JP4070301B2 - Electrophoresis analyzer and analysis method - Google Patents

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Description

【0001】
【発明の属する技術分野】
本発明は、電気泳動分析装置および分析方法に関する。本発明は特に、複数の毛細管または微細流路を泳動媒体としてDNA(デオキシリボ核酸)などの生体試料を分析するDNAシーケンサ(DNA塩基配列解析装置)に用いるに好適な電気泳動装置および分析方法に関する。
【0002】
【従来の技術】
電気泳動を基盤にしたDNA分析技術、特に、DNAシーケンサ(DNA塩基配列解析装置)が、広く普及してきている。分析ニーズの高まりに応じて、分析処理量を向上させる必要が増加している。分析処理量を向上させる一つの方法として、電気泳動媒体の集積化が上げられる。
【0003】
特開平6−138037 号公報には、電源によって電圧を印加された陰極電極槽と陽極電極槽の間に設けた試料分離部がキャピラリーからなる泳動路である電気泳動装置であって、一端がそれぞれ前記陰極電極槽または前記陽極電極槽に接続されたキャピラリー対の他端を光学セル中にその軸をほぼ一致させ一定の間隙を保持して対向させて配置して前記光学セルを貫通する泳動路と、前記光学セルの外部の設けられたシース液容器と、該シース液容器から前記光学セル内にシース液を注入して流し試料分離部である上流側の泳動部である泳動分離用キャピラリー端から泳動される試料をシースフロー状態にして対向するキャピラリーに導くシースフロー形成手段と、前記間隙部を光学検出部とし該光学検出部に光源から光照射して試料の検出を行う光検出手段を有し、複数のキャピラリー対によって形成される複数の光学検出部を前記光学セル中に配置し、前記複数の光学検出部が互いに電解液を介して連結し、前記複数の光学検出部を一直線上に位置するように前記複数のキャピラリー対を整列して配置し、全ての光学検出部を同時に照射するように励起光を前記直線に沿って照射して前記各キャピラリーを泳動流出する試料から発せられる蛍光を同時に検出する電気泳動装置が記載されている。
【0004】
また、第2の方式としては、米国特許第5192412 号明細書や特開平5−93711号公報に記載のように、ガラス板表面に微細な溝を形成させ泳動路として利用するマルチチャンネル方式も提案されている。この方式においても、多数の試料を同時に、かつ高速に分離分析できるようになる。
【0005】
上述したようなマルチチャンネル方式においては、最初に、試料容器に収容された試料中に、電極とキャピラリーの一端を挿入してから、キャピラリー両端に電圧を印加し、電気的に試料を移動させてキャピラリー内に導入し、次に、バッファ槽のバッファ液中に、電極とキャピラリーの一端を挿入してから、キャピラリー両端に電圧を印加し、電気泳動により試料を分離する。
【0006】
【発明が解決しようとする課題】
分析処理量を向上させるために同時に分析する試料の数を数十個にすると、電極やキャピラリーを挿入する作業が困難なものとなる。
【0007】
本発明は、マルチキャピラリー方式を用いるに当って、装置の構造・構成をコンパクトにして取扱い易いものになし、分析作業の容易な電気泳動分析装置および使用し易くした分析方法を提供することを目的とする。
【0008】
【課題を解決するための手段】
本発明は、キャピラリーとこれに組み合わさせるシースフローセルを縦方向配列とし、試料を載置するサンプルプレートを平面方向配列とし、両配列の交わる線にバッファ液タンクを配置し、該バッファ液タンク内の液を介して双方を接合するようにしたことを特徴とする。二つの配列を構成するそれぞれの装置群は、縦板部と平面板部とからなる台座上に載置することによって、装置を簡便に組み立てて使用に供することができるようにした。また、本発明は、使用頻度の高い装置と使用頻度の低い装置とでは台座上への載置の仕方を区別し、使い頻度の高い装置、例えばキャピラリーとシースフローセルの組み合せあるいはサンプルプレートは台座に固着することなく載置するものとした。
【0009】
また、本発明は、このような装置構造を採用することによって、既存のピペットを変更することなしに改良されたピペッティング方法を採用し得るものとした。
【0010】
本発明は具体的には、次に掲げる装置および方法を提供する。
【0011】
本発明は、複数の試料成分を光学的に電気泳動分析する電気泳動分析装置において、縦板部と平面板部とから構成される台座を有し、シースフローセルを具備するシースフローセル台、該シースフローセルに組み合わされるキャピラリーおよび該キャピラリーの温度コントロールを行うホットプレート並びに前記シースフローセルにレーザ光を照射するレーザ照射口部材から構成される一群を前記台座の縦板部に装着し、バッファ液タンクおよび試料を収容するサンプルトレイをテーブル上に載置し、該テーブルを前記台座の平面板部に装置し、かつ前述のように装置された前記一群およびテーブルが前記台座と共に分析装置本体に形成された試料室に配置される電気泳動分析装置を提供する。
【0012】
本発明は、複数の試料成分を光学的に電気泳動分析する電気泳動分析装置において、シースフローセル、該シースフローセルに組み合わされるキャピラリーおよび該キャピラリーの温度コントロールを行うホットプレートのユニット並びに前記シースフローセルにレーザ光を照射するレーザ照射口部材から構成される一群を縦面上に配設し、並列した試料容器を具備するサンプルトレイを複数個平面上に配設し、前記双方を配設する二つの面が交わる線にバッファ液タンクを配設し、前記キャピラリーの先端を前記バッファ液タンク内の液に浸した電気泳動分析装置を提供する。
【0013】
本発明は、複数の試料成分を光学的に電気泳動分析する電気泳動分析装置において、縦板部と平面板部とから構成される台座を有し、該台座の縦板部にレーザ光を照射するレーザ照射口部材および温度コントロールを行うホットプレートを固着し、シースフローセルおよびキャピラリーの組み合せ体を、レーザ光がシースフローセルを照射し、ホットプレートが前記キャピラリーを加温するようにして、前記縦板部に固着することなく載置し、複数のサンプルトレイをトレイホルダ上に固着し、該トレイホルダおよびバッファ液タンクをテーブル上に固着することなく載置し、かつ前記テーブルを分析装置本体に形成された試料室の保持部に固着することなくスライドして載置可能にした電気泳動分析装置を提供する。
【0014】
本発明は、複数の試料成分を光学的に電気泳動分析する電気泳動分析装置において、レーザ光を発するレーザを収容する箱体、試料を収納する試料収納室部および試料の分析を行う試料室部から構成される箱状のDNAシーケンサ本体、および画面入出力装置を含んで構成され、前記試料室部には、シースフローセル、該シースフローセルに組み合わされたキャピラリーおよび該キャピラリーの温度コントロールを行うホットプレートとのユニット並びに前記シースフローセルにレーザ光を照射するレーザ照射口部から構成され、縦方向に配設される一群と、バッファ液タンクおよびDNA試料を収容するサンプルトレイから構成され、横方向に配設される他の一群とが配設され、前記試料室部の開閉扉が縦方向にスライド可能に配設されている電気泳動分析装置を提供する。
【0015】
本発明は、複数の試料成分を光学的に電気泳動分析する電気泳動分析方法において、マイクロタイタープレートを用いて試料の準備を行い、隣合う試料容器間のピッチPを前記マイクロタイタープレートのピッチの整数分の1にしたサンプルトレイを準備し、前記マイクロタイタープレートから準備された試料をピペッティングするピペットのピッチを、該マイクロタイタープレートのピペットと等しくし、該マイクロタイタープレートから前記試料容器に試料をピペッティングする際、整数分の1の分母の数を置いて試料を分けてピペッティングし、および前記サンプルトレイに並行で、縦方向に配設したシースフローセルと該シースフローセルに組み合わされるキャピラリーに前記ピペッティングした試料を吸入することによって分析を行う電気泳動分析方法を提供する。
【0016】
【発明の実施の形態】
以下、本発明に係る一実施例を図面に基づいて説明する。
【0017】
図1は、全体構成概略を示す。図において、DNAシーケンサ装置は、レーザ部1,DNAシーケンサ本体部2,画面入出力装置3から構成され、画面入力出力装置3はパソコン4およびキーボード5からなる。これらの装置は台6上に配設される。
【0018】
図2は、レーザ部1および本体部2の概略構成を示す。レーザ部1は、レーザ光を発する2つのレーザ11,12、それらからのレーザ光を90゜方向転換する回転式ミラー13を有する箱体14からなる。本体部2は、試料を収納し、その移動を行う試料収納室部15および試料の分析を行う試料室部16から構成される。これらは、箱状をなし、DNAシーケンサ本体となる。試料室部16を密閉するために、縦方向にスライド可能にして試料扉17が設けてある。また、試料収納室部15には廃液扉18が設けてある。
【0019】
図3は、DNAシーケンサ本体の試料扉17が開放されている場合の配置構成を示し、図4は試料扉17が閉鎖されている場合の配置構成を示す。図3にあっては、試料室部16内に配設されたホットプレート94,サンプルトレイホルダ34およびシース液の廃液貯めとしてのドレイン瓶69および安全ロック解除ボタン19が見える。これらの構成・配置の詳細については後述する。
【0020】
図5は、全体構成を示す原理説明図である。
【0021】
テーブル30の上には、バッファ(電解液)を収容した泳動バッファ槽としてのバッファ液タンク32が配置されている。バッファ液タンク32の中には、白金電極33が張架されており、白金電極33は、バッファと接触している。また、テーブル10の上には、サンプルトレイホルダ34を介して、3個のサンプルトレイ100A,100B,100Cが配置されている。サンプルトレイ100Aは、図2を用いて後述するように、48個の試料容器を備えている。サンプルトレイ100Aは、止めネジS1,S2によってサンプルトレイホルダ34に固定されており、サンプルトレイホルダ34から取り外し可能である。サンプルトレイ100Aの底部は、SUSのような導電性金属で構成されており、SUSのような導電性金属で構成されてサンプルトレイホルダ34と電気的に導通している。サンプルトレイ100B,100Cも同様にして、48個の試料容器を備えており、サンプルトレイ100B,100Cの底部は、サンプルトレイホルダ34と電気的に導通している。
【0022】
48本のキャピラリー40が並列的に配置されており、その内部には、分離用のゲルマトリックスが充填されている。キャピラリー40の下端側はキャピラリー押さえ42により固定され、その下端はバッファ液タンク33内のバッファに挿入されている。キャピラリー40の上端側は、キャピラリー押さえ44により固定され、その上端は、カプラ46に接続固定されている。
【0023】
カプラ46は、接地側の電極プラグ52に接続され、電極プラグ52は、高電圧電源50の接地極に接続されている。また、サンプルトレイホルダ34は、高圧側の電極プラグ54と接続され、バッファ液タンク32の白金電極33は、高圧側の電極プラグ56と接続され、電極プラグ54,56は、高電圧電源50の高圧(−)極に接続されている。
【0024】
カプラ46は、シースフローセル60に接続されている。シースフローセル60には、シース液タンク62の中に保持されたシース液64が、重力によって導入される。キャピラリー40の中で泳動分離され、キャピラリー40の泳動終端部から流出する分離された試料は、シース液によって各キャピラリーの試料成分が互いに分離されたまま上部側に運ばれる。
【0025】
シースフローセル60の側面方向(図示Y方向)からは、レーザ11,12から出射さたレーザ光が、レンズ72によって平行光束にコリメートされた上で、照射され、シースフローセル60中の分離された試料を励起する。レーザ11,12とレンズ72の間には、シャッタ74が設けられており、試料の励起を選択的に行えるようになっている。レーザ光照射によって発生した蛍光は、Y軸方向に直交するX軸方向から取り出され、集光レンズ82によって集光され、フィルタ84によって検出すべき波長の光が選択され、さらに、結像レンズ86によって、2次元CCDセンサ等の光センサ88上に結像する。光センサ88によって検出された信号は、信号処理装置である画面処理装置3に送られ、信号処理され、蛍光の波長により末端塩基の種類を識別し、計測信号をもとに核酸試料の塩基配列が解析される。
【0026】
DNA(デオキシリボ核酸)の塩基配列の決定では、一般的に4波長の計測が行われる。各極大波長が、それぞれ、DNA断片の末端の塩基の種類に対応するように、予め反応操作で蛍光色素が結合される。
【0027】
シースフローセル60の上端部には、ドレインアダプタ66が取り付けられており、キャピラリー40からシースフローセル60内に流入した試料を、廃液として、ドレインチューブ67を通って、ドレイン瓶69に排出する。ドレインチューブ67の途中には、オリフィスや複数本のキャピラリーから構成されるフローコントローラ68が設けられており、ドレインチューブ67の流路抵抗を一定として、流量を制御している。
【0028】
次に、本実施形態による電気泳動分析装置の全体的な動作について説明する。
【0029】
予めサンプルトレイ100A,100B,100Cのそれぞれ48個の試料容器には、所定量の分析試料が分注されている。試料の収容されたサンプルトレイ100A,100B,100Cは、サンプルトレイホルダ34に止めネジS1,S2により固定される。
【0030】
キャピラリー40の下端が試料中に挿入されている状態で、サンプルトレイ100Aとカプラ46の間に高電圧電源50から高電圧を印加することにより、試料容器中の試料は、キャピラリー40内に導入される。
【0031】
キャピラリー40の下端がバッファ中に挿入されている状態で、白金電極33とカプラ46の間に高電圧電源50から高電圧を印加することにより、キャピラリー40に導入されている試料は、電気泳動により分離される。
【0032】
サンプルトレイ100Aの中の試料の分析が終了すると、上述したのと同様の手順で、サンプルトレイ100B,100C内の試料がキャピラリー40に導入され、電気泳動分離される。
【0033】
一つの試料の分析には、約2時間程度を要するため、図5に示すように、サンプルトレイホルダ34上に、3個のサンプルトレイ100A,100B,100Cを設置することにより、約6時間の自動分析が可能となる。サンプルトレイの数は3個に限らず、さらに多くてもよい。
【0034】
また、電気泳動分離された試料の光学的な検出方法としては、蛍光検出に限らず、吸光度検出などを用いることもできる。
【0035】
次に、図6を用いて、本実施形態において用いる試料容器の構成について説明する。
【0036】
図6は、本発明の一実施形態による電気泳動分析装置に用いる試料容器の配置を示す平面図である。
【0037】
サンプルトレイ100は、平面形状は矩形であり、48個の円形の試料容器100−1,100−2,…,100−48が直線的に配置されている。サンプルトレイ100は、上部のサンプルプレート102と、サンプルプレート102の下に固定された金属ベース104を備えている。サンプルプレート102は、透明なアクリル樹脂により形成されており、試料容器100−1,100−2,…,100−48を形成するための48個の円形の開口が形成されている。サンプルプレート102の材質としては、他に、塩化ビニールやポリカーボン等の透明なプラスチック等を用いることができる。サンプルプレート102を透明な材質により形成することにより、試料容器100−1,100−2,…,100−48内に収容される試料や、試料内に挿入されるキャピラリーの状態を目視で容易に確認することができる。
【0038】
サンプルプレート102は、8個のネジにより金属ベース104に固定されている。金属ベース104の材料としては、導電性材料であるSUSを用いている。金属ベース104は、試料容器100−1,100−2,…,100−48の壁面の一部を形成しており、試料容器100−1,100−2,…,100−48内に収容される試料に対する共通な電極として用いられる。試料容器の一部を金属ベースとすることにより、従来のように、試料中に電極を挿入する必要はなくなる。金属ベース104の材料として、汎用性のある材料であるSUSを用いても、充分な耐久性があることが実験的に確かめられている。金属ベース104としてSUSを用い、サンプルトレイ100を定期的に水洗いするだけで、6ヶ月以上の連続使用が可能であった。従来の電気泳動分析装置においては、電極材料としては、白金等の貴金属を用いていたため、装置が高価になっていたが、電極としてSUSを用いることにより、試料容器を安価に構成することができる。
【0039】
金属ベース104の両端には、円形の穴104Aが形成されており、図1において説明したように、サンプルトレイ100は、止めネジを用いて、金属性のサンプルトレイホルダに固定されて使用される。
【0040】
なお、サンプルトレイ100をサンプルトレイホルダに固定する方法としては、止めネジに限らず、板バネ等を用いることも可能である。
【0041】
なお、金属ベース104の代わりに、絶縁性基板の上に、金属箔を形成したり、蒸着やスパッタリング等の方法により金属皮膜を形成しても、金属ベースと同様に用いることができる。このとき、金属箔若しくは金属皮膜は、試料容器の壁面の一部を形成し、試料容器内に収容される試料と電気的導通をとることにより、電極として使用できる。
【0042】
サンプルプレート102と金属ベース104の間には、後述するように、試料容器内の試料が漏れるのを防止するため、パッキングが挿入されている。
【0043】
サンプルプレート102の長さL1は、160mmとしている。サンプルプレート102に形成された試料容器100−1の中心から試料容器100−48の中心までの距離L2は、141mmである。即ち、隣合う試料容器間のピッチPは、3mmとしている。
【0044】
隣合う試料容器間のピッチPは、マイクロタイタープレートのピッチ(9mm)の整数分の1にしている。即ち、一般に、試料の準備にはマイクロタイタープレートが良く用いられている。マイクロタイタープレートから試料をピペッティングするピペットのピッチは、マイクロタイタープレートのピッチと等しくなっている。このピペットを用いて、マイクロタイタープレートから試料容器に試料をピペッティングする際、試料容器間のピッチPを、マイクロタイタープレートのピッチ(9mm)の整数分の1、例えば、図6に示すように、整数分/1すなわち1/3とすることにより、既存のピペットを用いることができる。即ち、第1回目のピペッティングで、試料容器100−1,100−4,…,100−46というように、整数分/1の分母である3つ置きの試料容器内に試料を注入する。第2回目のピペッティングでは、ピペットを3mmだけずらして、試料容器100−2,100−5,…,100−47に試料を注入する。さらに、第3回目には、さらに、ピペットを3mmだけずらして、試料容器100−3,100−6,…,100−48に試料を注入する。このようにして、試料のピペッティングを3回に分ける必要はあるものの、既存のピペットを用いて、試料を試料容器に注入することができる。
【0045】
試料容器間のピッチPは、マイクロタイタープレートのピッチ(9mm)の整数分の1とし、使用する試料量と寸法を考慮すると、多くは、2分の1乃至4分の1が適当である。
【0046】
図7は、電気泳動分析装置の主要部の構成及びその組み立ての状況を、ホットプレートが開放されている状況と共に示す。図8は、ホットプレートが閉じられている場合の状況を示す。これらの図において、台座90は、縦板部91と平面板部92とから構成される。台座90の縦板部91上にはレーザ光線の照射口部材93およびホットプレート94が固着される。キャピラリー40のシースフローセル側先端をカットし、キャピラリーのセル側先端をシースフローセル60にセットする。これによってキャピラリー40とシースフローセル60の組み合わせが構成される。キャピラリー40は図に示すようにセル側先端部は絞られて密集する構成とし、キャピラリー押さえ95によって長手方向を一定に保持する。シースフローセル60はシースフローセル台96に固着してあり、フローセル台96台座の縦板部91に止め具97によって止めることによってフローセル60およびキャピラリー40を台座90にセットすなわち載置することができる。ホットプレート94はキャピラリー40を加温し、その温度をコントロールする。
【0047】
シースフローセル60、このシースフローセル60に組み合わされたキャピラリー40およびキャピラリーの温度コントロールを行うホットプレート94のユニット並びにシースフローセル60にレーザ光を照射するレーザ照射口部材93から構成される一群の装置は一つの縦面上に配設される。その配設を容易にするために、台座90すなわち台座90の縦板部91が利用される。
【0048】
ホットプレート94はヒンジ構成98とされており、一方側から開放され得る。ホットプレート94は、キャピラリー40のほぼ全面を覆うことができる。
【0049】
シースフローセル台96上にはアース200,シース液管からの管201が接続される管202,203が設けられる。また、シースフローセル60には廃液ボトル69へつながる管67が接続される管204が設けられる。
【0050】
テーブル10は、その上に電極からなる台部210を備え、該台部210上にバッファ液タンク33およびトレイホルダ34が固着されることなく載置される。そして、トレイホルダ34上にはサンプルトレイ100が載置され、固着される。その固着方法については前述した。このようにして構成されたテーブル10を含む一群の装置は、テーブル10をスライドさせて台座90の平面板部92にセット、すなわち載置される。
【0051】
並列した試料容器100−1,…,100−48を具備するサンプルトレイ100を複数個平面上に配設される。その配設を容易にするために、台座90すなわち台座90の平面板部91が利用され、平面板部91上にテーブル10がスライド可能にして載置される。
【0052】
以上のように、前述した2群の装置は90゜配置でそれぞれが矩形をなす縦板部91および平面板部92内におさめられ、コンパクト化される。台座90の一部についてもう少し詳しく説明すると図に示すように縦板部91と平面板部92は一体化した構成とされ、その接続部はコ状の収容部屋201が形成されている。この収容部屋201にはテーブル10の一部が収容されることによってキャピラリー40とバッファ液タンク33との接続が1つの縦面上に配設され得るものとなっている。キャピラリー40のサンプルトレイ側をカットと、その先端をバッファ液タンク33に浸し、前述したようにシールフローセル台96を縦板部91に固定する。
【0053】
図9は、装置ユニットの分解図である。図において、装置ユニットは、レーザ照射口部材93およびホットプレート94を固着した台座90,シースフローセル60を有するセル台96とキャピラリー40の組み合わせが台座90に固着されることなく固定されてすばやい交換が可能とされる。平面側には、テーブル10の上にバッファ液タンク32,サンプルトレイ100が固着されたトレイホルダ34を載置している。テーブル10は、平面板部92にスライド可能に載置され、バッファ液タンク32とトレイホルダ34はテーブル10上に固着されることなく固定されてすばやい交換が可能とされている。
【0054】
すなわち、図5に示した機能を有する装置の主要部が図9に示すユニット化によってコンパクトに構成し、大きな使用頻度・交換頻度が要求されるシースフローセル60(シースフローセル台96)およびキャピラリー40の組み合わせ体を縦板部91に固着することなく固定載置し、トレイホルダ34およびバッファ液タンク32をテーブル10上に固着することなく固定載置する構成にしたことに本実施例の1つの特徴がある。
【0055】
次に、試料のサンプル番号の設定について説明する。
【0056】
サンプルトレイの穴のピッチは、8連ピペットのピッチの1/3になっている。したがって、8連ピペットで3回の注入で24サンプルの注入を行うことができる。
【0057】
サーマルサイクラー用96穴(8×12)トレイから8連マイクロピペットでサンプルトレイにサンプルを注入するとき、サンプル番号は以下の項の1)−1,1)−2,2)−1,2)−2 のように、また1本ずつサンプルを注入するときは3)−1,3)−2のようにサンプル番号を対応させる。
【0058】
「ユーザ指定番号」を使用する場合は、図10において、および表1においてそれぞれのサンプル番号は((下記の番号)+(「レーン#1のサンプル番号」)−1)となる。
【0059】
【表1】

Figure 0004070301
【0060】
1)−1 8連ピペットで注入する場合(1)
−「番号付け」を「(A1,B1,C1,…,F1,G1,H1)」「(A7,B7,C7,…,F7,G7,H7)」に、「サンプル配列」を「A1:1,B1:2,C1:3,…」に設定したとき96サンプルを2回に分けて測定する。
【0061】
A1が左下になるように96穴トレイを置く。
【0062】
【表2】
Figure 0004070301
【0063】
表2の▲1▼の列のサンプルを注入する場合、8連マイクロピペットは図11の●の穴に合わせる。その他の列のサンプルを注入するときは、図11の該当する番号の穴にピペットの左端を合わせる。
【0064】
ファイル名は、サンプル名[固定部]の文字列の後に、次の番号が表3に示されるように付加される。
【0065】
【表3】
Figure 0004070301
【0066】
1)−2 8連ピペットで注入する場合(2)
−「番号付け」を「(A1,B1,C1,…,F1,G1,H1)」「(A7,B7,C7,…,F7,G7,H7)」に、「サンプル配列」を「A1:1,A2:2,A3:3,…」に設定したときサンプルトレイへの注入は1)−1と同様に行う。
【0067】
ファイル名は、サンプル名[固定部]の文字列の後に、次の番号が表4に示されるように付加される。
【0068】
【表4】
Figure 0004070301
【0069】
2)−1 8連ピペットで注入する場合(3)
−「番号付け」を「(H1,G1,F1,…,C1,B1,A1)」「(H7,G7,F7,…,C7,B7,A7)」に、「サンプル配列」を「A1:1,B1:2,C1:3,…」に設定する場合96サンプルを2回に分けて測定する。
【0070】
A1が右上になるように96穴トレイを置く。
【0071】
【表5】
Figure 0004070301
【0072】
表5の■の列のサンプルを注入する場合、8連マイクロピペットは図12の●の穴に合わせる。その他の列のサンプルを注入するときは、図12の該当する番号の穴にピペットの左端を合わせる。
【0073】
この時、ファイル名は、サンプル名[固定部]の文字列の後に、次の番号が表6に示されるように付加される。
【0074】
【表6】
Figure 0004070301
【0075】
2)−2 8連ピペットで注入する場合(4)
−「番号付け」を「(H1,G1,F1,…,C1,B1,A1)」「(H7,G7,F7,…,C7,B7,A7)」に、「サンプル配列」を「A1:1,A2:2,A3:3,…」に設定したときサンプルトレイへの注入は2)−1と同様に行う。
【0076】
ファイル名は、サンプル名[固定部]の文字列の後に、次の番号が表7に示されるように付加される。
【0077】
【表7】
Figure 0004070301
【0078】
3) 1本ずつ注入するとき(1)
3)−1 「番号付け」を「連続(01〜48)」に設定する場合
(「サンプル配列」はどちらを選択しても同じ番号が付加される)
サンプルトレイの左側のサンプルのデータから順に01,02,…47,48となる。
【0079】
3)−2 「番号付け」を「連続(49〜96)」に設定する場合
(「サンプル配列」はどちらを選択しても同じ番号が付加される)
サンプルトレイの左側のサンプルのデータから順に49,50,…95,96となる。
【図面の簡単な説明】
【図1】全体構成概略図を示す。
【図2】図1の一部構成の概略図を示す。
【図3】本体の配置構成図(扉開放)を示す。
【図4】本体の配置構成図(扉閉鎖)を示す。
【図5】原理説明図を示す。
【図6】試料容器の配置を示す平面図である。
【図7】電気泳動分析装置の主要部構成(ホットプレート開放)を示す構成図である。
【図8】電気泳動分析装置の主要部構成(ホットプレート閉鎖)を示す構成図である。
【図9】装置ユニットの分解図を示す。
【図10】画面入力装置の一つの図面図を示す。
【図11】試料のサンプル番号設定図を示す。
【図12】試料のサンプル番号設定図を示す。
【符号の説明】
1…レーザ部、2…DNAシーケンサ本体部、3…画面入出力装置、4…パソコン、5…キーボード、11,12…レーザ、13…ミラー、14…箱体、15…試料収納室部、16…試料室部、17…試料扉、30…テーブル、32…バッファ液タンク、34…サンプルトレイホルダ、40…キャピラリー、42,95…キャピラリー押さえ、60,96…シースフローセル、66…ドレインアダプタ、67…ドレインチューブ、69…ドレイン瓶、90…台座、91…縦板部、92…平面板部、93…レーザ光線照射部材、94…ホットプレート、97…止め具、100…サンプルトレイ、100−1…試料容器、102…サンプルプレート、200…アース、201…シース液管、202,203,204…管、210…電極からなる台部。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to an electrophoresis analysis apparatus and an analysis method. In particular, the present invention relates to an electrophoresis apparatus and analysis method suitable for use in a DNA sequencer (DNA base sequence analyzer) that analyzes a biological sample such as DNA (deoxyribonucleic acid) using a plurality of capillaries or fine channels as an electrophoresis medium.
[0002]
[Prior art]
2. Description of the Related Art DNA analysis technology based on electrophoresis, in particular, DNA sequencers (DNA base sequence analyzers) have become widespread. As analysis needs increase, the need to improve analysis throughput is increasing. One method for improving the analysis throughput is to integrate the electrophoretic medium.
[0003]
JP-A-6-138037 discloses an electrophoresis apparatus in which a sample separation part provided between a cathode electrode tank and an anode electrode tank to which a voltage is applied by a power source is an electrophoresis path composed of capillaries, each having one end. The cathode electrode tank or the other end of the capillary pair connected to the anode electrode tank is placed in the optical cell so as to face each other while maintaining a certain gap while keeping the axis substantially coincident, and the electrophoresis path passing through the optical cell. A sheath liquid container provided outside the optical cell, and an electrophoresis separation capillary end which is an upstream migration part which is a sample separation part by injecting the sheath liquid into the optical cell from the sheath liquid container A sheath flow forming means for guiding a sample to be migrated from the tube to a facing capillary in a sheath flow state, and detecting the sample by irradiating the optical detection portion with light from a light source using the gap portion as an optical detection portion A plurality of optical detection units having a detection means and formed by a plurality of capillary pairs are arranged in the optical cell, and the plurality of optical detection units are connected to each other via an electrolytic solution; A plurality of capillary pairs arranged in a line so that they are positioned on a straight line, and excitation light is irradiated along the straight line so as to irradiate all optical detectors simultaneously, and the sample flows out of each capillary An electrophoretic device that simultaneously detects the fluorescence emitted from the liquid is described.
[0004]
As a second method, a multi-channel method is proposed in which fine grooves are formed on the surface of a glass plate and used as a migration path, as described in US Pat. No. 5,924,212 and JP-A-5-93711. Has been. Even in this method, a large number of samples can be separated and analyzed simultaneously and at high speed.
[0005]
In the multichannel method as described above, first, an electrode and one end of a capillary are inserted into a sample contained in a sample container, and then a voltage is applied to both ends of the capillary to electrically move the sample. The sample is introduced into the capillary, and then the electrode and one end of the capillary are inserted into the buffer solution in the buffer tank, and then a voltage is applied to both ends of the capillary to separate the sample by electrophoresis.
[0006]
[Problems to be solved by the invention]
If the number of samples to be analyzed simultaneously is several tens in order to improve the analysis throughput, the work of inserting electrodes and capillaries becomes difficult.
[0007]
It is an object of the present invention to provide an electrophoretic analyzer which can be easily handled by using a multi-capillary method so that the structure and configuration of the apparatus are compact and easy to handle, and an analysis method which is easy to use. And
[0008]
[Means for Solving the Problems]
In the present invention, a capillary and a sheath flow cell combined therewith are arranged in a vertical direction, a sample plate on which a sample is placed is arranged in a planar direction, a buffer liquid tank is arranged on a line where both arrays intersect, and the inside of the buffer liquid tank It is characterized in that both are joined via a liquid. Each device group constituting the two arrays was placed on a pedestal composed of a vertical plate portion and a flat plate portion, so that the device could be easily assembled and used. In addition, the present invention distinguishes the method of mounting on a pedestal between a frequently used device and a less frequently used device, and a frequently used device such as a combination of a capillary and a sheath flow cell or a sample plate on the pedestal. It was supposed to be placed without sticking.
[0009]
Further, the present invention can adopt an improved pipetting method without changing an existing pipette by adopting such an apparatus structure.
[0010]
Specifically, the present invention provides the following apparatuses and methods.
[0011]
The present invention relates to an electrophoretic analyzer for optically analyzing a plurality of sample components, a sheath flow cell base having a pedestal composed of a vertical plate portion and a flat plate portion, and having a sheath flow cell, and the sheath A group consisting of a capillary combined with a flow cell, a hot plate for controlling the temperature of the capillary, and a laser irradiation port member for irradiating the sheath flow cell with a laser beam is mounted on the vertical plate portion of the pedestal, and a buffer liquid tank and a sample A sample tray for storing the sample on the table, the table mounted on the flat plate portion of the pedestal, and the group and the table mounted as described above formed on the analyzer main body together with the pedestal An electrophoretic analyzer disposed in a chamber is provided.
[0012]
The present invention provides an electrophoretic analyzer for optically analyzing a plurality of sample components in a sheath flow cell, a capillary combined with the sheath flow cell, a hot plate unit for controlling the temperature of the capillary, and a laser in the sheath flow cell. A group of laser irradiation port members for irradiating light is disposed on a vertical surface, a plurality of sample trays having parallel sample containers are disposed on a plane, and two surfaces on which both are disposed An electrophoretic analyzer is provided in which a buffer liquid tank is disposed at a line where the two intersect, and the tip of the capillary is immersed in the liquid in the buffer liquid tank.
[0013]
The present invention relates to an electrophoretic analyzer for optically analyzing a plurality of sample components, having a pedestal composed of a vertical plate portion and a flat plate portion, and irradiating the vertical plate portion of the pedestal with laser light. A laser irradiation port member that performs temperature control and a hot plate that controls temperature are fixed, and a combination of a sheath flow cell and a capillary is applied to the vertical plate so that a laser beam irradiates the sheath flow cell and the hot plate heats the capillary. Place the sample tray on the tray holder, place the tray holder and the buffer solution tank on the table without sticking, and form the table on the analyzer body Provided is an electrophoretic analyzer which can be slid and placed without being fixed to a holding part of a sample chamber.
[0014]
The present invention relates to an electrophoretic analyzer for optically analyzing a plurality of sample components, a box housing a laser emitting laser light, a sample storage chamber for storing a sample, and a sample chamber for analyzing a sample. The sample chamber unit includes a sheath flow cell, a capillary combined with the sheath flow cell, and a hot plate for controlling the temperature of the capillary. And a laser irradiation port for irradiating the sheath flow cell with laser light, and a group arranged in the vertical direction, a buffer liquid tank and a sample tray for storing the DNA sample, and arranged in the horizontal direction. And a group of other doors provided, and the open / close door of the sample chamber is slidable in the vertical direction. Providing an electrophoretic analyzer that.
[0015]
The present invention provides an electrophoretic analysis method for optically analyzing a plurality of sample components by preparing a sample using a microtiter plate, and setting a pitch P between adjacent sample containers to a pitch of the microtiter plate. Prepare a sample tray with a fraction of an integer, and make the pitch of the pipette for pipetting the prepared sample from the microtiter plate equal to the pipette of the microtiter plate, and the sample from the microtiter plate to the sample container When pipetting the sample, the sample is divided and pipetted with the number of denominators of a fraction of an integer, and the sheath flow cell arranged in the vertical direction in parallel with the sample tray and the capillary combined with the sheath flow cell Analysis by inhaling the pipetted sample To provide a cormorant electrophoretic analysis method.
[0016]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Hereinafter, an embodiment of the present invention will be described with reference to the drawings.
[0017]
FIG. 1 shows an overall configuration outline. In the figure, the DNA sequencer device is composed of a laser unit 1, a DNA sequencer main body unit 2, and a screen input / output device 3. The screen input / output device 3 comprises a personal computer 4 and a keyboard 5. These devices are arranged on a table 6.
[0018]
FIG. 2 shows a schematic configuration of the laser unit 1 and the main body unit 2. The laser unit 1 includes a box 14 having two lasers 11 and 12 that emit laser light and a rotary mirror 13 that changes the direction of the laser light from the two lasers 11 and 12. The main body 2 includes a sample storage chamber 15 for storing and moving the sample, and a sample chamber 16 for analyzing the sample. These form a box shape and become a DNA sequencer body. In order to seal the sample chamber 16, a sample door 17 is provided so as to be slidable in the vertical direction. The sample storage chamber 15 is provided with a waste liquid door 18.
[0019]
FIG. 3 shows an arrangement configuration when the sample door 17 of the DNA sequencer main body is opened, and FIG. 4 shows an arrangement configuration when the sample door 17 is closed. In FIG. 3, a hot plate 94, a sample tray holder 34, a drain bottle 69 as a sheath liquid waste reservoir, and a safety lock release button 19 can be seen. Details of these configurations and arrangements will be described later.
[0020]
FIG. 5 is an explanatory diagram of the principle showing the overall configuration.
[0021]
On the table 30, a buffer liquid tank 32 is arranged as an electrophoresis buffer tank containing a buffer (electrolytic solution). A platinum electrode 33 is stretched in the buffer liquid tank 32, and the platinum electrode 33 is in contact with the buffer. Further, three sample trays 100A, 100B, and 100C are arranged on the table 10 via the sample tray holder 34. As will be described later with reference to FIG. 2, the sample tray 100A includes 48 sample containers. The sample tray 100A is fixed to the sample tray holder 34 by set screws S1 and S2, and can be detached from the sample tray holder 34. The bottom of the sample tray 100A is made of a conductive metal such as SUS, and is made of a conductive metal such as SUS and is electrically connected to the sample tray holder 34. Similarly, the sample trays 100B and 100C are provided with 48 sample containers, and the bottoms of the sample trays 100B and 100C are electrically connected to the sample tray holder 34.
[0022]
Forty-eight capillaries 40 are arranged in parallel, and the inside thereof is filled with a gel matrix for separation. The lower end side of the capillary 40 is fixed by a capillary presser 42, and the lower end thereof is inserted into a buffer in the buffer liquid tank 33. The upper end side of the capillary 40 is fixed by a capillary presser 44, and the upper end thereof is connected and fixed to a coupler 46.
[0023]
The coupler 46 is connected to the electrode plug 52 on the ground side, and the electrode plug 52 is connected to the ground electrode of the high voltage power supply 50. The sample tray holder 34 is connected to the high-voltage side electrode plug 54, the platinum electrode 33 of the buffer liquid tank 32 is connected to the high-voltage side electrode plug 56, and the electrode plugs 54, 56 are connected to the high-voltage power supply 50. Connected to the high voltage (-) pole.
[0024]
The coupler 46 is connected to the sheath flow cell 60. The sheath fluid 64 held in the sheath fluid tank 62 is introduced into the sheath flow cell 60 by gravity. The separated sample that is separated by electrophoresis in the capillary 40 and flows out from the migration terminal portion of the capillary 40 is carried to the upper side while the sample components of each capillary are separated from each other by the sheath liquid.
[0025]
From the side surface direction (Y direction in the figure) of the sheath flow cell 60, the laser light emitted from the lasers 11 and 12 is collimated into a parallel light beam by the lens 72, irradiated, and separated in the sheath flow cell 60. Excited. A shutter 74 is provided between the lasers 11 and 12 and the lens 72 so that the sample can be selectively excited. The fluorescence generated by the laser light irradiation is extracted from the X-axis direction orthogonal to the Y-axis direction, collected by the condensing lens 82, light having a wavelength to be detected by the filter 84, and the imaging lens 86. Thus, an image is formed on an optical sensor 88 such as a two-dimensional CCD sensor. The signal detected by the optical sensor 88 is sent to the screen processing device 3 which is a signal processing device, where the signal is processed, the type of terminal base is identified by the wavelength of the fluorescence, and the base sequence of the nucleic acid sample is based on the measurement signal Is analyzed.
[0026]
In determining the base sequence of DNA (deoxyribonucleic acid), generally, four wavelengths are measured. A fluorescent dye is bound in advance by a reaction operation so that each maximum wavelength corresponds to the type of base at the end of the DNA fragment.
[0027]
A drain adapter 66 is attached to the upper end of the sheath flow cell 60, and the sample flowing into the sheath flow cell 60 from the capillary 40 is discharged as a waste liquid to the drain bottle 69 through the drain tube 67. A flow controller 68 including an orifice and a plurality of capillaries is provided in the middle of the drain tube 67, and the flow rate is controlled with the flow path resistance of the drain tube 67 being constant.
[0028]
Next, the overall operation of the electrophoretic analyzer according to the present embodiment will be described.
[0029]
A predetermined amount of analysis sample is dispensed in advance into 48 sample containers of each of the sample trays 100A, 100B, and 100C. The sample trays 100A, 100B, and 100C in which the samples are stored are fixed to the sample tray holder 34 with set screws S1 and S2.
[0030]
The sample in the sample container is introduced into the capillary 40 by applying a high voltage from the high voltage power supply 50 between the sample tray 100A and the coupler 46 with the lower end of the capillary 40 inserted into the sample. The
[0031]
When a high voltage is applied from the high voltage power source 50 between the platinum electrode 33 and the coupler 46 with the lower end of the capillary 40 inserted in the buffer, the sample introduced into the capillary 40 is electrophoresed. To be separated.
[0032]
When the analysis of the sample in the sample tray 100A is completed, the sample in the sample trays 100B and 100C is introduced into the capillary 40 and separated by electrophoresis in the same procedure as described above.
[0033]
Since it takes about 2 hours to analyze one sample, as shown in FIG. 5, by installing three sample trays 100A, 100B, and 100C on the sample tray holder 34, about 6 hours can be obtained. Automatic analysis is possible. The number of sample trays is not limited to three and may be larger.
[0034]
Further, the optical detection method of the electrophoretically separated sample is not limited to fluorescence detection, and absorbance detection can also be used.
[0035]
Next, the configuration of the sample container used in the present embodiment will be described with reference to FIG.
[0036]
FIG. 6 is a plan view showing the arrangement of sample containers used in the electrophoretic analyzer according to one embodiment of the present invention.
[0037]
The sample tray 100 has a rectangular planar shape, and 48 circular sample containers 100-1, 100-2, ..., 100-48 are linearly arranged. The sample tray 100 includes an upper sample plate 102 and a metal base 104 fixed below the sample plate 102. The sample plate 102 is formed of a transparent acrylic resin, and 48 circular openings for forming the sample containers 100-1, 100-2,..., 100-48 are formed. As a material of the sample plate 102, transparent plastic such as vinyl chloride or polycarbonate can be used. By forming the sample plate 102 from a transparent material, it is easy to visually check the state of the sample accommodated in the sample containers 100-1, 100-2, ..., 100-48 and the capillaries inserted into the sample. Can be confirmed.
[0038]
The sample plate 102 is fixed to the metal base 104 with eight screws. As the material of the metal base 104, SUS which is a conductive material is used. The metal base 104 forms part of the wall surface of the sample containers 100-1, 100-2,..., 100-48, and is accommodated in the sample containers 100-1, 100-2,. It is used as a common electrode for the sample. By using a part of the sample container as a metal base, there is no need to insert an electrode into the sample as in the prior art. It has been experimentally confirmed that even when SUS, which is a versatile material, is used as the material of the metal base 104, it has sufficient durability. By using SUS as the metal base 104 and periodically washing the sample tray 100 with water, continuous use for 6 months or more was possible. In the conventional electrophoretic analyzer, a noble metal such as platinum is used as an electrode material, so the apparatus is expensive. However, by using SUS as an electrode, a sample container can be configured at low cost. .
[0039]
Circular holes 104A are formed at both ends of the metal base 104. As described in FIG. 1, the sample tray 100 is used by being fixed to a metallic sample tray holder using a set screw. .
[0040]
The method of fixing the sample tray 100 to the sample tray holder is not limited to a set screw, and a plate spring or the like can be used.
[0041]
In place of the metal base 104, a metal foil may be formed on an insulating substrate, or a metal film may be formed by a method such as vapor deposition or sputtering. At this time, the metal foil or the metal film can be used as an electrode by forming a part of the wall surface of the sample container and taking electrical continuity with the sample accommodated in the sample container.
[0042]
As will be described later, a packing is inserted between the sample plate 102 and the metal base 104 to prevent the sample in the sample container from leaking.
[0043]
The length L1 of the sample plate 102 is 160 mm. A distance L2 from the center of the sample container 100-1 formed on the sample plate 102 to the center of the sample container 100-48 is 141 mm. That is, the pitch P between adjacent sample containers is 3 mm.
[0044]
The pitch P between adjacent sample containers is set to 1 / integer of the pitch (9 mm) of the microtiter plate. That is, in general, a microtiter plate is often used for sample preparation. The pitch of the pipette that pipettes the sample from the microtiter plate is equal to the pitch of the microtiter plate. When pipetting a sample from a microtiter plate to a sample container using this pipette, the pitch P between the sample containers is set to 1 / integer of the pitch (9 mm) of the microtiter plate, for example, as shown in FIG. An existing pipette can be used by setting an integral part / 1 or 1/3. That is, in the first pipetting, the sample is injected into every third sample container that is an integer / 1 denominator, such as sample containers 100-1, 100-4,..., 100-46. In the second pipetting, the pipette is shifted by 3 mm, and the sample is injected into the sample containers 100-2, 100-5, ..., 100-47. Further, in the third time, the pipette is further shifted by 3 mm, and the sample is injected into the sample containers 100-3, 100-6, ..., 100-48. In this way, although it is necessary to separate the pipetting of the sample into three times, the sample can be injected into the sample container using an existing pipette.
[0045]
The pitch P between the sample containers is set to 1 / integer of the pitch (9 mm) of the microtiter plate. In consideration of the amount and size of the sample used, in most cases, 1/2 to 1/4 is appropriate.
[0046]
FIG. 7 shows the configuration of the main part of the electrophoretic analyzer and the state of assembly thereof together with the state where the hot plate is opened. FIG. 8 shows the situation when the hot plate is closed. In these drawings, the pedestal 90 includes a vertical plate portion 91 and a flat plate portion 92. A laser beam irradiation port member 93 and a hot plate 94 are fixed on the vertical plate portion 91 of the base 90. The tip of the capillary 40 on the sheath flow cell side is cut, and the tip of the capillary on the cell side is set in the sheath flow cell 60. Thus, a combination of the capillary 40 and the sheath flow cell 60 is configured. As shown in the drawing, the capillary 40 has a structure in which the cell-side tip portion is narrowed to be closely packed, and the longitudinal direction is held constant by the capillary presser 95. The sheath flow cell 60 is fixed to the sheath flow cell base 96, and the flow cell 60 and the capillary 40 can be set on the base 90 by being fixed to the vertical plate portion 91 of the flow cell base 96 by a stopper 97. The hot plate 94 heats the capillary 40 and controls its temperature.
[0047]
A group of devices including a sheath flow cell 60, a capillary 40 combined with the sheath flow cell 60, a unit of a hot plate 94 for controlling the temperature of the capillary, and a laser irradiation port member 93 for irradiating the sheath flow cell 60 with laser light are one group. Arranged on two vertical surfaces. In order to facilitate the arrangement, a pedestal 90, that is, a vertical plate portion 91 of the pedestal 90 is used.
[0048]
The hot plate 94 has a hinge configuration 98 and can be opened from one side. The hot plate 94 can cover almost the entire surface of the capillary 40.
[0049]
On the sheath flow cell base 96, pipes 202 and 203 to which a ground 200 and a pipe 201 from a sheath liquid pipe are connected are provided. The sheath flow cell 60 is provided with a pipe 204 to which a pipe 67 connected to the waste liquid bottle 69 is connected.
[0050]
The table 10 includes a base portion 210 made of an electrode thereon, and the buffer liquid tank 33 and the tray holder 34 are placed on the base portion 210 without being fixed. Then, the sample tray 100 is placed on and fixed to the tray holder 34. The fixing method has been described above. The group of apparatuses including the table 10 configured as described above is set, that is, placed on the flat plate portion 92 of the base 90 by sliding the table 10.
[0051]
A plurality of sample trays 100 including sample containers 100-1,..., 100-48 arranged in parallel are arranged on a plane. In order to facilitate the arrangement, the base 90, that is, the flat plate portion 91 of the base 90 is used, and the table 10 is slidably mounted on the flat plate portion 91.
[0052]
As described above, the above-described two groups of devices are accommodated in the vertical plate portion 91 and the flat plate portion 92 that are each 90 ° and rectangular, and are made compact. A part of the pedestal 90 will be described in more detail. As shown in the figure, the vertical plate portion 91 and the flat plate portion 92 are integrated, and a U-shaped accommodation chamber 201 is formed at the connecting portion. By accommodating a part of the table 10 in the accommodation chamber 201, the connection between the capillary 40 and the buffer liquid tank 33 can be arranged on one vertical surface. The sample tray side of the capillary 40 is cut and its tip is immersed in the buffer liquid tank 33, and the seal flow cell base 96 is fixed to the vertical plate portion 91 as described above.
[0053]
FIG. 9 is an exploded view of the device unit. In the figure, the apparatus unit is fixed without the base 90 to which the laser irradiation port member 93 and the hot plate 94 are fixed, the combination of the cell base 96 having the sheath flow cell 60 and the capillary 40 being fixed to the base 90, and can be quickly exchanged. It is possible. On the flat surface side, a tray holder 34 having a buffer liquid tank 32 and a sample tray 100 fixed thereon is placed on the table 10. The table 10 is slidably mounted on the flat plate portion 92, and the buffer liquid tank 32 and the tray holder 34 are fixed on the table 10 without being fixed and can be exchanged quickly.
[0054]
That is, the main part of the apparatus having the function shown in FIG. 5 is compactly configured by the unitization shown in FIG. 9, and the sheath flow cell 60 (sheath flow cell base 96) and the capillary 40 that require a large use frequency and exchange frequency are required. One feature of the present embodiment is that the combined body is fixedly mounted without being fixed to the vertical plate portion 91, and the tray holder 34 and the buffer liquid tank 32 are fixedly mounted without being fixed on the table 10. There is.
[0055]
Next, setting of the sample number of the sample will be described.
[0056]
The pitch of the holes in the sample tray is 1/3 of the pitch of the 8 pipettes. Therefore, it is possible to inject 24 samples in 3 injections with an 8-unit pipette.
[0057]
When injecting a sample from the 96-hole (8x12) tray for the thermal cycler into the sample tray with an 8-unit micropipette, the sample numbers are 1) -1, 1) -2, 2) -1, 2) in the following sections. -2 and when injecting samples one by one, the sample numbers are made to correspond to 3) -1, 3) -2.
[0058]
When “user-specified number” is used, the sample numbers in FIG. 10 and Table 1 are ((number below) + (“sample number of lane # 1”) − 1) −1.
[0059]
[Table 1]
Figure 0004070301
[0060]
1) -1 When injecting with an 8 pipette (1)
-“Numbering” is “(A1, B1, C1,..., F1, G1, H1)” “(A7, B7, C7,..., F7, G7, H7)” and “Sample arrangement” is “A1: 96 samples are divided into two measurements when set to “1, B1: 2, C1: 3,.
[0061]
Place the 96-hole tray so that A1 is on the lower left.
[0062]
[Table 2]
Figure 0004070301
[0063]
When injecting the sample in row (1) of Table 2, the 8-spindle micropipette is aligned with the hole marked with ● in FIG. When injecting samples in other rows, align the left end of the pipette with the corresponding numbered hole in FIG.
[0064]
The file name is appended as shown in Table 3 after the character string of the sample name [fixed part].
[0065]
[Table 3]
Figure 0004070301
[0066]
1) -2 When injecting with an 8 pipette (2)
-“Numbering” is “(A1, B1, C1,..., F1, G1, H1)” “(A7, B7, C7,..., F7, G7, H7)” and “Sample arrangement” is “A1: When “1, A2: 2, A3: 3,...” Is set, injection into the sample tray is performed in the same manner as 1) -1.
[0067]
The file name is appended as shown in Table 4 after the character string of the sample name [fixed part].
[0068]
[Table 4]
Figure 0004070301
[0069]
2) -1 When injecting with an 8 pipette (3)
“Numbering” is “(H1, G1, F1,..., C1, B1, A1)” “(H7, G7, F7,..., C7, B7, A7)”, and “Sample arrangement” is “A1: In the case of setting “1, B1: 2, C1: 3,...”, 96 samples are measured in two portions.
[0070]
Place the 96-hole tray so that A1 is on the upper right.
[0071]
[Table 5]
Figure 0004070301
[0072]
When injecting the sample in the row of ■ in Table 5, the 8-spinned micropipette is aligned with the hole of ● in FIG. When injecting samples in other rows, align the left end of the pipette with the corresponding numbered hole in FIG.
[0073]
At this time, the file number is added as shown in Table 6 after the character string of the sample name [fixed part].
[0074]
[Table 6]
Figure 0004070301
[0075]
2) -2 When injecting with an 8 pipette (4)
“Numbering” is “(H1, G1, F1,..., C1, B1, A1)” “(H7, G7, F7,..., C7, B7, A7)”, and “Sample arrangement” is “A1: When “1, A2: 2, A3: 3,...” Is set, injection into the sample tray is performed in the same manner as 2) -1.
[0076]
The file name is appended as shown in Table 7 after the character string of the sample name [fixed part].
[0077]
[Table 7]
Figure 0004070301
[0078]
3) When injecting one by one (1)
3) -1 When “Numbering” is set to “Continuous (01-48)”
(The same number is added to “Sample Sequence” regardless of which is selected.)
.., 47, 48 in order from the sample data on the left side of the sample tray.
[0079]
3) -2 When “Numbering” is set to “Continuous (49-96)”
(The same number is added to “Sample Sequence” regardless of which is selected.)
49, 50,... 95, 96 in order from the sample data on the left side of the sample tray.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 shows a schematic diagram of the overall configuration.
FIG. 2 shows a schematic diagram of a partial configuration of FIG.
FIG. 3 is a layout diagram of the main body (door open).
FIG. 4 shows an arrangement configuration diagram (door closing) of the main body.
FIG. 5 is a diagram illustrating the principle.
FIG. 6 is a plan view showing the arrangement of sample containers.
FIG. 7 is a configuration diagram showing a main configuration (hot plate opening) of the electrophoresis analyzer.
FIG. 8 is a configuration diagram showing a main configuration (hot plate closing) of the electrophoresis analyzer.
FIG. 9 shows an exploded view of the device unit.
FIG. 10 shows one drawing of the screen input device.
FIG. 11 shows a sample number setting diagram of a sample.
FIG. 12 shows a sample number setting diagram of a sample.
[Explanation of symbols]
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 ... Laser part, 2 ... DNA sequencer main-body part, 3 ... Screen input / output device, 4 ... Personal computer, 5 ... Keyboard, 11, 12 ... Laser, 13 ... Mirror, 14 ... Box, 15 ... Sample storage chamber part, 16 ... Sample chamber portion 17. Sample door 30. Table 32 Buffer buffer tank 34 Sample tray holder 40 Capillary 42 95 Depressor 60, 96 Sheath flow cell 66 Drain adapter 67 DESCRIPTION OF SYMBOLS ... Drain tube, 69 ... Drain bottle, 90 ... Base, 91 ... Vertical plate part, 92 ... Plane plate part, 93 ... Laser beam irradiation member, 94 ... Hot plate, 97 ... Stopper, 100 ... Sample tray, 100-1 ... Sample container, 102 ... Sample plate, 200 ... Earth, 201 ... Sheath liquid tube, 202, 203,204 ... Tube, 210 ... Plate comprising electrodes .

Claims (2)

複数の試料成分を光学的に電気泳動分析する電気泳動分析装置において、
縦板部と平面板部とから構成される台座を有し、
シースフローセルを具備するシースフローセル台、該シースフローセルに組み合わされるキャピラリーおよび該キャピラリーの温度コントロールを行うホットプレート並びに前記シースフローセルにレーザ光を照射するレーザ照射口部材から構成される一群を前記台座の縦板部に装着し、
バッファ液タンクおよび試料を収容するサンプルトレイをテーブル上に載置し、該テーブルを前記台座の平面板部にスライド可能に設置し、かつ
前述のように装置された前記一群およびテーブルが前記台座と共に分析装置本体に形成された試料室に配置される
ことを特徴とする電気泳動分析装置。
In an electrophoretic analyzer for optically analyzing a plurality of sample components,
It has a pedestal composed of a vertical plate portion and a flat plate portion,
A group consisting of a sheath flow cell base having a sheath flow cell, a capillary combined with the sheath flow cell, a hot plate for controlling the temperature of the capillary, and a laser irradiation port member for irradiating the sheath flow cell with laser light is arranged in the vertical direction of the base. Attach to the plate,
A sample tray containing a buffer liquid tank and a sample is placed on a table, the table is slidably installed on the flat plate portion of the pedestal, and the group and table installed as described above together with the pedestal An electrophoretic analyzer characterized by being disposed in a sample chamber formed in an analyzer main body.
前記請求項1記載の電気泳動分析装置において、
前記シースフローセルを具備するシースフローセル台は縦板部に装着され、
前記キャピラリーは前記シースフローセル台の下方に装着され、
前記ホットプレートは前記キャピラリーの前部に装着され、
前記レーザ照射口部材は前記シースフローセルの片側に装着され、
前記レーザ照射口部材のレーザ光は前記シースフローセル内に照射され、
該レーザ光の照射によって前記シースフローセル内で発生した蛍光は、前記シースフローセルの後方に配置される光センサで検出される
ことを特徴とする電気泳動分析装置。
The electrophoretic analyzer according to claim 1,
A sheath flow cell base comprising the sheath flow cell is mounted on a vertical plate part,
The capillary is mounted below the sheath flow cell base,
The hot plate is attached to the front of the capillary,
The laser irradiation port member is attached to one side of the sheath flow cell,
The laser beam of the laser irradiation port member is irradiated into the sheath flow cell,
Fluorescence generated in the sheath flow cell by irradiation with the laser light is detected by an optical sensor disposed behind the sheath flow cell.
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