JP4451100B2 - Immunostimulant and anticancer agent containing Tamogitake fruit body composition as active ingredient - Google Patents
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Description
本発明は、優れた生体吸収性を有するとともに優れた免疫賦活作用に基づく抗癌作用を発揮することができるタモギタケ子実体組成物を有効成分として含有する免疫賦活剤、及び抗癌剤に関するものである。 The present invention relates to superior immunostimulating agent containing as an active ingredient the Pleurotus cornucopiae fruit body composition which can exhibit anticancer effect based on immunostimulatory activity, and anti-cancer agent which has excellent bioresorbable It is.
タモギタケ（Pleurotus cornucopiae）はハラタケ目、ヒラタケ科に属するきのこで、日本、中国、ロシア等に分布する。このタモギタケは、子実体として初夏から秋にかけてニレ、ナラ、カエデ等の広葉樹の倒木や切り株等に群生し、食品として利用されている。 Cornucopiae (Pleurotus cornucopiae) Ha Ratake eyes, in the mushroom belonging to the pleurotaceae, Japan, China, distributed in Russia and other countries. This bamboo is grown as a fruiting body on fallen trees and stumps of broadleaf trees such as elm, oak, and maple from early summer to autumn, and is used as food.
タモギタケに関する生理活性機能としては、タモギタケの熱水抽出物について免疫活性増強作用及び抗腫瘍作用が報告されている（例えば、非特許文献１参照。）。また、タモギタケの緩衝液抽出物中に抗腫瘍活性を有するタンパク質が見出され、このタンパク質に関する遺伝子配列が提供されている（例えば、特許文献１参照。）。さらに、タモギタケ子実体から抽出される水溶性画分に由来する物質を有効成分とする血糖値上昇抑制食品素材について報告されている（例えば、特許文献２参照。）。 As a physiologically active function related to Tamogitake, a hot water extract of Tamogitake has been reported to have an immune activity enhancing action and an antitumor action (for example, see Non-Patent Document 1). In addition, a protein having antitumor activity has been found in the buffer extract of Tamogitake, and a gene sequence relating to this protein is provided (for example, see Patent Document 1). Furthermore, a blood sugar level elevation-suppressing food material containing a substance derived from a water-soluble fraction extracted from the fruit body of Tamogitake as an active ingredient has been reported (for example, see Patent Document 2).
ところで、日本における疾病による死亡原因の第１位は癌を含む悪性腫瘍であり、医療業界では癌の治療方法、医薬品、健康食品等が開発されているものの癌の撲滅には至っていない。このため、癌の治療に用いられる新しい医薬品等が望まれている。ここで、癌の治療に用いられるきのことしては、カワラタケ、アガリクスダケ、ヒメマツタケ、霊芝、マンネンタケ、マイタケ等が挙げられる。これらきのこやタモギタケはβ−１，３−グルカン等の生理活性を有するβ−グルカンを含有し、β−グルカンは生体に本来備わっている免疫系を活性化する免疫賦活作用に基づいて癌細胞を排除又は攻撃する作用を機序としている。
ところが、タモギタケ子実体に含有されているβ−グルカンは水不溶性のものが多く、水溶性β−グルカンは少ない。よって、タモギタケ子実体を直接摂取したときには、水不溶性β−グルカンは体内にほとんど吸収されないためにβ−グルカンの生体吸収性が低いという問題があった。一方、特許文献２の血糖値上昇抑制食品素材は、タモギタケ子実体から水溶性画分を抽出することにより製造されるためにβ−グルカンの抽出量が少なく、水溶性画分中のβ−グルカン量、特に生理活性を有するβ−１，３−グルカン量が少ない。このため、血糖値上昇抑制食品素材を摂取しても、β−グルカンの免疫賦活作用に基づく抗癌作用を発揮することができないという問題があった。また、免疫賦活作用等の生理活性がほとんどない構造のセルロースもβ−グルカンの一種として分類される等、製品に含有されるβ−グルカンの実際の組成等に起因する効果の有無の議論が不十分であった。 However, many β-glucans contained in the fruit bodies of Tamogitake are water-insoluble and few water-soluble β-glucans. Therefore, there is a problem that when the fruit body of Tamogitake is ingested directly, the water-insoluble β-glucan is hardly absorbed into the body, so that the bioabsorbability of β-glucan is low. On the other hand, since the food material for inhibiting blood sugar level elevation of Patent Document 2 is produced by extracting a water-soluble fraction from the fruit body of Tamogitake, the amount of β-glucan extracted is small, and β-glucan in the water-soluble fraction The amount, in particular, the amount of β-1,3-glucan having physiological activity is small. For this reason, even if it ingested the blood sugar level rise suppression food raw material, there existed a problem that the anticancer effect | action based on the immunostimulatory effect of (beta) -glucan cannot be exhibited. In addition, there is no debate about whether there is an effect due to the actual composition of β-glucan contained in the product, such as cellulose having a structure with little physiological activity such as immunostimulatory action is classified as a kind of β-glucan. It was enough.
本発明は、このような従来技術に存在する問題点に着目してなされたものである。その目的とするところは、優れた生体吸収性を有するとともに優れた免疫賦活作用に基づく抗癌作用を発揮することができるタモギタケ子実体組成物を有効成分として含有する免疫賦活剤、及び抗癌剤を提供することにある。 The present invention has been made paying attention to such problems existing in the prior art. It is an object of superior immunostimulating agent containing Pleurotus cornucopiae fruit body composition as an active ingredient can exert anticancer action based on excellent immunostimulatory activity and having a bioabsorbable, and anti-cancer agents Is to provide.
上記の目的を達成するために、請求項１に記載の発明の免疫賦活剤は、タモギタケ子実体組成物を有効成分として含有する免疫賦活剤において、前記タモギタケ子実体組成物は、タモギタケ子実体の粉砕物にエンドβ−グルカナーゼを加え、タモギタケ子実体中の水不溶性β−グルカンを加水分解して水溶性β−グルカンを生成させた後、次に熱水抽出により水溶性β−グルカンを抽出したものである。 In order to achieve the above object, the immunostimulant of the invention according to claim 1 is an immunostimulant containing a tamogitake fruiting body composition as an active ingredient, wherein the tamogitake fruiting body composition comprises end β- glucanase in addition to the pulverized product, after the water-insoluble β- glucan in cornucopiae fruit body to produce a hydrolyzed to soluble β- glucans, then extracted water-soluble β- glucans hot water extraction It is a thing.
請求項２に記載の発明の免疫賦活剤は、請求項１に記載の免疫賦活剤であって、前記タモギタケ子実体組成物は、分子量が５０００以上２００００未満の水溶性β−グルカンが水溶性β−グルカン全量に対して３０〜８０質量％含有している。 The immunostimulant of the invention described in claim 2 is the immunostimulator of claim 1 , wherein the Tamogitake fruiting body composition has a water-soluble β-glucan having a molecular weight of 5000 or more and less than 20000. -It contains 30-80 mass% with respect to the total amount of glucan.
請求項３に記載の発明の抗癌剤は、タモギタケ子実体組成物を有効成分として含有する抗癌剤において、前記タモギタケ子実体組成物は、タモギタケ子実体の粉砕物にエンドβ−グルカナーゼを加え、タモギタケ子実体中の水不溶性β−グルカンを加水分解して水溶性β−グルカンを生成させた後、次に熱水抽出により水溶性β−グルカンを抽出したものである。 The anticancer agent of the invention described in claim 3 is an anticancer agent containing a tamogita bamboo fruit body composition as an active ingredient, wherein the tamamotake mushroom fruit body composition is obtained by adding endo-β-glucanase to a pulverized product of tamamotake mushroom fruit body The water-insoluble β-glucan was hydrolyzed to produce water-soluble β-glucan , and then the water-soluble β-glucan was extracted by hot water extraction .
請求項４に記載の発明の抗癌剤は、請求項３に記載の抗癌剤において、前記タモギタケ子実体組成物は、分子量が５０００以上２００００未満の水溶性β−グルカンが水溶性β−グルカン全量に対して３０〜８０質量％含有している。 Anticancer invention described in 請 Motomeko 4 is the anticancer agent of claim 3, wherein the Pleurotus cornucopiae fruit body composition, water-soluble β- glucans having a molecular weight less than 5000 or more 20000 to water-soluble β- glucans total amount 30 to 80% by mass.
以上詳述したように、本発明によれば、次のような効果を奏する。
請求項１，２に記載の発明の免疫賦活剤又は請求項３，４に記載の発明の抗癌剤によれば、優れた生体吸収性を有するとともに優れた免疫賦活作用又は抗癌作用を発揮することができる。
As described in detail above, the present invention has the following effects.
According to the immunostimulant of the invention described in claims 1 and 2 or the anticancer agent of the invention described in claims 3 and 4 , it has excellent bioabsorbability and exhibits an excellent immunostimulatory action or anticancer action. Can do.
また、請求項１に記載の免疫賦活剤及び請求項３に記載の発明の抗癌剤によれば、タモギタケ子実体の粉砕物にエンドβ−グルカナーゼを加えた後、さらに熱水抽出するという簡単な操作で、水溶性β−グルカンを効率よく得ることができる。 Further, according to the anticancer agent of the invention described in adjuvants and claim 3 according to claim 1, after the addition of end-β- glucanase in pulverized Pleurotus cornucopiae fruit body, simple as further extracted with hot water operation Thus, water-soluble β-glucan can be obtained efficiently.
（第１実施形態）
以下、本発明を具体化した第１実施形態のタモギタケ子実体組成物について詳細に説明する。
(First embodiment)
Hereinafter, the Tamogitake fruiting body composition of 1st Embodiment which actualized this invention is demonstrated in detail.
本実施形態のタモギタケ子実体組成物には、水溶性β−１，３−グルカンを含む水溶性β−グルカンが含有されている。このタモギタケ子実体組成物は、抗癌剤、免疫賦活剤、食品製剤又は化粧品の原料等として利用される。 The bamboo shoot fruit body composition of the present embodiment contains water-soluble β-glucan including water-soluble β-1,3-glucan. This Tamogitake fruiting body composition is used as an anticancer agent, an immunostimulant, a food preparation or a raw material for cosmetics.
タモギタケはハラタケ目、ヒラタケ科に属し、日本、中国、ロシア等に分布している。このタモギタケの子実体、即ちタモギタケ子実体にはＤ−グルコースが重合することにより形成される多糖類のβ−グルカンが含有され、β−グルカンは優れた免疫賦活作用や抗酸化作用等の生理活性を有している。β−グルカンの具体例としては、免疫賦活作用等の生理活性を有しているβ−１，３−グルカンやβ−１，６−グルカン等が挙げられ、タモギタケ子実体１００ｇ中のβ−グルカンの含有量は例えば１５ｇであり、β−１，３−グルカンの含有量は例えば９ｇである。 Cornucopiae belongs Ha Ratake eyes, to pleurotaceae, Japan, China, are distributed in Russia and other countries. The fruit body of Tamogitake, that is, the fruit body of Tamogitake contains β-glucan which is a polysaccharide formed by polymerization of D-glucose. have. Specific examples of β-glucan include β-1,3-glucan and β-1,6-glucan having physiological activities such as immunostimulatory action, and β-glucan in 100 g of Tamogitake fruiting body. The content of is, for example, 15 g, and the content of β-1,3-glucan is, for example, 9 g.
β−グルカンは、Ｄ−グルコースの重合度が高いもの、即ち分子量が1,000,000等のように高分子量のものは水に対して不溶性を示し、Ｄ−グルコースの重合度が低いもの、即ち分子量が５０００等のように低分子量のものは水溶性を示す。ここで、β−グルカンの生理活性は、生体内に吸収された後に発揮される。このため、タモギタケ子実体組成物は、経口摂取等されたときにβ−グルカンの生体吸収性を高めるために、水不溶性β−グルカンではなく水溶性β−グルカンを含有する必要がある。 β-glucan has a high degree of polymerization of D-glucose, that is, a high molecular weight such as a molecular weight of 1,000,000, etc., and is insoluble in water, and has a low degree of polymerization of D-glucose, that is, a molecular weight of 5000. Those having a low molecular weight such as are water-soluble. Here, the physiological activity of β-glucan is exhibited after being absorbed into the living body. For this reason, in order to increase the bioabsorbability of β-glucan when ingested orally, the Tamogitake fruit body composition needs to contain water-soluble β-glucan instead of water-insoluble β-glucan.
タモギタケ子実体組成物中の水溶性β−グルカンの含有量は０．４〜１０質量％、好ましくは１〜５質量％である。ここで、β−グルカンは、その優れた免疫賦活作用により生体の免疫系を活性化し、癌細胞を排除又は攻撃することにより抗癌作用を発揮する。このため、水溶性β−グルカンの含有量が０．４質量％未満では、生体内に吸収されるβ−グルカン量が少ないために生体の免疫系を活性化することができず、抗癌作用を発揮することができない。一方、１０質量％を超えると、タモギタケ子実体から水溶性β−グルカンを得るのに時間を要し、タモギタケ子実体組成物の製造効率が低下するおそれがある。 The content of water-soluble β-glucan in the Tamogitake fruiting body composition is 0.4 to 10% by mass, preferably 1 to 5% by mass. Here, β-glucan activates the immune system of the living body by its excellent immunostimulatory action, and exhibits anticancer action by eliminating or attacking cancer cells. For this reason, if the content of water-soluble β-glucan is less than 0.4% by mass, the amount of β-glucan absorbed in the living body is small, and thus the living body's immune system cannot be activated, resulting in anticancer activity. Can not demonstrate. On the other hand, if it exceeds 10% by mass, it takes time to obtain a water-soluble β-glucan from the fruit body of Tamogitake, and the production efficiency of the Tamogitake fruit body composition may be reduced.
さらに、水溶性β−１，３−グルカンは、水溶性β−グルカン全量に対して２０〜８０質量％、好ましくは４０〜８０質量％である。ここで、β−グルカンの具体例としてはβ−１，３−グルカンや生理活性を有していないβ−１，４−グルカン（セルロース）等が挙げられ、β−グルカンの優れた免疫賦活作用はβ−１，３−グルカン等が有している免疫賦活作用に起因している。このため、水溶性β−１，３−グルカンが水溶性β−グルカン全量に対して２０質量％未満では、生体内に吸収されるβ−１，３−グルカン量が少ないためにβ−グルカンの免疫賦活作用は低く、生体の免疫系を活性化することができず抗癌作用を発揮することができない。一方、８０質量％を超えると、タモギタケ子実体から水溶性β−１，３−グルカンを得るのに時間を要し、タモギタケ子実体組成物の製造効率が低下するおそれがある。 Furthermore, the water-soluble β-1,3-glucan is 20 to 80% by mass, preferably 40 to 80% by mass, based on the total amount of the water-soluble β-glucan. Here, specific examples of β-glucan include β-1,3-glucan and β-1,4-glucan (cellulose) having no physiological activity, and β-glucan has an excellent immunostimulatory action. Is caused by the immunostimulatory action of β-1,3-glucan and the like. For this reason, if the amount of water-soluble β-1,3-glucan is less than 20% by mass relative to the total amount of water-soluble β-glucan, the amount of β-1,3-glucan absorbed in the living body is small. The immunostimulatory action is low, the body's immune system cannot be activated, and the anticancer action cannot be exhibited. On the other hand, when it exceeds 80% by mass, it takes time to obtain water-soluble β-1,3-glucan from Tamogitake fruit bodies, and the production efficiency of the Tamogitake fruit body composition may be reduced.
加えて、分子量が５０００以上２００００未満の水溶性β−グルカンは、水溶性β−グルカン全量に対して３０〜８０質量％が好ましく、４０〜８０質量％がより好ましい。ここで、水溶性β−グルカン中にはＤ−グルコースの重合度に応じて分子量が種々のものがあり、分子量が低いものは水に対する溶解性が高く生体吸収性に優れている。このため、分子量が前記範囲の水溶性β−グルカンの含有量が３０質量％未満では、水に対する溶解性が低下し生体吸収性が劣るおそれがある。一方、８０質量％を超えると、分子量が前記範囲の水溶性β−グルカンを得るのに時間を要し、タモギタケ子実体組成物の製造効率が低下するおそれがある。 In addition, the water-soluble β-glucan having a molecular weight of 5000 or more and less than 20000 is preferably 30 to 80% by mass, and more preferably 40 to 80% by mass with respect to the total amount of water-soluble β-glucan. Here, water-soluble β-glucan has various molecular weights depending on the degree of polymerization of D-glucose, and those having a low molecular weight are highly soluble in water and excellent in bioabsorbability. For this reason, when the content of the water-soluble β-glucan having a molecular weight in the above range is less than 30% by mass, the solubility in water is lowered and the bioabsorbability may be deteriorated. On the other hand, if it exceeds 80% by mass, it takes time to obtain a water-soluble β-glucan having a molecular weight in the above range, and the production efficiency of the Tamamogi bamboo fruit body composition may be lowered.
タモギタケ子実体組成物には、その他の添加成分として、結合剤、賦形剤、甘味剤、香味剤等を含有させてもよい。タモギタケ子実体中のその他の添加成分の含有量は常法に従って決定される。 The Tamogitake fruiting body composition may contain a binder, an excipient, a sweetening agent, a flavoring agent, and the like as other additive components. The content of other additive components in the fruit body of Tamogitake is determined according to a conventional method.
タモギタケ子実体組成物は、水溶性β−グルカン等の水溶性成分のみによって構成されているときには、１５〜３０℃での水１００重量部に対する溶解量は１０〜２０重量部が好ましく、１２〜２０重量部がより好ましく、１５〜２０重量部がさらに好ましい。タモギタケ子実体組成物の溶解量が１０重量部未満では、タモギタケ子実体組成物を原料として飲料品を製造したときに、飲料品の保存時にタモギタケ子実体組成物が析出して保存安定性が低下するおそれがある。一方、２０重量部を超えても、保存安定性をそれ以上向上させることができない。 When the Tamogitake fruiting body composition is composed only of water-soluble components such as water-soluble β-glucan, the amount dissolved in 100 parts by weight of water at 15 to 30 ° C. is preferably 10 to 20 parts by weight, Part by weight is more preferable, and 15 to 20 parts by weight is further preferable. When the amount of the Tamogitake fruit body composition dissolved is less than 10 parts by weight, when the beverage is produced using the Tamogitake fruit body composition as a raw material, the storage stability of the Tamogitake fruit body composition is reduced during storage of the beverage. There is a risk. On the other hand, even if it exceeds 20 parts by weight, the storage stability cannot be further improved.
さて、タモギタケ子実体組成物を製造するときには、まずタモギタケ子実体を採取する。タモギタケ子実体は日本や中国等のアジア諸国、フランス、ロシア等のヨーロッパ諸国、アフリカ諸国、北アメリカ諸国、南アメリカ諸国、オセアニア諸国いずれの産地のものであってもよい。タモギタケ子実体は天然栽培又は人工栽培のいずれでもよいが、β−グルカンの含有量を高めるために、太陽光を十分に浴びたものが好ましい。 Now, when manufacturing a Tamogitake fruit body composition, a Tamogitake fruit body is first extract | collected. The fruit body of Tamogitake may originate from any of the Asian countries such as Japan and China, European countries such as France and Russia, African countries, North American countries, South American countries, and Oceanian countries. The fruit body of Tamogitake may be either natural or artificial, but in order to increase the content of β-glucan, those that have been sufficiently exposed to sunlight are preferred.
タモギタケ子実体は、採取された状態のままのもの又は採取された後に乾燥されたもののいずれでもよいが、保存性が高いとともに粉砕が容易なために、採取された後に乾燥されたものが好ましい。一方、採取された状態のままのタモギタケ子実体を次の工程で使用するときには、タモギタケ子実体は、微生物が繁殖するのを防止するために、次の工程で使用されるまでの間冷蔵保存又は冷凍保存されるのが好ましい。 The fruit body of Tamogitake may be either as it is collected or dried after being collected, but it is preferable to be dried after being collected because of its high storage stability and easy pulverization. On the other hand, when the fruit body is used in the next step, the fruit body is stored refrigerated until it is used in the next process in order to prevent microorganisms from breeding. It is preferably stored frozen.
タモギタケ子実体の乾燥としては、自然光による天日乾燥、乾燥器又は温風乾燥器を用いた乾燥等が挙げられる。ここで、天日乾燥の場合には、乾燥時間は６〜７２時間が好ましく、１２〜４８時間がより好ましい。また、乾燥器等を用いた乾燥の場合には、乾燥時間は１〜７２時間が好ましく、６〜４８時間がより好ましく、１２〜２４時間がさらに好ましい。タモギタケ子実体の乾燥時間が前記範囲未満では、採取したタモギタケ子実体を十分に乾燥することができない。一方、前記範囲を超えると、タモギタケ子実体の乾燥に時間を要しタモギタケ子実体組成物の製造効率が低下するおそれがある。 Examples of the drying of the fruit body of Tamogitake include sun drying by natural light, drying using a dryer or a warm air dryer, and the like. Here, in the case of sun drying, the drying time is preferably 6 to 72 hours, and more preferably 12 to 48 hours. In the case of drying using a drier or the like, the drying time is preferably 1 to 72 hours, more preferably 6 to 48 hours, and further preferably 12 to 24 hours. If the drying time of the Tamogitake fruiting body is less than the above range, the collected Tamogitake fruiting body cannot be sufficiently dried. On the other hand, if it exceeds the above range, it takes time to dry the Tamogitake fruit body, and the production efficiency of the Tamogitake fruit body composition may be reduced.
次いで、タモギタケ子実体を大まかに裁断した後に石臼、木臼、電気式粉砕機等の粉砕装置を用いて粉砕し、タモギタケ子実体の粉砕物、即ちタモギタケ子実体粉砕物を得る。このタモギタケ子実体粉砕物は、吸湿や微生物が繁殖するのを防止するために、次の工程で使用されるまでの間乾燥機やデシケータ内等で保管されるのが好ましい。 Next, the Tamogitake fruit body is roughly cut and then pulverized using a pulverizer such as a stone mill, a wooden mill, or an electric pulverizer to obtain a pulverized product of Tamogitake fruit body, that is, a Tamogitake fruit body pulverized product. In order to prevent moisture absorption and propagation of microorganisms, the pulverized fruit body of Tamogitake is preferably stored in a dryer or desiccator until it is used in the next step.
続いて、タモギタケ子実体粉砕物に蒸留水等やｐＨが調整された緩衝液等の水系溶剤を加え、タモギタケ子実体粉砕物の分散液を得る。このとき、タモギタケ子実体粉砕物に含有されている水溶性β−１，３−グルカン等の水溶性β−グルカン等は水系溶剤に溶解し、水不溶性β−グルカン等は水系溶剤中に分散する。 Subsequently, an aqueous solvent such as distilled water or a pH-adjusted buffer solution is added to the pulverized Tamogittake fruiting substance to obtain a dispersion of the Tamogitake fruiting substance. At this time, water-soluble β-glucan such as water-soluble β-1,3-glucan contained in the pulverized fruit body of Tamogitake is dissolved in an aqueous solvent, and water-insoluble β-glucan is dispersed in the aqueous solvent. .
タモギタケ子実体粉砕物に加える水系溶剤の量は、タモギタケ子実体粉砕物の質量に対して５〜２０倍量が好ましい。タモギタケ子実体粉砕物に加える水系溶剤が５倍量未満では、タモギタケ子実体粉砕物を水系溶剤に十分に分散させることができない。一方、２０倍量を超えると、タモギタケ子実体粉砕物の分散液の量が多くなるために、タモギタケ子実体組成物の製造が煩雑になる。 The amount of the aqueous solvent added to the ground product of Tamogitake fruit body is preferably 5 to 20 times the mass of the ground product of Tamogitake fruit body. If the amount of the aqueous solvent added to the ground product of Tamogitake fruit body is less than 5 times, the ground product of Tamogitake fruit body cannot be sufficiently dispersed in the aqueous solvent. On the other hand, when the amount exceeds 20 times, the amount of the dispersion of the pulverized product of Tamogitake fruit body increases, so that the production of the Tamogitake fruit body composition becomes complicated.
そして、タモギタケ子実体粉砕物の分散液にエンドβ−グルカナーゼを添加した後、加温して酵素処理を行う。ここで、エンドβ−グルカナーゼはβ−グルカン、特にβ−１，３−グルカンをその中間部分から加水分解して低分子化させる。β−グルカナーゼにはエンドβ−グルカナーゼの他にエキソβ−グルカナーゼが挙げられ、エキソβ−グルカナーゼはエンドβ−グルカナーゼと同様にβ−グルカンを加水分解して低分子化させる。しかし、エキソβ−グルカナーゼはβ−グルカンをその末端から加水分解し、低分子化したβ−グルカンはその生理活性が失活する。このため、エキソβ−グルカナーゼはβ−グルカンをその生理活性を維持した状態で低分子化させることができないために、β−グルカンの低分子化にはエンドβ−グルカナーゼを用いる必要がある。エンドβ−グルカナーゼの具体例としては、食品加工用又は医薬品製造用として用いられるグレイナーゼＶ３（大和化成株式会社製の製品名）等が挙げられる。 Then, endo-β-glucanase is added to the dispersion of the pulverized fruit body of Tamogitake, followed by heating and enzyme treatment. Here, endo β-glucanase hydrolyzes β-glucan, in particular β-1,3-glucan, from its intermediate portion to lower the molecular weight. Examples of β-glucanase include exo β-glucanase in addition to endo β-glucanase, and exo β-glucanase hydrolyzes β-glucan to reduce its molecular weight in the same manner as endo β-glucanase. However, exo β-glucanase hydrolyzes β-glucan from its terminal, and β-glucan having a low molecular weight loses its physiological activity. For this reason, since exo β-glucanase cannot reduce the molecular weight of β-glucan while maintaining its physiological activity, it is necessary to use endo β-glucanase for reducing the molecular weight of β-glucan. Specific examples of endo β-glucanase include Grainase V3 (product name, manufactured by Daiwa Kasei Co., Ltd.) used for food processing or pharmaceutical production.
分散液にエンドβ−グルカナーゼを加えたときには、水系溶剤に溶解している水溶性β−グルカンがエンドβ−グルカナーゼによって低分子化されることにより、水系溶剤に溶解している水溶性β−グルカンの分子量分布は低分子側にシフトする。さらに、水系溶剤中に分散している水不溶性β−グルカンがエンドβ−グルカナーゼによって加水分解されて低分子化することにより、水溶性β−グルカンを得ることができる。 When endo β-glucanase is added to the dispersion, the water-soluble β-glucan dissolved in the aqueous solvent is reduced in molecular weight by the endo β-glucanase, so that the water-soluble β-glucan dissolved in the aqueous solvent is added. The molecular weight distribution of is shifted to the low molecular side. Furthermore, water-insoluble β-glucan dispersed in an aqueous solvent is hydrolyzed by endo β-glucanase to reduce the molecular weight, whereby water-soluble β-glucan can be obtained.
エンドβ−グルカナーゼの添加量は、タモギタケ子実体の質量に対して０．１〜５質量％が好ましく、０．５〜３質量％がより好ましい。エンドβ−グルカナーゼの添加量が０．１質量％未満では、β−グルカンを十分に加水分解することできない。一方、５質量％を超えると、エンドβ−グルカナーゼによる加水分解のコントロールが困難になるとともに、タモギタケ子実体組成物の製造コストが嵩むおそれがある。 The amount of endo β-glucanase added is preferably 0.1 to 5% by mass, and more preferably 0.5 to 3% by mass with respect to the mass of the tamogitake fruit body. If the amount of endo β-glucanase added is less than 0.1% by mass, β-glucan cannot be sufficiently hydrolyzed. On the other hand, when it exceeds 5% by mass, it is difficult to control hydrolysis with endo-β-glucanase, and the production cost of the tamogitake fruiting body composition may increase.
酵素処理における温度は２０〜５５℃が好ましく、３０〜５５℃がより好ましく、４０〜５５℃がさらに好ましい。また、酵素処理時間は１〜２４時間が好ましく、２〜１２時間がより好ましく、４〜８時間がさらに好ましい。酵素処理における温度又は酵素処理時間が前記範囲未満では、β−グルカンを十分に加水分解することができない。一方、酵素処理における温度が５５℃を超えるとエンドβ−グルカナーゼの酵素活性が低下するおそれがあり、酵素処理時間が２４時間を超えると酵素処理に時間を要しタモギタケ子実体組成物の製造効率が低下するおそれがある。 The temperature in the enzyme treatment is preferably 20 to 55 ° C, more preferably 30 to 55 ° C, and further preferably 40 to 55 ° C. The enzyme treatment time is preferably 1 to 24 hours, more preferably 2 to 12 hours, and further preferably 4 to 8 hours. When the temperature or the enzyme treatment time in the enzyme treatment is less than the above range, β-glucan cannot be sufficiently hydrolyzed. On the other hand, if the temperature in the enzyme treatment exceeds 55 ° C., the enzyme activity of endo β-glucanase may be reduced. May decrease.
次いで、分散液を９０℃以上に加熱してエンドβ−グルカナーゼを失活させ、タモギタケ子実体酵素処理液を得る。続いて、タモギタケ子実体酵素処理液を撹拌しながら水を加えるとともに加熱して熱水抽出を行い、水系溶剤に未溶解の水溶性β−グルカナーゼを熱水中に抽出してタモギタケ子実体酵素処理熱水抽出液を得る。 Next, the dispersion is heated to 90 ° C. or higher to inactivate endo β-glucanase to obtain a Tamogitake fruit body enzyme treatment solution. Subsequently, water is added while stirring the Tamogitake fruiting enzyme treatment solution and heated to perform hot water extraction, and water-soluble β-glucanase undissolved in an aqueous solvent is extracted into hot water to treat Tamogitake fruiting enzyme. A hot water extract is obtained.
タモギタケ子実体酵素処理液に加える水の量は、タモギタケ子実体の質量に対して５〜２０倍量が好ましい。水の量が５倍量未満では、熱水抽出における水の量が少ないために、未溶解の水溶性β−グルカナーゼを十分に抽出することができない。一方、２０倍量を超えると、タモギタケ子実体酵素処理熱水抽出液の量が多くなるために、タモギタケ子実体組成物の製造が煩雑になる。 The amount of water added to the Tamogitake fruiting body treatment solution is preferably 5 to 20 times the mass of the Tamogitake fruiting body. If the amount of water is less than 5 times, the amount of water in hot water extraction is small, so that undissolved water-soluble β-glucanase cannot be sufficiently extracted. On the other hand, when the amount exceeds 20 times, the amount of the hot water extract treated with Tamogitake fruit body enzyme increases, so that the production of the Tamogitake fruit body composition becomes complicated.
熱水抽出における抽出温度は６０〜１００℃が好ましく、８０〜１００℃がより好ましい。さらに、抽出時間は１〜６時間が好ましく、２〜４時間がより好ましい。抽出温度又は抽出時間が前記範囲未満では、水溶性β−グルカナーゼを熱水中に十分に抽出することができない。一方、抽出温度が１００℃を超えてもそれ以上抽出効率を向上させることができず、抽出時間が６時間を超えると熱水抽出に時間を要しタモギタケ子実体組成物の製造効率が低下するおそれがある。タモギタケ子実体酵素処理液の撹拌には、プロペラ式攪拌装置、振とう攪拌装置、回転式減圧蒸留装置、磁気回転装置（マグネチックスターラー）等が用いられる。 60-100 degreeC is preferable and, as for the extraction temperature in hot water extraction, 80-100 degreeC is more preferable. Furthermore, the extraction time is preferably 1 to 6 hours, more preferably 2 to 4 hours. When the extraction temperature or the extraction time is less than the above range, the water-soluble β-glucanase cannot be sufficiently extracted into hot water. On the other hand, even if the extraction temperature exceeds 100 ° C., the extraction efficiency cannot be further improved. If the extraction time exceeds 6 hours, it takes time for hot water extraction, and the production efficiency of the tamogitake fruiting body composition decreases. There is a fear. A propeller type stirring device, a shaking stirring device, a rotary vacuum distillation device, a magnetic rotating device (magnetic stirrer), or the like is used for stirring the Tamogitake fruiting body enzyme treatment solution.
そして、タモギタケ子実体酵素処理熱水抽出液から固液分離によって抽出液を得た後に抽出液を濃縮又は乾燥し、必要に応じてその他の添加成分を添加してタモギタケ子実体組成物を製造する。抽出液の濃縮には減圧蒸留装置等が用いられ、乾燥には真空乾燥機、真空凍結乾燥機等が用いられる。 Then, after obtaining the extract by solid-liquid separation from the Tamogitake fruit body enzyme-treated hot water extract, the extract is concentrated or dried, and if necessary, other additive components are added to produce a Tamogitake fruit body composition. . A vacuum distillation apparatus or the like is used for concentration of the extract, and a vacuum dryer, a vacuum freeze dryer, or the like is used for drying.
タモギタケ子実体組成物を摂取したときには、水溶性β−１，３−グルカン等の水溶性β−グルカンがタモギタケ子実体組成物中に上記範囲で含有されているために、タモギタケ子実体組成物は優れた生体吸収性を有している。さらに、生体内に吸収された水溶性β−グルカンが優れた免疫賦活作用を発揮して生体の免疫系を活性化することにより、抗癌作用を発揮することができる。 When the Tamogitake fruit body composition is ingested, water-soluble β-glucan such as water-soluble β-1,3-glucan is contained in the above range in the Tamogitake fruit body composition. Excellent bioabsorbability. Furthermore, when the water-soluble β-glucan absorbed in the living body exhibits an excellent immunostimulating action and activates the living body's immune system, an anticancer action can be exhibited.
前記の実施形態によって発揮される効果について、以下に記載する。
・ 第１の実施形態のタモギタケ子実体組成物は、水溶性β−１，３−グルカンを含む水溶性β−グルカンを含有している。水溶性β−グルカンはタモギタケ子実体を原料として得られ、タモギタケ子実体組成物中の含有量は０．４〜１０質量％である。さらに、水溶性β−１，３−グルカンは、水溶性β−グルカン全量に対して２０〜８０質量％である。このため、タモギタケ子実体組成物は優れた生体吸収性を有している。さらに、生体内に吸収されたβ−グルカンが優れた免疫賦活作用を発揮することにより、タモギタケ子実体組成物は生体の免疫系を活性化して抗癌作用を発揮することができる。
The effects exhibited by the above embodiment will be described below.
-The Tamogitake fruiting body composition of 1st Embodiment contains the water-soluble beta-glucan containing water-soluble beta-1, 3-glucan. Water-soluble β-glucan is obtained using Tamogitake fruit bodies as a raw material, and its content in the Tamogitake fruit body composition is 0.4 to 10% by mass. Furthermore, the water-soluble β-1,3-glucan is 20 to 80% by mass with respect to the total amount of the water-soluble β-glucan. For this reason, the Tamogitake fruiting body composition has excellent bioabsorbability. Furthermore, the β-glucan absorbed in the living body exhibits an excellent immunostimulatory action, so that the Tamogitake fruiting body composition can activate the living body's immune system and exhibit an anticancer action.
・ 水溶性β−グルカンにおいて、分子量が５０００以上２００００未満の水溶性β−グルカンが水溶性β−グルカン全量に対して３０〜８０質量％に設定されているのが好ましい。この場合には、水溶性β−グルカンの水に対する溶解性を向上させることにより、生体吸収性を向上させることができる。 In the water-soluble β-glucan, the water-soluble β-glucan having a molecular weight of 5000 or more and less than 20000 is preferably set to 30 to 80% by mass with respect to the total amount of the water-soluble β-glucan. In this case, bioabsorbability can be improved by improving the solubility of water-soluble β-glucan in water.
・ タモギタケ子実体組成物は、タモギタケ子実体粉砕物の分散液にエンドβ−グルカナーゼを添加し、水不溶性β−グルカンを加水分解して水溶性β−グルカンを得た後、熱水抽出により水溶性β−グルカンを抽出することにより製造される。このため、タモギタケ子実体粉砕物の分散液にエンドβ−グルカナーゼを添加するという簡単な操作で、水溶性β−グルカンを効率よく得ることができる。さらに、熱水抽出により、水溶性β−グルカンをより効率よく得ることができる。 -Tomotake mushroom fruit body composition is obtained by adding endo β-glucanase to a dispersion of pulverized mushroom fruit bodies and hydrolyzing water-insoluble β-glucan to obtain water-soluble β-glucan, followed by hot water extraction. It is produced by extracting sex β-glucan. For this reason, water-soluble β-glucan can be efficiently obtained by a simple operation of adding endo β-glucanase to the dispersion of the pulverized fruit body of Tamogitake. Furthermore, water-soluble β-glucan can be obtained more efficiently by hot water extraction.
（第２実施形態）
以下、本発明を具体化した第２実施形態の免疫賦活剤について、第１実施形態のタモギタケ子実体組成物と異なる点を中心に説明する。
(Second Embodiment)
Hereinafter, the immunostimulant of the second embodiment that embodies the present invention will be described focusing on differences from the Tamogitake fruiting body composition of the first embodiment.
本実施形態の免疫賦活剤には、第１実施形態のタモギタケ子実体組成物が有効成分として含有されている。この免疫賦活剤はタモギタケ子実体組成物中の水溶性β−グルカンに基づく免疫賦活作用を発揮し、医薬品又は医薬部外品として用いられる。 In the immunostimulant of this embodiment, the Tamogitake fruiting body composition of 1st Embodiment is contained as an active ingredient. This immunostimulant exhibits an immunostimulatory action based on the water-soluble β-glucan in the Tamogitake fruiting body composition, and is used as a pharmaceutical or a quasi-drug.
免疫賦活剤中のタモギタケ子実体組成物の含有量は０．１〜２０質量％が好ましく、１〜１５質量％がより好ましく、５〜１０質量％がさらに好ましい。タモギタケ子実体組成物の含有量が０．１質量％未満では、水溶性β−グルカンの含有量が低く免疫賦活作用を発揮することができない。一方、２０質量％を超えると、免疫賦活剤がその他の添加成分として免疫賦活剤の安定性の向上に寄与する成分を含有するときに、その成分の含有量が減少することによって免疫賦活剤の安定性が低下するおそれがある。免疫賦活剤の８０〜９９．９質量％は、その他の添加成分である。その他の添加成分の具体例としては、結合剤、賦形剤、滑沢剤、膨化剤、甘味剤、香味剤等が挙げられる。 0.1-20 mass% is preferable, as for content of the Tamogitake fruiting body composition in an immunostimulant, 1-15 mass% is more preferable, and 5-10 mass% is further more preferable. If the content of the Tamogitake fruiting body composition is less than 0.1% by mass, the content of water-soluble β-glucan is low and an immunostimulatory action cannot be exhibited. On the other hand, when the content exceeds 20% by mass, when the immunostimulant contains a component that contributes to the improvement of the stability of the immunostimulant as another additive component, the content of the component decreases, thereby reducing the content of the immunostimulant. Stability may be reduced. 80-99.9 mass% of an immunostimulant is another additive component. Specific examples of other additive components include a binder, an excipient, a lubricant, a swelling agent, a sweetening agent, and a flavoring agent.
免疫賦活剤は、医薬品として用いられるときには、経口剤又は非経口剤として構成され、経口剤の剤型としては錠剤、カプセル剤、散剤、シロップ剤、ドリンク剤等が挙げられる。免疫賦活剤は、錠剤として構成されるときにはその他の添加成分として例えば結合剤、賦形剤、滑沢剤、膨化剤、甘味剤、香味剤等が含有され、その表面がシェラック又は砂糖で被覆されてもよい。また、免疫賦活剤は、カプセル剤として構成されるときには例えば前記錠剤におけるその他の添加成分に加えて油脂等の液体担体が含有され、シロップ剤又はドリンク剤として構成されるときにはその他の添加成分として例えば甘味剤、防腐剤、色素香味剤等が含有される。 When used as a pharmaceutical, the immunostimulant is configured as an oral preparation or a parenteral preparation, and examples of the dosage form of the oral preparation include tablets, capsules, powders, syrups, and drinks. When configured as a tablet, the immunostimulant contains other additives such as a binder, an excipient, a lubricant, a swelling agent, a sweetening agent, a flavoring agent, etc., and the surface thereof is coated with shellac or sugar. May be. Further, when the immunostimulant is configured as a capsule, for example, it contains a liquid carrier such as fats and oils in addition to other additive components in the tablet, and when configured as a syrup or drink, for example, as other additive components Contains sweetening agents, preservatives, pigment flavoring agents and the like.
一方、非経口剤の剤型としては、軟膏剤、クリーム剤、水剤等の外用剤の他に注射剤等が挙げられる。免疫賦活剤は、外用剤として構成されるときにはその他の添加成分としてワセリン、パラフィン、油脂類、ラノリン、マクロゴールド等が含有される。また、注射剤には液剤や凍結乾燥剤等があり、免疫賦活剤は、凍結乾燥剤として構成されるときには生理食塩水や等張液等に無菌的に溶解して用いられる。免疫賦活剤は、医薬部外品として用いられるときには錠剤、カプセル剤、ドリンク剤、石鹸、歯磨き粉等に配合される。この免疫賦活剤は、タモギタケ子実体組成物等を撹拌し混和することによって製造される。 On the other hand, examples of dosage forms for parenterals include injections in addition to external preparations such as ointments, creams, and liquids. When configured as an external preparation, the immunostimulant contains petrolatum, paraffin, fats, lanolin, macro gold and the like as other additive components. Injectables include solutions and freeze-dried agents, and immunostimulants are used aseptically dissolved in physiological saline, isotonic solutions and the like when configured as freeze-dried agents. When used as a quasi-drug, the immunostimulant is blended in tablets, capsules, drinks, soaps, toothpastes and the like. This immunostimulant is produced by stirring and mixing the Tamogitake fruiting body composition or the like.
従って、第２実施形態の免疫賦活剤は、第１実施形態のタモギタケ子実体組成物を含有することにより優れた生体吸収性を有しているとともに、水溶性β−グルカンによって優れた免疫賦活作用を発揮することができる。 Therefore, the immunostimulant of the second embodiment has excellent bioabsorbability by containing the Tamogitake fruiting body composition of the first embodiment, and also has an excellent immunostimulatory action by water-soluble β-glucan. Can be demonstrated.
（第３実施形態）
以下、本発明を具体化した第３実施形態の抗癌剤について、第２実施形態の免疫賦活剤と異なる点を中心に説明する。
(Third embodiment)
Hereinafter, the anticancer agent of the third embodiment that embodies the present invention will be described focusing on differences from the immunostimulator of the second embodiment.
本実施形態の抗癌剤には、第１実施形態のタモギタケ子実体組成物が有効成分として含有されている。この抗癌剤は、タモギタケ子実体組成物中の水溶性β−グルカンの優れた免疫賦活作用により抗癌作用を発揮し、医薬品又は医薬部外品として用いられる。 The anticancer agent of the present embodiment contains the Tamogitake fruiting body composition of the first embodiment as an active ingredient. This anticancer agent exhibits an anticancer effect due to the excellent immunostimulatory action of the water-soluble β-glucan in the Tamogitake fruiting body composition, and is used as a pharmaceutical or a quasi-drug.
抗癌剤中のタモギタケ子実体組成物の含有量は０．１〜２０質量％が好ましく、１〜１５質量％がより好ましく、５〜１０質量％がさらに好ましい。タモギタケ子実体組成物の含有量が０．１質量％未満では、水溶性β−グルカンの含有量が低く抗癌作用を発揮することができない。一方、２０質量％を超えると、抗癌剤がその他の添加成分として抗癌剤の安定性の向上に寄与する成分を含有するときに、その成分の含有量が減少することによって抗癌剤の安定性が低下するおそれがある。抗癌剤の８０〜９９．９質量％は、その他の添加成分である。 0.1-20 mass% is preferable, as for content of the Tamogitake fruiting body composition in an anticancer agent, 1-15 mass% is more preferable, and 5-10 mass% is further more preferable. If the content of the Tamogitake fruiting body composition is less than 0.1% by mass, the content of the water-soluble β-glucan is low and the anticancer action cannot be exhibited. On the other hand, when the content exceeds 20% by mass, when the anticancer agent contains a component that contributes to the improvement of the stability of the anticancer agent as another additive component, the stability of the anticancer agent may decrease due to a decrease in the content of the component. There is. 80-99.9 mass% of an anticancer agent is another additive component.
従って、第３実施形態の抗癌剤は、第１実施形態のタモギタケ子実体組成物を含有することにより優れた生体吸収性を有しているとともに、水溶性β−グルカンの優れた免疫賦活作用による生体の免疫系の活性化により、抗癌作用を発揮することができる。 Therefore, the anticancer agent of the third embodiment has excellent bioabsorbability due to the inclusion of the Tamogitake fruiting body composition of the first embodiment, and the living body due to the excellent immunostimulatory action of water-soluble β-glucan. By activating the immune system, anticancer activity can be exerted.
（第４実施形態）
以下、本発明を具体化した第４実施形態の食品製剤について、第２実施形態の免疫賦活剤と異なる点を中心に説明する。
(Fourth embodiment)
Hereinafter, the food formulation of 4th Embodiment which actualized this invention is demonstrated centering on a different point from the immunostimulant of 2nd Embodiment.
本実施形態の食品製剤には、第１実施形態のタモギタケ子実体組成物が含有され、この食品製剤はタモギタケ子実体組成物中の水溶性β−グルカンの優れた免疫賦活作用を経て発癌防止作用を発揮する。食品製剤中のタモギタケ子実体組成物の含有量は０．１〜２０質量％が好ましく、１〜１５質量％がより好ましく、５〜１０質量％がさらに好ましい。タモギタケ子実体組成物の含有量が０．１質量％未満では、水溶性β−グルカンの含有量が低く発癌防止作用を発揮することができない。一方、２０質量％を超えると、食品製剤がその他の添加成分として基材を含有するときに、基材の含有量が減少することによって食品製剤としての形態を維持することができなくなるおそれがある。食品製剤の８０〜９９．９質量％は、その他の添加成分である。その他の添加成分の具体例としては、基材、賦形剤、添加剤、副素材、増量剤等が挙げられる。食品製剤の形態は粉末状、錠剤状、ドリンク剤等の液状、カプセル状等が挙げられ、具体的には飴、せんべい、クッキー、各種飲料等の形態を採用することができる。 The food preparation of this embodiment contains the Tamogitake fruiting body composition of the first embodiment, and this food preparation has an anti-carcinogenic action through the excellent immunostimulatory action of the water-soluble β-glucan in the Tamogitake fruiting body composition. Demonstrate. The content of the Tamogitake fruiting body composition in the food preparation is preferably 0.1 to 20% by mass, more preferably 1 to 15% by mass, and still more preferably 5 to 10% by mass. If the content of the Tamogitake fruiting body composition is less than 0.1% by mass, the content of water-soluble β-glucan is so low that it cannot exert a carcinogenic preventing action. On the other hand, when the content exceeds 20% by mass, when the food preparation contains a base material as another additive component, the form of the food preparation may not be maintained due to a decrease in the content of the base material. . 80 to 99.9% by mass of the food preparation is another additive component. Specific examples of other additive components include base materials, excipients, additives, auxiliary materials, extenders and the like. Examples of the form of the food preparation include powders, tablets, liquids such as drinks, capsules, and the like. Specifically, forms such as rice cake, rice crackers, cookies, and various beverages can be adopted.
食品製剤は、一日数回に分けて経口摂取される。一日の摂取量は０．１〜５ｇが好ましく、０．３〜３ｇがより好ましく、０．５〜１ｇがさらに好ましい。食品製剤の摂取量が０．１ｇ未満では、水溶性β−グルカンを必要量摂取するのが困難になり、十分な発癌防止作用が期待できないおそれがある。一方、５ｇを超えると、取扱い性が悪化し、コストが嵩むおそれがある。 Food preparations are taken orally in several divided doses per day. The daily intake is preferably 0.1 to 5 g, more preferably 0.3 to 3 g, and even more preferably 0.5 to 1 g. If the intake of the food preparation is less than 0.1 g, it becomes difficult to take the necessary amount of water-soluble β-glucan, and there is a possibility that sufficient carcinogenesis-preventing action cannot be expected. On the other hand, when it exceeds 5 g, the handleability deteriorates and the cost may increase.
従って、第4実施形態の食品製剤は、第１実施形態のタモギタケ子実体組成物を含有することにより優れた生体吸収性を有しているとともに、水溶性β−グルカンの優れた免疫賦活作用による生体の免疫系の活性化により、発癌防止作用を発揮することができる。さらに、この食品製剤は、免疫賦活作用及び抗癌作用を発揮することができる。 Therefore, the food preparation of the fourth embodiment has excellent bioabsorbability by containing the tamogita mushroom fruiting body composition of the first embodiment, and also has an excellent immunostimulatory action of water-soluble β-glucan. Carcinogenesis-preventing action can be exerted by activating the immune system of the living body. Furthermore, this food preparation can exhibit an immunostimulatory effect and an anticancer effect.
（第５実施形態）
以下、本発明を具体化した第５実施形態の化粧品について、第２実施形態の免疫賦活剤と異なる点を中心に説明する。
(Fifth embodiment)
Hereinafter, the cosmetic of the fifth embodiment embodying the present invention will be described focusing on differences from the immunostimulator of the second embodiment.
本実施形態の化粧品には、第１実施形態のタモギタケ子実体組成物が含有され、この化粧品はタモギタケ子実体組成物中の水溶性β−グルカンの優れた免疫賦活作用を経て抗癌作用や発癌防止作用を発揮する。化粧品中のタモギタケ子実体組成物の含有量は０．１〜１０質量％が好ましく、０．５〜５質量％がより好ましく、１〜３質量％がさらに好ましい。タモギタケ子実体組成物の含有量が０．１質量％未満では、水溶性β−グルカンの含有量が低く抗癌作用や発癌防止作用を発揮することができない。一方、１０質量％を超えても、それ以上抗癌作用や発癌防止作用を発揮することができず、不経済である。化粧品の９０〜９９．９質量％は、その他の添加成分である。その他の添加成分の具体例としては、油分、界面活性剤、ビタミン剤、紫外線吸収剤、増粘剤、保湿剤等が挙げられる。化粧品の形態は溶液状、クリーム状、ペースト状、ゲル状、ジェル状、固形状、粉末状等が挙げられ、具体的には化粧水、クリーム、軟膏、ローション、乳液、パック、オイル、石鹸、洗顔料、香料、オーディコロン、浴用剤、シャンプー、リンス等の形態を採用することができる。 The cosmetic product of the present embodiment contains the Tamogitake fruiting body composition of the first embodiment, and this cosmetic product has an anti-cancer effect and carcinogenesis through the excellent immunostimulatory action of the water-soluble β-glucan in the Tamogitake fruiting body composition. Demonstrates preventive action. 0.1-10 mass% is preferable, as for content of the Tamogitake fruiting body composition in cosmetics, 0.5-5 mass% is more preferable, and 1-3 mass% is further more preferable. When the content of the Tamogitake fruiting body composition is less than 0.1% by mass, the content of the water-soluble β-glucan is low, and the anticancer action and the carcinogenesis preventing action cannot be exhibited. On the other hand, even if it exceeds 10% by mass, the anti-cancer effect and the carcinogenesis-preventing effect cannot be exhibited any more, which is uneconomical. 90 to 99.9% by mass of the cosmetic is another additive component. Specific examples of other additive components include oils, surfactants, vitamins, ultraviolet absorbers, thickeners, moisturizers and the like. Cosmetic forms include solutions, creams, pastes, gels, gels, solids, powders, etc. Specifically, lotions, creams, ointments, lotions, emulsions, packs, oils, soaps, Forms such as facial cleansers, fragrances, audio colons, bath preparations, shampoos and rinses can be employed.
化粧品は、皮膚に塗布されるときには一日数回に分けて塗布され、一日の塗布量は０．０１〜５ｇが好ましく、０．０５〜３ｇがより好ましく、０．１〜１ｇがさらに好ましい。化粧品の塗布量が０．０１ｇ未満では、水溶性β−グルカンを必要量塗布するのが困難になり、十分な抗癌作用や発癌防止作用が期待できないおそれがある。一方、５ｇを超えると、取扱い性が悪化し、コストが嵩むおそれがある。 When the cosmetic is applied to the skin, it is applied in several times a day, and the daily application amount is preferably 0.01 to 5 g, more preferably 0.05 to 3 g, and further preferably 0.1 to 1 g. If the cosmetic application amount is less than 0.01 g, it becomes difficult to apply a necessary amount of water-soluble β-glucan, and there is a possibility that a sufficient anticancer action or carcinogenesis prevention action cannot be expected. On the other hand, when it exceeds 5 g, the handleability deteriorates and the cost may increase.
従って、第５実施形態の化粧品は、第１実施形態のタモギタケ子実体組成物を含有することにより優れた生体吸収性を有しているとともに、水溶性β−１，３−グルカンの優れた免疫賦活作用による生体の免疫系の活性化により、抗癌作用や発癌防止作用を発揮することができる。さらに、この化粧品は、免疫賦活作用を発揮することができる。 Therefore, the cosmetic product of the fifth embodiment has excellent bioabsorbability by containing the Tamogitake fruiting body composition of the first embodiment, and excellent immunity of water-soluble β-1,3-glucan By activating the immune system of the living body by an activating action, an anticancer action or a carcinogenesis preventing action can be exhibited. Furthermore, this cosmetic product can exhibit an immunostimulatory effect.
なお、本実施形態は、次のように変更して具体化することも可能である。
・ 第１実施形態のタモギタケ子実体組成物を発癌防止剤の原料として利用してもよいし、第３実施形態の免疫賦活剤を発癌防止剤として利用してもよい。このように構成した場合は、水溶性β−グルカンの優れた免疫賦活作用による生体の免疫系の活性化により、発癌防止作用を発揮することができる。
In addition, this embodiment can also be changed and embodied as follows.
-The Tamogitake fruiting body composition of 1st Embodiment may be utilized as a raw material of a carcinogenic prevention agent, and the immunostimulant of 3rd Embodiment may be utilized as a carcinogenic preventing agent. When comprised in this way, carcinogenesis prevention effect | action can be exhibited by activation of the immune system of the biological body by the outstanding immunostimulation effect | action of water-soluble beta-glucan.
・ 第３実施形態の抗癌剤を、他の抗癌剤又は発癌防止剤と併用してもよい。 -You may use the anticancer agent of 3rd Embodiment together with another anticancer agent or a carcinogenesis prevention agent.
次に、試験例及び比較例を挙げて前記実施形態をさらに具体的に説明する。
（試験例１）
試験例１においては、まず人工栽培されたタモギタケ子実体を天日により７２時間乾燥した後、粉砕機（株式会社石崎電機製作所製；こなどん）を用いて粉砕しタモギタケ子実体粉砕物を得た。次いで、タモギタケ子実体粉砕物の質量に対して１０倍量の水を加えタモギタケ子実体粉砕物を水に分散させた後、タモギタケ子実体粉砕物の全量に対して１質量％のエンドβ−グルカナーゼ（大和化成株式会社製；グレイナーゼＶ３）を加え、４５℃の恒温槽上で６時間振とうし酵素反応を行った。
Next, the embodiment will be described more specifically with reference to test examples and comparative examples.
(Test Example 1)
In Test Example 1, the artificially cultivated Tamogitake fruit body was first dried for 72 hours in the sun, and then pulverized using a pulverizer (manufactured by Ishizaki Electric Co., Ltd .; Koton) to obtain a pulverized Tamogittake fruit body. It was. Next, 10 times the amount of water was added to the mass of the ground powder of Tamogitake, and the ground powder of Tamogitake was dispersed in water, and then 1% by mass of endo β-glucanase with respect to the total amount of the ground powder of Tamogitake. (Daiwa Kasei Co., Ltd .; Grainase V3) was added, and the mixture was shaken on a 45 ° C. constant temperature bath for 6 hours to carry out enzyme reaction.
続いて、分散液に水をさらに加え、タモギタケ子実体に対する水の配合割合を２０倍量（質量比）とした後、９５℃で２時間撹拌し熱水抽出を行った。そして、分散液を２５℃に冷却した後に濾紙（Ｎｏ．２）を用いた吸引濾過を行い、凍結真空乾燥機を用いて濾液を凍結乾燥しタモギタケ子実体酵素処理熱水抽出物（以下、タモギタケ子実体抽出物という。）を得た。 Subsequently, water was further added to the dispersion, and the blending ratio of water to Tamogitake fruiting bodies was 20 times (mass ratio), followed by stirring at 95 ° C. for 2 hours for hot water extraction. The dispersion is cooled to 25 ° C. and then suction filtered using a filter paper (No. 2). The filtrate is freeze-dried using a freeze vacuum dryer, and then the water extract of Tamogitake fruiting enzyme treated with hot water (hereinafter referred to as Tamogitake) is used. A fruit body extract).
（参考例２）
参考例２においては、試験例１と同様にしてタモギタケ子実体粉砕物を得た後、タモギタケ子実体粉砕物の質量に対して１０倍量の水を加えタモギタケ子実体粉砕物を水に分散させた。続いて、分散液に、タモギタケ子実体粉砕物の全量に対して１質量％のエンドβ−グルカナーゼを加え、４５℃の恒温槽上で６時間振とうし酵素反応を行った。そして、分散液を９５℃で１５分間加温してエンドβ−グルカナーゼを失活させた後、凍結真空乾燥機を用いて凍結乾燥しタモギタケ子実体酵素処理物を得た。
( Reference Example 2)
In Reference Example 2, after obtaining a ground product of Tamogitake fruit body in the same manner as in Test Example 1, 10 times the amount of water was added to the mass of the ground product of Tamogitake fruit body, and the ground product of Tamogitake fruit body was dispersed in water. It was. Subsequently, 1% by mass of endo β-glucanase was added to the dispersion liquid based on the total amount of the pulverized fruit body of Tamogitake, and the mixture was shaken for 6 hours in a constant temperature bath at 45 ° C. to carry out an enzyme reaction. Then, the dispersion was heated at 95 ° C. for 15 minutes to inactivate endo β-glucanase, and then freeze-dried using a freeze vacuum dryer to obtain a processed product of Tamogitake fruiting enzyme.
（試験例３〜５）
試験例３においては、試験例１のタモギタケ子実体抽出物１００ｍｇと、デキストリン１１５ｍｇと、ショ糖脂肪酸エステル１０ｍｇと、クエン酸３ｍｇと、２ｍｇのレモンパウダーＮｏ．１と、アスコルビン酸２０ｍｇとを混合した後に打錠機を用いて打錠し、タモギタケ子実体抽出物含有錠剤を得た。試験例４においては、タモギタケ子実体抽出物を参考例２のタモギタケ子実体酵素処理物に変更した以外は、試験例３と同様にしてタモギタケ子実体酵素処理物含有錠剤を得た。試験例５においては、試験例１のタモギタケ子実体抽出物０．６ｇと、精製蜂蜜５ｇと、果糖ブドウ糖液糖１０ｇと、ジェランガム０．０３ｇと、クエン酸０．３ｇと、ＶＢ群０．００５ｇと、色素（ｃｌｏｕｄｙ）０．２ｇと、水とを混合し、全量が１００ｍｌのタモギタケ子実体抽出物含有ドリンクを得た。
(Test Examples 3 to 5)
In Test Example 3, 100 mg of Tamogitake fruiting body extract of Test Example 1, 115 mg of dextrin, 10 mg of sucrose fatty acid ester, 3 mg of citric acid, and 2 mg of Lemon Powder No. 1 and 20 mg of ascorbic acid were mixed and then tableted using a tableting machine to obtain a tablet containing Tamogitake fruit body extract. In Test Example 4, a Tamogitake fruit body enzyme-treated product-containing tablet was obtained in the same manner as in Test Example 3, except that the Tamogitake fruit body extract was changed to the Tamogitake fruit body enzyme-treated product of Reference Example 2. In Test Example 5, 0.6 g of Tamogitake fruiting body extract of Test Example 1, 5 g of purified honey, 10 g of fructose-glucose liquid sugar, 0.03 g of gellan gum, 0.3 g of citric acid, and 0.005 g of VB group Then, 0.2 g of a pigment (cloudy) and water were mixed to obtain a drink containing a whole body extract of Tamogitake fruit body of 100 ml.
（比較例１及び比較例２）
比較例１においては、試験例１と同様にしてタモギタケ子実体粉砕物を得た。比較例２においては、タモギタケ子実体をアガリクスダケ子実体に変更した以外は、試験例１と同様にしてアガリクスダケ子実体粉砕物を得た。
(Comparative Example 1 and Comparative Example 2)
In Comparative Example 1, a pulverized fruit body of Tamogitake was obtained in the same manner as in Test Example 1. In Comparative Example 2, an agaricus mushroom fruit body pulverized product was obtained in the same manner as in Test Example 1, except that the Tamogitake fruit body was changed to Agaricus mushroom fruit body.
（比較例３）
比較例３においては、試験例１と同様にしてタモギタケ子実体粉砕物を得た後、タモギタケ子実体粉砕物の質量に対して１０倍量の水を加えタモギタケ子実体粉砕物を水に分散させた。次いで、分散液を４５℃の恒温槽上で６時間振とうした後に水をさらに加え、タモギタケ子実体に対する水の配合割合を２０倍量（質量比）とした。続いて、分散液を９５℃で２時間撹拌し熱水抽出を行った後に分散液を２５℃に冷却し、濾紙（Ｎｏ．２）を用いた吸引濾過を行った後に凍結乾燥機を用いて濾液を凍結乾燥しタモギタケ子実体熱水抽出物を得た。
(Comparative Example 3)
In Comparative Example 3, after obtaining a ground product of Tamogitake fruit body in the same manner as in Test Example 1, 10 times the amount of water was added to the mass of the ground product of Tamogitake fruit body, and the ground product of Tamogitake fruit body was dispersed in water. It was. Next, after the dispersion was shaken on a 45 ° C. thermostatic bath for 6 hours, water was further added, and the blending ratio of water to Tamogitake fruit bodies was 20 times (mass ratio). Subsequently, the dispersion was stirred at 95 ° C. for 2 hours and subjected to hot water extraction, and then the dispersion was cooled to 25 ° C., subjected to suction filtration using filter paper (No. 2), and then freeze-dried. The filtrate was lyophilized to obtain a hot water extract of Tamogitake fruiting body.
（比較例４〜６）
比較例４においては、タモギタケ子実体粉砕物を比較例２のアガリクスダケ子実体粉砕物に変更した以外は、比較例３と同様にしてアガリクスダケ子実体熱水抽出物を得た。比較例５においては、まず試験例１と同様にしてタモギタケ子実体粉砕物を得た後、タモギタケ子実体粉砕物の質量に対して１０倍量の水を加えタモギタケ子実体粉砕物を水に分散させた。次いで、分散液を４５℃で６時間振とうした後、９５℃で１５分間加温して懸濁液を得た。続いて、凍結乾燥機を用いて懸濁液を凍結乾燥し、タモギタケ子実体加温物を得た。比較例６においては、タモギタケ子実体抽出物をタモギタケ子実体熱水抽出物に変更した以外は、試験例５と同様にしてタモギタケ子実体熱水抽出物含有ドリンクを得た。
(Comparative Examples 4-6)
In Comparative Example 4, an agaricus mushroom fruiting body hot water extract was obtained in the same manner as in Comparative Example 3 except that the pulverized Tamogittake fruiting body was changed to the agaricus mushroom fruiting body of Comparative Example 2. In Comparative Example 5, first, a ground product of Tamogitake fruit body was obtained in the same manner as in Test Example 1, then 10 times the amount of water was added to the mass of the ground body of Tamogitake fruit, and the ground product of Tamogitake fruit body was dispersed in water. I let you. Next, the dispersion was shaken at 45 ° C. for 6 hours, and then heated at 95 ° C. for 15 minutes to obtain a suspension. Subsequently, the suspension was lyophilized using a freeze dryer to obtain a warmed fruit body of Tamogitake. In Comparative Example 6, a Tamogitake fruit body hot water extract-containing drink was obtained in the same manner as in Test Example 5 except that the Tamogitake fruit body extract was changed to a Tamogitake fruit body hot water extract.
＜水溶性β−グルカンの構成に関する試験＞
試験例１及び参考例２並びに比較例５について、水溶性β−グルカンの構成に関する試験を行った。具体的には、まず検体１０ｇに１００倍量（質量比）のエタノール水溶液（エタノールの含有量：７０質量％）を加え２５℃で４時間撹拌した後、濾紙（Ｎｏ．２）を用いた吸引濾過によりエタノール水溶液中の低分子成分を濾別した。次いで、残渣に、その質量に対して１０倍量の蒸留水を加えた後にオートクレーブを用いて１２１℃で１時間加熱し、濾紙（Ｎｏ．２）を用いた吸引濾過を行い熱水抽出液を得た。
<Test on composition of water-soluble β-glucan>
Test Example 1, Reference Example 2 and Comparative Example 5 were tested for the composition of water-soluble β-glucan. Specifically, a 100-fold amount (mass ratio) of an aqueous ethanol solution (ethanol content: 70% by mass) was first added to 10 g of the sample, and the mixture was stirred at 25 ° C. for 4 hours, and then aspirated using filter paper (No. 2). The low molecular components in the ethanol aqueous solution were separated by filtration. Next, 10 times the amount of distilled water was added to the residue, and the residue was heated at 121 ° C. for 1 hour using an autoclave, subjected to suction filtration using filter paper (No. 2), and the hot water extract was obtained. Obtained.
続いて、熱水抽出液を撹拌しながらエタノールを少量ずつ加えてエタノールの最終濃度を６０容量％とした後、４℃で一晩（１２時間）静置した。次いで、溶液を１５００ｇで１５分間遠心し、熱水抽出物エタノール６０％沈殿を得た。続いて、遠心分離後の上清をさらに撹拌しながらエタノールを少量ずつ加えてエタノールの最終濃度を８０容量％とした後、４℃で一晩静置した。そして、前記遠心と同様にして溶液を遠心分離し熱水抽出物エタノール８０％沈殿を得た。 Subsequently, ethanol was added little by little while stirring the hot water extract to adjust the final concentration of ethanol to 60% by volume, and then allowed to stand at 4 ° C. overnight (12 hours). The solution was then centrifuged at 1500 g for 15 minutes to obtain a hot water extract ethanol 60% precipitate. Subsequently, ethanol was added in small portions while further stirring the supernatant after centrifugation to make the final concentration of ethanol 80% by volume, and then allowed to stand overnight at 4 ° C. And the solution was centrifuged like the said centrifugation, and hot water extract ethanol 80% precipitation was obtained.
次いで、得られた各沈殿をエタノールで洗浄した後に４０℃で一晩乾燥し、酵素法による精製及び硫酸による加水分解を行った。続いて、グルコースＣIIテストワコー（和光純薬株式会社製の製品名）を用いてグルコース量を測定した後、測定値に０．９を乗じてβ−グルカン量を求めた。ここで、各沈殿における分子量はプルラン標準品（Ｓｈｏｄｅｘ社製の製品名）を標準としてＧＰＣ分析を行い、溶出時間から推定分子量を算出した。この結果及び各画分の収量を表１に示す。ここで、カラムはＴＳＫ−ＧＥＬ Ｇ３０００ＰＷＸＬ ７．８×３００（ＴＯＳＯＨ社製の製品名）を用い、移動層は０．１Ｍ酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）及び流速は０．８ｍｌ／分とし、検出器には示差屈折計（ＥＲＣ ＩＮＣ．社製）を用いた。 Next, each of the obtained precipitates was washed with ethanol and then dried overnight at 40 ° C., and purified by an enzymatic method and hydrolyzed with sulfuric acid. Subsequently, after measuring the glucose level using Glucose CII Test Wako (product name, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), the measured value was multiplied by 0.9 to determine the β-glucan level. Here, the molecular weight in each precipitate was subjected to GPC analysis using a pullulan standard product (product name manufactured by Shodex) as a standard, and the estimated molecular weight was calculated from the elution time. The results and the yield of each fraction are shown in Table 1. Here, TSK-GEL G3000PWXL 7.8 × 300 (product name, manufactured by TOSOH) was used as the column, the moving bed was 0.1 M acetic acid-sodium acetate buffer (pH 6.0), and the flow rate was 0.8 ml / The differential refractometer (manufactured by ERC INC.) Was used as the detector.
ここで、分子量の高いβ−グルカンは水に対して難溶性を示して低いエタノール濃度で沈殿を生じ、分子量の小さいβ−グルカンは水溶性を示して高いエタノール濃度によってのみ沈殿を生じる。一方、比較例５においては、エンドβ−グルカナーゼを用いた酵素処理を行っていないために、分子量が高く水に対して難溶性を示すβ−グルカンの含有量が高く、生体吸収性が各試験例に比べて劣っている。 Here, β-glucan having a high molecular weight shows poor solubility in water and precipitates at a low ethanol concentration, and β-glucan having a low molecular weight shows water solubility and precipitates only at a high ethanol concentration. On the other hand, in Comparative Example 5, since the enzyme treatment using endo β-glucanase was not performed, the content of β-glucan having a high molecular weight and poor solubility in water was high, and the bioabsorbability was measured in each test. It is inferior to the example.
＜水溶性β−１，３−グルカンの確認及び溶解性に関する試験＞
試験例１及び参考例２並びに比較例１について、水溶性β−１，３−グルカンの確認及び溶解性に関する試験を行った。具体的には、まず検体１００ｇに１０倍量（質量比）のエタノール水溶液（エタノールの含有量：７０質量％）を加え２５℃で４時間撹拌した後、濾紙（Ｎｏ．２）を用いた吸引濾過によりエタノール水溶液中の低分子成分を濾別した。次いで、残差に、その質量に対して１０倍量の蒸留水を加えた後に沸騰水浴上で３０分間加熱し、濾紙（Ｎｏ．２）を用いた吸引濾過を行い熱水抽出液を得た。続いて、熱水抽出液を撹拌しながらエタノールを少量ずつ加えてエタノールの最終濃度を８０容量％とした後、４℃で一晩静置した。次いで、前記遠心と同様にして溶液を遠心分離し熱水抽出物エタノール８０％沈殿を得た。
<Test for confirmation and solubility of water-soluble β-1,3-glucan>
For Test Examples 1 and Reference Example 2 and Comparative Example 1 were subjected to testing for confirmation and solubility of the water-soluble beta-1,3-glucan. Specifically, a 10-fold amount (mass ratio) of an aqueous ethanol solution (ethanol content: 70% by mass) was first added to 100 g of the sample, and the mixture was stirred at 25 ° C. for 4 hours, and then aspirated using filter paper (No. 2). The low molecular components in the ethanol aqueous solution were separated by filtration. Next, 10 times the amount of distilled water was added to the residue, and then heated in a boiling water bath for 30 minutes, and suction filtration using filter paper (No. 2) was performed to obtain a hot water extract. . Subsequently, ethanol was added little by little while stirring the hot water extract to make the final concentration of ethanol 80% by volume, and then allowed to stand overnight at 4 ° C. Subsequently, the solution was centrifuged in the same manner as the above centrifugation to obtain a hot water extract ethanol 80% precipitate.
次いで、得られた沈殿をエタノールで洗浄した後に４０℃で１２時間乾燥し、沈殿０．１ｇに０．０５Ｍ酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ ６．０）５０ｍｌ及びｚｙｍｏｌｙａｓｅ２０Ｔ（生化学工業社製の製品名）１０質量％溶液０．２５ｍｌを加え４５℃で２４時間振とうして酵素反応を行った。そして、溶液を湯浴上で３分間煮沸して酵素を失活した後、溶液の質量に対して４倍量のエタノールを加え４℃で１時間静置した。次いで、前記遠心と同様にして溶液を遠心分離して沈殿を得た後、その沈殿を４０℃で一晩乾燥して未消化沈殿を得た。一方、ｚｙｍｏｌｙａｓｅ２０Ｔ（生化学工業社製の製品名）１０質量％溶液０．２５ｍｌを加えない以外は、前記と同様にして未消化処理沈殿を得た。 Next, the obtained precipitate was washed with ethanol and then dried at 40 ° C. for 12 hours. To 0.1 g of precipitate, 50 ml of 0.05 M acetic acid-sodium acetate buffer (pH 6.0) and zymolase 20T (manufactured by Seikagaku Corporation) were obtained. Product name) 0.25 ml of a 10% by mass solution was added, and the enzyme reaction was carried out by shaking at 45 ° C. for 24 hours. Then, the solution was boiled on a hot water bath for 3 minutes to deactivate the enzyme, and then 4 times the amount of ethanol was added to the mass of the solution, and allowed to stand at 4 ° C. for 1 hour. Subsequently, after centrifuging the solution in the same manner as the above centrifugation to obtain a precipitate, the precipitate was dried overnight at 40 ° C. to obtain an undigested precipitate. On the other hand, an undigested precipitate was obtained in the same manner as described above except that 0.25 ml of zymolase 20T (product name manufactured by Seikagaku Corporation) 10 mass% solution was not added.
得られた未消化沈殿及び未消化処理沈殿を、酵素法による精製及び硫酸による加水分解を行った後に前記と同様にしてグルコース量を測定し、測定値に０．９を乗じてβ−グルカン量を求めた。そして、消化試験前と消化試験後とのβ−グルカン減少量を、酵素反応によって新たに生成されたβ−１，３−グルカン量とした。この結果を表２に示す。 The obtained undigested precipitate and undigested precipitate were purified by enzymatic method and hydrolyzed with sulfuric acid, and then the glucose amount was measured in the same manner as described above, and the measured value was multiplied by 0.9 to obtain β-glucan amount. Asked. The amount of β-glucan decreased before and after the digestion test was defined as the amount of β-1,3-glucan newly generated by the enzyme reaction. The results are shown in Table 2.
＜免疫賦活作用に関する試験＞
試験例１及び参考例２並びに比較例１〜５について、免疫賦活作用に関する試験を行った。具体的には、健康な雄性ｄｄｙマウスを用い、マウスにシクロフォスミド３０ｍｇ／ｋｇを１日１回、２日間腹腔内投与し、２回目の投与４８時間後のマウスから脾臓を摘出してその重量を測定した。ここで、各検体を２００ｍｇ/ｋｇの投与量でシクロフォスミド投与の前日より脾臓を取出す日の前日までの４日間、１日１回経口投与した。試験は１群８〜１０匹で行い、これらの脾臓の平均値及び標準偏差を求め、水を投与した溶媒対照群との間でｔ検定により検定した。危険率５％未満の場合を有意差ありと判定した。また、脾臓重量減少抑制率（％）を下記式（１）により求めた。この結果を表３に示す。尚、表３において、有意差ありと判定したものを＊印で示している。
<Test on immunostimulatory action>
Test Example 1, Reference Example 2, and Comparative Examples 1 to 5 were tested for immunostimulatory action. Specifically, using healthy male ddy mice, cyclophosphide 30 mg / kg was intraperitoneally administered once a day for 2 days, and the spleen was removed from the mice 48 hours after the second administration. The weight was measured. Here, each sample was orally administered once a day at a dose of 200 mg / kg for 4 days from the day before cyclofosmid administration to the day before the day of spleen removal. The test was carried out with 8 to 10 animals per group, and the average value and standard deviation of these spleens were determined and tested with a solvent control group to which water was administered by t-test. When the risk rate was less than 5%, it was determined that there was a significant difference. Moreover, the spleen weight reduction inhibitory rate (%) was calculated | required by following formula (1). The results are shown in Table 3. In Table 3, those determined to have a significant difference are indicated by *.
ここで、抗癌剤であるシクロフォスファミドをマウスに投与すると、免疫担当細胞であるB及びT細胞に直接作用し、免疫応答が抑制される。このため、脾臓及び胸腺リンパ球数並びに末梢血白血球数が減少するとともに抗原刺激により造血機能が阻害され、脾臓及び胸腺重量が減少する。尚、下記式（１）において、Ｔｗは投与群の平均脾臓重量を示し、Ｃｗは溶媒対照群の平均脾臓重量を示し、Ｎｗはシクロフォスファミドを投与していない正常マウスの平均脾臓重量を示す。 Here, when cyclophosphamide, an anticancer agent, is administered to mice, it directly acts on B and T cells, which are immunocompetent cells, and suppresses the immune response. For this reason, the number of spleen and thymus lymphocytes and the number of peripheral blood leukocytes are decreased, the hematopoietic function is inhibited by antigen stimulation, and the spleen and thymus weights are decreased. In the following formula (1), Tw represents the average spleen weight of the administration group, Cw represents the average spleen weight of the solvent control group, and Nw represents the average spleen weight of normal mice not administered with cyclophosphamide. Show.
脾臓重量減少抑制率＝｛（Ｔｗ−Ｃｗ）／（Ｎｗ−Ｃｗ）｝×１００ …（１） Spleen weight reduction inhibition rate = {(Tw−Cw) / (Nw−Cw)} × 100 (1)
＜抗癌作用に関する試験＞
試験例１及び参考例２並びに比較例１〜５について、抗癌作用に関する試験を行った。具体的には、健康な雄性ｄｄｙマウスの背部皮下にザルコーマ１８０細胞（Ｓ１８０細胞）１０7個移植した後、各検体を２００ｍｇ／ｋｇの投与量で２１日間経口投与した。次いで、前記マウスの背部に認められた腫瘍を摘出し、腫瘍重量を測定した。試験は１群８〜１０匹で行い、これらの腫瘍の平均値及び標準偏差を求め、水を投与した溶媒対照群との間でｔ検定により検定した。危険率５％未満の場合を有意差ありと判定した。また、腫瘍増殖抑制率（％）を下記式（２）により求めた。この結果を表４に示す。尚、表４において、有意差ありと判定したものを＊印で示している。また、下記式（２）において、Ｃｗは溶媒対照群の平均腫瘍重量を示し、Ｔｗは投与群の平均腫瘍重量を示す。
<Test for anticancer effect>
Test Example 1, Reference Example 2, and Comparative Examples 1 to 5 were tested for anticancer activity. Specifically, after transplanting 10 7 sarcoma 180 cells (S180 cells) subcutaneously in the back of healthy male ddy mice, each sample was orally administered at a dose of 200 mg / kg for 21 days. Next, the tumor found on the back of the mouse was removed and the tumor weight was measured. The test was carried out with 8 to 10 animals per group, and the average value and standard deviation of these tumors were determined and tested with a solvent control group to which water was administered by t-test. When the risk rate was less than 5%, it was determined that there was a significant difference. Moreover, the tumor growth inhibitory rate (%) was calculated | required by following formula (2). The results are shown in Table 4. In Table 4, those determined to have a significant difference are indicated by *. In the following formula (2), Cw represents the average tumor weight of the solvent control group, and Tw represents the average tumor weight of the administration group.
腫瘍増殖抑制率＝｛（Ｃｗ−Ｔｗ）／Ｃｗ｝×１００ …（２） Tumor growth inhibition rate = {(Cw−Tw) / Cw} × 100 (2)
＜錠剤製造の適応性に関する評価＞
試験例３及び４について、錠剤製造の適応性に関し、錠剤を製造するときの打錠製及び製造された錠剤の風味について評価を行った。この結果を表５に示す。
<Evaluation on applicability of tablet manufacturing>
For Test Examples 3 and 4, the applicability of tablet production was evaluated for tableting when the tablet was produced and the flavor of the produced tablet. The results are shown in Table 5.
＜水に対する溶解性に関する試験＞
試験例１並びに比較例３及び４について、水に対する溶解性に関する試験を行った。具体的には、まず２５℃において検体０．１ｇを試験管にとった後、蒸留水０．５ｍｌを加えた。次いで、ｖｏｒｔｅｘ−ｇｅｎｉｅ２（Ｓｃｈｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｉｎｃ．社製の製品名）を用い、撹拌強度６で１分間撹拌した。そして、試験管中の液体の不溶物が認められなくなる水量を指標に溶解性を評価した。この結果を表６に示す。
<Test on solubility in water>
Test Example 1 and Comparative Examples 3 and 4 were tested for solubility in water. Specifically, first, 0.1 g of a sample was taken in a test tube at 25 ° C., and then 0.5 ml of distilled water was added. Subsequently, it stirred for 1 minute with the stirring intensity | strength 6 using vortex-genie2 (product name made by Scientific Industries Inc.). Then, the solubility was evaluated using as an index the amount of water in which no liquid insoluble matter was observed in the test tube. The results are shown in Table 6.
＜ドリンクとしての適性に関する試験＞
試験例５及び比較例６について、ドリンクとしての適性に関する試験を行った。具体的には、試験例５及び比較例６の調製時におけるタモギタケ子実体抽出物又はタモギタケ子実体熱水抽出物の水に対する溶解性及び調製後のドリンクの風味について評価した。ここで、試験例５のドリンク中のタモギタケ子実体抽出物の含有量及び比較例６のドリンク中のタモギタケ子実体熱水抽出物の含有量はそれぞれ０．６質量％である。この結果を表７に示す。
<Test for suitability as a drink>
Test Example 5 and Comparative Example 6 were tested for suitability as a drink. Specifically, the solubility of Tamogitake fruiting body extract or Tamogitake fruiting body hot water extract in water during the preparation of Test Example 5 and Comparative Example 6 and the flavor of the prepared drink were evaluated. Here, the content of the bamboo shoot fruit body extract in the drink of Test Example 5 and the content of the bamboo shoot fruit body hot water extract in the drink of Comparative Example 6 are each 0.6 mass%. The results are shown in Table 7.
さらに、前記実施形態より把握できる技術的思想について以下に記載する。
・ タモギタケ子実体の粉砕物にエンドβ−グルカナーゼを加え、タモギタケ子実体中の水不溶性β−グルカンを加水分解して水溶性β−グルカンを生成させたタモギタケ子実体組成物を含有し、抗癌作用及び発癌防止作用を有することを特徴とする化粧品。この構成によれば、優れた生体吸収性を有するとともに、抗癌作用及び発癌防止作用を発揮することができる。
Further, the technical idea that can be grasped from the embodiment will be described below.
An anti-cancer comprising a Tamomotake fruit body composition in which endo-β-glucanase is added to a ground product of Tamogitake fruit body and water-insoluble β-glucan in the Tamogitake fruit body is hydrolyzed to produce water-soluble β-glucan A cosmetic characterized by having an action and a carcinogenesis-preventing action. According to this configuration, it has excellent bioabsorbability and can exhibit an anticancer effect and a carcinogenesis preventing effect.
Claims (4)
前記タモギタケ子実体組成物は、タモギタケ子実体の粉砕物にエンドβ−グルカナーゼを加え、タモギタケ子実体中の水不溶性β−グルカンを加水分解して水溶性β−グルカンを生成させた後、次に熱水抽出により水溶性β−グルカンを抽出したものであることを特徴とする免疫賦活剤。 In the immunostimulant containing the Tamomogi bamboo fruit body composition as an active ingredient,
The Pleurotus cornucopiae fruit body composition, the end β- glucanase in addition to the pulverized Pleurotus cornucopiae fruit body, after generating a water-soluble β- glucans and hydrolyze water-insoluble β- glucan in Pleurotus cornucopiae fruit body, then An immunostimulant obtained by extracting water-soluble β-glucan by hot water extraction .
前記タモギタケ子実体組成物は、タモギタケ子実体の粉砕物にエンドβ−グルカナーゼを加え、タモギタケ子実体中の水不溶性β−グルカンを加水分解して水溶性β−グルカンを生成させた後、次に熱水抽出により水溶性β−グルカンを抽出したものであることを特徴とする抗癌剤。 In anticancer agent containing data Mogitake fruit body composition as an active ingredient,
The above-mentioned Tamogitake fruiting body composition is obtained by adding endo β-glucanase to the ground product of Tamogitake fruiting body, hydrolyzing water-insoluble β-glucan in the Tamogitake fruiting body, and generating water-soluble β-glucan. anticancer agent, characterized in der Rukoto an extract soluble β- glucans hot water extraction.
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