JP6600473B2 - Screening method for foot odor inhibitor - Google Patents

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JP6600473B2 JP2015064342A JP2015064342A JP6600473B2 JP 6600473 B2 JP6600473 B2 JP 6600473B2 JP 2015064342 A JP2015064342 A JP 2015064342A JP 2015064342 A JP2015064342 A JP 2015064342A JP 6600473 B2 JP6600473 B2 JP 6600473B2
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本発明は、足臭判定用指標剤、当該指標剤を用いる足臭判定方法、当該指標剤を用いるデオドラント剤の評価方法、およびスクリーニング方法に関する。   The present invention relates to an indicator for determining foot odor, a method for determining foot odor using the indicator, a method for evaluating a deodorant using the indicator, and a screening method.

足臭(足の不快な臭気)は、皮脂、蛋白質(角質)、汗等の有機物質が、靴の中で繁殖する細菌類によって分解されて発生するものである。足臭は、足が履物の内側に取り囲まれ、汗をかく時に発生する。足は身体の他の部分よりも汗腺が多いため、過剰に汗をかき、産生された汗は履物の中に足が取り囲まれていることに起因して蒸発することができない。従って、足臭は継続的に揮発して臭気を発し、靴下や靴にも付着する。
特許文献1および2には、その足臭の主たる原因物質がイソ吉草酸であると考えられていること、およびイソ吉草酸はL−ロイシンの酵素的変換により主に生成されることが記載されている。
Foot odor (unpleasant odor of the foot) is generated by decomposition of organic substances such as sebum, protein (keratin), and sweat by bacteria that propagate in shoes. Foot odor occurs when the foot is surrounded by the footwear and sweats. Since the foot has more sweat glands than the rest of the body, it sweats excessively and the sweat produced cannot evaporate due to the foot being surrounded by the footwear. Therefore, foot odors continuously evaporate and give off odors, which also adhere to socks and shoes.
Patent Documents 1 and 2 describe that the main causative substance of the foot odor is considered to be isovaleric acid, and that isovaleric acid is mainly produced by enzymatic conversion of L-leucine. ing.

イソ吉草酸の類縁物質であるイソ吉草酸アルデヒドについては、足臭に関連する報告は今までなされたことがない。足臭以外の臭いについては、特許文献3および4に以下の通り報告されている。
特許文献3には、メタンチオール、プロパンチオール、ジメチルスルフィド、ジメチルジスルフィド、トリメチルアミン、ジアセチル、アセトインおよび3−メチルブタナール(イソ吉草酸アルデヒド)が、経血臭または生理臭への寄与度の高い成分であると記載されている。
特許文献4には、非水系皮膚外用製品が微生物に汚染して発生する臭いの成分を分析した結果、イソ吉草酸、イソバレルアルデヒド(イソ吉草酸アルデヒド)、アセトイン、酢酸、酪酸等が大幅に増加していたことが記載されている。
For isovaleric aldehyde, which is a related substance of isovaleric acid, no reports related to foot odor have ever been made. Odors other than foot odor are reported in Patent Documents 3 and 4 as follows.
In Patent Document 3, methanethiol, propanethiol, dimethylsulfide, dimethyldisulfide, trimethylamine, diacetyl, acetoin, and 3-methylbutanal (isovaleric aldehyde) are components having a high contribution to menstrual odor or physiological odor. It is described that it is.
In Patent Document 4, as a result of analyzing components of odor generated when a nonaqueous skin external product is contaminated with microorganisms, isovaleric acid, isovaleraldehyde (isovaleric aldehyde), acetoin, acetic acid, butyric acid, etc. are greatly increased. It is described that it had increased.

特開2003−24422JP2003-24422 特表2009−508478Special table 2009-508478 特開2007−198829JP2007-198829 特開2014−150758JP 2014-150758 A

足臭の原因物質として知られているイソ吉草酸では、足臭の強度はイソ吉草酸を指標にしても正確に評価できない。そこで、足臭の強度を、より客観的に判定する方法が望まれていた。従って、本発明の課題は、足臭を客観的に判定する方法、およびその方法に用いる足臭判定用指標剤を提供することにある。また、本発明の課題は、その判定方法を用いてデオドラント剤の性能を簡便な操作で客観的かつ的確に評価することができるデオドラント剤の評価方法を提供することにある。さらに、本発明の課題は、その評価方法を用いて足臭抑制剤を簡便な操作で効率よくスクリーニングすることができる足臭抑制剤のスクリーニング方法を提供することにある。   With isovaleric acid, which is known as a causative agent of foot odor, the intensity of foot odor cannot be accurately evaluated even if isovaleric acid is used as an index. Therefore, a method for more objectively determining the intensity of foot odor has been desired. Accordingly, an object of the present invention is to provide a method for objectively determining foot odor and an indicator for foot odor determination used in the method. Moreover, the subject of this invention is providing the evaluation method of the deodorant agent which can objectively and accurately evaluate the performance of a deodorant agent by simple operation using the determination method. Furthermore, the subject of this invention is providing the screening method of the foot odor inhibitor which can screen a foot odor inhibitor efficiently by simple operation using the evaluation method.

本発明者らは、足臭の強度を客観的に評価する方法につき鋭意検討したところ、意外にも足臭の強度はイソ吉草酸の量ではなく、イソ吉草酸アルデヒドの量に強く相関することを見出した。特に、弱い足臭では、イソ吉草酸が発生していないにもかかわらず不快な足臭を発する場合がある。そのような弱い足臭の状況においても、イソ吉草酸アルデヒドは発生しており、イソ吉草酸アルデヒドの量によって、弱い足臭まで評価できることを見出した。本発明は、かかる知見に基づくものであり、具体的には、本発明は以下の通りである。   The present inventors diligently studied a method for objectively evaluating the intensity of foot odor, and surprisingly, the intensity of foot odor strongly correlates with the amount of isovaleric aldehyde, not the amount of isovaleric acid aldehyde. I found. In particular, a weak foot odor may give off an unpleasant foot odor despite the absence of isovaleric acid. It was found that even in such a weak foot odor situation, isovaleric aldehyde was generated, and even a weak foot odor could be evaluated by the amount of isovaleric aldehyde. The present invention is based on such knowledge. Specifically, the present invention is as follows.

[1] イソ吉草酸アルデヒドを含有する足臭判定用指標剤。
[2] [1]に記載の足臭判定用指標剤を用いる足臭判定方法。
[3] 足の皮膚に存在するサンプルを採取し、得られたサンプル中に含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量を測定し、前記イソ吉草酸アルデヒドの量によって足臭の強度を判定する、[2]に記載の足臭判定方法。
[4] デオドラント剤の適用箇所に存在するサンプルを採取し、前記サンプル中に含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量を測定し、前記イソ吉草酸アルデヒドの量によってデオドラント剤の性能を評価する、デオドラント剤の評価方法。
[1] An indicator for determining foot odor containing isovaleric aldehyde.
[2] A foot odor determination method using the foot odor determination indicator according to [1].
[3] A sample present on the skin of the foot is collected, the amount of isovaleric aldehyde contained in the obtained sample is measured, and the intensity of foot odor is determined based on the amount of the isovaleric aldehyde. [2 ] The foot odor determination method of description.
[4] A deodorant agent for collecting a sample present at an application site of the deodorant agent, measuring the amount of isovaleric aldehyde contained in the sample, and evaluating the performance of the deodorant agent based on the amount of isovaleric aldehyde. Evaluation method.

[5] イソ吉草酸アルデヒドに起因する足臭の発生を抑制するための足臭抑制剤のスクリーニング方法であって、
(1)イソ吉草酸アルデヒドの産生能を有する微生物を、被験物質およびL−ロイシンを含有する培地で培養するステップ、
(2)前記ステップ(1)で得られた培養物における前記微生物の生菌数、および/または前記イソ吉草酸アルデヒドの量を測定することにより、被験物質がイソ吉草酸アルデヒドの生成を抑制するかどうかを判定するステップ、および
(3)前記ステップ(2)において、イソ吉草酸アルデヒドの生成を抑制する被験物質を、足臭抑制剤として選択するステップ
を含む、足臭抑制剤のスクリーニング方法。
[6] 前記微生物がStaphylococcus.aureus、Staphylococcus.epidermidisおよびCorynebacterium.minutissimumからなる群より選ばれた少なくとも1種である[5]に記載の足臭抑制剤のスクリーニング方法。
[5] A screening method for a foot odor inhibitor for suppressing the generation of foot odor caused by isovaleric aldehyde,
(1) culturing a microorganism capable of producing isovaleric aldehyde in a medium containing a test substance and L-leucine,
(2) The test substance suppresses the production of isovaleric aldehyde by measuring the viable count of the microorganism and / or the amount of isovaleric aldehyde in the culture obtained in step (1). And (3) a screening method for a foot odor inhibitor, comprising the step of selecting, in the step (2), a test substance that suppresses the formation of isovaleric aldehyde as a foot odor inhibitor.
[6] The method for screening a foot odor inhibitor according to [5], wherein the microorganism is at least one selected from the group consisting of Staphylococcus.aureus, Staphylococcus.epidermidis and Corynebacterium.minutissimum.

本発明の足臭判定用指標剤および足臭判定方法によって、弱い足臭から強い足臭まで広い範囲で、足臭を客観的に評価することができる。弱い足臭の評価が可能になることで、将来の足臭の増幅を予想することも可能になる。また、本発明のデオドラント剤の評価方法によって、デオドラント剤の足臭の消臭効果、デオドラント剤の性能を簡便な操作で客観的かつ的確に評価することが可能になる。また、本発明の足臭抑制剤のスクリーニング方法によって、足臭抑制剤を簡便な操作で効率よくスクリーニングすることが可能になる。   The foot odor can be objectively evaluated in a wide range from a weak foot odor to a strong foot odor by the foot odor determination index agent and the foot odor determination method of the present invention. By enabling the evaluation of weak foot odors, it becomes possible to predict future amplification of foot odors. Further, the deodorant agent evaluation method of the present invention makes it possible to objectively and accurately evaluate the deodorant effect of the foot odor of the deodorant agent and the performance of the deodorant agent with a simple operation. In addition, the foot odor inhibitor screening method of the present invention enables efficient screening of foot odor inhibitors with a simple operation.

実施例1における、10名の被験者の足臭の強度とイソ吉草酸アルデヒドの量の関係を示すグラフである。6 is a graph showing the relationship between the intensity of foot odor of 10 subjects and the amount of isovaleric aldehyde in Example 1. FIG. 実施例1における、10名の被験者の足臭の強度とイソ吉草酸の量の関係を示すグラフである。4 is a graph showing the relationship between the intensity of foot odor and the amount of isovaleric acid of 10 subjects in Example 1.

1.足臭判定用指標剤
本発明の足臭判定用指標剤は、イソ吉草酸アルデヒドからなる。本発明の足臭判定用指標剤は、通常イソ吉草酸アルデヒドを有するものからなるが、そのハンドリング性を高めるため、水、メタノール、エタノール、エーテル、イソプロパノール、ジクロロメタン、プロピレングリコール等の溶剤に溶解又は希釈させて用いることもできる。また、必要に応じて、安定剤、殺菌剤、抗菌剤、界面活性剤、酸化防止剤、香料、植物抽出物等の添加剤を添加することができる。足臭の強度を評価する時に用いる溶媒は、特に限定されないが、例えば、無臭で、不揮発性の溶媒である点でプロピレングリコールなどを利用すると足臭の強度をより正確に評価することができる点で優れている。
実施例1に示すように、足臭の強度はイソ吉草酸アルデヒドの量に強く相関する。従って、イソ吉草酸アルデヒドを指標とすることで、弱い足臭から強い足臭まで広い範囲で、足臭を客観的に評価することができる。
そこで、本発明のイソ吉草酸アルデヒドからなる足臭判定用指標剤は、足臭の客観的な判定、足臭の消臭効果または防臭効果の評価、デオドラント剤の評価、足臭抑制剤のスクリーニング等に有用である。
1. Foot odor determination indicator agent The foot odor determination indicator agent of the present invention comprises isovaleric aldehyde. The indicator for determining foot odor according to the present invention usually comprises an isovaleric aldehyde, but in order to improve its handleability, it is dissolved in a solvent such as water, methanol, ethanol, ether, isopropanol, dichloromethane, propylene glycol or the like. It can also be used after diluting. Moreover, additives such as stabilizers, bactericides, antibacterial agents, surfactants, antioxidants, fragrances, plant extracts and the like can be added as necessary. The solvent used when evaluating the strength of foot odor is not particularly limited, but, for example, propylene glycol can be used to evaluate the strength of foot odor more accurately because it is a non-volatile and non-volatile solvent. Is excellent.
As shown in Example 1, the intensity of foot odor strongly correlates with the amount of isovaleric aldehyde. Therefore, by using isovaleric aldehyde as an index, foot odor can be objectively evaluated in a wide range from weak foot odor to strong foot odor.
Therefore, an indicator for foot odor determination comprising the isovaleric aldehyde of the present invention is an objective determination of foot odor, evaluation of deodorizing effect or deodorizing effect of foot odor, evaluation of deodorant agent, screening of foot odor inhibitor Etc. are useful.

2.足臭判定方法
本発明の足臭判定用指標剤を用いて足臭の強度を判定することができる。
本発明の足臭判定方法は、例えば、足の皮膚に存在するサンプルを採取し、得られたサンプル中に含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量を測定し、前記イソ吉草酸アルデヒドの量によって足臭の強度を判定することで実施される。
本発明の足臭判定方法は、足臭判定用指標剤の量を足臭の指標として用いて足臭の判定を行うため、簡便な操作で客観的かつ的確に、被験者の足臭の強度を判定することができる。
2. Foot odor determination method The foot odor intensity can be determined using the foot odor determination indicator of the present invention.
The foot odor determination method of the present invention includes, for example, collecting a sample present on the skin of the foot, measuring the amount of isovaleric aldehyde contained in the obtained sample, and determining the foot odor according to the amount of the isovaleric aldehyde. It is carried out by determining the intensity of.
In the foot odor judging method of the present invention, since the foot odor is judged using the amount of the indicator for foot odor judgment as an indicator of foot odor, the strength of the foot odor of the subject can be objectively and accurately determined by a simple operation. Can be determined.

前記の足の皮膚に存在するサンプルの採取は、例えば、
(a)被験者の足の皮膚のヘッドスペースガスを採取すること、
(b)被験者の足の皮膚に試験片を接触させ、前記試験片に付着したサンプルを抽出すること、
(c)被験者が一定期間着用した靴下に付着したサンプルを抽出すること、および
(d)被験者の足の皮膚に溶媒を接触させ、前記溶媒によって皮膚に存在するサンプルを抽出すること等によって行うことができる。
前記試験片としては、例えば、綿製シート、セルロース製シート、ポリエチレン製シート、ポリエチレンテレフタレート製シートなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。
サンプルの採取としては、(a)〜(d)の採取方法が挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されない。また、(a)〜(d)の採取方法は、どれか一つの方法を使用してもよいし、幾つかの方法を組合わせてサンプルを採取してもよい。簡便である点で、(b)および(c)の試験片に付着したサンプルを用いる方法が好ましい。
Collection of the sample present on the skin of the foot is, for example,
(A) collecting headspace gas from the skin of the subject's foot;
(B) bringing a test piece into contact with the skin of a subject's foot and extracting a sample attached to the test piece;
(C) Extracting a sample attached to a sock worn by a subject for a certain period, and (d) contacting a solvent with the skin of a subject's foot and extracting the sample present on the skin with the solvent, etc. Can do.
Examples of the test piece include a cotton sheet, a cellulose sheet, a polyethylene sheet, a polyethylene terephthalate sheet, and the like, but the present invention is not limited to such examples.
Examples of sample collection include the methods (a) to (d), but the present invention is not limited to such examples. In addition, any one of the collection methods (a) to (d) may be used, or a sample may be collected by combining several methods. In terms of simplicity, a method using a sample attached to the test pieces (b) and (c) is preferable.

イソ吉草酸アルデヒドの量の測定方法としては、例えば、ガスクロマトグラフ−質量分析法、ガスクロマトグラフ−水素炎イオン検出法、ガスクロマトグラフ−電子捕獲式検出法、高速液体クロマトグラフ−紫外可視分光法、高速液体クロマトグラフ−質量分析法、半導体センサを用いた検出法等が挙げられ、好ましくは、ガスクロマトグラフ−質量分析法が挙げられる。例えば、ガスクロマトグラフ−質量分析法では、クロマトグラムにおけるイソ吉草酸アルデヒドのピーク高さまたはピーク面積の数値を用いてイソ吉草酸アルデヒドの量を算出することができる。
また、足臭の官能評価の場合は、平均評点が0.5未満の場合には「足臭はなし」、平均評点0.5以上〜2未満の場合には「足臭は弱い」、平均評点2以上〜3.5未満の場合には「足臭は中程度」、平均評点3.5以上の場合は「足臭は強い」と判断することができる。
Examples of the method for measuring the amount of isovaleric aldehyde include gas chromatography-mass spectrometry, gas chromatograph-hydrogen flame ion detection method, gas chromatograph-electron capture detection method, high-speed liquid chromatograph-ultraviolet visible spectroscopy, high-speed spectroscopy. Examples of the method include a liquid chromatograph-mass spectrometry method, a detection method using a semiconductor sensor, and a gas chromatograph-mass spectrometry method is preferable. For example, in the gas chromatograph-mass spectrometry, the amount of isovaleric aldehyde can be calculated using the peak height or peak area value of isovaleric aldehyde in the chromatogram.
In the case of sensory evaluation of foot odor, “no foot odor” when the average score is less than 0.5, “weak foot odor” when the average score is 0.5 to less than 2, the average score In the case of 2 or more and less than 3.5, it can be judged that “foot odor is moderate”, and in the case of an average score of 3.5 or more, “foot odor is strong”.

3.デオドラント剤の評価方法
本発明のデオドラント剤の評価方法は、デオドラント剤の適用箇所に存在するサンプルを採取し、前記サンプル中に含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量を測定し、前記イソ吉草酸アルデヒドの量によってデオドラント剤の性能を評価することで実施される。
すなわち、本発明のデオドラント剤の評価方法は、本発明の足臭判定用指標剤を用いて、イソ吉草酸アルデヒドの量に基づいてデオドラント剤の性能の評価を行うため、簡便な操作で客観的かつ的確にデオドラント剤を評価することができる。
本明細書において、「デオドラント剤」としては、足の皮膚に直接塗布するデオドラント剤、および靴下、靴等の足臭が付着する物に適用するデオドラント剤のいずれも含まれる。また、デオドラント剤の適用箇所としては、例えば、足の皮膚、靴下、靴等が挙げられる。
3. Method for evaluating deodorant agent The method for evaluating the deodorant agent of the present invention is to collect a sample present at the application site of the deodorant agent, measure the amount of isovaleric aldehyde contained in the sample, and determine the amount of isovaleric aldehyde. It is carried out by evaluating the performance of the deodorant agent by the amount.
That is, since the deodorant agent evaluation method of the present invention evaluates the performance of the deodorant agent based on the amount of isovaleric acid aldehyde using the foot odor determination indicator of the present invention, it is objective and simple. A deodorant agent can be evaluated accurately and accurately.
In the present specification, the “deodorant agent” includes both a deodorant agent applied directly to the skin of a foot and a deodorant agent applied to an object to which foot odors such as socks and shoes adhere. In addition, examples of the application site of the deodorant agent include foot skin, socks, and shoes.

デオドラント剤の適用量としては、デオドラント剤としての効果を奏するであろうと思われる量を中心に複数の適応量を試験することが好ましい。
前記適用箇所へのデオドラント剤の接触時間は、適用箇所の種類、デオドラント剤の種類、デオドラント剤の使用量、デオドラント剤に含まれる有効成分の量などによって異なるが、例えば、1〜72時間、より好ましくは3〜24時間等が挙げられる。
前記デオドラント剤の適用箇所に存在するサンプルの採取は、例えば、
(a)前記デオドラント剤の適用箇所のヘッドスペースガスを採取すること、
(b)前記デオドラント剤の適用箇所に試験片を接触させ、前記試験片に付着した物質を抽出すること、および
(c)前記デオドラント剤の適用箇所に直接溶媒を加え、適用箇所に存在する物質を抽出すること等により、行うことができる。
As the application amount of the deodorant agent, it is preferable to test a plurality of adaptation amounts centering on an amount that will be effective as a deodorant agent.
The contact time of the deodorant agent to the application site varies depending on the type of application site, the type of deodorant agent, the amount of deodorant agent used, the amount of active ingredient contained in the deodorant agent, etc., for example, 1 to 72 hours, more Preferably 3-24 hours etc. are mentioned.
Collection of the sample present at the application site of the deodorant agent is, for example,
(A) collecting the headspace gas at the application site of the deodorant;
(B) bringing a test piece into contact with the application site of the deodorant agent and extracting a substance adhering to the test piece; and (c) adding a solvent directly to the application site of the deodorant agent and presenting the substance at the application site. This can be done by extracting, for example.

前記デオドラント剤の適用箇所に存在するサンプル中に含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量の測定方法は、前記の足臭判定方法におけるイソ吉草酸アルデヒドの量の測定方法と同様に行うことができる。
本発明のデオドラント剤の評価方法では、デオドラント剤の適用前の皮膚から採取したサンプル中に含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量と前記デオドラント剤の適用箇所に存在するサンプル中に含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量との差異などにより、デオドラント剤の性能を評価することができる。例えば、デオドラント剤によって前記足臭判定用指標剤の量が低減する場合、デオドラント剤が足臭の消臭効果および/または防臭効果を有すると判定することができる。また、前記のようにデオドランド剤の適用前後での比較ではなく、デオドランド剤の適用部位と非適用部位を比較することで、デオドラント剤の性能を評価することができる。例えば、一方の足にデオドラント剤を適用して、もう一方の足にはデオドランド剤を適用せずに、それぞれの足から採取したサンプル中に含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量の差異などにより、デオドラント剤の性能を評価することができる。
The method for measuring the amount of isovaleric aldehyde contained in the sample present at the application site of the deodorant agent can be performed in the same manner as the method for measuring the amount of isovaleric aldehyde in the foot odor determination method.
In the deodorant evaluation method of the present invention, the amount of isovaleric aldehyde contained in the sample collected from the skin before application of the deodorant and the isovaleric aldehyde contained in the sample present at the application site of the deodorant. The performance of the deodorant agent can be evaluated based on a difference from the amount of the deodorant. For example, when the amount of the indicator for determining foot odor is reduced by the deodorant agent, it can be determined that the deodorant agent has a deodorizing effect and / or a deodorizing effect on the foot odor. Moreover, the performance of a deodorant agent can be evaluated by comparing the application site | part of a deodorand agent, and a non-application site | part instead of the comparison before and behind application of a deodorant agent as mentioned above. For example, if a deodorant is applied to one foot and a deodorant agent is not applied to the other foot, the deodorant may vary depending on the amount of isovaleric aldehyde contained in the sample collected from each foot. The performance of the agent can be evaluated.

4.足臭抑制剤のスクリーニング方法
本発明のイソ吉草酸アルデヒドに起因する足臭の発生を抑制するための足臭抑制剤のスクリーニング方法は、
(1)イソ吉草酸アルデヒドの産生能を有する微生物を、被験物質およびL−ロイシンを含有する培地で培養するステップ、
(2)前記ステップ(1)で得られた培養物における前記微生物の生菌数および/または前記イソ吉草酸アルデヒドの量を測定することにより、被験物質がイソ吉草酸アルデヒドの生成を抑制するかどうかを判定するステップ、および
(3)前記ステップ(2)において、イソ吉草酸アルデヒドの生成を抑制する被験物質を、足臭抑制剤として選択するステップ
を含む工程によって実施される。
4). Screening method for foot odor inhibitor Screening method for foot odor inhibitor for suppressing the generation of foot odor caused by isovaleric aldehyde of the present invention,
(1) culturing a microorganism capable of producing isovaleric aldehyde in a medium containing a test substance and L-leucine,
(2) Whether the test substance suppresses the production of isovaleric aldehyde by measuring the viable count of the microorganism and / or the amount of isovaleric aldehyde in the culture obtained in step (1) (3) In step (2), the step (2) includes a step of selecting a test substance that suppresses the production of isovaleric aldehyde as a foot odor inhibitor.

ステップ(1)では、前記微生物を、被験物質およびL−ロイシンを含有する培地で培養して、培養物(培養物A)を得る。
実施例2に記載の通り、足の皮膚に存在しうる皮膚常在微生物を、L−ロイシンを含有する培地で培養することで、イソ吉草酸アルデヒドが生成することを、本発明者らは見出した。すなわち、イソ吉草酸アルデヒドは、皮膚の角質に存在する蛋白質が微生物によって加水分解されて生成されるL−ロイシンから、皮膚常在微生物の作用によって生成されることが明らかとなった。従って、ステップ(1)は、足臭が発生する状況を完全に反映したものであって、ステップ(1)において、被験物質が存在することでイソ吉草酸アルデヒドの量が減少すれば、当該被験物質は足臭抑制剤としての効果を有すると判断することができる。
In step (1), the microorganism is cultured in a medium containing a test substance and L-leucine to obtain a culture (culture A).
As described in Example 2, the present inventors have found that isovaleric aldehyde is produced by culturing skin resident microorganisms that may be present in foot skin in a medium containing L-leucine. It was. That is, it has been clarified that isovaleric aldehyde is produced by the action of skin resident microorganisms from L-leucine produced by hydrolysis of proteins present in the skin of the skin by microorganisms. Therefore, step (1) completely reflects the situation where foot odor occurs, and if the amount of isovaleric aldehyde decreases in step (1) due to the presence of the test substance, the test is performed. It can be determined that the substance has an effect as a foot odor inhibitor.

前記微生物は、イソ吉草酸アルデヒドの産生能を有するものであればよく、例えば、皮膚常在微生物、土壌微生物、腸内常在微生物、発酵食品に用いられる微生物などが挙げられる。前記微生物としては、足臭を抑制するのにより適した足臭抑制剤をスクリーニングする観点から、皮膚常在微生物が好ましい。皮膚常在微生物としては、例えば、Staphylococcus.epidermidis、Staphylococcus.warneri A、Staphylococcus.warneri B、Staphylococcus.caprae B、Staphylococcus.haemolyticus、Staphylococcus.capitis A、Staphylococcus.capitis B、Staphylococcus.lentus、Staphylococcus.gallinarum、Staphylococcus.delphini、Staphylococcus.aureus、Staphylococcus.hominis、Staphylococcus.xylosus、Staphylococcus.hyicus、Staphylococcus.cohnii、Corynebacterium.minutissimum、Corynebacterium.xerosis、Corynebacterium.tenuis、Micrococcus等が挙げられる。   The microorganism may be any microorganism that has the ability to produce isovaleric aldehyde, and examples thereof include skin resident microorganisms, soil microorganisms, intestinal resident microorganisms, and microorganisms used in fermented foods. As the microorganism, a skin resident microorganism is preferable from the viewpoint of screening a foot odor inhibitor more suitable for suppressing foot odor. Examples of skin resident microorganisms include Staphylococcus.epidermidis, Staphylococcus.warneri A, Staphylococcus.warneri B, Staphylococcus.caprae B, Staphylococcus.haemolyticus, Staphylococcus.capitis A, Staphylococlin. Staphylococcus.delphini, Staphylococcus.aureus, Staphylococcus.hominis, Staphylococcus.xylosus, Staphylococcus.hyicus, Staphylococcus.cohnii, Corynebacterium.minutissimum, Corynebacterium.xerosis, Corynebacterium.tenuis, Micrococcus, etc.

被験物質としては、例えば、L−ロイシンからイソ吉草酸アルデヒドまでの変換経路のいずれの段階での変換を阻害するもの、イソ吉草酸アルデヒドを分解させるもの、イソ吉草酸アルデヒドの構造を変化させるもの、イソ吉草酸アルデヒドを吸収または吸着するもの等が挙げられる。
被験物質の適用量としては、足臭抑制剤としての効果を奏するであろうと思われる量を中心に複数の適応量を試験することが好ましい。
前記培地におけるL−ロイシンの含有率としては、実際の足臭が発生する際の条件を再現する観点から、例えば、0.01〜5重量%、好ましくは0.1〜2重量%が挙げられる。
Examples of test substances include substances that inhibit conversion at any stage of the conversion pathway from L-leucine to isovaleric aldehyde, those that decompose isovaleric aldehyde, and those that change the structure of isovaleric aldehyde And those that absorb or adsorb isovaleric aldehyde.
As the application amount of the test substance, it is preferable to test a plurality of adaptation amounts mainly on the amount that would be effective as a foot odor suppressor.
The content of L-leucine in the medium is, for example, 0.01 to 5% by weight, preferably 0.1 to 2% by weight, from the viewpoint of reproducing the conditions when actual foot odor is generated. .

用いる培地としては、前記微生物の培養に通常用いられる培地を使用することができる。添加される培地成分としては、例えば、酵母エキス、リン酸、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、塩化アンモニウム、塩化マンガン、塩化鉄、塩化カルシウム等が挙げられる。
前記微生物の培養時間は、微生物の種類、培地の種類などによって異なるが、微生物によるL−ロイシンからイソ吉草酸アルデヒドが生成するのに要する時間を十分に確保する観点から、例えば、1〜72時間、好ましくは3〜24時間が挙げられる。
前記微生物の培養温度は、微生物の種類などによって異なるが、微生物を良好に生育させる観点から、例えば、20〜50℃、好ましくは30〜40℃が挙げられる。
As a medium to be used, a medium usually used for culturing the microorganism can be used. Examples of the medium component to be added include yeast extract, phosphoric acid, magnesium sulfate, sodium chloride, ammonium chloride, manganese chloride, iron chloride, calcium chloride and the like.
The culture time of the microorganism varies depending on the type of microorganism, the type of medium, etc., but from the viewpoint of sufficiently securing the time required for isovaleric aldehyde to be produced from L-leucine by the microorganism, for example, 1 to 72 hours. , Preferably 3-24 hours are mentioned.
Although the culture | cultivation temperature of the said microorganisms changes with kinds etc. of microorganisms, it is 20-50 degreeC from a viewpoint of growing microorganisms favorably, Preferably it is 30-40 degreeC.

ステップ(2)では、前記ステップ(1)で得られた培養物(培養物A)における前記微生物の生菌数および/またはイソ吉草酸アルデヒドの量を測定することにより、被験物質がイソ吉草酸アルデヒドの生成を抑制するかを判定する。
前記培養物における前記微生物の生菌数の測定方法は、特に限定されないが、本発明においては、例えば、前記培養物を寒天培地に塗布し、一定時間培養後に生成したコロニーの数を計測するコロニーカウント法、顕微鏡観察によって培養物Aにおける前記微生物の数を測定する方法などが挙げられる。
前記培養物におけるイソ吉草酸アルデヒドの量の測定方法としては、前記の足臭判定方法におけるイソ吉草酸アルデヒドの量の測定方法と同様に行うことができる。
In step (2), the test substance is isovaleric acid by measuring the viable count of the microorganism and / or the amount of isovaleric aldehyde in the culture (cultured product A) obtained in step (1). Determine whether to suppress the formation of aldehyde.
The method for measuring the number of viable microorganisms in the culture is not particularly limited. In the present invention, for example, the colony is applied to the agar medium and the number of colonies generated after culturing for a predetermined time is measured. Examples thereof include a counting method and a method of measuring the number of the microorganisms in the culture A by microscopic observation.
The method for measuring the amount of isovaleric aldehyde in the culture can be carried out in the same manner as the method for measuring the amount of isovaleric aldehyde in the foot odor determination method.

ステップ(2)において、被験物質がイソ吉草酸アルデヒドの生成を抑制するかどうかを判定するためには、例えば、被験物質を含めずに、前記ステップ(1)の操作を行って培養物(培養物B)を調製して、
(a)培養物Bにおける微生物の生菌数を、前記培養物Aにおける微生物の生菌数と比較すること、および/または
(b)培養物Bに含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量と、培養物Aに含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量とを比較すること、
などにより行うことができる。
この場合、
(a1)培養物Aにおける微生物の生菌数が培養物Bにおける微生物の生菌数よりも少ないこと、および/または
(b1)培養物Aに含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量が培養物Bに含まれるイソ吉草酸アルデヒドの量よりも少ないこと
を満たす場合、被験物質がイソ吉草酸アルデヒドの生成を抑制する物質であると判定することができる。
In step (2), in order to determine whether the test substance suppresses the production of isovaleric aldehyde, for example, the operation of step (1) is performed without including the test substance, and the culture (culture Preparation B)
(A) comparing the number of living microorganisms in the culture B with the number of living microorganisms in the culture A; and / or (b) the amount of isovaleric aldehyde contained in the culture B and the culture Comparing the amount of isovaleric aldehyde contained in product A;
Etc.
in this case,
(A1) The number of living microorganisms in the culture A is less than the number of living microorganisms in the culture B, and / or (b1) the amount of isovaleric aldehyde contained in the culture A is in the culture B. When satisfy | filling that it is less than the quantity of the isovaleric aldehyde contained, it can be determined that a test substance is a substance which suppresses the production | generation of isovaleric aldehyde.

ステップ(3)では、前記ステップ(2)において、イソ吉草酸アルデヒドの生成を抑制する被験物質を、足臭抑制剤として選択する。
本発明の足臭抑制剤のスクリーニング方法では、前記微生物の生菌数および/または前記微生物により産生されるイソ吉草酸アルデヒドの量によって、イソ吉草酸アルデヒドの生成を抑制する被験物質を足臭抑制剤として選択する。したがって、本発明の足臭抑制剤のスクリーニング方法は、官能評価によって足臭抑制剤を選択する場合と比べ、簡便な操作で客観的かつ的確に、足臭抑制剤を評価することができる。
In step (3), the test substance that suppresses the production of isovaleric aldehyde in step (2) is selected as a foot odor inhibitor.
In the method for screening a foot odor inhibitor of the present invention, a test substance that suppresses the production of isovaleric aldehyde is controlled by the viable count of the microorganism and / or the amount of isovaleric aldehyde produced by the microorganism. Select as an agent. Therefore, the foot odor inhibitor screening method of the present invention can evaluate the foot odor inhibitor objectively and accurately with a simple operation, compared with the case where the foot odor inhibitor is selected by sensory evaluation.

以下、本発明を実施例、試験例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに何ら限定されるものではない。
足臭の強度の評価、足からのサンプリング、ならびにイソ吉草酸およびイソ吉草酸アルデヒドの量の分析は以下のようにして行った。
EXAMPLES Hereinafter, although an Example and a test example demonstrate this invention further in detail, this invention is not limited to these at all.
Evaluation of foot odor intensity, sampling from the foot, and analysis of the amount of isovaleric acid and isovaleric aldehyde were performed as follows.

足臭の強度の評価方法
パネラー3人によって、以下の評価基準を用いて足の裏および指(靴下および試験片)における足臭の強度の評価を行った。得られた評価結果の数値から平均値を算出して、足臭の強度とした。
〔評価基準〕
0点:におわない
1点:かすかににおう
2点:弱くにおう
3点:はっきりにおう
4点:やや強くにおう
5点:かなり強くにおう
Evaluation method of foot odor intensity Three panelists evaluated the foot odor intensity on the soles and fingers (socks and test pieces) of the foot using the following evaluation criteria. An average value was calculated from the numerical values of the obtained evaluation results, and was used as the intensity of foot odor.
〔Evaluation criteria〕
0 point: not smelling 1 point: faintly smelling 2 points: weakly smelling 3 points: clearly smelling 4 points: smelling slightly strong 5 points: smelling very strongly

足からのサンプリング方法
被験者は指定の靴下(洗浄済、綿100%)および靴を履き、一定時間(6時間)放置する。放置後、足の親指と人差し指の間、人差し指と中指の間、中指と薬指の間に各々2cm×8cmの試験片(綿100%)を2つ折りにして挟んだ後、外れないようにテープを巻き、靴下および靴を履く。更に2時間経過後、靴下および試験片を回収し、官能評価(嗅覚)を行う。
Sampling method from the foot The subject wears the specified socks (washed, 100% cotton) and shoes, and is left for a certain time (6 hours). After leaving, fold a 2cm x 8cm test piece (100% cotton) between the thumb and forefinger, between the forefinger and middle finger, and between the middle and ring fingers, and then place the tape so that it does not come off. Wear rolls, socks and shoes. Further, after 2 hours, socks and test pieces are collected and subjected to sensory evaluation (olfaction).

イソ吉草酸およびイソ吉草酸アルデヒドの量の分析方法
足から得たサンプル(試験片)を、ヘッドスペースバイアルに挿入し、気化させた成分をヘッドスペース−ガスクロマトグラフ−質量分析法(HSS−GC−MS)を用いて下記条件で分析して、イソ吉草酸およびイソ吉草酸アルデヒドのピーク高さ(またはピーク面積)を得た。
〔GC−MSの分析条件〕
機種:アジレント・テクノロジー社製 ヘッドスペース−ガスクロマトグラフ−質量分析装置(HSS−GC−MS)
HSS:7697A
GC :7890B
MS :5977A
カラム :GLサイエンス社製 InertCap Pure Wax 60m,0.25mmI.D.,0.25μm
キャリヤーガス:He
[試験条件]
<ヘッドスペース条件>
ループサイズ:3mL
オーブン温度:45℃
ループ温度 :75℃
トランスファーライン温度:100℃
バイアル平衡化:10分
注入時間:1分
<GC条件>
温度:40℃(2分)⇒昇温(3℃/分)⇒180℃⇒昇温(10℃/分)⇒220℃
注入口:200℃
スプリット比 10:1
平均線速度:28cm/秒
<MS条件>
イオン化法:電子イオン化法(EI)
Method for Analyzing Amount of Isovaleric Acid and Isovaleric Aldehyde A sample (test piece) obtained from the foot was inserted into a headspace vial, and the vaporized components were subjected to headspace-gas chromatography-mass spectrometry (HSS-GC- MS) was used under the following conditions to obtain the peak height (or peak area) of isovaleric acid and isovaleric aldehyde.
[GC-MS analysis conditions]
Model: Headspace-gas chromatograph-mass spectrometer (HSS-GC-MS) manufactured by Agilent Technologies
HSS: 7697A
GC: 7890B
MS: 5977A
Column: GL Science InertCap Pure Wax 60m, 0.25mmI. D. , 0.25 μm
Carrier gas: He
[Test conditions]
<Head space conditions>
Loop size: 3mL
Oven temperature: 45 ° C
Loop temperature: 75 ° C
Transfer line temperature: 100 ° C
Vial equilibration: 10 minutes Injection time: 1 minute <GC conditions>
Temperature: 40 ° C (2 minutes) ⇒ Temperature rise (3 ° C / min) ⇒ 180 ° C ⇒ Temperature rise (10 ° C / min) ⇒ 220 ° C
Inlet: 200 ° C
Split ratio 10: 1
Average linear velocity: 28 cm / sec <MS conditions>
Ionization method: Electron ionization method (EI)

〔イソ吉草酸アルデヒドの定量〕
上記の分析結果で得られたイソ吉草酸アルデヒドのピーク高さ(またはピーク面積)に基づいて、下記のとおり、イソ吉草酸アルデヒドの定量値(ppm)を求めた。
既知濃度のイソ吉草酸アルデヒドのプロピレングリコール溶液を調製し、ヘッドスペースバイアルに添加したものを標準試料とした。試料及び標準試料につき、上記条件でHSS−GC−MSにより試験を行い、試料および標準試料のピーク高さ(またはピーク面積)を求めた。
イソ吉草酸アルデヒドの量(ppm)
=標準試料の濃度(ppm)×試料のピーク高さ(またはピーク面積)÷標準試料のピーク高さ(またはピーク面積)
実施例2では、イソ吉草酸アルデヒドのピーク高さに基づいて定量値を求めており、実施例3では、イソ吉草酸アルデヒドのピーク面積に基づいて定量値を求めた。
[Quantitative determination of isovaleric aldehyde]
Based on the peak height (or peak area) of isovaleric aldehyde obtained from the above analysis results, the quantitative value (ppm) of isovaleric aldehyde was determined as follows.
A propylene glycol solution of isovaleric aldehyde of known concentration was prepared and added to a headspace vial as a standard sample. The sample and standard sample were tested by HSS-GC-MS under the above conditions, and the peak height (or peak area) of the sample and standard sample was determined.
Amount of isovaleric aldehyde (ppm)
= Standard sample concentration (ppm) x Sample peak height (or peak area) / Standard sample peak height (or peak area)
In Example 2, the quantitative value was determined based on the peak height of isovaleric aldehyde, and in Example 3, the quantitative value was determined based on the peak area of isovaleric aldehyde.

実施例1
足臭の強度とイソ吉草酸アルデヒドおよびイソ吉草酸の量の関係
前記の足臭の強度の評価方法、足からのサンプリング、ならびにイソ吉草酸およびイソ吉草酸アルデヒドの量の分析方法に従って、被験者10名の足臭について評価および分析を行った。その評価および分析の結果を図1および図2にまとめる。図1では、横軸に10名の被験者を並べて、縦軸に各被験者の「足臭の強度」を●でプロットし、各被験者の「イソ吉草酸アルデヒドのピーク高さ」を■でプロットしている。図2では、横軸に10名の被験者を並べて、縦軸に各被験者の「足臭の強度」を●でプロットし、各被験者の「イソ吉草酸のピーク高さ」を■でプロットしている。
図2から分かる通り、特に足臭の強度が低いところで、イソ吉草酸は観測されず、足臭の強度を示す指標にはなり得ない。他方、図1から分かる通り、イソ吉草酸アルデヒドの量は、足臭の強度が弱いところから強いところまで広い範囲で、足臭の強度と強い相関を示している。
以上より、イソ吉草酸アルデヒドは、足臭の強度を示す優れた足臭判定用指標として用いることができることが分かる。
Example 1
Relationship between the intensity of foot odor and the amount of isovaleric aldehyde and isovaleric acid According to the method for evaluating the intensity of foot odor, sampling from the foot, and the method for analyzing the amount of isovaleric acid and isovaleric aldehyde, subject 10 The name foot odor was evaluated and analyzed. The results of the evaluation and analysis are summarized in FIG. 1 and FIG. In FIG. 1, 10 subjects are arranged on the horizontal axis, the “foot odor intensity” of each subject is plotted with ●, and the “peak height of isovaleric aldehyde” of each subject is plotted with ■. ing. In FIG. 2, 10 subjects are arranged on the horizontal axis, the “foot odor intensity” of each subject is plotted with ●, and the “peak height of isovaleric acid” of each subject is plotted with ■ on the vertical axis. Yes.
As can be seen from FIG. 2, isovaleric acid is not observed particularly where the foot odor intensity is low, and cannot be an indicator of the foot odor intensity. On the other hand, as can be seen from FIG. 1, the amount of isovaleric aldehyde shows a strong correlation with the intensity of foot odor in a wide range from where the intensity of foot odor is weak to where it is strong.
From the above, it can be seen that isovaleric aldehyde can be used as an excellent indicator for determining foot odor indicating the strength of foot odor.

実施例2
各種微生物によるイソ吉草酸アルデヒドの生成
足の皮膚に存在しうる皮膚常在微生物を用いて、L−ロイシンの存在下または非存在下、イソ吉草酸アルデヒドが生成されるかを実験した。用いた微生物は、Staphylococcus.aureus、Staphylococcus.epidermidisおよびCorynebacterium.minutissimumである。
菌濃度が1×10(CFU/mL)になるように1重量%ロイシン入り生理食塩水を用いて調製する。被験物質を1重量%になるように添加した。培養液をヘッドスペースバイアルに入れて封入し、よく混和後、36℃で6時間静置培養した。
Example 2
Production of Isovaleric Aldehyde by Various Microorganisms An experiment was conducted to determine whether isovaleric aldehyde is produced in the presence or absence of L-leucine using a skin resident microorganism that may be present in the skin of the foot. The microorganisms used are Staphylococcus.aureus, Staphylococcus.epidermidis and Corynebacterium.minutissimum.
Prepare using 1% by weight leucine-containing physiological saline so that the bacterial concentration is 1 × 10 8 (CFU / mL). The test substance was added to 1% by weight. The culture was placed in a headspace vial, sealed, mixed well, and then statically cultured at 36 ° C. for 6 hours.

得られた培養液より気化したガスを下記の分析方法で分析して、生成したイソ吉草酸アルデヒドの量を測定した。その結果を以下に表1に記す。
The gas vaporized from the obtained culture broth was analyzed by the following analysis method, and the amount of isovaleric aldehyde produced was measured. The results are shown in Table 1 below.

L−ロイシンを培地に添加しない場合、いずれの微生物の培地にもイソ吉草酸アルデヒドは測定されなかった。それに対して、1重量%のL−ロイシンを培地に添加した場合、Staphylococcus.aureus、Staphylococcus.epidermidisおよびCorynebacterium.minutissimumの3つの微生物では、イソ吉草酸アルデヒドが生成された。
この試験結果から、足臭判定用指標剤であるイソ吉草酸アルデヒドは、足の皮膚表面に繁殖する微生物、例えばStaphylococcus.aureus、Staphylococcus.epidermidisおよびCorynebacterium.minutissimumによって、L−ロイシンから生成されることが分かる。L−ロイシンは、皮膚の角質に存在する蛋白質が微生物によって加水分解されて生成される。
この試験結果から、足の皮膚表面に繁殖する微生物、例えばStaphylococcus.aureus、Staphylococcus.epidermidisおよびCorynebacterium.minutissimumを用いることで、足臭判定用指標剤であるイソ吉草酸アルデヒドの生成を阻害する足臭抑制剤をスクリーニングすることが可能であることが理解される。
When L-leucine was not added to the medium, isovaleric aldehyde was not measured in the medium of any microorganism. On the other hand, when 1% by weight of L-leucine was added to the medium, isovaleric aldehyde was produced in three microorganisms, Staphylococcus.aureus, Staphylococcus.epidermidis and Corynebacterium.minutissimum.
From this test result, isovaleric aldehyde, an indicator for determining foot odor, is produced from L-leucine by microorganisms that propagate on the skin surface of the foot, such as Staphylococcus.aureus, Staphylococcus.epidermidis and Corynebacterium.minutissimum. I understand. L-leucine is produced by hydrolyzing a protein present in the skin of the skin by microorganisms.
From this test result, foot odor that inhibits the production of isovaleric aldehyde, an indicator for determining foot odor, by using microorganisms that propagate on the skin surface of the foot, such as Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Corynebacterium minutissimum. It is understood that inhibitors can be screened.

実施例3
デオドラント剤の評価
デオドラント剤(薬用メンソレータム リフレア足指クリーム:ロート製薬(株))を被験者の足に塗布した。その後、指定の靴下(洗浄済、綿100%)および靴を履き、一定時間(6時間)放置した。放置後、足の親指と人差し指の間、人差し指と中指の間、中指と薬指の間に各々2cm×8cmの試験片(綿100%)を2つ折りにして挟んだ後、外れないようにテープを巻き、靴下および靴を履いた。更に2時間経過後、靴下および試験片を回収し、回収した試験片をヘッドスペース分析用バイアル内に挿入し、試験片に付着したイソ吉草酸アルデヒドの量(A)を分析した。
また、被験者の足にデオドラント剤を塗布せずに、前記と同様に操作を行なって、被験者に着用させた試験片に付着したイソ吉草酸アルデヒドの量(B)を分析した。
イソ吉草酸アルデヒドの量(A)とイソ吉草酸アルデヒドの量(B)とを比べ、デオドラント剤によって足臭判定用指標剤が減少しているかどうかを調べた。当デオドラント剤によって足臭判定用指標剤が減少している場合、当デオドラント剤は、消臭効果および/または防臭効果を有すると評価した。
Example 3
Evaluation of Deodorant Agent A deodorant agent (medicinal mentholatum reflair toe cream: Rohto Pharmaceutical Co., Ltd.) was applied to the subject's foot. Then, the designated socks (washed, 100% cotton) and shoes were put on and left for a certain time (6 hours). After leaving, fold a 2cm x 8cm test piece (100% cotton) between the thumb and forefinger, between the forefinger and middle finger, and between the middle and ring fingers, and then place the tape so that it does not come off. I wore rolls, socks and shoes. After another 2 hours, socks and test pieces were collected, the collected test pieces were inserted into a headspace analysis vial, and the amount (A) of isovaleric aldehyde adhering to the test pieces was analyzed.
Further, the same procedure as described above was performed without applying a deodorant agent to the subject's feet, and the amount (B) of isovaleric aldehyde adhering to the test piece worn by the subject was analyzed.
The amount of isovaleric aldehyde (A) was compared with the amount of isovaleric aldehyde (B) to examine whether the deodorant agent decreased the indicator for foot odor determination. When the index agent for foot odor determination was decreased by the deodorant, the deodorant was evaluated as having a deodorizing effect and / or a deodorizing effect.

被験者No.1では、デオドランド剤を塗布した右足は、足臭の強度が1であるが、デオドランド剤を塗布していない左足は、足臭の強度が3と高く、またイソ吉草酸アルデヒドの発生量が、右足に比べて4.0倍高かった。被験者No.2でも、同様の結果であり、イソ吉草酸アルデヒドの発生量が2.8倍異なった。
以上の試験結果から、イソ吉草酸アルデヒドの量を指標にして、デオドランド剤の効果を確かめることができることが分かる。
In test subject No.1, the right foot with deodorant applied has a foot odor intensity of 1, while the left foot without deodorant applied has a higher foot odor intensity of 3 and also produces isovaleric aldehyde. The amount was 4.0 times higher than the right foot. In subject No. 2, the same result was obtained, and the amount of isovaleric aldehyde generated was 2.8 times different.
From the above test results, it can be seen that the effect of the deodorant agent can be confirmed using the amount of isovaleric aldehyde as an index.

実施例4
デオドラント剤の評価
デオドラント剤を無臭化した靴下に噴霧する。その後、実施例3と同様に試験を行い、デオドラント剤によってイソ吉草酸アルデヒドの量が減少しているかどうかを調べる。当デオドラント剤によって足臭判定用指標剤が減少している場合、当デオドラント剤は、消臭効果および/または防臭効果を有すると評価する。
Example 4
Evaluation of Deodorant Agent Deodorant agent is sprayed on non-brominated socks. Thereafter, a test is conducted in the same manner as in Example 3 to examine whether or not the amount of isovaleric aldehyde is reduced by the deodorant agent. When the indicator for foot odor determination is decreased by the deodorant, the deodorant is evaluated as having a deodorizing effect and / or a deodorizing effect.

実施例5
足臭抑制剤のスクリーニング
実施例2の1重量%のL−ロイシンを添加した実験において、微生物としてStaphylococcus.epidermidis ATCC 12228を用いて、被験物質を種々濃度で添加して、実験を行った。実験終了後に、得られた培養液より気化したガスを上記の分析方法で分析して、生成したイソ吉草酸アルデヒドの量(C)を測定する。
被験物質を添加せずに、前記と同様に操作を行なって、得られた培養液より気化したガスの存在するイソ吉草酸アルデヒドの量(D)を測定する。
イソ吉草酸アルデヒドの量(C)とイソ吉草酸アルデヒドの量(D)とを比べ、被験物質によってイソ吉草酸アルデヒドが減少しているかどうかを調べる。被験物質によってイソ吉草酸アルデヒドが減少している場合、被験物質はイソ吉草酸アルデヒドの生成を阻害し、消臭効果を有すると評価する。
Example 5
Screening for foot odor suppressor In the experiment in which 1% by weight of L-leucine was added in Example 2, Staphylococcus. Epidermidis ATCC 12228 was used as a microorganism, and the test substance was added at various concentrations for the experiment. After the experiment is completed, the gas evaporated from the obtained culture solution is analyzed by the above analysis method, and the amount (C) of the produced isovaleric aldehyde is measured.
The same procedure as described above is performed without adding the test substance, and the amount (D) of isovaleric aldehyde present in the gas vaporized from the obtained culture solution is measured.
The amount of isovaleric aldehyde (C) is compared with the amount of isovaleric aldehyde (D) to determine whether the test substance reduces the amount of isovaleric aldehyde. When the isovaleric aldehyde is reduced by the test substance, the test substance inhibits the production of isovaleric aldehyde and is evaluated as having a deodorizing effect.

今回開示された実施の形態はすべての点で例示であって、制限的なものではないと考えられるべきである。本発明の範囲は上記した説明ではなく請求の範囲によって示され、請求の範囲と均等の意味、および範囲内でのすべての変更が含まれることが意図される。   The embodiment disclosed this time is to be considered as illustrative in all points and not restrictive. The scope of the present invention is defined by the terms of the claims, rather than the description above, and is intended to include any modifications within the scope and meaning equivalent to the terms of the claims.

本発明の足臭判定用指標剤および足臭判定方法によって、弱い足臭まで広い範囲で、足臭を客観的に評価することができる。また、本発明のデオドラント剤の評価方法によって、デオドラント剤の足臭の消臭効果、デオドラント剤の性能を簡便な操作で客観的かつ的確に評価することが可能になる。また、本発明の足臭抑制剤のスクリーニング方法によって、足臭抑制剤を簡便な操作で効率よくスクリーニングすることが可能になる。   The foot odor can be objectively evaluated in a wide range up to a weak foot odor by the foot odor determination indicator and the foot odor determination method of the present invention. Further, the deodorant agent evaluation method of the present invention makes it possible to objectively and accurately evaluate the deodorant effect of the foot odor of the deodorant agent and the performance of the deodorant agent with a simple operation. In addition, the foot odor inhibitor screening method of the present invention enables efficient screening of foot odor inhibitors with a simple operation.

Claims (2)

臭の発生を抑制するための足臭抑制剤のスクリーニング方法であって、
(1)イソ吉草酸アルデヒドの産生能を有する微生物を、被験物質およびL−ロイシンを含有する培地で培養するステップ、
(2)前記ステップ(1)で得られた培養物におけるソ吉草酸アルデヒドの量を測定することにより、被験物質がイソ吉草酸アルデヒドの生成を抑制するかどうかを判定するステップ、および
(3)前記ステップ(2)において、イソ吉草酸アルデヒドの生成を抑制する被験物質を、足臭抑制剤として選択するステップ
を含む、足臭抑制剤のスクリーニング方法。
A method for screening a foot odor inhibitor for suppressing the generation of foot odor,
(1) culturing a microorganism capable of producing isovaleric aldehyde in a medium containing a test substance and L-leucine,
(2) by measuring the amount of Lee Seo valeric aldehyde in the culture obtained in step (1), determining whether the test substance inhibits the production of iso-valeric aldehyde, and (3 ) A method for screening a foot odor inhibitor, comprising the step of selecting, as the foot odor inhibitor, a test substance that suppresses the production of isovaleric aldehyde in the step (2).
前記微生物がStaphylococcus.aureus、Staphylococcus.epidermidisおよびCorynebacterium.minutissimumからなる群より選ばれた少なくとも1種である請求項に記載の足臭抑制剤のスクリーニング方法。 The method for screening a foot odor inhibitor according to claim 1 , wherein the microorganism is at least one selected from the group consisting of Staphylococcus.aureus, Staphylococcus.epidermidis and Corynebacterium.minutissimum.
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