JP5179847B2 - 新規な可溶性卵殻膜の製造方法 - Google Patents
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Description
(1)アルカリ性含水有機溶媒中で卵殻膜を加水分解処理した後、陰イオン交換樹脂と接触せしめる、可溶性卵殻膜の製造方法、
(2)陰イオン交換樹脂の使用量が、卵殻膜固形物1質量部に対して1〜10容量倍量である、(1)の可溶性卵殻膜の製造方法、
(3)陰イオン交換樹脂との接触時間が1〜50時間である、(1)又は(2)の可溶性卵殻膜の製造方法、
である。
乾燥卵殻膜520g(固形物96%)を1.0mol/Lの水酸化ナトリウム水溶液10L中に分散し、40℃で5時間加水分解反応を行った。次いで2mol/Lの塩酸でpHを8に調整し、濾過により不溶物を除去した。得られた濾液に陰イオン交換樹脂デュオライトA368S(ローム・アンド・ハース社製)を4L投入し、40時間攪拌した。攪拌終了後、濾過にて陰イオン交換樹脂を除き、得られた濾液に2mol/Lの塩酸を添加してpHを8に調整した。その後孔径0.45μmのメンブレンフィルター濾過を行った。得られた濾液を電気透析処理して脱塩し、その後凍結乾燥することにより、粉末状の可溶性卵殻膜を得た。
実施例1の製造方法において、陰イオン交換樹脂量を1Lとする以外は、実施例1と同様の方法により、実施例2の粉末状の可溶性卵殻膜を得た。
実施例1の製造方法において、卵殻膜加水分解液と陰イオン交換樹脂との接触時間を16時間とする以外は、実施例1と同様の方法により、実施例3の粉末状の可溶性卵殻膜を得た。
実施例1の製造方法において、卵殻膜加水分解液と陰イオン交換樹脂との接触時間を1時間とする以外は、実施例1と同様の方法により、実施例4の粉末状の可溶性卵殻膜を得た。
実施例1の製造方法において、アルカリ加水分解工程を2mol/Lの水酸化ナトリウム水溶液・エタノール混合液(1:1)10L中で行う以外は実施例1と同様の方法により、実施例5の粉末状の可溶性卵殻膜を得た。
実施例1の製造方法において、陰イオン交換樹脂を使用しない以外は、実施例1と同様の方法により、比較例1の粉末状の可溶性卵殻膜を得た。
実施例および比較例にて得られた粉末状可溶性卵殻膜を使用して、繊維芽細胞の接着および増殖試験を行った。
培養5日目には、陰イオン交換樹脂を使用せずに得られた可溶性卵殻膜を使用した比較例1に対し、卵殻膜の加水分解液を陰イオン交換樹脂と接触せしめて得られた可溶性卵殻膜をコーティングした実施例1〜5では、ウェル中の生細胞数が多かった。したがって、卵殻膜の加水分解液と陰イオン交換樹脂とを接触せしめて得られた可溶化卵殻膜は、陰イオン交換樹脂を使用せずに得られた可溶化卵殻膜に対し、繊維芽細胞の接着および増殖に対する促進効果が高いことが示唆された。さらに、実施例1と3、4の比較により、わずかではあるが、卵殻膜の加水分解液と陰イオン交換樹脂との接触時間が長いほど可溶性卵殻膜の繊維芽細胞増殖効果が高くなることが理解される。また、卵殻膜の加水分解工程において、アルカリ含水有機溶媒中で加水分解を行った実施例5は、アルカリ水溶液中(有機溶媒を含まない)で加水分解を行った実施例1〜4に対して培養後5日目の生細胞数が多いことから、繊維芽細胞の接着および増殖に特に効果が高いことがわかった。
Claims (3)
- アルカリ性含水有機溶媒中で卵殻膜を加水分解処理した後、陰イオン交換樹脂と接触せしめる、可溶性卵殻膜の製造方法。
- 陰イオン交換樹脂の使用量が、卵殻膜固形物1質量部に対して1〜10容量倍量である、請求項1記載の可溶性卵殻膜の製造方法。
- 陰イオン交換樹脂との接触時間が1〜50時間である、請求項1又は2記載の可溶性卵殻膜の製造方法。
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KR20210103057A (ko) | 2020-02-13 | 2021-08-23 | 에드윈 주영 김 | 수용성 난각막 단백질의 제조방법, 수용성 난각막 단백질을 이용한 전기방사용 조성물의 제조방법 및 수용성 난각막 단백질을 이용한 3d 프린터용 조성물의 제조방법 |
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- 2007-11-30 JP JP2007311432A patent/JP5179847B2/ja active Active
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