JP4666766B2 - 塩化物を検知するための光学的−化学的センサー - Google Patents
塩化物を検知するための光学的−化学的センサー Download PDFInfo
- Publication number
- JP4666766B2 JP4666766B2 JP2000593959A JP2000593959A JP4666766B2 JP 4666766 B2 JP4666766 B2 JP 4666766B2 JP 2000593959 A JP2000593959 A JP 2000593959A JP 2000593959 A JP2000593959 A JP 2000593959A JP 4666766 B2 JP4666766 B2 JP 4666766B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polymer
- indicator
- film
- solution
- optical
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
- G01N21/643—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" non-biological material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/84—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving inorganic compounds or pH
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
- G01N2021/6432—Quenching
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/04—Endocrine or metabolic disorders
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/19—Halogen containing
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/19—Halogen containing
- Y10T436/193333—In aqueous solution
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Plasma & Fusion (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
発明は水性試料中の塩化物濃度のルミネッセンス光学素子による連続的及び不連続的決定に適し、ルミネッセンス指示薬及びルミネッセンス指示薬を担持するポリマーを含んでなる光学的−化学的センサー並びにこれら光学的−化学的センサーの製法に関する。
【0002】
塩化物は身体の細胞外液の主要なアニオン物質であり、水の分配平衡、浸透圧及びアニオン及びカチオン成分の平衡を維持するのに重要な役割を果す。ヒトの血清中の塩化物の正常値は約97〜108ミリモル/lであり、アニオン物質の総濃度は約154ミリモル/lである。不十分な水分補給を伴う浸透圧利尿の症例、のどの渇きの調節機構障害、腎性尿崩症の症例及び腸内重炭酸塩喪失の症例においては病理学的塩化物の値−170ミリモル/lまでも−が認められる。最低値−30ミリモル/lの少量まで−は胃腸の塩化物喪失の症例で認められ、慢性腎盂腎炎(アジソン氏病)及び腎不全と関連している。従って塩化物は臨床的診断において最も頻繁に決定しなければならないハロゲン化物である。
【0003】
非常に正確ではあるがまた甚大な作業を伴う滴定法及び光度定量法の他に、イオン選択性電極による電位差測定法が一般に実地に受け入れられるようになった。その欠点は塩化物−選択性電極の小さい特異性、蛋白質に対するそれらの感受性及び対照電極の必要性である。
【0004】
最近、部分的には異なる方法で作動する指示系を有する一連の光学的センサーが塩化物の決定のために提唱された。いわゆる同時抽出オプトード(cextraction optode)(欧州特許第0 358 991号明細書)は親油性対イオンを含む親油性のpH指示染料に基づき、試料の親油性のアニオン成分に非常に感受性であり、そしてpH値が非常に正確に知られる時にのみ有効な結果を与える。
【0005】
あるルミネッセンス指示薬のルミネッセンス強度及びルミネッセンス崩壊時間の両方がハロゲン化物イオンの動力学的ルミネッセンスの消光(quenching)により減少することが知られている。これはスターン−ボルマー等式(Stern-Vollmer equatin):
【0006】
【数1】
【0007】
により表される。
【0008】
この等式において、F0及びFは消光剤の不在及び存在下における相対的ルミネッセンスの強度を表し、[Q]は消光剤の濃度を表し、kqは消光に対して一定な2分子速度を表し、τ0は消光剤の不在下における励起状態の寿命を表し、KSVはスターン−ボルマー消光定数を表す。従って、試料の塩化物濃度を、ルミネッセンス指示薬の相対的ルミネッセンス強度及び/又はルミネッセンス崩壊時間から推定することができる。
【0009】
ガラス表面に共有結合しており、そのルミネッセンスがハロゲン化物濃度の関数として消光するキノリン又はアクリジン染料を基礎にした塩化物感受性のオプトードがオーストリア特許第384 891号明細書に提唱された。
【0010】
第四級化複素芳香族N原子を有する塩化物感受性のルミネッセンス指示薬は低いpH交差感受性及び混乱しているイオンの生理学的濃度に対する低い交差感受性を有する。しかし、非常に多数に関与する商業的適用物に到達すると、その欠点は紫外線スペクトル領域(適度な価格で市販される青色のLEDでは到達不可能)にある<450nmの吸収波長及び、特に多数を取り扱う時には煩わしい、適切な透明な担体材料の表面上への化学的固定化である。
【0011】
分離された膜の小胞、再構成されたリポソーム及び生存細胞及び組織中の塩化物の輸送及び調節機構のルミネッセンス測定による研究のための、一連のキノリン及びアクリジン誘導体及びルシゲニン(ビスアクリジンの1種)は市販されている(Richard P.Haughland、“Handbook of Flurescent Probes and Research Chemicals",6th edition,pp.577-579)。
【0012】
ポリアクリルアミド層中に存在し、30までのC原子をもつ親油性の脂肪族炭化水素鎖をもつ3,6−ビス(ジメチルアミノ)−アクリジンを基礎にした塩化物感受性の光学的−化学的センサーが米国特許第5 691 205号明細書に記載されている。この指示薬は488nmにおいて青光線源(LED)により励起することができる。
【0013】
この既知のセンサーの製造は、アクリルアミド−N,N’−メチレンビス(アクリルアミド)、リボフラビン及びペルオキソ二硫酸アンモニウムからなるモノマー溶液の光重合化によりポリアクリルアミドからなる薄い膜又は層の光伝導性繊維の末端における製造を含んでなる。続いて、膜又は層を指示薬溶液中に浸漬し、親油性指示薬が膜又は層中に拡散する。米国特許第5 691 205号明細書はそのセンサーの安定性、特に血液のような測定用液体との極めて長時間の接触の場合における指示薬の浸出性についての情報を与えていない。
【0014】
米国特許第5 691 205号明細書から知られるセンサーの場合には、その欠点は、特に一定の品質の多数の生産を考慮すると、モノマー溶液の光重合化による膜又は層の製造段階及び指示薬による膜又は層の被覆である。センサーの一定の品質を考慮するこの段階は非常に面倒である。
【0015】
本発明はその目的として、水性試料中の塩化物濃度のルミネッセンス光学素子による決定に適し、前記の欠点をもたない光学的−化学的センサーを提供することをもつ。なかでも市販のLED(励起波長>460nm)によりセンサーを励起し、適当な価格でそして再現可能な方法で非常に多数のものを製造し、そして好ましくは生理学的塩化物濃度の決定のためにそれを使用することができなければならない。
【0016】
水性試料中の塩化物濃度のルミネッセンス光学素子による連続的及び不連続的決定に適し、ルミネッセンス指示薬及び、ルミネッセンス指示薬を担持するポリマーを含んでなる光学的−化学的センサーにおいて、発明の目的はルミネッセンス指示薬が非親油性アクリジン又はビスアクリジン化合物であり、ポリマーが有機溶媒に可能性の直鎖の親水性ポリマーであることにおいて達成される。「直鎖」の用語はポリマーが架橋結合していないことを表す。
【0017】
ポリマーは試料、例えば血液、海水、塩含有水溶液に実質的に可溶性であってはならないことは明白である。
【0018】
塩化物測定のためのこれらのセンサーの利点は、
− 塩化物の広い動力学的測定範囲、なかでも生理学的に適切な濃度範囲、
− 高い感受性、
− 高い安定性及び再現性、
− 塩化物に対する高い選択性、及び
− 生理学的に適切なpH−値範囲における低いpH交差感受性、
である。
【0019】
好ましくはアクリジン又はビスアクリジン化合物はメト硫酸メチルアクリジニウム(MAC)、メト硫酸4−ニトロフェニルブチルアクリジニウム(NPBA)、N,N’−ジ−(3−スルホプロピル)−9,9−ビスアクリジニウム(SPBA)、N,N’−二酢酸エチルエステル−9,9−ビスアクリジニウム(AEBA)及びルシゲニンを含んでなる群から選択される。
【0020】
ポリマーとしては、酸アミド及びニトリル及び/又は酸イミド及び/又はカルボキシラート基を含むイオン−透過性の、多数のブロックのコポリマーが好ましい。例えば、これらの直鎖の親水性ポリマーは以下に、より詳細に述べる、HYMEDIX Int.Inc.,Dayton,N.J.から市販の多数のブロックコポリマーのHYPANである。このポリマーはDMSOのような有機溶媒に溶解させることができ、溶液を透明な担体材料に適用した後に、同様に溶媒を蒸発させることが容易であり、そのためセンサーの簡単で再現可能な製造を可能にすることは疑う余地がない。
【0021】
発明に従って使用することができる多数のブロックのコポリマーは、各ポリマー鎖が親水性をもつ幾つかの配列の単位からなる、例えば、相互に独立して、更に親水性の基で置換することができる酸アミド基、酸イミド基、カルボキシラート基及び高い凝集エネルギーの基、例えばニトリル基を含む幾つかの配列からなることを特徴とする。このようなポリマーの製造は例えば米国特許第4 331 783号及び同第4 379 874号明細書に記載されている。
【0022】
驚くべきことには、前記に挙げたアクリジン及びビスアクリジン化合物は直鎖の親水性ポリマーをこれらの化合物の溶液中に浸漬するとポリマー中に拡散し、その後に緩徐に浸出する可能性があるだけであることが発見された。すなわち、本発明は非常に安定なセンサーを提供する。
【0023】
前記のアクリジン及びビスアクリジン化合物の中では、以下の特性のお陰で血液、血清及び血漿中の生理学的塩化物濃度の決定に対してルシゲニンが特に適する、すなわち、
(a) 溶液中での高い消光定数KSV(KSV(Cl)>100M-1)、
(b) 450nmより高い励起最大域、従って光源として安価なLEDを使用することができる、
(c) 大きいストークのシフト、
(d) 高い光安定性、
(e) 0.5より高いルミネッセンス収量(quantum yeild)、及び
(f) 市場の入手性。
【0024】
発明に従うセンサーの好ましい態様に従うと、ルミネッセンス指示薬を担持するポリマーは透明な担体材料にフィルムの形態で適用される。ここではフィルムは好ましくは20μmまでの厚さをもつ。フィルムが水性の液体、すなわち試料又は検量用液体に可溶性でないことは必須である。
【0025】
もう1つの好ましい態様に従うと、ルミネッセンス指示薬を担持するポリマーは透明な担体材料に適用されたヒドロゲルのフィルム中に微細粒子の形態で埋封される。ここでは粉末度は20μmまで、好ましくは<1μmの可能性がある。この特に好都合な態様により、大量のルミネッセンス指示薬担持材料を適当な価格で1製造段階で製造することができる。もう1つの本質的な利点は、この材料を使用すると、特徴的曲線及びルミネッセンス指示薬負荷(load)のような特に均一な特性を有する大量のセンサーを製造することができる点である。
【0026】
発明に従って使用されるヒドロゲルは水又は塩の水溶液に不溶性のイオン−透過性の親水性ポリマーである。溶媒を層の適用後に蒸発させることができるために、それらは好ましくは、ルミネッセンス指示薬を担持するポリマーがそれに不溶性の有機溶媒又は溶媒混合物(例えばEtOH/H2O)に可溶性でなければならない。使用されるヒドロゲルは好ましくは例えばTyndale Plains-Hunterの直鎖の親水性ポリマー(以下を参照されたい)である。原則として、他のヒドロゲル、例えば架橋結合したポリマー、なかでもポリアクリルアミド使用することも可能で、そのモノマー溶液は適用後に重合化される。
【0027】
好ましくは、透明な担体材料上にあるフィルム又はヒドロゲルのフィルムに追加の層を適用することができ、その層は親水性のイオン−透過性のポリマーからなり、好ましくは色素顔料、なかでも黒顔料を含む。好都合にはこの追加層は測定用溶媒からのセンサーの光学的分離をもたらす。それはイオン透過性の光学的遮蔽層として働く。
【0028】
もう1つの態様に従うと、透明な担体材料は光伝導性繊維であり、フィルムは光伝導繊維に適用されているルミネッセンス指示薬を担持する。
【0029】
発明はまた水性試料中の塩化物濃度のルミネッセンス光学素子による連続的及び不連続的決定に適し、ルミネッセンス指示薬及び、ルミネッセンス指示薬を担体しているポリマーを含んでなり、
− アクリジン又はビスアクリジン化合物を基礎にした非親油性ルミネッセンス指示薬をルミネッセンス指示薬として使用すること、及び
− 有機溶媒中に可溶性の直鎖の親水性ポリマーをポリマーとして使用すること、そこで
− ルミネッセンス指示薬の溶液を生成し、そして
− その溶液を直鎖の親水性ポリマーと接触させ、ルミネッセンス指示薬が直鎖の親水性ポリマー中に拡散する、
ことを特徴とする光学的−化学的センサーの製造法に関する。
【0030】
好ましい態様に従うと、直鎖の親水性ポリマー中に拡散されるルミネッセンス指示薬は光線、好ましくは紫外線及び/又は青光線(320nm〜490nm)による照射により固定される。
【0031】
HYPAN型の多数のブロックのコポリマーを使用する時には、驚くべきことには、特に第四級化N原子上に少なくとも1個のメチル基をもつアクリジン及びビスアクリジン(例えばMAC、ルシゲニン)は青及び/又は紫外線光による照射後に、測定用液との極めて長い接触の場合ですら、浸出されないことが見いだされた。この浸出不能性は連続的方法で(「モニター」)そしてセンサーの複数の使用の場合に実施される測定において特に重要である。
【0032】
実験により、例えば青光線又は紫外線を照射しそしてMAC(図1)又はルシゲニンを担持しているHYPAN HN80において、ポリマーから放出された溶媒は透明であり、ポリマー画分は、ポリマーをDMSOに溶解し、溶液をMeOHの添加下で遠心分離した後にまだ、指示薬の典型的な黄色を有したことを確証した。青光線又は紫外線を照射されなかった指示薬担持ポリマーによる対応する対照実験により、ポリマーから放出された溶媒は指示薬の典型的な黄色を有し、ポリマー画分は無色であることを確証した。この実験は青光線又は紫外線による指示薬担持ポリマーの照射は指示薬のルミネッセンスの消光能に悪影響を与えずにポリマーに対する指示薬の共有結合をもたらすことを示唆している。
【0033】
酸アミド基を含む他のポリマー、例えばポリアクリルアミドを伴う実験により、前記指示薬もまた水性指示薬溶液と接触させることによりこれらのポリマー中に導入してそれらを緩徐に浸出させることができることを確証した。ポリマーを青光線又は紫外線で照射後、MAC及びルシゲニンはもはや浸出しない。
【0034】
発明に従う方法の好ましい態様は、
− 直鎖の親水性ポリマーの溶液を生成する、
− 溶液を透明な担体材料に適用し、溶媒を蒸発させ、直鎖の親水性ポリマーのフィルムを透明な担体材料上に形成し、
− フィルムをルミネッセンス指示薬の溶液と接触させ、ルミネッセンス指示薬がフィルム中に拡散し、場合によっては照射により固定化される、
ことを特徴としている。
【0035】
好ましくは、フィルムの厚さは20μmまでである。被覆された透明な担体材料から小さいディスクを打ち抜くことにより個々のセンサー素子を製造する。原則的にはこの処理の段階は文献から知られる(M.J.P.Leiner,Optical Sensors for in vitro Blood Gas Analysis,Sensors and Actuators B 29,(1995)169-173)。
【0036】
発明に従う方法のもう1つの好ましい態様は、
− ルミネッセンス指示薬の溶液を粉末状の直鎖の親水性ポリマーと接触させ、ルミネッセンス指示薬が直鎖の親水性ポリマー中に拡散し、場合によっては照射により固定化される、
− ルミネッセンス指示薬を担持する直鎖の親水性ポリマーをヒドロゲル溶液中に懸濁させ、懸濁液を生成し、
− 懸濁液を透明な担持材料に適用し、そして
− 溶媒をヒドロゲル溶液から蒸発させ、そこで、透明な担体材料上に、ルミネッセンス指示薬を担持する直鎖の親水性ポリマーが埋封されているヒドロゲルのフィルムが形成される、
ことを特徴とする。
【0037】
ここで、直鎖の親水性ポリマーは好ましくは1μm未満の粉末度で使用される。しかし粉末度はまた20μmまでにすることもできる。
【0038】
この手順の利点は多数のセンサー製造費用と全く同額の費用のアリコート部分のルミネッセンス指示薬−被覆の粉末状の直鎖の親水性ポリマーを使用することが非常に均一な特性をもつ大量のセンサーを製造させる点である。
【0039】
次いでこのように被覆された担体材料から、個々のセンサー素子を小さいディスクを打ち抜きすることにより製造することができる。
【0040】
発明は更に、発明に従う光学的−化学的センサーを使用しながらの水性試料中の塩化物の濃度の決定法に関する。
【0041】
以下に、発明を図面及び代表的態様につき、より詳細に説明される。
【0042】
図1は好ましく使用されるルミネッセンス指示薬を表す。図はメト硫酸メチルアクリジニウム(MAC)、メト硫酸4−ニトロフェニルブチルアクリジニウム(NPBA)、N,N’−ジ−(3−スルホプロピル)−9,9−ビスアクリジニウム(SPBA)、N,N’−二酢酸エチルエステル−9,9−ビスアクリジニウム(AEBA)及びルシゲニンを示す。
【0043】
図2は好ましく使用され、HYPAN(HYMEDIX Int.Inc.,Dayton,N.J.)の商品名で市販されている直鎖の親水性ポリマーの構造を表す。この多数のブロックのコポリマーにおいて、親水性の配列が連続的非晶質のイオン透過性領域(いわゆる柔らかいブロック、1)を形成し、一方凝集性の配列が結晶質のクラスター(いわゆる硬いブロック、2)を形成する。これらの多数のブロックのコポリマーの正確な説明はV.A.Stoy,New Type of Hydrogel for Controlled Drug Delivery,J.Biomedical Applications 3,553-604(1989)に認められる。
【0044】
図3は好ましい態様に従う発明のセンサーの構造を略図で示し、ルミネッセンス指示薬を担持するポリマーは透明な担体材料にフィルムの形態で適用される。図4は発明のセンサーのもう1つの好ましい態様を略図で示し、ルミネッセンス指示薬を担持するポリマーは透明な担体材料に適用されたヒドロゲルのフィルム中に小粒子の形態で埋封されている。
【0045】
図3及び4はそれぞれ発明に従うセンサーのディスクSを示す。HYPANに固定された塩化物感受性のルミネッセンス指示薬はIと呼ばれる。図3に従うと、ルミネッセンス指示薬Iを担持しているHYPANは薄膜Hの形態で励起光及び放射光に対して透明な担体材料T上にある。図4に従うとルミネッセンス指示薬Iを担持するHYPANは、薄膜の形態で励起光及び放射光に対して透明な担体材料Tに適用されているヒドロゲルG中に、懸濁粒子の形態で存在する。測定溶媒Pからルミネッセンス指示薬Iを担持する膜を光学的に分離するためには顔料を含むヒドロゲルからなるイオン透過性光学的遮蔽層OをフィルムH及び/又はフィルムGに適用する。
【0046】
光学的測定装置は、光源LとしてLED、検知器として光ダイオードM、波長を選択するための光学的フィルターA及びF、ポリマー層H及び/又はポリマー層G中に励起光を誘導し、そして光ダイオードMに放射光を誘導するための光学的装置並びに信号の処理のための装置(図示されていない)からなる。励起側には干渉フィルター(480nmのピーク透過性)を使用し、発光側に550nmの遮断フィルターを使用した。
【0047】
図5は市販の蛍光分析器を使用しながら図3に従う測定装置により記録した、好ましくは発明に従うセンサー中に使用したルシゲニンのルミネッセンス指示薬の励起及び発光スペクトルを示す。
【0048】
図6は塩化物の濃度の関数として図3の構造スキームに従う発明のセンサーの相対的ルミネッセンス強度を示す。図7は測定溶媒のpH値の関数としてそのセンサーの相対的ルミネッセンス強度を示す。図8及び9は図4の構造スキームに従う発明のセンサーに対する塩化物の濃度の関数として又はpH値の関数としての相対的ルミネッセンスの強度を示す。
【0049】
【実施例】
(実施例1、図3)
ルミネッセンス指示薬を担持するポリマーフィルムもつセンサーの製造
HYPANで被覆したフィルムの調製:
HYPAN HN80(HYMEDIX Int.Inc.,Dayton,N.J.08810,USA)6gを磁気撹拌器の補助により5時間にわたり60℃でDMSO80mlに溶解させた。ナイフの直線刃先の補助により、得られた溶液4.5mlを平面の支持体上に置いたポリエステルフィルム(MYLAR、Plastic Suppliers,USA)に100μmの湿潤厚さで適用した。溶媒を蒸発させる目的のためにフィルムを20分間室温に維持し、次いで30秒間脱イオン水中に浸漬させた。
HYPAN被覆フィルムのルミネッセンス指示薬による被覆:
ルシゲニン溶液(Aldrich Chemical Company Inc.,#B4920-3,USA)を300μMを脱イオン水1l中にルシゲニン135mgを溶解することにより調製した。その後、適当な容器中のHYPAN−被覆フィルムを1時間ルシゲニン溶液中に浸漬し、ルシゲニンの一部がフィルムのHYPAN層中に拡散した。次いでHYPAN層を脱イオン水で洗浄した。
ルミネッセンス指示薬で被覆したフィルムのUV処理:
紫外線による処理のために、開放容器中のルミネッセンス指示薬−被覆フィルムを脱イオン水の12.7mm(1/2インチ)の層上にHYPAN層とともに入れ、次いで1時間10cmの距離からUVランプで照射した。その後非結合指示薬を濯ぐ目的で、フィルムを100mMのNaF溶液(NaF4.3g及びNaH2PO44.13g、脱イオン水900mlに溶解し、5NのNaOHでpH7.1に調整、次いでH2Oで1lまで充填した)250ml中に1時間浸漬した。その後、ルミネッセンス指示薬−被覆HYPAN層を脱イオン水で濯いだ。
ルミネッセンス指示薬被覆フィルムへのイオン透過性光学的遮蔽層の調製及び適用:
25μmのふるい(VWR Scientific,P.O.Box 669967,Marietta,GA 30065,USA;Product No.JT 1528-1)でふるったセルロース繊維1.5g及びFe2O3(Fischer Scientific Company,#I116-3)3.5gをヒドロゲルD6(Tyndale Plains-Hunter Ltd.,Ringoes,N.J.08551,USA)1.8重量%及び水中55重量%のエタノールからなる溶液17g中で16時間懸濁させた。得られた均質の懸濁液5mlをHYPAN層に100μmの湿潤厚さで適用し、脱イオン水で湿潤化させそしてUV−処理フィルムのルミネッセンス指示薬で被覆した。室温で溶媒の蒸発後、2.5cmの直径をもつディスクを切り取り、使用時まで室温で塵が付かないように乾燥貯蔵した。使用前に、活性化の目的で少なくとも16時間、バッファー中に維持した。
センサーディスクの製造:
センサーディスクの切断及び測定法はSensors and Actuators B11(1993),pages 281-289(“Theory and Practice in Optical pH Sensing(光学的pH感知における理論及び実行)")中でM.J.P.Leiner and P.Hartmannにより、そしてSensors and Actuators B29(1995),pages 169-173(“Optical Sensors for in vitro Blood Gas Analysis(インビトロの血液ガス分析のための光学的センサー)"におけるM.J.P.Leinerにより記載された。
【0050】
その方法に従って得たセンサーディスクを図3に略図で表した測定装置に使用した。
(実施例2、図4)
ルミネッセンス指示薬−被覆粒子からのセンサーの製造
HYPAN粒子の調製:
粉末状HYPAN HN80(平均粒径130μm)を製造業者、HYMEDIXから直接入手した。より小さい粒径(50nm〜20μm)は実験室のジェットミル(Glen Mills Inc.,395 Altwood Road,Cliftton、N.J.07012,USA)で材料を微細磨砕することにより入手した。より狭い粒径範囲(50〜500nm)をもつ画分は微細磨砕材料を金属のふるいでふるうことにより得た。
ルミネッセンス指示薬によるHYPAN粒子の被覆及び指示薬の固定:
300μMのルシゲニン溶液を脱イオン水1l中にルシゲニン135mgを溶解することにより調製し、溶液を磁気撹拌器の付いた結晶皿中に入れた。次いでHYPAN HN80粉末50gを撹拌しながら溶液に緩徐に添加した。
【0051】
懸濁液の10cm上にUVランプ(Upland,CA 91786,USA,Model XX15,115V、60Hz,0.68A、発光青〜UV近辺)を配置し、懸濁液を常に撹拌しながら4時間UV光線で処理した。次いで、指示薬−被覆粒子をブッフナー漏斗によりそして濾紙を使用して被覆溶液から分離し、他の結晶皿に入れ、次いで−撹拌しながら−1時間、100mMのNaF溶液(NaF4.3g及びNaH2PO44.13g、脱イオン水900mlに溶解、5NのNaOHでpH7.1に調整、次いでH2Oで1リッターまで充填)1l中に懸濁させた。懸濁液を濾過し、濾液が無色になるまで粉末を脱イオン水で洗浄した。その後、ブッフナー漏斗中の粉末を無水エタノール中に懸濁させ、洗浄し、室温で1晩乾燥した。残渣の凝集物を除去するために粉末を50μmの金属ふるいを通してふるった。更なる使用まで粉末をCaCl2上の乾燥機中に保存した。
ルミネッセンス指示薬−被覆フィルムの調製:
磁石撹拌機の補助により、密閉容器中で、50μmにふるった指示薬−被覆粉末1.2gをヒドロゲルD6(Tyndale Plains-Hunter Ltd.,Ringoes,N.J.)1.8重量%及び水中55重量%エタノールからなる溶液6.8gに12時間懸濁させた。次いで均質な懸濁液を150μmの湿潤厚さでポリエステルフィルム(MELINEX)に適用し、溶媒を室温で1晩蒸発させた。
【0052】
イオン透過性光学的遮蔽層の適用及びセンサーディスクの製造は実施例1に記載のように実施した。
発明に従うセンサーのルミネッセンス特性の決定
発明に従うセンサーのルミネッセンス強度を測定する目的で、前記の方法に従って製造したセンサーディスクを光線透過性の温度調節された測定用セル中に導入し、異なる塩化物濃度及び異なるpH値をもつ試料と接触させた。
【0053】
図5は(A)200mMのNaCl溶液及び(B)200mMのNaF溶液と接触させた、pH7.1における実施例1に従って製造したセンサー(イオン透過性の光学的遮蔽層をもたない)のルミネッセンス励起及び発光スペクトルを示す。
【0054】
図6及び8は次の塩化物濃度(0.050、0.061、0.072、0.082、0.093、0.104、0.115、0.125、0.136、0.147、0.159モル/l)の負の常用対数の関数として水溶液と接触する、実施例1及び/又は実施例2に従って製造した発明に従うセンサーの相対的ルミネッセンス強度を示す。
【0055】
測定溶媒として、異なる濃度のNaClを含む、CO2を含まない、pH7.4(37℃)の0.1MのHEPESバッファーを使用した。
【0056】
図6及び8から明白なように、異なる構成のセンサーは両方とも塩化物の生理学的(血液の)濃度の決定に適する。
【0057】
図7及び9はpH値(6.819、6.910、7.009、7.123、7.250、7.363、7.481、7.575、7.671、)の関数として水溶液と接触する、実施例1及び/又は実施例2に従って製造した、発明に従うセンサーの相対的ルミネッセンス強度を示す。
【0058】
測定溶媒として、異なる濃度のHEPES酸及びHEPESNa塩を含み、塩化物濃度0.104モル/lを伴う0.1MのHEPESバッファーを使用した。
【0059】
図7及び9から明白なように、発明のセンサーは生理学的pH値の範囲内で測定溶媒のpH値への依存性を示さない。pH特性曲線の僅かな上昇は代表的測定溶媒のHEPES塩との弱い相互作用による。これらの高いHEPES塩濃度は天然の測定媒質(体液、海水、等)中には存在しない。
【0060】
本発明は代表された具体的な態様に制約されない。例えば、当業者は例えば前記の化合物を使用することにより、ルシゲニン以外の塩化物感受性のルミネッセンス指示薬を使用することにより、同様な方法でセンサーを製造することができる。
Claims (14)
- 水性試料中の塩化物の濃度のルミネッセンス光学素子による連続的及び不連続的決定に適し、ルミネッセンス指示薬(I)及び、ルミネッセンス指示薬(I)を担持するポリマー(H)を含んでなる光学的−化学的センサーであって、ルミネッセンス指示薬(I)が非親油性アクリジン又はビスアクリジン化合物であり、
ポリマー(H)が有機溶媒に可溶性の直鎖の親水性ポリマーであり、ルミネッセンス指
示薬(I)がポリマー(H)中に固定され、ここで、ポリマー(H)は各ポリマー鎖が、酸アミド基、酸イミド基、カルボキシラート基から選択される親水性をもつ幾つかの配列の単位及び高い凝集エネルギーのニトリル基を有する幾つかの配列からなる多数のブロックの共重合体である、
ことを
特徴とするセンサー。 - アクリジン又はビスアクリジン化合物がメト硫酸メチルアクリジニウム(MAC)、メト硫酸4−ニトロフェニルブチルアクリジニウム(NPBA)、N,N’−ジ−(3−スルホプロピル)−9,9−ビスアクリジニウム(SPBA)、N,N’−二酢酸エチルエステル−9,9−ビスアクリジニウム(AEBA)及びルシゲニン(lucigenine)を含んでなる群から選択されることを特徴とする、請求項1記載の光学的−化学的センサー。
- ルミネッセンス指示薬(I)を担持するポリマー(H)が透明な担体材料(T)にフィルムの形態で適用されていることを特徴とする、請求項1〜2のいずれかに記載の光学的−化学的センサー。
- ルミネッセンス指示薬(I)を担持するポリマー(H)が透明な担体材料(T)に適用されたヒドロゲルのフィルム(G)中に微細粒子の形態で埋封されていることを特徴とする、請求項1〜2のいずれかに記載の光学的−化学的センサー。
- 親水性のイオン−透過性のポリマーからなる追加層(O)が、透明な担体材料(T)上にあるフィルム又はヒドロゲルのフィルム(G)に適用されていることを特徴とする、請求項3又は4記載の光学的−化学的センサー。
- 親水性のイオン−透過性のポリマーからなり、色素の顔料を含む追加層(O)が、透明な担体材料(T)上にあるフィルム又はヒドロゲルのフィルム(G)に適用されていることを特徴とする、請求項3又は4記載の光学的−化学的センサー。
- 親水性のイオン−透過性のポリマーからなり、黒の顔料を含む追加層(O)が、透明な担体材料(T)上にあるフィルム又はヒドロゲルのフィルム(G)に適用されていることを特徴とする、請求項3又は4記載の光学的−化学的センサー。
- 透明な担体材料(T)が光ファイバーであることを特徴とする、請求項3〜7のいずれかに記載の光学的−化学的センサー。
- 水性試料中の塩化物の濃度のルミネッセンス光学素子による連続的及び不連続的決定に適し、そしてルミネッセンス指示薬(I)及びルミネッセンス指示薬(I)を担持するポリマー(H)を含んでなる光学的−化学的センサーの製造法であって、
− アクリジン又はビスアクリジン化合物を基礎にした非親油性ルミネッセンス指示薬をルミネッセンス指示薬(I)として使用すること、及び
− 有機溶媒中に可溶性の、各ポリマー鎖が、酸アミド基、酸イミド基、カルボキシラート基から選択される親水性をもつ幾つかの配列の単位及び高い凝集エネルギーのニトリル基を有する幾つかの配列からなる多数のブロックの共重合体である直鎖の親水性ポリマーをポリマー(H)として使用すること、ここで
− ルミネッセンス指示薬(I)の溶液を生成し、そして
− その溶液を直鎖の親水性ポリマー(H)と接触させ、そのルミネッセンス指示薬(I)が直鎖の親水性ポリマー(H)中に拡散すること、
を特徴とする方法。 - − 直鎖の親水性ポリマー(H)の溶液を生成すること、
− その溶液を透明な担体材料(T)に適用し、溶媒を蒸発させ、直鎖の親水性ポリマー(H)のフィルムを透明な担体材料(T)上に形成する、
− そのフィルムをルミネッセンス指示薬(I)の溶液と接触させ、ルミネッセンス指示薬(I)がフィルム内に拡散することを特徴とする請求項9記載の方法。 - − 直鎖の親水性ポリマー(H)の溶液を生成すること、
− その溶液を透明な担体材料(T)に適用し、溶媒を蒸発させ、直鎖の親水性ポリマー(H)のフィルムを透明な担体材料(T)上に形成する、
− そのフィルムをルミネッセンス指示薬(I)の溶液と接触させ、ルミネッセンス指示薬(I)がフィルム内に拡散し、照射により固定化されること、を特徴とする請求項9記載の方法。 - − ルミネッセンス指示薬の溶液を粉末状の直鎖の親水性ポリマー(H)と接触させ、ルミネッセンス指示薬(I)が直鎖の親水性ポリマー(H)中に拡散し、
− ルミネッセンス指示薬(I)を担持する直鎖の親水性ポリマー(H)をヒドロゲル溶液中に懸濁して、懸濁液を生成し、
− 懸濁液を透明な担体材料(T)に適用し、そして
− 溶媒をヒドロゲル溶液から蒸発させ、そこで透明な担体材料(T)上に、ルミネッセンス指示薬(I)を担持する直鎖の親水性ポリマー(H)が埋封されているヒドロゲルフィルム(G)が形成される、
ことを特徴とする、請求項9に記載の方法。 - − ルミネッセンス指示薬の溶液を粉末状の直鎖の親水性ポリマー(H)と接触させ、ルミネッセンス指示薬(I)が直鎖の親水性ポリマー(H)中に拡散し、照射により固定化され、
− ルミネッセンス指示薬(I)を担持する直鎖の親水性ポリマー(H)をヒドロゲル溶液中に懸濁して、懸濁液を生成し、
− 懸濁液を透明な担体材料(T)に適用し、そして
− 溶媒をヒドロゲル溶液から蒸発させ、そこで透明な担体材料(T)上に、ルミネッセンス指示薬(I)を担持する直鎖の親水性ポリマー(H)が埋封されているヒドロゲルフィルム(G)が形成される、
ことを特徴とする、請求項9に記載の方法。 - 請求項1〜8のいずれかに記載の光学的−化学的センサーを使用することによる水性試料中の塩化物の濃度の決定法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
AT37/99 | 1999-01-12 | ||
AT0003799A AT409307B (de) | 1999-01-12 | 1999-01-12 | Optisch-chemischer sensor |
PCT/AT2000/000004 WO2000042438A1 (de) | 1999-01-12 | 2000-01-12 | Optisch-chemischer sensor zur bestimmung von chlorid |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2002535623A JP2002535623A (ja) | 2002-10-22 |
JP4666766B2 true JP4666766B2 (ja) | 2011-04-06 |
Family
ID=3479865
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2000593959A Expired - Lifetime JP4666766B2 (ja) | 1999-01-12 | 2000-01-12 | 塩化物を検知するための光学的−化学的センサー |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US6613282B2 (ja) |
EP (1) | EP1141729B1 (ja) |
JP (1) | JP4666766B2 (ja) |
AT (1) | AT409307B (ja) |
DE (1) | DE50011683D1 (ja) |
WO (1) | WO2000042438A1 (ja) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AT409307B (de) * | 1999-01-12 | 2002-07-25 | Hoffmann La Roche | Optisch-chemischer sensor |
AT410601B (de) * | 2000-12-29 | 2003-06-25 | Hoffmann La Roche | Sensor zur lumineszenz-optischen bestimmung eines analyten sowie reagens, das nach dem fret-prinzip arbeitet |
BR0309947B1 (pt) * | 2002-05-16 | 2013-11-26 | Processo e dispositivo para produção de camadas de polímero sobre um suporte transparente, sua utilização e processo para produção de um sensor | |
US7524455B2 (en) * | 2003-11-24 | 2009-04-28 | General Electric Company | Methods for deposition of sensor regions onto optical storage media substrates and resulting devices |
US8018801B2 (en) | 2003-12-04 | 2011-09-13 | Panasonic Corporation | Optical information reproduction device |
CA2671915C (en) * | 2006-12-08 | 2015-04-07 | Opti Medical Systems | Spreading layer and humidity control layer for enhancing sensor performance |
US9717896B2 (en) | 2007-12-18 | 2017-08-01 | Gearbox, Llc | Treatment indications informed by a priori implant information |
US8636670B2 (en) | 2008-05-13 | 2014-01-28 | The Invention Science Fund I, Llc | Circulatory monitoring systems and methods |
US20090287120A1 (en) | 2007-12-18 | 2009-11-19 | Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware | Circulatory monitoring systems and methods |
CN102843987A (zh) * | 2010-04-13 | 2012-12-26 | 国际商业机器公司 | 采用激光消融修饰和/或平滑组织的系统和方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH085628A (ja) * | 1994-06-23 | 1996-01-12 | Canon Inc | 塩化物イオンの蛍光分析方法 |
JPH08128957A (ja) * | 1994-09-07 | 1996-05-21 | Canon Inc | 化学センサ |
JPH08304380A (ja) * | 1995-05-01 | 1996-11-22 | Canon Inc | 化学センサ |
JPH10507261A (ja) * | 1994-10-31 | 1998-07-14 | ミネソタ マイニング アンド マニュファクチャリング カンパニー | イオンセンサーおよびイオンセンサーを製造する方法 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4379874A (en) | 1980-07-07 | 1983-04-12 | Stoy Vladimir A | Polymer composition comprising polyacrylonitrile polymer and multi-block copolymer |
US4331783A (en) | 1980-09-17 | 1982-05-25 | S.K.Y. Polymers | Novel block copolymers including acrylonitrile sequences and glutarimide units and processes for preparing same |
AT384891B (de) * | 1983-12-09 | 1988-01-25 | Avl Verbrennungskraft Messtech | Messeinrichtung zur bestimmung der konzentration von halogeniden und pseudohalogeniden, sowie verfahren zur herstellung eines sensorelementes fuer eine derartige einrichtung |
ATE101922T1 (de) | 1988-08-26 | 1994-03-15 | Moeller Willi Ag | Testvorrichtung zur optischen bestimmung von kationen, anionen oder elektrisch neutralen ionogenen spezien und testverfahren unter verwendung dieser testvorrichtung. |
US5691205A (en) * | 1994-06-23 | 1997-11-25 | Canon Kabushiki Kaisha | Fluorometric analysis of chloride ion and chemical sensor therefor |
AT409307B (de) * | 1999-01-12 | 2002-07-25 | Hoffmann La Roche | Optisch-chemischer sensor |
-
1999
- 1999-01-12 AT AT0003799A patent/AT409307B/de not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-01-12 JP JP2000593959A patent/JP4666766B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2000-01-12 WO PCT/AT2000/000004 patent/WO2000042438A1/de active Search and Examination
- 2000-01-12 EP EP00900444A patent/EP1141729B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-01-12 DE DE50011683T patent/DE50011683D1/de not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-07-06 US US09/900,624 patent/US6613282B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2003
- 2003-01-02 US US10/335,843 patent/US6835351B2/en not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH085628A (ja) * | 1994-06-23 | 1996-01-12 | Canon Inc | 塩化物イオンの蛍光分析方法 |
JPH08128957A (ja) * | 1994-09-07 | 1996-05-21 | Canon Inc | 化学センサ |
JPH10507261A (ja) * | 1994-10-31 | 1998-07-14 | ミネソタ マイニング アンド マニュファクチャリング カンパニー | イオンセンサーおよびイオンセンサーを製造する方法 |
JPH08304380A (ja) * | 1995-05-01 | 1996-11-22 | Canon Inc | 化学センサ |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ATA3799A (de) | 2001-11-15 |
WO2000042438A1 (de) | 2000-07-20 |
DE50011683D1 (de) | 2005-12-29 |
US6613282B2 (en) | 2003-09-02 |
US20020034826A1 (en) | 2002-03-21 |
EP1141729A1 (de) | 2001-10-10 |
AT409307B (de) | 2002-07-25 |
US6835351B2 (en) | 2004-12-28 |
US20030101803A1 (en) | 2003-06-05 |
EP1141729B1 (de) | 2005-11-23 |
JP2002535623A (ja) | 2002-10-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Du et al. | Hydrogel-based optical ion sensors: Principles and challenges for point-of-care testing and environmental monitoring | |
Clark et al. | Optical nanosensors for chemical analysis inside single living cells. 1. Fabrication, characterization, and methods for intracellular delivery of PEBBLE sensors | |
US4892640A (en) | Sensor for the determination of electrolyte concentrations | |
Turkewitsch et al. | Fluorescent functional recognition sites through molecular imprinting. A polymer-based fluorescent chemosensor for aqueous cAMP | |
US5418143A (en) | Test article and method for performing blood coagulation assays | |
US6753191B2 (en) | Polymerized crystalline colloidal array chemical sensing materials for use in high ionic strength solutions | |
Vasylevska et al. | Indicator-loaded permeation-selective microbeads for use in fiber optic simultaneous sensing of pH and dissolved oxygen | |
JP3782780B2 (ja) | 被検体の発光光学的測定のためのセンサー | |
JP4666766B2 (ja) | 塩化物を検知するための光学的−化学的センサー | |
EP0424703A2 (en) | Optical sensor | |
Vire et al. | Adsorptive stripping voltammetry applied to drug analysis: a powerful tool | |
JPH0772084A (ja) | 試料溶液中のアルカリ金属イオンの活性を測定する蛍光指示薬 | |
JP2009526965A (ja) | 新規なボロン酸複合体、及び、グルコースセンサー中でのその使用 | |
Chen et al. | Synthesis and characterization of pH sensitive carboxySNARF-1 nanoreactors | |
Yari et al. | Ultra-trace electrochemical impedance determination of bovine serum albumin by a two dimensional silica network citrate-capped gold nanoparticles modified gold electrode | |
US20110207614A1 (en) | Polarized Flourescent Nanospheres | |
WO2006001721A1 (en) | Imprinted polmyer for binding organic molecules or metal ions | |
Seitz et al. | Reversible indicators for alkali metal ion optical sensors | |
EP3901619A1 (en) | Optical component | |
Sloan et al. | A fibre‐optic calcium ion sensor using a calcein derivative | |
EP1590456A4 (en) | USE OF PASSAGES THROUGH POROUS MEMBRANES | |
Bychkova | Polymeric Submicron Optical Ion-Selective Sensors |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20061006 |
|
RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20080904 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20080904 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090929 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20091224 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100106 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100318 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100914 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20101202 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20110104 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20110111 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140121 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Ref document number: 4666766 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |