JP6606130B2 - Production method of puffed food - Google Patents

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本発明は、グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素を使用することによる、ソフトでしっとりした食感(触感)を維持できる小麦粉膨化食品の製造方法に関する。   The present invention relates to a method for producing a puffed-up food that can maintain a soft and moist texture (tactile sensation) by using an enzyme having glyceroglycolipid degradation activity.

気泡を含有させることで、膨化させた小麦粉製品は口どけや柔らかさが良好な状態であることが好まれる。これら、小麦粉膨化食品は直ぐに消費されることもあるが、多くは数日経てから提供される。そのため、風味・食感などが劣化し、もともとの小麦粉膨化食品と全く異なってしまうことが問題である。特に、劣化した小麦粉膨化食品は硬く、パサパサした食感(触感)となる傾向にあり、しっとりとした食感(触感)が維持されていることが求められており、その解決方法が古くから模索されてきた。   By containing bubbles, it is preferred that the expanded flour product has a good mouthfeel and softness. These flour-expanded foods may be consumed immediately, but many are provided after several days. For this reason, there is a problem that the flavor and texture are deteriorated and completely different from the original puffed food. In particular, degraded flour-swollen foods tend to have a hard, crunchy texture (tactile sensation), and a moist texture (tactile sensation) is required to be maintained. It has been.

乳化剤による解決策では、乳化剤濃度あるいは種類により、乳化剤特有の臭気や苦味が生じることがあり、小麦粉膨化食品本来の風味を損ねる問題が指摘されている。また、澱粉や多糖類などの増粘剤を用いることも報告されている(特許文献1)。この場合には、製造した小麦粉膨化食品の味が本来のものとは異なる上、口どけが悪くなり、くちゃつきの原因になることが知られている。
また、卵黄を予めプロテアーゼで処理する方法も提示されている(特許文献2)。しかし、この方法ではプロテアーゼ加水分解物による苦味などが問題になる。このように従来の方法では、老化抑止効果をもたせようとすると、小麦粉膨化食品本来の風味や食感が保てないことが問題であった。
In the solution using an emulsifier, the odor and bitterness peculiar to the emulsifier may be generated depending on the concentration or type of the emulsifier, and the problem of impairing the original flavor of the flour-expanded food is pointed out. It has also been reported to use thickeners such as starch and polysaccharides (Patent Document 1). In this case, it is known that the taste of the flour-expanded food produced is different from the original one, and the mouthfeel is poor, causing flickering.
A method of treating egg yolk with a protease in advance has also been proposed (Patent Document 2). However, this method has a problem of bitterness caused by protease hydrolyzate. As described above, the conventional method has a problem in that the original flavor and texture of the flour-swollen food cannot be maintained if an effect of inhibiting aging is to be provided.

特開昭60−160833号公報JP-A-60-160833 特開昭62−111629号公報JP-A-62-111629

本発明の課題は、本来の味や風味を損ねることなく、苦味や不快な臭気および、食したときのくちゃつきを感じることなく、柔らかく、しっとりした食感(触感)を保持できる小麦粉膨化食品の製造方法を提供することである。   An object of the present invention is to swell a floury food that can maintain a soft and moist texture (tactile sensation) without damaging the original taste and flavor, without feeling bitterness, unpleasant odor, and flickering when eating It is to provide a manufacturing method.

本発明者らは、小麦粉膨化食品の製造において、グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素を配合することにより、本来の風味を維持したまま、苦味や不快な臭気および、食したときのくちゃつきを感じることなく、柔らかく、しっとりした食感(触感)を維持できることを見出した。更に、乳化剤と共に使用することにより、それぞれ単独では得られない、柔らかく、しっとりした食感(触感)を保持した小麦粉膨化食品ができることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素を使用すること、好ましくはグリセロ糖脂質分解活性を有する酵素と乳化剤を共用することを特徴とする小麦粉膨化食品の製造方法を提供する。   In the production of flour-expanded food, the present inventors incorporated an enzyme having glyceroglycolipid-degrading activity to maintain bitterness, unpleasant odor, and fluff when eaten while maintaining the original flavor. It was found that a soft and moist texture (tactile sensation) can be maintained without feeling. Furthermore, the present invention has been completed by finding that by using it together with an emulsifier, it is possible to produce a wheat flour-extended food that has a soft and moist texture (tactile sensation) that cannot be obtained individually. That is, the present invention provides a method for producing a puffed wheat food characterized by using an enzyme having glyceroglycolipid-degrading activity, preferably sharing an enzyme having glyceroglycolipid-degrading activity and an emulsifier.

本発明によれば、小麦粉膨化食品の製造において、グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素を配合することにより、本来の風味を維持したまま、苦味や不快な臭気および、食したときのくちゃつきを感じることなく、柔らかくしっとりした食感(触感)を維持した、老
化が抑制された小麦粉膨化食品を製造することができる。特に、本発明の製造方法により得られた小麦粉膨化食品は、保存後においても柔らかくしっとりした食感を維持することができる。また、本発明の製造方法により得られた小麦粉膨化食品は、保存時間が長くなっても硬くなりにくく、冷蔵庫のような乾燥しやすい環境下においても、しっとりした食感を維持することができる。
According to the present invention, in the production of flour-expanded food, by adding an enzyme having glyceroglycolipid-degrading activity, while maintaining the original flavor, bitterness and unpleasant odor, and fluffy when eaten Without feeling, it is possible to produce a flour-expanded food product that maintains a soft and moist texture (tactile sensation) and suppresses aging. In particular, the flour-expanded food obtained by the production method of the present invention can maintain a soft and moist texture even after storage. Moreover, the flour-expanded food obtained by the production method of the present invention is hard to be hardened even when the storage time is long, and can maintain a moist texture even in an easily dried environment such as a refrigerator.

以下、本発明を詳細に説明するが、この説明は本発明の実施態様の一例(代表例)であり、その要旨を越えない限り、これらの内容に特定はされない。   Hereinafter, the present invention will be described in detail, but this description is an example (representative example) of an embodiment of the present invention, and the contents are not specified unless it exceeds the gist.

本発明における小麦粉膨化食品とは、小麦粉を使用した食品で、焼成、蒸し、フライなどの加熱によって小麦粉を含有する生地を膨化させた食品をいい、加熱により気泡を膨化させた食品などがその一例である。   The flour-expanded food in the present invention is a food using flour, which is a food in which a dough containing flour is expanded by heating such as baking, steaming, frying, etc., such as a food in which bubbles are expanded by heating. It is.

小麦粉膨化食品として具体的には、パン、洋菓子、和菓子及びバッターを加熱により膨化させたものなどが挙げられる。
このなかで洋菓子を例にとって説明をする。本発明における洋菓子とは、スポンジケーキ、バターケーキ、パンケーキ、ホットケーキ、蒸しケーキなどのケーキ、シュー菓子、醗酵菓子、パイ、クッキーなどの食品である。中でも、本発明は、ケーキの製造において特に優れた効果を発揮する。
Specific examples of the wheat flour expanded food include bread, Western confectionery, Japanese confectionery, and batter that is expanded by heating.
In this example, I will explain using Western confectionery as an example. The Western confectionery in the present invention is a food such as sponge cake, butter cake, pancake, hot cake, steamed cake, etc., shoe confectionery, fermented confectionery, pies, cookies and the like. Especially, this invention exhibits the especially outstanding effect in manufacture of a cake.

本発明におけるケーキの一例として、スポンジケーキについて説明する。スポンジケーキとして具体的には、デコレーションケーキ、ショートケーキ、ロールケーキ、エンゼルケーキなどが挙げられる。
スポンジケーキの原材料としては、小麦粉、糖類、卵、油脂、乳成分、塩、水、雑穀、膨化剤などが挙げられる。
スポンジケーキは、例えば、薄力粉を主体とした小麦粉に、糖類、卵などを配合し、必要に応じて水、油脂、乳成分、膨化剤、塩、雑穀なども添加し、一定時間ホイップしたのちに焼成することによって製造される。
A sponge cake will be described as an example of the cake in the present invention. Specific examples of the sponge cake include a decoration cake, a short cake, a roll cake, and an angel cake.
Examples of the raw material for the sponge cake include wheat flour, sugars, eggs, fats and oils, milk components, salt, water, millet, and a puffing agent.
Sponge cakes, for example, contain sugar, eggs, etc. in wheat flour mainly composed of flour, add water, fats and oils, milk ingredients, leavening agent, salt, millet, etc. as necessary, and then whipped for a certain period of time. Manufactured by firing.

小麦粉としては、薄力粉を主として用い、これに適宜、強力粉、中力粉、雑穀などを混合することができる。薄力粉は1等粉、準1等粉、2等粉、3等粉など菓子製造に用いられるものが挙げられ、由来小麦粉の品種を問わない。これらの小麦粉は、薄力粉を主とする限り複数混合して用いることもできる。小麦粉膨化食品中の小麦粉の含有量は、通常1〜90重量%、好ましくは10〜80重量%、更に好ましくは、20〜70重量%である。小麦粉の含有量が少なすぎる場合は、生地形成が困難となる傾向があり、余りにも多い場合は、生地が硬く、機械耐性が低下する傾向がある。   As wheat flour, mainly weak flour is used, and strong flour, medium flour, millet, etc. can be appropriately mixed therewith. Examples of the weak flour include those used for confectionery production such as 1st grade, quasi-first grade, 2nd grade, 3rd grade, etc., and any kind of wheat flour derived. A plurality of these flours can be mixed and used as long as the flour is mainly used. Content of the flour in the flour-expanded food is usually 1 to 90% by weight, preferably 10 to 80% by weight, and more preferably 20 to 70% by weight. When the content of flour is too small, dough formation tends to be difficult, and when too large, the dough tends to be hard and mechanical resistance tends to decrease.

糖類としては、特に限定されないが、例えば、単糖、オリゴ糖、多糖類、糖アルコール、及び、これらの混合物、天然の糖類が挙げられ、これら1種のみを用いてもよいし、2種以上を混合して用いてもよい。
具体的に、単糖としては、グルコース(ブドウ糖)、ガラクトース、フルクトース(果糖)、アラビノース、キシロースなどが挙げられる。
オリゴ糖としては、砂糖、麦芽糖、セロビオース、乳糖、トレハロース、パラチノースなどの二糖、マルトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、乳果オリゴ糖、キシロオリゴ糖、デキストリン、シクロデキストリン、カップリングシュガーなどの三糖以上の糖が挙げられる。
糖アルコールとしては、ソルビトール、キシリトール、マンニトール、マルチトール、パラチニット、エリスリトール、還元澱粉糖化物などが挙げられる。
多糖類としては、カラギーナン、寒天、アルギン酸、グァガム、タラガム、ローカスト
ビーンガム、タマリンドガム、サイリュームシードガム、マンナン、アラビアガム、トラガントガム、カラヤガム、ペクチン、キサンタンガム、ジェランガム、カードラン、プルラン、セルロース、セルロース誘導体、澱粉、加工澱粉などが挙げられる。
また、これら混合物、天然の糖類としては、異性化糖、水飴、蜂蜜、メープルシロップなどが挙げられる。
The saccharide is not particularly limited, and examples thereof include monosaccharides, oligosaccharides, polysaccharides, sugar alcohols, and mixtures thereof, natural saccharides, and only one of these may be used, or two or more May be used in combination.
Specific examples of monosaccharides include glucose (glucose), galactose, fructose (fructose), arabinose, and xylose.
Oligosaccharides include sugars, maltose, cellobiose, lactose, trehalose, palatinose and other disaccharides, maltooligosaccharides, isomaltoligosaccharides, fructooligosaccharides, galactooligosaccharides, whey oligosaccharides, xylooligosaccharides, dextrin, cyclodextrins, coupling sugars And sugars with 3 or more sugars.
Examples of the sugar alcohol include sorbitol, xylitol, mannitol, maltitol, palatinit, erythritol, and reduced starch saccharified product.
Polysaccharides include carrageenan, agar, alginic acid, guar gum, tara gum, locust bean gum, tamarind gum, silium seed gum, mannan, gum arabic, tragacanth gum, karaya gum, pectin, xanthan gum, gellan gum, curdlan, pullulan, cellulose, cellulose derivatives. , Starch, modified starch and the like.
Examples of the mixture and natural saccharide include isomerized sugar, starch syrup, honey, and maple syrup.

卵は、全卵、卵黄のみ、または卵白のみ、いずれも用途に応じて用いることができる。その量も用途に応じて調整することができる。   The whole egg, only the yolk, or only the egg white can be used depending on the application. The amount can also be adjusted according to the application.

油脂としては、バターやバターファットなどの乳脂、ラード、魚鯨油などの動物性油脂、ヤシ油、パーム油、カカオ脂、ゴマ油、サフラワー油、大豆油、トウモロコシ油、菜種油、ひまわり油、綿実油、落花生油、オリーブ油などの植物性油脂、これら動物性油脂及び/または植物性油脂を含有する油脂、これら油脂の硬化、分別、エステル交換等を施した加工油脂などが挙げられる。これらの油脂は、1種のみを用いてもよいし、2種以上を混合して用いてもよい。   Fats and oils include butter and butter fat and other animal fats, lard, fish whale oil and other animal fats, coconut oil, palm oil, cocoa butter, sesame oil, safflower oil, soybean oil, corn oil, rapeseed oil, sunflower oil, cottonseed oil, Examples thereof include vegetable oils and fats such as peanut oil and olive oil, oils and fats containing these animal oils and / or vegetable oils, processed oils and fats subjected to hardening, fractionation, transesterification and the like of these oils and fats. Only 1 type may be used for these fats and oils, and 2 or more types may be mixed and used for them.

乳成分としては、生乳、全脂肪粉乳、脱脂粉乳、全脂練乳などの練乳、バター、生クリーム、濃縮クリーム、チーズ、ヨーグルトなどが挙げられる。これらの乳成分は、1種のみを用いてもよいし、2種以上を混合して用いてもよい。   Examples of milk components include raw milk, full fat powdered milk, skim milk powder, condensed milk such as whole fat condensed milk, butter, fresh cream, concentrated cream, cheese, yogurt and the like. These milk components may be used alone or in combination of two or more.

塩としては、種類、製造方法、由来は特に限定されず、通常飲食用に用いられる食塩であればよい。   As a salt, a kind, a manufacturing method, and origin are not specifically limited, What is necessary is just salt normally used for eating and drinking.

水は、産地、硬度、精製度、微量成分等は特に限定されず、飲食用に用いられるものであればよい。   There are no particular restrictions on the production area, hardness, degree of purification, trace components, etc. of water, so long as it is used for eating and drinking.

雑穀としては、ヒエ、アワ、キビ、モロコシ、ハトムギ、大麦、ライ麦、オーツ麦などのイネ科作物、大豆、小豆などの豆類、ソバ、ゴマ等が挙げられ、その量は用途に応じて適宜調整できる。これらの雑穀は、1種のみを用いてもよいし、2種以上を混合して用いてもよい。   Examples of millet include millet, millet, millet, sorghum, pearl barley, barley, rye, oats and other gramineous crops, soybeans, red beans, and other beans, buckwheat, sesame, etc. it can. These millet grains may be used alone or in combination of two or more.

膨化剤としては、ベーキングパウダーが使用でき、ベーキングパウダーとしては、アルカリ性を呈し且つガス発生源となる炭酸水素ナトリウム、塩化アンモニウム等のアルカリ性成分と、酸または酸性反応を呈する塩類でガス発生促進の役割を果たす酸性成分とから成る組成物が挙げられる。酸性成分としては、酒石酸水素カリウム、リン酸二水素カルシウム (別名第一リン酸カルシウム)、酒石酸、焼ミョウバン、フマル酸、リン酸ナトリ
ウム、グルコノデルタラクトン等が挙げられる。また、膨化剤には、膨化剤成分同士が保存中に反応することのないように、又は膨化剤が吸湿した場合にその湿気を捕捉するために、コーンスターチ、デンプン等の分散剤が添加されてもよい。
Baking powder can be used as a swelling agent. As baking powder, alkaline components such as sodium hydrogen carbonate and ammonium chloride, which are alkaline and serve as gas generating sources, and salts that exhibit acid or acidic reaction, promote the role of gas generation. The composition which consists of the acidic component which fulfill | performs is mentioned. Examples of the acidic component include potassium hydrogen tartrate, calcium dihydrogen phosphate (also known as primary calcium phosphate), tartaric acid, calcined alum, fumaric acid, sodium phosphate, glucono delta lactone, and the like. In addition, a dispersing agent such as corn starch or starch is added to the swelling agent so that the swelling agent components do not react with each other during storage or to capture the moisture when the swelling agent absorbs moisture. Also good.

本発明においては、上記のような原材料に対して、グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素を配合させる。本発明で使用するグリセロ糖脂質分解活性を有する酵素は、グリセロ糖脂質を分解する性質を有する酵素であり、グリセロ糖脂質分解(グリセロ糖脂質リパーゼ)活性の他にも、グリセロリン脂質分解(ホスホリパーゼ)活性、および/またはトリアシルグリセロール分解(トリアシルグリセリドリパーゼ)活性を有していてもよい。
グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素は、動植物由来、菌株由来、遺伝子非組換え、遺伝子組換えのいずれでもあってよく、グリセロ糖脂質分解活性を有する限り、これを有していれば全て含まれ、特に限定されない。また、グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素は、完全に精製したものでも、部分精製したものでもよく、また全く精製していないものでもよく、特に精製度合いに限定されるものではないが、洋菓子の風味・食感および老化抑
止に悪影響を及ぼす可能性がある物質を排除する点で、精製されているものは好ましい。
In the present invention, an enzyme having glyceroglycolipid degradation activity is added to the raw material as described above. The enzyme having glyceroglycolipid-degrading activity used in the present invention is an enzyme having a property of degrading glyceroglycolipid. In addition to glyceroglycolipid degrading (glyceroglycolipid lipase) activity, glycerophospholipid degrading (phospholipase) It may have activity and / or triacylglycerol degrading (triacylglyceride lipase) activity.
Enzymes having glyceroglycolipid-degrading activity may be any of plants and animals, strains, non-genetical recombination, and genetic recombination, as long as they have glyceroglycolipid-degrading activity. There is no particular limitation. In addition, the enzyme having glyceroglycolipid degradation activity may be completely purified, partially purified, or not purified at all, and is not particularly limited to the degree of purification. What is refine | purified is preferable at the point which excludes the substance which may have a bad influence on flavor, food texture, and antiaging.

本発明に用いる酵素は、グリセロ糖脂質分解活性を有するものであれば限定されないが、中でも、グリセロ糖脂質分解活性およびグリセロリン脂質分解活性を有するものが好ましく、特に、グリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性よりも高いことが好ましい。具体的には、グリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の3倍以上であることが好ましく、さらに好ましくは5倍以上、特に好ましくは10倍以上である。
このようなグリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性に対して十分に高いグリセロ糖脂質分解活性を有する酵素(グリセロ糖脂質分解酵素)としては、市販されているものを用いてもよいし、公知の方法(例えば、特表2009−527238号公報、特開2008−206515号公報、特開2008−35867号公報、特表2007−528732号公報)により得られるものを用いることもできる。グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素の市販品としては、リポパンF(ノボザイムズ社製)などが挙げられる。またグリセロ糖脂質分解酵素は、グリセロ糖脂質分解活性とグリセロリン脂質分解活性だけでなく、実質上、トリグリセリド分解活性をも有することが好ましい。
The enzyme used in the present invention is not limited as long as it has glyceroglycolipid-degrading activity. Among them, those having glyceroglycolipid-degrading activity and glycerophospholipid-degrading activity are preferable, and in particular, glyceroglycolipid-degrading activity is glycerophospholipid. It is preferably higher than the decomposition activity. Specifically, the glyceroglycolipid degradation activity is preferably 3 times or more of the glycerophospholipid degradation activity, more preferably 5 times or more, and particularly preferably 10 times or more.
As such an enzyme having a glyceroglycolipid degrading activity (glyceroglycolipid degrading enzyme) that is sufficiently high as compared with the glycerophospholipid degrading activity, a commercially available one may be used. Those obtained by the above method (for example, JP-T 2009-527238, JP-A 2008-206515, JP-A 2008-35867, JP-T 2007-528732) can also be used. As a commercial product of an enzyme having glyceroglycolipid degradation activity, lipopan F (manufactured by Novozymes) and the like can be mentioned. The glyceroglycolipid degrading enzyme preferably has not only glyceroglycolipid degrading activity and glycerophospholipid degrading activity but also substantially triglyceride degrading activity.

原材料に対するグリセロ糖脂質分解活性を有する酵素の配合量は、小麦1kgに対して、グリセロ糖脂質分解活性として、通常10ユニット以上、好ましくは30ユニット以上、より好ましくは100ユニット以上、さらに好ましくは500ユニット以上、特に好ましくは1000ユニット以上、通常10,000ユニット以下、好ましくは5,000ユニット以下、より好ましくは3,000ユニット以下である。少なすぎると酵素の効果が十分に発揮できない場合があり、多すぎるとケーキのボリュームが小さくなる場合がある。   The amount of the enzyme having glyceroglycolipid-degrading activity relative to the raw material is usually 10 units or more, preferably 30 units or more, more preferably 100 units or more, more preferably 500 as glyceroglycolipid-degrading activity per 1 kg of wheat. More than unit, particularly preferably more than 1000 units, usually 10,000 units or less, preferably 5,000 units or less, more preferably 3,000 units or less. If the amount is too small, the enzyme effect may not be sufficiently exerted, and if the amount is too large, the cake volume may be reduced.

本発明におけるグリセロ糖脂質分解活性を示すユニットとは下記の方法で測定した酵素活性を表す。すなわち、予め37℃に加温した4wt%Triton X−100(Sigma−Aldrich Japan社製)水溶液(50mL)にジガラクトシルジアシルグリセロール(DGDG)(Sigma−AldrichJapan社製)(1.0g)を少しずつ加えて完全に溶解するまで攪拌する。この基質溶液(210μL)および400mM MOPS(ナカライテスク社製) pH 6緩衝液(30μL)の混合液を37℃で5分間保温したのち、酵素溶液(30μL)を加え均一に分散させたのち、37℃で10分間保温する。この反応液に1N塩酸(30μL)を加え酵素反応を停止させたのち、20μLを別の試験管に移す。この溶液をデタミナーNEFA755(協和メディックス社製)で比色定量する。1分間に1μmolの遊離脂肪酸を生じさせる酵素量を1ユニットと定義する。   The unit exhibiting glyceroglycolipid degradation activity in the present invention represents an enzyme activity measured by the following method. That is, digalactosyl diacylglycerol (DGDG) (Sigma-Aldrich Japan) (1.0 g) was added little by little to an aqueous solution (50 mL) of 4 wt% Triton X-100 (Sigma-Aldrich Japan) previously heated to 37 ° C. In addition, stir until completely dissolved. A mixture of this substrate solution (210 μL) and 400 mM MOPS (manufactured by Nacalai Tesque) pH 6 buffer (30 μL) was incubated at 37 ° C. for 5 minutes, and then the enzyme solution (30 μL) was added and dispersed uniformly. Incubate at C for 10 minutes. After 1N hydrochloric acid (30 μL) is added to the reaction solution to stop the enzyme reaction, 20 μL is transferred to another test tube. This solution is colorimetrically quantified with a determiner NEFA755 (manufactured by Kyowa Medix). The amount of enzyme that generates 1 μmol of free fatty acid per minute is defined as 1 unit.

なお、グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素のグリセロリン脂質分解活性は下記の方法により測定することができる。
予め37℃に加温した4wt%Triton X−100(Sigma−Aldrich Japan社製)水溶液(10mL)にレシチン(SLP-ホワイト 辻製油社製)(2
00mg)を少しずつ加えて完全に溶解するまで攪拌する。この基質溶液(500μL)および400mM MOPS(ナカライテスク社製)、pH6緩衝液(250μL)の混合液を37℃で5分間保温したのち、酵素溶液(150μL)を加え均一に分散させたのち、37℃で10分間保温する。この反応液に1N塩酸(100μL)を加え酵素反応を停止させたのち、20μLを別の試験管に移す。この溶液をデタミナーNEFA755(協和メディックス社製)で比色定量する。1分間に1μmolの遊離脂肪酸を生じさせる酵素量をグリセロリン脂質分解活性1ユニットと定義する。
The glycerophospholipid degradation activity of an enzyme having glyceroglycolipid degradation activity can be measured by the following method.
Lecithin (SLP-White, manufactured by Sakai Oil Co., Ltd.) in an aqueous solution (10 mL) of 4 wt% Triton X-100 (Sigma-Aldrich Japan) preheated to 37 ° C. (2
00 mg) is added in small portions and stirred until completely dissolved. A mixture of this substrate solution (500 μL), 400 mM MOPS (manufactured by Nacalai Tesque), and pH 6 buffer (250 μL) was incubated at 37 ° C. for 5 minutes, and then the enzyme solution (150 μL) was added and dispersed uniformly. Incubate at C for 10 minutes. After 1N hydrochloric acid (100 μL) is added to the reaction solution to stop the enzyme reaction, 20 μL is transferred to another test tube. This solution is colorimetrically quantified with a determiner NEFA755 (manufactured by Kyowa Medix). The amount of enzyme that produces 1 μmol of free fatty acid per minute is defined as 1 unit of glycerophospholipid degradation activity.

また、グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素のトリグリセリド分解活性は下記の方法により測定することができる。
オリーブ油(ナカライテスク社製)100mgとアラビアガム(和光純薬社製)50mg、水10mlを加え、ブレンダー(日本精機社製)で10,000r.p.m.、1分間乳化する。この溶液(500μl)、400mM MOPS(ナカライテスク社製) pH 6
緩衝液(250μL)および100mM カルシウムクロライド溶液(50μl)の混合
液を37℃で5分間保温したのち、酵素溶液(100μl)を加え均一に分散させたのち
、37℃で10分間保温する。この反応液に1N塩酸(100μL)を加え酵素反応を停止させたのち、4wt%Triton X−100(Sigma−Aldrich Japan社製)水溶液(1mL)を加えて遊離脂肪酸を溶解させ、20μLを別の試験管に移す。この溶液をデタミナーNEFA755(協和メディックス社製)で比色定量する。1分間に1μmolの遊離脂肪酸を生じさせる酵素量をトリグリセリド分解活性1ユニットと定義する。
The triglyceride degrading activity of an enzyme having glyceroglycolipid degrading activity can be measured by the following method.
Add 100 mg of olive oil (Nacalai Tesque), 50 mg of gum arabic (Wako Pure Chemicals) and 10 ml of water, and emulsify with a blender (Nippon Seiki) for 10,000 minutes. This solution (500 μl), 400 mM MOPS (manufactured by Nacalai Tesque) pH 6
A mixture of a buffer solution (250 μL) and a 100 mM calcium chloride solution (50 μl) is kept warm at 37 ° C. for 5 minutes, and then an enzyme solution (100 μl) is added and dispersed uniformly, followed by incubation at 37 ° C. for 10 minutes. After 1N hydrochloric acid (100 μL) was added to the reaction solution to stop the enzyme reaction, 4 wt% Triton X-100 (Sigma-Aldrich Japan) aqueous solution (1 mL) was added to dissolve the free fatty acid, and 20 μL was added to another solution. Transfer to test tube. This solution is colorimetrically quantified with a determiner NEFA755 (manufactured by Kyowa Medix). The amount of enzyme that produces 1 μmol of free fatty acid per minute is defined as 1 unit of triglyceride-degrading activity.

本発明の小麦粉膨化食品の製造においては、さらに原材料に乳化剤を配合することが好ましい。乳化剤としては、特に限定されないが、例えば、グリセリン脂肪酸エステル、グリセリン酢酸脂肪酸エステル、グリセリン乳酸脂肪酸エステル、グリセリンコハク酸脂肪酸エステル、グリセリンジアセチル酒石酸脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ショ糖酢酸イソ酪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ステアロイル乳酸カルシウム、ステアロイル乳酸ナトリウム、ポリオキシエチレンソルビタンモノグリセリド等の合成乳化剤が挙げられる。また、サポニン、植物ステロール、レシチン、酵素処理レシチン等の天然の乳化剤も使用することができる。これら1種のみを用いてもよいし、2種以上を組み合わせて用いてもよい。また、乳化剤として、上記脂肪酸エステルの一つまたは複数を油脂と混合させた乳化油脂を用いることもできる。
乳化剤の配合量としては、小麦粉に対して通常0.1重量%以上、好ましくは1重量%以上、より好ましくは5重量%以上、通常20重量%以下、好ましくは15重量%以下、より好ましくは12重量%以下である。乳化剤の配合量が少なすぎると、機能が十分に発揮されず、多すぎると乳化剤特有の味・風味が感じられてしまい、ケーキの味や風味に影響を与える恐れがある。
In the production of the puffed food of the present invention, it is preferable to further add an emulsifier to the raw material. The emulsifier is not particularly limited. For example, glycerin fatty acid ester, glycerin acetic acid fatty acid ester, glycerin lactic acid fatty acid ester, glycerin succinic acid fatty acid ester, glycerin diacetyl tartaric acid fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, sucrose fatty acid ester, sucrose acetic acid isoester. Synthetic emulsifiers such as butyric acid ester, polyglycerin fatty acid ester, polyglycerin condensed ricinoleic acid ester, propylene glycol fatty acid ester, stearoyl calcium lactate, sodium stearoyl lactate and polyoxyethylene sorbitan monoglyceride. Natural emulsifiers such as saponins, plant sterols, lecithin, and enzyme-treated lecithin can also be used. Only one of these may be used, or two or more may be used in combination. Moreover, the emulsified fats and oils which mixed one or more of the said fatty acid ester with fats and oils can also be used as an emulsifier.
The blending amount of the emulsifier is usually 0.1% by weight or more, preferably 1% by weight or more, more preferably 5% by weight or more, usually 20% by weight or less, preferably 15% by weight or less, more preferably, based on wheat flour. 12% by weight or less. If the blending amount of the emulsifier is too small, the function is not sufficiently exerted, and if it is too large, the taste and flavor peculiar to the emulsifier may be felt, which may affect the taste and flavor of the cake.

以下、スポンジケーキの代表的な製造方法について説明する。スポンジケーキの生地の主な製造方法として、割卵した卵を糖類(例えば、砂糖)と共に気泡させ、小麦粉等を混合する共立て法、卵白と糖類を気泡させた後、卵黄、小麦粉等を混合する別立て法、乳化気泡剤を使用して小麦粉、糖類、卵等を一括混合し、気泡させるオールインミックス法が挙げられる。いずれにおいても、原材料を混合し、生地とした後に、これを焼成することによりスポンジケーキを製造する。
本発明における、基本的なスポンジケーキの製造に用いられる原材料として、小麦粉、糖類、グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素が挙げられ、通常さらに卵が用いられる。また、さらに、乳化剤を配合することが好ましい。
糖類の配合割合は、使用する小麦粉に対し、1重量%以上が好ましく、10重量%以上がより好ましく、50重量%以上がさらに好ましく、80重量%以上が特に好ましく、200重量%以下が好ましく、150重量%以下がより好ましい。糖類の割合が少なすぎると甘味に欠き、多すぎると甘味が強くなりすぎることがある。
卵の配合割合は、使用する小麦粉に対し、50重量%以上が好ましく、80重量%以上がより好ましく、300重量%以下が好ましい。卵の割合が少なすぎると、気泡力が足りず、重たい食感のケーキになることがある。
グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素や乳化剤の配合量は上述の通りである。
本発明におけるグリセロ糖脂質分解活性を有する酵素は生地中に均一に分散できれば、水に分散させて配合しても、予め小麦粉等の原材料に分散させて配合してもよい。
種々の方法により、原材料を混合することにより製造された生地は目的の型に流し込み、オーブン等の加熱機器により焼成する。焼成後のケーキは必要に応じてカットし、フィ
リング、クリーム、果実類、ナッツ類等でトッピングを行う。
Hereinafter, the typical manufacturing method of sponge cake is demonstrated. Sponge cake dough is mainly produced by splitting eggs with saccharides (eg sugar) and mixing with flour, etc., mixing with wheat flour, egg white and saccharide bubbles, mixing egg yolk, flour, etc. And an all-in-mix method in which flour, saccharides, eggs and the like are mixed together and bubbled using an emulsifying foaming agent. In any case, after mixing raw materials to make dough, this is baked to produce a sponge cake.
In the present invention, raw materials used for the production of basic sponge cake include flour, saccharides, and enzymes having glyceroglycolipid-degrading activity, and eggs are usually used. Furthermore, it is preferable to blend an emulsifier.
The blending ratio of the saccharide is preferably 1% by weight or more, more preferably 10% by weight or more, further preferably 50% by weight or more, particularly preferably 80% by weight or more, and preferably 200% by weight or less, based on the flour used. 150 wt% or less is more preferable. If the ratio of saccharides is too small, sweetness may be lacking, and if it is too high, sweetness may become too strong.
The blending ratio of the eggs is preferably 50% by weight or more, more preferably 80% by weight or more, and preferably 300% by weight or less based on the flour used. If the ratio of eggs is too small, the bubble power may be insufficient and the cake may have a heavy texture.
The amount of the enzyme or emulsifier having glyceroglycolipid degrading activity is as described above.
The enzyme having glyceroglycolipid-degrading activity in the present invention may be dispersed in water or blended in water, or previously dispersed in raw materials such as wheat flour as long as it can be uniformly dispersed in the dough.
The dough produced by mixing raw materials by various methods is poured into a target mold and baked by a heating device such as an oven. The baked cake is cut as necessary and topped with filling, cream, fruits, nuts and the like.

グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素を用いたパンの製造方法は、原材料にグリセロ糖脂質分解活性を有する酵素を配合すればよく、その他は通常のパンの製造方法と同様である。パンとしては、蒸しパン、食パン〔白パン、黒パン、フランスパン、バラエティブレッド、ロール(テーブルロール、バターロール等)等〕、菓子パン〔ジャムパン、あんパン、クリームパン、レーズンパン、メロンパン、リッチグッズ(クロワッサン、ブリオッシュ、デニッシュペストリー)等〕、調理パン〔ホットドック、ハンバーガー、ピザパイ等〕等などが挙げられる。   The method for producing bread using an enzyme having glyceroglycolipid-degrading activity may be the same as the ordinary bread-producing method except that an enzyme having glyceroglycolipid-degrading activity is added to the raw material. As bread, steamed bread, bread (white bread, black bread, French bread, variety red, roll (table roll, butter roll, etc.)), sweet bread (jam bread, anpan bread, cream bread, raisin bread, melon bread, rich goods ( Croissant, brioche, Danish pastry, etc.), cooking pan (hot dog, hamburger, pizza pie, etc.) and the like.

例えば、小麦粉、油脂、乳成分、糖類、食塩、水、酵母、その他添加剤等の原材料にグリセロ糖脂質リパーゼおよび好ましくは乳化剤を配合し、ミキサー等の機器を用いて均一に分散・混合させ、混合後の生地を発酵し、分割、丸め、ベンチタイム、成形、最終発酵を経て焼成に至る方法が挙げられる。原材料を混合する際、原材料をそれぞれ配合してもよいし、予め一部の原材料を混合した上で混合してもよい。   For example, glyceroglycolipid lipase and preferably an emulsifier are blended with raw materials such as flour, fats and oils, milk ingredients, sugars, salt, water, yeast, and other additives, and uniformly dispersed and mixed using an apparatus such as a mixer, Examples of the method include fermenting the dough after mixing, dividing, rounding, bench time, molding, and final fermentation to firing. When mixing the raw materials, the raw materials may be blended, or after mixing some raw materials in advance.

小麦粉としては、高蛋白粉、特等粉、強力一等粉、強力粉、強力二等粉、全粒粉など製パンに用いられる粉が挙げられ、その小麦の品種、等級を問わず、どのような小麦粉を用いてもよい。これらの小麦粉は、1種のみを用いても2種以上用いて混合したものでもよい。また、小麦粉に加えて、ライ麦、オーツ麦、大麦、米粉等の小麦以外の穀物を用いてもよい。なお、小麦以外の穀物は上記に限定されるものではない。   Wheat flour includes high protein flour, special flour, strong first flour, strong flour, strong second flour, flour used in bread making, such as whole grain flour. It may be used. These flours may be used alone or in combination of two or more. In addition to wheat flour, grains other than wheat, such as rye, oats, barley, and rice flour, may be used. In addition, grains other than wheat are not limited to the above.

酵母としては、通常パンに用いる酵母であれば、生イーストでもドライイーストのような培養された酵母でも、果実や植物由来の酵母菌などを用いてもよく、特に限定されるものではない。
また、油脂、乳成分、糖類、食塩、水等の種類、製造方法は特に限定されないが、前述のケーキに用いるものを用いることができる。
As yeast, as long as it is yeast normally used for bread, yeast cultured from fresh yeast or dry yeast, or yeast derived from fruits or plants may be used, and is not particularly limited.
Moreover, although the kind and manufacturing method of fats and oils, milk components, saccharides, salt, water, etc. are not specifically limited, What is used for the above-mentioned cake can be used.

パンの材料には、必要に応じてその他の添加剤を含有してもよく、その他の添加剤としては、乳化剤、後述のグリセロ糖脂質リパーゼ以外の酵素、イーストフード、生地改良剤、香料、色素、果汁、カカオ、ドライフルーツ類、ハーブ類、ナッツ類等が挙げられる。   The bread material may contain other additives as necessary. Examples of other additives include emulsifiers, enzymes other than glyceroglycolipid lipase described below, yeast food, dough improving agents, flavoring agents, and pigments. , Fruit juice, cacao, dried fruits, herbs, nuts and the like.

グリセロ糖脂質リパーゼ以外の酵素としては、特に限定されないが、例えば、酸化還元酵素、転移酵素、加水分解酵素、脱離酵素、異性化酵素、合成酵素などが挙げられる。特に小麦粉膨化食品においては、加水分解酵素や酸化還元酵素が広く使用される。
具体的に、加水分解酵素としては、αアミラーゼ、βアミラーゼ、グルコアミラーゼ、プルラナーゼ、ヘミセルラーゼ、キシラナーゼ、セルラーゼなどの糖質分解酵素、タンパク質分解酵素、脂質分解酵素が挙げられる。
酸化還元酵素としては、グルコースオキシダーゼ、ヘキソースオキシダーゼ、アスコルビン酸オキシダーゼなどが挙げられる。
The enzyme other than the glyceroglycolipid lipase is not particularly limited, and examples thereof include oxidoreductase, transferase, hydrolase, eliminase, isomerase, and synthetic enzyme. In particular, hydrolyzing enzymes and oxidoreductases are widely used in puffed foods.
Specific examples of hydrolases include α-amylases, β-amylases, glucoamylases, pullulanases, hemicellulases, xylanases, cellulases and other carbohydrate degrading enzymes, proteolytic enzymes, and lipolytic enzymes.
Examples of the oxidoreductase include glucose oxidase, hexose oxidase, and ascorbate oxidase.

パンの製造方法は、2回以上のミキシング工程、すなわち、少なくとも2回のミキシング工程を有するものでもよい。2回以上のミキシング工程を有する代表的なパンの製造方法として、標準中種法、100%中種法、短時間中種法、長時間中種法、オーバーナイト中種法、加糖中種法、湯捏法、中麺法、液種法等が挙げられる。より具体的には、小麦粉の一部または全部を酵母、水、副原料等とミキシングして得られる生地を製造し、発酵する工程を経て、残りの原材料または新たな原材料を加え、再度ミキシングし発酵、焼成し、パンを得る方法が挙げられる。   The bread manufacturing method may have two or more mixing steps, that is, at least two mixing steps. As a typical method for producing bread having two or more mixing steps, the standard middle seed method, the 100% middle seed method, the short time middle seed method, the long time middle seed method, the overnight middle seed method, the sweetened middle seed method The hot water method, the noodle method, the liquid seed method and the like. More specifically, a dough obtained by mixing a part or all of flour with yeast, water, auxiliary ingredients, etc. is manufactured, fermented, the remaining raw materials or new raw materials are added, and then mixed again. A method of obtaining bread by fermentation and baking.

以下、実施例により本発明の実施様態を具体的に説明するが、本発明はその要旨を超えない限り、本発明の技術範囲が以下の実施例によって限定されるものではない。   Hereinafter, the embodiment of the present invention will be specifically described by way of examples. However, the technical scope of the present invention is not limited by the following examples unless it exceeds the gist of the present invention.

(参考例1)グリセロ糖脂質分解酵素(グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素)の精製1

グリセロ糖脂質分解酵素の培養液の調製
滅菌した下記組成の培地100mlが入っている500ml容の三角フラスコにSANK11298株(FERM BP−10753)を接種し、26℃にて4日間、170rpm振とう培養を行った。なお、SANK11298株は、平成18年12月27日付けで、受託
番号FERM BP−10753で、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託されている(特開2008−206515号公報)。
(Reference Example 1) Purification 1 of glyceroglycolipid degrading enzyme (enzyme having glyceroglycolipid degrading activity)

Preparation of culture solution of glyceroglycolipid degrading enzyme Inoculate SANK11298 strain (FERM BP-10653) into a 500 ml Erlenmeyer flask containing 100 ml of sterilized medium having the following composition, and culture at 170 ° C. for 4 days at 170 rpm. Went. The SANK11298 strain was deposited at the Patent Organism Depositary, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, under the accession number FERM BP-10653, as of December 27, 2006 (Japanese Patent Laid-Open No. 2008-206515). .

培地組成グルコース 20g
イーストエクストラクト 10g
カザミノ酸 10g
すりゴマ 20g
トゥイーン80 10g
リン酸水素2カリウム 0.1g
硫酸マグネシウム 0.05g
純水で1000mlとした。
培養終了後、4℃、10,000×Gにて10分間の遠心分離を行った。得られた上清をグリセロ糖脂質分解酵素の培養液とした。
Medium composition glucose 20g
East Extract 10g
10g casamino acid
20g of ground sesame
Tween 80 10g
Dipotassium hydrogen phosphate 0.1g
Magnesium sulfate 0.05g
Made up to 1000 ml with pure water.
After completion of the culture, centrifugation was performed at 4 ° C. and 10,000 × G for 10 minutes. The obtained supernatant was used as a culture solution for glyceroglycolipid-degrading enzyme.

2)グリセロ糖脂質分解酵素培養液の精製
1)で得たグリセロ糖脂質分解酵素培養液1,150mlに粉末硫酸アンモニウム(ナカライテスク社製)を終濃度1Mになるように、攪拌しながらゆっくり加えた。これを、予め1M硫酸アンモニウム溶液で平衡化したToyopearl Butyl 650M(プレパック直径2.2cm×長さ20cm、東ソー社製)に1分間あたり2mlの流速でチャージした。1M硫酸アンモニウム溶液160mlで洗浄後、1M硫酸アンモニウム溶液から水の直線濃度勾配(640ml)にて該カラムにチャージした成分を溶出させた。硫酸アンモニウム濃度300mMから0mMの範囲を分取した。
硫酸アンモニウム濃度300mMから0mMの範囲の分取した画分は、2M硫酸アンモニウムで平衡化したHitrap Butyl FF(GEヘルスケアバイオサイエンス社製)カラム(5ml)に添加した後、2M硫酸アンモニウムから水の直線濃度勾配にて該カラムに吸着した成分を溶出させた。硫酸アンモニウム濃度1.2Mから1.0Mの範囲を分取した。
12.5%のポリアクリルアミドゲルを用いたSDS-PAGE電気泳動法にて、硫酸アンモニウム濃度1.5Mから2Mの範囲の分取した画分が単一バンドであることを確認後、透析膜(分子量分画10,000、三光社製)を用いて水(4L)に対して3回透析を行いグリセロ糖脂質分解酵素精製液とした。
2) Purification of glyceroglycolipid-degrading enzyme culture solution Powdered ammonium sulfate (manufactured by Nacalai Tesque) was slowly added to 1,150 ml of the glyceroglycolipid-degrading enzyme culture solution obtained in 1) with stirring to a final concentration of 1M. . This was charged into Toyopearl Butyl 650M (prepack diameter 2.2 cm × length 20 cm, manufactured by Tosoh Corp.) previously equilibrated with 1 M ammonium sulfate solution at a flow rate of 2 ml per minute. After washing with 160 ml of 1M ammonium sulfate solution, components charged in the column were eluted from the 1M ammonium sulfate solution with a linear concentration gradient of water (640 ml). Ammonium sulfate concentrations ranging from 300 mM to 0 mM were collected.
Fractionated fractions in the ammonium sulfate concentration range of 300 mM to 0 mM were added to a Hitrap Butyl FF (GE Healthcare Bioscience) column (5 ml) equilibrated with 2 M ammonium sulfate, and then a linear concentration gradient from 2 M ammonium sulfate to water. The components adsorbed on the column were eluted with Ammonium sulfate concentrations ranging from 1.2M to 1.0M were collected.
After confirming that the fraction collected in the range of ammonium sulfate concentration from 1.5M to 2M is a single band by SDS-PAGE electrophoresis using 12.5% polyacrylamide gel, dialysis membrane (molecular weight Using a fraction 10,000 (manufactured by Sanko Co., Ltd.), dialysis was performed 3 times against water (4 L) to obtain a purified glyceroglycolipidase.

<グリセロ糖脂質分解酵素の分解活性>
得られたグリセロ糖脂質分解酵素精製液についてグリセロ糖脂質分解活性、グリセロリン脂質分解活性及びトリグリセリド分解活性を測定したところ、グリセロリン脂質分解活性及びトリグリセリド分解活性は、グリセロ糖脂質分解活性を100としたとき、それぞれ7.6、13.1であった。なお、これらの活性は上記の方法に従い、pH6のグリセロ糖脂質分解酵素精製液を用いて測定した。
<Degradation activity of glyceroglycolipid degrading enzyme>
The obtained glyceroglycolipid-degrading enzyme purified solution was measured for glyceroglycolipid-degrading activity, glycerophospholipid-degrading activity, and triglyceride-degrading activity. When the glyceroglycolipid-degrading activity was 100, 7.6 and 13.1, respectively. These activities were measured using a purified glyceroglycolipid-degrading enzyme solution at pH 6 according to the above method.

(実施例1)ケーキ様モデル小麦粉膨化食品におけるグリセロ糖脂質分解酵素の効果
ケーキ様のモデル小麦粉膨化食品を用いて、参考例1のグリセロ糖脂質分解酵素の老化
抑制効果を検証した。
使用する小麦粉に対し150重量%の卵白、100重量%の砂糖、52.5重量%の水、および小麦粉1kgあたり500Uのグリセロ糖脂質分解酵素(参考例1で調製したもの)を容器内で混合し、高速で6分ホイップした。
次に、小麦粉(ハート:日本製粉社製)と、小麦粉に対し1重量%のベーキングパウダー(アイコク:愛国産業社製)を加えて20秒間高速でホイップし、比重を0.45に合わせて、上火165℃、下火175℃で焼成することで、ケーキ様モデル小麦粉膨化食品を製造した。
焼成後の体積をレーザー体積計(Volscan profile、Stable micro Systems社製)を用いて測定し、比較例1で製造されたケーキ様モデル小麦粉膨化食品の体積を100%とした時の比体積を算出した。
(Example 1) Effect of glyceroglycolipid-degrading enzyme in cake-like model wheat flour puffed food Using a cake-like model wheat flour puffed food, the aging inhibitory effect of glyceroglycolipid degrading enzyme in Reference Example 1 was verified.
150% by weight of egg white, 100% by weight of sugar, 52.5% by weight of water, and 500 U of glyceroglycolipid-degrading enzyme (prepared in Reference Example 1) per 1 kg of flour in a container And whipped at high speed for 6 minutes.
Next, add wheat flour (Heart: manufactured by Nippon Flour Mills) and 1% by weight baking powder (Ikoku: manufactured by Aikoku Sangyo Co., Ltd.) and whip at high speed for 20 seconds, adjusting the specific gravity to 0.45, The cake-like model wheat flour expanded food was manufactured by baking at 165 degreeC of upper flames and 175 degreeC of lower flames.
The volume after baking was measured using a laser volume meter (Volscan profile, manufactured by Stable micro Systems), and the specific volume when the volume of the cake-like model flour-expanded food produced in Comparative Example 1 was taken as 100% was calculated. did.

また、このケーキ様モデル小麦粉膨化食品を常温で1日保存した後、ラップで包み4℃で3日間保存し、保存中の内相の硬さとしっとりとした食感(触感)(以下、しっとり感という場合がある)の評価をレオメーターと官能評価により行った。
尚、レオメーターによる硬さ測定は、レオメーター( CR-500DX、サン科学社製)を用
いて、厚さ2cmに切断したケーキ様モデル小麦粉膨化食品を直径30mmの円形プランジャーで0.5cm押した時の応力を測定した。
In addition, this cake-like model flour-expanded food is stored at room temperature for 1 day, then wrapped in wrap and stored at 4 ° C for 3 days, and the internal phase hardness and moist texture (tactile feeling) during storage (hereinafter referred to as moist feeling) Evaluation) was performed by rheometer and sensory evaluation.
The rheometer is used to measure the hardness of the cake-like model flour-expanded food cut to a thickness of 2 cm using a rheometer (CR-500DX, manufactured by Sun Kagaku Co., Ltd.) with a circular plunger with a diameter of 30 mm. The stress was measured.

官能によるしっとり感(触感および食感)の評価は以下の基準に基づき、5段階で評価した。尚、無添加区とは比較例1を示す。
1:無添加区に比べ乾燥している
2:無添加区に比べやや乾燥している
3:無添加区と同等しっとり感
4:無添加区に比べややしっとりしている
5:無添加区に比べ明らかにしっとりしている

結果を表1に示す。
The evaluation of moist feeling (tactile sensation and texture) by sensory evaluation was performed in five stages based on the following criteria. In addition, the additive-free section shows Comparative Example 1.
1: Dry compared to the additive-free zone
2: Slightly dry compared to the additive-free zone
3: Moist feeling equivalent to the additive-free zone
4: Slightly moist compared to the additive-free zone
5: It is clearly moist compared to the additive-free zone

The results are shown in Table 1.

(比較例1)
グリセロ糖脂質分解酵素を配合(添加)しない以外は実施例1と同様にしてケーキ様モデル小麦粉膨化食品を製造し、評価を行った。結果を表1に示す。
(Comparative Example 1)
A cake-like model wheat flour puffed food was produced and evaluated in the same manner as in Example 1 except that glyceroglycolipid-degrading enzyme was not added (added). The results are shown in Table 1.

(比較例2)グリセロ糖脂質分解酵素の代わりに、小麦粉に対し0.3重量%の以下に記載の乳化剤を加えた以外は実施例1と同様にしてケーキ様モデル小麦粉膨化食品を製造し、評価を行った。結果を表1に示す。
乳化剤としてはショ糖脂肪酸エステル( リョートー(登録商標)シュガーエステルS-1670、三菱化学フーズ社製)、グリセリン脂肪酸エステル(エマルジーMM100、理研ビタミン社製)、ジアセチル酒石酸モノグリセリド(PANODAN150、ダニスコ社製)をそれぞれ用いた。
(Comparative Example 2) Instead of glyceroglycolipid-degrading enzyme, a cake-like model wheat flour expanded food was produced in the same manner as in Example 1 except that 0.3% by weight of the following emulsifier was added to the flour. Evaluation was performed. The results are shown in Table 1.
As emulsifiers, sucrose fatty acid ester (Ryoto (registered trademark) sugar ester S-1670, manufactured by Mitsubishi Chemical Foods), glycerin fatty acid ester (Emulsy MM100, manufactured by Riken Vitamin), diacetyltartaric acid monoglyceride (PANODAN150, manufactured by Danisco) Each was used.

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グリセロ糖脂質分解酵素の配合により体積、内相のソフトさ、しっとり感の増加効果が見られた。特に、乾燥し易い冷蔵保存後において、乳化剤の配合では得られないソフトで、しっとりした食感の小麦粉膨化食品が得られることがわかった。
また、グリセロ糖脂質分解酵素を配合した小麦粉膨化食品は、保存時間が長くなっても硬くなりにくく、硬くなる速度が遅いことがわかった。
また、表1には示していないが、グリセリン脂肪酸エステルや、ジアセチル酒石酸モノグリセリドを配合したケーキ様モデル小麦粉膨化食品は、独特の苦味や風味を感じたが、グリセロ糖脂質分解酵素を配合したケーキ様モデル小麦粉膨化食品の風味は無添加区(比較例1)と差異が無かった。また、酵素を配合しても、特に臭気に変化はなく、口どけも良く、くちゃつき感もなかった。
すなわち、本発明の製造方法により得られる小麦粉膨化食品は、小麦粉膨化食品の本来の風味を維持したまま、苦みなども感じず、柔らかくしっとりとした食感を維持できるものであることがわかった。
By adding glyceroglycolipid-degrading enzyme, volume, softness of internal phase and moist feeling were increased. In particular, after refrigerated storage, which is easy to dry, it was found that a soft and moist texture flour-swollen food that cannot be obtained by the emulsifier blending can be obtained.
In addition, it was found that the flour-swollen food containing glyceroglycolipid-degrading enzyme is hard to be hardened even when the storage time is long, and the rate of hardening is slow.
Although not shown in Table 1, the cake-like model wheat flour puffed food blended with glycerin fatty acid ester and diacetyl tartaric acid monoglyceride felt a unique bitterness and flavor, but cake-like model blended with glyceroglycolipidase The flavor of the model flour expanded food was not different from the additive-free group (Comparative Example 1). Moreover, even when the enzyme was added, the odor was not particularly changed, the mouthfeel was good, and there was no feeling of fluttering.
That is, it was found that the flour-swollen food obtained by the production method of the present invention can maintain a soft and moist texture without feeling bitterness while maintaining the original flavor of the flour-swollen food.

(実施例2)乳化剤併用におけるグリセロ糖脂質分解酵素の老化抑制効果
グリセロ糖脂質分解酵素とともに乳化剤を用いて製造したスポンジケーキにおいてグリセロ糖脂質分解酵素の老化抑制効果を検討した。
スポンジケーキの原材料及び配合量を表2に示す。小麦粉はハート(日本製粉社製)、卵は市販の鶏卵、砂糖は上白糖(日新製糖社製)、ベーキングパウダー(アイコク、愛国産業社製)を用いた。乳化剤としてはショ糖脂肪酸エステル及びモノグリセライド(グリセリン脂肪酸エステル)を主成分とする乳化剤製剤(リョートー(登録商標)エステルSP、三菱化学フーズ社製)を用いた。また、グリセロ糖脂質分解酵素としては、参考例1で調製したグリセロ糖脂質分解酵素を水に溶解して用いた。また、酵素の配合量は、小麦粉1kgに対し500Uとなるように配合した。
(Example 2) Anti-aging effect of glyceroglycolipid degrading enzyme in combination with emulsifier The anti-aging effect of glyceroglycolipid degrading enzyme was examined in a sponge cake produced using an emulsifier together with glyceroglycolipid degrading enzyme.
Table 2 shows the raw materials and blending amounts of the sponge cake. Wheat flour used was Heart (manufactured by Nippon Flour Mills Co., Ltd.), eggs used as commercially available chicken eggs, sugar used as sucrose (manufactured by Nissin Sugar Co., Ltd.), and baking powder (Aikoku, manufactured by Aikoku Sangyo) As an emulsifier, an emulsifier preparation (Ryoto (registered trademark) ester SP, manufactured by Mitsubishi Chemical Foods Co., Ltd.) containing sucrose fatty acid ester and monoglyceride (glycerin fatty acid ester) as main components was used. As the glyceroglycolipid degrading enzyme, the glyceroglycolipid degrading enzyme prepared in Reference Example 1 was dissolved in water and used. Moreover, the compounding quantity of the enzyme was mix | blended so that it might become 500U with respect to 1 kg of wheat flour.

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ホイップには関東混合機工業株式会社製の縦型ミキサーを用いた。
卵を予め高速で30秒ホイップし、砂糖、水および乳化剤を添加し、さらに低速1分、高速2分ホイップした。この混合物に小麦粉およびベーキングパウダーを添加し、低速1分で混合した後、高速で比重0.40付近になるまでホイップした。
For the whipping, a vertical mixer manufactured by Kanto Blender Kogyo Co., Ltd. was used.
Eggs were pre-whipped at high speed for 30 seconds, sugar, water and emulsifier were added and further whipped for 1 minute on low speed and 2 minutes on high speed. Wheat flour and baking powder were added to this mixture, mixed at a low speed of 1 minute, and then whipped at a high speed until the specific gravity was around 0.40.

上記のとおり、ホイップした混合物(生地)を固定釜を用い、上火165℃、下火175℃で35分焼成し、スポンジケーキを製造した。酵素配合による生地の比重、粘度に大きな差異は無く、良好なスポンジケーキが得られた。このスポンジケーキは、特に苦みや臭気は感じられず、くちゃつきもなく口どけも良かった。
その他の結果を表3に示す。表3における各評価項目は以下の通り求めた。
焼減率は、式1に従って算出した。
焼減率(%)=焼成後生地重量(g)/ 焼成前生地重量(g)×100・・・式1
As described above, the whipped mixture (dough) was baked for 35 minutes at 165 [deg.] C. and 175 [deg.] C. using a fixed kettle to produce a sponge cake. There was no significant difference in the specific gravity and viscosity of the dough due to the enzyme formulation, and a good sponge cake was obtained. The sponge cake did not feel bitter or odor, and it was not fluffy and had a good mouthfeel.
Other results are shown in Table 3. Each evaluation item in Table 3 was obtained as follows.
The burnout rate was calculated according to Equation 1.
Burn-out rate (%) = Dough weight after baking (g) / Dough weight before baking (g) × 100 Formula 1

体積(ml)は、レーザー体積計(Volscan profile、Stable Micro Systems社製)を用いて測定し、比容積は式2にしたがって算出した。
比容積=体積(ml)/ 焼成後生地比重(g)・・・式2
The volume (ml) was measured using a laser volume meter (Volscan profile, manufactured by Stable Micro Systems), and the specific volume was calculated according to Equation 2.
Specific volume = volume (ml) / baked dough specific gravity (g) Formula 2

水分(%)は、水分計(MOC-120H、島津製作所社製)を用いて測定し、水分活性は水分活性計(Aqualab LITE、アイネクス社製)を用いて測定した。   The moisture (%) was measured using a moisture meter (MOC-120H, manufactured by Shimadzu Corporation), and the water activity was measured using a water activity meter (Aqualab LITE, manufactured by Inex).

また、製造したスポンジケーキをラップで包み、4℃で5日間保存し、酵素の配合の有無における、しっとり感(触感および食感)の比較を官能試験により行った。
官能試験における、しっとり感(触感および食感)測定はパネラー3名で行い、以下の基準に基づき3段階で評価した。結果を表4に示す。
1:パサパサと乾燥した食感
2:ややしっとりした食感
3:明らかにしっとりした食感
Moreover, the produced sponge cake was wrapped in a wrap and stored at 4 ° C. for 5 days, and the moist feeling (tactile feeling and texture) with and without the enzyme was compared by a sensory test.
In the sensory test, moist feeling (tactile sensation and texture) was measured by three panelists and evaluated in three stages based on the following criteria. The results are shown in Table 4.
1: Papasa and dry texture
2: A slightly moist texture
3: Clearly moist texture

(実施例3)
グリセロ糖脂質分解酵素の配合量を、小麦粉1kgに対し1000Uとなるように配合した以外は実施例2と同様にして、スポンジケーキを製造した。酵素配合による生地の比重、粘度に大きな差異は無く、良好なスポンジケーキが得られた。このスポンジケーキは、特に苦みや臭気は感じられず、くちゃつきもなく口どけも良かった。
(Example 3)
A sponge cake was produced in the same manner as in Example 2 except that the amount of glyceroglycolipid-degrading enzyme was 1000 U per 1 kg of flour. There was no significant difference in the specific gravity and viscosity of the dough due to the enzyme formulation, and a good sponge cake was obtained. The sponge cake did not feel bitter or odor, and it was not fluffy and had a good mouthfeel.

(実施例4)
グリセロ糖脂質分解酵素の配合量を、小麦粉1kgに対し2000Uとなるように配合した以外は実施例2と同様にして、スポンジケーキを製造した。酵素配合による生地の比重、粘度に大きな差異は無く、良好なスポンジケーキが得られた。このスポンジケーキは、特に苦みや臭気は感じられず、くちゃつきもなく口どけも良かった。
(Example 4)
A sponge cake was produced in the same manner as in Example 2, except that the amount of glyceroglycolipid-degrading enzyme was 2000 U per 1 kg of flour. There was no significant difference in the specific gravity and viscosity of the dough due to the enzyme formulation, and a good sponge cake was obtained. The sponge cake did not feel bitter or odor, and it was not fluffy and had a good mouthfeel.

(比較例3)
グリセロ糖脂質分解酵素を配合しなかった以外は、実施例2と同様にして、スポンジケーキを製造した。
(Comparative Example 3)
A sponge cake was produced in the same manner as in Example 2 except that glyceroglycolipid degrading enzyme was not blended.

Figure 0006606130
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グリセロ糖脂質分解酵素の配合による、ケーキ体積、水分への大きな影響は見られなかった。また、焼成直後の食感(触感)も酵素の配合の有無に関わらず差異はなく、いずれもしっとりとしていた。   There was no significant effect on the cake volume and moisture by the formulation of glyceroglycolipidase. Moreover, the texture (tactile feeling) immediately after baking was not different regardless of the presence or absence of the enzyme, and both were moist.

Figure 0006606130
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表4に示すように、グリセロ糖脂質分解酵素を配合したケーキは、保存後において、しっとり感が優れており、特に小麦粉1kgに対し1000U以上の配合することでしっとりとした食感を維持していた。尚、パネラー3名は、各実施例、比較例においてそれぞれ同じスコアを付けた。
表3に示したとおり、ケーキ体積及び水分量については、実施例2〜4及び比較例3において大きな差異はなかったが、表4に示したとおり、グリセロ糖脂質分解酵素の配合により、乳化剤だけでは得られない保存後のしっとり感が得られ、酵素の配合効果が現れていると考えられた。
As shown in Table 4, cakes formulated with glyceroglycolipid-degrading enzyme have a moist feeling after storage, and maintain a moist texture especially by blending 1000 U or more with 1 kg of flour. It was. Three panelists gave the same score in each example and comparative example.
As shown in Table 3, the cake volume and water content were not significantly different in Examples 2 to 4 and Comparative Example 3, but as shown in Table 4, only the emulsifier was obtained by blending with glyceroglycolipidase. It was thought that the moist feeling after storage that could not be obtained was obtained, and that the effect of blending the enzyme appeared.

(実施例5)酵素反応時間による評価
グリセロ糖脂質分解酵素を小麦粉1kgに対し1000U配合した以外は、実施例2と同様にして、ホイップした混合物(生地)を作製した。この生地を30℃で表5に示す0〜2時間保存後、オーブンで焼成し、スポンジケーキを製造した。評価結果を表5に示す。各評価項目の求め方は、実施例2と同様とした。
次に、これらのスポンジケーキをラップで包み、4℃で5日間保存し、酵素の配合の有無における、しっとり感(触感および食感)の比較を官能試験により行った。官能試験の評価方法は実施例2と同様とした。結果を表6に示す。
(Example 5) Evaluation by enzyme reaction time A whipped mixture (dough) was prepared in the same manner as in Example 2 except that 1000 U of glyceroglycolipid-degrading enzyme was added to 1 kg of wheat flour. This dough was stored at 30 ° C. for 0 to 2 hours shown in Table 5, and then baked in an oven to produce a sponge cake. The evaluation results are shown in Table 5. The method for obtaining each evaluation item was the same as in Example 2.
Next, these sponge cakes were wrapped in wraps and stored at 4 ° C. for 5 days, and the moist feeling (tactile feeling and texture) with and without the enzyme was compared by a sensory test. The evaluation method of the sensory test was the same as in Example 2. The results are shown in Table 6.

(比較例4)
グリセロ糖脂質分解酵素を配合しなかった以外は、実施例5と同様にして、スポンジケーキを製造した。評価結果を表5、6に示す。
(Comparative Example 4)
A sponge cake was produced in the same manner as in Example 5 except that no glyceroglycolipid degrading enzyme was added. The evaluation results are shown in Tables 5 and 6.

Figure 0006606130
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酵素配合の有無に関わらず、生地を保存することによる粘度の低下は見られたが、その他、生地における有意な差はなかった。そして、これらの生地を用いて焼成したスポンジケーキは、酵素配合の有無、および保存時間の長短によらず、良好であった。
食感(触感)も、焼成直後においては酵素配合の有無、生地保存時間の長短によらず、いずれもしっとりとしていた。
また、酵素配合の有無、および保存時間の長短による、ケーキ体積及び水分への大きな影響は見られなかった。
Regardless of whether or not the enzyme was blended, the viscosity decreased by storing the dough, but there were no other significant differences in the dough. And the sponge cake baked using these dough was good irrespective of the presence or absence of enzyme blending and the length of storage time.
The texture (tactile sensation) was moist immediately after baking, regardless of the presence or absence of enzyme blending and the length of the dough storage time.
Moreover, the big influence on the cake volume and the water | moisture content by the presence or absence of an enzyme formulation and the length of storage time was not seen.

Figure 0006606130
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酵素を配合しなかったスポンジケーキは、いずれも乾燥した食感で生地の保存時間による差異は無かった。一方、酵素を配合したスポンジケーキは、保存時間如何に関わらずしっとりしており、生地を保存せずとも、長期間にわたりしっとりとしたスポンジケーキが得られることがわかった。尚、パネラー3名は、各実施例、比較例においてそれぞれ同じスコアを付けた。   Sponge cakes without any enzyme were all dry and had no difference depending on the storage time of the dough. On the other hand, the sponge cake containing the enzyme was moist regardless of the storage time, and it was found that a moist sponge cake was obtained over a long period of time without storing the dough. Three panelists gave the same score in each example and comparative example.

以上より、本発明の製造方法により得られたスポンジケーキは、冷蔵庫のような非常に乾燥しやすい環境下で保存しても、味、風味、苦味、臭気は酵素を配合しない場合と同等でありながら、柔らかくしっとりした食感(触感)が保持でき、老化を抑制できることがわかった。   From the above, even if the sponge cake obtained by the production method of the present invention is stored in a very dry environment such as a refrigerator, the taste, flavor, bitterness and odor are the same as when no enzyme is added. However, it was found that a soft and moist texture (tactile sensation) can be maintained and aging can be suppressed.

(実施例6)乳化剤併用におけるグリセロ糖脂質分解酵素のパン老化抑制効果
パンにおけるグリセロ糖脂質分解酵素の老化抑止効果を検討した。
100重量%の強力小麦粉(カメリヤ:日清製粉社製)に対し、2重量%の生イースト(オリエンタル酵母工業社製)、6重量%の砂糖、2重量%の脱脂粉乳、2重量%の食塩、10ppmのビタミンC、65重量%の水および、小麦粉1kgに対して、参考例1で調製した100Uのグリセロ糖脂質分解酵素をミキサーボールに投入した。フックを使用し、低速3分、中速2分、高速1分混合し、ここでショートニング6重量%を投入し、更に、低速2分、中速3分、高速1分ミキシングを行い、生地を得た。生地の捏上げ温度は27℃とし、温度27度、湿度75%に管理した恒温室で90分間、発酵を行った後、350g又は、220gに分割・丸めを行った。
次いで、上記恒温室で20分間ベンチタイムを取った後、モルダーで成形し、350gの生地をワンローフ型、220gの生地6個をプルマン型にいれた。温度38℃、湿度85%に管理した恒温室内で、ワンローフ型は、生地が型上1.5cm、プルマン型は型下2.5cmとなるまでホイロを取った。ホイロ後の生地は、プルマン型にのみ蓋をし、210℃に設定した固定窯に入れ、ワンローフは22分間、プルマンは32分間焼成することでワンローフ食パンと角型食パンを得た。
焼成後、約2時間室温で冷却した後、レーザー体積計を用いてワンローフ食パンの体積を測定し、グリセロ糖脂質リパーゼ及び乳化剤を配合せずに製造したパン(比較例5)の体積を100%とした時の比体積を算出した。
(Example 6) Bread aging inhibitory effect of glyceroglycolipid degrading enzyme in combination with emulsifier The aging inhibitory effect of glyceroglycolipid degrading enzyme in bread was examined.
100% by weight of strong wheat flour (camellia: manufactured by Nisshin Flour Milling Co., Ltd.), 2% by weight of raw yeast (manufactured by Oriental Yeast Co., Ltd.), 6% by weight of sugar, 2% by weight of skim milk powder, 2% by weight of salt 100 U of glyceroglycolipid degrading enzyme prepared in Reference Example 1 was added to a mixer bowl with respect to 10 ppm of vitamin C, 65% by weight of water and 1 kg of wheat flour. Using a hook, mix at low speed 3 minutes, medium speed 2 minutes, high speed 1 minute, add 6% by weight of shortening, and mix at low speed 2 minutes, medium speed 3 minutes, high speed 1 minute, Obtained. The dough was raised at a temperature of 27 ° C. and fermented for 90 minutes in a thermostatic chamber controlled at a temperature of 27 ° C. and a humidity of 75%, and then divided and rounded to 350 g or 220 g.
Next, after taking a bench time for 20 minutes in the temperature-controlled room, molding was performed with a molder, and 350 g of dough was put into a one loaf type, and 6 pieces of 220 g of dough were put into a pullman type. In a temperature-controlled room controlled at a temperature of 38 ° C. and a humidity of 85%, the one loaf type was removed until the fabric was 1.5 cm above the mold and the Pullman type was 2.5 cm below the mold. The dough after the proof was covered only in the pullman type, put in a fixed kiln set at 210 ° C., and the one loaf was baked for 22 minutes and the pullman was baked for 32 minutes to obtain a one loaf bread and a square bread.
After baking, after cooling at room temperature for about 2 hours, the volume of the one loaf bread was measured using a laser volume meter, and the volume of bread (Comparative Example 5) produced without blending glyceroglycolipid lipase and emulsifier was 100%. The specific volume was calculated.

角型食パンは、焼成後、約2時間室温で冷却した後、袋詰めし、翌日パンスライサーを用いて、厚さ20mmにスライスした。焼成1日後及び4日後の角型食パンを、レオメー
ターを用い、直径30mmの円形プランジャーで10mm圧縮した時の応力で硬さを評価した。測定は5枚ずつ行い、最小値と最大値を除いた3枚の平均値を算出した。
After baking, the square bread was cooled at room temperature for about 2 hours, then packed in bags, and sliced to a thickness of 20 mm using a bread slicer the next day. The hardness of the square bread after 1 day and 4 days after baking was evaluated by the stress when it was compressed 10 mm with a circular plunger with a diameter of 30 mm using a rheometer. The measurement was performed five sheets at a time, and the average value of three sheets excluding the minimum value and the maximum value was calculated.

スライスした角型食パンは、しっとり感(触感および食感)を官能により評価した。評価は以下の基準に基づき、5段階で評価した。尚、無添加区とは比較例5を示す。
1:無添加区に比べ乾燥している
2:無添加区に比べ乾燥している
3:無添加区と同等なしっとり感
4:無添加区に比べややしっとりしている
5:無添加区に比べ明らかにしっとりしている

評価結果を表7に示す。
The sliced square bread was evaluated by a sensory evaluation for a moist feeling (feel and texture). Evaluation was based on the following criteria, and was evaluated in five stages. In addition, the additive-free section shows Comparative Example 5.
1: Dry compared to the additive-free zone
2: Dry compared to the additive-free zone
3: Moist feeling equivalent to the additive-free zone
4: Slightly moist compared to the additive-free zone
5: It is clearly moist compared to the additive-free zone

Table 7 shows the evaluation results.

(実施例7)
乳化剤として、グリセリン脂肪酸エステル(エマルジーMM100、理研ビタミン社製)を0.3重量%配合した以外は、実施例6と同様にパンを製造した。評価結果を表7に示す。
(Example 7)
A bread was produced in the same manner as in Example 6 except that 0.3% by weight of glycerin fatty acid ester (Emulsy MM100, manufactured by Riken Vitamin Co., Ltd.) was blended as an emulsifier. Table 7 shows the evaluation results.

(実施例8)
乳化剤として、ジアセチル酒石酸モノグリセリド(PANODANA2020、ダニスコ社製)を0.3重量%配合した以外は、実施例6と同様にパンを製造した。評価結果を表7に示す。
(Example 8)
Bread was produced in the same manner as in Example 6 except that 0.3% by weight of diacetyltartaric acid monoglyceride (PANODANA2020, manufactured by Danisco Co.) was blended as an emulsifier. Table 7 shows the evaluation results.

(比較例5)
グリセロ糖脂質分解酵素を配合しない以外、実施例6と同様にパンを製造した。評価結果を表7に示す。
(Comparative Example 5)
Bread was produced in the same manner as in Example 6 except that glyceroglycolipid-degrading enzyme was not blended. Table 7 shows the evaluation results.

(比較例6)
乳化剤として、グリセリン脂肪酸エステル(エマルジーMM100、理研ビタミン社製
)を0.3重量%配合した以外、比較例5と同様にパンを製造した。評価結果を表7に示す。
(Comparative Example 6)
Bread was produced in the same manner as in Comparative Example 5 except that 0.3% by weight of glycerin fatty acid ester (Emulsy MM100, manufactured by Riken Vitamin Co., Ltd.) was added as an emulsifier. Table 7 shows the evaluation results.

(比較例7)
乳化剤として、ジアセチル酒石酸モノグリセリド(PANODANA2020、ダニス
コ社製)を0.3重量%配合した以外、比較例5と同様にパンを製造した。評価結果を表
7に示す。
(Comparative Example 7)
Bread was produced in the same manner as in Comparative Example 5, except that 0.3% by weight of diacetyltartaric acid monoglyceride (PANODANA2020, manufactured by Danisco Co.) was blended as an emulsifier. Table 7 shows the evaluation results.

Figure 0006606130
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グリセロ糖脂質分解酵素だけの配合でも、内相の柔らかさ、しっとり感が増加する効果が見られた。また、時間が経過してもその効果が比較的持続していることが分かった。更に、乳化剤を併用することで、より柔らかさ、しっとり感を維持することができた。   Even when only glyceroglycolipid-degrading enzyme was added, the softness and moist feeling of the internal phase increased. Moreover, it turned out that the effect is maintained comparatively even if time passes. Furthermore, the softness and moist feeling could be maintained by using the emulsifier together.

(実施例9)乳化剤併用におけるグリセロ糖脂質分解酵素の蒸し物モデル老化抑制効果
蒸すことで膨化させた食品における効果を検証するために、中華饅頭様の蒸し物モデル食品を用いて、グリセロ糖脂質分解酵素の効果を検討した。
使用する全小麦粉に対して、50重量%の強力小麦粉、50重量%の薄力小麦粉、10重量%の砂糖、3重量%のショートニング、3重量%の生イースト、1重量%の食塩、1重量%のベーキングパウダー、50重量%の水、および小麦粉1kgあたり500Uの参考例1で調製したグリセロ糖脂質分解酵素をミキサーボールに投入し、フックを使用し、低速で2分、中速で4分混合した。混合した生地を50gに分割し、丸めた後、40℃で
30分発酵させ、90℃、湿度100%の条件下で15分蒸すことで蒸し物モデル食品を製造した。
(Example 9) Steamed model aging inhibitory effect of glyceroglycolipid-degrading enzyme in combination with emulsifier In order to verify the effect on steamed food model foods swollen by steaming, glyceroglycolipid-degrading enzyme The effect of was examined.
50% strength flour, 50% strength flour, 10% sugar, 3% shortening, 3% fresh yeast, 1% salt, 1% based on the total flour used % Baking powder, 50% by weight of water, and 500 U / kg of wheat flour, the glyceroglycolipid-degrading enzyme prepared in Reference Example 1 was put into a mixer bowl, using a hook, 2 minutes at low speed, 4 minutes at medium speed Mixed. The mixed dough was divided into 50 g, rounded, fermented at 40 ° C. for 30 minutes, and steamed for 15 minutes at 90 ° C. and 100% humidity to produce a steamed model food.

製造後の体積をレーザー体積計で測定し、グリセロ糖脂質リパーゼ及び乳化剤を配合せずに製造した蒸し物モデル食品(比較例8)の体積を100%とした時の比体積を算出した。   The volume after production was measured with a laser volume meter, and the specific volume was calculated when the volume of the steamed model food (Comparative Example 8) produced without blending glyceroglycolipid lipase and emulsifier was 100%.

製造1日後及び5日後に、厚さ20mmに切断した蒸し物モデル食品を、レオメーターを用い、直径30mmの円形プランジャーで10mm圧縮した時の応力で硬さを評価した。測定は3個ずつ行い、平均値を算出した。   One day and five days after production, the hardness of the steamed food model food cut to a thickness of 20 mm was evaluated by using a rheometer and compressing it by 10 mm with a circular plunger having a diameter of 30 mm. Three measurements were performed, and the average value was calculated.

また、蒸し物モデル食品のしっとり感(触感および食感)を官能により評価した。評価は以下の基準に基づき、5段階で評価した。尚、無添加区とは比較例8を示す。
1:無添加区に比べ乾燥している
2:無添加区に比べ乾燥している
3:無添加区と同等なしっとり感
4:無添加区に比べややしっとりしている
5:無添加区に比べ明らかにしっとりしている

評価結果を表8に示す。
In addition, the moist feeling (tactile feeling and texture) of the steamed model food was evaluated by sensory evaluation. Evaluation was based on the following criteria, and was evaluated in five stages. In addition, the additive-free section shows Comparative Example 8.
1: Dry compared to the additive-free zone
2: Dry compared to the additive-free zone
3: Moist feeling equivalent to the additive-free zone
4: Slightly moist compared to the additive-free zone
5: It is clearly moist compared to the additive-free zone

The evaluation results are shown in Table 8.

(実施例10)
乳化剤として、グリセリン脂肪酸エステル(エマルジーMM100、理研ビタミン社製)0.3重量%配合した以外、実施例9と同様に蒸し物モデル食品を製造した。評価結果を表8に示す。
(Example 10)
A steamed model food was produced in the same manner as in Example 9 except that 0.3% by weight of glycerin fatty acid ester (Emulsy MM100, manufactured by Riken Vitamin Co., Ltd.) was added as an emulsifier. The evaluation results are shown in Table 8.

(比較例8)
グリセロ糖脂質分解酵素を添加しない以外、実施例9と同様に蒸し物モデル食品を製造した。評価結果を表8に示す。
(Comparative Example 8)
A steamed food model food was produced in the same manner as in Example 9 except that glyceroglycolipid degrading enzyme was not added. The evaluation results are shown in Table 8.

(比較例9)
グリセロ糖脂質分解酵素を添加しない以外、実施例10と同様に蒸し物モデル食品を製造した。評価結果を表8に示す。
(Comparative Example 9)
A steamed food model food was produced in the same manner as in Example 10 except that glyceroglycolipid degrading enzyme was not added. The evaluation results are shown in Table 8.

Figure 0006606130
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焼成だけでなく、蒸し工程により加熱を行う小麦粉膨化食品においても、グリセロ糖脂質分解酵素だけの配合で、内相の柔らかさ、しっとり感が増加する効果が見られた。また、時間が経過してもその効果が比較的持続していることが分かった。更に、乳化剤を併用することで、より柔らかさ、しっとり感を維持することができた。   In addition to baking, in the expanded food with wheat flour heated by a steaming process, the effect of increasing the softness and moist feeling of the inner phase was found by blending only glyceroglycolipidase. Moreover, it turned out that the effect is maintained comparatively even if time passes. Furthermore, the softness and moist feeling could be maintained by using the emulsifier together.

(実施例10)
グリセロ糖脂質とグリセロリン脂質に対する分解活性比が異なる、酵素が中種法食パンの老化に与える影響を検討した。
全小麦粉に対して、強力小麦粉70重量%、生イースト2重量%、ビタミンC10ppm、水40重量%および参考例1で調製したグリセロ糖脂質リパーゼを小麦粉1kgに対してグリセロ糖脂質分解活性100Uをミキサーボールに投入し、フックを使用し、低速3分、中速2分混合した。生地の捏上げ温度は24℃とし、温度27℃、湿度75%に管理した恒温室で4時間中種発酵を行った。この中種発酵の終了した生地を再びミキサーボールに投入し、さらに、強力小麦粉30重量%、食塩2重量%、砂糖6重量%、脱脂粉乳2重量% 、水25重量%を添加し低速3分、中速4分ミキシングした。ここでショートニング6重量部を投入し、フックを使用し、低速2
分、中速3分、高速3分ミキシングを行い、生地を得た。生地の捏上げ温度は27℃とし、温度27℃、湿度75%に管理した恒温室で30分間フロアタイムを取った後、実施例6と同様にプルマン食パンを製造し、焼成1日後及び4日後の角型食パンの硬さを、レオメーターを用
い測定した。数値は、グリセロ糖脂質リパーゼを添加せずに製造した比較例10の焼成1日後のパン硬さを100%とした時の相対値とした。結果を表10に示す。
(Example 10)
We investigated the effects of enzymes on the aging of middle-class breads, with different degradation activity ratios for glyceroglycolipid and glycerophospholipid.
70% by weight of strong wheat flour, 2% by weight of raw yeast, 10 ppm of vitamin C, 40% by weight of water and glyceroglycolipid lipase prepared in Reference Example 1 for 100 kg of flour It was thrown into the ball and mixed using a hook for 3 minutes at low speed and 2 minutes at medium speed. The dough was raised at a temperature of 24 ° C, and the medium seed fermentation was performed for 4 hours in a thermostatic chamber controlled at a temperature of 27 ° C and a humidity of 75%. The medium-type fermented dough is again put into the mixer bowl, and further added 30% by weight of strong wheat flour, 2% by weight of salt, 6% by weight of sugar, 2% by weight of skimmed milk powder and 25% by weight of water, and 3 minutes at low speed , Mixing at medium speed for 4 minutes. Here we put 6 parts by weight of shortening, use hooks, slow 2
Mixing was carried out for 3 minutes, medium speed 3 minutes, and high speed 3 minutes to obtain a dough. The dough is raised at a temperature of 27 ° C., and after taking a floor time of 30 minutes in a temperature-controlled room controlled at a temperature of 27 ° C. and a humidity of 75%, pullman bread is produced in the same manner as in Example 6, and 1 day and 4 days after baking. The hardness of the square bread was measured using a rheometer. The numerical value was a relative value when the bread hardness 1 day after baking in Comparative Example 10 produced without adding glyceroglycolipid lipase was taken as 100%. The results are shown in Table 10.

(実施例11)
小麦粉1kgに対して、以下の参考例2で得られた酵素を用いた以外は、実施例10と同
様にしてパンを製造し、硬さを測定した。結果を表10に示す。
(Example 11)
Bread was produced in the same manner as in Example 10 except that the enzyme obtained in Reference Example 2 below was used for 1 kg of wheat flour, and the hardness was measured. The results are shown in Table 10.

(参考例2)グリセロ糖脂質分解酵素(LipopanF、グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素)の精製
LipopanF(ノボザイムズ社製)に1M硫酸アンモニウム溶液を加えて酵素を抽出させた後、沈殿を除去して、LipopanFの上澄み液を得た。LipopanFの上澄み液を、予め1M硫酸アンモニウム溶液で平衡化したToyopearl Butyl 650M(プレパック直径2.2cm×長さ20cm、東ソー社製)に1分間あたり2mLの流速でチャージした。1M硫酸アンモニウム溶液160mlで洗浄後、1M硫酸アンモニウム溶液から水の直線濃度勾配(640mL)にて該カラムにチャージした成分を溶出させ、硫酸アンモニウム濃度0mMの水画分を分取した。12.5%のポリアクリルアミドゲルを用いたSDS-PAGE電気泳動法にて、硫酸アンモニウム濃度0mMの水画分が単一バンドであることを確認後、透析膜(分子量分画14,000、三光社製)を用いて水(4L)に対して3回透析を行いグリセロ糖脂質リパーゼ(LipopanF)精製液とした。
(Reference Example 2) Purification of glyceroglycolipid degrading enzyme (Lipopan F, an enzyme having glyceroglycolipid degrading activity)
A 1M ammonium sulfate solution was added to Lipopan F (manufactured by Novozymes) to extract the enzyme, and then the precipitate was removed to obtain a Lipopan F supernatant. The Lipopan F supernatant was charged at a flow rate of 2 mL per minute into Toyopearl Butyl 650M (prepack diameter 2.2 cm × length 20 cm, manufactured by Tosoh Corporation) previously equilibrated with 1 M ammonium sulfate solution. After washing with 160 ml of 1M ammonium sulfate solution, components charged in the column were eluted from the 1M ammonium sulfate solution with a linear concentration gradient of water (640 mL), and a water fraction having an ammonium sulfate concentration of 0 mM was collected. After confirming that the water fraction with an ammonium sulfate concentration of 0 mM is a single band by SDS-PAGE electrophoresis using 12.5% polyacrylamide gel, a dialysis membrane (molecular weight fraction 14,000, Sankosha) The product was dialyzed three times against water (4 L) to obtain a purified glyceroglycolipid lipase (Lipopan F) solution.

参考例1および参考例2で得られたグリセロ糖脂質リパーゼ精製液の分解活性を表9に示す。グリセロ糖脂質分解活性、グリセロリン脂質分解活性及びトリグリセリド分解活性は、上記の方法にしたがって測定を行った。表9の数値は、各グリセロ糖脂質リパーゼ精製液のpH6におけるグリセロ糖脂質分解活性を100%としたときのグリセロリン脂質およびトリグリセリドの分解活性の相対値(%)である。   Table 9 shows the degradation activity of the purified glyceroglycolipid lipase obtained in Reference Example 1 and Reference Example 2. The glyceroglycolipid degrading activity, glycerophospholipid degrading activity and triglyceride degrading activity were measured according to the above methods. The numerical values in Table 9 are relative values (%) of the glycerophospholipid and triglyceride decomposition activities when the glyceroglycolipid decomposition activity at pH 6 of each purified glyceroglycolipid lipase solution is defined as 100%.

Figure 0006606130
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(比較例10)
グリセロ糖脂質分解酵素を添加しない以外は、実施例10と同様にパンを製造し、硬さを測定した。結果を表10に示す。
(Comparative Example 10)
Bread was produced in the same manner as in Example 10 except that glyceroglycolipidase was not added, and the hardness was measured. The results are shown in Table 10.

Figure 0006606130
Figure 0006606130

グリセロ糖脂質分解活性を有するいずれの酵素の配合においても、内相の柔らかさが増加する効果が見られた。また、時間が経過してもその効果が比較的持続していることが分かった。特に、グリセロリン脂質に比べ、グリセロ糖脂質に対する分解活性が高い酵素を配合した時に、その効果が顕著であった。すなわち、グリセロリン脂質よりもグリセロ糖脂質に対する基質選択性が高い酵素を用いることで、より柔らかくかつ、より柔らかさが長持ちする小麦粉膨化食品を製造することが可能であることが判明した。   The effect of increasing the softness of the internal phase was observed in any enzyme formulation having glyceroglycolipid degradation activity. Moreover, it turned out that the effect is maintained comparatively even if time passes. In particular, when an enzyme having a higher degrading activity on glyceroglycolipid was blended than glycerophospholipid, the effect was remarkable. That is, it has been found that by using an enzyme having a higher substrate selectivity for glyceroglycolipid than glycerophospholipid, it is possible to produce a wheat flour expanded food that is softer and has a longer softness.

Claims (10)

小麦粉を含むケーキの原材料にグリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の3倍以上の酵素(但し、米糠として配合する場合を除く)を配合してケーキを製造することを特徴とする、ケーキの製造方法。 The cake is characterized by comprising a cake containing wheat flour and an enzyme having a glyceroglycolipid-degrading activity that is at least three times the glycerophospholipid-degrading activity (except when blended as rice bran). Production method. ケーキ中の小麦粉の含有量が10〜90重量%であることを特徴とする、請求項1に記載のケーキの製造方法。The method for producing a cake according to claim 1, wherein the content of the flour in the cake is 10 to 90% by weight. 該酵素のグリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の10倍以上であることを特徴とする、請求項1又は2に記載のケーキの製造方法。 The method for producing a cake according to claim 1 or 2 , wherein the glyceroglycolipid-degrading activity of the enzyme is 10 times or more of the glycerophospholipid-degrading activity. さらに、乳化剤を配合することを特徴とする、請求項1〜3のいずれか1項に記載のケーキの製造方法。 Furthermore, an emulsifier is mix | blended, The manufacturing method of the cake of any one of Claims 1-3 characterized by the above-mentioned. 前記酵素がトリグリセリド分解活性を有する、請求項1〜のいずれか1項に記載のケーキの製造方法。 The method for producing a cake according to any one of claims 1 to 4 , wherein the enzyme has triglyceride-degrading activity. 小麦粉を含むケーキの原材料にグリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の3倍以上の酵素(但し、米糠として配合する場合を除く)を配合したケーキを保存することを特徴とする、ケーキの保存方法。 Preservation of cakes characterized by preserving cakes containing wheat flour-containing cakes with glyceroglycolipid degradation activity more than three times the glycerophospholipid degradation activity (except when blended as rice bran) Method. ケーキ中の小麦粉の含有量が10〜90重量%であることを特徴とする、請求項6に記載のケーキの保存方法。The method for preserving a cake according to claim 6, wherein the content of the flour in the cake is 10 to 90% by weight. 該酵素のグリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の10倍以上であることを特徴とする、請求項6又は7に記載のケーキの保存方法。 The method for preserving cakes according to claim 6 or 7 , wherein the glyceroglycolipid-degrading activity of the enzyme is 10 times or more of the glycerophospholipid-degrading activity. さらに、原材料に乳化剤を配合することを特徴とする、請求項6〜8のいずれか1項に記載のケーキの保存方法。 Furthermore, the emulsifier is mix | blended with a raw material, The preservation | save method of the cake of any one of Claims 6-8 characterized by the above-mentioned. 前記酵素がトリグリセリド分解活性を有する、請求項のいずれか1項に記載のケーキの保存方法。 The method for preserving a cake according to any one of claims 6 to 9 , wherein the enzyme has triglyceride-degrading activity.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6147134A (en) * 1984-08-10 1986-03-07 協和醗酵工業株式会社 Premix
JPH078158A (en) * 1993-06-23 1995-01-13 Ritsu Yasutake Novel bread and production thereof
JPH10136876A (en) * 1996-11-04 1998-05-26 Tanaka Sangyo Kk Red rice chiffon cake
JP3856959B2 (en) * 1998-08-10 2006-12-13 大和化成株式会社 Novel quality improvement and storage methods in flour food production
US20040101928A1 (en) * 2001-02-23 2004-05-27 Noriko Tsutsumi Lipolytic enzyme genes
JP2003325140A (en) * 2002-05-09 2003-11-18 Taiyo Kagaku Co Ltd Quality-improving agent of confectionery or bread, and confectionery or bread
GB0405637D0 (en) * 2004-03-12 2004-04-21 Danisco Protein
WO2006025112A1 (en) * 2004-08-30 2006-03-09 Powder Techno Corporation Ltd. Microwave cooked powdery premix composition for sponge cake
JP4519717B2 (en) * 2005-05-10 2010-08-04 サンスター株式会社 Food composition
US7678403B2 (en) * 2005-07-15 2010-03-16 Crm Ip Llc Whole grain non-dairy milk production, products and use
AU2007217732B2 (en) * 2006-02-23 2012-02-02 Dsm Ip Assets B.V. Novel Lipases and uses thereof
WO2008093720A1 (en) * 2007-01-30 2008-08-07 Mitsubishi-Kagaku Foods Corporation Glyceroglycolipid lipase
CA2716692A1 (en) * 2008-02-29 2009-09-03 Dsm Ip Assets B.V. Lipases with high specificity towards short chain fatty acids and uses thereof

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