JP2004517896A - Compounds specific for the adenosine A1, A2A, and A3 receptors, and uses thereof - Google Patents

Abstract

The present invention includes adenosine _{A 1, A 2A,} and _{A 3} receptors specifically inhibit compounds and that the compounds of the therapeutically effective amount is administered to a _patient, A _{1, A 2A,} and _{A 3} It relates to the use of these compounds for treating diseases associated with adenosine receptors.
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Description

で表されるもの、およびそれらの薬学的に許容可能な塩が挙げられる。Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であるか、あるいは一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成する。Ｒ_３は、置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分である。Ｒ_４は、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分である。Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、ハロゲン原子（例えば、塩素、弗素、または臭素）、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であるか、あるいはＲ_５は、カルボキシル、カルボキシルのエステル、またはカルボキサミドであるか、あるいはＲ_４とＲ_５、またはＲ_５とＲ_６は、一緒に置換もしくは非置換の複素環または炭素環を形成する。
【００１３】
ある実施形態では、Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、置換もしくは非置換のシクロアルキルまたはヘテロアリールアルキル部分であり得る。他の実施形態では、Ｒ_３は、水素原子、または置換もしくは非置換のヘテロアリール部分である。さらに別の実施形態では、Ｒ_４、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、ヘテロアリール部分であり得る。好ましい実施形態では、Ｒ_１は水素原子であり、Ｒ_２は、シクロヘキサノール、例えばトランスシクロヘキサノールであり、Ｒ_３はフェニルであり、Ｒ_４は水素原子であり、Ｒ_５はメチル基であり、Ｒ_６はメチル基である。さらに別の実施形態では、Ｒ_１は水素原子であり、Ｒ_２は、下記：
【化２４】

であり、Ｒ_３はフェニルであり、Ｒ_４は水素原子であり、Ｒ_５およびＲ_６は、メチル基である。
【００１４】
本発明はさらに、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態、例えば、喘息、気管支炎、アレルギー性鼻炎、慢性閉塞性肺疾患、腎障害、胃腸障害、および眼の障害を治療するための薬学的組成物に関する。この薬学的組成物は、治療上有効な量のＮ−６置換７−デアザプリン、および薬学的に許容可能なキャリアを含む。
【００１５】
本発明はまた、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態を治療するための包装された薬学的組成物に関する。包装された薬学的組成物は、治療上有効な量の少なくとも１つのＮ−６置換７−デアザプリンを保持する容器と、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態を治療するためのＮ−６置換７−デアザプリンの使用説明書とを含む。
【００１６】
本発明はさらに、式Ｉを有する化合物、
（式中、
Ｒ_１は水素であり、
Ｒ_２は、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアルキルであるか、あるいはＲ_１およびＲ_２は、一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ_３は、置換もしくは非置換のアリールであり、
Ｒ_４は水素であり、
Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、水素またはアルキルである）
およびそれらの薬学的に許容可能な塩に関する。この実施形態のデアザプリンは、好適には選択的Ａ_１受容体アンタゴニストであってもよい。これらの化合物は、例えば喘息、心不全に関連した腎不全、および緑内障の治療のような多数の治療的使用に有用であり得る。特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、例えばエステラーゼにより触媒される加水分解によって、活性薬剤に、インビボで代謝されることが可能な水溶性プロドラッグである。
【００１７】
さらなる別の実施形態では、本発明は、細胞を、Ｎ−６置換７−デアザプリン（例えば、好ましくは、アデノシン受容体アンタゴニスト）と接触させることによって、細胞においてアデノシン受容体（例えば、Ａ_３）の活性を阻害する方法を特徴とする。
【００１８】
別の態様では、本発明は、有効な量の式Ｉを有するＮ−６置換７−デアザプリンを、動物に投与することによって、動物（例えば、ヒト）の眼に対する損傷を治療する方法を特徴とする。好ましくは、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、動物の細胞におけるＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである。損傷は、網膜または視神経乳頭に対するものであり、急性であっても慢性であってもよい。損傷は、例えば、緑内障、水腫、虚血、低酸素症、または外傷の結果であり得る。
【００１９】
本発明は、式Ｉを有するＮ−６置換化合物を含む薬学的組成物を特徴とする。好ましくは、薬学的調製物は、眼科用配合剤（例えば、眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤、全身性配合剤、または手術用灌注溶液）である。
【００２０】
さらなる別の実施形態では、本発明は、下記式ＩＩを有する化合物を特徴とする：
【化２５】

（式中、Ｘは、ＮまたはＣＲ_６であり、Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルコキシ、アミノアルキル、アルキル、アリール、またはアルキルアリールであるか、あるいは一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成し（但し、Ｒ_１およびＲ_２の両方がともに水素であることはない）、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のアルキル、アリールアルキル、またはアリールであり、Ｒ_４は、水素、または置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、Ｌは、水素、置換もしくは非置換のアリールであるか、あるいはＲ_４およびＬは、一緒に置換もしくは非置換の複素環または炭素環を形成し、Ｒ_６は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、またはハロゲンであり、Ｑは、ＣＨ_２、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ_７（ここで、Ｒ_７は、水素、または置換または非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルである）であり、Ｗは、置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、アリールアルキル、ビアリール、ヘテロアリール、置換カルボニル、置換チオカルボニル、または置換スルホニルであるが、但しＲ_３がピロリジンである場合は、Ｒ_４はメチルではない）。本発明はまた、本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩およびプロドラッグに関する。
【００２１】
好適な実施形態では、式ＩＩにおいて、ＸはＣＲ_６であり、Ｑは、ＣＨ_２、Ｏ、Ｓ、またはＮＨである（ここで、Ｒ_６は、上述に定義した通りである）。
【００２２】
式ＩＩの別の実施形態では、ＸはＮである。
【００２３】
本発明はさらに、細胞を、本発明の化合物と接触させることによって、細胞においてアデノシン受容体（例えば、Ａ_２ｂアデノシン受容体）の活性を阻害する方法に関する。好ましくは、化合物は、受容体のアンタゴニストである。
【００２４】
本発明はまた、有効な量の式ＩＩの化合物（例えば、Ａ_２ｂのアンタゴニスト）を、動物に投与することによって、動物において胃腸障害（例えば、下痢）または呼吸器障害（例えば、アレルギー性鼻炎、慢性閉塞性肺疾患）を治療する方法に関する。好ましくは、動物は、ヒトである。
【００２５】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を特徴とする：
【化２６】

（式中、Ｒ_１は、トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル、２−メチルアミノカルボニルアミノシクロヘキシル、２−メチルアミノカルボニルアミノシクロヘキシル、アセトアミドエチル、またはメチルアミノカルボニルアミノエチルであり、Ａｒは、置換もしくは非置換の４〜６員環である）。
【００２６】
上記化合物の一実施形態では、Ａｒは、フェニル、ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、１，２，４−トリアゾール、ピリジン、２（１Ｈ）−ピロリドン、４（１Ｈ）−ピロリドン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、イソチアゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、テトラゾール、ナフタレン、テトラリン、ナフチリジン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドール、２，３−ジヒドロインドール、１Ｈ−インドール、インドリン、ベンゾピラゾール、１，３−ベンゾジオキオール、ベンゾオキサゾール、プリン、クマリン、クロモン、キノリン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、ベンズイミダゾール、キナゾリン、ピリド［２，３−ｂ］ピラジン、ピリド［３，４−ｂ］ピラジン、ピリド［３，２−ｃ］ピリダジン、ピリド［３，４−ｂ］ピリミジン、１Ｈ−ピラゾール［３，４−ｄ］ピリミジン、プテリジン、２（１Ｈ）−キノロン、１（２Ｈ）−イソキノロン、１，４−ベンズイソオキサジン、ベンゾチアゾール、キノキサリン、キノリン−Ｎ−オキシド、イソキノリン−Ｎ−オキシド、キノキサリン−Ｎ−オキシド、キナゾリン−Ｎ−オキシド、ベンゾオキサジン、フタラジン、シンノリンであるか、または下記構造：
【化２７】

（式中、
Ｙは、炭素または窒素であり、
Ｒ_２およびＲ_２’は、独立して、Ｈ、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアリール、ハロゲン、メトキシ、メチルアミノ、またはメチルチオである）
を有するものであり、
Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_７）（Ｒ_８）ＸＲ_５（ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ_６であり、Ｒ_７およびＲ_８は、それぞれ独立して、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＲ_５、Ｒ_６および窒素は、一緒に置換もしくは非置換の４〜７員環を形成する）であり、
Ｒ_４は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキルである）
を有するもの、あるいは薬学的に許容可能な塩、またはプロドラッグ誘導体、または生物学的に活性な代謝産物であるが、但し、Ｒ_３がアセチルアミノエチルである場合は、Ａｒは４−ピリジルではない。
【００２７】
本発明はまた、下記構造を有する化合物に関する：
【化２８】

（式中、
Ｒ_１は、アリール、置換アリール、またはヘテロアリールであり、
Ｒ_２は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり、
Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_６）（Ｒ_７）ＮＲ_４Ｒ_５（ここで、Ｒ_６およびＲ_７はそれぞれ、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_４およびＲ_５はそれぞれ、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＲ_４、Ｒ_５および窒素は、一緒に５〜７員環系を形成する）。
【００２８】
本発明はまた、細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、上記細胞を、上述の化合物と接触させることを含む方法を特徴とする。
【００２９】
【詳細な説明】
本発明の特徴および他の詳細についてここでより具体的に記載し、それを特許請求項において指し示す。本発明の特定の実施形態は、説明の目的で示しているものであり、本発明を限定するものではないことが理解されよう。本発明の基本的な特徴は、本発明の範囲を逸脱することなく、様々な実施形態で使用することができる。
【００３０】
本発明は、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態を治療する方法に関する。この方法は、哺乳類におけるＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態の治療が行われるように、治療上有効な量の以下に記載するＮ−６置換７−デアザプリンを哺乳類に投与することを包含する。
【００３１】
「Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態」という用語は、以下に記載するような本発明のＮ−６置換７−デアザプリンによる治療に対する応答性を特徴とする疾患状態または症状を包含することを意図し、例えば、治療は、本発明のＮ−６置換７−デアザプリンにより達成される少なくとも１つの症状または状態の影響の有意な減少を包含する。通常かかる状態は、宿主内のアデノシンの増加に関連しており、その結果、宿主は、毒素の放出、炎症、昏睡、水停留、体重増加または体重減少、膵炎、気腫、慢性関節リウマチ、変形性関節症、多臓器不全、乳児および成人呼吸促進症候群、アレルギー性鼻炎、慢性閉塞性肺疾患、眼の障害、胃腸障害、皮膚腫瘍促進、免疫欠損、および喘息が挙げられるが、これらに限定されない生理学的症状を被ることが多い（例えば、Ｃ．Ｅ． Ｍｕｌｌｅｒ ａｎｄ Ｂ． Ｓｔｅｉｎ 「アデノシン受容体アンタゴニスト：構造および潜在的治療用途（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」， Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｅｓｉｇｎ， ２：５０１ （１９９６）、およびＣ．Ｅ． Ｍｕｌｌｅｒ 「Ａ_１アデノシン受容体アンタゴニスト（Ａ_１−Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ）」， Ｅｘｐ． Ｏｐｉｎ． Ｔｈｅｒ． Ｐａｔｅｎｔｓ ７（５）：４１９ （１９９７）、およびＩ． Ｆｅｏｋｔｉｓｔｏｖｅ， Ｒ． Ｐｏｌｏｓａ， Ｓ．Ｔ． Ｈｏｌｇａｔｅ ａｎｄ Ｉ． Ｅｉａｇｇｉｏｎｉ 「アデノシンＡ_２Ｂ受容体：喘息における新規治療薬標的？（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ａ_２ｂ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ： ａ ｎｏｖｅｌ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｉｎ ａｓｔｈｍａ？）」 ＴＩＰＳ １９： １４８ （１９９８）を参照）。かかる症状に関連することが多い影響としては、熱、息切れ、吐気、下痢、衰弱、頭痛、さらには死亡が挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態として、アデノシン受容体、例えば、Ａ_１、Ａ_２ａ、Ａ_２ｂ、Ａ_３等の刺激により媒介され、その結果、細胞中のカルシウム濃度および／またはＰＬＣ（ホスホリパーゼＣ）の活性が調節される疾患状態が挙げられる。好ましい実施形態では、Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態は、アデノシン受容体（複数可）に関連しており、例えば、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、アンタゴニストとして作用する。本発明の化合物、例えば生物学的影響を媒介するアデノシン受容体サブタイプにより治療することができる適切な応答性状態の例としては、中枢神経系（ＣＮＳ）の影響、心血管の影響、腎臓の影響、呼吸器の影響、免疫学的影響、胃腸の影響、および代謝の影響が挙げられる。患者におけるアデノシンの相対量は、以下に列挙した影響に関連することができ、すなわちアデノシンレベルの増加は、影響、例えば望ましくない生理学的応答（例えば、喘息による攻撃）を誘発することができる。
【００３２】
ＣＮＳの影響としては、伝達物質の放出（Ａ_１）の低下、鎮静（Ａ_１）、運動活性の低下（Ａ_２ａ）、鎮痙活性、化学受容体刺激（Ａ_２）、および痛覚過敏が挙げられる。本発明の化合物の治療用途としては、痴呆、アルツハイマー病および記憶強化が挙げられる。
【００３３】
心血管の影響としては、血管拡張（Ａ_２ａ）、（Ａ_２ｂ）および（Ａ_３）、血管収縮（Ａ_１）、徐脈（Ａ_１）、血小板阻害（Ａ_２ａ）、陰性心変力および変伝導（Ａ_１）、不整脈、頻拍、および血管新生が挙げられる。本発明の化合物の治療用途としては、例えば、心臓の虚血誘発性欠陥の防止、および強心薬、心筋組織保護、および心機能の修復が挙げられる。
【００３４】
腎臓の影響としては、ＧＦＲの低下（Ａ_１）、メサンギウム細胞収縮（Ａ_２）、抗利尿（Ａ_１）、およびレニン放出の阻害（Ａ_１）が挙げられる。本発明の化合物の適切な治療用途としては、利尿薬、ナトリウム排泄増加薬、カリウム保持剤、腎臓保護剤／急性腎不全の防止、抗高血圧薬、抗浮腫剤および抗抗腎炎剤としての本発明の使用が挙げられる。
【００３５】
呼吸器の影響としては、気管支拡張（Ａ_２）、気管支収縮（Ａ_１）、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、粘液分泌および呼吸低下（Ａ_２）が挙げられる。本発明の化合物に関する適切な治療用途としては、喘息鎮静用途、移植および呼吸器障害後の肺疾患の治療が挙げられる。
【００３６】
免疫学的影響としては、免疫抑制（Ａ_２）、好中球走化性（Ａ_１）、好中球スーパーオキシド生成（Ａ_２ａ）、および肥満細胞顆粒化（Ａ_２ｂおよびＡ_３）が挙げられる。アンタゴニストの治療用途としては、アレルギー性および非アレルギー性炎症（例えば、ヒスタミンおよび他の炎症性媒介物質の放出）が挙げられる。
【００３７】
胃腸の影響としては、酸分泌の阻害（Ａ_１）が挙げられる。治療用途としては、逆流および潰瘍状態が挙げられ得る、胃腸の影響としてはまた、結腸、腸管および下痢疾患、例えば腸炎に関連した下痢疾患（Ａ_２ｂ）が挙げられる。
【００３８】
眼の障害としては、網膜および視神経乳頭損傷および外傷関連障害（Ａ_３）が挙げられる。好ましい実施形態では、眼の障害は、緑内障である。
【００３９】
本発明の化合物の他の治療用途しては、肥満（脂肪分解特性）、高血圧の治療、うつ病の治療、鎮静薬、抗不安薬、抗てんかん薬、および緩下薬（例えば下痢を引き起こさずに運動性を達成するもの）が挙げられる。
【００４０】
「疾患状態」という用語は、望ましくないレベルのアデノシン、アデノリルシクラーゼ活性、アデノシン受容体の異常刺激に関連した生理学的活性の増大、および／またはｃＡＭＰの増加により引き起こされるか、またはそれらに関連した状態が挙げられる。一実施形態では、疾患状態は、例えば、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、気管支炎、腎障害、胃腸障害、または眼の障害である。さらなる例としては、慢性気管支炎、および嚢胞性線維症が挙げられる。炎症性障害の適切な例としては、非リンパ性白血病、心筋虚血、アンギナ、梗塞形成、脳血管性虚血、間欠性跛行、臨界四肢虚血、静脈高血圧、拡張蛇行静脈、静脈潰瘍形成、および動脈硬化が挙げられる。再灌流障害状態としては、例えば、再建手術、血栓崩壊または血管形成のような任意の手術後外傷が挙げられる。
【００４１】
「Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態の治療」、または「Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態を治療する」という用語は、哺乳類における生理学的症状を、有意に減少することができるか、または最小限に抑えることができるように、上述のような疾患状態または症状の変化を包含することを意図する。この用語はまた、異常量のアデノシンに関連した生理学的症状または影響の制御、防止あるいは阻害を包含する。１つの好ましい実施形態では、疾患状態または症状の制御は、疾患状態または症状が根絶されることである。別の好ましい実施形態では、制御は、他の生理学的系およびパラメータに影響を及ぼさないで、異常レベルのアデノシン受容体活性が制御されるように選択的である。
【００４２】
「Ｎ−６置換７−デアザプリン」という用語は、当該技術分野で認識されており、下記式Ｉ：
【化２９】

を有する化合物を包含することを意図する。
【００４３】
「Ｎ−置換７−デアザプリン」は、薬学的に許容可能な塩を包含し、一実施形態では、本明細書中に記載するある特定のＮ−６置換プリンも包含する。
【００４４】
ある実施形態では、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、Ｎ−６ベンジル置換も、Ｎ−６フェニルエチル置換もされていない。他の実施形態では、Ｒ_４は、ベンジル置換も、フェニルエチル置換もされていない。好ましい実施形態では、Ｒ_１およびＲ_２はともに、水素原子ではない。さらに他の好ましい実施形態では、Ｒ_３は水素原子ではない。
【００４５】
以下に記載するＮ−６置換７−デアザプリンの「治療上有効な量」という用語は、哺乳類内のその対象とされる機能を実施するのに（例えば、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態、または疾患状態を治するのに）必要または十分な治療用化合物の量である。治療用化合物の有効な量は、哺乳類にすでに存在している原因作用物質の量、哺乳類の年齢、性別、および体重、ならびに本発明の治療用化合物の、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態に影響を及ぼす能力のような要因に従って多様であり得る。
【００４６】
当業者は、上述の要因を研究し、過度の実験を行うことなく、治療用化合物の有効な量に関する決定を行うことが可能であろう。ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはインビボアッセイもまた、以下に記載する治療用化合物の「有効な量」を決定するのに使用することができる。当業者は、上述のアッセイでの使用に関して、あるいは治療上の処置として、治療用化合物の適切な量を選定する。
【００４７】
治療上有効な量は、好ましくは、治療していない患者に関して、治療中のＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態または症状に関連した少なくとも１つの症状あるいは影響を、少なくとも約２０％分（より好ましくは、少なくとも約４０％分、より好ましくは少なくとも約６０％、さらに好ましくは少なくとも約８０％分）低減する。当業者は、かかる症状および／または影響の減少を測定するように、アッセイを設計することができる。かかるパラメータを測定することが任意の当該技術分野で認識されているアッセイは、本発明の一部として包含されることを意図する。例えば、喘息が治療される状態である場合、患者の肺から消費される空気の容量を、当該技術分野で認識されている技法を用いて、容量の増加の測定のために治療前後で測定することができる。同様に、炎症が治療される状態である場合、炎症を起こした領域を、当該技術分野で認識されている技法を用いて、炎症を起こした領域の減少の測定のために治療の前後で測定することができる。
【００４８】
「細胞」という用語は、原核細胞および真核細胞の両方を包含する。
【００４９】
「動物」という用語は、アデノシン受容体を有する任意の生物、またはＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態になりやすい任意の生物を包含する。動物の例としては、酵母、哺乳類、爬虫類、および鳥類が挙げられる。動物はまた、トランスジェニック動物も包含する。
【００５０】
「哺乳類」という用語は、当該技術分野で認識されており、動物、より好ましくは温血動物、最も好ましくは、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、イヌ、ネコ、ラット、マウス、およびヒトを包含することを意図する。Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態、例えば、炎症、気腫、喘息、中枢神経系症状、または急性呼吸窮迫症候群になりやすい哺乳類は、本発明の一部として包含される。
【００５１】
別の態様では、本発明は、哺乳類におけるアデノシン受容体の調節が行われるように、治療上有効な量のＮ−６置換７−デアザプリンを哺乳類に投与することによって、哺乳類においてアデノシン受容体（複数可）を調節する方法に関する。適切なアデノシン受容体としては、Ａ_１、Ａ_２、またはＡ_３ファミリーが挙げられる。好ましい実施形態では、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、アデノシン受容体アンタゴニストである。
【００５２】
「アデノシン受容体を調節する」という用語は、化合物がアデノシン受容体（複数可）と相互作用して、アデノシン受容体またはアデノシン受容体の調節に起因する続くカスケードの影響に関連した増加した生理学的活性、減少した生理学的活性または異常な生理学的活性を引き起こす場合を包含することを意図する。アデノシン受容体に関連した生理学的活性としては、鎮静の誘発、血管拡張、心拍数の抑制および心筋収縮の抑制、血小板凝集性の阻害、糖新生の刺激、および脂肪分解の阻害、カリウムチャネルの開放、カルシウムチャネルの流出の低減が挙げられる。
【００５３】
「調節する」、「調節している」および「調節」という用語は、例えば本発明の治療方法の文脈では、アデノシン受容体の異常刺激に関連した結果として生じる望ましくない生理学的活性の増加を防止、根絶、または阻害することを包含することを意図する。別の実施形態では、調節するという用語は、アンタゴニスト効果、例えばアデノシン受容体（複数可）の過剰刺激に起因するアレルギーおよびアレルギー性炎症の媒介物質の活性または産生の減少を包含する。例えば、本発明の治療用デアザプリンは、アデノシン受容体と相互作用して、例えばアデニル酸シクラーゼ活性を阻害することができる。
【００５４】
「異常アデノシン受容体活性を特徴とする症状」という用語は、受容体の刺激が、疾患、障害または症状に直接的あるいは間接的に関連した生化学的および／または生理学的な一連の事象を引き起こすという点で、アデノシン受容体の異常刺激に関連した疾患、障害または症状を包含することを意図する。このアデノシン受容体の刺激は、疾患、障害または症状のたった１つの原因作用物質である必要はなく、治療される疾患、障害、または症状に通常関連した症状の幾つかを引き起こす原因である。受容体の異常刺激が、たった１つの要因であり得るか、または少なくとも１つの他の作用物質が、治療される状態に関与し得る。症状の例としては、炎症、胃腸障害、およびアデノシン受容体活性の増加の存在により現れる症状を含む、上記で列挙した疾患状態が挙げられる。好ましい例としては、喘息、アレルギー性鼻炎、慢性閉塞性肺疾患、気腫、気管支炎、胃腸障害、および緑内障に関連した症状が挙げられる。
【００５５】
「異常アデノシン受容体活性を特徴とする症状を治療すること、またはその症状の治療」という用語は、症状に通常関連した少なくとも１つの症状の軽減または減少を包含することを意図する。治療はまた、２つ以上の症状の軽減または減少も包含する。好ましくは、治療は、症状に関連した症状を治癒する（例えば、実質的に排除する）。
【００５６】
本発明は、下記一般式Ｉを有する化合物であるＮ−６置換７−デアザプリンに関する：
【化３０】

（式中、Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であるか、あるいは一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成し、Ｒ_３は、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であり、Ｒ_４は、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、ハロゲン原子（例えば、塩素、フッ素、または臭素）、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であるか、あるいはＲ_４とＲ_５、またはＲ_５とＲ_６は、一緒に置換もしくは非置換の複素環または炭素環を形成する）。Ｎ−６置換７−デアザプリンの薬学的に許容可能な塩も包含される。
【００５７】
ある実施形態では、Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、置換もしくは非置換のシクロアルキルまたはヘテロアリールアルキル部分であり得る。他の実施形態では、Ｒ_３は、水素原子、または置換もしくは非置換のヘテロアリール部分である。さらに別の実施形態では、Ｒ_４、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、ヘテロアリール部分であり得る。
【００５８】
一実施形態では、Ｒ_１は水素原子であり、Ｒ_２は、置換もしくは非置換のシクロヘキサン、シクロペンチル、シクロブチル、またはシクロプロパン部分であり、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニル部分であり、Ｒ_４は水素原子であり、Ｒ_５およびＲ_６はともに、メチル基である。
【００５９】
別の実施形態では、Ｒ_２は、シクロヘキサノール、シクロヘキサンジオール、シクロヘキシルスルホンアミド、シクロヘキサンアミド、シクロヘキシルエステル、シクロヘキセン、シクロペンタノール、またはシクロペンタンジオールであり、Ｒ_３は、フェニル部分である。
【００６０】
さらなる別の実施形態では、Ｒ_１は水素原子であり、Ｒ_２はシクロヘキサノールであり、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニル、ピリジン、フラン、シクロペンタン、またはチオフェン部分であり、Ｒ_４は、水素原子、置換アルキル、アリール、またはアリールアルキル部分であり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分である。
【００６１】
さらに別の実施形態では、Ｒ_１は水素原子であり、Ｒ_２は、置換もしくは非置換のアルキルアミン、アリールアミン、またはアルキルアリールアミン、置換もしくは非置換のアルキルアミド、アリールアミドまたはアルキルアリールアミド、置換もしくは非置換のアルキルスルホンアミド、アリールスルホンアミドまたはアルキルアリールスルホンアミド、置換もしくは非置換のアルキル尿素、アリール尿素またはアルキルアリール尿素、置換もしくは非置換のアルキルカルバメート、アリールカルバメートまたはアルキルアリールカルバメート、置換もしくは非置換のアルキルカルボン酸、アリールカルボン酸またはアルキルアリールカルボン酸であり、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニル部分であり、Ｒ_４は水素であり、Ｒ_５およびＲ_６は、メチル基である。
【００６２】
さらに別の実施形態では、Ｒ_２は、グアニジン、修飾グアニジン、シアノグアニジン、チオ尿素、チオアミド、またはアミジンである。
【００６３】
一実施形態では、Ｒ_２は、下記：
【化３１】

（式中、Ｒ_２ａ〜Ｒ_２ｃは、それぞれ独立して、水素原子、あるいは飽和もしくは不飽和のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分であり、Ｒ_２ｄは、水素原子、あるいは飽和もしくは不飽和のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分、ＮＲ_２ｅＲ_２ｆ、あるいはＲ_２ｇ（ここで、Ｒ_２ｅ〜Ｒ_２ｇは、それぞれ独立して、水素原子、あるいは飽和もしくは不飽和のアルキル、アリール、またはアルキルアリール部分である）である）
であり得る。あるいは、Ｒ_２ａおよびＲ_２ｂは、一緒に約３〜６員環サイズを有する炭素環または複素環（例えば、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル基）を形成することができる。
【００６４】
本発明の一態様では、Ｒ_５およびＲ_６がともに、メチルであることはなく、好ましくはＲ_５およびＲ_６のうちの１つがアルキル基、例えばメチル基であり、他方が水素原子である。
【００６５】
本発明の別の態様では、Ｒ_４が１−フェニルエチルであり、Ｒ_１が水素原子である場合には、Ｒ_３は、フェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、３−メトキシフェニル、または４−メトキシフェニルでないか、あるいはＲ_４およびＲ_１が１−フェニルエチルである場合には、Ｒ_３は水素原子でないか、あるいはＲ_４が水素原子であり、Ｒ_３がフェニルである場合には、Ｒ_１はフェニルエチルではない。
【００６６】
本発明の別の態様では、Ｒ_５およびＲ_６が、一緒に炭素環、例えば、次式：
【化３２】

またはピリミド［４，５−６］インドールを形成する場合、Ｒ_４が１−（４−メチルフェニル）エチル、フェニルイソプロピル、フェニル、または１−フェニルエチルである場合にはＲ_３はフェニルでなく、あるいはＲ_４が１−フェニルエチルである場合にはＲ_３は水素原子ではない。Ｒ_５およびＲ_６により形成される炭素環は、芳香族または脂肪族であることができ、また４〜１２個の炭素原子（例えばナフチル、フェニルシクロヘキル等）、好ましくは５〜７個の炭素原子（例えば、シクロペンチルまたはシクロヘキシル）を有することができる。あるいは、Ｒ_５およびＲ_６は一緒になって、以下に開示するもののような複素環を形成することができる。典型的な複素環は、４〜１２個の炭素原子、好ましくは５〜７個の炭素原子を含み、また芳香族であり得るか、または脂肪族であり得る。複素環はさらに、環構造の１以上の炭素原子を、１以上のヘテロ原子で置換することを含む置換をすることができる。
【００６７】
本発明のさらなる別の態様では、Ｒ_１およびＲ_２は、複素環を形成する。代表例としては、モルホリノ、ピペラジン等のような以下に列挙した複素環（例えば、４−ヒドロキシピペリジン、４−アミノピペリジン）が挙げられるが、これらに限定されない。ここではＲ_１およびＲ_２が、一緒に下記ピペラジン基：
【化３３】

（式中、Ｒ_７は、水素原子、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、アルキルアリール部分であり得る）
を形成する。
【００６８】
本発明のさらに別の態様では、Ｒ_４およびＲ_５は、一緒に複素環、例えば、下記：
【化３４】

を形成することができ、ここで複素環は、芳香族であり得るか、または脂肪族であり得て、また４〜１２個の炭素原子（例えば、ナフチル、フェニルシクロヘキシル等）を有する環を形成することができ、芳香族であり得るか、または脂肪族であり得る（例えば、シクロヘキシル、シクロペンチル）。
【００６９】
複素環はさらに、環構造の炭素原子を、１以上のヘテロ原子で置換することを含む置換をすることができる。あるいは、Ｒ_４およびＲ_５は、一緒に以下に開示するもののような複素環を形成することができる。
【００７０】
ある実施形態では、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、Ｎ−６ベンジル置換も、Ｎ−６フェニルエチル置換もされていない。他の実施形態では、Ｒ_４は、ベンジル置換も、フェニルエチル置換もされていない。好ましい実施形態では、Ｒ_１およびＲ_２はともに、水素原子ではない。さらに他の好ましい実施形態では、Ｒ_３は、水素原子ではない。
【００７１】
本発明の化合物は、１９９８年３月９日に出願され、１９９８年７月８日に公開された国際公開第９９／３３８１５号、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ９８／０４５９５号に記載されている水溶性プロドラッグを包含してもよい。国際公開第９９／３３８１５号の内容全体は、参照により本明細書に明らかに援用される。水溶性プロドラッグは、例えばエステラーゼにより触媒される加水分解によって、活性薬剤に、インビボで代謝される。潜在的プロドラッグの例としては、例えば−ＯＣ（Ｏ）（Ｚ）ＮＨ_２（ここで、Ｚは、天然に存在するか、または天然に存在しないアミノ鎖、またはそれらの類縁体、α、β、γ、またはωアミノ酸、あるいはジペプチドの側鎖である）で置換されたシクロアルキルとしてＲ_２を有するデアザプリンが挙げられる。好ましいアミノ酸側鎖としては、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、リシン、α−メチルアラニン、アミノシクロプロパンカルボン酸、アゼチジン−２−カルボン酸、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、アラニン−アラニン、またはグリシン−アラニンの側鎖が挙げられる。
【００７２】
さらなる実施形態では、本発明は、式Ｉ（式中、Ｒ_１は水素であり、Ｒ_２は、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアルキルであるか、あるいはＲ_１およびＲ_２は、一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成し、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のアリールであり、Ｒ_４は、水素であり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、水素またはアルキルである）を有するデアザプリン、およびそれらの薬学的に許容可能な塩を特徴とする。この実施形態のデアザプリンは潜在的に、選択的Ａ_３受容体アンタゴニストであり得る。
【００７３】
一実施形態では、Ｒ_２は、置換（例えば、ヒドロキシ置換）または非置換シクロアルキルである。好適な実施形態では、Ｒ_２およびＲ_４は、水素であり、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれアルキルである。好ましくは、Ｒ_２は、モノヒドロキシシクロペンチルまたはモノヒドロキシシクロヘキシルである。Ｒ_２はまた、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）Ｅ（ここで、Ｅは、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_４アルキル（例えば、アルキルアミン（例えば、エチルアミン））である）で置換されてもよい。
【００７４】
Ｒ_１およびＲ_２はまた、一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成してもよく、アミンまたはアセトアミド基で置換してもよい。
【００７５】
別の態様では、Ｒ_２は、−Ａ−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｂ（ここで、Ａは、非置換のＣ_１〜Ｃ_４アルキル（例えば、エチル、プロピル、ブチル）であり、Ｂは、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_４アルキル（例えば、メチル、アミノアルキル（例えば、アミノメチルまたはアミノエチル）アルキルアミノ）（例えば、メチルアミノ、エチルアミノ）である）であってもよく、好ましくはＲ_１およびＲ_４が水素である場合、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれアルキルである。Ｂは、置換もしくは非置換のシクロアルキル、例えばシクロプロピルまたは１−アミノ−シクロプロピルであってもよい。
【００７６】
別の実施形態では、好ましくはＲ_５およびＲ_６がそれぞれアルキルである場合、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニルである。好ましくは、Ｒ_３は、１以上の置換基（例えば、ｏ、ｍ、またはｐ−クロロフェニル、ｏ、ｍ、またはｐ−フルオロフェニル）を有してもよい。
【００７７】
好適には、好ましくはＲ_５およびＲ_６がそれぞれアルキルである場合、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のヘテロアリールであってもよい。ヘテロアリール基の例としては、ピリジル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジニル、ピロリル、トリアゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、フラニル、メチレンジオキシフェニル、およびチオフェニルが挙げられる。好ましくは、Ｒ_３は、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、または３−ピリミジルである。
【００７８】
好ましくは、一実施形態では、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ水素である。別の実施形態では、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれメチルである。
【００７９】
特に好ましい実施形態では、本発明のデアザプリンは、例えば、エステラーゼにより触媒される加水分解によって、活性薬剤に、インビボで代謝され得る水溶性プロドラッグである。好ましくは、プロドラッグは、−ＯＣ（Ｏ）（Ｚ）ＮＨ_２（ここで、Ｚは、天然に存在するか、または天然に存在しないアミノ酸、それらの類縁体、α、β、γ、またはωアミノ酸、あるいはジペプチドの側鎖である）で置換されたシクロアルキルであるＲ_２基を含む。好ましいアミノ酸側鎖としては、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、リシン、α−メチルアラニン、アミノシクロプロパンカルボン酸、アゼチジン−２−カルボン酸、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、アラニン−アラニン、またはグリシン−アラニンの側鎖が挙げられる。
【００８０】
特に好ましい実施形態では、Ｚは、グリシンの側鎖であり、Ｒ_２はシクロヘキシルであり、Ｒ_３はフェニルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、メチルである。
【００８１】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（シス−３−ヒドロキシシクロペンチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８２】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（シス−３−（２−アミノアセトキシ）シクロペンチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジントリフルオロ酢酸塩である。
【００８３】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（３−アセトアミド）ピペリジニル−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８４】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（２−Ｎ’−メチル尿素プロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８５】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセトアミドブチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８６】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（２−Ｎ’−メチル尿素ブチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８７】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アミノシクロプロピルアセトアミドエチル）アミノ−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８８】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−２−（３−クロロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００８９】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−２−（３−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００９０】
別の実施形態では、デアザプリンは、４−（トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−２−（４−ピリジル）−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【００９１】
さらに別の実施形態では、本発明は、細胞を、Ｎ−６置換７−デアザプリン（例えば、好ましくは、アデノシン受容体アンタゴニスト）と接触させることによって、細胞においてアデノシン受容体（例えば、Ａ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_２Ｂ、または好ましくはＡ_３）の活性を阻害する方法を特徴とする。
【００９２】
別の態様では、本発明は、有効な量のＮ−６置換７−デアザプリンを、動物（例えば、ヒト）に投与することによって、動物の眼に対する損傷を治療する方法を特徴とする。好ましくは、Ｎ−６置換７−デアザプリンは、動物の細胞におけるＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである。損傷は、網膜または視神経乳頭に対するものであり、急性であっても慢性であってもよい。損傷は、例えば、緑内障、水腫、虚血、低酸素症または外傷の結果であり得る。
【００９３】
好ましい実施形態では、本発明は、上記式ＩＩ（式中、Ｘは、ＮまたはＣＲ_６であり、Ｒ_１およびＲ_２は、それぞれ独立して、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルコキシ、アミノアルキル、アルキル、アリール、またはアルキルアリールであるか、あるいは一緒に置換もしくは非置換の複素環を形成し（但し、Ｒ_１およびＲ_２の両方が、ともに水素であることはない）、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のアルキル、アリールアルキル、またはアリールであり、Ｒ_４は、水素、または置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、Ｌは、水素、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであるか、あるいはＲ_４およびＬは、一緒に置換もしくは非置換の複素環または炭素環を形成し、Ｒ_６は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、またはハロゲンであり、Ｑは、ＣＨ_２、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ_７（ここで、Ｒ_７は、水素、または置換もしきは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルである）であり、Ｗは、置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ビアリール、ヘテロアリール、置換カルボニル、置換チオカルボニル、または置換スルホニルであるが、但し、Ｒ_３がピロリジノである場合は、Ｒ_４はメチルではない）を有するデアザプリンを特徴とする。
【００９４】
一実施形態では、式ＩＩの化合物において、Ｘは、ＣＲ_６であり、Ｑは、ＣＨ_２、Ｏ、Ｓ、またはＮＨである。別の実施形態では、ＸはＮである。
【００９５】
式ＩＩの化合物のさらなる実施形態では、Ｗは、置換もしくは非置換のアリール、５または６員環ヘテロアリール、またはビアリールである。Ｗは、１以上の置換基で置換されてもよい。置換基の例としては、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アミノアルキル、アミノカルボキシアミド、ＣＮ、ＣＦ_３、ＣＯ_２Ｒ_８、ＣＯＮＨＲ_８、ＣＯＮＲ_８Ｒ_９、ＳＯＲ_８、ＳＯ_２Ｒ_８、およびＳＯ_２ＮＲ_８Ｒ９（ここで、Ｒ_８およびＲ_９は、それぞれ独立して、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、またはアリールアルキルが挙げられる。好ましくは、Ｗは置換もしくは非置換のフェニル（例えばメチレンジオキシフェニル）であり得る。Ｗはまた、置換もしくは非置換の５員環のヘテロアリール環（例えば、ピロール、ピラゾール、オキサゾール、イミダゾール、トリアゾール、テトゾール、フラン、チオフェン、チアゾール、およびオキサジアゾール）であってもよい。好ましくは、Ｗは、６員環のヘテロアリール環（例えば、ピリジル、ピリミジル、ピリダニジル、ピラジナル、およびチオフェニル）であってもよい。好ましい実施形態では、Ｗは、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、または５−ピリミジル）であってもよい。
【００９６】
式ＩＩの化合物の１つの好適な実施形態では、Ｑは、ＮＨであり、Ｗは、非置換であるか、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、またはアリールアルキルでＮ置換されている３−ピラゾロ環である。
【００９７】
式ＩＩの化合物の別の実施形態では、Ｑは酸素であり、Ｗは、非置換であるか、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、またはアリールアルキルで置換されている２−チアゾロ環である。
【００９８】
式ＩＩの化合物の別の実施形態では、Ｗは、置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル（例えば、シクロペンチル）、またはアリールアルキルである。置換基の例としては、ハロゲン、ヒドロキシ、置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、アリールアルキル、またはＮＨＲ_１０（ここで、Ｒ_１０は、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、シクロアルキル、アリール、またはアリールアルキルである）が挙げられる。
【００９９】
さらに別の実施形態では、本発明は、式ＩＩ（式中、Ｗは、−（ＣＨ_２）_ａ−Ｃ（＝Ｏ）Ｙ、または−（ＣＨ_２）_ｂ−Ｃ（＝Ｓ）Ｙであり、ａは、０〜３の整数であり、Ｙは、アリール、アルキル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、アルキニル、ＮＨＲ_１１Ｒ_１２であるか、あるいはＱがＮＨである場合、ＯＲ_１３である（ここで、Ｒ_１１、Ｒ_１２およびＲ_１３は、それぞれ独立して、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、アリールアルキル、またはシクロアルキルである））を有するデアザプリンを特徴とする。好ましくは、Ｙは、５〜６員環のヘテロアリール環である。
【０１００】
さらに、Ｗは、−（ＣＨ_２）_ｂ−Ｓ（＝Ｏ）_ｊＹ（ここで、ｊは、１またｈ２であり、ｂは、０、１、２、または３であり、Ｙは、アリール、アルキル、アリールアルキル、シクロアルキル、アルキニル、ヘテロアリール、ＮＨＲ_１４Ｒ_１５であるが、但し、ｂが１である場合、ＱはＣＨ_２である（ここで、Ｒ_１４、Ｒ_１５、およびＲ_１６は、それぞれ独立して、水素、あるいは置換もしくは非置換のアルキル、アリール、アリールアルキル、またはシクロアルキルである））であってもよい。
【０１０１】
別の実施形態では、Ｒ_３は、置換および非置換のフェニル、ピリジル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジナル、ピロリル、トリアゾリル、チオアゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、ピラゾリル、フラニル、メチレンジオキシフェニル、およびチオフェニルからなる群から選択される。Ｒ_３がフェニルである場合、Ｒ_３は、例えば、ヒドロキシ、アルコキシ（例えば、メトキシ）、アルキル（例えば、トリル）、およびハロゲン（例えば、ｏ、ｍまたはｐ−フルオロフェニル、あるいはｏ、ｍまたはｐ−クロロフェニル）で置換されてもよい。好適には、Ｒ_３は、２、３または４−ピリジル、あるいは２または３−ピリミジルであってもよい。
【０１０２】
本発明はまた、Ｒ_６が、水素、またはＣ_１〜Ｃ_３アルキルであるデアザプリンに関する。好ましくは、Ｒ_６は水素である。
【０１０３】
本発明はまた、Ｒ_１が水素であり、Ｒ_２が置換もしくは非置換のアルキルまたはアルコキシ、置換もしくは非置換のアルキルアミン、アリールアミン、またはアルキルアリールアミン、置換もしくは非置換のアミノアルキル、アミノアリールまたはアミノアルキルアリール、置換もしくは非置換のアルキルアミド、アリールアミドまたはアルキルアリールアミド、置換もしくは非置換のアルキルスルホンアミド、アリールスルホンアミドまたはアルキルアリールスルホンアミド、置換もしくは非置換のアルキル尿素、アルキル尿素またはアルキルアリール尿素、置換もしくは非置換のアルキルカルバメート、アリールカルバメートまたはアルキルアリールカルバメート、あるいは置換もしくは非置換のアルキルカルボン酸、アリールカルボン酸またはアルキルアリールカルボン酸であるデアザプリンを含む。
【０１０４】
好ましくは、Ｒ_２は、置換もしくは非置換のシクロアルキル、例えばモノもしくはジヒドロキシ置換のシクロヘキシルまたはシクロペンチル（好ましくは、モノヒドロキシ置換シクロヘキシルまたはモノヒドロキシ置換シクロペンチル）である。
【０１０５】
好適には、Ｒ_２は、下記式：
【化３５】

（式中、Ａは、任意にＣ_１〜Ｃ_６アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、チオール、またはアミノ基で置換された、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_３〜Ｃ_７シクロアルキル、１〜７個の原子を有する鎖、あるいは３〜７個の原子を有する環であり、Ｂは、メチル、Ｎ（Ｍｅ）_２、Ｎ（Ｅｔ）_２、ＮＨＭｅ、ＮＨＥｔ、（ＣＨ）_２ｒＮＨ_３＋、ＮＨ（ＣＨ_２）_ｒＣＨ_３、（ＣＨ_２）_ｒＮＨ_２、（ＣＨ_２）_ｒＣＨＣＨ_３ＮＨ_２、（ＣＨ_２）_ｒＮＨＭｅ、（ＣＨ_２）_ｒＯＨ、ＣＨ_２ＣＮ、（ＣＨ_２）_ｍＣＯ_２Ｈ、ＣＨＲ_１８Ｒ_１９、またはＣＨＭｅＯＨ（ここで、ｒは、０〜２の整数であり、ｍは、１または２であり、Ｒ_１８は、アルキルであり、Ｒ_１９は、ＮＨ_３＋またはＣＯ_２Ｈであるか、あるいはＲ_１８およびＲ_１９は、一緒に下記：
【化３６】

（式中、ｐは、２または３である）であり、Ｒ_１７は、任意にＣ_１〜Ｃ_６アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボキシル、チオール、またはアミノ基で置換された、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_３〜Ｃ_７シクロアルキル、１〜７個の原子を有する鎖、あるいは３〜７個の原子を有する環である）
を有するものであり得る。
【０１０６】
好適には、Ａは、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルである。Ｂは、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであってもよい。
【０１０７】
好ましい実施形態では、Ｒ_２は、式−Ａ−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｂを有するものである。特に好適な実施形態では、Ａは−ＣＨ_２ＣＨ_２−であり、Ｂはメチルである。
【０１０８】
本発明の化合物は、例えばエステラーゼにより触媒される加水分解によって、活性薬剤に、インビボで代謝される水溶性プロドラッグを包含してもよい。潜在的プロドラッグの例としては、例えば−ＯＣ（Ｏ）（Ｚ）ＮＨ_２（ここで、Ｚは、天然に存在するか、または天然に存在しないアミノ鎖、またはそれらの類縁体、α、β、γ、またはωアミノ酸、あるいはジペプチドの側鎖である）で置換されたシクロアルキルとしてＲ_２を有するデアザプリンが挙げられる。好ましいアミノ酸側鎖としては、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、リシン、α−メチルアラニン、アミノシクロプロパン、カルボン酸、アゼチジン−２−カルボン酸、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、アラニン−アラニン、またはグリシン−アラニンの側鎖が挙げられる。
【０１０９】
別の実施形態では、Ｒ_１およびＲ_２は、一緒に下記：
【化３７】

（式中、ｎは、１または２であり、ここで環は、任意に１以上のヒドロキシル、アミノ、チオール、カルボキシル、ハロゲン、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨ_２ＮＨＣ（＝Ｏ）アルキル、またはＣＨ_２ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨアルキル基で置換されてもよい）である。好ましくは、ｎは、１または２であり、上記環は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）アルキルで置換される。
【０１１０】
１つの好適な実施形態において、Ｒ_１は水素であり、Ｒ_２は、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、Ｒ_３は、置換もしくは非置換のフェニルであり、Ｒ_４は水素であり、Ｌは、水素、または置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、Ｑは、Ｏ、ＳまたはＮＲ_７（ここで、Ｒ_７は、水素、または置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキルである）であり、Ｗは、置換もしくは非置換のアリールである。好ましくは、Ｒ_２は、−Ａ−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｂ（ここで、ＡおよびＢは、それぞれ独立して、置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_４アルキルである）である。例えば、Ａは、ＣＨ_２ＣＨ_２であってもよい。Ｂは、例えば、アルキル（例えば、メチル）、またはアミノアルキル（例えば、アミノメチル）であってもよい。好ましくは、Ｒ_３は、非置換のフェニルであり、Ｌは水素である。Ｒ_６はメチルであってもよく、あるいは好ましくは水素であってもよい。好ましくは、Ｑは、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ_７（ここで、Ｒ_７は、水素、または置換もしくは非置換のＣ_１〜Ｃ_６アルキル、例えばメチルである）である。Ｗは、置換もしくは非置換のフェニル（例えば、アルコキシ置換、ハロゲン置換）である。好ましくは、Ｗは、Ｐ−フルオロフェニル、ｐ−クロロフェニル、またはＰ−メトキシフェニルである。Ｗはまた、ヘテロアリール、例えば２−ピリジルであってもよい。
【０１１１】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−フェノキシメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１２】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（４−フルオロフェノキシ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１３】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（４−クロロフェノキシ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１４】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（４−メトキシフェノキシ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１５】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（２−ピリジルオキシ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１６】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（Ｎ−フェニルアミノ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１７】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１８】
特に好ましい実施形態では、デアザプリンは、４−（２−Ｎ’−メチル尿素エチル）アミノ−６−フェノキシメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンである。
【０１１９】
本発明はさらに、細胞を、本発明の化合物と接触させることによって、細胞においてアデノシン受容体（例えば、Ａ_２ｂアデノシン受容体）の活性を阻害する方法に関する。好ましくは、化合物は、受容体のアンタゴニストである。
【０１２０】
本発明はまた、有効な量の本発明の化合物（例えば、Ａ_２ｂのアンタゴニスト）を、動物に投与することによって、動物において胃腸障害（例えば、下痢）を治療する方法に関する。好ましくは、動物は、ヒトである。
【０１２１】
別の実施形態では、本発明は、本発明のＮ−６置換７−デアザプリン、および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物に関する。
【０１２２】
本発明はまた、動物におけるＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態の治療が行われるように、治療上有効な量の本発明のデアザプリンを哺乳類に投与することによって、動物において、Ｎ−６置換７−デアザプリン応答性状態を治療する方法に関する。好適には、疾患状態は、アデノシンにより媒介される障害であり得る。好ましい疾患状態の例としては、中枢神経系障害、心血管障害、腎障害、炎症性障害、アレルギー性障害、胃腸障害、眼の障害、および呼吸器障害が挙げられる。
【０１２３】
「アルキル」という用語は、直鎖アルキル基、分岐鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基、およびシクロアルキル置換アルキル基を含む飽和脂肪族基の基を指す。アルキルという用語はさらに、炭化水素骨格の１以上の炭素を置換する酸素、窒素、硫黄またはリン原子（例えば酸素、窒素、硫黄またはリン原子）をさらに包含することができるアルキル基を包含する。好ましい実施形態では、直鎖または分岐鎖アルキルは、その骨格中に３０個以下（例えば、直鎖に関してはＣ_１〜Ｃ_３０、分岐鎖に関してはＣ_３〜Ｃ_３０）、より好ましくは２０個以下の炭素原子を有する。同様に、好ましいシクロアルキルは、その環構造中に４〜１０個の炭素原子を有し、より好ましくは、環構造中に５個、６個または７個の炭素を有する。
【０１２４】
さらに、明細書および特許請求の範囲全体にわたって使用される場合アルキルという用語は、「非置換アルキル」および「置換アルキル」の両方を包含することを意図し、その後者は、炭化水素骨格の１以上の炭素上の水素を置換する置換基を有するアルキル部分を指す。かかる置換基としては、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナート、ホスフィナート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、およびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル、およびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分を挙げることができる。炭化水素鎖上で置換された部分は、適切な場合にはそれ自体置換することができることが当業者に理解されよう。シクロアルキル基は、例えば上述の置換基でさらに置換することができる。「アルキルアリール」部分は、アリールで置換されたアルキル（例えば、フェニルメチル（ベンジル））である。「アルキル」という用語はまた、上述のアルキルに対して、長さおよび考え得る置換が類似しているが、それぞれ少なくとも１つの二重結合または三重結合を含有する不飽和脂肪族基を包含する。
【０１２５】
本明細書中で使用する場合「アリール」という用語は、０個〜４個のヘテロ原子を含んでもよい５および６員環の単環芳香族基、例えば、ベンゼン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジンおよびピリミジン等を含むアリール基の基を指す。アリール基はまた、ナフチル、キノリル、インドリル等のような多環式融合芳香族基を包含する。環構造中にヘテロ原子を有するアリール基はまた、「アリールへテロ環」、「ヘテロアリール」、または「ヘテロ芳香族」とも称され得る。芳香環は、上述のような、例えばハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、ホスフェート、ホスホナート、ホスフィナート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、およびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル、およびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分のような置換基で、１以上の環の位置で置換することができる。アリール基はまた、多環（例えば、テトラリン）を形成するように芳香族でない脂環式もしくは複素環式の環と融合または架橋することができる。
【０１２６】
「アルケニル」および「アルキニル」という用語は、上述のアルキルに対して、長さおよび考え得る置換が類似しているが、それぞれ少なくとも１つの二重結合および三重結合を含有する不飽和脂肪族基を指す。例えば、本発明は、シアノおよびプロパルギル基を意図する。
【０１２７】
炭素数について別記しない限り、本明細書中で使用する場合「低級アルキル」は、上記に定義されるが、１〜１０個の炭素、より好ましくはその骨格構造中に１〜６個の炭素原子、さらに好ましくはその骨格構造中に１〜３個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。同様に、「低級アルケニル」および「低級アルキニル」は、同様の炭素鎖を有する。
【０１２８】
「アルコキシアルキル」、「ポリアミノアルキル」、および「チオアルコキシアルキル」という用語は、炭化水素骨格の１以上の炭素を置換する酸素、窒素、または硫黄原子（例えば、酸素、窒素、または硫黄原子）をさらに含む上述のアルキル基を指す。
【０１２９】
「ポリシクリル」または「多環式基」という用語は、２つ以上の炭素が２つの隣接する環に共通している２つ以上の環（例えば、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、および／またはヘテロアリール）を有する基を指し、例えば環は、「融合環」である。隣接しない原子を介して結合する環を、「架橋環」と呼ぶ。多環の環のそれぞれは、上述のような、例えばハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナート、ホスフィナート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、およびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル、およびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分のような置換基で置換することができる。
【０１３０】
本明細書中で使用する場合「ヘテロ原子」という用語は、炭素または水素以外の任意の元素の原子を意味する。好ましいヘテロ原子は、窒素、酸素、硫黄、およびリンである。
【０１３１】
「アミノ酸」という用語は、グリシン、アラニン、バリン、システイン、ロイシン、イソロイシン、セリン、スレオニン、メチオニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、グルタミン、アスパラギン、リシン、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンのような、タンパク質中に見出される天然に存在するアミノ酸および天然に存在しないアミノ酸を包含する。アミノ酸類縁体は、長くした側鎖または短くした側鎖、あるいは適切な官能基を有する変異側鎖を有するアミノ酸を包含する。アミノ酸はまた、アミノ酸の構造が立体異性体型を許容する場合、アミノ酸のＤおよびＬ立体異性体を包含する。「ジペプチド」という用語は、一緒に連結された２つ以上のアミノ酸を包含する。好ましくは、ジペプチドは、ペプチド結合により連結された２つのアミノ酸である。特に好ましいジペプチドとしては、例えばアラニン−アラニン、およびグリシン−アラニンが挙げられる。
【０１３２】
本発明の化合物の幾つかの構造は、不斉炭素を包含し、したがって、ラセミ化合物およびラセミ混合物、単一エナンチオマー、ジアステレオマー混合物、および個々のジアステレオマーとして見出されることに留意されたい。これらの化合物のかかる異性体型すべてが、本発明に明らかに包含される。各不斉炭素は、Ｒ配置またはＳ配置であってもよい。したがって、かかる不斉から生じる異性体（例えば、すべてのエナンチオマーおよびジアステレオマー）は、別記しない限り、本発明の範囲内に包含されることが理解されよう。かかる異性体は、古典的な分離技法によって、また立体化学的制御合成によって、実質的に純粋な形態で得ることができる。
【０１３３】
本発明はさらに、哺乳動物においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態、例えば呼吸器障害（例えば、喘息、気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、およびアレルギー性鼻炎）、腎障害、胃腸障害、および眼の障害を治療するための薬学的組成物に関する。薬学的組成物は、治療上有効な量の上述のＮ−６置換７−デアザプリン、および薬学的に許容可能なキャリアを包含する。上述のデアザプリンのすべてが、治療上の処置のために包含されることが理解されよう。本発明のデアザプリンは、単独で、あるいは本発明の他のデアザプリンと併用して、または例えば抗生物質、抗炎症剤、もしくは抗癌剤のようなさらなる治療用化合物と併用して使用することができることがさらに理解されよう。
【０１３４】
「抗生物質」という用語は、当該技術分野で認識されており、微生物を成長させることにより生産される物質、およびそれらの合成誘導体を包含することを意図し、それらは、病原体の成長を排除または阻害し、感染した宿主患者に対して最低限の有害な影響をもたらすか、または有害な影響をまったくもたらさずに、病原体に対して選択的に毒性を有する。抗生物質の適切な例としては、アミノグリコシド、セファロスポリン、クロラムフェニコール、フシジン酸、マクロライド、ペニシリン、ポリミキシン、テトラサイクリン、およびストレプトマイシンの基本的種類が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３５】
「抗炎症剤」という用語は、当該技術分野で認識されており、グルココルチコイド、アスピリン、イブプロフェン、ＮＳＡＩＤＳ等のような、炎症の原因作用物質を直接拮抗することなく、身体メカニズムに作用する作用物質を包含することを意図する。
【０１３６】
「抗癌剤」という用語は、当該技術分野で認識されており、好ましくは他の生理学的機能に悪影響を及ぼさずに、癌細胞の成長を減少、根絶または防止する作用物質を包含することを意図する。
【０１３７】
本発明の化合物が医薬品として、ヒトおよび哺乳類に投与される場合、本発明の化合物は、それ自体で、あるいは薬学的に許容可能なキャリアと組み合わせて例えば０．１〜９９．５％（より好ましくは０．５〜９０％）の有効成分を含有する薬学的組成物として付与され得る。
【０１３８】
本明細書中で使用する場合「薬学的に許容可能なキャリア」という語句は、本発明の化合物がその対象とされる機能を実施することができるように、患者内のまたは患者への本発明の化合物（複数可）の運搬または輸送に関与した、液体もしくは固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒またはカプセル化用物質のような薬学的に許容可能な物質、組成物あるいはベシクルを意味する。通常、かかる化合物は、１つの器官、または身体の一部から、別の器官、または身体の一部へ運搬あるいは輸送される。各キャリアは、配合剤の他の成分と相溶性であり、患者に有害でないという意味で「許容可能」でなくてはならない。薬学的に許容可能なキャリアとして作用することができる物質の幾つかの例としては、糖（例えば、ラクトース、グルコースおよびスクロース）、デンプン（例えば、コーンスターチおよびポテトスターチ）、セルロースおよびその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、および酢酸セルロース）、粉末トラガカント、麦芽、ゼラチン、タルク、賦形剤（例えば、ココアバターおよび座薬用ワックス）、油（落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、および大豆油）、グリコール（例えば、プロピレングリコール）、ポリオール（例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール）、エステル（例えば、オレイン酸エチル、およびラウリル酸エチル）、寒天、緩衝剤（例えば、水酸化マグネシウム、および水酸化アルミニウム）、アルギニン酸、発熱物質を含まない水、等張生理食塩水、リンゲル溶液、エチルアルコール、リン酸緩衝溶液、および薬学的配合剤で使用される他の無毒性の相溶性物質が挙げられる。
【０１３９】
上述のように、本発明の化合物のある実施形態は、アミノまたはアルキルアミノのような塩基性官能基を含有することができ、したがって薬学的に許容可能な酸と、薬学的に許容可能な塩を形成することが可能である。この観点での「薬学的に許容可能な塩」という用語は、本発明の化合物の比較的無毒性の無機および有機酸付加塩を指す。これらの塩は、本発明の化合物の最終単離および生成中にその場で、あるいは適切な有機または無機酸と、遊離塩基形態の本発明の生成化合物を別個に反応させて、このようにして形成された塩を単離することによって調製することができる。代表的な塩としては、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、ホスホン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリル酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メチル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、およびラウリルスルホン酸塩等が挙げられる（例えば、Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ． （１９９７） 「薬学的塩（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ）」， Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｓｃｉ． ６６：１−１９を参照）。
【０１４０】
他の場合では、本発明の化合物は、１つまたはそれ以上の酸性官能基を含有してもよく、したがって、薬学的に許容可能な塩基と、薬学的に許容可能な塩を形成することが可能である。これらの場合での「薬学的に許容可能な塩」という用語は、本発明の化合物の比較的無毒性の無機および有機塩基付加塩を指す。これらの塩は同様に、本発明の化合物の最終単離および精製中にその場で、あるいは適切な塩基（例えば、薬学的に許容可能な金属陽イオンの水酸化物、炭酸塩、または炭酸水素塩）、アンモニア、または薬学的に許容可能な有機第一アミン、第二アミンまたは第三アミンと、遊離酸形態の本発明の精製化合物を別個に反応させることによって調製することができる。代表的なアルカリ塩またはアルカリ土類塩としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、およびアルミニウム塩等が挙げられる。塩基付加塩の形成に有用な代表的な有機アミンとしては、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン等が挙げられる。
【０１４１】
「薬学的に許容可能なエステル」という用語は、本発明の化合物の比較的無毒性のエステル化生成物を指す。これらのエステルは、本発明の化合物の最終単離および生成中にその場で、あるいは適切なエステル化剤と、遊離塩基形態の本発明の生成化合物またはヒドロキシルを別個に反応させることによって調製することができる。カルボン酸は、触媒の存在下でのアルコールを用いた処理によりエステルに変換することができる。ヒドロキシル含有誘導体は、ハロゲン化アルキノイルのようなエステル化剤を用いた処理によりエステルに変換することができる。この用語はさらに、生理学的条件下で溶媒和することが可能な低級炭化水素基、例えばアルキルエステル（メチルエステル、エチルエステルおよびプロピルエステル）を包含することを意図する（例えば、上述のＢｅｒｇｅ等を参照）。
【０１４２】
本発明はさらに、本発明の治療用化合物に、インビボで変換されるプロドラッグの使用を意図する（例えば、Ｒ．Ｂ． Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ， １９９２， 「薬剤設計および薬剤作用の有機化学（Ｔｈｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｃｔｉｏｎ）」， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， Ｃｈａｐｔｅｒ ８を参照）。かかるプロドラッグは、治療用化合物の生体分布（例えば、通常プロテアーゼの反応性部位に侵入しない化合物を許可するために）または薬物動態を変更するのに使用することができる。例えば、カルボン酸基を、例えばメチル基またはエステル基でエステル化して、エステルを得ることができる。エステルを患者に投与すると、エステルは酵素的または非酵素的に、還元的にあるいは加水分解的に切断されて、陰イオン基を出現させる。陰イオン性基は、切断されて中間体化合物を出現させ、続いて分解して活性化合物を生じる部分（例えば、アシルオキシメチルエステル）でエステル化することができる。別の実施形態では、プロドラッグは、硫酸塩またはスルホン酸塩の還元型（例えば、チオール）であり、インビボで治療用化合物へと酸化される。さらに、陰イオン部分は、インビボで活発に輸送されるか、あるいは標的器官で選択的に取り込まれる基へとエステル化することができる。エステルは、キャリア部分に関して以下に記載するように、特定の反応性部位へと治療部分を特異的にターゲッティングすることを可能とするように選択することができる。
【０１４３】
湿潤剤、乳化剤、および潤滑剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム）、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、風味剤、および香料剤、防腐剤、および酸化防止剤もまた、組成物中に存在することができる。
【０１４４】
薬学的に許容可能な酸化防止剤の例としては、アスコルビン酸、塩酸システイン、硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムのような水溶性酸化防止剤、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロール等のような油溶性酸化防止剤、およびクエン酸、エチレンシアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、ホスホン酸等のような金属キレート剤が挙げられる。
【０１４５】
本発明の配合剤としては、経口、鼻、局所、経皮、口腔、舌下、直腸、膣および／または非経口投与に適したものが挙げられる。配合剤は、単位投薬形態で利便性よく付与されてもよく、また薬学の技術分野で既知の任意の方法により調製されてもよい。単回投薬形態をもたらすためにキャリア物質と組み合わせることができる有効成分の量は一般に、治療効果をもたらす化合物の量である。概して、１００％のうち、この量は、約１％〜約９９％、好ましくは約５％〜約７０％、最も好ましくは約１０％〜約３０％の有効成分の範囲である。
【０１４６】
これらの化合物または組成物を調製する方法は、本発明の化合物を、キャリア、および任意に１以上の付加的成分と会合させる工程を包含する。一般に、配合剤は、本発明の化合物を、液体キャリアまたは微細固体キャリア、あるいはその両方と一様かつ緊密に会合させ、続いて必要であれば生成物を造形することで調製される。
【０１４７】
経口投与に適した本発明の配合剤は、それぞれ有効成分として既定量の本発明の化合物を含有する、カプセル、サシェット、丸剤、錠剤、ロゼンジ（風味付き基剤、通常スクロースおよびアラビアゴムまたはトラガカントゴムを用いて）、粉末、顆粒の形態で、あるいは水性もしくは非水性液体中の溶液または懸濁液として、あるいは水中油型もしくは油中水型液体エマルジョンとして、あるいはエリキシルまたはシロップとして、あるいは香錠（ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアラビアゴムのような不活性基剤を用いて）および／または洗口剤等として存在し得る。本発明の化合物はまた、ボーラス、舐剤またはペーストとして投与されてもよい。
【０１４８】
経口投与用の本発明の固体投薬形態（カプセル、錠剤、丸剤、糖衣錠、粉末、顆粒等）では、有効成分は、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム、および／または以下の：充填剤または増量剤（例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／またはケイ酸）、結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアラビアゴム）、保湿剤（例えば、グリセロール）、崩壊剤（例えば、寒天−寒天、カルボン酸カルシウム、ポテトスターチまたはタピオカスターチ、アルギン酸、特定のケイ酸塩、およびカルボン酸ナトリウム）、溶液凝結遅延剤（例えば、パラフィン）、吸収促進剤（例えば、第四アンモニウム化合物）、湿潤剤（例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール）、吸収剤（例えば、カオリンおよびベントナイトクレー）、潤滑剤（例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびそれらの混合物）、および着色剤のような１以上の薬学的に許容可能なキャリアと混合される。カプセル、錠剤および丸剤の場合では、薬学的組成物はまた、緩衝剤を含んでもよい。同様のタイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖のような賦形剤、ならびに高分子量ポリエチレングリコール等を用いた軟質および硬質充填ゼラチンカプセルにおける充填剤として使用され得る。
【０１４９】
錠剤は、任意に１以上の付加的成分とともに、圧縮または成形により作製され得る。圧縮錠剤は、結合剤（例えば、ゼラチン、またはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、潤滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば、スターチグリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシセルロースナトリウム）、界面活性剤または分散剤を用いて調製され得る。成形された錠剤は、適切な機械装置で、湿潤した粉末化合物と不活性希釈液との混合物を成形することで作製され得る。
【０１５０】
錠剤、ならびに糖衣錠、カプセル、丸剤および顆粒のような本発明の薬学的組成物の他の固体投薬形態は、任意に、薬学的配合の技術分野で既知の腸溶性コーティングおよび他のコーティングのようなコーティングおよび外皮を用いて分割（ｓｃｏｒｅｄ）または調製され得る。それらはまた、例えば所望の放出プロフィールを提供するように様々な比率のヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソーム、および／またはミクロスフェアを用いて、その中の有効成分の徐放または制御放出を提供するように配合されてもよい。それらは、例えば細菌保持フィルタによるろ過により、あるいは使用直前に滅菌水または幾つか他の滅菌注射用媒質中に溶解することができる滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことにより殺菌してもよい。これらの組成物はまた、任意に乳白剤を含有してもよく、それらが有効成分（複数）のみ、あるいは有効成分（複数）を優先的に、胃腸管の特定部分で、任意に遅延様式で放出する組成物であってもよい。使用することができる包埋組成物の例としては、高分子物質およびワックスが挙げられる。有効成分はまた、適切な場合、１以上の上述の賦形剤とのマイクロカプセル化形態であってもよい。
【０１５１】
本発明の化合物の経口投与用の液体投薬形態としては、薬学的に許容可能なエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップ、および賦形剤が挙げられる。有効成分のほかに、液体投薬形態は、例えば、水または他の溶媒のような当該技術分野で一般に知られる不活性希釈剤、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に、綿実油、ピーナツ油、コーン油、胚種油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物のような可溶化剤および乳化剤を含有してもよい。
【０１５２】
不活性希釈剤のほかに、経口組成物はまた、湿潤剤、乳化剤および沈殿防止剤、甘味剤、風味剤、着色剤、香料剤、および防腐剤のような補助剤を含むことができる。
【０１５３】
活性化合物のほかに、懸濁液は、例えばエトキシ化イソステアリールアルコール、ポリエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天−寒天およびトラガカント、ならびにそれらの混合物のような沈殿防止剤を含有してもよい。
【０１５４】
直腸または膣投与用の本発明の薬学的組成物の配合剤は、座薬として提供されてもよく、それは１以上の本発明の化合物を、１以上の、例えばココアバター、ポリエチレングリコール、座薬用ワックスまたはサリチレートを包含し、室温で固体であるが、身体温度で液体であり、したがって直腸また膣腔で溶融し、活性化合物を放出する適切な非刺激性賦形剤あるいはキャリアと混合することにより調製されてもよい。
【０１５５】
膣投与に適した本発明の配合剤はまた、適切な技術分野で既知でのあるようなキャリアを含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ジェル、ペースト、泡またはスプレー配合剤を包含する。
【０１５６】
本発明の化合物の局所または経皮投与用の投薬形態としては、粉末、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ジェル、溶液、パッチ、および吸入剤が挙げられる。活性化合物は、薬学的に許容可能なキャリア、および必要とされ得る防腐剤、緩衝液、または噴射剤と、滅菌条件下で混合され得る。
【０１５７】
軟膏、ペースト、クリーム、およびジェルは、本発明の活性化合物のほかに、動物性および植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルク、および酸化亜鉛、またはそれらの混合物のような賦形剤を含有してもよい。
【０１５８】
粉末およびスプレーは、本発明の化合物のほかに、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、およびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物のような賦形剤を含有することができる。スプレーはさらに、クロロフルオロ炭化水素、および揮発性非置換炭化水素（例えば、ブタンおよびプロパン）のような慣例の噴射剤を含有することができる。
【０１５９】
経皮パッチは，本発明の化合物の身体への制御送達を提供する付加利益を有する。かかる投薬形態は、適正な媒質に化合物を溶解または分散させることで作製することができる。吸収増強剤はまた、皮膚を通過する化合物の流動を増加させるのに使用することができる。かかる流動の速度は、速度制御膜を提供するか、あるいはポリマーマトリックスまたはジェルに活性化合物を分散させることにより制御することができる。
【０１６０】
眼科用配合剤、眼の軟膏、粉末、溶液等はまた、本発明の範囲内であると意図される。好ましくは、薬学的調製物は、眼科用配合剤（例えば、眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤、全身性配合剤、または手術用灌注溶液）である。
【０１６１】
本発明の眼科用配合剤は、１以上のデアザプリン、および薬学的に許容可能なビヒクルを包含してもよい。様々なタイプのビヒクルを使用してもよい。ビヒクルは一般に、本質的に水性である。配合剤、ならびに冒された眼中に１〜２滴の溶液垂らすことによりかかる化合物を容易に投与する患者の能力の事情に基づいて、水溶液が一般に好ましい。しかしながら、本発明のデアザプリンはまた、懸濁液、粘性もしくは半粘性ジェルまたは他のタイプの固体もしくは半固体組成物のような他のタイプの組成物に容易に組み込まれてもよい。本発明の眼科用組成物はまた、緩衝液、防腐剤、補助溶媒および粘度上昇剤のような様々な他の成分を含んでもよい。
【０１６２】
適切な緩衝剤系（例えば、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、またはホウ酸ナトリウム）を添加して、貯蔵条件下でのｐＨドリフトを防いてもよい。
【０１６３】
眼科用製品は通常、多用量形態で包装される。したがって、防腐剤は、使用中の微生物混入を防ぐのに必要とされる。適切な防腐剤としては、塩化ベンザルコニウム、チメロサール、クロロブタノール、メチルパラベン、プロピルパラベン、フェニルエチルアルコール、エデト酸ナトリウム、ソルビン酸、ポリクオタニウム−１、または当業者に既知の他の作用物質が挙げられる。かかる防腐剤は通常、０．００１〜１．０％重量／容量（「％ｗ／ｖ」）のレベルで使用される。
【０１６４】
本発明のデアザプリンが、例えば眼球後または眼周囲注射および眼内灌流または注射により、眼内手術処置中に投与される場合、ベシクルとして平衡塩灌注溶液の使用が最も好ましい。ＢＢＳ（登録商標）滅菌灌注溶液およびＢＳＳ Ｐｌｕｓ（登録商標）滅菌眼内灌注溶液（Ａｌｃｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ， Ｉｎｃ．， Ｆｏｒｔ Ｗｏｒｔｈ， Ｔｅｘａｓ， ＵＳＡ）が、生理学的平衡眼内灌注溶液の例である。後者のタイプの溶液は、米国特許第４，５５０，０２２号（Ｇａｒａｂｅｄｉａｎ等）（この内容全体が、参照により本明細書中に援用される）に記載されている。眼球後および眼周囲注射は、当業者に既知であり、例えばＯｐｈｔｈａｌｍｉｃ Ｓｕｒｇｅｒｙ： Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃｅ， Ｅｄ．， Ｇ．Ｌ． Ｓｐａｅｔｈ． Ｗ．Ｂ． Ｓａｎｄｅｒｓ Ｃｏ．， Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ， Ｐａ．， Ｕ．Ｓ．Ａ．， ｐａｇｅｓ ８５−８７ （１９９０）を含む数多くの刊行物に記載されている。
【０１６５】
上述のように、細胞レベルで網膜および視神経乳頭組織に対する損傷を防止または低減するためのデアザプリンの使用は、本発明の実施形態の特に重要な態様である。治療され得る眼科的症状としては、網膜症、黄斑変性、眼の虚血、緑内障、ならびに虚血再灌流障害、光化学的障害、および眼の手術に関連した障害のような眼の組織に対する障害、特に光または手術機器への暴露による網膜あるいは視神経乳頭に対する障害に関連した損傷が挙げられるが、これらに限定されない。化合物はまた、例えば眼の手術後の硝子体（ｖｉｔｒｅａｌ）または結膜下注射のような眼科手術に対する付加物として使用してもよい。化合物は、一時的な症状の急性処置に使用してよく、あるいは特に変性疾患の場合に慢性的に投与してもよい。化合物はまた、特に眼の手術または非侵襲的眼科的処置、あるいは他のタイプの手術前に、予防的に使用してもよい。
【０１６６】
非経口投与に適した本発明の薬学的組成物は、１以上の薬学的に許容可能な滅菌等張水溶液または非水性溶液、分散液、懸濁液またはエマルジョン、あるいは使用直前に滅菌注射用溶液または分散液に再構成され得る滅菌粉末と併用して、１以上の本発明の化合物を含み、酸化防止剤、緩衝液、静菌薬、配合剤を、対象とするレシピエントの血液と等張にする溶質、または沈殿防止剤もしくは増粘剤を含有してもよい。
【０１６７】
本発明の薬学的組成物で使用され得る適切な水性および非水性キャリアの例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）およびそれらの適切な混合物、植物油（例えば、オリーブ油）、および注射用有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）が挙げられる。適正な流動性は、例えばレシチンのようなコーティング物質を使用することにより、分散液の場合には必要とされる粒径の維持により、また界面活性剤の使用により維持することができる。
【０１６８】
これらの組成物はまた、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤のような補助剤を含有してもよい。微生物の作用の防止は、様々な抗細菌剤および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等の含入により保証され得る。糖、塩化ナトリウム糖のような等張剤を組成物に包含することもまた望ましい場合がある。さらに、注射用薬学的形態の長期吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンのような吸収を遅延させる作用物質の含入により成し遂げられ得る。
【０１６９】
場合によっては、薬剤の影響を延長するために、皮下または皮内注射からの薬剤の吸収を遅らせることが望ましい。これは、水溶性が乏しい結晶性または非晶質物質の液体懸濁液の使用により達成され得る。また薬剤の吸収速度は、その溶解速度に依存し、順に溶解速度は、結晶サイズおよび結晶性形態に依存し得る。あるいは、非経口投与薬剤形態の遅延吸収は、油ベシクル中に薬剤を溶解または懸濁することにより達成される。
【０１７０】
注射用デポ剤形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドのような生分解性ポリマー中に対象化合物のマイクロカプセルマトリックスを形成することで作製される。薬剤対ポリマーの比、および使用する特定のポリマーの性質に依存して、薬剤放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポ注射用配合剤はまた、身体組織に相溶性のリポソームまたはマイクロカプセル中に薬剤を捕捉することで調製される。
【０１７１】
本発明の調製物は、経口的、非経口的、局所的、または直腸的に付与され得る。それらは、当然ながら各経口経路に適した形態で付与される。例えば、それらは、注射、吸入、眼用ローション、軟膏、座薬等（注射、注入または吸収による投与）により錠剤もしくはカプセルの形態で、ローションまたは軟膏により局所的に、また座薬により直腸的に投与される。経口投与が好ましい。
【０１７２】
本明細書中に使用される場合「非経口投与」および「非経口的に投与される」という語句は、通常注射による、経腸および局所投与以外の投与様式を意味し、静脈内、筋内、動脈内、髄腔内、包内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経器官、皮下、表皮下、関節内、被膜下、クモ膜下、脊椎内、および胸骨内注射および注入が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７３】
本明細書中で使用される場合「全身性投与」、「全身投与される」、「末梢性投与」および「末梢投与される」という語句は、化合物、薬剤または他の材料を、それらが患者の系統に入るように、したがって代謝および他の同様のプロセスを施されるように、直接中枢神経系への投与以外の化合物の投与（例えば、皮下投与）を意味する。
【０１７４】
これらの化合物は任意の適切な投与経路により（経口的、鼻的（例えばスプレーによるような）、直腸的、鞘膜内、非経口的、槽内および局所的（粉末、軟膏またはドロップ（口腔的および舌下的を含む）によるような）を含む）、治療法のためにヒトおよび他の動物に投与され得る。
【０１７５】
選択した投与経路に関係なく、適切な水和形態、および／または本発明の薬学的組成物で使用され得る本発明の化合物は、当業者に既知の従来法により、薬学的に許容可能な投薬形態に配合される。
【０１７６】
本発明の薬学的組成物中の有効成分の実際の投薬レベルは、患者に対して有毒でなく、特定の患者、組成物、および投与様式に関して所望の治療的応答を達成するのに有効な有効成分の量を獲得するように変化させてもよい。
【０１７７】
選択投薬レベルは、使用する本発明の特定の化合物、またはそれらのエステル、塩もしきはアミドの活性、投与経路、投与時間、使用される特定の化合物の排出速度、治療期間、使用する特定の化合物と併用される他の薬剤、化合物および／または物質、年齢、性別、体重、症状、治療中の患者の全般的健康状態およびこれまでの医療歴、および医療技術分野で既知の同様の要因を含む様々な要因に依存する。
【０１７８】
当業者を含む医師および獣医は、必要とされる薬学的組成物の有効量を容易に決定および処方することができる。例えば、医師または獣医は、所望の治療効果を達成するために必要とされるレベル未満のレベルで薬学的組成物中で使用される本発明の化合物の用量を開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加することができる。
【０１７９】
一般に、本発明の化合物の適切な日用量は、治療効果をもたらすのに有効な最低用量である化合物の量である。かかる有効な用量は概して、上述の要因に依存する。一般に、患者に関する本発明の化合物の静脈内および皮下用量は、示した鎮痛効果用に使用される場合、１日当たり体重１ｋｇにつき約０．０００１〜約２００ｍｇ、より好ましくは１日当たり体重１ｋｇにつき約０．０１〜約１５０ｍｇ、さらに好ましくは１日当たり体重１ｋｇにつき約０．２〜約１４０ｍｇ、の範囲である。
【０１８０】
望ましい場合、活性化合物の有効な日用量は、任意に単位投薬形態で、その日全体にわたって適切な間隔で別個に投与される２回、３回、４回、５回、６回またはそれ以上の分割用量（ｓｕｂ−ｄｏｓｅ）として投与される。
【０１８１】
本発明の化合物を単独で投与することが可能である一方で、薬学的組成物として化合物を投与することが望ましい。
【０１８２】
本発明はまた、哺乳類においてＮ−６置換７−デアザプリン応答性状態、例えばアデノシン受容体活性の望ましくない増加を治療するための包装された薬学的組成物に関連する。包装された薬学的組成物は、治療上有効な量の上述の少なくとも１つのデアザプリンを保持する容器と、哺乳類においてデアザプリン応答性状態を治療するためのデアザプリンの使用説明書とを含む。
【０１８３】
本発明のデアザプリンは、有機合成に関する標準的な方法を用いて調製することができる。デアザプリンは、逆相ＨＰＬＣ、クロマトグラフィ、再結晶等により精製することができ、それらの構造は、マススペクトル分析、元素分析、ＩＲおよび／またはＮＭＲ分光法により確認することができる。
【０１８４】
通常、本発明の中間体およびデアザプリンの合成は、溶液中で実施される。１以上の保護基の付加および除去もまた、典型的な実践であり、当業者に既知である。本発明のデアザプリン中間体の調製に関する典型的な合成スキームを以下のスキームＩに概略する。
【０１８５】
本発明はさらに、下記構造（ＩＶ）を有する化合物、あるいは薬学的に許容可能な塩、またはプロドラッグ誘導体、または生物学的に活性な代謝産物を提供する：
【化３８】

（式中、
Ｒ_１は、トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル、２−メチルアミノカルボニルアミノシクロヘキシル、アセチルアミノエチル、またはメチルアミノカルボニルアミノエチルであり、
Ａｒは、置換もしくは非置換の４〜６員環、フェニル、ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、１，２，４−トリアゾール、ピリジン、２（１Ｈ）−ピロリドン、４（１Ｈ）−ピロリドン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、イソチアゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、テトラゾール、ナフタレン、テトラリン、ナフチリジン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドール、２，３−ジヒドロインドール、１Ｈ−インドール、インドリン、ベンゾピラゾール、１，３−ベンゾジオキオール、ベンゾオキソール、プリン、クマリン、クロモン、キノリン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、ベンズイミダゾール、キナゾリン、ピリド［２，３−ｂ］ピラジン、ピリド［３，４−ｂ］ピラジン、ピリド［３，２−ｃ］ピリダジン、ピリド［３，４−ｂ］ピリジン、１Ｈ−ピラゾール［３，４−ｄ］ピリミジン、プテリジン、２（１Ｈ）−キノロン、１（２Ｈ）−イソキノロン、１，４−ベンズイソオキサジン、ベンゾチアゾール、キノキサリン、キノリン−Ｎ−オキシド、イソキノリン−Ｎ−オキシド、キノオキサリン−Ｎ−オキシド、キナゾリン−Ｎ−オキシド、ベンズオキサジン、フタラジン、シンノリンであるか、または下記構造：
【化３９】

式中、
Ｙは、炭素または窒素であり、
Ｒ_２およびＲ_２’は、独立して、Ｈ、置換もしくは非置換のアルキル、置換
もしくは非置換のアリール、ハロゲン、メトキシ、メチルアミノ、またはメチルチオである）
を有するものであり、
Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_７）（Ｒ_８）ＸＲ_５（ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ_６であり、Ｒ_７およびＲ_８は、それぞれ独立して、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＮＲ_５Ｒ_６は、一緒に置換もしくは非置換の４〜７員環である）であり、
Ｒ_４は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキルである）
が、但し、Ｒ_３がアセチルアミノエチルである場合は、Ａｒは、４−ピリジルではない。
【０１８６】
構造ＩＶを有する化合物の一実施形態では、ＮＲ_５Ｒ_６は、下記：
【化４０】

【化４１】

（式中、ｍは、０、１、または２である）、
【化４２】

（式中、ｎは、０、１、２、または３であり、Ｒ_８は、水素、−ＯＨ、−ＣＨ_２ＯＨ、−Ｃ（＝）ＮＲ_９Ｒ_１０、ＮＨＲ_１１（ここで、Ｒ_１１は、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ_３、または−ＳＯ_２Ｍｅである）である）、または
【化４３】

（式中、Ｒは、Ｈ、アルキル、またはアリールである）
からなる群から選択される置換もしくは非置換の４〜７員環である。
【０１８７】
式ＩＶを有する化合物の別の実施形態でにおいて、Ａｒは、下記構造を有する：
【化４４】

（式中、Ｙは、炭素または窒素であり、Ｒ_２はＨ、またはハロゲン、−Ｏ−アルキル基、アミン基、またはスルフィド基であり、
Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_７）（Ｒ_８）ＮＲ_５Ｒ_６（ここで、Ｒ_７およびＲ_８は、それぞれ独立して、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＲ_５、Ｒ_６および窒素は、一緒に置換もしくは非置換の４〜７員環を形成する）である）。
【０１８８】
化合物の別の実施形態では、Ｙは炭素である。
【０１８９】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_２は水素である。
【０１９０】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_４は水素である。
【０１９１】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_３は水素である。
【０１９２】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_３およびＲ_４は、それぞれメチルである。
【０１９３】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_３は、−Ｃ（Ｒ_７）（Ｒ_８）ＮＲ_５Ｒ_６（ここで、Ｒ_７およびＲ_８は、それぞれ独立して、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_５およびＲ_６は、それぞれ独立して、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＲ_５、Ｒ_６および窒素は、一緒に置換もしくは非置換の４〜７員環を形成する）である。
【０１９４】
化合物の別の実施形態では、Ｒ_２はハロゲンである。
【０１９５】
化合物の別の実施形態では、Ｙは窒素である。
【０１９６】
化合物のさらに別の実施形態では、Ｒ_２は水素である。
【０１９７】
化合物のさらなる実施形態では、Ｒ_３およびＲ_４は、それぞれ水素である。
【０１９８】
本発明はまた、下記構造（Ｖ）を有する化合物を提供する：
【化４５】

（式中、
Ｒ_１は、アリール、置換アリール、またはヘテロアリールであり、
Ｒ_２は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり、
Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_６）（Ｒ_７）ＮＲ_４Ｒ_５（ここで、Ｒ_６およびＲ_７はそれぞれ、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_４およびＲ_５はそれぞれ、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＲ_４、Ｒ_５および窒素は、一緒に４〜７員環を形成する）である）。
【０１９９】
構造Ｖを有する化合物の一実施形態では、Ｒ_４およびＲ_７は、それぞれ水素であり、Ｒ_４はＨであり、Ｒ_５は、−Ｒ_２２Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_２３である。
【０２００】
構造Ｖを有する化合物の別の実施形態では、Ｒ_４およびＲ_７は、それぞれＨであり、環系は、モルホリノ、チオモルホリノ、Ｎ−４−置換ピペラジノ、２−置換ピペラジン、またはＲ_８置換ピロリジノ、ピペラジンであり（ここで、Ｒ_８は、Ｈ、ＯＨ、ＣＨ_２ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ_９Ｎ_１０、ＮＲ_１１（ここで、Ｒ_１１は、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ_３、−ＳＯ_２Ｍｅである）である。
【０２０１】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化４６】

を有する。
【０２０２】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化４７】

を有する。
【０２０３】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化４８】

を有する。
【０２０４】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化４９】

を有する。
【０２０５】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化５０】

を有する。
【０２０６】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化５１】

を有する。
【０２０７】
化合物の別の実施形態では、当該化合物は、下記構造：
【化５２】

を有する。
【０２０８】
下記構造：
【化５３】

（式中、Ｒ_２は、芳香族の５〜６員環であり、Ｒ_３およびＲ_４は、独立して、Ｈ、またはアルキルである）を有する化合物。
【０２０９】
当該化合物の一実施形態において、化合物は、下記構造：
【化５４】

を有する。
【０２１０】
当該化合物の一実施形態において、化合物は、下記構造：
【化５５】

を有する。
【０２１１】
当該化合物の別の実施形態では、化合物は、下記構造：
【化５６】

を有する。
【０２１２】
当該化合物１５００の別の実施形態では、化合物は、下記構造：
【化５７】

を有する。
【０２１３】
当該化合物のさらなる実施形態では、化合物は、下記構造：
【化５８】

を有する。
【０２１４】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化５９】

（式中、Ｒ_２は、芳香族の５〜６員環であり、Ｒ_３およびＲ_４は、独立して、Ｈ、またはアルキルであるが、但し、Ｒ_２は４−ピリジルではない）。
【０２１５】
当該化合物の一実施形態において、該化合物は、下記構造：
【化６０】

を有する。
【０２１６】
本発明はさらに、下記構造を有する化合物を提供する：
【化６１】

（式中、
Ｒ_２は、芳香族の置換５〜６員環であり、
Ｒ_３およびＲ_４は、独立して、Ｈ、またはアルキルである）。
【０２１７】
当該化合物の一実施形態において、該化合物は、下記構造：
【化６２】

を有する。
【０２１８】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化６３】

（式中、Ｒ_２は、芳香族の５〜６員環であり、Ｘは、酸素、または硫黄である）。
【０２１９】
当該化合物の一実施形態において、該化合物は、下記構造：
【化６４】化合物１５０３

を有する。
【０２２０】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化６５】

（式中、Ｒ_２は、芳香族の５〜６員環であり、Ｘは、酸素、または硫黄である）。
【０２２１】
当該化合物の一実施形態において、該化合物は、下記構造：
【化６６】

を有する。
【０２２２】
本発明はさらに、患者においてＡ_１アデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、治療上有効な量の式ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物を、患者に投与することを含む方法を提供する。
【０２２３】
この方法の一実施形態では、患者は、動物である。この方法の別の実施形態では、哺乳類は、ヒトである。
【０２２４】
この方法の別の実施形態では、Ａ_１アデノシン受容体は、認識障害、腎不全、不整脈、呼吸上皮、伝達物質放出、鎮静、血管収縮、徐脈、陰性心変力および変伝導、気管支収縮、好中球走化性、逆流状態、または潰瘍状態に関連する。
【０２２５】
本発明はまた、化合物ＩＶおよびＶ、ならびにステロイド、β２アゴニスト、グルココルチコイド、ロイコトリエンアンタゴニスト、または抗コリン作用性アゴニストを含む、喘息のための併用療法を提供する。アデノシンＡ_１、Ａ_２ａ、Ａ_２ｂ、およびＡ_３受容体に関連した疾患は、国際公開第９９／０６０５３号、および国際公開第０９８２２４６５号、国際公開第０９７０５１３８号、国際公開第０９５１１６８１号、国際公開第０９７３３８７９号、日本国特許第０９２９１０８９号、ＰＣＴ／ＵＳ９８／１６０５３号、ならびに米国特許第５，５１６，８９４号（それらの内容全体が完全に、参照により本明細書に援用される）に開示されている。
【０２２６】
本発明はまた、構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物の水溶性プロドラッグを提供し、ここで上記水溶性プロドラッグは、Ａ_１アデノシン受容体を選択的に阻害する活性薬剤に、インビボで代謝される。
【０２２７】
プロドラッグの一実施形態では、上記プロドラッグは、エステラーゼにより触媒される加水分解によって、インビボで代謝される。
【０２２８】
本発明はまた、プロドラッグ、および薬学的に許容可能なキャリアを含む薬学的組成物を提供する。
【０２２９】
本発明はさらに、細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、細胞を、構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物と接触させることを含む方法を提供する。
【０２３０】
この方法の一実施形態では、上記化合物は、上記Ａ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０２３１】
本発明はまた、患者において胃腸障害を治療する方法であって、有効な量の構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物を投与することを含む方法を提供する。
【０２３２】
この方法の一実施形態では、上記障害は、下痢である。
【０２３３】
この方法の別の実施形態では、患者は、ヒトである。
【０２３４】
この方法の別の実施形態では、化合物は、Ａ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０２３５】
本発明はまた、患者において呼吸器障害を治療する方法であって、有効な量の構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物を、患者に投与することを含む方法を提供する。
【０２３６】
この方法の一実施形態では、上記障害は、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、または上気道障害である
この方法の別の実施形態では、患者は、ヒトである。
【０２３７】
この方法の別の実施形態では、上記化合物は、Ａ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０２３８】
本発明はさらに、患者の眼に体する損傷を治療する方法であって、有効な量の構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物を、患者に投与することを含む方法を提供する。
【０２３９】
この方法の一実施形態では、上記損傷は、網膜または視神経乳頭損傷である。
【０２４０】
この方法の別の実施形態では、上記損傷は、急性または慢性である。
【０２４１】
この方法の別の実施形態では、上記損傷は、緑内障、水腫、虚血、低酸素症、または外傷の結果である。
【０２４２】
この方法の別の実施形態では、患者は、ヒトである。
【０２４３】
この方法の別の実施形態では、化合物は、Ａ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０２４４】
本発明はまた、治療上有効な量の構造ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、またはＸを有する化合物、および薬学的に許容可能なキャリアを含む薬学的組成物を提供する。
【０２４５】
薬学的組成物の別の実施形態では、上記治療上有効な量は、呼吸器障害または胃腸障害を治療するのに有効である。
【０２４６】
薬学的組成物の別の実施形態では、上記胃腸障害は、下痢である。
【０２４７】
薬学的組成物の別の実施形態では、上記呼吸器障害は、喘息、アレルギー性鼻炎、または慢性閉塞性肺疾患である。
【０２４８】
薬学的組成物の別の実施形態では、上記薬学的組成物は、眼科用配合剤である。
【０２４９】
薬学的組成物の別の実施形態では、上記薬学的組成物は、眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である
薬学的組成物のさらに別の実施形態では、上記薬学的組成物は、全身性配合剤である。
【０２５０】
薬学的組成物のさらなる実施形態では、上記薬学的組成物は、手術用灌注溶液である。
【０２５１】
本発明はまた、患者においてＡ_１アデノシン受容体に関連した疾患を治癒するための包装された薬学的組成物であって、以下の：（ａ）治療上有効な量のＡ_１アデノシン特異的化合物を保持する容器と、（ｂ）患者において上記疾患を治療するための上記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０２５２】
本明細書中で使用する場合、「化合物は、Ａ_１選択的である」は、化合物が、アデノシンＡ_２ａ、Ａ_２ｂ、またはＡ_３への結合定数よりも少なくとも１０倍大きいアデノシンＡ_１受容体への結合定数を有することを意味する。
【０２５３】
本発明はまた、構造ＩＶを有する化合物、あるいは薬学的に許容可能な塩、またはプロドラッグ誘導体、または生物学的に活性な代謝産物を調製する方法であって：
ａ）下記：
【化６７】

を反応させて、下記構造：
【化６８】

（式中、Ｐは、除去可能な保護基である）
を得る工程と、
ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、下記構造：
【化６９】

を得る工程と、
ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、下記構造：
【化７０】

を得る工程と、
ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物を、ＮＨ_２Ｒ_１で処理して、下記構造を得る工程とをふくんでなり：
【化７１】

式中、
Ｒ_３は、トランス−４−ヒドロキシシクロヘキシル、２−メチルアミノカルボニルアミノシクロヘキシル、アセチルアミノエチル、またはメチルアミノカルボニルアミノエチルであり、
Ａｒは、置換もしくは非置換の４〜６員環であり、
Ｒ_４は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキルである；
（但し、Ｒ_３がアセチルアミノエチルである場合は、Ａｒは４−ピリジルではない）。
【０２５４】
本発明はまた、構造Ｖを有する化合物を調製する方法であって：
ａ）下記：
【化７２】

を反応させて、下記構造：
【化７３】

（式中、Ｐは、除去可能な保護基である）
を得る工程と、
ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、下記構造：
【化７４】

を得る工程と、
ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、下記構造：
【化７５】

を得る工程と、
ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物を、下記：
【化７６】

で処理して、下記構造：
【化７７】

を得る工程とを具備し、
式中、
Ｒ_１は、アリール、置換アリール、ヘテロアリールであり、
Ｒ_２は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり、Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、上記置換アルキルは、−Ｃ（Ｒ_６）（Ｒ_７）ＮＲ_４Ｒ_５（ここで、Ｒ_６およびＲ_７はそれぞれ、Ｈまたはアルキルであり、Ｒ_４およびＲ_５はそれぞれ、アルキルまたはシクロアルキルであるか、あるいはＮＲ_４Ｒ_５は、４〜７員環系である）であるである方法を提供する。
【０２５５】
式ＶＩ、ＶＩＩ、およびＶＩＩＩで表される化合物は、スキームＩ〜ＶＩＩＩのいずれかにより合成することができる。式ＩＸおよびＸで表される化合物は、スキームＩＸにより調製することができる。
【０２５６】
本発明はさらに、以下の実施例によりさらに説明されるが、これらの実施例は、いかなる場合においても、さらに限定するものと解釈されるべきではない。本出願全体にわたって引用した（背景の部で参照したものも含む）、すべての参照文献、係属中の特許出願、および公開済特許出願の内容は、参照により本明細書に援用される。実施例全体にわたって使用するモデルは、一般に認められたモデルであり、これらのモデルでの有効性の実証は、ヒトでの有効性を予示することを当業者は容易に理解するであろう。
【０２５７】
本発明は、以下の実験に関する詳細からよりよく理解されるであろう。しかしながら、特定の方法および論考する結果は、併記の特許請求項においてより完全に記載される本発明の単なる説明に過ぎないことを当業者は容易に理解するであろう。
【０２５８】
【実験の詳細】
本発明のデアザプリンは、有機合成に関する標準的な方法を用いて調製することができる。デアザプリンは、逆相ＨＰＬＣ、クロマトグラフィ、再結晶等により精製することができ、それらの構造は、マススペクトル分析、元素分析、ＩＲおよび／またはＮＭＲ分光法により確認することができる。
【０２５９】
通常、本発明の中間体およびデアザプリンの合成は、溶液中で実施される。１以上の保護基の付加および除去もまた、典型的な実践であり、当業者に既知である。本発明のデアザプリン中間体の調製に関する典型的な合成スキームを以下のスキームＩに概略する。
【０２６０】
【化７８】

（式中、Ｒ_３、Ｒ_５、およびＲ_６は、上記で定義される）
概して、保護２−アミノ−３−シアノ−ピロールをハロゲン化アリールで処理して、カルボキシアミド−３−シアノ−ピロールを形成することができ、これを酸性メタノールで処理して、ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オンへ閉環を行うことができる（Ｍｕｌｌｅｒ， Ｃ．Ｅ． ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ４０：４３９６ （１９９７））。ピロール保護基の除去、続く塩素化試薬（例えばオキシ塩化リン）による処理後により、置換もしくは非置換の４−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンが生産された。クロロピリミジンをアミンで処理することにより、７−デアザプリンが得られた。
【０２６１】
例えば、スキームＩに示すように、Ｎ−（１−ｄｌ−フェニルエチル）−２−アミノ−３−シアノ−ピロールを、ピリジンおよびジクロロメタン中で、ハロゲン化アシルで処理した。得られたＮ−（１−ｄｌ−フェニルエチル）−２−フェニルカルボキシアミド−３−シアノ−ピロールを、メタノール／硫酸の１０：１の混合物で処理して、閉環を行い、ｄｌ−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オンが生じた。ピリミジンをポリリン酸（ＰＰＡ）で処理することによるフェニルエチル基の除去、続くＰＯＣｌ_３により、重要中間体である４−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンが得られた。４−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジンを、表１に列挙した様々なアミンでさらに処理することで、式（Ｉ）および（ＩＩ）を有する化合物が得られる。
【０２６２】
【表１】

６−置換ピロールを調製するための一般的なアプローチを、以下のスキーム（スキームＩＩ）に表す。
【０２６３】
【化７９】

（式中、Ｒ_１〜Ｒ_５は、上記で定義される）
α−ハロケトンによるシアノ酢酸エチルのエステル交換およびアルキル化によりケトメチルエステルが得られる。ケトンの保護、続く塩酸アミジン（例えば、アルキル、アリール、またはアルキルアリール）での処理により、結果としてケタール保護ピリミジンが生じた。保護基の除去、続く環化、およびオキシ塩化リンによる処理により、塩化物中間体が得られ、これをさらにアミンで処理して、アミン６−置換ピロールを得ることができた。さらに、ピロールの窒素のアルキル化は、当該技術分野で認識されている条件下で達成することができる。
【０２６４】
５−置換ピロールを調製するための一般的なアプローチを、以下のスキーム（スキームＩＩＩ）に表す。
【０２６５】
【化８０】

（式中、Ｒ_１〜Ｒ_６は、上記で定義され、Ｒは、除去可能な保護基である）
マロノニトリルおよび過剰なケトンの縮合、続く生成物の臭素化により、出発原料、一臭素化生成物および二臭素化生成物の混合物が得られ、これらをアルキルアミン、アリールアミン、またはアルキルアリールアミンで処理した。得られたアミン生成物を、酸塩化物でアシル化して、モノアシル化ピロールを、酸の存在下で環化して、相当するピリジンが得られた。ピロール保護基をポリリン酸で除去して、オキシ塩化リンで処理して、塩素化生成物を生じた。続いて塩素化ピロールをアミンで処理して、アミノ５−置換ピロールを生じた。ピロール窒素のアルキル化は、当該技術分野で認識されている条件下で達成することができる。
【０２６６】
スキームＩＶおよびＶは、本発明のデアザプリン１および２を調製する方法を表す。
【０２６７】
【化８１】

（式中、Ｒ_５およびＲ_６は、上述の通り（例えば、ＣＨ_３）である）
６−メチルピロロピリミジンの特定の調製：
６−メチルピロロピリミジン（１）（Ｒ_５＝ＣＨ_３）への重要な反応は、ベンズアミジンを用いた、シアノ酢酸エステルのピリミジンへの環化である。シアノ酢酸メチルは、ベンズアミドを用いて、相当するエチルエステルよりも効率的にピリミジンへと環化すると考えられた。したがって、ＮａＯＭｅおよび過剰のα−ハロアセチル部分（例えば、クロロアセトン）の存在下でのシアノ酢酸エチルのエステル交換反応およびアルキル化により、所望のメチルエステル（３）が７９％の収率で得られた（スキームＩＶ）。ケトエステル（３）を、アセタール（４）として８１％の収率で保護した。ピリミジン（５）への新規環化方法は、塩酸アミジン、例えば塩酸ベンジアミジンにより、２当量のＤＢＵを用いて達成され、５が５４％の単離収率で得られた。この方法は、グアニジンによる環化中にＮａＯＭｅを利用する公開されている条件を用いた場合の２０％から収率を改善する。ピロール−ピリミジン（６）への環化は、ＨＣｌ水溶液中でのアセタールの脱保護により７８％の収率で達成された。還流下でオキシ塩化リンを用いた（６）の反応により、相当する４−クロロ誘導体（７）が得られた。１３５℃でのジメチルスルホキシド中のトランス−４−アミノシクロヘキサノールとのカップリングにより、（７）から５７％の収率で（１）が得られた。試薬の選択により所望の置換基Ｒ_５を選択する際に大きな融通性を可能となることを当業者は理解されよう。
【０２６８】
【化８２】

５−メチルピロロピリミジンの特定の調製：
マロノニトリルおよび過剰のケトン（例えば、アセトン）の還流ベンゼン中でのクネーベナーゲル縮合により、蒸留後に５０％の収率で８が得られた。クロロホルム中、過酸化ベンゾイルの存在下で、８をＮ−ブロモスクシンイミドで臭素化して、蒸留後に、出発原料、一臭素化生成物（９）、および二臭素化生成物（５／９０／５）を得た（７０％）。混合物を、α−メチルアルキルアミン、またはα−メチルアリールアミン（例えば、α−メチルベンジルアミン）と反応させて、アミノピロール（１０）を得た。ショートシリカゲルカラムに通した後、部分的に精製されたアミン（収率３１％）を、酸塩化物（例えば、塩化ベンゾイル）でアシル化して、モノアシル化ピロール（１１）およびジアシル化ピロール（１２）が得られ、それらをフラッシュクロマトグラフィで分離した。二置換ピロール（１２）の酸加水分解により、アシルピロール（１１）に関して２９％の組合せ収率をもたらした。濃硫酸およびＤＭＦの存在下での環化により（１３）が得られ（２３％）、これを（１４）へとポリリン酸で脱保護した。還流中、オキシ塩化リンと（１４）を反応させて相当する４−クロロ誘導体（１５）が得られた。１３５℃でのジメチルスルホキシド中のトランス−４−アミノシクロヘキサノールとのカップリングにより、（１４）から３０％の収率で（２）（Ｒ_６＝ＣＨ_３）が得られた（スキームＶを参照）。試薬の選択により所望の置換基Ｒ_６を選択する際に大きな融通性を可能となることを当業者は理解されよう。
【０２６９】
【化８３】

Ｒ _６ 置換ピロール（例えば、５−メチルピロロピリミジン）への代替的合成経路
Ｒ_６置換ピロール（例えば、５−メチルピロロピリミジン）へのこの代替的合成経路は、シアノ酢酸エチルの（１６）へのエステル交換およびアルキル化を包含する（スキームＶＩ）。２当量のＤＢＵを用いて、（１６）を塩酸ベンズアミジンと縮合することにより、ピリミジン（１７）が得られる。ピロール−ピリミジン（１４）への環化は、ＨＣｌ水溶液中のアセタールの脱保護により達成される。還流下で（１４）をオキシ塩化リンと反応させることで、相当する４−クロロ誘導体（１５）が得られた。１３５℃でのジメチルスルホキシド中のトランス−４−アミノシクロヘキサノールとのカップリングにより、２が得られた。この手順では、標的化合物（２）への合成反応の数が、９工程から４工程に減少する。さらに、収率が劇的に改善される。また、試薬の選択により所望の置換基Ｒ_６を選択する際に大きな融通性を可能となることを当業者は理解されよう。
【０２７０】
【化８４】

デスメチルピロールを調製するための一般的なアプローチを、以下のスキーム（スキームＶＩＩ）に表す。
【０２７１】
【化８５】

（式中、Ｒ_１〜Ｒ_３は、上記で定義される）
塩基の存在下でのジエチルアセタールを用いたシアノ酢酸アルキルのアルキル化により、シアノジエチルアセタールが得られ、これをアミン塩で処理して、メチルピロロピリミジン前駆体が生じた。この前駆体を塩素化して、アミンで処理して、上記に示すようにデスメチルピロロピリミジン標的が形成された。
【０２７２】
例えば、スキームＶＩＩＩは、化合物（１８）の合成を表す。
【０２７３】
【化８６】

市販のシアノ酢酸メチルを、炭酸カリウムおよびＮａＩの存在下でブロモアセトアルデヒドジエチルアセタールによりアルキル化して、（１９）を得た。ピリミジン（２０）への環化を２工程で達成された。最初に、２当量のＤＢＵを用いて、塩酸ベンジアミジンと（１９）を反応させることにより、ピリミジンアセタールを形成した。得られたピリミジンアセタールを、精製せずに１Ｎ ＨＣｌ水溶液で脱保護して、得られたアルデヒドをピロロ−ピリミジン（２０）へと環化して、ろ過により単離した。還流下でオキシ塩化リンと（２０）を反応させて、相当する４−クロロ誘導体（２１）が得られた。１３５℃でのＤＭＳＯ中のトランス−４−アミノシクロヘキサノールとのクロロ誘導体のカップリングにより、化合物（２１）から化合物（１８）が得られた。
【０２７４】
スキームＩＩ〜ＶＩＩＩは、ピロロピリミジン環の５位および６位を官能基化することが可能であることを実証している。種々の出発原料、および上記反応スキームのわずかな変更の使用により、様々な官能基を、式（Ｉ）および（ＩＩ）の５位ならびに６位に導入することができる。表２は、幾つかの例を示す。
【０２７５】
【表２】

患者における本明細書中に開示する化合物の代謝が、薬剤として作用することができるある特定の生物学的に活性な代謝産物を生じることは、当業者に既知であろう。
【０２７６】
本発明は、以下の実施例によりさらに説明されるが、実施例は、いかなる場合においても、さらに限定するものと解釈されるべきではない。本出願全体にわたって引用した（背景の部で参照したものも含む）、すべての参照文献、係属中の特許出願、および公開済特許出願の内容は、参照により本明細書に援用される。実施例全体にわたって使用するモデルは、一般に認められたモデルであり、これらのモデルでの有効性の実証は、ヒトでの有効性を予示することを当業者は容易に理解するであろう。
【０２７７】
例
調製１：
ＳｅｅｌａおよびＬｕｐｋｅのアルキル化方法を改変（ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）した方法を用いた^１。ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中のシアノ酢酸エチル（６．５８ｇ，５８．１ｍｍｏｌ）の氷冷した溶液（０℃）に、ＮａＯＭｅ（２５ｋｗ／ｖ；５８．１ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと添加した。１０分後クロロアセトン（５ｍＬ；６２．８ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。４時間後溶剤を除去した。茶色の油状物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を用いて希釈し、Ｈ_２Ｏ（１００ｍＬ）で洗浄した。有機画分を乾燥させ、濾過し、茶色の油状物（７．７９ｇ；７９％）になるまで濃縮した。この油状物（３）（スキームＩＶ）はメチル／エチルエステル生成物（９／１）の混合物であり、さらなる精製をすることなく用いられた。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ４．２４（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＯＣＨ_２），３．９１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２，７．０Ｈｚ，ＣＨ），３．６２（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ_３），３．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．０，７．１Ｈｚ，１ｘＣＨ_２）；３．０２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．０，７．０Ｈｚ，１ｘＣＨ_２）；２．４４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ_３），１．２６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，エステル−ＣＨ_３）。^１Ｓｅｅｌａ，Ｆ．；Ｌｕｐｋｅ，Ｕ． Ｃｈｅｍ． Ｂｅｒ． １９７７，１１０，１４６２−１４６９。
【０２７８】
調製２：
ＳｅｅｌａおよびＬｕｐｋｅの手順を用いた^１。よって、ＴｓＯＨ（１００ｍｇ）の存在下におけるエチレングリコール（４ｍＬ，６４．４ｍｍｏｌ）を用いたケトン（３）の保護化（スキームＩＶ；５．０ｇ，３２．２ｍｍｏｌ）により、フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２；３／７ ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ，Ｒ_ｆ ０．３５）を経て（４）を油状物（スキームＩＶ；５．２ｇ，８１．０）として得た。５％エチルエステルをなおも含んだ：^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ４．２４（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＯＣＨ_２），３．９８（ｓ，４Ｈ，２ｘアセタール−ＣＨ_２），３．７９（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ_３），３．６２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２，７．０Ｈｚ，ＣＨ），２．４８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．０，７．１Ｈｚ，１ｘＣＨ_２），２．３２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．０，７．０Ｈｚ，１ｘＣＨ_２）；１．３５（ｓ，３Ｈ，ＣＨ_３），１．２６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，エステル−ＣＨ_３）；ＭＳ（ＥＳ）：２００．１（Ｍ^＋＋１）。^１Ｓｅｅｌａ，Ｆ．；Ｌｕｐｋｅ，Ｕ． Ｃｈｅｍ． Ｂｅｒ． １９７７，１１０，１４６２−１４６９。
【０２７９】
調製３：
乾燥ＤＭＦ（１５ｍＬ）中のアセタール（４）（スキームＩＶ，１ｇ，５．０２ｍｍｏｌ）、ベンズアミジン（７８６ｍｇ，５．０２ｍｍｏｌ）、およびＤＢＵ（１．５ｍＬ，１０．０４ｍｍｏｌ）の溶液を８５℃にまで１５時間加熱した。この混合物をＣＨＣｌ_３（３０ｍＬ）を用いて希釈し、０．５Ｎ ＮＡＯＨ（１０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄した。有機画分を乾燥させ、濾過し、茶色の油状物になるまで濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２；１／９ ＥｔＯＡｃ／ＣＨ_２Ｃｌ_２，Ｒ_ｆ ０．３５）を試みたが、物質がカラム上で結晶化した。シリカゲルをＭｅＯＨで洗浄した。生成物（５）（スキームＩＶ）を含んだ画分を濃縮し、さらに精製することなく用いた（７８３ｍｇ，５４．３％）：^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．２４（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．４５（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），５．２４（ｂｒ ｓ，２Ｈ，ＮＨ_２），３．９８（ｓ，４Ｈ，２ｘアセタールＣＨ_２），３．６０−３．１５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ_２），１．３８（ｓ，３Ｈ，ＣＨ_３）；ＭＳ（ＥＳ）：２８８．１（Ｍ^＋＋１）。
【０２８０】
化合物（２０）の調製（スキームＶＩＩＩ）：乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のアセタール（１９）（４．４３ｇ，２０．６ｍｍｏｌ）^１、ベンズアミン塩酸塩（３．２２ｇ，２０．６ｍｍｏｌ）、およびＤＢＵ（６．１５ｍＬ，４１．２ｍｍｏｌ）の溶液を８５℃にまで１５時間加熱した。この混合物を１００ｍＬのＣＨＣｌ_３を用いて希釈し、Ｈ_２Ｏで洗浄した（２ｘ５０ｍＬ）。有機画分を乾燥させ、濾過し、濃い茶色の油状物になるまで濃縮した。この濃い茶色の油状物を１Ｎ ＨＣｌ（１００ｍＬ）中で２時間室温で撹拌した。得られたスラリを濾過し、（２０）のＨＣｌ塩を黄褐色の固体で得た（３．６０ｇ，７０．６％）；^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）１１．９２（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．４５（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．０５（ｓ，１Ｈ，ピロルＨ）；ＭＳ（ＥＳ）：２１２．１（Ｍ^＋＋１）。
【０２８１】
調製４：
１Ｎ ＨＣｌ（４０ｍＬ）中のアセタール（５）（７００ｍｇ，２．４４ｍｍｏｌ）の溶液を２時間室温で撹拌した。得られたスラリを濾過し、２−フェニル−６−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オンのＨＣｌ塩を黄褐色の固体で得た（４９８ｍｇ，７８．０％）：^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１１．７８（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．４５（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．１７（ｓ，１Ｈ，ピロル−Ｈ），２．２５（ｓ，３Ｈ，ＣＨ_３）；ＭＳ（ＥＳ）：２２６．１（Ｍ^＋＋１）。
【０２８２】
調製５：
Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．の環化方法を改変した方法を用いた^１。イソプロピルアルコール（６０ｍＬ）中の臭化物（９），（スキームＶ；２０．０ｇ，１０８ｍｍｏｌ；純度９０％）の氷冷した溶液（０℃）に、α−メチルベンジルアミン（１２．５ｍＬ，９７．３ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと添加した。黒色の溶液を室温にまで加温し、１５時間撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）を用いて希釈し、０．５Ｎ ＮａＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。有機画分を乾燥させ、濾過し、黒色のタールになるまで濃縮した（１９．２ｇ；９４％）。フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２；４／９６ ＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２，Ｒ_ｆ ０．３５）により残渣を部分的に精製し、化合物ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−アミノ−３−シアノ−４−メチルピロルを黒色の固体で得た（６．３８ｇ，３１％）：ＭＳ（ＥＳ）：２２６．１（Ｍ^＋＋１）。
【０２８３】
^１Ｃｈｅｎ，Ｙ． Ｌ．；Ｍａｎｓｂａｃｈ，Ｒ． Ｓ．；Ｗｉｎｔｅｒ，Ｓ． Ｍ．；Ｂｒｏｏｋｓ，Ｅ．；Ｃｏｌｌｉｎｓ，Ｊ．；Ｃｏｒｍａｎ，Ｍ． Ｌ．；Ｄｕｎａｉｓｋｉｓ，Ａ． Ｒ．；Ｆａｒａｃｉ，Ｗ． Ｓ．；Ｇａｌｌａｓｃｈｕｎ，Ｒ． Ｊ．；Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ａ．；Ｓｃｈｕｌｚ，Ｄ． Ｗ． Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．１９９７，４０，１７４９−１７５４。
【０２８４】
調製６：
ジクロロメタン（５０．０ｍＬ）中のｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−アミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル^１（１４．９ｇ，６２．５ｍｍｏｌ）およびピリジン（１０．０ｍＬ）の溶液に、塩化ベンゾイル（９．３７ｇ，６６．７ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。０℃で１時間撹拌した後、ヘキサン（１０．０ｍＬ）を添加して生成物の沈澱を促した。溶剤を真空下で除去し、固体をＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏから再結晶化させ、１３．９ｇ（６５％）のｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−フェニルカルボニルアミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロルを得た。ｍｐ：２１８−２２１℃；^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．７２（ｓ，３Ｈ），１．７６（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ），５．５２（ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．１４−７．５４（ｍ，９Ｈ），７．６８−７．７２（ｄｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，６．９Ｈｚ，２Ｈ），１０．７３（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３４４．４（Ｍ^＋＋１）。
【０２８５】
^１Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ． Ｃｈｅｍ． １９８６，１４８５−１５０５。
【０２８６】
以下の化合物を、同様の方法で得た。
【０２８７】
調製６Ａ：
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−（３−ピリジル）カルボニルアミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．８３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），５．５０（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１４−７．４２（ｍ，５Ｈ），８．０８（ｍ，２Ｈ），８．７５（ｍ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３４５．２（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−（２−フリル）カルボニルアミノ−３−シアノ−４−ジメチルピロル。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．８４（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．９２（ｓ，３Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ），５．４９（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），６．５４（ｄｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，３．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１２−７．４７（ｍ，７Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３４．２（Ｍ^＋＋１），２３０．１。
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−（３−フリル）カルボニルアミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．８０（ｄ，Ｊ＝−７Ｈ−ｚ，３Ｈ），１．８９（ｓ，３Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ），５．４８（ｑ，Ｊ＝−７Ｈ−ｚ，１Ｈ），６．５９（ｓ，１Ｈ），７．１２−７．４０（ｍ，６Ｈ），７．９３（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３４．１（Ｍ^＋＋１），２３０．０。
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−シクロペンチルカルボニルアミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．８２（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１，８８（ｓ，３Ｈ），２． ０５（ｓ，３Ｈ），１．６３−１．８５（ｍ，８Ｈ），２．６３（ｍ，１Ｈ），５．４３（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），６．５２（ｓ，１Ｈ），７．０５−７．２０（ｍ，５Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３６．３（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−（２−チエニル）カルボニルアミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル、Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．８２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），１．９６（ｓ，３Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ），５．４９（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０５−７．５５（ｍ，８Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３５０．１（Ｍ^＋＋１），２４６．０。
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−（３−チエニル）カルボニルアミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．８３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），１．９９（ｓ，３Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），５．４９（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｍ，１Ｈ），７．１８−７．３６（ｍ，６Ｈ），７．７９（ｍ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３５０．２（Ｍ^＋＋１），２４６．１。
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−（４−フルオロフェニル）カルボニルアミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．８３（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．９６（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），５．５１（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１６−７．５５（ｍ，９Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３６２．２（Ｍ^＋＋１），２５８．１。
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−（３−フルオロフェニル）カルボニルアミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．８３（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．９７（ｓ，３Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），５．５０（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０５−７．３８（ｍ，７Ｈ），７．６７−７．７４（ｍ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３６２．２（Ｍ^＋＋１），２５８．１。
【０２８８】
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−（２−フルオロフェニル）カルボニルアミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．８５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），２．１１（ｓ，３Ｈ），５．５０（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１２−７．３５（ｍ，６Ｈ），７．５３（ｍ，１Ｈ），７．７７（ｍ，１Ｈ），８．１３（ｍ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３６２．２（Ｍ^＋＋１），２５８．０。
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−イソプロピルカルボニルアミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．１９（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ），１．８２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．８８（ｓ，３Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．４６（ｍ，１Ｈ），５．３９（ｍ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．６４（ｓ，１Ｈ），７．１１−７．３６（ｍ，５Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３１０．２（Ｍ^＋＋１），２０６．１。
【０２８９】
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−アミノ−３−シアノ−４−メチルピロルのアシル化の場合、モノアシル化ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−ベンゾイルアミノ−３−シアノ−４−ジメチルピロル、およびジアシル化ピロルｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−ジベンゾイルアミノ−３−シアノ−４−メチルピロルを得た。
【０２９０】
モノアシル化ピロル：^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．６９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ），７．５８−７．１２（ｍ，８Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．１８（ｓ，１Ｈ，ピロル−Ｈ），５．５２（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ−ＣＨ_３），２．０５（ｓ，３Ｈ，ピロル−ＣＨ_３），１．８５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ−Ｃｈ３）；ＭＳ（ＥＳ）：３３０．２（Ｍ^＋＋１）；ジアシル化ピロル：^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．８５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．−７Ｈ−ｚ，Ａｒ−Ｈ），７．７４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ），７．５２−７．２０（ｍ，９Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．０４（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．２１（ｓ，１Ｈ，ピロル−Ｈ），５．５２（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｃｈ−ＣＨ_３），１．７７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ−ＣＨ_３），１．７４（ｓ，３Ｈ，ピロル−ＣＨ_３）；ＭＳ（ＥＳ）：４３４．１（Ｍ^＋＋１）。
【０２９１】
調製７：
メタノール（１０．０ｍＬ）中のｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−フェニルカルボキシアミド−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル（１．０ｇ，２．９２ｍｍｏｌ）の溶液に、濃縮した硫酸（１．０ｍＬ）を０℃で添加した。得られた混合物を１５時間還流させ、室温にまで冷却した。沈殿物を濾過し、０．４８ｇ（４８％）のｄｌ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オンを得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．０２（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．４１（ｓ，３Ｈ），６．２５（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２２−７．５０（ｍ，９Ｈ），８．０７−８．１２（ｄｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，６．８Ｈｚ，２Ｈ），１０．５１（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３４４．２（Ｍ^＋＋１）。次の化合物を、調製７と同様の手法により得た：
ｄｌ−５，６−ジメチル−２−（３−ピリジル）−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．０３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），６．２４（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．０９−７．４２（ｍ，５Ｈ），８．４８（ｍ，２Ｈ），８．７０（ｍ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３４５．１（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−５，６−ジメチル−２−（２−フリル）−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．９８（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３Ｈ），１．９９（ｓ，３Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ），６．１２（ｑ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），６．４８（ｄｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，３．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１７−７．５５（ｍ，７Ｈ），９．６（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３４．２（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−５，６−ジメチル−２−（３−フリル）−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．９９（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），６．２４（ｑ，Ｊ＝−７Ｈ−ｚ，１Ｈ），７．０９（ｓ，１Ｈ），７．１８−７．３２（ｍ，５Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３４．２（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−５，６−ジメチル−２−シクロペンチル−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．９５（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），２．００（ｓ，３Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），１．６８−１．８８（ｍ，８Ｈ），２．９７（ｍ，１Ｈ），６．１０（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１６−７．３０（ｍ，５Ｈ），９．２９（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３６．３（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−５，６−ジメチル−２−（２−チエニル）−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．０２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．４１（ｓ，３Ｈ），６．１３（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｄｄ，Ｊ＝４．８，２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２６−７．３２（ｍ，５Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）１１．２５（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３５０．２（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−５，６−ジメチル−２−（３−チエニル）−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．００（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），６．２４（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２４−７．３３（ｍ，５Ｈ），７．３３−７．３９（ｍ，１Ｈ），７．８５（ｍ，１Ｈ），８．４７（ｍ，１Ｈ），１２．０１（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３５０．２（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−５，６−ジメチル−２−（４−フルオロフェニル）−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．０１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），６．２６（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１２−７．３６（ｍ，７Ｈ），８．２３−８．３０（ｍ，２Ｈ），１１．８２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３６２．３（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−５，６−ジメチル−２−（３−フルオロフェニル）−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．０２（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．４４（ｓ，３Ｈ），６．２９（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１３−７．５１（ｍ，７Ｈ），８．００−８．０４（ｍ，２Ｈ），１１．７２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３６２．２（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−５，６−ジメチル−２−（２−フルオロフェニル）−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．００（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ），２．３８（ｓ，３Ｈ），６．２４（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１８−７．４５（ｍ，８Ｈ），８．２１（ｍ，１Ｈ），９．５４（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３６２．２（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−５，６−ジメチル−２−イソプロピル−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．３０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），１．３２（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），２．０１（ｓ，３Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ），２．９０（ｍ，１Ｈ），６．１３（ｍ，１Ｈ），７．１７−７．３４（ｍ，５Ｈ），１０．１６（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３１０．２（Ｍ^＋＋１）。
【０２９２】
調製８：
ＤＭＦ（１３ｍＬ）中の、濃縮したＨ_２ＳＯ_４（１ｍＬ）を含んだｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−ベンゾイルアミノ−３−シアノ−４−ジメチルピロル（７８５ｍｇ，２．３８ｍｍｏｌ）の溶液を１３０℃で４８時間撹拌した。黒色の溶液をＣＨＣｌ_３（１００ｍＬ）を用いて希釈し、１Ｎ ＮａＯＨ（３０ｍＬ）および塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機画分を乾燥させ、濾過し、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２；８／２ ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ，Ｒ_ｆ ０．３５）により精製し、ｄｌ−５−メチル−２−フェニル−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オンを茶色の固体（１８４ｍｇ，２４％）で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．１８（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．６２−７．４４（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．４０−７．１８（ｍ，５Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ，ピロル−Ｈ），６．２８（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ−ＣＨ_３），２．１８（ｓ，３Ｈ，ピロル−ＣＨ_３），２．０７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ−ＣＨ_３）；ＭＳ（ＥＳ）：３３０．２（Ｍ^＋＋１）。
【０２９３】
調製９：
ｄｌ−１−（１−フェニルエチル）−２−アミノ−３−シアノ−４，５−ジメチルピロル（９．６０ｇ，４０．０ｍｍｏｌ）および蟻酸（５０．０ｍＬ，９８％）の混合物を、５時間還流させた。室温にまで冷却し、フラスコの壁面をスクラッチし、形成された大量の沈殿物を濾過した。この物質を、洗浄液が中和ｐＨを示すまで水で洗浄し、ｄｌ−５，６−ジメチル−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オンを得た：^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．９６（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），２．００（ｓ，３Ｈ），２．３８（ｓ，３Ｈ），６．２１（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１１−７．３５（ｍ，５Ｈ），７．８１（ｓ，１Ｈ），１１．７１（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２６８．２（Ｍ^＋＋１）。
【０２９４】
調製１０：ｄｌ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（１．０ｇ，２．９１ｍｍｏｌ）を、ポリリン酸（３０．０ｍＬ）中に懸濁させた。この混合物を１００℃にまで４時間加熱した。この高温の懸濁液を氷水中に注ぎ、勢いよく撹拌して懸濁物を分散させ、固体 ＫＯＨを用いてｐＨ ６にまで塩基性にした。得られた固体を濾過し、回収して０．４９ｇ（６９％）の５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オンを得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ）δ２．１７（ｓ，３Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），７．４５（ｂｒ，３Ｈ），８．０７（ｂｒ，２Ｈ，），１１．４９（ｓ，１Ｈ），１１．８２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３４４．２（Ｍ^＋＋１）。
【０２９５】
次の化合物を、調製１０と同様の手法で得た：
５−メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。ＭＳ（ＥＳ）：２２６．０（Ｍ^＋＋１）。
５，６−ジメチル−２−（３−ピリジル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。ＭＳ（ＥＳ）：２４１．１（Ｍ^＋＋１）。
５，６−ジメチル−２−（２−フリル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．１３（ｓ，３Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），６．３９（ｄｄ，Ｊ＝１．８，３．６Ｈｚ，１Ｈ），６．６５（ｄｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，３．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，Ｊ＝１．８，３．６Ｈｚ，１Ｈ，），１１．４５（ｓ，１Ｈ），１１．６０（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２３０．１（Ｍ^＋＋１）。
５，６−ジメチル−２−（３−フリル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．１４（ｓ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），６．６６（ｓ，１Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），８．３５（ｓ，１Ｈ），１１．３（ｓ，１Ｈ），１１．４（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２３０．１（Ｍ^＋＋１）。
５，６−ジメチル−２−シクロペンチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１．５７−１．９１（ｍ，８Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），２．９９（ｍ，１Ｈ），１１．２４（ｓ，１Ｈ），１１．３８（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２３２．２（Ｍ^＋＋１）。
５，６−ジメチル−２−（２−チエニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．１４（ｓ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），７．１４（ｄｄ，Ｊ＝３．０，５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），８．１０（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ），１１．５０（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２４６．１（Ｍ^＋＋１）。
５，６−ジメチル−２−（３−チエニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．１７（ｓ，３Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），７．６６（ｍ，１Ｈ），７．７５（ｍ，１Ｈ），８．４３（ｍ，１Ｈ），１１．４７（ｓ，１Ｈ），１１．６９（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２４６．１（Ｍ^＋＋１）。
５，６−ジメチル−２−（４−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．１７（ｓ，３Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），７．３１（ｍ，２Ｈ），８．１２（ｍ，２Ｈ），１１．４７（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２５８．２（Ｍ^＋＋１）。
５，６−ジメチル−２−（３−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．１８（ｓ，３Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），７．３３（ｍ，１Ｈ），７．５２（ｍ，１Ｈ），７．８５−７．９５（ｍ，２Ｈ），１１．５６（ｓ，１Ｈ），１１．８０（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２５８．１（Ｍ^＋＋１）。
【０２９６】
５，６−ジメチル−２−（２−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．１８（ｓ，３Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），７．２７−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．５３（ｍ １Ｈ），７．６８（ｍ，１Ｈ），１１．５４（ｓ，１Ｈ），１１．７８（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２５８．１（Ｍ^＋＋１）。
５，６−ジメチル−２−イソプロピル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１．１７（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ），２．１１（ｓ，３Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．８１（ｍ，１Ｈ），１１．２０（ｓ，１Ｈ），１１．３９（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２０６．１（Ｍ^＋＋１）。
５，６−ジメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．１３（ｓ，３Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），７．６５（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：１６４．０（Ｍ^＋＋１）。
調製１１：オキシ塩化リン（２５．０ｍＬ）中の５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（１．０ｇ，４．２ｍｍｏｌ）の溶液を６時間還流させ、次いで乾燥するまで真空下で濃縮した。水を残渣に添加して、結晶化を誘発させ、得られた固体を濾過し、回収して０．９０ｇ（８３％）の４−クロロ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．３３（ｓ，３Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），７．４６−７．４９（ｍ，３Ｈ），８．３０−８．３５（ｍ，２Ｈ），１２．２０（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２５８．１（Ｍ^＋＋１）。
【０２９７】
次の化合物を調製１１と同様の手法で得た：
４−クロロ−５−メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）：２４４．０（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−６−メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）：２４４．０（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）８．３５（２，２Ｈ），７．６３（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．４５（ｍ，３Ｈ），６．４７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２３０．０（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−５，６−ジメチル−２−（３−ピリジル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）：２５９．０（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−５，６−ジメチル−２−（２−フリル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．３５（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），６．６８（ｄｄ，Ｊ＝１．８，３．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，３．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８９（ｄｄ，Ｊ＝１．８，３．６Ｈｚ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２４８．０（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−５，６−ジメチル−２−（３−フリル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．３１（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），６．６２（ｓ，１Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｓ，１Ｈ），１２．０２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２４８．１（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−５，６−ジメチル−２−シクロペンチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１．６１−１．９６（ｍ，８Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），３．２２（ｍ，１Ｈ），１１．９７（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２５０．１（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−５，６−ジメチル−２−（２−チエニル）−７Ｈ−ピロロ（２，３−ｄ）ピリミジン，^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．２９（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），７．１４（ｄｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ，４．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ，１Ｈ），１２．１９（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２６４．１（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−５，６−ジメチル−２−（３−チエニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．３２（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ），７．６２（ｄｄ，Ｊ＝３．０，５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２６４．０（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−５，６−ジメチル−２−（４−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．３３（ｓ，３Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），７．３０（ｍ，２Ｈ），８．３４（ｍ，２Ｈ），１２．１１（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２７６．１。（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−５，６−ジメチル−２−（３−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．３１（ｓ，３Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），７．２９（ｍ，１Ｈ），７．５２（ｍ，１Ｈ），７．９６（ｍ，１Ｈ），８．１４（ｍ，１Ｈ），１１．５７（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２７６．１（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−５，６−ジメチル−２−（２−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．３４（ｓ，３Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ），７．３３（ｍ，２Ｈ），７．４４（ｍ，１Ｈ），７．９９（ｍ，１Ｈ），１２．２３（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２７６．１（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−５，６−ジメチル−２−イソプロピル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１．２４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），３．０８（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），１１．９５（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２２４．０（Ｍ^＋＋１）。
４−クロロ−５，６−ジメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．３１（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ），８．４０（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：１８２．０（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−４−クロロ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。
【０２９８】
調製１２：
ジオキサン（１００．０ｍＬ）および水（１００．０ｍＬ）中のｄｌ−１，２−ジアミノプロパン（１．４８ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（２．７３ｇ，２２．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ジカーボネート（４．８０ｇ，２２．０ｍｍｏｌ）を室温で添加した。得られた混合物を１４時間撹拌した。ジオキサンを真空下で除去した。沈殿物を濾過除去し、濾液を真空下で乾燥するまで濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃを用いて粉砕し、濾過した。濾液を真空下で乾燥するまで濃縮し、ｄｌ−１−アミノ−２−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニルアミノ−プロパンおよびｄｌ−２−アミノ−１−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニルアミノ−プロパンの混合物を得た。これらは通常のクロマトグラフィ法では分離できないものであった。この混合物を例８の反応に用いた。
【０２９９】
調製１３：ジクロロメタン（２０．０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（１．０ｇ，３．２１２ｍｍｏｌ）および塩化オキサリル（０．４２８ｇ，０．２９ｍＬ，３．３７３ｍｍｏｌ）の溶液に、数滴のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを０℃で添加した。この混合物を室温で１時間撹拌し、続いてシクロプロピルメチルアミン（０．２２９ｇ，０．２８ｍＬ，３．２１２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．６５ｇ，０．９０ｍＬ，６．４２４ｍｍｏｌ）を添加した。１０分後、混合物を１Ｍ 塩酸塩（１０．０ｍＬ）を用いて処理し、混合物水溶液をジクロロメタンを用いて抽出した（３ｘ３０．０ｍＬ）。有機溶液を真空下で乾燥するまで濃縮した。残渣を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０．０ｍＬ）中の２０％ピペリジンの溶液を用いて０．５時間処理した。溶剤を真空下で除去した後、残渣を１Ｍ 塩酸塩（２０．０ｍＬ）および酢酸エチル（２０．０ｍＬ）を用いて処理した。この混合物を分離し、水溶液層（水層）を、固体水酸化ナトリウムを用いてｐＨ＝８にまで塩基性にした。沈殿物を濾過により除去し、水溶液を、２０％ピリジンを用いて溶出するイオン交換カラムに供し、０．２６２ｇ（５７％）のＮ−シクロプロピルメチル−アラニンアミドを得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ０．２２（ｍ，２Ｈ），０．４９（ｍ，２Ｈ），０．９６（ｍ，２Ｈ），２．４０（ｔ，２Ｈ），２．９２（ｔ，２Ｈ），３．０５（ｄ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：１４３．１（Ｍ^＋＋１）。
【０３００】
調製１４：Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ｔｒａｎｓ−１，４−シクロへキシルジアミン
ｔｒａｎｓ−１，４−シクロネキシルジアミン（６．０８ｇ，５３．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ＯｍＬ）中に溶解させた。ジ−ｔ−ブチルジカーボネートの溶液（２．３２ｇ，４０ｍＬ ジクロロメタン中に１０．６５ｍｍｏｌ）をカニューレを介して添加した。２０時間後、反応物をＣＨＣｌ_３と水との間で分配した。層を分離し、水層をＣＨＣｌ_３を用いて抽出した（３ｘ）。合体した有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して１．２０ｇの白色の固体を得た（５３％）。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ１．０−１．３（ｍ，４Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ），１．８−２．１（ｍ，４Ｈ），２．６２（ｂｒｍ，１Ｈ），３．４０（ｂｒｓ，１Ｈ），４．３７（ｂｒｓ，１ＨＯ；ＭＳ（ＥＳ）：２１５．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３０１】
４−（Ｎ−アセチル）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ｔｒａｎｓ−１，４−シクロへキシルジアミン
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ｔｒａｎｓ−１，４−シクロへキシルジアミン（５３０ｍｇ，２．４７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）中に溶解させた。無水酢酸（２５０ｍｇ，２．６０ｍｍｏｌ）を滴下添加した。１６時間後、反応物を水およびＣＨＣｌ_３を用いて希釈した。層を分離し、水層をＣＨＣｌ_３を用いて抽出した（３ｘ）。合体した有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。再結晶化（ＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ）により１９０ｍｇの白色の結晶を得た（３０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ０．９−１．３０（ｍ，４Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ），１．９６−２．１０（ｍ，７Ｈ），３．４０（ｂｒｓ，１Ｈ），３．７０（ｂｒｓ，１Ｈ），４．４０（ｂｒｓ，１Ｈ），４．４０（ｂｒｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２５７．２（Ｍ^＋＋１），２４２．１（Ｍ^＋−１５），２０１．１（Ｍ^＋−５６）。
【０３０２】
４−（４−ｔｒａｎｓ−アセトアミドシクロへキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン
４−（Ｎ−アセチル）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ｔｒａｎｓ−１，４−シクロへキシルジアミン（１９０ｍｇ，０．７４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）中に溶解させ、ＴＦＡ（６ｍＬ）を用いて希釈した。１６時間後、反応物を濃縮した。粗製の固体、ＤＭＳＣ（２ｍＬ）、ＮａＨＣＯ_２（２００ｍｇ，２．２ｍｍｏｌ）および４−クロロ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（３５ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）をフラスコ内で合体させ、１３０℃にまで加熱した。４．５時間後、反応物を室温にまで冷却し、ＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃを用いて抽出した（３ｘ）。合体した有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。クロマトグラフィ（シリカ分取用プレート；２０：１ ＣＨＣｌ_３：ＥｔＯＨ）により０．３ｍｇの黄褐色の固体で得た（１％収率）。ＭＳ（ＥＳ）：３７８．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３０３】
４−（Ｎ−メタンスルホニル）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ｔｒａｎｓ−１，４−シクロへキシルジアミン。
【０３０４】
ｔｒａｎｓ−１，４−シクロへキシルジアミン（５３０ｍｇ，２．４７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）中に溶解させ、ピリジン（２３３ｍｇ，３ｔ０ｍｍｏｌ）を用いて希釈した。塩化メタンスルホニル（３００ｍｇ，２．６０ｍｍｏｌ）を滴下添加した。１６時間後、反応物を水およびＣＨＣｌ_３を用いて希釈した。層を分離し、水層をＣＨＣｌ_３を用いて抽出した（３ｘ）。合体した有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。再結晶化（ＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ）により２０６ｍｇの白色の結晶を得た（２９％）。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ１．１０−１．４０（ｍ，４Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），２．００−２．２０（ｍ，４Ｈ），２．９８（ｓ，３Ｈ），３．２０−３．５０（ｂｒｓ，２Ｈ），４．３７（ｂｒｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）２９３．１（Ｍ^＋＋１）。２７８．１（Ｍ^＋１５），２３７．１（Ｍ^＋５６）。
【０３０５】
４−（４−ｔｒａｎｓ−メタンスルファミドシクロへキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン
４−（Ｎ−スルホニル）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ｔｒａｎｓ−１，４−シクロへキシルジアミン（２０６ｍｇ，０．７１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）中に溶解させ、ＴＦＡ（６ｍＬ）用いて希釈した。１６時間後反応物を濃縮した。粗製の反応混合物、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）、ＮａＨＣＯ_３（１００ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ）および１−クロロ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンをフラスコ内で合体させ、１３０℃にまで加熱した。１５時間後反応物を室温にまで冷却し、ＥｔＯＡｃを用いて希釈した（３ｘ）。合体した有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。クロマトグラフィ（シリカ分取用プレート，２０：１ ＣＨＣｌ_３／ＥｔＯＨ）を経て２．６ｍｇの黄褐色の固体を得た（５％ 収率）。ＭＳ（ＥＳ）：４１４．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３０６】
例１：メチルスルホキシド（１０．０ｍＬ）中の４−クロロ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．５０ｇ，１．９４ｍｍｏｌ）および ４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロへキシルアミン（２．２３ｇ，１９．４ｍｍｏｌ）の溶液を１３０℃で５時間加熱した。室温にまで冷却した後、水（１０．０ｍＬ）を添加し、得られた水溶液をＥｔＯＡｃを用いて抽出した（３ｘ１０．０ｍＬ）。合体したＥｔＯＡｃ溶液を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、濾液を真空下で乾燥するまで濃縮し、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィにかけて０．４９ｇ（７５％）の４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。ｍｐ １９７−１９９℃；^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．２５−１．５９（ｍ，８Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），３．６８−３．７９（ｍ，１Ｈ），４．３２−４．３８（ｍ，１Ｈ），４．８８（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．２６−７．４９（ｍ，３Ｈ），８．４０−８．４４（ｄｄ，Ｊ＝２．２，８Ｈｚ，２Ｈ），１０．６０（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３７．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３０７】
次の化合物を例１と同様の手法で得た：
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−６−メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１１．３７（ｓ，１Ｈ，ピロル−ＮＨ），８．４５（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．５５（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．１７（ｓ，１Ｈ，ピロル−Ｈ），４．９０（ｂｒ ｄ，１Ｈ，ＮＨ），４．１８（ｍ，１Ｈ，ＣＨ−Ｏ），３．６９（ｍ，１Ｈ，ＣＨ−Ｎ），２．４０−２．２０（ｍ，２Ｈ），２．１９−１．９８（ｍ，２Ｈ），２．２５（ｓ，３Ｈ，ＣＨ_３）１．６８−１．２０（ｍ，４Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３２３．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５−メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１１．３７（ｓ，１Ｈ，ピロル−ＮＨ），８．４０（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．４５（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），５．９６（ｓ，１Ｈ，ピロル−Ｈ），４．９０（ｂｒ ｄ，１Ｈ，ＮＨ），４．１８（ｍ，１Ｈ，ＣＨ−Ｏ），３．６９（ｍ，１Ｈ，ＣＨ−Ｎ），２．３８−２．２０（ｍ，２Ｈ），２．１８−１．９８（ｍ，２．００（ｓ，３Ｈ，ＣＨ_３）１．６８−１．２０（ｍ，４Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３２３．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。ｍｐ ２４５．５−２４６．５℃；^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ８．３３（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．４２（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．０２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，ピロル−Ｈ），６．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，ピロル−Ｈ），４．２６（ｍ，１Ｈ，ＣＨ−Ｏ），３．６２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ−Ｎ），２．３０−２．１２（ｍ，２Ｈ），２．１２−１．９６（ｍ，２Ｈ），１．６４−１．３４（ｍ，４Ｈ）；ＭＳ，Ｍ＋１＝３０９．３；分析（Ｃ_１９Ｈ_２ Ｎ_４Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−（３−ピリジル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．２１−１．５４（ｍ，８Ｈ）；２．２８（ｓ，３Ｈ）；２．３３（ｓ，３Ｈ）；３．７０（ｍ，１Ｈ），４．３１（ｍ，１Ｈ），４．８９（ｄ，１Ｈ），７．４０（ｍ，１Ｈ），８．６１（ｍ，２Ｈ），９．６４（ｍ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３８．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−（２−フリル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．２６−１．６４（ｍ，８Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），３．７２（ｍ，１Ｈ），４．２３（ｍ，１Ｈ），４．８５（ｄ，１Ｈ），６．５２（ｍ，１Ｈ），７．１２（ｍ，１Ｈ），７．５３（ｍ，１Ｈ），９．２８（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３２７．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−（３−フリル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．２５−１．６３（ｍ，８Ｈ），２．１１（ｓ，３Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），３．７１（ｍ，１Ｈ），４．２０（ｍ，１Ｈ），４．８４（ｄ，１Ｈ），７．０３（ｍ，１Ｈ），７．４５（ｍ，１Ｈ），８．１３（ｍ，１Ｈ），１０．３８（ｍ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３２７．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−シクロペンチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．２６−２．０４（ｍ，１６Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），３．１５（ｍ，１Ｈ），３．７０（ｍ，１Ｈ），４．１２（ｍ，１Ｈ），４．７５（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３２９．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−（２−チエニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−アミン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）１．２８−１．５９（ｍ，８Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｍ，１Ｈ），４．１９（ｍ，１Ｈ），４．８４（ｄ，１Ｈ），７．０９（ｍ，１Ｈ），７．３４（ｍ，１Ｈ），７．８５（ｍ，１Ｈ），９．０２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３４３．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−（３チエニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．２１−１．６０（ｍ，８Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ），２．２３（ｓ，３Ｈ），３．６６（ｍ，１Ｈ），４．２２（ｍ，１Ｈ），７．２７（ｍ，１Ｈ），７．８６（ｍ，１Ｈ），８．０９（ｍ，１Ｈ），１１．２３（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３４３．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−（４フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．２６−１．６６（ｍ，８Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），３．７３（ｍ，１Ｈ），４．３３（ｍ，１Ｈ），４．９２（ｄ，１Ｈ），７．１３（ｍ，２Ｈ），８．４１（ｍ，２Ｈ），１１．１４（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３５５．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−（３−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．２６−１．７１（ｍ，８Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），３．７２（ｍ，１Ｈ），４．３０（ｍ，１Ｈ），４．９０（ｄ，１Ｈ），７．０９（ｍ，１Ｈ），７．３９（ｍ，１Ｈ），８．０５（ｍ，１Ｈ），８．２０（ｍ，１Ｈ），１０．０４（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３５５．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−（２−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．３０−１．６４（ｍ，８Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），３．７３（ｍ，１Ｈ），４．２４（ｍ，１Ｈ），４．８２（ｄ，１Ｈ），７．２８（ｍ，２Ｈ），８．１８（ｍ，１Ｈ），９．０２（ｍ，１Ｈ），１２．２０（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３５５．３（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−イソプロピル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．３１（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ），１．３０−１．６５（ｍ，８Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），３．０１（ｍ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７１（ｍ，１Ｈ），４．１４（ｍ，１Ｈ），４．７８（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３０３．２。
ｄｌ−４−（２−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−イソプロピル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．３１−１．４２（ｂｒ，４Ｈ），１．７５−１．８２（ｂｒ，４Ｈ），２．０２（Ｓ，３Ｈ），２．（ｓ，３Ｈ），３．５３（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），５．０８（ｄ，１Ｈ），７．４１−７．４８（ｍ，３Ｈ），８．３０（ｍ，２Ｈ），１０．０８（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３７．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（３，４−ｔｒａｎｓ−ジヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。ＭＳ（ＥＳ）：３５３．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（３，４−ｃｉｓ−ジヒドロキシルシクロへキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。ＭＳ（ＥＳ）：３５３．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。ｍｐ １９６−１９９℃；^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．７２（ｓ，３Ｈ），１．９７（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），３．５９（ｍ，２Ｈ），３．９６（ｍ，２Ｈ），５．６３（ｂｒ，１Ｈ），７．４４−７．４７（ｍ，３Ｈ），８．３６−８．４３（ｄｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，７Ｈｚ，２Ｈ），１０．７６（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３２４．５（Ｍ^＋＋１）。
ｄｌ−４−（２−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロペンチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン^１。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．６２（ｍ，２Ｈ），１．７９（ｂｒ，４Ｈ），１．９２（ｓ，３Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），４．１１（ｍ，１Ｈ），４．２３（ｍ，１Ｈ），５．２８（ｄ，１Ｈ），７．４１−７．４９（ｍ，３Ｈ），８．２２（ｍ，２Ｈ），１０．５１（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３２３．２（Ｍ^＋＋１）。^１２−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロペンチルアミンの調製についてはＰＣＴ ９４１７０９０を参照されたい。
ｄｌ−４−（３−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロペンチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン^１。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．５８−１．９０（ｂｒ，６Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），４．４８−４．５７（ｍ，１Ｈ），４．９１−５．０１（ｍ，２Ｈ），７．３５−７．４６（ｍ，３Ｈ），８．４２−８．４７（ｍ，２Ｈ），１０．１１（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３２３．２（Ｍ^＋＋１）。^１３−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロペンチルアミンの調製については、Ａ−３２２２４２を参照されたい。
ｄｌ−４−（３−ｃｉｓ−ヒドロキシシクロペンチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン^１。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．８２−２．２８（ｂｒ，６Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），４．５３−４．６０（ｍ，１Ｈ），４．９５−５．０８（ｍ，１Ｈ），５．８５−５．９３（ｄ，１Ｈ），７．３５−７．４７（ｍ，３Ｈ），８．４２−８．４６（ｍ，２Ｈ），１０．０５（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３２３．２（Ｍ^＋＋１）。^１３−ｃｉｓ−ヒドロキシシクロペンチルアミンの調製については、ＥＰ−Ａ３２２２４２を参照されたい。
４−（３，４−ｔｒａｎｓ−ジヒドロキシシクロペンチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン^１。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．９２−１．９９（ｂｒ，２Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ），２．２０（ｂｒ，２Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），２．４１−２．５２（ｂｒ，２Ｈ），４．３５（ｍ，２Ｈ），４．９８（ｍ，２Ｈ），７．３８−７．４７（ｍ，３Ｈ），８．３８−８．４２（ｍ，２Ｈ），９．５３（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３９．２（Ｍ^＋＋１）。^１３，４−ｔｒａｎｓ−ジヒドロキシシクロペンチルアミンの調製については、ＰＣＴ ９４１７０９０ｑを参照されたい。
４−（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．０２（ｓ，３Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），２．７１（ｔ，２Ｈ），４．１８（ｍ，２Ｈ），５．７５−５．９５（ｍ，３Ｈ），７．３８−７．４８（ｍ，３Ｈ），８．３７−８．４１（ｍ，２Ｈ），１０．４２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３１０．１（Ｍ^＋＋１）。
４−（３−Ｎ−シクロプロピルメチルアミノ−３−オキソプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ０．５１（ｑ，２Ｈ），０．４０（ｑ，２Ｈ），１．７９−１．９５（ｂｒ，１Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），２．４０（ｓ，３Ｈ），２．７２（ｔ，２Ｈ），２．９９（ｄ，２Ｈ），４．０４（ｔ，２Ｈ），７．５８−７．６２（ｍ，３Ｈ），８．２２−８．２９（ｍ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３６４．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−アミノ−２−オキソエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ ２．３１（ｓ，３Ｈ），２．３８（ｓ，３Ｈ），４．２６（ｓ，２Ｈ），７．３６（ｍ，３Ｈ），８．３３（ｍ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３９６．１（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−Ｎ−メチルアミノ−２−オキソエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．９９（ｓ，３Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．８２（ｄ，３Ｈ），４．３９（ｄ，２Ｈ），５．７６（ｔ，１Ｈ），６．７１（ｂｒ，１Ｈ），７．４１−７．４８（ｍ，３Ｈ），８．４０（ｍ，４Ｈ），１０．６６（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３１０．１（Ｍ^＋＋１）。
４−（３−ｔｅｒｔ−ブチルオキシｌ−３−オキソプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．４５（ｓ，９Ｈ），１．９６（ｓ，３Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），２．７１（ｔ，２Ｈ），４．０１（ｑ，２Ｈ），５．７８（ｔ，１Ｈ），７．４１−７．４８（ｍ，３Ｈ），８．２２−８．２９（ｍ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３６７．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−ヒドロキシエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．９２（ｓ，３Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），３．８１−３．９８（ｂｒ，４Ｈ），５．５９（ｔ，１Ｈ），７．３９７．４８（ｍ，３Ｈ），８．３７（ｍ，２Ｈ），１０．７２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２８３．１（Ｍ^＋＋１）。
４−（３−ヒドロキシプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．８４（ｍ，２Ｈ），１．９９（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ），３．６２（ｔ，２Ｈ），３．９６（ｍ，２Ｈ），３．３５（ｔ，１Ｈ），７．３９−７．４８（ｍ，３Ｈ），８．３６（ｍ，２Ｈ），１０．２７（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：２９７．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（４−ヒドロキシブチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．７１−１．８２（ｍ，４Ｈ），１．９９（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），３．６８−３．８０（ｍ，４Ｈ），５．２０（ｔ，１Ｈ），７．４１−７．４９（ｍ，３Ｈ），８．４１（ｍ，２Ｈ），１０．３７（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３１１．２（Ｍ＋１）。
４−（４−ｔｒａｎｓ−アセチルアミノシクロへキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン
４−（４−ｔｒａｎｓ−メチルスルホニルアミノシクロへキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。
４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。
４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロへキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。
４−（３−ピリジルメチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。
４−（２−メチルプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−７−（１−フェニルエチル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。
【０３０８】
例２：０℃にまで冷却したＴＨＦ（１．０ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（０．０４７ｇ，０．１７９ｍｍｏｌ）および安息香酸（０．０２２ｇ，０．１７９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、４−（４−ｔｒａｎｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．０５ｇ，０．１４９ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。次いでジエチルアゾジカルボン酸塩０．０２８ｍＬ，０．１７９ｍｍｏｌ）を１０分にわたり滴下添加した。次いで反応物を室温にまで加温した。ＴＬＣにより反応が完了した後、反応混合物を重炭酸ナトリウム水溶液（３．０ｍＬ）を用いてクエンチした。水層を分離し、エーテルを用いて抽出した（２ｘ５．０ｍＬ）。有機抽出物を合体させ、乾燥させ、乾燥するまで真空下で濃縮した。残渣にエーテル（２．０ｍＬ）およびヘキサン（５．０ｍＬ）を添加した後、大部分の酸化トリフェニルホスフィンを濾過除去した。濾液を濃縮して、粘性のある油状物を得、これをカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸＝４：１）により精製して、５．０ｍｇ（７．６％）の４−（４−ｃｉｓ−ベンゾイルオキシシクロへキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。ＭＳ（ＥＳ）：４４１．３（Ｍ^＋＋１）。この反応もまた５０．０ｍｇ（８４％）の４−（３−シクロヘキシニル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを生成した。ＭＳ（ＥＳ）：３１９．２（Ｍ^＋＋１）。
例３：エタノール（１．０ｍＬ）中の４−（４−ｃｉｓ−ベンゾイルオキシシクロへキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（５．０ｍｇ，ｍｍｏｌ）の溶液に、１０滴の２Ｍ水酸化ナトリウムを添加した。１時間後、反応混合物を酢酸を用いて抽出し（３ｘ５．０ｍＬ）、有機層を乾燥させ、濾過し、乾燥するまで真空下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸＝４：１）に供し、３．６ｍｇ（９４％）の４−（４−ｃｉｓ−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。ＭＳ（ＥＳ）：３３７．２（Ｍ^＋＋１）。
次の化合物を例３と同様の手法で得た：
４−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−オキソプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．０１（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），２．７３（ｔ，２Ｈ），２．９７（ｓ，６Ｈ），４．０８（ｍ，２Ｈ），６．０９（ｔ，１Ｈ），７．４１−７．４８（ｍ，３Ｈ），８．４３（ｍ，２Ｈ），１０．４６（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３８．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−ホルミルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．２６（ｓ，３Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ），３．５９−３．７８（ｍ，２Ｈ），３．８８−４．０１（ｍ，２Ｈ），５．４８−５．６０（ｍ，１Ｈ），７．３８−７．５７（ｍ，３Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．３０−８．４５（ｍ，２Ｈ），８．８２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３１０．１（Ｍ^＋＋１）。
４−（３−アセチルアミノプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。ＭＳ（ＥＳ）：３３８．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３０９】
例４：４−（３−ｔｅｒｔ−ブチルオキシ−３−オキソプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（７０．０ｍｇ，０．１９１ｍｍｏｌ））をトリフルオロ酢酸：ジクロロメタン（１：１，５．０ｍＬ）中に溶解させた。得られた溶液を室温で１時間撹拌し、次いで２時間還流させた。室温にまで冷却した後、混合物を乾燥するまで真空下で濃縮した。残渣を分取用薄膜クロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：ＡｃＯＨ＝７：２．５：０．５）に供して、４０．０ｍｇ（６８％）の４−（３−ヒドロキシ−３−オキソプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ２．３２（ｓ，３Ｈ），２．３８（ｓ，３Ｈ），２．８１（ｔ，２Ｈ），４．０１（ｔ，２Ｈ），７．５５（ｍ，３Ｈ），８．２４（ｍ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３１１．１（Ｍ^＋＋１）。
【０３１０】
例４と同様の手法で次の化合物を得た：
４−（３−アミノプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。ＭＳ（ＥＳ）：２９６．１（Ｍ^＋＋１），２７９．１（Ｍ−ＮＨ_３）。
【０３１１】
例５：４−（３−ヒドロキシ−３−オキソプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（５０．０ｍｇ，０．１６１ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５０ｍＬ）、ジオキサン（０．５０ｍＬ）および水（０．２５ｍＬ）の混合物中に溶解させた。この溶液に、メチルアミン（０．０２ｍＬ，水中に４０％重量，０．２４２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．０８５ｍＬ）およびＮ，Ｎ，Ｎ’Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロホウ酸塩（６１．２ｍｇ，０．２０３ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１０分撹拌した後、溶液を濃縮し、残渣を分取用薄膜クロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ）に供して３５．０ｍｇ（６７％）の４−（３−Ｎ−メチル−３−オキソプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．９２（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），２．６５（ｔ，２Ｈ），４．０８（ｔ，２Ｈ），５．９０（ｔ，１Ｈ），６．１２（ｍ，１Ｈ），７．４５（ｍ，３Ｈ），８．４１（ｍ，２Ｈ），１０．６８（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３１１．１（Ｍ^＋＋１）。
次の化合物を例５と同様の手法で得た：
４−（２−シクロプロパンカルボニルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。ＭＳ（ＥＳ）：３５０．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−イソブチリルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。ＭＳ（ＥＳ）：３５２．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（３−プロピオニルアミノプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．００−１．０８（ｔ，３Ｈ），１．７１−２．０３（ｍ，４Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ），３．２６３．４０（ｍ，２Ｈ），３．７９−３．９６（ｍ，２Ｈ），５．５３−５．６２（ｍ，１Ｈ），６．１７−６．３３（ｍ，１Ｈ），７．３３−７．５７（ｍ，３Ｈ），８．３１−８．３９（ｍ，２Ｈ），９．６９（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３５２．２（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−メチルスルホニルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．１８（ｓ，３Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），２．９２（ｓ，３Ｈ），３．３９−３．５３（ｍ，２Ｈ），３．７１−３．８８（ｍ，２Ｈ），５．３１−５．３９（ｍ，１Ｈ），６．１７−６．３３（ｍ，１Ｈ），７．３６−７．４３（ｍ，３Ｈ），８．２０−８．２５（ｍ，２Ｈ），９．５２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３６０．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３１２】
例６：４−クロロ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．７０ｇ，２．７２ｍｍｏｌ）および１，２−ジアミノエタン（１０．０ｍＬ，１５０ｍｍｏｌ）の混合物を不活性雰囲気下で６時間還流させた。過剰のアミンを真空下で除去し、残渣を、エーテルおよびヘキサンを連続的に用いて洗浄し、０．７５ｇ（９８％）の４（２−アミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。ＭＳ（ＥＳ）；２８２．２（Ｍ^＋＋１），２６５．１（Ｍ^＋−ＮＨ_３）。
【０３１３】
例７：ジクロロメタン（２．０ｍＬ）中の４−（２−アミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（７０．０ｍｇ，０．２４９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（５０．４ｍｇ，０．４９８ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化プロピオニル（２５．６ｍｇ，０．０２４ｍＬ，０．２７４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。１時間後、混合物を真空下で濃縮し、残渣を分取用薄膜クロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ）に供して２２．０ｍｇ（２６％）の４−（２−プロピオニルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。ＭＳ（ＥＳ）：３３８．２（Ｍ^＋＋１）。
次の化合物を例７と同様の手法で得た：
４−（２−Ｎ’−メチルウレアエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．１３（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ），３．５３（ｄ，３Ｈ），３．５５（ｍ，２Ｈ），３．８８（ｍ，２Ｈ），４．２９（ｍ，１Ｈ），５．６８（ｔ，１Ｈ），５．８４（ｍ，１Ｈ），７．４２（ｍ，３Ｈ），８．３６（ｄｄ，２Ｈ），９．５２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３９．３（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−Ｎ’−エチルウレアエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。ＭＳ（ＥＳ）：３５３．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３１４】
例８：ジクロロメタン（２．０ｍＬ）中の１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（４１．１ｍｇ，０．２１５ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン（２．４ｍｇ，０．０２０ｍｍｏｌ）およびピルビン酸（１８．９ｍｇ，０．０１５ｍＬ，０．２１５ｍｍｏｌ）の溶液に、４−（２−アミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（５５．０ｍｇ，０．１９６ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で４時間撹拌した。通常のｗｏｒｋｕｐ、次いでカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ）を経て１０．０ｍｇ（１５％）の４−（２’−ピルビルアミドエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。ＭＳ（ＥＳ）：３５２．２（Ｍ^＋＋１）。
例９：ジクロロメタン（２．０ｍＬ）中の４−（２−アミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（６０．０ｍｇ，０．２１３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−トリメチルシリルイソシアン酸塩（４３．３ｍｇ，０．０５１ｍＬ，０．３２０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で３時間撹拌し、続いて重炭酸ナトリウム水溶液を添加した。少量のシリカゲルを介した濾過の後、濾液を真空下で濃縮して乾燥させ、９．８ｍｇ（１４％）の４−（２−ウレアエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。ＭＳ（ＥＳ）：３２５．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３１５】
次の化合物を例９と同様の手法で得た：
ｄｌ−４−（２−アセチルアミノプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．２８−１．３２（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，３Ｈ），１．６６（ｓ，３Ｈ），１．９６（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ）３．７６−３．８３（ｍ，２Ｈ），４．１０−４．３０（ｍ，１Ｈ），５．６０−５．６６（ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，１Ｈ），７．４０−７．５１（ｍ，３Ｈ），８．３６−８．４３（ｍ，２Ｈ），１０．８３（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３８．２（Ｍ^＋＋１）。
（Ｒ）−４−（２−アセチルアミノプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．３１（ｄ，３Ｈ），１．６６（ｓ，３Ｈ）１．９９（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），３．７８−３．８３（ｍ，２Ｈ），４．１７−４．２２（ｍ，１Ｈ），５．６７（ｔ，１Ｈ），７．３８−７．５（ｍ，３Ｈ），８．３９（ｍ，２Ｈ），１０．８１（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３８．２（Ｍ^＋＋１）。
（Ｒ）−４−（１−メチル−２−アセチルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．４１（ｄ，３Ｈ），１．６８（ｓ，３Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ），３．４６−３．５２（ｂｒ，ｍ，２Ｈ），４．７３（ｍ，１Ｈ），５．２２（ｄ，１Ｈ），７．４１−７．４６（ｍ，３Ｈ），８．３６−８．４０（ｍ，２Ｈ），８．９３（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３８．２（Ｍ^＋＋１）。
（Ｓ）−４−（２−アセチルアミノプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．３１（ｄ，３Ｈ），１．６６（ｓ，３Ｈ）２．２６（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），３．７８−３．８３（ｍ，２Ｈ），４．１７−４．２２（ｍ，１Ｈ），５．６７（ｔ，１Ｈ），７．３８−７．５（ｍ，３Ｈ），８．３９（ｍ，２Ｈ），８．６７（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３８．２（Ｍ^＋＋１）。
（Ｓ）−４−（１−メチル−２−アセチルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．４１（ｄ，３Ｈ），１．６８（ｓ，３Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ），３．４６３．５２（ｍ，２Ｈ），４．７３（ｍ，１Ｈ），５．２２（ｄ，１Ｈ），７．４１−７．４６（ｍ，３Ｈ），８．３６−８．４０（ｍ，２Ｈ），１０．１３（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３８．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３１６】
例１０：４−クロロ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンの、ｄｌ−１−アミノ−２−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニルアミノ−プロパンおよびｄｌ−２−アミノ−１−（１，１−ジメチル エトキシ）カルボニルアミノ−プロパンの混合物との反応を、例１と同様の手法で行った。反応を経てｄｌ−４−（１−メチル−２−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニルアミノ）エチルアミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンおよびｄｌ−４−（２メチル−２−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニルアミノ）エチルアミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンの混合物を得、これをカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：３）により分離した。第１の画分はｄｌ−４−（１−メチル−２−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンであった：^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．２９−１．３８（ｍ，１２Ｈ），１．９５（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ）３．３４−３．４３（ｍ，２Ｈ），４．６２−４．７０（ｍ，１Ｈ），５．３６−５．４０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），５．５３（ｂｒ，１Ｈ），７．３７−７．４９（ｍ，３Ｈ），８．３７−８．４４（ｍ，２Ｈ），１０．７５（ｓ，１Ｈ）。ＭＳ ３９６．３（Ｍ^＋＋１）；第２の画分はｄｌ−４−（２−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニルアミノプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンであった：^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．２６−１．４０（ｍ，１２Ｈ），２．００（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），３．６０−３．９０（ｍ，２Ｈ），３．９５−４．１０（ｍ，１Ｈ），５．４１−５．４４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），５．６５（ｂｒ，１Ｈ），７．４０−７．４６（ｍ，３Ｈ），８．３７−８．４４（ｍ，２Ｈ），１０．８９（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３９６．２（Ｍ^＋＋１）。
次の化合物を例１０と同様の手法で得た：
（Ｓ，Ｓ）−４−（２−アセチルアミノシクロへキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．４３（ｍ，４Ｈ），１．６０（ｓ，３Ｈ），１．８３（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｍ，２Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ），３．７３（ｂｒ，１Ｈ），４．２５（ｂｒ，１Ｈ），５．２９（ｄ，１Ｈ），７．４３−７．４８（ｍ，３Ｈ），８．３５−８．４０（ｍ，２Ｈ），９．０５（ｓ，１Ｈ）。
４−（２−メチル−２−アセチルアミノプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．５１（ｓ，６Ｈ），１．５６（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），３．７６（ｄ，２Ｈ），５．７８（ｔ，１Ｈ），７．４１−７．４８（ｍ，３Ｈ），７．９３（ｓ，１Ｈ），８．３９（ｍ，２Ｈ），１０．０７（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３５２．３（Ｍ^＋＋１）。
【０３１７】
例１１：ｄｌ−４−（１−メチル−２−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（６０．６ｍｇ，０．１５３ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２．０ｍＬ）中のトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）を用いて１４時間処理した。有機溶剤を乾燥するまで真空下で除去した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．０ｍＬ）およびトリエチルアミン（２．０ｍＬ）中に溶解させた。この溶液に０℃で、無水酢酸（１７．２ｍｇ，０．０１６，０．１６９ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を 室温で４８時間撹拌し、次いで乾燥するまで真空下で濃縮した。残渣を分取用薄膜クロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ）に供して２７．０ｍｇ（５２％）のｄｌ−４−（１−メチル−２−アセチルアミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．３８−１．４２（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，３Ｈ），１．６９（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ）３．３８−３．６０（ｍ，２Ｈ），４．６５−４．８０（ｍ，１Ｈ），５．２３−５．２６（ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，１Ｈ），７．４０−７．５１（ｍ，３Ｈ），８．３７−８．４３（ｍ，２Ｈ），１０．４４（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３３８．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３１８】
例１２：例１と同様の手法で、４−クロロ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．１５ｇ，０．５８３ｍｍｏｌ）および（１Ｒ，２Ｒ）−（−）−１，２−ジアミノシクロヘキサン（０．６３ｇ，５．５１７ｍｍｏｌ）から調製された（Ｒ，Ｒ）−４−（２−アミノシクロへキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０．０ｍＬ）中のトリエチルアミン（０．７２６ｇ，７．１７５ｍｍｏｌ）および無水酢酸（０．３２５ｇ，３．１８ｍｍｏｌ）を用いて室温で２時間処理した。溶剤を真空下で除去した後、酢酸（１０．０ｍＬ）および水（１０．０ｍＬ）を残渣に添加した。この混合物を分離し、水層を酢酸を用いて抽出した（２ｘ１０．０ｍＬ）。合体した酢酸エチル溶液を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過した。濾液を真空下で乾燥するまで濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１）に供して５７．０ｍｇ（２６％）の（Ｒ，Ｒ）−４−（２−アセチルアミノシクロへキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．４３（ｍ，４Ｈ），１．６０（ｓ，３Ｈ），１．８４（ｍ，２Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），３．７２（ｂｒ，１Ｈ），４．２４（ｂｒ，１Ｈ），５．２９（ｄ，１Ｈ），７．４３−７．４８（ｍ，３Ｈ），８．３５−８．３９（ｍ，２Ｈ），８．８３（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３７８．３（Ｍ^＋＋１）。
【０３１９】
例１３：ピリジン（１．０ｍＬ）中の４−（２−ヒドロキシエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（４０．０ｍｇ，０．１４１ｍｍｏｌ）の溶液に、無水酢酸（０．１０８ｇ，１．０６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。この混合物を室温で４時間撹拌し、溶剤を真空下で除去した。残渣を分取用薄膜クロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１）に供して３２．３ｍｇ（７１％）の４−（２−アセチルオキシエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１．９０（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），４．０５（ｍ，２Ｈ），４．４５（ｔ，２Ｈ），５．４２（ｍ，１Ｈ），７．４１−７．４９（ｍ，３Ｈ），８．４２（ｍ，２Ｈ），１１．２３（ｓ，１Ｈ）。
【０３２０】
例１４：１滴のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを加えたジクロロメタン（４．０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−β−Ａｌａ−ＯＨ（９７．４ｍｇ，０．３１３ｍｍｏｌ）および塩化オキサリル（３９．７ｍｇ，２７．３μＬ，０．３１３ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で１時間撹拌し、続いて４−（２−アミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（８０．０ｍｇ，０．２８５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（５７．６ｍｇ，７９．４μＬ，０．５７０ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。３時間後、混合物を真空下で濃縮し、残渣を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．０ｍＬ）中の２０％ピペリジン溶液を用いて０．５時間処理した。溶剤を真空下で除去した後、残渣をジエチルエーテル：ヘキサン（１：５）で洗浄して３．０ｍｇ（３ａ）の４−（６−アミノ−３−アザ−４−オキソヘキシル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。ＭＳ（ＥＳ）：３５３．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３２１】
例１５：１滴のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを加えたジクロロメタン（４．０ｍＬ）中の４−（２−アミノエチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（７０．０ｍｇ，０．２４９ｍｍｏｌ）および無水コハク酸（２７．０ｍｇ，０．２７４ｍｍｏｌ）の溶液を室温で４時間撹拌した。反応混合物を２０％水酸化ナトリウムを用いて抽出した（３ｘ５．０ｍＬ）。この水溶液を３Ｍ 塩酸塩を用いて酸性化し、ｐＨ＝７．０にする。混合物全体を酢酸を用いて抽出した（３ｘ１０ｍＬ）。合体した有機溶液を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過した。濾液を乾燥するまで真空下で濃縮して１５．０ｍｇ（１６％）の４−（７−ヒドロキシ−３−アザ−４，７−ジオキソヘプチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得た。ＭＳ（ＥＳ）：３８２．２（Ｍ^＋＋１）。
【０３２２】
例１６：１０ｍＬのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に、室温で７００ｍｇの４−ｃｉｓ−３−ヒドロキシシクロペンチル）アミノ−２−フェニル−５，６−ジメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを添加し、続いて４５５ｍｇのＮ−Ｂｏｃ グリシン、２０ｍｇのＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ），２９３ｍｇのヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）および６２２ｍｇの１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＬ）を添加した。この反応混合物を一晩撹拌した。次いでＤＭＦを減圧下で除去し、反応混合物を２０ｍＬの酢酸および５０ｍＬの水の間で分配した。水性の部分をさらに２ｘ２０ｍＬの酢酸を用いて抽出し、合体した有機部分を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ濾過し、濃縮した。シリカゲル上の精製、酢酸／ヘキサンを用いた溶出により、４１０ｍｇの所望の生成物を得た：４−（ｃｉｓ−３−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２−アミノアセトキシ）シクロペンチル）アミノ−２−フェニル−５，６−ジメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ^＋＋１）＝４８０．２。次いでこのエステルを５ｍＬのジクロロメタン中の２０％トリフルオロ酢酸を用いて室温で処理し、一晩放置し、次いで濃縮した。酢酸を用いた粉砕により３００ｍｇのオフホワイトの固体を得た；４−（ｃｉｓ−３−（２−アミノアセトキシ）シクロペンチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジントリフルオロ酢酸塩，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ^＋＋１）＝３８０．１。
【０３２３】
当業における熟練者は、上記で開示された方法により次の化合物を合成できることを認識するであろう：
４−（ｃｉｓ−３−ヒドロキシシクロペンチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ^＋＋１）＝３２３．１。４−（ｃｉｓ−３−（２−アミノアセトキシ）シクロペンチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジントリフルオロ酢酸塩，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ^＋＋１）＝３８０．１。
４−（３−アセトアミド）ピペリジニル−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ^＋＋１）＝３６４．２。
４−（２−Ｎ’−メチルウレアプロピル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ^＋＋１）＝３５３．４。
４−（２−アセトアミドブチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ^＋＋１）＝３５２．４。
４−（２−Ｎ’−メチルウレアブチル）アミノ−５，６−ジメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ^＋＋１）＝３６７．５。
４−（２−アミノシクロプロピルアセトアミドエチル）アミノ−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ^＋＋１）＝３０９．１。
４−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−２−（３−クロロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ^＋＋１）＝３４２．８。４−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−２−（３−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ−）＝３２７．２。
４−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ−２−（４−ピリジル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン，ＭＳ（ＥＳ）（Ｍ^＋＋１）＝３１０．２。
【０３２４】
例１７
【化８７】

（７）のピロル窒素（スキームＩＸ）を、塩基性の条件（ｂａｓｉｃ ｃｏｎｔｉｄｉｏｎ）下にてジ−ｔ−ブチルジカルボン酸塩を用いて保護化し、対応するカルバミン酸塩（２２）を得た。（２２）のラジカル臭素化を位置選択的に行い、臭化物（２３）を得た。一般的に、化合物（２３）は様々な求核カップリングｐａｒｔｎｅｒｓのための重要な（ｋｅｙ）求電子中間体として働く。アルキル臭化物を三水和フェノラートナトリウムを用いて置換して化合物（２４）を得た。続く塩化アリールの置換、およびｔ−ブチル ｃａｒｂａｍａｚｅ保護基の除去を一回の工程で行い、所望の赤色の化合物（２５）を得た。
【０３２５】
スキームＩＸにしたがう化合物（２２）〜（２５）合成の詳細
【化８８】

ジ−ｔ−ブチル ジカルボン酸塩（５．３７ｇ，２４．６ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（１．１３ｇ，９．２ｍｍｏｌ）を、（７）（１．５０ｇ，６．１５ｍｍｏｌ）および ピリジン（３０ｍＬ）を含んだ溶液に添加した。２０時間後、反応物を濃縮し、残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２および水の間で分配した。ＣＨ_２Ｃｌ_２層を分離し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して黒色の固体を得た。フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２；１／９ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，Ｒ_ｆ ０．４０）を経て１．７０ｇ（８０％）の白色の固体（２２）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．５０（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．４５（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．３９（ｓ，１Ｈ，ピロル−Ｈ），２．６６（ｓ，３Ｈ，ピロル−ＣＨ_３），１．７６（ｓ，９Ｈ，カルバミン酸塩−ＣＨ_３）；ＭＳ，Ｍ＋１＝３４４．１；Ｍｐｔ＝１７５−１７７℃。
【０３２６】
【化８９】

Ｎ−ブロモスクシンイミド（５０８ｍｇ，２．８６ｍｍｏｌ）およびＡＩＢＮ（１１２ｍｇ，ｍｍｏｌ）を、（２２）（９３５ｍｇ，２．７１ｍｍｏｌ）および ＣＣｌ_４（５０ｍＬ）を含んだ溶液に添加した。この溶液を還流にまで加熱した。２時間後、反応物を室温にまで冷却し、真空下で濃縮して白色の固体を得た。フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２；１／１ ＣＨ_２Ｃｌ_２／ヘキサン，Ｒ_ｆ ０．３０）により９６０ｍｇ（８４％）の白色の固体（２３）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．５２（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．４８（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ，ピロル−Ｈ），４．９３（ｓ，２Ｈ，ピロル−ＣＨ_２Ｂｒ），１．７９（ｓ，９Ｈ，カルバミン酸塩−ＣＨ）；ＭＳ，Ｍ＋１＝４２３．９；Ｍｐｔ＝１５５−１５７℃。
【０３２７】
【化９０】

三水和フェノール塩ナトリウム（１７３ｍｇ，１．０２ｍｍｏｌ）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）およびＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解した臭化物（２３）（４１０ｍｇ，０．９７ｍｍｏｌ）の溶液に一度で添加した。２時間後、反応溶液をＣＨ_２Ｃｌ_２および水の間で分配した。水層をＣＨ_２Ｃｌ_２を用いて抽出した。合体したＣＨ_２Ｃｌ_２層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して黄色の固体を得た。フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２；１／６ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，Ｒ_ｆ ０．３０）を経て２１０ｍｇ（５０％）の白色の固体（２４）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．５３（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．４８（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．３４（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．０３（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．８３（ｓ，１Ｈ，ピロル−Ｈ），５．４５（ｓ，２Ｈ，ＡｒＣＨ_２Ｏ），１．７６（ｓ，９Ｈ，カルバミン酸塩−ＣＨ）；ＭＳ，Ｍ^＋＝４３６．２。
【０３２８】
【化９１】

（２４）（８５ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）、Ｎ−アセチルエチレンジアミン（２０１ｍｇ，１．９５ｍｍｏｌ）および ＤＭＳＯ（３ｍＬ）を含んだ溶液を１００℃にまで加熱した。１時間後、温度を１３０℃にまで上げた。３時間後、反応物を室温にまで冷却し、ＥｔＯＡｃおよび水の間で分配した。水層をＥｔＯＡｃを用いて抽出した（２ｘ）。合体したＥｔＯＡｃ 層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２；１／１０ ＥｔＯＨ／ ＣＨＣｌ_３，Ｒ_ｆ ０．２５）により７３ｍｇ（９３％）の白色の泡状の固体（２５）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１１．８１（ｂｒ ｓ，１Ｈ，Ｎ−Ｈ），８．３９（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），８．０３（ｂｒ ｔ，１Ｈ，Ｎ−Ｈ），７．５７（ｂｒ ｔ，１Ｈ，Ｎ−Ｈ），７．２０７．５０（ｍ，ＳＨ，Ａｒ−Ｈ），６．８９−７．０９（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．５９（ｓ，１Ｈ，ピロル−Ｈ），５．１２（ｓ，２Ｈ，ＡＲＣＨ_２Ｏ），３．６１（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ），３．３６（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ），１．７９（ｓ，３Ｈ，ＣＯＣＨ_３）；ＭＳ，Ｍ^＋１＝４０２．６。
【０３２９】
例１７と同様の手法で次の化合物を得る：
４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−フェノキシメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン、ｍｐ １９６−１９７℃；ＭＳ（ＥＳ）：４０１．６（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（４−フルオロフェノキシ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン、ＭＳ（ＥＳ）：４２０．１（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（４−クロロフェノキシ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン、ＭＳ（ＥＳ）：４３６．１（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（４−メトキシフェノキシ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン、ＭＳ（ＥＳ）：４３２．１（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（Ｎ−ピリジン−２−オン）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン、ＭＳ（ＥＳ）：４０３．１（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（Ｎ−フェニルアミノ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３］ピリミジン、ＭＳ（ＥＳ）：４００．９（Ｍ^＋＋１）。４−（２−アセチルアミノエチル）アミノ−６−（Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノ）メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン、ＭＳ（ＥＳ）：４１４．８（Ｍ^＋＋１）。
４−（２−Ｎ’−メチルウレアエチル）アミノ−６−フェノキシメチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン、ＭＳ（ＥＳ）：４１６．９（Ｍ^＋＋１）。
【０３３０】
例１８：アデノシンＡ_１アンタゴニストの合成
本明細書に記載した一般手順により、化合物１３１９および化合物１３２０（下記表１３）を調製することができる。
【０３３１】
【化９２】

化合物１３１９（８１％）^１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）ｄ １．３７（ｍ，４Ｈ），１．９３（ｍ，２Ｈ），２．０１（ｍ，２Ｈ），４．１１（ｂｒｓ，１Ｈ），４．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），６．５９（ｍ，１Ｈ），７．０９（ｍ，１Ｈ），７．２１（ｍ，２Ｈ），７．４９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ，１４Ｈｚ），８．０３（ｍ，１Ｈ），８．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），１１．５５（ｂｒｓ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：３２７．０（Ｍ^＋＋１）。
化合物１３２０（３１％）ＭＳ（ＥＳ）：３４３．１（Ｍ^＋＋１）。
【０３３２】
例１９：アデノシンＡ_１アンタゴニストの合成
以下の一般手順により、化合物１３２１（下記表１３）を合成することができる。
【０３３３】
【化９３】

化合物２８（１０．９３ｇ，５０．７６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（６７ｍＬ）中に溶解させた。４−アミジノピリジン 塩酸塩（８．０ｇ，５０．７６ｍｍｏｌ）およびＤＢＵ（１５．４ｇ，１０１．５ｍｍｏｌ）を続けて添加し、反応物を８５℃にまで加熱した。２２時間後、反応物を室温にまで冷却し、ＤＭＦを真空下で除去した。暗色の油状物を２Ｍ ＨＣｌ（８０ｍＬ）を用いて希釈した。反応物を静置させた。２時間後、溶液を１０℃にまで冷却し、濾過した。固体を冷水で洗浄し、乾燥させて７．４０ｇの黄色の固体固体，化合物２９（６９％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）ｄ ６．５８（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．６），９．００（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），１２．３５（ｂｒｓ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：２１２．８（Ｍ^＋＋１）。
化合物２９（７．４ｍｍｏｌ，２９．８ｍｍｏｌ）をＰＯＣｌ_３を用いて希釈し、１０５℃にまで加熱した。１８時間後、反応物を室温にまで冷却し、ＰＯＣｌ_３を真空下で除去する。濃い暗色の油状物を、ＭｅＯＨ（７５ｍＬ）続いてエーテル（１２０ｍＬ）を用いて希釈する。非晶質の赤色の固体を濾過し、エーテルで洗浄して３．８２ｇの赤色の固体を得る。粗製の固体は純度が約８０％であり、さらに精製することなく次の反応に用いる。ＭＳ（ＥＳ）：２３０．７（Ｍ^＋＋１）。
化合物１３２１ ^１Ｈ−ＮＭＲ（１５％）（２００ＭＨ，ｄ−ＤＭＳＯ）ｄ １．３８（ｍ，４Ｈ），１．９２（ｂｒｓ，２Ｈ），２．０２（ｂｒｓ，２Ｈ），３．４４（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１４（ｂｒｓ，１Ｈ），４．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４Ｈｚ），６．６３（ｍ，１Ｈ），１５（ｍ，１Ｈ），７．３２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），８．２０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），８．６５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），１１．６７（ｂｒｓ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：３１０．２（Ｍ^＋＋１）。
化合物１５０１（表１５ 下記）^１Ｈ−ＮＭＲ（７０％）（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）ｄ １．８４（ｓ，３Ｈ），３．５２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），３．８３，ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ），６．５１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），７．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．８Ｈｚ），７．４２（ｍ，３Ｈ），８．３６（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：２９６．０（Ｍ^＋＋１）。
【０３３４】
化合物１５０２（下記表１５）ＭＳ（ＥＳ）：３４５．０（Ｍ^＋＋１）。
化合物１５００（下記表１５）^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）ｄ １．４０−１．８０（ｍ，６Ｈ），１．８５−２．１０（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），２．５０（ｄ，３Ｈ），３．９０−４．１０（ｍ，２Ｈ），４．７６（ｍ，１Ｈ），５．５０（ｄ，１Ｈ），６．０３（ｍ，１Ｈ），７．４０（ｍ，３Ｈ），８．３７（ｍ，２Ｈ），９．１５（ｂｒｓ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：３９３．３（Ｍ^＋＋１）。
【０３３５】
例２０：アデノシンＡ_１アンタゴニストの合成
下記の一般手順により、化合物１５０４（下記表１５）を合成することができる。
【０３３６】
【化９４】

化合物３１（２００ｍｇ，０．４７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４ｍＬ）中に溶解させた。トリエチルアミン（５１ｍｇ，Ｏ．５ｍｍｏｌ）およびチオモルホリン（５２ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）を連続して添加した。溶液を数分間混合し、７２時間静置した。反応物をＤＣＭおよびＨ_２Ｏで希釈し、層を分離した。水層をＤＣＭを用いて抽出した。合体したＤＣＭ 層をＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。この粗製の試料にエチルエーテルを添加し、得られた固体を濾過して１００ｍｇの白色の固体，３２（６２％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）ｄ１．７６（ｓ，９Ｈ），２．６６（ｂｒｓ，２Ｈ），２．７９（ｂｒｓ，２Ｈ），３．８６（ｓ，２Ｈ），７．４６（ｍ，３Ｈ），８．５０（ｍ，２Ｈ）。
【０３３７】
化合物３２をＤＭＳＯ（３ｍＬ）およびｔｒａｎｓ−４−アミノシクロヘキサノール（１４４ｍｇ，１．２５ｍｍｏｌ）と合体させ、１３０℃にまで４時間加熱した。反応物を室温にまで冷却し、ＥｔＯＡｃおよびＨ_２Ｏを用いて希釈した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２ｘ）を用いて抽出した。合体した有機層をＨ_２Ｏおよび塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。クロマトグラフィ（シリカ，８：１ ＣＨＣｌ_３／ＥｔＯＨ）を経て３２ｍｇの黄褐色の油状物を得た。エチルエーテルを添加し、得られた固体を濾過し、５ｍｇの白色の固体（９％）を得た。ＯＳＩＣ−１４８２６５：^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：ｄ１．４４（ｂｒｍ，４Ｈ），２．０３（ｂｒｍ，２Ｈ），２．２１（ｂｒｍ，２Ｈ），２．７０（ｂｒｍ，８Ｈ），３．６３（ｍ，４Ｈ），３．９２（ｍ，１Ｈ），４．２６（ｂｒｓ，１Ｈ），６．４２（ｓ，１Ｈ），７．４２（ｍ，３Ｈ），８．３３（ｍ，２Ｈ）。
【０３３８】
例２１：の合成アデノシンＡ１ アンタゴニスト
下記に示す一般手順により、化合物１５０３（下記表１５）を調製することができる。
【０３３９】
【化９５】

臭化物，化合物３１（２２０ｍｇ，０．４７ｍｍｏｌ）を１：１ ＤＭＦ：ジクロロメタン（５ｍＬ）中に溶解させた。これにＫ_２ＣＯ_３（７１ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ）およびモルホリン（０．０４７ｍＬ，０．４７ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で一晩撹拌した。溶剤を真空下で除去し、残渣をのＨ_２Ｏおよびジクロロメタン間で分配した。有機層をＭｇＳＯ_４を用いて乾燥させ、濾過し、濃縮してオフホワイトの固体を得、これをエーテル／ヘキサンを用いて粉砕して１７５ｍｇの白色の固体，３３（８４％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：（１．９（９Ｈ，ｓ），２．５４（４Ｈ，ｓ），３．６５（４Ｈ，ｓ），３．８５（１Ｈ，ｓ），６．５９（１Ｈ，ｓ），７．４５（３Ｈ，ｍ），８．５（２Ｈ，ｍ）。
【０３４０】
化合物３３（５０ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）および ｔｒａｎｓ−４−アミノシクロヘキサノール（１０５ｍｇ，０．９１ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（２ｍＬ）中に取り出した。得られた溶液にＮ_２を噴霧し（ｓｐａｒｇｅｄ）、次いで油浴で１００℃にまで加熱、一晩撹拌した。粗製の反応混合物を水中に注ぎ、酢酸（５０ｍＬ）を用いて二回抽出した。合体した有機層をＨ_２Ｏで洗浄した。ＭｇＳＯ_４を用いて乾燥させ濾過した後、有機層を真空下で濃縮して橙色の固体を得た。クロマトグラフィ（シリカ，ＣＨ_２Ｃｌ_２中に１０％ ＣＨ_２ＯＨ）を経て１５ｍｇ（３３％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：（１．２４−１．６２（４Ｈ，ｍ），１．８５（２Ｈ，ｍ），２．１０（２Ｈ，ｍ），２．２６（４Ｈ，ｍ），３．５３（４Ｈ，ｍ），４．２２（１Ｈ，ｍ），４．７３（１Ｈ，ｍ），５．８５（１Ｈ，ｄ），６．１５（１Ｈ，ｓ），７．２５（３Ｈ，ｍ），８．４２（２Ｈ，Ｍ），１０．０（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（ＥＳ）：４０８（Ｍ^＋＋１）。
例２０の調製工程と同様に、化合物３２を適切に置換されたアミンを用いて処理することにより、化合物１５００、１５０１および１５０２を調製することができる。
【０３４１】
ヒトアデノシンＡ _１ 及びＡ _２ａ 受容体の酵母β−ガラクトシダーゼレポーター遺伝子アッセイ：酵母菌株（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）をヒトアデノシンＡ_１（Ａ_１Ｒ；ＣＡＤＵＳ菌株ＣＹ１２６６０）又はヒトＡ_２ａ（Ａ_２ａ；ＣＡＤＵＳ菌株ＣＹ８３６２）で形質転換し、機能が測定できるようにｌａｃＺ（β−ガラクトシダーゼ）レポーター遺伝子を添加した。この形質転換についての記載を以下に列記する（酵母菌株参照）。Ａ_１及びＡ_２ａ受容体に対してほぼ同じ親和性を有する、強力なアデノシン受容体アゴニストであるＮＥＣＡ（５’−Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン）を、すべてのアッセイでリガンドとして使用した。ＮＥＣＡにより誘導されるβ−ガラクトシダーゼ活性をＣＹ１２６６０又はＣＹ８３６２で阻害できるかどうか８通りの濃度（０．１〜１０，０００ｎＭ）で試験化合物を調べた。
【０３４２】
酵母保存培養の調製：酵母菌株ＣＹ１２６６０及びＣＹ８３６２のそれぞれを、ＬＴ寒天平板上に画線し、コロニーが観察されるまで３０℃でインキュベートした。これらのコロニーから採取した酵母をＬＴ液（ｐＨ６．８）に添加し、３０℃で１晩増殖させた。次いで、各酵母菌株を分光光度計（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ ＶＭＡＸ）で測定してＯＤ_６００＝１．０〜２．０（約１〜２×１０^７細胞／ｍＬ）になるように希釈した。各６ｍＬの酵母培養液に、４ｍＬの４０％グリセロール（１：１．５体積：体積）を添加した（「酵母／グリセロール保存培養」）。この酵母／グリセロール保存培養から、１ｍＬのアリコートを１０個調製し、アッセイで必要になるまで−８０℃で貯蔵した。
【０３４３】
酵母Ａ_１Ｒ及びＡ_２ａＲアッセイ：ＣＹ８３６２及びＣＹ１２６６０酵母／グリセロール保存培養の各１瓶を解凍し、ｐＨ６．８の補充ＬＴ液培地（５ｍＬの４０％グルコース、０．４５ｍＬの１Ｍ ＫＯＨ、及び２．５ｍＬのＰｉｐｅｓ ｐＨ６．８を添加した９２ｍＬのＬＴ液）を播種するために使用した。培養液を３０℃で１６〜１８時間（１晩）増殖させた。次いで、１晩増殖させた培養液のアリコートを、４Ｕ／ｍＬのアデノシンデアミナーゼ（子ウシ腸粘膜由来のタイプＶＩ又はＶＩＩ、Ｓｉｇｍａ）含有ＬＴ培地で希釈して、ＣＹ８３６２（Ａ２ａＲ）でＯＤ_６００＝０．１５（１．５×１０^６細胞／ｍＬ）、また、ＣＹ１２６６０（Ａ_１Ｒ）でＯＤ_６００＝０．５０（５×１０^６細胞／ｍＬ）とした。
【０３４４】
すべてのウェルで最終濃度が２％ＤＭＳＯとなるように、９６ウェルマクロタイタープレート中最終容積１００μＬでアッセイを実施した。一次スクリーニングとして、１〜２通りの濃度（１０ｕＭ、１μＭ）の試験化合物を利用した。化合物をさらに精査選別するために、８通りの濃度（１００００、１０００、５００、１００、５０、１０、１及び０．１ｎＭ）で試験した。各マイクロタイタープレートで、「コントロール」及び「トータル（Ｔｏｔａｌ）」ウェルに１０ｕＬの２０％ＤＭＳＯを添加し、一方、「未知」ウェルに１０ｕＬの（２０％ＤＭＳＯ中の）試験化合物を添加した。続いて、１０ｕＬのＮＥＣＡ（Ａ_１Ｒは５ｕＭ、Ａ２_ａＲは１ｕＭ）を「トータル」及び「未知」ウェルに添加した。一方、「コントロール」ウェルには１０ｕＬのＰＢＳを添加した。最後に、８０ｕＬの酵母菌株ＣＹ８３６２又はＣＹ１２６６０をすべてのウェルに添加した。次いで、すべてのプレートを短時間撹拌し（ＬａｂＬｉｎｅオービタルシェーカーで２〜３分）、乾燥オーブン中３０℃で４時間インキュベートした。
【０３４５】
比色定量法（例えば、ＯＮＰＧ、ＣＰＲＧ）、発光定量法（例えば、Ｇａｌａｃｔｏｎ−Ｓｔａｒ）、又は蛍光基質（例えば、ＦＤＧ、レゾルフィン）を用いて、β−ガラクトシダーゼ活性を定量することができる。現時点では、信号／ノイズ比が高く、干渉が比較的なく、低コストであることから蛍光検出が好ましい。蛍光β−ガラクトシダーゼ基質であるフルオレセインジガラクトピラノシド（ＦＤＧ、ＭｏｌｅｃｕＬａｒ Ｐｒｏｂｅｓ又はＭａｒｋｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）をすべてのウェルに２０ｕＬ／ウェル（最終濃度＝８０ｕＭ）で添加した。プレートを５〜６秒間振とうし（ＬａｂＬｉｎｅオービタルシェーカー）、次いで、３７℃で９０分間インキュベートした（９５％Ｏ_２／５％ＣＯ_２インキュベーター）。９０分間のインキュベーション期間の最後に、２０ｕＬ／ウェルの１Ｍ Ｎａ_２ＣＯ_３を用いてβ−ガラクトシダーゼ活性を抑え、すべてのプレートを５〜６秒間振とうした。次いで、プレートを６秒間撹拌し、蛍光光度計（Ｔｅｃａｎ Ｓｐｅｃｔｒａｆｌｕｏｒ；励起＝４８５ｎｍ、発光＝５３５ｎｍ）を用いて相対蛍光強度を測定した。
【０３４６】
計算：「コントロール」ウェルの相対蛍光値をバックグラウンドとみなし、「トータル」及び「未知」の値から差し引いた。化合物特性を対数変換して解析し（ｘ軸：化合物濃度）、その後単一部位競合カーブフィッティング（ｏｎｅ ｓｉｔｅ ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅ ｆｉｔｔｉｎｇ）を用いてＩＣ_５０値を計算した（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ）。
【０３４７】
酵母菌株：Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ菌株ＣＹ１２６６０［ｆａｒ１＊１４４２ ｔｂｔ１−１ ｆｕｓ１−ＨＩＳ３ ｃａｎ１ ｓｔｅ１４：：ｔｒｐ１：：ＬＹＳ２ ｓｔｅ３＊１１５６ ｇｐａ１（４１）−Ｇαｉ３ ｌｙｓ２ ｕｒａ３ ｌｅｕ２ ｔｒｐ１：ｈｉｓ３；ＬＥＵ２ ＰＧＫｐ−Ｍｆα１リーダー−ｈＡ１Ｒ−ＰＨＯ５ｔｅｒｍ ２ｍｕ−ｏｒｉｇ ＲＥＰ３ Ａｍｐｒ］及びＣＹ８３６２［ｇｐａ１ｐ−ｒＧαｓＥ１０Ｋ ｆａｒ１＊１４４２ ｔｂｔ１−１ ｆｕｓ１−ＨＩＳ３ ｃａｎ１ ｓｔｅ１４：：ｔｒｐ１：ＬＹＳ２ ｓｔｅ３＊１１５６ ｌｙｓ２ ｕｒａ３ ｌｅｕ２ ｔｒｐ１ ｈｉｓ３；ＬＥＵ２ ＰＧＫｐ−ｈＡ２ａＲ ２ｍｕ−ｏｒｉ ＲＥＰ３ Ａｍｐｒ］を発生させた。
【０３４８】
ＬＴ培地：ＬＴ（Ｌｅｕ−Ｔｒｐ補充）培地は、以下のものを補充した１００ｇのＤＩＦＣＯ酵母窒素基礎培地からなる：１．０ｇバリン、１．０ｇアスパラギン酸、０．７５ｇフェニルアラニン、０．９ｇリジン、０．４５ｇチロシン、０．４５ｇイソロイシン、０．３ｇメチオニン、０．６ｇアデニン、０．４ｇウラシル、０．３ｇセリン、０．３ｇプロリン、０．３ｇシステイン、０．３ｇアルギニン、０．９ｇヒスチジン、及び１．０ｇトレオニン。
【０３４９】
ヒトＡ _１ アデノシン受容体を発現する酵母菌株の構築
この例では、酵母フェロモンシステム経路中に機能的に組み込まれたヒトＡ_１アデノシン受容体を発現する酵母菌株の構築について説明する。
【０３５０】
Ｉ．発現ベクターの構築
ヒトＡ_１アデノシン受容体用酵母発現ベクターを構築するために、ヒトＡ_１アデノシン受容体の公表配列に基づいて設計されたプライマー及び標準技術を用いて、ヒト海馬ｍＲＮＡの逆転写酵素ＰＣＲによりＡ_１アデノシン受容体ｃＤＮＡを得た。このＰＣＲ産物を、酵母発現プラスミドｐＭＰ１５のＮｃｏＩ及びＸｂａＩ部位にサブクローニングした。
【０３５１】
ｐＭＰ１５プラスミドは、ｐＬＰＸｔから以下のようにして作製した。ＹＥＰ５１のＸｂａＩ部位（Ｍ．Ｉｎｏｕｙｅ編、Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ＭａｎｉｐｕＬａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ中の、Ｂｒｏａｃｈ、Ｊ．Ｒ．等（１９８３）「Ｖｅｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ｈｉｇｈ−ｌｅｖｅｌ、ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｌｏｎｅｄ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｙｅａｓｔ」、８３〜１１７頁）を消化し、末端を平滑化し、再連結によって除去してＹｅｐ５１ＮｃｏＤＸｂａを作製した。ＢａｍＨＩによる消化、平滑化、リンカー（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ、＃１０８１）の連結、ＸｂａＩ消化、及び再連結によって、別のＸｂａＩ部位をＢａｍＨＩ部位に作製してＹＥＰ５１ＮｃｏＸｔを生成させた。このプラスミドを、Ｅｓｐ３１及びＮｃｏＩで消化し、ＰＣＲにより生成されるＬｅｕ２及びＰＧＫｐ断片に連結した。この２ｋｂのＬｅｕ２ ＰＣＲ産物は、Ｅｓｐ３１及びＢｇｌＩＩ部位を含むプライマーを用いてＹＥＰ５１Ｎｃｏから増幅して生成させた。６６０塩基対のＰＧＫｐ ＰＣＲ産物を、ＢｇｌＩＩ及びＮｃｏＩ部位を含むＰＣＲプライマーを用いてｐＰＧＫαｓ（Ｋａｎｇ、Ｙ．−Ｓ．等（１９９０）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０：２５８２〜２５９０）から増幅して生成させた。得られたプラスミドをｐＬＰＸｔと呼ぶ。ａ−ファクタープレプロリーダーのコード領域をＮｃｏＩ部位に挿入して、ｐＬＰＸｔを改変した。このプレプロリーダーは、ＮｃｏＩクローニング部位がリーダーの３’末端で保持され、５’末端で再生されないように挿入した。このように、プラスミドをＮｃｏＩ及びＸｂａＩで消化して受容体をクローン化することができる。得られたプラスミドをｐＭＰ１５と呼ぶ。
【０３５２】
ヒトＡ_１アデノシン受容体ｃＤＮＡが挿入されるこのｐＭＰ１５プラスミドをｐ５０９５と表記する。このベクターでは、この受容体ｃＤＮＡを酵母ａ−ファクタープレプロリーダーの３’末端に融合する。タンパク質の成熟中に、このプレプロペプチド配列が切断されて成熟した完全長の受容体が生成する。これは、この受容体が酵母の分泌経路経由でプロセシングを受ける間に起こる。このプラスミドを、Ｌｅｕ選択（すなわち、ロイシンを欠く培地上での増殖）により維持する。このクローン化されたコード領域の配列を決定し、それが公表文献（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｓ４５２３５及びＳ５６１４３）の配列と同等であることがわかった。
【０３５３】
ＩＩ．酵母菌株の構築
ヒトＡ_１アデノシン受容体を発現する酵母菌株を作製するために、酵母菌株ＣＹ７９６７を初発の親菌株として使用した。ＣＹ７９６７の遺伝子型は以下の通りである：ＭＡＴα ｇｐａＤ１１６３ ｇｐａ１（４１）Ｇαｉ３ ｆａｒ１Ｄ１４４２ ｔｂｔ−１ ＦＵＳ１−ＨＩＳ３ ｃａｎ１ ｓｔｅ１４：：ｔｒｐ１：：ＬＹＳ２ ｓｔｅ３Ｄ１１５６ ｌｙｓ２ ｕｒａ３ ｌｅｕ２ ｔｒｐ１ ｈｉｓ３
これらの遺伝マーカーを以下に概説する：
ＭＡＴａ……交配型ａ
ｇｐａ１Ｄ１１６３……内在酵母Ｇ−タンパク質ＧＰＡ１が欠失している。
ｇｐａ１（４１）Ｇαｉ３……ｇｐａ１（４１）−Ｇａｉ３が酵母ゲノム中に組み込まれた。このキメラＧａタンパク質は、同族Ｎ−末端アミノ酸が欠失した哺乳動物Ｇ−タンパク質Ｇａ３に融合された内在酵母ＧａサブユニットＧＰＡ１の最初の４１個のアミノ酸から構成される。
ｆａｒ１Ｄ１４４２……（細胞周期停止の原因である）ＦＡＲ１遺伝子が欠失している（これにより、フェロモン応答経路の活性化による細胞周期停止を防止する）。
ｔｂｔ−１……エレクトロポレーションによる高い形質転換効率を有する菌株。
ＦＵＳ１−ＨＩＳ３……ＦＵＳ１プロモーターとＨＩＳ３コード領域との融合物（これにより、フェロモン誘導ＨＩＳ３遺伝子を作製する）。
ｃａｎ １……アルギニン／カナバニン（ｃａｎａｖｉｎｉｎｅ）透過酵素。
ｓｔｅ１４：：ｔｒｐ１：：ＬＹＳ２……Ｃ−ファルネシルメチルトランスフェラーゼであるＳＴＥ１４の遺伝子破壊（これにより、フェロモン経路経由の基礎的な情報伝達が低下する）。
ｓｔｅ３Ｄ１１５６……内在酵母ＳＴＲ、ａ−ファクターフェロモン受容体（ＳＴＥ３）が破壊されている。
ｌｙｓ２…………２−アミノアジピン酸（ａｍｉｎｏａｐｉｄａｔｅ）レダクターゼが欠損。酵母が増殖するにはリジンが必要である。
ｕｒａ３…………オロチジン−５’−リン酸デカルボキシラーゼが欠損。酵母が増殖するにはウラシルが必要である。
【０３５４】
ｌｅｕ２…………ｂ−イソプロピルリンゴ酸デヒドロゲナーゼが欠損。酵母が増殖するにはロイシンが必要である。
ｔｒｐ１…………ホスホリボシルアントラニル酸が欠損。酵母が増殖するにはトリプトファンが必要である。
ｈｉｓ３…………イミダゾールグリセロールホスフェートデヒドロゲナーゼが欠損。酵母が増殖するにはヒスチジンが必要である。
２つのプラスミドをエレクトロポレーションにより菌株ＣＹ７９６７に形質転換した：プラスミドｐ５０９５（ヒトＡ_１アデノシン受容体をコードする；上記）及びＦＵＳ１−β−ガラクトシダーゼレポーター遺伝子プラスミドであるプラスミドｐ１５８４。プラスミドｐ１５８４は、プラスミドｐＲＳ４２６（Ｃｈｒｉｓｔｉａｎｓｏｎ，Ｔ．Ｗ．等（１９９２）Ｇｅｎｅ １１０：１１９〜１１２２）から誘導した。プラスミドｐＲＳ４２６は、ヌクレオチド２００４〜２０１６にポリリンカー部位を含有する。ＦＵＳ１プロモーターとβ−ガラクトシダーゼ遺伝子との融合物を、制限部位ＥａｇＩ及びＸｈｏＩに挿入して、プラスミドｐ１５８４を作製した。ｐ１５８４プラスミドを、Ｔｒｐ選択（すなわち、ロイシンを欠く培地上での増殖）により維持する。
【０３５５】
得られるｐ５０９５及びｐ１５８４を有する菌株は、ＣＹ１２６６０と呼ばれ、ヒトＡ_１アデノシン受容体を発現する。この菌株を液中又は寒天平板上で増殖させるために、ロイシン及びトリプトファンを欠く最少培地を使用した。（ＦＵＳ１−ＨＩＳ３をアッセイする）増殖アッセイを平板上で実施するために、この平板はｐＨ６．８になっており、０．５〜２．５ｍＭの３−アミノ−１，２，４−トリアゾールを含有し、ロイシン、トリプトファン、及びヒスチジンを欠いていた。特異性のコントロールとして、１以上の他の酵母ベースの７回膜貫通受容体スクリーニングによる比較をすべての実験に含めた。
【０３５６】
ヒトＡ _２ａ アデノシン受容体を発現する酵母菌株の構築
この例では、酵母フェロモンシステム経路中に機能的に組み込まれるヒトＡ_２ａアデノシン受容体を発現する酵母菌株の構築について述べる。
【０３５７】
Ｉ．発現ベクターの構築
ヒトＡ２ａアデノシン受容体用酵母発現ベクターを構築するために、ヒトＡ２ａ受容体ｃＤＮＡを、Ｐｈｉｌ Ｍｕｒｐｈｙ博士（ＮＩＨ）から入手した。このクローンを受け取り、そのＡ２ａ受容体挿入断片の配列を決定して、公表されている配列（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション＃Ｓ４６９５０）と同一であることが判明した。ＶＥＮＴポリメラーゼを用いたＰＣＲによりこの受容体ｃＤＮＡをプラスミドから切除し、構成性ホスホグリセリン酸キナーゼ（ＰＧＫ）プロモーターにより酵母中で受容体を発現させるプラスミドｐＬＰＢＸにクローン化した。この挿入断片全体の配列を再度決定して、公表されている配列と同一であることが判明した。但し、使用したクローニング方法のため、ＧｌｙＳｅｒＶａｌの３個のアミノ酸が、受容体のカルボキシ末端に付加されていた。
【０３５８】
ＩＩ．酵母菌株の構築
ヒトＡ２ａアデノシン受容体を発現する酵母菌株を作製するために、酵母菌株ＣＹ８３４２を出発親菌株として使用した。ＣＹ８３４２の遺伝子型は以下の通りである：ＭＡＴａ ｆａｒ１Ｄ１４４２ ｔｂｔ１−１ ｌｙｓ２ ｕｒａ３ ｌｅｕ２ ｔｒｐ１ ｈｉｓ３ ｆｕｓ１−ＨＩＳ３ ｃａｎ１ ｓｔｅ３Ｄ１１５６ ｇｐａＤ１１６３ ｓｔｅ１４：：ｔｒｐ１：：ＬＹＳ２ ｇｐａ１ｐ−ｒＧ_{α ｓ}Ｅ１０Ｋ（又はｇｐａ１ｐ−ｒＧ_{α Ｓ}Ｄ２２９Ｓ又はｇｐａ１ｐ−ｒＧ_{α Ｓ}Ｅ１０Ｋ＋Ｄ２２９Ｓ）。
【０３５９】
これらの遺伝マーカーは、Ｇ−タンパク質変異以外、実施例１に記載した通りである。ヒトＡ２ａ受容体発現では、内在酵母Ｇタンパク質ＧＰＡ１が欠失し、哺乳動物Ｇ_αｓで置換された酵母菌株を利用した。３個のラットＧ_αｓ変異体を利用した。これらの変異体は、酵母βγに効率的に結合するタンパク質にこれらの変異体を変換する１個又は２個の点変異を含んでいる。これらの変異体は、（１０番目のグルタミン酸がリジンで置換されている）Ｇ_αＳＥ１０Ｋ、（２２９番目のアスパラギン酸がセリンで置換されている）Ｇ_αＳＤ２２９５、及び（両方の点変異を含む）Ｇ_αＳＥ１０Ｋ＋Ｄ２２９Ｓと同定される。
【０３６０】
（３個の変異ラットＧ_αＳタンパク質のうち１個を有する）菌株ＣＹ８３４２を、親ベクターｐＬＰＢＸ（受容体⁻）又はｐＬＰＢＸ−Ａ２ａ（受容体⁻）のいずれかで形質転換した。（上記）β−ガラクトシダーゼコード配列に融合したＦＵＳ１プロモーターを有するプラスミドを添加して、フェロモン応答経路の活性度を評価した。
【０３６１】
ヒトＡ _１ アデノシン受容体を発現する酵母菌株を用いた機能アッセイ
この例では、ヒトＡ_１アデノシン受容体のモジュレーターの酵母中での機能スクリーニングアッセイの開発について説明する。
【０３６２】
Ｉ．アッセイに使用するリガンド
この受容体に対する天然アゴニストであるアデノシン、並びに他の２つの合成アゴニストを、このアッセイの開発に利用した。ＥＣ_５０が約７５ｎＭであると報告されているアデノシン、及び約５０ｎＭのアフィニティーがあると報告されている（−）−Ｎ６−（２−フェニルイソプロピル）−アデノシン（ＰＩＡ）を、一部の実験に使用した。５’−Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン（ＮＥＣＡ）をすべての増殖アッセイに使用した。増殖培地中にアデノシンが存在することによる情報伝達を防止するために、アデノシンデアミナーゼ（４Ｕ／ｍＬ）をすべてのアッセイで添加した。
【０３６３】
ＩＩ．酵母内の生物学的応答
様々なＧタンパク質サブユニットを発現する一連の酵母菌株にＡ_１受容体発現ベクター（上記ｐ５０９５）を導入して、異種酵母系におけるＡ_１アデノシン受容体の機能的な結合能力を評価した。これらの形質転換体の大部分が、Ｇ_α１又はＧ_α０サブタイプのＧ_αサブユニットを発現した。乱交雑受容体−Ｇαタンパク質カップリングが同定されるかどうかについて、追加のＧ_αタンパク質も試験した。種々の菌株において、ＳＴＥ１８又はキメラＳＴＥ１８−Ｇγ２構築物を酵母のゲノム中に組み込んだ。この酵母菌株は、欠陥ＨＩＳ３遺伝子及びＦＵＳ１−ＨＩＳ３の組込みコピーを有し、それによって３−アミノ−１，２，４−トリアゾール（０．２、０．５、及び１．０ｍＭで試験）を含有しヒスチジンを欠く選択培地での選択が可能になる。形質転換体を単離し、３−アミノ−１，２，４−トリアゾール、４Ｕ／ｍＬのアデノシンデアミナーゼを含有しヒスチジンを欠く培地上に単層を調製した。５μＬの種々の濃度のリガンド（例えば、０、０．１、１．０、及び１０ｍＭのＮＥＣＡ）を使用した。増殖を２日間モニターした。このようにして、リガンドに依存する増殖応答を種々の酵母菌株で試験した。結果を下記表１に要約する。記号（−）はリガンド依存受容体活性が検出されなかったことを示し、一方、（＋）はリガンド依存応答を意味する。用語「ＬＩＲＭＡ」は、リガンドに依存しない受容体によって媒介される活性化を示す。
【０３６４】
【表３】

表３に示したように、最も強い情報伝達が、ＧＰＡ_１（４１）−Ｇ_αｉ３キメラを発現する酵母菌株で起こることが判明した。
【０３６５】
ＩＩＩ．ｆｕｓ１−ＬａｃＺアッセイ
フェロモン応答経路活性の特徴をより完全に明らかにするために、アゴニストの刺激に応じたｆｕｓ１ＬａｃＺによるβ−ガラクトシダーゼ合成について測定した。β−ガラクトシダーゼアッセイを実施するために、Ｓｔｅ１８−Ｇγ２キメラ及びＧＰＡ_４１−Ｇ_αｉ３を同時発現する酵母菌株中で発現される、対数期中間部にあるヒトＡ_１アデノシン受容体培養物に漸増濃度のリガンドを添加した。形質転換体を単離し、ヒスチジン及び４Ｕ／ｍＬのアデノシンデアミナーゼ存在下で１晩増殖させた。４Ｕ／ｍＬのアデノシンデアミナーゼ及びリガンドと共に５時間インキュベーション後、β−ガラクトシダーゼが誘発されるかどうかを、β−ガラクトシダーゼの基質としてＣＰＲＧを用いて測定した。１回のアッセイ当たり５×１０^５の細胞を用いた。
【０３６６】
ＮＥＣＡによる刺激で得られる結果は、１０^−８ＭのＮＥＣＡ濃度で、β−ガラクトシダーゼ活性が約２倍刺激されることを示した。また、ＮＥＣＡ濃度１０^−５Ｍでは、約１０倍の刺激インデックス（ｓｔｉｍｕＬａｔｉｏｎ ｉｎｄｅｘ）が観測された。
【０３６７】
この菌株に対する拮抗薬の活性を確認したことで、このアッセイの利用範囲が広がった。２種類の既知のアデノシン拮抗薬ＸＡＣ及びＤＰＣＰＸを、β−ガラクトシダーゼアッセイにおいて（５ｍＭで）ＮＥＣＡと活性を競うことができるかどうか試験した。これらのアッセイでは、β−ガラクトシダーゼの誘発を、ＦＤＧを基質とし、１回のアッセイ当たり１．６×１０^５の細胞を用いて測定した。その結果、ＸＡＣとＤＰＣＰＸいずれも、酵母によって発現されるＡ_１アデノシン受容体の強力な拮抗薬として働き、ＩＣ_５０値がそれぞれ４４ｎＭ及び４９ｎＭであることが示された。
【０３６８】
この阻害効果がＡ_１サブタイプに特異的であるかどうかを決定するために、一連の補足実験を（実施例４に記載の）酵母ベースのＡ_２ａ受容体アッセイにより実施した。Ａ_２ａ酵母ベースのアッセイで得られた結果から、ＸＡＣが比較的効果のあるＡ_２ａ受容体拮抗薬であり、既報と一致することが示された。これに対し、ＤＰＣＰＸは、既報から予想される通りこの受容体に対して比較的不活性であった。
【０３６９】
ＩＶ．放射性リガンド結合
Ａ_１アデノシン受容体アッセイの特徴を、受容体の放射性リガンド結合パラメータを測定することによってさらに明らかにした。幾つかのアデノシン受容体基準化合物ＸＡＣ、ＤＰＣＰＸ、及びＣＧＳによる［^３Ｈ］ＣＰＸの結合の置換について、ヒトＡ_１アデノシン受容体を発現する酵母から調製したメンブレンを用いて分析した。ヒトＡ_１アデノシン受容体を発現する酵母メンブレンを用いた結果を、ヒトＡ２ａアデノシン受容体又はヒトＡ３受容体を発現する酵母メンブレンから得た結果と比較して、結合の特異性を調べた。このアッセイを実施するために、５０ｍｇのメンブレンを０．４ｎＭ［^３Ｈ］ＣＰＸ及び漸増濃度のアデノシン受容体リガンドと共にインキュベートした。インキュベーションを、５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２、０．２５％ＢＳＡ及び２Ｕ／ｍＬアデノシンデアミナーゼ中で、プロテアーゼ阻害剤の存在下、室温で６０分間実施した。氷冷５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４＋１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２を添加して結合を停止し、その後Ｐａｃｋａｒｄ９６ウェルハーベスタを用いて、０．５％ポリエチレンイミン（ｐｏｌｙｅｔｈｙｅｎｉｍｉｎｅ）を予め染み込ませたＧＦ／Ｂフィルターで素早くろ過した。Ｐｒｉｓｍ２．０１ソフトウェアを用いた非線形最小二乗カーブフィッティング法によりデータを解析した。この実験で得たＩＣ_５０値を下記表４に要約する。
【０３７０】
【表４】

これらのデータは、前記基準化合物が文献に報告された親和性と一致する親和性を有することを示している。さらにこのデータは、酵母ベースのこのアッセイが、受容体サブタイプ特異性を識別するのに十分な感度を有することを示している。
【０３７１】
ヒトＡ２ａアデノシン受容体を発現する酵母菌株を用いた機能アッセイ
この例では、ヒトＡ_１アデノシン受容体のモジュレーターを酵母中で機能的にスクリーニングするアッセイの開発について説明する。
【０３７２】
Ｉ．アッセイに使用するリガンド
天然リガンドアデノシン、並びに特徴が完全に明確な他の市販リガンドを、酵母中で機能的に発現されるヒトＡ２ａ受容体の分析に使用した。このアッセイを確立するのに３つのリガンドを使用した。そのリガンドは、以下の通りである。
【０３７３】

アデノシンが増殖培地中に存在することによる情報伝達を防止するために、アデノシンデアミナーゼ（４Ｕ／ｍＬ）をすべてのアッセイで添加した。
【０３７４】
ＩＩ．酵母内の生物学的応答
Ａ２ａ受容体発現プラスミドで形質転換され、Ｇ_αＳＥ１０Ｋ、Ｇ_αＳＤ２２９Ｓ又はＧ_αＳＥ１０Ｋ＋Ｄ２２９Ｓのいずれかを発現する酵母において、フェロモン応答経路を刺激する能力についてＡ２ａ受容体アゴニストを試験した。受容体に依存したリガンドのフェロモン応答経路刺激能力は、酵母の表現型が変化することにより示された。受容体が活性化されると、ヒスチジン要求体からヒスチジン原栄養体に表現型が変化した（ｆｕｓ１−ＨＩＳ３の活性化）。３つの別個の形質転換体を単離し、ヒスチジンの存在下で１晩増殖させた。細胞を洗浄してヒスチジンを除去し、２×１０^６細胞／ｍＬに希釈した。（ヒスチジンを含む）非選択培地又は選択培地（１ｍＭ ＡＴ）上に、４Ｕ／ｍＬのアデノシンデアミナーゼ非存在下又は存在下で、５μＬの各形質転換体を点在させた。平板を３０℃で２４時間増殖させた。ヒスチジン存在下では、受容体^＋（Ｒ^＋）及び受容体⁻（Ｒ⁻）菌株のいずれも、増殖することができた。しかし、ヒスチジン非存在下では、Ｒ^＋細胞だけが増殖した。これらのプレートにリガンドを添加しなかったので、この結果には２通りの説明が可能であった。１つの可能な解釈は、この受容体を有する酵母が、リガンドに依存しない受容体によって媒介される活性化（ＬＩＲＭＡ）のために増殖が有利であったというものである。もう１つの解釈によれば、この酵母はリガンドのアデノシンを合成することができた。これら２通りの可能性を判別するために、このリガンドを分解する酵素であるアデノシンデアミナーゼ（ＡＤＡ）を、増殖中の酵母及び平板に添加した。アデノシンデアミナーゼの存在下では、Ｒ^＋細胞はヒスチジン非存在下でもはや増殖せず、この酵母が実際にリガンドを合成することが示された。
【０３７５】
この解釈を、液中のＡ２ａ増殖アッセイによって確認した。この実験では、Ｒ^＋酵母（Ａ２ａ受容体を発現するＧ_αＳＥ１０Ｋ菌株）を、３通りの密度（１×１０^６細胞／ｍＬ、３×１０^５細胞／ｍＬ、又は１×１０^５細胞／ｍＬ）で、アデノシンデアミナーゼ（４Ｕ／ｍＬ）の存在下又は非存在下で播種した。ＨＩＳ３遺伝子のタンパク質産物であるイミダゾールグリセロール−Ｐデヒドラターゼの競合的拮抗薬である３−アミノ−１，２，４−トリアゾール（ＡＴ）の濃度が増加するにつれ（０、０．１、０．２、又は０．４ｍＭ）、アッセイの厳密性が増した。アデノシンデアミナーゼ及び３−アミノ−１，２，４−トリアゾール酵母の存在下では、増殖は弱まった。しかし、３−アミノ−１，２，４−トリアゾールの非存在下では、アデノシンデアミナーゼはほとんど効果がなかった。したがって、アデノシンデアミナーゼ自体は、フェロモン応答経路に対して直接の効果を持たなかった。
【０３７６】
増殖を測定する別の手法であり、高スループットスクリーニング用に小型化できる手法は、Ａ２ａ受容体リガンドスポットアッセイ（ｓｐｏｔ ａｓｓａｙ）である。Ａ２ａ受容体を発現する（Ａ２ａＲ＋）又はこの受容体を欠く（Ｒ−）Ｇ_αｓＥ１０Ｋ菌株を、ヒスチジン及び４Ｕ／ｍＬアデノシンデアミナーゼ存在下で１晩増殖させた。細胞を洗浄してヒスチジンを除去し、５×１０^６細胞／ｍＬに希釈した。１×１０^６細胞を、４Ｕ／ｍＬアデノシンデアミナーゼ及び０．５又は１．０ｍＭ３−アミノ−１，２，４−トリアゾール（ＡＴ）含有選択平板上に蒔き、１時間乾燥した。５μＬの以下の試薬をこの単層に塗布した：１０ｍＭアデノシン、３８．７ｍＭヒスチジン、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、１０ｍＭ ＰＩＡ又は１０ｍＭ ＮＥＣＡ。細胞を３０℃で２４時間増殖させた。その結果、受容体のない細胞は、ヒスチジンを培地に添加したときのみ増殖することができた。これに対し、Ｒ^＋細胞のみが、Ａ２ａ受容体リガンドＰＩＡ及びＮＥＣＡを点在させた区域で増殖した。この平板はアデノシンデアミナーゼを含有するので、アデノシンを点在させた場合に増殖しなかったことで、アデノシンデアミナーゼが活性であることが確認された。
【０３７７】
ＩＩＩ．ｆｕｓ１ ＬａｃＺアッセイ
酵母の交配経路の活性を定量化するために、ｆｕｓ１ＬａｃＺによるβ−ガラクトシダーゼの合成について測定した。Ｇ_αＳＥ１０Ｋ、Ｇ_αＳＤ２２９Ｓ又はＧ_αＳＥ１０Ｋ＋Ｄ２２９Ｓを発現する酵母菌株を、ヒトＡ２ａ受容体をコードするプラスミド（Ｒ＋）又は受容体を欠くプラスミド（Ｒ−）で形質転換した。形質転換体を単離し、ヒスチジン及び４Ｕ／ｍＬアデノシンデアミナーゼ存在下で１晩増殖させた。１×１０^７細胞を１×１０^６細胞／ｍＬに希釈し、漸増濃度のＮＥＣＡに４時間曝し、その後細胞中のβ−ガラクトシダーゼ活性を測定した。その結果、β−ガラクトシダーゼ活性はＲ−菌株中で本質的に検出されず、一方、Ｇ_αＳＥ１０Ｋ、Ｇ_αＳＤ２２９Ｓ又はＧ_αＳＥ１０Ｋ＋Ｄ２２９Ｓのいずれかを発現するＲ＋菌株中では、ＮＥＣＡの濃度の増加に伴いβ−ガラクトシダーゼ活性量の増大が検出されることが示され、このことから、検出されるβ−ガラクトシダーゼ量が高濃度リガンドへの暴露に応じ投与量に依存して増加することが示された。この投与量依存性は、Ａ２ａ受容体を発現する細胞でのみ観測された。また、Ａ２ａ受容体に対して最も強力なＧ_αｓ構築物は、Ｇ_αｓＥ１０Ｋであった。Ｇ_αＳＤ２２９Ｓ構築物は、Ａ２ａ受容体に対する２番目に強力なＧ_αｓ構築物であり、Ｇ_αｓＥ１０Ｋ＋Ｄ２２９Ｓ構築物は、試験した３個のＧ_αｓ中で最も弱かったが、それでもこの構築物は、容易に検出可能な量のβ−ガラクトシダーゼ活性を刺激した。
【０３７８】
確認したアッセイのさらに詳細な説明は、１９９８年６月２日出願の米国特許出願第０９／０８８９８５号「Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ Ｙｅａｓｔ」（代理人整理番号ＣＰＩ−０９３）を参照されたい（ここで、この内容全体を参照により本明細書に組み込む）。
【０３７９】
ヒトアデノシン受容体サブタイプの薬理学的キャラクタリゼーション
材料及び方法
材料 ［^３Ｈ］−ＤＰＣＰＸ［シクロペンチル−１，３−ジプロピルキサンチン、８−［ジプロピル−２，３−^３Ｈ（Ｎ）］（１２０．０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）；［^３Ｈ］−ＣＧＳ ２１６８０、［カルボキシエチル−^３Ｈ（Ｎ）］（３０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）及び［^１２５Ｉ］−ＡＢ−ＭＥＣＡ（［^１２５Ｉ］−４−アミノベンジル−５’−Ｎ−メチルカルボキサミドアデノシン）（２，２００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）をＮｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ（Ｂｏｓｔｏｎ、ＭＡ）から購入した。ＸＡＣ（キサンチンアミン同族体（ｃｏｎｇｅｎｅｒ））；ＮＥＣＡ（５’−Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン）；及びＩＢ−ＭＥＣＡは、Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（ＲＢＩ、Ｎａｔｉｃｋ、ＭＡ）から購入した。アデノシンデアミナーゼ及び完全プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤をＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ Ｃｏｒｐ．（Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）から購入した。ヒトアデノシン２ａ［ＲＢ−ＨＡ２ａ］；アデノシン２ｂ［ＲＢ−ＨＡ２ｂ］又はアデノシン３［ＲＢ−ＨＡ３］受容体サブタイプを安定に発現するＨＥＫ−２９３細胞由来のメンブレンを、それぞれＲｅｃｅｐｔｏｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｂｅｌｔｓｖｉｌｌｅ、ＭＤ）から購入した。細胞培養試薬は、血清をＨｙｃｌｏｎｅ（Ｌｏｇａｎ、ＵＴ）から購入した以外は、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ、ＮＹ）から購入した。
【０３８０】
酵母菌株：Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ菌株ＣＹ１２６６０［ｆａｒ１＊１４４２ ｔｂｔ１−１ ｆｕｓ１−ＨＩＳ３ ｃａｎ１ ｓｔｅ１４：：ｔｒｐ１：：ＬＹＳ２ ｓｔｅ３＊１１５６ ｇｐａ１（４１）−Ｇαｉ３ ｌｙｓ２ ｕｒａ３ ｌｅｕ２ ｔｒｐ１：ｈｉｓ３；ＬＥＵ２ ＰＧＫｐ−Ｍｆα１リーダー−ｈＡ１Ｒ−ＰＨＯ５ｔｅｒｍ ２ｍｕ−ｏｒｉｇ ＲＥＰ３ Ａｍｐｒ］及びＣＹ８３６２［ｇｐａ１ｐ−ｒＧαｓＥ１０Ｋ ｆａｒ１＊１４４２ ｔｂｔ１−１ ｆｕｓ１−ＨＩＳ３ ｃａｎ１ ｓｔｅ１４：：ｔｒｐ１：ＬＹＳ２ ｓｔｅ３＊１１５６ ｌｙｓ２ ｕｒａ３ ｌｅｕ２ ｔｒｐ１ ｈｉｓ３；ＬＥＵ２ ＰＧＫｐ−ｈＡ２ａＲ ２ｍｕ−ｏｒｉ ＲＥＰ３ Ａｍｐｒ］を上述のように発生させた。
【０３８１】
培養酵母：形質転換した酵母を、２％グルコースを補充したＬｅｕ−Ｔｒｐ［ＬＴ］培地（ｐＨ５．４）で増殖させた。メンブレンを調製するため、２５０ｍＬのＬＴ培地に、３０ｍＬの１晩増殖させた培養物から得た１〜２×１０^６細胞／ｍＬの初発力価を接種し、撹拌による持続的酸化の下で３０℃にてインキュベートした。１６時間増殖後、細胞を遠心分離して収集し、メンブレンを下記のように調製した。
【０３８２】
哺乳動物培養組織：ヒトアデノシン２ａ受容体サブタイプを安定に発現するＨＥＫ−２９３細胞（Ｃａｄｕｓ ｃｌｏｎｅ＃５）を、１０％ウシ胎児血清及び１×ペニシリン／ストレプトマイシンを補充したダルベッコ最少必須培養液（ＤＭＥＭ）中で、５００ｍｇ／ｍＬのＧ４１８抗生物質を用いた選択圧の下、加湿５％ＣＯ_２雰囲気中３７℃で増殖させた。
【０３８３】
酵母細胞メンブレンの調製：２５０ｍＬの培養物を１晩インキュベートした後に、Ｓｏｒｖａｌｌ ＲＴ６０００遠心分離機を用いて２，０００×ｇで遠心分離して収集した。細胞を氷冷水で洗浄し、４℃で遠心分離し、そのペレットを、プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤（緩衝液２５ｍＬ当たり１錠）を補充した１０ｍＬの氷冷溶解緩衝液［５ｍＭトリス−ＨＣ１、ｐＨ７．５；５ｍＭ ＥＤＴＡ、及び５ｍＭ ＥＧＴＡ］に再懸濁した。ガラスビーズ（１７ｇ、４００〜６００メッシュ、Ｓｉｇｍａ）をこの懸濁液に添加し、４℃で５分間激しく撹拌して細胞を粉砕した。３０ｍＬの溶解緩衝液＋プロテアーゼ阻害剤を添加してホモジネートを希釈し、３，０００×ｇで５分間遠心分離した。続いて、そのメンブレンを４５分間３６，０００×ｇ（Ｓｏｒｖａｌｌ ＲＣ５Ｂ、タイプＳＳ３４ローター）でペレット状にした。得られたメンブレンペレットを、プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤（５０ｍＬの緩衝液当たり１錠剤）を補充した５ｍＬのメンブレン緩衝液［５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５；０．６ｍＭ ＥＤＴＡ；及び５ｍＭ ＭｇＣｌ_２］中に再懸濁し、その後の実験用に−８０℃で貯蔵した。
【０３８４】
哺乳動物細胞メンブレンの調製：ＨＥＫ−２９３細胞メンブレンを、既報（Ｄｕｚｉｃ Ｅ等、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６７、９８４４〜９８５２、１９９２）の通りに調製した。簡単に述べると、細胞をＰＢＳで洗浄し、ゴム製ポリスマンで収集した。Ｓｏｒｖａｌｌ ＲＴ６０００遠心分離機を用いて、４℃、２００×ｇで細胞をペレットにした。このペレットを、５ｍＬ／ｍの溶解緩衝液（５ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５；５ｍＭ ＥＤＴＡ；５ｍＭ ＥＧＴＡ；０．１ｍＭフッ化フェニルメチルスルホニル、１０ｍｇ／ｍＬペプスタチンＡ；及び１０ｍｇ／ｍＬアプロチニン）中４℃で再懸濁し、ダンス型ホモジナイザーでホモジナイズした。次いで、この細胞溶解産物を、３６，０００×ｇ（Ｓｏｒｖａｌｌ ＲＣ５Ｂ、タイプＳＳ３４ローター）で４５分間遠心分離し、そのペレットを５ｍＬのメンブレン緩衝液［５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５；０．６ｍＭ ＥＤＴＡ；５ｍＭ ＭｇＣｌ_２；０．１ｍＭフッ化フェニルメチルスルホニル、１０ｍｇ／ｍＬペプスタチンＡ；及び１０ｍｇ／ｍＬアプロチニン）中で再懸濁し、その後の実験用に−８０℃で貯蔵した。
【０３８５】
Ｂｒａｄｆｏｒｄ色素結合法（Ｂｒａｄｆｏｒｄ、Ｍ．：Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．７２：２４８（１９７６））に基づくＢｉｏ−Ｒａｄタンパク質アッセイキットを用いて、酵母及び哺乳動物メンブレン中の全タンパク質濃度を測定した。
【０３８６】
アデノシン１受容体サブタイプ飽和及び競合放射性リガンド結合：ヒトＡ_１受容体サブタイプで形質転換した酵母細胞由来のメンブレンへの飽和及び競合結合を、拮抗薬［^３Ｈ］ＤＰＣＰＸを放射性リガンドとして用いて実施した。メンブレンを濃度１．０ｍｇ／ｍＬに結合緩衝液［１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２；１．０ｍＭ ＥＤＴＡ；０．２５％ＢＳＡ；２Ｕ／ｍＬアデノシンデアミナーゼ、及び１プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤／５０ｍＬ含有５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４］で希釈した。
【０３８７】
飽和結合では、メンブレン（５０μｇ／ウェル）を、漸増濃度の［^３Ｈ］ＤＰＣＰＸ（０．０５〜２５ｎＭ）と共に、最終体積１００μＬの結合緩衝液中、２５℃で１時間、１０μＭ非標識ＸＡＣの非存在下及び存在下、９６−ウェルマイクロタイタープレート中でインキュベートした。
【０３８８】
競合結合では、メンブレン（５０μｇ／ウェル）を、［^３Ｈ］ＤＰＣＰＸ（１．０ｎＭ）と共に、最終体積１００ｍＬの結合緩衝液中、２５℃で１時間、１０μＭ非標識ＸＡＣ又は漸増濃度の競合化合物の非存在下及び存在下、９６−ウェルマイクロタイタープレート中でインキュベートした。
【０３８９】
アデノシン２ａ受容体サブタイプ競合放射性リガンド結合：ヒトＡ２ａ受容体サブタイプを安定して発現するＨＥＫ２９３細胞由来のメンブレン上の競合結合を、アゴニスト［^３Ｈ］ＣＧＳ−２１６８０を放射性リガンドとして用いて実施した。メンブレンを、結合緩衝液［１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２；１．０ｍＭ ＥＤＴＡ；０．２５％ＢＳＡ、２Ｕ／ｍＬアデノシンデアミナーゼ、及び１プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤／５０ｍＬ含有５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４］中に濃度０．２ｍｇ／ｍＬで希釈した。メンブレン（１０μｇ／ウェル）を、［^３Ｈ］ＣＧＳ−２１６８０（１００ｎＭ）と共に、最終体積１００ｍＬの結合緩衝液中、２５℃で１時間、５０μＭ非標識ＮＥＣＡ又は漸増濃度の競合化合物の非存在下及び存在下、９６−ウェルマイクロタイタープレート中でインキュベートした。
【０３９０】
アデノシン３受容体競合放射性リガンド結合：ヒトＡ３受容体サブタイプを安定して発現するＨＥＫ２９３細胞由来のメンブレン上の競合結合を、アゴニスト［^１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡを放射性リガンドとして用いて実施した。メンブレンを、結合緩衝液［１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２；１．０ｍＭ ＥＤＴＡ；０．２５％ＢＳＡ；２Ｕ／ｍＬアデノシンデアミナーゼ、及び１プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤／５０ｍＬ含有５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４］中に濃度０．２ｍｇ／ｍＬで希釈した。メンブレン（１０μｇ／ウェル）を、［^１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡ（０．７５ｎＭ）と共に、最終体積１００μＬの結合緩衝液中、２５℃で１時間、１０μＭ非標識ＩＢ−ＭＥＣＡ又は漸増濃度の競合化合物の非存在下及び存在下、９６−ウェルマイクロタイタープレート中でインキュベートした。
【０３９１】
インキュベーションの最後で、１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２を補充した氷冷５０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）緩衝液を添加して、Ａ_１、Ａ_２ａ、及びＡ_３受容体サブタイプ放射性リガンド結合アッセイを終了し、その後ＦＩＬＴＥＲＭＡＴＥ１９６セルハーベスター（Ｐａｃｋａｒｄ）中で０．５％ポリエチレンイミン中に予め浸漬したガラス繊維フィルター（９６−ウェルＧＦ／Ｂ ＵｎｉＦｉｌｔｅｒｓ、Ｐａｃｋａｒｄ）で素早くろ過した。このフィルタープレートを、５０μＬ／ウェル シンチレーション液（ＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−２０、Ｐａｃｋａｒｄ）で乾燥被覆し、ＴｏｐＣｏｕｎｔ（Ｐａｃｋａｒｄ）でカウントした。アッセイは３回実施した。非特異的結合は、Ａ１Ｒ、Ａ２ａＲ、及びＡ３Ｒ結合アッセイでそれぞれ、結合全体の５．６±０．５％、１０．８±１．４％、及び１５．１±２．６％であった。
【０３９２】
アデノシン２ｂ受容体サブタイプ競合放射性リガンド結合：ヒトＡ２ｂ受容体サブタイプを安定して発現するＨＥＫ２９３細胞由来のメンブレン上の競合結合を、Ａ_１受容体拮抗薬［^３Ｈ］ＤＰＣＰＸを放射性リガンドとして用いて実施した。メンブレンを、結合緩衝液［１．０ｍＭ ＥＤＴＡ；０．１ｍＭベンズアミジン、２Ｕ／ｍＬアデノシンデアミナーゼ含有１０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ−ＫＯＨ、ｐＨ７．４］中に濃度０．３ｍｇ／ｍＬで希釈した。メンブレン（１５μｇ／ウェル）を、［^３Ｈ］ＤＰＣＰＸ（１５ｎＭ）と共に、最終体積１００μＬの結合緩衝液中、２５℃で１時間、１０μＭ非標識ＸＡＣ又は漸増濃度の競合化合物の非存在下及び存在下、９６−ウェルマイクロタイタープレート中でインキュベートした。インキュベーションの最後で、氷冷１０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ−ＫＯＨ（ｐＨ７．４）緩衝液を添加してこのアッセイを終了し、その後Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅ１９６セルハーベスター（Ｐａｃｋａｒｄ）中で０．５％ポリエチレンイミン中に予め浸漬したガラス繊維フィルター（９６ウェルＧＦ／Ｃ ＵｎｉＦｉｌｔｅｒｓ、Ｐａｃｋａｒｄ）で素早くろ過した。このフィルタープレートを、５０μＬ／ウェル シンチレーション液（ＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−２０、Ｐａｃｋａｒｄ）で乾燥被覆し、ＴｏｐＣｏｕｎｔ（Ｐａｃｋａｒｄ）でカウントした。アッセイは３回実施した。非特異的結合は、結合全体の１４．３±２．３％であった。
【０３９３】
［^３Ｈ］ＤＰＣＰＸの特異的結合；［^３Ｈ］ＣＧＳ−２１６８０及び［^１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡを、結合全体と非特異的結合との差として定義した。化合物の阻害割合を、結合全体に対して計算した。競合データを１サイトモデルへの反復カーブフィッティングによって解析し、Ｋ_Ｉ値をＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｚｍ ２．０１ソフトウェアを用いてＩＣ_５０値から計算した（Ｃｈｅｎｇ及びＰｒｕｓｏｆ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２、３０９９〜３１０９、１９７３）。
【０３９４】
結果：
ある種の細胞表面受容体の主要な機能は、適切なリガンドを認識することである。したがって、本発明者らは、リガンド結合親和性を決定して、酵母で発現されるアデノシン１受容体サブタイプが機能的に完全であることを確定した。ヒトアデノシン１受容体サブタイプ構築物で形質転換したＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅから調製した未精製メンブレンは、４．０±０．１９ｎＭのＫ_ｄで［^３Ｈ］ＤＰＣＰＸの特異的な飽和性結合をもたらした。Ｋ_Ｄ及びＢ_ｍａｘ値は飽和等温線から計算され、このデータのスキャッチャード（Ｓｃａｔｃｈａｒｄ）変換から、単一クラスの結合部位が示された。酵母メンブレン調製物中のアデノシン結合部位の密度は、７１６．８±４３．４ｆｍｏｌ／ｍｇメンブレンタンパク質と推算された。
【０３９５】
［^３Ｈ］ＤＰＣＰＸと以下の順位で競合すると予測されるサブタイプ選択的アデノシンリガンド（ＸＡＣ、ＤＰＣＰＸ；ＣＧＳ−１５９４３；Ｃｏｍｐｏｕｎｄ ６００；Ｃｏｍｐｏｕｎｄ １００２；ＮＥＣＡ、（Ｒ）−ＰＩＡ；ＩＢ−ＭＥＣＡ、及びアロキサジン）を用いて、ヒトＡ_１受容体サブタイプで形質転換した組換え酵母細胞の薬理学的サブタイプの諸特性を調べた。これらの化合物を用いて記録した置換曲線は、すべてのリガンドで典型的な急勾配を示し、各リガンドのデータを、単一部位フィッティングによりモデル化することが可能であった。この曲線から算出した個々の化合物の見掛け解離定数（表５）は、他の情報源から得られたこの受容体に対する公表値と一致する。
【０３９６】
【表５】

表６〜１２は、本発明のデアザプリンの有効性及び構造活性特性を示すものである。表１３及び１４は、デアザプリン構造の官能基を調節することによって、ヒトアデノシン受容体部位に対する選択性を実現できることを示している。表１４は、本明細書記載の化合物が、ナノモル以下の活性、及び表１３の化合物に比べて高いＡ_２ｂ受容体選択性を有することも示している。
【０３９７】
【表６】

【表７】

【表８】

【表９】

【表１０】

【表１１】

【表１２】

【表１３】

【表１４】

【表１５】

ＰＣＴ／ＵＳ０１／４５２８０の第１７６−２０１頁は、Ａ_２Ａ受容体に特異的な化合物に関する。
【０３９８】
＜発明の概要＞
本発明はまた、その治療的に有効な量を患者に投与することによって、アデノシンＡ_２Ａに特異的に選択的に結合し、それによって患者におけるＡ_２Ａアデノシン受容体に関連した疾患を治療する化合物に基づいている。治療すべき疾患は、例えば中枢神経系障害、心臓血管系障害、腎障害、炎症性障害、胃腸障害、眼科障害、アレルギー性障害または呼吸器障害に関連している。
【０３９９】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を特徴とする：
【化９６】

ここで、
ＮＲ_１Ｒ_２は、置換または非置換の４〜８員環であり；
Ａｒは、置換または非置換の４〜６員環であり；
Ｒ_４は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、前記置換アルキルはＣ（Ｒ_８）（Ｒ_９）ＸＲ_６であり、ＸはＯ、Ｓ、またはＮＲ_７であり、Ｒ_８およびＲ_９は夫々独立にＨまたはアルキルであり、Ｒ_６およびＲ_７は夫々独立にアルキルまたはシクロアルキルであるか、またはＲ_６、Ｒ_７および窒素が一緒になって置換または非置換の４〜６員環を形成し；
Ｒ_５は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
但し、ＮＲ_１Ｒ_２は、３−アセタミドピペリジノ、３−ヒドロキシピロリジノ、３−メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、３−アミノカルボニルメチル、またはピロリジノではなく；またＮＲ_１Ｒ_２は、Ａｒが４−ピリジルであるときにのみ３−ヒドロキシメチルピペラジノである。
【０４００】
本発明はまた、細胞においてＡ_２ａアデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、前記細胞を上記化合物と接触させることを含んでなることを特徴とする。
【０４０１】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化９７】

ここで、
ＮＲ_１Ｒ_２は、置換もしくは非置換の４〜８員環であり；
Ａｒは、置換もしくは非置換の４〜６員環であり；
Ｒ_４は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、前記置換アルキルは−Ｃ（Ｒ_８）（Ｒ_９）ＸＲ_６であり、ＸはＯ、Ｓ、またはＮＲ_７であり、Ｒ_８およびＲ_９は夫々独立にＨまたはアルキルであり、Ｒ_６およびＲ_７は夫々独立にアルキルまたはシクロアルキルであるか、またはＲ_６、Ｒ_７および窒素が一緒になって置換もしくは非置換の４〜７員環を形成し；
Ｒ_５は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
但し、ＮＲ_１Ｒ_２は３−アセタミドピペラジノ、３−ヒドロキシピロリジノ、３−メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、３−アミノカルボニルメチル、またはピロリジノではなく；またＡｒが４−ピリジルであるときにのみ、ＮＲ_１Ｒ_２は３−ヒドロキシメチルピペラジノである。
【０４０２】
当該化合物の一つの実施形態において、Ａｒは置換もしくは非置換の４〜６員環、フェニル、ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、１，２，４トリアゾール、ピリジン、２（１Ｈ）−ピリドン、４（ｌＨ）−ピリドン、ピラジン，ピリミジンｅ、ピリダジン、イソチアゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、テトラゾール、ナフタレン、テトラリン、ナフチリジン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドール、２，３−ジヒドロインドール、１Ｈ−インドール、インドリン、ベンゾピラゾール、１，３−ベンゾジオキソール、ベンズオキサゾール、プリン、クマリン、クマロン、キノリン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、ベンズイミダゾール、キナゾリン、ピリド［２，３−ｂ］ピラジン、ピリド［３，４ｂ］ピラジン、ピリド［３，２−ｃ］ピリダジン、プリド［３，４−ｂ］−ピリジン、１Ｈ−ピラゾール［３，４−ｄ］ピリミジン、プテリジン、２（１Ｈ）−キノロン、１（２Ｈ）−イソキノロン、１，４−ベンズイソオキサジン、ベンゾチアゾール、キノキサリン、キノリン−Ｎ−オキシド、イソキノリンＮ−オキシド、キノキサリン−Ｎ−オキシド、キナゾリン−Ｎ−オキシド、ベンズオキサジン、フタラジン、シンノリン、または下記構造であり：
【化９８】

ここで、Ｙは炭素または窒素である；
Ｒ_３は、Ｈ、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアリール、ハロゲン、メトキシ、メチルアミノ、メチルチオである。
【０４０３】
当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化９９】

ここで、ｍは１または２であり；Ｒ_Ａ ａｎｄ Ｒ_Ｂは夫々独立にＨ、−ＯＨ、−ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、ヘテロ原子、または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ_３Ｒ_３’であり；Ｒ_３はアリール、置換アリール、またはヘテロアリールであり；Ｒ_３’はアルキルまたはＸＲ”で、ＸはＯまたはＮであり、Ｒ”は置換アルキルまたはアリールである。
【０４０４】
当該化合物のもう一つの実施形態において、Ｒ_ｌＲ_２Ｎは、（Ｄ）−２−アミノカルボニルピロリジノ、（Ｄ）−２−ヒドロキシメチルピロリジノ、（Ｄ）−２−ヒドロキシメチル−トランス−４−ヒドロキシピロリジノ、ピペラジノ、または３−ヒドロキシメチルピペラジノである。
【０４０５】
当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１００】

ここで、ｍは０、１、２、または３であり；Ｙは０、Ｓ、またはＮＲで、ＲはＲ_ＡもしくはＲ_Ｂであり；ここでＲ_ＡおよびＲ_Ｂは夫々独立に、Ｈ、ＯＨ、−ＣＨ_２０Ｈ、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、ヘテロ原子、または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ_３Ｒ_３’であり；Ｒ_３はアリール、置換アリール、またはヘテロアリールであり；Ｒ_３’はアルキルまたはＲ_３”で、ＸはＯまたはＮであり、Ｒ”は置換アルキルまたはアリールである。
【０４０６】
当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０１】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０２】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０３】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０４】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０５】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０６】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０７】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０８】

当該化合物の更にもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１０９】

当該化合物の更なる一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１１０】

本発明は更に、下記構造（Ｖ）を有する化合物を提供する：
【化１１１】

ここで、ＲはＨまたはメチルである。
【０４０７】
化合物Ｖの一つの実施形態において、該化合物は下記構造を有する：
【化１１２】

化合物Ｖのもう一つの実施形態において、該化合物は下記構造を有する：
【化１１３】

本発明はまた、患者においてＡ_２ａアデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、治療上有効な量の化合物ＩＶまたはＶを、該患者に投与することを含む方法を提供する。
【０４０８】
当該方法の一つの実施形態において、該化合物はアデニル酸シクラーゼを刺激することによって前記疾患を治療する。
【０４０９】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記患者は哺乳類である。
【０４１０】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記哺乳類はヒトである。
【０４１１】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記Ａ_２ａアデノシン受容体はパーキンソン病、並びに運動活性、血管拡張、血小板阻害、好中球スーパーオキシド生成、認識障害、老年痴呆に関連した疾患に関連している。
【０４１２】
アデノシンＡ_１、Ａ_２ａ、Ａ_２ｂおよびＡ_３受容体に関連する疾患は、ＷＯ ９９／０６０５３およびＷＯ−０９８２２４６５、ＷＯ−０９７０５１３８、ＷＯ ０９５１１６８１、ＷＯ−０９７３３８７９、ＪＰ−０９２９１０８９、ＰＣＴ／ＵＳ９８／１６０５３および米国特許第５，５１６，８９４号に開示されており、それらの全体の内容を本明細書の一部として援用する。
【０４１３】
本発明はまた、化合物ＩＶまたはＶの水溶性プロドラッグを提供する。該水溶性プロドラッグは、インビボで代謝されて、Ａ_２ａアデノシン受容体を選択的に阻害する活性薬物を生じる。
【０４１４】
当該プロドラッグの一つの実施形態において、前記プロドラッグは、エステラーゼに触媒された加水分解によりインビボで代謝される。
【０４１５】
本発明はまた、前記プロドラッグおよび薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０４１６】
本発明はまた、細胞においてＡ_２ａアデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、該細胞を、化合物ＩＶまたはＶと接触させることを含む方法を提供する。
【０４１７】
当該方法の一つの実施形態において、前記化合物は、前記Ａ_２ａアデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０４１８】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼科用配合剤である。
【０４１９】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は、眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である。
【０４２０】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は全身性配合剤である。
【０４２１】
本発明はまた、患者における胃腸疾患を治療する方法であって、該患者に対して、有効量の化合物ＩＶまたはＶを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０４２２】
当該方法の一つの実施形態において、前記疾患は下痢である。
【０４２３】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０４２４】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記化合物はＡ_２ａアデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０４２５】
本発明は更に、患者における呼吸器疾患を治療する方法であって、前記患者に対して、有効量の化合物ＩＶまたはＶを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０４２６】
当該方法の一つの実施形態において、前記疾患は喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、または上気道障害である。
【０４２７】
当該方法の一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０４２８】
当該方法の一つの実施形態において、前記化合物はＡ_２ａアデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０４２９】
本発明はまた、患者の目に対する損傷を治療する方法であって、前記患者に対して、有効量の化合物ＩＶまたはＶを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０４３０】
当該方法の一つの実施形態において、前記損傷は網膜または視神経乳頭損傷である。
【０４３１】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記損傷は急性または慢性である。
【０４３２】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記損傷は、緑内障、浮腫、貧血、低酸素症または外傷の結果である。
【０４３３】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０４３４】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記化合物はＡ_２ａアデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０４３５】
本発明はまた、治療的有効量の化合物ＩＶまたはＶ、および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０４３６】
当該薬学的組成物の一つの実施形態において、前記治療的有効量は、パーキンソン病、並びに運動活性、血管拡張、血小板阻害、好中球スーパーオキシド生成、認識障害、老年痴呆に関連した疾患を治療するのに効果的なものである。
【０４３７】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼科用配合剤である。
【０４３８】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である。
【０４３９】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、は前記薬学的組成物は全身性配合剤である。
【０４４０】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は手術用灌注溶液である
本発明はまた、化合物ＩＶおよびＶ並びに何れかのドパミンエンハンサを含む、パーキンソン病のための併用療法を提供する。
【０４４１】
本発明は更に、化合物ＩＶおよびＶ並びに何れかの細胞傷害剤を含む、癌のための併用療法を提供する。
【０４４２】
本発明は更に、化合物ＩＶまたはＶ並びにプロスタグランジンアゴニスト、ムスカリン性アゴニスト、またはβ２アンタゴニストを含む、緑内障のための併用療法を提供する。
【０４４３】
本発明はまた、患者においてＡ_２ａアデノシン受容体に関連した疾患を治療するための包装された薬学的組成物であって：（ａ）治療上有効な量の化合物ＩＶまたはＶを保持する容器と；（ｂ）患者において前記疾患を治療するための前記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０４４４】
本発明はまた、化合物ＩＶを調製する方法であって：
（ａ）以下の二つを反応させて、
【化１１４】

次式の化合物を得る工程と；
【化１１５】

ここで、Ｐは除去可能な保護基である
（ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１１６】

（ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１１７】

（ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物をＮＨＲ_１Ｒ_２で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１１８】

を具備する方法を提供し、ここで、
ＮＲ_１Ｒ_２は、置換もしくは非置換の４〜８員環であり；
Ａｒは、置換もしくは非置換の４〜６員環であり；
Ｒ_４は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、ここで前記置換アルキルは−Ｃ（Ｒ_８）（Ｒ_９）ＸＲ_６であり、Ｘは０、Ｓ、またはＮＲ−であり、Ｒ_８およびＲ_９は夫々独立にＨまたはアルキルであり、Ｒ_６およびＲ_７は夫々独立にアルキルまたはシクロアルキルであるか、またはＲ_６、Ｒ_７および窒素は一緒になって置換もしくは非置換の４〜７員環を形成し；
Ｒ_５は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
但し、ＮＲ_１Ｒ_２は３−アセタミドピペラジノ、３−ヒドロキシピロリジノ、３−メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、３−アミノカルボニルメチル、またはピロリジノではなく；またＮＲ_１Ｒ_２は、Ａｒが４−ピリジルであるときにのみ３−ヒドロキシメチルピペラジノである。
【０４４５】
本発明は更に、化合物Ｖの調製方法であって：
（ａ）以下の二つを反応させて、
【化１１９】

次式の化合物を得る工程と；
【化１２０】

ここで、Ｐは除去可能な保護基である
（ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１２１】

（ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１２２】

（ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物を、最初にジメチルアミンおよびホルムアルデヒドで処理し、次いでＮ−メチルベンジルアミンで処理し、最後にＮＨ_２Ｒ_１で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１２３】

を具備する方法を提供し、ここで、
Ｒ_１はアセタミドエチルであり；Ａｒは４−ピリジルであり；ＲはＨまたはメチルであり；Ｒ_５はＮ−メチル−Ｎ−ベンジルアミノメチルである。
【０４４６】
ここで使用する「化合物がＡ_２ａ選択的である」とは、該化合物が、アデノシンＡ_２ａに対して、アデノシンＡ_１、Ａ_２ｂまたはＡ_３に対する結合定数より少なくとも５倍高い結合定数を有することを意味する。
【０４４７】
以下の実施例により本発明を更に説明するが、これらは如何なる意味でも更に限定するものとして解釈されるべきではない。背景の節において引用されたものを含めて、この出願の全体を通して引用された全ての参照文献、継続中の特許出願および発行された特許出願は、本明細書の一部をなすものとして本願に援用される。以下の例を通して使用されるモデルはモデルとして許容され、またこれらモデルにおける薬効の実証は、ヒトにおける薬効を予測させるものである。
【０４４８】
本発明は、以下の実験の詳細から更に良く理解されるであろう。しかし、ここで議論される特定の方法および結果は、特許請求の範囲において更に十分に既述された発明の単なる例示であることを、当業者は容易に理解するであろう。
【０４４９】
例２２：アデノシンＡ_２ａアンタゴニスト，化合物１６０１，１６０２，および１６０３の合成
【化１２４】

化合物２６（１０．９３ｇ，５０．７６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（６７ｍＬ）中に溶解させた。４−アミジノピリジン塩酸塩（８．０ｇ，５０．７６ｍｍｏｌ）およびＤＢＵ（１５．４ｇ，１０１．５ｍｍｏｌ）を連続的に添加し、反応物を８５℃にまで加熱した。２２時間後、反応物を室温にまで冷却し、ＤＭＦを真空下で除去した。暗色の油状物を２Ｍ ＨＣｌ（８０ｍＬ）で希釈した。反応物を静置した。２時間後、溶液を１０℃にまで冷却し、濾過した。固体を冷水で洗浄し、乾燥させて７．４０ｇの黄色の固体，化合物２７（６９％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ） ｄ ６．５８（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．６），９．００（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），１２．３５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：２１２．８（Ｍ^＋＋１）。
【０４５０】
化合物２７（７．４ｍｍｏｌ，２９．８ｍｍｏｌ）をＰＯＣｌ_３で希釈し、１０５℃にまで加熱した。１８時間後、反応物を室温にまで冷却し、ＰＯＣｌ_３を真空下で除去する。濃い暗色の油状物をＭｅＯＨ（７５ｍＬ）で希釈し、続いてエーテル（１２０ｍＬ）で希釈する。非晶質の赤色の固体を濾過し、エーテルで洗浄して３．８２ｇの赤色の固体を得た。粗製の固体，化合物２８をおよを８０％の純度で得、これをさらに精製せずに次の反応に用いる。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）ｄ ６．５８（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．６），９．００（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），１２．３５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：２１２．８（Ｍ^＋＋１）。
【０４５１】
化合物１６０１：ＤＭＳＯ（５ｍＬ）およびＤ−プロリノール（５００ｍｇ，４．９４ｍｍｏｌ）を化合物２８（５００ｍｇ，２．１ｍｍｏｌ）に添加した。反応物を１２０℃にまで加熱した。１８時間後、反応物を室温にまで冷却し、ＥｔＯＡｃおよびＨ_２Ｏで希釈した。層を分離させ、水層をＥｔＯＡｃで抽出した（２ｘ）。合体した有機相を、Ｈ２Ｏ（２ｘ）、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して２００ｍｇの黄褐色の固体を得た。この固体をＥｔＯＡｃから再結晶化させ、８２ｍｇの黄褐色の固体（１３％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ） ｄ ２．０５（ｍ，４Ｈ），３．４３（ｍ，１Ｈ），３．７０−４．００（ｍ，３Ｈ），４．５０（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．９２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），６．６２（ｍ，１Ｈ），７．２２（ｍ，１Ｈ），８．２２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），６．６４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），ＭＳ（ＥＳ）：２９６．０（Ｍ^＋１），融点＝２１０−２２０℃（ｄｅｃｏｍｐ．）。
【０４５２】
化合物１６０２：クロマトグラフィ（シリカ，９：１ ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ）により１０ｍｇの黄褐色の固体（９２％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ_６−ＤＭＳＯ） ｄ ２．００−２．５０（ｍ，４Ｈ），４．０５（ｍ，１Ｈ），４．２１（ｍ，１Ｈ），６．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），７．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），８．３７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），８．５６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ）。ＭＳ（ＥＳ）：３０９．１（Ｍ^＋＋１）。
【０４５３】
化合物１６０３：クロマトグラフィ（シリカ， ２０：１ ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により１３５ｍｇの黄褐色の固体（５３％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ） ｄ ２．００（ｍ，４Ｈ），３．４３（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．７４（ｂｒ ｓ，２Ｈ），３．８７（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．４９（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．９３（ｍ，１Ｈ），６．５６（ｍ，１Ｈ），７．１２（ｍ，１Ｈ），７．４０（ｍ，３Ｈ），８．３４（ｍ，２Ｈ），１１．６２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：２９５．１（Ｍ^＋＋１）。
【０４５４】
化合物１６０５：５０ｍＬ ＲＢＦ中で、６０ｍｇの２−（４’−ピリジル）−４−クロロピリミジノピロールＨＣｌ 塩を、２ｍＬ 無水ＤＭＳＯ中に溶解させた。これに３−（Ｒ）−ヒドロキシ−（Ｄ）−プロリノールＴＦＡ 塩（３８０ｍｇ）および５００ｍｇ 重炭酸ナトリウムを添加した。次いでこの混合物を窒素ガスを用いて５分フラッシュし、１３０℃にまで加熱した。２時間後、反応物を室温にまで冷却し、ＤＭＳＯを真空下で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）および重炭酸ナトリウム飽和水溶液（１５ｍＬ）の間で分配した。有機層を分離し、塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させた。溶剤を除去した後、粗成物を分取用ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ＝９５／５）により精製して３５ｍｇ（５０％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）（２．３−２．５（１Ｈ），３．４−３．８（３Ｈ），４．４−４．６（２Ｈ），６．４（１Ｈ）；７．１（１Ｈ）；８．２（ｄ，２Ｈ）；８．７（ｄ，２Ｈ）；１１．０（１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：３１２（Ｍ^＋＋１）。
【０４５５】
例２３：アデノシンＡ_２ａアンタゴニスト、化合物１６０６の合成
【化１２５】

化合物２８（２００ｍｇ）を、ＤＭＦ（３０ｍＬ）、（，（−ジメチルグリシンメチルエステル（２ｍＬ水中に７３ｍｇ ＨＣｌ 塩）および５００ｍｇ 重炭酸ナトリウムを用いて処理した。１８時間後、ＤＭＦを真空下で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）および重炭酸ナトリウム飽和水溶液（１５ｍＬ）の間で分配した。有機層を塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。クロマトグラフィ（シリカ，１０：４ ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により１５０ｍｇの純粋な生成物，化合物２９（６９％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３），（１．４（ｓ，６Ｈ），３．８（ｓ，３Ｈ）；３．９（ｓ，２Ｈ）；６．４（ｓ，１Ｈ）；７．４−７．５（ｍ，３Ｈ）；８．４（ｍ，２Ｈ）；９．８（ｓ，１Ｈ）。
【０４５６】
化合物１６０６：
手順は化合物１６０５（７２％）と同様である。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３），（１．３（ｓ，６Ｈ），１．７−１．９（ｍ，２Ｈ）；２．０５−２．３０（ｍ，２Ｈ）；３．６−４．１（ｍ，１１Ｈ）；４．８０−４．９５（ｍ，１Ｈ）；６．４（ｓ，１Ｈ）；７．４−７．６（ｍ，３Ｈ）；８．３−８．４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），１０（ｓ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：４２４．０（Ｍ^＋＋１）。
【０４５７】
同様の手法で次の化合物を合成することができる。
【０４５８】
化合物１６００：（５１％）。ＭＳ（ＥＳ）：３２６．０（Ｍ^＋＋１）。
【０４５９】
化合物１６０７：^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３），（１．４０−１．８０（ｍ，５Ｈ），２．８０−３．５０（ｍ，３Ｈ），４．６０−４．８０（ｍ，３Ｈ），６．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），７．２６（ｍ，１Ｈ），８．２１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），８．６５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），１１．９０（ｓ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：３１０．１（Ｍ^＋＋１）。
【０４６０】
化合物１６０８：（６４％）。^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ），（１．７５（ｓ，３Ｈ），２．１１（ｓ，３Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），３．５６（ｍ，６Ｈ），７．２３−７．４１（ｍ，５Ｈ），８．００（ｂｒ ｓ，１Ｈ），８．２３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），８．６３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），８．８２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），１１．５６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：４４４．０（Ｍ^＋＋１）。
【０４６１】
化合物１６０４：^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）（３．４０（ｍ，４Ｈ），４．２９（ｍ，４Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），７．５−７．２（ｍ，３Ｈ），７．９０（ｄ，２Ｈ），８．３９（ｄ，２Ｈ），８．６１（ｄ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：５７．０（Ｍ^＋＋１）。
【０４６２】
表１６ アデノシンＡ_２ａ 受容体選択的化合物
^＊他の３つのサブタイプよりも、少なくとも５倍選択的である。
【０４６３】
【表１６】

ＰＣＴ／ＵＳ０１／４５２８０の第２０２−２５６頁は、Ａ_３受容体に特異的な化合物に関する。
【０４６４】
＜発明の概要＞
本発明はまた、その治療的に有効な量を患者に投与することによって、アデノシンＡ_３に特異的に選択的に結合し、それによって患者におけるＡ_３アデノシン受容体に関連した疾患を治療する化合物に基づいている。治療すべき疾患は、例えば喘息、過敏症、鼻炎、枯草熱、血清病、アレルギー性血管炎、アトピー性皮膚炎、皮膚炎、乾癬、湿疹、突発性肺繊維症、好酸性塩素膀胱炎（ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｌｉｃ ｃｈｌｏｒｅｃｙｓｔｉｔｉｓ）、慢性気道炎、過好酸性症候群、好酸性胃腸炎、浮腫、蕁麻疹、好酸性心筋症、偶発性血管性浮腫、炎症性腸疾患、潰瘍性結腸炎、アレルギー性肉芽腫、癌腫症、好酸性肉芽腫、家族性組織球増殖症（ｆａｍｉｌｉａｌ ｈｉｓｔｉｏｃｙｔｏｓｉｓ）、高血圧症、肥満細胞脱顆粒、腫瘍、癌性低酸素症（ｃａｒｃｉａｃ ｈｙｐｏｘｉａ）、脳虚血、多尿症、腎不全、神経疾患、精神障害、認識障害、心筋虚血、気管支収縮、関節炎、自己免疫疾患、クローン病、グレーブ病（Ｇｒａｖｅ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、糖尿病、多発性硬化症、貧血、乾癬、妊娠障害、紅斑性狼蒼、再灌流障害、脳細動脈直径（ｂｒａｉｎ ａｒｔｅｒｉｏｌｅ ｄｉａｍｅｔｅｒ）、アレルギー性媒体放出、硬皮症、発作、全身虚血（ｇｌｏｂａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ）、中枢神経系障害、心血管障害、腎障害、炎症性疾患、胃腸障害、眼障害、アレルギー性障害、呼吸器障害または免疫障害に関連している。
【０４６５】
本発明はまた、下記構造を有する化合物を特徴とする：
【化１２６】

ここで、Ｒ_１はＨであり、またＲ_２はシクロプロピルメチルアミノカルボニルエチル、ｃｉｓ−３−ヒドロキシシクロペンチル、アセタミドブチル、メチルアミノカルボニルアミノブチル、エチルアミノカルボニルアミノプロピル、メチルアミノカルボニルアミノプロピル、２−アセチルアミノ３−メチルブチル、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノカルボニルアミノエチル、チオアセタミドエチル、３−アミノアセチルオキシシクロペンチル、３ヒドロキシシクロペンチル、２−ピロリルカルボニルアミノエチル、２−イミダゾリジノンエチル、ｌ−アミノカルボニル−２−メチルプロピル、１−アミノカルボニル−２−フェニルエチル、３−ヒドロキシアゼチジノ、２−イミダゾリルエチル、アセタミドエチル、１−（Ｒ）−フェニル−２−ヒドロキシエチル、Ｎ−メチルアミノカルボニルピリジル−２−メチルであるか、またはＲ_１、Ｒ_２および窒素が一緒になって３−アセタミドピペラジノ、３−ヒドロキシピロリジノ、３−メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、３−アミノカルボニルメチルピロリジノ、もしくは３−ヒドロキシメチルピペラジノを形成し；
Ｒ_３は、置換もしくは非置換の４〜６員環、ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、１，２，４−トリアゾール、ピリジン、２（１Ｈ）−ピリドン、４（１Ｈ）−ピリドン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、イソチアゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、テトラゾール、ナフタレン、テトラリン、ナフチリジン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドール、２，３−ジヒドロインドール、１Ｈ−インドール、インドリン、ベンゾピラゾール、１，３−ベンゾジオキソール、ベンズオキサゾール、プリン、クマリン、クロノン、キノリン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、ベンズイミダゾール、キナゾリン、ピリド［２，３−ｂ］ピラジン、ピリド［３，４−ｂ］ピラジン、ピリド［３，２−ｃ］ピリダジン、プリド［３，４−ｂ］−ピリジン、１Ｈ−ピラゾール［３，４−ｄ］ピリミジン、プテリジン、２（１Ｈ）−キノロン、１（２Ｈ）−イソキノロン、１，４−ベンズイソオキサジン、ベンゾチアゾール、キノキサリン、キノリン−Ｎ−オキシド、イソキノリンＮ−オキシド、キノキサリン−Ｎ−オキシド、キナゾリン−Ｎ−オキシド、ベンズオキサジン、フタラジン、またはシンノリンであり；
Ｒ_５は、Ｈ、アルキル、置換 アルキル、またはシクロアルキルであり；
Ｒ_６は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、または置換 アリールである。
【０４６６】
本発明はまた、細胞内においてアデノシンＡ_３の活性を阻害する方法を特徴とし、該方法は、前記細胞を上記の化合物に接触させることを含む。
【０４６７】
典型的なプラクティスは当業者に既知である。
【０４６８】
本発明のデアザプリンを調製するための典型的な合成スキームは、下記のスキームＩに概説されている。
【０４６９】
本発明はまた、化合物ＩＶを調製する方法であって：
（ａ）以下の二つを反応させて、
【化１２７】

次式の化合物を得る工程と；
【化１２８】

ここで、Ｐは除去可能な保護基である
（ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１２９】

（ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３０】

（ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物をＮＨＲ_１Ｒ_２で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３１】

を具備する方法を提供し、ここで、
Ｒ_１はＨであり、Ｒ_２はシクロプロピルメチルアミノカルボニルエチル、ｃｉｓ−３−ヒドロキシシクロペンチル、アセタミドブチル、メチルアミノカルボニルアミノブチル、エチルアミノカルボニルアミノプロピル、メチルアミノカルボニルアミノプロピル、２−アセチルアミノ−３−メチルブチル、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノカルボニルアミノエチル、チオアセタミドエチル、３−アミノアセチルオキシシクロペンチル、３−ヒドロキシシクロペンチル、２−ピロリルカルボニルアミノエチル、２−イミダゾリジノンエチル、ｌ−アミノカルボニル−２−メチルプロピル、１−アミノカルボニル−２−フェニルエチル、３−ヒドロキシアゼチジノ、２−イミダゾリルエチル、アセタミドエチル、１−（Ｒ）−フェニル−２−ヒドロキシエチル、Ｎ−メチルアミノカルボニルピリジル−２−メチルであるか、またはＲ_１、Ｒ_２および窒素が一緒になって３−アセタミドピペラジノ、３−ヒドロキシピロリジノ、３−メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、３−アミノカルボニルメチルピロリジノ、もしくは３−ヒドロキシメチルピペラジノを形成し；
Ｒ_３は、置換もしくは非置換の４〜６員環であり；
Ｒ_５は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
Ｒ_６は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、または置換アリールである。
【０４７０】
本発明はまた、化合物Ｖを調製する方法であって：
（ａ）以下の二つを反応させて、
【化１３２】

次式の化合物を得る工程と；
【化１３３】

ここで、Ｐは除去可能な保護基である
（ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３４】

（ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３５】

（ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物をＮＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）ｍＣＨ_２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ_ｌで処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３６】

を具備する方法を提供し、ここで、
ｍは、０、１、または２であり；
Ｒ_１は、シクロプロピルメチル、メチル、メチルアミノ、またはアミノメチルであり；
Ｒ_２は、アリール、置換アリール、ヘテロアリールであり；
Ｒ_５は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
Ｒ_６は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、該置換アルキルは−Ｃ（Ｒ_９）（Ｒ_１０）ＮＲ_７Ｒ_８であり、Ｒ_９およびＲ_１０はそれぞれＨまたはアルキルであり、Ｒ_７およびＲ_８はそれぞれアルキルまたはシクロアルキルであるか、またはＲ_７、Ｒ_８および窒素が一緒になって４〜７員の環系を形成する。
【０４７１】
本発明はまた、化合物ＩＶを調製する方法であって：
（ａ）以下の二つを反応させて、
【化１３７】

次式の化合物を得る工程と；
【化１３８】

ここで、Ｐは除去可能な保護基である
（ｂ）工程ａ）の生成物を環化条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１３９】

（ｃ）工程ｂ）の生成物を適切な条件下で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１４０】

（ｄ）工程ｃ）の塩素化生成物を
【化１４１】

で処理して、次式の化合物を得る工程と；
【化１４２】

を具備する方法を提供し、ここで、
Ｒ_２は、非置換のアリールであり；
Ｒ_５は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
Ｒ_６は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、該置換アルキルは−Ｃ（Ｒ_９）（Ｒ_１０）ＮＲ_７Ｒ_８であり、Ｒ_９およびＲ_１０はそれぞれＨまたはアルキルであり、Ｒ_７およびＲ_８はそれぞれアルキルまたはシクロアルキルであるか、またはＲ_７、Ｒ_８および窒素が一緒になって４〜７員の環系を形成する
本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１４３】

ここで、
Ｒ_１はＨであり、Ｒ_２はシクロプロピルメチルアミノカルボニルエチル、ｃｉｓ−３−ヒドロキシシクロペンチル、アセタミドブチル、メチルアミノカルボニルアミノブチル、エチルアミノカルボニルアミノプロピル、メチルアミノカルボニルアミノプロピル、２−アセチルアミノ３−メチルブチル、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノカルボニルアミノエチル、チオアセタミドエチル、３−アミノアセチルオキシシクロペンチル、３−ヒドロキシシクロペンチル、２−ピロリルカルボニルアミノエチル、２−イミダゾリジノンエチル、ｌ−アミノカルボニル−２−メチルプロピル、１−アミノカルボニル−２−フェニルエチル、３−ヒドロキシアゼチジノ、２−イミダゾリルエチル、アセタミドエチル、１−（Ｒ）−フェニル−２−ヒドロキシエチル、Ｎ−メチルアミノカルボニルピリジル−２−メチルであるか、またはＲ_１、Ｒ_２および窒素原子が一緒になって、３−アセタミドピペラジノ、３−ヒドロキシピロリジノ、３−メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、３−アミノカルボニルメチルピロリジノ、もしくは３−ヒドロキシメチルピペラジノであり；
Ｒ_３は、置換もしくは非置換のベンゼン、ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、１，２，４−トリアゾール、ピリジン、２（１Ｈ）−ピリドン、４（ｌＨ）−ピリドン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、イソチアゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、テトラゾール、ナフタレン、テトラリン、ナフチリジン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドール、２，３−ジヒドロインドール、１Ｈ−インドール、インドリン、ベンゾピラゾール、１，３−ベンゾジオキソール、ベンズオキサゾール、プリン、クマリン、クマロン、キノリン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、ベンズイミダゾール、キナゾリン、ピリド［２，３−ｂ］ピラジン、ピリド［３，４−ｂ］ピラジン、ピリド［３，２−ｃ］ピリダジン、プリド［３，４−ｂ］−ピリジン、１Ｈ−ピラゾール［３，４−ｄ］ピリミジン、プテリジン、２（１Ｈ）−キノロン、１（２Ｈ）−イソキノロン、１，４−ベンズイソオキサジン、ベンゾチアゾール、キノキサリン、キノリン−Ｎ−オキシド、イソキノリン−Ｎ−オキシド、キノキサリン−Ｎ−オキシド、キナゾリン−Ｎ−オキシド、ベンズオキサジン、フタラジン、またはシンノリンであり；
Ｒ_５は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
Ｒ_６は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、または置換アリールである。
【０４７２】
当該化合物の一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１４４】

当該化合物のもう一つの実施形態において、Ｒ_３はフェニルである。
【０４７３】
当該化合物のもう一つの実施形態において、Ｒ_５は水素またはメチルである。
【０４７４】
当該化合物のもう一つの実施形態において、Ｒ６は水素、メチル、フェニル、３−クロロフェニルオキシメチル、またはトランス−２−フェニルアミノメチルピロリジノメチルである。
【０４７５】
本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する。
【０４７６】
【化１４５】

ここで、
ｍは、０、１、または２であり；
Ｒ_１は、シクロプロピルメチル、メチル、メチルアミノ、またはアミノメチルであり；
Ｒ_２は、アリール、置換アリール、またはヘテロアリールであり；
Ｒ_３は、Ｈ、アルキル、置換 アルキル、またはシクロアルキルであり；
Ｒ_６は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、ここで該置換アルキルは−Ｃ（Ｒ_９）（Ｒ_１０）ＮＲ_７Ｒ_８であり、Ｒ_９およびＲ_１０はそれぞれＨまたはアルキルであり、Ｒ_７およびＲ_８はそれぞれアルキルもしくはシクロアルキルであるか、またはＲ_７、Ｒ_８および窒素原子が一緒になって４〜７員の環系を形成する。
【０４７７】
化合物Ｖの一つの実施形態において、ｍは０であり、Ｒ_２はフェニルである。
【０４７８】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、ｍは１であり、Ｒ_２はフェニルである。
【０４７９】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、ｍは２であり、Ｒ_２はフェニルである。
【０４８０】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、Ｒ_５およびＲ_６はメチルである。
【０４８１】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、Ｒ_５およびＲ_６はメチルである。
【０４８２】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、Ｒ_５およびＲ_６はメチルである。
【０４８３】
化合物Ｖのもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１４６】

化合物Ｖのもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１４７】

化合物Ｖのもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１４８】

化合物Ｖのもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１４９】

化合物Ｖのもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１５０】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する。
【０４８４】
【化１５１】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する。
【０４８５】
【化１５２】

ここで、
Ｒ_２は、非置換アリールであり；
Ｒ_５は、Ｈ，アルキル、置換アルキル、またはシクロアルキルであり；
Ｒ_６は、Ｈ，アルキル、置換アルキル、アリール、アリールアルキル、アミノ、置換アリールであり、ここで前記置換アルキルは−Ｃ（Ｒ_９）（Ｒ_１０）ＮＲ_７Ｒ_８であり、Ｒ_９およびＲ_１０はそれぞれＨまたはアルキルであり、Ｒ_７およびＲ_８はそれぞれアルキルもしくはシクロアルキルであるか、またはＲ_７、Ｒ_８および窒素原子が一緒になって４〜７員の環系を形成する。
【０４８６】
化合物ＩＶの一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１５３】

化合物１３０９の一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１５４】

化合物１３０９のもう一つの実施形態において、当該化合物は下記の構造を有する：
【化１５５】

本発明はまた、下記構造を位有する化合物を提供する：
【化１５６】

ここで、
Ｒ_１は、３−ヒドロキシシクロペンチルエチルアミノカルボニルアミノプロピル、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノカルボニルアミノエチル、チオアセタミドエチル、３−アミノアセチルオキシシクロペンチル、３−ヒドロキシシクロペンチル、２−ピロリルカルボニルアミノエチル、２−イミダゾリジノンエチル、ｌ−アミノカルボニル−２−メチルプロピル、１−アミノカルボニル−２−フェニルエチル、３−ヒドロキシアゼチジノ、２−イミダゾリルエチル、アセタミドエチル、１−（Ｒ）−フェニル−２−ヒドロキシエチル、またはＮ−メチルアミノカルボニルピリジル−２−メチルであり；
Ｒ_３およびＲ_４は、独立にＨ、置換もしくは非置換のアルキル、またはアリールである。
【０４８７】
当該化合物の一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１５７】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１５８】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１５９】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６０】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６１】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６２】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６３】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６４】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６５】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６６】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６７】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６８】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１６９】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７０】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７１】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７２】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７３】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７４】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７５】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７６】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７７】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７８】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１７９】

ここで、
Ｒ_１、Ｒ_２および窒素は一緒になって、３−ヒドロキシピロリジノ、３−メチルオキシカルボニルメチルピロリジノ、３−アミノカルボニルメチルピロリジノ、または３−ヒドロキシメチルピペラジノであり；
Ｒ_３およびＲ_４は、独立にＨ、置換もしくは非置換のアルキル、またはアリールである。
【０４８８】
当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８０】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８１】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８２】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８３】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８４】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８５】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８６】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８７】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８８】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１８９】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１９０】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１９１】

当該化合物のもう一つの実施形態において、該化合物は下記の構造を有する：
【化１９２】

本発明はまた、患者においてＡ_３アデノシン受容体に関連した疾患を治療する
方法であって、治療上有効な量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかを、該患者に投与することを含む方法を提供する。
【０４８９】
当該方法の一つの実施形態において、前記患者は哺乳類である。
【０４９０】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記哺乳類はヒトである。
【０４９１】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記Ａ_３アデノシン受容体は、中枢神経系障害、心臓血管系障害、喘息、喘息、過敏症、鼻炎、枯草熱、血清病、アレルギー性血管炎、アトピー性皮膚炎、皮膚炎、乾癬、湿疹、突発性肺繊維症、好酸性塩素膀胱炎（ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｌｉｃ ｃｈｌｏｒｅｃｙｓｔｉｔｉｓ）、慢性気道炎、過好酸性症候群、好酸性胃腸炎、浮腫、蕁麻疹、好酸性心筋症、偶発性血管性浮腫、炎症性腸疾患、潰瘍性結腸炎、アレルギー性肉芽腫、癌腫症、好酸性肉芽腫、家族性組織球増殖症（ｆａｍｉｌｉａｌ ｈｉｓｔｉｏｃｙｔｏｓｉｓ）、高血圧症、肥満細胞脱顆粒、腫瘍、癌性低酸素症（ｃａｒｃｉａｃ ｈｙｐｏｘｉａ）、脳虚血、多尿症、腎不全、神経疾患、精神障害、認識障害、心筋虚血、気管支収縮、関節炎、自己免疫疾患、クローン病、グレーブ病（Ｇｒａｖｅ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、糖尿病、多発性硬化症、貧血、乾癬、妊娠障害、紅斑性狼蒼、再灌流障害、脳細動脈直径（ｂｒａｉｎ ａｒｔｅｒｉｏｌｅ ｄｉａｍｅｔｅｒ）、アレルギー性媒体放出、硬皮症、発作、全身虚血（ｇｌｏｂａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ）、中枢神経系障害、心血管障害、腎障害、炎症性疾患、胃腸障害、眼障害、アレルギー性障害、呼吸器障害または免疫障害に関連している。
【０４９２】
アデノシンＡ_１、Ａ_２ａ、Ａ_２ｂおよびＡ_３受容体に関連する疾患は、ＷＯ ９９／０６０５３およびＷＯ−０９８２２４６５、ＷＯ−０９７０５１３８、ＷＯ ０９５１１６８１、ＷＯ−０９７３３８７９、ＪＰ−０９２９１０８９、ＰＣＴ／ＵＳ９８／１６０５３および米国特許第５，５１６，８９４号に開示されており、それらの全体の内容を本明細書の一部として援用する。
【０４９３】
本発明はまた、化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかの水溶性プロドラッグを提供する。該水溶性プロドラッグは、インビボで代謝されて、Ａ_２ａアデノシン受容体を選択的に阻害する活性薬物を生じる。
【０４９４】
当該プロドラッグの一つの実施形態において、前記プロドラッグは、エステラーゼに触媒された加水分解によりインビボで代謝される。
【０４９５】
本発明はまた、前記プロドラッグおよび薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０４９６】
本発明はまた、細胞においてＡ_２ａアデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、該細胞を、化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかと接触させることを含む方法を提供する。
【０４９７】
当該方法の一つの実施形態において、前記化合物は、前記Ａ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０４９８】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼科用配合剤である。
【０４９９】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は、眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である。
【０５００】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は全身性配合剤である。
【０５０１】
本発明はまた、患者における胃腸疾患を治療する方法であって、該患者に対して、有効量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０５０２】
当該方法の一つの実施形態において、前記疾患は下痢である。
【０５０３】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０５０４】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記化合物はＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０５０５】
本発明は更に、患者における呼吸器疾患を治療する方法であって、前記患者に対して、有効量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０５０６】
当該方法の一つの実施形態において、前記疾患は喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、または上気道障害である。
【０５０７】
当該方法の一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０５０８】
当該方法の一つの実施形態において、前記化合物はＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０５０９】
本発明はまた、患者の目に対する損傷を治療する方法であって、前記患者に対して、有効量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかを投与することを含んでなる方法を提供する。
【０５１０】
当該方法の一つの実施形態において、前記損傷は網膜または視神経乳頭損傷である。
【０５１１】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記損傷は急性または慢性である。
【０５１２】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記損傷は、緑内障、浮腫、貧血、低酸素症または外傷の結果である。
【０５１３】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記患者はヒトである。
【０５１４】
当該方法のもう一つの実施形態において、前記化合物はＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである。
【０５１５】
本発明はまた、治療的有効量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れか、および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０５１６】
当該薬学的組成物の一つの実施形態において、前記治療的有効量は、呼吸器障害または胃腸障害を治療するために有効である。
【０５１７】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記胃腸障害は下痢である。
【０５１８】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記呼吸器障害は喘息、アレルギー性鼻炎、または慢性閉塞性肺疾患である。
【０５１９】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼科用配合剤である。
【０５２０】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である。
【０５２１】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は全身性配合剤である。
【０５２２】
当該薬学的組成物のもう一つの実施形態において、前記薬学的組成物は手術用灌注溶液である。
【０５２３】
本発明はまた、患者においてＡ_２ａアデノシン受容体に関連した疾患を治療するための包装された薬学的組成物であって：（ａ）治療上有効な量の化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、またはＶＩＩの何れかを保持する容器と；（ｂ）患者において前記疾患を治療するための前記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０５２４】
式化合物ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、およびＶＩＩにより表される化合物は、スキームＩ〜ＩＸによって合成することができる。
【０５２５】
ここで使用する「化合物がＡ_３選択的である」とは、該化合物が、アデノシンＡ_３に対して、アデノシンＡ_１、Ａ_２ｂまたはＡ_２ｂに対する結合定数より少なくとも５倍高い結合定数を有することを意味する。
【０５２６】
以下の実施例により本発明を更に説明するが、これらは如何なる意味でも更に限定するものとして解釈されるべきではない。背景の節において引用されたものを含めて、この出願の全体を通して引用された全ての参照文献、継続中の特許出願および発行された特許出願は、本明細書の一部をなすものとして本願に援用される。以下の例を通して使用されるモデルはモデルとして許容され、またこれらモデルにおける薬効の実証は、ヒトにおける薬効を予測させるものである。
【０５２７】
当業者は、ここに開示した化合物の患者における代謝が、薬物として作用できる一定の生物学的に活性な代謝物を生じることを知るであろう。
【０５２８】
本発明は、以下の実験の詳細から更に良く理解されるであろう。しかし、ここで議論される特定の方法および結果は、特許請求の範囲において更に十分に既述された発明の単なる例示であることを、当業者は容易に理解するであろう。
【０５２９】
例２４：アデノシンＡ_３アンタゴニストの実験
化合物１７００（下記表１７）：ＭＳ（ＥＳ）：３６６．１（Ｍ^＋＋１）
化合物１７１０（下記表１７）：ＭＳ（ＥＳ ；：３８１．１（Ｍ^＋＋１）
化合物１３１６（下記表１７）：ＭＳ（ＥＳ）：３５３．２（Ｍ^＋＋１）
化合物１７０３（下記表１７）：ＭＳ（ＥＳ）：３５７．１（Ｍ^＋＋１）
化合物１７１９（下記表１７）：^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）（１．７５（ｍ，２Ｈ），３．１１（ｍ，２Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ），３．５９（ｍ，２Ｈ），５．７２（ｍ，１Ｈ），５．９６（ｍ，１Ｈ），６．５５（ｓ，１Ｈ），７．１５（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｍ，２Ｈ），８．３２（ｍ，２Ｈ）
化合物１７０４（下記表１７）：ＭＳ（ＥＳ）：３６７．０（Ｍ^＋＋１）
化合物１７０６（下記表１７）：１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） ｄ １．２２（ｍ，２Ｈ），１．６０−２．４０（ｍ，４Ｈ），４．５３（ｍ，１Ｈ），４．９４（ｍ，１Ｈ），５．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），６．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．８Ｈｚ），６．９７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．５０（ｍ，３Ｈ），８．４０（ｍ，２Ｈ），１０．８３（ｂｒ ｓ，１Ｈ） 化合物１７０７（下記表１７）：ＭＳ（ＥＳ）：３４７．０（Ｍ^＋＋１）
化合物１７０８（下記表１７）：ＭＳ（ＥＳ）：３９９．０（Ｍ^＋＋１）
化合物１７０９（下記表１７）：ＭＳ（ＥＳ）：３８５．９（Ｍ^＋＋１）
化合物１７１０（下記表１７）：ＭＳ（ＥＳ）：４３４．０（Ｍ^＋＋１）
化合物１７１１（下記表１７）：^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） ｄ ３．９５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），４．２３−４．３１（ｍ，２Ｈ），４．５３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），６．３０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３． ＯＨｚ），６．９８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．ＯＨｚ），７．４５−７．４８（ｍ，３Ｈ），７．８３−８．４２（ｍ，２Ｈ），９．７０（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＭＳ（ＥＳ）：２８１．１（Ｍ^＋＋１）
ＯＳＩＣ−１４８３１３ ^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） ｄ ３．０２（ｍ，２Ｈ），３．９２（ｍ，２Ｈ），５．０９（２，２Ｈ），６．５３（ｓ，１Ｈ），６．９０−７．０４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），６．９２（ｍ，２Ｈ），７．０２（ｍ，１Ｈ），７．２１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．４０（ｍ，３Ｈ），７．５０−７．８０（ｂｒ ｓ，１Ｈ），８．３３（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：４４５．１（Ｍ^＋＋１）
化合物１７１３（下記表１７）：^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３） ｄ １．６５−１．８０（ｍ，７Ｈ），１．８８−２．００（ｍ，１Ｈ），２．１０−２．４０（ｍ，１Ｈ），２．７０−３．０５（ｍ，３Ｈ），３．０９−３．１４（ｍ，２Ｈ），３．１６−３．３８（ｍ，１Ｈ），３．４５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４Ｈｚ），３．５３−３．６０（ｍ，２Ｈ），３．８４−３．９２（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４Ｈｚ），５．５５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５． ８Ｈｚ），６．１７（ｓ，１Ｈ），６．５５−６．５９（ｍ，２Ｈ），６．６４−６．７１（ｍ，１Ｈ），７．１１−７．１９（ｍ，２Ｈ），７．４３−７．４６（ｍ，３Ｈ），８．３８−８．４２（ｍ，２Ｈ），ＭＳ（ＥＳ）：４８４．０（Ｍ^＋＋１）
化合物１７１４（下記表１７）：ＭＳ（ＥＳ）：４７１．０（Ｍ^＋＋１）
化合物１７１５（下記表１７）：ＭＳ（ＥＳ）：５０５．０（Ｍ^＋＋１）
化合物１７１６（下記表１７）：^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） ｄ １．６５（ｍ，１Ｈ），２．１８（ｍ，１Ｈ），２．４９（ｂｒ ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），２．６４（ｍ，１Ｈ），３．３８（ｍ，１Ｈ），３．６９（ｓ，３Ｈ），３．７２（ｍ，１Ｈ），３．９３（ｍ，１Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），５．０６（２，２Ｈ），６．５８（ｓ，１Ｈ），６．９２（ｍ，２Ｈ），７．０２（ｍ，１Ｈ），７．２３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．３９（ｍ，３Ｈ），８．３２（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ）：４７７．１（Ｍ^＋＋１）
化合物１７１７（下記表１７）：^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） ｄ １．６９（ｍ，１Ｈ），２．２６（ｍ，１Ｈ），２．４２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．７２（ｍ，１Ｈ），３．５３（ｍ，１Ｈ），３．８３（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），４．１４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．６，７．０Ｈｚ），５．１４（２，２Ｈ），６．６９（ｓ，１Ｈ），６．９６（ｍ，２Ｈ），７．０６（ｍ，１Ｈ），７．２５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３９（ｍ，３Ｈ），８．３５（ｍ，２Ｈ）。
【０５３０】
ＭＳ（ＥＳ）：４６２．２（Ｍ^＋＋１）。
【０５３１】
化合物１７１８（下記表１７）：１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） ｄ １．４０−２． ００（ｍ，５Ｈ），３．５２（ｄ，２Ｈ，７．６Ｈｚ），３．８０−４．００（ｍ，１Ｈ），４．００−４．２０（ｍ，３Ｈ），４．５０（ｍ，２Ｈ），６．３６−６．５０（ｍ，２Ｈ），６．５４（ｓ，１Ｈ），６．８４−６．９２（ｍ，１Ｈ），７．０５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．３０−７．４５（ｍ，３Ｈ），８．２４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ）。ＭＳ（ＥＳ）：４４９．０（Ｍ^＋＋１）
表１７ アデノシンＡ_３ 受容体選択的化合物
＊他の３つのサブタイプよりも少なくとも１０倍選択的である。
【０５３２】
【表１７】

本発明は、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９３】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９４】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９５】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９６】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９７】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９８】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化１９９】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２００】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０１】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０２】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０３】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０４】

【化２０５】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０６】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０７】

本発明は更に、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２０８】

更なる実施形態において、本発明は、患者においてＡ_１アデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、前記患者に対して、治療的有効量の化合物１５０５、１５０６、１５０７、１５０８、１５０９、１５１０、１５１１、１５１２、１５１３、１５１４、１５１６、１５１７、１５１８、１５１９、または１５２０を投与することを含んでなる方法を提供する。．
更なる実施形態において、本発明は、前記患者が哺乳類である上記方法を提供する。
【０５３３】
更なる実施形態において、本発明は、前記哺乳類がヒトである方法を提供する。
【０５３４】
更なる実施形態において、本発明は、前記Ａ_１アデノシン受容体が認識障害、腎不全、心臓不整脈、呼吸器上皮、伝達物質放出、沈静、血管収縮、徐脈、負の心臓変力および変伝導、気管支収縮、好中球化学走性（ｎｅｕｔｒｏｐｉｌ ｃｈｅｍｏｔａｘｉｓ）、還流症状、または潰瘍症状に関連する上記方法を提供する。
【０５３５】
更なる実施形態において、本発明は、化合物１５０５、１５０６、１５０７、１５０８、１５０９、１５１０、１５１１、１５１２、１５１３、１５１４、１５１６、１５１７、１５１８、１５１９、または１５２０の水溶性プロドラッグを提供する。該水溶性プロドラッグは、インビボで代謝されて、Ａ_１アデノシン受容体を選択的に阻害する活性薬物を生じる。
【０５３６】
更なる実施形態において、本発明は、エステラーゼに触媒された加水分解によりインビボで代謝される前記プロドラッグを提供する。
【０５３７】
更なる実施形態において、本発明は、前記プロドラッグおよび薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０５３８】
更なる実施形態において、本発明は、細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、該細胞を、化合物１５０５、１５０６、１５０７、１５０８，１５０９、１５１０、５１１、１５１２、１５１３、１５１４、１５１６、１５１７、１５１８、１５１９、または１５２０と接触させることを含む方法を提供する。
【０５３９】
更なる実施形態において、本発明は、前記化合物がＡ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである、細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する上記方法を提供する。
【０５４０】
更なる実施形態において、本発明は、前記細胞がヒト細胞である、細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する上記方法を提供する。
【０５４１】
更なる実施形態において、本発明は、前記化合物がＡ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである、ヒト細胞においてＡ_１アデノシン受容体の活性を阻害する上記方法を提供する。
【０５４２】
更なる実施形態において、本発明は、患者においてＡ_１アデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、前記疾患は喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、または上気道障害であるである方法を提供する。
【０５４３】
更なる実施形態において、本発明は、患者においてＡ_１アデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、前記疾患は喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、または上気道障害であるであり、また前記患者はヒトである方法を提供する。
【０５４４】
更なる実施形態において、本発明は、前記化合物がＡ_１アデノシン受容体のアンタゴニストである、上記疾患を治療する方法を提供する。
【０５４５】
更なる実施形態において、本発明は、化合物１５０５、１５０６、１５０７、１５０８、１５０９、１５１０、１５１１、１５１２、１５１３、１５１４、１５１６、１５１７、１５１８、１５１９、または１５２０と、ステロイド、β２アゴニスト、グルココルチコイド、ロイコトリエンアンタゴニスト、または抗コリン作動性アゴニストとの組合せを含有する、喘息のための併用療法剤を提供する。
【０５４６】
更なる実施形態において、本発明は、治療的有効量の化合物１５０５、１５０６、１５０７、１５０８、１５０９、１５１０、１５１１、１５１２、１５１３、１５１４、１５１６、１５１７、１５１８、１５１９、または１５２０、および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０５４７】
更なる実施形態において、本発明は、化合物１５０５、１５０６、１５０７、１５０８、１５０９、１５１０、１５１１、１５１２、１３１３、１５１４、１５１６、１５１７、１５１８、１５１９、または１５２０を用いて呼吸器障害を治療するための方法であって、前記呼吸器障害は喘息、アレルギー性鼻炎、または慢性閉塞性肺疾患である方法を提供する。
【０５４８】
更なる実施形態において、本発明は、前記薬学的組成物が眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である上記薬学的組成物を提供する。
【０５４９】
更なる実施形態において、本発明は、前記薬学的組成物が全身性配合剤である上記薬学的組成物を提供する。
【０５５０】
更なる実施形態において、本発明は、前記薬学的組成物が手術用灌注溶液である上記薬学的組成物を提供する。
【０５５１】
更なる実施形態において、本発明は、患者においてＡ_１アデノシン受容体に関連した疾患を治療するための包装された薬学的組成物であって：
（ａ）治療上有効な量の化合物１５０５、１５０６、１５０７、１５０８、１５０９、１５１０、１５１１、１５１２、１５１３、１５１４、１５１６、１５１７、１５１８、１５１９、または１５２０を保持する容器と；
（ｂ）患者において前記疾患を治療するための前記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０５５２】
更なる実施形態において、本発明は、１５０５、１５０６、１５０７、１５０８、１５０９、１５１０、１５１１、１５１２、１５１３、１５１４、１５１６、１５１７、１５１８、１５１９、または１５２０の薬学的に許容可能な塩を提供する。
【０５５３】
更なる実施形態において、本発明は、前記化合物１５０９、１５１１、１５１５、１５１８、または１５１９の薬学的に許容可能な塩がナトリウム、カルシウムおよびアンモニウムからなる群から選択される陽イオンを含む、上記薬学的組成物を提供する。
【０５５４】
更なる実施形態において、本発明は、患者においてＡ_１アデノシン受容体に関連した疾患を治療するための方法であって、該Ａ_１アデノシン受容体に関連した疾患が心不全である方法を提供する。
【０５５５】
例証
例２１：１−［６−（４−ヒドロキシ−４−フェニル−ピペリジン−１−イル−メチル）−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］−ピロリジン−２−カルボン酸アミド（１５０５）の合成
例１７と同様の手法で、合成スキームＩＸにしたがい、Ｌ−プロリンアミドおよび４−フェニル−ピペリジン−４−オールを用いて化合物１５０５を合成した：
【化２０９】

^１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ） ｄ １．５３（ｓ，１Ｈ），１．６０（ｓ，１Ｈ），１．８４−２．３０（ｍ，６Ｈ），２．６６（ｍ，２Ｈ），３．６０（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），４．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），４．７３（ｓ，１Ｈ），６．４４（ｓ，１Ｈ），６．９４（ｓ，１Ｈ），７．１２−７．５０（ｍ，１０Ｈ），８．３５（ｍ，２Ｈ），１１．６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３０５．１（Ｍ^＋＋１）；融点＝２３４−２３５℃。
【０５５６】
例２２：［Ｎ−（２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）（Ｌ）−プロリンアミド（１５０６）の合成
合成スキームＶＩＩにしたがい、Ｌ−プロリンアミドを用いて化合物１５０６を得た：
【化２１０】

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｄ ２．０５（ｍ，４Ｈ），３．８５（ｍ，１Ｈ），４．０５（ｍ，１Ｈ），４．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．５８（ｂｒ ｓ，１Ｈ），６．９５（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），７．４０（ｍ，３Ｈ），７．５０（ｂｒ ｓ，１Ｈ），８．４０（ｍ，２Ｈ），１１．６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３０８．３（Ｍ^＋＋１）。融点＝２３６−２３８℃。
【０５５７】
例２３：［Ｎ−（２−フェニル−６−メトキシメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−（Ｌ）−プロリンアミド（１５０７）の合成
合成スキームＩＸの前駆体化合物２３を用いて化合物１５０７を合成した：
【化２１１】

臭化物２３（４．２３ｇ，１０ｍｍｏｌ）を無水メタノール（６０ｍＬ）およびＤＣＭ（１２０ｍＬ）中に溶解させ、ＡｇＯ_２ＣＣＦ_２を用いてＮ_２下にて室温で１時間処理する。固体を濾過除去し、ＤＣＭで洗浄する（２ｘ２０ｍＬ）。濾液を真空下で濃縮する。残渣をＤＣＭ（８０ｍＬ）中に再び溶解させる。次いで得られた溶液をＮａＨＣＯ_３飽和溶液および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して３．７１ｇ（４，９９％）のオフホワイトの固体を得る。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） ｄ １．７５（ｓ，９Ｈ），３．５１（ｓ，３Ｈ），４．８３（ｓ，２Ｈ），６．７０（ｓ，１Ｈ），７．４７（ｍ，３Ｈ），８．５２（ｍ，２Ｈ）。
【０５５８】
【化２１２】

塩化アリール４（２．４４８ｇ，６．５５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）、Ｌ−プロリンアミド（４．０ｇ，３５．０ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ_３（２．９ｇ）を合体させ、窒素下で１２０℃にまでにまで加熱する。４時間後、反応物を室温にまで冷却し、水（６０ｍＬ）で希釈する。得られたスラリをＤＣＭを用いて抽出する（１０ｘ）。合体した有機相をＮａＨＣＯ_３飽和溶液および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して２．４８ｇの茶色の固体を得る。フラッシュカラムを経て純粋な生成物（１．８６ｇ，８１％）を白色の固体で得る。白色の結晶をＴＨＦ／ヘキサンから得る。融点＝２１３−２１５℃。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） ｄ ２．１５（ｍ，３Ｈ），２．５２（ｍ，１Ｈ），３．２６（ｓ，３Ｈ），３．９２（ｍ，１Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），４．４２（ｓ，２Ｈ），５．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），５．４９（ｂｒ ｓ，１Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），７．０８（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．４２（ｍ，３Ｈ），８．３８（ｍ，２Ｈ），９．７８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３５２．２（Ｍ^＋＋１）。
【０５５９】
例２４：４−ヒドロキシ−１−（２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン−４−イル］−ピロリジン−２−カルボン酸アミド（１５０８）の合成
合成スキームＶＩＩにしたがいｃｉｓ−ヒドロキシ プロリンアミドを用いて、化合物１５０８を得た：
【化２１３】

^１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ_６−ＤＭＳＯ） ｄ １．９０（ｍ，１Ｈ），３．８５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），４．０８（ｍ，１Ｈ），４．３７（ｓ，１Ｈ），４．６７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８，４．０Ｈｚ），５．３０（ｓ，１Ｈ），６．５５（ｓ，１Ｈ），７．１５（ｓ，２Ｈ），７．３７（ｍ，３Ｈ），７．６４（ｓ，１Ｈ），８．３７（ｍ，２Ｈ），１１．６５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３２４．２（Ｍ^＋＋１）；融点＝２６８−２７１℃。
【０５６０】
例２５：３−［４−（（Ｓ）−２−カルバモイル−ピロロジン−１−イル）−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イル］−プロピオン酸（１５０９）の合成
合成スキームＩＸの前駆体化合物２３を用いて、化合物１５０９を得た：
【化２１４】

ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルで保護化された臭化アリール２３（４．０ｇ，９．５ｍｍｏｌ）、乾燥ＤＭＳＯ（２５ｍＬ）、ＮａＨ（４５４ｍｇ，３．７９ｍｍｏｌ）およびＮａＨ_２ＰＯ_４（１．６２ｇ，１１．４ｍｍｏｌ）を合体させ、アルゴン下にて約３．５時間５０℃にまで加熱した。次いでこの混合物を水（２００ｍＬ）中に注ぎ、ＥｔＯＡｃを１００ｍＬずつ用いて３回抽出した。合体した有機相を水、塩水で完全に洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ濾過し、濃縮して黄色の固体を得、これをエタノールを用いて粉砕することにより精製して、１．５５ｇの浅黄色の固体（７）を得た。母液をフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン中に１０％ ＥｔＯＡｃ）により精製して、さらに４５４ｍｇ（６０％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） ｄ １．７７（ｓ，９Ｈ），７．２５（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｍ，３Ｈ），８．５２（ｍ，２Ｈ），１０．３９（ｓ，１Ｈ）；ｍ．ｐ．＝１５６℃（ｄｅｃ）。
【０５６１】
【化２１５】

アルデヒド７（６００ｍｇ，１．７ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中に溶解させ、アルゴン下にて０℃にまで冷却した。これに１０ｍＬの乾燥ＴＨＦ中の（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメチレン）−トリフェニルホスホラン（６９４ｍｇ，１．８ｍｍｏｌ）の０℃の溶液を、カニューレを介して滴下添加した。３時間後、混合物を濃縮し、エタノールを用いた粉砕により精製して５６５ｍｇ（７３％）の白色の固体（８）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） ｄ １．５８（ｓ，９Ｈ），１．７９（ｓ，９Ｈ），６． ４６（ｄ，１Ｈ），６．９５（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｍ，３Ｈ），８．０９（ｄ，１Ｈ），８．５６，２Ｈ）。
【０５６２】
【化２１６】

５ｍＬ ＴＨＦ中の化合物８（５６５ｍｇ １．２ｍｍｏｌ）の溶液を、ＥｔＯＡｃを用いて１００ｍＬにまで希釈した。６００ｍｇの触媒（５％ ｗｔ Ｐｄ，５０％ Ｈ_２Ｏ）を添加した後、アルゴンを用いてパージし、混合物を大気圧下で水素化した。８時間後、混合物を濾過し、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン中に１０％ ＥｔＯＡｃ）を用いて精製して２００ｍｇ（３５％）の９を透明な油状物で分離し、これを静置して結晶化させた。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） ｄ １．４２（ｓ，９Ｈ），１．７５（ｓ，９Ｈ），２．６５（ｔ，２Ｈ），３．３２（ｔ，２Ｈ），６．４１（ｓ，１Ｈ），７．４５（ｍ，３Ｈ），８．５１（ｍ，２Ｈ）。
【０５６３】
【化２１７】

塩化アリール９（２００ｍｇ，０．４４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）およびＬ−プロリンアミド（４４０ｍｇ，４．４ｍｍｏｌ）を合体させ、アルゴン下にて８５℃にまで加熱した。１４時間後、混合物を室温にまで冷却し、水および酢酸エチルの間で分配した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで洗浄した（３ｘ）。合体した有機相を水（３ｘ）、塩水で完全に洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して１０を黄色の膜状で得、これをフラッシュクロマトグラフィ（ＣＨ_２Ｃｌ_２中に２．５％ ＭｅＯＨ）により精製した。１８５ｍｇ（９７％）を得た。ＭＳ（ＥＳ）：４３５．８（Ｍ^＋＋１）。
【０５６４】
【化２１８】

５ｍＬ ジオキサン中のエステル１０（３０ｍｇ，ｍｍｏｌ）を、濃縮したＨＣｌ ０．５ｍＬを添加することにより加水分解した。３時間後、混合物を真空下で濃縮し、ＥｔＯＨ／ＥｔＯＡｃ中で再結晶化させて１５０９を白色の固体（２０ｍｇ，６１％）で得た。ＭＳ（ＥＳ）：３８０（Ｍ^＋＋１）。
【０５６５】
例２６：［Ｎ−（２−フェニル−６−アミノカルボニル メトキシメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−（Ｌ）−プロリンアミド（１５１０）の合成
合成スキームＩＸの前駆体化合物２３を用いて、化合物１５１０を得た：
【化２１９】

臭化物２３（１．２７ｇ，３ｍｍｏｌ）および分子篩（５ｇ）を、グリコール酸無水メチル（５．８ｇ，６０ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（４０ｍＬ）中で撹拌する。溶液を、Ｎ_２下でＡｇＯＴｆを用いて処理し、３時間撹拌する。濾過により固体を除去し、ＤＣＭで洗浄する（２ｘ２０ｍＬ）。濾液を真空下で濃縮する。残渣をＤＣＭ（８０ｍＬ）中に再び溶解させる。次いで得られた溶液を水、ＮａＨＣＯ_３飽和溶液、および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して１．３５ｇ（９９％）のオフホワイトの固体（１２）を得る。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） ｄ １．７５（ｓ，９Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），５．０（ｓ，２Ｈ），６．７８（ｓ，１Ｈ），７．４７（ｍ，３Ｈ），８．５２（ｍ，２Ｈ）。
【０５６６】
【化２２０】

塩化アリール１２（１７７ｍｇ，０．４１ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）、Ｌ−プロリンアミド（４６６ｍｇ，４ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ_３（５００ｍｇ）を合体させ、窒素下で１２０℃にまで加熱する。４時間後、反応物を室温にまで冷却し、水（６０ｍＬ）で希釈する。得られたスラリをＤＣＭを用いて抽出する（５ｘ３０ｍＬ）。合体した有機相をＮａＨＣＯ_３飽和溶液および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して茶色の固体を得る。フラッシュカラム後、純粋な生成物（１５４ｍｇ，９２％）を白色の固体（１３）で得る。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） ｄ ２．１５（ｍ，３Ｈ），２．５２（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｓ，３Ｈ），４．５８（ｓ，２Ｈ），５．０８（ｓ，１Ｈ，），５．８５（ｂｒ ｓ，１Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），７．０８（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．４２（ｍ，３Ｈ），８．４０（ｍ，２Ｈ），１０．５８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：４１０．１（Ｍ^＋＋１）。
【０５６７】
【化２２１】

メチルエステル１３（１２４ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ）をＨＯＣＨ_３（１５ｍＬ）中に溶解させる。この溶液中に０．５時間アンモニアをバブリングさせる。次いでこの反応混合物をさらに３時間室温で撹拌する。溶剤を除去した後、１１１ｍｇの白色の固体（１５１０，９３％）を得る。^１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３） ｄ １．８２（ｍ，３Ｈ），２．２０（ｍ，１Ｈ），２．８０（ｍ，１Ｈ），３．１０（ｍ，１Ｈ），３．６３（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ_１＝１３．８Ｈｚ，Ｊ_２＝１９．４Ｈｚ），３．８７（ｍ，１Ｈ），４．０７（ｍ，１Ｈ），４．９７（ｍ，１Ｈ），５．９６（ｍ，２Ｈ），６．３５（ｓ，１Ｈ），６．８６（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．１１（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．３７（ｍ，３Ｈ），８．２８（ｍ，２Ｈ），１１．４６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３９４．８（Ｍ^＋＋１）。
【０５６８】
例２７：［４−（２−カルバモイルピロリジン−１−イル）−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸］（１５１１）の合成
合成スキームＶＩＩの前駆体化合物１５を用いて、化合物１５１１を合成した：
【化２２２】

乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の水素化ナトリウム（７８０ｍｇの６０の油状物懸濁液，１９．５ｍｍｏｌ）の懸濁液を氷／水浴で窒素下にて冷却したものに、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のピロロピリミジン１５（２．００ｇ，７．５２ｍｍｏｌ）の溶液を５分にわたり添加する。１５分後、塩化ベンゼンスルホニル（１．２ｍＬ，９．４０ｍｍｏｌ）を添加し、次いで冷却槽を取り外す。４時間後、反応混合物を氷とＮａＨＣＯ_３飽和溶液との混合物中に注ぎ、沈澱した固体を濾過除去し、アセトン（３）およびメタノール（２）を用いて粉砕し、２．３７ｇのベージュ色の固体を得る。この固体（１６）は約１０ｍｏｌ−％ ＤＭＦ（８３％収率に基づく）を含み、次の工程で使用することができ；アセトンを溶離剤として用いるシリカゲル上のクロマトグラフィにより、純粋な試料を得ることができる。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：ｄ ６．７０（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４７−７．６８（ｍ，６Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），８．２４−８．３２（ｍ，２Ｈ），８．４８−８．５６（ｍ，２Ｈ）；ＩＲ（固体）：ｎ＝３１４６ｃｍ^−１，１５８５，１５３９，１５０６，１４５０，１４１７，１３８６，１３７０，１１８６，１１７６，１１５４，１１１１，１０１５，９１９，７２６，６８３，６１６，６０７；ＭＳ（ＥＳ）：３７２／３７０（ＭＨ^＋）；融点＝２２６−２２７℃。
【０５６９】
【化２２３】

乾燥ＴＨＦ（３４ｍＬ）中のＮ−スルホニル化合物１６（３３７ｍｇ，０．９１１ｍｍｏｌ）の溶液を乾燥氷酢酸により冷却したものに、ＬＤＡＴＨＦ（１．ＯｍＬ，シクロヘキサン中の１．５Ｍ溶液，１．５ｍｍｏｌ）を添加する。４５分後、この溶液中で二酸化炭素を５分間バブリングさせ、次いで冷却槽を除去する。溶液が周囲温度に達したら、溶剤を蒸発させ、０．５当量の（ｉＰｒ）_２ＮＣＯ_２Ｌｉを含んだ３９８ｍｇの塩１７を黄色がかった固体で得る。この塩をさらに精製することなく次の工程で用いる。^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：ｄ＝６．４４（ｓ，１Ｈ），７．５０−７．７５（ｍ，６Ｈ），８．３３−８．４０（ｍ，２Ｈ），８．５３（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．６Ｈｚ，２Ｈ）。
【０５７０】
【化２２４】

ＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中のリチウム塩１７（５０ｍｇ）およびＬ−プロリンアミド（１２２ｍｇ，１．０７ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下で８０℃にまで１５．５時間加熱する。冷却した溶液に４％ 酢酸水溶液（１０ｍＬ）を添加し、混合物をＥｔＯＡｃを用いて抽出する。（５’１０ｍＬ）。合体した有機相をし４％ 酢酸水溶液（１０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させる。濾過および濃縮を経て４０ｍｇの１８を黄色がかった固体で得、これを精製せずに次の工程で用いる。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）：ｄ＝１．９５−２．３６（ｍ，４Ｈ），３．８５−３．９５（ｍ，１Ｈ），３．９５−４．１７（ｍ，１Ｈ），４．７２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．１４（ｓ，１Ｈ），７．３５−７．４５（ｍ，３Ｈ），７．４５−７．７０（ｍ，３Ｈ），８．３３−８．５０（ｍ，４Ｈ）。
【０５７１】
【化２２５】

メタノール中の水酸化ナトリウムの溶液（１．５ｍＬ，５Ｍ，７．５ｍｍｏｌ）を、メタノール（２ｍＬ）中のピロロピリミジン１８の溶液（４０ｍｇ，０．０８１ｍｍｏｌ）に添加する。２時間後、ｐＨを５に調整し、ほとんどのメタノールを蒸発させ、混合物をＥｔＯＡｃを用いて抽出し（５’１０ｍＬ）、合体した有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させる。濾過および濃縮により２４ｍｇの浅黄色の固体を得、これをトルエン／ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨを用いて粉砕し、１５．６ｍｇ（５５％）の酸１５１１をわずかに黄色がかった固体で得た。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）：ｄ＝２．０５−２．２０（ｍ，４Ｈ），３．９５−４．１０（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．２５（ｍ，１Ｈ），４．８５（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．１４（ｓ，１Ｈ），７．３５−７．４２（ｍ，３Ｈ），８．３８−８．４５（ｍ，２Ｈ）；ＩＲ（固体）：ｎ＝３１９２ｃｍ^−１，２９６４，２９２３，２８７７，１６８２，１６１４，１５６７，１５３１，１４５４，１３７４，１３５２，１２９５，１２６２，１１９０，９７４，７５４，７００；ＭＳ（ＥＳ）：３５２（Ｍ^＋＋１）；融点＝２２０℃（ｄｅｃｏｍｐ．）。
【０５７２】
例２８：１−（６−メチル−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン−４−イル）−（Ｓ）−ピロリジン−２−カルボン酸アミド（１５１２）の合成
次の工程により化合物１５１２を合成した：
【化２２６】

塩化アリール２０（３ｇ，１０．７ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（５０ｍＬ）、および（Ｓ）−プロリンアミドを合体させ、アルゴン下で８５℃にまで加熱した。一晩（１４時間）撹拌した後、混合物を室温にまで冷却し、８００ｍＬの水中に注いだ。これをＥｔＯＡｃを２００ｍＬずつ用いて３回抽出した。合体した有機相を水（３×３００ｍＬ）、塩水で完全に洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して濃い茶色の固体を得た。この固体をＥｔＯＡｃから２回再結晶化させ、１．９５ｇ（５７％）の黄褐色の固体（１５１２）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｄ １．８−２．２（ｍ，４Ｈ），２．３（ｓ，３Ｈ），３．８（ｍ，１Ｈ），４．０（ｍ，１Ｈ），４．６（ｄ，１Ｈ），６．２（ｓ，１Ｈ），６．９（ｓ，１Ｈ），７．２（ｍ，３Ｈ），７．３（ｓ，１Ｈ），８．４（ｍ，２Ｈ），１１．５（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：３２２（Ｍ^＋＋１）。
【０５７３】
例２９：１−［６−（２−ヒドロキシ−エトキシメチル）−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］−ピロリジン−２−カルボン酸アミド（１５１３）の合成
例１７と同様の手法により合成スキームＩＸにしたがい、Ｌ−プロリンアミドおよびエタン−１，２−ジオールを用いて、化合物１５１３を合成した。
【０５７４】
【化２２７】

ＭＳ（ＥＳ）：３８２（Ｍ^＋＋１）。
【０５７５】
例３０：４−（６−イミダゾール−１−イルメチル２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミノ）−シクロヘキサノール（１５１４）の合成
化合物１５１４を、例１７と同様の手法により合成スキームＩＸにしたがい、Ｎ−６アミノシクロヘキサノールおよびイミダゾールを用いて、合成した：
【化２２８】

ＭＳ（ＥＳ）：３８９（Ｍ^＋＋１）。
【０５７６】
例３１：４−（４−ヒドロキシ−シクロへキシルアミノ）−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸（１５１５）の合成
化合物１５１５を、例２７と同様の手法により合成スキームＩＸにしたがい、Ｎ−６アミノシクロヘキサノールおよびイミダゾールを用いて、合成した：
【化２２９】

ＭＳ（ＥＳ）：３５３（Ｍ^＋＋１）。
【０５７７】
例３２：４−［６−（２−ヒドロキシ−エトキシメチル）−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミノ］−シクロヘキサノール（１５１６）の合成
化合物１５１６を、化合物１５１３と同様の手法により合成スキームＩＸにしたがい、Ｎ−６ アミノシクロヘキサノールを用いて、合成した：
【化２３０】

ＭＳ（ＥＳ）：３８３（Ｍ^＋＋１）。
【０５７８】
例３３：４−（４−ヒドロキシ−シクロへキシルアミノ）−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸メチルエステル（１５１７）の合成
【化２３１】

乾燥ＤＭＦ（４ｍＬ）中のリチウム塩１７（０．１３ｍｍｏｌ）の溶液をヨウ化メチル（０．１ｍＬ，１．６ｍｍｏｌ）とともに２０℃でアルゴン下にて３時間撹拌する。ＤＭＦを蒸発させ、塩化アンモニウム水溶液を添加する（１５ｍＬ）。混合物をＥｔＯＡｃ（３’１５ｍＬ）を用いて抽出し、合体した有機相を水（２’１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させる。濾過および濃縮を経て２１ｍｇ（３８％）のメチルエステル２２を得る。
【０５７９】
【化２３２】

ＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中のメチルエステル２２（２４．５ｍｇ，０．０５７ｍｍｏｌ）および４−ｔｒａｎｓ−アミノシクロヘキサノール（６６ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下で８０℃にまで加熱し、次いで加熱を停止し、２０℃での撹拌を１３．５時間続けた。冷却した溶液に４％ 酢酸水溶液（１０ｍＬ）を添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（３’１０ｍＬ）を用いて抽出する。合体した有機相を４％ 酢酸水溶液（１０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）、２Ｎ ＮａＯＨ（１０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）、および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させる。濾過および濃縮（１Ｈ ＮＭＲ は、ベンゼンスルホニル基の約５０％除去を示す）を経て得られた粗製物質の、ＴＨＦ（２ｍＬ）中の溶液に、ＭｅＯＨ中のＮａＯＨの溶液（０．５ｍＬの５Ｍ 溶液，２．５ｍｍｏｌ）を周囲温度で添加する。２０分後、水およびＮａＨＣＯ_３飽和溶液（それぞれ５ｍＬ）を添加し、混合物をＥｔＯＡｃを用いて抽出する（４’１５ｍＬ）。合体した有機相を２Ｎ ＮａＯＨ（１０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）、および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させる。濾過および濃縮の後に得られた粗製物質を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ １：１ （Ｒ） １：２ で溶出するシリカゲル上のクロマトグラフィを経て８．６ｍｇ（４１％）の１５１７を白色の固体で得る。融点２２５−２２７℃。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）：ｄ＝１．３８−１．６２（ｍ，４Ｈ），１．９５−２．１０（ｍ，２Ｈ），２．１０−２．２５（ｍ，２Ｈ），３．５５−３．７０（ｍ，１Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），４．２０−４．３５（ｍ，１Ｈ），７．３２（ｓ，１Ｈ），７．３５−７．４７（ｍ，３Ｈ），８．３５−８．４２（ｍ，２Ｈ）；ＩＲ（固体）：ｎ＝３３５２ｃｍ^−１，３０６４，２９３５，２８６０，１７０１，１６０５，１５８８，１５７４，１５３４，１４４７，１３８６，１３３３，１２６３，１２０６，１１６４，１０７４，９３８，７５６，７０５；ＭＳ（ＥＳ）：３６７（ＭＨ^＋）。
【０５８０】
例３４：［４−（２−カルバモイル−ピロリジン−１−イル）−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イルメトキシ］−酢酸メチルエステル（１５１８）の合成
化合物１５１８を、例２６と同様に手法により前駆体化合物１２と合成して得た：
【化２３３】

ＭＳ（ＥＳ）：４１０（Ｍ^＋＋１）。
【０５８１】
例３５：［４−（２−カルバモイル−ピロリジン−１−イル）−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イルメトキシ］−酢酸（１５１９）の合成
化合物１５１９を、１５１８と同様の手法で、メチルエステル基を塩基を用いて加水分解して合成して得た：
【化２３４】

ＭＳ：３９６（Ｍ^＋＋１）。
【０５８２】
例３６：４−（４−ヒドロキシ−シクロへキシルアミノ）−２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸アミド（１５２０）の合成
【化２３５】

アンモニアガスを、メタノール（６ｍＬ）中のピロロピリミジン２３（７．８ｍｇ，０．０２１ｍｍｏｌ）の溶液中に濃縮し、全体積が１２ｍＬに達するまで乾燥氷／アセトンにより冷却する。１０日間２０℃で撹拌し、溶剤を蒸発させ、残渣を、ＣＨ_２Ｃｌ_２中の５％ ＭｅＯＨで溶出するシリカゲル上の分取用ＴＬＣにより精製する。次いで得られた物質をエーテルで粉砕して６．５ｍｇ（８８％）のアミド１５２０を白色の固体で得た，融点：２１０−２２０℃（ｄｅｃｏｍｐ．）。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）：ｄ＝１．４０−１．６０（ｍ，４Ｈ），２．００−２．１５（ｍ，２Ｈ），２．１５−２．２５（ｍ，２Ｈ），３．５５−３．７０（ｍ，１Ｈ），４．２０−４．３５（ｍ，１Ｈ），７．１６（ｓ，１Ｈ），７．３５−７．４７（ｍ，３Ｈ），８．３４−８．４０（ｍ，２Ｈ）；ＩＲ（固体）：ｎ＝３３５８ｃｍ^−１，３０６４，３０２５，２９６４，２９２４，２８５３，１６５２，１５９３，１５３９，１４９３，１４５２，１３７４，１３２６，１２５１，１１９７，１１１３，１０７４，１０２８，７５１，６９９；ＭＳ（ＥＳ）：３５２（ＭＨ^＋）。
【０５８３】
化合物の活性
アデノシン１（Ａ_１）受容体サブタイプ飽和および競合放射性リガンド結合を、既述した化合物１５０５，１５０６，１５０７，１５０８，１５０９，１５１０，１５１１，１５１２，１５１３，１５１４，１５１６，１５１７，１５１８，１５１９，および１５２０について、特に本明細書（ＰＣＴ／ＵＳ０１／４５２８０）の１５２−１５３頁の記載のとおり実施した。上記に参照した全ての化合物は、Ａ_１受容体結合親和性について、本明細書中記載の、特にＰＣＴ／ＵＳ０１／４５２８０の１７１頁の表１３に記載された参照化合物１３１８または１３１９の同等であるかまたは上回った。
【０５８４】
表１８に挙げられた上記化合物の水溶解性は、そのｃＬｏｇＰ値（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｓｏｆｔ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ， １００ Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｐａｒｋ Ｄｒｉｖｅ， Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ， ＭＡ ０２１４０より供給されるコンピュータープログラムＣＳ ＣｈｅｍＤｒａｗ， ＣｈｅｍＤｒａｗ Ｕｌｔｒａ ｖｅｒ． ６．０ （著作権）；１９９９ を用いて計算された）から、参照化合物１３１８または１３１９よりも良好であると予想される。
【０５８５】
表１８に挙げられたＡ_１受容体に特異的な化合物は、ｃＬｏｇＰ値が約３．８である参照化合物１３１８または１３１９と比べ、約１．５〜約３．４というより低いｃＬｏｇＰ値を有していた。表１８に列挙された、参照化合物１３１８または１３１９よりも低いｃＬｏｇＰ値を有するより極性のＡ_１受容体化合物は、参照化合物に比べ、有効性（ｐｏｔｅｎｃｙ）およびＡ_１受容体結合選択性をなおも有するであろうことは予測されなかった。
【０５８６】
【表１８】

ＰＣＴ／ＵＳ０１／４５２８０ の第 ２８８ 頁以降は、Ａ _２ａ 受容体に特異的な化合物に関する
本発明は、下記構造を有する化合物を提供する。
【０５８７】
【化２３６】

本発明はまた、下記構造を有する化合物を提供する。
【０５８８】
【化２３７】

更なる実施形態において、本発明は、患者におけるＡ_２ａアデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、前記患者に対して、治療的有効量の化合物１６０９または１６１０を投与することを含む方法を提供する。
【０５８９】
本発明はまた、前記患者が哺乳類である上記方法を提供する。
【０５９０】
本発明は更に、前記哺乳類がヒトである方法を提供する。
【０５９１】
本発明はまた、患者におけるＡ_２ａアデノシン受容体に関連した疾患を治療する方法であって、前記Ａ_２ａアデノシン受容体が運動活性、血管拡張、血小板阻害、好中球スーパーオキシド生成、認識障害、老人性痴呆、またはパーキンソン病に関連する方法を提供する。
【０５９２】
本発明は、前記化合物が、アデニル酸シクラーゼを刺激することにって前記疾患を治療する上記方法を提供する。
【０５９３】
本発明はまた、化合物１６０９または１６１０の水溶性プロドラッグを提供し、該水溶性プロドラッグは、Ａ_２ａアデノシン受容体を選択的に阻害する活性な薬物へとインビボで代謝される方法を提供する。
【０５９４】
本発明はまた、前記プロドラッグはエステラーゼに触媒された加水分解によりインビボで代謝される、化合物１６０９または１６１０の水溶性プロドラッグを提供する。
【０５９５】
本発明はまた、化合物１６０９または１６１０の水溶性プロドラッグと、薬学的に許容可能なキャリアとを含有する薬学的組成物を提供する。
【０５９６】
本発明はまた、細胞においてＡ_２ａアデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、前記細胞を化合物１６０９または１６１０に接触させることを含む方法を提供する。
【０５９７】
本発明はまた、細胞においてＡ_２ａアデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、前記細胞を化合物１６０９または１６１０に接触させることを含み、該化合物は前記Ａ_２ａアデノシン受容体のアンタゴニストである方法を提供する。
【０５９８】
本発明はまた、前記細胞がヒト細胞である上記方法を提供する。
【０５９９】
本発明はまた、前記細胞がヒト細胞であり、前記化合物がＡ_２ａアデノシン受容体のアンタゴニストである上記方法を提供する。
【０６００】
本発明はまた、治療的有効量の化合物１６０９または１６１０、および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０６０１】
本発明はまた、前記治療的有効量がパーキンソン病、並びに運動活性、血管拡張、血小板阻害、好中球スーパーオキシド生成、認識障害、老年痴呆に関連した疾患を治療するのに効果的である、上記薬学的組成物を提供する。
【０６０２】
本発明はまた、当該組成物が眼科用配合剤である上記薬学的組成物を提供する。
【０６０３】
本発明はまた、当該組成物が眼周囲、眼球後または眼内注射配合剤である上記薬学的組成物を提供する。
【０６０４】
本発明はまた、当該組成物が全身性配合剤である上記薬学的組成物を提供する。
【０６０５】
本発明はまた、当該組成物が手術用灌注溶液である上記薬学的組成物を提供する。
【０６０６】
本発明はまた、化合物１６０９または１６１０および何れかのドパミンエンハンサを含む、パーキンソン病のための併用療法を提供する。
【０６０７】
本発明はまた、化合物１６０９または１６１０および何れかの細胞障害剤を含む、癌のための併用療法を提供する。
【０６０８】
本発明はまた、化合物１６０９または１６１０、およびプロスタグランジンアゴニスト、ムスカリンアゴニストまたはβ−２アンタゴニストを含む、緑内障のための併用療法を提供する。
【０６０９】
本発明はまた、患者においてＡ_２ａアデノシン受容体に関連した疾患を治療するための包装された薬学的組成物であって：
（ａ）治療上有効な量の化合物１６０９または１６１０を保持する容器と；
（ｂ）患者において前記疾患を治療するための前記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０６１０】
例：
例４１：１−（６−フェニル−２−ピリジン−４−イル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］−ピロリジン−２−カルボン酸アミド（１６０９）の合成
Ｌ−プロリンアミドを、ＰＣＴ／ＵＳ０１／４５２８０の８２頁に記載の合成スキームＩＩに記載の適切な塩化物中間体と反応させることにより、化合物１６０９を合成した：
【化２３８】

^１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ_６−ＤＭＳＯ） ｄ １．９５−２．１５（ｍ，４Ｈ），４．００（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．１５（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．７２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），６．９０（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．１９（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．３０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），７．４４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），７．５９（ｓ，１Ｈ），７．９２（ｂｒ ｓ，２Ｈ），８．２６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），８．６５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ）；ＭＳ（ＥＳ）：３８４．９（Ｍ^＋＋１）；Ｍｐｔ＝２８０−３１６℃（ｄｅｃｏｍｐ．）。
【０６１１】
例４２：１−［６−（３−メトキシ−フェニル）−２−ピリジン−イル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］−ピロリジン−２−カルボン酸アミド（１６１０）の合成
Ｌ−プロリンアミドを、ＰＣＴ／ＵＳ０１／４５２８０の８２頁における合成スキームＩＩに記載の適切な塩化物中間体と反応させることにより、化合物１６１０を合成した：
【化２３９】

^１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ_６−ＤＭＳＯ） ｄ ２．０７（ｍ，４Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），４．１７（ｍ，１Ｈ），４．７５（ｍ，１Ｈ），６．８９（ｍ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｓ，１Ｈ），７．３５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．５３（ｓ，２Ｈ），７．６０（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），８．６７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），１２．３７（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ）：４１５．０（Ｍ^＋＋１）。
【０６１２】
化合物の活性
アデノシン２ａ（Ａ_２ａ）受容体サブタイプ競合放射性リガンド結合を、本文に記載のとおりに、とくに本明細書（ＰＣＴ／ＵＳ０１／４５２８０の）の１５３頁の記載のとおりに行った。化合物１６０９および１６１０はＡ_２ａ受容体結合親和性および選択性を有することが見出された。
【０６１３】
ＰＣＴ／ＵＳ０１／４５２８０の第２９２−３００頁は、Ａ_３受容体に特異的な追加の化合物に関する。
【０６１４】
本発明また、下記構造を有する化合物を提供する：
【化２４０】

更なる実施形態において、本発明は、細胞においてＡ_３アデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、前記細胞を化合物１７２０に接触させることを含む方法を提供する。
【０６１５】
更なる実施形態において、本発明は、細胞においてＡ_３アデノシン受容体の活性を阻害する方法であって、前記化合物がＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである方法を提供する。
【０６１６】
更なる実施形態において、本発明は、前記細胞がヒト細胞である、細胞においてＡ_３アデノシン受容体の活性を阻害する上記方法を提供する。
【０６１７】
更なる実施形態において、本発明は、前記細胞がヒト細胞であり、前記化合物がＡ_３アデノシン受容体のアンタゴニストである、細胞においてＡ_３受容体の活性を阻害する上記方法を提供する。
【０６１８】
更なる実施形態において、本発明は、患者の眼に対する損傷を治療する方法であって、前記患者に対して、治療的有効量の化合物１７２０を含有する組成物を投与することを含む方法を提供する。
【０６１９】
更なる実施形態において、本発明は、前記損傷が網膜または視神経乳頭の損傷を含む方法を提供する。
【０６２０】
更なる実施形態において、本発明は、患者に対して治療的有効量の化合物１７２０を投与することを含む、緑内障のための治療法を提供する。
【０６２１】
更なる実施形態において、本発明は緑内障のための治療法であって、一以上のアデノシン受容体アンタゴニストを含み、好ましくはアデノシン受容体Ａ_３アンタゴニスト（好ましくはＮ−６置換７−デアザプリン、最も好ましくは［２−（３Ｈ−イミダゾール−４−イル）−エチル］−（２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン−４−イル）−アミン）を含む、緑内障のための治療法を提供する。
【０６２２】
別の実施形態において、本発明は、アデノシン受容体Ａ_３アンタゴニスト（好ましくはＮ−６置換７−デアザプリン、最も好ましくは［２−（３Ｈ−イミダゾール−４−イル）−エチル］−（２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３ｄ］ピリミジン−４−イル）−アミン）、および下記からなる群から選択される一以上の他の化合物を含む、緑内障のための併用療法を提供する：βアドレナリン受容体アンタゴニスト（即ち、βアドレナリンアンタゴニストまたはβブロッカー）（例えば、マレイン酸チモロール、ベタキソロール、カルテオロール（ｃａｒｔｅｏｌｏｌ）、レボブノロール、メチプラノロール、Ｌ−６５３３２８ （Ｌ６５２６９８の酢酸エステル）、β１アドレナリン受容体アンタゴニスト）、α−２アドレナリン受容体アゴニスト（例えば、アプラクロニジン（ａｐｌａｃｌｏｎｉｄｉｎｅ）、ブリモニジン（ｂｒｉｍｏｎｉｄｉｎｅ）、ＡＧＮ−１９５７９５、ＡＧＮ１９０８３７（Ｂａｙ−ａ−６７８１の類縁体））、炭酸脱水酵素阻害剤（ブリンゾールアミド（ｂｒｉｎｚｏｌａｍｉｄｅ）、ドルゾールアミド（ｄｏｒｚｏｌａｍｉｄｅ）、ＭＫ−９２７（ヒト炭酸脱水酵素ＩＩイソ酵素の阻害剤）、炭酸脱水酵素ＩＶイソ酵素の阻害剤）、コリン作用性アゴニスト（例えば、ムスカリン作用性コリンアゴニスト、カルバコール、ピロカルピンＨＣｌ、硝酸ピロカルピン、ピロカルピン、ピロかルビンプロドラッグ（例えばＤＤ−２２Ａ））、プロスタグランジンおよびプロスタグランジン受容体アゴニスト、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、ＡＭＰＡ受容体アゴニスト（例えば、ラタノプロスト（ｌａｔａｎｏｐｒｏｓｔ）、ウノプロストンイソプロピル、ＰＧＦ２アルファアゴニスト、プロスタノイド選択的ＦＰ受容体アゴニスト、降圧性プロスタミドのようなＰＧアゴニスト）、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤（例えばスピラプリル、スピラプリラット（ｓｐｉｒａｐｒｉｌａｔ））、ＡＭＰＡ受容体アンタゴニスト、５−ＨＴアゴニスト（例えば、ＭＫＣ−２４２（５−３−［（（２Ｓ）−１，４−ベンゾジオキサン−２−イルメチル）アミノ］プロポキシ−ｌ，３−ベンゾジオキソールＨＣｌのような選択的５−ＨＴ１Ａ受容体アゴニスト）、血管新生阻害剤（例えば、ステロイドａｎｅｃｏｒｔａｖｅ）、ＮＭＤＡアンタゴニスト（例えば、Ｈｕ−２１１、メマンチン、カンナビノイドＭＮＤＡ受容体アゴニスト、デキサナビノール、デキサナビノールのプロドラッグおよび類縁体）、ＮＲ２Ｂ選択的アンタゴニスト（例えばエリプロジル（ＳＬ−８２．０７１５））、レニン阻害剤（例えば、ＣＧＰ−３８５６０、ＳＲ−４３８４５）、カンナビノイド受容体アゴニスト（例えば、テトラヒドロカンナビノール（ＴＨＣ）、およびＴＨＣ類縁体、選択的ＣＢ２カンナビノイド受容体アゴニスト（例えばＬ−７６８２４２、Ｌ−７５９７８７）、脳特異的なＣＢ１受容体および抹消ＣＢ２受容体に結合するアナンダミドのような化合物）、アンジオテンシン受容体アンタゴニスト（例えば、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（例えばＣＳ−０８８）、ロサルタンカリウムのような選択的アンジオテンシンＩＩ ＡＴ−Ｉ受容体アンタゴニスト）、ヒドロクロロチアジド（ＨＣＴＺ）、ソマトスタチンアゴニスト（例えば、非ペプチドソマトスタチンアゴニストＮＮＣ−２６−９１００）、グルココルチコイドアンタゴニスト、肥満細胞脱顆粒阻害剤（例えば、ネドクロミル）、α−アドレナリン作用性受容体遮断薬（例えば、ダピプラゾール（ｄａｐｉｐｒａｚｏｌｅ）、α２アドレナリン受容体アンタゴニスト、α１アドレナリン受容体アンタゴニスト（例えばブナゾシン（ｂｕｎａｚｏｓｉｎ））、α−２アドレナリン受容体アンタゴニスト、トロンボキサンＡ２擬似体、プロテインキナーゼ阻害剤（例えばＨ７）、プロスタグランジンＦ誘導体（例えばＳ−１０３３）、プロスタグランジン−２αアンタゴニスト（例えば ＰｈＸＡ−３４）、ドパミンＤ１および５−ＨＴ２アゴニスト（フェノルドパム（ｆｅｎｏｌｄｏｐａｍ））、一酸化窒素放出剤（例えば、ＮＣＸ−９０４またはＮＣＸ−９０５、チモロールの一酸化窒素放出性誘導体）、５−ＨＴ２アンタゴニスト（例えばサルポグリレート（ｓａｒｐｏｇｒｅｌａｔｅ））、ＮＭＤＡアンタゴニスト（例えば、デキサナビノール（ｄｅｘａｎａｂｉｎｏｌ）のプロドラッグおよび類縁体）、シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例えばジクロフェナック（ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ）、または非ステロイド化合物のネパフェナック（ｎｅｐａｆｅｎａｃ））、イノシン、ドパミンＤ２受容体およびαアドレナリン受容体アゴニスト（タリペキソール（ｔａｌｉｐｅｘｏｌｅ））、ドパミンＤ１受容体アンタゴニストおよびＤ２受容体アゴニスト（例えば、ＳＤＺ−ＧＬＣ−７５６）、バソプレシン受容体アンタゴニスト（例えば、バソプレシンＶ２受容体アンタゴニスト（例えばＳＲ−１２１４６３））、エンドセリンアンタゴニスト（例えばＴＢＣ−２５７６）、１−（３−ヒドロキシ−２−ホスホリルメトキシプロピル）シトシン（ＨＰＭＰＣ）および放出類縁体およびプロドラッグ、甲状腺ホルモン受容体リガンド（例えば、ＫＢ１３００１５）、ムスカリン性Ｍ１アゴニスト、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト（例えば、カンナビノイドＮＭＤＡ−受容体アンタゴニスト デキサナビノール（ｄｅｘａｎａｂｉｎｏｌ））、降圧性リピドのようなＰＧアゴニスト、プロスタミド、ナトリウムチャネル遮断薬、ＮＭＤＡアンタゴニスト、混合活動イオンチャネル遮断薬、βアドレナリン受容体アンタゴニストとＰＧＦ２αアゴニストとの組合せ（例えば、ラタノプロスト（ｌａｔａｎｏｐｒｏｓｔ）とチモロール）、グアニル酸シクラーゼ活性化剤（例えば、動脈ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）または非ペプチド擬似体）、ＡＮＰ中性エンドペプチダーゼの阻害剤、ニトロ血管拡張剤（例えばニトログリセリン、ヒドララジン、ナトリウムニトロプルシド）、エンドセリン受容体モジュレータ（例えば、ＥＴ−１もしくは非ペプチド擬似体、ラフォトキシン（ｓａｒａｆｏｔｏｘｉｎ）−Ｓ６ｃ）、エタクリン酸、他のフェノキシ酢酸類縁体（例えば、インダクリオン（ｉｎｄａｃｒｉｎｏｎｅ）、チクリナフェン（ｔｉｃｒｙｎａｆｅｎ））、アクチン撹乱物質（例えば、ラトルンクリン（ｌａｔｒｕｎｃｕｌｉｎ））、カルシウムチャネル遮断薬（例えば、ベラパミル、ニフェジピン、ブロビンカミン（ｂｒｏｖｉｎｃａｍｉｎｅ）、ニバルジピン（ｎｉｖａｌｄｉｐｉｎｅ））、および神経保護剤。
【０６２３】
化合物１７０２と、βアドレナリン受容体アンタゴニスト、α２アドレナリン受容体アゴニスト、炭酸脱水酵素アンタゴニスト、コリン作動性アゴニスト、およびプロスタグランジン受容体アゴニストからなる群から選択される一以上の化合物を含む、緑内障のための併用療法。
【０６２４】
更なる実施形態において、本発明は、治療的有効量の化合物１７２０および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物を提供する。
【０６２５】
更なる実施形態において、本発明は、患者におけるＡ_３アデノシン受容体に関連した疾患を治療するための放送された薬学的組成物であって：
（ａ）治療上有効な量の化合物１７２０を保持する容器と；
（ｂ）患者において前記疾患を治療するための前記化合物の使用説明書とを含む包装された薬学的組成物を提供する。
【０６２６】
更なる実施形態において、本発明は、化合物１７２０を適切なキャリアと混合することを含む、化合物１７２０を含有する組成物を製造する方法を提供する。
【０６２７】
更なる実施形態において、本発明は、マレイン酸イオン、フマル酸イオン、酒石酸イオン、酢酸イオン、リン酸イオン、およびメシル酸イオンからなる群から選択される陰イオンを含む、化合物１７２０の薬学的に許容可能な塩を提供する。
【０６２８】
例４３：［２−（３Ｈ−Ｉｍｉｄａｚｏｌ−４−イル）−エチル］−（２−フェニル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−アミン（１７２０）の合成
化合物１７２０ は、下記を得るために、合成スキームＶＩＩの前駆体化合物１を使用して合成された：
【化２４１】

塩化アリール１（４００ｍｇ，１．５０ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（ｌＯｍＬ）およびヒスタミン（１．６７ｇ，１５．０ ｍｍｏｌ）を混合し、窒素雰囲気下で１２０℃まで加熱しする。６．５時間後に反応物を室温にまで冷却し、ＥｔＯＡｃおよび水の間で分配する。これらの層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出する。合体した有機相を塩水（２×）でで洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥し、濾過および濃縮して、４９４ｍｇの褐色固体を得る。この固体を冷ＭｅＯＨで洗浄し、ＭｅＯＨから再結晶させて、１９７ｍｇ（４３％）のオフホワイト色の固体（１７２０）を得る。
【０６２９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ） ｄ ３．０５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７． ＯＨｚ），３．９４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），６．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ），６．８８（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．０４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ），７．４２（ｍ，３Ｈ），７．５７（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｍ，２Ｈ）； ＭＳ（ＥＳ）：３０５．１（Ｍ^＋＋１）； Ｍｐｔ＝２３４−２３５℃
化合物の活性
化合物１７２０について、ここでの記載、特に本明細書（ＰＣＴ／ＵＳ０１／４５２８０）の第１５３〜１５４頁に記載したようにして、アデノシン３（Ａ_３）受容体拮抗放射性リガンド結合を行なった。化合物１７２０は、特に本明細書第１６９頁の表１３に記載したように、参照化合物１３０８よりも１０倍大きいＡ_３受容体結合親和性を有することが分った。
【０６３０】
参照による援用
ここに開示された全ての特許、公開された特許出願、および他の参照文献は、本明細書の一部をなすものとして明示的に本願に援用する。
【０６３１】
均等
当業者は、ここに具体的に記載した本発明の特定の実施形態に対する多くの均等物を理解し、またルーチンを超える実験を使用することなく確認することができるであろう。このような均等物は、本願の特許請求の範囲内に含まれるものである。
【０６３２】
本発明は更に、次式の化合物を提供する：
【化２４２】

ここで、
Ｒ_１ＮＲ_２は、一緒になって下記構造を有する環を形成するか、
【化２４３】

またはＲ_１はＨで、Ｒ_２は
【化２４４】

であり；
Ｒ_５は、Ｈ、または置換もしくは非置換のアルキルもしくはアルキルアリールである。[0001]
No. 09 / 728,316 filed on Dec. 1, 2000, and Ser. No. 09 / 728,607 filed on Dec. 1, 2000, and Dec. 1, 2000. No. 09 / 728,616, filed on even date, each of which is a continuation-in-part application of which is hereby incorporated by reference in its entirety and claims priority to it.
[0002]
Throughout this application i) adenosine A₁Receptors (e.g., inter alia, pages 4-76, 130-175, and 256-287 of PCT / US01 / 45280), ii) Adenosine A_2aReceptors (e.g., inter alia, PCT / US01 / 45280, pages 176-201, and 288-293), and adenosine A₃Reference is made to compounds that specifically bind to the receptor (e.g., inter alia, PCT / US01 / 45280, pp. 202-256, and 294-300).
[0003]
BACKGROUND OF THE INVENTION
Adenosine is a ubiquitous modulator of many physiological activities, especially in the cardiovascular and nervous systems. The effects of adenosine appear to be mediated by specific cell surface receptor proteins. Adenosine regulates a variety of physiological functions, including inducing sedation, vasodilation, suppressing heart rate and myocardial contraction, inhibiting platelet aggregation, stimulating gluconeogenesis, and inhibiting lipolysis. In addition to the effects of adenosine on adenylate cyclase, adenosine has been shown to open potassium channels, reduce efflux by calcium channels, and inhibit or stimulate phosphoinositide turnover by receptor-mediated mechanisms (eg, CE Muller and B. Stein "Adenosine Receptor Antagonists: Structurals and Potential Therapeutics Therapeutics, Medical and Pharmaceuticals; "A₁Adenosine receptor antagonist (A₁-Adenosine Receptor Antagonists) ", Exp. Opin. Ther. Patents 7 (5): 419 (1997)).
[0004]
Adenosine receptors are currently P₁(Adenosine) and P₂(ATP, ADP, and other nucleotides) belong to the superfamily of purine receptors that are subdivided into receptors. Four receptor subtypes for the nucleoside adenosine have been cloned so far from various species, including humans. Two receptor subtypes (A₁And A_2a) Shows affinity for adenosine in the nanomolar range, while two other known subtypes A_2bAnd A₃Is a low affinity receptor with affinity for adenosine in the low micromolar range. A₁And A₃While adenosine receptor activation can lead to inhibition of adenylate receptor cyclase activity,_2aAnd A_2bActivation causes stimulation of adenylate cyclase.
[0005]
Several types of A₁Antagonists have been developed for the treatment of cognitive disorders, renal failure, and arrhythmias. A_2aIt has been suggested that antagonists may be beneficial for patients with Parkinson's disease. Adenosine receptor antagonists can be valuable in treating allergic inflammation and asthma, particularly in view of the potential for local delivery. Available information (e.g., Nyce & Metzger, "DNA antisense for asthma in an animal model", Nature (1997) 385: 721-5) describes this pathophysiology. In the situation, A₁While antagonists can block the contraction of the smooth muscle underlying the respiratory epithelium,_2bOr A₃Receptor antagonists have been shown to be able to block mast cell degranulation and reduce the release of histamine and other inflammatory mediators. A_2bReceptors have been found throughout the gastrointestinal tract, especially in the colon and small intestine epithelium. A_2bThe receptor has been suggested to mediate the cAMP response (Strohmeier et al., J. Bio. Chem. (1995) 270: 2387-94).
[0006]
Adenosine receptors are also known to be present on the retina of various mammalian species, including bovine, porcine, monkey, rat, guinea pig, mouse, rabbit, and human (Blazynski et al., Adenosine in the mammalian retina. Discrete Distributions of Adenosin Receptors in Mammarian Retina, Journal of Neurochemistry, volume 54, pages 54, 648-655, p.₁Characterization of the receptor binding site (Characterization of Adenosine A₁-Receptor Binding Sites in Bovine Retinal Membrane), Experimental Eye Research, volume 53, pages 325-331 (1991), and Braas et al. Endogenous adenosine and adenosine receptors localized to ganglion cells of the nation's memorial system, a part of the ganglion cells of the retinal ganglion, and the endogenous adenosine and adenosine receptors localized in ganglion cells of the retina. )checking). Recently, Williams reported on the observation of adenosine transport sites in cultured human retinal cell lines (Williams et al., Nucleoside Transport Sites in cultured human retinal cell lines established by the SV-40 T antigen gene. in a Cultured Human Retinal Cell Line Established By SV-40 T Antigen Gene), Current Eye Research, volume 13, pages 109-118 (1994)).
[0007]
Compounds that modulate adenosine uptake have previously been proposed as potential therapeutics for treating retinal and optic disc damage. In U.S. Patent No. 5,780,450 (Shade), Shade discusses the use of adenosine uptake inhibitors to treat ocular disorders. Shade is a specific A₃There is no disclosure of the use of receptor inhibitors. The entire contents of U.S. Patent No. 5,780,450 is incorporated herein by reference.
[0008]
Additional adenosine receptor antagonists are needed as pharmacological tools and are of great interest as agents for the above-mentioned disease states and / or conditions.
[0009]
Summary of the Invention
The present invention relates to adenosine A₁Selectively binds to the receptor, thereby causing A₁Based on compounds that treat diseases associated with adenosine receptors, by administering to a patient a therapeutically effective amount of such a compound. Diseases to be treated include cognitive disorders, renal failure, arrhythmias, respiratory epithelium, transmitter release, sedation, vasoconstriction, bradycardia, negative inotropic and inotropic, bronchoconstriction, neutrophil chemotaxis, reflux conditions Or ulcer condition.
[0010]
The present invention is based, at least in part, on the discovery that certain N-6 substituted 7-deazapurines described below can be used to treat N-6 substituted 7-deazapurine responsive conditions. I have. Examples of such conditions include those with increased adenosine receptor activity (eg, bronchitis, gastrointestinal disorders, or asthma). These conditions may be characterized in that activation of the adenosine receptor can cause inhibition or stimulation of adenylate cyclase activity. The compositions and methods of the present invention include enantiomerically or diastereomerically pure N-6 substituted 7-deazapurines. Preferred N-6 substituted 7-deazapurines include those having an acetamido, carboxamide, substituted cyclohexyl (eg, cyclohexanol), or urea moiety attached to the N-6 nitrogen by an alkylene chain.
[0011]
The present invention modulates adenosine receptor (s) in a mammal by administering to the mammal a therapeutically effective amount of an N-6-substituted 7-deazapurine such that modulation of the activity of the adenosine receptor occurs. About the method. Suitable adenosine receptors include A₁, A₂Or A₃Family. In a preferred embodiment, the N-6 substituted 7-deazapurine is an adenosine receptor antagonist.
[0012]
The present invention further provides administering to a mammal a therapeutically effective amount of an N-6 substituted 7-deazapurine disorder in a mammal, such that treatment of the disorder in the mammal is effected. , Asthma, bronchitis, allergic rhinitis, chronic obstructive pulmonary disease, renal disorders, gastrointestinal disorders, and eye disorders. Suitable N-6-substituted 7-deazapurines include compounds of the general formula I:
Embedded image

And pharmaceutically acceptable salts thereof. R₁And R₂Are each independently a hydrogen atom, or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, or together form a substituted or unsubstituted heterocycle. R₃Is a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety. R₄Is a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety. R₅And R₆Is each independently a halogen atom (eg, chlorine, fluorine, or bromine), a hydrogen atom, or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, or R₅Is a carboxyl, an ester of a carboxyl, or a carboxamide;₄And R₅Or R₅And R₆Together form a substituted or unsubstituted heterocyclic or carbocyclic ring.
[0013]
In some embodiments, R₁And R₂Can each independently be a substituted or unsubstituted cycloalkyl or heteroarylalkyl moiety. In other embodiments, R₃Is a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted heteroaryl moiety. In yet another embodiment, R₄, R₅And R₆Can each independently be a heteroaryl moiety. In a preferred embodiment, R₁Is a hydrogen atom, and R₂Is cyclohexanol, such as transcyclohexanol, and R₃Is phenyl and R₄Is a hydrogen atom, and R₅Is a methyl group, and R₆Is a methyl group. In yet another embodiment, R₁Is a hydrogen atom, and R₂The following:
Embedded image

And R₃Is phenyl and R₄Is a hydrogen atom, and R₅And R₆Is a methyl group.
[0014]
The present invention is further directed to treating an N-6 substituted 7-deazapurine responsive condition in a mammal, such as asthma, bronchitis, allergic rhinitis, chronic obstructive pulmonary disease, renal disorders, gastrointestinal disorders, and eye disorders. It relates to a pharmaceutical composition. The pharmaceutical composition comprises a therapeutically effective amount of an N-6-substituted 7-deazapurine, and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0015]
The invention also relates to packaged pharmaceutical compositions for treating an N-6 substituted 7-deazapurine responsive condition in a mammal. The packaged pharmaceutical composition comprises a container holding a therapeutically effective amount of at least one N-6 substituted 7-deazapurine and an N-substituted 7-deazapurine responsive condition in a mammal. Instructions for using 6-substituted 7-deazapurines.
[0016]
The present invention further provides a compound having formula I:
(Where
R₁Is hydrogen,
R₂Is a substituted or unsubstituted cycloalkyl, a substituted or unsubstituted alkyl, or R₁And R₂Form together a substituted or unsubstituted heterocycle,
R₃Is a substituted or unsubstituted aryl;
R₄Is hydrogen,
R₅And R₆Are each independently hydrogen or alkyl)
And their pharmaceutically acceptable salts. The deazapurine of this embodiment preferably has a selective A₁It may be a receptor antagonist. These compounds may be useful for a number of therapeutic uses, such as treating asthma, renal failure associated with heart failure, and glaucoma. In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is a water-soluble prodrug that can be metabolized in vivo to the active agent, for example, by esterase-catalyzed hydrolysis.
[0017]
In yet another embodiment, the present invention provides that the cell is contacted with an N-6-substituted 7-deazapurine (eg, preferably, an adenosine receptor antagonist) to cause the cell to contact the adenosine receptor (eg, A₃A) a method of inhibiting the activity of
[0018]
In another aspect, the invention features a method of treating damage to an animal (eg, a human) eye by administering to the animal an effective amount of an N-6-substituted 7-deazapurine having Formula I. I do. Preferably, the N-6-substituted 7-deazapurine is A-substituted in animal cells.₃It is an adenosine receptor antagonist. The damage is to the retina or optic disc and may be acute or chronic. The injury can be, for example, the result of glaucoma, edema, ischemia, hypoxia, or trauma.
[0019]
The invention features a pharmaceutical composition comprising an N-6 substituted compound having Formula I. Preferably, the pharmaceutical preparation is an ophthalmic formulation (eg, a periocular, retrobulbar or intraocular injection formulation, a systemic formulation, or a surgical irrigation solution).
[0020]
In yet another embodiment, the invention features a compound having Formula II:
Embedded image

(Where X is N or CR₆And R₁And R₂Are each independently hydrogen, or substituted or unsubstituted alkoxy, aminoalkyl, alkyl, aryl, or alkylaryl, or together form a substituted or unsubstituted heterocyclic ring (provided that R₁And R₂Are not both hydrogen)), R₃Is a substituted or unsubstituted alkyl, arylalkyl, or aryl;₄Is hydrogen or a substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl, L is hydrogen, substituted or unsubstituted aryl, or R₄And L together form a substituted or unsubstituted heterocyclic or carbocyclic ring;₆Is hydrogen, substituted or unsubstituted alkyl, or halogen; and Q is CH₂, O, S, or NR₇(Where R₇Is hydrogen or a substituted or unsubstituted C₁~ C₆And W is a substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, arylalkyl, biaryl, heteroaryl, substituted carbonyl, substituted thiocarbonyl, or substituted sulfonyl, provided that R is₃Is pyrrolidine, R₄Is not methyl). The present invention also relates to pharmaceutically acceptable salts and prodrugs of the compounds of the present invention.
[0021]
In a preferred embodiment, in Formula II, X is CR₆And Q is CH₂, O, S, or NH (where R₆Is as defined above).
[0022]
In another embodiment of Formula II, X is N.
[0023]
The present invention further provides that a cell is contacted with a compound of the present invention so that adenosine receptor (eg, A_2bAdenosine receptor) activity. Preferably, the compound is an antagonist of the receptor.
[0024]
The present invention also provides an effective amount of a compound of formula II (eg, A_2bA gastrointestinal disorder (eg, diarrhea) or a respiratory disorder (eg, allergic rhinitis, chronic obstructive pulmonary disease) in an animal by administering to the animal. Preferably, the animal is a human.
[0025]
The invention also features a compound having the structure:
Embedded image

(Where R₁Is trans-4-hydroxycyclohexyl, 2-methylaminocarbonylaminocyclohexyl, 2-methylaminocarbonylaminocyclohexyl, acetamidoethyl or methylaminocarbonylaminoethyl, and Ar is a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring Is).
[0026]
In one embodiment of the above compound, Ar is phenyl, pyrrole, thiophene, furan, thiazole, imidazole, pyrazole, 1,2,4-triazole, pyridine, 2 (1H) -pyrrolidone, 4 (1H) -pyrrolidone, pyrazine , Pyrimidine, pyridazine, isothiazole, isoxazole, oxazole, tetrazole, naphthalene, tetralin, naphthyridine, benzofuran, benzothiophene, indole, 2,3-dihydroindole, 1H-indole, indoline, benzopyrazole, 1,3-benzodioxide Chiol, benzoxazole, purine, coumarin, chromone, quinoline, tetrahydroquinoline, isoquinoline, benzimidazole, quinazoline, pyrido [2,3-b] pyrazine, pyrido [3,4-b] pyrazine, Lido [3,2-c] pyridazine, pyrido [3,4-b] pyrimidine, 1H-pyrazole [3,4-d] pyrimidine, pteridine, 2 (1H) -quinolone, 1 (2H) -isoquinolone, 4-benzisoxazine, benzothiazole, quinoxaline, quinoline-N-oxide, isoquinoline-N-oxide, quinoxaline-N-oxide, quinazoline-N-oxide, benzoxazine, phthalazine, cinnoline, or the following structure:
Embedded image

(Where
Y is carbon or nitrogen;
R₂And R_{2 '}Is independently H, substituted or unsubstituted alkyl, substituted or unsubstituted aryl, halogen, methoxy, methylamino, or methylthio)
Which has
R₃Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, and the substituted alkyl is -C (R₇) (R₈) XR₅(Where X is O, S, or NR₆And R₇And R₈Are each independently H or alkyl;₅And R₆Are each independently alkyl or cycloalkyl, or R₅, R₆And nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring)
R₄Is H, alkyl, substituted alkyl, cycloalkyl)
Or a pharmaceutically acceptable salt, or a prodrug derivative, or a biologically active metabolite, provided that R₃Is not acetylaminoethyl, Ar is not 4-pyridyl.
[0027]
The invention also relates to compounds having the structure:
Embedded image

(Where
R₁Is aryl, substituted aryl, or heteroaryl;
R₂Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₃Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, and the substituted alkyl is -C (R₆) (R₇) NR₄R₅(Where R₆And R₇Is each H or alkyl;₄And R₅Is alkyl or cycloalkyl, respectively, or R₄, R₅And nitrogen together form a 5- to 7-membered ring system).
[0028]
The present invention also relates to the use of A in cells.₁A method of inhibiting the activity of an adenosine receptor, comprising contacting said cell with said compound.
[0029]
[Detailed description]
The features and other details of the invention will now be more particularly described and pointed out in the claims. It will be understood that the specific embodiments of the present invention have been presented for purposes of illustration and not limitation. The basic features of the invention can be used in various embodiments without departing from the scope of the invention.
[0030]
The present invention relates to a method of treating an N-6 substituted 7-deazapurine responsive condition in a mammal. The method comprises administering to the mammal a therapeutically effective amount of an N-6-substituted 7-deazapurine described below, such that treatment of the N-6-substituted 7-deazapurine responsive condition in the mammal is effected. .
[0031]
The term "N-6 substituted 7-deazapurine responsive state" is intended to encompass disease states or conditions characterized by responsiveness to treatment with an N-6 substituted 7-deazapurine of the invention as described below. Intended, for example, treatment includes a significant reduction in the effect of at least one symptom or condition achieved with the N-6-substituted 7-deazapurines of the present invention. Usually such a condition is associated with increased adenosine in the host, which results in the host releasing toxins, inflammation, coma, water retention, weight gain or weight loss, pancreatitis, emphysema, rheumatoid arthritis, deformity Including, but not limited to, osteoarthritis, multiple organ failure, infant and adult respiratory distress syndrome, allergic rhinitis, chronic obstructive pulmonary disease, eye disorders, gastrointestinal disorders, skin tumor promotion, immunodeficiency, and asthma They often suffer from physiological symptoms (eg, CE Muller and B. Stein, "Adenosine Receptor Antagonists: Structures and Potential Therapeutics, Adenosine Receptor Antagonists: Structure and Potential Therapeutics," aceutical Design, 2: 501 (1996), and C.E. Muller "A₁Adenosine receptor antagonist (A₁-Adenosine Receptor Antagonists) ", Exp. Opin. Ther. Patents 7 (5): 419 (1997); Feoktistove, R .; Polosa, S.M. T. Holgate and I. Eiaggioni "Adenosine A_2BReceptors: a new therapeutic target in asthma? (Adenosine A_2b receptors: a novel therapeutic target in asthma? ) "TIPS 19: 148 (1998)). Effects often associated with such symptoms include, but are not limited to, fever, shortness of breath, nausea, diarrhea, weakness, headache, and even death. In one embodiment, the N-6 substituted 7-deazapurine responsive state includes an adenosine receptor such as A₁, A_2a, A_2b, A₃Disease states mediated by such stimuli, resulting in modulation of calcium levels in cells and / or the activity of PLC (phospholipase C). In a preferred embodiment, the N-6 substituted 7-deazapurine responsive state is associated with adenosine receptor (s), for example, the N-6 substituted 7-deazapurine acts as an antagonist. Examples of suitable responsive conditions that can be treated by compounds of the present invention, eg, adenosine receptor subtypes that mediate biological effects, include central nervous system (CNS) effects, cardiovascular effects, renal Effects, respiratory effects, immunological effects, gastrointestinal effects, and metabolic effects. The relative amount of adenosine in a patient can be related to the effects listed below, ie, an increase in adenosine levels can elicit an effect, eg, an undesirable physiological response (eg, asthma attack).
[0032]
The effects of the CNS include transmitter release (A₁), Sedation (A)₁), Decrease in motor activity (A_2a), Antispasmodic activity, chemoreceptor stimulation (A₂), And hyperalgesia. Therapeutic uses of the compounds of the present invention include dementia, Alzheimer's disease and memory enhancement.
[0033]
Cardiovascular effects include vasodilation (A_2a), (A_2b) And (A)₃), Vasoconstriction (A₁), Bradycardia (A₁), Platelet inhibition (A_2a), Negative inotropic and inotropic conduction (A₁), Arrhythmias, tachycardia, and angiogenesis. Therapeutic uses of the compounds of the present invention include, for example, prevention of ischemia-induced defects in the heart, and inotropic drugs, protection of myocardial tissue, and repair of cardiac function.
[0034]
The effects of the kidney include a decrease in GFR (A₁), Mesangial cell contraction (A₂), Antidiuresis (A₁) And inhibition of renin release (A₁). Suitable therapeutic uses of the compounds of the present invention include diuretics, natriuretics, potassium preservatives, renal protectants / prevention of acute renal failure, antihypertensives, antiedema and antinephritis agents Is used.
[0035]
Respiratory effects include bronchodilation (A₂), Bronchoconstriction (A₁), Chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, mucus secretion and hypopnea (A₂). Suitable therapeutic uses for the compounds of the present invention include asthma sedation use, transplantation and treatment of lung disease after respiratory disorders.
[0036]
Immunological effects include immunosuppression (A₂), Neutrophil chemotaxis (A₁), Neutrophil superoxide generation (A_2a), And mast cell granulation (A_2bAnd A₃). Therapeutic uses of antagonists include allergic and non-allergic inflammation (eg, release of histamine and other inflammatory mediators).
[0037]
Gastrointestinal effects include acid secretion inhibition (A₁). Therapeutic uses may include reflux and ulcer conditions; gastrointestinal effects may also include colon, intestinal and diarrheal diseases such as diarrheal diseases associated with enteritis (A_2b).
[0038]
Eye disorders include retinal and optic disc damage and trauma-related disorders (A₃). In a preferred embodiment, the ocular disorder is glaucoma.
[0039]
Other therapeutic uses for the compounds of the present invention include obesity (lipolytic properties), treatment of hypertension, treatment of depression, sedatives, anxiolytics, antiepileptics, and laxatives (eg, without causing diarrhea) That achieve motility).
[0040]
The term "disease state" is caused by or associated with undesired levels of adenosine, adenyl cyclase activity, increased physiological activity associated with aberrant stimulation of adenosine receptors, and / or increased cAMP. State. In one embodiment, the disease condition is, for example, asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, bronchitis, renal disorder, gastrointestinal disorder, or eye disorder. Further examples include chronic bronchitis, and cystic fibrosis. Suitable examples of inflammatory disorders include non-lymphocytic leukemia, myocardial ischemia, angina, infarction, cerebrovascular ischemia, intermittent claudication, critical limb ischemia, venous hypertension, varicose veins, venous ulceration, And arteriosclerosis. Reperfusion injury conditions include, for example, any post-operative trauma such as reconstructive surgery, thrombolysis or angioplasty.
[0041]
Does the term "treating an N-6 substituted 7-deazapurine responsive condition" or "treating an N-6 substituted 7-deazapurine responsive condition" significantly reduce a physiological condition in a mammal? It is intended to encompass a change in the disease state or condition as described above so that it can be minimized. The term also includes the control, prevention or inhibition of the physiological symptoms or effects associated with abnormal amounts of adenosine. In one preferred embodiment, controlling the disease state or condition is eradicating the disease state or condition. In another preferred embodiment, the control is selective such that abnormal levels of adenosine receptor activity are controlled without affecting other physiological systems and parameters.
[0042]
The term "N-6 substituted 7-deazapurine" is art-recognized and has the following formula I:
Embedded image

Is intended to encompass compounds having the formula:
[0043]
"N-substituted 7-deazapurine" includes pharmaceutically acceptable salts, and in one embodiment, certain N-6 substituted purines described herein.
[0044]
In certain embodiments, the N-6 substituted 7-deazapurine is not N-6 benzyl substituted or N-6 phenylethyl substituted. In other embodiments, R₄Is neither benzyl-substituted nor phenylethyl-substituted. In a preferred embodiment, R₁And R₂Are not hydrogen atoms. In still other preferred embodiments, R₃Is not a hydrogen atom.
[0045]
The term "therapeutically effective amount" of an N-6-substituted 7-deazapurine described below refers to the ability of the N-6-substituted 7-deazapurine to perform its intended function in a mammal (e.g., in a mammal). The amount of a therapeutic compound necessary or sufficient to cure a sexual condition, or a disease state. The effective amount of the therapeutic compound is the amount of causative agent already present in the mammal, the age, sex, and weight of the mammal, and the N-6 substituted 7-deazapurine response of the therapeutic compound of the invention in the mammal. It can vary according to factors such as the ability to affect sexual status.
[0046]
One of skill in the art would be able to study the above factors and make a determination as to an effective amount of a therapeutic compound without undue experimentation. In vitro or in vivo assays can also be used to determine the "effective amount" of the therapeutic compound described below. One skilled in the art will select an appropriate amount of a therapeutic compound for use in the assays described above or as a therapeutic treatment.
[0047]
A therapeutically effective amount preferably reduces at least one symptom or effect associated with the N-6 substituted 7-deazapurine responsive state or symptom during treatment by at least about 20% relative to an untreated patient. Preferably, at least about 40%, more preferably at least about 60%, and even more preferably at least about 80%). One of skill in the art can design the assay to measure a reduction in such symptoms and / or effects. Any art-recognized assay that measures such parameters is intended to be included as part of the present invention. For example, if asthma is a condition to be treated, the volume of air consumed from the patient's lungs is measured before and after treatment to measure the increase in volume using art-recognized techniques. be able to. Similarly, if the inflammation is in a condition to be treated, the inflamed area is measured before and after treatment using an art-recognized technique to measure the reduction in the inflamed area. can do.
[0048]
The term "cell" includes both prokaryotic and eukaryotic cells.
[0049]
The term "animal" includes any organism that has an adenosine receptor or is susceptible to an N-6 substituted 7-deazapurine responsive state. Examples of animals include yeast, mammals, reptiles, and birds. Animals also include transgenic animals.
[0050]
The term "mammal" is art-recognized and includes animals, more preferably warm-blooded animals, most preferably cows, sheep, pigs, horses, dogs, cats, rats, mice, and humans Intended to be. A mammal susceptible to an N-6 substituted 7-deazapurine responsive condition, eg, inflammation, emphysema, asthma, central nervous system symptoms, or acute respiratory distress syndrome, is included as part of the present invention.
[0051]
In another aspect, the invention provides a method for administering a therapeutically effective amount of an N-6-substituted 7-deazapurine to a mammal, wherein modulation of the adenosine receptor is effected in the mammal. Permissible). Suitable adenosine receptors include A₁, A₂Or A₃Family. In a preferred embodiment, the N-6 substituted 7-deazapurine is an adenosine receptor antagonist.
[0052]
The term "modulates adenosine receptor" refers to the compound that interacts with the adenosine receptor (s) to increase the physiological activity associated with the effects of the adenosine receptor or subsequent cascades resulting from modulation of the adenosine receptor. It is intended to encompass the case of causing an activity, decreased physiological activity or abnormal physiological activity. Physiological activities associated with adenosine receptors include induction of sedation, vasodilation, suppression of heart rate and myocardial contraction, inhibition of platelet aggregation, stimulation of gluconeogenesis, and inhibition of lipolysis, opening of potassium channels And reduced calcium channel efflux.
[0053]
The terms "modulate", "modulating" and "modulation" prevent, for example, in the context of the therapeutic methods of the present invention, from increasing undesired physiological activity associated with aberrant stimulation of adenosine receptors. , Eradication, or inhibition. In another embodiment, the term modulates includes an antagonistic effect, such as a decrease in the activity or production of mediators of allergy and allergic inflammation due to overstimulation of adenosine receptor (s). For example, the therapeutic deazapurines of the invention can interact with adenosine receptors, for example, to inhibit adenylate cyclase activity.
[0054]
The term "conditions characterized by abnormal adenosine receptor activity" refers to that stimulation of the receptor causes a series of biochemical and / or physiological events that are directly or indirectly related to the disease, disorder or condition. In that regard, it is intended to include diseases, disorders or conditions associated with aberrant stimulation of the adenosine receptor. This stimulation of the adenosine receptor need not be the sole causative agent of the disease, disorder or condition, but is responsible for causing some of the symptoms normally associated with the disease, disorder, or condition being treated. Aberrant stimulation of the receptor may be the only factor, or at least one other agent may be involved in the condition being treated. Examples of symptoms include the disease states listed above, including those manifested by the presence of inflammation, gastrointestinal disorders, and increased adenosine receptor activity. Preferred examples include conditions associated with asthma, allergic rhinitis, chronic obstructive pulmonary disease, emphysema, bronchitis, gastrointestinal disorders, and glaucoma.
[0055]
The term "treating a condition characterized by abnormal adenosine receptor activity, or treating the condition" is intended to include alleviation or reduction of at least one condition normally associated with the condition. Treatment also includes alleviation or reduction of two or more symptoms. Preferably, the treatment cures (eg, substantially eliminates) the symptoms associated with the symptoms.
[0056]
The present invention relates to N-6 substituted 7-deazapurines, which are compounds having the general formula I:
Embedded image

(Where R₁And R₂Are each independently a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, or together form a substituted or unsubstituted heterocycle;₃Is a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety;₄Is a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety;₅And R₆Is each independently a halogen atom (eg, chlorine, fluorine, or bromine), a hydrogen atom, or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety;₄And R₅Or R₅And R₆Together form a substituted or unsubstituted heterocyclic or carbocyclic ring). Also included are pharmaceutically acceptable salts of N-6-substituted 7-deazapurines.
[0057]
In some embodiments, R₁And R₂Can each independently be a substituted or unsubstituted cycloalkyl or heteroarylalkyl moiety. In other embodiments, R₃Is a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted heteroaryl moiety. In yet another embodiment, R₄, R₅And R₆Can each independently be a heteroaryl moiety.
[0058]
In one embodiment, R₁Is a hydrogen atom, and R₂Is a substituted or unsubstituted cyclohexane, cyclopentyl, cyclobutyl, or cyclopropane moiety;₃Is a substituted or unsubstituted phenyl moiety;₄Is a hydrogen atom, and R₅And R₆Are both methyl groups.
[0059]
In another embodiment, R₂Is cyclohexanol, cyclohexanediol, cyclohexylsulfonamide, cyclohexaneamide, cyclohexylester, cyclohexene, cyclopentanol, or cyclopentanediol;₃Is a phenyl moiety.
[0060]
In yet another embodiment, R₁Is a hydrogen atom, and R₂Is cyclohexanol and R₃Is a substituted or unsubstituted phenyl, pyridine, furan, cyclopentane, or thiophene moiety;₄Is a hydrogen atom, a substituted alkyl, aryl, or arylalkyl moiety;₅And R₆Are each independently a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, or alkylaryl moiety.
[0061]
In yet another embodiment, R₁Is a hydrogen atom, and R₂Is a substituted or unsubstituted alkylamine, arylamine or alkylarylamine, substituted or unsubstituted alkylamide, arylamide or alkylarylamide, substituted or unsubstituted alkylsulfonamide, arylsulfonamide or alkylarylsulfonamide Substituted or unsubstituted alkyl urea, aryl urea or alkyl aryl urea, substituted or unsubstituted alkyl carbamate, aryl carbamate or alkyl aryl carbamate, substituted or unsubstituted alkyl carboxylic acid, aryl carboxylic acid or alkyl aryl carboxylic acid , R₃Is a substituted or unsubstituted phenyl moiety;₄Is hydrogen and R₅And R₆Is a methyl group.
[0062]
In yet another embodiment, R₂Is guanidine, modified guanidine, cyanoguanidine, thiourea, thioamide, or amidine.
[0063]
In one embodiment, R₂The following:
Embedded image

(Where R_2a~ R_2cIs each independently a hydrogen atom or a saturated or unsaturated alkyl, aryl, or alkylaryl moiety;_2dIs a hydrogen atom or a saturated or unsaturated alkyl, aryl, or alkylaryl moiety, NR_2eR_2fOr R_2g(Where R_2e~ R_2gAre each independently a hydrogen atom or a saturated or unsaturated alkyl, aryl, or alkylaryl moiety)
Can be Alternatively, R_2aAnd R_2bCan together form a carbocyclic or heterocyclic ring having about 3-6 membered ring size (eg, a cyclopropyl, cyclopentyl, cyclohexyl group).
[0064]
In one aspect of the invention, R₅And R₆Are not both methyl, preferably R₅And R₆One is an alkyl group, such as a methyl group, and the other is a hydrogen atom.
[0065]
In another aspect of the invention, R₄Is 1-phenylethyl;₁Is a hydrogen atom, R₃Is not phenyl, 2-chlorophenyl, 3-chlorophenyl, 4-chlorophenyl, 3,4-dichlorophenyl, 3-methoxyphenyl, or 4-methoxyphenyl, or R₄And R₁Is 1-phenylethyl, R₃Is not a hydrogen atom, or R₄Is a hydrogen atom, and R₃Is phenyl, R₁Is not phenylethyl.
[0066]
In another aspect of the invention, R₅And R₆Are together carbocycles, for example:
Embedded image

Or to form a pyrimido [4,5-6] indole,₄Is 1- (4-methylphenyl) ethyl, phenylisopropyl, phenyl, or 1-phenylethyl,₃Is not phenyl, or R₄When R is 1-phenylethyl,₃Is not a hydrogen atom. R₅And R₆May be aromatic or aliphatic and may have from 4 to 12 carbon atoms (e.g., naphthyl, phenylcyclohexyl, etc.), preferably from 5 to 7 carbon atoms (e.g., cyclopentyl) Or cyclohexyl). Alternatively, R₅And R₆Can together form a heterocycle, such as those disclosed below. Typical heterocycles contain 4 to 12 carbon atoms, preferably 5 to 7 carbon atoms, and can be aromatic or aliphatic. Heterocycles can be further substituted, including substituting one or more carbon atoms of the ring structure with one or more heteroatoms.
[0067]
In yet another aspect of the invention, R₁And R₂Forms a heterocyclic ring. Representative examples include, but are not limited to, the heterocycles listed below, such as morpholino, piperazine, and the like (eg, 4-hydroxypiperidine, 4-aminopiperidine). Where R₁And R₂But together with the following piperazine groups:
Embedded image

(Where R₇Can be a hydrogen atom or a substituted or unsubstituted alkyl, aryl, alkylaryl moiety)
To form
[0068]
In yet another aspect of the invention, R₄And R₅Are together heterocycles, for example:
Embedded image

Wherein the heterocycle can be aromatic or aliphatic and also forms a ring having 4 to 12 carbon atoms (eg, naphthyl, phenylcyclohexyl, etc.) And can be aromatic or aliphatic (eg, cyclohexyl, cyclopentyl).
[0069]
Heterocycles may be further substituted, including substituting carbon atoms of the ring structure with one or more heteroatoms. Alternatively, R₄And R₅Can together form a heterocycle such as those disclosed below.
[0070]
In certain embodiments, the N-6 substituted 7-deazapurine is not N-6 benzyl substituted or N-6 phenylethyl substituted. In other embodiments, R₄Is neither benzyl-substituted nor phenylethyl-substituted. In a preferred embodiment, R₁And R₂Are not hydrogen atoms. In still other preferred embodiments, R₃Is not a hydrogen atom.
[0071]
The compounds of the present invention have been disclosed in WO 99/33815, filed March 9, 1998 and published on July 8, 1998, and in PCT / US98 / 04595, PCT / US98 / 04595. Prodrugs may be included. The entire content of WO 99/33815 is expressly incorporated herein by reference. Water-soluble prodrugs are metabolized in vivo to the active drug, for example, by esterase-catalyzed hydrolysis. Examples of potential prodrugs include, for example, -OC (O) (Z) NH₂Wherein Z is a naturally occurring or non-naturally occurring amino chain, or an analog thereof, an α, β, γ, or ω amino acid, or a side chain of a dipeptide. R as alkyl₂And deazapurine having the formula: Preferred amino acid side chains include glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, lysine, α-methylalanine, aminocyclopropanecarboxylic acid, azetidine-2-carboxylic acid, β-alanine, γ-aminobutyric acid, alanine-alanine, Or the side chain of glycine-alanine.
[0072]
In a further embodiment, the present invention provides compounds of formula I wherein R₁Is hydrogen and R₂Is a substituted or unsubstituted cycloalkyl, a substituted or unsubstituted alkyl, or R₁And R₂Together form a substituted or unsubstituted heterocyclic ring;₃Is a substituted or unsubstituted aryl;₄Is hydrogen and R₅And R₆Are each independently hydrogen or alkyl), and pharmaceutically acceptable salts thereof. The deazapurine of this embodiment is potentially a selective A₃It may be a receptor antagonist.
[0073]
In one embodiment, R₂Is a substituted (eg, hydroxy-substituted) or unsubstituted cycloalkyl. In a preferred embodiment, R₂And R₄Is hydrogen and R₃Is a substituted or unsubstituted phenyl;₅And R₆Are each alkyl. Preferably, R₂Is monohydroxycyclopentyl or monohydroxycyclohexyl. R₂Is also -NH-C (= O) E, wherein E is a substituted or unsubstituted C₁~ C₄It may be substituted with an alkyl (eg, an alkylamine (eg, ethylamine)).
[0074]
R₁And R₂May also together form a substituted or unsubstituted heterocycle, and may be substituted with an amine or acetamido group.
[0075]
In another aspect, R₂Is -A-NHC (= O) B (where A is unsubstituted C₁~ C₄Alkyl (eg, ethyl, propyl, butyl), wherein B is a substituted or unsubstituted C₁~ C₄Alkyl (e.g., methyl, aminoalkyl (e.g., aminomethyl or aminoethyl) alkylamino) (e.g., methylamino, ethylamino);₁And R₄Is hydrogen.₃Is a substituted or unsubstituted phenyl;₅And R₆Are each alkyl. B may be a substituted or unsubstituted cycloalkyl, such as cyclopropyl or 1-amino-cyclopropyl.
[0076]
In another embodiment, preferably R₅And R₆Is each alkyl, R₃Is a substituted or unsubstituted phenyl. Preferably, R₃May have one or more substituents (e.g., o, m, or p-chlorophenyl, o, m, or p-fluorophenyl).
[0077]
Suitably, preferably R₅And R₆Is each alkyl, R₃May be a substituted or unsubstituted heteroaryl. Examples of heteroaryl groups include pyridyl, pyrimidyl, pyridazinyl, pyrazinyl, pyrrolyl, triazolyl, thiazolyl, oxazolyl, oxadiazolyl, furanyl, methylenedioxyphenyl, and thiophenyl. Preferably, R₃Is 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, 2-pyrimidyl, or 3-pyrimidyl.
[0078]
Preferably, in one embodiment, R₅And R₆Is hydrogen. In another embodiment, R₅And R₆Are each methyl.
[0079]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurines of the invention are water-soluble prodrugs that can be metabolized in vivo to the active agent, for example, by esterase-catalyzed hydrolysis. Preferably, the prodrug is -OC (O) (Z) NH₂Wherein Z is a naturally occurring or non-naturally occurring amino acid, an analog thereof, an α, β, γ, or ω amino acid, or a side chain of a dipeptide, or a cycloalkyl substituted with Some R₂Group. Preferred amino acid side chains include glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, lysine, α-methylalanine, aminocyclopropanecarboxylic acid, azetidine-2-carboxylic acid, β-alanine, γ-aminobutyric acid, alanine-alanine, Or the side chain of glycine-alanine.
[0080]
In a particularly preferred embodiment, Z is the side chain of glycine and R₂Is cyclohexyl; R₃Is phenyl and R₅And R₆Is methyl.
[0081]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (cis-3-hydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0082]
In another embodiment, deazapurine is 4- (cis-3- (2-aminoacetoxy) cyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine trifluoroacetate. is there.
[0083]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (3-acetamido) piperidinyl-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0084]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (2-N'-methylureapropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0085]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetamidobutyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0086]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (2-N'-methylureabutyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0087]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (2-aminocyclopropylacetamidoethyl) amino-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0088]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (3-chlorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0089]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (3-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0090]
In another embodiment, the deazapurine is 4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (4-pyridyl) -7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0091]
In yet another embodiment, the invention provides that the cell is contacted with an N-6-substituted 7-deazapurine (eg, preferably, an adenosine receptor antagonist) to cause the cell to have an adenosine receptor (eg, A₁, A_2A, A_2BOr preferably A₃A) a method of inhibiting the activity of
[0092]
In another aspect, the invention features a method of treating damage to an animal's eye by administering an effective amount of an N-6-substituted 7-deazapurine to the animal (eg, a human). Preferably, the N-6-substituted 7-deazapurine is A-substituted in animal cells.₃It is an adenosine receptor antagonist. The damage is to the retina or optic disc and may be acute or chronic. The injury can be, for example, the result of glaucoma, edema, ischemia, hypoxia, or trauma.
[0093]
In a preferred embodiment, the present invention relates to a compound of the above formula II wherein X is N or CR₆And R₁And R₂Are each independently hydrogen, or substituted or unsubstituted alkoxy, aminoalkyl, alkyl, aryl, or alkylaryl, or together form a substituted or unsubstituted heterocyclic ring (provided that R₁And R₂Are not both hydrogen)), R₃Is a substituted or unsubstituted alkyl, arylalkyl, or aryl;₄Is hydrogen or a substituted or unsubstituted C₁~ C₆L is hydrogen, substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl or R₄And L together form a substituted or unsubstituted heterocyclic or carbocyclic ring;₆Is hydrogen, substituted or unsubstituted alkyl, or halogen; and Q is CH₂, O, S, or NR₇(Where R₇Is hydrogen, or substituted or unsubstituted C₁~ C₆And W is a substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, alkynyl, aryl, arylalkyl, biaryl, heteroaryl, substituted carbonyl, substituted thiocarbonyl, or substituted sulfonyl, provided that R is₃Is pyrrolidino, R₄Is not methyl).
[0094]
In one embodiment, in the compound of Formula II, X is CR₆And Q is CH₂, O, S, or NH. In another embodiment, X is N.
[0095]
In a further embodiment of the compound of Formula II, W is a substituted or unsubstituted aryl, 5- or 6-membered heteroaryl, or biaryl. W may be substituted with one or more substituents. Examples of substituents include halogen, hydroxy, alkoxy, amino, aminoalkyl, aminocarboxamide, CN, CF₃, CO₂R₈, CONHR₈, CONR₈R₉, SOR₈, SO₂R₈, And SO₂NR₈R9 (where R₈And R₉Each independently represents hydrogen or substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, or arylalkyl. Preferably, W can be a substituted or unsubstituted phenyl (eg, methylenedioxyphenyl). W may also be a substituted or unsubstituted 5-membered heteroaryl ring (eg, pyrrole, pyrazole, oxazole, imidazole, triazole, tetozole, furan, thiophene, thiazole, and oxadiazole). Preferably, W may be a 6 membered heteroaryl ring (eg, pyridyl, pyrimidyl, pyridanidyl, pyrazinal, and thiophenyl). In a preferred embodiment, W can be 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, 2-pyrimidyl, 4-pyrimidyl, or 5-pyrimidyl).
[0096]
In one preferred embodiment of the compounds of formula II, Q is NH and W is unsubstituted or N-substituted with substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, or arylalkyl. 3-pyrazolo ring.
[0097]
In another embodiment of the compound of formula II, Q is oxygen and W is 2-thiazolo, unsubstituted or substituted with substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, or arylalkyl. It is a ring.
[0098]
In another embodiment of the compound of Formula II, W is a substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl (eg, cyclopentyl), or arylalkyl. Examples of substituents include halogen, hydroxy, substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, arylalkyl, or NHR₁₀(Where R₁₀Is hydrogen, or substituted or unsubstituted alkyl, cycloalkyl, aryl, or arylalkyl.
[0099]
In yet another embodiment, the present invention provides compounds of formula II, wherein W is-(CH₂)_a-C (= O) Y or-(CH₂)_b-C (= S) Y, a is an integer of 0 to 3, and Y is aryl, alkyl, arylalkyl, cycloalkyl, heteroaryl, alkynyl, NHR₁₁R₁₂Or if Q is NH, OR_Thirteen(Where R₁₁, R₁₂And R_ThirteenAre each independently hydrogen or substituted or unsubstituted alkyl, aryl, arylalkyl, or cycloalkyl)). Preferably, Y is a 5- to 6-membered heteroaryl ring.
[0100]
Further, W is-(CH₂)_b-S (= O)_jY (where j is 1 or h2, b is 0, 1, 2, or 3; Y is aryl, alkyl, arylalkyl, cycloalkyl, alkynyl, heteroaryl, NHR₁₄R_FifteenWhere b is 1 and Q is CH₂(Where R₁₄, R_Fifteen, And R₁₆Are each independently hydrogen or substituted or unsubstituted alkyl, aryl, arylalkyl, or cycloalkyl.
[0101]
In another embodiment, R₃Is selected from the group consisting of substituted and unsubstituted phenyl, pyridyl, pyrimidyl, pyridazinyl, pyrazinal, pyrrolyl, triazolyl, thioazolyl, oxazolyl, oxadiazolyl, pyrazolyl, furanyl, methylenedioxyphenyl, and thiophenyl. R₃R is phenyl₃May be substituted, for example, with hydroxy, alkoxy (eg, methoxy), alkyl (eg, tolyl), and halogen (eg, o, m or p-fluorophenyl, or o, m or p-chlorophenyl). Preferably, R₃May be 2, 3 or 4-pyridyl, or 2 or 3-pyrimidyl.
[0102]
The present invention also provides R₆Is hydrogen, or C₁~ C₃It relates to deazapurine, which is alkyl. Preferably, R₆Is hydrogen.
[0103]
The present invention also provides R₁Is hydrogen and R₂Is substituted or unsubstituted alkyl or alkoxy, substituted or unsubstituted alkylamine, arylamine, or alkylarylamine, substituted or unsubstituted aminoalkyl, aminoaryl or aminoalkylaryl, substituted or unsubstituted alkylamide, aryl Amide or alkylarylamide, substituted or unsubstituted alkylsulfonamide, arylsulfonamide or alkylarylsulfonamide, substituted or unsubstituted alkyl urea, alkyl urea or alkyl aryl urea, substituted or unsubstituted alkyl carbamate, aryl carbamate or Alkylaryl carbamates or substituted or unsubstituted alkylcarboxylic acids, arylcarboxylic acids or alkylarylcarboxylic acids That include a deazapurine.
[0104]
Preferably, R₂Is a substituted or unsubstituted cycloalkyl, such as a mono- or dihydroxy-substituted cyclohexyl or cyclopentyl (preferably a monohydroxy-substituted cyclohexyl or monohydroxy-substituted cyclopentyl).
[0105]
Preferably, R₂Is the following formula:
Embedded image

(Where A is optionally C₁~ C₆C substituted with an alkyl, halogen, hydroxyl, carboxyl, thiol, or amino group₁~ C₆Alkyl, C₃~ C₇Cycloalkyl, a chain having 1 to 7 atoms, or a ring having 3 to 7 atoms, wherein B is methyl, N (Me)₂, N (Et)₂, NHMe, NHEt, (CH)_2rNH₃+, NH (CH₂)_rCH₃, (CH₂)_rNH₂, (CH₂)_rCHCH₃NH₂, (CH₂)_rNHMe, (CH₂)_rOH, CH₂CN, (CH₂)_mCO₂H, CHR₁₈R₁₉Or CHMeOH (where r is an integer from 0 to 2; m is 1 or 2;₁₈Is alkyl and R₁₉Is NH₃+ Or CO₂H or R₁₈And R₁₉Together with:
Embedded image

Wherein p is 2 or 3;₁₇Is arbitrarily C₁~ C₆C substituted with an alkyl, halogen, hydroxyl, carboxyl, thiol, or amino group₁~ C₆Alkyl, C₃~ C₇Cycloalkyl, a chain having 1 to 7 atoms, or a ring having 3 to 7 atoms)
May be provided.
[0106]
Suitably, A is a substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl. B is a substituted or unsubstituted C₁~ C₆It may be alkyl.
[0107]
In a preferred embodiment, R₂Has the formula -A-NHC (= O) B. In a particularly preferred embodiment, A is -CH₂CH₂And B is methyl.
[0108]
The compounds of the present invention may include water-soluble prodrugs that are metabolized in vivo to the active agent, for example, by esterase-catalyzed hydrolysis. Examples of potential prodrugs include, for example, -OC (O) (Z) NH₂Wherein Z is a naturally occurring or non-naturally occurring amino chain, or an analog thereof, an α, β, γ, or ω amino acid, or a side chain of a dipeptide. R as alkyl₂And deazapurine having the formula: Preferred amino acid side chains include glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, lysine, α-methylalanine, aminocyclopropane, carboxylic acid, azetidine-2-carboxylic acid, β-alanine, γ-aminobutyric acid, and alanine-alanine. Or the side chain of glycine-alanine.
[0109]
In another embodiment, R₁And R₂Together with:
Embedded image

Wherein n is 1 or 2 wherein the ring is optionally one or more of hydroxyl, amino, thiol, carboxyl, halogen, CH₂OH, CH₂NHC (＝ O) alkyl, or CH₂NHC (= O) NH alkyl group). Preferably, n is 1 or 2, and the ring is substituted with -NHC (= O) alkyl.
[0110]
In one preferred embodiment, R₁Is hydrogen and R₂Is a substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl and R₃Is a substituted or unsubstituted phenyl;₄Is hydrogen and L is hydrogen or substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl and Q is O, S or NR₇(Where R₇Is hydrogen or a substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl)) and W is a substituted or unsubstituted aryl. Preferably, R₂Is -A-NHC (= O) B (where A and B are each independently a substituted or unsubstituted C₁~ C₄Alkyl). For example, A is CH₂CH₂It may be. B can be, for example, alkyl (eg, methyl) or aminoalkyl (eg, aminomethyl). Preferably, R₃Is unsubstituted phenyl and L is hydrogen. R₆May be methyl or, preferably, hydrogen. Preferably, Q is O, S, or NR₇(Where R₇Is hydrogen or a substituted or unsubstituted C₁~ C₆Alkyl, for example methyl). W is a substituted or unsubstituted phenyl (eg, alkoxy-substituted, halogen-substituted). Preferably, W is P-fluorophenyl, p-chlorophenyl, or P-methoxyphenyl. W can also be heteroaryl, for example, 2-pyridyl.
[0111]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6-phenoxymethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0112]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-fluorophenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0113]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-chlorophenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0114]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-methoxyphenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0115]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (2-pyridyloxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0116]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (N-phenylamino) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0117]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (N-methyl-N-phenylamino) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0118]
In a particularly preferred embodiment, the deazapurine is 4- (2-N'-methylureaethyl) amino-6-phenoxymethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine.
[0119]
The present invention further provides that a cell is contacted with a compound of the present invention so that adenosine receptor (eg, A_2bAdenosine receptor) activity. Preferably, the compound is an antagonist of the receptor.
[0120]
The invention also provides an effective amount of a compound of the invention (eg, A_2bA gastrointestinal disorder (eg, diarrhea) in an animal by administering the antagonist to the animal. Preferably, the animal is a human.
[0121]
In another embodiment, the invention is directed to a pharmaceutical composition comprising an N-6-substituted 7-deazapurine of the invention and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0122]
The present invention also provides for administering a therapeutically effective amount of a deazapurine of the present invention to a mammal such that treatment of the N-6 substituted 7-deazapurine responsive condition in the animal results in an N-6 substituted in the animal. A method for treating a 7-deazapurine responsive condition. Suitably, the disease condition may be an adenosine mediated disorder. Examples of preferred disease states include central nervous system disorders, cardiovascular disorders, renal disorders, inflammatory disorders, allergic disorders, gastrointestinal disorders, eye disorders, and respiratory disorders.
[0123]
The term "alkyl" refers to straight-chain alkyl groups, branched-chain alkyl groups, cycloalkyl (alicyclic) groups, alkyl-substituted cycloalkyl groups, and groups of saturated aliphatic groups, including cycloalkyl-substituted alkyl groups. The term alkyl further includes alkyl groups that can further include oxygen, nitrogen, sulfur or phosphorus atoms (eg, oxygen, nitrogen, sulfur or phosphorus atoms) replacing one or more carbons of the hydrocarbon backbone. In preferred embodiments, no more than 30 straight or branched chain alkyls in the backbone (eg, C₁~ C₃₀For the branched chain, C₃~ C₃₀), More preferably up to 20 carbon atoms. Likewise, preferred cycloalkyls have from 4-10 carbon atoms in their ring structure, and more preferably have 5, 6 or 7 carbons in the ring structure.
[0124]
Furthermore, the term alkyl, as used throughout the specification and claims, is intended to encompass both "unsubstituted alkyl" and "substituted alkyl," with the latter meaning one or more of the hydrocarbon backbone. Refers to an alkyl moiety having a substituent that replaces a hydrogen on a carbon. Such substituents include, for example, halogen, hydroxyl, alkylcarbonyloxy, arylcarbonyloxy, alkoxycarbonyloxy, aryloxycarbonyloxy, carboxylate, alkylcarbonyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylthiocarbonyl, alkoxyl, phosphate, phosphonate, Phosphinates, cyano, amino (including alkylamino, dialkylamino, arylamino, diarylamino, and alkylarylamino), acylamino (including alkylcarbonylamino, arylcarbonylamino, carbamoyl, and ureido), amidino, imino, sulfhydryl , Alkylthio, arylthio, thiocarboxylate, sulfate, sulfonate, Famoiru, sulfonamido, nitro, trifluoromethyl, cyano, azido, heterocyclyl, alkylaryl, or an aromatic or heteroaromatic moiety. It will be appreciated by those skilled in the art that the moieties substituted on the hydrocarbon chain may themselves be substituted where appropriate. Cycloalkyl groups can be further substituted, for example, with the substituents described above. An “alkylaryl” moiety is an alkyl substituted with an aryl (eg, phenylmethyl (benzyl)). The term "alkyl" also includes unsaturated aliphatic groups analogous in length and possible substitution to the alkyls described above, but that contain at least one double or triple bond, respectively.
[0125]
As used herein, the term “aryl” refers to 5- and 6-membered monocyclic aromatic groups that may contain 0-4 heteroatoms, such as benzene, pyrrole, furan, thiophene, imidazole , Benzoxazole, benzothiazole, triazole, tetrazole, pyrazole, pyridine, pyrazine, pyridazine, pyrimidine and pyrimidine. Aryl groups also include polycyclic fused aromatic groups such as naphthyl, quinolyl, indolyl and the like. An aryl group having a heteroatom in the ring structure may also be referred to as an "aryl heterocycle," "heteroaryl," or "heteroaromatic." The aromatic ring may be, for example, halogen, hydroxyl, alkoxy, alkylcarbonyloxy, arylcarbonyloxy, alkoxycarbonyloxy, arylcarbonyloxy, carboxylate, alkylcarbonyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylthiocarbonyl, phosphate, phosphonate, as described above. , Phosphinates, cyano, amino (including alkylamino, dialkylamino, arylamino, diarylamino, and alkylarylamino), acylamino (including alkylcarbonylamino, arylcarbonylamino, carbamoyl, and ureido), amidino, imino, sulfide Ryl, alkylthio, arylthio, thiocarboxylate, sulfate, sulfonate, sulfamo Le, sulfonamido, nitro, trifluoromethyl, cyano, azido, heterocyclyl, in a substituent such as an alkyl or an aromatic or heteroaromatic moiety, may be substituted by one or more ring positions. Aryl groups can also be fused or bridged with non-aromatic alicyclic or heterocyclic rings to form polycycles (eg, tetralin).
[0126]
The terms "alkenyl" and "alkynyl" refer to unsaturated aliphatic groups analogous in length and possible substitution to the alkyls described above, but that contain at least one double and triple bond, respectively. Point. For example, the present invention contemplates cyano and propargyl groups.
[0127]
Unless stated otherwise, "lower alkyl", as used herein, is as defined above, but has 1 to 10 carbon atoms, more preferably 1 to 6 carbon atoms in its backbone structure. And more preferably an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms in its skeleton structure. Similarly, "lower alkenyl" and "lower alkynyl" have similar carbon chains.
[0128]
The terms “alkoxyalkyl,” “polyaminoalkyl,” and “thioalkoxyalkyl” refer to an oxygen, nitrogen, or sulfur atom (eg, an oxygen, nitrogen, or sulfur atom) that replaces one or more carbons in a hydrocarbon backbone. Refers to the alkyl groups described above, further including.
[0129]
The term “polycyclyl” or “polycyclic group” refers to two or more rings in which two or more carbons are common to two adjacent rings (eg, cycloalkyl, cycloalkenyl, cycloalkynyl, aryl, and And / or heteroaryl), for example a ring is a "fused ring". Rings that are joined through non-adjacent atoms are termed "bridged rings." Each of the polycyclic rings is, for example, halogen, hydroxyl, alkylcarbonyloxy, arylcarbonyloxy, alkoxycarbonyloxy, arylcarbonyloxy, carboxylate, alkylcarbonyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylthiocarbonyl, alkoxyl, as described above. , Phosphate, phosphonate, phosphinate, cyano, amino (including alkylamino, dialkylamino, arylamino, diarylamino, and alkylarylamino), acylamino (including alkylcarbonylamino, arylcarbonylamino, carbamoyl, and ureido), amidino , Imino, sulfhydryl, alkylthio, arylthio, thiocarboxylate, sulfate, sulfoner Can sulfamoyl, sulfonamido, nitro, trifluoromethyl, cyano, azido, heterocyclyl, alkyl, it is substituted with substituents such as alkyl, or an aromatic or heteroaromatic moiety.
[0130]
As used herein, the term “heteroatom” means an atom of any element other than carbon or hydrogen. Preferred heteroatoms are nitrogen, oxygen, sulfur, and phosphorus.
[0131]
The term "amino acid" refers to glycine, alanine, valine, cysteine, leucine, isoleucine, serine, threonine, methionine, glutamic acid, aspartic acid, glutamine, asparagine, lysine, arginine, proline, histidine, phenylalanine, tyrosine, and tryptophan. And naturally occurring and non-naturally occurring amino acids found in proteins. Amino acid analogs include amino acids having a lengthened or shortened side chain, or a mutated side chain having a suitable functional group. Amino acids also include D and L stereoisomers of the amino acid where the structure of the amino acid allows for stereoisomeric forms. The term "dipeptide" includes two or more amino acids linked together. Preferably, the dipeptide is two amino acids linked by a peptide bond. Particularly preferred dipeptides include, for example, alanine-alanine and glycine-alanine.
[0132]
It should be noted that some structures of the compounds of the present invention contain asymmetric carbons and are therefore found as racemates and racemic mixtures, single enantiomers, diastereomeric mixtures, and individual diastereomers. All such isomeric forms of these compounds are expressly included in the present invention. Each asymmetric carbon may be in the R or S configuration. Thus, it will be understood that isomers arising from such asymmetry (eg, all enantiomers and diastereomers) are included within the scope of the invention unless otherwise indicated. Such isomers can be obtained in substantially pure form by classical separation techniques and by stereochemically controlled synthesis.
[0133]
The invention further relates to N-6 substituted 7-deazapurine responsive states in mammals, such as respiratory disorders (eg, asthma, bronchitis, chronic obstructive pulmonary disease, and allergic rhinitis), renal disorders, gastrointestinal disorders, and The present invention relates to a pharmaceutical composition for treating an eye disorder. The pharmaceutical composition includes a therapeutically effective amount of an N-6-substituted 7-deazapurine described above, and a pharmaceutically acceptable carrier. It will be appreciated that all of the above deazapurines are included for therapeutic treatment. It is further contemplated that the deazapurines of the present invention can be used alone or in combination with other deazapurines of the present invention or in combination with additional therapeutic compounds such as, for example, antibiotics, anti-inflammatory agents, or anti-cancer agents. Will be understood.
[0134]
The term "antibiotic" is art-recognized and is intended to encompass substances produced by growing microorganisms, and synthetic derivatives thereof, which exclude or eliminate the growth of pathogens. Inhibit and selectively toxic to pathogens with minimal or no adverse effects on infected host patients. Suitable examples of antibiotics include, but are not limited to, the basic classes of aminoglycosides, cephalosporins, chloramphenicol, fusidic acid, macrolides, penicillins, polymyxins, tetracyclines, and streptomycin.
[0135]
The term "anti-inflammatory agent" is art-recognized and refers to agents that act on bodily mechanisms, such as glucocorticoids, aspirin, ibuprofen, NSAIDS, etc., without directly antagonizing the agents that cause inflammation. It is intended to encompass
[0136]
The term "anti-cancer agent" is art-recognized and is intended to encompass agents that reduce, eradicate or prevent the growth of cancer cells, preferably without adversely affecting other physiological functions. .
[0137]
When the compound of the present invention is administered to humans and mammals as a medicament, the compound of the present invention may be used alone or in combination with a pharmaceutically acceptable carrier, for example, 0.1 to 99.5% (more preferably). Can be applied as a pharmaceutical composition containing 0.5 to 90% of the active ingredient.
[0138]
As used herein, the phrase "pharmaceutically acceptable carrier" refers to a compound of the invention in or to a patient, such that the compound of the invention can perform its intended function. Pharmaceutically acceptable substances, compositions or vesicles, such as liquid or solid fillers, diluents, excipients, solvents or encapsulating substances involved in the transport or transport of the compound (s) of the invention. I do. Typically, such compounds are transported or transported from one organ or part of the body to another organ or part of the body. Each carrier must be "acceptable" in the sense that it is compatible with the other ingredients of the combination and is not harmful to the patient. Some examples of substances that can act as pharmaceutically acceptable carriers include sugars (eg, lactose, glucose and sucrose), starches (eg, corn starch and potato starch), cellulose and derivatives thereof (eg, Sodium carboxymethylcellulose, ethylcellulose, and cellulose acetate), powdered tragacanth, malt, gelatin, talc, excipients (eg, cocoa butter and suppository waxes), oils (peanut oil, cottonseed oil, safflower oil, sesame oil, olive oil, corn oil) And soybean oil), glycols (eg, propylene glycol), polyols (eg, glycerin, sorbitol, mannitol, polyethylene glycol), esters (eg, ethyl oleate, and ethyl laurate) Agar, buffers (eg, magnesium hydroxide and aluminum hydroxide), arginic acid, pyrogen-free water, isotonic saline, Ringer's solution, ethyl alcohol, phosphate buffered saline, and pharmaceutical combinations Other non-toxic compatible substances used in the above.
[0139]
As mentioned above, certain embodiments of the compounds of the present invention may contain a basic functional group such as amino or alkylamino, and thus include pharmaceutically acceptable acids and pharmaceutically acceptable salts. Can be formed. The term "pharmaceutically acceptable salts" in this regard, refers to the relatively non-toxic, inorganic and organic acid addition salts of compounds of the present invention. These salts may be reacted in situ during the final isolation and formation of the compounds of the invention, or separately with a suitable organic or inorganic acid, in free base form of the product compounds of the invention, thus It can be prepared by isolating the salt formed. Representative salts include hydrobromide, hydrochloride, sulfate, bisulfate, phosphonate, nitrate, acetate, valerate, oleate, palmitate, stearate, lauric acid Salt, benzoate, lactate, phosphate, tosylate, citrate, maleate, fumarate, succinate, tartrate, naphthylate, methylate, glucoheptonate, lactobionic acid And salts of lauryl sulfonate (see, for example, Berge et al. (1997) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66: 1-19).
[0140]
In other cases, the compounds of the present invention may contain one or more acidic functional groups, thus forming a pharmaceutically acceptable salt with a pharmaceutically acceptable base. It is possible. The term "pharmaceutically acceptable salts" in these cases refers to the relatively non-toxic, inorganic and organic base addition salts of compounds of the present invention. These salts may also be used in situ during the final isolation and purification of the compounds of the invention or with a suitable base such as a hydroxide, carbonate, or bicarbonate of a pharmaceutically acceptable metal cation. Salt), ammonia, or a pharmaceutically acceptable organic primary, secondary or tertiary amine, separately from the purified compound of the invention in free acid form. Representative alkali or alkaline earth salts include the lithium, sodium, potassium, calcium, magnesium, and aluminum salts and the like. Representative organic amines useful for forming base addition salts include ethylamine, diethylamine, ethylenediamine, ethanolamine, diethanolamine, piperazine, and the like.
[0141]
The term “pharmaceutically acceptable esters” refers to the relatively non-toxic esterification products of the compounds of the present invention. These esters may be prepared either in situ during the final isolation and production of the compounds of the invention, or by separately reacting the product compound of the invention or hydroxyl in free base form with a suitable esterifying agent. Can be. Carboxylic acids can be converted to esters by treatment with alcohols in the presence of a catalyst. Hydroxyl-containing derivatives can be converted to esters by treatment with an esterifying agent such as an alkinoyl halide. The term is further intended to include lower hydrocarbon groups that can be solvated under physiological conditions, such as alkyl esters (methyl, ethyl and propyl esters) (eg, Berge et al., Supra). reference).
[0142]
The present invention further contemplates the use of prodrugs that are converted in vivo to the therapeutic compounds of the invention (see, eg, RB Silverman, 1992, "The Organic Chemistry of Drug Design and Action"). Drug Design and Drug Action), Academic Press, Chapter 8). Such prodrugs can be used to alter the biodistribution (eg, to allow compounds that do not normally penetrate the reactive sites of the protease) or pharmacokinetics of the therapeutic compound. For example, a carboxylic acid group can be esterified with, for example, a methyl group or an ester group to give an ester. When the ester is administered to a patient, the ester is cleaved enzymatically or non-enzymatically, reductively or hydrolytically, to reveal anionic groups. Anionic groups can be cleaved to reveal intermediate compounds and subsequently esterified with moieties that decompose to yield active compounds (eg, acyloxymethyl esters). In another embodiment, the prodrug is a reduced form of a sulfate or sulfonate (eg, a thiol) and is oxidized in vivo to a therapeutic compound. In addition, the anionic moiety can be actively transported in vivo or esterified to a group that is selectively taken up by target organs. The ester can be selected to allow specific targeting of the therapeutic moiety to a particular reactive site, as described below for the carrier moiety.
[0143]
Wetting, emulsifying, and lubricating agents (eg, sodium lauryl sulfate and magnesium stearate), as well as coloring, releasing, coating, sweetening, flavoring, and flavoring, preservative, and antioxidant agents are also It can be present in the composition.
[0144]
Examples of pharmaceutically acceptable antioxidants include water-soluble antioxidants such as ascorbic acid, cysteine hydrochloride, sodium bisulfate, sodium metabisulfite, sodium sulfite, ascorbyl palmitate, butylated hydroxyanisole (BHA) ), Butylated hydroxytoluene (BHT), lecithin, oil-soluble antioxidants such as propyl gallate, α-tocopherol and the like, and citric acid, ethylenesiaminetetraacetic acid (EDTA), sorbitol, tartaric acid, phosphonic acid and the like. Such metal chelating agents.
[0145]
Combinations of the present invention include those suitable for oral, nasal, topical, transdermal, buccal, sublingual, rectal, vaginal and / or parenteral administration. Combinations may conveniently be presented in unit dosage form and may be prepared by any of the methods known in the art of pharmacy. The amount of active ingredient which can be combined with a carrier material to produce a single dosage form will generally be that amount of the compound which produces a therapeutic effect. Generally, out of 100%, this amount will range from about 1% to about 99%, preferably from about 5% to about 70%, most preferably from about 10% to about 30%.
[0146]
The methods of preparing these compounds or compositions include the step of bringing into association a compound of the present invention with the carrier and, optionally, one or more additional ingredients. In general, formulations are prepared by uniformly and intimately bringing into association a compound of the invention with a liquid carrier or finely divided solid carrier, or both, and then, if necessary, shaping the product.
[0147]
Formulations of the present invention suitable for oral administration include capsules, sachets, pills, tablets, lozenges (flavored bases, usually sucrose and acacia or tragacanth), each containing a predetermined amount of a compound of the invention as an active ingredient. ), In the form of powders, granules, or as a solution or suspension in an aqueous or non-aqueous liquid, or as an oil-in-water or water-in-oil liquid emulsion, or as an elixir or syrup, or as a pill ( (With inert bases such as gelatin and glycerin, or sucrose and acacia) and / or as mouthwashes and the like. The compounds of the present invention may also be administered as a bolus, electuary or paste.
[0148]
In the solid dosage forms of the present invention for oral administration (capsules, tablets, pills, dragees, powders, granules, etc.), the active ingredient is sodium citrate or dicalcium phosphate, and / or the following: Agents (eg, starch, lactose, sucrose, glucose, mannitol, and / or silicic acid), binders (eg, carboxymethylcellulose, alginate, gelatin, polyvinylpyrrolidone, sucrose and / or gum arabic), humectants (eg, Glycerol), disintegrants (eg, agar-agar, calcium carboxylate, potato starch or tapioca starch, alginic acid, certain silicates, and sodium carboxylate), solution set retarders (eg, paraffin), absorption enhancers ( For example, quaternary ammonium compounds), Lubricants (eg, cetyl alcohol and glycerol monostearate), absorbents (eg, kaolin and bentonite clay), lubricants (eg, talc, calcium stearate, magnesium stearate, solid polyethylene glycol, sodium lauryl sulfate and mixtures thereof) ), And one or more pharmaceutically acceptable carriers such as colorants. In the case of capsules, tablets and pills, the pharmaceutical compositions may also include a buffer. Solid compositions of a similar type may also be used as fillers in soft and hard-filled gelatin capsules using such excipients as lactose or milk sugar as well as high molecular weight polyethylene glycols and the like.
[0149]
A tablet may be made by compression or molding, optionally with one or more additional ingredients. Compressed tablets may contain binders (eg, gelatin or hydroxypropyl methylcellulose), lubricants, inert diluents, preservatives, disintegrants (eg, sodium starch glycolate or cross-linked sodium carboxycellulose), surfactants or dispersants. Can be prepared using Molded tablets may be made by molding in a suitable machine a mixture of the moist powder compound and an inert diluent.
[0150]
Tablets, and other solid dosage forms of the pharmaceutical compositions of the present invention, such as sugar-coated tablets, capsules, pills, and granules, are optionally coated with enteric coatings and other coatings known in the art of pharmaceutical compounding. It can be scored or prepared using various coatings and skins. They also provide for sustained or controlled release of the active ingredient therein, for example using various ratios of hydroxypropylmethylcellulose, other polymer matrices, liposomes, and / or microspheres to provide the desired release profile. It may be formulated to provide. They may also be sterilized by filtration, for example by means of a bacteria-retaining filter, or by incorporating a sterilant in the form of a sterile solid composition which can be dissolved in sterile water or some other sterile injectable medium immediately before use. Good. These compositions may also optionally contain opacifiers, which contain the active ingredient (s) alone or the active ingredient (s) preferentially, in a particular part of the gastrointestinal tract, optionally in a delayed manner. It may be a release composition. Examples of embedding compositions that can be used include polymeric substances and waxes. The active ingredient can also be in micro-encapsulated form, if appropriate, with one or more of the above-described excipients.
[0151]
Liquid dosage forms for oral administration of the compounds of the present invention include pharmaceutically acceptable emulsions, microemulsions, solutions, suspensions, syrups, and excipients. In addition to the active ingredient, liquid dosage forms include inert diluents commonly known in the art, such as, for example, water or other solvents, ethyl alcohol, isopropyl alcohol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzoic acid. Benzyl, propylene glycol, 1,3-butylene glycol, fatty acids (especially cottonseed oil, peanut oil, corn oil, germ oil, olive oil, castor oil, and sesame oil), glycerol, tetrahydrofuryl alcohol, polyethylene glycol, and sorbitan fatty acids It may contain solubilizers and emulsifiers such as esters, and mixtures thereof.
[0152]
In addition to inert diluents, oral compositions can also include adjuvants such as wetting, emulsifying and suspending agents, sweetening, flavoring, coloring, flavoring, and preservative agents.
[0153]
In addition to the active compounds, suspensions are for example, ethoxylated isosteryl alcohols, polyethylene sorbitol and sorbitan esters, microcrystalline cellulose, aluminum hydroxide, bentonite, agar-agar and tragacanth, and mixtures thereof. A suspending agent may be contained.
[0154]
Formulations of a pharmaceutical composition of the invention for rectal or vaginal administration may be presented as a suppository, which may contain one or more compounds of the invention, eg, cocoa butter, polyethylene glycol, a suppository wax. Or prepared by mixing with a suitable nonirritating excipient or carrier which contains salicylate and is solid at room temperature but liquid at body temperature and therefore melts in the rectum or vaginal cavity and releases the active compound. May be done.
[0155]
Formulations of the present invention suitable for vaginal administration also include pessaries, tampons, creams, gels, pastes, foams or spray formulations containing a carrier as known in the appropriate art.
[0156]
Dosage forms for topical or transdermal administration of a compound of this invention include powders, sprays, ointments, pastes, creams, lotions, gels, solutions, patches, and inhalants. The active compound can be mixed under sterile conditions with a pharmaceutically acceptable carrier, and with any preservatives, buffers, or propellants which may be required.
[0157]
Ointments, pastes, creams and gels may contain, in addition to the active compounds of the present invention, animal and vegetable fats, oils, waxes, paraffins, starches, tragacanth, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonite, silicic acid, talc. And excipients such as zinc oxide, or mixtures thereof.
[0158]
Powders and sprays can contain, in addition to a compound of the present invention, excipients such as lactose, talc, silicic acid, aluminum hydroxide, calcium silicate, and polyamide powder, or a mixture of these materials. . Sprays can further contain conventional propellants such as chlorofluorohydrocarbons, and volatile unsubstituted hydrocarbons (eg, butane and propane).
[0159]
Transdermal patches have the added benefit of providing controlled delivery of a compound of the present invention to the body. Such dosage forms can be made by dissolving or dispersing the compound in the proper medium. Absorption enhancers can also be used to increase the flux of the compound across the skin. The rate of such flow can be controlled by providing a rate controlling membrane or by dispersing the active compound in a polymer matrix or gel.
[0160]
Ophthalmic formulations, ointments, powders, solutions, and the like, are also contemplated as being within the scope of this invention. Preferably, the pharmaceutical preparation is an ophthalmic formulation (eg, a periocular, retrobulbar or intraocular injection formulation, a systemic formulation, or a surgical irrigation solution).
[0161]
The ophthalmic formulation of the invention may include one or more deazapurines, and a pharmaceutically acceptable vehicle. Various types of vehicles may be used. Vehicles are generally aqueous in nature. Aqueous solutions are generally preferred based on the formulation, as well as the ability of the patient to easily administer such compounds by dripping 1-2 drops of the solution into the affected eye. However, the deazapurines of the present invention may also be readily incorporated into other types of compositions, such as suspensions, viscous or semi-viscous gels, or other types of solid or semi-solid compositions. The ophthalmic compositions of the present invention may also include various other ingredients such as buffers, preservatives, co-solvents and viscosity enhancers.
[0162]
A suitable buffer system (eg, sodium phosphate, sodium acetate, or sodium borate) may be added to prevent pH drift under storage conditions.
[0163]
Ophthalmic products are usually packaged in multi-dose form. Thus, preservatives are needed to prevent microbial contamination during use. Suitable preservatives include benzalkonium chloride, thimerosal, chlorobutanol, methylparaben, propylparaben, phenylethyl alcohol, sodium edetate, sorbic acid, polyquaternium-1, or other agents known to those skilled in the art. . Such preservatives are typically used at a level of from 0.001 to 1.0% weight / volume ("% w / v").
[0164]
When the deazapurines of the present invention are administered during an intraocular surgical procedure, for example by retrobulbar or periocular injection and intraocular perfusion or injection, the use of a balanced salt irrigation solution as a vesicle is most preferred. BBS® sterile irrigation solution and BSS Plus® sterile intraocular irrigation solution (Alcon Laboratories, Inc., Fort Worth, Tex., USA) are examples of physiologically balanced intraocular irrigation solutions. Solutions of the latter type are described in U.S. Pat. No. 4,550,022 (Garabedian et al.), The entire contents of which are incorporated herein by reference. Retrobulbar and periocular injections are known to those skilled in the art and are described, for example, in Ophthalmic Surgery: Principles of Practice, Ed. , G. L. Spaeth. W. B. Sanders Co. , Philadelphia, Pa .; , U.S. S. A. , Pages 85-87 (1990).
[0165]
As mentioned above, the use of deazapurine to prevent or reduce damage to the retina and optic disc tissue at the cellular level is a particularly important aspect of embodiments of the present invention. Ophthalmological conditions that can be treated include retinopathy, macular degeneration, ocular ischemia, glaucoma, and damage to ocular tissues such as ischemia-reperfusion injury, photochemical injury, and disorders associated with eye surgery, In particular, but not limited to, damage associated with damage to the retina or optic disc due to exposure to light or surgical equipment. The compounds may also be used as adjuncts to ophthalmic surgery, such as, for example, intravitreal or subconjunctival injection after eye surgery. The compounds may be used for the acute treatment of transient symptoms or may be administered chronically, especially in the case of degenerative diseases. The compounds may also be used prophylactically, especially before eye surgery or non-invasive ophthalmic treatment, or other types of surgery.
[0166]
Pharmaceutical compositions of the present invention suitable for parenteral administration include one or more pharmaceutically acceptable sterile isotonic aqueous or non-aqueous solutions, dispersions, suspensions or emulsions, or sterile injectable solutions immediately before use. Alternatively, containing one or more compounds of the present invention, in combination with a sterile powder that can be reconstituted into a dispersion, the antioxidants, buffers, bacteriostats, and combinations are made isotonic with the blood of the intended recipient. Solutes, or suspending or thickening agents.
[0167]
Examples of suitable aqueous and non-aqueous carriers that can be used in the pharmaceutical compositions of the present invention include water, ethanol, polyol (eg, glycerol, propylene glycol, polyethylene glycol, and the like) and suitable mixtures thereof, vegetable oils (eg, , Olive oil), and injectable organic esters (eg, ethyl oleate). Proper fluidity can be maintained, for example, by the use of a coating material such as lecithin, by the maintenance of the required particle size in the case of dispersion and by the use of surfactants.
[0168]
These compositions may also contain adjuvants such as preserving, wetting, emulsifying, and dispersing agents. Prevention of the action of microorganisms can be ensured by the inclusion of various antibacterial and antifungal agents, for example, parabens, chlorobutanol, phenol, sorbic acid, and the like. It may also be desirable to include isotonic agents, such as sugars, sodium chloride sugar, in the composition. In addition, prolonged absorption of the injectable pharmaceutical form can be brought about by the inclusion of agents which delay absorption such as aluminum monostearate and gelatin.
[0169]
In some cases, in order to prolong the effect of the drug, it is desirable to slow the absorption of the drug from subcutaneous or intradermal injection. This can be achieved by the use of a liquid suspension of crystalline or amorphous material with poor water solubility. Also, the rate of absorption of a drug depends on its dissolution rate, which in turn can depend on crystal size and crystalline form. Alternatively, delayed absorption of a parenterally administered drug form is accomplished by dissolving or suspending the drug in an oil vesicle.
[0170]
Injectable depot forms are made by forming microencapsule matrices of the compound of interest in biodegradable polymers such as polylactide-polyglycolide. Depending on the ratio of drug to polymer, and the nature of the particular polymer employed, the rate of drug release can be controlled. Examples of other biodegradable polymers include poly (orthoester) and poly (anhydride). Depot injectable formulations are also prepared by entrapping the drug in liposomes or microcapsules that are compatible with body tissues.
[0171]
The preparations of the present invention may be given orally, parenterally, topically, or rectally. They are of course given in forms suitable for each oral route. For example, they are administered in the form of tablets or capsules by injection, inhalation, ophthalmic lotion, ointment, suppository etc. (injection, infusion or absorption), topically by lotion or ointment and rectally by suppository. You. Oral administration is preferred.
[0172]
As used herein, the phrases "parenteral administration" and "parenterally administered" refer to modes of administration other than enteral and topical, usually by injection, intravenous, intramuscular Intraarterial, intrathecal, intracapsular, intraorbital, intracardiac, intradermal, intraperitoneal, organ, subcutaneous, subepidermal, intraarticular, subcapsular, subarachnoid, intravertebral, and intrasternal injection and infusion But not limited thereto.
[0173]
As used herein, the phrases "systemic administration," "systemically administered," "peripheral administration," and "peripherally administered" refer to compounds, drugs or other materials that Means the administration of a compound other than administration directly to the central nervous system (e.g., subcutaneous administration) so as to be in a system of metabolism and other metabolic and other similar processes.
[0174]
These compounds may be administered by any suitable route of administration (oral, nasal (eg, by spraying), rectally, intrathecally, parenterally, intracisternally and topically (powder, ointment or drop (oral). And sublingual)) to humans and other animals for treatment.
[0175]
Regardless of the chosen route of administration, the compound of the invention, which can be used in the appropriate hydrated form and / or the pharmaceutical composition of the invention, is provided in a pharmaceutically acceptable dosage form by conventional methods known to those skilled in the art. Formulated in form.
[0176]
The actual dosage level of the active ingredients in the pharmaceutical compositions of the present invention will not be toxic to the patient, but will be effective to achieve the desired therapeutic response with respect to the particular patient, composition, and mode of administration. Variations may be made to obtain the amounts of the components.
[0177]
The selected dosage level will depend on the activity of the particular compound of the present invention used, or an ester, salt or amide thereof, the route of administration, the time of administration, the elimination rate of the particular compound used, the duration of treatment, the particular Other drugs, compounds and / or substances used in combination with the compound, age, gender, weight, symptoms, general health of the patient being treated and previous medical history, and similar factors known in the medical arts. Depends on various factors, including:
[0178]
Physicians and veterinarians, including those skilled in the art, can readily determine and prescribe the effective amount of the pharmaceutical composition required. For example, a physician or veterinarian would begin the dosage of a compound of the present invention used in a pharmaceutical composition at a level less than that required to achieve the desired therapeutic effect, to achieve the desired effect. The dose can be increased gradually until
[0179]
In general, a suitable daily dose of a compound of the invention will be that amount of the compound which is the lowest dose effective to produce a therapeutic effect. Such an effective dose will generally depend on the factors described above. In general, the intravenous and subcutaneous doses of a compound of the present invention for a patient, when used for the indicated analgesic effect, will be from about 0.0001 to about 200 mg / kg body weight per day, more preferably about 0,01 mg / kg body weight per day. 0.01 to about 150 mg, more preferably about 0.2 to about 140 mg / kg body weight per day.
[0180]
If desired, the effective daily dose of the active compound may be divided into two, three, four, five, six or more divided doses administered separately at appropriate intervals throughout the day, optionally in unit dosage form. It is administered as a sub-dose.
[0181]
While it is possible for a compound of the present invention to be administered alone, it is preferable to administer the compound as a pharmaceutical composition.
[0182]
The invention also relates to packaged pharmaceutical compositions for treating an N-6 substituted 7-deazapurine responsive condition in a mammal, such as an undesirable increase in adenosine receptor activity. The packaged pharmaceutical composition comprises a container holding a therapeutically effective amount of the at least one deazapurine described above, and instructions for using the deazapurine to treat a deazapurine responsive condition in a mammal.
[0183]
The deazapurines of the present invention can be prepared using standard methods for organic synthesis. Deazapurines can be purified by reverse phase HPLC, chromatography, recrystallization, etc., and their structures can be confirmed by mass spectral analysis, elemental analysis, IR and / or NMR spectroscopy.
[0184]
Usually, the synthesis of the intermediates and deazapurines of the present invention is performed in solution. The addition and removal of one or more protecting groups is also a typical practice and is known to those skilled in the art. A typical synthetic scheme for the preparation of a deazapurine intermediate of the present invention is outlined in Scheme I below.
[0185]
The present invention further provides a compound having the following structure (IV), or a pharmaceutically acceptable salt, or a prodrug derivative, or a biologically active metabolite:
Embedded image

(Where
R₁Is trans-4-hydroxycyclohexyl, 2-methylaminocarbonylaminocyclohexyl, acetylaminoethyl, or methylaminocarbonylaminoethyl;
Ar represents a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring, phenyl, pyrrole, thiophene, furan, thiazole, imidazole, pyrazole, 1,2,4-triazole, pyridine, 2 (1H) -pyrrolidone, 4 (1H)- Pyrrolidone, pyrazine, pyrimidine, pyridazine, isothiazole, isoxazole, oxazole, tetrazole, naphthalene, tetralin, naphthyridine, benzofuran, benzothiophene, indole, 2,3-dihydroindole, 1H-indole, indoline, benzopyrazole, 1,3 -Benzodioxol, benzoxol, purine, coumarin, chromone, quinoline, tetrahydroquinoline, isoquinoline, benzimidazole, quinazoline, pyrido [2,3-b] pyrazine, pyrido [3,4-b] pyrazine. Pyrido [3,2-c] pyridazine, pyrido [3,4-b] pyridine, 1H-pyrazole [3,4-d] pyrimidine, pteridine, 2 (1H) -quinolone, 1 (2H) -isoquinolone, 4-benzisoxazine, benzothiazole, quinoxaline, quinoline-N-oxide, isoquinoline-N-oxide, quinoxaline-N-oxide, quinazoline-N-oxide, benzoxazine, phthalazine, cinnoline, or the following structure:
Embedded image

Where:
Y is carbon or nitrogen;
R₂And R_{2 '}Is independently H, substituted or unsubstituted alkyl, substituted
Or unsubstituted aryl, halogen, methoxy, methylamino, or methylthio)
Which has
R₃Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, and the substituted alkyl is -C (R₇) (R₈) XR₅(Where X is O, S, or NR₆And R₇And R₈Are each independently H or alkyl;₅And R₆Are each independently alkyl or cycloalkyl, or NR₅R₆Are together a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring)
R₄Is H, alkyl, substituted alkyl, cycloalkyl)
Where R₃Is not acetylaminoethyl, Ar is not 4-pyridyl.
[0186]
In one embodiment of the compound having structure IV, NR₅R₆The following:
Embedded image

Embedded image

(Where m is 0, 1, or 2),
Embedded image

Wherein n is 0, 1, 2, or 3, and R₈Is hydrogen, -OH, -CH₂OH, -C (=) NR₉R₁₀, NHR₁₁(Where R₁₁Is -C (= O) CH₃Or -SO₂Me)), or
Embedded image

Wherein R is H, alkyl, or aryl
Or a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring selected from the group consisting of:
[0187]
In another embodiment of the compound having Formula IV, Ar has the structure:
Embedded image

Wherein Y is carbon or nitrogen;₂Is H, or a halogen, -O-alkyl group, amine group, or sulfide group;
R₃Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, and the substituted alkyl is -C (R₇) (R₈) NR₅R₆(Where R₇And R₈Are each independently H or alkyl;₅And R₆Are each independently alkyl or cycloalkyl, or R₅, R₆And nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring).
[0188]
In another embodiment of the compound, Y is carbon.
[0189]
In another embodiment of the compound,₂Is hydrogen.
[0190]
In another embodiment of the compound,₄Is hydrogen.
[0191]
In another embodiment of the compound,₃Is hydrogen.
[0192]
In another embodiment of the compound,₃And R₄Are each methyl.
[0193]
In another embodiment of the compound,₃Is -C (R₇) (R₈) NR₅R₆(Where R₇And R₈Are each independently H or alkyl;₅And R₆Are each independently alkyl or cycloalkyl, or R₅, R₆And nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring).
[0194]
In another embodiment of the compound, R₂Is halogen.
[0195]
In another embodiment of the compound, Y is nitrogen.
[0196]
In yet another embodiment of the compound, R₂Is hydrogen.
[0197]
In a further embodiment of the compound, R₃And R₄Is hydrogen.
[0198]
The present invention also provides a compound having the structure (V):
Embedded image

(Where
R₁Is aryl, substituted aryl, or heteroaryl;
R₂Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₃Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, and the substituted alkyl is -C (R₆) (R₇) NR₄R₅(Where R₆And R₇Is each H or alkyl;₄And R₅Is alkyl or cycloalkyl, respectively, or R₄, R₅And nitrogen together form a 4- to 7-membered ring).
[0199]
In one embodiment of the compound having structure V, R₄And R₇Is hydrogen, R₄Is H and R₅Is -R₂₂C (= O) R₂₃It is.
[0200]
In another embodiment of the compound having structure V, R₄And R₇Are each H and the ring system is morpholino, thiomorpholino, N-4-substituted piperazino, 2-substituted piperazine, or R₈Substituted pyrrolidino, piperazine (where R₈Is H, OH, CH₂OH, -C (= O) NR₉N₁₀, NR₁₁(Where R₁₁Is -C (= O) CH₃, -SO₂Me).
[0201]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0202]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0203]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0204]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0205]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0206]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0207]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0208]
The following structure:
Embedded image

(Where R₂Is an aromatic 5- to 6-membered ring;₃And R₄Is independently H, or alkyl).
[0209]
In one embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0210]
In one embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0211]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0212]
In another embodiment of the compound 1500, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0213]
In a further embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0214]
The present invention also provides a compound having the structure:
Embedded image

(Where R₂Is an aromatic 5- to 6-membered ring;₃And R₄Is independently H or alkyl, provided that R₂Is not 4-pyridyl).
[0215]
In one embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0216]
The present invention further provides a compound having the structure:
Embedded image

(Where
R₂Is an aromatic substituted 5- or 6-membered ring,
R₃And R₄Is independently H, or alkyl).
[0217]
In one embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0218]
The present invention also provides a compound having the structure:
Embedded image

(Where R₂Is an aromatic 5- to 6-membered ring, and X is oxygen or sulfur).
[0219]
In one embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image Compound 1503

Having.
[0220]
The present invention also provides a compound having the structure:
Embedded image

(Where R₂Is an aromatic 5- to 6-membered ring, and X is oxygen or sulfur).
[0221]
In one embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

Having.
[0222]
The invention further relates to the use of A in a patient.₁A method of treating a disease associated with an adenosine receptor, comprising administering to a patient a therapeutically effective amount of a compound having Formula IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X. provide.
[0223]
In one embodiment of the method, the patient is an animal. In another embodiment of this method, the mammal is a human.
[0224]
In another embodiment of the method, A₁Adenosine receptors may be impaired in cognition, renal failure, arrhythmias, respiratory epithelium, transmitter release, sedation, vasoconstriction, bradycardia, negative inotropic and inotropic, bronchoconstriction, neutrophil chemotaxis, reflux conditions, or Associated with ulcer condition.
[0225]
The present invention also provides combination therapies for asthma comprising Compounds IV and V and a steroid, β2 agonist, glucocorticoid, leukotriene antagonist, or anticholinergic agonist. Adenosine A₁, A_2a, A_2b, And A₃Receptor related diseases include WO 99/06053 and WO 09822465, WO 09705138, WO 09511681, WO 09733879, JP 0992989, PCT / Nos. US 98/16053 and US Pat. No. 5,516,894, the entire contents of which are incorporated herein by reference in their entirety.
[0226]
The present invention also provides a water-soluble prodrug of a compound having the structure IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X, wherein said water-soluble prodrug is A₁It is metabolized in vivo to active agents that selectively inhibit the adenosine receptor.
[0227]
In one embodiment of the prodrug, the prodrug is metabolized in vivo by esterase-catalyzed hydrolysis.
[0228]
The invention also provides for a pharmaceutical composition comprising a prodrug and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0229]
The present invention further provides that A₁Provided is a method of inhibiting the activity of an adenosine receptor, comprising contacting a cell with a compound having the structure IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X.
[0230]
In one embodiment of this method, the compound comprises A₁It is an adenosine receptor antagonist.
[0231]
The present invention also provides a method of treating a gastrointestinal disorder in a patient, comprising administering an effective amount of a compound having the structure IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X.
[0232]
In one embodiment of the method, the disorder is diarrhea.
[0233]
In another embodiment of the method, the patient is a human.
[0234]
In another embodiment of this method, the compound is A₁It is an adenosine receptor antagonist.
[0235]
The present invention also provides a method of treating a respiratory disorder in a patient, the method comprising administering to the patient an effective amount of a compound having the structure IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X. I will provide a.
[0236]
In one embodiment of this method, the disorder is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper airway disorder.
In another embodiment of the method, the patient is a human.
[0237]
In another embodiment of this method, the compound is A₁It is an adenosine receptor antagonist.
[0238]
The present invention is further directed to a method of treating an injury to a patient's eye, comprising administering to the patient an effective amount of a compound having the structure IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X. Provide methods including:
[0239]
In one embodiment of the method, the injury is a retinal or optic disc injury.
[0240]
In another embodiment of the method, the damage is acute or chronic.
[0241]
In another embodiment of this method, the damage is the result of glaucoma, edema, ischemia, hypoxia, or trauma.
[0242]
In another embodiment of the method, the patient is a human.
[0243]
In another embodiment of this method, the compound is A₁It is an adenosine receptor antagonist.
[0244]
The invention also provides a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound having the structure IV, V, VI, VII, VIII, IX, or X, and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0245]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the therapeutically effective amount is effective to treat a respiratory or gastrointestinal disorder.
[0246]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the gastrointestinal disorder is diarrhea.
[0247]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the respiratory disorder is asthma, allergic rhinitis, or chronic obstructive pulmonary disease.
[0248]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation.
[0249]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a periocular, retrobulbar or intraocular injection combination
In yet another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0250]
In a further embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a surgical irrigation solution.
[0251]
The invention also relates to the use of A in patients.₁A packaged pharmaceutical composition for curing a disease associated with adenosine receptors, comprising: (a) a therapeutically effective amount of A₁Provided is a packaged pharmaceutical composition comprising a container holding an adenosine-specific compound, and (b) instructions for using the compound to treat the disease in a patient.
[0252]
As used herein, “a compound is A₁"Selective" means that the compound is adenosine A_2a, A_2bOr A₃A at least 10 times greater than the binding constant to₁It means having a binding constant to the receptor.
[0253]
The present invention also provides a method of preparing a compound having structure IV, or a pharmaceutically acceptable salt, or prodrug derivative, or a biologically active metabolite:
a) below:
Embedded image

With the following structure:
Embedded image

Wherein P is a removable protecting group.
Obtaining a
b) treating the product of step a) under cyclization conditions to give the following structure:
Embedded image

Obtaining a
c) treating the product of step b) under suitable conditions to give the following structure:
Embedded image

Obtaining a
d) converting the chlorinated product of step c) to NH₂R₁And processing to obtain the following structure:
Embedded image

Where:
R₃Is trans-4-hydroxycyclohexyl, 2-methylaminocarbonylaminocyclohexyl, acetylaminoethyl, or methylaminocarbonylaminoethyl;
Ar is a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring,
R₄Is H, alkyl, substituted alkyl, cycloalkyl;
(However, R₃Is acetylaminoethyl, Ar is not 4-pyridyl).
[0254]
The present invention also provides a method of preparing a compound having structure V, comprising:
a) below:
Embedded image

With the following structure:
Embedded image

Wherein P is a removable protecting group.
Obtaining a
b) treating the product of step a) under cyclization conditions to give the following structure:
Embedded image

Obtaining a
c) treating the product of step b) under suitable conditions to give the following structure:
Embedded image

Obtaining a
d) The chlorination product of step c) is as follows:
Embedded image

Treated with the following structure:
Embedded image

And a step of obtaining
Where:
R₁Is aryl, substituted aryl, heteroaryl,
R₂Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;₃Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, and the substituted alkyl is -C (R₆) (R₇) NR₄R₅(Where R₆And R₇Is each H or alkyl;₄And R₅Is respectively alkyl or cycloalkyl, or NR₄R₅Is a 4 to 7 membered ring system).
[0255]
Compounds of formulas VI, VII, and VIII can be synthesized according to any of Schemes I-VIII. Compounds of formulas IX and X can be prepared according to Scheme IX.
[0256]
The present invention is further described by the following examples, which should not be construed as limiting in any way. The contents of all references, pending patent applications, and published patent applications cited throughout this application (including those referred to in the Background section) are hereby incorporated by reference. Those of skill in the art will readily appreciate that the models used throughout the examples are generally accepted models and that demonstration of efficacy in these models is predictive of efficacy in humans.
[0257]
The present invention will be better understood from the following experimental details. However, one of ordinary skill in the art will readily appreciate that the particular methods and results discussed are merely illustrative of the invention as more fully described in the appended claims.
[0258]
[Experiment Details]
The deazapurines of the present invention can be prepared using standard methods for organic synthesis. Deazapurines can be purified by reverse phase HPLC, chromatography, recrystallization, etc., and their structures can be confirmed by mass spectral analysis, elemental analysis, IR and / or NMR spectroscopy.
[0259]
Usually, the synthesis of the intermediates and deazapurines of the present invention is performed in solution. The addition and removal of one or more protecting groups is also a typical practice and is known to those skilled in the art. A typical synthetic scheme for the preparation of a deazapurine intermediate of the present invention is outlined in Scheme I below.
[0260]
Embedded image

(Where R₃, R₅, And R₆Is defined above)
In general, protected 2-amino-3-cyano-pyrroles can be treated with an aryl halide to form carboxamido-3-cyano-pyrrole, which can be treated with acidic methanol to give the pyrrolo [2,3d Ring closure can be effected to pyrimidin-4 (3H) -one (Muller, CE et al. J. Med. Chem. 40: 4396 (1997)). Removal of the pyrrole protecting group followed by treatment with a chlorinating reagent (eg, phosphorus oxychloride) produced a substituted or unsubstituted 4-chloro-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine. Treatment of chloropyrimidine with an amine provided 7-deazapurine.
[0261]
For example, as shown in Scheme I, N- (1-dl-phenylethyl) -2-amino-3-cyano-pyrrole was treated with an acyl halide in pyridine and dichloromethane. The resulting N- (1-dl-phenylethyl) -2-phenylcarboxamido-3-cyano-pyrrole was treated with a 10: 1 mixture of methanol / sulfuric acid to effect ring closure and dl-7H-7. -(1-Phenylethyl) pyrrolo [2,3d] pyrimidin-4 (3H) -one resulted. Removal of phenylethyl groups by treating pyrimidine with polyphosphoric acid (PPA) followed by POCl₃Afforded 4-chloro-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine, a key intermediate. Further treatment of 4-chloro-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidine with various amines listed in Table 1 provides compounds having formulas (I) and (II).
[0262]
[Table 1]

The general approach for preparing 6-substituted pyrroles is depicted in the following scheme (Scheme II).
[0263]
Embedded image

(Where R₁~ R₅Is defined above)
Transesterification and alkylation of ethyl cyanoacetate with an α-haloketone gives the ketomethyl ester. Protection of the ketone followed by treatment with an amidine hydrochloride (eg, an alkyl, aryl, or alkylaryl) resulted in a ketal protected pyrimidine. Removal of the protecting group, followed by cyclization, and treatment with phosphorus oxychloride provided the chloride intermediate, which could be further treated with an amine to give the amine 6-substituted pyrrole. Further, the alkylation of the pyrrole nitrogen can be accomplished under art-recognized conditions.
[0264]
The general approach for preparing 5-substituted pyrroles is depicted in the following scheme (Scheme III).
[0265]
Embedded image

(Where R₁~ R₆Is defined above, and R is a removable protecting group.
Condensation of malononitrile and excess ketone, followed by bromination of the product, provides a mixture of starting materials, monobrominated and dibrominated products, which are treated with an alkylamine, arylamine, or alkylarylamine. did. The resulting amine product was acylated with an acid chloride and the monoacylated pyrrole was cyclized in the presence of an acid to give the corresponding pyridine. The pyrrole protecting group was removed with polyphosphoric acid and treated with phosphorus oxychloride to give the chlorinated product. The chlorinated pyrrole was subsequently treated with an amine to yield the amino 5-substituted pyrrole. Alkylation of the pyrrole nitrogen can be accomplished under art-recognized conditions.
[0266]
Schemes IV and V represent methods for preparing deazapurines 1 and 2 of the present invention.
[0267]
Embedded image

(Where R₅And R₆Is as described above (eg, CH₃)
Specific preparation of 6-methylpyrrolopyrimidine:
6-methylpyrrolopyrimidine (1) (R₅= CH₃An important reaction to) is the cyclization of cyanoacetates to pyrimidines with benzamidines. Methyl cyanoacetate was thought to cyclize to pyrimidine more efficiently than the corresponding ethyl ester using benzamide. Thus, transesterification and alkylation of ethyl cyanoacetate in the presence of NaOMe and excess α-haloacetyl moiety (eg, chloroacetone) provided the desired methyl ester (3) in 79% yield. (Scheme IV). The ketoester (3) was protected as the acetal (4) in 81% yield. A novel method of cyclization to pyrimidine (5) was achieved with amidine hydrochloride, for example benzamidine hydrochloride, using 2 equivalents of DBU, giving 5 in 54% isolated yield. This method improves the yield from 20% when using published conditions utilizing NaOMe during cyclization with guanidine. Cyclization to pyrrole-pyrimidine (6) was achieved in 78% yield by deprotection of the acetal in aqueous HCl. The corresponding 4-chloro derivative (7) was obtained by the reaction of (6) using phosphorus oxychloride under reflux. Coupling with trans-4-aminocyclohexanol in dimethyl sulfoxide at 135 [deg.] C gave (1) in 57% yield from (7). Depending on the choice of reagent, the desired substituent R₅Those skilled in the art will appreciate that a great deal of flexibility is possible in choosing
[0268]
Embedded image

Specific preparation of 5-methylpyrrolopyrimidine:
Knoevenagel condensation of malononitrile and excess ketone (eg, acetone) in refluxing benzene gave 8 in 50% yield after distillation. 8 is brominated with N-bromosuccinimide in chloroform in the presence of benzoyl peroxide and, after distillation, starting material, monobrominated product (9), and dibrominated product (5/90/5) (70%). The mixture was reacted with α-methylalkylamine or α-methylarylamine (eg, α-methylbenzylamine) to give aminopyrrole (10). After passing through a short silica gel column, the partially purified amine (31% yield) is acylated with an acid chloride (eg, benzoyl chloride) to give a monoacylated pyrrole (11) and a diacylated pyrrole (12). Were obtained and they were separated by flash chromatography. Acid hydrolysis of the disubstituted pyrrole (12) resulted in a combined yield of 29% for acylpyrrole (11). Cyclization in the presence of concentrated sulfuric acid and DMF provided (13) (23%), which was deprotected to (14) with polyphosphoric acid. During reflux, phosphorus oxychloride was reacted with (14) to give the corresponding 4-chloro derivative (15). Coupling with trans-4-aminocyclohexanol in dimethyl sulfoxide at 135 ° C. gives (2) (R₆= CH₃) Was obtained (see Scheme V). Depending on the choice of reagent, the desired substituent R₆Those skilled in the art will appreciate that a great deal of flexibility is possible in choosing
[0269]
Embedded image

R ₆ Alternative synthetic routes to substituted pyrroles (eg, 5-methylpyrrolopyrimidine)
R₆This alternative synthetic route to substituted pyrroles (eg, 5-methylpyrrolopyrimidine) involves transesterification and alkylation of ethyl cyanoacetate to (16) (Scheme VI). Pyrimidine (17) is obtained by condensing (16) with benzamidine hydrochloride using 2 equivalents of DBU. Cyclization to the pyrrole-pyrimidine (14) is achieved by deprotection of the acetal in aqueous HCl. The corresponding 4-chloro derivative (15) was obtained by reacting (14) with phosphorus oxychloride under reflux. Coupling with trans-4-aminocyclohexanol in dimethyl sulfoxide at 135 ° C. provided 2. In this procedure, the number of synthesis reactions for the target compound (2) is reduced from 9 steps to 4 steps. Furthermore, the yield is dramatically improved. Also, depending on the selection of the reagent, the desired substituent R₆Those skilled in the art will appreciate that a great deal of flexibility is possible in choosing
[0270]
Embedded image

The general approach for preparing desmethylpyrrole is depicted in the following scheme (Scheme VII).
[0271]
Embedded image

(Where R₁~ R₃Is defined above)
Alkylation of the alkyl cyanoacetate with diethyl acetal in the presence of a base provided the cyano diethyl acetal, which was treated with an amine salt to give the methylpyrrolopyrimidine precursor. This precursor was chlorinated and treated with an amine to form the desmethylpyrrolopyrimidine target as shown above.
[0272]
For example, Scheme VIII illustrates the synthesis of compound (18).
[0273]
Embedded image

Commercially available methyl cyanoacetate was alkylated with bromoacetaldehyde diethyl acetal in the presence of potassium carbonate and NaI to give (19). Cyclization to the pyrimidine (20) was achieved in two steps. First, pyrimidine acetal was formed by reacting (19) with bendiamidine hydrochloride using 2 equivalents of DBU. The resulting pyrimidine acetal was deprotected without purification with 1N aqueous HCl and the resulting aldehyde was cyclized to pyrrolo-pyrimidine (20) and isolated by filtration. The reaction of phosphorus oxychloride with (20) under reflux gave the corresponding 4-chloro derivative (21). Coupling of the chloro derivative with trans-4-aminocyclohexanol in DMSO at 135 ° C. gave compound (18) from compound (21).
[0274]
Schemes II-VIII demonstrate that it is possible to functionalize the 5- and 6-positions of the pyrrolopyrimidine ring. Through the use of various starting materials and slight modifications of the above reaction scheme, various functional groups can be introduced at the 5- and 6-positions of Formulas (I) and (II). Table 2 shows some examples.
[0275]
[Table 2]

It will be known to those of skill in the art that metabolism of the compounds disclosed herein in a patient results in certain biologically active metabolites that can act as drugs.
[0276]
The present invention is further described by the following examples, which should not be construed as limiting in any case. The contents of all references, pending patent applications, and published patent applications cited throughout this application (including those referred to in the Background section) are hereby incorporated by reference. Those of skill in the art will readily appreciate that the models used throughout the examples are generally accepted models and that demonstration of efficacy in these models is predictive of efficacy in humans.
[0277]
An example
Preparation 1:
A modified method of the alkylation method of Seela and Lupke was used.¹. To an ice-cooled solution (0 ° C.) of ethyl cyanoacetate (6.58 g, 58.1 mmol) in MeOH (20 mL), a solution of NaOMe (25 kw / v; 58.1 mmol) was added slowly. After 10 minutes, chloroacetone (5 mL; 62.8 mmol) was added slowly. After 4 hours, the solvent was removed. Dilute the brown oil with EtOAc (100 mL) and add H₂Washed with O (100 mL). The organic fraction was dried, filtered and concentrated to a brown oil (7.79 g; 79%). This oil (3) (Scheme IV) was a mixture of the methyl / ethyl ester product (9/1) and was used without further purification.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 4.24 (q, J = 7.2 Hz, OCH₂), 3.91 (dd, 1H, J = 7.2, 7.0 Hz, CH), 3.62 (s, 3H, OCH)₃), 3.42 (dd, 1H, J = 15.0, 7.1 Hz, 1 × CH)₂); 3.02 (dd, 1H, J = 15.0, 7.0 Hz, 1 × CH)₂); 2.44 (s, 3H, CH₃), 1.26 (t, J = 7.1 Hz, ester-CH₃).¹Seela, F.C. Lupke, U .; Chem. Ber. 1977, 110, 1462-1469.
[0278]
Preparation 2:
Seea and Lupke procedures were used¹. Thus, protection of ketone (3) with ethylene glycol (4 mL, 64.4 mmol) in the presence of TsOH (100 mg) (Scheme IV; 5.0 g, 32.2 mmol) allowed flash chromatography (SiO 2).₂3/7 EtOAc / Hex, R_f 0.35) to give (4) as an oil (Scheme IV; 5.2 g, 81.0). Still containing 5% ethyl ester:¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 4.24 (q, J = 7.2 Hz, OCH₂), 3.98 (s, 4H, 2x acetal-CH)₂), 3.79 (s, 3H, OCH₃), 3.62 (dd, 1H, J = 7.2, 7.0 Hz, CH), 2.48 (dd, 1H, J = 15.0, 7.1 Hz, 1 × CH)₂), 2.32 (dd, 1H, J = 15.0, 7.0 Hz, 1 × CH)₂); 1.35 (s, 3H, CH₃), 1.26 (t, J = 7.1 Hz, ester-CH₃); MS (ES): 200.1 (M⁺+1).¹Seela, F.C. Lupke, U .; Chem. Ber. 1977, 110, 1462-1469.
[0279]
Preparation 3:
A solution of acetal (4) (Scheme IV, 1 g, 5.02 mmol), benzamidine (786 mg, 5.02 mmol), and DBU (1.5 mL, 10.04 mmol) in dry DMF (15 mL) was heated to 85 ° C. for 15 minutes. Heated for hours. This mixture is CHCl₃(30 mL), 0.5N NAOH (10 mL) and H₂Washed with O (20 mL). The organic fraction was dried, filtered, and concentrated to a brown oil. Flash chromatography (SiO₂1/9 EtOAc / CH₂Cl₂, R_f 0.35) was attempted, but the material crystallized on the column. The silica gel was washed with MeOH. Fractions containing product (5) (Scheme IV) were concentrated and used without further purification (783 mg, 54.3%):¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 8.24 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 5.24 (brs, 2H, NH₂), 3.98 (s, 4H, 2x acetal CH)₂), 3.60-3.15 (m, 2H, CH₂), 1.38 (s, 3H, CH₃); MS (ES): 288.1 (M⁺+1).
[0280]
Preparation of compound (20) (Scheme VIII): Acetal (19) (4.43 g, 20.6 mmol) in dry DMF (20 mL)¹, Benzamine hydrochloride (3.22 g, 20.6 mmol), and DBU (6.15 mL, 41.2 mmol) were heated to 85 ° C. for 15 hours. The mixture is mixed with 100 mL of CHCl₃And diluted with H₂Washed with O (2 × 50 mL). The organic fraction was dried, filtered, and concentrated to a dark brown oil. The dark brown oil was stirred in 1N HCl (100 mL) for 2 hours at room temperature. The resulting slurry was filtered to give the HCl salt of (20) as a tan solid (3.60 g, 70.6%);¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) 11.92 (s, 1H), 8.05 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 7.05 (s, 1H, pyrrol H); MS ( ES): 212.1 (M⁺+1).
[0281]
Preparation 4:
A solution of acetal (5) (700 mg, 2.44 mmol) in 1 N HCl (40 mL) was stirred at room temperature for 2 hours. The resulting slurry was filtered to give the HCl salt of 2-phenyl-6-methyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one as a tan solid (498 mg, 78. 0%):¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 11.78 (s, 1H), 8.05 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 6.17 (s, 1H, pyrrol-H), 2 .25 (s, 3H, CH₃); MS (ES): 226.1 (M⁺+1).
[0282]
Preparation 5:
Chen et al. Using a modified version of the cyclization method¹. To an ice-cooled solution (0 ° C.) of bromide (9), (Scheme V; 20.0 g, 108 mmol; purity 90%) in isopropyl alcohol (60 mL) was added α-methylbenzylamine (12.5 mL, 97.3 mmol). ) Was added slowly. The black solution was warmed to room temperature and stirred for 15 hours. The mixture was diluted with EtOAc (200 mL) and washed with 0.5N NaOH (50 mL). The organic fraction was dried, filtered and concentrated to a black tar (19.2 g; 94%). Flash chromatography (SiO₂4/96 MeOH / CH₂Cl₂, R_f 0.35) to partially purify the residue to give the compound dl-1- (1-phenylethyl) -2-amino-3-cyano-4-methylpyrrol as a black solid (6.38 g, 31%). ): MS (ES): 226.1 (M⁺+1).
[0283]
¹Chen, Y .; L. Mansbach, R .; S. Winter, S .; M. Brooks, E .; Collins, J .; Corman, M .; L. Dunaiskis, A .; R. Faraci, W .; S. Gallaschun, R .; J. Schmidt, A .; Schulz, D .; W. J. Med. Chem. 1997, 40, 1749-1754.
[0284]
Preparation 6:
Dl-1- (1-phenylethyl) -2-amino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol in dichloromethane (50.0 mL)¹To a solution of (14.9 g, 62.5 mmol) and pyridine (10.0 mL) was added benzoyl chloride (9.37 g, 66.7 mmol) at 0 ° C. After stirring at 0 ° C. for 1 hour, hexane (10.0 mL) was added to facilitate precipitation of the product. The solvent was removed under vacuum and the solid was removed from EtOH / H₂Recrystallization from O gave 13.9 g (65%) of dl-1- (1-phenylethyl) -2-phenylcarbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol. mp: 218-221 ° C;¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.72 (s, 3H), 1.76 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 1.98 (s, 3H), 5.52 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 7 .14-7.54 (m, 9H), 7.68-7.72 (dd, J = 1.4 Hz, 6.9 Hz, 2H), 10.73 (s, 1H); MS (ES): 344 .4 (M⁺+1).
[0285]
¹Liebigs Ann. Chem. 1986, 1485-1505.
[0286]
The following compounds were obtained in a similar manner.
[0287]
Preparation 6A:
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (3-pyridyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.83 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 5.50 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 7 .14-7.42 (m, 5H), 8.08 (m, 2H), 8.75 (m, 3H); MS (ES): 345.2 (M⁺+1).
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (2-furyl) carbonylamino-3-cyano-4-dimethylpyrrol.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.84 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 1.92 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 5.49 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 6 .54 (dd, J = 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 7.12-7.47 (m, 7H); MS (ES): 334.2 (M⁺+1), 230.1.
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (3-furyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.80 (d, J = -7H-z, 3H), 1.89 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 5.48 (q, J = -7H-z, 1H) , 6.59 (s, 1H), 7.12-7.40 (m, 6H), 7.93 (s, 1H); MS (ES): 334.1 (M⁺+1), 230.0.
dl-1- (1-phenylethyl) -2-cyclopentylcarbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.82 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 1,88 (s, 3H), 2. 05 (s, 3H), 1.63-1.85 (m, 8H), 2.63 (m, 1H), 5.43 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 7.05-7.20 (m, 5H); MS (ES): 336.3 (M⁺+1).
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (2-thienyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol, H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.82 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.96 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 5.49 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 7 .05-7.55 (m, 8H); MS (ES): 350.1 (M⁺+1), 246.0.
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (3-thienyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.83 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.99 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 5.49 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 6 .90 (m, 1H), 7.18-7.36 (m, 6H), 7.79 (m, 1H); MS (ES): 350.2 (M⁺+1), 246.1.
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (4-fluorophenyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.83 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 1.96 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 5.51 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 7 .16-7.55 (m, 9H); MS (ES): 362.2 (M⁺+1), 258.1.
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (3-fluorophenyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.83 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 1.97 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 5.50 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 7 .05-7.38 (m, 7H), 7.67-7.74 (m, 2H); MS (ES): 362.2 (M⁺+1), 258.1.
[0288]
dl-1- (1-phenylethyl) -2- (2-fluorophenyl) carbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.85 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.94 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 5.50 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 7 .12-7.35 (m, 6H), 7.53 (m, 1H), 7.77 (m, 1H), 8.13 (m, 1H); MS (ES): 362.2 (M⁺+1), 258.0.
dl-1- (1-phenylethyl) -2-isopropylcarbonylamino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.19 (d, J = 7.0 Hz, 6H), 1.82 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.88 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2 .46 (m, 1H), 5.39 (m, J = 7.2 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 7.11-7.36 (m, 5H); MS (ES): 310.2 (M⁺+1), 206.1.
[0289]
In the case of acylation of dl-1- (1-phenylethyl) -2-amino-3-cyano-4-methylpyrrol, monoacylated dl-1- (1-phenylethyl) -2-benzoylamino-3-cyano- 4-Dimethylpyrrol and diacylated pyrrol dl-1- (1-phenylethyl) -2-dibenzoylamino-3-cyano-4-methylpyrrol were obtained.
[0290]
Monoacylated pyrrol:¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 7.69 (d, 2H, J = 7.8 Hz, Ar-H), 7.58-7.12 (m, 8H, Ar-H), 6.18 (s, 1H, pyrrol-H), 5.52 (q, 1H, J = 7.2 Hz, CH-CH₃), 2.05 (s, 3H, pyrrol-CH₃), 1.85 (d, 3H, J = 7.2 Hz, CH-Ch3); MS (ES): 330.2 (M⁺+1); diacylated pyrrol:¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 7.85 (d, 2H, J = 7.-7H-z, Ar-H), 7.74 (d, 2H, J = 7.8 Hz, Ar-H), 7.52-7.20 ( m, 9H, Ar-H), 7.04 (m, 2H, Ar-H), 6.21 (s, 1H, pyrrol-H), 5.52 (q, 1H, J = 7.2 Hz, Ch) -CH₃), 1.77 (d, 3H, J = 7.2 Hz, CH-CH₃), 1.74 (s, 3H, pyrrol-CH₃); MS (ES): 434.1 (M⁺+1).
[0291]
Preparation 7:
Concentrated to a solution of dl-1- (1-phenylethyl) -2-phenylcarboxamido-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol (1.0 g, 2.92 mmol) in methanol (10.0 mL). Sulfuric acid (1.0 mL) was added at 0 ° C. The resulting mixture was refluxed for 15 hours and cooled to room temperature. The precipitate was filtered and 0.48 g (48%) of dl-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-4 (3H). -Got on.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.02 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 2.04 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 6.25 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 7 .22-7.50 (m, 9H), 8.07-8.12 (dd, J = 3.4 Hz, 6.8 Hz, 2H), 10.51 (s, 1H); MS (ES): 344 .2 (M⁺+1). The following compound was obtained by a procedure similar to Preparation 7 .:
dl-5,6-Dimethyl-2- (3-pyridyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.03 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 6.24 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 7 0.09-7.42 (m, 5H), 8.48 (m, 2H), 8.70 (m, 3H); MS (ES): 345.1 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2- (2-furyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.98 (d, J = 7.8 Hz, 3H), 1.99 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 6.12 (q, J = 7.8 Hz, 1H), 6 .48 (dd, J = 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 7.17-7.55 (m, 7H), 9.6 (s, 1H); MS (ES): 334.2 (M⁺+1).
dl-5,6-dimethyl-2- (3-furyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃6.) δ 1.99 (d, J = 7 Hz, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 6.24 (q, J = -7H-z, 1H), 7. 09 (s, 1H), 7.18-7.32 (m, 5H), 7.48 (s, 1H), 8.51 (s, 1H); MS (ES): 334.2 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2-cyclopentyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.95 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 2.00 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.68-1.88 (m, 8H), 2.97 (M, 1H), 6.10 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 7.16-7.30 (m, 5H), 9.29 (s, 1H); MS (ES): 336. 3 (M⁺+1).
dl-5,6-dimethyl-2- (2-thienyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.02 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 6.13 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 7 .12 (dd, J = 4.8, 2.8 Hz, 1H), 7.26-7.32 (m, 5H), 7.44 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.01 ( d, J = 2.8 Hz, 1H) 11.25 (s, 1H); MS (ES): 350.2 (M⁺+1).
dl-5,6-dimethyl-2- (3-thienyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.00 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 6.24 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 7 .24-7.33 (m, 5H), 7.33-7.39 (m, 1H), 7.85 (m, 1H), 8.47 (m, 1H), 12.01 (s, 1H) ); MS (ES): 350.2 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2- (4-fluorophenyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.01 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 6.26 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 7 .12-7.36 (m, 7H), 8.23-8.30 (m, 2H), 11.82 (s, 1H); MS (ES): 362.3 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2- (3-fluorophenyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.02 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 6.29 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 7 .13-7.51 (m, 7H), 8.00-8.04 (m, 2H), 11.72 (s, 1H); MS (ES): 362.2 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2- (2-fluorophenyl) -7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.00 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 6.24 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 7 .18-7.45 (m, 8H), 8.21 (m, 1H), 9.54 (s, 1H); MS (ES): 362.2 (M⁺+1).
dl-5,6-Dimethyl-2-isopropyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.30 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.32 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 2.01 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 2 .90 (m, 1H), 6.13 (m, 1H), 7.17-7.34 (m, 5H), 10.16 (s, 1H); MS (ES): 310.2 (M⁺+1).
[0292]
Preparation 8:
Concentrated H in DMF (13 mL)₂SO₄A solution of dl-1- (1-phenylethyl) -2-benzoylamino-3-cyano-4-dimethylpyrrol (785 mg, 2.38 mmol) containing (1 mL) was stirred at 130 ° C. for 48 hours. CHCl to black solution₃(100 mL) and washed with 1 N NaOH (30 mL) and brine (30 mL). The organic fraction is dried, filtered, concentrated and flash chromatographed (SiO 2₂8/2 EtOAc / Hex, R_f 0.35) to give dl-5-methyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one as a brown solid (184 mg). , 24%).¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃5.) δ 8.18 (m, 2H, Ar-H), 7.62-7.44 (m, 3H, Ar-H), 7.40-7.18 (m, 5H, Ar-H), 6. 48 (s, 1H, pyrrol-H), 6.28 (q, 1H, J = 7.2 Hz, CH-CH₃), 2.18 (s, 3H, pyrrol-CH₃), 2.07 (d, 3H, J = 7.2 Hz, CH-CH₃); MS (ES): 330.2 (M⁺+1).
[0293]
Preparation 9:
A mixture of dl-1- (1-phenylethyl) -2-amino-3-cyano-4,5-dimethylpyrrol (9.60 g, 40.0 mmol) and formic acid (50.0 mL, 98%) was added for 5 hours. Reflux. Upon cooling to room temperature, the flask wall was scratched and the large amount of precipitate formed was filtered. This material is washed with water until the washings show a neutralizing pH, and dl-5,6-dimethyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-4 (3H)- Got on:¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.96 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 2.00 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 6.21 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 7 .11-7.35 (m, 5H), 7.81 (s, 1H), 11.71 (s, 1H); MS (ES): 268.2 (M⁺+1).
[0294]
Preparation 10: dl-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one (1.0 g, 2.91 mmol) Was suspended in polyphosphoric acid (30.0 mL). The mixture was heated to 100 ° C. for 4 hours. The hot suspension was poured into ice water, stirred vigorously to disperse the suspension, and basified to pH 6 with solid KOH. The resulting solid was filtered and collected to give 0.49 g (69%) of 5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one. .¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d) 2.17 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 7.45 (br, 3H), 8.07 (br, 2H,), 11.49 ( s, 1H), 11.82 (s, 1H); MS (ES): 344.2 (M⁺+1).
[0295]
The following compound was obtained in a similar manner as in Preparation 10:
5-Methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one. MS (ES): 226.0 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (3-pyridyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one. MS (ES): 241.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (2-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.13 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 6.39 (dd, J = 1.8, 3.6 Hz, 1H), 6.65 (dd, J = 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 1.8, 3.6 Hz, 1H,), 11.45 (s, 1H), 11.60 (s, 1H); MS (ES): 230.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (3-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.14 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 6.66 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 11.3 ( s, 1H), 11.4 (s, 1H); MS (ES): 230.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2-cyclopentyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 1.57-1.91 (m, 8H), 2.12 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.99 (m, 1H), 11.24 (s, 1H), 11.38 (s, 1H); MS (ES): 232.2 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (2-thienyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.14 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 7.14 (dd, J = 3.0, 5.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 11.50 (s, 1H); MS (ES): 246.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (3-thienyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.17 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 7.66 (m, 1H), 7.75 (m, 1H), 8.43 (m, 1H), 11.47 ( s, 1H), 11.69 (s, 1H); MS (ES): 246.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (4-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.17 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 7.31 (m, 2H), 8.12 (m, 2H), 11.47 (s, 1H); MS (ES) : 258.2 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2- (3-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.18 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 7.33 (m, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.85-7.95 (m, 2H), 11.56 (s, 1H), 11.80 (s, 1H); MS (ES): 258.1 (M⁺+1).
[0296]
5,6-Dimethyl-2- (2-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.18 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 7.27-7.37 (m, 2H), 7.53 (m1H), 7.68 (m, 1H), 11 .54 (s, 1H), 11.78 (s, 1H); MS (ES): 258.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-2-isopropyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 1.17 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 2.11 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.81 (m, 1H), 11.20 (s, 1H) ), 11.39 (s, 1H); MS (ES): 206.1 (M⁺+1).
5,6-Dimethyl-7H-pyrrolo [2,3-d) pyrimidin-4 (3H) -one.¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.13 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 7.65 (s, 1H); MS (ES): 164.0 (M⁺+1).
Preparation 11: 5,6-Dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4 (3H) -one (1.0 g, 4.2 mmol) in phosphorus oxychloride (25.0 mL). Was refluxed for 6 hours and then concentrated in vacuo to dryness. Water was added to the residue to induce crystallization, and the resulting solid was filtered and collected to 0.90 g (83%) of 4-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo. [2,3-d] pyrimidine was obtained.¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) 2.33 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 7.46-7.49 (m, 3H), 8.30-8.35 (m, 2H), 12.20 (s) , 1H); MS (ES): 258.1 (M⁺+1).
[0297]
The following compound was obtained in a similar manner as in Preparation 11:
4-Chloro-5-methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 244.0 (M⁺+1).
4-Chloro-6-methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 244.0 (M⁺+1).
4-chloro-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) 8.35 (2,2H), 7.63 (br s, 1H), 7.45 (m, 3H), 6.47 (br s, 1H); MS (ES): 230.0 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (3-pyridyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 259.0 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (2-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,
¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.35 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 6.68 (dd, J = 1.8, 3.6 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 1.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 1.8, 3.6 Hz, 1H); MS (ES): 248.0 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (3-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.31 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 6.62 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 12.02 ( s, 1H); MS (ES): 248.1 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2-cyclopentyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 1.61-1.96 (m, 8H), 2.27 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 3.22 (m, 1H), 11.97 (s, 1H); MS (ES): 250.1 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (2-thienyl) -7H-pyrrolo (2,3-d) pyrimidine,¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.29 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 7.14 (dd, J = 3.1 Hz, 4.0 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 12.19 (s, 1H); MS (ES): 264.1 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (3-thienyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.32 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 7.62 (dd, J = 3.0, 5.2 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 3.0 Hz, 1H); MS (ES): 264.0 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (4-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) 2.33 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 7.30 (m, 2H), 8.34 (m, 2H), 12.11 (s, 1H); MS (ES) : 276.1. (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (3-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.31 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 7.29 (m, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.96 (m, 1H), 8.14 ( m, 1H), 11.57 (s, 1H); MS (ES): 276.1 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2- (2-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.34 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 7.33 (m, 2H), 7.44 (m, 1H), 7.99 (m, 1H), 12.23 ( s, 1H); MS (ES): 276.1 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-2-isopropyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 1.24 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 2.28 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 3.08 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 11 .95 (s, 1H); MS (ES): 224.0 (M⁺+1).
4-chloro-5,6-dimethyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine,¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 2.31 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 8.40 (s, 1H); MS (ES): 182.0 (M⁺+1).
dl-4-Chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
[0298]
Preparation 12:
To a solution of dl-1,2-diaminopropane (1.48 g, 20.0 mmol) and sodium carbonate (2.73 g, 22.0 mmol) in dioxane (100.0 mL) and water (100.0 mL) was added di- tert-Dicarbonate (4.80 g, 22.0 mmol) was added at room temperature. The resulting mixture was stirred for 14 hours. Dioxane was removed under vacuum. The precipitate was filtered off and the filtrate was concentrated to dryness under vacuum. The residue was triturated with EtOAc and filtered. The filtrate is concentrated to dryness under vacuum, dl-1-amino-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino-propane and dl-2-amino-1- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino A mixture of propane was obtained. These could not be separated by ordinary chromatography. This mixture was used for the reaction of Example 8.
[0299]
Preparation 13: To a solution of Fmoc-Ala-OH (1.0 g, 3.212 mmol) and oxalyl chloride (0.428 g, 0.29 mL, 3.373 mmol) in dichloromethane (20.0 mL), add a few drops of N, N-dimethylformamide was added at 0 ° C. The mixture was stirred at room temperature for 1 hour, followed by the addition of cyclopropylmethylamine (0.229 g, 0.28 mL, 3.212 mmol) and triethylamine (0.65 g, 0.90 mL, 6.424 mmol). After 10 minutes, the mixture was treated with 1M hydrochloride (10.0 mL) and the aqueous mixture was extracted with dichloromethane (3 × 30.0 mL). The organic solution was concentrated to dryness under vacuum. The residue was treated with a solution of 20% piperidine in N, N-dimethylformamide (20.0 mL) for 0.5 hours. After removing the solvent under vacuum, the residue was treated with 1 M hydrochloride (20.0 mL) and ethyl acetate (20.0 mL). The mixture was separated and the aqueous layer (aqueous layer) was basified to pH = 8 using solid sodium hydroxide. The precipitate was removed by filtration and the aqueous solution was applied to an ion exchange column eluted with 20% pyridine to give 0.262 g (57%) of N-cyclopropylmethyl-alanine amide.¹1 H NMR (200 MHz, CD₃OD) δ 0.22 (m, 2H), 0.49 (m, 2H), 0.96 (m, 2H), 2.40 (t, 2H), 2.92 (t, 2H), 3.05 (D, 2H); MS (ES): 143.1 (M⁺+1).
[0300]
Preparation 14: N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine
trans-1,4-cyclonexyldiamine (6.08 g, 53.2 mmol) was dissolved in dichloromethane (10 OmL). A solution of di-t-butyl dicarbonate (2.32 g, 10.65 mmol in 40 mL dichloromethane) was added via cannula. After 20 hours, the reaction was washed with CHCl₃And water. The layers were separated and the aqueous layer was₃(3x). MgSO 4₄Dry over, filter and concentrate to give 1.20 g of a white solid (53%).¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃): Δ1.0-1.3 (m, 4H), 1.44 (s, 9H), 1.8-2.1 (m, 4H), 2.62 (brm, 1H), 3.40 ( brs, 1H), 4.37 (brs, 1HO; MS (ES): 215.2 (M⁺+1).
[0301]
4- (N-acetyl) -N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine
N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine (530 mg, 2.47 mmol) was dissolved in dichloromethane (20 mL). Acetic anhydride (250 mg, 2.60 mmol) was added dropwise. After 16 hours, the reaction was washed with water and CHCl₃And diluted with. The layers were separated and the aqueous layer was₃(3x). MgSO 4₄Dry over, filter and concentrate. Recrystallization (EtOH / H₂O) yielded 190 mg of white crystals (30%).¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃): Δ 0.9-1.30 (m, 4H), 1.43 (s, 9H), 1.96-2.10 (m, 7H), 3.40 (brs, 1H), 3.70 ( brs, 1H), 4.40 (brs, 1H), 4.40 (brs, 1H); MS (ES): 257.2 (M⁺+1), 242.1 (M⁺−15), 201.1 (M⁺-56).
[0302]
4- (4-trans-acetamidocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine
4- (N-acetyl) -N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine (190 mg, 0.74 mmol) is dissolved in dichloromethane (5 mL) and diluted with TFA (6 mL). did. After 16 hours, the reaction was concentrated. Crude solid, DMSC (2 mL), NaHCO₂(200 mg, 2.2 mmol) and 4-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (35 mg, 0.14 mmol) were combined in a flask and brought to 130 ° C. Until heated. After 4.5 hours, the reaction was cooled to room temperature and diluted with EtOAc and water. The layers were separated and the aqueous layer was extracted with EtOAc (3x). MgSO 4₄Dry over, filter and concentrate. Chromatography (silica preparative plate; 20: 1 CHCl₃: EtOH) to give 0.3 mg of a tan solid (1% yield). MS (ES): 378.2 (M⁺+1).
[0303]
4- (N-methanesulfonyl) -N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine.
[0304]
trans-1,4-Cyclohexyldiamine (530 mg, 2.47 mmol) was dissolved in dichloromethane (20 mL) and diluted with pyridine (233 mg, 3t0 mmol). Methanesulfonyl chloride (300 mg, 2.60 mmol) was added dropwise. After 16 hours, the reaction was washed with water and CHCl₃And diluted with. The layers were separated and the aqueous layer was₃(3x). MgSO 4₄Dry over, filter and concentrate. Recrystallization (EtOH / H₂O) gave 206 mg of white crystals (29%).¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃): Δ 1.10-1.40 (m, 4H), 1.45 (s, 9H), 2.00-2.20 (m, 4H), 2.98 (s, 3H), 3.20- 3.50 (brs, 2H), 4.37 (brs, 1H); MS (ES) 293.1 (M⁺+1). 278.1 (M⁺15), 237.1 (M⁺56).
[0305]
4- (4-trans-methanesulfamidocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine
4- (N-sulfonyl) -N-tert-butoxycarbonyl-trans-1,4-cyclohexyldiamine (206 mg, 0.71 mmol) was dissolved in dichloromethane (5 mL) and diluted with TFA (6 mL). . After 16 hours, the reaction was concentrated. Crude reaction mixture, DMSO (2 mL), NaHCO₃(100 mg, 1.1 mmol) and 1-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine were combined in a flask and heated to 130 ° C. After 15 hours, the reaction was cooled to room temperature and diluted with EtOAc (3x). MgSO 4₄Dry over, filter and concentrate. Chromatography (silica preparative plate, 20: 1 CHCl₃/ EtOH) to give 2.6 mg of a tan solid (5% yield). MS (ES): 414.2 (M⁺+1).
[0306]
Example 1: 4-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (0.50 g, 1.94 mmol) and 4-trans in methyl sulfoxide (10.0 mL) A solution of -hydroxycyclohexylamine (2.23 g, 19.4 mmol) was heated at 130 C for 5 hours. After cooling to room temperature, water (10.0 mL) was added and the resulting aqueous solution was extracted with EtOAc (3 × 10.0 mL). Dry the combined EtOAc solution (MgSO 4₄), Filter, concentrate the filtrate under vacuum to dryness and chromatograph the residue on silica gel 0.49 g (75%) of 4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2. -Phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. mp 197-199 ° C;¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) 1.25-1.59 (m, 8H), 2.08 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.68-3.79 (m, 1H), 4.32-4 .38 (m, 1H), 4.88 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.26-7.49 (m, 3H), 8.40-8.44 (dd, J = 2.2, 8 Hz, 2H), 10.60 (s, 1H); MS (ES): 337.2 (M⁺+1).
[0307]
The following compound was obtained in an analogous manner to Example 1:
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-6-methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 11.37 (s, 1H, pyrrol-NH), 8.45 (m, 2H, Ar-H), 7.55 (m, 3H, Ar-H), 6.17 (s, 1H, pyrrol-). H), 4.90 (br d, 1H, NH), 4.18 (m, 1H, CH-O), 3.69 (m, 1H, CH-N), 2.40-2.20 (m , 2H), 2.19-1.98 (m, 2H), 2.25 (s, 3H, CH₃) 1.68-1.20 (m, 4H); MS (ES): 323.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5-methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 11.37 (s, 1H, pyrrol-NH), 8.40 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 5.96 (s, 1H, pyrrol-NH). H), 4.90 (br d, 1H, NH), 4.18 (m, 1H, CH-O), 3.69 (m, 1H, CH-N), 2.38-2.20 (m , 2H), 2.18-1.98 (m, 2.00 (s, 3H, CH)₃) 1.68-1.20 (m, 4H); MS (ES): 323.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. mp 245.5-246.5C;¹1 H NMR (200 MHz, CD3OD) δ 8.33 (m, 2H, Ar-H), 7.42 (m, 3H, Ar-H), 7.02 (d, 1H, J = 3.6 Hz, pyrrol-H) ), 6.53 (d, 1H, J = 3.6 Hz, pyrrol-H), 4.26 (m, 1H, CH-O), 3.62 (m, 1H, CH-N), 2.30. -2.12 (m, 2H), 2.12-1.96 (m, 2H), 1.64-1.34 (m, 4H); MS, M + 1 = 309.3; analysis (C₁₉H₂ N₄O) C, H, N.
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (3-pyridyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.21-1.54 (m, 8H); 2.28 (s, 3H); 2.33 (s, 3H); 3.70 (m, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.89 (d, 1H), 7.40 (m, 1H), 8.61 (m, 2H), 9.64 (m, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (2-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.26-1.64 (m, 8H), 2.22 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 3.72 (m, 1H), 4.23 (m, 1H), 4.85 (d, 1H), 6.52 (m, 1H), 7.12 (m, 1H), 7.53 (m, 1H), 9.28 (s, 1H); MS (ES): 327.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (3-furyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) 1.25-1.63 (m, 8H), 2.11 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 3.71 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.84 (d, 1H), 7.03 (m, 1H), 7.45 (m, 1H), 8.13 (m, 1H), 10.38 (m, 1H); MS (ES): 327.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-cyclopentyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.26 to 2.04 (m, 16H), 2.26 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 3.15 (m, 1H), 3.70 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 4.75 (d, 1H); MS (ES): 329.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (2-thienyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-amine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) 1.28-1.59 (m, 8H), 2.19 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.74 (m, 1H), 4.19 (m, 1H), 4.84 (d, 1H), 7.09 (m, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.85 (m, 1H), 9.02 (s, 1H); MS (ES): 343.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (3 thienyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ1.21-1.60 (m, 8H), 1.98 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 3.66 (m, 1H), 4.22 (m, 1H), 7.27 (m, 1H), 7.86 (m, 1H), 8.09 (m, 1H), 11.23 (s, 1H); MS (ES): 343.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (4fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.26-1.66 (m, 8H), 1.94 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 3.73 (m, 1H), 4.33 (m, 1H), 4.92 (d, 1H), 7.13 (m, 2H), 8.41 (m, 2H), 11.14 (s, 1H); MS (ES): 355.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (3-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.26-1.71 (m, 8H), 2.06 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 3.72 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.90 (d, 1H), 7.09 (m, 1H), 7.39 (m, 1H), 8.05 (m, 1H), 8.20 (m, 1H), 10.04 (s) , 1H); MS (ES): 355.2 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2- (2-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.30-1.64 (m, 8H), 2.17 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.73 (m, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.82 (d, 1H), 7.28 (m, 2H), 8.18 (m, 1H), 9.02 (m, 1H), 12.20 (s, 1H); MS (ES): 355.3 (M⁺+1).
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-isopropyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.31 (d, J = 7.0 Hz, 6H), 1.30-1.65 (m, 8H), 2.27 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 3.01 (M, J = 7.0 Hz, 1H), 3.71 (m, 1H), 4.14 (m, 1H), 4.78 (d, 1H); MS (ES): 303.2.
dl-4- (2-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-isopropyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.31-1.42 (br, 4H), 1.75-1.82 (br, 4H), 2.02 (S, 3H), 2. (S, 3H), 3.53 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 5.08 (d, 1H), 7.41-7.48 (m, 3H), 8.30 ( m, 2H), 10.08 (s, 1H); MS (ES): 337.2 (M⁺+1).
4- (3,4-trans-dihydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 353.2 (M⁺+1).
4- (3,4-cis-dihydroxylcyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 353.2 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. mp 196-199 ° C;¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.72 (s, 3H), 1.97 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.59 (m, 2H), 3.96 (m, 2H), 5.63 ( br, 1H), 7.44-7.47 (m, 3H), 8.36-8.43 (dd, J = 1 Hz, 7 Hz, 2H), 10.76 (s, 1H); MS (ES) : 324.5 (M⁺+1).
dl-4- (2-trans-hydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine¹.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.62 (m, 2H), 1.79 (br, 4H), 1.92 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 4.11 (m, 1H), 4.23 ( m, 1H), 5.28 (d, 1H), 7.41-7.49 (m, 3H), 8.22 (m, 2H), 10.51 (s, 1H); MS (ES): 323.2 (M⁺+1).¹See PCT 9417090 for the preparation of 2-trans-hydroxycyclopentylamine.
dl-4- (3-trans-hydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine¹.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Delta 1.58-1.90 (br, 6H), 2.05 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 4.48-4.57 (m, 1H), 4.91-5. .01 (m, 2H), 7.35-7.46 (m, 3H), 8.42-8.47 (m, 2H), 10.11 (s, 1H); MS (ES): 323. 2 (M⁺+1).¹See A-322242 for the preparation of 3-trans-hydroxycyclopentylamine.
dl-4- (3-cis-hydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine¹.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.82-2.28 (br, 6H), 2.02 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 4.53-4.60 (m, 1H), 4.95-5. 0.08 (m, 1H), 5.85-5.93 (d, 1H), 7.35-7.47 (m, 3H), 8.42-8.46 (m, 2H), 10.05 (S, 1H); MS (ES): 323.2 (M⁺+1).¹For the preparation of 3-cis-hydroxycyclopentylamine, see EP-A 322 242.
4- (3,4-trans-dihydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine¹.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ1.92-1.99 (br, 2H), 2.14 (s, 3H), 2.20 (br, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.41-2.52 (br , 2H), 4.35 (m, 2H), 4.98 (m, 2H), 7.38-7.47 (m, 3H), 8.38-8.42 (m, 2H), 9. 53 (s, 1H); MS (ES): 339.2 (M⁺+1).¹For the preparation of 3,4-trans-dihydroxycyclopentylamine, see PCT 9417090q.
4- (3-Amino-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.02 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.71 (t, 2H), 4.18 (m, 2H), 5.75-5.95 (m, 3H), 7.38-7.48 (m, 3H), 8.37-8.41 (m, 2H), 10.42 (s, 1H); MS (ES): 310.1 (M⁺+1).
4- (3-N-cyclopropylmethylamino-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CD₃OD) δ 0.51 (q, 2H), 0.40 (q, 2H), 1.79-1.95 (br, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.40 (s, 3H) , 2.72 (t, 2H), 2.99 (d, 2H), 4.04 (t, 2H), 7.58-7.62 (m, 3H), 8.22-8.29 (m , 2H); MS (ES): 364.2 (M⁺+1).
4- (2-Amino-2-oxoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CD₃OD) [delta] 2.31 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 4.26 (s, 2H), 7.36 (m, 3H), 8.33 (m, 2H); MS ( ES): 396.1 (M⁺+1).
4- (2-N-methylamino-2-oxoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.99 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.82 (d, 3H), 4.39 (d, 2H), 5.76 (t, 1H), 6.71 ( br, 1H), 7.41-7.48 (m, 3H), 8.40 (m, 4H), 10.66 (s, 1H); MS (ES): 310.1 (M⁺+1).
4- (3-tert-Butyloxyl-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.45 (s, 9H), 1.96 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.71 (t, 2H), 4.01 (q, 2H), 5.78 ( t, 1H), 7.41-7.48 (m, 3H), 8.22-8.29 (m, 2H); MS (ES): 367.2 (M⁺+1).
4- (2-hydroxyethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.92 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.81-3.98 (br, 4H), 5.59 (t, 1H), 7.39.48 (m, 3H) ), 8.37 (m, 2H), 10.72 (s, 1H); MS (ES): 283.1 (M⁺+1).
4- (3-Hydroxypropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.84 (m, 2H), 1.99 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 3.62 (t, 2H), 3.96 (m, 2H), 3.35 ( t, 1H), 7.39-7.48 (m, 3H), 8.36 (m, 2H), 10.27 (s, 1H); MS (ES): 297.2 (M⁺+1).
4- (4-hydroxybutyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.71-1.82 (m, 4H), 1.99 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.68-3.80 (m, 4H), 5.20 (t) , 1H), 7.41-7.49 (m, 3H), 8.41 (m, 2H), 10.37 (s, 1H); MS (ES): 311.2 (M + 1).
4- (4-trans-acetylaminocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine
4- (4-trans-methylsulfonylaminocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
4- (2-acetylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
4- (4-trans-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
4- (3-pyridylmethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
4- (2-Methylpropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-7- (1-phenylethyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.
[0308]
Example 2: To a stirred solution of triphenylphosphine (0.047 g, 0.179 mmol) and benzoic acid (0.022 g, 0.179 mmol) in THF (1.0 mL) cooled to 0 <0> C was added 4- (4 -Trans-Hydroxycyclohexyl) amino 5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (0.05 g, 0.149 mmol) was added at 0 ° C. Then, diethyl azodicarboxylate (0.028 mL, 0.179 mmol) was added dropwise over 10 minutes. The reaction was then warmed to room temperature. After the reaction was completed by TLC, the reaction mixture was quenched with aqueous sodium bicarbonate (3.0 mL). The aqueous layer was separated and extracted with ether (2 × 5.0 mL). The organic extracts were combined, dried and concentrated in vacuo to dryness. After adding ether (2.0 mL) and hexane (5.0 mL) to the residue, most of the triphenylphosphine oxide was removed by filtration. The filtrate was concentrated to give a viscous oil which was purified by column chromatography (hexane: acetic acid = 4: 1) to give 5.0 mg (7.6%) of 4- (4-cis-benzoyl). Oxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 441.3 (M⁺+1). This reaction also produced 50.0 mg (84%) of 4- (3-cyclohexynyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 319.2 (M⁺+1).
Example 3: 4- (4-cis-benzoyloxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (5. (0 mg, mmol) was added 10 drops of 2M sodium hydroxide. After 1 hour, the reaction mixture was extracted with acetic acid (3 × 5.0 mL), the organic layer was dried, filtered and concentrated in vacuo to dryness. The residue was subjected to column chromatography (hexane: acetic acid = 4: 1) to give 3.6 mg (94%) of 4- (4-cis-hydroxycyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [ 2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 337.2 (M⁺+1).
The following compound was obtained in a similar manner as in Example 3:
4- (3-N, N-dimethyl-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.01 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.73 (t, 2H), 2.97 (s, 6H), 4.08 (m, 2H), 6.09 ( t, 1H), 7.41-7.48 (m, 3H), 8.43 (m, 2H), 10.46 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
4- (2-formylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.26 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 3.59-3.78 (m, 2H), 3.88-4.01 (m, 2H), 5.48-5 .60 (m, 1H), 7.38-7.57 (m, 3H), 8.09 (s, 1H), 8.30-8.45 (m, 2H), 8.82 (s, 1H) ); MS (ES): 310.1 (M⁺+1).
4- (3-Acetylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
[0309]
Example 4: 4- (3-tert-butyloxy-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (70.0 mg, 0.191 mmol) Was dissolved in trifluoroacetic acid: dichloromethane (1: 1, 5.0 mL). The resulting solution was stirred at room temperature for 1 hour and then refluxed for 2 hours. After cooling to room temperature, the mixture was concentrated in vacuo to dryness. The residue was subjected to preparative thin film chromatography (EtOAc: Hexane: AcOH = 7: 2.5: 0.5) to give 40.0 mg (68%) of 4- (3-hydroxy-3-oxopropyl) amino- 5,6-Dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained.¹1 H NMR (200 MHz, CD₃OD) δ 2.32 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 2.81 (t, 2H), 4.01 (t, 2H), 7.55 (m, 3H), 8.24 (M, 2H); MS (ES): 311.1 (M⁺+1).
[0310]
The following compounds were obtained in an analogous manner to Example 4:
4- (3-Aminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 296.1 (M⁺+1), 279.1 (M-NH₃).
[0311]
Example 5: 4- (3-Hydroxy-3-oxopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (50.0 mg, 0.161 mmol) was treated with N , N-dimethylformamide (0.50 mL), dioxane (0.50 mL) and water (0.25 mL). To this solution was added methylamine (0.02 mL, 40% weight in water, 0.242 mmol), triethylamine (0.085 mL) and N, N, N'N'-tetramethyluronium tetrafluoroborate (61. (2 mg, 0.203 mmol). After stirring at room temperature for 10 minutes, the solution was concentrated and the residue was subjected to preparative thin-layer chromatography (EtOAc) to give 35.0 mg (67%) of 4- (3-N-methyl-3-oxopropyl) amino-. 5,6-Dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.92 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.65 (t, 2H), 4.08 (t, 2H), 5.90 (t, 1H), 6.12 ( m, 1H), 7.45 (m, 3H), 8.41 (m, 2H), 10.68 (s, 1H); MS (ES): 311.1 (M⁺+1).
The following compound was obtained in an analogous manner to Example 5:
4- (2-cyclopropanecarbonylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 350.2 (M⁺+1).
4- (2-isobutyrylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 352.2 (M⁺+1).
4- (3-propionylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.00-1.08 (t, 3H), 1.71-2.03 (m, 4H), 2.08 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 3.263.40. (M, 2H), 3.79-3.96 (m, 2H), 5.53-5.62 (m, 1H), 6.17-6.33 (m, 1H), 7.33-7 .57 (m, 3H), 8.31-8.39 (m, 2H), 9.69 (s, 1H); MS (ES): 352.2 (M⁺+1).
4- (2-Methylsulfonylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.18 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.92 (s, 3H), 3.39-3.53 (m, 2H), 3.71-3.88 (m , 2H), 5.31-5.39 (m, 1H), 6.17-6.33 (m, 1H), 7.36-7.43 (m, 3H), 8.20-8.25. (M, 2H), 9.52 (s, 1H); MS (ES): 360.2 (M⁺+1).
[0312]
Example 6: 4-Chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (0.70 g, 2.72 mmol) and 1,2-diaminoethane (10.0 mL, 150 mmol) )) Was refluxed for 6 hours under an inert atmosphere. The excess amine is removed under vacuum and the residue is washed successively with ether and hexane to give 0.75 g (98%) of 4 (2-aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2- Phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES); 282.2 (M⁺+1), 265.1 (M⁺-NH₃).
[0313]
Example 7: 4- (2-Aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (70.0 mg, 0.249 mmol) in dichloromethane (2.0 mL) ) And triethylamine (50.4 mg, 0.498 mmol) at 0 ° C. was added propionyl chloride (25.6 mg, 0.024 mL, 0.274 mmol). After 1 hour, the mixture was concentrated in vacuo and the residue was subjected to preparative thin-layer chromatography (EtOAc) to give 22.0 mg (26%) of 4- (2-propionylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl- 2-Phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
The following compound was obtained in an analogous manner to Example 7:
4- (2-N'-methylureaethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 2.13 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 3.53 (d, 3H), 3.55 (m, 2H), 3.88 (m, 2H), 4.29 ( m, 1H), 5.68 (t, 1H), 5.84 (m, 1H), 7.42 (m, 3H), 8.36 (dd, 2H), 9.52 (s, 1H); MS (ES): 339.3 (M⁺+1).
4- (2-N'-ethylureaethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. MS (ES): 353.2 (M⁺+1).
[0314]
Example 8: 1- (3-Dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride (41.1 mg, 0.215 mmol), dimethylaminopyridine (2.4 mg, 0.020 mmol) in dichloromethane (2.0 mL) and To a solution of pyruvic acid (18.9 mg, 0.015 mL, 0.215 mmol) was added 4- (2-aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine. (55.0 mg, 0.196 mmol) was added. The mixture was stirred at room temperature for 4 hours. Via regular workup followed by column chromatography (EtOAc) 10.0 mg (15%) of 4- (2'-pyruvylamidoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3 -D] pyrimidine was obtained. MS (ES): 352.2 (M⁺+1).
Example 9: 4- (2-Aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (60.0 mg, 0.213 mmol) in dichloromethane (2.0 mL) ) Was added N-trimethylsilyl isocyanate (43.3 mg, 0.051 mL, 0.320 mmol). The mixture was stirred at room temperature for 3 hours, followed by addition of aqueous sodium bicarbonate. After filtration through a small amount of silica gel, the filtrate was concentrated in vacuo to dryness and 9.8 mg (14%) of 4- (2-ureaethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H- Pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 325.2 (M⁺+1).
[0315]
The following compound was obtained in an analogous manner to Example 9:
dl-4- (2-Acetylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.28-1.32 (d, J = 8 Hz, 3H), 1.66 (s, 3H), 1.96 (s, 3H), 2.30 (s, 3H) 3.76-3. 83 (m, 2H), 4.10-4.30 (m, 1H), 5.60-5.66 (t, J = 6 Hz, 1H), 7.40-7.51 (m, 3H), 8.36-8.43 (m, 2H), 10.83 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
(R) -4- (2-Acetylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.31 (d, 3H), 1.66 (s, 3H) 1.99 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.78-3.83 (m, 2H), 4 .17-4.22 (m, 1H), 5.67 (t, 1H), 7.38-7.5 (m, 3H), 8.39 (m, 2H), 10.81 (s, 1H) ); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
(R) -4- (1-Methyl-2-acetylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.41 (d, 3H), 1.68 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 3.46-3.52 (br, m, 2H) ), 4.73 (m, 1H), 5.22 (d, 1H), 7.41-7.46 (m, 3H), 8.36-8.40 (m, 2H), 8.93 ( s, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
(S) -4- (2-Acetylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.31 (d, 3H), 1.66 (s, 3H) 2.26 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 3.78-3.83 (m, 2H), 4 .17-4.22 (m, 1H), 5.67 (t, 1H), 7.38-7.5 (m, 3H), 8.39 (m, 2H), 8.67 (s, 1H) ); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
(S) -4- (1-Methyl-2-acetylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃3.) δ 1.41 (d, 3H), 1.68 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 3.463.52 (m, 2H), 73 (m, 1H), 5.22 (d, 1H), 7.41-7.46 (m, 3H), 8.36-8.40 (m, 2H), 10.13 (s, 1H) MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
[0316]
Example 10: dl-1-amino-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino-propane of 4-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine And a reaction with dl-2-amino-1- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino-propane mixture was carried out in the same manner as in Example 1. After the reaction, dl-4- (1-methyl-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino) ethylamino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine and obtaining a mixture of dl-4- (2-methyl-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylamino) ethylamino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine; This was separated by column chromatography (EtOAc: hexane = 1: 3). The first fraction is dl-4- (1-methyl-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d The pyrimidine was:¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ1.29-1.38 (m, 12H), 1.95 (s, 3H), 2.31 (s, 3H) 3.34-3.43 (m, 2H), 4.62-4. 70 (m, 1H), 5.36-5.40 (d, J = 8 Hz, 1H), 5.53 (br, 1H), 7.37-7.49 (m, 3H), 8.37- 8.44 (m, 2H), 10.75 (s, 1H). MS 396.3 (M⁺+1); the second fraction is dl-4- (2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] Pyrimidine was:¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.26-1.40 (m, 12H), 2.00 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 3.60-3.90 (m, 2H), 3.95-4 .10 (m, 1H), 5.41-5.44 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.65 (br, 1H), 7.40-7.46 (m, 3H), 8 .37-8.44 (m, 2H), 10.89 (s, 1H); MS (ES): 396.2 (M⁺+1).
The following compound was obtained in an analogous manner to Example 10:
(S, S) -4- (2-Acetylaminocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.43 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.83 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.30 (m, 2H), 2.32 ( s, 3H), 3.73 (br, 1H), 4.25 (br, 1H), 5.29 (d, 1H), 7.43-7.48 (m, 3H), 8.35-8. .40 (m, 2H), 9.05 (s, 1H).
4- (2-Methyl-2-acetylaminopropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.51 (s, 6H), 1.56 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 3.76 (d, 2H), 5.78 ( t, 1H), 7.41-7.48 (m, 3H), 7.93 (s, 1H), 8.39 (m, 2H), 10.07 (s, 1H); MS (ES): 352.3 (M⁺+1).
[0317]
Example 11: dl-4- (1-Methyl-2- (1,1-dimethylethoxy) carbonylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine ( (60.6 mg, 0.153 mmol) was treated with trifluoroacetic acid (0.5 mL) in dichloromethane (2.0 mL) for 14 hours. The organic solvent was removed under vacuum until dry. The residue was dissolved in N, N-dimethylformamide (2.0 mL) and triethylamine (2.0 mL). Acetic anhydride (17.2 mg, 0.016, 0.169 mmol) was added to this solution at 0 ° C. The resulting mixture was stirred at room temperature for 48 hours, then concentrated in vacuo to dryness. The residue was subjected to preparative thin-film chromatography (EtOAc) to give 27.0 mg (52%) of dl-4- (1-methyl-2-acetylaminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-. Pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) 1.38-1.42 (d, J = 8 Hz, 3H), 1.69 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 2.32 (s, 3H) 3.38-3. 60 (m, 2H), 4.65-4.80 (m, 1H), 5.23-5.26 (d, J = 6 Hz, 1H), 7.40-7.51 (m, 3H), 8.37-8.43 (m, 2H), 10.44 (s, 1H); MS (ES): 338.2 (M⁺+1).
[0318]
Example 12: In the same manner as in Example 1, 4-chloro-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (0.15 g, 0.583 mmol) and (1R, 2R )-(-)-1,2-Diaminocyclohexane (0.63 g, 5.517 mmol) prepared from (R, R) -4- (2-aminocyclohexyl) amino-5,6-dimethyl-2 -Phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was treated with triethylamine (0.726 g, 7.175 mmol) and acetic anhydride (0.325 g, 3.18 mmol) in N, N-dimethylformamide (10.0 mL). ) At room temperature for 2 hours. After removing the solvent under vacuum, acetic acid (10.0 mL) and water (10.0 mL) were added to the residue. The mixture was separated and the aqueous layer was extracted with acetic acid (2 × 10.0 mL). Dry the combined ethyl acetate solution (MgSO 4₄), Filtered. The filtrate is concentrated to dryness under vacuum and the residue is subjected to column chromatography (EtOAc: hexane = 1: 1) to give 57.0 mg (26%) of (R, R) -4- (2-acetylaminocyclohexane). Xyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.43 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.84 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.30 (m, 2H), 2.33 ( s, 3H), 3.72 (br, 1H), 4.24 (br, 1H), 5.29 (d, 1H), 7.43-7.48 (m, 3H), 8.35-8. .39 (m, 2H), 8.83 (s, 1H); MS (ES): 378.3 (M⁺+1).
[0319]
Example 13: 4- (2-Hydroxyethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (40.0 mg, 0.141 mmol) in pyridine (1.0 mL) Acetic anhydride (0.108 g, 1.06 mmol) was added to the solution at 0 ° C. The mixture was stirred at room temperature for 4 hours and the solvent was removed under vacuum. The residue was subjected to preparative thin-layer chromatography (EtOAc: hexane = 1: 1) to give 32.3 mg (71%) of 4- (2-acetyloxyethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-. Pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained.¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 1.90 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 4.05 (m, 2H), 4.45 (t, 2H), 5.42 ( m, 1H), 7.41-7.49 (m, 3H), 8.42 (m, 2H), 11.23 (s, 1H).
[0320]
Example 14: Fmoc-β-Ala-OH (97.4 mg, 0.313 mmol) and oxalyl chloride (39.7 mg, 27.3 μL) in dichloromethane (4.0 mL) with one drop of N, N-dimethylformamide. , 0.313 mmol) at 0 ° C. for 1 hour, followed by 4- (2-aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine ( 80.0 mg, 0.285 mmol) and triethylamine (57.6 mg, 79.4 μL, 0.570 mmol) were added at 0 ° C. After 3 hours, the mixture was concentrated in vacuo and the residue was treated with a 20% solution of piperidine in N, N-dimethylformamide (2.0 mL) for 0.5 hours. After removing the solvent under vacuum, the residue was washed with diethyl ether: hexane (1: 5) and 3.0 mg (3a) of 4- (6-amino-3-aza-4-oxohexyl) amino-5. , 6-Dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 353.2 (M⁺+1).
[0321]
Example 15: 4- (2-Aminoethyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3 in dichloromethane (4.0 mL) with 1 drop of N, N-dimethylformamide A solution of -d] pyrimidine (70.0 mg, 0.249 mmol) and succinic anhydride (27.0 mg, 0.274 mmol) was stirred at room temperature for 4 hours. The reaction mixture was extracted with 20% sodium hydroxide (3 × 5.0 mL). The aqueous solution is acidified with 3M hydrochloride to pH = 7.0. The whole mixture was extracted with acetic acid (3 × 10 mL). Dry the combined organic solution (MgSO 4₄), Filtered. The filtrate was concentrated in vacuo to dryness and 15.0 mg (16%) of 4- (7-hydroxy-3-aza-4,7-dioxoheptyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-. 7H-Pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was obtained. MS (ES): 382.2 (M⁺+1).
[0322]
Example 16: To 10 mL of dimethylformamide (DMF) is added 700 mg of 4-cis-3-hydroxycyclopentyl) amino-2-phenyl-5,6-dimethyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine at room temperature. Followed by 455 mg of N-Boc glycine, 20 mg of N, N-dimethylaminopyridine (DMAP), 293 mg of hydroxybenzotriazole (HOBT) and 622 mg of 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride. Salt (EDCL) was added. The reaction mixture was stirred overnight. Then DMF was removed under reduced pressure and the reaction mixture was partitioned between 20 mL acetic acid and 50 mL water. The aqueous portion was extracted with an additional 2 × 20 mL of acetic acid, and the combined organic portions were washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated. Purification on silica gel, elution with acetic acid / hexane, gave 410 mg of the desired product: 4- (cis-3- (Nt-butoxycarbonyl-2-aminoacetoxy) cyclopentyl) amino-2- Phenyl-5,6-dimethyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 480.2. The ester was then treated with 5 mL of 20% trifluoroacetic acid in dichloromethane at room temperature, left overnight, and then concentrated. Trituration with acetic acid provided 300 mg of an off-white solid; 4- (cis-3- (2-aminoacetoxy) cyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3 -D] pyrimidine trifluoroacetate, MS (ES) (M⁺+1) = 380.1.
[0323]
Those skilled in the art will recognize that the following compounds can be synthesized by the methods disclosed above:
4- (cis-3-hydroxycyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 323.1. 4- (cis-3- (2-aminoacetoxy) cyclopentyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine trifluoroacetate, MS (ES) (M⁺+1) = 380.1.
4- (3-acetamido) piperidinyl-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 364.2.
4- (2-N'-methylureapropyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 353.4.
4- (2-acetamidobutyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 352.4.
4- (2-N'-methylureabutyl) amino-5,6-dimethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 367.5.
4- (2-aminocyclopropylacetamidoethyl) amino-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 309.1.
4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (3-chlorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 342.8. 4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (3-fluorophenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M-) = 327. .2.
4- (trans-4-hydroxycyclohexyl) amino-2- (4-pyridyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES) (M⁺+1) = 310.2.
[0324]
Example 17
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The pyrrol nitrogen of (7) (Scheme IX) was protected with di-t-butyl dicarboxylate under basic conditions to give the corresponding carbamate (22). The radical bromination of (22) was regioselectively performed to obtain a bromide (23). In general, compound (23) serves as a key electrophilic intermediate for various nucleophilic coupling partners. Substitution of the alkyl bromide with sodium trihydrate phenolate gave compound (24). Subsequent substitution of the aryl chloride and removal of the t-butyl carbamaze protecting group were performed in a single step to give the desired red compound (25).
[0325]
Synthesis details of compounds (22)-(25) according to Scheme IX
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Di-t-butyl dicarboxylate (5.37 g, 24.6 mmol) and dimethylaminopyridine (1.13 g, 9.2 mmol) were added to (7) (1.50 g, 6.15 mmol) and pyridine (30 mL). Added to the contained solution. After 20 hours, the reaction was concentrated and the residue was₂Cl₂And water. CH₂Cl₂The layers are separated and the MgSO₄Dry over, filter and concentrate to give a black solid. Flash chromatography (SiO₂1/9 EtOAc / hexane, R_f 0.40) to give 1.70 g (80%) of a white solid (22).¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 8.50 (m, 2H, Ar-H), 7.45 (m, 3H, Ar-H), 6.39 (s, 1H, pyrrol-H), 2.66 (s, 3H, pyrrol-) CH₃), 1.76 (s, 9H, carbamate-CH₃); MS, M + 1 = 344.1; Mpt = 175-177C.
[0326]
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N-bromosuccinimide (508 mg, 2.86 mmol) and AIBN (112 mg, mmol) were added to (22) (935 mg, 2.71 mmol) and CCl₄(50 mL). The solution was heated to reflux. After 2 hours, the reaction was cooled to room temperature and concentrated in vacuo to give a white solid. Flash chromatography (SiO₂; 1/1 CH₂Cl₂/ Hexane, R_f 0.30) yielded 960 mg (84%) of a white solid (23).¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) Δ 8.52 (m, 2H, Ar-H), 7.48 (m, 3H, Ar-H), 6.76 (s, 1H, pyrrol-H), 4.93 (s, 2H, pyrrol-). CH₂Br), 1.79 (s, 9H, carbamate-CH); MS, M + 1 = 423.9; Mpt = 155-157C.
[0327]
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Sodium trihydrate phenol (173 mg, 1.02 mmol) was added to CH 3₂Cl₂(5 mL) and a solution of bromide (23) (410 mg, 0.97 mmol) dissolved in DMF (10 mL) in one portion. After 2 hours, the reaction solution was₂Cl₂And water. CH layer₂Cl₂Extracted using. Merged CH₂Cl₂The layers are washed with water and MgSO₄Dry over, filter and concentrate to give a yellow solid. Flash chromatography (SiO₂1/6 EtOAc / hexane, R_f 0.30) to give 210 mg (50%) of a white solid (24).¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) 8.55 (m, 2H, Ar-H), 7.48 (m, 3H, Ar-H), 7.34 (m, 2H, Ar-H), 7.03 (m, 3H, Ar-). H), 6.83 (s, 1H, pyrrol-H), 5.45 (s, 2H, ArCH₂O), 1.76 (s, 9H, carbamate-CH); MS, M⁺= 436.2.
[0328]
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(24) A solution containing (85 mg, 0.20 mmol), N-acetylethylenediamine (201 mg, 1.95 mmol) and DMSO (3 mL) was heated to 100 ° C. After 1 hour, the temperature was raised to 130 ° C. After 3 hours, the reaction was cooled to room temperature and partitioned between EtOAc and water. The aqueous layer was extracted with EtOAc (2x). The combined EtOAc layers were washed with water, MgSO₄Dry over, filter and concentrate. Flash chromatography (SiO₂1/10 EtOH / CHCl₃, R_f 0.25) yielded 73 mg (93%) of a white foamy solid (25).¹1 H NMR (200 MHz, DMSO-d₆) Δ 11.81 (brs, 1H, NH), 8.39 (m, 2H, Ar-H), 8.03 (brt, 1H, NH), 7.57 (brt, 1H). , NH), 7.207.50 (m, SH, Ar-H), 6.89-7.09 (m, 3H, Ar-H), 6.59 (s, 1H, pyrrol-H). , 5.12 (s, 2H, ARCH₂O), 3.61 (m, 2H, NCH), 3.36 (m, 2H, NCH), 1.79 (s, 3H, COCH)₃); MS, M⁺1 = 402.6.
[0329]
The following compound is obtained in the same manner as in Example 17:
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6-phenoxymethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, mp 196-197 ° C; MS (ES): 401.6 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-fluorophenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 420.1 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-chlorophenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 436.1 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (4-methoxyphenoxy) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 432.1 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (N-pyridin-2-one) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 403.1 (M⁺+1).
4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (N-phenylamino) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3] pyrimidine, MS (ES): 400.9 (M⁺+1). 4- (2-acetylaminoethyl) amino-6- (N-methyl-N-phenylamino) methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 414.8 ( M⁺+1).
4- (2-N'-methylureaethyl) amino-6-phenoxymethyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine, MS (ES): 416.9 (M⁺+1).
[0330]
Example 18: Adenosine A₁Antagonist synthesis
Compounds 1319 and 1320 (Table 13 below) can be prepared according to the general procedures described herein.
[0331]
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Compound 1319 (81%)¹H-NMR (d6-DMSO) d 1.37 (m, 4H), 1.93 (m, 2H), 2.01 (m, 2H), 4.11 (brs, 1H), 4.61 (d , 1H, J = 4.4 Hz), 6.59 (m, 1H), 7.09 (m, 1H), 7.21 (m, 2H), 7.49 (dd, 1H, J = 8 Hz, 14 Hz) ), 8.03 (m, 1H), 8.18 (d, 1H, J = 8 Hz), 11.55 (brs, 1H). MS (ES): 327.0 (M⁺+1).
Compound 1320 (31%) MS (ES): 343.1 (M⁺+1).
[0332]
Example 19: Adenosine A₁Antagonist synthesis
Compound 1321 (Table 13 below) can be synthesized by the following general procedure.
[0333]
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Compound 28 (10.93 g, 50.76 mmol) was dissolved in DMF (67 mL). 4-Amidinopyridine hydrochloride (8.0 g, 50.76 mmol) and DBU (15.4 g, 101.5 mmol) were added sequentially and the reaction was heated to 85 <0> C. After 22 hours, the reaction was cooled to room temperature and DMF was removed under vacuum. The dark oil was diluted with 2M HCl (80 mL). The reaction was allowed to settle. After 2 hours, the solution was cooled to 10 ° C. and filtered. The solid was washed with cold water and dried to give 7.40 g of a yellow solid solid, compound 29 (69%).¹H-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) d 6.58 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 8.53 (d, 2H, J = 5.6), 9.00 (d, 2H, J = 5.2 Hz) ), 12.35 (brs, 1H). MS (ES): 212.8 (M⁺+1).
Compound 29 (7.4 mmol, 29.8 mmol) was added to POCl₃And heated to 105 ° C. After 18 hours, the reaction was cooled to room temperature and POCl₃Is removed under vacuum. The dark dark oil is diluted with MeOH (75 mL) followed by ether (120 mL). The amorphous red solid is filtered and washed with ether to give 3.82 g of a red solid. The crude solid is about 80% pure and is used in the next reaction without further purification. MS (ES): 230.7 (M⁺+1).
Compound 1321¹H-NMR (15%) (200 MH, d-DMSO) d 1.38 (m, 4H), 1.92 (brs, 2H), 2.02 (brs, 2H), 3.44 (brs, 1H) , 4.14 (brs, 1H), 4.56 (d, 1H, J = 4 Hz), 6.63 (m, 1H), 15 (m, 1H), 7.32 (d, 1H, J = 6) .2 Hz), 8.20 (d, 2H, J = 4.4 Hz), 8.65 (d, 2H, J = 4.4 Hz), 11.67 (brs, 1H). MS (ES): 310.2 (M⁺+1).
Compound 1501 (see Table 15 below)¹H-NMR (70%) (200 MHz, CD₃OD) d 1.84 (s, 3H), 3.52 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 3.83, t, 2H, J = 6 Hz), 6.51 (d, 1H, J = 3.4 Hz), 7.06 (d, 1H, J = 3.8 Hz), 7.42 (m, 3H), 8.36 (m, 2H). MS (ES): 296.0 (M⁺+1).
[0334]
Compound 1502 (Table 15 below) MS (ES): 345.0 (M⁺+1).
Compound 1500 (Table 15 below)¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃) D 1.40-1.80 (m, 6H), 1.85-2.10 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.50 ( d, 3H), 3.90-4.10 (m, 2H), 4.76 (m, 1H), 5.50 (d, 1H), 6.03 (m, 1H), 7.40 (m , 3H), 8.37 (m, 2H), 9.15 (brs, 1H). MS (ES): 393.3 (M⁺+1).
[0335]
Example 20: Adenosine A₁Antagonist synthesis
Compound 1504 (Table 15 below) can be synthesized by the following general procedure.
[0336]
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Compound 31 (200 mg, 0.47 mmol) was dissolved in DCM (4 mL). Triethylamine (51 mg, 0.5 mmol) and thiomorpholine (52 mg, 0.5 mmol) were added sequentially. The solution was mixed for a few minutes and left for 72 hours. The reaction was washed with DCM and H₂Dilute with O and separate the layers. Layer was extracted with DCM. The combined DCM layer was washed with MgSO₄Dry over, filter and concentrate. Ethyl ether was added to the crude sample and the resulting solid was filtered to give 100 mg of a white solid, 32 (62%).¹1 H NMR (200 MHz, CDCl₃) D 1.76 (s, 9H), 2.66 (brs, 2H), 2.79 (brs, 2H), 3.86 (s, 2H), 7.46 (m, 3H), 8.50 ( m, 2H).
[0337]
Compound 32 was combined with DMSO (3 mL) and trans-4-aminocyclohexanol (144 mg, 1.25 mmol) and heated to 130 ° C. for 4 hours. The reaction was cooled to room temperature and EtOAc and H₂Dilute with O. The layers were separated and the aqueous layer was extracted with EtOAc (2x). The combined organic layers are₂Washed with O and brine, MgSO₄Dry over, filter and concentrate. Chromatography (silica, 8: 1 CHCl₃/ EtOH) to give 32 mg of a tan oil. Ethyl ether was added and the resulting solid was filtered to give 5 mg of a white solid (9%). OSIC-148265:¹H-NMR (200 MHz, CD₃OD): d1.44 (brm, 4H), 2.03 (brm, 2H), 2.21 (brm, 2H), 2.70 (brm, 8H), 3.63 (m, 4H), 92 (m, 1H), 4.26 (brs, 1H), 6.42 (s, 1H), 7.42 (m, 3H), 8.33 (m, 2H).
[0338]
Example 21: Synthetic adenosine A1 antagonist
Compound 1503 (Table 15 below) can be prepared by the general procedure shown below.
[0339]
Embedded image

The bromide, compound 31 (220 mg, 0.47 mmol) was dissolved in 1: 1 DMF: dichloromethane (5 mL). To this₂CO₃(71 mg, 0.52 mmol) and morpholine (0.047 mL, 0.47 mmol) were added. The mixture was stirred overnight at room temperature. The solvent is removed under vacuum and the residue is₂Partitioned between O and dichloromethane. Organic layer MgSO₄, Filtered and concentrated to give an off-white solid, which was triturated with ether / hexane to give 175 mg of a white solid, 33 (84%).¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃): (1.9 (9H, s), 2.54 (4H, s), 3.65 (4H, s), 3.85 (1H, s), 6.59 (1H, s), 7. 45 (3H, m), 8.5 (2H, m).
[0340]
Compound 33 (50 mg, 0.11 mmol) and trans-4-aminocyclohexanol (105 mg, 0.91 mmol) were taken up in DMSO (2 mL). N was added to the resulting solution.₂Was sparged and then heated to 100 ° C. in an oil bath and stirred overnight. The crude reaction mixture was poured into water and extracted twice with acetic acid (50mL). The combined organic layers are₂Washed with O. MgSO₄After drying with and filtration, the organic layer was concentrated in vacuo to give an orange solid. Chromatography (silica, CH₂Cl₂10% CH in₂OH) to give 15 mg (33%).¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃): (1.24-1.62 (4H, m), 1.85 (2H, m), 2.10 (2H, m), 2.26 (4H, m), 3.53 (4H, m) ), 4.22 (1H, m), 4.73 (1H, m), 5.85 (1H, d), 6.15 (1H, s), 7.25 (3H, m), 8.42 (2H, M), 10.0 (1H, s) MS (ES): 408 (M⁺+1).
Compounds 1500, 1501 and 1502 can be prepared by treating compound 32 with an appropriately substituted amine as in the preparation steps of Example 20.
[0341]
Human adenosine A ₁ And A _2a Receptor yeast β-galactosidase reporter gene assay: Human yeast adenosine A (S. cerevisiae)₁(A₁R; CADUS strain CY12660) or human A_2a(A_2aCADUS strain CY8362), and a lacZ (β-galactosidase) reporter gene was added so that the function could be measured. A description of this transformation is listed below (see yeast strains). A₁And A_2aNECA (5'-N-ethylcarboxamide adenosine), a potent adenosine receptor agonist with about the same affinity for the receptor, was used as a ligand in all assays. Test compounds were tested at eight different concentrations (0.1-10,000 nM) to determine whether β-galactosidase activity induced by NECA could be inhibited by CY12660 or CY8362.
[0342]
Preparation of yeast stock culture: Yeast strains CY12660 and CY8362 were each streaked on LT agar plates and incubated at 30 ° C until colonies were observed. Yeasts collected from these colonies were added to LT solution (pH 6.8) and grown at 30 ° C. overnight. Then, each yeast strain was measured with a spectrophotometer (Molecular Devices VMAX) to determine OD.₆₀₀= 1.0-2.0 (about 1-2 × 10⁷(Cells / mL). To each 6 mL of yeast culture, 4 mL of 40% glycerol (1: 1.5 volume: volume) was added ("Yeast / glycerol stock culture"). From this yeast / glycerol stock culture, ten 1 mL aliquots were prepared and stored at -80 C until needed for the assay.
[0343]
Yeast A₁R and A_2aR assay: Thaw one vial of each of the CY8362 and CY12660 yeast / glycerol stock cultures and supplement with LT 6.8 pH 6.8 medium (5 mL 40% glucose, 0.45 mL 1 M KOH, and 2.5 mL Pipes pH 6.8). (92 mL of LT solution to which was added). Cultures were grown at 30 ° C. for 16-18 hours (overnight). An aliquot of the culture grown overnight is then diluted with LT medium containing 4 U / mL adenosine deaminase (type VI or VII from calf intestinal mucosa, Sigma) and OD8362 (A2aR).₆₀₀= 0.15 (1.5 x 10⁶Cells / mL) and CY12660 (A₁R) at OD₆₀₀= 0.50 (5 × 10⁶Cells / mL).
[0344]
Assays were performed in a final volume of 100 μL in a 96-well macrotiter plate such that the final concentration was 2% DMSO in all wells. For the primary screening, one or two concentrations (10 uM, 1 μM) of the test compound were used. The compounds were tested at eight different concentrations (10000, 1000, 500, 100, 50, 10, 1 and 0.1 nM) for further screening. In each microtiter plate, 10 uL of 20% DMSO was added to the "control" and "Total" wells, while 10 uL of the test compound (in 20% DMSO) was added to the "unknown" wells. Subsequently, 10 uL of NECA (A₁R is 5 uM, A2_aR1 uM) was added to the “total” and “unknown” wells. On the other hand, 10 uL of PBS was added to the "control" well. Finally, 80 uL of yeast strain CY8362 or CY12660 was added to all wells. All plates were then vortexed briefly (2-3 minutes on a LabLine orbital shaker) and incubated for 4 hours at 30 ° C. in a drying oven.
[0345]
Β-galactosidase activity can be quantified using a colorimetric assay (eg, ONPG, CPRG), a luminescence assay (eg, Galacton-Star), or a fluorescent substrate (eg, FDG, resorufin). At present, fluorescence detection is preferred because of its high signal / noise ratio, relatively little interference, and low cost. Fluorescein digalactopyranoside, a fluorescent β-galactosidase substrate (FDG, Molecular Cube Probes or Marker Gene Technologies), was added to all wells at 20 uL / well (final concentration = 80 uM). The plate was shaken for 5-6 seconds (LabLine orbital shaker) and then incubated at 37 ° C. for 90 minutes (95% O 2₂/ 5% CO₂Incubator). At the end of the 90 minute incubation period, 20 uL / well of 1 M Na₂CO₃Was used to suppress β-galactosidase activity, and all plates were shaken for 5-6 seconds. The plate was then agitated for 6 seconds and the relative fluorescence intensity was measured using a fluorimeter (Tecan Spectrofluor; excitation = 485 nm, emission = 535 nm).
[0346]
Calculations: The relative fluorescence values of the “control” wells were considered as background and were subtracted from “total” and “unknown” values. Compound characteristics were analyzed by logarithmic transformation (x-axis: compound concentration), and then IC was performed using one-site competition curve fitting.₅₀Values were calculated (GraphPad Prism).
[0347]
Yeast strains: Saccharomyces cerevisiae strains CY12660 [far1 * 1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14 :: trp1 :: LYS2 ste3 * 1156 gpa1 (41) -Gαi3 lys2 ura3 leu2 trp1: his3; LEU2 PGKp-Mfα1 leader -hA1R-PHO5term 2mu-orig REP3 Ampr] and CY8362 [gpa1p-rGαsE10K far1 * 1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14 :: trp1: LYS2 ste3 * 1156 lys2 ura3 leu2 trp1 his3; LEU2 PGKp-hA2aR 2mu-ori REP3 Ampr] to generate Was.
[0348]
LT medium: LT (Leu-Trp supplemented) medium consists of 100 g DIFCO yeast nitrogen basal medium supplemented with: 1.0 g valine, 1.0 g aspartic acid, 0.75 g phenylalanine, 0.9 g lysine, 0.45 g tyrosine, 0.45 g isoleucine, 0.3 g methionine, 0.6 g adenine, 0.4 g uracil, 0.3 g serine, 0.3 g proline, 0.3 g cysteine, 0.3 g arginine, 0.9 g histidine, And 1.0 g threonine.
[0349]
Human A ₁ Construction of yeast strain expressing adenosine receptor
In this example, human A functionally integrated into the yeast pheromone system pathway₁The construction of the yeast strain expressing the adenosine receptor will be described.
[0350]
I. Construction of expression vector
Human A₁To construct a yeast expression vector for the adenosine receptor, human A₁Using reverse transcriptase PCR of human hippocampal mRNA using primers and standard techniques designed based on the published sequence of the adenosine receptor, A₁Adenosine receptor cDNA was obtained. This PCR product was subcloned into the NcoI and XbaI sites of the yeast expression plasmid pMP15.
[0351]
The pMP15 plasmid was prepared from pLPXt as follows. XbaI site of YEP51 (M. Inouye, edited by Experimental Manipulation of Gene Expression. Academic Press, New York, Broach, J.R. 83-117), blunt-ended and removed by religation to create Yep51NcoDXba. Another XbaI site was created at the BamHI site to generate YEP51NcoXt by digestion with BamHI, blunting, ligation of linker (New England Biolabs, # 1081), XbaI digestion, and religation. This plasmid was digested with Esp31 and NcoI and ligated to the Leu2 and PGKp fragments generated by PCR. This 2 kb Leu2 PCR product was generated by amplification from YEP51Nco using primers containing Esp31 and BglII sites. The 660 base pair PGKp PCR product was converted to pPGKas (Kang, Y.-S. et al. (1990) Mol. Cell. Biol.) Using PCR primers containing BglII and NcoI sites.10: 2582 to 2590). The resulting plasmid is called pLPXt. pLPXt was modified by inserting the coding region of the a-factor prepro leader at the NcoI site. The prepro leader was inserted such that the NcoI cloning site was retained at the 3 'end of the leader and was not regenerated at the 5' end. Thus, the plasmid can be digested with NcoI and XbaI to clone the receptor. The resulting plasmid is called pMP15.
[0352]
Human A₁This pMP15 plasmid into which the adenosine receptor cDNA is inserted is designated p5095. In this vector, the receptor cDNA is fused to the 3 'end of the yeast a-factor prepro leader. During protein maturation, this prepropeptide sequence is cleaved to produce the mature full-length receptor. This occurs while the receptor is processed via the yeast secretory pathway. This plasmid is maintained by Leu selection (ie, growth on media lacking leucine). The sequence of this cloned coding region was determined and found to be equivalent to the published literature (GenBank accession numbers S45235 and S56143).
[0353]
II. Construction of yeast strains
Human A₁To generate a yeast strain expressing the adenosine receptor, yeast strain CY7967 was used as the initial parent strain. The genotype of CY7967 is as follows: MATα gpaD1163 gpa1 (41) Gαi3 far1D1442 tbt-1 FUS1-HIS3 can1 ste14 :: trp1 :: LYS2 ste3D1156 lys2 ura3 leu3 trp
These genetic markers are outlined below:
MATa …… Mating type a
gpa1D1163... Endogenous yeast G-protein GPA1 is deleted.
gpa1 (41) Gαi3... gpa1 (41) -Gai3 was integrated into the yeast genome. This chimeric Ga protein consists of the first 41 amino acids of the endogenous yeast Ga subunit GPA1 fused to the mammalian G-protein Ga3, which lacks the cognate N-terminal amino acid.
far1D1442... The FAR1 gene (causing cell cycle arrest) is deleted (this prevents cell cycle arrest due to activation of the pheromone response pathway).
tbt-1: A strain having high transformation efficiency by electroporation.
FUS1-HIS3: fusion of FUS1 promoter and HIS3 coding region (this creates a pheromone-inducible HIS3 gene).
can 1 arginine / canavanine permease.
ste14 :: trp1 :: LYS2... Gene disruption of CTE-farnesyl methyltransferase, STE14 (this reduces basal signaling through the pheromone pathway).
ste3D1156: Endogenous yeast STR, a-factor pheromone receptor (STE3) is disrupted.
lys2 ... 2-aminoadipate reductase is defective. Lysine is required for yeast to grow.
ura3... Orotidine-5′-phosphate decarboxylase is defective. Uracil is required for yeast to grow.
[0354]
leu2 ...... b-isopropylmalate dehydrogenase is defective. Leucine is required for yeast to grow.
trp1 ...... Phosphoribosylanthranilic acid is defective. Yeast requires tryptophan for growth.
his3 ……… Imidazole glycerol phosphate dehydrogenase is deficient. Histidine is required for yeast to grow.
Two plasmids were transformed by electroporation into strain CY7967: plasmid p5095 (human A₁Plasmid p1584, which encodes the adenosine receptor; supra) and the FUS1-β-galactosidase reporter gene plasmid. Plasmid p1584 is constructed from plasmid pRS426 (Christianson, TW et al. (1992) Gene.110: 119 to 1122). Plasmid pRS426 contains a polylinker site at nucleotides 2004-2016. A fusion of the FUS1 promoter and the β-galactosidase gene was inserted into the restriction sites EagI and XhoI to create plasmid p1584. The p1584 plasmid is maintained by Trp selection (ie, growth on media lacking leucine).
[0355]
The resulting strain with p5095 and p1584 is called CY12660 and has a human A₁Expresses adenosine receptor. A minimal medium lacking leucine and tryptophan was used to grow this strain in solution or on agar plates. To perform the proliferation assay (assaying FUS1-HIS3) on a plate, the plate was at pH 6.8 and 0.5-2.5 mM 3-amino-1,2,4-triazole was added. And lacked leucine, tryptophan, and histidine. As a control for specificity, comparisons from one or more other yeast-based seven transmembrane receptor screens were included in all experiments.
[0356]
Human A _2a Construction of yeast strain expressing adenosine receptor
In this example, human A is functionally integrated into the yeast pheromone system pathway._2aThe construction of a yeast strain expressing the adenosine receptor is described.
[0357]
I. Construction of expression vector
To construct a yeast expression vector for the human A2a adenosine receptor, human A2a receptor cDNA was obtained from Dr. Phil Murphy (NIH). This clone was received and the sequence of the A2a receptor insert was determined and found to be identical to the published sequence (GenBank Accession # S46950). The receptor cDNA was excised from the plasmid by PCR using VENT polymerase and cloned into plasmid pLPBX, which expresses the receptor in yeast with the constitutive phosphoglycerate kinase (PGK) promoter. The sequence of the entire insert was re-determined and found to be identical to the published sequence. However, due to the cloning method used, three amino acids of GlySerVal were added to the carboxy terminus of the receptor.
[0358]
II. Construction of yeast strains
To create a yeast strain that expresses the human A2a adenosine receptor, yeast strain CY8342 was used as a starting parent strain. The genotype of CY8342 is as follows: MATa far1D1442 tbt1-1 lys2 ura3 leu2 trp1 his3 fus1-HIS3 can1 ste3D1156 gpaD1163 ste14 :: trp1 :: LYS2 gap1_{α s}E10K (or gpa1p-rG_{α S}D229S or gpalp-rG_{α S}E10K + D229S).
[0359]
These genetic markers are as described in Example 1, except for the G-protein mutation. In human A2a receptor expression, the endogenous yeast G protein GPA1 is deleted and mammalian G_αsWas used. Three rats G_αsMutants were utilized. These mutants contain one or two point mutations that convert them to proteins that bind efficiently to yeast βγ. These variants have the G (where glutamic acid at position 10 is replaced with lysine) G_αSE10K, (where aspartic acid at position 229 is substituted with serine) G_αSD2295, and G (including both point mutations)_αSIdentified as E10K + D229S.
[0360]
(3 mutant rats G_αSThe strain CY8342 (having one of the proteins) was transformed with the parent vector pLPBX (receptor⁻) Or pLPBX-A2a (receptor⁻). A plasmid having the FUS1 promoter fused to the β-galactosidase coding sequence (described above) was added to evaluate the activity of the pheromone response pathway.
[0361]
Human A ₁ Functional assays using yeast strains expressing adenosine receptors
In this example, human A₁The development of a functional screening assay for adenosine receptor modulators in yeast is described.
[0362]
I. Ligands used in the assay
Adenosine, a natural agonist for this receptor, as well as two other synthetic agonists were utilized in the development of this assay. EC₅₀Adenosine reported to be about 75 nM and (-)-N6- (2-phenylisopropyl) -adenosine (PIA) reported to have an affinity of about 50 nM were used in some experiments. . 5'-N-ethylcarboxamide adenosine (NECA) was used in all proliferation assays. Adenosine deaminase (4 U / mL) was added in all assays to prevent signaling due to the presence of adenosine in the growth medium.
[0363]
II. Biological response in yeast
A series of yeast strains expressing various G protein subunits₁The receptor expression vector (p. 5095 above) was introduced to transform A in a heterologous yeast system.₁The functional binding capacity of the adenosine receptor was evaluated. Most of these transformants contain G_α1Or G_α0Subtype G_αThe subunit was expressed. Additional G to determine if a promiscuous receptor-Gα protein coupling is identified_αProtein was also tested. In various strains, the STE18 or chimeric STE18-Gγ2 construct was integrated into the yeast genome. This yeast strain has a defective HIS3 gene and an integrated copy of FUS1-HIS3, thereby containing 3-amino-1,2,4-triazole (tested at 0.2, 0.5, and 1.0 mM). Selection on a selective medium lacking histidine. Transformants were isolated and a monolayer was prepared on a medium containing 3-amino-1,2,4-triazole, 4 U / mL adenosine deaminase and lacking histidine. 5 μL of various concentrations of ligand (eg, 0, 0.1, 1.0, and 10 mM NECA) were used. Growth was monitored for 2 days. In this way, a ligand-dependent proliferative response was tested in various yeast strains. The results are summarized in Table 1 below. The symbol (-) indicates that no ligand-dependent receptor activity was detected, while (+) means a ligand-dependent response. The term “LIRMA” refers to ligand-independent receptor-mediated activation.
[0364]
[Table 3]

As shown in Table 3, the strongest communication is GPA₁(41) -G_αi3It has been found to occur in yeast strains expressing chimeras.
[0365]
III. fus1-LacZ assay
To more fully characterize the pheromone response pathway activity, β-galactosidase synthesis by fus1LacZ in response to agonist stimulation was measured. To perform the β-galactosidase assay, a Ste18-Gγ2 chimera and GPA₄₁-G_αi3Human A in the middle of the log phase expressed in a yeast strain co-expressing₁Increasing concentrations of ligand were added to the adenosine receptor culture. Transformants were isolated and grown overnight in the presence of histidine and 4 U / mL adenosine deaminase. After 5 hours incubation with 4 U / mL adenosine deaminase and ligand, whether β-galactosidase was induced was measured using CPRG as a substrate for β-galactosidase. 5x10 per assay⁵Cells were used.
[0366]
The result obtained by stimulation with NECA is 10^-8At M NECA concentrations, β-galactosidase activity was shown to be stimulated about 2-fold. NECA concentration of 10^-5In M, a stimulus index (stimulation index) of about 10 times was observed.
[0367]
Confirmation of the activity of the antagonist on this strain has broadened the utility of this assay. Two known adenosine antagonists, XAC and DPCPX, were tested for their ability to compete with NECA (at 5 mM) in the β-galactosidase assay. In these assays, the induction of β-galactosidase was determined to be 1.6 × 10 6 per assay using FDG as a substrate.⁵Of the cells. As a result, both XAC and DPCPX were expressed in yeast expressed by yeast.₁Acts as a potent antagonist of the adenosine receptor, providing IC₅₀The values were shown to be 44 nM and 49 nM, respectively.
[0368]
This inhibitory effect is A₁To determine if subtype-specific, a series of supplemental experiments were performed on yeast-based A (described in Example 4)._2aPerformed by receptor assay. A_2aFrom the results obtained in the yeast-based assay, it can be seen that XAC is relatively effective A_2aIt was a receptor antagonist and was shown to be consistent with previous reports. In contrast, DPCPX was relatively inactive at this receptor, as expected from previous reports.
[0369]
IV. Radioligand binding
A₁The characteristics of the adenosine receptor assay were further characterized by measuring the radioligand binding parameters of the receptor. By some adenosine receptor reference compounds XAC, DPCPX, and CGS [³H] CPX binding replacement for human A₁Analysis was performed using a membrane prepared from yeast expressing the adenosine receptor. Human A₁The specificity of binding was examined by comparing results using yeast membranes expressing adenosine receptors with results obtained from yeast membranes expressing human A2a adenosine receptor or human A3 receptor. To perform this assay, 50 mg of membrane was added to 0.4 nM [³[H] CPX and increasing concentrations of adenosine receptor ligand. Incubation was performed with 50 mM Tris-HCl, pH 7.4, 1 mM EDTA, 10 mM MgCl.₂, 0.25% BSA and 2 U / mL adenosine deaminase in the presence of a protease inhibitor for 60 minutes at room temperature. Ice cold 50 mM Tris-HCl, pH 7.4 + 10 mM MgCl₂Was added to stop the binding, followed by a quick filtration through a GF / B filter pre-soaked with 0.5% polyethylenimine using a Packard 96-well harvester. Data was analyzed by non-linear least squares curve fitting using Prism 2.01 software. IC obtained in this experiment₅₀The values are summarized in Table 4 below.
[0370]
[Table 4]

These data indicate that the reference compound has an affinity that is consistent with the affinity reported in the literature. Furthermore, the data indicate that this yeast-based assay is sensitive enough to discriminate receptor subtype specificity.
[0371]
Functional assay using yeast strain expressing human A2a adenosine receptor
In this example, human A₁The development of an assay to functionally screen for adenosine receptor modulators in yeast is described.
[0372]
I. Ligands used in the assay
The natural ligand adenosine, as well as other fully characterized commercial ligands, were used for the analysis of the human A2a receptor functionally expressed in yeast. Three ligands were used to establish this assay. The ligands are as follows.
[0373]

Adenosine deaminase (4 U / mL) was added in all assays to prevent signaling due to the presence of adenosine in the growth medium.
[0374]
II. Biological response in yeast
Transformed with the A2a receptor expression plasmid;_αSE10K, G_αSD229S or G_αSA2a receptor agonists were tested for the ability to stimulate the pheromone response pathway in yeast expressing any of the E10K + D229S. The ability of the receptor-dependent ligand to stimulate the pheromone response pathway was shown by altered yeast phenotype. When the receptor was activated, the phenotype changed from a histidine auxotroph to a histidine prototrophy (fus1-HIS3 activation). Three separate transformants were isolated and grown overnight in the presence of histidine. The cells were washed to remove histidine and 2 × 10⁶Diluted to cells / mL. 5 μL of each transformant was spotted on a non-selection medium (containing histidine) or a selection medium (1 mM AT) in the absence or presence of 4 U / mL adenosine deaminase. Plates were grown at 30 ° C. for 24 hours. In the presence of histidine, the receptor⁺(R⁺) And receptor⁻(R⁻) All of the strains were able to grow. However, in the absence of histidine, R⁺Only cells grew. Since no ligand was added to these plates, two explanations were possible for this result. One possible interpretation is that yeast with this receptor has benefited from growth due to ligand-independent receptor-mediated activation (LIRMA). According to another interpretation, the yeast was able to synthesize the ligand adenosine. To discriminate between these two possibilities, adenosine deaminase (ADA), an enzyme that degrades this ligand, was added to growing yeast and plates. In the presence of adenosine deaminase, R⁺The cells no longer proliferated in the absence of histidine, indicating that the yeast did indeed synthesize the ligand.
[0375]
This interpretation was confirmed by the in-solution A2a proliferation assay. In this experiment, R⁺Yeast (G expressing A2a receptor)_αSE10K strain) at three different densities (1 × 10⁶Cells / mL, 3 × 10⁵Cells / mL, or 1 × 10⁵Cells / mL) and seeded in the presence or absence of adenosine deaminase (4 U / mL). As the concentration of 3-amino-1,2,4-triazole (AT), a competitive antagonist of imidazole glycerol-P dehydratase, a protein product of the HIS3 gene, increases (0, 0.1, 0.2, Or 0.4 mM), increasing the stringency of the assay. Growth diminished in the presence of adenosine deaminase and 3-amino-1,2,4-triazole yeast. However, in the absence of 3-amino-1,2,4-triazole, adenosine deaminase had little effect. Thus, adenosine deaminase itself had no direct effect on the pheromone response pathway.
[0376]
Another technique for measuring proliferation, which can be miniaturized for high-throughput screening, is the A2a receptor ligand spot assay. (A2aR +) expressing the A2a receptor or (R-) G lacking this receptor_αsThe E10K strain was grown overnight in the presence of histidine and 4 U / mL adenosine deaminase. The cells were washed to remove histidine and 5 × 10⁶Diluted to cells / mL. 1 × 10⁶Cells were plated on selection plates containing 4 U / mL adenosine deaminase and 0.5 or 1.0 mM 3-amino-1,2,4-triazole (AT) and dried for 1 hour. 5 μL of the following reagent was applied to this monolayer: 10 mM adenosine, 38.7 mM histidine, dimethylsulfoxide (DMSO), 10 mM PIA or 10 mM NECA. Cells were grown at 30 ° C. for 24 hours. As a result, cells without the receptor were able to proliferate only when histidine was added to the medium. In contrast, R⁺Only cells grew in areas dotted with A2a receptor ligands PIA and NECA. Since this plate contained adenosine deaminase, it did not grow when dotted with adenosine, confirming that adenosine deaminase was active.
[0377]
III. fus1 LacZ assay
In order to quantify the activity of the yeast mating pathway, the synthesis of β-galactosidase by fus1LacZ was measured. G_αSE10K, G_αSD229S or G_αSYeast strains expressing E10K + D229S were transformed with a plasmid encoding the human A2a receptor (R +) or a plasmid lacking the receptor (R-). Transformants were isolated and grown overnight in the presence of histidine and 4 U / mL adenosine deaminase. 1 × 10⁷1 × 10 cells⁶Diluted to cells / mL and exposed to increasing concentrations of NECA for 4 hours before measuring β-galactosidase activity in the cells. As a result, β-galactosidase activity was essentially not detected in the R-strain, while_αSE10K, G_αSD229S or G_αSIn R + strains expressing any of E10K + D229S, an increase in the amount of β-galactosidase activity was detected with an increase in the concentration of NECA, indicating that the amount of β-galactosidase detected was high. Dose-dependent increases in response to exposure to This dose dependence was observed only in cells expressing the A2a receptor. Also, the most potent G for the A2a receptor_αsThe construct is G_αsIt was E10K. G_αSThe D229S construct is the second most potent G for the A2a receptor._αsA construct, G_αsThe E10K + D229S construct shows the three Gs tested._αsThe weakest of these, but nonetheless, stimulated readily detectable amounts of β-galactosidase activity.
[0378]
For a more detailed description of the identified assays, see U.S. patent application Ser. No. 09/088985 filed Jun. 2, 1998, "Functional Expression of Adenosine Receptors in Yeast" (Attorney Docket Number CPI-093). , The entire contents of which are incorporated herein by reference).
[0379]
Pharmacological characterization of human adenosine receptor subtype
Materials and methods
Material [³H] -DPCPX [cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine, 8- [dipropyl-2,3-³H (N)] (120.0 Ci / mmol);³H] -CGS 21680, [carboxyethyl-³H (N)] (30 Ci / mmol) and [¹²⁵I] -AB-MECA ([¹²⁵I] -4-Aminobenzyl-5'-N-methylcarboxamide adenosine) (2,200 Ci / mmol) was purchased from New England Nuclear (Boston, MA). XAC (xanthine amine congener); NECA (5'-N-ethylcarboxamide adenosine); and IB-MECA were purchased from Research Biochemicals International (RBI, Natick, MA). Adenosine deaminase and complete protease inhibitor cocktail tablets were purchased from Boehringer Mannheim Corp. (Indianapolis, IN). Membrane derived from HEK-293 cells stably expressing human adenosine 2a [RB-HA2a]; adenosine 2b [RB-HA2b] or adenosine 3 [RB-HA3] receptor subtype was respectively used as a receptor biology (Bertsville, MD). Purchased from. Cell culture reagents were purchased from Life Technologies (Grand Island, NY) except that serum was purchased from Hyclone (Logan, UT).
[0380]
Yeast strains: Saccharomyces cerevisiae strains CY12660 [far1 * 1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14 :: trp1 :: LYS2 ste3 * 1156 gpa1 (41) -Gαi3 lys2 ura3 leu2 trp1: his3; LEU2 PGKp-Mfα1 leader -hA1R-PHO5term 2mu-orig REP3 Ampr] and CY8362 [gpa1p-rGαsE10K far1 * 1442 tbt1-1 fus1-HIS3 can1 ste14 :: trp1: LYS2 ste3 * 1156 lys2 ura3 leu2 trp1 his3; LEU2 PGKp-hA2aR 2mu-ori REP3 Ampr] the above So generated.
[0381]
Culture yeast: The transformed yeast was grown in a Leu-Trp [LT] medium (pH 5.4) supplemented with 2% glucose. To prepare the membrane, 1-2 × 10 5 obtained from 30 mL overnight grown culture in 250 mL LT medium⁶Initial titers of cells / mL were inoculated and incubated at 30 ° C. under continuous oxidation with agitation. After 16 hours of growth, cells were harvested by centrifugation and membranes were prepared as described below.
[0382]
Mammalian culture tissue: HEK-293 cells (Cadus clone # 5) stably expressing the human adenosine 2a receptor subtype were prepared from Dulbecco's minimum essential medium (DMEM) supplemented with 10% fetal bovine serum and 1 × penicillin / streptomycin. ) In a humidified 5% CO 2 under selective pressure using 500 mg / mL G418 antibiotic.₂Grow at 37 ° C. in an atmosphere.
[0383]
Preparation of yeast cell membrane: 250 mL of the culture was incubated overnight and collected by centrifugation at 2,000 xg using a Sorvall RT6000 centrifuge. The cells are washed with ice-cold water, centrifuged at 4 ° C., and the pellet is washed with 10 mL of ice-cold lysis buffer [5 mM Tris-HCl, pH 7.0, supplemented with protease inhibitor cocktail tablets (1 tablet per 25 mL of buffer). 5; 5 mM EDTA, and 5 mM EGTA]. Glass beads (17 g, 400-600 mesh, Sigma) were added to the suspension and the cells were disrupted by vigorous stirring at 4 ° C. for 5 minutes. The homogenate was diluted by adding 30 mL of lysis buffer + protease inhibitor and centrifuged at 3,000 × g for 5 minutes. Subsequently, the membrane was pelletized at 36,000 × g (Sorvall RC5B, type SS34 rotor) for 45 minutes. The resulting membrane pellet was combined with 5 mL of membrane buffer [50 mM Tris-HCl, pH 7.5; 0.6 mM EDTA; and 5 mM MgCl 2 supplemented with protease inhibitor cocktail tablets (1 tablet per 50 mL buffer).₂And stored at −80 ° C. for subsequent experiments.
[0384]
Preparation of Mammalian Cell Membrane: HEK-293 cell membrane was prepared as previously described (Duzic E et al., J. Biol. Chem., 267, 9844-9852, 1992). Briefly, cells were washed with PBS and collected with a rubber policeman. Cells were pelleted at 4O <0> C and 200 xg using a Sorvall RT6000 centrifuge. The pellet is dissolved in 5 mL / m lysis buffer (5 mM Tris-HCl, pH 7.5; 5 mM EDTA; 5 mM EGTA; 0.1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, 10 mg / mL pepstatin A; and 10 mg / mL aprotinin). Resuspended at ℃ and homogenized with a dance homogenizer. The cell lysate is then centrifuged at 36,000 × g (Sorvall RC5B, type SS34 rotor) for 45 minutes and the pellet is washed with 5 mL of membrane buffer [50 mM Tris-HCl, pH 7.5; 0.6 mM EDTA. 5 mM MgCl₂0.1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, 10 mg / mL pepstatin A; and 10 mg / mL aprotinin) and stored at −80 ° C. for subsequent experiments.
[0385]
Total protein concentrations in yeast and mammalian membranes were measured using a Bio-Rad protein assay kit based on the Bradford dye binding method (Bradford, M .: Anal. Biochem. 72: 248 (1976)).
[0386]
Adenosine 1 receptor subtype saturation and competitive radioligand binding: human A₁Saturation and competitive binding to membranes from yeast cells transformed with the receptor subtype was determined by antagonist [³H] DPCPX was used as the radioligand. The membrane was adjusted to a concentration of 1.0 mg / mL with a binding buffer [10 mM MgCl₂1.0 mM EDTA; 0.25% BSA; 2 U / mL adenosine deaminase, and 1 protease inhibitor cocktail tablet / 50 mM Tris-HCl, pH 7.4 containing 50 mL].
[0387]
For saturable binding, the membrane (50 μg / well) was loaded with increasing concentrations of [³H] DPCPX (0.05-25 nM) was incubated in 96-well microtiter plates in a final volume of 100 μL binding buffer for 1 hour at 25 ° C. in the absence and presence of 10 μM unlabeled XAC.
[0388]
For competitive binding, the membrane (50 μg / well) was replaced with [³[H] with DPCPX (1.0 nM) in a final volume of 100 mL binding buffer for 1 hour at 25 ° C. in the absence and presence of 10 μM unlabeled XAC or increasing concentrations of competitor compounds in 96-well microtiter plates. Incubated.
[0389]
Adenosine 2a receptor subtype competitive radioligand binding: competitive binding on HEK293 cell-derived membranes stably expressing the human A2a receptor subtype was assessed by agonists [³H] CGS-21680 was used as the radioligand. The membrane is washed with binding buffer [10 mM MgCl₂1.0 mM EDTA; 0.25% BSA, 2 U / mL adenosine deaminase, and 1 protease inhibitor cocktail tablet / 50 mM Tris-HCl containing 50 mL, pH 7.4] at a concentration of 0.2 mg / mL. The membrane (10 μg / well) was added to [³[H] with CGS-21680 (100 nM) in a final volume of 100 mL of binding buffer at 25 ° C. for 1 hour in the absence and presence of 50 μM unlabeled NECA or increasing concentrations of competitor compounds in 96-well microtiter plates. Incubated.
[0390]
Adenosine 3 receptor competitive radioligand binding: competitive binding on HEK293 cell-derived membranes that stably express the human A3 receptor subtype,¹²⁵I] AB-MECA was used as the radioligand. The membrane is washed with binding buffer [10 mM MgCl₂1.0 mM EDTA; 0.25% BSA; 2 U / mL adenosine deaminase, and 1 protease inhibitor cocktail tablet / 50 mM Tris-HCl, pH 7.4 containing 50 mL at a concentration of 0.2 mg / mL. The membrane (10 μg / well) was added to [¹²⁵I] 96-well with AB-MECA (0.75 nM) in a final volume of 100 μL binding buffer for 1 hour at 25 ° C. in the absence and presence of 10 μM unlabeled IB-MECA or increasing concentrations of competitor compound Incubated in microtiter plate.
[0391]
At the end of the incubation, 10 mM MgCl₂Add ice-cold 50 mM Tris-HCl (pH 7.4) buffer supplemented with₁, A_2a, And A₃The receptor subtype radioligand binding assay was terminated and then quickly filtered through a glass fiber filter (96-well GF / B UniFilters, Packard) presoaked in 0.5% polyethyleneimine in a FILTERMATE 196 cell harvester (Packard). . The filter plate was dry-coated with 50 μL / well scintillation fluid (MicroScint-20, Packard) and counted with TopCount (Packard). The assay was performed three times. Nonspecific binding was 5.6 ± 0.5%, 10.8 ± 1.4%, and 15.1 ± 2.6% of total binding in the A1R, A2aR, and A3R binding assays, respectively. .
[0392]
Adenosine 2b receptor subtype competitive radioligand binding: Competitive binding on HEK293 cell-derived membranes stably expressing human A2b receptor subtype₁Receptor antagonist [³H] DPCPX was used as the radioligand. The membrane was diluted to a concentration of 0.3 mg / mL in binding buffer [1.0 mM EDTA; 10 mM Hepes-KOH, pH 7.4 containing 0.1 mM benzamidine, 2 U / mL adenosine deaminase]. Membrane (15 μg / well) was added to [³H] Incubate with DPCPX (15 nM) in a final volume of 100 μL binding buffer for 1 hour at 25 ° C. in the absence and presence of 10 μM unlabeled XAC or increasing concentrations of competitor compound in 96-well microtiter plates did. At the end of the incubation, the assay was terminated by the addition of ice-cold 10 mM Hepes-KOH (pH 7.4) buffer, followed by glass fibers presoaked in 0.5% polyethyleneimine in a Filtermate 196 cell harvester (Packard). Filtered quickly through filters (96-well GF / C UniFilters, Packard). The filter plate was dry-coated with 50 μL / well scintillation fluid (MicroScint-20, Packard) and counted with TopCount (Packard). The assay was performed three times. Non-specific binding was 14.3 ± 2.3% of the total binding.
[0393]
[³H] Specific binding of DPCPX; [³H] CGS-21680 and [¹²⁵I] AB-MECA was defined as the difference between total binding and non-specific binding. The percent inhibition of the compound was calculated relative to the total binding. Competition data was analyzed by iterative curve fitting to a one-site model and K_IThe values were read using the GraphPad Prizm 2.01 software₅₀Calculated from values (Cheng and Prusof, Biochem. Pharmacol. 22, 3099-3109, 1973).
[0394]
result:
The primary function of certain cell surface receptors is to recognize the appropriate ligand. Therefore, we determined the ligand binding affinity and determined that the adenosine 1 receptor subtype expressed in yeast was functionally complete. Crude membrane prepared from Saccharomyces cerevisiae transformed with the human adenosine 1 receptor subtype construct has a K ± 4.0 ± 0.19 nM._dso[³[H] DPCPX resulted in specific saturable binding. K_DAnd B_maxValues were calculated from saturation isotherms and Scatchard transformation of this data indicated a single class of binding sites. The density of adenosine binding sites in the yeast membrane preparation was estimated to be 716.8 ± 43.4 fmol / mg membrane protein.
[0395]
[³H] A subtype-selective adenosine ligand (XAC, DPCPX; CGS-15943; Compound 600; Compound 1002; NECA, (R) -PIA; IB-MECA, and alloxazine) predicted to compete with DPCPX in the following order: Using human A₁The characteristics of pharmacological subtypes of the recombinant yeast cells transformed with the receptor subtype were investigated. The displacement curves recorded with these compounds showed a typical steep slope for all ligands, and the data for each ligand could be modeled by single site fitting. The apparent dissociation constants for individual compounds calculated from this curve (Table 5) are consistent with published values for this receptor obtained from other sources.
[0396]
[Table 5]

Tables 6-12 show the efficacy and structure-activity properties of the deazapurines of the present invention. Tables 13 and 14 show that by adjusting the functionality of the deazapurine structure, selectivity for the human adenosine receptor site can be achieved. Table 14 shows that the compounds described herein have sub-nanomolar activity and higher A compared to the compounds in Table 13._2bIt also shows that it has receptor selectivity.
[0397]
[Table 6]

[Table 7]

[Table 8]

[Table 9]

[Table 10]

[Table 11]

[Table 12]

[Table 13]

[Table 14]

[Table 15]

PCT / US01 / 45280, pages 176-201,_2AFor compounds specific to the receptor.
[0398]
<Summary of the Invention>
The present invention also provides adenosine A by administering a therapeutically effective amount to a patient._2ASpecifically and selectively binds to A_2ABased on compounds that treat diseases associated with adenosine receptors. The disease to be treated is associated, for example, with central nervous system disorders, cardiovascular disorders, renal disorders, inflammatory disorders, gastrointestinal disorders, ophthalmic disorders, allergic disorders or respiratory disorders.
[0399]
The invention also features a compound having the structure:
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here,
NR₁R₂Is a substituted or unsubstituted 4- to 8-membered ring;
Ar is a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring;
R₄Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein said substituted alkyl is C (R₈) (R₉) XR₆And X is O, S, or NR₇And R₈And R₉Are each independently H or alkyl;₆And R₇Is each independently alkyl or cycloalkyl, or R₆, R₇And nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring;
R₅Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
Where NR₁R₂Is not 3-acetamidopiperidino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethyl, or pyrrolidino;₁R₂Is 3-hydroxymethylpiperazino only when Ar is 4-pyridyl.
[0400]
The present invention also relates to the use of A in cells._2aA method of inhibiting adenosine receptor activity, comprising contacting said cells with said compound.
[0401]
The present invention also provides a compound having the structure:
Embedded image

here,
NR₁R₂Is a substituted or unsubstituted 4- to 8-membered ring;
Ar is a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring;
R₄Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein said substituted alkyl is -C (R₈) (R₉) XR₆And X is O, S, or NR₇And R₈And R₉Are each independently H or alkyl;₆And R₇Is each independently alkyl or cycloalkyl, or R₆, R₇And the nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring;
R₅Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
Where NR₁R₂Is not 3-acetamidopiperazino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethyl, or pyrrolidino; and only when Ar is 4-pyridyl, NR₁R₂Is 3-hydroxymethylpiperazino.
[0402]
In one embodiment of the compound, Ar is a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring, phenyl, pyrrole, thiophene, furan, thiazole, imidazole, pyrazole, 1,2,4 triazole, pyridine, 2 (1H)- Pyridone, 4 (lH) -pyridone, pyrazine, pyrimidine e, pyridazine, isothiazole, isoxazole, oxazole, tetrazole, naphthalene, tetralin, naphthyridine, benzofuran, benzothiophene, indole, 2,3-dihydroindole, 1H-indole, Indoline, benzopyrazole, 1,3-benzodioxole, benzoxazole, purine, coumarin, coumarone, quinoline, tetrahydroquinoline, isoquinoline, benzimidazole, quinazoline, pyrido [2,3-b] pyrazine , Pyrido [3,4b] pyrazine, pyrido [3,2-c] pyridazine, pride [3,4-b] -pyridine, 1H-pyrazole [3,4-d] pyrimidine, pteridine, 2 (1H) -quinolone 1,1 (2H) -isoquinolone, 1,4-benzisoxazine, benzothiazole, quinoxaline, quinoline-N-oxide, isoquinoline N-oxide, quinoxaline-N-oxide, quinazoline-N-oxide, benzoxazine, phthalazine, cinnoline Or the following structure:
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Wherein Y is carbon or nitrogen;
R₃Is H, substituted or unsubstituted alkyl, substituted or unsubstituted aryl, halogen, methoxy, methylamino, methylthio.
[0403]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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Where m is 1 or 2;_A and R_BAre each independently H, -OH, -CH₂OH, -CH₂CH₂OH, -C (= O) NH₂, A heteroatom, or -C (= O) NR₃R₃’; R₃Is aryl, substituted aryl, or heteroaryl; R₃'Is alkyl or XR ", X is O or N, and R" is substituted alkyl or aryl.
[0404]
In another embodiment of the compound,_lR₂N is (D) -2-aminocarbonylpyrrolidino, (D) -2-hydroxymethylpyrrolidino, (D) -2-hydroxymethyl-trans-4-hydroxypyrrolidino, piperazino, or 3-hydroxymethylpipe. Lazino.
[0405]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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Where m is 0, 1, 2, or 3; Y is 0, S, or NR, and R is R_AOr R_BAnd where R_AAnd R_BAre each independently H, OH, -CH₂0H, -CH₂CH₂OH, -C (= O) NH₂, A heteroatom, or -C (= O) NR₃R₃’; R₃Is aryl, substituted aryl, or heteroaryl; R₃’Is alkyl or R₃", X is O or N, and R" is substituted alkyl or aryl.
[0406]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In yet another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In a further embodiment of the compound, the compound has the structure:
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The present invention further provides a compound having the following structure (V):
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Here, R is H or methyl.
[0407]
In one embodiment of compound V, the compound has the structure:
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In another embodiment of compound V, the compound has the structure:
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The invention also relates to the use of A in patients._2aProvided is a method of treating a disease associated with an adenosine receptor, comprising administering to said patient a therapeutically effective amount of a compound IV or V.
[0408]
In one embodiment of the method, the compound treats the disease by stimulating adenylate cyclase.
[0409]
In another embodiment of the method, the patient is a mammal.
[0410]
In another embodiment of the method, the mammal is a human.
[0411]
In another embodiment of the method, the A_2aAdenosine receptors are associated with Parkinson's disease and diseases associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, and senile dementia.
[0412]
Adenosine A₁, A_2a, A_2bAnd A₃Receptor-related diseases are disclosed in WO 99/06053 and WO-0982465, WO-0970138, WO 0951681, WO-09733879, JP-09291089, PCT / US98 / 16053 and U.S. Patent No. 5,516,894. And their entire contents are incorporated herein by reference.
[0413]
The present invention also provides a water-soluble prodrug of compound IV or V. The water-soluble prodrug is metabolized in vivo to form A_2aThis results in an active drug that selectively inhibits the adenosine receptor.
[0414]
In one embodiment of the prodrug, the prodrug is metabolized in vivo by esterase-catalyzed hydrolysis.
[0415]
The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising the prodrug and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0416]
The present invention also relates to the use of A in cells._2aProvided is a method of inhibiting the activity of an adenosine receptor, comprising contacting the cell with a compound IV or V.
[0417]
In one embodiment of the method, the compound comprises A_2aIt is an adenosine receptor antagonist.
[0418]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation.
[0419]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a periocular, retrobulbar or intraocular injection combination.
[0420]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0421]
The invention also provides a method of treating a gastrointestinal disorder in a patient, the method comprising administering to the patient an effective amount of a compound IV or V.
[0422]
In one embodiment of the method, the disease is diarrhea.
[0423]
In another embodiment of the method, the patient is a human.
[0424]
In another embodiment of the method, the compound is A_2aIt is an adenosine receptor antagonist.
[0425]
The invention further provides a method of treating a respiratory disease in a patient, the method comprising administering to said patient an effective amount of a compound IV or V.
[0426]
In one embodiment of the method, the disease is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper respiratory tract disorder.
[0427]
In one embodiment of the method, the patient is a human.
[0428]
In one embodiment of the method, the compound is A_2aIt is an adenosine receptor antagonist.
[0429]
The present invention also provides a method of treating damage to the eye of a patient, the method comprising administering to said patient an effective amount of Compound IV or V.
[0430]
In one embodiment of the method, the injury is a retinal or optic disc injury.
[0431]
In another embodiment of the method, the damage is acute or chronic.
[0432]
In another embodiment of the method, the injury is the result of glaucoma, edema, anemia, hypoxia or trauma.
[0433]
In another embodiment of the method, the patient is a human.
[0434]
In another embodiment of the method, the compound is A_2aIt is an adenosine receptor antagonist.
[0435]
The invention also provides for a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of compound IV or V, and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0436]
In one embodiment of the pharmaceutical composition, the therapeutically effective amount treats Parkinson's disease and diseases associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, senile dementia. It is effective to do.
[0437]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation.
[0438]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a periocular, retrobulbar or intraocular injection combination.
[0439]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0440]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a surgical irrigation solution
The invention also provides a combination therapy for Parkinson's disease, comprising Compounds IV and V and any dopamine enhancer.
[0441]
The present invention further provides a combination therapy for cancer comprising Compounds IV and V and any cytotoxic agent.
[0442]
The invention further provides a combination therapy for glaucoma, comprising Compound IV or V and a prostaglandin agonist, muscarinic agonist, or β2 antagonist.
[0443]
The invention also relates to the use of A in patients._2aClaims: 1. A packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with adenosine receptors, comprising: (a) a container holding a therapeutically effective amount of a compound IV or V; And instructions for use of the compound for treating.
[0444]
The present invention also provides a method of preparing compound IV, comprising:
(A) reacting the following two,
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Obtaining a compound of the formula:
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Where P is a removable protecting group
(B) treating the product of step a) under cyclization conditions to obtain a compound of the formula:
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(C) treating the product of step b) under suitable conditions to give a compound of the formula:
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(D) converting the chlorinated product of step c) to NHR₁R₂Treating to obtain a compound of the following formula:
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Providing a method comprising:
NR₁R₂Is a substituted or unsubstituted 4- to 8-membered ring;
Ar is a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring;
R₄Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein said substituted alkyl is -C (R₈) (R₉) XR₆X is 0, S, or NR-, and R₈And R₉Are each independently H or alkyl;₆And R₇Is each independently alkyl or cycloalkyl, or R₆, R₇And the nitrogen together form a substituted or unsubstituted 4- to 7-membered ring;
R₅Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
Where NR₁R₂Is not 3-acetamidopiperazino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethyl, or pyrrolidino;₁R₂Is 3-hydroxymethylpiperazino only when Ar is 4-pyridyl.
[0445]
The present invention further provides a process for preparing compound V, comprising:
(A) reacting the following two,
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Obtaining a compound of the formula:
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Where P is a removable protecting group
(B) treating the product of step a) under cyclization conditions to obtain a compound of the formula:
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(C) treating the product of step b) under suitable conditions to give a compound of the formula:
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(D) treating the chlorinated product of step c) first with dimethylamine and formaldehyde, then with N-methylbenzylamine and finally with NH 3₂R₁Treating to obtain a compound of the following formula:
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Providing a method comprising:
R₁Is acetamidoethyl; Ar is 4-pyridyl; R is H or methyl;₅Is N-methyl-N-benzylaminomethyl.
[0446]
As used herein, “the compound is A_2a"Selective" means that the compound is adenosine A_2aAgainst adenosine A₁, A_2bOr A₃Has a binding constant at least 5 times higher than the binding constant for
[0447]
The invention is further illustrated by the following examples, which should not be construed as further limiting in any way. All references, pending patent applications and issued patent applications cited throughout this application, including those cited in the background section, are hereby incorporated by reference. Incorporated. The models used throughout the examples below are accepted as models, and demonstration of efficacy in these models predicts efficacy in humans.
[0448]
The invention will be better understood from the experimental details that follow. However, one of ordinary skill in the art will readily appreciate that the specific methods and results discussed herein are merely illustrative of the invention as more fully described in the claims.
[0449]
Example 22: Adenosine A_2aSynthesis of antagonists, compounds 1601, 1602 and 1603
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Compound 26 (10.93 g, 50.76 mmol) was dissolved in DMF (67 mL). 4-Amidinopyridine hydrochloride (8.0 g, 50.76 mmol) and DBU (15.4 g, 101.5 mmol) were added sequentially and the reaction was heated to 85 <0> C. After 22 hours, the reaction was cooled to room temperature and DMF was removed under vacuum. The dark oil was diluted with 2M HCl (80 mL). The reaction was allowed to settle. After 2 hours, the solution was cooled to 10 ° C. and filtered. The solid was washed with cold water and dried to give 7.40 g of a yellow solid, compound 27 (69%).¹H-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) d 6.58 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 8.53 (d, 2H, J = 5.6), 9.00 (d, 2H, J = 5.2 Hz) ), 12.35 (br s, 1H). MS (ES): 212.8 (M⁺+1).
[0450]
Compound 27 (7.4 mmol, 29.8 mmol) was added to POCl₃And heated to 105 ° C. After 18 hours, the reaction was cooled to room temperature and POCl₃Is removed under vacuum. The dark dark oil is diluted with MeOH (75 mL), followed by ether (120 mL). The amorphous red solid was filtered and washed with ether to give 3.82 g of a red solid. A crude solid, compound 28, is obtained in 80% purity, which is used without further purification in the next reaction.¹H-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) d 6.58 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 8.53 (d, 2H, J = 5.6), 9.00 (d, 2H, J = 5.2 Hz) ), 12.35 (br s, 1H). MS (ES): 212.8 (M⁺+1).
[0451]
Compound 1601: DMSO (5 mL) and D-prolinol (500 mg, 4.94 mmol) were added to compound 28 (500 mg, 2.1 mmol). The reaction was heated to 120C. After 18 hours, the reaction was cooled to room temperature and EtOAc and H₂Diluted with O. The layers were separated and the aqueous layer was extracted with EtOAc (2x). The combined organic phases were washed with H2O (2x), brine and MgSO4.₄Dry over, filter and concentrate to give 200 mg of a tan solid. This solid was recrystallized from EtOAc to give 82 mg of a tan solid (13%).¹H-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) d 2.05 (m, 4H), 3.43 (m, 1H), 3.70-4.00 (m, 3H), 4.50 (brs, 1H), 4.92 (br s, 1H), 6.62 (m, 1H), 7.22 (m, 1H), 8.22 (d, 2H, J = 6.0 Hz), 6.64 (d, 2H, J = 6. 2 Hz), MS (ES): 296.0 (M⁺1), melting point = 210-220 ° C. (decomp.).
[0452]
Compound 1602: chromatography (silica, 9: 1 CHCl₃/ MeOH) to give 10 mg of a tan solid (92%).¹H-NMR (d₆-DMSO) d 2.00-2.50 (m, 4H), 4.05 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 6.71 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 7.18 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 8.37 (d, 2H, J = 4.8 Hz), 8.56 (d, 2H, J = 5.0 Hz). MS (ES): 309.1 (M⁺+1).
[0453]
Compound 1603: Chromatography (silica, 20: 1 hexane / EtOAc) gave 135 mg of a tan solid (53%).¹H-NMR (d6-DMSO) d 2.00 (m, 4H), 3.43 (brs, 1H), 3.74 (brs, 2H), 3.87 (brs, 1H), 4. 49 (br s, 1H), 4.93 (m, 1H), 6.56 (m, 1H), 7.12 (m, 1H), 7.40 (m, 3H), 8.34 (m, 1H) 2H), 11.62 (brs, 1H). MS (ES): 295.1 (M⁺+1).
[0454]
Compound 1605: In 50 mL RBF, 60 mg of 2- (4'-pyridyl) -4-chloropyrimidinopyrrole HCl salt was dissolved in 2 mL anhydrous DMSO. To this was added 3- (R) -hydroxy- (D) -prolinol TFA salt (380 mg) and 500 mg sodium bicarbonate. The mixture was then flushed with nitrogen gas for 5 minutes and heated to 130 ° C. After 2 hours, the reaction was cooled to room temperature and DMSO was removed under vacuum. The residue was partitioned between EtOAc (15mL) and saturated aqueous sodium bicarbonate (15mL). The organic layer was separated, washed with brine (15 mL),₂SO₄Dried on top. After removing the solvent, the crude product was separated by preparative TLC (CH₂Cl₂/ MeOH = 95/5) to give 35 mg (50%).¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃) (2.3-2.5 (1H), 3.4-3.8 (3H), 4.4-4.6 (2H), 6.4 (1H); 7.1 (1H); 8 8.7 (d, 2H); 11.0 (1H) MS (ES): 312 (M⁺+1).
[0455]
Example 23: Adenosine A_2aSynthesis of antagonist, compound 1606
Embedded image

Compound 28 (200 mg) was treated with DMF (30 mL), (, (-Dimethylglycine methyl ester (73 mg HCl salt in 2 mL water) and 500 mg sodium bicarbonate. After 18 hours, DMF was removed under vacuum. The residue was partitioned between EtOAc (30 mL) and saturated aqueous sodium bicarbonate (15 mL) The organic layer was washed with brine (15 mL), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated. (10: 4 hexane / EtOAc) gave 150 mg of pure product, compound 29 (69%).¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃), (1.4 (s, 6H), 3.8 (s, 3H); 3.9 (s, 2H); 6.4 (s, 1H); 7.4-7.5 (m, 3H). ); 8.4 (m, 2H); 9.8 (s, 1H).
[0456]
Compound 1606:
The procedure is similar to that of compound 1605 (72%).¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃), (1.3 (s, 6H), 1.7-1.9 (m, 2H); 2.05-2.30 (m, 2H); 3.6-4.1 (m, 11H). 4.80-4.95 (m, 1H); 6.4 (s, 1H); 7.4-7.6 (m, 3H); 8.3-8.4 (d, J = 8. 5 Hz, 2H), 10 (s, 1H) MS (ES): 424.0 (M⁺+1).
[0457]
The following compounds can be synthesized in a similar manner.
[0458]
Compound 1600: (51%). MS (ES): 326.0 (M⁺+1).
[0459]
Compound 1607:¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃), (1.40-1.80 (m, 5H), 2.80-3.50 (m, 3H), 4.60-4.80 (m, 3H), 6.66 (d, 1H, J = 6.2 Hz), 7.26 (m, 1H), 8.21 (d, 2H, J = 6.3 Hz), 8.65 (d, 2H, J = 5.8 Hz), 11.90 ( s, 1H) MS (ES): 310.1 (M⁺+1).
[0460]
Compound 1608: (64%).¹H-NMR (200 MHz, d₆-DMSO), (1.75 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.56 (m, 6H), 7.23-7.41 (m , 5H), 8.00 (brs, 1H), 8.23 (d, 2H, J = 6.0 Hz), 8.63 (d, 2H, J = 5.4 Hz), 8.82 (brs , 1H), 11.56 (brs, 1H) MS (ES): 444.0 (M⁺+1).
[0461]
Compound 1604:¹H-NMR (200 MHz, CD₃OD) (3.40 (m, 4H), 4.29 (m, 4H), 6.99 (s, 1H), 7.5-7.2 (m, 3H), 7.90 (d, 2H) ), 8.39 (d, 2H), 8.61 (d, 2H) MS (ES): 57.0 (M⁺+1).
[0462]
Table 16 Adenosine A_2a Receptor selective compound
^*It is at least 5-fold more selective than the other three subtypes.
[0463]
[Table 16]

PCT / US01 / 45280, pp. 202-256,₃For compounds specific to the receptor.
[0464]
<Summary of the Invention>
The present invention also provides adenosine A by administering a therapeutically effective amount to a patient.₃Specifically and selectively binds to A₃Based on compounds that treat diseases associated with adenosine receptors. Diseases to be treated include, for example, asthma, irritability, rhinitis, hay fever, serum sickness, allergic vasculitis, atopic dermatitis, dermatitis, psoriasis, eczema, spontaneous pulmonary fibrosis, eosinophilic cystitis (eosinophilic). chlorocystitis), chronic airway inflammation, hyperacidic syndrome, eosinophilic gastroenteritis, edema, hives, eosinophilic cardiomyopathy, incidental angioedema, inflammatory bowel disease, ulcerative colitis, allergic granuloma, carcinomatosis , Eosinophilic granuloma, familial histiocytosis, hypertension, mast cell degranulation, tumor, carciac hypoxia, cerebral ischemia, polyuria, renal failure, neurological disease , Mental disorders, cognitive disorders, myocardial ischemia, bronchoconstriction, arthritis, autoimmune diseases, Crohn's disease, Grave's disease , Diabetes, multiple sclerosis, anemia, psoriasis, pregnancy disorders, erythematous lupus, reperfusion injury, brain arterial diameter, allergic media release, scleroderma, seizures, global ischemia (global) ischemia), central nervous system disorders, cardiovascular disorders, renal disorders, inflammatory disorders, gastrointestinal disorders, eye disorders, allergic disorders, respiratory disorders or immune disorders.
[0465]
The invention also features a compound having the structure:
Embedded image

Where R₁Is H and R₂Is cyclopropylmethylaminocarbonylethyl, cis-3-hydroxycyclopentyl, acetamidebutyl, methylaminocarbonylaminobutyl, ethylaminocarbonylaminopropyl, methylaminocarbonylaminopropyl, 2-acetylamino3-methylbutyl, N, N-diethylaminocarbonylamino Ethyl, thioacetamidoethyl, 3-aminoacetyloxycyclopentyl, 3-hydroxycyclopentyl, 2-pyrrolylcarbonylaminoethyl, 2-imidazolidinone ethyl, l-aminocarbonyl-2-methylpropyl, 1-aminocarbonyl-2 -Phenylethyl, 3-hydroxyazetidino, 2-imidazolylethyl, acetamidoethyl, 1- (R) -phenyl-2-hydroxyethyl, N-methylaminocar Nirupirijiru -2-methyl or where R₁, R₂And nitrogen together form 3-acetamidopiperazino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethylpyrrolidino, or 3-hydroxymethylpiperazino. ;
R₃Is a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring, pyrrole, thiophene, furan, thiazole, imidazole, pyrazole, 1,2,4-triazole, pyridine, 2 (1H) -pyridone, 4 (1H) -pyridone, pyrazine , Pyrimidine, pyridazine, isothiazole, isoxazole, oxazole, tetrazole, naphthalene, tetralin, naphthyridine, benzofuran, benzothiophene, indole, 2,3-dihydroindole, 1H-indole, indoline, benzopyrazole, 1,3-benzodioxide Xyl, benzoxazole, purine, coumarin, clonone, quinoline, tetrahydroquinoline, isoquinoline, benzimidazole, quinazoline, pyrido [2,3-b] pyrazine, pyrido [3,4-b] pyrazine, pyrido [3,2 c] pyridazine, pride [3,4-b] -pyridine, 1H-pyrazole [3,4-d] pyrimidine, pteridine, 2 (1H) -quinolone, 1 (2H) -isoquinolone, 1,4-benzisoxazine Benzothiazole, quinoxaline, quinoline-N-oxide, isoquinoline N-oxide, quinoxaline-N-oxide, quinazoline-N-oxide, benzoxazine, phthalazine, or cinnoline;
R₅Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, or substituted aryl.
[0466]
The present invention also provides adenosine A in a cell.₃Characterized in that the method comprises contacting the cell with a compound as described above.
[0467]
Typical practices are known to those skilled in the art.
[0468]
An exemplary synthetic scheme for preparing deazapurines of the present invention is outlined in Scheme I below.
[0469]
The present invention also provides a method of preparing compound IV, comprising:
(A) reacting the following two,
Embedded image

Obtaining a compound of the formula:
Embedded image

Where P is a removable protecting group
(B) treating the product of step a) under cyclization conditions to obtain a compound of the formula:
Embedded image

(C) treating the product of step b) under suitable conditions to give a compound of the formula:
Embedded image

(D) converting the chlorinated product of step c) to NHR₁R₂Treating to obtain a compound of the following formula:
Embedded image

Providing a method comprising:
R₁Is H and R₂Is cyclopropylmethylaminocarbonylethyl, cis-3-hydroxycyclopentyl, acetamidebutyl, methylaminocarbonylaminobutyl, ethylaminocarbonylaminopropyl, methylaminocarbonylaminopropyl, 2-acetylamino-3-methylbutyl, N, N-diethylaminocarbonyl Aminoethyl, thioacetamidoethyl, 3-aminoacetyloxycyclopentyl, 3-hydroxycyclopentyl, 2-pyrrolylcarbonylaminoethyl, 2-imidazolidinoneethyl, l-aminocarbonyl-2-methylpropyl, 1-aminocarbonyl -2-phenylethyl, 3-hydroxyazetidino, 2-imidazolylethyl, acetamideethyl, 1- (R) -phenyl-2-hydroxyethyl, N-methylamino Rubonirupirijiru -2-methyl or where R₁, R₂And nitrogen together form 3-acetamidopiperazino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethylpyrrolidino, or 3-hydroxymethylpiperazino. ;
R₃Is a substituted or unsubstituted 4- to 6-membered ring;
R₅Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, or substituted aryl.
[0470]
The present invention also provides a method of preparing compound V, comprising:
(A) reacting the following two,
Embedded image

Obtaining a compound of the formula:
Embedded image

Where P is a removable protecting group
(B) treating the product of step a) under cyclization conditions to obtain a compound of the formula:
Embedded image

(C) treating the product of step b) under suitable conditions to give a compound of the formula:
Embedded image

(D) converting the chlorinated product of step c) to NH₂CH₂(CH₂) MCH₂NHC (= O) R_lTreating to obtain a compound of the following formula:
Embedded image

Providing a method comprising:
m is 0, 1, or 2;
R₁Is cyclopropylmethyl, methyl, methylamino, or aminomethyl;
R₂Is aryl, substituted aryl, heteroaryl;
R₅Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is -C (R₉) (R₁₀) NR₇R₈And R₉And R₁₀Is each H or alkyl;₇And R₈Is respectively alkyl or cycloalkyl, or R₇, R₈And nitrogen together form a 4-7 membered ring system.
[0471]
The present invention also provides a method of preparing compound IV, comprising:
(A) reacting the following two,
Embedded image

Obtaining a compound of the formula:
Embedded image

Where P is a removable protecting group
(B) treating the product of step a) under cyclization conditions to obtain a compound of the formula:
Embedded image

(C) treating the product of step b) under suitable conditions to give a compound of the formula:
Embedded image

(D) the chlorination product of step c)
Embedded image

Treating to obtain a compound of the following formula:
Embedded image

Providing a method comprising:
R₂Is unsubstituted aryl;
R₅Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is -C (R₉) (R₁₀) NR₇R₈And R₉And R₁₀Is each H or alkyl;₇And R₈Is respectively alkyl or cycloalkyl, or R₇, R₈And nitrogen together form a 4- to 7-membered ring system
The present invention also provides a compound having the structure:
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here,
R₁Is H and R₂Is cyclopropylmethylaminocarbonylethyl, cis-3-hydroxycyclopentyl, acetamidebutyl, methylaminocarbonylaminobutyl, ethylaminocarbonylaminopropyl, methylaminocarbonylaminopropyl, 2-acetylamino3-methylbutyl, N, N-diethylaminocarbonylamino Ethyl, thioacetamidoethyl, 3-aminoacetyloxycyclopentyl, 3-hydroxycyclopentyl, 2-pyrrolylcarbonylaminoethyl, 2-imidazolidinone ethyl, 1-aminocarbonyl-2-methylpropyl, 1-aminocarbonyl- 2-phenylethyl, 3-hydroxyazetidino, 2-imidazolylethyl, acetamideethyl, 1- (R) -phenyl-2-hydroxyethyl, N-methylaminoca Bonirupirijiru -2-methyl or where R₁, R₂And the nitrogen atom together form 3-acetamidopiperazino, 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethylpyrrolidino, or 3-hydroxymethylpiperazino. Yes;
R₃Is substituted or unsubstituted benzene, pyrrole, thiophene, furan, thiazole, imidazole, pyrazole, 1,2,4-triazole, pyridine, 2 (1H) -pyridone, 4 (lH) -pyridone, pyrazine, pyrimidine, pyridazine , Isothiazole, isoxazole, oxazole, tetrazole, naphthalene, tetralin, naphthyridine, benzofuran, benzothiophene, indole, 2,3-dihydroindole, 1H-indole, indoline, benzopyrazole, 1,3-benzodioxole, benz Oxazole, purine, coumarin, coumarone, quinoline, tetrahydroquinoline, isoquinoline, benzimidazole, quinazoline, pyrido [2,3-b] pyrazine, pyrido [3,4-b] pyrazine, pyrido [3,2- ] Pyridazine, pride [3,4-b] -pyridine, 1H-pyrazole [3,4-d] pyrimidine, pteridine, 2 (1H) -quinolone, 1 (2H) -isoquinolone, 1,4-benzisoxazine, Benzothiazole, quinoxaline, quinoline-N-oxide, isoquinoline-N-oxide, quinoxaline-N-oxide, quinazoline-N-oxide, benzoxazine, phthalazine, or cinnoline;
R₅Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, or substituted aryl.
[0472]
In one embodiment of the compound, the compound has the structure:
Embedded image

In another embodiment of the compound,₃Is phenyl.
[0473]
In another embodiment of the compound,₅Is hydrogen or methyl.
[0474]
In another embodiment of the compound, R6 is hydrogen, methyl, phenyl, 3-chlorophenyloxymethyl, or trans-2-phenylaminomethylpyrrolidinomethyl.
[0475]
The present invention further provides a compound having the structure:
[0476]
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here,
m is 0, 1, or 2;
R₁Is cyclopropylmethyl, methyl, methylamino, or aminomethyl;
R₂Is aryl, substituted aryl, or heteroaryl;
R₃Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein the substituted alkyl is -C (R₉) (R₁₀) NR₇R₈And R₉And R₁₀Is each H or alkyl;₇And R₈Is alkyl or cycloalkyl, respectively, or R₇, R₈And the nitrogen atom together form a 4-7 membered ring system.
[0477]
In one embodiment of compound V, m is 0 and R₂Is phenyl.
[0478]
In another embodiment of compound V, m is 1 and R₂Is phenyl.
[0479]
In another embodiment of compound V, m is 2 and R₂Is phenyl.
[0480]
In another embodiment of compound V, R₅And R₆Is methyl.
[0481]
In another embodiment of compound V, R₅And R₆Is methyl.
[0482]
In another embodiment of compound V, R₅And R₆Is methyl.
[0483]
In another embodiment of compound V, the compound has the structure:
Embedded image

In another embodiment of compound V, the compound has the structure:
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In another embodiment of compound V, the compound has the structure:
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In another embodiment of compound V, the compound has the structure:
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In another embodiment of compound V, the compound has the structure:
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The present invention further provides a compound having the structure:
[0484]
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The present invention further provides a compound having the structure:
[0485]
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here,
R₂Is an unsubstituted aryl;
R₅Is H, alkyl, substituted alkyl, or cycloalkyl;
R₆Is H, alkyl, substituted alkyl, aryl, arylalkyl, amino, substituted aryl, wherein said substituted alkyl is -C (R₉) (R₁₀) NR₇R₈And R₉And R₁₀Is each H or alkyl;₇And R₈Is alkyl or cycloalkyl, respectively, or R₇, R₈And the nitrogen atom together form a 4-7 membered ring system.
[0486]
In one embodiment of compound IV, the compound has the structure:
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In one embodiment of compound 1309, the compound has the structure:
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In another embodiment of compound 1309, the compound has the structure:
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The present invention also provides compounds having the following structure:
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here,
R₁Is 3-hydroxycyclopentylethylaminocarbonylaminopropyl, N, N-diethylaminocarbonylaminoethyl, thioacetamidoethyl, 3-aminoacetyloxycyclopentyl, 3-hydroxycyclopentyl, 2-pyrrolylcarbonylaminoethyl, 2-imidazo Lydinone ethyl, 1-aminocarbonyl-2-methylpropyl, 1-aminocarbonyl-2-phenylethyl, 3-hydroxyazetidino, 2-imidazolylethyl, acetamideethyl, 1- (R) -phenyl-2-hydroxyethyl, Or N-methylaminocarbonylpyridyl-2-methyl;
R₃And R₄Is independently H, substituted or unsubstituted alkyl, or aryl.
[0487]
In one embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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here,
R₁, R₂And nitrogen together are 3-hydroxypyrrolidino, 3-methyloxycarbonylmethylpyrrolidino, 3-aminocarbonylmethylpyrrolidino, or 3-hydroxymethylpiperazino;
R₃And R₄Is independently H, substituted or unsubstituted alkyl, or aryl.
[0488]
In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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In another embodiment of the compound, the compound has the structure:
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The invention also relates to the use of A in patients.₃Treat adenosine receptor-related disorders
Provided is a method comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of any of Compounds IV, V, VI, or VII.
[0489]
In one embodiment of the method, the patient is a mammal.
[0490]
In another embodiment of the method, the mammal is a human.
[0490]
In another embodiment of the method, the A₃Adenosine receptors are central nervous system disorders, cardiovascular disorders, asthma, asthma, hypersensitivity, rhinitis, hay fever, serum sickness, allergic vasculitis, atopic dermatitis, dermatitis, psoriasis, eczema, idiopathic lung Fibrosis, eosinophilic chlorocystitis, chronic airway inflammation, hyperacidic syndrome, eosinophilic gastroenteritis, edema, hives, eosinophilic cardiomyopathy, incidental angioedema, inflammatory bowel disease, ulcerative Colitis, allergic granuloma, carcinomatosis, eosinophilic granuloma, familial histiocytosis, hypertension, mast cell degranulation, tumor, carciac hypoxia, cerebral ischemia , Polyuria, renal failure, neurological disorders, mental disorders, cognitive disorders, myocardial ischemia, bronchoconstriction, arthritis, autoimmune diseases, Crohn's disease, Grave (Grave's disease), diabetes, multiple sclerosis, anemia, psoriasis, pregnancy disorder, erythematous lupus, reperfusion injury, cerebral arteriole diameter, allergic medium release, sclerosis, seizure , Global ischemia, central nervous system disorders, cardiovascular disorders, renal disorders, inflammatory diseases, gastrointestinal disorders, eye disorders, allergic disorders, respiratory disorders or immune disorders.
[0492]
Adenosine A₁, A_2a, A_2bAnd A₃Receptor-related diseases are disclosed in WO 99/06053 and WO-0982465, WO-0970138, WO 0951681, WO-09733879, JP-09291089, PCT / US98 / 16053 and U.S. Patent No. 5,516,894. And their entire contents are incorporated herein by reference.
[0493]
The present invention also provides a water-soluble prodrug of any of compounds IV, V, VI, or VII. The water-soluble prodrug is metabolized in vivo to form A_2aThis results in an active drug that selectively inhibits the adenosine receptor.
[0494]
In one embodiment of the prodrug, the prodrug is metabolized in vivo by esterase-catalyzed hydrolysis.
[0495]
The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising the prodrug and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0496]
The present invention also relates to the use of A in cells._2aProvided is a method of inhibiting the activity of an adenosine receptor, comprising contacting the cell with any of compounds IV, V, VI, or VII.
[0497]
In one embodiment of the method, the compound comprises A₃It is an adenosine receptor antagonist.
[0498]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation.
[0499]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a periocular, retrobulbar or intraocular injection combination.
[0500]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0501]
The invention also provides a method of treating a gastrointestinal disorder in a patient, the method comprising administering to the patient an effective amount of any of Compounds IV, V, VI, or VII. .
[0502]
In one embodiment of the method, the disease is diarrhea.
[0503]
In another embodiment of the method, the patient is a human.
[0504]
In another embodiment of the method, the compound is A₃It is an adenosine receptor antagonist.
[0505]
The invention further provides a method of treating a respiratory disease in a patient, the method comprising administering to the patient an effective amount of any of Compounds IV, V, VI, or VII. I do.
[0506]
In one embodiment of the method, the disease is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper respiratory tract disorder.
[0507]
In one embodiment of the method, the patient is a human.
[0508]
In one embodiment of the method, the compound is A₃It is an adenosine receptor antagonist.
[0509]
The present invention also provides a method of treating damage to the eye of a patient, the method comprising administering to the patient an effective amount of any of Compounds IV, V, VI, or VII. I do.
[0510]
In one embodiment of the method, the injury is a retinal or optic disc injury.
[0511]
In another embodiment of the method, the damage is acute or chronic.
[0512]
In another embodiment of the method, the injury is the result of glaucoma, edema, anemia, hypoxia or trauma.
[0513]
In another embodiment of the method, the patient is a human.
[0514]
In another embodiment of the method, the compound is A₃It is an adenosine receptor antagonist.
[0515]
The invention also provides for a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of any of Compounds IV, V, VI, or VII, and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0516]
In one embodiment of the pharmaceutical composition, the therapeutically effective amount is effective for treating a respiratory disorder or a gastrointestinal disorder.
[0517]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the gastrointestinal disorder is diarrhea.
[0518]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the respiratory disorder is asthma, allergic rhinitis, or chronic obstructive pulmonary disease.
[0519]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation.
[0520]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a periocular, retrobulbar or intraocular injection combination.
[0521]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0522]
In another embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition is a surgical irrigation solution.
[0523]
The invention also relates to the use of A in patients._2aA packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with an adenosine receptor, comprising: (a) a container holding a therapeutically effective amount of any of Compounds IV, V, VI, or VII; (B) instructions for using the compound to treat the disease in a patient.
[0524]
Compounds represented by formula compounds IV, V, VI, and VII can be synthesized according to Schemes I-IX.
[0525]
As used herein, “the compound is A₃"Selective" means that the compound is adenosine A₃Against adenosine A₁, A_2bOr A_2bHas a binding constant at least 5 times higher than the binding constant for
[0526]
The invention is further illustrated by the following examples, which should not be construed as further limiting in any way. All references, pending patent applications and issued patent applications cited throughout this application, including those cited in the background section, are hereby incorporated by reference. Incorporated. The models used throughout the examples below are accepted as models, and demonstration of efficacy in these models predicts efficacy in humans.
[0527]
One of skill in the art will know that metabolism in a patient of the compounds disclosed herein results in certain biologically active metabolites that can act as drugs.
[0528]
The invention will be better understood from the experimental details that follow. However, one of ordinary skill in the art will readily appreciate that the specific methods and results discussed herein are merely illustrative of the invention as more fully described in the claims.
[0529]
Example 24: Adenosine A₃Experiments with antagonists
Compound 1700 (Table 17 below): MS (ES): 366.1 (M⁺+1)
Compound 1710 (Table 17 below): MS (ES ;: 381.1 (M⁺+1)
Compound 1316 (Table 17 below): MS (ES): 353.2 (M⁺+1)
Compound 1703 (Table 17 below): MS (ES): 357.1 (M⁺+1)
Compound 1719 (Table 17 below):¹H-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) (1.75 (m, 2H), 3.11 (m, 2H), 3.35 (s, 3H), 3.59 (m, 2H), 5.72 (m, 1H), 5 .96 (m, 1H), 6.55 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.49 (m, 2H), 8.32 (m, 2H)
Compound 1704 (Table 17 below): MS (ES): 367.0 (M⁺+1)
Compound 1706 (Table 17 below): 1H-NMR (200 MHz, CDCl₃) D 1.22 (m, 2H), 1.60-2.40 (m, 4H), 4.53 (m, 1H), 4.94 (m, 1H), 5.70 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.35 (d, 1H, J = 2.8 Hz), 6.97 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 7.50 (m, 3H), 8.40 ( m, 2H), 10.83 (br s, 1H) Compound 1707 (Table 17 below): MS (ES): 347.0 (M⁺+1)
Compound 1708 (Table 17 below): MS (ES): 399.0 (M⁺+1)
Compound 1709 (Table 17 below): MS (ES): 385.9 (M⁺+1)
Compound 1710 (Table 17 below): MS (ES): 434.0 (M⁺+1)
Compound 1711 (Table 17 below):¹H-NMR (200 MHz, CD₃OD) d 3.95 (d, 2H, J = 5.8 Hz), 4.23-4.31 (m, 2H), 4.53 (t, 2H, J = 8.8 Hz), 6.30 ( d, 1H, J = 3.0 Hz, 6.98 (d, 1H, J = 3.0 Hz), 7.45-7.48 (m, 3H), 7.83-8.42 (m, 2H) ), 9.70 (brs, 1H).
MS (ES): 281.1 (M⁺+1)
OSIC-148313¹H-NMR (200 MHz, CD₃OD) d 3.02 (m, 2H), 3.92 (m, 2H), 5.09 (2, 2H), 6.53 (s, 1H), 6.90-7.04 (brs, 1H), 6.92 (m, 2H), 7.02 (m, 1H), 7.21 (dd, 1H, J = 8.2 Hz), 7.40 (m, 3H), 7.50-7. .80 (brs, 1H), 8.33 (m, 2H). MS (ES): 445.1 (M⁺+1)
Compound 1713 (Table 17 below):¹H-NMR (200 MHz, CDCl3) d 1.65-1.80 (m, 7H), 1.88-2.00 (m, 1H), 2.10-2.40 (m, 1H), 2. 70-3.05 (m, 3H), 3.09-3.14 (m, 2H), 3.16-3.38 (m, 1H), 3.45 (d, 1H, J = 14 Hz), 3.53-3.60 (m, 2H), 3.84-3.92 (m, 2H), 3.97 (d, 1H, J = 14 Hz), 5.55 (t, 1H, J = 5) .8 Hz), 6.17 (s, 1H), 6.55-6.59 (m, 2H), 6.64-6.71 (m, 1H), 7.11-7.19 (m, 2H) ), 7.43-7.46 (m, 3H), 8.38-8.42 (m, 2H), MS (ES): 484.0 (M⁺+1)
Compound 1714 (Table 17 below): MS (ES): 471.0 (M⁺+1)
Compound 1715 (Table 17 below): MS (ES): 505.0 (M⁺+1)
Compound 1716 (Table 17 below):¹H-NMR (200 MHz, CD₃OD) d 1.65 (m, 1H), 2.18 (m, 1H), 2.49 (br d, 2H, J = 6.2 Hz), 2.64 (m, 1H), 3.38 ( m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.72 (m, 1H), 3.93 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 5.06 (2, 2H), 6.58 (s, 1H), 6.92 (m, 2H), 7.02 (m, 1H), 7.23 (dd, 1H, J = 8.1 Hz), 7.39 (m, 3H) , 8.32 (m, 2H). MS (ES): 477.1 (M⁺+1)
Compound 1717 (Table 17 below):¹H-NMR (200 MHz, CD₃OD) d 1.69 (m, 1H), 2.26 (m, 1H), 2.42 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 2.72 (m, 1H), 3.53 (m , 1H), 3.83 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 4.14 (dd, 1H, J = 10.6, 7.0 Hz), 5.14 (2, 2H), 6.69 (s, 1H), 6.96 (m, 2H), 7.06 (m, 1H), 7.25 (dd, 1H, J = 8.0 Hz), 7.39 (m, 3H) , 8.35 (m, 2H).
[0530]
MS (ES): 462.2 (M⁺+1).
[0531]
Compound 1718 (Table 17 below): 1H-NMR (200 MHz, CD₃OD) d 1.40-2. 00 (m, 5H), 3.52 (d, 2H, 7.6 Hz), 3.80-4.00 (m, 1H), 4.00-4.20 (m, 3H), 4.50 ( m, 2H), 6.36-6.50 (m, 2H), 6.54 (s, 1H), 6.84-6.92 (m, 1H), 7.05 (t, 1H, J = 8.2 Hz), 7.30-7.45 (m, 3H), 8.24 (d, 2H, J = 9.8 Hz). MS (ES): 449.0 (M⁺+1)
Table 17 Adenosine A₃ Receptor selective compound
* At least 10 times more selective than the other three subtypes.
[0532]
[Table 17]

The present invention provides a compound having the structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention further provides a compound having the structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention further provides a compound having the structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention further provides a compound having the structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention further provides a compound having the structure:
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The present invention also provides a compound having the structure:
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The present invention further provides a compound having the structure:
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In a further embodiment, the invention relates to the use of A in a patient.₁A method of treating a disease associated with an adenosine receptor, comprising administering to said patient a therapeutically effective amount of a compound 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517. , 1518, 1519, or 1520. .
In a further embodiment, the present invention provides the above method, wherein said patient is a mammal.
[0533]
In a further embodiment, the invention provides a method wherein said mammal is a human.
[0534]
In a further embodiment, the present invention relates to the aforementioned A₁Adenosine receptors are impaired in cognition, renal failure, cardiac arrhythmias, respiratory epithelium, transmitter release, sedation, vasoconstriction, bradycardia, negative cardiac inotropics and conduction, bronchoconstriction, neutropil chemotaxis ), Perfusion symptoms, or ulcer symptoms.
[0535]
In a further embodiment, the invention provides a water soluble prodrug of compound 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520. The water-soluble prodrug is metabolized in vivo to form A₁This results in an active drug that selectively inhibits the adenosine receptor.
[0536]
In a further embodiment, the present invention provides said prodrug which is metabolized in vivo by esterase-catalyzed hydrolysis.
[0537]
In a further embodiment, the present invention provides a pharmaceutical composition comprising the prodrug and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0538]
In a further embodiment, the present invention relates to a method comprising:₁A method of inhibiting the activity of an adenosine receptor, comprising contacting said cell with a compound 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520. Providing a method comprising:
[0539]
In a further embodiment, the present invention provides a method wherein the compound comprises A₁A in the cell, which is an antagonist of the adenosine receptor₁The method for inhibiting the activity of adenosine receptor is provided.
[0540]
In a further embodiment, the present invention relates to a method wherein the cell is a human cell.₁The method for inhibiting the activity of adenosine receptor is provided.
[0541]
In a further embodiment, the present invention provides a method wherein the compound comprises A₁A in human cells that is an antagonist of the adenosine receptor₁The method for inhibiting the activity of adenosine receptor is provided.
[0542]
In a further embodiment, the invention relates to the use of A in a patient.₁Provided is a method of treating a disease associated with adenosine receptors, wherein the disease is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper respiratory tract disorder.
[0543]
In a further embodiment, the invention relates to the use of A in a patient.₁A method for treating a disease associated with adenosine receptors, wherein the disease is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper respiratory tract disorder, and wherein the patient is a human. .
[0544]
In a further embodiment, the present invention provides a method wherein the compound comprises A₁Provided are methods of treating the above diseases, which are antagonists of the adenosine receptor.
[0545]
In a further embodiment, the present invention relates to compounds 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520, and a steroid, β2 agonist, glucocorticoid. , A combination therapy with a leukotriene antagonist, or an anticholinergic agonist.
[0546]
In a further embodiment, the invention provides a therapeutically effective amount of a compound 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520, and a pharmaceutical agent. A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier is provided.
[0547]
In further embodiments, the invention treats a respiratory disorder with a compound 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1313, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520. The respiratory disorder is asthma, allergic rhinitis, or chronic obstructive pulmonary disease.
[0548]
In a further embodiment, the present invention provides the above pharmaceutical composition, wherein said pharmaceutical composition is a periocular, retrobulbar or intraocular injection combination.
[0549]
In a further embodiment, the present invention provides the above pharmaceutical composition, wherein said pharmaceutical composition is a systemic combination.
[0550]
In a further embodiment, the present invention provides the above pharmaceutical composition, wherein said pharmaceutical composition is a surgical irrigation solution.
[0551]
In a further embodiment, the invention relates to the use of A in a patient.₁A packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with an adenosine receptor, comprising:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of a compound 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520;
(B) instructions for using the compound to treat the disease in a patient.
[0552]
In a further embodiment, the invention provides pharmaceutically acceptable salts of 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, or 1520. I do.
[0553]
In a further embodiment, the present invention relates to the aforementioned pharmaceutical composition, wherein the pharmaceutically acceptable salt of said compound 1509, 1511, 1515, 1518 or 1519 comprises a cation selected from the group consisting of sodium, calcium and ammonium. A composition is provided.
[0554]
In a further embodiment, the invention relates to the use of A in a patient.₁A method for treating a disease associated with adenosine receptors, said A comprising:₁A method is provided wherein the disease associated with adenosine receptors is heart failure.
[0555]
Illustration
Example 21: 1- [6- (4-Hydroxy-4-phenyl-piperidin-1-yl-methyl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl] -pyrrolidin-2. -Synthesis of carboxamide (1505)
In a similar manner to Example 17, according to synthetic scheme IX, compound 1505 was synthesized using L-prolinamide and 4-phenyl-piperidin-4-ol:
Embedded image

¹H-NMR (d6-DMSO) d 1.53 (s, 1H), 1.60 (s, 1H), 1.84-2.30 (m, 6H), 2.66 (m, 2H), 3 .60 (s, 2H), 3.88 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 4.66 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 4.73 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 7.12-7.50 (m, 10H), 8.35 (m, 2H), 11.6 (brs, 1H); MS (ES): 305.1 (M⁺+1); melting point = 234-235 ° C.
[0556]
Example 22: Synthesis of [N- (2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl) (L) -prolinamide (1506)
Compound 1506 was obtained using L-prolinamide according to synthetic scheme VII:
Embedded image

¹H-NMR (DMSO-d₆) D 2.05 (m, 4H), 3.85 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 4.70 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 6.58 (br s) , 1H), 6.95 (brs, 1H), 7.15 (d, 1H, J = 3.4 Hz), 7.40 (m, 3H), 7.50 (brs, 1H), 8. 40 (m, 2H), 11.6 (br s, 1H); MS (ES): 308.3 (M⁺+1). Melting point = 236-238 [deg.] C.
[0557]
Example 23: Synthesis of [N- (2-phenyl-6-methoxymethyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl)-(L) -prolinamide (1507)
Compound 1507 was synthesized using precursor compound 23 of synthetic scheme IX:
Embedded image

Bromide 23 (4.23 g, 10 mmol) was dissolved in anhydrous methanol (60 mL) and DCM (120 mL) and AgO₂CCF₂Using N₂Treat for 1 hour at room temperature underneath. Filter off the solid and wash with DCM (2 × 20 mL). The filtrate is concentrated under vacuum. The residue is redissolved in DCM (80 mL). The resulting solution is then washed with NaHCO₃Washed with saturated solution and brine, MgSO₄Dry over, filter and concentrate to give 3.71 g (4,99%) of an off-white solid.¹H-NMR (CDCl₃) D 1.75 (s, 9H), 3.51 (s, 3H), 4.83 (s, 2H), 6.70 (s, 1H), 7.47 (m, 3H), 8.52. (M, 2H).
[0558]
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Aryl chloride 4 (2.448 g, 6.55 mmol), DMSO (15 mL), L-prolinamide (4.0 g, 35.0 mmol) and NaHCO₃(2.9 g) are combined and heated to 120 ° C. under nitrogen. After 4 hours, cool the reaction to room temperature and dilute with water (60 mL). The resulting slurry is extracted using DCM (10x). NaHCO₃Washed with saturated solution and brine, MgSO₄Dry over, filter and concentrate to give 2.48 g of a brown solid. The pure product (1.86 g, 81%) is obtained as a white solid via a flash column. White crystals are obtained from THF / hexane. Melting point = 213-215 [deg.] C.¹H-NMR (CDCl₃) D 2.15 (m, 3H), 2.52 (m, 1H), 3.26 (s, 3H), 3.92 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 4.42 (S, 2H), 5.08 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 5.49 (brs, 1H), 6.48 (s, 1H), 7.08 (brs, 1H), 7.42 (m, 3H), 8.38 (m, 2H), 9.78 (brs, 1H); MS (ES): 352.2 (M⁺+1).
[0559]
Example 24: Synthesis of 4-hydroxy-1- (2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidin-4-yl] -pyrrolidine-2-carboxylic acid amide (1508)
Using cis-hydroxy prolinamide according to synthetic scheme VII, compound 1508 was obtained:
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¹H-NMR (d₆-DMSO) d 1.90 (m, 1H), 3.85 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 4.08 (m, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.67 ( dd, 1H, J = 8.8, 4.0 Hz), 5.30 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 7.37 (m, 3H) , 7.64 (s, 1H), 8.37 (m, 2H), 11.65 (brs, 1H); MS (ES): 324.2 (M⁺+1); melting point = 268-271 ° C.
[0560]
Example 25: 3- [4-((S) -2-carbamoyl-pyrrolodin-1-yl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-6-yl] -propionic acid (1509) Synthesis of
Using precursor compound 23 of synthetic scheme IX, compound 1509 was obtained:
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Aryl bromide 23 (4.0 g, 9.5 mmol) protected with tert-butoxycarbonyl, dry DMSO (25 mL), NaH (454 mg, 3.79 mmol) and NaH₂PO₄(1.62 g, 11.4 mmol) were combined and heated to 50 ° C. for about 3.5 hours under argon. The mixture was then poured into water (200 mL) and extracted with three 100 mL portions of EtOAc. The combined organic phases are washed thoroughly with water, brine, MgSO 4₄Dry over, filter and concentrate to give a yellow solid, which was purified by trituration with ethanol to give 1.55 g of a pale yellow solid (7). The mother liquor was purified by flash chromatography (10% EtOAc in hexane) to give an additional 454 mg (60%).¹H-NMR (CDCl₃D) 1.77 (s, 9H), 7.25 (s, 1H), 7.48 (m, 3H), 8.52 (m, 2H), 10.39 (s, 1H); p. = 156 ° C (dec).
[0561]
Embedded image

Aldehyde 7 (600 mg, 1.7 mmol) was dissolved in dry THF (20 mL) and cooled to 0 ° C. under argon. To this was added a solution of (tert-butoxycarbonylmethylene) -triphenylphosphorane (694 mg, 1.8 mmol) in 10 mL of dry THF at 0 ° C. dropwise via cannula. After 3 hours, the mixture was concentrated and purified by trituration with ethanol to give 565 mg (73%) of a white solid (8).¹H NMR (CDCl₃5.) d 1.58 (s, 9H), 1.79 (s, 9H), 6. 46 (d, 1H), 6.95 (s, 1H), 7.48 (m, 3H), 8.09 (d, 1H), 8.56, 2H).
[0562]
Embedded image

A solution of compound 8 (565 mg 1.2 mmol) in 5 mL THF was diluted to 100 mL with EtOAc. 600 mg of catalyst (5% wt Pd, 50% H₂After addition of O), the mixture was purged with argon and the mixture was hydrogenated at atmospheric pressure. After 8 hours, the mixture was filtered, concentrated and purified using flash chromatography (10% EtOAc in hexane) to separate 200 mg (35%) of 9 as a clear oil, which was allowed to settle Crystallized.¹H NMR (CDCl₃) D 1.42 (s, 9H), 1.75 (s, 9H), 2.65 (t, 2H), 3.32 (t, 2H), 6.41 (s, 1H), 7.45. (M, 3H), 8.51 (m, 2H).
[0563]
Embedded image

Aryl chloride 9 (200 mg, 0.44 mmol), DMSO (10 mL) and L-prolinamide (440 mg, 4.4 mmol) were combined and heated to 85 ° C. under argon. After 14 hours, the mixture was cooled to room temperature and partitioned between water and ethyl acetate. The layers were separated and the aqueous layer was washed with EtOAc (3x). The combined organic phases were washed thoroughly with water (3x), brine and MgSO₄Dried over, filtered and concentrated to give 10 as a yellow film which was purified by flash chromatography (CH₂Cl₂(2.5% MeOH in). 185 mg (97%) were obtained. MS (ES): 435.8 (M⁺+1).
[0564]
Embedded image

Ester 10 (30 mg, mmol) in 5 mL dioxane was hydrolyzed by adding 0.5 mL of concentrated HCl. After 3 hours, the mixture was concentrated in vacuo and recrystallized in EtOH / EtOAc to give 1509 as a white solid (20 mg, 61%). MS (ES): 380 (M⁺+1).
[0565]
Example 26: Synthesis of [N- (2-phenyl-6-aminocarbonyl methoxymethyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl)-(L) -prolinamide (1510)
Using precursor compound 23 of synthetic scheme IX, compound 1510 was obtained:
Embedded image

Stir bromide 23 (1.27 g, 3 mmol) and molecular sieve (5 g) in anhydrous methyl glycolate (5.8 g, 60 mmol) and DCM (40 mL). The solution is₂Treat with AgOTf below and stir for 3 hours. Remove the solid by filtration and wash with DCM (2 × 20 mL). The filtrate is concentrated under vacuum. The residue is redissolved in DCM (80 mL). The resulting solution is then combined with water, NaHCO₃Washed with saturated solution, and brine, MgSO₄Dry over, filter and concentrate to give 1.35 g (99%) of an off-white solid (12).¹H-NMR (CDCl₃) D 1.75 (s, 9H), 3.80 (s, 3H), 5.0 (s, 2H), 6.78 (s, 1H), 7.47 (m, 3H), 8.52. (M, 2H).
[0566]
Embedded image

Aryl chloride 12 (177 mg, 0.41 mmol), DMSO (10 mL), L-prolinamide (466 mg, 4 mmol) and NaHCO₃(500 mg) are combined and heated to 120 ° C. under nitrogen. After 4 hours, cool the reaction to room temperature and dilute with water (60 mL). Extract the resulting slurry with DCM (5 × 30 mL). NaHCO₃Washed with saturated solution and brine, MgSO₄Dry over, filter and concentrate to give a brown solid. After a flash column, the pure product (154 mg, 92%) is obtained as a white solid (13).¹H-NMR (CDCl₃D) 2.15 (m, 3H), 2.52 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 4.58 (s, 2H), 5.08 (s, 1H,), 5. 85 (br s, 1H), 6.48 (s, 1H), 7.08 (br s, 1H), 7.42 (m, 3H), 8.40 (m, 2H), 10.58 (br s, 1H); MS (ES): 410.1 (M⁺+1).
[0567]
Embedded image

Methyl ester 13 (124 mg, 0.3 mmol) was added to HOCH₃(15 mL). Ammonia is bubbled through the solution for 0.5 hour. The reaction mixture is then stirred for a further 3 hours at room temperature. After removing the solvent, 111 mg of a white solid (1510, 93%) is obtained.¹H-NMR (CDCl₃) D 1.82 (m, 3H), 2.20 (m, 1H), 2.80 (m, 1H), 3.10 (m, 1H), 3.63 (dd, 2H, J₁= 13.8 Hz, J₂= 19.4 Hz), 3.87 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 4.97 (m, 1H), 5.96 (m, 2H), 6.35 (s, 1H) , 6.86 (brs, 1H), 7.11 (brs, 1H), 7.37 (m, 3H), 8.28 (m, 2H), 11.46 (brs, 1H); MS (ES): 394.8 (M⁺+1).
[0568]
Example 27: Synthesis of [4- (2-carbamoylpyrrolidin-1-yl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-6-carboxylic acid] (1511)
Using precursor compound 15 of synthesis scheme VII, compound 1511 was synthesized:
Embedded image

A suspension of sodium hydride (780 mg of an oil suspension in 60, 19.5 mmol) in dry DMF (20 mL) was cooled under nitrogen in an ice / water bath to give pyrrolo in DMF (10 mL). A solution of pyrimidine 15 (2.00 g, 7.52 mmol) is added over 5 minutes. After 15 minutes, benzenesulfonyl chloride (1.2 mL, 9.40 mmol) is added, then the cooling bath is removed. After 4 hours, the reaction mixture was washed with ice and NaHCO3.₃Pour into a mixture with a saturated solution, filter off the precipitated solid and triturate with acetone (3) and methanol (2) to give 2.37 g of a beige solid. This solid (16) contains about 10 mol-% DMF (based on 83% yield) and can be used in the next step; obtaining a pure sample by chromatography on silica gel using acetone as eluent Can be.¹H-NMR (CDCl₃): D 6.70 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 7.47-7.68 (m, 6H), 7.76 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 8.24- 8.32 (m, 2H), 8.48-8.56 (m, 2H); IR (solid): n = 3146 cm^-1, 1585, 1539, 1506, 1450, 1417, 1386, 1370, 1186, 1176, 1154, 1111, 1015, 919, 726, 683, 616, 607;⁺); Melting point = 226-227 ° C.
[0569]
Embedded image

To a solution of N-sulfonyl compound 16 (337 mg, 0.911 mmol) in dry THF (34 mL) cooled with dry glacial acetic acid was added LDATAF (1.0 mL, 1.5 M solution in cyclohexane, 1.5 mmol). Added. After 45 minutes, carbon dioxide is bubbled through the solution for 5 minutes, then the cooling bath is removed. When the solution reached ambient temperature, the solvent was evaporated and 0.5 equivalent of (iPr)₂NCO₂398 mg of salt 17 containing Li are obtained as a yellowish solid. This salt is used in the next step without further purification.¹H-NMR (D₆-DMSO): d = 6.44 (s, 1H), 7.50-7.75 (m, 6H), 8.33-8.40 (m, 2H), 8.53 (dd, J = 8) 2.0, 1.6 Hz, 2H).
[0570]
Embedded image

A solution of lithium salt 17 (50 mg) and L-prolinamide (122 mg, 1.07 mmol) in DMSO (1.5 mL) is heated to 80 ° C. under nitrogen for 15.5 hours. To the cooled solution is added 4% aqueous acetic acid (10 mL) and the mixture is extracted with EtOAc. (5'10 mL). The combined organic phases were washed with 4% aqueous acetic acid (10 mL), water (10 mL) and brine (10 mL),₄Dry on top. After filtration and concentration, 40 mg of 18 is obtained as a yellowish solid, which is used in the next step without purification.¹H-NMR (CD₃OD): d = 1.95-2.36 (m, 4H), 3.85-3.95 (m, 1H), 3.95-4.17 (m, 1H), 4.72 (brs) , 1H), 7.14 (s, 1H), 7.35-7.45 (m, 3H), 7.45-7.70 (m, 3H), 8.33-8.50 (m, 4H) ).
[0571]
Embedded image

A solution of sodium hydroxide in methanol (1.5 mL, 5M, 7.5 mmol) is added to a solution of pyrrolopyrimidine 18 (40 mg, 0.081 mmol) in methanol (2 mL). After 2 hours, the pH was adjusted to 5, most of the methanol was evaporated, the mixture was extracted with EtOAc (5'10 mL), the combined organic phases were washed with brine, MgSO 4₄Dry on top. Filtration and concentration gave 24 mg of a pale yellow solid, which was triturated with toluene / EtOAc / MeOH to give 15.6 mg (55%) of the acid 1511 as a slightly yellowish solid.¹H-NMR (CD₃OD): d = 2.05-2.20 (m, 4H), 3.95-4.10 (m, 1H), 4.15-4.25 (m, 1H), 4.85 (brs) , 1H), 7.14 (s, 1H), 7.35-7.42 (m, 3H), 8.38-8.45 (m, 2H); IR (solid): n = 3192 cm^-1, 2964, 2923, 2877, 1682, 1614, 1567, 1531, 1454, 1374, 1352, 1295, 1262, 1190, 974, 754, 700; MS (ES): 352 (M⁺+1); Melting point = 220 ° C (decomp.).
[0572]
Example 28: Synthesis of 1- (6-methyl-2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidin-4-yl)-(S) -pyrrolidine-2-carboxylic acid amide (1512)
Compound 1512 was synthesized by the following steps:
Embedded image

Aryl chloride 20 (3 g, 10.7 mmol), DMSO (50 mL), and (S) -prolinamide were combined and heated to 85 ° C. under argon. After stirring overnight (14 hours), the mixture was cooled to room temperature and poured into 800 mL of water. This was extracted with three 200 mL portions of EtOAc. The combined organic phases were thoroughly washed with water (3 × 300 mL), brine and MgSO₄Dry over, filter and concentrate to give a dark brown solid. The solid was recrystallized twice from EtOAc to give 1.95 g (57%) of a tan solid (1512).¹1 H NMR (DMSO-d₆) D 1.8-2.2 (m, 4H), 2.3 (s, 3H), 3.8 (m, 1H), 4.0 (m, 1H), 4.6 (d, 1H). , 6.2 (s, 1H), 6.9 (s, 1H), 7.2 (m, 3H), 7.3 (s, 1H), 8.4 (m, 2H), 11.5 ( s, 1H); MS (ES): 322 (M⁺+1).
[0573]
Example 29: Synthesis of 1- [6- (2-hydroxy-ethoxymethyl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl] -pyrrolidine-2-carboxylic acid amide (1513)
According to Synthetic Scheme IX in the same manner as in Example 17, compound 1513 was synthesized using L-prolinamide and ethane-1,2-diol.
[0574]
Embedded image

MS (ES): 382 (M⁺+1).
[0575]
Example 30: Synthesis of 4- (6-Imidazol-1-ylmethyl 2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-ylamino) -cyclohexanol (1514)
Compound 1514 was synthesized in a similar manner to Example 17 according to Synthesis Scheme IX, using N-6 aminocyclohexanol and imidazole:
Embedded image

MS (ES): 389 (M⁺+1).
[0576]
Example 31: Synthesis of 4- (4-hydroxy-cyclohexylamino) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-6-carboxylic acid (1515)
Compound 1515 was synthesized in a similar manner to Example 27 according to Synthesis Scheme IX, using N-6 aminocyclohexanol and imidazole:
Embedded image

MS (ES): 353 (M⁺+1).
[0577]
Example 32: Synthesis of 4- [6- (2-hydroxy-ethoxymethyl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-ylamino] -cyclohexanol (1516)
Compound 1516 was synthesized according to Synthetic Scheme IX in a similar manner to Compound 1513, using N-6 aminocyclohexanol:
Embedded image

MS (ES): 383 (M⁺+1).
[0578]
Example 33: Synthesis of methyl 4- (4-hydroxy-cyclohexylamino) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-6-carboxylate (1517)
Embedded image

A solution of lithium salt 17 (0.13 mmol) in dry DMF (4 mL) is stirred with methyl iodide (0.1 mL, 1.6 mmol) at 20 ° C. under argon for 3 hours. Evaporate DMF and add aqueous ammonium chloride solution (15 mL). The mixture was extracted with EtOAc (3'15 mL) and the combined organic phases were washed with water (2'10 mL) and brine (10 mL),₄Dry on top. After filtration and concentration, 21 mg (38%) of methyl ester 22 are obtained.
[0579]
Embedded image

A solution of methyl ester 22 (24.5 mg, 0.057 mmol) and 4-trans-aminocyclohexanol (66 mg, 0.57 mmol) in DMSO (1.5 mL) was heated to 80 ° C. under nitrogen, then The heating was stopped and stirring at 20 ° C. was continued for 13.5 hours. To the cooled solution is added 4% aqueous acetic acid (10 mL) and the mixture is extracted with EtOAc (3'10 mL). The combined organic phases were washed with 4% aqueous acetic acid (10 mL), water (10 mL), 2N NaOH (10 mL), water (10 mL), and brine (10 mL), and MgSO 4₄Dry on top. To a solution of the crude material obtained via filtration and concentration (1H NMR shows about 50% removal of the benzenesulfonyl group) in THF (2 mL) was added a solution of NaOH in MeOH (0.5 mL of a 5 M solution , 2.5 mmol) at ambient temperature. After 20 minutes, water and NaHCO₃Saturated solutions (5 mL each) are added and the mixture is extracted with EtOAc (4'15 mL). The combined organic phases were washed with 2N NaOH (10 mL), water (10 mL), and brine (10 mL),₄Dry on top. The crude material obtained after filtration and concentration is chromatographed on silica gel eluting with hexane / EtOAc 1: 1 (R) 1: 2 to give 8.6 mg (41%) of 1517 as a white solid. Melting point 225-227 [deg.] C.¹H-NMR (CD₃OD): d = 1.38-1.62 (m, 4H), 1.95-2.10 (m, 2H), 2.10-2.25 (m, 2H), 3.55-3. 70 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 4.20-4.35 (m, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.35-7.47 (m, 3H) , 8.35-8.42 (m, 2H); IR (solid): n = 3352 cm.^-1, 3064, 2935, 2860, 1701, 1605, 1588, 1574, 1534, 1447, 1386, 1333, 1263, 1206, 1164, 1074, 938, 756, 705; MS (ES): 367 (MH)⁺).
[0580]
Example 34: Synthesis of [4- (2-carbamoyl-pyrrolidin-1-yl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-6-ylmethoxy] -acetic acid methyl ester (1518)
Compound 1518 was obtained by synthesizing precursor compound 12 in the same manner as in Example 26:
Embedded image

MS (ES): 410 (M⁺+1).
[0581]
Example 35: Synthesis of [4- (2-carbamoyl-pyrrolidin-1-yl) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-6-ylmethoxy] -acetic acid (1519)
Compound 1519 was synthesized in a similar manner to 1518 by hydrolysis of the methyl ester group with a base:
Embedded image

MS: 396 (M⁺+1).
[0582]
Example 36: Synthesis of 4- (4-hydroxy-cyclohexylamino) -2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine-6-carboxylic acid amide (1520)
Embedded image

The ammonia gas is concentrated into a solution of pyrrolopyrimidine 23 (7.8 mg, 0.021 mmol) in methanol (6 mL) and cooled with dry ice / acetone until the total volume reaches 12 mL. Stir at 20 ° C. for 10 days, evaporate the solvent and remove the residue in CH 2₂Cl₂Purify by preparative TLC on silica gel, eluting with 5% MeOH in. The resulting material was then triturated with ether to give 6.5 mg (88%) of amide 1520 as a white solid, mp: 210-220 ° C (decomp.).¹H-NMR (CD₃OD): d = 1.40-1.60 (m, 4H), 2.00-2.15 (m, 2H), 2.15-2.25 (m, 2H), 3.55-3. 70 (m, 1H), 4.20-4.35 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.35-7.47 (m, 3H), 8.34-8.40 ( m, 2H); IR (solid): n = 3358 cm^-1, 3064, 3025, 2964, 2924, 2853, 1652, 1593, 1539, 1493, 1452, 1374, 1326, 1251, 1197, 1113, 1074, 1028, 751, 699; MS (ES): 352 (MH⁺).
[0583]
Compound activity
Adenosine 1 (A₁) Receptor subtype saturation and competitive radioligand binding were determined for compounds 1505, 1506, 1507, 1508, 1509, 1510, 1511, 1512, 1513, 1514, 1516, 1517, 1518, 1519, and 1520, in particular, as described above. The measurement was performed as described on pages 152 to 153 of the present specification (PCT / US01 / 45280). All compounds referred to above have A₁Receptor binding affinities were equivalent or better than the reference compounds 1318 or 1319 described herein, in particular, Table 13 on page 171 of PCT / US01 / 45280.
[0584]
The water solubility of the compounds listed in Table 18 was determined by measuring their cLogP values (Cambridge Soft Corporation, 100 Cambridge Park Drive, Cambridge, MA 02140, a computer program supplied by CS ChemDraw, ChemDraw Ult. ); Calculated using 1999), which is expected to be better than reference compound 1318 or 1319.
[0585]
A listed in Table 18₁Compounds specific for the receptor had lower cLogP values of about 1.5 to about 3.4 as compared to the reference compound 1318 or 1319, which had a cLogP value of about 3.8. More polar A with lower cLogP values than the reference compound 1318 or 1319, listed in Table 18.₁The receptor compound has a potency and A₁It was not expected that it would still have receptor binding selectivity.
[0586]
[Table 18]

PCT / US01 / 45280 No. 288 From the page, A _2a For compounds specific to the receptor
The present invention provides a compound having the following structure.
[0587]
Embedded image

The present invention also provides a compound having the structure:
[0588]
Embedded image

In a further embodiment, the invention relates to a method for treating A_2aProvided is a method of treating a disease associated with adenosine receptor, comprising administering to said patient a therapeutically effective amount of compound 1609 or 1610.
[0589]
The invention also provides the above method, wherein said patient is a mammal.
[0590]
The invention further provides a method wherein said mammal is a human.
[0591]
The present invention also relates to A_2aA method for treating a disease associated with adenosine receptor, comprising the step of_2aAdenosine receptors provide methods associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, senile dementia, or Parkinson's disease.
[0592]
The present invention provides the above method, wherein the compound treats the disease by stimulating adenylate cyclase.
[0593]
The present invention also provides a water-soluble prodrug of compound 1609 or 1610, wherein the water-soluble prodrug comprises A_2aProvided are methods that are metabolized in vivo to active drugs that selectively inhibit the adenosine receptor.
[0594]
The present invention also provides a water soluble prodrug of compound 1609 or 1610, wherein said prodrug is metabolized in vivo by esterase-catalyzed hydrolysis.
[0595]
The invention also provides for a pharmaceutical composition comprising a water-soluble prodrug of compound 1609 or 1610 and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0596]
The present invention also relates to the use of A in cells._2aProvided is a method of inhibiting adenosine receptor activity, said method comprising contacting said cell with compound 1609 or 1610.
[0597]
The present invention also relates to the use of A in cells._2aA method of inhibiting the activity of an adenosine receptor, comprising contacting said cell with a compound 1609 or 1610, wherein said compound comprises said A_2aProvided are methods that are antagonists of the adenosine receptor.
[0598]
The present invention also provides the above method, wherein said cells are human cells.
[0599]
The invention also provides that the cell is a human cell and the compound is A_2aProvided is a method as described above that is an adenosine receptor antagonist.
[0600]
The invention also provides for a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of compound 1609 or 1610, and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0601]
The present invention also provides that the therapeutically effective amount is effective for treating Parkinson's disease, and diseases associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, senile dementia, The pharmaceutical composition is provided.
[0602]
The present invention also provides the above pharmaceutical composition, wherein the composition is an ophthalmic formulation.
[0603]
The present invention also provides the above pharmaceutical composition, wherein the composition is a periocular, retrobulbar or intraocular injection formulation.
[0604]
The present invention also provides the above pharmaceutical composition, wherein the composition is a systemic combination.
[0605]
The present invention also provides the above pharmaceutical composition, wherein said composition is a surgical irrigation solution.
[0606]
The present invention also provides a combination therapy for Parkinson's disease comprising Compound 1609 or 1610 and either dopamine enhancer.
[0607]
The present invention also provides a combination therapy for cancer comprising Compound 1609 or 1610 and either cytotoxic agent.
[0608]
The present invention also provides a combination therapy for glaucoma, comprising compound 1609 or 1610, and a prostaglandin agonist, muscarinic agonist or β-2 antagonist.
[0609]
The invention also relates to the use of A in patients._2aA packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with an adenosine receptor, comprising:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of compound 1609 or 1610;
(B) instructions for using the compound to treat the disease in a patient.
[0610]
An example:
Example 41: Synthesis of 1- (6-phenyl-2-pyridin-4-yl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl] -pyrrolidine-2-carboxylic acid amide (1609)
Compound 1609 was synthesized by reacting L-prolinamide with the appropriate chloride intermediate described in Synthetic Scheme II described in PCT / US01 / 45280, page 82:
Embedded image

¹H-NMR (d₆-DMSO) d 1.95-2.15 (m, 4H), 4.00 (brs, 1H), 4.15 (brs, 1H), 4.72 (brs, 1H), 6.90. (Br s, 1H), 7.19 (br s, 1H), 7.30 (t, 1H, J = 7.0 Hz), 7.44 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 7.59 (S, 1H), 7.92 (br s, 2H), 8.26 (d, 2H, J = 6.2 Hz), 8.65 (d, 2H, J = 6.2 Hz); MS (ES) : 384.9 (M⁺+1); Mpt = 280-316 ° C (decomp.).
[0611]
Example 42: 1- [6- (3-Methoxy-phenyl) -2-pyridin-yl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl] -pyrrolidine-2-carboxylic acid amide (1610) Synthesis
Compound 1610 was synthesized by reacting L-prolinamide with the appropriate chloride intermediate as described in Synthesis Scheme II on PCT / US01 / 45280, page 82:
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¹H-NMR (d₆-DMSO) d 2.07 (m, 4H), 3.85 (s, 3H), 4.02 (m, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.75 (m, 1H), 6 .89 (m, 1H), 7.00 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.35 (t, 1H, J = 8.2 Hz), 7.53 (s, 2H), 7.60 (s, 1H), 8.28 (d, 2H, J = 5.8 Hz), 8.67 (d, 2H, J = 5.8 Hz), 12.37 (s, 1H); MS ( ES): 415.0 (M⁺+1).
[0612]
Compound activity
Adenosine 2a (A_2a) Receptor subtype competitive radioligand binding was performed as described herein, especially as described on page 153 herein (PCT / US01 / 45280). Compounds 1609 and 1610 have A_2aIt has been found to have receptor binding affinity and selectivity.
[0613]
PCT / US01 / 45280, pages 292-300,₃For additional compounds specific for the receptor.
[0614]
The present invention also provides a compound having the structure:
Embedded image

In a further embodiment, the present invention relates to a method comprising:₃Provided is a method of inhibiting adenosine receptor activity, comprising contacting the cell with compound 1720.
[0615]
In a further embodiment, the present invention relates to a method comprising:₃A method of inhibiting adenosine receptor activity, wherein said compound comprises A₃Provided are methods that are antagonists of the adenosine receptor.
[0616]
In a further embodiment, the present invention relates to a method wherein the cell is a human cell.₃The method for inhibiting the activity of adenosine receptor is provided.
[0617]
In a further embodiment, the present invention provides that the cell is a human cell, and wherein the compound is A₃A in the cell, which is an antagonist of the adenosine receptor₃A method for inhibiting the activity of a receptor is provided.
[0618]
In a further embodiment, the invention provides a method of treating an injury to a patient's eye, the method comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of a composition comprising Compound 1720. I do.
[0619]
In a further embodiment, the present invention provides a method, wherein the injury comprises an injury to the retina or optic disc.
[0620]
In a further embodiment, the present invention provides a method for treating glaucoma comprising administering to a patient a therapeutically effective amount of compound 1720.
[0621]
In a further embodiment, the present invention is a method of treating glaucoma, comprising one or more adenosine receptor antagonists, preferably adenosine receptor A₃Antagonist (preferably N-6 substituted 7-deazapurine, most preferably [2- (3H-imidazol-4-yl) -ethyl]-(2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidin-4-yl) -Amines) for the treatment of glaucoma.
[0622]
In another embodiment, the present invention provides adenosine receptor A₃Antagonist (preferably N-6 substituted 7-deazapurine, most preferably [2- (3H-imidazol-4-yl) -ethyl]-(2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3d] pyrimidin-4-yl) -Combination therapy for glaucoma, comprising a beta-adrenergic receptor antagonist (i.e., a beta-adrenergic antagonist or a beta blocker) (e.g., Timolol maleate, betaxolol, carteolol, levobunolol, metipranolol, L-655328 (acetate ester of L652696), β1 adrenergic receptor antagonist, α-2 adrenergic receptor agonist (eg, apraclonidine (aplaclonid)) ne), brimonidine, AGN-195797, AGN190837 (an analog of Bay-a-6781), carbonic anhydrase inhibitor (brinzolamide, dorzolamide, MK-927 (human) Inhibitors of carbonic anhydrase II isoenzyme), inhibitors of carbonic anhydrase IV isoenzyme), cholinergic agonists (eg, muscarinic cholinergic agonists, carbachol, pilocarpine HCl, pilocarpine nitrate, pilocarpine, pilocarbin prodrugs) (Eg, DD-22A)), prostaglandins and prostaglandin receptor agonists, angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitors, AMPA receptor agonists (eg, latanoprost (lat) anoprost), unoprostone isopropyl, PGF2 alpha agonist, prostanoid-selective FP receptor agonist, PG agonist such as antihypertensive prostamide), angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor (eg, spirapril, spiraprilat) , AMPA receptor antagonists, 5-HT agonists (for example, MKC-242 (5-3-[((2S) -1,4-benzodioxan-2-ylmethyl) amino] propoxy-1,3-benzodioxole) Selective 5-HT1A receptor agonists, such as HCl), angiogenesis inhibitors (eg, steroids anecortave), NMDA antagonists (eg, Hu-211, memantine, cannabinoid MNDA receptor agonists, Navinor, prodrugs and analogs of dexanabinol), NR2B selective antagonists (eg, eliprodil (SL-82.0715)), renin inhibitors (eg, CGP-38560, SR-43845), cannabinoid receptor agonists (eg, , Tetrahydrocannabinol (THC), and THC analogs, such as selective CB2 cannabinoid receptor agonists (eg, L-768242, L-759787), such as anandamide, which binds to brain-specific CB1 and peripheral CB2 receptors Compounds), angiotensin receptor antagonists (eg, angiotensin II receptor antagonists (eg, CS-088), selective angiotensin II AT-I receptor antagonists such as losartan potassium), Chlorothiazide (HCTZ), somatostatin agonist (eg, non-peptide somatostatin agonist NNC-26-9100), glucocorticoid antagonist, mast cell degranulation inhibitor (eg, nedocromil), α-adrenergic receptor blocker (eg, Dapiprazole, α2 adrenergic receptor antagonist, α1 adrenergic receptor antagonist (eg, bunazosin), α-2 adrenergic receptor antagonist, thromboxane A2 mimetic, protein kinase inhibitor (eg, H7), prostaglandin F derivatives (eg, S-1033), prostaglandin-2α antagonists (eg, PhXA-34), dopamine D1 and 5-HT2 agonists (eg, Fenoldopam), nitric oxide releasing agents (e.g., NCX-904 or NCX-905, timolol, a nitric oxide releasing derivative), 5-HT2 antagonists (e.g., sarpogrelate), NMDA antagonists (e.g., dexamethasone) Prodrugs and analogs of dexanabinol), cyclooxygenase inhibitors (eg diclofenac, or the non-steroidal compound nepafenac), inosine, dopamine D2 receptor and α-adrenergic receptor agonists (talipexole) )), Dopamine D1 receptor antagonists and D2 receptor agonists (eg, SDZ-GLC-756) Vasopressin receptor antagonists (eg, vasopressin V2 receptor antagonists (eg, SR-12463)), endothelin antagonists (eg, TBC-2576), 1- (3-hydroxy-2-phosphorylmethoxypropyl) cytosine (HPMPC) and release analogs And PG agonists such as prodrugs, thyroid hormone receptor ligands (eg, KB130015), muscarinic M1 agonists, NMDA receptor antagonists (eg, cannabinoid NMDA-receptor antagonist dexanabinol), hypotensive lipids, Prostamide, sodium channel blocker, NMDA antagonist, mixed activity ion channel blocker, β-adrenergic receptor antagonist and PGF2α Combinations with gonists (eg, latanoprost and timolol), guanylate cyclase activators (eg, arterial natriuretic peptide (ANP) or non-peptidomimetic), inhibitors of ANP neutral endopeptidase, nitrovasodilation Agents (eg, nitroglycerin, hydralazine, sodium nitroprusside), endothelin receptor modulators (eg, ET-1 or non-peptidomimetic, sarafotoxin-S6c), ethacrynic acid, other phenoxyacetic acid analogs (eg, Indac Indacrinone, ticrynafen), actin disruptors (eg, latrunculin), calcium channel blockers (eg, , Verapamil, nifedipine, Burobinkamin (brovincamine), nivaldipine (nivaldipine)), and neuroprotective agents.
[0623]
For glaucoma, comprising Compound 1702 and one or more compounds selected from the group consisting of β-adrenergic receptor antagonists, α2-adrenergic receptor agonists, carbonic anhydrase antagonists, cholinergic agonists, and prostaglandin receptor agonists Combination therapy.
[0624]
In a further embodiment, the invention provides a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of compound 1720 and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0625]
In a further embodiment, the invention relates to a method for treating A₃A broadcast pharmaceutical composition for treating a disease associated with an adenosine receptor, comprising:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of compound 1720;
(B) instructions for using the compound to treat the disease in a patient.
[0626]
In a further embodiment, the invention provides a method of making a composition containing compound 1720 comprising mixing compound 1720 with a suitable carrier.
[0627]
In a further embodiment, the invention provides a pharmaceutically acceptable salt of compound 1720, comprising an anion selected from the group consisting of maleate, fumarate, tartrate, acetate, phosphate, and mesylate. Provide an acceptable salt.
[0628]
Example 43: Synthesis of [2- (3H-Imidazol-4-yl) -ethyl]-(2-phenyl-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl) -amine (1720)
Compound 1720 was synthesized using precursor compound 1 of synthetic scheme VII to obtain:
Embedded image

Aryl chloride 1 (400 mg, 1.50 mmol), DMSO (10 mL) and histamine (1.67 g, 15.0 mmol) are mixed and heated to 120 ° C. under a nitrogen atmosphere. After 6.5 hours, cool the reaction to room temperature and partition between EtOAc and water. The layers are separated and the aqueous layer is extracted with EtOAc (3x). The combined organic phases are washed with brine (2x) and dried over MgSO₄Dry over, filter and concentrate to give 494 mg of a brown solid. The solid is washed with cold MeOH and recrystallized from MeOH to give 197 mg (43%) of an off-white solid (1720).
[0629]
1H-NMR (CD3OD) d 3.05 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 3.94 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 6.50 (d, 1H, J = 3.5 Hz) ), 6.88 (br s, 1H), 7.04 (d, 1H, J = 3.5 Hz), 7.42 (m, 3H), 7.57 (s, 1H), 8.34 (m , 2H); MS (ES): 305.1 (M⁺+1); Mpt = 234-235 ° C
Compound activity
For compound 1720, adenosine 3 (A) is described as described herein, particularly as described on pages 153-154 of this specification (PCT / US01 / 45280).₃) Receptor antagonist radioligand binding was performed. Compound 1720 has a 10-fold greater A than reference compound 1308, particularly as described in Table 13 on page 169 herein.₃It was found to have receptor binding affinity.
[0630]
Incorporation by reference
All patents, published patent applications, and other references disclosed herein are expressly incorporated herein by reference.
[0631]
Equal
Those skilled in the art will recognize many equivalents to the specific embodiments of the invention specifically described herein, and will be able to ascertain without employing more than routine experimentation. Such equivalents are intended to be included within the scope of the appended claims.
[0632]
The present invention further provides a compound of the formula:
Embedded image

here,
R₁NR₂Together form a ring having the structure:
Embedded image

Or R₁Is H, R₂Is
Embedded image

And;
R₅Is H or substituted or unsubstituted alkyl or alkylaryl.

Claims (82)

Compound having the following structure:

(Where
R ₁ NR ₂ has the following structure:

Or together R ₁ is H and R ₂ is

And
R ₅ is H or substituted or unsubstituted alkyl or alkylaryl). The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: The following structure:

The compound of claim 1, having the formula: A method of treating a disease associated with A ₁ adenosine receptor in a patient, comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of the compound of claim 1. 19. The method of claim 18, wherein said patient is a mammal. 20. The method of claim 19, wherein said mammal is a human. The A ₁ adenosine receptor is a cognitive disorder, renal failure, arrhythmia, respiratory epithelium, transmitter release, sedation, vasoconstriction, bradycardia, negative cardiac inotropic and inotropic, bronchoconstriction, neutrophil chemotaxis, reflux 19. The method of claim 18, wherein the method is associated with a reflex condition or an ulcer condition. 2. A water-soluble prodrug of the compound of claim 1, which is metabolized in vivo to produce an active agent that selectively inhibits A ₁ adenosine receptor. 23. The prodrug of claim 22, wherein the prodrug is metabolized in vivo by esterase-catalyzed hydrolysis. A pharmaceutical composition comprising the prodrug of claim 22, and a pharmaceutically acceptable carrier. A method of inhibiting the activity of the A ₁ adenosine receptor in a cell, comprising contacting the cell with a compound of claim 1. 26. The method of claim 25, wherein said compound is an antagonist of said A ₁ adenosine receptor. 26. The method of claim 25, wherein said cells are human cells. It said compound is an antagonist of A ₁ adenosine receptor, The method of claim 27. 19. The method of claim 18, wherein the disease is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, allergic rhinitis, or upper respiratory tract disorder. 30. The method of claim 29, wherein said patient is a human. It said compound is an antagonist of A ₁ adenosine receptor, The method of claim 30. A combination therapy for asthma comprising the compound of claim 1 and a steroid, a β2 agonist, a glucocorticoid, a leukotriene antagonist, or an anticholinergic agonist. A pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound of claim 1 and a pharmaceutically acceptable carrier. 30. The method of claim 29, wherein the respiratory disorder is asthma, allergic rhinitis, or chronic obstructive pulmonary disease. 34. The pharmaceutical composition of claim 33, wherein the pharmaceutical composition is a periocular, retrobulbar or intraocular injection formulation. 34. The pharmaceutical composition according to claim 33, wherein said pharmaceutical composition is a systemic combination. 34. The pharmaceutical composition according to claim 33, wherein said pharmaceutical composition is a surgical irrigation solution. A packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with A ₁ adenosine receptor in a patient, comprising:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of the compound of claim 1;
(B) a packaged pharmaceutical composition comprising instructions for using the compound to treat the disease in a patient. A pharmaceutically acceptable salt of the compound of claim 1. 40. The pharmaceutically acceptable salt of the compound of claim 6, 8, 12, 15, or 16, wherein the pharmaceutically acceptable salt contains a cation selected from the group consisting of sodium, calcium, and ammonium. Pharmaceutically acceptable salts of Wherein the A ₁ adenosine receptor is associated with congestive heart failure, the method of claim 18. The following structure:

A compound having the formula: The following structure:

A compound having the formula: 44. A method of treating a disease associated with _A2a adenosine receptor in a patient, comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of a compound according to claim 42 or 43. 46. The method of claim 44, wherein said patient is a mammal. 46. The method of claim 45, wherein said mammal is a human. 47. The method of claim 46, wherein the _A2a adenosine receptor is associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, senile dementia, or Parkinson's disease. 46. The method of claim 44, wherein the compound treats the disease by stimulating adenylate cyclase. 44. A water-soluble prodrug of the compound of claim 42 or 43, which is metabolized in vivo to an active agent that selectively inhibits _A2a adenosine receptor. 50. The prodrug of claim 49, wherein the prodrug is metabolized in vivo by esterase-catalyzed hydrolysis. 50. A pharmaceutical composition comprising the prodrug of claim 49, and a pharmaceutically acceptable carrier. A method of inhibiting _A2a adenosine receptor activity in a cell, comprising contacting the cell with a compound of claim 42 or 43. 53. The method of claim 52, wherein said compound is an antagonist of said _A2a adenosine receptor. 54. The method of claim 53, wherein said cells are human cells. 54. The method of claim 53, wherein said compound is an antagonist of the _A2a adenosine receptor. A pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound according to claim 42 or 43, and a pharmaceutically acceptable carrier. The therapeutically effective amount is effective for treating Parkinson's disease and diseases associated with motor activity, vasodilation, platelet inhibition, neutrophil superoxide production, cognitive impairment, or senile dementia. 56. The pharmaceutical composition according to 56. 57. The pharmaceutical composition according to claim 56, wherein said pharmaceutical composition is an ophthalmic formulation. 57. The pharmaceutical composition of claim 56, wherein the pharmaceutical composition is a periocular, retrobulbar or intraocular injection formulation. 57. The pharmaceutical composition of claim 56, wherein said pharmaceutical composition is a systemic combination. 57. The pharmaceutical composition of claim 56, wherein said pharmaceutical composition is a surgical irrigation solution. 44. A combination therapy for Parkinson's disease, comprising a compound of claim 42 or 43, and any of the dopamine enhancers. 44. A combination therapy for cancer, comprising a compound according to claim 42 or 43, and a cytotoxic agent. A combination therapy for glaucoma, comprising a compound according to claim 42 or 43, and a prostaglandin agonist, muscarinic agonist, or β2 antagonist. A packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with _A2a adenosine receptor in a patient, comprising:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of the compound of claim 42 or 43;
(B) a packaged pharmaceutical composition comprising instructions for using the compound to treat the disease in a patient. A pharmaceutically acceptable salt of the compound of claim 42 or 43. A pharmaceutically acceptable salt of the compound of claim 41 or 42, wherein the pharmaceutically acceptable salt contains an anion selected from the group consisting of maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, acetic acid, phosphoric acid, and myristic acid. 66. The pharmaceutically acceptable salt according to 66. The following structure:

A compound having the formula: A method of inhibiting the activity of A ₃ adenosine receptor in a cell, the method comprising the cells, are contacted with a compound according to claim 68. The compounds are antagonists of the A ₃ adenosine receptor The method of claim 69. 70. The method of claim 69, wherein said cells are human cells. It said compound is an antagonist of A ₃ adenosine receptor The method of claim 71. 69. A method of treating an eye injury in a patient, comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of a composition comprising a compound of claim 68. 74. The method of claim 73, wherein the damage comprises retinal or optic disc damage. 69. A method for glaucoma, comprising administering to a patient a therapeutically effective amount of a compound of claim 68. 69. The compound of claim 68, and a beta adrenergic receptor antagonist, an alpha-2 adrenergic receptor agonist, carbonic anhydrase, a cholinergic agonist, a prostaglandin and a prostaglandin receptor agonist, angiotensin converting enzyme (ACE) inhibition. Agent, AMPA receptor agonist, 5-HT agonist, angiogenesis inhibitor, NMDA antagonist, renin inhibitor, cannabinoid receptor agonist, angiotensin receptor antagonist, hydrochlorothiazide (HCTZ), somatostatin agonist, glucocorticoid antagonist, mast cell degranulation Inhibitor, α-adrenergic receptor blocker, α-2 adrenergic receptor antagonist, thromboxane A2 mimetic, protein kinase inhibitor, prosta Langin F derivative, prostaglandin-2α antagonist, dopamine D1 and 5-HT2 agonist, nitric oxide releasing agent, 5-HT2 antagonist, cyclooxygenase inhibitor, inosine, dopamine D2 receptor and α-adrenergic receptor agonist, dopamine D1 receptor Antagonists and D2 receptor agonists, vasopressin receptor antagonists, endothelin antagonists, 1- (3-hydroxy-2-phosphorylmethoxypropyl) cytosine (HPMPC) and release analogs and prodrugs, thyroid hormone receptor ligands, muscarinic M1 Agonist, sodium channel blocker, mixed activity ion channel blocker, combination of β-adrenergic receptor antagonist and PGF2α agonist, cycla guanylate One or more compounds selected from the group consisting of zeta activators, nitrovasodilators, endothelin receptor modulators, ethacrynic acid, other phenoxyacetic acid analogs, actin disruptors, calcium channel blockers, and neuroprotective agents. Combination therapy for glaucoma, including. 69. The compound of claim 68, and one or more compounds selected from the group consisting of a beta adrenergic receptor antagonist, an alpha-2 adrenergic receptor agonist, carbonic anhydrase, a cholinergic agonist, and a prostaglandin receptor agonist. Combination therapy for glaucoma. 69. A pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of the compound of claim 68, and a pharmaceutically acceptable carrier. A packaged pharmaceutical composition for treating a disease associated with A ₃ adenosine receptor in a patient, the following:
(A) a container holding a therapeutically effective amount of the compound of claim 68;
(B) a packaged pharmaceutical composition comprising instructions for using the compound to treat the disease in a patient. 70. A method of making a composition comprising the compound of claim 68, comprising mixing the compound of claim 68 with a suitable carrier. 69. A pharmaceutically acceptable salt of the compound of claim 68. 82. The pharmaceutically acceptable salt of claim 81, wherein the pharmaceutically acceptable salt comprises an anion selected from the group consisting of maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, acetic acid, phosphoric acid, and myristic acid. Salt.