JP6293736B2 - 細菌感染症を治療するための方法および組成物 - Google Patents

Description

発明の詳細な説明

本出願は、２０１２年５月２日に提出した米国仮出願第６１／６４１，５９０号に基づく優先権を主張するものであり、該仮出願は、参照によりその全体が本明細書に取り込まれる。

連邦政府によって支援を受けた研究または開発に関する記載
本発明は、国立保健研究機構によって与えられた認可番号ＰＯ１ ＨＬ ０５７３４６の下、政府の援助を受けた。政府は本発明に一定の権利を有する。

［技術分野］
本発明は、化合物、それらの発見方法、並びにその治療的および研究使用に関する。具体的には、本発明は、細菌感染症（例えば、バイオフィルム）に対する治療薬として化合物を提供する。

［背景技術］
細菌の抗生物質耐性の広まりは、進行中の公衆衛生の脅威の１つとなっている。現行の抗生物質は、病原体の重要な生物学的プロセスを干渉し、細菌の死または増殖停止を引き起こす。その結果、抗生物質治療は、抗生物質耐性の菌株の出現を支持する強力な選択圧を発揮する。この深刻な問題を回避するために、抗生物質耐性について強力な選択を生み出さずに、病原体の病原性を抑える代替の抗菌剤が必要とされる。

細菌は水浸状態の表面にバイオフィルムを発現することができる。バイオフィルムの細菌は、特に抗生物質治療に反応する点で、プランクトンの細菌とは異なる振る舞いをする（Ｄｏｎｌａｎ、２００１．Ｅｍｅｒｇ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．７：２７７-２８１）。カテーテル、人工心臓弁、ペースメーカー、人工関節、およびコンタクトレンズ等の体内留置型医療機器の表面または内部のバイオフィルム形成は、医療に重大な問題を提起する。グラム陰性およびグラム陽性細菌は、体内留置型医療機器上にバイオフィルムを形成することができる。最も多いバイオフィルム形成細菌として、エンテロコッカス‐フェカーリス、黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、緑色連鎖球菌、大腸菌、肺炎桿菌、プロテウス・ミラビリス、および緑膿菌が挙げられる（Ｄｏｎｌａｎ、２００１、ｓｕｐｒａ）。

これらのバイオフィルム形成細菌、黄色ブドウ球菌および表皮ブドウ球菌は、心循環系機器に最も多く認められる（Ｏｔｔｏ、２００８．Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌバイオフィルム．Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２２：２０７-２２８；Ｏｔｔｏ，Ｍ．２００９．Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．１-２２）。黄色ブドウ球菌および表皮ブドウ球菌は、人工心臓弁感染症の約４０〜５０％、および５０〜７０％のカテーテルバイオフィルム感染を引き起こすことが推定された（Ａｇａｒｗａｌら、ＦＥＭＳ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．５８：１４７-１６０）。２５０，０００〜５００，０００件の原発性血流感染は、米国で移植された年間１億５千万個の心循環系機器から発生した。これらの感染症のそれぞれの事象は、ヘルスケアにかかる費用を４，０００ドル〜５６，０００ドルに増加させる可能性がある（Ｍａｋｉら、２００６．Ｍａｙｏ Ｃｌｉｎ． Ｐｒｏｃ．８１：１１５９−１１７１；Ｕｃｋａｙら、２００９．Ａｎｎ．Ｍｅｄ．４１：１０９−１１９）。血流感染症の約８７％がブドウ球菌によって引き起こされた（Ａｇａｒｗａｌら、２０１０；ｓｕｐｒａ）。まとめると、バイオフィルムの黄色ブドウ球菌および表皮ブドウ球菌は、ヘルスケアシステムに圧倒するほどの重荷をもたらす。

黄色ブドウ球菌は主要なヒト病原体であり、ヒトの約３０％が無症状性の鼻腔の保菌者である（Ｃｈａｍｂｅｒｓ ａｎｄ ＤｅＬｅｏ ２００９．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．７：６２９-６４１）。黄色ブドウ球菌は、皮膚、軟組織、呼吸器、骨、関節および血管内疾患を引き起こす。黄色ブドウ球菌によって生命に脅威を及ぼす事例として、菌血症、心内膜炎、敗血症および毒素性ショック症候群が挙げられる（Ｌｏｗｙ １９９８．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３９：５２０-５３２）。黄色ブドウ球菌の抗生物質耐性は、ますます緊急の医療問題になっている。黄色ブドウ球菌のメチシリン耐性は、流行レベルに近づいている（Ｃｈａｍｂｅｒｓ ａｎｄ ＤｅＬｅｏ、ｓｕｐｒａ；Ｇｒｕｎｄｍａｎｎら、２００６．Ｌａｎｃｅｔ ３６８：８７４-８８５）。２００５年に、９４，３６０件の侵入性ＭＲＳＡ感染症が米国で発生し、これらの感染症は１８，６５０件の死亡に関連した（Ｋｌｅｖｅｎｓら、２００７．ＪＡＭＡ ２９８：１７６３-１７７１）。表皮ブドウ球菌は、正常なヒトの上皮細菌叢の一部であるが、皮膚または粘膜が傷つくと、感染症を引き起こす可能性がある。移植された体内留置型医療機器のバイオフィルム形成は、表皮ブドウ球菌の病因の主要な徴侯である（Ｏｔｔｏら、２００８；ｓｕｐｒａ）。

バイオフィルム関連の細菌は、特に、プランクトン有機体に比べ、抗生物質治療に耐性があり、おそらく、抗生物質が細菌に到達するのを防ぐバイオフィルム固有の構造、または抗生物質を不活化することのできるバイオフィルム内の微小環境の変化に起因すると思われる（Ｏｔｔら、２００８；ｓｕｐｒａ）。さらに、抗生物質は、主に、活性細胞プロセスを標的にし、生理学的にプランクトン細菌とは異なるバイオフィルム内の細菌に対して、限定的な効果をもたらす。バイオフィルム内の栄養欠乏および廃棄物の蓄積によって、細菌がゆっくりと増殖し、または抗生物質に耐性のある飢餓状態を誘発すると思われる。さらに、いくつかの細菌が、表面での増殖に反応して、抗生物質への感受性を低下させもする特徴的なバイオフィルム表現型の形をとり得る（Ｏｔｔｏら、２００８；ｓｕｐｒａ；Ｃｏｓｔｅｒｔｏｎら、１９９９．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８４：１３１８-１３２２；Ｆｕｘら、２００５．Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．１３：３４-４０；Ｓｔｅｗａｒｔら、２００１．Ｌａｎｃｅｔ ３５８：１３５-１３８）。

バイオフィルムをこれまでの抗生物質療法で対処することの困難に加え、ブドウ球菌の抗生物質耐性を向上することによって、バイオフィルムの対処がさらに複雑になる。抗生物質は、細胞壁の形成、または細菌ＤＮＡ、ＲＮＡ、脂質およびタンパク質の合成等の細菌の生存に欠かせない小さなタンパク質を標的にする。その結果、抗生物質に耐性である菌株が、選択圧によって支持されている（Ｍａｒｔｉｎｅｚ ａｎｄ Ｂａｑｕｅｒｏ、２００２．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．１５：６４７-６７９）。主要なヒト病原体の抗生物質耐性が、公衆衛生の深刻な重荷になっている。

まとめとして、これらの因子は、バイオフィルム形成から生じる病的状態および死亡に取り組むために、これまでの殺菌性抗生物質での治療を上回る新規の治療戦略が必要とされることを示す。

［発明の概要］
本発明は、化合物、それらの発見方法、並びにその治療的および研究使用に関する。具体的には、本発明は、細菌感染症（例えば、バイオフィルム）に対する治療薬として化合物を提供する。

例えば、本発明の実施形態は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶの構造を有する化合物を含む医薬組成物を提供し、

式中、ＸはＳ、ＮＨ、またはＯであり；Ｒ^１およびＲ^２は、独立して、Ｃ１-Ｃ８アルキルまたはアルケニルまたはシクロアルキルであり、Ｆ、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＲ^６ _２、ＣＯＲ^６、ＣＯ_２Ｒ^６、ＣＯＮＨＲ^６、アリールまたはヘテロアリールで置換されてもよく、１つ以上のアルキル炭素は、Ｏによって置換されてもよく；Ｒ^３およびＲ^４は、独立して、Ｈであり、または３〜７個の炭素のシクロアルキル環中で結合され、少なくとも１つの環ＣＨ_２は、ＯまたはＮ-Ｇによって置換され；ＧはＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^６、ＳＯ_２Ｒ^６またはＣ（＝Ｏ）ＯＲ^６であり；Ｒ^５はＨ、Ｃ１-Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＲ^６ _２、ＣＯＲ^６、ＣＯ_２Ｒ^６、ＣＯＮＨＲ^６、アリール、ヘテロアリール、ＳＯ_２Ｒ^６、ＮＨＣＯＲ^６、ＳＯ_２ＮＨＲ^６、またはＯＣＯＲ^６であり；Ｒ^６はＨ、Ｃ１-Ｃ６アルキル、Ｃ０-Ｃ３アルキル-アリール、またはＣ０-Ｃ３アルキル-ヘテロアリールであり、全て置換されてもよく；Ｒ^７およびＲ^８は、Ｃ１-Ｃ６アルキルであり、または３〜７個の炭素のシクロアルキル環中で結合され、環ＣＨ_２基の１つはＯまたはＮ-Ｇによって置換されてもよく；Ｒ^９はＣ１-Ｃ５アルキルであり；Ｒ^１０はＣ２-Ｃ８アルキルまたはアルケニルまたはシクロアルキルであり、Ｆ、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＲ^６ _２、ＣＯ_２Ｒ^６、ＣＯＮＨＲ^６、アリールまたはヘテロアリールで置換されてもよく、１つ以上のアルキル炭素は、Ｏによって置換されてもよく；並びに、Ｒ１１はＨまたはＣ１アルキルである。いくつかの実施形態では、化合物は、例えば、

いくつかの実施形態では、組成物は薬剤的に許容可能な担体をさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、（例えば、バイオフィルム中の）黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌の増殖または生物活性を阻害する。いくつかの実施形態では、組成物は、黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌によるバイオフィルム形成を阻害する。いくつかの実施形態では、組成物は周知の抗生物質化合物をさらに含む。

さらなる実施形態は、黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌の増殖または生物活性（例えば、病原性）を阻害する方法を提供し、黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌を本明細書に記載の化合物と接触することを含み、化合物は黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌の増殖または生物活性を阻害する。いくつかの実施形態では、黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌はバイオフィルムに存在する。いくつかの実施形態では、化合物は、黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌によるバイオフィルム形成を防ぐ。いくつかの実施形態では、方法は、黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌を周知の抗生物質化合物と接触するステップを含む。

追加の実施形態は、薬剤の調製に、前述の化合物のいずれか１つを使用することを提供する。ある実施形態は、（例えば、バイオフィルムに存在する）細菌（例えば、黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌）感染症の治療に、前述の化合物のいずれか１つを使用することを提供する。

本発明は、また、前述の化合物のいずれか１つで被覆された表面（例えば、医療機器の表面）も提供する。

追加の実施形態を以下に記載する。

［図面の簡単な説明］
［図１］Ａ群連鎖球菌病原性を阻害する化学系列の化合物の同定を示す。Ａ）ＤＭＳＯと比較して、ＣＣＧ-１０２４８７で治療を受けたＭＧＡＳ２２２１の遺伝子発現変化のマイクロアレイ分析。Ｂ）ＧＡＳ（１マウスあたり１０^５-６ＣＦＵ）による感染後のマウスの生存に及ぼすＣＣＧ-２９７９の影響。
［図２］連鎖球菌病原性を阻害する化合物を示す。Ａ）ＣＣＧ-２０３５９２およびＢ）ＣＣＧ-２０５３６３は、様々な濃度で、黄色ブドウ球菌ＲＮ６３９０菌株のバイオフィルム形成を阻害した。Ｃ）５０μＭの黄色ブドウ球菌ＲＮ６３９０菌株の遺伝子発現に及ぼす２０３５９２の影響。リアルタイムＲＴ-ＰＣＲを、中期対数増殖（ＭＬ）、後期対数増殖（ＬＬ）、および静止（Ｓ）期に実施した。Ｄ）ＣＣＧ-２０３５９２は、鼻腔の黄色ブドウ球菌Ｎｅｗｍａｎ菌株感染（１マウスあたり３-４Ｘ１０^８ＣＦＵ）に対して、ＢＡＬＢ／ｃＪマウスを保護した。Ｅ）ＣＣＧ-２０３０４３は、細菌の増殖を阻害することなく、マイクロタイタープレート内の表皮ブドウ球菌ＲＰ６２Ａ菌株を阻害した。
［図３］医療用シリコーンシート上の黄色ブドウ球菌ＲＮ６３９０菌株のバイオフィルム形成を阻害した化合物ＣＣＧ-２０３５９２を示す。
［図４］本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の構造を示す。
［図５］本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の構造を示す。
［図６］本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の合成を示す。
［図７］本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の合成を示す。
［図８］本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の構造を示す。
［図９］本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の合成を示す。
［図１０］めっきステンレス鋼（ＳＳ）ウェーハのプラズマコーティングを示す。

［発明を実施するための形態］
定義
本発明を理解し易くするために、いくつかの用語またはフレーズを以下に定義する。

用語「脂肪族の」は、本明細書に使用するとき、限定されないが、アルキル、アルケニル、アルキニル、脂環式を含む群を示す。

用語「アルキル」は、本明細書に使用するとき、不飽和炭素鎖置換基を意味する。一般的に、アルキルは一般式Ｃ_ｎＨ_２ｎ＋１を有する。例示的なアルキルとして、限定されないが、メチル（ＣＨ_３）、エチル（Ｃ_２Ｈ_５）、プロピル（Ｃ_３Ｈ_７），ブチル（Ｃ_４Ｈ_９）、ペンチル（Ｃ_５Ｈ_１１）等が挙げられる。

用語「アリール」は、本明細書に使用するとき、フェニル環、または２つ以上の芳香族環（例えば、ビスフェニル、ナフタレン、アントラセン）、または芳香族環および１つ以上の非芳香族環等の単一の芳香族環を示す。アリール基は、低級脂肪族基（例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、または脂環式）で置換されてもよい。さらに、脂肪族およびアリール基は、限定されないが、Ｎ、Ｓ、Ｏ、-ＮＨ_２、-ＮＨＣＯＣＨ_３、-ＯＨ、低級アルコキシ（Ｃ_１-Ｃ_４）、およびハロ（-Ｆ、-Ｃｌ、-Ｂｒ、または-Ｉ）を含む化学部分を含む１つ以上の官能基によってさらに置換することができる。

用語「置換脂肪族」は、本明細書に使用するとき、少なくとも１つの脂肪族水素原子が、例えば、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、ニトロ、チオ、ケトン、アルデヒド、エステル、アミド、低級脂肪族、置換低級脂肪族、または環（アリール、置換アリール、脂環式、または置換脂環式等）によって置換されている、アルカン、アルケン、アルキン、または脂環式部分を意味する。例として、限定されないが、１-クロロエチル等がある。

用語「置換アリール」は、本明細書に使用するとき、芳香族環または少なくとも１つの芳香族環から成る縮合芳香族環系を意味し、環炭素上の少なくとも１つの水素原子が、例えば、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、ニトロ、チオ、ケトン、アルデヒド、エステル、アミド、低級脂肪族、置換低級脂肪族、または環（アリール、置換アリール、脂環式、または置換脂環式）によって置換されている。例として、限定されないが、ヒドロキシフェニル等がある。

用語「脂環式」は、本明細書に使用するとき、縮合環系を含む脂肪族の構造を意味する。例として、限定されないが、デカリン等がある。

用語「置換脂環式」は、本明細書に使用するとき、少なくとも１つの脂肪族水素原子が、ハロゲン、ニトロ、チオ、アミノ、ヒドロキシ、ケトン、アルデヒド、エステル、アミド、低級脂肪族、置換低級脂肪族、または環（アリール、置換アリール、脂環式、または置換脂環式）によって置換されている、脂環式の構造を意味する。例として、限定されないが、１-クロロデカリル、ビシクロ-ヘプタン、オクタン、およびノナン（例えば、ノンルボルニル）等が挙げられる。

用語「複素環式」は、本明細書に使用するとき、例えば、１つ以上のヘテロ原子を含む芳香族、または非芳香族を示す。ヘテロ原子は、互いに同じであっても、異なっていてもよい。ヘテロ原子の例として、限定されないが、窒素、酸素および硫黄が挙げられる。芳香族、および非芳香族複素環式環は、当該技術分野に周知である。いくつかの芳香族複素環式環の非限定的な例として、ピリジン、ピリミジン、インドール、プリン、キノリンおよびイソキノリンが挙げられる。非芳香族複素環式化合物の非限定的な例として、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、ピロリジンおよびピラゾリジンが挙げられる。複素環式環を含む酸素の例として、限定されないが、フラン、オキシラン、２Ｈ-ピラン、４Ｈ-ピラン、２Ｈ-クロメン、およびベンゾフランが挙げられる。硫黄を含む複素環式環の例として、限定されないが、チオフェン、ベンゾチオフェン、およびパラチアジンが挙げられる。窒素を含む環の例として、限定されないが、ピロール、ピロリジン、ピラゾール、ピラゾリジン、イミダゾール、イミダゾリン、イミダゾリジン、ピリジン、ピペリジン、ピラジン、ピペラジン、ピリミジン、インドール、プリン、ベンズイミダゾール、キノリン、イソキノリン、トリアゾール、およびトリアジンが挙げられる。２つの異なるヘテロ原子を含む複素環式環の例として、限定されないが、フェノチアジン、モルホリン、パラチアジン、オキサジン、オキサゾール、チアジン、およびチアゾールが挙げられる。複素環式環は、脂肪族、ニトロ、アセチル（すなわち、-Ｃ（＝Ｏ）-ＣＨ_３）、またはアリール基から選択される１つ以上の基でさらに置換されてもよい。

用語「置換複素環式」は、本明細書に使用するとき、少なくとも１つの環炭素原子が、酸素、窒素または硫黄によって置換され、少なくとも１つの脂肪族水素原子がハロゲン、ヒドロキシ、チオ、ニトロ、アミノ、ケトン、アルデヒド、エステル、アミド、低級脂肪族の、置換低級脂肪族、または環（アリール、置換アリール、脂環式、または置換脂環式）によって置換されている複素環式構造を意味する。例として、限定されないが、２-クロロピラニルがある。

用語「電子が豊富な複素環」は、本明細書に使用するとき、１つ以上の環原子がヘテロ原子（例えば、酸素、窒素または硫黄）であり、ヘテロ原子が６-π電子系に寄与する不対電子を有する環式化合物を意味する。例示的な電子が豊富な複素環として、限定されないが、ピロール、インドール、フラン、ベンゾフラン、チオフェン、ベンゾチオフェンおよびその他の類似の構造が挙げられる。

用語「リンカー」は、本明細書に使用するとき、２つの異なる構造的部分を接続している最大８つまでの隣接する原子、例えば、炭素、窒素、酸素、または硫黄等を含む鎖を意味する。エチレングリコールは１つの非限定的な例である。

用語「低級アルキル置換アミノ」は、本明細書に使用するとき、脂肪族水素原子の１つがアミノ基によって置換される最大８つまでの炭素原子を含む任意のアルキル単位を意味する。例として、限定されないが、エチルアミノ等がある。

用語「低級アルキル置換ハロゲン」は、本明細書に使用するとき、脂肪族水素原子の１つがハロゲンによって置換される最大８つまでの炭素原子を含む任意のアルキル鎖を意味する。例として、限定されないが、クロールエチル等がある。

用語「アセチルアミノ」は、本明細書に使用するとき、アセチル化された第一級または第二級アミノを意味する。例として、限定されないが、アセトアミド等がある。

用語「水素結合に関与する部分」は、本明細書に使用するとき、プロトンを受け入れ、または供与することのできる基を意味し、それによって水素結合を形成することができる。水素結合に関与する部分のいくつかの特定の非限定的な例として、フルオロ、当該技術分野に周知の酸素を含むおよび窒素を含む基が挙げられる。水素結合に関与する酸素を含む基のいくつかの例として、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級カルボニル、低級カルボキシル、低級エーテルおよびフェノール基が挙げられる。修飾子「低級」は、本明細書に使用するとき、個々の酸素を含む官能基が結合される低級脂肪族基（Ｃ_１-Ｃ_４）を意味する。したがって、例えば、用語「低級カルボニル」は、特に、ホルムアルデヒド、アセトアルデヒドを意味する。水素結合形成に関与する窒素を含む基のいくつかの非限定的な例として、アミノおよびアミド基が挙げられる。さらに、酸素原子と窒素原子の両方を含む基は、水素結合形成に関与することもできる。このような基の例として、ニトロ、Ｎ-ヒドロキシおよび亜硝酸基が挙げられる。本発明の水素結合アクセプターは、芳香族環のπ電子である可能性もある。

用語、化合物の「誘導体」は、本明細書に使用するとき、化学修飾が、化合物または骨格の官能基のいずれかに起こる化学的に修飾された化合物を意味する。

用語「対象」は、本明細書に使用するとき、本発明の方法によって治療される有機体を意味する。当該有機体として、好ましくは、限定されないが、哺乳動物（例えば、マウス、サル、ウマ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコ等）であり、最も好ましくはヒトである。本発明の文脈で、用語「対象」は、通常、細菌感染症を特徴とする病態について、治療をこれから受けるまたは受けたことのある（例えば、本発明の化合物の投与および１つ以上のその他の薬剤の投与であってもよい）個体を意味する。

用語「診断された」は、本明細書に使用するとき、徴侯および症状（これまでの療法に対する耐性）、または遺伝子分析、病理学的分析、組織学的分析等による疾患の認識を意味する。

用語「ｉｎ ｖｉｔｒｏ」は、本明細書に使用するとき、人工環境および人工環境内で発生するプロセスを意味する。ｉｎ ｖｉｔｒｏ環境として、限定されないが、試験管および細胞培地が挙げられる。用語「ｉｎ ｖｉｖｏ」は、自然環境（例えば、動物または細胞）および自然環境内で発生するプロセスまたは反応を意味する。

用語「宿主細胞」は、本明細書に使用するとき、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏにあっても、任意の真核性または原核生物細胞（例えば、哺乳類細胞、鳥類細胞、両生類細胞、植物細胞、魚類細胞、および昆虫細胞）を意味する。

用語「細胞培地」は、本明細書に使用するとき、任意のｉｎ ｖｉｔｒｏの細胞培地を意味する。当該用語には、連続細胞株（例えば、不死化表現型）、初代細胞培養、有細胞株（例えば、非形質転換細胞）、および卵母細胞および胚を含むｉｎ ｖｉｔｒｏに保持される任意の他の細胞集団を含む。

用語「有効量」は、本明細書に使用するとき、有益な、または望ましい結果をもたらす十分な化合物（例えば、本発明の化合物）の量を意味する。有効量は、１つ以上の投与、適用、用量で投与することができ、特定の処方または投与経路に限定することを意図しない。

用語「同時投与」は、少なくとも２つの薬剤（例えば、本発明の化合物）または治療薬を対象に投与することを意味する。いくつかの実施形態では、２つ以上の薬剤／治療薬の同時投与は、同時に起こる。いくつかの実施形態では、第一の薬剤／治療薬は、第二の薬剤／治療薬の前に投与される。当業者は、使用される様々な薬剤／治療薬の処方および／または投与経路が変化し得ることを理解している。同時投与に適切な用量は、当業者によって容易に決定することができる。いくつかの実施形態では、薬剤／治療薬が同時投与されるとき、個々の薬剤／治療薬は、単独投与に適切な用量よりも低用量で投与される。したがって、同時投与は、薬剤／治療薬の同時投与が、周知の潜在的に有害（例えば、毒性のある）な薬剤の必要用量を少なくする実施形態で、特に望ましい。

用語「毒性のある」は、本明細書に使用するとき、毒物を投与する前の細胞または組織に比べ、その細胞または組織に、有害（ｄｅｔｒｉｍｅｎｔａｌ）または有害（ｈａｒｍｆｕｌ）な効果を及ぼすことを意味する。

用語「医薬組成物」は、本明細書に使用するとき、不活性であっても、活性であっても、担体と活性薬剤の組み合わせを意味し、ｉｎ ｖｉｖｏ、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏの診断的または治療的使用に特に適した組成物を作製することを意味する。

用語「薬剤的に許容可能な担体」は、本明細書に使用するとき、リン酸緩衝食塩液、水、乳状液（例えば、油／水または水／油乳状液等）、および様々な種類の湿潤剤等の標準的な薬剤的担体を意味する。組成物は、安定剤および保存剤も含むことができる。担体の例として、安定剤および補助剤（例えば、Ｍａｒｔｉｎ、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１５ｔｈ Ｅｄ．、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ［１９７５］を参照）がある。

用語「薬剤的に許容可能な塩」は、本発明の化合物の任意の薬剤的に許容可能な塩（例えば、酸または塩基）を意味し、対象に投与すると、本発明の化合物または活性代謝物またはその残基を提供することができる。当業者に周知のように、本発明の化合物の「塩」は、無機または有機酸および塩基に由来してもよい。酸の例として、限定されないが、塩化水素、臭化水素、硫黄、窒素、過塩素酸、フマル、マレイン、リン、グリコール、乳酸、サリチル、コハク、トルエン-ｐ-スルホン酸、酒石、酢酸、クエン酸、メタンスルホン、エタンスルホン、ギ酸、安息香酸、マロン酸、ナフタレン-２-スルホン酸、ベンゼンスルホン酸等が挙げられる。シュウ酸等のその他の酸は、それ自体では薬剤的に許容可能ではないが、本発明の化合物およびその薬剤的に許容可能な酸付加塩を得る中間体として有用な塩を調製する場合に使用してもよい。

塩基の例として、限定されないが、アルカリ金属（例えば、ナトリウム）水酸化物、アルカリ土類金属（例えば、マグネシウム）、水酸化物、アンモニア、および式ＮＷ_４ ^＋の化合物（ＷはＣ_１-４アルキルである）等が挙げられる。

塩の例として、限定されないが、酢酸塩、アジピン酸、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、フルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、半硫酸塩、ヘプタン酸、ヘキサン酸、塩酸塩、水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２-ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２-ナフタレンスルホン酸、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パルモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル化物、ウンデカン酸塩等が挙げられる。塩のその他の例として、Ｎａ^＋、ＮＨ_４ ^＋、およびＮＷ_４ ^＋（ＷはＣ_１-４アルキル基である）等の適切なカチオンと配合される本発明の化合物のアニオンが挙げられる。

治療的使用について、本発明の化合物の塩は、薬剤的に許容可能なものとして解釈される。しかしながら、薬剤的に許容可能ではない酸の塩および塩基も、薬剤的に許容可能な化合物を調製または精製するときに使用してもよい。

用語「試料」は、本明細書に使用するとき、広義の意味で使用される。ある意味では、任意の供給源、並びに生物および環境試料から得られる標本または培地を含む。生物試料は、動物（ヒトを含む）から得てもよく、液体、固体、組織および気体を含む。生物試料は、血漿、血清等の血液生成物を含む。環境試料は、物表面、土、水、結晶および工業試料等の環境材料を含む。しかしながら、当該例は、本発明に適用できる試料の種類を限定することを意図しない。

用語「精製された」または「精製する」は、本明細書に使用するとき、試料から望まない成分を取り除くことを意味する。用語「実質的に精製された」は、本明細書に使用するとき、通常、関連のあるその他の成分が、少なくとも６０％ない、好ましくは７５％ない、最も好ましくは９０％以上ない分子を意味する。

用語「調節する」は、本明細書に使用するとき、限定されないが、細菌増殖等を含む細胞機能の一態様に作用する（例えば、促進または遅延させる）化合物（例えば、本発明の化合物）の活性を意味する。

用語「試験化合物」は、疾患（ｄｉｓｅａｓｅ、ｉｌｌｎｅｓｓ、ｓｉｃｋｎｅｓｓ）、または身体機能の障害を治療し、さもなければ試料の生理学的または細胞の状態（例えば細菌感染症）を変化させるために使用することができる化学成分、薬剤、薬物等を意味する。試験化合物は周知のものも潜在的な治療的化合物も含む。本発明のスクリーニング方法を使用することによって、試験化合物を治療的であると決定することができる。「周知の治療的化合物」は、（例えば、動物試行またはヒトへの投与経験によって）当該治療または予防に効果的であることが示されている治療的化合物を意味する。

用語「バイオフィルム」は、本明細書に使用するとき、細胞が互いに表面に付着する微生物（例えば、細菌）の凝集物を意味する。これらの付着細胞は、細胞外高分子物質の自己発生マトリックスに組み込まれることが多い。バイオフィルムは、ヒトの身体の様々な感染症および医療機器に形成される。例として、限定されないが、尿路感染症、カテーテル感染症、中耳感染症、歯垢の形成、歯肉炎、コーティング・コンタクトレンズ、心内膜炎、嚢胞性繊維症の感染症、および人工関節および人工心臓弁等の内留置型医療機器の感染症が挙げられる。様々な細菌がバイオフィルムを形成する。例として、限定されないが、緑膿菌、黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、歯垢（例えば、ミュータンス菌およびサンギス菌）、レジオネラ、および淋菌が挙げられる。

発明の詳細な説明
本発明は、化学化合物、それらの発見方法、並びにその治療的および研究使用に関する。具体的には、本発明は、細菌感染症（例えば、バイオフィルム）に対する治療薬として、化合物を提供する。

抗生物質の耐性の出現は、世界的に緊急の医療問題である。現在の抗生物質の多くは、４０年以上前に開発された親化合物の誘導体であり、細胞壁の形成、または細菌ＤＮＡ、ＲＮＡ、脂質およびタンパク質の合成等の細菌の生存に欠かせない小さなタンパク質を標的にする。その結果、抗生物質に耐性の菌株が、選択圧によって支持されている（Ｍａｒｔｉｎｅｚら、Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．２００２；１５：６４７-６７９）。抗生物質の不適切で過剰な使用を含むいくつかのその他の因子が、現在最も利用可能な抗生物質に高度に耐性のある病原体の出現に寄与している（Ａｌａｎｉｓ、Ａｒｃｈ．Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．２００５；３６：６９７-７０５；Ｂａｘら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ ２０００；１６：５１-５９；Ｎｏｒｒｂｙら、Ｌａｎｃｅｔ Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．２００５；５：１１５-１１９；Ｓｉｌｖｅｒ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．２００７；６：４１-５５）。現在の抗生物質の開発は、既存の抗生物質の効果を改善することに大部分は限定されている。

したがって、感染性疾患に立ち向かうための新しい戦略を開発する必要がある。抗生物質耐性について選択を導入せずに病原体の病原性を阻害することは、伝統的な抗生物質戦略に代わるものとして、大いに見込みがある。

したがって、いくつかの実施形態では、本発明は、細菌感染症（例えば、Ａ群連鎖球菌および様々な細菌によって引き起こされるバイオフィルム）に対して活性のある組成物および方法を提供する。本発明の実施形態の開発の過程で実施された実験では、細菌増殖を阻害することなく、いくつかの生体材料の表面の、黄色ブドウ球菌および表皮ブドウ球菌によるバイオフィルム形成を阻害できる化学系列の化合物を同定した。これらの化合物は、バイオフィルム形成に関与する遺伝子を含むいくつかの病原性因子の発現を阻害することもできる。

本発明は特定の機序に限定されない。実際に、機序の理解は本発明の実施に必要としない。しかしながら、本明細書に記載の組成物および方法は、細菌増殖を阻害せずにバイオフィルム形成を阻害し、抗生物質（本明細書に記載の化合物および現行の抗生物質）に対する急速な細菌の耐性を誘発しないことを理解されたい。

いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載の化合物および薬剤放出制御バリアとしてのコーティング（例えば、プラズマコーティング）を組み合わせる薬剤の局所的送達を提供する（Ｍ Ｃｈｅｎ，ら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３：４８３-４９６、２０１２）。いくつかの実施形態では、化合物は、生体材料の表面で共有結合される（Ｖ．Ａｎｔｏｃｉ，ら、Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ ２９：４６８４-４６９０、２００８；Ｈｕｍｅ ＥＢＳ、Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ ２５：５０２３-５０３０、２００４）。

Ｉ．阻害剤
以下に詳細に説明するように、本発明の実施形態は、例えばバイオフィルム（例えば、生体または医療用機器の表面）内の細菌の病原性または増殖を特に阻害する化合物を提供する。

いくつかの実施形態では、阻害剤は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶの構造を有する構造化合物を有する。

式中、Ｒ^１およびＲ^２は、独立して、Ｃ１-Ｃ８アルキルまたはアルケニルまたはシクロアルキルであり、Ｆ、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＲ^６ _２、ＣＯＲ^６、ＣＯ_２Ｒ^６、ＣＯＮＨＲ^６、アリールまたはヘテロアリールで置換されてもよく、１つ以上のアルキル炭素は、Ｏによって置換されてもよく；Ｒ^３およびＲ^４は、３〜７個の炭素のシクロアルキル環中で結合され、少なくとも１つの環ＣＨ_２は、ＯまたはＮ-Ｇによって置換され；ＧはＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^６、ＳＯ_２Ｒ^６またはＣ（＝Ｏ）ＯＲ^６であり；Ｒ^５はＨ、Ｃ１-Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＲ^６ _２、ＣＯＲ^６、ＣＯ_２Ｒ^６、ＣＯＮＨＲ^６、アリール、ヘテロアリール、ＳＯ_２Ｒ^６、ＮＨＣＯＲ^６、ＳＯ_２ＮＨＲ^６、またはＯＣＯＲ^６であり；Ｒ^６はＨ、Ｃ１-Ｃ６アルキル、Ｃ０-Ｃ３アルキル-アリール、またはＣ０-Ｃ３アルキル-ヘテロアリールであり、全てが置換されてもよく；Ｒ^７およびＲ^８は独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキルであり、または３〜７個お炭素のシクロアルキル環中で結合され、少なくとも１つの環ＣＨ_２基は、ＯまたはＮ-Ｇによって置換され；Ｒ^９はＣ１-Ｃ５アルキルであり；並びにＲ^１０はＣ２-Ｃ８アルキルまたはアルケニルまたはシクロアルキルであり、Ｆ、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＲ^６ _２、ＣＯ_２Ｒ^６、ＣＯＮＨＲ^６、アリールまたはヘテロアリールで置換されてもよく、１つ以上のアルキル炭素はＯによって置換されてもよい。例示的な化合物を以下に示す。

ＩＩ．医薬組成物、製剤、および例示的な投与経路、並びに投与の考慮事項
様々な考慮される薬剤および医薬組成物の例示的な実施形態を以下に提供する。

Ａ．医薬品の調製
本発明の化合物は、細菌（例えば、黄色ブドウ球菌または表皮ブドウ球菌バイオフィルム）感染症を治療するための薬剤の調製に有用である。化合物の薬剤調製の方法および手技は、当該技術分野に周知である。例示的な医薬製剤および送達経路を以下に記載する。

当業者は、多くの特定の実施形態を含む本明細書に記載の化合物の１つ以上が、標準的な医薬製造手順によって調製されることを認識するだろう。医薬分野に周知の送達方法を用いて、当該薬剤は対象に送達される。

Ｂ．例示的な医薬組成物および製剤
本発明のいくつかの実施形態では、組成物は単独で投与され、一方ではいくつかの他の実施形態では、組成物は、固体担体、または、あるいは１つ以上の薬剤的に許容可能な担体および任意のその他の治療薬と一緒に、上述のように、少なくとも１つの有効成分／薬剤（例えば、本明細書に記載の黄色ブドウ球菌または表皮ブドウ球菌阻害剤）を含む医薬製剤中に存在する。個々の担体は、製剤のその他の成分に互換性があり、対象を傷つけない意味で、「許容可能」なはずである。

製剤は、適切な経口、直腸、鼻腔、局所（経皮、頬側および舌下）、膣、非経口（皮下、筋肉内、静脈内および皮内）および肺の投与が挙げられることを考慮されたい。いくつかの実施形態では、製剤は、便利に単位用量の形式で存在し、薬学の分野で周知の任意の方法によって調製される。当該方法は、有効成分を、有効成分を１つ以上の副成分を構成する担体と結合させるステップを含む。一般的に、製剤は、有効成分を液体担体、または細かく分割された固体担体、若しくはその両方と、均一および密に結合（例えば、混合）し、必要であれば、生成物を形成することによって、調製される。

経口投与に適した本発明の製剤は、カプセル、カシェ剤、錠剤等の別々の単位として存在してもよく、それぞれが、好ましくは、粉末または粒剤として、溶液または水性若しくは非水性液体中の懸濁剤として、水中油液体乳剤、または油中水液体乳剤として、事前に定められた量の有効成分を含む。いくつかの実施形態では、有効成分は、ボーラス、舐剤、ペースト剤等として存在する。

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの有効成分を含み、任意の１つ以上の副成分／担体は、個別の薬剤を圧縮または成型することによって作製される。いくつかの実施形態では、圧縮された錠剤は、粉末または粒剤等の易流動性形態で、適切な機械で有効成分を圧縮することによって調製され、結合剤（例えば、ポビドン、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、潤滑剤、不活希釈剤、保存剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウム、架橋ポビドン、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）界面活性または分散剤と混合してもよい。成型された錠剤は、適切な機械で、湿潤した粉末の化合物（例えば、有効成分）を不活液体希釈剤と混合することによって作製される。錠剤は被覆され、または刻み目を入れてもよく、例えば、望ましい放出プロフィールを提供するために割合に変化をつけたヒドロキシプロピルメチルセルロースを使用して、錠剤の中の有効成分の放出を遅延し、制御するために、製剤化してもよい。錠剤は、胃より腸の部分で放出されるように、腸溶コーティングで提供してもよい。

口の局所投与に適した製剤として、風味を付けた主成分、たいていはショ糖およびアカシアまたはトラガント中に有効成分を含むトローチ、ゼラチンおよびグリセリン、またはショ糖およびアカシア等の不活主成分中に有効成分を含む錠剤、並びに、適切な液体担体中に有効成分を含む口腔洗浄薬が挙げられる。

本発明による局所投与のための医薬組成物は、軟膏、クリーム、懸濁剤、ローション、粉末、溶液、ペースト剤、ゲル剤、スプレー、エアロゾルまたは油剤として、製剤されてもよい。あるいは、実施形態では、局所製剤は、包帯または有効成分、および任意の１つ以上の賦形剤または希釈剤等をしみ込ませた硬膏剤等のパッチまたは包帯剤を含む。いくつかの実施形態では、局所製剤は、有効成分を、皮膚またはその他の影響領域への吸収または浸透を高める化合物を含む。当該皮膚浸透エンハンサーとして、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）および関連の類似体が挙げられる。

望まれれば、クリーム基材の水相として、例えば、少なくとも約３０％ｗ／ｗの多価アルコール、すなわち、プロピレングリコール、ブタン-１，３-ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロールおよびポリエチレングリコール並びにその混合物等の２つ以上のヒドロキシル基を有するアルコールが挙げられる。

いくつかの実施形態では、本発明の油相乳剤は、周知の様式で周知の成分から構成される。この相は、典型的には孤立した乳化剤（さもなくば利尿薬として知られる）を含み、また、この相についてのいくつかの実施形態では、脂肪若しくは油、または脂肪と油の両方を少なくとも１つの乳化剤の混合物をさらに含むことが望ましい。

好ましくは、親水性乳化剤は、安定剤として作用するように、親油性乳化剤と一緒に含まれる。いくつかの実施形態では、また、油と脂肪の両方を含むことが好ましい。一緒に、安定剤のある、またはない乳化剤は、いわゆる乳化ろうを構成し、油および／または脂肪と共にあるろうは、クリーム製剤の油性分散相を形成するいわゆる乳化性油基材を構成する。

本発明の製剤に使用するのに適した利尿薬および乳化安定剤として、Ｔｗｅｅｎ６０、Ｓｐａｎ８０、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセリンおよび硫酸ラウリルナトリウムが挙げられる。

製剤について適切な油類または脂肪類の選択は、医薬用乳化製剤に使用される可能性のある大部分の有効化合物／薬剤の可溶性が極めて低いため、望ましい特性（例えば、化粧特性）を達成することに基づく。したがって、クリームは、チューブまたはその他の容器から漏れないように、適当な軟度を伴った、脂ぎっていない、非汚染性で洗浄できる生成物であることが好ましい。ジ-イソアジピン酸、ステアリン酸イソセチル、ヤシ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸デシル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、パルミチン酸２-エチルヘキシル、またはＣｒｏｄａｍｏｌ ＣＡＰとして知られる分岐鎖エステルの混合物等の直鎖または分岐鎖、一塩基性または二塩基性アルキルエステルを使用してもよく、最後の３つが好ましいエステルである。これらは、必要とされる特性に依存して、単独または組み合わせて使用してもよい。あるいは、白色ワセリンおよび／または液体パラフィンまたはその他の鉱油等の融点の高い脂質を使用することができる。

目の局所投与に適した製剤は、有効成分が適切な担体、特に薬剤ついての水性溶媒中に溶解または懸濁する点眼剤もある。

腸の投与のための製剤は、例えば、ココアバターまたはサリチル酸塩を含む適切な基材と伴う坐薬としてあってもよい。

膣の投与に適した製剤は、薬剤の他に、当該技術分野で適当であるとして知られている担体を含むクリーム、ゲル剤、ペースト剤、泡またはスプレー製剤としてあってもよい。

鼻腔の投与に適した製剤は、担体が固体であり、粒径が約２０〜約５００ミクロンの粗末（ｃｏａｒｓｅ ｐｏｗｄｅｒ）であり、鼻に非常に近いところに保持された粉末入りの容器から、（例えば強制的に）鼻腔を通って急速吸入することによって、鼻で吸い込む様式で投与される。担体が投与のための液体であるその他の適切な製剤として、限定されないが、点鼻薬、液滴、またはネブライザーによるエアロゾル、薬剤の水性または油性溶液を含むものが挙げられる。

非経口投与に適した製剤として、抗酸化剤、緩衝液、静菌薬、および製剤と意図される受容者の血液と等張にする溶質を含んでもよい非水性、等張無菌注射液、並びに懸濁剤および増粘剤、およびリポソーム、または血液成分または１つ以上の臓器に対する化合物を標的にするように設計されるその他の微小粒子系が挙げられる。いくつかの実施形態では、製剤は、単位用量、または複数用量が密封された容器、例えば、アンプルおよびバイアルに存在／調剤され、使用直前に、無菌液体担体、例えば、注射のための水のみを加える必要のあるフリーズドライ（凍結乾燥）条件で保管されてもよい。即時注射液および懸濁液は、無菌粉末、粒剤、および前述の種類の錠剤から調製されてもよい。

好ましい単位用量の製剤は、上述したように、一日量または単位、一日下位用量、または薬剤の適切な画分を含むものである。

特に上に述べた成分の他に、本発明の製剤は、問題のタイプの製剤について有する当該技術分野にありふれたその他の薬剤を含んでもよく、例えば、経口投与は、甘味剤、増粘剤、および香味剤のような薬剤を含んでもよい。また、本発明の薬剤、組成物、および方法は、その他の適切な組成物および治療薬と組み合わせることも意図される。その他の製剤は、食物添加物（適切な甘味剤、調味料、着色剤等）、栄養素（例えば、アマニ油）、鉱物（例えば、Ｃａ、Ｆｅ、Ｋ等）、ビタミン、およびその他の許容可能な組成物（例えば、共役リノール酸）、延長剤、および安定剤等を含んでもよい。

いくつかの実施形態では、本発明の実施形態の化合物は、医療機器（例えば、限定されないが、ペースメーカー、留置型カテーテル、インプラント、関節置換術、骨修復機器等）に被覆されている。

Ｃ．例示的な投与経路および投与の考慮事項
様々な送達系が周知であり、本発明の治療薬（例えば、黄色ブドウ球菌または表皮ブドウ球菌バイオフィルム阻害剤）を投与するために使用され、例えば、リポソームのカプセル化、微小粒子、マイクロカプセル、受容体媒介エンドサイトーシスがある。送達方法として、限定されないが、動脈内、筋肉内、静脈内、鼻腔内、および経口経路が挙げられる。特定の実施形態では、治療が必要な領域に、本発明の医薬組成物を局所的に投与することが望ましいこともある。例えば、限定されないが、手術中の局所注入、注射、またはカテーテルの方法によって、これを達成してもよい。

本明細書で意図する目的に効果的であると識別される薬剤は、黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌バイオフィルム感染症、およびこれに関連する病態を発生する疑いのある、またはそのリスクのある対象または個体に投与することができる。マウス、ラット、またはヒトの患者に薬剤を投与すると、薬剤は薬剤的に許容可能な担体に加えることができ、対象に全身または局所的に投与することができる。互恵的に治療することのできる患者を決定するために、組織試料を患者から取り除き、薬剤への感受性について細胞分析を行う。

いくつかの実施形態では、ｉｎ ｖｉｖｏ投与は一回の投与、治療方針にわたって連続または間欠的に行われる。最も効果的な方法および投与用量が当業者に周知であり、治療に使用される組成物、治療目的、治療する標的細胞、および治療を受ける対象によって変化する。用量レベルおよび治療をする医師によって選択されるパターンで、単一または複数投与が実施される。

当業者は、適切な投薬製剤および薬剤の投与方法を容易に決定する。好ましくは、化合物を約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇで投与する。本明細書に記載の化合物を別の薬剤（例えば、増感剤として）と同時投与する場合、有効量は、薬剤を単独で使用する場合より少なくてもよい。

経口、鼻腔内、非経口、または吸引療法によって、医薬組成物を投与することができ、形式は錠剤、トローチ、粒剤、カプセル、丸薬、アンプル、座薬またはエアロゾル形式であってよい。また、水性、または非水性希釈剤、シロップ、顆粒化物、または粉末中の有効成分の懸濁剤、溶液、およびの形式をとってもよい。本発明の薬剤の他に、医薬組成物はまた、その他の薬剤的に活性な化合物または本発明の複数の化合物を含むことができる。

より具体的には、本明細書で有効成分としても意味する薬剤は、限定されないが、経口、直腸、鼻腔、局所（限定されないが、経皮、エアロゾル、頬側および舌下）、膣内、非経口（限定されないが、皮下、筋肉内、静脈内のおよび皮内）および肺を含む任意の適切な経路によって治療のために投与されてもよい。好ましい経路は、受容者の病態および年齢、並びに治療する疾患によって変化することも認識されたい。

理想的には、疾患の部位で活性化合物がピーク濃度を達成するように薬剤は投与されるべきである。例えば、任意に生理食塩水中の薬剤の静脈注射、または例えば、有効成分を含んだ錠剤、カプセル、またはシロップとして、経口投与することによってこれを達成してもよい。

薬剤の望ましい血液レベルは、連続注入することによって保持され、疾患組織内に治療量の有効成分を提供する。操作的組み合わせを使用することによって、個々の治療的化合物または薬剤を単独で使用するときに要する用量よりも、個々の構成している成分の全体量が少なくて済む治療上の組み合わせを提供することが考慮され、それによって有害作用を低減する。

Ｄ．例示的な同時投与経路および投与の考慮事項
本発明は、また、１つ以上の追加の活性剤と共に、本明細書に記載の化合物の同時投与に関する方法も含む。実際に、本発明の化合物を同時投与することによって、先行技術の治療法および／または医薬組成物を高める方法を提供することが本発明のさらなる態様である。同時投与の手順では、薬剤は同時に、または連続的に投与されてもよい。ある実施形態では、本明細書に記載の化合物をその他の活性剤の前に投与する。医薬製剤および投与様式は上述のいずれでもよい。さらに、２つ以上の同時投与される化学薬剤、生物学的薬剤またはその他の治療薬を、様々な様式または処方を用いてそれぞれ投与してもよい。

同時投与される１つまたは複数の薬剤は、治療対象の病態の種類に依存する。例えば、治療対象の病態が細菌感染症である場合、追加の薬剤は周知の抗生物質の可能性がある。抗細菌免疫抑制剤、抗炎症薬等の同時投与される薬剤は、限定されないが、現在、臨床使用されているものを含む、当該技術分野に周知の薬剤であってもよい。

Ｅ．バイオフィルム標的製剤
いくつかの実施形態では、製剤（例えば、医薬組成物）は、細菌のバイオフィルムを治療するために処方される。製剤の例を以下に記載する。

低温プラズマコーティング技術は、多くの研究者、または複雑な手順が含まれることが多い市販品によって現在採用されている複数ステッププロセスに比べ、単純でコストパフォーマンスの高いアプローチを提供する。いくつかの実施形態では、プラズマコーティングは、例えば、成膜時間、プラズマ能力、モノマーの質量流量およびプラズマ反応器内の作動圧等の関連するコーティングプロセスのパラメータを最適化することによって適合し、臨床適用で様々な薬剤の望ましい薬剤放出速度を達成する。バイオフィルム阻害剤をプラズマコーティングと組み合わせることによって、広域抗菌スペクトルの抗バイオフィルム活性を得る機会が増加する。図１０は、例として、ステンレス鋼のプラズマコーティングによる薬剤の拡散を模式的に説明する。薬剤（バイオフィルム阻害剤）の頂部でコーティングを産生するプラズマは、薬剤分子と溶媒の間に透過バリアとして機能する。いくつかの実施形態では、プラズマポリマーコーティングは、最適化され、適切な架橋構造およびコーティングの厚みを産生し、したがって、結果的に望ましい放出速度で薬剤分子を分解するコーティングバリアによって、溶媒および水分子を拡散することが可能となる。

いくつかの実施形態では、生体試料の表面に対するバイオフィルム阻害剤の共有結合は、例えば、移植型の心血管装置上のバイオフィルム形成を阻害するために利用することができる。

ＩＩＩ．薬物スクリーニング
本発明のいくつかの実施形態では、本発明の化合物、およびその他の潜在的に有用な化合物を、生物活性（例えば、バイオフィルム中の黄色ブドウ球菌または表皮ブドウ球菌をブロックする能力）についてスクリーニングする。

いくつかの実施形態では、黄色ブドウ球菌または表皮ブドウ球菌の阻害剤を識別するために、構造に基づくスクリーニング手法が考えられる。例えば、いくつかの実施形態では、分子モデリングを使用して阻害剤を識別する。

いくつかの実施形態では、黄色ブドウ球菌または表皮ブドウ球菌によるバイオフィルム形成阻害の能力について、細胞培地またはｉｎ ｖｉｖｏ（例えば、非ヒトまたはヒト哺乳動物）内で化合物をスクリーニングする。いくつかの実施形態では、発現または下流シグナル伝達分子の発現の阻害を検出するスクリーニングである。

いくつかの実施形態では、以下の実験の節に記載されるスクリーニングの方法は利用することができる。例えば、いくつかの実施形態では、細菌の高スループットスクリーニングを実施する。ある実施形態では、抗生物質耐性またはその他のマーカーを使用して、大腸菌で高スループットスクリーニングを実施する。他の実施形態では、高スループットアッセイを利用する。黄色ブドウ球菌または表皮ブドウ球菌の増殖を阻害する能力について、化合物をスクリーニングする。いくつかの実施形態では、黄色ブドウ球菌または表皮ブドウ球菌によるバイオフィルム形成の殺傷または阻害能力について、化合物をスクリーニングする。いくつかの実施形態では、用量反応アッセイを実施する。

いくつかの実施形態では、上述の細菌のスクリーニングで同定される化合物は、動物でさらにスクリーニングされる。例えば、いくつかの実施形態では、バイオフィルム感染の表皮ブドウ球菌のマウスモデルをスクリーニングアッセイに使用する。

［実施例］
以下の実施例は、本発明の特定の実施形態をさらに説明するために提供し、その範囲を限定するものとしては解釈されない。

実施例１
様々な生体試料の表面の黄色ブドウ球菌および表皮ブドウ球菌によるバイオフィルム形成を阻害することのできる小さい分子量の化学化合物の化学系列を同定した（表１〜４）。これらの化合物は、細菌を殺傷しないまたは細胞増殖を阻害しないが、代わりに、病原性を減少させる遺伝子発現のパターンを変化させる点において、その他の化合物によって開発されている既存の抗生物質または化合物とは異なる。

耐性を発現することなくバイオフィルム形成を防ぐまたは治療するために、留置型医療機器、特に人工心臓弁、ペースメーカー、およびカテーテルを作製するために使用される生体材料の表面に適用される追加の非殺菌抗ブドウ球菌試薬を開発する。これらの化合物はまた、いくつかの重要な病原性因子の遺伝子発現を阻害するため、黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌によって引き起こされる感染症を治療するために使用することもできる。

抗病原性アプローチを使用して、ストレプトキナーゼがＡ群連鎖球菌感染の要となる病原性因子であることを説明する先行研究に基づき、Ａ群連鎖球菌（ＧＡＳ）に対して毒性の低いストレプトキナーゼ（ＳＫ）発現を阻害することのできる低分子をスクリーニングする。細菌増殖を妨害することなくＳＫ発現を阻害することができるいくつかの低分子を評価した。さらに、これらの化合物は、連鎖球菌病原性因子の広域抗菌スペクトルの遺伝子発現を阻害することができる（図１Ａ）。ある化合物（ＣＣＧ-２９７９）は、マウスをＡ群連鎖球菌感染から保護することができる（図１Ｂ）。

ブドウ球菌バイオフィルム形成について、これらの化合物を試験した。６８個の類似体から、マイクロタイタープレート内の黄色ブドウ球菌ニューマン・バイオフィルム形成に及ぼす影響を試験し、そのうち２つの化合物が、細菌増殖を有意に阻害することなく、一貫した阻害を示した。２つの化合物（ＣＣＧ-２０３５９２およびＣＣＧ-２０５３６３）を、黄色ブドウ球菌株ＲＮ６３９０で試験し、ニューマン菌株よりバイオフィルム形成を起こし易いことが報告された。両化合物は、２０μＭで細菌増殖を阻害せずに、マイクロタイタープレート内のＲＮ６３９０バイオフィルム形成に強い阻害を示した（ＣＣＧ-２０３５９２についてＩＣ５０＝２．４２±０．１４μＭ、ＣＣＧ-２０５３６３についてＩＣ５０＝６．９６±０．７６μＭ）（図２ＡおよびＢ）。これらの阻害剤の構造を図４に示す。

ＣＣＧ-２０３５９２治療に対する反応について、リアルタイムＲＴ-ＰＣＲによって、黄色ブドウ球菌の病原性因子遺伝子群を試験した。黄色ブドウ球菌バイオフィルム形成および構造化に重要な遺伝子（ａｔｌおよびｐｓｍ）を含むいくつかの病原性因子遺伝子をＣＣＧ-２０３５９２によってダウンレギュレートした（図２Ｃ）。重要な病原性因子であるタンパク質Ａ（ＳＰＡ）も阻害し、抗病原性試薬としての低化合物の能力を示唆する。黄色ブドウ球菌遺伝子発現に及ぼすＣＣＧ-２０３５９２の広範囲の影響は、黄色ブドウ球菌感染に対して、宿主を保護することもできることを示し、このことは黄色ブドウ球菌肺感染モデルにおいて、マウスを保護するｉｎ ｖｉｖｏ効果によって支持された（図２Ｄ）。同じ化学系列（ＣＣＧ-２０３０４３）からの類似体は、細胞増殖を阻害せずに表皮ブドウ球菌バイオフィルム形成を強力に阻害することを示した（図２Ｅ）。

ＣＣＧ-２０３５９２もまた、医療機器に広く使用されるシリコーンシート（図３）の表面のバイオフィルム形成を減少させた。

ＣＣＧ-２９７９系列からのいくつかの化合物は、黄色ブドウ球菌または表皮ブドウ球菌のいずれかのバイオフィルム形成を阻害することができ、一方でＡ群連鎖球菌ＳＫ遺伝子発現も阻害する。

バイオフィルム形成の最も効果的な阻害剤を識別するために、構造活性相関（ＳＡＲ）試験を２００〜３００個の新しい類似体に実施する。

ＣＣＧ-２９７９に関係する１１０個以上の新しい類似体を合成した。これら全てを、１００μＭでバイオフィルム阻害について分析し、ほんの少しのサブセットだけが、細菌増殖：黄色ブドウ球菌（１４個の類似体）；表皮ブドウ球菌（７個の類似体）を阻害せずにバイオフィルム形成の阻害に活性であった。最も能力のある類似体の３つを図４に記載する。活性類似体の２１個全てをテンプレートＡ〜Ｄ（図５）によって表される４つの菌株群に分類することができ、これらのうち２個（ＡおよびＢ、図５の囲まれたもの）だけが、両菌株に対して活性の類似体を示す。

これら２つの系列の類似体を合成する。Ａの類似体の例示的合成を図６に示す。市販されているアクリル酸塩１を、塩基条件（３２）下で、２-メチルベンゾニトリルを有する三環式アミノエステル２に変換し、その後、様々な条件下（３３）で、様々なイソチオシアン酸塩で、チオ尿素３にさらに環化することができる。

多様なアルキル化剤で硫黄をアルキル化し、酸性条件下でＮ-Ｂｏｃ基を取り除くことによって、中間体の二級アミン４を得ることができる。最後に、アミンをアシル化し、スルホニル化し、または標準条件下で還元的にアルキル化することができる。

テンプレートＢに基づく新しい類似体の調製は、同じ通常の経路をたどり、ジメチルアクリル酸塩６およびアルコキシ-２-メチルベンゾニトリル７から始まる（図７）。また、テンプレートＡおよびＢ（例えば、図７のＥ）の主要要素を保有するハイブリッド類似体も調製する。これらの化合物に対する合成経路は、テンプレートＡに使用したものと同一であり（図６）、２-メチルベンゾニトリルをアルコキシ-２-メチルベンゾニトリル７に変換する。

図６および７の新しい類似体を、バイオフィルム形成を阻害する放出制御のために、生体材料上で複層のコーティングに統合する。送達の代替方法は、バイオフィルム阻害剤を生体材料の表面に共有結合することであり、結果として、バイオフィルム形成をもっと長時間防ぐことが期待される。チタン表面に共有結合されたバンコマイシンが黄色ブドウ球菌を殺傷し、表皮ブドウ球菌によるバイオフィルム形成を防ぐ（２１；３４）ことは以前から示されている。バンコマイシンは、細菌に浸透する必要があるよりも、細胞壁の表面で作用するため、このことを可能にする。

Ｓ-メトキシエチル基をテンプレート上の他の点に移動するＣＣＧ-２０６２２７の類似体は、黄色ブドウ球菌および表皮ブドウ球菌の両方によるバイオフィルム形成を阻害することを示しており（図８に示される）、これを調製する。活性を保持するこれらの類似体は、抗バイオフィルム活性を喪失することなく、ＰＥＧリンカーによって生体材料に共有結合する可能性が最も高いことを示す。より長いＰＥＧのｔｅｔｈｅｒ（「つなぎ綱」を意味する）によって、活性類似体を生体材料に結合する。例えば、図９に示されるように活性類似体ＣＣＧ-２０６２２７の生体材料への結合が達成される。

実施例２
バイオフィルム阻害剤
様々な有機体によるバイオフィルム形成を阻害するのに使用される化合物を表１〜４に記載する。

表１は表皮ブドウ球菌のバイオフィルムの阻害を示す。表２は黄色ブドウ球菌のバイオフィルムの阻害を示す。表３は、１００または５０μＭで、黄色ブドウ球菌のバイオフィルムを２０％超の阻害する化合物を示す。表４は、１００または５０μＭで、表皮ブドウ球菌を２０％超阻害する化合物を示す。

実施例３
当該実施例は、本発明の実施形態の化合物の合成を記載する。ＣＣＧ命名１０２４８３、１０２４８５、１０２４９１、１０２４９３、１０２４９５、１０２６２０、１０２６２２、２０３０３７、２０３０３９、２０３０４１、２０３０４３、および２０３５７４を有する化合物の合成は、米国特許第２０１００３３１３５１号に以前から記載されており、その全体は参照により本明細書に取り込まれる。ＣＣＧ命名２０３５９２、２０３５９８、２０３６２５、２０３６２７、２０３６２９、２０３６３１、２０３６３３、２０３８０３、２０３８０４、２０４０６０、２０５３６３、２０５４２７、２０５４３４、２０５４３５、２０５４８０、２０６１７８、２０６３５２、２０６３５３、２０６３５５、２０６３５６、および２０６３５８を有する化合物の合成は、ＹｅｓｔｒｅｐｓｋｙらＢｉｏｏｒｇａｎｉｃ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１３、２１、１８８７-１８９７によって、全体を記載し、分光学的に特徴付けされており、その全体は参照により本明細書に取り込まれる。残りの化合物の合成を以下に記載する。

化合物の実験的および分光学的データ
化学物質。化学命名はＣＡＳ命名法に従う。出発材料をＦｉｓｈｅｒ、Ｓｉｇｍａ-Ａｌｄｒｉｃｈ Ｌａｎｃａｓｔｅｒ、ＦｌｕｋａまたはＴＣＩ-Ａｍｅｒｉｃａから購入し、精製することなく使用した。全反応溶媒はＦｉｓｈｅｒから購入し、受け取ったままを使用した。プレコートシリカゲル６０ Ｆ２５４プレートを使用して、ＴＬＣによって反応をモニターした。Ｓｉｌｉｃｙｃｌｅから入手したシリカゲル（２２０〜２４０メッシュ）で、シリカゲルクロマトグラフィーを実施した。

装置。ＮＭＲスペクトルをＢｒｕｋｅｒ ３００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ ４００ＭＨｚ、Ｖａｒｉａｎ ４００ＭＨｚ、またはＶａｒｉａｎ５００ＭＨｚ分光計で記録した。内部標準ＣＤＣＬ_３：δ＝７．２８（^１Ｈ ＮＭＲ）として、重溶媒の水素化残基を参照することによって、またはテトラメチルシランの水素化残基を参照することによって、化学シフトをδ（百万分率）で報告した。δ ＝ ０．００（^１Ｈ ＮＭＲ）。エレクトロスプレイイオン化モードを使用して、Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＬＣＴ ｔｉｍｅ-ｏｆ-ｆｌｉｇｈｔ装置に、質量スペクトルを記録した。ＭＥＬ-ＴＥＭＰ融点装置で融点を測定し、未修正であった。

スキームＡ．

エントリーＡ１（スキームＡ）の調製：５，５-ジメチル-２-チオキソ-２，３，５，６-テトラヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（１Ｈ）-オンを、ＹｅｓｔｒｅｐｓｋｙらＢｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２０１３、２１、１８８０-１８９７に記載のように、合成した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ（ｐｐｍ）９．９５（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、９．７５（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、７．５７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．７Ｈｚ）、７．４６（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、７．３９（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．２８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、２．７８（ｓ、２Ｈ）、１．３３（ｓ、６Ｈ）。

エントリーＡ２（スキームＡ）の調製：２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン。絶対ＥｔＯＨ（６０ｍＬ）中の化合物Ａ１（２．７ｇ）およびＫＯＨ（０．５９ｇ）の溶液を３０分間還流した。その後、ＥｔＯＨ（３ｍＬ）中の２-メトキシエチルｐ-トルエンスルホン酸エステル（２．４１ｇ）を加えた。反応を１６時間還流し、冷却した。結晶化固体を濾過し、ＥｔＯＨ（３ｍＬ）および水（７５ｍＬ）で洗浄し、吸引下で乾燥し、その後、高い真空下で一晩乾燥し、白色固体として掲題の化合物２．６５ｇを得た（収率８０％）。

スキームＢ．

エントリーＢ１の調製：９-メトキシ-５，５-ジメチル-２-チオキソ-２，３，５，６-テトラヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（１Ｈ）-オンを、ＹｅｓｔｒｅｐｓｋｙらＢｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２０１３、２１、１８８０-１８９７に記載のように、合成した。白色粉末として単離し、６５０ｍｇ、２ステップで収率６１％であった。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ（ｐｐｍ）９．３２（ｓ、２Ｈ）、７．２０（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．００（ｄｄ、Ｊ＝８．２、２．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．９７（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）、２．７１（ｓ、２Ｈ）、１．３２（ｓ、６Ｈ）。

エントリーＢ２ａの調製：９-メトキシ-５，５-ジメチル-２-（（２，２，２-トリフルオロエチル）チオ）-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン。化合物Ｂ１（５０ｍｇ、０．１７３ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の１，１，１-トリフルオロ-２-ヨードエタン（９１ｍｇ、０．４３３ｍｍｏｌ）および炭酸水素ナトリウム（２２ｍｇ、０．２６０ｍｍｏｌ）と化合した。反応物をキャップし、４０℃に加熱し、１６時間撹拌した。このときに、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、水およびブラインで洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮し、その後、フラッシュクロマトグラフィーによって精製し（５％ＥＨ〜２０％ＥＨ）、４９ｍｇ黄色粉末を得た（収率７６％）。

エントリーＢ２ｂの調製：２-（エチルチオ）-９-メトキシ-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン。アルキル化剤としてヨードエタンを使用して、化合物Ｂ２ａと同様の様式で、掲題の化合物を調製した。白色結晶物質として１８１ｍｇを単離し、収率は８２％であった。

エントリーＢ２ｃの調製：２−（（９−メトキシ−５，５−ジメチル−４−オキソ−３，４，５，６−テトラヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン−２−イル）チオ）アセトニトリル。アルキル化剤としてα−クロロアセトニトリルを使用して、化合物Ｂ２ａと同様の様式で、掲題の化合物を調製した。白色粉末として１２０ｍｇを単離し、収率は７１％であった。

スキームＣ．

エントリーＣ１の調製：１-アミノ-３，３-ジメチル-３，４-ジヒドロナフタレン-２-カルボン酸エチルを、ＹｅｓｔｒｅｐｓｋｙらＢｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２０１３、２１、１８８０-１８９７に記載のように、合成した。黄色油として８６０ｍｇを単離し、収率は４１％であった。ＴＬＣ Ｒｆ＝０．３０（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ（ｐｐｍ）７．４２（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．３６-７．２９（ｍ、２Ｈ）、７．２０（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．３５（ｓ、１Ｈ）、４．２８（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ）、２．６８（ｓ、２Ｈ）、１．３７（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ）、１．２２（ｓ、６Ｈ）。

エントリーＣ２の調製：３-（２-メトキシエチル）-５，５-ジメチル-２-チオキソ-２，３，５，６-テトラヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（１Ｈ）-オン。化合物Ｃ１（１００ｍｇ、０．４０８ｍｍｏｌ）を、絶対エタノール（０．５ｍＬ）中の２-メトキシエチルイソチオシアン酸塩（９６ｍｇ、０．８１５ｍｍｏｌ）および酢酸（４９ｍｇ、０．８１５ｍｍｏｌ）と化合し、７０℃で加熱し、キャップした。追加で２-メトキシエチルイソチオシアン酸塩（１４３ｍｇ、１．２２３ｍｍｏｌ）を、３時間にわたり、同じ量を３つに分けて加え、さらに１６時間、７０℃で撹拌した。このとき、反応物を酢酸エチルと水に分けた。追加の酢酸エチルで水層を抽出した後に、１つにまとめた有機抽出物を水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーによってさらに精製し、収率３３％で掲題の化合物を得た（４３ｍｇ）。

スキームＤ．

エントリーＤ１の調製：３-アリル-２-（エチルチオ）-８-ヒドロキシ-５，５-ジメチル-４ａ，５，６，１０ｂ-テトラヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オンを、ＹｅｓｔｒｅｐｓｋｙらＢｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２０１３、２１、１８８０-１８９７に記載のように、合成した。黄褐色固体として３１０ｍｇを単離し、収率は４３％であった。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ（ｐｐｍ）７．６２（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．８５-６．７９（ｍ、２Ｈ）、５．８８（ｄｄｔ、Ｊ＝１６．３、１０．８、５．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．４８-５．４０（ｍ、２Ｈ）、４．８６（ｄ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、２Ｈ）、４．２２（ｑ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、２．７４（ｓ、２Ｈ）、１．５９（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）、１．３１（ｓ、６Ｈ）。

スキームＥ．

エントリーＥ２の調製：１-アミノ-６-ブロモ-３，３-ジメチル-３，４-ジヒドロナフタレン-２-カルボン酸エチル。無水ジグリム（１８ｍＬ）を乾燥丸底フラスコに加え、-７８℃に冷却した。ジイソプロピルアミン（１．４５ｍＬ、１０．２ｍｍｏｌ）およびｎ-ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ、４．１ｍＬ、１０．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を撹拌しながら短時間で最大０℃に温め、-７８℃に再度冷却した。ジグリム（３ｍＬ）中の４-ブロモ-２-メチルベンゾニトリル溶液（１．０ｇ、５．１ｍｍｏｌ）をゆっくりと液滴し、反応物を暗赤色にし、２０分間撹拌した。エチル-３，３-ジメチルアクリル酸塩（１．０６ｍＬ、７．６５ｍｍｏｌ）を液滴した。同時に、分離乾燥丸底フラスコに、ジグリム（６ｍＬ）および亜鉛末（８３４ｍｇ、１２．７５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を-７８℃に冷却し、その後、ヨウ素（２．５９ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）をゆっくりと分取して加えた。混合物を-７８℃の浴から取り除き、ヨウ素の全トレースが取り除かれるまで、ヒートガンで穏やかに温めた。混合物を-７８℃に再度冷却し、最初の反応容器に加えた。反応物を２時間にわたって室温に温め、その後、飽和水性ＮＨ_４Ｃｌを加えることによって、クエンチした。水溶液をエーテルで５回抽出し、その後、１つにまとめた有機抽出物を水で５回、ブラインで１回洗浄した。有機層を単離し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（２％〜１５ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によってさらに精製し、黄色固体として所望の生成物を８９０ｍｇ得た。収率は５４％であった。

エントリーＥ３の調製：１-アミノ-６-ベンゾイル-３，３-ジメチル-３，４-ジヒドロナフタレン-２-カルボン酸エチルを、Ｃａｒａｔｏら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ２００６、６２、９０５４-９０５８ ａｎｄ Ｍｏｒｉｅｌｌｏら、Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２００６、４９、２３２０-２３３２の方法に従い、以下のように調製した。化合物Ｅ２（８９０ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を無水トルエン（２７．５ｍＬ）に溶解した。当該溶液にテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（３１７ｍｇ、０．２７５ｍｍｏｌ）およびビス（トリブチルスズ）（２．０８ｍＬ、４．１２ｍｍｏｌ）を加えた。反応容器を窒素下で還流まで加熱し、１６時間撹拌した。溶媒を減圧下で取り除き、フラッシュクロマトグラフィー（０〜５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって、アリールトリブチルスタンニル中間体を収率３７％（５４７ｍｇ）で単離した。当該中間体を無水ＤＭＦ（４．３ｍＬ）中に溶解し、その後、ヨードベンゼン（１３２μＬ、１．１８ｍｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスピン）パラジウム（ＩＩ）二塩化物（３８ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）を加えた。５分間、反応混合物によって一酸化炭素ガスの流れを泡沫し、その後、反応物をきつくキャップし、ＣＯのバルーンで付着させる。反応物を９０℃に温め、１６時間撹拌した。この時点で、反応物をＮ_２で１０分間パージし、その後、水で希釈した。水性混合物をエーテルで３回抽出し、１つにまとめた有機抽出物を水およびブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（０〜５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって分離し、収率５０％（２つのステップで１９％）の１８７ｍｇの掲題の化合物を送達した。

エントリーＥ４の調製：３-アリル-８-ベンゾイル-５，５-ジメチル-２-チオキソ-２，３，５，６-テトラヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（１Ｈ）-オン。化合物Ｅ３（１８７ｍｇ、０．５３５ｍｍｏｌ）を絶対エタノール（０．７２ｍＬ）に溶解し、次に酢酸（６１μＬ、１．０７ｍｍｏｌ）およびアリルイソチオシアン酸塩（１０４μＬ、１．１４ｍｍｏｌ）に溶解した。反応物を７０℃に温め、１時間撹拌した。追加のアリルイソチオシアン酸塩（１５６μＬ、１．７１ｍｍｏｌ）を加え、３時間にわたって、同じ量を３つに分けて加え、反応物を７０℃で、さらに１２時間撹拌した。このとき、反応物に水を加えることによってクエンチした。水層を酢酸エチルで３回抽出し、その後、１つにまとめた有機抽出物を水およびブラインで洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーによってさらに精製し、黄色油として掲題の化合物を得た（１１０ｍｇ、収率３７％）。

スキームＦ．

エントリーＦ２の調製：５-アミノ-７，７-ジメチル-７，８-ジヒドロイソキノリン-６-カルボン酸エチルを、３-メチルイソニコチノニトリルＦ１からエントリーＥ２と同様の様式で調製した。５００ｍｇの淡黄色固体を単離し、収率は４８％であった。

エントリーＦ３の調製：３-アリル-５，５-ジメチル-２-チオキソ-２，３，５，６-テトラヒドロピリド［３，４-ｈ］キナゾリン-４（１Ｈ）-オン。乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の水素化ナトリウム６０％（０．２７ｇ、７．１５ｍｍｏｌ）の０℃の懸濁液に、乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の３-イソチオシアナトプロパ-１-エン（０．３２ｇ、３．２５ｍｍｏｌ）とＦ２（０．８ｇ、３．２５ｍｍｏｌ）の混合物を液滴した。添加完了後に、混合物を３時間撹拌し、氷水に注いだ。ＮＨ４Ｃｌで酸性化した。Ｅｔ２Ｏ（２回）およびＥｔＯＡｃ（１回）で抽出した。有機抽出物を飽和ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥した。フラッシュクロマトグラフィーによって、固体として３-アリル-５，５-ジメチル-２-チオキソ-２，３，５，６-テトラヒドロピリド［３，４-ｈ］キナゾリン-４（１Ｈ）-オン（０．１９ｇ、０．６４ｍｍｏｌ、収率１９．５％）を得た。ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．６（ｄ、Ｊ＝４Ｈｚ、１Ｈ）、８．５（ｓ、１Ｈ）、７．４（ｄ、Ｊ＝４Ｈｚ、１Ｈ）、６．２-６．３（ｍ、１Ｈ）、６．１-６．２（ｍ、２Ｈ）、５．３-５．４（ｍ、２Ｈ）、２．８（ｓ、２Ｈ）、１．４（ｓ、６Ｈ）．ＥＳＩ＋ＭＳ ｍ／ｚ ３００．０（Ｍ＋Ｈ^＋）。

スキームＧ．

エントリーＧ１の調製：３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-４-オキソ-３，４，５，６-テトラヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-８-カルボン酸。ＹｅｓｔｒｅｐｓｋｙらＢｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２０１３、２１、１８８０-１８９７によって以前に報告されたように、化合物Ｇ１を調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）８．１８-８．１９（ｍ、１Ｈ）、８．０１-８．０５（ｍ、１Ｈ）、７．９５（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、６．２０-６．２３（ｍ、１Ｈ）、５．８９-５．９４（ｍ、１Ｈ）、５．２６-５．３１（ｍ、２Ｈ）、４．５８-４．６３（ｍ、２Ｈ）、３．７２-３．７８（ｍ、４Ｈ）、３．４９-３．５２（ｍ、２Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、２．９４-２．９５（ｍ、２Ｈ）、２．８０（ｓ、２Ｈ）、１．３７（ｓ、６Ｈ）．ＥＳＩ＋ＭＳ ｍ／ｚ＝４００．４９（Ｍ＋Ｈ＋）。

スキームＨ．

エントリーＨ２の調製：４-（２-メトキシ-２-オキソエチルイデン）ピペリジン-１-カルボン酸ｔ-ブチル。６０％のＮａＨ（３．０６ｇ）を乾燥ヘキサンで洗浄し（２０ｍＬを２回）、澄んだ溶液をＮ_２雰囲気下で抜き取った。洗浄したＮａＨを乾燥ＤＭＦ（１００ｍＬ）に懸濁し、０℃に冷却した。当該懸濁液に、２０分間にわたって、トリメチルホスホノ酢酸塩（１４．１ｍＬ）をゆっくりと加えた。乾燥ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の化合物Ｈ１（１４．０ｇ、７８ｍｍｏｌ）を溶液にゆっくりと加えた。温度は２０分間にわたって０℃に保ち、その後、室温で３時間、温めながら撹拌した。この時点で、反応物をＥｔ_２Ｏ（２５０ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ）で洗浄した。水層をジエチルエーテル（４０ｍＬ）で逆抽出し、その後、１つにまとめた抽出物を水（５０ｍＬを４回）およびブライン（３０ｍＬ）で洗浄した。分離した有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で取り除き、結晶固体として、生成物を得た。１６．９５ｇ（収率９４％）を単離した。

エントリーＨ３の調製：４-アミノ-１Ｈ-スピロ［ナフタレン-２，４'-ピペリジン］-１'，３-ジカルボン酸３-メチル１'-ｔｅｒｔ-ブチルを、エントリーＦ２と同様の様式で調製した。フラッシュクロマトグラフィーの後、淡黄色固体として５．７１ｇを単離した（収率３４％）。

エントリーＨ４の調製：３-アリル-４-オキソ-２-チオキソ-２，３，４，６-テトラヒドロ-１Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボン酸ｔ-ブチル。ＥｔＯＨ（７ｍＬ）中の化合物Ｈ３の溶液に、アリルイソチオシアン酸塩（０．４３ｍＬ）を加え、反応物をさらに１時間、８５℃で加熱した。追加の０．２ｍＬのアリルイソチオシアン酸塩を加え、反応物をさらに１５時間、８５℃で加熱した。溶液を室温に冷却し、沈殿した生成物を濾過し、ＥｔＯＨで洗浄し、空気の下、その後オーブンの中で２時間乾燥させた。２００μＬのアリルイソチオシアン酸塩で濾過物を処理し、８５℃で１６時間加熱し、追加の生成物を沈殿し、同一の様式で回収および精製した。灰白色固体として、計０．５７５ｇのＨ４を単離した（収率６０％）。

エントリーＨ５の調製：３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-４-オキソ-４，６-ジヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボン酸ｔ-ブチル。ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の化合物Ｈ４（０．２５ｇ）の溶液に、Ｃｓ_２ＣＯ_３（３７１ｍｇ）を加えた。反応混合物を３分間撹拌し、その後、２-メトキシエチルｐ-トルエンスルホナート（０．１３１ｇ）を加え、反応物を７０℃で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で取り除き、残査をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（４ｍＬ）で抽出した。分離した有機層をＨ_２Ｏ（２ｍＬを４回）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、溶媒を減圧下で取り除き、２８０ｍｇの掲題化合物を得た（収率１００％）。

スキームＩ．

４-アミノ-２'，３'，５'，６'-テトラヒドロ-１Ｈ-スピロ［ナフタレン-２，４'-ピラン］-３-カルボン酸エチルＩ３。無水ジグリム（１５ｍＬ）中の-７８℃のジイソプロピルアミンの溶液に、１０分間にわたって２．５Ｍのｎ-ＢｕＬｉをゆっくり加えた。その温度で４０分以上、反応物を撹拌した。その後、２-メチルベンゾニトリル（０．６９ｇ、５．８８ミリモル）を、-７８℃で１５分間にわたってゆっくりと加えた。同じ温度で１５分間反応物を撹拌した。その後、エチルエステルＩ２（１ｇ、４ｍＬのジグリム中５．８８ミリモル）を１０分間かけてゆっくりと加え、反応物を-７８℃で３０分間撹拌した。ＺｎＩ_２（１．８７５ｇ）を加え、反応物をゆっくりと室温まで温め、２時間撹拌した。反応物を塩化アンモニウムの飽和溶液でクエンチした。エーテル（５０ｍＬ）を加え、分液漏斗に抽出した。分離した水層を再度、エーテル（２０ｍＬを２回）で抽出した。１つにまとめた有機層を水で洗浄し（３０ｍＬを３回）、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧下で取り除いた。微量の溶媒を、ロータリー・エバポレーター内で７０℃、３時間取り除いた。Ｉｓｃｏ-Ｔｅｌｄｙｎｅスラッシュ系を使用しているプレパックドＢｉｏｔａｇｅ（８０ｇ）カラムを使用して、フラッシュクロマトグラフィーによって、単離された粗生成物を精製した。カラムを１０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出した。溶離剤として、５０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用して、ＴＬＣを確認した後に、画分を１つにまとめた。化合物をＥｔＯＡｃ／ヘキサンから結晶化によってさらに精製し、４-アミノ-２'，３'，５'，６'-テトラヒドロ-１Ｈ-スピロ［ナフタレン-２，４'-ピラン］-３-カルボン酸エチル、Ｉ３、０．１９ｇ（１１．３％）を得た。Ｒ_ｆ＝０．５１（１：１、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。

３-アリル-２-チオキソ-２，２'，３，３'，５'，６'-ヘキサヒドロ-１Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピラン］-４（６Ｈ）-オン、Ｉ４
絶対ＥｔＯＨ（７ｍＬ）中のＩ３の溶液（１７４ｍｇ、１ミリモル）に、アリルイソチオシアン酸塩（１８０ｍｇ、３ミリモル）を加えた。反応混合物を、Ｎ_２雰囲気下で、４時間還流した。追加の０．１５ｇのアリルイソチオシアン酸塩を加え、反応物をさらに２時間還流し続けた。ロータリー・エバポレーターによって、溶媒を減圧下で取り除き、残査を１２ｇのプレパックドＳｉｌｉｃｙｃｌｅカラム使用して、クロマトグラフィーにかけた。カラムを２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出し、掲題の化合物を４５ｍｇ（２２％）得た。

スキームＪ．

エントリーＪ２ａの調製：エントリーＥ２を合成するために使用されたものと同様の様式で、４-アミノ-１Ｈ-スピロ［ナフタレン-２，３'-ピロリジン］-１'，３-ジカルボン酸３-メチル１'-ｔｅｒｔ-ブチルを調製した。粘着性の黄色固体として、１９５ｍｇ、収率３０％を単離した。

エントリーＪ２ｂの調製：エントリーＥ２を合成するために使用されたものと同様の様式で、４-アミノ-７-メトキシ-１Ｈ-スピロ［ナフタレン-２，３'-ピロリジン］-１'，３-ジカルボン酸３-メチル１'-ｔｅｒｔ-ブチルを調製した。粘着性の黄色固体として、単離した（２２０ｍｇ、収率２５％）。

エントリーＪ３ａの調製：４-オキソ-２-チオキソ-２，３，４，４ａ，６，１０ｂ-ヘキサヒドロ-１Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，３'-ピロリジン］-１'-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル。化合物Ｊ２ａ（１９０ｍｇ、０．５３０ｍｍｏｌ）を絶対エタノール（６３０μＬ）に溶解し、ベンゾイルイソチオシアン酸塩（１１２ｍｇ、０．６８９ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を７５℃に温め、３時間撹拌した。この時点で、追加のベンゾイルイソチオシアン酸塩（４３ｍｇ、０．２６５ｍｍｏｌ）を加え、溶液を７５℃で一晩撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、エタノールと水（２：１、１．３ｍＬ）の溶液に再度溶解した。水酸化カリウム（４９ｍｇ、０．８７０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を７５℃に温め、９０分間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液（５ｍＬ）を加えることによって、反応を停止した。水層をジクロロメタンで３回抽出し、その後、１つにまとめた有機抽出物を飽和炭酸水素アンモニウム溶液、水およびブラインで洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、および減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（１０〜３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によってさらに精製し、白色結晶として、１１４ｍｇ（収率６８％）の掲題化合物を送達した。

エントリーＪ３ｂの調製：エントリーＪ３ａと同様の様式で、Ｊ２ｂから８-メトキシ-４-オキソ-２-チオキソ-２，３，４，４ａ，６，１０ｂ-ヘキサヒドロ-１Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，３'-ピロリジン］-１'-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチルを調製した。白色結晶として、２７５ｍｇの掲題化合物（収率４９％）を単離した。

スキームＫ．

エントリーＫ１の調製：４-アミノ-７-メトキシ-１Ｈ-スピロ［ナフタレン-２，４'-ピペリジン］-１'，３-ジカルボン酸３-メチル１'-ｔｅｒｔ-ブチルを、エントリーＥ２に使用した手順と同様の様式で、化合物Ｈ１および４-メトキシベンゾニトリルから調製した。カラムクロマトグラフィーによる精製、および１：１のジエチルとヘキサンで研和した後、白色の結晶固体として、掲題の化合物を送達した（１．９５ｇ、収率６８％）。

エントリーＫ２の調製：８-メトキシ-４-オキソ-２-チオキソ-２，３，４，６-テトラヒドロ-１Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチルを、Ｊ３ａの合成と同様の様式で、Ｋ１から調製した。白色固体として９５０ｍｇを単離し、収率は４８％であった。

エントリーＫ３の調製：４-（アリルオキシ）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-６Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル。中間体Ｋ２（９４０ｍｇ、２．１９ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（１３ｍＬ）に溶解し、２-メトキシエチルｐ-トルエンスルホナート（５５４ｍｇ、２．４０７ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（２７６ｍｇ、３．２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を５０℃に温め、一晩撹拌した。この時点で、水を加えることによって反応を停止し、次に酢酸エチルで３回抽出した。１つにまとめた有機層を水およびブラインで洗浄し、真空下で濃縮し、黄色固体を得た。固体をヘキサンで研和し、濾過によって回収し、その後、１５ｍＬの１：１のヘキサンとジエチルエーテル溶液で洗浄した。固体を配収し、高真空下で乾燥し、７９０ｍｇ（１．６２ｍｍｏｌ、収率７４％）のＳ-アルキル化中間体を得た。当該固体をメタノール（９．５ｍＬ）に再度溶解し、ナトリウムメトキシド（１７５ｍｇ、３．２４ｍｍｏｌ）および臭化アリル（２９４ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）を加えた。反応容器を５０℃に加熱し、３時間撹拌した。水を加えることによって反応を停止し、次に、酢酸エチルで抽出した。有機層を水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、Ｎ-およびＯ-アルキル化異性体から成る無色の油に濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーによって精製し、白色結晶固体として、Ｏ-アリル異性体Ｋ３
を得た（９４ｍｇ、２ステップで収率８．２％）。

スキームＬ．

スキームＭ．

スキームＮ．

エントリーＮ２の調製：２-メチル-３-オキソ-３-フェニルプロパン酸エチルを、Ｗｙｍａｎｎ、Ｓｙｎ Ｃｏｍｍ １８（１９８８）１３７９の手順に従い、３-オキソ-３-フェニルプロパン酸エチル（Ｎ１）から調製した。

エントリーＮ３の調製：５-メチル-６-フェニル-２-チオキソ-２，３-ジヒドロピリミジン-４（１Ｈ）-オンを、米国特許第２７４０７８５号に記載の手順に従って２-メチル-３-オキソ-３-フェニルプロパン酸エチル（Ｎ２）から以下のように調製した。化合物Ｎ２（１０．１ｇ、４９．０ｍｍｏｌ）を、Ｎ_２下、エタノール（５０ｍＬ）中の撹拌したナトリウム溶液（２．２５ｇ、９８．０ｍｍｏｌ）に液滴し、その後、チオ尿素（５．２ｇ、６８．１ｍｍｏｌ）を一部、加えた。混合物を７時間還流に加熱し、放冷した。溶媒の大部分をロータリー・エバポレーターによって取り除き、残査を４５０ｍＬの水に撹拌した。濃縮したＨＣｌをｐＨが３〜４になるまで、濃縮ＨＣｌを加えた。約１時間後、沈殿物を濾去し、水でリンスし、乾燥し、白色固体として、生成物（７．５ｇ）を得た。融点２１６〜２２７°Ｃ；質量スペクトルＥＳ＋ｍ／ｚ＝２１９、２４１（ｍ＋１、ｍ＋２３）。

エントリーＮ４の調製：２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５-メチル-６-フェニルピリミジン-４（３Ｈ）-オン。実施例５-０１６Ｂステップ２から、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）中の５-メチル-６-フェニル-２-チオキソ-２，３-ジヒドロピリミジン-４（１Ｈ）-オン（０．５ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、室温でＮ_２下、トリイソプロピルアミン（０．３６ｇ、２．８ｍｍｏｌ）を加え、次に５分後、２-ブロモエチルメチルエーテルを一部加えた。短時間撹拌した後、混合物を１８時間還流に加熱し、冷却し、ロータリー・エバポレーターによって溶媒を取り除いた。残査を１時間、水中で撹拌し、固体を濾去し、水でリンスし、乾燥した。得られる白色粉末を１．５ｍＬの熱いジメチルホルムアミドに溶解し、濾過し、等量のエタノールで希釈し、放冷し、純粋な生成物を得た（０．４ｇ）。融点１３２-１３４°Ｃ。質量スペクトルＥＳ＋ｍ／ｚ＝２７７、２９９（ｍ＋１、ｍ＋２３）；ＥＳ-ｍ／ｚ＝２７５（ｍ-１）；１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ｄｍｓｏ）δ１２．７２（ｂｓ、１Ｈ）、７．６７-７．５６（ｍ、２Ｈ）、７．５０-７．４３（ｍ、３Ｈ）、３．５８（ｔ、２Ｈ）、３．３０（ｍ、２Ｈ）、３．２５（ｓ、３Ｈ）、１．９６（ｓ、３Ｈ）。

化合物例１〜１４の一般的手順：ＤＭＦ（１ｍＬ）中のアルキル化剤（０．２３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｋ_２ＣＯ_３（０．５７ミリモル）および化合物Ａ２（０．１９ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で２０時間撹拌した。溶媒を減圧下で取り除き、残査をＥｔＯＡｃ（３ｍＬ）および水（１ｍＬ）で抽出した。分離した有機層を水（１ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧下で除去し、粗化合物、一般的にはＮ-およびＯ-アルキル化異性体の混合物を得た。粗混合物を分離し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用してフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。

化合物例１：３-（２-（４-フルオロフェノキシ）エチル）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ-［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０４０２７）。５９ｍｇ（６９％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０３ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．２８-７．３６（ｍ、２Ｈ）、７．１６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．６Ｈｚ）、６．９０-６．９６（ｍ、２Ｈ）、６．８２-６．８９（ｍ、２Ｈ）、４．４４（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、４．２５（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．７５（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．５４（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．４０（ｓ、３Ｈ）、２．８（ｓ、２Ｈ）および１．３５（ｓ、６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）：Ｍ＋Ｈ、４５５．２。

化合物例２：３-（（１，３-ジオキソラン-２-イル）メチル）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］-キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０４０２９）。９ｍｇ（１２％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．２５-７．３５（ｍ、２Ｈ）、７．１６（ｍ、１Ｈ）、５．４１（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝４．９Ｈｚ）、４．２（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝４．９Ｈｚ）、４．０５-４．．１０（ｍ、２Ｈ）、３．８５-３．９５（ｍ、２Ｈ）、３．７５（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．３Ｈｚ）、３．５３（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．３Ｈｚ）、２．８（ｓ、２Ｈ）および１．３（ｓ、６Ｈ）。

化合物例３：４-（２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-４-オキソ-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-３（４Ｈ）-イル）ブタンニトリル（ＣＣＧ-２０４０３１）。２１ｍｇ（２９％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．２８-７．３７（ｍ、２Ｈ）、７．１８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．９７Ｈｚ）、４．１６（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝７．４２Ｈｚ）、３．７６（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．１Ｈｚ）、３．５３（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、２．７８（ｓ、２Ｈ）、２．４６（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、２．１５（ｑｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）および１．３（ｓ、６Ｈ）。

化合物例４：３-（４-メトキシベンジル）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キン-アゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０４０３６）１４ｍｇ（３４％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．２８-７．３５（ｍ、４Ｈ）、７．１６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．９Ｈｚ）、６．８３（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．７Ｈｚ）、５．２４（ｓ、２Ｈ）、３．７７（ｓ、３Ｈ）、３．７２（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．４９（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．３９（ｓ、３Ｈ）、２．８（ｓ、２Ｈ）および１．３２（ｓ、６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）：Ｍ＋Ｈ、４３７．２。

化合物例５：２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-３-（４-（５-メチル-１，２，４-オキサジアゾール-３-イル）ベンジル）-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０５３８７）：４８ｍｇ（４４％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０８（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５＆１．５Ｈｚ）、８．０３（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．４４（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．３０-７．３８（ｍ、２Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）、５．３６（ｓ、２Ｈ）、３．７３（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．５０（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．３９（ｓ、３Ｈ）、２．８２（ｓ、２Ｈ）、２．６４（ｓ、３Ｈ）および１．４１（ｓ、６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）：Ｍ＋Ｈ、４８９．２。

化合物例６：３-（３-ヒドロキシプロピル）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０５３９０）。２２ｍｇ（２７％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．２９-７．３８（ｍ、２Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、４．２８（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．１Ｈｚ）、３．７８（ｔ、４Ｈ、Ｊ＝６．１Ｈｚ）、３．５１-３．５７（ｍ、５Ｈ）、３．４３（ｓ、３Ｈ）、２．７８（ｓ、２Ｈ）、２．０（ｍ、３Ｈ）および１．３（ｓ、６Ｈ）。

化合物例７：３-（シクロプロピルメチル）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０５４４４）、１０ｈ：３９ｍｇ（４８％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）、７．２８-７．３７（ｍ、２Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．８Ｈｚ）、４．００（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）、３．７８（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．５５（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、２．８（ｓ、２Ｈ）、１．３（ｓ、７Ｈ）および０．５３（ｄ、４Ｈ、Ｊ＝６．５Ｈｚ）．
化合物例８：４-（２-（４-フルオロフェノキシ）エトキシ）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］-キナゾリン（ＣＣＧ-２０４０２８）。２６ｍｇ（３０％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０５（ｄ，、１Ｈ、Ｊ＝７．４２Ｈｚ）、７．２８-７．３６（ｍ、２Ｈ）、７．１５（ｍ、１Ｈ）、６．９３-７．０（ｍ、２Ｈ）、６．８２-６．８９（ｍ、２Ｈ）、４．７３（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝４．８Ｈｚ）、４．２７（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝４．８Ｈｚ）、３．７３（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、３．３８-３．４５（ｍ、５Ｈ）、２．８（ｓ、２Ｈ）および１．３（ｓ、６Ｈ）。

化合物例９：４-（（１，３-ジオキソラン-２-イル）メトキシ）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］-キナゾリン（ＣＣＧ-２０４０３０）。３４ｍｇ（４５％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．２０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．１５Ｈｚ）、７．２６-７．３７（ｍ、２Ｈ）、７．１５（ｍ、１Ｈ）、５．２９（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝４．０３Ｈｚ）、４．４６（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝４．０４Ｈｚ）、３．９０-４．０５（ｍ、４Ｈ）、３．７２（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、３．３５-３．４３（ｍ、５Ｈ）、２．８（ｓ、２Ｈ）および１．３（ｓ、６Ｈ）。

化合物例１０：４-（２-（２-メトキシエトキシ）エトキシ）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］-キナゾリン（ＣＣＧ-２０４０３３）。１０ｍｇ（２４％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．２０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）、７．２８-７．３５（ｍ、２Ｈ）、７．１５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．６Ｈｚ）、４．５７（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝４．９Ｈｚ）、３．８６（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝４．９Ｈｚ）、３．７２（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．９Ｈｚ）、３．６５-３．８（ｍ、２Ｈ）、３．３５-３．４３（ｍ、８Ｈ）、２．８（ｓ、２Ｈ）および１．３（ｓ、６Ｈ）。
化合物１１：４-（（４-メトキシベンジル）オキシ）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］-キナゾリン（ＣＣＧ-２０４０３７）。１２ｍｇ（２９％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．２０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、７．２６-７．４（ｍ、５Ｈ）、７．１５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．６Ｈｚ）、６．９（ｍ、２Ｈ）、５．４（ｓ、２Ｈ）、３．８１（ｓ、３Ｈ）、３．７３（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．９Ｈｚ）、３．３８-３．４３（ｍ、５Ｈ）、２．８（ｓ、２Ｈ）および１．３（ｓ、６Ｈ）．
化合物例１２：１-（３，４-ジフルオロフェニル）-２-（（２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチ-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］-キナゾリン-４-イル）オキシ）エタノン（ＣＣＧ-２０４０４０）。５２ｍｇ（５０％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．１９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５＆１．３Ｈｚ）、７．７３-７．８４（ｍ、２Ｈ）、７．２４-７．３８（ｍ、３Ｈ）、７．１７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、５．６（ｓ、２Ｈ）、３．６１（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、３．２６（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、２．８（ｓ、２Ｈ）および１．３（ｓ、６Ｈ）。

化合物例１３：３-（（２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４-イル）オキシ）プロパン-１-オール（ＣＣＧ-２０５３８４）。１４ｍｇ（１７％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．２２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２＆１．７Ｈｚ）、７．３-７．３８（ｍ、２Ｈ）、７．１７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝５．８Ｈｚ）、４．５９（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．７-３．８２（ｍ、４Ｈ）、３．３９-３．４６（ｍ、５Ｈ）、２．８（ｓ、２Ｈ）、２．０５（ｍ、３Ｈ）および１．３（ｓ、６Ｈ）。

化合物例１４：４-（シクロプロピルメトキシ）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キン-アゾリン（ＣＣＧ-２０５４４５）： ３６ｍｇ（４４％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．１＆１．９Ｈｚ）、７．２９-７．３７（ｍ、２Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．６Ｈｚ）、４．２３（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、３．７４（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．９Ｈｚ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．４０（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．９Ｈｚ）、２．８１（ｓ、２Ｈ）、１．３６（ｓ、６Ｈ）１．３０（ｍ、１Ｈ）、０．６０（ｍ、２Ｈ）および０．３５（ｍ、２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）：Ｍ＋Ｈ、３７１．２。

化合物例１５：９-メトキシ-３，５，５-トリメチル-２-（（２，２，２-トリフルオロエチル）チオ）-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２１１７９０）。実施例１と一致した様式で、Ｂ２ａおよびメチルトシル化物から合成した。３２ｍｇ（収率５７％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ７．６２（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．１０（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．９３（ｄｄ、Ｊ＝８．２、２．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．１８（ｑ、Ｊ＝９．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．５６（ｓ、３Ｈ）、２．７３（ｓ、２Ｈ）、１．３７（ｓ、６Ｈ）。

化合物例１６：２-（（３-（シアノメチル）-９-メトキシ-５，５-ジメチル-４-オキソ-３，４，５，６-テトラヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-２-イル）チオ）アセトニトリル（ＣＣＧ-２１２０１２）。実施例１と一致した様式で、Ｂ２ｃおよびα-クロロアセトニトリルから合成した。１５ｍｇ（収率２２％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ７．７６（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．１２（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．９７（ｄｄ、Ｊ＝８．２、２．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．９６（ｓ、２Ｈ）、４．１０（ｓ、２Ｈ）、３．８８（ｓ、３Ｈ）、２．７５（ｓ、２Ｈ）、１．３７（ｓ、６Ｈ）。

化合物例１７：２-（エチルチオ）-４，９-ジメトキシ-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン（ＣＣＧ-２１１７９３）。実施例１と一致した様式で、Ｂ２ｂおよびメチルｐ-トルエンスルホン酸エステルから合成した。１８ｍｇ（収率３１％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ７．８１（ｄ、Ｊ＝２．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．０８（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．９１（ｄｄ、Ｊ＝８．２、２．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．００（ｓ、３Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）、３．２１（ｑ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、２．７３（ｓ、２Ｈ）、１．４８（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）、１．３０（ｓ、６Ｈ）。

化合物例１８：２-（（４-（アリルオキシ）-９-メトキシ-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-２-イル）チオ）アセトニトリル（ＣＣＧ-２１２０１０）。実施例１と一致した様式で、Ｂ２ｃおよび臭化アリルから合成した。２２ｍｇ（収率３３％）を単離した。Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ７．８３（ｄ、Ｊ＝２．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．０８（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．９３（ｄｄ、Ｊ＝８．２、２．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．０８（ｄｄｔ、Ｊ＝１６．７、１０．６、５．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．４１（ｄｄ、Ｊ＝１６．７、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．２９（ｄｄ、Ｊ＝１０．６、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．９６（ｄ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９０-３．８５（ｍ、５Ｈ）、２．７４（ｓ、２Ｈ）、１．３４（ｓ、６Ｈ）。

化合物例１９：２-（（４-（シアノメトキシ）-９-メトキシ-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-２-イル）チオ）アセトニトリル（ＣＣＧ-２１２０１１）。実施例１と一致した様式で、Ｂ２ｃおよびα-クロロアセトニトリルから合成した。２６ｍｇ（収率３９％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ７．８４（ｄ、Ｊ＝２．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．１２（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．９８（ｄｄ、Ｊ＝８．３、２．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．１２（ｓ、２Ｈ）、３．９２（ｓ、２Ｈ）、３．８９（ｓ、３Ｈ）、２．７８（ｓ、２Ｈ）、１．３４（ｓ、６Ｈ）。

化合物例２０：２-（エチルチオ）-３-（２-メトキシエチル）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０３８０２）。アルキル化剤としてヨードエタンを使用してＨ５の調製と同様の様式で、Ｃ２から調製した（２７ｍｇ、収率５８％）。Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ｃｄｃｌ_３）δ８．１１（ｄｄ、Ｊ＝７．５、１．５、１Ｈ）、７．３５（ｔｄ、Ｊ＝７．５、１．５、１Ｈ）、７．３１（ｔｄ、Ｊ＝７．５、１．５、１Ｈ）、７．１８（ｄ、Ｊ＝６．９、１Ｈ）、４．２６（ｔ、Ｊ＝６．４、２Ｈ）、３．７１（ｔ、Ｊ＝６．４、２Ｈ）、３．４０（ｓ、３Ｈ）、３．３２（ｑ、Ｊ＝７．４、２Ｈ）、２．７９（ｓ、２Ｈ）、１．４８（ｔ、Ｊ＝７．４、３Ｈ）、１．３８（ｓ、６Ｈ）．ＴＯＦ ＥＳ＋ＭＳ：３４５．２（Ｍ＋Ｈ）、３６７．２（Ｍ＋Ｎａ）。

化合物例２１：３-アリル-８-（２-（ジエチルアミノ）エトキシ）-２-（エチルチオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］-キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０５３９６）。ジメチルホルムアミド中、３-アリル-２-（エチルチオ）-８-ヒドロキシ-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（０．０３ｇ、０．０９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、炭酸セシウム（０．１０ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加え、５分後、２-（ジエチルアミノ）-エチルクロリド塩酸塩（０．０２ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１８時間後、混合物を水で希釈し、９０分間撹拌し、酢酸エチルで３回抽出した。１つにまとめた抽出物を水、その後、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥した。溶媒を減圧下で取り除き、単黄色のゴムとして生成物（０．０３ｇ）が残った。質量スペクトルＥＳ＋ｍ／ｚ＝４４２（ｍ＋１）；^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ｄｍｓｏ）δ８．００（ｄ、１Ｈ）、６．９１（ｄｄ、１Ｈ）、６．８５（ｓ、１Ｈ）、５．９６-５．７４（ｍ、１Ｈ）、５．２１（ｄ、１Ｈ）、５．１３（ｄ、１Ｈ）、４．５９（ｄ、２Ｈ）、４．０７（ｔ、２Ｈ）、３．２９（ｑ、２Ｈ）、２．７８（ｔ、２Ｈ）、２．７５（ｓ、２Ｈ）２．５６（ｑ、４Ｈ）、１．３９（ｔ、３Ｈ）、１．２９（ｓ、６Ｈ）、０．９８（ｔ、６Ｈ）。

化合物例２２：３-アリル-２-（エチルチオ）-８-イソブトキシ-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０５４２６）。実施例２１で使用したものと同様の様式で調製した。収率：７２％。質量スペクトルＥＳ＋ｍ／ｚ＝３９９、４２１（ｍ＋１、ｍ＋２３）．^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ８．０５（ｄ、１Ｈ）、６．９６（ｄ、１Ｈ）、６．９０（ｓ、１Ｈ）、５．９２（ｍ、１Ｈ）、５．２７（ｄ、１Ｈ）、５．１８（ｄ、１Ｈ）、４．６４（ｄ、２Ｈ）、３．８７（ｄ、２Ｈ）、３．３４（ｑ、２Ｈ）、２．８０（ｓ、２Ｈ）、２．０９（ｈ、１Ｈ）、１．４４（ｔ、３Ｈ）、１．３４（ｓ、６Ｈ）、１．０５（ｄ、６Ｈ）。

化合物例２３：２-（２-（（３-アリル-２-（エチルチオ）-５，５-ジメチル-４-オキソ-３，４，５，６-テトラヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-８-イル）オキシ）エチル）イソインドリン-１，３-ジオン（ＣＣＧ-２０６１７６）。実施例２１で使用したものと同様の様式で調製した。収率２８％。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ７．９２（ｄ、１Ｈ）、７．８７-７．７９（ｍ、４Ｈ）、６．８３（ｄ、１Ｈ）、６．７６（ｓ、１Ｈ）、５．８５-５．７５（ｍ、１Ｈ）、５．１７（ｄ、１Ｈ）、５．０８（ｄ、１Ｈ）、４．５２（ｄ、２Ｈ）、４．２３（ｔ、２Ｈ）、３．９５（ｔ、２Ｈ）、３．２３（ｑ、２Ｈ）、２．６５（ｄ、２Ｈ）、１．３３（ｔ、３Ｈ）、１．２１（ｓ、６Ｈ）。

化合物例２４：３-アリル-８-ベンゾイル-５，５-ジメチル-２-（プロパ-２-イン-１-イルチオ）-５，６-ジヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０４０８０）。アルキル化剤として、臭化プロパルギルを使用して、実施例２０で使用したものと同様の様式で調製した。２３ｍｇ単離した（収率７０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．２７（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．８３（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．７３（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．６６（ｓ、１Ｈ）、７．６１（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．５１（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、５．９７-５．８７（ｍ、１Ｈ）、５．３５-５．２７（ｍ、２Ｈ）、４．６８（ｄ、Ｊ＝５．５Ｈｚ、２Ｈ）、４．０７（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．８７（ｓ、２Ｈ）、２．２７（ｔ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、１Ｈ）、１．４１（ｓ、６Ｈ）。

化合物例２５：３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-５，６-ジヒドロピリド［３，４-ｈ］キナゾリン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０４０４１）。ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の３-アリル-５，５-ジメチル-２-チオキソ-２，３，５，６-テトラヒドロピリド［３，４-ｈ］キナゾリン-４（１Ｈ）-オンの溶液（０．１ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）に、炭酸セシウム（０．２２ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）、次に２-メトキシエチル４-メチルベンゼンスルホン酸塩（０．０９ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を加えた。得られる混合物を４０℃で３時間撹拌した。冷却し、濃縮した。２Ｍ ＨＣｌとＥｔＯＡｃに分割した。層および抽出した水相をＥｔＯＡｃで再び分離した。ＭｇＳＯ_４で乾燥した。濾過し濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製した。濃縮し、掲題の化合物を得た（０．０１ｇ、０．０３ｍｍｏｌ、収率８．５％）。ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．６２（ｄ、Ｊ＝４Ｈｚ、１Ｈ）、８．５１（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｄ、Ｊ＝４Ｈｚ、１Ｈ）、５．９０-５．９７（ｍ、１Ｈ）、５．３０-５．３４（ｍ、２Ｈ）、４．７２（ｄ、Ｊ＝４．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．７７（ｔ、２Ｈ）、３．５７（ｔ、２Ｈ）、３．４６（ｓ、３Ｈ）、２．８２（ｓ、２Ｈ）、１．４４（ｓ、６Ｈ）．ＥＳＩ＋ＭＳ ｍ／ｚ３５８．１（Ｍ＋Ｈ^＋）。

化合物例２６：３-アリル-Ｎ-（２-ヒドロキシエチル）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-４-オキソ-１，２，３，４，５，６-ヘキサヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-８-カルボキスアミド（ＣＣＧ-２０６２３９）。３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５，５-ジメチル-４-オキソ-３，４，５，６-テトラヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリン-８-カルボン酸（０．０５ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．０３ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、乾燥ＴＨＦ中のＨＯＢＴ（０．０２ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の溶液に、エタノールアミン（０．００９ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で一晩撹拌した。水を加えることによって反応物をクエンチし、酢酸エチルで抽出した。飽和炭酸ナトリウム溶液、水、およびブラインで洗浄し、有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、および真空で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（２０〜７０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、掲題化合物を単離した（収率（３６％）。ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．１８-８．１９（ｍ、１Ｈ）、８．０１-８．０５（ｍ、１Ｈ）、７．９５（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、６．２０-６．２３（ｍ、１Ｈ）、５．８９-５．９４（ｍ、１Ｈ）、５．２６-５．３１（ｍ、２Ｈ）、４．５８-４．６３（ｍ、２Ｈ）、３．７２-３．７８（４Ｈ、Ｍ）、３．４９-３．５２（ｍ ２Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、２．９４-２．９５（ｍ、２Ｈ）、２．８０（ｓ、２Ｈ）、１．３７（ｓ、６Ｈ）．ＥＳＩ-ＭＳ ｍ／ｚ ４４３．２（Ｍ＋Ｈ^＋）。

化合物例２７：３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-４（６Ｈ）-オン、（ＣＣＧ-２０５４４７）。ＤＣＭ（２．５ｍＬ）中の化合物（５０ｍｇ）の溶液に、ＴＦＡ（０．２５ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。ＴＬＣは出発材料が完全になくなったことを示した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ_３（１ｍＬを２回）溶液および水（１ｍＬを２回）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で取り除き、生成物を得た。３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-４（６Ｈ）-オン、１７：０．２０ｇ（９１％）．^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．３０-７．３９（ｍ、２Ｈ）、７．２３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）、５．９４（ｍ、１Ｈ）、５．２８（ｍ、２Ｈ）、４．６９（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝５．６Ｈｚ）、３．７６（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．５３（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．４（ｓ、３Ｈ）、３．１２（ｓ、２Ｈ）、２．９６（ｍ、４Ｈ）、２．７５（ｍ、２Ｈ）、２．１７（ｓ、１Ｈ）および１．３５（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝１３．３Ｈｚ）。

化合物例２８〜３１の一般的なアシル化手順：ＤＣＭ０．７ｍＬ中の化合物１７（０．０９〜０．１２６ミリモル）の溶液に、酸塩化物（１等量、ＡｃＣｌの場合７等量）およびＴＥＡ（１．２〜３等量）を加え、反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＴＬＣは生成物の形成を示した。反応物を１ｍＬのＤＣＭを加えることによって希釈した。有機層を１Ｎ ＨＣｌ（１ｍＬ）、次に（１ｍＬを２回）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、デカントし、溶媒を減圧下で取り除き、粗化合物を得た。粗化合物をＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用してフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。

化合物例２８：３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-１'-ペンタノイル-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-４（６Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０６２２７）。３６ｍｇ（５９％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．３２-７．３９（ｍ、２Ｈ）、７．２２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、５．９１（ｍ、１Ｈ）、５．２８（ｍ、２Ｈ）、４．６９（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝５．５Ｈｚ）、４．３８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１３．２Ｈｚ）、３．７４-３．８４（ｍ、３Ｈ）、３．５４（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．３３-３．４４（ｍ、４Ｈ）、３．１７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１７．６Ｈｚ）、２．９８-３．０６（ｍ、２Ｈ）、２．８８-２．９７（ｍ、１Ｈ）、２．４８（ｔｄ、１Ｈ、Ｊ＝１３．２＆４．８Ｈｚ）、２．３３（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）、１．５８-１．７（ｍ、２Ｈ）、１．３２-１．４８（ｍ、４Ｈ）＋０．９３（ｔ、３Ｈ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）。

化合物例２９：１'-アセチル-３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-４（６Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０６２３０）：２８ｍｇ（６６％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．３３-７．４１（ｍ、２Ｈ）、７．２２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、５．９１（ｍ、１Ｈ）、５．２８（ｍ、２Ｈ）、４．６８（ｍ、２Ｈ）、４．３８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ）、３．７６（ｍ、３Ｈ）、３．５４（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．３５-３．４４（ｍ、４Ｈ）、３．１６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１５．７Ｈｚ）、２．９８-３．０６（ｍ、２Ｈ）、２．８８-２．９７（ｍ、１Ｈ）、２．４８（ｔｄ、１Ｈ、Ｊ＝１３．２＆５．０Ｈｚ）、２．１０（ｓ、３Ｈ）および１．４３（ｍ、２Ｈ）。

化合物例３０：３-アリル-１'-ベンゾイル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-４（６Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０６２３１）：１６ｍｇ（３３％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）、７．４４-７．４８（ｍ、２Ｈ）、７．３３-７．４１（ｍ、５Ｈ）、７．２２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．６Ｈｚ）、５．９３（ｍ、１Ｈ）、５．２９（ｍ、２Ｈ）、４．７０（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝１５．５Ｈｚ）、４．４６-４．５６（ｍ、１Ｈ）、３．７６（ｔ、３Ｈ、６．２Ｈｚ）、３．５５（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．２８-３．３８（ｍ、１Ｈ）、２．９６-３．２５（ｍ、４Ｈ）、２．５８-２．６９（ｍ、１Ｈ）および１．３２-１．５６（ｍ、２Ｈ）。

化合物例３１：３-アリル-１'-（４-クロロベンゾイル）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-４（６Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０６２３５）：３３ｍｇ（７５％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０８（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５＆１．５Ｈｚ）、７．３４-７．４３（ｍ、６Ｈ）、７．２３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．９Ｈｚ）、５．９２（ｍ、１Ｈ）、５．３０（ｍ、２Ｈ）、４．７０（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝５．５Ｈｚ）、４．４７-４．５２（ｍ、１Ｈ）、３．７７（ｔ、３Ｈ、６．２Ｈｚ）、３．７０（ｍ、１Ｈ）、３．５５（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、２．９８-３．４０（ｍ、４Ｈ）、２．６（ｍ、１Ｈ）＋１．３２-１．５５（ｍ、２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）：Ｍ＋Ｈ、５３６．２＆５３８．２。

化合物例３２：３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-４-オキソ-４，６-ジヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルブアルデヒド（ＣＣＧ-２０６２３４）：室温で、トルエン（０．２ｍＬ）中の化合物１７（０．０４３）の溶液に、ＤＢＵ（０．０１ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＴＬＣは生成物の形成、および出発材料の存在を示した。室温でさらに１５時間撹拌した。粉末のＫＨＳＯ_４（５０ｍｇ）を加え、混合物を１時間撹拌した。反応混合物を濾過し、溶媒を取り除いた。残査をシリカゲル（４ｇ）のカラムに入れ、１２ｍＬ／分で１２０ｍＬ以上の勾配が１６〜９０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出した。１３ｍｇ（収率２８％）を単離した；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．３＆１．４Ｈｚ）、８．０４（ｓ、１Ｈ）、７．３３-７．４２（ｍ、２Ｈ）、７．２４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、５．９１（ｍ、１Ｈ）、５．２９（ｍ、２Ｈ）、４．６８（ｍ、２Ｈ）、４．２７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝１３．７＆５Ｈｚ）、３．７６（ｔ、２Ｈ、６．２Ｈｚ）、３．５４（ｔ、３Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．４３（ｓ、３Ｈ）、３．３５-３．４１（ｍ、１Ｈ）、３．１８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１５．７Ｈｚ）、３．０７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、３．００（ｔｄ、１Ｈ、Ｊ＝１２．９＆５．２Ｈｚ）、２．９２（ｔｄ、１Ｈ、Ｊ＝１３．４＆３．３Ｈｚ）、２．５９（ｔｄ、１Ｈ、Ｊ＝１３．４＆５．３Ｈｚ）および１．４０-１．５０（ｍ、２Ｈ）。

化合物例３３：３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-２'，３'，５'，６'-テトラヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピラン］-４（６Ｈ）-オン、（ＣＣＧ-２０５４５３）。ＤＭＦ（０．７ｍＬ）中の化合物（４０ｍｇ、０．１２ミリモル）の溶液に、Ｃｓ_２ＣＯ_３（７７ｍｇ、０．２４ミリモル）を加えた。反応混合物を３分撹拌した。その後、２-メトキシエチルｐ-トルエンスルホン酸エステル（３０ｍｇ、０．１２ミリモル）を加え、反応混合物を７０℃で３時間撹拌した。ＴＬＣは反応の完了を示した。溶媒を減圧下で取り除き、残査をＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（２ｍＬ）で抽出し、分離した有機層をＨ_２Ｏ（１ｍＬを２回）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒を減圧下で取り除き、粗生成物を得た。４ｇのＳｉｌｉｃｙｃｌｅカラムを使用して、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。カラムを最初に１２ｍＬ／分、２分間、４％ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭで溶出し、次に、４〜２０％勾配から６０ｍＬ以上溶出した。ＴＬＣの後、所望の画分をプールし、溶媒を減圧下で取り除き、精製された生成物を得た。収率：３９ｍｇ（８３％）；Ｒ_ｆ＝０．５９（１：１、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、７．３-７．４（ｍ、２Ｈ）、７．２４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）、５．９４（ｍ、１Ｈ）、５．２９（ｍ、２Ｈ）、４．７０（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝６．６Ｈｚ）、３．７-３．８８（ｍ、６Ｈ）、３．５４（ｔ、２Ｈ、６．２Ｈｚ）、３．４１（ｓ、３Ｈ）、３．１８（ｓ、２Ｈ）、３．０１（ｔｄ、２Ｈ、Ｊ＝１３＆６．３Ｈｚ）＆１．２７（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝１３．５Ｈｚ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）：Ｍ＋Ｈ、３９９．２＆Ｍ＋Ｎａ、４２１．２。

化合物例３４：３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-４-オキソ-４，６-ジヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，３'-ピロリジン］-１'-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（ＣＣＧ-２０８８６０）。出発材料としてＪ３ａを、第一および第二のアルキル化剤として、２-メトキシエチルｐ-トルエンスルホン酸エステルおよび臭化アリルを使用して、エントリーＫ３の合成と同様の様式で、化合物を調製した。４０ｍｇ（収率３０％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．１０（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．４１-７．３０（ｍ、２Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、５．９２（ｄ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．３０（ｄ、Ｊ＝１８．７Ｈｚ、２Ｈ）、４．６９（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．９９（ｄｄ、Ｊ＝３２．９、１０．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．７６（ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．６３-３．４５（ｍ、４Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．２７（ｄｄ、Ｊ＝３９．４、１０．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．９６（ｑ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、３Ｈ）、１．７０-１．６２（ｍ、１Ｈ）、１．４５（ｄ、Ｊ＝１５．７Ｈｚ、９Ｈ）。

化合物例３５：３-アリル-８-メトキシ-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-４-オキソ-４，６-ジヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，３'-ピロリジン］-１'-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（ＣＣＧ-２０８８６４）。出発材料としてＪ３ｂを、第一および第二のアルキル化剤として、２-メトキシエチルｐ-トルエンスルホン酸エステルおよび臭化アリルを使用して、エントリーＫ３の合成と同様の様式で、化合物を調製した。６８ｍｇ（収率２０％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．０３（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８５（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．７０（ｓ、１Ｈ）、５．８９（ｓ、１Ｈ）、５．２８（ｄ、Ｊ＝１９．５Ｈｚ、２Ｈ）、４．６７（ｄ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．９７（ｄｄ、Ｊ＝４３．４、１０．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．７４（ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．６２-３．４３（ｍ、４Ｈ）、３．４１（ｓ、３Ｈ）、３．２５（ｄｄ、Ｊ＝４０．４、１０．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．１５-２．８３（ｍ、３Ｈ）、１．７０-１．５９（ｍ、１Ｈ）、１．４４（ｄ、Ｊ＝１４．０Ｈｚ、９Ｈ）。

化合物例３６：３-アリル-８-メトキシ-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，３'-ピロリジン］-４（６Ｈ）-オン塩酸塩（ＣＣＧ-２０８８６５）。実施例３５（３０ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）を４Ｍ ＨＣｌ-ジオキサンに溶解し、混合物を１時間撹拌し、白色固体の沈殿物が発生した。濾過により固体を回収し、冷やしたジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥した。２０ｍｇ（収率７６％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ１１．６２（ｓ、１Ｈ）、８．１６（ｓ、１Ｈ）、８．０３（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．９０（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｓ、１Ｈ）、５．９７-５．８０（ｍ、１Ｈ）、５．３８-５．２０（ｍ、２Ｈ）、４．７８-４．５９（ｍ、２Ｈ）、４．０５-３．９２（ｍ、１Ｈ）、３．８８（ｓ、３Ｈ）、３．７５（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、３Ｈ）、３．６５-３．５１（ｍ、３Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．３８-３．１６（ｍ、２Ｈ）、２．８７（ｓ、１Ｈ）、２．２６-１．９９（ｍ、２Ｈ）。

化合物例３７：３-アリル-８-メトキシ-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-４-オキソ-４，６-ジヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（ＣＣＧ-２０６６６０）。第一および第二のアルキル化剤として、２-メトキシエチルｐ-トルエンスルホン酸エステルおよび臭化アリルを使用して、エントリーＫ３の合成と同様の様式で化合物を調製した。４９ｍｇ（収率４０％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ９．９７（ｓ、１Ｈ）、８．７４（ｓ、１Ｈ）、８．０１（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．７９（ｓ、１Ｈ）、５．９５-５．８３（ｍ、１Ｈ）、５．２８-５．１９（ｍ、２Ｈ）、４．６８（ｄ、Ｊ＝４．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）、３．７５（ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．５３（ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．５０-３．４３（ｍ、２Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．３６-３．２１（ｍ、２Ｈ）、３．０２（ｓ、２Ｈ）、２．９９-２．８４（ｍ、２Ｈ）、１．６９（ｄ、Ｊ＝１３．７Ｈｚ、２Ｈ）。

化合物例３８：３-アリル-２-（エチルチオ）-８-メトキシ-４-オキソ-４，６-ジヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（ＣＣＧ-２０６６６３）。ヨードエタン、アルキル化剤として臭化アリルを使用して、エントリーＫ３の合成と同様の様式で合成した。３０ｍｇ（収率５２％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．０５（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８６（ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．７４（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．９２（ｄｄｔ、Ｊ＝１５．９、１０．８、５．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．３０-５．２２（ｍ、２Ｈ）、４．６５（ｄ、Ｊ＝５．５Ｈｚ、２Ｈ）、４．０７-３．８９（ｍ、２Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｑ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．１９-２．８６（ｍ、５Ｈ）、２．６９-２．５２（ｍ、１Ｈ）、１．５１-１．４２（ｍ、１２Ｈ）、１．４２-１．３２（ｍ、２Ｈ）。

化合物例３９：２-（（シアノメチル）チオ）-８-メトキシ-３-メチル-４-オキソ-４，６-ジヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（ＣＣＧ-２１１８１１）。化合物Ｋ２（５００ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（７ｍＬ）に溶解し、炭酸水素ナトリウム（１０８ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）およびａ-クロロアセトニトリル（７８μＬ、１．２２２ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で３時間撹拌し、そのときに反応物を水（３０ｍＬ）で希釈し、黄色固体が沈殿した。当該固体を真空濾過によって回収し、水およびヘキサンで洗浄した。高真空で乾燥し、Ｓ-アルキル化中間体（４９０ｍｇ、収率９０％）を得た。当該固体の一部（１７０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に再溶解した。当該溶液に、炭酸セシウム（１４２ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）およびメチルトシル化物（７４ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を５０℃に温め、一晩撹拌した。水を加えることによって反応を停止し、水性混合物を酢酸エチルで２回抽出した。１つにまとめた有機抽出物を水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、Ｎ-およびＯ-アルキル化生成物の粗混合物に濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（１０〜４０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によってさらに精製し、白色固体としてＮ-アルキル化生成物を得た（２６ｍｇ、収率１５％）。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．１１（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８９（ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．７４（ｄ、Ｊ＝２．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．０６（ｓ、２Ｈ）、４．０４-３．９０（ｍ、２Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）、３．４９（ｓ、３Ｈ）、３．１７-２．９３（ｍ、４Ｈ）、２．９３-２．７５（ｍ、１Ｈ）、２．７２-２．５２（ｍ、１Ｈ）、１．４７（ｓ、９Ｈ）、１．４３-１．３３（ｍ、２Ｈ）。

化合物例４０：２-（（シアノメチル）チオ）-４，８-ジメトキシ-６Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（ＣＣＧ-２１１８１０）。化合物を粗反応混合物から単離し、フラッシュクロマトグラフィーによって実施例３９を精製した。２９ｍｇ（収率１７％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．１９（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８９（ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．７３（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．１０-３．８５（ｂｍ、２Ｈ）、４．０３（ｓ、３Ｈ）、３．９２（ｓ、２Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．１３-３．００（ｍ、４Ｈ）、２．４６（ｓ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）、１．４６（ｓ、２Ｈ）。

化合物例４１：４-（シアノメトキシ）-２-（（シアノメチル）チオ）-８-メトキシ-６Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（ＣＣＧ-２１１８１２）。第一および第二のアルキル化剤として、ａ-クロルアセトニトリルを使用して、実施例３９と同様の様式で合成した。４９ｍｇ（収率２４％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．２１（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．９０（ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．７５（ｄ、Ｊ＝２．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．１１（ｓ、２Ｈ）、４．０９-３．９６（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、２Ｈ）、３．８８（ｓ、３Ｈ）、３．１５-３．０１（ｍ、４Ｈ）、２．４６-２．２７（ｍ、２Ｈ）、１．５６-１．４５（ｍ、１１Ｈ）。

化合物例４２：３-アリル-８-メトキシ-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-４（６Ｈ）-オン塩酸塩（ＣＣＧ-２０６６６１）。出発材料として化合物例３７を使用して、実施例３６と同様の様式で合成した。１６ｍｇ（収率８２％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ９．９７（ｓ、１Ｈ）、８．７４（ｓ、１Ｈ）、８．０１（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．７９（ｓ、１Ｈ）、５．９５-５．８３（ｍ、１Ｈ）、５．２８-５．１９（ｍ、２Ｈ）、４．６８（ｄ、Ｊ＝４．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）、３．７５（ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．５３（ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．５０-３．４３（ｍ、２Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．３６-３．２１（ｍ、２Ｈ）、３．０２（ｓ、２Ｈ）、２．９９-２．８４（ｍ、２Ｈ）、１．６９（ｄ、Ｊ＝１３．７Ｈｚ、２Ｈ）。

化合物例４３：３-アリル-２-（エチルチオ）-８-メトキシ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-４（６Ｈ）-オン塩酸塩（ＣＣＧ-２０６６６４）。出発材料として化合物例３８を使用して、実施例３６と同様の様式で合成した。１７ｍｇ（収率８９％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）９．９８（ｓ、１Ｈ）、８．７７（ｓ、１Ｈ）、８．０５（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄｄ、Ｊ＝８．６、１．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．７８（ｓ、１Ｈ）、６．０１-５．７９（ｍ、１Ｈ）、５．３２-５．１３（ｍ、２Ｈ）、４．６６（ｄ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）、３．５５-３．４１（ｍ、２Ｈ）、３．３５-３．２２（ｍ、４Ｈ）、３．０２（ｓ、２Ｈ）、２．９８-２．８５（ｍ、２Ｈ）、１．６９（ｄ、Ｊ＝１４．２Ｈｚ、２Ｈ）、１．４７（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。

化合物例４４：３-アリル-８-メトキシ-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-１'-メチル-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-４（６Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０８９８１）。化合物例４２（３０ｍｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）を１，２-ジクロロエタン（４００μＬ）に溶解し、その後、酢酸（５μＬ、０．０８０ｍｍｏｌ）、パラホルムアルデヒド（１０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、およびトリアセトキシホウ水素化ナトリウム（２１ｍｇ、０．１００ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で１２時間撹拌し、その後、飽和水性炭酸ナトリウムを加えることによってクエンチした。反応物をＤＣＭで２回抽出し、その後、１つにまとめた有機抽出物を水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（０〜２０％メタノール：ＤＣＭ）によって、さらに精製し、粘性のある黄色油として掲題の化合物を得た（２２ｍｇ、収率７７％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．０１（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８４（ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．７４（ｄ、Ｊ＝２．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．９１（ｄｄｔ、Ｊ＝１６．２、１１．０、５．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．３３-５．２１（ｍ、２Ｈ）、４．６７（ｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．７５（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．５１（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．００（ｓ、２Ｈ）、２．９８-２．８９（ｍ、２Ｈ）、２．７４（ｄ、Ｊ＝１１．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．６４（ｓ、２Ｈ）、２．３４（ｓ、３Ｈ）、１．３６（ｄ、Ｊ＝１３．５Ｈｚ、２Ｈ）。

化合物例４５：３-アリル-１'-ベンジル-８-メトキシ-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-４（６Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０８９８２）。結合パートナーとしてベンズアルデヒドを使用して、化合物４４と同様の様式で合成した。２３ｍｇ（収率５７％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ７．９９（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．６４-７．５１（ｍ、２Ｈ）、７．４４-７．２９（ｍ、３Ｈ）、６．８８-６．８１（ｍ、２Ｈ）、５．９８-５．８５（ｍ、１Ｈ）、５．３４-５．２４（ｍ、２Ｈ）、４．７１（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．７５（ｔ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．５３（ｔ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．３１-３．０４（ｍ、４Ｈ）、３．０６-２．９３（ｍ、３Ｈ）、１．９０-１．６１（ｍ、５Ｈ）。
化合物例４６：３-アリル-８-メトキシ-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-Ｎ-メチル-４-オキソ-４，６-ジヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボキスアミド（ＣＣＧ-２１１９７０）。化合物例４２（３０ｍｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３５０μＬ）に溶解し、その後、カルバミン酸Ｏ-スクシンイミジルメチル（２４ｍｇ、０．１４０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１８μＬ、０．１０５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で６時間撹拌した。水を加えることによって反応を停止し、ＤＣＭで抽出した。有機抽出物を水およびブラインで洗浄し、その後、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（２０〜７０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、白色粉末として、所望の化合物を単離した（２２ｍｇ、収率６５％）。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．０２（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８６（ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．７４（ｄ、Ｊ＝２．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．９１（ｄｄｔ、Ｊ＝１５．９、１０．７、５．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．３１-５．２３（ｍ、２Ｈ）、４．６７（ｄ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、４．４２（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．８２-３．７２（ｍ、４Ｈ）、３．５２（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．１７（ｔｄ、Ｊ＝１２．７、３．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．０１（ｓ、２Ｈ）、２．８１（ｄ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、３Ｈ）、２．７４（ｔｄ、Ｊ＝１３．２、４．９Ｈｚ、２Ｈ）、１．４３（ｄ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）。

化合物例４７：３-アリル-８-メトキシ-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-４-オキソ-Ｎ-フェニル-４，６-ジヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボキスアミド（ＣＣＧ-２１１９７１）。アシル化剤として、イソシアン酸フェニルを使用して、化合物例４６と同様の様式で合成した。３２ｍｇ（収率８３％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．０４（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．３７（ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．３２-７．２５（ｍ、２Ｈ）、７．０２（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．８８（ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｄ、Ｊ＝２．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．３９（ｓ、１Ｈ）、５．９２（ｄｄｔ、Ｊ＝１５．９、１０．８、５．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．３３-５．２５（ｍ、２Ｈ）、４．６９（ｄ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｄｔ、Ｊ＝１３．０、４．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．８８（ｓ、３Ｈ）、３．７６（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．５４（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．４３（ｓ、３Ｈ）、３．３１（ｔｄ、Ｊ＝１２．８、３．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．０４（ｓ、２Ｈ）、２．７８（ｔｄ、Ｊ＝１３．６、４．７Ｈｚ、２Ｈ）、１．５２（ｄ、Ｊ＝１３．８Ｈｚ、２Ｈ）。

化合物例４８：エチル（３-アリル-８-メトキシ-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-４-オキソ-４，６-ジヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボニル）グリシナート（ＣＣＧ-２１１９７２）。アシル化剤としてエチル２-イソシアナト酢酸塩を使用して、化合物例４６と同様の様式で合成した。２６ｍｇ（収率６７％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．０２（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８６（ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．７４（ｄ、Ｊ＝２．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．９１（ｄｄｔ、Ｊ＝１５．９、１０．８、５．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．３２-５．２３（ｍ、２Ｈ）、４．９４（ｔ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．６７（ｄ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、４．２２（ｑ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ）、４．０２（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）、３．８２（ｄｔ、Ｊ＝１２．９、４．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．７５（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．５２（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．２３（ｔｄ、Ｊ＝１２．７、３．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．０１（ｓ、２Ｈ）、２．７５（ｔｄ、Ｊ＝１３．３、４．８Ｈｚ、２Ｈ）、１．４５（ｄ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、１．２９（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ）。

化合物例４９：２-（（４，８-ジメトキシ-６Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-２-イル）チオ）アセトニトリル（ＣＣＧ-２１２０１４）。化合物例２７と同様の様式で、化合物例４０から合成した。１６ｍｇ（収率１００％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、メタノール-ｄ_４）δ８．１８（ｄ、Ｊ＝９．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．９８-６．９１（ｍ、２Ｈ）、４．１２（ｓ、２Ｈ）、４．１０（ｓ、３Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．４３-３．２５（ｍ、４Ｈ）、３．２０（ｓ、２Ｈ）、２．７５（ｔｄ、Ｊ＝１４．２、５．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．７２（ｄ、Ｊ＝１５．２Ｈｚ、２Ｈ）。

化合物例５０：２-（（４-（シアノメトキシ）-８-メトキシ-６Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-２-イル）チオ）アセトニトリル（ＣＣＧ-２１２０１５）。基質として化合物例４１を使用して、化合物例２７と同様の様式で合成した。９ｍｇ（収率５６％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、メタノール-ｄ_４）δ８．２４（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．０２-６．８９（ｍ、２Ｈ）、５．２８（ｓ、２Ｈ）、４．１６（ｓ、２Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）、３．４３-３．３３（ｍ、２Ｈ）、３．３３-３．２６（ｍ、２Ｈ）、３．２４（ｓ、２Ｈ）、２．６７（ｔｄ、Ｊ＝１４．３、１３．８、５．１Ｈｚ、２Ｈ）、１．８０（ｄ、Ｊ＝１５．１Ｈｚ、２Ｈ）。

化合物例５１：１-（４-（アリルオキシ）-８-メトキシ-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-６Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-イル）ペンタン-１-オン（ＣＣＧ-２０８８６３）。化合物Ｋ３（９４ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）を、４Ｍ ＨＣｌ-ジオキサン溶液（１ｍＬ）に溶解した。３０分後、溶液から白色固体が沈殿した。溶液に５ｍＬノジエチルエーテルを加え、固体を濾過によって回収した。固体をジエチルエーテルで洗浄し、高真空下で乾燥し、８９ｍｇの遊離アミン中間体（定量）を送達した。当該物質の一部（３０ｍｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３５０μＬ）、およびＤＩＰＥＡ（３７μＬ、０．２１０ｍｍｏｌ）に溶解し、塩化ペンタノイル（１０μＬ、０．０８４ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１２時間撹拌した後、溶媒を真空で取り除き、カラムクロマトグラフィー（１０〜５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）を使用して、最終生成物を精製した。２７ｍｇ（収率７４％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム-ｄ）δ８．１６（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．７３（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．０４（ｄｄｔ、Ｊ＝１６．９、１０．６、５．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．３５（ｄ、Ｊ＝１６．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．２６（ｄ、Ｊ＝１０．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．９１（ｄ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、４．４３（ｄ、Ｊ＝１３．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．７２（ｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、２Ｈ）、３．４４-３．３４（ｍ、６Ｈ）、３．１５-３．００（ｍ、２Ｈ）、２．９６（ｔ、Ｊ＝１２．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．５７（ｔｄ、Ｊ＝１３．３、４．７Ｈｚ、１Ｈ）、２．４４（ｔｄ、Ｊ＝１３．３、４．７Ｈｚ、１Ｈ）、２．３５（ｔｄ、Ｊ＝７．３、３．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．７０-１．５８（ｍ、３Ｈ）、１．５８-１．４６（ｍ、２Ｈ）、１．４６-１．３３（ｍ、２Ｈ）、０．９４（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。

化合物例５２：４-（２-メトキシエトキシ）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５-メチル-６-フェニルピリミジン（ＣＣＧ-２０５３６０）。ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中、炭酸セシウム（０．８２ｇ、２．５ｍｍｏｌ）および５-メチル-６-フェニル-２-チオキソ-２，３-ジヒドロピリミジン-４（１Ｈ）-オン（Ｎ３）（０．５ｇ、２．２９ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、２-ブロモエチルメチルエーテル（０．３５ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を一部、室温で加えた。混合物を７０℃に４時間半加熱し、放冷した。炭酸セシウム（０．８２ｇ、２．５ｍｍｏｌ）をさらに加え、次にブロモエチルメチルエーテル（０．４ｇ、２．９ｍｍｏｌ）を加えた。１８時間後、混合物を水に注ぎ、撹拌し、その後、ジクロロメタンで３回抽出した。１つにまとめた抽出物を水で洗浄し、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥した。溶媒を真空で取り除き、フラッシュクロマトグラフィー（２５〜３３％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）でさらに精製し、澄んだ無色油として掲題の化合物（０．４ｇ）を得た；質量スペクトルＥＳ＋ｍ／ｚ＝３３５、３５７（ｍ＋１、ｍ＋２３）；^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ｄｍｓｏ）δ７．５８（ｄｄ、２Ｈ）、７．５４-７．４０（ｍ、３Ｈ）、４．５１（ｔ、２Ｈ）、３．７０（ｔ、２Ｈ）、３．６０（ｔ、２Ｈ）３．３１（ｓ、６Ｈ）、３．３０（ｍ、２Ｈ）、２．０９（ｓ、３Ｈ）。

化合物例５３：３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５-メチル-６-フェニルピリミジン-４（３Ｈ）-オン（ＣＣＧ-２０５３８１）。化合物Ｎ４をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に溶解し、室温で撹拌した。炭酸セシウム（０．５５ｇ、１．６７ｍｍｏｌ）を加え、次に臭化アリル（０．２２ｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を加えた。３時間後、混合物を４０ｍＬの水で希釈し、酢酸エチルで２回抽出した。１つにまとめた抽出物を水で洗浄し、その後、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥した。溶媒を減圧下で取り除き、残査をＨｘａ／ＥｔＯＡｃ６：１で溶出したシリカゲルでクロマトグラフィーにかけ、澄んだ淡黄色油として、生成物（０．０５２ｇ）を得た。質量スペクトルＥＳ＋ｍ／ｚ＝３１７、３３９（ｍ＋１、ｍ＋２３）；^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ７．６１（ｄ、２Ｈ）、７．５０-７．４６（ｍ、３Ｈ）、５．９７-５．８３（ｍ、１Ｈ）、５．２４（ｄ、１Ｈ）、５．１７（ｄ、１Ｈ）、４．６６（ｄ、２Ｈ）、３．６０（ｔ、２Ｈ）、３．３８（ｔ、２Ｈ）、３．２５（ｓ、３Ｈ）、２．０３（ｓ、３Ｈ）。

化合物例５４：４-（アリルオキシ）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５-メチル-６-フェニルピリミジン（ＣＣＧ-２０５３８２）。実施例５３からの不純なクロマトグラフィー画分を１つにまとめ、溶媒を取り除いた。残査をＨｘａ／ＥｔＯＡｃ １２：１で溶出したシリカゲルでクロマトグラフィーにかけ、濁った無色油として、生成物（０．０２ｇ）を得た。質量スペクトル ＥＳ＋ｍ／ｚ＝３１７、３３９（ｍ＋１、ｍ＋２３）；^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ｄｍｓｏ）δ７．５８（ｄｄ、２Ｈ）、７．５２-７．４９（ｍ、３Ｈ）、６．２２-６．０１（ｍ、１Ｈ）、５．４３（ｄｄ、１Ｈ）、５．３０（ｄ、１Ｈ）、４．９４（ｄ、２Ｈ）、３．６１（ｔ、２Ｈ）、３．３１-３．２１（ｍ、５Ｈ）、２．１１（ｓ、３Ｈ）。

化合物例５５：４-（２-メトキシエトキシ）-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-５-メチル-６-フェニルピリミジン（ＣＣＧ-２０５３６１）。ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中、炭酸セシウム（０．８２ｇ、２．５ｍｍｏｌ）およびステップ２からの５-メチル-６-フェニル-２-チオキソ-２，３-ジヒドロピリミジン-４（１Ｈ）-オン（０．５ｇ、２．２９ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、２-ブロモエチルメチルエーテル（０．３５ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を室温で一部加えた。混合物を７０℃に４時間半加熱し、放冷した。炭酸セシウム（０．８２ｇ、２．５ｍｍｏｌ）をさらに加え、次にブロモエチルメチルエーテル（０．４ｇ、２．９ｍｍｏｌ）を加えた。１８時間後、混合物に水を注ぎ、撹拌し、その後ジクロロメタンで３回抽出した。１つにまとめた抽出物を水で洗浄し、その後、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥した。溶媒を減圧下で取り除き、掲題の化合物を含有する粗混合物およびそのＮ-アルキル化異性体が残った。最初に２カラム容量のＨｘａ／ＥｔＯＡｃ４：１で溶出し、その後Ｈｘａ／ＥｔＯＡｃを３：１で溶出したシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、澄んだ無色油として、生成物（０．４ｇ）を得た。質量スペクトルＥＳ＋ｍ／ｚ＝３３５、３５７（ｍ＋１、ｍ＋２３）；^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ｄｍｓｏ）δ７．５８（ｄｄ、２Ｈ）、７．５４-７．４０（ｍ、３Ｈ）、４．５１（ｔ、２Ｈ）、３．７０（ｔ、２Ｈ）、３．６０（ｔ、２Ｈ）３．３１（ｓ、６Ｈ）、３．３０（ｍ、２Ｈ）、２．０９（ｓ、３Ｈ）。

化合物例５６：３-アリル-２-（（２-メトキシエチル）チオ）-４-オキソ-４，６-ジヒドロ-３Ｈ-スピロ［ベンゾ［ｈ］キナゾリン-５，４'-ピペリジン］-１'-カルボン酸エチル（ＣＣＧ-２０６２３３）：３０ｍｇ（８２％）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３／ＴＭＳ）δ８．０８（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５＆１．４Ｈｚ）、７．３２-７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．２３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、５．９１（ｍ、１Ｈ）、５．２８（ｍ、２Ｈ）、４．６８（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝５．２Ｈｚ）、４．１３（ｑ、２Ｈ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）、３．９８-４．０８（ｍ、２Ｈ）、３．７６（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．５４（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、２．９８-３．１８（ｍ、４Ｈ）、２．９（ｍ、１Ｈ）、２．７（ｍ、１Ｈ）、１．４３（ｍ、２Ｈ）および１．２５（ｔ、３Ｈ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）．
上述の明細書で言及された刊行物および特許は全て、参照により本明細書に取り込まれる。本発明は特定の好ましい実施形態と結びつけて記載しているが、請求される本発明は、当該特定の実施形態に過度に制限されないことを理解されたい。実際に、本発明を実施するために、関連分野の当業者に明白である記載の様式の様々な修正は、以下の請求項の範囲内にあることが意図される。

Ａ群連鎖球菌病原性を阻害する化学系列の化合物の同定を示す。Ａ）ＤＭＳＯと比較して、ＣＣＧ-１０２４８７で治療を受けたＭＧＡＳ２２２１の遺伝子発現変化のマイクロアレイ分析。Ｂ）ＧＡＳ（１マウスあたり１０^５-６ＣＦＵ）による感染後のマウスの生存に及ぼすＣＣＧ-２９７９の影響。 連鎖球菌病原性を阻害する化合物を示す。Ａ）ＣＣＧ-２０３５９２およびＢ）ＣＣＧ-２０５３６３は、様々な濃度で、黄色ブドウ球菌ＲＮ６３９０菌株のバイオフィルム形成を阻害した。Ｃ）５０μＭの黄色ブドウ球菌ＲＮ６３９０菌株の遺伝子発現に及ぼす２０３５９２の影響。リアルタイムＲＴ-ＰＣＲを、中期対数増殖（ＭＬ）、後期対数増殖（ＬＬ）、および静止（Ｓ）期に実施した。Ｄ）ＣＣＧ-２０３５９２は、鼻腔の黄色ブドウ球菌Ｎｅｗｍａｎ菌株感染（１マウスあたり３-４Ｘ１０^８ＣＦＵ）に対して、ＢＡＬＢ／ｃＪマウスを保護した。Ｅ）ＣＣＧ-２０３０４３は、細菌の増殖を阻害することなく、マイクロタイタープレート内の表皮ブドウ球菌ＲＰ６２Ａ菌株を阻害した。 医療用シリコーンシート上の黄色ブドウ球菌ＲＮ６３９０菌株のバイオフィルム形成を阻害した化合物ＣＣＧ-２０３５９２を示す。 本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の構造を示す。 本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の構造を示す。 本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の合成を示す。 本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の合成を示す。 本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の構造を示す。 本発明の実施形態の例示的なバイオフィルム阻害剤の合成を示す。 めっきステンレス鋼（ＳＳ）ウェーハのプラズマコーティングを示す。

Claims (12)

1. 式Ｉの構造を有する化合物を含む医薬組成物であって、
   

   

   式中、ＸはＳ、ＮＨ、またはＯであり、Ｒ^１およびＲ^２は、独立して、Ｃ１-Ｃ８アルキル、Ｃ１-Ｃ８アルケニル、およびＣ１-Ｃ８シクロアルキルから成る群から選択され、当該Ｃ１-Ｃ８アルキル、Ｃ１-Ｃ８アルケニル、およびＣ１-Ｃ８シクロアルキルは、少なくとも一つのＦ、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＲ^６ _２、ＣＯＲ^６、ＣＯ_２Ｒ^６、ＣＯＮＨＲ^６、アリールまたはヘテロアリールで置換されてもよく、１つ以上のアルキル炭素は、Ｏによって置換されてもよく；
   Ｒ^３およびＲ^４は、３〜７個の炭素のシクロアルキル環中で結合され、少なくとも１つの環ＣＨ_２は、ＯまたはＮ-Ｇによって置換され；
   ＧはＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^６、ＳＯ_２Ｒ^６およびＣ（＝Ｏ）ＯＲ^６から成る群から選択され；
   Ｒ^５はＨ、Ｃ１-Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＲ^６ _２、ＣＯＲ^６、ＣＯ_２Ｒ^６、ＣＯＮＨＲ^６、アリール、ヘテロアリール、ＳＯ_２Ｒ^６、ＮＨＣＯＲ^６、ＳＯ_２ＮＨＲ^６、およびＯＣＯＲ^６から成る群から選択され；
   Ｒ^６はＨ、Ｃ１-Ｃ６アルキル、Ｃ０-Ｃ３アルキル-アリール、およびＣ０-Ｃ３アルキル-ヘテロアリールから成る群から選択され、全て置換されてもよく；並びに
   Ｒ^１１はＨまたはＣ１アルキルである、医薬組成物。
2. 前記化合物は以下から成る群から選択される、請求項１に記載の組成物。
   

   

   

   
3. 薬剤的に許容可能な担体をさらに含む請求項１または２に記載の組成物。
4. 前記組成物は黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌の増殖または生物活性を阻害する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
5. 前記組成物は黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌によるバイオフィルム形成を阻害する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
6. 前記黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌はバイオフィルム内にある、請求項４に記載の組成物。
7. 前記組成物は抗生物質化合物をさらに含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
8. 薬剤の調製における請求項１〜７のいずれか１項の組成物の使用。
9. 細菌感染症の治療のための薬剤の調製における請求項１〜８のいずれか１項の組成物の使用。
10. 前記細菌がバイオフィルム内に存在する、請求項９に記載の使用。
11. 前記細菌が黄色ブドウ球菌および／または表皮ブドウ球菌から成る群から選択される、請求項９または１０に記載の使用。
12. 前記細菌が医療機器の表面にいる、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の使用。

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