JP4780799B2 - 肝臓繊維化レベルの識別方法及びその糖質医学イメージ分子造影剤 - Google Patents
肝臓繊維化レベルの識別方法及びその糖質医学イメージ分子造影剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4780799B2 JP4780799B2 JP2007317959A JP2007317959A JP4780799B2 JP 4780799 B2 JP4780799 B2 JP 4780799B2 JP 2007317959 A JP2007317959 A JP 2007317959A JP 2007317959 A JP2007317959 A JP 2007317959A JP 4780799 B2 JP4780799 B2 JP 4780799B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- liver
- medical imaging
- contrast agent
- liver fibrosis
- socta
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Magnetic Resonance Imaging Apparatus (AREA)
- Nuclear Medicine (AREA)
Description
本発明は、肝臓標的糖質医学イメージ分子造影方法及びその糖質造影剤に関し、特に、肝臓繊維化の程度を定量的且つ客観的に識別してクラス分けすることに適用する方法及びその糖質の医学イメージ分子造影剤に関する。
現在の臨床肝臓繊維化の検査は、肝生検により肝臓組織切片を採取した後、病理専門家により肉眼で識別する（図９参照）。この種の侵略的な方法は、潜在する危険性があり、患者の多くに望まれない。また、診断は主観的判断に頼ることになり、また肝生検サンプリングは誤差が大きいので、これは現在唯一の方法であるが、正確性は決して高くない。
Ｌｅｅは、１９８３年に三鎖構造のガラクトースペプチドと肝臓細胞受容体の結合力は、単鎖のガラクトースペプチドの１０6倍であることを報告している。ガラクトースペプチドは受容体と結合後、飲み込まれて肝臓細胞に進入する。Ｋｗｏｎは、２００４年局所貧血肝臓細胞膜上のガラクトースペプチド受容体と内部に飲み込まれるガラクトースペプチド量はいずれも減少し、且つ減少する量と局所貧血程度は正比例関係を有することを報告している。
本発明は、肝臓繊維化検査方法のボトルネックを突破し、肝臓繊維化レベルを正確に識別する非侵略的検査方法及び糖質造影剤を提供し、該造影剤は肝臓標的糖質医学イメージ分子造影方法に合わせて、定量的且つ客観的に肝臓繊維化の程度を識別でき、肝臓繊維化のクラス分けを行う根拠とし、特に、治療後の効果追跡及び疾病をクラス分けする精密な診断に適用する。
特表２００７−５２６３００号公報
本発明の目的は、肝臓繊維化レベルを臨床上正確に識別する方法を提供し、肝臓標的糖質医学イメージ分子造影方法を完成し、検査時、肝生検等の組織または体液のサンプリングを行う必要がないようにすることにある。
一実施例中、本発明は、肝臓繊維化レベルを臨床上正確に識別することができる方法を提供し、肝臓標的糖質医学イメージ分子造影技術の完成によって、検査時、肝生検で組織または体液のサンプリングを行う必要がなく、以下のステップ：（ａ）ガラクトースペプチドを含む医学イメージイメージング剤を静脈注射し、（ｂ）特定時間内に医学イメージ器具で単位肝臓体積が発生する医学イメージ信号を測定する。
他の実施例中、本発明は、更に肝臓繊維化レベルの評価に適用する肝臓標的糖質医学イメージ分子造影剤を提供し、それは、双官能基結合剤によってガラクトースペプチドを結合した後、医学イメージ用金属と結合させて造影剤とし、その特徴は、該造影剤が必要な双官能基結合剤が室温保存で潮解し難く、保存期間が1年以上に達することである。
本発明は、肝臓繊維化レベルを臨床上精確に識別する方法を提供し、肝臓標的糖質医学イメージ分子造影方法を完成し、検査時、肝生検等の組織または体液のサンプリングを行う必要がない。
図１は、本発明の肝臓繊維化レベルを臨床上精確に識別することが可能な方法のフロー説明図である。図２は、本発明の肝臓標的糖質医学イメージ分子造影法の概念説明図である。本実施例中、該方法１は、肝臓標的糖質医学イメージ分子造影技術によって完成され、検査時、肝生検で組織または体液のサンプリングを行う必要がなく、それは、以下のステップからなる：先ず、ステップ１０を行い、１つの生物体上でガラクトースペプチドを含む医学イメージ造影剤(Galactopeptide imaging agent for liver targeting)を静脈注射する。続いて、ステップ１１を行い、特定時間内に医学イメージ機器で単位肝臓体積が発生する医学イメージ信号を測定する。そのうち、該医学イメージ造影剤は、放射性薬剤または磁性造影剤等の試剤を選択できる。１つの実施例中、該医学イメージ造影剤がTc-99m-SOCTA-galactopeptideまたはTc-99m-DTPA-galactopeptideである時、該医学イメージ機器は単光子放射コンピュータ断層測定機器で肝臓組織のγ放射量を収集し、その単位肝臓体積が放出するγ放射量を測定する。もう１つの実施例中、該医学イメージ造影剤が磁性造影剤である時、核磁気共振器で単位肝臓体積が発生する電磁信号を測定する。また、本実施例のステップ１１中、該特定時間の長さは、6時間以内である。
本発明が提示するTc-99m-SOCTA-galactopeptideは、肝臓繊維化レベルを識別するために用いられ、その基礎は、肝臓繊維化した肝臓が貧血状況にあり、局所貧血肝臓細胞が飲み込む医学イメージ造影剤剤量が貧血の程度に従い減少するので、図３のようなTc-99m-SOCTA-galactopeptide造影剤は図２の肝臓標的糖質の医学イメージ分子造影の概念に適合し、肝臓繊維化レベルの識別に用いることができる。医学イメージ分子造影の検査技術は従来技術に属するので、ここに記載しない。
図３の実施例中、SOCTAは、succinimidyl-3,6-diaza-5-oxo-3- [2-((triphenylmethyl)thio)ethyl]-8-[(triphenylmethyl)-thio]octanoateの略記であり、その構造は、図４に示すとおりである。
図２において、検査時、肝生検等で組織または体液のサンプリングを行う必要が無く、放射性薬剤Tc-99m-SOCTA-galactopeptideまたはTc-99m-DTPA-galactopeptideを人体に静脈注射し、Tc-99m-SOCTA-galactopeptideまたはTc-99m-DTPA-galactopeptideが標的として肝臓細胞受容体(Hepatic lectinまたはhepatic GalNAc receptorと証する)と結合し、中性子医学単光子放射コンピュータ断層測定機器で、肝臓細胞中Tc-99mが放射するγ射線と肝臓体積を測定し、単位肝臓体積が放出するγ射線量を算出し、この単位体積の医学イメージ数値が肝臓繊維化の程度を識別することに用い、肝臓繊維化程度のクラス分けの根拠することができる。磁性造影剤、例えば、Mn-DTPA-galactopeptideまたはGd-DTPA-galactopeptideを人体に静脈注射する場合、核磁気共鳴機器で単位肝臓体積が発生する電磁信号を測定することができる。同様に、この数値を肝臓繊維化の程度を識別することに用い、肝臓繊維化のクラス分けの根拠とすることができる。
図３は、Tc-99m-SOCTA-galactopeptideの調合フローを説明し、第１ステップは、ガラクトースペプチドを凍晶SOCTA中に加え、SOCTAはimidazole ester bondでガラクトースペプチドとアミノ結合し、第２ステップは、SOCTAがN2S2構造を有するので直接Tc-99mを結合でき、従って、Tc-99m-SOCTA-galactopeptideの調合を完成することができる。該凍晶SOCTAは潮解し難く、室温保存が1年以上に達することができる。
医学的な検討によると、肝臓繊維化は、コラーゲンが異常に増加し、コラーゲンが肝臓門脈から中央の静脈に向かって徐々に増加することによって、肝臓細胞に進入し血流量が減少し、肝臓細胞がこの箇所で貧血状態になる。予期できるのはコラーゲンの増加が酷くなると、貧血程度も酷くなることである。肝臓繊維化時、肝臓は局所貧血状況であり、従来技術「局所貧血肝臓細胞上のガラクトースペプチド受容体とその内に飲み込まれたガラクトースペプチド量はいずれも減少し、且つ減少する量と貧血程度は正比例関係を有する」に基づき、その肝臓繊維化時に細胞膜上のガラクトースペプチド受容体が減少することを推測できると同時に、飲み込む肝臓細胞のTc-99m-SOCTA-galactopeptideも少なく、図３のようなTc-99m-SOCTA-galactopeptideは図２の肝臓標的糖質の医学イメージ分子造影の概念と技術に適合しているので、肝臓繊維化の程度を識別することに用いることができる。
実験結果について分析すると、貧血時、ヘモグロビンαchain（分子量15.1kD）とヘモグロビンβchain（分子量15.9kD）はいずれも減少する。15.1kD（ヘモグロビンαchain）と15.9kD（ヘモグロビンβchain）の２つの蛋白のピークを固定観察し、SELDI-TOF（質量分析表面によって高められるレーザーの脱着またはイオン化経過時間を用いて）技術によって正常人と、肝臓繊維化患者の血清蛋白質図の変化を分析し、結果として肝臓繊維化患者の15.1kDと15.9kDこの２つの蛋白ピークが確実に減少または消失することが実証される、図５、図６参照。
図５からF0級の肝臓繊維化患者がその他のレベルの肝臓繊維化患者と15.1kDと15.9kDの２つの蛋白ピークが明らかに異なることが分かる。
図６は、40人の肝臓繊維化患者の15.1kDと15.9kDの２つの蛋白ピークの数値の統計分析であり、F0級の肝臓繊維化患者とその他のレベルの肝臓繊維化患者が15.1kDと15.9kDの２つの蛋白ピークが明らかに異なることが分かる。
正常人と肝臓繊維化患者の血清蛋白図の分析以外に、本発明は正常なマウスの肝臓と肝臓繊維化マウスの肝臓の組織蛋白図を分析した。マウスの肝臓は、冷凍した切片をガラス片に固定し、質量分析用のエネルギー量吸収物質を噴射し、同時に組織原位に組織蛋白を抽出し、エネルギー量吸収物質と混合させ、MALDI-TOF分析を行い、同様に15.1kD（ヘモグロビンαchain）と15.9kD（ヘモグロビンβchain）の変化を固定観察する。その結果、同様に繊維化マウスの肝臓の15.1kDと15.9kDの２つの蛋白ピークが大幅に減少することが実証される、図７、図８参照。
図７から、正常なマウスの肝臓と繊維化マウスの肝臓の分子量15197.2蛋白の発現が明らかに異なり、繊維化マウス肝臓が明らかに減少していることが分かる。
図８から、正常なマウスの肝臓と繊維化マウスの肝臓の分子量15858.3蛋白の発現が明らかに異なり、繊維化マウス肝臓の方が、明らかに減少が大きいことが分かる。
ヘモグロビンの減少は、肝臓繊維化が、確かに貧血現象が存在していることを説明している。肝臓標的糖質分子イメージ技術はイメージ空間分布および量化データを提供し、ガラクトースペプチドをイメージ医学用の金属に接触させ、静脈注射すれば、肝臓繊維化の程度を精確に識別でき、肝臓繊維化クラス分け診断と治療後の効果追跡の検査方法とすることができる。
肝臓繊維化を早期発見し、適切に投薬し、肝臓繊維化が完全に復原するまで好転させることができ、肝臓標的糖質医学イメージ分子造影は、イメージ空間分布と定量データを提供でき、肝臓繊維化レベルの精確な識別のための検査方法を提供できる。
造影剤方面において、本発明の実施例は、Tc-99m-SOCTA-galactopeptideを定量且つ肝臓繊維化の程度を識別する肝臓標的糖質イメージ分子造影剤として採用する。Galactopeptideと肝臓細胞は強力な結合力を備え、SOCTAの保存安定性は明らかにDTPAより優れている。従来使用する双官能基結合剤の多くは、DTPA anhydride (DTPA:diethylene-triamine-penta-acetic acid)を用い、この双官能基結合剤は弱アルカリ水溶液中でアミノ基と反応が速く、2時間内に反応が完成するが、空気に触れると不安定になり、潮解しやすく、保存が困難である。それに対してSOCTAの安定性は好ましく、凍晶のSOCTAは室温に1年放置しても依然としてアミノ基との結合に用いることができ、それとアミノ基の結合反応が比較的時間がかかるが、通常16時間であり、潮解し難く、空気に触れても安定であり、１つの薬場の原料の1つとし、長期保存でき、有利である。
図４は、SOCTAの化学構造であり、SOCTAは末端のimidazole ester bondでガラクトースペプチドとアミノ結合し、SOCTAがN2S2構造を有するのでTc-99mを結合し、肝臓標的糖質医学イメージ分子造影剤となることができる。
なお、本発明では好ましい実施例を前述の通り開示したが、これらは決して本発明を限定するものではなく、当該技術を熟知する者なら誰でも、本発明の精神と領域を脱しない均等の範囲内で各種の変動や潤色を加えることができることは勿論である。前記の実施例の説明中、Tc-99m-SOCTA-galactopeptideにより説明しているが、本発明はこれに制限するものではなく、潮解し難く、N2S2構造を有し、末端がester bondであれば、いずれもガラクトースペプチドとアミノ基結合でき、Tc-99mを結合し、肝臓標的糖質医学イメージ分子造影剤となることができる。DTPA anhydrideは、潮解し易いが、Mn-DTPA-galactopeptideとTc-99m-DTPA-galactopeptideの調合が可能であるため、本発明を実施でき、肝臓繊維化クラス分けの肝臓標的糖質医学イメージ分子造影剤とすることができる。
１ 肝臓繊維化レベルの識別方法
１０〜１１ ステップ
１０〜１１ ステップ
Claims (5)
- （ａ）静脈経由で投与されたガラクトースペプチドを含む医学イメージング造影剤に対して、
（ｂ）特定時間内に医学イメージ器具で肝臓細胞と結合した前記医学イメージング造影剤が放出する医学イメージング信号を測定することからなる、
肝臓繊維化レベルを臨床的に識別するための肝臓標的糖質医学イメージ分子造影法。 - 前記医学イメージング造影剤がTc-99m-SOCTA-galactopeptideまたはTc-99m-DTPA-galactopeptideであり、単光子放射コンピュータ断層測定機器で
肝臓細胞と結合した前記医学イメージング造影剤が放出するγ放射量を測定することを特徴とする請求項１記載の肝臓繊維化レベルを臨床的に識別するための肝臓標的糖質医学イメージ分子造影法。 - 前記医学イメージング造影剤が磁性造影剤であり、核磁気共鳴機器で
前記肝臓細胞と結合した前記医学イメージング造影剤が発生する電磁信号を測定することを特徴とする請求項１記載の肝臓繊維化レベルを臨床的に識別するための肝臓標的糖質医学イメージ分子造影法。 - 前記特定時間の長さが、6時間以内であることを特徴とする請求項１記載の肝臓繊維化レベルを臨床的に識別するための肝臓標的糖質医学イメージ分子造影法。
- 双官能基結合剤によってガラクトースペプチドを結合した後、医学イメージング用金属と結合させることにより該造影剤の双官能基結合剤の室温保存における潮解性を抑制した医学イメージング造影剤であって、
前記医学イメージング造影剤がTc-99m-SOCTA-galactopeptideであり、SOCTAが（succinimidyl-3,6-diaza-5-oxo-3-
[2-((triphenylmethyl)thio)ethyl]
-8-[(triphenylmethyl)-thio]octanoate）である、
肝臓繊維化レベルの評価用肝臓標的糖質医学イメージ分子造影剤。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TW096145532A TWI417110B (zh) | 2007-11-30 | 2007-11-30 | 檢測肝殘餘功能之醣質醫學影像分子造影劑 |
| TW096145532 | 2007-11-30 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2009133803A JP2009133803A (ja) | 2009-06-18 |
| JP4780799B2 true JP4780799B2 (ja) | 2011-09-28 |
Family
ID=40865805
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2007317959A Active JP4780799B2 (ja) | 2007-11-30 | 2007-12-10 | 肝臓繊維化レベルの識別方法及びその糖質医学イメージ分子造影剤 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4780799B2 (ja) |
| TW (1) | TWI417110B (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW201348244A (zh) * | 2012-05-23 | 2013-12-01 | Iner Aec Executive Yuan | 醣質藥物造影劑前驅物之合成方法 |
| CN110866923B (zh) * | 2018-08-27 | 2022-11-01 | 詹宝珠 | 纤维化的计算机辅助分析方法、电子装置 |
| TWI714200B (zh) * | 2018-08-27 | 2020-12-21 | 國立成功大學 | 纖維化的電腦輔助分析方法、電子裝置、電腦程式產品 |
| US12357250B2 (en) | 2019-04-02 | 2025-07-15 | Lucerno Dynamics, Llc | System and method of using temporal measurements of localized radiation to estimate the magnitude, location, and volume of radioactive material in the body |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4401647A (en) * | 1980-03-03 | 1983-08-30 | The Regents Of The University Of Ca | Radiolabeled neoglycopeptides |
| US5679323A (en) * | 1986-07-03 | 1997-10-21 | Advanced Magnetics, Inc. | Hepatocyte-specific receptor-mediated endocytosis-type compositions |
| DE3789432T2 (de) * | 1986-12-30 | 1994-10-06 | Nihon Mediphysics Co Ltd | Hochmolekulare Verbindung, bestehend aus einer Einheit einer zum Asialoglykoproteinakzeptor leitenden Verbindung und aus einer Einheit einer chelatformenden, an dieser chemisch gebundenen, Verbindung, und ihre Verwendung. |
| US9820986B2 (en) * | 2005-03-04 | 2017-11-21 | Taiwan Hopaz Chems, Mfg. Co., Ltd. | Glycopeptide compositions |
| EP2067489B1 (en) * | 2007-12-04 | 2014-07-23 | Institute of Nuclear Energy Research Atomic Energy Council | Glyco-molecular imaging method for grade classification of liver fibrosis and its glyco-molecular imaging agent thereof |
-
2007
- 2007-11-30 TW TW096145532A patent/TWI417110B/zh active
- 2007-12-10 JP JP2007317959A patent/JP4780799B2/ja active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2009133803A (ja) | 2009-06-18 |
| TWI417110B (zh) | 2013-12-01 |
| TW200922627A (en) | 2009-06-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pandit-Taskar et al. | 89Zr-huJ591 immuno-PET imaging in patients with advanced metastatic prostate cancer | |
| Bajc et al. | EANM guidelines for ventilation/perfusion scintigraphy: Part 1. Pulmonary imaging with ventilation/perfusion single photon emission tomography | |
| Csonka et al. | Measurement of myocardial infarct size in preclinical studies | |
| Kurihara et al. | Molecular imaging using PET for breast cancer | |
| JP4780799B2 (ja) | 肝臓繊維化レベルの識別方法及びその糖質医学イメージ分子造影剤 | |
| US10264977B2 (en) | Transcutaneous organ function measurement | |
| Fu et al. | NIR‐II Photoacoustic Reporter for Biopsy‐Free and Real‐Time Assessment of Wilson's Disease | |
| US6884223B2 (en) | Method for detecting α-oxoaldehydes in the whole blood, blood plasma and/or serum of a patient | |
| US20190041407A1 (en) | Devices, systems and methods for quantifying hemoglobin s concentration | |
| WO2015106466A1 (zh) | 一种基于核苷等生物分子的原位快速合成金银荧光纳米材料及其制备方法和应用 | |
| Suh et al. | Phase I Clinical Trial of Prostate-Specific Membrane Antigen-Targeting 68Ga-NGUL PET/CT in Healthy Volunteers and Patients with Prostate Cancer | |
| US8142759B2 (en) | Glyco-molecular imaging method for grade classification of liver fibrosis and its glyco-molecular imaging agent thereof | |
| Yang et al. | A novel method for the diagnosis of atherosclerosis based on nanotechnology | |
| CN101419225B (zh) | 一种同时测定人尿液中霉酚酸酯、霉酚酸及其代谢物的方法 | |
| KR20170047151A (ko) | 타액 사용 치주질환 및 대사증후군 자가질병 검사기 | |
| Benisty et al. | Measures of GFR in health and disease | |
| Preisler et al. | Distribution of cell cycle times amongst the leukemia cells within individual patients with acute myelogenous leukemia | |
| RU2230326C2 (ru) | Способ диагностики тканевой инсулинорезистентности у различной категории кардиологических больных | |
| EP2067489B1 (en) | Glyco-molecular imaging method for grade classification of liver fibrosis and its glyco-molecular imaging agent thereof | |
| US7713516B2 (en) | Method for determining suitability of various contrast agents for the imaging examination of the patient and uses of the ligand contained in a selected contrast agent | |
| A Molitoris et al. | Quantifying glomerular filtration rates: kidney function analysis method and apparatus | |
| KR20190133603A (ko) | 신체 발톱의 케라틴 조직 중 비소 종 및 중금속 프로파일링을 활용한 암진단 및 예후 바이오마커 | |
| CN103344768A (zh) | 缺血性心脏病检测试剂盒及其应用 | |
| JP5071869B2 (ja) | 汗よりのグリコアルブミン判定方法、および測定方法およびキット | |
| CN108982877A (zh) | 一种sICAM-1荧光免疫层析检测试纸条、制备方法及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100812 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20101109 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20101202 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110302 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110324 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110610 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20110630 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20110704 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140715 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4780799 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |