JP5456102B2 - 光化学作用による組織接着 - Google Patents
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Description
この出願は、2000年2月11日に出願された米国仮特許出願第60/181,980号に基づく優先権を主張する。その内容は、参照することによりここに組み込まれる。
好ましい実施態様において、被験者の角膜組織の1つまたはそれ以上の要素、例えば切れた、あるいはまた分かれた縁部または表面を、互いにまたは移植組織と接合させることができる。
ここに記載されている組織−組織シールの作製方法は、好ましくは外因性タンパク質、例えばタンパク質ベースの接着剤、例えばフィブリンまたはフィブリノーゲンの不存在下に、光増感剤、例えばRB、R−5−P、MB、またはN−HTPで組織を処理する工程と、電磁放射線例えば光でこの光増感剤を光活性化する工程とを含む。
ここに記載されている方法は、多様な用途における使用に適しているが、これには、試験管内研究所使用、生体外組織処理が含まれるが、特に生きている被験者、例えばヒトへの生体内外科処理、および非外科的創傷治療が含まれる。
本発明はまた、光化学作用による組織接着における使用のためのキットも含む。このようなキットは、研究所用途または臨床的用途に用いることができる。このようなキットは、光増感剤、例えばここに記載されている光増感剤と、研究所使用のために少なくとも1つのタンパク質試薬を架橋するため、または動物の組織、例えば特にヒトの患者におけるヒトの組織を接着するか、修復するか、または治療するための、光増感剤の適用および照射のための使用説明書とを含んでいる。これらのキットは、保存用容器、例えば光増感剤の保存用の光保護された、および/または冷却された容器を含んでいてもよい。これらのキットに含まれている光増感剤は、様々な形態、例えば粉末、凍結乾燥、結晶、または液体形態で供給されてもよい。任意にはキットは、組織接着、創傷修復、または眼の治療の用途における使用のための追加薬剤、例えば抗生物質またはコンタクトレンズを含んでいてもよい。
PTBは、組織、例えば創傷、例えば角膜創傷をシールまたは修復するために用いることができる。この実施例は、生体外の哺乳動物の角膜を用いて、ここに記載されているようなPTBの効力をテストするように設計された実験手順を例証している。実験は下記手順にしたがって実施した。
角膜において、RBは、約0.5mM〜5mM、好ましくは約1mM〜3mMの濃度でPTBに用いることができる。RBの場合の照射波長は、好ましくは約450〜600nm、より好ましくは約500〜560nmである。照射線量は、約0.5〜2kJ/cm2であってもよい。送り出される放射度は、約0.2〜3W/cm2であってもよい。照射時間は好ましくは約1〜10分である。
角膜において、R−5−Pは、約1mM〜30mM、好ましくは約10mM〜20mMの濃度でPTBに用いることができる。R−5−Pの場合の照射波長は、好ましくは約400〜600nm、より好ましくは約450〜550nmである。照射線量は、約0.5〜2kJ/cm2であってもよい。送り出される放射度は、約0.2〜3W/cm2であってもよい。照射時間は好ましくは約1〜10分である。
角膜において、N−HTPは、約0.5mM〜10mM、好ましくは約3mM〜6mMの濃度で用いることができる。N−HTPの場合の照射波長は、好ましくは約330〜400nmである。照射線量は、約0.5〜2kJ/cm2であってもよい。送り出される放射度は、約0.2〜3W/cm2であってもよい。照射時間は好ましくは約1〜10分である。N−HTPの4.5mM溶液を、実施例1に記載されているように切開壁に塗布し、127J/cm2〜508J/cm2の線量で、351nm光(0.64W/cm2)を用いて照射した。60±23mmHgおよび126±40mmHgの平均IOPL値が、その他の光増感剤に用いられた線量よりも低い線量である、それぞれ254J/cm2および508J/cm2の線量を用いた時に生じた。
MBは、ラットの尾の腱においてコラーゲン架橋を光増感すると報告されている、眼の手術に頻繁に用いられている染料である(Ramshawら、(1994)Biochim Biophys Acta 1206:225−230)。本発明者らの以前の研究では、MBおよび355nm光は、可溶性コラーゲンの効率的な架橋を生じないことを証明した。したがってMBは、これらの生体外研究において対照として用いられた。MB(3mM)を、実施例1に記載されているように切開壁に塗布し、0.64W/cm2において661nm光で照射した。508J/cm2、762J/cm2、および1016J/cm2の線量は、処理後のIOPLを増加させなかった。しかしながらMBは、角膜組織を効率的に染色しないことが観察された。このことはおそらく、PTBについてのその低い効率を説明している。
レーザー活性化組織融合は、多様な組織において研究されている(Abergelら、(1986)J Am Acad Dermatol.14:810−814;Cilesizら、上記;Massicotteら、(1998)Lasers in Surgery and Medicine 23:18−24;Ozら、(1990)J Vasc Surg.11:718−725;Poppasら、(1996)Lasers in Surgery and Medicine 18:335−344;Poppasら、(1996)Lasers in Surgery and Medicine 19:360−368;Stewartら、(1996)Lasers in Surgery and Medicine 19:9−16;Widerら、(1991)Plastic Reconstr Surg 88:1018−1025)。組織融合において、レーザー照射は、コラーゲンが変性する温度まで組織を加熱するために用いられ、冷却した時、コラーゲン分子が絡み合って「融合」を形成する。さらには染料増強熱融合が研究されている(Bass & Treat(1995)Lasers Surg and Med 17:315−349;Chuckら、(1989)Lasers Surg and Med 9:471−477)。この方法では、染料が選択的にレーザーエネルギーを吸収し、ついで所望の部位に熱を放出し、末梢組織損傷を縮小する。しかしながらこれらの方法は、熱組織損傷によって生じる角膜変形から結果として生じるであろう視力の潜在的低下によって、角膜には適切でない。角膜に対してPTBを実施する時、加熱は避けなければならない。
実施例1に記載されているように、PTB処理後のIOPL値を、縫合術を用いて得られた値と比較した。ブラックモノフィラメント10−0ナイロン(Ethilon Inc.)の2つの断続放射状(radial)縫合を用いて、角膜刀切開部を閉鎖した。縫合は、約90%角膜深さで放射状に配置された。縫合でのIOPL値は、約230mmHgであった。この値は、PTB処理を用いて閉鎖された切開の場合と同様である。
ニュージーランドウサギにおいて2種類の角膜創傷を修復するために、PTBを生体内で実施した。
1.組織シールを作製する方法であって、
修復を必要としている組織を識別する工程と、
前記組織、および必要に応じて第二組織と、少なくとも1つの光増感剤とを接触させて、組織−光増感剤混合物を形成する工程と、
前記組織中にタンパク質の架橋を生じるのに効果的であるように、電磁エネルギーを前記組織−光増感剤混合物に加える工程と、
を含み、
前記組織は、電磁エネルギーを加えることによって架橋される外因性タンパク質またはペプチドと接触させられず、
これによって組織シールを作製する方法。
角膜組織と少なくとも1つの光増感剤とを接触させて、角膜組織−光増感剤混合物を形成する工程と、
前記光増感剤からの反応種の生成を誘発するのに効果的であるように、前記角膜組織−光増感剤混合物に電磁エネルギーを加える工程と、
を含み、
前記角膜組織は、電磁エネルギーを加えることによって架橋される外因性タンパク質またはペプチドと接触させられず、
これによって角膜病変の一部または全部修復を促進させることを特徴とする方法。
角膜組織とローズベンガル(RB)とを接触させて、角膜組織−RB混合物を形成する工程と、
前記RBからの反応性酸素種の生成を誘発するのに効果的であるように、前記角膜組織−RB混合物に電磁エネルギーを加える工程と、
を含み、
前記角膜組織は、電磁エネルギーを加えることによって架橋される外因性タンパク質またはペプチドと接触させられず、
これによって角膜病変の一部または全部修復を促進させることを特徴とする方法。
角膜病変の修復のための前記光増感剤の光活性化についての使用説明書と、
を含む、角膜病変の修復用キット。
Claims (13)
- 組織シールを作製するための医薬の製造における光増感剤の使用であって、該光増感剤が、ローズベンガル、リボフラビン−5−ホスフェートまたはN−ヒドロキシピリジン−2−(1H)−チオンであり、電磁エネルギーを加えることにより架橋される外因性タンパク質またはペプチドの不在下で、該光増感剤が、修復を必要としている組織と接触したときに、3.5W/cm2未満の放射度で電磁エネルギーにより照射されて、前記組織中にタンパク質の架橋を生じさせることによって組織シールを作製することを特徴とする使用。
- 前記組織が角膜組織であることを特徴とする請求項1記載の使用。
- 角膜病変を修復するための医薬の製造における光増感剤の使用であって、該光増感剤が、ローズベンガル、リボフラビン−5−ホスフェートまたはN−ヒドロキシピリジン−2−(1H)−チオンであり、電磁エネルギーを加えることによって架橋される外因性タンパク質またはペプチドの不在下で、該光増感剤が、角膜組織と接触したときに、2.55W/cm2未満の放射度で電磁エネルギーにより照射されて、該光増感剤から反応種を生成させることによって角膜病変の一部または全部の修復が促進されることを特徴とする使用。
- 前記角膜病変が、外科処置によって引き起こされたものであることを特徴とする請求項3記載の使用。
- 前記外科処置が、角膜移植手術、白内障手術、レーザー手術、角膜形成術、LASIK、屈折手術、角膜再形成、および角膜破裂の治療よりなる群から選択されることを特徴とする請求項4記載の使用。
- 前記接触が、生体外で行なわれることを特徴とする請求項1から5いずれか1項記載の使用。
- 前記接触が、被験者において生体内で行なわれることを特徴とする請求項1から5いずれか1項記載の使用。
- 前記被験者がヒトであることを特徴とする請求項7記載の使用。
- 電磁エネルギーの適用が、実質的な組織の熱損傷を伴わずに行なわれることを特徴とする請求項1から8いずれか1項記載の使用。
- 電磁エネルギーの適用が、3℃の温度上昇よりも大きい温度上昇を伴わずに行なわれることを特徴とする請求項1から9いずれか1項記載の使用。
- 電磁エネルギーの適用が、2℃の温度上昇よりも大きい温度上昇を伴わずに行なわれることを特徴とする請求項10記載の使用。
- 電磁エネルギーの適用が、1℃の温度上昇よりも大きい温度上昇を伴わずに行なわれることを特徴とする請求項11記載の使用。
- 加えられる電磁エネルギーが、200J/cm2よりも大きいことを特徴とする請求項1から12いずれか1項記載の使用。
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