JP3937007B2

JP3937007B2 - Monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative, process for producing the same, and surfactant comprising the derivative

Info

Publication number: JP3937007B2
Application number: JP2001238348A
Authority: JP
Inventors: 久彰八木
Original assignee: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology AIST
Current assignee: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology AIST
Priority date: 2001-08-06
Filing date: 2001-08-06
Publication date: 2007-06-27
Anticipated expiration: 2021-08-06
Also published as: JP2003055393A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新規モノアシルジグリコシルモノアシルグリセロール誘導体及びその製造方法並びにこれらの誘導体からなる界面活性剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、バクテリアからは生理活性を有する様々な化学物質が発見されており、現在でも生物活性を有する化学物質の探索が行われ、医薬品及び研究用試薬の開発のためのリード化合物として供されている。従って、バクテリアから得られる生物活性物質に関する研究は、バクテリアの生態を解明するための基礎的な研究にとどまらず、広く天然化合物の有効利用の観点において産業的にも注目されている。
【０００３】
本発明者らも、機能性成分をスクリーニングしているとき、Deleya属の生合成産物中から新規なN-アシルアミノ酸やグリセロール誘導体、さらにグリコシルフォスファチジルグリセロール誘導体等が得られることを報告している。
しかし、バクテリアからは未だ見出されていない化合物が数多く存在するものと推定され、詳しくは解明されていない。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、バクテリアを由来とし、界面活性能を有する新規な化学物質及びその製造方法を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決すべく、 Alicyclobacillus属細菌を対象とし、当該菌体によって産生される物質に着目して鋭意研究をした結果、界面活性剤などとして有用な特有な新規物質を見出し、それを単離するとともに構造を決定することに成功し、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明によれば以下の発明が提供される。
（１）下記一般式（Ｉ）
【化３】

（式中、Ｒは互いに同一であっても異なっていてもよく、それぞれ水素原子、脂肪族アシル基、芳香族アシル基、リン酸基、スルホン酸基、またはスルホン酸塩基を表し、Ｒ_１及びＲ_２は、それぞれ独立して、脂肪酸由来の炭化水素残基を表す。）
で示されるモノアシルジグリコシルモノアシルグリセロール誘導体。
（２）下記一般式（II）
【化４】

（式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それぞれ独立して、脂肪酸由来の炭化水素残基を表す。）
で示されるモノアシルジグリコシルモノアシルグリセロール誘導体。
（３）Ｒ_１及びＲ_２が、それぞれ独立して、炭素数7-29の飽和或いは不飽和炭化水素であることを特徴とする前記（１）又は（２）に記載のモノアシルジグリコシルモノアシルグリセロール誘導体。
（４）Alicyclobacillus 属に属する細菌より産生される物質を抽出し、得られた抽出物を精製することを特徴とする前記（２）に記載の化合物の製造方法。
（５）前記（１）乃至前記（４）何れか記載のモノアシルジグリコシルモノアシルグリセロール誘導体からなる界面活性剤。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明に係る前記一般式（Ｉ）で示されるモノアシルジグリコシルモノアシルグリセロール誘導体は新規化合物である。
一般式（Ｉ）において、Ｒ_１及びＲ_２は、それぞれ独立して、脂肪酸由来の炭化水素残基である。その炭化水素としては、炭素数8以上の飽和又は不飽和脂肪酸の炭化水素であり、好ましくは炭素数8-30の飽和又は不飽和脂肪酸の炭化水素、より好ましくは炭素数12-22の飽和又は不飽和脂肪酸の炭化水素、さらにより好ましくは炭素数15-19の飽和或いは不飽和脂肪酸の炭化水素である。
【０００８】
また、一般式（Ｉ）において、Ｒは、水素原子、脂肪族アシル基、芳香族アシル基、リン酸基、スルホン酸基、またはスルホン酸塩基であり、その各のＲは、互いに同一であってもよいし異なっていてもよい。
【０００９】
脂肪族アシル基の代表例としては、ホルミル基、アセチル基、プロパノイル基、ブタノイル基などが挙げられるが、中でもアセチル基が好ましい。
芳香族アシル基の代表例としては、置換若しくは無置換のベンゾイル基又はナフトイル基等のアロイル基が挙げられるが、ベンゾイル基が好ましい。また、その置換基としては、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル等のアルキル基、メトキシ、エトキシ、プロポキシ等のアルコキシ基、ハロゲン元素、ニトロ基、アミノ基、又はスルホン酸基、又はスルホン酸塩酸基等が挙げられる。
【００１０】
また、スルホン酸塩の代表例としては、スルホン酸のナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、有機アンモニウム塩等が挙げられる。
【００１１】
本発明に係る前記一般式（Ｉ）又は（II）で示される化合物は、 Alicyclobacillus属に属する細菌、好ましくはAlicyclobacillus acidocaldarius(JCM 5260)の産生する物質を常法により抽出し、その抽出物を精製することにより、また得られた物質を適宜誘導体化することにより簡単に合成することができる。
菌体としては、 Alicyclobacillus属に属し、前記一般式（Ｉ）及び（II）で表される本発明の化合物を産生するものであれば特に限定されないが、 Alicyclobacillus acidocaldarius(JCM 5260)が好ましい。
【００１２】
上記細菌の培養は、資化可能な炭素源、窒素源を含む培地で行うことが好ましい。所望により、上記培地にその他の無機物、生育促進物質等の必要な物質を加えてもよい。そのような培地であれば、合成培地、天然培地のいずれも使用可能である。
【００１３】
上記の炭素源としては、アラビノース、フラクトース、グルコース、イノシトール、マンニトール、ラフィノース、ラムノース、シュクロース、キシロース、澱粉、デキストリン、マンノース、ラクトース、糖蜜等の糖類、酢酸などの有機酸、グリセリンなどのアルコール類が挙げられ、Ｄ−グルコースが好ましく、これら炭素源を、単独でも又は組み合わせて用いてもよい。
【００１４】
上記の窒素源としては、ペプトン、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、尿素、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、コーンスチープリカー、大豆粉、カザミノ酸等があげられ、ペプトン、乾燥酵母エキス、乾燥酵母が好ましく、これら窒素源を、単独でも又は組み合わせて用いてもよい。
【００１５】
上記の無機物としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウム、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、硫酸第一鉄、塩化カルシウム、硫酸マンガン、硫酸亜鉛、硫酸銅等の無機塩類があげられ、これら無機塩類を必要に応じて培地に加えてもよい。培養温度は、通常５０〜7０℃、好ましくは５５〜６５℃である。培地のｐＨは、通常２〜５、好ましくはｐＨ３〜４である。
【００１６】
具体的に、本発明において、前記一般式（II）で示される化合物を得るには、培養した培養物から菌体を遠心分離法などにより分離した後、乾燥し、適宜溶媒により抽出し、抽出液を濃縮した後、分離精製すればよい。
【００１７】
抽出に使用する溶媒としては、有機溶媒もしくは２種以上の有機溶媒の混合溶媒、又はこれらの有機溶媒と水との混合溶媒があげられる。
有機溶媒の代表例としては、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等のアルコール、クロロホルム等の塩素化炭化水素等があげられるが、クロロホルム/メタノールの混合溶媒が好ましい。
【００１８】
抽出液を濃縮した後、抽出物から目的とする本発明の化合物（II）を分離精製する方法としては、例えばODSカラムクロマトグラフィー、順相シリカゲルクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ，ゲルろ過、分取ＴＬＣ等があげられ、これらを適宜組み合わせて行うことができる。
【００１９】
本発明において、好ましく使用される精製方法は、抽出物をODSカラムクロマトグラフィーにより、メタノール、クロロホルム、および水から選択される１種以上の溶媒を組み合わせた混合溶媒により極性の高い溶媒から極性の低い溶媒へと順次溶出させ、目的とする化合物を含む画分を分取用ＴＬＣによりクロロホルム、メタノール、および水から選択される１種以上の溶媒を組み合わせた混合溶媒で展開して他の成分と分離する方法である。
【００２０】
また、新規化合物（Ｉ）は、上記で得た新規化合物（II）を、常法によりアセチル化、ベンゾイル化等のアシル化反応、又はスルホン化反応などを行った後、通常の精製操作を施すことにより、簡便に合成することができる。
なお、スルホン化した場合は、さらに常法により前述した種々の塩の形に変換することができる。
【００２１】
以上のようにして得られる、本発明のモノアシルジグリコシルモノアシルグリセロール誘導体は、その構造中に疎水基としての炭化水素基と親水基としての水酸基などを有することから、界面活性剤としての用途が期待される。
本発明の化合物を界面活性剤として用いるとき、その有効濃度は、界面活性を発揮できる範囲内であれば特に限定されないが、５〜１０ｍｇ/ｍｌが好ましい。
【００２２】
【実施例】
以下に本発明を実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は以下の実施例に限定されるものではない。
【００２３】
実施例１
［化合物（II）の単離操作］
Alicyclobacillus acidocaldarius (JCM5260)を、0.1％グルコース、0.1％乾燥酵母エキス、0.02％(NH₄)₂SO₄、0.05%MgSO₄・7H₂O、0.025%CaCl₂・2H₂O、0.06%KH₂PO₄を含む培地中（ｐＨ３−４）で６０℃で培養した。培養液を６０００ｇで１０分間遠心分離にかけ菌体を分離し、これを蒸留水で１回洗浄し凍結乾燥した。得られた乾燥菌体をクロロホルム/メタノール（１/２）で抽出し、抽出液をODSに吸着させ、５０％メタノール、９０％メタノール、メタノール、メタノール/クロロホルム（１/４）、メタノール/クロロホルム（1/1）、クロロホルム、クロロホルム/メタノール/水（65/25/4）の順で溶出した。メタノール/クロロホルム（４/１）で溶出した画分を分取用ＴＬＣにのせ、クロロホルム/メタノール/水（65/25/4）で展開し、目的の成分をかきとってクロロホルム/メタノール（２/１および1/2）で溶出した。その後溶媒を留去して目的の化合物（II）を含む画分を得た。
【００２４】
実施例２
（１）化合物（Ｉ）（Ｒ；アセチル基）の製造
実施例１で得た化合物（II）を含む画分をピリジン/無水酢酸（２/１）中に溶解し、室温で18時間撹拌して水酸基をアセチル化した。反応終了後、溶媒を留去して、反応物を分取用ＴＬＣにのせ、クロロホルム/メタノール（100/4）で展開し、目的の成分をかきとってクロロホルム/メタノール（2/1）で溶出した。溶媒を留去して化合物（Ｉ）（Ｒ；アセチル基：化合物（II）のアセチル化体）を得た。
【００２５】
（２）化合物（Ｉ）（Ｒ；アセチル基）の構造解析
化合物（Ｉ）（Ｒ；のアセチル基）の^１Ｈ−NMR（CDCl₃)及び^１３Ｃ−NMR（CDCl₃)のNMRデータを以下の表１に示す。
【００２６】
【表１】

【００２７】
COSYとHOHAHAスペクトルの解析から、Ｈ１−Ｈ６，Ｈ７−Ｈ１２，Ｈ１３−Ｈ１５の結合が決定され、これらのプロトンに結合しているカーボンをＨＳＱＣの測定から決定した。
Ｈ１−Ｈ１５のプロトンと、このプロトンに結合しているカーボンのケミカルシフトから、Ｈ１−Ｈ６，Ｈ７−Ｈ１２は糖、Ｈ１３−Ｈ１５はグリセロール骨格に結合したプロトンであることがわかった。アセチル化体において観測されたカップリング定数Ｊ_１ _- _２7.89Ｈｚ，Ｊ_2-39.40Ｈｚ、Ｊ_３−４9.54Ｈｚ，Ｊ_４−５9.72Ｈｚ、Ｊ_７−８7.98Ｈｚ，Ｊ_９−１０9.38Ｈｚ，Ｊ_{１０−１１}9.44Ｈｚの値から、Ｈ１，Ｈ２，Ｈ３，Ｈ４，Ｈ５，Ｈ７，Ｈ８，Ｈ９，Ｈ１０，Ｈ１１はaxialの配置であることがわかった。
【００２８】
プロトンとカーボンのNMRスペクトルから脂肪酸の存在が推定されたので、化合物（Ｉ）（Ｒ；アセチル基）を塩酸メタノールでメタノリシスして溶媒を留去した後、ヘキサンと水とで２相分配してヘキサン層をとり、ヘキサン層をＧＣーＭＳで分析し脂肪酸組成を決定した。マスフラグメントと分子イオンピーク（m/z＝256, 284）から、炭素数１５、１７の飽和脂肪酸の存在と、分子イオンピーク m/z=282 とそのマスフラグメントからcycloheptyl-heputadecanoic acid が存在することを確認した。
【００２９】
次にHMBCスペクトルの解析から、糖、グリセロール、脂肪酸残基がそれぞれどの位置で結合しているかを調べた。Ｈ１からＣ１２へＨＭＢＣの相関が出ていることより、糖は１→６結合していることがわかった。Ｈ７からC１３へＨＭＢＣの相関が出ていることから、グリセロール骨格は酸素を介して７位に結合していることがわかった。アミノ基のプロトンから脂肪酸のカルボニル炭素Ｃ１７へＨＭＢＣの相関が出ていることから、糖のアミノ基はアシル化されていることがわかった。Ｈ１５から脂肪酸のカルボニル炭素Ｃ１６へＨＭＢＣの相関が出ていることから、脂肪酸はＣ１５の酸素に結合していることがわかった。Ｈ１４は、アセチル化することで１ｐｐｍほど低磁場にシフトするここと、アセチル化体ではＨ１４からアセチル基のカルボニル炭素にＨＭＢＣの相関が出ていることから、アセチル化する前のＣ１４は修飾されていない水酸基が結合していたことがわかった。
以上の解析から決定された化合物（Ｉ）（Ｒ；アセチル基）の分子構造及びＨＭＢＣの主要な相関を図１に示す。なお、図において、Ｒはアセチル基を表し、Ｒ_１及びＲ_２は、それぞれ独立して炭素数１５又は１７の脂肪酸由来の炭化水素基を表す。矢印はＨＭＢＣの相関を表す。
【００３０】
【発明の効果】
本発明によれば、その構造中に疎水基としての炭化水素基と親水基としての水酸基等を有する新規なモノアシルジグリコシルモノアシルグリセロール誘導体が提供される。そして、この化合物は、分子内に疎水基と親水基の両方を持つことから界面活性剤としての用途が期待される。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明のモノアシルジグリコシルモノアシルグリセロール誘導体の分子構造及びＨＭＢＣの主要な相関を示した図である。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to novel monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivatives, processes for producing the same, and surfactants comprising these derivatives.
[0002]
[Prior art]
Conventionally, various chemical substances having physiological activity have been discovered from bacteria, and even today, chemical substances having biological activity are searched for and used as lead compounds for the development of pharmaceuticals and research reagents. Yes. Therefore, research on biologically active substances obtained from bacteria is not limited to basic research for elucidating the ecology of bacteria, but is also attracting industrial attention from the viewpoint of effective utilization of natural compounds.
[0003]
The present inventors also reported that when screening for functional components, novel N-acylamino acids and glycerol derivatives, glycosylphosphatidylglycerol derivatives, and the like can be obtained from the biosynthetic products of the genus Deleya. Yes.
However, it is presumed that there are many compounds that have not yet been found from bacteria, and the details have not been elucidated.
[0004]
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide a novel chemical substance derived from bacteria and having a surface activity, and a method for producing the same.
[0005]
[Means for Solving the Problems]
In order to solve the above-mentioned problems, the present inventors have conducted intensive research on Alicyclobacillus genus bacteria and focused on the substances produced by the cells, and as a result, have found unique novel substances useful as surfactants and the like. The headline, it was isolated and the structure was successfully determined, and the present invention was completed.
[0006]
That is, according to the present invention, the following inventions are provided.
(1) The following general formula (I)
[Chemical 3]

(Wherein, R may be the being the same or different, each represents a hydrogen atom, an aliphatic acyl group, aromatic acyl group, phosphoric acid group, a sulfonic acid group or a sulfonate,, R ₁ and R ₂ each independently represents a fatty acid-derived hydrocarbon residue.)
A monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative represented by:
(2) The following general formula (II)
[Formula 4]

(In the formula, R ₁ and R ₂ each independently represent a fatty acid-derived hydrocarbon residue.)
A monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative represented by:
(3) The monoacyldiglycosylmono described in (1) or (2) above, wherein R ₁ and R ₂ are each independently a saturated or unsaturated hydrocarbon having 7 to 29 carbon atoms. Acylglycerol derivative.
(4) The method for producing a compound according to (2) above, wherein a substance produced from a bacterium belonging to the genus Alicyclobacillus is extracted, and the obtained extract is purified.
(5) A surfactant comprising the monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative according to any one of (1) to (4).
[0007]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative represented by the general formula (I) according to the present invention is a novel compound.
In general formula (I), R ₁ and R ₂ are each independently a hydrocarbon residue derived from a fatty acid. The hydrocarbon is a hydrocarbon of a saturated or unsaturated fatty acid having 8 or more carbon atoms, preferably a hydrocarbon of a saturated or unsaturated fatty acid having 8 to 30 carbon atoms, more preferably a saturated or unsaturated hydrocarbon having 12 to 22 carbon atoms. Hydrocarbons of unsaturated fatty acids, even more preferably hydrocarbons of saturated or unsaturated fatty acids having 15-19 carbon atoms.
[0008]
In the general formula (I), R is a hydrogen atom, an aliphatic acyl group, an aromatic acyl group, a phosphoric acid group, a sulfonic acid group, or a sulfonic acid group, and each R is the same as each other. It may be different or different.
[0009]
Representative examples of the aliphatic acyl group include formyl group, acetyl group, propanoyl group, butanoyl group and the like, and among them, acetyl group is preferable.
Representative examples of the aromatic acyl group include an aroyl group such as a substituted or unsubstituted benzoyl group or naphthoyl group, and a benzoyl group is preferred. In addition, examples of the substituent include alkyl groups such as methyl, ethyl, propyl, butyl, and pentyl, alkoxy groups such as methoxy, ethoxy, and propoxy, halogen elements, nitro groups, amino groups, sulfonic acid groups, or sulfonic acid acids Groups and the like.
[0010]
Representative examples of the sulfonate include alkali metal salts such as sodium salt and potassium salt of sulfonic acid, alkaline earth metal salts such as calcium salt and magnesium salt, ammonium salt, and organic ammonium salt.
[0011]
The compound represented by the general formula (I) or (II) according to the present invention is a bacterium belonging to the genus Alicyclobacillus, preferably a substance produced by Alicyclobacillus acidocaldarius (JCM 5260) is extracted by a conventional method, and the extract is purified. Thus, it can be easily synthesized by derivatizing the obtained substance as appropriate.
The cells are not particularly limited as long as they belong to the genus Alicyclobacillus and produce the compounds of the present invention represented by the above general formulas (I) and (II), but Alicyclobacillus acidocaldarius (JCM 5260) is preferable.
[0012]
The bacterium is preferably cultured in a medium containing an assimitable carbon source and nitrogen source. If necessary, other necessary substances such as other inorganic substances and growth promoting substances may be added to the medium. As long as such a medium is used, either a synthetic medium or a natural medium can be used.
[0013]
Examples of the carbon source include arabinose, fructose, glucose, inositol, mannitol, raffinose, rhamnose, sucrose, xylose, starch, dextrin, mannose, lactose, molasses and other sugars, acetic acid and other organic acids, and glycerin and other alcohols. D-glucose is preferable, and these carbon sources may be used alone or in combination.
[0014]
Examples of the nitrogen source include peptone, ammonium chloride, ammonium sulfate, sodium nitrate, urea, meat extract, yeast extract, dry yeast, corn steep liquor, soy flour, casamino acid, and the like. Peptone, dry yeast extract, dry yeast These nitrogen sources may be used alone or in combination.
[0015]
Examples of the inorganic substances include inorganic salts such as sodium chloride, potassium chloride, magnesium sulfate, calcium carbonate, potassium dihydrogen phosphate, dipotassium hydrogen phosphate, ferrous sulfate, calcium chloride, manganese sulfate, zinc sulfate, and copper sulfate. These inorganic salts may be added to the medium as necessary. The culture temperature is usually 50 to 70 ° C, preferably 55 to 65 ° C. The pH of the medium is usually 2 to 5, preferably 3 to 4.
[0016]
Specifically, in the present invention, in order to obtain the compound represented by the general formula (II), the microbial cells are separated from the cultured culture by a centrifugal separation method, and then dried, appropriately extracted with a solvent, and extracted. After concentrating the liquid, it may be separated and purified.
[0017]
Examples of the solvent used for extraction include an organic solvent, a mixed solvent of two or more organic solvents, or a mixed solvent of these organic solvents and water.
Representative examples of the organic solvent include alcohols such as methanol, ethanol, propanol and butanol, chlorinated hydrocarbons such as chloroform, and a mixed solvent of chloroform / methanol is preferable.
[0018]
Examples of the method for separating and purifying the target compound (II) of the present invention from the extract after concentrating the extract include, for example, ODS column chromatography, normal phase silica gel chromatography, HPLC, gel filtration, preparative TLC and the like. These can be combined as appropriate.
[0019]
In the present invention, the purification method that is preferably used is that the extract is subjected to ODS column chromatography, and a mixed solvent in which one or more solvents selected from methanol, chloroform, and water are used in combination with a highly polar solvent to a less polar solvent. Elution into a solvent in sequence, separation of the fraction containing the target compound with a mixture of one or more solvents selected from chloroform, methanol, and water by preparative TLC and separation from other components It is a method to do.
[0020]
Further, the novel compound (I) is subjected to an ordinary purification operation after subjecting the novel compound (II) obtained above to an acylation reaction such as acetylation or benzoylation or sulfonation reaction by a conventional method. Therefore, it can be easily synthesized.
In addition, when it sulfonates, it can further convert into the various salt forms mentioned above by a conventional method.
[0021]
The monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative of the present invention obtained as described above has a hydrocarbon group as a hydrophobic group and a hydroxyl group as a hydrophilic group in its structure, so that it can be used as a surfactant. There is expected.
When the compound of the present invention is used as a surfactant, its effective concentration is not particularly limited as long as it is within a range where surface activity can be exhibited, but 5 to 10 mg / ml is preferable.
[0022]
【Example】
EXAMPLES The present invention will be described more specifically with reference to the following examples. However, the scope of the present invention is not limited to the following examples.
[0023]
Example 1
[Isolation procedure for compound (II)]
Alicyclobacillus acidocaldarius (JCM5260), 0.1% glucose, 0.1% dry yeast extract, 0.02% (NH ₄ ) ₂ SO ₄ , 0.05% MgSO ₄ · 7H ₂ O, 0.025% CaCl ₂ · 2H ₂ O, 0.06% KH ₂ PO _The culture was performed at 60 ° C. in a medium containing ₄ (pH 3-4). The culture solution was centrifuged at 6000 g for 10 minutes to separate the cells, washed once with distilled water and lyophilized. The obtained dried cells were extracted with chloroform / methanol (1/2), and the extract was adsorbed on ODS, 50% methanol, 90% methanol, methanol, methanol / chloroform (1/4), methanol / chloroform ( Elution was performed in the order of 1/1), chloroform, chloroform / methanol / water (65/25/4). Fractions eluted with methanol / chloroform (4/1) are placed on preparative TLC, developed with chloroform / methanol / water (65/25/4), scraped with the desired components, and chloroform / methanol (2 / 1 and 1/2). Thereafter, the solvent was distilled off to obtain a fraction containing the desired compound (II).
[0024]
Example 2
(1) Production of Compound (I) (R: Acetyl Group) The fraction containing Compound (II) obtained in Example 1 was dissolved in pyridine / acetic anhydride (2/1) and stirred at room temperature for 18 hours. The hydroxyl group was acetylated. After completion of the reaction, the solvent was distilled off, the reaction product was placed on preparative TLC, developed with chloroform / methanol (100/4), and the desired component was scraped off and eluted with chloroform / methanol (2/1). did. The solvent was distilled off to obtain compound (I) (R; acetyl group: acetylated compound (II)).
[0025]
(2) Structural analysis of compound (I) (R; acetyl group) ¹ H-NMR (CDCl ₃ ) and ¹³ C-NMR (CDCl ₃ ) NMR data of compound (I) (R; acetyl group) are shown below. Table 1 shows.
[0026]
[Table 1]

[0027]
From the analysis of COZY and HOHAHA spectra, the binding of H1-H6, H7-H12, H13-H15 was determined, and the carbon bonded to these protons was determined from the HSQC measurement.
From the chemical shift of the H1-H15 proton and the carbon bonded to this proton, it was found that H1-H6, H7-H12 are sugars, and H13-H15 are protons bonded to the glycerol skeleton. Coupling was observed in acetylation body constants _{_{_{_{J 1 - 2 7.89Hz, J 2-3}}}} 9.40Hz, J 3-4 9.54Hz, J 4-5 9.72Hz, J 7-8 7.98Hz, J 9-1 09 .38 Hz, J _10-11 From the values of 9.44 Hz, it was found that H1, H2, H3, H4, H5, H7, H8, H9, H10, and H11 are in an axial arrangement.
[0028]
Since the presence of fatty acids was estimated from the NMR spectra of protons and carbon, the compound (I) (R; acetyl group) was methanolized with hydrochloric acid methanol and the solvent was distilled off, followed by two-phase partitioning between hexane and water. The hexane layer was taken and the hexane layer was analyzed by GC-MS to determine the fatty acid composition. From the mass fragment and molecular ion peak (m / z = 256, 284), the presence of saturated fatty acids with 15 and 17 carbon atoms and the presence of cycloheptyl-heputadecanoic acid from the molecular ion peak m / z = 282 and its mass fragment It was confirmed.
[0029]
Next, from the analysis of HMBC spectrum, it was investigated where each sugar, glycerol, and fatty acid residue was bound. From the correlation of HMBC from H1 to C12, it was found that the sugar was 1 → 6 linked. From the correlation of HMBC from H7 to C13, it was found that the glycerol skeleton was bonded to the 7-position via oxygen. The HMBC correlation from the amino group proton to the carbonyl carbon C17 of the fatty acid indicates that the amino group of the sugar is acylated. From the correlation of HMBC from H15 to the carbonyl carbon C16 of the fatty acid, it was found that the fatty acid was bonded to oxygen of C15. H14 is shifted to a low magnetic field by about 1 ppm by acetylation, and in the acetylated form, C14 before acetylation is modified because HMBC has a correlation from H14 to the carbonyl carbon of the acetyl group. It was found that there were no hydroxyl groups attached.
FIG. 1 shows the molecular structure of compound (I) (R: acetyl group) determined from the above analysis and the main correlation of HMBC. In the figure, R represents an acetyl group, and R ₁ and R ₂ each independently represent a hydrocarbon group derived from a fatty acid having 15 or 17 carbon atoms. Arrows indicate HMBC correlation.
[0030]
【The invention's effect】
According to the present invention, a novel monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative having a hydrocarbon group as a hydrophobic group and a hydroxyl group as a hydrophilic group in its structure is provided. And since this compound has both a hydrophobic group and a hydrophilic group in a molecule | numerator, the use as a surfactant is anticipated.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a diagram showing the main correlation between the molecular structure of the monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative of the present invention and HMBC.

Claims

The following general formula (I)

(Wherein, R may be the being the same or different, each represents a hydrogen atom, an aliphatic acyl group, aromatic acyl group, phosphoric acid group, a sulfonic acid group or a sulfonate,, R ₁ and R ₂ each independently represents a fatty acid-derived hydrocarbon residue.)
A monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative represented by:

The following general formula (II)

(In the formula, R ₁ and R ₂ each independently represent a fatty acid-derived hydrocarbon residue.)
A monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative represented by:

The monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative according to claim 1 or 2, wherein R ₁ and R ₂ are each independently a saturated or unsaturated hydrocarbon having 7 to 29 carbon atoms.

The method for producing a compound according to claim 2, wherein a substance produced from a bacterium belonging to the genus Alicyclobacillus is extracted, and the obtained extract is purified.

A surfactant comprising the monoacyl diglycosyl monoacylglycerol derivative according to any one of claims 1 to 4.