JP4251557B2 - Polymer analyzer and polymer analysis method - Google Patents
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Description
本発明は、高分子の分析装置および分析方法に関する。さらに詳しくは、本発明は、生体高分子を赤外線レーザーにより切断し、切断されたフラグメントを質量分析することにより、高分子を分析する装置および方法に関する。 The present invention relates to a polymer analyzer and an analysis method. More specifically, the present invention relates to an apparatus and method for analyzing a polymer by cutting a biopolymer with an infrared laser and mass-analyzing the cut fragment.
タンパク質や多糖などの高分子を分析するには、これらの高分子を切断して、そのフラグメントを質量分析することが多く行われている。 In order to analyze macromolecules such as proteins and polysaccharides, these macromolecules are often cleaved and their fragments are subjected to mass spectrometry.
そして、高分子の切断方法としては、例えば高分子がタンパク質や多糖の場合は、分解酵素を用いることが行われている。 As a method for cleaving the polymer, for example, when the polymer is a protein or a polysaccharide, a degrading enzyme is used.
しかし、分解酵素を用いた場合は、質量分析を行う前に、分解酵素を除去する必要があった。 However, when a decomposing enzyme is used, it was necessary to remove the decomposing enzyme before mass spectrometry.
また、高分子を切断する他の方法としては、タンパク質に赤外線レーザーを照射して分解するものが知られている（非特許文献１参照）。これは、タンパク質をイオン化し、真空中で強力なＣＯ２レーザーを照射するものであり、赤外線多光子吸収解離反応（Ｉｎｆｒａ Ｒｅｄ Ｍｕｌｔｉ Ｐｈｏｔｏｎ Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ；ＩＲＭＰＤ）として知られている（非特許文献１参照）。 In addition, as another method for cleaving a polymer, a method in which a protein is decomposed by irradiation with an infrared laser is known (see Non-Patent Document 1). This ionizes proteins and irradiates with a powerful CO 2 laser in vacuum, and is known as an infrared multi-photon absorption dissociation (IRMPD) (see Non-Patent Document 1). .
しかし、ここで用いられる赤外線レーザーは、波長が１０．６μｍに固定されたものであり、高分子中の切断される箇所を変化させることは、困難であった。 However, the wavelength of the infrared laser used here is fixed at 10.6 μm, and it is difficult to change the portion to be cut in the polymer.
本発明の課題は、高分子を切断して質量分析を行う場合に、切断される箇所を変化させることにより、種々のフラグメントを得、これを質量分析することにより、効率的に高分子を分析することができる装置および方法を提供することにある。 The object of the present invention is to analyze a polymer efficiently by mass-analyzing various fragments obtained by changing the position to be cut when the polymer is cut and mass spectrometry is performed. It is to provide an apparatus and method that can be used.
本発明者らは、波長を変化させた赤外線レーザーを高分子に照射することにより、上記課題を解決できることを見出し、本発明を完成するに至った。 The present inventors have found that the above problems can be solved by irradiating a polymer with an infrared laser having a wavelength changed, and have completed the present invention.
即ち、本発明は、イオン化された試料を保持するイオントラップ部と、前記イオントラップ部に保持されたイオン化された前記試料に、波長可変の赤外線レーザーを照射して前記試料を切断する赤外線レーザーを出力するレーザー出力部と、前記赤外線レーザーにより切断された前記試料の質量分析を行なう質量分析部と、を備え、前記赤外線レーザーの波長を変化させることにより、前記試料を特定の箇所で切断することを特徴とする、高分子分析装置である。 That is, the present invention provides an ion trap unit that holds an ionized sample, and an infrared laser that irradiates the ionized sample held in the ion trap unit with a wavelength-variable infrared laser to cut the sample. A laser output unit for outputting, and a mass analyzing unit for performing mass analysis of the sample cut by the infrared laser, and cutting the sample at a specific location by changing a wavelength of the infrared laser It is a polymer analyzer characterized by this.
また、本発明は、波長可変の赤外線レーザー出力部が、３．５〜９．６μｍの範囲で波長を変化させることができることを特徴とする、上記の分析装置である。 Further, the present invention is the above analyzer, wherein the wavelength-variable infrared laser output unit can change the wavelength in the range of 3.5 to 9.6 μm.
さらに、本発明は、波長可変の赤外線レーザー出力部が、５〜９．６μｍの範囲で波長を変化させることができることを特徴とする、上記の分析装置である。 Furthermore, the present invention is the above analyzer, wherein the wavelength-tunable infrared laser output unit can change the wavelength in the range of 5 to 9.6 μm.
また、本発明は、赤外線レーザーが、パルスレーザーであることを特徴とする、上記の分析装置である。 The present invention is also the above-described analyzer, wherein the infrared laser is a pulse laser.
また、本発明は、赤外線レーザー出力部が、自由電子レーザー出力装置であることを特徴とする、上記の分析装置である。 Moreover, this invention is said analyzer characterized by an infrared laser output part being a free electron laser output device.
また、本発明は、イオントラップ部が、超高真空型イオントラップであることを特徴とする、上記の分析装置である。 The present invention is also the above-described analyzer, wherein the ion trap section is an ultra-high vacuum type ion trap.
また、本発明は、質量分析部が、フーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴質量分析計であることを特徴とする、上記の分析装置である。 Moreover, this invention is said analyzer characterized by a mass-analysis part being a Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometer.
また、本発明は、試料が、タンパク質、ペプチド、糖類、ポリヌクレオチドおよびオリゴヌクレオチドからなる群より選ばれる少なくとも１種であることを特徴する、上記の分析装置である。 In addition, the present invention is the above analytical apparatus, wherein the sample is at least one selected from the group consisting of proteins, peptides, sugars, polynucleotides and oligonucleotides.
また、本発明は、イオン化された試料を保持するイオントラップ工程と、前記イオントラップ工程にて保持したイオン化された前記試料に波長可変の赤外線レーザーを照射し、前記試料を切断する赤外線レーザー照射工程と、前記赤外線レーザー照射工程にて切断された前記試料の質量分析を行なう質量分析工程と、を含み、前記赤外線レーザーの波長を変化させることにより、前記試料を特定の箇所で切断することを特徴とする、高分子分析方法である。 The present invention also provides an ion trap step for holding an ionized sample, and an infrared laser irradiation step for irradiating the ionized sample held in the ion trap step with a wavelength-variable infrared laser and cutting the sample. And a mass analysis step of performing mass analysis of the sample cut in the infrared laser irradiation step, and changing the wavelength of the infrared laser to cut the sample at a specific location. This is a polymer analysis method.
また、本発明は、波長可変の赤外線レーザーが、３．５〜９．６μｍの範囲で波長を変化させることができることを特徴とする、上記の分析方法である。 The present invention is also the above analysis method, characterized in that the wavelength-tunable infrared laser can change the wavelength in the range of 3.5 to 9.6 μm.
さらに、本発明は、波長可変の赤外線レーザーが、５〜９．６μｍの範囲で波長を変化させることができることを特徴とする、上記の分析方法である。 Furthermore, the present invention is the above analysis method, characterized in that the wavelength-tunable infrared laser can change the wavelength in the range of 5 to 9.6 μm.
また、本発明は、赤外線レーザーが、パルスレーザーであることを特徴とする、上記の分析方法である。 Moreover, this invention is said analysis method characterized by an infrared laser being a pulse laser.
また、本発明は、赤外線レーザーが、自由電子レーザーであることを特徴とする、上記の分析方法である。 The present invention is also the above analysis method, wherein the infrared laser is a free electron laser.
また、本発明は、イオントラップ工程が、超高真空型イオントラップにより行なわれることを特徴とする、上記の分析方法である。 The present invention is also the above analysis method, wherein the ion trap step is performed by an ultra-high vacuum type ion trap.
また、本発明は、質量分析が、フーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴質量分析計により行われることを特徴とする、上記の分析方法である。 Moreover, this invention is said analysis method characterized by mass spectrometry being performed with a Fourier-transform ion cyclotron resonance mass spectrometer.
また、本発明は、試料が、タンパク質、ペプチド、糖類、ポリヌクレオチドおよびオリゴヌクレオチドからなる群より選ばれる少なくとも１種であることを特徴する、上記の分析方法である。 The present invention is also the above analysis method, wherein the sample is at least one selected from the group consisting of proteins, peptides, saccharides, polynucleotides and oligonucleotides.
本発明の装置および方法を用いることにより、高分子に赤外線レーザーを照射して切断する場合に、赤外線レーザーの波長を変化させることにより、高分子中の切断される箇所を変化させることができる。これにより、高分子の種々のフラグメントを得ることができ、これらを質量分析することにより、効率的に高分子を分析することができることとなる。 By using the apparatus and method of the present invention, when the polymer is cut by irradiation with an infrared laser, the location of the polymer to be cut can be changed by changing the wavelength of the infrared laser. Thereby, various fragments of the polymer can be obtained, and the polymer can be efficiently analyzed by mass spectrometry of these fragments.
以下、本発明を図面を参照しながら説明する。
図１は、本発明の高分子分析装置の構成を示す図である。図１において、本発明の高分子分析装置１０は、レーザー出力部１、レンズ２、パワーメータ３、質量分析部４、イオン化部５から構成されており、質量分析部４はイオントラップ部８を備えている。イオン化部５は、図示しない高分子の試料をイオン化し、イオン化された試料はイオントラップ部８に保持される。一方、レーザー出力部１から出力された赤外線レーザー１２は、レンズ２、パワーメータ３を通り、イオントラップ部８に保持された試料に照射される。そして、レーザーを照射されることにより高分子の試料が切断されることとなる。ここで、レーザー出力部１は、出力されるレーザーの波長を変えることができるようになっており、波長を変化させることにより、高分子中の切断される箇所を変化させることができる。そして、切断された試料は、質量分析部４により、その分子量が測定される。したがって、赤外線レーザーの波長を変化させることにより、高分子の種々のフラグメントを得ることができ、これを質量分析することにより、効率的に高分子を分析することが可能となる。
The present invention will be described below with reference to the drawings.
FIG. 1 is a diagram showing the configuration of the polymer analyzer of the present invention. In FIG. 1, the polymer analyzer 10 of the present invention includes a laser output unit 1, a lens 2, a power meter 3, a mass analysis unit 4, and an ionization unit 5, and the mass analysis unit 4 includes an ion trap unit 8. I have. The ionization unit 5 ionizes a polymer sample (not shown), and the ionized sample is held in the ion trap unit 8. On the other hand, the infrared laser 12 output from the laser output unit 1 passes through the lens 2 and the power meter 3 and is irradiated to the sample held in the ion trap unit 8. The polymer sample is cut by being irradiated with the laser. Here, the laser output unit 1 can change the wavelength of the output laser, and can change the position to be cut in the polymer by changing the wavelength. Then, the molecular weight of the cut sample is measured by the mass analyzer 4. Therefore, various fragments of the polymer can be obtained by changing the wavelength of the infrared laser, and the polymer can be efficiently analyzed by mass spectrometry.
本発明に用いられる赤外線レーザー出力部としては、波長を変化させることができるものであれば特に制限はないが、自由電子レーザー出力装置を好ましい例として挙げることができる。 The infrared laser output unit used in the present invention is not particularly limited as long as it can change the wavelength, but a free electron laser output device can be mentioned as a preferred example.
波長を変化させるレーザーの波長範囲としては、高分子を切断できる波長であれば特に制限はないが、３．５〜９．６μｍを好ましい範囲として挙げることができ、さらに好ましくは、５〜９．６μｍの波長領域である。特に、５〜９．６μｍの波長領域は指紋（Ｆｉｎｇｅｒ Ｐｒｉｎｔ）領域とも呼ばれ、種々の生体高分子に特徴的な赤外吸収を示す領域である。従って、これらの指紋領域の波長の赤外線レーザーを照射することにより、目的とする高分子に特有の箇所で、高分子を切断することが可能となる。 The wavelength range of the laser that changes the wavelength is not particularly limited as long as it is a wavelength that can cut the polymer, but a preferable range is 3.5 to 9.6 μm, and more preferably 5 to 9. The wavelength region is 6 μm. In particular, the wavelength region of 5 to 9.6 μm is also called a fingerprint region, and is a region that exhibits infrared absorption characteristic of various biopolymers. Therefore, by irradiating with an infrared laser having a wavelength in these fingerprint regions, the polymer can be cut at a location peculiar to the target polymer.
本発明に用いられる赤外線レーザーとしては、パルスレーザーであることが好ましい。この場合のパルス幅としては、切断する高分子や用いる赤外線レーザーの波長に応じて適宜決定されるが、例えば、１フェムト秒〜１００ナノ秒のものを挙げることができる。 The infrared laser used in the present invention is preferably a pulse laser. The pulse width in this case is appropriately determined depending on the polymer to be cut and the wavelength of the infrared laser used, and examples thereof include those of 1 femtosecond to 100 nanoseconds.
本発明に用いられる赤外線レーザーの照射エネルギーとしては、高分子を切断できるものであれば特に制限はないが、例えば、１〜１０００ｍＪ、好ましくは１０〜５００ｍＪを挙げることができる。 The irradiation energy of the infrared laser used in the present invention is not particularly limited as long as it can cut the polymer, and examples thereof include 1-1000 mJ, preferably 10-500 mJ.
また、本発明に用いられるイオントラップ部としては、イオン化された試料を保持でき、レーザーを照射できるものであれば特に制限はないが、超高真空型イオントラップを好ましい例として挙げることができる。 The ion trap part used in the present invention is not particularly limited as long as it can hold an ionized sample and can be irradiated with a laser, but an ultrahigh vacuum type ion trap can be cited as a preferred example.
本発明に用いられる質量分析装置としては、切断された試料の質量分析ができるものであれば特に制限はないが、例えば、飛行時間型質量分析装置（ＴＯＦ）、フーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴質量分析計等を挙げることができる。 The mass spectrometer used in the present invention is not particularly limited as long as it can perform mass analysis of a cut sample. For example, time-of-flight mass spectrometer (TOF), Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometer Etc.
本発明に用いられる高分子としては、特に制限はないが、タンパク質、ペプチド、糖類、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド等の生体高分子を好ましい例として挙げることができる。 Although there is no restriction | limiting in particular as a polymer used for this invention, Biopolymers, such as a protein, a peptide, saccharides, a polynucleotide, and an oligonucleotide, can be mentioned as a preferable example.
また、図１において、イオン化部としては、高分子をイオン化できるものであれば特に制限はないが、例えば、ＭＡＬＤＩやＥＳＩを挙げることができる。 In FIG. 1, the ionization part is not particularly limited as long as it can ionize a polymer, and examples thereof include MALDI and ESI.
図２は、波長可変赤外線レーザーとして、自由電子レーザーを用いた場合の光学系を示す図である。図２（ａ）は正面図、図２（ｂ）は上面図を示す。図２において、自由電子レーザーの出射口１５から放出された赤外線レーザー１２は、ミラーＭ１〜Ｍ８によって反射を繰り返し、レンズ２を通って、質量分析部４に入射される。質量分析部４は、図示しないイオントラップ部を備えており、イオントラップ部には、イオン化された高分子試料が保持されている。そして、高分子試料にレーザー１２が照射されるようになっている。 FIG. 2 is a diagram showing an optical system when a free electron laser is used as the wavelength tunable infrared laser. 2A shows a front view, and FIG. 2B shows a top view. In FIG. 2, the infrared laser 12 emitted from the free electron laser exit 15 is repeatedly reflected by mirrors M <b> 1 to M <b> 8, passes through the lens 2, and enters the mass analyzer 4. The mass analyzer 4 includes an ion trap unit (not shown), and an ionized polymer sample is held in the ion trap unit. The polymer sample is irradiated with the laser 12.
以下、本発明の実施例を説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。 Examples of the present invention will be described below, but the present invention is not limited to these examples.
＜ペプチド：サブスタンス Ｐの切断の例＞
図１の高分子分析装置を用いて、以下の手順でサブスタンス Ｐ（配列番号：１、ＳＵＢ Ｐ）を切断した。
<Example of cleavage of peptide: substance P>
Substance P (SEQ ID NO: 1, SUB P) was cleaved by the following procedure using the polymer analyzer of FIG.
なお、サブスタンス Ｐは、神経細胞から放出される化学伝達物質である神経ペプチドとして知られており、そのアミノ酸配列は、「Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ」である。 Substance P is known as a neuropeptide that is a chemical transmitter released from nerve cells, and its amino acid sequence is “Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu”. -Met ".
まず、サブスタンス Ｐ粉末（ＳＩＧＭＡ社製）をＭｉｌｌｉＱ水で溶解して３．７ｐｍｏｌ／μＬ溶液とし、２μＬをｎａｎｏ−ＥＳＩスプレーを用い質量分析装置内の超高真空イオン・トラップにサブスタンス Ｐをイオンとしてトラップした。 First, substance P powder (manufactured by SIGMA) was dissolved in MilliQ water to give a 3.7 pmol / μL solution, and 2 μL was added to the ultrahigh vacuum ion trap in the mass spectrometer using nano-ESI spray as the substance P as ions. Trapped.
図１に示す高分子分析装置を用いて、波長可変赤外線レーザーを特定の発振波長に設定し、レーザー光をトラップされたイオンに３分間照射する測定を２回行い、蓄積されたデータの質量解析を実行することでサブスタンス Ｐの切断箇所を同定した。 Using the polymer analyzer shown in Fig. 1, the wavelength tunable infrared laser is set to a specific oscillation wavelength, the laser beam is irradiated twice for 3 minutes and the mass analysis of the accumulated data is performed. To identify the site of substance P cleavage.
なお、質量分析は、フーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴質量分析計（Ｂｒｕｋｅｒ Ｄａｌｔｏｎｉｃｓ社製 ＦＴＭＳ ４．７Ｔ）を用いて行った。 Mass spectrometry was performed using a Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometer (FTMS 4.7T manufactured by Bruker Daltonics).
波長可変赤外線レーザーを用いて照射実験を行う際、使用したレーザーは、パルス幅約２ｐｓの極短ミクロパルスであることを特徴とし、このパルスは３５０ｐｓ毎に出力されるものである。これらのミクロパルスから幅１μｓのマクロパルスが形成され、そのマクロパルスは５Ｈｚで出力された。 When performing an irradiation experiment using a wavelength tunable infrared laser, the laser used is an ultrashort micro pulse with a pulse width of about 2 ps, and this pulse is output every 350 ps. A macro pulse having a width of 1 μs was formed from these micro pulses, and the macro pulse was output at 5 Hz.
その結果は、図３に示すとおりである。図３には、２価の親イオン［ＳＵＢ Ｐ＋２Ｈ］２＋（ｍ／ｚ＝６７４．３Ｄａ）に波長可変レーザーを照射することで、フラグメントの波長依存によるＦＴＭＳ質量スペクトラが示されている。 The result is as shown in FIG. FIG. 3 shows an FTMS mass spectrum depending on the wavelength of a fragment by irradiating a tunable laser to a divalent parent ion [SUB P + 2H] 2+ (m / z = 674.3 Da).
このＦＴＭＳ質量スペクトラでは、Ｐｒｏ−Ｌｙｓ間のペプチド結合が切断されｍ／ｚ＝１０９４．８Ｄａと２５４．２Ｄａに相当するピーク（ｂ２／ｙ９）が観測され、またｍ／ｚ＝６００．３ＤａにはＬｅｕ−Ｍｅｔ間のペプチド結合が切断され２価にチャージしたｂ１０ ２＋のピークが観測できた。 In this FTMS mass spectrum, the peptide bond between Pro-Lys is cleaved, and peaks (b 2 / y 9 ) corresponding to m / z = 1094.8 Da and 254.2 Da are observed, and m / z = 600.3 Da. In Fig. 2, a peak of b 10 2+ charged with a bivalent charged peptide bond between Leu and Met was observed.
図４に、サブスタンス Ｐ イオンに照射したレーザーの波長と観測されたイオンの関係を示す。 FIG. 4 shows the relationship between the wavelength of the laser irradiated to substance P ions and the observed ions.
この図から明らかなように、Ｐｒｏ−Ｌｙｓ及びＬｅｕ−Ｍｅｔ間のペプチド結合が切断され検出されたフラグメント・ピーク（ｂ２／ｙ９， ｂ１０ ２＋）は、５．９〜８．５μｍの波長の範囲で観測されたが、８．７μｍ波長以上では観測できなかった。特に、ペプチドやタンパク質の赤外スペクトルにおいて強い吸光度を示すバンドとして知られるアミドＩに相当する６．１μｍでは、フラグメント強度が最も強く観測された。 As is clear from this figure, the fragment peak (b 2 / y 9 , b 10 2+ ) detected by cleaving the peptide bond between Pro-Lys and Leu-Met has a wavelength of 5.9 to 8.5 μm. However, it could not be observed above 8.7 μm wavelength. Particularly, the strongest fragment intensity was observed at 6.1 μm corresponding to amide I known as a band showing strong absorbance in the infrared spectrum of peptides and proteins.
＜糖鎖：シアリル ルィスＸの切断の例＞
実施例１と同様の方法を用い、波長依存性による糖鎖切断部位の選択性を調査した。ここで実験対象としたのは５糖からなるシアリル ルィスＸである。
<Example of cleavage of sugar chain: sialyl Lewis X>
Using the same method as in Example 1, the selectivity of the sugar chain cleavage site due to wavelength dependence was investigated. The subject of the experiment is sialyl Lewis X consisting of pentasaccharide.
図５は、１価の親イオン［ＳＬＥＸ＋Ｎａ］＋（ｍ／ｚ＝８４３．４Ｄａ）に０．１μｍ間隔で５．７μｍから９．５μｍまでのレーザー光を照射して得られた、フラグメント・イオンの波長依存性を示した質量スペクトラである。 FIG. 5 shows fragment ions obtained by irradiating a monovalent parent ion [SLEX + Na] + (m / z = 843.4 Da) with laser light from 5.7 μm to 9.5 μm at intervals of 0.1 μm. This is a mass spectrum showing the wavelength dependence of.
図６に、シアリル ルィスＸ イオンに照射したレーザーの波長と観測されたイオンの関係を示す。シアリル ルィスＸ イオンでは８．５μｍから９．５μｍにおいては［（Ｍ−ＮｅｕＡｃ）＋Ｎａ］＋（ｍ／ｚ＝５５２．２Ｄａ）や［（Ｍ−ＮｅｕＡｃ−Ｆｕｃ）＋Ｎａ］＋（ｍ／ｚ＝４０６．２Ｄａ）に相当するピークが強く観測された。これらは親イオンからＮ−アセチルノイラミン酸（ＮｅｕＡｃ）やフコース（Ｆｕｃ）のグリコシド結合が切断されたピークに相当している。この図に示されるように糖鎖では、ペプチドとは異なりアミドＩやアミドＩＩに相当する５．７μｍ〜６．５μｍの波長域の間にフラグメント・ピークを観測できなかったが、グリコシド結合の結合伸縮に相当する９μｍ付近では顕著にフラグメント・ピークを観測できた。この結果はペプチド／タンパク質のペプチド結合と糖鎖のグリコシド結合の波長による選択的切断を意味している。 FIG. 6 shows the relationship between the wavelength of the laser irradiated to sialyl Lewis X ions and the observed ions. In the case of sialyl Lewis X ions, [(M-NeuAc) + Na] + (m / z = 552.2 Da) and [(M-NeuAc-Fuc) + Na] + (m / z = 406) from 8.5 μm to 9.5 μm. A peak corresponding to 2 Da) was strongly observed. These correspond to peaks in which the glycosidic bond of N-acetylneuraminic acid (NeuAc) or fucose (Fuc) is cleaved from the parent ion. As shown in this figure, in the sugar chain, unlike peptides, fragment peaks could not be observed in the wavelength range of 5.7 μm to 6.5 μm corresponding to amide I or amide II. A fragment peak was remarkably observed in the vicinity of 9 μm corresponding to expansion and contraction. This result means selective cleavage by the wavelength of peptide bond of peptide / protein and glycosidic bond of sugar chain.
なお、上記の実験で用いた波長可変赤外線レーザー発振器の波長ごとのレーザー光強度は、図７に示すとおりである。 In addition, the laser beam intensity | strength for every wavelength of the wavelength variable infrared laser oscillator used in said experiment is as showing in FIG.
以上の結果から、本発明の高分子分析装置および高分子分析方法の有用性が確認された。 From the above results, the usefulness of the polymer analyzer and the polymer analysis method of the present invention was confirmed.
１ レーザー出力部
２ レンズ
３ パワーメータ
４ 質量分析部
５ イオン化部
８ イオントラップ部
１０ 高分子分析装置
１２ 赤外線レーザー
１５ 自由電子レーザーの出射口
Ｍ１〜Ｍ８ ミラー
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 Laser output part 2 Lens 3 Power meter 4 Mass analysis part 5 Ionization part 8 Ion trap part 10 Polymer analyzer 12 Infrared laser 15 Free electron laser exit port M1-M8 Mirror
Claims (7)
前記イオントラップ工程にて保持したイオン化された前記試料に波長可変の赤外線レーザーを照射し、前記試料を切断する赤外線レーザー照射工程と、
前記赤外線レーザー照射工程にて切断された前記試料の質量分析を行なう質量分析工程と、を含み、
前記赤外線レーザーが、パルスレーザーであり、前記赤外線レーザーの波長を変化させることにより、前記波長に対応する特定の箇所で前記試料を切断することを特徴とする、高分子分析方法。 An ion trap process for holding an ionized sample;
Infrared laser irradiation step of irradiating the ionized sample held in the ion trap step with a wavelength tunable infrared laser and cutting the sample;
A mass analysis step for performing mass analysis of the sample cut in the infrared laser irradiation step,
The polymer analysis method, wherein the infrared laser is a pulse laser, and the sample is cut at a specific location corresponding to the wavelength by changing the wavelength of the infrared laser.
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