JP5629682B2

JP5629682B2 - ２−メチレン−（１７ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−ビタミンｄ類似物質

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Publication number: JP5629682B2
Application number: JP2011517605A
Authority: JP
Inventors: デルーカ，ヘクター，エフ．; タディ，ブリ，パドマジャ; プラム，ロリ，エー．; クラゲット−デイム，マーガレット
Original assignee: ウィスコンシンアラムナイリサーチファンデーション
Priority date: 2008-07-10
Filing date: 2009-07-09
Publication date: 2014-11-26
Anticipated expiration: 2029-07-09
Also published as: WO2010006135A3; US20100009942A1; EP2313368A2; US7893043B2; CA2730254A1; AU2009268567A1; MX2011000357A; AU2009268567B2; EP2313368B1; WO2010006135A2; CA2730254C; JP2011527696A

Description

本発明は、ビタミンＤ化合物に関し、さらに特定的には、２−メチレン−（１７Ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−ビタミンＤ類似物質、及びこれらの医薬としての使用に関する。

天然ホルモンである１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３、及びそのエルゴステロール群の類似物質、すなわち、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_２は、動物及びヒトにおけるカルシウムホメオスタシスの極めて強力な調整剤であることが知られており、細胞分化におけるこれらの活性も、Ｏｓｔｒｅｍｅｔａｌ．によって、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８４、２６１０（１９８７）で確立されている。１α−ヒドロキシビタミンＤ_３、１α−ヒドロキシビタミンＤ_２、種々の側鎖が認定されているビタミン及びフッ素化された類似物質を含め、これらの代謝物の多くの構造類似物質が調製され、試験されている。これらの化合物のうち、いくつかは、細胞分化及びカルシウム調節において興味深い分離活性を示す。この活性の差は、腎性骨ジストロフィー、ビタミンＤ抵抗性くる病、骨粗鬆症、乾癬、特定の悪性腫瘍といった種々の疾患の治療で有用であり得る。

別の種類のビタミンＤ類似物質、すなわち、いわゆる１９−ノル−ビタミンＤ化合物は、ビタミンＤ系では典型的なＡ環の環外メチレン基（炭素１９）が２個の水素原子と置き換わっていることを特徴とする。このような１９−ノル−類似物質（例えば、１α，２５−ジヒドロキシ−１９，２１−ジノル−ビタミンＤ_３）の生物学的試験は、細胞分化を誘導する高い能力を有し、カルシウム動員活性が極めて低いという選択的な活性プロフィールを明らかにした。従って、これらの化合物は、悪性腫瘍の治療、又は種々の皮膚障害の治療の治療薬剤として有用な可能性を秘めている。このような１９−ノル−ビタミンＤ類似物質の２つの異なる合成方法が記載されている（Ｐｅｒｌｍａｎｅｔａｌ．、ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．３１、１８２３（１９９０）；Ｐｅｒｌｍａｎｅｔａｌ．、ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．３２、７６６３（１９９１）、ＤｅＬｕｃａｅｔａｌ．、米国特許第５，０８６，１９１号）。

米国特許第４，６６６，６３４において、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３の２β−ヒドロキシ類似物質及びアルコキシ類似物質（例えば、ＥＤ−７１）が記載されており、骨粗鬆症の有望な薬物として、及び抗腫瘍剤として、中外グループによって試験されている。また、Ｏｋａｎｏｅｔａｌ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１６３、１４４４（１９８９）を参照。１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３の他の２−置換された（ヒドロキシアルキルで、例えば、ＥＤ−１２０、フルオロアルキル基で）Ａ環類似物質も調製され、試験されている（Ｍｉｙａｍｏｔｏｅｔａｌ．、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．４１、１１１１（１９９３）；Ｎｉｓｈｉｉｅｔａｌ．、ＯｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓＩｎｔ．Ｓｕｐｐｌ．１、１９０（１９９３）；Ｐｏｓｎｅｒｅｔａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５９、７８５５（１９９４）、及び、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６０、４６１７（１９９５））。

１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノル−ビタミンＤ_３の２−置換された類似物質、すなわち、２位で、ヒドロキシ基又はアルコキシ基で置換された化合物（ＤｅＬｕｃａｅｔａｌ．、米国特許第５，５３６，７１３号）、２−アルキル基で置換された化合物も合成されており（ＤｅＬｕｃａｅｔａｌ、米国特許第５，９４５，４１０号）、および２−アルキリデン基で置換された化合物も合成されており（ＤｅＬｕｃａｅｔａｌ、米国特許第５，８４３，９２８号）、これらは、興味深く選択的な活性プロフィールを示す。これらのすべての研究は、ビタミンＤ受容体の結合部位が、合成されたビタミンＤ類似物質のＣ−２に異なる置換基を受け入れることが可能であることを示す。

薬理学的に重要なビタミンＤ化合物である１９−ノル群を調査する努力を続けていく中で、炭素２（Ｃ−２）にメチレン置換基が存在し、炭素１（Ｃ−１）にヒドロキシル基が存在し、炭素２０（Ｃ−２０）に短い側鎖が結合していることを特徴とする類似物質も合成され、試験されている。１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−プレグナカルシフェロールは、米国特許第６，５６６，３５２号に記載されており、一方、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールは、米国特許第６，５７９，８６１号に記載されており、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ビスホモプレグナカルシフェロールは、米国特許第６，６２７，６２２号に記載されている。これら３種類の化合物はすべて、ビタミンＤ受容体に対して相対的に高い結合活性を有しており、比較的高い細胞分化活性を有しているが、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３と比較して、カルシウム血症活性は、それがあったとしても非常に低い。これらの生物学的活性は、’３５２特許、’８６１特許、’６２２特許に記載されているように、これらの化合物を、種々の医薬用途のすぐれた候補物質にする。

１７−エンビタミンＤ化合物、ならびに側鎖に二重結合を有するビタミンＤ化合物も知られており、種々の薬理学的用途が提案されている。骨粗鬆症のような骨の疾患、乾癬のような皮膚障害、白血病のような癌、しわのような美容に関する状態は、このような化合物で提案されている用途のうち、ほんのいくつかである。１７−エン化合物は、米国特許第５，５４５，６３３号；第５，９２９，０５６号、第６，３９９，７９７号に記載されており、一方、二重結合を有する側鎖を有する２−アルキリデン化合物は、例えば、米国特許第５，８４３，９２８号に記載されている。

本発明は、２−メチレン−（１７Ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−ビタミンＤ類似物質、それらの生物学的活性、及びそれらの化合物の種々の薬理学的用途に関する。これまでに知られていない、これらの新規ビタミンＤ化合物は、２−位（Ｃ−２）にメチレン基を有し、典型的には側鎖の２１位（Ｃ−２１）に位置しているメチル基が、水素原子と置き換わった、炭素原子１７と２０との間に位置する二重結合を有し、１７位（Ｃ−１７）にＺ配置で接続する側鎖を有する、１９−ノル−ビタミンＤ類似物質である。好ましいビタミンＤ類似物質は、２−メチレン−（１７Ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３（以下、「ＶｉｔＩＩＺ」と称する）である。

構造的に、これらの２−メチレン−（１７Ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−ビタミンＤ類似物質は、以下に示される一般式Ｉによって特徴づけられ、

式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される。好ましい類似物質は、以下の式Ｉａを有する、２−メチレン−（１７Ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３である。

上の化合物Ｉ、特にＩａは、望ましく、極めて有益な生物学的活性パターンを示す。これらの化合物は、ビタミンＤ受容体に対し、比較的に結合性が高いことを特徴とし、天然のホルモン１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３よりもほんのわずか効能が低い。また、これらの化合物は、用量に依存する様式で、腸のカルシウム輸送をｉｎｖｉｖｏで促進する能力も有し、これらは、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３と比較し、腸のカルシウム輸送活性は、ほぼ同じであるか、等しいと分類されるであろう。また、これらの化合物Ｉ、特にＩａは、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３と比較した場合、骨からカルシウムを動員する能力も有しており、これらは、骨のカルシウムを動員する活性は、ほぼ同じであるか、等しいと分類されるであろう。従って、これらの化合物は、顕著なカルシウム血症活性を有するものと特徴づけることができる。プレプロ副甲状腺ホルモン遺伝子（Ｄａｒｗｉｓｈ＆ＤｅＬｕｃａ、Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．３６５、１２３−１３０、１９９９）および副甲状腺が増殖を抑制する場合、血清カルシウムが生理学的レベルを超えた値まで上がることは望ましくない。カルシウム血症活性を有しつつ、分化及び転写に対しても非常に活性である、これらの類似物質は、腎性骨ジストロフィーの二次性副甲状腺機能亢進症を抑制するための治療として有用であると予想される。

また、本発明の化合物Ｉ、特にＩａは、免疫系の失調によって特徴づけられるヒトの障害、例えば、多発性硬化症、ループス、糖尿病、移植片対宿主拒絶反応、臓器移植の拒絶反応を含む自己免疫疾患の治療及び予防、さらに、関節リウマチ、喘息のような炎症性疾患、セリアック病、潰瘍性大腸炎、クローン病のような炎症性腸疾患の治療に特に適していることが発見されている。座瘡、脱毛症、高血圧は、本発明の化合物で治療し得る他の状態である。

また、上の化合物Ｉ、特にＩａは、比較的高い細胞分化活性と、転写を促進することによっても特徴づけられる。従って、これらの化合物は、乾癬を治療するため、又は抗癌剤、特に、白血病、結腸癌、乳癌、皮膚癌、前立腺癌の抗癌剤として治療薬剤も提供する。それに加えて、これらが比較的高い細胞分化活性を有するため、これらの化合物は、しわ、十分な皮膚の水分が失われること、すなわち、乾燥肌、十分な皮膚の堅さが失われること、すなわち、皮膚のたるみ、不十分な皮脂分泌を含む種々の皮膚の状態を治療するための治療薬剤を提供する。従って、これらの化合物の使用は、皮膚を保湿するだけではなく、皮膚の障壁機能も高める。

本発明の式Ｉ、特に式Ｉａの化合物は、肥満を予防するか、又は治療し、脂肪細胞の分化を阻害し、ＳＣＤ−１遺伝子の転写を阻害し、及び／又は、動物対象の体脂肪を減らすことにも有用である。従って、ある実施形態では、肥満を予防するか、又は治療する方法、脂肪細胞の分化を阻害する方法、ＳＣＤ−１遺伝子の転写を阻害する方法、及び／又は動物対象の体脂肪を減らす方法は、動物対象に、式Ｉの１つ以上の化合物、又は式Ｉの１つ以上の化合物を含む医薬組成物を有効な量投与することを含む。１つ以上の化合物又は医薬組成物を対象に投与すると、脂肪細胞の分化を阻害し、遺伝子の転写を阻害し、及び／又は動物対象において体脂肪を減らす。

上述の１つ以上の化合物は、上述の疾患及び障害を治療するために、組成物の約０．０１μｇ／ｇ〜約１０００μｇ／ｇの量で、好ましくは、組成物の約０．１μｇ／ｇ〜約５００μｇ／ｇの量で組成物中に存在してもよく、約０．０１μｇ／日〜約１０００μｇ／日、好ましくは、約０．１μｇ／日〜約５００μｇ／日の用量で、局所投与、経皮投与、経口投与、直腸投与、経鼻投与、舌下投与又は非経口投与されてもよい。

図面において、図１〜５は、以下、「１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３」と称する天然のホルモンである１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３と比較した、以下「ＶｉｔＩＩＺ」と称する２−メチレン−（１７Ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３の種々の生物学的活性を示す。

図１は、全長組み換えラットビタミンＤ受容体に対する結合について、［^３Ｈ］−１，２５−（ＯＨ）_２−Ｄ_３と競合する、ＶｉｔＩＩＺ及び１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３の相対活性を示すグラフである。図２は、ＶｉｔＩＩＺ及び１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３の濃度の関数として、ＨＬ−６０細胞分化の割合（％）を示すグラフである。図３は、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３のｉｎｖｉｔｒｏでの転写活性をＶｉｔＩＩＺと比較して示すグラフである。図４は、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３が、骨のカルシウムを動員する活性をＶｉｔＩＩＺと比較して示すグラフである。図５は、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３が、腸のカルシウムを移動させる活性をＶｉｔＩＩＺと比較して示すグラフである。

炭素２（Ｃ−２）にメチレン置換基が存在し、炭素原子１７と２０との間に位置する二重結合を有し、典型的には側鎖の２１位（Ｃ−２１）に位置しているメチル基が、水素原子と置き換わった、１７位（Ｃ−１７）にＺ配置で接続する側鎖を有することを特徴とする１９−ノルビタミンＤ類似物質である、２−メチレン−（１７Ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３（本明細書では「ＶｉｔＩＩＺ」と称する）が合成され、試験された。Ｃ−２位置にある比較的小さなメチレン基は、ビタミンＤ受容体への結合を妨害しないはずであるため、このようなビタミンＤ類似物質は、興味深い標的であると思われる。構造的に、この１９−ノル類似物質は、本明細書ですでに示された一般式Ｉａによって特徴づけられ、そのプロドラッグ（保護されたヒドロキシ形態）は、本明細書ですでに示された一般式Ｉによって特徴づけられる。

構造Ｉを有する２−メチレン−（１７Ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−ビタミンＤ類似物質の調製は、通常の一般的な方法によって行うことができ、すなわち、Ｗｉｎｄａｕｓ−Ｇｒｕｎｄｍａｎｎ型の二環式ケトンＩＩをアリルホスフィンオキシドＩＩＩと縮合させて、対応する２−メチレン−１９，２１−ジノル−ビタミンＤ類似物質ＩＶにした後、後者の化合物のＣ−１およびＣ−３で脱保護する（本明細書のスキームを参照）。

構造ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶにおいて、Ｘ_１基、Ｘ_２基、Ｘ_３基は、ヒドロキシ保護基であり、好ましくは、ｔ−ブチルジメチルシリルであり、縮合反応に感受性であるか、又は縮合反応を妨害するであろう任意の官能基は、当該技術分野で十分に知られているように適切に保護されることも理解される。上に示されるプロセスは、収束型合成の概念の適用をあらわしており、ビタミンＤ化合物を調製するのに有効に適用されている［例えば、Ｌｙｔｈｇｏｅｅｔａｌ．、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．ＰｅｒｋｉｎＴｒａｎｓ．Ｉ、５９０（１９７８）；Ｌｙｔｈｇｏｅ、Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．９、４４９（１９８３）；Ｔｏｈｅｔａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．４８、１４１４（１９８３）；Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉｅｔａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１、３０９８（１９８６）；Ｓａｒｄｉｎａｅｔａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１、１２６４（１９８６）；Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１、１２６９（１９８６）；ＤｅＬｕｃａｅｔａｌ．、米国特許第５，０８６，１９１号；ＤｅＬｕｃａｅｔａｌ．、米国特許第５，５３６，７１３号］。

一般構造ＩＩのヒドリンダノンは既知ではない。これは、本明細書のスキームに示されている方法によって調製することができる（化合物ＶｉｔＩＩＺの調製を参照）。

一般構造ＩＩＩの必要なホスフィンオキシドを調製するために、Ｐｅｒｌｍａｎｅｔａｌ．、ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．３２、７６６３（１９９１）、ＤｅＬｕｃａｅｔａｌ．、米国特許第５，０８６，１９１号に記載されているように、市販の（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−（−）−キナ酸から容易に得られるキナ酸メチル誘導体から出発する合成経路が開発されている。

化合物Ｉ及びＩａの全体的な合成プロセスは、「２−Ａｌｋｙｌｉｄｅｎｅ−１９−Ｎｏｒ−ＶｉｔａｍｉｎＤＣｏｍｐｏｕｎｄｓ」という名称の米国特許第５，８４３，９２８号に示され、もっと完全に記載されており、この明細書は、特に、参照により組み込まれる。

この記載及び特許請求の範囲で使用される場合、用語「ヒドロキシ保護基」は、ヒドロキシ官能基を一時的に保護するために一般的に使用される任意の基を示し、例えば、アルコキシカルボニル基、アシル基、アルキルシリル基又はアルキルアリールシリル基（以下、単に「シリル」基と称する）、アルコキシアルキル基、ベンジルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、メトキシエトキシメチル、テトラヒドロフラニル及びテトラヒドロピラニルを意味する。アルコキシカルボニル保護基は、アルキル−Ｏ−ＣＯ−群であり、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、又はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである。用語「アシル」は、すべての異性体形態での１〜６個の炭素を有するアルカノイル基、又は１〜６個の炭素を有するカルボキシアルカノイル基、例えば、オキサリル基、マロニル基、スクシニル基、グルタリル基、又は、芳香族アシル基、例えば、ベンゾイル基、又はハロ基、ニトロ基又はアルキル置換されたベンゾイル基を意味する。用語「アルキル」は、この記載及び特許請求の範囲で使用される場合、すべての異性体形態での１〜１０個の炭素を有する直鎖又は分枝鎖のアルキル基を意味する。アルコキシアルキル保護基は、メトキシメチル、エトキシメチルのような群である。好ましいシリル保護基は、トリメチルシリル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ジブチルメチルシリル、ジフェニルメチルシリル、フェニルジメチルシリル、ジフェニル−ｔ−ブチルシリル、及び類似するアルキル化シリル基である。用語「アリール」は、フェニル置換されたフェニル基、又はアルキル置換されたフェニル基、ニトロ置換されたフェニル基、又はハロ置換されたフェニル基を表す。

「保護されたヒドロキシ」基は、ヒドロキシ官能基を一時的又は永久的に保護するために一般的に使用される、例えば、すでに定義された、シリル基、アルコキシアルキル基、アシル基又はアルコキシカルボニル基のような、上述のいずれかの基によって誘導体化されたか、又は保護されたヒドロキシ基である。用語「ヒドロキシアルキル」、「重水素化アルキル」、「フルオロアルキル」は、それぞれ、１個以上のヒドロキシ基、重水素、又はフルオロ基で置換されたアルキル基を指す。

さらに特定的には、以下の実例となる例及び記載、並びに化合物ＶｉｔＩＩＺを調製する詳細な実例のための本明細書のスキームに対して、参照がなされるべきである。

この例では、アラビア数字（１、２、３）によって特定される特定の生成物は、スキームで特定される特定の構造を指す。

化学。紫外線（ＵＶ）吸収スペクトルは、記載した溶媒中、ＨｉｔａｃｈｉＭｏｄｅｌ６０−１００ＵＶ−ｖｉｓ分光計で記録された。^１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、ＢｒｕｋｅｒＡＭ−５００ＦＴ分光計を用い、重水素クロロホルム中、５００ＭＨｚで報告された。化学シフト（δ）は、内部Ｍｅ_４Ｓｉ（δ０．００）からの低磁場で報告される。マススペクトルは、ＫｒａｔｏｓＤＳ−５０ＴＣ装置に、ＫｒａｔｏｓＭＳ−５５データシステムを取り付け、７０ｅＶで報告された。試料を、直接挿入プローブを介し、１２０〜２５０℃に維持されているイオン源に導入した。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、ＷａｔｅｒｓＡｓｓｏｃｉａｔｅｓ液体クロマトグラフをＭｏｄｅｌ６０００Ａ溶媒送達システム、Ｍｏｄｅｌ６ＵＫＵｎｉｖｅｒｓａｌインジェクタ、Ｍｏｄｅｌ４８６の調整可能な吸光度検出器、Ｒ４０１型示差屈折計を取り付けて行った。

（実施例１）
デス−Ａ，Ｂ−２３，２４−ジノルコラン−８β，２２−ジオール（２）。火力乾燥した１０００ｍＬ二口フラスコに、エルゴカルシフェロール１（５ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）、ピリジン（５ｍＬ）、および無水ＭｅＯＨ（４００ｍＬ）を入れた。この溶液を、アルゴン雰囲気下、−７８℃まで冷却した。この溶液を、深い青色になり、この色が維持されるまで、Ｏ_３で泡立てた（約１時間）。この溶液を、青色が消えるまで、Ｏ_２で処理した（１５分）。次いで、ＮａＢＨ_４（１．５ｇ、３９．７ｍｍｏｌ）を添加した。１５分後、第２の量のＮａＢＨ_４（１．５ｇ、３９．７ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温まで加温した。次いで、第３の量のＮａＢＨ_４（１．５ｇ、３９．７ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を一晩撹拌した。水（５０ｍＬ）を加えることによって、反応物をクエンチした。メタノールを減圧下で蒸発させ、残渣を酢酸エチルに溶解した。有機相を、１ＮＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍＬ）、およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、蒸発させた。シリカゲルクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、ジオール２を白色固体として２．１８ｇ（１０．３ｍｍｏｌ、８１％）得た。Ｍｐ１１０〜１１１℃；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：０．９６（３Ｈ，ｓ），１．０３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），３．３８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，６．７Ｈｚ），３．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，３．２Ｈｚ），４．０９（１Ｈ，ｍ）；^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：６９．２，６７．８，５２．９，５２．４，４１．８，４０．２，３８．２，３３．６，２６．６，２２．６，１７．４，１６．６，１３．６；ＭＳｍ／ｚ（相対強度）：２１２（Ｍ^＋，２），１９４（Ｍ^＋−Ｈ_２Ｏ，１５），１７９（Ｍ^＋−Ｈ_２Ｏ−ＣＨ_３，１８），１２５（４３），１１１（１００）；Ｃ_１３Ｈ_２２Ｏ［Ｍ−Ｈ_２Ｏ］^＋として算出した正確な質量は１９４．１６７１，測定値は１９４．１６６５である。

デス−Ａ，Ｂ−２２−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）−２３，２４−ジノルコラン−８β−オール（３）。ジオール２（１ｇ、４．７１ｍｍｏｌ）の無水ピリジン（１２ｍＬ）溶液を−２５℃まで冷却し、あらかじめ冷却しておいた塩化トシル（１．０８ｇ、５．６６ｍｍｏｌ）の無水ピリジン（２ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を、この温度で４時間撹拌し、０℃まで加温し、この温度でさらに２０時間撹拌した。この混合物を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＣｕＳＯ_４溶液（３０ｍＬ）、１ＮＨＣｌ（３０ｍＬ）、および水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥し（ＮａＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、ヒドロキシルトシレート３を１．７ｇ（４．６４ｍｍｏｌ、９８％）得た。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：０．８９（３Ｈ，ｓ），０．９６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），２．４５（３Ｈ，ｓ），３．８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，６．２Ｈｚ），３．９５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，３．０Ｈｚ），４．０６（１Ｈ，ｍ），７．３５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．７８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：１４４．７，１３３．０，１２９．８，１２７．９，７５．６，６９．０，６０．４，５２．２，４１．９，４０．１，３５．７，３３．５，２６．４，２２．４，２１．６，１７．３，１６．７，１３．４；ＭＳｍ／ｚ（相対積分値）：３６６（Ｍ^＋，６），１９４（１４），１７９（１６），１２５（３０），１１１（１００）；Ｃ_２０Ｈ_３０ＳＯ_４Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ^＋）として算出した正確な質量は３８９．１７６３，測定値は３８９．１７６８である。

デス−Ａ，Ｂ−８β−［（トリエチルシリル）オキシ］−２２−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）−２３，２４−ジノルコラン（４）。−５０℃に冷却した、ヒドロキシルトシレート３（１．５ｇ、４．０９ｍｍｏｌ）の無水ＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）溶液に、２，６−ルチジン（０．９５０ｍＬ、０．８８０ｇ、８．２ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、ＴＥＳＯＴｆ（１．４ｍＬ、１．６ｇ、６．１４ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を−５０℃で１５分間撹拌し、水（１０ｍＬ）を添加した。この混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し（４０ｍＬ×３回）、合わせた有機相を、１ＮＮａＯＨ水溶液（４０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、４を１．７ｇ（３．５４ｍｍｏｌ、８６％）得た。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ；０．５３（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），０．８６（３Ｈ，ｓ），０．９３（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），０．９４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）２．４３（３Ｈ，ｓ），３．７８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，６．４Ｈｚ），３．９５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，３．０Ｈｚ），４．０（１Ｈ，ｍ），７．３３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．７７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）。^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：１４４．５，１３３．１，１２９．７，１２７．９，７５．７，６９．１，５２．７，５２．４，４２．１，４０．３，３５．７，３４．５，２６．５，２２．９，２１．６，１７．５，１６．７，１３．４，６．９，４．９；ＭＳｍ／ｚ（相対積分値）：４８０（Ｍ^＋，３０），４３７（５０），３２７（１８），２５７（９０），１７７（１００）；Ｃ_２６Ｈ_４４Ｏ_４ＳＳｉＮａ（Ｍ＋Ｎａ^＋）として算出した正確な質量は４８０．２７３０，測定値は４８０．２７４１である。

デス−Ａ，Ｂ−８β−［（トリエチルシリル）オキシ］−２３，２４−ジノルコラン−２２−アール（５）。４（１．５ｇ、３．１２ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（５ｍＬ）溶液を、ＮａＨＣＯ_３（１．３ｇ、１５．６ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２０ｍＬ）懸濁物に、室温で添加した。混合物を、アルゴン下、１５分間で１５０℃まで加熱し、室温まで冷却した。水（５０ｍＬ）、次いで酢酸エチル（５０ｍＬ）を添加し、水相を酢酸エチルで抽出した（３０ｍＬ×３回）。合わせた有機相を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（２％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、アルデヒド５を０．７７０ｇ（２．３８ｍｍｏｌ、７６％）得た。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：０．５６（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），０．９５（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），０．９６（３Ｈ，ｓ）１．１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），４．０６（１Ｈ，ｍ），９．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ）。^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：２０５．５，６９．０，５２．４，５１．７，４９．１，４２．６，４０．５，３４．５，２６．２，２３．３，１７．６，１３．９，１３．３，６．９，４．９；ＭＳｍ／ｚ（相対積分値）：２９５（［Ｍ−Ｃ_２Ｈ_５］^＋，４０），２６５（３），１６３（１００）；Ｃ_１７Ｈ_３１ＳｉＯ_２（Ｍ−Ｃ_２Ｈ_５ ^＋）として算出した正確な質量は２９５．２０９３，測定値は２９５．２０９５である。

デス−Ａ，Ｂ−８β−［（トリエチルシリル）オキシ］−プレグナン−２０−オン（６）。火力乾燥したフラスコに、ｔ−ＢｕＯＫ（１．３５ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）、無水ｔ−ＢｕＯＨ（３０ｍＬ）を室温で入れた。この溶液を、Ｏ_２で１５分間泡立てた。この反応混合物に、アルデヒド５（０．７７０ｇ、２．３８ｍｍｏｌ）の無水ｔ−ＢｕＯＨ（１５ｍＬ）溶液を添加し、この溶液を、Ｏ_２でさらに１０分間泡立てた。反応物を水（１５ｍＬ）でクエンチし、エーテルで抽出した（３０ｍＬ×３回）。合わせた有機相を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（３％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、ケトン６を０．５２０ｇ（１．６８ｍｍｏｌ、７１％）得た。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ；０．５５（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），０．８５（３Ｈ，ｓ），０．９４（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），２．０９（３Ｈ，ｓ），４．０７（１Ｈ，ｍ）。^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：２０９．６，６８．９，６４．５，５３．２，４３．７，３９．９，３４．４，３１．５，２３．１，２１．７，１７．６，１５．３，６．９，４．９；ＭＳｍ／ｚ（相対積分値）：３１０（Ｍ^＋，１３），２９５（３），２８１（１００）；Ｃ_１８Ｈ_３４ＳｉＯ_２（Ｍ^＋）として算出した正確な質量は３１０．２３２８，測定値は３１０．２３２５である。

デス−Ａ，Ｂ−８β−［（トリエチルシリル）オキシ］−テストステロンアセテート（７）。０℃に冷却した、ケトン６（０．６１０ｇ、１．９７ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）溶液に、ｍ−ＣＰＢＡ（７７％、１．０ｇ、３．９４ｍｍｏｌ）を添加し、室温で６日間撹拌した［さらなる量のｍ−ＣＰＢＡを添加した（１．０ｇ、４８時間；０．４００ｇ９６時間）］。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（３０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（３０ｍＬ）で洗浄した。水相をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した（２０ｍＬ×２回）。合わせた有機相を水（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（２％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、アセテート７を白色固体として０．４００ｇ（１．２３ｍｍｏｌ、６２％）得た。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：０．５６（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９５Ｈｚ），０．９５（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９７Ｈｚ），１．０（３Ｈ，ｓ），２．０３（３Ｈ，ｓ），４．０５（１Ｈ，ｍ），４．５４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）。ＭＳｍ／ｚ（相対積分値）：３２６（Ｍ^＋，８），２９７（［Ｍ−Ｃ_２Ｈ_５］^＋，３２），２８１（２７）１３５（１００）；Ｃ_１８Ｈ_３４Ｏ_３Ｓｉ（Ｍ^＋）として算出した正確な質量は３２６．２２７７，測定値は３２６．２２６２である。

デス−Ａ，Ｂ−８β−［（トリエチルシリル）オキシ］−テストステロン（８）。ＭｅＯＨ（９ｍＬ）及びＨ_２Ｏ（１ｍＬ）中のアセテート７（０．４００ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）氷冷溶液にＮａＯＨ（０．４９０ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、室温で６時間撹拌した。得られた溶液を、ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（１０ｍＬ）で処理した。ＭｅＯＨを減圧下で除去し、水相を酢酸エチルで抽出した（３０ｍＬ×３回）。合わせた有機相を乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（１０％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、アルコール８を白色固体として０．２９０ｇ（１．０２ｍｍｏｌ、８３％）得た。［α］^２０ _Ｄ＋３８．９４（ｃ０．６４、ＣＨＣｌ_３）；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：０．５６（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ），０．９５（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ），０．９６（３Ｈ，ｓ），２．０４（１Ｈ，ｍ），３．５６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６８Ｈｚ），４．０２（１Ｈ，ｍ）。^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：８２．２，６９．１，４８．１，４２．１，３７．５，３４．６，２９．９，２２．１，１７．３，１２．３，６．９，４．９。ＭＳｍ／ｚ（相対積分値）：２８４（Ｍ^＋，１２），２５５（［Ｍ−ＣＨ_３−Ｈ_２Ｏ］^＋，１００）２３７（５２），１３５（５０）。Ｃ_１６Ｈ_３２Ｏ_２Ｓｉ［Ｍ］^＋として算出した正確な質量は２８４．２１７２，実測値２８４．２１６６。

デス−Ａ，Ｂ−８β−［（トリエチルシリル）オキシ］−アンドロスタン−１７−オン（９）。アルコール８（０．２９０ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）の無水ＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）氷冷溶液に、ＰＤＣ（０．５７６ｇ、１．５３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、セライト濾過した。この溶液を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（７％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、ケトン９を無色液体として０．２５６ｇ（０．９１ｍｍｏｌ、８９％）得た。［α］^２０ _Ｄ＋８０．４（ｃ０．９２，ＣＨＣｌ_３）；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：０．５８（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０５Ｈｚ），０．９５（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９５Ｈｚ），１．０９（３Ｈ，ｓ），２．４１（１Ｈ，ｍ），４．１７（１Ｈ，ｍ）。^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：８２．２，６９．８，４８．８，４７．５，３５．２，３４．４，３２．２，２１．２，１６．９，１６．１，６．８，４．９。ＭＳｍ／ｚ（相対積分値）：２８２（Ｍ^＋，２３），２５３（［Ｍ−ＣＨ_３−Ｈ_２Ｏ］^＋，１００）１７１（１２）。Ｃ_１６Ｈ_３０Ｏ_２Ｓｉ［Ｍ］^＋として算出した正確な質量は２８２．２０１５，実測値２８２．２０１２。

（１７Ｚ）−デス−Ａ，Ｂ−８β−［（トリエチルシリル）オキシ］−２１，２６，２７−トリノルコレスタ−１７（２０）−エン−２５−酸（１１）：ｔ−ＢｕＯＫ（０．８９５ｇ、７．９８ｍｍｏｌ）の無水ベンゼン（１５ｍＬ）溶液に、アルゴン雰囲気下、ベンゼン（１０ｍＬ）中の（４−カルボキシブチル）トリフェニルホスホニウムブロミド（１．１８０ｇ、２．６６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１時間還流し、次いで、ケトン９（０．２５０ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）のベンゼン（５ｍＬ）溶液を添加した。この溶液を２４時間還流させた後、この混合物を水で洗浄し、次いで、水相をＨＣｌ（１０％）で酸性にし、酢酸エチルで抽出した（１０ｍＬ×３回）。合わせた有機相を乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（１６％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、酸１１を黄色油状物として０．１９１ｇ（０．５２ｍｍｏｌ、５９％）得た。［α］^２０ _Ｄ＋２．７７（ｃ０．７９，ＣＨＣｌ_３）；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ：０．５６（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ），０．９５（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９２Ｈｚ），１．０８（３Ｈ，ｓ），４．１（１Ｈ，ｍ），４．９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３６Ｈｚ）。^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ：１８０．１，１５１．３，１１７．５，６９．６，５２．７，４４．２，３８．２，３４．５，３３．６，３０．６，２６．７，２５．６，２３．６，１９．９，１７．９，６．９，４．９。ＭＳｍ／ｚ（相対強度）：３６６（Ｍ^＋，３），３５１（［Ｍ−ＣＨ_３］^＋，２）２３４（１００）。Ｃ_２１Ｈ_３７Ｏ_３Ｓｉ［Ｍ−Ｈ］⁻として算出した正確な質量は３６５．２５１２，実測値３６５．２５１８。

（１７Ｚ）−デス−Ａ，Ｂ−８β−［（トリエチルシリル）オキシ］−２１−ノルコレスタ−１７（２０）−エン−２５−オール（１２）：化合物（０．１００ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、０℃で、ＭｅＬｉ（Ｅｔ_２Ｏ中１．６Ｍ、０．３４０ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、氷でクエンチした。この混合物をジエチルエーテルで抽出し（１０ｍＬ×２回）、合わせた抽出物を洗浄し、乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（８％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、メチルエステル０．０７１ｇ（０．１９ｍｍｏｌ、６９％）を得た。メチルエステル（０．０７１ｇ、０．１９ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、−７８℃で、ＭｅＬｉ溶液（Ｅｔ_２Ｏ中１．６Ｍ、０．３４０ｍｌ、０．５６ｍｍｏｌ）を添加した。−７８℃で１時間後、反応混合物を室温にして、さらに１時間撹拌した。反応物を氷でクエンチし、酢酸エチルで抽出した（５ｍＬ×２回）。合わせた有機相を乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（１５％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製し、アルコール４３ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ、６０％）を得た。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：０．５６（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．８９Ｈｚ），０．９５（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９５Ｈｚ），１．０９（３Ｈ，ｓ），１．２０（６Ｈ，ｓ），２．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６．３及び９．７Ｈｚ），４．１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），４．９３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２９Ｈｚ）。^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：１５０．４，１１８．８，７１．０，６９．７，５２．８，４４．２，４３．７，３８．３，３４．６，３０．６，２９．６，２９．２，２７．８，２５．５，２３．７，１９．９，１７．９，６．９，４．９。

（１７Ｚ）−デス−Ａ，Ｂ−２１−ノルコレスタ−１７（２０）−エン−８β，２５−ジオール（１３）：シリルエーテル１２（２８ｍｇ、７３．７μｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中で１Ｍ、０．３６８ｍＬ、０．０９６ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を室温で１２時間撹拌した。反応物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液でクエンチし、水相をジエチルエーテルで抽出した（５ｍＬ×３回）。有機相を乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、ジオール１３を１６ｍｇ（８２％、６０．１μｍｏｌ）得た。［α］^２０ _Ｄ−６．３８（ｃ０．７９，ＣＨＣｌ_３）；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：１．１３（３Ｈ，ｓ），１．２０（６Ｈ，ｍ），２．４３（１Ｈ，ｍ），４．１５（１Ｈ，ｍ），４．９７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２８Ｈｚ）。^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：１４９．４，１１９．３，７１．０，６９．２，５２．２，４３．７，４３．６，３７．９，３３．５，３０．４，２９．２，２７．７，２５．４，２３．２，１９．８，１７．７。ＭＳｍ／ｚ（相対強度）：２６６（Ｍ^＋，３），２４８（［Ｍ−Ｈ_２Ｏ］^＋，８），２３３（［Ｍ−ＣＨ_３−Ｈ_２Ｏ］^＋，１５），１４７（１００）。

１７（Ｚ）−デス−Ａ，Ｂ−２５−（トリエチルシリルオキシ）−２１−ノルコレスタン−１７（２０）−エン−８−オン（１４）。アルコール１３（１６ｍｇ、６０．１μｍｏｌ）の無水ＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）溶液に、室温でＰＤＣ（３４ｍｇ、９０．２μｍｏｌ）を添加した。この反応物をアルゴン雰囲気下で３時間撹拌した後、この溶液を、酢酸エチルを用いてセライトパッドに通した。濾液を濃縮し、Ｓｅｐ−Ｐａｋカートリッジに入れ、酢酸エチル／ヘキサン（２０％酢酸エチル／ヘキサン）で溶出し、ケトンを無色油状物として１２ｍｇ（４５．５μｍｏｌ、７６％）得た。−５０℃に冷却した、ケトン（１２ｍｇ、４５．５μｍｏｌ）の無水ＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）溶液に、２，６−ルチジン（１１μＬ、９．７ｍｇ、９１μｍｏｌ）を添加し、次いで、ＴＥＳＯＴｆ（１６μＬ、１８ｍｇ、６８μｍｏｌ）を添加した。この溶液を、−５０℃で１５分間撹拌し、水（５ｍＬ）を添加した。この混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し（５ｍＬ×３回）、合わせた有機相を、１ＮＮａＯＨ水溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。ケトンを、１０％酢酸エチル／ヘキサン溶媒系を用い、ＨＰＬＣ（９．４ｍｍ×２５ｃｍＺｏｒｂａｘ−Ｓｉｌカラム、４ｍｌ／分）で精製した。純粋なケトン１４１１．６ｍｇ（３０．７μｍｏｌ、６８％）を、無色油状物としてＲ_ｖ＝２０ｍＬで溶出した。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：０．５６（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．８４Ｈｚ），０．８６（３Ｈ，ｓ），０．９４（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ），１．１９（６Ｈ，ｓ），２．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．２８，６．２Ｈｚ）．５．１２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４０Ｈｚ）。

１７（Ｚ）−１α，２５ジヒドロキシ−１７（２０）−エン−２−メチレン−１９，２１−ジノルビタミンＤ_３（１７）。ホスフィンオキシド１５（０．０４７ｇ、８０．７μｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５００μＬ）溶液に、−２５℃で、アルゴン下、撹拌しつつ、シクロヘキサン／エーテル（７０／３０）中、１．２ＭのＰｈＬｉ（７４μＬ、７．５ｍｇ、８８．８μｍｏｌ）をゆっくりと添加した。溶液は深い橙色に変わった。混合物をその温度で２０分間撹拌し、−７８℃まで冷却した。あらかじめ冷却しておいた（−７８℃）、ケトン１４（１１．６ｍｇ、３０．７μｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１００μＬ）溶液を、ゆっくりと添加した。この混合物を、アルゴン雰囲気下、−７８℃で３時間撹拌し、０℃で１８時間撹拌した。酢酸エチルを添加し、有機相をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発させた。残渣をＳｅｐ−Ｐａｋカートリッジに入れ、１％酢酸エチル／ヘキサンで溶出し、１９−ノル保護されたビタミン誘導体１６を得た。この保護されたビタミンを、ヘキサン／ＩＰＡ（９９．９５：０．０５）溶媒系を用いてＨＰＬＣ（９．４ｍｍ×２５ｃｍＺｏｒｂａｘ−Ｓｉｌカラム、４ｍｌ／分）でさらに精製した。純粋な化合物１６、８．４ｍｇ（１１．４μｍｏｌ、３７％）を、無色油状物としてＲ_ｖ＝１６ｍＬで溶出した。ＵＶ（ヘキサン中）λ_ｍａｘ２４３、２５１．８、２６２．２ｎｍ；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：０．０２，０．０５，０．０６，０．０８（それぞれ３Ｈ，それぞれｓ），０．５６（６Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），０．７６（３Ｈ，ｓ），０．８６及び０．９０（それぞれ９Ｈ，それぞれｓ），０．９６（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），１．１９（６Ｈ，ｓ），２．１９（１Ｈ，ｍ），２．３３（１Ｈ，ｍ）２．４７（１Ｈ，ｄｄ，１２．９，４．５６Ｈｚ），２．５３（１Ｈ，ｄｄ，１３．３，５．８８Ｈｚ），２．８１（１Ｈ，ｍ），４．４３（２Ｈ，ｍ），４．９３及び４．９８（１Ｈ及び１Ｈ，それぞれｓ），５．０９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），５．８８及び６．２１（１Ｈ及び１Ｈ，それぞれｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ）；ＭＳｍ／ｚ（相対強度）：ＮｏＭ^＋，６１０（２０），３６６（７），１０３（１００）；Ｃ_３８Ｈ_６７Ｏ_２Ｓｉ_２［Ｍ−Ｃ_６Ｈ_１５ＳｉＯ］^＋として算出した正確な質量は６１１．４６８０，実測値６１１．４６９２。

保護されたビタミン１６（８．４ｍｇ、１１．４μｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（５０μＬ）に溶解し、ＴＢＡＦ（０．１１５ｍＬ、３０ｍｇ、１１４μｍｏｌ）で処理し、暗状態で、室温で一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＳｅｐ−Ｐａｋカートリッジに入れ、３０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出し、脱保護されたビタミン１７を得た。このビタミンは、ＨＰＬＣ（９．４ｍｍ×２５ｃｍＺｏｒｂａｘＳｉｌカラム、３ｍＬ／分）によって、ヘキサン／ＩＰＡ（９０／１０）を溶媒系として用いてさらに精製した。純粋なビタミン１７、３．１ｍｇ（７μｍｏｌ、７０％）を、白色固体としてＲ_ｖ＝４２ｍＬで収集した：ＵＶ（ＥｔＯＨ中）λ_ｍａｘ２４３、２５１．８、２６２．２ｎｍ；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：０．７６（３Ｈ，ｓ），１．２１（６Ｈ，ｓ），２．３０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．２４，７．９Ｈｚ），２．３５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．０，５．７４Ｈｚ），２．５８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．３，３．８Ｈｚ），２．８０（１Ｈ，ｂｒｄ）２．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．１，４．４Ｈｚ），４．４９（２Ｈ，ｍ），５．０７（３Ｈ，ｍ），５．９２及び６．３５（１Ｈ及び１Ｈ，それぞれｄ，Ｊ＝１１．０９Ｈｚ）；ＭＳｍ／ｚ（相対強度）：４００（Ｍ^＋，５），３６７（［Ｍ−Ｈ_２Ｏ−ＣＨ_３］^＋，１）２８５（７），２４９（４０），１９２（１００）。

（ｉ）Ｏ_３，Ｃ_５Ｈ_５Ｎ，ＭｅＯＨ，ＮａＢＨ_４，８１％．（ｉｉ）ＴｓＣｌ，Ｃ_５Ｈ_５Ｎ，９８％．（ｉｉｉ）ＴＥＳＯＴｆ，２，６−ルチジン，ＣＨ_２Ｃｌ_２，８６％．（ｉｖ）ＮａＨＣＯ_３，ＤＭＳＯ，７６％（ｖ）ｔ−ＢｕＯＫ，ｔ−ＢｕＯＨ，Ｏ_２，７１％．（ｖｉ）ｍＣＰＢＡ，ＣＨ_２Ｃｌ_２，６２％．（ｖｉｉ）ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ（９：１），ＮａＯＨ，８３％．（ｖｉｉｉ）ＰＤＣ，ＣＨ_２Ｃｌ_２，８９％（ｉｘ）１０，ｔ−ＢｕＯＫ，Ｃ_６Ｈ_６，５９％（ｘ）ＭｅＬｉ，ジエチルエーテル，０℃ ６９％；ＭｅＬｉ，ジエチルエーテル −７８℃，６０％（ｘｉ）ＴＢＡＦ，ＴＨＦ，８２％（ｘｉｉ）ＰＤＣ，ＣＨ_２Ｃｌ_２，７６％；ＴＥＳＯＴｆ，２，６−ルチジン，ＣＨ_２Ｃｌ_２，６８％（ｘｉｉｉ）１５，ＰｈＬｉ，ＴＨＦ，３７％（ｘｉｖ）ＴＢＡＦ，ＴＨＦ，７０％．

（２−メチレン−（１７Ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３の生物学的活性）
２−位にメチレン基を導入すること、炭素原子１７と２０との間の二重結合、典型的には側鎖の２１位（Ｃ−２１）に位置しているメチル基を、水素原子と置き換えること、および１７位（Ｃ−１７）にＺ配置で接続する側鎖は、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３と比較して、全長組み換えラットビタミンＤ受容体に対するＶｉｔＩＩＺの結合にほとんど影響を及ぼさなかった。化合物ＶｉｔＩＩＺは、標準物質１，２５−（ＯＨ）_２Ｄ_３と比較して、核内ビタミンＤ受容体に対してほぼ同じ親和性で結合した（図１）。これらの結果から、化合物ＶｉｔＩＩＺは、同等の生体活性を有するであろうと予想し得る。しかし、驚くべきことに、化合物ＶｉｔＩＩＺは、固有の生体活性を有し、極めて選択的な類似物質である。

図５は、ＶｉｔＩＩＺが、ｉｎｖｉｖｏで腸のカルシウムを移動させる活性を上昇させる顕著な能力を、用量依存的に有し、天然ホルモンである１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３（１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３）の能力と比較して、腸のカルシウム移動の刺激について、明らかにほぼ同じまたは等しい活性を有することを示す。ＶｉｔＩＩＺは、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３と同様の効力で、腸のカルシウム移動を刺激した。

図４は、ＶｉｔＩＩＺは、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３と比較して、骨のカルシウムを動員する活性も顕著であることを示す。ＶｉｔＩＩＺは、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３と比較して、骨のカルシウムを動員する活性がほぼ同じであるか、または等しい。

従って、図４及び図５は、ＶｉｔＩＩＺが、顕著なカルシウム血症活性を有することを特徴とする可能性を示している。

図２は、ＶｉｔＩＩＺが、ＨＬ−６０細胞分化、すなわち、ＨＬ−６０細胞を単球に分化させることに対し、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３よりも約２５倍以上強力であることを示しており、このことは、乾癬及び癌の治療に対し、特に、白血病、結腸癌、乳癌、皮膚癌、前立腺癌に対し、優れた候補物質にする。それに加えて、ＶｉｔＩＩＺが相対的に高い細胞分化活性を有するため、この化合物は、しわ、十分な皮膚の水分が失われること、すなわち、乾燥肌、十分な皮膚の堅さが失われること、すなわち、皮膚のたるみ、不十分な皮脂分泌を含む種々の皮膚の状態を治療するための治療薬剤を提供する。従って、この化合物の使用は、皮膚を保湿するだけではなく、皮膚の障壁機能も高める。

図３は、骨の細胞において、化合物ＶｉｔＩＩＺが、２４−ヒドロキシラーゼ遺伝子の転写を高めることについて１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３よりも１ｌｏｇ以上、すなわち１０倍以上強力であることを示す。この結果を、図２の細胞分化活性とあわせると、ＶｉｔＩＩＺが、細胞分化、遺伝子転写を引き起こし、細胞成長を抑制するという直接的な細胞活性を有しているため、乾癬に極めて有効である可能性を示唆している。また、これらのデータは、ＶｉｔＩＩＺが、抗癌剤として、特に、白血病、結腸癌、乳癌、皮膚癌、前立腺癌に対して顕著な活性を有する可能性を示している。

ＨＬ−６０分化に対し、ＶｉｔＩＩＺの活性が強いことは、ＶｉｔＩＩＺが、副甲状腺の成長を抑制し、プレプロ副甲状腺遺伝子を抑制する活性がある可能性を示唆している。

（実験法）
（ビタミンＤ受容体の結合）
（試験物質）
（タンパク質源）
全長組み換えラット受容体が、Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）ＣｏｄｏｎＰｌｕｓＲＩＬ細胞で発現され、２種類の異なるカラムクロマトグラフィーシステムを用いて均一になるように精製した。第１の系は、このタンパク質に対し、Ｃ−末端ヒスチジンタグを利用するニッケル親和性樹脂であった。この樹脂から溶出したタンパク質を、イオン交換クロマトグラフィー（Ｓ−ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ）を用いてさらに精製した。精製したタンパク質を等分し、液体窒素で迅速に凍結し、使用するまで−８０℃で保存した。結合アッセイで使用するために、このタンパク質を、０．１％Ｃｈａｐｓ洗浄剤を含むＴＥＤＫ_５０（５０ｍＭＴｒｉｓ、１．５ｍＭＥＤＴＡ、ｐＨ７．４、５ｍＭＤＴＴ、１５０ｍＭＫＣｌ）で希釈した。受容体タンパク質及びリガンド濃度は、受容体に結合する添加された放射能標識されたリガンドが２０％を超えないように最適化された。

（試験薬物）
標識されていないリガンドを、エタノールに溶解し、ＵＶ分光光度法を用いて濃度を決定した（１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３：モル吸光係数＝１８，２００及びλ_ｍａｘ＝２６５ｎｍ；類似物質：モル吸光係数＝４２，０００及びλ_ｍａｘ＝２５２ｎｍ）。放射能標識されたリガンド（^３Ｈ−１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３、約１５９Ｃｉ／ｍｍｏｌｅ）を、最終濃度が１ｎＭになるようにエタノールに添加した。

（アッセイ条件）
放射能標識されたリガンド及び標識されていないリガンドを、最終エタノール濃度が１０％以下になるように希釈したタンパク質１００ｍｃｌに添加し、混合して、結合を平衡状態にするため、氷上で一晩インキュベーションした。次の日に、ヒドロキシルアパタイトスラリー（５０％）１００ｍｃｌをそれぞれの管に添加し、１０分間隔で３０分間混合した。ヒドロキシルアパタイトを、遠心分離によって収集し、次いで、０．５％ＴｉｔｒｏｎＸ−１００を含有するＴｒｉｓ−ＥＤＴＡバッファ（５０ｍＭＴｒｉｓ、１．５ｍＭＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）で３回洗浄した。最後の洗浄が終わったら、ＢｉｏｓａｆｅＩＩシンチレーションカクテル４ｍｌを含有するシンチレーションバイアルにペレットを移し、混合して、シンチレーションカウンターに置いた。放射能標識されたリガンドのみを含む管から、全結合を決定した。

（ＨＬ−６０の分化）
（試験物質）
（試験薬物）
試験薬物を、エタノールに溶解し、ＵＶ分光光度法を用いて濃度を決定した。細胞培養物中に存在する最終エタノール濃度（≦０．２）を変えずに、さまざまな薬物濃度を試験することができるように、段階希釈物を調製した。

（細胞）
ヒト前骨髄球性白血病（ＨＬ６０）細胞を、１０％胎児ウシ血清を含有するＲＰＭＩ−１６４０培地で成長させた。この細胞を、５％ＣＯ_２存在下、３７℃でインキュベーションした。

（アッセイ条件）
ＨＬ６０細胞を、１．２×１０^５細胞／ｍｌで播種した。播種してから１８時間後、２ッ組の細胞を、薬物で処理した。４日後、細胞を採集し、ニトロブルーテトラゾリウム還元アッセイを行った（Ｃｏｌｌｉｎｓｅｔａｌ．、１９７９；Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１４９：９６９−９７４）。分化した細胞の割合は、合計２００細胞を計数し、細胞内に黒〜青色のホルマザンの沈殿を含む数を記録することによって決定した。単球細胞への分化の検証を、食作用活性を測定することによって決定した（データは示されていない）。

（ｉｎｖｉｔｒｏでの転写アッセイ）
転写活性を、ルシフェラーゼレポーター遺伝子の上流の２４−ヒドロキシラーゼ（２４Ｏｈａｓｅ）遺伝子プロモーターで安定にトランスフェクトされたＲＯＳ１７／２．８（骨）細胞で測定された（Ａｒｂｏｕｒｅｔａｌ．、１９９８）。細胞に、さまざまな投与量を与えた。投与の１６時間後、細胞を採集し、ルシフェラーゼ活性を、照度計を用いて測定した。

ＲＬＵ＝相対ルシフェラーゼユニット

（腸のカルシウム移動及び骨のカルシウム動員）
雄の離乳期Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを、Ｄｉｅｔ１１（０．４７％Ｃａ）食餌＋ＡＥＫ油の状態に１週間置き、次いで、Ｄｉｅｔ１１（０．０２％Ｃａ）＋ＡＥＫ油の状態に３週間置いた。次いで、このラットは、０．４７％Ｃａを含む食餌に１週間変更し、次いで、０．０２％Ｃａを含有する食餌に２週間変更した。０．０２％カルシウムの食餌の最後の週に、投与量の投与を開始した。約２４時間の間隔をあけて、４回連続して腹腔内投与を行った。最後の投与から２４時間後、切断された頸部から血液を採集し、血清カルシウム濃度を、骨のカルシウム動員の測定値として測定した。反転腸管法を用いて腸のカルシウム移動を分析するために、最初の腸１０ｃｍも採集した。

（データの解釈）
生物学的知見のまとめ。この化合物は、天然のホルモンとほぼ同じ親和性でＶＤＲに結合するが、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３と比較して、約２５倍以上の細胞分化活性を示し、約１０倍以上のｉｎｖｉｔｒｏでの遺伝子転写活性を示す。この化合物は、ｉｎｖｉｖｏで、天然ホルモンと比較して、ほぼ同じか、または等しいカルシウム動員の活性及び腸のカルシウム移動活性を示し、このことにより、この化合物は、癌、腎性骨ジストロフィー、自己免疫疾患、皮膚の状態又は乾癬のような疾患を治療する潜在的に価値のある薬剤である。この化合物は、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３と比較して、ｉｎｖｉｔｒｏでの効力が顕著に大きいが、この天然ホルモンと比較して、ｉｎｖｉｖｏでは、同様のカルシウム移動活性およびカルシウム動員活性を示す。顕著により高い細胞分化活性および転写活性の効力、及び血中カルシウム量を上げる組織活性に対する同様の効力のため、この化合物は、上述の天然ホルモンよりも安全性の範囲が大きいと考えられる。ＶｉｔＩＩＺは、上に列挙した疾患の治療に有用なだけではなく、上に列挙した疾患の予防にも有用であろう。

（ＶＤＲへの結合、ＨＬ６０細胞分化、及び転写活性）
ＶｉｔＩＩＺ（Ｋ_ｉ＝２ｘ１０^−１０Ｍ）は、全長組み換えラットビタミンＤ受容体に対する結合について、［^３Ｈ］−１，２５−（ＯＨ）_２−Ｄ_３と競合する能力に関し、天然ホルモンである１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３（Ｋ_ｉ＝４ｘ１０^−１１Ｍ）とほぼ同じ活性を有する（図１）。ＶｉｔＩＩＺは、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３（ＥＣ_５０＝２ｘ１０^−９Ｍ）と比較して、ＨＬ−６０の細胞分化を促進する能力（有効性又は効力）において、約２５倍以上の活性を示す（ＥＣ_５０＝８ｘ１０^−１１Ｍ）（図２を参照）。また、化合物ＶｉｔＩＩＺ（ＥＣ_５０＝３ｘ１０^−１１Ｍ）は、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３（ＥＣ_５０＝２ｘ１０^−１０Ｍ）よりも、骨細胞における転写活性が約１０倍以上大きい（図３を参照）。これらの結果は、ＶｉｔＩＩＺが、細胞分化、遺伝子転写を引き起こし、細胞成長を抑制するという直接的な細胞活性を有しているため、乾癬に極めて有効である可能性を示唆している。また、これらのデータは、ＶｉｔＩＩＺが、抗癌剤として、特に、白血病、結腸癌、乳癌、皮膚癌、前立腺癌に対して顕著な活性を有する可能性を示しており、さらに、乾燥肌（皮膚の水分が失われること）、過度な皮膚のたるみ（不十分な皮膚の堅さ）、不十分な皮脂分泌、しわのような皮膚の状態に対して顕著な活性を有する可能性を示している。また、ＶｉｔＩＩＺは、二次的な副甲状腺機能亢進症を抑制することに非常に活性があると予想されるであろう。

ビタミンＤ欠損動物における、骨からのカルシウム動員及び腸のカルシウム吸収。低カルシウムの食餌（０．０２％）を与えたビタミンＤ欠損ラットを使い、腸及び骨におけるＶｉｔＩＩＺ及び１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３の活性を試験した。予想されたように、天然のホルモン（１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３）は、すべての投与量で血清カルシウム濃度を増加させた（図４）。図４に報告されている試験は、ＶｉｔＩＩＺが、骨からカルシウムを動員する顕著な活性を有することを示す。８７ｐｍｏｌ／日及び７８０ｐｍｏｌ／日のＶｉｔＩＩＺを連続して４日間投与すると、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３とほぼ同じか、または等しい骨カルシウム動員活性を生じ、ＶｉｔＩＩＺの量を２，３４０ｐｍｏｌ／日まで増やしても、なんら実質的なさらなる効果はなかった。

腸のカルシウム移動を、反転腸管法を用いて、同じ動物群で評価した（図５）。これらの結果は、化合物ＶｉｔＩＩＺが、２９ｐｍｏｌ／日で投与されると、腸のカルシウム移動を促進することを示し、その活性は、試験した投与量で同様の顕著な増加を提供する１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３とほぼ同じであるか、または等しい。非常に顕著な腸カルシウム移動活性が記録されたのは、２，３４０ｐｍｏｌ／日のＶｉｔＩＩＺを投与した場合のみであった。従って、ＶｉｔＩＩＺは、推奨される、より低投与量における、腸のカルシウムを移動する活性は１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３と同様であると結論づけることができるだろう。

これらの結果は、ＶｉｔＩＩＺが、本明細書に記載されるような多くのヒトの治療のために、優れた候補物質であることを示しており、腎性骨ジストロフィー、自己免疫疾患、癌、多くの種類の皮膚状態、乾癬の二次的な副甲状腺機能亢進症を抑制するといった多くの状況で特に有用な可能性があることを示している。ＶｉｔＩＩＺは、乾癬を治療するのに優れた候補物質である。なぜなら、（１）ＶｉｔＩＩＺは、顕著なＶＤＲ結合活性、転写活性、細胞分化活性を有しており、（２）ＶｉｔＩＩＺは、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３とは異なり、比較的低い用量で高カルシウム血症の弊害がほとんどなく、（３）ＶｉｔＩＩＺは、簡単に合成されるからである。ＶｉｔＩＩＺは、ビタミンＤ受容体に比べて顕著な結合活性を有しているが、血清カルシウムを上げる能力は比較的低く、このことは、腎性骨ジストロフィーの二次的な副甲状腺機能亢進症の治療に特に有用である可能性がある。

また、これらのデータは、本発明の化合物ＶｉｔＩＩＺが、免疫系の失調によって特徴づけられるヒトの障害、例えば、多発性硬化症、ループス、糖尿病、移植片対宿主拒絶反応、臓器移植の拒絶反応を含む自己免疫疾患の治療及び予防に特に適しており、さらに、関節リウマチ、喘息のような炎症性疾患、セリアック病、潰瘍性大腸炎、クローン病のような炎症性腸疾患の治療に特に適していることも示している。座瘡、脱毛症、高血圧は、本発明の化合物ＶｉｔＩＩＺで治療可能な他の状態である。

本発明の式Ｉの化合物、特に式Ｉａの化合物は、肥満を予防するか、又は治療し、脂肪細胞の分化を阻害し、ＳＣＤ−１遺伝子の転写を阻害し、及び／又は、動物対象の体脂肪を減らすことにも有用である。従って、ある実施形態では、肥満を予防するか、又は治療する方法、脂肪細胞の分化を阻害する方法、ＳＣＤ−１遺伝子の転写を阻害する方法、及び／又は動物対象の体脂肪を減らす方法は、動物対象に、式Ｉの１つ以上の化合物、又は式Ｉの１つ以上の化合物を含む医薬組成物を有効量で投与することを含む。化合物又は医薬組成物を対象に投与すると、脂肪細胞の分化を阻害し、遺伝子の転写を阻害し、及び／又は動物対象において体脂肪を減らす。動物は、ヒトであってもよく、イヌ又はネコのような飼育されている動物、又は農業用動物であってもよく、特に、ヒトが消費するための肉を提供する動物、例えば、ニワトリ、シチメンチョウ、キジ又はウズラのような鳥類、ウシ、ヒツジ、ヤギ又はブタのような動物であってもよい。

予防及び／又は治療の目的で、式Ｉに定義される本発明の化合物、特にＶｉｔＩＩＺは、医薬用途のために、当該技術分野で既知の従来の方法に従って、無害な溶媒の溶液、又は適切な溶媒又は担体のエマルション、懸濁物又は分散物、又は固体担体とともに丸薬、錠剤又はカプセルとして配合されてもよい。また、任意のこのような配合物は、安定化剤、抗酸化剤、結合剤、着色剤、乳化剤又は味覚改質剤のような、他の医薬的に許容され、毒性のない賦形剤を含有していてもよい。

式Ｉの化合物、特にＶｉｔＩＩＺは、経口、局所、非経口、直腸、経鼻、舌下又は経皮で投与されてもよい。この化合物は、注射によって、又は静脈内注入又は適切な滅菌溶液によって、又は、液体又は固体の投薬形態で、消化管を経て、又は、クリーム、軟膏、パッチ又は経皮塗布するのに適した同様のビヒクルの形態で、有益に投与される。化合物Ｉ、特にＶｉｔＩＩＺの投与量が１日あたり０．０１μｇ〜１０００μｇ、好ましくは、１日あたり約０．１μｇ〜約５００μｇであることが、予防及び／又は治療目的で適しており、このような投与量は、当該技術分野では十分に理解されているように、治療すべき疾患、疾患の重篤度、対象の応答によって調整される。この化合物が作用について特異性を示すため、それぞれを単独で適切に投与してもよく、骨中の無機質の動員及びカルシウム移動の刺激が異なるレベルであることが有益であることが分かっている状況では、別の活性があるビタミンＤ化合物、例えば、１α−ヒドロキシビタミンＤ_２又はＤ_３、すなわち１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３の投与量を段階的に変えて併用投与してもよい。

上述の治療で使用するための組成物は、活性成分として上の式Ｉ及びＩａによって定義されるような有効な量の化合物Ｉ、特にＶｉｔＩＩＺと、適切な担体とを含む。本発明に従って使用するための、このような化合物の有効な量は、組成物１ｇあたり、約０．０１μｇ〜約１０００μｇ、好ましくは、組成物１ｇあたり、約０．１μｇ〜約５００μｇであり、約０．０１μｇ／日〜約１０００μｇ／日の投与量で、好ましくは、約０．１μｇ／日〜約５００μｇ／日の投与量で、局所、経皮、経口、直腸、経鼻、舌下、又は非経口で投与されてもよい。

化合物Ｉ、特にＶｉｔＩＩＺは、クリーム、ローション、軟膏、局所用パッチ、丸薬、カプセル又は錠剤、坐剤、エアロゾルとして配合されてもよく、又は、医薬的に無害で許容される溶媒又は油の溶液、エマルション、分散物又は懸濁物として液体形態で配合されてもよく、このような製剤は、それに加えて、安定化剤、酸化防止剤、乳化剤、着色剤、結合剤又は味覚改質剤のような、他の医薬的に無害又は有益な成分を含有していてもよい。

化合物Ｉ、特にＶｉｔＩＩＺは、前骨髄球から正常なマクロファージへの分化に影響を与えるのに十分な量で投与されるのが有益な場合がある。上述のような投与量が適しており、与えられている量は、当該技術分野で十分に理解されているように、疾患の重篤度、対象の状態及び反応に従って調整すべきであることが理解される。

本発明の配合物は、従って医薬的に許容される担体と組み合わせて、活性成分を含み、場合により、他の治療成分を含む。担体は、配合物の他の成分と適合性を有し、受容者に有害ではないという観点で、「許容される」ものでなければならない。

経口投与に適した本発明の配合物は、それぞれ所定量の活性成分を含むカプセル、小袋、錠剤又は薬用キャンディーのような別個の投与形態、粉末又は顆粒の形態、水系液体又は非水系液体の溶液又は懸濁物の形態、又は、水中油エマルション又は油中水エマルションの形態であり得る。

直腸投与のための配合物は、活性成分と、ココアバターのような担体とが組み込まれた坐剤の形態、または浣腸剤の形態であってもよい。

非経口投与に適した配合物は、便宜上、油系又は水系の活性成分の滅菌製剤を含み、好ましくは、受容者の血液と等張性である。

局所投与に適した配合物は、塗布薬、ローション、膏薬、水中油エマルション又は油中水エマルション、例えば、クリーム、軟膏又はペースト、又は、溶液又は懸濁物、例えば、点薬、又はスプレーのような、液体又は半液体の製剤を含む。

経鼻投与の場合、粉末の吸入、スプレー缶、ネブライザ又はアトマイザを用いて分注する自己噴射式配合物又はスプレー式配合物を用いてもよい。配合物が分注される場合、好ましくは、粒径は、１０〜１００μの範囲である。

配合物は、便宜上、投薬単位形態で存在していてもよく、医薬分野でよく知られている任意の方法によって調製することができる。用語「投薬単位」とは、単位を意味し、すなわち、活性成分を、それ自体で含むか、又は、医薬品用の固体又は液体の希釈剤又は担体とともに混合物として含む、物理的及び化学的に安定な単位投与量として患者に投与することが可能な１つの投与量を意味する。

Claims

下式を有する化合物であって、

式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される化合物であって、
前記ヒドロキシ保護基はアルコキシカルボニル、アシル、アルキルシリル、アルキルアリールシリル、アルコキシアルキル、ベンジルオキシカルボニル、およびアリルオキシカルボニルからなる群から選択される化合物。
Ｘ_３が水素である、請求項１に記載の化合物。
Ｘ_１が水素である、請求項１に記載の化合物。
Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３がすべてｔ−ブチルジメチルシリルである、請求項１に記載の化合物。
下式を有する、２−メチレン−（１７Ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３。
請求項１又は５に記載の化合物の少なくとも一つの有効量を、医薬的に許容される賦形剤とともに含有する、医薬組成物。
前記有効量が、前記組成物１ｇあたり０．０１μｇ〜１０００μｇを含む、請求項６に記載の医薬組成物。
乾癬を治療するための医薬組成物であって、有効量の下式を有する化合物を含み、

式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される医薬組成物であって、
前記ヒドロキシ保護基はアルコキシカルボニル、アシル、アルキルシリル、アルキルアリールシリル、アルコキシアルキル、ベンジルオキシカルボニル、およびアリルオキシカルボニルからなる群から選択される医薬組成物。
白血病、結腸癌、乳癌、皮膚癌又は前立腺癌からなる群より選択される疾患を治療するための医薬組成物であって、有効量の下式を有する化合物を含み、

式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される医薬組成物であって、
前記ヒドロキシ保護基はアルコキシカルボニル、アシル、アルキルシリル、アルキルアリールシリル、アルコキシアルキル、ベンジルオキシカルボニル、およびアリルオキシカルボニルからなる群から選択される医薬組成物。
多発性硬化症、ループス、糖尿病、移植片対宿主拒絶反応、臓器移植の拒絶反応からなる群より選択される自己免疫疾患を治療するための医薬組成物であって、有効量の下式を有する化合物を含み、

式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される医薬組成物であって、
前記ヒドロキシ保護基はアルコキシカルボニル、アシル、アルキルシリル、アルキルアリールシリル、アルコキシアルキル、ベンジルオキシカルボニル、およびアリルオキシカルボニルからなる群から選択される医薬組成物。
関節リウマチ、喘息、炎症性腸疾患からなる群より選択される炎症性疾患を治療するための医薬組成物であって、有効量の下式を有する化合物を含み、

式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される医薬組成物であって、
前記ヒドロキシ保護基はアルコキシカルボニル、アシル、アルキルシリル、アルキルアリールシリル、アルコキシアルキル、ベンジルオキシカルボニル、およびアリルオキシカルボニルからなる群から選択される医薬組成物。
しわ、十分な皮膚の堅さが失われること、十分な皮膚の水分が失われること、不十分な皮脂分泌からなる群より選択される皮膚の状態を治療するための医薬組成物であって、有効量の下式を有する化合物を含み、

式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される医薬組成物であって、
前記ヒドロキシ保護基はアルコキシカルボニル、アシル、アルキルシリル、アルキルアリールシリル、アルコキシアルキル、ベンジルオキシカルボニル、およびアリルオキシカルボニルからなる群から選択される医薬組成物。
腎性骨ジストロフィーを治療するための医薬組成物であって、有効量の下式を有する化合物を含み、

式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される医薬組成物であって、
前記ヒドロキシ保護基はアルコキシカルボニル、アシル、アルキルシリル、アルキルアリールシリル、アルコキシアルキル、ベンジルオキシカルボニル、およびアリルオキシカルボニルからなる群から選択される医薬組成物。
動物の肥満を治療するか、又は予防する、脂肪細胞の分化を阻害する、ＳＣＤ−１遺伝子の転写を阻害する、及び／又は体脂肪を減らすための医薬組成物であって、有効量の下式を有する化合物を含み、

式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｘ_３は、同じであっても異なっていてもよく、それぞれ、水素又はヒドロキシ保護基から選択される医薬組成物であって、
前記ヒドロキシ保護基はアルコキシカルボニル、アシル、アルキルシリル、アルキルアリールシリル、アルコキシアルキル、ベンジルオキシカルボニル、およびアリルオキシカルボニルからなる群から選択される医薬組成物。
前記化合物の投与方法が、経口投与、非経口投与、経皮投与、直腸投与、経鼻投与、舌下投与からなる群より選択される、請求項８〜１４の何れか１項に記載の医薬組成物。
前記化合物の投与方法が局所投与である、請求項８又は１２に記載の医薬組成物。
前記化合物が、０．０１μｇ／日〜１０００μｇ／日の用量で包含される、請求項８〜１４の何れか１項に記載の医薬組成物。
前記化合物が、下式を有する、２−メチレン−（１７Ｚ）−１７（２０）−デヒドロ−１９，２１−ジノル−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３である、請求項８〜１４の何れか１項に記載の医薬組成物。