JP2010243299A - バイオセンサ、電荷転送型センサおよび測定方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】バイオセンサ60は、基板表面に形成されたゲート電極22・24と、ゲート電極22とゲート電極24との間の基板表面上に形成されたセンシング部27と、センシング部27の表面に結合された、対象タンパク質34と特異的に相互作用するリガンド33と、上記ゲート電極22により上記センシング部27と隔てられた電荷供給部と、センシング部27においてリガンド33と相互作用した対象タンパク質34に由来する電荷を蓄積するn+型ドープ領域13とを備える電荷転送型センサ50と、n+型ドープ領域13に蓄積された電荷の量を測定するオシロスコープ45とを備えている。
【選択図】図1
Description
本実施形態のバイオセンサ60の構成を図1の上段に示した。図1の上段に示すように、バイオセンサ60は、電荷転送型センサ50、ソースフォロア回路40およびオシロスコープ(測定装置)45を含んでいる。
バイオセンサ60が備える電荷転送型センサの別の構成を、図2を参照しつつ説明する。図2は、電荷転送型センサ70の構成を示す概略図である。図2に示すように、電荷転送型センサ70は、電荷転送型センサ50の構成に加えて、n+型ドープ領域14およびゲート電極(第3ゲート電極)26を備えている。n+型ドープ領域14はRD(Reset Diode)端子に接続されており、ゲート電極26はRG端子に接続されている。RD端子およびRG端子はパルスジェネレータ(不図示)に接続されており、このパルスジェネレータは、後述する所定の様式でn+型ドープ領域14およびゲート電極26に電圧を印加する。その他の構成は、電荷転送型センサ50の構成と同様である。
本実施形態のバイオセンサ60においては、FD部であるn+型ドープ領域13にソースフォロア回路40が連結されている。ソースフォロア回路40を含む電荷転送型センサの基本的な構成を図3(a)および図3(b)に示す。図3(a)は、電荷転送型センサ50に接続されたソースフォロア回路40の構成を示す概略図である。図3(b)は、電荷転送型センサ70に接続されたソースフォロア回路40の構成を示す概略図である。
対象タンパク質34および電荷付与試薬35に由来する電荷の蓄積方法を図4および図5を参照しつつ説明する。図4は、電荷転送型センサ70においてFD部に電荷が蓄積する原理を説明するための図である。図5は、バイオセンサ60において、各端子に印加される電位の大きさおよびタイミングを表したグラフである。
次に、電荷転送型センサ50・70を用いた場合のタンパク質濃度を定量する方法について説明する。なお、ここでは、リガンド33に特異的に対象タンパク質34を結合させ、当該対象タンパク質34に電荷付与試薬35を結合させた後の工程から説明を始める。
次に、リガンド33に対象タンパク質34を特異的に結合させ、結合した対象タンパク質34を電荷付与試薬35で処理する方法について図6を用いて説明する。
CBB G−250は、リガンド33およびブロッキング剤にも結合する。検量線を作成するために用いるリガンド33と濃度未知のタンパク質溶液のタンパク質濃度を測定するために用いるリガンド33とは、基本的に同じものであるため、バックグラウンドを除くためのコントロールをとる必要は必ずしもない。
本発明では対象タンパク質34の電荷量を大きくするために、電気泳動の一種であるBN−PAGEに用いられているCBB G−250を電荷付与試薬35の一例として利用している。一般的に、タンパク質の電気泳動を行う場合、SDS−PAGEやNative−PAGEが用いられる。
本発明に係るバイオセンサ60を用いてタンパク質濃度測定のための検量線を作成した実験結果の一例について説明する。
まず、電荷転送型センサ70を3つ用意し、それぞれ、図6に示すようにSi3N4膜である固定化層20上にリガンド33として抗アディポネクチン抗体を物理吸着法で固定化した。用いた抗体溶液は、2.5mM KH2PO4/2.5mM Na2HPO4 1mLに抗体500μgを溶解し、500μg/mLの抗体溶液とし、さらに5μg/mLへ希釈したものを使用した。Si3N4膜上に抗アディポネクチン抗体溶液を滴下した後、1時間静置した。
次に、希釈した各濃度の抗体溶液を、抗アディポネクチン抗体を固定化した3つの電荷転送型センサ70のSi3N4膜にそれぞれ滴下し、10分間静置することにより抗原抗体反応を行った。0.1×PBSを用いて洗浄して遊離の抗体を除去した後、電荷付与試薬35としてCBB G−250溶液を滴下し、5分間静置した。この処理によりアディポネクチンにCBB G−250を結合させた。CBB G−250溶液は、PROTEIN ASSAY Bradford、BIO-RADを希釈せずに使用した。
本発明は上述した各実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。
10 基板
13 n+型ドープ領域(電荷蓄積部)
22 ゲート電極(第1ゲート電極)
24 ゲート電極(第2ゲート電極)
27 センシング部
33 リガンド
34 対象タンパク質
35 電荷付与試薬(電荷付与分子)
40 ソースフォロア回路
45 オシロスコープ(測定装置)
50 電荷転送型センサ
60 バイオセンサ
70 電荷転送型センサ
Claims (5)
- 測定対象である対象タンパク質の濃度を測定するバイオセンサであって、
基板表面に形成された第1および第2ゲート電極と、
上記第1ゲート電極と上記第2ゲート電極との間の基板表面上に形成されたセンシング部と、
上記センシング部の表面に結合された、上記対象タンパク質と特異的に相互作用するリガンドと、
上記第1ゲート電極により上記センシング部と隔てられた電荷供給部と、
上記ゲート電極において上記リガンドと相互作用した対象タンパク質に由来する電荷を蓄積する電荷蓄積部とを備える電荷転送型センサと、
上記電荷蓄積部に蓄積された電荷の量を測定する測定装置とを備えることを特徴とするバイオセンサ。 - 上記測定装置は、上記対象タンパク質の電荷に加え、当該対象タンパク質に結合した電荷付与分子の電荷の量を測定することを特徴とする請求項1に記載のバイオセンサ。
- 上記電荷付与分子は、CBB G−250、ドデシル硫酸ナトリウム、およびカチオン性ポリマーからなる群から選択されることを特徴とする請求項1または2に記載のバイオセンサ。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載のバイオセンサを用いた測定方法であって、
上記リガンドと上記対象タンパク質とを特異的に相互作用させる相互作用工程と、
上記相互作用工程において上記リガンドと相互作用しなかったタンパク質を除去する洗浄工程と、
上記洗浄工程の後に、電解質溶液に浸漬された上記センシング部の電荷を上記電荷蓄積部に蓄積する蓄積工程と、
上記蓄積工程の後に、上記電荷蓄積部の電位を測定する測定工程とを含むことを特徴とする測定方法。 - 基板表面に形成された第1および第2ゲート電極と、
上記第1ゲート電極と上記第2ゲート電極との間の基板表面上に形成されたセンシング部と、
上記センシング部の表面に結合された、上記対象タンパク質と特異的に相互作用するリガンドと、
上記センシング部において上記リガンドと相互作用した対象タンパク質に由来する電荷を蓄積する電荷蓄積部とを備えることを特徴とする電荷転送型センサ。
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Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101365039B1 (ko) | 2012-08-03 | 2014-02-21 | 한국해양과학기술원 | 확산 흐름을 이용한 단백질 바이오센서를 구비하는 측정 시스템 |
WO2014192830A1 (ja) * | 2013-05-29 | 2014-12-04 | 独立行政法人国立長寿医療研究センター | 化学・物理現象検出方法及びその装置 |
JP2017009612A (ja) * | 2015-06-24 | 2017-01-12 | 学校法人早稲田大学 | タンパク質の検出方法 |
JP2018036154A (ja) * | 2016-08-31 | 2018-03-08 | 国立大学法人大阪大学 | 標的物質の電気的検出方法、定量方法、検出システム、定量システム及び試薬 |
JP2021006821A (ja) * | 2016-08-31 | 2021-01-21 | 国立大学法人大阪大学 | 標的物質の電気的定量方法、定量システム及び試薬 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007506085A (ja) * | 2003-09-19 | 2007-03-15 | ケンブリッジ・エンタープライズ・リミテッド | 電界効果トランジスタを用いる分子間相互作用の検知 |
JP2007255906A (ja) * | 2006-03-20 | 2007-10-04 | Horiba Ltd | 電極式溶液測定方法および電極式溶液測定装置 |
-
2009
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007506085A (ja) * | 2003-09-19 | 2007-03-15 | ケンブリッジ・エンタープライズ・リミテッド | 電界効果トランジスタを用いる分子間相互作用の検知 |
JP2007255906A (ja) * | 2006-03-20 | 2007-10-04 | Horiba Ltd | 電極式溶液測定方法および電極式溶液測定装置 |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101365039B1 (ko) | 2012-08-03 | 2014-02-21 | 한국해양과학기술원 | 확산 흐름을 이용한 단백질 바이오센서를 구비하는 측정 시스템 |
WO2014192830A1 (ja) * | 2013-05-29 | 2014-12-04 | 独立行政法人国立長寿医療研究センター | 化学・物理現象検出方法及びその装置 |
JP2014232032A (ja) * | 2013-05-29 | 2014-12-11 | 独立行政法人国立長寿医療研究センター | 化学・物理現象検出方法及びその装置 |
JP2017009612A (ja) * | 2015-06-24 | 2017-01-12 | 学校法人早稲田大学 | タンパク質の検出方法 |
JP2018036154A (ja) * | 2016-08-31 | 2018-03-08 | 国立大学法人大阪大学 | 標的物質の電気的検出方法、定量方法、検出システム、定量システム及び試薬 |
JP2021006821A (ja) * | 2016-08-31 | 2021-01-21 | 国立大学法人大阪大学 | 標的物質の電気的定量方法、定量システム及び試薬 |
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