JP5600065B2 - オキシダント耐性アポリポ蛋白質a−1および類似ペプチド - Google Patents
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Description
本出願は、2007年10月23日出願の、米国特許仮出願第60/981,887号の優先権を主張する。なお、この特許出願の主題を参照することにより本明細書に含める。
DEPPQSPXDR VKDLATVYVD VLKDSGRDYV SQFEGSALGK QLNLKLLDNX DSVTSTFSKL REQLGPVTQE FXDNLEKETE GLRQEMSKDL EEVKAKVQPY LDDFQKKXQE EMELYRQKVE PLRAELQEGA RQKLHELQEK LSPLGEEMRD RARAHVDALR THLAPYSDEL RQRLAARLEA LKENGGARLA EYHAKATEHL STLSEKAKPA LEDLRQGLLP VLESFKVSFL SALEEYTKKL NTQ(配列番号1)
上式において、Xは、トリプトファン残基であるか、またはオキシダント耐性残基(例えば、フェニルアラニン)であり、4個のXの内少なくとも一つは、オキシダント耐性残基である。他の例では、配列番号1のXの内少なくとも二つは、オキシダント耐性残基であり、配列番号1のXの内少なくとも三つは、オキシダント耐性残基であり、あるいは、これらのXの四つ全てがオキシダント耐性残基である。
DEPPQSPXDR VKDLATVYVD VLKDSGRDYV SQFEGSALGK QLNLKLLDNX DSVTSTFSKL REQLGPVTQE FXDNLEKETE GLRQEMSKDL EEVKAKVQPY LDDFQKKXQE EMELYRQKVE PLRAELQEGA RQKLHELQEK LSPLGEEMRD RARAHVDALR THLAPYSDEL RQCLAARLEA LKENGGARLA EYHAKATEHL STLSEKAKPA LEDLRQGLLP VLESFKVSFL SALEEYTKKL NTQ(配列番号2)
上式において、Xは、トリプトファンであるか、またはオキシダント耐性残基(例えば、フェニルアラニン)であり、少なくとも一つのXは、オキシダント耐性残基である。
DEPPQSPXDR VKDLATVYVD VLKDSGRDYV SQFEGSALGK QLNLKLLDNX DSVTSTFSKL REQLGPVTQE FXDNLEKETE GLRQEMSKDL EEVKAKVQPY LDDFQKKXQE EMELYRQKVE PLRAELQEGA RQKLHELQEK LSPLGEEMRD CARAHVDALR THLAPYSDEL RQRLAARLEA LKENGGARLA EYHAKATEHL STLSEKAKPA LEDLRQGLLP VLESFKVSFL SALEEYTKKL NTQ(配列番号3);
上式において、Xは、トリプトファンであるか、またはオキシダント耐性残基(例えば、フェニルアラニン)であり、少なくとも一つのXは、オキシダント耐性残基(例えば、フェニルアラニン)によって置換される。
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-A-F-(配列番号4)、
D-X-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-A-F-(配列番号5)、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-(配列番号6)、
D-X-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-(配列番号7)、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-F-F-(配列番号8)、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-F-F-E-K-F-K-E-F-F-(配列番号9)、
D-X-F-K-A-F-Y-D-K-F-F-E K-F-K-E-F-F-(配列番号10)、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-A-F-(配列番号11)、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-A-F-(配列番号12)、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-L-K-E-F-F-(配列番号13)、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-F-F-(配列番号14)、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-F-F-(配列番号15)、
E-X-L-K-L-F-Y-E-K-V-L-E-K-F-K-E-A-F-(配列番号16)、
E-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-(配列番号17) 、
E-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-F-F-(配列番号18)、
E-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-A-F-(配列番号19)、
E-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-L-K-E-F-F-(配列番号20)、
E-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-F-F-(配列番号21)、
E-X-L K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-F-F-(配列番号22)、
D-X-L-K-A-L-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-A-L-(配列番号23)、
D-X-F-K-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-L-K-E-F-F-(配列番号24)、
D-X-F-K-A-F-Y-E-K-F-F-E-K-F-K-E-F-F-(配列番号25)、
E-X-L-K-A-L-Y-E-K-V-A-E-K-L-K-E-A-L-(配列番号26)、
E-X-L-K-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-L-K-E-A-F-(配列番号27)、
E-X-F-K-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-L-K-E-F-F-(配列番号28)、
E-X-L-K-A-F-Y-E-K-V-F-E-K-F-K-E-F-F-(配列番号29)、
E-X-L-K-A-F-Y-E-K-F-F-E-K-F-K-E-F-F-(配列番号30)、
E-X-F-K-A-F-Y-E-K-F-F-E-K-F-K-E-F-F-(配列番号31)、
D-F-L-K-A-X-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-A-X-(配列番号32)、
E-F-L-K-A X-Y-E-K-V-A-E-K-L-K-E-A-X-(配列番号33)、
D-F-X-K-A-X-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-X-X-(配列番号34)、
E-F-X-K-A-X-Y-E-K-V-A-E-K-L-K-E-X-X-(配列番号35)、
D-K-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-X-A-K-E-A-F-(配列番号36)、
D-K-X-K-A-V-Y-D-K-F-A-E-A-F-K-E-F-L-(配列番号37)、
E-K-L-K-A-F-Y-E-K-V-F-E-X-A-K-E-A-F-(配列番号38)、
E-K-X-K-A-V-Y-E-K-F-A-E-A-F-K-E-F-L-(配列番号39)、
D-X-L-K-A-F-V-D-K-F-A-E-K-F-K-E-A-Y-(配列番号40)、
E-K-X-K-A-V-Y-E-K-F-A-E-A-F-K-E-F-L-(配列番号41)、
D-X-L-K-A-F-V-Y-D-K-V-F-K-L-K-E-F-F-(配列番号42)、
E-X-L-K-A-F-V-Y-E-K-V-F-K-L-K-E-F-F-(配列番号43)、
D-X-L-R-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-A-F-(配列番号44)、
E-X-L-R-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-L-K-E-A-F-(配列番号45)、
D-X-L-K-A-F-Y-D-R-V-A-E-K-L-K-E-A-F-(配列番号46)、
E-X-L-K-A-F-Y-E-R-V-A-E-K-L-K-E-A-F-(配列番号47)、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-R-L-K-E-A-F-(配列番号48)、
E-X-L-K-A-F-Y-E-K-V-A-E-R-L-K-E-A-F-(配列番号49) 、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-R-E-A-F-(配列番号50) 、
E-X-L-K-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-L-R-E-A-F-(配列番号51) 、
D-X-L-K-A-F-Y-D-R-V-A-E-R-L-K-E-A-F-(配列番号52) 、
E-X-L-K-A-F-Y-E-R-V-A-E-R-L-K-E-A-F-(配列番号53) 、
D-X-L-R-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-R-E-A-F-(配列番号54) 、
E-X-L-R-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-L-R-E-A-F-(配列番号55) 、
D-X-L-R-A-F-Y-D-R-V-A-E-K-L-K-E-A-F-(配列番号56) 、
X-L-R-A-F-Y-E-R-V-A-E-K-L-K-E-A-F-(配列番号57) 、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-R-L-R-E-A-F-(配列番号58) 、
E-X-L-K-A-F-Y-E-K-V-A-E-R-L-R-E-A-F-(配列番号59) 、
D-X-L-R-A-F-Y-D-K-V-A-E-R-L-K-E-A-F-(配列番号60) 、
E-X-L-R-A-F-Y-E-K-V-A-E-R-L-K-E-A-F-(配列番号61) 、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-A-F-P-D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-A-F(配列番号62) 、
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-F-F-P-D-X-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-F-F(配列番号63) 、
D-X-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-A-F-P-D-X-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-A-F(配列番号64) 、
D-K-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-X-A-K-E-A-F-P-D-K-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-X-L-K-E-A-F(配列番号65) 、
D-K-X-K-A-V-Y-D-K-F-A-E-A-F-K-E-F-L-P-D-K-X-K-A-V-Y-D-K-F-A-E-A-F-K-E-F-L(配列番号66) 、
D-X-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-P-D-X-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F(配列番号67) 、
D-X-L-K-A-F-V-Y-D-K-V-F-K-L-K-E-F-F-P-D-X-L-K-A-F-V-Y-D-K-V-F-K-L-K-E-F-F(配列番号68)、および
D-X-L-K-A-F-Y-D-K-F-A-E-K-F-K-E-F-F-P-D-X-L-K-A-F-Y-D-K-F-A-E-K-F-K-E-F-F(配列番号69)、
上式において、Xは、トリプトファンであるか、またはオキシダント耐性残基(例えば、フェニルアラニン)であり、各配列において、少なくとも一つのXは、オキシダント耐性残基によって置換される。
<質量分析>
ヒトのアテローム由来のApoA1を、以前報告したように免疫アフィニティークロマトグラフィーによって単離した。ApoA1は、グリシンバッファー(pH2.5)に溶出し、直接トリプシン消化させるか、または、先ず、SDS-PAGEによって分離し、ゲル内トリプシン消化を行った。質量分析を行い、以前に記載したように、コリジョン誘発解離(CID)スペクトラムを得た。免疫アフィニティークロマトグラフィーによって単離された、ヒトアテロームから得たApoA1、または、健康なボランチアの血漿から得たApoA1について、以前記載したように、重同位元素の内部標準と共に酸加水分解後、クロロトリプシンおよび2-アミノアジピン酸分析による二重アッセイを行なった。
トリプトファン(8, 50, 72, 108)およびメチオニン(86, 112, 148)残基に対する点突然変異は、Stratageneから市販されるQuickChange Mutagenesis Kitを用いて実行し、DNA配列決定によって確認した。プラスミドは、大腸菌BL21株(DE-3) pLysS, InJに形質導入し、ApoA1の発現および精製は、以前の記載通りに行った。rh-ApoA1は、PBSまたはMPO反応バッファー(60 mmol/Lのリン酸ナトリウム、100 mmol/Lの塩化ナトリウム、100 μmol/Lのジエチレントリアミン五酢酸、pH7.0)に対して徹底的に透析してイミダゾールの全ての痕跡を取り除き、SDS-PAGEによって分析したところ、純度>95%であることが判明した。TrpおよびMet置換は、蛋白質のOD280、およびBCAまたはLowryの蛋白質アッセイに対する反応性を変えてしまうので、蛋白質濃度は、以前に記載したように、ヒト血漿由来ApoA1(Biodesign)標準による、o-フタールジアルデヒド(OPA)アッセイを用いて、遊離アミンに基づいて定量した。rh-ApoA1の最初のMetおよびHisタグの切断は、ギ酸処理によって実行し、次いで高速液体クロマトグラフィー(FPLC)精製を行った。
ヒト血漿由来のApoA1を、PBSに対して透析し、0.5 mg/mLまで希釈した。リシン還元性メチル化を以前の記載の通りに行った。リシン修飾の程度は、OPAアッセイによって定量した。次に、ApoA1をMPO反応バッファーに対して透析し、リシン修飾ApoA1の蛋白質濃度をBCA試薬を用いて定量した。
以前に記載したように調製した、最終濃度57 nmol/LのMPOを、あらかじめMPO反応バッファーに対して徹底的に透析した100 μg/mL (3.5 μmol/L)のApoA1にに加えた。反応は、過酸化水素を、4分液においてApoA1に対し種々のモル比で、37℃、15分間隔で加えることによって起動し、インキュベーションを90分持続し、その90分時点で、2 mmol/LのL-メチオニオンを加えて反応を停止させた。ApoA1の化学的修飾のために、次亜塩素酸ナトリウム(NaOCl)を、4分液において種々の濃度で、MPOバッファーに溶解した100 μg/mLのApoA1に対し37℃、15分間隔で加えた。合計60分のインキュベーション時間後、2 mmol/LのL-メチオニオンを加えて反応を停止させた。
RAW 264.7マウスのマクロファージ細胞を、[3H]コレステロールで標識し、以前に記載した通り、ABCA1活性を誘発するために、0.3 mmol/L 8Br-cAMPで処理した。この細胞を洗浄し、無血清培地中で、0.3 mmol/L 8Br-cAMPの存在下、および、種々のApoA1調剤の存在または不在下に、4時間チェースした。チェース用培地中の放射活性を、軽い遠心で残渣を沈殿させてから定量した。細胞中の放射活性を、ヘキサン:イソプロパノール(3:2)で抽出し、シンチレーションバイアル中の溶媒を蒸発させ、次いでカウンティングを行うことによって定量した。コレステロール流出パーセントは、100X(培地のdpm)/(培地のdpm + 細胞のdpm)として計算した。
ApoA1の脂質結合活性は、以前に記載した通り、ヒトの低密度リポ蛋白質の、フォスフォリパーゼC(PLC)介在性凝集に対する抑制に基づいて評価した。本発明者らは以前に、このアッセイは、DMPC分散解除アッセイによって観察されるものと同様の結果を与えるが、このアッセイの方がより感受性が高く、必要とされるApoA1はより少ないことを示した。このアッセイで使用されるApoA1の最終濃度は12.5 μg/mLであるが、これは、LDL凝集の初期速度を約75%減少させるのに十分であった。
レーン当たり250 gのApoA1を、SDSサンプルバッファーにおいて変性し、SDSの存在下10%トリスグリシンゲルにおいて泳動させ、問題の蛋白質をポリビニリデンフルオリド(PVDF)膜に移送した。この膜を、ヤギ抗ヒトApoA1一次抗体(1:1000希釈、DiaSorin)、ウサギ抗ヤギHRP結合抗体(1:1000希釈)によって順次プローブし、ApoA1は、強化化学発光基質によって可視化した。
<ヒトアテロームにおけるApoA1修飾>
本発明者らは、ヒトのアテローム細胞から単離されたApoA1が、修飾されたトリプトファン、メチオニン、およびリシン残基を含むかどうかを決定した。タンデム質量分析を用いて、ApoA1の4つのトリプトファンの位置8、50、72、および108のうち、全てにおいてモノヒドロキシトリプトファン残基を、位置108においてジヒドロキシトリプトファンを、検出することができた(図1A〜F)。本発明者らは以前、インビトロでMPOで修飾されたApoA1の残基W72において、モノ-およびジ-ヒドロキシトリプトファンを特定した(Peng, D.Q., Wu, Z., Brubaker, G., Zheng, L., Settle, M., Gross, E., Kinter, M., Hazen, S.L. and Smith, J.D. (2005) J Biol Chem 280, 33775-33784)。それに加えて本発明者らは、残基48および112においてメチオニンスルフォキシドを検出した(図1D,E)。MPO生成HOClによるリシン修飾を探すために、本発明者らは、安定同位元素希釈HPLCとオンラインタンデム質量分析を用いて、MPO生成オキシダントによるリシン酸化の最終産物である2-アミノアジピン酸を定量した。6名の健康な志願者の血漿から単離されたApoA1では、2-アミノアジピン酸レベルは低いが検出可能であった。一方、6個のヒトのアテロームサンプルから単離されたApoA1では、その平均レベルが著明に、約16倍も上昇していた(図2、両側t-検定でp=0.005)。したがって、ApoA1のトリプトファン、メチオニン、およびリシンの酸化は、ヒトのアテロームにおいて生理的に起こる。そこで本発明者らは、このような修飾の内のどれが、細胞コレステロール受容能の減退をもたらすApoA1の機能不全をもたらすのかを決定することを試みた。
ApoA1の両親媒性構造において、21のリシン残基は大部分が、疎水面の両側とその近接に局在する。本発明者らは以前に、ApoA1リシン残基は、MPOによる修飾を受ける可能性があるということ、および、ApoA1の陽性電荷を変えるようなApoA1リシン残基の広範な化学的修飾を行うと、ApoA1のコレステロールアクセプタ活性の消失を招くということを証明していたので、MPOによるリシン修飾は、MPO誘発性ApoA1機能喪失の原因となる有力な候補であると予想された。しかしながら同時に本発明者らは、リシンの陽性電荷を保存する還元性メチル化によるリシン修飾では、ApoA1機能のごく僅かな減退しかもたらされないことも見出していた。ApoA1に対し、92%のリシン修飾をもたらす還元性メチル化を行うか、または対照インキュベーションを行い、MPO反応バッファーに対して徹底的に透析した。修飾反応は、触媒量のMPOを用い、H2O2:ApoA1のモル比を漸増しながら行った。反応産物は、ABCA1を誘発するようにあらかじめcAMP類縁体によって処理した、コレステロール標識RAW264マクロファージを用いて、コレステロールアクセプタ活性について定量した。修飾反応においてH2O2が不在の場合には、メチル化ApoA1および対照の非メチル化ApoA1は、強力で、同等な、ABCA1依存性コレステロールアクセプタ活性を示した。H2O2用量を増していくと、メチル化および対照の両ApoA1サンプルのコレステロールアクセプタ活性は、同様に低下した(図3)。さらに、これらの調製品のアルファヘリックス含量をCDによって推定したが、メチル化および対照ApoA1調製品の両方とも、アルファヘリックス含量のMPO/H2O2用量依存性低減に対して同様に感受性を持っていた。リシンの一次アミンの還元性メチル化による三次アミンへの変換は、その化学的反応性は下げるが、ApoA1機能の保護をもたらさなかったので、MPOによるApoA1のリシン修飾は、ApoA1の機能喪失の原因とは考えられない。
次に本発明者らは、以前、MPO誘発によるApoA1機能の喪失に関与するとされた、3個のApoA1メチオニン残基に注意を向けた。三つ全てのメチオニンをバリンで置換するために、本発明者らは、ヒトの組み換えApoA1 (rh-ApoA1)を用いた。これは、N末端にもう一つのメチオニン開始コドンおよび6-hisタグを加える。本発明者らは、以前に、rh-ApoA1は、そのコレステロール活性、脂質結合活性、および、MPO介在性機能喪失において、血漿由来ApoA1と同様に振舞うことを明らかにした。部位特異的突然変異導入を用いて、本発明者らは、3個の内部メチオニンがバリンに変換された蛋白質をコードするApoA1発現構築体を創出し、これを、rh-ApoA1 3MV(3個のメチオニンがバリンへ)と呼んだ。開始メチオニンは置換することができない。しかしながら、このメチオニンおよびhisタグは、以前記載したように、ギ酸インキュベーションによって化学的に切断することが可能である(Ryan, R. O., Forte, T. M., and Oda, M. N. (2003) Protein Expr. Purif. 27, 98-103)。これは、位置2におけるグルタミン酸のアスパラギン酸による置換が、hisタグの近傍に、特異なギ酸感受性のAsp-Proジペプチドを生成するためである。本発明者らは、rh-ApoA1 3MVは、開始MetおよびHisタグが元のままであろうが、取り除かれようが、野生型rh-ApoA1と同様のABCA1-依存性コレステロールアクセプタ活性を持つことを確定した。さらに、rh-ApoA1 3MVは、N-末端メチオニンが有ろうと無かろうと、および野生型rh-ApoA1も、高用量の(H2O2:apoAI=1.5:1)MPO介在性コレステロールアクセプタ活性の喪失に対し等しく感受性を持っていた(図4A)。rh-ApoA1および3MV変異種のMPO修飾を、H2O2:apoAIモル比を中程度に変えて実行したところ、3MV変異種の方が、低いモル比ではコレステロールアクセプタ活性に対しより感受性を持っていた(図4B)。例えば、1.4のH2O2:apoAI比率では、野生型ApoA1のコレステロールアクセプタ活性の消失は無視できるほどであるのに、一方、3MV変異種の方は、そのコレステ
ロールアクセプタ活性の約半分を失う。したがって、本発明者らは、ApoA1における3個のメチオニン残基は、ApoA1機能の酸化的傷害に係わるのではなく、実際には、無害にオキシダントを吸収することによって保護的役割を果たすことを見出した。
次に本発明者らは、4個のトリプトファン残基のそれぞれを、ロイシン(rh-ApoA1 4WL)か、またはフェニルアラニン(rh-ApoA1 4WF)に変えることによって、ApoA1トリプトファン残基の関与を調べた。トリプトファン残基の芳香族性は、ApoA1のコレステロールアクセプタ活性にとって決定的重要性を持つと思われる。なぜなら、4WL変異種は、広い範囲のApoA1用量に亘って行われたコレステロール流出実験においてこの活性の大部分を失ったのに対し、4WF変異種の方はこの活性を保持していたからである(図5A)。本発明者らは、K2dアルゴリスムを用いたCDにより、これらの蛋白質のアルファヘリックスの予想含量を調べ、野生型蛋白質は、57%のアルファヘリックスを含むが、4WLおよび4WFでは共に、それぞれ、79%および77%と、アルファヘリックス含量が増大することを見出した。したがって、4WL変異種における流出および脂質結合活性の喪失は、ヘリックス含量の消失に帰すことはできない。
Claims (15)
- 配列番号1のアミノ酸配列を含み、ここで配列番号1中のXのそれぞれはフェニルアラニンアミノ酸である、ポリペプチド。
- 脂質担持細胞からのコレステロール流出を増進させることが可能である、請求項1に記載のポリペプチド。
- 精製されたポリペプチドである、請求項1又は2に記載のポリペプチド。
- 組み換えポリペプチドである、請求項1又は2に記載のポリペプチド。
- 細菌、酵母、植物、昆虫、または哺乳類の細胞中で生産された組み換えポリペプチドである、請求項4に記載のポリペプチド。
- ミエロペルオキシダーゼ(MPO)、MPO-生成オキシダントによる酸化作用、MPO-生成反応性塩素化分子による酸化作用、MPO/H2O2/Cl-系に関連する酸化作用、HOCl/OCl-による酸化作用、MPO生成反応性窒素分子による酸化作用、MPO/H2O2/NO2 -系に関連する酸化作用、二酸化窒素による酸化作用、ペルオキシナイトライト(ONOO-)による酸化作用、ペルオキシカルボキシナイトライト(ONOOCO2 -)による酸化作用、および、ONOO - がバッファー中でCO2またはHCO3 -の存在下に活動するときに形成される産物による酸化作用、の内の少なくとも一つに対して耐性を示すことを特徴とする、請求項1又は2に記載のポリペプチド。
- ミエロペルオキシダーゼ(MPO)による酸化的不活性化に対して耐性を示すことを特徴とする、請求項6に記載のポリペプチド。
- ポリヒスチジンタグをさらに含む、請求項1又は2に記載のポリペプチド。
- ポリペプチド、および薬学的に受容可能な賦形剤を含む製薬組成物であって、該ポリペプチドは配列番号1のアミノ酸配列を含み、ここで配列番号1中のXのそれぞれはフェニルアラニンアミノ酸である、製薬組成物。
- 前記ポリペプチドは脂質担持細胞からのコレステロール流出を増進させることが可能である、請求項9に記載の製薬組成物。
- 前記ポリペプチドが精製されたポリペプチドである、請求項9又は10に記載の製薬組成物。
- 経口投与、鼻腔投与、直腸投与、腹腔内注入、血管内注入、皮下注入、経皮投与、吸引投与、および筋肉内注入から成る群から選ばれるルートによって対象に投与されるように処方されることを特徴とする、請求項9又は10に記載の製薬組成物。
- 単位用量処方として処方されることを特徴とする、請求項12に記載の製薬組成物。
- ポリペプチド、および薬学的に受容可能な賦形剤を含む製薬組成物であって、該ポリペプチドは配列番号1のアミノ酸配列から成り、ここで配列番号1中のXのそれぞれはフェニルアラニンアミノ酸である、製薬組成物。
- 前記ポリペプチドは脂質担持細胞からのコレステロール流出を増進させることが可能である、請求項14に記載の製薬組成物。
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