JP6872925B2 - Rahnella属細菌の新規農業用途 - Google Patents
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Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
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Description
(1)ラーネラ(Rahnella)属に属し、農業上有用な植物体内に共生して該植物の収量を増加させる能力を有する細菌を、該植物に人為的に感染させる工程を含む、農業上有用な植物の収量を増加させる方法。
(2)ラーネラ(Rahnella)属に属し、農業上有用な植物体内に共生して該植物の生育を促進する能力を有する細菌を、該植物に人為的に感染させる工程を含む、農業上有用な植物の生育を促進する方法。
(3)農業上有用な植物が、マメ科植物、イネ科植物、ユリ科植物、アブラナ科植物、キク科植物、ナス科植物、ウリ科植物及びセリ科植物からなる群から選択される植物である、(1)又は(2)に記載の方法。
(4)前記細菌が、配列番号1に示す塩基配列と97%以上の同一性を有する塩基配列を含む16S rDNAを有する、(1)〜(3)のいずれかに記載の方法。
(5)前記細菌がRahnella sp. MYK106(受託番号NITE P-02062)、又は、農業上有用な植物体内に共生して該植物の収量を増加させる能力、及び/又は該植物の生育を促進する能力を有する、その変異株である、(1)〜(4)のいずれかに記載の方法。
(6)ラーネラ(Rahnella)属に属し、農業上有用な植物体内に共生して該植物の収量を増加させる能力、及び/又は該植物の生育を促進する能力を有する細菌を有効成分として含有する、農業上有用な植物用の微生物製剤。
(7)農業上有用な植物が、マメ科植物、イネ科植物、ユリ科植物、アブラナ科植物、キク科植物、ナス科植物、ウリ科植物及びセリ科植物からなる群から選択される植物である、(6)に記載の微生物製剤。
(8)前記細菌が、配列番号1に示す塩基配列と97%以上の同一性を有する塩基配列を含む16S rDNAを有する、(6)又は(7)に記載の微生物製剤。
(9)前記細菌がRahnella sp. MYK106(受託番号NITE P-02062)、又は、農業上有用な植物体内に共生して該植物の収量を増加させる能力、及び/又は該植物の生育を促進する能力を有する、その変異株である、(6)〜(8)のいずれかに記載の微生物製剤。
(10)Rahnella sp. MYK106(受託番号NITE P-02062)、又は、農業上有用な植物体内に共生して該植物の収量を増加させる能力、及び/又は該植物の生育を促進する能力を有する、その変異株。
本発明に用いることができる細菌は、ラーネラ(Rahnella)属に属する細菌、例えばRahnella aquatilisであって、農業上有用な植物、例えば、マメ科植物、イネ科植物、ユリ科植物、アブラナ科植物、キク科植物、ナス科植物、ウリ科植物及びセリ科植物からなる群から選択される植物の体内に共生して、該植物の生育(生長)を促進する能力、及び/又は、該植物の収量を増加する能力を有する細菌であれば特に限定されない。
本発明の方法で使用可能な対象植物は、以下のものに限定されないが、例えばマメ科植物、イネ科植物、ユリ科植物、アブラナ科植物、キク科植物、ナス科植物、ウリ科植物及びセリ科植物からなる群から選択される農業上有用な植物が挙げられる。好ましくは、農業上有用な植物は、ユリ科植物、アブラナ科植物、キク科植物、及びナス科植物からなる群から選択される。
本発明の方法は、Rahnella属に属し、農業上有用な上記の植物の体内に共生して該植物の収量を増加する能力、及び/又は、該植物の生育を促進する能力を有する細菌を、該植物に人為的に感染させる工程を含む。
本発明はさらに、ラーネラ(Rahnella)属に属し、農業上有用な植物体内に共生して該植物の収量を増加させる能力、及び/又は、該植物の生育を促進する能力を有する細菌を有効成分として含有する、農業上有用な植物用の微生物製剤を提供する。
<Rahnella sp. MYK106(受託番号NITE P-02062)株の取得>
自生しているユリ科植物を採取し、切断した。切断したユリ科植物を70%エタノールに30秒、2.5%次亜塩素酸ナトリウム溶液に5分浸すことにより表面殺菌を行った。その後、植物体を乳鉢に移し滅菌した生理食塩水1mlと海砂を適量加えながら磨砕した。磨砕した上澄みを100μl、NA(Nutrient Agar)培地に塗布し、30℃、数日間培養後、シングルコロニーを単離することにより標題のMYK106株を得た。
<MYK106株の16SrDNA塩基配列の決定>
1)方法
Rahnella sp. MYK106株菌体を0.85%NaCl水溶液500μlに懸濁し、遠心後に上清を除去した。菌体に滅菌水20μl、BL buffer(40mM Tris、1%Tween20、0.5% Nonidet P-40、1mM EDTA、pH 8.0)25μl、Proteinase K(1mg/ml)5μlを加え、軽く懸濁した。60℃、20分間放置後に105℃で5分間放置した後、遠心し、上清をDNA抽出液とした。
決定された16SrDNAの塩基配列は、配列番号1の配列からなるものであった。
<Rahnella sp. MYK106株によるタマネギの生育促進1>
1)方法
タマネギ品種:ターボ
エンドファイト菌株:MYK106株
接種日:平成23年11月
接種方法: 1×108個/mlの菌懸濁液を、50ml/m2で圃場にてスプレーで接種した。
定植日:平成23年11月
圃場:愛知県
測定項目:収穫期に2条を2mの範囲で3箇所全量収穫し、各規格の個数および重量を調査した。
収穫調査日:平成24年6月19日
全量収穫し、各規格の個数と重量の測定を行なった(表1)。大きさ、外観から2L、L、M、Sに分類された球を規格内とし、それ以外の小さいものや外観が悪いものは規格外とした。
<Rahnella sp. MYK106株によるタマネギの生育促進2>
1)方法
タマネギ品種:ターボ
エンドファイト菌株:MYK106株
接種日:平成24年11月20日
接種方法:定植前の苗の根部を、1×108個/mlの菌懸濁液に一晩浸した。
定植日:平成24年11月21日
圃場:愛知県
測定項目:収穫期に2条を2mの範囲で3箇所全量収穫し、各規格の個数および重量を調査した。
収穫調査日:平成25年6月18日
全量収穫し、各規格の個数と重量の測定を行なった(表3)。大きさ、外観から2L、L、M、Sに分類された球を規格内とし、それ以外の小さいものや外観が悪いものは規格外とした。
<Rahnella sp. MYK106株によるタマネギの生育促進3>
1)方法
タマネギ品種:ターボ
エンドファイト菌株:MYK106株
接種日:平成25年10月26日
接種方法:1×108個/mlの菌懸濁液を、26.7ml/m2で苗に散布した。
定植日:平成25年10月26日
圃場:愛知県
測定項目:収穫期に2条を2mの範囲で3箇所全量収穫し、各規格の個数および重量を調査した。
収穫調査日:平成26年6月6日
全量収穫し、各規格の個数と重量の測定を行なった(表5)。大きさ、外観から2L、L、M、Sに分類された球を規格内とし、それ以外の小さいものや外観が悪いものは規格外とした。
<Rahnella sp. MYK106株によるポット試験におけるコマツナの生育促進>
1)方法
コマツナ品種:夏楽天
エンドファイト菌株:MYK106株
試験規模:1処理区9株
5×5セル(計25セル)になるように準備したセルトレーの底に約2cm角に切った不織布を引き、タネマキ培土(タキイ種苗株式会社)を充填した。2粒/セルずつ播種し、タネマキ培土で覆土した。播種日を0日目として播種後7日目前後に間引きをして1株/セルにした。MYK106株接種区には、播種後14日を目安に本葉が2〜3枚展開したところで、1×108cells/mlに純水を用いて調整した菌液を1セルあたり10mlずつ接種した。15℃以下にならないように加温したガラス温室内で栽培し本葉が4枚以上展開するまで栽培した。その後外周を除いた9株を地際部から切断し、乾物重を測定した。
27日間栽培後、無接種区を100としたときにMYK106接種区で乾物重が7.9%増加していた(表7)。
<Rahnella sp. MYK106株によるポット試験におけるレタスの生育促進>
1)方法
レタス(品種:グリーンウェーブ)を用いる以外は、実施例6と同様に試験を行い、乾物重を測定した。
24日間栽培後、無接種区を100としたときにMYK106株接種区で乾物重が27.8%増加したことが示された(表8)。
<Rahnella sp. MYK106株によるポット試験におけるネギの生育促進>
1)方法
ネギ(品種:万能小ネギ)を用いる以外は、実施例6と同様に試験を行い、乾物重を測定した。
38日間栽培後、無接種区を100としたときにMYK106株接種区で乾物重が7.7%増加していた(表9)。
<Rahnella sp. MYK106株によるポット試験におけるトマトの生育促進>
1)方法
トマト(品種:CF桃太郎ヨーク)を用いる以外は、実施例6と同様に試験を行い、乾物重を測定した。
24日間栽培後、無接種区を100としたときにMYK106株接種区で乾物重が3.3%増加した(表10)。
<Rahnella sp. MYK106株によるポット試験におけるダイズの生育促進>
1)方法
ダイズ(品種:とよまさり)を用いる以外は、実施例6と同様に試験を行い、乾物重を測定した。
40日間栽培後、無接種区を100としたときにMYK106株接種区で乾物重が2.2%増加した(表11)。
<Rahnella sp. MYK106株によるポット試験におけるイネの生育促進>
1)方法
イネ(品種:コシヒカリ)を用いる以外は、実施例6と同様に試験を行い、乾物重を測定した。
40日間栽培後、無接種区を100としたときにMYK106株接種区で乾物重が26.7%増加した(表12)。
Claims (6)
- Rahnella sp. MYK106(受託番号NITE P-02062)、又は、農業上有用な植物体内に共生して該植物の収量を増加させる能力を有する、その変異株を、該植物に人為的に感染させる工程を含む、農業上有用な植物の収量を増加させる方法。
- Rahnella sp. MYK106(受託番号NITE P-02062)、又は、農業上有用な植物体内に共生して該植物の生育を促進する能力を有する、その変異株を、該植物に人為的に感染させる工程を含む、農業上有用な植物の生育を促進する方法。
- 農業上有用な植物が、マメ科植物、イネ科植物、ユリ科植物、アブラナ科植物、キク科植物、ナス科植物、ウリ科植物及びセリ科植物からなる群から選択される植物である、請求項1又は2に記載の方法。
- Rahnella sp. MYK106(受託番号NITE P-02062)、又は、農業上有用な植物体内に共生して該植物の収量を増加させる能力、及び/若しくは該植物の生育を促進する能力を有する、その変異株を有効成分として含有する、農業上有用な植物用の微生物製剤。
- 農業上有用な植物が、マメ科植物、イネ科植物、ユリ科植物、アブラナ科植物、キク科植物、ナス科植物、ウリ科植物及びセリ科植物からなる群から選択される植物である、請求項4に記載の微生物製剤。
- Rahnella sp. MYK106(受託番号NITE P-02062)からなる菌株、又は、農業上有用な植物体内に共生して該植物の収量を増加させる能力、及び/又は該植物の生育を促進する能力を有する、その変異株。
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