JP4040069B2 - Composition for improving brain function - Google Patents
Composition for improving brain function Download PDFInfo
- Publication number
- JP4040069B2 JP4040069B2 JP2006205754A JP2006205754A JP4040069B2 JP 4040069 B2 JP4040069 B2 JP 4040069B2 JP 2006205754 A JP2006205754 A JP 2006205754A JP 2006205754 A JP2006205754 A JP 2006205754A JP 4040069 B2 JP4040069 B2 JP 4040069B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- acetic acid
- sphinganine
- group
- acid bacteria
- alkali
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000003925 brain function Effects 0.000 title claims description 41
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 37
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 claims description 12
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 9
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 237
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 81
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 71
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 43
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 38
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 28
- DUUGKQCEGZLZNO-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxyindoleacetic acid Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 DUUGKQCEGZLZNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- XSDVOEIEBUGRQX-RBUKOAKNSA-N dihydroceramide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC=O XSDVOEIEBUGRQX-RBUKOAKNSA-N 0.000 description 26
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 25
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 24
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 20
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 20
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- IRJCBFDCFXCWGO-BYPYZUCNSA-N (2s)-2-amino-2-(3-oxo-1,2-oxazol-5-yl)acetic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1=CC(=O)NO1 IRJCBFDCFXCWGO-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 19
- IRJCBFDCFXCWGO-UHFFFAOYSA-N Ibotenic acid Natural products OC(=O)C(N)C1=CC(=O)NO1 IRJCBFDCFXCWGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 230000006870 function Effects 0.000 description 17
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 16
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 16
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 16
- -1 hopanoid compounds Chemical class 0.000 description 16
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 16
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 16
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 15
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 14
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 14
- 206010027175 memory impairment Diseases 0.000 description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 14
- RVWZUOPFHTYIEO-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxyindoleacetic acid Natural products C1=C(O)C=C2C(C(=O)O)=CNC2=C1 RVWZUOPFHTYIEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000003310 5-hydroxyindoleacetic acid Substances 0.000 description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000004129 prosencephalon Anatomy 0.000 description 12
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000009471 action Effects 0.000 description 10
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 10
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 238000012347 Morris Water Maze Methods 0.000 description 7
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 7
- OTKJDMGTUTTYMP-UHFFFAOYSA-N dihydrosphingosine Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(N)CO OTKJDMGTUTTYMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 7
- 230000000508 neurotrophic effect Effects 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- OTKJDMGTUTTYMP-ZWKOTPCHSA-N sphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@@H](N)CO OTKJDMGTUTTYMP-ZWKOTPCHSA-N 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 6
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 6
- 239000000544 cholinesterase inhibitor Substances 0.000 description 6
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 6
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 6
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 5
- 241000589220 Acetobacter Species 0.000 description 5
- 229940100578 Acetylcholinesterase inhibitor Drugs 0.000 description 5
- 241000032681 Gluconacetobacter Species 0.000 description 5
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 5
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 5
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 5
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 5
- 230000005062 synaptic transmission Effects 0.000 description 5
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 4
- 208000026139 Memory disease Diseases 0.000 description 4
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 4
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 4
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 description 4
- 238000009227 behaviour therapy Methods 0.000 description 4
- 230000001149 cognitive effect Effects 0.000 description 4
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 4
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 4
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 4
- 239000003900 neurotrophic factor Substances 0.000 description 4
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 241000308413 Asaia Species 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GCGTXOVNNFGTPQ-JHOUSYSJSA-N N-hexadecanoylsphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC GCGTXOVNNFGTPQ-JHOUSYSJSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 3
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 3
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 3
- 230000014511 neuron projection development Effects 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 description 3
- 150000003410 sphingosines Chemical class 0.000 description 3
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 3
- JLBMJJXYKPCIKZ-FIDRQUTQSA-N (18R,19R)-18-amino-17,19-dihydroxytetratriacontan-16-one Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@@H](N)C(O)C(=O)CCCCCCCCCCCCCCC JLBMJJXYKPCIKZ-FIDRQUTQSA-N 0.000 description 2
- JYZJYKOZGGEXSX-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxymyristic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC(O)C(O)=O JYZJYKOZGGEXSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001497546 Acetobacter lovaniensis Species 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 2
- 241000308412 Asaia bogorensis Species 0.000 description 2
- 241000142976 Asaia siamensis Species 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 239000004129 EU approved improving agent Substances 0.000 description 2
- 241000589236 Gluconobacter Species 0.000 description 2
- SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N Indole-3-acetic acid Natural products C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 2
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 2
- UWHZIFQPPBDJPM-FPLPWBNLSA-M Vaccenic acid Natural products CCCCCC\C=C/CCCCCCCCCC([O-])=O UWHZIFQPPBDJPM-FPLPWBNLSA-M 0.000 description 2
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002164 acetylcholinergic effect Effects 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000006993 memory improvement Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N monopropylene glycol Natural products CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 210000002241 neurite Anatomy 0.000 description 2
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 2
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N ornithyl group Chemical group N[C@@H](CCCN)C(=O)O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N palmitoleic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- DIWFUPGNXPIXAB-CRGCAJGSSA-N (2s)-3-(2-aminoethyl)-2-(16-hydroxyhexadecanoylamino)-4-oxononadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)C(CCN)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCO DIWFUPGNXPIXAB-CRGCAJGSSA-N 0.000 description 1
- UUMBWNXCQGDFKZ-GGYWPGCISA-N (2s)-5-amino-2-(3-hydroxyhexadecanoylamino)pentanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(O)CC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN UUMBWNXCQGDFKZ-GGYWPGCISA-N 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N (9Z,12Z)-9,10,12,13-tetratritiooctadeca-9,12-dienoic acid Chemical compound C(CCCCCCC\C(=C(/C\C(=C(/CCCCC)\[3H])\[3H])\[3H])\[3H])(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DJCQJZKZUCHHAL-UHFFFAOYSA-N (Z)-9-Pentadecensaeure Natural products CCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O DJCQJZKZUCHHAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- KQPJSKCOHPLHPI-SHXCFHCCSA-N 2-[[(2s)-3-(2-aminoethyl)-2-(16-hydroxyhexadecanoylamino)-4-oxononadecanoyl]amino]ethanesulfonic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)C(CCN)[C@@H](C(=O)NCCS(O)(=O)=O)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCO KQPJSKCOHPLHPI-SHXCFHCCSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HHXYJYBYNZMZKX-PYQRSULMSA-N 22(29)-Hopene Chemical compound C([C@]1(C)[C@H]2CC[C@H]34)CCC(C)(C)[C@@H]1CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@@H]1C(=C)C HHXYJYBYNZMZKX-PYQRSULMSA-N 0.000 description 1
- PNJBOAVCVAVRGR-UDCAXGDQSA-N 22-Hopanol Chemical compound C([C@]1(C)[C@H]2CC[C@H]34)CCC(C)(C)[C@@H]1CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@@H]1C(C)(O)C PNJBOAVCVAVRGR-UDCAXGDQSA-N 0.000 description 1
- HHXYJYBYNZMZKX-UHFFFAOYSA-N 3,4:15,16-diepoxy-7-oxo-13(16),14-clerodadien-20,12-olide-(3alpha,4alpha)-form Natural products C12CCC3C4(C)CCCC(C)(C)C4CCC3(C)C1(C)CCC1C2(C)CCC1C(=C)C HHXYJYBYNZMZKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000021959 Abnormal metabolism Diseases 0.000 description 1
- 241001497543 Acetobacter indonesiensis Species 0.000 description 1
- 241001310537 Acetobacter orientalis Species 0.000 description 1
- 241001497697 Acetobacter orleanensis Species 0.000 description 1
- 241000589212 Acetobacter pasteurianus Species 0.000 description 1
- 241000923672 Acetobacter pomorum Species 0.000 description 1
- 241001310552 Acetobacter syzygii Species 0.000 description 1
- 241001497552 Acetobacter tropicalis Species 0.000 description 1
- 244000235858 Acetobacter xylinum Species 0.000 description 1
- 235000002837 Acetobacter xylinum Nutrition 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000957724 Catostomus commersonii Corticoliberin-1 Proteins 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004278 EU approved seasoning Substances 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 241001468096 Gluconacetobacter diazotrophicus Species 0.000 description 1
- 241000320577 Gluconacetobacter sacchari Species 0.000 description 1
- 241001518248 Gluconobacter cerinus Species 0.000 description 1
- 241001518243 Gluconobacter frateurii Species 0.000 description 1
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLTTWXWDLCGBRD-UHFFFAOYSA-N Hydroxyhopane Natural products CC12CCCC(C)(C)C1CCC1(C)C2CCC2C3(C)CCC(C(C)C)C3(O)CCC21C DLTTWXWDLCGBRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 241001468094 Komagataeibacter europaeus Species 0.000 description 1
- 241000589216 Komagataeibacter hansenii Species 0.000 description 1
- 241000933022 Komagataeibacter intermedius Species 0.000 description 1
- 241001629396 Komagataeibacter xylinus NBRC 15237 Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 229920000161 Locust bean gum Polymers 0.000 description 1
- 244000294411 Mirabilis expansa Species 0.000 description 1
- 235000015429 Mirabilis expansa Nutrition 0.000 description 1
- CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N N-acetylsphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC(C)=O CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N 0.000 description 1
- 206010056677 Nerve degeneration Diseases 0.000 description 1
- 101710138657 Neurotoxin Proteins 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000021319 Palmitoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 208000008469 Peptic Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 235000021322 Vaccenic acid Nutrition 0.000 description 1
- BZHJMEDXRYGGRV-UHFFFAOYSA-N Vinyl chloride Chemical compound ClC=C BZHJMEDXRYGGRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 1
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 description 1
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WUOACPNHFRMFPN-UHFFFAOYSA-N alpha-terpineol Chemical compound CC1=CCC(C(C)(C)O)CC1 WUOACPNHFRMFPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 1
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- JMKBTQYGOKJMBJ-ZQPPIKFSSA-N bacteriohopane-32,33,34,35-tetrol Chemical compound C([C@]1(C)[C@H]2CC[C@H]34)CCC(C)(C)[C@@H]1CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@@H]1[C@@H](CC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CO)C JMKBTQYGOKJMBJ-ZQPPIKFSSA-N 0.000 description 1
- LFYJSSARVMHQJB-QIXNEVBVSA-N bakuchiol Chemical compound CC(C)=CCC[C@@](C)(C=C)\C=C\C1=CC=C(O)C=C1 LFYJSSARVMHQJB-QIXNEVBVSA-N 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 1
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 1
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 1
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 1
- ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(CO)C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N cis-palmitoleic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UWHZIFQPPBDJPM-FPLPWBNLSA-N cis-vaccenic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCCCC(O)=O UWHZIFQPPBDJPM-FPLPWBNLSA-N 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 235000014510 cooky Nutrition 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 210000003792 cranial nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 125000005313 fatty acid group Chemical group 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000008717 functional decline Effects 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229910002804 graphite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010439 graphite Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 1
- CBZFLMNNXKRPHN-UHFFFAOYSA-N hopene-a Natural products C12CCC3C4(C)CCCC(C)(C)C4CCC3(C)C1(C)CCC1C2(C)CCC1=C(C)C CBZFLMNNXKRPHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 235000010420 locust bean gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000711 locust bean gum Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 230000006371 metabolic abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- KWKAKUADMBZCLK-UHFFFAOYSA-N methyl heptene Natural products CCCCCCC=C KWKAKUADMBZCLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013536 miso Nutrition 0.000 description 1
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N n-Octanol Natural products CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 239000002581 neurotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000618 neurotoxin Toxicity 0.000 description 1
- VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N newbouldiamide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)C(CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 235000021313 oleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 208000011906 peptic ulcer disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 235000013555 soy sauce Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 235000011496 sports drink Nutrition 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- UWHZIFQPPBDJPM-BQYQJAHWSA-N trans-vaccenic acid Chemical compound CCCCCC\C=C\CCCCCCCCCC(O)=O UWHZIFQPPBDJPM-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 1
- 238000006227 trimethylsilylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 229930195735 unsaturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 description 1
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 description 1
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 1
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 description 1
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 1
Images
Description
本発明は、経口摂取により、脳機能改善効果を有する機能性組成物に関するものである。さらに具体的には、本発明は、Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンを有効成分とする、神経伝達機構の異常を改善することによる記憶、学習能の改善機能を有する、脳機能改善用組成物に関する。 The present invention relates to a functional composition having an effect of improving brain function by oral ingestion. More specifically, the present invention relates to a composition for improving brain function, which comprises N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine as an active ingredient, and has a function of improving memory and learning ability by improving abnormalities in a nerve transmission mechanism. Related to things.
近年、人口の高齢化などにより、神経，精神疾患が社会に及ぼす負担が大きくなっており、例えば年配者に多発する認知症による学習，記憶障害が大きな問題となっている。日本での認知症患者は既に１００万人を超え、２０年後には３００万人近くまで増加するとも言われている。 In recent years, due to the aging of the population and the like, the burden of society on neurological and mental illnesses has been increasing. For example, learning and memory impairment due to dementia that frequently occur in the elderly has become a major problem. It is said that the number of dementia patients in Japan already exceeds 1 million and will increase to nearly 3 million in 20 years.
認知症の一つであるアルツハイマー症（以下、ＡＤと称する場合もある）は、脳における神経伝達機構に異常を生じることが明らかとなっている。すなわち、ＡＤでは前脳基底部のマイネルト核においてコリン作動性神経の変性や脱落が起こり、それに伴い、アセチルコリンの合成酵素であるアセチルコリントランスフェラーゼ活性の低下やノルエピネフリンやセロトニンなどのモノアミン系化合物の濃度減少、ＮＧＦなどの神経栄養因子の濃度減少といった状況が認められている（例えば、非特許文献１参照）。
なお、コリン作動性神経の機能低下はＡＤのみならず、加齢脳においても共通する現象である（例えば、非特許文献１参照）。また、モノアミン系の障害は、統合失調症などの種々の神経、精神疾患と強く関わることも、様々な事例で示されている（例えば、非特許文献２参照）。
It has been clarified that Alzheimer's disease (hereinafter sometimes referred to as AD), which is one of dementia, causes an abnormality in the nerve transmission mechanism in the brain. That is, in AD, cholinergic nerve degeneration or shedding occurs in the myelto nucleus of the basal forebrain, accompanied by a decrease in acetylcholine transferase activity, which is a synthase of acetylcholine, and a decrease in the concentration of monoamine compounds such as norepinephrine and serotonin, A situation such as a decrease in the concentration of neurotrophic factors such as NGF has been recognized (see Non-Patent
Note that the decline in cholinergic nerve function is a common phenomenon not only in AD but also in the aging brain (see Non-Patent
これらのＡＤのような重篤な脳疾患に対しては、脳機能改善剤として種々の合成医薬品の開発が進められており、例えば、アセチルコリン作動性神経を賦活することに改善効果を期待したアセチルコリンエステラーゼ阻害剤が現在アルツハイマー治療薬として承認されている。
しかしながら、該アセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、肝障害や不整脈、消化性潰瘍などの増悪といった副作用が報告されているなど、合成医薬品には弊害があることが問題となっていた。
また、神経栄養因子も脳内への直接投与による脳機能改善作用が報告されているが（例えば、非特許文献１参照）、神経栄養因子そのものは高分子であるため、経口摂取においては脳血液関門を通過できず、作用が期待できないという問題点がある。
For these serious brain diseases such as AD, various synthetic pharmaceuticals are being developed as brain function improving agents. For example, acetyl which is expected to have an improvement effect in activating acetylcholinergic nerves. Cholinesterase inhibitors are currently approved for the treatment of Alzheimer's.
However, the acetylcholinesterase inhibitor has been problematic in that it has adverse effects on synthetic drugs, such as reports of side effects such as liver damage, arrhythmia, and exacerbation of peptic ulcer.
In addition, neurotrophic factor has also been reported to improve brain function by direct administration into the brain (see, for example, Non-patent Document 1). There is a problem that it cannot pass through the barrier and cannot be expected to work.
一方、合成医薬品を常用するのではなく、日常的な食事などとして摂取することによって神経、精神疾患を予防、改善することを期待して、種々の食品成分や天然抽出物が提案されている。
例えば、脳神経には、特異的な脂質成分としてホスファチジルコリンやホスファチジルセリンなどのリン脂質やドコサヘイサエン酸やアラキドン酸などの脂肪酸、ガングリオシド、スフィンゴミエリンなどが存在していることや神経栄養因子と同様の生理作用をもつことなどに着目して、ホスファチジルコリンやホスファチジルセリン、ドコサヘキサエン酸などを有効成分とする脳機能改善組成物が提唱されている（例えば、特許文献１参照）。
しかしながら、上記のホスファチジルコリンやホスファチジルセリンなどの脳機能改善効果はモノアミンの代謝が改善されないなど、さほど強いものではないことが報告されている（例えば、非特許文献３及び非特許文献４参照）。
こうした背景から、より強力な脳機能改善効果を有し、しかも安全な物質の開発が望まれていた。
On the other hand, various food ingredients and natural extracts have been proposed in the hope of preventing and improving neurological and psychiatric disorders by taking them as a daily meal instead of using synthetic drugs regularly.
For example, cranial nerves have phospholipids such as phosphatidylcholine and phosphatidylserine, fatty acids such as docosahaisaenoic acid and arachidonic acid, gangliosides, sphingomyelin, etc. as specific lipid components, and physiological effects similar to neurotrophic factors. Focusing on the fact that it has, etc., a brain function improving composition containing phosphatidylcholine, phosphatidylserine, docosahexaenoic acid or the like as an active ingredient has been proposed (for example, see Patent Document 1).
However, it has been reported that the above brain function improving effects such as phosphatidylcholine and phosphatidylserine are not so strong that the metabolism of monoamine is not improved (for example, see Non-Patent
Against this background, it has been desired to develop a safe substance that has a stronger effect of improving brain function.
本発明の目的は、上記従来の問題点を解消し、合成医薬品といったものではなく、食品成分や天然抽出物などのように安全な素材であって、かつ、より強い脳機能改善効果を有する物質を提供することにある。 The object of the present invention is to solve the above-mentioned conventional problems, not a synthetic drug, but a safe material such as a food ingredient or a natural extract, and a substance having a stronger effect of improving brain function Is to provide.
本発明者は、上記課題に鑑み、鋭意検討した結果、醸造酢製造菌として古来より使用されており、安全性の高いことが認知されている酢酸菌に着目した。
なお、ヨーロッパの伝統食であるカスピ海ヨーグルトには酢酸菌が含まれており、酢酸菌自体も歴史的食経験があり、安全性が高いことも知られている。
本発明者は、このように安全性が高く、食経験もある酢酸菌の脳機能改善機能について検討した結果、酢酸菌由来のアルカリ安定脂質、Ｎ−アシルスフィンガニンならびにＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンが神経伝達機構の機能低下を改善し、また、記憶、学習能を改善する強い作用を有することを見出し、本発明を完成した。
As a result of intensive investigations in view of the above problems, the present inventors have focused on acetic acid bacteria that have been used since ancient times as brewing vinegar-producing bacteria and are recognized to have high safety.
The Caspian Sea yogurt, which is a traditional European food, contains acetic acid bacteria, and the acetic acid bacteria itself has a historical diet and is known to be highly safe.
As a result of studying the brain function improving function of acetic acid bacteria having high safety and eating experience as described above, the present inventor has found that the alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria, N-acyl sphinganine and N-2′-hydroxy The present inventors have found that palmitoyl-sphinganine has a strong action of improving the function of the nerve transmission mechanism and improving memory and learning ability.
認知症や加齢による脳機能低下においては、記憶・学習能力の低下に伴い、アセチルコリントランスフェラーゼ活性の低下や、ノルエピネフリンやセロトニンなどのモノアミン系化合物の濃度減少、ＮＧＦなどの神経栄養因子の濃度減少といった神経伝達機構の機能低下が認められる。 In brain function decline due to dementia and aging, as memory and learning ability decline, acetylcholine transferase activity decreases, monoamine compounds such as norepinephrine and serotonin decrease, and neurotrophic factors such as NGF decrease Decreased function of nerve transmission mechanism is observed.
このような脳機能低下の改善機能を検討するための試験方法には、ラットやマウス等の動物を用いる方法として、モリス水迷路試験などの行動学的試験により記憶・学習能力の改善を直接的に検証する方法や脳内神経伝達物質の含量を定量するといった生化学的試験により、神経伝達機構の改善を検証する方法が挙げられる。
また、動物を用いた試験では多量の投与検体を要するため、少量の検体で脳機能改善機能を検討する方法として、神経細胞のモデル細胞株や脳組織の初代培養細胞を用いる方法がある。すなわち、神経細胞に対する神経突起の伸長作用や神経細胞死の抑制作用といった神経栄養因子様の作用を観察することにより、神経伝達機構の改善を検証することができる。
As a test method for examining such an improvement function of brain function deterioration, as a method using an animal such as a rat or a mouse, improvement of memory / learning ability is directly performed by a behavioral test such as a Morris water maze test. And a method of verifying the improvement of the nerve transmission mechanism by biochemical tests such as quantifying the content of neurotransmitters in the brain.
In addition, since a large amount of administration sample is required in a test using animals, there are methods using a model cell line of nerve cells or primary cultured cells of brain tissue as a method for examining a brain function improving function with a small amount of sample. That is, by observing neurotrophic factor-like effects such as the neurite outgrowth effect on nerve cells and the inhibitory effect on nerve cell death, the improvement of the nerve transmission mechanism can be verified.
本発明者は上記の検証方法を駆使し、酢酸菌から抽出、分画した酢酸菌由来のアルカリ安定脂質を経口摂取することにより、脳内神経伝達物質であるモノアミンの代謝を改善し、かつアセチルコリン作動性神経の機能低下による記憶、学習能の低下を改善することを確認した。さらに、酢酸菌由来アルカリ安定脂質中の成分であるＮ−アシルスフィンガニンが、さらにＮ−アシルスフィンガニン中の成分としてはＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンが、神経栄養因子様作用により神経伝達機構の機能低下を改善することを確認した。
なお、該アルカリ安定脂質には、従来から脳機能改善効果が報告されていたホスファチジルコリンやホスファチジルセリン、ドコサヘキサエン酸などが含有されておらず、また、Ｎ−アシルスフィンガニンならびにＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンは上記の脳機能改善効果が報告されていた物質とは異なるものであることも確認した。
The present inventor has improved the metabolism of monoamine, which is a neurotransmitter in the brain, by orally ingesting an alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria extracted and fractionated from acetic acid bacteria using the above verification method, and acetylcholine It was confirmed that the decrease in memory and learning ability due to the decline in function of the acting nerve was improved. Furthermore, N-acyl sphinganine, which is a component in the alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria, and N-2'-hydroxypalmitoyl-sphinganin as a component in N-acyl sphinganine are caused by a neurotrophic factor-like action. It was confirmed that the functional deterioration of the nerve transmission mechanism was improved.
The alkali-stable lipid does not contain phosphatidylcholine, phosphatidylserine, docosahexaenoic acid, etc., which have been reported to improve brain function, and N-acyl sphinganine and N-2′-hydroxy. It was also confirmed that palmitoyl-sphinganine is different from the substance for which the above brain function improving effect has been reported.
すなわち、請求項１に係る本発明は、Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンを有効成分として含有することを特徴とする脳機能改善用組成物に関する。
請求項２に係る本発明は、飲食品であることを特徴とする請求項１に記載の脳機能改善用組成物に関する。
請求項３に係る本発明は、食酢であることを特徴とする請求項２に記載の脳機能改善用組成物に関する。
That is, the present invention according to
The present invention according to
The present invention according to
本発明の脳機能改善用組成物は、直接、酢酸菌由来のアルカリ安定脂質、特にＮ−アシルスフィンガニン、或いはＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンを経口摂取することにより、アセチルコリン作動性神経の変性、脱落による記憶、学習能の低下を改善する機能や、脳内神経伝達物質であるモノアミンの代謝を改善することによる神経伝達機構の機能低下を改善する機能、神経栄養因子様作用により神経伝達機構の機能低下を改善する機能がある。
しかも、本発明の脳機能改善用組成物は、食経験のある酢酸菌に含まれるものであって、安全性にも優れたものである。
The composition for improving brain function of the present invention can be obtained by directly ingesting an alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria, particularly N-acyl sphinganine or N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine. Functions to improve memory, learning ability decline due to degeneration, dropout, function to improve neurotransmitter function decline by improving metabolism of monoamine, a neurotransmitter in the brain, and neurotrophic factor-like action There is a function to improve the function deterioration of the transmission mechanism.
Moreover, the composition for improving brain function according to the present invention is contained in acetic acid bacteria having experience in eating, and is excellent in safety.
以下、本発明を詳細に説明する。
請求項１に係る本発明は、Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンを有効成分として含有することを特徴とする脳機能改善用組成物である。
Hereinafter, the present invention will be described in detail.
The present invention according to
本発明で用いる酢酸菌としては、グルコンアセトバクター属（Gluconacetobacter）、グルコノバクター属（Gluconobacter）、アセトバクター属（Acetobacter）、アサイア属（Asaia）、アシドモナス属（Asidomonas）などに属するいずれの酢酸菌を用いても良く、特に制限はない。 As the acetic acid bacteria used in the present invention, any acetic acid bacteria belonging to the genus Gluconacetobacter, Gluconobacter, Acetobacter, Asaia, Asidomonas, etc. There is no particular limitation.
詳細には、グルコンアセトバクター属（Gluconacetobacter）の酢酸菌としては、グルコンアセトバクター・ハンゼニイ（Gluconacetobacter hansenii）、グルコンアセトバクター・ジアゾトロフィカス（Gluconacetobacter diazotrophicus）、グルコンアセトバクター・インタメデイウス（Gluconacetobacter intermedius）、グルコンアセトバクター・サッカリ（Gluconacetobacter sacchari）、グルコンアセトバクター・ザイリナス（Gluconacetobacter xylinus）、グルコンアセトバクター・ヨーロッパエウス（Gluconacetobacter europaeus）、グルコンアセトバクター・オボエディエンス（Gluconacetobacter oboediens）などが例示される。 Specifically, the acetic acid bacteria of the genus Gluconacetobacter include Gluconacetobacter hansenii, Gluconacetobacter diazotrophicus, Gluconacetobacter intermedius Gluconacetobacter sacchari, Gluconacetobacter xylinus, Gluconacetobacter europaeus, Gluconacetobacter oboeiens (Gluconacetobacter oboedens)
また、グルコノバクター属（Gluconobacter）の酢酸菌としては、グルコノバクター・フラトウリ（Gluconobacter frateurii）、グルコノバクター・セリナス（Gluconobacter cerinus）などが例示される。 Examples of acetic acid bacteria belonging to the genus Gluconobacter include Gluconobacter frateurii and Gluconobacter cerinus.
さらに、アセトバクター属（Acetobacter）の酢酸菌としては、アセトバクター・トロピカリス（Acetobacter tropicalis）、アセトバクター・インドネシエンシス（Acetobacter indonesiensis）、アセトバクター・シジギイ（Acetobacter syzygii）、アセトバクター・シビノンゲンシス（Acetobacter cibinongensis）、アセトバクター・オリエンタリス（Acetobacter orientalis）、アセトバクター・パスツリアヌス（Acetobacter pasteurianus）、アセトバクター・オルレアネンシス（Acetobacter orleanensis）、アセトバクター・ロバニエンシス（Acetobacter lovaniensis）、アセトバクター・アセチ（Acetobacter aceti）、アセトバクター・ポモラム（Acetobacter pomorum）などが例示される。 Furthermore, the acetic acid bacteria of the genus Acetobacter include Acetobacter tropicalis, Acetobacter indonesiensis, Acetobacter syzygii, Acetobacter cibinogensis (Acetobacter cibingiensis) ), Acetobacter orientalis, Acetobacter pasteurianus, Acetobacter orleanensis, Acetobacter lovaniensis, Acetobacter lovaniensis, Acetobacter actiaceto Examples thereof include Acetobacter pomorum.
さらに、アサイア属（Asaia）の酢酸菌としては、アサイア・ボゴレンシス（Asaia bogorensis）、アサイア・シアメンシス（Asaia siamensis）などが例示される。 Furthermore, as acetic acid bacteria of the genus Asaia (Asaia), Asaia bogorensis (Asaia bogorensis), Asaia siamensis (Asaia siamensis), etc. are illustrated.
また、アシドモナス属（Asidomonas）の酢酸菌としては、アシドモナス・メタノリカ（Asidomonas methanolica）などが例示される。 Examples of acetic acid bacteria belonging to the genus Asidomonas include Asidomonas methanolica.
さらに、酢酸菌としては、上記の他、食酢製造やヨーグルトなどの発酵食品に用いられている酢酸菌や、自然界より分離されたもの、また既存の微生物保存機関に保存されていて分譲可能な保存菌株などが適宜利用可能である。 Furthermore, as acetic acid bacteria, in addition to the above, acetic acid bacteria used in fermented foods such as vinegar production and yogurt, those isolated from the natural world, and preserved in existing microorganism storage institutions that can be distributed Strains and the like can be used as appropriate.
酢酸菌由来のアルカリ安定脂質は、エタノール、アセトン、ヘキサン、クロロホルム、メタノール、酢酸エチル等の１種又は２種以上からなる有機溶媒を用いて酢酸菌から脂質類を抽出した脂質画分に対して、弱アルカリ分解処理を施してリン脂質を除去することにより調製することができる。食品用途での安全性、低極性溶媒が望ましいことを考慮すると、抽出溶媒としてはヘキサンやアセトンなどが適している。 Alkali-stable lipids derived from acetic acid bacteria are obtained by extracting lipids from acetic acid bacteria using an organic solvent consisting of one or more of ethanol, acetone, hexane, chloroform, methanol, ethyl acetate, etc. It can be prepared by applying a weak alkaline decomposition treatment to remove phospholipids. Considering safety in food use and the desire for a low polarity solvent, hexane, acetone or the like is suitable as the extraction solvent.
また、Ｎ−アシルスフィンガニンやＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンは、上記の酢酸菌由来のアルカリ安定脂質をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、ヘキサン、クロロホルム、メタノール等の２種以上からなる有機溶媒を用いて溶出させ、分画することにより調製することができる。
なお、Ｎ−アシルスフィンガニンやＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンは化学合成由来のものでも良いが、安全性は酢酸菌の食経験に裏打ちされたものであり、化学合成の場合は副作用のある化合物類を副産物として含まないように製造することが望ましい。
In addition, N-acyl sphinganine and N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine are prepared by subjecting the above-mentioned alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria to silica gel column chromatography, and comprising two or more kinds of hexane, chloroform, methanol and the like. It can be prepared by eluting with a solvent and fractionating.
N-acyl sphinganine and N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine may be derived from chemical synthesis, but safety is supported by dietary experience of acetic acid bacteria. It is desirable to produce such that it does not contain certain compounds as by-products.
酢酸菌由来のアルカリ安定脂質は、ホパノイド化合物、スフィンゴ脂質、アミノ脂質、脂肪酸などを含む。これらの化合物は酢酸菌の膜脂質として一般的に含まれるものであり、例えば、「帯大研報」、２３巻、ｐ．９１７〜９２５（１９７８年）や、「岩手大学大学院連合農学研究科博士論文」、後藤英嗣著、ｐ．１１〜４１（２００１年）に示されるように、以下に示す化合物を含む。 Alkali-stable lipids derived from acetic acid bacteria include hopanoid compounds, sphingolipids, aminolipids, fatty acids and the like. These compounds are generally contained as membrane lipids of acetic acid bacteria. For example, “Obihiro Lab.”, Vol. 23, p. 917-925 (1978), “Doctoral Dissertation of Graduate School of Agricultural Sciences, Iwate University”, written by Eigo Goto, p. As shown in 11-41 (2001), the following compounds are included.
すなわち、ホパノイド化合物（テルぺノイド化合物）としては、例えば、テトラヒドロキシバクテリオホパン（Ｃ３５−ペンタサイクリックテルペンアルコール）、ホパン−２２−オール、ホプ−２２（２９）−エンなどが含まれる。
また、スフィンゴ脂質としては、例えば、Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニン、Ｎ−パルミトイル−スフィンガニン、Ｏ−１−グルクロニル−Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニン、Ｎ−シス−バクセノイル−スフィンガニン、Ｏ−１−グルクロニル−Ｎ−パルミトイル−スフィンガニンなどのＮ−アシルスフィンガニン、および遊離のスフィンガニンなどが含まれる。
さらに、アミノ脂質としては、例えば、オルニチルタウリン脂質３−（パルミトイル）−ヒドロキシパルミトイル−オルニチル−タウリン、オルニチン脂質３−（パルミトイル）−ヒドロキシパルミトイル−オルニチン、リゾオルニチン脂質３−ヒドロキシパルミトイル−オルニチンなどが含まれる。
そして、脂肪酸としては、例えば、シス−バクセン酸などが含まれる。
That is, examples of the hopanoid compound (terpenoid compound) include tetrahydroxybacteriohopane (C35-pentacyclic terpene alcohol), hopan-22-ol, hop-22 (29) -ene, and the like.
Examples of sphingolipids include N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine, N-palmitoyl-sphinganine, O-1-glucuronyl-N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine, N-cis-bacenoyl-sphinganine, O N-acyl sphinganines such as -1-glucuronyl-N-palmitoyl-sphinganine and free sphinganine are included.
Furthermore, examples of amino lipids include ornithyl taurophospholipid 3- (palmitoyl) -hydroxypalmitoyl-ornithyl-taurine, ornithine lipid 3- (palmitoyl) -hydroxypalmitoyl-ornithine, lysoornithine lipid 3-hydroxypalmitoyl-ornithine and the like. included.
Examples of the fatty acid include cis-vaccenic acid.
Ｎ−アシルスフィンガニンは、アルカリ安定脂質に含まれるスフィンゴ脂質の一部を指し、スフィンゴイド塩基であるスフィンガニンに脂肪酸が結合した一般的にセラミドと総称される化合物であり、一般的に以下の化学式（１）で示される。なお、式（１）において、−ＣＯ−Ｒはアシル基を示す。式（１）において、アシル基を構成する脂肪酸は、ヒドロキシ脂肪酸またはノルマル脂肪酸、飽和炭化水素または不飽和炭化水素、直鎖状または分岐鎖状であり、炭素原子数は２から３０以下のものが知られている。
なお、酢酸菌由来のＮ−アシルスフィンガニンとしては、アシル基を構成する脂肪酸としてミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、パルミトレイン酸、オレイン酸、バクセン酸、リノール酸、２−ヒドロキシミリスチン酸、２−ヒドロキシパルミチン酸などが確認されており、特に、Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニン、Ｎ−パルミトイル−スフィンガニン、Ｎ−シス−バクセノイル−スフィンガニンがその組成比の多くを占める。
N-acyl sphinganine refers to a part of sphingolipids contained in alkali-stable lipids, and is a compound generally referred to as ceramide in which a fatty acid is bound to sphinganine, which is a sphingoid base. It is represented by chemical formula (1). In the formula (1), —CO—R represents an acyl group. In the formula (1), the fatty acid constituting the acyl group is a hydroxy fatty acid or normal fatty acid, a saturated hydrocarbon or an unsaturated hydrocarbon, a linear or branched chain, and has 2 to 30 carbon atoms. Are known.
As N-acyl sphinganine derived from acetic acid bacteria, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, palmitoleic acid, oleic acid, vaccenic acid, linoleic acid, 2-hydroxymyristic acid, 2 as fatty acids constituting the acyl group -Hydroxypalmitic acid and the like have been confirmed, and N-2'-hydroxypalmitoyl-sphinganine, N-palmitoyl-sphinganine, and N-cis-buxenoyl-sphinganin occupy most of the composition ratio.
以上の化合物は酢酸菌の種類により、その含量比は異なるが、酢酸菌が属するグラム陰性菌においてのみ膜脂質の主要構成成分として存在するものであり、グラム陽性菌や真核生物など他の生物種の脂質成分としては存在しないか、または極微量の化合物類である。 Although the content ratio of these compounds varies depending on the type of acetic acid bacteria, it exists as a major component of membrane lipid only in Gram-negative bacteria to which acetic acid bacteria belong, and other organisms such as Gram-positive bacteria and eukaryotes. It does not exist as a lipid component of the species, or is a trace amount of compounds.
該脳機能改善用組成物としては、上記の有機溶媒を用いて酢酸菌から脂質類を抽出した脂質画分に対して、弱アルカリ分解処理を施してリン脂質を除去することにより調製された酢酸菌由来のアルカリ安定脂質、または該アルカリ安定脂質を精製して得られるＮ−アシルスフィンガニン、ならびにＮ−アシルスフィンガニン中のＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンを有効成分として含有することを基本とするが、必要に応じて該抽出工程における弱アルカリ分解処理を経ずに調製された脂質画分をそのまま含有させても良い。 As the composition for improving brain function, acetic acid prepared by subjecting a lipid fraction obtained by extracting lipids from acetic acid bacteria using the above organic solvent to a weak alkaline decomposition treatment to remove phospholipids. Alkaline-stable lipid derived from bacteria, or N-acyl sphinganine obtained by purifying the alkali-stable lipid, and N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganin in N-acyl sphinganine as active ingredients However, if necessary, the lipid fraction prepared without the weak alkali decomposition treatment in the extraction step may be contained as it is.
また、該アルカリ安定脂質、Ｎ−アシルスフィンガニン、またはＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンは、酢酸菌の細胞膜に存在するので、抽出工程を経ずに酢酸菌そのままを有効成分として含有させてもよいが、このような場合は体内での吸収を考慮して、高圧ホモジナイザー等により細胞破壊させたものを含有させた方がよい。
このように、酢酸菌由来のアルカリ安定脂質、Ｎ−アシルスフィンガニン、またはＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンを含有する酢酸菌の細胞破壊物や有機溶媒等により抽出された脂質画分を有効成分として含有させても、同様の脳機能改善効果が得られる。
In addition, since the alkali-stable lipid, N-acyl sphinganine, or N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine is present in the cell membrane of acetic acid bacteria, the acetic acid bacteria can be contained as an active ingredient without undergoing an extraction step. However, in such a case, taking into account absorption in the body, it is better to contain a cell disrupted by a high-pressure homogenizer or the like.
Thus, the lipid fraction extracted by the cell destruction product of the acetic acid bacterium containing an alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria, N-acyl sphinganine, or N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganin, an organic solvent, etc. Even if contained as an active ingredient, the same effect of improving brain function can be obtained.
請求項１に係る本発明の脳機能改善用組成物の形態は、錠剤、カプセル剤、粉末または液体などが採用できる。 As the form of the composition for improving brain function according to the first aspect of the present invention , a tablet, capsule, powder, liquid, or the like can be adopted.
次に、請求項２に係る本発明は、飲食品であることを特徴とする請求項１に記載の脳機能改善用組成物である。
ここで飲食品の形態としては、具体的には、キャンデイ、ガム、ゼリー、アイスクリーム、クッキー等の菓子；食パン、米飯等の主食品；アルコール飲料；牛乳、ヨーグルト等の乳製品；食酢飲料、スポーツ飲料等の各種飲料；また、醤油、味噌、食酢等の調味料等が挙げられる。
これらの中でも請求項３に記載したような食酢が好適であり、食酢がもつ他の健康機能とあわせた優れた機能性食品の提供が期待できる
Next, the present invention according to
Here, as the form of food and drink, specifically, sweets such as candy, gum, jelly, ice cream and cookies; main foods such as bread and cooked rice; alcoholic drinks; dairy products such as milk and yogurt; vinegar drinks, Various drinks such as sports drinks; and seasonings such as soy sauce, miso and vinegar.
Among these, vinegar as described in
また、上記形態の酢酸菌由来のアルカリ安定脂質、Ｎ−アシルスフィンガニン、またはＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンに加えて、その他の天然物由来の脳機能改善剤、野菜や果実等の天然物に由来する抗酸化物質等を配合することで、脳機能改善における相乗効果が期待できる。 In addition to the above-mentioned form of the alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria, N-acyl sphinganine, or N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine, other natural product-derived brain function improving agents, vegetables, fruits, etc. A synergistic effect in improving brain function can be expected by adding antioxidants derived from natural products.
本発明において、脳機能改善用組成物中への酢酸菌由来のアルカリ安定脂質の含有割合は、０．０００１〜５重量％、好ましくは、０．００１〜１重量％である。
また、脳機能改善用組成物中へのＮ−アシルスフィンガニンやＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンの含有割合は、それぞれ０．００００１〜０．５重量％、好ましくは、０．０００１〜０．１重量％である。
In the present invention, the content of the alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria in the composition for improving brain function is 0.0001 to 5% by weight, preferably 0.001 to 1% by weight.
The content ratio of N-acyl sphinganine and N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine in the composition for improving brain function is 0.00001 to 0.5% by weight, preferably 0.0001 to 0.1% by weight.
脳機能改善用組成物中への酢酸菌由来のアルカリ安定脂質の含有量が０．０００１重量％未満では、神経伝達機構の異常を改善し、記憶、学習能を改善する効果が発現しづらく、一方、５重量％を越えると該組成物製造時の分散効率の悪化等により、経口摂取に適さなくなるので、いずれも好ましくない。
また、Ｎ−アシルスフィンガニンやＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンの脳機能改善用組成物中の含有量が、それぞれ０．００００１重量％未満の場合は神経伝達機構の異常を改善し記憶、学習能を改善する効果が発現しづらく、一方、０．５重量％を超えると該組成物製造時の分散効率の悪化等により、経口摂取に適さなくなるので、いずれも好ましくない。
When the content of the alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria in the composition for improving brain function is less than 0.0001% by weight, it is difficult to improve the abnormality of the nerve transmission mechanism and improve the memory and learning ability. On the other hand, if it exceeds 5% by weight, it becomes unsuitable for oral ingestion due to the deterioration of the dispersion efficiency during the production of the composition, etc., which is not preferable.
Further, when the content of N-acyl sphinganine or N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine in the composition for improving brain function is less than 0.00001% by weight, the abnormality in the neurotransmission mechanism is ameliorated and memorized. On the other hand, if it exceeds 0.5% by weight, it is not suitable for oral intake due to deterioration of dispersion efficiency during the production of the composition.
本発明の脳機能改善用組成物としての酢酸菌由来のアルカリ安定脂質の投与量は、成人1日当たり０．００１ｍｇ〜１００ｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１０ｇである。成人1日当たり０．１ｍｇの投与量では、神経伝達機構の異常の改善効果、記憶、学習能の改善効果が少なく、一方、成人1日当たりの投与量が成人1日当たり１０ｇを超えると消化吸収ができなくなる恐れがある。
また、Ｎ−アシルスフィンガニンやＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンの投与量は、成人１日当たり０．０００１ｍｇ〜１０ｇ、好ましくは０．０１ｍｇ〜１ｇである。Ｎ−アシルスフィンガニンやＮ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンの投与量が、成人1日当たり、それぞれ０．０１ｍｇ未満では、神経伝達機構の異常の改善効果、記憶、学習能の改善効果が少なく、一方、成人1日当たりの投与量が１ｇを超えると消化吸収ができなくなる恐れがある。
The dosage of the alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria as the composition for improving brain function of the present invention is 0.001 mg to 100 g, preferably 0.1 mg to 10 g per day for an adult. A dose of 0.1 mg per day for adults has little effect on improving neurotransmission mechanism abnormalities, memory and learning ability. On the other hand, if the dose per day for adults exceeds 10 g per day, digestion and absorption can be achieved. There is a risk of disappearing.
The dose of N-acyl sphinganine or N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine is 0.0001 mg to 10 g, preferably 0.01 mg to 1 g per day for an adult. When the dose of N-acyl sphinganine or N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine is less than 0.01 mg per adult day, there is little improvement effect on neurotransmission mechanisms, memory and learning ability. On the other hand, if the daily dose for an adult exceeds 1 g, digestion and absorption may not be possible.
本発明の脳機能改善用組成物は、Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンを有効成分として含有するが、それ以外の各種原料とを混合・均一化した後に、必要に応じて界面活性剤などを混合して、安定化を図ることもできる。これらの界面活性剤としては、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステルおよびレシチンなどを用いることができる。 The composition for improving brain function according to the present invention contains N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine as an active ingredient, and after mixing and homogenizing with other raw materials, a surfactant or the like as necessary. It is also possible to stabilize by mixing. As these surfactants, sorbitan fatty acid ester, glycerin fatty acid ester, propylene glycol fatty acid ester, sucrose fatty acid ester, lecithin and the like can be used.
次に、本発明を実施例等により詳しく説明するが、本発明の範囲はこれらにより何ら限定されるものではない。 EXAMPLES Next, although an Example etc. demonstrate this invention in detail, the scope of the present invention is not limited at all by these.
実施例１（酢酸菌由来のアルカリ安定脂質の調製）
酢酸菌株としてはグルコンアセトバクター・ザイリナスNBRC15237（Gluconacetobacter xylinus NBRC15237）株を用いた。該酢酸菌株は、独立行政法人製品評価技術基盤機構バイオテクノロジー本部生物遺伝資源部門（千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８）に保存されており、譲受可能な酢酸菌である。
Example 1 (Preparation of alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria)
Gluconacetobacter zylinus NBRC15237 (Gluconacetobacter xylinus NBRC15237) strain was used as the acetic acid strain. The acetic acid strain is an acetic acid bacterium which is preserved and transferred in the Biological Genetic Resource Department (2-5-8, Kazusa-Kamashita, Kisarazu City, Chiba Prefecture), National Institute of Technology and Evaluation Biotechnology Headquarters.
酢酸菌由来のアルカリ安定脂質は、以下の方法で調製した。
すなわち、該酢酸菌株の２０００ｇ乾燥菌体からクロロホルム−メタノール系の溶媒（クロロホルム：メタノール：水＝１：２：０．８）で抽出し、その後、２層分離を行い、下層を全脂質画分として回収した。次に、０．４Ｎ ＮａＯＨにより全脂質画分を弱アルカリ分解してリン脂質を除去し、フォルチの組成（クロロホルム：メタノール：水＝８：４：３）に従って再抽出を行い、濃縮乾固し、酢酸菌由来のアルカリ安定脂質を得た。以上の抽出方法の概要を図１に示した。
The alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria was prepared by the following method.
That is, extraction from a 2000 g dry cell of the acetic acid strain with a chloroform-methanol solvent (chloroform: methanol: water = 1: 2: 0.8) followed by separation into two layers, with the lower layer being the total lipid fraction As recovered. Next, the total lipid fraction is weakly alkaline-degraded with 0.4N NaOH to remove phospholipids, re-extracted according to the Forty composition (chloroform: methanol: water = 8: 4: 3), and concentrated to dryness. An alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria was obtained. The outline of the above extraction method is shown in FIG.
得られた酢酸菌由来のアルカリ安定脂質に含まれる脂質成分を、シリカゲルプレートを用いた薄層クロマトグラフィーにて確認した。該薄層クロマトグラフィーにおける展開溶媒としては、脂肪酸、ホパノイド化合物、スフィンゴ脂質に関してはクロロホルム：メタノール＝９６：４を用い、また、スフィンガニンやアミノ脂質に関してはクロロホルム：メタノール：水＝６５：１６：２を用いた。 The lipid component contained in the obtained alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria was confirmed by thin layer chromatography using a silica gel plate. As a developing solvent in the thin layer chromatography, chloroform: methanol = 96: 4 is used for fatty acids, hopanoid compounds, and sphingolipids, and chloroform: methanol: water = 65: 16: 2 is used for sphinganines and aminolipids. Using.
対照として、ホパノイド化合物、Ｎ−アシルスフィンガニン、アミノ脂質などを含むことが確認されている酢酸菌からの精製品（例えば、前記した「帯大研報」、２３巻、ｐ．９１７〜９２５（１９７８年）や、「岩手大学大学院連合農学研究科博士論文」、後藤英嗣著、ｐ．１１〜４１（２００１年）参照）ならびに市販のスフィンガニン（ＳＩＧＭＡ社製）を指標とした。薄層クロマトグラフィーの結果、アルカリ安定脂質中には、対照としたいずれの化合物も存在していることが確認された。 As a control, a purified product from acetic acid bacteria that has been confirmed to contain a hopanoid compound, N-acyl sphinganine, aminolipid, etc. (for example, the above-mentioned “Obihiro Lab.”, Vol. 23, p. 917-925). (1978), “Doctoral Dissertation of Iwate University Graduate School of Agricultural Sciences”, written by Eigo Goto, p.11-41 (2001)) and commercially available sphinganine (manufactured by SIGMA) were used as indices. As a result of thin layer chromatography, it was confirmed that any compound as a control was present in the alkali-stable lipid.
また、アルカリ安定脂質中の主な成分の含有量を高速液体クロマトグラフィーによって確認した。アルカリ安定脂質を無水ピリジン及び塩化ベンゾイル存在下にて７０℃で１０分間反応させ、ホパノイド化合物やスフィンゴ脂質を含んだベンゾイル誘導体を精製した。このベンゾイル誘導体を高速液体クロマトグラフィーに供し、紫外吸光２３０ｎｍの波長を検出した。
上記、各化合物の市販標準品または構造が確認されている酢酸菌からの精製品を用いた標準曲線から、アルカリ安定脂質中に含まれる含量を算出した。高速液体クロマトグラフィーの移動相にはヘキサン：イソプロパノール＝１００：１の溶媒を用い、流速は１ｍｌ／分とした。
In addition, the content of main components in the alkali-stable lipid was confirmed by high performance liquid chromatography. The alkali-stable lipid was reacted at 70 ° C. for 10 minutes in the presence of anhydrous pyridine and benzoyl chloride to purify a benzoyl derivative containing a hopanoid compound and a sphingolipid. This benzoyl derivative was subjected to high performance liquid chromatography, and a wavelength of 230 nm in ultraviolet absorption was detected.
The content contained in the alkali-stable lipid was calculated from the above-mentioned standard curve using commercially available standard products or purified products from acetic acid bacteria whose structures were confirmed. A solvent of hexane: isopropanol = 100: 1 was used as the mobile phase for high performance liquid chromatography, and the flow rate was 1 ml / min.
このようにして分析された酢酸菌由来のアルカリ安定脂質中の主な成分を下記の表１に示した。なお、アミノ脂質の存在は確認（組成比は未確認）できたが、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロールなどのリン脂質類の存在は確認されなかった。 The main components in the alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria analyzed in this way are shown in Table 1 below. Although the presence of aminolipids was confirmed (composition ratio was not confirmed), the presence of phospholipids such as phosphatidylcholine, phosphatidylserine, and phosphatidylglycerol was not confirmed.
実施例２（記憶障害モデルラットを用いた酢酸菌由来のアルカリ安定脂質投与によるモリス水迷路試験での改善効果）
ＡＤ患者の脳や加齢脳では前脳基底部のマイネルト核でアセチルコリン作動性神経の変性、脱落が見られるが、正常ラットの脳にイボテン酸を投与することによっても同様の現象を発現させることが可能である。そこで、常法に従って、７週齢、Ｃｒｊ：Ｗｉｓｔｅｒ系の雄ラットの前脳基底部マイネルト核に、神経毒であるイボテン酸を５μｇ注入し、コリン作動性神経を脱落する記憶障害モデルラットを作製した。
ＡＤ治療薬として承認されているアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、この記憶障害モデルラットにおいて経口投与により行動学的試験での学習能の改善を示すことが報告されている。
この記憶障害ラットにイボテン酸注入日より１４日間、実施例１で調製した酢酸菌アルカリ安定脂質を経口投与し、コリン作動性神経の脱落による記憶、学習能の低下を改善する効果をモリス水迷路による行動学的試験で確認した。
Example 2 (Improvement effect in Morris water maze test by administration of alkali-stable lipids derived from acetic acid bacteria using memory impairment model rats)
In AD patients' brains and aging brains, degeneration and loss of acetylcholinergic nerves are observed in the meinert nucleus of the basal forebrain, but the same phenomenon can be expressed by administering ibotenic acid to the brains of normal rats. Is possible. Therefore, according to a conventional method, a 7-week-old Crj: Wister male rat forebrain basal meinerto nucleus was injected with 5 μg of neurotoxin ibotenic acid to produce a memory disorder model rat in which cholinergic nerves were dropped. did.
It has been reported that an acetylcholinesterase inhibitor approved as an AD therapeutic drug shows improved learning ability in a behavioral test by oral administration in this memory disorder model rat.
This memory-impaired rat was orally administered with the alkaline stable lipid of acetic acid bacteria prepared in Example 1 for 14 days from the date of infusion of ibotenic acid, and the effect of improving memory and learning ability decline due to cholinergic nerve loss was observed in the Morris water maze. Confirmed by a behavioral test.
（１）記憶障害モデルラットへの酢酸菌由来のアルカリ安定脂質投与
記憶障害のない正常ラットを用いたイボテン酸無処置区、ならびに記憶障害モデルラットを用いた無投与対照区、酢酸菌由来のアルカリ安定脂質低用量投与区（以下、ＡＳＬ低用量区と称する場合もある）、酢酸菌由来のアルカリ安定脂質高用量投与区（以下、ＡＳＬ高用量区と称する場合もある）、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤を投与した陽性対照区（以下、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤投与区と称する場合もある）の計５群を設定し、それぞれ１０匹を１群とした。
(1) Alkali-stable lipid administration from acetic acid bacteria to memory-impaired model rats Ibotenic acid-untreated group using normal rats without memory impairment, untreated control group using memory-impaired model rats, alkali derived from acetic acid bacteria Stable lipid low dose group (hereinafter also referred to as ASL low dose group), alkaline stable lipid high dose group (hereinafter also referred to as ASL high dose group) derived from acetic acid bacteria, acetylcholinesterase inhibitor A total of 5 groups of positive control groups (hereinafter sometimes referred to as acetylcholinesterase inhibitor administration groups) administered were set, and 10 animals each were defined as 1 group.
なお、いずれの群においても固形飼料としてＣＲＦ−１（オリエンタル酵母工業社製）を自由に摂取させた。また、酢酸菌由来のアルカリ安定脂質投与区は、３％モノミリスチン酸溶液に酢酸菌由来のアルカリ安定脂質を分散させ、１日にラット体重１ｋｇあたり低用量で１６５ｍｇ、高用量で１６５０ｍｇの該アルカリ安定脂質を経口投与した。
イボテン酸無処置区と無投与対照区では、３％モノミリスチン酸溶液のみを酢酸菌由来のアルカリ安定脂質投与区と同容量で投与した。
陽性対照区としては、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤である９−アミノ−１，２，３，４，−テトラヒドロアクリジンヒドロクロリド（９−Ａｍｉｎｏ−１，２，３，４−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏａｃｒｉｄｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＳＩＧＭＡ社製）を、十分な薬効が得られる量として、１日にラット体重１ｋｇあたり１ｍｇ経口投与した。１４日の全投与期間中、ラットの体重、一般状態について投与検体による異常は観察されなかった。
In any group, CRF-1 (manufactured by Oriental Yeast Co., Ltd.) was freely ingested as a solid feed. In addition, the alkaline stable lipid administration group derived from acetic acid bacteria is obtained by dispersing the alkaline stable lipid derived from acetic acid bacteria in a 3% monomyristic acid solution, and 165 mg of the alkali per kg body weight of the rat per day and 1650 mg of the alkali at a high dose. Stable lipids were administered orally.
In the ibotenic acid non-treated group and the non-treated control group, only the 3% monomyristic acid solution was administered in the same volume as the alkaline stable lipid-treated group derived from acetic acid bacteria.
As a positive control group, 9-amino-1,2,3,4, -tetrahydroacridine hydrochloride (9-Amino-1,2,3,4-tetrahydroacrylamide hydrochloride, manufactured by SIGMA) which is an acetylcholinesterase inhibitor is used. As an amount capable of obtaining sufficient drug efficacy, 1 mg / kg of rat body weight was orally administered per day. During the entire 14-day administration period, no abnormalities were observed in the administered specimens regarding the body weight and general condition of the rats.
（２）モリス水迷路試験
投与開始１０日後から１３日後まで、モリス水迷路試験の習得試行を行い、学習の程度を確認した。１日に午前と午後に１匹２試行、計４日間で８試行を行った。なお、モリス水迷路装置の概要を図１に示す。視覚では識別不可能な透明なアクリル製のプラットホーム（直径：約１２ｃｍ、高さ：約３０ｃｍ）とプラットホームが水に隠れるように約３２ｃｍの高さまで水を張った灰色塩化ビニール製の円形プール（直径：約１４８ｃｍ、高さ約４４ｃｍ）を使用した。
また、プールを4つの象限に分割し、そのうちの第四象限中央（プール中央より約３６ｃｍ）にプラットホームを設置し、プールの周囲には空間的手がかりとして電球を設置した。Ａ〜Ｅの各１地点からラットの頭を円形プールの壁に向けて投入し、プラットホーム上に到達するまでの時間（秒）を測定（測定時間は最大９０秒間）した。
最大測定時間９０秒以内にプラットホームに辿り着き、プラットホーム上に３０秒間滞在した場合は、プラットホームの位置を認識していると判断し、測定を終了した。なお、辿り着けなかったラットについては９０秒時点でプールより救出した。
８試行のラットの投入場所はＣ地点、Ｅ地点、Ａ地点、Ｄ地点、Ｂ地点、Ｅ地点、Ｃ地点、Ａ地点の順に行った。
(2) Morris water maze test From the 10th day to the 13th day after the start of administration, a trial of learning the Morris water maze test was conducted to confirm the degree of learning. On the 1st, 8 trials were conducted in 4 days, 2 trials each in the morning and afternoon. An outline of the Morris water maze device is shown in FIG. A transparent acrylic platform (diameter: approx. 12 cm, height: approx. 30 cm) that cannot be visually discerned, and a circular pool made of gray vinyl chloride (diameter: approx. 32 cm so that the platform is hidden in water) : About 148 cm, height about 44 cm).
In addition, the pool was divided into four quadrants, a platform was installed in the middle of the fourth quadrant (about 36 cm from the center of the pool), and light bulbs were installed around the pool as spatial cues. The rat's head was introduced from one point A to E toward the wall of the circular pool, and the time (seconds) required to reach the platform was measured (maximum measurement time was 90 seconds).
When the platform reached the platform within 90 seconds and stayed on the platform for 30 seconds, it was determined that the position of the platform was recognized, and the measurement was terminated. Rats that could not reach were rescued from the pool at 90 seconds.
Eight trial rats were placed in the order of C point, E point, A point, D point, B point, E point, C point, and A point.
習得試行終了後、投与開始から１４日後にプローブ試行を行った。
すなわち、プラットホームを取り外して、その付近にどれだけとどまるのかを観察し、ラットの空間認知記憶および場所学習の習得の程度を確認した。Ｃ地点からラットの頭を円形プールの壁に向けて入れ、０〜３０秒、３０〜６０秒および６０〜９０秒の観察時間内にラットが第四象限（習得試行時にプラットホームが設置されていた象限）に滞在した時間（第四象限の遊泳時間：秒）およびプラットホームのあった位置の通過回数（第四象限内のプラットホームのあった場所を通過した回数）を測定した。
After completing the acquisition trial, a probe trial was conducted 14 days after the start of administration.
That is, the platform was removed and the extent of staying in the vicinity was observed to confirm the degree of mastery of spatial cognitive memory and place learning of rats. From point C, the rat's head is placed against the wall of the circular pool, and within the observation time of 0-30 seconds, 30-60 seconds, and 60-90 seconds, the rats are in the fourth quadrant (the platform was installed during the acquisition trial). The time spent in the quadrant (swimming time in the fourth quadrant: seconds) and the number of times the platform was passed (the number of passes through the place where the platform was in the fourth quadrant) were measured.
習得試行、プローブ試行の結果を図３〜５に示した。なお、いずれの結果も各群１０匹の平均値で示した。 The results of learning trials and probe trials are shown in FIGS. All results are shown as an average value of 10 animals in each group.
（３）アルカリ安定脂質の習得試行への影響
図３にはイボテン酸無処置区、無投与対照区、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区、陽性対照区について習得試行８試行を行い、各区の習得試行での到達時間の測定結果を示した。なお、図３中のバーは標準偏差を示す。
その結果、イボテン酸無処置区では試行回数が増す毎に学習効果が得られ到達時間が短縮した。また、無投与対照区では試行による学習効果が得られず、到達時間が短縮しなかった。
そして、無投与対照区に対してＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区、陽性対照区では到達時間の短縮傾向が見られ、特にＡＳＬ高用量区では、３、５、６試行目の到達時間が陽性対照区よりも短縮しており、ＡＳＬ高用量区において陽性対照区以上の学習効果が確認された。
さらに、試行回数７において、無投与対照区とＡＳＬ低用量区の間でＳｔｅｅｌ検定において危険率ｐ＜０．０５で有意差があったのに対して、無投与対照区と陽性対照区の間では危険率ｐ＜０．０５での有意差はなく、ＡＳＬ低用量区においても陽性対照区以上の学習効果が確認された。
(3) Influence on Trials of Acquisition of Alkali-Stable Lipids Figure 8 shows 8 trials of learning for the ibotenic acid untreated group, non-administered control group, ASL low-dose group, ASL high-dose group, and positive control group. The measurement result of the arrival time in the acquisition trial was shown. In addition, the bar in FIG. 3 shows a standard deviation.
As a result, in the ibotenic acid untreated section, the learning effect was obtained and the arrival time was shortened every time the number of trials increased. In the non-treated control group, the learning effect by trial was not obtained, and the arrival time was not shortened.
In addition, the ASL low-dose group, the ASL high-dose group, and the positive control group showed a tendency to shorten the arrival time compared to the non-administration control group. It was shorter than the positive control group, and the learning effect over the positive control group was confirmed in the ASL high dose group.
Furthermore, in the number of
（４）アルカリ安定脂質投与のプローブ試行への影響
図４にはイボテン酸無処置区、無投与対照区、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区、陽性対照区におけるプローブ試行での第四象限の滞在時間を示した。なお、バーは標準偏差を示す。
その結果、無投与対照区では、イボテン酸無処置区に対して、第四象限の滞在時間が延長した。第四象限の滞在時間は陽性対照区では延長傾向が見られなかったのに対し、ＡＳＬ低用量区、高用量区ではイボテン酸無処置区に近いレベルまで延長したことから、陽性対照区以上の空間認知記憶および場所学習の習得機能の改善効果が確認された。
(4) Effect of Alkali-Stable Lipid Administration on Probe Trials FIG. 4 shows the fourth quadrant in the probe trials in the ibotenic acid untreated group, untreated control group, ASL low dose group, ASL high dose group, and positive control group. Showed stay time. The bar indicates the standard deviation.
As a result, in the non-administered control group, the residence time in the fourth quadrant was extended as compared to the ibotenic acid-free group. The stay in the fourth quadrant did not show a tendency to increase in the positive control group, but extended to a level close to the ibotenic acid-free group in the ASL low-dose group and the high-dose group. The improvement effect of the acquisition function of spatial cognitive memory and place learning was confirmed.
さらに、図５にはイボテン酸無処置区、無投与対照区、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区、陽性対照区におけるプローブ試行でのプラットホーム位置通過回数を示した。なお、バーは標準偏差を示す。
その結果、無投与対照区では、イボテン酸無処置区に対して、プラットホーム位置の通過回数が著しく減少していた。これに対し、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区ならびに陽性対照区のいずれの群においても通過回数の有意な増加が認められた。特にＡＳＬ高用量区では陽性対照区よりも通過回数が増加していることから、陽性対照区と同等以上の空間認知記憶および場所学習の習得の機能の改善効果が確認された。
なお、無投与対照区に対してＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区ならびに陽性対照区の３群の間でＳｔｅｅｌ検定において、危険率ｐ＜０．０５で有意差が認められた。
Further, FIG. 5 shows the number of times of passing the platform position in the probe trial in the ibotenic acid non-treated group, the non-treated control group, the ASL low-dose group, the ASL high-dose group, and the positive control group. The bar indicates the standard deviation.
As a result, in the non-administered control group, the number of passes through the platform position was remarkably reduced as compared with the ibotenic acid non-treated group. In contrast, a significant increase in the number of passages was observed in any of the ASL low dose group, the ASL high dose group, and the positive control group. In particular, since the number of passages increased in the ASL high-dose group compared with the positive control group, the improvement effect of the function of acquiring spatial cognitive memory and location learning was confirmed to be equal to or higher than that of the positive control group.
In the Steel test, a significant difference was observed between the three groups of the ASL low-dose group, the ASL high-dose group, and the positive control group with respect to the untreated control group at a risk rate of p <0.05.
（５）考察
以上の結果、習得試行でのプラットホーム到達時間（図３）は、記憶障害のないイボテン酸無処置区では試行を繰り返す毎に学習効果が得られ、到達時間が短縮した。また、イボテン酸処置による記憶障害をもつ無投与対照区では試行による学習効果が得られず、到達時間が短縮しなかった。
これに対し、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区では習得試行において陽性対照区と同等レベル以上の学習効果が得られた。すなわち、ＡＳＬ高用量区では、３、５、６試行目の到達時間が陽性対照区よりも短縮しており、また、７試行目ではＡＳＬ低用量区において無投与対照区に対して有意な到達時間の短縮が見られたが、陽性対照区では有意な短縮はみられなかった。
以上から、酢酸菌由来のアルカリ安定脂質投与による優れた学習能の改善効果が示された。
(5) Consideration As a result of the above, the platform arrival time in the acquisition trial (FIG. 3) was obtained in each trial repeated in the ibotenic acid-free treatment section without memory impairment, and the arrival time was shortened. In the non-administration control group having memory impairment due to ibotenic acid treatment, the learning effect by trial was not obtained, and the arrival time was not shortened.
In contrast, in the ASL low-dose group and the ASL high-dose group, a learning effect equal to or higher than that of the positive control group was obtained in the acquisition trial. That is, in the ASL high-dose group, the arrival time in
From the above, the improvement effect of the excellent learning ability by administration of the alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria was shown.
さらに、プローブ試行での結果（図４及び図５）においても同様の改善効果が確認された。すなわち、イボテン酸処置を行った無投与対照区ではイボテン酸無処置区に対して、第四象限の滞在時間が延長し、プラットホーム位置の通過回数も著しく減少しており、空間認知記憶および場所学習の習得の機能が低下していた。
これに対し、ＡＳＬ低用量区、高用量区では第四象限の滞在時間が記憶障害のないラットに近いレベルまで延長した。第四象限の滞在時間は陽性対照区では改善傾向が見られなかった。さらに、プラットホーム位置の通過回数も無投与対照区に対して有意な増加が確認され、ＡＳＬ高用量投与区では陽性対照区よりも増加した。
以上から、酢酸菌由来のアルカリ安定脂質の投与により、空間認知記憶および場所学習の習得の機能を改善する優れた効果が確認された。
Further, the same improvement effect was confirmed in the results of the probe trial (FIGS. 4 and 5). In other words, in the non-administration control group treated with ibotenic acid, the residence time in the fourth quadrant was prolonged and the number of times of passing through the platform position was significantly reduced compared to the ibotenic acid non-treated group, and spatial cognitive memory and place learning The ability to learn was degraded.
In contrast, in the ASL low-dose group and the high-dose group, the residence time in the fourth quadrant was extended to a level close to that of rats without memory impairment. The stay in the fourth quadrant did not improve in the positive control group. Furthermore, the number of times of passing through the platform position was also significantly increased with respect to the non-administered control group, and increased in the ASL high-dose group as compared with the positive control group.
From the above, it was confirmed that administration of an alkaline stable lipid derived from acetic acid bacteria has an excellent effect of improving the function of learning spatial recognition memory and location learning.
叙上のように、習得試行、プローブ試行の結果から、酢酸菌アルカリ安定脂質は経口摂取により、ＡＤ患者の脳や加齢脳などで見られる前脳基底部マイネルト核でのコリン作動性神経の脱落による学習、記憶障害を改善する優れた効果が発揮されることが行動学的試験において確認された。 As described above, from the results of acquisition trials and probe trials, the alkaline stable lipids of acetic acid bacteria are taken orally, and cholinergic nerves in the forebrain basal meinelt nucleus seen in AD patients' brains, aging brains, etc. It was confirmed in the behavioral test that it has an excellent effect of improving learning and memory impairment due to dropout.
実施例３（記憶障害モデルラットを用いた酢酸菌由来のアルカリ安定脂質の投与による脳内モノアミン含量の改善効果）
ＡＤ患者の脳や加齢脳などで見られる前脳基底部マイネルト核でのコリン作動性神経の脱落に伴い、前脳皮質や海馬においてノルエピネフリンやセロトニンなどのモノアミン系化合物の濃度が低下する。モノアミン系化合物の代謝の異常は、種々の神経、精神疾患との関連性も明らかとなっている。
Example 3 (Improvement effect of monoamine content in the brain by administration of alkaline stable lipids derived from acetic acid bacteria using memory disorder model rats)
With the loss of cholinergic nerves in the forebrain basement Minelt nucleus seen in AD patients' brains and aging brains, the concentration of monoamine compounds such as norepinephrine and serotonin in the forebrain cortex and hippocampus decreases. Abnormal metabolism of monoamine compounds has also been found to be associated with various neurological and psychiatric disorders.
そこで実施例２における各群のラットについて、これらの脳内物質を消長を測定した。
すなわち、実施例２にて作製した記憶障害モデルラットの脳を摘出し、前脳皮質および海馬のモノアミンの含量を測定した。
（１）記憶障害モデルラット脳におけるモノアミン含量の測定方法
実施例２におけるイボテン酸無処置区、無投与対照区、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区、陽性対照区の５群の各５匹について、投与１４日後のラットを、断頭器を用いて断頭し、脳を取り出し、氷冷した生理食塩液（株式会社大塚製薬工場）に脳を入れた。次いで、脳を取り出し、分割した脳から前脳皮質、海馬を取り出し、モノアミンおよびその代謝物含量を測定した。測定方法を以下の（ａ）〜（ｃ）に示す。
Therefore, for each group of rats in Example 2, the aging of these brain substances was measured.
That is, the brain of the memory impairment model rat prepared in Example 2 was removed, and the monoamine content of the forebrain cortex and hippocampus was measured.
(1) Method for measuring monoamine content in brain of memory disorder model rat About 5 each of 5 groups of ibotenic acid untreated group, untreated control group, ASL low dose group, ASL high dose group, and positive control group in Example 2 The rat 14 days after administration was decapitated using a decapitator, the brain was taken out, and the brain was placed in an ice-cold physiological saline (Otsuka Pharmaceutical Factory). Next, the brain was removed, the forebrain cortex and hippocampus were removed from the divided brain, and the monoamine and its metabolite contents were measured. The measuring method is shown in the following (a) to (c).
（ａ）ＨＰＬＣ−ＥＣＤシステム
・ポンプシステムＥＰ−３００（エイコム社製）
・デガッサーＤＧ−３００（エイコム社製）
・カラム恒温槽ＡＴＣ−３００（エイコム社製）
・電気化学検出器ＥＣＤ−３００（エイコム社製）
・グラファイト電極ＷＥ−３Ｇ（エイコム社製）
・ガスケットＧＳ−２５（エイコム社製）
・参照電極ＲＥ−１００（エイコム社製）
・オートサンプラー２３１ＸＬ（エムエス機器社製）
・シリンジポンプ４０２（エムエス機器社製）
・冷却器８３２（エムエス機器社製）
・データ処理装置ＥＰＣ−３００（エイコム社製）
・ホモジナイザーＰＲＯ ２６０（ＰＲＯ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ．社製）
・冷却遠心機５４１７Ｒ（エッペンドルフ・ヤトロン社製）
(A) HPLC-ECD system / pump system EP-300 (manufactured by Aicom)
・ Degasser DG-300 (manufactured by Acom)
-Column thermostat ATC-300 (manufactured by Aicom)
・ Electrochemical detector ECD-300 (Aicom)
・ Graphite electrode WE-3G (Aicom)
・ Gasket GS-25 (manufactured by Acom)
・ Reference electrode RE-100 (manufactured by Acom)
・ Autosampler 231XL (manufactured by MS Equipment Co., Ltd.)
・ Syringe pump 402 (manufactured by MS Equipment Co., Ltd.)
・ Cooler 832 (manufactured by MS Equipment Co., Ltd.)
・ Data processing device EPC-300 (manufactured by ACOM)
-Homogenizer PRO 260 (manufactured by PRO Scientific Inc.)
Cooling centrifuge 5417R (Eppendorf Yatron)
（ｂ）サンプルの前処理
脳サンプル容器に、０．２Ｎ過塩素酸溶液を加えた後、内部標準液を添加し、ホモジナイザーでホモジナイズし、６０分間以上氷冷した後、冷却遠心機で遠心分離（約４℃、１３８００ｒｐｍ、５分間）を行い、上清を測定試料とした。
(B) Sample pretreatment After adding a 0.2N perchloric acid solution to a brain sample container, add an internal standard solution, homogenize with a homogenizer, cool with ice for 60 minutes or more, and then centrifuge with a cooling centrifuge. (About 4 ° C., 13800 rpm, 5 minutes) was performed, and the supernatant was used as a measurement sample.
（ｃ）ＨＰＬＣ条件
・分離カラム：Ｅｉｃｏｍｐａｋ ＳＣ−５ＯＤＳ（３．０φ×１５０ｍｍ）（エイコム社製）
・プレカラム：ＰＣ−０４（ＡＣ−ＯＤＳ剤充填済み）（エイコム社製）
・移動相：０．１ｍｏｌ／Ｌ酢酸・クエン酸緩衝液（ｐＨ３．５）／メタノール／１００ｍｇ／ｍｌ、１−オクタンスルホン酸ナトリウム溶液／５ｍｇ／ｍｌＥＤＴＡ・２・Ｎａ溶液の混合液（８３０／１７０／１．８５／１）
・流速：０．５ｍｌ／ｍｉｎ
・ラム温度：２５℃
・冷却器温度：４℃
・注入量：２０μｌ
・加電圧：＋７５０ｍＶ
(C) HPLC conditions and separation column: Eicompak SC-5ODS (3.0φ × 150 mm) (manufactured by Aicom)
-Precolumn: PC-04 (AC-ODS agent filled) (manufactured by Aicom)
Mobile phase: 0.1 mol / L acetic acid / citrate buffer (pH 3.5) / methanol / 100 mg / ml, 1-octane sodium sulfonate solution / 5 mg / ml EDTA · 2 · Na solution mixture (830/170 /1.85/1)
・ Flow rate: 0.5ml / min
-Ram temperature: 25 ° C
・ Cooler temperature: 4 ℃
・ Injection volume: 20 μl
・ Applied voltage: +750 mV
（２）アルカリ安定脂質投与の前脳皮質及び海馬モノアミン含量への影響
以上の測定方法により、イボテン酸無処置区、無投与対照区、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区、陽性対照区の前脳皮質におけるノルエピネフリン（ＮＥ）含量とセロトニン代謝物である５−ハイドロキシインドール酢酸（５−ＨＩＡＡ）含量を測定した結果を図６に示した。図６中のバーは標準偏差を示す。
その結果、無投与対照区に対して、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区、陽性対照区はいずれもＮＥ含量、５−ＨＩＡＡの増加傾向を示した。
イボテン酸無処置区と無投与対照区の間でＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定において、ＮＥ含量に危険率ｐ＜０．０１で、５−ＨＩＡＡ含量に危険率ｐ＜０．０１で有意差がみられた。これに対してイボテン酸無処置区とＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区、陽性対照区の間では危険率ｐ＜０．０５での有意差はみられず、いずれもイボテン酸無処置区に近いレベルまで回復していることが確認された。さらにＮＥ含量において、ＡＳＬ高用量区では陽性対象区よりも増加していたことから、陽性対象区と同等以上の改善効果が確認された。
(2) Effect of alkali-stable lipid administration on forebrain cortex and hippocampal monoamine content By the above measurement method, before ibotenic acid untreated group, untreated control group, ASL low-dose group, ASL high-dose group, and positive control group The results of measuring norepinephrine (NE) content and serotonin metabolite 5-hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA) content in the brain cortex are shown in FIG. The bar in FIG. 6 shows the standard deviation.
As a result, the ASL low-dose group, the ASL high-dose group, and the positive control group all showed a tendency to increase NE content and 5-HIAA relative to the non-administered control group.
In the Student's t-test between the ibotenic acid untreated group and the untreated control group, there was a significant difference in the NE content with a risk factor p <0.01 and the 5-HIAA content with a risk factor p <0.01. . On the other hand, there was no significant difference in the risk factor p <0.05 between the ibotenic acid untreated group and the ASL low-dose group, the ASL high-dose group, and the positive control group. It was confirmed that it has recovered to a near level. Furthermore, since the NE content was higher in the ASL high dose group than in the positive target group, an improvement effect equal to or higher than that in the positive target group was confirmed.
同様に、イボテン酸無処置区、無投与対照区、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区、陽性対照区の海馬でのＮＥ含量と５−ＨＩＡＡ含量の測定結果を図７に示した。図７中のバーは標準偏差を示す。
その結果、無投与対照区に対して、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区、陽性対照区はいずれもＮＥ含量、５−ＨＩＡＡの増加傾向を示した。
イボテン酸無処置区と無投与対照区の間でＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定において、ＮＥ含量に危険率ｐ＜０．０５で有意差がみられた。これに対してイボテン酸無処置区とＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区、陽性対照区の間では危険率ｐ＜０．０５での有意差はみられず、いずれもイボテン酸無処置区に近いレベルまで回復していることが確認された。さらにＮＥ含量において、ＡＳＬ高用量区では陽性対象区よりも増加していたことから、陽性対象区と同等以上の改善効果が確認された。
なお、いずれの結果も５匹の平均値で示した。
Similarly, the measurement results of NE content and 5-HIAA content in hippocampus of ibotenic acid non-treated group, non-treated control group, ASL low-dose group, ASL high-dose group, and positive control group are shown in FIG. The bar in FIG. 7 shows the standard deviation.
As a result, the ASL low-dose group, the ASL high-dose group, and the positive control group all showed a tendency to increase NE content and 5-HIAA relative to the non-administered control group.
In the Student's t-test between the ibotenic acid untreated group and the untreated control group, there was a significant difference in NE content with a risk factor of p <0.05. On the other hand, there was no significant difference in the risk factor p <0.05 between the ibotenic acid untreated group and the ASL low-dose group, the ASL high-dose group, and the positive control group. It was confirmed that it has recovered to a near level. Furthermore, since the NE content was higher in the ASL high dose group than in the positive target group, an improvement effect equal to or higher than that in the positive target group was confirmed.
In addition, all the results were shown by the average value of 5 animals.
（３）考察
以上の結果、前脳皮質では、記憶障害をもつ無投与区ではＮＥ含量と５−ＨＩＡＡ含量が記憶障害の無いイボテン酸無処置区に対して、有意に低下した。これに対して、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区ではともにＮＥ含量、５−ＨＩＡＡ含量ともに無投与区に対して増加、改善傾向が確認された。また、海馬においても、記憶障害をもつ無投与区に対して、ＡＳＬ低用量区、ＡＳＬ高用量区ともに、ＮＥ含量、５−ＨＩＡＡ含量のいずれについても、増加、改善傾向が見られた。ＡＳＬ高用量区では、前脳皮質、海馬ともにＮＥ含量が陽性対照区よりも増加していた。
(3) Discussion As a result of the above, in the forebrain cortex, the NE content and 5-HIAA content in the non-administered group with memory impairment were significantly lower than the ibotenic acid-free group without memory impairment. On the other hand, both the NE content and the 5-HIAA content increased and improved in the ASL low dose group and the ASL high dose group as compared to the non-administered group. In the hippocampus, both the NE content and the 5-HIAA content showed an increasing trend and an improvement trend in both the ASL low dose group and the ASL high dose group, compared to the non-administration group having memory impairment. In the ASL high-dose group, the NE content in the forebrain cortex and hippocampus was higher than that in the positive control group.
叙上のように、酢酸菌由来のアルカリ安定脂質投与によりモノアミン系化合物の代謝を改善することが確認された。また、酢酸菌由来のアルカリ安定脂質の経口摂取によるモノアミン系化合物の代謝改善効果からは、ＡＤや加齢脳における記憶、学習能の改善のみならず、神経伝達機構の異常が関連するその他の種々の神経、精神疾患を改善する効果が期待できる。 As described above, it was confirmed that administration of an alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria improves the metabolism of monoamine compounds. In addition, from the effect of improving the metabolism of monoamine compounds by oral ingestion of alkali-stable lipids derived from acetic acid bacteria, not only the improvement of memory and learning ability in AD and aging brain, but also various other factors related to abnormalities in neurotransmission mechanism Can be expected to improve neurological and mental illness.
実施例４（酢酸菌由来のアルカリ安定脂質の分画）
実施例１で調製した酢酸菌由来のアルカリ安定脂質をさらにクロマトグラフィーにより極性の強さに応じて分画し、その脂質構造を確認した。
すなわち、アルカリ安定脂質１０ｇを、クロロホルムで平衡化したシリカゲルカラムに供し、クロロホルム：酢酸＝１００：１の容量比で混合した溶媒で洗浄後、クロロホルム：メタノール＝９７：３の溶媒で溶出して得られた画分を乾固して、約０．５ｇの画分１を得た。
続いて、クロロホルム：メタノール＝９６：４、９５：５の溶媒で溶出して得られた画分を乾固して、約０．５ｇの画分２を得た。さらに、クロロホルム：メタノール＝２：１の溶媒で残余脂質を溶出して得られた画分を乾固して、約０．５ｇの画分３を得た。
Example 4 (Fractionation of alkali-stable lipids derived from acetic acid bacteria)
The alkali-stable lipid derived from acetic acid bacteria prepared in Example 1 was further fractionated according to the strength of polarity by chromatography, and the lipid structure was confirmed.
That is, 10 g of an alkali-stable lipid was applied to a silica gel column equilibrated with chloroform, washed with a solvent mixed with a volume ratio of chloroform: acetic acid = 100: 1, and then eluted with a solvent of chloroform: methanol = 97: 3. The obtained fraction was dried to obtain about 0.5 g of
Subsequently, the fraction obtained by elution with a solvent of chloroform: methanol = 96: 4, 95: 5 was dried to obtain about 0.5 g of
得られた画分１について、シリカゲルプレートを用いた薄層クロマトグラフィーにて構成脂質を確認した。該薄層クロマトグラフィーにおける展開溶媒としては、クロロホルム：メタノール＝９６：４を用いた。その結果、画分１の構成脂質は、実施例１で用いたＮ−アシルスフィンガニンが確認されている酢酸菌からの精製品と同一の移動度である単一のスポットであった。さらに、画分１を常法に従い、含水メタノール性塩酸で分解し、薄層クロマトグラフィーにてスフィンゴイド塩基と脂肪酸に分離、精製した。
About the obtained
これらのスフィンゴイド塩基と脂肪酸それぞれについて、常法に従い、トリメチルシリル化反応を行い、ガスクロマトグラフィー−マススペクトロメトリーにより構造分析したところ、Ｎ−アシルスフィンガニンとして、Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニン、Ｎ−パルミトイル−スフィンガニン、Ｎ−シス−バクセノイル−スフィンガニンを含んでいることが確認された。
以上の結果から、画分１の薄層クロマトグラフィーで検出される単一のスポットがＮ−アシルスフィンガニンであることが確認された。
For each of these sphingoid bases and fatty acids, trimethylsilylation reaction was performed according to a conventional method, and structural analysis was performed by gas chromatography-mass spectrometry. As a result, N-2'-hydroxypalmitoyl-sphinganine was obtained as N-acyl sphinganine. , N-palmitoyl-sphinganine and N-cis-bexenoyl-sphinganine were confirmed.
From the above results, it was confirmed that the single spot detected by thin layer chromatography of
さらに画分２、画分３の構成脂質を薄層クロマトグラフィーにより確認した。薄層クロマトグラフィーにおける展開溶媒として、画分２はクロロホルム：メタノール＝９６：４の溶媒を用い、画分３はクロロホルム：メタノール：水＝６５：１６：２の溶媒を用いた。対照として、実施例１で用いたホパノイド化合物、アミノ脂質の構造が確認されている酢酸菌からの精製品、ならびに市販のスフィンガニン（ＳＩＧＭＡ社製）を用いた。
Furthermore, the constituent lipids of
薄層クロマトグラフィーの結果、画分２はホパノイド化合物の対照とスポットが一致し、画分３はスフィンガニン、アミノ脂質の対照とスポットが一致した。
以上の結果から、画分２で検出される薄層クロマトグラフィーのスポットがホパノイド化合物を含むこと、画分３で検出される薄層クロマトグラフィーのスポットがスフィンガニン、アミノ脂質を含むことが、それぞれ確認された。
As a result of thin layer chromatography,
From the above results, it is confirmed that the thin-layer chromatography spot detected in
実施例５（神経突起伸長作用の確認）
実施例４にて精製した画分１（Ｎ−アシルスフィンガニンを含む）、画分２（ホパノイド化合物を含む）、及び画分３（スフィンガニン、アミノ脂質を含む）の３つの画分について、神経モデル細胞であるＰＣ−１２細胞を用い、神経栄養因子様の作用として、神経突起を伸ばし分化する作用の有無を確認した。
Example 5 (Confirmation of neurite outgrowth action)
For the three fractions of fraction 1 (containing N-acyl sphinganine), fraction 2 (containing a hopanoid compound) and fraction 3 (containing sphinganine and aminolipid) purified in Example 4, PC-12 cells, which are neural model cells, were used to confirm the presence or absence of the action of extending and differentiating neurites as a neurotrophic factor-like action.
なお、実施例４と同様にして、アルカリ安定脂質１０ｇをクロロホルムで平衡化したシリカゲルカラムに供し、クロロホルム：酢酸＝１００：１の容量比で混合した溶媒で洗浄後、クロロホルム：メタノール＝２：１の溶媒で溶出することにより、画分１、画分２および画分３の構成脂質をすべて含む画分を調製し、該画分を脂肪酸を含まないアルカリ安定脂質画分として、神経突起を伸ばし分化する作用の有無を同様に確認した。
As in Example 4, 10 g of alkali-stable lipid was applied to a silica gel column equilibrated with chloroform, washed with a solvent mixed in a volume ratio of chloroform: acetic acid = 100: 1, and then chloroform: methanol = 2: 1. The fraction containing all the constituent lipids of
ＰＣ−１２細胞はＲＩＫＥＮ Ｃｅｌｌ Ｂａｎｋより購入したものを用い（ＲＣＢ０００９）、ダルベッコ改変培地（ＤＭＥＭ）、５％ウシ血清（ＦＢＳ）、１０％ウマ血清（ＨＳ）、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン、１００ユニット／ｍｌペニシリンを含む培地でコラーゲンＶコートディッシュにて、３７℃、５％ＣＯ２の条件で培養した。培地交換は２〜３日に１回、継代はトリプシン処理により７日に１回行った。
PC-12 cells were purchased from RIKEN Cell Bank (RCB0009), Dulbecco's modified medium (DMEM), 5% bovine serum (FBS), 10% horse serum (HS), 100 μg / ml streptomycin, 100 units / ml. The cells were cultured in a medium containing penicillin in a collagen V-coated dish at 37 ° C. and 5
約７０％コンフルエントのＰＣ１２細胞をトリプシン処理、遠心、再懸濁し、３５ｍｍ径のコラーゲンＶコートディッシュに、５ｘ１０4 細胞／ｍｌの濃度で播種した。数時間培養し、細胞をディッシュ表面に接着させた後、ＤＭＳＯに各添加濃度の１００倍の濃度で溶解した画分１、画分２、画分３およびアルカリ安定脂質画分を１％の濃度で添加した。
Approximately 12% confluent PC12 cells were trypsinized, centrifuged, resuspended, and seeded in 35 mm diameter collagen V-coated dishes at a concentration of 5 × 10 4 cells / ml. After culturing for several hours, the cells were allowed to adhere to the dish surface, and then fractions 1, 2 and 3 and the alkali-stable lipid fraction dissolved in DMSO at a
その後、３７℃、５％ＣＯ２の条件で４８時間培養した後、位相差顕微鏡を用いて細胞の形態、突起を観察した。突起の長さが細胞の直径以上の細胞を分化した細胞とみなし、視野あたりの全細胞数と分化した細胞数をカウントした。約１００細胞をフレーム中に含むように顕微鏡像をランダムに写真撮影し、１０枚の写真をカウントした平均を算出し、全細胞数に対する分化した細胞数の割合を分化細胞率とした。
Thereafter, the cells were cultured for 48 hours under conditions of 37 ° C. and 5
無添加、及び画分１、画分２、画分３及びアルカリ安定脂質画分をそれぞれ添加後４８時間におけるＰＣ１２細胞の分化細胞率を表２に示した。
表２から、アルカリ安定脂質画分添加時に、無添加に比べて、分化細胞率が大きく上昇した。また、画分１を濃度１０μｇ／ｍｌで添加することにより、無添加に比べて、分化細胞率の大幅な上昇が確認された。
Table 2 shows the differentiated cell rate of PC12 cells at 48 hours after the addition, and addition of
From Table 2, when the alkali-stable lipid fraction was added, the differentiated cell rate was greatly increased compared to the case where no alkali-stable lipid fraction was added. In addition, when
以上の結果から、アルカリ安定脂質中の脂質成分として、画分１、すなわちＮ−アシルスフィンガニンを含む画分の神経栄養因子様の作用が確認された。すなわち、Ｎ−アシルスフィンガニンを摂取することにより、神経変性疾患や加齢に伴なう神経伝達機構の機能低下を改善することが示された。
From the above results, a neurotrophic factor-like action of
実施例６（Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンの神経突起伸長作用の確認）
Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンについて、実施例５と同様の方法により、ＰＣ−１２細胞に対する神経栄養因子様の作用を確認した。
すなわち、Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンの化学合成品（純度９９％以上、マトレヤ社）をＤＭＳＯに各添加濃度の１００倍の濃度で溶解したものを用い、また、実施例５で実施した画分１（Ｎ−アシルスフィンガニンを含む）およびアルカリ安定脂質画分を用いて、１％の濃度で添加し、他は実施例５と同様に実施した。
Example 6 (Confirmation of neurite outgrowth action of N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine)
N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine was confirmed to have a neurotrophic factor-like action on PC-12 cells by the same method as in Example 5.
That is, the chemical synthesis product of N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine (purity 99% or more, Matreya Co., Ltd.) dissolved in DMSO at a
各成分の添加後４８時間におけるＰＣ１２細胞の分化細胞率を表３に示した。
表３から、Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンを５〜２５μｇ／ｍｌの濃度で添加することによって、アルカリ安定脂質画分や画分１を添加した場合と同様に、無添加の場合に比べて、分化細胞率が大きく上昇した。
Table 3 shows the differentiated cell rate of PC12 cells 48 hours after the addition of each component.
From Table 3, by adding N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine at a concentration of 5 to 25 μg / ml, as compared with the case where no alkali-stable lipid fraction or
以上の結果から、Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンの神経栄養因子様の作用が確認され、Ｎ−２’−ヒドロキシパルミトイル−スフィンガニンを摂取することにより、神経変性疾患や加齢に伴なう神経伝達機構の機能低下を改善することが示された。 From the above results, the neurotrophic factor-like action of N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine was confirmed, and by ingesting N-2′-hydroxypalmitoyl-sphinganine, it accompanies neurodegenerative diseases and aging. It has been shown to improve the decline in neurotransmitter function.
実施例７（錠剤の調製）
酢酸発酵液１０キロリットルを高速遠心機器（８０００ｒｐｍ、２０分）で集菌し、湿菌体１０ｋｇを得た。得られた湿菌体１０ｋｇを蒸留水にて洗浄後に大型凍結乾燥機で凍結減圧乾固し、乾燥菌体１．８ｋｇを得た。
得られた乾燥菌体１ｋｇをエタノール１０リットルと共にソックスレー抽出器に仕込み、２０時間加熱還流した。得られた抽出液を減圧乾固し、５リットルのアセトンに溶解した。沈殿物をろ過で除去し、ろ液をロータリーエバポレーターで蒸発乾固し、淡黄褐色の酢酸菌アルカリ安定脂質を含む脂質画分約３００ｇを得た。
得られた脂質画分１ｇ（０．７重量％）、結晶セルロース３５ｇ（２６．９重量％）、乾燥コーンスターチ６７ｇ（５１．５重量％）、乳糖２２ｇ（１６．９重量％）、ステアリン酸カルシウム２ｇ（１．５重量％）、および結合剤としてポリビニルピロリドン３ｇ（２．３重量％）を加え、混合粉末化した後に、ゼラチン硬カプセルに充填した。
このようにして調製された錠剤は、脳機能改善用組成物として有効に経口摂取可能であることが期待できる。
Example 7 (Preparation of tablets)
10 kiloliters of acetic acid fermentation broth was collected using a high-speed centrifuge (8000 rpm, 20 minutes) to obtain 10 kg of wet cells. 10 kg of the obtained wet cells were washed with distilled water and then freeze-dried by a large freeze dryer to obtain 1.8 kg of dry cells.
1 kg of the obtained dried cells were charged into a Soxhlet extractor together with 10 liters of ethanol and heated to reflux for 20 hours. The obtained extract was dried under reduced pressure and dissolved in 5 liters of acetone. The precipitate was removed by filtration, and the filtrate was evaporated to dryness using a rotary evaporator to obtain about 300 g of a lipid fraction containing pale yellowish brown acetic acid alkali-stable lipid.
Obtained lipid fraction 1 g (0.7 wt%), crystalline cellulose 35 g (26.9 wt%), dried corn starch 67 g (51.5 wt%), lactose 22 g (16.9 wt%), calcium stearate 2 g (1.5% by weight) and 3 g (2.3% by weight) of polyvinylpyrrolidone as a binder were added, mixed powdered, and then filled into hard gelatin capsules.
It can be expected that the tablet thus prepared can be effectively taken orally as a composition for improving brain function.
実施例８（ゼリーの製造）
酢酸発酵液１０キロリットルを高速遠心機器（８０００rpm、２０分）で集菌し、湿菌体１０ｋｇを得た。得られた湿菌体１０ｋｇを等量の蒸留水に分散させた。分散させた２０ｋｇの酢酸菌分散液を高圧ホモジナイザー（２００００ｐｓｉ）に３回通過させて細胞破壊処理を施した後に、大型凍結乾燥機で凍結減圧乾固し、乾燥菌体粉末１．５ｋｇを得た。
得られた乾燥菌体粉末８ｇ（０．８重量％）、砂糖２５０ｇ（２５重量％）、カラギーナン１．６ｇ（０．１６重量％）、ローカストビーンガム０．８ｇ（０．０８重量％）、キサンタンガム０．８ｇ（０．０８重量％）を混合均一化し、粉体混合物を得た。鍋に３００ｇの水を計量し、黒糖３０ｇ（３．０重量％）を溶解し、さらに還元水あめ１５０ｇ（１５重量％）を混合し、先に得た粉体混合物を加えて攪拌しながら、更に混合した。それらを均一に攪拌し、残りの水２５８．８ｇを加え、加温した。溶液温度が８５℃１０分間加熱溶解後、流水で冷却し酢酸菌体含有ゼリー食品を得た。
このようにして調製されたゼリーは、脳機能改善用組成物として、有効に経口摂取可能であることが期待できる。
Example 8 (Production of jelly)
10 kiloliters of acetic acid fermentation broth was collected using a high-speed centrifugal device (8000 rpm, 20 minutes) to obtain 10 kg of wet cells. 10 kg of the obtained wet cells were dispersed in an equal amount of distilled water. The dispersed 20 kg of acetic acid bacteria dispersion was passed through a high-pressure homogenizer (20000 psi) three times and subjected to cell disruption treatment, followed by freeze-drying with a large freeze dryer to obtain 1.5 kg of dried cell powder. .
8 g (0.8 wt%) of the obtained dry cell powder, 250 g (25 wt%) sugar, 1.6 g (0.16 wt%) carrageenan, 0.8 g (0.08 wt%) locust bean gum, Xanthan gum 0.8 g (0.08 wt%) was mixed and homogenized to obtain a powder mixture. Weigh 300 g of water in the pan, dissolve 30 g (3.0 wt%) of brown sugar, mix 150 g (15 wt%) of reduced water candy, add the powder mixture obtained above and stir further. Mixed. They were stirred uniformly and the remaining 258.8 g of water was added and warmed. The solution was heated and dissolved at 85 ° C. for 10 minutes, and then cooled with running water to obtain acetic acid bacterium-containing jelly food.
It can be expected that the jelly thus prepared can be effectively taken orally as a composition for improving brain function.
実施例９（食酢の製造）
酢酸発酵液１０キロリットルを高速遠心機器（８０００ｒｐｍ、２０分）で集菌し、湿菌体１０ｋｇを得た。得られた湿菌体１０ｋｇを食酢１００Ｌに分散させた。分散させた酢酸菌分散液を高圧ホモジナイザー（２００００ｐｓｉ）に３回通過させて細胞破壊処理を施した。その溶液を５００ｍｌ容の瓶に分注し、７５℃まで加温により殺菌し酢酸菌体含有食酢を得た。
このようにして調製された食酢は、脳機能改善用組成物として、有効に経口摂取可能であることが期待できる。
Example 9 (Production of vinegar)
10 kiloliters of acetic acid fermentation broth was collected using a high-speed centrifuge (8000 rpm, 20 minutes) to obtain 10 kg of wet cells. 10 kg of the obtained wet bacterial cells were dispersed in 100 L of vinegar. The dispersed acetic acid bacteria dispersion was passed through a high-pressure homogenizer (20000 psi) three times for cell destruction treatment. The solution was dispensed into 500 ml bottles and sterilized by heating to 75 ° C. to obtain vinegar containing acetic acid bacteria.
The vinegar thus prepared can be expected to be effectively orally ingested as a brain function improving composition.
本発明は、合成医薬品といったものではなく、食品成分や天然抽出物などのように安全な素材であって、且つより強い脳機能改善効果を有する物質を提供することを可能にする。従って、本発明に係る脳機能改善用組成物は、日常的な食事などとして摂取することによって、神経、精神疾患を予防、改善する効果が期待される。 The present invention makes it possible to provide a substance that is a safe material such as a food ingredient or natural extract and has a stronger effect of improving brain function, not a synthetic drug. Therefore, the composition for improving brain function according to the present invention is expected to have an effect of preventing and improving neurological and psychiatric disorders when taken as a daily meal.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2006205754A JP4040069B2 (en) | 2005-08-09 | 2006-07-28 | Composition for improving brain function |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2005230326 | 2005-08-09 | ||
| JP2006205754A JP4040069B2 (en) | 2005-08-09 | 2006-07-28 | Composition for improving brain function |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2007070342A JP2007070342A (en) | 2007-03-22 |
| JP4040069B2 true JP4040069B2 (en) | 2008-01-30 |
Family
ID=37932100
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2006205754A Active JP4040069B2 (en) | 2005-08-09 | 2006-07-28 | Composition for improving brain function |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4040069B2 (en) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4040070B2 (en) * | 2005-08-22 | 2008-01-30 | 株式会社ミツカングループ本社 | Muscle damage inhibiting composition |
| EP2123290A1 (en) * | 2007-03-19 | 2009-11-25 | Mizkan Group Corporation | Melanogenesis inhibitory composition |
| US20200113854A1 (en) * | 2017-05-30 | 2020-04-16 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | Composition for Improving Brain Function |
| JP7165321B2 (en) * | 2018-03-15 | 2022-11-04 | 株式会社ダイセル | exosome production promoter |
| JP7386366B1 (en) * | 2023-02-13 | 2023-11-24 | キユーピー株式会社 | Beverage containing acetic acid bacteria and its manufacturing method |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08188532A (en) * | 1995-01-04 | 1996-07-23 | Hisashi Ishihara | Preventing and treating technic for thrombus and arteriosclerosis using vinegar |
| WO2004064820A2 (en) * | 2003-01-20 | 2004-08-05 | Nederlandse Organisatie Voor Toegepast- Natuurwetenschappelijk Onderzoek Tno | Use of sphingolipids for reducing plasma cholesterol and triacylglycerol levels |
| JP4223483B2 (en) * | 2005-01-20 | 2009-02-12 | 株式会社ミツカングループ本社 | Composition for improving skin function comprising acetic acid ceramide |
-
2006
- 2006-07-28 JP JP2006205754A patent/JP4040069B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2007070342A (en) | 2007-03-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5337855B2 (en) | Method for producing ceramidase inhibitor | |
| EP3483256A1 (en) | Akkermansia muciniphila strain having effect of preventing or treating degenerative brain diseases or metabolic diseases, and use thereof | |
| KR101809172B1 (en) | Composition for preventing, improving or treating metabolic disease comprising Akkermansia muciniphila strain or its culture broth cultivated in medium without mucin as effective component | |
| KR101010914B1 (en) | Probiotic Lactobacillus plantarum having anti-obesity and brain function improvement activity | |
| JP5400779B2 (en) | Medicinal product or food or drink having serotonin transporter inhibitory activity | |
| TWI565471B (en) | Oral use of DNA damage repair promoters and elastase activity inhibitors | |
| Shi et al. | The effects of supplementation with blueberry, cyanidin-3-O-β-glucoside, yoghurt and its peptides on obesity and related comorbidities in a diet-induced obese mouse model | |
| JP4040069B2 (en) | Composition for improving brain function | |
| IL283973B (en) | Compositions comprising bacterial strains | |
| JP6942061B2 (en) | Process for preparing animal brain extract | |
| JPWO2008120712A1 (en) | Pharmaceutical composition or food or drink having sympathetic nerve activity enhancing action | |
| JP6990303B2 (en) | MEGAMONAS FUNIFORMIS and its applications | |
| Fukami et al. | Acetic acid bacterial lipids improve cognitive function in dementia model rats | |
| JP2015096494A (en) | In vivo redox status-improving agent | |
| US20100028465A1 (en) | Composition for ameliorating cerebral function | |
| CN111714522B (en) | Bacteroides and application thereof | |
| JP6784979B2 (en) | Neurite stretcher | |
| Fukami et al. | Continuous ingestion of acetic acid bacteria: effect on cognitive function in healthy middle-aged and elderly persons | |
| JP7001450B2 (en) | Compositions and anti-inflammatory agents | |
| TWI797600B (en) | Composition for elevating ability of brain tissue and uses thereof | |
| KR20190003570A (en) | Methods for Determining Infectious Conditions of Safe, Stable Plasma Genogens, Agents and Dyslipidemia | |
| JP2004269374A (en) | Hypoglycemic composition | |
| Sarma et al. | Fortification methods of coenzyme Q10 in yogurt and its health functionality—a review | |
| JPH11246418A (en) | Intracerebral ganglioside level drop inhtbitor and learning behavior improver | |
| CN117018039A (en) | Use of Akkermansia muciniphila for the preparation of a product for the prevention, treatment and/or adjuvant treatment of metabolic disorders |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20070622 |
|
| A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20070622 |
|
| A975 | Report on accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005 Effective date: 20070720 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070731 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070921 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20071023 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20071106 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101116 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Ref document number: 4040069 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131116 Year of fee payment: 6 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
| S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |