JP5733695B2

JP5733695B2 - 新規化合物及び植物成長調節剤

Info

Publication number: JP5733695B2
Application number: JP2010096370A
Authority: JP
Inventors: 中野　洋; 洋中野; 真坂井; 亮太梶; 吉田　充; 充吉田; 里愛岩浦; 誠治小瀬村; 利貞鈴木
Original assignee: Kagawa University NUC; National Agriculture and Food Research Organization
Current assignee: Kagawa University NUC; National Agriculture and Food Research Organization
Priority date: 2010-04-19
Filing date: 2010-04-19
Publication date: 2015-06-10
Anticipated expiration: 2030-04-19
Also published as: JP2011225482A

Description

本発明は、新規な化合物、及びそれを用いた植物成長調節剤に関するものである。

従来、様々な作用を有する植物成長調節剤が知られている。現在、農業で利用されている植物成長調節剤として、ＭＨ、アンシミドール、メフルイジド、パクロプトラゾール、ウニコナゾール、イナベンヒド、イソプロチオラン等の化合物が挙げられる（非特許文献１）。

上記の植物成長調節剤は、いずれも有機合成された化合物である。そのため、天然（植物）由来であって、かつ優れた活性を持った植物成長調節剤を開発することが農業に関わる業界より強く要望されていた。植物由来の化合物は、植物体にのみ存在する作用点に働くことで、安全性の高い植物成長調節剤となる可能性がある（非特許文献２）。このような植物由来の植物成長調節剤として、例えば、桂皮を含有するものや（特許文献１）、ユキヤナギから抽出されたグリコピラノシル−シス桂皮酸を有効成分とするもの（特許文献２）等が知られているが、いずれも性能が不十分であった。

特開２００６−３３５７２６号公報特開２００６−０６２９６７号公報

本田他、「新農薬学概論」、朝倉書店、１９９３年藤井義晴、「アレロパシー」、農文協、２０００年

上述のように、従来の植物由来の植物成長調節剤は性能が不十分であるため、新たな植物由来の植物成長調節剤の開発が望まれていた。

九州沖縄農業研究センター稲育種ユニットでは、イネ品種「キヌヒカリ」にγ線を照射することで突然変異を誘発させ、胚乳が黄色を呈する品種「初山吹」を育成した。しかし、「初山吹」の胚乳に含まれる未知成分の探索は不十分である。

そこで本発明は、「初山吹」の胚乳由来の新規化合物を特定し、また、その化合物を利用することで、新しいタイプの、かつ安全性の高い植物由来の植物成長調節剤を提供することを目的とする。

上記課題を解決するため、本発明者らは、「初山吹」の胚乳のアルコール／水抽出物から複数のアルカロイド化合物を単離することに成功し、これらアルカロイド化合物の物理化学的性質を分析することによって、本化合物が従来知られていない新規化合物であることを明らかにした。また、それら胚乳由来の化合物が、植物の成長調節剤として有効であることを見出し、本発明を完成した。すなわち、本発明の要旨は以下の通りである。

１．式（１）

［式中、Ｒ_１は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、Ｒ_２は、水素原子、ヒドロキシル基又はＣＯＲ_３（Ｒ_３は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である）であり、Ｒ_４は、水素原子（ただし、Ｒ_２がＣＯＲ_３である場合を除く）、ヒドロキシル基又はＣＯＲ_５（Ｒ_５は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である）であり、Ｒ_６及びＲ_７は、それぞれ独立して水素原子、炭素数１〜４のアシル基又は炭素数１〜４のアルキル基である］
で表される化合物。

２．式（１）で表される化合物が、式（２）

で表される前記１に記載の化合物。

３．式（１）で表される化合物が、式（３）

で表される前記１に記載の化合物。

４．式（１）で表される化合物が、式（４）

で表される前記１に記載の化合物。

５．式（５）

で表される化合物。

６．式（６）

で表される化合物。

７．式（７）

で表される化合物。

８．式（８）

で表される化合物。

９．式（９）

［式中、Ｒ_８は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、Ｒ_９は、水素原子、ヒドロキシル基又はＣＯＲ_１０（Ｒ_１０は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である）であり、Ｒ_１２及びＲ_１３は、それぞれ独立して水素原子、炭素数１〜４のアシル基又は炭素数１〜４のアルキル基であり、

は単結合又は二重結合であり、Ｒ_１４は、水素原子、ヒドロキシル基又はＣＯＲ_１５（Ｒ_１５は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である）であり、Ｒ_１６及びＲ_１７は、それぞれ独立して水素原子であるか、あるいは、アミノ基及び／又は−ＣＯＲ_１８（Ｒ_１８はヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である）を有しても良い、直鎖状、分岐状もしくは環状のアルキル基又は含窒素複素環基である］
で表される化合物を含む植物成長調節剤。

１０．式（１０）

［式中、Ｒ_１９及びＲ_２０は、それぞれ独立してヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、Ｒ_２１は、水素原子、炭素数１〜４のアシル基又は炭素数１〜４のアルキル基である］
で表される化合物を含む植物成長調節剤。

１１．前記２〜４のいずれかに記載の化合物の製造方法であって、イネ品種初山吹（ＦＥＲＭＢＰ−１１１４９）又はその後代の種子、玄米、胚乳又は糠から水又はアルコール水溶液で抽出し、抽出液より化合物を分離精製する化合物の製造方法。

本発明によって得られる新規化合物は、植物由来の植物成長調節剤として好適に利用することができる。

植物の成長に及ぼす本発明の化合物の影響を示すグラフである。

以下、本発明を詳細に説明する。
本発明に係る化合物は、下記式（１）で表される。

上記式（１）において、Ｒ_１は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、Ｒ_２は、水素原子、ヒドロキシル基又はＣＯＲ_３（Ｒ_３は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である）であり、Ｒ_４は、水素原子（ただし、Ｒ_２がＣＯＲ_３である場合を除く）、ヒドロキシル基又はＣＯＲ_５（Ｒ_５は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である）であり、Ｒ_６及びＲ_７は、それぞれ独立して水素原子、炭素数１〜４のアシル基又は炭素数１〜４のアルキル基である。

上記Ｒ_１、Ｒ_３及びＲ_５に関し、炭素数１〜４のアルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブトキシ基等が挙げられる。また、Ｒ_６及びＲ_７に関し、炭素数１〜４のアシル基としては、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基等が挙げられ、さらに炭素数１〜４のアルキル基としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等の直鎖状又は分岐状のアルキル基が挙げられる。なお、式（１）において、各結合の向きは特に限定されるものではなく、本発明には式（１）の平面構造式を有する複数の立体異性体（ジアステレオマー及びエナンチオマー）が包含される。
好ましくは、本発明に係る化合物は式（２）の構造を有している。

また、好ましくは、本発明に係る化合物は式（３）の構造を有している。

さらに、好ましくは、本発明に係る化合物は式（４）の構造を有している。

また、別の実施形態として、本発明に係る化合物は式（５）の構造を有している。

さらに、別の実施形態として、本発明に係る化合物は式（６）の構造を有している。

さらに、別の実施形態として、本発明に係る化合物は式（７）の構造を有している。

さらに、別の実施形態として、本発明に係る化合物は式（８）の構造を有している。

上記式（１）〜（８）で表される化合物は、従来知られていない新規化合物である。本発明者らは、これらの化合物を包含する、次の式（９）で表される化合物群が、植物成長調節剤として有用であることを見出した。ここで、本発明において植物成長調節剤とは、植物の根茎・シュート等の成長を抑制する機能を有する薬剤をいい、このような成長調節剤は、例えば、植物の伸長抑制、花粉成長抑制、花の鮮度保持、植物の抗ストレス剤、雑草防除、植物の老化抑制、根の肥大化抑制等の用途に好適に用いられる。

式（９）において、Ｒ_８は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、Ｒ_９は、水素原子、ヒドロキシル基又はＣＯＲ_１０（Ｒ_１０は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である）であり、Ｒ_１２及びＲ_１３は、それぞれ独立して水素原子、炭素数１〜４のアシル基又は炭素数１〜４のアルキル基であり、

は単結合又は二重結合であり、Ｒ_１４は、水素原子、ヒドロキシル基又はＣＯＲ_１５（Ｒ_１５は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である）であり、Ｒ_１６及びＲ_１７は、それぞれ独立して水素原子であるか、あるいは、アミノ基及び／又は−ＣＯＲ_１８（Ｒ_１８はヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である）を有しても良い、直鎖状、分岐状もしくは環状のアルキル基又は含窒素複素環基である。ここで、炭素数１〜４のアルコキシ基、炭素数１〜４のアシル基及び炭素数１〜４のアルキル基としては、上記式（１）の説明において述べたような具体例が挙げられる。

また、「アミノ基及び／又は−ＣＯＲ_１８を有しても良い、直鎖状、分岐状もしくは環状のアルキル基又は含窒素複素環基」としては、−（ＣＨ_２）_ｎＣＨ（ＣＯＯＨ）（ＮＨ_２）等の構造を有する直鎖状、分岐状もしくは環状のアルキル基や含窒素複素環基が挙げられる。この場合、アルキル基及び複素環基の炭素数（−ＣＯＲ_１８の炭素を含まず）は、１〜８であることが好ましく、特に好ましくは４〜６である。なお、環を形成する場合、環員としてアミノ基の窒素原子を含み、その結果２級アミノ基−ＮＨ−を有していても良い。

式（９）に包含される化合物であって、式（１）〜（８）の新規化合物以外の好適な例として、下記式（１１）の化合物を挙げることができる。

上記式（１１）において、Ｒ_８及びＲ_１０、Ｒ_１２及びＲ_１３は上記定義の通りである。Ｒ_１８は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、この炭素数１〜４のアルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブトキシ基等を挙げることができる。

特に好ましくは、本発明に係る植物成長調節剤として用いる化合物は、式（１２）の構造を有している。

また、特に好ましくは、本発明に係る植物成長調節剤として用いる化合物は、式（１３）の構造を有している。

また、特に好ましくは、本発明に係る植物成長調節剤として用いる化合物は式（１４）の構造を有している。

また、別の実施形態として、本発明に係る植物成長調節剤として用いる化合物は、式（１０）で表される。

上記式（１０）において、Ｒ_１９及びＲ_２０は、それぞれ独立してヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である。この炭素数１〜４のアルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブトキシ基等が挙げられる。また、Ｒ_２１は、水素原子、炭素数１〜４のアシル基又は炭素数１〜４のアルキル基である。炭素数１〜４のアシル基又は炭素数１〜４のアルキル基としては、上記式（１）の説明において述べたような具体例が挙げられる。

式（１０）に包含される好適な化合物の例として、下記式（１５）で表される化合物が挙げられる。

式（２）〜（８）及び式（１２）〜（１５）で表される化合物は、イネ品種「初山吹」又はその後代の種子（籾殻が付いた状態のもの）、玄米、胚乳（精米）又は糠から得ることができる。この初山吹は、１９９８年５月農業生物資源研究所放射線育種場において、新規形質を備えた品種の育成を目標に「キヌヒカリ」にγ線照射（照射線量：３００Ｇｙ、線量率：１５Ｇｙ／ｈ）を行った種子から育成された。その後、１９９８年６月に国際農林水産業研究センター沖縄支所において、Ｍ_１世代を屋外苗箱放置栽培で養成し、１９９９年に九州農業試験場（現・九州沖縄農業研究センター）の圃場においてＭ_２を養成して株毎にＭ_３種子を採種した。Ｍ_３の玄米の外観調査により玄米が黄色を呈する突然変異を選抜した後、系統育種法により選抜固定を行った。

２００２年Ｍ_５より「泉１２７５」の名で生産力検定試験、特性検定試験に供試したところ、精米も黄色を呈する黄色胚乳突然変異であることが明らかになった。２００３年以降も、生産力検定試験、特性検定試験に供試し、黄色胚乳をはじめとする主要形質が実用的に固定されたため、２００５年Ｍ_８より「西海黄２５６号」の地方名を付した。２００８年１１月に「初山吹」の品種名で種苗法に基づく品種登録出願を行い、２００９年２月に出願公表された（出願番号：第２３１７６号）。初山吹の特性は次の通りである。

１）形態的特徴
「キヌヒカリ」と比較して稈長はやや短く、穂長は同程度、穂数はやや少ない中間型である。止葉は立ち草姿・熟色は良い。芒は無く、粒着密度は中、ふ先色は黄白である。脱粒性は難である。

２）生態的特徴
出穂期は「キヌヒカリ」と同程度で、「ミネアサヒ」より５日早い。成熟期は「キヌヒカリ」と同程度で「ミネアサヒ」より２日程度早く、暖地では極早生に属する粳種である。収量性は「キヌヒカリ」よりやや少収である。耐倒伏性は「キヌヒカリ」並である。葉いもち、穂いもちとも「キヌヒカリ」並のやや弱である。縞葉枯病抵抗性は不明である。白葉枯病抵抗性は「キヌヒカリ」並のやや弱である。穂発芽性は「キヌヒカリ」並のやや易である。

３）品質、食味特性
玄米は千粒重が２２ｇ前後で、「キヌヒカリ」並かやや小さい中粒である。玄米の外観品質は粒色がやや黄色を呈するが、腹白、心白、乳白の発現は「キヌヒカリ」と同程度である。精米、飯米は黄色を呈する。食味は「日本晴」並である。

なお、初山吹の種子は、２００８年９月３日、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（郵便番号３０５−８５６６日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１中央第６）に受託番号ＦＥＲＭＰ−２１６６４として寄託され、２００９年７月２７日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号ＦＥＲＭＢＰ−１１１４９が付与されている。

なお、本発明において「後代」とは、初山吹を母本又は父本として用いて人工交配を行った雑種の後代に由来する、あるいは初山吹の種子又は組織に対して突然変異又は形質転換等の遺伝的変異を生じせしめる処理を行った後代に由来する品種又は系統であって、初山吹の持つ黄色胚乳形質を有しているものをいう。

式（２）〜（８）及び式（１２）〜（１５）の化合物は、初山吹又はその後代の種子（籾殻が付いた状態のもの）、玄米、胚乳（精米）又は糠から溶媒で抽出し、抽出液より分離精製して得ることができる。抽出溶媒としては、一般には水又は有機溶媒、好ましくは水又はアルコール水溶液が用いられる。アルコールとしては、メタノール、エタノール、プロパノール等が挙げられるがこれに限定されるものではない。また場合により、抽出剤としてキレート剤や酸・アルカリ等を加えても良い。得られた抽出液は、必要に応じてアルコール沈殿、限外濾過等の手段によりデンプンを取り除き、さらに濾過・濃縮した後に精製することによって目的とする化合物を効率良く得ることができる。

精製は、従来知られた方法が用いられ、例えばシリカゲルクロマトグラフィー、逆相シリカゲルクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー等を適宜組み合わせて行うことができる。

抽出液から分離精製することで上記式（２）〜（８）及び式（１２）〜（１５）の化合物が得られるが、その際、溶出液の組成を変えること等によって、所望の化合物を単離することができる。そして、これらの化合物を精製後、あるいは精製前に適切な試薬で処理することにより、式（２）〜（８）及び式（１２）〜（１５）の化合物の誘導体を得ることができる。具体的には、例えば上記式（１）、式（９）又は式（１０）においてＲ_１、Ｒ_３、Ｒ_５、Ｒ_８、Ｒ_１０、Ｒ_１５及びＲ_１８〜Ｒ_２０がアルコキシ基である誘導体は、必要に応じて脱水剤を添加した上で適切なアルコールと例えば式（２）や式（１５）等の対応する化合物とを反応させ、エステル化することで得ることができる。また、Ｒ_６、Ｒ_７、Ｒ_１２、Ｒ_１３及びＲ_２１が炭素数１〜４のアシル基であるアミド誘導体は、式（２）等の化合物と、対応するカルボン酸ハロゲン化物もしくはカルボン酸無水物とを反応させるか、ＤＣＣ等の脱水剤を用いてカルボン酸と反応させることにより得ることができる。さらに、Ｒ_６、Ｒ_７、Ｒ_１２、Ｒ_１３及びＲ_２１がアルキル基である誘導体は、それらＲ_６等が水素原子である式（２）等の化合物を、金属塩とした後ハロゲン化アルキルで処理するか、あるいは銅、ビスマス等からなるアルキル化金属試薬で処理してＮ−アルキル化することにより得ることができるが、この方法に限定されるものではない。特に化合物を植物成長調節剤として利用する場合は、毒性等を考慮して、用いる試薬に留意するものとする。

なお、以上のような各化合物は、例えば水中においてカルボキシル基がＣＯＯ⁻として存在する等、イオン化した状態となり得るが、このようなイオン化した化合物も本発明に包含されることは無論である。

本発明の植物成長調節剤の剤型としては、粉末、粒剤、水和剤、フロワブル剤、液剤等の一般的な剤型が挙げられる。これらの剤型は、上記式（１）〜（１５）の化合物と、溶剤、分散媒、増量剤等を適宜用いて、常法に従って製造することができる。

植物に対して植物成長調節剤を適用する方法は、植物が有効成分を吸収できる方法であれば良く、例えば、茎葉に散布する茎葉処理、土壌に散布する土壌処理、水耕栽培時に水等の培地に溶解又は懸濁して根から吸収させる水耕処理等が挙げられる。また、植物を植え付けたり、挿し木等を行う前に吸収させたりしてもよい。

植物成長調節剤を茎葉処理によって施用する場合は、例えば、有効成分濃度を１μｍｏｌ／ｌ〜１００ｍｍｏｌ／ｌとなるように調整し、これを土地１０アール当たり１０〜１０００リットルの量で使用することが好ましい。葉面に薬剤が付着しにくい場合には、展着剤を併用することができる。また、土壌処理を行う場合は、有効成分量が土地１０アール当たり１ｍｍｏｌ〜１０ｍｏｌとなるように使用することが好ましい。さらに、水耕処理を行う場合には、有効成分を５ｎｍｏｌ／ｌ〜５００μｍｏｌ／ｌの濃度で植物の根から吸収させることが好ましいが、これらの施用する量は、植物の種類、生育段階等によって大きく異なるため、上記の範囲に限定されるものではない。

本発明の植物成長調節剤は、植物に対しいずれの成育段階で施用しても良い。処理は１回でも十分な効果が得られるが、複数回処理することによって効果をさらに高めることができる。複数回処理する場合は、上述の各処理方法を組み合わせることもできる。他の農薬、肥料等と併用する場合は、本薬剤の効果を失わない限り、どのような物質と併用しても良い。

本発明の植物成長調節剤の適用対象としては、特に限定されず、農業・園芸分野で広く栽培されている植物に対して適用することができる。例えば、イネ、コムギ、オオムギ、ヒエ、トウモロコシ、アワ等の穀物類；レタス、カボチャ、カブ、キャベツ、ダイコン、ハクサイ、ホウレンソウ、ピーマン、トマト、ネギ、タマネギ、ラッキョウ等の野菜類；ミカン、リンゴ、カキ、ウメ、ナシ、ブドウ、モモ等の果樹類；キク、ガーベラ、パンジー、ラン、シャクヤク、チューリップ等の花卉類；サツキ、クヌギ、スギ、ヒノキ、ナラ、ブナ等の樹木類；アズキ、インゲン、大豆、ラッカセイ、ソラマメ、エンドウ等の豆類；コウライシバ、ベントグラス、ノシバ等の芝類；ジャガイモ、サツマイモ、サトイモ、ヤマイモ、タロイモ等のイモ類；アルファルファ、クローバー、レンゲ等の牧草類等を挙げることができる。

また、植物成長調節剤を製造するためには、必ずしも有効成分である化合物を単離する必要はなく、分離精製工程の途中で得られる、式（１）〜（１５）の化合物を一成分として含む組成物を植物成長調節剤として用いても良い。具体的には、例えば、イネ品種初山吹又はその後代の種子、玄米、胚乳又は糠から水又はアルコール水溶液で抽出し、デンプンを除去し、必要に応じて乾燥させた抽出物をそのまま植物成長調節剤として利用することができる。ここで、抽出物の固形分中、有効成分の含有率は、抽出方法によって異なるが、通常、０．０１〜０．５０重量％程度である。あるいは、デンプンを除去した抽出物を、さらにカラムクロマトグラフィー等の固定相に吸着させ、適切な溶媒により溶出させた画分を、そのまま植物成長調節剤とすることもできる。

以下、実施例に基づき本発明をさらに詳細に説明するが、これに限定されるものではない。

実施例１：式（２）〜（４）の化合物の製造
イネ品種初山吹の胚乳４０ｋｇを、メタノール水溶液（メタノール：水＝１：９（ｖ／ｖ））２００Ｌにより１日間２５℃の条件下で抽出した。この抽出液を濾過し、３５℃減圧下で濃縮後、メタノール水溶液（メタノール：水＝５：１（ｖ／ｖ））を用いてメタノール沈殿させた。続いて、その上清を、３５℃減圧下で濃縮後、メタノール水溶液（メタノール：水＝０：１００、１：１９、１：９、３：１７、１：４、１００：０（ｖ／ｖ））によりＣ１８カラムクロマトグラフィーで分離・精製し、１：９の画分からは式（２）の化合物（１．３ｍｇ）、３：１７の画分からは式（３）の化合物（０．４ｍｇ）及び式（４）の化合物（１．３ｍｇ）をそれぞれ単離した。

得られた化合物について、高分解能エレクトロスプレー質量分析（ＨＲＥＳＩＭＳ）及びＮＭＲにより構造決定を行った。その結果、上記式（２）〜（４）に示される化学構造式を得た。

製造した式（２）〜（４）の化合物の物理化学的性質は次の通りである。また、各化合物の^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ）及び^１ＨＮＭＲ（８００ＭＨｚ）スペクトルを表１に示す。測定溶媒はＤ_２Ｏである。

＜式（２）の化合物の物理化学的性質＞
（１）外観
無色粉末
（２）分子式
Ｃ_１８Ｈ_２５Ｎ_３Ｏ_６
（３）ＨＲＥＳＩＭＳによる分子量
３８０．１９１１（Ｍ＋Ｈ）^＋

＜式（３）の化合物の物理化学的性質＞
（１）外観
無色粉末
（２）分子式
Ｃ_１７Ｈ_２５Ｎ_３Ｏ_５
（３）ＨＲＥＳＩＭＳによる分子量
３５２．１８６７（Ｍ＋Ｈ）^＋

＜式（４）の化合物の物理化学的性質＞
（１）外観
無色粉末
（２）分子式
Ｃ_１７Ｈ_２５Ｎ_３Ｏ_４
（３）ＨＲＥＳＩＭＳによる分子量
３３６．１９０８（Ｍ＋Ｈ）^＋

実施例２：式（５）〜（８）の化合物の製造
イネ品種初山吹の胚乳４０ｋｇを、メタノール水溶液（メタノール：水＝１：９（ｖ／ｖ））２００Ｌにより１日間２５℃の条件下で抽出した。この抽出液（６４８ｇ）に対し、メタノール水溶液（メタノール：水＝５：１（ｖ／ｖ））１．８Ｌを加え、メタノール沈殿した（３５００×ｇ、１０分間、２５℃）。続いて、その上清（３６８ｇ）を、３５℃減圧下で濃縮後、メタノール水溶液（メタノール：水＝０：１、１：１９、１：９、３：１７、１：４及び１：０（ｖ／ｖ））を用いてＳｅｐ−ＰａｋＣ１８カートリッジクロマトグラフィーで分離・精製し、メタノール：水＝１：４画分を高速液体クロマトグラフィー（ＯＤＳ−８０Ｔｓ、４．６×２５０ｍｍ、東ソー、メタノール：水＝３：１７（ｖ／ｖ）、０．８ｍｌ／分）に供し、１５〜１８分の画分から式（５）の化合物（無色粉体、４６．０ｍｇ、収率０．０００１１５％）、１０〜１５分の画分から式（６）の化合物（無色粉体、１７．８ｍｇ、収率０．００００４５％）をそれぞれ単離した。またＳｅｐ−ｐａｋＣ１８カートリッジクロマトグラフィーのメタノール：水＝３：１７の画分を、高速液体クロマトグラフィー（ＯＤＳ−８０Ｔｓ、４．６×２５０ｍｍ、東ソー、メタノール：水＝３：２２（ｖ／ｖ）、０．８ｍｌ／分）に供し、１２〜１４分の画分から式（７）の化合物（無色粉体、１．８ｍｇ、収率０．０００００５％）、及び９〜１２分の画分から式（８）の化合物（無色粉体、５．２ｍｇ、収率０．００００１３％）をそれぞれ単離した。

得られた化合物について、単結晶Ｘ線構造解析、高分解能エレクトロスプレー質量分析（ＨＲＥＳＩＭＳ）及びＮＭＲにより構造決定を行った。その結果、上記式（５）〜（８）に示される化学構造式を得た。製造した式（５）〜（８）の化合物の物理化学的性質は次の通りである。また、各化合物の^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ）及び^１ＨＮＭＲ（８００ＭＨｚ）スペクトルを表２及び３に示す。

＜式（５）〜（８）の化合物の物理化学的性質＞
（１）外観
無色粉末
（２）分子式
Ｃ_１７Ｈ_２５Ｎ_３Ｏ_４
（３）ＨＲＥＳＩＭＳによる分子量
３３６．１９１６（Ｍ＋Ｈ）^＋

実施例３：式（１２）の化合物の製造
イネ品種初山吹の胚乳２０ｋｇを、メタノール水溶液１００Ｌ（メタノール：水＝１０：９０（ｖ／ｖ））により１日間２５℃の条件下で抽出した。この抽出液を濾過し、３５℃減圧下で濃縮した後、メタノール水溶液（メタノール：水＝５：１（ｖ／ｖ））を用いてメタノール沈殿（３５００×ｇ、１０分間、２５℃）させた。

続いて、黄色を示した上清画分（１８４ｇ）を、３５℃減圧下で濃縮し、Ｓｅｐ−ｐａｋＣ１８カートリッジクロマトグラフィーによって、メタノール水溶液（メタノール：水＝０：１００、５：９５、１０：９０、１５：８５、２０：８０、１００：０（ｖ／ｖ））で６分画した。黄色を示したメタノール水溶液（メタノール：水＝１０：９０（ｖ／ｖ））画分（２ｇ）を、３５℃減圧下で濃縮し、高速液体クロマトグラフィー（ＯＤＳ−８０Ｔｓ、４．６×２５０ｍｍ、東ソー、メタノール：水＝１０：９０（ｖ／ｖ）、０．８ｍｌ／分）に供した。保持時間９〜１１分の黄色を示した画分から目的の式（１２）の化合物３５ｍｇを得た。

得られた化合物について、単結晶Ｘ線構造解析、高分解能エレクトロスプレー質量分析（ＨＲＥＳＩＭＳ）及びＮＭＲにより構造決定を行った。単結晶Ｘ線構造解析の使用機器は、ビームラインがＳＰｒｉｎｇ−８のＢＬ２６Ｂ１、検出器がＲｉｇａｋｕＲＡＸＩＳＶｉｍａｇｉｎｇｐｌａｔｅａｒｅａｄｅｔｅｃｔｏｒである。その結果、上記式（１２）に示される平面化学構造式を得た。

式（１２）の化合物の物理化学的性質は次の通りである。また、化合物の^１３ＣＮＭＲ及び^１ＨＮＭＲスペクトル（測定溶媒：Ｄ_２Ｏ）を表４に示す。
（１）外観
黄色粉末
（２）紫外−可視吸収スペクトルλ_ｍａｘ（水）
３９５ｎｍ（ε１７２００）
（３）分子式
Ｃ_２３Ｈ_３２Ｎ_４Ｏ_６
（４）ＨＲＥＳＩＭＳによる分子量
４６１．２４７５５８（Ｍ＋Ｈ）^＋
４５９．２０８０９６（Ｍ＋Ｈ）⁻

実施例４：式（１３）の化合物の製造
上記実施例３におけるメタノール水溶液（メタノール：水＝２０：８０）画分を、３５℃減圧下で濃縮し、高速液体クロマトグラフィー（ＯＤＳ−８０Ｔｓ、４．６×２５０ｍｍ、東ソー、メタノール：水＝３：１７（ｖ／ｖ）、０．８ｍｌ／分）に供した。保持時間１０〜１５分の黄色を示した画分から目的の式（１３）の化合物１．７ｍｇを得た。

得られた化合物について、高分解能エレクトロスプレー質量分析（ＨＲＥＳＩＭＳ）及びＮＭＲにより構造決定を行った。その結果、上記式（１３）に示される構造式を得た。この化合物の物理化学的性質は次の通りである。また、化合物の^１３ＣＮＭＲ及び^１ＨＮＭＲスペクトル（測定溶媒：Ｄ_２Ｏ）を表５に示す。
（１）外観
黄色粉末
（２）紫外−可視吸収スペクトルλ_ｍａｘ
３９５ｎｍ
（３）分子式
Ｃ_１７Ｈ_２３Ｎ_３Ｏ_４
（４）ＨＲＥＳＩＭＳによる分子量
３３４．１７５９（Ｍ＋Ｈ）^＋

実施例５：式（１４）の化合物の製造
上記実施例３におけるメタノール水溶液（メタノール：水＝１５：８５）画分を、３５℃減圧下で濃縮し、高速液体クロマトグラフィー（ＯＤＳ−８０Ｔｓ、４．６×２５０ｍｍ、東ソー、メタノール：水＝３：２２（ｖ／ｖ）、０．８ｍｌ／分）に供した。保持時間１２〜１４分の画分から無色を呈する目的の式（１４）の化合物０．６ｍｇを得た。

得られた化合物について、高分解能エレクトロスプレー質量分析（ＨＲＥＳＩＭＳ）及びＮＭＲにより構造決定を行った。その結果、上記式（１４）に示される構造式を得た。この化合物の物理化学的性質は次の通りである。また、化合物の^１３ＣＮＭＲ及び^１ＨＮＭＲスペクトル（測定溶媒：Ｄ_２Ｏ）を表６に示す。
（１）外観
無色粉末
（２）紫外−可視吸収スペクトルλ_ｍａｘ
３６０ｎｍ
（３）分子式
Ｃ_２３Ｈ_３５Ｎ_４Ｏ_４
（４）ＨＲＥＳＩＭＳによる分子量
４６５．２７０５（Ｍ＋Ｈ）^＋

実施例６：式（１５）の化合物の製造
上記実施例３におけるメタノール水溶液（メタノール：水＝２０：８０）画分を、３５℃減圧下で濃縮し、高速液体クロマトグラフィー（ＯＤＳ−８０Ｔｓ、４．６×２５０ｍｍ、東ソー、メタノール：水＝３：１７（ｖ／ｖ）、０．８ｍｌ／分）に供した。保持時間１０〜１５分の黄色を示した画分から目的の式（１５）の化合物０．７ｍｇを得た。

得られた化合物について、高分解能エレクトロスプレー質量分析（ＨＲＥＳＩＭＳ）及びＮＭＲにより構造決定を行った。その結果、上記式（１５）に示される構造式を得た。この化合物の物理化学的性質は次の通りである。また、化合物の^１３ＣＮＭＲ及び^１ＨＮＭＲスペクトル（測定溶媒：Ｄ_２Ｏ）を表７に示す。
（１）外観
黄色粉末
（２）紫外−可視吸収スペクトルλ_ｍａｘ
３９５ｎｍ
（３）分子式
Ｃ_１９Ｈ_２５Ｎ_３Ｏ_４
（４）ＨＲＥＳＩＭＳによる分子量
３６０．１９００（Ｍ＋Ｈ）^＋

実施例７：植物に対する影響
実施例２で製造した式（５）の化合物の濃度０．０１、０．０３、０．１０、０．３０、１．００及び３．００ｍＭの水溶液を調製し、３．３ｃｍペトリシャーレの濾紙上に播いたレタス種子１２粒をそれぞれの溶液で処理し、２５℃、暗所の条件で培養した。３日後、根及びシュートの長さを測定し、水で処理したものを１００％として植物の成長に及ぼす影響を調べた。その結果を図１に示す。図１の結果から、式（５）の化合物は、レタス幼植物の根及びシュートの成長を抑制することが明らかとなった（Ｉ_２５、すなわち根及びシュートに対する２５％阻害濃度はそれぞれ１．５ｍＭ及び２．０ｍＭ）。

FERM BP-11149

Claims

式（２ａ）、式（３ａ）又は式（４ａ）

［式中、Ｒ_１は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、Ｒ _３は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、Ｒ _５は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、Ｒ_６及びＲ_７は、それぞれ独立して水素原子、炭素数１〜４のアシル基又は炭素数１〜４のアルキル基である］
で表される化合物。
式（２ａ）で表される化合物が、式（２）

で表される請求項１に記載の化合物。
式（３ａ）で表される化合物が、式（３）

で表される請求項１に記載の化合物。
式（４ａ）で表される化合物が、式（４）

で表される請求項１に記載の化合物。
式（１１）、式（１３ａ）又は式（１４ａ）

［式中、Ｒ_８は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、Ｒ _１０は、ヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、Ｒ_１２及びＲ_１３は、それぞれ独立して水素原子、炭素数１〜４のアシル基又は炭素数１〜４のアルキル基であり、Ｒ _１８はヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基である］
で表される化合物を含む植物成長調節剤。
式（１０）

［式中、Ｒ_１９及びＲ_２０は、それぞれ独立してヒドロキシル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基であり、Ｒ_２１は、水素原子、炭素数１〜４のアシル基又は炭素数１〜４のアルキル基である］
で表される化合物を含む植物成長調節剤。
請求項２〜４のいずれかに記載の化合物の製造方法であって、イネ品種初山吹（ＦＥＲＭＢＰ−１１１４９）又はその後代の種子、玄米、胚乳又は糠から水又はアルコール水溶液で抽出し、抽出液より化合物を分離精製する化合物の製造方法。