JP2971757B2 - 新規微生物およびそれを用いたポリエステルの分解方法 - Google Patents
新規微生物およびそれを用いたポリエステルの分解方法Info
- Publication number
- JP2971757B2 JP2971757B2 JP28637494A JP28637494A JP2971757B2 JP 2971757 B2 JP2971757 B2 JP 2971757B2 JP 28637494 A JP28637494 A JP 28637494A JP 28637494 A JP28637494 A JP 28637494A JP 2971757 B2 JP2971757 B2 JP 2971757B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- pao
- polyethylene glycol
- decomposing
- sphingomonas
- phthalic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
- Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
- Biological Depolymerization Polymers (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、一般に、優れたポリエ
ステル分解能を有した新規微生物、優れたポリエチレン
グリコール（以下、「ＰＥＧ」と称する）分解能を有し
た新規微生物、および当該新規微生物の共生系を用いた
ポリエステル、特に、芳香族ポリエステルの分解方法に
関する。 具体的には、本発明による新規微生物は、フ
タル酸エステル、フタル酸あるいはＰＥＧ、およびその
誘導体を分解する能力を利用した、これら化合物の分
解、ならびにこれら化合物の分解を通じた有用成分の取
得に関する。
ステル分解能を有した新規微生物、優れたポリエチレン
グリコール（以下、「ＰＥＧ」と称する）分解能を有し
た新規微生物、および当該新規微生物の共生系を用いた
ポリエステル、特に、芳香族ポリエステルの分解方法に
関する。 具体的には、本発明による新規微生物は、フ
タル酸エステル、フタル酸あるいはＰＥＧ、およびその
誘導体を分解する能力を利用した、これら化合物の分
解、ならびにこれら化合物の分解を通じた有用成分の取
得に関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】従来
より、脂肪族ポリエステルの分解についてはもはや周知
の域に達しているものの、芳香族ポリエステルの分解に
ついては困難とされてきた〔「生分解性高分子材料」、
pp.263-276 (1990) 、工業調査会、東京〕。 また、高
分子ＰＥＧの分解に関して、好気的共生系細菌または嫌
気的細菌による分解が報告されているが〔F. Kawai, CR
C Ctit. Rev. Biotechnol., 6, 273-307 (1987) 〕、ス
フィンゴモナス属に属する細菌については、スフィンゴ
モナス・マクロゴルタビダスならびにスフィンゴモナス
・テラエが、それぞれＰＥＧ4000とＰＥＧ20000（商品
名：ＰＥＧシリーズ（第一工業製薬株式会社))を資化で
きる菌であることが報告されているに過ぎない〔M. Tak
euchi, et al., System. Appl. Microbiol., 16, 227-2
38 (1993)〕。 また、スフィンゴモナス・テラエは、
リゾビウム属に属する細菌との共存下でしか、ＰＥＧを
資化できないという条件上の制約がある。
より、脂肪族ポリエステルの分解についてはもはや周知
の域に達しているものの、芳香族ポリエステルの分解に
ついては困難とされてきた〔「生分解性高分子材料」、
pp.263-276 (1990) 、工業調査会、東京〕。 また、高
分子ＰＥＧの分解に関して、好気的共生系細菌または嫌
気的細菌による分解が報告されているが〔F. Kawai, CR
C Ctit. Rev. Biotechnol., 6, 273-307 (1987) 〕、ス
フィンゴモナス属に属する細菌については、スフィンゴ
モナス・マクロゴルタビダスならびにスフィンゴモナス
・テラエが、それぞれＰＥＧ4000とＰＥＧ20000（商品
名：ＰＥＧシリーズ（第一工業製薬株式会社))を資化で
きる菌であることが報告されているに過ぎない〔M. Tak
euchi, et al., System. Appl. Microbiol., 16, 227-2
38 (1993)〕。 また、スフィンゴモナス・テラエは、
リゾビウム属に属する細菌との共存下でしか、ＰＥＧを
資化できないという条件上の制約がある。
【０００３】同様に、フタール酸エステル資化菌につい
ての報告もあるが〔倉根隆一郎、「バイオサイエンスと
インダストリー」、46、５、pp.3173-3177 (1988);「微
生物工学技術ハンドブック」、pp.477-490 (1990) 、朝
倉書店、東京〕、ポリエステルを特異的に分解する細菌
に係る報告は、未だされていない。
ての報告もあるが〔倉根隆一郎、「バイオサイエンスと
インダストリー」、46、５、pp.3173-3177 (1988);「微
生物工学技術ハンドブック」、pp.477-490 (1990) 、朝
倉書店、東京〕、ポリエステルを特異的に分解する細菌
に係る報告は、未だされていない。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上述した
従来技術の背景に鑑みて、フタール酸エステル分解能な
らびにＰＥＧ分解能双方を備えた微生物を検索すべく鋭
意検討を重ねた結果、本願出願人の四日市工場敷地内の
土壌から分離した混合培養試料、および大阪市住吉区内
の畑の土壌から分離した混合培養試料から、所望の特性
を有した細菌の単離に至り、本願発明を完成ならしめた
のである。
従来技術の背景に鑑みて、フタール酸エステル分解能な
らびにＰＥＧ分解能双方を備えた微生物を検索すべく鋭
意検討を重ねた結果、本願出願人の四日市工場敷地内の
土壌から分離した混合培養試料、および大阪市住吉区内
の畑の土壌から分離した混合培養試料から、所望の特性
を有した細菌の単離に至り、本願発明を完成ならしめた
のである。
【０００５】すなわち、本願発明の要旨とするところ
は： (1) 脂肪族および芳香族ポリエステルを分解し、かつフ
タール酸資化能を有するコマモナス・アシドヴォラン
ス； (2) ポリエチレングリコール資化能を有するスフィンゴ
モナス属に属する新規微生物； (3) 前記微生物(1) および(2) の混合体〔共生系〕を調
製し、そして脂肪族および芳香族ポリエステルに作用さ
せる工程を含む、ポリエチレングリコールを含んだ脂肪
族および芳香族ポリエステルの分解方法； (4) 前記微生物(1) を、フタル酸エステルおよび／また
はフタル酸に作用させる工程を含む、フタル酸エステル
またはフタル酸の分解方法；および (5) 前記微生物(2) を、ポリエチレングリコールおよび
／またはポリエチレングリコール誘導体に作用させる工
程を含む、ポリエチレングリコールおよび／またはポリ
エチレングリコール誘導体の分解方法である。
は： (1) 脂肪族および芳香族ポリエステルを分解し、かつフ
タール酸資化能を有するコマモナス・アシドヴォラン
ス； (2) ポリエチレングリコール資化能を有するスフィンゴ
モナス属に属する新規微生物； (3) 前記微生物(1) および(2) の混合体〔共生系〕を調
製し、そして脂肪族および芳香族ポリエステルに作用さ
せる工程を含む、ポリエチレングリコールを含んだ脂肪
族および芳香族ポリエステルの分解方法； (4) 前記微生物(1) を、フタル酸エステルおよび／また
はフタル酸に作用させる工程を含む、フタル酸エステル
またはフタル酸の分解方法；および (5) 前記微生物(2) を、ポリエチレングリコールおよび
／またはポリエチレングリコール誘導体に作用させる工
程を含む、ポリエチレングリコールおよび／またはポリ
エチレングリコール誘導体の分解方法である。
【０００６】本願発明によって取得された三つの代表的
な新規微生物〔それぞれ、「Ｎ２」、「Ｋ１」、「Ｎ
６」と命名した〕の生物学的特徴を決定するために、こ
れら新規微生物が有する菌学的性質、すなわち、形態的
性質、培地における生育状態、および生理学的性質に関
して検定を行った。
な新規微生物〔それぞれ、「Ｎ２」、「Ｋ１」、「Ｎ
６」と命名した〕の生物学的特徴を決定するために、こ
れら新規微生物が有する菌学的性質、すなわち、形態的
性質、培地における生育状態、および生理学的性質に関
して検定を行った。
【０００７】なお、分類学上の諸性質は、以下の文献を
参照して決定した。
参照して決定した。
【０００８】I 「微生物の分類と同定」（長谷川武
治、編著）、学会出版センター、(1975) II 「微生物の化学分類実験法」（駒形和男、編）、学
会出版センター、(1982) III Barrow G.I. and Feltham R.K.A., "Cowan and St
eel's Manual for theIdentification of Medical Bact
eria", 3rd edition (1993), CambridgeUniversity Pre
ss. IV Board R.G., Jones D. and Skinner F.A., "Identi
fication Methods inApplied and Environmental Micro
biology", (1992) Society for AppliedBacteriology T
echnical Series 29. Blackwell Scientific. 検定の結果を、以下に列挙する。
治、編著）、学会出版センター、(1975) II 「微生物の化学分類実験法」（駒形和男、編）、学
会出版センター、(1982) III Barrow G.I. and Feltham R.K.A., "Cowan and St
eel's Manual for theIdentification of Medical Bact
eria", 3rd edition (1993), CambridgeUniversity Pre
ss. IV Board R.G., Jones D. and Skinner F.A., "Identi
fication Methods inApplied and Environmental Micro
biology", (1992) Society for AppliedBacteriology T
echnical Series 29. Blackwell Scientific. 検定の結果を、以下に列挙する。
【０００９】Ｎ２の菌学的性質
【００１０】
【表５】
【００１１】
【表６】
【００１２】Ｋ１の菌学的性質
【００１３】
【表７】
【００１４】Ｎ６の菌学的性質
【００１５】
【表８】
【００１６】なお、上記したＫ１およびＮ６は、細胞壁
脂肪酸組成ならびにキノン組成が、従前のスフィンゴモ
ナス・マクロゴルタビダスならびにスフィンゴモナス・
テラエとは全く異なり、特に、Ｎ６は、この細菌単独で
も、ＰＥＧを特異的に資化できる特徴を有していた。
脂肪酸組成ならびにキノン組成が、従前のスフィンゴモ
ナス・マクロゴルタビダスならびにスフィンゴモナス・
テラエとは全く異なり、特に、Ｎ６は、この細菌単独で
も、ＰＥＧを特異的に資化できる特徴を有していた。
【００１７】上記した各新規微生物の諸性質について、
バージェイのマニュアル〔Bergey'sManual of Systemat
ic Bacteriology, Vols. 1-4〕と対照させて検索したと
ころ、Ｎ２は、コマモナス・アシドヴォランスが有する
諸性質とよく対応したので、コマモナス・アシドヴォラ
ンス PAO-N2 と命名した。 一方で、Ｋ１とＮ６は、共
にコリネ型細菌であるものの、同マニュアルにおいて該
当する種は検索されなかったが、M. Takeuchi らのスフ
ィンゴモナス属細菌の同定に関する報告〔M.Takeuchi,
et al., System. Appl. Microbiol., 16, 227-238 (199
3)〕ならびに同文献にて参考文献として挙げられている
文献の開示から、スフィンゴモナス属に属するものと判
断し、スフィンゴモナス PAO-K1 およびスフィンゴモナ
ス PAO-N6 とそれぞれ命名した。 しかしながら、前述
したように、本願発明のＫ１とＮ６は、細胞壁脂肪酸組
成、キノン組成、ならびにＰＥＧ資化能が独特であるこ
とから、これら参考文献に開示されたスフィンゴモナス
属細菌とは別異のものであると考えられる。
バージェイのマニュアル〔Bergey'sManual of Systemat
ic Bacteriology, Vols. 1-4〕と対照させて検索したと
ころ、Ｎ２は、コマモナス・アシドヴォランスが有する
諸性質とよく対応したので、コマモナス・アシドヴォラ
ンス PAO-N2 と命名した。 一方で、Ｋ１とＮ６は、共
にコリネ型細菌であるものの、同マニュアルにおいて該
当する種は検索されなかったが、M. Takeuchi らのスフ
ィンゴモナス属細菌の同定に関する報告〔M.Takeuchi,
et al., System. Appl. Microbiol., 16, 227-238 (199
3)〕ならびに同文献にて参考文献として挙げられている
文献の開示から、スフィンゴモナス属に属するものと判
断し、スフィンゴモナス PAO-K1 およびスフィンゴモナ
ス PAO-N6 とそれぞれ命名した。 しかしながら、前述
したように、本願発明のＫ１とＮ６は、細胞壁脂肪酸組
成、キノン組成、ならびにＰＥＧ資化能が独特であるこ
とから、これら参考文献に開示されたスフィンゴモナス
属細菌とは別異のものであると考えられる。
【００１８】なお、本願発明にて得られた、これらコマ
モナス・アシドヴォランス PAO-N2、スフィンゴモナス
PAO-K1 およびスフィンゴモナス PAO-N6 は、平成６年
９月19日に、茨城県つくば市東町１丁目１番３号に所在
の通商産業省工業技術院微生物工業技術研究所にて寄託
され、そして、〔PAO-N2の名称で〕受託番号 FERM P-14
541 ；〔PAO-K1の名称で〕受託番号 FERM P-14542 ；
〔PAO-N6の名称で〕受託番号 FERM P-14543 が付与され
ており、本願発明は、これら寄託微生物自体はもちろ
ん、前述した能力を有するその変異体および子孫まで意
図するものである。
モナス・アシドヴォランス PAO-N2、スフィンゴモナス
PAO-K1 およびスフィンゴモナス PAO-N6 は、平成６年
９月19日に、茨城県つくば市東町１丁目１番３号に所在
の通商産業省工業技術院微生物工業技術研究所にて寄託
され、そして、〔PAO-N2の名称で〕受託番号 FERM P-14
541 ；〔PAO-K1の名称で〕受託番号 FERM P-14542 ；
〔PAO-N6の名称で〕受託番号 FERM P-14543 が付与され
ており、本願発明は、これら寄託微生物自体はもちろ
ん、前述した能力を有するその変異体および子孫まで意
図するものである。
【００１９】次に、このようにして得られた細菌の混合
培養系でのポリエステルの分解方法〔実験室規模〕の概
略を述べると、まず、ポリエステルを構成するＰＥＧの
分子量に対応できるよう、コマモナス・アシドヴォラン
ス PAO-N2 と、スフィンゴモナス PAO-K1 あるいはスフ
ィンゴモナス PAO-N6 を、選択・準備する。 そして、
培地として、下記表９に記載の培地組成に従って調製し
た基本培地を用いた。
培養系でのポリエステルの分解方法〔実験室規模〕の概
略を述べると、まず、ポリエステルを構成するＰＥＧの
分子量に対応できるよう、コマモナス・アシドヴォラン
ス PAO-N2 と、スフィンゴモナス PAO-K1 あるいはスフ
ィンゴモナス PAO-N6 を、選択・準備する。 そして、
培地として、下記表９に記載の培地組成に従って調製し
た基本培地を用いた。
【００２０】
【表９】
【００２１】この基本培地に、適当なポリエステルを加
えて滅菌した後に、コマモナス・アシドヴォランス PAO
-N2 と、スフィンゴモナス PAO-K1 あるいはスフィンゴ
モナス PAO-N6 を植菌して、振とうする。 振とう培養
した後、培養物から菌体を遠心分離で除去し、上澄液中
の未分解物の残存量および分解生成物を、ゲル浸透クロ
マトグラフィー（以下、「ＧＰＣ」と称する）に適用し
て分析する。
えて滅菌した後に、コマモナス・アシドヴォランス PAO
-N2 と、スフィンゴモナス PAO-K1 あるいはスフィンゴ
モナス PAO-N6 を植菌して、振とうする。 振とう培養
した後、培養物から菌体を遠心分離で除去し、上澄液中
の未分解物の残存量および分解生成物を、ゲル浸透クロ
マトグラフィー（以下、「ＧＰＣ」と称する）に適用し
て分析する。
【００２２】この培養条件は、使用する微生物の生育温
度範囲、好ましくは最適生育温度の範囲に設定すべきで
あるが、この範囲は、培地の組成、pHその他の条件によ
っても変化するので一律に規定できないが、通常は、10
〜30℃、好ましくは、20〜30℃と設定し、また、pHは中
性付近(6.0〜7.5)に設定するのが、良好な分析条件を整
える上で好ましい。
度範囲、好ましくは最適生育温度の範囲に設定すべきで
あるが、この範囲は、培地の組成、pHその他の条件によ
っても変化するので一律に規定できないが、通常は、10
〜30℃、好ましくは、20〜30℃と設定し、また、pHは中
性付近(6.0〜7.5)に設定するのが、良好な分析条件を整
える上で好ましい。
【００２３】培養条件は、通常好気的条件が、微生物の
良好な生育をもたらす上で好ましく、例えば、振とう培
養法または通気撹拌培養法などが利用できる。 培養時
間としては、ポリエステルおよび分解生成物であるＰＥ
Ｇが十分に分解できるまで行えばよく、通常、５〜７日
間〔ＰＥＧ4000ポリエステルおよびＰＥＧ6000ポリエス
テル〕あるいは７〜10日間〔ＰＥＧ20000 ポリエステル
（商品名：PAOGEN PP-15（第一工業製薬株式会社）〕で
あるが、一般的には、好ましくは、それぞれ７日以上お
よび14日以上である。 培養の際には、混合培養系に、
微生物の生育に十分な栄養物を補給する必要があり、通
常、無機塩、窒素源等が加えられる。
良好な生育をもたらす上で好ましく、例えば、振とう培
養法または通気撹拌培養法などが利用できる。 培養時
間としては、ポリエステルおよび分解生成物であるＰＥ
Ｇが十分に分解できるまで行えばよく、通常、５〜７日
間〔ＰＥＧ4000ポリエステルおよびＰＥＧ6000ポリエス
テル〕あるいは７〜10日間〔ＰＥＧ20000 ポリエステル
（商品名：PAOGEN PP-15（第一工業製薬株式会社）〕で
あるが、一般的には、好ましくは、それぞれ７日以上お
よび14日以上である。 培養の際には、混合培養系に、
微生物の生育に十分な栄養物を補給する必要があり、通
常、無機塩、窒素源等が加えられる。
【００２４】この無機塩としては、燐酸塩、マグネシウ
ム塩、カルシウム塩等が、また、窒素源としては、混合
培養系にて資化されるものであればよく、例えば、硫酸
アンモニウム、燐酸アンモニウム、塩化アンモニウム、
硝酸アンモニウム、および硝酸塩等が該当し、これらの
１種以上を任意に選択して使用することができる。 さ
らに、混合培養系での微生物の成長促進のための栄養源
として、適量のビタミン、酵母エキスなどを添加でき
る。 本発明では、使用する微生物が資化できるＰＥＧ
またはジアルキルフタル酸エステルを含む培養液で予め
培養して得られる菌体を、上述した基本培地と同様の組
成を有する液体に添加して、反応を行うこともできる。
ム塩、カルシウム塩等が、また、窒素源としては、混合
培養系にて資化されるものであればよく、例えば、硫酸
アンモニウム、燐酸アンモニウム、塩化アンモニウム、
硝酸アンモニウム、および硝酸塩等が該当し、これらの
１種以上を任意に選択して使用することができる。 さ
らに、混合培養系での微生物の成長促進のための栄養源
として、適量のビタミン、酵母エキスなどを添加でき
る。 本発明では、使用する微生物が資化できるＰＥＧ
またはジアルキルフタル酸エステルを含む培養液で予め
培養して得られる菌体を、上述した基本培地と同様の組
成を有する液体に添加して、反応を行うこともできる。
【００２５】また、本発明では、炭素源としてのＰＥＧ
または非イオン性界面活性剤等のＰＥＧ誘導体を含ん
だ、上述した基本培地と同様の組成からなる培地を滅菌
し、これに、スフィンゴモナス PAO-K1 あるいはスフィ
ンゴモナス PAO-N6 を植菌して、振とう培養する態様も
含む。
または非イオン性界面活性剤等のＰＥＧ誘導体を含ん
だ、上述した基本培地と同様の組成からなる培地を滅菌
し、これに、スフィンゴモナス PAO-K1 あるいはスフィ
ンゴモナス PAO-N6 を植菌して、振とう培養する態様も
含む。
【００２６】また、本発明では、スフィンゴモナス PAO
-K1 あるいはスフィンゴモナス PAO-N6 が資化できるＰ
ＥＧあるいはその誘導体を含む培地であらかじめ培養し
て得られる菌体を、上述した基本培地と同様の組成から
なる液体に添加して、反応を行うこともできる。
-K1 あるいはスフィンゴモナス PAO-N6 が資化できるＰ
ＥＧあるいはその誘導体を含む培地であらかじめ培養し
て得られる菌体を、上述した基本培地と同様の組成から
なる液体に添加して、反応を行うこともできる。
【００２７】さらに、本発明では、フタル酸またはその
エステルを炭素源とし、上述した基本培地と同様の組成
からなる培地を滅菌した後、これにコマモナス・アシド
ヴォランス PAO-N2 を植菌して、振とう培養する態様も
包含され、加えて、前述のスフィンゴモナス PAO-K1 あ
るいは PAO-N6 と同様に、このコマモナス・アシドヴォ
ランス PAO-N2 が資化できる炭素源を含む培地で予め培
養して得られる菌体を、上述した基本培地と同様の組成
からなる液体培地に添加し、反応を行うこともできる。
エステルを炭素源とし、上述した基本培地と同様の組成
からなる培地を滅菌した後、これにコマモナス・アシド
ヴォランス PAO-N2 を植菌して、振とう培養する態様も
包含され、加えて、前述のスフィンゴモナス PAO-K1 あ
るいは PAO-N6 と同様に、このコマモナス・アシドヴォ
ランス PAO-N2 が資化できる炭素源を含む培地で予め培
養して得られる菌体を、上述した基本培地と同様の組成
からなる液体培地に添加し、反応を行うこともできる。
【００２８】本発明のその他の態様および利点は、以下
に例示的に示した実施例の開示から明らかである。
に例示的に示した実施例の開示から明らかである。
【００２９】
【実施例】実施例１：菌株の単離 前出の基本培地の単一炭素源として、ＰＥＧ4000〔商品
名：ＰＥＧシリーズ（第一工業製薬株式会社）〕フター
ル酸ポリエステルあるいはＰＥＧ6000〔商品名：ＰＥＧ
シリーズ（第一工業製薬株式会社）〕フタール酸ポリエ
ステルを含む、前出の組成を有する基本培地に、前述し
た本願出願人の四日市工場敷地内の土壌から分離した混
合培養試料、および大阪市住吉区内の畑の土壌から分離
した混合培養試料を含めた、日本国内各地から収集した
268種の土壌試料の水懸濁上澄液、および下水処理場か
ら入手した４種の活性汚泥試料を馴養させて得た上澄液
を、前記培地に接種した。
名：ＰＥＧシリーズ（第一工業製薬株式会社）〕フター
ル酸ポリエステルあるいはＰＥＧ6000〔商品名：ＰＥＧ
シリーズ（第一工業製薬株式会社）〕フタール酸ポリエ
ステルを含む、前出の組成を有する基本培地に、前述し
た本願出願人の四日市工場敷地内の土壌から分離した混
合培養試料、および大阪市住吉区内の畑の土壌から分離
した混合培養試料を含めた、日本国内各地から収集した
268種の土壌試料の水懸濁上澄液、および下水処理場か
ら入手した４種の活性汚泥試料を馴養させて得た上澄液
を、前記培地に接種した。
【００３０】そして、細菌の生育に伴う培地の濁りが認
められた試料を常法（前出の「微生物工学技術ハンドブ
ック」の開示）により、集積培養を、数回繰り返した。
その結果、15種の土壌試料について良好な生育が認め
られた。 さらに、最終的に最も優れた生育を示した細
菌として、ＰＥＧ4000フタール酸ポリエステルを用いた
培地から１種（混合培養系Ｋ）、そして、ＰＥＧ6000フ
タール酸ポリエステルを用いた培地から１種（混合培養
系Ｎ）を、それぞれ選択した。 それぞれの培養系か
ら、ポリエステルの分解資化に関与する細菌を純粋分離
することで、培養系Ｋには、コマモナス・アシドヴォラ
ンス PAO-N2 とスフィンゴモナス PAO-K1が、また、培
養系Ｎには、コマモナス・アシドヴォランス PAO-N2 と
スフィンゴモナス PAO-N6 が含まれていることを、前出
の菌学的性質に関する分析結果から判明した。
められた試料を常法（前出の「微生物工学技術ハンドブ
ック」の開示）により、集積培養を、数回繰り返した。
その結果、15種の土壌試料について良好な生育が認め
られた。 さらに、最終的に最も優れた生育を示した細
菌として、ＰＥＧ4000フタール酸ポリエステルを用いた
培地から１種（混合培養系Ｋ）、そして、ＰＥＧ6000フ
タール酸ポリエステルを用いた培地から１種（混合培養
系Ｎ）を、それぞれ選択した。 それぞれの培養系か
ら、ポリエステルの分解資化に関与する細菌を純粋分離
することで、培養系Ｋには、コマモナス・アシドヴォラ
ンス PAO-N2 とスフィンゴモナス PAO-K1が、また、培
養系Ｎには、コマモナス・アシドヴォランス PAO-N2 と
スフィンゴモナス PAO-N6 が含まれていることを、前出
の菌学的性質に関する分析結果から判明した。
【００３１】実施例２：ポリエステル分解能〔ポリエス
テル濃度依存性〕の検定 前出の基本培地の単一炭素源として、ＰＥＧ6000を含む
培地100mlを、500mlの坂口フラスコ〔振とうフラスコ40
70 FK-500：岩城硝子〕に入れた。 そして、この培地
を、120℃で、15分間、オートクレープ〔オートクレー
プ S-90-N：トミー精工〕で加熱殺菌した後、数白金耳
のスフィンゴモナス PAO-K1 をこの培地に接種し、30℃
で、３〜４日間、往復振盪培養機〔往復式振盪培養機 R
LR-3：いわしや生物科学株式会社〕にて振とう（105往
復／分）培養した〔前培養１〕。また、コマモナス・ア
シドヴォランス PAO-N2 を、ジブチルフタール酸(0.2
％：ＤＢＰ）培地でスフィンゴモナス PAO-K1 の場合と
同様にして培養を行った〔前培養２〕。 一方、前培養
１および２に代わって、スフィンゴモナス PAO-K1とコ
マモナス・アシドヴォランス PAO-N2 を、基本培地の単
一炭素源としてＰＥＧ4000フタル酸ポリエステル培地
に、それぞれ数白金耳ずつ、混合接種したものを、上述
した方法に従って培養を行い、これを前培養とした〔前
培養３〕。
テル濃度依存性〕の検定 前出の基本培地の単一炭素源として、ＰＥＧ6000を含む
培地100mlを、500mlの坂口フラスコ〔振とうフラスコ40
70 FK-500：岩城硝子〕に入れた。 そして、この培地
を、120℃で、15分間、オートクレープ〔オートクレー
プ S-90-N：トミー精工〕で加熱殺菌した後、数白金耳
のスフィンゴモナス PAO-K1 をこの培地に接種し、30℃
で、３〜４日間、往復振盪培養機〔往復式振盪培養機 R
LR-3：いわしや生物科学株式会社〕にて振とう（105往
復／分）培養した〔前培養１〕。また、コマモナス・ア
シドヴォランス PAO-N2 を、ジブチルフタール酸(0.2
％：ＤＢＰ）培地でスフィンゴモナス PAO-K1 の場合と
同様にして培養を行った〔前培養２〕。 一方、前培養
１および２に代わって、スフィンゴモナス PAO-K1とコ
マモナス・アシドヴォランス PAO-N2 を、基本培地の単
一炭素源としてＰＥＧ4000フタル酸ポリエステル培地
に、それぞれ数白金耳ずつ、混合接種したものを、上述
した方法に従って培養を行い、これを前培養とした〔前
培養３〕。
【００３２】次に、ＰＥＧ6000ポリエステルの濃度を変
えて調製した前記基本培地を、同様に、 120℃で、５分
間、オートクレープ〔オートクレープ S-90-N：トミー
精工〕で加熱殺菌し、前培養３で得られた培養物の５ml
を、この培地に接種し、30℃で、３日間、振とう（105
往復／分）培養を行った。
えて調製した前記基本培地を、同様に、 120℃で、５分
間、オートクレープ〔オートクレープ S-90-N：トミー
精工〕で加熱殺菌し、前培養３で得られた培養物の５ml
を、この培地に接種し、30℃で、３日間、振とう（105
往復／分）培養を行った。
【００３３】得られた培養液を、9000rpm で、20分間、
遠心分離〔高速冷却遠心分離機20PR-52 ：日立工機〕
し、その上澄液を、ＧＰＣに適用し、分析を行った。
なお、ＧＰＣを用いた測定条件は、以下の通りである。
遠心分離〔高速冷却遠心分離機20PR-52 ：日立工機〕
し、その上澄液を、ＧＰＣに適用し、分析を行った。
なお、ＧＰＣを用いた測定条件は、以下の通りである。
【００３４】 使用機器：東ソー高速ＧＰＣ装置 HLC
-8020 カラム： Tosoh TSHGEL G5000PWXL-G4000PWXL-G30
00PWXL-G2500PWXL(内径：7.8mm 、長さ：30cm) 溶媒： 0.1M 塩化ナトリウム（流速：0.7ml/min.、
温度：40℃) 検出器：ＲＩ（示差屈折率）検出 その分析結果を、下記表10に示した。
-8020 カラム： Tosoh TSHGEL G5000PWXL-G4000PWXL-G30
00PWXL-G2500PWXL(内径：7.8mm 、長さ：30cm) 溶媒： 0.1M 塩化ナトリウム（流速：0.7ml/min.、
温度：40℃) 検出器：ＲＩ（示差屈折率）検出 その分析結果を、下記表10に示した。
【００３５】
【表１０】
【００３６】実施例３：ポリエステル分解能〔培養日数
依存性〕の検定 実施例２と同様にして調製した、ＰＥＧ4000ポリエステ
ル濃度を0.5 ％とした培地 100mlを、 500mlの坂口フラ
スコに入れ、オートクレープ殺菌した。 そして、実施
例２と同様にして前培養した、前培養３で得られた培養
物の５mlをこの培地に接種して、30℃で、振とう（105
往復／分）培養を行った。
依存性〕の検定 実施例２と同様にして調製した、ＰＥＧ4000ポリエステ
ル濃度を0.5 ％とした培地 100mlを、 500mlの坂口フラ
スコに入れ、オートクレープ殺菌した。 そして、実施
例２と同様にして前培養した、前培養３で得られた培養
物の５mlをこの培地に接種して、30℃で、振とう（105
往復／分）培養を行った。
【００３７】この培養によって増殖した細菌の生育度は
λ＝610nm での吸光度で、また、炭素源分解率を、実施
例２でのＧＰＣ測定条件と同一の測定条件下で、ＧＰＣ
にて分析し、その結果を、下記表11に示した。
λ＝610nm での吸光度で、また、炭素源分解率を、実施
例２でのＧＰＣ測定条件と同一の測定条件下で、ＧＰＣ
にて分析し、その結果を、下記表11に示した。
【００３８】
【表１１】
【００３９】実施例４：ポリエステル分解能〔ポリエス
テル濃度依存性〕の検定 前出の基本培地の単一炭素源として、ＰＥＧ6000を用い
た以外は、実施例２に記載の方法に準じて、スフィンゴ
モナス PAO-K1 の前培養〔前培養４〕、コマモナス・ア
シドヴォランス PAO-N2 の前培養〔前培養５〕、およ
び、スフィンゴモナス PAO-K1 とコマモナス・アシドヴ
ォランス PAO-N2 の混合培養〔前培養６〕を行った。
テル濃度依存性〕の検定 前出の基本培地の単一炭素源として、ＰＥＧ6000を用い
た以外は、実施例２に記載の方法に準じて、スフィンゴ
モナス PAO-K1 の前培養〔前培養４〕、コマモナス・ア
シドヴォランス PAO-N2 の前培養〔前培養５〕、およ
び、スフィンゴモナス PAO-K1 とコマモナス・アシドヴ
ォランス PAO-N2 の混合培養〔前培養６〕を行った。
【００４０】次に、ＰＥＧ6000ポリエステルの濃度を変
えて調製した前記基本培地を、実施例２の場合と同様に
して、 120℃で、５分間、オートクレープ〔オートクレ
ープS-90-N ：トミー精工〕で加熱殺菌し、前培養６で
得られた培養物の５mlを、この培地に接種し、30℃で、
７日間、振とう(105往復／分）培養を行った。 得られ
た培養液を、9000rpm で、20分間、遠心分離〔高速冷却
遠心分離機20PR-52 ：日立工機〕し、その上澄液を、Ｇ
ＰＣに適用し、分析を行った。 なお、ＧＰＣの測定条
件は、実施例２と同一条件とした。 その分析結果を、
下記表12に示した。
えて調製した前記基本培地を、実施例２の場合と同様に
して、 120℃で、５分間、オートクレープ〔オートクレ
ープS-90-N ：トミー精工〕で加熱殺菌し、前培養６で
得られた培養物の５mlを、この培地に接種し、30℃で、
７日間、振とう(105往復／分）培養を行った。 得られ
た培養液を、9000rpm で、20分間、遠心分離〔高速冷却
遠心分離機20PR-52 ：日立工機〕し、その上澄液を、Ｇ
ＰＣに適用し、分析を行った。 なお、ＧＰＣの測定条
件は、実施例２と同一条件とした。 その分析結果を、
下記表12に示した。
【００４１】
【表１２】
【００４２】実施例５：ポリエステル分解能〔培養日数
依存性〕の検定 実施例４と同様にして調製した、ＰＥＧ6000ポリエステ
ル濃度を0.5 ％とした培地 100mlを、 500mlの坂口フラ
スコに入れ、オートクレープ殺菌した。 そして、実施
例４と同様にして前培養した、前培養６で得られた培養
物の５mlをこの培地に接種して、30℃で振とう（105 往
復／分）培養を行った。 この培養によって増殖した細
菌の生育度はλ＝610nm での吸光度で、また、炭素源分
解率を、ＧＰＣによって分析し、その結果を、下記表13
に示した。 なお、ＧＰＣの測定条件は、実施例２と同
一条件とした。
依存性〕の検定 実施例４と同様にして調製した、ＰＥＧ6000ポリエステ
ル濃度を0.5 ％とした培地 100mlを、 500mlの坂口フラ
スコに入れ、オートクレープ殺菌した。 そして、実施
例４と同様にして前培養した、前培養６で得られた培養
物の５mlをこの培地に接種して、30℃で振とう（105 往
復／分）培養を行った。 この培養によって増殖した細
菌の生育度はλ＝610nm での吸光度で、また、炭素源分
解率を、ＧＰＣによって分析し、その結果を、下記表13
に示した。 なお、ＧＰＣの測定条件は、実施例２と同
一条件とした。
【００４３】
【表１３】
【００４４】実施例６：ポリエステル分解能〔培養日数
依存性〕の検定 前培養２で得られた培養物の10mlを、ＰＥＧ 20000ポリ
エステル 0.5％を含む100ml の前出の基本培地にて、30
℃で、１日間、振とう（105 往復／分）培養を行い、こ
の培養懸濁液を、9000rpm で、20分間、遠心分離で菌体
を除去した後に、得られた培養上澄を濾過滅菌した。
そして、培養ろ液の基質とＰＥＧの生成量に関して、実
施例２と同一条件にてＧＰＣ分析を行ったところ、ポリ
エステルはすべてＰＥＧ 20000に分解されていたことが
判明した（データ示さず）。 一方で、前出の基本培地
の単一炭素源として、ＰＥＧ 20000を用いた以外は、実
施例２に記載の方法に準じて、スフィンゴモナス PAO-N
6 の前培養〔前培養７〕を行った。 そして、前記濾過
滅菌した培養上澄に、前培養７で得られた培養物の10ml
を植菌し、30℃で、15日間、振とう（105 往復／分）培
養を行った。 そして、培養開始後の８日目と15日目に
培養液を採取し、この培養により増殖した細菌の生育度
をλ＝610nm の吸光度で、また、菌体を除去した上澄液
中のＰＥＧの量の変化を、実施例２と同一条件にて、Ｇ
ＰＣによって分析を行い、その結果を、下記表14に示し
た。 なお、８日目の分析後に、１Ｎ水酸化ナトリウム
にて反応液のpHを、7.0 に補正した。
依存性〕の検定 前培養２で得られた培養物の10mlを、ＰＥＧ 20000ポリ
エステル 0.5％を含む100ml の前出の基本培地にて、30
℃で、１日間、振とう（105 往復／分）培養を行い、こ
の培養懸濁液を、9000rpm で、20分間、遠心分離で菌体
を除去した後に、得られた培養上澄を濾過滅菌した。
そして、培養ろ液の基質とＰＥＧの生成量に関して、実
施例２と同一条件にてＧＰＣ分析を行ったところ、ポリ
エステルはすべてＰＥＧ 20000に分解されていたことが
判明した（データ示さず）。 一方で、前出の基本培地
の単一炭素源として、ＰＥＧ 20000を用いた以外は、実
施例２に記載の方法に準じて、スフィンゴモナス PAO-N
6 の前培養〔前培養７〕を行った。 そして、前記濾過
滅菌した培養上澄に、前培養７で得られた培養物の10ml
を植菌し、30℃で、15日間、振とう（105 往復／分）培
養を行った。 そして、培養開始後の８日目と15日目に
培養液を採取し、この培養により増殖した細菌の生育度
をλ＝610nm の吸光度で、また、菌体を除去した上澄液
中のＰＥＧの量の変化を、実施例２と同一条件にて、Ｇ
ＰＣによって分析を行い、その結果を、下記表14に示し
た。 なお、８日目の分析後に、１Ｎ水酸化ナトリウム
にて反応液のpHを、7.0 に補正した。
【００４５】
【表１４】
【００４６】実施例７：ポリエステル分解能〔ポリエス
テル種依存性〕の検定 0.2 ％のジブチルフタール酸（ＤＢＰ）を含む基本培地
にて、３日間、生育させたコマモナス・アシドヴォラン
ス PAO-N2 の培養液を、9000rpm で、20分間、遠心分離
して得た上澄液あるいは菌体に、 0.5％濃度のＰＥＧ40
00とフタル酸からなるポリエステル、ＰＥＧ4000とイソ
フタル酸からなるポリエステル、あるいはＰＥＧ4000と
テレフタル酸からなるポリエステルのいずれか、およ
び、反応液の最終濃度が0.05Ｍになるように燐酸緩衝液
(pH 7.0)を加えて、30℃で、反応を進行せしめた。 こ
の反応を開始して後、１日目および３日目における基質
の分解につき、実施例２と同一条件にてＧＰＣにて分析
を行い、その結果を、下記表15に示した。
テル種依存性〕の検定 0.2 ％のジブチルフタール酸（ＤＢＰ）を含む基本培地
にて、３日間、生育させたコマモナス・アシドヴォラン
ス PAO-N2 の培養液を、9000rpm で、20分間、遠心分離
して得た上澄液あるいは菌体に、 0.5％濃度のＰＥＧ40
00とフタル酸からなるポリエステル、ＰＥＧ4000とイソ
フタル酸からなるポリエステル、あるいはＰＥＧ4000と
テレフタル酸からなるポリエステルのいずれか、およ
び、反応液の最終濃度が0.05Ｍになるように燐酸緩衝液
(pH 7.0)を加えて、30℃で、反応を進行せしめた。 こ
の反応を開始して後、１日目および３日目における基質
の分解につき、実施例２と同一条件にてＧＰＣにて分析
を行い、その結果を、下記表15に示した。
【００４７】
【表１５】
【００４８】実施例８：ポリエステル分解能〔ポリエス
テル種依存性〕の検定 0.2 ％のジブチルフタール酸（ＤＢＰ）を含む基本培地
にて、３日間、生育させたコマモナス・アシドヴォラン
ス PAO-N2 の培養液を、9000rpm で、20分間、遠心分離
して得た上澄液に、ＰＥＧ4000とフタル酸からなるポリ
エステル（ＤＭＰＰＡＯ）、 0.5％濃度のＰＥＧ4000と
イソフタル酸からなるポリエステル（ＤＭＩＰＡＯ）、
あるいはＰＥＧ4000とテレフタル酸からなるポリエステ
ル（ＤＭＴＰＡＯ）のいずれかを反応基質とした。 そ
して、これら基質に作用させる酵素として、コマモナス
・アシドヴォランス PAO-N2 の培養上澄液に加え、エス
テラーゼ(100U)〔Pseudomonas sp. 由来：A. Sugihara
et al., Biosci. Biotech.Biochem. 58, 752-755 (199
4)に開示されたもの〕、リパーゼ (7000U)〔Candida cy
lindracea 由来：名糖産業株式会社〕、リパーゼ (11U)
〔Fusariumsp. 由来：Y. Shimada et al., J. Ferment.
Bioeng., 75, 349-352 (1993)に開示されたもの〕、お
よびリパーゼ (500U) 〔Rhizopus arrhizus 由来：Sigm
aChemical社、セントルイス、米国〕を用意した。 そ
して、反応液の最終濃度が0.05Ｍになるように燐酸緩衝
液(pH 7.0)を加えて反応を進行せしめた。 この反応
を、30℃で、３日間進行せしめた後、基質の分解につ
き、実施例２と同一条件にてＧＰＣで分析を行い、その
結果を、下記表16に示した。
テル種依存性〕の検定 0.2 ％のジブチルフタール酸（ＤＢＰ）を含む基本培地
にて、３日間、生育させたコマモナス・アシドヴォラン
ス PAO-N2 の培養液を、9000rpm で、20分間、遠心分離
して得た上澄液に、ＰＥＧ4000とフタル酸からなるポリ
エステル（ＤＭＰＰＡＯ）、 0.5％濃度のＰＥＧ4000と
イソフタル酸からなるポリエステル（ＤＭＩＰＡＯ）、
あるいはＰＥＧ4000とテレフタル酸からなるポリエステ
ル（ＤＭＴＰＡＯ）のいずれかを反応基質とした。 そ
して、これら基質に作用させる酵素として、コマモナス
・アシドヴォランス PAO-N2 の培養上澄液に加え、エス
テラーゼ(100U)〔Pseudomonas sp. 由来：A. Sugihara
et al., Biosci. Biotech.Biochem. 58, 752-755 (199
4)に開示されたもの〕、リパーゼ (7000U)〔Candida cy
lindracea 由来：名糖産業株式会社〕、リパーゼ (11U)
〔Fusariumsp. 由来：Y. Shimada et al., J. Ferment.
Bioeng., 75, 349-352 (1993)に開示されたもの〕、お
よびリパーゼ (500U) 〔Rhizopus arrhizus 由来：Sigm
aChemical社、セントルイス、米国〕を用意した。 そ
して、反応液の最終濃度が0.05Ｍになるように燐酸緩衝
液(pH 7.0)を加えて反応を進行せしめた。 この反応
を、30℃で、３日間進行せしめた後、基質の分解につ
き、実施例２と同一条件にてＧＰＣで分析を行い、その
結果を、下記表16に示した。
【００４９】
【表１６】
【００５０】実施例９：ポリエステル分解能〔ポリエス
テル種依存性〕の検定 0.2 ％のジブチルフタール酸（ＤＢＰ）を含む基本培地
にて、３日間、生育させたコマモナス・アシドヴォラン
ス PAO-N2 の培養液を、9000rpm で、20分間、遠心分離
して得た上澄液あるいは菌体に、 0.5％濃度の(1) PEG4
000 とフタル酸からなるポリエステル、(2) PEG6000 と
フタル酸からなるポリエステル、(3)PEG20000とフタル
酸からなるポリエステル〔商品名：PAOGEN PP-15（第一
工業製薬株式会社）〕、(4) PEG9000-PEG2000-PEG9000
とフタル酸からなるポリエステル〔商品名：PAOGEN EP-
15（第一工業製薬株式会社）〕、および(5) PEG20000と
セバシン酸〔脂肪酸〕からなるポリエステルのいずれか
を加え、反応液の最終濃度が0.05Ｍになるように燐酸緩
衝液(pH 7.0)を加えて反応を進行せしめた。 30℃に
て、３日間反応を進め、その際の基質の分解につき、実
施例２と同一条件にてＧＰＣにて分析を行い、その結果
を、下記表17に示した。
テル種依存性〕の検定 0.2 ％のジブチルフタール酸（ＤＢＰ）を含む基本培地
にて、３日間、生育させたコマモナス・アシドヴォラン
ス PAO-N2 の培養液を、9000rpm で、20分間、遠心分離
して得た上澄液あるいは菌体に、 0.5％濃度の(1) PEG4
000 とフタル酸からなるポリエステル、(2) PEG6000 と
フタル酸からなるポリエステル、(3)PEG20000とフタル
酸からなるポリエステル〔商品名：PAOGEN PP-15（第一
工業製薬株式会社）〕、(4) PEG9000-PEG2000-PEG9000
とフタル酸からなるポリエステル〔商品名：PAOGEN EP-
15（第一工業製薬株式会社）〕、および(5) PEG20000と
セバシン酸〔脂肪酸〕からなるポリエステルのいずれか
を加え、反応液の最終濃度が0.05Ｍになるように燐酸緩
衝液(pH 7.0)を加えて反応を進行せしめた。 30℃に
て、３日間反応を進め、その際の基質の分解につき、実
施例２と同一条件にてＧＰＣにて分析を行い、その結果
を、下記表17に示した。
【００５１】
【表１７】
【００５２】
【発明の効果】本発明により、フタル酸エステル、イソ
フタル酸エステルおよびテレフタル酸エステルを特異的
に分解する上に、分解物たるフタル酸をも資化できる、
コマモナス・アシドヴォランス PAO-N2 ；そして、ＰＥ
Ｇあるいはその誘導体を資化できるスフィンゴモナス P
AO-K1 ならびにスフィンゴモナス PAO-N6 の、各新規微
生物が提供されるのである。
フタル酸エステルおよびテレフタル酸エステルを特異的
に分解する上に、分解物たるフタル酸をも資化できる、
コマモナス・アシドヴォランス PAO-N2 ；そして、ＰＥ
Ｇあるいはその誘導体を資化できるスフィンゴモナス P
AO-K1 ならびにスフィンゴモナス PAO-N6 の、各新規微
生物が提供されるのである。
【００５３】すなわち、本発明によって提供されたこれ
ら新規微生物は、上記したポリエステルやＰＥＧを炭素
源として含む増殖培地にて、それらポリエステルを分解
し、ＰＥＧを資化分解できるのみならず、これらの新規
微生物を混合培養することで、ＰＥＧフタル酸ポリエス
テルを効率よく分解し、かつ分解産物を完全に資化分解
することができるなどの効果を奏する。 また、本願発
明のこれら作用効果を加味すれば、バイオリアクター、
廃水処理、プロテインエンジニアリング等の分野での広
範な応用も、当然期待できるものである。
ら新規微生物は、上記したポリエステルやＰＥＧを炭素
源として含む増殖培地にて、それらポリエステルを分解
し、ＰＥＧを資化分解できるのみならず、これらの新規
微生物を混合培養することで、ＰＥＧフタル酸ポリエス
テルを効率よく分解し、かつ分解産物を完全に資化分解
することができるなどの効果を奏する。 また、本願発
明のこれら作用効果を加味すれば、バイオリアクター、
廃水処理、プロテインエンジニアリング等の分野での広
範な応用も、当然期待できるものである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01） (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C12N 1/20 C08G 63/88 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (13)
- 【請求項１】 脂肪族および芳香族ポリエステルを分解
し、かつフタール酸資化能を有することを特徴とするコ
マモナス・アシドヴォランス。 - 【請求項２】 前記ポリエステルが、フタール酸、イソ
フタール酸、テレフタール酸、およびこれらの組み合わ
せからなるグループから選択されるポリエステルを含む
請求項１に記載のコマモナス・アシドヴォランス。 - 【請求項３】 前記コマモナス・アシドヴォランスが、
以下の菌学的性質、すなわち； 【表１】 【表２】 の菌学的性質を有する請求項１または２に記載のコマモ
ナス・アシドヴォランス。 - 【請求項４】 前記コマモナス・アシドヴォランスが、
コマモナス・アシドヴォランスPAO-N2（PAO-N2: FERM P
-14541）である請求項３に記載のコマモナス・アシドヴ
ォランス。 - 【請求項５】 スフィンゴモナス属に属する新規微生
物、スフィンゴモナスPAO-K1（PAO-K1: FERM P-14542）
であって、 該新規微生物が、平均分子量4,000のポリエチレングリ
コールを資化する能力を有し、かつ以下の菌学的性質、
すなわち； 【表３】 の菌学的性質を有する、ことを特徴とするスフィンゴモ
ナス属に属する新規微生物。 - 【請求項６】 スフィンゴモナス属に属する新規微生
物、スフィンゴモナスPAO-N6（PAO-N6: FERM P-14543）
であって、 該新規微生物が、平均分子量20,000のポリエチレングリ
コールを資化する能力を有し、かつ以下の菌学的性質、
すなわち； 【表４】 の菌学的性質を有する、ことを特徴とするスフィンゴモ
ナス属に属する新規微生物。 - 【請求項７】 ポリエチレングリコールを含む脂肪族お
よび芳香族ポリエステルの分解方法であって、下記工
程、すなわち；脂肪族および芳香族ポリエステルを分解
し、かつフタール酸資化能を有するコマモナス・アシド
ヴォランスと、ポリエチレングリコール資化能を有する
スフィンゴモナス属に属する新規微生物の混合体を調製
し、および脂肪族および芳香族ポリエステルに、前記混
合体を作用させる、 工程を含む、ことを特徴とするポリエチレングリコール
を含む脂肪族および芳香族ポリエステルの分解方法。 - 【請求項８】 前記コマモナス・アシドヴォランスが、
コマモナス・アシドヴォランス PAO-N2（PAO-N2: FERM
P-14541）である請求項７に記載のポリエチレングリコ
ールを含む脂肪族および芳香族ポリエステルの分解方
法。 - 【請求項９】 前記スフィンゴモナス属に属する新規微
生物が、スフィンゴモナス PAO-K1（PAO-K1: FERM P-14
542）である請求項７に記載のポリエチレングリコール
を含む脂肪族および芳香族ポリエステルの分解方法。 - 【請求項１０】 前記スフィンゴモナス属に属する新規
微生物が、スフィンゴモナス PAO-N6（PAO-N6: FERM P-
14543）である請求項７に記載のポリエチレングリコー
ルを含む脂肪族および芳香族ポリエステルの分解方法。 - 【請求項１１】 フタル酸エステルおよび／またはフタ
ル酸の分解方法であって、下記工程、すなわち； フタル酸エステルおよび／またはフタル酸を、脂肪族お
よび芳香族ポリエステルを分解し、かつフタール酸資化
能を有するコマモナス・アシドヴォランスに作用させる
工程を含む、ことを特徴とするフタル酸エステルおよび
／またはフタル酸の分解方法。 - 【請求項１２】 前記コマモナス・アシドヴォランス
が、コマモナス・アシドヴォランス PAO-N2（PAO-N2: F
ERM P-14541）である請求項11に記載のフタル酸エステ
ルまたはフタル酸の分解方法。 - 【請求項１３】 ポリエチレングリコールおよび／また
はポリエチレングリコール誘導体の分解方法であって、
下記工程、すなわち； ポリエチレングリコールおよび／またはポリエチレング
リコール誘導体を、請求項５または６に記載の新規微生
物に作用させる工程を含む、ことを特徴とするポリエチ
レングリコールおよび／またはポリエチレングリコール
誘導体の分解方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28637494A JP2971757B2 (ja) | 1994-11-21 | 1994-11-21 | 新規微生物およびそれを用いたポリエステルの分解方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28637494A JP2971757B2 (ja) | 1994-11-21 | 1994-11-21 | 新規微生物およびそれを用いたポリエステルの分解方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08140666A JPH08140666A (ja) | 1996-06-04 |
| JP2971757B2 true JP2971757B2 (ja) | 1999-11-08 |
Family
ID=17703571
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP28637494A Expired - Fee Related JP2971757B2 (ja) | 1994-11-21 | 1994-11-21 | 新規微生物およびそれを用いたポリエステルの分解方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2971757B2 (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005118693A1 (en) * | 2004-05-25 | 2005-12-15 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Method to accelerate biodegradation of aliphatic-aromatic co-polyesters by enzymatic treatment |
| JP2008199957A (ja) * | 2007-02-20 | 2008-09-04 | Kyoto Institute Of Technology | 芳香族ポリエステル分解細菌およびこれを用いた芳香族ポリエステル分解方法 |
| JP6126935B2 (ja) * | 2013-08-07 | 2017-05-10 | 積水アクアシステム株式会社 | 微生物、並びに、廃水の処理方法 |
| US20240026113A1 (en) * | 2020-12-09 | 2024-01-25 | Innovazione E Sviluppo Sostenibile S.r.l. | Plastic-degrading solution |
-
1994
- 1994-11-21 JP JP28637494A patent/JP2971757B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ｓｙｓｔｅｍ．Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，１６，２２７−２３８（１９９３） |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH08140666A (ja) | 1996-06-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bubpachat et al. | Isolation and role of polylactic acid-degrading bacteria on degrading enzymes productions and PLA biodegradability at mesophilic conditions | |
| Mohapatra et al. | Production of industrial enzymes (amylase, carboxymethylcellulase and protease) by bacteria isolated from marine sedentary organisms | |
| Kay et al. | Chemical and physical changes occurring in polyester polyurethane during biodegradation | |
| EP0571982A1 (en) | Alkaline lipase, method for producing the same, microorganism producing the same and detergent composition containing alkaline lipase | |
| Padmapriya et al. | Production of lipase enzyme from Lactobacillus spp. and its application in the degradation of meat | |
| EP0214761A2 (en) | An enzymatic detergent additive, a detergent, and a washing method | |
| US7560266B2 (en) | Method to enhance biodegradation of sulfonated aliphatic-aromatic co-polyesters by addition of a microbial consortium | |
| Tiago et al. | Metabolic and genetic diversity of mesophilic and thermophilic bacteria isolated from composted municipal sludge on poly-ε-caprolactones | |
| Taskin et al. | Lipase production with free and immobilized cells of cold-adapted yeast Rhodotorula glutinis HL25 | |
| Shovitri et al. | Soil burial method for plastic degradation performed by Pseudomonas PL-01, Bacillus PL-01, and indigenous bacteria | |
| Alhamdani et al. | Isolation and identification of lipase producing bacteria from oil-contaminant soil | |
| JP3036833B2 (ja) | ポリエステルの微生物学的製造 | |
| JP2971757B2 (ja) | 新規微生物およびそれを用いたポリエステルの分解方法 | |
| Shin et al. | Bacillus miscanthi sp. nov., a alkaliphilic bacterium from the rhizosphere of Miscanthus sacchariflorus | |
| Schinner et al. | Extracellular protease-producing psychrotrophic bacteria from high alpine habitats | |
| Ardyati | Screening of keratinolytic fungi for biodegradation agent of keratin from chicken feather waste | |
| JP2002301494A (ja) | 活性汚泥及び排水処理方法 | |
| Zeyneb et al. | Screening and Optimization of Alkaline Protease Production from Bacteria Isolated from Seawater in The North West of Algeria | |
| Yanti et al. | The Potential of Lipolytic Filamentous Fungi Isolated from Landfill Soil as Poly-β-Hydroxybutirate (PHB) Bioplastic Degrader | |
| Sonderkamp et al. | Interactions between bacterial populations during degradation of a lubricant base oil | |
| Scherer | Biological and enzymatic mechanisms of polyester biodegradation by fungi | |
| US7326556B2 (en) | Microorganism capable of degrading aromatic polyester and method of degrading aromatic polyester using the same | |
| Benhoula et al. | Olive mill wastewater biodegradation for bacterial lipase production using a response surface methodology | |
| Yassin et al. | Screening For the Production of Lipase and Its Optimum Conditions from Bacterial Isolates | |
| TWI381051B (zh) | 一種Ｂａｃｉｌｌｕｓ菌屬菌株以及其使用方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |