JP5950277B2 - Cell and tissue transport equipment - Google Patents
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Description
本発明は、生体から採取およびセルプロセッシングセンタにて生産された細胞および組織を輸送する装置に関する。 The present invention relates to an apparatus for transporting cells and tissues collected from a living body and produced at a cell processing center.
現在、日本国内で実施されている再生医療のほとんどは、患者自身の細胞を用いた自家培養移植によるものであり、多くの場合、自家培養移植では、細胞は医療機関において患者から採取され、大学や企業などのセルプロセッシングセンタ(CPC)に輸送され、このCPCで細胞から目的とする細胞および組織を生産している。そして生産された細胞および組織は、患者に移植するため再び医療機関へと輸送される。 Currently, most regenerative medicine in Japan is based on autologous transplantation using the patient's own cells. In many cases, cells are collected from patients at medical institutions and used in universities. The cells are transported to a cell processing center (CPC) such as a company or a company, and the target cells and tissues are produced from the cells using the CPC. The produced cells and tissues are then transported back to the medical institution for transplantation into the patient.
このような細胞および組織の輸送では、温度およびpHなどの通常の培養条件を再現し、かつ輸送時の細胞への物理的衝撃を軽減し、細胞増殖による細胞保持容器内の環境悪化を防止することで、細胞活性へのダメージを軽減するこに加え、輸送後の細胞の回収を容易にすることが必要である。 In such transport of cells and tissues, normal culture conditions such as temperature and pH are reproduced, physical impact on the cells during transport is reduced, and environmental deterioration in the cell holding container due to cell growth is prevented. Thus, in addition to reducing damage to cell activity, it is necessary to facilitate recovery of cells after transport.
しかしながら、従来は、上述したような要件を十分に満たしているものはなく、例えば足場依存性の細胞はフラスコに接種し、培養面に接着した状態で輸送されるため、物理的衝撃が細胞に直接伝わり、細胞活性がダメージを受けるなど、輸送時の細胞への振動影響は考慮されてこなかった。さらに、制御温度を低温とすることで輸送時の細胞増殖を抑制しているが、増殖以外の細胞活性を維持できなかったり、更に低温状態でのみ温度制御を行い、ガス制御ができないなどの問題があった。 However, conventionally, none of the above-mentioned requirements are sufficiently satisfied.For example, anchorage-dependent cells are inoculated into a flask and transported while adhering to the culture surface. Vibration effects on cells during transport, such as direct transmission and damage to cell activity, have not been considered. In addition, cell growth during transportation is suppressed by lowering the control temperature, but cell activities other than growth cannot be maintained, and problems such as inability to perform gas control by controlling temperature only at low temperatures was there.
このような問題を解決し、上述したような要件を適確に満たしている細胞および組織の輸送装置が要望されている。 There is a need for a device for transporting cells and tissues that solves such problems and accurately satisfies the above-described requirements.
本発明は、上記に鑑みてなされたもので、その目的とするところは、輸送時の細胞および組織への物理的衝撃および細胞活性へのダメージを軽減し、輸送後の細胞の回収を容易にすることができる細胞および組織の輸送装置を提供することにある。 The present invention has been made in view of the above, and the object of the present invention is to reduce physical impact on cells and tissues during transportation and damage to cell activity, and facilitate recovery of cells after transportation. It is to provide a cell and tissue transport device that can be used.
上記課題を達成するため、請求項1記載の細胞および組織の輸送装置は、細胞を搬送する際に用いられる細胞および組織の輸送装置であって、界面が形成される高比重溶液と低比重溶液とを収容する細胞保持容器と、前記界面に保持される細胞とは離隔して前記細胞保持容器内に配設され、前記界面に保持された細胞を回収するための細胞回収笊とを有し、前記高比重溶液は、パーフルオロカーボンまたは変性シリコーンオイルであり、前記低比重溶液は、細胞培養用の培地または細胞保存液であることを要旨とする。
To achieve the above object, the cell and tissue transport apparatus according to
請求項1記載の細胞および組織の輸送装置では、パーフルオロカーボンまたは変性シリコーンオイルである高比重溶液と、細胞培養用の培地または細胞保存液である低比重溶液との間に形成される界面に細胞を保持するとともに、界面に保持される細胞から離隔して細胞回収笊を配設し、この細胞回収笊で界面に保持された細胞を回収するため、輸送時の振動などによる物理的衝撃が細胞に伝達されず、細胞活性にダメージが与えられることもなく、細胞を安全に輸送できるとともに、界面に保持されている細胞を簡単かつ効率良く回収することができる。
また、パーフルオロカーボンまたは変性シリコーンオイルの高比重溶液と細胞培養用の培地または細胞保存液である生理的食塩水の低比重溶液とを細胞保持容器に入れ、高比重溶液と低比重溶液との間の界面に細胞を浮遊させて保持しているため、輸送時の細胞への振動などの物理的衝撃および細胞活性へのダメージを軽減することができるとともに、足場を提供しないため、細胞の増殖活性を停止または低下することにより、細胞増殖による細胞保持容器内の環境悪化の防止も可能である。
The cell and tissue transport apparatus according to
In addition, a high-density solution of perfluorocarbon or modified silicone oil and a low-density solution of physiological saline, which is a cell culture medium or cell storage solution, are placed in a cell holding container and placed between the high-density solution and the low-density solution. Since cells are suspended and held at the interface of the cells, physical impacts such as vibration to the cells during transportation and damage to cell activity can be reduced, and since no scaffold is provided, cell proliferation activity By stopping or lowering, it is possible to prevent environmental deterioration in the cell holding container due to cell proliferation.
請求項2記載の細胞および組織の輸送装置は、前記細胞保持容器を密閉すべく該容器の上開口部を閉鎖する容器蓋と、この容器蓋の下側に配設される空気排出部であって、中央に形成された空気排出孔、この空気排出孔の下端部から下方に向かって円錐状に広がり、この広がった下端の開口部が前記細胞保持容器内の空気を収集するように容器の内壁に近接する円錐状広がり部、およびこの円錐状広がり部の周縁部寄りに形成され、前記細胞保持容器内に溶液を投入するための溶液注入孔を有する空気排出部と、前記空気排出孔内に下端が挿通され、上端が上方に突出して前記容器蓋の下面の中央に形成された円筒状中央凹部に密接に嵌合する空気排出パイプと、上端が前記溶液注入孔を貫通して上方に突出し前記容器蓋の下面の周縁寄りに形成された円筒状周縁凹部に密接に嵌合し、下端が下方に延出し、前記細胞回収笊を固定的に保持する溶液注入パイプとを有することを要旨とする。 The cell and tissue transport device according to claim 2 is a container lid that closes the upper opening of the container so as to seal the cell holding container, and an air discharge unit disposed below the container lid. The air discharge hole formed in the center, conically spreads downward from the lower end of the air discharge hole, and the expanded lower end of the container collects the air in the cell holding container. An air discharge portion having a solution injection hole for introducing a solution into the cell holding container, and a conical expansion portion adjacent to the inner wall, and a peripheral portion of the conical expansion portion; An air discharge pipe that has a lower end inserted therethrough, an upper end projecting upward, and closely fitting into a cylindrical central recess formed in the center of the lower surface of the container lid, and an upper end penetrating upward through the solution injection hole. Protruding and near the periphery of the lower surface of the container lid Engaged closely fitted to made a cylindrical peripheral recess, the lower end extending downward, and summarized in that and a solution injection pipe for fixedly retaining the cells harvested bamboo basket.
請求項2記載の細胞および組織の輸送装置では、細胞保持容器を閉鎖する容器蓋の下側に空気排出部を配設し、この空気排出部の中央の空気排出孔から下方に向かって円錐状に広がる円錐状広がり部を設け、この円錐状広がり部の周縁部寄りの溶液注入孔に通した溶液注入パイプから細胞保持容器内に溶液を注入しながら、容器内の空気を円錐状広がり部で収集し、空気排出孔に通した空気排出パイプから空気を排出するとともに、溶液注入孔に通した溶液注入パイプの下端に細胞回収笊を固定的に保持しているため、細胞保持容器内の空気を完全に排出することができ、輸送時の振動などによる細胞保持容器内の溶液の揺れが低減し、細胞への物理的衝撃を軽減できるとともに、また溶液注入パイプの下端に細胞回収笊が固定的に保持されているため、空気排出部を溶液注入パイプとともに持ち上げることにより細胞回収笊を容易に取り出し、細胞を容易に回収することができる。 In the cell and tissue transport apparatus according to claim 2, an air discharge portion is disposed below the container lid for closing the cell holding container, and a conical shape is formed downward from a central air discharge hole of the air discharge portion. A conical spreading portion is provided, and while injecting the solution into the cell holding container from the solution injection pipe passing through the solution injection hole near the peripheral edge of the conical spreading portion, the air in the container is The collected air is discharged from the air discharge pipe that is passed through the air discharge hole, and the cell recovery basket is fixedly held at the lower end of the solution injection pipe that is passed through the solution injection hole. Can be discharged completely, and the shaking of the solution in the cell holding container due to vibration during transportation can be reduced, reducing the physical impact on the cells, and the cell recovery rod is fixed to the lower end of the solution injection pipe Kept Are therefore the cell recovery colander by lifting the air outlet with a solution injection pipe easily taken out, the cells can be easily recovered.
請求項3記載の細胞および組織の輸送装置は、前記細胞保持容器の周壁部に形成され、該細胞保持容器内の温度を所定の温度に加温するためのヒータを有することを要旨とする。 The gist of the cell and tissue transport device according to claim 3 is that it has a heater formed on the peripheral wall portion of the cell holding container and for heating the temperature inside the cell holding container to a predetermined temperature.
請求項3記載の細胞および組織の輸送装置では、細胞保持容器の周壁部にヒータを形成し、このヒータで細胞保持容器内の温度を所定の温度に加温するため、細胞保持容器の内部は所定の温度に加温され、高比重溶液と低比重溶液との界面に保持されている細胞も所定の温度に加温され、細胞の生存率を高い状態に保持している。 In the apparatus for transporting cells and tissues according to claim 3, a heater is formed on the peripheral wall portion of the cell holding container, and the temperature inside the cell holding container is heated to a predetermined temperature by this heater. The cells that are heated to a predetermined temperature and are held at the interface between the high specific gravity solution and the low specific gravity solution are also heated to a predetermined temperature, and the viability of the cells is kept high.
請求項4記載の細胞および組織の輸送装置は、前記細胞回収笊が、ナイロンメッシュからなる網目状部分とこの網目状部分の外周縁部を囲む笊枠で構成されていることを要旨とする。 4. Symbol placement of cells and tissues of the transport device, said cell collection colander is, a gist that it is constituted by colander frame surrounding the outer periphery of the reticulated portion and reticulated portions of nylon mesh .
請求項4記載の細胞および組織の輸送装置では、前記細胞回収笊の網目状の部分がナイロンメッシュで構成され、細胞回収笊の外周縁部を笊枠で囲まれているため、高比重溶液と低比重溶液を除去し、細胞を効率良く回収することができる。 Transport device cells and tissues according to claim 4 Symbol mounting, since the mesh portion of said cell collection colander is composed of a nylon mesh, surrounded the outer periphery of the cell collection colander in colander frame, high density solution And the low specific gravity solution can be removed, and the cells can be efficiently recovered.
請求項5記載の細胞および組織の輸送装置は、前記笊枠の内壁にタンパク質吸着阻害剤を塗布することを要旨とする。 Billing transportation device 5. Symbol placement of cells and tissues is summarized in that applying a protein adsorption inhibitor to the inner wall of the bamboo basket frame.
請求項5記載の細胞および組織の輸送装置では、細胞回収笊を囲む笊枠の内壁にタンパク質吸着阻害剤を塗布するため、細胞回収笊への細胞接着を防止することができる。 Transport device cells and tissues according to claim 5 Symbol mounting, in order to apply the protein adsorption inhibitor to the inner wall of the colander frame surrounding the cell recovery colander, it is possible to prevent cell adhesion to cell recovery colander.
本発明によれば、高比重溶液と低比重溶液との間に形成される界面に細胞を浮遊して保持するとともに、界面から離隔して細胞回収笊を配設し、この細胞回収笊で界面に保持された細胞を回収するので、輸送時の振動などによる物理的衝撃が細胞に伝達されず、細胞活性にダメージが与えられることもなく、細胞を安全に輸送できるとともに、界面に浮遊して保持されている細胞を簡単かつ効率良く回収することができる。
また、本発明によれば、パーフルオロカーボンまたは変性シリコーンオイルなどの高比重溶液と細胞培養用の培地または細胞保存液(例えば生理的食塩水)などの低比重溶液とを細胞保持容器に入れ、高比重溶液と低比重溶液との間の界面に細胞を浮遊させて保持しているので、輸送時の細胞への振動などの物理的衝撃および細胞活性へのダメージを軽減することができるとともに、足場を提供しないので、細胞の増殖活性を停止または低下することにより、細胞増殖による細胞保持容器内の環境悪化の防止も可能である。
According to the present invention, the cells are suspended and held at the interface formed between the high specific gravity solution and the low specific gravity solution, and the cell recovery tub is disposed separately from the interface. Since the cells held in the cell are collected, physical impacts due to vibration during transportation are not transmitted to the cells, and the cells are not damaged, and the cells can be transported safely and floated at the interface. The retained cells can be collected easily and efficiently.
Further, according to the present invention, a high specific gravity solution such as perfluorocarbon or modified silicone oil and a low specific gravity solution such as a cell culture medium or a cell preservation solution (for example, physiological saline) are placed in a cell holding container. Since the cells are suspended and held at the interface between the specific gravity solution and the low specific gravity solution, physical impact such as vibration to the cells during transportation and damage to the cell activity can be reduced and the scaffolding can be reduced. Therefore, it is possible to prevent deterioration of the environment in the cell holding container due to cell growth by stopping or reducing the cell growth activity.
また、本発明によれば、細胞保持容器を閉鎖する容器蓋の下側に空気排出部を配設し、この空気排出部の中央の空気排出孔から下方に向かって円錐状に広がる円錐状広がり部を設け、この円錐状広がり部の周縁部寄りの溶液注入孔に通した溶液注入パイプから細胞保持容器内に溶液を注入しながら、容器内の空気を円錐状広がり部で収集し、空気排出孔に通した空気排出パイプから空気を排出するとともに、溶液注入孔に通した溶液注入パイプの下端に細胞回収笊を固定的に保持しているので、細胞保持容器内の空気を完全に排出することができ、輸送時の振動などによる細胞保持容器内の溶液の揺れが低減し、細胞への物理的衝撃を軽減できるとともに、また溶液注入パイプの下端に細胞回収笊が固定的に保持されているので、空気排出部を溶液注入パイプとともに持ち上げることにより細胞回収笊を容易に取り出し、細胞を容易に回収することができる。 Further, according to the present invention, the air discharge part is disposed below the container lid that closes the cell holding container, and the conical expanse spreads conically downward from the central air discharge hole of the air discharge part. While injecting the solution into the cell holding container from the solution injection pipe passed through the solution injection hole near the peripheral edge of this conical spreading part, air in the container is collected at the conical spreading part and discharged Air is discharged from the air discharge pipe that has passed through the hole, and the cell recovery tub is fixedly held at the lower end of the solution injection pipe that has passed through the solution injection hole, so that the air in the cell holding container is completely discharged. It can reduce the shaking of the solution in the cell holding container due to vibration during transportation, reduce the physical impact on the cells, and the cell recovery basket is fixedly held at the lower end of the solution injection pipe. Because the air discharge part Cells harvested colander easily removed by lifting with a solution injection pipe, the cells can be easily recovered.
更に、本発明によれば、細胞保持容器の周壁部にヒータを形成し、このヒータで細胞保持容器内の温度を所定の温度に加温するので、細胞保持容器の内部は所定の温度に加温され、高比重溶液と低比重溶液との界面に保持されている細胞も所定の温度に加温され、細胞の生存率を高い状態に保持することができる。 Furthermore, according to the present invention, the heater is formed on the peripheral wall portion of the cell holding container, and the temperature inside the cell holding container is heated to a predetermined temperature by this heater, so that the inside of the cell holding container is heated to the predetermined temperature. The cells that are warmed and held at the interface between the high specific gravity solution and the low specific gravity solution are also heated to a predetermined temperature, and the viability of the cells can be kept high.
また、本発明によれば、細胞回収笊の網目状の部分がナイロンメッシュで構成され、細胞回収笊の外周縁部を笊枠で囲まれているので、高比重溶液と低比重溶液を除去し、細胞を効率良く回収することができる。 In addition, according to the present invention, since the mesh-like portion of the cell recovery basket is made of nylon mesh, and the outer peripheral edge of the cell recovery basket is surrounded by the hook frame, the high specific gravity solution and the low specific gravity solution are removed. The cells can be recovered efficiently.
更に、本発明によれば、細胞回収笊を囲む笊枠の内壁にタンパク質吸着阻害剤を塗布するので、細胞回収笊への細胞接着を防止することができる。 Furthermore, according to the present invention, since the protein adsorption inhibitor is applied to the inner wall of the cage frame surrounding the cell collection basket, cell adhesion to the cell collection basket can be prevented.
以下、図面を用いて、本発明を実施するための形態(以下、実施形態と称する)を説明する。 DESCRIPTION OF EMBODIMENTS Hereinafter, embodiments for carrying out the present invention (hereinafter referred to as embodiments) will be described with reference to the drawings.
図1は、本発明の一実施形態に係わる細胞および組織の輸送装置の外観を示す斜視図である。同図に示す細胞および組織の輸送装置1は、アルミニウムやステンレスなどからなる円筒形で大径の外側容器3で全体的に囲まれて構成され、この外側容器3の上端の開口部には、外蓋31が密接に嵌合し、外側容器3内を密閉状態にし得るようになっている。
FIG. 1 is a perspective view showing an appearance of a cell and tissue transport apparatus according to an embodiment of the present invention. The cell and
また、外側容器3の内部には、後述するように、高比重溶液と低比重溶液との間に形成される界面に細胞を浮遊して保持するように高比重溶液および低比重溶液を収容する細胞保持容器である遠沈管201が配設されている。この遠沈管201の下部は、半球状もしくは円錐状に形成され、この遠沈管201の下側にはスプリング33sが配設され、このスプリング33sにより遠沈管201が緩衝性をもって支持されている。
Further, as will be described later, the high specific gravity solution and the low specific gravity solution are accommodated in the outer container 3 so as to float and hold cells at the interface formed between the high specific gravity solution and the low specific gravity solution. A
更に、外側容器3の中程には、USB35bが電気ケーブルを介して接続されているが、このUSB35bは電気ケーブルを介して細胞輸送装置1の内部の後述する制御部に接続されるとともに、図示しない外部の制御装置に接続され、この制御装置からUSB35bを介して細胞輸送装置1に電源や制御信号を供給するとともに、細胞輸送装置1からの情報がUSB35bを介して外部の制御装置に送信されるようになっている。また、このUSB35bが接続された部分の少し上方の外側容器3にLEDを設け、このLEDにより細胞輸送装置1が作動状態にあるか否かが分かるようにしても良い。
Further, a
図2は、図1に示した細胞輸送装置1の内部構造を示す縦断面を示す模式図である。図2に示すように、遠沈管201の内部には、高比重溶液9と低比重溶液11が入れられているが、この遠沈管201内に入れられた2種類の溶液のうち、下方に沈む高比重溶液9とその上方に浮かぶ低比重溶液11との間には界面13が形成される。この界面13に細胞15が浮遊するようにして保持され、細胞15に対して足場が提供されない状態にするとともに、細胞15に対して輸送時の振動などによる物理的衝撃が伝わらず、また細胞の活性にダメージが与えられないようになっている。
FIG. 2 is a schematic view showing a longitudinal section showing the internal structure of the
また、界面13の下方には、細胞回収笊17が界面13の下方の高比重溶液9内に配設されている。また、この細胞回収笊17の周縁部を囲っている笊枠19には上方から下方に垂直に伸びたチューブ21の下端部が固定的に取り付けられている。
Further, below the
なお、細胞回収笊17は、例えばメッシュサイズ5μmのナイロンメッシュで構成され、この細胞回収笊17の上方の界面13に浮遊して保持されている細胞15を後述するように掬い上げて効率良く回収し得るようになっている。また、笊枠19の内側は、タンパク質吸収阻害剤が塗布され、これにより細胞回収笊17への細胞接着を防止している。
The
遠沈管201の上端部の内側には、内蓋23が嵌合している。この内蓋23は、図3(a)および(b)に拡大して示すように、外周面が下方に向かってしぼみ、このしぼんだ下端部は、低比重溶液11内において界面13の上方で界面13に対向している。
An
内蓋23は、空気排出部を構成するものであり、図3(a)および(b)に示すように、中央に形成された空気排出孔の下端部から下方に向かって円錐状に広がり、この広がった下端の開口部が遠沈管201内の空気を収集するように遠沈管201の内壁に近接する円錐状部23bを有し、この円錐状部23bの周縁部寄りに形成され、遠沈管201内に溶液を注入するための溶液注入孔が形成され、この溶液注入孔に前記チューブ21の上端が挿入されている。
The
内蓋23の中央の空気排出孔には、短い空気排出パイプ23aが挿入され、この空気排出パイプ23aの上端は、封止用シーラを使用して封止され、封止部23cとなっている。また、内蓋23の周縁部寄りを貫通して延出したチューブ21の上端も封止用シーラを使用して封止され、封止部21cとなっている。
A short
なお、内蓋23は、チューブ21から遠沈管201内に溶液を注入しながら空気排出パイプ23aから遠沈管201内の空気を排出し終わった後、空気排出パイプ23aおよびチューブ21から遠沈管201内に空気が入らないように空気排出パイプ23aおよびチューブ21のそれぞれの上端部は、上述したように、封止用シーラを使用して封止されているが、更に図示しないが、例えばバルブや密閉蓋などで完全に密閉するようにしてもよい。封止用シーラを使用して封止したときには、空気排出パイプ23aおよびチューブ21のそれぞれの上端を鋏等によって切断して開封することになる。
In addition, the
遠沈管201の外側には、図2に示すように、遠沈管201の外周部を全体的に覆うようにフィルムヒータ33g、カーボン33f、アルミテープ33e、アルミ板33d、アクリル筒33cが内側から外側に向かって記載順に層状に設けられている。また、アクリル筒33cと外側容器3の内周面との間には、発泡スチロールやアルミニウムビーズ等からなる断熱部33bが断熱と緩衝抑制のために設けられている。なお、遠沈管201の外周部とフィルムヒータ33gとは、図では離間しているが、実際は遠沈管201が挿脱自在である程度に密着している。
As shown in FIG. 2, a
更に、外側容器3の上開口部を閉塞している外蓋31の下方であって、前記空気排出パイプ23aの上部には、温度ロガー31aが設けられ、この温度ロガー31aにより温度を測定し、記録するようになっている。また、外側容器3の内周面には、例えばワンチップマイクロプロセッサなどからなる制御部35が設けられ、この制御部35には、前記USB35bが電気ケーブルを介して接続される。前記アクリル筒33cの外周部には、サーモスタット35aが取り付けられているが、このサーモスタット35aは電気ケーブルを介して制御部35に接続されている。
Further, a
以上のように構成される本実施形態の細胞輸送装置1においては、CPCに輸送されるべく医療機関において患者から採取された細胞は、遠沈管201内に注入された高比重溶液9および低比重溶液11の間に形成された界面13の上に符号15で示すように浮遊するように保持される。
In the
なお、このように遠沈管201内に高比重溶液9および低比重溶液11を注入するとともに、両者の界面13に細胞15を浮遊させて保持した後に、遠沈管201内の空気を完全に排出するために、チューブ21から高比重溶液9または低比重溶液11を遠沈管201内に追加注入しながら、遠沈管201内の空気を円錐状部23bで収集し、この収集した空気を空気排出パイプ23aから外部に排出し、遠沈管201内の空気を完全に排出する。それから、遠沈管201の上開口部に内蓋23を気密状態に嵌合させるとともに、チューブ21および空気排出パイプ23aの上端を封止用シーラで封止する。
In addition, after injecting the high
このようにして高比重溶液9と低比重溶液11との間の界面13に細胞15を浮遊させて保持するとともに、遠沈管201から空気を抜き、それから内蓋23で遠沈管201内を気密状態にした後、この遠沈管201を外側容器3内に配設し、遠沈管201の下端部をスプリング33s上に載置する。
In this way, the
次に、制御部35によってフィルムヒータ33gを駆動して発熱させ、この発熱により遠沈管201内の高比重溶液9および低比重溶液11を所定の温度、例えば25゜C乃至37゜Cなどの温度に加温して、高比重溶液9と低比重溶液11との界面13に保持されている細胞15を当該所定の温度に暖め、それから制御部35の制御によって細胞15を常に所定の温度に保温するように制御し、細胞15の生存率を高い状態に保持する。
Next, the
上述したように、本実施形態の細胞輸送装置1においては、遠沈管201内で界面13に細胞15を浮遊して保持するとともに、細胞15を所定の温度に保温しつつ、細胞輸送装置1を例えば宅配便などによりCPCに輸送することになるが、本実施形態の細胞輸送装置1は、高比重溶液9と低比重溶液11を入れた遠沈管201を外側容器3内に収納するという極めてコンパクトで簡便な構造であって、輸送における取扱いが極めて簡単なものであり、この輸送では、空気が完全に排出された気密状態の遠沈管201内において高比重溶液9と低比重溶液11との間の界面13に細胞15が浮遊して保持されるため、輸送時の細胞への振動などの衝撃および細胞活性へのダメージを軽減することができることに加えて、足場を提供しないため、細胞の増殖活性を停止または低下することにより、細胞増殖による細胞保持容器内の環境悪化の防止も可能であると同時に、細胞を休眠状態に保持することができる。
As described above, in the
また、細胞15は、制御部35の制御による加温制御により常に所定の最適温度に保持されているため、従来のような低温傷害が生ぜず、細胞活性を維持した状態で細胞輸送することができる。
Further, since the
更に、細胞輸送装置1をCPCに輸送した後、CPCにおいて細胞15から組織を生産するために、細胞輸送装置1から細胞15を回収することが必要であるが、この細胞15の回収では、細胞輸送装置1の外側容器3の外蓋31を取り外して、外側容器3から遠沈管201を取り出し、この取り出した遠沈管201から内蓋23を上方に持ち上げるように取り出すと、この内蓋23に固定されているチューブ21も同時に上方に持ち上げられ、このチューブ21の下端部に固定されている細胞回収笊17も高比重溶液9および低比重溶液11をその網目から排液しながら同時に上方に持ち上げられて取り出されるので、高比重溶液9と低比重溶液11との界面13に保持されていた細胞15は、細胞回収笊17で掬い上げられるように簡単に回収されることになる。
Furthermore, after transporting the
このように細胞15の回収は、単に遠沈管201から内蓋23を上方に持ち上げればよいだけであって、非常に簡単に行うことができる。また、本実施形態の細胞輸送装置1では、高比重溶液9にPFCを用いているため、低比重溶液のガス制御、すなわちPFCと培地または保存溶液との間のガス移動による制御を行うことができ、温度およびpHなどの通常の培養条件を用いることで輸送時の細胞活性へのダメージを軽減することが可能である。
As described above, the
図4および図5は、本発明の他の実施形態に係わる細胞および組織の輸送装置に使用される遠沈管を示す斜視図であるが、図5は、下部の遠沈管201とその上部とが切り離されて分離した状態が図示されている。図4および図5に示す遠沈管201は、その内部に高比重溶液9と低比重溶液11とが入れられ、この2種類の溶液のうち、下方に沈む高比重溶液9とその上方に浮かぶ低比重溶液11との間には界面13が図4に示すように形成され、この界面13に細胞15が浮遊して保持され、細胞15に対して足場がない状態にするとともに、細胞15に対して輸送時の振動などによる物理的衝撃が伝達せず、また細胞活性にダメージが与えられないようになっている。
4 and 5 are perspective views showing a centrifuge tube used in a cell and tissue transport apparatus according to another embodiment of the present invention. FIG. 5 shows a
なお、遠沈管201は、図5および図9に示すように、その上端部外側にはねじ部201aが形成されている。このねじ部201aには、遠沈管201の上開口部を緊密に閉塞している内蓋213と接着剤等により固定的に取り付けられ固着される内蓋キャップ123dの内側に形成されたねじ部123eが螺合している。図6は、この螺合した状態を図示している。
As shown in FIGS. 5 and 9, the
内蓋213は、図7に示すように、内蓋213の中央に形成された円筒部225aの下端部から下方に向かって、円錐状広がり部225が円錐状に広がるように形成されている。この広がった下端の開口部が、遠沈管201内の空気を収集する。
As shown in FIG. 7, the
更に、内蓋213と、この内蓋213と固着される内蓋キャップ123dの中央部には、空気抜きパイプ123aが貫通して取り付けられる。この空気抜きパイプ123aの上端部には、空気抜き部用キャップ123cが緊密に嵌合され、空気抜きパイプ123aを緊密に閉塞する。なお、この内蓋キャップ123dが嵌合する空気抜きパイプ123aの上部は、図2に示すように、空気抜き部用キャップ123cの代わりにシリンジ23cによって閉塞するようにしても良い。
Further, an
空気抜きパイプ123aの下端部は、前記内蓋213内の円錐状広がり部225の上部の円筒部225aの上端部に連結され、両者内を、すなわち空気抜きパイプ123aと円筒部225a内を空気や溶液が通過し得るようになっている。
The lower end portion of the
前記内蓋キャップ123dの周縁部寄りには、チューブ121の上端が貫通して設けられ、このチューブ121の上端部には、チューブ用キャップ121cが緊密に嵌合するように取り付けられている。チューブ121の下部は、内蓋キャップ123dを貫通し、さらに内蓋213内の後述する細胞回収笊117の外側を、すなわち内蓋213内の円錐状広がり部225の周縁部寄りに図7に示すように形成されたチューブ孔123fを通って下方に延出し、その下端部は、遠沈管201内に下方まで伸びている。そして、チューブ用キャップ121cを取り外した場合に、チューブ121の上端から取り入れられる外部の空気がチューブ121を通って、遠沈管201内に取り込まれ得るようになっている。
Near the peripheral edge of the
前記内蓋213の円錐状広がり部225の途中には、図7にも示すように、細胞回収笊117が配設されているが、この細胞回収笊117は、円錐状広がり部225の傾斜部に上側角部が食い込むように配設されている。また、細胞回収笊117の周縁部には、図8に示すように、笊枠119が設けられている。なお、細胞回収笊117の網目状部は、例えばメッシュサイズ5μmのナイロンメッシュで構成され、この細胞回収笊117で高比重溶液9と低比重溶液11の界面13に浮遊して保持されている細胞15を回収し得るようになっている。また、笊枠119および遠沈管201の内側は、タンパク質吸収阻害剤が塗布され、これにより細胞回収笊117への細胞接着を防止している。
As shown in FIG. 7, a
以上のように構成される本実施形態の遠沈管201においては、当該遠沈管201内の高比重溶液9と低比重溶液11との界面13に細胞15を浮遊させながら保持するとともに、内蓋キャップ123dを緊密に嵌合して内部の溶液が漏出しないようにしてから、遠沈管201を細胞輸送装置内に収納して、CPCに輸送する。
In the
この遠沈管201を収納した細胞輸送装置を受け取ったCPCでは、細胞15から組織を生産するために、細胞15を遠沈管201から回収することになる。この回収では、まず空気抜き部用キャップ123cおよびチューブ用キャップ121cを取り外し、空気抜き部用キャップ123cの代わり空気抜きパイプ123aの上端に図示しないシリンジを取り付ける。
In the CPC that has received the cell transport device containing the
それから、遠沈管201を逆さまにし、空気抜きパイプ123aに取り付けたシリンジで高比重溶液9および低比重溶液11を抜き取る。遠沈管201内の高比重溶液9と低比重溶液11を抜き取ると、これらの溶液の界面13に浮遊して保持されていた細胞15は、細胞回収笊117の上に乗るように回収される。
Then, the
このように細胞回収笊117に細胞15が回収された後、新しい遠沈管201を取り付け、逆さまの状態から元の正常な状態に戻し、空気抜きパイプ123aに取り付けたシリンジからリン酸緩衝生理食塩水(PBS)を遠沈管201内に流し込み、これにより細胞回収笊117に回収された細胞15を遠沈管201内に流し入れる。細胞15を新たな遠沈管201内に流し込み、遠沈管201に新しい蓋をしてから、遠心分離機にかけ、細胞15を回収する。
After the
図10は、本発明の別の実施形態に係わる細胞および組織の輸送装置に使用される細胞収納容器の縦断面を示す模式図である。同図に示す細胞収納容器200は、容器本体222の上開口部と上蓋223dの内側に形成されたねじとが螺合して、容器本体222を密閉状態で閉塞し得るように構成されている。
FIG. 10 is a schematic view showing a longitudinal section of a cell storage container used in a cell and tissue transport apparatus according to another embodiment of the present invention. The
容器本体222は、外側にフィルムヒータ233fが設けられ、さらにその外側に断熱層233bが設けられる。この構成により容器本体222内を所定の温度に加温し得るようになっている。なお、フィルムヒータ233fは、密着して設けられ容器と一体的に構成されている。
The
前記上蓋223dの下面には、上端が近接して円筒部311が設けられ、この円筒部311の下部は、容器本体222の内蓋223として形成されている。また、内蓋223は、円筒部311の下端部から下方に向かって円錐状に広がった円錐状広がり部223bを形成し、この円錐状広がり部223bの下方の円錐状に広がった下端の開口部は容器本体222の内周壁に内溶液が漏れない程度にかつ着脱自在であるように密接している。
A
内蓋223の中央部には、空気抜きパイプ311が貫通して取り付けられる。この空気抜きパイプ311の上端部には、空気抜き部用キャップ233cが緊密に嵌合され、空気抜きパイプ311を緊密に閉塞する。なお、この空気抜きパイプ311の上部は、空気抜き部用キャップ233cの代わりに図2に示す封止用シーラを使用して封止、閉塞するようにしても良い。
An
円錐状広がり部223bの下方の容器本体222の内部には、高比重溶液9と低比重溶液11が入れられる。この容器本体222内に入れられた2種類の溶液のうち、下方に沈む高比重溶液9とその上方に浮かぶ低比重溶液11との間には界面13が形成され、この界面13に培養された皮膚組織等の細胞シートである組織片215が浮遊して保持され、組織片215に対して足場がない状態にするとともに、組織片215に対して輸送時の振動などによる物理的衝撃が伝達せず、また細胞活性にダメージが与えられないようになっている。
The high
上述したように構成される本実施形態の細胞収納容器200においては、容器本体222が全体的に内蓋223で閉塞されるとともに、上蓋223dで上開口部が密閉状態で閉塞された容器本体222内に高比重溶液9と低比重溶液11を入れ、この高比重溶液9と低比重溶液11との間の界面13に組織片215を浮遊して保持しているため、この細胞収納容器200の輸送時にも振動などによる物理的衝撃が組織片215に伝達することなく、安全に組織片215を輸送することができる。
In the
以上、実施形態を挙げて本発明の実施形態を説明したが、前記実施形態は例示であり、特許請求の範囲に記載される発明の範囲は、発明の要旨を逸脱しない範囲内で種々変更できるものである。 The embodiments of the present invention have been described with reference to the embodiments. However, the embodiments are exemplifications, and the scope of the invention described in the claims can be variously changed without departing from the gist of the invention. Is.
1 細胞輸送装置
3 外側容器
9 高比重溶液
11 低比重溶液
13 界面
15 細胞
17 細胞回収笊
19 笊枠
21 チューブ
21c 封止部
23 内蓋
23a 空気排出パイプ
23b 円錐状部
23c 封止部
31 外蓋
33b 断熱部
33c アクリル筒
33d アルミ板
33e アルミテープ
33f カーボン
33g フィルムヒータ
33s スプリング
35 制御部
35b USB
117 細胞回収笊
121 チューブ
121c チューブ用キャップ
123a 空気抜きパイプ
123c 空気抜き部用キャップ
123d 内蓋キャップ
200 細胞収納容器
201 遠沈管
213 内蓋
215 組織片
222 容器本体
223 内蓋
223b 円錐状広がり部
225 円錐状広がり部
225a 円筒部
233b 断熱層
233f フィルムヒータ
311 円筒部
DESCRIPTION OF
117
Claims (5)
界面が形成される高比重溶液と低比重溶液とを収容する細胞保持容器と、
前記界面に保持される細胞とは離隔して前記細胞保持容器内に配設され、前記界面に保持された細胞を回収するための細胞回収笊と
を有し、
前記高比重溶液は、パーフルオロカーボンまたは変性シリコーンオイルであり、前記低比重溶液は、細胞培養用の培地または細胞保存液であることを特徴とする細胞および組織の輸送装置。 A cell and tissue transport device used in transporting cells,
A cell holding container containing a high-density solution and a low-density solution in which an interface is formed;
Wherein the interface cells are retained disposed spaced apart the cell retention vessel, possess a cell recovery colander for collecting the cells retained on the interface,
The device for transporting cells and tissues, wherein the high specific gravity solution is perfluorocarbon or modified silicone oil, and the low specific gravity solution is a medium for cell culture or a cell preservation solution .
この容器蓋の下側に配設され、中央に形成された空気排出孔、この空気排出孔の下端部から下方に向かって円錐状に広がり、この広がった下端の開口部が前記細胞保持容器の内壁に近接する円錐状広がり部、およびこの円錐状広がり部の周縁部寄りに形成され、前記細胞保持容器内に溶液を投入するための溶液注入孔を有する空気排出部と、
前記空気排出孔内に下端が挿通され、上端が上方に突出して前記容器蓋の下面の中央に形成された円筒状中央凹部に密接に嵌合する空気排出パイプと、
上端が前記溶液注入孔を貫通して上方に突出し前記容器蓋の下面の周縁寄りに形成された円筒状周縁凹部に密接に嵌合し、下端が下方に延出し、前記細胞回収笊を保持する溶液注入パイプと
を有することを特徴とする請求項1記載の細胞および組織の輸送装置。 A container lid for closing the upper opening of the container to seal the cell holding container;
An air discharge hole disposed in the lower part of the container lid and formed in the center, and extends downwardly from the lower end of the air discharge hole in a conical shape. An air discharge part having a solution injection hole for introducing a solution into the cell holding container, formed near the peripheral part of the conical extension part close to the inner wall and the conical extension part;
An air discharge pipe having a lower end inserted through the air discharge hole and an upper end protruding upward and closely fitting into a cylindrical central recess formed at the center of the lower surface of the container lid;
The upper end penetrates the solution injection hole and protrudes upward, closely fits into a cylindrical peripheral recess formed near the periphery of the lower surface of the container lid, and the lower end extends downward to hold the cell collection basket The cell and tissue transport device according to claim 1, further comprising a solution injection pipe.
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