JP5873215B2 - 向上した精度を備えた電気化学的バイオセンサ - Google Patents
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Description
(1)グルコース+GOx−FAD→グルコン酸+GOx−FADH2
(2)GOx−FADH2+電子移動メディエータ(酸化状態)→GOx−FAD+電子移動メディエータ(還元状態)
(反応式1において、GOxは、グルコースオキシダーゼを示し、GOx−FADおよびGOx−FADH2はそれぞれ、グルコースオキシダーゼの活性部位であるフラビンアデニンジヌクレオチド(FAD)の酸化状態および還元状態を示す。)
G=σA/L (1)
本発明のもう1つの目的は、バイオセンサを使用してヘマトクリット値を分析することによって、血液グルコース濃度を正確に測定するための方法を提供することにある。
下部基板、
前記下部基板上に形成される第1作用電極および第1補助電極を含む、第1電極部、
前記下部基板上に形成される第2作用電極および第2補助電極を含む、第2電極部、
前記第2作用電極上または前記第2補助電極上に形成される試薬層であって、電子移動メディエータを含む、前記試薬層、
血液サンプルを前記第1電極部および前記第2電極部の中へ連続して導くためのマイクロチャネルサンプルセル部を具備する、中間基板、および、
上部基板を含み、
前記第1反応ユニットおよび前記第2反応ユニットにおいて露出している第1作用電極および第1補助電極の面積およびその間の距離は、絶縁カバーを利用することによって一定である。
マイクロチャネルサンプルセル部の中へ血液サンプルを導入すること(ステップ1)、
第1電極部において血液サンプルの電気伝導率を測定することによって、ヘマトクリット値を計算すること(ステップ2)、
第2電極部において信号を測定することによって、グルコース濃度を計算すること(ステップ3)、および、
第1電極部において計算されたヘマトクリット値を適用することによって、第2電極部において計算されたグルコース濃度を補正すること(ステップ4)、
を含む。
本発明は、電気化学的バイオセンサを提供し、該電気化学的バイオセンサは、
下部基板、
前記下部基板上に形成される第1作用電極および第1補助電極を含む、第1電極部、
前記下部基板上に形成される第2作用電極および第2補助電極を含む、第2電極部、
前記第2作用電極上または前記第2補助電極上に形成される試薬層であって、電子移動メディエータを含む、前記試薬層、
血液サンプルを前記第1電極部および前記第2電極部の中へ連続して導くためのマイクロチャネルサンプルセル部を具備する、中間基板、および、
上部基板を含み、
前記第1反応ユニットおよび前記第2反応ユニットに対して露出している第1作用電極および第1補助電極の面積およびその間の距離は、絶縁カバーを利用することによって一定である(図1および2参照)。
本発明に係るバイオセンサにおいて、第1電極部は、血液サンプルの電気伝導率を測定することによって、ヘマトクリット値を分析する役割を果たす。
特に、第2電極部は、第2作用電極および第2補助電極を含み、直流(DC)電圧を適用することによって、血液サンプル中のグルコース濃度を測定する。
酸化還元酵素は、測定されるグルコースとの反応を介して還元される。そして、還元された酵素は電子移動メディエータと反応し、それによりグルコースを定量化する。酸化還元酵素は、例えばフラビンアデニンジヌクレオチド−グルコースデヒドロゲナーゼ(FAD−GDH)、ニコチンアミドジヌクレオチド−グルコースデヒドロゲナーゼ(NAD−GDH)、ピロロキノリンキノン−グルコースデヒドロゲナーゼ(PQQ−GDH)、グルコースオキシダーゼ(GOx)などを含んでもよい。
第1電極部において血液サンプルの電気伝導率を測定することによって、ヘマトクリット値を計算すること(ステップ2)、
第2電極部において信号を測定することによって、グルコース濃度を計算すること(ステップ3)、および、
第1電極部において計算されたヘマトクリット値を適用することによって、第2電極部において計算されたグルコース濃度を補正すること(ステップ4)。
本発明に係る方法において、ステップ1は、サンプルセル部の中へ血液サンプルを導入するステップである。
以下、本発明は、下記の例を参照してより詳細に説明される。しかしながら、下記の例は、例示を目的としたものであり、本発明の内容を限定することを意図していない。
図1に示されるように、平均値0.5μlの導入量のセル導入部を有するプレーナーバイオセンサが、プレーナーバイオセンサの例として製造された。プレーナーバイオセンサは、韓国特許出願10−2003−0036804号明細書、韓国特許出願10−2005−0010720号明細書、韓国特許出願10−2007−0020447号明細書、韓国特許出願10−2007−0021086号明細書、韓国特許出願10−2007−0025106号明細書、韓国特許出願10−2007−0030346号明細書、および、E. K. Bauman et al., Analytical Chemistry, vol 37, p 1378, 1965; K. B. Oldham in "Microelectrodes: Theory and Applications," Kluwer Academic Publishers, 1991., などに公開された方法を参照して製造された。
1は、ポリエステルで作られた下部基板であり、その上には作用電極および補助電極が形成されている。
2〜5は、スクリーン印刷炭素/グラファイトで製造された電極である(2は、第1作用電極、3は、第1補助電極、4は、第2作用電極、5は、第2補助電極)。
6は、第1電極部および第2電極部を規定し、同様に第1作用電極および第1補助電極の面積を規定する、絶縁カバーである。
7は、酸化還元酵素および電子移動メディエータを含む、試薬層である。
9は、ポリエステルで作成され、マイクロチャネルサンプルセル部の中へ血液を浸透させるための排気口を具備する、上部基板である。
10は、排気口である。
図3に示されるように、バイオセンサは、例1と同じ方法で製造され、絶縁カバー6は、第1作用電極および第2作用電極の間には配置されていない。
図4に示されるように、バイオセンサは、例1と同じ方法で製造され、絶縁カバー6は、第1および第2電極が血液流入方向の方向に対して連続的に位置付けられ、絶縁カバーによって規定されないように提供される。
例1、比較例1および2において製造されたバイオセンサのヘマトクリット測定の精度を調査するために、以下のような実験が行われた。
特に、最大振幅81mv、2.5kHzの交流周波数が、第1電極に適用され、0、10、20、30、40、50、60および70%のヘマトクリットを有する準備がある血液の伝導率が5回測定された。結果は、下の表1および図8〜10に示される。
図9は、比較例1で製造されたセンサを使用した、電気伝導率対ヘマトクリットの測定結果を示すグラフである(ここで、%Hctは、%ヘマトクリットを意味する)。
図10は、比較例2で製造されたセンサを使用した、電気伝導率対ヘマトクリットの測定結果を示すグラフである(ここで、%Hctは、%ヘマトクリットを意味する)。
2:第1作用電極
3:第1補助電極
4:第2作用電極
5:第2補助電極
6:絶縁カバー
7:試薬層
8:中間基板
9:上部基板
10:排気口
Claims (11)
- 電気化学的バイオセンサであって、
下部基板、
前記下部基板上に形成される第1作用電極および第1補助電極を含む、第1電極部、
前記下部基板上に形成される第2作用電極および第2補助電極を含む、第2電極部、
前記第2作用電極上または前記第2補助電極上に形成される試薬層であって、電子移動メディエータを含む、前記試薬層、
各々が空洞を有するように区分され、それぞれ第1、第2および第3反応ユニットに対応した領域を有する絶縁カバーであって、前記第1反応ユニットは前記第1作用電極の位置に設けられ、前記第2反応ユニットは前記第1補助電極の位置に設けられ、前記第3反応ユニットは前記第2作用電極の位置に設けられる、前記絶縁カバー、
血液サンプルを前記第1電極部および前記第2電極部の中へ連続して導くためのマイクロチャネルサンプルセル部を具備する、中間基板、および、
上部基板を含み、
前記第1反応ユニットおよび前記第2反応ユニットに対して露出している第1作用電極および第1補助電極の間の距離は、絶縁カバーを利用することによって一定であり、
第1電極部は、血液サンプルの伝導率を測定することによってヘマトクリットを計算し、
第1電極部は、試薬層を欠いており、
第1反応ユニットおよび第2反応ユニットに露出している第1作用電極および第1補助電極の面積は同じである、
前記電気化学的バイオセンサ。 - 絶縁カバーが、第1反応ユニットに対して露出している第1作用電極の少なくとも1つの傾斜端部、および、第2反応ユニットに対して露出している第1補助電極の少なくとも1つの傾斜端部を覆う、請求項1に記載の電気化学的バイオセンサ。
- 絶縁カバーの厚さが、電極の厚さより小さい、請求項1に記載の電気化学的バイオセンサ。
- 第1作用電極に位置付けられる第1反応ユニットおよび第1補助電極に位置付けられる第2反応ユニットが、第1および第2反応ユニットが少なくとも部分的に重なるように、血液がマイクロチャネルサンプルセル部の中へそれに沿って流れる方向である縦方向に対して垂直な線上の位置に設けられる、請求項1に記載の電気化学的バイオセンサ。
- 第1作用電極の位置に設けられる第1反応ユニットおよび第1補助電極の位置に設けられる第2反応ユニットが同じ形を有する、請求項1に記載の電気化学的バイオセンサ。
- 第1作用電極の位置に設けられる第1反応ユニットおよび第1補助電極の位置に設けられる第2反応ユニットが、血液がマイクロチャネルサンプルセル部の中へそれに沿って流れる方向である縦方向に対して垂直な線上で、縦方向の中心線に対してデカルコマニー形状で位置付けられる、請求項1に記載の電気化学的バイオセンサ。
- 試薬層が酸化還元酵素をさらに含む、請求項1に記載の電気化学的バイオセンサ。
- 第2電極部が、血液サンプルにおけるグルコースの酸化還元反応によって生じた電流を測定する、請求項1に記載の電気化学的バイオセンサ。
- 第1電極部が、交流(AC)電圧を適用することによって電気伝導率を測定する、請求項1に記載の電気化学的バイオセンサ。
- 第2電極部が、直流(DC)電圧を適用することによってグルコースの酸化還元反応によって生じた電流を測定する、請求項1に記載の電気化学的バイオセンサ。
- 請求項1に記載のバイオセンサを使用してヘマトクリット値を適用することにより血液グルコース濃度を正確に測定するための方法であって、
マイクロチャネルサンプルセル部の中へ血液サンプルを導入すること(ステップ1)、
第1電極部において血液サンプルの電気伝導率を測定することによって、ヘマトクリット値を計算すること(ステップ2)、
第2電極部において信号を測定することによって、グルコース濃度を計算すること(ステップ3)、および、
第1電極部において計算されたヘマトクリット値を適用することによって、第2電極部において計算されたグルコース濃度を補正すること(ステップ4)、
を含む、前記方法。
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