JP5678390B2 - 骨強度低下抑制剤 - Google Patents
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Description
より詳細には、本発明にかかる骨強度低下抑制剤は、ジアリルスルフィド(DAS)と植物油であるコーン胚芽油とを混合させたDAS含有植物油溶液を有効成分とし、前記ジアリルスルフィド(DAS)を200ppm含有することを特徴とする。
採血後、臓器(心臓・肺・肝臓・腎臓・脾臓・副腎・精巣・精巣上体・胸腺・褐色脂肪細胞・後腹壁脂肪・副腎周囲脂肪・精巣周囲脂肪)、骨(大腿骨・脛骨・腓骨)、筋肉(ひらめ筋・腓腹筋)を摘出した。
臓器・筋肉は、重量測定後、10%ホルマリン緩衝液に浸漬し、固定した。血液は、遠心分離(3000rpm、15分間、4℃)にて血漿を分離した。骨は、生理食塩水中で保存した。
骨湿重量に関しては、左右大腿骨の湿重量を電子天秤にて測定し、記録した。
骨強度の測定は、骨強度試験装置(室町機械株式会社製:TK−252C)を用いて、三点曲げ試験法によってENERGYとSTIFFNESSを測定した。
三点曲げ試験法は、骨を下側から二点で支え、上側から骨の中央に負荷を加えて、骨が折れたときの値、すなわち破断力を測定する方法である。この三点曲げ試験法においては、大腿骨・脛骨を12mm間隔で支持し、最も安定する角度で置いて測定した。
ENERGY(破断エネルギー)は、骨が破断されるまでの仕事量、すなわち荷重が加わってその方法に動いた仕事量を表す。STIFFNESSは、骨の弾性率であり、骨の硬さの目安を表す。
骨中カルシウムの測定は、カルシウム測定用カルシウムE−テストワコー(和光純薬工業株式会社)を用いて、オクトクレゾールフタレインコンプレキソン(OCPC)法で行った。
5倍希釈した試料0.05mlにモノエタノールアミン緩衝液(pH12.0)を2.0ml加え、よく振り混ぜた。これにメチルキシレノールブルーと8−キノリノールを含有した発色試薬を1.0ml加え、よく振り混ぜた。そして、3時間以内にブランクを対照として、分光光度計で610nmの波長で検体および標準液(10mg/dl)の吸光度を測定した。
骨中リンの測定は、モリブデンブルー法で行った。このリン測定にあたっては、以下の要領で試薬等を調整した。
まず、蒸留水336mlに塩酸14mlを加え、1.4%塩酸とした。次に、燐酸カリウムをろ紙にとり、乾燥機中(105℃)で2時間乾燥させた。それをデシケーター内で放冷した後、0.220gを量りとり、1.4%塩酸で50mlにメスアップし、リン標準液とした。
次に、モリブデン酸アンモニウム5.0gを約80mlの温水(60℃)中で溶解させた。それを蒸留水で100mlにメスアップし、モリブデン酸アンモニウム溶液とした。
次に、メタバナジン酸アンモニウム0.25gを温水約50mlで溶かし、冷却後、濃硝酸を4ml加え、蒸留水で100mlにメスアップし、メタバナジン酸アンモニウム溶液とした。
試料としては、原液:蒸留水=1:1で、2倍希釈したものを用いた。
そして、試料5ml(ブランクは1.4%塩酸5ml)、蒸留水15ml、メタバナジン酸アンモニウム溶液2.5ml、モリブデン酸アンモニウム溶液2.5mlを加えてよく混合し、蒸留水で50mlメスアップした。それを10分間室温に放置した後、分光光度計で460nmの波長で検体および標準液の吸光度を測定した。
恒量に達した糞入りのるつぼは、骨と同様の方法で100mlにメスアップし、糞試料とした。
カルシウム測定は、カルシウム測定用カルシウムE−テストワコー(和光純薬工業株式会社)を用いて、オクトクレゾールフタレインコンプレキソン(OCPC)法で行った。
5倍希釈した試料0.05mlにモノエタノールアミン緩衝液(pH12.0)を2.0ml加え、よく振り混ぜた。これにメチルキシレノールブルーと8−キノリノールを含有した発色試薬を1.0ml加え、よく振り混ぜた。そして、3時間以内にブランクを対照として、分光光度計で610nmの波長で検体および標準液(10mg/dl)の吸光度を測定した。
原尿を4℃、3000rpm、15分間で遠心分離し、上清をデカンテーションにて別のプラスチックチューブに採取した。これを尿試料とした。
尿中カルシウムの測定は、カルシウム測定用カルシウムE−テストワコー(和光純薬工業株式会社)を用いて、オクトクレゾールフタレインコンプレキソン(OCPC)法で行った。
5倍希釈した試料0.05mlにモノエタノールアミン緩衝液(pH12.0)を2.0ml加え、よく振り混ぜた。これにメチルキシレノールブルーと8−キノリノールを含有した発色試薬を1.0ml加え、よく振り混ぜた。そして、3時間以内にブランクを対照として、分光光度計で610nmの波長で検体および標準液(10mg/dl)の吸光度を測定した。
実験期間中のトレッドミル走行訓練の週齢とその時期の速度については、先に説明した図3に示した。また、運動群(CD群・DE群)の総走行距離を図7に示した。この図7の表に示すように、総走行距離に関しては、運動群の2群間に差はなかった。
肝臓については、CE群がC群に対して有意に低値を示し、DE群がD群に対して有意に低値を示した。すなわち、運動群が非運動群に比べ、有意に低値を示した。(p<0.05)(図9参照)
脾臓については、D群がDE群に対して有意に高値を示した。(p<0.05)(図10参照)
右腎臓については、CE群がC群に対して有意に高値を示し、CE群がDE群に対して有意に高値を示した。(p<0.05)(図11参照)
左副腎については、CE群がC群に対して有意に高値を示し、CE群がDE群に対して有意に高値を示し、D群がC群に対して有意に高値を示した。(p<0.05)(図13参照)
また、図18に尿中カルシウム排泄量に関するグラフを示し、図19に尿中クレアチン排泄量に関するグラフを示している。これらの図18および図19に示すグラフによれば、尿中カルシウム排泄量、尿中クレアチン排泄量は、いずれの群間においても、有意な差はみられなかった。
さらに、図20は、尿素窒素排出量に関するグラフを示している。この図20に示すように、尿素窒素排出量については、D群がC群に比べ有意に低値を示し、DAS添加食群が対照食群と比較して有意に低値を示す傾向がみられた。(p<0.05)
また、図21は、糞中カルシウム排泄量に関するグラフを示している。この図21に示すように、糞中カルシウム排泄量は、いずれの群間においても有意な差はみられなかった。
ここで、図32は血漿総たんぱく質濃度に関するグラフを示し、図33は血漿アルブミン濃度に関するグラフを示している。
これらの図に示すように、血漿総たんぱく質濃度については、各群間で有意な差はみられなかったが(図32参照)、血漿アルブミン濃度においては、CE群がC群と比較して有意に高値を示し、DE群がD群と比較して有意に高値を示し、運動群が非運動群と比較して高値を示し、D群がC群と比較して有意に高値を示した。
つまり、血漿アルブミン濃度は、DAS添加食群が対照食群に比べ有意に高値を示した。しかしながら、その一方では、尿素窒素排泄量(図20参照)においては、DAS添加食群が対照食群に比べ、低い傾向がみられた。このことから、本実施形態にかかるDAS添加食群の方が、「骨の形成材料」をより多く体内に留めていることが明らかである。すなわち、本実施形態にかかる骨強度低下抑制剤を構成するDASが、骨吸収促進因子の産生を抑制したことによって、骨密度を高め、骨破断におけるSTIFFNESSを高めたためであると考えられる。
なお、本発明は、上記実施形態に限定されるものではなく、本発明の趣旨に適合し得る範囲で必要に応じて種々の変更を加えて実施することも可能であり、それらはいずれも本発明の技術的範囲に含まれる。
CE…対照食群(運動群)
D …DAS添加食群(非運動群)
DE…DAS添加食群(運動群)
Claims (2)
- ジアリルスルフィド(DAS)と植物油であるコーン胚芽油とを混合させたDAS含有植物油溶液を有効成分とし、前記ジアリルスルフィド(DAS)を200ppm含有することを特徴とする骨強度低下抑制剤。
- 前記ジアリルスルフィド(DAS)が、ニンニクから抽出されたものである
請求項1に記載の骨強度低下抑制剤。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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JP2009251537A JP5678390B2 (ja) | 2009-10-31 | 2009-10-31 | 骨強度低下抑制剤 |
Applications Claiming Priority (1)
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JP2009251537A JP5678390B2 (ja) | 2009-10-31 | 2009-10-31 | 骨強度低下抑制剤 |
Publications (2)
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JP2011093862A JP2011093862A (ja) | 2011-05-12 |
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ID=44111202
Family Applications (1)
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---|---|---|---|
JP2009251537A Active JP5678390B2 (ja) | 2009-10-31 | 2009-10-31 | 骨強度低下抑制剤 |
Country Status (1)
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Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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GB9709082D0 (en) * | 1997-05-06 | 1997-06-25 | Ciba Geigy Ag | Organic compositions |
-
2009
- 2009-10-31 JP JP2009251537A patent/JP5678390B2/ja active Active
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JP2011093862A (ja) | 2011-05-12 |
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