JP6949397B2 - 標的物質の電気的定量方法、定量システム及び試薬 - Google Patents
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Description
1)標的物質に選択的に結合しかつ有電荷物質を発生可能な化合物Aを、標的物質に結合させる工程、
2)化合物Aに有電荷物質を発生させる工程、及び
3)所要容積中の有電荷物質による電気的変化を電界効果型トランジスタで測定する工程、
4)該測定される電気的変化に関わるパラメータ量を、パラメータ量と標的物質量との作成済みの相関データに照会し、標的物質量を算出する工程、を有し、
該パラメータ量は、前記有電荷物質発生後の経過時間に対する電気的変化の関数において、当初の接線傾きに対する所定比の接線傾きになるまでの経過時間である、標的物質の定量方法。
(2) 前記所要容積が500μm3以下である前記1記載の標的物質の定量方法。
(3) 前記測定する工程では、有電荷物質の前記所要容積外への拡散を抑制する前記1または2に記載の標的物質の定量方法。
(4) 前記電界効果型トランジスタのデバイ長よりも標的物質の径が大きい前記1〜3いずれかに記載の標的物質の定量方法。
(5) 前記試料中の標的物質の濃度が1μM以下である前記1〜4いずれかに記載の標的物質の定量方法。
(6) 前記1記載の標的物質の定量のための電気的変化測定方法に使用される試薬であって、標的物質に選択的に結合しかつ有電荷物質を発生可能な化合物Aを含む試薬。
(7) 前記1〜5のいずれかに記載の標的物質の定量方法に使用する、標的物質の定量のために電気的変化を測定するシステムであって、
1)標的物質に選択的に結合しかつ有電荷物質を発生可能な化合物Aを担持可能な反応ウェル、
2)反応ウェルにおいて化合物Aが発生する有電荷物質による電気的変化を測定する電界効果型トランジスタ、および前記電気的変化に関わるパラメータ量の情報を外部へ送信する送信手段、
を有するシステム。
(8) 前記1〜5のいずれかに記載の標的物質の定量方法に使用するシステムであって、
電気的変化に関わるパラメータ量の情報を受信する受信手段、
電気的変化に関わるパラメータ量と標的物質量との作成済み相関データが格納されたデータ格納手段、
前記受信手段の情報に基づくパラメータ量を、前記データ格納手段の前記相関データに照会し、標的物質量を算出する処理手段、
および、前記標的物質量の情報を送信する送信手段、
を有する電界効果型トランジスタである標的物質の定量システム。
本発明では、生体内の低分子物質だけでなく、ウイルス、タンパク質等の巨大標的物質でも検出することを可能にするため、標的物質そのものを検出するのではなく、標的物質と選択的に結合し、そして所定の反応により有電荷物質を発生するような化合物Aを利用する。つまり化合物Aから発生した有電荷物質を検出することを特徴とする。
本発明の標的物質は、生体等の生の試料中に存在する場合だけでなく、濃度既知の標準試料中の標的物質でもよい。この場合、標準試料と生の試料とをウェルに適用し、生の試料中の標的物質の濃度の大小に依存して電気的変化が増減する。
本発明の標的物質の電気的検出方法は、標的物質の検出方法であって、
1)標的物質に選択的に結合し、かつ有電荷物質を発生可能な化合物Aを、標的物質に結合させる工程
2)化合物Aに有電荷物質を発生させる工程
3)有電荷物質による電気的変化を電界効果型トランジスタで測定する工程
を有する。
本発明では高感度の検出が可能であり、標的物質の濃度が1μM以下であることが可能である。
本発明では、電気的変化に関わるパラメータ量と標的物質量との作成済みの相関データとを比較することにより標的物質を定量することが可能である。
例えば、前述のウレアーゼと尿素の系では、発生するアンモニウムイオン量による電気的変化に関わるパラメータ(ここでは電流値)とウレアーゼ量の検量線を作成しておき、その検量線からウレアーゼ量を知ることができ、結果として標的物質の定量が可能となる。
検量線としては、他に作成しているデータベース上のデータと比較対応使用することも可能である。
本発明では、標的物質の検出又は定量のために電気的変化を測定するシステムであって、1)標的物質に選択的に結合しかつ有電荷物質を発生可能な化合物Aを担持可能な反応ウェル、2)反応ウェルにおいて化合物Aが発生する有電荷物質による電気的変化を測定する電界効果型トランジスタ、および、前記電気的変化に関わるパラメータ量の情報を外部へ送信する送信手段、を有するシステムを構成する。
本発明の手段は、それぞれ独立した手段であって、全体としてシステムを構成することができる。
2 ウレアーゼ
3 標的と選択的に結合する部位(検出抗体)
4 標的を選択的に補足する部位(捕捉抗体)
5 容積を保持する手段
G グラフェン(チャネル)
S ソース電極
D ドレイン電極
SiO2 基体
10 反応開始当初の電流変化を示す接線
11 反応終点の電流変化を示す接線
Claims (7)
- 試料中の標的物質の定量のために電気的変化を測定する方法であって、
1)標的物質に選択的に結合しかつ有電荷物質を発生可能な化合物Aを、標的物質に結合させる工程、
2)化合物Aに有電荷物質を発生させる工程、及び
3)所要容積中の有電荷物質による電気的変化を電界効果型トランジスタで測定する工程、
4)該測定される電気的変化に関わるパラメータ量を、パラメータ量と標的物質量との作成済みの相関データに照会し、標的物質量を算出する工程、を有し、
該パラメータ量は、前記有電荷物質発生後の経過時間に対する電気的変化の関数において、当初の接線傾きに対する所定比の接線傾きになるまでの経過時間である、標的物質の定量方法。 - 前記所要容積が500μm3以下である請求項1記載の標的物質の定量方法。
- 前記測定する工程では、有電荷物質の前記所要容積外への拡散を抑制する請求項1または2に記載の標的物質の定量方法。
- 前記電界効果型トランジスタのデバイ長よりも標的物質の径が大きい請求項1〜3いずれかに記載の標的物質の定量方法。
- 前記試料中の標的物質の濃度が1μM以下である請求項1〜4いずれかに記載の標的物質の定量方法。
- 請求項1〜5のいずれかに記載の標的物質の定量方法に使用する、標的物質の定量のために電気的変化を測定するシステムであって、
1)標的物質に選択的に結合しかつ有電荷物質を発生可能な化合物Aを担持可能な反応ウェル、
2)反応ウェルにおいて化合物Aが発生する有電荷物質による電気的変化を測定する電界効果型トランジスタ、および前記電気的変化に関わるパラメータ量の情報を外部へ送信する送信手段、
を有するシステム。 - 請求項1〜5のいずれかに記載の標的物質の定量方法に使用するシステムであって、
電気的変化に関わるパラメータ量の情報を受信する受信手段、
電気的変化に関わるパラメータ量と標的物質量との作成済み相関データが格納されたデータ格納手段、
前記受信手段の情報に基づくパラメータ量を、前記データ格納手段の前記相関データに照会し、標的物質量を算出する処理手段、
および、前記標的物質量の情報を送信する送信手段、
を有する電界効果型トランジスタである標的物質の定量システム。
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