JP5320183B2 - 顎顔面インプラント治療のための骨質検査方法 - Google Patents
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1.採取された顎顔面由来骨組織をvon Kossa染色することを特徴とする顎顔面インプラント治療のための骨質検査方法。
2.以下の1)〜5)の工程を含む、前項1に記載の骨質検査方法:
1)採取された顎顔面由来骨組織を固定し、包埋ブロックを作製する工程;
2)上記1)の包埋ブロックから切片を作製する工程;
3)上記2)の組織切片をプレパラート用ストリップにのせる工程;
4)ストリップ上の組織切片を染色する工程;
5)ストリップ上の組織切片内の染色組織面積比率を計測する工程。
4.採取された顎顔面由来骨組織をのせるためのプレパラート用ストリップと、硝酸銀水溶液を含むことを特徴とする、前項1または2に記載の骨質検査方法に使用する検査用キット。
1)採取された顎顔面由来骨組織を固定し、包埋ブロックを作製する工程;
2)上記1)の包埋ブロックから切片を作製する工程;
3)上記2)の組織切片をプレパラート用ストリップにのせる工程;
4)ストリップ上の組織切片を染色する工程;
5)ストリップ上の組織切片内の染色組織面積比率を計測する工程。
インプラント治療を行う前の患者の顎骨組織から、長さ7mm、直径2mmのシリンダ状のトレフィンを用いてインプラント埋入のために骨組織をくり抜き、採取したものを試料とした。該試料を、4℃で10%の中性ホルマリンに直ちに浸した。その後、リン酸緩衝液で組織を洗浄した。その後試料を、−75度のn−ヘキセンにさらし、急速凍結した。凍結試料を4%のカルボキシメチルセルロース(CMC)ゲル(Fintec社)で満たしたステンレス製のコンテナに浸し、さらにコンテナを冷たいn−ヘキセン中に置き、CMCを凍結した。凍結ブロックを、チャンバー内の温度が−25℃のミクロトーム(CM3500、LEICA社製)を用いて凍結切片を作製した。凍結切片を3−5時間、−25℃のチャンバー内で凍結乾燥させ、切片試料を作製した。
1)水洗処理
2)5%硝酸銀水溶液で、60ワットの白熱光の下で1時間染色
3)蒸留水を用いて3度洗浄
4)5%チオ硫酸ナトリウム水溶液に5分間浸した後、水道水および蒸留水で洗浄
5)ケルンエヒトロート液に5分間浸した後、軽く水洗し、脱水、封入
切片試料について、Von Kossa染色のかわりにトルイジンブルーにより組織染色を行った以外は、実施例1と同様の処理を行った。トルイジンブルー染色は、以下の要領で行った。
1)水洗処理
2)0.5%トルイジンブルー液を用いて30分間染色
3)ろ紙で水分を除くために軽く押さえたのち、純アルコールで脱水処理を2回
4)キシレンにて透徹後封入
上記の結果、実施例1および比較例1の手法により染色された切片試料について、比較例1では染色された骨組織と他の組織との鑑別は困難であったが、実施例1のVon Kossa染色で染色したものは骨組織が茶色に染色され、他の組織と容易に識別できた(図3)。
インプラント治療を行う前の被験者6名の顎骨組織から、実施例1に記載の方法と同手法により試料を得、切片試料を作製した。作製した切片試料を、実施例1と同手法にてVon Kossa染色で染色した。染色された切片の染色面積を、画像処理装置(Mac Scope、三谷商事)を用いて計測し、試料における骨占有率を計測した。
インプラント治療を行う前の被験者30名の顎骨組織から、実施例1に記載の方法と同手法により試料を得、切片試料を作製した。作製した切片試料を、実施例1と同手法にてVon Kossa染色で染色した。染色された切片の染色面積を、画像処理装置(Mac Scope、三谷商事)を用いて計測し、試料における骨占有率を計測した。
短期的な観察により、骨占有率が10%以下の症例では成功率が極端に低下する印象が得られた。
Claims (3)
- インプラント治療前に採取された顎顔面由来骨組織試料をvon Kossa染色することを特徴とする顎顔面インプラント治療期間決定評価のための骨質検査方法。
- 以下の1)〜5)の工程を含む、請求項1に記載の骨質検査方法:
1)インプラント治療前に採取された顎顔面由来骨組織試料を固定し、包埋ブロックを作製する工程;
2)上記1)の包埋ブロックから切片を作製する工程;
3)上記2)の組織切片をプレパラート用ストリップにのせる工程;
4)ストリップ上の組織切片を染色する工程;
5)ストリップ上の組織切片内の染色組織面積比率を計測する工程。 - 顎顔面インプラント治療期間決定評価が、歯科分野のインプラント治療期間決定評価である、請求項1または2に記載の骨質検査方法。
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