JP6263224B2 - 動脈性高血圧症から心不全への初期移行の評価におけるバイオマーカーの使用 - Google Patents

動脈性高血圧症から心不全への初期移行の評価におけるバイオマーカーの使用 Download PDF

Info

Publication number
JP6263224B2
JP6263224B2 JP2016092730A JP2016092730A JP6263224B2 JP 6263224 B2 JP6263224 B2 JP 6263224B2 JP 2016092730 A JP2016092730 A JP 2016092730A JP 2016092730 A JP2016092730 A JP 2016092730A JP 6263224 B2 JP6263224 B2 JP 6263224B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
heart failure
subject
concentration
troponin
risk
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
JP2016092730A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2016166892A (ja
Inventor
ヴィーンヒューズ−テレン，ウルスラ−ヘンリケ
ブロック，ディルク
ヒュディグ，ヘンドリク
フォーゲル−ジーボルツ，ザビーネ
ベーム，クリスティン
ヘス，ゲオルグ
ホルシュ，アンドレア
ズドゥネック，ディートマー
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
F Hoffmann La Roche AG
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=45722923&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=JP6263224(B2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by F Hoffmann La Roche AG filed Critical F Hoffmann La Roche AG
Publication of JP2016166892A publication Critical patent/JP2016166892A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP6263224B2 publication Critical patent/JP6263224B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54306—Solid-phase reaction mechanisms
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6887—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids from muscle, cartilage or connective tissue
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
    • G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
    • G01N2333/4701—Details
    • G01N2333/4712—Muscle proteins, e.g. myosin, actin, protein
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/475—Assays involving growth factors
    • G01N2333/495—Transforming growth factor [TGF]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/575—Hormones
    • G01N2333/58—Atrial natriuretic factor complex; Atriopeptin; Atrial natriuretic peptide [ANP]; Brain natriuretic peptide [BNP, proBNP]; Cardionatrin; Cardiodilatin
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/32—Cardiovascular disorders
    • G01N2800/325—Heart failure or cardiac arrest, e.g. cardiomyopathy, congestive heart failure
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/50—Determining the risk of developing a disease
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

本発明は、心不全を発症するリスク因子を保有する個体が心不全に罹患するリスクを予測する方法に関する。本発明はさらに、心不全を発症するリスク因子を保有する個体において、左心室肥大（ＬＶＨ）および／または心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常を診断する方法に関する。好ましい態様において、対象は高血圧症および／または糖尿病に罹患している。他の好ましい態様において、対象は拡張期機能不全に罹患している。さらに他の好ましい態様において、対象は雌性である。特に、本発明は、左心室肥大（ＬＶＨ）が顕性になる（すなわち、たとえば心エコー検査またはＥＣＧによって目視できる）前に心不全のリスクを予測する方法を提供する。本発明はさらに、そのような個体が心臓の機能および／または構造の異常の存在の結果として心不全に罹患するリスクを予測する方法に関する。本発明はさらに、雌性対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測する方法に関する。本発明はさらに、そのような個体が、心不全に先立つ心血管事象および腎事象：虚血性発作、致命的ではない有害な発作、心筋虚血／心筋梗塞、動脈瘤、慢性腎不全、そして最終的に心不全に罹患するリスクを予測する方法に関する。この診断は、少なくとも１種類の心臓性トロポニンの濃度を測定することにより実施される。場合によっては、さらにＧＤＦ−１５およびＩＧＦＢＰ７から選択される１種類の他のマーカーを測定してもよい。本方法は、心不全に罹患するリスク因子を保有する、および／または心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常が診断された、および／または心不全に罹患するリスクが高いと予測される個体の、可能な処置を決定するためにも使用できる。さらに本発明は、本発明の方法を実施するために適応させたデバイスおよびキットに関する。本発明には、心不全を発症するリスク因子を保有する個体において前記の健康状態を診断および／または予測するための、前記の複数マーカーの使用も包含される。
近代医療の目的は、個別化または個体化された処置計画を提供することである。それらは、患者の個々の要望またはリスクを考慮に入れた処置計画である。個別化または個体化された処置計画は、必要な場合であれば可能性のある処置計画を決定する措置すら考慮に入れるべきである。
心不全（ＨＦ）は大きな、かつ増大しつつある保健問題である。米国で約５００万人がＨＦを伴い、毎年５０００００人を超える患者が初めてＨＦと診断され、米国で毎年５０．０００人を超える患者が主因としてのＨＦで死亡していると推定される。心不全（ＨＦ）は先進国における罹病および死亡の主因のひとつである。集団が高齢化し、心血管疾患を伴う患者の寿命が延びているので、ＨＦの発生率および有病率は増大している。
ＨＦ、虚血性発作、致命的ではない有害な発作、心筋虚血／心筋梗塞、動脈瘤、慢性腎不全、そして最終的に心不全のリスクが増大している人々を同定すること、および初期ＨＦ（ＡＨＡ／ＡＣＣ分類法に従った病期Ａ／Ｂ）を伴う患者のリスク層別法を改良することは、不可逆性のＨＦ進行または主合併症が起きる前に適切な予防処置を開始するために重要である。
心不全は、心臓の構造または機能の何らかの障害から生じる可能性がある複雑な臨床症候群であり、心室が血液を充満し、または血液を排出し、血液／酸素の供給に対する身体の代謝要求を保証する能力を損なう。そのような場合、身体は要求される供給を維持するために心筋の構造を変化させることにより（たとえば、線維症、アポトーシス、壊死）供給の欠如を代償しようとする。心筋の最初の構造変化は一般に可逆性変化であるが、処置
しない場合にはそれが不可逆性の永久変化になり、それは最後は最終段階の末期ＨＦを伴う慢性ＨＦに至る。
ＨＦは多様な重症度に分類される。
１分類法は、いわゆるＮＹＨＡ(New York Heart Association、ニューヨーク心臓協会)分類法である。心不全患者はＮＹＨＡクラスＩ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶに分類される。心不全を伴う患者は、その心膜(pericardium)、心筋、冠循環または心臓弁に構造および
機能の変化が既に生じている。患者はその健康を完全には回復できないと予想され、療法処置を必要とする。ＮＹＨＡクラスＩの患者は、心血管疾患の明らかな症状を伴わないが、既に機能障害の客観的な証拠を伴う。ＮＹＨＡクラスＩＩの患者は、身体活動がわずかに制限される。ＮＹＨＡクラスＩＩＩの患者は、身体活動に顕著な制限を示す。ＮＹＨＡクラスＩＶの患者は、不快感なしに何ら身体活動を行なうことができない。その患者らは安静状態で心不全の症状を示す。
この機能分類法は、より最近のAmerican College of CardiologyおよびAmerican Heart
Associationによる分類法によって補足される(参照：J. Am. Coll. Cardiol. 2001; 38;
2101-2113, 2005年改訂, 参照:J. Am. Coll. Cardiol. 2005; 46; el-e82)。４つの病期Ａ、Ｂ、ＣおよびＤが定義される。病期ＡおよびＢはＨＦではないが、“実際に”ＨＦを発症する前に早期に患者を同定する補助になると考えられる。病期ＡおよびＢの患者は、ＨＦを発症するリスク因子をもつ者と定義するのが最も良い。たとえば、冠動脈疾患、高血圧症または糖尿病を伴う患者であって、まだ左心室（ＬＶ）の機能障害、肥大、または心室の幾何学的ゆがみを示していない者は、病期Ａとみなされ、これに対し、無症候性ではあるがＬＶ肥大（ＬＶＨ、すなわち心室壁が肥厚する現象）および／またはＬＶ機能障害を示している患者は、病期Ｂと表示されるであろう。次いで病期Ｃは、根底にある構造性心疾患に関連する現在または以前のＨＦの症状を伴う患者を表わし（ＨＦを伴う患者の大部分）、病期Ｄは真に難治性のＨＦを伴う患者を表わす。
動脈性高血圧症は左心室心筋に高い張力を負荷し、これは硬直および肥大として顕性になる。それとは別に、高血圧症の結果として冠血管内にアテローム性硬化症が発症する。高血圧症を伴う対象は、致命的ではない有害な発作のリスクが高い。抗高血圧症薬物療法は、この致命的ではない有害な発作のリスクを低下させるのに役立つ可能性がある。糖尿病に罹患している対象はアテローム性硬化症に罹患するリスクが高いことは知られている。アテローム性硬化症に罹患している対象は、虚血性発作のリスクが高い。抗高血圧症薬物療法は虚血性発作および虚血性心疾患のリスクを低下させるのに役立つ可能性がある。
収縮期機能不全は症候性収縮期ＨＦを発症するリスクの増大と関連することが見出された。拡張期機能不全は拡張期ＨＦの前駆症状であると考えられる。高血圧症の早期処置により拡張期機能が改善される可能性がある。早期療法は予後を改善する可能性があるが、左心室機能不全、収縮期および拡張期機能不全を伴う多数の個体は診断および処置がなされないままである。処置されない高血圧症は心不全発症のリスクの増大と関連する；心不全に先立ってしばしば他の心血管事象および腎事象が起きる：高血圧症または糖尿病は、患者が十分に長く生存すれば虚血性発作、致命的ではない有害な発作、心筋虚血／心筋梗塞、動脈瘤、そして最終的に心不全に至る。
持続性高血圧症は慢性腎不全の主因である。高血圧症の早期処置は、疾患が進行してさまざまな心血管リスクおよび腎臓死のリスクを生じるのを阻止するのに役立つ可能性がある。
一般に、ＨＦはたとえば心エコー検査およびドップラーソノグラフィーにより診断されるが、それらは症候性の後期ＨＦを診断できるにすぎない。前症候性形態のＨＦに罹患し
ている個体をこれらの確立した方法で診断することはできない。この診断不良は、ＨＦと診断された個体の生存率が５年間で５０％にすぎない理由のひとつである。
最近の療法方策は、その心筋が機能および／または構造の変化を生じている個体の早期処置によりＨＦ（すなわち、ＡＣＣ／ＡＨＡのＣまたはＤ期）を阻止することに注目している。したがって、これらの対象は、一般に心不全ならびにさらに心血管疾患および腎疾患に罹患するリスク因子を保有し、心不全に先立ってその心筋の機能および／または構造の変化により引き起こされる心臓の機能および／または構造の異常を発症しようとしている（初期）かあるいは発症した（後期）者である。一般に、これらの対象はＡＣＣ／ＡＨＡのＢ期に分類されるであろう（すなわち、病期Ａを脱して病期Ｂに入ろうとしているか、あるいは病期Ｂに入っている）
したがって、対象において、心不全に先立ってその心筋の機能および／または構造の変化により引き起こされる心臓の機能および／または構造の異常を、その患者が顕性心不全の症状（たとえば、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期ＣまたはＤに典型的なもの）を発症する前に同定できる方法および手段を入手するという強い要望がある。好ましくは、それらの方法および手段は、心機能障害の初期にある対象を同定できるものでなければならない；すなわち、それらの対象は心機能障害を発症しようとしている。好ましくは、対象は、患者の心膜、心筋、冠循環または心臓弁に起きた機能および／または構造の変化（たとえば、患者の左心室の変化）が最小の段階、好ましくは左心室肥大が顕性になる前であるべきである。好ましくは、対象はＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期Ａを脱してＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期Ｂに入ろうとしているべきである。それらの方法および手段は、不可逆性のＨＦ進行または主合併症が起きる前に適切な予防処置を開始するために、ＨＦならびに関連の心血管疾患および腎疾患を発症するリスクが高い対象を同定でき、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常を伴う患者においてリスク層別（ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法による病期Ａ／Ｂ）を改善できる。それらの方法および手段は、各個体／対象の適切な処置について早期決定を行ない、かつその処置をモニターすることができるものでなければならない。
本発明に関して実施した研究で、心臓性トロポニンの濃度の測定により、肥大が顕性になる前ですら、初期の病期Ｂにある対象、したがって心不全に罹患するリスク因子をもち、左心室に最初の構造変化および／または拡張期機能不全を示しているけれども左心室肥大に罹患していない対象を同定できることが予想外に見出された。したがって、心臓性トロポニンの測定により、左心室に最初の構造変化および／または拡張期機能不全を伴う対象と、左心室に最初の構造変化および／または拡張期機能不全を伴わない対象とを鑑別できる。特に、心臓性トロポニンの測定により、初期の病期Ｂにある雌性対象を同定できる。
これと対照的に、本発明に関して実施した研究により、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、すなわち心不全の診断のための周知のマーカーは、左心室に最初の構造変化および／または拡張期機能不全を伴う対象を同定できないことが示された。むしろ、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは左心室肥大（ＬＶＨ）を伴う患者において増加していたにすぎない。ＬＶＨを伴わない患者、したがってＬＶＨを規定するために用いられるカットオフより低い左心室質量指数をもつ患者においては、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのレベルは増大していなかった。したがって、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰと対照的に、心臓性トロポニンはＬＶＨおよび心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の最初の異常を（したがって、ＬＶＨを伴わない対象において）診断するための価値あるマーカーである。
本発明の知見は、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常を早期診断できるので有利である。特に女性において、初期の心臓の機能および／または構造の異常ならびに心不全はしばしば診断されないままである。心筋の最初の構造変化は一般に可逆性変化であるが、処置しない場合にはそれが不可逆性の永久変化になり、それは最終的に最終段階の末期ＨＦを伴う慢性ＨＦに至る可能性がある。したがって、心臓の構造変化の早期診断は、ＬＶＨおよび／またはＨＦに進行する前あるいは他の主合併症が起きる前に適切な予防処置を開始できるので重要である。
図１は、実施例に記載したグループ１、２、３または４に属する患者のトロポニンＴの値を示す。 図２は、実施例に記載したグループ１、２、３または４に属する患者のＧＤＦ−１５の値を示す。 図３は、実施例に記載したグループ１、２、３または４に属する患者のＩＦＧＢＰ７の値を示す。 図４は、実施例に記載したグループ１、２、３または４に属する患者のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの値を示す。
診断方法
したがって本発明は、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントおよび場合により１種類以上の他の心不全マーカーの濃度と、対照試料におけるこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度との比較に基づいて、対象において一般に心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する方法に関する。
本発明のこの方法は、下記の段階を含むことができる：ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そしてｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量、たとえば対照試料において確立したこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度と比較することにより、機能および／または構造の異常を診断する。
したがって本発明は、対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する方法を提供し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、機能および／または構造の異常を診断する。
一般に、その対象は心不全に罹患していない；すなわち、患者はその心筋に永久的な構造または機能の損傷を生じていない。好ましくは、対象は心不全のリスク因子を保有する。これらは当業者に既知であり、たとえば高血圧症および糖尿病を含む。同様に好ましくは、対象は心不全の顕性の徴候および／または症状を示していない。最も好ましくは、対象はＬＶＨを示していない。
好ましくは、対象は高血圧症、糖尿病、肥満症、メタボリックシンドローム、および／または喫煙歴を伴う（すなわち、喫煙歴をもつ）。特に好ましい態様において、対象は高
血圧症および／または糖尿病に罹患している。
好ましくは、心不全および／または左心室肥大に先立つ心臓の構造および／または機能の異常は、左心室構造変化、中隔径増大、後壁径増大、および拡張期機能不全から選択される異常である。
好ましくは、対象は雌性である。
したがって本発明は、特に、高血圧症、糖尿病、肥満症、メタボリックシンドロームに罹患しており、および／または喫煙歴をもつ対象において、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常を診断する方法であって、下記の段階を含む方法に関する：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、機能および／または構造の異常を診断する；
その際、対象は、好ましくは左心室肥大を示しておらず、
その際、心不全および／または左心室肥大に先立つ心臓の構造および／または機能の異常は、左心室構造変化、中隔径増大、後壁径増大、および拡張期機能不全から選択される異常を含む。
鑑別方法
他の態様において、本発明は、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントおよび場合により１種類以上の他の心不全マーカーの濃度と、対照試料におけるこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度との比較に基づいて、心不全を発症するリスク因子を保有するだけの対象と、リスク因子を保有するだけでなく心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を既に伴う対象とを鑑別する方法に関する。
本発明のこの方法は、下記の段階を含むことができる：ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そしてｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量、たとえば対照試料において確立したこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度と比較することにより、機能および／または構造の異常を評価する。
したがって本発明は、心不全を発症するリスク因子を保有するだけの対象と、リスク因子を保有するだけでなく、左心室肥大に先立つ、および／または心不全に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常をも既に伴う対象とを鑑別する方法を提供し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、それらの対象（すなわち、心不全を発症するリスク因子を保有するだけの対象と、リスク因子を保有するだけでなく心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を既に伴う対象）を鑑別する。
一般に、その対象（すなわち、リスク因子を保有する個体、ならびに／あるいは心不全
に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う個体）は心不全に罹患していない；すなわち、患者はその心筋に永久的な構造または機能の損傷を生じておらず、その健康を完全に回復できると予想され、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期ＣまたはＤに分類されない。心不全のリスク因子は当業者に既知であり、たとえば高血圧症および糖尿病を含む。同様に好ましくは、対象は心不全の顕性の徴候および／または症状を示していない。最も好ましくは、対象はＬＶＨを示していない。
好ましくは、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の構造および／または機能の異常は、左心室構造変化、中隔径増大、後壁径増大、および拡張期機能不全から選択される異常である。
したがって本発明はまた、心不全を発症するリスク因子を保有するだけの対象と、リスク因子を保有するだけでなく、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常を既に伴う対象とを鑑別する方法であって、下記の段階を含む方法に関する：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、それらの対象を鑑別する；
その際、対象は、好ましくは左心室肥大を示しておらず、
その際、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の構造および／または機能の異常は、左心室構造変化、中隔径増大、後壁径増大、および拡張期機能不全から選択される異常を含む。
本発明はまた、対象が心不全に罹患するリスクを予測する方法および手段を提供する。好ましくは、対象は心不全を発症するリスク因子を保有し、好ましくは病期Ａに分類される対象である。本発明は、好ましくは、左心室肥大（ＬＶＨ）が顕性になる前に心不全のリスクを予測する方法および手段を提供する。
本発明はまた、病期Ｂに入ろうとしている病期Ａ（ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法）の対象であって、その時点では左心室肥大が顕性でなく（すなわち、たとえば心エコー検査またはＥＣＧによって同定できない）、その後の数カ月または数年以内に左心室肥大へ進行するリスクが高い対象を診断する方法および手段を提供する。
リスク因子を保有する個体は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常に向かう生理的変化、好ましくは左心室拡張期機能不全、または左心室駆出分画（ＬＶＥＦ）が保存された左心室拡張期機能不全を生じている可能性がある。心不全に先立つこれらの心臓の機能および／または構造の異常が本発明により診断される；それについてはより詳細に後記の節に説明する。
リスク因子を保有する個体は、特に、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常に向かう生理的変化であってＬＶＨが顕性でないもの、好ましくはＬＶＨを伴わない心室構造変化、特にＬＶＨを伴わない左心室拡張期機能不全を生じている可能性があるが、心筋、心外膜(epicardium)、心臓弁または冠循環の機能および／または構造の損傷を生じている可能性もある。心不全に先立つこれらの心臓の機能および／または構造の異常であって、ただしＬＶＨが顕性でないものが、本発明の方法により診断される；それについてはより詳細に後記の節に説明する。
他の態様において、本発明は、心臓の機能および／または構造の異常の早期診断の結果として抗高血圧症薬による処置についてこれらの対象を層別し、これによりＬＶＨが顕性になる前に（特に、たとえば心エコー検査またはＥＣＧによってＬＶＨを目視できるようになる前ですら）心不全を予測する方法および手段を提供する。
対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴うならば、本発明の方法および手段によって直接かつ簡単に診断できる。特に本発明は、後記に定める対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常を、特に左心室肥大ＬＶＨが顕性になる前に有利に診断できる。したがって本発明はまた、心不全を発症するリスク因子（心不全を発症するリスク因子を保有する対象）と心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常とを鑑別する方法を提供する。
本発明の方法および手段により、心不全を発症するリスク因子を保有する個体が心不全に罹患するリスクを予測できる。特に、本発明は左心室肥大（ＬＶＨ）が顕性になる前に心不全のリスクを有利に予測できる。さらに本発明の方法は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の診断結果として、ＬＶＨが顕性になる前に心不全のリスクをもつ対象の療法を適応させることができる。
本発明の他の方法には、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴うと同定された個体の療法を決定し、その療法をモニタリングする方法が含まれる。これらの態様は、本発明の全体を調べることによって明らかになるであろう。明確にするために、本発明の好ましい態様を含めて、独立請求項の形態で予め示した本発明の方法（心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断すること、ならびに心臓の機能および／または構造の異常を伴う個体とリスク因子を保有するだけの個体とを鑑別すること）に関してその原理を以下に示す。別に記載しなければ、これらの原理および態様は、本発明に属する他の方法にも適用される。
一般的定義
心不全は、ニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）に従った機能分類体系に分類できる。ＮＹＨＡクラスＩの患者は、心血管疾患の明らかな症状を伴わないが、既に機能障害の客観的な証拠を伴う。身体活動は制限されず、通常の身体活動で過度の疲労、動悸、または呼吸困難（息切れ）を生じることはない。ＮＹＨＡクラスＩＩの患者は、身体活動がわずかに制限される。その患者らは安静状態では快適であるが、通常の身体活動で過度の疲労、動悸、または呼吸困難を生じる。ＮＹＨＡクラスＩＩＩの患者は、顕著な身体活動制限を示す。その患者らは安静状態では快適であるが、通常より少ない活動で過度の疲労、動悸、または呼吸困難を生じる。ＮＹＨＡクラスＩＶの患者は、不快感なしに何ら身体活動を行なうことができない。その患者らは安静状態で心不全の症状を示す。心不全、すなわち心臓の収縮期および／または拡張期の機能不全は、たとえば心エコー検査、血管造影、シンチグラフィー、または磁気共鳴イメージングによっても判定できる。この機能障害は前記に概説した心不全の症状（ＮＹＨＡクラスＩＩ〜ＩＶ）を伴う可能性があるが、ある患者らは有意の症状を示さない場合がある（ＮＹＨＡ Ｉ）。
本発明は、ＨＦ症候群の発症に関係する４病期を同定する、より最近の心不全ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法（冒頭部分を参照）について述べる。最初の２病期（ＡおよびＢ）はＨＦではないことが明らかであるが、ＨＦを発症するリスクをもつ患者をヘルスケア提供者が早期に同定するのを補助するためのものである。病期ＡおよびＢの患者は、明らかにＨＦ発症の素因をもつリスク因子を伴う者と定義するのが最も良い。次いで病期Ｃは、根底にある構造性心疾患に関連する現在または過去のＨＦの症状を伴う患者を表わす；病期Ｄは真に難治性のＨＦを伴う患者を表わし、その患者らは特別な進歩した処置方策、たとえば機械的循環支持、体液除去を促進する措置、連続的変力性注入、あるいは心臓移植または他
の革新的もしくは試験的外科措置を受けるか、あるいは終末期ケア、たとえばホスピスを受けるのが適切であろう。この分類法は、ＨＦの発症には樹立したリスク因子および構造前提条件があること、またＬＶの機能不全または症状の出現前ですら療法介入を導入することにより集団のＨＦの罹病率および死亡率を低下させうることを認識している。
種々の病期の定義は下記のとおりである（成人の慢性心不全の評価および管理のためのＡＣＣ／ＡＨＡ指針から採用; J. Am. Coll. Cardiol. 2001; 38; 2101-2113）。下記に
は、各病期に分類されるであろう個体の病態生理学的状態に関する病期および例の記載が含まれる。
病期Ａ：
定義：ＨＦの発症と強く関連する状態の存在のため、ＨＦを発症するリスクが高い患者。そのような患者は、心膜、心筋、冠循環または心臓弁の構造または機能の異常が同定されず、ＨＦの徴候または症状を示したことがない。
例：全身性高血圧症；冠動脈疾患；糖尿病；心臓毒薬療法歴またはアルコール中毒歴；リウマチ性発熱の個人歴；心筋障害の家族歴。
病期Ｂ：
定義：ＨＦの発症と強く関連する構造性心疾患を発症しているが、ＨＦの徴候または症状を示したことがない患者。
例：左心室の肥大または線維症；左心室の拡張または収縮性低下；無症候性心臓弁膜症；以前の心筋梗塞。
病期Ｃ：
定義：根底にある構造性心疾患に関連する現在または以前のＨＦの症状を伴う患者。
例：左心室収縮期機能不全による呼吸困難または疲労感；以前のＨＦの症状に対する処置を受けている無症候性患者。
病期Ｄ：
定義：最大限の薬物療法にもかかわらず進行した構造性心疾患および安静時にＨＦの顕著な症状を伴い、特別な介入を必要とする患者。
例：ＨＦのため頻繁に入院しているか、あるいは安全に退院できない患者；心臓移植を待っている入院患者；家庭で症状緩和のために連続的に静脈内支持を受けているか、あるいは機械的循環補助装置により支持されている患者；ＨＦの管理のためにホスピス施設にいる患者。
以上に詳述したＡＣＣ／ＡＨＡ病期Ａ、Ｂ、ＣおよびＤを、本発明に関して“病期Ａ”、“病期Ｂ”、“病期Ｃ”、および“病期Ｄ”と呼ぶ。
本発明に関して、一般に心不全の発症と関連するリスク因子をもつけれども心膜、心筋、心臓弁または冠循環の構造または機能の異常が同定されない病期Ａの対象は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常をもたない対象である。ＨＦの発症と強く関連しかつ一般にそれに先立つ機能性および／または構造性心疾患を発症しているけれどもＨＦの徴候または症状を示したことがない病期Ｂの対象は、心筋、心外膜、心臓弁または冠循環の機能および／または構造の損傷をもつ対象である。本発明は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常（初期の病期Ｂ）を、またＬＶＨに先立つもの（後期の病期Ｂ）ですら、有利に診断できる。本発明はまた、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常（初期の病期Ｂ）と、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の後期の異常（後期の病期Ｂ）とを鑑別できる。
心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常
本発明の方法に関して、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常を診断すべきである。本明細書中で用いる用語“異常”は、好ましくは“少なくとも１つの異常”を意味するものとする。したがって、本明細書に記載する方法に関して、１つの異常または１より多い異常を診断できる。
用語“心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常”は、一般に心不全の前に起きる（すなわち、それらは一般に心不全に先立つ）ことが当技術分野で知られている、心筋の幾つかの病的状態に関する。心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常は、本発明の意味において、一般に心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の無症候性の異常である。心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常は、根底にある原因を除いた後に、または鍛錬運動により、消失する場合がある。心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常、特に心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の無症候性の異常は、心不全にまで進展する場合もある。
本発明において用いる用語“心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常”は、心筋、心外膜、冠循環または心臓弁の機能および／または構造の変化、ならびに／あるいは機能および／または構造の損傷に関連し、心臓の機能異常および／または心臓の構造異常とみなすべきである。心臓の機能異常の例は、ポンピングまたは充満能の障害、しばしば収縮期または拡張期障害である。心臓の構造異常の例は、左心室の幾何学的形状の変化である。しばしば、心臓の構造および／または機能の異常／障害は根底にある原因が治療された場合は（たとえば、適切に処置された場合は）可逆性であり、心筋に対して心不全に典型的な構造または機能の永久的な損傷を残すことはない（すなわち、病期Ｂに分類された個体が病期Ａに戻る可能性がある）。心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常をもつ個体は、心不全の徴候を示していない（したがって、その個体は好ましくは見掛け上は健康である）。
心不全はしばしば左心室の幾何学的形状の変化で始まり、収縮期および拡張期の両方の機能が変化する可能性がある（左心室機能不全ＬＶＤ）。ＬＶＤは収縮期ＬＶＤと拡張期ＬＶＤに下位分類される。ＬＶＤが進行して、心室壁が肥厚した左心室肥大（ＬＶＨ）になる場合がある。
左心室機能不全は心筋に対する負荷または傷害で始まり、一般に進行性プロセスであり、ＬＶの幾何学的形状および構造の変化を生じる。心室は拡張および／または肥大して、より球状になる。このプロセスは一般に心臓リモデリングと呼ばれる。心室のサイズおよび構造のこの変化は、その（損傷を受けた）心臓の壁に対する血流負荷を増大させ、それの機械的性能を低下させる。さらに、これによって僧帽弁を通る逆流が増大して、リモデリングプロセスが持続または増悪する可能性もある。心臓リモデリングは一般に症状の発現（これには数カ月、または数年すらかかる場合がある）に先立って起き、症状が現われた後も継続し、実質的に症状の悪化に関与する。冠動脈疾患、糖尿病、高血圧症、または心房細動発生も、ＨＦの進行に関与する可能性がある。
本発明の方法に関して、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を、対象が左心室肥大に罹患する前ですら診断できる。したがって、本発明の方法は、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の構造異常を診断できる。用語“左心室肥大”は当技術分野で周知である。左心室肥大に関する総説は、たとえばテキスト中に見ることができる(参照：Swamy Curr Cardiol Rep (2010) 12: 277-282)。ＬＶＨは、心電
図検査、心エコー検査、または心臓の磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）により検出できる。好ましくは、ＬＶＨは心エコー検査により検出される。さらに、ＬＶＨの診断基準は当技術分野で周知である(Mancia et al., European Heart J. 2007, 28: 1462, Die Innere
Medizin: Referenzwerk fur den Facharzt - Wolfgang Gerok - 2007, page 293., Swamy Curr Cardiol Rep (2010) 12: 277-282)。
ＬＶＨの診断には、好ましくは中隔径、左心室後壁厚および拡張終期径の測定が含まれ、左心室質量を当技術分野で既知の方程式に従って計算する。ＬＶＨを診断するための特に好ましい基準は、たとえば指針に示されている(Mancia et al., European Heart J. 2007, 28: 1462)。
好ましくは、コーネル(Cornell)電圧基準、コーネル積基準、ソコロウ−リオン(Sokolow-Lyon)電圧基準、またはロムヒルト−エステス(Romhilt-Estes)採点方式を用いる(Mancia et al., European Heart J. 2007, 28: 1462)。
本明細書中で用いる用語“左心室肥大”(“ＬＶＨ”と略称)は、好ましくは心室壁の肥厚に関する。ＬＶＨは、好ましくは、心臓に対する作業負荷の慢性的な増大に対する応答である。ＬＶＨは動脈性高血圧症に罹患している患者にみられ、処置を必要とする疾患である。本発明に関して、心臓の機能および／または構造の異常は、一般に左心室肥大および／または心不全に先立って起きる。
全身血管抵抗性の亢進に関連する後負荷増大に対する応答としての肥大は、ある点までは必然的かつ防御的である。その点を越えると、冠動脈拡張能の低下、左心室壁の力学的作用の抑制、および左心室拡張期充満パターンの異常を含めたさまざまな機能不全がＬＶＨに随伴する。
好ましくは、雄性対象は、左心室質量と体表面積の比が１１２ｇ／ｍ２より大きければ、またはより好ましくはこの比が１２５ｇ／ｍ２より大きければ、ＬＶＨを示している（したがって、好ましくはＬＶＨに罹患している）。好ましくは、雌性対象は、左心室質量と体表面積の比が８９ｇ／ｍ２より大きければ、またはより好ましくはこの比が１１０ｇ／ｍ２より大きければ、ＬＶＨを示している（したがって、好ましくはＬＶＨに罹患している）(たとえば、Drazner MH, Dries DL, Peshock RM, Cooper RS, Klassen C, Kazi F., Willett D, Victor RG. Left ventricular hypertrophy is more prevalent in blacks
than whites in the general population: the Dallas Heart Study. Hypertension. 2005 46: 124 -129を参照)。
本発明の方法に関して、用語ＬＶＤは求心性肥大または遠心性肥大をも含むことができる。
動脈性高血圧症の処置がＬＶＨを退縮させるであろうということは知られている。抗高血圧症薬による処置がＬＶＨを退縮させることが示された。退縮に伴って、左心室機能が通常は改善され、心血管罹病率が低下する。
本発明は、本明細書の他の箇所に詳述した心不全発症に対する少なくとも１つのリスク因子を保有することが分かっており、かつ心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常状態に入っている対象に関する。機能および／または構造の異常は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期または後期の異常であってもよい。
本発明のある態様において、個体は以前に病期Ａに分類され、そして心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常状態（後期の病期Ｂ）に入っている。好ましい態様において、その個体は心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常状態（初期の病期Ｂ）に入ろうとしている。
病期Ｂ
したがって本発明の方法は、一般に左心室肥大に先立つ、および一般に心不全に先立つ、心臓の機能および／または構造の何らかの異常を伴う個体を同定でき、これには進行した病期Ｂに典型的な進行した構造性心疾患を伴う者が含まれる。
心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常状態に入っている個体は、心不全に先立って起きることが知られている下記の心臓の構造異常のうち１以上に罹患することにより、一般に心不全にまで進行する。下記のリストには、心臓の機能および／または構造の初期または後期の異常が含まれる。これらの個体は、好ましくはＡＣＣ／ＡＨＡ分類法のクラスＢに属し、これには初期および後期の病期Ｂが含まれる：収縮期および拡張期不整；心室の幾何学的ゆがみ；左心室拡張；心臓リモデリング；左心室肥大；求心性肥大、左心室線維症；左心室収縮性低下；無症候性心臓弁疾患；限局性の壁運動異常、左心室収縮期機能不全、好ましくはＬＶＥＦ≦５０％；左心室の拡張期機能不全（ＤＤ）、好ましくはＬＶ拡張終期充満圧の増大を伴わない異常な弛緩としての軽度のＤＤ（Ｅ／Ａ比低下＜０．７５）、またはＬＶ拡張終期充満圧の増大を伴う異常な弛緩としての中等度もしくは偽正常”ＤＤ（Ｅ／Ａ ０．７５〜１．５，減速時間＞１４０ミリ秒、および増大したＬＶ拡張終期充満圧の他の２つのドップラー指数）；駆出分画が保存された心筋機能不全、６分間歩行テストによる心機能不全、心臓カテーテル導入で検出できる心機能不全としてのＤＤ；以前の心筋梗塞。
好ましくは、本明細書に述べる心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常は、機能および／または構造の初期の異常（初期）である。好ましくは、心臓の機能および／または構造の初期の異常（初期）は、心不全および左心室肥大に先立って起きる。
本発明に関して、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常を伴う個体（好ましくは、初期の病期Ｂ）は、一般に下記の心臓の機能および／または構造の異常のうち少なくとも１つに罹患している：心筋、心外膜、心臓弁または冠循環の機能および／または構造の損傷；ポンピングまたは充満能の障害、しばしば収縮期または拡張期障害；左心室の幾何学的形状の変化；心室の幾何学的ゆがみに関連する高血圧症；左心室構造変化に関連する高血圧症であって、発症しつつあるかまたは発症した左心室肥大を伴わないもの、好ましくは中隔径増大（または中隔拡張）に関連する高血圧症であって肥大を伴わないもの；後壁径増大に関連する高血圧症、求心性増大した心筋拡張に関連する高血圧症、遠心性増大した心筋拡張に関連する高血圧症、無症候性の拡張期左心室機能不全であって、左心室駆出分画（ＬＶＥＦ）が保存されたもの、特にＬＶＥＦが＞５０％のもの。
好ましい態様において、心不全および／または左心室肥大に先立つ心臓の機能および／または構造の異常は、下記のものから選択される少なくとも１つの異常である：
・左心室構造変化、
・中隔径増大（および／または中隔拡張）、特に中隔径増大（または中隔拡張）に関連する高血圧症、
・後壁径増大、特に後壁径増大に関連する高血圧症、および
・拡張期機能不全、特に駆出分画が保存されたもの。
好ましくは、拡張期機能不全は、左心室駆出分画（ＬＶＥＦ）が保存された、特にＬＶＥＦが＞５０％の、無症候性の拡張期左心室機能不全である。
したがって、心不全および／または左心室肥大に先立つ好ましい構造異常は、左心室構造変化、中隔径増大（および／または中隔拡張）、および後壁径増大から選択される。
したがって、心不全に先立つ好ましい機能異常は、拡張期機能不全、特に駆出分画が保存された拡張期機能不全である。
好ましくは、中隔壁が１１ｍｍより厚ければ中隔径は増大している（および／または中
隔が拡張している）。より好ましくは中隔壁の厚さが１１ｍｍより大きく、ただし１６ｍｍより小さければ、または最も好ましくは厚さが１２〜１６ｍｍであれば、中隔径は増大している（および／または中隔が拡張している）。
好ましくは、後壁が１１ｍｍより厚ければ後壁径は増大している。より好ましくは後壁の厚さが１１ｍｍより大きく、ただし１６ｍｍより小さければ、または最も好ましくは厚さが１２〜１６ｍｍであれば、後壁径は増大している。
本発明の好ましい態様において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常（初期の病期Ｂ）をもつ患者は、心不全に罹患する下記のリスク因子を示す：喫煙歴、肥満症、メタボリックシンドローム、１型および２型糖尿病、動脈性高血圧症。したがって、対象は好ましくは高血圧症、糖尿病、肥満症、メタボリックシンドロームおよび／または喫煙歴を伴う（したがって、喫煙歴をもつ）。
特に好ましい態様において、対象は高血圧症および／または糖尿病に罹患している。
拡張期機能不全
本発明の好ましい態様において、本方法は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常（初期の病期Ｂ）をもつ個体において、無症候性の拡張期機能不全を診断できる。その個体は、収縮期機能不全にも罹患している可能性がある。さらに、その個体は、左心室の形態変化を伴う可能性がある。好ましくは、拡張期機能不全に罹患している個体は、左心室駆出分画ＬＶＥＦが低下してはいない（すなわち、その個体はＬＶＥＦが保存されている）。好ましい１態様において、拡張期機能不全に罹患している個体は収縮期機能不全に罹患していない。その個体は、特に左心室肥大ＬＶＨに罹患していない。
本発明のよりさらに好ましい態様において、上の節に詳述したように、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常（初期の病期Ｂ）をもち、かつ拡張期機能不全に罹患している患者は、心不全に罹患する下記のリスク因子のうち少なくとも１つを示す：喫煙歴、肥満症、メタボリックシンドローム、１型および２型糖尿病、動脈性高血圧症、特に動脈性高血圧症。
心不全
心不全は、心臓が十分な量の血液を全身に充満またはポンピングする能力を損なう、心臓の構造または機能の何らかの障害から生じる可能性がある状態である。心不全は慢性疾患である；それは特に急性心血管事象（心筋梗塞など）後に起きる可能性があり、あるいはそれはたとえば心筋組織の炎症性または変性性変化の結果として起きる可能性がある。
心臓の機能および／または構造の異常ならびに心不全は、特にその状態が“軽度”であると考えられる場合は診断されないままであることがしばしばある。しかし、心不全を伴う患者は、その健康を完全には回復できないであろう。最良の療法を受けたとしても、心不全は約１０％の年間死亡率を伴う。
本明細書中で用いる用語“心不全”は、当業者に既知である顕性の心不全徴候を随伴する心臓の収縮期および／または拡張期の機能不全に関する。好ましくは、本明細書中に述べる心不全は慢性心不全でもある。本発明による心不全には、顕性および／または進行した心不全が含まれる。顕性心不全では、対象は当業者に既知である心不全の症状を示す。
本明細書中で用いる用語“心不全”は、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期ＣおよびＤを表わす；これらの病期では、対象は心不全の典型的な症状を示し、すなわち対象は健康でないことが明らかである。心不全を伴い、病期ＣおよびＤに分類される対象は、その心筋に永久的な不可逆性の構造および／または機能の変化を生じており、これらの変化の結果とし
て、完全な健康回復は不可能である。ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期Ｃ、またはさらにはＤに達している対象は、病期Ｂ、またはさらにはＡに戻る可能性はない。
心不全に典型的な、心筋に対する永久的な構造または機能の損傷は当業者に知られており、さまざまな分子心臓学的リモデリングプロセス、たとえば間質性線維症、炎症、浸潤、瘢痕形成、アポトーシス、壊死を含む。
間質性線維症のため硬化した心室壁は、拡張期機能不全における不適切な心室充満の原因である。心筋に対する永久的な構造または機能の損傷は、心筋細胞の機能不全または破壊により引き起こされる。心筋細胞およびそれらの構成要素が炎症または浸潤によって損傷を受ける可能性がある。毒素および薬理作用物質（たとえば、エタノール、コカイン、およびアンフェタミン類）は、細胞内損傷および酸化的ストレスを引き起こす。損傷の一般的な機序は、梗塞および瘢痕形成を引き起こす虚血である。心筋梗塞の後、死んだ心筋細胞は瘢痕組織で置き換えられ、心筋の機能に有害な作用を及ぼす。心エコー図上に、これは壁の運動の異常または不在として現われる。
ＨＦの発現（症状）は呼吸困難および疲労感ならびに体液貯留であり、これらは肺うっ血および末梢浮腫に至る可能性があり、身体検査における典型的な徴候は浮腫および水泡音である。ＨＦに関する単一の診断試験はない；それは多くの場合、病歴および身体の慎重な検査に基づく臨床診断だからである。
ＨＦの臨床症候群は心膜、心筋、心内膜(endocardium)、または大血管の障害から生じ
る可能性があるが、ＨＦを伴う大部分の患者はＬＶ心筋機能の損傷を受けている。心不全は、たとえば正常なＬＶサイズおよび保存されたＥＦから、重篤な拡張および／または顕著に低下したＥＦにまで及ぶ、広域のＬＶ機能異常を随伴する可能性がある。多くの患者において、収縮期および拡張期機能不全の異常が共存する。正常なＥＦをもつ患者は、低下したＥＦをもつ患者とは異なる自然病歴をもち、異なる処置方策を必要とする可能性がある。
ＬＶＨについてみられる収縮期および拡張期の機能のさまざまな変異は、明らかにうっ血性心不全（ＣＨＦ）にまで進行する可能性がある。
収縮期および拡張期心不全は、当業者に既知の方法、好ましくは心エコー検査、特に組織ドップラー心エコー検査（ＴＤ）により診断できる。
一般に、収縮期心不全は、左心室駆出分画（ＬＶＥＦ）の低下によって顕性になる。本発明のある態様において、本明細書中で用いる心不全は、５０％未満の左心室駆出分画（ＬＶＥＦ）または＜１５％の中壁分割短縮(midwall fractional shortening)（ＭＦＳ）
を伴う。
拡張期心不全（ＤＨＦ）は、心不全患者全体の５０％以上を占めると推定され、正常ＬＶＥＦ駆出分画を伴う心不全（ＨＦＮＥＦ）とも呼ばれる。ＨＦＮＥＦの診断には下記の条件を満たすことが要求される：（ｉ）心不全の徴候または症状；（ｉｉ）正常または軽度に異常な収縮期ＬＶ機能；（ｉｉｉ）拡張期ＬＶ機能不全の証拠。正常または軽度に異常な収縮期ＬＶ機能は、ＬＶＥＦ＞５０％とＬＶ拡張終期指数(LV end-diastolic volume
index)（ＬＶＥＤＶＩ）＜９７ｍＬ／ｍ２の両方を意味する。拡張期ＬＶ機能不全は、
好ましくは組織ドップラー（ＴＤ）により診断され、その際、Ｅ／Ｅ’比＞１５は拡張期ＬＶ機能不全の診断証拠とみなされる（Ｅは初期僧帽弁流速であり；Ｅ’は初期ＴＤ延長速度である）。ＴＤが拡張期ＬＶ機能不全を示唆するＥ／Ｅ’比（１５＞Ｅ／Ｅ’＞８）を示せば、拡張期ＬＶ機能不全の診断証拠を得るために追加の非侵襲性調査が要求される（たとえば、外側僧帽弁輪(lateral mitral annulus)のドップラー、僧帽弁または肺静脈
のドップラー、ＬＶ質量指数または左心房体積指数のエコー測定、心房細動の心電図証拠）。拡張期ＬＶ機能不全に関するより詳細な情報については、欧州心臓学会、心不全および心エコー検査協会(Heart Failure and Echocardiography Associations of the European Society of Cardiology)による、正常な左心室駆出分画を伴う心不全の診断に関する
合意声明が参照される；European Heart Journal 2007, 28, 2359-2550。
リスク因子
一般に、本発明の方法を実施する前に、各個体を心不全を発症するリスク因子について診断する。
リスク因子は当業者に既知であり、下記を含む：高血圧症；年齢、収縮期および拡張期高血圧症；冠動脈疾患（ＣＡＤ）；たとえば心臓、脳、腎臓、血管の非顕性臓器損傷；肥満症、好ましくは肥満指数ＢＭＩ＜２５ｋｇ／ｍ２と規定される肥満症；脂肪過多症；メタボリックシンドローム；１型または２型の糖尿病、特に２型糖尿病；ミクロアルブミン尿症を伴う１型糖尿病、喫煙；血管再生歴；心臓毒薬療法歴またはアルコール中毒歴；異脂肪血症；総コレステロール、総コレステロール／ＨＤＬコレステロール比、リウマチ性発熱の個人歴；心筋障害の家族歴。
前記のリストがすべてではないことを理解すべきである。より徹底的なリスク因子引用は、2007 Guidelines for the Management of Arterial Hypertension, European Heart Journal (2007) 28, 1462-1536中にみられ、これをリスク因子に関して全体として本明細書に援用する；特に表1、2および3、ならびに図1。
個々のリスク因子は、ＣＶＤのリスクおよび致命的なアテローム硬化事象発症のリスクを含み、これはＳＣＯＲＥ方式を用いて計算される；これは欧州高血圧症学会(European Society of Hypertension) (European Society of Hypertension Scientific Newsletter
2010, 11, No 48)から得られる。推奨される高血圧症のＥＳＣ採点方式に従って、リス
ク因子の数およびレベルに基づいて異なるリスクグループを形成し（低、低〜中．．．）、それに従って療法を適応させる。European Society of Hypertensio Scientific Newsletter 2010, 11, No 48の記載内容を全体として本明細書に援用する。
本明細書中で用いる用語“非顕性臓器損傷”は、臓器の病態生理学的状態（損傷）を表わす。この用語は当業者に知られている。非顕性臓器損傷は、さまざまな理由により、たとえば前記に詳述した心不全を生じるリスク因子により引き起こされる可能性がある；特に、動脈性高血圧症は臨床症状を発現せず、確立された診断方法を参照しなければ当業者が認識できない（たとえば、心臓肥大、軽度のアルブミン尿症、脈波伝播速度）。より詳細な非顕性臓器損傷の定義については、European Heart Journal (2007) 28, 1462-1536
が参照され、これをリスク因子に関して全体として本明細書に援用する；特にchapter 3.6；box 7を含む。
前記のリストがすべてではないことを理解すべきである。さらに、各個体が１つのリスク因子、または２つもしくはそれ以上のリスク因子を示す可能性がある。たとえば、糖尿病は一般にＣＡＤおよび／または高血圧症を誘発することが知られている；冠動脈疾患は糖尿病の存在に関係なく、しばしば高血圧症に至る。
前記に詳述した１つ以上のリスク因子を伴い、心不全の症状をもたない（見掛け上は健康）個体は、その個体において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常が診断されない場合、一般に好ましくはＡＣＣ／ＡＨＡの病期Ａに分類されるであろう。
前記の基準は多様に解釈できるわけではなく、個体の分類は検査を実施する医師に応じ
て異なる可能性があるのを留意することが重要である。個体をＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期Ａ（ならびに、病期Ｂ、ＣおよびＤ）に分類するための第１基準は、患者の記述である（指針の元の刊行物から採用した前記のＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の定義を参照）。元の刊行物を調べることによって明らかになるように、各病期のリスク因子／病態生理学的状態についての例は網羅的ではあり得ない。これは、本発明に関して、ある個体が保有するリスク因子がその指針に明白に引用されていない場合ですら、その個体は一般に好ましくはＡＣＣ／ＡＨＡの病期Ａに分類されるであろうということを意味する。
本発明のある態様において、心不全を発症するリスク因子を保有する個体は、本発明による方法を実施する前にＡＣＣ／ＡＨＡの病期Ａに分類された個体である。病期Ａに分類された個体は、ＡＣＣ／ＡＨＡの病期Ｂに属する病態生理学的状態に向かう生理学的変化（すなわち、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常）を生じている可能性がある。本発明に関して、この状態は“心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常”（初期の病期Ｂ）と呼ばれ、“心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の後期の異常”（後期の病期Ｂ）とは異なる。好ましくは、その個体は明瞭な心不全の症状を示していない。その個体が左心室肥大を示していなければさらに好ましい（すなわち、その個体は見掛け上は健康である）。
好ましくは、その個体は、心不全の、より好ましくは左心室肥大の、明瞭なまたは顕性の徴候を示してない（すなわち、その個体は見掛け上は健康である）ので、起きている可能性がある生理学的変化は、当技術分野で既知の方法（それらは面倒で経費が高く、かつ時間がかかる）で、または本発明の方法で、詳細な診断を実施しなければ診断されない。
好ましくは、その対象は高血圧症、特に動脈性高血圧症に罹患している。本発明に関して、高血圧症に罹患している個体は“高血圧症の個体”と呼ばれるであろう。高血圧症は当業者に既知のいかなる形態の高血圧症であってもよい。限定ではない例には、その心血管リスクプロフィールのため指針の推奨に従った抗高血圧症薬物療法に適した対象、および既に抗高血圧症薬物療法を受けている対象が含まれる。これに関して、2007 Guidelines for the Management of Arterial Hypertension, European Heart Journal (2007) 28,
1462-1536、およびEuropean Society of Hypertension Scientific Newsletter 2010, 11 , No 48)が参照される。
本発明の好ましい態様において、個体は動脈性高血圧症、収縮期および拡張期高血圧症に罹患している。高血圧症は、前記に述べた他の１以上のリスク因子を伴う可能性がある。したがって、心不全のリスク因子を保有する対象は、前記に述べた他の１以上のリスク因子を伴う高血圧症に罹患している可能性がある。しかし、その対象が高血圧症にだけ罹患していることも考慮される。
本発明の他の好ましい態様において、個体は糖尿病、特に２型糖尿病に罹患している。本発明のさらに他の好ましい態様において、個体は肥満症に罹患している。本発明のさらに他の好ましい態様において、個体はメタボリックシンドロームに罹患している。本発明のさらに他の好ましい態様において、個体はEuropean Society of Hypertensionのリスクチャートに従った低い、中等度、高い、またはきわめて高いリスクを伴う。
リスク因子の診断は、一般に当業者に既知の方法により行なわれる；一般に、心臓聴診、および／またはＥＣＧ、および／または胸部Ｘ線撮影、および／または心エコー検査、組織ドップラー心エコー検査、冠動脈カテーテル導入、血圧の測定、脈波速度の測定、内膜(intina media)厚さの測定、糖尿病の判定、メタボリックシンドロームの判定、肥満指数の決定、喫煙習慣の判定、総コレステロールの測定、ＬＤＬコレステロールの測定、血糖値の測定、European Society of Hypertensionのリスクチャートに従った、ならびにGu
idelines for the Management of Arterial Hypertension, European Heart Journal (2007) 28, 1462-1536およびEuropean Society of Hypertension Scientific Newsletter 2010, 11 , No 48)に従った心血管リスクプロフィールの判定。
好ましい態様において、前記に引用した１以上の追加の診断段階は、本発明の一部である；すなわち、これらの追加段階は、心臓性トロポニンまたはそのバリアントを心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の診断に利用する本発明の方法に加えて実施できる。これは本発明の他の方法にも適用される。
したがって本発明は、当業者に既知の方法（単数または複数）による心不全を発症するリスク因子の診断、ならびにさらに少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントおよび場合により１種類以上の他の心不全マーカーの濃度と、対照試料におけるこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度との比較に基づいて、対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する方法に関する。
本発明のこの方法は、下記の段階を含むことができる：ａ）当業者に既知の方法（単数または複数）により心不全を発症するリスク因子を診断する；ｂ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；ｃ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そしてｄ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量、たとえば対照試料において確立したこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度と比較することにより、機能および／または構造の異常を評価する。
したがって本発明は、対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する方法を提供し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）当業者に既知の方法（単数または複数）により心不全を発症するリスク因子を診断する；
ｂ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｃ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｄ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、機能および／または構造の異常を評価する。
当業者に既知の方法は下記のものである：心臓聴診、および／またはＥＣＧ、および／または胸部Ｘ線撮影、および／または心エコー検査、組織ドップラー心エコー検査、冠動脈カテーテル導入、血圧の測定、脈波速度の測定、内膜厚さの測定、糖尿病の判定、メタボリックシンドロームの判定、肥満指数の決定、喫煙習慣の判定、総コレステロールの測定、ＬＤＬコレステロールの測定、血糖値の測定、European Society of Hypertensionのリスクチャートに従った、ならびにGuidelines for the Management of Arterial Hypertension, European Heart Journal (2007) 28, 1462-1536およびEuropean Society of Hypertension Scientific Newsletter 2010, 11 , No 48)に従った心血管リスクプロフィー
ルの判定。
前記の方法において、段階ａ）と段階ｂ）、または段階ａ）と段階ｂ）〜ｄ）を同時に（すなわち、同じ時点で）、または連続的に（すなわち、異なる時点で）実施できる。これらの段階を連続的に実施する場合、それらの段階間の時間間隔は対象の病態生理学的状態が変化する可能性があるのに十分なほど長くない。
本発明によれば、心臓性トロポニンまたはそのバリアント、特にトロポニンＴまたはそ
のバリアントの濃度の増大は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の指標となる。その対象は心不全を発症するリスク因子を保有し、好ましくは無症候性の対象であり、より好ましくは左心室機能不全（ＬＶＤ）、より好ましくは拡張期左心室機能不全、よりさらに好ましくは左心室収縮期機能が保存された拡張期左心室機能不全に罹患している。特に、その個体はＬＶＨを発症していない（すなわち、ＬＶＨは顕性ではない）。心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアント、またはトロポニンＩもしくはそのバリアント、特にトロポニンＴもしくはそのバリアントの濃度の低下は、心疾患が存在しないことの指標となる。
上記によれば、≧（等しいか、またはより高い）約５．０ｐｇ／ｍＬ、好ましくは≧約６．０ｐｇ／ｍＬ、特に≧約７，０ｐｇ／ｍＬのトロポニンＴ濃度は、増大したトロポニンＴ濃度であり、これは上記の節に述べたように、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常の指標となる。さらに、約３．３ｐｇ／ｍＬと等しいかまたはより高い、好ましくは約３．５ｐｇ／ｍＬと等しいかまたはより高いトロポニンＴ濃度は、増大したトロポニンＴ濃度であり、これは上記の節に述べたように、心不全および／または左心室肥大に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の指標となる。
さらに、好ましくは０．２〜９．０ｐｇ／ｍＬと等しいかまたはより高い、あるいはより好ましくは約９ｐｇ／ｍＬと等しいかまたはより高いトロポニンＩ濃度は、増大したトロポニンＩ濃度であり、これは上記の節に述べたように、心不全および／または左心室肥大に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の指標となる。上記濃度より低い心臓性トロポニン、好ましくはトロポニンＴまたはＩの濃度は、心不全および／または左心室肥大に先立つ心臓の機能および／または構造の異常が存在しないことの指標となる。
本発明に関して実施した試験において、心臓性トロポニン、特にトロポニンＴの量より少なくとも２０％、またはより好ましくは少なくとも３０％多い心臓性トロポニン、特にトロポニンＴの増加は、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常を診断するための指標となることが、予想外に見出された。本発明に関して用いる用語の説明によれば、“減少（低下）した”または“増加（増大）した”は、好ましくはある健康な個体／対象からの、および／または複数の健康な個体／対象からの試料中のマーカーの量／濃度に対して、好ましくは少なくとも１０％、少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％の増加（増大）または減少（低下）を表わす。実施例１に記載したグループ１〜３に属する対象には、基準量に対するＮｔ−ＰｒｏＢＮＰの増加はみられなかった。
本発明に関して実施した研究で、さらに、雌性対象に由来する試料における、健康な雌性対象（または健康な雌性対象のグループ）の試料中の心臓性トロポニン、特にトロポニンＴの量より少なくとも３０％、またはより好ましくは少なくとも５０％多い心臓性トロポニン、特にトロポニンＴの増加は、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常を診断するための指標となることが、予想外に見出された。
トロポニンＴの量を測定する場合、カットオフとして用いられる基準量は、好ましくは２〜１４ｐｇ／ｍｌの範囲内である。よりさらに好ましくは、トロポニンについてカットオフとして用いられる基準量は３．２〜４ｐｇ／ｍｌである。カットオフ量として使用できる特に好ましいトロポニンＴの基準量は、好ましさが増大する順に３．２、３．４および４．２ｐｇ／ｍｌである。カットオフとして使用できる好ましいトロポニンＩの基準量は９．０ｐｇ／ｍｌである。基準量より多い、対象の試料中、好ましくは血清または血漿中の心臓性トロポニンの量は、好ましくは心不全に先立つ、および／または左心室肥大に
先立つ、心臓の機能および／または構造の異常を診断するための指標となる。基準量より少ない、対象の試料中、好ましくは血清または血漿中の心臓性トロポニンの量は、好ましくはその対象が心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常をもたないことを示す。
上記の数値は、実施例中で“方法”に詳述するように、Ｒｏｃｈｅの電気化学発光ＥＬＩＳＡサンドイッチ試験Ｅｌｅｃｓｙｓ Ｔｒｏｐｏｎｉｎ Ｔ ｈｓ（high sensitive、高感度）ＳＴＡＴ(Short Turn Around Time、短ターンアラウンド時間)アッセイ法を用いて確立された。
さらに、前記の各バイオマーカーは統計学的に互いに独立していることが見出された。
本発明は、心不全に対するリスク因子を保有する対象がリスク因子を保有するだけなのか、あるいはそのリスク因子が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常にまで進展しているかどうかを診断または評価できる方法に関する。
前記に詳述した心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴い、心不全の症状をもたない（見掛け上は健康な）個体は、その個体に心不全が診断されない場合は、一般に好ましくはＡＣＣ／ＡＨＡの病期Ｂに分類される。
前記の基準は多様に解釈できるわけではなく、個体の分類は検査を実施する医師に応じて異なる可能性があるのを留意することが重要である。ＡＣＣ／ＡＨＡの病期Ｂ（ならびに、病期Ａ、ＣおよびＤ）の個体の分類に関する第１基準は、患者の記述である（指針の元の刊行物から採用した前記のＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の定義を参照）。元の刊行物を調べることによって明らかになるように、各病期のリスク因子／病態生理学的状態についての例は網羅的ではあり得ない。これは、本発明によれば、ある個体が保有する心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常がその指針に明白に引用されていない場合ですら、その個体は一般に好ましくはＡＣＣ／ＡＨＡの病期Ｂに分類されるであろうということを意味する。
本発明に関して測定されるタンパク質は、対象の単一試料、または多様な試料、たとえば２、３、４もしくは５つの試料において測定できる。試料は、同一時点または異なる時点で得ることができる。たとえば、試料は患者の療法の前および／または途中および／または後に採集することができる。
好ましくは、心臓性トロポニンはトロポニンＴもしくはそのバリアントまたはトロポニンＩもしくはそのバリアント、特にトロポニンＴまたはそのバリアントである。
本発明の他の態様において、心臓性トロポニンから選択したマーカーのほかに少なくとも１種類のマーカー、すなわち少なくとも１種類の他の心不全マーカーを本発明の方法に使用する。この少なくとも１種類の心不全マーカーは、ＧＤＦ−１５およびそのバリアントならびにＩＧＦＢＰ７およびそのバリアントから選択される。本発明のある態様において、心臓性トロポニンはトロポニンＴおよびそのバリアントならびにトロポニンＩおよびそのバリアントから選択され、特に心臓性トロポニンはトロポニンＴまたはそのバリアントである。本発明の１態様において、下記のマーカーを共に測定する：心臓性トロポニンはトロポニンＴおよびそのバリアントならびにトロポニンＩおよびそのバリアントから選択され、特に心臓性トロポニンはトロポニンＴまたはそのバリアントである；ＧＤＦ−１５またはそのバリアント；ならびにＩＧＦＢＰ７またはそのバリアント。
本明細書中で用いる用語“診断すること”は、ある対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴うかどうかを判定、同定、評価または分類することを意味する。用語“診断すること”は、心不全を発症するリスク因子を保有するだけの対象、また
は心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を既に伴う対象を鑑別することをも表わす。
対象がＡＣＣ／ＡＨＡの病期Ａに分類された場合、その対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴っているか、あるいは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を発現しようとしているかを診断する方法は、当業者に知られている。この診断は一般に経費が高く、時間がかかり、医療の手腕および経験を必要とする。評価の方法は当業者に既知であり、一般に病歴を基礎とし、評価にはさらに診断装置／器具を用いる検査（心臓聴診、ＥＣＧ、心エコー検査、胸部Ｘ線撮影、放射性核種イメージング、心室造影、ＣＴスキャン、ＭＲＩおよび／または負荷試験、冠血管造影、超音波検査、冠動脈カテーテル導入）が含まれる。原因を判定するために必要に応じて他の試験を実施できる。処置は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の個々のタイプおよび重症度に依存する。
たとえば、左心室肥大の予診は、通常は身体検査の結果に基づいて実施できる。聴診器で聴く心音が通常は特徴的である。心エコー検査はその診断を確定するための最良の方法である。心電図検査法（ＥＣＧ）および胸部Ｘ線撮影法も役立つ。侵襲措置である心臓カテーテル導入は、外科処置を考慮している場合にのみ、心室腔内の圧力を測定するために実施される。
前記に挙げた診断方法は、指示したマーカーの測定に基づく本発明の方法と共に、補足的／補助的に使用できる。
本発明に用いるマーカー（ペプチド）は、本発明の他の態様において、当業者に既知の一般的な診断方法によって確立した診断を確定するために、あるいはその逆のために使用することもできる。したがって、本発明はまた、本発明に用いるマーカーの濃度を測定し、これらを対照試料中のそのマーカーの濃度と比較し、そして技術水準に従った方法により得られた診断を確定し、または確定しないことによって、本発明に用いるマーカーの測定に基づくものではない診断または一部がそれに基づく診断を確定する方法に関する。
確定
他の態様において、本発明は、対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を確定する方法であって、当業者に既知の方法（単数または複数）による心不全を発症するリスク因子の診断、ならびにさらに少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントおよび場合により１種類以上の他の心不全マーカーの濃度と対照試料におけるこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度との比較に基づく方法に関する。
本発明のこの方法は、下記の段階を含むことができる：ａ）当業者に既知の方法（単数または複数）により心不全を発症するリスク因子を診断する；ｂ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；ｃ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そしてｄ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量、たとえば対照試料において確立したこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度と比較することにより、機能および／または構造の異常を確定する。
したがって本発明は、対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を確定する方法を提供し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）当業者に既知の方法（単数または複数）により心不全を発症するリスク因子を診断する；
ｂ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｃ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｄ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、機能および／または構造の異常を確定する。
当業者に既知の方法は一般に診断装置／器具を使用し、下記のものから選択される：経静脈心内膜心筋生検、心臓カテーテル導入、心臓聴診、ＥＣＧ、心エコー検査、胸部Ｘ線撮影、放射性核種イメージング、心室造影、ＣＴスキャン、ＭＲＩおよび／または負荷試験、冠血管造影、超音波検査。
前記の方法において、段階ａ）と段階ｄ）、または段階ａ）〜ｃ）と段階ｄ）を同時に（すなわち、同じ時点で）、または連続的に（すなわち、異なる時点で）実施できる。これらの段階を連続的に実施する場合、それらの段階間の時間間隔は対象の病態生理学的状態が変化する可能性があるのに十分なほど長くない。
既に前記に述べたように、１より多い病的機序が対象の病的な左心室肥大の発生の原因である可能性がある。
リスク予測
他の態様において、本発明は、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントおよび場合により１種類以上の他の心不全マーカーの濃度と、対照試料におけるこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度との比較に基づいて、対象が心不全、または心不全に先立つそれぞれの心血管事象および腎事象に罹患するリスクを予測する方法を提供する。
本発明のこの方法は、下記の段階を含むことができる：ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そしてｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量、たとえば対照試料において確立したこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度と比較することにより、対象が心不全または心血管事象および腎事象に罹患するリスクを予測する。
したがって本発明は、対象が心不全、または心不全に先立つそれぞれの心血管事象および腎事象に罹患するリスクを予測する方法を提供し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、それらの対象が心不全または心血管事象および腎事象に罹患するリスクを予測する。
上記の予測方法は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する任意段階ｂｂ）を含むことができる。この段階ｂｂ）は、好ましくは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の初期にみられるものを含めて、前記に示したいずれかの心疾患を同定することができる。
本発明の好ましい態様において、心不全に罹患するリスクを判定される個体は、ＬＶＨが顕性ではない個体である。
ＬＶＨの前に予測する方法
したがって、他の態様において本発明は、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントおよび場合により１種類以上の他の心不全マーカーの濃度と、対照試料におけるこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度との比較に基づいて、対象において左心室肥大（ＬＶＨ）が顕性になる前に心不全のリスクを予測する方法を提供する。
本発明のこの方法は、下記の段階を含むことができる：ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そしてｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量、たとえば対照試料において確立したこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度と比較することにより、対象が心不全に罹患するリスクを予測する。
したがって本発明は、対象において左心室肥大（ＬＶＨ）が顕性になる前に心不全のリスクを予測する方法を提供し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、それらの対象が心不全に罹患するリスクを予測する。
対象は、好ましくは心不全のリスク因子、たとえば高血圧症および糖尿病を保有する。同様に好ましくは、対象は心不全の顕性の徴候および／または症状を示していない。
拡張期機能不全
本発明の好ましい態様において、前記方法は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常（初期の病期Ｂ）をもち、かつ無症候性の拡張期機能不全に罹患している個体において、心不全に罹患するリスクを予測できる。その個体は、収縮期機能不全に罹患している可能性もある。さらに、その個体は、左心室に形態変化を伴っている可能性がある。好ましくは、拡張期機能不全に罹患している個体は左心室駆出分画ＬＶＥＦ低下を伴っていない（すなわち、その個体はＬＶＥＦが保存されている）。好ましい１態様において、拡張期機能不全に罹患している個体は収縮期機能不全に罹患していない。その個体は、特に左心室肥大ＬＶＨに罹患していない。
上記方法のよりさらに好ましい態様において、上の節に詳述したように、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常（初期の病期Ｂ）をもち、および／または拡張期機能不全に罹患している患者は、心不全に罹患する下記のリスク因子を示す：喫煙歴、肥満症、メタボリックシンドローム、１型および２型糖尿病、動脈性高血圧症、特に動脈性高血圧症。
拡張期機能不全を伴う対象における予測の場合、本発明による予測方法は、（無症候性）拡張期機能不全を診断する任意段階ｂｂ）を含むことができる。この段階ｂｂ）は、好ましくは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の初期にみられるものを含めて、前記に示した心臓の機能および／または構造の何らかの異常を同定することができる。
拡張期機能不全を伴う個体はその拡張期機能不全の結果として心不全に罹患する素因をもつことが当技術分野で知られている。これはたとえば下記に発表されている; Med Clin
North Am. 2009 May; 93(3) :647-64; Am J Hypertens. 2001 Feb; 14(2). 106-13; Hypertension. 2002; 40: 136-14。
初期の病期Ｂの予測
本発明の好ましい態様において、前記方法は、好ましくは心不全を発症するリスク因子をもつ個体（病期Ａ）が、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常（病期Ｂ）および／または左心室肥大に先立つ異常に罹患するリスクを予測できる。上記方法の好ましい態様において、リスク因子をもつ個体が左心室機能不全、特に拡張期機能不全に罹患するリスクを予測する。好ましくは、拡張期機能不全に罹患している個体は左心室駆出分画ＬＶＥＦ低下を伴っていない（すなわち、その個体はＬＶＥＦが保存されている）。好ましい１態様において、拡張期機能不全に罹患している個体は収縮期機能不全に罹患していない。上記方法の他の好ましい態様において、左心室の構造変化を生じるリスクを予測する。特に、その個体がＬＶＨに罹患する前にリスクを予測する（すなわち、好ましくは心不全を発症するリスク因子をもつ個体（病期Ａ）が、一般に心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常（初期の病期Ｂ）、左心室肥大に先立つ異常（後期の病期Ｂ）に罹患するリスクを予測する）。
上記方法のよりさらに好ましい態様において、上の節に詳述したように、心不全を発症するリスク因子をもつ（病期Ａ）か、または心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う（病期Ｂ）個体は、心不全に罹患する下記のリスク因子を示す：喫煙歴、肥満症、メタボリックシンドローム、１型および２型糖尿病、動脈性高血圧症、特に動脈性高血圧症。
拡張期機能不全を伴う対象における予測の場合、本発明による予測方法は、（無症候性）拡張期機能不全を診断する任意段階ｂｂ）を含むことができる。この段階ｂｂ）は、好ましくは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の初期にみられるものを含めて、前記に示した心臓の機能および／または構造の何らかの異常を同定することができる。
雌性対象がＬＶＨに罹患するリスクを予測する方法
本明細書中に示す定義および説明は、好ましくは下記にも適用される：
さらに、本発明は、雌性対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測する方法に関連し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、それらの対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測する。
本発明の方法は、好ましくはエクスビボ方法である。さらにそれは、前記に明白に述べた段階に追加した段階を含むことができる。たとえば、追加段階は試料の前処理、またはその方法により得られた結果の評価に関するものであってもよい。前記方法は、手動で実施するか、あるいは自動化により支援することができる。好ましくは、それらの段階は全体または一部を自動化により、たとえば測定に適したロボット装置およびセンサー装置または前記の比較に基づくコンピューター処理比較により、支援することができる。より好ましくは、前記方法は全体が自動化方式で実施される。そのような場合、段階ｃ）で確立する予後結果は、それをたとえば医療担当者が最終的な臨床予後の確立のための補助として使用できるように、適切な出力フォーマットで作成される。
前記の本発明方法に関して、雌性対象がＬＶＨに罹患するリスクが予測されるはずであ
る。本明細書中で用いる用語“リスクを予測する”は、好ましくは、本明細書中に述べる雌性対象が左心室肥大に罹患する確率を評価することを表わす。より好ましくは、ある時間ウィンドウ内で左心室肥大に罹患するリスク／確率を予測する。本発明の好ましい態様において、この予測ウィンドウは、好ましくは少なくとも６か月、少なくとも９か月、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、少なくとも１０年、少なくとも１５年の期間、またはいずれかの周期的範囲である。本発明の特に好ましい態様において、この予測ウィンドウは、好ましくは１０年、またはより好ましくは５年の期間である。好ましくは、予測ウィンドウは被験試料を入手した時点から計算される。
当業者に理解されるように、前記の予測は通常は被分析対象の１００％について正確であることを意図するものではない。ただし、この用語はその評価が統計的に有意な部分の被分析対象について有効であることを要求する。ある部分が統計的に有意であるかどうかは、当業者が多様な周知の統計学的評価ツール、たとえば信頼区間の決定、ｐ値の決定、スチューデントのｔ検定、マン−ホイットニー(Mann-Whitney)検定などを用いて、さらに苦労することなく判定できる。詳細はDowdy and Wearden, Statistics for Research, John Wiley & Sons, New York 1983中にみられる。好ましい信頼区間は少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％である。
用語“予測する”は、好ましくは対象が左心室肥大（左心室肥大という用語は本明細書中の他の箇所に定義されており、したがってその定義を適用する）に罹患するリスクをもつかあるいはリスクをもたないかを評価することに関する。好ましくは、雌性のリスクが対象の集団における平均リスクと比較して高いリスクであるかまたは低いリスクであるかを評価すべきである。本明細書中で用いる用語“左心室肥大に罹患するリスクを予測する”は、本発明の方法により分析すべき対象を、左心室肥大に罹患するリスクをもつ対象のグループまたは左心室肥大に罹患するリスクをもたない対象のグループのいずれかに割り当てることを意味する。本発明に従って述べる左心室肥大に罹患するリスクをもつとは、好ましくは左心室肥大に罹患するリスクが高い（好ましくは、予測ウィンドウ内で）ことを意味する。好ましくは、そのリスクは雌性対象のコホート、特に心不全に罹患する少なくとも１つのリスク因子（好ましくは、その被験対象と同じリスク因子（単数または複数））を保有する対象のコホートにおける平均リスクと比較して高い。本発明に従って述べる左心室肥大に罹患するリスクをもたない対象は、好ましくは左心室肥大に罹患するリスクが低い（好ましくは、予測ウィンドウ内で）。好ましくは、そのリスクは雌性対象のコホート、特に心不全に罹患する少なくとも１つのリスク因子（好ましくは、その被験対象と同じリスク因子（単数または複数））を保有する対象のコホートにおける平均リスクと比較して低い。左心室肥大に罹患するリスクをもつ対象は、５年の予測ウィンドウ内で左心室肥大に罹患するリスクが、好ましくは１０〜２０％またはそれ以上、より好ましくは２０％またはそれ以上である。左心室肥大に罹患するリスクをもたない対象は、好ましくは１０年の予測ウィンドウ内で、左心室肥大に罹患するリスクが好ましくは１０％未満、より好ましくは５％未満、またはそれ以下である。
用語“対象”は、本明細書中の他の箇所に記載されている。したがってその定義を適用する。前記方法に従った対象は、雌性対象のはずである。
前記方法の好ましい態様において、検査すべき雌性対象は心不全に罹患する少なくとも１つの（したがって、１つまたは１つより多い）リスク因子を示す。特に、検査すべき雌性対象は、喫煙歴、肥満症、メタボリックシンドローム、１型および２型糖尿病、ならびに高血圧症、特に動脈性高血圧症からなる群から選択される少なくとも１つのリスク因子を示す。したがって雌性対象は、好ましくは高血圧症（特に動脈性高血圧症）、糖尿病、肥満症、メタボリックシンドロームおよび／または喫煙歴を伴う（したがって、対象は喫
煙歴をもつ）。特に好ましい態様において、心不全の少なくとも１つのリスク因子を保有する雌性対象は、高血圧症（特に動脈性高血圧症）および／または糖尿病に罹患している。
用語“基準量”は、本明細書中の他の箇所に記載されている。したがってその定義を適用する。さらに、本明細書中で前記方法に関して用いる用語“基準量”または“基準値”は、ＬＶＨに罹患するリスクを予測できるポリペプチドの量を表わす。
したがって、基準量は一般に、ＬＶＨに罹患するリスクをもつことが分かっている対象、またはＬＶＨに罹患するリスクをもたないことが分かっている対象に由来するであろう。
好ましくは、検査すべき雌性対象に由来する試料から測定した心臓性トロポニンまたはそのバリアントの量の増加は、その雌性対象がＬＶＨに罹患するリスクをもつことを示す。同様に、検査すべき雌性対象に由来する試料から測定したＧＤＦ−１５またはそのバリアントおよびＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの量の増加は、ＬＶＨに罹患するリスクの指標となる。好ましくは、基準量に対比して増加した量は、ＬＶＨに罹患するリスクの指標となる。
たとえば、対照グループまたは対照集団において測定した心臓性トロポニンまたはそのバリアント、ＧＤＦ−１５またはそのバリアント、およびＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの量を用いて、カットオフ量または基準範囲を確立する。そのようなカットオフ量を超える量または基準範囲およびそれの高い方の端の外側の量を、増加しているとみなす。
１態様において、固定されたカットオフ値を確立する。そのようなカットオフ値は目的とする診断質問に適合するように選択される。
前記方法に関して、用語“減少した”および“増加した”は、好ましくは対象の集団における平均量、特に中央量に対比して増加または減少している量を表わすことができる。好ましくは、その集団は健康な対象の集団である。
好ましくは、雌性対象の試料において、ＬＶＨに罹患するリスクをもたない雌性対象（または雌性対象のグループ）の試料中の心臓性トロポニン、特にトロポニンＴの量より少なくとも３０％、またはより好ましくは少なくとも５０％多い心臓性トロポニン、特にトロポニンＴの量は、その雌性対象がＬＶＨに罹患するリスクをもつことを示す。ＬＶＨに罹患するリスクをもたない対象は、好ましくは心不全に先立つ、および／または左心室肥大（この用語の定義については、他の箇所を参照）に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常をもたない対象である。その対象は、少なくとも１つの心不全のリスク因子を保有する可能性がある（したがって、本明細書中の他の箇所に記載した病期Ａにある）。しかし、好ましくはＬＶＨに罹患するリスクをもたない対象は健康な対象である。好ましくは、試料は血清または血漿の試料である。
したがって、基準量は健康な雌性対象（またはそのグループ）に由来する。好ましくは、健康な雌性対象における量（または健康な雌性対象のグループにおける中央量）と比較して少なくとも３０％、またはより好ましくは少なくとも５０％の心臓性トロポニン（特にトロポニンＴ）の増加は、その対象が左心室肥大に罹患するリスクの指標となる。
トロポニンＴの量を測定する場合、カットオフとして用いられる基準量は、好ましくは２〜１４ｐｇ／ｍｌの範囲内である。よりさらに好ましくは、トロポニンＴについてカットオフとして用いられる基準量は３．２〜４ｐｇ／ｍｌである。カットオフ量として使用できる特に好ましいトロポニンＴの基準量は、好ましさが増大する順に３．２、３．４お
よび４．２ｐｇ／ｍｌである。カットオフ量として使用できる好ましいトロポニンＩの基準量は０．２〜９．０ｐｇ／ｍｌの範囲内である。カットオフ量として使用できるさらに好ましいトロポニンＩの基準量は９．０ｐｇ／ｍｌである。基準量より多い、雌性対象の試料、好ましくは血清または血漿中の心臓性トロポニンの量は、好ましくはその対象がＬＶＨに罹患するリスクをもつことを示す。基準量より少ない、雌性対象の試料、好ましくは血清または血漿中の心臓性トロポニンの量は、好ましくはその対象がＬＶＨに罹患するリスクをもたないことを示す。
ＩＧＦＢＰ７の量を測定する場合、カットオフとして用いられる基準量は、好ましくは３３．３ｐｇｍｌ〜４６．２ｐｇ／ｍｌの範囲内である。よりさらに好ましくは、ＩＧＦＢＰ７についてカットオフとして用いられる基準量は４２．６〜４６．２ｐｇ／ｍｌの範囲内である。カットオフ量として使用できる特に好ましいＩＧＦＢＰ７の基準量は、好ましさが増大する順に４２．６ｐｇ／ｍｌおよび４６．２ｐｇ／ｍｌである。
本発明の方法および使用の態様において、ＧＦＢＰ７を心臓性トロポニンの代わりに単一のマーカーとして用いることもできる（したがって、ＴＧＦＢＰ７が好ましくは心臓性トロポニンの代わりとなる）。
他の態様において、本発明は、対象において心不全を診断する方法を提供し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、心不全を評価する。
本発明の方法は、好ましくはインビトロ方法である。好ましくは、対象から得た試料において少なくとも１種類のマーカーの濃度を測定する。さらにそれは、前記に明白に述べた段階に追加した段階を含むことができる。たとえば、追加段階は試料の前処理、またはその方法により得られた結果の評価に関するものであってもよい。本発明の方法は、対象のモニタリング、確定、および下位分類にも使用できる。前記方法は、手動で実施するか、あるいは自動化により支援することができる。好ましくは、その対象の少なくとも１つの試料において少なくとも１種類の心臓性トロポニンの濃度を測定する段階、こうして前段階で測定したマーカー（単数または複数）の濃度を対照試料において確立したこのマーカーの濃度と比較する段階、および／または診断／鑑別／予測の段階は、全体または一部を自動化により、たとえば適切なロボット装置およびセンサー装置により支援することができる。
当業者に理解されるように、そのような評価は通常は同定すべき対象のすべて（１００％）について正確であることを意図するものではない。ただし、この用語は統計的に有意な部分の対象（たとえば、コホート試験のコホート）を同定できることを要求する。ある部分が統計的に有意であるかどうかは、当業者が多様な周知の統計学的評価ツール、たとえば信頼区間の決定、ｐ値の決定、スチューデントのｔ検定、マン−ホイットニー検定などを用いて判定できる。詳細はDowdy and Wearden, Statistics for Research, John Wiley & Sons, New York 1983中にみられる。好ましい信頼区間は少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％である。ｐ値は、好ましくは０．１、０．０５、０．０１、０．００５または０．０００１である。より好ましくは、ある集団の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％の対象を本発明の方法によって適正に同定できる。
用語“個体”、“対象”および“患者”は、本明細書中で互換性をもって使用でき、動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトに関する。対象は雄性または雌性対象であってよい。対象は雌性対象であることが好ましい。
本発明の前記方法によれば、対象はＡＣＣ／ＡＨＡ、病期Ａに属し、ＨＦを発症する１以上のリスク因子を示す対象のはずであると考えられる。さらに、対象はＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期Ｂに入っているか、あるいは病期Ｂに入ろうとしている（初期の病期Ｂ）可能性がある。その対象はＨＦに関連することが知られている症状および／または身体徴候を示していないはずである（すなわち、その対象は見掛け上は健康である）。
本発明の方法は、いわゆる“マーカー”または“分子マーカー”を利用する。これらの用語は当業者に既知であり、対象の身体に発現するポリペプチドまたはタンパク質を表わす。一方で、その発現または発現増大は、その対象に起きた、または起きつつある病態生理学的状態の結果である可能性があり、生理的に健康な対象において測定した“正常”値（場合によりゼロの可能性がある）に対比して増大した濃度は、その対象に起きつつある病態生理学的状態（または“疾患”）の指標となる。他方で、そのタンパク質は生理的に健康な対象においてある濃度で発現している可能性があり、その対象に起きた、または起きつつある病態生理学的状態の結果としてその発現が増大する。
本発明に関して、測定されるマーカーはすべてこの第１グループに属し、すなわちそれらは対象が病態生理学的状態または疾患に罹患すれば発現するか、または正常より高い濃度で発現する。本発明に用いるすべてのマーカータイプおよびマーカー類は、当業者に既知である。
本発明は心臓性トロポニンおよびそのバリアントを利用する。心筋梗塞ＭＩに罹患している患者は心臓性トロポニン、好ましくはトロポニンＴまたはＩ、最も好ましくはトロポニンＴにより診断できることが知られている。心筋梗塞は心筋の壊死状態、すなわち細胞死により引き起こされると考えられる。心臓性トロポニンは細胞死に伴って放出されるので、ＭＩの診断に使用できる。血液中のトロポニンＴの濃度が増大すると、すなわち０．１ｎｇ／ｍｌを超えると、急性心血管事象が推測され、その患者はそれに従って処置される。しかし、心臓性トロポニンは細胞死に先立つ病理状態、たとえば虚血に際しても放出される（少量）ことが知られている。
用語“心臓性トロポニン”は、心臓の細胞、好ましくは心内膜下細胞に発現するすべてのトロポニンイソ型を表わす。これらのイソ型は、Anderson 1995, Circulation Research, vol. 76, no. 4: 681-686およびFerrieres 1998, Clinical Chemistry, 44: 487-493
に記載されるように、当技術分野で十分に特性解明されている。好ましくは、心臓性トロポニンはトロポニンＴおよび／またはトロポニンＩ、最も好ましくはトロポニンＴを表わす。トロポニンのイソ型は本発明の方法において一緒に、すなわち同時もしくは連続して、または個別に、すなわち他のイソ型を全く測定せずに、測定できることを理解すべきである。ヒトトロポニンＴおよびヒトトロポニンＩのアミノ酸配列は、Anderson, 前掲、およびFerrieres 1998, Clinical Chemistry, 44: 487-493に示されている。
用語“心臓性トロポニン”には、前記の特定のトロポニンの、すなわちトロポニンＩの、最も好ましくはトロポニンＴの、バリアントも包含される。そのようなバリアントは、少なくとも特定の心臓性トロポニンと同じ本質的な生物学的特性および免疫学的特性をもつ。特に、それらが本明細書中で述べるものと同じ特異的アッセイ法により、たとえばその心臓性トロポニンを特異的に認識するポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体を用いるＥＬＩＳＡアッセイ法により検出されれば、同じ本質的な生物学的特性および免疫
学的特性を共有する。さらに、本発明に従って述べるバリアントは、少なくとも１つのアミノ酸の置換、欠失および／または付加のため異なるアミノ酸配列をもつはずであり、その際、そのバリアントのアミノ酸配列はなお、好ましくは特定のトロポニンのアミノ酸配列と少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９２％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％、同一であることを理解すべきである。バリアントは、対立遺伝子バリアント、または他のいずれかの種特異的なホモログ、パラログもしくはオルソログであってもよい。さらに、本明細書中に述べるバリアントには、特定の心臓性トロポニンまたは上記タイプのバリアントのフラグメントが含まれるが、ただしこれらのフラグメントが上記に述べた本質的な免疫学的特性および生物学的特性をもつ限りにおいてである。好ましくは、心臓性トロポニンのバリアントは、ヒトのトロポニンＴまたはトロポニンＩのものに匹敵する免疫学的特性（すなわち、エピトープ組成）をもつ。したがって、それらのバリアントは心臓性トロポニンの濃度を測定するために用いる前記の手段またはリガンドにより認識されるはずである。したがって、それらのバリアントは心臓性トロポニンの濃度を測定するために用いる前記の手段またはリガンドにより認識されるはずである。そのようなフラグメントは、たとえばトロポニンの分解生成物であってもよい。さらに、翻訳後修飾、たとえばリン酸化またはミリスチル化のため異なるバリアントが含まれる。好ましくは、トロポニンＩおよびそのバリアントの生物学的特性は、インビボおよびインビトロでアクトミオシンＡＴＰａｓｅを阻害する能力または血管形成を阻害する能力であり、これらはたとえばMoses et al. 1999 PNAS USA 96 (6): 2645-2650)により記載されたアッセイ法に基づいて検出できる。
好ましくは、心臓性トロポニンＴおよびそのバリアントの生物学的特性は、トロポニンＣおよびＩと複合体を形成する能力、カルシウムイオンを結合する能力、またはトロポミオシンに結合する能力（好ましくは、トロポニンＣ、ＩおよびＴの複合体、またはトロポニンＣ、トロポニンＩ、およびトロポニンＴバリアントにより形成された複合体として存在する場合に）である。低濃度の循環型心臓性トロポニンがさまざまな状態の対象において検出される場合があることは知られているが、それらのそれぞれの役割および割合を理解するためにはさらに研究が必要である(Masson et al., Curr Heart Fail Rep (2010) 7: 15-21)。
用語“増殖分化因子−１５”または“ＧＤＦ−１５”は、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）−βサイトカインスーパーファミリーのメンバーであるポリペプチドに関する。用語ポリペプチド、ペプチドおよびタンパク質は、本明細書全体において互換性をもって用いられる。ＧＤＦ−１５は最初はマクロファージ阻害性サイトカイン−１としてクローン化され、のちに胎盤性トランスフォーミング増殖因子−β、胎盤性骨形態形成タンパク質、非ステロイド系抗炎症薬活性化遺伝子−１、および前立腺由来因子としても同定された(Bootcov 前掲; Hromas, 1997 Biochim Biophys Acta 1354: 40-44; Lawton 1997,
Gene 203: 17-26; Yokoyama-Kobayashi 1997, J Biochem (Tokyo), 122: 622-626; Paralkar 1998, J Biol Chem 273: 13760-13767)。他のＴＧＦ−β関連サイトカインと同様に、ＧＤＦ−１５は不活性の前駆タンパク質として合成され、それがジスルフィド結合したホモ二量体化を行なう。Ｎ末端プロペプチドのタンパク質開裂に際して、ＧＤＦ−１５は約２８ｋＤａの二量体タンパク質として分泌される(Bauskin 2000, Bmbo J 19: 2212-2220)。ＧＤＦ−１５のアミノ酸配列は、WO 99/06445、WO 00/70051、WO 2005/113585、Bottner 1999, Gene 237: 105-1 11 , Bootcov 前掲, Tan 前掲, Baek 2001, Mol Pharmacol 59: 901-908, Hromas 前掲, Paralkar 前掲, Morrish 1996, Placenta 17: 431-441、ま
たはYokoyama-Kobayashi 前掲に開示されている。本明細書中で用いるＧＤＦ−１５には
、上記の特定のＧＤＦ−１５ポリペプチドのバリアントも包含される。そのようなバリアントは、少なくとも特定のＧＤＦ−１５ポリペプチドと同じ本質的な生物学的特性および免疫学的特性をもつ。特に、それらが本明細書中で述べるものと同じ特異的アッセイ法により、たとえばそのＧＤＦ−１５ポリペプチドを特異的に認識するポリクローナル抗体ま
たはモノクローナル抗体を用いるＥＬＩＳＡアッセイ法により検出されれば、同じ本質的な生物学的特性および免疫学的特性を共有する。好ましいアッセイ法は後記の実施例に記載されている。さらに、本発明に従って述べるバリアントは、少なくとも１つのアミノ酸の置換、欠失および／または付加のため異なるアミノ酸配列をもつはずであり、その際、そのバリアントのアミノ酸配列はなお、特定のＧＤＦ−１５ポリペプチドのアミノ酸配列と、好ましくはヒトＧＤＦ−１５のアミノ酸配列と、より好ましくは特定のＧＤＦ−１５、たとえばヒトＧＤＦ−１５の全長にわたって、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９２％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％、同一であることを理解すべきである。２つのアミノ酸配列間の同一度は、当技術分野で周知のアルゴリズムにより判定できる。好ましくは、同一度は、２つの最適状態にアラインさせた配列を比較ウィンドウにわたって比較することにより判定すべきであり、その際、比較ウィンドウ内のアミノ酸配列のフラグメントは、最適アラインメントのために基準配列（付加または欠失を含まないもの）と比較して付加または欠失（たとえば、ギャップまたはオーバーハング）を含むことができる。両配列中に同一アミノ酸残基が現われる位置の数を測定して一致した位置の数を求め、この一致した位置の数を比較ウィンドウ内の位置の総数で割り、その商に１００を掛けることによりパーセントを計算して、配列同一パーセントを求めることができる。比較のための配列の最適アラインメントは、下記により実施できる：Smith and Waterman Add. APL. Math. 2:482 (1981)の局所相同アルゴリズム、Needleman and Wunsch J. Mol. Biol. 48:443 (1970)の相同アラインメントアルゴリズム、Pearson and Lipman Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 85: 2444 (1988)の類似性検索法、これらのアルゴリズムのコンピューター化実行（ＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＢＬＡＳＴ、ＰＡＳＴＡ、およびＴＦＡＳＴＡ：Wisconsin Genetics Software Package中, Genetics Computer Group (GCG), 575 Science Dr., Madison, WI)、または目視検査。比較のための２配列が同定されれば、好ましくはＧＡＰおよび
ＢＥＳＴＦＩＴを用いてそれらの最適アラインメントを決定し、こうして同一度を判定する。好ましくは、ギャップ重みにつき５．００およびギャップ重み長さにつき０．３０ののデフォルト値を用いる。前記に述べたバリアントは、対立遺伝子バリアント、または他のいずれかの種特異的なホモログ、パラログもしくはオルソログであってもよい。さらに、本明細書中に述べるバリアントには、特定のＧＤＦ−１５ポリペプチドまたは上記タイプのバリアントのフラグメントが含まれるが、ただしこれらのフラグメントが上記に述べた本質的な免疫学的特性および生物学的特性をもつ限りにおいてである。そのようなフラグメントは、たとえばＧＤＦ−１５ポリペプチドの分解生成物であってもよい。さらに、翻訳後修飾、たとえばリン酸化またはミリスチル化のため異なるバリアントが含まれる。
インスリン様増殖因子結合タンパク質（ＩＧＦＢＰ）系は、細胞の増殖および分化において重要な役割を果たす。それは２種類のリガンドであるＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩ、２種類の受容体であるタイプ１およびタイプ２ ＩＧＦ受容体、ならびに１９９５年の時点で６種類のＩＧＦ結合タンパク質（ＩＧＦＢＰ）であるＩＧＦＢＰ−１〜−６から構成される(Jones, J.L, et al., Endocr. Rev. 16 (1 95) 3-34)。最近、ＩＧＦＢＰファ
ミリーは拡大されてＩＧＦＢＰ関連タンパク質（ＩＧＦＢＰ−ｒＰ）を含み、これらはＩＧＦＢＰと有意の構造類似性をもつ(Hwa, V., et al., Endocr. Rev 20 (1999) 761-787)。したがって、ＩＧＦＢＰスーパーファミリーには、ＩＧＦに対して高い親和性をもつ上記の６種類の一般的ＩＧＦＢＰ、ならびにＩＧＦＢＰの保存されたアミノ末端ドメインを共有するだけでなくＩＧＦおよびインスリンに対してもある程度の親和性を示す少なくとも１０種類のＩＧＦＢＰ−ｒＰが含まれる。ＩＧＦＢＰ−ｒＰは一群のシステインリッチタンパク質であり、これらは細胞増殖、細胞の接着および移動、ならびに細胞外マトリックスの合成など、多様な細胞機能を制御する。さらに、これらのタンパク質は組織の増殖および分化、生殖、血管形成、創傷修復、炎症、線維形成、ならびに腫瘍形成などの生物学的プロセスに関与している可能性がある(Hwa, V., et al., Endocr. Rev 20 (1999) 76
1-787)。
ＩＧＦ結合タンパク質７（＝ＩＧＦＢＰ７）は、内皮細胞、血管平滑筋細胞、線維芽細胞、および上皮細胞により分泌されることが知られている３０−ｋＤａのモジュラー糖タンパク質である(Ono, Y., et al, Biochem Biophys Res Comm 202 (1994) 1490-1496)。
この文献中で、この分子はＦＳＴＬ２；ＩＢＰ ７；ＩＧＦ結合タンパク質関連タンパク質Ｉ；ＩＧＦＢＰ ７；ＩＧＦＢＰ ７ｖ；ＩＧＦＢＰ ｒＰｌ；ＩＧＦＢＰ７；ＩＧＦＢＰＲＰｌ；インスリン様増殖因子結合タンパク質７；インスリン様増殖因子結合タンパク質７前駆体；ＭＡＣ２５；ＭＡＣ２５タンパク質；ＰＧＩ２刺激因子；およびＰＳＦまたはプロスタサイクリン刺激因子とも呼ばれている。ノーザンブロット試験により、この遺伝子は心臓、脳、胎盤、肝臓、骨格筋、および膵臓を含めたヒトの組織に広く発現することが明らかになった(Oh, Y., et al., J. Biol. Chem. 271 (1996) 30322-30325)。
ＩＧＦＢＰ７は、最初は、正常な軟膜細胞および乳房上皮細胞にそれらの対応する腫瘍細胞と比較して差示発現する遺伝子として同定され、髄膜腫関連ｃＤＮＡ（ＭＡＣ２５）と命名された(Burger, A.M., et al, Oncogene 16 (1998) 2459-2467)。発現したタンパ
ク質は、腫瘍由来接着因子（のちにアンギオモジュリンと改名された）(Sprenger, C.C.,
et al., Cancer Res 59 (1999) 2370-2375)およびプロスタサイクリン刺激因子(Akaogi,
., et al., Proc Natl Acad Sci USA 93 (1996) 8384-8389)として独立して精製された
。それはさらにＴ１Ａ１２、すなわち乳癌においてダウンレギュレートされる遺伝子として報告された(StCroix, B., et al., Science 289 (2000) 1197-1202)。
ＩＧＦＢＰ７の生物学的役割はまだ明瞭には確立していない。予備実験データは若干の議論の余地があり、ＩＧＦＢＰ７の多様な作用、たとえば腫瘍抑制(Sprenger, C.C., et al.. Cancer Res 59 (1999) 2370-2375)、腫瘍増殖促進(Lopez-Bermejo, A., et al., J.
Clinical Endocrinology and Metabolism 88 (2003) 3401 -3408)、プロスタサイクリンの刺激(Akaogi, K., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93 (1996) 8384-8389)、ならびに血管形成(Yamauchi, T., et al., Biochem J. 303 (1994) 591-598)および老化(Lopez-Bermejo, A., et al., Endocrinology 141 (2000) 4072-4080)における関与に関係づけられている。
ＩＧＦＢＰ７ ｍＲＮＡの差示発現が、心疾患、腎疾患、炎症性疾患(US 6,709,855, Scios Inc.)および人工血管疾患(US 2006/0,003,338)を含めたさまざまな疾患に罹患して
いる患者において測定された。
ＩＧＦＢＰ７のホルモン結合特性について多種多様なアッセイ法が記載され、それを試験するために使用されている。低親和性ＩＧＦ結合が、競合アフィニティー架橋アッセイ法により分析された。組換えヒトｍａｃ２５タンパク質はＩＧＦ−Ｉおよび−ＩＩを特異的に結合する(Oh, Y., et al., J. Biol. Chem. 271 (1996) 20322-20325; Kim, H.S., et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA94 (1997) 12981-12986.)。ＩＧＦＢＰ活性はそのタ
ンパク質が放射性標識ＩＧＦに結合する能力をウェスタンブロット法で測定することによっても検出できる。
循環ＩＧＦＢＰ７の免疫学的測定が最近実施された。低レベルのこの被分析体がランダムにヒト血清中に検出され、インスリン抵抗性に関連して高い血清レベルがみられた(Lopez-Bermejo, A., et al., J. Clinical Endocrinology and Metabolism 88 (2003) 3401-3408, Lopez-Bermejo, A., et al., Diabetes 55 (2006) 2333-2339)。
本発明のこの態様において本明細書中で用いる用語“基準量”または“基準値”は、ＡＣＣ／ＡＨＡ、クラスＡに分類された各個体が、一般に心不全に先立つ心疾患を発症して
いるか、あるいは一般に心不全に先立つ心疾患を発症しようとしているかを診断できる、ポリペプチドの量を表わす。
したがって、基準量は一般的に、一般に心不全に先立つ心疾患を発症していることおよび／または一般に心不全に先立つ心疾患を発症しようとしていることが分かっている対象に由来するであろう。本発明のある態様において、対象は、ＡＣＣ／ＡＨＡ、クラスＡに分類される。
“．．．の濃度を対照試料において確立された濃度と比較する”という表現は、いずれにしろ当業者に自明なものを、さらに説明するために用いられるにすぎない。対照試料は、内部または外部対照試料であってよい。１態様において、内部対照試料を用いる；すなわち、被験試料および同じ対象から採取した１以上の他の試料においてマーカーレベル（単数または複数）を評価して、そのマーカーのレベル（単数または複数）に何らかの変化があるかどうかを判定する。他の態様においては、外部対照試料を用いる。外部対照試料については、その個体に由来する試料中のあるマーカーの存在または濃度を、ある状態に罹患していることが分かっているかまたはそのリスクをもつことが分かっている個体；あるいはある状態をもたないことが分かっている個体、すなわち“正常な個体”におけるそれの存在または濃度と比較する。たとえば、患者試料におけるあるマーカーのレベルをＨＦの特定の疾病経過と関連することが分かっているレベルと比較することができる。通常、試料のマーカーレベルは診断と直接または間接的に相関し、そのマーカーレベルは、たとえばある個体がＨＦのリスクをもつかどうかを判定するために用いられる。あるいは、下記のために、試料のマーカーレベルを、たとえば心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常に罹患している患者の療法に対する応答に関連することが分かっているマーカーレベルと比較することができる；心不全、ならびに心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を発症するリスク因子の鑑別診断；心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の、特に初期の異常を処置するのに適切な薬物を選択するためのガイダンス；疾患進行のリスクの判定；あるいは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常をもつ患者の追跡。意図する診断用途に応じて、適切な対照試料を選択し、それにおいてそのマーカーについての対照値または基準値を確立する。１態様において、そのような対照試料は年齢が一致しかつ混乱させる疾患をもたない基準集団から得られることは、当業者に認識されるであろう。同様に当業者に自明のとおり、対照試料において確立される絶対マーカー値は使用するアッセイ法に依存するであろう。好ましくは、適切な基準集団からの十分に特性解明された１００の個体からの試料を用いて対照（基準）値を確立する。同様に好ましくは、２０、３０、５０、２００、５００または１０００の個体からなるように基準集団を選択できる。健康な個体は対照値を確立するために好ましい集団である。
ある個体に由来する試料から測定した心臓性トロポニンまたはそのバリアントについて増大した数値は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を示し、ある個体に由来する試料から測定したＧＤＦ−１５またはそのバリアントおよびＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの増大した数値は、心不全の指標となる。対照グループまたは対照集団において測定した心臓性トロポニンまたはそのバリアント、ＧＤＦ−１５またはそのバリアント、およびＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントについての数値を用いて、たとえばカットオフ値または基準範囲を確立する。そのようなカットオフ量を超える量または基準範囲およびそれの高い方の端の外側の量を、増加しているとみなす。
１態様において、固定されたカットオフ値を確立する。そのようなカットオフ値は目的とする診断質問に適合するように選択される。
１態様において、対照グループまたは対照集団において測定した心臓性トロポニンまたはそのバリアント、ＧＤＦ−１５またはそのバリアント、およびＩＧＦＢＰ７またはその
バリアントについての数値を用いて、基準範囲を確立する。好ましい態様において、測定値が基準範囲の９０％百分位数を超えれば、心臓性トロポニンまたはそのバリアント、ＧＤＦ−１５またはそのバリアント、およびＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの濃度を、増大しているとみなす。他の好ましい態様において、測定値が基準範囲の９５％百分位数、９６％百分位数、９７％百分位数または９９％百分位数を超えれば、心臓性トロポニンまたはそのバリアント、ＧＤＦ−１５またはそのバリアント、およびＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの濃度を、増大しているとみなす。
１態様において、対照試料は内部対照試料であろう。この態様においては、被験個体から系列試料を入手してマーカーレベルを比較する。これは、たとえば療法の有効性を評価するのに有用な可能性がある。
診断および／または予後試験の感度および特異度は、その試験法の分析の“質”だけでなく、異常な結果を構成するものの定義にも依存する。実際に、受信者動作特性(Receiver Operating Characteristic)曲線、または“ＲＯＣ”曲線は、一般に“正常”集団およ
び“疾病”集団において、可変値をそれの相対頻度に対してプロットすることにより計算される。本発明のいずれか特定のマーカーについて、疾患をもつ対象およびもたない対象のマーカーレベルの分布はオーバーラップする可能性があるであろう。そのような状況では、ある検査が正常を疾患から１００％の精度で絶対的に鑑別することはなく、オーバーラップの面積はその検査が正常を疾患から鑑別できない領域を示す。それより上では（または、その疾患に伴ってマーカーがどのように変化するかに応じて、それより下では）その検査値が異常とみなされ、それより下ではその検査値が正常とみなされる、閾値を選択する。ＲＯＣ曲線下面積は、その検知された測定値がある状態を正確に同定できる確率の尺度である。検査結果が必ずしも厳密な数値を与えない場合ですら、ＲＯＣ曲線を使用できる。結果をランク付けできる限り、ＲＯＣ曲線を作成できる。たとえば、“疾病”試料についての検査結果を程度に従ってランク付けできる（たとえば、１＝低、２＝正常、および３＝高）。このランク付けを“正常”集団における結果と相関させて、ＲＯＣ曲線を作成することができる。これらの方法は当技術分野で周知である。たとえば、Hanley et al, Radiology 143: 29-36 (1982)を参照。
特定の態様において、マーカーおよび／またはマーカーパネルは、少なくとも約７０％の感度、より好ましくは少なくとも約８０％の感度、よりさらに好ましくは少なくとも約８５％の感度、よりさらに好ましくは少なくとも約９０％の感度、最も好ましくは少なくとも約９５％の感度を、少なくとも約７０％の特異度、より好ましくは少なくとも約８０％の特異度、よりさらに好ましくは少なくとも約８５％の特異度、よりさらに好ましくは少なくとも約９０％の特異度、最も好ましくは少なくとも約９５％の特異度と合わせて示すように選択される。特に好ましい態様において、感度および特異度の両方が少なくとも約７５％、よりさらに好ましくは少なくとも約８０％、よりさらに好ましくは少なくとも約８５％、よりさらに好ましくは少なくとも約９０％、最も好ましくは少なくとも約９５％である。これに関して、用語“約”はその測定値の±５％を表わす。
他の態様において、正の尤度比、負の尤度比、オッズ比、またはハザード比を、ある検査がリスクを予測する能力または疾患を診断する能力の尺度として用いる。正の尤度比の場合、１の数値は正の結果が“罹患”グループと“対照”グループの両方の対象間で同等な可能性をもつことを示す；１より大きい数値は、正の結果が罹患グループにおいてより可能性が高いことを示す；１未満の数値は正の結果が対照グループにおいてより可能性が高いことを示す。負の尤度比の場合、１の数値は負の結果が“罹患”グループと“対照”グループの両方の対象間で同等な可能性をもつことを示す；１より大きい数値は、負の結果が被験グループにおいてより可能性が高いことを示す；１未満の数値は負の結果が対照グループにおいてより可能性が高いことを示す。特定の好ましい態様において、マーカー
および／またはマーカーパネルは、好ましくは少なくとも約１．５以上または約０．６７未満、より好ましくは少なくとも約２以上または約０．５未満、よりさらに好ましくは少なくとも約５以上または約０．２未満、よりさらに好ましくは少なくとも約１０以上または約０．１未満、最も好ましくは少なくとも約２０以上または約０．０５未満の正または負の尤度比を示すように選択される。これに関して、用語“約”はその測定値の±５％を表わす。
オッズ比の場合、１の数値は正の結果が“罹患”グループと“対照”グループの両方の対象間で同等な可能性をもつことを示す；１より大きい数値は、正の結果が罹患グループにおいてより可能性が高いことを示す；１未満の数値は正の結果が対照グループにおいてより可能性が高いことを示す。特定の好ましい態様において、マーカーおよび／またはマーカーパネルは、好ましくは少なくとも約２以上または約０．５未満、より好ましくは少なくとも約３以上または約０．３３未満、よりさらに好ましくは少なくとも約４以上または約０．２５未満、よりさらに好ましくは少なくとも約５以上または約０．２未満、最も好ましくは少なくとも約１０以上または約０．１未満のオッズ比を示すように選択される。これに関して、用語“約”はその測定値の±５％を表わす。
ハザード比の場合、１の数値はエンドポイント（たとえば、死亡）の相対リスクが“罹患”グループと“対照”グループの両方の対象間で同等な可能性をもつことを示す；１より大きい数値は、そのリスクが罹患グループにおいてより可能性が高いことを示す；１未満の数値はそのリスクが対照グループにおいてより可能性が高いことを示す。特定の好ましい態様において、マーカーおよび／またはマーカーパネルは、好ましくは少なくとも約１．１以上または約０．９１未満、より好ましくは少なくとも約１．２５以上または約０．８未満、よりさらに好ましくは少なくとも約１．５以上または約０．６７未満、よりさらに好ましくは少なくとも約２以上または約０．５未満、最も好ましくは少なくとも約２．５以上または約０．４未満のハザード比を示すように選択される。これに関して、用語“約”はその測定値の±５％を表わす。
例示パネルを本明細書に記載したが、臨床的に有用な結果が得られる状態でこれらの例示パネルから１以上のマーカーを置き換え、追加または削除してもよい。パネルは、疾患の特異的マーカー（たとえば、細菌感染に際して増加または減少するが、他の疾患状態では増減しない）および／または非特異的マーカー（たとえば、原因に関係なく炎症のため増加または減少するマーカー；原因に関係なく血流遮断状態の変化のため増加または減少するマーカーなど）の両方を含むことができる。本明細書に記載する方法においてあるマーカーが個々には決定的ではない場合があるが、変化の特定の“フィンガープリント”パターンが疾患状態の特異的指標として実際に作用する可能性がある。前記に考察したように、その変化のパターンは単一試料から得ることができ、あるいは場合によりパネルの１以上のメンバーの一時的変化（またはパネル応答値の一時的変化）を考慮することができる。
個体が健康であるか、またはある病態生理学的状態に罹患しているかの診断は、当業者に既知の確立された方法により行なわれる。それらの方法は、個体の病態生理学的状態に関連して異なる。
目的とする診断を確立するためのアルゴリズムを、本明細書中で、参照した各態様について述べる節に示す。
したがって、本発明には、生理学的状態および／または病理学的状態および／または特定の病理学的状態の指標となる閾値レベルを決定する方法であって、データを収集し、それらのデータを統計的方法により分析して閾値レベルを確立する段階を含む方法も含まれる。
本発明において、適切なマーカーは、心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントまたはトロポニンＩもしくはそのバリアント、特にトロポニンＴまたはそのバリアント；ならびに場合によりＧＤＦ−１５またはそのバリアントおよびＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントから選択される少なくとも１種類の他のマーカーである。
本発明はまた、前記の段階に基づいて、前記に述べた対象の療法を決定する方法に関する。したがって、本発明の方法により、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う対象、あるいは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を発症しようとしている対象（この場合、対象はＡＣＣ／ＡＨＡ、病期Ａに分類される）が受けるべき介入の種類または医薬もしくは医薬類を決定することができる。処置は、そのような心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を処置し、あるいは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常がそれ以上悪化するのを阻止するのを目的とすることができる。
処置の決定
したがって、本発明は、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントおよび場合により１種類以上の他の心不全マーカーの濃度と、対照試料におけるこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度との比較に基づいて、対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の処置を決定する方法に関する。
本発明のこの方法は、下記の段階を含むことができる：ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そしてｃ）こうして測定した濃度を基準量、たとえば対照試料において確立したこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度と比較する。
好ましくは、療法の決定は測定した濃度を基準量と比較することにより行なわれる。
したがって本発明は、対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の処置を決定する方法を提供し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）こうして測定した濃度を基準量と比較することにより、対象の処置を決定する。
好ましくは、処置を決定する前に、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常を対象がもつかどうかを診断する。
一般に、対象は心不全に罹患しておらず、すなわち対象はその心筋に対する永久的な構造または機能の損傷を受けていない。好ましくは、対象は左心室肥大を規定するために用いられる基準未満の左心室質量指数をもつ。好ましくは、対象は心不全のリスク因子を保有する。これらは当業者に既知であり、たとえば高血圧症および糖尿病を含む。同様に好ましくは、対象は心不全の顕性の徴候および／または症状を示していない。
対象は、一般に本発明の方法を実施する前にＡＣＣ／ＡＨＡ、病期Ａに分類されている。
対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴うか、あるいは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を発症しようとしている（この場合、対象はＡＣＣ／ＡＨＡ、病期Ａに分類される）かを診断する方法は当業者に知られている。こ
の診断は一般に経費が高く、時間がかかり、医療の手腕および経験を必要とする。したがって、機能および／または構造の初期の異常は診断されないままであることがしばしばある。評価の方法は当業者に既知であり、一般に病歴を基礎とし、評価にはさらに診断装置／器具を用いる検査（心臓聴診、ＥＣＧ、心エコー検査、胸部Ｘ線撮影、放射性核種イメージング、心室造影、ＣＴスキャン、ＭＲＩおよび／または負荷試験、冠血管造影、超音波検査、冠動脈カテーテル導入）が含まれる。原因を判定するために必要に応じて他の試験を実施できる。ＬＶＨおよび／または心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を検出するための感度には限界があるので、前記方法はやむを得ず適用される。処置は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の個々のタイプおよび重症度に依存する。ＬＶＨおよび／またはＨＦに進行する前に、あるいは他の主合併症の前に、適切な予防処置を開始できる。動脈性高血圧症または糖尿病を伴う対象において最初の構造異常が診断された結果、急速にＬＶＨにまで進行する可能性のあるこれらの患者にはより集中的な薬物療法または薬物療法の適応およびより集中的なモニタリングが必要である。
好ましい態様において、本発明は、心不全に先立つ、特にＬＶＨに先立つ、心臓の機能および／または構造の初期の異常の診断結果に、療法を適応させる方法を提供する。療法の結果は、利尿薬およびカルシウムアンタゴニストに対比して、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、アンギオテンシン−ＩＩ−受容体遮断薬（ＡＲＢ）、アルドステロンアンタゴニスト、ベータ遮断薬を優先した抗高血圧症薬物療法の変更である。したがって、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常が診断されれば、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、アンギオテンシン−ＩＩ−受容体遮断薬（ＡＲＢ）、および／またはアルドステロンアンタゴニストの投与が優先して推奨される。
本発明の他の態様において、前記に示した補足的／補助的方法を、前記段階に基づいて前記に述べた対象の処置を決定する方法に使用できる。これらの方法は本明細書中で後記にさらに説明され、その対象に採用すべき医薬もしくは医薬類、またはその対象が受けるべき他の療法を決定することができる。
本発明はまた、心不全を発症するリスク因子を保有するけれども心不全の顕性徴候を示していない対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の初期の異常の処置を決定するための、心臓性トロポニンおよびそのバリアント、ならびに場合によりＧＤＦ−１５またはそのバリアントおよびＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントから選択される少なくとも１種類のマーカーの使用を包含する。
本発明のある態様において、心臓性トロポニンはトロポニンＴまたはそのバリアントおよびトロポニンＩまたはそのバリアントから選択され、特に心臓性トロポニンはトロポニンＴまたはそのバリアントである。本発明の１態様において、下記のマーカーを合わせて測定する：心臓性トロポニンはトロポニンＴまたはそのバリアントおよびトロポニンＩまたはそのバリアントから選択され、特に心臓性トロポニンはトロポニンＴまたはそのバリアントである；ＧＤＦ−１５またはそのバリアント；およびＩＧＦＢＰ７またはそのバリアント。
本明細書中で用いる用語“決定する”は、本発明による検査を受けた対象に特定の薬物療法または処置を施すべきかどうかを評価することを意味する。
療法、処置
本発明に関して用いる用語“療法”は、本発明による対象の処置のための、ライフスタイルの変更、食事療法計画、身体への介入、および適切な薬物の投与を包含する。対象は、左心室肥大に先立つ、および／または心不全に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常を伴うか、あるいは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を発症しようとしており、対象は好ましくはＡＣＣ／ＡＨＡ、病期Ａに分類される。より好ましく
は、対象は動脈性高血圧症、収縮期および／または拡張期高血圧症、肥満症、メタボリックシンドローム、および／または糖尿病（好ましくは、２型糖尿病）を伴う。さらに他の好ましい態様において、個体はEuropean Society of Hypertensionのリスクチャートに従った低い、中等度、高い、またはきわめて高いリスクを伴う。
心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の処置に適切な医薬は、当技術分野で周知である；たとえばHeart Disease, 2008, 8th Edition, Eds. Braunwald, Elsevier Sounders, chapter 24 (心不全に関して)およびchapter 41 (高血圧症に関して)を参
照。これらの処置は本発明の一部である。好ましくは、そのような医薬の投与は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の症状および徴候が発現したものを処置することを目的とし、かつ心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常のそれ以上の進行、および／または心不全の発症を阻止することを目的とする。したがって、左心室肥大および／または心不全および／または左心室機能不全に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常、ならびに／あるいは心不全を処置することを目的とする医薬も考慮される。
ライフスタイルの変更には、禁煙、アルコール摂取の低減、身体活動の増大、減量、ナトリウム（食塩）制限、体重管理、および健全な食事、魚油の常用、食塩制限が含まれる。
療法には介入も含めることができる。本発明に関して好ましい介入のひとつは、利尿薬およびカルシウムアンタゴニストに対比して、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、アンギオテンシン−ＩＩ−受容体遮断薬（ＡＲＢ）、アルドステロンアンタゴニスト、ベータ遮断薬を優先した抗高血圧症薬の投与である。好ましい態様において、本発明は、心不全に先立つ、および／または特にＬＶＨにすら先立つ、心臓の機能および／または構造の初期の異常の診断結果に、療法を適応させる方法を提供する。療法の結果は、利尿薬およびカルシウムアンタゴニストに対比して、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、アンギオテンシン−ＩＩ−受容体遮断薬（ＡＲＢ）、アルドステロンアンタゴニスト、ベータ遮断薬を優先した抗高血圧症薬物療法の変更である。
心臓性トロポニンまたはそのバリアント、特にトロポニンＴまたはそのバリアントのレベルにより、その対象が、左心室肥大に先立つ、および／または心不全に先立つ、心臓の機能および／または構造の異常をもつことが示された場合、下記の薬物のうち１種類以上を投与すべきである：
利尿薬、たとえばループ利尿薬、チアジドおよびチアジド様利尿薬、カリウム保持性利尿薬、Ｉ型ミネラルコルチコイド受容体アンタゴニスト、アルドステロン、炭酸アンヒドラーゼ阻害薬、バソプレシンアンタゴニスト；
ベータ遮断薬、たとえばプロプレノロール(proprenolol）、メトプロロール（metoprolol）、ビソプロロール（bisoprolol）、カルベジロール（carvedilol）、ブシンドロール（bucindolol）、ネビボロール（nebivolol)；
カルシウムアンタゴニスト、たとえばジヒドロピリミジン類、ベラパミル(verapamil）、ジルチアゼム（diltiazem)；
アドレナリンアゴニスト、たとえばドブタミン(dobutamine）、ドーパミン（dopamine
）、エピネフリン（epinephrine）、イソプロテレノール（isoprotenerol）、ノルエピネフリン（norepinephrine）、フェニレフリン（phenylephrine)；
正の変力作用剤、たとえばジゴキシン(digoxin）、ジギトキシン（digitoxin)；
ＡＣＥ阻害薬、たとえばエナラプリル(Enalapril）、カプトプリル（Captopril）、ラ
ミプリル（Ramipril）、トランドラプリル（Trandolapril)；
アンギオテンシン受容体アンタゴニスト、たとえばロサルタン(Losartan）、バルサル
タン（Valsartan）、イルベサルタン（Irbesartan）、カンデサルタン（Candesartan）、
テルミサルタン（Telmisartan）、エプロサルタン（Eprosartan)；
アルドステロンアンタゴニスト、たとえばエプレロン(Eplerone）、スピロノラクトン
（Spironolactone）、カンレノン（Canrenone）、メキシレノン（Mexrenone）、プロレノン（Prorenone)；
スタチン類、特にアトルバスタチン(Atorvastatin）、フルバスタチン（Fluvastatin）、ロバスタチン（Lovastatin）、プラバスタチン（Pravastatin）、ロスバスタチン（Rosuvastatin）、シンバスタチン（Simvastatin)；
ヒダザリン(Hydazaline)および二硝酸イソソルビド(isosorbide dinitrate)。
心臓性トロポニンまたはそのバリアント、特にトロポニンＴまたはそのバリアントのレベルにより、その対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴うこと（初期の病期Ｂ）、より好ましくはＬＶＨを示さないこと、よりさらに好ましくはＬＶＨを伴わない拡張期機能不全を示さないことが示された場合、下記の薬物のうち１種類以上を投与すべきである：
ベータ遮断薬、たとえばプロプレノロール、メトプロロール、ビソプロロール、カルベジロール、ブシンドロール、ネビボロール；
アドレナリンアゴニスト、たとえばドブタミン、ドーパミン、エピネフリン、イソプロテレノール、ノルエピネフリン、フェニレフリン；
アルドステロンアンタゴニスト、たとえばエプレロン、スピロノラクトン、カンレノン、メキシレノン、プロレノン；
好ましい療法薬には下記のものが含まれる：
ＡＣＥ阻害薬、たとえばエナラプリル、カプトプリル、ラミプリル、トランドラプリル；
アンギオテンシン受容体アンタゴニスト、たとえばロサルタン、バルサルタン、イルベサルタン、カンデサルタン、テルミサルタン、エプロサルタン。
処置のモニタリング
さらに、本発明は、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの反復測定した濃度、ならびに場合により１種類以上の他の心不全マーカーの反復測定した濃度と、対照試料におけるこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度との比較に基づいて、対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の処置をモニタリングする方法を提供する。
本発明のこの方法は、下記の段階を含むことができる：ａ）少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を、特定した時間間隔内で反復測定する；ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を反復測定する；ｃ）段階ａ）で測定したそれらのマーカーの濃度を対照試料におけるそれの濃度と比較する；そしてｄ）上記に引用した１種類以上のマーカーにおいて測定した濃度の差に基づいて、その対象がその病態生理学的状態に変化を生じたかどうかを評価する。
好ましくは、評価は、こうして測定した、段階ａ）および場合により段階ｂ）で測定したそれらのマーカーの濃度を、対照試料におけるそれの濃度と比較することにより実施される。
したがって本発明は、対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の処置をモニタリングする方法を提供し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）こうして測定した、段階ａ）で測定したそれらのマーカーの濃度を、対照試料にお
けるそれの濃度と比較することにより、その対象がその病態生理学的状態に変化を生じたかどうかを評価する。
本発明の好ましい態様において、心臓性トロポニンおよび場合により１種類以上の他の心不全マーカーの測定は、反復して、すなわち少なくとも２回、好ましくは特定した時間間隔（単数または複数）内で実施される。
一般に、対象は心不全に罹患しておらず、すなわち対象はその心筋に対する永久的な構造または機能の損傷を受けていない。好ましくは、対象は心不全のリスク因子を保有する。これらは当業者に既知であり、たとえば高血圧症および糖尿病を含む。同様に好ましくは、対象は心不全の顕性の徴候および／または症状を示していない。
段階ｂ）に示した濃度は、本明細書中で予め療法決定に関して引用した濃度であってもよく、またはその療法を開始する前に測定した濃度、あるいは両方であってもよい。
一般に、本発明の好ましい態様において、本発明のモニタリング方法を実施する前に、左心室肥大の療法を決定する方法を実施する。
療法の適応
他の態様において、本発明は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常が診断された対象において、特にＬＶＨが顕性ではない時点で、心不全のリスクの予測結果に療法を適応させる方法を提供する。心不全のリスクがある場合、療法の結果は、利尿薬およびカルシウムアンタゴニストに対比して、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、アンギオテンシン−ＩＩ−受容体遮断薬（ＡＲＢ）、アルドステロンアンタゴニスト、ベータ遮断薬を優先した抗高血圧症薬物療法の変更である。本発明のこの方法は、左心室肥大および／または心不全に先立つ構造変化が診断された結果として病期Ａおよび／または初期の病期ＢのＨＦを伴う対象の抗高血圧症療法を、利尿薬およびカルシウムアンタゴニストに対比して、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、アンギオテンシン−ＩＩ−受容体遮断薬（ＡＲＢ）、アルドステロンアンタゴニスト、ベータ遮断薬を優先したものに適応させることを提供する。有利には、左心室肥大および／または心不全にまでさらに進行するのを阻止できる。
心臓性トロポニンまたはそのバリアント、ならびに場合によりＧＤＦ−１５もしくはそのバリアントまたはＩＧＦＢＰ７もしくはそのバリアント、あるいは本明細書中に述べた他のいずれかのペプチドまたはポリペプチドの濃度の測定は、濃度または濃度を好ましくは半定量的または定量的に測定することに関する。測定は、直接または間接的に実施できる。直接測定は、ペプチドまたはポリペプチド自体から得られる信号であってその強度が試料中に存在するペプチドの分子数に直接的に相関する信号に基づいて、ペプチドまたはポリペプチドの濃度または濃度を測定することに関する。そのような信号−本明細書中で時には強度信号と呼ぶ−は、たとえばペプチドまたはポリペプチドの特異的な物理的または化学的特性の強度値を測定することにより得ることができる。間接測定には、二次成分（すなわち、ペプチドまたはポリペプチド自体ではない成分）または生物学的読出し系、たとえば測定可能な細胞応答、リガンド、標識、または酵素反応生成物から得られる信号の測定が含まれる。
本発明の他の態様において、場合によっては後記の疾患の処置のために知られている他のいずれかの医薬または医薬の組合わせに加えて、ＡＣＥ阻害薬、アンギオテンシン受容体遮断薬およびアルドステロンアンタゴニスト、または前記のいずれかの組合わせから選択される医薬の投与を受けている対象における、療法モニタリングおよび療法適応の方法が提供される。本発明のこの態様に従った方法は、場合によりＡＣＥ阻害薬およびアンギオテンシン受容体遮断薬に加えて、また場合によっては心不全、ならびに／あるいは心不
全に先立つ心臓の構造および／または機能の異常の処置のために知られている他のいずれかの医薬に加えて、特にアルドステロンアンタゴニストの投与を決定することができる。
１態様において、対象は心不全を伴い、特に対象はＡＣＣ／ＡＨＡ方式の病期Ｃに分類される。他の態様において、個体は心不全に先立つ心臓の構造および／または機能の異常を伴う。
技術水準によれば、現在は、心不全のリスクをもつ患者をＡＣＥ阻害薬およびアンギオテンシン受容体遮断薬で処置することが推奨されている。これには、ＡＣＣ／ＡＨＡ指針に従って病期ＡおよびＢに分類された患者が含まれる。
病期Ｃ（これは、以前または現在の心不全の症状をもつ構造性心疾患を伴う患者を含む）から開始する利尿薬が推奨され、これにはＡＣＣ／ＡＨＡ指針に従って選択された患者におけるアルドステロンアンタゴニストが含まれる。選択された患者には、中等度ないし重度の心不全および最近の代償障害の証拠を伴う者が含まれる（ＡＣＣ／ＡＨＡ指針を参照）。
ＡＣＥ阻害薬およびアンギオテンシン受容体遮断薬の効果は機能多型性により影響されることが認識されている(参照：McNamara, Heart Failure Clin 6 (2010), p 35-43, 特
に表1)。ＡＣＥ阻害薬に対するアルドステロン回避(aldosterone escape)の優勢はＡＣＥ
ＤＤ表現型で最大であることが示され(Mc Namara et al, p. 39)、これはアルドステロンアンタゴニストの使用の妥当性を支持する。
心臓組織におけるコラーゲン形成に先立って炎症が起きる。レニン−アンギオテンシン−アルドステロン（ＲＡＡＳ）系の活性化により心不全患者に炎症が存在することは知られており、これは心不全におけるアルドステロンアンタゴニストの使用を支持する。アルドステロンアンタゴニストであるエプレロンが、ＰＩＩＩＮＰレベルにより示されるように心不全患者のコラーゲン形成を低下させることが、以前に示された(参照：G. Mak et al, JACC vol 54, no 18, 2009, p 1674-1682, 特に図2)。これは、ＮＹＨＡクラスＩＩ患者におけるアルドステロンアンタゴニストの使用を調べるために現在行なわれている研究によってさらに支持される(Mc Murray NEJM 362, 228 - 238, 2010, 特にp 236, “Areas
of uncertainty”)。ただし、これはアルドステロンが心臓におけるコラーゲン合成を促進し、適応不良な心臓リモデリングを促進することを指摘した最近の総説と一致する(KIM
Y.S., Current Treatment Options in Cardiovascular Medicine 11, 455 - 466, 2009,
特にp. 462, “ARAs”)。
本発明者らは、心臓性トロポニンおよびそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントまたはトロポニンＩもしくはそのバリアント、特にトロポニンＴまたはそのバリアント、ならびにＧＤＦ−１５またはそのバリアント、ならびに場合によりＡＮＰ型およびＢＮＰ型ナトリウム利尿ペプチドおよびそのバリアントから選択されるナトリウム利尿ペプチド、好ましくはＢＮＰもしくはそのバリアントまたはＮＴ−ｐｒｏＢＮＰもしくはそのバリアント、特にＮＴ−ｐｒｏＢＮＰまたはそのバリアントが、前記対象の処置の有効性に関する情報を与えることを見出した。一方で、これらの対象は心不全を伴う者であり、特にＡＣＣ／ＡＨＡ方式の病期Ｃに分類される。他方で、これらの対象は心不全に罹患するリスク因子をもち、好ましくはＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期Ａに分類され、あるいは心不全に先立つ心臓の構造および／または機能の異常を伴い、好ましくはＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期Ｂに分類される。
特に、ＧＤＦ−１、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰおよびトロポニンＴの量を、顕性心不全を伴う患者９７人において測定した。すべての患者がベータ遮断薬およびＡＣＥ阻害薬療法を受
けており、５９人の患者はアルドステロンアンタゴニストを投与されており、３８人はアルドステロンアンタゴニストを投与されていなかった。前記マーカーの量を測定した後、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰとＧＤＦ １５の比、およびトロポニンＴとＧＤＦ−１５の比を求めた。興味深いことに、アルドステロンアンタゴニストのグループにおけるこの比はアルドステロンアンタゴニストで処置されていない患者のグループの場合より高いことが見出された。したがって、ナトリウム利尿ペプチドまたは心臓性トロポニンと合わせたＧＤＦ−１５の測定は、ＡＣＥ阻害薬、アンギオテンシン受容体アンタゴニスト、またはアルドステロンアンタゴニスト（またはその組合わせ）で処置した患者の療法適応の決定を可能にするはずである。特に、その測定は、ＡＣＥ阻害薬で処置した患者の療法適応の決定を可能にするはずである。前記の薬物療法、特にＡＣＥ阻害薬は、時には有効性が低下して炎症のレベルを増大させる。この場合、アルドステロンアンタゴニストは炎症のレベルを低下させることができるので、後記に述べるアルドステロンアンタゴニストによる療法適応は有用であろう。後記に述べる方法は、療法適応が有益な可能性がある対象を同定できる。
ＡＣＥ阻害薬およびアンギオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）は有効であることが大規模なランダム化試験で示されたが、現在は個々の患者においてこれらの薬物の有効性を診断するために利用できる方法がない。これは、腎疾患を伴う患者にこれらの薬物を適用するのと対照的である；その場合は、尿中アルブミンの減少を利用して処置の成功を評価できる。したがって、本明細書に記載する方法は、処置の不成功を診断するための方法を初めてもたらし、アルドステロン阻害薬またはアルドステロンの合成を阻害する将来の薬物を用いる処置を改善するためのガイダンスを提供する。
本発明の１態様において、本発明による対象において開始した薬物療法をモニターする（すなわち、その薬物療法が有効であるかどうかを評価する）。
本発明の他の態様において、好ましくは薬物療法のモニタリングの結果に従って、薬物療法の適応の決定を行なう。特に好ましい態様において、アルドステロンアンタゴニストの投与が適切であるかどうかを判定する。１種類以上のアルドステロンシンセターゼ阻害薬の投与も考慮される；参照：Roumen L. et al J Medical Chemistry 2010, 53 1712 - 25。
したがって、本発明はさらに、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントおよび場合により１種類以上の他の心不全マーカーの濃度と、対照試料におけるこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度との比較に基づいて、心不全を伴うか、あるいは左心室肥大に先立つ、および／または心不全に先立つ病期（心不全のリスク因子を含む）を伴う対象において開始した薬物療法をモニタリングする方法に関する。
本発明のこの方法は、下記の段階を含むことができる：ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；ｂ）その試料においてＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度を測定する；そしてｃ）こうして測定した濃度を、たとえば対照試料における基準量と比較することにより、その薬物療法をモニタリングする。
好ましくは、モニタリングは測定した濃度を基準量と比較することにより行なわれる。
したがって本発明は、心不全を伴うか、あるいは左心室肥大および／または心不全に先立つ病期（心不全のリスク因子を含む）を伴う対象が受けている薬物療法をモニタリングする方法を提供し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンもしくはそのバリアント、および／またはナトリウム利尿ペプチドもしくはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）その試料においてＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度を測定する；
ｃ）こうして測定した濃度を基準量と比較することにより薬物療法をモニタリングする。
本発明はさらに、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントおよび場合により１種類以上の他の心不全マーカーの濃度と、対照試料におけるこのマーカーまたはこれらのマーカーの濃度との比較に基づいて、心不全または心不全に先立つ病期（心不全のリスク因子を含む）を伴う対象において開始した薬物療法の適応を決定する方法に関する。
本発明のこの方法は、下記の段階を含むことができる：ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を反復測定する；ｂ）その試料においてＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度を反復測定する；そしてｃ）こうして測定した濃度を基準量と比較することにより、その薬物療法の適応を決定する。
好ましくは、適応の決定は測定した濃度を基準量と比較することにより行なわれる。
したがって本発明はまた、薬物療法を受けており、心不全または心不全に先立つ病期（心不全のリスク因子を含む）を伴う対象において、その薬物療法の適応を決定する方法を提供し、この方法は下記の段階を含む：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンもしくはそのバリアント、および／またはナトリウム利尿ペプチドもしくはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）その試料においてＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度を測定する；
ｃ）こうして測定した濃度を基準量と比較することにより薬物療法の適応を決定する。
本発明の好ましい態様において、心臓性トロポニンおよび場合により１種類以上の他の心不全マーカーの測定は、反復して、すなわち少なくとも２回、好ましくは特定した時間間隔（単数または複数）内で実施される。
用語“対象”の定義は本明細書中の他の箇所に示されている。したがって、その定義を適用する。好ましくは、薬物療法の適応を決定する方法に関する対象、および薬物療法をモニタリングする方法に関する対象（両方法ともナトリウム利尿ペプチドおよび心臓性トロポニンと合わせてＧＤＦ−１５の量を測定することに基づく）は、その方法を実施するための試料を入手する前の少なくとも２週間以内、またはより好ましくは４週間以内に、急性冠動脈症候群を示していてはならない。同様に好ましくは、対象は、その方法を実施するための試料を入手した時点で、急性炎症、特に全身性炎症応答症候群(systemic inflammatory response syndrome)（ＳＩＲＳ）を罹患していない。
好ましくは、薬物療法はＡＣＥ阻害薬、アンギオテンシン受容体遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストから選択される。特に、薬物療法はＡＣＥ阻害薬である。
これらのクラスの薬物の例は下記のものである：
ＡＣＥ阻害薬：エナラプリル、カプトプリル、ラミプリル、トランドラプリル；好ましくはエナラプリル；
アンギオテンシン受容体遮断薬：ロサルタン、バルサルタン、イルベサルタン、カンデサルタン、テルミサルタン、エプロサルタン；好ましくはロサルタン；
アルドステロンアンタゴニスト：エプレレノン(Eplerenone)、スピロノラクトン、カンレノン、メキシレノン、プロレノン；好ましくはスピロノラクトン、より好ましくはエプレレノン。
前記に述べたように、病期ＡおよびＢにおけるＡＣＥ阻害薬の推奨は炎症処置の必要性を示唆するが、多型性のため、これは必ずしもすべての症例に有効であるとは思われない。アルドステロンアンタゴニストはＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期ＡおよびＢに属する患者、好ましくはＡＣＥ阻害薬およびアンギオテンシン受容体遮断薬が有効ではない症例にも有用であると考えられる。
ＡＣＥ阻害薬およびアンギオテンシン受容体遮断薬の有効性の欠如は、本発明の方法により同定できる。これは、一方では、心不全に罹患していないけれども心不全を発症するリスク因子をもつ対象、好ましくは病期Ａに分類される対象に適用される；他方で、この方法は、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う対象、好ましくは病期Ｂに分類される対象に適用される。本発明の方法は、心臓の不可逆的な構造損傷（すなわち、心不全）を伴う対象、好ましくは病期Ｃに分類される対象にも役立つ。
本発明に関して、ＡＣＥ阻害薬、アンギオテンシン受容体遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストの群からの医薬による処置の有効性は、心臓性トロポニンおよびそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントまたはトロポニンＩもしくはそのバリアント、特にトロポニンＴまたはそのバリアントの濃度を、ＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度と合わせたものにより評価される。他の態様において、処置の有効性は、ナトリウム利尿ペプチド、好ましくはＢＮＰまたはＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、特にＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの濃度を、ＧＤＦ−１５の濃度と合わせたものにより評価される。
上記から明らかなように、対象における心臓性トロポニンの濃度の増大は、その対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴うか、あるいは既に心不全に罹患していることを示す。対象における心臓性トロポニンの濃度の増大は、その対象が冠動脈疾患に罹患していることを示す可能性もある；当業者に知られているように、この場合は心臓性トロポニンの濃度が健康な個体に対比して増大している可能性がある。
対象におけるナトリウム利尿ペプチドの濃度の増大は、その対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の異常を伴うか、あるいは既に心不全に罹患していることを示す。対象におけるナトリウム利尿ペプチドの濃度の増大は、その対象が冠動脈疾患に罹患していることを示す可能性もある；当業者に知られているように、この場合はナトリウム利尿ペプチドの濃度が健康な個体に対比して増大している可能性がある。
対象におけるＧＤＦ−１５の濃度の増大は、心不全の指標となるだけでなく、その個体の心筋に起きている炎症プロセスをも示すことも上記から明らかである。したがって、ＧＤＦ−１５の濃度が健康な個体に対比して増大してないかまたはわずかに増大しているにすぎなければ、それは心筋に起きている炎症プロセスが無いかまたは少数であることの指標となる。これに対し、対象における増大した、または著しく増大したＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度は、その個体の心筋に炎症プロセスが起きていることを示す。
当業者は、心臓性トロポニンまたはそのバリアントの各数値ならびにＧＤＦ−１５およびそのバリアントの濃度から、療法モニタリングおよび／または療法適応に必要な情報を結論することができる。たとえば、わずかに増大した（健康な個体に対比して）心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＩもしくはそのバリアントまたはトロポニンＩもしくはそのバリアント、特にトロポニンＴまたはそのバリアントの濃度を、増大した、またはさらには著しく増大したＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度と合わせると、その対象は心不全に罹患していないけれどもその心筋にかなりの数の炎症プロセスが起きていることを示し、心不全を発症する危険性およびその薬物療法が有効ではないことを指摘し、適応が推奨される（療法適応の説明については、本明細書の他の箇所を参照されたい）。したがって、増大したレベル（または著しく増大したレベル）のＧＤ
Ｆ−１５を、わずかに増大したレベルの心臓性トロポニンと合わせると、その療法、特にＡＣＥ阻害薬による療法を適応させるべきであることが示される。
他方で、著しく増大した（健康な個体に対比して）心臓性トロポニン、好ましくはトロポニンＩまたはトロポニンＩ、特にトロポニンＴ、またはそのバリアントの濃度を、ごくわずかに増大したＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度と合わせると、その対象は心不全に罹患しているけれども炎症プロセスは中等度であり、その薬物療法が有効であって適応の必要はないことが示される。したがって、著しく増大したレベルの心臓性トロポニンをわずかに増大したレベルのＧＤＦ−１５と合わせると、療法の適応は必要なく、したがってその療法を継続できることが示される。
前記に引用したマーカーの中間集合体があり、それらが医薬投与の種々の程度の有効性を示すことは当業者に自明である。
本発明のこの態様の好ましい態様において、心臓性トロポニン／ＧＤＦ １５比を求める；心臓性トロポニンは、好ましくはトロポニンＴまたはトロポニンＩ、特にトロポニンＴである。これにより、各対象の処置に関してしばしばより深い情報を得ることができる。一般に、高い心臓性トロポニン／ＧＤＦ−１５比は、しばしば炎症プロセスを抑制する適切な薬物療法の指標となる。したがって、ＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の比が高いのは、好ましくは療法適応が必要ではなく、したがってその療法を継続できることを示す。したがって、ＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の比が低いのは、その療法を適応させるべきであることを示す。
上記方法の好ましい態様において、ＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の比を求め、ＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の基準比と比較する。好ましくは、基準比は療法適応の必要がない対象、または療法を適応させるべき対象（したがって、療法適応が有益であろう対象）に由来する。
好ましくは、基準比と比較して、被験対象に由来する試料においてＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の比が高いのは、療法適応が必要ではなく、したがってその療法を継続できる（したがって、その療法を変更すべきではない）ことを示し、これに対し、基準比と比較して、被験対象に由来する試料においてＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の比が低いのは、その療法を適応させるべきであることを示す。好ましい基準比を下記に述べる。
本発明のよりさらに好ましい態様において、上記の心臓性トロポニン／ＧＤＦ １５比を、個々の濃度と合わせて用いる。
一般に、≧（等しいか、またはより高い）約０．０１、好ましくは約０．０１７のトロポニンＴ／ＧＤＦ−１５比は、その薬物療法が適切であって変更すべきではないことの指標となる。これに対し、＜（より低い）約０．０１、好ましくは約０．００５のトロポニンＴ／ＧＤＦ−１５比は、その薬物療法が適切ではなく適応させるべきであることの指標となる。
本発明の他の態様において、ナトリウム利尿ペプチド／ＧＤＦ １５比を求める。ナトリウム利尿ペプチドは、好ましくはＢＮＰ型またはＡＮＰ型ナトリウム利尿ペプチド、よりさらに好ましくはＢＮＰまたはＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、特にＮＴ−ｐｒｏＢＮＰである。
上記方法の他の好ましい態様において、ＧＤＦ−１５の量に対するナトリウム利尿ペプチドの量の比を求め、ＧＤＦ−１５の量に対するナトリウム利尿ペプチドの量の基準比と比較する。好ましくは、基準比は療法適応の必要がない対象、または療法を適応させるべき対象（したがって、療法適応が有益であろう対象）に由来する。
好ましくは、基準比と比較して、被験対象に由来する試料におけるＧＤＦ−１５の量に対するナトリウム利尿ペプチドの量の比が高いのは、療法適応が必要ではなく、したがってその療法を継続できる（したがって、その療法を変更すべきではない）ことを示し、これに対し、基準比と比較して、被験対象に由来する試料におけるＧＤＦ−１５の量に対するナトリウム利尿ペプチドの量の比が低いのは、その療法を適応させるべきであることを示す。好ましい基準比を下記に述べる。
一般に、≧（等しいか、またはより高い）約０．８、好ましくは約１．９のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ／ＧＤＦ−１５比は、その薬物療法が適切であって変更すべきではないことの指標となる。これに対し、＜（より低い）約０．７、好ましくは約０．４のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ／ＧＤＦ−１５比は、その薬物療法が適切ではなく適応させるべきであることの指標となる。
薬物療法を受けており、かつ心不全または心不全に先立つ病期（心不全のリスク因子を含む）に罹患している対象においてその薬物療法をモニタリングする方法に関して、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、心臓性トロポニン／ＧＤＦ １５比を求める；心臓性トロポニンは、好ましくはトロポニンＴまたはトロポニンＩ、特にトロポニンＴである。これにより、各対象の処置に関してしばしばより深い情報を得ることができる。一般に、高い心臓性トロポニン／ＧＤＦ−１５比は、しばしば炎症プロセスを抑制する適切な薬物療法の指標となる。したがって、ＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の比が高いのは、好ましくはその療法が適切であり、したがってその療法を継続できることを示す。したがって、ＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の比が低いのは、その療法が適切ではないことを示す。
上記方法の好ましい態様において、ＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の比を求め、ＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の基準比と比較する。好ましくは、基準比は療法が適切である対象、または療法が適切ではない対象に由来する。
好ましくは、基準比と比較して、被験対象に由来する試料におけるＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の比が高いのは、その療法が適切である（したがって、その療法を変更すべきではない）ことを示し、これに対し、基準比と比較して、被験対象に由来する試料におけるＧＤＦ−１５の量に対する心臓性トロポニンの量の比が低いのは、その療法が適切ではないことを示す。好ましい基準比を下記に述べる。
本発明のよりさらに好ましい態様において、上記の心臓性トロポニン／ＧＤＦ １５比を、個々の濃度と合わせて用いる。
一般に、≧（等しいか、またはより高い）約０．０１、好ましくは約０．０１７のトロポニンＴ／ＧＤＦ−１５比は、その薬物療法が適切であることの指標となる。これに対し、＜（より低い）約０．０１、好ましくは約０．００５のトロポニンＴ／ＧＤＦ−１５比は、その薬物療法が適切ではないことの指標となる。
本発明の他の態様において、ナトリウム利尿ペプチド／ＧＤＦ １５比を求める。ナトリウム利尿ペプチドは、好ましくはＢＮＰ型またはＡＮＰ型ナトリウム利尿ペプチド、よりさらに好ましくはＢＮＰまたはＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、特にＮＴ−ｐｒｏＢＮＰである。
上記方法の好ましい態様において、ＧＤＦ−１５の量に対するナトリウム利尿ペプチドの量の比を求め、ＧＤＦ−１５の量に対するナトリウム利尿ペプチドの量の基準比と比較する。好ましくは、基準比は療法が適切である対象、または療法が適切ではない対象に由
来する。
好ましくは、基準比と比較して、被験対象に由来する試料におけるＧＤＦ−１５の量に対するナトリウム利尿ペプチドの量の比が高いのは、療法適応が適切であることを示し、これに対し、基準比と比較して、被験対象に由来する試料におけるＧＤＦ−１５の量に対するナトリウム利尿ペプチドの量の比が低いのは、その療法が適切ではないことを示す。好ましい基準比を下記に述べる。
一般に、約０．８、好ましくは約１．９と等しいか、またはそれより高いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ／ＧＤＦ−１５比は、その薬物療法が適切であることの指標となる。これに対し、＜（より低い）約０．７、好ましくは約０．４のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ／ＧＤＦ−１５比は、その薬物療法が適切ではないことの指標となる。
本発明の対象（心不全に罹患しており、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期Ｃに分類される；あるいは心不全のリスク因子をもつか、あるいは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴い、好ましくはＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期ＡまたはＢに分類される）は既に上記状態の処置、一般にＡＣＥ阻害薬、アンギオテンシン受容体遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストから選択される薬物療法を受けていると理解すべきである。よりさらに好ましい態様において、対象はアルドステロンアンタゴニストの投与を受けていない。
薬物療法の適応の決定に際して、好ましい態様はアルドステロンアンタゴニストの投与の決定、またはアルドステロンアンタゴニストの濃度の補充の決定、または別種もしくは追加のアルドステロンアンタゴニストの投与の決定である。
したがって療法適応は、好ましくはｉ）アルドステロンアンタゴニストの投与、ｉｉ）アルドステロンアンタゴニストの濃度（特に、特に量）の補充、およびｉｉｉ）別種もしくは追加のアルドステロンアンタゴニストの投与から選択される。本方法の実施前に（すなわち、試料を入手する前に）対象がアルドステロンアンタゴニストを投与されていないならば、好ましくはｉ）が推奨される。本方法の実施前に（すなわち、試料を入手する前に）対象がアルドステロンアンタゴニストを投与されていたならば、好ましくはｉｉ）またはｉｉｉ）が推奨される。
個体におけるＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度が、炎症プロセスが優勢であることを示す場合、心不全または心不全に先立つ病期を示す個体では、特に心臓性トロポニンの濃度を考慮して薬物療法を適応させるべきである。好ましくは、アルドステロンアンタゴニストの投与を開始すべきである。
個体の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度が、その個体は心不全および心不全に先立つ病期に罹患していることを示す場合、特に炎症プロセスを示す個体または示さない個体のＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度を考慮して、炎症プロセスが優勢であることをＧＤＦ−１５濃度が示せば、その薬物療法を適応させるべきであり、健康な個体に対比してＧＤＦ−１５濃度が増大していないかまたはわずかしか増大しておらず、炎症プロセスが存在しないかまたは優勢ではないことを示せば、その薬物療法を適応させるべきではない。
細胞間にコラーゲンが沈着する結果として左心室はより硬くなるので、心臓におけるコラーゲン合成が拡張期機能不全の理由であると考えられる。その結果、充満能が損なわれる。したがって、拡張期機能不全に罹患するリスクをもつ個体、または拡張期機能不全を発症しようとしている個体、または悪化する可能性のある拡張期機能不全に罹患している
個体を処置するには、アルドステロンアンタゴニストが特に適切であると思われる。
本発明のこの態様に関して、用語“増加した”および“減少した”は、健康な対象における平均値に対するものである。これらの数値は当業者に既知であり、下記のとおりである:トロポニンＴについては約２．０ｐｇ／ｍＬ、または約３ｐｇ／ｍｌ（または、検査
法の感度約２．０を考慮に入れると０．０ｐｇ／ｍＬ）；ＧＤＦ−１５については約６８０ｐｇ／ｍｌ、好ましくは約５８０ｐｇ／ｍＬ、特に約５００ｐｇ／ｍＬ；ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰについては約６８ｐｇ／ｍｌ、好ましくは約３７ｐｇ／ｍＬ、特に約１８ｐｇ／ｍＬ。
当業者に知られているように、健康な対象におけるＮＴ−ＰｒｏＢＮＰの平均値は年齢と共に増大する（たとえば、１８〜４４歳では３７ｐｇ／ｍＬ、５５〜６４歳では７２ｐｇ／ｍｌ、６５〜７４歳では１０７ｐｇ／ｍｌ、７５歳以上では２１１ｐｇ／ｍｌ）。当業者は、ナトリウム利尿ペプチドの量が増加しているかどうかを評価する際にはこれを考慮する。したがって、ある量のナトリウム利尿ペプチドが健康な個体からの試料中の量に対比してたとえば少なくとも２０％増加しているかどうかは、当業者が容易に判定できる。
ＧＤＦ−１５の場合は、本発明に関して用いる用語“増加した”および“減少した”は、健康な個体に対比して、少なくとも１０％、好ましくは少なくとも２０％の増加または減少を表わす；トロポニンＴおよびＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの場合は、本発明に関して用いる用語“増加した”および“減少した”は、健康な個体に対比して、少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％の増加または減少を表わす。したがって、健康な対象からの試料中の量に対比して、あるいは心不全のリスク因子をもつけれども心不全に先立つ機能および／または構造の異常を伴わない対象（特に、病期Ａの対象）からの試料中の量に対比して、好ましくは少なくとも２０％、またはより好ましくは少なくとも３０％の心臓性トロポニン、特にトロポニンＴの増加は、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、機能および／または構造の異常の診断の指標となる。さらに好ましくは、上記の量に対比して少なくとも５０％の心臓性トロポニン、特にトロポニンＴの増加は、心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、機能および／または構造の異常の診断の指標となる。好ましくは、被験対象と基準対象のリスク因子は同じである。
健康な対象／個体は、好ましくは心不全のリスク因子を保有しない対象、特に正常血圧の対象である（たとえば、実施例１のグループ１を参照）。より好ましくは、その対象は、心不全のリスク因子を保有せず、かつ心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の機能および構造の異常をもたない対象である。健康な対象は、好ましくは心不全のリスク因子を保有するけれども、心不全に先立つ、および／またはＬＶＨに先立つ、機能および／または構造の異常をもたない対象であることがさらに好ましい（たとえば、実施例１のグループ２を参照）。好ましくは、心不全のリスク因子を保有するけれども、心不全に先立つ、および／またはＬＶＨに先立つ、機能および／または構造の異常をもたない対象は、病期Ａの対象である。好ましくは、健康な対象が心不全のリスク因子を保有するならば、被験対象は同じリスク因子を保有する。
好ましくは、健康な対象からの（または心不全のリスク因子を保有するけれども、心不全に先立つ機能および／または構造の異常をもたない対象（特に、病期Ａの対象）からの）試料中の心臓性トロポニンの量と比較して減少しているかまたは本質的に同じである、被験対象からの試料中の心臓性トロポニンの量は、その対象が心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、機能および／または構造の異常を伴わないことを示す。
トロポニンＴについてカットオフ量として使用できる特に好ましい基準量は、好ましく
は３．３ｐｇ／ｍｌ、またはより好ましくは３．５ｐｇ／ｍｌである。トロポニンＩについてカットオフ量として使用できる特に好ましい基準量は、好ましくは９ｐｇ／ｍｌである。好ましい基準範囲は０．２〜９ｐｇ／ｍｌであろう。基準量より多い、対象からの試料中の、好ましくは血清または血漿試料中の心臓性トロポニンの量は、好ましくは、その対象が心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の構造または機能の異常に罹患していることを示す。基準量より少ない、対象からの試料中の、好ましくは血清または血漿試料中の心臓性トロポニンの量は、好ましくは、その対象が心不全に先立つ、および／または左心室肥大に先立つ、心臓の構造または機能の異常に罹患していないことを示す。
ＩＧＦＢＰ７についてカットオフ量として使用できる特に好ましい基準量は、好ましくは４２．６ｐｇ／ｍｌ、またはより好ましくは４６．２ｐｇ／ｍｌである。好ましい基準範囲は３３．３ｐｇ／ｍｌ〜４６．２ｐｇ／ｍｌである。
用語“ナトリウム利尿ペプチド”は、同じ予測力価をもつ心房性ナトリウム利尿ペプチド(Atrial Natriuretic Peptide)（ＡＮＰ)型および脳ナトリウム利尿ペプチド(Brain Natriuretic Peptide)（ＢＮＰ）型ペプチドならびにそのバリアントを含む。本発明によるナトリウム利尿ペプチドは、ＡＮＰ型およびＢＮＰ型ペプチドならびにそのバリアントを含む(たとえば、Bonow, 1996, Circulation 93: 1946-1950を参照)。ＡＮＰ型ペプチドは、ｐｒｅ−ｐｒｏＡＮＰ、ｐｒｏＡＮＰ、ＮＴ−ｐｒｏＡＮ、およびＡＮＰを含む。ＢＮＰ型ペプチドは、ｐｒｅ−ｐｒｏＢＮＰ、ｐｒｏＢＮＰ、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、およびＢＮＰを含む。プレプロ（ｐｒｅ−ｐｒｏ）ペプチド（ｐｒｅ−ｐｒｏＢＮＰの場合は１３４アミノ酸）は短いシグナルペプチドを含み、それが酵素により開裂除去されてプロペプチド（ｐｒｏＢＮＰの場合は１０８アミノ酸）を放出する。プロペプチドは、さらに開裂してＮ末端プロペプチド（ＮＴ−ｐｒｏペプチド；ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの場合は７６アミノ酸）と活性ホルモン（ＢＮＰの場合は３２アミノ酸、ＡＮＰの場合は２８アミノ酸）になる。好ましくは、本発明によるナトリウム利尿ペプチドは、ＮＴ−ｐｒｏＡＮＰ、ＡＮＰ、およびより好ましくはＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、ならびにそのバリアントである。ＡＮＰおよびＢＮＰは活性ホルモンであり、それらのそれぞれの不活性カウンターパートＮＴ−ｐｒｏＡＮＰおよびＮＴ−ｐｒｏＢＮＰより短い半減期をもつ。ＢＮＰは血中で代謝され、これに対しＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは血中を無傷分子として循環し、したがって腎臓により排出される。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのインビボ半減期は、ＢＮＰの半減期（２０分）より１２０分長い(Smith 2000, J Endocrinol. 167: 239-46.)。予備分析によればＮＴ−ｐｒｏＢＮＰはより強靭であり、試料を容易に中央研究所へ輸送できる(Mueller 2004,
Clin Chem Lab Med 42: 942-4.)。血液試料を室温で数日間保存でき、あるいは回収率の損失なしに郵送または搬送できる。これに対し、ＢＮＰを室温または４℃で４８時間で保存すると、少なくとも２０％の濃度損失が生じる(Mueller 前掲; Wu 2004, Clin Chem 50: 867-73.)。したがって、目的とするタイムコースまたは特性に応じて、活性形態または不活性形態のいずれかのナトリウム利尿ペプチドの測定が有利な可能性がある。本発明による最も好ましいナトリウム利尿ペプチドは、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰまたはそのバリアントである。前記に簡単に考察したように、本発明に従って述べるヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは、好ましくはヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ分子のＮ末端部分に対応する長さの７６アミノ酸を含むポリペプチドである。ヒトのＢＮＰおよびＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの構造は、既に先行技術文献、たとえばWO 02/089657、WO 02/083913、またはBonow 前掲に詳細に記載されている。好ましくは、本発明に用いるヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは、EP 0 648 228 Blに開示さ
れているヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰである。これらの先行技術文献を、それらに開示されているＮＴ−ｐｒｏＢＮＰおよびそのバリアントの個々の配列に関して本明細書に援用する。本発明に従って述べるＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは、さらに上記に考察したヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰに対する対立遺伝子バリアントおよびその特定の配列の他のバリアントを包含する。詳細には、ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰに対して、好ましくはヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの全
長にわたって、アミノ酸レベルで少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、または９９％同一であるバリアントポリペプチドが含まれる。２つのアミノ酸配列間の同一度は、当技術分野で周知のアルゴリズムにより判定できる。好ましくは、同一度は、２つの最適状態にアラインさせた配列を比較ウィンドウにわたって比較することにより判定すべきであり、その際、比較ウィンドウ内のアミノ酸配列のフラグメントは、最適アラインメントのために基準配列（付加または欠失を含まないもの）と比較して付加または欠失（たとえば、ギャップまたはオーバーハング）を含むことができる。両配列中に同一アミノ酸残基が現われる位置の数を測定して一致した位置の数を求め、この一致した位置の数を比較ウィンドウ内の位置の総数で割り、その商に１００を掛けることによりパーセントを計算して、配列同一パーセントを求めることができる。比較のための配列の最適アラインメントは、下記により実施できる：Smith and Waterman Add. APL. Math. 2:482 (1981)の局所相同アルゴリズム、Needleman and Wunsch J. Mol. Biol. 48:443 (1970)の相同アラインメントアルゴリズム、Pearson and Lipman Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 85: 2444 (1988)の類似性検索法、これらのアルゴリズムのコンピューター化実行（ＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＢＬＡＳＴ、ＰＡＳＴＡ、およびＴＦＡＳＴＡ：Wisconsin Genetics Software Package中, Genetics Computer Group
(GCG), 575 Science Dr., Madison, WI)、または目視検査。比較のための２配列が同定
されれば、好ましくはＧＡＰおよびＢＥＳＴＦＩＴを用いてそれらの最適アラインメントを決定し、こうして同一度を判定する。好ましくは、ギャップ重みにつき５．００およびギャップ重み長さにつき０．３０ののデフォルト値を用いる。前記に述べたバリアントは、対立遺伝子バリアント、または他のいずれかの種特異的なホモログ、パラログもしくはオルソログであってもよい。実質的に類似し、同様に考慮されるものは、各全長ペプチドに対する診断手段またはリガンドによってなお認識されるタンパク質分解生成物である。同様に包含されるのは、ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのアミノ酸配列と比較してアミノ酸の欠失、置換および／または付加をもつバリアントポリペプチドであるが、ただしそれらのポリペプチドがＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ特性をもつ限りにおいてである。本明細書中で述べるＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ特性は、免疫学的特性および／または生物学的特性である。好ましくは、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰバリアントは、ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのものに匹敵する免疫学的特性（すなわち、エピトープ組成）をもつ。したがって、それらのバリアントはナトリウム利尿ペプチドの量の測定のために用いる前記の手段またはリガンドにより認識されるはずである。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの生物学的特性および／または免疫学的特性は、Karlら(Karl 1999, Scand J Clin Lab Invest 230:177-181)、Yeoら(Yeo 2003, Clinica Chimica Acta 338:107-115)が記載したアッセイ法により検出できる。バリアントには、翻訳後修
飾されたペプチド、たとえばグリコシル化されたペプチドも含まれる。さらに、本発明によるバリアントは、試料を採集した後に、たとえば標識、特に放射性標識または蛍光標識をペプチドに共有結合または非共有結合させることにより修飾したペプチドまたはポリペプチドでもある。
本発明のこの態様（すなわち、ＡＣＥ阻害薬、アンギオテンシン受容体遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストから選択される医薬の投与を受けている対象における、療法のモニタリング方法および療法適応方法）に関する対象は、本発明の主題である心臓の異常または疾患に罹患していない個体に関して引用したマーカーの濃度に影響を及ぼす疾患に罹患していてはならないことを理解すべきである。したがって、その対象は、心不全／心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を除いて、また心不全に罹患するリスク因子を除いて、臨床的に健康でなければならない。さらに、対象は糖尿病に罹患していてはならず、肝疾患を伴うべきではなく、妊娠していてはならず、かつ悪性疾患に罹患していてはならない。
心臓性トロポニン（トロポニンＴまたはそのバリアントおよびトロポニンＩまたはそのバリアント）、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰまたはそのバリアント、および−より低い程度で−Ｇ
ＤＦ−１５またはそのバリアントについて本発明において引用した濃度を、腎機能障害に罹患している患者、好ましくは腎不全に罹患している患者、特に慢性および終末期の腎不全に罹患している患者には適用できないことは、当業者には自明である。本発明の好ましい態様において、腎機能障害に罹患している患者、好ましくは腎不全に罹患している患者、特に慢性および終末期の腎不全に罹患している患者は、本発明の方法には含まれない（本発明から除外される）。他の好ましい態様において、腎性高血圧症を伴う患者は本発明の方法には含まれない（本発明から除外される）。
好ましくは、本明細書中で用いる“対象”は、腎機能障害に罹患している患者、好ましくは腎不全に罹患している患者、特に慢性および終末期の腎不全に罹患している患者、より好ましくは腎性高血圧症を伴う患者、最も好ましくはこの文中に述べる疾患および状態のうち１以上に罹患しているすべての患者を除外する。これに関して、“腎不全”は、６０〜１２０ｍｌ／分の通常範囲より低い、好ましくは６０ｍｌ／分未満である糸球体濾過率（ＧＦＲ）障害とみなされる。慢性腎不全は、持続的な進行性の腎機能劣化であり、これは結果的にしばしば終末期腎不全になる。終末期腎不全は、ＧＦＲが約３０ｍｌ／分の率にまで達した時点で診断される。ＧＦＲはクレアチニンクリアランスにより測定され、これは当業者に知られている。腎機能障害を伴う対象は、ペプチドのクリアランスが損なわれるため、前記に引用したものより高いトロポニンＩおよびトロポニンＴのレベルを示す。そのレベルは、腎障害の重症度に伴って変動する。
腎障害の重症度は、以下に示すように種々のグレードに分類される：
０： ≧９０ｍｌ／分
１： ≧９０ｍｌ／分；ミクロアルブミン尿症を伴う
２： ≧６０ 〜 ＜９０ｍｌ／分
３： ≧３０ 〜 ＜６０ｍｌ／分
４： ≧１５ 〜 ＜３０ｍｌ／分
５： ＜１５ｍｌ／分
(出典: National Kidney Foundation, Am J. Kidney Dis 39 suppi 1, 2002; Clinical Practice Guidelines for chronic kidney diseaseに発表)。
本明細書中に述べる対象は、好ましくは病期Ａを脱して病期Ｂに入ろうとしているはずである（または、初期の病期Ｂに入っているはずである）。したがって、対象は、好ましくは心筋梗塞の病歴をもつはずはなく、特に心筋梗塞の病歴をもつことが分かっているはずはない。したがって、本明細書中で用いる用語“対象”は、好ましくは、心筋梗塞の病歴をもつことが分かっている対象を除外する。これは特に、本明細書中に述べる診断方法、鑑別方法、薬物療法のモニタリング方法、および予測方法に適用される。
心筋梗塞（ＭＩ）の病歴をもたない対象は、好ましくは、過去に、すなわち被験試料を入手する前に、心筋梗塞に罹患しなかった（特に、心筋梗塞と診断されなかった）。用語“心筋梗塞”は当技術分野で周知である。本明細書中で用いるこの用語には、好ましくは、ＳＴ上昇型ＭＩ（ＳＴＥＭＩ）および非ＳＴ上昇型ＭＩ（ＮＳＴＥＭＩ）が含まれる。
同様に好ましくは、本明細書中で用いる用語“対象”は、好ましくは、冠動脈疾患に罹患している対象を除外する。したがって、被験対象は、冠動脈疾患に罹患しているはずはない。これは特に、本明細書中に述べる診断方法、鑑別方法、薬物療法のモニタリング方法、および予測方法に適用される。
用語“冠動脈疾患”（ＣＡＤ；しばしば冠動脈性心疾患（ＣＨＤ）とも呼ばれる）は当業者に知られている。この用語は、好ましくは、主冠動脈のうち少なくとも１つが狭くなり、これによって血管当たり５０％以上の狭窄が起きた状態を表わす。ＣＡＤに罹患して
いない対象は、主冠動脈の狭窄が５０％未満である（したがって、閉塞は５０％未満である）。冠動脈の閉塞度を評価する方法は当技術分野で周知であり、好ましくは閉塞度は冠動脈造影法により評価される。
さらに、本発明の方法に関する被験対象は、ナトリウム利尿ペプチドのレベルが増大していないことが好ましい。これは特に、本明細書中に述べる診断方法、鑑別方法、薬物療法のモニタリング方法、および予測方法に適用される。好ましくは、対象は脳ナトリウム利尿ペプチドのレベルが増大していない。より好ましくは、対象はＢＮＰ型ナトリウム利尿ペプチドのレベルが増大していない。最も好ましくは、対象はＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのレベルが増大していない。
ナトリウム利尿ペプチド、特にＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのレベルが増大していない対象は、健康な個体と対比して、より好ましくは心不全のリスク因子を保有するけれどもＬＶＨおよび／または心不全に先立つ機能および／または構造の異常をもたない健康な対象（特に、病期Ａの対象）からの試料中の量に対比して、好ましくは同じ心不全のリスク因子を保有し、かつＬＶＨに先立つ、および／または心不全に先立つ、機能および／または構造の異常をもつ対象（特に、初期の病期Ｂの対象）からの試料中の量に対比して、好ましくはナトリウム利尿ペプチドの増加が２０％未満である。より好ましくは、上記のレベルと比較して、対象はＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのレベルが１０％未満である。上記のレベルは血清レベルにも適用される。
用語“試料”は、体液の試料、分離した細胞の試料、または組織もしくは臓器からの試料を表わす。体液の試料は周知の技術により得ることができ、好ましくは血液、血漿、血清、尿の試料、血液、血漿または血清の試料を含む。試料は測定すべきマーカーに依存することを理解すべきである。したがって、本明細書中に述べるポリペプチドを種々の試料において測定することが包含される。好ましくは、血清または血漿の試料中の心臓性トロポニンまたはそのバリアント、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰまたはそのバリアント、ＧＤＦ １５またはそのバリアント、およびＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントを測定する。
本発明によれば、ペプチドまたはポリペプチドの濃度の測定は、試料中のペプチドの濃度を測定するためのあらゆる既知手段により達成できる（用語“レベル”と“量”は、好ましくは本明細書中で互換性をもって用いられる）。それらの手段には、標識した分子を多様なサンドイッチ、競合、または他のアッセイ方式で利用できるイムノアッセイのデバイスおよび方法が含まれる。それらのアッセイ法では、ペプチドまたはポリペプチドの存在または不存在の指標となる信号が発生するであろう。さらにその信号強度を、好ましくは試料中に存在するポリペプチドの濃度に直接または間接的に（たとえば、反比例）相関させることができる。他の適切な方法は、そのペプチドまたはポリペプチドに特異的な物理的または化学的性質、たとえばそれの厳密な分子質量またはＮＭＲスペクトルを測定することを含む。それらの方法は、好ましくはバイオセンサー、イムノアッセイに連携させた光学デバイス、バイオチップ、分析機器、たとえば質量分析計、ＮＭＲ分析器、またはクロマトグラフィー装置を含む。さらに、方法にはマイクロプレートＥＬＩＳＡに基づく方法、完全自動化またはロボット式イムノアッセイ法（たとえば、Ｅｌｅｃｓｙｓ（商標）分析器で得られる）、ＣＢＡ（酵素コバルト結合アッセイ(Cobalt Binding Assay)；たとえば、Ｒｏｃｈｅ−Ｈｉｔａｃｈｉ（商標）分析器で得られる）、およびラテックス凝集アッセイ法（たとえば、Ｒｏｃｈｅ−Ｈｉｔａｃｈｉ（商標）分析器で得られる）が含まれる。
好ましくは、ペプチドまたはポリペプチドの濃度の測定は下記の段階を含む：（ａ）その強度がペプチドまたはポリペプチドの濃度の指標となる細胞応答を誘発できる細胞を、そのペプチドまたはポリペプチドと、適宜な期間接触させる、（ｂ）その細胞応答を測定
する。細胞応答を測定するために、試料または処理した試料を、好ましくは細胞培養物に添加し、内部または外部細胞応答を測定する。細胞応答には、測定可能なレポーター遺伝子の発現、または物質、たとえばペプチド、ポリペプチドもしくは小分子の分泌を含めることができる。その発現または物質は、ペプチドまたはポリペプチドの濃度に相関する強度信号を発生するはずである。
同様に好ましくは、ペプチドまたはポリペプチドの濃度の測定は、試料中のペプチドまたはポリペプチドからの特異的強度信号を測定する段階を含む。前記のように、そのような信号は質量スペクトル中にペプチドもしくはポリペプチドに特異的なｍ／ｚ変数で観察される信号強度、またはペプチドもしくはポリペプチドに特異的なＮＭＲスペクトルであってもよい。
ペプチドまたはポリペプチドの濃度の測定は、好ましくは下記の段階を含むことができる：（ａ）ペプチドを特異的リガンドと接触させる、（ｂ）（場合により）結合していないリガンドを除去する、（ｃ）結合したリガンドの濃度を測定する。結合したリガンドは強度信号を発生するであろう。本発明による結合には共有結合および非共有結合の両方が含まれる。本発明によるリガンドは、本明細書に記載するペプチドまたはポリペプチドに結合するいずれかの化合物、たとえばペプチド、ポリペプチド、核酸、または小分子であってもよい。好ましいリガンドには、抗体、核酸、ペプチドまたはポリペプチド、たとえば前記のペプチドまたはポリペプチドに対する受容体または結合パートナー、およびそのフラグメントであって前記ペプチドに対する結合ドメインを含むもの、ならびにアプタマー、たとえば核酸アプタマーまたはペプチドアプタマーが含まれる。そのようなリガンドを調製する方法は当技術分野で周知である。たとえば、適切な抗体またはアプタマーの同定および調製は業者も提供している。より高い親和性または特異性をもつそのようなリガンドの誘導体を開発する方法は、当業者に周知である。たとえば、核酸、ペプチドまたはポリペプチドにランダム変異を導入することができる。これらの誘導体を、次いで当技術分野で既知のスクリーニング法、たとえばファージディスプレーに従って、結合について試験することができる。本明細書に述べる抗体には、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体の両方、ならびにそのフラグメント、たとえば抗原またはハプテンに結合できるＦｖ、ＦａｂおよびＦ（ａｂ）２フラグメントが含まれる。本発明には、一本鎖抗体、および目的とする抗原特異性を示すヒト以外のドナー抗体のアミノ酸配列がヒト−アクセプター抗体の配列と結合したヒト化ハイブリッド抗体も含まれる。ドナー配列は、通常はドナーの少なくとも抗原結合アミノ酸残基を含むであろうが、ドナー抗体の他の構造および／または機能関連のアミノ酸残基も含むことができる。そのようなハイブリッドは、当技術分野で周知である幾つかの方法により調製できる。好ましくは、そのリガンドまたは作用剤は前記のペプチドまたはポリペプチドに特異的に結合する。本発明による特異的結合は、そのリガンドまたは作用物が、被験試料中に存在する他のペプチド、ポリペプチド、または物質に実質的に結合（それらと“交差反応”）すべきではないことを意味する。好ましくは、特異的に結合されるペプチドまたはポリペプチドは、他のいずれかの関連ペプチドまたはポリペプチドより少なくとも３倍高い、好ましくは少なくとも１０倍高い、よりさらに好ましくは少なくとも５０倍高い親和性で結合されるべきである。非特異的結合は、たとえばウェスタンブロットにおけるそれのサイズにより、または試料中における相対的に高いそれの存在度により、それがなお確実に識別および測定可能であれば許容できる。リガンドの結合は、当技術分野で既知のいずれかの方法により測定できる。好ましくは、その方法は半定量的または定量的である。適切な方法を以下に記載する。
第１に、リガンドの結合は、直接的に、たとえばＮＭＲまたは表面プラズモン共鳴により測定できる。
第２に、リガンドが目的のペプチドまたはポリペプチドの酵素活性の基質としても作用するならば、酵素反応生成物を測定してもよい（たとえば、ブロテアーゼの濃度は、開裂
した基質の濃度を、たとえばウェスタンブロット上で測定することにより測定できる）。あるいは、リガンドはそれ自体が酵素特性を示す場合があり、“リガンド／ペプチドまたはポリペプチド”複合体、すなわちそれぞれペプチドまたはポリペプチドが結合したリガンドを、強度信号の発生により検出できる適切な基質と接触させることができる。酵素反応生成物の測定のために、好ましくは基質の濃度を飽和させる。反応前に基質を検出可能な標識で標識化することもできる。好ましくは、適切な期間、試料を基質と接触させる。適切な期間とは、検出可能な、好ましくは測定可能な濃度の生成物が生成するのに必要な時間を表わす。生成物の濃度を測定する代わりに、一定の（たとえば、検出可能な）濃度の生成物が出現するのに必要な時間を測定してもよい。
第３に、リガンドの検出および測定を可能にする標識にリガンドを共有結合または非共有結合によりカップリングさせてもよい。標識化は、直接法または間接法により実施できる。直接標識化は、標識をリガンドに直接カップリングさせる（共有結合または非共有結合により）ことを伴う。間接標識化は、二次リガンドを一次リガンドに結合させる（共有結合または非共有結合により）ことを伴う。二次リガンドは一次リガンドに結合すべきである。二次リガンドは適切な標識とカップリングさせてもよく、および／または二次リガンドに結合する三次リガンドの標的（受容体）であってもよい。信号を増強するために、二次、三次またはさらに高次のリガンドの使用がしばしば採用される。適切な二次およびさらに高次のリガンドには、抗体、二次抗体、および周知のストレプトアビジン−ビオチン系（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）を含めることができる。リガンドまたは基質に、当技術分野で既知である１以上のタグを“タグ付け”することもできる。その際、そのようなタグはより高次のリガンドに対する標的であってもよい。適切なタグには、ビオチン、ジゴキシゲニン、Ｈｉｓ−タグ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、ＦＬＡＧ、ＧＦＰ、ｍｙｃ−タグ、インフルエンザＡウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）、マルトース結合タンパク質などが含まれる。ペプチドまたはポリペプチドの場合、タグは好ましくはＮ−末端および／またはＣ−末端にある。適切な標識は、適切な検出法により検出できるいずれかの標識である。一般的な標識には、金粒子、ラテックスビーズ、アクリダン(acridan)エステル、ルミノール、ルテニウム、酵素活性標識、放射性
標識、磁性標識（たとえば“磁性ビーズ”；常磁性標識および超常磁性標識を含む）、および蛍光標識が含まれる。酵素活性標識には、たとえば西洋わさびペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、およびその誘導体が含まれる。検出に適した基質には、ジアミノ−ベンジジン（ＤＡＢ）、３，３’−５，５’−テトラメチルベンジジン、ＮＢＴ−ＢＣＩＰ（４−ニトロブルーテトラゾリウムクロリドおよび５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−ホスフェート；既製原液としてＲｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓから入手できる）、ＣＤＰ−Ｓｔａｒ（商標）（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＥＣＦ（商標）（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）が含まれる。適切な酵素−基質の組合わせは、着色した反応生成物、蛍光または化学発光を生じることができ、それを当技術分野で既知の方法に従って（たとえば、感光フィルムまたは適切なカメラシステムを用いて）測定できる。酵素反応の測定には前記の基準を同様に適用する。一般的な蛍光標識には、蛍光タンパク質（たとえば、ＧＦＰおよびそれの誘導体）、Ｃｙ３、Ｃｙ５、テキサスレッド、フルオレセイン、およびＡｌｅｘａ色素（たとえば、Ａｌｅｘａ ５６８）が含まれる。他の蛍光標識を、たとえばＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ（オレゴン州）から入手できる。蛍光標識としての量子ドットの使用も考慮される。一般的な放射性標識には、３５Ｓ、１２５Ｉ、３２Ｐ、３３Ｐなどが含まれる。放射性標識はいずれか既知の適切な方法、たとえば感光フィルムまたはホスホイメージャー(phosphr imager)により検出できる。本発明による適切な測定方法には、下記のものも含まれる：沈降法（特に免疫沈降法）、電気化学発光（電気的に発生する化学発光）、ＲＩＡ（ラジオイムノアッセイ）、ＥＬＩＳＡ（酵素結合イムノソルベントアッセイ）、サンドイッチ酵素免疫検定、電気化学発光サンドイッチイムノアッセイ(electrochemiluminescence sandwich immunoassays、ＥＣＬＩＡ）、解離増強
ランタニドフルオロイムノアッセイ(dissociation-enhanced lanthanide fluoro immuno assay 、ＤＥＬＦＩＡ）、シンチレーション近接アッセイ(scintillation proximity assay、ＳＰＡ）、タービジメトリー、ネフェロメトリー、ラテックス増強型のタービジメトリーもしくはネフェロメトリー、または固相免疫検定。当技術分野で既知のさらに他の方法（たとえば、電気泳動、２Ｄゲル電気泳動、ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）、ウェスタンブロット法、および質量分析）を単独で、または前記の標識法その他の検出法と組み合わせて使用できる。
ペプチドまたはポリペプチドの量は、好ましくは下記に従って測定することもできる：（ａ）前記に詳述したペプチドまたはポリペプチドに対するリガンドを含む固体支持体を、ペプチドまたはポリペプチドを含む試料と接触させ、そして（ｂ）支持体に結合したペプチドまたはポリペプチドの量を測定する。好ましくは核酸、ペプチド、ポリペプチド、抗体およびアプタマーからなる群から選択されるリガンドは、好ましくは固体支持体上に固定化された形態で存在する。固体支持体を作成するための材料は当技術分野で周知であり、特に市販のカラム材料、ポリスチレンビーズ、ラテックスビーズ、磁性ビーズ、コロイド金属粒子、ガラスおよび／またはシリコンのチップおよび表面、ニトロセルロースストリップ、メンブレン、シート、デュラサイト(duracyte)類、反応トレーのウェルおよび壁、プラスチックチューブなどが含まれる。リガンドまたは作用剤を多様なキャリヤーに結合させることができる。周知のキャリヤーの例には、ガラス、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリカーボネート、デキストラン、ナイロン、アミロース類、天然および改質セルロース類、ポリアクリルアミド類、アガロース類、および磁鉄鉱が含まれる。本発明の目的に対して、キャリヤーの性質は可溶性または不溶性のいずれであってもよい。前記リガンドを固定／固定化するのに適切な方法は周知であり、イオン性、疎水性、共有結合性の相互作用などが含まれるが、これらに限定されない。“懸濁アレイ”を本発明によるアレイとして用いることも考慮される(Nolan 2002, Trends Biotechnol. 20(1): 9-12)。そのような懸濁アレイにおいて、キャリヤー、たとえばマイクロビーズまたはマイクロスフェアは懸濁状態で存在する。このアレイは、種々のリガンドを保有する標識されていてもよい種々のマイクロビーズまたはマイクロスフェアからなる。そのようなアレイを調製する方法、たとえば固相化学および光不安定保護基に基づくものが一般に知られている(US 5,744,305)。
本明細書中で用いる用語“濃度”は、あるポリペプチドまたはペプチドの絶対濃度、そのポリペプチドまたはペプチドの相対濃度、およびそれらと相関するかまたはそれらから誘導できるいずれかの数値またはパラメーターを包含する。そのような数値またはパラメーターは、そのペプチドから直接測定により得られるすべての特異的な物理的または化学的特性からの強度信号値、たとえば質量スペクトルまたはＮＭＲスペクトルにおける強度値を含む。さらに本明細書中の他の箇所に詳述した間接測定により得られるすべての数値またはパラメーター、たとえば生物学的読出し系から前記ペプチドに応答して測定された応答レベル、または特異的に結合したリガンドから得られる強度信号が包含される。上記の濃度またはパラメーターに相関する数値はあらゆる標準的数学操作によっても得られることを理解すべきである。
本発明はさらに、本発明方法の実施に適応させた、下記のものを含むデバイスを包含する：
ａ）下記のペプチドの濃度を測定するための手段：
心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはトロポニンＩまたはそのバリアント；
および場合により下記の手段のうち１以上：
炎症マーカー、好ましくはＧＤＦ−１５もしくはそのバリアントの濃度を測定するための手段；および／またはＩＧＦＢＰ７もしくはそのバリアントの濃度を測定するための
手段；
ｂ）段階ａ）で測定した濃度を対照試料中のそれらのマーカーの各濃度と比較し、これにより本発明の方法を実施するための手段。
このデバイスは、本発明方法の実施に適応させてある。本発明の方法は、好ましくは下記を含む：
心不全および／または個々の発作および／または個々の慢性腎疾患を発症するリスク因子を保有する対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、その対象がリスク因子を保有するだけであるか、あるいはその対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を既に伴うかを鑑別する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有する対象が心不全に罹患するリスクを予測する。
一般に、対象（すなわち、リスク因子を保有し、ならびに／あるいは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う個体）は、心不全に罹患していない；すなわち、その患者はその心筋に構造または機能の永久的な損傷を生じておらず、その健康を完全に回復できると予想され、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期ＣまたはＤに分類されされない。好ましくは、対象は心不全のリスク因子を保有する。これらは当業者に既知であり、たとえば高血圧症および糖尿病を含む。同様に好ましくは、対象は心不全の顕性の徴候および／または症状を示していない。
本発明によるデバイスにより得られる結果に応じて、療法決定または療法適応を行なうことができる。たとえば、投与されている医薬の補充または濃度低下により療法を適応させることができる。したがって、このデバイスはその療法のモニタリングにも適応させることができる。
本発明はまた、前記に示したデバイスまたはデバイス類を下記のために使用することに関する：
心不全および／または発作および／または慢性腎疾患を発症するリスク因子を保有する対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する；
心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、その対象がリスク因子を保有するだけであるか、あるいはその対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を既に伴うかを鑑別する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有する対象が心不全に罹患するリスクを予測する。
一般に、対象（すなわち、リスク因子を保有し、ならびに／あるいは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う個体）は、心不全に罹患していない；すなわち、その患者はその心筋に構造または機能の永久的な損傷を生じておらず、その健康を完全に回復できると予想され、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期ＣまたはＤに分類されされない。好ましくは、対象は心不全のリスク因子を保有する。これらは当業者に既知であり、たとえば高血圧症および糖尿病を含む。同様に好ましくは、対象は心不全の顕性の徴候および／または症状を示していない。
本発明によるデバイスの使用により得られる結果に応じて、療法決定または療法適応を行なうことができる。たとえば、投与されている医薬の補充または濃度低下により療法を適応させることができる。したがって、このデバイスはその療法のモニタリングにも使用できる。
本明細書中で用いる用語“デバイス”は、ある系統の手段であって、予測を行なうこと
ができるように互いに作動可能な状態で連結した少なくとも１つの前記手段を含むものに関する。前記ポリペプチドのうち１以上の濃度を測定するための好ましい手段、および比較を行なうための手段は、本発明の方法に関して前記に開示されている。これらの手段を作動可能な状態で連結する方法は、そのデバイスに含まれる手段のタイプに依存するであろう。たとえば、ペプチドの濃度を自動的に測定するための手段を適用する場合、それらの自動的に作動する手段により得られるデータは、たとえば目的とする結果を得るためのコンピュータープログラムにより処理できる。好ましくは、そのような場合はそれらの手段は単一デバイスにより構成される。したがって、そのデバイスは、適用した試料中のペプチドまたはポリペプチドの濃度を測定するための分析ユニット、および得られたデータを評価のために処理するコンピューターユニットを含む。コンピューターユニットは、好ましくは、本明細書中の他の箇所に示したその基準濃度または基準値を記憶させたものを含むデータベース、およびポリペプチドについて測定した濃度と記憶させたデータベースの基準濃度との比較を実施するためのコンピューター実行アルゴリズムを含む。本明細書中で用いるコンピューター実行とは、コンピューターユニットに具体的に(tangibly)含まれるコンピューター可読プログラムコードを表わす。あるいは、ペプチドまたはポリペプチドの濃度を測定するために試験ストリップなどの手段を用いる場合、比較のための手段は、測定した濃度を基準濃度に割り当てる対照ストリップまたは対照表を含むことができる。試験ストリップは、好ましくは本明細書中に述べるペプチドまたはポリペプチドに特異的に結合するリガンドにカップリングしている。ストリップまたはデバイスは、好ましくはそのリガンドへの前記ペプチドまたはポリペプチドの結合を検出するための手段を含む。検出のための好ましい手段は、前記の本発明方法に関する態様に関して開示されている。そのような場合、そのシステムの利用者がマニュアルに示された指示および解釈によって濃度の測定結果とその診断値または予後値を結びつけるという点で、それらの手段は作動可能な状態で連結している。そのような態様では、それらの手段を個別のデバイスとして提示し、好ましくはキットとして一緒にパッケージすることができる。当業者はそれらの手段を連結する方法を容易に理解するであろう。好ましいデバイスは、専門臨床医の知識なしに利用できるもの、たとえば試料を装填するだけでよい試験ストリップまたはエレクトロニクスデバイスである。結果は、臨床医の解釈を必要とする生データの出力として得られる場合がある。しかし好ましくは、デバイスの出力は生データを処理したもの、すなわち評価したものであり、その解釈に臨床医を必要としない。他の好ましいデバイスは、本発明の方法に従って前記に述べた分析ユニット／デバイス（たとえば、心臓性トロポニン、ＩＧＦＢＰ７またはＧＤＦ １５を特異的に認識するリガンドにカップリングしたバイオセンサー、アレイ、固体支持体、プラズモン表明共鳴デバイス、ＮＭＲ分光計、質量分析計など）、および／または評価ユニット／デバイスを含む。
本発明はまた、前記に示したデバイスを下記のために使用することに関する：心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断された対象の療法をモニタリングする。
さらに本発明は、前記に述べた本発明方法の実施に適応させた、下記のものを含むキットに関する：
ａ）下記のペプチドの濃度を測定するための手段：
心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはトロポニンＩまたはそのバリアント；
炎症マーカー、好ましくはＧＤＦ−１５またはそのバリアント；ＩＧＦＢＰ７またはそのバリアント；および
ｂ）段階ａ）で測定した濃度を対照試料中のそれらのマーカーの各濃度と比較し、これにより本発明の方法を実施するための手段。
キットは、前記に述べた本発明方法の実施に適応させてある。好ましくは、キットは本
発明の方法を実施するための指示を含む。
本発明の方法は、好ましくは下記を含む：
心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、その対象がリスク因子を保有するだけであるか、あるいはその対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を既に伴うかを鑑別する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有する対象が心不全に罹患するリスクを予測する。
一般に、対象（すなわち、リスク因子を保有し、ならびに／あるいは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う個体）は、心不全に罹患していない；すなわち、その患者はその心筋に構造または機能の永久的な損傷を生じておらず、その健康を完全に回復できると予想され、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期ＣまたはＤに分類されされない。好ましくは、対象は心不全のリスク因子を保有する。これらは当業者に既知であり、たとえば高血圧症および糖尿病を含む。同様に好ましくは、対象は心不全の顕性の徴候および／または症状を示していない。
本発明によるキットにより得られる結果に応じて、療法決定または療法適応を行なうことができる。たとえば、投与されている医薬の補充または濃度低下により療法を適応させることができる。したがって、キットはその療法のモニタリングにも適応させることができる。
本発明はまた、前記に示したキットまたはキット類を下記のために使用することに関する：
心不全を発症する、および／または個々の発作を発症する、および／または個々の慢性腎疾患を発症するリスク因子を保有する対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する；
心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、その対象がリスク因子を保有するだけであるか、あるいはその対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を既に伴うかを鑑別する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有する対象が心不全に罹患するリスクを予測する。
一般に、対象（すなわち、リスク因子を保有し、ならびに／あるいは心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う個体）は、心不全に罹患していない；すなわち、その患者はその心筋に構造または機能の永久的な損傷を生じておらず、その健康を完全に回復できると予想され、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期ＣまたはＤに分類されされない。好ましくは、対象は心不全のリスク因子を保有する。これらは当業者に既知であり、たとえば高血圧症および糖尿病を含む。同様に好ましくは、対象は心不全の顕性の徴候および／または症状を示していない。
本発明によるキットの使用により得られる結果に応じて、療法決定または療法適応を行なうことができる。たとえば、投与されている医薬の補充または濃度低下により療法を適応させることができる。したがって、キットはその療法のモニタリングにも使用できる。
本明細書中で用いる用語“キット”は、好ましくは個別に、または単一容器内で提供される、前記手段の集合体を表わす。同様に好ましくは、その容器は本発明の方法を実施するための指示を含む。
本発明はまた、前記に詳述したキット、デバイスおよび手段を下記に示す目的のために使用することに関する：
対象の試料中の心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントおよび／またはトロポニンＩもしくはそのバリアント；ならびに場合によりＧＤＦ−１５またはそのバリアント；ならびに／あるいはＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの濃度を測定するキットまたはデバイスの使用；ならびに心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントおよび／またはトロポニンＩもしくはそのバリアント；ならびに場合によりＧＤＦ−１５またはそのバリアント；ならびに／あるいはＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの濃度を測定する手段の使用；ならびに心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントおよび／またはトロポニンＩもしくはそのバリアント；ならびに場合によりＧＤＦ−１５またはそのバリアント；ならびに／あるいはＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの濃度を、対照試料中のそれらのマーカーのうち少なくとも１種類の濃度と比較する手段の使用であって、下記のための使用：
心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有するけれども心不全の顕性徴候を示していない対象において、その対象がリスク因子を保有するだけであるか、あるいはその対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を既に伴うかを鑑別する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有する対象が心不全に罹患するリスクを予測する；
その際、すべての使用は、心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断することに基づく。
本発明はまた、以下の抗体および手段を下記に示す目的のために使用することに関する：
心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントおよび／またはトロポニンＩもしくはそのバリアントに対する抗体；ならびに場合によりＧＤＦ−１５またはそのバリアントに対する抗体ならびに／あるいはＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントに対する抗体；ならびに／あるいは心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントおよび／またはトロポニンＩもしくはそのバリアントの濃度を測定する手段；ならびに場合によりＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度を測定する手段、ならびに／あるいはＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの濃度を測定する手段；ならびに／あるいは心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントおよび／またはトロポニンＩもしくはそのバリアント；ならびに場合によりＧＤＦ−１５またはそのバリアントならびに／あるいはＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの濃度を、対照試料中のそれらのマーカーのうち少なくとも１種類の濃度と比較する手段の使用であって、下記に用いる診断用組成物を調製するための使用：
心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、その対象がリスク因子を保有するだけであるか、あるいはその対象が心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を既に伴うかを鑑別する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有する対象が心不全に罹患するリスクを予測する；
その際、すべての使用は、心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断することに基づく。
本発明はまた、以下の抗体および手段を下記に示す目的のために使用することに関する：
心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントおよび／またはトロポニンＩもしくはそのバリアントに対する抗体；ならびに場合に
よりＧＤＦ−１５またはそのバリアントに対する抗体ならびに／あるいはＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントに対する抗体；ならびに／あるいは心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントおよび／またはトロポニンＩもしくはそのバリアントの濃度を測定する手段；ならびに場合によりＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度を測定する手段、ならびに／あるいはＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの濃度を測定する手段；ならびに／あるいは心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントおよび／またはトロポニンＩもしくはそのバリアント；ならびに場合によりＧＤＦ−１５またはそのバリアントならびに／あるいはＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントの濃度を、対照試料中のそれらのマーカーのうち少なくとも１種類の濃度と比較する手段の使用であって、下記のための使用：
心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、その対象がリスク因子を保有するだけであるか、あるいはその対象が心筋機能不全に罹患しているか、ならびに／あるいは心不全に先立つ心臓の構造機能および／または構造の異常を既に伴うかを鑑別する；ならびに／あるいは
心不全を発症するリスク因子を保有する対象が心不全に罹患するリスクを予測する；
その際、すべての使用は、心不全を発症するリスク因子を保有する対象において、心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断することに基づく。
さらに、本発明は、心不全を発症するリスク因子を保有する雌性対象がＬＶＨに罹患するリスクを予測するための、雌性対象の試料中の心臓性トロポニンまたはそのバリアント、好ましくはトロポニンＴもしくはそのバリアントおよび／またはトロポニンＩもしくはそのバリアントに特異的に結合する抗体；ならびに場合によりＧＤＦ−１５またはそのバリアントに特異的に結合する抗体ならびに／あるいはＩＧＦＢＰ７またはそのバリアントに特異的に結合する抗体の使用に関する。
一般に、前記に詳述した本発明の使用に関して述べた対象（すなわち、リスク因子を保有し、および／または心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う個体）は心不全に罹患していない；すなわち、その患者はその心筋に構造または機能の永久的な損傷を生じておらず、その健康を完全に回復できると予想され、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類法の病期ＣまたはＤに分類されされない。好ましくは、対象は心不全のリスク因子を保有する。これらは当業者に既知であり、たとえば高血圧症および糖尿病を含む。同様に好ましくは、対象は心不全の顕性の徴候および／または症状を示していない。
前記に詳述した本発明の使用は、好ましくはインビトロ方法である。
前記に示した説明および定義は、必要に応じて変更を加えて、以下の項目に適用される。
本発明の特に好ましい項目は下記のものである：
１．対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を診断する方法であって、下記の段階を含む方法：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、機能および／または構造の異常を診断する。
２．対象は心不全に罹患しておらず、または心不全の症状を提示していない、項目１に
記載の方法。
３．心臓性トロポニンはトロポニンＩもしくはＴまたはそのバリアントである、項目１または２に記載の方法。
４．対象は左心室機能不全に罹患している、項目１〜３のいずれか１つに記載の方法。
５．１種類以上の他の心不全マーカーは、ＧＤＦ−１５もしくはそのバリアント、および／またはＩＧＦＢＰ７もしくはそのバリアントから選択される、項目１〜４のいずれか１つに記載の方法。
６．心不全を発症するリスク因子を保有するだけの対象と、リスク因子を保有するだけでなく心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を既に伴う対象とを鑑別する方法であって、下記の段階を含む方法：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、それらの対象を鑑別する。
７．対象が心不全、または心不全に先立つ個々の心血管事象および腎事象に罹患するリスクを予測する方法であって、下記の段階を含む方法：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、それらの対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測する。
８．対象は左心室機能不全、好ましくは拡張期機能不全に罹患している、項目７に記載の方法。
９．対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の処置を決定する方法であって、下記の段階を含む方法：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンもしくはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；
ｃ）こうして測定した濃度を基準量と比較することにより、その対象の処置を決定する。
１０．処置が下記の医薬のうち少なくとも１種類の投与である、項目９に記載の方法：利尿薬、カルシウムアンタゴニスト、アドレナリンアゴニスト、正の変力作用剤、スタチン類、ヒダザリンおよび二硝酸イソソルビド、好ましくはベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、特にＡＣＥ阻害薬、アンギオテンシン受容体アンタゴニスト。
１１．対象において心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常の処置をモニタリングする方法であって、下記の段階を含む方法：
ａ）少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）こうして段階ａ）で測定したマーカーの濃度を対照試料中のその濃度と比較することにより、その対象がその病態生理学的状態に変化を生じたかどうかを評価する。
１２．対象において心不全を診断する方法であって、下記の段階を含む方法：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）場合により、その試料において１種類以上の他の心不全マーカーの濃度を測定する；そして
ｃ）段階（ａ）で測定した濃度および場合により段階（ｂ）で測定した濃度（単数または複数）を基準量と比較することにより、心不全を評価する。
１３．ある薬物療法を受けており、かつ心不全または心不全に先立つ病期（心不全のリスク因子を含む）に罹患している対象において、その薬物療法をモニタリングする方法であって、下記の段階を含む方法：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンもしくはそのバリアント、および／またはナトリウム利尿ペプチドもしくはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）試料において、ＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度を測定する；そして
ｃ）こうして測定した濃度を基準量と比較することにより、その薬物療法をモニタリングする。
１４．ある薬物療法を受けており、かつ心不全または心不全に先立つ病期（心不全のリスク因子を含む）に罹患している対象において、その薬物療法の適応を決定する方法であって、下記の段階を含む方法：
ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンもしくはそのバリアント、および／またはナトリウム利尿ペプチドもしくはそのバリアントの濃度を測定する；
ｂ）試料において、ＧＤＦ−１５またはそのバリアントの濃度を測定する；
ｃ）こうして測定した濃度を基準量と比較することにより、その薬物療法の適応を決定する。
１５．薬物療法がＡＣＥ阻害薬、アンギオテンシン受容体遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストから選択される、項目１３または１４に記載の方法。
本明細書に引用したすべての参考文献を、それらの開示内容全体および本明細書中に詳細に述べた開示内容に関して本明細書に援用する。
方法
トロポニンＴは、Ｒｏｃｈｅの電気化学発光ＥＬＩＳＡサンドイッチ試験Ｅｌｅｃｓｙｓ Ｔｒｏｐｏｎｉｎ Ｔ ｈｓ（high sensitive、高感度）ＳＴＡＴ（Short Turn Around Time、短ターンアラウンド時間)アッセイを用いて測定された。この試験には、特異
的にヒト心臓性トロポニンＴタンパク質を指向する２種類のモノクローナル抗体を用いる。これらの抗体は、２８８個のアミノ酸からなるトロポニンＴタンパク質の中央部分にある２つのエピトープ（アミノ酸位置１２５−１３１および１３６−１４７）を認識する。ｈｓ−ＴｎＴアッセイ法により、３〜１００００ｐｇ／ｍＬの範囲のトロポニンＴレベルを測定できる。
ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは、Ｒｏｃｈｅの電気化学発光ＥＬＩＳＡサンドイッチ試験Ｅｌｅｃｓｙｓ ｐｒｏＢＮＰ ＩＩ ＳＴＡＴ（短ターンアラウンド時間）アッセイを用いて測定された。この試験には、ｐｒｏＢＮＰ（１−１０８）のＮ末端部分（１−７６）にあ
るエピトープ類を認識する２種類のモノクローナル抗体を用いる。
血清および血漿試料中のＧＤＦ−１５の濃度を測定するために、Ｅｌｅｃｓｙｓ基本型試験を用いた；Ｒ＆Ｄ ＳｙｓｔｅｍｓからのポリクローナルＧＤＦ−１５アフィニティークロマトグラフィー精製ヤギ抗ヒトＧＤＦ−１５ ＩｇＧ抗体（ＡＦ９５７）を使用。各実験において、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓからの組換えヒトＧＤＦ−１５（９５７−ＧＤ／ＣＦ）を用いて標準曲線を作成した。新たなバッチまたは組換えＧＤＦ−１５タンパク質についての結果を標準血漿試料において検査し、１０％を超える偏差はいずれも、このアッセイについての調整係数の導入により補正された。同じ患者からの血清および血漿試料中のＧＤＦ−１５測定は、最終的な希釈計数について補正した後は実質的に同一の結果を与えた。このアッセイの検出限界は２００ｐｇ／ｍｌであった。
ヒト血清または血漿中のＩＧＦＢＰ７の検出のために、サンドイッチＥＬＩＳＡを用いた。抗原の捕獲および検出のために、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓからの抗ＩＧＦＢＰ７ポリクローナル抗体（カタログ番号：ＡＦ １３３４）の部分量を、それぞれビオチンおよびジゴキシゲニンとコンジュゲートさせた。
ストレプトアビジンコートした９６ウェルマイクロタイタープレートトを、１００ｐｉのビオチニル化抗ＩＧＦＢＰ７ポリクローナル抗体と共に、ｌ×ＰＢＳ溶液中１ｐｇ／ｍｌで６０分間インキュベートした。インキュベーション後、プレートをｌ×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ−２０で３回洗浄し、ＰＢＳ＋１％ ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）でブロックし、次いでｌ×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ−２０で再び３回洗浄した。次いでウェルを、標準抗原としての組換えＩＧＦＢＰ７系列希釈液と共に、またはそれぞれ患者もしくは対照個体からの希釈した血清または血漿試料（１：５０）と共に、１．５時間インキュベートした。ＩＧＦＢＰ７が結合した後、プレートをｌ×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ−２０で３回洗浄した。結合した１ＧＦＢＰ７の特異的検出のために、ウェルを１００μｌのジゴキシゲニル化抗ＩＧＦＢＰ７ポリクローナル抗体と共に、ｌ×ＰＢＳ＋１％ ＢＳＡ中１μｇ／ｍｌで６０分間インキュベートした。その後、プレートを３回洗浄して、結合していない抗体を除去した。次の段階で、ウェルを７５ｍＵ／ｍｌの抗ジゴキシゲニン−ＰＯＤコンジュゲート（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ，ドイツ，マンハイム，カタログＮｏ．１６３３７１６）と共にｌ×ＰＢＳ＋１％ ＢＳＡ中で６０分間インキュベートした。その後、プレートを同じ緩衝液で６回洗浄した。抗原−抗体複合体の検出のために、ウェルを１００μｌのＡＢＴＳ溶液（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ，ドイツ，マンハイム，カタログＮｏ．１１６８５７６７）と共にインキュベートし、１５分後に４０５および４９２ｎｍでＥＬＩＳＡリーダーにより光学濃度（ＯＤ）を測定した。
実施例１：
トロポニンＴ、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、ＧＤＦ １５およびＩＧＦＢＰ７を下記の個体集合体において測定した。患者のインフォームドコンセントを得た。
グループ１：正常血圧対象，ｎ＝３２；
グループ２：心不全に罹患するリスク因子を保有する高血圧症対象（病期Ａ），ｎ＝４７；
グループ３：心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う高血圧症対象（初期の病期Ｂ）；対象はＮＴ−ｐｒｏＢＮＰレベルが増大しておらず、対象は左心室に構造変化を示し（中隔壁厚の増大（＞１１ｍｍ）、後壁厚の増大（＞１２ｍｍ）、または肥大もしくは求心性肥大の１期徴候）、ならびに／あるいは対象は収縮期機能不全（ＬＶＥＦ＜５０％）および／または少なくとも５０％の駆出分画ＬＶＥＦを保存した拡張期機能不全を示した，ｎ＝３７。対象は左心室肥大に罹患していなかった；
グループ４：拡張型心筋障害（ＤＣＭ）を伴う対象，ｎ＝２９。
グループ１〜３について、対象は腎機能障害を示していなかった。さらに、心筋梗塞および冠動脈疾患の病歴が分かっている患者をグループ１〜３から除外した。
左心室の幾何学的変化を心エコー検査により判定した（中隔壁厚(septum wall thickness)ＳＴ、後壁厚（posterial wall thickness)ＰＷＴ、ＬＶＥＦ、ＬＶＥＤＤ）；機能変化（ＬＶＥＤＤ）を心エコー検査により判定した。
データは、グループ３の対象（心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う高血圧症対象）においてグループ１（正常血圧対象）およびグループ２（心不全に罹患するリスク因子を保有するだけ）の対象よりトロポニンＴのレベルが高いことを示す。トロポニンＴのレベルは、個体が心不全（ＤＣＭ、グループ４）に進行する時点まで増大し続ける。
データは、グループ３の対象（心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う高血圧症対象）においてグループ１（正常血圧対象）およびグループ２（心不全に罹患するリスク因子を保有するだけ）の対象よりＧＤＦ １５のレベルが高いことを示す。ＧＤＦ １５のレベルは、個体が心不全（ＤＣＭ、グループ４）に進行する時点まで増大し続ける。
データは、グループ３の対象（心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う高血圧症対象）においてグループ１（正常血圧対象）およびグループ２（心不全に罹患するリスク因子を保有するだけ）の対象よりＩＧＦＢＰ７のレベルが高いことを示す。インスリン増殖因子結合タンパク質７のレベルは、個体が心不全、拡張型心筋障害（ＤＣＭ、グループ４）に進行する時点まで増大し続ける。
データは、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのレベルがグループ４の対象（拡張型心筋障害を伴う対象）のみにおいて増大したが、グループ１の対象（正常血圧対象）、グループ２の対象（心不全に罹患するリスク因子を保有する高血圧症対象）およびグループ３の対象（心不全に先立つ心臓の機能および／または構造の異常を伴う高血圧症対象）のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰレベル間には差がみられなかったことを示す。
トロポニンレベルは肥大が顕性になる前ですら初期の病期Ｂの対象を同定できることが、予想外に見出された；すなわち、それらの対象は心不全に罹患するリスク因子をもち、左心室に最初の構造変化を示すが、肥大を伴ってはいない。同様な診断情報がＧＤＦ−１５およびＩＧＦＢＰ７により得られる。
下記の表１、２、３および４にデータを示す。図１、２、３および４は、それぞれ表１、２、３および４のデータをグラフで表わす。
Figure 0006263224
表１：患者グループにおけるトロポニンＴ濃度
Figure 0006263224
表２：患者グループにおけるＧＤＦ−１５濃度
Figure 0006263224
表３：患者グループにおけるＩＧＦＢＰ７濃度
Figure 0006263224
表４：患者グループにおけるＮｔ−ＰｒｏＢＮＰ濃度
表１から分かるように、グループ３に属する患者のトロポニンＴレベルは、グループ１および２に属する患者と比較して３０％より大きく増大していた。したがって、少なくとも３０％の増大は、ＬＶＨを伴わない患者において、ＬＶＨに先立つ、および／または心不全に先立つ、機能および／または構造の異常の存在の指標となる。
これと対照的に、表４から分かるように、グループ３に属する患者のＮｔ−ＰｒｏＢＮＰレベルは、グループ１および２に属する患者と比較して変化しないままである。したがって、ＬＶＨを伴わず、ＬＶＨに先立つ、および／または心不全に先立つ、機能および／または構造の異常を伴う患者は、健康な個体（グループ１）における基準量と比較して少なくとも２０％増大したＮｔ−ＰｒｏＢＮＰのレベルをもたない。
表２および３に示すように、ＩＧＦＢＰ７およびＧＤＦ−１５の両方のレベルとも、グループ３に属する患者においてグループ１および２に属する患者と比較して少なくとも１０％増大している。
表３から分かるように、ＩＧＦＢＰ７のレベルは、グループ１に属する健康な対象における基準量と対比してステージ３の患者において少なくとも２０％増大している。
表５は、グループ１、２および３に属する対象における中隔および後壁の厚さの分布を示す。
Figure 0006263224
表５：中隔および後壁の厚さの分布
表５から分かるように、グループ３の対象は１１ｍｍを超える増大した中隔厚（平均値１３．３ｍｍ，１２〜１６ｍｍ）および増大した後壁厚（平均値１３．４ｍｍ）をもつ。グループ１および２に属する患者は、ＬＶＨに先立つ、および／または心不全に先立つ、構造変化を伴わず、中隔および後壁の厚さの平均値は９．５〜１０．２であった。
したがって、グループ３（初期の病期Ｂ）に属する患者は、１１ｍｍを超える増大した中隔厚（平均値１３．３ｍｍ，１２〜１６ｍｍ）として、ＬＶＨおよび／または心不全に先立つ構造変化を示した。グループ２（病期Ａ）およびグループ１（健康）に属する患者は、構造変化を伴わなかった；たとえば、１１ｍｍを超える増大した中隔厚はなかった。
表６：グループ１、２および３の患者の特徴：性、年齢、およびＬＶＨ／ＨＦ発症に対する各種リスク因子の分布
Figure 0006263224
表６から分かるように、グループ２および３に属するすべての患者ならびに見掛け上は健康なグループ１の対象は、比較可能な平均年齢６０歳であった。
ＨＦの病期Ａまたは初期の病期Ｂにある患者（グループ２および３）の半数は女性であり、それらのすべてが動脈性高血圧症を伴っていた。表６にみられるように、それらのうち２０％は２型糖尿病を伴い、および／または空腹時血糖値が１１０ｍｇ／ｄＬ未満であった。
Figure 0006263224
表７：ＬＶＨ／ＨＦ発症に対する各種リスク因子についてのカットオフの有効性
先の表１から分かるように、グループ３に属する患者のトロポニンＴレベルは、グループ１および２に属する患者と比較して少なくとも２０％より大きく（＞３．３ｐｇ／ｍｌ）、３０％（＞３．５ｐｇ／ｍｌ）より大きく、よりさらに５０％より大きく（＞４．２ｐｇ／ｍｌ）増大していた。単一リスク因子を段階的に除外することにより、トロポニンＴレベルは、初期の病期Ｂの患者では、各リスク因子を伴う病期Ａの患者、すなわち正常血圧である見掛け上は健康な対象と比較して、少なくとも３０％（＞３．５ｐｇ／ｍｌ）
増大していたことが表７から分かる。
動脈性高血圧症を伴う対象においてＬＶＨおよび／または心不全に先立つ構造および／または機能の初期の変化を診断するための、３．３ｐｇ／ｍｌ、好ましくは３．５ｐｇ／ｍｌ、よりさらに好ましくは４．２ｐｇ／ｍｌを超えるＴｎＴレベルのカットオフの有効性が、各種リスク因子グループを段階的に除外することにより示された。
したがって、他のリスク因子、たとえば２型糖尿病を伴うかまたは伴わない動脈性高血圧症患者において、少なくとも３０％、好ましくは少なくとも５０％の増大は、ＬＶＨに先立つ、および／または心不全に先立つ、機能および／または構造の異常の指標となる。
Figure 0006263224
表８：ＬＶＨ／ＨＦ発症に対する各種リスク因子を伴う初期の病期Ｂの患者におけるトロポニンＴレベル増大の確証
構造異常を伴う高血圧症の個体において、構造異常を伴わない高血圧症の個体（および正常血圧の個体）と対比して少なくとも２０％のＴｎＴレベル増大の有効性が、各種リスク因子のサブグループ（脂肪過多症、喫煙歴・・・）について示される。
表８から分かるように、ＴｎＴレベルは構造変化を伴うかまたは伴わない動脈性高血圧症の女性患者を、男性患者より良好に鑑別する（少なくとも５０％−対−少なくとも２０
％）。
したがって、増大したＴｎＴレベルは、特に高血圧症の女性において、ＬＶＨおよび／または心不全に先立つ構造および／または機能の初期の変化の指標となる。
Figure 0006263224
表９：ＬＶＨ／ＨＦ発症に対する各種リスク因子についてのカットオフの有効性
先の表１から分かるように、グループ３に属する患者のＩＧＦＢＰ７レベルは、グループ１および２に属する患者と比較して少なくとも１０％より大きく、よりさらに少なくとも２０％より大きく（＞４６．５ｐｇ／ｍｌ）増大していた。単一リスク因子を段階的に除外することにより、ＩＧＦＢＰ７レベルは、初期の病期Ｂの患者では、各リスク因子を伴う病期Ａの患者、すなわち正常血圧である見掛け上は健康な対象と比較して、少なくとも１０％増大していたことが表９から分かる。
したがって、他のリスク因子、たとえば脂肪過多症を伴うかまたは伴わない動脈性高血圧症患者において、少なくとも１０％、好ましくは少なくとも２０％の増大は、ＬＶＨに先立つ、および／または心不全に先立つ、機能および／または構造の異常の存在の指標となる。動脈性高血圧症を伴う対象においてＬＶＨおよび／または心不全に先立つ構造および／または機能の初期の変化を診断するための、４６．５ｐｇ／ｍｌを超えるＩＧＦＢＰ７レベルのカットオフの有効性が、各種リスク因子グループを段階的に除外することにより示された。
Figure 0006263224
表１０：各種リスク因子を伴う初期の病期Ｂの患者におけるＩＧＦＢＰ７レベル増大の確証
構造異常を伴う高血圧症の個体において、構造異常を伴わない高血圧症の個体（および正常血圧の個体）と対比して少なくとも１０％のＴｎＴレベル増大の 有効性が、各種リスク因子のサブグループ（リピド(lipids)、喫煙歴．．．）について示される。
したがって、増大したＩＧＦＢＰ７レベルは、特に高血圧症の女性において、ＬＶＨおよび／または心不全に先立つ構造および／または機能の初期の変化の指標となった。
実施例２：
トロポニンＴ、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰおよびＧＤＦ−１５を下記の個体集合体において測定した。顕性心不全を伴う合計９７人の患者を試験に参加させた；平均年齢６０．９歳、男性５２人、女性４５人、ＬＶＥＦは５０％未満、正常クレアチニンレベルに表わされるように腎機能は正常であった。すべての患者がベータ遮断薬およびＡＣＥ阻害薬療法を受けており、５９人の患者はアルドステロンアンタゴニストを投与され、３８人はアルドステロンアンタゴニストを投与されていなかった。患者をこの試験で指針（前記）に従って処置した。糖尿病またはメタボリックシンドロームに罹患している患者はおらず、さらに肝疾患または悪性疾患に罹患している患者はいなかった。
アルドステロンアンタゴニストを投与されていない３８人の患者（すべてがクラスＣ）は、下記の特徴を備えていた。
Figure 0006263224
表１１：アルドステロンアンタゴニストを投与されていない３８人の患者のマーカー濃度
アルドステロンアンタゴニストを投与されている患者（すべてがクラスＣ）は、下記の特徴を備えていた。
Figure 0006263224
表１２：アルドステロンアンタゴニストを投与されている患者のマーカー濃度
アルドステロンアンタゴニストを投与されている患者は、アルドステロンアンタゴニストを投与されていない患者より重篤な心不全を伴っていた。ところが、比を求めると、ＧＤＦ １５がアルドステロンアンタゴニストグループのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰおよびＧＤＦ
１５に対比して低いことが明らかになり、これはＧＤＦ １５がアルドステロンアンタゴニストの使用およびモニタリングに関する価値あるマーカーであることを示していた。
前記のように、病期ＡおよびＢにおけるＡＣＥ阻害薬の推奨は抗炎症処置の必要性を示唆するが、多型性のためこれは必ずしもすべての症例において有効ではないと思われるので、低用量のアルドステロンアンタゴニストが病期ＡおよびＢの心不全にも有用な可能性がある。ＮＴ−ｐｒｏ ＢＮＰ／ＧＤＦ １５比およびトロポニンＴ／ＧＤＦ １５比は、この薬物の使用についてのガイダンスを提供する。言い換えると、すべての症例において、ＡＣＥ阻害薬およびアンギオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）が有効であることが大規模ランダム化試験で示されたが、現在は個々の患者においてこれらの薬物の有効性を診断する手段がない。これは、腎疾患患者におけるこれらの薬物の適用と対照的である；この場合は、尿中アルブミンの減少を利用して処置の成功を確認できる。したがって本発明方法は、処置の不成功を診断するための方法を初めてもたらし、アルドステロン阻害薬またはアルドステロンの合成を阻害する将来の薬物を用いる処置を改善するためのガイダンスを提供する。
個別症例研究
安定樹立したクラスＣ心不全を伴う６２歳の患者は、現在、ベータ遮断薬とＡＣＥ阻害
薬の組合わせを投与されている。患者から得た血清試料中のＧＤＦ−１５、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰおよびトロポニンＴを測定する。ＮＴ−ｐｒｏ ＢＮＰ／ＧＤＦ １５比は０．３９、トロポニンＴ／ＧＤＦ １５比は０．００３である。療法が不適切であるため、患者はスピロノラクトン２５ｍｇ／日の投与を開始する。３か月後、ＮＴ−ｐｒｏ ＢＮＰ／ＧＤＦ １５比は０．６２、トロポニンＴ／ＧＤＦ １５比は０．００６である。療法がまだ不適切であるため、スピロノラクトンを５０ｍｇ／日に増加する。再び３か月後、ＮＴ−ｐｒｏ ＢＮＰ／ＧＤＦ １５比は０．９、トロポニンＴ／ＧＤＦ １５比は０．０１２であり、療法は適切であることが分かる。
安定クラスＣ心不全を伴う４８歳の女性患者は、ベータ遮断薬とＡＣＥ阻害薬の標準療法を受けている。患者から得た血清試料中のＧＤＦ−１５、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰおよびトロポニンＴを測定する。ＮＴ−ｐｒｏ ＢＮＰ／ＧＤＦ １５比は０．９５、トロポニンＴ／ＧＤＦ １５比は０．０１１である。これらの結果は、その患者がアルドステロンアンタゴニストによる療法を必要としないことを示す。その療法は９カ月前に開始したばかりなので、患者にＡＣＥ阻害薬耐性の可能性を伝え、１２カ月以内または心不全の症状が発現した時点で追跡来院するようにアドバイスする。
安定心不全クラスＣを伴う６８歳の男性患者は、現在、ベータ遮断薬、ＡＣＥ阻害薬および低用量のアルドステロンアンタゴニストの組合わせを投与されている。ＮＴ−ｐｒｏ
ＢＮＰ／ＧＤＦ １５比は０．９５、トロポニンＴ／ＧＤＦ １５比は０．０１２である。患者に、療法が適切であり、現在の処置計画を続行すること、１２カ月以内または症状が悪化した時点で再び追跡来院することを伝える。
安定タイプＣ心不全を伴う５６歳の患者は、ベータ遮断薬、ＡＣＥ阻害薬および２５ｍｇ／日のスピロノラクトンによる療法を受けており、ＮＴ−ｐｒｏ ＢＮＰ／ＧＤＦ １４比は１，７、トロポニンＴ／ＧＤＦ １５比は０．０２である。患者に、スピロノラクトンを３ヶ月間停止する試みを実施し（停止の効果は著しく遅れて認識されるにすぎないので）、次いでスピロノラクトンの必要性を判定することができるとアドバイスする。スピロノラクトン停止の３ヶ月後、ＮＴ−ｐｒｏ ＢＮＰ／ＧＤＦ １５比は０．９、トロポニンＴ／ＧＤＦ １４比は０．０１３である。スピロノラクトンを停止できると患者に伝える。

Claims (14)

  1. 雌性対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測するための指標を提供する方法であって、下記の段階を含む方法：
    ａ）その対象から得た試料において、少なくとも１種類の心臓性トロポニンまたはそのバリアントの濃度を測定する、ここで前記対象は終末期の腎不全に罹患していない；そして
    ｃ）段階ａ）で測定した濃度を基準量と比較することにより、それらの対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測するための指標を提供する。
  2. さらに、ｂ）前記試料においてＧＤＦ−１５および／またはＩＧＦＢＰ７、あるいはそれらに特異的に結合する抗体の濃度を測定し、基準量と比較することにより、それらの対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測するための指標を提供する、請求項１記載の方法。
  3. 段階ａ）および／または段階ｂ）で測定した濃度が基準量と比較して増加していることが雌性対象が左心室肥大に罹患するリスクの指標である、請求項１または２記載の方法。
  4. 対象は少なくとも１つの心不全リスク因子を保有する、請求項１から３のいずれか一項記載の方法。
  5. 少なくとも１つのリスク因子を保有する対象が高血圧症に罹患している、請求項４に記載の方法。
  6. 基準量が健康な雌性対象またはそのグループに由来し、その基準量と比較して少なくとも３０％の心臓性トロポニンの増大は、その対象が左心室肥大に罹患するリスクの指標となる、請求項１〜５のいずれか一項記載の方法。
  7. 基準量が健康な雌性対象またはそのグループに由来し、その基準量と比較して少なくとも５０％の心臓性トロポニンの増大は、その対象が左心室肥大に罹患するリスクの指標となる、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
  8. 心臓性トロポニンがトロポニンＴである、請求項１〜７のいずれか一項記載の方法。
  9. 雌性対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測するための、心臓性トロポニン、または心臓性トロポニンに特異的に結合する抗体のインビトロ使用であって、ここで前記対象は終末期の腎不全に罹患していない、前記使用。
  10. さらに、ＧＤＦ−１５および／またはＩＧＦＢＰ７、あるいはそれらに特異的に結合する抗体の使用を含む、請求項９に記載のインビトロ使用。
  11. 雌性対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測するための指標を提供する方法であって、下記の段階を含む方法：
    ａ）その対象から得た試料において、心臓性トロポニンＩの濃度を測定する、ここで前記対象は終末期の腎不全に罹患していない；そして
    ｃ）段階ａ）で測定した濃度を基準量と比較することにより、それらの対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測するための指標を提供する。
  12. 前記対象は終末期の腎不全に罹患していない、請求項１１記載の方法。
  13. 雌性対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測するための指標を提供する方法であって、下記の段階を含む方法：
    ａ）その対象から得た試料において、心臓性トロポニンＴの濃度を測定する、ここで前記対象は終末期の腎不全に罹患していない；そして
    ｃ）段階ａ）で測定した濃度を基準量と比較することにより、それらの対象が左心室肥大に罹患するリスクを予測するための指標を提供する。
  14. 前記対象は終末期の腎不全に罹患していない、請求項１３記載の方法。
JP2016092730A 2010-08-26 2016-05-02 動脈性高血圧症から心不全への初期移行の評価におけるバイオマーカーの使用 Active JP6263224B2 (ja)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP10174182.5 2010-08-26
EP10174182 2010-08-26
EP10186710.9 2010-10-06
EP10186710 2010-10-06

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2014258701A Division JP5933682B2 (ja) 2010-08-26 2014-12-22 動脈性高血圧症から心不全への初期移行の評価におけるバイオマーカーの使用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2016166892A JP2016166892A (ja) 2016-09-15
JP6263224B2 true JP6263224B2 (ja) 2018-01-17

Family

ID=45722923

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2013525221A Active JP5676763B2 (ja) 2010-08-26 2011-08-03 動脈性高血圧症から心不全への初期移行の評価におけるバイオマーカーの使用
JP2014258701A Active JP5933682B2 (ja) 2010-08-26 2014-12-22 動脈性高血圧症から心不全への初期移行の評価におけるバイオマーカーの使用
JP2016092730A Active JP6263224B2 (ja) 2010-08-26 2016-05-02 動脈性高血圧症から心不全への初期移行の評価におけるバイオマーカーの使用

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2013525221A Active JP5676763B2 (ja) 2010-08-26 2011-08-03 動脈性高血圧症から心不全への初期移行の評価におけるバイオマーカーの使用
JP2014258701A Active JP5933682B2 (ja) 2010-08-26 2014-12-22 動脈性高血圧症から心不全への初期移行の評価におけるバイオマーカーの使用

Country Status (7)

Country Link
US (3) US20140065648A1 (ja)
EP (3) EP2796874B1 (ja)
JP (3) JP5676763B2 (ja)
CN (3) CN108387744A (ja)
CA (1) CA2807213C (ja)
ES (2) ES2534921T3 (ja)
WO (1) WO2012025355A1 (ja)

Families Citing this family (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2694092B1 (en) * 2011-04-08 2017-01-04 Amgen Inc. Method of treating or ameliorating metabolic disorders using growth differentiation factor 15 (gdf-15)
MX347355B (es) 2011-10-17 2017-04-24 Hoffmann La Roche Diagnostico basado en troponina y en peptido natriuretico cerebral (bnp) de pacientes en riesgo y de causa de ataque.
EP2807266B1 (en) 2012-01-26 2020-01-15 Amgen Inc. Growth differentiation factor 15 (gdf-15) polypeptides
WO2013148117A1 (en) 2012-03-27 2013-10-03 Ngm Biopharmaceuticals, Inc. Compositions and methods of use for treating metabolic disorders
SI2883057T1 (sl) * 2012-08-09 2019-07-31 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Diagnostika srčnega popuščanja
ES2913539T3 (es) 2012-09-12 2022-06-02 Hoffmann La Roche Identificación de pacientes con fracción de acortamiento anómala
US20140273273A1 (en) 2012-11-01 2014-09-18 Christie Mitchell Ballantyne Biomarkers to improve prediction of heart failure risk
WO2014072500A1 (en) 2012-11-09 2014-05-15 Roche Diagnostics Gmbh Tnt based diagnosis of paroxysmal atrial fibrillation
EP2730923A1 (en) 2012-11-09 2014-05-14 Roche Diagniostics GmbH NTproBNP and cTnT based therapy guidance in heart failure
CN108956999A (zh) 2012-12-04 2018-12-07 霍夫曼-拉罗奇有限公司 心力衰竭疗法的选择中的生物标记物
US9161966B2 (en) 2013-01-30 2015-10-20 Ngm Biopharmaceuticals, Inc. GDF15 mutein polypeptides
BR112015018104A2 (pt) 2013-01-30 2017-11-21 Ngm Biopharmaceuticals Inc polipeptídeos de gdf15 modificados, seu uso, composições compreendendo os mesmos e recipiente estéril compreendendo as referidas composições
CA2919759A1 (en) * 2013-07-29 2015-02-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Use of alpha-crystallin b (cryab) in the assessment of heart failure
MX387211B (es) 2013-07-31 2025-03-18 Amgen Inc Construcciones del factor de diferenciacion de crecimiento 15 (gdf-15)
CA2935958A1 (en) * 2014-01-10 2015-07-16 Critical Care Diagnostics, Inc. Methods and systems for determining risk of heart failure
EP2916134B1 (en) 2014-03-05 2017-08-16 Roche Diagnostics GmbH Use of Seprase for differential diagnosis of acute dyspnea
ES2939018T3 (es) 2014-03-26 2023-04-18 Hoffmann La Roche IGFBP7 para diagnosticar una disfunción diastólica
WO2015171989A1 (en) * 2014-05-08 2015-11-12 University Of Maryland, Baltimore Methods for assessing differential risk for developing heart failure
US10172568B2 (en) * 2014-07-14 2019-01-08 Medtronic, Inc. Determining prospective risk of heart failure hospitalization
SG10201802098UA (en) 2014-07-30 2018-04-27 Ngm Biopharmaceuticals Inc Compositions and methods of use for treating metabolic disorders
BR112017005730B1 (pt) 2014-09-26 2023-12-12 Somalogic Operating Co., Inc Método para triagem de um indivíduo quanto ao risco de um evento cardiovascular ou para predizer a probabilidade que um indivíduo tenha tal evento
BR112017005554A2 (en) * 2014-10-29 2018-01-23 F. Hoffmann-La Roche Ag methods for predicting a subject's risk of rapid progression to chronic heart failure and uses of at least one biomarker and at least one binding agent
MY186702A (en) 2014-10-31 2021-08-11 Ngm Biopharmaceuticals Inc Compositions and methods of use for treating metabolic disorders
CA3012985A1 (en) 2015-01-27 2016-08-04 Kardiatonos, Inc. Biomarkers of vascular disease
AU2017241161B2 (en) 2016-03-31 2022-05-26 Ngm Biopharmaceuticals, Inc. Binding proteins and methods of use thereof
KR102112945B1 (ko) * 2016-04-18 2020-05-19 에프. 호프만-라 로슈 아게 일반 집단에서 lvh 로의 진행자 확인을 위한 가용성 st2
WO2018127372A1 (en) * 2016-12-13 2018-07-12 Witteman Johanna Cornelia Maria Detection of transient troponin peaks for diagnosis of subjects at high risk of cardiovascular disease
WO2018187767A1 (en) * 2017-04-06 2018-10-11 The Regents Of The University Of California Predicting, diagnosing, and treating nausea and vomiting of pregnancy
WO2019071128A1 (en) * 2017-10-06 2019-04-11 Mhs Care-Innovation Llc ASSESSING MEDICAL IMAGING OF THE LEFT VENTRICULAR MASS
KR20200140878A (ko) 2018-04-09 2020-12-16 암젠 인크 성장 분화 인자 15 융합 단백질
JP7024576B2 (ja) * 2018-04-20 2022-02-24 オムロンヘルスケア株式会社 電子血圧計および心不全検出器
WO2020202241A1 (ja) * 2019-03-29 2020-10-08 栄研化学株式会社 動脈硬化及び動脈硬化関連疾患マーカー
EP3948301A1 (en) * 2019-03-29 2022-02-09 B.R.A.H.M.S GmbH Prescription of remote patient management based on biomarkers
WO2021067655A1 (en) 2019-10-04 2021-04-08 Amgen Inc. Use of gdf15 for treating cardiometabolic syndrome and other conditions
US11476004B2 (en) * 2019-10-11 2022-10-18 Hualien Armed Forces General Hospital System capable of establishing model for cardiac ventricular hypertrophy screening
CN113238063A (zh) * 2021-05-31 2021-08-10 迈克生物股份有限公司 Gdf15评估代谢综合征患者进展为心血管疾病的应用
US20240071625A1 (en) * 2022-08-29 2024-02-29 Cedars-Sinai Medical Center Nafld identification and prediction systems and methods

Family Cites Families (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4620549A (en) 1985-01-25 1986-11-04 Becton, Dickinson And Company Blood collection assembly
DE3922873A1 (de) * 1989-04-25 1990-10-31 Boehringer Mannheim Gmbh Spezifische antikoerper gegen troponin t, ihre herstellung und verwendung in einem reagenz zur bestimmung von hermuskelnekrosen
US5744101A (en) 1989-06-07 1998-04-28 Affymax Technologies N.V. Photolabile nucleoside protecting groups
US5604105B1 (en) * 1990-10-12 1999-08-24 Spectral Diagnostics Inc Method and device for diagnosingand distinguishing chest pain in early onset thereof
GB9211686D0 (en) 1992-06-03 1992-07-15 Medisinsk Innovation A S Chemical compounds
CA2162121A1 (en) 1993-05-17 1994-11-24 Richard W. Wicks Assay for cardiac troponin i
WO1999006445A1 (en) 1997-07-31 1999-02-11 The Johns Hopkins University School Of Medicine Growth differentiation factor-15
US6709855B1 (en) 1998-12-18 2004-03-23 Scios, Inc. Methods for detection and use of differentially expressed genes in disease states
ES2275513T3 (es) 1999-05-17 2007-06-16 Biopharm Gesellschaft Zur Biotechnologischen Entwicklung Und Zum Vertrieb Von Pharmaka Mbh Propiedades neuroprotectoras de gdf-15, un miembro de la superfamilia de tgf-beta.
US7632647B2 (en) 2001-04-13 2009-12-15 Biosite Incorporated Use of B-type natriuretic peptide as a prognostic indicator in acute coronary syndromes
EP1322957B1 (en) 2001-05-04 2009-08-12 Biosite Incorporated Diagnostic markers of acute coronary syndromes and methods of use thereof
US20090042780A1 (en) 2004-05-20 2009-02-12 Acceleron Pharma Inc Modified TGF-Beta Superfamily Polypeptides and Related Methods
US20060003338A1 (en) 2004-06-30 2006-01-05 Deng David X System and methods for the management and treatment of vascular graft disease
WO2007013641A1 (ja) * 2005-07-25 2007-02-01 Genomidea Inc. Cmya5遺伝子に存在する遺伝子多型と疾患の診断のための検出方法
AU2007249620A1 (en) * 2006-05-09 2007-11-22 Musc Foundation For Research Development Detecting diastolic heart failure by protease and protease inhibitor plasma profiling
CN106018820B (zh) * 2006-08-04 2018-04-27 汉诺威医学院 根据gdf-15评价心脏介入风险的工具与方法
EP1884777A1 (en) * 2006-08-04 2008-02-06 Medizinische Hochschule Hannover Means and methods for assessing the risk of cardiac interventions based on GDF-15
EP1890153A1 (en) * 2006-08-16 2008-02-20 F. Hoffman-la Roche AG Cardiac troponin as an indicator of advanced coronary artery disease
EP1890154B1 (en) 2006-08-16 2012-07-04 F. Hoffmann-La Roche AG Cardiac troponin as an indicator of advanced coronary artery disease
JP5306218B2 (ja) 2006-11-21 2013-10-02 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー トロポニンＴおよびＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの検出に基づく慢性動脈疾患での診断および治療的アプローチの最適化のための手段および方法
WO2008089994A1 (en) * 2007-01-25 2008-07-31 Roche Diagnostics Gmbh Use of igfbp-7 in the assessment of heart failure
RU2498309C2 (ru) * 2007-05-10 2013-11-10 Акорда Терапьютикс, Инк. Способы выявления сердечных нарушений
JP5198565B2 (ja) * 2007-08-30 2013-05-15 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 心疾患に関連する又は関連しないｇｄｆ−１５の上昇の区別のための手段及び方法
EP2210111A1 (en) * 2007-10-10 2010-07-28 Roche Diagnostics GmbH Natriuretic peptide/troponin ratio for the assessment of preexisting myocardial dysfunction in patients with acute coronary syndrome
EP2201383B1 (en) * 2007-10-10 2014-01-15 Roche Diagnostics GmbH Means and methods for monitoring myocardial infarction and its treatment
AU2009222048A1 (en) 2008-03-03 2009-09-11 Dyax Corp. Metalloproteinase 9 binding proteins
GB2458025A (en) 2008-03-05 2009-09-09 Singulex Inc Methods of detecting cardiac troponin using a single molecule detector
EP2274622B1 (en) 2008-04-30 2014-10-08 The Governing Council of the University of Toronto Use of sfrp-3 in the assessment of heart failure
EP2294423A1 (en) * 2008-05-15 2011-03-16 F. Hoffmann-La Roche AG Multimarker panel for the differentiation of dilated cardiomyopathy and as basis for a differential therapy and its result
WO2009150253A1 (en) * 2008-06-13 2009-12-17 F. Hoffmann La-Roche Ag Assessment of complications of patients with type 1 diabetes
US9103785B2 (en) 2008-06-25 2015-08-11 Emergence Genomics, Llc Method and apparatus for melting curve analysis of nucleic acids in microarray format
EP2318844A1 (en) * 2008-07-14 2011-05-11 Roche Diagnostics GmbH Multimarker panel for diagnosing, monitoring and selecting the therapy for patients with heart failure
WO2010012616A1 (en) * 2008-07-30 2010-02-04 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Blood glutathione as a biomarker for screening asymptomatic patients at risk for heart failure
AU2009313561A1 (en) * 2008-11-06 2011-06-30 Musc Foundation For Research Development Detecting and monitoring left ventricular hypertrophy and congestive heart failure by profiling biomarkers

Also Published As

Publication number Publication date
ES2627337T3 (es) 2017-07-27
JP5676763B2 (ja) 2015-02-25
EP2796874B1 (en) 2017-03-08
US20140065648A1 (en) 2014-03-06
US20150079615A1 (en) 2015-03-19
JP2015079008A (ja) 2015-04-23
CA2807213A1 (en) 2012-03-01
JP2013536425A (ja) 2013-09-19
JP5933682B2 (ja) 2016-06-15
JP2016166892A (ja) 2016-09-15
WO2012025355A1 (en) 2012-03-01
EP2796874A1 (en) 2014-10-29
CN103080746B (zh) 2015-07-15
ES2534921T3 (es) 2015-04-30
US20210164969A1 (en) 2021-06-03
CA2807213C (en) 2022-06-28
EP2609427B1 (en) 2015-01-21
CN103080746A (zh) 2013-05-01
HK1184853A1 (zh) 2014-01-30
EP2609427A1 (en) 2013-07-03
HK1217230A1 (zh) 2016-12-30
CN105044349B (zh) 2018-04-06
CN105044349A (zh) 2015-11-11
EP3225994A1 (en) 2017-10-04
CN108387744A (zh) 2018-08-10
US10942175B2 (en) 2021-03-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6263224B2 (ja) 動脈性高血圧症から心不全への初期移行の評価におけるバイオマーカーの使用
JP6247302B2 (ja) 異常な短縮率（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌｓｈｏｒｔｅｎｉｎｇ）を持つ患者の同定
US20110107821A1 (en) Multimarker panel for monitoring patients with and without overt heart failure
KR101522078B1 (ko) 좌심실 비대에 대한 멀티마커 패널
US20110111527A1 (en) Multimarker panel for differentiation of dilated cardiomyopathy and as a basis for differential therapy
US20110207629A1 (en) Predicting cardiovascular events and renal failure in type 1 diabetics
HK1217230B (en) Use of biomarkers in the assessment of the early transition from arterial hypertension to heart failure
AU2010297279B2 (en) Multimarker panel for left ventricular hypertrophy
HK1184853B (en) Use of biomarkers in the assessment of the early transition from arterial hypertension to heart failure
HK1166370B (en) Multimarker panel for left ventricular hypertrophy

Legal Events

Date Code Title Description
A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20170331

A977 Report on retrieval

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007

Effective date: 20170331

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20170630

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20171116

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20171215

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 6263224

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250