JP2012152128A - Method for producing flour product - Google Patents

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JP2012152128A JP2011013314A JP2011013314A JP2012152128A JP 2012152128 A JP2012152128 A JP 2012152128A JP 2011013314 A JP2011013314 A JP 2011013314A JP 2011013314 A JP2011013314 A JP 2011013314A JP 2012152128 A JP2012152128 A JP 2012152128A
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glyceroglycolipid
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Tomosada Masuko
朝貞 増子
Tetsuya Fukazawa
徹也 深沢
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for obtaining a flour product, such as baked bread, which has excellent dough physical properties and an improved volume.SOLUTION: The flour product is produced by using a sugar breakdown enzyme and/or an oxidase as a compounding ingredient, together with a glycoglycerolipid lipase having glycoglycerolipid cracking activity three times or much greater than glycerophospholipid cracking activity.

Description

本発明は、パンなどの小麦粉製品の製造方法、およびパンなどの小麦粉製品に関するものである。   The present invention relates to a method for producing a flour product such as bread, and a flour product such as bread.

パンは、小麦粉に油脂、乳成分、糖類、食塩、水、酵母などを配合し、一定時間捏ねたのちに発酵させ、分割成形し焼成することにより製造されるが、パンの品質を高めるために、種々の酵素を添加することが提案されている。   Bread is made by blending oils and fats, milk ingredients, sugars, salt, water, yeast, etc. into wheat flour, kneading for a certain period of time, fermenting, dividing and baking, to improve the quality of bread It has been proposed to add various enzymes.

例えば、特許文献1では、α−アミラーゼとβ−アミラーゼを添加することでパンの食感がソフトになると報告されている。また、特許文献2では、特定の穀物蛋白質部分分解物と、アミラーゼ、リパーゼおよびアスコルビン酸オキシダーゼから選択される少なくとも1 種の酵素剤と、ヘミセルラーゼとを含むパン用品質改良剤が開示されている。さらに、特許文献3では、アルギン酸プロピレングリコールエステルを特定の物性の油脂に分散し、これにグルコースオキシダーゼを加えた製パン用油脂組成物が、パンのソフトさに悪影響を与えず、パン焼成後に生じる縮みや表面のしわ、凹みを効果的に防止し、外観を良好に保つことができることが開示されている。しかしながら、これらの文献に開示されている酵素を使用してもパンの体積増加は不十分であった。   For example, Patent Document 1 reports that the food texture of bread becomes soft by adding α-amylase and β-amylase. Patent Document 2 discloses a bread quality improving agent comprising a specific grain protein partial degradation product, at least one enzyme selected from amylase, lipase and ascorbate oxidase, and hemicellulase. . Furthermore, in Patent Document 3, an oil and fat composition for breadmaking in which propylene glycol alginate is dispersed in an oil and fat having specific physical properties and glucose oxidase is added thereto does not adversely affect the softness of bread and is produced after baking. It is disclosed that shrinkage, surface wrinkles, and dents can be effectively prevented and the appearance can be kept good. However, even when the enzymes disclosed in these documents were used, the increase in bread volume was insufficient.

一方、他のパン改質剤としてグリセロ糖脂質やグリセロリン脂質などの極性脂質を分解する酵素の使用も知られている(特許文献4〜6)。小麦粉中における極性脂質の含量はグリセロリン脂質に比べ、圧倒的にグリセロ糖脂質が多いことが知られているが、これら文献記載の酵素は、グリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の2倍以下の酵素であった。
また、グリセロ糖脂質分解活性対グリセロリン脂質分解活性の比が異なると、単独または上記酵素と併用した時の体積増加効果は異なり、十分な効果が得られないこともあった(特許文献7,8)。そのため、基質の選択性が大きく異なるグリセロ糖脂質リパーゼを上記酵素と用いた時の効果は予期できないものであった。
On the other hand, the use of enzymes that degrade polar lipids such as glyceroglycolipids and glycerophospholipids as other bread modifiers is also known (Patent Documents 4 to 6). It is known that the content of polar lipids in wheat flour is overwhelmingly higher than that of glycerophospholipids. However, the enzymes described in these documents have a glyceroglycolipid degradation activity that is less than twice that of glycerophospholipid degradation activity. It was an enzyme.
In addition, if the ratio of glyceroglycolipid degradation activity to glycerophospholipid degradation activity is different, the effect of increasing the volume when used alone or in combination with the above enzyme is different, and sufficient effects may not be obtained (Patent Documents 7 and 8). ). Therefore, the effect of using glyceroglycolipid lipase with greatly different substrate selectivity with the above enzyme was unexpected.

特開2010−11798号公報JP 2010-11798 A 特開2007−325515号公報JP 2007-325515 A 特開2010−98993号公報JP 2010-98993 A 特表2000−507458号公報Special Table 2000-507458 特表2005−508609号公報JP 2005-508609 A 特表2005−525818号公報JP 2005-525818 A 特表2006−506960号公報JP 2006-506960 A 特表2007−528732号公報Special table 2007-528732

本発明は良好な生地物性を有し、かつ従来に比べ、ボリュームアップ(体積増加)がみられる焼成パンなどの小麦粉製品を得る方法、およびボリュームアップした焼成パンなどの小麦粉製品を提供することを課題とする。 The present invention provides a method for obtaining a flour product such as a baked bread having good dough physical properties and an increase in volume (volume increase) compared to the conventional one, and a flour product such as a baked bread having an increased volume. Let it be an issue.

本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、糖質分解酵素および/または酸化酵素に、グリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の3倍以上であるグリセロ糖脂質リパーゼを配合することにより、良好な生地物性を有し、かつ単一の酵素剤だけでは得られなかったボリュームアップした焼成パンが得られることを見出し、本発明を完成するに至った。   As a result of intensive studies to solve the above-mentioned problems, the present inventors have found that glyceroglycolipids having a glyceroglycolipid-degrading activity that is at least three times that of glycerophospholipid-degrading activity for glucolytic enzymes and / or oxidases. By blending lipase, it was found that a volume-increased baked bread having good dough physical properties that could not be obtained with only a single enzyme agent was obtained, and the present invention was completed.

すなわち、本発明は、グリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の3倍以上であるグリセロ糖脂質リパーゼとともに、糖質分解酵素および/または酸化酵素を配合剤として用いることを特徴とする小麦粉製品の製造方法および該グリセロ糖脂質リパーゼ、糖質分解酵素および/または酸化酵素を用いて改質されたことを特徴とする小麦粉製品に存する。   That is, the present invention relates to a flour product characterized in that a glyceroglycolipid lipase having a glyceroglycolipid degrading activity that is at least three times the glycerophospholipid degrading activity, and a carbohydrase and / or oxidase as a compounding agent. The present invention resides in a wheat product characterized in that it is modified using the production method and the glyceroglycolipid lipase, carbohydrase and / or oxidase.

本発明によれば、糖質分解酵素および/または酸化酵素にグリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の3倍以上であるグリセロ糖脂質リパーゼを配合することにより、良好な生地物性を有し、かつ単一の酵素剤だけでは得られなかったボリュームアップした食パン、バラエティパン、ロールパン、フランスパン、デニッシュパン、ペストリー、スイートロール、クロワッサン、スコーン、ベーグル、ドーナッツ、ナン、ピロシキ、中華まんじゅう、ピザ、マフィン、ビスケット、クラッカー、菓子パン、パン粉等の小麦粉製品などの小麦粉製品を得る方法およびボリュームアップした小麦粉製品を提供することができる。 According to the present invention, by adding a glyceroglycolipid lipase having a glyceroglycolipid degrading activity of 3 times or more of the glycerophospholipid degrading activity to the saccharide-degrading enzyme and / or oxidase, it has good dough properties, And the volume-enhanced bread, variety bread, roll bread, French bread, Danish bread, pastry, sweet roll, croissant, scone, bagel, donut, naan, piroshki, Chinese bun, pizza, A method for obtaining flour products such as muffins, biscuits, crackers, confectionery breads, flour products such as bread crumbs, and flour products with increased volume can be provided.

以下に記載する構成要件の説明は、本発明の実施態様の一例(代表例)であり、これらの内容に特定はされない。
本発明における小麦粉製品とは、パン、洋菓子、和菓子、麺類等の小麦粉を含有する食品である。特に小麦粉を主成分として含有する食品に好ましく用いられる。また、本発明は、特に発酵工程を要するパンや菓子などの食品の製造に優れた効果を発現する。本発明における小麦粉製品の一例としてパンについて説明する。パン以外の小麦粉製品も同様にして製造することができる。
The description of the constituent requirements described below is an example (representative example) of the embodiment of the present invention, and the contents are not specified.
The flour product in the present invention is a food containing flour such as bread, confectionery, Japanese confectionery, and noodles. In particular, it is preferably used for foods containing flour as a main component. Moreover, this invention expresses the effect excellent in manufacture of foodstuffs, such as bread and confectionery which require a fermentation process especially. A bread is demonstrated as an example of the flour product in this invention. Flour products other than bread can be produced in the same manner.

本発明におけるパンとは、小麦粉に油脂、乳成分、糖類、食塩、水、酵母などを配合し、一定時間捏ねたのちに発酵させ、必要に応じて分割成形し、加熱(焼成、蒸す、茹でる及び/又は揚げる)されるものをいい、食パン、バラエティパン、ロールパン、フランスパン、デニッシュパン、ペストリー、スイートロール、クロワッサン、スコーン、ベーグル、ドーナッツ、ナン、ピロシキ、中華まんじゅう、ピザ、マフィン、ビスケット、クラッカー、菓子パン、パン粉などが挙げられる。   The bread in the present invention is a mixture of fats and oils, milk ingredients, sugars, salt, water, yeast, etc. in wheat flour, kneaded for a certain period of time, fermented, dividedly shaped as necessary, and heated (baked, steamed, boiled) And / or fried), bread, variety bread, roll bread, French bread, Danish bread, pastries, sweet rolls, croissants, scones, bagels, donuts, naan, piroshki, Chinese buns, pizza, muffins, biscuits, Examples include crackers, sweet buns, and bread crumbs.

本発明のパンの原材料としては、小麦粉のほかに、油脂、乳成分、糖類、食塩、水、酵母、イーストフードなどが挙げられ、必要に応じて添加剤が用いられる。各原材料は、食品用として市販されているものを用いることができる。   In addition to wheat flour, the raw material for bread of the present invention includes fats and oils, milk components, sugars, salt, water, yeast, yeast food and the like, and additives are used as necessary. As each raw material, those commercially available for food can be used.

小麦粉としては、強力粉、準強力粉、中力粉、薄力粉、高蛋白粉、特等粉、一等粉、二等粉、全粒粉など製パンに用いられる粉が挙げられ、その小麦の品種、等級を問わず、どのような小麦粉を用いてもよい。これらの小麦粉は、1種のみを用いても2種以上用いて混合したものでもよい。また、小麦粉に加えて、ライ麦、オーツ麦、大麦、米粉等の小麦以外の穀物を用いてもよい。また、小麦以外の穀物は上記に限定されるものではない。小麦粉製品中の小麦粉の含有量は、通常1〜90重量%、好ましくは10〜80重量%、更に好ましくは、20〜70重量%である。小麦粉の含有量が少なすぎる場合は、生地形成が困難となる傾向があり、余りにも多い場合は、生地が硬く、機械耐性が低下する傾向がある。   Wheat flour includes strong flour, semi-strong flour, medium strength flour, thin flour, high protein flour, special flour, first flour, second flour, whole wheat flour, etc. Any flour may be used. These flours may be used alone or in combination of two or more. In addition to wheat flour, grains other than wheat such as rye, oats, barley, and rice flour may be used. Moreover, grains other than wheat are not limited to the above. The content of flour in the flour product is usually 1 to 90% by weight, preferably 10 to 80% by weight, and more preferably 20 to 70% by weight. When the content of flour is too small, dough formation tends to be difficult, and when too large, the dough tends to be hard and mechanical resistance tends to decrease.

油脂としては、乳脂、魚鯨油などの動物性油脂、ヤシ油、パーム油、カカオ脂、ゴマ油、サフラワー油、大豆油、トウモロコシ油、菜種油、ひまわり油、綿実油、落花生油、オリーブ油などの植物性油脂、これらを含有する動植物性油脂、これら動植物性油脂の硬化、分別、エステル交換等を施した加工油脂などが挙げられる。これらの油脂は、1種のみを用いてもよいし、2種以上を混合して用いてもよい。   As fats and oils, animal fats such as milk fat and fish whale oil, coconut oil, palm oil, cacao butter, sesame oil, safflower oil, soybean oil, corn oil, rapeseed oil, sunflower oil, cottonseed oil, peanut oil, olive oil and other vegetable oils Fats and oils, animal and vegetable oils and fats containing them, processed oils and fats that have been cured, fractionated, transesterified and the like of these animal and vegetable oils and the like. Only 1 type may be used for these fats and oils, and 2 or more types may be mixed and used for them.

糖類としては、砂糖、異性化糖、麦芽糖、乳糖、ブドウ糖、果糖、キシロース、水あめ、蜂蜜、メープルシロップ、カップリングシュガー、パラチノース、イソマルトオリゴ糖、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、乳果オリゴ糖、キシロオリゴ糖、ソルビトール、マンニトール、マルチトール、キシリトール、パラチニット、エリスリトール及び還元澱粉糖化物などが挙げられる。これらの糖類は、1種のみを用いてもよいし、2種以上を混合して用いてもよい。   As sugars, sugar, isomerized sugar, maltose, lactose, glucose, fructose, xylose, syrup, honey, maple syrup, coupling sugar, palatinose, isomaltoligosaccharide, fructooligosaccharide, galactooligosaccharide, whey oligosaccharide, xylooligosaccharide Sorbitol, mannitol, maltitol, xylitol, palatinit, erythritol, and reduced starch saccharified product. These saccharides may be used alone or in combination of two or more.

乳成分としては、生乳、全脂肪粉乳、脱脂粉乳、全脂練乳などの練乳、バター、バターファット、生クリーム、濃縮クリーム、チーズ、ヨーグルトなどが挙げられる。   Examples of the milk component include raw milk, full fat powdered milk, skim milk powder, condensed milk such as whole fat condensed milk, butter, butterfat, fresh cream, concentrated cream, cheese, yogurt and the like.

食塩としては、種類、製造方法、由来は特に限定されず、通常飲食用に用いられるものであればよい。
水は、産地、硬度、精製度、微量成分等は特に限定されず、飲食用に用いられるものであればよい。
As a salt, a kind, a manufacturing method, and origin are not specifically limited, What is necessary is just used normally for eating and drinking.
There are no particular restrictions on the production area, hardness, degree of purification, trace components, etc. of water, so long as it is used for eating and drinking.

酵母としては、通常パンに用いる酵母であれば、生イーストでもドライイーストのような培養された酵母でも、果実や植物由来の酵母菌などの天然酵母を用いてもよく、特に限定されるものではない。   As yeast, as long as it is usually used for bread, natural yeast such as fresh yeast or dried yeast, fruit or plant-derived yeast may be used, and is not particularly limited. Absent.

パンの材料には、必要に応じてその他の添加剤を含有していてもよく、その他の添加剤としては、乳化剤、後述のグリセロ糖脂質リパーゼや糖質分解酵素および酸化酵素以外の酵素(例えば、タンパク分解酵素、脂質分解酵素、リン脂質分解酵素)、イーストフード、生地改良剤、香料、色素、果汁、カカオ、ドライフルーツ類、ハーブ類、ナッツ類等が挙げられる。   The bread material may contain other additives as necessary. Examples of the other additives include emulsifiers, enzymes other than glyceroglycolipid lipase, glycolytic enzymes, and oxidases described below (for example, , Proteolytic enzyme, lipolytic enzyme, phospholipid degrading enzyme), yeast food, dough improving agent, flavor, pigment, fruit juice, cacao, dried fruits, herbs, nuts and the like.

一般的なパン生地中の水の配合量は小麦粉100重量部に対して0〜90重量部であり、好ましくは0〜80重量部、更に好ましくは0〜75重量部である。水の配合量が多すぎると生地の付着性が増加し、作業性が低下する傾向がある。
酵母の含有量は、小麦粉100重量部に対して通常生イーストでは0〜5重量部であり、好ましくは1〜3重量部である。酵母が少ないと発酵に時間を要する傾向にあり、多すぎるとパンの風味が低下する傾向がある。
食塩の含有量は、小麦粉100重量部に対して通常0〜3重量部であり、好ましくは1〜2重量部が好ましい。食塩の配合量が少なすぎると生地が緩く、パンの風味が低下する傾向にあり、多すぎると塩味が強すぎる傾向にある。
糖類の含有量は、小麦粉100重量部に対して通常0〜50重量部であり、好ましくは0〜40重量部、更に好ましくは0〜30重量部である。糖類の含有量が多すぎると、酵母の発酵を阻害し、パンの甘味が強くなる傾向がある。
油脂の含有量は、小麦粉100重量部に対して通常0〜150重量部であり、好ましくは0〜100重量部である。油脂が多すぎると、生地の付着性が増加し、風味が低下する傾向がある。
The amount of water in general bread dough is 0 to 90 parts by weight, preferably 0 to 80 parts by weight, and more preferably 0 to 75 parts by weight with respect to 100 parts by weight of flour. If the amount of water is too large, the adhesion of the dough increases and the workability tends to decrease.
The yeast content is usually 0 to 5 parts by weight, preferably 1 to 3 parts by weight for fresh yeast with respect to 100 parts by weight of flour. If the amount of yeast is small, fermentation tends to take time, and if the amount is too large, the flavor of bread tends to decrease.
The salt content is usually 0 to 3 parts by weight, preferably 1 to 2 parts by weight, based on 100 parts by weight of flour. When the amount of salt is too small, the dough is loose and the bread flavor tends to be lowered, and when it is too much, the saltiness tends to be too strong.
The content of the saccharide is usually 0 to 50 parts by weight, preferably 0 to 40 parts by weight, and more preferably 0 to 30 parts by weight with respect to 100 parts by weight of the flour. When there is too much content of saccharides, it tends to inhibit yeast fermentation and increase the sweetness of bread.
The content of fats and oils is usually 0 to 150 parts by weight, preferably 0 to 100 parts by weight with respect to 100 parts by weight of flour. When there are too many fats and oils, the adhesiveness of dough increases and there exists a tendency for a flavor to fall.

本発明においては、上記のような原材料に対して、グリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の3倍以上であるグリセロ糖脂質リパーゼと糖質分解酵素および/または酸化酵素を配合させることを特徴とする。   In the present invention, a glyceroglycolipid lipase having a glyceroglycolipid degrading activity three times or more of the glycerophospholipid degrading activity, a carbohydrase and / or an oxidase is mixed with the raw materials as described above. And

該グリセロ糖脂質リパーゼは、動植物由来であっても、菌株由来であってもよいが、糸状菌から単離された物が好ましく、アスペルギルス属由来の物が更に好ましく、アスペルギルス・ジャポニクス由来の物が更に好ましい。遺伝子非組み換えであっても、遺伝子組み換えであってもよく、特に限定されない。また、該グリセロ糖脂質リパーゼは、精製したものでも、していないものでもよく、特に限定されるものではないが、製パンに悪影響を及ぼす可能性が有る物質を排除する点で精製されているものが好ましい。本発明に用いるグリセロ糖脂質リパーゼは、グリセロ糖脂質分解活性とグリセロリン脂質分解活性を有し、グリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の3倍以上、好ましくは5倍以上、より好ましくは10倍以上である。このようなグリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性に対して十分に高いグリセロ糖脂質リパーゼとしては、例えば、特開2008−206515号公報に記載のグリセロ糖脂質リパーゼが挙げられる。またグリセロ糖脂質リパーゼは、グリセロ糖脂質分解活性とグリセロリン脂質分解活性だけでなく、実質上、トリグリセリド分解活性をも有することが好ましい。   The glyceroglycolipid lipase may be derived from animals or plants or strains, but is preferably isolated from filamentous fungi, more preferably from Aspergillus genus, and from Aspergillus japonicus. Further preferred. There may be no gene recombination or gene recombination, and it is not particularly limited. The glyceroglycolipid lipase may be purified or not, and is not particularly limited, but is purified in that it eliminates substances that may adversely affect bread making. Those are preferred. The glyceroglycolipid lipase used in the present invention has glyceroglycolipid degradation activity and glycerophospholipid degradation activity, and the glyceroglycolipid degradation activity is 3 times or more, preferably 5 times or more, more preferably 10 times the glycerophospholipid degradation activity. That's it. Examples of the glyceroglycolipid lipase having such a high glyceroglycolipid degrading activity relative to the glycerophospholipid degrading activity include glyceroglycolipid lipases described in JP-A-2008-206515. The glyceroglycolipid lipase preferably has not only glyceroglycolipid degrading activity and glycerophospholipid degrading activity but also substantially triglyceride degrading activity.

また、小麦粉製品の生地の多くはpH4〜7であり、この条件下でグリセロ糖脂質及びグリセロリン脂質に対して高い活性を有することが好ましい。そのため、至適pHにおけるグリセロ糖脂質分解活性を100%とした時、pH4〜7におけるグリセロ糖脂質分解活性が50%以上、好ましくは60%以上、より好ましくは70%以上であり、至適pHにおけるグリセロリン脂質分解活性を100%とした時、pH4〜7におけるグリセロリン脂質分解活性が50%以上、好ましくは60%以上である酵素が好ましい。  In addition, most of the dough of the flour product has a pH of 4 to 7, and preferably has high activity against glyceroglycolipid and glycerophospholipid under these conditions. Therefore, when the glyceroglycolipid degradation activity at the optimum pH is 100%, the glyceroglycolipid degradation activity at pH 4 to 7 is 50% or more, preferably 60% or more, more preferably 70% or more. An enzyme having a glycerophospholipid degradation activity at a pH of 4 to 7 is 50% or more, preferably 60% or more, when the glycerophospholipid degradation activity in is 100%.

原材料に対する該グリセロ糖脂質リパーゼの配合量は、小麦粉1kgに対してグリセロ糖脂質分解活性が通常1ユニット以上、好ましくは10ユニット以上、より好ましくは50ユニット以上、通常2,000ユニット以下、好ましくは1,000ユニット以下、より好ましくは500ユニット以下である。少なすぎると酵素の効果が十分に発揮できない場合があり、多すぎると焼成パンのボリュームが小さくなる場合があり好ましくない。   The blending amount of the glyceroglycolipid lipase with respect to the raw material is usually 1 unit or more, preferably 10 units or more, more preferably 50 units or more, usually 2,000 units or less, preferably 2,000 units or less, preferably 1 kg of wheat flour. 1,000 units or less, more preferably 500 units or less. If the amount is too small, the effect of the enzyme may not be sufficiently exhibited. If the amount is too large, the volume of the baked bread may be reduced, which is not preferable.

グリセロ糖脂質リパーゼのグリセロ糖脂質分解活性は下記の方法により測定することができる。すなわち、予め37℃に加温した4wt%Triton X−100(Sigma−Aldrich Japan株式会社製)水溶液(50mL)にジガラクトシルジアシルグリセロール(DGDG)(Sigma−AldrichJapan株式会社製)(1.0g)を少しずつ加えて完全に溶解するまで攪拌する。この基質溶液(210μL)および400mM MOPS(ナカライテスク株式会社製) pH 6緩衝液(30μL)の混合液を37℃で5分間保温したのち、酵素溶液(30μL)を加え均一に分散させたのち、37℃で10分間保温する。この反応液に1N塩酸(30μL)を加え酵素反応を停止させたのち、20μLを別の試験管に移す。この溶液をデタミナーNEFA755(協和メディックス株式会社製)で比色定量する。1分間に1μmolの遊離脂肪酸を生じさせる酵素量を1ユニットと定義する。     The glyceroglycolipid degradation activity of glyceroglycolipid lipase can be measured by the following method. That is, digalactosyl diacylglycerol (DGDG) (manufactured by Sigma-Aldrich Japan) (1.0 g) was added to an aqueous solution (50 mL) of 4 wt% Triton X-100 (manufactured by Sigma-Aldrich Japan) previously heated to 37 ° C. Add little by little and stir until completely dissolved. A mixture of this substrate solution (210 μL) and 400 mM MOPS (manufactured by Nacalai Tesque) pH 6 buffer (30 μL) was incubated at 37 ° C. for 5 minutes, and then the enzyme solution (30 μL) was added and dispersed uniformly. Incubate at 37 ° C. for 10 minutes. After 1N hydrochloric acid (30 μL) is added to the reaction solution to stop the enzyme reaction, 20 μL is transferred to another test tube. This solution is colorimetrically determined with a determiner NEFA755 (manufactured by Kyowa Medix Co., Ltd.). The amount of enzyme that generates 1 μmol of free fatty acid per minute is defined as 1 unit.

グリセロ糖脂質リパーゼのグリセロリン脂質分解活性は下記の方法により測定することができる。
予め37℃に加温した4wt%Triton X−100(Sigma−Aldrich Japan株式会社製)水溶液(10mL)にレシチン(SLP-ホワイト 辻製油株式会社製)(200mg)を少しずつ加えて完全に溶解するまで攪拌する。この基質溶液(500μL)および400mM MOPS(ナカライテスク株式会社製) pH 6緩衝液(250μL)の混合液を37℃で5分間保温したのち、酵素溶液(150μL)を加え均一に分散させたのち、37℃で10分間保温する。この反応液に1N塩酸(100μL)を加え酵素反応を停止させたのち、20μLを別の試験管に移す。この溶液をデタミナーNEFA755(協和メディックス株式会社製)で比色定量する。1分間に1μmolの遊離脂肪酸を生じさせる酵素量を1ユニットと定義する。
The glycerophospholipid degradation activity of glyceroglycolipid lipase can be measured by the following method.
Lecithin (SLP-White Sakai Oil Co., Ltd.) (200 mg) is added little by little to a 4 wt% Triton X-100 (Sigma-Aldrich Japan Co.) aqueous solution (10 mL) preheated to 37 ° C., and completely dissolved. Stir until. A mixture of this substrate solution (500 μL) and 400 mM MOPS (manufactured by Nacalai Tesque) pH 6 buffer (250 μL) was incubated at 37 ° C. for 5 minutes, and then the enzyme solution (150 μL) was added and dispersed uniformly. Incubate at 37 ° C. for 10 minutes. After 1N hydrochloric acid (100 μL) is added to the reaction solution to stop the enzyme reaction, 20 μL is transferred to another test tube. This solution is colorimetrically determined with a determiner NEFA755 (manufactured by Kyowa Medix Co., Ltd.). The amount of enzyme that generates 1 μmol of free fatty acid per minute is defined as 1 unit.

グリセロ糖脂質リパーゼのトリグリセリド分解活性は下記の方法により測定することができる。
オリーブ油(ナカライテスク株式会社)100mgとアラビアガム(和光純薬株式会社)50mg、水10mlを加え、ブレンダー(日本精機株式会社)で10,000r.p.m.、1分間乳化した。この溶液(500μl)、400mM MOPS(ナカライテスク株式会社製) pH 6緩衝液(250μL)および100mM カルシウムクロライド溶液(50μl)の混合液を37℃で5分間保温したのち、酵素溶液(100μl)を加え均一に分散させたのち、37℃で10分間保温する。この反応液に1N塩酸(100μL)を加え酵素反応を停止させたのち、4wt%Triton X−100(Sigma−Aldrich Japan株式会社製)水溶液(1mL)を加えて遊離脂肪酸を溶解させ、20μLを別の試験管に移す。この溶液をデタミナーNEFA755(協和メディックス株式会社製)で比色定量する。1分間に1μmolの遊離脂肪酸を生じさせる酵素量を1ユニットと定義する。
The triglyceride-degrading activity of glyceroglycolipid lipase can be measured by the following method.
Olive oil (Nacalai Tesque Co., Ltd.) 100 mg, gum arabic (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) 50 mg and water 10 ml were added and emulsified with a blender (Nihon Seiki Co., Ltd.) for 10,000 minutes. This solution (500 μl), 400 mM MOPS (manufactured by Nacalai Tesque) pH 6 buffer (250 μL) and 100 mM calcium chloride solution (50 μl) were incubated at 37 ° C. for 5 minutes, and then the enzyme solution (100 μl) was added. After uniformly dispersing, the mixture is kept at 37 ° C. for 10 minutes. 1N Hydrochloric acid (100 μL) was added to this reaction solution to stop the enzyme reaction, 4 wt% Triton X-100 (Sigma-Aldrich Japan) aqueous solution (1 mL) was added to dissolve free fatty acid, and 20 μL was separated. Transfer to the test tube. This solution is colorimetrically determined with a determiner NEFA755 (manufactured by Kyowa Medix Co., Ltd.). The amount of enzyme that generates 1 μmol of free fatty acid per minute is defined as 1 unit.

糖質分解酵素としては、グリセロ糖脂質以外の糖脂質を分解する酵素であれば特に限定されないが、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、グルコアミラーゼ、プルラナーゼ、ヘミセルラーゼ、キシラナーゼ、セルラーゼ、βグルカナーゼなどが挙げられる。これら糖質分解酵素は、小麦粉1kgに対して通常1ユニット以上、好ましくは5ユニット以上、より好ましくは10ユニット以上、通常500ユニット以下、好ましくは300ユニット以下、より好ましくは100ユニット以下である。少なすぎると酵素の効果が十分に発揮できない場合があり、多すぎると焼成パンのボリュームが小さくなる場合があり好ましくない。ここで、該糖質分解酵素におけるユニットとは第四版既存添加物自主規格(日本食品添加物協会、2008年10月16日発刊)の酵素活性測定法に記載の方法で測定したときの酵素活性を示す。   The saccharide-degrading enzyme is not particularly limited as long as it is an enzyme that degrades glycolipids other than glyceroglycolipid, but α-amylase, β-amylase, glucoamylase, pullulanase, hemicellulase, xylanase, cellulase, β-glucanase, etc. Can be mentioned. These saccharide-degrading enzymes are usually 1 unit or more, preferably 5 units or more, more preferably 10 units or more, usually 500 units or less, preferably 300 units or less, more preferably 100 units or less, per 1 kg of flour. If the amount is too small, the effect of the enzyme may not be sufficiently exhibited. If the amount is too large, the volume of the baked bread may be reduced, which is not preferable. Here, the unit in the saccharolytic enzyme is an enzyme as measured by the method described in the method for measuring enzyme activity in the voluntary standard for existing additives in the fourth edition (Japan Food Additives Association, published on October 16, 2008). Shows activity.

酸化酵素としては、グルコースオキシダーゼ、ヘキソースオキシダーゼ、アルドースオキシダーゼ、ピラノースオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、アミノ酸オキシダーゼ、アスコルビン酸オキシダーゼなどが挙げられる。酸化酵素は、小麦粉1kgに対して通常1ユニット以上、好ましくは5ユニット以上、より好ましくは10ユニット以上、通常500ユニット以下、好ましくは300ユニット以下、より好ましくは100ユニット以下である。少なすぎると酵素の効果が十分に発揮できない場合があり、多すぎると焼成パンのボリュームが小さくなる場合があり好ましくない。ここで、酸化酵素におけるユニットとは第四版既存添加物自主規格(日本食品添加物協会、2008年10月16日発刊)の酵素活性測定法に記載の方法または、国際公開第WO2009/130306号パンフレットに記載の方法で測定したときの酵素活性を示す。   Examples of the oxidase include glucose oxidase, hexose oxidase, aldose oxidase, pyranose oxidase, lipoxygenase, amino acid oxidase, ascorbate oxidase and the like. The oxidase is usually 1 unit or more, preferably 5 units or more, more preferably 10 units or more, usually 500 units or less, preferably 300 units or less, more preferably 100 units or less, per 1 kg of flour. If the amount is too small, the effect of the enzyme may not be sufficiently exhibited. If the amount is too large, the volume of the baked bread may be reduced, which is not preferable. Here, the unit in the oxidase is the method described in the method for measuring enzyme activity in the voluntary standard for existing additives of the fourth edition (Japan Food Additives Association, published on October 16, 2008), or International Publication No. WO2009 / 130306. The enzyme activity when measured by the method described in the pamphlet is shown.

次に、小麦粉製品に代表して、パンの製造方法について具体的に説明する。本発明のパンの製造方法は、原材料に該グリセロ糖脂質リパーゼと糖質分解酵素および/または酸化酵素を配合すればよく、その他は通常のパンの製造方法と同様である。   Next, on behalf of flour products, a method for producing bread will be specifically described. The bread production method of the present invention may be the same as the ordinary bread production method, except that the glyceroglycolipid lipase and the saccharide-degrading enzyme and / or oxidase are mixed in the raw material.

一例として、上記原材料の一部または全てをミキサー等の機器を用いて均一に分散・混合させ、混合後の生地を発酵し、分割、丸め、ベンチタイム、成形、最終発酵を経て焼成に至る方法が挙げられる。原材料を混合する際、原材料をそれぞれ添加してもよいし、予め一部の原材料を混合した上で混合してもよい。   As an example, a method in which some or all of the above raw materials are uniformly dispersed and mixed using equipment such as a mixer, the dough after mixing is fermented, divided, rounded, bench time, molded, and finally baked through final fermentation Is mentioned. When mixing the raw materials, the raw materials may be added, or after mixing some raw materials in advance.

パンの製造方法は、2回以上のミキシング工程、すなわち、少なくとも2回のミキシング工程を有するものでもよい。2回以上のミキシング工程を有する代表的な小麦粉製品の製造方法として、標準中種法、100%中種法、短時間中種法、長時間中種法、オーバーナイト中種法、加糖中種法、湯捏法、中麺法、液種法等が挙げられる。より具体的には、小麦粉の一部または全部を酵母、水、副原料等とミキシングして得られる生地を製造し、発酵する工程を経て、残りの原材料または新たな原材料を加え、再度ミキシングし発酵、焼成し、パンを得る方法が挙げられる。   The bread manufacturing method may have two or more mixing steps, that is, at least two mixing steps. Typical methods for producing flour products that have two or more mixing steps are standard medium seed method, 100% medium seed method, short time medium seed method, long time medium seed method, overnight medium seed method, sweetened medium seed Method, hot water supply method, middle noodle method, liquid seed method and the like. More specifically, a dough obtained by mixing a part or all of flour with yeast, water, auxiliary ingredients, etc. is manufactured, fermented, the remaining raw materials or new raw materials are added, and then mixed again. A method of obtaining bread by fermentation and baking.

尚、本発明の小麦粉製品は、糖質分解酵素および/または酸化酵素とグリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の3倍以上であるグリセロ糖脂質リパーゼを用いて改質されることを特徴とし、通常本発明の製造方法により製造されるものである。小麦粉製品としては上記例示したものが挙げられる。また、小麦粉製品に代表して、パンに含まれる各種材料は、上記原材料として記載したものが挙げられ、そのパン中の含有量は、通常のパンと同じである。また、該グリセロ糖脂質リパーゼと糖質分解酵素および/または酸化酵素の使用量もまた、上記該グリセロ糖脂質リパーゼと糖質分解酵素および/または酸化酵素の配合量として説明したものと同様である。   The wheat flour product of the present invention is characterized in that it is modified using a glyceroglycolipid lipase having a saccharide-degrading enzyme and / or oxidase and a glyceroglycolipid-degrading activity that is at least three times the glycerophospholipid-degrading activity. Usually, it is manufactured by the manufacturing method of the present invention. Examples of the flour product include those exemplified above. In addition, as a representative of flour products, various materials contained in bread include those described as the above-mentioned raw materials, and the content in the bread is the same as that of ordinary bread. Further, the amount of the glyceroglycolipid lipase and the saccharide-degrading enzyme and / or oxidase used is also the same as that described as the amount of the glyceroglycolipid lipase and the saccharide-degrading enzyme and / or oxidase. .

以下、実施例により本発明の実施様態を具体的に説明するが、本発明の技術範囲がこれらによって限定されるものではない。   Hereinafter, although the embodiment of the present invention will be specifically described by way of examples, the technical scope of the present invention is not limited thereto.

(参考例)グリセロ糖脂質リパーゼ(DGDGL)の精製
1)DGDGLの培養液の調製
滅菌した下記組成の培地100mlが入っている500ml容の三角フラスコにSANK11298株(FERM BP−10753)を接種し、26℃にて4日間、170rpm振とう培養を行った。なお、SANK11298株は、平成18年12月27日付けで、受託番号FERM BP−10753で、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託されている(特開2008−206515号公報)。

培地組成
グルコース 20g
イーストエクストラクト 10g
カザミノ酸 10g
すりゴマ 20g
トゥイーン80 10g
リン酸水素2カリウム 0.1g
硫酸マグネシウム 0.05g
純水で1000mlとした。
培養終了後、4℃、10,000×Gにて10分間の遠心分離を行った。得られた上清をDGDGLの培養液とした。
(Reference Example) Purification of glyceroglycolipid lipase (DGGDGL) 1) Preparation of DGDGL culture solution Inoculate SANK11298 strain (FERM BP-10773) into a 500 ml Erlenmeyer flask containing 100 ml of sterilized medium having the following composition, The culture was performed with shaking at 170 rpm for 4 days at 26 ° C. The SANK11298 strain was deposited at the Patent Organism Depositary, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, under the accession number FERM BP-10653, as of December 27, 2006 (Japanese Patent Laid-Open No. 2008-206515). .

Medium composition glucose 20g
East Extract 10g
10g casamino acid
20g of ground sesame
Tween 80 10g
Dipotassium hydrogen phosphate 0.1g
Magnesium sulfate 0.05g
Made up to 1000 ml with pure water.
After completion of the culture, centrifugation was performed at 4 ° C. and 10,000 × G for 10 minutes. The obtained supernatant was used as a culture solution of DGDGL.

2)DGDGL培養液の精製
1)で培養したDGDGL培養液1,150mlに粉末硫酸アンモニウム(ナカライテスク社製)を終濃度1Mになるように、攪拌しながらゆっくり加えた。これを、予め1M硫酸アンモニウム溶液で平衡化したToyopearl Butyl 650M(プレパック直径2.2cm×長さ20cm、東ソー社製)に1分間あたり2mlの流速でチャージした。1M硫酸アンモニウム溶液160mlで洗浄後、1M硫酸アンモニウム溶液から水の直線濃度勾配(640ml)にて該カラムにチャージした成分を溶出させた。硫酸アンモニウム濃度300mMから0mMの範囲を分取した。
硫酸アンモニウム濃度300mMから0mMの範囲の分取した画分は、2M硫酸アンモニウムで平衡化したHitrap Butyl FF(GEヘルスケアバイオサイエンス社製)カラム(5ml)に添加した後、2M硫酸アンモニウムから水の直線濃度勾配にて該カラムに吸着した成分を溶出させた。硫酸アンモニウム濃度1.2Mから1.0Mの範囲を分取した。
12.5%のポリアクリルアミドゲルを用いたSDS-PAGE電気泳動法にて、硫酸アンモニウム濃度1.5Mから2Mの範囲の分取した画分が単一バンドであることを確認後、透析膜(分子量分画10,000、三光社製)を用いて水(4L)に対して3回透析を行いグリセロ糖脂質リパーゼ(DGDGL)精製液とした。
2) Purification of DGDGL culture solution Powdered ammonium sulfate (manufactured by Nacalai Tesque) was slowly added to 1,150 ml of the DGDGL culture solution cultured in 1) with stirring to a final concentration of 1M. This was charged into Toyopearl Butyl 650M (prepack diameter 2.2 cm × length 20 cm, manufactured by Tosoh Corp.) previously equilibrated with 1 M ammonium sulfate solution at a flow rate of 2 ml per minute. After washing with 160 ml of 1M ammonium sulfate solution, components charged in the column were eluted from the 1M ammonium sulfate solution with a linear concentration gradient of water (640 ml). Ammonium sulfate concentrations ranging from 300 mM to 0 mM were collected.
Fractionated fractions in the ammonium sulfate concentration range of 300 mM to 0 mM were added to a Hitrap Butyl FF (GE Healthcare Bioscience) column (5 ml) equilibrated with 2M ammonium sulfate, and then a linear concentration gradient from 2M ammonium sulfate to water. The components adsorbed on the column were eluted with Ammonium sulfate concentrations ranging from 1.2M to 1.0M were collected.
After confirming that the fraction collected in the range of ammonium sulfate concentration from 1.5M to 2M is a single band by SDS-PAGE electrophoresis using 12.5% polyacrylamide gel, dialysis membrane (molecular weight Using a fraction 10,000 (manufactured by Sanko Co., Ltd.), dialysis was performed three times against water (4 L) to obtain a purified glyceroglycolipid lipase (DGGDGL) solution.

<グリセロ糖脂質リパーゼの分解活性>
得られたグリセロ糖脂質リパーゼ精製液についてグリセロ糖脂質分解活性、グリセロリン脂質分解活性及びトリグリセリド分解活性を測定したところ、グリセロリン脂質分解活性及びトリグリセリド分解活性は、グリセロ糖脂質分解活性を100としたとき、それぞれ7.6、13.1であった。なお、これらの活性は[0025]〜[0027]に記載の方法に基づいて、pH6のグリセロ糖脂質リパーゼ精製液を用いて行った。
<Degradation activity of glyceroglycolipid lipase>
The obtained glyceroglycolipid lipase purified solution was measured for glyceroglycolipid degradation activity, glycerophospholipid degradation activity and triglyceride degradation activity. When the glyceroglycolipid degradation activity was 100, They were 7.6 and 13.1, respectively. These activities were performed using a purified glyceroglycolipid lipase solution at pH 6 based on the method described in [0025] to [0027].

(実施例)パンの製造
強力粉100重量部、生イースト2重量部、砂糖6重量部、食塩2重量部、脱脂粉乳2重量部、ビタミンC10ppm、水65重量部に小麦粉1kgに対して表1に記載の各酵素(○のものを添加)をミキサーボールに投入し、フックを用い低速3分、中速2分、高速1分ミキシングし、ショートニング6重量部を加え、低速2分、中速3分、高速1分ミキシングし生地を作成した。生地の捏上げ温度は27℃とし、温度27℃、湿度75%に管理した恒温室で90分間発酵を取った後、350gに分割・丸めを行った。次いで、上記恒温室で20分間ベンチタイムを取った後、モルダーを使用し、ワンローフを成形し、ワンローフ型にいれ、温度38℃、湿度85%に管理した恒温室で生地が型上1.5cmとなるまでホイロをとった。ホイロ時間は通常80分〜90分であった。ホイロ後の生地を210℃に設定した固定窯に入れ22分間焼成することでパンを得た。焼成後、約2時間室温で冷却した後レーザー体積計を用いてパン体積を測定した。
(Example) Production of bread 100 parts by weight of strong flour, 2 parts by weight of raw yeast, 6 parts by weight of sugar, 2 parts by weight of salt, 2 parts by weight of skim milk powder, 10 ppm of vitamin C, 65 parts by weight of water Each enzyme described (added with ○) is put into a mixer ball, mixed with a hook at low speed 3 minutes, medium speed 2 minutes, high speed 1 minute, added 6 parts by weight of shortening, low speed 2 minutes, medium speed 3 Minutes and high speed mixing for 1 minute to create a dough. The dough was raised at a temperature of 27 ° C., fermented for 90 minutes in a thermostatic chamber controlled at a temperature of 27 ° C. and a humidity of 75%, and then divided and rounded to 350 g. Next, after taking a bench time for 20 minutes in the above-mentioned temperature-controlled room, using a molder, a one-loaf was molded, put into a one-loaf mold, and the fabric was 1.5 cm above the mold in the temperature-controlled room controlled at a temperature of 38 ° C. and a humidity of 85%. I took a proof until it became. The proof time was usually 80 minutes to 90 minutes. Bread was obtained by putting the dough after proofing in a fixed kiln set at 210 ° C. and baking for 22 minutes. After baking, after cooling at room temperature for about 2 hours, the pan volume was measured using a laser volume meter.

なお、アミラーゼ、ヘミセルラーゼ、グルコースオキシダーゼは以下のものを用いた。
アミラーゼ 商品名:コクラーゼ(三菱化学フーズ社製)
ヘミセルラーゼ 商品名:スクラーゼX (三菱化学フーズ社製)
グルコースオキシダーゼ 商品名:Bakezyme (GO1500 DSMジャパン社製)
アミラーゼの添加量は、第四版既存添加物自主規格(日本食品添加物協会、2008年10月16日発刊)記載のデンプン糖化力測定法 銅試薬測定法1に準じて得られた活性に従い決定した。
ヘミセルラーゼの添加量は第四版既存添加物自主規格(日本食品添加物協会、2008年10月16日発刊)記載のヘミセルラーゼ活性測定法 第2法に準じて得られた活性に従い決定した。
グルコースオキシダーゼの添加量は、国際公開第WO2009/130306号パンフレットに記載の測定法に準じて得られた活性に従い決定した。
In addition, the following were used for amylase, hemicellulase, and glucose oxidase.
Amylase Product name: Cochlase (Mitsubishi Chemical Foods)
Hemicellulase Product name: Sucrase X (Mitsubishi Chemical Foods)
Glucose oxidase Product name: Bakezyme (GO1500 DSM Japan)
The amount of amylase added is determined according to the activity obtained in accordance with the starch saccharification power measurement method copper reagent measurement method 1 described in the voluntary standard for existing additives in the 4th edition (Japan Food Additives Association, published on October 16, 2008) did.
The amount of hemicellulase added was determined according to the activity obtained according to the second method of the hemicellulase activity measurement method described in the voluntary standard of the fourth edition of existing additives (Japan Food Additives Association, published on October 16, 2008).
The amount of glucose oxidase added was determined according to the activity obtained according to the measurement method described in International Publication No. WO2009 / 130306.

結果を表1に示す。なお、パン体積は対応する比較例のパン体積を100%とした時の相対値で記す。表1より、糖質分解酵素および/または酸化酵素に本発明で特定するグリセロ糖脂質リパーゼを配合することにより、パンの体積が顕著に増加(ボリュームアップ)することが分かった。   The results are shown in Table 1. Note that the pan volume is expressed as a relative value when the pan volume of the corresponding comparative example is 100%. From Table 1, it was found that the volume of bread was significantly increased (volume up) by adding the glyceroglycolipid lipase specified in the present invention to the saccharide-degrading enzyme and / or oxidase.

Figure 2012152128
Figure 2012152128

Claims (5)

グリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の3倍以上であるグリセロ糖脂質リパーゼとともに、糖質分解酵素および/または酸化酵素を配合剤として用いることを特徴とする、小麦粉製品の製造方法。   A method for producing a flour product, characterized by using a glyceroglycolipid lipase having a glyceroglycolipid-degrading activity three or more times that of glycerophospholipid-degrading activity, and a carbohydrase and / or oxidase as a compounding agent. 該グリセロ糖脂質リパーゼが、グリセロ糖脂質分解活性、グリセロリン脂質分解活性およびトリグリセリド分解活性を有することを特徴とする、請求項1に記載の小麦粉製品の製造方法。   The method for producing a wheat flour product according to claim 1, wherein the glyceroglycolipid lipase has glyceroglycolipid degrading activity, glycerophospholipid degrading activity and triglyceride degrading activity. 該糖質分解酵素がα−アミラーゼ、β−アミラーゼ、ヘミセルラーゼ、セルラーゼおよびグルコアミラーゼからなる群より選ばれる少なくとも1つであることを特徴とする、請求項1または2に記載の小麦粉製品の製造方法。   The production of a flour product according to claim 1 or 2, wherein the saccharide-degrading enzyme is at least one selected from the group consisting of α-amylase, β-amylase, hemicellulase, cellulase and glucoamylase. Method. 酸化酵素がグルコースオキシダーゼであることを特徴とする、請求項1から3いずれか一項に記載の小麦粉製品の製造方法。   The method for producing a flour product according to any one of claims 1 to 3, wherein the oxidase is glucose oxidase. グリセロ糖脂質分解活性がグリセロリン脂質分解活性の3倍以上であるグリセロ糖脂質リパーゼと、糖質分解酵素および/または酸化酵素を用いて改質されたことを特徴とする小麦粉製品。   A wheat flour product modified with a glyceroglycolipid lipase having a glyceroglycolipid degrading activity three times or more of a glycerophospholipid degrading activity, and a carbohydrase and / or oxidase.
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