JP4838094B2 - 細胞分別処理機能を有するフローサイトメータ、および生細胞分別処理方法 - Google Patents
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-
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- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
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Description
11 生細胞群
12 分析サンプル
12a 幹細胞
12b 不要生細胞
13 死亡細胞
20 液流形成ユニット
22 液体供給装置
25 分析サンプル液タンク
27 シース液タンク
32 フローセル
34 外部管路
36 サンプル液流管
40 光学ユニット
42 測定レーザ光照射手段
44、46 受光部
48 フェムト秒レーザ光照射手段
50 分析ユニット
52 データ取得部
54 データ処理・判別部
62 測定レーザ光源部
64、69 レーザ光整形・調整部
66 フェムト秒レーザ光源部
68 レーザ変調部
70 制御装置
72 照射タイミング制御部
80 回収容器
100 セルソータ
102 細胞サンプル
103 ノズル
104 ジェット流
106 レーザ光
108、110 光電子増倍管
112 液滴
114、116 電場形成電極板
120 試験管
Claims (4)
- 細胞分別処理機能を有するフローサイトメータであって、
複数の不要生細胞と複数の目的生細胞とが混合してなる生細胞群を含むサンプル液の流れを形成するサンプル液流形成手段と、
前記サンプル液流に測定用レーザ光を照射するレーザ光照射手段と、
前記測定用レーザ光の照射を受けて、前記サンプル液流の各生細胞それぞれから発する、散乱光および蛍光の少なくともいずれか一方の光情報それぞれを取得する光情報取得手段と、
前記光情報取得手段によって取得された光情報に基づき、各光情報に対応する前記生細胞が、前記不要生細胞または前記目的生細胞のいずれであるか、をそれぞれ判別する生細胞判別手段と、
前記生細胞判別手段における判別結果に応じて、前記サンプル液中の前記生細胞群のうち前記不要生細胞と判別された生細胞に対してのみフェムト秒レーザ光を照射し、前記不要生細胞に損傷を与えて死細胞とするフェムト秒レーザ光照射手段と、を有し、
前記フェムト秒レーザ光の前記生細胞に対する照射スポットサイズは、前記生細胞のサイズに比べて小さく、前記フェムト秒レーザ光照射手段は、前記フェムト秒レーザ光が前記生細胞の内部の少なくとも複数個所の異なる位置を照射するように、前記フェムト秒レーザ光の照射を制御する、ことを特徴とする細胞分別処理機能を有するフローサイトメータ。 - 生細胞分別処理方法であって、
複数の不要生細胞と複数の目的生細胞とが混合してなる生細胞群を含むサンプル液の流れを形成するステップと、
前記サンプル液流に測定用レーザ光を照射するステップと、
前記測定用レーザ光の照射を受けて、前記サンプル液流の各生細胞それぞれから発する、散乱光および蛍光の少なくともいずれか一方の光情報それぞれを取得するステップと、
前記取得するステップによって取得された光情報に基づき、各光情報に対応する前記生細胞が、前記不要生細胞または前記目的生細胞のいずれであるかをそれぞれ判別するステップと、
前記判別するステップにおける判別結果に応じて、前記サンプル液中の前記生細胞群のうち前記不要生細胞と判別された生細胞に対してのみフェムト秒レーザ光を照射し、前記不要生細胞に損傷を与えて死細胞とするステップと、を有し、
前記フェムト秒レーザ光の前記生細胞に対する照射スポットサイズは、前記生細胞のサイズに比べて小さく、前記フェムト秒レーザ光を前記生細胞に照射するとき、前記フェムト秒レーザ光が前記生細胞の内部の少なくとも複数個所の異なる位置を照射するように、前記フェムト秒レーザ光の照射が制御される、ことを特徴とする生細胞分別処理方法。 - さらに、前記フェムト秒レーザ光の照射によって損傷を受けた前記死細胞と前記目的生細胞とが含まれる、前記フェムト秒レーザ光が照射された後の前記サンプル液を回収容器に回収するステップと、
前記サンプル液中、前記回収容器の内壁面に付着した細胞を、前記目的生細胞として回収するとともに、前記回収容器の内壁面に付着せず前記サンプル液に浮遊する細胞を、前記死細胞として分別して回収するステップと、を有することを特徴とする請求項2記載の生細胞分別処理方法。 - さらに、前記フェムト秒レーザ光の照射によって損傷を受けた前記死細胞と前記目的生細胞とが含まれる、前記フェムト秒レーザ光が照射された後の前記サンプル液を回収容器に回収するステップと、
前記回収容器中の前記サンプル液に対して生細胞を培養可能な培養処理を施し、前記サンプル液中の前記目的生細胞のみを分別して培養することで、前記サンプル液中の前記死細胞の割合を減少させるステップと、を有することを特徴とする請求項2記載の生細胞分別処理方法。
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