JP4904086B2 - Jellyfish decomposition waste liquid treatment apparatus and treatment method, and microorganism - Google Patents

Jellyfish decomposition waste liquid treatment apparatus and treatment method, and microorganism Download PDF

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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an apparatus and a method of efficiently treating a salt-containing waste liquid such as a decomposition waste liquid of a jellyfish to decompose and dispose of at a low cost without using a special apparatus and causing environmental pollution, and a microorganism used for at least one of the treating apparatus and the treating method. <P>SOLUTION: The apparatus for treating the salt-containing waste liquid has a support onto which the microorganism capable of growing in the salt-containing liquid is fixed and a contact means for bringing the salt-containing waste liquid into contact with the support. In the method of treating the salt-containing waste liquid, the salt-containing waste liquid is brought into contact with the support onto which the microorganism capable of growing in the salt-containing liquid is fixed. The microorganism growing in the salt-containing waste liquid is used at least for one of the treating apparatus or the treating method. <P>COPYRIGHT: (C)2007,JPO&amp;INPIT

Description

本発明は、クラゲ等の有機物の分解処理液等の塩分含有廃液を、環境を汚染することなく廃棄可能にする処理装置及び処理方法、並びに、前記処理装置及び処理方法の少なくともいずれかに使用される微生物に関する。   INDUSTRIAL APPLICABILITY The present invention is used in at least one of a processing apparatus and a processing method that makes it possible to dispose of a salt-containing waste liquid such as an organic substance decomposition processing liquid such as jellyfish without polluting the environment. Related to microorganisms.

海水などに浮遊しているクラゲは、主に温暖な時期に大発生し、様々な被害をもたらしている。例えば、日本近海で大量発生するエチゼンクラゲは、海流に乗って各地沿岸に出現し、近年、沿岸の定置網漁などの漁業に甚大な被害をもたらしている。また、大量の冷却水を必要とする発電所、製鉄所などの臨海プラント施設においては、海水を冷却水として使用するため、海水の取水口が設けられているが、該取水口をクラゲ類が閉塞してしまうことによる被害、即ち、取水が制限乃至停止され、その運転に支障をきたすという被害が問題となってきている。更に、漁網に入り陸揚げされた前記エチゼンクラゲ、あるいは前記臨海プラント施設で陸揚げされたミズクラゲを主体とする前記クラゲ類は、一旦陸揚げされると、産業廃棄物となりそのまま海洋に放流乃至廃棄することができないという問題がある。   Jellyfish floating in seawater, etc. occur mainly during warm periods and cause various damages. For example, Echizen jellyfish, which occur in large quantities in the seas near Japan, appear on the coasts of various regions along the ocean current, and in recent years have caused tremendous damage to fisheries such as coastal net fishing. Also, in coastal plant facilities such as power plants and steelworks that require a large amount of cooling water, seawater intake is provided to use seawater as cooling water. Damage due to blockage, that is, damage that water intake is restricted or stopped and hinders its operation has become a problem. Furthermore, the jellyfish mainly composed of the Echizen jellyfish landed in the fishing net or the jellyfish landed at the seaside plant facility, once landed, becomes industrial waste and cannot be discharged into the ocean or discarded as it is. There is a problem.

そこで、従来においては、一旦陸揚げされたクラゲ類を廃棄処理する各種方法が検討されてきた(特許文献1〜9参照)。いずれの処理方法においても、必然的に塩分を含む有機物廃液が排出される。特にクラゲは体成分の95%以上が水分であるため大量の塩分を含む有機物廃液となる。前記クラゲ類の分解廃液には、主として、蛋白質、脂質、遊離アミノ酸、多糖類、無機質などが含まれており、換言すれば、BOD成分(生物化学的酸素要求量)、COD(化学的酸素要求量)成分及びリン、窒素分が大量に含まれており、3質量%以上という高濃度の塩分も含まれている。このようなクラゲ類の分解廃液をそのまま放流すると、河川、海洋、湖沼、地下水等が汚染され、富栄養化や塩害による環境汚染を招くことから、前記クラゲ類の分解廃液を環境汚染を生ずることなく廃棄可能とする処理装置及び処理方法の提供が望まれている。   Therefore, conventionally, various methods for discarding jellyfish once landed have been studied (see Patent Documents 1 to 9). In any treatment method, organic waste liquid containing salt is inevitably discharged. Particularly, jellyfish is an organic waste liquid containing a large amount of salt because 95% or more of the body components are moisture. The jellyfish decomposition waste liquid mainly contains proteins, lipids, free amino acids, polysaccharides, minerals, etc. In other words, BOD components (biochemical oxygen demand), COD (chemical oxygen demand) Amount) component, phosphorus, and nitrogen are contained in large amounts, and a high concentration of 3% by mass or more is also included. If such jellyfish decomposition waste liquid is discharged as it is, rivers, oceans, lakes, groundwater, etc. will be contaminated, resulting in environmental pollution due to eutrophication and salt damage. Therefore, it is desired to provide a processing apparatus and a processing method that can be disposed of without waste.

ところが、前記クラゲ類の分解廃液等の塩分含有廃液は、そこに含まれる塩分のために、機械的廃棄処理を行う場合には処理装置を腐食させる、また、効率的な分解廃棄処理ができない等の問題があり、一方、酵素乃至微生物等を利用した生物的処理を行う場合、前記機械的廃棄処理に比べると効率的な分解廃棄処理が可能であるものの、十分な酵素活性が得られない、微生物が死んでしまう等の問題がある。このため、従来においては、前記クラゲ類の分解廃液を一旦淡水で希釈してから活性汚泥等を利用して分解廃棄処理を行う等していた。しかし、この場合、大量の希釈用の淡水が必要になり、希釈工程が必要になり、効率的でなく、また、活性汚泥処理施設等の設備が特別に必要になり、簡便でないという問題がある。したがって、クラゲ類の分解廃液等の塩分含有廃液を、低コストで効率的に、しかも特別な装置を要せず、環境汚染を生ずることなく分解廃棄可能にする処理装置及び処理方法は未だ提供されていないのが現状である。   However, the salt-containing waste liquid such as the jellyfish decomposition waste liquid corrodes the processing apparatus when performing mechanical disposal due to the salt contained therein, and cannot be efficiently decomposed and discarded. On the other hand, when performing biological treatment using enzymes or microorganisms, although efficient decomposition and disposal treatment is possible compared to the mechanical waste treatment, sufficient enzyme activity is not obtained, There are problems such as the death of microorganisms. For this reason, conventionally, the decomposition waste liquid of the jellyfish has been once diluted with fresh water and then decomposed and discarded using activated sludge or the like. However, in this case, a large amount of fresh water for dilution is required, a dilution step is required, which is not efficient, and special equipment such as an activated sludge treatment facility is required, which is not convenient. . Accordingly, there is still provided a processing apparatus and a processing method that can dispose of salt-containing waste liquids such as jellyfish decomposition waste liquids at low cost efficiently and without requiring special equipment and without causing environmental pollution. The current situation is not.

特開2001−300505号公報JP 2001-300505 A 特開2000−5738号公報JP 2000-5738 A 特開平11−244833号公報Japanese Patent Laid-Open No. 11-244833 特開2000−145196号公報JP 2000-145196 A 特開2001−198566号公報JP 2001-198566 A 特開2003−53303号公報JP 2003-53303 A 特開平11−179327号公報JP-A-11-179327 特開2001−95564号公報JP 2001-95564 A 特開2002−136952号公報JP 2002-136852 A

本発明は、従来における問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、クラゲ類の分解廃液等の塩分含有廃液を、低コストで効率的に、しかも特別な装置を要せず、環境汚染を生ずることなく分解廃棄可能にする処理装置及び処理方法、並びに、前記処理装置及び処理方法の少なくともいずれかに使用可能な微生物を提供することを目的とする。   An object of the present invention is to solve the conventional problems and achieve the following objects. That is, the present invention provides a processing apparatus and a processing method for disposing of salt-containing waste liquids such as jellyfish decomposition waste liquids at low cost and efficiently without requiring special equipment and without causing environmental pollution. Another object of the present invention is to provide a microorganism that can be used in at least one of the processing apparatus and the processing method.

本発明は、前記課題を解決するために本発明者が鋭意検討した結果、クラゲ類の分解廃液等の塩分含有廃液を、塩分含有液中で生育可能な微生物を固定化した担体に接触させて処理することにより、低コストで効率的に、しかも特別な装置を要せず、環境汚染を生ずることなく分解廃棄し得ることを見出し、完成するに至ったものである。前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。
<1> 塩分含有液中で生育可能な微生物を固定化した担体と、該担体に塩分含有廃液を接触させる接触手段とを有することを特徴とする塩分含有廃液の処理装置である。該<1>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記接触手段により、前記塩分含有廃液が前記微生物を固定した担体と接触される。このとき、該塩分含有廃液は、前記微生物の作用によって、そこに含まれる蛋白質等の有機物が廃棄処分可能なレベルにまで効率的に分解される。その結果、該塩分含有廃液の処理装置は、いわゆるバイオリアクターとして機能し、該塩分含有廃液の処理装置によると、クラゲ類等の蛋白質等を含む塩分含有廃液が、低コストで効率的に、しかも特別な装置を要せず、環境汚染を生ずることなく分解廃棄し得るようになる。該塩分含有廃液の処理装置は、一般のバイオリアクターと同様に、(1)連続処理が可能である、(2)微生物や酵素を包括固定化し、単位体積あたりの処理能力を高めることができる、(3)高速処理できる、(4)装置をコンパクト化できる、(5)硝化細菌などの廃水処理の目的に応じた微生物を固定できる、などの利点を有する。
<2> 塩分含有液中で生育可能な微生物を固定した担体が、多糖類、蛋白質、合成高分子、及び無機物のいずれかで形成された前記<1>に記載の塩分含有廃液の処理装置である。該<2>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記担体が、多糖類等で形成されているので、前記微生物が容易にかつ効率的に固定され、かつ容易に該担体から脱離することがない。このため、該担体に対して処理対象となる塩分含有廃液を接触させるだけで、該塩分含有廃液の分解処理が可能である。
<3> 塩分含有液中で生育可能な微生物を固定した担体が、多孔質構造を有する前記<1>から<2>のいずれかに記載の塩分含有廃液の処理装置である。該<3>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記担体が多孔質構造を有するため、処理対象である前記塩分含有廃液が前記担体中を透過可能であり、該担体中に固定された前記微生物との接触面積が大きいため、効率的に前記塩分含有廃液の分解処理が行われる。
<4> 塩分含有液中で生育可能な微生物が、汚泥中の耐塩性有機物廃液利用微生物群を含む前記<1>から<3>のいずれかに記載の塩分含有廃液の処理装置である。該<4>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記耐塩性有機物廃液利用微生物群の作用により、効率的に前記塩分含有廃液が分解処理される。
<5> 塩分含有液中で生育可能な微生物が、付着法、架橋法及び包括法の少なくともいずれかにより、担体に固定された前記<1>から<4>のいずれかに記載の塩分含有廃液の処理装置である。該<5>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記微生物が前記担体に付着法等によって固定されているので、該微生物が前記担体から容易に脱離することがなく、効率的に前記塩分含有廃液の分解処理が行われる。
<6> 塩分含有液中で生育可能な微生物を固定した担体が容器内に収容され、接触手段が、前記容器内に塩分含有廃液を送液する送液装置である前記<1>から<5>のいずれかに記載の塩分含有廃液の処理装置である。該<6>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記容器が、バイオリアクターの反応槽として機能し、前記送液手段により、前記担体が収容された前記容器内に前記塩分含有廃液が送液される。その結果、不連続的に又は連続的に前記塩分含有廃液の分解処理が行われる。
<7> 送液装置が、塩分含有廃液を導送する管と、該塩分含有廃液を担体に向けて送液する送液ポンプとを有する前記<6>に記載の塩分含有廃液の処理装置である。前記<7>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記送液ポンプの作用によって前記管を介して前記塩分含有廃液が送液される。
<8> 容器が、内部に収容される塩分含有廃液中の溶存酸素濃度を調整する溶存酸素濃度調整手段を備えた前記<6>から<7>のいずれかに記載の塩分含有廃液の処理装置である。該<8>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記溶存酸素濃度調整手段により、前記容器の内部に収容される前記塩分含有廃液中の溶存酸素濃度が一定にコントロールされる。このため、前記担体に固定された前記微生物による該塩分含有廃液の分解活性が常に安定にかつ一定に維持される。その結果、前記塩分含有廃液の分解処理効率に優れる。
<9> 接触手段により担体に接触させられた塩分含有廃液に対して殺菌処理を行う殺菌手段を更に有する前記<1>から<8>のいずれかに記載の塩分含有廃液の処理装置である。該<9>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記殺菌手段により、廃棄処分される前記塩分含有廃液中に前記担体から脱離した微生物等が効果的に殺菌される。
<10> 接触手段により担体に接触させられた塩分含有廃液に対して脱塩処理を行う脱塩手段を更に有する前記<1>から<9>のいずれかに記載の塩分含有廃液の処理装置である。
<11> 殺菌手段及び脱塩手段の少なくともいずれかが、容器から排出される塩分含有廃液に対し電圧を印加する電圧印加装置である前記<9>から<10>のいずれかに記載の塩分含有廃液の処理装置である。該<11>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記電圧印加装置により、廃棄処分される前記塩分含有廃液に電圧が印加され、該塩分含有廃液中に含まれる微生物等が効果的に殺菌され、また該塩分含有廃液が効果的に脱塩される。この結果、例えば、廃棄処分される前記塩分含有廃液を、肥料等として使用することができる。
<12> 塩分含有廃液が有機物廃液である前記<1>から<11>のいずれかに記載の塩分含有廃液の処理装置である。該<12>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記塩分含有廃液が有機物廃液であるため、該塩分含有廃液をそのまま廃棄処分すると、環境汚染の原因となるが、該塩分含有廃液中の前記有機物が分解されてから廃棄処分されるため、環境汚染等を生ずるおそれがない。
<13> 有機物廃液がクラゲ分解液である前記<12>に記載の塩分含有廃液の処理装置である。該<13>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記有機物廃液が前記クラゲ分解液であるため、有機物と塩分とを含むが、前記担体に固定化された前記微生物の作用により、効率的に前記有機物が分解除去される。
<14> 塩分含有廃液中の塩分濃度が1質量%以上である前記<1>から<13>のいずれかに記載の塩分含有廃液の処理装置である。前記<14>に記載の塩分含有廃液の処理装置においては、前記塩分含有廃液中の塩分濃度が比較的高濃度であるが、前記単体に固定化された前記微生物の作用により、効率的に前記塩分含有廃液中に含まれる有機物等が分解される。
<15> 塩分含有液中で生育可能な微生物を固定化した担体に、塩分含有廃液を接触させることを特徴とする塩分含有廃液の処理方法である。該<15>に記載の塩分含有廃液の処理方法においては、前記微生物を固定化した担体に、前記塩分含有廃液を接触させる。このとき、該塩分含有廃液中に含まれる有機物等が、前記微生物の作用により、効率的に分解除去される。このため、該塩分含有廃液の処理方法によれば、クラゲ類等の蛋白質等を含む塩分含有廃液が、低コストで効率的に、しかも特別な装置を要せず、環境汚染を生ずることなく分解廃棄することができる。
<16> 塩分含有液中で生育可能であり、前記<1>から<14>のいずれかに記載の塩分含有廃液の処理装置、及び、前記<15>に記載の塩分含有廃液の処理方法の少なくともいずれかに使用されることを特徴とする微生物である。
<17> 汚泥中の耐塩性有機物廃液利用微生物群を含む前記<16>に記載の微生物である。
<18> 酵母を含む前記<16>から<17>のいずれかに記載の微生物である。
<19> 更に、細菌群を含む前記<18>に記載の微生物である。
<20> 酵母が、ロドトルーラ ムシラギノーサ(Rhodotorula mucilaginosa)である前記<18>から<19>のいずれかに記載の微生物である。
<21> 酵母が、ロドトルーラ ムシラギノーサ(Rhodotorula mucilaginosa)126−Aege株(受託番号FERM P−20896)である前記<18>から<20>のいずれかに記載の微生物である。
<22> 細菌群が、スフィンゴバクテリウム(Sphingobacterium)属に属する細菌、シュードモナス(Pseudomonas)属に属する細菌、フラボバクテリウム(Flavobacterium)属に属する細菌、及び、バチルス(Bacillus)属に属する細菌からなる群より選択される少なくとも1種からなる細菌群である前記<19>から<21>のいずれかに記載の微生物である。
<23> スフィンゴバクテリウム(Sphingobacterium)属に属する細菌が、スフィンゴバクテリウム マルチボーラム(Sphingobacterium multivorum)、及び、スフィンゴバクテリウム スピリチボーラム(Sphingobacterium spiritivorum)から選択される少なくともいずれかである前記<22>に記載の微生物である。
<24> バチルス(Bacillus)属に属する細菌が、バチルス パミルス(Bacillus pumilus)である前記<22>から<23>のいずれかに記載の微生物である。
<25> 汚泥中の耐塩性有機物廃液利用微生物群を、処理対象となる塩分含有廃液中で集積培養することにより得られる前記<16>から<24>のいずれかに記載の微生物である。
In order to solve the above-mentioned problems, the present inventor has made extensive investigations, and as a result, a salt-containing waste liquid such as a jellyfish decomposition waste liquid is brought into contact with a carrier on which microorganisms that can grow in the salt-containing liquid are immobilized. By processing, it has been found that it can be disassembled and disposed of efficiently and inexpensively without requiring special equipment, and without causing environmental pollution. Means for solving the problems are as follows.
<1> An apparatus for treating a salt-containing waste liquid, comprising: a carrier on which microorganisms capable of growing in a salt-containing liquid are immobilized; and a contact means for bringing the salt-containing waste liquid into contact with the carrier. In the apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to <1>, the salt-containing waste liquid is brought into contact with the carrier on which the microorganism is fixed by the contact means. At this time, the salt-containing waste liquid is efficiently decomposed to a level at which organic substances such as proteins contained therein can be disposed of by the action of the microorganism. As a result, the salt-containing waste liquid treatment apparatus functions as a so-called bioreactor. According to the salt-containing waste liquid treatment apparatus, the salt-containing waste liquid containing proteins such as jellyfish can be efficiently produced at low cost. It does not require special equipment and can be disassembled and discarded without causing environmental pollution. The treatment apparatus for the salt-containing waste liquid, like a general bioreactor, can (1) be capable of continuous treatment, (2) comprehensively immobilize microorganisms and enzymes, and increase the treatment capacity per unit volume. (3) It is possible to perform high-speed processing, (4) the apparatus can be made compact, and (5) microorganisms according to the purpose of wastewater treatment such as nitrifying bacteria can be fixed.
<2> The apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to <1>, wherein the carrier on which microorganisms that can grow in the salt-containing liquid are fixed is formed of any one of a polysaccharide, a protein, a synthetic polymer, and an inorganic substance. is there. In the apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to <2>, since the carrier is formed of a polysaccharide or the like, the microorganism is easily and efficiently fixed and easily detached from the carrier. There is nothing to do. Therefore, the salt-containing waste liquid can be decomposed only by bringing the salt-containing waste liquid to be treated into contact with the carrier.
<3> The apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to any one of <1> to <2>, wherein the carrier on which microorganisms that can grow in the salt-containing liquid are fixed has a porous structure. In the apparatus for processing a salt-containing waste liquid according to <3>, since the carrier has a porous structure, the salt-containing waste liquid to be processed can pass through the carrier and is fixed in the carrier. In addition, since the contact area with the microorganism is large, the salt-containing waste liquid is efficiently decomposed.
<4> The apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to any one of <1> to <3>, wherein the microorganism that can grow in the salt-containing liquid includes a salt-resistant organic matter waste liquid-using microorganism group in sludge. In the apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to <4>, the salt-containing waste liquid is efficiently decomposed by the action of the microorganism group using the salt-resistant organic waste liquid.
<5> The salt-containing waste liquid according to any one of <1> to <4>, wherein the microorganism that can grow in the salt-containing liquid is fixed to the carrier by at least one of an attachment method, a crosslinking method, and a comprehensive method It is a processing device. In the apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to <5>, since the microorganism is fixed to the carrier by an adhesion method or the like, the microorganism is not easily detached from the carrier, and the The salt-containing waste liquid is decomposed.
<6> The above <1> to <5, wherein a carrier on which microorganisms that can grow in a salt-containing liquid are fixed is contained in a container, and the contact means is a liquid-feeding device that feeds the salt-containing waste liquid into the container. > Is a treatment apparatus for salt-containing waste liquid according to any of the above. In the apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to <6>, the container functions as a reaction tank of a bioreactor, and the salt-containing waste liquid is contained in the container containing the carrier by the liquid feeding unit. The liquid is sent. As a result, the salt-containing waste liquid is decomposed discontinuously or continuously.
<7> The apparatus for processing a salt-containing waste liquid according to <6>, wherein the liquid-feeding device includes a pipe that guides the salt-containing waste liquid and a liquid-feeding pump that feeds the salt-containing waste liquid toward the carrier. is there. In the salt-containing waste liquid treatment apparatus according to <7>, the salt-containing waste liquid is fed through the pipe by the action of the liquid feed pump.
<8> The apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to any one of <6> to <7>, wherein the container includes a dissolved oxygen concentration adjusting unit that adjusts a dissolved oxygen concentration in a salt-containing waste liquid contained therein. It is. In the salt-containing waste liquid treatment apparatus according to <8>, the dissolved oxygen concentration in the salt-containing waste liquid stored in the container is controlled to be constant by the dissolved oxygen concentration adjusting means. For this reason, the decomposition activity of the salt-containing waste liquid by the microorganisms fixed to the carrier is always kept stable and constant. As a result, the decomposition treatment efficiency of the salt-containing waste liquid is excellent.
<9> The apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to any one of <1> to <8>, further including a sterilization unit that sterilizes the salt-containing waste liquid brought into contact with the carrier by the contact unit. In the salt-containing waste liquid treatment apparatus according to <9>, microorganisms and the like detached from the carrier are effectively sterilized by the sterilizing means in the salt-containing waste liquid to be discarded.
<10> The apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to any one of <1> to <9>, further including a desalting means for performing a desalination treatment on the salt-containing waste liquid brought into contact with the carrier by the contact means. is there.
<11> The salt content according to any one of <9> to <10>, wherein at least one of the sterilizing means and the desalting means is a voltage application device that applies a voltage to the salt-containing waste liquid discharged from the container. This is a waste liquid treatment device. In the apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to <11>, a voltage is applied to the salt-containing waste liquid to be disposed of by the voltage application device, so that microorganisms and the like contained in the salt-containing waste liquid can be effectively used. It is sterilized and the salt-containing waste liquid is effectively desalted. As a result, for example, the salt-containing waste liquid to be discarded can be used as a fertilizer or the like.
<12> The apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to any one of <1> to <11>, wherein the salt-containing waste liquid is an organic waste liquid. In the salt-containing waste liquid treatment apparatus according to <12>, since the salt-containing waste liquid is an organic waste liquid, if the salt-containing waste liquid is disposed of as it is, it causes environmental pollution. Since the organic matter is decomposed and disposed of, there is no risk of environmental pollution.
<13> The apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to <12>, wherein the organic waste liquid is a jellyfish decomposition liquid. In the apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to <13>, since the organic waste liquid is the jellyfish decomposition solution, the organic waste liquid contains an organic substance and a salt, but the efficiency of the microorganisms immobilized on the carrier is improved. Thus, the organic matter is decomposed and removed.
<14> The apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to any one of <1> to <13>, wherein a salt concentration in the salt-containing waste liquid is 1% by mass or more. In the apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to <14>, the salt concentration in the salt-containing waste liquid is relatively high, but due to the action of the microorganisms immobilized on the simple substance, the salt efficiently Organic substances contained in the salt-containing waste liquid are decomposed.
<15> A method for treating a salt-containing waste liquid, comprising contacting a salt-containing waste liquid with a carrier on which microorganisms that can grow in the salt-containing liquid are immobilized. In the salt-containing waste liquid treatment method according to <15>, the salt-containing waste liquid is brought into contact with a carrier on which the microorganism is immobilized. At this time, organic substances and the like contained in the salt-containing waste liquid are efficiently decomposed and removed by the action of the microorganisms. For this reason, according to the method for treating a salt-containing waste liquid, the salt-containing waste liquid containing proteins such as jellyfish can be decomposed at low cost efficiently without requiring special equipment and without causing environmental pollution. Can be discarded.
<16> The apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to any one of <1> to <14>, which is capable of growing in a salt-containing liquid, and the method for treating a salt-containing waste liquid according to <15>. It is a microorganism characterized by being used in at least one of them.
<17> The microorganism according to <16>, which includes a microorganism group using salt-resistant organic matter waste liquid in sludge.
<18> The microorganism according to any one of <16> to <17>, comprising yeast.
<19> The microorganism according to <18>, further including a bacterial group.
<20> The microorganism according to any one of <18> to <19>, wherein the yeast is Rhodotorula mucilaginosa.
<21> The microorganism according to any one of <18> to <20>, wherein the yeast is Rhodotorula mucilaginosa 126-Age strain (Accession No. FERM P-20896).
<22> The group of bacteria comprises bacteria belonging to the genus Sphingobacteria, bacteria belonging to the genus Pseudomonas, bacteria belonging to the genus Flavobacterium, and bacteria belonging to the genus Bacillus The microorganism according to any one of <19> to <21>, which is a bacterial group consisting of at least one species selected from the group.
<23> The aforementioned <22> wherein the bacterium belonging to the genus Sphingobacterium is at least any one selected from Sphingobacterium multivolum and Sphingobacterium spiritiborum <22 >.
<24> The microorganism according to any one of <22> to <23>, wherein the bacterium belonging to the genus Bacillus is Bacillus pumilus.
<25> The microorganism according to any one of <16> to <24>, which is obtained by accumulating a group of microorganisms using salt-resistant organic waste liquid in sludge in a salt-containing waste liquid to be treated.

本発明によると、従来における問題を解決することができ、クラゲ類の分解廃液等の塩分含有廃液を、低コストで効率的に、しかも特別な装置を要せず、環境汚染を生ずることなく分解廃棄可能にする処理装置及び処理方法、並びに、前記処理装置及び処理方法の少なくともいずれかに使用可能な微生物を提供することができる。   According to the present invention, conventional problems can be solved, and salt-containing waste liquids such as jellyfish decomposition waste liquid can be decomposed efficiently at low cost without requiring special equipment and causing environmental pollution. It is possible to provide a processing apparatus and a processing method that can be disposed of, and a microorganism that can be used in at least one of the processing apparatus and the processing method.

(塩分含有廃液の処理装置、処理方法、及び微生物)
本発明の塩分含有廃液の処理装置は、塩分含有液中で生育可能な微生物を固定化した担体と、該担体に塩分含有廃液を接触させる接触手段とを有してなり、更に必要に応じて適宜選択したその他の手段、例えば、殺菌手段等を有してなる。
本発明の塩分含有廃液の処理方法は、塩分含有液中で生育可能な微生物を固定化した担体に、塩分含有廃液を接触させる接触工程を含み、更に必要に応じて適宜選択したその他の処理、例えば殺菌工程等を含む。該塩分含有廃液の処理方法は、本発明の前記塩分含有廃液の処理装置を用いて好適に実施することができる。即ち、前記接触工程は、前記接触手段により、前記殺菌工程は、前記殺菌手段により、前記その他の処理は、前記その他の手段により、それぞれ好適に実施することができる。
以下、本発明の塩分含有廃液の処理装置について説明するが、その説明を通じて本発明の塩分含有廃液の処理方法についても説明する。
また、本発明の微生物は、前記処理装置、及び、前記処理方法の少なくともいずれかに使用されるものである。以下の本発明の塩分含有廃液の処理装置の説明を通じて、本発明の微生物についても説明する。
(Salt-containing waste liquid treatment equipment, treatment method, and microorganism)
The apparatus for treating a salt-containing waste liquid according to the present invention comprises a carrier on which microorganisms that can grow in the salt-containing liquid are immobilized, and contact means for bringing the salt-containing waste liquid into contact with the carrier. It has other means suitably selected, for example, sterilization means.
The method for treating a salt-containing waste liquid according to the present invention includes a contact step of bringing a salt-containing waste liquid into contact with a carrier on which microorganisms that can grow in the salt-containing liquid are immobilized, and other treatments appropriately selected as necessary. For example, a sterilization process is included. The salt-containing waste liquid treatment method can be preferably carried out using the salt-containing waste liquid treatment apparatus of the present invention. That is, the contact step can be suitably performed by the contact unit, the sterilization step can be performed by the sterilization unit, and the other processing can be performed by the other unit.
Hereinafter, although the processing apparatus of the salt containing waste liquid of this invention is demonstrated, the processing method of the salt containing waste liquid of this invention is demonstrated through the description.
Further, the microorganism of the present invention is used in at least one of the processing apparatus and the processing method. The microorganisms of the present invention will also be described through the following description of the apparatus for treating a salt-containing waste liquid of the present invention.

<微生物>
前記微生物としては、前記塩分含有液中で生育可能である限り特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、耐塩性有機物廃液利用微生物群を含むのが好ましい。前記微生物が前記耐塩性有機物廃液利用微生物群を含んでいると、前記塩分含有廃液の分解効率に優れ、連続処理、繰返し処理等が可能である点で有利である。
<Microorganism>
The microorganism is not particularly limited as long as it can grow in the salt-containing liquid, and can be appropriately selected according to the purpose. For example, it preferably includes a salt-resistant organic waste liquid-utilizing microorganism group. When the microorganism contains the group of microorganisms using the salt-resistant organic waste liquid, it is advantageous in that it is excellent in decomposition efficiency of the salt-containing waste liquid and can be subjected to continuous treatment, repeated treatment, and the like.

前記耐塩性有機物廃液利用微生物群としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、汚泥中の耐塩性有機物廃液利用微生物群を使用することができる。
前記汚泥としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、海底汚泥が好ましく、更に、海底表面に近い層(例えば、海底表面から5〜20cm程度、好ましくは5〜10cm程度)から採取した海底汚泥がより好ましい。海底表面に近い層から採取された海底汚泥であると、好気条件下でより効率的にCOD等を低減可能である点で、有利である。
There is no restriction | limiting in particular as the said salt-resistant organic substance waste liquid utilization microorganism group, Although it can select suitably according to the objective, For example, the salt tolerance organic substance waste liquid utilization microorganism group in sludge can be used.
There is no restriction | limiting in particular as said sludge, Although it can select suitably according to the objective, For example, a seabed sludge is preferable, Furthermore, a layer (for example, about 5-20 cm from the seabed surface, for example, preferably 5 Submarine sludge collected from about 10 cm) is more preferable. Submarine sludge collected from a layer close to the seafloor surface is advantageous in that COD and the like can be more efficiently reduced under aerobic conditions.

また、前記微生物としては、前記汚泥中の耐塩性有機物廃液利用微生物群を、処理対象である塩分含有廃液中で集積培養することにより得られた微生物であることが、特に好ましい。このような微生物としては、例えば、クラゲ類を分解後の有機物廃液を、汚泥、好ましくは前記海底汚泥と1〜10質量%混合し、必要に応じて糖類、リン酸塩などの栄養塩類を混合し、前記有機物廃液を主たる栄養源として繁殖する微生物群を馴養することにより得られた微生物群(クラゲ廃液利用微生物群)などが挙げられる。このような微生物群は、処理対象であるクラゲ類の分解液等の前記塩分含有廃液を主たる栄養源として、活発に繁殖可能であり、有機物廃液中のCOD成分等を効果的に除去することができる点で有利である。
なお、前記耐塩性有機物廃液利用微生物群は、例えば、クラゲ分解液等の前記塩分含有廃液を用いて順次、馴養を繰り返すことにより、更にCOD成分等の分解除去能の高い微生物群を選択しかつ集積することができる。
Further, the microorganism is particularly preferably a microorganism obtained by accumulating and culturing a group of microorganisms using salt-resistant organic waste liquid in the sludge in a salt-containing waste liquid to be treated. As such microorganisms, for example, organic waste liquid after decomposing jellyfish is mixed with sludge, preferably with the above-mentioned seabed sludge, and mixed with nutrient salts such as sugars and phosphates as necessary. And a microorganism group obtained by acclimatizing a microorganism group that propagates using the organic waste liquid as a main nutrient source (a jellyfish waste liquid utilizing microorganism group). Such a microorganism group can be actively propagated using the salt-containing waste liquid such as a jellyfish decomposition solution to be treated as a main nutrient source, and can effectively remove COD components and the like in the organic waste liquid. This is advantageous.
The microorganism group using the salt-resistant organic waste liquid is selected from microorganism groups having a higher ability to decompose and remove COD components and the like by repeating the acclimatization sequentially using the salt-containing waste liquid such as a jellyfish decomposition solution. Can be integrated.

前記微生物の種類としては、前記塩分含有廃液中に含まれる有機物等を分解可能である限り特に制限はなく、例えば、酵母、バクテリア(細菌類)、カビ、放線菌等の糸状菌、原生動物、などが挙げられる。これらは、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。前記微生物としては、例えば、好気性菌であってもよいし、嫌気性菌であってもよいが、一般には好気性菌が好適に挙げられる。   The type of the microorganism is not particularly limited as long as the organic matter contained in the salt-containing waste liquid can be decomposed. For example, yeast, bacteria (bacteria), mold, filamentous fungi such as actinomycetes, protozoa, Etc. These may be used individually by 1 type and may use 2 or more types together. The microorganism may be, for example, an aerobic bacterium or an anaerobic bacterium, but in general, an aerobic bacterium is preferably exemplified.

また、前記微生物としては、酵母を含むことが特に好ましい。
前記微生物として酵母を少なくとも使用することにより、廃液処理時に発生する汚泥量をより効率的に低減可能である点や、COD等をより効率的に低減可能である点、また、廃液処理装置をよりコンパクト化できる点などで、有利である。
Moreover, it is particularly preferable that the microorganism contains yeast.
By using at least yeast as the microorganism, the amount of sludge generated during waste liquid treatment can be reduced more efficiently, COD and the like can be reduced more efficiently, and more This is advantageous in that it can be made compact.

前記酵母としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、ロドトルーラ ムシラギノーサ(Rhodotorula mucilaginosa)などが好適に挙げられる。前記ロドトルーラ ムシラギノーサとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、独立行政法人産業技術総合研究所内特許生物寄託センター(IPOD)に平成18年4月21日付で受託番号FERM P−20896として寄託されている126−Aege株などが好適に利用可能である。なお、前記126−Aege株の各種性質は、例えば後述する実施例に示す通りである。
前記酵母として前記ロドトルーラ ムシラギノーサを使用することにより、他の微生物、例えばバクテリア(細菌類)等との併用に好適である点や、COD等をより効率的に低減可能である点で有利である。
なお、前記酵母は、例えば、前記汚泥中の耐塩性有機物廃液利用微生物群から分離することにより得ることも可能である。
There is no restriction | limiting in particular as said yeast, Although it can select suitably according to the objective, For example, Rhodotorula mucilaginosa (Rhodotorula mucilainosa) etc. are mentioned suitably. The Rhodotorula musillaguinosa is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. The 126-Aege strain deposited under the number FERM P-20896 can be suitably used. The various properties of the 126-Age strain are as shown in the examples described later, for example.
Use of Rhodotorula musillaguinosa as the yeast is advantageous in that it is suitable for use in combination with other microorganisms such as bacteria (bacteria), and COD can be more efficiently reduced.
In addition, the said yeast can also be obtained by isolate | separating from the salt-resistant organic substance waste liquid utilization microbe group in the said sludge, for example.

また、前記酵母は、単独で使用されることも好ましいが、例えば前記したような他の微生物と併用されることもまた、好ましい。例えば、バクテリア(細菌群)を、前記酵母と併用することができる。前記酵母とバクテリア(細菌群)とを併用することにより、前記酵母により産生される色素を抑制可能であり、廃液の透明化を促進できるという利点もある。   In addition, the yeast is preferably used alone, but it is also preferable to use it together with other microorganisms as described above, for example. For example, bacteria (bacteria group) can be used in combination with the yeast. By using the yeast and bacteria (bacteria group) together, there is an advantage that the pigment produced by the yeast can be suppressed and the clarification of the waste liquid can be promoted.

前記バクテリア(細菌類)としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、スフィンゴバクテリウム(Sphingobacterium)属に属する細菌、シュードモナス(Pseudomonas)属に属する細菌、フラボバクテリウム(Flavobacterium)属に属する細菌、バチルス(Bacillus)属に属する細菌などが挙げられる。
前記スフィンゴバクテリウム属に属する細菌としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、スフィンゴバクテリウム マルチボーラム(Sphingobacterium multivorum)、スフィンゴバクテリウム スピリチボーラム(Sphingobacterium spiritivorum)などが挙げられる。
前記バチルス属に属する細菌としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、バチルス パミルス(Bacillus pumilus)などが挙げられる。
The bacterium (bacteria) is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include bacteria belonging to the genus Sphingobacteria, bacteria belonging to the genus Pseudomonas, flavobacteria Examples include bacteria belonging to the genus (Flavobaterium), bacteria belonging to the genus Bacillus, and the like.
The bacterium belonging to the genus Sphingobacterium is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Etc.
The bacterium belonging to the genus Bacillus is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include Bacillus pumilus.

なお、前記酵母と、バクテリア(細菌群)等の他の微生物とを併用する場合の各々の使用量比としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。   In addition, there is no restriction | limiting in particular as each usage-amount ratio in the case of using together the said yeast and other microorganisms, such as bacteria (bacteria group), According to the objective, it can select suitably.

<担体>
前記微生物を固定する担体としては、特に制限はなく、前記微生物の種類、目的等に応じて適宜、その形状、構造、大きさ、材質等について選択することができる。
前記担体の形状としては、例えば、球状、粒状、塊状(ペレット状)、シート状、柱状、網状、カプセル状、などが挙げられる。これらは、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。
前記担体の構造としては、1種単独の部材で形成されていてもよいし、2以上の部材で形成されていてもよく、また、単層構造であってもよいし、積層構造であってもよい。これらは、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。
また、前記担体の微細構造としては、例えば、該担体に固定化された前記微生物が前記塩分含有廃液と接触可能な構造であれば特に制限はないが、例えば、多孔質構造、網状構造などが好ましい。前記担体がこれらの構造を有すると、該担体に固定化された微生物と前記塩分含有廃液との接触面積を大きくすることができるため、前記塩分含有廃液の分解処理効率に優れる点で有利である。
前記担体の大きさとしては、該担体を収容する容器等の大きさ、前記微生物の種類等に応じて適宜選択することができる。前記担体の大きさとしては、均一(一定)であってもよいし、互いに異なっていてもよい。
<Carrier>
There is no restriction | limiting in particular as a support | carrier which fixes the said microorganisms, According to the kind, purpose, etc. of the said microorganisms, the shape, a structure, a magnitude | size, a material, etc. can be selected suitably.
Examples of the shape of the carrier include a spherical shape, a granular shape, a lump shape (pellet shape), a sheet shape, a column shape, a net shape, and a capsule shape. These may be used individually by 1 type and may use 2 or more types together.
As the structure of the carrier, it may be formed of one kind of member, may be formed of two or more members, may be a single layer structure, or is a laminated structure. Also good. These may be used individually by 1 type and may use 2 or more types together.
Further, the fine structure of the carrier is not particularly limited as long as the microorganism immobilized on the carrier can be brought into contact with the salt-containing waste liquid. preferable. When the carrier has these structures, the contact area between the microorganisms immobilized on the carrier and the salt-containing waste liquid can be increased, which is advantageous in that the decomposition treatment efficiency of the salt-containing waste liquid is excellent. .
The size of the carrier can be appropriately selected according to the size of a container or the like that contains the carrier, the type of the microorganism, and the like. The size of the carrier may be uniform (constant) or different from each other.

前記担体の材質としては、例えば、多糖類、蛋白質、合成高分子、無機物、などが好適に挙げられる。これらは、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。
前記多糖類としては、例えば、セルロース、デキストラン、アガロース、アルギン酸ナトリウム、寒天、カラギーナンなどが挙げられ、これらの中でも、各種微生物を高濃度に保持可能であるとともに廃液中の成分の透過性に優れ、造粒操作が容易であり、毒性が少なく、処理や処分が容易であるという点で、寒天が好ましい。
前記蛋白質としては、例えば、不活性化されたものが好ましく、その中でも、ゼラチン、アルブミン、コラーゲン、などが挙げられる。
前記合成高分子としては、例えば、アクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリビニルクロリド、ポリスチレン、ポリウレタン、及び光硬化性樹脂などが挙げられる。
前記無機物としては、例えば、シリカゲル、活性炭、砂、ゼオライト、多孔性ガラス、アンスラサイト、ゼオライト、発泡煉石、溶融スラグ、などが挙げられ、これらの中でも多孔質材であるシリカゲル、及び活性炭がより好ましい。
Suitable examples of the material for the carrier include polysaccharides, proteins, synthetic polymers, and inorganic substances. These may be used individually by 1 type and may use 2 or more types together.
Examples of the polysaccharide include cellulose, dextran, agarose, sodium alginate, agar, carrageenan and the like. Among these, various microorganisms can be maintained at a high concentration and excellent in the permeability of components in the waste liquid. Agar is preferred in that the granulation operation is easy, the toxicity is low, and the treatment and disposal are easy.
As the protein, for example, inactivated one is preferable, and among them, gelatin, albumin, collagen and the like can be mentioned.
Examples of the synthetic polymer include acrylamide, polyvinyl alcohol, polyethylene glycol, sodium polyacrylate, polyvinyl chloride, polystyrene, polyurethane, and a photocurable resin.
Examples of the inorganic material include silica gel, activated carbon, sand, zeolite, porous glass, anthracite, zeolite, foam brick, molten slag, and among these, silica gel and activated carbon which are porous materials are more preferable. preferable.

前記担体に前記微生物を固定化する方法としては、特に制限はなく、公知の方法に従って行うことができ、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、付着法(担体結合法)、架橋法、包括法などが好適に挙げられる。これらは、1種単独で採用してもよいし、2種以上を併用してもよい。
前記付着法(担体結合法)は、水に不溶性の前記担体の表面に前記微生物を固定化させる方法である。前記架橋法は、2個以上の官能基を持つ試薬と架橋させる方法である。前記包括法は、前記微生物をゲルの格子内に包み込むか(格子型)又はポリマーの皮膜によって被覆する方法(マイクロカプセル)である。
The method for immobilizing the microorganism on the carrier is not particularly limited and can be carried out according to a known method and can be appropriately selected according to the purpose. For example, an adhesion method (carrier binding method), cross-linking, A law, a comprehensive method, etc. are mentioned suitably. These may be used alone or in combination of two or more.
The adhesion method (carrier binding method) is a method of immobilizing the microorganism on the surface of the carrier that is insoluble in water. The crosslinking method is a method of crosslinking with a reagent having two or more functional groups. The enveloping method is a method of encapsulating the microorganism in a gel lattice (lattice type) or coating with a polymer film (microcapsule).

なお、前記担体に前記微生物を固定化する際の該微生物の固定位置としては、特に制限はなく、前記微生物の好気性、嫌気性等の別、目的等に応じて適宜選択することができるが、例えば、前記微生物が好気性である場合には、該微生物は前記担体の表面近傍に固定化されているのが好ましく、前記微生物が嫌気性である場合には、該微生物は前記担体の内部に固定化されているのが好ましい。   In addition, there is no restriction | limiting in particular as a fixing position of this microorganism at the time of fix | immobilizing the said microorganisms to the said support | carrier, Although it can select suitably according to the objective, etc., such as aerobic and anaerobic property of the said microorganisms. For example, when the microorganism is aerobic, the microorganism is preferably immobilized in the vicinity of the surface of the carrier. When the microorganism is anaerobic, the microorganism is contained inside the carrier. It is preferable that it is fixed to.

前記固定化担体として、寒天を用いたゲル状の担体を製造する場合について、以下に説明する。
前記寒天は、例えば、固定化した微生物の漏出や、内部への侵入が少なく、耐久性に優れ、寿命が長く、安定性が高い濃度である3質量%で担体の造粒を行なうのが好ましい。
前記寒天を3質量%になるように水を混合し、60℃以上で撹拌しながら寒天を溶解する。その後、熱耐性のない前記微生物群を安定に固定化するために、固化しない範囲で可能な限り低温(例えば55℃以下)で前記微生物と混合することが好ましい。
前記微生物は、例えば、遠心分離などの操作によって集菌されたものを用いることができる。
前記微生物を混合した前記寒天を、室温まで冷却させ固化させたのち、成型容器に入れ所望の形状に切断することにより、前記微生物固定化担体が得られる。
The case of producing a gel-like carrier using agar as the immobilization carrier will be described below.
The agar preferably granulates the carrier at a concentration of 3% by mass, which is a concentration of 3% by mass, for example, with little leakage of immobilized microorganisms or penetration into the interior, excellent durability, long life, and high stability. .
Water is mixed so that the agar becomes 3% by mass, and the agar is dissolved while stirring at 60 ° C. or higher. Thereafter, in order to stably immobilize the microorganism group having no heat resistance, it is preferable to mix with the microorganism at as low a temperature as possible (for example, 55 ° C. or less) as long as it does not solidify.
As the microorganism, for example, a microorganism collected by an operation such as centrifugation can be used.
The agar mixed with the microorganisms is cooled to room temperature and solidified, and then placed in a molding container and cut into a desired shape to obtain the microorganism-immobilized carrier.

<容器>
前記微生物を固定した担体(以下、「微生物固定化担体」ということがある)は、前記塩分含有廃液と接触させる際に容器中に収容されているのが好ましい。前記担体が前記容器に収容されていることにより、前記担体と前記塩分含有廃液との接触を効率よく、かつ制御しつつ行うことができる等の点で好ましい。
前記容器としては、特に制限はなく、その形状、構造、大きさ、材質等について目的に応じて適宜選択することができる。
前記容器の形状としては、例えば、円筒状などが好適に挙げられる。
また、前記容器の材質としては、耐塩性材料で形成されているのが好ましく、ガラス、樹脂、ステンレスなどで形成されているのがより好ましく、これらの中でも、該容器の内部を視認可能であるものが好ましい。
前記容器内における前記微生物固定化担体の充填率としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、100%であってもよく、100%未満であってもよい。
また、前記容器は、塩分含有廃液の負荷に応じて、複数を並列又は直列に接続しても良い。
<Container>
The carrier on which the microorganisms are immobilized (hereinafter sometimes referred to as “microorganism-immobilized carrier”) is preferably contained in a container when brought into contact with the salt-containing waste liquid. It is preferable that the carrier is contained in the container in that the contact between the carrier and the salt-containing waste liquid can be performed efficiently and controlled.
There is no restriction | limiting in particular as said container, The shape, a structure, a magnitude | size, a material, etc. can be suitably selected according to the objective.
Suitable examples of the shape of the container include a cylindrical shape.
Further, the material of the container is preferably formed of a salt-resistant material, more preferably formed of glass, resin, stainless steel, etc. Among these, the inside of the container is visible. Those are preferred.
There is no restriction | limiting in particular as a filling rate of the said microorganisms fixed support | carrier in the said container, According to the objective, it can select suitably, 100% may be sufficient, and less than 100% may be sufficient.
A plurality of the containers may be connected in parallel or in series depending on the load of the salt-containing waste liquid.

−溶存酸素濃度調整手段−
前記容器としては、その内部に収容される前記塩分含有廃液中の溶存酸素濃度を調整する溶存酸素濃度調整手段を備えているのが好ましい。この場合、該容器内に収容した前記担体に固定化された前記微生物の生育条件を好適な条件に常に維持することができる点で有利であり、特に溶存酸素濃度の変化により、前記塩分含有廃液に対する分解活性等の変動を効果的に抑制することができる点で有利である。
-Means for adjusting dissolved oxygen concentration-
The container is preferably provided with a dissolved oxygen concentration adjusting means for adjusting the dissolved oxygen concentration in the salt-containing waste liquid accommodated therein. In this case, it is advantageous in that the growth conditions of the microorganisms immobilized on the carrier accommodated in the container can always be maintained at suitable conditions, and in particular, due to a change in dissolved oxygen concentration, the salt-containing waste liquid This is advantageous in that fluctuations in decomposition activity and the like can be effectively suppressed.

前記溶存酸素濃度調整手段としては、前記容器内に空気を泡状に送ることができる手段、エアーリフト手段、攪拌手段などが挙げられる。なお、前記溶存酸素調整手段は、前記容器内に備えさせた酸素濃度センサー等の計測情報に基づいて、前記容器内への溶存酸素濃度を上昇又は低下させることができる制御機構を有しているのが好ましい。この場合、前記酸素濃度センサーとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、市販品等を好適に使用することができる。前記制御機構としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、フィードバック制御機構、PID制御機構、ファジィ制御機構、などが挙げられる。   Examples of the dissolved oxygen concentration adjusting means include means capable of sending air into the container in the form of bubbles, air lift means, stirring means, and the like. The dissolved oxygen adjusting means has a control mechanism capable of increasing or decreasing the dissolved oxygen concentration in the container based on measurement information from an oxygen concentration sensor or the like provided in the container. Is preferred. In this case, there is no restriction | limiting in particular as said oxygen concentration sensor, According to the objective, it can select suitably, For example, a commercial item etc. can be used conveniently. There is no restriction | limiting in particular as said control mechanism, According to the objective, it can select suitably, For example, a feedback control mechanism, a PID control mechanism, a fuzzy control mechanism, etc. are mentioned.

前記溶存酸素濃度調整手段は、塩分含有廃液中の溶存酸素濃度がDO値で好ましくは2mg/L以上、より好ましくは4mg/L以上となるように制御することが好ましい。   The dissolved oxygen concentration adjusting means is preferably controlled so that the dissolved oxygen concentration in the salt-containing waste liquid is preferably 2 mg / L or more, more preferably 4 mg / L or more in terms of DO value.

−接触手段−
前記接触手段としては、前記担体に前記塩分含有廃液を接触させることができる限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、前記容器内に塩分含有廃液を送液する送液装置、などが好適に挙げられる。
前記送液装置としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、塩分含有廃液を導送する管と、該塩分含有廃液を担体に向けて送液する送液ポンプとを有してなるものなどが挙げられる。なお、前記管の形状、構造、大きさ、材質等については特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。前記送液ポンプの駆動は、コンピュータ等の制御手段により制御可能に設計してもよい。
-Contact means-
The contact means is not particularly limited as long as the salt-containing waste liquid can be brought into contact with the carrier, and can be appropriately selected depending on the purpose. For example, the salt-containing waste liquid is fed into the container. Preferred examples include a liquid feeding device.
The liquid feeding device is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the intended purpose. For example, a pipe for feeding the salt-containing waste liquid and a liquid feeding liquid for feeding the salt-containing waste liquid toward the carrier The thing etc. which have a pump are mentioned. In addition, there is no restriction | limiting in particular about the shape of a pipe | tube, a structure, a magnitude | size, a material, etc., According to the objective, it can select suitably. You may design the drive of the said liquid feeding pump so that control is possible by control means, such as a computer.

−その他の手段−
前記その他の手段としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、殺菌手段、脱塩手段、温度調節手段、照明手段、凝集沈殿手段、ろ過手段などが挙げられる。
-Other means-
There is no restriction | limiting in particular as said other means, According to the objective, it can select suitably, For example, a disinfection means, a desalting means, a temperature control means, an illumination means, a coagulation precipitation means, a filtration means etc. are mentioned.

−−殺菌手段−−
前記殺菌手段としては、例えば、前記接触手段により前記担体に接触させられ、分解処理された前記塩分含有廃液に対して殺菌処理を行うことができればよく、例えば、前記塩分含有廃液に対し、電圧を印加する電圧印加装置、オゾンを接触させるオゾン接触装置、紫外線を照射する紫外線照射装置、などが挙げられる。これらは、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。
--Sterilization means--
As the sterilizing means, for example, the salt-containing waste liquid that is brought into contact with the carrier by the contact means and decomposed can be sterilized. For example, a voltage is applied to the salt-containing waste liquid. Examples thereof include a voltage application device to be applied, an ozone contact device for contacting ozone, and an ultraviolet irradiation device for irradiating ultraviolet rays. These may be used individually by 1 type and may use 2 or more types together.

−−脱塩手段−−
前記脱塩手段としては、例えば、前記接触手段により前記担体に接触させられ、分解処理された前記塩分含有廃液に対して脱塩処理を行うことができればよく、例えば、前記塩分含有廃液に対し、電圧を印加する電圧印加装置などが挙げられる。なお、前記塩分含有廃液の処理装置が、前記殺菌手段としての電圧印加装置を備える場合、該電圧印加装置により脱塩を達成することができる。
--Desalting means--
As the desalting means, for example, the salt-containing waste liquid that is brought into contact with the carrier by the contact means and decomposed can be subjected to a desalting treatment. For example, for the salt-containing waste liquid, Examples include a voltage applying device that applies a voltage. In addition, when the processing apparatus of the said salt containing waste liquid is equipped with the voltage application apparatus as said sterilization means, desalting can be achieved with this voltage application apparatus.

−−温度調節手段−−
前記温度手段としては、前記接触手段により前記微生物固定化担体に接触させられる前記塩分含有廃液を、前記微生物の生育及び分解反応を阻害しないような温度に調節可能であればよく、例えば、サーモスタット、ヒーター、送風機等を適宜組合せたものなどが挙げられる。
--- Temperature adjusting means--
As the temperature means, it is sufficient that the salt-containing waste liquid brought into contact with the microorganism-immobilized carrier by the contact means can be adjusted to a temperature that does not inhibit the growth and decomposition reaction of the microorganism, for example, a thermostat, What combined suitably a heater, an air blower, etc. are mentioned.

−−照明手段−−
前記照明手段を備えることにより、前記微生物の中でも明反応を示す好気性微生物群の増殖を増進し、前記塩分含有廃液をより効果的に分解処理することができる。
前記照明手段としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、白熱灯、蛍光灯などが挙げられる。また、屋外光の採光手段であってもよい。
--Lighting means--
By providing the illumination means, it is possible to increase the growth of aerobic microorganisms that exhibit a light reaction among the microorganisms, and to decompose the salt-containing waste liquid more effectively.
There is no restriction | limiting in particular as said illumination means, According to the objective, it can select suitably, An incandescent lamp, a fluorescent lamp, etc. are mentioned. Moreover, it may be a daylighting means for outdoor light.

−−凝集沈殿手段−−
前記凝集沈殿手段としては、例えば、前記接触手段により前記塩分含有廃液が前記微生物固定化担体に接触させられ、処理された後に、発生した懸濁物質を凝集させ、沈殿させることができるような手段であれば特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水酸化カルシウム、酸化カルシウム、アルミン酸ナトリウム等の試薬を利用したものなどが挙げられる。
-Means for aggregation and precipitation-
As the coagulation sedimentation means, for example, the salt-containing waste liquid is brought into contact with the microorganism-immobilized carrier by the contact means, and after the treatment, the generated suspended substance can be aggregated and precipitated. If it is, there will be no restriction | limiting in particular, According to the objective, it can select suitably, For example, what utilized reagents, such as calcium hydroxide, calcium oxide, sodium aluminate, etc. are mentioned.

−−ろ過手段−−
前記ろ過手段としては、例えば、前記凝集沈殿手段により形成された沈殿を除去できるような手段であれば特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、活性炭を利用したカラムなどが挙げられる。
--- Filtration means--
The filtration means is not particularly limited as long as it can remove the precipitate formed by the coagulation sedimentation means, and can be appropriately selected according to the purpose. For example, a column using activated carbon, etc. Is mentioned.

<塩分含有廃液>
本発明の塩分含有廃液の処理装置及び処理方法において、分解処理する対象である前記塩分含有廃液としては、塩分を含んでおり、そのまま廃棄処分をすることができない程度に有機物等を含んでいるものであれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、有機物廃液などが挙げられる。
前記有機物廃液としては、前記担体に固定化された前記微生物が分解しやすい態様であることが好ましく、例えば、蛋白質であれば蛋白質分解酵素などによって、アミノ酸にまで切断された状態であることが好ましい。
前記有機物廃液の発生過程において、塩分濃度が減少した場合には、例えば、新たに塩分を追加することによって、前記微生物による分解効率を維持することができる。
また、前記有機物廃液中の有機物濃度が低い場合は、適宜ブドウ糖などの糖類、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウムなどの窒素源、塩化カリウム、リン酸ナトリウムなどの無機塩類の1種又は2種以上を、前記有機物廃液に混合することによって、前記担体に固定化した前記微生物の活発な増殖に資することができる。
<Salt-containing waste liquid>
In the apparatus and method for treating a salt-containing waste liquid according to the present invention, the salt-containing waste liquid to be decomposed contains salt and contains organic substances to the extent that it cannot be disposed of as it is. If it is, there is no restriction | limiting in particular, Although it can select suitably according to the objective, For example, organic substance waste liquid etc. are mentioned.
The organic waste liquid is preferably in a mode in which the microorganisms immobilized on the carrier are easily decomposed. For example, in the case of a protein, it is preferably in a state of being cleaved to amino acids by a proteolytic enzyme or the like. .
In the process of generating the organic waste liquid, when the salinity concentration decreases, the decomposition efficiency by the microorganisms can be maintained, for example, by adding new salinity.
In addition, when the organic matter concentration in the organic waste liquid is low, one or more of saccharides such as glucose, nitrogen sources such as ammonium sulfate and ammonium chloride, and inorganic salts such as potassium chloride and sodium phosphate are appropriately added to the organic matter. Mixing with the waste liquid can contribute to the active growth of the microorganisms immobilized on the carrier.

−クラゲ分解液−
前記有機物廃液としては、各種存在し、これらのいずれであってもよいが、本発明においては、クラゲ分解液であるのが特に好ましい。該クラゲ分解液中には、アミノ酸〜ペプチドレベルの有機物分子が存在し、この程度にまで低分子化された有機物分子を更に分解することは技術的にもコスト的にも極めて難しいのであるが、本発明によれば、このようなクラゲ分解液中に含まれる有機物等も効果的に分解処理することができる点で有利である。
-Jellyfish decomposition solution-
There are various kinds of the organic waste liquid, and any of these may be used. In the present invention, a jellyfish decomposition liquid is particularly preferable. In the jellyfish decomposition solution, there are organic molecules at the amino acid to peptide level, and it is extremely difficult in terms of technology and cost to further decompose the organic molecules that have been reduced to this level. According to the present invention, it is advantageous in that an organic substance contained in such a jellyfish decomposition solution can be effectively decomposed.

前記塩分含有廃液中の塩分濃度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、1質量%以上であり、前記微生物の分解活性に悪影響を与えることなく、前記クラゲ分解液等の塩分含有廃液中の有機物等を効率よく分解処理する観点からは、海水程度の濃度であるのが好ましい。   The salt concentration in the salt-containing waste liquid is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose.For example, it is 1% by mass or more, and without adversely affecting the decomposition activity of the microorganism, From the viewpoint of efficiently decomposing organic matter in a salt-containing waste liquid such as a jellyfish decomposition solution, the concentration is preferably about seawater.

なお、前記クラゲ分解液としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、本発明者らが開発したプリオナーゼ酵素を用いてクラゲ類を分解処理した液が好ましく、更には、本発明者が開発したクラゲ分解装置を用いてクラゲ類を分解処理して得た液がより好ましい。   The jellyfish decomposition solution is not particularly limited and may be appropriately selected according to the purpose. However, a solution obtained by decomposing jellyfish using a prionase enzyme developed by the present inventors is preferable, and A liquid obtained by decomposing jellyfish using a jellyfish decomposing apparatus developed by the present inventors is more preferable.

−−プリオナーゼ酵素−−
前記プリオナーゼ酵素は、本発明者により開発された酵素であり、ウシ海綿状脳症(狂牛病)、スクレイピー(羊)、クロイツフェルト・ヤコブ病など、プリオン病の原因となる異常プリオン蛋白質を分解する酵素プリオナーゼ産生微生物から得た酵素である。一般に、前記異常プリオン蛋白質は、各種の蛋白質分解酵素、消毒薬やオートクレーブ処理に対し非常に安定で、処理法も限定されているが、前記プリオナーゼ酵素によれば、前記異常プリオン蛋白質を37℃、5分間で分解することができ、また、東京湾で採取したミズクラゲを至適条件下において30分間以内で完全に分解できる。
--Prionase enzyme--
The prionase enzyme is an enzyme developed by the present inventor and degrades abnormal prion proteins that cause prion diseases such as bovine spongiform encephalopathy (mad cow disease), scrapie (sheep), Creutzfeldt-Jakob disease, etc. It is an enzyme obtained from the enzyme prionase-producing microorganism. In general, the abnormal prion protein is very stable against various proteolytic enzymes, disinfectants and autoclave treatments, and treatment methods are limited. According to the prionase enzyme, the abnormal prion protein is The jellyfish collected in Tokyo Bay can be completely decomposed within 30 minutes under optimum conditions.

前記プリオナーゼ酵素を産生する微生物は、抗生物質、抗癌剤、免疫抑制剤などの生理活性物質を多く産生することが知られているストレプトミセス属の放線菌に属する微生物であり、病原性はない。一般に放線菌は土壌に多く存在し、環境中では有機物分解を担っている。前記プリオナーゼ酵素は、70℃、アルカリ側で至適の蛋白質分解活性を示す。また、前記プリオナーゼ酵素は、ミズクラゲに限らずエチゼンクラゲ、ビゼンクラゲ、アカクラゲ、サカサクラゲなど他種のクラゲも分解することができる。なお、前記プリオナーゼ酵素によるクラゲ類の分解後の前記クラゲ分解液は、その粘性が非常に低く、蛋白質を構成しているアミノ酸からペプチドの大きさにまでに分子が切断されている。   The microorganisms that produce the prionase enzyme are microorganisms belonging to Streptomyces actinomycetes, which are known to produce a large amount of physiologically active substances such as antibiotics, anticancer agents, and immunosuppressants, and are not pathogenic. In general, a large number of actinomycetes are present in soil and are responsible for organic matter decomposition in the environment. The prionase enzyme exhibits optimal proteolytic activity on the alkali side at 70 ° C. The prionase enzyme can also decompose other types of jellyfish such as jellyfish jellyfish, bizen jellyfish, red jellyfish and scorpion jellyfish. The jellyfish decomposition solution after the decomposition of jellyfish by the prionase enzyme has a very low viscosity, and the molecules are cleaved from the amino acid constituting the protein to the size of the peptide.

前記ストレプトミセス属放線菌としては、例えば、エスピー種放線菌から選択されるものが好ましい。
前記エスピー種放線菌としては、例えば、以下のA〜C、好ましくはA〜Dの菌学的性質を有するものが好適に挙げられ、99−GP−2D−5株(FERM P−19336)及びその誘導菌株から選択されるものがより好適に挙げられる。
A.形態的性質
(1)分枝した基生菌糸より、比較的長い波状の気菌糸を伸長し、まれにかぎ状あるいはル−プ状を呈する。
(2)成熟した胞子鎖は10〜50個の卵円形の胞子を連鎖し、胞子の大きさは約0.6〜0.7×0.8〜1.0ミクロンである。
(3)胞子の表面は平滑である。
(4)輪生枝、菌束糸、胞子のうおよび運動性胞子は認められない。
B.細胞壁組成としてLL型の2,6−ジアミノピメリン酸を含有する。
C.16SリボゾームRNA遺伝子の部分塩基配列(400〜500bp)によるストレプトミセス属放線菌に対する相同性90%以上、好ましくは95%以上。
D.各種培地における生育状態
(1)イ−スト・麦芽寒天培地(ISP−培地2、27℃培養)、うす黄[2ea, LtWheat]の発育上に、灰白[1 dc, Putty]〜明るいオリーブ灰[1 1/2 ge,Lt Olive Gray]の気菌糸をわずかに着生し、可溶性色素は認められない。
(2)オートミール寒天培地(ISP−培地3、27℃培養)、無色〜うす黄[1 1/2 ca, Cream]の発育上に、白の気菌糸をわずかに着生し、可溶性色素は認められない。
(3)スタ−チ・無機塩寒天培地(ISP−培地4、27℃培養)、無色の発育上に、白の気菌糸をわずかに着生し、可溶性色素は認められない。
(4)グリセリン・アスパラギン寒天培地(ISP−培地5、27℃培養)、発育は無色、気菌糸は着生せず、可溶性色素は認められない。
(5)シュクロ−ス・硝酸塩寒天培地(27℃培養)、無色の発育上に、白の気菌糸をうっすらと着生し、可溶性色素は認められない。
As the Streptomyces genus actinomycetes, for example, those selected from sp.
As the SP species actinomycetes, for example, those having the following A to C, preferably A to D bacteriological properties are suitably exemplified, such as 99-GP-2D-5 strain (FERM P-19336) and More preferred are those selected from the derived strains.
A. Morphological properties (1) A relatively long wavy aerial hyphae is elongated from a branched basic hyphae and rarely has a hook or loop shape.
(2) The mature spore chain links 10 to 50 oval spore, and the size of the spore is about 0.6 to 0.7 × 0.8 to 1.0 micron.
(3) The spore surface is smooth.
(4) No roticular branch, mycelial bundle, spore and motility spore are observed.
B. The cell wall composition contains LL-type 2,6-diaminopimelic acid.
C. 90% or more, preferably 95% or more homology to Streptomyces actinomycetes due to a partial base sequence (400 to 500 bp) of 16S ribosomal RNA gene.
D. Growth state in various media (1) On the growth of yeast / malt agar medium (ISP-medium 2, cultured at 27 ° C.) and light yellow [2ea, LtWheat], grayish white [1 dc, Putty] to bright olive ash [ 1 1/2 ge, Lt Olive Gray] slightly aerial mycelia were formed, and no soluble pigment was observed.
(2) Oatmeal agar medium (ISP-medium 3, 27 ° C. culture), colorless to light yellow [1 1/2 ca, Cream], white aerial mycelia grow slightly, soluble pigment is observed I can't.
(3) On a starch / inorganic salt agar medium (ISP-medium 4, 27 ° C. culture) and colorless growth, white aerial mycelia are slightly formed and no soluble pigment is observed.
(4) Glycerin / asparagine agar medium (ISP-medium 5, 27 ° C. culture), growth is colorless, aerial hyphae do not grow, and no soluble pigment is observed.
(5) On a sucrose / nitrate agar medium (27 ° C. culture), colorless growth, white aerial mycelia are slightly formed and no soluble pigment is observed.

前記ストレプトミセス・エスピー99−GP−2D−5株(FERM P−19336)の誘導菌株としては、ストレプトミセス・エスピー99−GP−2D−5株の子孫や、ストレプトミセス・エスピー99−GP−2D−5株の人工又は自然変異体であって、難分解性蛋白質を分解することができるプロテアーゼ産生能を有する菌株、などが挙げられる。なお、ストレプトミセス・エスピー99−GP−2D−5株は、他のストレプトミセス属の菌株と同様、その性状が変化し易く、例えば、紫外線、エックス線及び薬剤などを用いる人工的な変異手段で容易に変異し得る。   Examples of the derived strain of Streptomyces sp. 99-GP-2D-5 (FERM P-19336) include progeny of Streptomyces sp. 99-GP-2D-5 and Streptomyces sp. 99-GP-2D. -5 strains which are artificial or natural mutants and have a protease-producing ability capable of degrading a hardly degradable protein. The Streptomyces sp. 99-GP-2D-5 strain, like other Streptomyces strains, is susceptible to changes in its properties, for example, by artificial mutation means using ultraviolet rays, X-rays, drugs, and the like. Can be mutated.

−−クラゲ分解装置−−
前記クラゲ分解装置は、サイフォンを利用したクラゲ分解装置であり、(1)分解槽の中に攪拌装置を必要としない、(2)ポンプが1台で運転が可能なのでランニングコストを抑え、保守管理を容易にすることができる、(3)分解槽から分解液が溢れることがない、(4)分解の様子が容易に観察できる、(5)装置を簡単に大型化できる、及び(6)連続的に分解できる、などの特長を有する。
--- Jellyfish decomposition device-
The jellyfish decomposition device is a jellyfish decomposition device that uses a siphon. (1) No agitation device is required in the decomposition tank. (2) Since one pump can be operated, the running cost is reduced and maintenance management is performed. (3) The decomposition liquid does not overflow from the decomposition tank, (4) The state of decomposition can be easily observed, (5) The apparatus can be easily enlarged, and (6) Continuous It can be decomposed automatically.

前記クラゲ分解装置の具体例としては、図4に示す湿式処理装置が好適に挙げられる。図4に示す装置において、循環・加温槽50内に予め収容させておいた前記プリオナーゼを含む処理液(以下、「クラゲ分解用組成物」と表す)を、前記配管における仕切弁140を「開」にし、仕切弁60、仕切弁70、仕切弁110及び仕切弁130を「閉」にしておき、前記配管に設けた送液ポンプ4を駆動させて汲み上げて、分解槽10内に移送させる。すると、前記クラゲ分解用組成物は、前記液状物流入口から分解槽10内に流入し、仕切槽20内に収容されたクラゲに接触し、該クラゲが該クラゲ分解用組成物によって接触処理される。このとき、このとき、前記クラゲは、分解槽10の下部から内部に流入するクラゲ分解用組成物により、上方に押し上げられるようにして接触処理される。即ち、前記クラゲは、重力方向に落下しようとするのに対し、前記クラゲ分解用組成物は、この落下しようとするクラゲを押し上げるようにして接触する。このため、前記クラゲに付加される重力と、前記クラゲ分解用組成物の流圧との相乗効果により、前記接触処理が効果的に行われ、前記クラゲが効率よく分解される。   As a specific example of the jellyfish decomposition apparatus, a wet processing apparatus shown in FIG. 4 is preferably exemplified. In the apparatus shown in FIG. 4, a treatment liquid containing the prionase previously stored in the circulation / warming tank 50 (hereinafter, referred to as a “jellyfish decomposition composition”) is supplied to the gate valve 140 in the pipe as “ "Open", the gate valve 60, the gate valve 70, the gate valve 110 and the gate valve 130 are "closed", the liquid feed pump 4 provided in the pipe is driven to pump up, and transferred into the decomposition tank 10 . Then, the jellyfish decomposing composition flows into the decomposing tank 10 from the liquid flow inlet, contacts the jellyfish accommodated in the partition tank 20, and the jellyfish is contact-treated by the jellyfish decomposing composition. . At this time, the jellyfish is contact-treated so as to be pushed upward by the jellyfish decomposing composition flowing into the inside from the lower part of the decomposition tank 10. That is, the jellyfish is about to fall in the direction of gravity, whereas the jellyfish decomposing composition comes into contact with the jellyfish about to fall. For this reason, the contact treatment is effectively performed by the synergistic effect of the gravity applied to the jellyfish and the fluid pressure of the jellyfish decomposing composition, and the jellyfish is efficiently decomposed.

分解槽10内に流入する前記クラゲ分解用組成物の一部は、分解槽10の下部に設けられた前記液状物流出口からサイフォン管30内に流出する。そして、分解槽10内に流入する前記クラゲ分解用組成物の液量の増量(水位の上昇)と共に、分解槽10における前記液状物流出口に接続され、該液状物流出口付近から上方に向けて延設され、分解槽10の上部付近で下方に向けて湾曲するサイフォン管30内において前記クラゲ分解用組成物の液量も同様の速度で増量(水位が上昇)する。そして、サイフォン管30内において前記クラゲ分解用組成物の液量(水位)がサイフォン管30の湾曲部に達すると、サイフォンの原理により、分解槽10内の前記クラゲ分解用組成物が、前記液状物流出口からサイフォン管30を通して外部に連続的に移送され、サイフォン管30の先端170から循環・加温槽50内に連続的に移送される。このとき、仕切槽20内においては、前記クラゲ分解用組成物の減量と共に前記クラゲが自重で落下していき、該クラゲ分解用組成物が総て外部に移送された際には、仕切槽20の底面に衝突し、その際の衝撃等により破損等し小片化する。   A part of the jellyfish decomposition composition flowing into the decomposition tank 10 flows out into the siphon tube 30 from the liquid flow outlet provided in the lower part of the decomposition tank 10. Then, along with an increase in the liquid amount of the jellyfish decomposition composition flowing into the decomposition tank 10 (increase in the water level), it is connected to the liquid distribution outlet in the decomposition tank 10 and extends upward from the vicinity of the liquid distribution outlet. In the siphon tube 30 that is provided and curves downward near the upper part of the decomposition tank 10, the liquid amount of the jellyfish decomposition composition increases (the water level increases) at the same rate. When the liquid amount (water level) of the jellyfish decomposing composition in the siphon tube 30 reaches the curved portion of the siphon tube 30, the jellyfish decomposing composition in the decomposition tank 10 is liquid according to the principle of siphon. The material is continuously transferred from the distribution outlet to the outside through the siphon tube 30, and continuously transferred from the tip 170 of the siphon tube 30 into the circulation / heating tank 50. At this time, in the partition tank 20, the jellyfish falls by its own weight as the jellyfish decomposition composition is reduced, and when all of the jellyfish decomposition composition is transferred to the outside, the partition tank 20. It collides with the bottom surface of the plate and breaks into small pieces due to the impact and the like.

循環・加温槽50内に移送された前記クラゲ分解用組成物は、前記配管に設けた送液ポンプ40を駆動させることにより、再度汲み上げられて、分解槽10内に再度移送される。これにより、分解槽10内において2回目の接触処理が行われる。このとき、前記配管における仕切弁140は「開」にし、仕切弁60、仕切弁70、仕切弁110及び仕切弁130は「閉」にしておく。なお、前記配管に設けた送液ポンプ40を連続的に駆動させておくと、分解槽10内に再移送、分解槽10内での再接触処理を連続的に繰り返すことができる。この接触処理を複数回行うことにより、仕切槽20内に収容されたクラゲが完全に分解され、前記クラゲ分解用組成物中に溶解する。   The jellyfish decomposing composition transferred into the circulation / warming tank 50 is pumped up again by driving the liquid feed pump 40 provided in the pipe and transferred into the decomposition tank 10 again. Thereby, the second contact process is performed in the decomposition tank 10. At this time, the gate valve 140 in the piping is “open”, and the gate valve 60, gate valve 70, gate valve 110, and gate valve 130 are “closed”. In addition, if the liquid feeding pump 40 provided in the said piping is continuously driven, the re-transfer in the decomposition tank 10 and the recontact process in the decomposition tank 10 can be repeated continuously. By performing this contact treatment a plurality of times, the jellyfish accommodated in the partition tank 20 are completely decomposed and dissolved in the jellyfish decomposing composition.

また、循環・加温槽50内では、必要に応じて、サイフォン管30により移送された前記クラゲ分解用組成物を加温管80内を通過させ、循環させることによって加温乃至反応させることができる。即ち、加温管80内を通過し、循環・加温槽50内を循環することにより、前記クラゲ分解用組成物は、均一に混合され、また、ヒーター90によって該クラゲ分解用組成物中に含まれる前記酵素の至適温度に加温されることにより(前記クラゲ分解用組成物の温度が、そこに含まれる酵素の既に至適温度に達している場合には、ヒーター90を作動させる必要はない)、該クラゲ分解用組成物中に含まれる未分解のクラゲ細片等(クラゲ蛋白質)の完全かつ効率的な分解が進み、前記クラゲ蛋白質が均一に溶解した溶液としての前記クラゲ分解用組成物が調製される。なお、循環・加温槽50内の前記クラゲ分解用組成物を、加温管80内を通過させて循環・加温槽50内で循環させるには、前記配管における仕切弁70を「開」にし、仕切弁60、仕切弁130及び仕切弁140を「閉」にしておき、前記配管に設けた送液ポンプ40を駆動させることにより行うことができる。また、このとき、循環・加温槽50内の前記クラゲ分解用組成物の全部を、加温管80内を通過させて循環・加温槽50内で循環させてもよいし、循環・加温槽50内の前記クラゲ分解用組成物の一部を、加温管80内を通過させて循環・加温槽50内で循環させ、残りの一部を分解槽10内に移送させてもよい。   Further, in the circulation / heating tank 50, the jellyfish decomposition composition transferred by the siphon tube 30 is allowed to warm or react by passing through the heating tube 80 and circulating as necessary. it can. That is, the jellyfish decomposition composition is uniformly mixed by passing through the heating pipe 80 and circulating in the circulation / heating tank 50, and is also mixed into the jellyfish decomposition composition by the heater 90. By heating to the optimum temperature of the enzyme contained (when the temperature of the jellyfish decomposition composition has already reached the optimum temperature of the enzyme contained therein, it is necessary to operate the heater 90) The jellyfish degrading solution as a solution in which the jellyfish protein is uniformly dissolved as a result of complete and efficient degradation of undegraded jellyfish fragments (jellyfish protein) contained in the jellyfish decomposing composition A composition is prepared. In order to allow the jellyfish decomposition composition in the circulation / heating tank 50 to pass through the heating pipe 80 and circulate in the circulation / heating tank 50, the gate valve 70 in the piping is "open". The gate valve 60, the gate valve 130, and the gate valve 140 are set to “closed”, and the liquid feed pump 40 provided in the pipe is driven. At this time, all of the jellyfish decomposing composition in the circulation / heating tank 50 may be circulated in the circulation / heating tank 50 by passing through the heating tube 80, or the circulation / heating tank 50 may be circulated. Even if a part of the composition for decomposing jellyfish in the warm bath 50 is circulated in the circulation / heating bath 50 through the heating tube 80, the remaining portion is transferred into the decomposition bath 10. Good.

<塩分含有廃液の処理方法>
前記塩分含有廃液の処理方法としては、例えば、後述する実施例に示すように、図1に示す本発明の塩分含有廃液の処理装置を用い、前記微生物が最良の増殖を示し、前記有機物の除去を行なうことができる温度に調節された前記微生物固定化担体を備える前記容器内に、前記塩分含有廃液を送液し、循環させることによって行うことができる。必要に応じて前記の工程を繰り返すことにより、前記塩分含有廃液中の有機物は、所望の程度まで分解処理される。
<Method of treating salt-containing waste liquid>
As a method for treating the salt-containing waste liquid, for example, as shown in the examples described later, the microorganisms show the best growth using the salt-containing waste liquid treatment apparatus of the present invention shown in FIG. The salt-containing waste liquid can be fed and circulated into the container provided with the microorganism-immobilized carrier that has been adjusted to a temperature capable of performing the process. By repeating the above steps as necessary, the organic matter in the salt-containing waste liquid is decomposed to a desired degree.

COD成分等の除去が行なわれた廃水は、微生物群固定化担体から漏出した微生物の殺菌を目的として、例えば、分岐管の操作によって電気分解槽へ移送することが出来る。その際、固定化された前記微生物が充填された前記容器への廃液の移送経路は、前記微生物の死滅を防止するため、バルブを設置した分岐管によって閉鎖することが望ましい。この殺菌の工程は上述のとおり、殺菌の工程が完了するまで、前記容器へ返送と循環を繰り返すことが出来る。   The waste water from which the COD components and the like have been removed can be transferred to an electrolysis tank by, for example, operating a branch pipe for the purpose of sterilizing microorganisms leaking from the microorganism group-immobilized carrier. At this time, it is desirable that the transfer path of the waste liquid to the container filled with the immobilized microorganisms is closed by a branch pipe provided with a valve in order to prevent the microorganisms from being killed. As described above, the sterilization process can be repeated and returned to the container until the sterilization process is completed.

以下、本発明の実施例について説明するが、本発明は、これらの実施例になんら限定されるものではない。   Examples of the present invention will be described below, but the present invention is not limited to these examples.

(実施例1:熱水処理クラゲ廃液の処理)
(1)塩分含有廃液(クラゲの有機物廃液)の調製
クラゲを90℃以上の熱水で約1時間加熱し、完全に溶解した後に室温まで冷却し、クラゲの廃液を調製した。
(Example 1: Treatment of hot water treatment jellyfish waste liquid)
(1) Preparation of salt-containing waste liquid (organic jellyfish waste liquid) The jellyfish was heated with hot water at 90 ° C. or higher for about 1 hour, completely dissolved, and then cooled to room temperature to prepare a jellyfish waste liquid.

(2)耐塩性有機物利用微生物群の馴養
前記(1)で得たクラゲ由来の塩分含有廃液のうち100mLを、500mL容三角フラスコに入れ、海底底泥を10g混合した。さらに27℃、毎分180回転の条件下で海底低泥に含まれる、耐塩性有機物利用微生物群を馴養した。
(2) Acclimatization of salt-resistant organic matter-utilizing microorganism group 100 mL of the jellyfish-derived salt-containing waste liquid obtained in (1) above was placed in a 500 mL Erlenmeyer flask, and 10 g of seabed mud was mixed. Furthermore, the salt-resistant organic matter-utilizing microorganism group contained in the seabed low mud was conditioned under the conditions of 27 ° C. and 180 rpm.

(3)微生物の調製
前記(2)で得た前記耐塩性有機物利用微生物群を含む溶液1mLを、前記(1)と同様にして調製したクラゲの有機物廃液と混合し、同様に馴養を繰り返した。馴養を数回繰り返すことによって、より高活性の塩分含有廃液の処理方法に好適な微生物を高濃度に集積することが出来る。
(3) Preparation of microorganisms 1 mL of the solution containing the salt-tolerant organic substance-utilizing microorganism group obtained in (2) above was mixed with the jellyfish organic waste liquid prepared in the same manner as in (1) above, and repeated acclimatization in the same manner. . By repeating the acclimatization several times, it is possible to accumulate a high concentration of microorganisms suitable for the treatment method of a highly active salt-containing waste liquid.

(4)微生物固定化担体の調製
前記(3)で得た耐塩性有機物廃液利用微生物群は、遠心分離(10分間、10,000×g)によって微生物菌体を集菌した。100℃で溶解した後、50℃以下までに冷却した3%寒天(DIFCO社製)と、遠心分離によって集菌した微生物菌体を1%濃度になるように混合し、シリコンチューブ(内径6mm)へシリンジで注入した。シリコンチューブ内に注入した微生物群を固定化した寒天が固化したら、シリコンチューブの内径より細い棒状の押し出し器で押し出した後に、3mmの長さになるように固化した寒天を切断し、微生物群固定化担体を調製した。
(4) Preparation of microorganism-immobilized carrier The microorganism group using the salt-tolerant organic waste liquid obtained in (3) was collected by centrifugation (10 minutes, 10,000 xg). After dissolving at 100 ° C, 3% agar (made by DIFCO) cooled to 50 ° C or less and microbial cells collected by centrifugation are mixed to a concentration of 1%, and a silicon tube (inner diameter 6 mm) Was injected with a syringe. Once the agar immobilized with the microorganisms injected into the silicon tube has solidified, it is extruded with a rod-shaped extruder thinner than the inner diameter of the silicon tube, and then the solidified agar is cut to a length of 3 mm to fix the microorganisms. A modified carrier was prepared.

(5)塩分含有廃液の処理
図1に示す装置を用いて、処理を行った。図1において、1は廃水槽、2は移送ポンプ、3は三方コック、4は通気装置(溶存酸素濃度調整手段)、5はバイオリアクター(容器)、6は電気分解槽(殺菌手段)、7は仕切弁をそれぞれ示す。
(5) Treatment of salt-containing waste liquid Treatment was carried out using the apparatus shown in FIG. In FIG. 1, 1 is a wastewater tank, 2 is a transfer pump, 3 is a three-way cock, 4 is a venting device (dissolved oxygen concentration adjusting means), 5 is a bioreactor (container), 6 is an electrolysis tank (sterilizing means), 7 Indicates a gate valve.

有機物廃液の処理過程において、廃液槽1から移送ポンプ2によって毎分150mLの流速で移送された有機物廃液は、三方コックの操作によってバイオリアクター5に移送されるように操作した。バイオリアクター5には上記(1)〜(4)の方法で調製した微生物群固定化担体を充填し、通気装置からは、バイオリアクター内が好気的条件となるように空気を供給した。廃液槽1の容積は18リットルで、バイオリアクター5の容積は1.8リットルである。廃液槽1からバイオリアクター5を通過して、再び廃液槽1に循環させ、有機物廃液の処理を行なった。結果を図2に示す。   In the treatment process of the organic waste liquid, the organic waste liquid transferred from the waste liquid tank 1 by the transfer pump 2 at a flow rate of 150 mL per minute was operated so as to be transferred to the bioreactor 5 by the operation of the three-way cock. The bioreactor 5 was filled with the microorganism group-immobilized support prepared by the above methods (1) to (4), and air was supplied from the aeration apparatus so that the bioreactor was in an aerobic condition. The volume of the waste liquid tank 1 is 18 liters, and the volume of the bioreactor 5 is 1.8 liters. The waste liquid tank 1 passed through the bioreactor 5 and was circulated again to the waste liquid tank 1 to treat the organic waste liquid. The results are shown in FIG.

図2から、前記塩分含有廃液は、前記微生物固定化担体による分解前に1,280ppmあったCOD(化学的酸素要求量)値が、3日後には122ppmまで減少し、さらに7日後には88ppmまで減少したことがわかった。   From FIG. 2, the salt-containing waste liquid had a COD (chemical oxygen demand) value of 1,280 ppm before decomposition with the microorganism-immobilized support decreased to 122 ppm after 3 days, and further 88 ppm after 7 days. It turned out that it decreased to.

処理終了後、廃液は三方コック3の操作をすることによって、バイオリアクター5を通過させることなく、電気分解槽6を通過させ、廃液槽1を循環させることによって有機物廃液中にバイオリアクター5から漏出した微生物群を殺菌した。電気分解槽には白金電極が設置されており、9V、9Aの直流電気を通電し、循環を15分間行なうことによって、廃液中に含まれる塩分を電解質として電気分解した。殺菌効果の結果を図3に示す。   After the treatment is finished, the waste liquid leaks from the bioreactor 5 into the organic waste liquid by passing through the electrolysis tank 6 and circulating the waste liquid tank 1 without passing through the bioreactor 5 by operating the three-way cock 3. The microbial population was sterilized. A platinum electrode was installed in the electrolysis tank, and the direct current of 9V and 9A was energized and circulated for 15 minutes to electrolyze the salt contained in the waste liquid as an electrolyte. The result of the bactericidal effect is shown in FIG.

図3の結果から、電気分解前に1mLあたり6.75×10個あった微生物群は、15分間の電気分解処理によって、1mLあたり1.14×10個に減少したことがわかった。 From the results shown in FIG. 3, it was found that the microorganism group, which was 6.75 × 10 7 per mL before electrolysis, was reduced to 1.14 × 10 4 per mL by the electrolysis treatment for 15 minutes.

以上の工程を終えた廃液処理水は、仕切弁7を解放することによって系外に放出することが可能である。実施例1の結果から、本発明による処理方法により、塩分を含む有機物廃液中からCOD成分を短時間で、効率よく除去できることが認められた。   The waste liquid treated water after the above steps can be discharged out of the system by releasing the gate valve 7. From the results of Example 1, it was confirmed that the COD component can be efficiently removed in a short time from the organic waste liquid containing salt by the treatment method according to the present invention.

(実施例2:酵素処理クラゲ廃液の処理)
実施例1において、分解対象物である塩分含有廃液(クラゲの有機物廃液)を、図4に示す装置を用い、分解酵素としてプリオナーゼを用いて以下の方法によりクラゲを分解して調製した以外は、実施例1と同様にして前記塩分含有廃液の処理を行った。
(Example 2: Treatment of enzyme-treated jellyfish waste liquid)
In Example 1, except that the salt-containing waste liquid (organic jellyfish waste liquid), which is a decomposition target, was prepared by decomposing jellyfish by the following method using prionase as a degrading enzyme using the apparatus shown in FIG. The salt-containing waste liquid was treated in the same manner as in Example 1.

図4に示す装置において、循環・加温槽50内に予め収容させておいた前記プリオナーゼを含む処理液(クラゲ分解用組成物)を、分解槽10内に移送させ、仕切槽20内に収容されたクラゲに接触させる。前記クラゲは、分解槽10の下部から内部に流入するクラゲ分解用組成物により、上方に押し上げられるようにして接触処理される。
分解槽10内に流入した前記クラゲ分解用組成物の一部は、分解槽10の下部に設けられた前記液状物流出口からサイフォン管30内に流出する。そして、分解槽10内に流入する前記クラゲ分解用組成物の液量の増量(水位の上昇)と共に、分解槽10における前記液状物流出口に接続され、該液状物流出口付近から上方に向けて延設され、分解槽10の上部付近で下方に向けて湾曲するサイフォン管30内において前記クラゲ分解用組成物の液量も同様の速度で増量(水位が上昇)する。そして、サイフォン管30内において前記クラゲ分解用組成物の液量(水位)がサイフォン管30の湾曲部に達すると、サイフォンの原理により、分解槽10内の前記クラゲ分解用組成物が、前記液状物流出口からサイフォン管30を通して外部に連続的に移送され、サイフォン管30の先端170から循環・加温槽50内に連続的に移送される。このとき、仕切槽20内においては、前記クラゲ分解用組成物の減量と共に前記クラゲが自重で落下していき、該クラゲ分解用組成物が総て外部に移送された際には、仕切槽20の底面に衝突し、その際の衝撃等により破損等し小片化する。
In the apparatus shown in FIG. 4, the treatment liquid containing prionase (composition for jellyfish decomposition) previously stored in the circulation / heating tank 50 is transferred into the decomposition tank 10 and stored in the partition tank 20. In contact with the jellyfish. The jellyfish is contact-treated so as to be pushed up by the jellyfish decomposition composition flowing into the interior from the lower part of the decomposition tank 10.
Part of the jellyfish decomposition composition that has flowed into the decomposition tank 10 flows out into the siphon tube 30 from the liquid flow outlet provided at the lower part of the decomposition tank 10. Then, along with an increase in the liquid amount of the jellyfish decomposition composition flowing into the decomposition tank 10 (increase in the water level), it is connected to the liquid distribution outlet in the decomposition tank 10 and extends upward from the vicinity of the liquid distribution outlet. In the siphon tube 30 that is provided and curves downward near the upper part of the decomposition tank 10, the liquid amount of the jellyfish decomposition composition increases (the water level increases) at the same rate. When the liquid amount (water level) of the jellyfish decomposing composition in the siphon tube 30 reaches the curved portion of the siphon tube 30, the jellyfish decomposing composition in the decomposition tank 10 is liquid according to the principle of siphon. The material is continuously transferred from the distribution outlet to the outside through the siphon tube 30, and continuously transferred from the tip 170 of the siphon tube 30 into the circulation / heating tank 50. At this time, in the partition tank 20, the jellyfish falls by its own weight as the jellyfish decomposition composition is reduced, and when all of the jellyfish decomposition composition is transferred to the outside, the partition tank 20. It collides with the bottom surface of the plate and breaks into small pieces due to the impact and the like.

循環・加温槽50内に移送された前記クラゲ分解用組成物は、前記配管に設けた送液ポンプ40を駆動させることにより、再度汲み上げられて、分解槽10内に再度移送される。これにより、分解槽10内において2回目の接触処理が行われる。この接触処理を複数回行うことにより、仕切槽20内に収容されたクラゲが完全に分解され、前記クラゲ分解用組成物中に溶解し、前記塩分含有廃液としてのクラゲの有機物廃液が得られる。   The jellyfish decomposing composition transferred into the circulation / warming tank 50 is pumped up again by driving the liquid feed pump 40 provided in the pipe and transferred into the decomposition tank 10 again. Thereby, the second contact process is performed in the decomposition tank 10. By performing this contact treatment a plurality of times, the jellyfish accommodated in the partition tank 20 are completely decomposed and dissolved in the jellyfish decomposition composition, thereby obtaining an organic waste liquid of jellyfish as the salt-containing waste liquid.

上記の方法により得られた塩分含有廃液(クラゲの有機物廃液)を処理した実施例2では、実施例1よりもCOD値の低下が迅速であり、COD成分を効率よく除去できることがわかった。   In Example 2 in which the salt-containing waste liquid (jellyfish organic waste liquid) obtained by the above method was treated, the COD value decreased more rapidly than in Example 1, and it was found that the COD component could be removed efficiently.

(実施例3:塩分含有廃液の処理に好適な微生物の探索)
実施例3では、本発明の塩分含有廃液の処理に好適な微生物の探索を行った。具体的には、クラゲ廃液を培地として増殖するクラゲ廃液利用微生物群を以下(1)〜(2)のようにして探索し、次に、得られたクラゲ廃液利用微生物群中の酵母及び細菌群をそれぞれ以下(3)〜(4)のようにして同定した。
(Example 3: Search for microorganisms suitable for treatment of waste liquid containing salt)
In Example 3, a search was made for microorganisms suitable for the treatment of the salt-containing waste liquid of the present invention. Specifically, a jellyfish waste liquid-use microorganism group that grows using the jellyfish waste liquid as a medium is searched as described in (1) to (2) below, and then the yeast and bacteria group in the obtained jellyfish waste liquid-use microorganism group Were identified as follows (3) to (4).

(1)クラゲ廃液の調製
<クラゲのサンプリング>
東京湾で採取したミズクラゲを使用した。船上でたも網を使ってクラゲを採取し、クラゲ解凍後のクラゲ体成分組織崩壊を防止するため、エチレングリコールにクラゲを浸漬し、ビニール袋に小分け保存後、ドライアイスで冷凍保存した。その後、3時間以内に実験室へ運搬し、−60℃で保存した。
(1) Preparation of jellyfish waste liquid <Jellyfish sampling>
Moon jellyfish collected in Tokyo Bay were used. Jellyfish were collected using a net on board, and in order to prevent the jellyfish body component tissue from collapsing after thawing the jellyfish, the jellyfish was immersed in ethylene glycol, stored in a plastic bag, and stored frozen in dry ice. Thereafter, it was transported to the laboratory within 3 hours and stored at -60 ° C.

<クラゲの酵素処理>
−60℃で凍結保存しておいたビニール袋入りのミズクラゲを、流水で解凍した。次に、ホットスターラー上にビーカーを設置し、ビーカー内に2Lの淡水と、0.1〜0.2%になるようにタンパク質分解酵素(粗プリオナーゼ)を混合した。その後、50℃に加温し、解凍したミズクラゲを入れた1mmメッシュ籠をビーカー内に入れ、常時低速で撹拌しながら、ミズクラゲの分解を行った。
分解を行った後のクラゲの溶解液(クラゲ廃液)は、ポリタンクに移し、6℃で保存した。
<Enzyme treatment of jellyfish>
The moon jellyfish in a plastic bag that had been stored frozen at −60 ° C. was thawed with running water. Next, a beaker was set on a hot stirrer, and 2 L of fresh water and a proteolytic enzyme (crude prionase) were mixed so as to be 0.1 to 0.2% in the beaker. Then, the jellyfish was decomposed | disassembled, always heating at 50 degreeC and putting the 1 mm mesh cage | basket in which the thawed moon jellyfish was put into a beaker, always stirring at low speed.
The jellyfish solution after decomposition (jellyfish waste solution) was transferred to a plastic tank and stored at 6 ° C.

<クラゲ廃液のオゾン処理>
ポリタンクに3〜4ヶ月間、保存しておいたクラゲ廃液にオゾン発生機を用いて、オゾン発生量(2g/hL)、オゾン濃度(0.5w%)、クラゲ廃液温度(10℃)の条件で4時間のオゾン処理を行った。その後、最高圧力(2.3bar)、排気量(9.2L/min)の条件でクラゲ廃液の曝気を行い、残留オゾンを除去した。本実施例3、及び、後述する実施例4〜5では、特別に記す場合を除き、プリオナーゼによりクラゲを分解した後、このオゾン処理した廃液を、塩分含有廃液のモデルとした。
<Ozone treatment of jellyfish waste liquid>
Using the ozone generator for the jellyfish waste liquid stored in the plastic tank for 3-4 months, the conditions of ozone generation amount (2g / hL), ozone concentration (0.5w%), jellyfish waste liquid temperature (10 ° C) Then, ozone treatment was performed for 4 hours. Thereafter, the jellyfish waste liquid was aerated under the conditions of maximum pressure (2.3 bar) and displacement (9.2 L / min) to remove residual ozone. In Example 3 and Examples 4 to 5 to be described later, the jellyfish was decomposed by prionase, and this ozone-treated waste liquid was used as a model of salt-containing waste liquid, unless otherwise specified.

(2)クラゲ廃液利用微生物群の探索
100ml容のロータリーフラスコに、海底汚泥を0.5g入れた。海底汚泥は佐竹式コアサンプラー(離合社)で、主として東京湾内の沿岸海域(例えば、東京都江東区の東雲運河・有明)から船舶で採取した。海底汚泥は海底方向へ層状(コア状)に採取した。クラゲ廃液利用微生物群の生育を活性化する目的で、0.1gのグルコースを混合し、更にクラゲ廃液を50ml加え、振盪培養(180r.p.m.,27℃)を行い、海底汚泥中に存在するクラゲ廃液利用微生物群の集積培養を行った。
クラゲ廃液を培地として増殖し、廃液中のCODを効率よく減じる海底汚泥中の微生物群を探索するために、培養開始から7日目のCOD減少率と海底汚泥の採取深度(海底からの深さ)との関係について検討した。結果を図5に示す。
結果、最もCOD減少率が高かったのは、海底から5cmの深さで採取した海泥で、40.2%(4,480ppm→2,680ppm)の減少率であった。また、海泥を採取したコア層が深いほど、COD減少率は低減した(図5)。
この結果から、海底表面には海底深くよりもクラゲ廃液のCODを低減可能な微生物がより多く存在していることが認められた。海底からの深さが深いほど海泥は嫌気状態になっていると考えられ、本実施例で設定した好気条件での培養では、海底表面試料で高いCOD減少率が観察されたものと推察される。以上の結果から、クラゲ廃液処理に好適な微生物の採取は、海底表面(例えば、海底から5cm程度の深さ)から行うことがより望ましいことが判った。
(2) Search for microorganisms using jellyfish waste liquid 0.5 g of seabed sludge was placed in a 100 ml rotary flask. The submarine sludge is a Satake-type core sampler (separate company), which was collected by ship mainly from the coastal sea area in Tokyo Bay (for example, Shinonome Canal and Ariake in Koto-ku, Tokyo). Seabed sludge was collected in layers (core form) toward the seabed. For the purpose of activating the growth of microorganisms using jellyfish waste liquid, 0.1 g of glucose is mixed, and 50 ml of jellyfish waste liquid is further added, followed by shaking culture (180 rpm) at 27 ° C. in the seabed sludge. Accumulated culture of jellyfish waste liquid utilizing microorganisms was performed.
In order to search for microbial groups in the seabed sludge that proliferate in the jellyfish wastewater as a medium and efficiently reduce COD in the wastewater, the COD reduction rate and the depth of seabed sludge collection (depth from the seabed) ). The results are shown in FIG.
As a result, the highest COD reduction rate was 40.2% (4480 ppm → 2,680 ppm) in the sea mud collected at a depth of 5 cm from the seabed. Moreover, the COD reduction rate decreased as the core layer from which the sea mud was collected was deeper (FIG. 5).
From this result, it was recognized that more microorganisms that can reduce COD of the jellyfish waste liquid exist on the surface of the sea bottom than deep in the sea bottom. It is considered that the deeper the seabed, the more the sea mud is in an anaerobic state. In the culture under the aerobic condition set in this example, it is assumed that a high COD reduction rate was observed in the seafloor surface sample. Is done. From the above results, it was found that it is more desirable to collect microorganisms suitable for jellyfish waste liquid treatment from the surface of the seabed (for example, a depth of about 5 cm from the seabed).

(3)クラゲ廃液利用微生物群中の酵母の同定
Yeast Malt extract Agar(Becton Dickinson社)培地(以下、YMA培地と称する場合がある)のプレートを調製し、前記(2)での7日間の振盪培養の結果、COD減少率が最大であった試料(海底から5cmの深さで採取した海泥を、クラゲ廃液で7日間集積培養したもの)について、更にクラゲ廃液で3〜4日間繰り返し集積培養した培養液(クラゲ廃液利用微生物群を多く含む)を検体として、火炎滅菌した白金耳でYMAプレート培地へ画線培養を行った。2日後、YMAプレート培地に出現した酵母のコロニーを無菌的条件下において、YMAのスラント培地に分離し、9℃で保存を行った。スラント保存酵母は約1ヶ月おきに継代培養を行った。
(3) Identification of Yeast in Jellyfish Waste Liquid Utilizing Microorganism Group A plate of Yeast Malt Extract Agar (Becton Dickinson) medium (hereinafter sometimes referred to as YMA medium) is prepared, and shaking for 7 days in the above (2) As a result of culturing, the sample with the greatest COD reduction rate (sea mud collected at a depth of 5 cm from the seabed for 7 days in the jellyfish waste solution) was further accumulated in the jellyfish waste solution for 3 to 4 days. Using the obtained culture broth (containing a lot of jellyfish waste liquid-use microorganisms) as a specimen, streak culture was performed on a YMA plate medium with a flame-sterilized platinum loop. Two days later, the yeast colonies that appeared on the YMA plate medium were separated into a YMA slant medium under aseptic conditions and stored at 9 ° C. The slant-preserving yeast was subcultured about every other month.

−培養性状及び形態観察−
前記保存酵母をYMAプレート培地に接種し、27℃で3日間から1ヶ月間の培養を行い、コロニー性状の観察を肉眼及び実体顕微鏡SZH10で行った。また、検体の微視的特徴の観察は、プレートから菌体を直接採取してプレパラートを作製し、微分干渉顕微鏡BX50F4で観察した。
-Observation of culture properties and morphology-
The preserved yeast was inoculated into a YMA plate medium, cultured at 27 ° C. for 3 days to 1 month, and colony properties were observed with the naked eye and a stereomicroscope SZH10. In addition, the microscopic characteristics of the specimen were observed by directly collecting bacterial cells from a plate to prepare a preparation and observing with a differential interference microscope BX50F4.

微視的特徴を観察した結果、卵形(oval)〜楕円形(ellipsoid)の栄養細胞(vegetative cell)の形成が認められた(図6)。そして、栄養増殖は出芽によって増殖する様子が確認できた。また、1ヶ月培養したプレートで有性生殖器官の形成は認められなかった。
また、YMプレート培地上において湿性のコロニーを形成した(図7、図8)。各コロニーの周縁部は平滑で、コロニーの色調は赤橙色を呈していた。また、有機物廃液をロータリーフラスコに入れ振盪培養(180r.p.m.,27℃)を行った結果、有機物廃液の色調も白濁色から薄い赤橙色へ変化した(図9)。
As a result of observing microscopic features, formation of vegetative cells having an oval shape to an elliptic shape was observed (FIG. 6). And it was confirmed that the vegetative growth was increased by budding. In addition, the formation of sexual reproductive organs was not observed on the plates cultured for 1 month.
Further, wet colonies were formed on the YM plate medium (FIGS. 7 and 8). The peripheral edge of each colony was smooth, and the color of the colony was reddish orange. Moreover, as a result of carrying out shaking culture (180 rpm, 27 degreeC) by putting an organic waste liquid in a rotary flask, the color tone of the organic waste liquid also changed from the cloudy color to the light red orange color (FIG. 9).

前記検体からYMA培地で分離された菌体は、形態観察の結果、酵母であると同定された。また、前記酵母の形態性状は、公知のロドトルーラ ムシラギノーサ(Rhodotorula mucilaginosa)の形態性状(例えば、Barnettら,2000;Yeasts:Characteristics and identification,3rd edition.Cambridge University Press,Cambridge,UK、並びに、Kurtzman及びFell,1998;The Yeasts,a taxonomic study,4th edition.Elsevier,Amsterdam,Netherlands参照)にほぼ類似したものであることが判った。   As a result of morphological observation, the microbial cells separated from the specimen with the YMA medium were identified as yeast. Further, the morphological properties of the yeast are those of the known Rhodotorula mucilaginosa (for example, Barnett et al., 2000, Yeasts: Characteristics and Kent. 1998; see The Yeasts, a taxonomic study, 4th edition. Elsevier, Amsterdam, Netherlands).

−生理・生化学性状試験−
前記酵母の生理・生化学性状試験は、炭素源資化性試験、糖類発酵性試験、窒素源資化性試験、ビタミン要求性試験、温度耐性試験、薬剤耐性試験の各項目について行った。なお、温度耐性試験以外の前記酵母の培養温度は、25℃で行った。
前記生理・生化学性状試験の結果は、以下の表1〜2に示す通りである。
-Physiological and biochemical property tests-
The physiological / biochemical property test of the yeast was conducted for each of the carbon source utilization test, saccharide fermentability test, nitrogen source utilization test, vitamin requirement test, temperature tolerance test, and drug resistance test. In addition, the culture | cultivation temperature of the said yeast other than a temperature tolerance test was performed at 25 degreeC.
The results of the physiological / biochemical property test are as shown in Tables 1 and 2 below.

※表1中の[+]は反応が陽性、[−]は反応が陰性、[w]は弱い陽性反応、[D]は試験開始1週間以上経過後に陽性反応が認められたことを示す。 * In Table 1, [+] indicates a positive reaction, [-] indicates a negative reaction, [w] indicates a weak positive reaction, and [D] indicates that a positive reaction was observed after 1 week or more from the start of the test.

※表2中の[+]は反応が陽性、[−]は反応が陰性、[w]は弱い陽性反応、[D]は試験開始1週間以上経過後に陽性反応が認められたことを示す。 * In Table 2, [+] indicates a positive reaction, [-] indicates a negative reaction, [w] indicates a weak positive reaction, and [D] indicates that a positive reaction was observed after 1 week or more from the start of the test.

前記検体からYMA培地で分離された酵母の生理・生化学的性状は、公知のロドトルーラ ムシラギノーサ(Rhodotorula mucilaginosa)の生理・生化学的性状(例えば、Barnettら,2000;Yeasts:Characteristics and identification,3rd edition.Cambridge University Press,Cambridge,UK参照)にほぼ類似したものであることが判った。   Physiological and biochemical properties of yeast isolated from the specimen in YMA medium are those of known Rhodotorula mucilaginosa (eg, Barnett et al., 2000; Yeasts: Characteristics and dentitives) .. University University Press, Cambridge, UK).

−28SrDNA−D1/D2領域配列解析−
前記保存酵母を、YMAプレート培地を用いて25℃で7日間培養し、採取したコロニーからDNeasy Plant Mini Kit(QIAGEN社)を用いてゲノムDNAを抽出した。このゲノムDNAをテンプレートとして、18SrDNA3’末端〜28SrDNA−D1/D2領域DNAフラグメントのPCR増幅を行った。
PCRはpuReTaq Ready−To−Go PCR beads(Amersham Biosciences社)と、プライマーITS5(Whiteら,1990;PCR protocols,a guide to methods and applications,Academic Press,New York,USA,pp.315−322参照)及びNL4(O’Donnell,1993;The Fungal Holomorph:Mitotic,Meiotic and Pleomorphic Speciation in Fungal Systematics,CAB International,Wallingford参照)とを用い、GeneAmp PCR System 9600(Applied Biosystems社)上でサーマルサイクルを行った。得られたDNAフラグメントはQIAquick PCR Purification Kit(QIAGEN社)を用いて精製し、サイクルシークエンシング反応に供した。サイクルシークエンシング反応はABI PRISM BigDye Terminator Kit(Applied Biosystems社)を用い、GeneAmp PCR System 9600(Applied Biosystems社)上で反応を行った。28SrDNA−D1/D2領域の配列解析には、プライマーNL1、NL2、NL3及びNL4(O’Donnell,1993;The Fungal Holomorph:Mitotic,Meiotic and Pleomorphic Speciation in Fungal Systematics,CAB International,Wallingford参照)を用いた。
[使用プライマー]
PCRプライマー;
ITS5(Forward):5’―GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG―3’(配列番号1)
NL4 (Reverse):5’―GGTCCGTGTTTCAAGACGG―3’(配列番号2)
シーケンスプライマー;
NL1 (Forward):5’―GCATATCAATAAGCGGAGGAAAAG―3’(配列番号3)
NL2 (Reverse):5’―CTCTCTTTTCAAAGTTCTTTTCATCT―3’(配列番号4)
NL3 (Forward):5’―AGATGAAAAGAACTTTGAAAAGAGAG―3’(配列番号5)
NL4 (Reverse):5’―GGTCCGTGTTTCAAGACGG―3’(配列番号6)
-28SrDNA-D1 / D2 region sequence analysis-
The preserved yeast was cultured at 25 ° C. for 7 days using a YMA plate medium, and genomic DNA was extracted from the collected colonies using DNeasy Plant Mini Kit (QIAGEN). Using this genomic DNA as a template, PCR amplification of the 18SrDNA 3′-end to 28SrDNA-D1 / D2 region DNA fragment was performed.
PCR is puReTaq Ready-To-Go PCR beads (Amersham Biosciences) and primer ITS5 (White et al., 1990; PCR protocols, a guide to methods and applications, Academic. And NL4 (see O'Donnell, 1993; The Fungal Homerph: Mitotic, Meiotic and Plemorphic Specification in Fungal Systemics, CAB International, Wallingford, p. stems Co., Ltd.) was carried out a thermal cycle on. The obtained DNA fragment was purified using QIAquick PCR Purification Kit (QIAGEN) and subjected to cycle sequencing reaction. The cycle sequencing reaction was performed on GeneAmp PCR System 9600 (Applied Biosystems) using ABI PRISM BigDye Terminator Kit (Applied Biosystems). For sequence analysis of the 28S rDNA-D1 / D2 region, primers NL1, NL2, NL3 and NL4 (O'Donnell, 1993; The Fungal Homeomorph: Mitotic, Miomatic and Plemorphic Specification in Bumping Instigation) .
[Primers used]
PCR primers;
ITS5 (Forward): 5′-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3 ′ (SEQ ID NO: 1)
NL4 (Reverse): 5′-GGTCCGGTTTCAAGACGG-3 ′ (SEQ ID NO: 2)
Sequencing primer;
NL1 (Forward): 5′-GCATATCAATAAGCGGAGGAAAA-3 ′ (SEQ ID NO: 3)
NL2 (Reverse): 5′-CTCTCTTTTCAAAGTTCTTTCATCT-3 ′ (SEQ ID NO: 4)
NL3 (Forward): 5′-AGATGAAAAAGAACTTTGAAAAGAGAG-3 ′ (SEQ ID NO: 5)
NL4 (Reverse): 5′-GGTCCGTGTTTCAAGACGG-3 ′ (SEQ ID NO: 6)

反応生成物はDyeExTM2.0Spin Kit(QIAGEN社)を用いて精製し、ABI PRISM 3100 DNA Sequencer(Applied Biosystems社)で配列解読を行い、AutoAssembler(Applied Biosystems社)を用いて各シークエンス断片を結合し、目的塩基配列を得た。
得られた配列は、以下の表3に示す通り(配列番号7)であった。
The reaction product was purified using DyeEx 2.0 Spin Kit (QIAGEN), sequenced with ABI PRISM 3100 DNA Sequencer (Applied Biosystems), and AutoAssembler (Applied Biosystems Co.) The target nucleotide sequence was obtained.
The resulting sequence was as shown in Table 3 below (SEQ ID NO: 7).

得られた配列と類似の塩基配列を国際DNAデータベース(GenBank/EMBL/DDBJ)から検索するため、BLAST(例えば、Altschulら,1997;Nucleic Acids Research 25:3389−3402参照)による相同性検索を行った。データベースに対する検索の結果得られた上位20エントリーの塩基配列を用いて、CLUSTAL W(例えば、Thompsonら,1994;Nucleic Acids Research 22:4673−4680参照)にてアライメントを作成し、MEGA ver3.1(例えば、Kumarら,2004;Briefings in Bioinfomatics 5:150−163参照)の系統樹作成ソフトを用いて系統樹を作成した。系統樹の推定には近隣結合法(例えば、Saitou及びNei,1987;Molecular Biology and Evolution 4:406−425参照)を用い、各系統枝の信頼度はブートストラップ法(例えば、Felsenstein,1985;Evolution 39:783−791参照)により評価した。
作成した分子系統樹を、図10に示す。なお、図10中、前記検体から分離された酵母の28SrDNA−D1/D2塩基配列(表3、前述)は「表3」として示した。
In order to search a base sequence similar to the obtained sequence from the international DNA database (GenBank / EMBL / DDBJ), a homology search using BLAST (see, for example, Altschul et al., 1997; Nucleic Acids Research 25: 3389-3402) is performed. It was. An alignment is created using CLUSTAL W (for example, see Thompson et al., 1994; Nucleic Acids Research 22: 4673-4680) using the base sequences of the top 20 entries obtained as a result of searching the database, and MEGA ver3.1 (see, for example, Thompson et al., 1994; Nucleic Acids Research 22: 4673-4680). For example, the phylogenetic tree was created using the phylogenetic tree creation software of Kumar et al., 2004; Briefings in Bioinformatics 5: 150-163). For estimation of the phylogenetic tree, the neighborhood connection method (see, for example, Saitou and Nei, 1987; Molecular Biology and Evolution 4: 406-425) is used, and the reliability of each phylogenetic branch is determined by the bootstrap method (for example, Felsenstein, 1985; Evolution). 39: 783-791).
The created molecular phylogenetic tree is shown in FIG. In FIG. 10, the 28S rDNA-D1 / D2 base sequence (Table 3, previously described) of yeast isolated from the specimen is shown as “Table 3”.

結果、前記検体からYMA培地で分離された酵母から得られた28SrDNA−D1/D2塩基配列は、担子菌系酵母の一種であるロドトルーラ ムシラギノーサ(Rhodotorula mucilaginosa)の塩基配列と高い相同率を示した。また、得られた配列をもとに作成した系統樹(図10)においても、R.mucilaginosaの基準株(CBS316;アクセッション番号AF070432)を含むR.mucilaginosa菌群と同一の大きな系統樹を形成した。   As a result, the 28SrDNA-D1 / D2 base sequence obtained from the yeast isolated from the specimen on the YMA medium showed a high homology with the base sequence of Rhodotorula mucilaginosa, which is a kind of basidiomycetous yeast. In addition, in the phylogenetic tree created based on the obtained sequence (FIG. 10), R.I. including the reference strain of mucilaginosa (CBS316; accession number AF070432). A large phylogenetic tree identical to the mucilaginosa group was formed.

以上の結果から、前記クラゲ廃液利用微生物群検体から分離された酵母は、ロドトルーラ ムシラギノーサ(Rhodotorula mucilaginosa)に帰属する菌種であると同定された。
なお、本実施例3にて前記検体から分離、保存したRhodotorula mucilaginosa 126−Aege株は、独立行政法人産業技術総合研究所内特許生物寄託センター(IPOD)に平成18年4月21日付で、受託番号FERM P−20896として寄託した。
From the above results, the yeast isolated from the jellyfish waste liquid-utilizing microorganism group specimen was identified as a bacterial species belonging to Rhodotorula mucilaginosa.
The Rhodotorula mucilaginosa 126-Aege strain separated and stored from the specimen in Example 3 was registered with the Patent Organism Depositary (IPOD) in the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology as of April 21, 2006. Deposited as FERM P-20896.

(4)クラゲ廃液利用微生物群中の細菌群の同定
<DGGE解析>
前記(2)での7日間の振盪培養の結果、COD減少率が最大であった試料(海底から5cmの深さで採取した海泥をクラゲ廃液で7日間集積培養したもの)について、更にクラゲ廃液で3〜4日間繰り返し集積培養した培養液(クラゲ廃液利用微生物群を多く含む)を検体として、該検体に含まれる細菌群を、DGGE(変性剤濃度勾配ゲル電気泳動)を用い、以下のようにして解析した。
前記検体から、15,000rpm、20分の遠心分離により沈殿物を回収した。この沈殿物を用いて、前記検体中の細菌由来のDNAを、長島らの方法(Food Sci.Technol.Res.2000,6,115−118参照)に基づいて抽出した。
抽出したDNAを鋳型として、PCR法により16SrDNAの約200bp(E.coli No.341−534)(Food Sci.Technol.Res.2000,6,115−118参照)を増幅した。使用したプライマーは以下の通りである。
(4) Identification of bacteria group in jellyfish waste liquid utilization microorganism group <DGGE analysis>
As a result of the shaking culture for 7 days in the above (2), the jellyfish was further collected with respect to the sample (the sea mud collected at a depth of 5 cm from the seabed was accumulated and cultured in the jellyfish waste liquid for 7 days). Using a culture solution (including many jellyfish waste liquid-use microorganisms) repeatedly accumulated and cultured in waste liquid for 3 to 4 days, the bacterial group contained in the specimen is analyzed using DGGE (denaturing agent gradient gel electrophoresis) as follows: Analysis was performed as described above.
The precipitate was collected from the specimen by centrifugation at 15,000 rpm for 20 minutes. Using this precipitate, DNA derived from bacteria in the specimen was extracted based on the method of Nagashima et al. (See Food Sci. Technol. Res. 2000, 6, 115-118).
About 200 bp (E. coli No. 341-534) of 16S rDNA (see Food Sci. Technol. Res. 2000, 6, 115-118) was amplified by PCR using the extracted DNA as a template. The used primers are as follows.

[使用プライマー]
GC−341f:5’−GCクランプ−CCTACGGGAGGCAGCAG−3’(配列番号:8)
534r :5’−ATTACCGCGGCTGCTGG−3’ (配列番号:9)
(GCクランプ:CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGCACGGGGGG)
[Primers used]
GC-341f: 5′-GC clamp—CCTACGGGAGGCAGCAG-3 ′ (SEQ ID NO: 8)
534r: 5′-ATTACCCGCGCTGCTGGG-3 ′ (SEQ ID NO: 9)
(GC clamp: CGCCCGCCGCGCGCGGGCGGGGGGGGCCGGGGGGG)

DNAポリメラーゼにはAmpliTaq Gold(Applied Biosystems社)、サーマルサイクラーにはGeneAmp PCR System 9600(Applied Biosystems社)を用いた。PCRの条件は94℃、7分+(94℃、60秒/65℃〜55℃、60秒/72℃、120秒)×20サイクル(2サイクル毎にアニーリング温度が1℃下がるように設定)+(94℃、60秒/55℃、60秒/72℃、120秒)×15サイクル+72℃、10分で行った。   AmpliTaq Gold (Applied Biosystems) was used for the DNA polymerase, and GeneAmp PCR System 9600 (Applied Biosystems) was used for the thermal cycler. PCR conditions are 94 ° C., 7 minutes + (94 ° C., 60 seconds / 65 ° C. to 55 ° C., 60 seconds / 72 ° C., 120 seconds) × 20 cycles (set so that the annealing temperature decreases by 1 ° C. every 2 cycles) + (94 ° C., 60 seconds / 55 ° C., 60 seconds / 72 ° C., 120 seconds) × 15 cycles + 72 ° C., 10 minutes.

PCRにより目的配列が増幅されたことを確認するために、2%アガロースゲルによるPCR産物の電気泳動を行った。紫外線照射下で、アガロースゲル中に電気泳動された増幅断片と、マーカーである100bpDNAラダー(TOYOBO社)とを比較し、目的の長さの増幅断片について確認した。
DGGE解析は、Dcode DGGEコンプリートシステム(BIORAD社)を用いて行った。変性剤濃度勾配は電気泳動方向に30%→60%とし、ポリアクリルアミドゲル濃度は10%とした。ゲル変性剤には尿素(BIORAD社)とホルムアミド(BIORAD社)とを用い、泳動条件は電圧200V、泳動時間3.5時間とした。
泳動後、変性剤濃度勾配ゲルをSyber Green(タカラバイオ社)で染色し、染色されたDNAがUV(310nm)照射下で発する励起光をCCDカメラで撮影した。得られたDGGE電気泳動像を、図11に示す。
DGGE解析の結果、前記検体に含まれる細菌群のDNA断片を示すバンドが6種類(図11、a〜f)検出された。各バンドを、更に、以下の塩基配列解析、及び分子系統解析に供した。
In order to confirm that the target sequence was amplified by PCR, the PCR product was electrophoresed on a 2% agarose gel. An amplified fragment electrophoresed in an agarose gel under ultraviolet irradiation was compared with a 100 bp DNA ladder (TOYOBO) as a marker, and an amplified fragment having a target length was confirmed.
The DGGE analysis was performed using a Dcode DGGE complete system (BIORAD). The denaturant concentration gradient was 30% → 60% in the electrophoresis direction, and the polyacrylamide gel concentration was 10%. Urea (BIORAD) and formamide (BIORAD) were used as the gel denaturant, and the electrophoresis conditions were a voltage of 200 V and a migration time of 3.5 hours.
After the electrophoresis, the denaturant concentration gradient gel was stained with Syber Green (Takara Bio Inc.), and excitation light emitted from the stained DNA under UV (310 nm) irradiation was photographed with a CCD camera. The obtained DGGE electrophoresis image is shown in FIG.
As a result of DGGE analysis, six types of bands (FIG. 11, a to f) showing DNA fragments of the bacterial group contained in the specimen were detected. Each band was further subjected to the following base sequence analysis and molecular phylogenetic analysis.

<塩基配列解析>
前記DGGE解析で得られたa〜fの6バンド(図11)の各DNA断片に対して塩基配列解析を行い、各バンドが由来する菌株の帰属分類群を推定した。
まず、再度DGGE解析を行うことにより、各バンドの純度確認を行った。DGGE条件は前記と同様とした。次いで、以下の解析ツールを使用して、公知の手法により各バンドの塩基配列を解読し、得られた塩基配列について、相同性検索を行った。
<Base sequence analysis>
Base sequence analysis was performed on each of the DNA fragments of the six bands a to f (FIG. 11) obtained by the DGGE analysis, and the attribution taxon of the strain from which each band was derived was estimated.
First, the purity of each band was confirmed by performing DGGE analysis again. The DGGE conditions were the same as described above. Subsequently, using the following analysis tool, the base sequence of each band was decoded by a known method, and the obtained base sequence was subjected to homology search.

[バンドの塩基配列解析使用ツール]
サイクルシークエンス:BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit(Applied Biosystems社)
シークエンス:ABI PRISM 3100 Genetic Analyzer System(Applied Biosystems社)
使用プライマー:前記GC−341f、534r(Appl.Environ.Microbiol.1993,59,695−700参照)
解析ソフトウエア:Auto Assembler(Applied Biosystems社)、DNASIS Pro(日立ソフトウエアエンジニアリング社)
相同性検索:国際塩基配列データベース(GenBank/DDBJ/EMBL)
[Band base sequence analysis tool]
Cycle sequence: BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems)
Sequence: ABI PRISM 3100 Genetic Analyzer System (Applied Biosystems)
Primers used: GC-341f, 534r (see Appl. Environ. Microbiol. 1993, 59, 695-700)
Analysis software: Auto Assembler (Applied Biosystems), DNASIS Pro (Hitachi Software Engineering)
Homology search: International base sequence database (GenBank / DDBJ / EMBL)

相同性検索の結果から、各バンドa〜fにおける相同性の高い配列の帰属を推定した結果を、以下表4〜表9に示す。なお、括弧内の数字(%)は、前記相同性検索で得られた相同率を示す。   The results of estimating the assignment of highly homologous sequences in the bands a to f from the results of the homology search are shown in Tables 4 to 9 below. The number (%) in parentheses indicates the homology rate obtained by the homology search.

表4の結果から、バンドaは、Sphingobacteriumに帰属する菌株に由来する配列と推定した。
表5の結果から、バンドbは、Sphingobacteriumに帰属する菌株に由来する配列と推定した。
表6の結果から、バンドcは、Pseudomonasに帰属する菌株に由来する配列と推定した。
表7の結果から、バンドdは、Bacteroidetes門に帰属する菌株に由来する配列と推定した。
表8の結果から、バンドeは、Bacteroidetes門に帰属する菌株に由来する配列と推定した。
表9の結果から、バンドfは、Bacillusに帰属する菌株に由来する配列と推定した。
From the results in Table 4, band a was estimated to be a sequence derived from a strain belonging to Sphingobacterium.
From the results of Table 5, band b was estimated to be a sequence derived from a strain belonging to Sphingobacterium.
From the results in Table 6, band c was estimated to be a sequence derived from a strain belonging to Pseudomonas.
From the results in Table 7, band d was estimated to be a sequence derived from a strain belonging to the Bacteroidetes gate.
From the results in Table 8, band e was estimated to be a sequence derived from a strain belonging to the Bacteroidetes gate.
From the results in Table 9, band f was estimated to be a sequence derived from a strain belonging to Bacillus.

<分子系統解析>
前記塩基配列解析結果から、各バンドa〜fで示された菌株に近縁であることが示唆された菌種の近縁群の16SrDNAを用いて、分子系統解析を行い、各バンドの帰属分類群を更に推定した。
国際塩基配列データベース(GenBank/DDBJ/EMBL)及び細菌基準株データベース(テクノスルガ社)より、a〜fの6バンドの塩基配列解析の結果から推定された近縁群における基準株由来の16SrDNAを取得し、分子系統樹を作成した。また、系統樹作成に使用した領域は、前記DGGE解析で用いたプライマーの増幅範囲と合致させるため、16SrDNAの約200bp(E.Coli No.341−534)とした。解析ソフトフェアとしては、DNASIS Pro(日立ソフトウエアエンジニアリング社)、CLUSTAL W(例えば、Nucleic Acids Research,1994,22:4673−4680参照)、MEGA ver3.1(例えば、Briefings in Bioinfomatics,2004,5,150−163参照)を用いた。
<Molecular phylogenetic analysis>
Based on the results of the base sequence analysis, molecular phylogenetic analysis was performed using 16S rDNA of a close group of bacterial species suggested to be related to the strains indicated by the bands a to f, and the attribution classification of each band Groups were further estimated.
16S rDNA derived from a reference strain in a related group estimated from the results of base sequence analysis of 6 bands a to f from the international base sequence database (GenBank / DDBJ / EMBL) and the bacterial reference strain database (Techno Suruga) And created a molecular phylogenetic tree. In addition, the region used for creating the phylogenetic tree was approximately 200 bp (E. Coli No. 341-534) of 16S rDNA in order to match the amplification range of the primer used in the DGGE analysis. Analysis software includes DNASIS Pro (Hitachi Software Engineering), CLUSTAL W (see, for example, Nucleic Acids Research, 1994, 22: 4673-4680), and MEGA ver. 3.1 (for example, Briefings in Bioinformatics, 2004, 5, 150-163).

Sphingobacterium及びBacteroidetes門に由来するバンド(a、b、d、e)は一つの系統樹としてまとめ、その他のバンド(c、f)は、それぞれ一つの系統樹として作成した。各系統樹を、図12〜14に示す。
なお、図12〜14中、枝の分岐付近の数字はブートストラップ値(例えば、Evolution,1985,39:783−791参照)、左下の線はスケールバーを示す。株名の末尾のTはその種の基準株(Type strain)であることを示す。
Bands (a, b, d, e) derived from Sphingobacterium and Bacteroidetes were combined as one phylogenetic tree, and the other bands (c, f) were prepared as one phylogenetic tree. Each phylogenetic tree is shown in FIGS.
12 to 14, numbers near the branch of the branch are bootstrap values (see, for example, Evolution, 1985, 39: 783-791), and a lower left line indicates a scale bar. T at the end of the stock name indicates that type of strain (Type strain).

前記塩基配列解析の結果から、バンドa、b、d、eはBacteroidetes門への帰属が示唆されたことにより、Sphingobacteriumを中心としたBacteroidetes門に帰属するより多くの属から基準株由来の16SrDNAデータを取得し、分子系統樹を作成した(図12)。
また、バンドc及びdは、それぞれPseudomonas及びBacillusへの帰属が示唆されていることから、Pseudomonas及びBacillusに帰属する多くの基準株由来の16SrDNAデータを取得し、分子系統樹を作成した(図13、14)。
From the results of the base sequence analysis, bands a, b, d, and e were suggested to be attributed to Bacteroidetes, so that 16S rDNA data derived from a larger number of genera belonging to Bacteroidetes, centered on Sphingobacterium. And a molecular phylogenetic tree was created (FIG. 12).
Also, since bands c and d are suggested to belong to Pseudomonas and Bacillus, respectively, 16S rDNA data derived from many reference strains belonging to Pseudomonas and Bacillus were obtained, and a molecular phylogenetic tree was created (FIG. 13). 14).

分子系統解析の結果、バンドaの16SrDNAはSphingobacterium multivorum IAM14316(AB100738)の16SrDNAと系統枝を形成したことから、Sphingobacterium multivorumと近縁であると推定された(図12)。
また、バンドbの16SrDNAは基準種であるSphingobacterium spiritivorum ATCC33861(M58778)の16SrDNAと系統枝を形成したことから、Sphingobacterium spiritivorumと近縁であると推定された(図12)。
これら2つのバンドとも、系統枝(分岐)の信頼性を示すブートストラップ値(Evolution,1985,39:783−791参照)は100%と高いことから、系統樹の安定性は高いと考えられる。
As a result of molecular phylogenetic analysis, 16S rDNA in band a formed a phylogenetic branch with 16S rDNA of Sphingobacterium multivolum IAM14316 T (AB100738), and thus was estimated to be closely related to Sphingobacterium multivorum (FIG. 12).
Further, 16SrDNA of band b formed a phylogenetic branch with 16SrDNA of Sphingobacterium spiritivorum ATCC 33861 T (M58778), which was a reference species, and thus was assumed to be closely related to Sphingobacterium spiritivorum (FIG. 12).
Both of these two bands have a high bootstrap value (see Evolution, 1985, 39: 783-791) indicating the reliability of the phylogenetic branch (branch), which is considered to have high stability of the phylogenetic tree.

前記DGGEバンド塩基配列解析の結果で、Bacteroidetes門とされたバンドd及びeの16SrDNAは、基準種であるFlavobacterium aquatile ATCC11947(M62797)と同じクラスターには含まれないものの、Flavobacteriumに帰属される菌種に由来する配列と系統枝を形成した(図12)。したがって、これらのバンドはFlavobacteriumに帰属する菌株に由来する配列と推定された。 As a result of the DGGE band base sequence analysis, the 16S rDNAs of the bands d and e, which have been designated as Bacteroidetes, are not included in the same cluster as Flavobacterium aquatile ATCC 11947 T (M62797), but belong to Flavobacterium Species-derived sequences and phylogenetic branches were formed (FIG. 12). Therefore, these bands were presumed to be sequences derived from a strain belonging to Flavobacterium.

バンドcの16SrDNAは、Pseudomonas rhizosphaerae IH5(AY152673)、Pseudomonas flavescens B62(U01916)、Pseudomonas graminis DSM11363(Y11150)の16SrDNAと系統枝を形成していることから(図13)、これら3菌種の16SrDNAに近縁であるPseudomonasに帰属する菌株に由来する配列と推定された。 The 16S rDNA of band c is composed of Pseudomonas rhizosphaerae IH5 T (AY152673), Pseudomonas flavescens B62 T (U01916), Pseudomonas graminis DSM11363 T (Y11150) and 16 SrDNA which form Pseudomonas graminis DSM11363 T (Y11150). It was presumed to be a sequence derived from a strain belonging to Pseudomonas, which is closely related to 16SrDNA.

バンドfの16SrDNAは基準種であるBacillus subtilis IAM12118(AB042061)と同じクラスターには含まれないものの、Bacillus pumilus ATCC7061(AY876289)の16SrDNAと系統枝を形成(図14)していることから、Bacillus pumilusの16SrDNAに近縁であると推定された。 Although the 16S rDNA of the band f is not included in the same cluster as the reference species Bacillus subtilis IAM12118 T (AB042061), it forms a phylogenetic branch with the 16S rDNA of Bacillus pumilus ATCC7061 T (AY87289) (FIG. 14). Presumed to be closely related to Bacillus pumilus 16SrDNA.

得られた各バンドの分子系統解析の結果から推定された帰属分類群を表10にまとめた。   The assigned taxonomic groups estimated from the results of molecular phylogenetic analysis of the obtained bands are summarized in Table 10.

以上の結果から、海泥中のクラゲ廃液利用微生物群検体中には、スフィンゴバクテリウム(Sphingobacterium)属に属する細菌、シュードモナス(Pseudomonas)属に属する細菌、フラボバクテリウム(Flavobacterium)属に属する細菌、及び、バチルス(Bacillus)属に属する細菌からなる細菌群が含まれることが判った。
また更に、前記スフィンゴバクテリウム属に属する細菌としては、スフィンゴバクテリウム マルチボーラム(Sphingobacterium multivorum)、及び、スフィンゴバクテリウム スピリチボーラム(Sphingobacterium spiritivorum)の少なくともいずれかが含まれ、前記バチルス属に属する細菌としては、バチルス パミルス(Bacillus pumilus)が含まれることが判った。
From the above results, in the jellyfish waste liquid-utilizing microorganism group sample in the sea mud, bacteria belonging to the genus Sphingobacteria, bacteria belonging to the genus Pseudomonas, bacteria belonging to the genus Flavobacterium, And it turned out that the bacteria group which consists of bacteria which belong to Bacillus (Bacillus) genus is contained.
Still further, the bacterium belonging to the genus Sphingobacteria includes at least one of Sphingobacterium multivolum and Sphingobacterium spiritivorum, and belongs to the genus Bacillus. It has been found that bacteria include Bacillus pumilus.

(実施例4:各微生物群固定化担体の廃液処理能力の基礎検討)
実施例4では、前記実施例3で同定された塩分含有廃液の処理に好適な微生物、即ち、前記酵母及び前記細菌群を、それぞれ別々に、或いは混合して担体に固定化し、以下の(1)〜(3)のようにして、各微生物群固定化担体の廃液処理能力についての基礎検討を行った。
本実施例4において比較検討を行った組合せは、以下のI)〜IV)の通りである。なお、「酵母+細菌群」とは、酵母と細菌群とを両方共に固定化した担体を使用したことを示す。
I) 酵母 ― 細菌群
II) 酵母+細菌群 ― 酵母
III) 酵母+細菌群 ― 細菌群
IV) オゾン処理 ― オゾン未処理(微生物としては、いずれも酵母+細菌群を使用した)
(Example 4: Basic examination of waste liquid treatment capacity of each microorganism group-immobilized carrier)
In Example 4, the microorganisms suitable for the treatment of the salt-containing waste liquid identified in Example 3, that is, the yeast and the bacteria group, were separately or mixed and immobilized on a carrier, and the following (1) ) To (3), a basic study was conducted on the waste liquid treatment capacity of each microorganism group-immobilized carrier.
The combinations subjected to the comparative study in Example 4 are as shown in the following I) to IV). “Yeast + bacteria group” indicates that a carrier on which both yeast and bacteria group are immobilized was used.
I) Yeast-Bacterial group II) Yeast + Bacterial group-Yeast III) Yeast + Bacterial group-Bacterial group IV) Ozone treatment-Ozone untreated (both used yeast + bacteria group)

(1)各微生物群固定化担体(ペレット)の調製
各微生物群固定化担体(ペレット)の調製は、以下のようにして行った。包括固定化する微生物としては、細菌群(前記実施例3の(2)で、海底から5cmの深さで採取した海泥をクラゲ廃液で7日間集積培養したものについて、更にクラゲ廃液で3〜4日間繰り返し集積培養して得られた、細菌を中心としたクラゲ廃液利用微生物群)と、酵母(前記実施例3で分離、保存した酵母(Rhodotorula mucilaginosa)を更にクラゲ廃液で3〜4日間培養したクラゲ廃液利用酵母)とを、それぞれ単独、或いは混合して用いた。
(1) Preparation of each microorganism group immobilization carrier (pellet) Each microorganism group immobilization carrier (pellet) was prepared as follows. The microorganism to be entrapped and immobilized is a group of bacteria (the sea mud collected at a depth of 5 cm from the seabed in Example 3 (2) above and accumulated and cultured in a jellyfish waste solution for 7 days. The jellyfish waste liquid-use microorganism group centering on bacteria obtained by repeated culture for 4 days and yeast (Rhodotorula mucilaginosa) isolated and stored in Example 3 above were further cultured in the jellyfish waste liquid for 3 to 4 days. The jellyfish waste liquid use yeast) was used alone or in combination.

以下に、クラゲ廃液利用酵母を包括固定化したペレットの調製を例に挙げて、ペレットの調製方法を記述する。
500ml容のロータリーフラスコにクラゲ廃液(100ml)を入れた。次にクラゲ廃液利用酵母を、前記実施例3の(2)で分離し、保存しておいたスラント培地から、無菌的条件下において、火炎滅菌をした白金耳で、上記のクラゲ廃液に植菌した。その後3〜4日間、振盪培養(180r.p.m.,27℃)を行い、増菌した。
次に培養液を遠沈管に移し、遠心分離(10,000r.p.m.,10min,4℃)し、上清を除去した。上清除去後、遠沈管に蒸留水(20ml)を入れ、クラゲ廃液利用酵母を含む沈殿と混合し、懸濁した。次に、200ml容のビーカーに寒天(6g)と蒸留水(180ml)を撹拌混合し、加熱溶解した。
寒天溶解後、混合した微生物の死滅を防ぐため寒天溶解液の温度を55℃まで下げ、クラゲ廃液利用酵母を含む沈殿の混合液(20ml)を加えて撹拌した。撹拌後、内径6mmのシリコンのチューブ(36本)に10ml容のシリンジを用いて、酵母を懸濁した寒天を注入した。注入後、寒天を迅速に固化させるために6℃の低温室に10分間放置した。放置後、ステンレス製の棒を用いてシリコンチューブから寒天(細い紐状)を押し出し、ステンレスのへらを用いて約3mm間隔に切断した。切断した寒天(以後、ペレットと記載)はビーカーにクラゲ廃液を入れ、4℃で保存した。
Below, the preparation method of a pellet is described, taking the example of the preparation of the pellet which carried out the comprehensive fixation of the jellyfish waste liquid utilization yeast.
Jellyfish waste liquid (100 ml) was placed in a 500 ml rotary flask. Next, the jellyfish waste liquor-utilizing yeast is inoculated into the jellyfish waste liquor from the slant medium separated and stored in Example 2 (2) above, using a platinum sterilized flame-sterilized under aseptic conditions. did. Thereafter, shaking culture (180 rpm) was performed for 3 to 4 days to increase the number of bacteria.
Next, the culture solution was transferred to a centrifuge tube, centrifuged (10,000 rpm, 10 min, 4 ° C.), and the supernatant was removed. After removing the supernatant, distilled water (20 ml) was added to the centrifuge tube, mixed with the precipitate containing the jellyfish waste liquid utilizing yeast, and suspended. Next, agar (6 g) and distilled water (180 ml) were stirred and mixed in a 200 ml beaker and dissolved by heating.
After the agar lysis, the temperature of the agar lysate was lowered to 55 ° C. in order to prevent the mixed microorganisms from being killed, and a mixture of precipitates (20 ml) containing jellyfish waste liquid utilizing yeast was added and stirred. After agitation, agar suspended in yeast was injected into a silicone tube (36 tubes) having an inner diameter of 6 mm using a 10 ml syringe. After the injection, the mixture was left in a low temperature room at 6 ° C. for 10 minutes in order to quickly solidify the agar. After standing, agar (thin string-like shape) was extruded from the silicon tube using a stainless steel rod, and cut at intervals of about 3 mm using a stainless steel spatula. The cut agar (hereinafter referred to as pellet) was stored in a beaker with jellyfish waste liquid at 4 ° C.

前記細菌群を包括固定化したペレット、並びに、前記酵母及び前記細菌群を両方共に包括固定化したペレットについても、前記酵母の場合と同様の方法で作成した。
なお、酵母及び細菌群を両方共に包括固定化する場合には、その両者を、寒天に加える前記混合液の量として、等量となるようにして調製した。
The pellets in which the bacterial group was entrapped and immobilized, and the pellets in which both the yeast and the bacterium group were entrapped and immobilized, were prepared in the same manner as in the case of the yeast.
In addition, when both yeast and bacteria groups were entrapped and immobilized together, both were prepared so as to be equal in amount as the amount of the mixed solution added to the agar.

(2)包括固定化微生物による廃液処理の基礎検討
実施例3と同様にして得られたクラゲ廃液を、2本の1L容三角フラスコに500ml入れ、綿栓をし、オートクレーブによる滅菌を行い、クラゲ廃液の調製を行った。本実施例では、クラゲ廃液中に最初から存在する微生物の影響を排除するために、前記のようにしてクラゲ廃液のオートクレーブ処理を行った。また、IV)のオゾン未処理の検討以外の項目については、実施例3の(1)に記載の方法に従い、クラゲ廃液にあらかじめオゾン処理を行った。
(2) Basic examination of waste liquid treatment with entrapped immobilized microorganisms 500 ml of jellyfish waste liquid obtained in the same manner as in Example 3 was put into two 1 L Erlenmeyer flasks, capped, sterilized by autoclave, and jellyfish A waste liquid was prepared. In this example, in order to eliminate the influence of microorganisms present in the jellyfish waste liquid from the beginning, the jellyfish waste liquid was autoclaved as described above. In addition, for items other than IV), the jellyfish waste liquid was pretreated with ozone according to the method described in Example 1 (1).

前記のようにして調製したクラゲ廃液に、それぞれ各項目の微生物を包括固定化したペレット(200ml分)を入れた。その後、インキュベータ(32℃)内で、フラスコ内に曝気を行い、好気条件で、各包括固定化微生物による廃液処理を行った。前記I)〜IV)の各組合せ要素について、以下の各評価項目(COD、全窒素、全リン、残留塩素、pH)について評価し、比較検討を行った。   Into the jellyfish waste liquid prepared as described above, pellets (200 ml) in which microorganisms of each item were comprehensively immobilized were placed. Thereafter, the flask was aerated in an incubator (32 ° C.), and the waste liquid was treated with each entrapping immobilized microorganism under aerobic conditions. For each of the combination elements I) to IV), the following evaluation items (COD, total nitrogen, total phosphorus, residual chlorine, pH) were evaluated and compared.

[CODの測定]
CODの測定は日本工業規格(JIS)に準拠した、デジタルリアクターブロック・DRB200型(以後、デジタルブロックと記載)で測定を行った。測定試料をエッペンドルフチューブに1ml取り、遠心分離(15,000r.p.m.,10min,4℃)をして固形物を除去した。遠心分離後、試験管に遠心分離で、得られた試料上清を30μl入れ、さらにミリQ水を5,970μl加え、試料原液の200倍希釈試料を調製した。希釈試料を調製後、テストチューブ(COD測定用キット、キャップ付ガラスチューブ)に希釈試料(5ml)を入れ、更に試薬A液(COD測定用キット、KMnO溶液)(0.5ml)を加え、キャップを閉じ転倒混和を行った。転倒混和後、100℃になったデジタルブロックで反応を行った。
30分後、デジタルブロックからテストチューブを取り出し、氷冷した。テストチューブの冷却を確認し、遠心分離(3,500r.p.m.,5min)を行いチューブ内の固形物を除去した。そして、水質分析計(DR/2400型)でミリQ水を対照とし、ゼロ点調整を行った。次に測定試料の入ったテストチューブのCOD測定を行った。
[Measurement of COD]
The COD was measured with a digital reactor block / DRB200 type (hereinafter referred to as a digital block) compliant with Japanese Industrial Standards (JIS). 1 ml of a measurement sample was taken in an Eppendorf tube, and centrifuged (15,000 rpm, 10 min, 4 ° C.) to remove solids. After centrifugation, 30 μl of the obtained sample supernatant was placed in a test tube by centrifugation, and 5,970 μl of MilliQ water was added to prepare a 200-fold diluted sample of the sample stock solution. After preparing the diluted sample, put the diluted sample (5 ml) into a test tube (COD measurement kit, glass tube with cap), and add reagent A solution (COD measurement kit, KMnO 4 solution) (0.5 ml), The cap was closed and mixed by inversion. After mixing by inversion, the reaction was performed with a digital block at 100 ° C.
After 30 minutes, the test tube was removed from the digital block and cooled on ice. The cooling of the test tube was confirmed, and centrifugation (3,500 rpm) was performed to remove solid matter in the tube. The zero point adjustment was performed with a water quality analyzer (DR / 2400 type) using Milli-Q water as a control. Next, COD measurement was performed on the test tube containing the measurement sample.

[全窒素(T−N)の測定]
T−Nの測定は日本工業規格(JIS)に準拠した、デジタルブロックで測定を行った。測定試料をテストチューブ(T−N測定用キット、ガラスチューブ)に0.5ml入れた。ミリQ水0.5mlを対照とした。測定試料に、全窒素過硫酸塩試薬パウダーピロー(T−N測定用キット試薬)を混合し、チューブの転倒混和を行った。105℃になったデジタルブロックで反応を行った。
30分後、デジタルブロックからテストチューブを取り出し、室温になるまで放置した。その後、窒素試薬〔A〕(T−N測定用キット試薬)を入れ、キャップを閉めチューブを転倒混和した。3分後、全窒素試薬〔B〕(T−N測定用キット試薬)を入れ、キャップを閉めチューブを転倒混和した。2分後、TN試薬Cバイアル(T−N測定用キット、テストチューブ)に、上記において全窒素試薬〔A・B〕を加えた試料(2ml)を混合した。その後、TN試薬Cバイアルをよく転倒混和した。そして対照でゼロ点調整を行い、測定試料のT−Nを測定した。
[Measurement of total nitrogen (TN)]
The measurement of TN was performed with a digital block conforming to Japanese Industrial Standards (JIS). 0.5 ml of the measurement sample was put in a test tube (TN measurement kit, glass tube). The control was 0.5 ml of milli-Q water. A total nitrogen persulfate reagent powder pillow (TN measurement kit reagent) was mixed with the measurement sample, and the tube was mixed by inversion. The reaction was carried out with a digital block at 105 ° C.
After 30 minutes, the test tube was removed from the digital block and allowed to stand at room temperature. Thereafter, nitrogen reagent [A] (TN measurement kit reagent) was added, the cap was closed, and the tube was mixed by inversion. Three minutes later, total nitrogen reagent [B] (TN measurement kit reagent) was added, the cap was closed, and the tube was mixed by inversion. Two minutes later, the sample (2 ml) to which the total nitrogen reagent [A · B] was added as described above was mixed in a TN reagent C vial (TN measurement kit, test tube). Thereafter, the TN reagent C vial was thoroughly mixed by inversion. And the zero point adjustment was performed by the control | contrast and TN of the measurement sample was measured.

[全リン(T−P)の測定]
T−Pの測定は日本工業規格(JIS)に準拠した、デジタルブロックで測定を行った。測定試料をテストチューブ(T−P測定用キット、ガラスチューブ)に5ml入れた。ミリQ水5mlを対照とした。測定試料混合後、リン酸塩用過硫酸カリウムパウダーピロー(T−P測定用キット試薬)を加え、チューブの転倒混和を行った。そして、150℃になったデジタルブロックで反応を行った。
30分後、デジタルブロックからテストチューブを取り出し、室温になるまで放置した。1.54N NaOH(2ml)を加えて転倒混和を行った。1分後、モリブデンバナジウム酸試薬(0.5ml)を混合し、転倒混和を行った。その後対照でゼロ点調整を行い、7分間放置しテストチューブの遠心分離(3,500r.p.m.,5min)を行い、懸濁物質を沈殿させた測定試料のT−Pを測定した。
[Measurement of total phosphorus (TP)]
The measurement of TP was performed with a digital block conforming to Japanese Industrial Standards (JIS). 5 ml of the measurement sample was put in a test tube (TP measurement kit, glass tube). The control was 5 ml of Milli-Q water. After mixing the measurement sample, potassium persulfate powder pillow for phosphate (TP measurement kit reagent) was added, and the tube was mixed by inversion. The reaction was carried out with a digital block at 150 ° C.
After 30 minutes, the test tube was removed from the digital block and allowed to stand at room temperature. 1.54N NaOH (2 ml) was added and mixed by inversion. One minute later, a molybdenum vanadate reagent (0.5 ml) was mixed and mixed by inversion. Thereafter, the zero point was adjusted with the control, and the test tube was centrifuged (3,500 rpm) for 5 minutes, and TP of the measurement sample on which the suspended substance was precipitated was measured.

[残留塩素(Cl)の測定]
Clの測定は日本工業規格(JIS)に準拠した、デジタルブロックで測定を行った。測定試料をガラスチューブに10ml入れた。また、対照とするため上記の測定試料をもう1本ずつガラスチューブに10ml入れた。その後、測定試料にDPD遊離塩素パウダー(Cl測定用キット試薬)を加え、チューブの転倒混和を行った。そして、ゼロ点調整はDPD遊離塩素パウダーを混合しない対照で行い、測定試料のClを測定した。
[Measurement of residual chlorine (Cl)]
The Cl was measured with a digital block in accordance with Japanese Industrial Standard (JIS). 10 ml of the measurement sample was placed in a glass tube. For control purposes, another 10 ml of the above measurement sample was placed in a glass tube. Thereafter, DPD free chlorine powder (Cl measurement kit reagent) was added to the measurement sample, and the tube was mixed by inversion. And zero point adjustment was performed by the control | contrast which does not mix DPD free chlorine powder, and measured Cl of the measurement sample.

[pHの測定]
pHメーターでpHを測定した。
[Measurement of pH]
The pH was measured with a pH meter.

(3)結果
I) 酵母 ― 細菌群
[COD減少率]
酵母をクラゲ廃液で培養した時の最大COD減少率は7日目の53.1%(2,560ppm→1,200ppm)であった。それに対し細菌群のみの減少率は7日目の46.2%(2,600ppm→1,400ppm)であった。7日間では酵母と細菌群それぞれを培養した時のCOD減少率の差は6.9%であった。培養開始3日後でのCOD減少率は酵母23.4%に対し細菌群は4.6%であった(図15)。
[全窒素(T−N)減少率]
酵母をクラゲ廃液で培養した時の最大T−N減少率は7日目の64.3%(73ppm→26ppm)であった。それに対し細菌群のみの減少率は7日目の56%(72ppm→32ppm)であった。7日間では酵母と細菌群それぞれを培養した時のT−N減少率の差は8.3%であった(図16)。培養開始2日後でのT−N減少率は酵母41.1%に対し細菌群は19.4%であった。
[全リン(T−P)減少率]
酵母をクラゲ廃液で培養した時の最大T−P減少率は7日目の100%(26ppm→0ppm)であった。同様に、細菌群のみの減少率も100%(25.9ppm→0ppm)であった。7日間では酵母と細菌群それぞれを培養した時のT−P減少率の差はなかった。培養開始2日後でのT−P減少率は酵母の39.61%に対し細菌群は17.7%であった(図17)。
[残留塩素(Cl)減少率]
酵母をクラゲ廃液で培養した時の最大Cl減少率は7日目の37.7%(0.61ppm→0.38ppm)であった。細菌群のみの最大減少率は2日目の32.8%(0.67ppm→0.45ppm)であった。7日間では酵母と細菌群それぞれを培養した時の差は43.6%であった(図18)。
[pH]
運転開始後のpHの変化を経日的に測定した(図19)。酵母のpHは5.89から4.52へと変化した。一方、細菌群のpHは5.74から4.56へと変化した。両方とも同様に酸性側に変化し、最終pHはほぼ同じ値を示した。
[汚泥発生量]
また、各組合せ要素条件別ペレットによる廃液の処理時の汚泥発生量を、以下の表11に示す。I)の酵母−細菌群では、酵母の方が細菌群に比べて汚泥発生量は89.8%少なかった(表11)。
(3) Results I) Yeast-bacteria group [COD reduction rate]
The maximum COD reduction rate when the yeast was cultured in the jellyfish waste solution was 53.1% (2,560 ppm → 1,200 ppm) on the seventh day. In contrast, the reduction rate of the bacterial group alone was 46.2% (2,600 ppm → 1,400 ppm) on the seventh day. In 7 days, the difference in the COD reduction rate when the yeast group and the bacterial group were cultured was 6.9%. The COD reduction rate 3 days after the start of the culture was 23.4% for the yeast and 4.6% for the bacterial group (FIG. 15).
[Total nitrogen (TN) reduction rate]
The maximum TN reduction rate when yeast was cultured in the jellyfish waste solution was 64.3% (73 ppm → 26 ppm) on the seventh day. In contrast, the reduction rate of the bacterial group alone was 56% (72 ppm → 32 ppm) on the seventh day. In 7 days, the difference in the TN reduction rate when the yeast and the bacterial group were cultured was 8.3% (FIG. 16). The TN decrease rate 2 days after the start of the culture was 49.4% for the yeast and 19.4% for the bacterial group.
[Total phosphorus (TP) reduction rate]
The maximum TP reduction rate when yeast was cultured in the jellyfish waste solution was 100% (26 ppm → 0 ppm) on the seventh day. Similarly, the reduction rate of the bacterial group alone was 100% (25.9 ppm → 0 ppm). In 7 days, there was no difference in the TP decrease rate when the yeast and the bacterial group were cultured. Two days after the start of the culture, the TP decrease rate was 39.61% for the yeast and 17.7% for the bacterial group (FIG. 17).
[Residual chlorine (Cl) reduction rate]
When the yeast was cultured in the jellyfish waste solution, the maximum Cl reduction rate was 37.7% on the seventh day (0.61 ppm → 0.38 ppm). The maximum reduction rate of the bacterial group alone was 32.8% (0.67 ppm → 0.45 ppm) on the second day. In 7 days, the difference in culturing the yeast and bacterial groups was 43.6% (FIG. 18).
[PH]
Changes in pH after the start of operation were measured over time (FIG. 19). The pH of the yeast changed from 5.89 to 4.52. On the other hand, the pH of the bacterial group changed from 5.74 to 4.56. Both changed to the acidic side as well, and the final pH showed almost the same value.
[Sludge generation amount]
In addition, Table 11 below shows the amount of sludge generated during the treatment of the waste liquid with the pellets according to the combination element conditions. In the yeast-bacteria group of I), the amount of sludge generation was 89.8% less in the yeast group than in the bacterial group (Table 11).

II) 酵母+細菌群 ― 酵母
[COD減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大COD減少率は7日目の48.8%(1,620ppm→830ppm)であった。7日目の酵母のみの減少率は46.1%(1,650ppm→890ppm)であった。7日間では酵母+細菌群と酵母の差は2.7%であった(図20)。培養開始1日後でのCOD減少率は酵母+細菌群の31.5%に対し酵母は52.7%であった。
[全窒素減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大T−N減少率は3日目の4.6%(24ppm→22.9ppm)であった。酵母のみでは2日目の24.9%(23.7ppm→17.8ppm)であった。(図21)。培養開始2日後でのT−N減少率は酵母+細菌群の0%に対し酵母は24.9%であった。
[全リン減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大T−P減少率は7日目の100%(13.6ppm→0ppm)であった。同様に酵母のみでの減少率も100%(11.3ppm→0ppm)であった。7日間では酵母+細菌群と酵母の差はなかった(図22)。培養開始3日後でのT−P減少率は酵母+細菌群の46.9%に対し酵母は4.6%であった。
[残留塩素減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大Cl減少率は1日目の100%(0.25ppm→0.00ppm)であった。同様に酵母のみでは減少率は1日目で100%(0.5ppm→0ppm)であった(図23)。培養開始1日後でのCl減少率は酵母+細菌群の100%に対し酵母も100%で差はなかった。
[pH測定]
運転開始後のpHの変化を経日的に測定した(図24)。酵母+細菌群のpHは7.26から7.44へと変化した。一方、酵母のpHは7.01から7.42へと変化した。両方ともほぼ中性付近のpHとなった。
[汚泥発生量]
酵母+細菌群 ― 酵母では酵母のみの方が酵母+細菌群に比べて汚泥発生量は42.4%少なかった(表11、前述)。
II) Yeast + Bacteria group-Yeast [COD reduction rate]
The maximum COD reduction rate when the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution was 48.8% (1,620 ppm → 830 ppm) on the seventh day. The decrease rate of yeast only on the 7th day was 46.1% (1,650 ppm → 890 ppm). In 7 days, the difference between the yeast + bacteria group and the yeast was 2.7% (FIG. 20). One day after the start of the culture, the COD reduction rate was 32.7% in the yeast + bacteria group, and 52.7% in the yeast.
[Total nitrogen reduction rate]
The maximum TN reduction rate when the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution was 4.6% (24 ppm → 22.9 ppm) on the third day. In yeast alone, it was 24.9% (23.7 ppm → 17.8 ppm) on the second day. (FIG. 21). The TN reduction rate 2 days after the start of the culture was 24.9% for yeast versus 0% for the yeast + bacteria group.
[Total phosphorus reduction rate]
The maximum TP reduction rate when the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution was 100% (13.6 ppm → 0 ppm) on the seventh day. Similarly, the reduction rate with only yeast was 100% (11.3 ppm → 0 ppm). There was no difference between yeast + bacteria group and yeast in 7 days (FIG. 22). The TP reduction rate 3 days after the start of the culture was 4.6% for yeast versus 46.9% for the yeast + bacteria group.
[Residual chlorine reduction rate]
When the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution, the maximum Cl reduction rate was 100% on the first day (0.25 ppm → 0.00 ppm). Similarly, with yeast alone, the reduction rate was 100% (0.5 ppm → 0 ppm) on the first day (FIG. 23). The Cl reduction rate one day after the start of the culture was 100% of the yeast + bacteria group, and the yeast was 100%, and there was no difference.
[PH measurement]
Changes in pH after the start of operation were measured over time (FIG. 24). The pH of the yeast + bacteria group changed from 7.26 to 7.44. On the other hand, the pH of the yeast changed from 7.01 to 7.42. In both cases, the pH was almost neutral.
[Sludge generation amount]
Yeast + bacteria group—Yeast alone produced 42.4% less sludge than yeast + bacteria group (Table 11, above).

III) 酵母+細菌群 ― 細菌群
[COD減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大COD減少率は3日目の41.4%(1,400ppm→820ppm)であった。細菌群のみの減少率は7日目の41.8%(1,340ppm→780ppm)であった(図25)。培養開始3日後でのCOD減少率は酵母+細菌群41.4%なのに対し細菌群は3.0%であった。
[全窒素減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大T−N減少率は3日目の97.5%(80ppm→2.0ppm)であった。細菌群のみの減少率は2日目の88.5%(61ppm→7.0ppm)であった(図26)。培養開始3日後でのT−N減少率は酵母+細菌群97.5%なのに対し細菌群は77.0%であった。
[全リン減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大T−P減少率は3日目の100%(21.3ppm→0ppm)であった。細菌群のみの減少率は7日目の100%(21.3ppm→0ppm)であった。7日間では酵母+細菌群と細菌群の差はなかった(図27)。培養開始3日後でのT−P減少率は酵母+細菌群100%なのに対し細菌群は62.0%であった。
[残留塩素減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大Cl減少率は1日目の100%(0ppm→0ppm)であった。同様に細菌群のみの減少率は100%(0.26ppm→0.00ppm)であった。7日間では酵母+細菌群と細菌群の差は30.8%であった(図28)。培養開始2日後でのCl減少率は酵母+細菌群100%なのに対し細菌群は53.8%であった。
[pH測定]
運転開始後のpHの変化を経日的に測定した(図29)。酵母+細菌群のpHは4.27から6.13へと変化した。そして、細菌群のpHは4.26から5.65へと変化した。両方ともにアルカリ性側に変化し、最終pHはほぼ同じ値を示した。
[汚泥発生量]
酵母+細菌群 ― 細菌群では酵母+細菌群の方が細菌群に比べて汚泥発生量は52.5%少なかった(表11、前述)。
III) Yeast + bacteria group-bacteria group [COD reduction rate]
The maximum COD reduction rate when the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution was 41.4% (1,400 ppm → 820 ppm) on the third day. The reduction rate of the bacterial group alone was 41.8% (1,340 ppm → 780 ppm) on the seventh day (FIG. 25). The COD reduction rate after 3 days from the start of the culture was 41.4% for the yeast + bacteria group, but 3.0% for the bacteria group.
[Total nitrogen reduction rate]
The maximum TN reduction rate when the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution was 97.5% (80 ppm → 2.0 ppm) on the third day. The reduction rate of the bacterial group alone was 88.5% (61 ppm → 7.0 ppm) on the second day (FIG. 26). The TN reduction rate 3 days after the start of the culture was 97.5% for the yeast + bacteria group, whereas it was 77.0% for the bacteria group.
[Total phosphorus reduction rate]
The maximum TP reduction rate when the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution was 100% (21.3 ppm → 0 ppm) on the third day. The reduction rate of the bacterial group alone was 100% on the seventh day (21.3 ppm → 0 ppm). There was no difference between the yeast + bacteria group and the bacteria group in 7 days (FIG. 27). The TP reduction rate 3 days after the start of the culture was 62.0% for the bacteria group compared to 100% for the yeast + bacteria group.
[Residual chlorine reduction rate]
The maximum Cl reduction rate when the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution was 100% (0 ppm → 0 ppm) on the first day. Similarly, the reduction rate of only the bacterial group was 100% (0.26 ppm → 0.00 ppm). In 7 days, the difference between the yeast + bacteria group and the bacteria group was 30.8% (FIG. 28). The Cl reduction rate 2 days after the start of the culture was 100% for the yeast + bacteria group, whereas it was 53.8% for the bacteria group.
[PH measurement]
The change in pH after the start of operation was measured over time (FIG. 29). The pH of the yeast + bacteria group changed from 4.27 to 6.13. The pH of the bacterial group was changed from 4.26 to 5.65. Both changed to the alkaline side, and the final pH showed almost the same value.
[Sludge generation amount]
Yeast + Bacterial Group-In the bacterial group, sludge generation was 52.5% less in the yeast + bacterial group than in the bacterial group (Table 11, above).

IV) オゾン処理区 ― オゾン未処理区
[COD減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大COD減少率はオゾン処理区が6日目の74.9%(3,920ppm→985ppm)であった。同様にオゾン未処理区の減少率は69.0%(3,480ppm1→1,080ppm)であった。6日間ではオゾン処理区と未処理区の差は5.9%であった(図30)。
[全窒素減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大T−N減少率はオゾン処理区が6日目の100%(148ppm→0ppm)であった。同様にオゾン未処理区の減少率も100%(156ppm→0ppm)であった。6日間ではオゾン処理区と未処理区の差はなかった(図31)。
[全リン減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大T−P減少率はオゾン処理区が6日目の100%(42.7ppm→0ppm)であった。オゾン未処理区の減少率は73.6%(43.6ppm→11.5ppm)であった。6日間ではオゾン処理区と未処理区の差は26.4%であった(図32)。培養開始2日後でのT−P減少率はオゾン処理区が12.4%なのに対し未処理区は2.3%であった。
[残留塩素減少率]
酵母+細菌群をクラゲ廃液で培養した時の最大Cl減少率はオゾン処理区が2日目の100%(0.99ppm→0ppm)であった。同様にオゾン未処理区の減少率も100%(0.79ppm→0ppm)で、オゾン処理区と未処理区の差はなかった(図33)。
[pH測定]
運転開始後のpHの変化を経日的に測定した(図34)。オゾン処理のpHは4.99から6.82へと変化した。そして、オゾン未処理のpHは5.06から6.21へと変化した。また、両方ともにアルカリ側に変化し、最終pHはほぼ同じ値を示した。
[汚泥発生量]
オゾン処理 ― オゾン未処理ではオゾン未処理の方がオゾン処理に比べて汚泥発生量は31.2%少なかった(表11、前述)。
IV) Ozone treatment zone-Ozone untreated zone [COD reduction rate]
The maximum COD reduction rate when the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution was 74.9% (3,920 ppm → 985 ppm) on the sixth day in the ozone treatment group. Similarly, the decrease rate of the ozone-untreated section was 69.0% (3,480 ppm1 → 1,080 ppm). In 6 days, the difference between the ozone-treated area and the untreated area was 5.9% (FIG. 30).
[Total nitrogen reduction rate]
The maximum TN reduction rate when the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution was 100% (148 ppm → 0 ppm) on the sixth day in the ozone treatment group. Similarly, the decrease rate of the ozone-untreated section was 100% (156 ppm → 0 ppm). There was no difference between the ozone-treated area and the untreated area in 6 days (FIG. 31).
[Total phosphorus reduction rate]
The maximum TP reduction rate when the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution was 100% (42.7 ppm → 0 ppm) on the sixth day in the ozone treatment group. The decrease rate of the ozone-untreated section was 73.6% (43.6 ppm → 11.5 ppm). In 6 days, the difference between the ozone-treated area and the untreated area was 26.4% (FIG. 32). Two days after the start of the culture, the TP reduction rate was 12.4% in the ozone-treated group and 2.3% in the untreated group.
[Residual chlorine reduction rate]
The maximum Cl reduction rate when the yeast + bacteria group was cultured in the jellyfish waste solution was 100% (0.99 ppm → 0 ppm) on the second day in the ozone treatment group. Similarly, the decrease rate of the ozone-untreated section was 100% (0.79 ppm → 0 ppm), and there was no difference between the ozone-treated section and the untreated section (FIG. 33).
[PH measurement]
The change in pH after the start of operation was measured over time (FIG. 34). The pH of the ozone treatment changed from 4.99 to 6.82. And the pH of ozone non-treatment changed from 5.06 to 6.21. Moreover, both changed to the alkali side and the final pH showed almost the same value.
[Sludge generation amount]
Ozone treatment—The amount of sludge generated in the untreated ozone was 31.2% less than in the untreated ozone (Table 11, above).

以上、本実施例4により、前記実施例3で同定された酵母、ロドトルーラ ムシラギノーサ(Rhodotorula mucilaginosa)が、クラゲ廃液の有機物、窒素、リン、残留塩素を、特に効率的に低減可能であり、塩分濃度が高く有機物濃度が高いクラゲ廃液の処理に非常に有効であることが示された(図15〜29)。
また、表11の結果から、前記酵母は細菌群に比べてクラゲ廃液処理で発生する汚泥量を著しく低減可能であることが観察され(I)、また、酵母+細菌群では、細菌群単独に比べて汚泥を約50%低減可能であることが観察された(IV)。Rhodotorula mucilaginosaは、菌体外に粘性物質である多糖類マンナンを生成することから、マンナンにより廃液中の無機物や浮遊物質を凝集させ、廃液処理の効果を高めていることが推測される。前記無機物や浮遊物質が凝集してフロックを形成することにより、処理工程から微生物の流出を防止することができ、更に処理槽内部、バイオリアクター内にバイオフィルムの形成も行われ、処理系内での微生物表面積を格段に大きくすることができると考えられる。
As described above, according to Example 4, the yeast, Rhodotorula mucilaginosa identified in Example 3, can reduce organic matter, nitrogen, phosphorus, and residual chlorine in the jellyfish waste liquid particularly efficiently, and has a salinity concentration. It was shown to be very effective in the treatment of jellyfish waste liquid with a high organic matter concentration (FIGS. 15 to 29).
Further, from the results of Table 11, it was observed that the yeast can remarkably reduce the amount of sludge generated in the jellyfish waste liquid treatment compared to the bacterial group (I). In comparison, it was observed that sludge can be reduced by about 50% (IV). Since Rhodotorula mucilaginosa produces polysaccharide mannan, which is a viscous substance, outside the cells, it is presumed that the mannan agglomerates inorganic substances and floating substances in the waste liquid to enhance the effect of the waste liquid treatment. By the formation of flocs by aggregation of the inorganic substances and suspended solids, it is possible to prevent microorganisms from flowing out of the treatment process, and further, biofilms are formed in the treatment tank and in the bioreactor. It is thought that the microbial surface area of can be greatly increased.

なお、前記酵母、Rhodotorula mucilaginosaはカロテノイドを産生し、培養液は赤橙色となる(図9)(例えば、Folia Microiol.,49;2004;19−25参照)。細菌群と混合培養することにより色素の産生は少なくなるため、凝集沈殿処理後の処理液の透明化には、前記酵母と細菌群との併用もまた有利であると考えられる。酵母と細菌群とを併用した処理方法もまた、クラゲ廃液処理に非常に有効であることは、本実施例4の結果からも示されている通りである(図15〜29)。   The yeast, Rhodotorula mucilaginosa, produces carotenoids, and the culture becomes reddish orange (see, for example, Folia Microiol., 49; 2004; 19-25). Since the production of pigments is reduced by mixed culture with bacterial groups, the combined use of the yeast and bacterial groups is also advantageous for clarifying the treatment solution after the coagulation-precipitation treatment. It is also shown from the results of this Example 4 that the treatment method using both yeast and bacteria group is also very effective for jellyfish waste liquid treatment (FIGS. 15 to 29).

なお、オゾン処理を行った場合と行わなかった場合とでは、クラゲ廃液処理に対する顕著な違いは認められなかった(図30〜34)。したがって、このことからも、クラゲ廃液処理に対する前記各効果が、オゾン処理による影響ではなく、それぞれの微生物群の働きによるものであることが確認された。しかし、オゾン処理によれば、プリオナーゼ処理により分解できなかった脂質、多糖類などの有機物が更にオゾンで分解されるため、廃液を微生物が利用しやすくするためには、このオゾン処理を行うこともまた有利であると考えられる。   In addition, the remarkable difference with respect to a jellyfish waste liquid process was not recognized by the case where it does not perform with the case where ozone treatment is performed (FIGS. 30-34). Therefore, it was also confirmed from this that each of the above-mentioned effects on the jellyfish waste liquid treatment was not due to the effect of the ozone treatment, but due to the action of each microbial group. However, according to the ozone treatment, since organic substances such as lipids and polysaccharides that could not be decomposed by the prionase treatment are further decomposed by ozone, this ozone treatment may be performed in order to make it easier for microorganisms to use the waste liquid. It is also considered advantageous.

(実施例5:酵母+細菌群固定化担体を用いたバイオリアクターによる廃液処理)
(1)酵母+細菌群固定化担体の調製
実施例4と同様にして、前記酵母及び前記細菌群を両方共に包括固定化したペレットを作成した。なお、酵母と細菌群との量比は、前記同様、寒天に加える前記混合液の量がそれぞれ等量となるようにして調整した。
(Example 5: Waste liquid treatment by bioreactor using yeast + bacteria group immobilization support)
(1) Preparation of Yeast + Bacterial Group Immobilization Carrier A pellet in which both the yeast and the bacterial group were comprehensively immobilized was prepared in the same manner as in Example 4. In addition, the amount ratio between the yeast and the bacterial group was adjusted so that the amount of the mixed solution added to the agar was equal to each other as described above.

(2)廃液処理
<装置>
図1に示す本発明の装置を用いて、処理を行った。図1において、1は廃水槽、2は移送ポンプ、3は三方コック、4は通気装置(溶存酸素濃度調整手段)、5はバイオリアクター(容器)、6は電気分解槽(殺菌手段)、7は仕切弁をそれぞれ示す。
バイオリアクター内には、ペレットを保持するステンレス(SUS304)製の籠(1mmメッシュ)を設置した。バイオリアクター内に、前記(1)で調製したペレットを、ペレット全体に通気が行われるように、あらかじめバイオリアクター内に配置した籠に90%量充填した。
また、実施例3(1)と同様にして調製したクラゲ廃液に、クラゲ廃液量の0.1%量のグルコースと海水の塩分濃度と同条件になるように3.0%(w/v)量の人工海水を加え、微生物群が活発に増殖する温度に廃水槽の温度を設定(32℃)した。
(2) Waste liquid treatment <Equipment>
Processing was performed using the apparatus of the present invention shown in FIG. In FIG. 1, 1 is a wastewater tank, 2 is a transfer pump, 3 is a three-way cock, 4 is a venting device (dissolved oxygen concentration adjusting means), 5 is a bioreactor (container), 6 is an electrolysis tank (sterilizing means), 7 Indicates a gate valve.
In the bioreactor, a stainless steel (SUS304) cage (1 mm mesh) was installed to hold the pellets. In the bioreactor, 90% of the pellet prepared in the above (1) was filled in a basket previously placed in the bioreactor so that the whole pellet was vented.
Further, in the jellyfish waste liquid prepared in the same manner as in Example 3 (1), 0.1% of the jellyfish waste liquid amount of glucose and the salt concentration of seawater are 3.0% (w / v). An amount of artificial seawater was added, and the temperature of the wastewater tank was set to a temperature at which the microbial community actively grew (32 ° C.).

<廃液処理>
クラゲ廃液の処理は以下の工程で行った。廃水槽から移送ポンプによってクラゲ廃液を、三方コックの操作によってバイオリアクター内に移送した。また、各バイオリアクターをシリコンチューブにより連結し、3本全てのバイオリアクター内をクラゲ廃液が通過するようにした。そして、一旦バイオリアクター内を通過した廃液は廃液槽に戻り、再びバイオリアクター内へ移送する循環処理により廃液の処理を行った。更に、バイオリアクター内を好気条件にするためエアポンプ(通気装置)で発生させた空気をバイオリアクター内に通気した(図1)。バイオリアクターによるクラゲ廃液の処理は、連続運転で7日間行った。
前記装置の運転条件を、以下に示す。
[運転条件]
ポンプ型式:CAS−1
電気使用:100V 50/60Hz
消費電流値:1.8/1.4A
無負荷時流量:9.2/11LPM
最大圧力:2.3bar以上
最大真空度:292mbar以上
接続口径:8mm
<Waste liquid treatment>
The jellyfish waste liquid was treated in the following steps. The jellyfish waste liquid was transferred from the waste water tank into the bioreactor by the operation of the three-way cock. In addition, each bioreactor was connected by a silicon tube so that the jellyfish waste liquid passed through all three bioreactors. Then, the waste liquid that once passed through the bioreactor returned to the waste liquid tank, and the waste liquid was treated by a circulation process that was transferred again into the bioreactor. Further, air generated by an air pump (aeration device) was aerated in the bioreactor in order to make the bioreactor aerobic (FIG. 1). The treatment of the jellyfish waste liquid by the bioreactor was performed for 7 days in continuous operation.
The operating conditions of the apparatus are shown below.
[Operating conditions]
Pump model: CAS-1
Electricity use: 100V 50 / 60Hz
Current consumption: 1.8 / 1.4A
No load flow rate: 9.2 / 11 LPM
Maximum pressure: 2.3 bar or more Maximum vacuum: 292 mbar or more Port size: 8 mm

<沈殿及びろ過処理>
7日後、前記廃液処理を終了した8L容のクラゲ廃液を凝集沈殿装置に移し、20gの水酸化カルシウムを加えた。1時間後、凝集沈殿の上清を集めた。そして、凝集沈殿によって得られた上清を活性炭カラムに通過させ、クラゲ廃液のろ過を行った。
<Precipitation and filtration>
Seven days later, the 8 L volume of jellyfish waste liquid after the waste liquid treatment was transferred to a coagulation sedimentation apparatus, and 20 g of calcium hydroxide was added. After 1 hour, the supernatant of the aggregated precipitate was collected. Then, the supernatant obtained by coagulation precipitation was passed through an activated carbon column, and the jellyfish waste liquid was filtered.

(3)廃液処理結果
前記実施例4と同様にして、以下の各項目について評価した。結果を以下に示す。
なお、懸濁物質(SS)の測定は、日本工業規格(JIS)に準拠した、デジタルブロックを用いて行った。測定試料をSS測定専用のガラスチューブに25ml入れた。ミリQ水を対照試料とし、ゼロ点調整を行い、測定試料のSSを測定した。
[COD測定結果]
バイオリアクターによる1次処理4日目で86.2%(2,320ppm→320ppm)、7日間で88.7%(2,320ppm→260ppm)CODが低下した(図35)。また、2次処理として、凝集沈殿を行った結果、減少率は89.7%となり、活性炭ろ過を行った結果、減少率は99.9%となった(図35)。
また、バイオリアクター運転開始後、1週間おきに廃液を交換し、7日目以降のCOD減少率を調べた。その結果、第1週目が86.0%(1,680ppm→235ppm)、第2週目が88.5%(3,440ppm→395ppm)、第3週目が88.7%(2,320ppm→260ppm)と、繰り返しの回数が増えるごとにCOD減少効率が高くなっていった。(図36)。
[全窒素(T−N)測定結果]
バイオリアクターによる1次処理2日目に92.7%(31ppm→3ppm)、4日間で90.2%(41ppm→4ppm)T−Nが低下した(図37)。また、凝集沈殿、活性炭ろ過による2次処理により減少率は100%となった(図37)。
[全リン(T−P)測定結果]
バイオリアクターによる1次処理4日目に90%(40.1ppm→4ppm)、7日間で80.5%(40.1ppm→7.8ppm)T−Pが低下した(図38)。また、2次処理として凝集沈殿、活性炭ろ過を行った結果、減少率は98.8%となった(図38)。
また、毎回ほぼ100%の減少率が認められた。
[残留塩素(Cl)測定結果]
バイオリアクターによる1次処理3日目に100%(0.85ppm→0ppm)、7日間で83.5%(0.85ppm→0.14ppm)Clが低下した(図39)。また、2次処理として凝集沈殿、活性炭ろ過を行った結果、減少率は82.4%となった(図39)。
[懸濁物質(SS)測定結果]
バイオリアクターによる1次処理7日間で19%(100ppm→81ppm)SSが低下した(図40)。また、2次処理として凝集沈殿、活性炭ろ過を行った結果、減少率は100%となった(図40)。
[pH測定結果]
pH変化の平均値(10ヶ月)を求めた(図41)。また、1次処理における凝集沈殿でpHがアルカリ性となったのは水酸化カルシウムで凝集沈殿を行ったためである。
(3) Waste liquid treatment results The following items were evaluated in the same manner as in Example 4. The results are shown below.
In addition, the measurement of suspended solids (SS) was performed using the digital block based on the Japanese Industrial Standard (JIS). 25 ml of the measurement sample was put in a glass tube dedicated to SS measurement. Milli-Q water was used as a control sample, zero point adjustment was performed, and SS of the measurement sample was measured.
[COD measurement results]
The COD decreased by 86.2% (2,320 ppm → 320 ppm) on the 4th day of the first treatment by the bioreactor and 88.7% (2,320 ppm → 260 ppm) in 7 days (FIG. 35). As a result of coagulation precipitation as a secondary treatment, the reduction rate was 89.7%, and as a result of performing activated carbon filtration, the reduction rate was 99.9% (FIG. 35).
In addition, after the start of the bioreactor operation, the waste liquid was changed every other week, and the COD reduction rate after the seventh day was examined. As a result, the first week was 86.0% (1,680 ppm → 235 ppm), the second week was 88.5% (3,440 ppm → 395 ppm), and the third week was 88.7% (2,320 ppm). → 260 ppm), the COD reduction efficiency increased as the number of repetitions increased. (FIG. 36).
[Total nitrogen (TN) measurement results]
On the second day of the primary treatment with the bioreactor, 92.7% (31 ppm → 3 ppm) and 90.2% (41 ppm → 4 ppm) TN decreased in 4 days (FIG. 37). Moreover, the reduction rate became 100% by the secondary treatment by coagulation sedimentation and activated carbon filtration (FIG. 37).
[Total phosphorus (TP) measurement results]
90% (40.1 ppm → 4 ppm) on the 4th day of the primary treatment by the bioreactor, and 80.5% (40.1 ppm → 7.8 ppm) TP decreased in 7 days (FIG. 38). In addition, as a result of coagulation precipitation and activated carbon filtration as a secondary treatment, the reduction rate was 98.8% (FIG. 38).
In addition, a reduction rate of almost 100% was observed every time.
[Residual chlorine (Cl) measurement results]
On the third day of the primary treatment by the bioreactor, 100% (0.85 ppm → 0 ppm) and 83.5% (0.85 ppm → 0.14 ppm) Cl decreased in 7 days (FIG. 39). In addition, as a result of coagulation precipitation and activated carbon filtration as a secondary treatment, the reduction rate was 82.4% (FIG. 39).
[Suspended matter (SS) measurement result]
19% (100 ppm → 81 ppm) SS decreased in 7 days of the primary treatment with the bioreactor (FIG. 40). Moreover, as a result of carrying out aggregation precipitation and activated carbon filtration as the secondary treatment, the reduction rate was 100% (FIG. 40).
[PH measurement result]
The average value of pH change (10 months) was determined (FIG. 41). In addition, the reason why the pH became alkaline in the coagulation sedimentation in the primary treatment is that the coagulation sedimentation was performed with calcium hydroxide.

[ペレットの形態変化]
運転1ヶ月後、リアクター内のペレットは半透明から微生物の増殖を示す白濁化が認められた(図42)。また、顕微鏡観察の結果では、包括固定化したペレット内の微生物に酵母やバクテリア、更には原生動物がバランスよく存在していた(図43)。
[各工程別廃液の外見]
また、図44には、左から順にオゾン処理後クラゲ廃液(処理前)、バイオリアクター処理後廃液(一次処理)、凝集沈殿処理後廃液(凝集沈殿)、活性炭ろ過後廃液(活性炭ろ過)を示す。凝集沈殿廃液はわずかに着色した液体であったが、活性炭ろ過により完全に透明な液体となった。
[凝集沈殿処理に用いる凝集剤の検討]
なお、図45〜46には、凝集沈殿処理に用いる凝集剤の予備検討を行った結果を示した。凝集沈殿剤として酸化カルシウム(生石灰)(図45、右から2つ目)、水酸化カルシウム(消石灰)(図45、右端)、アルミン酸ナトリウム(図45、左から4つ目)を加えた場合には、上層廃液は透明になり、アルミン酸ナトリウムは沈殿するまでに時間を要した。
[Changes in pellet morphology]
One month after the operation, the pellet in the reactor was translucent to clouding indicating microbial growth (FIG. 42). Moreover, as a result of microscopic observation, yeasts, bacteria, and protozoa were present in a well-balanced manner in the microorganisms in the entrapped and immobilized pellets (FIG. 43).
[Appearance of waste liquid for each process]
In addition, FIG. 44 shows the jellyfish waste liquid after ozone treatment (before treatment), the waste liquid after bioreactor treatment (primary treatment), the waste liquid after aggregation precipitation treatment (aggregation precipitation), and the waste liquid after activated carbon filtration (activated carbon filtration) in order from the left. . The coagulation sediment waste liquid was a slightly colored liquid, but became a completely transparent liquid by activated carbon filtration.
[Examination of coagulant used for coagulation sedimentation]
45 to 46 show the results of preliminary examination of the flocculant used for the coagulation sedimentation treatment. When calcium oxide (quick lime) (Fig. 45, second from the right), calcium hydroxide (slaked lime) (Fig. 45, right end), sodium aluminate (Fig. 45, fourth from the left) is added as a coagulating precipitant In this case, the upper layer waste liquid became transparent, and it took time for sodium aluminate to precipitate.

結果、酵母+細菌群を包括固定化したペレットを充填したバイオリアクター単独処理によれば、4日以内に、実施例4においてフラスコ中で7日間処理した各項目の測定値(減少率)にまで減少する効果が認められた。したがって、短期間で廃液を処理するバイオリアクターの効果が認められた。
また、図36の結果から、バイオリアクターを連続運転しても、COD減少率が劣ることはなく、逆に、運転回数を繰り返すほど、COD減少率が高くなったことが判る。これはペレット内の微生物が廃液中の有機成分により馴化されたものと推察される。
また、本実施例5(プリオナーゼ酵素処理クラゲ廃液の処理)におけるCOD測定結果(図35)と、前記実施例1(熱水処理クラゲ廃液の処理)におけるCOD測定結果(図2)とを比較することにより、本実施例5では、バイオリアクター処理前のクラゲ廃液中のCOD値がより高い(2,320ppm)のにもかかわらず、前記実施例1とほぼ同様なCOD低減作用が認められた。したがって、前記バイオリアクターは酵素処理クラゲ廃液の処理により好適であることが認められた。
As a result, according to the bioreactor single treatment filled with pellets in which yeast and bacteria were entrapped and immobilized, within 4 days, the measurement values (reduction rate) of each item treated in the flask in Example 4 for 7 days were reached. A decreasing effect was observed. Therefore, the effect of the bioreactor treating waste liquid in a short period was recognized.
In addition, it can be seen from the results of FIG. 36 that even when the bioreactor is continuously operated, the COD reduction rate is not inferior, and conversely, the COD reduction rate increases as the number of operations is repeated. This is presumed that the microorganisms in the pellet were conditioned by the organic components in the waste liquid.
Moreover, the COD measurement result (FIG. 35) in Example 5 (treatment of prionase enzyme-treated jellyfish waste liquid) is compared with the COD measurement result (FIG. 2) in Example 1 (treatment of hydrothermal treatment jellyfish waste liquid). As a result, in Example 5, the COD reduction effect almost the same as that of Example 1 was observed despite the higher COD value in the jellyfish waste liquid before bioreactor treatment (2,320 ppm). Therefore, the bioreactor was found to be more suitable for the treatment of enzyme-treated jellyfish waste liquid.

(実施例6:クラゲ廃液以外の培地で培養した微生群を使用した場合の廃液処理)
前記実施例4〜5で使用した細菌群(微生物群)は、クラゲ廃液を培地として増殖する汚泥中の微生物を集積培養して得られた微生物群(酵母を含む)であり、この場合、培養日数の経過とともにクラゲ廃液中の各成分は顕著に減少した(図15〜41)。しかしながら、本実施例6において、汚泥中の微生物を集積培養する培地を、クラゲ廃液から、微生物の培養に通常用いる培地(S培地:バクトソイトン;1.0%,ガラクトース;2.0%,コーンスティープリキュール;0.5%,デキストリン;2.0%,硫酸アンモニウム;0.2%,炭酸カルシウム;0.2%,pH6.5)に置き換え、汚泥中の微生物の集積培養を行った場合には、得られた微生物群(酵母を含む)によるクラゲ廃液処理時のCODの減少率は、培養開始3日後においても10%に満たなかった。結果を図47に示す。
このことから、本発明における廃液処理に利用する微生物群の集積培養は、処理対象となる廃液(塩分含有廃液、例えば、クラゲ廃液)を培地として行い、分解液中の栄養成分を資化させることが望ましく、馴養においても栄養成分を極端に変動させないことが望ましいことが判った。
(Example 6: Waste liquid treatment when using a microbial group cultured in a medium other than jellyfish waste liquid)
The bacteria group (microorganism group) used in Examples 4 to 5 is a microorganism group (including yeast) obtained by accumulating microorganisms in sludge that grows using jellyfish waste liquid as a medium. Each component in the jellyfish waste liquid decreased remarkably with the passage of days (FIGS. 15 to 41). However, in Example 6, the culture medium for accumulating the microorganisms in the sludge is the medium normally used for culturing microorganisms from the jellyfish waste liquid (S medium: bacto-seuton; 1.0%, galactose; 2.0%, corn steep). Liqueur; 0.5%, dextrin; 2.0%, ammonium sulfate; 0.2%, calcium carbonate; 0.2%, pH 6.5) The reduction rate of COD during jellyfish waste liquid treatment by the obtained microorganism group (including yeast) was less than 10% even after 3 days from the start of the culture. The results are shown in FIG.
From this, the accumulation culture of the microorganism group used for the waste liquid treatment in the present invention is performed using the waste liquid to be treated (salt-containing waste liquid, for example, jellyfish waste liquid) as a culture medium, and assimilating the nutrient components in the decomposition liquid. It has been found that it is desirable not to change the nutritional components extremely even during habituation.

本実施例3〜5で使用した機器及び試薬を、以下の表12〜13に示す。   The apparatuses and reagents used in Examples 3 to 5 are shown in Tables 12 to 13 below.

本発明によると、クラゲ類の分解廃液等の塩分含有廃液を、低コストで効率的に、しかも特別な装置を要せず、環境汚染を生ずることなく分解廃棄可能であるため、臨海地域で陸揚げされたクラゲなどの生物体の処理に好適であり、特に、海域の汚染防止及び富栄養化の防止に有用な各種塩分含有廃液の処理に好適である。   According to the present invention, salt-containing waste liquids such as jellyfish decomposition waste liquids can be landed in coastal areas because they can be decomposed and disposed of at low cost, efficiently, without special equipment, and without causing environmental pollution. It is suitable for treatment of living organisms such as jellyfish, and is particularly suitable for treatment of various salt-containing waste liquids useful for preventing pollution and eutrophication of sea areas.

図1は、本発明に係る、バイオリアクターを用いた塩分を含む有機物廃液の処理装置の概略図の一例である。FIG. 1 is an example of a schematic diagram of an apparatus for treating organic waste liquid containing salt using a bioreactor according to the present invention. 図2は、実施例1の本発明の耐塩性有機物廃液利用微生物を用いた廃水処理系におけるCOD濃度の経日変化を示すグラフ図である。FIG. 2 is a graph showing the daily change in COD concentration in a wastewater treatment system using the salt-resistant organic waste liquid-use microorganism of the present invention of Example 1. 図3は、実施例1の本発明の耐塩性有機物廃液利用微生物を用いた廃水処理系における電気分解槽での殺菌効果を示すグラフ図である。FIG. 3 is a graph showing the sterilization effect in the electrolysis tank in the wastewater treatment system using the salt-resistant organic waste liquid-use microorganism of the present invention of Example 1. 図4は、湿式処理装置の一態様であるクラゲ分解装置の一例を表す概略説明図である。FIG. 4 is a schematic explanatory diagram illustrating an example of a jellyfish decomposing apparatus that is an aspect of the wet processing apparatus. 図5は、各深さから採取した海底汚泥中のクラゲ廃液利用微生物群によるCOD減少率(培養7日間)を示すグラフ図である。FIG. 5 is a graph showing the COD reduction rate (7 days of culture) by the jellyfish waste liquid utilizing microorganism group in the seabed sludge collected from each depth. 図6は、実施例3でクラゲ廃液利用微生物群から分離された酵母、Rhodotorula mucilaginosaの位相差顕微鏡写真像である。FIG. 6 is a phase-contrast micrograph image of yeast, Rhodotorula mucilaginosa, isolated from the jellyfish waste liquid-use microorganism group in Example 3. 図7は、実施例3でクラゲ廃液利用微生物群から分離された酵母、Rhodotorula mucilaginosaの画線培養写真像である。FIG. 7 is a streak culture photographic image of the yeast Rhodotorula mucilaginosa isolated from the jellyfish waste liquid-use microorganism group in Example 3. 図8は、実施例3でクラゲ廃液利用微生物群から分離された酵母、Rhodotorula mucilaginosaの単コロニー写真像である。FIG. 8 is a single colony photographic image of yeast, Rhodotorula mucilaginosa, isolated from the jellyfish waste liquid-using microorganism group in Example 3. 図9は、実施例3でクラゲ廃液利用微生物群から分離された酵母、Rhodotorula mucilaginosaの培養前及び培養後の液体培養写真像である。FIG. 9 is a liquid culture photographic image of yeast and Rhodotorula mucilaginosa isolated from the jellyfish waste liquid-use microorganism group in Example 3 before and after the culture. 図10は、実施例3でクラゲ廃液利用微生物群から分離された酵母、Rhodotorula mucilaginosa 126−Aege株の帰属を示す分子系統樹である。FIG. 10 is a molecular phylogenetic tree showing the attribution of the yeast, Rhodotorula mucilaginosa 126-Age strain, isolated from the jellyfish waste liquid-using microorganism group in Example 3. 図11は、実施例3でクラゲ廃液利用微生物群中の細菌群を検出したDGGE電気泳動像である。FIG. 11 is a DGGE electrophoresis image in which a bacterial group in the jellyfish waste liquid-using microorganism group was detected in Example 3. 図12は、実施例3のDGGE解析で検出されたバンドa、b、d、eの帰属を示す分子系統樹である。FIG. 12 is a molecular phylogenetic tree showing the attribution of bands a, b, d, and e detected by DGGE analysis of Example 3. 図13は、実施例3のDGGE解析で検出されたバンドcの帰属を示す分子系統樹である。FIG. 13 is a molecular phylogenetic tree showing the attribution of band c detected by DGGE analysis of Example 3. 図14は、実施例3のDGGE解析で検出されたバンドfの帰属を示す分子系統樹である。FIG. 14 is a molecular phylogenetic tree showing the attribution of the band f detected by the DGGE analysis of Example 3. 図15は、実施例4の基礎検討I群のCOD減少率を示すグラフ図である。FIG. 15 is a graph showing the COD reduction rate of the basic study group I of Example 4. 図16は、実施例4の基礎検討I群の全窒素(T−N)減少率を示すグラフ図である。FIG. 16 is a graph showing the total nitrogen (TN) reduction rate of the basic study group I of Example 4. 図17は、実施例4の基礎検討I群の全リン(T−P)減少率を示すグラフ図である。FIG. 17 is a graph showing the total phosphorus (TP) reduction rate of the basic study group I of Example 4. 図18は、実施例4の基礎検討I群の残留塩素(Cl)減少率を示すグラフ図である。FIG. 18 is a graph showing the residual chlorine (Cl) reduction rate of the basic study group I of Example 4. 図19は、実施例4の基礎検討I群のpH測定結果を示すグラフ図である。FIG. 19 is a graph showing the pH measurement results of the basic study group I of Example 4. 図20は、実施例4の基礎検討II群のCOD減少率を示すグラフ図である。FIG. 20 is a graph showing the COD reduction rate of the basic study group II of Example 4. 図21は、実施例4の基礎検討II群の全窒素(T−N)減少率を示すグラフ図である。FIG. 21 is a graph showing the total nitrogen (TN) reduction rate of the basic study group II of Example 4. 図22は、実施例4の基礎検討II群の全リン(T−P)減少率を示すグラフ図である。22 is a graph showing the total phosphorus (TP) reduction rate of the basic study group II of Example 4. FIG. 図23は、実施例4の基礎検討II群の残留塩素(Cl)減少率を示すグラフ図である。FIG. 23 is a graph showing the residual chlorine (Cl) reduction rate of the basic study group II of Example 4. 図24は、実施例4の基礎検討II群のpH測定結果を示すグラフ図である。FIG. 24 is a graph showing the pH measurement results of the basic study group II of Example 4. 図25は、実施例4の基礎検討III群のCOD減少率を示すグラフ図である。FIG. 25 is a graph showing the COD reduction rate of the basic study group III of Example 4. 図26は、実施例4の基礎検討III群の全窒素(T−N)減少率を示すグラフ図である。FIG. 26 is a graph showing the total nitrogen (TN) reduction rate of the basic study group III of Example 4. 図27は、実施例4の基礎検討III群の全リン(T−P)減少率を示すグラフ図である。FIG. 27 is a graph showing the total phosphorus (TP) reduction rate of the basic study group III of Example 4. 図28は、実施例4の基礎検討III群の残留塩素(Cl)減少率を示すグラフ図である。FIG. 28 is a graph showing the residual chlorine (Cl) reduction rate of the basic study group III of Example 4. 図29は、実施例4の基礎検討III群のpH測定結果を示すグラフ図である。FIG. 29 is a graph showing the pH measurement results of the basic study group III of Example 4. 図30は、実施例4の基礎検討IV群のCOD減少率を示すグラフ図である。FIG. 30 is a graph showing the COD reduction rate of the basic study group IV of Example 4. 図31は、実施例4の基礎検討IV群の全窒素(T−N)減少率を示すグラフ図である。FIG. 31 is a graph showing the total nitrogen (TN) reduction rate of the basic study group IV of Example 4. 図32は、実施例4の基礎検討IV群の全リン(T−P)減少率を示すグラフ図である。32 is a graph showing the total phosphorus (TP) reduction rate of the basic study group IV of Example 4. FIG. 図33は、実施例4の基礎検討IV群の残留塩素(Cl)減少率を示すグラフ図である。FIG. 33 is a graph showing the residual chlorine (Cl) reduction rate of the basic study group IV of Example 4. 図34は、実施例4の基礎検討IV群のpH測定結果を示すグラフ図である。FIG. 34 is a graph showing the pH measurement results of the basic study group IV of Example 4. 図35は、実施例5でのバイオリアクターを用いた処理によるCOD減少率を示すグラフ図である。FIG. 35 is a graph showing the COD reduction rate due to the treatment using the bioreactor in Example 5. 図36は、実施例5においてバイオリアクターの運転期間を3週間とした場合の各週ごとのCOD減少率を示すグラフ図である。FIG. 36 is a graph showing the COD reduction rate for each week when the operation period of the bioreactor is 3 weeks in Example 5. 図37は、実施例5でのバイオリアクターを用いた処理による全窒素(T−N)減少率を示すグラフ図である。FIG. 37 is a graph showing the total nitrogen (TN) reduction rate by the treatment using the bioreactor in Example 5. 図38は、実施例5でのバイオリアクターを用いた処理による全リン(T−P)減少率を示すグラフ図である。38 is a graph showing the total phosphorus (TP) reduction rate due to the treatment using the bioreactor in Example 5. FIG. 図39は、実施例5でのバイオリアクターを用いた処理による残留塩素(Cl)減少率を示すグラフ図である。FIG. 39 is a graph showing the residual chlorine (Cl) reduction rate by the treatment using the bioreactor in Example 5. 図40は、実施例5でのバイオリアクターを用いた処理による懸濁物質(SS)減少率を示すグラフ図である。40 is a graph showing the suspended matter (SS) reduction rate by the treatment using the bioreactor in Example 5. FIG. 図41は、実施例5でのバイオリアクターを用いた処理によるpH測定結果を示すグラフ図である。FIG. 41 is a graph showing the results of pH measurement by the treatment using the bioreactor in Example 5. 図42は、バイオリアクター運転前と運転後のペレットの色調変化を示す写真像である。FIG. 42 is a photographic image showing the change in color tone of the pellets before and after the bioreactor operation. 図43は、バイオリアクター運転後のペレット中の微生物の多様性を示す写真像である。FIG. 43 is a photographic image showing the diversity of microorganisms in the pellets after operation of the bioreactor. 図44は、各処理工程後の廃液の外見写真像である。FIG. 44 is an appearance photographic image of the waste liquid after each processing step. 図45は、バイオリアクター処理後廃液に対する、各試薬の凝集沈殿効果の違いを調べた結果を示す写真像である。FIG. 45 is a photographic image showing the results of examining the difference in the aggregation and precipitation effect of each reagent with respect to the waste liquid after bioreactor treatment. 図46は、バイオリアクター処理後廃液に対する、各試薬の凝集沈殿効果の違いを調べた結果を示す写真像である。FIG. 46 is a photographic image showing the results of examining the difference in the aggregation and precipitation effect of each reagent with respect to the waste liquid after bioreactor treatment. 図47は、Rhodotorula mucilaginosaをS培地で培養した際のCOD減少率を示すグラフ図である。FIG. 47 is a graph showing the COD reduction rate when Rhodotorula mucilaginosa is cultured in S medium.

符号の説明Explanation of symbols

1 廃水槽
2 移送ポンプ
3 三方コック
4 通気装置(溶存酸素濃度調整手段)
5 バイオリアクター(容器)
6 電気分解槽(殺菌手段)
7 仕切弁
10 分解槽
20 仕切槽
30 サイフォン管
40 送液ポンプ
50 循環・加温槽
60 仕切弁
70 仕切弁
80 加温管
90 ヒーター
100 オゾン発生装置
110 仕切弁
120 逆止弁
130 仕切弁
140 仕切弁
150 活性炭処理筒
160 クラゲ分解処理水
170 サイフォン管通過処理液出口
180 活性炭処理筒通過清浄排水
1 Wastewater tank 2 Transfer pump 3 Three-way cock 4 Ventilator (dissolved oxygen concentration adjusting means)
5 Bioreactor (container)
6 Electrolysis tank (sterilization means)
7 Gate valve 10 Decomposition tank 20 Partition tank 30 Siphon tube 40 Liquid feed pump 50 Circulation / warming tank 60 Gate valve 70 Gate valve 80 Heating tube 90 Heater 100 Ozone generator 110 Gate valve 120 Check valve 130 Gate valve 140 Partition Valve 150 Activated carbon treatment tube 160 Jellyfish decomposition treatment water 170 Siphon tube passage treatment liquid outlet 180 Activated carbon treatment tube passage clean waste water

Claims (14)

酵母及び細菌群の少なくともいずれかの微生物を固定化した担体と、該担体にプリオナーゼ酵素で分解したクラゲ類の分解廃液を接触させる接触手段と、該接触手段で接触させられたクラゲ類の分解廃液の処理液を凝集させる凝集沈殿手段と、該凝集沈殿手段で形成された沈殿を除去するろ過手段と、を有し、
前記酵母が、ロドトルーラ ムシラギノーサ(Rhodotorula mucilaginosa)であり、
前記細菌群が、スフィンゴバクテリウム(Sphingobacterium)属に属する細菌、シュードモナス リゾスファエラエ(Pseudomonas rhizosphaerae)、シュードモナス フラベセンス(Pseudomonas flavescens)、シュードモナス グラミニス(Pseudomonas graminis)、フラボバクテリウム(Flavobacterium)属に属する細菌、及び、バチルス パミルス(Bacillus pumilus)からなる群より選択される少なくとも1種であることを特徴とするクラゲ類の分解廃液の処理装置。
A carrier and at least immobilize either microorganisms yeast and bacteria, and contact means for contacting the decomposition waste jellyfish decomposed by Purionaze enzyme to the carrier, decomposition waste jellyfish which is brought into contact with said contact means A coagulation-precipitation means for aggregating the treatment liquid, and a filtration means for removing the precipitate formed by the aggregation-precipitation means,
The yeast is Rhodotorula mucilaginosa,
The bacteria group belongs to the genus Sphingobacterium, Pseudomonas rhizosphaerae, Pseudomonas flavesens, Pseudomonas flavescens, Pseudomonas flavums, An apparatus for treating a jellyfish decomposition waste liquid , which is at least one selected from the group consisting of Bacillus pumilus .
生物を固定した担体が、多糖類、蛋白質、合成高分子、及び無機物のいずれかで形成された請求項1に記載のクラゲ類の分解廃液の処理装置。 Carrier fixing the microorganisms is, polysaccharides, proteins, synthetic polymer, and the processing unit of the decomposition waste jellyfish of claim 1 which is formed in one of an inorganic material. 生物を固定した担体が、多孔質構造を有する請求項1から2のいずれかに記載のクラゲ類の分解廃液の処理装置。 Carrier fixing the microorganisms is, processor degradation effluent jellyfish according to any one of claims 1 to 2 having a porous structure. 微生物が、付着法、架橋法及び包括法の少なくともいずれかにより、担体に固定された請求項1から3のいずれかに記載のクラゲ類の分解廃液の処理装置。The processing apparatus of the jellyfish decomposition | disassembly waste liquid in any one of Claim 1 to 3 with which the microorganisms were fixed to the support | carrier by at least any one of the adhesion method, the crosslinking method, and the inclusion method. 微生物を固定した担体が容器内に収容され、接触手段が、前記容器内にクラゲ類の分解廃液を送液する送液装置である請求項1から4のいずれかに記載のクラゲ類の分解廃液の処理装置。The jellyfish decomposition waste liquid according to any one of claims 1 to 4, wherein a carrier on which microorganisms are fixed is housed in a container, and the contact means is a liquid feeding device for feeding the jellyfish decomposition waste liquid into the container. Processing equipment. 送液装置が、クラゲ類の分解廃液を導送する管と、該クラゲ類の分解廃液を担体に向けて送液する送液ポンプとを有する請求項5に記載のクラゲ類の分解廃液の処理装置。The treatment of the jellyfish decomposition waste liquid according to claim 5, wherein the liquid supply device includes a pipe for introducing the jellyfish decomposition waste liquid and a liquid supply pump for supplying the jellyfish decomposition waste liquid toward the carrier. apparatus. 容器が、内部に収容されるクラゲ類の分解廃液中の溶存酸素濃度を調整する溶存酸素濃度調整手段を備えた請求項5から6のいずれかに記載のクラゲ類の分解廃液の処理装置。The processing apparatus of the jellyfish decomposition waste liquid in any one of Claim 5 to 6 with which the container was equipped with the dissolved oxygen concentration adjustment means which adjusts the dissolved oxygen concentration in the decomposition waste liquid of the jellyfish accommodated in an inside. 接触手段により担体に接触させられたクラゲ類の分解廃液に対して殺菌処理を行う殺菌手段を更に有する請求項1から7のいずれかに記載のクラゲ類の分解廃液の処理装置。The jellyfish decomposition waste liquid treatment apparatus according to any one of claims 1 to 7, further comprising a sterilization means for sterilizing the jellyfish decomposition waste liquid brought into contact with the carrier by the contact means. 接触手段により担体に接触させられたクラゲ類の分解廃液に対して脱塩処理を行う脱塩手段を更に有する請求項1から8のいずれかに記載のクラゲ類の分解廃液の処理装置。The apparatus for treating a jellyfish decomposition waste liquid according to any one of claims 1 to 8, further comprising a desalting means for performing a desalination treatment on the jellyfish decomposition waste liquid brought into contact with the carrier by the contact means. 殺菌手段及び脱塩手段の少なくともいずれかが、容器から排出されるクラゲ類の分解廃液に対し電圧を印加する電圧印加装置である請求項9に記載のクラゲ類の分解廃液の処理装置。The jellyfish decomposition waste liquid treatment apparatus according to claim 9, wherein at least one of the sterilization means and the desalting means is a voltage application device that applies a voltage to the jellyfish decomposition waste liquid discharged from the container. クラゲ類の分解廃液中の塩分濃度が1質量%以上である請求項1から10のいずれかに記載のクラゲ類の分解廃液の処理装置。The apparatus for treating a jellyfish decomposition waste liquid according to any one of claims 1 to 10, wherein the concentration of salt in the jellyfish decomposition waste liquid is 1% by mass or more. スフィンゴバクテリウム(Sphingobacterium)属に属する細菌が、スフィンゴバクテリウム マルチボーラム(Sphingobacterium multivorum)、及び、スフィンゴバクテリウム スピリチボーラム(Sphingobacterium spiritivorum)から選択される少なくともいずれかである請求項1から11のいずれかに記載のクラゲ類の分解廃液の処理装置。12. The bacterium belonging to the genus Sphingobacterium is at least one selected from Sphingobacterium multivorum and Sphingobacterium spiritiborum. The processing apparatus of the decomposition waste liquid of the jellyfish in any one. 酵母及び細菌群の少なくともいずれかの微生物を固定化した担体に、プリオナーゼ酵素で分解したクラゲ類の分解廃液を接触させ、該接触させられたクラゲ類の分解廃液の処理液を凝集沈殿させ、形成された凝集沈殿物を除去するクラゲ類の分解廃液の処理方法であって、
前記酵母が、ロドトルーラ ムシラギノーサ(Rhodotorula mucilaginosa)であり、
前記細菌群が、スフィンゴバクテリウム(Sphingobacterium)属に属する細菌、シュードモナス リゾスファエラエ(Pseudomonas rhizosphaerae)、シュードモナス フラベセンス(Pseudomonas flavescens)、シュードモナス グラミニス(Pseudomonas graminis)、フラボバクテリウム(Flavobacterium)属に属する細菌、及び、バチルス パミルス(Bacillus pumilus)からなる群より選択される少なくとも1種であることを特徴とするクラゲ類の分解廃液の処理方法。
Formed by bringing the jellyfish decomposition waste liquid decomposed with the prionase enzyme into contact with a carrier on which at least one of the microorganisms of the yeast and bacteria group is immobilized, and coagulating and precipitating the treatment liquid of the contacted jellyfish decomposition waste liquid A method for treating a jellyfish decomposition waste liquid that removes the aggregated precipitate,
The yeast is Rhodotorula mucilaginosa,
The bacteria group belongs to the genus Sphingobacterium, Pseudomonas rhizosphaerae, Pseudomonas flavesens, Pseudomonas flavescens, Pseudomonas flavums, A method for treating a jellyfish decomposition waste liquid , which is at least one selected from the group consisting of Bacillus pumilus .
ロドトルーラ ムシラギノーサ(Rhodotorula mucilaginosa)126−Aege株(受託番号FERM P−20896)であり、クラゲ類の分解廃液のCOD成分を除去することを特徴とする微生物。A microorganism characterized in that it is a Rhodotorula mucilaginosa 126-Aege strain (Accession No. FERM P-20896), which removes the COD component of the jellyfish decomposition waste liquid.
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