JP6430659B2 - キャロブ抽出物を有効成分として含む男性更年期の予防および改善用組成物 - Google Patents

キャロブ抽出物を有効成分として含む男性更年期の予防および改善用組成物 Download PDF

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Description

本発明は、キャロブ抽出物の新たな用途に関し、より詳細には、キャロブ抽出物を有効成分として含むことで、更年期の男性に現れる症状を予防および改善するための組成物に関する。
一般的に、更年期は、女性の閉経後に女性ホルモンの不足から現れる各種の症状が発生する時期を指す用語であって、閉経を経験しない男性とは無関係であった。しかし、男性もまた年を取るにつれて男性ホルモンの分泌が減少することからこれに関連する様々な症状が現れており、近年、かかる症状のある男性もまた更年期と称し、主に50代の男性に現れる。
男性更年期の場合、疲労感、記憶力低下、うつ病、体脂肪増加、骨密度減少、勃起不全、性欲減退症といった症状が現れるが、仮に、飲みすぎと喫煙、ストレスなどの外的要素が加わると、前記のような症状がさらに促進される。さらに、高齢の男性の場合、ほとんどが高血圧や糖尿病といった成人病を持っており、問題はさらに深刻になる。
一方、男性更年期症状を治療するための手段としては、ホルモン療法が代表的に用いられている。ホルモン療法は、足りない男性ホルモンを人為的に補充する療法であり、その効果が良いことが知られている。しかし、仮に、男性更年期症状と類似しているという理由だけで前記の治療方法を行う場合には、深刻な副作用をもたらすことがあり、また、身体の特性上、人為的なホルモン補充によって副作用が発生した事例が多く、その使用の際に専門家の正確な診断が求められている。
したがって、男性ホルモンの減少による症状を治療または予防することができ、副作用を最小化する天然物質を用いた組成物に関する研究および開発が必要となっており、本発明者らは、男性ホルモン調節異常症候群およびこれによる症状の改善効能に優れた新たな天然成分について鋭意研究を重ねた結果、キャロブ[Ceratonia siliqua(L.)Taub.]抽出物が、男性の更年期による症状を改善することを見出し、本発明を完成するに至った。
キャロブは、マメ科に属する常緑広葉低木であり、干ばつによく耐え、葉に樹脂を含有している。かかるキャロブが、男性の更年期症状と関連して如何なる効果を奏するかについては研究されたことがない。
本発明において解決しようとする課題は、更年期の男性に現れる症状を効果的に緩和することができ、天然成分からなることで身体への拒絶反応を最小化することができるキャロブ抽出物を有効成分として含む男性更年期の予防および改善用組成物を提供することである。
前記のような課題を解決するための本発明に係る組成物は、キャロブ抽出物を有効成分として含むことを技術的特徴とする。
本発明に係るキャロブ抽出物を有効成分として含む組成物は、更年期の男性に現れる前立腺肥大症、下部尿路症状、神経過敏症、情緒不安定、うつ病、顔面紅潮、睡眠障害、活力低下、業務能力減少、性欲減退症、勃起不全、精力減退、体力低下、運動能力減少、体毛減少といった症状を改善することができる。
試験対象動物の体重増加量の測定結果を示すグラフである。 試験対象動物の内臓脂肪の重量の測定結果を示すグラフである。 血中テストステロン濃度の測定結果を示すグラフである。 IPSS検査法で測定された試験対象男性の前立腺肥大症および下部尿路症状の改善率を示すグラフである。 AMS検査法で測定された試験対象男性の更年期症状の改善率を示すグラフである。
本発明を説明する前に、本発明において用いられる用語の意味を説明する。
本明細書において「抽出物」とは、当業界において粗抽出物(Crude extract)として通用するものを意味するが、広義には抽出物をさらに分画(Fractionation)した分画物の意味をも含む。すなわち、キャロブ抽出物は、上述の抽出溶媒を用いて得られたものだけでなく、これに精製過程をさらに適用して得られたものをも含む。例えば、前記抽出物を所定の分子量カット‐オフ値を有する限外濾過膜を通過させて得た分画、様々なクロマトグラフィー(大きさ、電荷、疎水性または親和性による分離のために作製されたもの)による分離など、さらに行われた様々な精製方法により得られた分画をも本発明のキャロブ抽出物に含まれる。
本明細書において「有効成分として含む」とは、キャロブ抽出物の効能や活性を達成するために十分な量を含むことを意味する。本発明は、天然植物材料であるキャロブから抽出した組成物であり、過量投与を行っても人体に副作用がないことから、キャロブ抽出物が本発明の組成物に含まれた量的な上限は、通常の技術者が適切な範囲内で選択して実施することができる。
本明細書において「薬学的な有効量」とは、キャロブ抽出物の効能または活性を達成するために十分な量を意味する。
男性更年期は、女性更年期と同様、中年の男性に現れる様々な症状の通称であり、外部的に現れる症状としては、疲労感、記憶力低下、うつ病、体脂肪増加、骨密度減少、勃起不全、性欲減退症、下部尿路症状、性腺機能低下症などがあり、内部的には、テストステロン低下症がある。仮に、飲みすぎと喫煙、ストレスなどの外的要素が加わると、前記のような症状がさらに促進される。さらに、高齢の男性の場合、ほとんどが高血圧や糖尿病といった成人病を持っており、問題はさらに深刻になる。
以下では、かかる男性更年期を緩和するためのキャロブ抽出物について詳細に説明する。
本発明に係るキャロブ抽出物は、有機溶媒を用いて抽出しており、抽出溶媒として使用可能なものは、以下のとおりである。
まず、極性溶媒として適するものは、(i)水、(ii)炭素数1〜6のアルコール(好ましくは、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ノルマル‐プロパノール、イソ‐プロパノール、ノルマル‐ブタノール、1‐ペンタノール、2‐ブトキシエタノールまたはエチレングリコール)、(iii)酢酸、(iv)DMFO(Dimethyl‐formamide)および(v)DMSO(Dimethyl sulfoxide)などがある。
また、非極性溶媒として適するものは、アセトン、アセトニトリル、エチルアセテート、メチルアセテート、フルオロアルカン、ペンタン、ヘキサン、2,2,4‐トリメチルペンタン、デカン、シクロヘキサン、シクロペンタン、ジイソブチレン、1‐ペンテン、1‐クロロブタン、1‐クロロペンタン、o‐キシレン、ジイソプロピルエーテル、2‐クロロプロパン、トルエン、1‐クロロプロパン、クロロベンゼン、ベンゼン、ジエチルエーテル、ジエチルスルフィド、クロロホルム、ジクロロメタン、1,2‐ジクロロエタン、アニリン、ジエチルアミン、エーテル、四塩化炭素、メチレンクロライド、石油エーテルおよびTHFなどがある。
本発明は、抽出溶媒として、(a)水、(b)炭素数1〜4の無水または低級アルコール(メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなど)、(c)前記低級アルコールと水との混合溶媒、(d)アセトン、(e)エチルアセテート、(f)クロロホルム、(g)ブチルアセテート、(h)1,3‐ブチレングリコール、(i)ヘキサンおよび(j)ジエチルエーテルなどを使用することが好ましいが、容易な抽出のために、水、エタノール、または水とエタノールとの混合物をキャロブに処理して抽出することがさらに好ましい。
また、本発明において用いられるキャロブ抽出物は、減圧蒸留および凍結乾燥または噴霧乾燥などのさらなる過程により粉末状に製造されてもよい。
したがって、本発明は、上記のような抽出溶媒を用いて抽出物を製造することができ、以下では、キャロブ抽出物を製造する方法について説明する。
1)キャロブ抽出物の製造
(a)キャロブを選別し粉砕した後、(b)粉砕物の重量の約1〜25倍の体積量(v/w%)、好ましくは、7〜20倍の体積量の精製水を含む水、メタノール、エタノール、ブタノールなどの炭素数1〜4の低級アルコールまたはこれらの混合溶媒から選択される溶媒、さらに好ましくは、水、エタノールまたはこれらの混合溶媒で、(c)0〜120℃、好ましくは、50〜100℃の抽出温度で、(d)約1時間〜10日、好ましくは、約2時間〜8時間、(e)冷浸抽出、熱水抽出、超音波抽出、還流冷却抽出または加熱抽出法などの抽出方法で、好ましくは、熱水抽出または還流冷却抽出法で、(f)約1〜10回、好ましくは2〜8回繰り返して抽出する。また、(g)前記抽出物を濾過布で濾過し、(h)濾過液を真空濃縮した後、(i)‐(a)凍結乾燥するか、(i)‐(b)配合比率に応じてデキストリンを混合し噴霧乾燥してキャロブ抽出物を取得する。
また、後述する実験で用いられるキャロブ抽出物は、キャロブの実の粉砕物の重量の8倍の体積量を有する精製水を溶媒とし、熱水抽出法で4時間1次の抽出を行い、4倍の精製水を加え2次の抽出を行ってから、抽出物を濾過布で濾過し、真空濃縮した後、抽出物とデキストリンを1:1で混合し噴霧乾燥することで製造する。
一方、キャロブ抽出物は、亜臨界流体を用いて抽出する亜臨界抽出法、もしくは超臨界流体を用いて抽出する超臨界抽出法により抽出物を製造してもよい。
以下では、本発明に係るキャロブ抽出物による効果について試験例により詳細に説明する。
試験例1:動物対象試験
<1‐1>試験対象
10週齢、体重略250gのSD(Sprague‐Dawley)系の雄性ラット(Rat)を対照群と実験群とにそれぞれ10匹ずつ分類した。
実験群には、毎日、午前の同時間に50mg/kgの濃度で生理食塩水に溶解したキャロブ抽出物を経口投与し、対照群には、同一量の生理食塩水を経口投与した。参照までに、飼育条件は、温度24±2℃、湿度50〜55%、水と食餌は制限なく提供した。
<1‐2>体重増加量の測定
本発明の組成物が体重増加に及ぼす影響を確認し、男性更年期の予防または治療に効果があるかを確認した。
体重は、前記<1‐1>試験対象で分類された各群の体重を試験の開始日と終了日の同時間に測定し、その増加量を結果値として使用した。結果は図1に図示されている。試験結果の有意性検定のために、統計プログラムのスチューデントのt検定(Student’s t‐test)を用いて統計処理を行い、p<0.05の時に有意のものとみなし表示した。
図1に図示されているように、生理食塩水のみ摂取した対照群(CTL)の体重増加量は約103gである一方、キャロブ抽出物を摂取した実験群(CA)の体重増加量は約84gであり、対照群に比べて体重増加量が統計的に有意に低いことを確認した。これにより、キャロブ抽出物が、男性更年期症状の一つである体重増加を抑制する効果があるということが分かる。
<1‐3>内臓脂肪の重量測定
本発明の組成物が内臓脂肪の重量に及ぼす影響を確認し、男性更年期の予防または治療に効果があるかを確認した。
具体的には、前記<1‐1>試験対象で分類された各群を最後の経口投与時点から8時間絶食させてから、エーテル麻酔し開腹して内臓脂肪を分離した後、その重量を測定した。結果値は、対照群(CTL)の内臓脂肪の重量を100%に換算した後、実験群の内臓脂肪の重量を対照群(CTL)に対する相対比率値で示した。結果は図2に図示されており、試験結果の有意性検定のために、統計プログラムのスチューデントのt検定(Student’s t‐test)を用いて統計処理を行い、p<0.05の時に有意のものとみなし表示した。
図2に図示されているように、キャロブ抽出物を摂取した実験群(CA)の内臓脂肪の重量は、生理食塩水のみ摂取した対照群(CTL)の内臓脂肪の重量に対して約66%と確認された。これにより、キャロブ抽出物が、男性更年期症状の一つである内臓脂肪増加を減少させる効果があるということが分かる。
<1‐4>体内のテストステロン測定
本発明の組成物が血中男性ホルモンの量に及ぼす影響を確認し、男性更年期の予防または治療に効果があるかを確認した。
具体的には、前記<1‐1>試験対象で分類された各群を経口投与前の時点と最後の経口投与時点から8時間絶食させてから、エーテル麻酔し開腹して腹大静脈から血液を採取した。このように採取された経口投与前後の血液を、それぞれヘパリン(Heparin)が処理されたチューブに移した後、遠心分離(2,500rpm、15min、4℃)して血漿を分離した。また、分離した血漿にステロイド代替剤(Steroid displacement reagent)を処理した後、免疫分析キット(R&D Systems、米国)を用いて血中の総テストステロン含量を測定した。結果値は、投与前の血漿テストステロン含量に対比する値で示す。結果は図3に図示されており、試験結果の有意性検定のために、統計プログラムのスチューデントのt検定(Student’s t‐test)を用いて統計処理し、p<0.05の時に有意のものとみなし表示した。
図3に図示されているように、生理食塩水のみ摂取した対照群(CTL)は、投与後に統計的に有意の変化が現れていない一方、キャロブ抽出物を摂取した実験群(CA)は、投与前に比べて約46%の血中テストステロン数値が増加した。これにより、キャロブ抽出物が、血中テストステロン濃度増加に影響を及ぼすということが分かる。
試験例2:人体対象試験
<2‐1>試験対象
本検査に同意した満40歳以上の男性30名を、対照群と実験群とに各15名ずつ任意に分類し、対照群は偽薬(Placebo)を摂取するようにし、実験群は、キャロブ抽出物を一日40mgずつ4週間摂取するようにした。
<2‐2>前立腺症状スコアのアンケート調査
I‐PSS(International Prostate symptom score、国際前立腺症状スコア)は、前立腺健康の低下によって生じ得る下部尿路症状およびそれによる生活の不都合を客観的に評価するために考案された検査である。IPSSは、世界各国の言語に翻訳され妥当性が立証されて全世界的に用いられており、韓国でも検査法の妥当性と信頼性が立証され、現在、韓国の前立腺健康の評価に用いられる代表的な検査法であり、各項目は、表1のとおりである。
摂取前後のIPSSスコアの改善率が計算された結果が図4に図示されている。結果は、統計プログラムSPSS(version 12.0)で統計処理し、p<0.05の水準に有意性を検定した。
図4に図示されているように、対照群(Placebo)は、IPSSスコアが2.8%程度変化した一方、キャロブ抽出物摂取群(実験群)は、IPSSスコアが約48%以上減少し、前立腺肥大症と下部尿路症状が効果的に改善したことが確認された。これにより、本発明の組成物であるキャロブ抽出物が、男性更年期に現れうる前立腺肥大症、下部尿路症状の改善に効果があるということが分かる。
<2‐3>韓国語版AMS(Aging Males’ Symptom)
1999年Heinemannら(Heinemann LAJ,Zimmermann T,Vermeulen A,Thiel C.A New ‘Aging Male’s Symptom’(AMS)Scale.The Aging Male 1992,2:105‐114.)が、ドイツ語で開発したAMS等級は、老化が男性の生活の質に及ぼす影響を客観的に評価するために考案された、妥当性と信頼性が立証されたツールであり、韓国版としては、2003年キム・セヒョンの翻訳版が妥当性と信頼性が立証された(Daig I,Heinemann LA,Kim S,Leungwattanakij S,Badia X,Myon E,et al.e Aging Males’ Symptoms(AMS)scale:review of its methodological characteristics.Health Qual Life Outcomes 2003;1:77.)。韓国語版AMSは、表2のように、計17個の質問項目からなっており、すべての項目は、症状なし(1点)、軽い(2点)、普通(3点)、重い(4点)および非常に重い(5点)に定量化される。総点27点以上の場合を陽性と判定し、症状の程度に応じて17‐26点はなし(No)、27‐36点は軽度(Little)、37‐49点は中等度(Moderate)、50点以上を重度(Severe)に区分する。AMSの17個の質問項目は、それぞれの項目にしたがって症状別にアンケート項目を更年期の代表的な症状である神経過敏症、情緒不安定、うつ病、顔面紅潮、睡眠障害、活力低下、業務能力減少、性欲減退症、勃起不全、精力減退、体力低下、運動能力減少、体毛減少に分類し評価することができる。
対照群および実験群のAMS結果は、項目別の改善率および全体の改善率として表3および図5に図示されており、結果値は、平均と標準偏差で記入しており、統計プログラムのスチューデントのt検定(Student’s t‐test)で統計処理し、p<0.05の時に有意のものとみなした。
試験結果、対照群のAMSスコアが、摂取前後、それほど差がない一方、本組成物の摂取群は、摂取前に比べてAMSスコアにおいて約57%以上の男性更年期症状の改善率を示した。また、各項目別の症状の改善率を確認した結果、各項目に該当する症状が全体的に改善したことを確認した。これにより、キャロブ抽出物が、中年男性に現れる様々な男性更年期症状を全般的に緩和することを確認した。
<2‐4>韓国語版ADAM(Androgen Deficiency in Aging Males)
2000年Morleyら(Morley JE,Charlton E、Patrick P,Kaiser FE,Cadeau P,McCready D,et al.Validation of a screening questionnaire for androgen deficiency in aging males.Metabolism 2000,49:1239‐1242.)が、自分たちの臨床経験を根拠として代表的な10種の症状を確認し、男性ホルモン欠乏を評価するために開発した質問紙であり、40歳以上の男性から男性ホルモン欠乏状態を選別することができる診断検査として妥当性が立証された。質問項目の数があまり多くなく、診断の敏感度が高いことから、男性ホルモン欠乏選別検査としてよく用いられる。韓国語版ADAM質問紙は、キム・スウンら{キム・スウン、オ・スンジュン、ベク・ゼスン、キム・セチョル、Androgen Deficiency in Aging Males(ADAM)アンケート紙の韓国語翻訳本開発、大韓泌尿器科学会誌 2004,45(7):674‐679.]が、男性更年期患者を選別し、これを臨床研究に活用できるように英語版を韓国語版に翻訳した質問紙である。ADAMの10個の質問項目は、それぞれの症状に対して「はい」または「いいえ」と回答することができるようになっており、性機能の低下またはその他の症状有無を評価することで、男性ホルモンの欠乏有無を評価することができる検査である。検査項目のうち質問項目1または7で「はい」と回答したか、1番と7番の質問項目以外の項目で3個以上「はい」と回答した場合、男性ホルモン欠乏症状があり、男性更年期症状があると考えられる。
キャロブ抽出物を摂取した実験群と偽薬を摂取した対照群のADAM結果は、表4の質問紙を基準として男性更年期有病率(%)が疑われる人の比率で示した。実験群および対照群の摂取前後の男性更年期有病率は表5に記載しており、結果値は平均と標準偏差で記入しており、統計プログラムのスチューデントのt検定(Student’s t‐test)で統計処理し、p<0.05の時に有意のものとみなした(*p<0.05vs.摂取前)。
試験結果、対照群では、偽薬の摂取前後、ADAM質問紙で評価した男性更年期有病率にあまり変化がない一方、キャロブ組成物を摂取した実験群は、摂取後、ADAM質問紙で評価した男性更年期有病率が約38%減少した。したがって、本発明の組成物は、男性ホルモン欠乏症状を緩和し、男性更年期症状を好転させるということが分かる。

Claims (4)

  1. キャロブ抽出物を有効成分として含む男性更年期症状の予防および改善用食品組成物。
  2. キャロブ抽出物を有効成分として含む男性更年期症状の予防および治療用薬学的組成物。
  3. 前記男性更年期症状は、テストステロン低下症であることを特徴とする、請求項1または2に記載の組成物。
  4. 前記男性更年期症状は、性腺機能低下症、前立腺肥大症、下部尿路症状、神経過敏症、情緒不安定、うつ病、顔面紅潮、睡眠障害、活力低下、業務能力減少、性欲減退症、勃起不全、精力減退、体力低下、運動能力減少、体毛減少のいずれか一つであることを特徴とする、請求項1または2に記載の組成物。
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