JP4059294B2 - 微生物によるゲラニルゲラニオール及びその類縁化合物の製造方法 - Google Patents
微生物によるゲラニルゲラニオール及びその類縁化合物の製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4059294B2 JP4059294B2 JP2007101999A JP2007101999A JP4059294B2 JP 4059294 B2 JP4059294 B2 JP 4059294B2 JP 2007101999 A JP2007101999 A JP 2007101999A JP 2007101999 A JP2007101999 A JP 2007101999A JP 4059294 B2 JP4059294 B2 JP 4059294B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- genus
- ifo
- medium
- geranylgeraniol
- farnesol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
サッカロミコシス(Saccharomycopsis) 属
サッカロミコデス(Saccharomycodes)属
シゾサッカロミセス(Schizosaccharomyces)属
ヴィッカーハミア(Wickerhamia) 属
デバリオミセス(Debaryomyces)属
ハンゼヌラ (Hansenula)属
ハンゼニアスポーラ(Hanseniaspora)属
リポミセス(Lypomyces)属
ピキア(Pichia)属
クロッケラ(Kloeckera) 属
キャンジダ(Candida) 属
ザイゴサッカロミセス(Zygosaccharomyces) 属
オガタエア(Ogataea) 属
クライシア(Kuraishia) 属
コマガタエラ (Komagataella) 属
ヤロウヴィア (Yarrowia) 属
ウィリオプシス(Williopsis) 属
ナカザワエア(Nakazawaea )属
クリベロマイセス(Kluyveromyces)属
トルラスポーラ(Torulaspora)属
シテロマイセス(Citeromyces) 属
ウォルトマイセス(Waltomyces)属
バチルス (Bacillus) 属
スタフィロコッカス(Staphylococcus)属
シュードモナス(Pseudomonas) 属
マイクロコッカス(Micrococcus)属
エキシグオバクテリウム(Exiguobacterium) 属
ムコール(Mucor)属
アンブロジオザイマ(Ambrosiozyma)属
シストフィロバシジウム(Cystofilobasidium)属
メトシュニコヴィア(Metschnikowia)属
トリコスポロン(Trichosporon)属
キサントフィロミセス(Xanthophyllomyces)属
ブレラ(Bullera)属
フェロミセス(Fellomyces)属
フィロバシジウム(Filobasidium)属
ホルテルマンニア(Holtermannia)属
ファフィア(Phaffia)属
ロドトルラ(Rhodotorula)属
スポリジオボラス(Sporidiobolus)属
スポロボロミセス(Sporobolomyces)属
ジゴアスカス(Zygoascus)属
ハロフェラックス(Haloferax)属
ブレビバクテリウム(Brevibacterium)属
ロイコスポリジウム(leucosporidium)属
ミキソザイマ(Myxozyma)属
トリコスポリエラ(Trichosporiella)属
アルカリゲネス(Alcaligenes)属
クリプトコッカス(Cryptococcus)属
カンジダ(Candida) 属
ストレプトマイセス(Streptomyces)属
ノカルディア(Nocardia) 属
シストフィロバシジウム(Cystofilobasidium)属
ロドトルラ(Rhodotorula)属
ウィロプシス(Willopsis)属
ハロフェラックス(Haloferax)属
以下に本発明を詳細に説明する。
(1) サッカロミセス(Saccharomyces )属;Saccharomyces cerevisiae ATCC 12341, IFO 0565, IFO 0222, IFO 0216, ATCC 9080, IFO 1346, ATCC 204660, IFO 0538, IFO 0210 、Saccharomyces ellipsoideus 京都大学保存株4102、Saccharomycessake 協会2 号、Saccharomyces rosei IFO 0252、Saccharomyces kluyveri IFO 1892
(2) サッカロミコシス(Saccharomycopsis) 属;Saccharomycopsis fibuligera IFO 0106, IFO 1665, IFO 1774, IFO 0107
(3) サッカロミコデス(Saccharomycodes)属;Saccharomycodes ludwigii IFO 0339
(4) シゾサッカロミセス(Schizosaccharomyces)属;Schizosaccharomyces octosporus IAM 4842, Schizosaccharomyces pombe IFO0346
(5) ヴィッカーハミア(Wickerhamia) 属;Wickerhamia fluorescens IFO 1116
(6) デバリオミセス(Debaryomyces)属;Debaryomyces hansenii var.fabryi IFO 0794 、Debaryomyces castellii IFO1359 、Debaryomyces vanrijiae var.vanrijiae JCM 2169
(7) ハンゼヌラ (Hansenula)属;Hansenula polymorpha 京都大学保存株4327
(8) ハンゼニアスポーラ(Hanseniaspora)属;Hanseniaspora valbyensis IFO 0115
(9) ピキア(Pichia)属;Pichia membranaefaciens IFO 0128、Pichia aganobii 京都大学保存株4261、Pichia naganishii IFO 1670 、Pichia silvicola IFO 0807 、Pichia anomala IFO 0118, IFO 0569, IFO 0707
(10) クロッケラ(Kloeckera) 属;Kloeckera japonica IFO 0151
(11) キャンジダ(Candida) 属;Candida krusei IFO 0013、Candida kefyr IFO 0706、Candida tenuis IFO 0716、Candida solani IFO 0762 、Candida glabrata IFO 0005, IFO 0622 、Candida albicans IFO 1060 、Candida zeylanoides IFO 0719、Candida catenulata IFO 0720 、Candida cariosilignicola IFO 1910 、Candida stellata IFO 0701、Candida utilis IFO0619
(12) ザイゴサッカロミセス(Zygosaccharomyces) 属;Zygosaccharomyces rouxii IFO 0487、Zygosaccharomyces japanicus IFO 0595
(13) オガタエア(Ogataea) 属;Ogataea glucozyma IFO 1472 、 Ogataea polymorpha IFO 1475
(14) クライシア(Kuraishia) 属;Kuraishia capsulata IFO 0974
(15) コマガタエラ (Komagataella) 属;Komagataella pastoris IFO 0948
(16) ヤロウヴィア (Yarrowia) 属;Yarrowia lopolytica IFO 0717
(17) ウィリオプシス(Williopsis) 属;Williopsis saturnus var. saturnus IFO 0125, IFO 0941、Williopsis saturnus IFO 0895
(18) ナカザワエア(Nakazawaea )属;Nakazawaea holstii IFO 0980
(19) クリベロマイセス(Kluyveromyces)属;Kluyveromyces marxianus IFO 0617, IFO 0288、Kluyveromyces thermotolerans IFO 0662 、Kluyveromyces lactis IFO 0648
(20) トルラスポーラ(Torulaspora)属;Torulaspora delbrueckii IFO 0422
(21) クリプトコッカス(Cryptococcus)) 属;Cryptococcus humicolus IFO 1527
(22) ムコール(Mucor)属;Mucor javanicus IFO 4570
(23) ブレラ(Bullera)属;Bullera pseudoalba IFO 10179
(24) ロドトルラ(Rhodotorula)属;Rhodotorula minuta IFO 0715、Rhodotorula rubra IFO 0870
(25) スポロボロミセス(Sporobolomyces)属;Sporobolomyces salmonicolor IFO 0374
(26) ハロフェラックス(Haloferax)属;Haloferax volcanii IFO 14742
(27) アルカリゲネス(Alcaligenes)属;Alcaligenes faecalis IFO 13111
(1) サッカロミセス(Saccharomyces)属;Saccharomyces cerevisiae IFO 1346, ATCC 204660, IFO 0258, IFO 0262, IFO 0538, IFO 0565, IFO 0210, IFO 2347、Saccharomyces unisporus IFO 0215、Saccharomyces sake 協会2 号、Saccharomyces ellipsoideus 京都大学保存株 4102 、Saccharomyces rosei IFO 0252、Saccharomyces logos 京都大学保存株 4101 、Saccharomyces dairensis IFO 0285、Saccharomyces bayanus IFO 0539, IFO 0613、Saccharomyces kluyveri IFO 1892 、Saccharomyces paradoxus IFO 0259
(2) サッカロミコデス(Saccharomycodes)属;Saccharomycodes ludwigii IFO 0339
(3) シゾサッカロミセス(Schizosaccharomyces)属;Schizosaccharomyces pombe IFO 0346, IFO 0358,IFO 0638、Schizosaccharomyces octosporus IAM 4842
(4) ハンゼニアスポーラ(Hanseniaspora)属;Hanseniaspora valbyensis IFO 0115
(5) デバリオミセス(Debaryomyces)属;Debaryomyces hansenii IFO 0023、Debaryomyces hansenii var.fabryi IFO 0749 、Debaryomyces castellii IFO 1359 、Debaryomyces vanrijiae var. vanrijiae JCM 2169
(6) リポミセス(Lypomyces)属;Lypomyces starkeyi IFO 0678
(7) ピキア(Pichia)属;Pichia aganobii 京都大学保存株 4261 、Pichia naganishii IFO 1670、Pichia
anomala IFO 0118, IFO 0569, IFO 0963, IFO 707, IFO 0146
(8) カンジダ(Candida) 属;Candida utilis IFO 0626, IFO 0619、Candida albicans IFO 0579, IFO 1060、Candida zeylanoides IFO 0719、Candida glabrata IFO 0005, IFO 0622, IFO 0741、Candida cariosilignicola IFO 1910 、Candida stellata IFO 0701 、Candida solani IFO 0762、Candida intermedia IFO 0761、Candida krusei IFO 0941、Candida tenuis IFO 0716
(9) ヴィッカーハミア(Wickerhamia) 属;Wickerhamia fluoresces IFO 1116
(10) クライシア(Kuraishia) 属;Kuraishia capsulata IFO 0974
(11) コマガタエラ (Komagataella) 属;Komagataella pastoris IFO 0948
(12) オガタエア(Ogataea) 属;Ogataea glucozyma IFO 1472 、Ogataea polymorpha IFO 1475
(13) ヤロウヴィア (Yarrowia) 属;Yerrowia lopolytica IFO 0717
(14) クリベロマイセス(Kluyveromyces)属;Kluyveromyces marxianus IFO 0288, IFO 0617、Kluyveromyces thermotolerans IFO 0662 、Kluyveromyces lactis IFO 0648
(15) トルラスポーラ(Torulaspora)属;Torulaspora delbrueckii IFO 0422
(16) ザイゴサッカロミセス(Zygosaccharomyces) 属;Zygosaccharomyces rouxii IFO 0487, IFO 0686、Zygosaccharomyces japanicus IFO 0595、Zygosaccharomyces fermentati IFO 0021
(17) ウィリオプシス(Williopsis) 属;Williopsis saturnus var. saturnus IFO 0941、Williopsis californica IFO 0800、Willopsis saturnus IFO 0895
(18) シテロマイセス(Citeromyces) 属;Citeromyces matritensis IFO 0954
(19) ウォルトマイセス(Waltomyces)属;Waltomyces lipoder IFO 0673
(20) クリプトコッカス(Cryptococcus)) 属;Cryptococcus humicolus IFO 1527
(21) バチルス (Bacillus) 属;Bacillus amyloliquefaciens IFO 3022、Bacillus pumilus IFO 3030
(22) スタフィロコッカス(Staphylococcus)属;Staphylococcus epidermidis IFO 3762
(23) シュードモナス(Pseudomonas) 属;Pseudomonas sp. 京都大学保存株 876
(24) マイクロコッカス(Micrococcus)属;Micrococcus luteus IFO 3067
(25) エキシグオバクテリウム(Exiguobacterium)属;Exiguobacterium acetylicum IFO 12146
(26) ムコール(Mucor)属;Mucor javanicus IFO 4570
(27) アンブロジオザイマ(Ambrosiozyma)属;Ambrosiozyma platypodis IFO 10752
(28) シストフィロバシジウム(Cystofilobasidium)属;Cystofilobasidium infirmominiatum IFO 1057
(29) ロイコスポリジウム(leucosporidium)属;Leucosporidium scottii IFO 1924
(30) メトシュニコヴィア(Metschnikowia)属;Metschnikowia lunata IFO 1605
(31) ミキソザイマ(Myxozyma)属;Myxozyma lipomycoides IFO 10351
(32) トリコスポロン(Trichosporon)属;Trichosporon pullulans IFO 1232
(33) キサントフィロミセス(Xanthophyllomyces)属;Xanthophyllomyces dendrorhous IFO 10130
(34) ブレラ(Bullera)属;Bullera pseudoalba IFO 10179
(35) フェロミセス(Fellomyces)属;Fellomyces penicillatus IFO 10119
(36) フィロバシジウム(Filobasidium)属;Filobasidium capsuligenum IFO 1185、Filobasidium uniguttulatum IFO 0699
(37) クロッケラ(Kloeckera) 属;Kloeckera corticis IFO 0633
(38) ホルテルマンニア(Holtermannia)属;Holtermannia corniformis IFO 10742
(39) ファフィア(Phaffia)属;Phaffia rhodozyma ATCC 66270
(40) サッカロミコシス(Saccharomycopsis) 属;Saccharomycopsis fermentans IFO 10772
(41) スポリジオボラス(Sporidiobolus)属;Sporidiobolus samonicolar IFO 1035
(42) スポロボロミセス(Sporobolomyces)属;Sporobolomyces salmonicolor IFO 0374
(43) トリコスポリエラ(Trichosporiella)属;Trichosporiella flavificans IFO 1573
(44) ジゴアスカス(Zygoascus)属;Zygoascus hellenicus IFO IFO 10184
(45) ハロフェラックス(Haloferax)属;Haloferax volcanii IFO 14742
(46) ブレビバクテリウム(Brevibacterium)属;Brevibacterium linens IFO 12171
(1) ノカルディア(Nocardia) 属;Norcadia asteroides IFO 3384 、Norcadia fusca IFO 14340
(2) ストレプトマイセス(Streptomyces)属;Streptomyces gardneri IFO 12865
(3) サッカロミセス(Saccharomyces)属;Saccharomyces unisporus IFO 0215 、Saccharomyces cerevisiae IFO 0210 、Saccharomyces ellipsoideus 京都大学保存株 4102
(4) カンジダ(Candida) 属;Candida glabrata IFO 0005, IFO 0741、Candida solani IFO 0762,Candida krusei IFO 0941
(5) クリプトコッカス(Cryptococcus)属;Cryptococcus humicolus IFO 1527
(6) シストフィロバシジウム(Cystofilobasidium)属;Cystofilobasidium infirmominiatum IFO 1057
(7) ロドトルラ(Rhodotorula)属;Rhodotorula minuta IFO 0715,Rhodotorula rubra IFO 0870
(8) ウィロプシス(Willopsis)属;Williopsis californica IFO 0800
(9) ハロフェラックス(Haloferax)属;Haloferax volcanii IFO 14742
〔実施例1〕(ゲラニルゲラニオール類生産菌のスクリーニング)
(1) 菌株
ATCC、IAM、IFO、JCMより購入した菌株及び京都大学清水研究室より入手した菌株約930株についてゲラニルゲラニオール類生産菌をスクリーニングした。
菌株保存は以下の3通りを適宜行なった。
1 グリセロールストック
液体培養液900μlにオートクレーブ滅菌した50%グリセロール(ナカライ製)300μl を加え、−80℃と−20℃で保存した。−20℃保存菌体は一週間後にプレートに蒔き保存できていることを確認した。
液体培養液2mlを2mlエッペンドルフチューブに入れて遠心し(6000rpm 、5分)、菌体を集めた。110 ℃、20分オートクレーブ滅菌した20%スキムミルク(森永乳業製)溶液150μl を加えて菌体を懸濁させた。乾熱滅菌したパスツールピペットを用いて懸濁液を凍結乾燥用ガラス管に入れ、−80℃冷凍庫で凍結させた。凍結乾燥機(Labconco製Lyph Lock 1L)で一晩十分に乾燥させてからハンドバーナー(Prince製GB20001)で封印した。Tesler coil(若井田理学製WTC−100型)を用い封印が確実であるかどうか確かめた。
液体培養液と同じ培地組成の2%アガースラントを作製した。液体培養液よりディスポループを用いて菌をストリークした。室温に一週間おいて十分に菌が生えたことを確認してからオートクレーブ滅菌にした流動パラフィン(ナカライ製)を深さ1cm程度になるよう加え4℃にて保存した
酵母菌培養にはYM培地(Difco 製) 、あるいは以下のようにして調製したKY培地、F101培地を用いた。細菌・放線菌については、KB培地を用いた。プレートは同培地に終濃度2%のバクトアガー(Difco製)を加え作製した。
以下を1Lの脱イオン水に加え、2N水酸化ナトリウム溶液でpH5.5に調整した後、脱イオン水で1Lにし、オートクレーブした。
Malt Extract (Difco製) 5g
Yeast Extract (Difco製) 5g
角切りしたジャガイモ200gを500ml の脱イオン水に入れ、30分間沸騰後、ガーゼで不溶化物を除去した。以下を加え、脱イオン水で1Lにし、オートクレーブした。
Yeast Extract (Difco製) 30g
グルコース (ナカライ製) 15g
シュクロース (ナカライ製) 15g
以下を1Lの脱イオン水に加え、2N水酸化カリウム溶液でpH7.0に調整し後、脱イオン水で1Lにし、オートクレーブした。
Bactotryptone (Difco製) 5g
Yeast Extract (Difco製) 5g
グルコース(ナカライ製) 1g
KH2PO4 (ナカライ製) 0.7g
K2HPO4 (ナカライ製) 0.3g
上記培地をそれぞれ用い、バッフル付き100ml容三角フラスコに培地20mlを入れ、モルトン栓をし、121℃、1.2 気圧にて15分間オートクレーブ滅菌を行った。これにスラントより一白金耳植菌し、30℃、130rpmで3日間回転培養した。
培養液2.5ml を18φmm×125mm 試験管に入れ、ベックマン製遠心分離器GP centrifugeで1000rpm 、5分遠心し、上清を新しい18φmm×125mm 試験管に移した。6mM の塩化マグネシウムを含むトリス塩酸緩衝液(pH8.0) 0.5ml 、大腸菌アルカリフォスファターゼ(宝酒造製)5 μl (2ユニット)を加え、65℃で30分加熱した。氷上で十分に冷却してからペンタン2ml 、メタノール1ml を加え、十分に混合後、ベックマン製遠心分離器GP centrifugeで1000rpm 、5分遠心し、上清を別の新しい試験管に移した。ドラフト内でペンタン・メタノール溶媒を蒸発させた後、300ml のペンタンに再溶解し、GC/MS 用バイアル瓶に詰めた。
1 細菌・放線菌の場合
液体培養液10mlを50mlコーニングチューブに入れ、ベックマン製冷却遠心機(Avant J25-I)で6000rpm 、5分遠心分離し菌体を集めた。菌体を脱イオン水0.5ml に懸濁させた後、10mlスピッツ管に移し、東海電機製超音波細胞破砕機UC W-201で破砕した(条件:10℃、1分破砕−30秒停止を20分間繰り返す)。18φmm×125mm 試験管に移し、6mM の塩化マグネシウムを含むトリス塩酸緩衝液(pH8.0)0.5mlを加え、(5) と同様にしてフォスファターゼ処理、抽出を行なった。
液体培養液2.5ml を18φmm×125mm 試験管に入れ、ベックマン製遠心分離器GPcetrifugeで1000rpm 、5 分間遠心し、菌体を集めた。6mM の塩化マグネシウムを含むトリス塩酸緩衝液(pH8.0)0.5mlを加え、菌体を懸濁させた後、破砕用ガラスチューブに移した。等量のガラズビーズ(シグマ製 acid washed425φ-600μm)を加え、安井機械製Multi-Beads Schocker MB-200 で破砕した(条件:室温、2500rpm, 20 分) 。 18 φmm×125mm 試験管に全量移し、(5) と同様にフォスファターゼ処理、抽出を行った。
アジレント社(Agilent)製HP6890/5973 GC/MSシステムを用い以下の条件で分析した。
1 インレット温度: 250 ℃
2 ディテクター温度:260 ℃
3 MSゾーン温度
MS Quad: 150℃
MS Source: 230℃
4 スキャンパラメーター
Low Mass: 35
High Mass: 200
Threshold: 40
5 インジェクションパラメーター
モード:自動インジェクション
サンプル量:2 μl
洗浄回数:メタノールで3回、ヘキサンで2回
スプリット比:1:20
カラム:アジレント社(Agilent)製HP-5MS
(0.25mm×30M、フィルム厚0.25μm)
キャリアーガス:ヘリウム1.0ml/min
ソルベントディレイ:2 min
オーブン昇温条件:115℃、1.5分保持
70/分で250℃まで昇温、2分保持
70/分で300℃まで昇温、7分保持
ポストタイム 0
内部標準:1−ウンデカノール/エタノール溶液(1μl/ml)を各バイアルに10μl添加
注入口ライナー:スプリット/スプリットレスライナー
解析:TIC を取り込んだ後、69マスをセレクションし、1−ウンデカノール(RT=3.39min)、ネロリドール(RT=3.86min)、ファルネソール(RT=4.23min)、ゲラニルゲラニオール(RT=5.78min)のピーク面積を積分した。内部標準のウンデカノールに対するピーク面積比より定量した。
供試菌中、子嚢菌酵母類162株のうちの約1/3、不完全菌酵母類73株のうちの約一割に ゲラニルゲラニオール及び/又はファルネソール生産菌を、また放線菌95株のうち3株にネロリドール生産菌を確認できた。表1にゲラニオ−ルのみを生産する菌株、表2にゲラニオールとファルネソールを生産する菌株、表3にファルネソールのみを生産する菌株、表4にネロリドールのみを生産する菌株をその生産量とともにそれぞれ示す。
実施例1において、ゲラニオゲラニオール生産が多かった上位2株Hanseniaspora valbyensis IFO 0115株、Saccharomycodes ludwigii IFO 0339株、及びゲラニルゲラニオールとファルネソールの生産量が共に多かったCandida glabrata IFO 0005株について、培養日数、培地組成、ファスファターゼ処理の有無による生産量の変化を表5(培養上清画分)、表6(菌体画分)に示す。いずれの株もファルネソール、ゲラニオゲラニオールの生産は培養時間とともに増加し、培地に5%グルコースを添加すると菌体画分中の生産量が増加する。さらに、1%大豆油を添加した場合、Candida glabrataでは分泌が促進される。このように、微生物種によって差はあるものの、5%グルコースと1%大豆油を含む培地を用いることによりファルネソールとゲラニルゲラニオールの生産量、分泌量を増やすことが可能である。また、フォスファターゼ処理の有無で比較すると、上清画分ではフォスファターゼ処理しない方が検出量が多く、菌体画分では逆にフォスファターゼ処理すると検出量が多くなる傾向にあることから、ファルネシルピロリン酸、ゲラニルピロリン酸が菌体画分に存在していると考えられる。
実施例1において試験した菌株のうちの数種について、YM培地にて培養した場合と、YM培地に5%グルコースと1%大豆油を添加した培地で培養した場合の生産量をそれぞれ表7、表8に示す。5%グルコースと1%大豆油を添加した培地では、生産量が大幅に上昇した。
表9、10に示す各菌株を、YM培地又はYM培地に5グルコース、1%大豆油を添加した培地に、それぞれエルゴステロール 4mg/L及びスクアレン合成阻害剤(SQAD)を0 〜20mg/Lを添加した培地にて培養し、同様にしてネロリドール、ゲラニルゲラニオール、ファルネソールの各生産量を調べた。結果を表9、10に併せて示す。
ファルネソールが検出されたバクテリアに関し、KB培地に1%大豆油、4mg/L エルゴステロール、スクアレン合成阻害剤(SQAD)を0 又は20mg/Lを添加した培地にてそれぞれ培養し、同様にしてネロリドール、ゲラニルゲラニオール、ファルネソールの各生産量を調べた。結果を表13に示す。バクテリアの場合も酵母と同様に、スクアレン合成阻害剤の添加によって生産量が増大することがわかる。
以下の表14に示す培養日数、培養温度、培地等の培養条件により、実施例1と同様の培養手順により種々の菌体を培養し、菌体画分及び上清画分からゲラニルゲラニオール類縁体を抽出し、分析した。その結果を表14に示す。なお、LBO−SSI培地、YPDO−SSI培地、YMO−SSI培地、YMOL−SSI培地、及びHVO−SSI培地は以下のようにして調製した。
以下を脱イオン水1Lに溶解し、オートクレーブ滅菌した。滅菌後、十分に培地が冷えてからフィルター滅菌したスクアレン合成阻害剤SQAD水溶液(2.5mg/ml)を20mg/Lになるように添加した。
Yeast Extract (Difco製) 5g
Bactopeptone (Difco製) 10g
NaCl(ナカライ製) 5g
グルコース(ナカライ製) 50g
大豆油(ナカライ製) 10ml
エルゴステロール溶液 200μl(2% エルゴステロール、50% タージトールを含むエタノール溶液)
以下を脱イオン水1Lに溶解し、オートクレーブ滅菌した。滅菌後、十分に培地が冷えてからフィルター滅菌したスクアレン合成阻害剤SQAD水溶液(2.5mg/ml)を20mg/Lになるように添加した。
Yeast Extract (Difco製) 10g
Bactopeptone (Difco製) 20g
グルコース(ナカライ製) 50g
大豆油(ナカライ製) 10ml
エルゴステロール溶液 200μl(2% エルゴステロール、50% タージトールを含むエタノール溶液)
YM 培地 (Difco社製)に以下を添加し、脱イオン水で1Lにしオートクレーブ滅菌した。滅菌後、フィルター滅菌したスクアレン合成酵素阻害剤SQAD(エーザイ社製、2.5mg/ml-水溶液)を20mg/Lになるよう添加した。
グルコース(ナカライ製) 50g
大豆油(ナカライ製) 10ml
エルゴステロール (ナカライ製) 4mg(20mg/50%エタノール、50%タージトール溶液200μl添加)
YMO培地に10mlのオリーブオイル(ナカライ製)を添加し、YMO−SSIと同様にして調製した。
以下を脱イオン水1Lに溶解し、オートクレーブ滅菌した。滅菌後、十分に培地が冷えてからフィルター滅菌したスクアレン合成阻害剤SQAD水溶液(2.5mg/ml)を20mg/Lになるように添加した。
NaCl(ナカライ製) 156g
MgCl2・6H2O(ナカライ製) 13g
MgSO4・7H2O(ナカライ製) 20g
CaCl2・2H2O(ナカライ製) 1g
KCl(ナカライ製) 4g
NaHCO3(ナカライ製) 0.2g
KBr(ナカライ製) 0.5g
Yeast Extract (Difco製) 5g
グルコース(ナカライ製) 50g
大豆油(ナカライ製) 10ml
エルゴステロール溶液 200μl(2% エルゴステロール、50% タージトールを含むエタノール溶液)
Claims (2)
- ハンゼニアスポーラ(Hanseniaspora)属に属するゲラニルゲラニオール及び/又はファルネソール生産菌であるHanseniaspora valbyensis IFO 0115を培地に培養し、ゲラニルゲラニオール及び/又はファルネソールを菌体内外に生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴とする、ゲラニルゲラニオール及び/又はファルネソールの製造方法。
- ハンゼニアスポーラ属に属するゲラニルゲラニオール及び/又はファルネソール生産菌であるHanseniaspora valbyensis IFO 0115を培地に培養した後、上清画分から分離した菌体画分に対してフォスファターゼ処理を行うことを特徴とする請求項1記載のゲラニルゲラニオール及び/又はファルネソールの製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2007101999A JP4059294B2 (ja) | 2000-12-28 | 2007-04-09 | 微生物によるゲラニルゲラニオール及びその類縁化合物の製造方法 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2000401266 | 2000-12-28 | ||
JP2007101999A JP4059294B2 (ja) | 2000-12-28 | 2007-04-09 | 微生物によるゲラニルゲラニオール及びその類縁化合物の製造方法 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2001376173A Division JP2002253284A (ja) | 2000-12-28 | 2001-12-10 | 微生物によるゲラニルゲラニオール及びその類縁化合物の製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2007181472A JP2007181472A (ja) | 2007-07-19 |
JP4059294B2 true JP4059294B2 (ja) | 2008-03-12 |
Family
ID=38338055
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007101999A Expired - Fee Related JP4059294B2 (ja) | 2000-12-28 | 2007-04-09 | 微生物によるゲラニルゲラニオール及びその類縁化合物の製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP4059294B2 (ja) |
-
2007
- 2007-04-09 JP JP2007101999A patent/JP4059294B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2007181472A (ja) | 2007-07-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Breuer et al. | Debaryomyces hansenii—an extremophilic yeast with biotechnological potential | |
Feron et al. | Production, identification, and toxicity of (gamma)-decalactone and 4-hydroxydecanoic acid from Sporidiobolus spp | |
CA2834422C (en) | Method for utilizing extraction residue of yeast extract | |
Atli et al. | Screening of medicinal higher Basidiomycetes mushrooms from Turkey for lovastatin production | |
He et al. | Enzymatic degradation of mycotoxin patulin by an extracellular lipase from Ralstonia and its application in apple juice | |
CN103620041A (zh) | 从微藻制备和提取角鲨烯的方法 | |
JP4013535B2 (ja) | 微生物によるプレニルアルコールの高生産方法 | |
Han et al. | Screening of γ-aminobutyric acid (GABA)-producing wild yeasts and their microbiological characteristics | |
US6972191B2 (en) | Method for production of geranylgeraniol and analogous compounds thereof by microorganisms | |
JP4114992B2 (ja) | テトラヒドロクルクミン類の製造方法 | |
CN112940953A (zh) | 一株高产3-甲基丁醇的汉逊德巴利酵母 | |
JP4059294B2 (ja) | 微生物によるゲラニルゲラニオール及びその類縁化合物の製造方法 | |
JP2003033195A (ja) | テトラヒドロクルクミン類の製造方法 | |
JP2007252378A (ja) | 微生物によるゲラニルゲラニオール及びその類縁化合物の製造方法 | |
CN115349616B (zh) | 一种低盐双菌接菌发酵制备泡椒的方法 | |
Moussa et al. | Effect of media composition on citrinin and bio-pigments production by Monascus ruber | |
JP6722209B2 (ja) | カロテノイド組成物、カロテノイド組成物の製造方法、カロテノイド組成物を生産する微生物 | |
Wongsadee et al. | Comparison of 2-acetyl-1-pyrroline production between Aspergillus awamori and Aspergillus oryzae | |
HP et al. | Optimization of monacolin K production by Monascus purpureus MTTC 410 in submerged fermentation | |
JP4059295B2 (ja) | 微生物によるプレニルアルコールの高生産方法 | |
JP2002300896A (ja) | プレニルアルコールの製造方法 | |
JP2007190030A (ja) | 微生物によるプレニルアルコールの高生産方法 | |
Naik et al. | Solid state fermentation of pomegranate seed for lovastatin production:: A bioprocessing approach | |
JP4288862B2 (ja) | プレニルアルコールの製造方法 | |
Deori et al. | Yeast: A multifaceted eukaryotic microbe and its biotechnological applications |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20070409 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070529 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070730 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070821 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20071018 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20071127 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20071210 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101228 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101228 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111228 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111228 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121228 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131228 Year of fee payment: 6 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |