JP4693745B2 - N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物の定量方法 - Google Patents
N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物の定量方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4693745B2 JP4693745B2 JP2006288000A JP2006288000A JP4693745B2 JP 4693745 B2 JP4693745 B2 JP 4693745B2 JP 2006288000 A JP2006288000 A JP 2006288000A JP 2006288000 A JP2006288000 A JP 2006288000A JP 4693745 B2 JP4693745 B2 JP 4693745B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide compound
- peptide
- terminus
- phenylalanine residue
- mmol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6818—Sequencing of polypeptides
- G01N33/6824—Sequencing of polypeptides involving N-terminal degradation, e.g. Edman degradation
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/815—Test for named compound or class of compounds
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analyzing Materials Using Thermal Means (AREA)
Description
Sures, I.; Crippa, M. Proc. Natl. Acad. Sci. 1984, 81, p380 Bevins, C.L.; Zasloff, M. Annu. Rev. Biochem. 1990, 59, p395 Carraway, R.E.; Mitra, S.P.; Muraki, K. Regul. Pept. 1990, 29, p229-239 Carraway, R.E.;Cochrane, D.E.; Mitra, S.P. Regul. Pept. 1988, 22, p303-314 Carraway, R.E.; Mitra, S.P. Peptides. 1990, 11, p747-752
1. N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物の定量方法であって、
1)N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物、
2)キューカービチュリル[7]、及び
3)金属イオン
を溶液中で混合することにより発生する熱量を測定する工程を含む、N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物の定量方法。
2. N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物以外のペプチド化合物を含むペプチド混合物中のN−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物を定量する上記項1に記載の定量方法。
3. N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物が、Phe−His−Pro−Lys−Arg−Pro−Trp−Ile−Leu−OHである上記項1又は2に記載の定量方法。
1)N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物、
2)キューカービチュリル[7]、及び
3)金属イオン
を溶液中で混合することにより発生する熱量を測定する工程を含む。
N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物(以下「ペプチド化合物A」ということがある)としては、N−末端にフェニルアラニン残基を有するオリゴペプチド、ポリペプチド等であればよく特に限定されない。ペプチド化合物Aとしては、例えばPhe−His−Pro−Lys−Arg−Pro−Trp−Ile−Leu−OH(XP−2)、インシュリン、人間のニューロメディンU−25、豚のニューロメディンU−25等が挙げられる。
キューカービチュリル[7](以下「CB[7]ということがある」)は、図1に示す樽状の分子である。
金属イオンを混合することにより、ペプチド混合物中のペプチド化合物AとCB[7]との反応(錯体の形成)を好適に促すことができる。より具体的には、金属イオンがCB[7]に結合することにより、ペプチド化合物A以外のペプチド化合物とCB[7]との反応(錯体の形成)を効果的に抑制しつつ、ペプチド化合物AとCB[7]との反応(錯体の形成)を促すことができる。
本発明の定量方法は、ペプチド化合物A、CB[7]及び金属イオンを溶液中で混合することにより発生する熱量を測定する工程を含む。
本発明の定量方法によれば、ペプチド化合物A以外のペプチド化合物を含むペプチド混合物中のペプチド化合物Aがキューカービチュリル[7]と反応する(錯体を形成する)ことにより発生する熱量を測定し、得られた熱量からペプチド混合物に含まれるペプチド化合物Aを定量することができる。
本発明の定量方法では、ペプチド混合物中、ペプチド化合物Aは1種又は2種以上で存在していてもよい。ペプチド化合物Aが2種以上で存在する場合、これらペプチド化合物Aの混合物として定量できる。
ペプチド混合物に含まれるペプチド化合物A以外のペプチド化合物としては、例えばPyr−Gly−Lys−Arg−Pro−Trp−Ile−Leu−OH(XP)、His−Pro−Lys−Arg−Pro−Trp−Ile−Leu−OH(XP−1)、ニューロテンシン等及びそれらの関連ペプチドが挙げられる。
本発明の定量方法において、溶液中のペプチド混合物の濃度は、特に限定されないが、0.01〜1mmol/lが好ましく、0.03〜0.5mmol/lがより好ましく、0.05〜0.1mmol/lが最も好ましい。
本発明の定量方法において、溶液中で溶解させるペプチド混合物中のペプチド化合物Aのモル百分率は特に限定されない。特に、本発明の定量方法によれば、ペプチド混合物中のペプチド化合物Aのモル百分率が1%程度であっても、精度よくペプチド化合物Aを定量することができる。
中性を呈する塩としては、例えば、Na2SO4、K2SO4、MgSO4、NaCl、KCl、MgCl2、NaNO3、KNO3、Mg(NO3)2、Ca(NO3)2、Na3PO4、K3PO4等が挙げられる。
弱酸性を呈する塩としては、例えば、NaH2PO4、KH2PO4等が挙げられる。
弱塩基性を呈する塩としては、例えば、Na2CO3、NaHCO3、K2CO3、KHCO3、Na2HPO4、K2HPO4、CH3COONa、CH3COOK等が挙げられる。
これらの塩は1種又は2種以上で用いることができる。
上記ペプチド混合物、CB[7]及び金属イオンを混合するための溶媒としては、特に限定されず、例えば水、エタノール、酢酸、アセトニトリル、アセトン等が挙げられる。これらは1種又は2種以上で用いることができる。本発明においては、溶媒として水を用いることが好ましい。
ペプチド混合物に含まれるペプチド化合物Aを定量するに先立って、予め、純粋なペプチド化合物Aを混合する場合に発生する熱量を測定する。
ペプチド混合物に含まれるペプチド化合物Aを定量する。具体的には、ペプチド化合物A含有溶液の代わりに、ペプチド混合物を上記溶媒に溶解させることにより調製したペプチド混合物含有溶液を用いる以外は、上記「検量線の作成」と同様の方法により行えばよい。
検量線の作成
0.1mgのXP−2を0.1mol/lのNaCl水溶液1.5mlに溶解させることにより0.056mmol/lのXP−2含有水溶液を調製した。
次に、XP−2のモル百分率が4%であるゼノプシン混合物(ペプチド混合物)を0.1mol/lのNaCl水溶液に溶解させることにより0.056mmol/lの混合溶液を調製した。調製した混合溶液を上記カロリメータの反応セルの中に入れた。また、上記CB[7]含有水溶液0.25mlを前記カロリメータのシリンジの中に入れた。
Claims (3)
- N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物の定量方法であって、
1)N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物、
2)キューカービチュリル[7]、及び
3)金属イオン
を溶液中で混合することにより発生する熱量を測定する工程を含む、N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物の定量方法。 - N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物以外のペプチド化合物を含むペプチド混合物中のN−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物を定量する請求項1に記載の定量方法。
- N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物が、Phe−His−Pro−Lys−Arg−Pro−Trp−Ile−Leu−OHである請求項1又は2に記載の定量方法。
Priority Applications (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006288000A JP4693745B2 (ja) | 2006-10-23 | 2006-10-23 | N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物の定量方法 |
PCT/JP2007/070656 WO2008050769A1 (fr) | 2006-10-23 | 2007-10-23 | Procédé de détermination de la quantité d'un composé peptidique ayant un résidu de phénylalanine à son extrémité n terminale |
US12/446,718 US8168436B2 (en) | 2006-10-23 | 2007-10-23 | Method for determining quantity of peptide compound having phenylalanine residue at N-terminus |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006288000A JP4693745B2 (ja) | 2006-10-23 | 2006-10-23 | N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物の定量方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008107114A JP2008107114A (ja) | 2008-05-08 |
JP4693745B2 true JP4693745B2 (ja) | 2011-06-01 |
Family
ID=39324566
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006288000A Expired - Fee Related JP4693745B2 (ja) | 2006-10-23 | 2006-10-23 | N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物の定量方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8168436B2 (ja) |
JP (1) | JP4693745B2 (ja) |
WO (1) | WO2008050769A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101846634B1 (ko) | 2015-12-29 | 2018-04-09 | 고려대학교 산학협력단 | 쿠커비투릴[7]을 이용한 펩타이드의 정성 및 정량 분석방법 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005503415A (ja) * | 2001-09-18 | 2005-02-03 | ポステック ファンデーション | ククルビチュリル誘導体をホスト分子として含む包接化合物およびこれを含む薬剤組成物 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7335768B2 (en) * | 2003-09-04 | 2008-02-26 | University Of Maryland | Cucurbit [n] uril compounds and analogs, and methods of making and using the same |
-
2006
- 2006-10-23 JP JP2006288000A patent/JP4693745B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2007
- 2007-10-23 US US12/446,718 patent/US8168436B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-10-23 WO PCT/JP2007/070656 patent/WO2008050769A1/ja active Application Filing
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005503415A (ja) * | 2001-09-18 | 2005-02-03 | ポステック ファンデーション | ククルビチュリル誘導体をホスト分子として含む包接化合物およびこれを含む薬剤組成物 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US8168436B2 (en) | 2012-05-01 |
US20100238969A1 (en) | 2010-09-23 |
JP2008107114A (ja) | 2008-05-08 |
WO2008050769A1 (fr) | 2008-05-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0873361B1 (en) | Crystals of the ligand-binding domain of the thyroid hormone receptor complexed to a ligand | |
Mu et al. | Stereoselective interactions of lactic acid enantiomers with HSA: Spectroscopy and docking application | |
Moreno et al. | Are the effects of T3 on resting metabolic rate in euthyroid rats entirely caused by T3 itself? | |
Ho et al. | Fluorescent sensors for activity and regulation of the nitrate transceptor CHL1/NRT1. 1 and oligopeptide transporters | |
Wintgens et al. | Plasma myostatin measured by a competitive ELISA using a highly specific antiserum | |
US20070027215A1 (en) | Nuclear receptor ligands and ligand binding domains | |
Mondal et al. | Structure elucidation and characterization of different thyroxine polymorphs | |
Kulprachakarn et al. | Copper (II) binding properties of hepcidin | |
JP2010536327A5 (ja) | ||
Pais et al. | Role of enteroendocrine L‐cells in arginine vasopressin‐mediated inhibition of colonic anion secretion | |
Weiss | The structure and function of insulin: decoding the TR transition | |
Di Bernardo et al. | Intracellular anion fluorescence assay for sodium/iodide symporter substrates | |
JP4693745B2 (ja) | N−末端にフェニルアラニン残基を有するペプチド化合物の定量方法 | |
Haugaard-Kedström et al. | Synthesis and pharmacological characterization of a europium-labelled single-chain antagonist for binding studies of the relaxin-3 receptor RXFP3 | |
JP2022105082A (ja) | 新規のアシル化インスリン類似体およびそれらの使用 | |
Ulmer et al. | High-resolution mass spectrometry for the measurement of PTH and PTH fragments: insights into PTH physiology and bioactivity | |
Peinado‐Izaguerri et al. | A novel dynamic proteomics approach for the measurement of broiler chicken protein fractional synthesis rate | |
Piszczek et al. | The molecular chaperone, ClpA, has a single high affinity peptide binding site per hexamer | |
Kertisová et al. | Insulin receptor Arg717 and IGF-1 receptor Arg704 play a key role in ligand binding and in receptor activation | |
Arsene et al. | Determination of HbA2 by quantitative bottom-up proteomics and isotope dilution mass spectrometry | |
Zhang et al. | Comparison and analysis on the serum‐binding characteristics of aspirin–zinc complex and aspirin | |
US7993929B2 (en) | Method for determination of presence or absence of peptide compound PYY3-36 | |
Meyer et al. | Pharmacological assessment of sepiapterin reductase inhibition on tactile response in the rat | |
JP4894445B2 (ja) | カルシウムの定量方法、およびカルシウム定量キット | |
WO2018210919A1 (en) | Glp-1 compositions and uses thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20080822 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20110201 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20110222 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140304 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |