JP6592638B1 - 脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、脂肪性肝疾患を検出するための診断薬キット及びバイオマーカー、対象の肝線維化の進行度の判定方法、並びに対象の肝線維化の進行度を判定するためのバイオマーカー - Google Patents
脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、脂肪性肝疾患を検出するための診断薬キット及びバイオマーカー、対象の肝線維化の進行度の判定方法、並びに対象の肝線維化の進行度を判定するためのバイオマーカー Download PDFInfo
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Abstract
Description
具体的に、本発明は以下のとおりである。
<1>対象からの体液試料中の、オクタデセノイルカルニチン、テトラデセノイルカルニチン、テトラデカノイルカルニチン、ヘキサデカノイルカルニチン、オクタデカノイルカルニチン、及びオクタデカジエノイルカルニチンからなる群から選択される長鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を測定することと
測定した前記長鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を基準値と比較することと
を含む、前記対象における脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、
<2> 前記体液試料が、血液、血清又は血漿である、<1>に記載の脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、
<3> 前記脂肪性肝疾患が、NASHである、<1>又は<2>に記載の脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、
<4> 肝臓における線維化の進行度を判断する、<1>〜<3>のいずれかに記載の脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、
<5> アシル基の炭素数が2〜10である中短鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を測定することと
測定した中短鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を基準値と比較することと
をさらに含む、<1>〜<4>のいずれかに記載の脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、
<6> 前記中短鎖アシルカルニチンが、イソ吉草酸カルニチンである、<5>に記載の脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、
<7>対象における脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法であって、以下の計算式を用いて、指標スコアを計算することと:
[式1]
AC14:1+AC18:1−AC5:0
(式中、AC14:1は、対象からの体液試料中のテトラデセノイルカルニチンの量を示し、AC18:1は、対象からの体液試料中のオクタデセノイルカルニチンの量を示し、そして、AC5:0は、対象からの体液試料中のイソ吉草酸カルニチンの量を示す)
計算した前記指標スコアを基準値と比較することと
を含む、前記方法、
<8> 対象における脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法であって、以下の計算式を用いて、指標スコアを計算することと:
[式2]
(AC16:0+AC18:1)×100/AC2:0
(式中、AC16:0は、対象からの体液試料中のヘキサデカノイルカルニチンの量を示し、AC18:1は、対象からの体液試料中のオクタデセノイルカルニチンの量を示し、そしてAC2:0は、対象からの体液試料中のアセチルカルニチンの量を示す)
計算した前記指標スコアを基準値と比較することと
を含む、前記方法、
<9> 前記体液試料が、血液、血清又は血漿であり、前記脂肪性肝疾患が、NASHが進行した肝細胞癌である、<8>に記載の脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法、
<10> 脂肪性肝疾患を診断するための体液中のバイオマーカーであって、
オクタデセノイルカルニチン、テトラデセノイルカルニチン、テトラデカノイルカルニチン、ヘキサデカノイルカルニチン、オクタデカノイルカルニチン、及びオクタデカジエノイルカルニチンからなる群から選択されることを特徴とする、前記バイオマーカー、
<11> 前記体液試料が、血液、血清又は血漿である、<10>に記載のバイオマーカー、
<12> 前記脂肪性肝疾患が、NASHである、<10>又は<11>に記載のバイオマーカー、
<13> 肝臓における線維化の進行度を判断する、<10>〜<12>のいずれかに記載のバイオマーカー、
<14>脂肪性肝疾患を検出するための診断薬キットであって、オクタデセノイルカルニチン、テトラデセノイルカルニチン、テトラデカノイルカルニチン、ヘキサデカノイルカルニチン、オクタデカノイルカルニチン、及びオクタデカジエノイルカルニチンからなる群から選択される長鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を測定する試薬を含む診断薬キット、
<15> 脂肪性肝疾患に罹患している可能性のある対象からの体液試料中の、オクタデセノイルカルニチン、テトラデセノイルカルニチン、テトラデカノイルカルニチン、ヘキサデカノイルカルニチン、オクタデカノイルカルニチン、及びオクタデカジエノイルカルニチンからなる群から選択される長鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を測定すること
測定した長鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を基準値と比較すること
を含む、前記対象における肝線維化の進行度の判定方法、
<16> 前記体液試料が、血液、血清又は血漿である、<15>に記載の対象における肝線維化の進行度の判定方法、
<17> アシル基の炭素数が2〜10である中短鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を測定することと
測定した中短鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を基準値と比較すること
をさらに含む、<15>又は<16>に記載の対象における肝線維化の進行度の判定方法、
<18> 前記中短鎖アシルカルニチンが、イソ吉草酸カルニチンである、<17>に記載の対象における肝線維化の進行度の判定方法、
<19>脂肪性肝疾患に罹患している可能性のある対象における肝線維化の進行度の判定方法であって、以下の計算式を用いて、指標スコアを計算することと
[式1]
AC14:1+AC18:1−AC5:0
(式中、AC14:1は、対象からの体液試料中のテトラデセノイルカルニチンの量を示し、AC18:1は、対象からの体液試料中のオクタデセノイルカルニチンの量を示し、そして、AC5:0は、対象からの体液試料中のイソ吉草酸カルニチンの量を示す)
計算した前記指標スコアを基準値と比較することと
を含む、前記方法、並びに
<20> 脂肪性肝疾患に罹患している可能性のある対象における、肝線維化の進行度を判定するための体液中のバイオマーカーであって、
オクタデセノイルカルニチン、テトラデセノイルカルニチン、テトラデカノイルカルニチン、ヘキサデカノイルカルニチン、オクタデカノイルカルニチン、及びオクタデカジエノイルカルニチンからなる群から選択されることを特徴とする、前記バイオマーカー。
(対象からの体液試料)
本発明において分析可能な体液試料としては、主に生体(生物)由来の体液を挙げることができる。本発明において分析可能な体液試料は、より好ましくは、血液、血清、血漿、尿、唾液、喀痰、涙液、耳漏、又は前立腺液であり、さらに好ましくは血液、血清又は血漿であり、さらに好ましくは脂肪性肝疾患(例えば、NAFLD又はNASH)に罹患している疑いのある対象の血液、血清又は血漿である。生体又は対象は、ヒト又は動物(例えば、マウス、モルモット、ラット、サル、イヌ、ネコ、ハムスター、ウマ、ウシ、及びブタ)を含み、好ましくはヒトである。
本発明において、アシルカルニチンとは、式1で表される化合物群をいう。
式1:(CH3)3N+CH2CH(OR1)CH2COO-
(式1中、R1は炭素数2〜30の飽和もしくは不飽和の脂肪酸残基を表し、該脂肪酸残基に結合する水素原子は、酸素原子又はヒドロキシ基で置換されていてもよい。)
本明細書において「長鎖アシルカルニチン」とは、脂肪酸残基(アシル基)の炭素数が12〜30個であるアシルカルニチンを意味する。本発明の脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法においては、オクタデセノイルカルニチン、テトラデセノイルカルニチン、テトラデカノイルカルニチン、ヘキサデカノイルカルニチン、オクタデカノイルカルニチン、及びオクタデカジエノイルカルニチンからなる群から選択される長鎖アシルカルニチン(以下、6種の長鎖アシルカルニチンと称することがある)のいずれか1つ以上の量を測定する。より好ましくは、測定される長鎖アシルカルニチンは、テトラデセノイルカルニチン及びオクタデセノイルカルニチンから選択される1つ以上であり、最も好ましくはオクタデセノイルカルニチンである。
長鎖アシルカルニチンの量は、例えばキャピラリー電気泳動−質量分析計、及び液体クロマトグラフ−タンデム型質量分析計(LC−MS/MS)等により測定することができる。これらの方法を組み合わせて使用することもできる。本明細書において「液体クロマトグラフ−タンデム型質量分析計」又は「LC−MS/MS」は、液体クロマトグラフ(LC)により分離した分析対象成分を専用のインターフェースを介してイオン化し、生成するイオンを質量分析計(MS)で分離して特定の質量を有するイオンを解離及び/又はフラグメント化させ、それらのイオンを質量分析計で検出する装置を意味する。
本発明の脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法は、6種の長鎖アシルカルニチンのうちのいずれか1つ以上の長鎖アシルカルニチンの量を基準値と比較することを含む。本発明の脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法では、対象における6種の長鎖アシルカルニチンのうちのいずれかの量が、健常人群の前記長鎖アシルカルニチンの量よりも高いことを指標として脂肪性肝疾患の検出およびリスクの予測を行うことができる。具体的には、例えば、対象における6種の長鎖アシルカルニチンのうちのいずれかの量が健常人群との判定用閾値(基準値)以上となった場合に、脂肪性肝疾患を検出するか、又は発症する可能性が高いと判定することができる。
[式1]
AC14:1+AC18:1−AC5:0
(式中、AC14:1は、対象からの体液試料中のテトラデセノイルカルニチンの量を示し、AC18:1は、対象からの体液試料中のオクタデセノイルカルニチンの量を示し、そして、AC5:0は、対象からの体液試料中のイソ吉草酸カルニチンの量を示す)
[式2]
(AC16:0+AC18:1)×100/AC2:0
(式中、AC16:0は、対象からの体液試料中のヘキサデカノイルカルニチンの量を示し、AC18:1は、対象からの体液試料中のオクタデセノイルカルニチンの量を示し、そしてAC2:0は、対象からの体液試料中のアセチルカルニチンの量を示す)
上記式を用いる場合、脂肪性肝疾患は、好ましくはNASHが進行した肝細胞癌である。
本明細書において「脂肪性肝疾患」とは、肝細胞の線維化及び/又は脂肪沈着によって引き起こされる肝疾患を意味する。脂肪性肝疾患は、好ましくはNAFLDである。NAFLDには、非アルコール性脂肪肝(NAFL)、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)、NASHが進行した肝硬変、及びNASHが進行した肝細胞癌が含まれる。脂肪性肝疾患は、より好ましくはNASHである。なお、本明細書においては、用語「NAFLD」及び「NASH」は、NASHが進行した肝細胞癌を含むことができるが、含まないことが好ましい。
また、後述の実施例において示すように、長鎖アシルカルニチンの量と肝線維化とは有意な正の相関を有する。したがって、検出感度の観点からは、脂肪性肝疾患は、NASHが進行した肝硬変、又はNASHが進行した肝細胞癌であることが好ましく、NASHが進行した肝細胞癌であることが最も好ましい。
本発明の脂肪性肝疾患の検出又はリスクの予測方法は、脂肪性肝疾患の進行度をモニタリングすることができる。この場合、特定の時点での対象における6種の長鎖アシルカルニチンのうちのいずれかの量を、判定用閾値(基準値)として使用する。一定期間後(例えば、1、3、6、又は12か月後)に再度この対象におけるこの長鎖アシルカルニチンの量を測定し、以前の測定値と比較してこの長鎖アシルカルニチンの量が多ければ、脂肪性肝疾患が進行していると判断することができる。逆に、以前の測定値と比較してこの長鎖アシルカルニチンの量が同じ程度であるか又は少なければ、脂肪性肝疾患が進行していないと判断することができる。前述のように、6種の長鎖アシルカルニチンのうちのいずれかの量に加えて、アシル基の炭素数がC2〜10である中短鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量(好ましくは、イソ吉草酸カルニチンの量)を、特定の時点及び一定期間経過後にさらに測定することもできる。
本明細書において、バイオマーカーとは、所定の疾患に関連するペプチド、タンパク質、核酸、脂質又はその他の低分子化合物であり、その生体中の濃度の増減が当該疾患の存在又は進行度に反映するものである。本発明の脂肪性肝疾患を診断するためのバイオマーカーでは、対象における6種の長鎖アシルカルニチンのうちのいずれかの量が、健常人群の前記長鎖アシルカルニチンの量よりも高いことを指標として脂肪性肝疾患を診断することができる。具体的には、例えば、対象におけるいずれかの長鎖アシルカルニチンの量が健常人群との判定用閾値(基準値)以上となった場合に、脂肪性肝疾患を検出するか、又は発症する可能性が高いと判定することができる。
本発明の脂肪性肝疾患を検出するための診断薬キットは、6種の長鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を測定するための試薬を含む。前記試薬は、特定の1つの長鎖アシルカルニチンの量を測定するための試薬を含んでいてもよく、2つ以上の長鎖アシルカルニチンの量を測定するための試薬を含んでいてもよい。本発明の脂肪性肝疾患を検出するための診断薬キットは、好ましくは、液体クロマトグラフ−タンデム型質量分析計(LC−MS/MS)を用いて6種の長鎖アシルカルニチンのうちの1つ以上の量を測定するための試薬を含む。
本発明の対象の肝線維化の進行度の判定方法では、対象の体液試料中の6種の長鎖アシルカルニチンのいずれかの量に応じて、肝臓における線維化の進行度を判定することができる。本明細書において「肝線維化」とは、慢性的な肝臓の炎症により、コラーゲン線維などの線維性成分及び/又は細胞外基質を含む結合組織が肝臓に大量に増加し、組織が硬化することを意味する。本発明の対象の肝線維化の進行度の判定方法は、NAFLD又はNASHに罹患している可能性のある対象において、NAFLD又はNASHにより生じる肝線維化の進行度の判定を行うことができる。また、NAFLD又はNASHに既に罹患している対象において、NAFLD又はNASHにより生じる肝線維化の進行度の判定を行うこともできる。長鎖アシルカルニチンの測定方法や体液試料については、前述のとおりである。
本発明の対象の肝線維化の進行度の判定方法は、測定した長鎖アシルカルニチンの量を基準値と比較することを含む。本発明の本発明の対象の肝線維化の進行度の判定方法では、数値の範囲を基準値とすることが好ましい。対象の肝線維化の進行度を判定する際には、予め、種々の肝線維化段階の対象の体液試料中の6種の長鎖アシルカルニチンうちのいずれかの量の範囲を計測しておき、この長鎖アシルカルニチンの量が、特定の肝線維化段階の体液試料中の長鎖アシルカルニチンの範囲に入る場合は、対象はその特定の肝線維化段階である可能性が高い。
肝線維化段階の分類は、例えば、F0:線維化なし、F1:小葉中心部の線維化、F2:小葉中心部+門脈域の線維化、F3:線維性架橋形成、F4:肝硬変、HCC:肝細胞がんの区別に従うことができる。本発明の対象の肝線維化の進行度の判定方法は、対象の肝臓が上記F0〜F4のどの段階にあるかを判定することができる。ただ、上記F0〜F4の分類には限定されず、異なる分類を使用してもよい。
肥満に関連した肝細胞癌に特徴的な代謝の変化を調べるために、通常食(ND)又は高脂肪食(HFD)を与えた8ヶ月齢のジエチルニトロサミン(DEN)投与マウスから得られた非腫瘍組織(NT)及び肝細胞癌組織(HCC)に関して、液体クロマトグラフィー−質量分析(LC−MS)を使用した非標的メタボロミクスプロファイリングを行った。高脂肪食を与えたDEN投与マウスは、肥満に関連した肝細胞癌モデルマウスとして、広く認知されている。
代謝産物の抽出と代謝産物の分析を、Human Metabolome Technologies社(HMT;鶴岡市)において行った。簡潔には、CE−TOFMS分析のために、凍結組織約50mgを内部標準(H3304−1002;HMT)を含有する50%アセトニトリル/ミリQ水1,500μL中に0℃で沈降させた。組織を組織ホモジナイザー(Micro Smash MS100R;富士デジタルバイオロジー社)を用いて1,500rpmで120秒間3回ホモジナイズした。ホモジネートを2,300xg、4℃で5分間遠心分離した。続いて、上部水層800μLをMillipore 5−kDaカットオフフィルター(UltrafreeMC−PLHCC;HMT)を用いて遠心分離し、高分子を除去した(9,100xg、4℃、120分)。濾液を遠心分離して濃縮し、HMTでのCE−TOFMS分析のために、ミリQ水50μLに再懸濁した。
メタボローム分析を、Oogaら Mol Biosyst 2011;7:1217〜1223頁及びSugimotoら Metabolomics 2010;6:78−95頁に記載の方法に基づいて、イオンおよび非イオン代謝産物に関して、それぞれ、CE−TOFMS及びLC−TOFMSを用いて、HMTのDualScanパッケージを用いて行った。簡潔には、Agilent 6210 TOFMS、Agilent 1100 isocratic HPLCポンプ、Agilent G1603A CE−MSアダプターキット、及びAgilent G1607A CE−ESI−MSスプレーキット(Agilent Technologies)を搭載したAgilent CEシステムを使用してCE−TOFMS分析を行った。このシステムは、Agilent G2201A ChemStationソフトウェアバージョンB.03.01 for CE(Agilent Technologies)によって制御されており、溶融シリカキャピラリー(50μm i.d.×80cm全長)により、電解液としての市販の電気泳動バッファー(カチオン及びアニオン分析に関して、それぞれH3301−1001及びH3302−1021;HMT)に接続していた。分光光度計を50〜1,000m/zで走査した。LC−TOFMS分析を、Agilent 6230 TOFMS(Agilent Technologies)を搭載したAgilent LC System(Agilent 1200シリーズRRLCシステムSL)を用いて行った。このシステムをODSカラム(2x50 mm、2μm)を搭載したAgilent G2201A ChemStationソフトウェアバージョンB.03.01(Agilent Technologies)によって制御した。
HFD−HCCでは、ND−NTと比較して、様々な種類の長鎖アシルカルニチン(AC)の量が増加していることが分かった(図1)。
HFD−HCCでは、ND−HCC及びHFD−NTの各々よりも、長鎖アシルカルニチン量が多い傾向があった。特にAC12:1、AC16:0、及びAC18:1の3種は、HFD−HCC組織において他の3種の組織の全てに対して、有意に多い量が確認できた。
実施例1において得た、通常食又は高脂肪食を与えたDEN注入マウスを実験に用いた。ND−NT、ND−HCC、HFD−NT、及びHFD−HCCの各々の組織において、アシルカルニチン代謝に関連するACSL4、CPT1A、CACT、及びCPT2の遺伝子発現量をリアルタイムPCRを用いて調査した。結果を図4に示す。
NAFLD患者保存血清241検体を用いて、液体クロマトグラフ−タンデム型質量分析法(LC−MS/MS法)及びNeoSMAAT(登録商標)(積水メディカル社製)を用いて様々なアシルカルニチンの濃度を測定し、NAFLDの病態との関連性を検討した。また、血清中アシルカルニチン濃度と血清中炎症性サイトカイン濃度又は血清中発癌リスクマーカー濃度との関連性を検討した。
NAFLD患者血清を線維化の程度に応じて、以下のようにF0〜4及び肝細胞癌に分類した。
F0:線維化なし
F1:小葉中心部の線維化
F2:小葉中心部+門脈域の線維化
F3:線維性架橋形成
F4:肝硬変
HCC:肝細胞癌
241検体の内訳は、線維化レベルF0が38検体、F1が74検体、F2が63検体、F4が25検体、肝細胞癌が23検体である。
採取した血清サンプルを、液体クロマトグラフ−タンデム型質量分析法(LC−MS/MS法)及びNeoSMAAT(登録商標)を用いて測定した。NeoSMAAT(登録商標)には、重水素で同位体標識した、カルニチン(C0)、アセチルカルニチン(C2)、プロピオニルカルニチン(C3)、ブチリルカルニチン(C4)、イソ吉草酸カルニチン(C5)、3−ヒドロキシ−イソ吉草酸カルニチン(C5OH)、グルタリルカルニチン(C5DH)、オクタノイルカルニチン(C8)、デカノイルカルニチン(C10)、ドデカノイルカルニチン(C12)、テトラデカノイルカルニチン(C14)、テトラデセノイルカルニチン(C14:1)、パルミトイルカルニチン(C16)、及びステアロイルカルニチン(C18)が内部標準として含まれている。測定対象物質であるそれぞれのアシルカルニチン又は遊離カルニチンのピーク面積と内部標準物質とのピーク面積の比を算出することにより、血清サンプル中に存在する測定対象物質の量及び濃度を求めることができる。
<LC条件>
HPLC column:Inertsil Amide (2.1×250mm, 3μm, GL Sciences)
Mobile Phase A:200 mmol/L Ammonium formate
Mobile Phase B:Acetonitrile
Gradient:
前記式(AC16:0+AC18:1)×100/AC2:0の計算値は、HCCを有するNAFLD患者において高い値を示した。したがって、前記式の計算値を計算することにより、NASHが進行した肝細胞癌を検出できることが分かった。
Claims (11)
- 対象からの体液試料中の、オクタデセノイルカルニチン及びテトラデセノイルカルニチンからなる群から選択される長鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を測定することと
測定した前記長鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を基準値と比較することと
イソ吉草酸カルニチンの量を測定することと
測定したイソ吉草酸カルニチンの量を基準値と比較することと
を含む、前記対象における脂肪性肝疾患を検出するための方法。 - 対象における脂肪性肝疾患を検出するための方法であって、以下の計算式を用いて、指標スコアを計算することと:
[式1]
AC14:1+AC18:1−AC5:0
(式中、AC14:1は、対象からの体液試料中のテトラデセノイルカルニチンの量を示し、AC18:1は、対象からの体液試料中のオクタデセノイルカルニチンの量を示し、そして、AC5:0は、対象からの体液試料中のイソ吉草酸カルニチンの量を示す)
計算した前記指標スコアを基準値と比較することと
を含む、前記方法。 - 対象における脂肪性肝疾患を検出するための方法であって、以下の計算式を用いて、指標スコアを計算することと:
[式2]
(AC16:0+AC18:1)×100/AC2:0
(式中、AC16:0は、対象からの体液試料中のヘキサデカノイルカルニチンの量を示し、AC18:1は、対象からの体液試料中のオクタデセノイルカルニチンの量を示し、そしてAC2:0は、対象からの体液試料中のアセチルカルニチンの量を示す)
計算した前記指標スコアを基準値と比較することと
を含む、前記方法。 - 前記体液試料が、血液、血清又は血漿であり、前記脂肪性肝疾患が、NASHが進行した肝細胞癌である、請求項3に記載の脂肪性肝疾患を検出するための方法。
- 脂肪性肝疾患を診断するための体液中のバイオマーカーであって、
オクタデセノイルカルニチン及びテトラデセノイルカルニチンからなる群から選択されることを特徴とし、肝臓における線維化の進行度を判断する、前記バイオマーカー。 - 対象からの体液試料中の、オクタデセノイルカルニチン及びテトラデセノイルカルニチンからなる群から選択される長鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を測定すること
測定した長鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を基準値と比較すること
を含む、前記対象における肝線維化の進行度を判定するための方法。 - 前記体液試料が、血液、血清又は血漿である、請求項6に記載の対象における肝線維化の進行度を判定するための方法。
- アシル基の炭素数が2〜10である中短鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を測定することと
測定した中短鎖アシルカルニチンのいずれか1つ以上の量を基準値と比較すること
をさらに含む、請求項6又は7に記載の対象における肝線維化の進行度を判定するための方法。 - 前記中短鎖アシルカルニチンが、イソ吉草酸カルニチンである、請求項8に記載の対象における肝線維化の進行度を判定するための方法。
- 対象における肝線維化の進行度を判定するための方法であって、以下の計算式を用いて、指標スコアを計算することと
[式1]
AC14:1+AC18:1−AC5:0
(式中、AC14:1は、対象からの体液試料中のテトラデセノイルカルニチンの量を示し、AC18:1は、対象からの体液試料中のオクタデセノイルカルニチンの量を示し、そして、AC5:0は、対象からの体液試料中のイソ吉草酸カルニチンの量を示す)
計算した前記指標スコアを基準値と比較することと
を含む、前記方法。 - 対象における、肝線維化の進行度を判定するための体液中のバイオマーカーであって、
オクタデセノイルカルニチン及びテトラデセノイルカルニチンからなる群から選択されることを特徴とする、前記バイオマーカー。
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