JP4579497B2 - Compounds specific for adenosine A1, A2A and A3 receptors and uses thereof - Google Patents

Description

で表されるもの、およびそれらの薬学的に許容可能な塩が挙げられる。Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であるか、あるいは一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成する。Ｒ_３は、置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分である。Ｒ_４は、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分である。Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、ハロゲン原子（例えば、塩素、弗素、または臭素）、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であるか、あるいはＲ_５は、カルボキシル、カルボキシルのエステル、またはカルボキサミドであるか、あるいはＲ_４とＲ_５、またはＲ_５とＲ_６は、一緒に置換もしくは非置換の複素環または炭素環を形成する。
【００１３】
ある実施形態では、Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、置換もしくは非置換のシクロアルキルまたはヘテロアリールアルキル部分であり得る。他の実施形態では、Ｒ_３は、水素原子、または置換もしくは非置換のヘテロアリール部分である。さらに別の実施形態では、Ｒ_４、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、ヘテロアリール部分であり得る。好ましい実施形態では、Ｒ_１は水素原子であり、Ｒ_２は、シクロヘキサノール、例えばトランスシクロヘキサノールであり、Ｒ_３はフェニルであり、Ｒ_４は水素原子であり、Ｒ_５はメチル基であり、Ｒ_６はメチル基である。さらに別の実施形態では、Ｒ_１は水素原子であり、Ｒ_２は、下記：
【化２４】

であり、Ｒ_３はフェニルであり、Ｒ_４は水素原子であり、Ｒ_５およびＲ_６は、メチル基である。
【００１４】
本発明はさらに、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態、例えば、喘息、気管支炎、アレルギー性鼻炎、慢性閉塞性肺疾患、腎障害、胃腸障害、および眼の障害を治療するための薬学的組成物に関する。この薬学的組成物は、治療上有効な量のＮ−６置換７−デアザプリン、および薬学的に許容可能なキャリアを含む。
【００１５】
本発明はまた、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態を治療するための包装された薬学的組成物に関する。包装された薬学的組成物は、治療上有効な量の少なくとも１つのＮ−６置換７−デアザプリンを保持する容器と、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態を治療するためのＮ−６置換７−デアザプリンの使用説明書とを含む。
【００１６】
本発明はさらに、式Ｉを有する化合物、
（式中、
Ｒ_１は水素であり、
Ｒ_２は、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアルキルであるか、あるいはＲ_１およびＲ_２は、一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ_３は、置換もしくは非置換のアリールであり、
Ｒ_４は水素であり、
Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、水素またはアルキルである）
およびそれらの薬学的に許容可能な塩に関する。この実施形態のデアザプリンは、好適には選択的Ａ_１受容体アンタゴニストであってもよい。これらの化合物は、例えば喘息、心不全に関連した腎不全、および緑内障の治療のような多数の治療的使用に有用であり得る。特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、例えばエステラーゼにより触媒される加水分解によって、活性薬剤に、インビボで代謝されることが可能な水溶性プロドラッグである。
【００１７】
さらなる別の実施形態では、本発明は、細胞を、Ｎ−６置換７−デアザプリン（例えば、好ましくは、アデノシン受容体アンタゴニスト）と接触させることによって、細胞においてアデノシン受容体（例えば、Ａ_３）の活性を阻害する方法を特徴とする。
【００１８】
別の態様では、本発明は、有効な量の式Ｉを有するＮ−６置換７−デアザプリンを、動物に投与することによって、動物（例えば、ヒト）の眼に対する損傷を治療する方法を特徴とする。好ましくは、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、動物の細胞におけるＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである。損傷は、網膜または視神経乳頭に対するものであり、急性であっても慢性であってもよい。損傷は、例えば、緑内障、水腫、虚血、低酸素症、または外傷の結果であり得る。
【００１９】
本発明は、式Ｉを有するＮ−６置換化合物を含む薬学的組成物を特徴とする。好ましくは、薬学的調製物は、眼科用配合剤（例えば、眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤、全身性配合剤、または手術用灌注溶液）である。
【００２０】
さらなる別の実施形態では、本発明は、下記式ＩＩを有する化合物を特徴とする：
【化２５】

（式中、Ｘは、ＮまたはＣＲ_６であり、Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルコキシ、アミノアルキル、アルキル、アリール、またはアルキルアリールであるか、あるいは一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成し（但し、Ｒ_１およびＲ_２の両方がともに水素であることはない）、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のアルキル、アリールアルキル、またはアリールであり、Ｒ_４は、水素、または置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、Ｌは、水素、置換もしくは非置換のアリールであるか、あるいはＲ_４およびＬは、一緒に置換もしくは非置換の複素環または炭素環を形成し、Ｒ_６は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、またはハロゲンであり、Ｑは、ＣＨ_２、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ_７（ここで、Ｒ_７は、水素、または置換または非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルである）であり、Ｗは、置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、アリールアルキル、ビアリール、ヘテロアリール、置換カルボニル、置換チオカルボニル、または置換スルホニルであるが、但しＲ_３がピロリジンである場合は、Ｒ_４はメチルではない）。本発明はまた、本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩およびプロドラッグに関する。
【００２１】
好適な実施形態では、式ＩＩにおいて、ＸはＣＲ_６であり、Ｑは、ＣＨ_２、Ｏ、Ｓ、またはＮＨである（ここで、Ｒ_６は、上述に定義した通りである）。
【００２２】
式ＩＩの別の実施形態では、ＸはＮである。
【００２３】
本発明はさらに、細胞を、本発明の化合物と接触させることによって、細胞においてアデノシン受容体（例えば、Ａ_２ｂアデノシン受容体）の活性を阻害する方法に関する。好ましくは、化合物は、受容体のアンタゴニストである。
【００２４】
本発明はまた、有効な量の式ＩＩの化合物（例えば、Ａ_２ｂのアンタゴニスト）を、動物に投与することによって、動物において胃腸障害（例えば、下痢）または呼吸器障害（例えば、アレルギー性鼻炎、慢性閉塞性肺疾患）を治療する方法に関する。好ましくは、動物は、ヒトである。
【００２５】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を特徴とする：
【化２６】

（式中、Ｒ_１は、トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル、２−メチルアミノカルボニルアミノシクロヘキシル、２−メチルアミノカルボニルアミノシクロヘキシル、アセトアミドエチル、またはメチルアミノカルボニルアミノエチルであり、Ａｒは、置換もしくは非置換の４〜６員環である）。
【００２６】
上記化合物の一実施形態では、Ａｒは、フェニル、ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、１，２，４−トリアゾール、ピリジン、２（１Ｈ）−ピロリドン、４（１Ｈ）−ピロリドン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、イソチアゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、テトラゾール、ナフタレン、テトラリン、ナフチリジン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドール、２，３−ジヒドロインドール、１Ｈ−インドール、インドリン、ベンゾピラゾール、１，３−ベンゾジオキオール、ベンゾオキサゾール、プリン、クマリン、クロモン、キノリン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、ベンズイミダゾール、キナゾリン、ピリド［２，３−ｂ］ピラジン、ピリド［３，４−ｂ］ピラジン、ピリド［３，２−ｃ］ピリダジン、ピリド［３，４−ｂ］ピリミジン、１Ｈ−ピラゾール［３，４−ｄ］ピリミジン、プテリジン、２（１Ｈ）−キノロン、１（２Ｈ）−イソキノロン、１，４−ベンズイソオキサジン、ベンゾチアゾール、キノキサリン、キノリン−Ｎ−オキシド、イソキノリン−Ｎ−オキシド、キノキサリン−Ｎ−オキシド、キナゾリン−Ｎ−オキシド、ベンゾオキサジン、フタラジン、シンノリンであるか、または下記構造：
【化２７】

（式中、
Ｙは、炭素または窒素であり、
Ｒ_２およびＲ_２’は、独立して、Ｈ、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアリール、ハロゲン、メトキシ、メチルアミノ、またはメチルチオである）
を有するものであり、
Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_７）（Ｒ_８）ＸＲ_５（ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ_６であり、Ｒ_７およびＲ_８は、それぞれ独立して、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＲ_５、Ｒ_６および窒素は、一緒に置換もしくは非置換の４〜７員環を形成する）であり、
Ｒ_４は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキルである）
を有するもの、あるいは薬学的に許容可能な塩、またはプロドラッグ誘導体、または生物学的に活性な代謝産物であるが、但し、Ｒ_３がアセチルアミノエチルである場合は、Ａｒは４−ピリジルではない。
【００２７】
本発明はまた、下記構造を有する化合物に関する：
【化２８】

（式中、
Ｒ_１は、アリール、置換アリール、またはヘテロアリールであり、
Ｒ_２は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり、
Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_６）（Ｒ_７）ＮＲ_４Ｒ_５（ここで、Ｒ_６およびＲ_７はそれぞれ、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_４およびＲ_５はそれぞれ、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＲ_４、Ｒ_５および窒素は、一緒に５〜７員環系を形成する）。
【００２８】
本発明はまた、細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、上記細胞を、上述の化合物と接触させることを含む方法を特徴とする。
【００２９】
【詳細な説明】
本発明の特徴および他の詳細についてここでより具体的に記載し、それを特許請求項において指し示す。本発明の特定の実施形態は、説明の目的で示しているものであり、本発明を限定するものではないことが理解されよう。本発明の基本的な特徴は、本発明の範囲を逸脱することなく、様々な実施形態で使用することができる。
【００３０】
本発明は、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態を治療する方法に関する。この方法は、哺乳類におけるＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態の治療が行われるように、治療上有効な量の以下に記載するＮ−６置換７−デアザプリンを哺乳類に投与することを包含する。
【００３１】
「Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態」という用語は、以下に記載するような本発明のＮ−６置換７−デアザプリンによる治療に対する応答性を特徴とする疾患状態または症状を包含することを意図し、例えば、治療は、本発明のＮ−６置換７−デアザプリンにより達成される少なくとも１つの症状または状態の影響の有意な減少を包含する。通常かかる状態は、宿主内のアデノシンの増加に関連しており、その結果、宿主は、毒素の放出、炎症、昏睡、水停留、体重増加または体重減少、膵炎、気腫、慢性関節リウマチ、変形性関節症、多臓器不全、乳児および成人呼吸促進症候群、アレルギー性鼻炎、慢性閉塞性肺疾患、眼の障害、胃腸障害、皮膚腫瘍促進、免疫欠損、および喘息が挙げられるが、これらに限定されない生理学的症状を被ることが多い（例えば、C.E. Muller and B. Stein 「アデノシン受容体アンタゴニスト：構造および潜在的治療用途(Adenosine Receptor Antagonists: Structures and Potential Therapeutic Applications」, Current Pharmaceutical Design, 2:501 (1996)、およびC.E. Muller 「Ａ_１アデノシン受容体アンタゴニスト(A₁-Adenosine Receptor Antagonists)」, Exp. Opin. Ther. Patents 7(5):419 (1997)、およびI. Feoktistove, R. Polosa, S.T. Holgate and I. Eiaggioni 「アデノシンＡ_２Ｂ受容体：喘息における新規治療薬標的？(Adenosine A_2b receptors: a novel therapeutic target in asthma?)」 TIPS 19: 148 (1998)を参照）。かかる症状に関連することが多い影響としては、熱、息切れ、吐気、下痢、衰弱、頭痛、さらには死亡が挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態として、アデノシン受容体、例えば、Ａ_１、Ａ_２ａ、Ａ_２ｂ、Ａ_３等の刺激により媒介され、その結果、細胞中のカルシウム濃度および／またはＰＬＣ（ホスホリパーゼＣ）の活性が調節される疾患状態が挙げられる。好ましい実施形態では、Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態は、アデノシン受容体（複数可）に関連しており、例えば、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、アンタゴニストとして作用する。本発明の化合物、例えば生物学的影響を媒介するアデノシン受容体サブタイプにより治療することができる適切な応答性状態の例としては、中枢神経系（ＣＮＳ）の影響、心血管の影響、腎臓の影響、呼吸器の影響、免疫学的影響、胃腸の影響、および代謝の影響が挙げられる。患者におけるアデノシンの相対量は、以下に列挙した影響に関連することができ、すなわちアデノシンレベルの増加は、影響、例えば望ましくない生理学的応答（例えば、喘息による攻撃）を誘発することができる。
【００３２】
ＣＮＳの影響としては、伝達物質の放出（Ａ_１）の低下、鎮静（Ａ_１）、運動活性の低下（Ａ_２ａ）、鎮痙活性、化学受容体刺激（Ａ_２）、および痛覚過敏が挙げられる。本発明の化合物の治療用途としては、痴呆、アルツハイマー病および記憶強化が挙げられる。
【００３３】
心血管の影響としては、血管拡張（Ａ_２ａ）、（Ａ_２ｂ）および（Ａ_３）、血管収縮（Ａ_１）、徐脈（Ａ_１）、血小板阻害（Ａ_２ａ）、陰性心変力および変伝導（Ａ_１）、不整脈、頻拍、および血管新生が挙げられる。本発明の化合物の治療用途としては、例えば、心臓の虚血誘発性欠陥の防止、および強心薬、心筋組織保護、および心機能の修復が挙げられる。
【００３４】
腎臓の影響としては、ＧＦＲの低下（Ａ_１）、メサンギウム細胞収縮（Ａ_２）、抗利尿（Ａ_１）、およびレニン放出の阻害（Ａ_１）が挙げられる。本発明の化合物の適切な治療用途としては、利尿薬、ナトリウム排泄増加薬、カリウム保持剤、腎臓保護剤／急性腎不全の防止、抗高血圧薬、抗浮腫剤および抗抗腎炎剤としての本発明の使用が挙げられる。
【００３５】
呼吸器の影響としては、気管支拡張（Ａ_２）、気管支収縮（Ａ_１）、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、粘液分泌および呼吸低下（Ａ_２）が挙げられる。本発明の化合物に関する適切な治療用途としては、喘息鎮静用途、移植および呼吸器障害後の肺疾患の治療が挙げられる。
【００３６】
免疫学的影響としては、免疫抑制（Ａ_２）、好中球走化性（Ａ_１）、好中球スーパーオキシド生成（Ａ_２ａ）、および肥満細胞顆粒化（Ａ_２ｂおよびＡ_３）が挙げられる。アンタゴニストの治療用途としては、アレルギー性および非アレルギー性炎症（例えば、ヒスタミンおよび他の炎症性媒介物質の放出）が挙げられる。
【００３７】
胃腸の影響としては、酸分泌の阻害（Ａ_１）が挙げられる。治療用途としては、逆流および潰瘍状態が挙げられ得る、胃腸の影響としてはまた、結腸、腸管および下痢疾患、例えば腸炎に関連した下痢疾患（Ａ_２ｂ）が挙げられる。
【００３８】
眼の障害としては、網膜および視神経乳頭損傷および外傷関連障害（Ａ_３）が挙げられる。好ましい実施形態では、眼の障害は、緑内障である。
【００３９】
本発明の化合物の他の治療用途しては、肥満（脂肪分解特性）、高血圧の治療、うつ病の治療、鎮静薬、抗不安薬、抗てんかん薬、および緩下薬（例えば下痢を引き起こさずに運動性を達成するもの）が挙げられる。
【００４０】
「疾患状態」という用語は、望ましくないレベルのアデノシン、アデノリルシクラーゼ活性、アデノシン受容体の異常刺激に関連した生理学的活性の増大、および／またはｃＡＭＰの増加により引き起こされるか、またはそれらに関連した状態が挙げられる。一実施形態では、疾患状態は、例えば、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、気管支炎、腎障害、胃腸障害、または眼の障害である。さらなる例としては、慢性気管支炎、および嚢胞性線維症が挙げられる。炎症性障害の適切な例としては、非リンパ性白血病、心筋虚血、アンギナ、梗塞形成、脳血管性虚血、間欠性跛行、臨界四肢虚血、静脈高血圧、拡張蛇行静脈、静脈潰瘍形成、および動脈硬化が挙げられる。再灌流障害状態としては、例えば、再建手術、血栓崩壊または血管形成のような任意の手術後外傷が挙げられる。
【００４１】
「Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態の治療」、または「Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態を治療する」という用語は、哺乳類における生理学的症状を、有意に減少することができるか、または最小限に抑えることができるように、上述のような疾患状態または症状の変化を包含することを意図する。この用語はまた、異常量のアデノシンに関連した生理学的症状または影響の制御、防止あるいは阻害を包含する。１つの好ましい実施形態では、疾患状態または症状の制御は、疾患状態または症状が根絶されることである。別の好ましい実施形態では、制御は、他の生理学的系およびパラメータに影響を及ぼさないで、異常レベルのアデノシン受容体活性が制御されるように選択的である。
【００４２】
「Ｎ−６置換７−デアザプリン」という用語は、当該技術分野で認識されており、下記式Ｉ：
【化２９】

を有する化合物を包含することを意図する。
【００４３】
「Ｎ−置換７−デアザプリン」は、薬学的に許容可能な塩を包含し、一実施形態では、本明細書中に記載するある特定のＮ−６置換プリンも包含する。
【００４４】
ある実施形態では、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、Ｎ−６ベンジル置換も、Ｎ−６フェニルエチル置換もされていない。他の実施形態では、Ｒ_４は、ベンジル置換も、フェニルエチル置換もされていない。好ましい実施形態では、Ｒ_１およびＲ_２はともに、水素原子ではない。さらに他の好ましい実施形態では、Ｒ_３は水素原子ではない。
【００４５】
以下に記載するＮ−６置換７−デアザプリンの「治療上有効な量」という用語は、哺乳類内のその対象とされる機能を実施するのに（例えば、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態、または疾患状態を治するのに）必要または十分な治療用化合物の量である。治療用化合物の有効な量は、哺乳類にすでに存在している原因作用物質の量、哺乳類の年齢、性別、および体重、ならびに本発明の治療用化合物の、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態に影響を及ぼす能力のような要因に従って多様であり得る。
【００４６】
当業者は、上述の要因を研究し、過度の実験を行うことなく、治療用化合物の有効な量に関する決定を行うことが可能であろう。ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはインビボアッセイもまた、以下に記載する治療用化合物の「有効な量」を決定するのに使用することができる。当業者は、上述のアッセイでの使用に関して、あるいは治療上の処置として、治療用化合物の適切な量を選定する。
【００４７】
治療上有効な量は、好ましくは、治療していない患者に関して、治療中のＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態または症状に関連した少なくとも１つの症状あるいは影響を、少なくとも約２０％分（より好ましくは、少なくとも約４０％分、より好ましくは少なくとも約６０％、さらに好ましくは少なくとも約８０％分）低減する。当業者は、かかる症状および／または影響の減少を測定するように、アッセイを設計することができる。かかるパラメータを測定することが任意の当該技術分野で認識されているアッセイは、本発明の一部として包含されることを意図する。例えば、喘息が治療される状態である場合、患者の肺から消費される空気の容量を、当該技術分野で認識されている技法を用いて、容量の増加の測定のために治療前後で測定することができる。同様に、炎症が治療される状態である場合、炎症を起こした領域を、当該技術分野で認識されている技法を用いて、炎症を起こした領域の減少の測定のために治療の前後で測定することができる。
【００４８】
「細胞」という用語は、原核細胞および真核細胞の両方を包含する。
【００４９】
「動物」という用語は、アデノシン受容体を有する任意の生物、またはＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態になりやすい任意の生物を包含する。動物の例としては、酵母、哺乳類、爬虫類、および鳥類が挙げられる。動物はまた、トランスジェニック動物も包含する。
【００５０】
「哺乳類」という用語は、当該技術分野で認識されており、動物、より好ましくは温血動物、最も好ましくは、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、イヌ、ネコ、ラット、マウス、およびヒトを包含することを意図する。Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態、例えば、炎症、気腫、喘息、中枢神経系症状、または急性呼吸窮迫症候群になりやすい哺乳類は、本発明の一部として包含される。
【００５１】
別の態様では、本発明は、哺乳類におけるアデノシン受容体の調節が行われるように、治療上有効な量のＮ−６置換７−デアザプリンを哺乳類に投与することによって、哺乳類においてアデノシン受容体（複数可）を調節する方法に関する。適切なアデノシン受容体としては、Ａ_１、Ａ_２、またはＡ_３ファミリーが挙げられる。好ましい実施形態では、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、アデノシン受容体アンタゴニストである。
【００５２】
「アデノシン受容体を調節する」という用語は、化合物がアデノシン受容体（複数可）と相互作用して、アデノシン受容体またはアデノシン受容体の調節に起因する続くカスケードの影響に関連した増加した生理学的活性、減少した生理学的活性または異常な生理学的活性を引き起こす場合を包含することを意図する。アデノシン受容体に関連した生理学的活性としては、鎮静の誘発、血管拡張、心拍数の抑制および心筋収縮の抑制、血小板凝集性の阻害、糖新生の刺激、および脂肪分解の阻害、カリウムチャネルの開放、カルシウムチャネルの流出の低減が挙げられる。
【００５３】
「調節する」、「調節している」および「調節」という用語は、例えば本発明の治療方法の文脈では、アデノシン受容体の異常刺激に関連した結果として生じる望ましくない生理学的活性の増加を防止、根絶、または阻害することを包含することを意図する。別の実施形態では、調節するという用語は、アンタゴニスト効果、例えばアデノシン受容体（複数可）の過剰刺激に起因するアレルギーおよびアレルギー性炎症の媒介物質の活性または産生の減少を包含する。例えば、本発明の治療用デアザプリンは、アデノシン受容体と相互作用して、例えばアデニル酸シクラーゼ活性を阻害することができる。
【００５４】
「異常アデノシン受容体活性を特徴とする症状」という用語は、受容体の刺激が、疾患、障害または症状に直接的あるいは間接的に関連した生化学的および／または生理学的な一連の事象を引き起こすという点で、アデノシン受容体の異常刺激に関連した疾患、障害または症状を包含することを意図する。このアデノシン受容体の刺激は、疾患、障害または症状のたった１つの原因作用物質である必要はなく、治療される疾患、障害、または症状に通常関連した症状の幾つかを引き起こす原因である。受容体の異常刺激が、たった１つの要因であり得るか、または少なくとも１つの他の作用物質が、治療される状態に関与し得る。症状の例としては、炎症、胃腸障害、およびアデノシン受容体活性の増加の存在により現れる症状を含む、上記で列挙した疾患状態が挙げられる。好ましい例としては、喘息、アレルギー性鼻炎、慢性閉塞性肺疾患、気腫、気管支炎、胃腸障害、および緑内障に関連した症状が挙げられる。
【００５５】
「異常アデノシン受容体活性を特徴とする症状を治療すること、またはその症状の治療」という用語は、症状に通常関連した少なくとも１つの症状の軽減または減少を包含することを意図する。治療はまた、２つ以上の症状の軽減または減少も包含する。好ましくは、治療は、症状に関連した症状を治癒する（例えば、実質的に排除する）。
【００５６】
本発明は、下記一般式Ｉを有する化合物であるＮ−６置換７−デアザプリンに関する：
【化３０】

（式中、Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であるか、あるいは一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成し、Ｒ_３は、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であり、Ｒ_４は、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、ハロゲン原子（例えば、塩素、フッ素、または臭素）、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であるか、あるいはＲ_４とＲ_５、またはＲ_５とＲ_６は、一緒に置換もしくは非置換の複素環または炭素環を形成する）。Ｎ−６置換７−デアザプリンの薬学的に許容可能な塩も包含される。
【００５７】
ある実施形態では、Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、置換もしくは非置換のシクロアルキルまたはヘテロアリールアルキル部分であり得る。他の実施形態では、Ｒ_３は、水素原子、または置換もしくは非置換のヘテロアリール部分である。さらに別の実施形態では、Ｒ_４、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、ヘテロアリール部分であり得る。
【００５８】
一実施形態では、Ｒ_１は水素原子であり、Ｒ_２は、置換もしくは非置換のシクロヘキサン、シクロペンチル、シクロブチル、またはシクロプロパン部分であり、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニル部分であり、Ｒ_４は水素原子であり、Ｒ_５およびＲ_６はともに、メチル基である。
【００５９】
別の実施形態では、Ｒ_２は、シクロヘキサノール、シクロヘキサンジオール、シクロヘキシルスルホンアミド、シクロヘキサンアミド、シクロヘキシルエステル、シクロヘキセン、シクロペンタノール、またはシクロペンタンジオールであり、Ｒ_３は、フェニル部分である。
【００６０】
さらなる別の実施形態では、Ｒ_１は水素原子であり、Ｒ_２はシクロヘキサノールであり、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニル、ピリジン、フラン、シクロペンタン、またはチオフェン部分であり、Ｒ_４は、水素原子、置換アルキル、アリール、またはアリールアルキル部分であり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分である。
【００６１】
さらに別の実施形態では、Ｒ_１は水素原子であり、Ｒ_２は、置換もしくは非置換のアルキルアミン、アリールアミン、またはアルキルアリールアミン、置換もしくは非置換のアルキルアミド、アリールアミドまたはアルキルアリールアミド、置換もしくは非置換のアルキルスルホンアミド、アリールスルホンアミドまたはアルキルアリールスルホンアミド、置換もしくは非置換のアルキル尿素、アリール尿素またはアルキルアリール尿素、置換もしくは非置換のアルキルカルバメート、アリールカルバメートまたはアルキルアリールカルバメート、置換もしくは非置換のアルキルカルボン酸、アリールカルボン酸またはアルキルアリールカルボン酸であり、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニル部分であり、Ｒ_４は水素であり、Ｒ_５およびＲ_６は、メチル基である。
【００６２】
さらに別の実施形態では、Ｒ_２は、グアニジン、修飾グアニジン、シアノグアニジン、チオ尿素、チオアミド、またはアミジンである。
【００６３】
一実施形態では、Ｒ_２は、下記：
【化３１】

（式中、Ｒ_２ａ〜Ｒ_２ｃは、それぞれ独立して、水素原子、あるいは飽和もしくは不飽和のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であり、Ｒ_２ｄは、水素原子、あるいは飽和もしくは不飽和のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分、ＮＲ_２ｅＲ_２ｆ、あるいはＲ_２ｇ（ここで、Ｒ_２ｅ〜Ｒ_２ｇは、それぞれ独立して、水素原子、あるいは飽和もしくは不飽和のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分である）である）
であり得る。あるいは、Ｒ_２ａおよびＲ_２ｂは、一緒に約３〜６員環サイズを有する炭素環または複素環（例えば、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル基）を形成することができる。
【００６４】
本発明の一態様では、Ｒ_５およびＲ_６がともに、メチルであることはなく、好ましくはＲ_５およびＲ_６のうちの１つがアルキル基、例えばメチル基であり、他方が水素原子である。
【００６５】
本発明の別の態様では、Ｒ_４が１−フェニルエチルであり、Ｒ_１が水素原子である場合には、Ｒ_３は、フェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、３−メトキシフェニル、または４−メトキシフェニルでないか、あるいはＲ_４およびＲ_１が１−フェニルエチルである場合には、Ｒ_３は水素原子でないか、あるいはＲ_４が水素原子であり、Ｒ_３がフェニルである場合には、Ｒ_１はフェニルエチルではない。
【００６６】
本発明の別の態様では、Ｒ_５およびＲ_６が、一緒に炭素環、例えば、次式：
【化３２】

またはピリミド［４，５−６］インドールを形成する場合、Ｒ_４が１−（４−メチルフェニル）エチル、フェニルイソプロピル、フェニル、または１−フェニルエチルである場合にはＲ_３はフェニルでなく、あるいはＲ_４が１−フェニルエチルである場合にはＲ_３は水素原子ではない。Ｒ_５およびＲ_６により形成される炭素環は、芳香族または脂肪族であることができ、また４〜１２個の炭素原子（例えばナフチル、フェニルシクロヘキル等）、好ましくは５〜７個の炭素原子（例えば、シクロペンチルまたはシクロヘキシル）を有することができる。あるいは、Ｒ_５およびＲ_６は一緒になって、以下に開示するもののような複素環を形成することができる。典型的な複素環は、４〜１２個の炭素原子、好ましくは５〜７個の炭素原子を含み、また芳香族であり得るか、または脂肪族であり得る。複素環はさらに、環構造の１以上の炭素原子を、１以上のヘテロ原子で置換することを含む置換をすることができる。
【００６７】
本発明のさらなる別の態様では、Ｒ_１およびＲ_２は、複素環を形成する。代表例としては、モルホリノ、ピペラジン等のような以下に列挙した複素環（例えば、４−ヒドロキシピペリジン、４−アミノピペリジン）が挙げられるが、これらに限定されない。ここではＲ_１およびＲ_２が、一緒に下記ピペラジン基：
【化３３】

（式中、Ｒ_７は、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、アルキルアリール部分であり得る）
を形成する。
【００６８】
本発明のさらに別の態様では、Ｒ_４およびＲ_５は、一緒に複素環、例えば、下記：
【化３４】

を形成することができ、ここで複素環は、芳香族であり得るか、または脂肪族であり得て、また４〜１２個の炭素原子（例えば、ナフチル、フェニルシクロヘキシル等）を有する環を形成することができ、芳香族であり得るか、または脂肪族であり得る（例えば、シクロヘキシル、シクロペンチル）。
【００６９】
複素環はさらに、環構造の炭素原子を、１以上のヘテロ原子で置換することを含む置換をすることができる。あるいは、Ｒ_４およびＲ_５は、一緒に以下に開示するもののような複素環を形成することができる。
【００７０】
ある実施形態では、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、Ｎ−６ベンジル置換も、Ｎ−６フェニルエチル置換もされていない。他の実施形態では、Ｒ_４は、ベンジル置換も、フェニルエチル置換もされていない。好ましい実施形態では、Ｒ_１およびＲ_２はともに、水素原子ではない。さらに他の好ましい実施形態では、Ｒ_３は、水素原子ではない。
【００７１】
本発明の化合物は、１９９８年３月９日に出願され、１９９８年７月８日に公開された国際公開第９９／３３８１５号、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ９８／０４５９５号に記載されている水溶性プロドラッグを包含してもよい。国際公開第９９／３３８１５号の内容全体は、参照により本明細書に明らかに援用される。水溶性プロドラッグは、例えばエステラーゼにより触媒される加水分解によって、活性薬剤に、インビボで代謝される。潜在的プロドラッグの例としては、例えば−ＯＣ（Ｏ）（Ｚ）ＮＨ_２（ここで、Ｚは、天然に存在するか、または天然に存在しないアミノ鎖、またはそれらの類縁体、α、β、γ、またはωアミノ酸、あるいはジペプチドの側鎖である）で置換されたシクロアルキルとしてＲ_２を有するデアザプリンが挙げられる。好ましいアミノ酸側鎖としては、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、リシン、α−メチルアラニン、アミノシクロプロパンカルボン酸、アゼチジン−２−カルボン酸、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、アラニン−アラニン、またはグリシン−アラニンの側鎖が挙げられる。
【００７２】
さらなる実施形態では、本発明は、式Ｉ（式中、Ｒ_１は水素であり、Ｒ_２は、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアルキルであるか、あるいはＲ_１およびＲ_２は、一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成し、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のアリールであり、Ｒ_４は、水素であり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、水素またはアルキルである）を有するデアザプリン、およびそれらの薬学的に許容可能な塩を特徴とする。この実施形態のデアザプリンは潜在的に、選択的Ａ_３受容体アンタゴニストであり得る。
【００７３】
一実施形態では、Ｒ_２は、置換（例えば、ヒドロキシ置換）または非置換シクロアルキルである。好適な実施形態では、Ｒ_２およびＲ_４は、水素であり、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれアルキルである。好ましくは、Ｒ_２は、モノヒドロキシシクロペンチルまたはモノヒドロキシシクロヘキシルである。Ｒ_２はまた、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）Ｅ（ここで、Ｅは、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_４アルキル（例えば、アルキルアミン（例えば、エチルアミン））である）で置換されてもよい。
【００７４】
Ｒ_１およびＲ_２はまた、一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成してもよく、アミンまたはアセトアミド基で置換してもよい。
【００７５】
別の態様では、Ｒ_２は、−Ａ−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｂ（ここで、Ａは、非置換のＣ_１〜Ｃ_４アルキル（例えば、エチル、プロピル、ブチル）であり、Ｂは、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_４アルキル（例えば、メチル、アミノアルキル（例えば、アミノメチルまたはアミノエチル）アルキルアミノ）（例えば、メチルアミノ、エチルアミノ）である）であってもよく、好ましくはＲ_１およびＲ_４が水素である場合、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれアルキルである。Ｂは、置換もしくは非置換のシクロアルキル、例えばシクロプロピルまたは１−アミノ−シクロプロピルであってもよい。
【００７６】
別の実施形態では、好ましくはＲ_５およびＲ_６がそれぞれアルキルである場合、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニルである。好ましくは、Ｒ_３は、１以上の置換基（例えば、ｏ、ｍ、またはｐ−クロロフェニル、ｏ、ｍ、またはｐ−フルオロフェニル）を有してもよい。
【００７７】
好適には、好ましくはＲ_５およびＲ_６がそれぞれアルキルである場合、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のヘテロアリールであってもよい。ヘテロアリール基の例としては、ピリジル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジニル、ピロリル、トリアゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、フラニル、メチレンジオキシフェニル、およびチオフェニルが挙げられる。好ましくは、Ｒ_３は、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、または３−ピリミジルである。
【００７８】
好ましくは、一実施形態では、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ水素である。別の実施形態では、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれメチルである。
【００７９】
特に好ましい実施形態では、本発明のデアザプリンは、例えば、エステラーゼにより触媒される加水分解によって、活性薬剤に、インビボで代謝され得る水溶性プロドラッグである。好ましくは、プロドラッグは、−ＯＣ（Ｏ）（Ｚ）ＮＨ_２（ここで、Ｚは、天然に存在するか、または天然に存在しないアミノ酸、それらの類縁体、α、β、γ、またはωアミノ酸、あるいはジペプチドの側鎖である）で置換されたシクロアルキルであるＲ_２基を含む。好ましいアミノ酸側鎖としては、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、リシン、α−メチルアラニン、アミノシクロプロパンカルボン酸、アゼチジン−２−カルボン酸、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、アラニン−アラニン、またはグリシン−アラニンの側鎖が挙げられる。
【００８０】
特に好ましい実施形態では、Ｚは、グリシンの側鎖であり、Ｒ_２はシクロヘキシルであり、Ｒ_３はフェニルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、メチルである。
【００８１】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（シス−３−ヒドロキシシクロペンチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８２】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（シス−３−（２−アミノアセトキシ）シクロペンチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジントリフルオロ酢酸塩である。
【００８３】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（３−アセトアミド）ピペリジニル−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８４】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（２−Ｎ’−メチル尿素プロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８５】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセトアミドブチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８６】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（２−Ｎ’−メチル尿素ブチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８７】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アミノシクロプロピルアセトアミドエチル）アミノ−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８８】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−２−（３−クロロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８９】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−２−（３−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００９０】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−２−（４−ピリジル）−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００９１】
さらに別の実施形態では、本発明は、細胞を、Ｎ−６置換７−デアザプリン（例えば、好ましくは、アデノシン受容体アンタゴニスト）と接触させることによって、細胞においてアデノシン受容体（例えば、Ａ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_２Ｂ、または好ましくはＡ_３）の活性を阻害する方法を特徴とする。
【００９２】
別の態様では、本発明は、有効な量のＮ−６置換７−デアザプリンを、動物（例えば、ヒト）に投与することによって、動物の眼に対する損傷を治療する方法を特徴とする。好ましくは、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、動物の細胞におけるＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである。損傷は、網膜または視神経乳頭に対するものであり、急性であっても慢性であってもよい。損傷は、例えば、緑内障、水腫、虚血、低酸素症または外傷の結果であり得る。
【００９３】
好ましい実施形態では、本発明は、上記式ＩＩ（式中、Ｘは、ＮまたはＣＲ_６であり、Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルコキシ、アミノアルキル、アルキル、アリール、またはアルキルアリールであるか、あるいは一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成し（但し、Ｒ_１およびＲ_２の両方が、ともに水素であることはない）、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のアルキル、アリールアルキル、またはアリールであり、Ｒ_４は、水素、または置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、Ｌは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであるか、あるいはＲ_４およびＬは、一緒に置換もしくは非置換の複素環または炭素環を形成し、Ｒ_６は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、またはハロゲンであり、Ｑは、ＣＨ_２、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ_７（ここで、Ｒ_７は、水素、または置換もしきは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルである）であり、Ｗは、置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ビアリール、ヘテロアリール、置換カルボニル、置換チオカルボニル、または置換スルホニルであるが、但し、Ｒ_３がピロリジノである場合は、Ｒ_４はメチルではない）を有するデアザプリンを特徴とする。
【００９４】
一実施形態では、式ＩＩの化合物において、Ｘは、ＣＲ_６であり、Ｑは、ＣＨ_２、Ｏ、Ｓ、またはＮＨである。別の実施形態では、ＸはＮである。
【００９５】
式ＩＩの化合物のさらなる実施形態では、Ｗは、置換もしくは非置換のアリール、５または６員環ヘテロアリール、またはビアリールである。Ｗは、１以上の置換基で置換されてもよい。置換基の例としては、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アミノアルキル、アミノカルボキシアミド、ＣＮ、ＣＦ_３、ＣＯ_２Ｒ_８、ＣＯＮＨＲ_８、ＣＯＮＲ_８Ｒ_９、ＳＯＲ_８、ＳＯ_２Ｒ_８、およびＳＯ_２ＮＲ_８Ｒ９（ここで、Ｒ_８およびＲ_９は、それぞれ独立して、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、またはアリールアルキルが挙げられる。好ましくは、Ｗは置換もしくは非置換のフェニル（例えばメチレンジオキシフェニル）であり得る。Ｗはまた、置換もしくは非置換の５員環のヘテロアリール環（例えば、ピロール、ピラゾール、オキサゾール、イミダゾール、トリアゾール、テトゾール、フラン、チオフェン、チアゾール、およびオキサジアゾール）であってもよい。好ましくは、Ｗは、６員環のヘテロアリール環（例えば、ピリジル、ピリミジル、ピリダニジル、ピラジナル、およびチオフェニル）であってもよい。好ましい実施形態では、Ｗは、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、または５−ピリミジル）であってもよい。
【００９６】
式ＩＩの化合物の１つの好適な実施形態では、Ｑは、ＮＨであり、Ｗは、非置換であるか、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、またはアリールアルキルでＮ置換されている３−ピラゾロ環である。
【００９７】
式ＩＩの化合物の別の実施形態では、Ｑは酸素であり、Ｗは、非置換であるか、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、またはアリールアルキルで置換されている２−チアゾロ環である。
【００９８】
式ＩＩの化合物の別の実施形態では、Ｗは、置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル（例えば、シクロペンチル）、またはアリールアルキルである。置換基の例としては、ハロゲン、ヒドロキシ、置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、アリールアルキル、またはＮＨＲ_１０（ここで、Ｒ_１０は、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、またはアリールアルキルである）が挙げられる。
【００９９】
さらに別の実施形態では、本発明は、式ＩＩ（式中、Ｗは、−（ＣＨ_２）_ａ−Ｃ（＝Ｏ）Ｙ、または−（ＣＨ_２）_ｂ−Ｃ（＝Ｓ）Ｙであり、ａは、０〜３の整数であり、Ｙは、アリール、アルキル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、アルキニル、ＮＨＲ_１１Ｒ_１２であるか、あるいはＱがＮＨである場合、ＯＲ_１３である（ここで、Ｒ_１１、Ｒ_１２およびＲ_１３は、それぞれ独立して、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、アリールアルキル、またはシクロアルキルである））を有するデアザプリンを特徴とする。好ましくは、Ｙは、５〜６員環のヘテロアリール環である。
【０１００】
さらに、Ｗは、−（ＣＨ_２）_ｂ−Ｓ（＝Ｏ）_ｊＹ（ここで、ｊは、１またｈ２であり、ｂは、０、１、２、または３であり、Ｙは、アリール、アルキル、アリールアルキル、シクロアルキル、アルキニル、ヘテロアリール、ＮＨＲ_１４Ｒ_１５であるが、但し、ｂが１である場合、ＱはＣＨ_２である（ここで、Ｒ_１４、Ｒ_１５、およびＲ_１６は、それぞれ独立して、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、アリールアルキル、またはシクロアルキルである））であってもよい。
【０１０１】
別の実施形態では、Ｒ_３は、置換および非置換のフェニル、ピリジル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジナル、ピロリル、トリアゾリル、チオアゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、ピラゾリル、フラニル、メチレンジオキシフェニル、およびチオフェニルからなる群から選択される。Ｒ_３がフェニルである場合、Ｒ_３は、例えば、ヒドロキシ、アルコキシ（例えば、メトキシ）、アルキル（例えば、トリル）、およびハロゲン（例えば、ｏ、ｍまたはｐ−フルオロフェニル、あるいはｏ、ｍまたはｐ−クロロフェニル）で置換されてもよい。好適には、Ｒ_３は、２、３または４−ピリジル、あるいは２または３−ピリミジルであってもよい。
【０１０２】
本発明はまた、Ｒ_６が、水素、またはＣ_１〜Ｃ_３アルキルであるデアザプリンに関する。好ましくは、Ｒ_６は水素である。
【０１０３】
本発明はまた、Ｒ_１が水素であり、Ｒ_２が置換もしくは非置換のアルキルまたはアルコキシ、置換もしくは非置換のアルキルアミン、アリールアミン、またはアルキルアリールアミン、置換もしくは非置換のアミノアルキル、アミノアリールまたはアミノアルキルアリール、置換もしくは非置換のアルキルアミド、アリールアミドまたはアルキルアリールアミド、置換もしくは非置換のアルキルスルホンアミド、アリールスルホンアミドまたはアルキルアリールスルホンアミド、置換もしくは非置換のアルキル尿素、アルキル尿素またはアルキルアリール尿素、置換もしくは非置換のアルキルカルバメート、アリールカルバメートまたはアルキルアリールカルバメート、あるいは置換もしくは非置換のアルキルカルボン酸、アリールカルボン酸またはアルキルアリールカルボン酸であるデアザプリンを含む。
【０１０４】
好ましくは、Ｒ_２は、置換もしくは非置換のシクロアルキル、例えばモノもしくはジヒドロキシ置換のシクロヘキシルまたはシクロペンチル（好ましくは、モノヒドロキシ置換シクロヘキシルまたはモノヒドロキシ置換シクロペンチル）である。
【０１０５】
好適には、Ｒ_２は、下記式：
【化３５】

（式中、Ａは、任意にＣ_１〜Ｃ_６アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、チオール、またはアミノ基で置換された、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_３〜Ｃ_７シクロアルキル、１〜７個の原子を有する鎖、あるいは３〜７個の原子を有する環であり、Ｂは、メチル、Ｎ（Ｍｅ）_２、Ｎ（Ｅｔ）_２、ＮＨＭｅ、ＮＨＥｔ、（ＣＨ）_２ｒＮＨ_３＋、ＮＨ（ＣＨ_２）_ｒＣＨ_３、（ＣＨ_２）_ｒＮＨ_２、（ＣＨ_２）_ｒＣＨＣＨ_３ＮＨ_２、（ＣＨ_２）_ｒＮＨＭｅ、（ＣＨ_２）_ｒＯＨ、ＣＨ_２ＣＮ、（ＣＨ_２）_ｍＣＯ_２Ｈ、ＣＨＲ_１８Ｒ_１９、またはＣＨＭｅＯＨ（ここで、ｒは、０〜２の整数であり、ｍは、１または２であり、Ｒ_１８は、アルキルであり、Ｒ_１９は、ＮＨ_３＋またはＣＯ_２Ｈであるか、あるいはＲ_１８およびＲ_１９は、一緒に下記：
【化３６】

（式中、ｐは、２または３である）であり、Ｒ_１７は、任意にＣ_１〜Ｃ_６アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、チオール、またはアミノ基で置換された、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_３〜Ｃ_７シクロアルキル、１〜７個の原子を有する鎖、あるいは３〜７個の原子を有する環である）
を有するものであり得る。
【０１０６】
好適には、Ａは、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルである。Ｂは、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであってもよい。
【０１０７】
好ましい実施形態では、Ｒ_２は、式−Ａ−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｂを有するものである。特に好適な実施形態では、Ａは−ＣＨ_２ＣＨ_２−であり、Ｂはメチルである。
【０１０８】
本発明の化合物は、例えばエステラーゼにより触媒される加水分解によって、活性薬剤に、インビボで代謝される水溶性プロドラッグを包含してもよい。潜在的プロドラッグの例としては、例えば−ＯＣ（Ｏ）（Ｚ）ＮＨ_２（ここで、Ｚは、天然に存在するか、または天然に存在しないアミノ鎖、またはそれらの類縁体、α、β、γ、またはωアミノ酸、あるいはジペプチドの側鎖である）で置換されたシクロアルキルとしてＲ_２を有するデアザプリンが挙げられる。好ましいアミノ酸側鎖としては、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、リシン、α−メチルアラニン、アミノシクロプロパン、カルボン酸、アゼチジン−２−カルボン酸、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、アラニン−アラニン、またはグリシン−アラニンの側鎖が挙げられる。
【０１０９】
別の実施形態では、Ｒ_１およびＲ_２は、一緒に下記：
【化３７】

（式中、ｎは、１または２であり、ここで環は、任意に１以上のヒドロキシル、アミノ、チオール、カルボキシル、ハロゲン、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨ_２ＮＨＣ（＝Ｏ）アルキル、またはＣＨ_２ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨアルキル基で置換されてもよい）である。好ましくは、ｎは、１または２であり、上記環は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）アルキルで置換される。
【０１１０】
１つの好適な実施形態において、Ｒ_１は水素であり、Ｒ_２は、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニルであり、Ｒ_４は水素であり、Ｌは、水素、または置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、Ｑは、Ｏ、ＳまたはＮＲ_７（ここで、Ｒ_７は、水素、または置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルである）であり、Ｗは、置換もしくは非置換のアリールである。好ましくは、Ｒ_２は、−Ａ−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｂ（ここで、ＡおよびＢは、それぞれ独立して、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_４アルキルである）である。例えば、Ａは、ＣＨ_２ＣＨ_２であってもよい。Ｂは、例えば、アルキル（例えば、メチル）、またはアミノアルキル（例えば、アミノメチル）であってもよい。好ましくは、Ｒ_３は、非置換のフェニルであり、Ｌは水素である。Ｒ_６はメチルであってもよく、あるいは好ましくは水素であってもよい。好ましくは、Ｑは、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ_７（ここで、Ｒ_７は、水素、または置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキル、例えばメチルである）である。Ｗは、置換もしくは非置換のフェニル（例えば、アルコキシ置換、ハロゲン置換）である。好ましくは、Ｗは、Ｐ−フルオロフェニル、ｐ−クロロフェニル、またはＰ−メトキシフェニルである。Ｗはまた、ヘテロアリール、例えば２−ピリジルであってもよい。
【０１１１】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−フェノキシメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１２】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（４−フルオロフェノキシ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１３】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（４−クロロフェノキシ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１４】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（４−メトキシフェノキシ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１５】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（２−ピリジルオキシ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１６】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（Ｎ−フェニルアミノ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１７】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１８】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−Ｎ’−メチル尿素エチル）アミノ−６−フェノキシメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１９】
本発明はさらに、細胞を、本発明の化合物と接触させることによって、細胞においてアデノシン受容体（例えば、Ａ_２ｂアデノシン受容体）の活性を阻害する方法に関する。好ましくは、化合物は、受容体のアンタゴニストである。
【０１２０】
本発明はまた、有効な量の本発明の化合物（例えば、Ａ_２ｂのアンタゴニスト）を、動物に投与することによって、動物において胃腸障害（例えば、下痢）を治療する方法に関する。好ましくは、動物は、ヒトである。
【０１２１】
別の実施形態では、本発明は、本発明のＮ−６置換７−デアザプリン、および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物に関する。
【０１２２】
本発明はまた、動物におけるＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態の治療が行われるように、治療上有効な量の本発明のデアザプリンを哺乳類に投与することによって、動物において、Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態を治療する方法に関する。好適には、疾患状態は、アデノシンにより媒介される障害であり得る。好ましい疾患状態の例としては、中枢神経系障害、心血管障害、腎障害、炎症性障害、アレルギー性障害、胃腸障害、眼の障害、および呼吸器障害が挙げられる。
【０１２３】
「アルキル」という用語は、直鎖アルキル基、分岐鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基、およびシクロアルキル置換アルキル基を含む飽和脂肪族基の基を指す。アルキルという用語はさらに、炭化水素骨格の１以上の炭素を置換する酸素、窒素、硫黄またはリン原子（例えば酸素、窒素、硫黄またはリン原子）をさらに包含することができるアルキル基を包含する。好ましい実施形態では、直鎖または分岐鎖アルキルは、その骨格中に３０個以下（例えば、直鎖に関してはＣ_１〜Ｃ_３０、分岐鎖に関してはＣ_３〜Ｃ_３０）、より好ましくは２０個以下の炭素原子を有する。同様に、好ましいシクロアルキルは、その環構造中に４〜１０個の炭素原子を有し、より好ましくは、環構造中に５個、６個または７個の炭素を有する。
【０１２４】
さらに、明細書および特許請求の範囲全体にわたって使用される場合アルキルという用語は、「非置換アルキル」および「置換アルキル」の両方を包含することを意図し、その後者は、炭化水素骨格の１以上の炭素上の水素を置換する置換基を有するアルキル部分を指す。かかる置換基としては、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナート、ホスフィナート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、およびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル、およびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分を挙げることができる。炭化水素鎖上で置換された部分は、適切な場合にはそれ自体置換することができることが当業者に理解されよう。シクロアルキル基は、例えば上述の置換基でさらに置換することができる。「アルキルアリール」部分は、アリールで置換されたアルキル（例えば、フェニルメチル（ベンジル））である。「アルキル」という用語はまた、上述のアルキルに対して、長さおよび考え得る置換が類似しているが、それぞれ少なくとも１つの二重結合または三重結合を含有する不飽和脂肪族基を包含する。
【０１２５】
本明細書中で使用する場合「アリール」という用語は、０個〜４個のヘテロ原子を含んでもよい５および６員環の単環芳香族基、例えば、ベンゼン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジンおよびピリミジン等を含むアリール基の基を指す。アリール基はまた、ナフチル、キノリル、インドリル等のような多環式融合芳香族基を包含する。環構造中にヘテロ原子を有するアリール基はまた、「アリールへテロ環」、「ヘテロアリール」、または「ヘテロ芳香族」とも称され得る。芳香環は、上述のような、例えばハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、ホスフェート、ホスホナート、ホスフィナート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、およびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル、およびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分のような置換基で、１以上の環の位置で置換することができる。アリール基はまた、多環（例えば、テトラリン）を形成するように芳香族でない脂環式もしくは複素環式の環と融合または架橋することができる。
【０１２６】
「アルケニル」および「アルキニル」という用語は、上述のアルキルに対して、長さおよび考え得る置換が類似しているが、それぞれ少なくとも１つの二重結合および三重結合を含有する不飽和脂肪族基を指す。例えば、本発明は、シアノおよびプロパルギル基を意図する。
【０１２７】
炭素数について別記しない限り、本明細書中で使用する場合「低級アルキル」は、上記に定義されるが、１〜１０個の炭素、より好ましくはその骨格構造中に１〜６個の炭素原子、さらに好ましくはその骨格構造中に１〜３個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。同様に、「低級アルケニル」および「低級アルキニル」は、同様の炭素鎖を有する。
【０１２８】
「アルコキシアルキル」、「ポリアミノアルキル」、および「チオアルコキシアルキル」という用語は、炭化水素骨格の１以上の炭素を置換する酸素、窒素、または硫黄原子（例えば、酸素、窒素、または硫黄原子）をさらに含む上述のアルキル基を指す。
【０１２９】
「ポリシクリル」または「多環式基」という用語は、２つ以上の炭素が２つの隣接する環に共通している２つ以上の環（例えば、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、および／またはヘテロアリール）を有する基を指し、例えば環は、「融合環」である。隣接しない原子を介して結合する環を、「架橋環」と呼ぶ。多環の環のそれぞれは、上述のような、例えばハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナート、ホスフィナート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、およびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル、およびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分のような置換基で置換することができる。
【０１３０】
本明細書中で使用する場合「ヘテロ原子」という用語は、炭素または水素以外の任意の元素の原子を意味する。好ましいヘテロ原子は、窒素、酸素、硫黄、およびリンである。
【０１３１】
「アミノ酸」という用語は、グリシン、アラニン、バリン、システイン、ロイシン、イソロイシン、セリン、スレオニン、メチオニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、グルタミン、アスパラギン、リシン、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンのような、タンパク質中に見出される天然に存在するアミノ酸および天然に存在しないアミノ酸を包含する。アミノ酸類縁体は、長くした側鎖または短くした側鎖、あるいは適切な官能基を有する変異側鎖を有するアミノ酸を包含する。アミノ酸はまた、アミノ酸の構造が立体異性体型を許容する場合、アミノ酸のＤおよびＬ立体異性体を包含する。「ジペプチド」という用語は、一緒に連結された２つ以上のアミノ酸を包含する。好ましくは、ジペプチドは、ペプチド結合により連結された２つのアミノ酸である。特に好ましいジペプチドとしては、例えばアラニン−アラニン、およびグリシン−アラニンが挙げられる。
【０１３２】
本発明の化合物の幾つかの構造は、不斉炭素を包含し、したがって、ラセミ化合物およびラセミ混合物、単一エナンチオマー、ジアステレオマー混合物、および個々のジアステレオマーとして見出されることに留意されたい。これらの化合物のかかる異性体型すべてが、本発明に明らかに包含される。各不斉炭素は、Ｒ配置またはＳ配置であってもよい。したがって、かかる不斉から生じる異性体（例えば、すべてのエナンチオマーおよびジアステレオマー）は、別記しない限り、本発明の範囲内に包含されることが理解されよう。かかる異性体は、古典的な分離技法によって、また立体化学的制御合成によって、実質的に純粋な形態で得ることができる。
【０１３３】
本発明はさらに、哺乳動物においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態、例えば呼吸器障害（例えば、喘息、気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、およびアレルギー性鼻炎）、腎障害、胃腸障害、および眼の障害を治療するための薬学的組成物に関する。薬学的組成物は、治療上有効な量の上述のＮ−６置換７−デアザプリン、および薬学的に許容可能なキャリアを包含する。上述のデアザプリンのすべてが、治療上の処置のために包含されることが理解されよう。本発明のデアザプリンは、単独で、あるいは本発明の他のデアザプリンと併用して、または例えば抗生物質、抗炎症剤、もしくは抗癌剤のようなさらなる治療用化合物と併用して使用することができることがさらに理解されよう。
【０１３４】
「抗生物質」という用語は、当該技術分野で認識されており、微生物を成長させることにより生産される物質、およびそれらの合成誘導体を包含することを意図し、それらは、病原体の成長を排除または阻害し、感染した宿主患者に対して最低限の有害な影響をもたらすか、または有害な影響をまったくもたらさずに、病原体に対して選択的に毒性を有する。抗生物質の適切な例としては、アミノグリコシド、セファロスポリン、クロラムフェニコール、フシジン酸、マクロライド、ペニシリン、ポリミキシン、テトラサイクリン、およびストレプトマイシンの基本的種類が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３５】
「抗炎症剤」という用語は、当該技術分野で認識されており、グルココルチコイド、アスピリン、イブプロフェン、ＮＳＡＩＤＳ等のような、炎症の原因作用物質を直接拮抗することなく、身体メカニズムに作用する作用物質を包含することを意図する。
【０１３６】
「抗癌剤」という用語は、当該技術分野で認識されており、好ましくは他の生理学的機能に悪影響を及ぼさずに、癌細胞の成長を減少、根絶または防止する作用物質を包含することを意図する。
【０１３７】
本発明の化合物が医薬品として、ヒトおよび哺乳類に投与される場合、本発明の化合物は、それ自体で、あるいは薬学的に許容可能なキャリアと組み合わせて例えば０．１〜９９．５％（より好ましくは０．５〜９０％）の有効成分を含有する薬学的組成物として付与され得る。
【０１３８】
本明細書中で使用する場合「薬学的に許容可能なキャリア」という語句は、本発明の化合物がその対象とされる機能を実施することができるように、患者内のまたは患者への本発明の化合物（複数可）の運搬または輸送に関与した、液体もしくは固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒またはカプセル化用物質のような薬学的に許容可能な物質、組成物あるいはベシクルを意味する。通常、かかる化合物は、１つの器官、または身体の一部から、別の器官、または身体の一部へ運搬あるいは輸送される。各キャリアは、配合剤の他の成分と相溶性であり、患者に有害でないという意味で「許容可能」でなくてはならない。薬学的に許容可能なキャリアとして作用することができる物質の幾つかの例としては、糖（例えば、ラクトース、グルコースおよびスクロース）、デンプン（例えば、コーンスターチおよびポテトスターチ）、セルロースおよびその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、および酢酸セルロース）、粉末トラガカント、麦芽、ゼラチン、タルク、賦形剤（例えば、ココアバターおよび座薬用ワックス）、油（落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、および大豆油）、グリコール（例えば、プロピレングリコール）、ポリオール（例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール）、エステル（例えば、オレイン酸エチル、およびラウリル酸エチル）、寒天、緩衝剤（例えば、水酸化マグネシウム、および水酸化アルミニウム）、アルギニン酸、発熱物質を含まない水、等張生理食塩水、リンゲル溶液、エチルアルコール、リン酸緩衝溶液、および薬学的配合剤で使用される他の無毒性の相溶性物質が挙げられる。
【０１３９】
上述のように、本発明の化合物のある実施形態は、アミノまたはアルキルアミノのような塩基性官能基を含有することができ、したがって薬学的に許容可能な酸と、薬学的に許容可能な塩を形成することが可能である。この観点での「薬学的に許容可能な塩」という用語は、本発明の化合物の比較的無毒性の無機および有機酸付加塩を指す。これらの塩は、本発明の化合物の最終単離および生成中にその場で、あるいは適切な有機または無機酸と、遊離塩基形態の本発明の生成化合物を別個に反応させて、このようにして形成された塩を単離することによって調製することができる。代表的な塩としては、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、ホスホン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリル酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メチル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、およびラウリルスルホン酸塩等が挙げられる（例えば、Berge et al. (1997) 「薬学的塩(Pharmaceutical Salts)」, J. Pharm. Sci. 66:1-19を参照）。
【０１４０】
他の場合では、本発明の化合物は、１つまたはそれ以上の酸性官能基を含有してもよく、したがって、薬学的に許容可能な塩基と、薬学的に許容可能な塩を形成することが可能である。これらの場合での「薬学的に許容可能な塩」という用語は、本発明の化合物の比較的無毒性の無機および有機塩基付加塩を指す。これらの塩は同様に、本発明の化合物の最終単離および精製中にその場で、あるいは適切な塩基（例えば、薬学的に許容可能な金属陽イオンの水酸化物、炭酸塩、または炭酸水素塩）、アンモニア、または薬学的に許容可能な有機第一アミン、第二アミンまたは第三アミンと、遊離酸形態の本発明の精製化合物を別個に反応させることによって調製することができる。代表的なアルカリ塩またはアルカリ土類塩としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、およびアルミニウム塩等が挙げられる。塩基付加塩の形成に有用な代表的な有機アミンとしては、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン等が挙げられる。
【０１４１】
「薬学的に許容可能なエステル」という用語は、本発明の化合物の比較的無毒性のエステル化生成物を指す。これらのエステルは、本発明の化合物の最終単離および生成中にその場で、あるいは適切なエステル化剤と、遊離塩基形態の本発明の生成化合物またはヒドロキシルを別個に反応させることによって調製することができる。カルボン酸は、触媒の存在下でのアルコールを用いた処理によりエステルに変換することができる。ヒドロキシル含有誘導体は、ハロゲン化アルキノイルのようなエステル化剤を用いた処理によりエステルに変換することができる。この用語はさらに、生理学的条件下で溶媒和することが可能な低級炭化水素基、例えばアルキルエステル（メチルエステル、エチルエステルおよびプロピルエステル）を包含することを意図する（例えば、上述のBerge等を参照）。
【０１４２】
本発明はさらに、本発明の治療用化合物に、インビボで変換されるプロドラッグの使用を意図する（例えば、R.B. Silverman, 1992, 「薬剤設計および薬剤作用の有機化学(The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action)」, Academic Press, Chapter 8を参照）。かかるプロドラッグは、治療用化合物の生体分布（例えば、通常プロテアーゼの反応性部位に侵入しない化合物を許可するために）または薬物動態を変更するのに使用することができる。例えば、カルボン酸基を、例えばメチル基またはエステル基でエステル化して、エステルを得ることができる。エステルを患者に投与すると、エステルは酵素的または非酵素的に、還元的にあるいは加水分解的に切断されて、陰イオン基を出現させる。陰イオン性基は、切断されて中間体化合物を出現させ、続いて分解して活性化合物を生じる部分（例えば、アシルオキシメチルエステル）でエステル化することができる。別の実施形態では、プロドラッグは、硫酸塩またはスルホン酸塩の還元型（例えば、チオール）であり、インビボで治療用化合物へと酸化される。さらに、陰イオン部分は、インビボで活発に輸送されるか、あるいは標的器官で選択的に取り込まれる基へとエステル化することができる。エステルは、キャリア部分に関して以下に記載するように、特定の反応性部位へと治療部分を特異的にターゲッティングすることを可能とするように選択することができる。
【０１４３】
湿潤剤、乳化剤、および潤滑剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム）、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、風味剤、および香料剤、防腐剤、および酸化防止剤もまた、組成物中に存在することができる。
【０１４４】
薬学的に許容可能な酸化防止剤の例としては、アスコルビン酸、塩酸システイン、硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムのような水溶性酸化防止剤、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロール等のような油溶性酸化防止剤、およびクエン酸、エチレンシアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、ホスホン酸等のような金属キレート剤が挙げられる。
【０１４５】
本発明の配合剤としては、経口、鼻、局所、経皮、口腔、舌下、直腸、膣および／または非経口投与に適したものが挙げられる。配合剤は、単位投薬形態で利便性よく付与されてもよく、また薬学の技術分野で既知の任意の方法により調製されてもよい。単回投薬形態をもたらすためにキャリア物質と組み合わせることができる有効成分の量は一般に、治療効果をもたらす化合物の量である。概して、１００％のうち、この量は、約１％〜約９９％、好ましくは約５％〜約７０％、最も好ましくは約１０％〜約３０％の有効成分の範囲である。
【０１４６】
これらの化合物または組成物を調製する方法は、本発明の化合物を、キャリア、および任意に１以上の付加的成分と会合させる工程を包含する。一般に、配合剤は、本発明の化合物を、液体キャリアまたは微細固体キャリア、あるいはその両方と一様かつ緊密に会合させ、続いて必要であれば生成物を造形することで調製される。
【０１４７】
経口投与に適した本発明の配合剤は、それぞれ有効成分として既定量の本発明の化合物を含有する、カプセル、サシェット、丸剤、錠剤、ロゼンジ（風味付き基剤、通常スクロースおよびアラビアゴムまたはトラガカントゴムを用いて）、粉末、顆粒の形態で、あるいは水性もしくは非水性液体中の溶液または懸濁液として、あるいは水中油型もしくは油中水型液体エマルジョンとして、あるいはエリキシルまたはシロップとして、あるいは香錠（ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアラビアゴムのような不活性基剤を用いて）および／または洗口剤等として存在し得る。本発明の化合物はまた、ボーラス、舐剤またはペーストとして投与されてもよい。
【０１４８】
経口投与用の本発明の固体投薬形態（カプセル、錠剤、丸剤、糖衣錠、粉末、顆粒等）では、有効成分は、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム、および／または以下の：充填剤または増量剤（例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／またはケイ酸）、結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアラビアゴム）、保湿剤（例えば、グリセロール）、崩壊剤（例えば、寒天−寒天、カルボン酸カルシウム、ポテトスターチまたはタピオカスターチ、アルギン酸、特定のケイ酸塩、およびカルボン酸ナトリウム）、溶液凝結遅延剤（例えば、パラフィン）、吸収促進剤（例えば、第四アンモニウム化合物）、湿潤剤（例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール）、吸収剤（例えば、カオリンおよびベントナイトクレー）、潤滑剤（例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびそれらの混合物）、および着色剤のような１以上の薬学的に許容可能なキャリアと混合される。カプセル、錠剤および丸剤の場合では、薬学的組成物はまた、緩衝剤を含んでもよい。同様のタイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖のような賦形剤、ならびに高分子量ポリエチレングリコール等を用いた軟質および硬質充填ゼラチンカプセルにおける充填剤として使用され得る。
【０１４９】
錠剤は、任意に１以上の付加的成分とともに、圧縮または成形により作製され得る。圧縮錠剤は、結合剤（例えば、ゼラチン、またはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、潤滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば、スターチグリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシセルロースナトリウム）、界面活性剤または分散剤を用いて調製され得る。成形された錠剤は、適切な機械装置で、湿潤した粉末化合物と不活性希釈液との混合物を成形することで作製され得る。
【０１５０】
錠剤、ならびに糖衣錠、カプセル、丸剤および顆粒のような本発明の薬学的組成物の他の固体投薬形態は、任意に、薬学的配合の技術分野で既知の腸溶性コーティングおよび他のコーティングのようなコーティングおよび外皮を用いて分割（scored）または調製され得る。それらはまた、例えば所望の放出プロフィールを提供するように様々な比率のヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソーム、および／またはミクロスフェアを用いて、その中の有効成分の徐放または制御放出を提供するように配合されてもよい。それらは、例えば細菌保持フィルタによるろ過により、あるいは使用直前に滅菌水または幾つか他の滅菌注射用媒質中に溶解することができる滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことにより殺菌してもよい。これらの組成物はまた、任意に乳白剤を含有してもよく、それらが有効成分（複数）のみ、あるいは有効成分（複数）を優先的に、胃腸管の特定部分で、任意に遅延様式で放出する組成物であってもよい。使用することができる包埋組成物の例としては、高分子物質およびワックスが挙げられる。有効成分はまた、適切な場合、１以上の上述の賦形剤とのマイクロカプセル化形態であってもよい。
【０１５１】
本発明の化合物の経口投与用の液体投薬形態としては、薬学的に許容可能なエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップ、および賦形剤が挙げられる。有効成分のほかに、液体投薬形態は、例えば、水または他の溶媒のような当該技術分野で一般に知られる不活性希釈剤、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に、綿実油、ピーナツ油、コーン油、胚種油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物のような可溶化剤および乳化剤を含有してもよい。
【０１５２】
不活性希釈剤のほかに、経口組成物はまた、湿潤剤、乳化剤および沈殿防止剤、甘味剤、風味剤、着色剤、香料剤、および防腐剤のような補助剤を含むことができる。
【０１５３】
活性化合物のほかに、懸濁液は、例えばエトキシ化イソステアリールアルコール、ポリエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天−寒天およびトラガカント、ならびにそれらの混合物のような沈殿防止剤を含有してもよい。
【０１５４】
直腸または膣投与用の本発明の薬学的組成物の配合剤は、座薬として提供されてもよく、それは１以上の本発明の化合物を、１以上の、例えばココアバター、ポリエチレングリコール、座薬用ワックスまたはサリチレートを包含し、室温で固体であるが、身体温度で液体であり、したがって直腸また膣腔で溶融し、活性化合物を放出する適切な非刺激性賦形剤あるいはキャリアと混合することにより調製されてもよい。
【０１５５】
膣投与に適した本発明の配合剤はまた、適切な技術分野で既知でのあるようなキャリアを含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ジェル、ペースト、泡またはスプレー配合剤を包含する。
【０１５６】
本発明の化合物の局所または経皮投与用の投薬形態としては、粉末、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ジェル、溶液、パッチ、および吸入剤が挙げられる。活性化合物は、薬学的に許容可能なキャリア、および必要とされ得る防腐剤、緩衝液、または噴射剤と、滅菌条件下で混合され得る。
【０１５７】
軟膏、ペースト、クリーム、およびジェルは、本発明の活性化合物のほかに、動物性および植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルク、および酸化亜鉛、またはそれらの混合物のような賦形剤を含有してもよい。
【０１５８】
粉末およびスプレーは、本発明の化合物のほかに、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、およびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物のような賦形剤を含有することができる。スプレーはさらに、クロロフルオロ炭化水素、および揮発性非置換炭化水素（例えば、ブタンおよびプロパン）のような慣例の噴射剤を含有することができる。
【０１５９】
経皮パッチは，本発明の化合物の身体への制御送達を提供する付加利益を有する。かかる投薬形態は、適正な媒質に化合物を溶解または分散させることで作製することができる。吸収増強剤はまた、皮膚を通過する化合物の流動を増加させるのに使用することができる。かかる流動の速度は、速度制御膜を提供するか、あるいはポリマーマトリックスまたはジェルに活性化合物を分散させることにより制御することができる。
【０１６０】
眼科用配合剤、眼の軟膏、粉末、溶液等はまた、本発明の範囲内であると意図される。好ましくは、薬学的調製物は、眼科用配合剤（例えば、眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤、全身性配合剤、または手術用灌注溶液）である。
【０１６１】
本発明の眼科用配合剤は、１以上のデアザプリン、および薬学的に許容可能なビヒクルを包含してもよい。様々なタイプのビヒクルを使用してもよい。ビヒクルは一般に、本質的に水性である。配合剤、ならびに冒された眼中に１〜２滴の溶液垂らすことによりかかる化合物を容易に投与する患者の能力の事情に基づいて、水溶液が一般に好ましい。しかしながら、本発明のデアザプリンはまた、懸濁液、粘性もしくは半粘性ジェルまたは他のタイプの固体もしくは半固体組成物のような他のタイプの組成物に容易に組み込まれてもよい。本発明の眼科用組成物はまた、緩衝液、防腐剤、補助溶媒および粘度上昇剤のような様々な他の成分を含んでもよい。
【０１６２】
適切な緩衝剤系（例えば、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、またはホウ酸ナトリウム）を添加して、貯蔵条件下でのｐＨドリフトを防いてもよい。
【０１６３】
眼科用製品は通常、多用量形態で包装される。したがって、防腐剤は、使用中の微生物混入を防ぐのに必要とされる。適切な防腐剤としては、塩化ベンザルコニウム、チメロサール、クロロブタノール、メチルパラベン、プロピルパラベン、フェニルエチルアルコール、エデト酸ナトリウム、ソルビン酸、ポリクオタニウム−１、または当業者に既知の他の作用物質が挙げられる。かかる防腐剤は通常、０．００１〜１．０％重量／容量（「％ｗ／ｖ」）のレベルで使用される。
【０１６４】
本発明のデアザプリンが、例えば眼球後または眼周囲注射および眼内灌流または注射により、眼内手術処置中に投与される場合、ベシクルとして平衡塩灌注溶液の使用が最も好ましい。ＢＢＳ（登録商標）滅菌灌注溶液およびＢＳＳ Ｐｌｕｓ（登録商標）滅菌眼内灌注溶液(Alcon Laboratories, Inc., Fort Worth, Texas, USA)が、生理学的平衡眼内灌注溶液の例である。後者のタイプの溶液は、米国特許第４，５５０，０２２号(Garabedian等）（この内容全体が、参照により本明細書中に援用される）に記載されている。眼球後および眼周囲注射は、当業者に既知であり、例えばOphthalmic Surgery: Principles of Practice, Ed., G.L. Spaeth. W.B. Sanders Co., Philadelphia, Pa., U.S.A., pages 85-87 (1990)を含む数多くの刊行物に記載されている。
【０１６５】
上述のように、細胞レベルで網膜および視神経乳頭組織に対する損傷を防止または低減するためのデアザプリンの使用は、本発明の実施形態の特に重要な態様である。治療され得る眼科的症状としては、網膜症、黄斑変性、眼の虚血、緑内障、ならびに虚血再灌流障害、光化学的障害、および眼の手術に関連した障害のような眼の組織に対する障害、特に光または手術機器への暴露による網膜あるいは視神経乳頭に対する障害に関連した損傷が挙げられるが、これらに限定されない。化合物はまた、例えば眼の手術後の硝子体(vitreal)または結膜下注射のような眼科手術に対する付加物として使用してもよい。化合物は、一時的な症状の急性処置に使用してよく、あるいは特に変性疾患の場合に慢性的に投与してもよい。化合物はまた、特に眼の手術または非侵襲的眼科的処置、あるいは他のタイプの手術前に、予防的に使用してもよい。
【０１６６】
非経口投与に適した本発明の薬学的組成物は、１以上の薬学的に許容可能な滅菌等張水溶液または非水性溶液、分散液、懸濁液またはエマルジョン、あるいは使用直前に滅菌注射用溶液または分散液に再構成され得る滅菌粉末と併用して、１以上の本発明の化合物を含み、酸化防止剤、緩衝液、静菌薬、配合剤を、対象とするレシピエントの血液と等張にする溶質、または沈殿防止剤もしくは増粘剤を含有してもよい。
【０１６７】
本発明の薬学的組成物で使用され得る適切な水性および非水性キャリアの例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）およびそれらの適切な混合物、植物油（例えば、オリーブ油）、および注射用有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）が挙げられる。適正な流動性は、例えばレシチンのようなコーティング物質を使用することにより、分散液の場合には必要とされる粒径の維持により、また界面活性剤の使用により維持することができる。
【０１６８】
これらの組成物はまた、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤のような補助剤を含有してもよい。微生物の作用の防止は、様々な抗細菌剤および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等の含入により保証され得る。糖、塩化ナトリウム糖のような等張剤を組成物に包含することもまた望ましい場合がある。さらに、注射用薬学的形態の長期吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンのような吸収を遅延させる作用物質の含入により成し遂げられ得る。
【０１６９】
場合によっては、薬剤の影響を延長するために、皮下または皮内注射からの薬剤の吸収を遅らせることが望ましい。これは、水溶性が乏しい結晶性または非晶質物質の液体懸濁液の使用により達成され得る。また薬剤の吸収速度は、その溶解速度に依存し、順に溶解速度は、結晶サイズおよび結晶性形態に依存し得る。あるいは、非経口投与薬剤形態の遅延吸収は、油ベシクル中に薬剤を溶解または懸濁することにより達成される。
【０１７０】
注射用デポ剤形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドのような生分解性ポリマー中に対象化合物のマイクロカプセルマトリックスを形成することで作製される。薬剤対ポリマーの比、および使用する特定のポリマーの性質に依存して、薬剤放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポ注射用配合剤はまた、身体組織に相溶性のリポソームまたはマイクロカプセル中に薬剤を捕捉することで調製される。
【０１７１】
本発明の調製物は、経口的、非経口的、局所的、または直腸的に付与され得る。それらは、当然ながら各経口経路に適した形態で付与される。例えば、それらは、注射、吸入、眼用ローション、軟膏、座薬等（注射、注入または吸収による投与）により錠剤もしくはカプセルの形態で、ローションまたは軟膏により局所的に、また座薬により直腸的に投与される。経口投与が好ましい。
【０１７２】
本明細書中に使用される場合「非経口投与」および「非経口的に投与される」という語句は、通常注射による、経腸および局所投与以外の投与様式を意味し、静脈内、筋内、動脈内、髄腔内、包内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経器官、皮下、表皮下、関節内、被膜下、クモ膜下、脊椎内、および胸骨内注射および注入が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７３】
本明細書中で使用される場合「全身性投与」、「全身投与される」、「末梢性投与」および「末梢投与される」という語句は、化合物、薬剤または他の材料を、それらが患者の系統に入るように、したがって代謝および他の同様のプロセスを施されるように、直接中枢神経系への投与以外の化合物の投与（例えば、皮下投与）を意味する。
【０１７４】
これらの化合物は任意の適切な投与経路により（経口的、鼻的（例えばスプレーによるような）、直腸的、鞘膜内、非経口的、槽内および局所的（粉末、軟膏またはドロップ（口腔的および舌下的を含む）によるような）を含む）、治療法のためにヒトおよび他の動物に投与され得る。
【０１７５】
選択した投与経路に関係なく、適切な水和形態、および／または本発明の薬学的組成物で使用され得る本発明の化合物は、当業者に既知の従来法により、薬学的に許容可能な投薬形態に配合される。
【０１７６】
本発明の薬学的組成物中の有効成分の実際の投薬レベルは、患者に対して有毒でなく、特定の患者、組成物、および投与様式に関して所望の治療的応答を達成するのに有効な有効成分の量を獲得するように変化させてもよい。
【０１７７】
選択投薬レベルは、使用する本発明の特定の化合物、またはそれらのエステル、塩もしきはアミドの活性、投与経路、投与時間、使用される特定の化合物の排出速度、治療期間、使用する特定の化合物と併用される他の薬剤、化合物および／または物質、年齢、性別、体重、症状、治療中の患者の全般的健康状態およびこれまでの医療歴、および医療技術分野で既知の同様の要因を含む様々な要因に依存する。
【０１７８】
当業者を含む医師および獣医は、必要とされる薬学的組成物の有効量を容易に決定および処方することができる。例えば、医師または獣医は、所望の治療効果を達成するために必要とされるレベル未満のレベルで薬学的組成物中で使用される本発明の化合物の用量を開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加することができる。
【０１７９】
一般に、本発明の化合物の適切な日用量は、治療効果をもたらすのに有効な最低用量である化合物の量である。かかる有効な用量は概して、上述の要因に依存する。一般に、患者に関する本発明の化合物の静脈内および皮下用量は、示した鎮痛効果用に使用される場合、１日当たり体重１ｋｇにつき約０．０００１〜約２００ｍｇ、より好ましくは１日当たり体重１ｋｇにつき約０．０１〜約１５０ｍｇ、さらに好ましくは１日当たり体重１ｋｇにつき約０．２〜約１４０ｍｇ、の範囲である。
【０１８０】
望ましい場合、活性化合物の有効な日用量は、任意に単位投薬形態で、その日全体にわたって適切な間隔で別個に投与される２回、３回、４回、５回、６回またはそれ以上の分割用量(sub-dose)として投与される。
【０１８１】
本発明の化合物を単独で投与することが可能である一方で、薬学的組成物として化合物を投与することが望ましい。
【０１８２】
本発明はまた、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態、例えばアデノシン受容体活性の望ましくない増加を治療するための包装された薬学的組成物に関連する。包装された薬学的組成物は、治療上有効な量の上述の少なくとも１つのデアザプリンを保持する容器と、哺乳類においてデアザプリン応答性状態を治療するためのデアザプリンの使用説明書とを含む。
【０１８３】
本発明のデアザプリンは、有機合成に関する標準的な方法を用いて調製することができる。デアザプリンは、逆相ＨＰＬＣ、クロマトグラフィ、再結晶等により精製することができ、それらの構造は、マススペクトル分析、元素分析、ＩＲおよび／またはＮＭＲ分光法により確認することができる。
【０１８４】
通常、本発明の中間体およびデアザプリンの合成は、溶液中で実施される。１以上の保護基の付加および除去もまた、典型的な実践であり、当業者に既知である。本発明のデアザプリン中間体の調製に関する典型的な合成スキームを以下のスキームＩに概略する。
【０１８５】
本発明はさらに、下記構造（ＩＶ）を有する化合物、あるいは薬学的に許容可能な塩、またはプロドラッグ誘導体、または生物学的に活性な代謝産物を提供する：
【化３８】

（式中、
Ｒ_１は、トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル、２−メチルアミノカルボニルアミノシクロヘキシル、アセチルアミノエチル、またはメチルアミノカルボニルアミノエチルであり、
Ａｒは、置換もしくは非置換の４〜６員環、フェニル、ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、１，２，４−トリアゾール、ピリジン、２（１Ｈ）−ピロリドン、４（１Ｈ）−ピロリドン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、イソチアゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、テトラゾール、ナフタレン、テトラリン、ナフチリジン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドール、２，３−ジヒドロインドール、１Ｈ−インドール、インドリン、ベンゾピラゾール、１，３−ベンゾジオキオール、ベンゾオキソール、プリン、クマリン、クロモン、キノリン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、ベンズイミダゾール、キナゾリン、ピリド［２，３−ｂ］ピラジン、ピリド［３，４−ｂ］ピラジン、ピリド［３，２−ｃ］ピリダジン、ピリド［３，４−ｂ］ピリジン、１Ｈ−ピラゾール［３，４−ｄ］ピリミジン、プテリジン、２（１Ｈ）−キノロン、１（２Ｈ）−イソキノロン、１，４−ベンズイソオキサジン、ベンゾチアゾール、キノキサリン、キノリン−Ｎ−オキシド、イソキノリン−Ｎ−オキシド、キノオキサリン−Ｎ−オキシド、キナゾリン−Ｎ−オキシド、ベンズオキサジン、フタラジン、シンノリンであるか、または下記構造：
【化３９】

式中、
Ｙは、炭素または窒素であり、
Ｒ_２およびＲ_２’は、独立して、Ｈ、置換もしくは非置換のアルキル、置換
もしくは非置換のアリール、ハロゲン、メトキシ、メチルアミノ、またはメチルチオである）
を有するものであり、
Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_７）（Ｒ_８）ＸＲ_５（ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ_６であり、Ｒ_７およびＲ_８は、それぞれ独立して、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＮＲ_５Ｒ_６は、一緒に置換もしくは非置換の４〜７員環である）であり、
Ｒ_４は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキルである）
が、但し、Ｒ_３がアセチルアミノエチルである場合は、Ａｒは、４−ピリジルではない。
【０１８６】
構造ＩＶを有する化合物の一実施形態では、ＮＲ_５Ｒ_６は、下記：
【化４０】

【化４１】

（式中、ｍは、０、１、または２である）、
【化４２】

（式中、ｎは、０、１、２、または３であり、Ｒ_８は、水素、−ＯＨ、−ＣＨ_２ＯＨ、−Ｃ（＝）ＮＲ_９Ｒ_１０、ＮＨＲ_１１（ここで、Ｒ_１１は、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ_３、または−ＳＯ_２Ｍｅである）である）、または
【化４３】

（式中、Ｒは、Ｈ、アルキル、またはアリールである）
からなる群から選択される置換もしくは非置換の４〜７員環である。
【０１８７】
式ＩＶを有する化合物の別の実施形態でにおいて、Ａｒは、下記構造を有する：
【化４４】

（式中、Ｙは、炭素または窒素であり、Ｒ_２はＨ、またはハロゲン、−Ｏ−アルキル基、アミン基、またはスルフィド基であり、
Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_７）（Ｒ_８）ＮＲ_５Ｒ_６（ここで、Ｒ_７およびＲ_８は、それぞれ独立して、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＲ_５、Ｒ_６および窒素は、一緒に置換もしくは非置換の４〜７員環を形成する）である）。
【０１８８】
化合物の別の実施形態では、Ｙは炭素である。
【０１８９】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_２は水素である。
【０１９０】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_４は水素である。
【０１９１】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_３は水素である。
【０１９２】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_３およびＲ_４は、それぞれメチルである。
【０１９３】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_３は、−Ｃ（Ｒ_７）（Ｒ_８）ＮＲ_５Ｒ_６（ここで、Ｒ_７およびＲ_８は、それぞれ独立して、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＲ_５、Ｒ_６および窒素は、一緒に置換もしくは非置換の４〜７員環を形成する）である。
【０１９４】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_２はハロゲンである。
【０１９５】
化合物の別の実施形態では、Ｙは窒素である。
【０１９６】
化合物のさらに別の実施形態では、Ｒ_２は水素である。
【０１９７】
化合物のさらなる実施形態では、Ｒ_３およびＲ_４は、それぞれ水素である。
【０１９８】
本発明はまた、下記構造（Ｖ）を有する化合物を提供する：
【化４５】

（式中、
Ｒ_１は、アリール、置換アリール、またはヘテロアリールであり、
Ｒ_２は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり、
Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_６）（Ｒ_７）ＮＲ_４Ｒ_５（ここで、Ｒ_６およびＲ_７はそれぞれ、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_４およびＲ_５はそれぞれ、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＲ_４、Ｒ_５および窒素は、一緒に４〜７員環を形成する）である）。
【０１９９】
構造Ｖを有する化合物の一実施形態では、Ｒ_４およびＲ_７は、それぞれ水素であり、Ｒ_４はＨであり、Ｒ_５は、−Ｒ_２２Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_２３である。
【０２００】
構造Ｖを有する化合物の別の実施形態では、Ｒ_４およびＲ_７は、それぞれＨであり、環系は、モルホリノ、チオモルホリノ、Ｎ−４−置換ピペラジノ、２−置換ピペラジン、またはＲ_８置換ピロリジノ、ピペラジンであり（ここで、Ｒ_８は、Ｈ、ＯＨ、ＣＨ_２ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ_９Ｎ_１０、ＮＲ_１１（ここで、Ｒ_１１は、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ_３、−ＳＯ_２Ｍｅである）である。
【０２０１】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化４６】

を有する。
【０２０２】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化４７】

を有する。
【０２０３】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化４８】

を有する。
【０２０４】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化４９】

を有する。
【０２０５】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化５０】

を有する。
【０２０６】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化５１】

を有する。
【０２０７】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化５２】

を有する。
【０２０８】
下記構造：
【化５３】

（式中、Ｒ_２は、芳香族の５〜６員環であり、Ｒ_３およびＲ_４は、独立して、Ｈ、またはアルキルである）を有する化合物。
【０２０９】
当該化合物の一実施形態において、化合物は、下記構造：
【化５４】

を有する。
【０２１０】
当該化合物の一実施形態において、化合物は、下記構造：
【化５５】

を有する。
【０２１１】
当該化合物の別の実施形態では、化合物は、下記構造：
【化５６】

を有する。
【０２１２】
当該化合物１５００の別の実施形態では、化合物は、下記構造：
【化５７】

を有する。
【０２１３】
当該化合物のさらなる実施形態では、化合物は、下記構造：
【化５８】

を有する。
【０２１４】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化５９】

（式中、Ｒ_２は、芳香族の５〜６員環であり、Ｒ_３およびＲ_４は、独立して、Ｈ、またはアルキルであるが、但し、Ｒ_２は４−ピリジルではない）。
【０２１５】
当該化合物の一実施形態において、該化合物は、下記構造：
【化６０】

を有する。
【０２１６】
本発明はさらに、下記構造を有する化合物を提供する：
【化６１】

（式中、
Ｒ_２は、芳香族の置換５〜６員環であり、
Ｒ_３およびＲ_４は、独立して、Ｈ、またはアルキルである）。
【０２１７】
当該化合物の一実施形態において、該化合物は、下記構造：
【化６２】

を有する。
【０２１８】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化６３】

（式中、Ｒ_２は、芳香族の５〜６員環であり、Ｘは、酸素、または硫黄である）。
【０２１９】
当該化合物の一実施形態において、該化合物は、下記構造：
【化６４】
化合物１５０３

を有する。
【０２２０】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化６５】

（式中、Ｒ_２は、芳香族の５〜６員環であり、Ｘは、酸素、または硫黄である）。
【０２２１】
当該化合物の一実施形態において、該化合物は、下記構造：
【化６６】

を有する。
【０２２２】
本発明はさらに、患者においてＡ_１アデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、治療上有効な量の式ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物を、患者に投与することを含む方法を提供する。
【０２２３】
この方法の一実施形態では、患者は、動物である。この方法の別の実施形態では、哺乳類は、ヒトである。
【０２２４】
この方法の別の実施形態では、Ａ_１アデノシン受容体は、認識障害、腎不全、不整脈、呼吸上皮、伝達物質放出、鎮静、血管収縮、徐脈、陰性心変力および変伝導、気管支収縮、好中球走化性、逆流状態、または潰瘍状態に関連する。
【０２２５】
本発明はまた、化合物ＩＶおよびＶ、ならびにステロイド、β２アゴニスト、グルココルチコイド、ロイコトリエンアンタゴニスト、または抗コリン作用性アゴニストを含む、喘息のための併用療法を提供する。アデノシンＡ_１、Ａ_２ａ、Ａ_２ｂ、およびＡ_３受容体に関連した疾患は、国際公開第９９／０６０５３号、および国際公開第０９８２２４６５号、国際公開第０９７０５１３８号、国際公開第０９５１１６８１号、国際公開第０９７３３８７９号、日本国特許第０９２９１０８９号、ＰＣＴ／ＵＳ９８／１６０５３号、ならびに米国特許第５，５１６，８９４号（それらの内容全体が完全に、参照により本明細書に援用される）に開示されている。
【０２２６】
本発明はまた、構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物の水溶性プロドラッグを提供し、ここで上記水溶性プロドラッグは、Ａ_１アデノシン受容体を選択的に阻害する活性薬剤に、インビボで代謝される。
【０２２７】
プロドラッグの一実施形態では、上記プロドラッグは、エステラーゼにより触媒される加水分解によって、インビボで代謝される。
【０２２８】
本発明はまた、プロドラッグ、および薬学的に許容可能なキャリアを含む薬学的組成物を提供する。
【０２２９】
本発明はさらに、細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、細胞を、構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物と接触させることを含む方法を提供する。
【０２３０】
この方法の一実施形態では、上記化合物は、上記Ａ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０２３１】
本発明はまた、患者において胃腸障害を治療する方法であって、有効な量の構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物を投与することを含む方法を提供する。
【０２３２】
この方法の一実施形態では、上記障害は、下痢である。
【０２３３】
この方法の別の実施形態では、患者は、ヒトである。
【０２３４】
この方法の別の実施形態では、化合物は、Ａ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０２３５】
本発明はまた、患者において呼吸器障害を治療する方法であって、有効な量の構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物を、患者に投与することを含む方法を提供する。
【０２３６】
この方法の一実施形態では、上記障害は、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、または上気道障害である
この方法の別の実施形態では、患者は、ヒトである。
【０２３７】
この方法の別の実施形態では、上記化合物は、Ａ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０２３８】
本発明はさらに、患者の眼に体する損傷を治療する方法であって、有効な量の構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物を、患者に投与することを含む方法を提供する。
【０２３９】
この方法の一実施形態では、上記損傷は、網膜または視神経乳頭損傷である。
【０２４０】
この方法の別の実施形態では、上記損傷は、急性または慢性である。
【０２４１】
この方法の別の実施形態では、上記損傷は、緑内障、水腫、虚血、低酸素症、または外傷の結果である。
【０２４２】
この方法の別の実施形態では、患者は、ヒトである。
【０２４３】
この方法の別の実施形態では、化合物は、Ａ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０２４４】
本発明はまた、治療上有効な量の構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物、および薬学的に許容可能なキャリアを含む薬学的組成物を提供する。
【０２４５】
薬学的組成物の別の実施形態では、上記治療上有効な量は、呼吸器障害または胃腸障害を治療するのに有効である。
【０２４６】
薬学的組成物の別の実施形態では、上記胃腸障害は、下痢である。
【０２４７】
薬学的組成物の別の実施形態では、上記呼吸器障害は、喘息、アレルギー性鼻炎、または慢性閉塞性肺疾患である。
【０２４８】
薬学的組成物の別の実施形態では、上記薬学的組成物は、眼科用配合剤である。
【０２４９】
薬学的組成物の別の実施形態では、上記薬学的組成物は、眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である
薬学的組成物のさらに別の実施形態では、上記薬学的組成物は、全身性配合剤である。
【０２５０】
薬学的組成物のさらなる実施形態では、上記薬学的組成物は、手術用灌注溶液である。
【０２５１】
本発明はまた、患者においてＡ_１アデノシン受容体に関連した疾患を治癒するための包装された薬学的組成物であって、以下の：（ａ）治療上有効な量のＡ_１アデノシン特異的化合物を保持する容器と、（ｂ）患者において上記疾患を治療するための上記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０２５２】
本明細書中で使用する場合、「化合物は、Ａ_１選択的である」は、化合物が、アデノシンＡ_２ａ、Ａ_２ｂ、またはＡ_３への結合定数よりも少なくとも１０倍大きいアデノシンＡ_１受容体への結合定数を有することを意味する。
【０２５３】
本発明はまた、構造ＩＶを有する化合物、あるいは薬学的に許容可能な塩、またはプロドラッグ誘導体、または生物学的に活性な代謝産物を調製する方法であって：
ａ）下記：
【化６７】

を反応させて、下記構造：
【化６８】

（式中、Ｐは、除去可能な保護基である）
を得る工程と、
ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、下記構造：
【化６９】

を得る工程と、
ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、下記構造：
【化７０】

を得る工程と、
ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物を、ＮＨ_２Ｒ_１で処理して、下記構造を得る工程とをふくんでなり：
【化７１】

式中、
Ｒ_３は、トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル、２−メチルアミノカルボニルアミノシクロヘキシル、アセチルアミノエチル、またはメチルアミノカルボニルアミノエチルであり、
Ａｒは、置換もしくは非置換の４〜６員環であり、
Ｒ_４は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキルである；
（但し、Ｒ_３がアセチルアミノエチルである場合は、Ａｒは４−ピリジルではない）。
【０２５４】
本発明はまた、構造Ｖを有する化合物を調製する方法であって：
ａ）下記：
【化７２】

を反応させて、下記構造：
【化７３】

（式中、Ｐは、除去可能な保護基である）
を得る工程と、
ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、下記構造：
【化７４】

を得る工程と、
ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、下記構造：
【化７５】

を得る工程と、
ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物を、下記：
【化７６】

で処理して、下記構造：
【化７７】

を得る工程とを具備し、
式中、
Ｒ_１は、アリール、置換アリール、ヘテロアリールであり、
Ｒ_２は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり、Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_６）（Ｒ_７）ＮＲ_４Ｒ_５（ここで、Ｒ_６およびＲ_７はそれぞれ、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_４およびＲ_５はそれぞれ、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＮＲ_４Ｒ_５は、４〜７員環系である）であるである方法を提供する。
【０２５５】
式ＶＩ、ＶＩＩ、およびＶＩＩＩで表される化合物は、スキームＩ〜ＶＩＩＩのいずれかにより合成することができる。式ＩＸおよびＸで表される化合物は、スキームＩＸにより調製することができる。
【０２５６】
本発明はさらに、以下の実施例によりさらに説明されるが、これらの実施例は、いかなる場合においても、さらに限定するものと解釈されるべきではない。本出願全体にわたって引用した（背景の部で参照したものも含む）、すべての参照文献、係属中の特許出願、および公開済特許出願の内容は、参照により本明細書に援用される。実施例全体にわたって使用するモデルは、一般に認められたモデルであり、これらのモデルでの有効性の実証は、ヒトでの有効性を予示することを当業者は容易に理解するであろう。
【０２５７】
本発明は、以下の実験に関する詳細からよりよく理解されるであろう。しかしながら、特定の方法および論考する結果は、併記の特許請求項においてより完全に記載される本発明の単なる説明に過ぎないことを当業者は容易に理解するであろう。
【０２５８】
【実験の詳細】
本発明のデアザプリンは、有機合成に関する標準的な方法を用いて調製することができる。デアザプリンは、逆相ＨＰＬＣ、クロマトグラフィ、再結晶等により精製することができ、それらの構造は、マススペクトル分析、元素分析、ＩＲおよび／またはＮＭＲ分光法により確認することができる。
【０２５９】
通常、本発明の中間体およびデアザプリンの合成は、溶液中で実施される。１以上の保護基の付加および除去もまた、典型的な実践であり、当業者に既知である。本発明のデアザプリン中間体の調製に関する典型的な合成スキームを以下のスキームＩに概略する。
【０２６０】
【化７８】

（式中、Ｒ_３、Ｒ_５、およびＲ_６は、上記で定義される）
概して、保護２−アミノ−３−シアノ−ピロールをハロゲン化アリールで処理して、カルボキシアミド−３−シアノ−ピロールを形成することができ、これを酸性メタノールで処理して、ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オンへ閉環を行うことができる(Muller, C.E. et al. J. Med. Chem. 40:4396 (1997))。ピロール保護基の除去、続く塩素化試薬（例えばオキシ塩化リン）による処理後により、置換もしくは非置換の４−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンが生産された。クロロピリミジンをアミンで処理することにより、７−デアザプリンが得られた。
【０２６１】
例えば、スキームＩに示すように、Ｎ−（１−ｄｌ−フェニルエチル）−２−アミノ−３−シアノ−ピロールを、ピリジンおよびジクロロメタン中で、ハロゲン化アシルで処理した。得られたＮ−（１−ｄｌ−フェニルエチル）−２−フェニルカルボキシアミド−３−シアノ−ピロールを、メタノール／硫酸の１０：１の混合物で処理して、閉環を行い、ｄｌ−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オンが生じた。ピリミジンをポリリン酸（ＰＰＡ）で処理することによるフェニルエチル基の除去、続くＰＯＣｌ_３により、重要中間体である４−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンが得られた。４−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンを、表１に列挙した様々なアミンでさらに処理することで、式（Ｉ）および（ＩＩ）を有する化合物が得られる。
【０２６２】
【表１】

６−置換ピロールを調製するための一般的なアプローチを、以下のスキーム（スキームＩＩ）に表す。
【０２６３】
【化７９】

（式中、Ｒ_１〜Ｒ_５は、上記で定義される）
α−ハロケトンによるシアノ酢酸エチルのエステル交換およびアルキル化によりケトメチルエステルが得られる。ケトンの保護、続く塩酸アミジン（例えば、アルキル、アリール、またはアルキルアリール）での処理により、結果としてケタール保護ピリミジンが生じた。保護基の除去、続く環化、およびオキシ塩化リンによる処理により、塩化物中間体が得られ、これをさらにアミンで処理して、アミン６−置換ピロールを得ることができた。さらに、ピロールの窒素のアルキル化は、当該技術分野で認識されている条件下で達成することができる。
【０２６４】
５−置換ピロールを調製するための一般的なアプローチを、以下のスキーム（スキームＩＩＩ）に表す。
【０２６５】
【化８０】

（式中、Ｒ_１〜Ｒ_６は、上記で定義され、Ｒは、除去可能な保護基である）
マロノニトリルおよび過剰なケトンの縮合、続く生成物の臭素化により、出発原料、一臭素化生成物および二臭素化生成物の混合物が得られ、これらをアルキルアミン、アリールアミン、またはアルキルアリールアミンで処理した。得られたアミン生成物を、酸塩化物でアシル化して、モノアシル化ピロールを、酸の存在下で環化して、相当するピリジンが得られた。ピロール保護基をポリリン酸で除去して、オキシ塩化リンで処理して、塩素化生成物を生じた。続いて塩素化ピロールをアミンで処理して、アミノ５−置換ピロールを生じた。ピロール窒素のアルキル化は、当該技術分野で認識されている条件下で達成することができる。
【０２６６】
スキームＩＶおよびＶは、本発明のデアザプリン１および２を調製する方法を表す。
【０２６７】
【化８１】

（式中、Ｒ_５およびＲ_６は、上述の通り（例えば、ＣＨ_３）である）
６−メチルピロロピリミジンの特定の調製：
６−メチルピロロピリミジン（１）（Ｒ_５＝ＣＨ_３）への重要な反応は、ベンズアミジンを用いた、シアノ酢酸エステルのピリミジンへの環化である。シアノ酢酸メチルは、ベンズアミドを用いて、相当するエチルエステルよりも効率的にピリミジンへと環化すると考えられた。したがって、ＮａＯＭｅおよび過剰のα−ハロアセチル部分（例えば、クロロアセトン）の存在下でのシアノ酢酸エチルのエステル交換反応およびアルキル化により、所望のメチルエステル（３）が７９％の収率で得られた（スキームＩＶ）。ケトエステル（３）を、アセタール（４）として８１％の収率で保護した。ピリミジン（５）への新規環化方法は、塩酸アミジン、例えば塩酸ベンジアミジンにより、２当量のＤＢＵを用いて達成され、５が５４％の単離収率で得られた。この方法は、グアニジンによる環化中にＮａＯＭｅを利用する公開されている条件を用いた場合の２０％から収率を改善する。ピロール−ピリミジン（６）への環化は、ＨＣｌ水溶液中でのアセタールの脱保護により７８％の収率で達成された。還流下でオキシ塩化リンを用いた（６）の反応により、相当する４−クロロ誘導体（７）が得られた。１３５℃でのジメチルスルホキシド中のトランス−４−アミノシクロヘキサノールとのカップリングにより、（７）から５７％の収率で（１）が得られた。試薬の選択により所望の置換基Ｒ_５を選択する際に大きな融通性を可能となることを当業者は理解されよう。
【０２６８】
【化８２】

５−メチルピロロピリミジンの特定の調製：
マロノニトリルおよび過剰のケトン（例えば、アセトン）の還流ベンゼン中でのクネーベナーゲル縮合により、蒸留後に５０％の収率で８が得られた。クロロホルム中、過酸化ベンゾイルの存在下で、８をＮ−ブロモスクシンイミドで臭素化して、蒸留後に、出発原料、一臭素化生成物（９）、および二臭素化生成物（５／９０／５）を得た（７０％）。混合物を、α−メチルアルキルアミン、またはα−メチルアリールアミン（例えば、α−メチルベンジルアミン）と反応させて、アミノピロール（１０）を得た。ショートシリカゲルカラムに通した後、部分的に精製されたアミン（収率３１％）を、酸塩化物（例えば、塩化ベンゾイル）でアシル化して、モノアシル化ピロール（１１）およびジアシル化ピロール（１２）が得られ、それらをフラッシュクロマトグラフィで分離した。二置換ピロール（１２）の酸加水分解により、アシルピロール（１１）に関して２９％の組合せ収率をもたらした。濃硫酸およびＤＭＦの存在下での環化により（１３）が得られ（２３％）、これを（１４）へとポリリン酸で脱保護した。還流中、オキシ塩化リンと（１４）を反応させて相当する４−クロロ誘導体（１５）が得られた。１３５℃でのジメチルスルホキシド中のトランス−４−アミノシクロヘキサノールとのカップリングにより、（１４）から３０％の収率で（２）（Ｒ_６＝ＣＨ_３）が得られた（スキームＶを参照）。試薬の選択により所望の置換基Ｒ_６を選択する際に大きな融通性を可能となることを当業者は理解されよう。
【０２６９】
【化８３】

Ｒ _６ 置換ピロール（例えば、５−メチルピロロピリミジン）への代替的合成経路
Ｒ_６置換ピロール（例えば、５−メチルピロロピリミジン）へのこの代替的合成経路は、シアノ酢酸エチルの（１６）へのエステル交換およびアルキル化を包含する（スキームＶＩ）。２当量のＤＢＵを用いて、（１６）を塩酸ベンズアミジンと縮合することにより、ピリミジン（１７）が得られる。ピロール−ピリミジン（１４）への環化は、ＨＣｌ水溶液中のアセタールの脱保護により達成される。還流下で（１４）をオキシ塩化リンと反応させることで、相当する４−クロロ誘導体（１５）が得られた。１３５℃でのジメチルスルホキシド中のトランス−４−アミノシクロヘキサノールとのカップリングにより、２が得られた。この手順では、標的化合物（２）への合成反応の数が、９工程から４工程に減少する。さらに、収率が劇的に改善される。また、試薬の選択により所望の置換基Ｒ_６を選択する際に大きな融通性を可能となることを当業者は理解されよう。
【０２７０】
【化８４】

デスメチルピロールを調製するための一般的なアプローチを、以下のスキーム（スキームＶＩＩ）に表す。
【０２７１】
【化８５】

（式中、Ｒ_１〜Ｒ_３は、上記で定義される）
塩基の存在下でのジエチルアセタールを用いたシアノ酢酸アルキルのアルキル化により、シアノジエチルアセタールが得られ、これをアミン塩で処理して、メチルピロロピリミジン前駆体が生じた。この前駆体を塩素化して、アミンで処理して、上記に示すようにデスメチルピロロピリミジン標的が形成された。
【０２７２】
例えば、スキームＶＩＩＩは、化合物（１８）の合成を表す。
【０２７３】
【化８６】

市販のシアノ酢酸メチルを、炭酸カリウムおよびＮａＩの存在下でブロモアセトアルデヒドジエチルアセタールによりアルキル化して、（１９）を得た。ピリミジン（２０）への環化を２工程で達成された。最初に、２当量のＤＢＵを用いて、塩酸ベンジアミジンと（１９）を反応させることにより、ピリミジンアセタールを形成した。得られたピリミジンアセタールを、精製せずに１Ｎ ＨＣｌ水溶液で脱保護して、得られたアルデヒドをピロロ−ピリミジン（２０）へと環化して、ろ過により単離した。還流下でオキシ塩化リンと（２０）を反応させて、相当する４−クロロ誘導体（２１）が得られた。１３５℃でのＤＭＳＯ中のトランス−４−アミノシクロヘキサノールとのクロロ誘導体のカップリングにより、化合物（２１）から化合物（１８）が得られた。
【０２７４】
スキームＩＩ〜ＶＩＩＩは、ピロロピリミジン環の５位および６位を官能基化することが可能であることを実証している。種々の出発原料、および上記反応スキームのわずかな変更の使用により、様々な官能基を、式（Ｉ）および（ＩＩ）の５位ならびに６位に導入することができる。表２は、幾つかの例を示す。
【０２７５】
【表２】

患者における本明細書中に開示する化合物の代謝が、薬剤として作用することができるある特定の生物学的に活性な代謝産物を生じることは、当業者に既知であろう。
【０２７６】
本発明は、以下の実施例によりさらに説明されるが、実施例は、いかなる場合においても、さらに限定するものと解釈されるべきではない。本出願全体にわたって引用した（背景の部で参照したものも含む）、すべての参照文献、係属中の特許出願、および公開済特許出願の内容は、参照により本明細書に援用される。実施例全体にわたって使用するモデルは、一般に認められたモデルであり、これらのモデルでの有効性の実証は、ヒトでの有効性を予示することを当業者は容易に理解するであろう。
【０２７７】
例
調製１：
SeelaおよびLupkeのアルキル化方法を改変(modification)した方法を用いた¹。MeOH(20mL)中のシアノ酢酸エチル(6.58g，58.1mmol)の氷冷した溶液(０℃)に、NaOMe(25kw/v；58.1mmol)の溶液をゆっくりと添加した。10分後クロロアセトン(5mL；62.8mmol)をゆっくりと添加した。４時間後溶剤を除去した。茶色の油状物をEtOAc(100mL)を用いて希釈し、H₂O(100mL)で洗浄した。有機画分を乾燥させ、濾過し、茶色の油状物(7.79g；79％)になるまで濃縮した。この油状物(3)（スキームIV）はメチル／エチルエステル生成物(9/1)の混合物であり、さらなる精製をすることなく用いられた。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ4.24(q，J＝7.2Hz，OCH₂)，3.91(dd，1H，J＝7.2，7.0Hz，CH)，3.62(s，3H，OCH₃)，3.42(dd，1H，J＝15.0，7.1Hz，1xCH₂)；3.02(dd，1H，J＝15.0，7.0Hz，1xCH₂)；2.44(s，3H，CH₃)，1.26(t，J＝7.1Hz，エステル-CH₃)。¹Seela，F.；Lupke，U. Chem. Ber. 1977,110，1462-1469。
【０２７８】
調製２：
SeelaおよびLupkeの手順を用いた¹。よって、TsOH(100mg)の存在下におけるエチレングリコール(4mL，64.4mmol)を用いたケトン(3)の保護化（スキームIV；5.0g，32.2mmol)により、フラッシュクロマトグラフィ(SiO₂；3/7 EtOAc/Hex，R_f 0.35)を経て(4)を油状物（スキームIV；5.2g，81.0）として得た。５％エチルエステルをなおも含んだ：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ4.24(q，J＝7.2Hz，OCH₂)，3.98(s，4H，2xアセタール-CH₂)，3.79(s，3H，OCH₃)，3.62(dd，1H，J＝7.2，7.0Hz，CH)，2.48(dd，1H，J＝15.0，7.1Hz，1xCH₂)，2.32(dd，1H，J＝15.0，7.0Hz，1xCH₂)；1.35(s，3H，CH₃)，1.26(t，J＝7.1Hz，エステル-CH₃)；MS(ES)：200.1(M⁺+1)。¹Seela，F.；Lupke，U. Chem. Ber. 1977，110，1462-1469。
【０２７９】
調製３：
乾燥DMF(15mL)中のアセタール(4)（スキームIV，1g，5.02mmol）、ベンズアミジン(786mg，5.02mmol)、およびDBU(1.5mL，10.04mmol)の溶液を85℃にまで15時間加熱した。この混合物をCHCl₃(30mL)を用いて希釈し、0.5N NAOH(10mL)およびH₂O(20mL)で洗浄した。有機画分を乾燥させ、濾過し、茶色の油状物になるまで濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ(SiO₂；1/9 EtOAc/CH₂Cl₂，R_f 0.35)を試みたが、物質がカラム上で結晶化した。シリカゲルをMeOHで洗浄した。生成物(5)（スキームIV）を含んだ画分を濃縮し、さらに精製することなく用いた(783mg，54.3％)：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ8.24(m，2H，Ar-H)，7.45(m，3H，Ar-H)，5.24(br s，2H，NH₂)，3.98(s，4H，2xアセタールCH₂)，3.60-3.15(m，2H，CH₂)，1.38(s，3H，CH₃)；MS(ES)：288.1(M⁺+1)。
【０２８０】
化合物(20)の調製（スキームVIII）：乾燥DMF(20mL)中のアセタール(19)(4.43g，20.6mmol)¹、ベンズアミン塩酸塩(3.22g，20.6mmol)、およびDBU(6.15mL，41.2mmol)の溶液を85℃にまで15時間加熱した。この混合物を100mLのCHCl₃を用いて希釈し、H₂Oで洗浄した(2x50mL)。有機画分を乾燥させ、濾過し、濃い茶色の油状物になるまで濃縮した。この濃い茶色の油状物を1N HCl(100mL)中で２時間室温で撹拌した。得られたスラリを濾過し、(20)のHCl塩を黄褐色の固体で得た(3.60g，70.6％)；¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)11.92(s，1H)，8.05(m，2H，Ar-H)，7.45(m，3H，Ar-H)，7.05(s，1H，ピロルH)；MS(ES)：212.1(M⁺+1)。
【０２８１】
調製４：
1N HCl(40mL)中のアセタール(5)(700mg，2.44mmol)の溶液を２時間室温で撹拌した。得られたスラリを濾過し、2-フェニル-6-メチル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オンのHCl塩を黄褐色の固体で得た(498mg，78.0％)：¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ11.78(s，1H)，8.05(m，2H，Ar-H)，7.45(m，3H，Ar-H)，6.17(s，1H，ピロル-H)，2.25(s，3H，CH₃)；MS(ES)：226.1(M⁺+1)。
【０２８２】
調製５：
Chen et al.の環化方法を改変した方法を用いた¹。イソプロピルアルコール(60mL)中の臭化物(9),（スキームV；20.0g，108mmol；純度90％）の氷冷した溶液（０℃）に、α-メチルベンジルアミン(12.5mL，97.3mmol)の溶液をゆっくりと添加した。黒色の溶液を室温にまで加温し、15時間撹拌した。この混合物をEtOAc(200mL)を用いて希釈し、0.5N NaOH(50mL)で洗浄した。有機画分を乾燥させ、濾過し、黒色のタールになるまで濃縮した(19.2g；94％)。フラッシュクロマトグラフィ(SiO₂；4/96 MeOH/CH₂Cl₂，R_f 0.35)により残渣を部分的に精製し、化合物dl-1-(1-フェニルエチル)-2-アミノ-3-シアノ-4-メチルピロルを黒色の固体で得た(6.38g，31％)：MS(ES)：226.1(M⁺+1)。
【０２８３】
¹Chen，Y. L.；Mansbach，R. S.；Winter，S. M.；Brooks，E.；Collins，J.；Corman，M. L.；Dunaiskis，A. R.；Faraci，W. S.；Gallaschun，R. J.；Schmidt，A.；Schulz，D. W. J. Med. Chem．1997，40，1749-1754。
【０２８４】
調製６：
ジクロロメタン(50.0mL)中のdl-1-(1-フェニルエチル)-2-アミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル¹(14.9g，62.5mmol)およびピリジン(10.0mL)の溶液に、塩化ベンゾイル(9.37g，66.7mmol)を０℃で添加した。０℃で１時間撹拌した後、ヘキサン(10.0mL)を添加して生成物の沈澱を促した。溶剤を真空下で除去し、固体をEtOH/H₂Oから再結晶化させ、13.9g(65％)のdl-1-(1-フェニルエチル)-2-フェニルカルボニルアミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロルを得た。mp：218-221℃；¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.72(s，3H)，1.76(d，J＝7.3Hz，3H)，1.98(s，3H)，5.52(q，J＝7.3Hz，1H)，7.14-7.54(m，9H)，7.68-7.72(dd，J＝1.4Hz，6.9Hz，2H)，10.73(s，1H)；MS(ES)：344.4(M⁺+1)。
【０２８５】
¹Liebigs Ann. Chem. 1986,1485-1505。
【０２８６】
以下の化合物を、同様の方法で得た。
【０２８７】
調製６Ａ：
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-(3-ピリジル)カルボニルアミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.83(d，J＝6.8Hz，3H)，2.02(s，3H)，2.12(s，3H)，5.50(q，J＝6.8Hz，1H)，7.14-7.42(m，5H)，8.08(m，2H)，8.75(m，3H)；MS(ES)：345.2(M⁺+1)。
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-(2-フリル)カルボニルアミノ-3-シアノ-4-ジメチルピロル。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.84(d，J＝7.4Hz，3H)，1.92(s，3H)，2.09(s，3H)，5.49(q，J＝7.4Hz，1H)，6.54(dd，J＝1.8Hz，3.6Hz，1H)，7.12-7.47(m，7H)；MS(ES)：334.2(M⁺+1)，230.1。
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-(3-フリル)カルボニルアミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.80(d，J＝-7H-z，3H)，1.89(s，3H)，2.05(s，3H)，5.48(q，J＝-7H-z，1H)，6.59(s，1H)，7.12-7.40(m，6H)，7.93(s，1H)；MS(ES)：334.1(M⁺+1)，230.0。
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-シクロペンチルカルボニルアミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.82(d，J＝7.4Hz，3H)，1,88(s，3H)，2. 05(s，3H)，1.63-1.85(m，8H)，2.63(m，1H)，5.43(q，J＝7.4Hz，1H)，6.52(s，1H)，7.05-7.20(m，5H)；MS(ES)：336.3(M⁺+1)。
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-(2-チエニル)カルボニルアミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル、H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.82(d，J＝6.8Hz，3H)，1.96(s，3H)，2.09(s，3H)，5.49(q，J＝6.8Hz，1H)，7.05-7.55(m，8H)；MS(ES)：350.1(M⁺+1)，246.0。
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-(3-チエニル)カルボニルアミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.83(d，J＝7.0Hz，3H)，1.99(s，3H)，2.12(s，3H)，5.49(q，J＝7.0Hz，1H)，6.90(m，1H)，7.18-7.36(m，6H)，7.79(m，1H)；MS(ES)：350.2(M⁺+1)，246.1。
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-(4-フルオロフェニル)カルボニルアミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.83(d，J＝7.4Hz，3H)，1.96(s，3H)，2.08(s，3H)，5.51(q，J＝7.4Hz，1H)，7.16-7.55(m，9H)；MS(ES)：362.2(M⁺+1)，258.1。
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-(3-フルオロフェニル)カルボニルアミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.83(d，J＝7.4Hz，3H)，1.97(s，3H)，2.10(s，3H)，5.50(q，J＝7.4Hz，1H)，7.05-7.38(m，7H)，7.67-7.74(m，2H)；MS(ES)：362.2(M⁺+1)，258.1。
【０２８８】
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-(2-フルオロフェニル)カルボニルアミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.85(d，J＝7.2Hz，3H)，1.94(s，3H)，2.11(s，3H)，5.50(q，J＝7.2Hz，1H)，7.12-7.35(m，6H)，7.53(m，1H)，7.77(m，1H)，8.13(m，1H)；MS(ES)：362.2(M⁺+1)，258.0。
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-イソプロピルカルボニルアミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.19(d，J＝7.0Hz，6H)，1.82(d，J＝7.2Hz，3H)，1.88(s，3H)，2.06(s，3H)，2.46(m，1H)，5.39(m，J＝7.2Hz，1H)，6.64(s，1H)，7.11-7.36(m，5H)；MS(ES)：310.2(M⁺+1)，206.1。
【０２８９】
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-アミノ-3-シアノ-4-メチルピロルのアシル化の場合、モノアシル化dl-1-(1-フェニルエチル)-2-ベンゾイルアミノ-3-シアノ-4-ジメチルピロル、およびジアシル化ピロルdl-1-(1-フェニルエチル)-2-ジベンゾイルアミノ-3-シアノ-4-メチルピロルを得た。
【０２９０】
モノアシル化ピロル：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ7.69(d，2H，J＝7.8Hz，Ar-H)，7.58-7.12(m，8H，Ar-H)，6.18(s，1H，ピロル-H)，5.52(q，1H，J＝7.2Hz，CH-CH₃)，2.05(s，3H，ピロル-CH₃)，1.85(d，3H，J＝7.2Hz，CH-Ch3)；MS(ES)：330.2(M⁺+1)；ジアシル化ピロル：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ7.85(d，2H，J＝7.-7H-z，Ar-H)，7.74(d，2H，J＝7.8Hz，Ar-H)，7.52-7.20(m，9H，Ar-H)，7.04(m，2H，Ar-H)，6.21(s，1H，ピロル-H)，5.52(q，1H，J＝7.2Hz，Ch-CH₃)，1.77(d，3H，J＝7.2Hz，CH-CH₃)，1.74(s，3H，ピロル-CH₃)；MS(ES)：434.1(M⁺+1)。
【０２９１】
調製７：
メタノール(10.0mL)中のdl-1-(1-フェニルエチル)-2-フェニルカルボキシアミド-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル(1.0g，2.92mmol)の溶液に、濃縮した硫酸(1.0mL)を０℃で添加した。得られた混合物を15時間還流させ、室温にまで冷却した。沈殿物を濾過し、0.48g(48％)のdl-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オンを得た。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.02(d，J＝7.4Hz，3H)，2.04(s，3H)，2.41(s，3H)，6.25(q，J＝7.4Hz，1H)，7.22-7.50(m，9H)，8.07-8.12(dd，J＝3.4Hz，6.8Hz，2H)，10.51(s，1H)；MS(ES)：344.2(M⁺+1)。次の化合物を、調製７と同様の手法により得た：
dl-5,6-ジメチル-2-(3-ピリジル)-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.03(d，J＝7.2Hz，3H)，2.08(s，3H)，2.42(s，3H)，6.24(q，J＝7.2Hz，1H)，7.09-7.42(m，5H)，8.48(m，2H)，8.70(m，3H)；MS(ES)：345.1(M⁺+1)。
dl-5,6-ジメチル-2-(2-フリル)-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.98(d，J＝7.8Hz，3H)，1.99(s，3H)，2.37(s，3H)，6.12(q，J＝7.8Hz，1H)，6.48(dd，J＝1.8Hz，3.6Hz，1H)，7.17-7.55(m，7H)，9.6(s，1H)；MS(ES)：334.2(M⁺+1)。
dl-5,6-ジメチル-2-(3-フリル)-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.99(d，J＝7Hz，3H)，2.02(s，3H)，2.42(s，3H)，6.24(q，J＝-7H-z，1H)，7.09(s，1H)，7.18-7.32(m，5H)，7.48(s，1H)，8.51(s，1H)；MS(ES)：334.2(M⁺+1)。
dl-5,6-ジメチル-2-シクロペンチル-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.95(d，J＝7.4Hz，3H)，2.00(s，3H)，2.33(s，3H)，1.68-1.88(m，8H)，2.97(m，1H)，6.10(q，J＝7.4Hz，1H)，7.16-7.30(m，5H)，9.29(s，1H)；MS(ES)：336.3(M⁺+1)。
dl-5,6-ジメチル-2-(2-チエニル)-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.02(d，J＝7.2Hz，3H)，2.06(s，3H)，2.41(s，3H)，6.13(q，J＝7.2Hz，1H)，7.12(dd，J＝4.8，2.8Hz，1H)，7.26-7.32(m，5H)，7.44(d，J＝4.8Hz，1H)，8.01(d，J＝2.8Hz，1H)11.25(s，1H)；MS(ES)：350.2(M⁺+1)。
dl-5,6-ジメチル-2-(3-チエニル)-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.00(d，J＝7.4Hz，3H)，2.05(s，3H)，2.43(s，3H)，6.24(q，J＝7.4Hz，1H)，7.24-7.33(m，5H)，7.33-7.39(m，1H)，7.85(m，1H)，8.47(m，1H)，12.01(s，1H)；MS(ES)：350.2(M⁺+1)。
dl-5,6-ジメチル-2-(4-フルオロフェニル)-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.01(d，J＝6.8Hz，3H)，2.05(s，3H)，2.42(s，3H)，6.26(q，J＝6.8Hz，1H)，7.12-7.36(m，7H)，8.23-8.30(m，2H)，11.82(s，1H)；MS(ES)：362.3(M⁺+1)。
dl-5,6-ジメチル-2-(3-フルオロフェニル)-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.02(d，J＝7.4Hz，3H)，2.06(s，3H)，2.44(s，3H)，6.29(q，J＝7.4Hz，1H)，7.13-7.51(m，7H)，8.00-8.04(m，2H)，11.72(s，1H)；MS(ES)：362.2(M⁺+1)。
dl-5,6-ジメチル-2-(2-フルオロフェニル)-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.00(d，J＝7.2Hz，3H)，2.05(s，3H)，2.38(s，3H)，6.24(q，J＝7.2Hz，1H)，7.18-7.45(m，8H)，8.21(m，1H)，9.54(s，1H)；MS(ES)：362.2(M⁺+1)。
dl-5,6-ジメチル-2-イソプロピル-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.30(d，J＝6.8Hz，3H)，1.32(d，J＝7.0Hz，3H)，2.01(s，3H)，2.34(s，3H)，2.90(m，1H)，6.13(m，1H)，7.17-7.34(m，5H)，10.16(s，1H)；MS(ES)：310.2(M⁺+1)。
【０２９２】
調製８：
DMF(13mL)中の、濃縮したH₂SO₄(1mL)を含んだdl-1-(1-フェニルエチル)-2-ベンゾイルアミノ-3-シアノ-4-ジメチルピロル(785mg，2.38mmol)の溶液を130℃で48時間撹拌した。黒色の溶液をCHCl₃(100mL)を用いて希釈し、1N NaOH(30mL)および塩水(30mL)で洗浄した。有機画分を乾燥させ、濾過し、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィ(SiO₂；8/2 EtOAc/Hex，R_f 0.35)により精製し、dl-5-メチル-2-フェニル-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オンを茶色の固体(184mg，24％)で得た。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ8.18(m，2H，Ar-H)，7.62-7.44(m，3H，Ar-H)，7.40-7.18(m，5H，Ar-H)，6.48(s，1H，ピロル-H)，6.28(q，1H，J＝7.2Hz，CH-CH₃)，2.18(s，3H，ピロル-CH₃)，2.07(d，3H，J＝7.2Hz，CH-CH₃)；MS(ES)：330.2(M⁺+1)。
【０２９３】
調製９：
dl-1-(1-フェニルエチル)-2-アミノ-3-シアノ-4,5-ジメチルピロル(9.60g，40.0mmol)および蟻酸(50.0mL，98％)の混合物を、５時間還流させた。室温にまで冷却し、フラスコの壁面をスクラッチし、形成された大量の沈殿物を濾過した。この物質を、洗浄液が中和pHを示すまで水で洗浄し、dl-5,6-ジメチル-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オンを得た：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.96(d，J＝7.4Hz，3H)，2.00(s，3H)，2.38(s，3H)，6.21(q，J＝7.4Hz，1H)，7.11-7.35(m，5H)，7.81(s，1H)，11.71(s，1H)；MS(ES)：268.2(M⁺+1)。
【０２９４】
調製10：dl-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン(1.0g，2.91mmol)を、ポリリン酸(30.0mL)中に懸濁させた。この混合物を100℃にまで４時間加熱した。この高温の懸濁液を氷水中に注ぎ、勢いよく撹拌して懸濁物を分散させ、固体 KOHを用いてpH 6にまで塩基性にした。得られた固体を濾過し、回収して0.49g(69％)の5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オンを得た。¹H NMR(200MHz，DMSO-d)δ2.17(s，3H)，2.22(s，3H)，7.45(br，3H)，8.07(br，2H,)，11.49(s，1H)，11.82(s，1H)；MS(ES)：344.2(M⁺+1)。
【０２９５】
次の化合物を、調製10と同様の手法で得た：
5-メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。MS(ES)：226.0(M⁺+1)。
5,6-ジメチル-2-(3-ピリジル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。MS(ES)：241.1(M⁺+1)。
5,6-ジメチル-2-(2-フリル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.13(s，3H)，2.18(s，3H)，6.39(dd，J＝1.8，3.6Hz，1H)，6.65(dd，J＝1.8Hz，3.6Hz，1H)，7.85(dd，J＝1.8,3.6Hz，1H,)，11.45(s，1H)，11.60(s，1H)；MS(ES)：230.1(M⁺+1)。
5,6-ジメチル-2-(3-フリル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.14(s，3H)，2.19(s，3H)，6.66(s，1H)，7.78(s，1H)，8.35(s，1H)，11.3(s，1H)，11.4(s，1H)；MS(ES)：230.1(M⁺+1)。
5,6-ジメチル-2-シクロペンチル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ1.57-1.91(m，8H)，2.12(s，3H)，2.16(s，3H)，2.99(m，1H)，11.24(s，1H)，11.38(s，1H)；MS(ES)：232.2(M⁺+1)。
5,6-ジメチル-2-(2-チエニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.14(s，3H)，2.19(s，3H)，7.14(dd，J＝3.0，5.2Hz，1H)，7.70(d，J＝5.2Hz，1H)，8.10(d，J＝3.0Hz，1H)，11.50(s，1H)；MS(ES)：246.1(M⁺+1)。
5,6-ジメチル-2-(3-チエニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.17(s，3H)，2.21(s，3H)，7.66(m，1H)，7.75(m，1H)，8.43(m，1H)，11.47(s，1H)，11.69(s，1H)；MS(ES)：246.1(M⁺+1)。
5,6-ジメチル-2-(4-フルオロフェニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.17(s，3H)，2.21(s，3H)，7.31(m，2H)，8.12(m，2H)，11.47(s，1H)；MS(ES)：258.2(M⁺+1)。
5,6-ジメチル-2-(3-フルオロフェニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.18(s，3H)，2.21(s，3H)，7.33(m，1H)，7.52(m，1H)，7.85-7.95(m，2H)，11.56(s，1H)，11.80(s，1H)；MS(ES)：258.1(M⁺+1)。
【０２９６】
5,6-ジメチル-2-(2-フルオロフェニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.18(s，3H)，2.22(s，3H)，7.27-7.37(m，2H)，7.53(m 1H)，7.68(m，1H)，11.54(s，1H)，11.78(s，1H)；MS(ES)：258.1(M⁺+1)。
5,6-ジメチル-2-イソプロピル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ1.17(d，J＝6.6Hz，6H)，2.11(s，3H)，2.15(s，3H)，2.81(m，1H)，11.20(s，1H)，11.39(s，1H)；MS(ES)：206.1(M⁺+1)。
5,6-ジメチル-7H-ピロロ[2,3-d)ピリミジン-4(3H)-オン。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.13(s，3H)，2.17(s，3H)，7.65(s，1H)；MS(ES)：164.0(M⁺+1)。
調製11：オキシ塩化リン(25.0mL)中の5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4(3H)-オン(1.0g，4.2mmol)の溶液を６時間還流させ、次いで乾燥するまで真空下で濃縮した。水を残渣に添加して、結晶化を誘発させ、得られた固体を濾過し、回収して0.90g(83％)の4-クロロ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.33(s，3H)，2.33(s，3H)，7.46-7.49(m，3H)，8.30-8.35(m，2H)，12.20(s，1H)；MS(ES)：258.1(M⁺+1)。
【０２９７】
次の化合物を調製11と同様の手法で得た：
4-クロロ-5-メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)：244.0(M⁺+1)。
4-クロロ-6-メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)：244.0(M⁺+1)。
4-クロロ-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)8.35(2,2H)，7.63(br s，1H)，7.45(m，3H)，6.47(br s，1H)；MS(ES)：230.0(M⁺+1)。
4-クロロ-5,6-ジメチル-2-(3-ピリジル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)：259.0(M⁺+1)。
4-クロロ-5,6-ジメチル-2-(2-フリル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，
¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.35(s，3H)，2.35(s，3H)，6.68(dd，J＝1.8，3.6Hz，1H)，7.34(dd，J＝1.8Hz，3.6Hz，1H)，7.89(dd，J＝1.8，3.6Hz，1H)；MS(ES)：248.0(M⁺+1)。
4-クロロ-5,6-ジメチル-2-(3-フリル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.31(s，3H)，2.31(s，3H)，6.62(s，1H)，7.78(s，1H)，8.18(s，1H)，12.02(s，1H)；MS(ES)：248.1(M⁺+1)。
4-クロロ-5,6-ジメチル-2-シクロペンチル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ1.61-1.96(m，8H)，2.27(s，3H)，2.27(s，3H)，3.22(m，1H)，11.97(s，1H)；MS(ES)：250.1(M⁺+1)。
4-クロロ-5,6-ジメチル-2-(2-チエニル)-7H-ピロロ(2,3-d)ピリミジン，¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.29(s，3H)，2.31(s，3H)，7.14(dd，J＝3.1Hz，4.0Hz，1H)，7.33(d，J＝4.9Hz，1H)，7.82(d，J＝3.1Hz，1H)，12.19(s，1H)；MS(ES)：264.1(M⁺+1)。
4-クロロ-5,6-ジメチル-2-(3-チエニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.32(s，3H)，2.32(s，3H)，7.62(dd，J＝3.0，5.2Hz，1H)，7.75(d，J＝5.2Hz，1H)，8.20(d，J＝3.0Hz，1H)；MS(ES)：264.0(M⁺+1)。
4-クロロ-5,6-ジメチル-2-(4-フルオロフェニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.33(s，3H)，2.33(s，3H)，7.30(m，2H)，8.34(m，2H)，12.11(s，1H)；MS(ES)：276.1。(M⁺+1)。
4-クロロ-5,6-ジメチル-2-(3-フルオロフェニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.31(s，3H)，2.33(s，3H)，7.29(m，1H)，7.52(m，1H)，7.96(m，1H)，8.14(m，1H)，11.57(s，1H)；MS(ES)：276.1(M⁺+1)。
4-クロロ-5,6-ジメチル-2-(2-フルオロフェニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.34(s，3H)，2.34(s，3H)，7.33(m，2H)，7.44(m，1H)，7.99(m，1H)，12.23(s，1H)；MS(ES)：276.1(M⁺+1)。
4-クロロ-5,6-ジメチル-2-イソプロピル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ1.24(d，J＝6.6Hz，6H)，2.28(s，3H)，2.28(s，3H)，3.08(q，J＝6.6Hz，1H)，11.95(s，1H)；MS(ES)：224.0(M⁺+1)。
4-クロロ-5,6-ジメチル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ2.31(s，3H)，2.32(s，3H)，8.40(s，1H)；MS(ES)：182.0(M⁺+1)。
dl-4-クロロ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン。
【０２９８】
調製１２：
ジオキサン(100.0mL)および水(100.0mL)中のdl-1,2-ジアミノプロパン(1.48g，20.0mmol)および炭酸ナトリウム(2.73g，22.0mmol)の溶液に、ジ-tert-ジカーボネート(4.80g，22.0mmol)を室温で添加した。得られた混合物を14時間撹拌した。ジオキサンを真空下で除去した。沈殿物を濾過除去し、濾液を真空下で乾燥するまで濃縮した。残渣をEtOAcを用いて粉砕し、濾過した。濾液を真空下で乾燥するまで濃縮し、dl-1-アミノ-2-(1,1-ジメチルエトキシ)カルボニルアミノ-プロパンおよびdl-2-アミノ-1-(1,1-ジメチルエトキシ)カルボニルアミノ-プロパンの混合物を得た。これらは通常のクロマトグラフィ法では分離できないものであった。この混合物を例８の反応に用いた。
【０２９９】
調製１３：ジクロロメタン(20.0mL)中のFmoc-Ala-OH(1.0g，3.212mmol)および塩化オキサリル(0.428g，0.29mL，3.373mmol)の溶液に、数滴のN，N-ジメチルホルムアミドを０℃で添加した。この混合物を室温で１時間撹拌し、続いてシクロプロピルメチルアミン(0.229g，0.28mL，3.212mmol)およびトリエチルアミン(0.65g，0.90mL，6.424mmol)を添加した。10分後、混合物を1M 塩酸塩(10.0mL)を用いて処理し、混合物水溶液をジクロロメタンを用いて抽出した(3x30.0mL)。有機溶液を真空下で乾燥するまで濃縮した。残渣を、N,N-ジメチルホルムアミド(20.0mL)中の20％ピペリジンの溶液を用いて0.5時間処理した。溶剤を真空下で除去した後、残渣を1M 塩酸塩(20.0mL)および酢酸エチル(20.0mL)を用いて処理した。この混合物を分離し、水溶液層(水層)を、固体水酸化ナトリウムを用いてpH＝8にまで塩基性にした。沈殿物を濾過により除去し、水溶液を、20％ピリジンを用いて溶出するイオン交換カラムに供し、0.262g(57％)のN-シクロプロピルメチル-アラニンアミドを得た。¹H NMR(200MHz，CD₃OD)δ0.22(m，2H)，0.49(m，2H)，0.96(m，2H)，2.40(t，2H)，2.92(t，2H)，3.05(d，2H)；MS(ES)：143.1(M⁺+1)。
【０３００】
調製1４：N-tert-ブトキシカルボニル-trans-1,4-シクロへキシルジアミン
trans-1,4-シクロネキシルジアミン(6.08g，53.2mmol)をジクロロメタン(10OmL)中に溶解させた。ジ-t-ブチルジカーボネートの溶液(2.32g，40mL ジクロロメタン中に10.65mmol)をカニューレを介して添加した。20時間後、反応物をCHCl₃と水との間で分配した。層を分離し、水層をCHCl₃を用いて抽出した(3x)。合体した有機層をMgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮して1.20gの白色の固体を得た(53％)。¹H-NMR(200MHz，CDCl₃)：δ1.0-1.3(m，4H)，1.44(s，9H)，1.8-2.1(m，4H)，2.62(brm，1H)，3.40(brs，1H)，4.37(brs，1HO；MS(ES)：215.2(M⁺+1)。
【０３０１】
4-(N-アセチル)-N-tert-ブトキシカルボニル-trans-1,4-シクロへキシルジアミン
N-tert-ブトキシカルボニル-trans-1,4-シクロへキシルジアミン(530mg，2.47mmol)をジクロロメタン(20mL)中に溶解させた。無水酢酸(250mg，2.60mmol)を滴下添加した。16時間後、反応物を水およびCHCl₃を用いて希釈した。層を分離し、水層をCHCl₃を用いて抽出した(3x)。合体した有機層をMgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。再結晶化(EtOH/H₂O)により190mgの白色の結晶を得た(30％)。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：δ0.9-1.30(m，4H)，1.43(s，9H)，1.96-2.10(m，7H)，3.40(brs，1H)，3.70(brs，1H)，4.40(brs，1H)，4.40(brs，1H)；MS(ES)：257.2(M⁺+1)，242.1(M⁺-15)，201.1(M⁺-56)。
【０３０２】
4-(4-trans-アセトアミドシクロへキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン
4-(N-アセチル)-N-tert-ブトキシカルボニル-trans-1,4-シクロへキシルジアミン(190mg，0.74mmol)をジクロロメタン(5mL)中に溶解させ、TFA(6mL)を用いて希釈した。16時間後、反応物を濃縮した。粗製の固体、DMSC(2mL)、NaHCO₂(200mg，2.2mmol)および4-クロロ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(35mg，0.14mmol)をフラスコ内で合体させ、130℃にまで加熱した。4.5時間後、反応物を室温にまで冷却し、EtOAcおよび水で希釈した。層を分離し、水層をEtOAcを用いて抽出した(3x)。合体した有機層をMgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。クロマトグラフィ(シリカ分取用プレート；20：1 CHCl₃：EtOH)により0.3mgの黄褐色の固体で得た(1％収率)。MS(ES)：378.2(M⁺+1)。
【０３０３】
4-(N-メタンスルホニル)-N-tert-ブトキシカルボニル-trans-1,4-シクロへキシルジアミン。
【０３０４】
trans-1,4-シクロへキシルジアミン(530mg，2.47mmol)をジクロロメタン(20mL)中に溶解させ、ピリジン(233mg，3t0mmol)を用いて希釈した。塩化メタンスルホニル(300mg，2.60mmol)を滴下添加した。16時間後、反応物を水およびCHCl₃を用いて希釈した。層を分離し、水層をCHCl₃を用いて抽出した(3x)。合体した有機層をMgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。再結晶化(EtOH/H₂O)により206mgの白色の結晶を得た(29％)。¹H-NMR(200MHz，CDCl₃)：δ1.10-1.40(m，4H)，1.45(s，9H)，2.00-2.20(m，4H)，2.98(s，3H)，3.20-3.50(brs，2H)，4.37(brs，1H)；MS(ES)293.1(M⁺+1)。278.1(M⁺15)，237.1(M⁺56)。
【０３０５】
4-(4-trans-メタンスルファミドシクロへキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン
4-(N-スルホニル)-N-tert-ブトキシカルボニル-trans-1,4-シクロへキシルジアミン(206mg，0.71mmol)をジクロロメタン(5mL)中に溶解させ、TFA(6mL)用いて希釈した。16時間後反応物を濃縮した。粗製の反応混合物、DMSO(2mL)、NaHCO₃(100mg，1.1mmol)および1-クロロ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンをフラスコ内で合体させ、130℃にまで加熱した。15時間後反応物を室温にまで冷却し、EtOAcを用いて希釈した(3x)。合体した有機層をMgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。クロマトグラフィ(シリカ分取用プレート，20：1 CHCl₃/EtOH)を経て2.6mgの黄褐色の固体を得た(5％ 収率)。MS(ES)：414.2(M⁺+1)。
【０３０６】
例１：メチルスルホキシド(10.0mL)中の4-クロロ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(0.50g，1.94mmol)および 4-trans-ヒドロキシシクロへキシルアミン(2.23g，19.4mmol)の溶液を130℃で５時間加熱した。室温にまで冷却した後、水(10.0mL)を添加し、得られた水溶液をEtOAcを用いて抽出した(3x10.0mL)。合体したEtOAc溶液を乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで濃縮し、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィにかけて0.49g(75％)の4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。mp 197-199℃；¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.25-1.59(m，8H)，2.08(s，3H)，2.29(s，3H)，3.68-3.79(m，1H)，4.32-4.38(m，1H)，4.88(d，J＝8Hz，1H)，7.26-7.49(m，3H)，8.40-8.44(dd，J＝2.2，8Hz，2H)，10.60(s，1H)；MS(ES)：337.2(M⁺+1)。
【０３０７】
次の化合物を例１と同様の手法で得た：
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-6-メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ11.37(s，1H，ピロル-NH)，8.45(m，2H，Ar-H)，7.55(m，3H，Ar-H)，6.17(s，1H，ピロル-H)，4.90(br d，1H，NH)，4.18(m，1H，CH-O)，3.69(m，1H，CH-N)，2.40-2.20(m，2H)，2.19-1.98(m，2H)，2.25(s，3H，CH₃)1.68-1.20(m，4H)；MS(ES)：323.2(M⁺+1)。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5-メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ11.37(s，1H，ピロル-NH)，8.40(m，2H，Ar-H)，7.45(m，3H，Ar-H)，5.96(s，1H，ピロル-H)，4.90(br d，1H，NH)，4.18(m，1H，CH-O)，3.69(m，1H，CH-N)，2.38-2.20(m，2H)，2.18-1.98(m，2.00(s，3H，CH₃)1.68-1.20(m，4H)；MS(ES)：323.2(M⁺+1)。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。mp 245.5-246.5℃；¹H NMR(200MHz，CD3OD)δ8.33(m，2H，Ar-H)，7.42(m，3H，Ar-H)，7.02(d，1H，J＝3.6Hz，ピロル-H)，6.53(d，1H，J＝3.6Hz，ピロル-H)，4.26(m，1H，CH-O)，3.62(m，1H，CH-N)，2.30-2.12(m，2H)，2.12-1.96(m，2H)，1.64-1.34(m，4H)；MS，M+1＝309.3；分析(C₁₉H₂ N₄O)C，H，N。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-(3-ピリジル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.21-1.54(m，8H)；2.28(s，3H)；2.33(s，3H)；3.70(m，1H)，4.31(m，1H)，4.89(d，1H)，7.40(m，1H)，8.61(m，2H)，9.64(m，1H)；MS(ES)：338.2(M⁺+1)。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-(2-フリル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.26-1.64(m，8H)，2.22(s，3H)，2.30(s，3H)，3.72(m，1H)，4.23(m，1H)，4.85(d，1H)，6.52(m，1H)，7.12(m，1H)，7.53(m，1H)，9.28(s，1H)；MS(ES)：327.2(M⁺+1)。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-(3-フリル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.25-1.63(m，8H)，2.11(s，3H)，2.27(s，3H)，3.71(m，1H)，4.20(m，1H)，4.84(d，1H)，7.03(m，1H)，7.45(m，1H)，8.13(m，1H)，10.38(m，1H)；MS(ES)：327.2(M⁺+1)。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-シクロペンチル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.26-2.04(m，16H)，2.26(s，3H)，2.27(s，3H)，3.15(m，1H)，3.70(m，1H)，4.12(m，1H)，4.75(d，1H)；MS(ES)：329.2(M⁺+1)。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-(2-チエニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-アミン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)1.28-1.59(m，8H)，2.19(s，3H)，2.29(s，3H)，3.74(m，1H)，4.19(m，1H)，4.84(d，1H)，7.09(m，1H)，7.34(m，1H)，7.85(m，1H)，9.02(s，1H)；MS(ES)：343.2(M⁺+1)。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-(3チエニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.21-1.60(m，8H)，1.98(s，3H)，2.23(s，3H)，3.66(m，1H)，4.22(m，1H)，7.27(m，1H)，7.86(m，1H)，8.09(m，1H)，11.23(s，1H)；MS(ES)：343.2(M⁺+1)。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-(4フルオロフェニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.26-1.66(m，8H)，1.94(s，3H)，2.28(s，3H)，3.73(m，1H)，4.33(m，1H)，4.92(d，1H)，7.13(m，2H)，8.41(m，2H)，11.14(s，1H)；MS(ES)：355.2(M⁺+1)。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-(3-フルオロフェニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.26-1.71(m，8H)，2.06(s，3H)，2.30(s，3H)，3.72(m，1H)，4.30(m，1H)，4.90(d，1H)，7.09(m，1H)，7.39(m，1H)，8.05(m，1H)，8.20(m，1H)，10.04(s，1H)；MS(ES)：355.2(M⁺+1)。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-(2-フルオロフェニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.30-1.64(m，8H)，2.17(s，3H)，2.31(s，3H)，3.73(m，1H)，4.24(m，1H)，4.82(d，1H)，7.28(m，2H)，8.18(m，1H)，9.02(m，1H)，12.20(s，1H)；MS(ES)：355.3(M⁺+1)。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-イソプロピル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.31(d，J＝7.0Hz，6H)，1.30-1.65(m，8H)，2.27(s，3H)，2.28(s，3H)，3.01(m，J＝7.0Hz，1H)，3.71(m，1H)，4.14(m，1H)，4.78(d，1H)；MS(ES)：303.2。
dl-4-(2-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-イソプロピル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.31-1.42(br，4H)，1.75-1.82(br，4H)，2.02(S，3H)，2.(s，3H)，3.53(m，1H)，4.02(m，1H)，5.08(d，1H)，7.41-7.48(m，3H)，8.30(m，2H)，10.08(s，1H)；MS(ES)：337.2(M⁺+1)。
4-(3,4-trans-ジヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。MS(ES)：353.2(M⁺+1)。
4-(3,4-cis-ジヒドロキシルシクロへキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。MS(ES)：353.2(M⁺+1)。
4-(2-アセチルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。mp 196-199℃；¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.72(s，3H)，1.97(s，3H)，2.31(s，3H)，3.59(m，2H)，3.96(m，2H)，5.63(br，1H)，7.44-7.47(m，3H)，8.36-8.43(dd，J＝1Hz，7Hz，2H)，10.76(s，1H)；MS(ES)：324.5(M⁺+1)。
dl-4-(2-trans-ヒドロキシシクロペンチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン¹。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.62(m，2H)，1.79(br，4H)，1.92(s，3H)，2.29(s，3H)，4.11(m，1H)，4.23(m，1H)，5.28(d，1H)，7.41-7.49(m，3H)，8.22(m，2H)，10.51(s，1H)；MS(ES)：323.2(M⁺+1)。¹2-trans-ヒドロキシシクロペンチルアミンの調製についてはPCT 9417090を参照されたい。
dl-4-(3-trans-ヒドロキシシクロペンチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン¹。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.58-1.90(br，6H)，2.05(s，3H)，2.29(s，3H)，4.48-4.57(m，1H)，4.91-5.01(m，2H)，7.35-7.46(m，3H)，8.42-8.47(m，2H)，10.11(s，1H)；MS(ES)：323.2(M⁺+1)。¹3-trans-ヒドロキシシクロペンチルアミンの調製については、A-322242を参照されたい。
dl-4-(3-cis-ヒドロキシシクロペンチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン¹。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.82-2.28(br，6H)，2.02(s，3H)，2.30(s，3H)，4.53-4.60(m，1H)，4.95-5.08(m，1H)，5.85-5.93(d，1H)，7.35-7.47(m，3H)，8.42-8.46(m，2H)，10.05(s，1H)；MS(ES)：323.2(M⁺+1)。¹3-cis-ヒドロキシシクロペンチルアミンの調製については、EP-A322242を参照されたい。
4-(3,4-trans-ジヒドロキシシクロペンチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン¹。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.92-1.99(br，2H)，2.14(s，3H)，2.20(br，2H)，2.30(s，3H)，2.41-2.52(br，2H)，4.35(m，2H)，4.98(m，2H)，7.38-7.47(m，3H)，8.38-8.42(m，2H)，9.53(s，1H)；MS(ES)：339.2(M⁺+1)。¹3,4-trans-ジヒドロキシシクロペンチルアミンの調製については、PCT 9417090ｑを参照されたい。
4-(3-アミノ-3-オキソプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.02(s，3H)，2.29(s，3H)，2.71(t，2H)，4.18(m，2H)，5.75-5.95(m，3H)，7.38-7.48(m，3H)，8.37-8.41(m，2H)，10.42(s，1H)；MS(ES)：310.1(M⁺+1)。
4-(3-N-シクロプロピルメチルアミノ-3-オキソプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CD₃OD)δ0.51(q，2H)，0.40(q，2H)，1.79-1.95(br，1H)，2.36(s，3H)，2.40(s，3H)，2.72(t，2H)，2.99(d，2H)，4.04(t，2H)，7.58-7.62(m，3H)，8.22-8.29(m，2H)；MS(ES)：364.2(M⁺+1)。
4-(2-アミノ-2-オキソエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CD₃OD)δ 2.31(s，3H)，2.38(s，3H)，4.26(s，2H)，7.36(m，3H)，8.33(m，2H)；MS(ES)：396.1(M⁺+1)。
4-(2-N-メチルアミノ-2-オキソエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.99(s，3H)，2.17(s，3H)，2.82(d，3H)，4.39(d，2H)，5.76(t，1H)，6.71(br，1H)，7.41-7.48(m，3H)，8.40(m，4H)，10.66(s，1H)；MS(ES)：310.1(M⁺+1)。
4-(3-tert-ブチルオキシl-3-オキソプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.45(s，9H)，1.96(s，3H)，2.29(s，3H)，2.71(t，2H)，4.01(q，2H)，5.78(t，1H)，7.41-7.48(m，3H)，8.22-8.29(m，2H)；MS(ES)：367.2(M⁺+1)。
4-(2-ヒドロキシエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.92(s，3H)，2.29(s，3H)，3.81-3.98(br，4H)，5.59(t，1H)，7.397.48(m，3H)，8.37(m，2H)，10.72(s，1H)；MS(ES)：283.1(M⁺+1)。
4-(3-ヒドロキシプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.84(m，2H)，1.99(s，3H)，2.32(s，3H)，3.62(t，2H)，3.96(m，2H)，3.35(t，1H)，7.39-7.48(m，3H)，8.36(m，2H)，10.27(s，1H)；MS(ES)：297.2(M⁺+1)。
4-(4-ヒドロキシブチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.71-1.82(m，4H)，1.99(s，3H)，2.31(s，3H)，3.68-3.80(m，4H)，5.20(t，1H)，7.41-7.49(m，3H)，8.41(m，2H)，10.37(s，1H)；MS(ES)：311.2(M+1)。
4-(4-trans-アセチルアミノシクロへキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン
4-(4-trans-メチルスルホニルアミノシクロへキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。
4-(2-アセチルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン。
4-(4-trans-ヒドロキシシクロへキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン。
4-(3-ピリジルメチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン。
4-(2-メチルプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-7-(1-フェニルエチル)ピロロ[2,3-d]ピリミジン。
【０３０８】
例２：０℃にまで冷却したTHF(1.0mL)中のトリフェニルホスフィン(0.047g，0.179mmol)および安息香酸(0.022g，0.179mmol)の撹拌溶液に、4-(4-trans-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(0.05g，0.149mmol)を０℃で添加した。次いでジエチルアゾジカルボン酸塩0.028mL，0.179mmol)を１０分にわたり滴下添加した。次いで反応物を室温にまで加温した。TLCにより反応が完了した後、反応混合物を重炭酸ナトリウム水溶液(3.0mL)を用いてクエンチした。水層を分離し、エーテルを用いて抽出した(2x5.0mL)。有機抽出物を合体させ、乾燥させ、乾燥するまで真空下で濃縮した。残渣にエーテル(2.0mL)およびヘキサン(5.0mL)を添加した後、大部分の酸化トリフェニルホスフィンを濾過除去した。濾液を濃縮して、粘性のある油状物を得、これをカラムクロマトグラフィ(ヘキサン：酢酸＝4：1)により精製して、5.0mg(7.6％)の4-(4-cis-ベンゾイルオキシシクロへキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。MS(ES)：441.3(M⁺+1)。この反応もまた50.0mg(84％)の4-(3-シクロヘキシニル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを生成した。MS(ES)：319.2(M⁺+1)。
例３：エタノール(1.0mL)中の4-(4-cis-ベンゾイルオキシシクロへキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(5.0mg,mmol)の溶液に、10滴の2M水酸化ナトリウムを添加した。１時間後、反応混合物を酢酸を用いて抽出し(3x5.0mL)、有機層を乾燥させ、濾過し、乾燥するまで真空下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ(ヘキサン：酢酸＝4：1)に供し、3.6mg(94％)の4-(4-cis-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。MS(ES)：337.2(M⁺+1)。
次の化合物を例３と同様の手法で得た：
4-(3-N,N-ジメチル-3-オキソプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.01(s，3H)，2.31(s，3H)，2.73(t，2H)，2.97(s，6H)，4.08(m，2H)，6.09(t，1H)，7.41-7.48(m，3H)，8.43(m，2H)，10.46(s，1H)；MS(ES)：338.2(M⁺+1)。
4-(2-ホルミルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.26(s，3H)，2.37(s，3H)，3.59-3.78(m，2H)，3.88-4.01(m，2H)，5.48-5.60(m，1H)，7.38-7.57(m，3H)，8.09(s，1H)，8.30-8.45(m，2H)，8.82(s，1H)；MS(ES)：310.1(M⁺+1)。
4-(3-アセチルアミノプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。MS(ES)：338.2(M⁺+1)。
【０３０９】
例４：4-(3-tert-ブチルオキシ-3-オキソプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(70.0mg，0.191mmol))をトリフルオロ酢酸：ジクロロメタン(1:1，5.0mL)中に溶解させた。得られた溶液を室温で１時間撹拌し、次いで２時間還流させた。室温にまで冷却した後、混合物を乾燥するまで真空下で濃縮した。残渣を分取用薄膜クロマトグラフィ(EtOAc：ヘキサン：AcOH＝7：2.5：0.5)に供して、40.0mg(68％)の4-(3-ヒドロキシ-3-オキソプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。¹H NMR(200MHz，CD₃OD)δ2.32(s，3H)，2.38(s，3H)，2.81(t，2H)，4.01(t，2H)，7.55(m，3H)，8.24(m，2H)；MS(ES)：311.1(M⁺+1)。
【０３１０】
例４と同様の手法で次の化合物を得た：
4-(3-アミノプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。MS(ES)：296.1(M⁺+1)，279.1(M-NH₃)。
【０３１１】
例５：4-(3-ヒドロキシ-3-オキソプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(50.0mg，0.161mmol)を、N,N-ジメチルホルムアミド(0.50mL)、ジオキサン(0.50mL)および水(0.25mL)の混合物中に溶解させた。この溶液に、メチルアミン(0.02mL，水中に40％重量，0.242mmol)、トリエチルアミン(0.085mL)およびN,N,N'N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロホウ酸塩(61.2mg，0.203mmol)を添加した。室温で10分撹拌した後、溶液を濃縮し、残渣を分取用薄膜クロマトグラフィ(EtOAc)に供して35.0mg(67％)の4-(3-N-メチル-3-オキソプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.92(s，3H)，2.30(s，3H)，2.65(t，2H)，4.08(t，2H)，5.90(t，1H)，6.12(m，1H)，7.45(m，3H)，8.41(m，2H)，10.68(s，1H)；MS(ES)：311.1(M⁺+1)。
次の化合物を例５と同様の手法で得た：
4-(2-シクロプロパンカルボニルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。MS(ES)：350.2(M⁺+1)。
4-(2-イソブチリルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。MS(ES)：352.2(M⁺+1)。
4-(3-プロピオニルアミノプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.00-1.08(t，3H)，1.71-2.03(m，4H)，2.08(s，3H)，2.37(s，3H)，3.263.40(m，2H)，3.79-3.96(m，2H)，5.53-5.62(m，1H)，6.17-6.33(m，1H)，7.33-7.57(m，3H)，8.31-8.39(m，2H)，9.69(s，1H)；MS(ES)：352.2(M⁺+1)。
4-(2-メチルスルホニルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.18(s，3H)，2.27(s，3H)，2.92(s，3H)，3.39-3.53(m，2H)，3.71-3.88(m，2H)，5.31-5.39(m，1H)，6.17-6.33(m，1H)，7.36-7.43(m，3H)，8.20-8.25(m，2H)，9.52(s，1H)；MS(ES)：360.2(M⁺+1)。
【０３１２】
例６：4-クロロ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(0.70g，2.72mmol)および1,2-ジアミノエタン(10.0mL，150mmol)の混合物を不活性雰囲気下で６時間還流させた。過剰のアミンを真空下で除去し、残渣を、エーテルおよびヘキサンを連続的に用いて洗浄し、0.75g(98％)の4(2-アミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。MS(ES)；282.2(M⁺+1)，265.1(M⁺-NH₃)。
【０３１３】
例７：ジクロロメタン(2.0mL)中の4-(2-アミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(70.0mg，0.249mmol)およびトリエチルアミン(50.4mg，0.498mmol)の溶液に、塩化プロピオニル(25.6mg，0.024mL，0.274mmol)を０℃で添加した。１時間後、混合物を真空下で濃縮し、残渣を分取用薄膜クロマトグラフィ(EtOAc)に供して22.0mg(26％)の4-(2-プロピオニルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。MS(ES)：338.2(M⁺+1)。
次の化合物を例７と同様の手法で得た：
4-(2-N'-メチルウレアエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.13(s，3H)，2.32(s，3H)，3.53(d，3H)，3.55(m，2H)，3.88(m，2H)，4.29(m，1H)，5.68(t，1H)，5.84(m，1H)，7.42(m，3H)，8.36(dd，2H)，9.52(s，1H)；MS(ES)：339.3(M⁺+1)。
4-(2-N'-エチルウレアエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。MS(ES)：353.2(M⁺+1)。
【０３１４】
例８：ジクロロメタン(2.0mL)中の1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(41.1mg，0.215mmol)、ジメチルアミノピリジン(2.4mg，0.020mmol)およびピルビン酸(18.9mg，0.015mL，0.215mmol)の溶液に、4-(2-アミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(55.0mg，0.196mmol)を添加した。この混合物を室温で４時間撹拌した。通常のworkup、次いでカラムクロマトグラフィ(EtOAc)を経て10.0mg(15％)の4-(2'-ピルビルアミドエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。MS(ES)：352.2(M⁺+1)。
例９：ジクロロメタン(2.0mL)中の4-(2-アミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(60.0mg，0.213mmol)の溶液に、N-トリメチルシリルイソシアン酸塩(43.3mg，0.051mL，0.320mmol)を添加した。この混合物を室温で３時間撹拌し、続いて重炭酸ナトリウム水溶液を添加した。少量のシリカゲルを介した濾過の後、濾液を真空下で濃縮して乾燥させ、9.8mg(14％)の4-(2-ウレアエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。MS(ES)：325.2(M⁺+1)。
【０３１５】
次の化合物を例９と同様の手法で得た：
dl-4-(2-アセチルアミノプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H-NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.28-1.32(d，J＝8Hz，3H)，1.66(s，3H)，1.96(s，3H)，2.30(s，3H)3.76-3.83(m，2H)，4.10-4.30(m，1H)，5.60-5.66(t，J＝6Hz，1H)，7.40-7.51(m，3H)，8.36-8.43(m，2H)，10.83(s，1H)；MS(ES)：338.2(M⁺+1)。
(R)-4-(2-アセチルアミノプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.31(d，3H)，1.66(s，3H)1.99(s，3H)，2.31(s，3H)，3.78-3.83(m，2H)，4.17-4.22(m，1H)，5.67(t，1H)，7.38-7.5(m，3H)，8.39(m，2H)，10.81(s，1H)；MS(ES)：338.2(M⁺+1)。
(R)-4-(1-メチル-2-アセチルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.41(d，3H)，1.68(s，3H)，2.21(s，3H)，2.34(s，3H)，3.46-3.52(br，m，2H)，4.73(m，1H)，5.22(d，1H)，7.41-7.46(m，3H)，8.36-8.40(m，2H)，8.93(s，1H)；MS(ES)：338.2(M⁺+1)。
(S)-4-(2-アセチルアミノプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.31(d，3H)，1.66(s，3H)2.26(s，3H)，2.35(s，3H)，3.78-3.83(m，2H)，4.17-4.22(m，1H)，5.67(t，1H)，7.38-7.5(m，3H)，8.39(m，2H)，8.67(s，1H)；MS(ES)：338.2(M⁺+1)。
(S)-4-(1-メチル-2-アセチルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.41(d，3H)，1.68(s，3H)，2.05(s，3H)，2.32(s，3H)，3.463.52(m，2H)，4.73(m，1H)，5.22(d，1H)，7.41-7.46(m，3H)，8.36-8.40(m，2H)，10.13(s，1H)；MS(ES)：338.2(M⁺+1)。
【０３１６】
例10：4-クロロ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの、dl-1-アミノ-2-(1,1-ジメチルエトキシ)カルボニルアミノ-プロパンおよびdl-2-アミノ-1-(1,1-ジメチル エトキシ)カルボニルアミノ-プロパンの混合物との反応を、例１と同様の手法で行った。反応を経てdl-4-(1-メチル-2-(1,1-ジメチルエトキシ)カルボニルアミノ)エチルアミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンおよびdl-4-(2メチル-2-(1,1-ジメチルエトキシ)カルボニルアミノ)エチルアミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンの混合物を得、これをカラムクロマトグラフィ(EtOAc：ヘキサン＝1：3)により分離した。第１の画分はdl-4-(1-メチル-2-(1,1-ジメチルエトキシ)カルボニルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンであった：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.29-1.38(m，12H)，1.95(s，3H)，2.31(s，3H)3.34-3.43(m，2H)，4.62-4.70(m，1H)，5.36-5.40(d，J＝8Hz，1H)，5.53(br，1H)，7.37-7.49(m，3H)，8.37-8.44(m，2H)，10.75(s，1H)。MS 396.3(M⁺+1)；第２の画分はdl-4-(2-(1,1-ジメチルエトキシ)カルボニルアミノプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンであった：¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.26-1.40(m，12H)，2.00(s，3H)，2.31(s，3H)，3.60-3.90(m，2H)，3.95-4.10(m，1H)，5.41-5.44(d，J＝6.0Hz，1H)，5.65(br，1H)，7.40-7.46(m，3H)，8.37-8.44(m，2H)，10.89(s，1H)；MS(ES)：396.2(M⁺+1)。
次の化合物を例10と同様の手法で得た：
(S,S)-4-(2-アセチルアミノシクロへキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.43(m，4H)，1.60(s，3H)，1.83(m，2H)，2.18(s，3H)，2.30(m，2H)，2.32(s，3H)，3.73(br，1H)，4.25(br，1H)，5.29(d，1H)，7.43-7.48(m，3H)，8.35-8.40(m，2H)，9.05(s，1H)。
4-(2-メチル-2-アセチルアミノプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.51(s，6H)，1.56(s，3H)，2.07(s，3H)，2.36(s，3H)，3.76(d，2H)，5.78(t，1H)，7.41-7.48(m，3H)，7.93(s，1H)，8.39(m，2H)，10.07(s，1H)；MS(ES)：352.3(M⁺+1)。
【０３１７】
例11：dl-4-(1-メチル-2-(1,1-ジメチルエトキシ)カルボニルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(60.6mg，0.153mmol)を、ジクロロメタン(2.0mL)中のトリフルオロ酢酸(0.5mL)を用いて14時間処理した。有機溶剤を乾燥するまで真空下で除去した。残渣をN,N-ジメチルホルムアミド(2.0mL)およびトリエチルアミン(2.0mL)中に溶解させた。この溶液に０℃で、無水酢酸(17.2mg，0.016，0.169mmol)を添加した。得られた混合物を 室温で48時間撹拌し、次いで乾燥するまで真空下で濃縮した。残渣を分取用薄膜クロマトグラフィ(EtOAc)に供して27.0mg(52％)のdl-4-(1-メチル-2-アセチルアミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.38-1.42(d，J＝8Hz，3H)，1.69(s，3H)，2.01(s，3H)，2.32(s，3H)3.38-3.60(m，2H)，4.65-4.80(m，1H)，5.23-5.26(d，J＝6Hz，1H)，7.40-7.51(m，3H)，8.37-8.43(m，2H)，10.44(s，1H)；MS(ES)：338.2(M⁺+1)。
【０３１８】
例12：例１と同様の手法で、4-クロロ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(0.15g，0.583mmol)および(1R,2R)-(-)-1,2-ジアミノシクロヘキサン(0.63g，5.517mmol)から調製された(R,R)-4-(2-アミノシクロへキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを、N,N-ジメチルホルムアミド(10.0mL)中のトリエチルアミン(0.726g，7.175mmol)および無水酢酸(0.325g，3.18mmol)を用いて室温で２時間処理した。溶剤を真空下で除去した後、酢酸(10.0mL)および水(10.0mL)を残渣に添加した。この混合物を分離し、水層を酢酸を用いて抽出した(2x10.0mL)。合体した酢酸エチル溶液を乾燥させ(MgSO₄)、濾過した。濾液を真空下で乾燥するまで濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィ(EtOAc：ヘキサン＝1：1)に供して57.0mg(26％)の(R,R)-4-(2-アセチルアミノシクロへキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.43(m，4H)，1.60(s，3H)，1.84(m，2H)，2.22(s，3H)，2.30(m，2H)，2.33(s，3H)，3.72(br，1H)，4.24(br，1H)，5.29(d，1H)，7.43-7.48(m，3H)，8.35-8.39(m，2H)，8.83(s，1H)；MS(ES)：378.3(M⁺+1)。
【０３１９】
例13：ピリジン(1.0mL)中の4-(2-ヒドロキシエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(40.0mg，0.141mmol)の溶液に、無水酢酸(0.108g，1.06mmol)を０℃で添加した。この混合物を室温で４時間撹拌し、溶剤を真空下で除去した。残渣を分取用薄膜クロマトグラフィ(EtOAc：ヘキサン＝1：1)に供して32.3mg(71％)の4-(2-アセチルオキシエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.90(s，3H)，2.08(s，3H)，2.31(s，3H)，4.05(m，2H)，4.45(t，2H)，5.42(m，1H)，7.41-7.49(m，3H)，8.42(m，2H)，11.23(s，1H)。
【０３２０】
例14：１滴のN,N-ジメチルホルムアミドを加えたジクロロメタン(4.0mL)中のFmoc-β-Ala-OH(97.4mg，0.313mmol)および塩化オキサリル(39.7mg，27.3μL，0.313mmol)の溶液を０℃で１時間撹拌し、続いて4-(2-アミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(80.0mg，0.285mmol)およびトリエチルアミン(57.6mg，79.4μL，0.570mmol)を０℃で添加した。３時間後、混合物を真空下で濃縮し、残渣を、N,N-ジメチルホルムアミド(2.0mL)中の20％ピペリジン溶液を用いて0.5時間処理した。溶剤を真空下で除去した後、残渣をジエチルエーテル：ヘキサン(1：5)で洗浄して3.0mg(3a)の4-(6-アミノ-3-アザ-4-オキソヘキシル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。MS(ES)：353.2(M⁺+1)。
【０３２１】
例15：１滴のN，N-ジメチルホルムアミドを加えたジクロロメタン(4.0mL)中の4-(2-アミノエチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン(70.0mg，0.249mmol)および無水コハク酸(27.0mg，0.274mmol)の溶液を室温で４時間撹拌した。反応混合物を20％水酸化ナトリウムを用いて抽出した(3x5.0mL)。この水溶液を3M 塩酸塩を用いて酸性化し、pH＝7.0にする。混合物全体を酢酸を用いて抽出した(3x10mL)。合体した有機溶液を乾燥させ(MgSO₄)、濾過した。濾液を乾燥するまで真空下で濃縮して15.0mg(16％)の4-(7-ヒドロキシ-3-アザ-4,7-ジオキソヘプチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを得た。MS(ES)：382.2(M⁺+1)。
【０３２２】
例16：10mLのジメチルホルムアミド(DMF)に、室温で700mgの4-cis-3-ヒドロキシシクロペンチル)アミノ-2-フェニル-5,6-ジメチル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジンを添加し、続いて455mgのN-Boc グリシン、20mgのN,N-ジメチルアミノピリジン(DMAP)，293mgのヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBT)および622mgの1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(EDCL)を添加した。この反応混合物を一晩撹拌した。次いでDMFを減圧下で除去し、反応混合物を20mLの酢酸および50mLの水の間で分配した。水性の部分をさらに2x20mLの酢酸を用いて抽出し、合体した有機部分を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ濾過し、濃縮した。シリカゲル上の精製、酢酸／ヘキサンを用いた溶出により、410mgの所望の生成物を得た：4-(cis-3-(N-t-ブトキシカルボニル-2-アミノアセトキシ)シクロペンチル)アミノ-2-フェニル-5,6-ジメチル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)(M⁺+1)＝480.2。次いでこのエステルを5mLのジクロロメタン中の20％トリフルオロ酢酸を用いて室温で処理し、一晩放置し、次いで濃縮した。酢酸を用いた粉砕により300mgのオフホワイトの固体を得た；4-(cis-3-(2-アミノアセトキシ)シクロペンチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジントリフルオロ酢酸塩，MS(ES)(M⁺+1)＝380.1。
【０３２３】
当業における熟練者は、上記で開示された方法により次の化合物を合成できることを認識するであろう：
4-(cis-3-ヒドロキシシクロペンチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)(M⁺+1)＝323.1。4-(cis-3-(2-アミノアセトキシ)シクロペンチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジントリフルオロ酢酸塩，MS(ES)(M⁺+1)＝380.1。
4-(3-アセトアミド)ピペリジニル-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)(M⁺+1)＝364.2。
4-(2-N'-メチルウレアプロピル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)(M⁺+1)＝353.4。
4-(2-アセトアミドブチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)(M⁺+1)＝352.4。
4-(2-N'-メチルウレアブチル)アミノ-5,6-ジメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)(M⁺+1)＝367.5。
4-(2-アミノシクロプロピルアセトアミドエチル)アミノ-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)(M⁺+1)＝309.1。
4-(trans-4-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-2-(3-クロロフェニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)(M⁺+1)＝342.8。4-(trans-4-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-2-(3-フルオロフェニル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)(M-)＝327.2。
4-(trans-4-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ-2-(4-ピリジル)-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン，MS(ES)(M⁺+1)＝310.2。
【０３２４】
例１７
【化８７】

(7)のピロル窒素（スキームIX)を、塩基性の条件(basic contidion)下にてジ-t-ブチルジカルボン酸塩を用いて保護化し、対応するカルバミン酸塩(22)を得た。(22)のラジカル臭素化を位置選択的に行い、臭化物(23)を得た。一般的に、化合物(23)は様々な求核カップリングpartnersのための重要な(key)求電子中間体として働く。アルキル臭化物を三水和フェノラートナトリウムを用いて置換して化合物(24)を得た。続く塩化アリールの置換、およびt-ブチル carbamaze保護基の除去を一回の工程で行い、所望の赤色の化合物(25)を得た。
【０３２５】
スキームIXにしたがう化合物(22)〜(25)合成の詳細
【化８８】

ジ-t-ブチル ジカルボン酸塩(5.37g，24.6mmol)およびジメチルアミノピリジン(1.13g，9.2mmol)を、(7)(1.50g，6.15mmol)および ピリジン(30mL)を含んだ溶液に添加した。20時間後、反応物を濃縮し、残渣をCH₂Cl₂および水の間で分配した。CH₂Cl₂層を分離し、MgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮して黒色の固体を得た。フラッシュクロマトグラフィ(SiO₂；1/9 EtOAc/ヘキサン，R_f 0.40)を経て1.70g(80％)の白色の固体(22)を得た。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ8.50(m，2H，Ar-H)，7.45(m，3H，Ar-H)，6.39(s，1H，ピロル-H)，2.66(s，3H，ピロル-CH₃)，1.76(s，9H，カルバミン酸塩-CH₃)；MS，M+1＝344.1；Mpt＝175-177℃。
【０３２６】
【化８９】

N-ブロモスクシンイミド(508mg，2.86mmol)およびAIBN(112mg,mmol)を、(22)(935mg，2.71mmol)および CCl₄(50mL)を含んだ溶液に添加した。この溶液を還流にまで加熱した。２時間後、反応物を室温にまで冷却し、真空下で濃縮して白色の固体を得た。フラッシュクロマトグラフィ(SiO₂；1/1 CH₂Cl₂/ヘキサン，R_f 0.30)により960mg(84％)の白色の固体(23)を得た。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ8.52(m，2H，Ar-H)，7.48(m，3H，Ar-H)，6.76(s，1H，ピロル-H)，4.93(s，2H，ピロル-CH₂Br)，1.79(s，9H，カルバミン酸塩-CH)；MS，M+1＝423.9；Mpt＝155-157℃。
【０３２７】
【化９０】

三水和フェノール塩ナトリウム(173mg，1.02mmol)を、CH₂Cl₂(5mL)およびDMF(10mL)中に溶解した臭化物(23)(410mg，0.97mmol)の溶液に一度で添加した。２時間後、反応溶液をCH₂Cl₂および水の間で分配した。水層をCH₂Cl₂を用いて抽出した。合体したCH₂Cl₂層を水で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮して黄色の固体を得た。フラッシュクロマトグラフィ(SiO₂；1/6 EtOAc/ヘキサン，R_f 0.30)を経て210mg(50％)の白色の固体(24)を得た。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ8.53(m，2H，Ar-H)，7.48(m，3H，Ar-H)，7.34(m，2H，Ar-H)，7.03(m，3H，Ar-H)，6.83(s，1H，ピロル-H)，5.45(s，2H，ArCH₂O)，1.76(s，9H，カルバミン酸塩-CH)；MS，M⁺＝436.2。
【０３２８】
【化９１】

(24)(85mg，0.20mmol)、N-アセチルエチレンジアミン(201mg，1.95mmol)および DMSO(3mL)を含んだ溶液を100℃にまで加熱した。１時間後、温度を130℃にまで上げた。３時間後、反応物を室温にまで冷却し、EtOAcおよび水の間で分配した。水層をEtOAcを用いて抽出した(2x)。合体したEtOAc 層を水で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ(SiO₂；1/10 EtOH/ CHCl₃，R_f 0.25)により73mg(93％)の白色の泡状の固体(25)を得た。¹H NMR(200MHz，DMSO-d₆)δ11.81(br s，1H，N-H)，8.39(m，2H，Ar-H)，8.03(br t，1H，N-H)，7.57(br t，1H，N-H)，7.207.50(m，SH，Ar-H)，6.89-7.09(m，3H，Ar-H)，6.59(s，1H，ピロル-H)，5.12(s，2H，ARCH₂O)，3.61(m，2H，NCH)，3.36(m，2H，NCH)，1.79(s，3H，COCH₃)；MS，M⁺1＝402.6。
【０３２９】
例17と同様の手法で次の化合物を得る：
4-(2-アセチルアミノエチル)アミノ-6-フェノキシメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン、mp 196-197℃；MS(ES)：401.6(M⁺+1)。
4-(2-アセチルアミノエチル)アミノ-6-(4-フルオロフェノキシ)メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン、MS(ES)：420.1(M⁺+1)。
4-(2-アセチルアミノエチル)アミノ-6-(4-クロロフェノキシ)メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン、MS(ES)：436.1(M⁺+1)。
4-(2-アセチルアミノエチル)アミノ-6-(4-メトキシフェノキシ)メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン、MS(ES)：432.1(M⁺+1)。
4-(2-アセチルアミノエチル)アミノ-6-(N-ピリジン-2-オン)メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン、MS(ES)：403.1(M⁺+1)。
4-(2-アセチルアミノエチル)アミノ-6-(N-フェニルアミノ)メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3]ピリミジン、MS(ES)：400.9(M⁺+1)。4-(2-アセチルアミノエチル)アミノ-6-(N-メチル-N-フェニルアミノ)メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン、MS(ES)：414.8(M⁺+1)。
4-(2-N'-メチルウレアエチル)アミノ-6-フェノキシメチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン、MS(ES)：416.9(M⁺+1)。
【０３３０】
例18：アデノシンＡ₁アンタゴニストの合成
本明細書に記載した一般手順により、化合物1319および化合物1320（下記表13）を調製することができる。
【０３３１】
【化９２】

化合物1319(81％)¹H-NMR(d6-DMSO)d 1.37(m，4H)，1.93(m，2H)，2.01(m，2H)，4.11(brs，1H)，4.61(d，1H，J＝4.4Hz)，6.59(m，1H)，7.09(m，1H)，7.21(m，2H)，7.49(dd，1H，J＝8Hz，14Hz)，8.03(m，1H)，8.18(d，1H，J＝8Hz)，11.55(brs，1H)。MS(ES)：327.0(M⁺+1)。
化合物1320(31％)MS(ES)：343.1(M⁺+1)。
【０３３２】
例19：アデノシンＡ₁アンタゴニストの合成
以下の一般手順により、化合物1321（下記表13）を合成することができる。
【０３３３】
【化９３】

化合物28(10.93g，50.76mmol)をDMF(67mL)中に溶解させた。4-アミジノピリジン 塩酸塩(8.0g，50.76mmol)およびDBU(15.4g，101.5mmol)を続けて添加し、反応物を85℃にまで加熱した。22時間後、反応物を室温にまで冷却し、DMFを真空下で除去した。暗色の油状物を2M HCl(80mL)を用いて希釈した。反応物を静置させた。２時間後、溶液を10℃にまで冷却し、濾過した。固体を冷水で洗浄し、乾燥させて7.40gの黄色の固体固体，化合物29(69％)を得た。¹H-NMR(200MHz，d₆-DMSO)d 6.58(s，1H)，7.27(s，1H)，8.53(d，2H，J＝5.6)，9.00(d，2H，J＝5.2Hz)，12.35(brs，1H)。MS(ES)：212.8(M⁺+1)。
化合物29(7.4mmol，29.8mmol)をPOCl₃を用いて希釈し、105℃にまで加熱した。18時間後、反応物を室温にまで冷却し、POCl₃を真空下で除去する。濃い暗色の油状物を、MeOH(75mL)続いてエーテル(120mL)を用いて希釈する。非晶質の赤色の固体を濾過し、エーテルで洗浄して3.82gの赤色の固体を得る。粗製の固体は純度が約80％であり、さらに精製することなく次の反応に用いる。MS(ES)：230.7(M⁺+1)。
化合物1321 ¹H-NMR(15％)(200MH，d-DMSO)d 1.38(m，4H)，1.92(brs，2H)，2.02(brs，2H)，3.44(brs，1H)，4.14(brs，1H)，4.56(d，1H，J＝4Hz)，6.63(m，1H)，15(m，1H)，7.32(d，1H，J＝6.2Hz)，8.20(d，2H，J＝4.4Hz)，8.65(d，2H，J＝4.4Hz)，11.67(brs，1H)。MS(ES)：310.2(M⁺+1)。
化合物1501(表15 下記)¹H-NMR(70％)(200MHz，CD₃OD)d 1.84(s，3H)，3.52(t，2H，J＝6.0Hz)，3.83，t，2H，J＝6Hz)，6.51(d，1H，J＝3.4Hz)，7.06(d，1H，J＝3.8Hz)，7.42(m，3H)，8.36(m，2H)。MS(ES)：296.0(M⁺+1)。
【０３３４】
化合物1502(下記表15)MS(ES)：345.0(M⁺+1)。
化合物1500(下記表15)¹H-NMR(200MHz，CDCl₃)d 1.40-1.80(m，6H)，1.85-2.10(m，2H)，2.18(s，3H)，2.33(s，3H)，2.50(d，3H)，3.90-4.10(m，2H)，4.76(m，1H)，5.50(d，1H)，6.03(m，1H)，7.40(m，3H)，8.37(m，2H)，9.15(brs，1H)。MS(ES)：393.3(M⁺+1)。
【０３３５】
例20：アデノシンＡ₁アンタゴニストの合成
下記の一般手順により、化合物1504（下記表15）を合成することができる。
【０３３６】
【化９４】

化合物31(200mg，0.47mmol)をDCM(4mL)中に溶解させた。トリエチルアミン(51mg，O.5mmol)およびチオモルホリン(52mg，0.5mmol)を連続して添加した。溶液を数分間混合し、72時間静置した。反応物をDCMおよびH₂Oで希釈し、層を分離した。水層をDCMを用いて抽出した。合体したDCM 層をMgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。この粗製の試料にエチルエーテルを添加し、得られた固体を濾過して100mgの白色の固体，32(62％)を得た。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)d1.76(s，9H)，2.66(brs，2H)，2.79(brs，2H)，3.86(s，2H)，7.46(m，3H)，8.50(m，2H)。
【０３３７】
化合物32をDMSO(3mL)およびtrans-4-アミノシクロヘキサノール(144mg，1.25mmol)と合体させ、130℃にまで４時間加熱した。反応物を室温にまで冷却し、EtOAcおよびH₂Oを用いて希釈した。層を分離し、水層をEtOAc(2x)を用いて抽出した。合体した有機層をH₂Oおよび塩水で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。クロマトグラフィ(シリカ，8：1 CHCl₃/EtOH)を経て32mgの黄褐色の油状物を得た。エチルエーテルを添加し、得られた固体を濾過し、5mgの白色の固体(9％)を得た。OSIC-148265：¹H-NMR(200MHz，CD₃OD)：d1.44(brm，4H)，2.03(brm，2H)，2.21(brm，2H)，2.70(brm，8H)，3.63(m，4H)，3.92(m，1H)，4.26(brs，1H)，6.42(s，1H)，7.42(m，3H)，8.33(m，2H)。
【０３３８】
例21：の合成アデノシンA1 アンタゴニスト
下記に示す一般手順により、化合物1503（下記表15）を調製することができる。
【０３３９】
【化９５】

臭化物，化合物31(220mg，0.47mmol)を1：1 DMF：ジクロロメタン(5mL)中に溶解させた。これにK₂CO₃(71mg，0.52mmol)およびモルホリン(0.047mL，0.47mmol)を添加した。この混合物を室温で一晩撹拌した。溶剤を真空下で除去し、残渣をのH₂Oおよびジクロロメタン間で分配した。有機層をMgSO₄を用いて乾燥させ、濾過し、濃縮してオフホワイトの固体を得、これをエーテル／ヘキサンを用いて粉砕して175mgの白色の固体，33(84％)を得た。¹H-NMR(200MHz，CDCl₃):(1.9(9H，s)，2.54(4H，s)，3.65(4H，s)，3.85(1H，s)，6.59(1H，s)，7.45(3H，m)，8.5(2H，m)。
【０３４０】
化合物33(50mg，0.11mmol)および trans-4-アミノシクロヘキサノール(105mg，0.91mmol)をDMSO(2mL)中に取り出した。得られた溶液にN₂を噴霧し(sparged)、次いで油浴で100℃にまで加熱、一晩撹拌した。粗製の反応混合物を水中に注ぎ、酢酸(50mL)を用いて二回抽出した。合体した有機層をH₂Oで洗浄した。MgSO₄を用いて乾燥させ濾過した後、有機層を真空下で濃縮して橙色の固体を得た。クロマトグラフィ(シリカ，CH₂Cl₂中に10％ CH₂OH)を経て15mg(33％)を得た。¹H-NMR(200MHz，CDCl₃):(1.24-1.62(4H，m)，1.85(2H，m)，2.10(2H，m)，2.26(4H，m)，3.53(4H，m)，4.22(1H，m)，4.73(1H，m)，5.85(1H，d)，6.15(1H，s)，7.25(3H，m)，8.42(2H，M)，10.0(1H，s)。MS(ES)：408(M⁺+1)。
例20の調製工程と同様に、化合物32を適切に置換されたアミンを用いて処理することにより、化合物1500、1501および1502を調製することができる。
【０３４１】
ヒトアデノシンＡ _１ 及びＡ _２ａ 受容体の酵母β−ガラクトシダーゼレポーター遺伝子アッセイ：酵母菌株(S.cerevisiae)をヒトアデノシンＡ_１（Ａ_１Ｒ；CADUS菌株CY12660）又はヒトＡ_２ａ（Ａ_２ａ；CADUS菌株CY8362）で形質転換し、機能が測定できるようにｌａｃＺ（β−ガラクトシダーゼ）レポーター遺伝子を添加した。この形質転換についての記載を以下に列記する（酵母菌株参照）。Ａ_１及びＡ_２ａ受容体に対してほぼ同じ親和性を有する、強力なアデノシン受容体アゴニストであるＮＥＣＡ（５’−Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン）を、すべてのアッセイでリガンドとして使用した。ＮＥＣＡにより誘導されるβ−ガラクトシダーゼ活性をCY12660又はCY8362で阻害できるかどうか８通りの濃度（0.1〜10,000nM）で試験化合物を調べた。
【０３４２】
酵母保存培養の調製：酵母菌株CY12660及びCY8362のそれぞれを、ＬＴ寒天平板上に画線し、コロニーが観察されるまで３０℃でインキュベートした。これらのコロニーから採取した酵母をＬＴ液（ｐＨ６．８）に添加し、３０℃で１晩増殖させた。次いで、各酵母菌株を分光光度計(Molecular Devices VMAX)で測定してＯＤ_６００＝１．０〜２．０（約１〜２×１０^７細胞／mL）になるように希釈した。各６mLの酵母培養液に、４mLの４０％グリセロール（１：１．５体積：体積）を添加した（「酵母／グリセロール保存培養」）。この酵母／グリセロール保存培養から、１mLのアリコートを１０個調製し、アッセイで必要になるまで−８０℃で貯蔵した。
【０３４３】
酵母Ａ_１Ｒ及びＡ_２ａＲアッセイ：CY8362及びCY12660酵母／グリセロール保存培養の各１瓶を解凍し、ｐＨ６．８の補充ＬＴ液培地（５mLの４０％グルコース、０．４５mLの１Ｍ ＫＯＨ、及び２．５mLのPipes ｐＨ６．８を添加した９２mLのＬＴ液）を播種するために使用した。培養液を３０℃で１６〜１８時間（１晩）増殖させた。次いで、１晩増殖させた培養液のアリコートを、４Ｕ／mLのアデノシンデアミナーゼ（子ウシ腸粘膜由来のタイプＶＩ又はＶＩＩ、Ｓｉｇｍａ）含有ＬＴ培地で希釈して、CY8362（Ａ２ａＲ）でＯＤ_６００＝０．１５（１．５×１０^６細胞／mL）、また、CY12660（Ａ_１Ｒ）でＯＤ_６００＝０．５０（５×１０^６細胞／mL）とした。
【０３４４】
すべてのウェルで最終濃度が２％ＤＭＳＯとなるように、９６ウェルマクロタイタープレート中最終容積１００μLでアッセイを実施した。一次スクリーニングとして、１〜２通りの濃度（１０ｕＭ、１μＭ）の試験化合物を利用した。化合物をさらに精査選別するために、８通りの濃度（10000、１０００、５００、１００、５０、１０、１及び０．１ｎＭ）で試験した。各マイクロタイタープレートで、「コントロール」及び「トータル(Total)」ウェルに１０ｕLの２０％ＤＭＳＯを添加し、一方、「未知」ウェルに１０ｕLの（２０％ＤＭＳＯ中の）試験化合物を添加した。続いて、１０ｕLのＮＥＣＡ（Ａ_１Ｒは５ｕＭ、Ａ２_ａＲは１ｕＭ）を「トータル」及び「未知」ウェルに添加した。一方、「コントロール」ウェルには１０ｕLのＰＢＳを添加した。最後に、８０ｕLの酵母菌株CY8362又はCY12660をすべてのウェルに添加した。次いで、すべてのプレートを短時間撹拌し（LabLineオービタルシェーカーで２〜３分）、乾燥オーブン中３０℃で４時間インキュベートした。
【０３４５】
比色定量法（例えば、ONPG、CPRG）、発光定量法（例えば、Galacton-Star）、又は蛍光基質（例えば、ＦＤＧ、レゾルフィン）を用いて、β−ガラクトシダーゼ活性を定量することができる。現時点では、信号／ノイズ比が高く、干渉が比較的なく、低コストであることから蛍光検出が好ましい。蛍光β−ガラクトシダーゼ基質であるフルオレセインジガラクトピラノシド（FDG、MolecuLar Probes又はMarker Gene Technologies）をすべてのウェルに２０ｕL／ウェル（最終濃度＝８０ｕＭ）で添加した。プレートを５〜６秒間振とうし（LabLineオービタルシェーカー）、次いで、３７℃で９０分間インキュベートした（９５％Ｏ_２／５％ＣＯ_２インキュベーター）。９０分間のインキュベーション期間の最後に、２０ｕL／ウェルの１Ｍ Ｎａ_２ＣＯ_３を用いてβ−ガラクトシダーゼ活性を抑え、すべてのプレートを５〜６秒間振とうした。次いで、プレートを６秒間撹拌し、蛍光光度計（Tecan Spectrafluor；励起＝４８５ｎｍ、発光＝５３５ｎｍ）を用いて相対蛍光強度を測定した。
【０３４６】
計算：「コントロール」ウェルの相対蛍光値をバックグラウンドとみなし、「トータル」及び「未知」の値から差し引いた。化合物特性を対数変換して解析し（ｘ軸：化合物濃度）、その後単一部位競合カーブフィッティング(one site competition curve fitting)を用いてＩＣ_５０値を計算した(GraphPad Prism)。
【０３４７】
酵母菌株：Saccharomyces cerevisiae菌株CY12660[far1*1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14::trp1::LYS2 ste3*1156 gpa1(41)-Gαi3 lys2 ura3 leu2 trp1:his3；LEU2 PGKp-Mfα1リーダー-hA1R-PHO5term 2mu-orig REP3 Ampr]及びCY8362[gpa1p-rGαsE10K far1*1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14::trp1:LYS2 ste3*1156 lys2 ura3 leu2 trp1 his3;LEU2 PGKp-hA2aR 2mu-ori REP3 Ampr]を発生させた。
【０３４８】
ＬＴ培地：ＬＴ（Leu-Trp補充）培地は、以下のものを補充した１００ｇのＤＩＦＣＯ酵母窒素基礎培地からなる：１．０ｇバリン、１．０ｇアスパラギン酸、０．７５ｇフェニルアラニン、０．９ｇリジン、０．４５ｇチロシン、０．４５ｇイソロイシン、０．３ｇメチオニン、０．６ｇアデニン、０．４ｇウラシル、０．３ｇセリン、０．３ｇプロリン、０．３ｇシステイン、０．３ｇアルギニン、０．９ｇヒスチジン、及び１．０ｇトレオニン。
【０３４９】
ヒトＡ _１ アデノシン受容体を発現する酵母菌株の構築
この例では、酵母フェロモンシステム経路中に機能的に組み込まれたヒトＡ_１アデノシン受容体を発現する酵母菌株の構築について説明する。
【０３５０】
Ｉ．発現ベクターの構築
ヒトＡ_１アデノシン受容体用酵母発現ベクターを構築するために、ヒトＡ_１アデノシン受容体の公表配列に基づいて設計されたプライマー及び標準技術を用いて、ヒト海馬ｍＲＮＡの逆転写酵素ＰＣＲによりＡ_１アデノシン受容体ｃＤＮＡを得た。このＰＣＲ産物を、酵母発現プラスミドpMP15のNcoI及びXbaI部位にサブクローニングした。
【０３５１】
pMP15プラスミドは、pLPXtから以下のようにして作製した。YEP51のXbaI部位（M．Inouye編、Experimental ManipuLation of Gene Expression．Academic Press、New York中の、Broach、J．R．等(1983)「Vectors for high-level、inducible expression of cloned genes in yeast」、８３〜１１７頁）を消化し、末端を平滑化し、再連結によって除去してYep51NcoDXbaを作製した。ＢａｍＨＩによる消化、平滑化、リンカー(New England Biolabs、#1081)の連結、XbaI消化、及び再連結によって、別のXbaI部位をＢａｍＨＩ部位に作製してYEP51NcoXtを生成させた。このプラスミドを、Esp31及びNcoIで消化し、ＰＣＲにより生成されるLeu2及びPGKp断片に連結した。この２ｋｂのLeu2 PCR産物は、Esp31及びBglII部位を含むプライマーを用いてYEP51Ncoから増幅して生成させた。６６０塩基対のＰＧＫｐ ＰＣＲ産物を、ＢｇｌＩＩ及びNcoI部位を含むＰＣＲプライマーを用いてｐＰＧＫαｓ（Kang、Ｙ．−Ｓ．等（１９９０）Mol.Cell.Biol.10:2582〜2590）から増幅して生成させた。得られたプラスミドをｐＬＰＸｔと呼ぶ。ａ−ファクタープレプロリーダーのコード領域をNcoI部位に挿入して、ｐＬＰＸｔを改変した。このプレプロリーダーは、NcoIクローニング部位がリーダーの３’末端で保持され、５’末端で再生されないように挿入した。このように、プラスミドをNcoI及びXbaIで消化して受容体をクローン化することができる。得られたプラスミドをｐＭＰ１５と呼ぶ。
【０３５２】
ヒトＡ_１アデノシン受容体ｃＤＮＡが挿入されるこのｐＭＰ１５プラスミドをｐ５０９５と表記する。このベクターでは、この受容体ｃＤＮＡを酵母ａ−ファクタープレプロリーダーの３’末端に融合する。タンパク質の成熟中に、このプレプロペプチド配列が切断されて成熟した完全長の受容体が生成する。これは、この受容体が酵母の分泌経路経由でプロセシングを受ける間に起こる。このプラスミドを、Ｌｅｕ選択（すなわち、ロイシンを欠く培地上での増殖）により維持する。このクローン化されたコード領域の配列を決定し、それが公表文献（GenBankアクセッション番号S45235及びS56143）の配列と同等であることがわかった。
【０３５３】
ＩＩ．酵母菌株の構築
ヒトＡ_１アデノシン受容体を発現する酵母菌株を作製するために、酵母菌株CY7967を初発の親菌株として使用した。CY7967の遺伝子型は以下の通りである：MATα gpaD1163 gpa1(41)Gαi3 far1D1442 tbt-1 FUS1-HIS3 can1 ste14::trp1::LYS2 ste3D1156 lys2 ura3 leu2 trp1 his3
これらの遺伝マーカーを以下に概説する：
ＭＡＴａ……交配型ａ
gpa1D1163……内在酵母Ｇ−タンパク質ＧＰＡ１が欠失している。
gpa1(41)Gαi3……gpa1(41)-Gai3が酵母ゲノム中に組み込まれた。このキメラＧａタンパク質は、同族Ｎ−末端アミノ酸が欠失した哺乳動物Ｇ−タンパク質Ｇａ３に融合された内在酵母ＧａサブユニットＧＰＡ１の最初の４１個のアミノ酸から構成される。
far1D1442……（細胞周期停止の原因である）ＦＡＲ１遺伝子が欠失している（これにより、フェロモン応答経路の活性化による細胞周期停止を防止する）。
tbt-1……エレクトロポレーションによる高い形質転換効率を有する菌株。
FUS1-HIS3……ＦＵＳ１プロモーターとＨＩＳ３コード領域との融合物（これにより、フェロモン誘導ＨＩＳ３遺伝子を作製する）。
ｃａｎ １……アルギニン／カナバニン(canavinine)透過酵素。
ste14::trp1::LYS2……Ｃ−ファルネシルメチルトランスフェラーゼであるＳＴＥ１４の遺伝子破壊（これにより、フェロモン経路経由の基礎的な情報伝達が低下する）。
ste3D1156……内在酵母ＳＴＲ、ａ−ファクターフェロモン受容体（ＳＴＥ３）が破壊されている。
ｌｙｓ２…………２−アミノアジピン酸（aminoapidate）レダクターゼが欠損。酵母が増殖するにはリジンが必要である。
ｕｒａ３…………オロチジン−５’−リン酸デカルボキシラーゼが欠損。酵母が増殖するにはウラシルが必要である。
【０３５４】
ｌｅｕ２…………ｂ−イソプロピルリンゴ酸デヒドロゲナーゼが欠損。酵母が増殖するにはロイシンが必要である。
ｔｒｐ１…………ホスホリボシルアントラニル酸が欠損。酵母が増殖するにはトリプトファンが必要である。
ｈｉｓ３…………イミダゾールグリセロールホスフェートデヒドロゲナーゼが欠損。酵母が増殖するにはヒスチジンが必要である。
２つのプラスミドをエレクトロポレーションにより菌株CY7967に形質転換した：プラスミドｐ５０９５（ヒトＡ_１アデノシン受容体をコードする；上記）及びＦＵＳ１−β−ガラクトシダーゼレポーター遺伝子プラスミドであるプラスミドｐ１５８４。プラスミドｐ１５８４は、プラスミドpRS426(Christianson,T.W.等(1992)Gene 110:119〜1122)から誘導した。プラスミドｐＲＳ４２６は、ヌクレオチド２００４〜２０１６にポリリンカー部位を含有する。ＦＵＳ１プロモーターとβ−ガラクトシダーゼ遺伝子との融合物を、制限部位ＥａｇＩ及びＸｈｏＩに挿入して、プラスミドｐ１５８４を作製した。ｐ１５８４プラスミドを、Ｔｒｐ選択（すなわち、ロイシンを欠く培地上での増殖）により維持する。
【０３５５】
得られるｐ５０９５及びｐ１５８４を有する菌株は、CY12660と呼ばれ、ヒトＡ_１アデノシン受容体を発現する。この菌株を液中又は寒天平板上で増殖させるために、ロイシン及びトリプトファンを欠く最少培地を使用した。（ＦＵＳ１−ＨＩＳ３をアッセイする）増殖アッセイを平板上で実施するために、この平板はｐＨ６．８になっており、０．５〜２．５mMの３−アミノ−１，２，４−トリアゾールを含有し、ロイシン、トリプトファン、及びヒスチジンを欠いていた。特異性のコントロールとして、１以上の他の酵母ベースの７回膜貫通受容体スクリーニングによる比較をすべての実験に含めた。
【０３５６】
ヒトＡ _２ａ アデノシン受容体を発現する酵母菌株の構築
この例では、酵母フェロモンシステム経路中に機能的に組み込まれるヒトＡ_２ａアデノシン受容体を発現する酵母菌株の構築について述べる。
【０３５７】
Ｉ．発現ベクターの構築
ヒトＡ２ａアデノシン受容体用酵母発現ベクターを構築するために、ヒトＡ２ａ受容体ｃＤＮＡを、Phil Murphy博士（ＮＩＨ）から入手した。このクローンを受け取り、そのＡ２ａ受容体挿入断片の配列を決定して、公表されている配列（GenBankアクセッション＃Ｓ４６９５０）と同一であることが判明した。ＶＥＮＴポリメラーゼを用いたＰＣＲによりこの受容体ｃＤＮＡをプラスミドから切除し、構成性ホスホグリセリン酸キナーゼ（ＰＧＫ）プロモーターにより酵母中で受容体を発現させるプラスミドｐＬＰＢＸにクローン化した。この挿入断片全体の配列を再度決定して、公表されている配列と同一であることが判明した。但し、使用したクローニング方法のため、GlySerValの３個のアミノ酸が、受容体のカルボキシ末端に付加されていた。
【０３５８】
ＩＩ．酵母菌株の構築
ヒトＡ２ａアデノシン受容体を発現する酵母菌株を作製するために、酵母菌株ＣＹ８３４２を出発親菌株として使用した。ＣＹ８３４２の遺伝子型は以下の通りである：MATa far1D1442 tbt1-1 lys2 ura3 leu2 trp1 his3 fus1-HIS3 can1 ste3D1156 gpaD1163 ste14::trp1::LYS2 gpa1p-rG_{α s}E10K（又はgpa1p-rG_{α S}D229S又はgpa1p-rG_{α S}E10K+D229S）。
【０３５９】
これらの遺伝マーカーは、Ｇ−タンパク質変異以外、実施例１に記載した通りである。ヒトＡ２ａ受容体発現では、内在酵母Ｇタンパク質ＧＰＡ１が欠失し、哺乳動物Ｇ_αｓで置換された酵母菌株を利用した。３個のラットＧ_αｓ変異体を利用した。これらの変異体は、酵母βγに効率的に結合するタンパク質にこれらの変異体を変換する１個又は２個の点変異を含んでいる。これらの変異体は、（１０番目のグルタミン酸がリジンで置換されている）Ｇ_αＳＥ１０Ｋ、（２２９番目のアスパラギン酸がセリンで置換されている）Ｇ_αＳＤ２２９５、及び（両方の点変異を含む）Ｇ_αＳＥ１０Ｋ＋Ｄ２２９Ｓと同定される。
【０３６０】
（３個の変異ラットＧ_αＳタンパク質のうち１個を有する）菌株ＣＹ８３４２を、親ベクターｐＬＰＢＸ（受容体⁻）又はｐＬＰＢＸ−Ａ２ａ（受容体⁻）のいずれかで形質転換した。（上記）β−ガラクトシダーゼコード配列に融合したＦＵＳ１プロモーターを有するプラスミドを添加して、フェロモン応答経路の活性度を評価した。
【０３６１】
ヒトＡ _１ アデノシン受容体を発現する酵母菌株を用いた機能アッセイ
この例では、ヒトＡ_１アデノシン受容体のモジュレーターの酵母中での機能スクリーニングアッセイの開発について説明する。
【０３６２】
Ｉ．アッセイに使用するリガンド
この受容体に対する天然アゴニストであるアデノシン、並びに他の２つの合成アゴニストを、このアッセイの開発に利用した。ＥＣ_５０が約７５ｎＭであると報告されているアデノシン、及び約５０ｎＭのアフィニティーがあると報告されている（−）−Ｎ６−（２−フェニルイソプロピル）−アデノシン（ＰＩＡ）を、一部の実験に使用した。５’−Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン（ＮＥＣＡ）をすべての増殖アッセイに使用した。増殖培地中にアデノシンが存在することによる情報伝達を防止するために、アデノシンデアミナーゼ（４Ｕ／mL）をすべてのアッセイで添加した。
【０３６３】
ＩＩ．酵母内の生物学的応答
様々なＧタンパク質サブユニットを発現する一連の酵母菌株にＡ_１受容体発現ベクター（上記ｐ５０９５）を導入して、異種酵母系におけるＡ_１アデノシン受容体の機能的な結合能力を評価した。これらの形質転換体の大部分が、Ｇ_α１又はＧ_α０サブタイプのＧ_αサブユニットを発現した。乱交雑受容体−Ｇαタンパク質カップリングが同定されるかどうかについて、追加のＧ_αタンパク質も試験した。種々の菌株において、ＳＴＥ１８又はキメラＳＴＥ１８−Ｇγ２構築物を酵母のゲノム中に組み込んだ。この酵母菌株は、欠陥ＨＩＳ３遺伝子及びＦＵＳ１−ＨＩＳ３の組込みコピーを有し、それによって３−アミノ−１，２，４−トリアゾール（０．２、０．５、及び１．０mMで試験）を含有しヒスチジンを欠く選択培地での選択が可能になる。形質転換体を単離し、３−アミノ−１，２，４−トリアゾール、４Ｕ／mLのアデノシンデアミナーゼを含有しヒスチジンを欠く培地上に単層を調製した。５μLの種々の濃度のリガンド（例えば、０、０．１、１．０、及び１０mMのＮＥＣＡ）を使用した。増殖を２日間モニターした。このようにして、リガンドに依存する増殖応答を種々の酵母菌株で試験した。結果を下記表１に要約する。記号（−）はリガンド依存受容体活性が検出されなかったことを示し、一方、（＋）はリガンド依存応答を意味する。用語「ＬＩＲＭＡ」は、リガンドに依存しない受容体によって媒介される活性化を示す。
【０３６４】
【表３】

表３に示したように、最も強い情報伝達が、ＧＰＡ_１（４１）−Ｇ_αｉ３キメラを発現する酵母菌株で起こることが判明した。
【０３６５】
ＩＩＩ．ｆｕｓ１−ＬａｃＺアッセイ
フェロモン応答経路活性の特徴をより完全に明らかにするために、アゴニストの刺激に応じたｆｕｓ１ＬａｃＺによるβ−ガラクトシダーゼ合成について測定した。β−ガラクトシダーゼアッセイを実施するために、Ｓｔｅ１８−Ｇγ２キメラ及びＧＰＡ_４１−Ｇ_αｉ３を同時発現する酵母菌株中で発現される、対数期中間部にあるヒトＡ_１アデノシン受容体培養物に漸増濃度のリガンドを添加した。形質転換体を単離し、ヒスチジン及び４Ｕ／mLのアデノシンデアミナーゼ存在下で１晩増殖させた。４Ｕ／mLのアデノシンデアミナーゼ及びリガンドと共に５時間インキュベーション後、β−ガラクトシダーゼが誘発されるかどうかを、β−ガラクトシダーゼの基質としてＣＰＲＧを用いて測定した。１回のアッセイ当たり５×１０^５の細胞を用いた。
【０３６６】
ＮＥＣＡによる刺激で得られる結果は、１０^−８ＭのＮＥＣＡ濃度で、β−ガラクトシダーゼ活性が約２倍刺激されることを示した。また、ＮＥＣＡ濃度１０^−５Ｍでは、約１０倍の刺激インデックス(stimuLation index)が観測された。
【０３６７】
この菌株に対する拮抗薬の活性を確認したことで、このアッセイの利用範囲が広がった。２種類の既知のアデノシン拮抗薬ＸＡＣ及びＤＰＣＰＸを、β−ガラクトシダーゼアッセイにおいて（５mMで）ＮＥＣＡと活性を競うことができるかどうか試験した。これらのアッセイでは、β−ガラクトシダーゼの誘発を、ＦＤＧを基質とし、１回のアッセイ当たり１．６×１０^５の細胞を用いて測定した。その結果、ＸＡＣとＤＰＣＰＸいずれも、酵母によって発現されるＡ_１アデノシン受容体の強力な拮抗薬として働き、ＩＣ_５０値がそれぞれ４４ｎＭ及び４９ｎＭであることが示された。
【０３６８】
この阻害効果がＡ_１サブタイプに特異的であるかどうかを決定するために、一連の補足実験を（実施例４に記載の）酵母ベースのＡ_２ａ受容体アッセイにより実施した。Ａ_２ａ酵母ベースのアッセイで得られた結果から、ＸＡＣが比較的効果のあるＡ_２ａ受容体拮抗薬であり、既報と一致することが示された。これに対し、ＤＰＣＰＸは、既報から予想される通りこの受容体に対して比較的不活性であった。
【０３６９】
ＩＶ．放射性リガンド結合
Ａ_１アデノシン受容体アッセイの特徴を、受容体の放射性リガンド結合パラメータを測定することによってさらに明らかにした。幾つかのアデノシン受容体基準化合物ＸＡＣ、ＤＰＣＰＸ、及びＣＧＳによる［^３Ｈ］ＣＰＸの結合の置換について、ヒトＡ_１アデノシン受容体を発現する酵母から調製したメンブレンを用いて分析した。ヒトＡ_１アデノシン受容体を発現する酵母メンブレンを用いた結果を、ヒトＡ２ａアデノシン受容体又はヒトＡ３受容体を発現する酵母メンブレンから得た結果と比較して、結合の特異性を調べた。このアッセイを実施するために、５０mgのメンブレンを０．４ｎＭ［^３Ｈ］ＣＰＸ及び漸増濃度のアデノシン受容体リガンドと共にインキュベートした。インキュベーションを、５０mMトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１mM EDTA、１０mM ＭｇＣｌ_２、０．２５％ＢＳＡ及び２Ｕ／mLアデノシンデアミナーゼ中で、プロテアーゼ阻害剤の存在下、室温で６０分間実施した。氷冷５０mMトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４＋１０mM ＭｇＣｌ_２を添加して結合を停止し、その後Packard96ウェルハーベスタを用いて、０．５％ポリエチレンイミン(polyethyenimine)を予め染み込ませたＧＦ／Ｂフィルターで素早くろ過した。Prism2.01ソフトウェアを用いた非線形最小二乗カーブフィッティング法によりデータを解析した。この実験で得たＩＣ_５０値を下記表４に要約する。
【０３７０】
【表４】

これらのデータは、前記基準化合物が文献に報告された親和性と一致する親和性を有することを示している。さらにこのデータは、酵母ベースのこのアッセイが、受容体サブタイプ特異性を識別するのに十分な感度を有することを示している。
【０３７１】
ヒトＡ２ａアデノシン受容体を発現する酵母菌株を用いた機能アッセイ
この例では、ヒトＡ_１アデノシン受容体のモジュレーターを酵母中で機能的にスクリーニングするアッセイの開発について説明する。
【０３７２】
Ｉ．アッセイに使用するリガンド
天然リガンドアデノシン、並びに特徴が完全に明確な他の市販リガンドを、酵母中で機能的に発現されるヒトＡ２ａ受容体の分析に使用した。このアッセイを確立するのに３つのリガンドを使用した。そのリガンドは、以下の通りである。
【０３７３】

アデノシンが増殖培地中に存在することによる情報伝達を防止するために、アデノシンデアミナーゼ（４Ｕ／mL）をすべてのアッセイで添加した。
【０３７４】
ＩＩ．酵母内の生物学的応答
Ａ２ａ受容体発現プラスミドで形質転換され、Ｇ_αＳＥ１０Ｋ、Ｇ_αＳＤ２２９Ｓ又はＧ_αＳＥ１０Ｋ＋Ｄ２２９Ｓのいずれかを発現する酵母において、フェロモン応答経路を刺激する能力についてＡ２ａ受容体アゴニストを試験した。受容体に依存したリガンドのフェロモン応答経路刺激能力は、酵母の表現型が変化することにより示された。受容体が活性化されると、ヒスチジン要求体からヒスチジン原栄養体に表現型が変化した（ｆｕｓ１−ＨＩＳ３の活性化）。３つの別個の形質転換体を単離し、ヒスチジンの存在下で１晩増殖させた。細胞を洗浄してヒスチジンを除去し、２×１０^６細胞／mLに希釈した。（ヒスチジンを含む）非選択培地又は選択培地（１mM ＡＴ）上に、４Ｕ／mLのアデノシンデアミナーゼ非存在下又は存在下で、５μLの各形質転換体を点在させた。平板を３０℃で２４時間増殖させた。ヒスチジン存在下では、受容体^＋（Ｒ^＋）及び受容体⁻（Ｒ⁻）菌株のいずれも、増殖することができた。しかし、ヒスチジン非存在下では、Ｒ^＋細胞だけが増殖した。これらのプレートにリガンドを添加しなかったので、この結果には２通りの説明が可能であった。１つの可能な解釈は、この受容体を有する酵母が、リガンドに依存しない受容体によって媒介される活性化（ＬＩＲＭＡ）のために増殖が有利であったというものである。もう１つの解釈によれば、この酵母はリガンドのアデノシンを合成することができた。これら２通りの可能性を判別するために、このリガンドを分解する酵素であるアデノシンデアミナーゼ（ＡＤＡ）を、増殖中の酵母及び平板に添加した。アデノシンデアミナーゼの存在下では、Ｒ^＋細胞はヒスチジン非存在下でもはや増殖せず、この酵母が実際にリガンドを合成することが示された。
【０３７５】
この解釈を、液中のＡ２ａ増殖アッセイによって確認した。この実験では、Ｒ^＋酵母（Ａ２ａ受容体を発現するＧ_αＳＥ１０Ｋ菌株）を、３通りの密度（１×１０^６細胞／mL、３×１０^５細胞／mL、又は１×１０^５細胞／mL）で、アデノシンデアミナーゼ（４Ｕ／mL）の存在下又は非存在下で播種した。ＨＩＳ３遺伝子のタンパク質産物であるイミダゾールグリセロール−Ｐデヒドラターゼの競合的拮抗薬である３−アミノ−１，２，４−トリアゾール（ＡＴ）の濃度が増加するにつれ（０、０．１、０．２、又は０．４mM）、アッセイの厳密性が増した。アデノシンデアミナーゼ及び３−アミノ−１，２，４−トリアゾール酵母の存在下では、増殖は弱まった。しかし、３−アミノ−１，２，４−トリアゾールの非存在下では、アデノシンデアミナーゼはほとんど効果がなかった。したがって、アデノシンデアミナーゼ自体は、フェロモン応答経路に対して直接の効果を持たなかった。
【０３７６】
増殖を測定する別の手法であり、高スループットスクリーニング用に小型化できる手法は、Ａ２ａ受容体リガンドスポットアッセイ(spot assay)である。Ａ２ａ受容体を発現する（Ａ２ａＲ＋）又はこの受容体を欠く（Ｒ−）Ｇ_αｓＥ１０Ｋ菌株を、ヒスチジン及び４Ｕ／mLアデノシンデアミナーゼ存在下で１晩増殖させた。細胞を洗浄してヒスチジンを除去し、５×１０^６細胞／mLに希釈した。１×１０^６細胞を、４Ｕ／mLアデノシンデアミナーゼ及び０．５又は１．０mM３−アミノ−１，２，４−トリアゾール（ＡＴ）含有選択平板上に蒔き、１時間乾燥した。５μLの以下の試薬をこの単層に塗布した：１０mMアデノシン、３８．７mMヒスチジン、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、１０mM ＰＩＡ又は１０mM ＮＥＣＡ。細胞を３０℃で２４時間増殖させた。その結果、受容体のない細胞は、ヒスチジンを培地に添加したときのみ増殖することができた。これに対し、Ｒ^＋細胞のみが、Ａ２ａ受容体リガンドＰＩＡ及びＮＥＣＡを点在させた区域で増殖した。この平板はアデノシンデアミナーゼを含有するので、アデノシンを点在させた場合に増殖しなかったことで、アデノシンデアミナーゼが活性であることが確認された。
【０３７７】
ＩＩＩ．ｆｕｓ１ ＬａｃＺアッセイ
酵母の交配経路の活性を定量化するために、fus1LacZによるβ−ガラクトシダーゼの合成について測定した。Ｇ_αＳＥ１０Ｋ、Ｇ_αＳＤ２２９Ｓ又はＧ_αＳＥ１０Ｋ＋Ｄ２２９Ｓを発現する酵母菌株を、ヒトＡ２ａ受容体をコードするプラスミド（Ｒ＋）又は受容体を欠くプラスミド（Ｒ−）で形質転換した。形質転換体を単離し、ヒスチジン及び４Ｕ／mLアデノシンデアミナーゼ存在下で１晩増殖させた。１×１０^７細胞を１×１０^６細胞／mLに希釈し、漸増濃度のＮＥＣＡに４時間曝し、その後細胞中のβ−ガラクトシダーゼ活性を測定した。その結果、β−ガラクトシダーゼ活性はＲ−菌株中で本質的に検出されず、一方、Ｇ_αＳＥ１０Ｋ、Ｇ_αＳＤ２２９Ｓ又はＧ_αＳＥ１０Ｋ＋Ｄ２２９Ｓのいずれかを発現するＲ＋菌株中では、ＮＥＣＡの濃度の増加に伴いβ−ガラクトシダーゼ活性量の増大が検出されることが示され、このことから、検出されるβ−ガラクトシダーゼ量が高濃度リガンドへの暴露に応じ投与量に依存して増加することが示された。この投与量依存性は、Ａ２ａ受容体を発現する細胞でのみ観測された。また、Ａ２ａ受容体に対して最も強力なＧ_αｓ構築物は、Ｇ_αｓＥ１０Ｋであった。Ｇ_αＳＤ２２９Ｓ構築物は、Ａ２ａ受容体に対する２番目に強力なＧ_αｓ構築物であり、Ｇ_αｓＥ１０Ｋ＋Ｄ２２９Ｓ構築物は、試験した３個のＧ_αｓ中で最も弱かったが、それでもこの構築物は、容易に検出可能な量のβ−ガラクトシダーゼ活性を刺激した。
【０３７８】
確認したアッセイのさらに詳細な説明は、１９９８年６月２日出願の米国特許出願第09/088985号「Functional Expression of Adenosine Receptors in Yeast」（代理人整理番号ＣＰＩ−０９３）を参照されたい（ここで、この内容全体を参照により本明細書に組み込む）。
【０３７９】
ヒトアデノシン受容体サブタイプの薬理学的キャラクタリゼーション
材料及び方法
材料 ［^３Ｈ］−ＤＰＣＰＸ［シクロペンチル−１，３−ジプロピルキサンチン、８−［ジプロピル−２，３−^３Ｈ（Ｎ）］（120.0Ｃｉ／ｍｍｏｌ）；［^３Ｈ］−ＣＧＳ 21680、［カルボキシエチル−^３Ｈ（Ｎ）］（３０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）及び［^１２５Ｉ］−ＡＢ−ＭＥＣＡ（［^１２５Ｉ］−４−アミノベンジル−５’−Ｎ−メチルカルボキサミドアデノシン）（2,200Cｉ／ｍｍｏｌ）をNew England Nuclear(Boston、MA)から購入した。ＸＡＣ（キサンチンアミン同族体(congener)）；ＮＥＣＡ（５’−Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン）；及びＩＢ−ＭＥＣＡは、Research Biochemicals International（ＲＢＩ、Ｎａｔｉｃｋ、ＭＡ）から購入した。アデノシンデアミナーゼ及び完全プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤をBoehringer Mannheim Corp.(Indianapolis、IN)から購入した。ヒトアデノシン２ａ［ＲＢ−ＨＡ２ａ］；アデノシン２ｂ［ＲＢ−ＨＡ２ｂ］又はアデノシン３［ＲＢ−ＨＡ３］受容体サブタイプを安定に発現するＨＥＫ−２９３細胞由来のメンブレンを、それぞれReceptor Biology(Beltsville、MD)から購入した。細胞培養試薬は、血清をHyclone（Logan、ＵＴ）から購入した以外は、Life Technologies(Grand Island、NY)から購入した。
【０３８０】
酵母菌株：Saccharomyces cerevisiae菌株CY12660[far1*1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14::trp1::LYS2 ste3*1156 gpa1(41)-Gαi3 lys2 ura3 leu2 trp1:his3;LEU2 PGKp-Mfα1リーダー-hA1R-PHO5term 2mu-orig REP3 Ampr]及びCY8362[gpa1p-rGαsE10K far1*1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14::trp1:LYS2 ste3*1156 lys2 ura3 leu2 trp1 his3;LEU2 PGKp-hA2aR 2mu-ori REP3 Ampr]を上述のように発生させた。
【０３８１】
培養酵母：形質転換した酵母を、２％グルコースを補充したＬｅｕ−Ｔｒｐ［ＬＴ］培地（ｐＨ５．４）で増殖させた。メンブレンを調製するため、２５０mLのＬＴ培地に、３０mLの１晩増殖させた培養物から得た１〜２×１０^６細胞／mLの初発力価を接種し、撹拌による持続的酸化の下で３０℃にてインキュベートした。１６時間増殖後、細胞を遠心分離して収集し、メンブレンを下記のように調製した。
【０３８２】
哺乳動物培養組織：ヒトアデノシン２ａ受容体サブタイプを安定に発現するＨＥＫ−２９３細胞（Cadus clone#5）を、１０％ウシ胎児血清及び１×ペニシリン／ストレプトマイシンを補充したダルベッコ最少必須培養液（ＤＭＥＭ）中で、５００mg／mLのＧ４１８抗生物質を用いた選択圧の下、加湿５％ＣＯ_２雰囲気中３７℃で増殖させた。
【０３８３】
酵母細胞メンブレンの調製：２５０mLの培養物を１晩インキュベートした後に、Sorvall RT6000遠心分離機を用いて２，０００×ｇで遠心分離して収集した。細胞を氷冷水で洗浄し、４℃で遠心分離し、そのペレットを、プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤（緩衝液２５mL当たり１錠）を補充した１０mLの氷冷溶解緩衝液［５mMトリス−ＨＣ１、ｐＨ７．５；５mM EDTA、及び５mM ＥＧＴＡ］に再懸濁した。ガラスビーズ（１７ｇ、４００〜６００メッシュ、Ｓｉｇｍａ）をこの懸濁液に添加し、４℃で５分間激しく撹拌して細胞を粉砕した。３０mLの溶解緩衝液＋プロテアーゼ阻害剤を添加してホモジネートを希釈し、３，０００×ｇで５分間遠心分離した。続いて、そのメンブレンを４５分間３６，０００×ｇ（Sorvall RC5B、タイプＳＳ３４ローター）でペレット状にした。得られたメンブレンペレットを、プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤（５０mLの緩衝液当たり１錠剤）を補充した５mLのメンブレン緩衝液［５０mMトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５；０．６mM EDTA；及び５mM ＭｇＣｌ_２］中に再懸濁し、その後の実験用に−８０℃で貯蔵した。
【０３８４】
哺乳動物細胞メンブレンの調製：ＨＥＫ−２９３細胞メンブレンを、既報（Duzic E等、J.Biol.Chem.、267、9844〜9852、1992）の通りに調製した。簡単に述べると、細胞をＰＢＳで洗浄し、ゴム製ポリスマンで収集した。Sorvall RT6000遠心分離機を用いて、４℃、２００×ｇで細胞をペレットにした。このペレットを、５mL／ｍの溶解緩衝液（５mMトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５；５mM EDTA；５mM ＥＧＴＡ；０．１mMフッ化フェニルメチルスルホニル、１０mg／mLペプスタチンＡ；及び１０mg／mLアプロチニン）中４℃で再懸濁し、ダンス型ホモジナイザーでホモジナイズした。次いで、この細胞溶解産物を、３６，０００×ｇ（Ｓｏｒｖａｌｌ ＲＣ５Ｂ、タイプＳＳ３４ローター）で４５分間遠心分離し、そのペレットを５mLのメンブレン緩衝液［５０mMトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５；０．６mM EDTA；５mM ＭｇＣｌ_２；０．１mMフッ化フェニルメチルスルホニル、１０mg／mLペプスタチンＡ；及び１０mg／mLアプロチニン）中で再懸濁し、その後の実験用に−８０℃で貯蔵した。
【０３８５】
Bradford色素結合法(Bradford、M.:Anal.Biochem.72:248(1976))に基づくＢｉｏ−Ｒａｄタンパク質アッセイキットを用いて、酵母及び哺乳動物メンブレン中の全タンパク質濃度を測定した。
【０３８６】
アデノシン１受容体サブタイプ飽和及び競合放射性リガンド結合：ヒトＡ_１受容体サブタイプで形質転換した酵母細胞由来のメンブレンへの飽和及び競合結合を、拮抗薬［^３Ｈ］ＤＰＣＰＸを放射性リガンドとして用いて実施した。メンブレンを濃度１．０mg／mLに結合緩衝液［10mM MgCl₂；1.0mM EDTA；０．２5%BSA；2U/mLアデノシンデアミナーゼ、及び１プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤／５０mL含有５０mMトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４］で希釈した。
【０３８７】
飽和結合では、メンブレン（５０μｇ／ウェル）を、漸増濃度の[³H]DPCPX(0.05〜25nM)と共に、最終体積１００μLの結合緩衝液中、２５℃で１時間、１０μＭ非標識ＸＡＣの非存在下及び存在下、９６−ウェルマイクロタイタープレート中でインキュベートした。
【０３８８】
競合結合では、メンブレン（５０μｇ／ウェル）を、[³H]DPCPX(1.0nM)と共に、最終体積１００mLの結合緩衝液中、２５℃で１時間、１０μＭ非標識ＸＡＣ又は漸増濃度の競合化合物の非存在下及び存在下、９６−ウェルマイクロタイタープレート中でインキュベートした。
【０３８９】
アデノシン２ａ受容体サブタイプ競合放射性リガンド結合：ヒトＡ２ａ受容体サブタイプを安定して発現するＨＥＫ２９３細胞由来のメンブレン上の競合結合を、アゴニスト［^３Ｈ］ＣＧＳ−２１６８０を放射性リガンドとして用いて実施した。メンブレンを、結合緩衝液［10mM MgCl₂；1.0mM EDTA；0.25%BSA、２Ｕ／mLアデノシンデアミナーゼ、及び１プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤／５０mL含有５０mMトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４］中に濃度０．２mg／mLで希釈した。メンブレン（１０μｇ／ウェル）を、[³H]CGS-21680(100nM)と共に、最終体積１００mLの結合緩衝液中、２５℃で１時間、５０μＭ非標識ＮＥＣＡ又は漸増濃度の競合化合物の非存在下及び存在下、９６−ウェルマイクロタイタープレート中でインキュベートした。
【０３９０】
アデノシン３受容体競合放射性リガンド結合：ヒトＡ３受容体サブタイプを安定して発現するＨＥＫ２９３細胞由来のメンブレン上の競合結合を、アゴニスト［^１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡを放射性リガンドとして用いて実施した。メンブレンを、結合緩衝液［１０mM ＭｇＣｌ_２；１．０mM EDTA；０．２５％ＢＳＡ；２Ｕ／mLアデノシンデアミナーゼ、及び１プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤／５０mL含有５０mMトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４］中に濃度０．２mg／mLで希釈した。メンブレン（１０μｇ／ウェル）を、［^１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡ（０．７５ｎＭ）と共に、最終体積１００μLの結合緩衝液中、２５℃で１時間、１０μＭ非標識ＩＢ−ＭＥＣＡ又は漸増濃度の競合化合物の非存在下及び存在下、９６−ウェルマイクロタイタープレート中でインキュベートした。
【０３９１】
インキュベーションの最後で、１０mM ＭｇＣｌ_２を補充した氷冷５０mMトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）緩衝液を添加して、Ａ_１、Ａ_２ａ、及びＡ_３受容体サブタイプ放射性リガンド結合アッセイを終了し、その後FILTERMATE196セルハーベスター(Packard)中で０．５％ポリエチレンイミン中に予め浸漬したガラス繊維フィルター（９６−ウェルＧＦ／B UniFilters、Packard）で素早くろ過した。このフィルタープレートを、５０μL／ウェル シンチレーション液（MicroScint-20、Packard）で乾燥被覆し、TopCount(Packard)でカウントした。アッセイは３回実施した。非特異的結合は、Ａ１Ｒ、Ａ２ａＲ、及びＡ３Ｒ結合アッセイでそれぞれ、結合全体の５．６±０．５％、１０．８±１．４％、及び１５．１±２．６％であった。
【０３９２】
アデノシン２ｂ受容体サブタイプ競合放射性リガンド結合：ヒトＡ２ｂ受容体サブタイプを安定して発現するＨＥＫ２９３細胞由来のメンブレン上の競合結合を、Ａ_１受容体拮抗薬［^３Ｈ］ＤＰＣＰＸを放射性リガンドとして用いて実施した。メンブレンを、結合緩衝液［1.0mM EDTA；0.1mMベンズアミジン、２Ｕ／mLアデノシンデアミナーゼ含有10mM Hepes-KOH、ｐＨ７．４］中に濃度０．３mg／mLで希釈した。メンブレン（１５μｇ／ウェル）を、[³H]DPCPX(15nM)と共に、最終体積１００μLの結合緩衝液中、２５℃で１時間、１０μＭ非標識ＸＡＣ又は漸増濃度の競合化合物の非存在下及び存在下、９６−ウェルマイクロタイタープレート中でインキュベートした。インキュベーションの最後で、氷冷10mM Hepes-KOH（ｐＨ７．４）緩衝液を添加してこのアッセイを終了し、その後Filtermate196セルハーベスター(Packard)中で０．５％ポリエチレンイミン中に予め浸漬したガラス繊維フィルター（９６ウェルＧＦ／Ｃ UniFilters、Packard）で素早くろ過した。このフィルタープレートを、５０μL／ウェル シンチレーション液（MicroScint-20、Packard）で乾燥被覆し、TopCount(Packard)でカウントした。アッセイは３回実施した。非特異的結合は、結合全体の１４．３±２．３％であった。
【０３９３】
[³H]DPCPXの特異的結合；[³H]CGS-21680及び[¹²⁵I]AB-MECAを、結合全体と非特異的結合との差として定義した。化合物の阻害割合を、結合全体に対して計算した。競合データを１サイトモデルへの反復カーブフィッティングによって解析し、Ｋ_Ｉ値をGraphPad Prizm 2.01ソフトウェアを用いてＩＣ_５０値から計算した（Cheng及びPrusof、Biochem.Pharmacol.22、3099〜3109、1973）。
【０３９４】
結果：
ある種の細胞表面受容体の主要な機能は、適切なリガンドを認識することである。したがって、本発明者らは、リガンド結合親和性を決定して、酵母で発現されるアデノシン１受容体サブタイプが機能的に完全であることを確定した。ヒトアデノシン１受容体サブタイプ構築物で形質転換したSaccharomyces cerevisiaeから調製した未精製メンブレンは、４．０±０．１９ｎＭのＫ_ｄで[³H]DPCPXの特異的な飽和性結合をもたらした。Ｋ_Ｄ及びＢ_ｍａｘ値は飽和等温線から計算され、このデータのスキャッチャード（Ｓｃａｔｃｈａｒｄ）変換から、単一クラスの結合部位が示された。酵母メンブレン調製物中のアデノシン結合部位の密度は、７１６．８±４３．４ｆｍｏｌ／mgメンブレンタンパク質と推算された。
【０３９５】
［^３Ｈ］ＤＰＣＰＸと以下の順位で競合すると予測されるサブタイプ選択的アデノシンリガンド（XAC、DPCPX;CGS-15943;Compound 600;Compound 1002;NECA、(R)-PIA;IB-MECA、及びアロキサジン）を用いて、ヒトＡ_１受容体サブタイプで形質転換した組換え酵母細胞の薬理学的サブタイプの諸特性を調べた。これらの化合物を用いて記録した置換曲線は、すべてのリガンドで典型的な急勾配を示し、各リガンドのデータを、単一部位フィッティングによりモデル化することが可能であった。この曲線から算出した個々の化合物の見掛け解離定数（表５）は、他の情報源から得られたこの受容体に対する公表値と一致する。
【０３９６】
【表５】

表６〜１２は、本発明のデアザプリンの有効性及び構造活性特性を示すものである。表１３及び１４は、デアザプリン構造の官能基を調節することによって、ヒトアデノシン受容体部位に対する選択性を実現できることを示している。表１４は、本明細書記載の化合物が、ナノモル以下の活性、及び表１３の化合物に比べて高いＡ_２ｂ受容体選択性を有することも示している。
【０３９７】
【表６】

【表７】

【表８】

【表９】

【表１０】

【表１１】

【表１２】

【表１３】

【表１４】

【表１５】

PCT/US01/45280の第176-201頁は、Ａ_２Ａ受容体に特異的な化合物に関する。
【０３９８】
＜発明の概要＞
本発明はまた、その治療的に有効な量を患者に投与することによって、アデノシンＡ_２Ａに特異的に選択的に結合し、それによって患者におけるＡ_２Ａアデノシン受容体に関連した疾患を治療する化合物に基づいている。治療すべき疾患は、例えば中枢神経系障害、心臓血管系障害、腎障害、炎症性障害、胃腸障害、眼科障害、アレルギー性障害または呼吸器障害に関連している。
【０３９９】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を特徴とする：
【化９６】

ここで、
NR₁R₂は、置換または非置換の4〜8員環であり；
Arは、置換または非置換の4〜6員環であり；
R₄は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、前記置換アルキルはC(R₈)(R₉)XR₆であり、XはO、S、またはNR₇であり、R₈およびR₉は夫々独立にHまたはアルキルであり、R₆およびR₇は夫々独立にアルキルまたはシクロアルキルであるか、またはR₆、R₇および窒素が一緒になって置換または非置換の4〜6員環を形成し；
R₅は、H、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
但し、NR₁R₂は、3-アセタミドピペリジノ、3-ヒドロキシピロリジノ、3-メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、3-アミノカルボニルメチル、またはピロリジノではなく；またNR₁R₂は、Arが4-ピリジルであるときにのみ3-ヒドロキシメチルピペラジノである。
【０４００】
本発明はまた、細胞においてＡ_2aアデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、前記細胞を上記化合物と接触させることを含んでなることを特徴とする。
【０４０１】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化９７】

ここで、
NR₁R₂は、置換もしくは非置換の4〜8員環であり；
Arは、置換もしくは非置換の4〜6員環であり；
R₄は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、前記置換アルキルは-C(R₈)(R₉)XR₆であり、XはO、S、またはNR₇であり、R₈およびR₉は夫々独立にHまたはアルキルであり、R₆およびR₇は夫々独立にアルキルまたはシクロアルキルであるか、またはR₆、R₇および窒素が一緒になって置換もしくは非置換の4〜7員環を形成し；
R₅は、H、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
但し、NR₁R₂は3-アセタミドピペラジノ、3-ヒドロキシピロリジノ、3-メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、3-アミノカルボニルメチル、またはピロリジノではなく；またArが4-ピリジルであるときにのみ、NR₁R₂は3-ヒドロキシメチルピペラジノである。
【０４０２】
当該化合物の一つの実施形態において、Arは置換もしくは非置換の4〜6員環、フェニル、ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、1,2,4トリアゾール、ピリジン、2(1H)-ピリドン、4(lH)-ピリドン、ピラジン,ピリミジンe、ピリダジン、イソチアゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、テトラゾール、ナフタレン、テトラリン、ナフチリジン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドール、2,3-ジヒドロインドール、1H-インドール、インドリン、ベンゾピラゾール、1,3-ベンゾジオキソール、ベンズオキサゾール、プリン、クマリン、クマロン、キノリン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、ベンズイミダゾール、キナゾリン、ピリド[2,3-b]ピラジン、ピリド[3,4b]ピラジン、ピリド[3,2-c]ピリダジン、プリド[3,4-b]-ピリジン、1H-ピラゾール[3,4-d]ピリミジン、プテリジン、2(1H)-キノロン、1(2H)-イソキノロン、1,4-ベンズイソオキサジン、ベンゾチアゾール、キノキサリン、キノリン-N-オキシド、イソキノリンN-オキシド、キノキサリン-N-オキシド、キナゾリン-N-オキシド、ベンズオキサジン、フタラジン、シンノリン、または下記構造であり：
【化９８】

ここで、Yは炭素または窒素である；
R₃は、H、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアリール、ハロゲン、メトキシ、メチルアミノ、メチルチオである。
【０４０３】
当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化９９】

ここで、mは1または2であり；R_A and R_Bは夫々独立にH、-OH、-CH₂OH、-CH₂CH₂OH、-C(=O)NH₂、ヘテロ原子、または-C(=O)NR₃R₃'であり；R₃はアリール、置換アリール、またはヘテロアリールであり；R₃'はアルキルまたはXR"で、XはOまたはNであり、R"は置換アルキルまたはアリールである。
【０４０４】
当該化合物のもう一つの実施形態において、R_lR₂Nは、(D)-2-アミノカルボニルピロリジノ、(D)-2-ヒドロキシメチルピロリジノ、(D)-2-ヒドロキシメチル-トランス-4-ヒドロキシピロリジノ、ピペラジノ、または3-ヒドロキシメチルピペラジノである。
【０４０５】
当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１００】

ここで、mは0、1、2、または3であり；Yは0、S、またはNRで、RはR_AもしくはR_Bであり；ここでR_AおよびR_Bは夫々独立に、H、OH、-CH₂0H、-CH₂CH₂OH、-C(=O)NH₂、ヘテロ原子、または-C(=O)NR₃R₃'であり；R₃はアリール、置換アリール、またはヘテロアリールであり；R₃'はアルキルまたはR₃"で、XはOまたはNであり、R"は置換アルキルまたはアリールである。
【０４０６】
当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０１】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０２】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０３】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０４】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０５】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０６】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０７】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０８】

当該化合物の更にもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０９】

当該化合物の更なる一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１１０】

本発明は更に、下記構造（Ｖ）を有する化合物を提供する：
【化１１１】

ここで、RはHまたはメチルである。
【０４０７】
化合物Ｖの一つの実施形態において、該化合物は下記構造を有する：
【化１１２】

化合物Ｖのもう一つの実施形態において、該化合物は下記構造を有する：
【化１１３】

本発明はまた、患者においてＡ_2aアデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、治療上有効な量の化合物ＩＶまたはＶを、該患者に投与することを含む方法を提供する。
【０４０８】
当該方法の一つの実施形態において、該化合物はアデニル酸シクラーゼを刺激することによって前記疾患を治療する。
【０４０９】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記患者は哺乳類である。
【０４１０】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記哺乳類はヒトである。
【０４１１】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記Ａ_2aアデノシン受容体はパーキンソン病、並びに運動活性、血管拡張、血小板阻害、好中球スーパーオキシド生成、認識障害、老年痴呆に関連した疾患に関連している。
【０４１２】
アデノシンＡ₁、Ａ_2a、Ａ_2bおよびＡ₃受容体に関連する疾患は、WO 99/06053およびWO-09822465、WO-09705138、WO 09511681、WO-09733879、JP-09291089、PCT/US98/16053および米国特許第5,516,894号に開示されており、それらの全体の内容を本明細書の一部として援用する。
【０４１３】
本発明はまた、化合物ＩＶまたはＶの水溶性プロドラッグを提供する。該水溶性プロドラッグは、インビボで代謝されて、Ａ_2aアデノシン受容体を選択的に阻害する活性薬物を生じる。
【０４１４】
当該プロドラッグの一つの実施形態において、前記プロドラッグは、エステラーゼに触媒された加水分解によりインビボで代謝される。
【０４１５】
本発明はまた、前記プロドラッグおよび薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０４１６】
本発明はまた、細胞においてＡ_２ａアデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、該細胞を、化合物ＩＶまたはＶと接触させることを含む方法を提供する。
【０４１７】
当該方法の一つの実施形態において、前記化合物は、前記Ａ_２ａアデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０４１８】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼科用配合剤である。
【０４１９】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は、眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である。
【０４２０】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は全身性配合剤である。
【０４２１】
本発明はまた、患者における胃腸疾患を治療する方法であって、該患者に対して、有効量の化合物ＩＶまたはＶを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０４２２】
当該方法の一つの実施形態において、前記疾患は下痢である。
【０４２３】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０４２４】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記化合物はＡ_２ａアデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０４２５】
本発明は更に、患者における呼吸器疾患を治療する方法であって、前記患者に対して、有効量の化合物ＩＶまたはＶを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０４２６】
当該方法の一つの実施形態において、前記疾患は喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、または上気道障害である。
【０４２７】
当該方法の一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０４２８】
当該方法の一つの実施形態において、前記化合物はＡ_２ａアデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０４２９】
本発明はまた、患者の目に対する損傷を治療する方法であって、前記患者に対して、有効量の化合物ＩＶまたはＶを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０４３０】
当該方法の一つの実施形態において、前記損傷は網膜または視神経乳頭損傷である。
【０４３１】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記損傷は急性または慢性である。
【０４３２】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記損傷は、緑内障、浮腫、貧血、低酸素症または外傷の結果である。
【０４３３】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０４３４】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記化合物はＡ_2aアデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０４３５】
本発明はまた、治療的有効量の化合物ＩＶまたはＶ、および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０４３６】
当該薬学的組成物の一つの実施形態において、前記治療的有効量は、パーキンソン病、並びに運動活性、血管拡張、血小板阻害、好中球スーパーオキシド生成、認識障害、老年痴呆に関連した疾患を治療するのに効果的なものである。
【０４３７】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼科用配合剤である。
【０４３８】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である。
【０４３９】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、は前記薬学的組成物は全身性配合剤である。
【０４４０】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は手術用灌注溶液である
本発明はまた、化合物ＩＶおよびＶ並びに何れかのドパミンエンハンサを含む、パーキンソン病のための併用療法を提供する。
【０４４１】
本発明は更に、化合物ＩＶおよびＶ並びに何れかの細胞傷害剤を含む、癌のための併用療法を提供する。
【０４４２】
本発明は更に、化合物ＩＶまたはＶ並びにプロスタグランジンアゴニスト、ムスカリン性アゴニスト、またはβ２アンタゴニストを含む、緑内障のための併用療法を提供する。
【０４４３】
本発明はまた、患者においてＡ_２ａアデノシン受容体に関連した疾患を治療するための包装された薬学的組成物であって：（ａ）治療上有効な量の化合物ＩＶまたはＶを保持する容器と；（ｂ）患者において前記疾患を治療するための前記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０４４４】
本発明はまた、化合物ＩＶを調製する方法であって：
（ａ）以下の二つを反応させて、
【化１１４】

次式の化合物を得る工程と；
【化１１５】

ここで、Ｐは除去可能な保護基である
（ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１１６】

（ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１１７】

（ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物をNHR₁R₂で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１１８】

を具備する方法を提供し、ここで、
NR₁R₂は、置換もしくは非置換の4〜8員環であり；
Arは、置換もしくは非置換の4〜6員環であり；
R₄は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、ここで前記置換アルキルは-C(R₈)(R₉)XR₆であり、Xは0、S、またはNR-であり、R₈およびR₉は夫々独立にHまたはアルキルであり、R₆およびR₇は夫々独立にアルキルまたはシクロアルキルであるか、またはR₆、R₇および窒素は一緒になって置換もしくは非置換の4〜7員環を形成し；
R₅は、H、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
但し、NR₁R₂は3-アセタミドピペラジノ、3-ヒドロキシピロリジノ、3-メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、3-アミノカルボニルメチル、またはピロリジノではなく；またNR₁R₂は、Arが4-ピリジルであるときにのみ3-ヒドロキシメチルピペラジノである。
【０４４５】
本発明は更に、化合物Ｖの調製方法であって：
（ａ）以下の二つを反応させて、
【化１１９】

次式の化合物を得る工程と；
【化１２０】

ここで、Ｐは除去可能な保護基である
（ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１２１】

（ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１２２】

（ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物を、最初にジメチルアミンおよびホルムアルデヒドで処理し、次いでN-メチルベンジルアミンで処理し、最後にNH₂R₁で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１２３】

を具備する方法を提供し、ここで、
R₁はアセタミドエチルであり；Arは4-ピリジルであり；RはHまたはメチルであり；R₅はN-メチル-N-ベンジルアミノメチルである。
【０４４６】
ここで使用する「化合物がＡ_2a選択的である」とは、該化合物が、アデノシンＡ_2aに対して、アデノシンＡ₁、Ａ_2bまたはＡ₃に対する結合定数より少なくとも５倍高い結合定数を有することを意味する。
【０４４７】
以下の実施例により本発明を更に説明するが、これらは如何なる意味でも更に限定するものとして解釈されるべきではない。背景の節において引用されたものを含めて、この出願の全体を通して引用された全ての参照文献、継続中の特許出願および発行された特許出願は、本明細書の一部をなすものとして本願に援用される。以下の例を通して使用されるモデルはモデルとして許容され、またこれらモデルにおける薬効の実証は、ヒトにおける薬効を予測させるものである。
【０４４８】
本発明は、以下の実験の詳細から更に良く理解されるであろう。しかし、ここで議論される特定の方法および結果は、特許請求の範囲において更に十分に既述された発明の単なる例示であることを、当業者は容易に理解するであろう。
【０４４９】
例22：アデノシンＡ_2aアンタゴニスト，化合物1601，1602，および1603の合成
【化１２４】

化合物26(10.93g，50.76mmol)をDMF(67mL)中に溶解させた。4-アミジノピリジン塩酸塩(8.0g，50.76mmol)およびDBU(15.4g，101.5mmol)を連続的に添加し、反応物を85℃にまで加熱した。22時間後、反応物を室温にまで冷却し、DMFを真空下で除去した。暗色の油状物を2M HCl(80mL)で希釈した。反応物を静置した。２時間後、溶液を10℃にまで冷却し、濾過した。固体を冷水で洗浄し、乾燥させて7.40gの黄色の固体，化合物27(69％)を得た。¹H-NMR(200MHz，d₆-DMSO) d 6.58(s，1H)，7.27(s，1H)，8.53(d，2H，J＝5.6)，9.00(d，2H，J＝5.2Hz)，12.35(br s，1H)。MS(ES)：212.8(M⁺+1)。
【０４５０】
化合物27(7.4mmol，29.8mmol)をPOCl₃で希釈し、105℃にまで加熱した。18時間後、反応物を室温にまで冷却し、POCl₃を真空下で除去する。濃い暗色の油状物をMeOH(75mL)で希釈し、続いてエーテル(120mL)で希釈する。非晶質の赤色の固体を濾過し、エーテルで洗浄して3.82gの赤色の固体を得た。粗製の固体，化合物28をおよを80％の純度で得、これをさらに精製せずに次の反応に用いる。¹H-NMR(200MHz，d₆-DMSO)d 6.58(s，1H)，7.27(s，1H)，8.53(d，2H，J＝5.6)，9.00(d，2H，J＝5.2Hz)，12.35(br s，1H)。MS(ES)：212.8(M⁺+1)。
【０４５１】
化合物1601：DMSO(5mL)およびD-プロリノール(500mg，4.94mmol)を化合物28(500mg，2.1mmol)に添加した。反応物を120℃にまで加熱した。18時間後、反応物を室温にまで冷却し、EtOAcおよびH₂Oで希釈した。層を分離させ、水層をEtOAcで抽出した(2x)。合体した有機相を、H2O(2x)、塩水で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮して200mgの黄褐色の固体を得た。この固体をEtOAcから再結晶化させ、82mgの黄褐色の固体(13％)を得た。¹H-NMR(200MHz，d₆-DMSO) d 2.05(m，4H)，3.43(m，1H)，3.70-4.00(m，3H)，4.50(br s，1H)，4.92(br s，1H)，6.62(m，1H)，7.22(m，1H)，8.22(d，2H，J＝6.0Hz)，6.64(d，2H，J＝6.2Hz)，MS(ES)：296.0(M⁺1)，融点＝210-220℃(decomp.)。
【０４５２】
化合物1602：クロマトグラフィ(シリカ，9：1 CHCl₃/MeOH)により10mgの黄褐色の固体(92％)を得た。¹H-NMR(d₆-DMSO) d 2.00-2.50(m，4H)，4.05(m，1H)，4.21(m，1H)，6.71(d，1H，J＝3.2Hz)，7.18(d，1H，J＝3.2Hz)，8.37(d，2H，J＝4.8Hz)，8.56(d，2H，J＝5.0Hz)。MS(ES)：309.1(M⁺+1)。
【０４５３】
化合物1603：クロマトグラフィ(シリカ, 20：1 ヘキサン/EtOAc)により135mgの黄褐色の固体(53％)を得た。¹H-NMR(d6-DMSO) d 2.00(m，4H)，3.43(br s，1H)，3.74(br s，2H)，3.87(br s，1H)，4.49(br s，1H)，4.93(m，1H)，6.56(m，1H)，7.12(m，1H)，7.40(m，3H)，8.34(m，2H)，11.62(br s，1H)。MS(ES)：295.1(M⁺+1)。
【０４５４】
化合物1605：50mL RBF中で、60mgの2-(4'-ピリジル)-4-クロロピリミジノピロールHCl 塩を、2mL 無水DMSO中に溶解させた。これに3-(R)-ヒドロキシ-(D)-プロリノールTFA 塩(380mg)および500mg 重炭酸ナトリウムを添加した。次いでこの混合物を窒素ガスを用いて５分フラッシュし、130℃にまで加熱した。２時間後、反応物を室温にまで冷却し、DMSOを真空下で除去した。残渣をEtOAc(15mL)および重炭酸ナトリウム飽和水溶液(15mL)の間で分配した。有機層を分離し、塩水(15mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させた。溶剤を除去した後、粗成物を分取用ＴＬＣ(CH₂Cl₂/MeOH＝95/5)により精製して35mg(50％)を得た。¹H-NMR(200MHz，CDCl₃)(2.3-2.5(1H)，3.4-3.8(3H)，4.4-4.6(2H)，6.4(1H)；7.1(1H)；8.2(d，2H)；8.7(d，2H)；11.0(1H)。MS(ES)：312(M⁺+1)。
【０４５５】
例23：アデノシンＡ_2aアンタゴニスト、化合物1606の合成
【化１２５】

化合物28(200mg)を、DMF(30mL)、(,(-ジメチルグリシンメチルエステル（2mL水中に73mg HCl 塩）および500mg 重炭酸ナトリウムを用いて処理した。18時間後、DMFを真空下で除去した。残渣をEtOAc(30mL)および重炭酸ナトリウム飽和水溶液(15mL)の間で分配した。有機層を塩水(15mL)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。クロマトグラフィ(シリカ，10：4 ヘキサン/EtOAc)により150mgの純粋な生成物，化合物29(69％)を得た。¹H-NMR(200MHz，CDCl₃),(1.4(s，6H)，3.8(s，3H)；3.9(s，2H)；6.4(s，1H)；7.4-7.5(m，3H)；8.4(m，2H)；9.8(s，1H)。
【０４５６】
化合物1606：
手順は化合物1605(72％)と同様である。¹H-NMR(200MHz，CDCl₃),(1.3(s，6H)，1.7-1.9(m，2H)；2.05-2.30(m，2H)；3.6-4.1(m，11H)；4.80-4.95(m，1H)；6.4(s，1H)；7.4-7.6(m，3H)；8.3-8.4(d，J＝8.5Hz，2H)，10(s，1H)。MS(ES)：424.0(M⁺+1)。
【０４５７】
同様の手法で次の化合物を合成することができる。
【０４５８】
化合物1600：(51％)。MS(ES)：326.0(M⁺+1)。
【０４５９】
化合物1607：¹H-NMR(200MHz，CDCl₃)，(1.40-1.80(m，5H)，2.80-3.50(m，3H)，4.60-4.80(m，3H)，6.66(d，1H，J＝6.2Hz)，7.26(m，1H)，8.21(d，2H，J＝6.3Hz)，8.65(d，2H，J＝5.8Hz)，11.90(s，1H)。MS(ES)：310.1(M⁺+1)。
【０４６０】
化合物1608：(64％)。¹H-NMR(200MHz，d₆-DMSO),(1.75(s，3H)，2.11(s，3H)，2.29(s，3H)，3.56(m，6H)，7.23-7.41(m，5H)，8.00(br s，1H)，8.23(d，2H，J＝6.0Hz)，8.63(d，2H，J＝5.4Hz)，8.82(br s，1H)，11.56(br s，1H)。MS(ES)：444.0(M⁺+1)。
【０４６１】
化合物1604：¹H-NMR(200MHz，CD₃OD)(3.40(m，4H)，4.29(m，4H)，6.99(s，1H)，7.5-7.2(m，3H)，7.90(d，2H)，8.39(d，2H)，8.61(d，2H)。MS(ES)：57.0(M⁺+1)。
【０４６２】
表１６ アデノシンＡ_2a 受容体選択的化合物
^*他の３つのサブタイプよりも、少なくとも５倍選択的である。
【０４６３】
【表１６】

PCT/US01/45280の第202-256頁は、Ａ_３受容体に特異的な化合物に関する。
【０４６４】
＜発明の概要＞
本発明はまた、その治療的に有効な量を患者に投与することによって、アデノシンＡ_３に特異的に選択的に結合し、それによって患者におけるＡ_３アデノシン受容体に関連した疾患を治療する化合物に基づいている。治療すべき疾患は、例えば喘息、過敏症、鼻炎、枯草熱、血清病、アレルギー性血管炎、アトピー性皮膚炎、皮膚炎、乾癬、湿疹、突発性肺繊維症、好酸性塩素膀胱炎（eosinophillic chlorecystitis）、慢性気道炎、過好酸性症候群、好酸性胃腸炎、浮腫、蕁麻疹、好酸性心筋症、偶発性血管性浮腫、炎症性腸疾患、潰瘍性結腸炎、アレルギー性肉芽腫、癌腫症、好酸性肉芽腫、家族性組織球増殖症（familial histiocytosis）、高血圧症、肥満細胞脱顆粒、腫瘍、癌性低酸素症（carciac hypoxia）、脳虚血、多尿症、腎不全、神経疾患、精神障害、認識障害、心筋虚血、気管支収縮、関節炎、自己免疫疾患、クローン病、グレーブ病（Grave's disease）、糖尿病、多発性硬化症、貧血、乾癬、妊娠障害、紅斑性狼蒼、再灌流障害、脳細動脈直径（brain arteriole diameter）、アレルギー性媒体放出、硬皮症、発作、全身虚血（global ischemia）、中枢神経系障害、心血管障害、腎障害、炎症性疾患、胃腸障害、眼障害、アレルギー性障害、呼吸器障害または免疫障害に関連している。
【０４６５】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を特徴とする：
【化１２６】

ここで、R₁はHであり、またR₂はシクロプロピルメチルアミノカルボニルエチル、cis-3-ヒドロキシシクロペンチル、アセタミドブチル、メチルアミノカルボニルアミノブチル、エチルアミノカルボニルアミノプロピル、メチルアミノカルボニルアミノプロピル、2-アセチルアミノ3-メチルブチル、N,N-ジエチルアミノカルボニルアミノエチル、チオアセタミドエチル、3-アミノアセチルオキシシクロペンチル、3ヒドロキシシクロペンチル、2-ピロリルカルボニルアミノエチル、2-イミダゾリジノンエチル、l-アミノカルボニル-2-メチルプロピル、1-アミノカルボニル-2-フェニルエチル、3-ヒドロキシアゼチジノ、2-イミダゾリルエチル、アセタミドエチル、1-(R)-フェニル-2-ヒドロキシエチル、N-メチルアミノカルボニルピリジル-2-メチルであるか、またはR₁、R₂および窒素が一緒になって3-アセタミドピペラジノ、3-ヒドロキシピロリジノ、3-メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、3-アミノカルボニルメチルピロリジノ、もしくは3-ヒドロキシメチルピペラジノを形成し；
R₃は、置換もしくは非置換の4〜6員環、ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、1,2,4-トリアゾール、ピリジン、2(1H)-ピリドン、4(1H)-ピリドン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、イソチアゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、テトラゾール、ナフタレン、テトラリン、ナフチリジン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドール、2,3-ジヒドロインドール、1H-インドール、インドリン、ベンゾピラゾール、1,3-ベンゾジオキソール、ベンズオキサゾール、プリン、クマリン、クロノン、キノリン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、ベンズイミダゾール、キナゾリン、ピリド[2,3-b]ピラジン、ピリド[3,4-b]ピラジン、ピリド[3,2-c]ピリダジン、プリド[3,4-b]-ピリジン、1H-ピラゾール[3,4-d]ピリミジン、プテリジン、2(1H)-キノロン、1(2H)-イソキノロン、1,4-ベンズイソオキサジン、ベンゾチアゾール、キノキサリン、キノリン-N-オキシド、イソキノリンN-オキシド、キノキサリン-N-オキシド、キナゾリン-N-オキシド、ベンズオキサジン、フタラジン、またはシンノリンであり；
R₅は、H、アルキル、置換 アルキル、またはシクロアルキルであり；
R₆は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、または置換 アリールである。
【０４６６】
本発明はまた、細胞内においてアデノシンＡ_３の活性を阻害する方法を特徴とし、該方法は、前記細胞を上記の化合物に接触させることを含む。
【０４６７】
典型的なプラクティスは当業者に既知である。
【０４６８】
本発明のデアザプリンを調製するための典型的な合成スキームは、下記のスキームＩに概説されている。
【０４６９】
本発明はまた、化合物ＩＶを調製する方法であって：
（ａ）以下の二つを反応させて、
【化１２７】

次式の化合物を得る工程と；
【化１２８】

ここで、Ｐは除去可能な保護基である
（ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１２９】

（ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３０】

（ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物をNHR₁R₂で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３１】

を具備する方法を提供し、ここで、
R₁はHであり、R₂はシクロプロピルメチルアミノカルボニルエチル、cis-3-ヒドロキシシクロペンチル、アセタミドブチル、メチルアミノカルボニルアミノブチル、エチルアミノカルボニルアミノプロピル、メチルアミノカルボニルアミノプロピル、2-アセチルアミノ-3-メチルブチル、N,N-ジエチルアミノカルボニルアミノエチル、チオアセタミドエチル、3-アミノアセチルオキシシクロペンチル、3-ヒドロキシシクロペンチル、2-ピロリルカルボニルアミノエチル、2-イミダゾリジノンエチル、l-アミノカルボニル-2-メチルプロピル、1-アミノカルボニル-2-フェニルエチル、3-ヒドロキシアゼチジノ、2-イミダゾリルエチル、アセタミドエチル、1-(R)-フェニル-2-ヒドロキシエチル、N-メチルアミノカルボニルピリジル-2-メチルであるか、またはR₁、R₂および窒素が一緒になって3-アセタミドピペラジノ、3-ヒドロキシピロリジノ、3-メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、3-アミノカルボニルメチルピロリジノ、もしくは3-ヒドロキシメチルピペラジノを形成し；
R₃は、置換もしくは非置換の4〜6員環であり；
R₅は、H、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
R₆は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、または置換アリールである。
【０４７０】
本発明はまた、化合物Ｖを調製する方法であって：
（ａ）以下の二つを反応させて、
【化１３２】

次式の化合物を得る工程と；
【化１３３】

ここで、Ｐは除去可能な保護基である
（ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３４】

（ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３５】

（ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物をNH₂CH₂(CH₂)mCH₂NHC(=O)R_lで処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３６】

を具備する方法を提供し、ここで、
mは、0、1、または2であり；
R₁は、シクロプロピルメチル、メチル、メチルアミノ、またはアミノメチルであり；
R₂は、アリール、置換アリール、ヘテロアリールであり；
R₅は、H、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
R₆は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、該置換アルキルは-C(R₉)(R₁₀)NR₇R₈であり、R₉およびR₁₀はそれぞれHまたはアルキルであり、R₇およびR₈はそれぞれアルキルまたはシクロアルキルであるか、またはR₇、R₈および窒素が一緒になって4〜7員の環系を形成する。
【０４７１】
本発明はまた、化合物IＶを調製する方法であって：
（ａ）以下の二つを反応させて、
【化１３７】

次式の化合物を得る工程と；
【化１３８】

ここで、Ｐは除去可能な保護基である
（ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３９】

（ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１４０】

（ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物を
【化１４１】

で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１４２】

を具備する方法を提供し、ここで、
R₂は、非置換のアリールであり；
R₅は、H、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
R₆は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、該置換アルキルは-C(R₉)(R₁₀)NR₇R₈であり、R₉およびR₁₀はそれぞれHまたはアルキルであり、R₇およびR₈はそれぞれアルキルまたはシクロアルキルであるか、またはR₇、R₈および窒素が一緒になって4〜7員の環系を形成する
本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１４３】

ここで、
R₁はHであり、R₂はシクロプロピルメチルアミノカルボニルエチル、cis-3-ヒドロキシシクロペンチル、アセタミドブチル、メチルアミノカルボニルアミノブチル、エチルアミノカルボニルアミノプロピル、メチルアミノカルボニルアミノプロピル、2-アセチルアミノ3-メチルブチル、N,N-ジエチルアミノカルボニルアミノエチル、チオアセタミドエチル、3-アミノアセチルオキシシクロペンチル、3-ヒドロキシシクロペンチル、2-ピロリルカルボニルアミノエチル、2-イミダゾリジノンエチル、l-アミノカルボニル-2-メチルプロピル、1-アミノカルボニル-2-フェニルエチル、3-ヒドロキシアゼチジノ、2-イミダゾリルエチル、アセタミドエチル、1-(R)-フェニル-2-ヒドロキシエチル、N-メチルアミノカルボニルピリジル-2-メチルであるか、またはR₁、R₂および窒素原子が一緒になって、3-アセタミドピペラジノ、3-ヒドロキシピロリジノ、3-メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、3-アミノカルボニルメチルピロリジノ、もしくは3-ヒドロキシメチルピペラジノであり；
R₃は、置換もしくは非置換のベンゼン、ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、1,2,4-トリアゾール、ピリジン、2(1H)-ピリドン、4(lH)-ピリドン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、イソチアゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、テトラゾール、ナフタレン、テトラリン、ナフチリジン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドール、2,3-ジヒドロインドール、1H-インドール、インドリン、ベンゾピラゾール、1,3-ベンゾジオキソール、ベンズオキサゾール、プリン、クマリン、クマロン、キノリン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、ベンズイミダゾール、キナゾリン、ピリド[2,3-b]ピラジン、ピリド[3,4-b]ピラジン、ピリド[3,2-c]ピリダジン、プリド[3,4-b]-ピリジン、1H-ピラゾール[3,4-d]ピリミジン、プテリジン、2(1H)-キノロン、1(2H)-イソキノロン、1,4-ベンズイソオキサジン、ベンゾチアゾール、キノキサリン、キノリン-N-オキシド、イソキノリン-N-オキシド、キノキサリン-N-オキシド、キナゾリン-N-オキシド、ベンズオキサジン、フタラジン、またはシンノリンであり；
R₅は、H、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
R₆は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、または置換アリールである。
【０４７２】
当該化合物の一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１４４】

当該化合物のもう一つの実施形態において、R₃はフェニルである。
【０４７３】
当該化合物のもう一つの実施形態において、R₅は水素またはメチルである。
【０４７４】
当該化合物のもう一つの実施形態において、R6は水素、メチル、フェニル、3-クロロフェニルオキシメチル、またはトランス-2-フェニルアミノメチルピロリジノメチルである。
【０４７５】
本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する。
【０４７６】
【化１４５】

ここで、
mは、0、1、または2であり；
R₁は、シクロプロピルメチル、メチル、メチルアミノ、またはアミノメチルであり；
R₂は、アリール、置換アリール、またはヘテロアリールであり；
R₃は、H、アルキル、置換 アルキル、またはシクロアルキルであり；
R₆は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、ここで該置換アルキルは-C(R₉)(R₁₀)NR₇R₈であり、R₉およびR₁₀はそれぞれHまたはアルキルであり、R₇およびR₈はそれぞれアルキルもしくはシクロアルキルであるか、またはR₇、R₈および窒素原子が一緒になって4〜7員の環系を形成する。
【０４７７】
化合物Ｖの一つの実施形態において、mは0であり、R₂はフェニルである。
【０４７８】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、mは1であり、R₂はフェニルである。
【０４７９】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、mは2であり、R₂はフェニルである。
【０４８０】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、R₅およびR₆はメチルである。
【０４８１】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、R₅およびR₆はメチルである。
【０４８２】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、R₅およびR₆はメチルである。
【０４８３】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１４６】

化合物Ｖのもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１４７】

化合物Ｖのもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１４８】

化合物Ｖのもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１４９】

化合物Ｖのもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１５０】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する。
【０４８４】
【化１５１】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する。
【０４８５】
【化１５２】

ここで、
R₂は、非置換アリールであり；
R₅は、H，アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
R₆は、H，アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、ここで前記置換アルキルは-C(R₉)(R₁₀)NR₇R₈であり、R₉およびR₁₀はそれぞれHまたはアルキルであり、R₇およびR₈はそれぞれアルキルもしくはシクロアルキルであるか、またはR₇、R₈および窒素原子が一緒になって4〜7員の環系を形成する。
【０４８６】
化合物ＩＶの一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１５３】

化合物1309の一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１５４】

化合物1309のもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１５５】

本発明はまた、下記構造を位有する化合物を提供する：
【化１５６】

ここで、
R₁は、3-ヒドロキシシクロペンチルエチルアミノカルボニルアミノプロピル、N,N-ジエチルアミノカルボニルアミノエチル、チオアセタミドエチル、3-アミノアセチルオキシシクロペンチル、3-ヒドロキシシクロペンチル、2-ピロリルカルボニルアミノエチル、2-イミダゾリジノンエチル、l-アミノカルボニル-2-メチルプロピル、1-アミノカルボニル-2-フェニルエチル、3-ヒドロキシアゼチジノ、2-イミダゾリルエチル、アセタミドエチル、1-(R)-フェニル-2-ヒドロキシエチル、またはN-メチルアミノカルボニルピリジル-2-メチルであり；
R₃およびR₄は、独立にH、置換もしくは非置換のアルキル、またはアリールである。
【０４８７】
当該化合物の一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１５７】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１５８】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１５９】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６０】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６１】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６２】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６３】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６４】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６５】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６６】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６７】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６８】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６９】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７０】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７１】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７２】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７３】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７４】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７５】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７６】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７７】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７８】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７９】

ここで、
R₁、R₂および窒素は一緒になって、3-ヒドロキシピロリジノ、3-メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、3-アミノカルボニルメチルピロリジノ、または3-ヒドロキシメチルピペラジノであり；
R₃およびR₄は、独立にH、置換もしくは非置換のアルキル、またはアリールである。
【０４８８】
当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８０】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８１】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８２】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８３】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８４】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８５】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８６】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８７】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８８】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８９】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１９０】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１９１】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１９２】

本発明はまた、患者においてＡ₃アデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、治療上有効な量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかを、該患者に投与することを含む方法を提供する。
【０４８９】
当該方法の一つの実施形態において、前記患者は哺乳類である。
【０４９０】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記哺乳類はヒトである。
【０４９１】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記Ａ₃アデノシン受容体は、中枢神経系障害、心臓血管系障害、喘息、喘息、過敏症、鼻炎、枯草熱、血清病、アレルギー性血管炎、アトピー性皮膚炎、皮膚炎、乾癬、湿疹、突発性肺繊維症、好酸性塩素膀胱炎（eosinophillic chlorecystitis）、慢性気道炎、過好酸性症候群、好酸性胃腸炎、浮腫、蕁麻疹、好酸性心筋症、偶発性血管性浮腫、炎症性腸疾患、潰瘍性結腸炎、アレルギー性肉芽腫、癌腫症、好酸性肉芽腫、家族性組織球増殖症（familial histiocytosis）、高血圧症、肥満細胞脱顆粒、腫瘍、癌性低酸素症（carciac hypoxia）、脳虚血、多尿症、腎不全、神経疾患、精神障害、認識障害、心筋虚血、気管支収縮、関節炎、自己免疫疾患、クローン病、グレーブ病（Grave's disease）、糖尿病、多発性硬化症、貧血、乾癬、妊娠障害、紅斑性狼蒼、再灌流障害、脳細動脈直径（brain arteriole diameter）、アレルギー性媒体放出、硬皮症、発作、全身虚血（global ischemia）、中枢神経系障害、心血管障害、腎障害、炎症性疾患、胃腸障害、眼障害、アレルギー性障害、呼吸器障害または免疫障害に関連している。
【０４９２】
アデノシンＡ₁、Ａ_2a、Ａ_2bおよびＡ₃受容体に関連する疾患は、WO 99/06053およびWO-09822465、WO-09705138、WO 09511681、WO-09733879、JP-09291089、PCT/US98/16053および米国特許第5,516,894号に開示されており、それらの全体の内容を本明細書の一部として援用する。
【０４９３】
本発明はまた、化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかの水溶性プロドラッグを提供する。該水溶性プロドラッグは、インビボで代謝されて、Ａ_2aアデノシン受容体を選択的に阻害する活性薬物を生じる。
【０４９４】
当該プロドラッグの一つの実施形態において、前記プロドラッグは、エステラーゼに触媒された加水分解によりインビボで代謝される。
【０４９５】
本発明はまた、前記プロドラッグおよび薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０４９６】
本発明はまた、細胞においてＡ_２ａアデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、該細胞を、化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかと接触させることを含む方法を提供する。
【０４９７】
当該方法の一つの実施形態において、前記化合物は、前記Ａ₃アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０４９８】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼科用配合剤である。
【０４９９】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は、眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である。
【０５００】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は全身性配合剤である。
【０５０１】
本発明はまた、患者における胃腸疾患を治療する方法であって、該患者に対して、有効量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０５０２】
当該方法の一つの実施形態において、前記疾患は下痢である。
【０５０３】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０５０４】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記化合物はＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０５０５】
本発明は更に、患者における呼吸器疾患を治療する方法であって、前記患者に対して、有効量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０５０６】
当該方法の一つの実施形態において、前記疾患は喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、または上気道障害である。
【０５０７】
当該方法の一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０５０８】
当該方法の一つの実施形態において、前記化合物はＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０５０９】
本発明はまた、患者の目に対する損傷を治療する方法であって、前記患者に対して、有効量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０５１０】
当該方法の一つの実施形態において、前記損傷は網膜または視神経乳頭損傷である。
【０５１１】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記損傷は急性または慢性である。
【０５１２】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記損傷は、緑内障、浮腫、貧血、低酸素症または外傷の結果である。
【０５１３】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０５１４】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記化合物はＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０５１５】
本発明はまた、治療的有効量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れか、および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０５１６】
当該薬学的組成物の一つの実施形態において、前記治療的有効量は、呼吸器障害または胃腸障害を治療するために有効である。
【０５１７】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記胃腸障害は下痢である。
【０５１８】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記呼吸器障害は喘息、アレルギー性鼻炎、または慢性閉塞性肺疾患である。
【０５１９】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼科用配合剤である。
【０５２０】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である。
【０５２１】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は全身性配合剤である。
【０５２２】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は手術用灌注溶液である。
【０５２３】
本発明はまた、患者においてＡ_２ａアデノシン受容体に関連した疾患を治療するための包装された薬学的組成物であって：（ａ）治療上有効な量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかを保持する容器と；（ｂ）患者において前記疾患を治療するための前記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０５２４】
式化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、およびＶＩＩにより表される化合物は、スキームＩ〜ＩＸによって合成することができる。
【０５２５】
ここで使用する「化合物がＡ₃選択的である」とは、該化合物が、アデノシンＡ₃に対して、アデノシンＡ₁、Ａ_2bまたはＡ_2bに対する結合定数より少なくとも５倍高い結合定数を有することを意味する。
【０５２６】
以下の実施例により本発明を更に説明するが、これらは如何なる意味でも更に限定するものとして解釈されるべきではない。背景の節において引用されたものを含めて、この出願の全体を通して引用された全ての参照文献、継続中の特許出願および発行された特許出願は、本明細書の一部をなすものとして本願に援用される。以下の例を通して使用されるモデルはモデルとして許容され、またこれらモデルにおける薬効の実証は、ヒトにおける薬効を予測させるものである。
【０５２７】
当業者は、ここに開示した化合物の患者における代謝が、薬物として作用できる一定の生物学的に活性な代謝物を生じることを知るであろう。
【０５２８】
本発明は、以下の実験の詳細から更に良く理解されるであろう。しかし、ここで議論される特定の方法および結果は、特許請求の範囲において更に十分に既述された発明の単なる例示であることを、当業者は容易に理解するであろう。
【０５２９】
例24：アデノシンＡ₃アンタゴニストの実験
化合物1700（下記表17）：MS(ES)：366.1(M⁺+1)
化合物1710（下記表17）：MS(ES ;：381.1(M⁺+1)
化合物1316（下記表17）：MS(ES)：353.2(M⁺+1)
化合物1703（下記表17）：MS(ES)：357.1(M⁺+1)
化合物1719（下記表17）：¹H-NMR(200MHz，d₆-DMSO)(1.75(m，2H)，3.11(m，2H)，3.35(s，3H)，3.59(m，2H)，5.72(m，1H)，5.96(m，1H)，6.55(s，1H)，7.15(s，1H)，7.49(m，2H)，8.32(m，2H)
化合物1704（下記表17）：MS(ES)：367.0(M⁺+1)
化合物1706（下記表17）：1H-NMR(200MHz，CDCl₃) d 1.22(m，2H)，1.60-2.40(m，4H)，4.53(m，1H)，4.94(m，1H)，5.70(d，1H，J＝8.2Hz)，6.35(d，1H，J＝2.8Hz)，6.97(d，1H，J＝2.0Hz)，7.50(m，3H)，8.40(m，2H)，10.83(br s，1H) 化合物1707（下記表17）：MS(ES)：347.0(M⁺+1)
化合物1708（下記表17）：MS(ES)：399.0(M⁺+1)
化合物1709（下記表17）：MS(ES)：385.9(M⁺+1)
化合物1710（下記表17）：MS(ES)：434.0(M⁺+1)
化合物1711（下記表17）：¹H-NMR(200MHz，CD₃OD) d 3.95(d，2H，J＝5.8Hz)，4.23-4.31(m，2H)，4.53(t，2H，J＝8.8Hz)，6.30(d，1H，J＝3. OHz)，6.98(d，1H，J＝3.OHz)，7.45-7.48(m，3H)，7.83-8.42(m，2H)，9.70(br s，1H)
MS(ES)：281.1(M⁺+1)
OSIC-148313 ¹H-NMR(200MHz，CD₃OD) d 3.02(m，2H)，3.92(m，2H)，5.09(2，2H)，6.53(s，1H)，6.90-7.04(br s，1H)，6.92(m，2H)，7.02(m，1H)，7.21(dd，1H，J＝8.2Hz)，7.40(m，3H)，7.50-7.80(br s，1H)，8.33(m，2H)。MS(ES)：445.1(M⁺+1)
化合物1713（下記表17）：¹H-NMR(200MHz，CDCl3) d 1.65-1.80(m，7H)，1.88-2.00(m，1H)，2.10-2.40(m，1H)，2.70-3.05(m，3H)，3.09-3.14(m，2H)，3.16-3.38(m，1H)，3.45(d，1H，J＝14Hz)，3.53-3.60(m，2H)，3.84-3.92(m，2H)，3.97(d，1H，J＝14Hz)，5.55(t，1H，J＝5. 8Hz)，6.17(s，1H)，6.55-6.59(m，2H)，6.64-6.71(m，1H)，7.11-7.19(m，2H)，7.43-7.46(m，3H)，8.38-8.42(m，2H)，MS(ES)：484.0(M⁺+1)
化合物1714（下記表17）：MS(ES)：471.0(M⁺+1)
化合物1715（下記表17）：MS(ES)：505.0(M⁺+1)
化合物1716（下記表17）：¹H-NMR(200MHz，CD₃OD) d 1.65(m，1H)，2.18(m，1H)，2.49(br d，2H，J＝6.2Hz)，2.64(m，1H)，3.38(m，1H)，3.69(s，3H)，3.72(m，1H)，3.93(m，1H)，4.10(m，1H)，5.06(2,2H)，6.58(s，1H)，6.92(m，2H)，7.02(m，1H)，7.23(dd，1H，J＝8.1Hz)，7.39(m，3H)，8.32(m，2H)。MS(ES)：477.1(M⁺+1)
化合物1717（下記表17）：¹H-NMR(200MHz，CD₃OD) d 1.69(m，1H)，2.26(m，1H)，2.42(d，2H，J＝7.4Hz)，2.72(m，1H)，3.53(m，1H)，3.83(m，1H)，4.02(m，1H)，4.14(dd，1H，J＝10.6，7.0Hz)，5.14(2,2H)，6.69(s，1H)，6.96(m，2H)，7.06(m，1H)，7.25(dd，1H，J＝8.0Hz)，7.39(m，3H)，8.35(m，2H)。
【０５３０】
MS(ES)：462.2(M⁺+1)。
【０５３１】
化合物1718（下記表17）：1H-NMR(200MHz，CD₃OD) d 1.40-2. 00(m，5H)，3.52(d，2H，7.6Hz)，3.80-4.00(m，1H)，4.00-4.20(m，3H)，4.50(m，2H)，6.36-6.50(m，2H)，6.54(s，1H)，6.84-6.92(m，1H)，7.05(t，1H，J＝8.2Hz)，7.30-7.45(m，3H)，8.24(d，2H，J＝9.8Hz)。MS(ES)：449.0(M⁺+1)
表１７ アデノシンＡ₃ 受容体選択的化合物
＊他の３つのサブタイプよりも少なくとも１０倍選択的である。
【０５３２】
【表１７】

本発明は、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９３】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９４】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９５】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９６】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９７】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９８】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９９】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２００】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０１】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０２】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０３】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０４】

【化２０５】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０６】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０７】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０８】

更なる実施形態において、本発明は、患者においてＡ₁アデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、前記患者に対して、治療的有効量の化合物1505、1506、1507、1508、1509、1510、1511、1512、1513、1514、1516、1517、1518、1519、または1520を投与することを含んでなる方法を提供する。.
更なる実施形態において、本発明は、前記患者が哺乳類である上記方法を提供する。
【０５３３】
更なる実施形態において、本発明は、前記哺乳類がヒトである方法を提供する。
【０５３４】
更なる実施形態において、本発明は、前記Ａ₁アデノシン受容体が認識障害、腎不全、心臓不整脈、呼吸器上皮、伝達物質放出、沈静、血管収縮、徐脈、負の心臓変力および変伝導、気管支収縮、好中球化学走性（neutropil chemotaxis）、還流症状、または潰瘍症状に関連する上記方法を提供する。
【０５３５】
更なる実施形態において、本発明は、化合物1505、1506、1507、1508、1509、1510、1511、1512、1513、1514、1516、1517、1518、1519、または1520の水溶性プロドラッグを提供する。該水溶性プロドラッグは、インビボで代謝されて、Ａ_１アデノシン受容体を選択的に阻害する活性薬物を生じる。
【０５３６】
更なる実施形態において、本発明は、エステラーゼに触媒された加水分解によりインビボで代謝される前記プロドラッグを提供する。
【０５３７】
更なる実施形態において、本発明は、前記プロドラッグおよび薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０５３８】
更なる実施形態において、本発明は、細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、該細胞を、化合物1505、1506、1507、1508,1509、1510、511、1512、1513、1514、1516、1517、1518、1519、または1520と接触させることを含む方法を提供する。
【０５３９】
更なる実施形態において、本発明は、前記化合物がＡ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである、細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する上記方法を提供する。
【０５４０】
更なる実施形態において、本発明は、前記細胞がヒト細胞である、細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する上記方法を提供する。
【０５４１】
更なる実施形態において、本発明は、前記化合物がＡ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである、ヒト細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する上記方法を提供する。
【０５４２】
更なる実施形態において、本発明は、患者においてＡ_１アデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、前記疾患は喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、または上気道障害であるである方法を提供する。
【０５４３】
更なる実施形態において、本発明は、患者においてＡ_１アデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、前記疾患は喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、または上気道障害であるであり、また前記患者はヒトである方法を提供する。
【０５４４】
更なる実施形態において、本発明は、前記化合物がＡ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである、上記疾患を治療する方法を提供する。
【０５４５】
更なる実施形態において、本発明は、化合物1505、1506、1507、1508、1509、1510、1511、1512、1513、1514、1516、1517、1518、1519、または1520と、ステロイド、β2アゴニスト、グルココルチコイド、ロイコトリエンアンタゴニスト、または抗コリン作動性アゴニストとの組合せを含有する、喘息のための併用療法剤を提供する。
【０５４６】
更なる実施形態において、本発明は、治療的有効量の化合物1505、1506、1507、1508、1509、1510、1511、1512、1513、1514、1516、1517、1518、1519、または1520、および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０５４７】
更なる実施形態において、本発明は、化合物1505、1506、1507、1508、1509、1510、1511、1512、1313、1514、1516、1517、1518、1519、または1520を用いて呼吸器障害を治療するための方法であって、前記呼吸器障害は喘息、アレルギー性鼻炎、または慢性閉塞性肺疾患である方法を提供する。
【０５４８】
更なる実施形態において、本発明は、前記薬学的組成物が眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である上記薬学的組成物を提供する。
【０５４９】
更なる実施形態において、本発明は、前記薬学的組成物が全身性配合剤である上記薬学的組成物を提供する。
【０５５０】
更なる実施形態において、本発明は、前記薬学的組成物が手術用灌注溶液である上記薬学的組成物を提供する。
【０５５１】
更なる実施形態において、本発明は、患者においてＡ₁アデノシン受容体に関連した疾患を治療するための包装された薬学的組成物であって：
（ａ）治療上有効な量の化合物1505、1506、1507、1508、1509、1510、1511、1512、1513、1514、1516、1517、1518、1519、または1520を保持する容器と；
（ｂ）患者において前記疾患を治療するための前記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０５５２】
更なる実施形態において、本発明は、1505、1506、1507、1508、1509、1510、1511、1512、1513、1514、1516、1517、1518、1519、または1520の薬学的に許容可能な塩を提供する。
【０５５３】
更なる実施形態において、本発明は、前記化合物1509、1511、1515、1518、または1519の薬学的に許容可能な塩がナトリウム、カルシウムおよびアンモニウムからなる群から選択される陽イオンを含む、上記薬学的組成物を提供する。
【０５５４】
更なる実施形態において、本発明は、患者においてＡ₁アデノシン受容体に関連した疾患を治療するための方法であって、該Ａ₁アデノシン受容体に関連した疾患が心不全である方法を提供する。
【０５５５】
例証
例21：1-[6-(4-ヒドロキシ-4-フェニル-ピペリジン-1-イル-メチル)-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル]-ピロリジン-2-カルボン酸アミド(1505)の合成
例17と同様の手法で、合成スキームIXにしたがい、L-プロリンアミドおよび4-フェニル-ピペリジン-4-オールを用いて化合物1505を合成した：
【化２０９】

¹H-NMR(d6-DMSO) d 1.53(s，1H)，1.60(s，1H)，1.84-2.30(m，6H)，2.66(m，2H)，3.60(s，2H)，3.88(m，1H)，4.02(m，1H)，4.66(d，1H，J＝6.8Hz)，4.73(s，1H)，6.44(s，1H)，6.94(s，1H)，7.12-7.50(m，10H)，8.35(m，2H)，11.6(br s，1H)；MS(ES)：305.1(M⁺+1)；融点＝234-235℃。
【０５５６】
例22：[N-(2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)(L)-プロリンアミド(1506)の合成
合成スキームVIIにしたがい、L-プロリンアミドを用いて化合物1506を得た：
【化２１０】

¹H-NMR(DMSO-d₆) d 2.05(m，4H)，3.85(m，1H)，4.05(m，1H)，4.70(d，1H，J＝8.0Hz)，6.58(br s，1H)，6.95(br s，1H)，7.15(d，1H，J＝3.4Hz)，7.40(m，3H)，7.50(br s，1H)，8.40(m，2H)，11.6(br s，1H)；MS(ES)：308.3(M⁺+1)。融点＝236-238℃。
【０５５７】
例23：[N-(2-フェニル-6-メトキシメチル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)-(L)-プロリンアミド(1507)の合成
合成スキームIXの前駆体化合物23を用いて化合物1507を合成した：
【化２１１】

臭化物23(4.23g，10mmol)を無水メタノール(60mL)およびDCM(120mL)中に溶解させ、AgO₂CCF₂を用いてN₂下にて室温で１時間処理する。固体を濾過除去し、DCMで洗浄する(2x20mL)。濾液を真空下で濃縮する。残渣をDCM(80mL)中に再び溶解させる。次いで得られた溶液をNaHCO₃飽和溶液および塩水で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮して3.71g(４，99％)のオフホワイトの固体を得る。¹H-NMR(CDCl₃) d 1.75(s，9H)，3.51(s，3H)，4.83(s，2H)，6.70(s，1H)，7.47(m，3H)，8.52(m，2H)。
【０５５８】
【化２１２】

塩化アリール４(2.448g，6.55mmol)、DMSO(15mL)、L-プロリンアミド(4.0g，35.0mmol)およびNaHCO₃(2.9g)を合体させ、窒素下で120℃にまでにまで加熱する。４時間後、反応物を室温にまで冷却し、水(60mL)で希釈する。得られたスラリをDCMを用いて抽出する(10x)。合体した有機相をNaHCO₃飽和溶液および塩水で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮して2.48gの茶色の固体を得る。フラッシュカラムを経て純粋な生成物(1.86g，81％)を白色の固体で得る。白色の結晶をTHF/ヘキサンから得る。融点＝213-215℃。¹H-NMR(CDCl₃) d 2.15(m，3H)，2.52(m，1H)，3.26(s，3H)，3.92(m，1H)，4.10(m，1H)，4.42(s，2H)，5.08(d，1H，J＝8.2Hz)，5.49(br s，1H)，6.48(s，1H)，7.08(br s，1H)，7.42(m，3H)，8.38(m，2H)，9.78(br s，1H)；MS(ES)：352.2(M⁺+1)。
【０５５９】
例24：4-ヒドロキシ-1-(2-フェニル-7H-ピロロ[2,3d]ピリミジン-4-イル]-ピロリジン-2-カルボン酸アミド(1508)の合成
合成スキームVIIにしたがいcis-ヒドロキシ プロリンアミドを用いて、化合物1508を得た：
【化２１３】

¹H-NMR(d₆-DMSO) d 1.90(m，1H)，3.85(d，1H，J＝9.2Hz)，4.08(m，1H)，4.37(s，1H)，4.67(dd，1H，J＝8.8，4.0Hz)，5.30(s，1H)，6.55(s，1H)，7.15(s，2H)，7.37(m，3H)，7.64(s，1H)，8.37(m，2H)，11.65(br s，1H)；MS(ES)：324.2(M⁺+1)；融点＝268-271℃。
【０５６０】
例25：3-[4-((S)-2-カルバモイル-ピロロジン-1-イル)-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-6-イル]-プロピオン酸(1509)の合成
合成スキームIXの前駆体化合物23を用いて、化合物1509を得た：
【化２１４】

tert-ブトキシカルボニルで保護化された臭化アリール23(4.0g，9.5mmol)、乾燥DMSO(25mL)、NaH(454mg，3.79mmol)およびNaH₂PO₄(1.62g，11.4mmol)を合体させ、アルゴン下にて約3.5時間50℃にまで加熱した。次いでこの混合物を水(200mL)中に注ぎ、EtOAcを100mLずつ用いて３回抽出した。合体した有機相を水、塩水で完全に洗浄し、MgSO₄上で乾燥させ濾過し、濃縮して黄色の固体を得、これをエタノールを用いて粉砕することにより精製して、1.55gの浅黄色の固体(7)を得た。母液をフラッシュクロマトグラフィ(ヘキサン中に10％ EtOAc)により精製して、さらに454mg(60％)を得た。¹H-NMR(CDCl₃) d 1.77(s，9H)，7.25(s，1H)，7.48(m，3H)，8.52(m，2H)，10.39(s，1H)；m.p.＝156℃(dec)。
【０５６１】
【化２１５】

アルデヒド７(600mg，1.7mmol)を乾燥THF(20mL)中に溶解させ、アルゴン下にて０℃にまで冷却した。これに10mLの乾燥THF中の(tert-ブトキシカルボニルメチレン)-トリフェニルホスホラン(694mg，1.8mmol)の０℃の溶液を、カニューレを介して滴下添加した。３時間後、混合物を濃縮し、エタノールを用いた粉砕により精製して565mg(73％)の白色の固体(8)を得た。¹H NMR(CDCl₃) d 1.58(s，9H)，1.79(s，9H)，6. 46(d，1H)，6.95(s，1H)，7.48(m，3H)，8.09(d，1H)，8.56，2H)。
【０５６２】
【化２１６】

5mL THF中の化合物８(565mg 1.2mmol)の溶液を、EtOAcを用いて100mLにまで希釈した。600mgの触媒(5％ wt Pd，50％ H₂O)を添加した後、アルゴンを用いてパージし、混合物を大気圧下で水素化した。８時間後、混合物を濾過し、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィ(ヘキサン中に10％ EtOAc)を用いて精製して200mg(35％)の９を透明な油状物で分離し、これを静置して結晶化させた。¹H NMR(CDCl₃) d 1.42(s，9H)，1.75(s，9H)，2.65(t，2H)，3.32(t，2H)，6.41(s，1H)，7.45(m，3H)，8.51(m，2H)。
【０５６３】
【化２１７】

塩化アリール９(200mg，0.44mmol)、DMSO(10mL)およびL-プロリンアミド(440mg，4.4mmol)を合体させ、アルゴン下にて85℃にまで加熱した。14時間後、混合物を室温にまで冷却し、水および酢酸エチルの間で分配した。層を分離し、水層をEtOAcで洗浄した(3x)。合体した有機相を水(3x)、塩水で完全に洗浄し、MgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮して10を黄色の膜状で得、これをフラッシュクロマトグラフィ(CH₂Cl₂中に2.5％ MeOH)により精製した。185mg(97％)を得た。MS(ES)：435.8(M⁺+1)。
【０５６４】
【化２１８】

5mL ジオキサン中のエステル10(30mg，mmol)を、濃縮したHCl 0.5mLを添加することにより加水分解した。３時間後、混合物を真空下で濃縮し、EtOH/EtOAc中で再結晶化させて1509を白色の固体(20mg，61％)で得た。MS(ES)：380(M⁺+1)。
【０５６５】
例26：[N-(2-フェニル-6-アミノカルボニル メトキシメチル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)-(L)-プロリンアミド(1510)の合成
合成スキームIXの前駆体化合物23を用いて、化合物1510を得た：
【化２１９】

臭化物23(1.27g，3mmol)および分子篩(5g)を、グリコール酸無水メチル(5.8g，60mmol)およびDCM(40mL)中で撹拌する。溶液を、N₂下でAgOTfを用いて処理し、３時間撹拌する。濾過により固体を除去し、DCMで洗浄する(2x20mL)。濾液を真空下で濃縮する。残渣をDCM(80mL)中に再び溶解させる。次いで得られた溶液を水、NaHCO₃飽和溶液、および塩水で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮して1.35g(99％)のオフホワイトの固体(12)を得る。¹H-NMR(CDCl₃) d 1.75(s，9H)，3.80(s，3H)，5.0(s，2H)，6.78(s，1H)，7.47(m，3H)，8.52(m，2H)。
【０５６６】
【化２２０】

塩化アリール12(177mg，0.41mmol)、DMSO(10mL)、L-プロリンアミド(466mg，4mmol)およびNaHCO₃(500mg)を合体させ、窒素下で120℃にまで加熱する。４時間後、反応物を室温にまで冷却し、水(60mL)で希釈する。得られたスラリをDCMを用いて抽出する(5x30mL)。合体した有機相をNaHCO₃飽和溶液および塩水で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮して茶色の固体を得る。フラッシュカラム後、純粋な生成物(154mg，92％)を白色の固体(13)で得る。¹H-NMR(CDCl₃) d 2.15(m，3H)，2.52(m，1H)，3.55(s，3H)，4.58(s，2H)，5.08(s，1H,)，5.85(br s，1H)，6.48(s，1H)，7.08(br s，1H)，7.42(m，3H)，8.40(m，2H)，10.58(br s，1H)；MS(ES)：410.1(M⁺+1)。
【０５６７】
【化２２１】

メチルエステル13(124mg，0.3mmol)をHOCH₃(15mL)中に溶解させる。この溶液中に0.5時間アンモニアをバブリングさせる。次いでこの反応混合物をさらに３時間室温で撹拌する。溶剤を除去した後、111mgの白色の固体(1510，93％)を得る。¹H-NMR (CDCl₃) d 1.82(m，3H)，2.20(m，1H)，2.80(m，1H)，3.10(m，1H)，3.63(dd，2H，J₁＝13.8Hz，J₂＝19.4Hz)，3.87(m，1H)，4.07(m，1H)，4.97(m，1H)，5.96(m，2H)，6.35(s，1H)，6.86(br s，1H)，7.11(br s，1H)，7.37(m，3H)，8.28(m，2H)，11.46(br s，1H)；MS(ES)：394.8(M⁺+1)。
【０５６８】
例27：[4-(2-カルバモイルピロリジン-1-イル)-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-6-カルボン酸](1511)の合成
合成スキームVIIの前駆体化合物15を用いて、化合物1511を合成した：
【化２２２】

乾燥DMF(20mL)中の水素化ナトリウム(780mgの60の油状物懸濁液，19.5mmol)の懸濁液を氷／水浴で窒素下にて冷却したものに、DMF(10mL)中のピロロピリミジン15(2.00g，7.52mmol)の溶液を５分にわたり添加する。15分後、塩化ベンゼンスルホニル(1.2mL，9.40mmol)を添加し、次いで冷却槽を取り外す。４時間後、反応混合物を氷とNaHCO₃飽和溶液との混合物中に注ぎ、沈澱した固体を濾過除去し、アセトン(3)およびメタノール(2)を用いて粉砕し、2.37gのベージュ色の固体を得る。この固体(16)は約10mol-％ DMF(83％収率に基づく)を含み、次の工程で使用することができ；アセトンを溶離剤として用いるシリカゲル上のクロマトグラフィにより、純粋な試料を得ることができる。¹H-NMR(CDCl₃)：d 6.70(d，J＝4.2Hz，1H)，7.47-7.68(m，6H)，7.76(d，J＝4.2Hz，1H)，8.24-8.32(m，2H)，8.48-8.56(m，2H)；IR(固体)：n＝3146cm^-1，1585，1539，1506，1450，1417，1386，1370，1186，1176，1154，1111，1015，919，726，683，616，607；MS(ES)：372/370(MH⁺)；融点＝226-227℃。
【０５６９】
【化２２３】

乾燥THF(34mL)中のN-スルホニル化合物16(337mg，0.911mmol)の溶液を乾燥氷酢酸により冷却したものに、LDATHF(1.OmL，シクロヘキサン中の1.5M溶液，1.5mmol)を添加する。45分後、この溶液中で二酸化炭素を５分間バブリングさせ、次いで冷却槽を除去する。溶液が周囲温度に達したら、溶剤を蒸発させ、0.5当量の(iPr)₂NCO₂Liを含んだ398mgの塩17を黄色がかった固体で得る。この塩をさらに精製することなく次の工程で用いる。¹H-NMR(D₆-DMSO)：d＝6.44(s，1H)，7.50-7.75(m，6H)，8.33-8.40(m，2H)，8.53(dd，J＝8.0，1.6Hz，2H)。
【０５７０】
【化２２４】

DMSO(1.5mL)中のリチウム塩17(50mg)およびL-プロリンアミド(122mg，1.07mmol)の溶液を、窒素下で80℃にまで15.5時間加熱する。冷却した溶液に4％ 酢酸水溶液(10mL)を添加し、混合物をEtOAcを用いて抽出する。(5'10mL)。合体した有機相をし4％ 酢酸水溶液(10mL)、水(10mL)および塩水(10mL)で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させる。濾過および濃縮を経て40mgの18を黄色がかった固体で得、これを精製せずに次の工程で用いる。¹H-NMR(CD₃OD)：d＝1.95-2.36(m，4H)，3.85-3.95(m，1H)，3.95-4.17(m，1H)，4.72(br s，1H)，7.14(s，1H)，7.35-7.45(m，3H)，7.45-7.70(m，3H)，8.33-8.50(m，4H)。
【０５７１】
【化２２５】

メタノール中の水酸化ナトリウムの溶液(1.5mL，5M，7.5mmol)を、メタノール(2mL)中のピロロピリミジン18の溶液(40mg，0.081mmol)に添加する。２時間後、ｐＨを５に調整し、ほとんどのメタノールを蒸発させ、混合物をEtOAcを用いて抽出し(5'10mL)、合体した有機相を塩水で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させる。濾過および濃縮により24mgの浅黄色の固体を得、これをトルエン／EtOAc／MeOHを用いて粉砕し、15.6mg(55％)の酸1511をわずかに黄色がかった固体で得た。¹H-NMR(CD₃OD)：d＝2.05-2.20(m，4H)，3.95-4.10(m，1H)，4.15-4.25(m，1H)，4.85(br s，1H)，7.14(s，1H)，7.35-7.42(m，3H)，8.38-8.45(m，2H)；IR(固体)：n＝3192cm^-1，2964，2923，2877，1682，1614，1567，1531，1454，1374，1352，1295，1262，1190，974，754，700；MS(ES)：352(M⁺+1)；融点＝220℃(decomp.)。
【０５７２】
例28：1-(6-メチル-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3d]ピリミジン-4-イル)-(S)-ピロリジン-2-カルボン酸アミド(1512)の合成
次の工程により化合物1512を合成した：
【化２２６】

塩化アリール20(3g，10.7mmol)、DMSO(50mL)、および(S)-プロリンアミドを合体させ、アルゴン下で85℃にまで加熱した。一晩(14時間)撹拌した後、混合物を室温にまで冷却し、800mLの水中に注いだ。これをEtOAcを200mLずつ用いて３回抽出した。合体した有機相を水(3×300mL)、塩水で完全に洗浄し、MgSO₄上で乾燥させ、濾過し、濃縮して濃い茶色の固体を得た。この固体をEtOAcから２回再結晶化させ、1.95g(57％)の黄褐色の固体(1512)を得た。¹H NMR(DMSO-d₆) d 1.8-2.2(m，4H)，2.3(s，3H)，3.8(m，1H)，4.0(m，1H)，4.6(d，1H)，6.2(s，1H)，6.9(s，1H)，7.2(m，3H)，7.3(s，1H)，8.4(m，2H)，11.5(s，1H)；MS(ES)：322(M⁺+1)。
【０５７３】
例29：1-[6-(2-ヒドロキシ-エトキシメチル)-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル]-ピロリジン-2-カルボン酸アミド(1513)の合成
例17と同様の手法により合成スキームIXにしたがい、L-プロリンアミドおよびエタン-1,2-ジオールを用いて、化合物1513を合成した。
【０５７４】
【化２２７】

MS(ES)：382(M⁺+1)。
【０５７５】
例30：4-(6-イミダゾール-1-イルメチル2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イルアミノ)-シクロヘキサノール(1514)の合成
化合物1514を、例17と同様の手法により合成スキームIXにしたがい、N-6アミノシクロヘキサノールおよびイミダゾールを用いて、合成した：
【化２２８】

MS(ES)：389(M⁺+1)。
【０５７６】
例31：4-(4-ヒドロキシ-シクロへキシルアミノ)-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-6-カルボン酸(1515)の合成
化合物1515を、例27と同様の手法により合成スキームIXにしたがい、N-6アミノシクロヘキサノールおよびイミダゾールを用いて、合成した：
【化２２９】

MS(ES)：353(M⁺+1)。
【０５７７】
例32：4-[6-(2-ヒドロキシ-エトキシメチル)-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イルアミノ]-シクロヘキサノール(1516)の合成
化合物1516を、化合物1513と同様の手法により合成スキームIXにしたがい、N-6 アミノシクロヘキサノールを用いて、合成した：
【化２３０】

MS(ES)：383(M⁺+1)。
【０５７８】
例33：4-(4-ヒドロキシ-シクロへキシルアミノ)-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-6-カルボン酸メチルエステル(1517)の合成
【化２３１】

乾燥DMF(4mL)中のリチウム塩17(0.13mmol)の溶液をヨウ化メチル(0.1mL，1.6mmol)とともに20℃でアルゴン下にて３時間撹拌する。DMFを蒸発させ、塩化アンモニウム水溶液を添加する(15mL)。混合物をEtOAc(3'15mL)を用いて抽出し、合体した有機相を水(2'10mL)および塩水(10mL)で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させる。濾過および濃縮を経て21mg(38％)のメチルエステル22を得る。
【０５７９】
【化２３２】

DMSO(1.5mL)中のメチルエステル22(24.5mg，0.057mmol)および4-trans-アミノシクロヘキサノール(66mg，0.57mmol)の溶液を、窒素下で80℃にまで加熱し、次いで加熱を停止し、20℃での撹拌を13.5時間続けた。冷却した溶液に4％ 酢酸水溶液(10mL)を添加し、混合物をEtOAc(3'10mL)を用いて抽出する。合体した有機相を4％ 酢酸水溶液(10mL)、水(10mL)、2N NaOH(10mL)、水(10mL)、および塩水(10mL)で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させる。濾過および濃縮（1H NMR は、ベンゼンスルホニル基の約50％除去を示す）を経て得られた粗製物質の、THF(2mL)中の溶液に、MeOH中のNaOHの溶液(0.5mLの5M 溶液，2.5mmol)を周囲温度で添加する。20分後、水およびNaHCO₃飽和溶液（それぞれ5mL）を添加し、混合物をEtOAcを用いて抽出する(4'15mL)。合体した有機相を2N NaOH(10mL)、水(10mL)、および塩水(10mL)で洗浄し、MgSO₄上で乾燥させる。濾過および濃縮の後に得られた粗製物質を、ヘキサン／EtOAc 1：1 (R) 1：2 で溶出するシリカゲル上のクロマトグラフィを経て8.6mg(41％)の1517を白色の固体で得る。融点225-227℃。¹H-NMR(CD₃OD)：d＝1.38-1.62(m，4H)，1.95-2.10(m，2H)，2.10-2.25(m，2H)，3.55-3.70(m，1H)，3.91(s，3H)，4.20-4.35(m，1H)，7.32(s，1H)，7.35-7.47(m，3H)，8.35-8.42(m，2H)；IR(固体)：n＝3352cm^-1，3064，2935，2860，1701，1605，1588，1574，1534，1447，1386，1333，1263，1206，1164，1074，938，756，705；MS(ES)：367(MH⁺)。
【０５８０】
例34：[4-(2-カルバモイル-ピロリジン-1-イル)-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-6-イルメトキシ]-酢酸メチルエステル(1518)の合成
化合物1518を、例26と同様に手法により前駆体化合物12と合成して得た：
【化２３３】

MS(ES)：410(M⁺+1)。
【０５８１】
例35：[4-(2-カルバモイル-ピロリジン-1-イル)-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-6-イルメトキシ]-酢酸(1519)の合成
化合物1519を、1518と同様の手法で、メチルエステル基を塩基を用いて加水分解して合成して得た：
【化２３４】

MS：396(M⁺+1)。
【０５８２】
例36：4-(4-ヒドロキシ-シクロへキシルアミノ)-2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-6-カルボン酸アミド(1520)の合成
【化２３５】

アンモニアガスを、メタノール(6mL)中のピロロピリミジン23(7.8mg，0.021mmol)の溶液中に濃縮し、全体積が12mLに達するまで乾燥氷／アセトンにより冷却する。10日間20℃で撹拌し、溶剤を蒸発させ、残渣を、CH₂Cl₂中の5％ MeOHで溶出するシリカゲル上の分取用TLCにより精製する。次いで得られた物質をエーテルで粉砕して6.5mg(88％)のアミド1520を白色の固体で得た，融点：210-220℃(decomp.)。¹H-NMR(CD₃OD)：d＝1.40-1.60(m，4H)，2.00-2.15(m，2H)，2.15-2.25(m，2H)，3.55-3.70(m，1H)，4.20-4.35(m，1H)，7.16(s，1H)，7.35-7.47(m，3H)，8.34-8.40(m，2H)；IR(固体)：n＝3358cm^-1，3064，3025，2964，2924，2853，1652，1593，1539，1493，1452，1374，1326，1251，1197，1113，1074，1028，751，699；MS(ES)：352(MH⁺)。
【０５８３】
化合物の活性
アデノシン１(A₁)受容体サブタイプ飽和および競合放射性リガンド結合を、既述した化合物1505，1506，1507，1508，1509，1510，1511，1512，1513，1514，1516，1517，1518，1519，および1520について、特に本明細書（PCT/US01/45280）の152-153頁の記載のとおり実施した。上記に参照した全ての化合物は、Ａ₁受容体結合親和性について、本明細書中記載の、特にPCT/US01/45280の171頁の表13に記載された参照化合物1318または1319の同等であるかまたは上回った。
【０５８４】
表18に挙げられた上記化合物の水溶解性は、そのcLogP値（Cambridge Soft Corporation, 100 Cambridge Park Drive, Cambridge, MA 02140より供給されるコンピュータープログラムCS ChemDraw, ChemDraw Ultra ver. 6.0 （著作権）；1999 を用いて計算された）から、参照化合物1318または1319よりも良好であると予想される。
【０５８５】
表18に挙げられたＡ₁受容体に特異的な化合物は、cLogP値が約3.8である参照化合物1318または1319と比べ、約1.5〜約3.4というより低いcLogP値を有していた。表18に列挙された、参照化合物1318または1319よりも低いcLogP値を有するより極性のＡ₁受容体化合物は、参照化合物に比べ、有効性(potency)およびＡ₁受容体結合選択性をなおも有するであろうことは予測されなかった。
【０５８６】
【表１８】

PCT/US01/45280 の第 288 頁以降は、Ａ _2a 受容体に特異的な化合物に関する
本発明は、下記構造を有する化合物を提供する。
【０５８７】
【化２３６】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する。
【０５８８】
【化２３７】

更なる実施形態において、本発明は、患者におけるＡ_2aアデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、前記患者に対して、治療的有効量の化合物1609または1610を投与することを含む方法を提供する。
【０５８９】
本発明はまた、前記患者が哺乳類である上記方法を提供する。
【０５９０】
本発明は更に、前記哺乳類がヒトである方法を提供する。
【０５９１】
本発明はまた、患者におけるＡ_2aアデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、前記Ａ_2aアデノシン受容体が運動活性、血管拡張、血小板阻害、好中球スーパーオキシド生成、認識障害、老人性痴呆、またはパーキンソン病に関連する方法を提供する。
【０５９２】
本発明は、前記化合物が、アデニル酸シクラーゼを刺激することにって前記疾患を治療する上記方法を提供する。
【０５９３】
本発明はまた、化合物1609または1610の水溶性プロドラッグを提供し、該水溶性プロドラッグは、Ａ_2aアデノシン受容体を選択的に阻害する活性な薬物へとインビボで代謝される方法を提供する。
【０５９４】
本発明はまた、前記プロドラッグはエステラーゼに触媒された加水分解によりインビボで代謝される、化合物1609または1610の水溶性プロドラッグを提供する。
【０５９５】
本発明はまた、化合物1609または1610の水溶性プロドラッグと、薬学的に許容可能なキャリアとを含有する薬学的組成物を提供する。
【０５９６】
本発明はまた、細胞においてＡ_2aアデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、前記細胞を化合物1609または1610に接触させることを含む方法を提供する。
【０５９７】
本発明はまた、細胞においてＡ_2aアデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、前記細胞を化合物1609または1610に接触させることを含み、該化合物は前記Ａ_2aアデノシン受容体のアンタゴニストである方法を提供する。
【０５９８】
本発明はまた、前記細胞がヒト細胞である上記方法を提供する。
【０５９９】
本発明はまた、前記細胞がヒト細胞であり、前記化合物がＡ_2aアデノシン受容体のアンタゴニストである上記方法を提供する。
【０６００】
本発明はまた、治療的有効量の化合物1609または1610、および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０６０１】
本発明はまた、前記治療的有効量がパーキンソン病、並びに運動活性、血管拡張、血小板阻害、好中球スーパーオキシド生成、認識障害、老年痴呆に関連した疾患を治療するのに効果的である、上記薬学的組成物を提供する。
【０６０２】
本発明はまた、当該組成物が眼科用配合剤である上記薬学的組成物を提供する。
【０６０３】
本発明はまた、当該組成物が眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である上記薬学的組成物を提供する。
【０６０４】
本発明はまた、当該組成物が全身性配合剤である上記薬学的組成物を提供する。
【０６０５】
本発明はまた、当該組成物が手術用灌注溶液である上記薬学的組成物を提供する。
【０６０６】
本発明はまた、化合物1609または1610および何れかのドパミンエンハンサを含む、パーキンソン病のための併用療法を提供する。
【０６０７】
本発明はまた、化合物1609または1610および何れかの細胞障害剤を含む、癌のための併用療法を提供する。
【０６０８】
本発明はまた、化合物1609または1610、およびプロスタグランジンアゴニスト、ムスカリンアゴニストまたはβ-2アンタゴニストを含む、緑内障のための併用療法を提供する。
【０６０９】
本発明はまた、患者においてＡ_２ａアデノシン受容体に関連した疾患を治療するための包装された薬学的組成物であって：
（ａ）治療上有効な量の化合物1609または1610を保持する容器と；
（ｂ）患者において前記疾患を治療するための前記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０６１０】
例：
例41：1-(6-フェニル-2-ピリジン-4-イル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル]-ピロリジン-2-カルボン酸アミド(1609)の合成
L-プロリンアミドを、PCT/US01/45280の82頁に記載の合成スキームIIに記載の適切な塩化物中間体と反応させることにより、化合物1609を合成した：
【化２３８】

¹H-NMR(d₆-DMSO) d 1.95-2.15(m，4H)，4.00(br s，1H)，4.15(br s，1H)，4.72(br s，1H)，6.90(br s，1H)，7.19(br s，1H)，7.30(t，1H，J＝7.0Hz)，7.44(t，2H，J＝7.0Hz)，7.59(s，1H)，7.92(br s，2H)，8.26(d，2H，J＝6.2Hz)，8.65(d，2H，J＝6.2Hz)；MS(ES)：384.9(M⁺+1)；Mpt＝280-316℃(decomp.)。
【０６１１】
例42：1-[6-(3-メトキシ-フェニル)-2-ピリジン-イル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル]-ピロリジン-2-カルボン酸アミド(1610)の合成
L-プロリンアミドを、PCT/US01/45280の82頁における合成スキームIIに記載の適切な塩化物中間体と反応させることにより、化合物1610を合成した：
【化２３９】

¹H-NMR(d₆-DMSO) d 2.07(m，4H)，3.85(s，3H)，4.02(m，1H)，4.17(m，1H)，4.75(m，1H)，6.89(m，1H)，7.00(s，1H)，7.23(s，1H)，7.35(t，1H，J＝8.2Hz)，7.53(s，2H)，7.60(s，1H)，8.28(d，2H，J＝5.8Hz)，8.67(d，2H，J＝5.8Hz)，12.37(s，1H)；MS(ES)：415.0(M⁺+1)。
【０６１２】
化合物の活性
アデノシン2a(Ａ_2a)受容体サブタイプ競合放射性リガンド結合を、本文に記載のとおりに、とくに本明細書（PCT/US01/45280の）の153頁の記載のとおりに行った。化合物1609および1610はＡ_2a受容体結合親和性および選択性を有することが見出された。
【０６１３】
PCT/US01/45280の第292-300頁は、Ａ_３受容体に特異的な追加の化合物に関する。
【０６１４】
本発明また、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２４０】

更なる実施形態において、本発明は、細胞においてＡ_３アデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、前記細胞を化合物1720に接触させることを含む方法を提供する。
【０６１５】
更なる実施形態において、本発明は、細胞においてＡ_３アデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、前記化合物がＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである方法を提供する。
【０６１６】
更なる実施形態において、本発明は、前記細胞がヒト細胞である、細胞においてＡ_３アデノシン受容体の活性を阻害する上記方法を提供する。
【０６１７】
更なる実施形態において、本発明は、前記細胞がヒト細胞であり、前記化合物がＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである、細胞においてＡ_３受容体の活性を阻害する上記方法を提供する。
【０６１８】
更なる実施形態において、本発明は、患者の眼に対する損傷を治療する方法であって、前記患者に対して、治療的有効量の化合物1720を含有する組成物を投与することを含む方法を提供する。
【０６１９】
更なる実施形態において、本発明は、前記損傷が網膜または視神経乳頭の損傷を含む方法を提供する。
【０６２０】
更なる実施形態において、本発明は、患者に対して治療的有効量の化合物1720を投与することを含む、緑内障のための治療法を提供する。
【０６２１】
更なる実施形態において、本発明は緑内障のための治療法であって、一以上のアデノシン受容体アンタゴニストを含み、好ましくはアデノシン受容体Ａ₃アンタゴニスト（好ましくはN-6置換7-デアザプリン、最も好ましくは[2-(3H-イミダゾール-4-イル)-エチル]-(2-フェニル-7H-ピロロ[2,3d]ピリミジン-4-イル)-アミン）を含む、緑内障のための治療法を提供する。
【０６２２】
別の実施形態において、本発明は、アデノシン受容体Ａ₃アンタゴニスト（好ましくはN-6置換7-デアザプリン、最も好ましくは[2-(3H-イミダゾール-4-イル)-エチル]-(2-フェニル-7H-ピロロ[2,3d]ピリミジン-4-イル)-アミン）、および下記からなる群から選択される一以上の他の化合物を含む、緑内障のための併用療法を提供する：βアドレナリン受容体アンタゴニスト（即ち、βアドレナリンアンタゴニストまたはβブロッカー）（例えば、マレイン酸チモロール、ベタキソロール、カルテオロール(carteolol)、レボブノロール、メチプラノロール、L-653328 (L652698の酢酸エステル)、β1アドレナリン受容体アンタゴニスト）、α−２アドレナリン受容体アゴニスト（例えば、アプラクロニジン(aplaclonidine)、ブリモニジン(brimonidine)、AGN-195795、AGN190837(Bay-a-6781の類縁体)）、炭酸脱水酵素阻害剤（ブリンゾールアミド(brinzolamide)、ドルゾールアミド(dorzolamide)、MK-927（ヒト炭酸脱水酵素IIイソ酵素の阻害剤）、炭酸脱水酵素IVイソ酵素の阻害剤）、コリン作用性アゴニスト（例えば、ムスカリン作用性コリンアゴニスト、カルバコール、ピロカルピンＨＣｌ、硝酸ピロカルピン、ピロカルピン、ピロかルビンプロドラッグ（例えばＤＤ-２２Ａ)）、プロスタグランジンおよびプロスタグランジン受容体アゴニスト、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、ＡＭＰＡ受容体アゴニスト（例えば、ラタノプロスト(latanoprost)、ウノプロストンイソプロピル、ＰＧＦ２アルファアゴニスト、プロスタノイド選択的ＦＰ受容体アゴニスト、降圧性プロスタミドのようなＰＧアゴニスト）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤（例えばスピラプリル、スピラプリラット(spiraprilat)）、ＡＭＰＡ受容体アンタゴニスト、５−ＨＴアゴニスト（例えば、MKC-242（5-3-[((2S)-1,4-ベンゾジオキサン-2-イルメチル)アミノ]プロポキシ-l,3-ベンゾジオキソールHClのような選択的５−ＨＴ１Ａ受容体アゴニスト）、血管新生阻害剤（例えば、ステロイドanecortave）、ＮＭＤＡアンタゴニスト（例えば、Ｈｕ−２１１、メマンチン、カンナビノイドＭＮＤＡ受容体アゴニスト、デキサナビノール、デキサナビノールのプロドラッグおよび類縁体）、ＮＲ２Ｂ選択的アンタゴニスト（例えばエリプロジル(SL-82.0715)）、レニン阻害剤（例えば、CGP-38560、SR-43845）、カンナビノイド受容体アゴニスト（例えば、テトラヒドロカンナビノール(THC)、およびTHC類縁体、選択的ＣＢ２カンナビノイド受容体アゴニスト(例えばL-768242、L-759787)、脳特異的なＣＢ１受容体および抹消CB2受容体に結合するアナンダミドのような化合物）、アンジオテンシン受容体アンタゴニスト（例えば、アンジオテンシンII受容体アンタゴニスト(例えばCS-088)、ロサルタンカリウムのような選択的アンジオテンシンII AT-I受容体アンタゴニスト）、ヒドロクロロチアジド（ＨＣＴＺ）、ソマトスタチンアゴニスト（例えば、非ペプチドソマトスタチンアゴニストNNC-26-9100）、グルココルチコイドアンタゴニスト、肥満細胞脱顆粒阻害剤（例えば、ネドクロミル）、α−アドレナリン作用性受容体遮断薬（例えば、ダピプラゾール(dapiprazole)、α２アドレナリン受容体アンタゴニスト、α１アドレナリン受容体アンタゴニスト(例えばブナゾシン(bunazosin)）、α−２アドレナリン受容体アンタゴニスト、トロンボキサンＡ２擬似体、プロテインキナーゼ阻害剤（例えばＨ７）、プロスタグランジンＦ誘導体（例えばＳ-1033）、プロスタグランジン−２αアンタゴニスト（例えば PhXA-34）、ドパミンＤ１および５−ＨＴ２アゴニスト（フェノルドパム(fenoldopam)）、一酸化窒素放出剤（例えば、NCX-904またはNCX-905、チモロールの一酸化窒素放出性誘導体）、５−ＨＴ２アンタゴニスト（例えばサルポグリレート(sarpogrelate)）、ＮＭＤＡアンタゴニスト（例えば、デキサナビノール(dexanabinol)のプロドラッグおよび類縁体）、シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例えばジクロフェナック(diclofenac)、または非ステロイド化合物のネパフェナック(nepafenac)）、イノシン、ドパミンＤ２受容体およびαアドレナリン受容体アゴニスト（タリペキソール(talipexole)）、ドパミンＤ１受容体アンタゴニストおよびＤ２受容体アゴニスト（例えば、SDZ-GLC-756）、バソプレシン受容体アンタゴニスト（例えば、バソプレシンＶ２受容体アンタゴニスト(例えばSR-121463)）、エンドセリンアンタゴニスト（例えばTBC-2576）、１−（３−ヒドロキシ−２−ホスホリルメトキシプロピル）シトシン（ＨＰＭＰＣ）および放出類縁体およびプロドラッグ、甲状腺ホルモン受容体リガンド（例えば、KB130015）、ムスカリン性Ｍ１アゴニスト、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト（例えば、カンナビノイドNMDA-受容体アンタゴニスト デキサナビノール(dexanabinol)）、降圧性リピドのようなＰＧアゴニスト、プロスタミド、ナトリウムチャネル遮断薬、ＮＭＤＡアンタゴニスト、混合活動イオンチャネル遮断薬、βアドレナリン受容体アンタゴニストとＰＧＦ２αアゴニストとの組合せ（例えば、ラタノプロスト(latanoprost)とチモロール）、グアニル酸シクラーゼ活性化剤（例えば、動脈ナトリウム利尿ペプチド(ANP)または非ペプチド擬似体）、ＡＮＰ中性エンドペプチダーゼの阻害剤、ニトロ血管拡張剤（例えばニトログリセリン、ヒドララジン、ナトリウムニトロプルシド）、エンドセリン受容体モジュレータ（例えば、ET-1もしくは非ペプチド擬似体、ラフォトキシン(sarafotoxin)-S6c）、エタクリン酸、他のフェノキシ酢酸類縁体（例えば、インダクリオン(indacrinone)、チクリナフェン(ticrynafen)）、アクチン撹乱物質（例えば、ラトルンクリン(latrunculin)）、カルシウムチャネル遮断薬（例えば、ベラパミル、ニフェジピン、ブロビンカミン(brovincamine)、ニバルジピン(nivaldipine)）、および神経保護剤。
【０６２３】
化合物1702と、βアドレナリン受容体アンタゴニスト、α２アドレナリン受容体アゴニスト、炭酸脱水酵素アンタゴニスト、コリン作動性アゴニスト、およびプロスタグランジン受容体アゴニストからなる群から選択される一以上の化合物を含む、緑内障のための併用療法。
【０６２４】
更なる実施形態において、本発明は、治療的有効量の化合物1720および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０６２５】
更なる実施形態において、本発明は、患者におけるＡ_３アデノシン受容体に関連した疾患を治療するための放送された薬学的組成物であって：
（ａ）治療上有効な量の化合物1720を保持する容器と；
（ｂ）患者において前記疾患を治療するための前記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０６２６】
更なる実施形態において、本発明は、化合物1720を適切なキャリアと混合することを含む、化合物1720を含有する組成物を製造する方法を提供する。
【０６２７】
更なる実施形態において、本発明は、マレイン酸イオン、フマル酸イオン、酒石酸イオン、酢酸イオン、リン酸イオン、およびメシル酸イオンからなる群から選択される陰イオンを含む、化合物1720の薬学的に許容可能な塩を提供する。
【０６２８】
例43：[2-(3H-Imidazol-4-イル)-エチル]-(2-フェニル-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-イル)-アミン(1720)の合成
化合物1720 は、下記を得るために、合成スキームＶＩＩの前駆体化合物１を使用して合成された：
【化２４１】

塩化アリール1(400mg，1.50mmol)、DMSO(lOmL)およびヒスタミン(1.67g，15.0 mmol)を混合し、窒素雰囲気下で120℃まで加熱しする。6.5時間後に反応物を室温にまで冷却し、EtOAcおよび水の間で分配する。これらの層を分離し、水層をEtOAc（3×）で抽出する。合体した有機相を塩水（2×）でで洗浄し、MgSO₄上で乾燥し、濾過および濃縮して、494mgの褐色固体を得る。この固体を冷MeOHで洗浄し、MeOHから再結晶させて、197mg(43％)のオフホワイト色の固体(1720)を得る。
【０６２９】
1H-NMR(CD3OD) d 3.05(t，2H，J＝7. OHz)，3.94(t，2H，J＝7.0Hz)，6.50(d，1H，J＝3.5Hz)，6.88(br s，1H)，7.04(d，1H，J＝3.5Hz)，7.42(m，3H)，7.57(s，1H)，8.34(m，2H); MS(ES)：305.1(M⁺+1)； Mpt＝234-235℃
化合物の活性
化合物1720について、ここでの記載、特に本明細書（PCT/US01/45280）の第153〜154頁に記載したようにして、アデノシン3(A₃)受容体拮抗放射性リガンド結合を行なった。化合物1720は、特に本明細書第169頁の表１３に記載したように、参照化合物1308よりも10倍大きいA₃受容体結合親和性を有することが分った。
【０６３０】
参照による援用
ここに開示された全ての特許、公開された特許出願、および他の参照文献は、本明細書の一部をなすものとして明示的に本願に援用する。
【０６３１】
均等
当業者は、ここに具体的に記載した本発明の特定の実施形態に対する多くの均等物を理解し、またルーチンを超える実験を使用することなく確認することができるであろう。このような均等物は、本願の特許請求の範囲内に含まれるものである。
【０６３２】
本発明は更に、次式の化合物を提供する：
【化２４２】

ここで、
R₁NR₂は、一緒になって下記構造を有する環を形成するか、
【化２４３】

またはR₁はHで、R₂は
【化２４４】

であり；
R₅は、H、または置換もしくは非置換のアルキルもしくはアルキルアリールである。[0001]
No. 09 / 728,316, filed Dec. 1, 2000, and 09 / 728,607, filed Dec. 1, 2000, and Dec. 1, 2000. No. 09 / 728,616, filed on the same day, each of which is a continuation-in-part of all of which is hereby incorporated by reference in its entirety, and claims its priority.
[0002]
Throughout this application i) Adenosine A₁Receptors (e.g., inter alia PCT / US01 / 45280, pages 4-76, pages 130-175, and pages 256-287), ii) adenosine A_2aReceptors (for example, inter alia PCT / US01 / 45280, pages 176-201 and 288-293), and adenosine A₃References are made to compounds that specifically bind to receptors (for example, PCT / US01 / 45280, pages 202-256, and pages 294-300, among others).
[0003]
BACKGROUND OF THE INVENTION
Adenosine is a ubiquitous modulator of numerous physiological activities, particularly within the cardiovascular and nervous systems. The effect of adenosine appears to be mediated by specific cell surface receptor proteins. Adenosine regulates a variety of physiological functions including induction of sedation, vasodilation, suppression of heart rate and myocardial contraction, inhibition of platelet aggregation, stimulation of gluconeogenesis, and inhibition of lipolysis. In addition to the effect of adenosine on adenylate cyclase, adenosine has been shown to open potassium channels, reduce calcium channel efflux, and inhibit or stimulate phosphoinositide turnover by receptor-mediated mechanisms (eg, CE Muller and B. Stein “Adenosine Receptor Antagonists: Structures and Potential Therapeutic Applications”, Current Pharmaceutical Design, 2: 501 (1996), and CE Muller “A₁Adenosine receptor antagonist (A₁-Adenosine Receptor Antagonists), Exp. Opin. Ther. Patents 7 (5): 419 (1997)).
[0004]
The adenosine receptor is currently P₁(Adenosine) and P₂(ATP, ADP, and other nucleotides) belong to the superfamily of purine receptors that are subdivided into receptors. Four receptor subtypes for nucleoside adenosine have been cloned from various species so far, including humans. Two receptor subtypes (A₁And A_2a) Show affinity for adenosine in the nanomolar range, while two other known subtypes A_2bAnd A₃Is a low affinity receptor with affinity for adenosine in the low micromolar range. A₁And A₃While adenosine receptor activation can lead to inhibition of adenylate receptor cyclase activity, A_2aAnd A_2bActivation causes stimulation of adenylate cyclase.
[0005]
Several A₁Antagonists have been developed for the treatment of cognitive disorders, renal failure, and arrhythmias. A_2aIt has been suggested that antagonists may be beneficial for patients with Parkinson's disease. Adenosine receptor antagonists can be valuable for the treatment of allergic inflammation and asthma, especially in terms of local delivery potential. Information available (eg, Nyce & Metzger “DNA antisense Therapy for Asthma in an Animal Model” Nature (1997) 385: 721-5) In the situation, A₁While antagonists can block the contraction of smooth muscle underlying the respiratory epithelium,_2bOr A₃It has been shown that receptor antagonists can block mast cell degranulation and reduce the release of histamine and other inflammatory mediators. A_2bReceptors have been found throughout the gastrointestinal tract, especially in the colon and small intestinal epithelium. A_2bReceptors have been suggested to mediate cAMP responses (Strohmeier et al., J. Bio. Chem. (1995) 270: 2387-94).
[0006]
Adenosine receptors are also known to be present on the retinas of various mammalian species, including cattle, pigs, monkeys, rats, guinea pigs, mice, rabbits, and humans (Blazynski et al., Adenosine in mammalian retinas). Discrete Distributions of Adenosine Receptors in Mammalian Retina, Journal of Neurochemistry, volume 54, pages 648-655 (1990), Wood et al., Adenosine A in Bovine Retina₁Characterization of Adenosine A₁-Receptor Binding Sites in Bovine Retinal Membranes), Experimental Eye Research, volume 53, pages 325-331 (1991), and Braas et al., Endogenous and adenosine receptors localized to ganglion cells of the retina. adenosine and adenosine receptors localized to ganglion cells of the retina), Proceedings of the National Academy of Science, volume 84, pages 3906-3910 (1987)). Recently, Williams has reported on the observation of adenosine transport sites in cultured human retinal cell lines (Williams et al., Nucleoside Transport Sites in cultured human retinal cell lines established by the SV-40 T antigen gene. in a Cultured Human Retinal Cell Line Established By SV-40 T Antigen Gene), Current Eye Research, volume 13, pages 109-118 (1994)).
[0007]
Compounds that modulate adenosine uptake have previously been proposed as potential therapeutics for treating retinal and optic nerve head injury. In US Pat. No. 5,780,450 (Shade), Shade discusses the use of adenosine uptake inhibitors to treat eye disorders. Shade is a specific A₃There is no disclosure of the use of receptor inhibitors. The entire contents of US Pat. No. 5,780,450 are hereby incorporated by reference.
[0008]
Additional adenosine receptor antagonists are needed as pharmacological tools and are of great interest as agents for the above mentioned disease states and / or symptoms.
[0009]
SUMMARY OF THE INVENTION
The present invention relates to adenosine A₁Selectively binds to the receptor, whereby A₁Based on compounds that treat diseases associated with adenosine receptors, by administering to a patient a therapeutically effective amount of such compounds. Diseases to be treated are cognitive disorders, renal failure, arrhythmia, respiratory epithelium, transmitter release, sedation, vasoconstriction, bradycardia, negative cardiac inotropic and transduction, bronchoconstriction, neutrophil chemotaxis, reflux status Or an ulcer condition.
[0010]
The present invention is based, at least in part, on the discovery that certain N-6 substituted 7-deazapurines described below can be used to treat N-6 substituted 7-deazapurine responsive conditions. Yes. Examples of such conditions include those with increased adenosine receptor activity (eg, bronchitis, gastrointestinal disorders, or asthma). These conditions may be characterized in that activation of the adenosine receptor can cause inhibition or stimulation of adenylate cyclase activity. The compositions and methods of the present invention include enantiomerically or diastereomerically pure N-6 substituted 7-deazapurines. Preferred N-6 substituted 7-deazapurines include those having an acetamide, carboxamide, substituted cyclohexyl (eg, cyclohexanol), or urea moiety attached to the N-6 nitrogen by an alkylene chain.
[0011]
The present invention modulates adenosine receptor (s) in a mammal by administering to the mammal a therapeutically effective amount of N-6 substituted 7-deazapurine so that modulation of the activity of the adenosine receptor occurs. Regarding the method. Suitable adenosine receptors include A₁, A₂Or A₃Family is mentioned. In a preferred embodiment, N-6 substituted 7-deazapurine is an adenosine receptor antagonist.
[0012]
The invention further provides for administering a therapeutically effective amount of an N-6 substituted 7-deazapurine to a mammal such that the disorder is treated in the mammal, such as an N-6 substituted 7-deazapurine disorder, such as Relates to methods for treating asthma, bronchitis, allergic rhinitis, chronic obstructive pulmonary disease, kidney disorders, gastrointestinal disorders, and eye disorders. Suitable N-6 substituted 7-deazapurines include the following general formula I:
Embedded image

And pharmaceutically acceptable salts thereof. R₁And R₂Are each independently a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, or together form a substituted or unsubstituted heterocycle. R₃Is a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety. R₄Is a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety. R₅And R₆Each independently is a halogen atom (eg, chlorine, fluorine, or bromine), a hydrogen atom, or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, or R₅Is carboxyl, an ester of carboxyl, or carboxamide, or R₄And R₅Or R₅And R₆Together form a substituted or unsubstituted heterocycle or carbocycle.
[0013]
In some embodiments, R₁And R₂Each independently can be a substituted or unsubstituted cycloalkyl or heteroarylalkyl moiety. In other embodiments, R₃Is a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted heteroaryl moiety. In yet another embodiment, R₄, R₅And R₆Each independently can be a heteroaryl moiety. In a preferred embodiment, R₁Is a hydrogen atom and R₂Is cyclohexanol, for example transcyclohexanol, R₃Is phenyl and R₄Is a hydrogen atom and R₅Is a methyl group and R₆Is a methyl group. In yet another embodiment, R₁Is a hydrogen atom and R₂The following:
Embedded image

And R₃Is phenyl and R₄Is a hydrogen atom and R₅And R₆Is a methyl group.
[0014]
The present invention further provides for treating N-6 substituted 7-deazapurine responsive states in mammals, such as asthma, bronchitis, allergic rhinitis, chronic obstructive pulmonary disease, kidney disorders, gastrointestinal disorders, and eye disorders. It relates to a pharmaceutical composition. The pharmaceutical composition comprises a therapeutically effective amount of N-6 substituted 7-deazapurine and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0015]
The present invention also relates to packaged pharmaceutical compositions for treating N-6 substituted 7-deazapurine responsive conditions in mammals. The packaged pharmaceutical composition comprises a container holding a therapeutically effective amount of at least one N-6 substituted 7-deazapurine and an N- for treating an N-6 substituted 7-deazapurine responsive condition in a mammal. And instructions for using 6-substituted 7-deazapurine.
[0016]
The present invention further comprises a compound having formula I,
(Where
R₁Is hydrogen,
R₂Is substituted or unsubstituted cycloalkyl, substituted or unsubstituted alkyl, or R₁And R₂Together form a substituted or unsubstituted heterocycle,
R₃Is substituted or unsubstituted aryl;
R₄Is hydrogen,
R₅And R₆Each independently is hydrogen or alkyl)
And pharmaceutically acceptable salts thereof. The deazapurine of this embodiment is preferably selective A₁It may be a receptor antagonist. These compounds may be useful for a number of therapeutic uses, such as the treatment of asthma, renal failure associated with heart failure, and glaucoma. In a particularly preferred embodiment, deazapurine is a water-soluble prodrug that can be metabolized in vivo to the active agent, for example by esterase-catalyzed hydrolysis.
[0017]
In yet another embodiment, the present invention relates to an adenosine receptor (eg, AA) in a cell by contacting the cell with an N-6 substituted 7-deazapurine (eg, preferably an adenosine receptor antagonist).₃) Is inhibited.
[0018]
In another aspect, the invention features a method of treating damage to an eye of an animal (eg, a human) by administering to the animal an effective amount of N-6 substituted 7-deazapurine having Formula I. To do. Preferably, the N-6 substituted 7-deazapurine is A in animal cells.₃It is an adenosine receptor antagonist. The damage is to the retina or optic disc and may be acute or chronic. The injury can be the result of, for example, glaucoma, edema, ischemia, hypoxia, or trauma.
[0019]
The invention features a pharmaceutical composition comprising an N-6 substituted compound having Formula I. Preferably, the pharmaceutical preparation is an ophthalmic formulation (eg, periocular, post-ocular or intraocular injection formulation, systemic formulation, or surgical irrigation solution).
[0020]
In yet another embodiment, the invention features a compound having the following Formula II:
Embedded image

(Where X is N or CR₆And R₁And R₂Are each independently hydrogen or substituted or unsubstituted alkoxy, aminoalkyl, alkyl, aryl, or alkylaryl, or together form a substituted or unsubstituted heterocycle (provided that R₁And R₂Are not both hydrogen), R₃Is substituted or unsubstituted alkyl, arylalkyl, or aryl, and R₄Is hydrogen or substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl and L is hydrogen, substituted or unsubstituted aryl, or R₄And L together form a substituted or unsubstituted heterocycle or carbocycle and R₆Is hydrogen, substituted or unsubstituted alkyl, or halogen, and Q is CH₂, O, S, or NR₇(Where R₇Is hydrogen or substituted or unsubstituted C₁~ C₆W is substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, arylalkyl, biaryl, heteroaryl, substituted carbonyl, substituted thiocarbonyl, or substituted sulfonyl, provided that R is₃R is pyrrolidine, R₄Is not methyl). The invention also relates to pharmaceutically acceptable salts and prodrugs of the compounds of the invention.
[0021]
In a preferred embodiment, in Formula II, X is CR₆And Q is CH₂, O, S, or NH (where R₆Is as defined above).
[0022]
In another embodiment of formula II, X is N.
[0023]
The present invention further provides adenosine receptors (eg, A) in a cell by contacting the cell with a compound of the present invention._2bThe present invention relates to a method for inhibiting the activity of adenosine receptors. Preferably, the compound is a receptor antagonist.
[0024]
The present invention also provides an effective amount of a compound of formula II (eg, A_2bIs administered to the animal to treat a gastrointestinal disorder (eg, diarrhea) or a respiratory disorder (eg, allergic rhinitis, chronic obstructive pulmonary disease) in the animal. Preferably the animal is a human.
[0025]
The invention also features a compound having the following structure:
Embedded image

(Wherein R₁Is trans-4-hydroxycyclohexyl, 2-methylaminocarbonylaminocyclohexyl, 2-methylaminocarbonylaminocyclohexyl, acetamidoethyl, or methylaminocarbonylaminoethyl, Ar is a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring Is).
[0026]
In one embodiment of the above compound, Ar is phenyl, pyrrole, thiophene, furan, thiazole, imidazole, pyrazole, 1,2,4-triazole, pyridine, 2 (1H) -pyrrolidone, 4 (1H) -pyrrolidone, pyrazine. , Pyrimidine, pyridazine, isothiazole, isoxazole, oxazole, tetrazole, naphthalene, tetralin, naphthyridine, benzofuran, benzothiophene, indole, 2,3-dihydroindole, 1H-indole, indoline, benzopyrazole, 1,3-benzodio Chiol, benzoxazole, purine, coumarin, chromone, quinoline, tetrahydroquinoline, isoquinoline, benzimidazole, quinazoline, pyrido [2,3-b] pyrazine, pyrido [3,4-b] pyrazine, Lido [3,2-c] pyridazine, pyrido [3,4-b] pyrimidine, 1H-pyrazole [3,4-d] pyrimidine, pteridine, 2 (1H) -quinolone, 1 (2H) -isoquinolone, 1, 4-benzisoxazine, benzothiazole, quinoxaline, quinoline-N-oxide, isoquinoline-N-oxide, quinoxaline-N-oxide, quinazoline-N-oxide, benzoxazine, phthalazine, cinnoline or the following structure:
Embedded image

(Where
Y is carbon or nitrogen;
R₂And R_{2 '}Are independently H, substituted or unsubstituted alkyl, substituted or unsubstituted aryl, halogen, methoxy, methylamino, or methylthio)
Having
R₃Are H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is —C (R₇) (R₈) XR₅(Where X is O, S or NR₆And R₇And R₈Each independently is H or alkyl, R₅And R₆Each independently is alkyl or cycloalkyl, or R₅, R₆And nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring),
R₄Is H, alkyl, substituted alkyl, cycloalkyl)
Or a pharmaceutically acceptable salt, or prodrug derivative, or a biologically active metabolite, provided that R₃When is acetylaminoethyl, Ar is not 4-pyridyl.
[0027]
The invention also relates to compounds having the following structure:
Embedded image

(Where
R₁Is aryl, substituted aryl, or heteroaryl;
R₂Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₃Are H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is —C (R₆) (R₇) NR₄R₅(Where R₆And R₇Each is H or alkyl and R₄And R₅Each is alkyl or cycloalkyl, or R₄, R₅And nitrogen together form a 5- to 7-membered ring system).
[0028]
The present invention also provides A₁A method of inhibiting the activity of an adenosine receptor, characterized in that it comprises contacting said cell with said compound.
[0029]
[Detailed explanation]
The features and other details of the invention will now be more particularly described and pointed out in the claims. It will be understood that the particular embodiments of the invention are shown by way of illustration and not as limitations of the invention. The basic features of the invention can be used in various embodiments without departing from the scope of the invention.
[0030]
The present invention relates to a method of treating an N-6 substituted 7-deazapurine responsive state in a mammal. The method includes administering to the mammal a therapeutically effective amount of an N-6 substituted 7-deazapurine, as described below, such that treatment of the N-6 substituted 7-deazapurine responsive state in the mammal is performed. .
[0031]
The term “N-6 substituted 7-deazapurine responsive state” is intended to encompass disease states or conditions characterized by responsiveness to treatment with an N-6 substituted 7-deazapurine of the present invention as described below. Intended, for example, treatment includes a significant reduction in the effect of at least one symptom or condition achieved by the N-6 substituted 7-deazapurine of the present invention. Such conditions are usually associated with increased adenosine in the host, so that the host may release toxins, inflammation, coma, water retention, weight gain or weight loss, pancreatitis, emphysema, rheumatoid arthritis, deformity Include, but are not limited to, osteoarthritis, multiple organ failure, infant and adult respiratory distress syndrome, allergic rhinitis, chronic obstructive pulmonary disease, eye disorders, gastrointestinal disorders, skin tumor promotion, immune deficiency, and asthma Often suffers physiological symptoms (eg CE Muller and B. Stein “Adenosine Receptor Antagonists: Structures and Potential Therapeutic Applications”, Current Pharmaceutical Design, 2: 501 (1996 ), And CE Muller “A₁Adenosine receptor antagonist (A₁-Adenosine Receptor Antagonists), Exp. Opin. Ther. Patents 7 (5): 419 (1997), and I. Feoktistove, R. Polosa, S.T.Holgate and I. Eiaggioni "Adenosine A_2BReceptor: a novel therapeutic target in asthma? (Adenosine A_2b receptors: a novel therapeutic target in asthma?) "TIPS 19: 148 (1998)). Effects often associated with such symptoms include, but are not limited to, fever, shortness of breath, nausea, diarrhea, weakness, headache, and even death. In one embodiment, the N-6 substituted 7-deazapurine responsive state has an adenosine receptor, eg, A₁, A_2a, A_2b, A₃Disease states that are mediated by such stimuli and as a result the modulation of cellular calcium concentration and / or the activity of PLC (phospholipase C). In a preferred embodiment, the N-6 substituted 7-deazapurine responsive state is associated with adenosine receptor (s), for example, N-6 substituted 7-deazapurine acts as an antagonist. Examples of suitable responsive states that can be treated by the compounds of the present invention, eg, adenosine receptor subtypes that mediate biological effects include central nervous system (CNS) effects, cardiovascular effects, renal effects Effects, respiratory effects, immunological effects, gastrointestinal effects, and metabolic effects. The relative amount of adenosine in a patient can be related to the effects listed below, ie, an increase in adenosine levels can induce an effect, such as an undesirable physiological response (eg, asthma attack).
[0032]
CNS effects include the release of transmitters (A₁), Sedation (A₁), Decreased motor activity (A_2a), Antispasmodic activity, chemoreceptor stimulation (A₂), And hyperalgesia. Therapeutic uses of the compounds of the invention include dementia, Alzheimer's disease and memory enhancement.
[0033]
Cardiovascular effects include vasodilation (A_2a), (A_2b) And (A₃), Vasoconstriction (A₁), Bradycardia (A₁), Platelet inhibition (A_2a), Negative heart force and transduction (A₁), Arrhythmia, tachycardia, and angiogenesis. Therapeutic uses of the compounds of the invention include, for example, prevention of ischemia-induced defects in the heart, and cardiotonic drugs, myocardial tissue protection, and cardiac function repair.
[0034]
Kidney effects include decreased GFR (A₁), Mesangial cell contraction (A₂), Antidiuretic (A₁), And inhibition of renin release (A₁). Suitable therapeutic uses for the compounds of the present invention include diuretics, natriuretics, potassium retention agents, renal protectants / prevention of acute renal failure, the present invention as antihypertensives, antiedema and antinephritis agents. Use.
[0035]
Respiratory effects include bronchodilation (A₂), Bronchoconstriction (A₁), Chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, mucus secretion and hypopnea (A₂). Suitable therapeutic uses for the compounds of the present invention include asthma sedation, transplantation and treatment of pulmonary disease after respiratory failure.
[0036]
Immunological effects include immunosuppression (A₂), Neutrophil chemotaxis (A₁), Neutrophil superoxide production (A_2a), And mast cell granulation (A_2bAnd A₃). The therapeutic use of antagonists includes allergic and non-allergic inflammation (eg, release of histamine and other inflammatory mediators).
[0037]
Gastrointestinal effects include acid secretion inhibition (A₁). Therapeutic applications may include reflux and ulcer conditions. Gastrointestinal effects may also include colon, intestinal and diarrheal diseases such as those associated with enteritis (A_2b).
[0038]
Eye disorders include retinal and optic disc damage and trauma related disorders (A₃). In a preferred embodiment, the ocular disorder is glaucoma.
[0039]
Other therapeutic uses for the compounds of the present invention include obesity (lipolytic properties), treatment of hypertension, treatment of depression, sedatives, anxiolytics, antiepileptics, and laxatives (eg, do not cause diarrhea) To achieve motility).
[0040]
The term “disease state” is caused by or associated with undesirable levels of adenosine, adenyl cyclase activity, increased physiological activity associated with abnormal stimulation of adenosine receptors, and / or increased cAMP. States. In one embodiment, the disease state is, for example, asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, bronchitis, renal disorder, gastrointestinal disorder, or eye disorder. Further examples include chronic bronchitis and cystic fibrosis. Suitable examples of inflammatory disorders include nonlymphocytic leukemia, myocardial ischemia, angina, infarction, cerebrovascular ischemia, intermittent claudication, critical limb ischemia, venous hypertension, dilated serpentine vein, venous ulceration, And arteriosclerosis. Reperfusion injury conditions include, for example, any post-surgical trauma such as reconstruction surgery, thrombolysis or angiogenesis.
[0041]
Can the term “treatment of an N-6 substituted 7-deazapurine responsive state” or “treat an N-6 substituted 7-deazapurine responsive state” significantly reduce a physiological condition in a mammal? Or intended to encompass changes in disease states or symptoms as described above so that they can be minimized. The term also encompasses the control, prevention or inhibition of physiological symptoms or effects associated with abnormal amounts of adenosine. In one preferred embodiment, the control of the disease state or symptom is that the disease state or symptom is eradicated. In another preferred embodiment, the control is selective such that abnormal levels of adenosine receptor activity are controlled without affecting other physiological systems and parameters.
[0042]
The term “N-6 substituted 7-deazapurine” is art-recognized and has the formula I:
Embedded image

It is intended to include compounds having
[0043]
“N-substituted 7-deazapurine” includes pharmaceutically acceptable salts, and in one embodiment also includes certain N-6 substituted purines described herein.
[0044]
In certain embodiments, the N-6 substituted 7-deazapurine is neither N-6 benzyl substituted nor N-6 phenylethyl substituted. In other embodiments, R₄Is neither benzyl-substituted nor phenylethyl-substituted. In a preferred embodiment, R₁And R₂Both are not hydrogen atoms. In yet another preferred embodiment, R₃Is not a hydrogen atom.
[0045]
The term “therapeutically effective amount” of N-6 substituted 7-deazapurine, described below, is used to perform its intended function in a mammal (eg, an N-6 substituted 7-deazapurine response in a mammal). The amount of therapeutic compound necessary or sufficient to cure a sexual or disease state. An effective amount of therapeutic compound is the amount of causative agent already present in the mammal, the mammal's age, sex, and weight, and the N-6 substituted 7-deazapurine response in the mammal of the therapeutic compound of the invention. It can vary according to factors such as ability to influence sexual status.
[0046]
One of ordinary skill in the art will be able to study the above factors and make a determination regarding the effective amount of the therapeutic compound without undue experimentation. In vitro or in vivo assays can also be used to determine an “effective amount” of a therapeutic compound as described below. Those skilled in the art will select an appropriate amount of the therapeutic compound for use in the above-described assays or as a therapeutic treatment.
[0047]
The therapeutically effective amount is preferably at least about 20% (more than at least one symptom or effect associated with the N-6 substituted 7-deazapurine responsive state or symptom being treated for a non-treated patient. Preferably at least about 40%, more preferably at least about 60%, even more preferably at least about 80%). One skilled in the art can design an assay to measure such symptoms and / or a reduction in effects. Any art-recognized assay for measuring such parameters is intended to be included as part of the present invention. For example, if asthma is the condition being treated, the volume of air consumed from the patient's lungs is measured before and after treatment to measure volume increase using techniques recognized in the art. be able to. Similarly, if inflammation is the condition being treated, the inflamed area is measured before and after treatment to measure the reduction of the inflamed area using techniques recognized in the art. can do.
[0048]
The term “cell” encompasses both prokaryotic and eukaryotic cells.
[0049]
The term “animal” includes any organism that has an adenosine receptor, or any organism that is susceptible to an N-6 substituted 7-deazapurine responsive state. Examples of animals include yeast, mammals, reptiles, and birds. Animals also include transgenic animals.
[0050]
The term “mammal” is art-recognized and includes animals, more preferably warm-blooded animals, most preferably cattle, sheep, pigs, horses, dogs, cats, rats, mice, and humans. I intend to. Mammals prone to N-6 substituted 7-deazapurine responsive states such as inflammation, emphysema, asthma, central nervous system symptoms, or acute respiratory distress syndrome are included as part of the invention.
[0051]
In another aspect, the invention provides for adenosine receptor (s) in a mammal by administering to the mammal a therapeutically effective amount of N-6 substituted 7-deazapurine such that modulation of the adenosine receptor in the mammal occurs. It relates to a method of adjusting the possible. Suitable adenosine receptors include A₁, A₂Or A₃Family is mentioned. In a preferred embodiment, N-6 substituted 7-deazapurine is an adenosine receptor antagonist.
[0052]
The term “modulates adenosine receptor” refers to an increased physiological relationship where a compound interacts with adenosine receptor (s) and is associated with the effects of adenosine receptors or subsequent cascades of adenosine receptors. It is intended to encompass cases that cause activity, decreased physiological activity or abnormal physiological activity. Physiological activities associated with adenosine receptors include induction of sedation, vasodilation, suppression of heart rate and suppression of myocardial contraction, inhibition of platelet aggregation, stimulation of gluconeogenesis, and inhibition of lipolysis, opening of potassium channels. Reduction of calcium channel efflux.
[0053]
The terms “modulate”, “modulating” and “modulation” prevent, for example, in the context of the treatment method of the invention, an increase in undesirable physiological activity that occurs as a result of abnormal stimulation of adenosine receptors. Intended to encompass eradication, inhibition, or inhibition. In another embodiment, the term modulating encompasses a decrease in activity or production of mediators of allergy and allergic inflammation due to an antagonistic effect, eg, overstimulation of adenosine receptor (s). For example, the therapeutic deazapurines of the present invention can interact with adenosine receptors to inhibit, for example, adenylate cyclase activity.
[0054]
The term “symptoms characterized by aberrant adenosine receptor activity” means that receptor stimulation causes a series of biochemical and / or physiological events that are directly or indirectly associated with a disease, disorder or condition In this regard, it is intended to encompass a disease, disorder or condition associated with abnormal adenosine receptor stimulation. This stimulation of adenosine receptors need not be the only causative agent of the disease, disorder or condition, but is the cause of some of the symptoms usually associated with the disease, disorder or condition being treated. Abnormal stimulation of the receptor may be just one factor or at least one other agent may be involved in the condition being treated. Examples of symptoms include the disease states listed above, including symptoms manifested by the presence of inflammation, gastrointestinal disorders, and increased adenosine receptor activity. Preferred examples include symptoms associated with asthma, allergic rhinitis, chronic obstructive pulmonary disease, emphysema, bronchitis, gastrointestinal disorders, and glaucoma.
[0055]
The term “treating or treating a condition characterized by abnormal adenosine receptor activity” is intended to encompass alleviation or reduction of at least one symptom usually associated with the condition. Treatment also includes the alleviation or reduction of two or more symptoms. Preferably, the treatment cures (eg, substantially eliminates) the symptoms associated with the symptoms.
[0056]
The present invention relates to N-6 substituted 7-deazapurines, which are compounds having the following general formula I:
Embedded image

(Wherein R₁And R₂Are each independently a hydrogen atom, or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, or together, form a substituted or unsubstituted heterocycle, R₃Is a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, and R₄Is a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, and R₅And R₆Each independently is a halogen atom (eg, chlorine, fluorine, or bromine), a hydrogen atom, or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, or R₄And R₅Or R₅And R₆Together form a substituted or unsubstituted heterocycle or carbocycle). Also included are pharmaceutically acceptable salts of N-6 substituted 7-deazapurines.
[0057]
In some embodiments, R₁And R₂Each independently can be a substituted or unsubstituted cycloalkyl or heteroarylalkyl moiety. In other embodiments, R₃Is a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted heteroaryl moiety. In yet another embodiment, R₄, R₅And R₆Each independently can be a heteroaryl moiety.
[0058]
In one embodiment, R₁Is a hydrogen atom and R₂Is a substituted or unsubstituted cyclohexane, cyclopentyl, cyclobutyl, or cyclopropane moiety, and R₃Is a substituted or unsubstituted phenyl moiety and R₄Is a hydrogen atom and R₅And R₆Are both methyl groups.
[0059]
In another embodiment, R₂Is cyclohexanol, cyclohexanediol, cyclohexylsulfonamide, cyclohexaneamide, cyclohexyl ester, cyclohexene, cyclopentanol, or cyclopentanediol, and R₃Is a phenyl moiety.
[0060]
In yet another embodiment, R₁Is a hydrogen atom and R₂Is cyclohexanol and R₃Is a substituted or unsubstituted phenyl, pyridine, furan, cyclopentane, or thiophene moiety, and R₄Is a hydrogen atom, a substituted alkyl, aryl, or arylalkyl moiety, and R₅And R₆Are each independently a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety.
[0061]
In yet another embodiment, R₁Is a hydrogen atom and R₂Is a substituted or unsubstituted alkylamine, arylamine, or alkylarylamine, substituted or unsubstituted alkylamide, arylamide or alkylarylamide, substituted or unsubstituted alkylsulfonamide, arylsulfonamide or alkylarylsulfonamide Substituted or unsubstituted alkylurea, arylurea or alkylarylurea, substituted or unsubstituted alkylcarbamate, arylcarbamate or alkylarylcarbamate, substituted or unsubstituted alkylcarboxylic acid, arylcarboxylic acid or alkylarylcarboxylic acid , R₃Is a substituted or unsubstituted phenyl moiety and R₄Is hydrogen and R₅And R₆Is a methyl group.
[0062]
In yet another embodiment, R₂Is guanidine, modified guanidine, cyanoguanidine, thiourea, thioamide, or amidine.
[0063]
In one embodiment, R₂The following:
Embedded image

(Wherein R_2a~ R_2cAre each independently a hydrogen atom or a saturated or unsaturated alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, and R_2dIs a hydrogen atom or a saturated or unsaturated alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, NR_2eR_2fOr R_2g(Where R_2e~ R_2gAre each independently a hydrogen atom or a saturated or unsaturated alkyl, aryl, or alkylaryl moiety))
It can be. Or R_2aAnd R_2bTogether can form a carbocyclic or heterocyclic ring (eg, cyclopropyl, cyclopentyl, cyclohexyl group) having about 3-6 membered ring size.
[0064]
In one aspect of the invention, R₅And R₆Are not both methyl, preferably R₅And R₆One of them is an alkyl group, for example, a methyl group, and the other is a hydrogen atom.
[0065]
In another aspect of the invention, R₄Is 1-phenylethyl and R₁R is a hydrogen atom, R₃Is not phenyl, 2-chlorophenyl, 3-chlorophenyl, 4-chlorophenyl, 3,4-dichlorophenyl, 3-methoxyphenyl, or 4-methoxyphenyl, or R₄And R₁Is 1-phenylethyl, R₃Is not a hydrogen atom or R₄Is a hydrogen atom and R₃R is phenyl₁Is not phenylethyl.
[0066]
In another aspect of the invention, R₅And R₆Together with a carbocyclic ring, for example:
Embedded image

Or when forming a pyrimido [4,5-6] indole, R₄R is 1- (4-methylphenyl) ethyl, phenylisopropyl, phenyl, or 1-phenylethyl₃Is not phenyl or R₄R is 1-phenylethyl₃Is not a hydrogen atom. R₅And R₆The carbocycle formed by can be aromatic or aliphatic and has 4 to 12 carbon atoms (eg, naphthyl, phenylcyclohexyl), preferably 5 to 7 carbon atoms (eg, cyclopentyl). Or cyclohexyl). Or R₅And R₆Together can form heterocycles such as those disclosed below. Typical heterocycles contain 4 to 12 carbon atoms, preferably 5 to 7 carbon atoms, and can be aromatic or aliphatic. Heterocycles can be further substituted, including substituting one or more carbon atoms of the ring structure with one or more heteroatoms.
[0067]
In yet another aspect of the invention, R₁And R₂Forms a heterocycle. Representative examples include, but are not limited to, the heterocycles listed below (eg, 4-hydroxypiperidine, 4-aminopiperidine) such as morpholino, piperazine and the like. Here R₁And R₂But together with the piperazine group:
Embedded image

(Wherein R₇Can be a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, alkylaryl moiety)
Form.
[0068]
In yet another aspect of the invention, R₄And R₅Are heterocycles together, for example:
Embedded image

Wherein the heterocycle can be aromatic or aliphatic and can also form a ring having 4 to 12 carbon atoms (eg, naphthyl, phenylcyclohexyl, etc.) And can be aromatic or aliphatic (eg, cyclohexyl, cyclopentyl).
[0069]
Heterocycles can be further substituted, including substituting carbon atoms of the ring structure with one or more heteroatoms. Or R₄And R₅Together can form heterocycles such as those disclosed below.
[0070]
In certain embodiments, the N-6 substituted 7-deazapurine is neither N-6 benzyl substituted nor N-6 phenylethyl substituted. In other embodiments, R₄Is neither benzyl-substituted nor phenylethyl-substituted. In a preferred embodiment, R₁And R₂Both are not hydrogen atoms. In yet another preferred embodiment, R₃Is not a hydrogen atom.
[0071]
The compounds of the present invention are water-soluble as described in WO 99/33815, International Application No. PCT / US98 / 04595, filed Mar. 9, 1998 and published Jul. 8, 1998. Prodrugs may be included. The entire contents of WO 99/33815 are expressly incorporated herein by reference. Water soluble prodrugs are metabolized in vivo to the active drug, for example, by hydrolysis catalyzed by esterases. Examples of potential prodrugs include, for example, —OC (O) (Z) NH₂Where Z is a naturally occurring or non-naturally occurring amino chain, or analogs thereof, an α, β, γ, or ω amino acid, or a side chain of a dipeptide. R as alkyl₂Deazapurine having Preferred amino acid side chains include glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, lysine, α-methylalanine, aminocyclopropanecarboxylic acid, azetidine-2-carboxylic acid, β-alanine, γ-aminobutyric acid, alanine-alanine, Or the side chain of glycine-alanine is mentioned.
[0072]
In a further embodiment, the present invention provides compounds of formula I wherein R₁Is hydrogen and R₂Is substituted or unsubstituted cycloalkyl, substituted or unsubstituted alkyl, or R₁And R₂Together form a substituted or unsubstituted heterocycle and R₃Is substituted or unsubstituted aryl and R₄Is hydrogen and R₅And R₆Are each independently hydrogen or alkyl) and are characterized by deazapurines, and pharmaceutically acceptable salts thereof. The deazapurine of this embodiment is potentially selective A₃It can be a receptor antagonist.
[0073]
In one embodiment, R₂Is substituted (eg, hydroxy substituted) or unsubstituted cycloalkyl. In a preferred embodiment, R₂And R₄Is hydrogen and R₃Is substituted or unsubstituted phenyl and R₅And R₆Are each alkyl. Preferably R₂Is monohydroxycyclopentyl or monohydroxycyclohexyl. R₂Is also —NH—C (═O) E, where E is a substituted or unsubstituted C₁~ C₄It may be substituted with alkyl (eg, alkylamine (eg, ethylamine)).
[0074]
R₁And R₂May also form a substituted or unsubstituted heterocycle together and may be substituted with an amine or acetamide group.
[0075]
In another aspect, R₂Is —A—NHC (═O) B (where A is unsubstituted C₁~ C₄Alkyl (eg, ethyl, propyl, butyl) and B is substituted or unsubstituted C₁~ C₄May be alkyl (eg methyl, aminoalkyl (eg aminomethyl or aminoethyl) alkylamino) (eg methylamino, ethylamino), preferably R₁And R₄R is hydrogen, R₃Is substituted or unsubstituted phenyl and R₅And R₆Are each alkyl. B may be substituted or unsubstituted cycloalkyl, such as cyclopropyl or 1-amino-cyclopropyl.
[0076]
In another embodiment, preferably R₅And R₆When each is alkyl₃Is substituted or unsubstituted phenyl. Preferably R₃May have one or more substituents (eg, o, m, or p-chlorophenyl, o, m, or p-fluorophenyl).
[0077]
Suitably, preferably R₅And R₆When each is alkyl₃May be substituted or unsubstituted heteroaryl. Examples of heteroaryl groups include pyridyl, pyrimidyl, pyridazinyl, pyrazinyl, pyrrolyl, triazolyl, thiazolyl, oxazolyl, oxadiazolyl, furanyl, methylenedioxyphenyl, and thiophenyl. Preferably R₃Is 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, 2-pyrimidyl, or 3-pyrimidyl.
[0078]
Preferably, in one embodiment, R₅And R₆Are each hydrogen. In another embodiment, R₅And R₆Are each methyl.
[0079]
In particularly preferred embodiments, the deazapurines of the invention are water-soluble prodrugs that can be metabolized in vivo to the active agent, for example, by hydrolysis catalyzed by esterases. Preferably, the prodrug is —OC (O) (Z) NH.₂Where Z is a naturally occurring or non-naturally occurring amino acid, their analogs, an α, β, γ, or ω amino acid, or a side chain of a dipeptide, R₂Contains groups. Preferred amino acid side chains include glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, lysine, α-methylalanine, aminocyclopropanecarboxylic acid, azetidine-2-carboxylic acid, β-alanine, γ-aminobutyric acid, alanine-alanine, Or the side chain of glycine-alanine is mentioned.
[0080]
In a particularly preferred embodiment, Z is a side chain of glycine and R₂Is cyclohexyl and R₃Is phenyl and R₅And R₆Is methyl.
[0081]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (cis-3-hydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0082]
In another embodiment, deazapurine is 4- (cis-3- (2-aminoacetoxy) cyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine trifluoroacetate. is there.
[0083]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (3-acetamido) piperidinyl-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0084]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (2-N'-methylureapropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0085]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetamidobutyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0086]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (2-N'-methylureabutyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0087]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (2-aminocyclopropylacetamidoethyl) amino-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0088]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (3-chlorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0089]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (3-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0090]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (4-pyridyl) -7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0091]
In yet another embodiment, the present invention provides an adenosine receptor (eg, AA) in a cell by contacting the cell with an N-6 substituted 7-deazapurine (eg, preferably an adenosine receptor antagonist).₁, A_2A, A_2BOr preferably A₃) Is inhibited.
[0092]
In another aspect, the invention features a method of treating damage to an animal's eye by administering an effective amount of an N-6 substituted 7-deazapurine to the animal (eg, a human). Preferably, the N-6 substituted 7-deazapurine is A in animal cells.₃It is an adenosine receptor antagonist. The damage is to the retina or optic disc and may be acute or chronic. The injury can be, for example, the result of glaucoma, edema, ischemia, hypoxia or trauma.
[0093]
In preferred embodiments, the present invention provides compounds of formula II above, wherein X is N or CR₆And R₁And R₂Are each independently hydrogen or substituted or unsubstituted alkoxy, aminoalkyl, alkyl, aryl, or alkylaryl, or together form a substituted or unsubstituted heterocycle (provided that R₁And R₂Are not both hydrogen), R₃Is substituted or unsubstituted alkyl, arylalkyl, or aryl, and R₄Is hydrogen or substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl and L is hydrogen, substituted or unsubstituted C₁~ C₆Is alkyl or R₄And L together form a substituted or unsubstituted heterocycle or carbocycle and R₆Is hydrogen, substituted or unsubstituted alkyl, or halogen, and Q is CH₂, O, S, or NR₇(Where R₇Is hydrogen, or substituted C is unsubstituted C₁~ C₆W is substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, alkynyl, aryl, arylalkyl, biaryl, heteroaryl, substituted carbonyl, substituted thiocarbonyl, or substituted sulfonyl, provided that R is₃R is pyrrolidino, R₄Is characterized by a deazapurine having no methyl).
[0094]
In one embodiment, in compounds of Formula II, X is CR₆And Q is CH₂, O, S, or NH. In another embodiment, X is N.
[0095]
In a further embodiment of the compound of formula II, W is substituted or unsubstituted aryl, 5 or 6 membered heteroaryl, or biaryl. W may be substituted with one or more substituents. Examples of substituents include halogen, hydroxy, alkoxy, amino, aminoalkyl, aminocarboxamide, CN, CF₃, CO₂R₈, CONHR₈, CONR₈R₉, SOR₈, SO₂R₈, And SO₂NR₈R9 (where R₈And R₉Are each independently hydrogen or substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, or arylalkyl. Preferably W may be substituted or unsubstituted phenyl (eg methylenedioxyphenyl). W may also be a substituted or unsubstituted 5-membered heteroaryl ring (eg, pyrrole, pyrazole, oxazole, imidazole, triazole, tetozole, furan, thiophene, thiazole, and oxadiazole). Preferably, W may be a 6-membered heteroaryl ring (eg, pyridyl, pyrimidyl, pyridanidyl, pyrazinal, and thiophenyl). In preferred embodiments, W may be 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, 2-pyrimidyl, 4-pyrimidyl, or 5-pyrimidyl).
[0096]
In one preferred embodiment of the compound of Formula II, Q is NH and W is unsubstituted or N-substituted with substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, or arylalkyl. It is a 3-pyrazolo ring.
[0097]
In another embodiment of the compounds of formula II, Q is oxygen and W is 2-thiazolo, which is unsubstituted or substituted with substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, or arylalkyl. It is a ring.
[0098]
In another embodiment of the compounds of formula II, W is substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl (eg, cyclopentyl), or arylalkyl. Examples of substituents include halogen, hydroxy, substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, arylalkyl, or NHR₁₀(Where R₁₀Are hydrogen, or substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, or arylalkyl).
[0099]
In yet another embodiment, the invention provides compounds of formula II, wherein W is — (CH₂)_a-C (= O) Y or-(CH₂)_b-C (= S) Y, a is an integer from 0 to 3, and Y is aryl, alkyl, arylalkyl, cycloalkyl, heteroaryl, alkynyl, NHR₁₁R₁₂OR or if Q is NH, OR₁₃(Where R₁₁, R₁₂And R₁₃Are each independently hydrogen or a deazapurine having a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, arylalkyl, or cycloalkyl))). Preferably, Y is a 5-6 membered heteroaryl ring.
[0100]
Furthermore, W is-(CH₂)_b-S (= O)_jY (where j is 1 or h2, b is 0, 1, 2, or 3; Y is aryl, alkyl, arylalkyl, cycloalkyl, alkynyl, heteroaryl, NHR;₁₄R₁₅Where, when b is 1, Q is CH₂(Where R₁₄, R₁₅And R₁₆Each independently may be hydrogen or substituted or unsubstituted alkyl, aryl, arylalkyl, or cycloalkyl)).
[0101]
In another embodiment, R₃Is selected from the group consisting of substituted and unsubstituted phenyl, pyridyl, pyrimidyl, pyridazinyl, pyrazinal, pyrrolyl, triazolyl, thioazolyl, oxazolyl, oxadiazolyl, pyrazolyl, furanyl, methylenedioxyphenyl, and thiophenyl. R₃R is phenyl₃May be substituted with, for example, hydroxy, alkoxy (eg methoxy), alkyl (eg tolyl), and halogen (eg o, m or p-fluorophenyl, or o, m or p-chlorophenyl). Preferably R₃May be 2, 3 or 4-pyridyl, or 2 or 3-pyrimidyl.
[0102]
The present invention also provides R₆Is hydrogen or C₁~ C₃It relates to deazapurine which is alkyl. Preferably R₆Is hydrogen.
[0103]
The present invention also provides R₁Is hydrogen and R₂Is substituted or unsubstituted alkyl or alkoxy, substituted or unsubstituted alkylamine, arylamine, or alkylarylamine, substituted or unsubstituted aminoalkyl, aminoaryl or aminoalkylaryl, substituted or unsubstituted alkylamide, aryl Amides or alkylarylamides, substituted or unsubstituted alkylsulfonamides, arylsulfonamides or alkylarylsulfonamides, substituted or unsubstituted alkylureas, alkylureas or alkylarylureas, substituted or unsubstituted alkylcarbamates, arylcarbamates or Alkylaryl carbamates or substituted or unsubstituted alkylcarboxylic acids, arylcarboxylic acids or alkylarylcarboxylic acids That include a deazapurine.
[0104]
Preferably R₂Is a substituted or unsubstituted cycloalkyl, such as mono- or dihydroxy-substituted cyclohexyl or cyclopentyl (preferably monohydroxy-substituted cyclohexyl or monohydroxy-substituted cyclopentyl).
[0105]
Preferably R₂Is the following formula:
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(Where A is optionally C₁~ C₆C substituted with an alkyl, halogen, hydroxyl, carboxyl, thiol, or amino group,₁~ C₆Alkyl, C₃~ C₇A cycloalkyl, a chain having 1 to 7 atoms, or a ring having 3 to 7 atoms, wherein B is methyl, N (Me)₂, N (Et)₂, NHMe, NHEt, (CH)_2rNH₃+, NH (CH₂)_rCH₃, (CH₂)_rNH₂, (CH₂)_rCHCH₃NH₂, (CH₂)_rNHMe, (CH₂)_rOH, CH₂CN, (CH₂)_mCO₂H, CHR₁₈R₁₉Or CHMeOH (wherein r is an integer from 0 to 2, m is 1 or 2, R₁₈Is alkyl and R₁₉Is NH₃+ Or CO₂H or R₁₈And R₁₉Together below:
Embedded image

(Wherein p is 2 or 3) and R₁₇Is optionally C₁~ C₆C substituted with an alkyl, halogen, hydroxyl, carboxyl, thiol, or amino group,₁~ C₆Alkyl, C₃~ C₇A cycloalkyl, a chain having 1 to 7 atoms, or a ring having 3 to 7 atoms)
It may have.
[0106]
Preferably, A is substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl. B is substituted or unsubstituted C₁~ C₆It may be alkyl.
[0107]
In a preferred embodiment, R₂Has the formula -A-NHC (= O) B. In particularly preferred embodiments, A is —CH.₂CH₂-And B is methyl.
[0108]
The compounds of the present invention may include water-soluble prodrugs that are metabolized in vivo to the active agent, for example, by hydrolysis catalyzed by esterases. Examples of potential prodrugs include, for example, —OC (O) (Z) NH₂Where Z is a naturally occurring or non-naturally occurring amino chain, or analogs thereof, an α, β, γ, or ω amino acid, or a side chain of a dipeptide. R as alkyl₂Deazapurine having Preferred amino acid side chains include glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, lysine, α-methylalanine, aminocyclopropane, carboxylic acid, azetidine-2-carboxylic acid, β-alanine, γ-aminobutyric acid, alanine-alanine. Or the side chain of glycine-alanine.
[0109]
In another embodiment, R₁And R₂Together below:
Embedded image

Wherein n is 1 or 2, wherein the ring is optionally one or more hydroxyl, amino, thiol, carboxyl, halogen, CH₂OH, CH₂NHC (= O) alkyl or CH₂NHC (═O) NH alkyl group may be substituted). Preferably n is 1 or 2, and the ring is substituted with -NHC (= O) alkyl.
[0110]
In one preferred embodiment, R₁Is hydrogen and R₂Is substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl and R₃Is substituted or unsubstituted phenyl and R₄Is hydrogen and L is hydrogen or substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl, Q is O, S or NR₇(Where R₇Is hydrogen or substituted or unsubstituted C₁~ C₆And W is a substituted or unsubstituted aryl. Preferably R₂Is —A—NHC (═O) B, wherein A and B are each independently substituted or unsubstituted C₁~ C₄Is alkyl). For example, A is CH₂CH₂It may be. B may be, for example, alkyl (eg, methyl), or aminoalkyl (eg, aminomethyl). Preferably R₃Is unsubstituted phenyl and L is hydrogen. R₆May be methyl, or preferably hydrogen. Preferably Q is O, S, or NR.₇(Where R₇Is hydrogen or substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl, for example methyl). W is substituted or unsubstituted phenyl (for example, alkoxy substitution, halogen substitution). Preferably W is P-fluorophenyl, p-chlorophenyl, or P-methoxyphenyl. W may also be heteroaryl, such as 2-pyridyl.
[0111]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6-phenoxymethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0112]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-fluorophenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0113]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-chlorophenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0114]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-methoxyphenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0115]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (2-pyridyloxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0116]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (N-phenylamino) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0117]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (N-methyl-N-phenylamino) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0118]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-N'-methylureaethyl) amino-6-phenoxymethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0119]
The present invention further provides adenosine receptors (eg, A) in a cell by contacting the cell with a compound of the present invention._2bThe present invention relates to a method for inhibiting the activity of adenosine receptors. Preferably, the compound is a receptor antagonist.
[0120]
The present invention also includes effective amounts of a compound of the present invention (eg, A_2bIs administered to the animal to treat a gastrointestinal disorder (eg, diarrhea) in the animal. Preferably the animal is a human.
[0121]
In another embodiment, the invention relates to a pharmaceutical composition comprising an N-6 substituted 7-deazapurine of the invention and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0122]
The invention also provides for N-6 substitution in an animal by administering to a mammal a therapeutically effective amount of a deazapurine of the invention such that treatment of the N-6 substitution 7-deazapurine responsive state in the animal is performed. It relates to a method of treating a 7-deazapurine responsive state. Suitably, the disease state may be a disorder mediated by adenosine. Examples of preferred disease states include central nervous system disorders, cardiovascular disorders, renal disorders, inflammatory disorders, allergic disorders, gastrointestinal disorders, ocular disorders, and respiratory disorders.
[0123]
The term “alkyl” refers to a group of saturated aliphatic groups including straight chain alkyl groups, branched chain alkyl groups, cycloalkyl (alicyclic) groups, alkyl substituted cycloalkyl groups, and cycloalkyl substituted alkyl groups. The term alkyl further includes alkyl groups that can further include oxygen, nitrogen, sulfur or phosphorous atoms (eg, oxygen, nitrogen, sulfur or phosphorous atoms) replacing one or more carbons of the hydrocarbon backbone. In preferred embodiments, no more than 30 linear or branched alkyls are present in the backbone (eg C₁~ C₃₀, C for branched chain₃~ C₃₀), More preferably no more than 20 carbon atoms. Likewise, preferred cycloalkyls have from 4-10 carbon atoms in their ring structure, and more preferably have 5, 6, or 7 carbons in the ring structure.
[0124]
Furthermore, the term alkyl, as used throughout the specification and claims, is intended to encompass both “unsubstituted alkyl” and “substituted alkyl”, the latter being one or more of the hydrocarbon backbone. Refers to an alkyl moiety having a substituent that replaces a hydrogen on the carbon. Such substituents include, for example, halogen, hydroxyl, alkylcarbonyloxy, arylcarbonyloxy, alkoxycarbonyloxy, aryloxycarbonyloxy, carboxylate, alkylcarbonyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylthiocarbonyl, alkoxyl, phosphate, phosphonate, Phosphinate, cyano, amino (including alkylamino, dialkylamino, arylamino, diarylamino, and alkylarylamino), acylamino (including alkylcarbonylamino, arylcarbonylamino, carbamoyl, and ureido), amidino, imino, sulfhydryl , Alkylthio, arylthio, thiocarboxylate, sulfate, sulfonate, Famoiru, sulfonamido, nitro, trifluoromethyl, cyano, azido, heterocyclyl, alkylaryl, or an aromatic or heteroaromatic moiety. Those skilled in the art will appreciate that a moiety substituted on a hydrocarbon chain can itself be substituted if appropriate. Cycloalkyl groups can be further substituted, for example, with the substituents described above. An “alkylaryl” moiety is an alkyl substituted with an aryl (eg, phenylmethyl (benzyl)). The term “alkyl” also includes unsaturated aliphatic groups similar in length and possible substitution to the alkyls described above, but each containing at least one double or triple bond.
[0125]
As used herein, the term “aryl” refers to 5- and 6-membered monocyclic aromatic groups that may contain 0 to 4 heteroatoms, such as benzene, pyrrole, furan, thiophene, imidazole. , Benzoxazole, benzothiazole, triazole, tetrazole, pyrazole, pyridine, pyrazine, pyridazine, pyrimidine, pyrimidine and the like. Aryl groups also include polycyclic fused aromatic groups such as naphthyl, quinolyl, indolyl and the like. Aryl groups having heteroatoms in the ring structure may also be referred to as “aryl heterocycles”, “heteroaryls”, or “heteroaromatics”. Aromatic rings are as described above, eg halogen, hydroxyl, alkoxy, alkylcarbonyloxy, arylcarbonyloxy, alkoxycarbonyloxy, arylcarbonyloxy, carboxylate, alkylcarbonyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylthiocarbonyl, phosphate, phosphonate Phosphinate, cyano, amino (including alkylamino, dialkylamino, arylamino, diarylamino, and alkylarylamino), acylamino (including alkylcarbonylamino, arylcarbonylamino, carbamoyl, and ureido), amidino, imino, sulfide Ril, alkylthio, arylthio, thiocarboxylate, sulfate, sulfonate, sulfamo Le, sulfonamido, nitro, trifluoromethyl, cyano, azido, heterocyclyl, in a substituent such as an alkyl or an aromatic or heteroaromatic moiety, may be substituted by one or more ring positions. Aryl groups can also be fused or bridged with alicyclic or heterocyclic rings which are not aromatic so as to form a polycycle (eg, tetralin).
[0126]
The terms “alkenyl” and “alkynyl” refer to unsaturated aliphatic groups similar in length and possible substitution to the alkyls described above, but containing at least one double and triple bond, respectively. Point to. For example, the present invention contemplates cyano and propargyl groups.
[0127]
Unless otherwise specified for carbon number, “lower alkyl” as used herein is defined above, but preferably has 1 to 10 carbon atoms, more preferably 1 to 6 carbon atoms in its skeletal structure. More preferably, it means an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms in its skeleton structure. Similarly, “lower alkenyl” and “lower alkynyl” have similar carbon chains.
[0128]
The terms “alkoxyalkyl”, “polyaminoalkyl”, and “thioalkoxyalkyl” refer to an oxygen, nitrogen, or sulfur atom (eg, an oxygen, nitrogen, or sulfur atom) that replaces one or more carbons of a hydrocarbon backbone. Furthermore, the above-mentioned alkyl group is included.
[0129]
The term “polycyclyl” or “polycyclic group” refers to two or more rings in which two or more carbons are common to two adjacent rings (eg, cycloalkyl, cycloalkenyl, cycloalkynyl, aryl, and For example, a ring is a “fused ring”. Rings that are joined through non-adjacent atoms are termed “bridged rings”. Each of the polycyclic rings is as described above, for example, halogen, hydroxyl, alkylcarbonyloxy, arylcarbonyloxy, alkoxycarbonyloxy, arylcarbonyloxy, carboxylate, alkylcarbonyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylthiocarbonyl, alkoxyl , Phosphate, phosphonate, phosphinate, cyano, amino (including alkylamino, dialkylamino, arylamino, diarylamino, and alkylarylamino), acylamino (including alkylcarbonylamino, arylcarbonylamino, carbamoyl, and ureido), amidino , Imino, sulfhydryl, alkylthio, arylthio, thiocarboxylate, sulfate, sulfonater Can sulfamoyl, sulfonamido, nitro, trifluoromethyl, cyano, azido, heterocyclyl, alkyl, it is substituted with substituents such as alkyl, or an aromatic or heteroaromatic moiety.
[0130]
As used herein, the term “heteroatom” means an atom of any element other than carbon or hydrogen. Preferred heteroatoms are nitrogen, oxygen, sulfur and phosphorus.
[0131]
The term `` amino acid '' refers to glycine, alanine, valine, cysteine, leucine, isoleucine, serine, threonine, methionine, glutamic acid, aspartic acid, glutamine, asparagine, lysine, arginine, proline, histidine, phenylalanine, tyrosine, and tryptophan. Including naturally occurring and non-naturally occurring amino acids found in proteins. Amino acid analogs include amino acids having long or short side chains or mutated side chains with appropriate functional groups. Amino acids also include D and L stereoisomers of amino acids where the structure of the amino acid allows for stereoisomeric forms. The term “dipeptide” includes two or more amino acids linked together. Preferably, the dipeptide is two amino acids linked by a peptide bond. Particularly preferred dipeptides include, for example, alanine-alanine and glycine-alanine.
[0132]
It should be noted that some structures of the compounds of the present invention include asymmetric carbons and are therefore found as racemates and racemic mixtures, single enantiomers, diastereomeric mixtures, and individual diastereomers. All such isomeric forms of these compounds are expressly included in the present invention. Each asymmetric carbon may be in R configuration or S configuration. It is to be understood accordingly that the isomers arising from such asymmetry (eg, all enantiomers and diastereomers) are included within the scope of the invention, unless indicated otherwise. Such isomers can be obtained in substantially pure form by classical separation techniques and by stereochemically controlled synthesis.
[0133]
The invention further provides N-6 substituted 7-deazapurine responsive states in mammals such as respiratory disorders (eg, asthma, bronchitis, chronic obstructive pulmonary disease, and allergic rhinitis), renal disorders, gastrointestinal disorders, and It relates to a pharmaceutical composition for treating ocular disorders. The pharmaceutical composition includes a therapeutically effective amount of the above-described N-6 substituted 7-deazapurine and a pharmaceutically acceptable carrier. It will be appreciated that all of the above deazapurines are included for therapeutic treatment. It is further possible that the deazapurines of the present invention can be used alone or in combination with other deazapurines of the present invention or in combination with further therapeutic compounds such as, for example, antibiotics, anti-inflammatory agents, or anticancer agents. It will be understood.
[0134]
The term “antibiotic” is art-recognized and is intended to encompass substances produced by growing microorganisms, and synthetic derivatives thereof, which eliminate or eliminate pathogen growth. Inhibits and is selectively toxic to pathogens with minimal or no adverse effects on the infected host patient. Suitable examples of antibiotics include, but are not limited to, basic types of aminoglycosides, cephalosporins, chloramphenicol, fusidic acid, macrolides, penicillins, polymyxins, tetracyclines, and streptomycin.
[0135]
The term “anti-inflammatory agent” is art-recognized and is an agent that acts on the body mechanism without directly antagonizing the causative agent of inflammation, such as glucocorticoids, aspirin, ibuprofen, NSAIDS, etc. Is intended to be included.
[0136]
The term “anticancer agent” is art-recognized and is intended to encompass agents that reduce, eradicate or prevent the growth of cancer cells, preferably without adversely affecting other physiological functions. .
[0137]
When the compound of the present invention is administered to humans and mammals as a pharmaceutical, the compound of the present invention is, for example, 0.1 to 99.5% (more preferably, in combination with a pharmaceutically acceptable carrier). Can be applied as a pharmaceutical composition containing 0.5 to 90% active ingredient).
[0138]
As used herein, the phrase “pharmaceutically acceptable carrier” refers to the invention within or to a patient, such that the compound of the invention can perform the function for which it is intended. Means a pharmaceutically acceptable substance, composition or vesicle, such as a liquid or solid filler, diluent, excipient, solvent or encapsulating substance involved in the transport or transport of the compound (s) To do. Usually, such compounds are transported or transported from one organ or body part to another organ or body part. Each carrier must be “acceptable” in the sense of being compatible with the other ingredients of the formulation and not injurious to the patient. Some examples of substances that can act as pharmaceutically acceptable carriers include sugars (eg, lactose, glucose and sucrose), starches (eg, corn starch and potato starch), cellulose and its derivatives (eg, Sodium carboxymethylcellulose, ethylcellulose, and cellulose acetate), powdered tragacanth, malt, gelatin, talc, excipients (eg, cocoa butter and suppository wax), oils (peanut oil, cottonseed oil, safflower oil, sesame oil, olive oil, corn oil) , And soybean oil), glycols (eg, propylene glycol), polyols (eg, glycerin, sorbitol, mannitol, polyethylene glycol), esters (eg, ethyl oleate, and ethyl laurate) , Agar, buffers (eg, magnesium hydroxide and aluminum hydroxide), arginic acid, pyrogen-free water, isotonic saline, Ringer's solution, ethyl alcohol, phosphate buffered solutions, and pharmaceutical formulations Other non-toxic compatible materials used in
[0139]
As mentioned above, certain embodiments of the compounds of the invention may contain a basic functional group such as amino or alkylamino, and thus pharmaceutically acceptable acids and pharmaceutically acceptable salts. Can be formed. The term “pharmaceutically acceptable salts” in this regard refers to the relatively non-toxic inorganic and organic acid addition salts of the compounds of the present invention. These salts are thus reacted in situ during the final isolation and production of the compounds of the invention, or separately by reacting the appropriate organic or inorganic acids with the product compounds of the invention in free base form. It can be prepared by isolating the salt formed. Typical salts include hydrobromide, hydrochloride, sulfate, hydrogen sulfate, phosphonate, nitrate, acetate, valerate, oleate, palmitate, stearate, lauric acid Salt, benzoate, lactate, phosphate, tosylate, citrate, maleate, fumarate, succinate, tartrate, naphthylate, methylate, glucoheptonate, lactobionic acid Salts, and lauryl sulfonates (see, for example, Berge et al. (1997) “Pharmaceutical Salts”, J. Pharm. Sci. 66: 1-19).
[0140]
In other cases, the compounds of the invention may contain one or more acidic functional groups and thus form a pharmaceutically acceptable salt with a pharmaceutically acceptable base. Is possible. The term “pharmaceutically acceptable salts” in these cases refers to the relatively non-toxic inorganic and organic base addition salts of the compounds of the present invention. These salts may also be used in situ during final isolation and purification of the compounds of the invention, or in appropriate bases (eg, pharmaceutically acceptable metal cation hydroxides, carbonates, or bicarbonates). Salt), ammonia, or a pharmaceutically acceptable organic primary amine, secondary amine or tertiary amine and the free acid form of the purified compound of the present invention can be prepared separately. Representative alkali salts or alkaline earth salts include lithium, sodium, potassium, calcium, magnesium, and aluminum salts. Representative organic amines useful for the formation of base addition salts include ethylamine, diethylamine, ethylenediamine, ethanolamine, diethanolamine, piperazine and the like.
[0141]
The term “pharmaceutically acceptable esters” refers to the relatively non-toxic esterification products of the compounds of the invention. These esters may be prepared in situ during the final isolation and production of the compounds of the invention or by separately reacting the free base form of the product compound or hydroxyl of the invention with a suitable esterifying agent. Can do. Carboxylic acids can be converted to esters by treatment with an alcohol in the presence of a catalyst. Hydroxyl-containing derivatives can be converted to esters by treatment with an esterifying agent such as a halogenated alkinoyl. This term is further intended to encompass lower hydrocarbon groups that can be solvated under physiological conditions, such as alkyl esters (methyl esters, ethyl esters and propyl esters) (see, for example, Berge et al. Above). reference).
[0142]
The present invention further contemplates the use of prodrugs that are converted in vivo to the therapeutic compounds of the present invention (see, eg, RB Silverman, 1992, “The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action) ", Academic Press, Chapter 8. Such prodrugs can be used to alter the biodistribution of therapeutic compounds (eg, to allow compounds that do not normally enter the reactive site of a protease) or pharmacokinetics. For example, a carboxylic acid group can be esterified with, for example, a methyl group or an ester group to give an ester. When an ester is administered to a patient, the ester is cleaved enzymatically or non-enzymatically, reductively or hydrolysed to reveal an anionic group. Anionic groups can be esterified with moieties (eg, acyloxymethyl esters) that are cleaved to reveal an intermediate compound that subsequently decomposes to yield the active compound. In another embodiment, the prodrug is a reduced form (eg, a thiol) of a sulfate or sulfonate salt that is oxidized in vivo to a therapeutic compound. Furthermore, the anionic moiety can be esterified into a group that is actively transported in vivo or that is selectively taken up by the target organ. Esters can be selected to allow specific targeting of the therapeutic moiety to a specific reactive site, as described below with respect to the carrier moiety.
[0143]
Wetting agents, emulsifiers, and lubricants (eg, sodium lauryl sulfate and magnesium stearate), as well as colorants, release agents, coating agents, sweetening, flavoring, and perfuming agents, preservatives, and antioxidants also It can be present in the composition.
[0144]
Examples of pharmaceutically acceptable antioxidants include water-soluble antioxidants such as ascorbic acid, cysteine hydrochloride, sodium hydrogen sulfate, sodium metabisulfite, sodium sulfite, ascorbyl palmitate, butylated hydroxyanisole (BHA) ), Butylated hydroxytoluene (BHT), lecithin, propyl gallate, α-tocopherol, etc., and oil-soluble antioxidants, and citric acid, ethylenecyamine tetraacetic acid (EDTA), sorbitol, tartaric acid, phosphonic acid, etc. Such metal chelating agents are mentioned.
[0145]
Formulations of the present invention include those suitable for oral, nasal, topical, transdermal, buccal, sublingual, rectal, vaginal and / or parenteral administration. The combination may be conveniently provided in unit dosage form and may be prepared by any method known in the pharmaceutical arts. The amount of active ingredient that can be combined with a carrier material to produce a single dosage form will generally be that amount of the compound that provides a therapeutic effect. Generally, out of 100%, this amount ranges from about 1% to about 99%, preferably from about 5% to about 70%, most preferably from about 10% to about 30% active ingredient.
[0146]
Methods of preparing these compounds or compositions include the step of bringing the compound of the invention into association with a carrier and optionally one or more additional ingredients. In general, the formulations are prepared by uniformly and intimately bringing into association the compounds of the present invention with liquid carriers or finely divided solid carriers or both, and then if necessary shaping the product.
[0147]
Formulations of the present invention suitable for oral administration are capsules, sachets, pills, tablets, lozenges (flavored bases, usually sucrose and gum arabic or gum tragacanth, each containing a predetermined amount of the compound of the present invention as an active ingredient ), In the form of powder, granules, or as a solution or suspension in an aqueous or non-aqueous liquid, or as an oil-in-water or water-in-oil liquid emulsion, or as an elixir or syrup, Gelatin and glycerin, or inert bases such as sucrose and gum arabic) and / or as mouthwashes and the like. The compounds of the present invention may also be administered as boluses, electuaries or pastes.
[0148]
In solid dosage forms of the invention for oral administration (capsules, tablets, pills, dragees, powders, granules, etc.), the active ingredient is sodium citrate or dicalcium phosphate and / or the following: fillers or bulking Agents (eg starch, lactose, sucrose, glucose, mannitol and / or silicic acid), binders (eg carboxymethylcellulose, alginate, gelatin, polyvinylpyrrolidone, sucrose and / or gum arabic), humectants (eg Glycerol), disintegrants (eg agar-agar, calcium carboxylate, potato starch or tapioca starch, alginic acid, certain silicates, and sodium carboxylate), solution set retarders (eg paraffin), absorption enhancers ( For example, quaternary ammonium compounds), Lubricants (eg, cetyl alcohol and glycerol monostearate), absorbents (eg, kaolin and bentonite clay), lubricants (eg, talc, calcium stearate, magnesium stearate, solid polyethylene glycol, sodium lauryl sulfate and mixtures thereof) ), And one or more pharmaceutically acceptable carriers such as colorants. In the case of capsules, tablets and pills, the pharmaceutical composition may also comprise a buffer. Similar types of solid compositions can also be used as fillers in soft and hard-filled gelatin capsules with excipients such as lactose or lactose, and high molecular weight polyethylene glycols and the like.
[0149]
A tablet may be made by compression or molding, optionally with one or more additional ingredients. Compressed tablets can be binders (eg gelatin or hydroxypropylmethylcellulose), lubricants, inert diluents, preservatives, disintegrants (eg sodium starch glycolate or crosslinked sodium carboxycellulose), surfactants or dispersants. Can be used to prepare. Molded tablets can be made by molding a mixture of the wet powder compound and an inert diluent in a suitable mechanical device.
[0150]
Other solid dosage forms of the pharmaceutical compositions of the present invention, such as tablets, and dragees, capsules, pills, and granules are optionally like enteric coatings and other coatings known in the art of pharmaceutical formulation. Can be scored or prepared with a simple coating and skin. They also provide sustained or controlled release of active ingredients therein, for example using various ratios of hydroxypropylmethylcellulose, other polymer matrices, liposomes, and / or microspheres to provide the desired release profile. It may be formulated to provide. They can be sterilized, for example, by filtration through a bacteria-retaining filter, or by incorporating a sterilizing agent in the form of a sterile solid composition that can be dissolved in sterile water or some other sterile injectable medium immediately before use. Good. These compositions may also optionally contain opacifiers, which may be the active ingredient (s) alone, or the active ingredient (s) preferentially, in certain parts of the gastrointestinal tract, optionally in a delayed manner. It may be a releasing composition. Examples of embedding compositions that can be used include polymeric substances and waxes. The active ingredient may also be in micro-encapsulated form, if appropriate, with one or more of the above-described excipients.
[0151]
Liquid dosage forms for oral administration of the compounds of the invention include pharmaceutically acceptable emulsions, microemulsions, solutions, suspensions, syrups and excipients. In addition to the active ingredient, liquid dosage forms may be inert diluents commonly known in the art such as water or other solvents, ethyl alcohol, isopropyl alcohol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzoic acid, for example. Fatty acids of benzyl, propylene glycol, 1,3-butylene glycol, oils (especially cottonseed oil, peanut oil, corn oil, seed oil, olive oil, castor oil, and sesame oil), glycerol, tetrahydrofuryl alcohol, polyethylene glycol, and sorbitan Solubilizers and emulsifiers such as esters and mixtures thereof may be included.
[0152]
In addition to inert diluents, oral compositions can also include adjuvants such as wetting agents, emulsifying and suspending agents, sweetening, flavoring, coloring, flavoring, and preservatives.
[0153]
In addition to the active compounds, suspensions such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyethylene sorbitol and sorbitan esters, microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar-agar and tragacanth, and mixtures thereof A precipitation inhibitor may be contained.
[0154]
Formulations of the pharmaceutical composition of the present invention for rectal or vaginal administration may be provided as suppositories, which contain one or more compounds of the present invention in one or more such as cocoa butter, polyethylene glycol, suppository waxes. Or prepared by mixing with a suitable non-irritating excipient or carrier that includes salicylate and is solid at room temperature but liquid at body temperature and therefore melts in the rectum or vaginal cavity to release the active compound May be.
[0155]
Formulations of the present invention suitable for vaginal administration also include pessaries, tampons, creams, gels, pastes, foams or spray formulations containing carriers as are known in the appropriate art.
[0156]
Dosage forms for topical or transdermal administration of a compound of this invention include powders, sprays, ointments, pastes, creams, lotions, gels, solutions, patches, and inhalants. The active compound can be mixed under sterile conditions with a pharmaceutically acceptable carrier, and any preservatives, buffers, or propellants that may be required.
[0157]
Ointments, pastes, creams and gels, in addition to the active compounds of the invention, are animal and vegetable fats, oils, waxes, paraffins, starches, tragacanths, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicic acids, talc. And excipients such as zinc oxide, or mixtures thereof.
[0158]
Powders and sprays can contain, in addition to the compounds of this invention, excipients such as lactose, talc, silicic acid, aluminum hydroxide, calcium silicate, and polyamide powder, or mixtures of these substances. . The spray can further contain conventional propellants such as chlorofluorohydrocarbons and volatile unsubstituted hydrocarbons (eg, butane and propane).
[0159]
Transdermal patches have the added benefit of providing controlled delivery of the compounds of the invention to the body. Such dosage forms can be made by dissolving or dispensing the compound in the proper medium. Absorption enhancers can also be used to increase the flux of the compound across the skin. The rate of such flow can be controlled by providing a rate controlling membrane or by dispersing the active compound in a polymer matrix or gel.
[0160]
Ophthalmic formulations, eye ointments, powders, solutions, and the like are also intended to be within the scope of the present invention. Preferably, the pharmaceutical preparation is an ophthalmic formulation (eg, periocular, post-ocular or intraocular injection formulation, systemic formulation, or surgical irrigation solution).
[0161]
The ophthalmic formulation of the present invention may include one or more deazapurines and a pharmaceutically acceptable vehicle. Various types of vehicles may be used. The vehicle is generally aqueous in nature. Aqueous solutions are generally preferred based on the formulation and the patient's ability to easily administer such compounds by dripping 1-2 drops of the solution into the affected eye. However, the deazapurines of the present invention may also be readily incorporated into other types of compositions such as suspensions, viscous or semi-viscous gels or other types of solid or semi-solid compositions. The ophthalmic compositions of the present invention may also contain various other ingredients such as buffers, preservatives, co-solvents and viscosity increasing agents.
[0162]
Appropriate buffer systems (eg, sodium phosphate, sodium acetate, or sodium borate) may be added to prevent pH drift under storage conditions.
[0163]
Ophthalmic products are usually packaged in multi-dose forms. Preservatives are therefore required to prevent microbial contamination during use. Suitable preservatives include benzalkonium chloride, thimerosal, chlorobutanol, methylparaben, propylparaben, phenylethyl alcohol, sodium edetate, sorbic acid, polyquaternium-1, or other agents known to those skilled in the art. . Such preservatives are typically used at a level of 0.001 to 1.0% weight / volume ("% w / v").
[0164]
Most preferred is the use of balanced salt irrigation solution as a vesicle when the deazapurines of the present invention are administered during intraocular surgical procedures, for example, by post-ocular or periocular injection and intraocular perfusion or injection. BBS® sterile irrigation solution and BSS Plus® sterile intraocular irrigation solution (Alcon Laboratories, Inc., Fort Worth, Texas, USA) are examples of physiologically balanced intraocular irrigation solutions. The latter type of solution is described in US Pat. No. 4,550,022 (Garabedian et al.), The entire contents of which are hereby incorporated by reference. Post-ocular and periocular injections are known to those skilled in the art and include, for example, Ophthalmic Surgery: Principles of Practice, Ed., GL Spaeth.WB Sanders Co., Philadelphia, Pa., USA, pages 85-87 (1990) It has been described in numerous publications.
[0165]
As mentioned above, the use of deazapurine to prevent or reduce damage to the retina and optic disc tissue at the cellular level is a particularly important aspect of embodiments of the present invention. Ophthalmic symptoms that can be treated include retinopathy, macular degeneration, ocular ischemia, glaucoma, and disorders to ocular tissues such as ischemia-reperfusion injury, photochemical disorders, and disorders associated with eye surgery, In particular, but not limited to, damage related to damage to the retina or optic nerve head due to exposure to light or surgical equipment. The compounds may also be used as an adjunct to ophthalmic surgeries such as vitreal or subconjunctival injection after eye surgery. The compounds may be used for acute treatment of transient symptoms or may be administered chronically, especially in the case of degenerative diseases. The compounds may also be used prophylactically, especially prior to eye surgery or non-invasive ophthalmic procedures, or other types of surgery.
[0166]
Pharmaceutical compositions of the present invention suitable for parenteral administration are one or more pharmaceutically acceptable sterile isotonic or non-aqueous solutions, dispersions, suspensions or emulsions, or sterile injectable solutions just before use. Or in combination with a sterile powder that can be reconstituted into a dispersion, containing one or more compounds of the invention, and containing an antioxidant, buffer, bacteriostatic agent, combination agent, isotonic with the blood of the intended recipient Or may contain a suspending agent or thickener.
[0167]
Examples of suitable aqueous and non-aqueous carriers that may be used in the pharmaceutical compositions of the present invention include water, ethanol, polyols (eg, glycerol, propylene glycol, polyethylene glycol, etc.) and suitable mixtures thereof, vegetable oils (eg, , Olive oil), and injectable organic esters such as ethyl oleate. The proper fluidity can be maintained, for example, by the use of a coating material such as lecithin, by the maintenance of the required particle size in the case of dispersion and by the use of surfactants.
[0168]
These compositions may also contain adjuvants such as preservatives, wetting agents, emulsifying agents, and dispersing agents. Prevention of the action of microorganisms can be ensured by the inclusion of various antibacterial and antifungal agents, for example, parabens, chlorobutanol, phenol, sorbic acid, and the like. It may also be desirable to include isotonic agents such as sugars, sodium chloride sugars in the composition. In addition, prolonged absorption of the injectable pharmaceutical form may be accomplished through the inclusion of agents that delay absorption such as aluminum monostearate and gelatin.
[0169]
In some cases, it may be desirable to delay the absorption of the drug from subcutaneous or intradermal injection in order to prolong the effect of the drug. This can be achieved by the use of a liquid suspension of crystalline or amorphous material with poor water solubility. Also, the absorption rate of the drug depends on its dissolution rate, which in turn can depend on the crystal size and crystalline form. Alternatively, delayed absorption of a parenterally administered drug form is accomplished by dissolving or suspending the drug in oil vesicles.
[0170]
Injectable depot forms are made by forming microencapsule matrices of the subject compounds in biodegradable polymers such as polylactide-polyglycolide. Depending on the ratio of drug to polymer, and the nature of the particular polymer used, the rate of drug release can be controlled. Examples of other biodegradable polymers include poly (orthoesters) and poly (anhydrides). Depot injectable formulations are also prepared by entrapping the drug in liposomes or microcapsules that are compatible with body tissues.
[0171]
The preparations of the invention can be given orally, parenterally, topically, or rectally. They are naturally given in a form suitable for each oral route. For example, they are administered in the form of tablets or capsules by injection, inhalation, ophthalmic lotion, ointment, suppository etc. (administration by injection, infusion or absorption), topically by lotion or ointment and rectally by suppository. The Oral administration is preferred.
[0172]
As used herein, the phrases “parenteral administration” and “administered parenterally” refer to modes of administration other than enteral and topical administration, usually by injection, intravenous, intramuscular. Intraarterial, intrathecal, intracapsular, intraorbital, intracardiac, intradermal, intraperitoneal, transorgan, subcutaneous, epidermal, intraarticular, subcapsular, subarachnoid, intravertebral, and intrasternal injection and infusion However, it is not limited to these.
[0173]
As used herein, the phrases “systemic administration”, “systemically administered”, “peripheral administration” and “peripherally administered” refer to compounds, agents or other materials, which are patients Means administration of a compound other than direct administration to the central nervous system (e.g., subcutaneous administration) so that it enters the family of humans and thus is subjected to metabolism and other similar processes.
[0174]
These compounds can be administered by any suitable route of administration (oral, nasal (eg by spraying), rectal, intrathecal, parenteral, in the bath and topically (powder, ointment or drop (oral And sublingual) can be administered to humans and other animals for therapy.
[0175]
Regardless of the route of administration chosen, the appropriate hydrated forms and / or compounds of the present invention that can be used in the pharmaceutical compositions of the present invention can be prepared according to conventional methods known to those skilled in the art according to pharmaceutically acceptable dosages. Blended into form.
[0176]
The actual dosage level of the active ingredient in the pharmaceutical composition of the invention is not toxic to the patient and is effective to achieve the desired therapeutic response for the particular patient, composition, and mode of administration. The amount of ingredients may be varied to obtain.
[0177]
The selected dosage level will depend on the particular compound of the invention used, or the activity of the ester, salt or amide, route of administration, administration time, excretion rate of the particular compound used, duration of treatment, the particular used Other drugs, compounds and / or substances used in combination with the compound, age, gender, weight, symptoms, general health of the patient being treated and previous medical history, and similar factors known in the medical arts Depends on various factors including.
[0178]
Physicians and veterinarians, including those skilled in the art, can readily determine and prescribe the effective amount of the pharmaceutical composition required. For example, a physician or veterinarian can start a dose of a compound of the invention used in a pharmaceutical composition at a level below that required to achieve the desired therapeutic effect, and the desired effect is achieved. The dosage can be gradually increased until
[0179]
In general, a suitable daily dose of a compound of the invention is that amount of the compound that is the lowest dose effective to produce a therapeutic effect. Such effective dose generally depends on the factors discussed above. In general, intravenous and subcutaneous doses of a compound of the invention for a patient, when used for the indicated analgesic effect, are from about 0.0001 to about 200 mg / kg body weight per day, more preferably about 0 / kg body weight per day. 0.01 to about 150 mg, more preferably about 0.2 to about 140 mg per kg body weight per day.
[0180]
If desired, the effective daily dose of the active compound may be divided into 2, 3, 4, 5, 6 or more doses, optionally in unit dosage forms, administered separately at appropriate intervals throughout the day. It is administered as a sub-dose.
[0181]
While it is possible for a compound of the present invention to be administered alone, it is desirable to administer the compound as a pharmaceutical composition.
[0182]
The present invention also relates to packaged pharmaceutical compositions for treating N-6 substituted 7-deazapurine responsive states in mammals, such as an undesirable increase in adenosine receptor activity. The packaged pharmaceutical composition comprises a container holding a therapeutically effective amount of at least one deazapurine as described above and instructions for using the deazapurine to treat a deazapurin responsive condition in a mammal.
[0183]
The deazapurines of the present invention can be prepared using standard methods for organic synthesis. Deazapurines can be purified by reverse phase HPLC, chromatography, recrystallization, etc., and their structure can be confirmed by mass spectral analysis, elemental analysis, IR and / or NMR spectroscopy.
[0184]
Usually, the synthesis of the intermediates and deazapurines of the present invention is carried out in solution. Addition and removal of one or more protecting groups is also typical practice and is known to those skilled in the art. A typical synthetic scheme for the preparation of the deazapurine intermediate of the present invention is outlined in Scheme I below.
[0185]
The present invention further provides a compound having the following structure (IV), or a pharmaceutically acceptable salt, or prodrug derivative, or a biologically active metabolite:
Embedded image

(Where
R₁Is trans-4-hydroxycyclohexyl, 2-methylaminocarbonylaminocyclohexyl, acetylaminoethyl, or methylaminocarbonylaminoethyl;
Ar is a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring, phenyl, pyrrole, thiophene, furan, thiazole, imidazole, pyrazole, 1,2,4-triazole, pyridine, 2 (1H) -pyrrolidone, 4 (1H)- Pyrrolidone, pyrazine, pyrimidine, pyridazine, isothiazole, isoxazole, oxazole, tetrazole, naphthalene, tetralin, naphthyridine, benzofuran, benzothiophene, indole, 2,3-dihydroindole, 1H-indole, indoline, benzopyrazole, 1,3 Benzodiochiol, benzoxol, purine, coumarin, chromone, quinoline, tetrahydroquinoline, isoquinoline, benzimidazole, quinazoline, pyrido [2,3-b] pyrazine, pyrido [3,4-b] pyrazine Pyrido [3,2-c] pyridazine, pyrido [3,4-b] pyridine, 1H-pyrazole [3,4-d] pyrimidine, pteridine, 2 (1H) -quinolone, 1 (2H) -isoquinolone, 1, 4-benzisoxazine, benzothiazole, quinoxaline, quinoline-N-oxide, isoquinoline-N-oxide, quinoxaline-N-oxide, quinazoline-N-oxide, benzoxazine, phthalazine, cinnoline or the following structure:
Embedded image

Where
Y is carbon or nitrogen;
R₂And R_{2 '}Are independently H, substituted or unsubstituted alkyl, substituted
Or unsubstituted aryl, halogen, methoxy, methylamino, or methylthio)
Having
R₃Are H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is —C (R₇) (R₈) XR₅(Where X is O, S or NR₆And R₇And R₈Each independently is H or alkyl, R₅And R₆Each independently is alkyl or cycloalkyl, or NR₅R₆Are substituted or unsubstituted 4- to 7-membered rings together),
R₄Is H, alkyl, substituted alkyl, cycloalkyl)
However, R₃When is acetylaminoethyl, Ar is not 4-pyridyl.
[0186]
In one embodiment of the compound having structure IV,₅R₆The following:
Embedded image

Embedded image

Where m is 0, 1, or 2.
Embedded image

Wherein n is 0, 1, 2, or 3 and R₈Is hydrogen, —OH, —CH₂OH, -C (=) NR₉R₁₀, NHR₁₁(Where R₁₁Is -C (= O) CH₃Or -SO₂Me)), or
Embedded image

(Wherein R is H, alkyl, or aryl)
A substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring selected from the group consisting of
[0187]
In another embodiment of the compounds having formula IV, Ar has the following structure:
Embedded image

Wherein Y is carbon or nitrogen and R₂Is H, or halogen, —O-alkyl group, amine group, or sulfide group;
R₃Are H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is —C (R₇) (R₈) NR₅R₆(Where R₇And R₈Each independently is H or alkyl, R₅And R₆Each independently is alkyl or cycloalkyl, or R₅, R₆And nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring)).
[0188]
In another embodiment of the compound, Y is carbon.
[0189]
In another embodiment of the compounds, R₂Is hydrogen.
[0190]
In another embodiment of the compounds, R₄Is hydrogen.
[0191]
In another embodiment of the compounds, R₃Is hydrogen.
[0192]
In another embodiment of the compounds, R₃And R₄Are each methyl.
[0193]
In another embodiment of the compounds, R₃Is -C (R₇) (R₈) NR₅R₆(Where R₇And R₈Each independently is H or alkyl, R₅And R₆Each independently is alkyl or cycloalkyl, or R₅, R₆And nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring).
[0194]
In another embodiment of the compounds, R₂Is a halogen.
[0195]
In another embodiment of the compound, Y is nitrogen.
[0196]
In yet another embodiment of the compounds, R₂Is hydrogen.
[0197]
In a further embodiment of the compound, R₃And R₄Are each hydrogen.
[0198]
The present invention also provides a compound having the following structure (V):
Embedded image

(Where
R₁Is aryl, substituted aryl, or heteroaryl;
R₂Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₃Are H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is —C (R₆) (R₇) NR₄R₅(Where R₆And R₇Each is H or alkyl and R₄And R₅Each is alkyl or cycloalkyl, or R₄, R₅And nitrogen together form a 4-7 membered ring)).
[0199]
In one embodiment of the compound having structure V, R₄And R₇Are each hydrogen and R₄Is H and R₅Is -R₂₂C (= O) R₂₃It is.
[0200]
In another embodiment of the compounds having structure V, R₄And R₇Are each H and the ring system is morpholino, thiomorpholino, N-4-substituted piperazino, 2-substituted piperazine, or R₈Substituted pyrrolidino, piperazine (where R₈H, OH, CH₂OH, -C (= O) NR₉N₁₀, NR₁₁(Where R₁₁Is -C (= O) CH₃, -SO₂Me).
[0201]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0202]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0203]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0204]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0205]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0206]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0207]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0208]
The following structure:
Embedded image

(Wherein R₂Is an aromatic 5-6 membered ring and R₃And R₄Are independently H or alkyl).
[0209]
In one embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0210]
In one embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0211]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0212]
In another embodiment of the compound 1500, the compound has the structure:
Embedded image

Have
[0213]
In a further embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0214]
The present invention also provides a compound having the structure:
Embedded image

(Wherein R₂Is an aromatic 5-6 membered ring and R₃And R₄Are independently H or alkyl, provided that R₂Is not 4-pyridyl).
[0215]
In one embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0216]
The present invention further provides compounds having the structure:
Embedded image

(Where
R₂Is an aromatic substituted 5-6 membered ring,
R₃And R₄Are independently H or alkyl).
[0217]
In one embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0218]
The present invention also provides a compound having the structure:
Embedded image

(Wherein R₂Is an aromatic 5- to 6-membered ring, and X is oxygen or sulfur.
[0219]
In one embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image
Compound 1503

Have
[0220]
The present invention also provides a compound having the structure:
Embedded image

(Wherein R₂Is an aromatic 5- to 6-membered ring, and X is oxygen or sulfur.
[0221]
In one embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

Have
[0222]
The present invention further provides A₁A method of treating a disease associated with an adenosine receptor, comprising administering to a patient a therapeutically effective amount of a compound having formula IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X. provide.
[0223]
In one embodiment of this method, the patient is an animal. In another embodiment of this method, the mammal is a human.
[0224]
In another embodiment of this method, A₁Adenosine receptors are cognitive impairment, renal failure, arrhythmia, respiratory epithelium, transmitter release, sedation, vasoconstriction, bradycardia, negative cardiac inotropic and transduction, bronchoconstriction, neutrophil chemotaxis, reflux status, or Associated with ulcer condition.
[0225]
The invention also provides a combination therapy for asthma comprising compounds IV and V and a steroid, β2 agonist, glucocorticoid, leukotriene antagonist, or anticholinergic agonist. Adenosine A₁, A_2a, A_2bAnd A₃Receptor-related diseases are disclosed in WO99 / 06053, WO09822465, WO09705138, WO0995181, WO0973879, Japanese Patent 09291089, PCT / No. 98/16053, as well as US Pat. No. 5,516,894, the entire contents of which are hereby fully incorporated by reference.
[0226]
The present invention also provides water-soluble prodrugs of compounds having the structures IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X, wherein the water-soluble prodrug is A₁Metabolized in vivo to active agents that selectively inhibit adenosine receptors.
[0227]
In one embodiment of the prodrug, the prodrug is metabolized in vivo by esterase catalyzed hydrolysis.
[0228]
The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising a prodrug and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0229]
The present invention further provides that A₁A method is provided for inhibiting the activity of an adenosine receptor comprising contacting a cell with a compound having the structure IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X.
[0230]
In one embodiment of this method, the compound comprises the A₁It is an adenosine receptor antagonist.
[0231]
The invention also provides a method of treating a gastrointestinal disorder in a patient, comprising administering an effective amount of a compound having structure IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X.
[0232]
In one embodiment of this method, the disorder is diarrhea.
[0233]
In another embodiment of this method, the patient is a human.
[0234]
In another embodiment of this method, the compound is A₁It is an adenosine receptor antagonist.
[0235]
The present invention also provides a method of treating a respiratory disorder in a patient comprising administering to the patient an effective amount of a compound having structure IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X. I will provide a.
[0236]
In one embodiment of this method, the disorder is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper respiratory tract disorder
In another embodiment of this method, the patient is a human.
[0237]
In another embodiment of this method, the compound comprises A₁It is an adenosine receptor antagonist.
[0238]
The present invention further provides a method of treating damage to the eye of a patient, comprising administering to the patient an effective amount of a compound having structure IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X. A method of including is provided.
[0239]
In one embodiment of this method, the injury is retinal or optic nerve head injury.
[0240]
In another embodiment of this method, the injury is acute or chronic.
[0241]
In another embodiment of this method, the injury is the result of glaucoma, edema, ischemia, hypoxia, or trauma.
[0242]
In another embodiment of this method, the patient is a human.
[0243]
In another embodiment of this method, the compound is A₁It is an adenosine receptor antagonist.
[0244]
The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound having structure IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X, and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0245]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the therapeutically effective amount is effective to treat a respiratory or gastrointestinal disorder.
[0246]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the gastrointestinal disorder is diarrhea.
[0247]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the respiratory disorder is asthma, allergic rhinitis, or chronic obstructive pulmonary disease.
[0248]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation.
[0249]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a periocular, retro-ocular or intraocular injection formulation
In yet another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0250]
In a further embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a surgical irrigation solution.
[0251]
The present invention also provides A₁A packaged pharmaceutical composition for curing a disease associated with an adenosine receptor comprising: (a) a therapeutically effective amount of A₁A packaged pharmaceutical composition comprising a container holding an adenosine specific compound and (b) instructions for use of the compound for treating the disease in a patient is provided.
[0252]
As used herein, “compound is A₁“Selective” means that the compound is adenosine A_2a, A_2bOr A₃Adenosine A at least 10 times greater than the binding constant to₁It means having a binding constant to the receptor.
[0253]
The invention also provides a method of preparing a compound having structure IV, or a pharmaceutically acceptable salt, or prodrug derivative, or a biologically active metabolite:
a) The following:
Embedded image

And the following structure:
Embedded image

(Wherein P is a removable protecting group)
Obtaining
b) The product of step a) is treated under cyclization conditions to give the following structure:
Embedded image

Obtaining
c) treating the product of step b) under suitable conditions to give the following structure:
Embedded image

Obtaining
d) The chlorination product of step c) is NH₂R₁And process to get the following structure:
Embedded image

Where
R₃Is trans-4-hydroxycyclohexyl, 2-methylaminocarbonylaminocyclohexyl, acetylaminoethyl, or methylaminocarbonylaminoethyl;
Ar is a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring,
R₄Is H, alkyl, substituted alkyl, cycloalkyl;
(However, R₃Is not acetylaminoethyl, Ar is not 4-pyridyl).
[0254]
The invention also provides a method for preparing a compound having structure V comprising:
a) The following:
Embedded image

And the following structure:
Embedded image

(Wherein P is a removable protecting group)
Obtaining
b) The product of step a) is treated under cyclization conditions to give the following structure:
Embedded image

Obtaining
c) treating the product of step b) under suitable conditions to give the following structure:
Embedded image

Obtaining
d) The chlorination product of step c) is:
Embedded image

Process with the following structure:
Embedded image

And a step of obtaining
Where
R₁Is aryl, substituted aryl, heteroaryl,
R₂Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl, and R₃Are H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is —C (R₆) (R₇) NR₄R₅(Where R₆And R₇Each is H or alkyl and R₄And R₅Are each alkyl or cycloalkyl, or NR₄R₅Is a 4-7 membered ring system).
[0255]
Compounds of formula VI, VII, and VIII can be synthesized according to any of Schemes I-VIII. Compounds of formula IX and X can be prepared according to Scheme IX.
[0256]
The present invention is further illustrated by the following examples, which should not be construed as further limiting in any way. The contents of all references, pending patent applications, and published patent applications cited throughout this application (including those referenced in the background section) are hereby incorporated by reference. Those of skill in the art will readily understand that the models used throughout the examples are generally accepted models and that demonstration of efficacy in these models is predictive of efficacy in humans.
[0257]
The invention will be better understood from the following experimental details. However, one of ordinary skill in the art will readily appreciate that the specific methods and results discussed are merely illustrative of the invention as described more fully in the appended claims.
[0258]
[Experiment details]
The deazapurines of the present invention can be prepared using standard methods for organic synthesis. Deazapurines can be purified by reverse phase HPLC, chromatography, recrystallization, etc., and their structure can be confirmed by mass spectral analysis, elemental analysis, IR and / or NMR spectroscopy.
[0259]
Usually, the synthesis of the intermediates and deazapurines of the present invention is carried out in solution. Addition and removal of one or more protecting groups is also typical practice and is known to those skilled in the art. A typical synthetic scheme for the preparation of the deazapurine intermediate of the present invention is outlined in Scheme I below.
[0260]
Embedded image

(Wherein R₃, R₅And R₆Is defined above)
In general, protected 2-amino-3-cyano-pyrrole can be treated with an aryl halide to form carboxamido-3-cyano-pyrrole, which can be treated with acidic methanol to produce pyrrolo [2,3d Ring closure to pyrimidin-4 (3H) -one can be performed (Muller, CE et al. J. Med. Chem. 40: 4396 (1997)). Subsequent removal of the pyrrole protecting group followed by treatment with a chlorinating reagent (eg, phosphorus oxychloride) produced a substituted or unsubstituted 4-chloro-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine. 7-Deazapurine was obtained by treating chloropyrimidine with an amine.
[0261]
For example, as shown in Scheme I, N- (1-dl-phenylethyl) -2-amino-3-cyano-pyrrole was treated with an acyl halide in pyridine and dichloromethane. The resulting N- (1-dl-phenylethyl) -2-phenylcarboxamido-3-cyano-pyrrole is treated with a 10: 1 mixture of methanol / sulfuric acid to effect ring closure and dl-7H-7. -(1-Phenylethyl) pyrrolo [2,3d] pyrimidin-4 (3H) -one was produced. Removal of phenylethyl groups by treatment of pyrimidine with polyphosphoric acid (PPA) followed by POCl₃Gave 4-chloro-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine, an important intermediate. Further treatment of 4-chloro-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine with various amines listed in Table 1 provides compounds having formulas (I) and (II).
[0262]
[Table 1]

A general approach for preparing 6-substituted pyrroles is depicted in the following scheme (Scheme II).
[0263]
Embedded image

(Wherein R₁~ R₅Is defined above)
Transesterification and alkylation of ethyl cyanoacetate with an α-haloketone gives the ketomethyl ester. Protection of the ketone followed by treatment with amidine hydrochloride (eg, alkyl, aryl, or alkylaryl) resulted in a ketal protected pyrimidine. Removal of the protecting group followed by cyclization and treatment with phosphorus oxychloride gave the chloride intermediate, which could be further treated with an amine to give the amine 6-substituted pyrrole. Furthermore, pyrrole nitrogen alkylation can be accomplished under conditions recognized in the art.
[0264]
A general approach for preparing 5-substituted pyrroles is depicted in the following scheme (Scheme III).
[0265]
Embedded image

(Wherein R₁~ R₆Is defined above and R is a removable protecting group)
Condensation of malononitrile and excess ketone followed by bromination of the product gives a mixture of starting material, monobrominated product and dibrominated product, which are treated with alkylamine, arylamine, or alkylarylamine did. The resulting amine product was acylated with an acid chloride and the monoacylated pyrrole was cyclized in the presence of acid to give the corresponding pyridine. The pyrrole protecting group was removed with polyphosphoric acid and treated with phosphorus oxychloride to give the chlorinated product. Subsequent treatment of chlorinated pyrrole with an amine yielded an amino 5-substituted pyrrole. Alkylation of the pyrrole nitrogen can be accomplished under conditions recognized in the art.
[0266]
Schemes IV and V represent methods for preparing deazapurines 1 and 2 of the present invention.
[0267]
Embedded image

(Wherein R₅And R₆Is as described above (eg, CH₃)
Specific preparation of 6-methylpyrrolopyrimidine:
6-methylpyrrolopyrimidine (1) (R₅= CH₃The important reaction to) is the cyclization of cyanoacetic acid ester to pyrimidine using benzamidine. Methyl cyanoacetate was thought to cyclize to pyrimidine more efficiently using benzamide than the corresponding ethyl ester. Thus, transesterification and alkylation of ethyl cyanoacetate in the presence of NaOMe and excess α-haloacetyl moiety (eg, chloroacetone) gave the desired methyl ester (3) in 79% yield. (Scheme IV). The keto ester (3) was protected in 81% yield as the acetal (4). A novel cyclization method to pyrimidine (5) was achieved with amidine hydrochloride, such as benzamidine hydrochloride, using 2 equivalents of DBU, and 5 was obtained in 54% isolated yield. This method improves the yield from 20% when using published conditions utilizing NaOMe during cyclization with guanidine. Cyclization to pyrrole-pyrimidine (6) was achieved in 78% yield by deprotection of the acetal in aqueous HCl. The corresponding 4-chloro derivative (7) was obtained by the reaction of (6) using phosphorus oxychloride under reflux. Coupling with trans-4-aminocyclohexanol in dimethyl sulfoxide at 135 ° C. yielded (1) in 57% yield from (7). Depending on the choice of reagent, the desired substituent R₅Those skilled in the art will appreciate that great flexibility is possible in selecting.
[0268]
Embedded image

Specific preparation of 5-methylpyrrolopyrimidine:
Kune-Benagel condensation of malononitrile and excess ketone (eg acetone) in refluxing benzene gave 8 in 50% yield after distillation. Bromination of 8 with N-bromosuccinimide in the presence of benzoyl peroxide in chloroform and after distillation, starting material, monobrominated product (9), and dibrominated product (5/90/5) Was obtained (70%). The mixture was reacted with α-methylalkylamine or α-methylarylamine (eg, α-methylbenzylamine) to give aminopyrrole (10). After passing through a short silica gel column, the partially purified amine (31% yield) is acylated with an acid chloride (eg, benzoyl chloride) to give monoacylated pyrrole (11) and diacylated pyrrole (12). Were obtained and separated by flash chromatography. Acid hydrolysis of the disubstituted pyrrole (12) resulted in a combined yield of 29% for the acyl pyrrole (11). Cyclization in the presence of concentrated sulfuric acid and DMF gave (13) (23%), which was deprotected to (14) with polyphosphoric acid. Under reflux, phosphorus oxychloride was reacted with (14) to give the corresponding 4-chloro derivative (15). Coupling with trans-4-aminocyclohexanol in dimethyl sulfoxide at 135 ° C. yielded (2) (R₆= CH₃) Was obtained (see Scheme V). Depending on the choice of reagent, the desired substituent R₆Those skilled in the art will appreciate that great flexibility is possible in selecting.
[0269]
Embedded image

R ₆ Alternative synthetic routes to substituted pyrroles (eg, 5-methylpyrrolopyrimidine)
R₆This alternative synthetic route to substituted pyrroles (eg, 5-methylpyrrolopyrimidine) involves transesterification and alkylation of ethyl cyanoacetate to (16) (Scheme VI). Pyrimidine (17) is obtained by condensing (16) with benzamidine hydrochloride using 2 equivalents of DBU. Cyclization to pyrrole-pyrimidine (14) is achieved by deprotection of the acetal in aqueous HCl. The corresponding 4-chloro derivative (15) was obtained by reacting (14) with phosphorus oxychloride under reflux. Coupling with trans-4-aminocyclohexanol in dimethyl sulfoxide at 135 ° C. yielded 2. In this procedure, the number of synthesis reactions to the target compound (2) is reduced from 9 steps to 4 steps. Furthermore, the yield is dramatically improved. In addition, the desired substituent R₆Those skilled in the art will appreciate that great flexibility is possible in selecting.
[0270]
Embedded image

A general approach for preparing desmethylpyrrole is depicted in the following scheme (Scheme VII).
[0271]
Embedded image

(Wherein R₁~ R₃Is defined above)
Alkylation of alkyl cyanoacetate with diethyl acetal in the presence of a base yielded cyano diethyl acetal, which was treated with an amine salt to yield the methyl pyrrolopyrimidine precursor. This precursor was chlorinated and treated with an amine to form the desmethylpyrrolopyrimidine target as shown above.
[0272]
For example, Scheme VIII represents the synthesis of compound (18).
[0273]
[Chemical Formula 86]

Commercially available methyl cyanoacetate was alkylated with bromoacetaldehyde diethyl acetal in the presence of potassium carbonate and NaI to give (19). Cyclization to the pyrimidine (20) was achieved in two steps. First, pyrimidine acetal was formed by reacting benzamidine hydrochloride with (19) using 2 equivalents of DBU. The resulting pyrimidine acetal was deprotected without purification with 1N aqueous HCl and the resulting aldehyde was cyclized to pyrrolo-pyrimidine (20) and isolated by filtration. Reaction of phosphorus oxychloride with (20) under reflux gave the corresponding 4-chloro derivative (21). Coupling of the chloro derivative with trans-4-aminocyclohexanol in DMSO at 135 ° C. gave compound (18) from compound (21).
[0274]
Schemes II-VIII demonstrate that it is possible to functionalize the 5- and 6-positions of the pyrrolopyrimidine ring. By using various starting materials and slight modifications of the above reaction scheme, various functional groups can be introduced at the 5- and 6-positions of formulas (I) and (II). Table 2 shows some examples.
[0275]
[Table 2]

It will be known to those skilled in the art that metabolism of a compound disclosed herein in a patient results in certain biologically active metabolites that can act as drugs.
[0276]
The present invention is further illustrated by the following examples, which should not be construed as further limiting in any way. The contents of all references, pending patent applications, and published patent applications cited throughout this application (including those referenced in the background section) are hereby incorporated by reference. Those of skill in the art will readily understand that the models used throughout the examples are generally accepted models and that demonstration of efficacy in these models is predictive of efficacy in humans.
[0277]
Example
Preparation 1:
A modification of the Seela and Lupke alkylation method was used.¹. To an ice-cooled solution (0 ° C.) of ethyl cyanoacetate (6.58 g, 58.1 mmol) in MeOH (20 mL) was slowly added a solution of NaOMe (25 kw / v; 58.1 mmol). After 10 minutes, chloroacetone (5 mL; 62.8 mmol) was added slowly. After 4 hours, the solvent was removed. Dilute the brown oil with EtOAc (100 mL) and add H₂Washed with O (100 mL). The organic fraction was dried, filtered and concentrated to a brown oil (7.79 g; 79%). This oil (3) (Scheme IV) was a mixture of methyl / ethyl ester product (9/1) and was used without further purification.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 4.24 (q, J = 7.2Hz, OCH₂), 3.91 (dd, 1H, J = 7.2, 7.0Hz, CH), 3.62 (s, 3H, OCH_Three), 3.42 (dd, 1H, J = 15.0, 7.1Hz, 1xCH₂); 3.02 (dd, 1H, J = 15.0, 7.0Hz, 1xCH₂); 2.44 (s, 3H, CH_Three), 1.26 (t, J = 7.1 Hz, ester-CH_Three).¹Seela, F .; Lupke, U. Chem. Ber. 1977, 110, 1462-1469.
[0278]
Preparation 2:
Using Seela and Lupke procedures¹. Thus, the protection of ketone (3) with ethylene glycol (4 mL, 64.4 mmol) in the presence of TsOH (100 mg) (Scheme IV; 5.0 g, 32.2 mmol) allows flash chromatography (SiO 2₂; 3/7 EtOAc / Hex, R_f 0.35) was obtained as an oil (Scheme IV; 5.2 g, 81.0). Still contained 5% ethyl ester:¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 4.24 (q, J = 7.2Hz, OCH₂), 3.98 (s, 4H, 2x acetal-CH₂), 3.79 (s, 3H, OCH_Three), 3.62 (dd, 1H, J = 7.2, 7.0Hz, CH), 2.48 (dd, 1H, J = 15.0, 7.1Hz, 1xCH₂), 2.32 (dd, 1H, J = 15.0, 7.0Hz, 1xCH₂); 1.35 (s, 3H, CH_Three), 1.26 (t, J = 7.1 Hz, ester-CH_ThreeMS (ES): 200.1 (M⁺+1).¹Seela, F .; Lupke, U. Chem. Ber. 1977, 110, 1462-1469.
[0279]
Preparation 3:
A solution of acetal (4) (Scheme IV, 1 g, 5.02 mmol), benzamidine (786 mg, 5.02 mmol), and DBU (1.5 mL, 10.04 mmol) in dry DMF (15 mL) was heated to 85 ° C. for 15 hours. This mixture is mixed with CHCl_ThreeDilute with (30 mL) and add 0.5 N NAOH (10 mL) and H₂Washed with O (20 mL). The organic fraction was dried, filtered and concentrated to a brown oil. Flash chromatography (SiO₂; 1/9 EtOAc / CH₂Cl₂, R_f 0.35) was attempted, but the material crystallized on the column. Silica gel was washed with MeOH. Fractions containing product (5) (Scheme IV) were concentrated and used without further purification (783 mg, 54.3%):¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ8.24 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 5.24 (br s, 2H, NH)₂), 3.98 (s, 4H, 2x acetal CH₂), 3.60-3.15 (m, 2H, CH₂), 1.38 (s, 3H, CH_ThreeMS (ES): 288.1 (M⁺+1).
[0280]
Preparation of compound (20) (Scheme VIII): Acetal (19) (4.43 g, 20.6 mmol) in dry DMF (20 mL)¹, A solution of benzamine hydrochloride (3.22 g, 20.6 mmol), and DBU (6.15 mL, 41.2 mmol) was heated to 85 ° C. for 15 hours. Add this mixture to 100 mL CHCl_ThreeDilute with₂Washed with O (2 × 50 mL). The organic fraction was dried, filtered and concentrated to a dark brown oil. The dark brown oil was stirred in 1N HCl (100 mL) for 2 hours at room temperature. The resulting slurry was filtered to give the HCl salt of (20) as a tan solid (3.60 g, 70.6%);¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) 11.92 (s, 1H), 8.05 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 7.05 (s, 1H, pyrrole H); MS (ES): 212.1 (M⁺+1).
[0281]
Preparation 4:
A solution of acetal (5) (700 mg, 2.44 mmol) in 1N HCl (40 mL) was stirred for 2 hours at room temperature. The resulting slurry was filtered to give the HCl salt of 2-phenyl-6-methyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one as a tan solid (498 mg, 78.0% ):¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ11.78 (s, 1H), 8.05 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 6.17 (s, 1H, pyrrole-H), 2.25 (s, 3H, CH_ThreeMS (ES): 226.1 (M⁺+1).
[0282]
Preparation 5:
Using a modified cyclization method of Chen et al.¹. A solution of α-methylbenzylamine (12.5 mL, 97.3 mmol) in an ice-cooled solution (0 ° C.) of bromide (9), (Scheme V; 20.0 g, 108 mmol; purity 90%) in isopropyl alcohol (60 mL) Was added slowly. The black solution was warmed to room temperature and stirred for 15 hours. The mixture was diluted with EtOAc (200 mL) and washed with 0.5N NaOH (50 mL). The organic fraction was dried, filtered and concentrated to a black tar (19.2 g; 94%). Flash chromatography (SiO₂4/96 MeOH / CH₂Cl₂, R_f The residue was partially purified by 0.35) to give the compound dl-1- (1-phenylethyl) -2-amino-3-cyano-4-methylpyrrole as a black solid (6.38 g, 31%): MS (ES): 226.1 (M⁺+1).
[0283]
¹Mansbach, R. S .; Winter, S. M .; Brooks, E .; Collins, J .; Corman, M. L .; Dunaiskis, A. R .; Faraci, W. S .; Gallaschun, R. J .; Schmidt, A .; 1997, 40, 1749-1754.
[0284]
Preparation 6:
Dl-1- (1-Phenylethyl) -2-amino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole in dichloromethane (50.0 mL)¹To a solution of (14.9 g, 62.5 mmol) and pyridine (10.0 mL) was added benzoyl chloride (9.37 g, 66.7 mmol) at 0 ° C. After stirring at 0 ° C. for 1 hour, hexane (10.0 mL) was added to facilitate precipitation of the product. Remove the solvent under vacuum and remove the solids with EtOH / H₂Recrystallization from O gave 13.9 g (65%) of dl-1- (1-phenylethyl) -2-phenylcarbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole. mp: 218-221 ° C;¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.72 (s, 3H), 1.76 (d, J = 7.3Hz, 3H), 1.98 (s, 3H), 5.52 (q, J = 7.3Hz, 1H), 7.14-7.54 (m, 9H), 7.68-7.72 (dd, J = 1.4Hz, 6.9Hz, 2H), 10.73 (s, 1H); MS (ES): 344.4 (M⁺+1).
[0285]
¹Liebigs Ann. Chem. 1986,1485-1505.
[0286]
The following compounds were obtained in a similar manner:
[0287]
Preparation 6A:
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (3-pyridyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.83 (d, J = 6.8Hz, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 5.50 (q, J = 6.8Hz, 1H), 7.14-7.42 (m, 5H), 8.08 (m, 2H), 8.75 (m, 3H); MS (ES): 345.2 (M⁺+1).
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (2-furyl) carbonylamino-3-cyano-4-dimethylpyrrole.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.84 (d, J = 7.4Hz, 3H), 1.92 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 5.49 (q, J = 7.4Hz, 1H), 6.54 (dd, J = 1.8Hz, 3.6Hz, 1H), 7.12-7.47 (m, 7H); MS (ES): 334.2 (M⁺+1), 230.1.
dl-1- (1-Phenylethyl) -2- (3-furyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.80 (d, J = -7H-z, 3H), 1.89 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 5.48 (q, J = -7H-z, 1H), 6.59 (s, 1H) ), 7.12-7.40 (m, 6H), 7.93 (s, 1H); MS (ES): 334.1 (M⁺+1), 230.0.
dl-1- (1-Phenylethyl) -2-cyclopentylcarbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.82 (d, J = 7.4Hz, 3H), 1,88 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.63-1.85 (m, 8H), 2.63 (m, 1H), 5.43 (q, J = 7.4Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 7.05-7.20 (m, 5H); MS (ES): 336.3 (M⁺+1).
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (2-thienyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole, H NMR (200 MHz, CDCl_Three) δ1.82 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.96 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 5.49 (q, J = 6.8Hz, 1H), 7.05-7.55 (m, 8H); MS (ES): 350.1 (M⁺+1), 246.0.
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (3-thienyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.83 (d, J = 7.0Hz, 3H), 1.99 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 5.49 (q, J = 7.0Hz, 1H), 6.90 (m, 1H), 7.18- 7.36 (m, 6H), 7.79 (m, 1H); MS (ES): 350.2 (M⁺+1), 246.1.
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (4-fluorophenyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.83 (d, J = 7.4Hz, 3H), 1.96 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 5.51 (q, J = 7.4Hz, 1H), 7.16-7.55 (m, 9H); MS (ES): 362.2 (M⁺+1), 258.1.
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (3-fluorophenyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.83 (d, J = 7.4Hz, 3H), 1.97 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 5.50 (q, J = 7.4Hz, 1H), 7.05-7.38 (m, 7H), 7.67-7.74 (m, 2H); MS (ES): 362.2 (M⁺+1), 258.1.
[0288]
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (2-fluorophenyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.85 (d, J = 7.2Hz, 3H), 1.94 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 5.50 (q, J = 7.2Hz, 1H), 7.12-7.35 (m, 6H), 7.53 (m, 1H), 7.77 (m, 1H), 8.13 (m, 1H); MS (ES): 362.2 (M⁺+1), 258.0.
dl-1- (1-Phenylethyl) -2-isopropylcarbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.19 (d, J = 7.0Hz, 6H), 1.82 (d, J = 7.2Hz, 3H), 1.88 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.46 (m, 1H), 5.39 ( m, J = 7.2Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 7.11-7.36 (m, 5H); MS (ES): 310.2 (M⁺+1), 206.1.
[0289]
In the case of acylation of dl-1- (1-phenylethyl) -2-amino-3-cyano-4-methylpyrrole, monoacylated dl-1- (1-phenylethyl) -2-benzoylamino-3-cyano- 4-Dimethylpyrrole and diacylated pyrrole dl-1- (1-phenylethyl) -2-dibenzoylamino-3-cyano-4-methylpyrrole were obtained.
[0290]
Monoacylated pyrrole:¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 7.69 (d, 2H, J = 7.8Hz, Ar-H), 7.58-7.12 (m, 8H, Ar-H), 6.18 (s, 1H, pyrrole-H), 5.52 (q, 1H, J) = 7.2Hz, CH-CH_Three), 2.05 (s, 3H, pyrrole-CH_Three), 1.85 (d, 3H, J = 7.2 Hz, CH-Ch3); MS (ES): 330.2 (M⁺+1); diacylated pyrrole:¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 7.85 (d, 2H, J = 7.-7H-z, Ar-H), 7.74 (d, 2H, J = 7.8Hz, Ar-H), 7.52-7.20 (m, 9H, Ar-H) ), 7.04 (m, 2H, Ar-H), 6.21 (s, 1H, pyrrole-H), 5.52 (q, 1H, J = 7.2Hz, Ch-CH_Three), 1.77 (d, 3H, J = 7.2Hz, CH-CH_Three), 1.74 (s, 3H, pyrrole-CH_Three); MS (ES): 434.1 (M⁺+1).
[0291]
Preparation 7:
To a solution of dl-1- (1-phenylethyl) -2-phenylcarboxamido-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole (1.0 g, 2.92 mmol) in methanol (10.0 mL) was added concentrated sulfuric acid (1.0 mL) was added at 0 ° C. The resulting mixture was refluxed for 15 hours and cooled to room temperature. The precipitate was filtered and 0.48 g (48%) of dl-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-4 (3H)- Got on.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ2.02 (d, J = 7.4Hz, 3H), 2.04 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 6.25 (q, J = 7.4Hz, 1H), 7.22-7.50 (m, 9H), 8.07-8.12 (dd, J = 3.4Hz, 6.8Hz, 2H), 10.51 (s, 1H); MS (ES): 344.2 (M⁺+1). The following compound was obtained in a similar manner as Preparation 7:
dl-5,6-Dimethyl-2- (3-pyridyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ2.03 (d, J = 7.2Hz, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 6.24 (q, J = 7.2Hz, 1H), 7.09-7.42 (m, 5H), 8.48 (m, 2H), 8.70 (m, 3H); MS (ES): 345.1 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2- (2-furyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.98 (d, J = 7.8Hz, 3H), 1.99 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 6.12 (q, J = 7.8Hz, 1H), 6.48 (dd, J = 1.8Hz, 3.6Hz, 1H), 7.17-7.55 (m, 7H), 9.6 (s, 1H); MS (ES): 334.2 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2- (3-furyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.99 (d, J = 7Hz, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 6.24 (q, J = -7H-z, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.18 -7.32 (m, 5H), 7.48 (s, 1H), 8.51 (s, 1H); MS (ES): 334.2 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2-cyclopentyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.95 (d, J = 7.4Hz, 3H), 2.00 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.68-1.88 (m, 8H), 2.97 (m, 1H), 6.10 (q, J = 7.4Hz, 1H), 7.16-7.30 (m, 5H), 9.29 (s, 1H); MS (ES): 336.3 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2- (2-thienyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ2.02 (d, J = 7.2Hz, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 6.13 (q, J = 7.2Hz, 1H), 7.12 (dd, J = 4.8, 2.8) Hz, 1H), 7.26-7.32 (m, 5H), 7.44 (d, J = 4.8Hz, 1H), 8.01 (d, J = 2.8Hz, 1H) 11.25 (s, 1H); MS (ES): 350.2 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2- (3-thienyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ2.00 (d, J = 7.4Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 6.24 (q, J = 7.4Hz, 1H), 7.24-7.33 (m, 5H), 7.33-7.39 (m, 1H), 7.85 (m, 1H), 8.47 (m, 1H), 12.01 (s, 1H); MS (ES): 350.2 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2- (4-fluorophenyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ2.01 (d, J = 6.8Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 6.26 (q, J = 6.8Hz, 1H), 7.12-7.36 (m, 7H), 8.23-8.30 (m, 2H), 11.82 (s, 1H); MS (ES): 362.3 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2- (3-fluorophenyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ2.02 (d, J = 7.4Hz, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 6.29 (q, J = 7.4Hz, 1H), 7.13-7.51 (m, 7H), 8.00-8.04 (m, 2H), 11.72 (s, 1H); MS (ES): 362.2 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2- (2-fluorophenyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ2.00 (d, J = 7.2Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 6.24 (q, J = 7.2Hz, 1H), 7.18-7.45 (m, 8H), 8.21 (m, 1H), 9.54 (s, 1H); MS (ES): 362.2 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2-isopropyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.30 (d, J = 6.8Hz, 3H), 1.32 (d, J = 7.0Hz, 3H), 2.01 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.90 (m, 1H), 6.13 ( m, 1H), 7.17-7.34 (m, 5H), 10.16 (s, 1H); MS (ES): 310.2 (M⁺+1).
[0292]
Preparation 8:
Concentrated H in DMF (13 mL)₂SO_FourA solution of dl-1- (1-phenylethyl) -2-benzoylamino-3-cyano-4-dimethylpyrrole (785 mg, 2.38 mmol) containing (1 mL) was stirred at 130 ° C. for 48 hours. Black solution with CHCl_ThreeDilute with (100 mL) and wash with 1N NaOH (30 mL) and brine (30 mL). The organic fraction is dried, filtered, concentrated and flash chromatographed (SiO₂8/2 EtOAc / Hex, R_f 0.35) and dl-5-methyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one was converted to a brown solid (184 mg, 24 %).¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ8.18 (m, 2H, Ar-H), 7.62-7.44 (m, 3H, Ar-H), 7.40-7.18 (m, 5H, Ar-H), 6.48 (s, 1H, pyrrole-H) , 6.28 (q, 1H, J = 7.2Hz, CH-CH_Three), 2.18 (s, 3H, pyrrole-CH_Three), 2.07 (d, 3H, J = 7.2Hz, CH-CH_ThreeMS (ES): 330.2 (M⁺+1).
[0293]
Preparation 9:
A mixture of dl-1- (1-phenylethyl) -2-amino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrole (9.60 g, 40.0 mmol) and formic acid (50.0 mL, 98%) was refluxed for 5 hours. . Cooled to room temperature, scratched the wall of the flask and filtered a large amount of precipitate formed. This material is washed with water until the wash solution shows neutralization pH, and dl-5,6-dimethyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-4 (3H)- Got on:¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.96 (d, J = 7.4Hz, 3H), 2.00 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 6.21 (q, J = 7.4Hz, 1H), 7.11-7.35 (m, 5H), 7.81 (s, 1H), 11.71 (s, 1H); MS (ES): 268.2 (M⁺+1).
[0294]
Preparation 10: dl-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one (1.0 g, 2.91 mmol) Suspended in polyphosphoric acid (30.0 mL). The mixture was heated to 100 ° C. for 4 hours. The hot suspension was poured into ice water and stirred vigorously to disperse the suspension and basified to pH 6 using solid KOH. The resulting solid was filtered and collected to give 0.49 g (69%) of 5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200 MHz, DMSO-d) δ 2.17 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 7.45 (br, 3H), 8.07 (br, 2H,), 11.49 (s, 1H), 11.82 (s , 1H); MS (ES): 344.2 (M⁺+1).
[0295]
The following compound was obtained in a similar manner as Preparation 10:
5-Methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one. MS (ES): 226.0 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (3-pyridyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one. MS (ES): 241.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (2-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ2.13 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 6.39 (dd, J = 1.8, 3.6Hz, 1H), 6.65 (dd, J = 1.8Hz, 3.6Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 1.8,3.6Hz, 1H,), 11.45 (s, 1H), 11.60 (s, 1H); MS (ES): 230.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (3-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 2.14 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 6.66 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 11.3 (s, 1H), 11.4 (s, 1H) MS (ES): 230.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2-cyclopentyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ1.57-1.91 (m, 8H), 2.12 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.99 (m, 1H), 11.24 (s, 1H), 11.38 (s, 1H); MS (ES ): 232.2 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (2-thienyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 2.14 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 7.14 (dd, J = 3.0, 5.2Hz, 1H), 7.70 (d, J = 5.2Hz, 1H), 8.10 (d, J = 3.0) Hz, 1H), 11.50 (s, 1H); MS (ES): 246.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (3-thienyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 2.17 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 7.66 (m, 1H), 7.75 (m, 1H), 8.43 (m, 1H), 11.47 (s, 1H), 11.69 (s, 1H) MS (ES): 246.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (4-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 2.17 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 7.31 (m, 2H), 8.12 (m, 2H), 11.47 (s, 1H); MS (ES): 258.2 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (3-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 2.18 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 7.33 (m, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.85-7.95 (m, 2H), 11.56 (s, 1H), 11.80 (s) , 1H); MS (ES): 258.1 (M⁺+1).
[0296]
5,6-Dimethyl-2- (2-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 2.18 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 7.27-7.37 (m, 2H), 7.53 (m 1H), 7.68 (m, 1H), 11.54 (s, 1H), 11.78 (s, 1H); MS (ES): 258.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2-isopropyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 1.17 (d, J = 6.6Hz, 6H), 2.11 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.81 (m, 1H), 11.20 (s, 1H), 11.39 (s, 1H); MS (ES): 206.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-7H-pyrrolo [2,3-d) pyrimidin-4 (3H) -one.¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ2.13 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 7.65 (s, 1H); MS (ES): 164.0 (M⁺+1).
Preparation 11: A solution of 5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one (1.0 g, 4.2 mmol) in phosphorus oxychloride (25.0 mL) Refluxed for 6 hours and then concentrated under vacuum until dry. Water was added to the residue to induce crystallization and the resulting solid was filtered and collected and 0.90 g (83%) of 4-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [ 2,3-d] pyrimidine was obtained.¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ2.33 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 7.46-7.49 (m, 3H), 8.30-8.35 (m, 2H), 12.20 (s, 1H); MS (ES): 258.1 (M⁺+1).
[0297]
The following compound was obtained in a similar manner as Preparation 11:
4-Chloro-5-methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 244.0 (M⁺+1).
4-Chloro-6-methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 244.0 (M⁺+1).
4-chloro-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) 8.35 (2, 2H), 7.63 (br s, 1H), 7.45 (m, 3H), 6.47 (br s, 1H); MS (ES): 230.0 (M⁺+1).
4-Chloro-5,6-dimethyl-2- (3-pyridyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 259.0 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (2-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,
¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 2.35 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 6.68 (dd, J = 1.8, 3.6Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 1.8Hz, 3.6Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 1.8, 3.6Hz, 1H); MS (ES): 248.0 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (3-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ2.31 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 6.62 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 12.02 (s, 1H); MS (ES): 248.1 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2-cyclopentyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 1.61-1.96 (m, 8H), 2.27 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 3.22 (m, 1H), 11.97 (s, 1H); MS (ES): 250.1 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (2-thienyl) -7H-pyrrolo (2,3-d) pyrimidine,¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 2.29 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 7.14 (dd, J = 3.1Hz, 4.0Hz, 1H), 7.33 (d, J = 4.9Hz, 1H), 7.82 (d, J = 3.1Hz, 1H), 12.19 (s, 1H); MS (ES): 264.1 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (3-thienyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ2.32 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 7.62 (dd, J = 3.0, 5.2Hz, 1H), 7.75 (d, J = 5.2Hz, 1H), 8.20 (d, J = 3.0) Hz, 1H); MS (ES): 264.0 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (4-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 2.33 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 7.30 (m, 2H), 8.34 (m, 2H), 12.11 (s, 1H); MS (ES): 276.1. (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (3-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ2.31 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 7.29 (m, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.96 (m, 1H), 8.14 (m, 1H), 11.57 (s, 1H) MS (ES): 276.1 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (2-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 2.34 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 7.33 (m, 2H), 7.44 (m, 1H), 7.99 (m, 1H), 12.23 (s, 1H); MS (ES): 276.1 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2-isopropyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ1.24 (d, J = 6.6Hz, 6H), 2.28 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 3.08 (q, J = 6.6Hz, 1H), 11.95 (s, 1H); MS ( ES): 224.0 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ 2.31 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 8.40 (s, 1H); MS (ES): 182.0 (M⁺+1).
dl-4-Chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
[0298]
Preparation 12:
To a solution of dl-1,2-diaminopropane (1.48 g, 20.0 mmol) and sodium carbonate (2.73 g, 22.0 mmol) in dioxane (100.0 mL) and water (100.0 mL) was added di-tert-dicarbonate (4.80 g, 22.0 mmol) was added at room temperature. The resulting mixture was stirred for 14 hours. Dioxane was removed under vacuum. The precipitate was filtered off and the filtrate was concentrated to dryness under vacuum. The residue was triturated with EtOAc and filtered. The filtrate was concentrated to dryness under vacuum, dl-1-amino-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino-propane and dl-2-amino-1- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino -A mixture of propane was obtained. These could not be separated by ordinary chromatographic methods. This mixture was used in the reaction of Example 8.
[0299]
Preparation 13: To a solution of Fmoc-Ala-OH (1.0 g, 3.212 mmol) and oxalyl chloride (0.428 g, 0.29 mL, 3.373 mmol) in dichloromethane (20.0 mL) was added 0 drops of N, N-dimethylformamide. Added at 0C. The mixture was stirred at room temperature for 1 hour, followed by addition of cyclopropylmethylamine (0.229 g, 0.28 mL, 3.212 mmol) and triethylamine (0.65 g, 0.90 mL, 6.424 mmol). After 10 minutes, the mixture was treated with 1M hydrochloride (10.0 mL) and the aqueous mixture was extracted with dichloromethane (3 × 30.0 mL). The organic solution was concentrated to dryness under vacuum. The residue was treated with a solution of 20% piperidine in N, N-dimethylformamide (20.0 mL) for 0.5 hour. After the solvent was removed in vacuo, the residue was treated with 1M hydrochloride (20.0 mL) and ethyl acetate (20.0 mL). The mixture was separated and the aqueous layer (aqueous layer) was basified to pH = 8 using solid sodium hydroxide. The precipitate was removed by filtration and the aqueous solution was applied to an ion exchange column eluting with 20% pyridine to give 0.262 g (57%) of N-cyclopropylmethyl-alanine amide.¹H NMR (200MHz, CD_ThreeOD) δ0.22 (m, 2H), 0.49 (m, 2H), 0.96 (m, 2H), 2.40 (t, 2H), 2.92 (t, 2H), 3.05 (d, 2H); MS (ES) : 143.1 (M⁺+1).
[0300]
Preparation 14: N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine
trans-1,4-Cyclohexyldiamine (6.08 g, 53.2 mmol) was dissolved in dichloromethane (10 OmL). A solution of di-t-butyl dicarbonate (2.32 g, 10.65 mmol in 40 mL dichloromethane) was added via cannula. After 20 hours, the reaction was washed with CHCl._ThreeAnd partitioned between water. The layers are separated and the aqueous layer is CHCl_Three(3x). Combined organic layer is MgSO_FourDried over, filtered and concentrated to give 1.20 g of a white solid (53%).¹H-NMR (200MHz, CDCl_Three): Δ1.0-1.3 (m, 4H), 1.44 (s, 9H), 1.8-2.1 (m, 4H), 2.62 (brm, 1H), 3.40 (brs, 1H), 4.37 (brs, 1HO; MS (ES): 215.2 (M⁺+1).
[0301]
4- (N-acetyl) -N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine
N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine (530 mg, 2.47 mmol) was dissolved in dichloromethane (20 mL). Acetic anhydride (250 mg, 2.60 mmol) was added dropwise. After 16 hours, the reaction was washed with water and CHCl._ThreeDiluted with The layers are separated and the aqueous layer is CHCl_Three(3x). Combined organic layer is MgSO_FourDry above, filter and concentrate. Recrystallization (EtOH / H₂O) yielded 190 mg of white crystals (30%).¹H NMR (200MHz, CDCl_Three): Δ0.9-1.30 (m, 4H), 1.43 (s, 9H), 1.96-2.10 (m, 7H), 3.40 (brs, 1H), 3.70 (brs, 1H), 4.40 (brs, 1H), 4.40 (brs, 1H); MS (ES): 257.2 (M⁺+1), 242.1 (M⁺-15), 201.1 (M⁺-56).
[0302]
4- (4-trans-acetamidocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine
4- (N-acetyl) -N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine (190 mg, 0.74 mmol) was dissolved in dichloromethane (5 mL) and diluted with TFA (6 mL) . After 16 hours, the reaction was concentrated. Crude solid, DMSC (2 mL), NaHCO₂(200 mg, 2.2 mmol) and 4-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (35 mg, 0.14 mmol) were combined in a flask and heated to 130 ° C. did. After 4.5 hours, the reaction was cooled to room temperature and diluted with EtOAc and water. The layers were separated and the aqueous layer was extracted with EtOAc (3x). Combined organic layer is MgSO_FourDry above, filter and concentrate. Chromatography (Silica preparative plate; 20: 1 CHCl_Three: EtOH) to give 0.3 mg of a tan solid (1% yield). MS (ES): 378.2 (M⁺+1).
[0303]
4- (N-methanesulfonyl) -N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine.
[0304]
trans-1,4-Cyclohexyldiamine (530 mg, 2.47 mmol) was dissolved in dichloromethane (20 mL) and diluted with pyridine (233 mg, 3t0 mmol). Methanesulfonyl chloride (300 mg, 2.60 mmol) was added dropwise. After 16 hours, the reaction was washed with water and CHCl._ThreeDiluted with The layers are separated and the aqueous layer is CHCl_Three(3x). Combined organic layer is MgSO_FourDry above, filter and concentrate. Recrystallization (EtOH / H₂O) gave 206 mg of white crystals (29%).¹H-NMR (200MHz, CDCl_Three): Δ 1.10-1.40 (m, 4H), 1.45 (s, 9H), 2.00-2.20 (m, 4H), 2.98 (s, 3H), 3.20-3.50 (brs, 2H), 4.37 (brs, 1H) MS (ES) 293.1 (M⁺+1). 278.1 (M⁺15), 237.1 (M⁺56).
[0305]
4- (4-trans-methanesulfamidocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine
4- (N-sulfonyl) -N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine (206 mg, 0.71 mmol) was dissolved in dichloromethane (5 mL) and diluted with TFA (6 mL). After 16 hours the reaction was concentrated. Crude reaction mixture, DMSO (2 mL), NaHCO_Three(100 mg, 1.1 mmol) and 1-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine were combined in the flask and heated to 130 ° C. After 15 hours, the reaction was cooled to room temperature and diluted with EtOAc (3 ×). Combined organic layer is MgSO_FourDry above, filter and concentrate. Chromatography (Silica preparative plate, 20: 1 CHCl_Three/ EtOH) gave 2.6 mg of a tan solid (5% yield). MS (ES): 414.2 (M⁺+1).
[0306]
Example 1: 4-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (0.50 g, 1.94 mmol) and 4-trans-hydroxycyclohexane in methyl sulfoxide (10.0 mL) A solution of hexylamine (2.23 g, 19.4 mmol) was heated at 130 ° C. for 5 hours. After cooling to room temperature, water (10.0 mL) was added and the resulting aqueous solution was extracted with EtOAc (3 × 10.0 mL). The combined EtOAc solution is dried (MgSO_Four), Filtered, the filtrate concentrated to dryness under vacuum and the residue chromatographed on silica gel to give 0.49 g (75%) of 4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- Phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. mp 197-199 ° C;¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.25-1.59 (m, 8H), 2.08 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.68-3.79 (m, 1H), 4.32-4.38 (m, 1H), 4.88 (d, J = 8Hz, 1H), 7.26-7.49 (m, 3H), 8.40-8.44 (dd, J = 2.2, 8Hz, 2H), 10.60 (s, 1H); MS (ES): 337.2 (M⁺+1).
[0307]
The following compound was obtained in a similar manner as Example 1:
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-6-methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ11.37 (s, 1H, pyrrole-NH), 8.45 (m, 2H, Ar-H), 7.55 (m, 3H, Ar-H), 6.17 (s, 1H, pyrrole-H), 4.90 (br d, 1H, NH), 4.18 (m, 1H, CH-O), 3.69 (m, 1H, CH-N), 2.40-2.20 (m, 2H), 2.19-1.98 (m, 2H), 2.25 (s , 3H, CH_Three1.68-1.20 (m, 4H); MS (ES): 323.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5-methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ11.37 (s, 1H, pyrrole-NH), 8.40 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 5.96 (s, 1H, pyrrole-H), 4.90 (br d, 1H, NH), 4.18 (m, 1H, CH-O), 3.69 (m, 1H, CH-N), 2.38-2.20 (m, 2H), 2.18-1.98 (m, 2.00 (s, 3H, CH_Three) 1.68-1.20 (m, 4H); MS (ES): 323.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. mp 245.5-246.5 ℃;¹H NMR (200 MHz, CD3OD) δ 8.33 (m, 2H, Ar—H), 7.42 (m, 3H, Ar—H), 7.02 (d, 1H, J = 3.6 Hz, pyrrole-H), 6.53 (d , 1H, J = 3.6Hz, pyrrole-H), 4.26 (m, 1H, CH-O), 3.62 (m, 1H, CH-N), 2.30-2.12 (m, 2H), 2.12-1.96 (m, 2H), 1.64-1.34 (m, 4H); MS, M + 1 = 309.3; analysis (C₁₉H₂ N_FourO) C, H, N.
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (3-pyridyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.21-1.54 (m, 8H); 2.28 (s, 3H); 2.33 (s, 3H); 3.70 (m, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.89 (d, 1H), 7.40 (m , 1H), 8.61 (m, 2H), 9.64 (m, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (2-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.26-1.64 (m, 8H), 2.22 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 3.72 (m, 1H), 4.23 (m, 1H), 4.85 (d, 1H), 6.52 (m , 1H), 7.12 (m, 1H), 7.53 (m, 1H), 9.28 (s, 1H); MS (ES): 327.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (3-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.25-1.63 (m, 8H), 2.11 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 3.71 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.84 (d, 1H), 7.03 (m , 1H), 7.45 (m, 1H), 8.13 (m, 1H), 10.38 (m, 1H); MS (ES): 327.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-cyclopentyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.26-2.04 (m, 16H), 2.26 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 3.15 (m, 1H), 3.70 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 4.75 (d , 1H); MS (ES): 329.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (2-thienyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-amine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) 1.28-1.59 (m, 8H), 2.19 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.74 (m, 1H), 4.19 (m, 1H), 4.84 (d, 1H), 7.09 (m, 1H) ), 7.34 (m, 1H), 7.85 (m, 1H), 9.02 (s, 1H); MS (ES): 343.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (3thienyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.21-1.60 (m, 8H), 1.98 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 3.66 (m, 1H), 4.22 (m, 1H), 7.27 (m, 1H), 7.86 (m) , 1H), 8.09 (m, 1H), 11.23 (s, 1H); MS (ES): 343.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (4 fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.26-1.66 (m, 8H), 1.94 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 3.73 (m, 1H), 4.33 (m, 1H), 4.92 (d, 1H), 7.13 (m , 2H), 8.41 (m, 2H), 11.14 (s, 1H); MS (ES): 355.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (3-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.26-1.71 (m, 8H), 2.06 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 3.72 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.90 (d, 1H), 7.09 (m , 1H), 7.39 (m, 1H), 8.05 (m, 1H), 8.20 (m, 1H), 10.04 (s, 1H); MS (ES): 355.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (2-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.30-1.64 (m, 8H), 2.17 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.73 (m, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.82 (d, 1H), 7.28 (m , 2H), 8.18 (m, 1H), 9.02 (m, 1H), 12.20 (s, 1H); MS (ES): 355.3 (M⁺+1).
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-isopropyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.31 (d, J = 7.0Hz, 6H), 1.30-1.65 (m, 8H), 2.27 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 3.01 (m, J = 7.0Hz, 1H), 3.71 (m, 1H), 4.14 (m, 1H), 4.78 (d, 1H); MS (ES): 303.2.
dl-4- (2-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-isopropyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.31-1.42 (br, 4H), 1.75-1.82 (br, 4H), 2.02 (S, 3H), 2. (s, 3H), 3.53 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 5.08 (d, 1H), 7.41-7.48 (m, 3H), 8.30 (m, 2H), 10.08 (s, 1H); MS (ES): 337.2 (M⁺+1).
4- (3,4-trans-dihydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 353.2 (M⁺+1).
4- (3,4-cis-dihydroxylcyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 353.2 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. mp 196-199 ° C;¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.72 (s, 3H), 1.97 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.59 (m, 2H), 3.96 (m, 2H), 5.63 (br, 1H), 7.44-7.47 (m) , 3H), 8.36-8.43 (dd, J = 1Hz, 7Hz, 2H), 10.76 (s, 1H); MS (ES): 324.5 (M⁺+1).
dl-4- (2-trans-hydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine¹.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.62 (m, 2H), 1.79 (br, 4H), 1.92 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 4.11 (m, 1H), 4.23 (m, 1H), 5.28 (d, 1H) ), 7.41-7.49 (m, 3H), 8.22 (m, 2H), 10.51 (s, 1H); MS (ES): 323.2 (M⁺+1).¹See PCT 9417090 for the preparation of 2-trans-hydroxycyclopentylamine.
dl-4- (3-trans-hydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine¹.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.58-1.90 (br, 6H), 2.05 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 4.48-4.57 (m, 1H), 4.91-5.01 (m, 2H), 7.35-7.46 (m, 3H), 8.42-8.47 (m, 2H), 10.11 (s, 1H); MS (ES): 323.2 (M⁺+1).¹See A-322242 for the preparation of 3-trans-hydroxycyclopentylamine.
dl-4- (3-cis-hydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine¹.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.82-2.28 (br, 6H), 2.02 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 4.53-4.60 (m, 1H), 4.95-5.08 (m, 1H), 5.85-5.93 (d, 1H), 7.35-7.47 (m, 3H), 8.42-8.46 (m, 2H), 10.05 (s, 1H); MS (ES): 323.2 (M⁺+1).¹See EP-A322242 for the preparation of 3-cis-hydroxycyclopentylamine.
4- (3,4-trans-dihydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine¹.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.92-1.99 (br, 2H), 2.14 (s, 3H), 2.20 (br, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.41-2.52 (br, 2H), 4.35 (m, 2H), 4.98 (m, 2H), 7.38-7.47 (m, 3H), 8.38-8.42 (m, 2H), 9.53 (s, 1H); MS (ES): 339.2 (M⁺+1).¹See PCT 9417090q for the preparation of 3,4-trans-dihydroxycyclopentylamine.
4- (3-Amino-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ2.02 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.71 (t, 2H), 4.18 (m, 2H), 5.75-5.95 (m, 3H), 7.38-7.48 (m, 3H), 8.37 -8.41 (m, 2H), 10.42 (s, 1H); MS (ES): 310.1 (M⁺+1).
4- (3-N-cyclopropylmethylamino-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CD_ThreeOD) δ0.51 (q, 2H), 0.40 (q, 2H), 1.79-1.95 (br, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.72 (t, 2H), 2.99 ( d, 2H), 4.04 (t, 2H), 7.58-7.62 (m, 3H), 8.22-8.29 (m, 2H); MS (ES): 364.2 (M⁺+1).
4- (2-Amino-2-oxoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CD_ThreeOD) δ 2.31 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 4.26 (s, 2H), 7.36 (m, 3H), 8.33 (m, 2H); MS (ES): 396.1 (M⁺+1).
4- (2-N-methylamino-2-oxoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.99 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.82 (d, 3H), 4.39 (d, 2H), 5.76 (t, 1H), 6.71 (br, 1H), 7.41-7.48 (m) , 3H), 8.40 (m, 4H), 10.66 (s, 1H); MS (ES): 310.1 (M⁺+1).
4- (3-tert-Butyloxyl-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.45 (s, 9H), 1.96 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.71 (t, 2H), 4.01 (q, 2H), 5.78 (t, 1H), 7.41-7.48 (m) , 3H), 8.22-8.29 (m, 2H); MS (ES): 367.2 (M⁺+1).
4- (2-hydroxyethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.92 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.81-3.98 (br, 4H), 5.59 (t, 1H), 7.399.48 (m, 3H), 8.37 (m, 2H), 10.72 (s, 1H); MS (ES): 283.1 (M⁺+1).
4- (3-hydroxypropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.84 (m, 2H), 1.99 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 3.62 (t, 2H), 3.96 (m, 2H), 3.35 (t, 1H), 7.39-7.48 (m) , 3H), 8.36 (m, 2H), 10.27 (s, 1H); MS (ES): 297.2 (M⁺+1).
4- (4-Hydroxybutyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.71-1.82 (m, 4H), 1.99 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.68-3.80 (m, 4H), 5.20 (t, 1H), 7.41-7.49 (m, 3H) , 8.41 (m, 2H), 10.37 (s, 1H); MS (ES): 311.2 (M + 1).
4- (4-trans-acetylaminocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine
4- (4-trans-methylsulfonylaminocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
4- (2-acetylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
4- (4-trans-Hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
4- (3-Pyridylmethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
4- (2-Methylpropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
[0308]
Example 2: To a stirred solution of triphenylphosphine (0.047 g, 0.179 mmol) and benzoic acid (0.022 g, 0.179 mmol) in THF (1.0 mL) cooled to 0 ° C. was added 4- (4-trans-hydroxycyclohexyl). ) Amino 5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (0.05 g, 0.149 mmol) was added at 0 ° C. Then, diethyl azodicarboxylate 0.028 mL, 0.179 mmol) was added dropwise over 10 minutes. The reaction was then warmed to room temperature. After the reaction was complete by TLC, the reaction mixture was quenched with aqueous sodium bicarbonate (3.0 mL). The aqueous layer was separated and extracted with ether (2 × 5.0 mL). The organic extracts were combined, dried and concentrated under vacuum until dry. After adding ether (2.0 mL) and hexane (5.0 mL) to the residue, most of the triphenylphosphine oxide was filtered off. The filtrate was concentrated to give a viscous oil which was purified by column chromatography (hexane: acetic acid = 4: 1) to give 5.0 mg (7.6%) of 4- (4-cis-benzoyloxycyclohexane. Xyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 441.3 (M⁺+1). This reaction also produced 50.0 mg (84%) of 4- (3-cyclohexynyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 319.2 (M⁺+1).
Example 3: 4- (4-cis-benzoyloxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (5.0 mg, in ethanol (1.0 mL)) mmol) solution was added 10 drops of 2M sodium hydroxide. After 1 hour, the reaction mixture was extracted with acetic acid (3 × 5.0 mL), the organic layer was dried, filtered and concentrated in vacuo to dryness. The residue was subjected to column chromatography (hexane: acetic acid = 4: 1) and 3.6 mg (94%) of 4- (4-cis-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2 , 3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 337.2 (M⁺+1).
The following compound was obtained in a similar manner as Example 3:
4- (3-N, N-dimethyl-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ2.01 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.73 (t, 2H), 2.97 (s, 6H), 4.08 (m, 2H), 6.09 (t, 1H), 7.41-7.48 (m) , 3H), 8.43 (m, 2H), 10.46 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
4- (2-Formylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 2.26 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 3.59-3.78 (m, 2H), 3.88-4.01 (m, 2H), 5.48-5.60 (m, 1H), 7.38-7.57 (m, 3H), 8.09 (s, 1H), 8.30-8.45 (m, 2H), 8.82 (s, 1H); MS (ES): 310.1 (M⁺+1).
4- (3-acetylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
[0309]
Example 4: 4- (3-tert-butyloxy-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (70.0 mg, 0.191 mmol)) Dissolved in fluoroacetic acid: dichloromethane (1: 1, 5.0 mL). The resulting solution was stirred at room temperature for 1 hour and then refluxed for 2 hours. After cooling to room temperature, the mixture was concentrated in vacuo to dryness. The residue was subjected to preparative thin film chromatography (EtOAc: hexane: AcOH = 7: 2.5: 0.5) to give 40.0 mg (68%) of 4- (3-hydroxy-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl. -2-Phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained.¹H NMR (200MHz, CD_ThreeOD) δ2.32 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 2.81 (t, 2H), 4.01 (t, 2H), 7.55 (m, 3H), 8.24 (m, 2H); MS (ES) : 311.1 (M⁺+1).
[0310]
The following compound was obtained in a similar manner as Example 4:
4- (3-Aminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 296.1 (M⁺+1), 279.1 (M-NH_Three).
[0311]
Example 5: 4- (3-hydroxy-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (50.0 mg, 0.161 mmol) was added to N, N -Dissolved in a mixture of dimethylformamide (0.50 mL), dioxane (0.50 mL) and water (0.25 mL). To this solution was added methylamine (0.02 mL, 40% weight in water, 0.242 mmol), triethylamine (0.085 mL) and N, N, N'N'-tetramethyluronium tetrafluoroborate (61.2 mg, 0.203 mmol). ) Was added. After stirring at room temperature for 10 minutes, the solution is concentrated and the residue is subjected to preparative thin film chromatography (EtOAc) to give 35.0 mg (67%) of 4- (3-N-methyl-3-oxopropyl) amino-5. 1,6-Dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.92 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.65 (t, 2H), 4.08 (t, 2H), 5.90 (t, 1H), 6.12 (m, 1H), 7.45 (m, 3H) ), 8.41 (m, 2H), 10.68 (s, 1H); MS (ES): 311.1 (M⁺+1).
The following compound was obtained in a similar manner as Example 5:
4- (2-Cyclopropanecarbonylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 350.2 (M⁺+1).
4- (2-Isobutyrylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 352.2 (M⁺+1).
4- (3-propionylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.00-1.08 (t, 3H), 1.71-2.03 (m, 4H), 2.08 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 3.263.40 (m, 2H), 3.79-3.96 (m, 2H), 5.53-5.62 (m, 1H), 6.17-6.33 (m, 1H), 7.33-7.57 (m, 3H), 8.31-8.39 (m, 2H), 9.69 (s, 1H); MS (ES) : 352.2 (M⁺+1).
4- (2-Methylsulfonylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 2.18 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.92 (s, 3H), 3.39-3.53 (m, 2H), 3.71-3.88 (m, 2H), 5.31-5.39 (m, 1H) , 6.17-6.33 (m, 1H), 7.36-7.43 (m, 3H), 8.20-8.25 (m, 2H), 9.52 (s, 1H); MS (ES): 360.2 (M⁺+1).
[0312]
Example 6: Mixture of 4-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (0.70 g, 2.72 mmol) and 1,2-diaminoethane (10.0 mL, 150 mmol) Was refluxed for 6 hours under an inert atmosphere. Excess amine was removed under vacuum and the residue was washed successively with ether and hexane to give 0.75 g (98%) of 4 (2-aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl. -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES); 282.2 (M⁺+1), 265.1 (M⁺-NH_Three).
[0313]
Example 7: 4- (2-Aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (70.0 mg, 0.249 mmol) and triethylamine in dichloromethane (2.0 mL) To a solution of (50.4 mg, 0.498 mmol) was added propionyl chloride (25.6 mg, 0.024 mL, 0.274 mmol) at 0 ° C. After 1 hour, the mixture was concentrated in vacuo and the residue was subjected to preparative thin film chromatography (EtOAc) to yield 22.0 mg (26%) of 4- (2-propionylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2. -Phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
The following compound was obtained in a similar manner as Example 7:
4- (2-N′-methylureaethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ2.13 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 3.53 (d, 3H), 3.55 (m, 2H), 3.88 (m, 2H), 4.29 (m, 1H), 5.68 (t, 1H) ), 5.84 (m, 1H), 7.42 (m, 3H), 8.36 (dd, 2H), 9.52 (s, 1H); MS (ES): 339.3 (M⁺+1).
4- (2-N′-ethylureaethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 353.2 (M⁺+1).
[0314]
Example 8: 1- (3-Dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride (41.1 mg, 0.215 mmol), dimethylaminopyridine (2.4 mg, 0.020 mmol) and pyruvic acid (18.9 mg) in dichloromethane (2.0 mL) , 0.015 mL, 0.215 mmol) was added 4- (2-aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (55.0 mg, 0.196 mmol). Added. The mixture was stirred at room temperature for 4 hours. After normal workup and then column chromatography (EtOAc), 10.0 mg (15%) 4- (2′-pyruviramidoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3- d] Pyrimidine was obtained. MS (ES): 352.2 (M⁺+1).
Example 9: Solution of 4- (2-aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (60.0 mg, 0.213 mmol) in dichloromethane (2.0 mL) Was added N-trimethylsilyl isocyanate (43.3 mg, 0.051 mL, 0.320 mmol). The mixture was stirred at room temperature for 3 hours, followed by the addition of aqueous sodium bicarbonate. After filtration through a small amount of silica gel, the filtrate was concentrated to dryness in vacuo and 9.8 mg (14%) of 4- (2-ureaethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 325.2 (M⁺+1).
[0315]
The following compound was obtained in a similar manner as Example 9:
dl-4- (2-acetylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H-NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.28-1.32 (d, J = 8Hz, 3H), 1.66 (s, 3H), 1.96 (s, 3H), 2.30 (s, 3H) 3.76-3.83 (m, 2H), 4.10-4.30 (m , 1H), 5.60-5.66 (t, J = 6Hz, 1H), 7.40-7.51 (m, 3H), 8.36-8.43 (m, 2H), 10.83 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
(R) -4- (2-acetylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.31 (d, 3H), 1.66 (s, 3H) 1.99 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.78-3.83 (m, 2H), 4.17-4.22 (m, 1H), 5.67 ( t, 1H), 7.38-7.5 (m, 3H), 8.39 (m, 2H), 10.81 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
(R) -4- (1-Methyl-2-acetylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.41 (d, 3H), 1.68 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 3.46-3.52 (br, m, 2H), 4.73 (m, 1H), 5.22 (d, 1H), 7.41-7.46 (m, 3H), 8.36-8.40 (m, 2H), 8.93 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
(S) -4- (2-acetylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.31 (d, 3H), 1.66 (s, 3H) 2.26 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 3.78-3.83 (m, 2H), 4.17-4.22 (m, 1H), 5.67 ( t, 1H), 7.38-7.5 (m, 3H), 8.39 (m, 2H), 8.67 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
(S) -4- (1-Methyl-2-acetylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.41 (d, 3H), 1.68 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 3.463.52 (m, 2H), 4.73 (m, 1H), 5.22 (d , 1H), 7.41-7.46 (m, 3H), 8.36-8.40 (m, 2H), 10.13 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
[0316]
Example 10: 4-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, dl-1-amino-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino-propane And the reaction with a mixture of dl-2-amino-1- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino-propane was carried out in the same manner as in Example 1. After reaction, dl-4- (1-methyl-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino) ethylamino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine and to obtain a mixture of dl-4- (2methyl-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino) ethylamino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, This was separated by column chromatography (EtOAc: hexane = 1: 3). The first fraction is dl-4- (1-methyl-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d It was a pyrimidine:¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.29-1.38 (m, 12H), 1.95 (s, 3H), 2.31 (s, 3H) 3.34-3.43 (m, 2H), 4.62-4.70 (m, 1H), 5.36-5.40 (d, J = 8Hz, 1H), 5.53 (br, 1H), 7.37-7.49 (m, 3H), 8.37-8.44 (m, 2H), 10.75 (s, 1H). MS 396.3 (M⁺+1); the second fraction is dl-4- (2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d It was a pyrimidine:¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.26-1.40 (m, 12H), 2.00 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.60-3.90 (m, 2H), 3.95-4.10 (m, 1H), 5.41-5.44 (d, J = 6.0Hz, 1H), 5.65 (br, 1H), 7.40-7.46 (m, 3H), 8.37-8.44 (m, 2H), 10.89 (s, 1H); MS (ES): 396.2 (M⁺+1).
The following compound was obtained in a similar manner as Example 10:
(S, S) -4- (2-acetylaminocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.43 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.83 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.30 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 3.73 (br, 1H) ), 4.25 (br, 1H), 5.29 (d, 1H), 7.43-7.48 (m, 3H), 8.35-8.40 (m, 2H), 9.05 (s, 1H).
4- (2-Methyl-2-acetylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.51 (s, 6H), 1.56 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 3.76 (d, 2H), 5.78 (t, 1H), 7.41-7.48 (m) , 3H), 7.93 (s, 1H), 8.39 (m, 2H), 10.07 (s, 1H); MS (ES): 352.3 (M⁺+1).
[0317]
Example 11: dl-4- (1-methyl-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine ( 60.6 mg, 0.153 mmol) was treated with trifluoroacetic acid (0.5 mL) in dichloromethane (2.0 mL) for 14 hours. The organic solvent was removed under vacuum until dry. The residue was dissolved in N, N-dimethylformamide (2.0 mL) and triethylamine (2.0 mL). To this solution was added acetic anhydride (17.2 mg, 0.016, 0.169 mmol) at 0 ° C. The resulting mixture was stirred at room temperature for 48 hours and then concentrated under vacuum until dry. The residue was subjected to preparative thin film chromatography (EtOAc) to give 27.0 mg (52%) of dl-4- (1-methyl-2-acetylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.38-1.42 (d, J = 8Hz, 3H), 1.69 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 2.32 (s, 3H) 3.38-3.60 (m, 2H), 4.65-4.80 (m , 1H), 5.23-5.26 (d, J = 6Hz, 1H), 7.40-7.51 (m, 3H), 8.37-8.43 (m, 2H), 10.44 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
[0318]
Example 12: In a manner similar to Example 1, 4-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (0.15 g, 0.583 mmol) and (1R, 2R)- (R, R) -4- (2-Aminocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H prepared from (-)-1,2-diaminocyclohexane (0.63 g, 5.517 mmol) -Pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was treated with triethylamine (0.726 g, 7.175 mmol) and acetic anhydride (0.325 g, 3.18 mmol) in N, N-dimethylformamide (10.0 mL) at room temperature for 2 hours. did. After the solvent was removed in vacuo, acetic acid (10.0 mL) and water (10.0 mL) were added to the residue. The mixture was separated and the aqueous layer was extracted with acetic acid (2 × 10.0 mL). The combined ethyl acetate solution is dried (MgSO_Four) And filtered. The filtrate was concentrated to dryness under vacuum and the residue was subjected to column chromatography (EtOAc: hexane = 1: 1) to 57.0 mg (26%) of (R, R) -4- (2-acetylaminocyclohexyl). Amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ1.43 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.84 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.30 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 3.72 (br, 1H) ), 4.24 (br, 1H), 5.29 (d, 1H), 7.43-7.48 (m, 3H), 8.35-8.39 (m, 2H), 8.83 (s, 1H); MS (ES): 378.3 (M⁺+1).
[0319]
Example 13: Solution of 4- (2-hydroxyethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (40.0 mg, 0.141 mmol) in pyridine (1.0 mL) To this was added acetic anhydride (0.108 g, 1.06 mmol) at 0 ° C. The mixture was stirred at room temperature for 4 hours and the solvent was removed in vacuo. The residue was subjected to preparative thin film chromatography (EtOAc: hexane = 1: 1) 32.3 mg (71%) of 4- (2-acetyloxyethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained.¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ 1.90 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 4.05 (m, 2H), 4.45 (t, 2H), 5.42 (m, 1H), 7.41-7.49 (m) , 3H), 8.42 (m, 2H), 11.23 (s, 1H).
[0320]
Example 14: Fmoc-β-Ala-OH (97.4 mg, 0.313 mmol) and oxalyl chloride (39.7 mg, 27.3 μL, 0.313 mmol) in dichloromethane (4.0 mL) with a drop of N, N-dimethylformamide added. The solution was stirred at 0 ° C. for 1 hour, followed by 4- (2-aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (80.0 mg, 0.285 mmol). And triethylamine (57.6 mg, 79.4 μL, 0.570 mmol) was added at 0 ° C. After 3 hours, the mixture was concentrated in vacuo and the residue was treated with a 20% piperidine solution in N, N-dimethylformamide (2.0 mL) for 0.5 hour. After removing the solvent under vacuum, the residue was washed with diethyl ether: hexane (1: 5) to give 3.0 mg (3a) of 4- (6-amino-3-aza-4-oxohexyl) amino-5, 6-Dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 353.2 (M⁺+1).
[0321]
Example 15: 4- (2-Aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3- in dichloromethane (4.0 mL) with 1 drop of N, N-dimethylformamide added A solution of d] pyrimidine (70.0 mg, 0.249 mmol) and succinic anhydride (27.0 mg, 0.274 mmol) was stirred at room temperature for 4 hours. The reaction mixture was extracted with 20% sodium hydroxide (3 × 5.0 mL). The aqueous solution is acidified with 3M hydrochloride to pH = 7.0. The entire mixture was extracted with acetic acid (3 × 10 mL). The combined organic solution is dried (MgSO_Four) And filtered. The filtrate was concentrated to dryness under vacuum to 15.0 mg (16%) of 4- (7-hydroxy-3-aza-4,7-dioxoheptyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H -Pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 382.2 (M⁺+1).
[0322]
Example 16: To 10 mL dimethylformamide (DMF), add 700 mg 4-cis-3-hydroxycyclopentyl) amino-2-phenyl-5,6-dimethyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine at room temperature Followed by 455 mg N-Boc glycine, 20 mg N, N-dimethylaminopyridine (DMAP), 293 mg hydroxybenzotriazole (HOBT) and 622 mg 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride Salt (EDCL) was added. The reaction mixture was stirred overnight. DMF was then removed under reduced pressure and the reaction mixture was partitioned between 20 mL acetic acid and 50 mL water. The aqueous portion was further extracted with 2 × 20 mL of acetic acid and the combined organic portions were washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated. Purification on silica gel, elution with acetic acid / hexanes gave 410 mg of the desired product: 4- (cis-3- (Nt-butoxycarbonyl-2-aminoacetoxy) cyclopentyl) amino-2-phenyl- 5,6-Dimethyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 480.2. The ester was then treated with 5% 20% trifluoroacetic acid in dichloromethane at room temperature, left overnight and then concentrated. Trituration with acetic acid gave 300 mg of an off-white solid; 4- (cis-3- (2-aminoacetoxy) cyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3 -d] pyrimidine trifluoroacetate, MS (ES) (M⁺+1) = 380.1.
[0323]
Those skilled in the art will recognize that the following compounds can be synthesized by the methods disclosed above:
4- (cis-3-hydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 323.1. 4- (cis-3- (2-aminoacetoxy) cyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidinetrifluoroacetate, MS (ES) (M⁺+1) = 380.1.
4- (3-acetamido) piperidinyl-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 364.2.
4- (2-N'-methylureapropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 353.4.
4- (2-acetamidobutyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 352.4.
4- (2-N'-methylureabutyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 367.5.
4- (2-Aminocyclopropylacetamidoethyl) amino-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 309.1.
4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (3-chlorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 342.8. 4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (3-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M-) = 327.2.
4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (4-pyridyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 310.2.
[0324]
Example 17
Embedded image

The pyrrole nitrogen of (7) (Scheme IX) was protected with di-t-butyl dicarboxylate under basic contidion to give the corresponding carbamate (22). The radical bromination of (22) was regioselectively performed to obtain bromide (23). In general, compound (23) serves as a key electrophilic intermediate for various nucleophilic coupling partners. The alkyl bromide was replaced with sodium trihydrate phenolate to obtain compound (24). Subsequent substitution of aryl chloride and removal of the t-butyl carbamaze protecting group was performed in a single step to give the desired red compound (25).
[0325]
Details of synthesis of compounds (22)-(25) according to Scheme IX
Embedded image

Di-t-butyl dicarboxylate (5.37 g, 24.6 mmol) and dimethylaminopyridine (1.13 g, 9.2 mmol) were added to a solution containing (7) (1.50 g, 6.15 mmol) and pyridine (30 mL). . After 20 hours, the reaction was concentrated and the residue was washed with CH.₂Cl₂And partitioned between water. CH₂Cl₂Separate the layers, MgSO_FourDried over, filtered and concentrated to give a black solid. Flash chromatography (SiO₂1/9 EtOAc / hexane, R_f 0.40) gave 1.70 g (80%) of a white solid (22).¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ8.50 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 6.39 (s, 1H, pyrrole-H), 2.66 (s, 3H, pyrrole-CH)_Three), 1.76 (s, 9H, carbamate-CH_Three); MS, M + 1 = 344.1; Mpt = 175-177 ° C.
[0326]
Embedded image

N-bromosuccinimide (508 mg, 2.86 mmol) and AIBN (112 mg, mmol), (22) (935 mg, 2.71 mmol) and CCl_FourTo the solution containing (50 mL). The solution was heated to reflux. After 2 hours, the reaction was cooled to room temperature and concentrated in vacuo to give a white solid. Flash chromatography (SiO₂; 1/1 CH₂Cl₂/ Hexane, R_f 0.30) gave 960 mg (84%) of a white solid (23).¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ8.52 (m, 2H, Ar-H), 7.48 (m, 3H, Ar-H), 6.76 (s, 1H, pyrrole-H), 4.93 (s, 2H, pyrrole-CH)₂Br), 1.79 (s, 9H, carbamate—CH); MS, M + 1 = 423.9; Mpt = 155-157 ° C.
[0327]
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Sodium trihydrate phenol salt (173 mg, 1.02 mmol) in CH₂Cl₂(5 mL) and bromide (23) (410 mg, 0.97 mmol) dissolved in DMF (10 mL) was added in one portion. After 2 hours, the reaction solution was washed with CH.₂Cl₂And partitioned between water. CH₂Cl₂Extracted using. Combined CH₂Cl₂The layer is washed with water and MgSO_FourDried over, filtered and concentrated to give a yellow solid. Flash chromatography (SiO₂1/6 EtOAc / hexane, R_f 0.30) gave 210 mg (50%) of a white solid (24).¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) δ8.53 (m, 2H, Ar-H), 7.48 (m, 3H, Ar-H), 7.34 (m, 2H, Ar-H), 7.03 (m, 3H, Ar-H), 6.83 (s) , 1H, pyrrole-H), 5.45 (s, 2H, ArCH₂O), 1.76 (s, 9H, carbamate-CH); MS, M⁺= 436.2.
[0328]
Embedded image

A solution containing (24) (85 mg, 0.20 mmol), N-acetylethylenediamine (201 mg, 1.95 mmol) and DMSO (3 mL) was heated to 100 ° C. After 1 hour, the temperature was raised to 130 ° C. After 3 hours, the reaction was cooled to room temperature and partitioned between EtOAc and water. The aqueous layer was extracted with EtOAc (2x). The combined EtOAc layer was washed with water and MgSO._FourDry above, filter and concentrate. Flash chromatography (SiO₂1/10 EtOH / CHCl_Three, R_f 0.25) gave 73 mg (93%) of a white foamy solid (25).¹H NMR (200MHz, DMSO-d₆) δ11.81 (br s, 1H, NH), 8.39 (m, 2H, Ar-H), 8.03 (br t, 1H, NH), 7.57 (br t, 1H, NH), 7.207.50 (m, SH, Ar-H), 6.89-7.09 (m, 3H, Ar-H), 6.59 (s, 1H, pyrrole-H), 5.12 (s, 2H, ARCH₂O), 3.61 (m, 2H, NCH), 3.36 (m, 2H, NCH), 1.79 (s, 3H, COCH_Three); MS, M⁺1 = 402.6.
[0329]
In a manner similar to Example 17, the following compound is obtained:
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6-phenoxymethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, mp 196-197 ° C .; MS (ES): 401.6 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-fluorophenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 420.1 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-chlorophenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 436.1 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-methoxyphenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 432.1 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (N-pyridin-2-one) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 403.1 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (N-phenylamino) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3] pyrimidine, MS (ES): 400.9 (M⁺+1). 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (N-methyl-N-phenylamino) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 414.8 (M⁺+1).
4- (2-N'-methylureaethyl) amino-6-phenoxymethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 416.9 (M⁺+1).
[0330]
Example 18: Adenosine A₁Antagonist synthesis
Compound 1319 and compound 1320 (Table 13 below) can be prepared by the general procedures described herein.
[0331]
Embedded image

Compound 1319 (81%)¹H-NMR (d6-DMSO) d 1.37 (m, 4H), 1.93 (m, 2H), 2.01 (m, 2H), 4.11 (brs, 1H), 4.61 (d, 1H, J = 4.4Hz), 6.59 (m, 1H), 7.09 (m, 1H), 7.21 (m, 2H), 7.49 (dd, 1H, J = 8Hz, 14Hz), 8.03 (m, 1H), 8.18 (d, 1H, J = 8Hz) 11.55 (brs, 1H). MS (ES): 327.0 (M⁺+1).
Compound 1320 (31%) MS (ES): 343.1 (M⁺+1).
[0332]
Example 19: Adenosine A₁Antagonist synthesis
Compound 1321 (Table 13 below) can be synthesized by the following general procedure.
[0333]
Embedded image

Compound 28 (10.93 g, 50.76 mmol) was dissolved in DMF (67 mL). 4-Amidinopyridine hydrochloride (8.0 g, 50.76 mmol) and DBU (15.4 g, 101.5 mmol) were added in succession and the reaction was heated to 85 ° C. After 22 hours, the reaction was cooled to room temperature and DMF was removed in vacuo. The dark oil was diluted with 2M HCl (80 mL). The reaction was allowed to settle. After 2 hours, the solution was cooled to 10 ° C. and filtered. The solid was washed with cold water and dried to give 7.40 g of a yellow solid solid, compound 29 (69%).¹H-NMR (200MHz, d₆-DMSO) d 6.58 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 8.53 (d, 2H, J = 5.6), 9.00 (d, 2H, J = 5.2Hz), 12.35 (brs, 1H). MS (ES): 212.8 (M⁺+1).
Compound 29 (7.4 mmol, 29.8 mmol) was added to POCl_ThreeAnd diluted to 105 ° C. After 18 hours, the reaction was cooled to room temperature and POCl_ThreeAre removed under vacuum. The dark dark oil is diluted with MeOH (75 mL) followed by ether (120 mL). The amorphous red solid is filtered and washed with ether to give 3.82 g of a red solid. The crude solid has a purity of about 80% and is used in the next reaction without further purification. MS (ES): 230.7 (M⁺+1).
Compound 1321¹H-NMR (15%) (200MH, d-DMSO) d 1.38 (m, 4H), 1.92 (brs, 2H), 2.02 (brs, 2H), 3.44 (brs, 1H), 4.14 (brs, 1H), 4.56 (d, 1H, J = 4Hz), 6.63 (m, 1H), 15 (m, 1H), 7.32 (d, 1H, J = 6.2Hz), 8.20 (d, 2H, J = 4.4Hz), 8.65 (d, 2H, J = 4.4Hz), 11.67 (brs, 1H). MS (ES): 310.2 (M⁺+1).
Compound 1501 (Table 15 below)¹H-NMR (70%) (200 MHz, CD_ThreeOD) d 1.84 (s, 3H), 3.52 (t, 2H, J = 6.0Hz), 3.83, t, 2H, J = 6Hz), 6.51 (d, 1H, J = 3.4Hz), 7.06 (d, 1H , J = 3.8Hz), 7.42 (m, 3H), 8.36 (m, 2H). MS (ES): 296.0 (M⁺+1).
[0334]
Compound 1502 (Table 15 below) MS (ES): 345.0 (M⁺+1).
Compound 1500 (Table 15 below)¹H-NMR (200MHz, CDCl_Three) d 1.40-1.80 (m, 6H), 1.85-2.10 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.50 (d, 3H), 3.90-4.10 (m, 2H), 4.76 (m, 1H), 5.50 (d, 1H), 6.03 (m, 1H), 7.40 (m, 3H), 8.37 (m, 2H), 9.15 (brs, 1H). MS (ES): 393.3 (M⁺+1).
[0335]
Example 20: Adenosine A₁Antagonist synthesis
Compound 1504 (Table 15 below) can be synthesized by the following general procedure.
[0336]
Embedded image

Compound 31 (200 mg, 0.47 mmol) was dissolved in DCM (4 mL). Triethylamine (51 mg, 0.5 mmol) and thiomorpholine (52 mg, 0.5 mmol) were added sequentially. The solution was mixed for several minutes and allowed to stand for 72 hours. React the reactants with DCM and H₂Dilute with O and separate the layers. The aqueous layer was extracted with DCM. Combined DCM layer is MgSO_FourDry above, filter and concentrate. Ethyl ether was added to the crude sample and the resulting solid was filtered to give 100 mg of a white solid, 32 (62%).¹H NMR (200MHz, CDCl_Three) d1.76 (s, 9H), 2.66 (brs, 2H), 2.79 (brs, 2H), 3.86 (s, 2H), 7.46 (m, 3H), 8.50 (m, 2H).
[0337]
Compound 32 was combined with DMSO (3 mL) and trans-4-aminocyclohexanol (144 mg, 1.25 mmol) and heated to 130 ° C. for 4 hours. The reaction is cooled to room temperature, EtOAc and H₂Diluted with O. The layers were separated and the aqueous layer was extracted with EtOAc (2x). Combined organic layer with H₂Wash with O and brine, MgSO_FourDry above, filter and concentrate. Chromatography (silica, 8: 1 CHCl_Three/ EtOH) to give 32 mg of a tan oil. Ethyl ether was added and the resulting solid was filtered to give 5 mg of a white solid (9%). OSIC-148265:¹H-NMR (200MHz, CD_ThreeOD): d1.44 (brm, 4H), 2.03 (brm, 2H), 2.21 (brm, 2H), 2.70 (brm, 8H), 3.63 (m, 4H), 3.92 (m, 1H), 4.26 (brs) , 1H), 6.42 (s, 1H), 7.42 (m, 3H), 8.33 (m, 2H).
[0338]
Example 21: Synthetic adenosine A1 antagonist
Compound 1503 (Table 15 below) can be prepared by the general procedure shown below.
[0339]
Embedded image

The bromide, compound 31 (220 mg, 0.47 mmol) was dissolved in 1: 1 DMF: dichloromethane (5 mL). K₂CO_Three(71 mg, 0.52 mmol) and morpholine (0.047 mL, 0.47 mmol) were added. The mixture was stirred at room temperature overnight. The solvent is removed under vacuum and the residue is washed with H₂Partitioned between O and dichloromethane. MgSO organic layer_Four, Filtered and concentrated to an off-white solid that was triturated with ether / hexanes to give 175 mg of a white solid, 33 (84%).¹H-NMR (200MHz, CDCl_Three): (1.9 (9H, s), 2.54 (4H, s), 3.65 (4H, s), 3.85 (1H, s), 6.59 (1H, s), 7.45 (3H, m), 8.5 (2H, m ).
[0340]
Compound 33 (50 mg, 0.11 mmol) and trans-4-aminocyclohexanol (105 mg, 0.91 mmol) were taken up in DMSO (2 mL). N was added to the resulting solution.₂Was then sparged and then heated to 100 ° C. in an oil bath and stirred overnight. The crude reaction mixture was poured into water and extracted twice with acetic acid (50 mL). Combined organic layer with H₂Washed with O. MgSO_FourAfter drying with and filtering, the organic layer was concentrated in vacuo to give an orange solid. Chromatography (silica, CH₂Cl₂10% CH in₂OH) to give 15 mg (33%).¹H-NMR (200MHz, CDCl_Three): (1.24-1.62 (4H, m), 1.85 (2H, m), 2.10 (2H, m), 2.26 (4H, m), 3.53 (4H, m), 4.22 (1H, m), 4.73 (1H) , M), 5.85 (1H, d), 6.15 (1H, s), 7.25 (3H, m), 8.42 (2H, M), 10.0 (1H, s) MS (ES): 408 (M⁺+1).
Similar to the preparation step of Example 20, compounds 1500, 1501 and 1502 can be prepared by treating compound 32 with an appropriately substituted amine.
[0341]
Human adenosine A ₁ And A _2a Receptor Yeast β-Galactosidase Reporter Gene Assay: Yeast strain (S. cerevisiae) is human adenosine A₁(A₁R: CADUS strain CY12660) or human A_2a(A_2aAnd transformed with CADUS strain CY8362), and a lacZ (β-galactosidase) reporter gene was added so that the function could be measured. A description of this transformation is listed below (see yeast strains). A₁And A_2aNECA (5'-N-ethylcarboxamide adenosine), a potent adenosine receptor agonist with approximately the same affinity for the receptor, was used as the ligand in all assays. Test compounds were tested at 8 concentrations (0.1-10,000 nM) to determine whether NECA-induced β-galactosidase activity could be inhibited by CY12660 or CY8362.
[0342]
Yeast stock culture preparation: Yeast strains CY12660 and CY8362 were each streaked on LT agar plates and incubated at 30 ° C. until colonies were observed. Yeasts collected from these colonies were added to LT solution (pH 6.8) and grown overnight at 30 ° C. Next, each yeast strain was measured with a spectrophotometer (Molecular Devices VMAX) and OD₆₀₀= 1.0-2.0 (about 1-2 × 10⁷Cells / mL). To each 6 mL yeast culture, 4 mL 40% glycerol (1: 1.5 volume: volume) was added (“yeast / glycerol stock culture”). Ten 1 mL aliquots were prepared from this yeast / glycerol stock culture and stored at −80 ° C. until needed for the assay.
[0343]
Yeast A₁R and A_2aR assay: Thaw one bottle each of CY8362 and CY12660 yeast / glycerol stock cultures, supplemented LT medium with pH 6.8 (5 mL 40% glucose, 0.45 mL 1 M KOH, and 2.5 mL Pipes pH 6.8). 92 mL of LT solution to which was added). The culture was grown at 30 ° C. for 16-18 hours (overnight). An aliquot of the culture grown overnight is then diluted with LT medium containing 4 U / mL of adenosine deaminase (type VI or VII from calf intestinal mucosa, Sigma) and OD with CY8362 (A2aR).₆₀₀= 0.15 (1.5 × 10⁶Cells / mL), CY12660 (A₁R) at OD₆₀₀= 0.50 (5 x 10⁶Cells / mL).
[0344]
The assay was performed in a final volume of 100 μL in a 96 well macrotiter plate so that the final concentration in all wells was 2% DMSO. For primary screening, test compounds at 1-2 concentrations (10 uM, 1 μM) were utilized. The compounds were tested at 8 concentrations (10000, 1000, 500, 100, 50, 10, 1 and 0.1 nM) for further screening. In each microtiter plate, 10 uL of 20% DMSO was added to the “control” and “Total” wells, while 10 uL of test compound (in 20% DMSO) was added to the “unknown” wells. Subsequently, 10 uL of NECA (A₁R is 5uM, A2_aRWas added to the “total” and “unknown” wells. Meanwhile, 10 uL PBS was added to the “control” well. Finally, 80 uL of yeast strain CY8362 or CY12660 was added to all wells. All plates were then agitated briefly (2-3 minutes on a LabLine orbital shaker) and incubated for 4 hours at 30 ° C. in a drying oven.
[0345]
Β-galactosidase activity can be quantified using a colorimetric method (eg, ONPG, CPRG), a luminescence method (eg, Galacton-Star), or a fluorescent substrate (eg, FDG, resorufin). At present, fluorescence detection is preferred because of its high signal / noise ratio, relatively low interference and low cost. Fluorescein digalactopyranoside (FDG, MolecuLar Probes or Marker Gene Technologies), a fluorescent β-galactosidase substrate, was added to all wells at 20 uL / well (final concentration = 80 uM). The plate was shaken for 5-6 seconds (LabLine orbital shaker) and then incubated at 37 ° C. for 90 minutes (95% O₂/ 5% CO₂Incubator). At the end of the 90 minute incubation period, 20 uL / well of 1 M Na₂CO₃Was used to suppress β-galactosidase activity and all plates were shaken for 5-6 seconds. The plates were then stirred for 6 seconds and the relative fluorescence intensity was measured using a fluorimeter (Tecan Spectrafluor; excitation = 485 nm, emission = 535 nm).
[0346]
Calculation: Relative fluorescence values of “control” wells were considered background and subtracted from “total” and “unknown” values. Analyze compound characteristics by logarithmic transformation (x-axis: compound concentration), then IC using one site competition curve fitting₅₀Values were calculated (GraphPad Prism).
[0347]
Yeast strain: Saccharomyces cerevisiae strain CY12660 [far1 * 1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14 :: trp1 :: LYS2 ste3 * 1156 gpa1 (41) -Gαi3 lys2 ura3 leu2 trp1: his3; LEU2 PGKp-Mfα1 leader-hA1R 2mu-orig REP3 Ampr] and CY8362 [gpa1p-rGαsE10K far1 * 1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14 :: trp1: LYS2 ste3 * 1156 lys2 ura3 leu2 trp1 his3; LEU2 PGKp-hA2aR 2mu-ori REP3 Ampr] It was.
[0348]
LT medium: LT (Leu-Trp supplemented) medium consists of 100 g DIFCO yeast nitrogen basal medium supplemented with: 1.0 g valine, 1.0 g aspartic acid, 0.75 g phenylalanine, 0.9 g lysine, 0.45 g tyrosine, 0.45 g isoleucine, 0.3 g methionine, 0.6 g adenine, 0.4 g uracil, 0.3 g serine, 0.3 g proline, 0.3 g cysteine, 0.3 g arginine, 0.9 g histidine, And 1.0 g threonine.
[0349]
Human A ₁ Construction of yeast strain expressing adenosine receptor
In this example, human A functionally incorporated into the yeast pheromone system pathway.₁The construction of a yeast strain expressing an adenosine receptor will be described.
[0350]
I. Construction of expression vector
Human A₁To construct a yeast expression vector for adenosine receptors,₁A1 by reverse transcriptase PCR of human hippocampal mRNA using primers and standard techniques designed based on the published sequence of the adenosine receptor.₁Adenosine receptor cDNA was obtained. This PCR product was subcloned into the NcoI and XbaI sites of the yeast expression plasmid pMP15.
[0351]
The pMP15 plasmid was prepared from pLPXt as follows. XbaI site of YEP51 (M. Inouye, Ed. Experimental Manipuation of Gene Expression. Academic Press, New York, Broach, JR et al. (1983) “Vectors for high-level, inducible expression of cloned genes in yeast” 83-117) was digested, the ends were blunted and removed by religation to produce Yep51NcoDXba. Another XbaI site was created at the BamHI site to generate YEP51NcoXt by digestion with BamHI, blunting, ligation of linkers (New England Biolabs, # 1081), XbaI digestion, and religation. This plasmid was digested with Esp31 and NcoI and ligated to the Leu2 and PGKp fragments generated by PCR. This 2 kb Leu2 PCR product was generated by amplification from YEP51Nco using primers containing Esp31 and BglII sites. A 660 base pair PGKp PCR product was obtained from pPGKαs (Kang, Y.-S. et al. (1990) Mol. Cell. Biol. Using PCR primers containing BglII and NcoI sites.Ten: 2582 to 2590). The resulting plasmid is called pLPXt. The coding region of the a-factor prepro leader was inserted into the NcoI site to modify pLPXt. This prepro leader was inserted such that the NcoI cloning site was retained at the 3 'end of the leader and not regenerated at the 5' end. Thus, the receptor can be cloned by digesting the plasmid with NcoI and XbaI. The resulting plasmid is called pMP15.
[0352]
Human A₁This pMP15 plasmid into which the adenosine receptor cDNA is inserted is designated p5095. In this vector, this receptor cDNA is fused to the 3 'end of a yeast a-factor prepro leader. During protein maturation, this prepropeptide sequence is cleaved to produce the mature full-length receptor. This occurs while this receptor is processed via the yeast secretory pathway. This plasmid is maintained by Leu selection (ie, growth on medium lacking leucine). The sequence of this cloned coding region was determined and found to be equivalent to that of the published literature (GenBank accession numbers S45235 and S56143).
[0353]
II. Construction of yeast strain
Human A₁To create a yeast strain that expresses the adenosine receptor, yeast strain CY7967 was used as the first parental strain. The genotype of CY7967 is as follows: MATα gpaD1163 gpa1 (41) Gαi3 far1D1442 tbt-1 FUS1-HIS3 can1 ste14 :: trp1 :: LYS2 ste3D1156 lys2 ura3 leu2 trp1 his3
These genetic markers are outlined below:
MATa …… Mating type a
gpa1D1163... Endogenous yeast G-protein GPA1 is deleted.
gpa1 (41) Gαi3 …… gpa1 (41) -Gai3 was integrated into the yeast genome. This chimeric Ga protein is composed of the first 41 amino acids of the endogenous yeast Ga subunit GPA1 fused to the mammalian G-protein Ga3 lacking the cognate N-terminal amino acid.
far1D1442 ... FAR1 gene (causing cell cycle arrest) is deleted (this prevents cell cycle arrest due to activation of the pheromone response pathway).
tbt-1 …… A strain with high transformation efficiency by electroporation.
FUS1-HIS3: Fusion of FUS1 promoter and HIS3 coding region (this creates a pheromone-inducible HIS3 gene).
can 1 ... arginine / canavanine permease.
ste14 :: trp1 :: LYS2 ... Gene disruption of STE14, which is a C-farnesylmethyltransferase (this reduces basic information transmission via the pheromone pathway).
ste3D1156 ... Endogenous yeast STR, a-factor pheromone receptor (STE3) is destroyed.
lys2 ............ 2-amino adipate reductase is deficient. Lysine is required for yeast to grow.
ura3 ............ Orotidine-5'-phosphate decarboxylase is deficient. Uracil is required for yeast to grow.
[0354]
leu2 ............ b-isopropylmalate dehydrogenase is deficient. Leucine is required for yeast to grow.
trp1 ............ phosphoribosylanthranilic acid is deficient. Tryptophan is required for yeast to grow.
his3 ………… Imidazoleglycerol phosphate dehydrogenase is deficient. Histidine is required for yeast to grow.
Two plasmids were transformed into strain CY7967 by electroporation: plasmid p5095 (human A₁Plasmid p1584 which encodes the adenosine receptor; above) and is a FUS1-β-galactosidase reporter gene plasmid. Plasmid p1584 is the plasmid pRS426 (Christianson, T.W. et al. (1992) Gene110: 119-1122). Plasmid pRS426 contains a polylinker site at nucleotides 2004-2016. A fusion of the FUS1 promoter and β-galactosidase gene was inserted into restriction sites EagI and XhoI to create plasmid p1584. The p1584 plasmid is maintained by Trp selection (ie, growth on medium lacking leucine).
[0355]
The resulting strain with p5095 and p1584 is called CY12660 and is human A₁Expresses adenosine receptors. A minimal medium lacking leucine and tryptophan was used to grow this strain in liquid or on agar plates. In order to perform the proliferation assay on the plate (assay FUS1-HIS3), the plate is at pH 6.8 and 0.5-2.5 mM 3-amino-1,2,4-triazole is added. Contained and lacked leucine, tryptophan, and histidine. As a control for specificity, a comparison with one or more other yeast-based seven-transmembrane receptor screens was included in all experiments.
[0356]
Human A _2a Construction of yeast strain expressing adenosine receptor
In this example, human A functionally incorporated into the yeast pheromone system pathway._2aThe construction of a yeast strain expressing an adenosine receptor is described.
[0357]
I. Construction of expression vector
To construct a yeast expression vector for the human A2a adenosine receptor, human A2a receptor cDNA was obtained from Dr. Phil Murphy (NIH). Upon receipt of this clone, the sequence of its A2a receptor insert was determined and found to be identical to the published sequence (GenBank Accession # S46950). This receptor cDNA was excised from the plasmid by PCR using VENT polymerase and cloned into plasmid pLPBX, which expresses the receptor in yeast with a constitutive phosphoglycerate kinase (PGK) promoter. The sequence of this entire insert was determined again and found to be identical to the published sequence. However, due to the cloning method used, 3 amino acids of GlySerVal were added to the carboxy terminus of the receptor.
[0358]
II. Construction of yeast strain
To create a yeast strain that expresses the human A2a adenosine receptor, yeast strain CY8342 was used as the starting parental strain. The genotype of CY8342 is as follows: MATa far1D1442 tbt1-1 lys2 ura3 leu2 trp1 his3 fus1-HIS3 can1 ste3D1156 gpaD1163 ste14 :: trp1 :: LYS2 gpa1p-rG_{α s}E10K (or gpa1p-rG_{α S}D229S or gpa1p-rG_{α S}E10K + D229S).
[0359]
These genetic markers are as described in Example 1 except for the G-protein mutation. In human A2a receptor expression, the endogenous yeast G protein GPA1 is deleted and mammalian G_αsA yeast strain substituted with was used. 3 rats G_αsMutants were utilized. These mutants contain one or two point mutations that convert these mutants into proteins that bind efficiently to yeast βγ. These mutants are G (the 10th glutamic acid is replaced by lysine) G_αSE10K, (229th aspartic acid is replaced by serine) G_αSD2295, and G (including both point mutations)_αSIdentified as E10K + D229S.
[0360]
(Three mutant rats G_αSStrain CY8342, which has one of the proteins), the parent vector pLPBX (receptor)⁻) Or pLPBX-A2a (receptor⁻). A plasmid having the FUS1 promoter fused to the β-galactosidase coding sequence (above) was added to evaluate the activity of the pheromone response pathway.
[0361]
Human A ₁ Functional assays using yeast strains expressing adenosine receptors
In this example, human A₁The development of functional screening assays in yeast for modulators of adenosine receptors is described.
[0362]
I. Ligand used in the assay
Adenosine, a natural agonist for this receptor, as well as two other synthetic agonists were utilized in the development of this assay. EC₅₀Was reported to be about 75 nM, and (−)-N6- (2-phenylisopropyl) -adenosine (PIA), reported to have an affinity of about 50 nM, was used in some experiments. . 5'-N-ethylcarboxamide adenosine (NECA) was used for all proliferation assays. Adenosine deaminase (4 U / mL) was added in all assays to prevent signaling due to the presence of adenosine in the growth medium.
[0363]
II. Biological response in yeast
A series of yeast strains expressing various G protein subunits₁Introducing a receptor expression vector (p5095 above)₁The functional binding ability of adenosine receptors was evaluated. Most of these transformants are G_α1Or G_α0Subtype G_αThe subunit was expressed. Whether additional promiscuous receptor-Gα protein couplings are identified_αProteins were also tested. In various strains, STE18 or chimeric STE18-Gγ2 constructs were integrated into the yeast genome. This yeast strain has a defective HIS3 gene and an integrated copy of FUS1-HIS3, thereby containing 3-amino-1,2,4-triazole (tested at 0.2, 0.5, and 1.0 mM) Selection on a selective medium lacking histidine becomes possible. Transformants were isolated and monolayers were prepared on medium containing 3-amino-1,2,4-triazole, 4 U / mL adenosine deaminase and lacking histidine. 5 μL of various concentrations of ligand (eg, 0, 0.1, 1.0, and 10 mM NECA) were used. Growth was monitored for 2 days. Thus, ligand-dependent growth responses were tested in various yeast strains. The results are summarized in Table 1 below. The symbol (−) indicates that no ligand-dependent receptor activity was detected, while (+) means a ligand-dependent response. The term “LIRMA” refers to activation mediated by a ligand independent receptor.
[0364]
[Table 3]

As shown in Table 3, the strongest communication is GPA.₁(41) -G_αi3It has been found to occur in yeast strains expressing the chimera.
[0365]
III. fus1-LacZ assay
To characterize the pheromone response pathway activity more completely, β-galactosidase synthesis by fus1LacZ in response to agonist stimulation was measured. To perform a β-galactosidase assay, Ste18-Gγ2 chimera and GPA₄₁-G_αi3Human A in logarithmic phase expressed in yeast strains co-expressing₁Increasing concentrations of ligand were added to the adenosine receptor culture. Transformants were isolated and grown overnight in the presence of histidine and 4 U / mL adenosine deaminase. After 5 hours incubation with 4 U / mL adenosine deaminase and ligand, whether β-galactosidase was induced was determined using CPRG as a substrate for β-galactosidase. 5 x 10 per assay⁵Cells were used.
[0366]
The result obtained by stimulation with NECA is 10^-8It was shown that β-galactosidase activity was stimulated approximately 2-fold at M NECA concentrations. Also, NECA concentration 10^-5In M, a stimulation index (stimuation index) of about 10 times was observed.
[0367]
Confirming the activity of antagonists against this strain expanded the range of use of this assay. Two known adenosine antagonists XAC and DPCPX were tested for their ability to compete with NECA (at 5 mM) in a β-galactosidase assay. In these assays, the induction of β-galactosidase is 1.6 × 10 6 per assay using FDG as a substrate.⁵The cells were measured. As a result, both XAC and DCPPX are expressed by yeast.₁Acts as a powerful adenosine receptor antagonist, IC₅₀Values were shown to be 44 nM and 49 nM, respectively.
[0368]
This inhibitory effect is A₁To determine if it is specific for a subtype, a series of supplementary experiments were performed on yeast-based A (described in Example 4)_2aPerformed by receptor assay. A_2aFrom the results obtained in the yeast-based assay, XAC is relatively effective A_2aIt was a receptor antagonist and was shown to be consistent with previous reports. In contrast, DCPPX was relatively inactive for this receptor as expected from previous reports.
[0369]
IV. Radioligand binding
A₁The characteristics of the adenosine receptor assay were further clarified by measuring the radioligand binding parameters of the receptor. With several adenosine receptor reference compounds XAC, DCPPX, and CGS [³H] For substitution of CPX binding, human A₁Analysis was performed using membranes prepared from yeast expressing adenosine receptors. Human A₁The results of using the yeast membrane expressing the adenosine receptor were compared with the results obtained from the yeast membrane expressing the human A2a adenosine receptor or the human A3 receptor to examine the specificity of the binding. To perform this assay, 50 mg of membrane was added to 0.4 nM [³Incubated with H] CPX and increasing concentrations of adenosine receptor ligand. Incubation was performed at 50 mM Tris-HCl, pH 7.4, 1 mM EDTA, 10 mM MgCl.₂In 0.25% BSA and 2 U / mL adenosine deaminase in the presence of protease inhibitors at room temperature for 60 minutes. Ice-cold 50 mM Tris-HCl, pH 7.4 + 10 mM MgCl₂Was added to stop binding and then quickly filtered through a GF / B filter pre-stained with 0.5% polyethyenimine using a Packard 96 well harvester. Data was analyzed by nonlinear least square curve fitting method using Prism 2.01 software. IC obtained in this experiment₅₀The values are summarized in Table 4 below.
[0370]
[Table 4]

These data indicate that the reference compound has an affinity that is consistent with the affinity reported in the literature. Furthermore, this data shows that this yeast-based assay is sensitive enough to discriminate receptor subtype specificity.
[0371]
Functional assay using yeast strains expressing the human A2a adenosine receptor
In this example, human A₁The development of an assay for functional screening of adenosine receptor modulators in yeast is described.
[0372]
I. Ligand used in the assay
The natural ligand adenosine, as well as other well-characterized commercial ligands, were used for the analysis of the human A2a receptor functionally expressed in yeast. Three ligands were used to establish this assay. The ligands are as follows.
[0373]

Adenosine deaminase (4 U / mL) was added in all assays to prevent signaling due to the presence of adenosine in the growth medium.
[0374]
II. Biological response in yeast
Transformed with an A2a receptor expression plasmid,_αSE10K, G_αSD229S or G_αSA2a receptor agonists were tested for their ability to stimulate the pheromone response pathway in yeast expressing either E10K + D229S. The ability of receptor-dependent ligands to stimulate the pheromone response pathway was demonstrated by changes in the yeast phenotype. When the receptor was activated, the phenotype changed from a histidine requirement to a histidine prototrophy (activation of fus1-HIS3). Three separate transformants were isolated and grown overnight in the presence of histidine. Wash cells to remove histidine, 2 × 10⁶Dilute to cells / mL. 5 μL of each transformant was spotted on non-selective medium (containing histidine) or selective medium (1 mM AT) in the absence or presence of 4 U / mL adenosine deaminase. Plates were grown at 30 ° C. for 24 hours. In the presence of histidine, the receptor⁺(R⁺) And receptors⁻(R⁻) All of the strains were able to grow. However, in the absence of histidine, R⁺Only cells grew. Since no ligand was added to these plates, there were two possible explanations for this result. One possible interpretation is that yeast with this receptor was favored for growth because of ligand-independent receptor-mediated activation (LIRMA). According to another interpretation, the yeast was able to synthesize the ligand adenosine. To discriminate between these two possibilities, adenosine deaminase (ADA), an enzyme that degrades this ligand, was added to growing yeast and plates. In the presence of adenosine deaminase, R⁺The cells no longer grew in the absence of histidine, indicating that this yeast actually synthesizes the ligand.
[0375]
This interpretation was confirmed by A2a proliferation assay in fluid. In this experiment, R⁺Yeast (G expressing A2a receptor_αSE10K strain) in three different densities (1 × 10⁶Cells / mL, 3 × 10⁵Cells / mL, or 1 × 10⁵Cells / mL) in the presence or absence of adenosine deaminase (4 U / mL). As the concentration of 3-amino-1,2,4-triazole (AT), a competitive antagonist of imidazoleglycerol-P dehydratase, the protein product of the HIS3 gene, increases (0, 0.1, 0.2, Or 0.4 mM), increasing the stringency of the assay. Growth was weakened in the presence of adenosine deaminase and 3-amino-1,2,4-triazole yeast. However, in the absence of 3-amino-1,2,4-triazole, adenosine deaminase had little effect. Thus, adenosine deaminase itself did not have a direct effect on the pheromone response pathway.
[0376]
Another technique for measuring proliferation, which can be miniaturized for high-throughput screening, is the A2a receptor ligand spot assay. Expresses the A2a receptor (A2aR +) or lacks this receptor (R−) G_αsThe E10K strain was grown overnight in the presence of histidine and 4 U / mL adenosine deaminase. Wash cells to remove histidine, 5x10⁶Dilute to cells / mL. 1 × 10⁶Cells were plated on selective plates containing 4 U / mL adenosine deaminase and 0.5 or 1.0 mM 3-amino-1,2,4-triazole (AT) and dried for 1 hour. 5 μL of the following reagents were applied to this monolayer: 10 mM adenosine, 38.7 mM histidine, dimethyl sulfoxide (DMSO), 10 mM PIA or 10 mM NECA. Cells were grown for 24 hours at 30 ° C. As a result, cells without receptors could only grow when histidine was added to the medium. In contrast, R⁺Only cells grew in areas interspersed with A2a receptor ligands PIA and NECA. Since this plate contains adenosine deaminase, it was confirmed that adenosine deaminase was active because it did not grow when adenosine was scattered.
[0377]
III. fus1 LacZ assay
In order to quantify the activity of the yeast mating pathway, the synthesis of β-galactosidase by fus1LacZ was measured. G_αSE10K, G_αSD229S or G_αSYeast strains expressing E10K + D229S were transformed with a plasmid encoding the human A2a receptor (R +) or a plasmid lacking the receptor (R−). Transformants were isolated and grown overnight in the presence of histidine and 4 U / mL adenosine deaminase. 1 × 10⁷1 × 10 cells⁶Diluted to cells / mL and exposed to increasing concentrations of NECA for 4 hours, after which β-galactosidase activity in the cells was measured. As a result, β-galactosidase activity is essentially not detected in the R-strain, while G_αSE10K, G_αSD229S or G_αSIn R + strains expressing any of E10K + D229S, it was shown that an increase in the amount of β-galactosidase activity was detected with an increase in the concentration of NECA, which indicates that the amount of β-galactosidase detected is a high concentration ligand It was shown to increase depending on the dose in response to exposure to. This dose dependence was observed only in cells expressing the A2a receptor. It is also the most potent G against A2a receptor_αsThe structure is G_αsE10K. G_αSThe D229S construct is the second strongest G for the A2a receptor_αsA construct, G_αsThe E10K + D229S construct is the 3 G tested_αsAlthough the weakest of all, this construct nevertheless stimulated an easily detectable amount of β-galactosidase activity.
[0378]
For a more detailed description of the confirmed assay, see US patent application Ser. No. 09/088985, “Functional Expression of Adenosine Receptors in Yeast” filed Jun. 2, 1998 (Attorney Docket No. CPI-093). The entire contents of which are incorporated herein by reference).
[0379]
Pharmacological characterization of the human adenosine receptor subtype
Materials and methods
Material [³H] -DPCPX [cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine, 8- [dipropyl-2,3-³H (N)] (120.0 Ci / mmol);³H] -CGS 21680, [carboxyethyl-³H (N)] (30 Ci / mmol) and [¹²⁵I] -AB-MECA ([¹²⁵I] -4-aminobenzyl-5'-N-methylcarboxamide adenosine) (2,200 Ci / mmol) was purchased from New England Nuclear (Boston, MA). XAC (xanthineamine congener); NECA (5'-N-ethylcarboxamide adenosine); and IB-MECA were purchased from Research Biochemicals International (RBI, Natick, Mass.). Adenosine deaminase and complete protease inhibitor cocktail tablets were purchased from Boehringer Mannheim Corp. (Indianapolis, IN). A membrane derived from HEK-293 cells stably expressing human adenosine 2a [RB-HA2a]; adenosine 2b [RB-HA2b] or adenosine 3 [RB-HA3] receptor subtypes, Receptor Biology (Beltsville, MD), respectively. Purchased from. Cell culture reagents were purchased from Life Technologies (Grand Island, NY) except serum was purchased from Hyclone (Logan, UT).
[0380]
Yeast strain: Saccharomyces cerevisiae strain CY12660 [far1 * 1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14 :: trp1 :: LYS2 ste3 * 1156 gpa1 (41) -Gαi3 lys2 ura3 leu2 trp1: his3; LEU2 PGKp-Mfα1 HO5R5 2mu-orig REP3 Ampr] and CY8362 [gpa1p-rGαsE10K far1 * 1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14 :: trp1: LYS2 ste3 * 1156 lys2 ura3 leu2 trp1 his3; LEU2 PGKp-hA2aR 2mu-ori REP3 Ampr Was generated.
[0381]
Culture yeast: The transformed yeast was grown in Leu-Trp [LT] medium (pH 5.4) supplemented with 2% glucose. To prepare the membrane, 1-2 × 10 5 obtained from 30 mL overnight growth in 250 mL LT medium.⁶Initial titers of cells / mL were inoculated and incubated at 30 ° C. under continuous oxidation with agitation. After 16 hours of growth, cells were collected by centrifugation and membranes were prepared as follows.
[0382]
Mammalian cultured tissues: HEK-293 cells stably expressing the human adenosine 2a receptor subtype (Cadus clone # 5) in Dulbecco's minimal essential medium (DMEM supplemented with 10% fetal bovine serum and 1 × penicillin / streptomycin) ) Under selective pressure with 500 mg / mL G418 antibiotics under humidified 5% CO₂Grow at 37 ° C. in atmosphere.
[0383]
Yeast cell membrane preparation: 250 mL cultures were incubated overnight and then collected by centrifugation at 2,000 × g using a Sorvall RT6000 centrifuge. The cells are washed with ice-cold water, centrifuged at 4 ° C., and the pellet is added with 10 mL ice-cold lysis buffer [5 mM Tris-HCl, pH 7.6 supplemented with protease inhibitor cocktail tablets (1 tablet per 25 mL buffer). 5; 5 mM EDTA, and 5 mM EGTA]. Glass beads (17 g, 400-600 mesh, Sigma) were added to this suspension and the cells were crushed by vigorous stirring at 4 ° C. for 5 minutes. The homogenate was diluted by adding 30 mL lysis buffer + protease inhibitor and centrifuged at 3,000 × g for 5 minutes. Subsequently, the membrane was pelletized with 36,000 × g (Sorvall RC5B, type SS34 rotor) for 45 minutes. The resulting membrane pellet was added to 5 mL membrane buffer [50 mM Tris-HCl, pH 7.5; 0.6 mM EDTA; and 5 mM MgCl] supplemented with protease inhibitor cocktail tablets (1 tablet per 50 mL buffer).₂] And then stored at -80 ° C for subsequent experiments.
[0384]
Preparation of mammalian cell membranes: HEK-293 cell membranes were prepared as previously described (Duzic E et al., J. Biol. Chem., 267, 9844-9852, 1992). Briefly, cells were washed with PBS and collected with a rubber policeman. Cells were pelleted at 200 × g at 4 ° C. using a Sorvall RT6000 centrifuge. The pellet was 4 in 5 mL / m lysis buffer (5 mM Tris-HCl, pH 7.5; 5 mM EDTA; 5 mM EGTA; 0.1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, 10 mg / mL pepstatin A; and 10 mg / mL aprotinin). The suspension was resuspended at 0 ° C. and homogenized with a dance homogenizer. The cell lysate was then centrifuged at 36,000 × g (Sorvall RC5B, type SS34 rotor) for 45 minutes and the pellet was washed with 5 mL membrane buffer [50 mM Tris-HCl, pH 7.5; 0.6 mM EDTA. ; 5 mM MgCl₂Resuspended in 0.1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, 10 mg / mL pepstatin A; and 10 mg / mL aprotinin) and stored at −80 ° C. for subsequent experiments.
[0385]
Total protein concentrations in yeast and mammalian membranes were measured using a Bio-Rad protein assay kit based on the Bradford dye binding method (Bradford, M .: Anal. Biochem. 72: 248 (1976)).
[0386]
Adenosine 1 receptor subtype saturation and competitive radioligand binding: human A₁Saturation and competitive binding to membranes from yeast cells transformed with receptor subtypes,³H] DPCPX was used as the radioligand. Binding buffer solution [10 mM MgCl to a concentration of 1.0 mg / mL₂1.0 mM EDTA; 0.25% BSA; 2 U / mL adenosine deaminase, and 1 protease inhibitor cocktail tablet / 50 mL containing 50 mM Tris-HCl, pH 7.4].
[0387]
For saturation binding, membranes (50 μg / well) were added at increasing concentrations [^ThreeH] DPCPX (0.05-25 nM) was incubated in 96-well microtiter plates in the absence of and in the presence of 10 μM unlabeled XAC for 1 hour at 25 ° C. in a final volume of 100 μL binding buffer.
[0388]
For competitive binding, membrane (50 μg / well)^ThreeH] DPCPX (1.0 nM) in 96-well microtiter plates in the absence of and in the presence of 10 μM unlabeled XAC or increasing concentrations of competing compounds in a final volume of 100 mL binding buffer at 25 ° C. for 1 hour. Incubated.
[0389]
Adenosine 2a receptor subtype competitive radioligand binding: competitive binding on membranes from HEK293 cells stably expressing human A2a receptor subtypes³H] CGS-21680 was used as the radioligand. Membrane with binding buffer [10 mM MgCl₂1.0 mM EDTA; diluted in 0.25% BSA, 2 U / mL adenosine deaminase, and 1 protease inhibitor cocktail tablet / 50 mL containing 50 mM Tris-HCl, pH 7.4] at a concentration of 0.2 mg / mL. Membrane (10 μg / well)^ThreeH] CGS-21680 (100 nM) in a 96-well microtiter plate in the absence of and in the presence of 50 μM unlabeled NECA or increasing concentrations of competing compounds in a final volume of 100 mL binding buffer at 25 ° C. for 1 hour. Incubated with.
[0390]
Adenosine 3 receptor competitive radioligand binding: competitive binding on membranes from HEK293 cells stably expressing human A3 receptor subtypes¹²⁵I] Performed using AB-MECA as the radioligand. The membrane was bound with binding buffer [10 mM MgCl.₂1.0 mM EDTA; 0.25% BSA; 2 U / mL adenosine deaminase, and 1 protease inhibitor cocktail tablet / 50 mL containing 50 mM Tris-HCl, pH 7.4] at a concentration of 0.2 mg / mL. Membrane (10 μg / well)¹²⁵I] 96-well in the absence and presence of 10 μM unlabeled IB-MECA or increasing concentrations of competing compounds in AB-MECA (0.75 nM) in a final volume of 100 μL binding buffer for 1 hour at 25 ° C. Incubated in microtiter plates.
[0390]
At the end of incubation, 10 mM MgCl₂Ice-cold 50 mM Tris-HCl (pH 7.4) buffer supplemented with₁, A_2aAnd A₃The receptor subtype radioligand binding assay was terminated and then quickly filtered through a glass fiber filter (96-well GF / B UniFilters, Packard) presoaked in 0.5% polyethyleneimine in a FILTERMATE196 cell harvester (Packard). . The filter plate was dry coated with 50 μL / well scintillation fluid (MicroScint-20, Packard) and counted with TopCount (Packard). The assay was performed in triplicate. Nonspecific binding was 5.6 ± 0.5%, 10.8 ± 1.4%, and 15.1 ± 2.6% of total binding in the A1R, A2aR, and A3R binding assays, respectively. .
[0392]
Adenosine 2b receptor subtype competitive radioligand binding: competitive binding on membranes from HEK293 cells stably expressing the human A2b receptor subtype₁Receptor antagonist [³H] DPCPX was used as the radioligand. The membrane was diluted at a concentration of 0.3 mg / mL in binding buffer [1.0 mM EDTA; 0.1 mM benzamidine, 2 U / mL adenosine deaminase containing 10 mM Hepes-KOH, pH 7.4]. Membrane (15 μg / well)^ThreeIncubate in 96-well microtiter plates with H] DPCPX (15 nM) in a final volume of 100 μL of binding buffer for 1 hour at 25 ° C. in the absence and presence of 10 μM unlabeled XAC or increasing concentrations of competing compounds. did. At the end of the incubation, ice-cold 10 mM Hepes-KOH (pH 7.4) buffer was added to terminate the assay, followed by glass fibers presoaked in 0.5% polyethyleneimine in a Filtermate 196 cell harvester (Packard). Filtered quickly with filters (96-well GF / C UniFilters, Packard). The filter plate was dry coated with 50 μL / well scintillation fluid (MicroScint-20, Packard) and counted with TopCount (Packard). The assay was performed in triplicate. Non-specific binding was 14.3 ± 2.3% of the total binding.
[0393]
[^ThreeH] Specific binding of DPCPX; [^ThreeH] CGS-21680 and [¹²⁵I] AB-MECA was defined as the difference between total binding and non-specific binding. The percent inhibition of the compound was calculated relative to the total binding. Analyzing competitive data by iterative curve fitting to a one-site model,_IValues are measured using GraphPad Prizm 2.01 software₅₀Calculated from the values (Cheng and Prusof, Biochem. Pharmacol. 22, 3099-3109, 1973).
[0394]
result:
The primary function of certain cell surface receptors is to recognize appropriate ligands. Therefore, the inventors determined ligand binding affinity to determine that the adenosine 1 receptor subtype expressed in yeast is functionally complete. An unpurified membrane prepared from Saccharomyces cerevisiae transformed with the human adenosine 1 receptor subtype construct has a K of 4.0 ± 0.19 nM._dso[^ThreeIt resulted in specific saturable binding of H] DPCPX. K_DAnd B_maxValues were calculated from saturation isotherms, and a Scatchard transform of this data indicated a single class of binding sites. The density of adenosine binding sites in the yeast membrane preparation was estimated to be 716.8 ± 43.4 fmol / mg membrane protein.
[0395]
[³H] Subtype-selective adenosine ligands (XAC, DPCPX; CGS-15943; Compound 600; Compound 1002; NECA, (R) -PIA; IB-MECA, and alloxazine) that are predicted to compete with DCPPX in the following order: Using human A₁The characteristics of the pharmacological subtypes of recombinant yeast cells transformed with the receptor subtype were investigated. The displacement curves recorded with these compounds showed typical steep slopes for all ligands and it was possible to model the data for each ligand by single site fitting. The apparent dissociation constants (Table 5) for individual compounds calculated from this curve are consistent with published values for this receptor obtained from other sources.
[0396]
[Table 5]

Tables 6-12 show the effectiveness and structure activity properties of the deazapurines of the present invention. Tables 13 and 14 show that selectivity for the human adenosine receptor site can be achieved by modulating functional groups of the deazapurine structure. Table 14 shows that the compounds described herein have sub-nanomolar activity and higher A compared to the compounds in Table 13._2bIt also shows that it has receptor selectivity.
[0397]
[Table 6]

[Table 7]

[Table 8]

[Table 9]

[Table 10]

[Table 11]

[Table 12]

[Table 13]

[Table 14]

[Table 15]

PCT / US01 / 45280, pages 176-201 are A_2AReceptor specific compounds.
[0398]
<Outline of the invention>
The invention also provides adenosine A by administering to a patient a therapeutically effective amount thereof._2ASpecifically and selectively binding to A in the patient_2ABased on compounds that treat diseases associated with adenosine receptors. The diseases to be treated are associated, for example, with central nervous system disorders, cardiovascular disorders, renal disorders, inflammatory disorders, gastrointestinal disorders, ophthalmic disorders, allergic disorders or respiratory disorders.
[0399]
The invention also features a compound having the following structure:
Embedded image

here,
NR₁R₂Is a substituted or unsubstituted 4- to 8-membered ring;
Ar is a substituted or unsubstituted 4-6 membered ring;
R_FourIs H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is C (R₈) (R₉) XR₆And X is O, S, or NR₇And R₈And R₉Each independently is H or alkyl and R₆And R₇Each independently is alkyl or cycloalkyl, or R₆, R₇And nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4-6 membered ring;
R_FiveIs H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
However, NR₁R₂Is not 3-acetamidopiperidino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethyl, or pyrrolidino; and NR₁R₂Is 3-hydroxymethylpiperazino only when Ar is 4-pyridyl.
[0400]
The present invention also provides A_2aA method of inhibiting the activity of an adenosine receptor comprising contacting said cell with said compound.
[0401]
The present invention also provides a compound having the structure:
Embedded image

here,
NR₁R₂Is a substituted or unsubstituted 4- to 8-membered ring;
Ar is a substituted or unsubstituted 4-6 membered ring;
R_FourIs H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is -C (R₈) (R₉) XR₆And X is O, S, or NR₇And R₈And R₉Each independently is H or alkyl and R₆And R₇Each independently is alkyl or cycloalkyl, or R₆, R₇And nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring;
R_FiveIs H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
However, NR₁R₂Is not 3-acetamidopiperazino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethyl, or pyrrolidino; and only when Ar is 4-pyridyl₁R₂Is 3-hydroxymethylpiperazino.
[0402]
In one embodiment of the compound, Ar is a substituted or unsubstituted 4-6 membered ring, phenyl, pyrrole, thiophene, furan, thiazole, imidazole, pyrazole, 1,2,4 triazole, pyridine, 2 (1H)- Pyridone, 4 (lH) -pyridone, pyrazine, pyrimidine e, pyridazine, isothiazole, isoxazole, oxazole, tetrazole, naphthalene, tetralin, naphthyridine, benzofuran, benzothiophene, indole, 2,3-dihydroindole, 1H-indole, Indoline, benzopyrazole, 1,3-benzodioxole, benzoxazole, purine, coumarin, coumarone, quinoline, tetrahydroquinoline, isoquinoline, benzimidazole, quinazoline, pyrido [2,3-b] pyrazine, pyrido [3,4b Pyrazine, pyrido [3,2-c] pyridazine, prido [3,4 -b] -pyridine, 1H-pyrazole [3,4-d] pyrimidine, pteridine, 2 (1H) -quinolone, 1 (2H) -isoquinolone, 1,4-benzisoxazine, benzothiazole, quinoxaline, quinoline-N -Oxide, isoquinoline N-oxide, quinoxaline-N-oxide, quinazoline-N-oxide, benzoxazine, phthalazine, cinnoline, or the following structure:
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Where Y is carbon or nitrogen;
R_ThreeIs H, substituted or unsubstituted alkyl, substituted or unsubstituted aryl, halogen, methoxy, methylamino, methylthio.
[0403]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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Where m is 1 or 2; R_A and R_BAre independently H, -OH, -CH₂OH, -CH₂CH₂OH, -C (= O) NH₂, Heteroatoms, or -C (= O) NR_ThreeR_Three'And R_ThreeIs aryl, substituted aryl, or heteroaryl; R_Three'Is alkyl or XR ", X is O or N, and R" is substituted alkyl or aryl.
[0404]
In another embodiment of the compounds, R_lR₂N is (D) -2-aminocarbonylpyrrolidino, (D) -2-hydroxymethylpyrrolidino, (D) -2-hydroxymethyl-trans-4-hydroxypyrrolidino, piperazino, or 3-hydroxymethylpipe Rajno.
[0405]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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Where m is 0, 1, 2, or 3; Y is 0, S, or NR and R is R_AOr R_BWhere R is_AAnd R_BAre independently H, OH, -CH₂0H, -CH₂CH₂OH, -C (= O) NH₂, Heteroatoms, or -C (= O) NR_ThreeR_Three'And R_ThreeIs aryl, substituted aryl, or heteroaryl; R_Three'Is alkyl or R_Three"Wherein X is O or N and R" is substituted alkyl or aryl.
[0406]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In yet another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In a further embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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The present invention further provides a compound having the following structure (V):
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Here, R is H or methyl.
[0407]
In one embodiment of Compound V, the compound has the following structure:
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In another embodiment of compound V, the compound has the following structure:
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The present invention also provides A_2aProvided is a method of treating a disease associated with an adenosine receptor, comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of compound IV or V.
[0408]
In one embodiment of the method, the compound treats the disease by stimulating adenylate cyclase.
[0409]
In another embodiment of the method, the patient is a mammal.
[0410]
In another embodiment of the method, the mammal is a human.
[0411]
In another embodiment of the method, the A_2aAdenosine receptors are associated with Parkinson's disease and diseases associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, and senile dementia.
[0412]
Adenosine A₁, A_2a, A_2bAnd A_ThreeReceptor related diseases are disclosed in WO 99/06053 and WO-09822465, WO-09705138, WO 09511681, WO-09733879, JP-09291089, PCT / US98 / 16053 and US Pat. Is incorporated herein by reference in its entirety.
[0413]
The present invention also provides water-soluble prodrugs of compound IV or V. The water soluble prodrug is metabolized in vivo to yield A_2aIt produces active drugs that selectively inhibit adenosine receptors.
[0414]
In one embodiment of the prodrug, the prodrug is metabolized in vivo by esterase-catalyzed hydrolysis.
[0415]
The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising the prodrug and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0416]
The present invention also provides A_2aProvided is a method of inhibiting the activity of an adenosine receptor comprising contacting the cell with compound IV or V.
[0417]
In one embodiment of the method, the compound comprises the A_2aIt is an adenosine receptor antagonist.
[0418]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation.
[0419]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a periocular, retro-ocular or intraocular injection formulation.
[0420]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0421]
The present invention also provides a method of treating gastrointestinal disease in a patient, comprising administering to the patient an effective amount of Compound IV or V.
[0422]
In one embodiment of the method, the disease is diarrhea.
[0423]
In another embodiment of the method, the patient is a human.
[0424]
In another embodiment of the method, the compound is A_2aIt is an adenosine receptor antagonist.
[0425]
The present invention further provides a method of treating a respiratory disease in a patient comprising administering to said patient an effective amount of Compound IV or V.
[0426]
In one embodiment of the method, the disease is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper respiratory tract disorder.
[0427]
In one embodiment of the method, the patient is a human.
[0428]
In one embodiment of the method, the compound is A_2aIt is an adenosine receptor antagonist.
[0429]
The present invention also provides a method of treating damage to a patient's eye comprising administering to said patient an effective amount of Compound IV or V.
[0430]
In one embodiment of the method, the injury is retinal or optic disc injury.
[0431]
In another embodiment of the method, the injury is acute or chronic.
[0432]
In another embodiment of the method, the injury is the result of glaucoma, edema, anemia, hypoxia or trauma.
[0433]
In another embodiment of the method, the patient is a human.
[0434]
In another embodiment of the method, the compound is A_2aIt is an adenosine receptor antagonist.
[0435]
The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of compound IV or V and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0436]
In one embodiment of the pharmaceutical composition, the therapeutically effective amount treats Parkinson's disease and diseases associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, and senile dementia. It is effective to do.
[0437]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation.
[0438]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a periocular, retro-ocular or intraocular injection formulation.
[0439]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0440]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a surgical irrigation solution
The invention also provides a combination therapy for Parkinson's disease comprising compounds IV and V and any dopamine enhancer.
[0441]
The present invention further provides a combination therapy for cancer comprising compounds IV and V and any cytotoxic agent.
[0442]
The invention further provides a combination therapy for glaucoma comprising Compound IV or V and a prostaglandin agonist, muscarinic agonist, or β2 antagonist.
[0443]
The present invention also provides A_2aA packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with an adenosine receptor comprising: (a) a container holding a therapeutically effective amount of compound IV or V; and (b) said disease in a patient. Packaged pharmaceutical compositions comprising instructions for use of said compounds for treatment are provided.
[0444]
The present invention also provides a method for preparing Compound IV comprising:
(A) React the following two,
Embedded image

Obtaining a compound of the formula:
Embedded image

Where P is a removable protecting group
(B) treating the product of step a) under cyclization conditions to obtain a compound of the formula:
Embedded image

(C) treating the product of step b) under suitable conditions to obtain a compound of the formula:
Embedded image

(D) The chlorination product of step c) is converted to NHR.₁R₂To obtain a compound of the formula:
Embedded image

Providing a method comprising:
NR₁R₂Is a substituted or unsubstituted 4- to 8-membered ring;
Ar is a substituted or unsubstituted 4-6 membered ring;
R_FourIs H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is -C (R₈) (R₉) XR₆And X is 0, S, or NR- and R₈And R₉Each independently is H or alkyl and R₆And R₇Each independently is alkyl or cycloalkyl, or R₆, R₇And nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring;
R_FiveIs H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
However, NR₁R₂Is not 3-acetamidopiperazino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethyl, or pyrrolidino; and NR₁R₂Is 3-hydroxymethylpiperazino only when Ar is 4-pyridyl.
[0445]
The present invention is further a process for the preparation of compound V comprising:
(A) React the following two,
Embedded image

Obtaining a compound of the formula:
Embedded image

Where P is a removable protecting group
(B) treating the product of step a) under cyclization conditions to obtain a compound of the formula:
Embedded image

(C) treating the product of step b) under suitable conditions to obtain a compound of the formula:
Embedded image

(D) The chlorination product of step c) is first treated with dimethylamine and formaldehyde, then with N-methylbenzylamine and finally with NH.₂R₁To obtain a compound of the formula:
Embedded image

Providing a method comprising:
R₁Is acetamidoethyl; Ar is 4-pyridyl; R is H or methyl; R_FiveIs N-methyl-N-benzylaminomethyl.
[0446]
As used herein, “compound is A_2a“Selective” means that the compound is adenosine A_2aIn contrast, adenosine A₁, A_2bOr A_ThreeHaving a binding constant at least 5 times higher than the binding constant for.
[0447]
The invention is further illustrated by the following examples, which should not be construed as further limiting in any way. All references, pending patent applications and issued patent applications cited throughout this application, including those cited in the background section, are hereby incorporated by reference into this application. Incorporated. The models used throughout the examples below are accepted as models, and the demonstration of efficacy in these models is predictive of efficacy in humans.
[0448]
The invention will be better understood from the following experimental details. However, one of ordinary skill in the art will readily appreciate that the specific methods and results discussed herein are merely exemplary of the invention as more fully described in the claims.
[0449]
Example 22: Adenosine A_2aSynthesis of antagonists, compounds 1601, 1602, and 1603
Embedded image

Compound 26 (10.93 g, 50.76 mmol) was dissolved in DMF (67 mL). 4-Amidinopyridine hydrochloride (8.0 g, 50.76 mmol) and DBU (15.4 g, 101.5 mmol) were added sequentially and the reaction was heated to 85 ° C. After 22 hours, the reaction was cooled to room temperature and DMF was removed in vacuo. The dark oil was diluted with 2M HCl (80 mL). The reaction was left to stand. After 2 hours, the solution was cooled to 10 ° C. and filtered. The solid was washed with cold water and dried to give 7.40 g of a yellow solid, compound 27 (69%).¹H-NMR (200MHz, d₆-DMSO) d 6.58 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 8.53 (d, 2H, J = 5.6), 9.00 (d, 2H, J = 5.2Hz), 12.35 (brs, 1H). MS (ES): 212.8 (M⁺+1).
[0450]
Compound 27 (7.4 mmol, 29.8 mmol) was added to POCl_ThreeDilute with and heat to 105 ° C. After 18 hours, the reaction was cooled to room temperature and POCl_ThreeAre removed under vacuum. Dilute dark dark oil with MeOH (75 mL) followed by ether (120 mL). The amorphous red solid was filtered and washed with ether to give 3.82 g of a red solid. The crude solid, compound 28, is obtained in 80% purity and is used in the next reaction without further purification.¹H-NMR (200MHz, d₆-DMSO) d 6.58 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 8.53 (d, 2H, J = 5.6), 9.00 (d, 2H, J = 5.2Hz), 12.35 (brs, 1H). MS (ES): 212.8 (M⁺+1).
[0451]
Compound 1601: DMSO (5 mL) and D-prolinol (500 mg, 4.94 mmol) were added to compound 28 (500 mg, 2.1 mmol). The reaction was heated to 120 ° C. After 18 hours, the reaction was cooled to room temperature, EtOAc and H₂Dilute with O. The layers were separated and the aqueous layer was extracted with EtOAc (2x). The combined organic phases are washed with H2O (2x), brine, MgSO_FourDried over, filtered and concentrated to give 200 mg of a tan solid. This solid was recrystallized from EtOAc to give 82 mg of a tan solid (13%).¹H-NMR (200MHz, d₆-DMSO) d 2.05 (m, 4H), 3.43 (m, 1H), 3.70-4.00 (m, 3H), 4.50 (br s, 1H), 4.92 (br s, 1H), 6.62 (m, 1H), 7.22 (m, 1H), 8.22 (d, 2H, J = 6.0Hz), 6.64 (d, 2H, J = 6.2Hz), MS (ES): 296.0 (M⁺1) Melting point = 210-220 ° C (decomp.).
[0452]
Compound 1602: chromatography (silica, 9: 1 CHCl_Three/ MeOH) gave 10 mg of a tan solid (92%).¹H-NMR (d₆-DMSO) d 2.00-2.50 (m, 4H), 4.05 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 6.71 (d, 1H, J = 3.2Hz), 7.18 (d, 1H, J = 3.2Hz) 8.37 (d, 2H, J = 4.8Hz), 8.56 (d, 2H, J = 5.0Hz). MS (ES): 309.1 (M⁺+1).
[0453]
Compound 1603: Chromatography (silica, 20: 1 hexane / EtOAc) gave 135 mg of a tan solid (53%).¹H-NMR (d6-DMSO) d 2.00 (m, 4H), 3.43 (br s, 1H), 3.74 (br s, 2H), 3.87 (br s, 1H), 4.49 (br s, 1H), 4.93 ( m, 1H), 6.56 (m, 1H), 7.12 (m, 1H), 7.40 (m, 3H), 8.34 (m, 2H), 11.62 (br s, 1H). MS (ES): 295.1 (M⁺+1).
[0454]
Compound 1605: In 50 mL RBF, 60 mg of 2- (4′-pyridyl) -4-chloropyrimidinopyrrole HCl salt was dissolved in 2 mL anhydrous DMSO. To this was added 3- (R) -hydroxy- (D) -prolinol TFA salt (380 mg) and 500 mg sodium bicarbonate. The mixture was then flushed with nitrogen gas for 5 minutes and heated to 130 ° C. After 2 hours, the reaction was cooled to room temperature and DMSO was removed in vacuo. The residue was partitioned between EtOAc (15 mL) and saturated aqueous sodium bicarbonate (15 mL). The organic layer is separated and washed with brine (15 mL) and Na₂SO_FourDry above. After removing the solvent, the crude product is purified by preparative TLC (CH₂Cl₂/ MeOH = 95/5) to give 35 mg (50%).¹H-NMR (200MHz, CDCl_Three) (2.3-2.5 (1H), 3.4-3.8 (3H), 4.4-4.6 (2H), 6.4 (1H); 7.1 (1H); 8.2 (d, 2H); 8.7 (d, 2H); 11.0 (1H MS (ES): 312 (M⁺+1).
[0455]
Example 23: Adenosine A_2aSynthesis of antagonist, compound 1606
Embedded image

Compound 28 (200 mg) was treated with DMF (30 mL), (, (-dimethylglycine methyl ester (73 mg HCl salt in 2 mL water) and 500 mg sodium bicarbonate. After 18 hours, DMF was removed in vacuo. The residue was partitioned between EtOAc (30 mL) and saturated aqueous sodium bicarbonate (15 mL) The organic layer was washed with brine (15 mL), dried over sodium sulfate, filtered and concentrated Chromatography (silica, 10: 4 hexane / EtOAc) gave 150 mg of pure product, compound 29 (69%).¹H-NMR (200MHz, CDCl_Three), (1.4 (s, 6H), 3.8 (s, 3H); 3.9 (s, 2H); 6.4 (s, 1H); 7.4-7.5 (m, 3H); 8.4 (m, 2H); 9.8 (s , 1H).
[0456]
Compound 1606:
The procedure is similar to compound 1605 (72%).¹H-NMR (200MHz, CDCl_Three), (1.3 (s, 6H), 1.7-1.9 (m, 2H); 2.05-2.30 (m, 2H); 3.6-4.1 (m, 11H); 4.80-4.95 (m, 1H); 6.4 (s, 1H); 7.4-7.6 (m, 3H); 8.3-8.4 (d, J = 8.5Hz, 2H), 10 (s, 1H) MS (ES): 424.0 (M⁺+1).
[0457]
The following compounds can be synthesized in the same manner.
[0458]
Compound 1600: (51%). MS (ES): 326.0 (M⁺+1).
[0459]
Compound 1607:¹H-NMR (200MHz, CDCl_Three), (1.40-1.80 (m, 5H), 2.80-3.50 (m, 3H), 4.60-4.80 (m, 3H), 6.66 (d, 1H, J = 6.2Hz), 7.26 (m, 1H), 8.21 (d, 2H, J = 6.3Hz), 8.65 (d, 2H, J = 5.8Hz), 11.90 (s, 1H) MS (ES): 310.1 (M⁺+1).
[0460]
Compound 1608: (64%).¹H-NMR (200MHz, d₆-DMSO), (1.75 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.56 (m, 6H), 7.23-7.41 (m, 5H), 8.00 (br s, 1H), 8.23 (d, 2H, J = 6.0Hz), 8.63 (d, 2H, J = 5.4Hz), 8.82 (br s, 1H), 11.56 (br s, 1H) MS (ES): 444.0 (M⁺+1).
[0461]
Compound 1604:¹H-NMR (200MHz, CD_ThreeOD) (3.40 (m, 4H), 4.29 (m, 4H), 6.99 (s, 1H), 7.5-7.2 (m, 3H), 7.90 (d, 2H), 8.39 (d, 2H), 8.61 (d , 2H) MS (ES): 57.0 (M⁺+1).
[0462]
Table 16 Adenosine A_2a Receptor selective compounds
^*It is at least 5 times more selective than the other three subtypes.
[0463]
[Table 16]

PCT / US01 / 45280, pages 202-256, A₃Receptor specific compounds.
[0464]
<Outline of the invention>
The invention also provides adenosine A by administering to a patient a therapeutically effective amount thereof.₃Specifically and selectively binding to A in the patient₃Based on compounds that treat diseases associated with adenosine receptors. Diseases to be treated include, for example, asthma, hypersensitivity, rhinitis, hay fever, serum sickness, allergic vasculitis, atopic dermatitis, dermatitis, psoriasis, eczema, idiopathic pulmonary fibrosis, eosinophilic cystitis (eosinophillic) chlorecystitis), chronic airway inflammation, hyperacidic syndrome, eosinophilic gastroenteritis, edema, urticaria, eosinophilic cardiomyopathy, incidental angioedema, inflammatory bowel disease, ulcerative colitis, allergic granulomas, carcinomatosis , Eosinophilic granuloma, familial histiocytosis, hypertension, mast cell degranulation, tumor, carciac hypoxia, cerebral ischemia, polyuria, renal failure, neurological disease , Mental disorder, cognitive impairment, myocardial ischemia, bronchoconstriction, arthritis, autoimmune disease, Crohn's disease, Grave's disease, diabetes, multiple sclerosis, anemia, psoriasis, pregnancy disorder, lupus erythematosus, re Perfusion injury, brain arteriole diameter , Allergic media release, scleroderma, seizures, global ischemia, central nervous system disorders, cardiovascular disorders, kidney disorders, inflammatory diseases, gastrointestinal disorders, eye disorders, allergic disorders, respiratory disorders or Associated with immune disorders.
[0465]
The invention also features a compound having the following structure:
Embedded image

Where R₁Is H and R₂Is cyclopropylmethylaminocarbonylethyl, cis-3-hydroxycyclopentyl, acetamidobutyl, methylaminocarbonylaminobutyl, ethylaminocarbonylaminopropyl, methylaminocarbonylaminopropyl, 2-acetylamino-3-methylbutyl, N, N-diethylaminocarbonylamino Ethyl, thioacetamidoethyl, 3-aminoacetyloxycyclopentyl, 3-hydroxycyclopentyl, 2-pyrrolylcarbonylaminoethyl, 2-imidazolidinone ethyl, l-aminocarbonyl-2-methylpropyl, 1-aminocarbonyl-2 -Phenylethyl, 3-hydroxyazetidino, 2-imidazolylethyl, acetamidoethyl, 1- (R) -phenyl-2-hydroxyethyl, N-methylaminocarbonylpyridyl-2-methyl, or R₁, R₂And nitrogen together form 3-acetamidopiperazino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethylpyrrolidino, or 3-hydroxymethylpiperazino. ;
R_ThreeIs a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring, pyrrole, thiophene, furan, thiazole, imidazole, pyrazole, 1,2,4-triazole, pyridine, 2 (1H) -pyridone, 4 (1H) -pyridone, pyrazine , Pyrimidine, pyridazine, isothiazole, isoxazole, oxazole, tetrazole, naphthalene, tetralin, naphthyridine, benzofuran, benzothiophene, indole, 2,3-dihydroindole, 1H-indole, indoline, benzopyrazole, 1,3-benzodio Xol, benzoxazole, purine, coumarin, clonone, quinoline, tetrahydroquinoline, isoquinoline, benzimidazole, quinazoline, pyrido [2,3-b] pyrazine, pyrido [3,4-b] pyrazine, pyrido [3,2- c] pyridazine, pride [3,4-b] -pyridine, 1H-pyrazole [3,4-d] pyrimidine, Teridine, 2 (1H) -quinolone, 1 (2H) -isoquinolone, 1,4-benzisoxazine, benzothiazole, quinoxaline, quinoline-N-oxide, isoquinoline N-oxide, quinoxaline-N-oxide, quinazoline-N- Oxide, benzoxazine, phthalazine, or cinnoline;
R_FiveIs H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, or substituted aryl.
[0466]
The present invention also provides adenosine A in the cell.₃Characterized in that the method comprises the step of contacting said cell with said compound.
[0467]
Typical practices are known to those skilled in the art.
[0468]
A typical synthetic scheme for preparing the deazapurines of the present invention is outlined in Scheme I below.
[0469]
The present invention also provides a method for preparing Compound IV comprising:
(A) React the following two,
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Obtaining a compound of the formula:
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Where P is a removable protecting group
(B) treating the product of step a) under cyclization conditions to obtain a compound of the formula:
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(C) treating the product of step b) under suitable conditions to obtain a compound of the formula:
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(D) The chlorination product of step c) is converted to NHR.₁R₂To obtain a compound of the formula:
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Providing a method comprising:
R₁Is H and R₂Is cyclopropylmethylaminocarbonylethyl, cis-3-hydroxycyclopentyl, acetamidobutyl, methylaminocarbonylaminobutyl, ethylaminocarbonylaminopropyl, methylaminocarbonylaminopropyl, 2-acetylamino-3-methylbutyl, N, N-diethylaminocarbonyl Aminoethyl, thioacetamidoethyl, 3-aminoacetyloxycyclopentyl, 3-hydroxycyclopentyl, 2-pyrrolylcarbonylaminoethyl, 2-imidazolidinone ethyl, l-aminocarbonyl-2-methylpropyl, 1-aminocarbonyl 2-phenylethyl, 3-hydroxyazetidino, 2-imidazolylethyl, acetamidoethyl, 1- (R) -phenyl-2-hydroxyethyl, N-methylaminocarbonylpyridyl-2-methyl, or R₁, R₂And nitrogen together form 3-acetamidopiperazino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethylpyrrolidino, or 3-hydroxymethylpiperazino. ;
R_ThreeIs a substituted or unsubstituted 4-6 membered ring;
R_FiveIs H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, or substituted aryl.
[0470]
The present invention also provides a method for preparing compound V comprising:
(A) React the following two,
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Obtaining a compound of the formula:
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Where P is a removable protecting group
(B) treating the product of step a) under cyclization conditions to obtain a compound of the formula:
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(C) treating the product of step b) under suitable conditions to obtain a compound of the formula:
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(D) the chlorination product of step c) is NH₂CH₂(CH₂) mCH₂NHC (= O) R_lTo obtain a compound of the formula:
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Providing a method comprising:
m is 0, 1, or 2;
R₁Is cyclopropylmethyl, methyl, methylamino, or aminomethyl;
R₂Is aryl, substituted aryl, heteroaryl;
R_FiveIs H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is —C (R₉) (R_Ten) NR₇R₈And R₉And R_TenEach is H or alkyl and R₇And R₈Are each alkyl or cycloalkyl, or R₇, R₈And nitrogen together form a 4-7 membered ring system.
[0471]
The present invention also provides a method for preparing compound IV comprising:
(A) React the following two,
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Obtaining a compound of the formula:
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Where P is a removable protecting group
(B) treating the product of step a) under cyclization conditions to obtain a compound of the formula:
Embedded image

(C) treating the product of step b) under suitable conditions to obtain a compound of the formula:
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(D) the chlorination product of step c)
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To obtain a compound of the formula:
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Providing a method comprising:
R₂Is unsubstituted aryl;
R_FiveIs H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is —C (R₉) (R_Ten) NR₇R₈And R₉And R_TenEach is H or alkyl and R₇And R₈Are each alkyl or cycloalkyl, or R₇, R₈And nitrogen together form a 4-7 membered ring system
The present invention also provides a compound having the structure:
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here,
R₁Is H and R₂Is cyclopropylmethylaminocarbonylethyl, cis-3-hydroxycyclopentyl, acetamidobutyl, methylaminocarbonylaminobutyl, ethylaminocarbonylaminopropyl, methylaminocarbonylaminopropyl, 2-acetylamino-3-methylbutyl, N, N-diethylaminocarbonylamino Ethyl, thioacetamidoethyl, 3-aminoacetyloxycyclopentyl, 3-hydroxycyclopentyl, 2-pyrrolylcarbonylaminoethyl, 2-imidazolidinone ethyl, l-aminocarbonyl-2-methylpropyl, 1-aminocarbonyl- 2-phenylethyl, 3-hydroxyazetidino, 2-imidazolylethyl, acetamidoethyl, 1- (R) -phenyl-2-hydroxyethyl, N-methylaminocarbonylpyridyl-2-methyl, or R₁, R₂And the nitrogen atom together in 3-acetamidopiperazino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethylpyrrolidino, or 3-hydroxymethylpiperazino Yes;
R_ThreeIs substituted or unsubstituted benzene, pyrrole, thiophene, furan, thiazole, imidazole, pyrazole, 1,2,4-triazole, pyridine, 2 (1H) -pyridone, 4 (lH) -pyridone, pyrazine, pyrimidine, pyridazine , Isothiazole, isoxazole, oxazole, tetrazole, naphthalene, tetralin, naphthyridine, benzofuran, benzothiophene, indole, 2,3-dihydroindole, 1H-indole, indoline, benzopyrazole, 1,3-benzodioxole, benz Oxazole, purine, coumarin, coumarone, quinoline, tetrahydroquinoline, isoquinoline, benzimidazole, quinazoline, pyrido [2,3-b] pyrazine, pyrido [3,4-b] pyrazine, pyrido [3,2-c] pyridazine, Prido [3,4-b] -pyridine, 1H-pyrazole [3,4-d] pyrimidine, Teridine, 2 (1H) -quinolone, 1 (2H) -isoquinolone, 1,4-benzisoxazine, benzothiazole, quinoxaline, quinoline-N-oxide, isoquinoline-N-oxide, quinoxaline-N-oxide, quinazoline-N -Oxide, benzoxazine, phthalazine, or cinnoline;
R_FiveIs H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, or substituted aryl.
[0472]
In one embodiment of the compound, the compound has the following structure:
Embedded image

In another embodiment of the compounds, R_ThreeIs phenyl.
[0473]
In another embodiment of the compounds, R_FiveIs hydrogen or methyl.
[0474]
In another embodiment of the compounds, R6 is hydrogen, methyl, phenyl, 3-chlorophenyloxymethyl, or trans-2-phenylaminomethylpyrrolidinomethyl.
[0475]
The present invention further provides a compound having the structure:
[0476]
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here,
m is 0, 1, or 2;
R₁Is cyclopropylmethyl, methyl, methylamino, or aminomethyl;
R₂Is aryl, substituted aryl, or heteroaryl;
R_ThreeIs H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is —C (R₉) (R_Ten) NR₇R₈And R₉And R_TenEach is H or alkyl and R₇And R₈Are each alkyl or cycloalkyl, or R₇, R₈And the nitrogen atom together form a 4-7 membered ring system.
[0477]
In one embodiment of Compound V, m is 0 and R₂Is phenyl.
[0478]
In another embodiment of compound V, m is 1 and R₂Is phenyl.
[0479]
In another embodiment of compound V, m is 2 and R₂Is phenyl.
[0480]
In another embodiment of Compound V, R_FiveAnd R₆Is methyl.
[0481]
In another embodiment of Compound V, R_FiveAnd R₆Is methyl.
[0482]
In another embodiment of Compound V, R_FiveAnd R₆Is methyl.
[0483]
In another embodiment of Compound V, the compound has the following structure:
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In another embodiment of Compound V, the compound has the following structure:
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In another embodiment of Compound V, the compound has the following structure:
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In another embodiment of Compound V, the compound has the following structure:
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In another embodiment of Compound V, the compound has the following structure:
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The present invention further provides a compound having the structure:
[0484]
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The present invention further provides a compound having the structure:
[0485]
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here,
R₂Is unsubstituted aryl;
R_FiveIs H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is —C (R₉) (R_Ten) NR₇R₈And R₉And R_TenEach is H or alkyl and R₇And R₈Are each alkyl or cycloalkyl, or R₇, R₈And the nitrogen atom together form a 4-7 membered ring system.
[0486]
In one embodiment of Compound IV, the compound has the following structure:
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In one embodiment of compound 1309, the compound has the following structure:
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In another embodiment of compound 1309, the compound has the following structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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here,
R₁Is 3-hydroxycyclopentylethylaminocarbonylaminopropyl, N, N-diethylaminocarbonylaminoethyl, thioacetamidoethyl, 3-aminoacetyloxycyclopentyl, 3-hydroxycyclopentyl, 2-pyrrolylcarbonylaminoethyl, 2-imidazo Lidinone ethyl, 1-aminocarbonyl-2-methylpropyl, 1-aminocarbonyl-2-phenylethyl, 3-hydroxyazetidino, 2-imidazolylethyl, acetamidoethyl, 1- (R) -phenyl-2-hydroxyethyl, Or N-methylaminocarbonylpyridyl-2-methyl;
R_ThreeAnd R_FourAre independently H, substituted or unsubstituted alkyl, or aryl.
[0487]
In one embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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here,
R₁, R₂And nitrogen together are 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethylpyrrolidino, or 3-hydroxymethylpiperazino;
R_ThreeAnd R_FourAre independently H, substituted or unsubstituted alkyl, or aryl.
[0488]
In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the following structure:
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The present invention also provides A_ThreeA method of treating a disease associated with an adenosine receptor, comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of any of compounds IV, V, VI, or VII.
[0489]
In one embodiment of the method, the patient is a mammal.
[0490]
In another embodiment of the method, the mammal is a human.
[0491]
In another embodiment of the method, the A_ThreeAdenosine receptor is central nervous system disorder, cardiovascular disorder, asthma, asthma, hypersensitivity, rhinitis, hay fever, serum disease, allergic vasculitis, atopic dermatitis, dermatitis, psoriasis, eczema, idiopathic lung Fibrosis, eosinophillic chlorecystitis, chronic airway inflammation, hyperacidic syndrome, eosinophilic gastroenteritis, edema, urticaria, eosinophilic cardiomyopathy, incidental angioedema, inflammatory bowel disease, ulcerative Colitis, allergic granulomas, carcinomatosis, eosinophilic granulomas, familial histiocytosis, hypertension, mast cell degranulation, tumors, carciac hypoxia, cerebral ischemia , Polyuria, renal failure, neurological disease, mental disorder, cognitive impairment, myocardial ischemia, bronchoconstriction, arthritis, autoimmune disease, Crohn's disease, Grave's disease, diabetes, multiple sclerosis, anemia, psoriasis Pregnancy disorder, lupus erythematosus, reperfusion injury , Brain arteriole diameter, allergic media release, scleroderma, stroke, global ischemia, central nervous system disorder, cardiovascular disorder, renal disorder, inflammatory disease, gastrointestinal disorder, eye Associated with disorder, allergic disorder, respiratory disorder or immune disorder.
[0492]
Adenosine A₁, A_2a, A_2bAnd A_ThreeReceptor related diseases are disclosed in WO 99/06053 and WO-09822465, WO-09705138, WO 09511681, WO-09733879, JP-09291089, PCT / US98 / 16053 and US Pat. Is incorporated herein by reference in its entirety.
[0493]
The present invention also provides water soluble prodrugs of any of compounds IV, V, VI, or VII. The water soluble prodrug is metabolized in vivo to yield A_2aIt produces active drugs that selectively inhibit adenosine receptors.
[0494]
In one embodiment of the prodrug, the prodrug is metabolized in vivo by esterase-catalyzed hydrolysis.
[0495]
The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising the prodrug and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0496]
The present invention also provides A_2aA method of inhibiting the activity of an adenosine receptor is provided, comprising contacting the cell with any of compounds IV, V, VI, or VII.
[0497]
In one embodiment of the method, the compound comprises the A_ThreeIt is an adenosine receptor antagonist.
[0498]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation.
[0499]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a periocular, retro-ocular or intraocular injection formulation.
[0500]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0501]
The invention also provides a method of treating gastrointestinal disease in a patient comprising administering to the patient an effective amount of any of compounds IV, V, VI, or VII. .
[0502]
In one embodiment of the method, the disease is diarrhea.
[0503]
In another embodiment of the method, the patient is a human.
[0504]
In another embodiment of the method, the compound is A₃It is an adenosine receptor antagonist.
[0505]
The present invention further provides a method of treating a respiratory disease in a patient, comprising administering to said patient an effective amount of any of compounds IV, V, VI, or VII. To do.
[0506]
In one embodiment of the method, the disease is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper respiratory tract disorder.
[0507]
In one embodiment of the method, the patient is a human.
[0508]
In one embodiment of the method, the compound is A₃It is an adenosine receptor antagonist.
[0509]
The present invention also provides a method of treating damage to a patient's eye comprising administering to said patient an effective amount of any of compounds IV, V, VI, or VII. To do.
[0510]
In one embodiment of the method, the injury is retinal or optic disc injury.
[0511]
In another embodiment of the method, the injury is acute or chronic.
[0512]
In another embodiment of the method, the injury is the result of glaucoma, edema, anemia, hypoxia or trauma.
[0513]
In another embodiment of the method, the patient is a human.
[0514]
In another embodiment of the method, the compound is A₃It is an adenosine receptor antagonist.
[0515]
The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of any of compounds IV, V, VI, or VII and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0516]
In one embodiment of the pharmaceutical composition, the therapeutically effective amount is effective to treat a respiratory or gastrointestinal disorder.
[0517]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the gastrointestinal disorder is diarrhea.
[0518]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the respiratory disorder is asthma, allergic rhinitis, or chronic obstructive pulmonary disease.
[0519]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation.
[0520]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a periocular, retro-ocular or intraocular injection formulation.
[0521]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0522]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a surgical irrigation solution.
[0523]
The present invention also provides A_2aA packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with an adenosine receptor, comprising: (a) a container holding a therapeutically effective amount of any of compounds IV, V, VI, or VII; (B) providing a packaged pharmaceutical composition comprising instructions for using the compound to treat the disease in a patient.
[0524]
Compounds represented by formula compounds IV, V, VI, and VII can be synthesized according to Schemes I-IX.
[0525]
As used herein, “compound is A_Three“Selective” means that the compound is adenosine A_ThreeIn contrast, adenosine A₁, A_2bOr A_2bHaving a binding constant at least 5 times higher than the binding constant for.
[0526]
The invention is further illustrated by the following examples, which should not be construed as further limiting in any way. All references, pending patent applications and issued patent applications cited throughout this application, including those cited in the background section, are hereby incorporated by reference into this application. Incorporated. The models used throughout the examples below are accepted as models, and the demonstration of efficacy in these models is predictive of efficacy in humans.
[0527]
One skilled in the art will know that metabolism in patients of the compounds disclosed herein results in certain biologically active metabolites that can act as drugs.
[0528]
The invention will be better understood from the following experimental details. However, one of ordinary skill in the art will readily appreciate that the specific methods and results discussed herein are merely exemplary of the invention as more fully described in the claims.
[0529]
Example 24: Adenosine A_ThreeAntagonist experiment
Compound 1700 (Table 17 below): MS (ES): 366.1 (M⁺+1)
Compound 1710 (Table 17 below): MS (ES ;: 381.1 (M⁺+1)
Compound 1316 (Table 17 below): MS (ES): 353.2 (M⁺+1)
Compound 1703 (Table 17 below): MS (ES): 357.1 (M⁺+1)
Compound 1719 (Table 17 below):¹H-NMR (200MHz, d₆-DMSO) (1.75 (m, 2H), 3.11 (m, 2H), 3.35 (s, 3H), 3.59 (m, 2H), 5.72 (m, 1H), 5.96 (m, 1H), 6.55 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.49 (m, 2H), 8.32 (m, 2H)
Compound 1704 (Table 17 below): MS (ES): 367.0 (M⁺+1)
Compound 1706 (Table 17 below): 1H-NMR (200 MHz, CDCl_Three) d 1.22 (m, 2H), 1.60-2.40 (m, 4H), 4.53 (m, 1H), 4.94 (m, 1H), 5.70 (d, 1H, J = 8.2Hz), 6.35 (d, 1H, J = 2.8Hz), 6.97 (d, 1H, J = 2.0Hz), 7.50 (m, 3H), 8.40 (m, 2H), 10.83 (br s, 1H) Compound 1707 (Table 17 below): MS (ES ): 347.0 (M⁺+1)
Compound 1708 (Table 17 below): MS (ES): 399.0 (M⁺+1)
Compound 1709 (Table 17 below): MS (ES): 385.9 (M⁺+1)
Compound 1710 (Table 17 below): MS (ES): 434.0 (M⁺+1)
Compound 1711 (Table 17 below):¹H-NMR (200MHz, CD_ThreeOD) d 3.95 (d, 2H, J = 5.8Hz), 4.23-4.31 (m, 2H), 4.53 (t, 2H, J = 8.8Hz), 6.30 (d, 1H, J = 3. OHz), 6.98 (d, 1H, J = 3.OHz), 7.45-7.48 (m, 3H), 7.83-8.42 (m, 2H), 9.70 (br s, 1H)
MS (ES): 281.1 (M⁺+1)
OSIC-148313¹H-NMR (200MHz, CD_ThreeOD) d 3.02 (m, 2H), 3.92 (m, 2H), 5.09 (2, 2H), 6.53 (s, 1H), 6.90-7.04 (br s, 1H), 6.92 (m, 2H), 7.02 ( m, 1H), 7.21 (dd, 1H, J = 8.2Hz), 7.40 (m, 3H), 7.50-7.80 (br s, 1H), 8.33 (m, 2H). MS (ES): 445.1 (M⁺+1)
Compound 1713 (Table 17 below):¹H-NMR (200 MHz, CDCl3) d 1.65-1.80 (m, 7H), 1.88-2.00 (m, 1H), 2.10-2.40 (m, 1H), 2.70-3.05 (m, 3H), 3.09-3.14 (m , 2H), 3.16-3.38 (m, 1H), 3.45 (d, 1H, J = 14Hz), 3.53-3.60 (m, 2H), 3.84-3.92 (m, 2H), 3.97 (d, 1H, J = 14Hz), 5.55 (t, 1H, J = 5.8Hz), 6.17 (s, 1H), 6.55-6.59 (m, 2H), 6.64-6.71 (m, 1H), 7.11-7.19 (m, 2H), 7.43-7.46 (m, 3H), 8.38-8.42 (m, 2H), MS (ES): 484.0 (M⁺+1)
Compound 1714 (Table 17 below): MS (ES): 471.0 (M⁺+1)
Compound 1715 (Table 17 below): MS (ES): 505.0 (M⁺+1)
Compound 1716 (Table 17 below):¹H-NMR (200MHz, CD_ThreeOD) d 1.65 (m, 1H), 2.18 (m, 1H), 2.49 (br d, 2H, J = 6.2Hz), 2.64 (m, 1H), 3.38 (m, 1H), 3.69 (s, 3H) , 3.72 (m, 1H), 3.93 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 5.06 (2, 2H), 6.58 (s, 1H), 6.92 (m, 2H), 7.02 (m, 1H), 7.23 (dd, 1H, J = 8.1Hz), 7.39 (m, 3H), 8.32 (m, 2H). MS (ES): 477.1 (M⁺+1)
Compound 1717 (Table 17 below):¹H-NMR (200MHz, CD_ThreeOD) d 1.69 (m, 1H), 2.26 (m, 1H), 2.42 (d, 2H, J = 7.4Hz), 2.72 (m, 1H), 3.53 (m, 1H), 3.83 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 4.14 (dd, 1H, J = 10.6, 7.0 Hz), 5.14 (2, 2H), 6.69 (s, 1H), 6.96 (m, 2H), 7.06 (m, 1H), 7.25 (dd, 1H, J = 8.0Hz), 7.39 (m, 3H), 8.35 (m, 2H).
[0530]
MS (ES): 462.2 (M⁺+1).
[0531]
Compound 1718 (Table 17 below): 1H-NMR (200 MHz, CD_ThreeOD) d 1.40-2.00 (m, 5H), 3.52 (d, 2H, 7.6Hz), 3.80-4.00 (m, 1H), 4.00-4.20 (m, 3H), 4.50 (m, 2H), 6.36 -6.50 (m, 2H), 6.54 (s, 1H), 6.84-6.92 (m, 1H), 7.05 (t, 1H, J = 8.2Hz), 7.30-7.45 (m, 3H), 8.24 (d, 2H , J = 9.8Hz). MS (ES): 449.0 (M⁺+1)
Table 17 Adenosine A_Three Receptor selective compounds
* At least 10 times more selective than the other three subtypes.
[0532]
[Table 17]

The present invention provides compounds having the following structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention further provides compounds having the structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention further provides compounds having the structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention further provides compounds having the structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention further provides compounds having the structure:
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In a further embodiment, the present invention provides A₁A method of treating a disease associated with an adenosine receptor, wherein said patient is treated with a therapeutically effective amount of compound 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517. , 1518, 1519, or 1520 is provided. .
In a further embodiment, the present invention provides the above method, wherein said patient is a mammal.
[0533]
In a further embodiment, the present invention provides a method wherein said mammal is a human.
[0534]
In a further embodiment, the present invention provides the above A₁Adenosine receptors are cognitive impairment, renal failure, cardiac arrhythmia, respiratory epithelium, transmitter release, sedation, vasoconstriction, bradycardia, negative cardiac inotropic and transduction, bronchoconstriction, neutropil chemotaxis ), Reflux symptoms, or ulcer symptoms.
[0535]
In further embodiments, the present invention provides water-soluble prodrugs of compounds 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520. The water soluble prodrug is metabolized in vivo to yield A₁It produces active drugs that selectively inhibit adenosine receptors.
[0536]
In a further embodiment, the present invention provides said prodrug that is metabolized in vivo by esterase-catalyzed hydrolysis.
[0537]
In a further embodiment, the present invention provides a pharmaceutical composition comprising the prodrug and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0538]
In a further embodiment, the present invention relates to A₁A method of inhibiting the activity of an adenosine receptor, wherein the cell is contacted with compound 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520 Providing a method.
[0539]
In a further embodiment, the invention provides that the compound is A₁A in the cell, an antagonist of the adenosine receptor₁Provided is the above method of inhibiting the activity of an adenosine receptor.
[0540]
In a further embodiment, the present invention provides a method wherein the cell is a human cell.₁Provided is the above method of inhibiting the activity of an adenosine receptor.
[0541]
In a further embodiment, the invention provides that the compound is A₁A in human cells, which is an adenosine receptor antagonist₁Provided is the above method of inhibiting the activity of an adenosine receptor.
[0542]
In a further embodiment, the present invention provides A₁Provided is a method of treating a disease associated with an adenosine receptor, wherein the disease is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper respiratory tract disorder.
[0543]
In a further embodiment, the present invention provides A₁A method of treating a disease associated with adenosine receptors, wherein the disease is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper respiratory tract disorder and the patient is a human .
[0544]
In a further embodiment, the invention provides that the compound is A₁Provided are methods for treating the above diseases that are antagonists of adenosine receptors.
[0545]
In further embodiments, the present invention provides compounds 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520, and a steroid, β2 agonist, glucocorticoid A combination therapy for asthma, comprising a combination with a leukotriene antagonist or an anticholinergic agonist.
[0546]
In further embodiments, the present invention provides therapeutically effective amounts of compounds 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520, and pharmaceutical A pharmaceutical composition containing an acceptable carrier is provided.
[0547]
In further embodiments, the present invention treats respiratory disorders with compounds 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1313, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520. And the respiratory disorder is asthma, allergic rhinitis, or chronic obstructive pulmonary disease.
[0548]
In a further embodiment, the present invention provides a pharmaceutical composition as described above, wherein said pharmaceutical composition is a periocular, retro-ocular or intraocular injection formulation.
[0549]
In a further embodiment, the present invention provides the above pharmaceutical composition, wherein said pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0550]
In a further embodiment, the present invention provides the above pharmaceutical composition, wherein said pharmaceutical composition is a surgical irrigation solution.
[0551]
In a further embodiment, the present invention provides A₁A packaged pharmaceutical composition for treating diseases associated with adenosine receptors, comprising:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of compound 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520;
(B) providing a packaged pharmaceutical composition comprising instructions for using the compound to treat the disease in a patient.
[0552]
In further embodiments, the present invention provides pharmaceutically acceptable salts of 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520. To do.
[0553]
In a further embodiment, the invention relates to the aforementioned pharmaceutical, wherein the pharmaceutically acceptable salt of said compound 1509, 1511, 1515, 1518, or 1519 comprises a cation selected from the group consisting of sodium, calcium and ammonium. A functional composition is provided.
[0554]
In a further embodiment, the present invention provides A₁A method for treating a disease associated with an adenosine receptor comprising the A₁A method is provided wherein the disease associated with adenosine receptors is heart failure.
[0555]
Illustration
Example 21: 1- [6- (4-Hydroxy-4-phenyl-piperidin-1-yl-methyl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl] -pyrrolidine-2 -Synthesis of carboxylic acid amide (1505)
In a manner similar to Example 17, Compound 1505 was synthesized using L-prolinamide and 4-phenyl-piperidin-4-ol according to Synthesis Scheme IX:
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¹H-NMR (d6-DMSO) d 1.53 (s, 1H), 1.60 (s, 1H), 1.84-2.30 (m, 6H), 2.66 (m, 2H), 3.60 (s, 2H), 3.88 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 4.66 (d, 1H, J = 6.8Hz), 4.73 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 7.12-7.50 (m, 10H) ), 8.35 (m, 2H), 11.6 (br s, 1H); MS (ES): 305.1 (M⁺+1); melting point = 234-235 ° C.
[0556]
Example 22: Synthesis of [N- (2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl) (L) -prolinamide (1506)
Following synthesis scheme VII, compound 1506 was obtained using L-prolinamide:
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¹H-NMR (DMSO-d₆) d 2.05 (m, 4H), 3.85 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 4.70 (d, 1H, J = 8.0Hz), 6.58 (br s, 1H), 6.95 (br s, 1H) , 7.15 (d, 1H, J = 3.4Hz), 7.40 (m, 3H), 7.50 (br s, 1H), 8.40 (m, 2H), 11.6 (br s, 1H); MS (ES): 308.3 ( M⁺+1). Melting point = 236-238 ° C.
[0557]
Example 23: Synthesis of [N- (2-phenyl-6-methoxymethyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl)-(L) -prolinamide (1507)
Compound 1507 was synthesized using precursor compound 23 of Synthesis Scheme IX:
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Bromide 23 (4.23 g, 10 mmol) was dissolved in absolute methanol (60 mL) and DCM (120 mL) and AgO₂CCF₂N₂Treat for 1 hour at room temperature under. Filter off the solid and wash with DCM (2 × 20 mL). The filtrate is concentrated under vacuum. The residue is redissolved in DCM (80 mL). The resulting solution is then added to NaHCO_ThreeWash with saturated solution and brine, MgSO_FourDry above, filter and concentrate to give 3.71 g (4,99%) of an off-white solid.¹H-NMR (CDCl_Threed 1.75 (s, 9H), 3.51 (s, 3H), 4.83 (s, 2H), 6.70 (s, 1H), 7.47 (m, 3H), 8.52 (m, 2H).
[0558]
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Aryl chloride 4 (2.448 g, 6.55 mmol), DMSO (15 mL), L-prolinamide (4.0 g, 35.0 mmol) and NaHCO_Three(2.9 g) is combined and heated to 120 ° C. under nitrogen. After 4 hours, the reaction is cooled to room temperature and diluted with water (60 mL). The resulting slurry is extracted using DCM (10x). The combined organic phase is washed with NaHCO_ThreeWash with saturated solution and brine, MgSO_FourDry over, filter and concentrate to give 2.48 g of a brown solid. Pure product (1.86 g, 81%) is obtained as a white solid via flash column. White crystals are obtained from THF / hexane. Melting point = 213-215 ° C.¹H-NMR (CDCl_Three) d 2.15 (m, 3H), 2.52 (m, 1H), 3.26 (s, 3H), 3.92 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 4.42 (s, 2H), 5.08 (d, 1H, J = 8.2Hz), 5.49 (br s, 1H), 6.48 (s, 1H), 7.08 (br s, 1H), 7.42 (m, 3H), 8.38 (m, 2H), 9.78 (br s, 1H) MS (ES): 352.2 (M⁺+1).
[0559]
Example 24: Synthesis of 4-hydroxy-1- (2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidin-4-yl] -pyrrolidine-2-carboxylic acid amide (1508)
Compound 1508 was obtained using cis-hydroxyproline amide according to synthetic scheme VII:
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¹H-NMR (d₆-DMSO) d 1.90 (m, 1H), 3.85 (d, 1H, J = 9.2Hz), 4.08 (m, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.67 (dd, 1H, J = 8.8, 4.0Hz) , 5.30 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 7.37 (m, 3H), 7.64 (s, 1H), 8.37 (m, 2H), 11.65 (br s, 1H) MS (ES): 324.2 (M⁺+1); melting point = 268-271 ° C.
[0560]
Example 25: 3- [4-((S) -2-carbamoyl-pyrrolodin-1-yl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-6-yl] -propionic acid (1509) Synthesis of
Using precursor compound 23 of synthetic scheme IX, compound 1509 was obtained:
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tert-Butoxycarbonyl protected aryl bromide 23 (4.0 g, 9.5 mmol), dry DMSO (25 mL), NaH (454 mg, 3.79 mmol) and NaH₂PO_Four(1.62 g, 11.4 mmol) were combined and heated to 50 ° C. under argon for about 3.5 hours. The mixture was then poured into water (200 mL) and extracted three times with 100 mL portions of EtOAc. The combined organic phases are washed thoroughly with water, brine and MgSO_FourDrying above, filtering and concentration gave a yellow solid which was purified by trituration with ethanol to give 1.55 g of a pale yellow solid (7). The mother liquor was purified by flash chromatography (10% EtOAc in hexanes) to give an additional 454 mg (60%).¹H-NMR (CDCl_Threed 1.77 (s, 9H), 7.25 (s, 1H), 7.48 (m, 3H), 8.52 (m, 2H), 10.39 (s, 1H); m.p. = 156 ° C (dec).
[0561]
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Aldehyde 7 (600 mg, 1.7 mmol) was dissolved in dry THF (20 mL) and cooled to 0 ° C. under argon. To this was added a 0 ° C. solution of (tert-butoxycarbonylmethylene) -triphenylphosphorane (694 mg, 1.8 mmol) in 10 mL dry THF dropwise via a cannula. After 3 hours, the mixture was concentrated and purified by trituration with ethanol to give 565 mg (73%) of a white solid (8).¹H NMR (CDCl_Threed 1.58 (s, 9H), 1.79 (s, 9H), 6.46 (d, 1H), 6.95 (s, 1H), 7.48 (m, 3H), 8.09 (d, 1H), 8.56, 2H) .
[0562]
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A solution of compound 8 (565 mg 1.2 mmol) in 5 mL THF was diluted to 100 mL with EtOAc. 600 mg catalyst (5% wt Pd, 50% H₂O) was added and then purged with argon and the mixture was hydrogenated at atmospheric pressure. After 8 hours, the mixture was filtered, concentrated and purified using flash chromatography (10% EtOAc in hexanes) to separate 200 mg (35%) of 9 as a clear oil that was allowed to stand. Crystallized.¹H NMR (CDCl_Three) d 1.42 (s, 9H), 1.75 (s, 9H), 2.65 (t, 2H), 3.32 (t, 2H), 6.41 (s, 1H), 7.45 (m, 3H), 8.51 (m, 2H) .
[0563]
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Aryl chloride 9 (200 mg, 0.44 mmol), DMSO (10 mL) and L-prolinamide (440 mg, 4.4 mmol) were combined and heated to 85 ° C. under argon. After 14 hours, the mixture was cooled to room temperature and partitioned between water and ethyl acetate. The layers were separated and the aqueous layer was washed with EtOAc (3x). The combined organic phases are washed thoroughly with water (3x), brine, MgSO_FourDry over, filter and concentrate to give 10 as a yellow film that is flash chromatographed (CH₂Cl₂In 2.5% MeOH). 185 mg (97%) were obtained. MS (ES): 435.8 (M⁺+1).
[0564]
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Ester 10 (30 mg, mmol) in 5 mL dioxane was hydrolyzed by adding 0.5 mL concentrated HCl. After 3 hours, the mixture was concentrated in vacuo and recrystallized in EtOH / EtOAc to give 1509 as a white solid (20 mg, 61%). MS (ES): 380 (M⁺+1).
[0565]
Example 26: Synthesis of [N- (2-phenyl-6-aminocarbonyl methoxymethyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl)-(L) -prolinamide (1510)
Using precursor compound 23 of synthetic scheme IX, compound 1510 was obtained:
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Bromide 23 (1.27 g, 3 mmol) and molecular sieve (5 g) are stirred in anhydrous methyl glycolate (5.8 g, 60 mmol) and DCM (40 mL). Solution, N₂Treat with AgOTf below and stir for 3 hours. Remove the solids by filtration and wash with DCM (2 × 20 mL). The filtrate is concentrated under vacuum. The residue is redissolved in DCM (80 mL). The resulting solution was then washed with water, NaHCO._ThreeWash with saturated solution and brine, MgSO_FourDry over, filter and concentrate to give 1.35 g (99%) of an off-white solid (12).¹H-NMR (CDCl_Threed 1.75 (s, 9H), 3.80 (s, 3H), 5.0 (s, 2H), 6.78 (s, 1H), 7.47 (m, 3H), 8.52 (m, 2H).
[0566]
Embedded image

Aryl chloride 12 (177 mg, 0.41 mmol), DMSO (10 mL), L-prolinamide (466 mg, 4 mmol) and NaHCO_Three(500 mg) are combined and heated to 120 ° C. under nitrogen. After 4 hours, the reaction is cooled to room temperature and diluted with water (60 mL). The resulting slurry is extracted with DCM (5 × 30 mL). The combined organic phase is washed with NaHCO_ThreeWash with saturated solution and brine, MgSO_FourDry over, filter and concentrate to give a brown solid. After the flash column, the pure product (154 mg, 92%) is obtained as a white solid (13).¹H-NMR (CDCl_Threed 2.15 (m, 3H), 2.52 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 4.58 (s, 2H), 5.08 (s, 1H,), 5.85 (br s, 1H), 6.48 (s, 1H), 7.08 (br s, 1H), 7.42 (m, 3H), 8.40 (m, 2H), 10.58 (br s, 1H); MS (ES): 410.1 (M⁺+1).
[0567]
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Methyl ester 13 (124 mg, 0.3 mmol) in HOCH_ThreeDissolve in (15 mL). Ammonia is bubbled into this solution for 0.5 hour. The reaction mixture is then stirred for a further 3 hours at room temperature. After removing the solvent, 111 mg of a white solid (1510, 93%) is obtained.¹H-NMR (CDCl_Three) d 1.82 (m, 3H), 2.20 (m, 1H), 2.80 (m, 1H), 3.10 (m, 1H), 3.63 (dd, 2H, J₁= 13.8Hz, J₂= 19.4Hz), 3.87 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 4.97 (m, 1H), 5.96 (m, 2H), 6.35 (s, 1H), 6.86 (br s, 1H), 7.11 ( br s, 1H), 7.37 (m, 3H), 8.28 (m, 2H), 11.46 (br s, 1H); MS (ES): 394.8 (M⁺+1).
[0568]
Example 27: Synthesis of [4- (2-carbamoylpyrrolidin-1-yl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-6-carboxylic acid] (1511)
Compound 1511 was synthesized using precursor compound 15 of Synthesis Scheme VII:
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A suspension of sodium hydride (780 mg of 60 oil suspension, 19.5 mmol) in dry DMF (20 mL) cooled to nitrogen in an ice / water bath was added to pyrrolopyrimidine in DMF (10 mL). A solution of 15 (2.00 g, 7.52 mmol) is added over 5 minutes. After 15 minutes, benzenesulfonyl chloride (1.2 mL, 9.40 mmol) is added, then the cooling bath is removed. After 4 hours, the reaction mixture was iced and NaHCO 3._ThreePour into a mixture with saturated solution, filter off the precipitated solid and triturate with acetone (3) and methanol (2) to give 2.37 g of a beige solid. This solid (16) contains about 10 mol-% DMF (based on 83% yield) and can be used in the next step; obtain a pure sample by chromatography on silica gel using acetone as the eluent. Can do.¹H-NMR (CDCl_Three): D 6.70 (d, J = 4.2Hz, 1H), 7.47-7.68 (m, 6H), 7.76 (d, J = 4.2Hz, 1H), 8.24-8.32 (m, 2H), 8.48-8.56 (m , 2H); IR (solid): n = 3146cm^-1, 1585, 1539, 1506, 1450, 1417, 1386, 1370, 1186, 1176, 1154, 1111, 1015, 919, 726, 683, 616, 607; MS (ES): 372/370 (MH⁺); Melting point = 226-227 ° C.
[0569]
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To a solution of N-sulfonyl compound 16 (337 mg, 0.911 mmol) in dry THF (34 mL) cooled with dry glacial acetic acid is added LDATHF (1.OmL, 1.5 M solution in cyclohexane, 1.5 mmol). After 45 minutes, carbon dioxide is bubbled through the solution for 5 minutes and then the cooling bath is removed. When the solution reaches ambient temperature, the solvent is evaporated and 0.5 equivalents of (iPr)₂NCO₂398 mg of salt 17 containing Li is obtained as a yellowish solid. This salt is used in the next step without further purification.¹H-NMR (D₆-DMSO): d = 6.44 (s, 1H), 7.50-7.75 (m, 6H), 8.33-8.40 (m, 2H), 8.53 (dd, J = 8.0, 1.6Hz, 2H).
[0570]
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A solution of lithium salt 17 (50 mg) and L-prolinamide (122 mg, 1.07 mmol) in DMSO (1.5 mL) is heated to 80 ° C. under nitrogen for 15.5 hours. To the cooled solution is added 4% aqueous acetic acid (10 mL) and the mixture is extracted with EtOAc. (5'10 mL). The combined organic phases were washed with 4% aqueous acetic acid (10 mL), water (10 mL) and brine (10 mL), MgSO_FourDry on top. Filtration and concentration gives 40 mg of 18 as a yellowish solid which is used in the next step without purification.¹H-NMR (CD_ThreeOD): d = 1.95-2.36 (m, 4H), 3.85-3.95 (m, 1H), 3.95-4.17 (m, 1H), 4.72 (br s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.35-7.45 (m, 3H), 7.45-7.70 (m, 3H), 8.33-8.50 (m, 4H).
[0571]
Embedded image

A solution of sodium hydroxide in methanol (1.5 mL, 5 M, 7.5 mmol) is added to a solution of pyrrolopyrimidine 18 (40 mg, 0.081 mmol) in methanol (2 mL). After 2 hours, the pH was adjusted to 5, most of the methanol was evaporated, the mixture was extracted with EtOAc (5'10 mL), the combined organic phases were washed with brine, MgSO_FourDry on top. Filtration and concentration gave 24 mg of a pale yellow solid which was triturated with toluene / EtOAc / MeOH to give 15.6 mg (55%) of acid 1511 as a slightly yellowish solid.¹H-NMR (CD_ThreeOD): d = 2.05-2.20 (m, 4H), 3.95-4.10 (m, 1H), 4.15-4.25 (m, 1H), 4.85 (br s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.35-7.42 (m, 3H), 8.38-8.45 (m, 2H); IR (solid): n = 3192cm^-1, 2964, 2923, 2877, 1682, 1614, 1567, 1531, 1454, 1374, 1352, 1295, 1262, 1190, 974, 754, 700; MS (ES): 352 (M⁺+1); melting point = 220 ° C. (decomp.).
[0572]
Example 28: Synthesis of 1- (6-methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidin-4-yl)-(S) -pyrrolidine-2-carboxylic acid amide (1512)
Compound 1512 was synthesized by the following steps:
Embedded image

Aryl chloride 20 (3 g, 10.7 mmol), DMSO (50 mL), and (S) -prolinamide were combined and heated to 85 ° C. under argon. After stirring overnight (14 hours), the mixture was cooled to room temperature and poured into 800 mL of water. This was extracted three times with 200 mL portions of EtOAc. The combined organic phase was washed thoroughly with water (3 × 300 mL), brine, and MgSO_FourDried over, filtered and concentrated to give a dark brown solid. This solid was recrystallized twice from EtOAc to give 1.95 g (57%) of a tan solid (1512).¹H NMR (DMSO-d₆d 1.8-2.2 (m, 4H), 2.3 (s, 3H), 3.8 (m, 1H), 4.0 (m, 1H), 4.6 (d, 1H), 6.2 (s, 1H), 6.9 (s, 1H), 7.2 (m, 3H), 7.3 (s, 1H), 8.4 (m, 2H), 11.5 (s, 1H); MS (ES): 322 (M⁺+1).
[0573]
Example 29: Synthesis of 1- [6- (2-hydroxy-ethoxymethyl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl] -pyrrolidine-2-carboxylic acid amide (1513)
Compound 1513 was synthesized using L-prolinamide and ethane-1,2-diol according to Synthesis Scheme IX in the same manner as in Example 17.
[0574]
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MS (ES): 382 (M⁺+1).
[0575]
Example 30: Synthesis of 4- (6-imidazol-1-ylmethyl 2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-ylamino) -cyclohexanol (1514)
Compound 1514 was synthesized according to Synthesis Scheme IX using procedures similar to Example 17 using N-6 aminocyclohexanol and imidazole:
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MS (ES): 389 (M⁺+1).
[0576]
Example 31: Synthesis of 4- (4-hydroxy-cyclohexylamino) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-6-carboxylic acid (1515)
Compound 1515 was synthesized according to Synthesis Scheme IX, using N-6 aminocyclohexanol and imidazole, in a manner similar to Example 27:
Embedded image

MS (ES): 353 (M⁺+1).
[0577]
Example 32: Synthesis of 4- [6- (2-hydroxy-ethoxymethyl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-ylamino] -cyclohexanol (1516)
Compound 1516 was synthesized in the same manner as compound 1513, using N-6 aminocyclohexanol, following synthesis scheme IX:
Embedded image

MS (ES): 383 (M⁺+1).
[0578]
Example 33: Synthesis of 4- (4-hydroxy-cyclohexylamino) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-6-carboxylic acid methyl ester (1517)
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A solution of lithium salt 17 (0.13 mmol) in dry DMF (4 mL) is stirred with methyl iodide (0.1 mL, 1.6 mmol) at 20 ° C. under argon for 3 hours. DMF is evaporated and aqueous ammonium chloride is added (15 mL). The mixture was extracted with EtOAc (3'15 mL) and the combined organic phases were washed with water (2'10 mL) and brine (10 mL), MgSO_FourDry on top. Filtration and concentration gives 21 mg (38%) of methyl ester 22.
[0579]
Embedded image

A solution of methyl ester 22 (24.5 mg, 0.057 mmol) and 4-trans-aminocyclohexanol (66 mg, 0.57 mmol) in DMSO (1.5 mL) was heated to 80 ° C. under nitrogen and then the heating was stopped. Stirring at 20 ° C. was continued for 13.5 hours. To the cooled solution is added 4% aqueous acetic acid (10 mL) and the mixture is extracted with EtOAc (3′10 mL). The combined organic phases were washed with 4% aqueous acetic acid (10 mL), water (10 mL), 2N NaOH (10 mL), water (10 mL), and brine (10 mL), and MgSO_FourDry on top. To a solution of the crude material obtained via filtration and concentration (1H NMR shows about 50% removal of the benzenesulfonyl group) in THF (2 mL) was added a solution of NaOH in MeOH (0.5 mL of 5 M solution, 2.5 mmol) is added at ambient temperature. After 20 minutes, water and NaHCO_ThreeSaturated solution (5 mL each) is added and the mixture is extracted with EtOAc (4'15 mL). The combined organic phase was washed with 2N NaOH (10 mL), water (10 mL), and brine (10 mL), and MgSO_FourDry on top. The crude material obtained after filtration and concentration is chromatographed on silica gel eluting with hexane / EtOAc 1: 1 (R) 1: 2 to give 8.6 mg (41%) of 1517 as a white solid. Melting point 225-227 ° C.¹H-NMR (CD_ThreeOD): d = 1.38-1.62 (m, 4H), 1.95-2.10 (m, 2H), 2.10-2.25 (m, 2H), 3.55-3.70 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 4.20- 4.35 (m, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.35-7.47 (m, 3H), 8.35-8.42 (m, 2H); IR (solid): n = 3352 cm^-1, 3064, 2935, 2860, 1701, 1605, 1588, 1574, 1534, 1447, 1386, 1333, 1263, 1206, 1164, 1074, 938, 756, 705; MS (ES): 367 (MH⁺).
[0580]
Example 34: Synthesis of [4- (2-carbamoyl-pyrrolidin-1-yl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-6-ylmethoxy] -acetic acid methyl ester (1518)
Compound 1518 was obtained by synthesis with precursor compound 12 by the same procedure as in Example 26:
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MS (ES): 410 (M⁺+1).
[0581]
Example 35: Synthesis of [4- (2-carbamoyl-pyrrolidin-1-yl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-6-ylmethoxy] -acetic acid (1519)
Compound 1519 was obtained by synthesizing a methyl ester group using a base in the same manner as 1518:
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MS: 396 (M⁺+1).
[0582]
Example 36: Synthesis of 4- (4-hydroxy-cyclohexylamino) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-6-carboxylic acid amide (1520)
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Ammonia gas is concentrated into a solution of pyrrolopyrimidine 23 (7.8 mg, 0.021 mmol) in methanol (6 mL) and cooled with dry ice / acetone until the total volume reaches 12 mL. Stir at 20 ° C. for 10 days, evaporate the solvent and remove the residue in CH₂Cl₂Purify by preparative TLC on silica gel eluting with 5% MeOH in. The resulting material was then triturated with ether to give 6.5 mg (88%) of amide 1520 as a white solid, mp: 210-220 ° C. (decomp.).¹H-NMR (CD_ThreeOD): d = 1.40-1.60 (m, 4H), 2.00-2.15 (m, 2H), 2.15-2.25 (m, 2H), 3.55-3.70 (m, 1H), 4.20-4.35 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.35-7.47 (m, 3H), 8.34-8.40 (m, 2H); IR (solid): n = 3358cm^-1, 3064, 3025, 2964, 2924, 2853, 1652, 1593, 1539, 1493, 1452, 1374, 1326, 1251, 1197, 1113, 1074, 1028, 751, 699; MS (ES): 352 (MH⁺).
[0583]
Compound activity
Adenosine 1 (A₁) Receptor subtype saturation and competitive radioligand binding are described for compounds 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, and 1520 described above, particularly This was carried out as described on pages 152-153 of this specification (PCT / US01 / 45280). All the compounds referenced above are A₁Receptor binding affinity was equivalent to or exceeded that of reference compound 1318 or 1319 as described herein, particularly as described in Table 13 on page 171 of PCT / US01 / 45280.
[0584]
The water solubility of the above-listed compounds listed in Table 18 is determined by their cLogP value (computer program CS ChemDraw, ChemDraw Ultra ver. 6.0 (Copyright) supplied by Cambridge Soft Corporation, 100 Cambridge Park Drive, Cambridge, MA 02140); Calculated from 1999) is expected to be better than reference compounds 1318 or 1319.
[0585]
A listed in Table 18₁The receptor specific compound had a lower cLogP value of about 1.5 to about 3.4 compared to the reference compound 1318 or 1319 with a cLogP value of about 3.8. More polar A listed in Table 18 with lower cLogP values than reference compound 1318 or 1319₁The receptor compound has a potency and A as compared to the reference compound.₁It was not expected that it would still have receptor binding selectivity.
[0586]
[Table 18]

PCT / US01 / 45280 The first 288 After page, A _2a Receptor specific compounds
The present invention provides a compound having the following structure.
[0587]
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The present invention also provides a compound having the structure:
[0588]
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In a further embodiment, the present invention relates to A in a patient._2aProvided is a method of treating a disease associated with an adenosine receptor comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of compound 1609 or 1610.
[0589]
The present invention also provides the above method wherein said patient is a mammal.
[0590]
The present invention further provides a method wherein the mammal is a human.
[0591]
The present invention also provides A_2aA method for treating a disease associated with an adenosine receptor comprising:_2aMethods are provided in which adenosine receptors are associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, senile dementia, or Parkinson's disease.
[0592]
The present invention provides the above method wherein the compound treats the disease by stimulating adenylate cyclase.
[0593]
The present invention also provides a water-soluble prodrug of compound 1609 or 1610, wherein the water-soluble prodrug is A_2aMethods are provided for in vivo metabolism to active drugs that selectively inhibit adenosine receptors.
[0594]
The invention also provides a water-soluble prodrug of compound 1609 or 1610, wherein the prodrug is metabolized in vivo by esterase-catalyzed hydrolysis.
[0595]
The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising a water-soluble prodrug of compound 1609 or 1610 and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0596]
The present invention also provides A_2aA method of inhibiting adenosine receptor activity comprising contacting the cell with compound 1609 or 1610 is provided.
[0597]
The present invention also provides A_2aA method of inhibiting the activity of an adenosine receptor comprising contacting said cell with compound 1609 or 1610, said compound comprising said A_2aMethods are provided that are antagonists of adenosine receptors.
[0598]
The present invention also provides the above method, wherein the cell is a human cell.
[0599]
The present invention also provides that the cell is a human cell and the compound is A._2aProvided is the above method, which is an adenosine receptor antagonist.
[0600]
The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of compound 1609 or 1610 and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0601]
The invention also provides that the therapeutically effective amount is effective to treat Parkinson's disease and diseases associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, senile dementia, The pharmaceutical composition is provided.
[0602]
The present invention also provides the above pharmaceutical composition, wherein the composition is an ophthalmic formulation.
[0603]
The present invention also provides the pharmaceutical composition as described above, wherein the composition is a periocular, post-ocular or intraocular injection formulation.
[0604]
The present invention also provides the above pharmaceutical composition, wherein the composition is a systemic combination.
[0605]
The present invention also provides the above pharmaceutical composition, wherein the composition is a surgical irrigation solution.
[0606]
The invention also provides a combination therapy for Parkinson's disease comprising compound 1609 or 1610 and any dopamine enhancer.
[0607]
The present invention also provides a combination therapy for cancer comprising compound 1609 or 1610 and any cytotoxic agent.
[0608]
The present invention also provides a combination therapy for glaucoma comprising compound 1609 or 1610 and a prostaglandin agonist, muscarinic agonist or β-2 antagonist.
[0609]
The present invention also provides A_2aA packaged pharmaceutical composition for treating diseases associated with adenosine receptors, comprising:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of compound 1609 or 1610;
(B) providing a packaged pharmaceutical composition comprising instructions for using the compound to treat the disease in a patient.
[0610]
Example:
Example 41: Synthesis of 1- (6-phenyl-2-pyridin-4-yl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl] -pyrrolidine-2-carboxylic acid amide (1609)
Compound 1609 was synthesized by reacting L-proline amide with the appropriate chloride intermediate described in Synthesis Scheme II described on page 82 of PCT / US01 / 45280:
Embedded image

¹H-NMR (d₆-DMSO) d 1.95-2.15 (m, 4H), 4.00 (br s, 1H), 4.15 (br s, 1H), 4.72 (br s, 1H), 6.90 (br s, 1H), 7.19 (br s, 1H), 7.30 (t, 1H, J = 7.0Hz), 7.44 (t, 2H, J = 7.0Hz), 7.59 (s, 1H), 7.92 (br s, 2H), 8.26 (d, 2H, J = 6.2Hz), 8.65 (d, 2H, J = 6.2Hz); MS (ES): 384.9 (M⁺+1); Mpt = 280-316 ° C. (decomp.).
[0611]
Example 42: 1- [6- (3-methoxy-phenyl) -2-pyridin-yl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl] -pyrrolidine-2-carboxylic acid amide (1610) Composition
Compound 1610 was synthesized by reacting L-proline amide with the appropriate chloride intermediate described in Synthesis Scheme II on page 82 of PCT / US01 / 45280:
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¹H-NMR (d₆-DMSO) d 2.07 (m, 4H), 3.85 (s, 3H), 4.02 (m, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.75 (m, 1H), 6.89 (m, 1H), 7.00 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.35 (t, 1H, J = 8.2Hz), 7.53 (s, 2H), 7.60 (s, 1H), 8.28 (d, 2H, J = 5.8Hz), 8.67 ( d, 2H, J = 5.8Hz), 12.37 (s, 1H); MS (ES): 415.0 (M⁺+1).
[0612]
Compound activity
Adenosine 2a (A_2a) Receptor subtype competitive radioligand binding was performed as described herein, particularly as described on page 153 of this specification (PCT / US01 / 45280). Compounds 1609 and 1610 are A_2aIt has been found to have receptor binding affinity and selectivity.
[0613]
PCT / US01 / 45280, pages 292-300 are A₃It relates to additional compounds specific for the receptor.
[0614]
The present invention also provides a compound having the structure:
Embedded image

In a further embodiment, the present invention relates to A₃A method of inhibiting the activity of an adenosine receptor, comprising contacting said cell with compound 1720 is provided.
[0615]
In a further embodiment, the present invention relates to A₃A method for inhibiting the activity of an adenosine receptor, wherein said compound comprises A₃Methods are provided that are antagonists of adenosine receptors.
[0616]
In a further embodiment, the present invention provides a method wherein the cell is a human cell.₃Provided is the above method of inhibiting the activity of an adenosine receptor.
[0617]
In a further embodiment, the invention provides that the cell is a human cell and the compound is A₃A in the cell, an antagonist of the adenosine receptor₃Provided is the above method of inhibiting receptor activity.
[0618]
In a further embodiment, the present invention provides a method of treating damage to a patient's eye comprising administering to said patient a composition containing a therapeutically effective amount of Compound 1720. To do.
[0619]
In a further embodiment, the present invention provides a method wherein said damage comprises retinal or optic nerve head damage.
[0620]
In a further embodiment, the present invention provides a treatment for glaucoma comprising administering to a patient a therapeutically effective amount of compound 1720.
[0621]
In a further embodiment, the present invention is a treatment for glaucoma comprising one or more adenosine receptor antagonists, preferably adenosine receptor A_ThreeAntagonists (preferably N-6 substituted 7-deazapurine, most preferably [2- (3H-imidazol-4-yl) -ethyl]-(2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidin-4-yl) Provides treatments for glaucoma, including -amine).
[0622]
In another embodiment, the present invention provides adenosine receptor A_ThreeAntagonists (preferably N-6 substituted 7-deazapurine, most preferably [2- (3H-imidazol-4-yl) -ethyl]-(2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidin-4-yl) -Amine), and one or more other compounds selected from the group consisting of: a combination therapy for glaucoma: a beta adrenergic receptor antagonist (ie, a beta adrenergic antagonist or beta blocker) (eg, Timolol maleate, betaxolol, carteolol, levobnolol, metipranolol, L-653328 (acetate of L652698), β1 adrenergic receptor antagonist, α-2 adrenergic receptor agonist (eg, aplaclonidine) , Brimonidine, AGN-195795, AGN190837 (analogue of Bay-a-6781)), carbonic anhydrase inhibitor (brinzamide (brinz) olamide), dorzolamide, MK-927 (inhibitor of human carbonic anhydrase II isoenzyme), an inhibitor of carbonic anhydrase IV isoenzyme, cholinergic agonist (eg muscarinic cholinergic agonist, Carbachol, pilocarpine HCl, pilocarpine nitrate, pilocarpine, pyrolorubin prodrug (eg DD-22A)), prostaglandin and prostaglandin receptor agonists, angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitors, AMPA receptor agonists (eg Latanoprost, unoprostone isopropyl, PGF2 alpha agonist, prostanoid selective FP receptor agonist, PG agonist such as antihypertensive prostamide), angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor (eg, spirapril, spiraprila SpAprilat), AMPA receptor antagonists, 5-HT agonists (eg, MKC-242 (5-3-[((2S) -1,4-benzodioxan-2-ylmethyl) amino] propoxy-1, Selective 5-HT1A receptor agonists such as 3-benzodioxole HCl), angiogenesis inhibitors (eg steroid anecortave), NMDA antagonists (eg Hu-211, memantine, cannabinoid MNDA receptor agonist, dexanabi , Dexanabinol prodrugs and analogs), NR2B selective antagonists (eg eliprodil (SL-82.0715)), renin inhibitors (eg CGP-38560, SR-43845), cannabinoid receptor agonists (eg tetrahydro Cannabinol (THC), and THC analogs, selective CB2 cannabinoid receptor agonists (eg L-768242, L-759787), brain Compounds such as anandamide that bind to distinct CB1 and peripheral CB2 receptors), angiotensin receptor antagonists (eg, angiotensin II receptor antagonists (eg CS-088), selective angiotensin II AT such as losartan potassium -I receptor antagonist), hydrochlorothiazide (HCTZ), somatostatin agonist (eg, non-peptide somatostatin agonist NNC-26-9100), glucocorticoid antagonist, mast cell degranulation inhibitor (eg, nedocromil), α-adrenergic receptor Body blockers (eg, dapiprazole, α2 adrenergic receptor antagonist, α1 adrenergic receptor antagonist (eg, bunazosin), α-2 adrenergic receptor antagonist, thromboxane 2 mimetics, protein kinase inhibitors (eg H7), prostaglandin F derivatives (eg S-1033), prostaglandin-2α antagonists (eg PhXA-34), dopamine D1 and 5-HT2 agonists (fenoldopam) ), Nitric oxide releasing agents (eg NCX-904 or NCX-905, nitric oxide releasing derivatives of timolol), 5-HT2 antagonists (eg sarpogrelate), NMDA antagonists (eg dexanabinol ) Prodrugs and analogs), cyclooxygenase inhibitors (eg, diclofenac, or non-steroidal compounds nepafenac), inosine, dopamine D2 receptor and alpha adrenergic receptor agonists (talipexole)), dopamine D1 receptor Antagonists and D2 receptor agonists (eg SDZ-GLC-756), vasopressin receptor antagonists (eg vasopressin V2 receptor antagonist (eg SR-121463)), endothelin antagonists (eg TBC-2576), 1- (3- Hydroxy-2-phosphorylmethoxypropyl) cytosine (HPMPC) and released analogs and prodrugs, thyroid hormone receptor ligands (eg KB130015), muscarinic M1 agonists, NMDA receptor antagonists (eg cannabinoid NMDA-receptor antagonists dex Dexanabinol), PG agonists such as antihypertensive lipids, prostamide, sodium channel blockers, NMDA antagonists, mixed activity ion channel blockers, β-adrenergic receptor antagonists and PGF2α Combinations with gonists (eg latanoprost and timolol), guanylate cyclase activators (eg arterial natriuretic peptide (ANP) or non-peptide mimetics), inhibitors of ANP neutral endopeptidase, nitrovasodilation Agents (eg nitroglycerin, hydralazine, sodium nitroprusside), endothelin receptor modulators (eg ET-1 or non-peptidomimetics, sarafotoxin-S6c), ethacrynic acid, other phenoxyacetic acid analogues (eg induct Indacrinone, ticrynafen), actin disrupters (eg, latrunculin), calcium channel blockers (eg, verapamil, nifedipine, brovincamine, nivaldipine), and neuroprotective agents.
[0623]
For glaucoma comprising Compound 1702 and one or more compounds selected from the group consisting of β-adrenergic receptor antagonists, α2-adrenergic receptor agonists, carbonic anhydrase antagonists, cholinergic agonists, and prostaglandin receptor agonists Combination therapy.
[0624]
In a further embodiment, the present invention provides a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of compound 1720 and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0625]
In a further embodiment, the present invention relates to A in a patient.₃A broadcast pharmaceutical composition for treating diseases associated with adenosine receptors, comprising:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of Compound 1720;
(B) providing a packaged pharmaceutical composition comprising instructions for using the compound to treat the disease in a patient.
[0626]
In a further embodiment, the present invention provides a method of making a composition containing compound 1720 comprising mixing compound 1720 with a suitable carrier.
[0627]
In a further embodiment, the invention provides a pharmaceutically acceptable compound 1720 comprising an anion selected from the group consisting of maleate ion, fumarate ion, tartrate ion, acetate ion, phosphate ion, and mesylate ion. Provide an acceptable salt.
[0628]
Example 43: Synthesis of [2- (3H-Imidazol-4-yl) -ethyl]-(2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl) -amine (1720)
Compound 1720 was synthesized using precursor compound 1 of Synthesis Scheme VII to obtain:
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Aryl chloride 1 (400 mg, 1.50 mmol), DMSO (10 mL) and histamine (1.67 g, 15.0 mmol) are mixed and heated to 120 ° C. under a nitrogen atmosphere. After 6.5 hours, the reaction is cooled to room temperature and partitioned between EtOAc and water. The layers are separated and the aqueous layer is extracted with EtOAc (3x). The combined organic phases are washed with brine (2x) and MgSO_FourDry over, filter and concentrate to give 494 mg of a brown solid. This solid is washed with cold MeOH and recrystallized from MeOH to give 197 mg (43%) of an off-white solid (1720).
[0629]
1H-NMR (CD3OD) d 3.05 (t, 2H, J = 7. OHz), 3.94 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 6.50 (d, 1H, J = 3.5 Hz), 6.88 (br s, 1H ), 7.04 (d, 1H, J = 3.5Hz), 7.42 (m, 3H), 7.57 (s, 1H), 8.34 (m, 2H); MS (ES): 305.1 (M⁺+1); Mpt = 234-235 ℃
Compound activity
Compound 1720 is adenosine 3 (A as described herein, in particular as described herein on pages 153-154 (PCT / US01 / 45280)._Three) Receptor antagonist radioligand binding was performed. Compound 1720 is 10 times greater than Reference Compound 1308, particularly as described in Table 13 on page 169 herein._ThreeIt has been found to have receptor binding affinity.
[0630]
Incorporation by reference
All patents, published patent applications, and other references disclosed herein are expressly incorporated herein by reference as part of this specification.
[0631]
Equal
Those skilled in the art will recognize, and be able to ascertain using no more than routine experimentation, many equivalents to the specific embodiments of the invention specifically described herein. Such equivalents are intended to be included within the scope of the claims.
[0632]
The present invention further provides compounds of the formula:
Embedded image

here,
R₁NR₂Together form a ring having the structure:
Embedded image

Or R₁Is H, R₂Is
Embedded image

Is;
R_FiveIs H, or substituted or unsubstituted alkyl or alkylaryl.

Claims (66)

A compound having the following structure or a pharmaceutically acceptable salt thereof:

(Where
R ₁ NR ₂ has the following structure:

Or together, R ₁ is H and R ₂ is

Is;
R ₁ NR ₂ is

R ₅ is H, —CH ₂ (NC ₅ H ₈ ) (OH) (C ₆ H ₅ ), —CH ₂ OCH ₃ , — (CH ₂ ) ₂ C (O ) OH, —CH ₂ OCH ₂ C (O) NH ₂ , —C (O) OH, —CH ₃ , —CH ₂ O (CH ₂ ) ₂ OH, —CH ₂ OCH ₂ C (O) OCH ₃ , or It is _{-CH 2 OCH 2 C (O)} OH;
R ₁ is H and R ₂ is

R ₅ is —CH ₂ (N ₂ C ₃ H ₃ ), —C (O) OH, —CH ₂ O (CH ₂ ) ₂ OH, —C (O) OCH ₃ , or —C ( O) is the NH _2). The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.   A pharmaceutically acceptable salt of the compound of claim 6, 8, 12, 15, or 16, wherein the salt contains a cation selected from the group consisting of sodium, calcium, and ammonium. salt.   18. A pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound according to any one of claims 1 to 17, and a pharmaceutically acceptable carrier.   18. A pharmaceutical composition comprising a compound according to any one of claims 1 to 17, a pharmaceutically acceptable carrier and at least one of a steroid, a β2 agonist, a glucocorticoid, a leukotriene antagonist, or an anticholinergic agonist. For the treatment of a disease associated with A ₁ adenosine receptor, the compounds according to any one of claims 1 to 17. Wherein the A ₁ adenosine receptors, recognition disorder, renal failure, arrhythmia, respiratory epithelia, transmitter release, sedation, vasoconstriction, bradycardia, negative cardiac inotropic and dromotropic, bronchoconstriction, neutrophil chemotaxis, reflux 22. A compound according to claim 21 associated with a reflux condition or ulcer condition.   23. The compound of claim 21, wherein the disease is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper respiratory tract disorder.   24. The compound of claim 23, wherein the disease is asthma, allergic rhinitis, or chronic obstructive pulmonary disease. Wherein the A ₁ adenosine receptor is associated with congestive heart failure, compounds of claim 21. A compound according to any one of claims 1-17 for treating a disease associated with A ₁ adenosine receptor in a treated patient in need of, said disease, antidiuretic, bradycardia, bronchitis Bronchoconstriction, Alzheimer's disease, arrhythmia, hypoxia, hypertension, inflammation, negative cardiac inotropic and transduction, renal failure, sedation, or transmitter release, respiratory epithelium, respiratory epithelium Compounds related to smooth muscle contraction, vasoconstriction or mast cell degranulation.   18. A compound according to any one of claims 1 to 17 for enhancing patient memory. For inhibiting the activity of the A ₁ adenosine receptor in a cell, A compound according to any one of claims 1 to 17. A packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with A ₁ adenosine receptor in a patient, the following:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of the compound of any one of claims 1 to 17;
(B) a packaged pharmaceutical composition comprising instructions for use of the compound to treat the disease in a patient. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.   32. A pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound according to claim 30 or 31 and a pharmaceutically acceptable carrier.   The therapeutically effective amount is effective to treat Parkinson's disease and diseases associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, or senile dementia. 33. The pharmaceutical composition according to 32.   33. The pharmaceutical composition of claim 32, wherein the pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation.   33. The pharmaceutical composition according to claim 19 or 32, wherein the pharmaceutical composition is a periocular, post-ocular or intraocular injection formulation.   33. A pharmaceutical composition according to claim 19 or 32, wherein the pharmaceutical composition is a systemic combination.   33. A pharmaceutical composition according to claim 19 or 32, wherein the pharmaceutical composition is a surgical irrigation solution.   32. A pharmaceutical composition comprising a compound according to claim 30 or 31, a pharmaceutically acceptable carrier, and at least one dopamine enhancer.   32. A pharmaceutical composition comprising a compound according to claim 30 or 31, a pharmaceutically acceptable carrier, and at least one cytotoxic agent.   32. A pharmaceutical composition comprising a compound according to claim 30 or 31, a pharmaceutically acceptable carrier, and at least one of a prostaglandin agonist, muscarinic agonist, or β2 antagonist. 32. A compound according to claim 30 or 31 for treating a disease associated with the _A2a adenosine receptor in a patient. 42. The compound of claim 41, wherein the _A2a adenosine receptor is associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, senile dementia, or Parkinson's disease.   42. The compound of claim 41, wherein the disease is treated by stimulating adenylate cyclase. 32. A compound according to claim 30 or 31 for treating a disease associated with the _A2a adenosine receptor, wherein the disease is Parkinson's disease or glaucoma. 32. A compound according to claim 30 or 31 for inhibiting the activity of the _A2a adenosine receptor in a cell. A packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with an _A2a adenosine receptor in a patient, comprising:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of the compound of claim 30 or 31;
(B) a packaged pharmaceutical composition comprising instructions for use of the compound to treat the disease in a patient. The following structure:

Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.   48. A pharmaceutically acceptable salt of the compound of claim 30, 31, or 47, comprising an anion selected from the group consisting of maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, acetic acid, phosphoric acid, and myristic acid. A pharmaceutically acceptable salt containing.   48. A pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of the compound of claim 47 and a pharmaceutically acceptable carrier.   50. The pharmaceutical composition of claim 49, further comprising a beta adrenergic receptor antagonist, an alpha-2 adrenergic receptor agonist, a carbonic anhydrase inhibitor, a cholinergic agonist, a prostaglandin and a prostaglandin receptor agonist, Angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor, AMPA receptor antagonist, 5-HT agonist, angiogenesis inhibitor, NMDA antagonist, renin inhibitor, cannabinoid receptor agonist, angiotensin receptor antagonist, hydrochlorothiazide (HCTZ), somatostatin agonist, gluco Corticoid antagonist, mast cell degranulation inhibitor, α-adrenergic receptor blocker, α2 adrenergic receptor antagonist, thromboxane A2 mimetic, protein kinase Harmful agent, prostaglandin F derivative, prostaglandin-2α antagonist, dopamine D1 and 5-HT2 agonist, nitric oxide releasing agent, 5-HT2 antagonist, cyclooxygenase inhibitor, inosine, dopamine D2 receptor and α2 adrenergic receptor Agonists, dopamine D1 receptor antagonists and D2 receptor agonists, vasopressin receptor antagonists, endothelin antagonists, 1- (3-hydroxy-2-phosphonylmethoxypropyl) cytosine (HPMPC) and release analogs and prodrugs, thyroid hormone receptor Body ligand, muscarinic M1 agonist, sodium channel blocker, mixed activity ion channel blocker, combination of β receptor agonist and PGF2α agonist, One or more compounds selected from the group consisting of a nylate cyclase activator, a nitro vasodilator, an endothelin receptor modulator, ethacrynic acid, other phenoxyacetic acid analogs, actin disruptors, calcium channel blockers and neuroprotective agents A pharmaceutical composition comprising   50. The pharmaceutical composition according to claim 49, further comprising a β-adrenergic receptor antagonist, an α-2 adrenergic receptor agonist, a carbonic anhydrase inhibitor, a cholinergic agonist and a prostaglandin receptor agonist. A pharmaceutical composition comprising one or more compounds selected from.   48. The compound of claim 47, for treating eye damage in a patient.   53. The compound of claim 52, wherein the damage comprises retinal or optic nerve head damage.   48. A compound according to claim 47 for the treatment of glaucoma.   49. A pharmaceutical composition for treating glaucoma comprising the compound of claim 47 and one or more compounds selected from the group consisting of: a beta adrenergic receptor antagonist, an alpha-2 adrenergic receptor agonist, Carbonic anhydrase, cholinergic agonist, prostaglandin and prostaglandin receptor agonist, angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor, AMPA receptor agonist, 5-HT agonist, angiogenesis inhibitor, NMDA antagonist, renin inhibitor , Cannabinoid receptor agonist, angiotensin receptor antagonist, hydrochlorothiazide (HCTZ), somatostatin agonist, glucocorticoid antagonist, mast cell degranulation inhibitor, α-adrenergic receptor blocker, α-2 address Phosphorus receptor antagonist, thromboxane A2 mimetic, protein kinase inhibitor, prostaglandin F derivative, prostaglandin-2α antagonist, dopamine D1 and 5-HT2 agonist, nitric oxide releasing agent, 5-HT2 antagonist, cyclooxygenase inhibition Agent, inosine, dopamine D2 receptor and alpha adrenergic receptor agonist, dopamine D1 receptor antagonist and D2 receptor agonist, vasopressin receptor antagonist, endothelin antagonist, 1- (3-hydroxy-2-phosphorylmethoxypropyl) cytosine (HPMPC ) And release analogs and prodrugs, thyroid hormone receptor ligands, muscarinic M1 agonists, sodium channel blockers, mixed active ion channel blockers Drugs, combinations of β-adrenergic receptor antagonists and PGF2α agonists, guanylate cyclase activators, nitrovasodilators, endothelin receptor modulators, ethacrynic acid, other phenoxyacetic acid analogs, actin disruptors, calcium channel blockers, And neuroprotective agents.   48. The compound of claim 47, and one or more compounds selected from the group consisting of β-adrenergic receptor antagonists, α-2 adrenergic receptor agonists, carbonic anhydrase, cholinergic agonists, and prostaglandin receptor agonists. A pharmaceutical composition for treating glaucoma.   48. The compound of claim 47 for treating a disease associated with an A3 adenosine receptor, wherein the disease associated with the A3 adenosine receptor is asthma, bronchitis, chronic obstructive pulmonary disease, or bronchoconstriction. A compound.   48. The compound of claim 47 for treating a disease associated with an A3 adenosine receptor, wherein the disease is myocardial ischemia, bronchitis, or bronchoconstriction.   48. The compound of claim 47, for treating eye inflammation associated with the A3 adenosine receptor.   48. The compound of claim 47 for treating a disease associated with an A3 adenosine receptor, wherein the disease is associated with mast cell degranulation.   48. The compound of claim 47 for treating a disease associated with an A3 adenosine receptor, wherein the disease associated with the A3 adenosine receptor is asthma, glaucoma, retinopathy, ocular ischemia, or macular degeneration. A compound that is For inhibiting the activity of the A ₃ adenosine receptor in a cell, A compound according to claim 47. A packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with A ₃ adenosine receptor in a patient, the following:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of the compound of claim 47;
(B) a packaged pharmaceutical composition comprising instructions for use of the compound to treat the disease in a patient. A method for producing the compound of claim 47,
(A) reacting the following compound with histamine in the presence of dimethyl sulfoxide;

(B) heating the reaction mixture under an inert atmosphere;
(C) cooling the reaction mixture and separating the organic layer from the aqueous layer;
(D) washing the organic layer with brine, drying and filtering to obtain a compound. 65. The method of claim 64 , wherein in step (b), the reaction mixture is heated under a nitrogen atmosphere. The method as claimed in claim 64, in the step (d), the organic layer is dried using MgSO _4.