JP5780791B2 - 細胞の追跡処理方法 - Google Patents
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Description
本発明は、視野範囲に複数の細胞を含む観察画像を時間間隔をあけて複数枚取得する画像取得工程と、前記観察画像から、第1の閾値を用いて細胞を検出する細胞検出工程と、前記画像取得工程により取得された前記観察画像における、前記細胞検出工程で検出された各細胞の少なくとも波長の情報を含む所定の特徴量を解析する特徴量解析工程と、該特徴量解析工程により解析された特徴量と該特徴量を分類する第2の閾値とに基づいて、前記観察画像ごとに前記細胞をグループ分けするグルーピング工程と、前記観察画像ごとに該グループ分けされた特定のグループのみの細胞を抽出する抽出工程と、前記グルーピング工程により分けられたグループごとに、取得時間が前後する前記観察画像間の形態的特徴がほぼ一致する、前記抽出工程で抽出された細胞どうしを対応づける対応づけ工程とを含む細胞の追跡処理方法を提供する。
このように構成することで、細胞の特性に応じて効率的に細胞をグループ分けし、対応づける細胞を絞り込み易くすることができる。例えば、時間が経過しても変化し難い特徴量に基づいて細胞をグループ分けすることで、所定時間経過後の同一の細胞どうしの対応づけを容易にすることができる。
このように構成することで、細胞が特徴量の異なる複数の領域を有する場合であっても、所定の領域の特徴量に限定して各観察画像間の細胞どうしを対応づけることができる。例えば、細胞が形状や輝度等の変化が少ない本体部分と変化が多い突起部分とを有する場合に、本体部分に限定した特徴量に基づいて細胞どうしを精度よく対応づけることができる。また、例えば、神経細胞のように、細胞どうしが部分的に複雑に絡まり合う領域を有する場合に、絡まり合っていない領域に限定した特徴量に基づいて各細胞どうしを個々に対応づけることができる。
このように構成することで、関心領域により、追跡対象の細胞と他の細胞との区別を容易にすることができる。この場合において、観察画像ごとに細胞と共に関心領域を移動させることで、視野範囲や細胞を載置するステージを移動させなくても、各観察画像における追跡対象の細胞を容易に把握して追跡することができる。
このように構成することで、各観察画像において、追跡対象の細胞を視野範囲の所望の位置に配置したまま追跡することができる。
本実施形態に係る細胞の追跡処理方法は、図1のフローチャートに示されるように、複数の細胞の観察画像を時間間隔をあけて複数枚取得する画像取得工程S1と、画像取得工程S1により取得された観察画像における各細胞の所定の特徴量を解析する特徴量解析工程S2と、特徴量解析工程S2により解析された特徴量に基づいて、観察画像ごとに細胞をグループ分けするグルーピング工程S3と、グルーピング工程S3により分けられたグループごとに各観察画像における同一の細胞を対応づける対応づけ工程S4と、対応づけ工程S4により対応づけられた細胞の移動量を算出する移動量算出工程S5と、移動量算出工程S5により算出された細胞の移動量に基づいて、細胞が載置されているステージを移動させる移動工程S6とを含んでいる。
移動工程S6においては、観察画像ごとに細胞の移動方向とは逆方向に、細胞の移動量と同じ量だけステージを移動させるようになっている。ステージは、例えば、視野範囲のほぼ中央に追跡対象の細胞が配置されるように設定されている。
本実施形態に係る細胞の追跡処理方法により細胞を追跡処理するには、まず、視野範囲に複数の細胞を含む時刻Tにおける観察画像を取得する(ステップS1)。
同様にして、時刻T+1についてもステップS1〜S3を繰り返す。
本実施形態においては、細胞C全体の特徴量に着目して細胞Cをグループ分けすることとしたが、例えば、細胞の部分的な領域内における特徴量に着目して細胞をグループ分けすることとしてもよい。この場合、図12のフローチャートに示されるように、画像取得工程S1により取得された観察画像において、画像上の細胞のいずれかの部分的な領域を特定し(ステップS1−2)、特定した領域に限定して特徴量を解析し(ステップS2)、特定した領域どうしをグループ分け(ステップS3)および対応づけ(ステップS4)することとすればよい。
S2 特徴量解析工程
S3 グルーピング工程
S4 対応づけ工程
S4−2 領域定義工程
S5 移動量算出工程
S6,S6´ 移動工程
Claims (5)
- 視野範囲に複数の細胞を含む観察画像を時間間隔をあけて複数枚取得する画像取得工程と、
前記観察画像から、第1の閾値を用いて細胞を検出する細胞検出工程と、
前記画像取得工程により取得された前記観察画像における、前記細胞検出工程で検出された各細胞の少なくとも波長の情報を含む所定の特徴量を解析する特徴量解析工程と、
該特徴量解析工程により解析された特徴量と該特徴量を分類する第2の閾値とに基づいて、前記観察画像ごとに前記細胞をグループ分けするグルーピング工程と、
前記観察画像ごとに該グループ分けされた特定のグループのみの細胞を抽出する抽出工程と、
前記グルーピング工程により分けられたグループごとに、取得時間が前後する前記観察画像間の形態的特徴がほぼ一致する、前記抽出工程で抽出された細胞どうしを対応づける対応づけ工程とを含む細胞の追跡処理方法。 - 前記特徴量が、さらに、前記細胞の輝度、前記細胞の大きさ、および前記細胞の形状の少なくとも1つを含む請求項1に記載の細胞の追跡処理方法。
- 前記グルーピング工程が、前記細胞の部分的な領域内における特徴量に着目して前記細胞をグループ分けする請求項1または請求項2に記載の細胞の追跡処理方法。
- 追跡対象の前記細胞を含む関心領域を前記観察画像上に定義する領域定義工程と、
前記対応づけ工程により対応づけられた前記細胞の移動量を算出する移動量算出工程と、
該移動量算出工程により算出された前記細胞の移動量に基づいて、前記領域定義工程により定義された前記関心領域を前記観察画像ごとに前記細胞と共に移動させる移動工程とを含む請求項1から請求項3のいずれかに記載の細胞の追跡処理方法。 - 前記対応づけ工程により対応づけられた前記細胞の移動量を算出する移動量算出工程と、
移動量算出工程により算出された前記細胞の移動量に基づいて、前記視野範囲または前記細胞が載置されるステージを前記観察画像ごとに前記細胞の移動方向とは逆方向に移動させる移動工程とを含む請求項1から請求項3のいずれかに記載の細胞の追跡処理方法。
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