JP4339594B2 - Ｎ−保護化ピログルタミン酸メチルを用いた３−グルタミド胆汁酸エステル誘導体の調製方法 - Google Patents

Description

【０００１】
本発明はコントラスト剤の調製に使用される中間体の新規な調製方法に関する。
【０００２】
より詳しくは、本発明は、一般式（Ｉ）
【化９】

［式中；Ｒ₀ はＨまたはＯＨであり、
Ｒ₁ はＨ、α−ＯＨまたはβ−ＯＨであり、
Ｒ₂ およびＲ₃ は独立して、水素であるか、又はアリールで置換されてよい直鎖もしくは分岐鎖の（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキルであり、
Ｒ₅ は直鎖もしくは分岐鎖の（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルであり、Ｒ₆ は直鎖もしくは分岐鎖の（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルまたはベンジル基である。］
の胆汁酸エステル誘導体の改良された調製方法に関する。
【０００３】
式（Ｉ）の化合物は、その核磁気共鳴診断における使用が WO 00/38738に広く記載されているコントラスト剤の調製における中間体である。
【０００４】
この文献は、式（II）
【化１０】

のＮ−保護化ピロリジノンをアミン（III） Ｈ₂Ｎ−Ｒ^* ［式中、Ｒ^* は便利な胆汁酸の反応性誘導体である。］によりアミド交換（transamidation）することによって中間体化合物（IV）
【化１１】

を生じさせること、次にＮ−保護基Ｒ₄ を選択的に除去することを含む複数工程プロセスによる、式（I）の化合物の合成を特に報告している。
【０００５】
アミド交換反応は、出発物質ピロリジノンの窒素原子に隣接したキラル中心における立体化学を保持して、第二級アミドを生じる。
【０００６】
Ｒ₅ およびＲ₆ 基に影響を与えない条件下でＲ₄ の開裂が起こる必要があるので、Ｒ₄ 保護基の選択が重要である。同特許出願においては、Ｒ₄ としてカルボベンジルオキシ（Ｃｂｚ）保護基の使用が典型的に示されている。
【０００７】
しかしながら、Ｃｂｚ保護基を使用するこの先行技術は、工業的スケールアップのために克服すべき以下の欠点を有する：
・脱保護工程が水素および触媒の使用を含む；
・中間体Ｎ−Ｃｂｚ保護化化合物が保存されないオイルであり、したがって使用の直前に調製され、このために全体の工業的プロセスが非常に複雑化する。
【０００８】
tert−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）基によるピロリジノン窒素原子の保護およびこうして保護されたラクタムとアミンとの反応について、H. Kotsukiらにより、Tetrahedron Letters, 33, No. 34, pp. 4945-4948, 1992において記載されている。そこで報告されている結果は、Ｎ−Ｂｏｃ保護化ピロリジノンの場合、アミンとの反応が高圧を使用する場合にのみ進行し、一方、大気圧において還流しながら行う同一アミンとの反応は出発物質の完全な回収という結果になることを示す。上記文献で示唆されている圧力値は１０ｋｂａｒのオーダーのものである。これらの圧力値は小さな実験室規模では採用することもできようが、大きな工業スケールで使用する場合には安全性の問題を生じ得るため実際には許容できないことになる。さらに同文献において、著者は、場合によっては高圧においても立体障害のあるアミンが反応しないことをも報告している。
【０００９】
上記の文献に基づいて予想され得ることに反して、高圧または大気圧を超える圧力の使用を必要としない工業的に許容できる条件下で、胆汁酸由来のアミンによるＮ−Ｂｏｃピロリジノンのアミド交換を実行可能であることが今般見出された。
【００１０】
更に、上記化合物（I）の合成におけるＮ−保護基としてtert−ブトキシカルボニル基を使用して、上記先行技術の技術的問題点を解決可能であることが見出された。実際に、tert−ブトキシカルボニル基の選択的開裂は酸性条件の下で達成することができるため水素の使用が回避され、また、Ｎ−Ｂｏｃ保護化ピロリジノンエステルは安定な固体生成物であって、別個の工程で調製でき、何ら問題なく保存できる。
【００１１】
理論的検討に基づき、類似の化学的挙動に鑑みて、メトキシカルボニル、エトシキカルボニル、２−トリメチルシリルエトシキカルボニル、シクロブトキシカルボニルおよび１−メチルシクロブトキシカルボニル基のような他の保護基も、Ｂｏｃ基と同様に、酸性条件の下で選択的に開裂でき、上記技術的問題点の解決手段となることが期待される。
【００１２】
したがって、本発明は、一般式（Ｉ）
【化１２】

［式中；Ｒ₀ はＨまたはＯＨであり、
Ｒ₁ はＨ、α−ＯＨまたはβ−ＯＨであり、
Ｒ₂ およびＲ₃ は独立して、水素であるか、又はアリールで置換されてよい直鎖もしくは分岐鎖の（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキルであり、
Ｒ₅ は直鎖もしくは分岐鎖の（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルであり、
Ｒ₆ は直鎖もしくは分岐鎖の（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルまたはベンジル基である。］
の化合物の調製方法であって、式（II）
【化１３】

［式中、Ｒ₂ 、Ｒ₃ およびＲ₅ は上で定義した通りであり、Ｒ₄ はtertブトキシカルボニル、メトキシカルボニル、エトシキカルボニル、２−トリメチルシリルエトシキカルボニル、シクロブトキシカルボニルおよび１−メチルシクロブトキシカルボニルから成る群より選択される。］の化合物を、一般式（Ｖ）
【化１４】

［式中、Ｒ₀ 、Ｒ₁ およびＲ₆ は上で定義した通りである。］の化合物で処理することによるアミド交換の対象として、式（VI）
【化１５】

の化合物を生じさせること、
および酸条件の下で選択的にＲ₄ 保護基を開裂させることを含んでなる方法に関する。
【００１３】
好ましい実施態様において本発明は、Ｒ₂ およびＲ₃ が共に水素である式（I）の化合物の製造方法に関する。
【００１４】
より好ましい実施態様において本発明は、Ｒ₂ およびＲ₃ が共に水素であり、かつ、Ｒ₅ が直鎖の（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキル基、より一層好ましくはそれがメチル基である式（I）の化合物の製造方法に関する。
【００１５】
上記方法において、第一工程のアミド交換反応は、双極性非プロトン性溶媒または非極性有機溶媒の類より選択される有機溶媒中で、式（Ｖ）［式中、Ｒ₀ 、Ｒ₁ およびＲ₆ は上で定義した通りである。］のアミン１モルを、化合物（II）［式中、Ｒ₂ 、Ｒ₃ 、Ｒ₄ およびＲ₅ は上で定義した通りである。］の約１ないし約１．５モルと反応させることによって一般に行われる。適当な溶媒は、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、酢酸エチル、酢酸ブチル、トルエン、キシレン、ｐ−シメン、ジエチルベンゼン、および芳香環が１つ以上の直鎖もしくは分岐鎖の（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキル基を有する類似の有機溶媒から成る群より選択される。
【００１６】
好ましくは、本発明の方法において、Ｎ−保護基Ｒ₄ がｔ−ブトキシカルボニル、メトキシカルボニル、エトシキカルボニル、シクロブトキシカルボニルおよび１−メチル−シクロブトキシカルボニルから成る群より選択される。より好ましくは、Ｒ₄ がtert−ブトキシカルボニルまたはメトキシカルボニル基であり、より一層好ましくは、それがtert−ブトキシカルボニル基である。
【００１７】
上記反応混合物は、用いる反応物および溶媒に依存して、通常約７０℃ないし約１３０℃の間の温度で攪拌される。
【００１８】
上に示したように、アミド交換反応は、大気圧において容易に進行するので、高圧の使用を必要としない。
【００１９】
これらの温度および圧力条件の下で、アミド交換反応は概ね１２〜３０時間内に完了する。
【００２０】
反応混合物を次に室温まで放冷し、生成する沈殿を濾過により回収し、フィルター上で洗浄し、乾燥して、式（VI）の縮合生成物を得る。
【００２１】
次の工程において、式（VI）の化合物に対して酸加水分解が行われて、Ｎ−保護基Ｒ₄ が除去され、式（Ｉ）の最終生成物が得られる。
【００２２】
好ましくはこの反応は、反応温度を１５〜６０℃に維持しながら、メタノールもしくはエタノールのような（Ｃ₁−Ｃ₄）アルカノール中、またはテトラヒドロフラン、ジオキサンおよび類似の溶媒等のような不活性有機溶媒中の化合物（VI）の溶液に対して無水（例えばガス）または水性の形態の無機酸または有機酸をゆっくりと添加することにある。
【００２３】
その結果得られる溶液は、Ｒ₄ の除去が完了するまでこの反応温度に保たれる。これには（VI）から（Ｉ）への変換に使用される酸および温度に依存して０．５〜２０時間かかる。
【００２４】
この工程において、酸化合物は、ＨＣｌガス、ＭｅＯＨ中のＨＣｌガス、ＭｅＯＨ中のＨＣｌ、ＣＨ₃ＣＯ₂Ｈ中のＨＢｒ、Ｈ₂ＳＯ₄水溶液、ＣＦ₃ＣＯ₂Ｈ、ＣＨ₃ＣＯ₂Ｈ、シュウ酸、メタンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸より選択されるのが好ましい。
【００２５】
この酸は（VI）のモル当たり１〜３モルに相当する量で添加される。
【００２６】
得られる式（Ｉ）の化合物は、保護基を開裂するために使用される酸の塩として、又は一般式（Ｉ）の遊離アミンとして単離される。
【００２７】
遊離アミンとしての（Ｉ）の単離は、好ましくはトリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミン等の第三級アミンより選択される塩基の添加により、反応終了時に得られた酸性混合物を第一に中和することによって行われる。
【００２８】
嵩高い第三級アミンを使用することは、例えばエステル基の加水分解やアミド交換等の副反応に起因して起こり得る副生成物の生成を少なくして化合物（Ｉ）の単離を可能とする。事実、例えばＮａＯＨやＫＯＨ水溶液のような水性塩基は、エステル基、特にコラン部分のエステル基よりも開裂し易いグルタミン鎖に存在するエステル基を加水分解し得る。さらに、ＮＨ₃ 溶液の使用や第一級または第二級アミンの使用は、アミド交換反応を促進し得る。
【００２９】
第三級アミンを使用することにより、この工程において式（Ｉ）の化合物が８０〜９７％の範囲の収率で単離される。
【００３０】
式（Ｖ）の出発化合物は、 WO-A-95/32741またはPCT/EP00/08226に開示されているところに従って調製される。これらの化合物は胆汁酸のエステルにおいて３位にヒドロキシ基を置換するβ−アミノ基が必ず存在しているものである。
【００３１】
本発明の胆汁酸の最も重要な例は、以下の式で表されるコール酸、ケノデオキシコール酸、デオキシコール酸、ウルソデオキシコール酸およびリトコール酸から成る群より選択される。
【化１６】

【００３２】
式（II）の化合物は、対応する５−オキソプロリン誘導体（VII）
【化１７】

から、先ずそれ自体公知の方法により、適当に選択された（Ｃ₁−Ｃ₄）アルカノールとの反応によってカルボキシ基をエステル化すること、次にＮ−保護基Ｒ₄ を導入することによって調製される。
【００３３】
５−オキソプロリンエステルの保護のための一般的方法は、メチルエステルのtert−ブトキシカルボニル基による保護について記載する以下の文献から導くことができる：JP05247047；Eur. J. Org. Chem., 1999, 1581-1584；Tetrahedron Lett., 1998, 39, 4789-4792；Tetrahedron Lett., 1993, 34, 5455-5458；Chem. Pharm. Bull., 1991, 39, 1199-1212；J. Org. Chem. 1983, 48, 2424-2426 。
【００３４】
代替的に、そして好ましくは、式（II）の化合物は、次式（VIII）
【化１８】

［式中、Ｒ₂ およびＲ₃ は上で定義した通りである。］のＬ−グルタミン酸誘導体、好ましくは鉱酸との付加塩の形態のもの、例えば塩酸塩のエステル化により、対応するジ（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルエステル（IX）、
【化１９】

好ましくは鉱酸との付加塩の形態のもの、例えば塩酸塩を与え、次に上記ジエステルの環化により、５−オキソプロリン（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルエステル（Ｘ）
【化２０】

を生じさせること、および適当に選択されたＮ−保護基Ｒ₄ を導入することにより、式（II）の化合物を生じさせることによって得られる。
【００３５】
特に、式（VIII）の化合物のエステル化は、先ず該化合物を適当に選択された（Ｃ₁−Ｃ₄）アルカノール中で懸濁させ、次に（VIII）のモル当たり少なくとも２モルのＳＯＣｌ₂ を添加することによって行われる。温度は添加の間０〜５℃に維持され、そして次に室温においてほぼ１日以内に反応が完了する。溶媒を蒸発させ、そうして得られた生成物が精製されることなく次の工程において直接使用される。この工程において、ジエステル（IX）の酸付加塩が（Ｃ₁−Ｃ₄）アルカノール溶液中のＫＯＨにより中和され、そして沈殿したＫＣｌが濾過により除去される。濾液を蒸発させ、次に８０〜１３０℃で可変の温度において数（１〜７）時間加熱して、Ｒ₄ 保護基導入の最終工程において直接使用される環化生成物を与える。
【００３６】
最後に、Ｒ₄ 保護基による（Ｘ）のラクタム窒素の保護は、文献中に記載されている古典的な保護方法に従って行われる。これは、式（Ｘ）の化合物を少なくとも等モル量の対応する次の化合物（XI）と反応させることによって容易に達成し得る。
Ｒ₄−Ｘ （XI）
［式中、Ｒ₄ がtert−ブトキシカルボニル基である場合には、反応が対応する炭酸エステル(carbonate）により行われるように、Ｘはtert−ブトキシ基であり、また、Ｒ₄ がメトキシカルボニル、エトシキカルボニル、２−トリメチルシリルエトシキカルボニル、シクロブトキシカルボニルまたは１−メチルシクロブトキシカルボニル基である場合には、反応が対応するクロロ蟻酸エステル(chloroformate）（すなわちクロロ蟻酸メチル、クロロ蟻酸エチル、クロロ蟻酸２−トリメチルシリルエチル、クロロ蟻酸シクロブチルまたはクロロ蟻酸１−メチルシクロブチル）により行われるように、Ｘは塩素原子である。］
【００３７】
好ましい実施態様によりＲ₄ がtert−ブトキシカルボニル基であって、この保護基の導入が炭酸ジtertブチルを用いて行われる場合には、反応は好ましくは、酢酸の（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルエステル、アセトニトリルや、トルエン、キシレン等の芳香族溶媒および類似の溶媒のような、極性非プロトン性溶媒および非極性有機溶媒の類から選択される溶媒の存在下で、式（Ｘ）の化合物１モルを含有する溶液に対して少なくとも等モル量の炭酸ジtertブチルを添加することによって行われる。酢酸エチルおよびアセトニトリルが好ましい溶媒である。反応は通常、例えば４−（ジメチルアミノ）ピリジンを（Ｘ）のモル当たり０．０１〜０．１モルの範囲の量で添加することによって触媒される。
【００３８】
Ｒ₄ がメトキシカルボニル、エトシキカルボニル、２−トリメチルシリルエトシキカルボニル、シクロブトキシカルボニルまたは１−メチルシクロブトキシカルボニル基であって、この保護基の導入が対応するクロロ蟻酸エステルを用いて行われる場合には、反応は通常、極性非プロトン性溶媒、例えばアセトニトリル中で、無機塩基等の塩基、典型的には、アルカリ金属炭酸塩、例えばＫ₂ＣＯ₃ や又は第三級アミン、例えばトリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンの存在下で行われる。有機塩基として第三級アミンが用いられる場合には、反応は触媒量の４−（ジメチルアミノ）ピリジンの存在下で行われることが好ましい。
【００３９】
反応は、通常、室温において二、三時間内に完了し、溶媒の蒸発により得られた粗残留物が洗浄により、および溶媒、好ましくはＥｔＯＡｃおよび／またはｎ−ヘキサンからの結晶化により精製される。
【００４０】
以下の実施例は本発明による方法をその好ましい実施態様の一つにおいて更に例示するものである。それらは本発明の範囲に対する限定として何ら解釈されるべきでない。
【００４１】
以下の実施例において報告されるＴＬＣおよびＨＰＬＣ方法は以下に示すように行われた。
【００４２】
薄層クロマトグラフィー：
ＴＬＣに用いられるシリカゲルプレート：６０Ｆ₂₅₄ ，
溶出液Ａ：７０：２５：３のＣＨＣｌ₃／ＭｅＯＨ／２５％ＮＨ₄ＯＨ，
溶出液Ｂ：８０：２０のＥｔＯＡｃ／ＣＨ₂Ｃｌ₂ ,
検出：Ｃｌ₂ 蒸気への露出＋ｏ−トリジン
【００４３】
分析ＨＰＬＣ方法：
方法Ａ
固定相：Chiracel OD-H, Daicelにより充填された250×4.6 mmカラム，
温度：４０℃，
移動相：アイソクラティック(isocratic）溶出：Ａ／Ｂ＝９３：７
Ａ＝ｎ−ヘキサン，Ｂ＝エタノール，
流量：１．０ｍＬ／分，
検出（ＵＶ）：２１０ｎｍ，
注入：２０μＬ，
サンプル濃度：２．０ｍｇ／ｍＬ（ラセミ体混合物），５．０ｍｇ／ｍＬ（光学活性）
【００４４】
方法Ｂ
固定相：Lichrosorb RP-Select B 5μm，Merck KGaAにより充填された250×4 mmカラム，
温度：４５℃，
移動相：グラジエント溶出，Ａ＝水中０．０１７Ｍ Ｈ₃ＰＯ₄, Ｂ＝ＣＨ₃ＣＮ,
グラジエントタイムテーブル：
分：％Ａ：％Ｂ，
０：８２：１８，
３０：１５：８５，
４５：１５：８５，
流量：１ｍＬ／分，
検出（ＵＶ）：２１０ｎｍ，
注入：１０μＬ，
サンプル濃度：２ｍｇ／Ｌ
【００４５】
方法Ｃ
固定相：Chiracel OD-H, Daicelにより充填された250×4.6 mmカラム，
温度：４０℃，
移動相：アイソクラティック(isocratic）溶出：Ａ／Ｂ＝９５：５
Ａ＝ｎ−ヘキサン，Ｂ＝エタノール，
流量：１．０ｍＬ／分，
検出（ＵＶ）：２１０ｎｍ，
注入：２０μＬ，
サンプル濃度：０．４ｍｇ／ｍＬ（ラセミ体混合物），１．０ｍｇ／ｍＬ（光学活性）
【００４６】
方法Ｄ
固定相：Chiracel OD-H；Daicelにより充填された250×4.6 mmカラム；
温度：４０℃；
移動相：アイソクラティック(isocratic）溶出：Ａ／Ｂ＝９２：８；
Ａ＝ｎ−ヘキサン，Ｂ＝エタノール，
流量：１．０ｍＬ／分；
検出（ＵＶ）：２１０ｎｍ；
注入：１０μＬ；
サンプル濃度：２．０ｍｇ／ｍＬ（ラセミ体混合物），５．０ｍｇ／ｍＬ（光学活性）
【００４７】
方法Ｅ
固定相：Lichrosorb RP-Select B 5μm；Merck KGaAにより充填された250×4 mmカラム，
温度：４５℃，
移動相：グラジエント溶出；
Ａ＝水中０．０１７Ｍ Ｈ₃ＰＯ₄, Ｂ＝ＣＨ₃ＣＮ,
グラジエントタイムテーブル：
分：％Ａ：％Ｂ，
０：８２：１８，
３０：１５：８５，
４５：１５：８５，
流量：１ｍＬ／分；
検出（ＵＶ）：２１０ｎｍ；
注入：１０μＬ；
サンプル濃度：１ｍｇ／Ｌ
【００４８】
方法Ｆ
固定相：Chiracel OD；Daicelにより充填された250×4.6 mmカラム；
温度：４０℃；
移動相：アイソクラティック(isocratic）溶出：Ａ／Ｂ＝８５：１５；
Ａ＝ｎ−ヘキサン，Ｂ＝２−プロパノール
流量：１．０ｍＬ／分；
検出（ＵＶ）：２１０ｎｍ；
注入：２０μＬ；
サンプル濃度：０．７ｍｇ／ｍＬ（ラセミ体混合物），３．０ｍｇ／ｍＬ（光学活性）
【００４９】
実施例１
ａ） （３β，５β，１２α）−１２−ヒドロキシ−３−［［５−メトキシ−１，５−ジオキソ−４（Ｓ）−４−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ペンチル］アミノ］コラン−２４−酸メチルエステルの調製（II：Ｒ₅ ＝Ｍｅ，Ｒ₂ ＝Ｒ₃ ＝Ｈ，Ｒ₄ ＝ｔ−ブトキシカルボニル； Ｖ：Ｒ₀ ＝ＯＨ，Ｒ₁ ＝Ｈ，Ｒ₆ ＝Ｍｅ； VI：Ｒ₀ ＝ＯＨ，Ｒ₁ ＝Ｈ，Ｒ₂ ＝Ｒ₃ ＝Ｈ，Ｒ₄ ＝ｔ−ブトキシカルボニル，Ｒ₅ ＝Ｍｅ，Ｒ₆ ＝Ｍｅ）
【化２１】

トルエン（１．５４Ｌ）中の（Ｖ）（６２５ｇ；１．５４モル）および（II）（３７４．６ｇ；１．５４モル）の懸濁液を９０℃において２４時間攪拌した。その反応混合物を次に室温まで一晩放冷し、沈殿を濾過により回収し、トルエンで洗浄し、乾燥して（４０℃；２ｋＰａ）、トルエンとの１：１クラスレートとして（VI）を得た（８８９．２ｇ；１．２モル）。
収率７８％
ＨＰＬＣ（方法Ｄ）：ｅ．ｅ．＞９９．６％
ＨＰＬＣ（方法Ｅ）：９８％
¹Ｈ−ＮＭＲ， ¹³Ｃ−ＮＭＲ，ＩＲおよびＭＳスペクトルは表示される構造と一致した。
【００５０】
ｂ） （３β，５β，１２α）−３−［［４（Ｓ）−４−アミノ−５−メトキシ−１，５−ジオキソペンチル］アミノ］−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸メチルエステルの調製（Ｉ：Ｒ₀ ＝ＯＨ，Ｒ₁ ＝Ｈ，Ｒ₂ ＝Ｒ₃ ＝Ｈ，Ｒ₅ ＝Ｒ₆ ＝Ｍｅ）
【化２２】

工程ａ）で得られたトルエンとの１：１クラスレートとしての化合物（２３１．６ｇ；０．３１モル）のＭｅＯＨ（１．１６Ｌ）溶液に対して、反応温度を２０℃よりも低く維持しながらメタンスルホン酸（５６．７ｇ；０．６モル）をゆっくりと添加した。その結果得られる溶液を室温において２４時間攪拌した。次に、ジイソプロピルエチルアミン（７７．６ｇ；０．６モル）を添加し、その溶液を粗残留物にまで蒸発させ、これを水で取り出した。室温における１時間の攪拌後、固体を濾過し、水で洗浄し、乾燥して、表題化合物（１４９．１ｇ；０．２７モル）を白色固体として得た。収率８７％。
ＨＰＬＣ（方法Ｅ）：９８．４％（面積％），
ＨＰＬＣ（方法Ｆ）：ｅ．ｅ．＞９９．５％，
¹Ｈ−ＮＭＲ， ¹³Ｃ−ＮＭＲ，ＩＲおよびＭＳスペクトルは表示される構造と一致した。
【００５１】
実施例２
（３β，５β，１２α）−３−［［４（Ｓ）−４−アミノ−５−メトキシ−１，５−ジオキソペンチル］アミノ］−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸メチルエステルジヒドロクロリドの調製
実施例１ａ）で得られたトルエンとの１：１クラスレートとしての化合物（３０ｇ；４０ミリモル）の２．５Ｍ ＨＣｌを含むＭｅＯＨ（１００ｍＬ）溶液を室温において１５時間攪拌し、次に溶液をシード処理した。０℃において２時間後、固体を濾過し、冷メタノール（３０ｍＬ）中１．５Ｍ ＨＣｌで洗浄し、乾燥して、更なるモルのＨＣｌを含有する表題化合物（２１．４ｇ；３４．４ミリモル）を白色固体として得た。
収率８６％。
ＴＬＣ：（溶出液Ｂ）Ｒf ０．６８，
ＨＰＬＣ（方法Ｅ）：９６．９％（面積％），
ＨＰＬＣ（方法Ｆ）：ｅ．ｅ．＞９９．５％，
銀滴定（０．１Ｎ ＡｇＮＯ₃ ）：９７．３％，
¹Ｈ−ＮＭＲ， ¹³Ｃ−ＮＭＲ，ＩＲおよびＭＳスペクトルは表示される構造と一致した。
【００５２】
実施例３
出発（Ｓ）−５−オキソ−１，２−ピロリジンジカルボン酸１−（１，１−ジメチルエチル）２−メチルエステルの調製
ａ） 塩酸Ｌ−グルタミン酸ジメチルエステルの調製（IX；Ｒ₅ ＝−Ｍｅ，Ｒ₂ ＝Ｒ₃ ＝Ｈ）
【化２３】

０〜５℃において攪拌されたＭｅＯＨ（３．５Ｌ）中の塩酸Ｌ−グルタミン酸（VIII；Ｒ₂ ＝Ｒ₃ ＝Ｈ）（５５１ｇ；３モル）又はＬ−グルタミン酸（４４１．４ｇ；３モル）のいずれかの懸濁液に対して、ＳＯＣｌ₂ （７３２ｇ；６．１５モル）を２時間にわたって添加した。室温において３．５時間後、反応混合物は透明な溶液に変わり、これを２０時間攪拌した。溶媒を蒸発させて上記化合物（６５０．８ｇ）を濃厚なオイルとして与え、これを何ら精製することなく以下の工程において使用した。
ＴＬＣ：Ｒf ０．７９（溶出液Ａ），
銀滴定（０．１Ｎ ＡｇＮＯ₃ ）：１０５．３％，
¹Ｈ−ＮＭＲ， ¹³Ｃ−ＮＭＲ，およびＭＳスペクトルは表示される構造と一致した。
【００５３】
ｂ） Ｌ−５−オキソプロリンメチルエステルの調製（Ｘ；Ｒ₂ ＝Ｒ₃ ＝Ｈ，Ｒ₅ ＝Ｍｅ）
【化２４】

上記工程ａ）で得られた化合物（６５０．６ｇ）のＭｅＯＨ（１Ｌ）溶液に対して、メタノール（１．０８Ｌ；３．２４モル）中の３Ｍ ＫＯＨを０．５時間にわたって添加し、ＫＣｌの沈殿を生じさせ、これを濾過により除去した。その透明な溶液を濃縮し、（発生した更なるＫＣｌの沈殿として）濾過し、蒸発させた。環化反応により生じるＭｅＯＨを蒸留しながら、その残留物を１１５℃において大気圧で約１時間加熱して、無色オイルとして粗生成物（４４７ｇ）を得て、これを精製することなく次の工程において使用した。
ＴＬＣ：Ｒf ０．７１（溶出液Ａ），
ＨＰＬＣ：Ｓ／Ｒ比９９．０：１．０（方法Ａ），
¹Ｈ−ＮＭＲ， ¹³Ｃ−ＮＭＲ，およびＭＳスペクトルは表示される構造と一致した。
【００５４】
ｃ） （Ｓ）−５−オキソ−１，２−ピロリジンジカルボン酸１−（１，１−ジメチルエチル）２−メチルエステルの調製（II：Ｒ₂ ＝Ｒ₃ ＝Ｈ，Ｒ₅ ＝Ｍｅ，Ｒ₄ ＝−ＣＯＯ−ｔ−Ｂｕ）
【化２５】

１５〜１８℃で攪拌されたアセトニトリル（２．８Ｌ）中の上記工程ｂ）で得られた化合物（４４７ｇ）および４−（ジメチルアミノ）ピリジン（６．１ｇ；０．０５モル）の濁った溶液に対して、ジ−ｔ−ブチルジカーボネート（６１１ｇ；２．８モル）を１時間にわたって添加した。２時間後、溶媒を蒸発させた。その残留物をＥｔＯＡｃ中に溶解させ、水性ｐＨ５．７リン酸緩衝液およびＨ₂Ｏで洗浄した。乾燥後、溶媒を蒸発させて、表題化合物を濃厚なオイルとして得た。これをＥｔＯＡｃ中に溶解させ、その溶液をｎ−ヘキサンでゆっくりと希釈して結晶化を促した。室温において１５時間後、固体を濾過し、ｎ−ヘキサンで洗浄し、乾燥して、表題化合物（４７４．３ｇ；１．９５モル）を白色固体として得た。
収率６５％。母液および洗浄液を合せて、蒸発させた。そのオイル状残留物をｎ−ヘキサンで処理して、第一の結晶化物と同様の純度の白っぽい固体として表題化合物の第二の結晶化物（７３ｇ；０．３モル）（収率１０％）を得た。グルタミン酸からの全収率７５％。
ｍｐ：７０〜７１．５℃，
ＴＬＣ：Ｒf ０．７４（溶出液Ｂ），
ＨＰＬＣ（方法Ｂ）：
第一結晶化物９９．６％（面積％），
第二結晶化物９８．８％（面積％），
ＨＰＬＣ（方法Ｂ）：Ｓ／Ｒ比
第一結晶化物１００：０，
第二結晶化物１００：０，
¹Ｈ−ＮＭＲ， ¹³Ｃ−ＮＭＲ，ＩＲおよびＭＳスペクトルは表示される構造と一致した。
【００５５】
このようにして得られた化合物は次に本発明に直接に用いることができる。

Claims (9)

1. 一般式（Ｉ）
   

   

   ［式中；Ｒ₀ はＨまたはＯＨであり、
   Ｒ₁ はＨ、α−ＯＨまたはβ−ＯＨであり、
   Ｒ₂ およびＲ₃ は独立して、水素であるか、又はアリールで置換されてよい直鎖もしくは分岐鎖の（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル0であり、
   Ｒ₅ は直鎖もしくは分岐鎖の（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルであり、
   Ｒ₆ は直鎖もしくは分岐鎖の（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルまたはベンジル基である。］
   の胆汁酸エステル誘導体の調製方法であって、式（II）
   

   

   ［式中、Ｒ₂ 、Ｒ₃ およびＲ₅ は上で定義した通りであり、Ｒ₄ はtert−ブトキシカルボニルである。］の化合物に、一般式（Ｖ）
   

   

   ［式中、Ｒ₀ 、Ｒ₁ およびＲ₆ は上で定義した通りである。］の化合物で処理することによるアミド交換を大気圧で行って、式（VI）
   

   

   の化合物を生じさせること、
   および酸条件の下でＲ₄ 保護基を選択的に開裂させることを含んでなる方法。
2. Ｒ₂ およびＲ₃ が水素である式（I）の化合物の調製のための請求項１の方法。
3. Ｒ₅ がメチル基である式（I）の化合物の調製のための請求項２の方法。
4. アミド交換が、７０ないし１３０℃の温度における、双極性非プロトン性溶媒および非極性有機溶媒より選択される溶媒中で、１ないし１．５モルの化合物（II）につき１モルの化合物（Ｖ）を用いて行われる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
5. 保護基Ｒ₄ の選択的開裂が（II）のモル当たり１〜３モルの酸を用いて行われ、ここで酸がＨＣｌガス、ＭｅＯＨ中のＨＣｌガス、ＭｅＯＨ中のＨＣｌ、ＣＨ₃ＣＯ₂Ｈ中のＨＢｒ、ＨＣｌ水溶液、Ｈ₂ＳＯ₄水溶液、ＣＦ₃ＣＯ₂Ｈ、ＣＨ₃ＣＯ₂Ｈ、シュウ酸、メタンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸より選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
6. 式（Ｉ）の最終化合物が、トリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンより選択される第三級アミンの添加により、遊離アミンとして単離される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
7. 次式
   

   

   の（３β，５β，１２α）−３−［［４（Ｓ）−４−アミノ−５−メトキシ−１，５−ジオキソペンチル］アミノ］−１２−ヒドロキシコラン−２４−酸メチルエステルの調製のための請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
8. 式（II）の出発化合物が、次式（VIII）
   

   

   の対応するＬ−グルタミン酸誘導体のエステル化により、ジ（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルエステル（IX）
   

   

   を与え、次に上記ジエステルの環化により、対応する５−オキソプロリン（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルエステル（Ｘ）
   

   

   を生じさせること、および当該Ｎ−保護基Ｒ ₄ を導入することにより調製される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
9. 式（VIII）の前記グルタミン酸が鉱酸との付加塩形態にあり、且つ前記（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルエステル（IX）が酸との付加塩形態にある、請求項８に記載の方法。