JP6973705B2 - アッセイデバイス - Google Patents

Description

本発明は、デバイスが適切に機能して正確な結果を生み出すために十分な量のサンプルがデバイスに塗布（ａｐｐｌｙ）されたときに、ユーザに指示を示すアッセイデバイスに関する。アッセイデバイスは、ユーザが正しくサンプリングを行い、従ってテストを行ったという確信もユーザに提供する。

１つ以上の分析物の存在または量を決定するために、尿または血液のような、流体サンプルを分析する様々な診断用製品が知られている。これらは、生物サンプルを吸着剤構成要素に塗布することによって用いられる小さいハンドヘルドデバイスであってもよい。次に、これらのデバイスは、重力による著しい促進を何も必要としないで、例えば、加えられた圧力によって、流体を流路に沿ってアッセイテストゾーンへ運ぶように構成され、アッセイテストゾーンにおいて反応または結合事象が発生してアッセイ結果をもたらす。

この種のデバイスの一例は、特許文献１に記載されるラテラルフロー型アッセイデバイスである。この文書は、ウィックとして知られるタイプのサンプル塗布領域（またはサンプル受け入れ領域）を備えるイムノアッセイデバイスを開示し、ウィックは、分析物に対する可動性標識特異的結合試薬を担う試薬ゾーンを含んだ多孔質キャリアに重なって、それに流体的に接続される。下流では、テストゾーンまたは分析物検出ゾーンに分析物に対する非標識特異的結合試薬が固定化される。ユーザは、液体サンプルをウィックに塗布する単一のステップを行い、サンプルは、その後、毛細管作用により流路に沿って運ばれる。このデバイスは、サンプルによる可動性標識試薬の制御放出を可能にするように設計される。その場合にはサンプル中のいずれかの分析物が、放出された標識特異的結合試薬と相互作用して標識された複合体を形成することになり、その複合体がテストゾーンへ運ばれて、非可動性非標識結合試薬と「サンドイッチ」複合体を形成する。標識は、着色粒子であってもよく、それによってサンプル中の分析物の存在および／または量を示すためにテストゾーンで濃縮されて観察できるようになる。テストゾーンは、いわゆる視覚的読み取りテストでテスト結果を決定するためにユーザによって直接に観察することができる。しかしながら、デジタルテストでは、テストゾーンを光学的または他の読み取りシステムを用いて測定できて、結果がＬＣＤディスプレイのようなディスプレイ上に提示される。例えば、特許文献２を参照。

これらのアッセイの正しい機能は、ユーザが十分な体積のサンプルをデバイスに塗布することに依存する。かかるテストを用いる際に、ユーザが不十分な体積の液体サンプル、例えば、尿を提供することがある。これは、テストサンプルが流路に沿ってウィックの下流に配置されたアッセイ試薬に到達しないため、アッセイの失敗に繋がりかねない。不十分な体積のサンプルは、流路に沿ったサンプルの流速に影響を及ぼす可能性があり、可動性標識試薬の不適切な、または制御されない可動化（放出される速度および総量）が正しい結果を与えるテストの能力に影響してテストの性能を左右しかねない。正しい結果は、デバイス障害のために再テストするようにユーザに通知する無効な結果ではなく、むしろ陽性または陰性の結果、例えば、妊娠または非妊娠のユーザへの送達によって定義される。

視覚的読み取りデバイスに塗布された不十分なサンプル体積は、例えば、テストおよびコントロールラインを何も生み出さない、コントロールラインを何も生み出さない、ならびに部分的に形成されたテストおよび／またはコントロールラインを生み出すデバイスとして多様に現出しうる。様々なテストおよびコントロールラインの形成が読み取りウィンドウにおける可動性標識のスミアを伴うことがある。読み取りウィンドウとは、テスト結果を解釈するためにユーザによって視覚的に観察されるか、または光学的もしくは他の読み取りシステムによって測定されるデバイスの領域である。スミアは、結果を解釈するときの混乱ならびにユーザのフラストレーションに繋がり、最終的にテストを繰り返さなければならないため、テストデバイスの浪費に繋がる。デジタルテストデバイスは、尿サンプルの塗布の開始からテストまでテストデバイス上の濡れのような事象を追跡する多くのモニタリング手段を備えることができる。クリアブルー・シングルユース使い捨てデジタルテスト（スイスプレシジョンダイアグノスティックス社：Ｓｗｉｓｓ Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ）は、例として、「ウェイクアップ」期間を有し、「ウェイクアップ」期間は、流れが尿サンプルの塗布の箇所からサンプル受け入れ部材へデバイスを通して流れ始めて、サンプルの流れがサンプル受け入れ部材と接触している電極の対に到達するために要する時間として定義される。この事象は、デジタルテストをスタンバイモードから実効的に「始動させる」。一旦始動すると、かかるデバイスは、溶媒前端が流路に沿って配置された１つ以上の光学センサに到達するための時間を測定することによって、サンプルの流れを流路に沿ってモニタし続ける。オンボード・デジタルプロセッサは、流れがセンサ（単数または複数）に到達するために要する時間に関して予め定義された制限を有し、流れが不適切であると判断すると、デバイス障害を指示することができる。かかる測定システムは、流路に沿ってサンプルの流れをモニタし、かつ流れの方向も決定できる。これらのシステムは、デバイスに塗布されるサンプルが不十分な体積になることを必ずしも減少させるわけではない。従って、不十分なサンプリングによるテストデバイスの浪費が依然として生じうる。

従って、ユーザは、例えば、ウィックをユーザの尿の流れの中に５秒間保持することによって、またはウィックを容器に採取された尿中にある距離まで５から２０秒間浸漬することによって注意深くある体積のサンプルを塗布するように一般的に指示される。サンプリング時間は、もちろん、異なるテストデバイスでは変化しうる。

かかるデバイス上へのサンプリングは、概して問題ではないが、ユーザがしばしば未経験であるか、またはこのタイプのアッセイの稀なユーザであり、アッセイとともに提供された使用説明書を読むこと、およびダイアグラムを観察することからアッセイを行うための手順を解釈すると予想される。しかしながら、残念なことに、いくらかのユーザは、例として、使用説明書を誤解するか、またはデバイスを用いたいという熱心さのあまり使用説明書を少しも読まないため、使用説明書に常に従うわけではない。

不十分なサンプリングの問題は、特に尿のサンプリングに関連する。尿サンプル中の分析物を検出するとき、例えば、妊娠についてテストするときに、ユーザは、ユーザの尿を最初に容器に採取するより、むしろユーザの尿をユーザの尿の流れからサンプル塗布領域に直接に塗布することを好むかもしれない（「中間尿サンプリング」）。実際、ユーザは、ユーザの尿の流れの方向をウィック上に制御することの難しさ、特に、女性に関しては（女性の解剖学的形態を念頭に置くと）中間尿サンプリングのときに彼女らが何をしているかを見ることの難しさを経験するかもしれない。現在のデバイスは、ユーザが尿の流れから尿を数秒間、典型的に５および１０秒の間にわたって採取することを要求する。人々は、デバイス上での尿の採取の時間を測るのを助けるために、タイマ、例えば、時計を用いることを選ぶかもしれず、結果として、不安なときにユーザが取り組まなければならない別の作業が加わる。他の人々は、タイマを用いないことを選び、ある時間にわたって自らカウントすることに依存するかもしれない。時間の知覚は、個人間で大きく変動する可能性があり、デバイスが尿に曝露される時間のばらつきを増す。これは、尿の流れの方向のばらつきと、中間尿サンプリングの間に採尿を観察することの難しさとに起因して、デバイスがこの時間の一部分にわたって尿の流れに曝露されないため、さらに変動する。

それゆえに、例えば、ユーザがサンプリング事象の時間を適切に測らなければ、不十分な尿サンプルが用意される可能性がある。これは、ユーザがデバイスのウィックを採取された尿の容器に浸漬するか、または中間尿をサンプリングするかに係らず当て嵌まる。試行が示したのは、尿の流れと尿の流れの中に保持されているときのウィックの位置とが変動する可能性があり、結果として、ウィックに塗布される尿の総体積に影響を与えることである。さらに、ユーザがウィックを採取された尿の容器に必要な程度まで浸漬しないことがあり、ウィックによって採取される尿の体積に影響を与えて不十分なサンプリングを生じさせる。

十分な量のサンプルが得られたことを示すための手段をアッセイデバイスに提供することによってかかるアッセイのユーザを補助するための努力がなされてきた。

例えば、特許文献１に記載されるような既知のアッセイデバイスは、テストゾーンから下流にコントロールゾーンを有し、コントロールゾーンでのラインの形成は、サンプルがテストゾーンを通り過ぎて流れたこと、従って、たぶん十分なサンプルが塗布されたことをユーザに示す。コントロールラインが現れなければ、ユーザは、テストを無効であるとして拒絶するように指示される。しかしながら、ユーザは、コントロールラインが形成するかどうかを見るために必要な時間（典型的に数分）を待たなければならないため、サンプリング事象自体の間にフィードバックを受けることはなく、従って、アンダーサンプリングが生じた場合にはテストが無駄になるであろう。さらに、コントロールラインの欠如は、アンダーサンプリングが生じたに違いないとユーザに通知するわけではなく、コントロールラインの欠如は、デバイスの貯蔵の間の試薬の劣化に起因することもありうる。

欧州特許第０，２９１，１９４号 米国特許第７，８７９，６２４号

それゆえに、当技術分野では、好ましくはサンプリング事象の間にユーザにフィードバックを与えることによって十分なサンプルが塗布されたことを示す、ラテラルフロー型アッセイデバイスのような、アッセイデバイスに対するニーズと、ウィックを尿の流れから取り去る必要のない、好ましくはユーザに分かりやすい方法での尿サンプリングに対するニーズとがある。このフィードバックは、ユーザがテストを行うときに正しいステップに従っていること、およびテストが意図されたように機能していることをユーザに確信させるので重要である。かかるデバイスのユーザは、陰性または陽性の結果を予想して情緒的になっているかもしれず、それゆえにユーザがテストを正しく行っているといういくらかの確信には価値がある。

本発明者らは、サンプリング事象の間にユーザにフィードバックを与えることによって、しかも女性がウィックを彼女の尿の流れから取り去る必要のない分かりやすい方法で、十分なサンプル、特に尿のサンプルが、アッセイデバイス、および特にラテラルフロー型デバイスに塗布されたことを示す方法をいまや案出した。

従って、本発明の第１の態様において、本発明は、流体サンプル中の分析物を検出するためのアッセイデバイスを提供し、アッセイデバイスは、
アッセイ流路を規定する少なくとも２つの構成要素（２、３）に流体的に接続され、それらのうちの少なくとも１つは、分析物検出ゾーン（３１）を備える検出部材（３）である、サンプル受け入れ部材（１）と、
アッセイ流路に沿ったある特定の箇所で流体を検出するようになっているサンプル検出要素（１３）と、
を備える。

一実施形態において、サンプル検出要素（１３）は、アッセイ流路と接触している。一実施形態において、サンプル検出要素（１３）は、１つの電極または電極（５、６）の対である。

次に、例を用い、添付図面を参照して実施形態が記載される。

アッセイ流路の第１の構成要素がアッセイ流路の第２の構成要素と重なる領域で２つの電極（すなわち、電極の対）がアッセイ流路と接触している、本発明の実施形態によるアッセイデバイスの側面図を示す。 ４つの電極（すなわち、電極の２つの対）を備える、本発明の実施形態によるアッセイデバイスの側面図を示す。図２に示される実施形態において、２つの電極（すなわち、電極の対）は、アッセイ流路の第１の構成要素がアッセイ流路の第２の構成要素と重なる領域でアッセイ流路と接触し、他の２つの電極（すなわち、電極の対）は、サンプル受け入れ部材と接触している。 ４つの電極（すなわち、電極の２つの対）を備える、本発明の実施形態によるアッセイデバイスの側面図を示す。図３に示される実施形態において、２つの電極（すなわち、電極の対）は、アッセイ流路の第１の構成要素においてアッセイ流路と接触し、他の２つの電極（すなわち、電極の対）は、サンプル受け入れ部材と接触している。 ２つの電極（すなわち、一対の電極）を備える、本発明の実施形態によるアッセイデバイスの側面図を示す。電極は、アッセイ流路の第１の構成要素においてアッセイ流路と接触している。 （ピペットを用いて塗布される）異なる体積のサンプルを塗布したとき、ならびにデバイスが浸漬された（一定の時間にわたってサンプル受け入れ部材が縦方向にサンプル中に保持された）ときに流れが見られる、デバイス・ウェイクアップからテストウィンドウで流れが検出されるまでの時間（秒単位）を示す。 テストウィンドウで流れが検出されるためのフロー時間（秒単位）（テストフロー時間）、（テストラインが見られる）テストウィンドウから（テストウィンドウとコントロールウィンドウとの間にある）参照ウィンドウへの流れのための時間（参照フロー時間）、およびテストウィンドウから（コントロールラインが見られる）コントロールウィンドウへの流れのための時間（コントロールフロー時間）の個別値のプロットである。これらのデバイスにおいて、流れは、テストウィンドウから参照ウィンドウへ、そしてコントロールウィンドウへと進む。テスト、参照およびコントロールウィンドウは、すべてニトロセルロース上にある。 （ピペットを用いて）塗布された異なる体積のサンプルでデバイスがテストされたとき、ならびにデバイスが浸漬された（一定の時間にわたってサンプル受け入れ部材が縦方向にサンプル中に保持された）ときに、流れが電極５、６で検出された後にテストウィンドウで流れが見られる時間（秒単位）を示す。 このグラフの左側は、電極５、６で流れを検出するための時間（秒単位）のプロットを示す。グラフの右側は、テストウィンドウで流れを検出するための時間（秒単位）のプロットを示す。様々な体積のサンプルがデバイスに塗布され、いくつかのデバイスは、図４から６に関して記載されるように浸漬された。 電極位置５、６からの流れをテストウィンドウで検出するための時間（秒単位）のプロットを示す。様々な体積のサンプルがデバイスに塗布され、いくつかのデバイスは、図４から図６に関して記載されるように浸漬された。

図４から図８において用いられたデバイス・アーキテクチャは、図１または図２に従ってもよい。

「アッセイ流路」は、アッセイの実行の間にサンプル流体がそれに沿って流れるように意図された経路を意味する。アッセイ流路は、少なくとも２つの構成要素からなる。典型的に、構成要素は、流体的に接続される。典型的に、構成要素は、少なくとも部分的に重なり合う。典型的に、アッセイ流路は、２つの構成要素、例えば、部分的に重なり合い流体的に接続された２つのストリップからなる。アッセイ流路は、本明細書では「テストストリップ」とも呼ばれる。

アッセイ流路における構成要素の位置を指すときに、「上流」は、構成要素がサンプル受け入れ部材の方に近いことを意味する。逆に、「下流」は、構成要素がサンプル受け入れ部材からより離れていることを意味する。

サンプル受け入れ部材は、流体サンプル、典型的に液体サンプルを受け入れること、およびそのサンプルをアッセイ流路へ移すことが可能である。サンプル受け入れ部材は、サンプル取り込み手段としての機能を果たしてもよく、アッセイデバイスのサンプル受け入れ部分に存在してもよい。サンプル受け入れ部材は、細長いストリップであってもよい。サンプル受け入れ部材は、アッセイ流路を取り囲むハウジングから突き出てもよい。本発明において、サンプル受け入れ部材は、典型的に多孔質材料でできている。サンプル受け入れ部材は、典型的に非膨潤性である。ある１つの実施形態では、サンプル受け入れ部材は、マクロポーラスである。ある１つの実施形態では、デバイスは、ユーザが力を加えることなく、サンプルをサンプル受け入れ部材からアッセイ流路へ移すようになっている。好ましくは、サンプル受け入れ部材およびアッセイ流路の構成要素の材料は、サンプル受け入れ部材からアッセイ流路の始まりまでサンプルを毛細管作用のみで移すことができるように選択される。

サンプル受け入れ部材は、１つ以上の異なる多孔質材料を備えてもよい。サンプル受け入れ部材は、繊維質または非繊維質であってもよい。適切な多孔質材料は、ガラス繊維、セルロース、ニトロセルロース、紙、シリカ、焼結ＰＥＴのような多孔質合成ポリマ、および、ポリエステル、ナイロン、綿、それらの単一成分繊維の組み合わせ、またはそれらの２成分繊維の組み合わせを備える材料を含む。多孔質材料は、織物または不織材であってもよい。一実施形態において、サンプル受け入れ部材は、ポリエステル繊維および／またはナイロン繊維を備える。

ある１つの実施形態では、サンプル受け入れ部材は、ウィックである。ウィックは、液体がそれを通して比較的容易に流れることができる比較的高容量および高毛細管作用の材料を備えてもよい。これは、アッセイ流路の他の構成要素に相対的であってもよい。これによって、ウィックは、デバイスに塗布されるある体積のサンプル液体を迅速に吸収できて、十分な体積のサンプル液体をアッセイ流路へ容易に移すことも可能である。

アッセイデバイスに塗布されるサンプルは、流体である。サンプルは、本来、液体であってもよく、またはデバイスへの塗布前に液状で提供されるように前処理された固体であってもよい。例えば、糞便のような固形サンプルは、デバイスに塗布される前に適切な溶媒に溶解できる。代わりに、液体サンプルは、デバイスに塗布される前にその粘度を変えるおよび／またはその体積を増加させるために（水また水溶液のような）別の液体で処理されてもよい。サンプルは、任意の供給源から抽出できて、血液、血清、血漿、唾液、痰、眼球レンズ液体、汗、尿、乳、腹水、粘液、滑液、腹膜液、経皮滲出液、咽頭滲出液、気管支肺胞洗浄、気管吸引、脳脊髄液、精液、子宮頸管粘液、腟または尿道分泌物、および羊水を含めて、体液であってもよい。対象となる分析物に依存して、他のサンプル、例えば、産業、環境または農業関係の供給源からのサンプルが考慮されてもよい。

ある１つの実施形態では、サンプルは水性である。ある１つの実施形態では、サンプルは、２５℃において粘度≦２ｍＰａ．ｓ、≦１．５ｍＰａ．ｓ、または≦１ｍＰａ．ｓを有する。ある１つの実施形態では、サンプルは、尿または希釈された体液である。

デバイスの使用の間に、サンプルは、１つ以上のアッセイ用試薬が見出されるアッセイ流路に沿って運ばれる。試薬（単数または複数）は、アッセイのタイプによって変化するであろう。試薬（単数または複数）は、分析物と相互作用して、例えば、分析物−試薬複合体を形成するための簡単な結合反応によって、または化学反応によって検出可能な産物を形成してもよい。

アッセイ試薬は、可動性および非可動性アッセイ試薬を備えてもよく、可動性試薬は、アッセイ流路を規定する構成要素上に乾燥形態で予め堆積されてもよい。分析物の存在および／または量を示す信号が形成される、「分析物検出ゾーン」は、非可動性アッセイ試薬を含んでもよく、可動性アッセイ試薬は、分析物検出ゾーンから上流のゾーン（「可動性試薬ゾーン」）に最初に提供されてもよい。アッセイがサンドイッチアッセイを備えるケースでは、可動性試薬ゾーンは、分析物に対する可動性標識結合試薬を担ってもよく、これから下流で、分析物検出ゾーンは、分析物に対する非可動性非標識結合試薬を担う。もちろん、当業者に知られ、本発明の範囲内に含まれる、競合アッセイまたは阻害アッセイのような他のアッセイ・フォーマットも可能である。別の例では、分析物は、後で検出される切断産物を生成するためにアッセイ試薬を切断することが可能な酵素である。いくつかの実施形態において、切断産物は、直接検出できなくてもよく、その代わりに、切断産物は、検出される産物（単数または複数）に最終的に繋がる他の反応に引き続き関与することができる。

アッセイ流路を規定する構成要素は、１つ以上のコントロール試薬も含んでもよく、アッセイが正しく動作したという「コントロールゾーン」における指示を提供するためにコントロール試薬が従来のように用いられてもよい。従って、一実施形態において、アッセイ流路は、コントロールゾーンをさらに備える。例として、可動性標識コントロール試薬がアッセイ流路における上流位置に（例えば、可動性試薬ゾーンに）提供されてもよく、非可動性コントロール試薬がコントロールゾーンに提供されてもよい。可動性コントロール試薬は、非可動性コントロール試薬に結合してもよく、従って、コントロールゾーンにおける標識の蓄積は、アッセイが正しく動作したという信号を与える。可動性標識テスト試薬は、コントロールゾーンを形成するために非可動性コントロール試薬と結合してもよい。典型的に、コントロールゾーンは、分析物検出ゾーンから下流に位置する。

アッセイ流路は、流体的に接続された複数の構成要素によって規定されてもよい。一実施形態において、可動性試薬ゾーンは、（いわゆる「コンジュゲートパッド」であってもよい）第１の材料上で設けられてもよく、分析物検出ゾーンは、下流の、流体的に接続された（ニトロセルロースであってもよい）第２の材料上に設けられてもよい。

アッセイ流路を規定する構成要素は、サンプルがサンプル受け入れ部材からアッセイ試薬（単数または複数）へ流れることを可能にできる任意の材料を備えてもよい。アッセイデバイスは、ラテラルフロー型デバイスとして構成されてもよく、構成要素は、多孔質、繊維質または吸湿性キャリアを備えてもよい。

ある１つの実施形態では、構成要素は、流体的に接続された複数の多孔質キャリアを備える。多孔質キャリアは、サンプルをアッセイ試薬（単数または複数）へ運ぶのに適した任意の材料を備えてもよい。アッセイ流路に沿ったサンプルのウィッキング速度は、好ましくは、サンプル受け入れ部材を通してのサンプルのウィッキング速度より小さい。

多孔質キャリア材料の例は、ガラス繊維、セルロース、ニトロセルロース、紙、シリカ、焼結ＰＥＴのような多孔質合成ポリマ、およびポリエステル、ナイロン、綿、それらの単一成分繊維の組み合わせ、またはそれらの２成分繊維の組み合わせを備える材料を含む。多孔質キャリア材料は、織物または不織材であってもよい。

ある１つの実施形態では、多孔質キャリアは、ガラス繊維および／またはニトロセルロースを備える。ある１つの実施形態では、アッセイ流路を規定する構成要素は、可動性試薬ゾーンがその上に位置するガラス繊維パッドと、分析物検出ゾーンがその上に位置するニトロセルロース・ストリップとを備え、ガラス繊維パッドは、ニトロセルロース・ストリップと流体的に接続されてその上流にある。

サンプル受け入れ部材の少なくとも一部分は、アッセイ流路の上流構成要素に重なってもよい。かわりに、それらは、端と端を接していてもよい。

アッセイデバイスは、すべてのアッセイ試薬から下流に位置するシンクパッドと、アッセイ流路に、典型的にはアッセイ流路の終端に存在する任意のコントロール試薬（単数または複数）とをさらに備えてもよい。シンクパッドは、アッセイ流路を規定する他の上流構成要素からサンプルをウィッキングして、それをシンクパッド内に保持することによって、アッセイ流路に沿ったサンプルの継続的な流れを促進する。シンクパッドは、セルロース、綿および／またはガラス繊維のような、当技術分野で知られる任意の適切な吸収剤または吸湿性材料を備えてもよい。

本発明のアッセイデバイスは、アッセイ流路に沿ったある特定の箇所で流体を検出するようになっているサンプル検出要素を含む。流体が検出されるアッセイ流路に沿った箇所は、サンプル検出要素の位置によって決定づけられるであろう。

いくつかの実施形態において、サンプル検出要素は、アッセイ流路と接触している。これらの実施形態では、流体は、アッセイ流路に沿って流れて、サンプル検出要素と接触したときに検出される。

一実施形態において、サンプル検出要素は、アッセイ流路の第１の構成要素と接触している。アッセイ流路の第１の構成要素と第２の構成要素とが少なくとも部分的に重なる一実施形態において、サンプル検出要素は、第１の構成要素と第２の構成要素とが重なる領域でアッセイ流路の第１の構成要素と接触している。アッセイ流路の第１の構成要素と第２の構成要素とが少なくとも部分的に重なる別の実施形態では、サンプル検出要素は、第１の構成要素と第２の構成要素とが部分的に重ならない領域でアッセイ流路の第１の構成要素と接触している。この実施形態では、アッセイ流路の第１の構成要素とサンプル受け入れ部材とが重なる場合、サンプル検出要素は、典型的に、アッセイ流路の第１の構成要素とサンプル受け入れ部材とが重ならない領域でアッセイ流路の第１の構成要素と接触している。別の実施形態では、サンプル検出要素は、アッセイ流路の第２の構成要素と接触している。

サンプル検出要素は、その要素が存在する位置でサンプルの存在を検出する任意の適切な手段であってもよく、検出は、その要素自体によって単独で、あるいはデバイスの他の構成要素と連携して行われる。いくつかの実施形態では、サンプル検出要素におけるサンプルの存在が検出されたことをサンプル検出要素自体がユーザに示すようになっている。いくつかの実施形態において、サンプル検出要素におけるサンプルの存在は、十分な量のサンプルが得られたことを示す。他の実施形態では、サンプル検出要素におけるサンプルの存在は、十分な量のサンプルが得られたことを示すさらなる事象または一連の事象のきっかけとなる。

一実施形態において、サンプル検出要素は、視覚センシング・システムを備える。これは、サンプルの固有特性、例えば、水分含有量、ｐＨ、化学成分（テストされる対象となる分析物以外）、温度（サンプルが最近得られた体液の場合）に応じて変色する試薬を備えうる化学センシング・システムであってもよい。かかる試薬は、本明細書では変色試薬と呼ばれる。水和のときに変色する化合物が当業者によく知られており、塩化コバルト（ＩＩ）、硫酸銅（ＩＩ）を含む。試薬は、基材、例えば、紙の上に担持されてもよい。変色は、デバイスのハウジングにおけるウィンドウを通して視覚的に観察可能であってもよい。変色は、測定可能であってもよく、またはデバイスのハウジングにおけるウィンドウを通して目視できてもよい。

いくつかの実施形態において、サンプル検出要素は、１つ以上の変色試薬を備える化学センシング・システムからなり、すなわち化学センシング・システムには他の成分は何も存在しない。例えば、化学センシング・システムは、１つ以上の変色試薬を１つ以上の緩衝剤、洗浄剤および／またはタンパク質とともに備えることができるが、他の成分を何も備えない。一実施形態において、サンプル検出要素は、ｐＨインジケーターペーパーのような、ｐＨインジケーターである。

別の実施形態では、サンプル検出要素は、光センシング・システムを備える。例として、上記のセンシング・システムの変色が発光ダイオードおよび光検出器のような適切な照明および検出要素を用いて検出されてもよい。かかる検出要素は、サンプル検出要素の光学特性における変化、例えば乾燥から湿潤状態になるときの、例えばサンプル検出要素上の光透過における変化を検出するために用いられてもよい。これらの実施形態では、サンプル検出要素は、アッセイ流路と接触していない。

一実施形態において、サンプル検出要素は、非吸収性である。

別の実施形態では、サンプル検出要素は、電極を備える。一実施形態において、サンプル検出要素は、電極の対である。別の実施形態では、サンプル検出要素は、単一の電極である。

一実施形態において、本発明のアッセイデバイスは、それゆえに、アッセイ流路と接触している電極の対（すなわち、２つの電極）を含む。これらの電極は、本明細書では図中の構成要素５および６として示される。いくつかの実施形態において、アッセイデバイスは、電極の単一対、すなわち２つの電極のみを含む。

本発明のアッセイデバイスのこの構成の目的は、尿のような、サンプル流体がアッセイ流路に沿って流れて、電極の対と接触しているアッセイ流路中の箇所に到達したときに、サンプル流体が電極を備えた電気回路を完成させるための電解質ブリッジとしての機能を果たすことである。その場合には（電池を含んだ）電気回路に電流が流れて、指示システムに電力を供給し、指示システムは、電極の対と接触しているアッセイ流路中の箇所でサンプル流体が検出されたという指示を提供する。次に十分な量のサンプルが塗布されたという指示をユーザに提供できる。サンプルが十分であることの指示は、本明細書に記載されるように、直接的あるいは間接的に提供できる。好ましくは、指示方法は、十分なサンプルを確実に塗布できるように、サンプリング自体の間に即時のフィードバックをユーザに提供する。これは、中間尿サンプリングに対して特に有用である。代わりに、指示方法は、アンダーサンプリングのためにテストが拒絶されるべきであるというフィードバックをサンプリング後にユーザに提供する。これは、ユーザにとって価値のあるフィードバックを提供し、アンダーサンプリングがデバイス障害の原因であったことをユーザに認識させる。別のデバイスを用いてテストする際に、ユーザは、正しくサンプリングすることの重要性をいっそう認識するであろう。

一実施形態において、電極の対は、アッセイ流路の第１の構成要素と接触している。例えば、可動性アッセイ試薬（単数また複数）が第１の多孔質材料によって担われ、非可動性アッセイ試薬が流体的に接続された第２の多孔質材料によって担われる場合、電極の対は、第１の多孔質材料と接触している。代わりの実施形態では、電極の対は、アッセイ流路の第２の構成要素と接触している。例えば、可動性アッセイ試薬（単数また複数）が第１の多孔質材料によって担われ、非可動性アッセイ試薬が流体的に接続された第２の多孔質材料によって担われる場合、電極の対は、第２の多孔質材料と接触している。

アッセイ流路の第１の構成要素と第２の構成要素とが少なくとも部分的に重なる、一実施形態において、サンプル検出要素（例えば、電極の対）は、第１の構成要素と第２の構成要素とが重なる領域でアッセイ流路の第１の構成要素と接触している。例えば、第１の多孔質材料と第２の多孔質材料とが少なくとも部分的に重なる場合、サンプル検出要素（例えば、電極の対）は、第１の多孔質材料と第２の多孔質材料とが重なる領域で第１の多孔質材料と接触している。この実施形態では、サンプル検出要素が電極の対であるとき、これらの電極は、電極がアッセイ流路の第２の構成要素にも接触するように、例えば、アッセイ流路の第１の構成要素を完全に突き抜けることによってアッセイ流路の第２の構成要素とも接触していてもよい。

第１の多孔質材料がコンジュゲートパッドであり、第２の多孔質材料がニトロセルロースであるときに、この配置は、サンプル検出要素（例えば、電極の対）が第２の多孔質材料、すなわち、ニトロセルロースと直接に接触している実施形態と同様に、特に有利である。この理由は、サンプル流体が一旦ニトロセルロースに到達すると、ニトロセルロースがコンジュゲートパッドならびにサンプル受け入れ部材より大きい毛細管引力を有し、従って、サンプル流体をアッセイデバイスのそれらの構成要素から引き寄せることになるので、アッセイデバイスが正しく動作することになるためである。

アッセイ流路の第１の構成要素と第２の構成要素とが少なくとも部分的に重なる、別の実施形態では、サンプル検出要素（例えば、電極の対）は、第１の構成要素と第２の構成要素とが重ならない領域でアッセイ流路の第１の構成要素と接触している。この実施形態では、アッセイ流路の第１の構成要素とサンプル受け入れ部材とが重なる場合、サンプル検出要素（例えば、電極の対）は、典型的に、アッセイ流路の第１の構成要素とサンプル受け入れ部材とが重ならない領域でアッセイ流路の第１の構成要素と接触している。

電極の対は、２つの電極からなる。いくつかの実施形態において、電極の対は、アノードおよびカソードからなる。電極の対は、典型的に、２つの細長いストリップからなるが、任意の適切な形状またはサイズとすることができる。

一実施形態において、２つの電極は、アッセイ流路の同じ面上に位置する。この実施形態では、２つの電極は、互いにほぼ平行な細長いストリップとすることができる。別の実施形態では、電極のうちの１つは、アッセイ流路の１つの面上に位置し、他の電極は、アッセイ流路の別の面上に位置する。電極は、必ずしも互いに平行である必要はなく、異なる形状およびサイズとすることができる。

電極は、任意の適切な材料から作ることができる。典型的に、電極は、金属、例えば、鋼、銅、銀、鉛または亜鉛でできている。代わりに、電極は、非金属、例えば、カーボンでできている。両方の電極が同じ材料でできていてもよく、２つの異なるそれぞれの材料でできていてもよい。いくつかの実施形態において、濡れを助けるために、電極の片方または両方の表面を、例えば、親水性層を用いて処理することができる。

任意の適切な手段を用いて、電極の対（すなわち、２つの電極）をアッセイ流路と接触して配置することができる。これは、もちろん、電極の形状および寸法、ならびに電極が接触しているアッセイ流路の構成要素（単数または複数）の特性に依存するであろう。典型的に、電極は、アッセイ流路の然るべき構成要素 （単数または複数）と表面で接触している。一実施形態において、電極は、アッセイ流路の然るべき構成要素 （単数または複数）と接触してそれらを保持するためにばねで留められる。他の実施形態では、電極は、アッセイ流路の１つ以上の構成要素に入り込むか、またはそれらを突き抜けてもよい。例えば、アッセイ流路の第１の構成要素と第２の構成要素とが少なくとも部分的に重なる、一実施形態では、電極の対は、アッセイ流路の第１の構成要素に入り込むか、またはそれを突き抜けて、アッセイ流路の第２の構成要素と接触してもよく、その逆であってもよい。この実施形態では、アッセイ流路の第１の構成要素を突き抜けた、電極の対は、アッセイ流路の第２の構成要素も突き抜けてもよく、またはアッセイ流路の第２の構成要素と単に表面で接触するだけでもよい。一実施形態において、電極をアッセイ流路の構成要素（単数または複数）の一部として含浸させるか、または形成することができ、すなわち、電極は、その構成要素の構造内に存在する。一実施形態において、電極は、アッセイ流路の１つ以上の構成要素（単数または複数）の構造と接触し、またはその内部に存在する導電性メッシュの一部である。例えば、アッセイ流路の１つ以上の構成要素がかかる導電性メッシュ上に重ね合わされてもよい。

上記のような、いくつかの実施形態において、アッセイ流路と接触している電極の対におけるサンプル流体の検出、延いては電池からの電流の流れの検出は、十分な量のサンプルが塗布されたことをそれ自体が示す。他の実施形態では、サンプルが十分であることを示すために、アッセイ流路と接触している電極の対がアッセイデバイスの他の要素と組み合わせて用いられる。

当技術分野では、ラテラルフロー型アッセイデバイスをスタンバイモードから「ウェイクアップ」するために、電極間のインピーダンスにおける変化を用いることが知られている。これは、かかる製品の貯蔵寿命が数年に及ぶ可能性があり、デバイスを用いようとするときまで電池を保持する必要があるので有用である。いくつかのかかるデバイスでは、電極の対がサンプル受け入れ部材と接触している。サンプル流体がサンプル受け入れ部材に塗布されたときに、サンプル流体は、サンプル受け入れ部材に沿って流れ、それが電極と遭遇する箇所で、サンプル流体は、電極を備えた電気回路を完成させるための電解質ブリッジとしての機能を果たす。これは、次に電池から回路中に電流を流れさせ、かかるデバイスにおいて電池から電流が流れ始める時点は、本明細書ではデバイスの「ウェイクアップ」と呼ばれる。かかるアッセイデバイスを「ウェイクアップ」するために用いられる電極は、本明細書では「オートスタート」とも呼ばれる。一旦始動すると、デバイスは、必要な分析を行う準備を整え、多孔質キャリアに沿って流れるサンプルを予期してそのソフトウェアおよびハードウェアに関する必要なチェックを行うことができる。アッセイデバイスは、デバイスが貯蔵されたポーチから取り出される際に、またはキャップの除去もしくは移動によって始動するように、機械的スイッチによるかまたは光に反応するテストを用いることによって「ウェイクアップ」するように誘導することもできる。サンプルが十分であることのインジケーターとともに、「ウェイクアップ」を生じさせる任意のかかる方法を含んだアッセイデバイスは、本発明の範囲内にある。いくつかの実施形態において、デバイスの「ウェイクアップ」は、ＤＣ技術を用いて測定される。例えば、抵抗を通して正電圧を印加できて、２つの電極（オートスタート）間の抵抗が下がれば、これが抵抗を通して電流を流れさせ、抵抗後の電圧を低下させる。この電圧の低下が次にデバイスを「ウェイクアップ」する。

本発明の一実施形態において、アッセイデバイスは、サンプル受け入れ部材と接触している電極の第２の対をさらに備える。これらの電極は、本明細書では図中の構成要素７および８として示される。本明細書に記載されるように、この配置を任意のタイプのサンプル検出要素と組み合わせて用いることができる。アッセイデバイスが電極（７、８）の第２の対およびさらに電極（５、６）の対を備える実施形態において、電極（５、６）の対は、本明細書では電極の第１の対と呼ばれる。

このように、一実施形態において、本発明は、流体サンプル中の分析物を検出するためのアッセイデバイスを提供し、アッセイデバイスは、
アッセイ流路を規定する少なくとも２つの構成要素（２、３）に流体的に接続され、それらのうちの少なくとも１つは、分析物検出ゾーン（３１）を備える検出部材（３）である、サンプル受け入れ部材（１）と、
電極（５、６）の第１の対は、アッセイ流路と接触し、電極（７、８）の第２の対は、サンプル受け入れ部材と接触している、電極（５、６）（７、８）の２つの対と、
を備える。

電極の第２の対の特徴は、電極の第１の対に関して本明細書に記載される通りである。

電極の第２の対は、任意の適切な手段を用いてサンプル受け入れ部材と接触して配置できる。これは、もちろん、電極の形状および寸法、ならびに用いられるサンプル受け入れ部材の特性に依存するであろう。典型的に、電極は、サンプル受け入れ部材と表面で接触している。他の実施形態では、電極は、サンプル受け入れ部材に入り込むか、またはそれを突き抜けてもよい。

一実施形態において、アッセイデバイスは、サンプル流体が電極の第２の対に接触したときに「ウェイクアップ」するように設定されるが、しかし、上記のように、アッセイ流路上のサンプル検出要素（例えば、電極の第１の対）の位置によって規定されるような、アッセイ流路を規定する１つ以上の構成要素へサンプルが流れてしまうまで、サンプルが十分であることの指示を提供しないように設定される。一例において、電極の第１の対は、コンジュゲートパッドがニトロセルロースに重なる領域でコンジュゲートパッド上に位置する。別の例では、電極の第１の対は、コンジュゲートパッドがニトロセルロースに重ならない領域でコンジュゲートパッド上に位置する。別の例では、電極の第１の対は、ニトロセルロース上に位置する。サンプル流体がそれらの電極に一旦到達すると、上記のように、十分な量のサンプルが塗布されたという指示を提供する個別の回路へ電流が流れ込む。

別のかかる実施形態では、サンプルが十分であることの指示は、（サンプル流体が電極の第２の対に接触することによって生じた、電極の第２の対から流れる電流によって示される）デバイスの「ウェイクアップ」と、サンプル検出要素（例えば、アッセイ流路上に位置する電極の第１の対、その場合にはサンプル流体が電極の第１の対に到達したことが電極の第１の対から流れる電流によって示されるであろう）へのサンプル流体の到達との間に経過した時間をモニタすることによって与えられる。一例において、サンプル検出要素、例えば電極の第１の対は、ニトロセルロースの上流の、コンジュゲートパッド上に位置する。

これらの実施形態において、ウェイクアップと、サンプルが十分であることの指示との間に経過した時間量をモニタするためにタイマを用いることができ、所定の時間内に十分な量のサンプルが得られた場合、ユーザに対して指示が示される。これは、ユーザがサンプリングをより早く停止するように注意を喚起されるという利点を有し、結果として、サンプリングの合計時間を削減し、ユーザがデバイスを溢れされる（すなわち、サンプルを多く塗布し過ぎて、やはりデバイスを故障させかねない）可能性を回避する。現在のデバイスは、いつ十分なサンプルがデバイスに塗布されたかを示す手段を何も有さない。中間尿サンプリングの際に、ユーザは、定義された時間にわたってデバイスを尿の流れの中に保持するように指示される。ユーザは、指示された時間を超過してサンプリングを続けることがあり、これは、デバイス上の過剰なサンプル量に繋がり、溢れとして知られる、流路に沿ったサンプルの不適切な流れを生じさせかねない。

一実施形態において、所定の時間内に十分なサンプルが得られなかったという指示をユーザに示すことができる。かかる指示の目的は、その後のアッセイを実施するときにサンプリング手順についてより用心深くなるようにユーザに注意を喚起することであろう。

いくつかの実施形態において、アッセイデバイスは、電極（５、６）（７、８）の２つの対に加えてさらなる電極対を備える。かかるさらなる電極対は、例えば、電極（５、６）および（７、８）の２つの対の間に、またはアッセイ流路に沿って電極（５、６）の対のさらに下流に位置することができる。

一実施形態において、本発明のアッセイデバイスは、十分なサンプルが塗布されたことを示すようになっている指示システムを備える。本明細書に記載されるように、これは、サンプル流体が、アッセイ流路上に位置する電極の第１の対、例えば、コンジュゲートパッドがニトロセルロースに重なる領域に位置するか、もしくはコンジュゲートパッドがニトロセルロースに重ならない領域でコンジュゲートパッド上に位置するか、またはニトロセルロース自体の上に位置する電極の第１の対のような、サンプル検出要素に到達する結果か、あるいは、所定の時間が、デバイスの「ウェイクアップ」と、電極の第１の対、例えば、コンジュゲートパッド上に位置する電極の第１の対のような、サンプル検出要素へのサンプル流体の到達との間に経過する結果とすることができる。

指示システムは、十分なサンプルが塗布されたことを当技術分野で知られた任意の適切な方法によって示すことができる。指示方法は、例えば、視覚（例えば、光学的）、聴覚（例えば、圧電サウンダの使用）、または触覚（例えば、デバイスのハンドルで生成される振動）によることができるであろう。光学的方法は、十分な量のサンプルがデバイスに一旦塗布されるとアイコンかまたは他のメッセージが現れる、ＬＥＤまたはＬＣＤスクリーンを用いることを含む。代わりに、十分な量のサンプルがデバイスに塗布されたことをユーザに示すために色を変化させるバックライト付きＬＣＤスクリーンを用いることができるであろう。指示方法がＬＥＤを含むときには、アッセイを実施しているときにユーザに光が見やすいように、ＬＥＤは、典型的にアッセイデバイスの下流（遠位）端に位置する。

指示方法、例えば、音または振動による指示（間接的に見る方法）は、サンプルが十分なことの指示が明らかになるまで、ユーザがデバイスを尿の流れの中に保持し続けることをこれらの方法は可能にするので、中間尿サンプリングに用いるのに好ましい。逆に、直接に見る方法は、一般に、サンプルが十分なことのインジケーターの状況を視覚的に点検するためにユーザがデバイスを尿の流れから取り出すことを必要とする。デバイスに不十分なサンプルが塗布された場合には、デバイスが尿の流れに戻される必要があろう。

それゆえに、第２の態様においては、本発明は、アッセイデバイスが流体サンプルに曝露されたとき、例えば、デバイスがユーザの尿の流れの中に保持されるか、または容器に保持された尿サンプル中に浸漬されたときに、サンプルが十分なことを示すための本発明のアッセイデバイスの使用を提供する。関連する態様において、本発明は、本発明のアッセイデバイスに十分なサンプルが塗布されたという事実に対してユーザに注意を喚起する方法も提供し、方法は、（ａ）本発明のアッセイデバイスを流体サンプルに曝露するステップと、（ｂ）十分なサンプルが得られたという事実に対してユーザに注意を喚起するステップとを備える。一実施形態において、本発明は、中間尿サンプリングのときに十分なサンプルが得られたという事実に対してユーザに注意を喚起する方法を提供し、方法は、（ａ）本発明のアッセイデバイスをユーザの尿の流れの中に保持するステップと、（ｂ）ユーザが尿の流れからサンプリングし続ける間に、十分なサンプルが得られたという事実に対してユーザに注意を喚起するステップとを備える。本発明のこれらの態様において、アッセイデバイスは、十分なサンプルが得られたという事実に対してユーザに注意を喚起するための指示システムを備える。アッセイデバイスが典型的に妊娠テストなので、ユーザは、典型的に女性ユーザである。関連する態様において、本発明は、不十分なサンプリングに起因してテストが失敗したことをサンプリング後にユーザに示すための本発明のアッセイデバイスの使用を提供する。

本発明は、いずれかの特定の分析物の検出には限定されない。例として、分析物は、哺乳動物、特にヒト由来であってもよく、またはバクテリアもしくはウィルス由来であってもよい。１つより多い分析物が検出されてもよい。デバイスが１つより多い分析物検出ゾーンを含むケースでは、サンプル受け入れ部材の少なくとも一部分は、好ましくは、分析物検出ゾーンのうちの少なくとも１つの上流にあるか、またはそれと同じレベルにある。

分析物（単数または複数）の存在および／または量は、任意の臨床的、生理学的、もしくは医学的状態、例えば、妊娠または妊孕性を示すことができる。分析物（単数または複数）は、例えば、毒素、汚濁因子、有機物、タンパク質、酵素、ペプチド、微生物、バクテリア、ウィルス、アミノ酸、核酸、炭水化物、ホルモン、ステロイド、ビタミンまたは薬物であってもよい。ある１つの実施形態において、分析物（単数または複数）は、ホルモンである。ある１つの実施形態において、分析物（単数または複数）は、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ｈＣＧ：ｈｕｍａｎ ｃｈｏｒｉｏｎｉｃ ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ）、黄体ホルモン（ＬＨ：ｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ）、エストロン−３−グルクロニド（Ｅ３Ｇ：ｅｓｔｒｏｎｅ−３−ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄｅ）、もしくはそれらのフラグメントまたはアイソフォームである。これらの分析物は、女性の妊娠または妊孕性状態を示すために用いられる。

アッセイデバイスは、対象となる分析物の定性的、半定量的または定量的検出を提供できる。ユーザは、存在するならば光学的または他の測定システムを用いて測定された分析物検出ゾーン（単数または複数）およびコントロールゾーン（単数または複数）を見ることによってアッセイの結果を解釈できて、その結果をいずれかの既知の適切な形態で、例えば、アッセイ結果のデジタル表示または代わりの視覚信号を用いて表示することができる。

アッセイデバイスは、例として、分析物ごとに別個の検出ゾーンをアッセイ流路に含めることにより１つより多い分析物を検出してもよい。代わりに、アッセイデバイスは、複数の別個のアッセイ流路を備えてもよく、各アッセイ流路が自らと関連付けられたサンプル受け入れ部材を備えてもよく、または（例えば、アッセイ流路が並んで配置される場合には）アッセイ流路間で単一のサンプル受け入れ部材が共有されてもよい。デバイスは、単一の分析物を定量化または半定量化するときに複数の別個のアッセイ流路を用いてもよい。

使用するときに、サンプルは、デバイスに直接に塗布されてもよい。サンプル液体が体液であるとき、被験者から直接に液体サンプルを採取するためにデバイスを用いることができる。例えば、中間尿サンプルを採取するためにデバイスを用いることができる。

代わりに、サンプルは、アッセイデバイスに曝露される前に液体前処理ステップを受けてもよい。液体前処理ステップは、以下には限定されないが、希釈、液体懸濁、抽出、濾過、結合反応、生化学反応、化学反応、溶解反応、緩衝化または界面活性剤による処理のうちの１つ以上を備えてもよい。従って、先に考察されたように、液体前処理ステップは、サンプルが液状でデバイスに塗布されること、所要の制御された粘性の液体が塗布されることを確実にするため、および／または、分析物が１つ以上のアッセイ試薬と反応または相互作用することを可能にするであろう形態で対象となる分析物が提供されることを確実にするために用いられてもよい。

アッセイデバイスは、任意の所望の前処理ステップが実施された後に、サンプルを得て、そのサンプルをサンプル受け入れ部材へ移すためのサンプリング手段をさらに備えてもよい。サンプリング手段は、被験者からの体液のサンプルを受け入れるようになっていてもよい。

図１は、サンプル検出要素が電極５、６の対である、本発明によるアッセイデバイスの側面図を示す。アッセイデバイスは、アッセイ流路を規定する２つの構成要素２および３に流体的に接続されたサンプル受け入れ部材１を備える。構成要素２および３は、流体的に接続されたストリップである。構成要素３は、分析物検出ゾーン３１を備える検出部材である。アッセイ流路は、ハウジング４で囲まれ、サンプル受け入れ部材１は、ハウジング４から突き出る。サンプル受け入れ部材１の下流端は、ストリップ２の上流端に重なり、ストリップ２は、可動性試薬ゾーン２１において標識された可動性アッセイ試薬２２を担うコンジュゲートパッドである。コンジュゲートパッド２の下流端は、ストリップ３の上流端に重なり、ストリップ３は、分析物検出ゾーン３１において非可動性非標識アッセイ試薬３２を担う。２つの電極５、６（すなわち、電極の対）は、アッセイ流路と接触しており、図１ではストリップ２がストリップ３と重なる領域でこれらの電極がストリップ２と接触して示される。

図２は、図１によるアッセイデバイスの側面図を示し、同図では電極７、８の追加の対がサンプル受け入れ部材１と接触している。

図３は、４つの電極（すなわち、電極の２つの対）を備える、本発明の実施形態によるアッセイデバイスの側面図を示す。図３に示される実施形態において、電極５、６の対は、（ストリップ２がストリップ３と重なる領域以外で）ストリップ２と接触しているアッセイ流路と接触し、電極７、８の他の対は、サンプル受け入れ部材１と接触している。

図３Ａは、２つの電極（すなわち、電極の対）を備える、本発明の実施形態によるアッセイデバイスの側面図を示す。図３に示される実施形態において、電極５、６の対は、（ストリップ２がストリップ３と重なる領域以外で）ストリップ２と接触しているアッセイ流路と接触している。

図に示されたアッセイデバイスの寸法は、例示的であるに過ぎない。これらの図は、縮尺通りに描かれてはいない。当然のことながら、本発明のアッセイデバイスの寸法および材料は、所望により変更されてもよい。

技術的に一貫性がないか、または別に明記される場合を除いて、本明細書に記載される本発明の実施形態は、必要な変更を加えて本発明の両方の態様に適用される。

本明細書に挙げられる先行技術の書面は、法的に認められる最大限まで組み込まれる。

本発明が以下の非限定の例においてさらに記載され、説明される。

実施例１ サンプルが十分なことを判断するための本発明のデバイスの使用
次の例は、欧州特許第０，２９１，１９４号に記載されるタイプの単一ステップ・ラテラルフロー型妊娠テストデバイスを活用した。

デバイスは、サンプル受け入れ部材としてナイロン／ポリエステル・バイコンポーネントファイバ・ウィックを備え、アッセイ流路は、ニトロセルロース・ストリップに重なったガラス繊維のコンジュゲートパッドによって規定した。青色ラテックス標識抗ｈＣＧ抗体および青色ラテックス標識ウサギＩｇＧ抗体をコンジュゲートパッド上に堆積させた。ニトロセルロース・ストリップ上のテストゾーンは、固定化した非標識抗ｈＣＧ抗体を含み、コントロールゾーンは、固定化した非標識ヤギ抗ウサギＩｇＧ抗体を含んだ。妊娠を示すために十分な量のｈＣＧを含んだ尿をウィックに塗布して、アッセイが正しく動作したときには、テストゾーンおよびコントロールゾーンで、「サンドイッチ」または他の結合反応を通じて青色ラテックスをそれらの領域で固定化したことによって生じる、青色ラインを形成することが予想される。

アンダーサンプリングは、サンプルをテストウィンドウで検出するための時間の増加によって示す。しかしながら、テストウィンドウで流れを一旦検出すると、流速を規格化して塗布したサンプルの体積に係らず一定とする。

７５０μｌから１０００μｌに及ぶ様々なサンプル体積をデバイスに塗布した。製品とともに供給された使用説明書に従って追加のデバイスを（２０秒間）浸漬した。デバイスへの１０００μｌのサンプルの塗布ならびにサンプル中に浸漬したデバイスは、正しいデバイス動作を提供し、正確な結果を与えることを示した。これらの条件は、コントロールとして知られる。

８００μｌ未満の体積を塗布したデバイスは、流れがテストウィンドウに到達するための時間がコントロール（１０００μｌ）よりも長かったため、アンダーサンプリングに影響されやすいと見做した（図４）。デバイスは、サンプルの不十分な流れを判断して、テストウィンドウに到達するのに要する時間が３２秒以上であれば、エラーをハイライト表示する。７７５μｌまたは７５０μｌのサンプルを塗布した際には、テストウィンドウに到達するための時間が３２秒以上に達しており、不十分なサンプリングが無効な結果とデバイスの浪費とをもたらすことを示す。

図５は、流れが一旦テストウィンドウに到達すると、参照およびコントロールウィンドウに流れが到達するための時間を規格化することを示す。

サンプル受け入れ部材の下流で構成要素２と接触している電極によるサンプルの検出は、サンプルがサンプル受け入れ部材から（図１および図２に示すような）インターフェース箇所におけるアッセイの構成要素２へ流れたことを示す。

構成要素２上の電極の箇所が用いるフォーマット（図１から図３）を決定づける。

図１および図２に示すような構成要素２および３の間の重なりゾーンにおける電極（位置５、６）は、十分なサンプルが存在することをそれが示すので、アッセイが完了へ向かうであろう箇所へ流体が流れたことを示す（図６）。テストしたすべての体積が（位置５、６での流れの検出から）流れがテストウィンドウに到達するために約８秒と約１６秒の間を要するので、電極（５、６）によって流れを一旦検出すると、流れをこの箇所の下流で規格化する。

図７のグラフの左側は、構成要素３との重なり部分で構成要素２と接触している電極において流れを見た時間を示し、これは、名目上１０秒遅れて（図８）テストウィンドウで流れを見る時間を表す（図７の右側のグラフ）。

アッセイが完了まで動作するのに十分な流体を受け入れたことを示して、正確な結果を提供するために、これを独立して（図１）用いることができる。代わりに、いつサンプルを最初に加えてデバイスをウェイクアップしたかを示すために電極５、６をサンプル受け入れ部材上に配置した電極７、８と組み合わせて用いることができ、十分なサンプルを加えたことを示すために電極５、６を用いることができる（図２）。

構成要素２上にあるが構成要素２および３の間の重なり部分にはない電極５、６の箇所（図３）を追加の電極７、８と組み合わせて、十分なサンプルが存在することを示すことができる。この実施形態では、十分なサンプルをデバイスに塗布したかどうかを判断するために、電極７、８でのサンプル検出と電極５、６でのサンプル検出との間の時間を用いることができる。電極７、８および５、６の間の短い流れの時間を用いて、十分なサンプルをデバイスに塗布したことを示すことができる。このような方法で、サンプリングをより早く停止するようにユーザに注意を喚起できる。逆に、電極の２つのセット間のより長い流れの時間を用いて、不十分なサンプルを示すことができる。ユーザは、流れが電極５、６に到達するまでサンプリングを続けてもよく、またはユーザが不十分にサンプリングしたことを表示手段（ＬＣＤ）によってユーザに通知してもよい。

要約すると、本明細書に提示した結果は、十分な量のサンプルをデバイスに加えたことを示すために本発明によるデバイスが有用であることを実証する。

Claims (29)

1. 流体サンプル中の分析物を検出するためのアッセイデバイスであって、
   流体サンプルを受け入れ可能な、かつ前記サンプルをアッセイ流路に移送可能なサンプル受け入れ部材（１）であって、前記アッセイ流路は前記サンプル受け入れ部材に流体的に接続され、前記アッセイ流路は少なくとも２つの構成要素（２、３）を備え、それらのうちの少なくとも１つは、非可動性アッセイ試薬（３２）を１つ以上含む分析物検出ゾーン（３１）を備える検出部材（３）であり、前記アッセイ流路を規定する前記構成要素（２、３）は、前記分析物検出ゾーン（３１）から上流の可動性試薬ゾーン（２１）において１つ以上の可動性アッセイ試薬（２２）を担う、サンプル受け入れ部材（１）と、
   前記サンプル受け入れ部材の下流で、前記分析物検出ゾーン（３１）の上流に位置して前記アッセイ流路と接触し、前記アッセイ流路に沿ったある特定の箇所で流体を検出するようになっている、サンプル検出要素と、
   サンプリング事象の間にサンプルが前記サンプル検出要素に到達するときに、十分なサンプルが前記デバイスに塗布されたことを確かめるためにユーザにフィードバックを提供する指示システムと、
   を備える、アッセイデバイス。
2. 前記アッセイ流路を規定する前記構成要素（２、３）は、流体的に接続された少なくとも２つの多孔質材料を備える、請求項１に記載のアッセイデバイス。
3. 前記可動性アッセイ試薬（２２）は、第１の多孔質材料（２）によって担われ、前記非可動性アッセイ試薬（３２）は、流体的に接続された第２の多孔質材料（３）によって担われる、請求項２に記載のアッセイデバイス。
4. 前記サンプル検出要素は、電極を備える、請求項１〜３のいずれか一項に記載のアッセイデバイス。
5. 前記サンプル検出要素は、電極（５、６）の１つの対である、請求項４に記載のアッセイデバイス。
6. 前記アッセイ流路の前記第１の構成要素（２）と前記第２の構成要素（３）とは、少なくとも部分的に重なる、請求項１〜５のいずれか一項に記載のアッセイデバイス。
7. 前記サンプル検出要素は、前記アッセイ流路の前記第１の構成要素（２）と接触している、請求項１〜６のいずれか一項に記載のアッセイデバイス。
8. 前記サンプル検出要素は、前記アッセイ流路の前記第１の構成要素（２）と前記第２の構成要素（３）とが重なる領域において前記アッセイ流路の前記第１の構成要素（２）と接触する、請求項６または、請求項６に従属するときの請求項７に記載のアッセイデバイス。
9. 前記サンプル検出要素は、電極（５、６）の１つの対であり、電極（５、６）の前記１つの対は、前記アッセイ流路の前記第１の構成要素（２）を突き抜けて、前記アッセイ流路の前記第２の構成要素（３）と接触する、請求項８に記載のアッセイデバイス。
10. 前記サンプル検出要素は、前記アッセイ流路の前記第１の構成要素（２）と前記第２の構成要素（３）とが重ならない領域において前記アッセイ流路の前記第１の構成要素（２）と接触する、請求項６または、請求項６に従属するときの請求項７に記載のアッセイデバイス。
11. 前記サンプル検出要素は、前記アッセイ流路の前記第２の構成要素（３）と接触している、請求項１〜６のいずれか一項に記載のアッセイデバイス。
12. 前記アッセイデバイスは、電極（５、６）の１つの対を備え、他の電極を何も備えない、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のアッセイデバイス。
13. 前記サンプル受け入れ部材と接触している電極（７、８）の第２の対をさらに備える、請求項５または、請求項５に従属するときの請求項６〜１１のいずれか一項に記載のアッセイデバイス。
14. 電極（７、８）の前記第２の対は、前記デバイスをウェイクアップし、電極（５、６）の第１の対は、サンプルが十分であることを示す、請求項１３に記載のアッセイデバイス。
15. 電極（７、８）の前記第２の対から電極（５、６）の前記第１の対までサンプル流体が流れるのに要する時間をモニタするようになっている、請求項１４に記載のアッセイデバイス。
16. 前記指示システムは、十分なサンプルが前記アッセイデバイスに塗布されたことを視覚的に、聴覚的におよび／または触覚的に示すようになっている、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のアッセイデバイス。
17. 前記指示システムは、ＬＥＤを含む、請求項１６に記載のアッセイデバイス。
18. 前記ＬＥＤは、前記アッセイデバイスの下流端に配置される、請求項１７に記載のアッセイデバイス。
19. 電極（５、６）の前記１つの対は、前記指示システムに接続された電気回路の一部である、請求項５に従属するときの請求項１６または１７に記載のアッセイデバイス。
20. 前記サンプル受け入れ部材（１）は、多孔質である、請求項１〜１９のいずれか一項に記載のアッセイデバイス。
21. 前記サンプル受け入れ部材（１）は、ウィックである、請求項１９に記載のアッセイデバイス。
22. 前記アッセイ流路（２、３）は、コントロールゾーンをさらに備える、請求項１〜２１のいずれか一項に記載のアッセイデバイス。
23. ２５℃で≦２ｍＰａ．ｓ、≦１．５ｍＰａ．ｓ、または≦１ｍＰａ．ｓの粘度を有するサンプル中の分析物を検出するようになっている、請求項１〜２２のいずれか一項に記載のアッセイデバイス。
24. 前記サンプルは、尿である、請求項１〜２３のいずれか一項に記載のアッセイデバイス。
25. 前記アッセイデバイスが流体サンプルに曝露されたときにサンプルが十分であることを示すための請求項１〜２４のいずれか一項に記載のアッセイデバイスの使用。
26. 前記アッセイデバイスは、ユーザの尿の流れの中に保持されるか、または容器内に保持された尿サンプル中に浸漬される、請求項２５に記載の使用。
27. 請求項１〜２４のいずれか一項に記載のアッセイデバイスに十分なサンプルが塗布されたという事実に対してユーザに注意を喚起する方法であって、
    （ａ）請求項１〜２４のいずれか一項に記載のアッセイデバイスを流体サンプルに曝露するステップと、
    （ｂ）十分なサンプルが得られたという事実に対して前記ユーザに注意を喚起するステップと、
    を含む、方法。
28. （ａ）請求項１〜２４のいずれか一項に記載のアッセイデバイスをユーザの尿の流れの中に保持するステップと、
    （ｂ）前記ユーザが前記尿の流れからサンプリングし続ける間に、十分なサンプルが得られたという事実に対して前記ユーザに注意を喚起するステップと、
    を含む、請求項２７に記載の方法。
29. 不十分なサンプリングに起因して前記テストが失敗したことをサンプリング後にユーザに示すための請求項１〜２４のいずれか一項に記載のアッセイデバイスの使用。

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