JP6018874B2 - Plant growth regulator - Google Patents

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Description

本発明は、植物成長調整剤に関する。   The present invention relates to a plant growth regulator.

農業分野において、植物の成長を制御することは生産性向上のために重要な技術である。現在では植物の成長抑制を目的とした様々な種類の植物成長調整剤が実用化され、作物の収量や生産物の品質向上に貢献している。   In the agricultural field, controlling plant growth is an important technique for improving productivity. At present, various types of plant growth regulators aimed at suppressing plant growth have been put into practical use, contributing to the improvement of crop yield and product quality.

しかしながら、根の発達を促進する植物成長調整剤は、その数が少なく、効果も十分でなく、好ましくない作用を有する場合もあった。例えば、現在発根剤として広く用いられているオーキシン系化合物は、植物の種類や状態、施用する濃度によっては葉の上偏成長、茎の捻転や茎割れ、根こぶの誘導、更には枯死等といった好ましくない作用を及ぼすことがあるため、使用方法、使用量等に制限があり、また根の発達を促進する作用も十分満足できるものではなかった。   However, plant growth regulators that promote root development have a small number, are not sufficiently effective, and sometimes have undesirable effects. For example, auxin compounds that are widely used as rooting agents at present, depending on the type and state of the plant, depending on the concentration applied, uneven growth of leaves, torsion and cracking of stems, induction of root nodules, and even death Such an undesired effect may be exerted, so that there are limitations on the method of use, amount of use, etc., and the effect of promoting root development was not satisfactory.

また、植物の種子は播種後の気象条件等の影響によって発芽が不順となると、収量の低下に結びつくため問題となっているが、発芽不順現象を改善する植物成長調整剤もその数が少なく、効果も十分でなかった。   In addition, plant seeds are problematic because germination due to the influence of weather conditions after sowing leads to a decrease in yield, but there are few plant growth regulators that improve germination irregularity, The effect was not sufficient.

ところで、フェニル乳酸は植物の発根促進作用をもつことが知られている(非特許文献1)が、その作用は弱いため、単独では植物成長調整剤として実用化に至っていない。一方、フェニル乳酸にトリプトファンを混合すると協働作用が認められることや、フェニル乳酸を含有する微生物培養液やその部分精製物にトリプトファン混合すると植物成長調整作用が認められることが報告されている(特許文献1)が、さらなる効果の増強が望まれていた。   By the way, although phenyllactic acid is known to have a plant rooting promoting action (Non-patent Document 1), since its action is weak, it has not been put into practical use as a plant growth regulator alone. On the other hand, it has been reported that when tryptophan is mixed with phenyl lactic acid, a synergistic action is observed, and when a microorganism culture solution containing phenyl lactic acid or a partially purified product thereof is mixed with tryptophan, a plant growth regulating action is observed (patent) Document 1) has been desired to further enhance the effect.

また、エチレンは植物の種類やその状態によっては発根促進作用や発芽促進作用も有することが知られている(非特許文献2)が、その前駆体であるメチオニンにはそのような効果は一般的には認められていない。特にメチオニンを高濃度で土壌灌注するとかえって根の生育を抑制することもあり、植物成長調整剤として実用化されてはいない。   In addition, ethylene is known to have a rooting promoting action and a germination promoting action depending on the kind of plant and its state (Non-patent Document 2), but such an effect is generally exerted on the precursor methionine. Is not allowed. In particular, when methionine is irrigated with soil at a high concentration, root growth may be suppressed, and it has not been put into practical use as a plant growth regulator.

国際公開第2009/104405号パンフレットInternational Publication No. 2009/104405 Pamphlet

Mikami et al. 1970. Several synthetic hydroxy-acids as plantgrowth regulators. Agricultural and Biological Chemistry 34: 977-979.Mikami et al. 1970. Several synthetic hydroxy-acids as plantgrowth regulators. Agricultural and Biological Chemistry 34: 977-979. Phatak et al. 1981. Flowering and adventitious root growth of tomato cultivars as influenced by ethephon. Hort. Science 16:181-182.Phatak et al. 1981. Flowering and adventitious root growth of tomato cultivars as influenced by ethephon. Hort. Science 16: 181-182.

本発明の課題は、根の発達を促進する効果に優れた植物成長調整剤を提供することにある。   The subject of this invention is providing the plant growth regulator excellent in the effect which accelerates | stimulates root development.

本発明者らは、かかる問題点を解決するために鋭意研究した結果、意外にもフェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩とを併用することで、植物の発根促進効果が大幅に増強されることを見出し、本発明を完成するに至った。   As a result of diligent research to solve such problems, the present inventors have surprisingly enhanced the rooting promoting effect of plants by using phenyllactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof in combination. As a result, the present invention has been completed.

そこで、本発明は、フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩とを組み合わせてなる植物成長調整剤を提供するものである。   Therefore, the present invention provides a plant growth regulator comprising a combination of phenyllactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof.

また、本発明は、フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩を植物に施用することを特徴とする植物成長調整方法を提供するものである。   The present invention also provides a plant growth adjustment method characterized by applying phenyllactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof to a plant.

本発明の植物成長調整剤は、植物の発根促進活性が高く、かつ葉の上偏成長促進作用といった副作用が極めて弱いため、植物の成長調整剤、特に発根促進剤として生育期間全体にわたって使用できる。特に育苗期・移植時の発根促進剤として有用である。また、植物の発芽促進剤としても有用である。また、植物の発根促進活性が高く、農薬や肥料添加剤として、また肥料としても有用である。   The plant growth regulator of the present invention has a high rooting promoting activity of plants and has extremely weak side effects such as an action of promoting the upward growth of leaves. Therefore, it is used throughout the growth period as a plant growth regulator, particularly as a rooting promoter. it can. It is particularly useful as a rooting promoter during seedling and transplanting. It is also useful as a germination promoter for plants. Further, it has high rooting promoting activity of plants, and is useful as an agrochemical, a fertilizer additive, and a fertilizer.

本発明の植物成長調整剤の有効成分(以下、「植物成長調整物質」という)はフェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩である。   The active ingredient of the plant growth regulator of the present invention (hereinafter referred to as “plant growth regulator”) is phenyllactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof.

本発明に用いる植物成長調整物質のうち、メチオニンは、D体でもL体でも両者の混合物でもよいが、L体が好ましい。
当該メチオニンは、市販品でもよく、有機合成や微生物発酵によって製造されたものを用いてもよい。また、メチオニン又はその塩を含む組成物を用いてもよく、例えば、メチオニンを含む微生物発酵培養液、メチオニンを構成成分とするタンパク質・ペプチド(いわゆるタンパク態)やその分解物等が挙げられるが、このうち、タンパク態でなく、メチオニン又はその塩、或いはメチオニン又はその塩を含む培養液が特に好ましい。
Among the plant growth regulators used in the present invention, methionine may be D-form, L-form, or a mixture of both, but L-form is preferred.
The methionine may be a commercially available product or may be produced by organic synthesis or microbial fermentation. In addition, a composition containing methionine or a salt thereof may be used, for example, a microbial fermentation broth containing methionine, a protein / peptide (so-called protein state) containing methionine as a constituent, or a degradation product thereof, Among these, methionine or a salt thereof, or a culture solution containing methionine or a salt thereof is particularly preferable instead of a protein form.

メチオニンの塩としては、特に限定されないが、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩;カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属塩;アンモニア;クエン酸、酒石酸、シュウ酸、乳酸、酢酸等の有機酸塩;リン酸、炭酸、硝酸、硫酸、塩酸等の鉱酸塩等が挙げられる。   The salt of methionine is not particularly limited, but alkali metal salts such as sodium and potassium; alkaline earth metal salts such as calcium and magnesium; ammonia; organic acid salts such as citric acid, tartaric acid, oxalic acid, lactic acid, and acetic acid; Examples thereof include mineral acid salts such as phosphoric acid, carbonic acid, nitric acid, sulfuric acid and hydrochloric acid.

メチオニンの製造方法としては、例えば、公知の方法により工業的にDL体を合成し、さらにこれを光学分割することによってD体とL体が得られる[大木ら(編).『化学辞典』東京化学同人]。また、微生物を用いた発酵法や微生物変換法、微生物由来の酵素を用いた酵素法によってもL体を得ることが出来る[椎尾 勇1986.メチオニン、フェニルアラニン、チロシン発酵.相田ら(編).『アミノ酸発酵』343-360ページ.学会出版センター]。   As a method for producing methionine, for example, a DL isomer is industrially synthesized by a known method and further optically resolved to obtain a D isomer and an L isomer [Oki et al. (Ed.). "Chemical Dictionary" Tokyo Chemical Doujin]. L-forms can also be obtained by fermentation methods using microorganisms, microorganism conversion methods, and enzyme methods using microorganism-derived enzymes [Ishio Isamu 1986. Methionine, phenylalanine, tyrosine fermentation. Aida et al. "Amino acid fermentation" pp. 343-360. Academic Publishing Center].

本発明に用いる植物成長調整物質のうち、フェニル乳酸(3−フェニル乳酸)は、D体でもL体でも両者の混合物でもよいが、D体が好ましい。
当該フェニル乳酸は、市販品でもよく、有機合成や微生物発酵によって製造されたものを用いてもよい。
また、植物成長調整物質としてフェニル乳酸又はその塩を含む組成物を用いてもよく、例えばコーンスティープリカー、食酢にはフェニル乳酸が含まれ、これらをそのまま使用してもよく、また濃縮、希釈又は懸濁して使用してもよい。この際、コーンスティープリカー製造時にフェニル乳酸生産能の高い乳酸菌を接種しておくことが望ましい。
Among the plant growth regulators used in the present invention, phenyllactic acid (3-phenyllactic acid) may be D-form, L-form or a mixture of both, but D-form is preferred.
The phenyl lactic acid may be a commercially available product or may be produced by organic synthesis or microbial fermentation.
Further, a composition containing phenyl lactic acid or a salt thereof as a plant growth regulator may be used. For example, corn steep liquor, vinegar contains phenyl lactic acid, these may be used as they are, and concentrated, diluted or diluted. It may be used after being suspended. At this time, it is desirable to inoculate lactic acid bacteria having a high ability to produce phenyl lactic acid at the time of producing corn steep liquor.

また、フェニル乳酸の塩としては、特に限定されないが、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩;カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属塩;アンモニア;クエン酸、酒石酸、シュウ酸、乳酸、酢酸等の有機酸塩;リン酸、炭酸、硝酸、硫酸、塩酸等の鉱酸塩等が挙げられる。   The salt of phenyl lactic acid is not particularly limited, but alkali metal salts such as sodium and potassium; alkaline earth metal salts such as calcium and magnesium; ammonia; organic such as citric acid, tartaric acid, oxalic acid, lactic acid and acetic acid Acid salts; mineral acid salts such as phosphoric acid, carbonic acid, nitric acid, sulfuric acid and hydrochloric acid.

フェニル乳酸は、フェニルアラニンをジアゾ化して得られるジアゾニウム塩を酸性水溶液中で熱分解することにより得ることが出来る[Kimura and Tamura 1973. Isolation of L-β-phenyllactic acid and tyrosol as plant growth regulators from Gloeosporium laeticolor. Agricultural and Biological Chemistry 37: 2925]。また、フェニルアラニンを硫酸中に溶解し、亜硝酸ナトリウムを添加することによるいわゆるvan Slyke法によっても得ることが出来る[Koga et al. 1971. Examinations on the neighboring aryl group participation in nitrous acid deaminations of L-phenylalanine and its p-nitro and p-methoxy derivatives. Tetrahedron Lett. 25: 2287-2290.]。   Phenyllactic acid can be obtained by pyrolyzing a diazonium salt obtained by diazotizing phenylalanine in an acidic aqueous solution [Kimura and Tamura 1973. Isolation of L-β-phenyllactic acid and tyrosol as plant growth regulators from Gloeosporium laeticolor Agricultural and Biological Chemistry 37: 2925]. It can also be obtained by the so-called van Slyke method by dissolving phenylalanine in sulfuric acid and adding sodium nitrite [Koga et al. 1971. Examinations on the neighboring aryl group participation in nitrous acid deaminations of L-phenylalanine and its p-nitro and p-methoxy derivatives. Tetrahedron Lett. 25: 2287-2290.].

また、フェニル乳酸は、フェニル乳酸生産性微生物を一般に用いられる培地中で培養することによっても得ることができるので、当該フェニル乳酸生産性微生物の培養液を用いることもできる。この際、培地としては一般に用いられている培地(MRS培地、GYP培地等)を用いることができるほか、トウモロコシ抽出液、おから抽出液を用いることもできる。また、培地にフェニル乳酸の基質であるフェニルアラニン[日本化学会(編)1997.『細胞機能と代謝マップ(I)』東京化学同人]の添加量を増加させれば、得られるフェニル乳酸量も増大させることが出来る。   In addition, since phenyllactic acid can be obtained by culturing a phenyllactic acid-producing microorganism in a commonly used medium, a culture solution of the phenyllactic acid-producing microorganism can also be used. At this time, a commonly used medium (MRS medium, GYP medium or the like) can be used as the medium, and a corn extract or okara extract can also be used. In addition, if the addition amount of phenylalanine (the Chemical Society of Japan (ed.) 1997. “Cell function and metabolism map (I)” Tokyo Kagaku Dojin) is added to the medium, the amount of phenyllactic acid obtained increases. It can be made.

当該微生物としては、例えばラクトバチルス属菌、ラクトコッカス属菌、エンテロコッカス属菌等の乳酸菌等が挙げられ、好ましくはラクトバチルス属菌である。具体的には、ラクトバチルス属菌としては、例えばLactobacillus rhamnosus、Lactobacillus plantarum [Valerio et al.2004. Production of phenyllactic acid by lactic acid bacteria: an approach to the selection of strains contributing to food quality and preservation. FEMS Microbiol. Lett. 233: 289-295.]、Lactobacillus paracasei、ラクトコッカス属としてはLactococcus lactis、エンテロコッカス属菌としてはEnterococcus faecalis[特開2000−300284号公報]が挙げられ、このうち、Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus paracasei、特に、Lactobacillus rhamnosus(FERM P-13245)株、Lactobacillus plantarum(FERM P-18930)株、Lactobacillus plantarum(FERM P-19645)株、及びLactobacillus paracasei (NITE BP-1109)株が好ましく、これらのうち、前者3株は産業技術総合研究所 特許生物寄託センター(住所:茨城県つくば市東1−1−1 中央第6)に、後者1株は独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センターNPMDにそれぞれ寄託されたものである。   Examples of the microorganism include lactic acid bacteria such as Lactobacillus, Lactococcus, and Enterococcus, and preferably Lactobacillus. Specifically, as Lactobacillus genus bacteria, for example, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum [Valerio et al. 2004. Production of phenyllactic acid by lactic acid bacteria: an approach to the selection of strains contributing to food quality and preservation.FEMS Microbiol Lett. 233: 289-295.], Lactobacillus paracasei, Lactococcus lactis as the genus Lactococcus, and Enterococcus faecalis [JP-A 2000-300284] as the genus Enterococcus, among which Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum Lactobacillus paracasei, in particular, Lactobacillus rhamnosus (FERM P-13245) strain, Lactobacillus plantarum (FERM P-18930) strain, Lactobacillus plantarum (FERM P-19645) strain, and Lactobacillus paracasei (NITE BP-1109) strain, Of these, the former 3 shares are the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology Patent Biological Deposit Center (Address: 1-1-1 Higashi Tsukuba City, Ibaraki Prefecture) In the center No. 6), the latter one was deposited at the Patent Microorganism Deposit Center NPMD, National Institute of Technology and Evaluation.

また、コーンスティープリカーは、コーンスターチ製造の際の副産物の一つであり、製造工程で乳酸発酵が行われたものである(三輪 泰造1979.とうもろこし加工工業副産物.『配合飼料講座(下巻)』265-269ページ.チクサン出版社.)が、フェニル乳酸が含有されていることは既に開示されており[特許文献1]、これを利用することも出来る。
また、食酢中にフェニル乳酸が含まれていることが知られており、食酢を利用することが出来る。
Corn steep liquor is one of the by-products in the production of corn starch, and is the product of lactic acid fermentation in the manufacturing process (Yasuzo Miwa 1979. By-product of corn processing industry. “Mixed feed course (second volume)” 265 -269. Chikusan Publishing Co., Ltd.) has already disclosed that phenyllactic acid is contained [Patent Document 1], and this can also be used.
Moreover, it is known that phenyllactic acid is contained in vinegar, and vinegar can be utilized.

また、上記フェニル乳酸を含む培養液から、イオン交換樹脂、多孔性合成吸着剤、溶媒抽出等によってフェニル乳酸を部分精製又は精製単離して利用することも出来る。
例えば、コーンスティープリカーの部分精製物は、コーンスティープリカー水溶液のpHを中性領域(pH5〜8)に調整後、強塩基性イオン交換樹脂又は弱塩基性イオン交換樹脂に吸着させた後、酸含有アルコール水溶液で溶出して得ることができる。このとき、吸着前のイオン交換樹脂を蟻酸型又は酢酸型等に置換することが好ましい。
当該溶液の酸濃度としては、0.01〜4Nが好ましく、1〜3Nがより好ましい。当該酸としては、蟻酸、酢酸、塩酸、硫酸等が挙げられる。
当該溶液のアルコール濃度としては、0〜80容量%が好ましく、10〜30容量%がより好ましい。当該アルコールとしては、メタノール、エタノール、ブタノール、イソプロパノール等が挙げられる。
また、例えば、コーンスティープリカーの部分精製物は、コーンスティープリカー水溶液のpHを酸性領域(pH1〜4)に調整後、ポリスチレン系合成吸着剤、スチレン−ジビニルベンゼン系吸着剤又はメタクリル系合成吸着剤に吸着させた後、アルコール水溶液又はケトン水溶液で溶出して得ることができる。
当該溶液のアルコール又はケトン濃度としては、0〜99容量%が好ましく、10〜30容量%がより好ましい。当該アルコールとしては、メタノール、エタノール、ブタノール、イソプロパノール等が挙げられる。当該ケトンとしてはアセトン等が挙げられる。
In addition, phenyllactic acid can be partially purified or purified and isolated from the culture solution containing phenyllactic acid by ion exchange resin, porous synthetic adsorbent, solvent extraction, or the like.
For example, a partially purified corn steep liquor is prepared by adjusting the pH of a corn steep liquor aqueous solution to a neutral region (pH 5 to 8) and then adsorbing it on a strongly basic ion exchange resin or weakly basic ion exchange resin. It can be obtained by elution with an aqueous alcohol solution. At this time, it is preferable to replace the ion exchange resin before adsorption with a formic acid type or an acetic acid type.
The acid concentration of the solution is preferably 0.01 to 4N, and more preferably 1 to 3N. Examples of the acid include formic acid, acetic acid, hydrochloric acid, sulfuric acid and the like.
The alcohol concentration of the solution is preferably 0 to 80% by volume, more preferably 10 to 30% by volume. Examples of the alcohol include methanol, ethanol, butanol, isopropanol and the like.
For example, the partially purified corn steep liquor is prepared by adjusting the pH of the aqueous corn steep liquor to the acidic range (pH 1 to 4), and then a polystyrene synthetic adsorbent, styrene-divinylbenzene adsorbent or methacrylic synthetic adsorbent. And then eluted with an aqueous alcohol solution or an aqueous ketone solution.
The alcohol or ketone concentration of the solution is preferably 0 to 99% by volume, more preferably 10 to 30% by volume. Examples of the alcohol include methanol, ethanol, butanol, isopropanol and the like. Examples of the ketone include acetone.

なお、フェニル乳酸生産性微生物の培養液中にメチオニン又はその塩が含まれている場合には、その培養液をそのまま本発明の植物成長調整剤として使用することができる。ただし、培養液中にメチオニン又はその塩の含有量が少ない場合には、更にメチオニン又はその塩を添加することもできる。
また、フェニル乳酸生産性微生物を培養する際にあらかじめ培地中にメチオニンを添加しておくことも出来る。添加濃度としてはフェニル乳酸生産性微生物の生育を阻害しない範囲であれば特に限定されないが、0.1重量%以上が好ましく、特に1〜10重量%が好ましい。
In addition, when methionine or its salt is contained in the culture solution of the phenyllactic acid-producing microorganism, the culture solution can be used as it is as the plant growth regulator of the present invention. However, when the content of methionine or a salt thereof is low in the culture solution, methionine or a salt thereof can be further added.
In addition, methionine can be added to the medium in advance when cultivating a phenyllactic acid-producing microorganism. The addition concentration is not particularly limited as long as it does not inhibit the growth of the phenyllactic acid-producing microorganism, but is preferably 0.1% by weight or more, and particularly preferably 1 to 10% by weight.

本発明の植物成長調整剤中のフェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩との含有比は、これら2成分の併用による植物成長調整効果や増強効果の点から、質量比で1:700〜99:1が好ましく、1:600〜99:1がより好ましく、1:500〜99:1が更に好ましく、1:200〜9:1が殊更好ましく、1:50〜9:1が特に好ましい。溶液としたときに、フェニル乳酸又はその塩は0.1ppm以上含まれることが好ましく、またメチオニン又はその塩は1ppm以上含まれることが好ましい。
また、フェニル乳酸とトリプトファンも協働作用を示す[特許文献1]ことから、トリプトファンを混合することがさらに好ましい。
The content ratio of phenyllactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof in the plant growth regulator of the present invention is 1: 700 to 99 in terms of mass ratio from the viewpoint of plant growth regulation effect and enhancement effect by the combined use of these two components. Is preferably 1: 600, more preferably 1: 600 to 99: 1, still more preferably 1: 500 to 99: 1, still more preferably 1: 200 to 9: 1, and particularly preferably 1:50 to 9: 1. When the solution is used, it is preferable that phenyllactic acid or a salt thereof is contained in an amount of 0.1 ppm or more, and methionine or a salt thereof is preferably contained in an amount of 1 ppm or more.
In addition, since phenyllactic acid and tryptophan also exhibit a cooperative action [Patent Document 1], it is more preferable to mix tryptophan.

本発明の植物成長調整剤の形態としては、フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩とを組み合わせてなればよく、フェニル乳酸又はその塩を含有する製剤(組成物)と、メチオニン又はその塩を含有する製剤(組成物)とを組み合わせてなるものでもよく、またフェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩とを含有する一の製剤(組成物)でもよい。   The form of the plant growth regulator of the present invention may be a combination of phenyl lactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof, and a preparation (composition) containing phenyl lactic acid or a salt thereof, and methionine or a salt thereof. It may be a combination of a preparation (composition) containing it, or may be a single preparation (composition) containing phenyllactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof.

本発明の植物成長調整剤は、上記の植物成長調整物質及びその他の任意成分を常法に従い、混合、撹拌等することにより製造することができる。
本発明の植物成長調整剤は、上記の植物成長調整物質の混合物そのものでもよいが、水和剤、乳剤、粒剤、粉剤等、通常の植物成長調整剤で用いられる担体で製剤化してもよい。
製剤の形状も制限はなく、粉剤、顆粒剤、粒剤、水和剤、フロアブル剤、乳剤及びペースト剤等のあらゆる製剤形態に成形することができる。
The plant growth regulator of the present invention can be produced by mixing, stirring, etc. the above plant growth regulator and other optional components according to a conventional method.
The plant growth regulator of the present invention may be a mixture of the above-mentioned plant growth regulators, but may be formulated with a carrier used in usual plant growth regulators such as wettable powder, emulsion, granule, powder and the like. .
There is no restriction | limiting also in the shape of a formulation, It can shape | mold into all formulation forms, such as a powder agent, a granule, a granule, a wettable powder, a flowable agent, an emulsion, and a paste.

例えば、固体担体としては鉱物質粉末(カオリン、ベントナイト、クレー、モンモリロナイト、タルク、ケイソウ土、雲母、バーミキュライト、セッコウ、炭酸カルシウム、リン石灰等)、植物質粉末(大豆粉、小麦粉、木粉、タバコ粉、デンプン、結晶セルロース等)、高分子化合物(石油樹脂、ポリビニルアルコール樹脂、ポリビニル酢酸樹脂、ポリ塩化ビニル、ケトン樹脂等)、更に、アルミナ、ワックス類等を使用することができる。 また、液体担体としては、例えば、アルコール類(メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、エチレングリコール、ベンジルアルコール等)、芳香族炭化水素類(トルエン、ベンゼン、キシレン等)、塩素化炭化水素類(クロロホルム、四塩化炭素、モノクロルベンゼン等)、エーテル類(ジオキサン、テトラヒドロフラン等)、ケトン類(アセトン、メチルエチルケトン、シクロヘキサン等)、エステル類(酢酸エチル、酢酸ブチル等)、酸アミド類(N、N−ジメチルアセトアミド等)、エーテルアルコール類(エチレングリコールエチルエーテル等)、又は水等を使用することができる。   For example, as a solid carrier, mineral powder (kaolin, bentonite, clay, montmorillonite, talc, diatomaceous earth, mica, vermiculite, gypsum, calcium carbonate, phosphorus lime, etc.), vegetable powder (soy flour, wheat flour, wood flour, tobacco) Powder, starch, crystalline cellulose, etc.), polymer compounds (petroleum resin, polyvinyl alcohol resin, polyvinyl acetate resin, polyvinyl chloride, ketone resin, etc.), alumina, waxes, etc. can be used. Examples of the liquid carrier include alcohols (methanol, ethanol, propanol, butanol, ethylene glycol, benzyl alcohol, etc.), aromatic hydrocarbons (toluene, benzene, xylene, etc.), chlorinated hydrocarbons (chloroform, Carbon tetrachloride, monochlorobenzene, etc.), ethers (dioxane, tetrahydrofuran, etc.), ketones (acetone, methyl ethyl ketone, cyclohexane, etc.), esters (ethyl acetate, butyl acetate, etc.), acid amides (N, N-dimethylacetamide) Etc.), ether alcohols (ethylene glycol ethyl ether, etc.), water, etc. can be used.

乳化、分散、拡散等の目的で使用される界面活性剤としては、非イオン性、陰イオン性、陽イオン性及び両イオン性のいずれも使用することができる。本発明において使用することができる界面活性剤の例を挙げると、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、オキシエチレンポリマー、オキシプロピレンポリマー、ポリオキシエチレンアルキルリン酸エステル、脂肪酸塩、アルキル硫酸エステル塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルアリールスルホン酸塩、アルキルリン酸塩、アルキルリン酸エステル塩、ポリオキシエチレンアルキル硫酸エステル、第四級アンモニウム塩、オキシアルキルアミン、レシチン、サポニン等である。また、必要に応じてゼラチン、カゼイン、アルギン酸ソーダ、デンプン、寒天、ポリビニルアルコール等を補助剤として用いることができる。   As the surfactant used for the purpose of emulsification, dispersion, diffusion, etc., any of nonionic, anionic, cationic and amphoteric can be used. Examples of surfactants that can be used in the present invention include polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene alkyl aryl ether, polyoxyethylene fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene Sorbitol fatty acid ester, glycerin fatty acid ester, oxyethylene polymer, oxypropylene polymer, polyoxyethylene alkyl phosphate ester, fatty acid salt, alkyl sulfate ester salt, alkyl sulfonate, alkyl aryl sulfonate, alkyl phosphate, alkyl phosphorus Acid ester salts, polyoxyethylene alkyl sulfates, quaternary ammonium salts, oxyalkylamines, lecithin, saponins, and the like. Moreover, gelatin, casein, sodium alginate, starch, agar, polyvinyl alcohol, etc. can be used as an adjuvant as needed.

本発明の植物成長調整剤を水溶液又は懸濁液とした場合のpH(25℃)は、2〜8となるのが好ましく、当該pHを調整する緩衝剤としては、酢酸、クエン酸、フマル酸、リンゴ酸、乳酸、グルコン酸、酒石酸等の有機酸塩、リン酸、塩酸、硫酸等の無機塩、水酸化ナトリウム等の水酸化物、アンモニア又はアンモニア水等が挙げられ、これらを単独又は2種以上組み合わせて用いてもよく、さらに他のpH調整剤と適宜組み合わせてもよい。   When the plant growth regulator of the present invention is used as an aqueous solution or suspension, the pH (25 ° C.) is preferably 2 to 8. Buffers for adjusting the pH include acetic acid, citric acid, and fumaric acid. , Organic acid salts such as malic acid, lactic acid, gluconic acid and tartaric acid, inorganic salts such as phosphoric acid, hydrochloric acid and sulfuric acid, hydroxides such as sodium hydroxide, ammonia or aqueous ammonia, etc. Two or more species may be used in combination, and may be appropriately combined with other pH adjusters.

本発明の植物成長調整剤は、根量を増加させる作用、生育全般を促進する作用等を有するが、特に発根促進剤として用いることが好ましい。
また、本発明の植物成長調整剤はアミノ酸を含んでいるため、そのものを肥料としても利用可能である。
The plant growth regulator of the present invention has an action of increasing the amount of roots, an action of promoting overall growth, and the like, and is particularly preferably used as a rooting promoter.
Moreover, since the plant growth regulator of the present invention contains an amino acid, it can be used as a fertilizer.

本発明の植物成長調整剤を植物に施用する場合、直接そのまま使用してもよいし、又は水で所定の濃度に希釈又は懸濁して使用してもよい。
また、フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩とを別々の製剤として調製し、これらを植物に併用してもよい。
When the plant growth regulator of the present invention is applied to plants, it may be used directly as it is, or may be used after diluting or suspending to a predetermined concentration with water.
Alternatively, phenyllactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof may be prepared as separate preparations and used in combination with plants.

植物に施用する場合、土壌処理剤、茎葉処理剤、播種前の種子処理剤、移植前植物の処理剤及び移植時の植物に対する処理剤等として使用することができる。また、水耕栽培においては水耕液に混合して使用してもよく、組織培養では培地中に懸濁又は溶解させて用いてもよい。   When applied to a plant, it can be used as a soil treatment agent, a foliar treatment agent, a seed treatment agent before sowing, a treatment agent for a plant before transplantation, a treatment agent for a plant at the time of transplantation, or the like. In hydroponics, it may be used by mixing with a hydroponic solution, and in tissue culture, it may be suspended or dissolved in a medium.

本発明の植物成長調整剤を散布用として用いる場合の使用濃度は、フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩の合計濃度として、好ましくは0.01〜100000ppm、より好ましくは1〜10000ppm、特に好ましくは5〜1000ppmの範囲とすることができる。特に育苗期の苗に使用する場合は、上記濃度の希釈液を培養土1L当たり50〜200mL散布することが望ましい。これらの場合、展着剤を使用してもよく、用いる展着剤の種類及び使用量については特に制限されない。   The concentration used when the plant growth regulator of the present invention is used for spraying is preferably 0.01 to 100,000 ppm, more preferably 1 to 10,000 ppm, particularly preferably as the total concentration of phenyllactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof. Can be in the range of 5-1000 ppm. In particular, when used for seedlings in the growing season, it is desirable to spray 50 to 200 mL of the diluted solution having the above concentration per 1 L of the culture soil. In these cases, a spreading agent may be used, and the type and amount of the spreading agent to be used are not particularly limited.

肥料と混合する場合を含め、土壌に直接施用する場合の使用量としては、フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩の合計濃度として、1ヘクタール当たり100〜10000g、特に500〜5000g用いるのが好ましい。特に育苗期の苗に使用する場合は、培養土1L当たり0.001〜10g用いるのが望ましい。この場合、播種前の培養土に予め混合しておいてもよく、育苗期間中に散布してもよい。   The amount used when directly applied to soil, including when mixed with fertilizer, is preferably 100 to 10,000 g, particularly 500 to 5000 g per hectare, as the total concentration of phenyllactic acid or its salt and methionine or its salt. . In particular, when used for seedlings at the seedling raising stage, it is desirable to use 0.001 to 10 g per liter of culture soil. In this case, it may be preliminarily mixed in the culture soil before sowing or may be sprayed during the seedling raising period.

播種前の種子処理用として用いる場合は、水、アルコール類(メタノール、エタノール等)、ケトン類(アセトン等)、エーテル類(ジエチルエーテル等)、エステル類(酢酸エチル等)等の液体担体にフェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩の合計濃度として0.01〜100000ppmとなるように希釈又は懸濁し、乾燥種子に噴霧するか、乾燥種子を希釈液に浸漬して種子に吸収させることもできる。浸漬時間としては特に制限されないが1秒〜30分が好ましい。また、処理した種子は、風乾、減圧乾燥、加熱乾燥、真空乾燥等によって液体担体を蒸発させてもよい。また、クレー等の鉱物質粉末の固体担体を用いて製剤化したものを種子表面に付着させ使用することもできる。また、通常用いられている種子コーティング剤、種子コーティングフィルムに混合して種子に被覆することもできる。   When used for seed treatment before sowing, phenyl on a liquid carrier such as water, alcohols (methanol, ethanol, etc.), ketones (acetone, etc.), ethers (diethyl ether, etc.), esters (ethyl acetate, etc.) Diluted or suspended so that the total concentration of lactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof is 0.01 to 100000 ppm and sprayed on the dried seed, or the dried seed is immersed in a diluent and absorbed by the seed. . Although it does not restrict | limit especially as immersion time, 1 second-30 minutes are preferable. In addition, the liquid seed may be evaporated from the treated seeds by air drying, vacuum drying, heat drying, vacuum drying, or the like. Moreover, what was formulated using the solid support | carrier of mineral substance powders, such as clay, can also be used by making it adhere to the seed surface. Moreover, it can also mix | blend with the seed coating agent and seed coating film which are used normally, and can also coat | cover a seed.

組織培養や細胞培養時に使用する場合は、通常用いられる植物組織培養用の培地(MS培地、ホワイト培地、ガンボルグのB5培地等)に培地中濃度として好ましくは、フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩の合計濃度として、0.01〜10000ppm、特に好ましくは0.1〜1000ppmの範囲で溶解又は懸濁して用いることができる。この場合、通常行われているように、炭素源としての糖類(ショ糖、ブドウ糖等)、各種植物ホルモンとしてサイトカイニン(ベンジルアデニン、カイネチン等)、オーキシン(インドール酢酸、ナフタレン酢酸等)、ジベレリン(GA3、GA4等)、アブシジン酸等を適宜加えることができる。   When used at the time of tissue culture or cell culture, it is preferable to use phenyl lactic acid or a salt thereof and methionine or the like as a medium concentration in a commonly used medium for plant tissue culture (MS medium, white medium, Gamborg B5 medium, etc.). The total salt concentration can be used by dissolving or suspending in the range of 0.01 to 10000 ppm, particularly preferably 0.1 to 1000 ppm. In this case, as usual, saccharides (sucrose, glucose, etc.) as a carbon source, cytokinins (benzyladenine, kinetin, etc.), auxins (indole acetic acid, naphthalene acetic acid, etc.), gibberellins (GA3) as various plant hormones , GA4, etc.), abscisic acid and the like can be added as appropriate.

移植前の植物に直接吸収させる場合は、フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩の合計濃度として、0.1〜1000ppmに希釈又は懸濁した液に、植物の根部あるいは全体を浸漬して使用することができる。また、挿し穂、挿し芽、挿し木等であれば基部又は全体を浸漬して使用することができる。この場合の浸漬時間は1秒〜1週間、特に1分〜3日間が望ましい。また、鉱物質粉末の固体担体を用いて製剤化したものを、根部に付着させたり、挿し穂、挿し芽、挿し木等の場合は茎基部に付着させてもよい。   When directly absorbing the plant before transplantation, use the root or whole of the plant immersed in a solution diluted or suspended to 0.1 to 1000 ppm as the total concentration of phenyllactic acid or its salt and methionine or its salt. can do. Moreover, if it is a cutting head, cutting bud, cutting, etc., a base part or the whole can be immersed and used. In this case, the immersion time is preferably 1 second to 1 week, particularly 1 minute to 3 days. Moreover, what was formulated using the solid support | carrier of the mineral substance powder may be made to adhere to a root part, and in the case of cuttings, cuttings, cuttings, cuttings, etc., you may make it adhere to a stem base.

本発明の植物成長調整剤の投与時期としては、生育期間中いかなる時期にも使用が可能であるが、特に発根促進剤として適用する場合は、播種前、播種時、苗の育成時、移植等の耕種的断根を伴う作業の前後、気象要因等で根の発育が阻害されあるいは根に障害が発生した場合等が特に有効である。   As the administration time of the plant growth regulator of the present invention, it can be used at any time during the growth period, but particularly when applied as a rooting promoter, before sowing, at the time of sowing, at the time of seedling growth, transplanting It is particularly effective before and after work involving cultivated rooting, such as when root growth is hindered or a root is damaged by weather factors.

本発明の植物成長調整剤を発根促進剤として植物に適用すれば、側根数、不定根数等の根数の増加を通じて根量や根密度が増加するため、苗の移植時の活着率向上や、健苗育成、生育促進、吸水力の向上、吸肥力の向上、肥料成分利用率の向上、緑色の保持、光合成能力の向上、水ストレス耐性の向上、倒伏防止、収量増加等の効果が得られる。   If the plant growth regulator of the present invention is applied to a plant as a rooting promoter, the amount of roots and root density increase through an increase in the number of roots such as the number of lateral roots and the number of adventitious roots. , Healthy seedling growth, growth promotion, improvement of water absorption, improvement of fertilizer absorption, improvement of fertilizer component utilization rate, retention of green color, improvement of photosynthetic ability, improvement of water stress tolerance, prevention of lodging, increase of yield, etc. It is done.

本発明の植物成長調整剤の適用対象となる植物としては、特に限定されないが、例えば、トマト、ピーマン、トウガラシ、ナス等のナス類、キュウリ、カボチャ、メロン、スイカ等のウリ類、セルリー、パセリー、レタス等の生菜・香辛菜類、ネギ、タマネギ、ニンニク等のネギ類、ダイズ、ラッカセイ、インゲン、エンドウ、アズキ等の豆類、イチゴ等のその他果菜類、ダイコン、カブ、ニンジン、ゴボウ等の直根類、サトイモ、キャッサバ、バレイショ、サツマイモ、ナガイモ等の芋類、アスパラガス、ホウレンソウ、ミツバ等の柔菜類、トルコギキョウ、ストック、カーネーション、キク等の花卉類、イネ、コムギ、オオムギ、エンバク、トウモロコシ等の穀物類、ベントグラス、コウライシバ等の芝類、ナタネ、ヒマワリ等の油料作物類、サトウキビ、テンサイ等の糖料作物類、ワタ、イグサ等の繊維料作物類、クローバー、ソルガム、デントコーン等の飼料作物類、リンゴ、ナシ、ブドウ、モモ等の落葉性果樹類、ウンシュウミカン、レモン、グレープフルーツ等の柑橘類、サツキ、ツツジ、スギ等の木本類が挙げられる。   The plant to which the plant growth regulator of the present invention is applied is not particularly limited. For example, eggplants such as tomatoes, peppers, peppers, eggplants, cucumbers, pumpkins, melons, melons such as watermelons, celery, parsley Fresh vegetables such as lettuce, spicy vegetables, leeks such as leek, onion, garlic, beans such as soybeans, peanuts, green beans, peas, azuki bean, other fruit vegetables such as strawberries, radish, turnip, carrots, burdock etc. Roots, taros, cassava, potatoes, sweet potatoes, potatoes, etc., asparagus, spinach, honeybees, etc., Eustoma, stock, carnation, chrysanthemum, rice, wheat, barley, oats, corn Oil such as cereals such as bentgrass, turf such as corn borer, rapeseed, sunflower Sugar crops such as sugarcane and sugar beet, fiber crops such as cotton and rush, feed crops such as clover, sorghum and dent corn, deciduous fruit trees such as apples, pears, grapes and peaches, citrus Examples include citrus fruits such as lemon and grapefruit, and woody materials such as satsuki, azalea and cedar.

これらのうち、発根促進剤として適用する場合は、トマト、ピーマン、トウガラシ、ナス、キュウリ、カボチャ、メロン、スイカ、セルリー、パセリー、レタス、ネギ、タマネギ、アスパラガス、トルコギキョウ、ストック、イネ、ベントグラス、コウライシバ、テンサイイグサ等の栽培中に移植を行う植物や、キク、カーネーション、サツキ、ツツジ、ブドウ等の切り枝や挿し穂から発根させることにより増殖を行う植物に対しては特に有効である。   Among these, when applied as a rooting promoter, tomato, pepper, capsicum, eggplant, cucumber, pumpkin, melon, watermelon, celery, parsley, lettuce, leek, onion, asparagus, eustoma, stock, rice, bentgrass It is particularly effective for plants that are transplanted during cultivation, such as corn borer and sugar beet, and plants that grow by rooting from cuts and cuttings such as chrysanthemum, carnation, satsuki, azalea, and grape. .

また、本発明の効果向上を目的として、他の植物成長調整剤と併用することもでき、場合によっては相乗効果を期待することもできる。例えば、発根促進剤として適用する場合、高い栽植密度、高湿度、日照不足等といった極めて徒長しやすい条件下での育苗時には、地上部地下部重比の小さい良質な苗の育成を目的として、強力な茎の伸長抑制作用を持つ抗ジベレリン剤(パクロブトラゾール、ウニコナゾールP、アンシミドール等)、成長抑制剤(ダミノジッド等)、エチレン発生剤(エテホン等)と併用してもよい。また、挿し穂、挿し芽、挿し木、組織培養時においては、発根促進効果の増強を目的として、オーキシン系化合物(インドール酢酸、インドール酪酸、ナフチルアセトアミド、ナフタレン酢酸等)と併用してもよい。また、播種前の種子処理時には、発芽促進作用を持つジベレリン剤と併用してもよい。これらは単なる例示であって、本発明の植物成長調整剤と併用できる他の植物成長調整剤はこれらに限られるものではない。   Further, for the purpose of improving the effect of the present invention, it can be used in combination with other plant growth regulators, and in some cases, a synergistic effect can be expected. For example, when applied as a rooting promoter, when raising seedlings under conditions that are very easy to grow, such as high planting density, high humidity, lack of sunlight, etc. You may use together with anti- gibberellins (paclobutrazol, uniconazole P, ansimidol, etc.), growth inhibitors (daminozide, etc.), ethylene generators (ethephon etc.) which have a strong stem elongation inhibitory action. Further, at the time of cuttings, cuttings, cuttings, and tissue culture, auxin compounds (such as indole acetic acid, indole butyric acid, naphthylacetamide, naphthalene acetic acid, etc.) may be used in combination for the purpose of enhancing the rooting promoting effect. Moreover, you may use together with the gibberellin agent which has a germination promotion effect | action at the time of the seed treatment before sowing. These are merely examples, and other plant growth regulators that can be used in combination with the plant growth regulator of the present invention are not limited thereto.

また、本発明の植物成長調整剤は、各種殺虫剤、殺菌剤、微生物農薬、肥料等と混用又は併用することも可能である。特に、発根促進剤として適用する場合は殺菌作用の他に発根促進作用も報告されているヒドロキシイソキサゾール、メタスルホカルブ、メタラキシル等との併用は有効である。また、育苗期に使用する殺虫殺菌剤と混用は特に有効である。また、肥料と併用する場合、健苗育成を目的とした育苗用肥料との併用、活着促進を目的とした移植直前施用肥料との併用は特に有効である。また、本発明の植物成長調整剤の効力を長期間持続させ肥料成分利用率を向上させる目的とした緩効性肥料との混用も特に有効である。   In addition, the plant growth regulator of the present invention can be mixed or used in combination with various insecticides, fungicides, microbial pesticides, fertilizers and the like. In particular, when applied as a rooting promoter, combined use with hydroxyisoxazole, metasulfocarb, metalaxyl and the like, which have been reported to have a root promoting effect in addition to the bactericidal action, is effective. In addition, it is particularly effective to mix with an insecticide and fungicide used during the seedling raising period. Further, when used in combination with a fertilizer, the combined use with a seedling fertilizer for the purpose of raising healthy seedlings and the use with a fertilizer applied immediately before transplanting for the purpose of promoting survival are particularly effective. In addition, mixing with a slow-acting fertilizer for the purpose of maintaining the efficacy of the plant growth regulator of the present invention for a long period of time and improving the fertilizer component utilization rate is particularly effective.

次に実施例を示して本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。   EXAMPLES Next, although an Example is shown and this invention is demonstrated further in detail, this invention is not limited to a following example.

製造例1
<米糠・菜種油粕・おから抽出液を用いた乳酸菌培養による製造法>
米糠を2%・菜種油粕(日清オイリオグループ(株)製)を2%・乾燥おから(さとの雪食品(株)製)を3%添加した水溶液4Lを、121℃、15分オートクレーブ滅菌し、Lactobacillus paracasei NITE BP-1109株を接種し、7日間37℃で培養した。
培養液は塩酸を用いてpH3.0に調整した後、8,000Gで遠心分離して上澄を得た。別途、スチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着樹脂ダイヤイオン(登録商標)HP−20をメタノールで洗浄した後、カラム(内径45mm×長さ550mm)に充填し、pH3.0酢酸水を通液して調整した。本カラムに上記の培養上澄を流すことによって、フェニル乳酸を吸着した。カラムはpH3.0酢酸水1Lで洗浄した後、20%イソプロパノール2Lでフェニル乳酸を溶出した。溶出液はエバポレータで50mLとなるまで濃縮し、乳酸菌培養液部分精製物を得た。
この部分精製物中のフェニル乳酸濃度を確認するため、一部を水酸化ナトリウム水溶液を用いてpH8.0に調整して、酢酸エチルで3回抽出を行い、酢酸エチル層は棄却した。残った水相は塩酸を用いてpH2.5とし、酢酸エチル抽出を3回行った。得られた酢酸エチル層は無水硫酸マグネシウムを用いて脱水した後、溶媒を減圧下で除去した。残渣は少量の10%メタノールで溶解し、10%メタノールを通液して調整したSepPak C18カートリッジ(Waters社製)を通過させ、さらに20mLの10%メタノールで溶出した。溶出液は減圧下、乾固した。
Production Example 1
<Production method by cultivation of lactic acid bacteria using rice bran, rapeseed oil cake, okara extract>
Autoclave sterilization with 4% aqueous solution containing 2% rice bran, 2% rapeseed oil cake (Nisshin Oillio Group Co., Ltd.) and 3% dried okara (Sato Snow Food Co., Ltd.) at 121 ° C for 15 minutes Then, Lactobacillus paracasei NITE BP-1109 strain was inoculated and cultured at 37 ° C. for 7 days.
The culture solution was adjusted to pH 3.0 using hydrochloric acid and then centrifuged at 8,000 G to obtain a supernatant. Separately, styrene-divinylbenzene synthetic adsorption resin Diaion (registered trademark) HP-20 was washed with methanol, packed into a column (inner diameter 45 mm x length 550 mm), and adjusted by passing pH 3.0 acetic acid water through. did. Phenyllactic acid was adsorbed by flowing the above culture supernatant through this column. The column was washed with 1 L of pH 3.0 acetic acid water, and phenyllactic acid was eluted with 2 L of 20% isopropanol. The eluate was concentrated to 50 mL with an evaporator to obtain a partially purified lactic acid bacteria culture solution.
In order to confirm the phenyllactic acid concentration in this partially purified product, a part thereof was adjusted to pH 8.0 using an aqueous sodium hydroxide solution, extracted three times with ethyl acetate, and the ethyl acetate layer was discarded. The remaining aqueous phase was adjusted to pH 2.5 with hydrochloric acid and extracted three times with ethyl acetate. The obtained ethyl acetate layer was dehydrated using anhydrous magnesium sulfate, and then the solvent was removed under reduced pressure. The residue was dissolved in a small amount of 10% methanol, passed through a SepPak C18 cartridge (manufactured by Waters) prepared by passing 10% methanol, and further eluted with 20 mL of 10% methanol. The eluate was dried under reduced pressure.

このサンプルはHPLC(カラム、YMC ODS-A 内径10mm×長さ250mm(YMC社製);カラム温度、室温;移動相、1%酢酸含有60%メタノール;流速、3mL/分)で精製し、フェニル乳酸相当画分(保持時間7〜9分)を分取した。さらに分取した画分はHPLC(カラム、Polar RP 内径4.6mm×長さ250mm(Phenomenex社製);カラム温度、40℃;移動相、1%酢酸含有40%メタノール;流速、0.8mL/分)で分析した。ピークは10.48分に認められ、これは試薬のフェニル乳酸(シグマアルドリッチジャパン)とほぼ一致した。このピークの紫外部吸光スペクトルを測定したところ、259nmに吸光極大が認められ、試薬のフェニル乳酸と一致した。260nmで測定したピーク面積を試薬のフェニル乳酸によって作成した検量線と比較したところ、部分精製物中のフェニル乳酸濃度は6.62mg/Lと算出された。   This sample was purified by HPLC (column, YMC ODS-A inner diameter 10 mm × length 250 mm (manufactured by YMC); column temperature, room temperature; mobile phase, 60% methanol containing 1% acetic acid; flow rate, 3 mL / min), phenyl Lactic acid equivalent fractions (retention time 7-9 minutes) were collected. Further, the fraction collected was HPLC (column, Polar RP inner diameter 4.6 mm × length 250 mm (manufactured by Phenomenex)); column temperature, 40 ° C .; mobile phase, 40% methanol containing 1% acetic acid; flow rate, 0.8 mL / Min). A peak was observed at 10.48 minutes, which almost coincided with the reagent phenyllactic acid (Sigma Aldrich Japan). When the ultraviolet absorption spectrum of this peak was measured, an absorption maximum was observed at 259 nm, which was consistent with the reagent phenyllactic acid. When the peak area measured at 260 nm was compared with a calibration curve created with the reagent phenyllactic acid, the phenyllactic acid concentration in the partially purified product was calculated to be 6.62 mg / L.

製造例2
<乳酸菌培養による製造法>
乳酸菌Lactobacillus plantarum FERM P-19645株を培地(グルコース22g、SK酵母エキス(日本製紙ケミカル(株)製)10g、ポリペプトンN(日本製薬(株)製)10g、硫酸マグネシウム七水和物0.2g、硫酸第一鉄七水和物0.01g、硫酸マンガン七水和物0.01gに、DLメチオニンを0g、1g、3g、10gまたは30g添加したものを蒸留水1Lに溶解し、121℃、15分オートクレーブにより滅菌して調整)に接種し、1日間37℃で培養した。
培養後の菌数を表1に示した。本菌株を培養する場合、培地中メチオニン濃度を3重量%としても増殖には問題がないことが明らかであった。
Production Example 2
<Production method by lactic acid bacteria culture>
Lactobacillus plantarum FERM P-19645 strain medium (glucose 22 g, SK yeast extract (Nippon Paper Chemical Co., Ltd.) 10 g, polypeptone N (Nippon Pharmaceutical Co., Ltd.) 10 g, magnesium sulfate heptahydrate 0.2 g, A solution obtained by adding 0 g, 1 g, 3 g, 10 g, or 30 g of DL methionine to 0.01 g of ferrous sulfate heptahydrate and 0.01 g of manganese sulfate heptahydrate is dissolved in 1 L of distilled water, 121 ° C., 15 Sterilized by minute autoclave) and inoculated at 37 ° C. for 1 day.
The number of bacteria after the culture is shown in Table 1. When this strain was cultured, it was clear that there was no problem in growth even when the methionine concentration in the medium was 3% by weight.

Figure 0006018874
Figure 0006018874

実施例1
<アズキ切り口浸漬処理によるフェニル乳酸・メチオニン混合物の発根促進作用>
D−フェニル乳酸(シグマアルドリッチジャパン)とL−メチオニン(和光純薬)の合わせた濃度が150ppmとなるようにした水溶液を調整し、塩酸を用いてpH7とし、アズキ発根促進アッセイ(Itagaki et al. 2003. Biological activities and structure-activity relationship of substitution compounds of N-[2-(3-indolyl)ethyl]succinamic acid and N-[2-(1-naphthyl)ethyl]succinamic acid、 derived from a new category of root-promoting substance、N-(phenethyl)succinamic acid analogs. Plant Soil 255:67-75.)に供した。アズキ切片は基部を72時間被検液に浸漬し、7日後に発生した不定根数を数えた。反復数は5本とした。
試験は濃度別に2回行い、その結果を表1に示す。
D−フェニル乳酸単独でも発根促進作用は若干認められるが、D−フェニル乳酸:L−メチオニン=9:1〜1:9となるようにL−メチオニンを混合すると発根促進作用は大幅に増強されることが表2から明らかとなった。
Example 1
<Rooting promoting effect of phenyl lactic acid / methionine mixture by azuki bean dipping treatment>
An aqueous solution in which the combined concentration of D-phenyllactic acid (Sigma Aldrich Japan) and L-methionine (Wako Pure Chemical Industries) was adjusted to 150 ppm was adjusted to pH 7 using hydrochloric acid, and azuki bean root promotion assay (Itagaki et al 2003. Biological activities and structure-activity relationship of substitution compounds of N- [2- (3-indolyl) ethyl] succinamic acid and N- [2- (1-naphthyl) ethyl] succinamic acid, derived from a new category of Root-promoting substance, N- (phenethyl) succinamic acid analogs. Plant Soil 255: 67-75.). The azuki bean slice was immersed in the test solution for 72 hours, and the number of adventitious roots generated after 7 days was counted. The number of repetitions was 5.
The test was performed twice for each concentration, and the results are shown in Table 1.
Although D-phenyllactic acid alone has a slight rooting promoting effect, mixing with L-methionine so that D-phenyllactic acid: L-methionine = 9: 1 to 1: 9 greatly enhances the rooting promoting action. It is clear from Table 2.

Figure 0006018874
Figure 0006018874

実施例2
<アズキ切り口浸漬処理による乳酸菌培養液部分精製物・メチオニン混合物の発根促進作用>
製造例1で得た乳酸菌培養液部分精製物そのものと同精製物・L−メチオニン混合物を実施例1と同様にアズキ発根アッセイに供した。その結果を表3に示す。部分精製物濃縮液そのものでも発根促進作用は認められるが、乳酸菌培養液部分精製物・L−メチオニン混合物の効果の方が高いことが明らかであった。
Example 2
<Rooting promoting effect of partially purified lactic acid bacteria culture solution / methionine mixture by azuki bean dipping treatment>
The partially purified lactic acid bacteria culture solution obtained in Production Example 1 and the purified product / L-methionine mixture were subjected to azuki bean rooting assay in the same manner as in Example 1. The results are shown in Table 3. Although the root refinement promoting action was recognized even in the partially purified product concentrate itself, it was clear that the effect of the lactic acid bacteria culture solution partially purified product and L-methionine mixture was higher.

Figure 0006018874
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Claims (12)

フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩とを組み合わせてなる植物成長調整剤。   A plant growth regulator comprising a combination of phenyllactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof. フェニル乳酸又はその塩を含有する製剤と、メチオニン又はその塩を含有する製剤とを組み合わせてなるものである請求項1記載の植物成長調整剤。   The plant growth regulator according to claim 1, which is a combination of a preparation containing phenyllactic acid or a salt thereof and a preparation containing methionine or a salt thereof. フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩とを含有する製剤である請求項1記載の植物成長調整剤。   The plant growth regulator according to claim 1, which is a preparation containing phenyllactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof. フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩との質量比が1:600〜99:1である請求項1〜3のいずれか1項記載の植物成長調整剤。   The plant growth regulator according to any one of claims 1 to 3, wherein the mass ratio of phenyllactic acid or a salt thereof to methionine or a salt thereof is 1: 600 to 99: 1. フェニル乳酸又はその塩としてフェニル乳酸生産性微生物の培養液を用いる請求項1〜4のいずれか1項記載の植物成長調整剤。   The plant growth regulator according to any one of claims 1 to 4, wherein a culture solution of a phenyllactic acid-producing microorganism is used as phenyllactic acid or a salt thereof. フェニル乳酸生産性微生物が、乳酸菌である請求項5記載の植物成長調整剤。   The plant growth regulator according to claim 5, wherein the phenyllactic acid-producing microorganism is a lactic acid bacterium. フェニル乳酸生産性微生物の培養液が、コーンスティープリカーである請求項5又は6記載の植物成長調整剤。   The plant growth regulator according to claim 5 or 6, wherein the culture solution of the phenyllactic acid-producing microorganism is corn steep liquor. 植物の発根促進剤である請求項1〜7のいずれか1項記載の植物成長調整剤。   The plant growth regulator according to any one of claims 1 to 7, which is a plant root promoter. 植物の発芽促進剤である請求項1〜7のいずれか1項記載の植物成長調整剤。   The plant growth regulator according to any one of claims 1 to 7, which is a plant germination promoter. フェニル乳酸生産性微生物をメチオニン又はその塩0.1質量%以上含有する培地を用いて培養することを特徴とする請求項1、3〜9のいずれか1項記載の植物成長調の製造方法 Production of plant growth adjustment agent according to any one of claims 1,3~9 which comprises culturing in a medium containing phenyl lactic acid producing microorganism methionine or a salt 0.1 wt% or more Way . フェニル乳酸又はその塩とメチオニン又はその塩とを植物に施用することを特徴とする植物成長調整方法。   A plant growth control method comprising applying phenyllactic acid or a salt thereof and methionine or a salt thereof to a plant. フェニル乳酸生産性微生物の培養液とメチオニン又はその塩とを植物に施用することを特徴とする植物成長調整方法。   A plant growth adjustment method comprising applying a culture solution of a phenyllactic acid-producing microorganism and methionine or a salt thereof to a plant.
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