JP6886578B1

JP6886578B1 - 化合物又はその塩、がん治療薬、光増感剤、及び蛍光プローブ組成物

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Publication number: JP6886578B1
Application number: JP2020146971A
Authority: JP
Inventors: 堀内　宏明; 宏明堀内; 真彦大重; 松尾　一郎; 一郎松尾; 哲夫奥津; 桂　進司; 進司桂; 利忠吉原; 成史飛田; 菅原　二三男; 二三男菅原; 坂口　謙吾; 謙吾坂口
Original assignee: Gunma University NUC; MT3 Inc
Current assignee: Gunma University NUC; MT3 Inc
Priority date: 2020-09-01
Filing date: 2020-09-01
Publication date: 2021-06-16
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Abstract

【課題】腫瘍組織に選択的に集積する化合物又はその塩、及びそれを用いたがん治療薬、光増感剤、及び蛍光プローブ組成物の提供。【解決手段】例えば、エステル基及びトリメチルシリル基を有するポルフィリン化合物と、１−（３−アミノプロピル）−α−Ｄ−キノボピラノシドナトリウム塩とを縮合させて合成した下記化合物（ＩＩｂ）。【選択図】図５

Description

本発明は、化合物又はその塩、がん治療薬、光増感剤、及び蛍光プローブ組成物に関する。

がんなどの患者に一重項酸素を発生しうる化合物（光増感剤）を投与し、適当な波長の光を照射して一重項酸素を発生させることにより、悪性細胞を破壊して疾患を治療する方法（光線力学療法（ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃｔｈｅｒａｐｙ））が知られている。また、光増感剤の多くは蛍光も示し、適当な波長の光を照射して蛍光を観察することによる癌などを診断する光線力学診断（ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃｄｉａｇｎｏｓｉｓ）も知られている。このような治療・診断方法においては、従来のポルフィリン類縁体・フタロシアニン誘導体・ヒポクレリン誘導体・ヒペリシン誘導体など（例えば、特許文献１、２、及び非特許文献１、２参照）に加え、ケイ素を含む置換基を有する化合物を用いた例を開発し、その有用性を示した（特許文献３、４、非特許文献３、４及び５）。一方で、光感受性蛍光物質クロリンにグルコースを連結し、高い腫瘍細胞指向性を可能する糖鎖連結クロリンが開発され、腫瘍選択性が示された（非特許文献６）。

特開２００２−５２３５０９号公報特開２００４−００２４３８号公報国際公開第２０１２／０２９６０９号特許第５８４３１１３号公報

Coordination Chemistry Reviews, 248 (2004), p321-35 Journal of the National Comprehensive Cancer Network, 10 (2012), S-3-8 J. Photochem. Photobiol. A, 2011, 221, 98-104. Chem. Eur. J., 2014, 20, 6054-6060. J. Photochem. Photobiol. A, 2016, 321, 72-8. 日本レーザー医学会誌 JJSLSM, 34 (2013), 113-7

例えばがんは日本人の最大の死亡要因であり、そのような腫瘍組織の治療及び診断に用いることのできる光増感剤及び蛍光プローブの特性の向上が望まれている。

本発明は、腫瘍組織に選択的に集積する化合物又はその塩、がん治療薬、光増感剤、及び蛍光プローブ組成物を提供することを目的とする。

本発明の目的を達成するために、例えば、一実施形態に係る化合物又はその塩は以下の構成を備える。すなわち、下記式（Ｉ）によって表される。

前記式（Ｉ）中、Ａは−Ｘ−ＮＨＣＯ−で表される、ＸがＣ _１〜Ｃ _６のアルキレン基である連結基であり、
Ｒ _１、Ｒ _２、Ｒ _４、Ｒ _５、Ｒ _７、Ｒ _８、Ｒ _１０、及びＲ _１１は水素原子であり、
Ｒ _３、Ｒ _６、及びＲ _９は下記式（ｉｉｉ）の置換基であり、

Ｒ_１２は前記式（ｉ）又は（ｉｉ）から選ばれる置換基であり、
Ｒ_１３はスルホ基であり、
前記式（ｉ）及び（ｉｉ）において、Ｒａ、Ｒｂ、及びＲｃはそれぞれ独立してＣ _１〜Ｃ _６のアルキル基から選ばれる置換基であり、
前記式（ｉｉｉ）において、Ｒｄは水素原子又はＣ_１〜Ｃ _６のアルキル基であり、Ｒｘは前記式（ｉ）又は（ｉｉ）に示される置換基である。

腫瘍組織に選択的に集積する化合物又はその塩、がん治療薬、光増感剤、及び蛍光プローブ組成物を提供する。

実施例３に係る各化合物の吸収スペクトル及び蛍光スペクトル。実施例３に係る各化合物の蛍光粒子収率の測定結果を示す図。実施例３に係る各化合物の蛍光減衰曲線を示す図。実施例３に係る各化合物の光励起によるりん光スペクトルを示す図。実施例４に係る各化合物のがん細胞に対する取り込み効率を示す図。構造式（４）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（４）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（５）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（５）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（６）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（６）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（７）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（７）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（８）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（８）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（９）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（９）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（１０）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（１０）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（１１）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（１１）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（１２）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（１２）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（１３）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（１３）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（１４）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（１４）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（１５）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（１５）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（１６）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（１６）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。構造式（１７）の化合物の質量分析結果を示す図。構造式（１７）の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果を示す図。

以下、添付図面を参照して実施形態を詳しく説明する。なお、以下の実施形態は特許請求の範囲に係る発明を限定するものではなく、また実施形態で説明されている特徴の組み合わせの全てが発明に必須のものとは限らない。実施形態で説明されている複数の特徴のうち二つ以上の特徴は任意に組み合わされてもよい。また、同一若しくは同様の構成には同一の参照番号を付し、重複した説明は省略する。

本発明の一実施形態に係る化合物は、下記一般式（Ｉ）で表される。

一般式（Ｉ）において、Ａは２価の連結基である。２価の連結基の種類は特に限定されないが、２価の脂肪族炭化水素基、２価の複素環基、アミノ基（−ＮＨ−）、若しくはカルボニル基、又はこれらの連結基にさらにエーテル基（−Ｏ−）若しくは水酸基等が結合した連結基が挙げられる。

本明細書において、炭化水素基は、脂肪族炭化水素基であっても芳香族炭化水素基であってもよい。脂肪族炭化水素基の例としては、メチル基、エチル基、ヘキシル基、又はシクロヘキシル基のようなアルキル基、エテニル基若しくはヘキセニル基のようなアルケニル基、及びエチニル基又はヘキシニル基のようなアルキニル基が挙げられる。また、芳香族炭化水素基の例としては、フェニル基又はナフチル基等が挙げられる。複素環基は、芳香族複素環基であっても脂肪族複素環基であってもよい。芳香族複素環基の例としては、チエニル基及びピリジル基等が挙げられる。また、脂肪族複素環基の例としては、テトラヒドロフラニル基及びピロリジニル基等が挙げられる。なお、２価の脂肪族炭化水素基及び２価の芳香族基は、それぞれ、上記のような脂肪族炭化水素基及び芳香族基から１つの水素原子を除いたものに相当する。

一実施形態において、Ａは−Ｘ−Ｙ−で表され、ここでＸは酸素原子と、ＹはＲ_１２とともにベンゼン環と、それぞれ結合している。ここで、例えば、ＸはＣ_１〜Ｃ_２０の２価の炭化水素基である。一実施形態において、ＸはＣ_１〜Ｃ_６の２価の炭化水素基であり、例えば、ＸはＣ_１〜Ｃ_６のアルキレン基である。Ｘの具体例としては、メチレン基、エチレン基、プロパン−１，３−ジイル基、ブタン−１，４−ジイル基、若しくはヘキサン−１，６−ジイル基等の直鎖アルキレン基、又はプロパン−１，２−ジイル基、２−メチルペンタン−１，５−ジイル基等の分岐鎖アルキレン基等が挙げられる。また、Ｙはアミド基である。一実施形態においては、アミド基を構成するＣ＝Ｏ部位がＲ_１２とともにベンゼン環と結合しており、アミド基を構成する窒素原子がＸと結合している。アミド基は−ＮＲ_ＹＣＯ−で表すことができ、ここでＲ_Ｙは水素原子又はＣ_１〜Ｃ_６の炭化水素基であってもよい。

式（Ｉ）において、Ｒ_１〜Ｒ_１１は１価の置換基である。例えば、Ｒ_１〜Ｒ_１１は、それぞれ独立に、水素原子、メチレン基、カルボキシル基（例えば−ＣＨ_２ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、若しくは−ＣＨ_２ＣＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_２ＣＯＯＨ）ＣＯＯＨ）、水酸基、スルホ基（−ＳＯ_３Ｈ）、又は炭化水素基（ＣＨ_３、若しくはＣＨ_２ＣＨ_３）であってもよい。

一方で、Ｒ_１〜Ｒ_１１の少なくとも１つは下記の一般式（ｉ）〜（ｉｉｉ）から選ばれる置換基である。

一般式（ｉ）及び（ｉｉ）において、Ｒａ、Ｒｂ、及びＲｃはそれぞれ独立して水素原子、Ｃ_１〜Ｃ_６の脂肪族炭化水素基、Ｃ_１〜Ｃ_６のアルコキシ基、又はＣ_２〜Ｃ_１０の芳香族基から選ばれる置換基である。アルコキシ基としては、例えばメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ｔ−ブトキシ基、フェノキシ基、ペンチルオキシ基、アリルオキシ基、及びシクロヘキシルオキシ基が挙げられる。

一般式（ｉｉｉ）において、Ｒｄは水素原子又はＣ_１〜Ｃ_６の脂肪族炭化水素基から選ばれる置換基であり、Ｒｘは一般式（ｉ）又は（ｉｉ）に示される置換基である。一般式（ｉｉｉ）のフェニル環上におけるＣＯＯＲｄ及びＲｘの結合位置は、特に限定されない。一方で、一実施形態において、置換基ＣＯＯＲｄ及びＲｘのそれぞれは、ポルフィリン環の結合部位に対して、メタ位に結合している。

ここでは、Ｒ_１〜Ｒ_１１の少なくとも１つが、Ｒｘを（ｉ）とする（ｉｉｉ）である場合がより好ましい。また、一実施形態において、Ｒ_３、Ｒ_６、及びＲ_９は、上記式（ｉ）〜（ｉｉｉ）から選ばれる置換基である。例えば、一実施形態において、Ｒ_３、Ｒ_６、及びＲ_９は、上記式（ｉｉｉ）で表される置換基であり、この場合、Ｒｘは式（ｉ）で表される置換基であってもよい。また、この場合において、Ｒｄは水素原子であってもよく、Ｃ_１〜Ｃ_６の脂肪族炭化水素基であってもよい。また、この場合において、Ｒａ、Ｒｂ、及びＲｃは、それぞれ独立してＣ_１〜Ｃ_６の脂肪族炭化水素基であってもよい。さらに、この場合において、Ｒ_１〜Ｒ_２、Ｒ_４〜Ｒ_５、Ｒ_７〜Ｒ_８、及びＲ_１０〜Ｒ_１１は、水素原子であってもよい。

式（Ｉ）において、Ｒ_１２は前記式（ｉ）又は（ｉｉ）から選ばれる置換基である。ここで、Ｒａ、Ｒｂ、及びＲｃはトリアルキルシリル基、例えばトリメチルシリル基であってもよく、トリアルキルシロキシ基、例えばトリメチルシロキシ基であってもよい。

なお、フェニル基上のＡ及びＲ_１２の結合位置は特に限定されない。一方で、一実施形態において、置換基Ａ及びＲ_１２のそれぞれは、ポルフィリン環の結合部位に対して、メタ位に結合している。

式（Ｉ）において、Ｒ_１３はヒドロキシ基又はスルホ基である。式（Ｉ）で表される化合物の腫瘍細胞への取り込み効率を向上させる観点からは、Ｒ_１３をスルホ基とすることができる。

本発明の別の一実施形態に係る化合物は、下記式（ＩＩｂ）で表される化合物である。下記式（ＩＩｂ）で表される化合物は、一般式（Ｉ）で表される化合物の一例である。

本発明のさらなる一実施形態に係る化合物は、上記一般式（Ｉ）で表される化合物の塩である。塩としては、ナトリウム塩、又はカルシウム塩などが用いられてもよい。例えば、式（Ｉ）におけるＲ_１３が、スルホ基の塩となっていてもよい。また、一般式（Ｉ）の化合物において、ポルフィリン環の中心にＺｎ^２＋、Ｃｕ^２＋（ＩＩ）、Ｃａ^２＋、Ｍｇ^２＋、ＳｉＲ_２などの金属が結合して塩を形成していてもよい。

例えば、本発明の一実施形態に係る化合物として、式（ＩＩｂ）で表される化合物の塩である、以下の化合物（ＩＩａ）及び（ＩＩｃ）が挙げられる。

上記一般式（Ｉ）で表される化合物は、後述する構造式（ＩＩＩ）に示されるようなポルフィリン化合物に対して、ケイ素置換基と糖鎖とが導入されている。このような構成のために、上記一般式（Ｉ）で表される化合物は、腫瘍部位における集積性が向上する。ポルフィリン化合物はがん治療において、とりわけ光線力学療法用の光増感剤として利用可能であり、また蛍光性を有するため蛍光プローブとして使用可能である。したがって、上記一般式（Ｉ）で表される化合物を含有する組成物は、がん治療薬として、光線力学療法用の光増感剤として、又は蛍光プローブ組成物として使用可能である。

一般式（Ｉ）で表される化合物を含有する組成物は、医薬製剤の製造法で一般的に用いられている公知の手段に従って、そのままあるいは薬理学的に許容される担体と混合して、例えば、錠剤、液剤、注射剤等の医薬製剤として、経口的または非経口的（例、局所、静脈投与等）に投与することができる。なお、一般式（Ｉ）の化合物はがん組織に蓄積しやすいため、単独で投与してもよいが、リポソームなどを用いた薬品輸送システム（ＤＤＳ）の手法により、標的組織に到達しやすいような形で投与してもよい。

組成物中の一般式（Ｉ）で表される化合物の含有量は、用途に応じて適宜選択することができるが、例えば製剤全体の約０.０１ないし約１００重量％であってもよい。一般式（Ｉ）の化合物の投与量は、投与対象、対象臓器、症状、投与方法などにより異なり特に制限されないが、一般的に、一回の投与あたり、約０．１〜１０００ｍｇ、好ましくは約１．０〜１００ｍｇである。

薬理学的に許容される担体としては、例えば固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤及び崩壊剤、あるいは液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤及び無痛化剤等が挙げられる。更に必要に応じ、通常の防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、吸着剤、湿潤剤等の添加物を適宜、適量用いることもできる。

一重項酸素を発生させて光線力学療法（ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃｔｈｅｒａｐｙ）（ＰＤＴ）、あるいは蛍光を放出させて光線力学診断（ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃｄｉａｇｎｏｓｉｓ）に用いるためには、一般式（Ｉ）の化合物を含有する上記の組成物を投与した後に、適当な波長の光を照射する。

照射時間は、患者の年齢や性別、疾患の種類や程度、光源と患部との距離などによって適宜選定される。波長は特に制限されないが、６００〜８００ｎｍが好ましい。照射は体外から行ってもよいし、光ファイバーなどを標的組織近傍に挿入して行ってもよい。また、白血病患者から骨髄を取り出して、インビトロで一般式（Ｉ）の化合物による処理をし、処理された骨髄を患者に戻すというような態様も含む。

一重項酸素を発生させることにより細胞を破壊することができる。また、蛍光を放出させて細胞を光らせることができる。したがって、本発明に係る組成物を適用することのできる疾患は、一重項酸素を発生させて細胞を破壊することによって治療されうるもの、あるいは診断しうるものであれば特に制限されないが、癌、移植片対宿主疾患、移植片拒絶、自己免疫疾患およびＴ細胞仲介性免疫アレルギー、細菌の感染症、ウイルス感染、加齢性黄斑変性、にきびなどが例示される。このなかでは、癌が特に好ましい。癌の種類は特に制限されないが、肺癌、悪性リンパ腫（例えば、細網肉腫、リンパ肉腫、ホジキン病等）、消化器癌（例えば、胃癌、胆のう・胆管癌、膵臓癌、肝癌、結腸癌、直腸癌等）、乳癌、卵巣癌、播種性多発性骨髄腫、膀胱癌、白血病（例えば、慢性骨髄性白血病の急性転化を含む急性白血病等）、腎臓癌、および前立腺癌等が例示される。

［実施例１］
以下、構造式（ＩＩａ）で表される化合物（構造式（１０）としても示される）のナトリウム塩合成方法の一例について説明を行う。本実施例では、３−トリメチルシリル−１−ベンゼンカルボキシアミド，Ｎ−［３−ｎ−プロピル−α−Ｄ−キノボピラノシド］−５−［１０，１５，２０−トリス（３−カルボネート−５−トリメチルシリルフェニル）ポルフィリン］４ナトリウム塩（構造式（１１））が、以下の経路Ａ〜Ｇにしたがって合成された。

経路Ａでは、５−（３−カルボキシ−５−トリメチルシリルフェニル）−１０，１５，２０−トリス（３−メトキシカルボニル−５−トリメチルシリルフェニル）ポルフィリン（構造式（４））が合成された。２００ｍＬナスフラスコに３−カルボキシ−５−トリメチルシリルベンズアルデヒドメチルエステル（構造式（１））（３２０ｍｇ）、３−カルボキシ−５−トリメチルシリルベンズアルデヒド（構造式（２））（１００ｍｇ）及びピロール（１２０ｍｇ）を加えた。それらを脱水クロロホルム５０ｍＬに溶かした後、窒素置換を行った。次いで、これにフッ化ホウ素・ジエチルエーテル錯体を加え、室温で４０分攪拌した。その後、２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−ｐ−ベンゾキノン（３６０ｍｇ）を加え、室温で一時間反応させた後、溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝６６／３３，１％酢酸溶液）にて精製し、構造式（４）に示される化合物（７８．６ｍｇ，１６％）を得た。

構造式（４）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図６及び図７に示されている。

本実施例において、質量分析には質量分析装置（島津製作所製，ＡＸＩＭＡＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＭＡＬＤＩＴＯＦＭＳ）を用いた。また、以下^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの測定は、分光計（ＪＥＯＬ製，ＥＣＳ４００４００ＭＨｚ）を用い、ＣＤＣｌ_３を溶媒として行った。構造式（４）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ１１２０．１９［Ｍ＋Ｈ］、計算値１１２１．４１［Ｍ＋Ｈ］
δ＝８．９５−８．９３（ｄ，１Ｈ），８．８８−８．８５（ｍ，３Ｈ），８．８２（ｓ，８Ｈ），８．６７（ｓ，１Ｈ），８．６１（ｓ，３Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ），８．５５−８．５３（ｍ，３Ｈ），４．００（ｓ，９Ｈ），０．４５（ｓ，３６Ｈ），−２．７５（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ

経路Ｂでは、３−（トシル）−ｎ−プロピル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−チオアセチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（構造式（６））が合成された。２００ｍＬナスフラスコをアルゴン置換し、乾燥ピリジン（５０ｍＬ）を投入した。これに、３−（ヒドロキシ）−ｎ−プロピル−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−チオアセチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（構造式（５））（５ｇ）及び塩化トシル（５ｇ）を攪拌しながら加え、室温で２時間攪拌した。次いで、反応液に酢酸エチル（５０ｍＬ）を加え、１Ｍ塩酸（１ｍＬ）で洗浄後、さらに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥及び濾過した後、減圧濃縮することで反応物を得た。この反応物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサンと酢酸エチルとの混合溶液）で精製し、構造式（６）で示される化合物（５．０ｇ、７９％）を得た。

構造式（５）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図８及び図９に示されている。また、構造式（６）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図１０及び図１１に示されている。

構造式（６）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ７４３．０２［Ｍ＋Ｎａ］、計算値７３２．２４［Ｍ＋Ｎａ］
δ＝７．７９−７．７６（ｄ，２Ｈ），７．３８−７．２８（ｍ，１７Ｈ），４．９６−４.８８（ｑ，２Ｈ），４．７９−４．７１（ｑ，２Ｈ），４．６４−４．６３（ｔ，２Ｈ），４．６１−４．６０（ｄ，１Ｈ），４．２２−４．０８（ｍ，２Ｈ），３．８８−３．８４（ｔ，１Ｈ），３．７５−３．６６（ｍ，２Ｈ），３．５１−３．３９（ｍ，３Ｈ），３．３２−３．２８（ｔ，１Ｈ），３．０４−２．９９（ｑ，１Ｈ），２．３９（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．００−１．９４（ｍ，２Ｈ），１．５９（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ

経路Ｃでは、３−（アジド）−ｎ−プロピル−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−チオアセチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（構造式（７））が合成された。２００ｍＬナスフラスコをアルゴン置換し、乾燥ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）を投入した。これに構造式（６）の化合物（３．６ｇ）とアジ化ナトリウム（３．６ｇ）とを攪拌しながら投入し、５０℃で３時間攪拌した。反応液に酢酸エチル（５０ｍＬ）を加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、さらに飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥及び濾過した後、減圧濃縮することで反応物を得た。この反応物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサンと酢酸エチルとの混合溶液）で精製し、構造式（７）で示される化合物（２．３ｇ、７９％）を得た。

構造式（７）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図１２及び図１３に示されている。

構造式（７）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ５６４．１３［Ｍ−Ｎ_２＋Ｈ］、計算値５６４．２４［Ｍ−Ｎ_２＋Ｈ］、計算式Ｃ_３２Ｈ_３７Ｎ_３Ｏ_６Ｓ
δ＝７．４１−７．２９（ｍ，１５Ｈ），５．０１−４．９９（ｄ，１Ｈ），４．９３−４．９０（ｄ，１Ｈ），４．８４−４．７７（ｑ，２Ｈ），４．６７−４．６３（ｍ，３Ｈ），３.９９−３．９４（ｔ，１Ｈ），３．７９−３．７３（ｍ，２Ｈ），３．５５−３．５１（ｑ，１Ｈ），３．４７−３．３７（ｍ，４Ｈ），３．３５−３．３１（ｔ，１Ｈ），３．０７−３.０１（ｑ，１Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），１．９５−１．８７（ｍ，２Ｈ），１．２７（ｓ，１Ｈ）ｐｐｍ

経路Ｄでは、３−（アジド）ｎ−プロピル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−キノボピラノシドナトリウム塩（構造式（８））が合成された。２００ｍＬナスフラスコをアルゴン置換し、構造式（７）の化合物（２．２ｇ）、酢酸カリウム（７．４ｇ）、オキソン（５．８ｇ）、及び酢酸（５０ｍＬ）を加えてアルゴン雰囲気下の室温で２日間攪拌した。この反応液に酢酸エチル（５０ｍＬ）を加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥及び濾過した後、減圧濃縮することで反応物を得た。この反応物をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルムとメタノールの混合溶液）で精製し、構造式（８）で示される化合物（１．８ｇ、８０％）を得た。

構造式（８）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図１４及び図１５に示されている。

構造式（８）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ５９８．８４［Ｍ−Ｎａ＋Ｈ_２］、計算値５９８．２１［Ｍ−Ｎａ＋Ｈ_２］、計算式Ｃ_３０Ｈ_３４Ｎ_３ＮａＯ_８Ｓ
δ＝７．３０−７．１９（ｍ，１５Ｈ），４．９３−４．９０（ｄ，１Ｈ），４．８０−４．７７（ｄ，２Ｈ），４．６９−４．５３（ｍ，４Ｈ），４．１８−４．１３（ｔ，１Ｈ），３．９４−３．８６（ｍ，２Ｈ），３．６３−３．４３（ｍ，６Ｈ），３．４１−３．２５（ｍ，４Ｈ），３．２２−３．１７（ｔ，１Ｈ），３．１１−３．０５（ｑ，１Ｈ），１．８２−１．７４（ｍ，２Ｈ），１．２５−１．２２（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ

経路Ｅでは、３−（アミノ）−ｎ−プロピル−α−Ｄ−キノボピラノシドナトリウム塩（構造式（９））が合成された。２００ｍＬナスフラスコに構造式（８）の化合物（１．２ｇ）、水酸化パラジウム（１．９ｇ）、ｔｅｒｔ−ブタノール（４０ｍＬ）、及び水（４０ｍＬ）を加え、水素雰囲気下の４０℃で一晩攪拌した。この反応液を減圧濃縮することで反応物を得た。反応物を逆相シリカゲルクロマトグラフィー（水とメタノールとの混合溶液）で精製し、構造式（９）で示される化合物（０．５３ｇ、８５％）を得た。

構造式（９）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図１６及び図１７に示されている。

構造式（９）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ３０２．１５［Ｍ−Ｎａ＋Ｈ_２］、計算値３０２．０８［Ｍ−Ｎａ＋Ｈ_２］計算値Ｃ_９Ｈ_１９ＮＮａＯ_８Ｓ
δ＝４．８０−４．７９（ｄ，１Ｈ），３．９７−３．８６（ｍ，２Ｈ），３．６２−３．５４，（ｑ，１Ｈ），３．５２−３．４７（ｍ，２Ｈ），３．３１−３．２６（ｄ，１Ｈ），３.２０−３．１３（ｔ，１Ｈ），３．０８−３．０４（ｔ，２Ｈ），３．０１−２．９３（ｑ，１Ｈ），１．９７−１．８８（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ

経路Ｆでは、３−トリメチルシリル−１−ベンゼンカルボキシアミド，Ｎ−［３−ｎ−プロピル−α−Ｄ−キノボピラノシド］−５−［１０，１５，２０−トリス（３−メトキシカルボニル−５−トリメチルシリルフェニル）ポルフィリン］ナトリウム塩（構造式（１０））が合成された。５０ｍＬナスフラスコに構造式（４）の化合物（１０ｍｇ）、構造式（９）の化合物（９．１ｍｇ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３．５ｍｇ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３．６ｍｇ）、ジエチルアニリン（２５μＬ）、及びジメチルホルムアミド（１．６ｍＬ）を加えた。次いで、この混合溶液を室温で１３時間攪拌した。この反応液に酢酸エチル（５０ｍＬ）を加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、さらに飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥及び濾過した後、減圧濃縮することで反応物を得た。この反応物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタンとメタノールとの混合溶液）で精製し、構造式（１０）で示される化合物（９．８ｍｇ、８０％）を得た。

構造式（１０）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図１８及び図１９に示されている。

構造式（１０）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ１４０４．２２［Ｍ−Ｎａ＋Ｈ_２］、計算値１４０４．４８［Ｍ−Ｎａ＋Ｈ_２］、計算式Ｃ_７２Ｈ_８５Ｎ_５ＮａＯ_１５ＳＳｉ_４
δ＝８．９９−８．４８（ｂｒ，２０Ｈ），４．７４−４．７３（ｍ，１Ｈ），４．１５−４.０５（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｓ，９Ｈ），３．７８−３．７０（ｍ，１Ｈ），３．６４−３．５９（ｔ，２Ｈ），３．５５−３．４９（ｍ，２Ｈ），３．３５−３．３２（ｍ，１Ｈ），３．０３−２．９３（ｍ，２Ｈ），２．８８−２．８２（ｑ，１Ｈ），２．０３−１．９６（ｍ，２Ｈ），０．４６−０．４２（ｍ，３６Ｈ）ｐｐｍ

経路Ｇでは、３−トリメチルシリル−１−ベンゼンカルボキシアミド，Ｎ−［３−ｎ−プロピル−α−Ｄ−キノボピラノシド］−５−［１０，１５，２０−トリス（３−カルボネート−５−トリメチルシリルフェニル）ポルフィリン］４ナトリウム塩（構造式（１１））が合成された。５０ｍＬナスフラスコに構造式（１０）の化合物（１７ｍｇ）、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１５０μＬ）、テトラヒドロフラン（２ｍＬ）、及びメタノール（１ｍＬ）を加え、４０℃で３時間攪拌した。この反応液を減圧濃縮することで反応物を得た。反応物を逆相シリカゲルクロマトグラフィー（水とメタノールとの混合溶液）で精製した後、ゲル濾過（メタノール）で精製し、構造式（１１）で示される化合物（１４ｍｇ、８０％）を得た。

構造式（１１）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図２０及び図２１に示されている。

構造式（１１）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ１３６３．３１［Ｍ−Ｎａ_４＋Ｈ_５］、計算値１３６２．４４［Ｍ−Ｎａ_４＋Ｈ_５］、計算式Ｃ_６９Ｈ_７５Ｎ_５Ｎａ_４Ｏ_１５ＳＳｉ_４
δ ＝８．９６−８．４９（ｂｒ，２０Ｈ），４．７２−４．７０（ｍ，１Ｈ），４．１３−４.０３（ｍ，２Ｈ），３．７５−３．６６（ｍ，１Ｈ），３．６３−３．５５（ｍ，１Ｈ），３．５２−３．４２（ｍ，２Ｈ），３．３４−３．３０（ｍ，１Ｈ），２．９３−２．８７（ｑ，１Ｈ），２．８５−２．８０（ｍ，１Ｈ），１．９８（ｂｒ，２Ｈ），０．４５−０．４１（ｍ，３６Ｈ）ｐｐｍ

［実施例２］
また、以下、本発明に係る光増感剤の一態様である３−トリメチルシリル−１−ベンゼンカルボキシアミド，Ｎ−［３−ｎ−プロピル−α−Ｄ−グルコピラノシド］−５−［１０，１５，２０−トリス（３−カルボネート−５−トリメチルシリルフェニル）ポルフィリン］３ナトリウム塩（以下の構造式（１７））の合成方法の一例について説明を行う。本実施形態においては、以下の経路Ｈ〜Ｌにしたがって構造式（１７）に示される化合物が合成された。

経路Ｈでは、３−（トシル）−ｎ−プロピル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシド（構造式（１３））が合成された。２００ｍＬナスフラスコをアルゴン置換し、乾燥ピリジン（５ｍＬ）を投入した。これに、３−（ｎ−オクタデシルオキシ）−ｎ−プロピル−２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシド（構造式（１２））（０．５０ｇ）及び塩化トシル（０．５０ｇ）を攪拌しながら加え、室温で２時間攪拌した。次いで、反応液に酢酸エチル（５ｍＬ）を加え、１Ｍ塩酸（１ｍＬ）で洗浄後、さらに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥及び濾過した後、減圧濃縮することで反応物を得た。この反応物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサンと酢酸エチルとの混合溶液）で精製し、構造式（１３）で示される化合物（０．４９ｇ、７５％）を得た。

構造式（１２）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図２２及び図２３に示されている。また、構造式（１３）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図２４及び図２５に示されている。

構造式（１３）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ６６１．１４［Ｍ＋Ｎａ］、計算値６６１．２４［Ｍ＋Ｎａ］
δ＝７．８１−７．７８（ｍ，２Ｈ），７．５４−７．５２（ｍ，２Ｈ），７．４２−７．２５（ｍ，１５Ｈ），５．６７（ｓ，１Ｈ），４．９４（ｄ，１Ｈ），４．８８−４．７８（ｑ，２Ｈ），４．７６−４．６８（ｑ，２Ｈ），４．２４−４．１７（ｍ，３Ｈ），４．０８−４．０２（ｑ，１Ｈ），３．８６−３．８０（ｍ，２Ｈ），３．７８−３．７０（ｍ，２Ｈ），３．６８−３．６３（ｍ，１Ｈ），３．６０−３．５６（ｑ，１Ｈ），３．５３−３．４７（ｍ，１Ｈ），２．８１（ｓ，１Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ），２．００−１．９７（ｔ，１Ｈ），１．９６−１．９４（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ

経路Ｉでは、３−（アジド）−ｎ−プロピル−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシド（構造式（１４））が合成された。２００ｍＬナスフラスコをアルゴン置換し、乾燥ジメチルホルムアミド（７ｍＬ）を投入した。これに構造式（１３）の化合物（０．４９ｇ）とアジ化ナトリウム（０．５０ｇ）とを攪拌しながら投入し、５０℃で３時間攪拌した。反応液に酢酸エチル（５ｍＬ）を加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５ｍＬ）で洗浄し、さらに飽和食塩水（５ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥及び濾過した後、減圧濃縮することで反応物を得た。この反応物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサンと酢酸エチルとの混合溶液）で精製し、構造式（１４）で示される化合物（０．３６ｇ、９１％）を得た。

構造式（１４）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図２６及び図２７に示されている。

構造式（１４）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ５０４．２７［Ｍ−Ｎ_２＋Ｈ］、計算値５０３．２３［Ｍ−Ｎ_２＋Ｈ］
δ＝７．５２−７．４９（ｍ，２Ｈ），７．４３−７．２４（ｍ，１３Ｈ），５．６７（ｓ，１Ｈ），５．００−４．９９（ｄ，１Ｈ），４．９１−４．８１（ｑ，２Ｈ），４．８１−４.７２（ｑ，２Ｈ），４．２３−４．２０（ｑ，１Ｈ），３．９７−３．９２（ｔ，１Ｈ），３．８９−３．８４（ｍ，１Ｈ），３．８２−３．７６（ｍ，２Ｈ），３．７３−３．６５（ｑ，１Ｈ），３．６３−３．６０（ｑ，１Ｈ），３．５７−３．５０（ｍ，３Ｈ），２．８０（ｓ，１Ｈ），１．９５−１．８８（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ

経路Ｊでは、３−（アミノ）−ｎ−プロピル−α−Ｄ−グルコピラノシド（構造式（１５））が合成された。２００ｍＬナスフラスコに構造式（１４）の化合物（０．１８ｇ）、水酸化パラジウム（０．２９ｇ）、ｔｅｒｔ−ブタノール（４ｍＬ）、及び水（４ｍＬ）を加え、水素雰囲気下の４０℃で一晩攪拌した。この反応液を減圧濃縮することで反応物を得た。反応物を逆相シリカゲルクロマトグラフィー（水とメタノールとの混合溶液）で精製し、構造式（１５）で示される化合物（３０ｍｇ、３７％）を得た。

構造式（１５）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図２８及び図２９に示されている。

構造式（１５）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ２３８．３０［Ｍ＋Ｈ］、計算値２３８．１２［Ｍ＋Ｈ］
δ＝４．８６−４．８５（ｄ，１Ｈ），３．８６−３．８０（ｍ，１Ｈ），３．７７（ｄ，１Ｈ），３．７０−３．６４（ｍ，１Ｈ），３．６１−３．５５（ｍ，２Ｈ），３．５５−３．４９（ｍ，２Ｈ），３．３６−３．３１（ｔ，１Ｈ），３．１４−３．０２（ｍ，２Ｈ），１.９７−１．９０（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ

経路Ｋでは、３−トリメチルシリル−１−ベンゼンカルボキシアミド，Ｎ−［３−ｎ−プロピル−α−Ｄ−グルコピラノシド］−５−［１０，１５，２０−トリス（３−メトキシカルボニル−５−トリメチルシリルフェニル）ポルフィリン］（構造式（１６））が合成された。５０ｍＬナスフラスコに構造式（４）の化合物（１０ｍｇ）、構造式（１５）の化合物（６．３ｍｇ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３．５ｍｇ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３．６ｍｇ）、ジエチルアニリン（２５μＬ）、及びジメチルホルムアミド（１．６ｍＬ）を加えた。次いで、この混合溶液を室温で１３時間攪拌した。この反応液に酢酸エチル（５０ｍＬ）を加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、さらに飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥及び濾過した後、減圧濃縮することで反応物を得た。この反応物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタンとメタノールとの混合溶液）で精製し、構造式（１６）で示される化合物（７．２ｍｇ、７２％）を得た。

構造式（１６）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図３０及び図３１に示されている。

構造式（１６）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ１３４１．５４［Ｍ＋Ｈ］、計算値１３４０．５２［Ｍ＋Ｈ］
δ＝８．８６−８．４５（ｂｒ，２０Ｈ），４．７２−４．７１（ｍ，１Ｈ），３．９２（ｓ，９Ｈ），３．８１−３．７９（ｍ，１Ｈ），３．７３−３．７０（ｄ，１Ｈ），３．５８−３．５４（ｍ，６Ｈ），３．３２−３．３１（ｍ，１Ｈ），３．２０−３．１５（ｍ，１Ｈ），２．０１−１．９３（ｍ，２Ｈ），０．４３−０．３８（ｍ，３６Ｈ）ｐｐｍ

経路Ｌでは、３−トリメチルシリル−１−ベンゼンカルボキシアミド，Ｎ−［３−ｎ−プロピル−α−Ｄ−グルコピラノシド］−５−［１０，１５，２０−トリス（３−カルボネート−５−トリメチルシリルフェニル）ポルフィリン］３ナトリウム塩（構造式（１７））が合成された。５０ｍＬナスフラスコに構造式（１６）の化合物（１７ｍｇ）、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１５０μＬ）、テトラヒドロフラン（２ｍＬ）、及びメタノール（１ｍＬ）を加え、４０℃で３時間攪拌した。この反応液を減圧濃縮することで反応物を得た。反応物を逆相シリカゲルクロマトグラフィー（水とメタノールとの混合溶液）で精製した後、ゲル濾過（メタノール）で精製し、構造式（１７）で示される化合物（１５．３ｍｇ、９２％）を得た。これは、以下の構造式（ＩＩｄ）に示される（構造式（１６）としても示される）化合物のナトリウム塩である。

構造式（１７）の化合物の質量分析、及び^１Ｈ−ＮＭＲの結果得られたスペクトルが図３２及び図３３に示されている。

構造式（１７）の化合物の質量分析と^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルとのデータを以下に示す。
ＭＳ：測定値ｍ／ｚ１２９８．６８［Ｍ−Ｎａ_３＋Ｈ_４］、計算値１２９８．４８［Ｍ−Ｎａ_３＋Ｈ_４］、計算式Ｃ_６９Ｈ_７６Ｎ_５Ｎａ_３Ｏ_１３Ｓｉ_４
δ ＝８．８４−８．４１（ｂｒ，２０Ｈ），４．７４−４．７１（ｑ，１Ｈ），３．８５−３.７７（ｍ，１Ｈ），３．７４−３．６７（ｍ，１Ｈ），３．６０−３．４８（ｍ，６Ｈ），３．３２−３．３０（ｍ，１Ｈ），３．２０−３．１６（ｔ，１Ｈ），１．９４（ｂｒ，２.０４），０．４５−０．４２（ｍ，３６Ｈ）ｐｐｍ

［実施例３］
構造式（１０）及び（１１）の化合物は、ポルフィリン類縁体である下記の構造式（ＩＩＩ）に示される化合物に含硫糖鎖を導入した化合物である。構造式（ＩＩＩ）の化合物は、非特許文献２−４に記載されるように、優れた一重項酸素の光学的性質を有している。ここで、含硫糖鎖を結合することによっても、構造式（ＩＩＩ）で示されるポルフィリン化合物の優れた光化学的性質が維持されることを確認した。図１は、構造式（ＩＩａ）、（ＩＩｄ）、及び（ＩＩＩ）のそれぞれに示される化合物の吸収スペクトル及び蛍光スペクトルをまとめた図である。なお、構造式（ＩＩａ）及び（ＩＩｄ）は、それぞれ構造式（ＩＩＩ）のフェニル基に含硫糖鎖及び糖鎖を結合させた化合物である。

ここで、構造式（ＩＩＩ）の化合物の吸収スペクトルでは、４１６ｎｍにＳｏｒｅｔ−ｂａｎｄと呼ばれる鋭い吸収帯と、５００〜６５０ｎｍ付近にＱ−ｂａｎｄと呼ばれる吸収帯が観測された。また、構造式（ＩＩａ）の化合物の吸収スペクトルでも同様の吸収帯が観測された。

構造式（ＩＩＩ）の化合物を４１６ｎｍで励起した蛍光スペクトルでは、６５０ｎｍと７１７ｎｍとのピークが観測され、構造式（ＩＩａ）の化合物においても類似の蛍光スペクトルが観測された。このことから、構造式（ＩＩＩ）の化合物に含硫糖鎖を結合した場合であっても、基底状態と励起状態の電子状態に変化はないことが示された。

次いで、各化合物について蛍光量子収率（Φ_ｆ）と蛍光寿命（τ_ｆ）とを測定した。また、構造式（ＩＩａ）及び構造式（ＩＩＩ）の化合物について一重項酸素の生成量子収率（Φ_Δ）を測定した。この測定結果に基づいて決定したΦ_ｆ、τ_ｆ、及びΦ_Δが表１に示されている。

図２は、これらのΦ_ｆを絶対ＰＬ量子収率計で測定したスペクトルである。この結果、構造式（ＩＩａ）、（ＩＩｄ）、及び（ＩＩＩ）の化合物についてのΦ_ｆは同等の値であった。

図３は、各化合物のτ_ｆの測定結果に基づく測定減衰曲線を表す図である。それぞれの蛍光減衰曲線をデコンボリューション法によって単一指数関数でカーブフィッティングし、τ_ｆを決定した。結果、構造式（ＩＩａ）、（ＩＩｄ）、及び（ＩＩＩ）のτ_ｆは同等の値であった。

次に、Φ_Δの測定について説明する。まず、構造式（ＩＩａ）及び（ＩＩＩ）の化合物のそれぞれをエタノール中に吸光度０．１の濃度で溶解させた後、Ｎｄ^３＋：ＹＡＧＬＡＳＥＲ（ＬｏｔｉｓＴＩＩ製，ＬＳ−２１３７Ｕ）を用いて３５５ｎｍの光を照射した。次いで、近赤外用光電子倍増管（浜松ホトニクス製，Ｒ５５０９−４２）を用いた自作の赤外発光測定装置を用いて一重項酸素の測定を行った。なお、一重項酸素の測定はそれぞれ１７回ずつ行い、その平均値がりん光スペクトルとして図３に示されている。一重項酸素は１２７０ｎｍの近赤外でりん光を示すため、ここではそのりん光強度を測定することでΦ_Δを求めた。Φ_Δ決定のための基準物質をＴＰＰＳ（Φ_Δ＝０．６３）とし、構造式ＩＩａ、及び構造式（ＩＩＩ）の化合物のΦ_Δはそれぞれ０．５７、及び０．５３と決定された。このことから、構造式（ＩＩａ）の化合物は、構造式（ＩＩＩ）の化合物の高い一重項酸素の生成量子収率を維持していたといえる。

［実施例４］
また、構造式（ＩＩＩ）の化合物に含硫糖鎖を結合することにより、腫瘍への集積性が向上する。以下、そのような集積性の向上について、構造式（ＩＩａ）及び（ＩＩＩ）の化合物を用いた、がん細胞に対する取り込み効率の評価を行った。

がん細胞にはヒト由来のＡ５４９細胞を用いた。後述する培地にはＤｕｌｂｅｃｃｏ'ｓＭｏｄｉｆｉｅｄＥａｇｌｅＭｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ）に１０％のＦｅｔａｌＢｏｖｉｎｅＳｅｒｕｍ（ＦＢＳ：ＥＱＵＩＴＥＣＨ−ＢＩＯ，ＩＮＣ．製）と１％のＰｅｎｉｃｉｌｉｎＳｐｅｃｔｒｏｍｙｃｉｎＧｌｕｔａｍｉｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ^ＴＭ）とを加えたものを用いた。細胞洗浄溶液にはリン酸緩衝液（ＰＢＳ）を、細胞剥離溶液には０．０５％のトリプシンと０．０２％のＥＤＴＡとを含むＰＢＳを用いた。また、培養を行う容器には直径６ｃｍの丸型プラスチックシャーレ（ＧｒｅｉｎｅｒＢｉｏ−ｏｎｅ，６２８１６０）を用いた。

まず、Ａ５４９細胞の細胞懸濁溶液を培地上で培養した。黒色の９６ｗｅｌｌｐｌａｔｅの各ｗｅｌｌに細胞懸濁溶液を１００μＬ入れ、３７℃、５％ＣＯ_２雰囲気下で一日間培養を行った。その後、細胞をＰＢＳで洗浄し、ＤＭＥＭに１０％ＦＢＳ、１０％ＢＳＡ（和光純薬工業株式会社，ＣｏｈｎＦｒａｃｔｉｏｎＶ，ｐＨ＝７．０）、及び最終濃度が３μＭになるように各光増感剤を別々に加えた溶液を各ｗｅｌｌに１００μＬ入れ、１２時間インキュベーションした。次いで、細胞を１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭで２回洗浄した後にＦｌｕｏｒｏＢｒｉｔｅ^ＴＭＤＭＥＭで２回洗浄して細胞外の光増感剤を取り除いた。さらに、蛍光マイクロプレートリーダー（ＴＥＣＡＮ製、ＩｎｆｉｎｉｔｅＭ２００Ｐｒｏ）を用いて細胞内の光増感剤濃度を定量した。蛍光観察の励起波長は４１８ｎｍ、観測波長は６４６ｎｍとした。

ここで、構造式（ＩＩＩ）の化合物を加えた場合の取り込み効率を基準とした相対的な取り込み効率の測定結果を図５に示す。構造式（ＩＩａ）の化合物を加えた場合の取り込み効率は、構造式（ＩＩＩ）の化合物を加えた場合と比べて１．８倍に増加していた。この結果から、含硫糖鎖を導入することにより、がん細胞に対する取り込み効率が向上したと結論できる。一方で、糖鎖が硫黄原子を含まない場合（例えばＲ_１３＝ＯＨ）にも、がん細胞に対する取り込みが生じるため、増感剤及び蛍光プローブとしての使用が可能であることがわかった。

したがって、光増感剤にケイ素置換基とともに糖鎖を導入することにより、腫瘍組織に選択的に集積した後に一重項酸素を効率よく発生し、また蛍光を発することで癌などの治療・診断に好適に用いられる、化合物が得られることがわかる。このような光増感剤を用いることにより、ＰＤＴの治療効果を高めることが期待される。

発明は上記の実施形態に制限されるものではなく、発明の要旨の範囲内で、種々の変形・変更が可能である。

Claims

下記式（Ｉ）によって表される化合物又はその塩。

前記式（Ｉ）中、Ａは−Ｘ−ＮＨＣＯ−で表される、ＸがＣ _１〜Ｃ _６のアルキレン基である連結基であり、
Ｒ _１、Ｒ _２、Ｒ _４、Ｒ _５、Ｒ _７、Ｒ _８、Ｒ _１０、及びＲ _１１は水素原子であり、
Ｒ _３、Ｒ _６、及びＲ _９は下記式（ｉｉｉ）の置換基であり、

Ｒ_１２は前記式（ｉ）又は（ｉｉ）から選ばれる置換基であり、
Ｒ_１３はスルホ基であり、
前記式（ｉ）及び（ｉｉ）において、Ｒａ、Ｒｂ、及びＲｃはそれぞれ独立してＣ _１〜Ｃ _６のアルキル基から選ばれる置換基であり、
前記式（ｉｉｉ）において、Ｒｄは水素原子又はＣ_１〜Ｃ _６のアルキル基であり、Ｒｘは前記式（ｉ）又は（ｉｉ）に示される置換基である。
前記式（ｉ）及び（ｉｉ）において、Ｒａ、Ｒｂ、及びＲｃはメチル基であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物又はその塩。
前記式（ｉｉｉ）において、Ｒｄはメチル基であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の化合物又はその塩。
Ｒ_１２はトリアルキルシリル基であることを特徴とする、請求項１乃至３の何れか一項に記載の化合物又はその塩。
置換基Ｒ_１２及びＡがそれぞれポルフィリン環の結合部位に対してメタ位に結合していることを特徴とする、請求項１乃至４の何れか一項に記載の化合物又はその塩。
下記式（ＩＩｂ）で表される化合物又はその塩。
請求項１乃至６の何れか一項に記載の化合物又はその塩を含有するがん治療薬。
請求項１乃至６の何れか一項に記載の化合物又はその塩を含有する、光線力学療法用の光増感剤。
請求項１乃至６の何れか一項に記載の化合物又はその塩を含有する蛍光プローブ組成物。