JP2823358B2 - 免疫抑制性および寛容原性修飾ルイス▲上ｃ▼およびＬａｃＮＡｃ化合物 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 1.発明の分野 本発明はルイス^Ｃ−YRおよびLacNAc−YR類似体、該類
似体を含有する製剤組成物、それらの製造方法およびそ
れらの使用方法に関する。

2.参考文献 以下の文献は、本出願の関連する部分で上付き数字と
して引用されている： １ Horowitz,“The Glycoconjugates",Vols.I−V,Pigm
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203:302−307（1990）． 前記すべての刊行物および特許出願は、各文献や特許
出願が参考のため具体的かつ個々にあたかも完全な形で
引用されているような程度に、本明細書中に完全な形で
引用される。

3.技術の現状 炭水化物および／またはオリゴ糖は、種々の天然のお
よび病原性の糖複合体に存在する^１。とりわけ興味深い
のは、シアリルおよび／またはフコシル残基を含有する
炭水化物およびオリゴ糖である^３。そのようなシリアル
および／またはフコシル炭水化物およびオリゴ糖は、部
分的にはその炭水化物構造および特定のリガンドとの結
合によってもたらされる認識信号の概念に基づく、広範
囲の生物学的現象に関係している多くの生成物中に存在
する。

具体的には、多くのシアリル化およびシアリル化／フ
コシル化オリゴ糖配糖体は、これらがセレクチン（また
はLEC−CAM）^4,5,6,7のリガンドであるという点で、細
胞接着のメディエーターとして提唱されている。ルイス
^Ｘ、ルイス^Ａ、シアリルルイス^Ｘおよびシアリルルイス
^Ａを含有する、Ｉ型またはII型核構造を有する血液型決
定基に関連したシアリル化、フコシル化、およびシアリ
ル化かつフコシル化オリゴ糖構造はまた、抗炎症的免疫
調節性を含む、哺乳類におけるインビボの免疫調節性お
よび寛容原性（tolerogenic）を有することが、イッポ
リート（Ippolito）らによって示されている^2,13。

上記に関し、イッポリート（Ippolito）らによって報
告されたルイス^Ｘおよびシアリルルイス^ＸのDTH抗炎症
的免疫調節性は、シアリルルイス^Ｘ上のシアリル残基の
存在によりルイス^Ｘに比較して抗炎症活性が上昇し、ま
たシアリルルイス^Ｘ上のフコシル基の存在によりシアリ
ルLacNAcの抗炎症活性に比較して抗炎症活性が上昇する
ことを示す。

一方、シアリル基および／またはフコシル基および関
連化合物を含有するオリゴ糖配糖体は、高収率で化学合
成するのは困難である。例えば、シアリルルイス^Ｘおよ
びシアリルルイス^Ａなどの化合物中の、α（２→３）に
対するアノマー特異性を有するαNeu5Ac（２→３）βGa
l二単糖単位の合成は困難であることが知られている。
公知の化学的方法は、最初に、ガラクトースの遺伝糖末
端に適切な脱離基を有するブロック化αNeu5Ac（２→
３）βGal二単糖を生成する多段階合成法を含む^8,9。次
にこの二単糖を適切に保護されたGlcNAc−OR糖配糖体と
反応させ、さらに適切に保護されたＬ−フコース誘導体
と反応させ、これは脱保護後、シアリルルイス^Ｘ糖体
［αNeu5Ac（２→３）βGal（１→４）［αFuc（１→
３）］−βGlcNAc−OR］またはシアリルルイス^Ａ配糖体
［すなわち、αNeu5Ac（２→３）βGal（１→３）−
［αFuc（１→４）］−βGlcNAc−OR］（式中、Ｒは少
なくとも１つの炭素原子を有するアグリコンである）を
与える。

シアリル化およびフコシル化は、シアリルルイス^Ａお
よびシアリルルイス^Ｘのような化合物の化学的／酵素的
全合成^2,9,10の一部として行いうることは公知である
が、そのような方法は、必ずしも容易に入手できない融
和性のあるシアリルトランスフェラーゼおよびフコシル
トランスフェラーゼを必要とする。例えば、βGal（１
→４）βGlcNAc基本骨格（backbone）をシアリル化する
ための文献に開示されたβGal（１→3/4）βGlcNAc α
（２→３）シアリルトランスフェラーゼは、現在ラット
肝から回収される。

いずれにしても、シアリルおよび／またはフコシル化
誘導体を与えるためシアリルおよび／またはフコシル残
基をLacNAc−ORおよびルイス^Ｃ−OR上に包含すること
は、より複雑で費用のかかる合成をもたらす。

発明の概要 本発明の一部は、硫酸塩、リン酸塩またはカルボン酸
塩含有基をガラクトース単位の２、３および／または６
位に有する修飾ルイス^Ｃ−YRおよび修飾LacNAc−YR化合
物は、良好な免疫抑制性および寛容原性を有するという
発見に関する。さらに、３−硫酸塩ルイス^Ｃ−YR化合物
は、シアリルルイス^Ｘ−YRと比較してほぼ同等の免疫抑
制性を有する。この結果は、非修飾ルイス^Ａ−YRおよび
シアリルルイス^Ａ−YRは、ルイス^Ｃ−YRの３−硫酸塩に
比較して免疫抑制性が劣っているため、特に驚くべきこ
とである。加えて、これらの修飾LacNAc−YRおよびルイ
ス^Ｃ−YR化合物は、生理活性を与えるおにガラクトース
上のα（２→３）シアリル残基の形成、またはGlcNAc残
基の３または４位のフコシル残基の形成を必要としな
い。従って生理活性分子の合成は簡素化され、必要なシ
アリル基または必要なフコシル基を含有させる必要はな
い。しかしこの点に関して本明細書中では、ガラクトー
スの２または３位に硫酸塩、リン酸塩または−CHR₁₈COO
H基を有するガラクトースを６位へシアリル基が随時包
含される。

従って本発明は、その１つの構成において、式Ｉまた
はII: （式中、Ｒは水素、糖−OR₁₉、２から７のオリゴ糖単
位を有するオリゴ糖−OR₁₉または少なくとも１つの炭素
原子を有するアゴリコン（R₁₉は水素または少なくとも
１つの炭素原子を有するアグリコンである）よりなる群
から選択され； Ｙは酸素、イオウ、および−NH−よりなる群から選択
され； R₁は水素、−NH₂、−N₃、−NHSO₃H、−NR₅C（Ｏ）
R₄、−Ｎ＝Ｃ（R₅）_２、−NHCH（R₅）_２、−NHR₆、−Ｎ
（R₆）_２、−OH、−OR₆、−Ｓ（Ｏ）R₆、−Ｓ（Ｏ）₂R₆
および硫酸塩（式中、R₄は、水素、炭素原子数１〜４の
アルキル;OR₇（R₇は炭素原子数１から４のアルキル、ま
たは水酸基で置換された炭素原子数２から４のアルキル
である）、および−NR₈R₉（R₈およびR₉は、独立に水素
および炭素原子数１から４個のアルキルよりなる群から
選択される）よりなる群から選択され、 各R₅は水素および炭素原子数１から４のアルキルより
なる群から選択され、 各R₆は炭素原子数１から４のアルキルである）よりな
る群から選択され； R₂は水素、−N₃、−NH₂、−NHSO₃H、−NR₁₁C（Ｏ）R
₁₀、−Ｎ＝Ｃ（R₁₁）_２、−NHCH（R₁₁）_２、−NHR₁₂、
−Ｎ（R₁₂）_２、−OHおよび−OR₁₂ （式中、R₁₀は、水素、炭素原子数１から４のアルキ
ル、−OR₁₃（R₁₃は炭素原子数１から４のアルキル、ま
たは水酸基で置換された炭素原子数２から４のアルキル
である）、および−NR₁₄R₁₅（R₁₄およびR₁₅は、独立に
水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群か
ら選択される）よりなる群から選択され、 各R₁₁は水素および炭素原子数１から４のアルキルよ
りなる群から選択され、 各R₁₂は炭素原子数１から４のアルキルである）より
なる群から選択され； R₃は水素、フルオロ、硫酸塩およびヒドロキシよりな
る群から選択され； X₁は水素、シアリル、硫酸塩、リン酸塩、および−CH
R₁₈COOH（R₁₈は水素、炭素原子数１から７のアルキルお
よび−COOHよりなる群から選択される）よりなる群から
選択され； X₂は水素、硫酸塩、リン酸塩、および−CHR₁₈COOH（R
₁₈は水素、炭素原子数１から７のアルキルおよび−COOH
よりなる群から選択される）よりなる群から選択され
る）の化合物；および 薬剤として許容されるその塩に関する（但し、X₁また
はX₂の少なくとも一方は、硫酸塩、リン酸塩、または−
CHR₁₈COOHであるか、またはR₃は硫酸塩である）。

式ＩおよびIIの化合物は細胞性免疫炎症応答（cell−
mediated immune inflammatory response）の調節に有
用であり、特に抗原に対する細胞性免疫炎症応答に有用
である。

本発明の化合物は特に、感作された哺乳動物の抗原誘
発性炎症の低下に有用である。この点について、抗原刺
激に応答して感作された哺乳動物に式ＩおよびIIの化合
物を投与すると、そのような投与は後の同一抗原の抗原
刺激に対して寛容を引き起こす。好ましくは、上記式Ｉ
またはIIの化合物は、哺乳動物の免疫応答開始後、しか
し哺乳動物の炎症が最大に達するのに要する時間の半分
経過時点またはそれ以前に、投与される。

他の構成面では、本発明は、薬剤として不活性な担
体、および哺乳動物の細胞性免疫炎症応答を調節するの
に有効な量の式ＩまたはIIの化合物の哺乳動物（例え
ば、ヒト）への投与に適した薬剤組成物に関する。

１つの方法面で、本発明は、哺乳動物の免疫応答を調
節するのに有効な量の式ＩまたはIIの化合物を哺乳動物
に投与することからなる、哺乳動物の細胞性免疫炎症応
答を調節する方法に関する。

図面の簡単な説明 図１は、後に修飾ルイス^Ｃ−OR化合物または修飾LacN
Ac化合物のいずれかを調製するために使用される、部分
的にブロックされたＮ−アセチルグルコサミン誘導体合
成の反応概略図を示す。

図２は、後に修飾ルイス^Ｃ−OR化合物または修飾LacN
Ac−OR化合物のいずれかを調製するために使用される、
部分的にブロックされたガラクトース誘導体合成の反応
概略図を示す。

図3Aは、３−硫酸塩化ルイス^Ｃ−OR化合物の一つの調
製法を示す。

図3Bは、６−硫酸塩化ルイス^Ｃ−OR化合物の一つの調
製法を示す。

図４は、差別的にブロックされたβGal（１→３）βG
lcNAc−OR化合物（ルイス^Ｃ−OR）およびその誘導体、
および差別的にブロックされたβGal（１→４）βGlcNA
c−OR（LacNAc−OR）化合物の調製法を示す。

図５は、GlcNAc−ORの６−アジド誘導体の合成を示
す。

図６は、GlcNAc−ORの６−アルコキシ誘導体および６
−デオキシ誘導体の合成を示す。

図７は、アミノ基がＮ−フタルイミド基として保護さ
れた３−ヒドロキシまたは４−ヒドロキシブロック化Gl
cNH₂−ORの調製を示す。

好適な実施態様の詳細な説明 上記に述べたように、本発明の一部は、感作された哺
乳動物の抗原に対する細胞性および免疫指向性炎症応答
（例えば、DTH応答）よりなる細胞性免疫応答の、ヒト
を含む哺乳動物でのインビボの調節（例えば、抑制）に
有用な、新規ルイス^Ｃ−YRおよび新規LacNAc−YR類似体
の発見に関する。

しかし、さらに詳細に本発明を記載する前に、始めに
下記の用語を定義する。

定義 本発明において、下記の用語は、以下に与えられる定
義を有する： 用語「哺乳動物の細胞性免疫応答」は、細胞−細胞相
互作用に介在される哺乳動物の免疫応答を意味する。こ
の用語は、傷害（例えば、凍傷、再潅流傷害（reperfus
ion injury）、成人呼吸窮迫症候群（adult respirator
y distress syndrome）など）により起こる細胞性炎症
応答とともに、DTH応答のような抗原に対する細胞性炎
症応答も含む。好ましくは細胞性免疫応答は白血球介在
性応答である。

用語「抗原」は、哺乳動物に暴露するとその哺乳動物
に免疫応答を誘発する、蛋白、ペプチド、炭水化物、核
酸または他の非内因性物質を意味する。

抗原暴露により引き起こされると考えられる病気は、
例として、乾癬、喘息、皮膚炎、リウマチ様関節炎、遅
延型過敏症、腸炎（inflammatory bowel disease）、多
発性硬化症、ウィルス性肺炎、細菌性肺炎などを含む。

用語「感作された哺乳動物」は、以前にある抗原に暴
露し、従ってその免疫系がその抗原に教育された（educ
ated）哺乳動物のことをいう。典型的には、哺乳動物へ
の初回抗原暴露は、そのような初回暴露中の免疫応答は
最小にして、後の同じ抗原暴露に対する哺乳動物の免疫
応答をプライム（prime）または教育する。

用語「二次免疫応答」は、以前に感作された抗原に対
する哺乳動物の免疫応答のエフェクター相（effector p
hase）を意味する。哺乳動物の二次免疫応答は、典型的
には抗原暴露時点で炎症を伴う。

用語「最大炎症の時間」は、特定の抗原への暴露によ
り、感作された哺乳動物の炎症が最大に達するのに典型
的に要する時間、または細胞性炎症応答（例えば、心筋
梗塞）を誘発する傷害により、感作された哺乳動物の炎
症が最大に達するのに典型的に要する時間のことをい
う。この時間の長さは、いくつかの要因に依存する。例
えば、傷害による炎症では最大炎症時間は、傷害の型お
よび程度のような要因に依存する。抗原に暴露され感作
された哺乳動物では、この時間は、その哺乳動物が暴露
した特定の抗原、抗原に暴露されたその特定の哺乳動物
の種などのような要因に依存する。従って、感作された
哺乳動物の抗原誘発性炎症が最大に達するのに要する時
間の長さは、一例として喘息ではリウマチ様関節炎とは
異なっているであろう。

さらに、最大炎症時間は各哺乳動物種で多少異なって
いるであろうが、ヒトおよび他の哺乳動物での喘息、リ
ウマチ様関節炎、乾癬、DTHなどを引き起こす、異なる
抗原暴露の最大炎症に達する典型的な時間は、当該分野
で公知であるかまたは当業者が容易に確認できる。例え
ば、マウスにおけるDTHの場合、最大炎症は典型的には
抗原暴露の24時間後である 用語「LacNAc」は、二単糖βGal（１→４）βGlcNAc
を意味する。II型血液型決定基の核構造との関連のた
め、LacNAcのβGal（１→４）βGlcNAc構造はしばしばI
I型構造と呼ばれる。

用語「LacNH₂」は、LacNAcのＮ−アセチル基がアミン
（−NH₂）で置換されたLaNAc誘導体をいう。

用語「LacN₃）は、LacNAcのＮ−アセチル基がアジド
（−N₃）で置換されたLacNAc誘導体をいう。

用語「ルイス^Ｃ」（時々「Le^C」という）は、二単糖
βGal（１→３）βGlcNAcをいう。Ｉ型血液型決定基の
核構造との関連のため、ルイス^ＣのβGal（１→３）βG
lcNAc構造はしばしば「Ｉ型構造」と呼ばれる。

用語「修飾ルイス^Ｃ配糖体（ルイス^Ｃ−YR）およびそ
の誘導体」は、ルイス^ＣのガラクトースおよびＮ−アセ
チルグルコサミン糖単位の一方または両方が修飾され、
そして前記で定義された−YR置換基を有する、ルイス^Ｃ
の誘導体をいう。Ｒ置換基がアグリコン基である時、こ
の基は少なくとも１炭素原子を有するが、ただしそのよ
うなアグリコン部分はミセルまたは他の大きな凝集構造
を形成可能な蛋白や脂質ではないため、糖複合体とは異
なる。

用語「修飾LacNAc配糖体（LacNAc−YR）およびその誘
導体」は、LacNAcのガラクトースおよびＮ−アセチルグ
ルコサミン糖単位の一方または両方が修飾され、そして
前記で定義された−YR置換基を有する、LacNAcの誘導体
をいう。Ｒ置換基がアグリコン基である時、この基は少
なくとも１炭素原子を有するが、ただしそのようなアグ
リコン部分はミセルまたは他の大きな凝集構造を形成可
能な蛋白や脂質ではないため、糖複合体とは異なる。

用語「少なくとも１つの炭素原子のアグリコン」は、
少なくとも１つの炭素原子を有する非糖含有残基をい
う。好ましくは、そのアグリコン部分（Ｒ）は、−
（Ａ）−Ｚ（式中、Ａは結合、炭素原子数２から10のア
ルキレン基、および式−（CH₂−CR₂₀G）_ｎ−の部分（式
中、ｎは１から５に等しい整数であり;R₂₀は水素、メチ
ル、またはエチルよりなる群から選択され；そしてＧは
水素、ハロゲン、酸素、イオウ、窒素、フェニルおよび
１から３の置換基（アミン、ヒドロキシル、ハロ、炭素
原子数１から４のアルキルおよび炭素原子数１から４の
アルコキシよりなる群から選択される）で置換されたフ
ェニルよりなる群から選択される）であり、Ｚは水素、
メチル、フェニル、ニトロフェニル、アミノフェニルで
あり、そして、Ｇが酸素、イオウまたは窒素でなく、そ
してＡが結合でない時、はさらに−OH、−SH、−NH₂、
−NHR₂₁、−Ｎ（R₂₁）_２、−Ｃ（Ｏ）OH、−Ｃ（Ｏ）OR
₂₁、−Ｃ（Ｏ）NH−NH₂、−Ｃ（Ｏ）NH₂、−Ｃ（Ｏ）NH
R₂₁、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（R₂₁）_２、および−OR₂₂（式中、R
₂₁は独立に炭素原子数１から４のアルキルであり、R₂₂
は炭素原子数３から10のアルケニル基である）よりなる
群から選択される）よりなる基から選択される。

当該分野で多くのアグリコンが公知である。例えば、
パラ−ニトロフェニル基（すなわち、−YR＝−OC₆H₄pNO
₂）からなるアグリコンは、エクボーグ（Ekborg）ら¹⁸
によって開示されている。合成中の適切な時間に、その
ニトロ基はＮ−トリフルオロアセトアミドとして保護さ
れるアミノ基に還元される。そのトリフルオロアセトア
ミド基は後に脱離でき、そのようにして該アグリコン基
をさらに官能基化するのに使用されるアミノ基を露出す
る。

イオウを含有するアグリコンは、ダーメン（Dahmen）
ら¹⁹によって開示されている。具体的には、該アグリコ
ンは、チオ求核分子との置換反応で、種々の末端官能基
（例えば−OCH₂CH₂SCH₂CO₂CH₃および−OCH₂CH₂SC₆H₄−p
NH₂）を有するアグリコンになることが示された２−ブ
ロモエチル基から誘導される。

ラーナ（Rana）ら²⁰は、トリフルオロアセトアミド保
護基が脱離されて、後に該アグリコン基をさらに官能基
化するのに使用される一級アミノ基を露出する、６−ト
リフルオロアセトアミドヘキシルアグリコン（−Ｏ−
（CH₂）_６−NHCOCF₃）を開示している。

公知アグリコンの他の例には、７−メトキシカルボニ
ル−3,6−ジオキサヘプチルアグリコン²¹（−OCH₂−C
H₂）₂OCH₂CO₂CH₃;2−（４−メトキシカルボニルブタン
カルボキサミド）エチル²²（−OCH₂CH₂NHC（Ｏ）（C
H₂）₄CO₂CH₃）；および適切なモノマーとのラジカル共
重合によって共重合体を生成するアリルアグリコン
²³（−OCH₂CH＝CH₂）がある；他のアリルアグリコン²⁴
は公知である［例えば、−Ｏ（CH₂CH₂O）₂CH₂CH＝C
H₂］。さらに、アリルアグリコンは、２−アミノエタン
チオール²⁵の存在下で、誘導体化されて、アグリコン−
OCH₂CH₂CH₂SCH₂CH₂NH₂を与える。さらに他のアグリコン
は以後本明細書中に記載される。

加えて、ラトクリフ（Ratcliffe）ら^９が示すよう
に、Ｒ基は還元糖末端にアグリコンを含有する追加の糖
−OR₁₉またはオリゴ糖−OR₁₉であってもよい。

好ましくは、アグリコン部分は疎水性基であり、最も
好ましくは、アグリコン部分は−（CH₂）₈COOCH₃、−
（CH₂）₅OCH₂CH＝CH₂および−（CH₂）₈CH₂OHよりなる群
から選択される疎水性基である。

用語「オリゴ糖」は、２から約７の糖単位を有する炭
水化物構造をいう。使用される糖単位は特に決定的では
なく、例としてグルコース、ガラクトース、Ｎ−アセチ
ルグルコサミン、Ｎ−アセチルガラクトサミン、フコー
ス、シアル酸、３−デオキシ−D,L−オクツロソン酸
（３−deoxy−D,L−octulosonic acid）などの全ての天
然および合成誘導体を含む。それらがピラノース型であ
ることに加えて、本明細書中に記載の糖単位は、Ｌ与で
あるフコースを除いて全てＤ型である。

用語「シアル酸」または「シアリル」は、シアル酸お
よびシアル酸類似体の全ての天然に存在する構造を意味
する。シアル酸の天然に存在する構造は、例として５−
アセトアミド−3,5−ジデオキシ−Ｄ−グリセロ−Ｄ−
ガラクトノヌロ−ピラノシロン酸（「Neu5Ac」）、Ｎ」
−グリコイルノイラミン酸（Neu5Gc）および９−Ｏ−ア
セチルノイラミン酸（Neu5,9Ac₂）を含む。シアル酸類
似体は、その中のシアル酸単位がその構造に一つ以上の
官能基を導入および／または脱離するため化学的に修飾
されているものを含む、シアル酸の天然に存在する構造
の類似体のことをいう。例えばそのような修飾は、−OH
官能基の脱離、アミン官能基の導入、ハロ官能基の導入
などを引き起こし得る。

シアル酸のいくつかの類似体は当該分野で公知であ
り、例としてNeu5Acの６−チオ類似体とともに、９−ア
ジド−Neu5Ac、９−アミノ−Neu5Ac、９−デオキシ−Ne
u5Ac、９−フルオロ−Neu5Ac、９−ブロモ−Neu5Ac、７
−デオキシ−Neu5Ac、７−エピ−Neu5Ac、7,8−ビス−
エピ−Neu5Ac、４−Ｏ−メチル−Neu5Ac、４−Ｎ−アセ
チル−Neu5Ac、4,7−ジ−デオキシ−Neu5Ac、４−オキ
ソ−Neu5Acを含む。本明細書中でシアル酸の類似体を記
載するのに使用した命名法は、ロイター（Reuter）ら¹²
に示す方法による。

用語「薬剤として許容される塩」は、当該分野で公知
の、種々の有機および無機の対塩（counter salts）か
ら誘導される、式Ｉまたは式IIの化合物の薬剤として許
容される付加塩を含み、例えばナトリウム、カリウム、
カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアル
キルアンモニウムなどを含む。

置換基−X₁および−X₂を定義するために使用される用
語「硫酸塩」は、ガラクトース単位の水酸基の酸素とと
もに硫酸塩基（すなわち、−Ｏ−Ｓ（Ｏ）_２−OH）を形
成する置換基をいう。従ってX₁またはX₂が硫酸塩である
時、生成する−OX₁および／または−OX₂基は−Ｏ−Ｓ
（Ｏ）_２−OHであり、これはその薬剤として許容される
塩（例えば、−Ｏ−Ｓ（Ｏ）_２−O^-NA⁺）を容易に形成
することができる。

置換基−X₁および−X₂を定義するために使用される用
語「リン酸塩」は、ガラクトース単位の水酸基の酸素と
ともにリン酸塩基（すなわち、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）−（OH）
_２）を形成する置換基をいう。従ってX₁またはX₂がリン
酸塩である時、生成する−OX₁および／または−OX₂基は
−Ｏ−Ｐ（Ｏ）−（OH）_２であり、これはその薬剤とし
て許容される塩（例えば、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）−（O^-Na⁺）
_２）を容易に形成することができる。

用語「脱離可能なブロッキング基」または「ブロッキ
ング基」は、ルイス^Ｃ−YRおよびLacNAc−YR化合物のガ
ラクトースおよび／またはＮ−アセチルグルコサミンの
一つ以上の水酸基に結合するとこれら水酸基に起こる反
応を妨害する任意の基を意味し、その保護基は水酸基を
再構築するため従来の化学的または酵素的方法で脱離で
きる。使用される特定の脱離可能なブロッキング基は、
決定的ではないが、好適な脱離可能なヒドロキシルブロ
ッキング基としては、ベンジル、ベンゾイル、アセチ
ル、クロロアセチル、ベンジリジン、ｔ−ブチルジフェ
ニル−シリルのような従来の置換基、およびヒドロキシ
ル基上に酵素的にまたは化学的に導入でき、後に生成物
の性質と融和性のある穏やかな条件下で酵素的または化
学的方法で選択的に脱離できる任意の基を含む。そのよ
うな企図されるブロッキング基の一つは、α−ガラクト
シダーゼで酵素的に脱離できるα−ガラクトースであ
る。

2.方法 本明細書中に開示される修飾ルイス^Ｃ−YRおよび修飾
LacNAc−YR化合物は、完全な化学的合成により容易に調
製される。

本明細書に添付する図は、修飾ルイス^Ｃ−YRおよび修
飾LacNAc−YR化合物の調製に至る種々の完全な化学的合
成概略図を詳述している。

化学的合成は、完全なオリゴ糖配糖体を調製するため
に；次に化学的にまたは酵素的にオリゴ糖配糖体に結合
できるよう糖単位を化学的に修飾するために；またはそ
こに酵素的に１つまたはそれ以上の糖単位を結合できる
ようオリゴ糖配糖体を化学的に調製するために便利な方
法である。

いくつかのブロックされた中間体の化学的合成が存在
し^16,17,30、そしてこれらの合成経路に適切な修飾を加
えて本発明に使用することができる。当該分野で公知の
方法を利用したこれら中間体または同種の合成は、本明
細書に開示の修飾ルイス^Ｃ−YRおよび修飾LacNAc−YR化
合物の合成を可能にしている。

化学的修飾は、末端ガラクトースの３および／または
６位への硫酸塩基またはリン酸塩基または−OCHR₁₈COOH
の導入；ガラクトースの２位の硫酸塩の導入；そして随
時Ｎ−アセチルグルコサミン単位の２および６位への修
飾の導入および／またはガラクトースの２位へのデオキ
シまたはフルオロ基の導入などを含む。

以下の説明では実施例および図と同様に、還元糖の−
OR基について記載される。しかし、この基は−NHRまた
は−SRでもありうること、その調製法は当該分野で公知
であることは理解される。

2A.単糖の化学的合成 ルイス^Ｃ−YRおよびLacNAc−YRおよびそれらのいくつ
かの類似体の合成のための化学的方法は、当該分野で公
知である。これらの物質は一般に、適切に保護された個
々の単糖中間体を利用して組み立てられる。最終構造へ
の修飾は、完全にブロックされたルイス^Ｃ−YRまたはLa
cNAc−YRの官能基になるべき水酸基の適切な選択的な脱
ブロックの後、公知の方法を用いて硫酸塩化またはリン
酸塩化することにより行われる。

使用される具体的な方法は、一般に個々の合成される
構造に適合され最適化される。一般にこれらの二糖のす
べてまたは一部の化学的合成では、まず還元糖のアノマ
ー炭素原子にグリコシド結合が形成される。具体的に
は、適切に保護された型の天然に存在するかまたは化学
的に修飾された糖構造（グリコシル供与体）は、ハロゲ
ン化物、トリクロロアセトイミド化物、アセチル、チオ
グリコシドなどからなる脱離基を導入するために、還元
単位のアノマー中心で選択的に修飾される。該供与体
は、次に当該分野で公知の触媒条件下で、グリコシド結
合が生成される位置に一つの遊離の水酸基を有するアグ
リコンまらは適切な型の炭水化物受容体と反応させられ
る。多種のアグリコン分子が当該分野で公知であり、還
元単位のアノマー中心に正しい配置で付加できる。炭水
化物合成で当該分野で公知の、融和性のあるブロッキン
グ基の適切な使用は、合成される構造またはさらに追加
の糖単位または糖ブロックの、受容体構造への付加の選
択的修飾を可能にするであろう。

グリコシド結合の形成後、その糖配糖体は、ガラクト
ース単位を結合するために使用されるか、または選択さ
れた位置で化学的に修飾するために使用することができ
る。一般に、天然に存在するかまたは化学的に修飾され
た糖単位の糖配糖体への化学結合は、文献に記載されて
いる確立した化学を利用して行われる。例えば、オカモ
ト（Okamoto）ら³¹、ラトクリフ（Ratcliffe）ら^８、ア
バス（Abbas）ら³²、ポールセン（Paulsen）³³、シュミ
ット（Schmidt）³⁴,フゲヂ（Fugedi）ら³⁵、およびカメ
ヤマ（Kameyama）ら³⁶を参照せよ。

図に関して、図１はブロックされたLacNH₂−OR［βGa
l（１→４）βGlcNH₂−OR］、LacNAc−OR［βGal（１→
４）βGlcNAc−OR］、ルイス^Ｃ−OR［βGal（１→３）
βGlcNAc−OR］、ルイス^Ｃ−NH₂−OR［βGal（１→３）
βGlcNH₂−OR］などの構造の後の調製に有用な、グルコ
サミンおよびＮ−アセチルグルコサミンの多くのブロッ
クされた誘導体の合成を示す。具体的には、図１では塩
酸グルコサミンを当量の無水酢酸ナトリウムを含むジク
ロロエタン中でスラリーにし、そこに無水酢酸を滴加
し、添加終了後溶液を約12−16時間還流し、過アシル化
化合物10（α／βの比約3:1）を調製する。

あるいは、塩酸グルコサミンをまずメタノール中にと
り、次に１当量の金属ナトリウムで処理してHClを中和
する。次に無水フタル酸を反応混合物に急激に加え、し
ばらくしてからトリエチルアミンを加えてフタルイミド
誘導体を調製する。次にこの化合物を単離し、従来技術
を用いて無水酢酸／ピリジンでアセチル化して、アミン
を保護するフタルイミドブロッキング基を有する過アシ
ル化化合物１を調製する。

次に従来技術を用いてアグリコンを作成する。例えば
化合物10は、化合物10のジクロロエタン溶液中で飽和量
の塩酸を直接発泡させることを伴う、公知の化学を用い
て１−α−クロロ化合物２に変換される。この点で、化
合物10を調製するのに使用される溶液は、無水酢酸およ
び酢酸ナトリウムを除去するため水中で冷却され、乾燥
しそして回収した後、この反応に使用できる。該反応は
一般に約４−６日間にわたって進行し、塩酸は周期的に
（例えば、ほぼ１−２日に１回）溶液中へ発泡される。
反応終了後、該溶液を重炭酸ナトリウム水溶液中で約０
−５℃で冷却し、有機層を乾燥し、溶液を除去した後、
生成物を回収して、化合物２を調製する（t.l.c.で１ス
ポット）。

次に化合物２を、当量のシアン化水銀の存在下でモレ
キュラーシーブを含有する無水ジクロロメタン中で、HO
（CH₂）₈COOCH₃との化合物２の反応を伴う公知の化学を
用いて、１−β−（CH₂）₈COOCH₃アグリコンに変換す
る。該反応は、一般に室温で約12から24時間で行われ
る。反応終了後（t.l.c.で確認）、反応溶液をシリカで
濾過し、得られる溶液を該反応溶液を冷水に加えること
によって冷却する。有機層を回収し、ヨウ化カリウム水
溶液（５重量／体積パーセント）で２回洗浄し、次に飽
和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄する。次に得られる有
機溶液を乾燥し、溶媒を除去し、化合物３を調製する。

次に化合物３の３、４および６位の水酸基を、メタノ
ール中ナトリウムメトキシドとの反応によって脱保護
し、Ｎ−アセチルグルコサミン−OR（化合物４）を調製
する。この化合物をC₆H₅CH（OCH₃）_２と、例えば適切な
溶媒中の酸性媒体中で、約40−50℃で約４−６時間反応
させ、4,6−Ｏ−ジ保護ベンジリジン化合物５を調製す
る。次に化合物５を、触媒量の酸（例えば、ｐ−トルエ
ンスルホン酸−−pTSA）の存在下で、適切な溶媒（例え
ば、DMF、ジクロロメタン）中のｐ−メトキシベンジル
トリクロロアセトイミデートと反応させ、ｐ−メトキシ
ベンジル保護３−ヒドロキシ化合物６を調製する。化合
物６をテトラヒドロフラン中のシアノホウ化水素ナトリ
ウムで処理し、次に約０℃でHCl飽和エーテルを滴加し
て化合物７を得る。

あるいは、例えば臭化アリルおよび塩基（例えば、水
酸化バリウム／酸化バリウム）と反応させて、化合物５
を３−水酸基でブロックして化合物８を調製する。化合
物８をテトラヒドロフラン中のシアノホウ化水素ナトリ
ウムで処理し、次に約０℃でHCl飽和エーテルを滴加し
て化合物９を得る。

化合物７および９は、ブロックされたGlcNAc−OR糖の
４位に遊離の水酸基を含有するのみなので、適切にブロ
ックされたガラクトースとの以後の反応により、ブロッ
クされたII型LacNAc−OR構造［βGal（１→４）βGlcNA
c−OR］が形成される 化合物５は、ブロックされたGlcNAc−OR糖の３位に遊
離の水酸基を含有するのみなので、適切にブロックされ
たガラクトースとの以後の反応により、ブロックされた
Ｉ型構造［βGal（１→３）βGlcNAc−OR］が形成され
る。

あるいは、化合物１は、室温で２当量の三フッ化ホウ
素エーテレート（etherate）（BF₃エーテレート）の存
在下で、ジクロロメタン中の当量のｐ−クロロチオフェ
ノールと反応させることによって化合物11に変換でき
る。

さらに別の実施態様では、化合物１は、上記で化合物
２について記載した方法と同様の方法により化合物12
（またはその臭化物類似体）に変換される。

HO（CH₂）₈COOCH₃をアルコール（例えば、エタノー
ル、Ｒ＝−CH₂CH₃）に置き換えることを除いては化合物
３と同様の方法により、アルコールとの反応によって、
化合物12は化合物13に変換される。次に化合物13をナト
リウムメトキシド／メタノールで化合物14に変換し、次
に臭化テトラエチルアンモニウムを含有する還流トルエ
ン中で酸化ビス［トリブチルスズ］と反応させ、続いて
臭化ベンジルと反応させて化合物15に変換する。

化合物15は、ブロックされたGlcNAc−OR糖の３および
４位に遊離の水酸基を含有するため、次の適切にブロッ
クされたガラクトースとの反応により、Ｉ型構造［βGa
l（１→３）βGlcNAc−OR］およびII型構造［βGal（１
→４）βGlcNAc−OR］の両方が形成され、これらはクロ
マトグラフィーなどの従来技術により容易に分離され
る。

ｐ−クロロチオフェノールをエタノール中の0.95当量
の水酸化カリウムと処理し、続いて該溶液を約40−50℃
に加熱し、次に約0.5当量の化合物２を該反応溶液に加
えて調製することにより化合物16が調製される。該反応
は40−50℃で約１−２時間持続し、溶液の冷却により生
成物16が沈殿し、濾過により回収される。

化合物26−31の合成は図２および本明細書の以後の実
施例で記載される。図中、Ｄ−ガラクトースおよび約等
モル量の酢酸ナトリウム（NaOAc）をジクロロエタン（D
CE）中に懸濁し、還流するよう加熱し、その還流溶液
（約80−85℃）に少なくとも５当量の無水酢酸（AcOA
c）を滴加し、そしてその反応系をこの温度で十分な時
間（約16−32時間）維持し化合物26を形成させることに
より、Ｄ−ガラクトース五酢酸26は製造される。この方
法はβ−Ｄ−ガラクトース五酢酸26の収率を最適化し、
従来公知の方法による発熱反応を制御する。

溶液の調製後、生成物は約等モル等のベンジルメルカ
プタン（Ph−CH₂−SH）で処理し、ジクロロメタン中の
約１−３（好ましくは２）当量の三フッ化ホウ素エーテ
レート（BF₃OEt₂）で処理する。該反応条件は決定的で
はないが、該反応は好ましくは約０℃から約30℃で約６
から16時間の間行い、熱メタノールまたは熱イソプロパ
ノールからの結晶化後、55−65％のベンジル2,3,4,6−
テトラ−Ｏ−アセチルβ−Ｄ−チオガラクトピラノシド
（化合物27）を生成する。

ゼンプレン（Zemplen）条件下で脱アセチル化する
と、化合物28が得られる。脱アセチル化反応条件は決定
的ではないが、該反応は一般に室温で約２から15時間の
間行う。脱アセチル化反応終了後（t.l.c.で判定）、溶
液を酸性イオン交換樹脂で中和し、濾過し脱水して乾燥
状態として化合物28を調製する。残渣を熱アセトンから
結晶化し、生成物をジメチルホルムアミドまたはアセト
ニトリルにとり、１から２当量（好ましくは1.4当量）
のベンズアルデヒドジメチルアセタールおよび約0.25か
ら３重量パーセントのｐ−トルエンスルホン酸（化合物
28に基づく）で処理する。該反応条件は決定的ではない
が、好ましくは該反応は室温で行い、一般に約12−24時
間内に終了する。中和後、ベンジル4,6−Ｏ−ベンジリ
デンβ−Ｄ−チオガラクトピラノシド、化合物29を、分
離し熱イソプロパノールから結晶化する。

ベンジル4,6−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−クロロア
セチル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド30は、ベンジ
ル4,6−Ｏ−ベンジリデンβ−Ｄ−チオガラクト−ピラ
ノシド29を含有するジメチルホルムアミド（DMF）溶液
に添加される約１から３（好ましくは２）当量の塩化ク
ロロアセチルを使用してクロロアセチル化することによ
って調製する。塩化クロロアセチルは、DMF溶液を約−4
0℃から約−15℃（好ましくは−25℃）に維持しながら
滴加する。この条件下で、予想外にも、DMFの使用は追
加の塩基の必要なく化合物29の選択的クロロアセチル化
を可能にすることが発見された。反応は一般に約10−24
時間で完了する。

ベンジル4,6−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−クロロア
セチル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド（化合物30）
を、約0.1から約１重量パーセントのジメチルアミノピ
リジン［DMAP］を触媒として塩基（例えば、ピリジン／
塩化メチレン）を含有する適切な溶媒中の少なくとも１
当量（そして好ましくは約２当量）の塩化ベンゾイルで
ベンゾイル化する。該反応条件は決定的ではないが、好
ましくは該反応は約０℃から約30℃で約１から約４時間
（好ましくは室温、２時間）行い、結晶のベンジル4,6
−Ｏ−ベンジリデン２−Ｏ−ベンゾイル−３−Ｏ−クロ
ロアセチル−β−Ｄ−チオ−ガラクトピラノシド（化合
物31）がガラクトースからの全体の収率が約10−20％で
得られる。

この方法の利点は、次の組立の後で、ブロックされた
中間体が簡単に脱ブロックされ、硫酸塩化またはリン酸
塩化により修飾されることである。この物質は結晶であ
り、本方法はクロマトグラフィーを不要にしている。

ブロックされたルイス^Ｃ−YRおよびLacNAc−YRのガラ
クトース部分の硫酸塩およびリン酸塩は、これらの化合
物の合成で化合物32を用いても作ることができる。この
化合物は、化合物29の両方の2,3−水酸基を直接ベンゾ
イル化することにより作られる。しかし脱ブロック後、
ガラクトースの２および３水酸基の両方が硫酸塩化およ
びリン酸塩化に使用でき、選択性は十分でない。選択性
は、例えば硫酸塩化反応を低温（例えば、−50℃）で行
うことによって改善できる。

化合物29は、上記化合物31の調製で述べた方法と同様
の方法で2,3−ジベンゾイル保護化合物32に変換でき
る。この場合、一般に３−５当量の塩化ベンゾイルが使
用される。

化合物31および32は、公知の方法（ノルバーグ（Norb
erg）ら²⁶）で臭素、臭化テトラエチルアンモニウム化
合物を用いて、化合物33および32a（図４に示す）に変
換できる。

あるいは、約５℃で約１−２時間化合物31を80％酢酸
／水に接触させることにより、化合物31は化合物34に変
換できる。次に化合物34をジクロロメタン中の無水酢酸
／ピリジンで処理することによって化合物35に変換す
る。

別の実施態様では、化合物32をシアノホウ化水素ナト
リウムおよび塩化セリウムで処理して、ベンジル−2,3
−Ｏ−ジベンゾイル−４−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−チオ
ガラクトピラノシド（図に示していない）を調製する。
次にこの化合物を６−水酸基でクロロアセチル化する。
ルイス^Ｃ−ORまたはLacNAc−ORのブロックされた構造の
形成後、このクロロアセチル基は選択的に除去でき（上
述のとおり）、次にリン酸塩化または硫酸塩化のどちら
かを行うことにより６−リン酸塩または６−硫酸塩化誘
導体を得る。

2B.ガラクトースの３または６位に硫酸置換を有するＩ
型構造の形成 図3Aは、３−硫酸塩化ルイス^Ｃ−OR化合物の一つの調
製法を示す。具体的には図3Aで、化合物101は、Ｎ−ア
セチルグルコサミン−OR（例えば図１の化合物４）を、
酸性、アセトニトリルまたはジメチルホルムアミド（DM
F）中のC₆H₅CH（OCH₃）_２と約０℃から約50℃で12−48
時間にわたって反応させ、4,6−ジ保護ベンジリジン化
合物101を得ることにより調製される。

約１当量のＮ−ヨードサクシニドを、存在する水を除
去するモレキュラーシーブを含有する塩化メチレン中の
約１当量のトリフルオロメタンルホン酸と化合する。反
応混合物を−50℃に冷却し、次に化合物101を加え、続
いて（化合物101を基準にして）約１から1.1当量の化合
物32を加える。この反応は約−20℃から０℃に約１−３
時間にわって平衡化させる。次に該反応溶液を−50℃に
冷却し、続いてトリエチルアミンを中性pHに達するまで
加える。この溶液をセライト（Celite）で濾過し、飽和
重炭酸ナトリウムおよび水で洗浄する。有機層を乾燥
し、真空除去して、完全に保護された二糖102を得る。

この反応において、化合物32aまたは112を化合物32の
代わりに用いることができる。化合物112は化合物32aの
類似体であるが、化合物32aのベンジリジン保護基の代
わりにガラクトース上に4,6−ｐ−メトキシ−ベジリジ
ン保護基［（CH₃O）₂CH−C₆H₄−ｐ−OCH₃を用いて化合
物28から得る］を有する。

二糖102上のベンゾイル基をゼンプレン（Zemplen）条
件（NaOMe/MeOH）下で除去し、ガラクトースの２、３位
に遊離水酸基を有する二糖103を得る。二糖13を、DMF中
で約−30℃から−50℃で約1.1から1.5当量の三酸化イオ
ウ／ピリジン複合体を用いて硫酸塩化して、３−硫酸塩
化二糖104をピリジニウム塩として得る。この生成物
は、少量の２−硫酸塩および2,3−ジ硫酸塩を含有する
が、クロマトグラフィーで分離できる。硫酸塩化反応の
選択性は、より低温の使用により改善される。あるい
は、化合物103を典型的条件下でクロロアセチル化し
て、２−および３−クロロアセチル保護基の混合物を得
る。この混合物はクロマトグラフィーで分離でき、得ら
れる精製成分は２−または３−硫酸塩化生成物を選択的
に得るのに、または２−リン酸塩化および２−OCHR₁₈CO
OH置換基（以下に検討する）を得るのに使用できるが、
これらは皆、本発明では免疫調節化合物として有用であ
る。

３−硫酸塩化二糖ピリジニウム塩（104）のメタノー
ル溶液を、Na⁺イオン交換樹脂に通して、ナトリウム塩
（105）を得る。化合物105を従来条件で脱ブロックし
て、３−硫酸塩化ルイス^Ｃ−OR誘導体（106（図に示し
ていない））を得る。

差別的に保護されたルイス^Ｃ−OR構造は、化合物５を
化合物31と適切な条件下で化合して調製して、ガラクト
ース単位に３−クロロアセチルブロッキング基および２
−ベンゾイルブロッキング基を有する完全にブロックさ
れたルイス^Ｃ−OR構造を得る。次にこの化合物は、選択
的にガラクトースの３位を脱ブロックでき、上述の方法
で硫酸塩化して、３−硫酸塩化ブロック化構造を得る。
しかしこの生成物の脱保護は、副産物の生成（例えば、
GlcNAcの２−NH₂）を伴うかもしれない。必要なら、こ
れらの副産物をクロマトグラフィーで分離する。

図3Bは、６−硫酸塩化ルイス^Ｃ−OR化合物の一つの調
製法を示す。具体的には化合物107は、化合物28をｐ−
アニズアルデヒドジメチルアセタール（anizaldehyde d
imethylacetal）で、他の点では化合物29の調製法と同
一の条件下で処理することにより、化合物28から調製さ
れる。得られる生成物を化合物32を得るために使用する
条件と同様の条件下でベンゾイル化する。次にこの化合
物を、テトラヒドロフラン中の酸性媒体中でシアノホウ
化水素ナトリウムを用いて開環して遊離４−OH誘導体を
得、次にこれを典型的な条件下でアセチル化して化合物
107を得る。治療化合物107をノルバーグ²⁶（Norberg）
条件を用いて１−α−ブロモ誘導体に変換して、化合物
108を得る。

次に化合物108を、塩化メチレン、炭酸銀（約３当
量）、トリフル酸銀（silver triflate）（約0.1当量）
およびモレキュラーシーブの存在下で、化合物101と化
合する。反応は約０℃から室温で約５から16時間行い、
完全に保護されたルイス^Ｃ−OR誘導体（化合物109）を
得る。ガラクトース単位の６位のｐ−メトキシベンジル
ブロキング基は化合物109を塩化メチレンおよび微量の
水中のジクロロジシアノキノン（DDQ）と接触させるこ
とにより選択的に除去され、化合物110を得る。次に化
合物110をDMF中で約−50℃から０℃で約1.1から1.5当量
の三酸化イオウ／ピリジン複合体を用いてガラクトース
の６位の硫酸塩化し、６−硫酸塩化ブロック化ルイス^Ｃ
−ORをピリジニウム塩として得る。

この硫酸塩化生成物のメタノール溶液を、Na⁺イオン
交換樹脂に通して、ナトリウム塩（化合物111）を調製
し、これを脱ブロックして化合物121を得る。

2C.ガラクトースの３または６位に硫酸塩置換を有するI
I型構造の形成 図４は、３−硫酸塩化LacNAc−OR化合物の調製に有用
な中間体の一つの調製法を示す。具体的には図４では、
化合物７および約1.6−1.7当量の化合物32aをモノレキ
ュラーシーブを含有するジクロロメタンに溶解し、ここ
に約１当量（化合物７に基づいて）の2,6−ジ−ｔ−ブ
チル−４−メチルピリジンを加える。反応物は30分間室
温で撹拌し、次に−50℃に冷却する。ほぼ僅かに過剰
（例えば、約1.2当量）のトリフルオロメタンスルホン
酸銀を含有する無水トルエン溶液を該溶液に加え、２時
間で−15℃まで加温し、その温度でさらに５時間維持す
る。

反応終了後、この反応系から化合物42の粗生成物が調
製される。次にこれを、シリカゲルおよび溶離剤として
トルエン−酢酸エチル（1:1）を用いるカラムクロマト
グラフィーのような、従来技術で精製する。

保護化LacNAc−OR42上のベンゾイル基をゼンプレン
（Zemplen）条件下で除去し、ガラクトースの２、３位
に遊離水酸基を有するLacNAc−OR誘導体を得る。この二
糖をDMF中で約−30℃から−50℃で1.1から1.5当量の三
酸化イオウ／ピリジン複合体を用いて上述の方法で硫酸
塩化、ブロックされた２−ヒドロキシ−３−硫酸塩化La
cNAc−ORをピリジニウム塩として得る。この生成物は、
少量の２−硫酸塩および2,3−ジ硫酸塩物質を含有する
が、クロマトグラフィーで分離できる。硫酸塩化反応の
選択性は、より低温の使用により改善される。

あるいは、該2,3−ジヒドロキシ二糖は、典型的条件
下でクロロアセチル化することができ、２−または３−
クロロアセチル保護基の混合物を与える。この混合物は
クロマトグラフィーで分離でき、得られる精製成分は２
−または３−硫酸塩化生成物を選択的に得るために使用
できる。

３−硫酸塩化LacNAc−ORピリジニウム塩のメタノール
溶液を、Na⁺イオン交換樹脂に通してナトリウム塩を調
製し、これを従来法で脱ブロックして３−硫酸塩化LacN
Ac−OR誘導体を得る。

図４はまた、３−硫酸塩化構造を調製するのに使用で
きる、差別的にブロックされたLacNAc−OR構造を示す。
具体的には化合物７および化合物33を化合して化合物37
を形成する。これは、化合物７および約1.5当量の化合
物33をモレキュラーシーブを含有するジクロロメタンに
溶解し、それに約１当量（化合物７を基準として）の2,
6−ジ−ｔ−ブチル−４−メタンピリジンを加えて行
う。反応物を室温で30秒間撹拌し、次に−50℃まで冷却
する。僅かに過剰（例えば、約1.2当量）のトリフルオ
ロメタンスルホン酸銀を含有する無水トルエン溶液を該
溶液に加え、２時間で−15℃まで加温し、この温度でさ
らに５時間維持する。

この時、モレキュラーシーブをセライト（celite）で
濾過して除き、回収した溶液を飽和重炭酸ナトリウム溶
液を加えて冷却する。次に有機抽出物を水、0.5NのHCl
水溶液、次に再び水で洗浄する。次に有機溶液を乾燥
し、真空で濃縮し、粗生成物（化合物37）を得る。次に
これを、シリカおよび溶離剤としてヘキサン−酢酸エチ
ル（1:1）を用いるカラムクロマトグラフィーのような
従来技術で精製する。

次に化合物37をガラクトースの３位で選択的に脱ブロ
ックし、さらに上述の方法で硫酸塩化し、３−硫酸塩化
ブロック化構造を得る。しかし、この生成物の脱保護
は、副産物の生成（例えば、GlcNAcの２−NH₂）を伴う
かもしれない。必要なら、これらの副産物をクロマトグ
ラフィーで分離する。

LacNAc−ORの６−硫酸塩化誘導体は、この反応では化
合物101の代わりに化合物７または９が使用されること
を除いて、ルイス^Ｃ−ORの６−硫酸塩に関する上述の方
法で調製される。

2D.ガラクトースの３または６位にリン酸塩または−CHR
₁₈COOH置換を有するＩ型およびII型構造の形成 ガラクトース単位上に２、３−または６−水酸基を有
するブロックされたルイス^Ｃ−ORおよびブロックされた
LacNAc−OR化合物（例えば、化合物103）は、ピリジン
中０℃でのジフェニルホスホロ塩素酸および４−ジメチ
ルアミノピリジン（1:1）との反応¹⁶によって、ガラク
トース上の２−、３−、６−リン酸塩基に変換できる。
溶液を0.5時間以上かけて室温まで加温し、15時間撹拌
する。次に得られる化合物を従来法の条件下水素化して
（まず炭素上のPdとEtOH中のH₂とで15時間、次にPtO₂と
EtOH中のH₂とで３時間）、ガラクトースの２、３または
６位のリン酸塩誘導体を得る。脱保護により、ガラクト
ースの２、３、６位にリン酸置換基を有する修飾ルイス
^Ｃ−ORおよびLacNAc−OR化合物を生じ、これらは精製さ
れ、この化合物をナトリウム型のDowex50×８に接触さ
せてジナトリウム塩に変換される。

別の実施態様では、ガラクトース単位上に２、３また
は６−水酸基を有するブロックされたルイス^Ｃ−ORおよ
びブロックされたLacNAc−OR化合物（例えば、化合物10
3）は、まず適切な塩基（例えば、酸化銀、水酸化バリ
ウム、水素化ナトリウム）を加え、次にブロモ酢酸ベン
ジル（BrCH₂COOBn）または他の同様な酢酸塩（例えば、
BrCHR_18′COOBn、式中Ｒ_18′は炭素原子数１から７のア
ルキルまたは−COOBnである）をDMFのような適切な溶媒
中の反応媒体に加えることによって、アルキル化するこ
とができる。反応終了後、ベンジルエステルは、他のベ
ンジル保護基およびベンジリジン保護基を追加的に除去
する従来の水素化技術によって容易に除去される。ナト
リウムメトキシド／メタノールで処理して、ガラクトー
スの２、３、６位に置換される−OCH₂COOH（または−OC
HR₁₈COOH（式中R₁₈は、炭素原子数１から７のアルキル
または−COOHである））を得る。

2E.GlcNAcの２および／または６位の修飾 GlcNAc単位の２、６位は結合前に修飾して、これらの
位置で修飾されているルイス^Ｃ−ORおよびLacNAc−OR構
造が得られ、これらは上述の方法でさらに修飾されて、
硫酸塩化、リン酸塩化または−CHR₁₈COOH誘導体が得ら
れる。いずれにしてもGlcNAc単位の２、６位での官能基
は、一般に将来形成される官能基がさらに企図されてい
る任意の反応を妨害しない合成の時点である。例えば、
モシGlcNAc−ORのR₁官能基がブロックされたガラクトー
スとの結合反応を妨害するならば、該官能基は二糖のレ
ベルで導入するか、または単糖レベルでブロックされ
（例えば、２−アミノ基は従来法でＮ−トリフルオロア
セトアミドまたはＮ−フタルイミド基でブロックされ
る）、後で脱ブロックするかのいずれかである。

i.GlcNAcの２位の修飾 GlcNAcの２位の修飾は、種々の方法で行われる。例え
ば、公知^8,9の２−アジド−２−デオキシ−グルコース
−OR化合物（例えば、4,5,6−トリアセチルグルカルの
アジドニトロ化によって調製）は、従来技術^8,9で６位
を除去可能な保護基（すなわち、Si（C₆H₅）₂tBu）で保
護でき、次に適切なブロックされたガラクトース化合物
と上述の方法で化合させて、ブロックされたβGal（１
→３）GlcN₃−ORおよびβGal（１→４）GlcN₃−OR誘導
体を得る（両者は従来技術で容易に分離される）。

ルイス^Ｃ−ORおよびLacNAc−ORの合成中、適切な時間
に、アジド基は例えばＮ−トリフルオロアセトアミドと
して保護しうるアミノ基に還元される。次に、そのトリ
フルオロアセトアミド基は合成の適切な時点で除去され
て、アミノ基を露出する。

該アミノ基はまた従来法によって誘導体化されて、−
NR₁₁C（Ｏ）R₁₀、−NHSO₃H、−Ｎ＝Ｃ（R₁₁）_２、−NHC
H（R₁₁）_２、−NHR₁₂および−Ｎ（R₁₂）_２基を与える。
例えば、−NH₂基は従来技術を用いて、以下の反応が可
能である： カルボン酸、酸無水物または酸塩化物と反応してアミ
ドを与える。あるいは、目的の酸をイナズ（Inazu）ら
³⁷の報告のように活性化して、次にアミノ基と反応させ
る。このカルボン酸、酸無水物、酸塩化物、または活性
化酸は、水素または炭素原子数１から４のアルキルであ
るR₁₀基（すなわち、−NR₁₁C（Ｏ）R₁₀置換基の一部）
を与えるように選択される； アルデヒドまたはケトン（炭素原子数１から４まで）
と、制御されたpHでイミン［−Ｎ＝Ｃ（R₁₁）_２］を形
成し、これを還元（例えば、シアノホウ化水素ナトリウ
ムで）して、ベルノタス（Bernotas）ら³⁸の報告のよう
にアルキルアミン置換基［すなわち、−NHCH
（R₁₁）_２］を得る； エチレンカーボネートまたはプロピレンカーボネート
の様な環状カーボネートと反応して、これらが該アミン
との反応で開環して、ウォーレンバーグ（Wollenberg）
ら³⁹が合衆国特許4,612,132号に報告したようにHO−ア
ルキレン−OC（Ｏ）NH−置換基（式中、アルキレンは炭
素原子数２から４である）を有するカルバメート基を形
成する； クロロホルメート［すなわち、ClC（Ｏ）OR₁₃］と、
グレイグ（Greig）ら⁴⁰によって開示された方法で反応
する。この場合、該クロロホルメートは炭素原子数１か
ら４のアルキルであるR₁₃基を有する； 活性化中間体を与えるＯ＝Ｃ（Ｃ−C₆H₄−pNO₂）_２と
反応して、これが次にアミン（HNR₁₄R₁₅）と反応して、
ピエカルスカ−バルトスゼウィッチ（Piekarska−Barto
szewicz）ら⁴¹によって記載されたように尿素［−NHC
（Ｏ）NR₁₄R₁₅］を与える； トリメチルアミン、三酸化イオウ（SO₃）と反応し
て、ペティトウ（Petitou）²⁷によって記載されたよう
に−NHSO₃H基を形成する；そして 誘導体化蟻酸または他の物質と反応して、ホルムアミ
ド（−NH−CHO）²⁸を形成し、これはさらに官能基化さ
れてイソシアノ（−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ）となり、水素化トリブ
チルスズ（Bu₃SnH）²⁸でデオキシ誘導体に還元される。

あるいは、該２−デオキシ（R₂＝Ｈ）および２−アル
コキシグルコース誘導体［すなわち、NAcが−Ｈ（デオ
キシ）または−OR₁₂（アルコキシ）で置換されたGlcNAc
の誘導体］は、トルムテツ（Trumtez）ら²⁸によって提
唱されたのと同様な合成概略を用いて調製される。具体
的には、公知のグルコースの3,4,6−トリアシル化1,2−
オルトエステルを従来法の条件下脱アシル化して、グル
コースの1,2−オルトエステルを得る。次にこの化合物
を、従来技術を用いてグルコースの3,4,6−トリベンジ
ル1,2−オルトエステルに変換する。得られる化合物の
1,2−オルトエステルを次に従来技術で開いて、グルコ
ースの１−α−ブロモ−２−アセチル−3,4,6−トリベ
ンジル誘導体のような保護化グリコシル供与体を得る。
次にこの１−α−ブロモ誘導体を従来技術で配糖体（−
OR）に変換し、次に２−アセチル基を除去する。２位
は、例えばまず１当量の塩基の存在下でニ硫化炭素およ
びヨウ化メチルで処理して−Ｃ（Ｓ）SCH₃誘導体を形成
し、続いて水素化トリブチルスズと反応させるような従
来法による２−デオキシの形成が、あるいは２−アルコ
キシの調製が可能である。２−デオキシグルコース配糖
体または２−アルコキシグルコース配糖体を得るために
残りの保護基は除去され、これらは上述のおよび図１に
示した方法でアグリコン形成の必要なく誘導化すること
ができる。

ii.GlcNAcの６位の修飾 図６に示すように、GlcNAc−ORの６−デオキシ誘導体
は、３−ヒドロキシ位が除去可能なベンゾイルブロッキ
ング基（Bz）で保護された公知のベンジリデン環ブロッ
クされた糖（８−メトキシカルボニルオクチル−２−ア
セトアミド−4,6−Ｏ−ベンジルデン−２−デオキシ−
β−Ｄ−グルコピラノシド）²⁹から、ピリジン中で無水
安息香酸と反応させて合成する。この化合物を四塩化炭
素（CCl₄）中で65℃でＮ−ブロモサクシニミドおよび炭
酸バリウムと反応させてさらに変換すると、3,4−ジベ
ンゾイル−６−ブロモ−GlcNAc−OR化合物が生じる。次
にこの化合物は、AIBN（アゾビス−イソブチロニトリ
ル）の存在下で110℃で（C₄H₉）₃SnHと反応させ、次に
メタノール／ナトリウムメトキシドと処理することによ
り3,4−ジベンジル−６−デオキシ−GlcNAc−ORに変換
される。次にこの化合物は従来技術により脱保護されて
６−デオキシGlcNAc−OR配糖体を与えるが、これは上述
のおよび図１に示した方法でアグリコンの形成の必要な
く誘導化することができる。

該GlcNAc−ORの６−アジド誘導体は、図５に記載の方
法で調製される。具体的にはGlcNAc−OR（化合物87）を
（CH₃O）₂CH−C₆H₄−ｐ−OCH₃と反応させてｐ−メトキ
シベンジリジンブロックされた化合物88に変換する。次
にこの化合物を４−CH₃O−RC₆H₄−CH₂Brと反応させて３
−ヒドロキシ位を保護し、Ｘが４−CH₃O−C₆H₄−CH₂−
である化合物89を得る。化合物89は水中で約45℃での酢
酸（AcOH）との反応により４および６位の一部が脱保護
され、化合物90を与える。次に６−メシル化誘導体（化
合物91）は、化合物90をピリジン中の塩化メシル（MsCl
/py）と反応させることにより調製される。６−アジド
誘導体（化合物92）は、ジメチルホルムアミド（DMF）
中でアジ化ナトリウムと反応させて形成され、３−ブロ
ッキング基をジクロロジシアノキノン（DDQ）で除去す
ると化合物93が生じる。

６−メシル化合物91は、公知の化学でアルコキシ置換
基などを含む任意の多くの６−置換体にも誘導体化する
ことができる。

６−アジド化合物92は、上述の方法でルイス^Ｃ−ORま
たはLacNAc−OR類似体の合成の適切な時点で６−アミノ
に誘導体化することができる。次に６−アミノ誘導体
は、従来法でさらに官能基化されて−NR₅C（Ｏ）R₄、−
NHSO₃H、−Ｎ＝Ｃ（R₅）_２、−NHCH（R₅）_２、−NHR₆お
よび−Ｎ（R₆）_２を与える。例えば該−NH₂基は従来技
術を用いて以下のものと反応できる： カルボン酸、酸無水物または酸塩化物と反応してアミ
ドを与える。あるいは、目的を酸をイナズ（Inazu）ら
³⁷の報告のように活性化して、次にアミノ基と反応させ
る。このカルボン酸、酸無水物、酸塩化物、または活性
化酸は、水素または炭素原子数１から４のアルキルであ
るR₄基（すなわち、−NR₅C（Ｏ）R₄置換基の一部）を与
えるように選択される； アルデヒドまたはケトン（炭素原子数１から４まで）
と、制御されたpHでイミン［−Ｎ＝Ｃ（R₅）_２］を形成
し、これを還元（例えば、シアノホウ化水素ナトリウム
で）して、ベルノタス（Bernotas）ら³⁸の報告のように
アルキルアミン置換基［すなわち、−NHCH（R₅）_２］を
得る； エチレンカーボネートまたはプロピレンカーボネート
の様な環状カーボネートと反応して、それらが該アミン
との反応で開環して、ウォーレンバーグ（Wollenberg）
ら³⁹が合衆国特許4,612,132号に報告したようにHO−ア
ルキレン−OC（Ｏ）NH−置換基（式中、アルキレンは炭
素原子数２から４である）を有するカルバメート基を形
成する； クロロホルメート［すなわち、ClC（Ｏ）OR₇］と、グ
レイグ（Greig）ら⁴⁰によって開示された方法で反応す
る。この場合、該クロロホルメートは炭素原子数１から
４のアルキルであるR₇基を有する； 活性化中間体を与えるＯ＝Ｃ（Ｏ−C₆H₄−pNO₂）_２と
反応して、これが次にアミン（NHR₈R₉）と反応して、ピ
エカルスカ−バルトスゼウィッチ（Piekarska−Bartosz
ewicz）ら⁴¹によって記載されたように尿素［−NHC
（Ｏ）NR₈R₉］を与える； pH9.5でトリメチルアミン、三酸化イオウ（SO₃）と反
応し、ペティトウ（Petitou）²⁷によって記載されたよ
うに−NHSO₃H基を形成する；そして 誘導体化蟻酸または他の物質と反応して、ホルムアミ
ド（−NH−CHO）²⁸を形成し、これはさらに官能基化さ
れてイソシアノ（−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ）となり、水素化トリブ
チルスズ（Bu₃SnH）²⁸でデオキシ誘導体に還元される。

GlcNAcの６−アルコキシ誘導体は、図６に記載の方法
で調製できる。具体的にはGlcNAc−OR（化合物87）をア
セトニトリル中の酸性媒体中でC₆H₅CH（OCH₃）_２と反応
させて4,6−ジ保護ベンジリジン化合物94を得る。次
に、化合物94を臭化ベンジル（Bn）および水素化ナトリ
ウムとジメチルホルムアミドの存在下で約０℃で反応さ
せて、３位にベンジル保護基、すなわち化合物95を得
る。化合物95を約80−90℃で酢酸および水と接触させて
４、６位を脱保護して化合物96を得る。化合物96を酸化
ジブチルスズ［（Bu）₂SnO］およびR₆Brと反応させて、
６−アルコキシ化合物97を得る。従来法のパラジウム／
炭素中の水素でのベンジル基の脱保護で化合物98が生成
する。

別の実施態様では、化合物94をピリジン中で［C₆H₅C
（Ｏ）］₂Oと反応させて、３位にベンゾイル保護基（B
z）、すなわち化合物99を得る。化合物99を四塩化炭素
中でＮ−ブロモサクシニミドと反応させると、６−ブロ
モ化合物100が生成する。化合物100をトルエン中水素化
トリブチルスズ［（Bu）₃SnH］と反応させて６−デオキ
シ化合物100bを得るが、これは従来法のメタノール中の
ナトリウムメトキシドでのベンジル基の脱保護の後、６
−デオキシ化合物100cを与える。

６−SR₆化合物は、６−メシル誘導体（化合物91）か
らチオ酢酸カリウム、CH₃C（Ｏ）S^-K⁺と反応させて６位
にチオ酢酸誘導体を与える。次にこの誘導体を穏やかな
塩基で処理して６−SH誘導体を生成させる。６−SHはハ
ロゲン化アルキル（例えば、CH₃Br）と反応して−SR₆誘
導体を与えるが、これは次に、部分的にまたは全部が酸
化されて、６−スルホンまたは６−スルホキシド誘導
体、−Ｓ（Ｏ）R₆および−Ｓ（Ｏ）₂R₆（式中R₆は炭素
原子数１から４のアルキルである）を与える。

図７は、アミノ基がＮ−フタルイミド基として保護さ
れる３−ヒドロキシまたは４−ヒドロキシブロック化Gl
cNH₂−ORの調製を示す。具体的には、図７では化合物13
が上述の方法で調製される。次にこの化合物を従来技術
（ナトリウムメトキシド／メタノール）で脱アセチル化
して化合物14を得、これを従来技術によりベンジリデン
化して化合物66を得る。次に化合物66をジメチルホルム
アミド中で約−20℃から20℃で塩化ベンジルおよび水素
化ナトリウムで処理して化合物67を得る。次に化合物67
のベンジリデン基を80％水性酢酸中で約80℃で約１−４
時間除去して化合物68を得る。次にこの化合物を約−10
℃でジクロロメタン中のほぼ等モル量の塩化アセチル／
ピリジンを用いて、６位を選択的にアセチル化して化合
物69を得る。

化合物69は明らかにLacNH₂誘導体の調製に有用であ
り、一方化合物66がルイス^Ｘ−OR誘導体の調製に有用で
ある。

２−または３−硫酸塩、リン酸塩または−OCHR₁₈COOH
置換LacNAc構造は、以下の実施例に記載の方法と同様の
方法で、公知のβGal（１→４）βGlcNAcα（２→６）
シアリルトランスフェラーゼを使用することにより６−
シアリル誘導体に変換できる。ルイス^Ｃ−ORの６−シア
リル誘導体は、ラトクリフ（Ratcliffe）ら^12,23の方法
と同様の方法で、ブロッキング基を適切に修飾し、ガラ
クトースの２または３位に、後に硫酸塩、リン酸塩また
は−OCHR₁₈COOH基の置換を可能にする許す方法で調製さ
れる。

C.利用 いかなる理論にも限定されることなく、本明細書に開
示の修飾ルイス^Ｃ−YRおよびLacNAc−YR化合物は、多く
の方法で細胞性免疫応答に作用すると考えられる。具体
的にはこれらの化合物は、免疫系が最初に抗原刺激を受
けると同時に投与されると、免疫応答が特定の抗原に関
して教育される能力を阻害することができる。

また、本明細書に開示の修飾ルイス^Ｃ−YRおよびLacN
Ac−YR化合物は、免疫系が同じ抗原に対して二回目また
はそれ以降の抗原刺激を受けた後に投与されると、感作
された哺乳動物の抗原に対する二次免疫応答を阻害する
ことができる。さらに、本明細書に開示の修飾ルイス^Ｃ
−YRおよびLacNAc−YR化合物は、免疫系が抗原に対して
二回目またはそれ以降の抗原刺激を受ける時に投与され
ると、抗原に対する寛容性を誘導することができる。

本明細書に開示の修飾ルイス^Ｃ−YRおよびLacNAc−YR
化合物による二次免疫応答の炎症性構成要素の抑制に
は、哺乳動物の二次免疫応答の開始後ではあるが、抗原
誘発炎症が最大に達するのに要する時間の半分経過時点
またはそれ以前にそのような化合物が投与される必要が
ある。この臨界性は、本明細書と同時に代理人書類番号
000475−045で、発明の名称「抗原刺激により感作され
た哺乳動物の炎症を低減する、Ｉ型またはII型核構造を
有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体の時間依
存性投与」として出願した合衆国特許出願07/988,518号
（この出願は本明細書中にもその全体を参照している）
に開示される。

この実施態様では、修飾ルイス^Ｃ−ORおよびLacNAc−
OR化合物は、好ましくは抗原暴露の少なくとも約0.5時
間後に、さらに好ましくは抗原暴露の少なくとも約１か
ら10時間後に、さらに一層好ましくは抗原暴露の少なく
とも約１から５時間後から投与される。

同様に、傷害により引き起こされる細胞性炎症応答
（例えば、成人呼吸窮迫傷害（肺傷害））では、ルイス
^Ｃ−YRおよびLacNAc−YRの投与も、この傷害に対する免
疫応答の開始後に投与されるが、炎症が最大に達するの
に要する時間の半分経過時点またはそれ以前に投与され
る。

本明細書で開示される修飾ルイス^Ｃ−YRおよびLacNAc
−OR配糖体は、体重当り約0.5mgから約50mg/kgの投与量
範囲で、そして好ましくは体重当り約0.5から5mg/kgの
範囲で投与されると、抗原（例えばDTH応答の炎症成
分）に対する細胞性免疫応答を含む細胞性免疫応答の抑
制、および傷害（例えば、肺傷害）に対する細胞性免疫
応答の抑制に有効である。使用される具体的な投与量
は、治療される特定の細胞性免疫応答によって、また有
害な免疫応答の重症度、患者の年齢および一般症状など
の要因に依存する担当医師の診断に支配される。修飾ル
イス^Ｃ−YRまたはLacNAc−YR類似体は一般に鼻腔内、肺
内、経皮および静脈内などの非経口的投与が行われる
が、他の投与剤型も企図される。

抗原に対する哺乳動物の２次免疫応答を抑制すること
に加えて、本明細書に開示される修飾ルイス^Ｃ−YRおよ
びLacNAc−YR化合物の投与は、その化合物が上述の臨界
的期間に投与されるならば、追加の同一抗原投与に対す
る寛容を与える。この点に関して、修飾ルイス^Ｃ−YRま
たはLacNAc−YR化合物の投与後数週間に同一抗原を再投
与すると、免疫応答は著しく低下する。

本明細書に開示される修飾ルイス^Ｃ−YRおよびLlcNAc
−YR化合物を、抗原に対する初回暴露（すなわち、非感
作哺乳動物）と同時に投与すると、その抗原に対する細
胞性免疫応答が抑制され、および将来その抗原刺激に対
する寛容を与えられる。この点に関し、用語「感作の低
下」は、修飾ルイス^Ｃ−YRまたはLacNAc−YR化合物を、
免疫応答を誘発するのに充分な量の抗原と一緒に哺乳動
物にその有効量を投与すると、修飾ルイス^Ｃ−YRまたは
LacNAc−YR化合物と同時に投与される抗原に対してその
哺乳動物の免疫系が教育され感作される能力を低下させ
ることを意味する。この化合物の「有効量」とは、例え
ばフットパッド（footpad）抗原投与試験で試験されるD
TH応答の様に、抗原に対する細胞性応答の低下によって
測定される、同時に投与される抗原に対するヒトを含む
哺乳動物の感作（免疫的教育）の低下を引き起こす量で
ある。好ましくは感作の低下は少なくとも約20％および
それ以上であり、さらに好ましくは少なくとも約30％お
よびそれ以上である。一般に本明細書に開示された修飾
ルイス^Ｃ−YRおよびLacNAc−YR化合物は、体重当り約0.
5mgから約50mg/kgの投与量範囲で、および好ましくは約
0.5mgから約5mg/kgの投与量範囲で投与される時、感作
を低下するのに有効である。使用される具体的な投与量
は、治療される特定の感作によって、また患者の年齢お
よび一般症状などの要因に依存する担当医師の診断によ
って、支配される。感作の阻止に関して、抗原との化合
物の「同時」投与とは、抗原の投与から３時間以内に１
回またはその間連続的にその化合物が、さらに好ましく
は抗原の１時間以内にその化合物が投与されることを意
味する。

本発明の方法は一般に、有効量のルイス^Ｃ−YRまたは
LacNAc−YR化合物の非経口投与使用に適切な薬剤組成物
を用いて達成される。患者に投与された時これらの化合
物の上述の投与量を与えるように、これら組成物は例え
ば水、緩衝化生理食塩水などの薬剤として不活性な担
体、および有効量の修飾ルイス^Ｃ−YRまたはLacNAc−YR
化合物よりなる。適切な薬剤組成物は、例えば保存剤な
どの成分を随時追加的に含有できる。

また、他の適切な薬剤組成物は、経口組成物、経皮組
成物またはバンデージなどの当該分野で公知の組成物を
含んでよい。

また、これら化合物の混合物も使用することができ
る。

以下の実施例は、本発明を説明するために提供するも
のであり、決して本発明の範囲を限定するものではな
い。他の記載のない限り、温度は全て度摂氏で表す。ま
た、下記に特に定義されない限り、実施例中で使用する
略語は一般に許容される意味を有する： Å＝オングストローム（Angstroms） AB＝ABパターン ax＝軸結合（アキシャル） bs＝広い一重項 BSA＝ウシ血清アルブミン¹³ C−n.m.r.＝C¹³核磁気共鳴 ｄ＝二重項 dd＝二重項の二重項 ddd＝二重項の二重項の二重項 DDQ＝ジクロロジシアノキノン DTH＝遅延型過敏症 eq＝赤道結合（エカトリアル） ｇ＝グラム¹ H−n.m.r.＝プロトン核磁気共鳴 i.r.＝赤外 kg＝キログラム Ｌ＝リットル ｍ＝多重項 mL＝ミリリットル ｑ＝四重項 ｓ＝一重項 ｔ＝三重項 t.l.c.＝薄層クロマトグラフィー Ｕ＝単位 μｍ＝ミクロン AGl×８（蟻酸塩型）＝イオン交換樹脂AGl×８（蟻酸塩
型）、バイオーラッド・ラボラトリーズ（Bio−Rad Lab
oratories）、リッチモンド（Richmond）、カリホルニ
ア州より入手可能。

Dowex 50W×８（H^H型）＝イオン交換樹脂Dowex 50W×８
（H⁺型）、ダウ・ケミカル（Dow Chemical）、ミッドラ
ンド（Midland）、ミシガン州より入手可能。

IR−120（H⁺型）＝アンバーライト樹脂、ローム＆ハー
ス（Rohm ＆ Haas）、フィラデルフィア（Philadelphi
a）、ペンシルバニア州より入手可能。

IR−C50（H⁺型）＝イオン交換樹脂IR−C50（H⁺型）、ロ
ーム＆ハース（Rohm ＆ Haas）、フィラデルフィア（Ph
iladelphia）、ペンシルバニア州より入手可能。

市販の成分は製造業者により、適宜注文番号によりリ
スト化される。いくつかの記載の製造業者は、以下のと
おりである： メルク（Merck）＝イー・メルク（E.Merck AG），ダー
ムスタット（Darmstadt）、ドイツ、 ミリポア（Millipore）＝ミリポア・コーポレーション
（Millipore Corp.）、ベッドフォード（Bedford）、マ
サチュセッツ州、 ウォーターズ（Waters）＝ウォーターズ・アソシエーシ
ョン（Waters Associates Inc.）、ミルフォード（Milf
ord）、マサチュセッツ州。

以下の実施例は２部に分割される。最初のパート（パ
ートＩ）は、記載の化合物の合成方法に関し、次のパー
ト（パートII）は、その生理的結果に関する。

パートＩ 合成方法 実施例１−18は、記載される化合物の合成を示す。

実施例１ ベンジル−２−Ｏ−ベンゾイル−4,6−Ｏ−
ベンジリデン−３−Ｏ−クロロアセチル−β−Ｄ−チオ
ガラクトピラノシド（化合物31）の合成 還流冷却器付の20L撹拌反応器、加熱マントル（mantl
e）および1L添加ロート（addition funnel）を乾燥す
る。この反応器に10Lのジクロロエタンを充填する。反
応器を撹拌し始め、1kgのＤ−ガラクトースおよび500g
の無水酢酸ナトリウムをジクロロエタン中に充填する。
このスラリーを加熱し還流させる。反応器上の1Lの添加
ロートを用いて、4Lの無水酢酸を反応混合物に滴下して
加える。２−４時間の添加時間の間還流を続ける。還流
しながら混合物の撹拌と加熱を一晩続ける。

反応終了（t.l.c.によって決定される）後、反応器の
加熱を止め添加ロートを用いてゆっくり滴下しながら25
0mLの水を加える。この反応は非常に激しいが、水をゆ
っくり添加することで制御される。反応液を１−２時間
撹拌する。50Lの撹拌反応器に30Lの冷水を充填し、撹拌
を開始する。20Lの反応器の内容物を20Lのポリエチレン
バケツにあけ、50Lの反応器中の撹拌されている氷水中
に注ぐ。この混合物を20分間撹拌する。下層の有機層を
20Lのポリエチレンバケツにあける。50Lの反応器中の水
層をさらに5Lの添加ジクロロメタンで抽出する。ジクロ
ロメタン抽出物を最初の有機層と一緒にする。水層をポ
リエチレンバケツにあけ、廃水として廃棄する。

一緒にした有機層を50Lの反応器に戻し、5L部の氷水
で10分間、２回抽出する。有機層を清浄な20Lのポリエ
チレンバケツにあける。水層を捨て、有機層を50L反応
器に戻し、撹拌し、そして1kgの無水硫酸ナトリウムを
加える。１−２時間撹拌し、次に溶液を清浄な20Lのポ
リエチレンバケツにあけ、4Lの真空濾過セット［または
コレクターに接続した大きなブフナー（Buchner）］を
用いて溶液を濾過する。

瀘液を8Lに濃縮し、次に撹拌器、1Lの添加ロートおよ
び冷却浴付の清浄な20Lの反応器に移す。溶液のレベル
が温度調節源（thermowell）より下であれば溶媒添加を
行ってもよい。冷却浴を用いて有機溶液を０℃まで冷却
する。この冷溶液に724gのベンジルメルカプタンを充填
する。1Lの添加ロートを用いて、全量で1.1Lの無色三フ
ッ化ホウ素エーテレートをゆっくり滴下しながら２時間
にわたり添加する。添加終了後反応液を温度を０℃に維
持しながら撹拌する。反応の終了はシリカゲルのt.l.c.
で確認する。［反応は一晩行ってもよい。］ 反応混合物を清浄な20Lのポリエチレンバケツにあけ
る。50Lの反応器に15Lの飽和炭酸ナトリウム溶液を充填
する。ガス放出が過激になりすぎない速度で、静かに撹
拌する炭酸塩溶液に20Lのポリエチレンバケツをゆっく
り移す。溶液を20分間撹拌し、ガス放出が止まった時、
溶液全体に24−36時間空気を吹き込む。有機層を清浄な
20Lのポリエチレンバケツにあけ、ドラフト中で保存す
る。炭酸ナトリウム溶液を３−5Lのジクロロメタンで抽
出し、この溶液を同一の20Lのポリエチレンバケツにあ
ける。

臭いが減少したら、4Lの真空濾過セットを用いて有機
溶液を濾過し、瀘液を20Lのロトバップ（rotovap）で減
圧下で蒸発することができる。7Lのメタノールをロタバ
ップ（rotavap）フラスコに導入し、残渣が温メタノー
ルに溶解するまで、ロタバップ浴で残渣を加熱する。フ
ラスコは回転し冷却させる。氷冷水をロタバップ浴に添
加し、フラスコは数時間ゆっくり回転させる。フラスコ
をロタバップから除去し、4Lの真空濾過セットを用いて
白色の結晶性生成物を濾取する。

ベンジル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−
チオガラクトピラノシド（〜1.3kg）を、撹拌モーター
付の清浄な乾燥した20Lの反応器に充填し、7Lの無水メ
タノールを添加してこの原料を溶解する。溶液を3gの新
たに表面を出させたナトリウムで処理し２時間撹拌す
る。保持されたベンジル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチ
ル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド試料を用いて、8
0:20酢酸エチル：メタノール（v/v）を溶出液としてシ
リカゲルのt.l.c.で、反応を確認する。出発物質がない
ことが反応の終了を示す。

50gの新鮮メタノールで洗浄したH⁺イオン交換樹脂を
添加し、反応液を15分間撹拌する。pH試験紙を用いてpH
を測定し、中性溶液であることを確認される。樹脂を減
圧下で濾過し、20Lのロトバップを用いて減圧下でメタ
ノールを除去する。残渣には、20Lのフラスコに5Lのア
セトンを添加し、溶液を還加温して還流する。残渣は溶
解し、室温まで冷却し、ここで氷を浴に添加し、冷却し
ながら溶液を一晩回転させる。800−900gのベンジルβ
−Ｄ−チオガラクトピラノシドは結晶化し、瀘取され、
真空下で乾燥される。

8Lの無水アセトニトリルに800gのベンジルβ−Ｄ−チ
オガラクトピラノース、600gのベンズアルデヒドジメチ
ルアセタールおよび２−5gのｐ−トルエンスルホン酸を
添加する。溶液を室温で一晩撹拌する。反応の進行はt.
l.c.でチェックする。終了後、トリエチルエミンの添加
により反応物をpH7にする。アセトニトリルの体積は最
小にし、7Lのイソプロパノールを添加し、混合物を還流
温度付近まで加熱する。大部分の生成物は、数時間の加
温後熱イソプロパノールに移行する。混合物を冷却し、
氷を浴に添加し、冷却を一晩続けて沈殿物を生じさせ
る。沈澱物を濾過および乾燥後、760gのベンジル−4,6
−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド
が得られる。

180gのベンジル−4,6−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ−
チオガラクトピラノシドを、無水DMFに溶解し、被覆反
応器に入れた。−25℃に維持した再循環冷却浴を用いて
反応器を冷却し、反応混合物を撹拌しながら108gの塩化
クロロアセチルで３時間にわたり滴下して処理した。こ
の温度で撹拌を24時間続けて、次に反応物を体積が数倍
の冷重炭酸溶液の中へ入れて冷却した。生成物を塩化メ
チレン中に抽出し、水で数回洗浄し、硫酸ナトリウム上
で乾燥し、蒸発乾固した。生成物をイソプロパノールか
ら結晶化した。収率:125gのベンジル4,6−Ｏ−ベンジリ
デン−３−Ｏ−クロロアセチル−β−Ｄ−チオガラクト
ピラノシド。

３当量の塩化ベンゾイルおよび触媒量のジメチルアミ
ノピリジンを用いて、塩化メチレン／ピリジン中で5gの
ベンジル4,6−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−クロロアセ
チル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシドを室温でベンゾ
イル化した。溶液は冷重炭酸ナトリウム溶液の中へ入れ
て冷却し、有機層は飽和硫酸銅溶液で洗浄しピリジンを
除去し、ピリジンを除去して、有機層を蒸発させた。残
渣を熱プロパノール中に分取して、ベンジル4,6−Ｏ−
ベンジリデン−２−Ｏ−ベンゾイル−３−Ｏ−クロロア
セチル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシドを溶液から結
晶化する。¹H−n.m.r.（CDCl₃）：δ＝7.96、7.4（2m,1
5H,芳香族）、5.79（t,1H,H−２）、5.5（s,1H,CH）、
5.2（q,1H,H−4,J_2,39.9Hz,J_3,43.3Hz）、4.5（m,2
H）、4.4（d,1H）、3.99（m,5H）、3.55（s,1H）。

実施例 臭化4,6−Ｏ−ベンジリデン−2,3−ジ−Ｏ−ベ
ンゾイル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（化合物32A）
の合成 ベンジル−4,6−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ−チオガ
ラクトピロノシド（10g）を100mLのジクロロメタンに溶
解し、6.35gのピリジンを添加した。この溶液に9gの塩
化ベンゾイルを滴下して添加し、１時間後この溶液に50
mgのジメチルアミノピリジンを添加し、混合物をさらに
２−４時間撹拌した。反応の進行はシリカゲルのt.l.c.
によって確認した。この反応混合物を飽和重炭酸ナトリ
ウム溶液の中へ入れて冷却し、有機抽出物を水、５％の
硫酸銅溶液、水で洗浄し、乾燥し溶媒を蒸発させて、ベ
ンジル4,6−Ｏ−ベンジリデン−2,3−ジ−Ｏ−ベンゾイ
ル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド（化合物32）を単
離した。残渣をイソプロパノールから結晶化して、10.7
gの化合物32を得た。

化合物32（ベンジル−4,6−Ｏ−ベンジリデン−2,3−
ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシ
ド）（9.89g）を、100mLのジクロロメタンに溶解し、０
℃に冷却し、10mLのジクロロメタン中の臭素（2.85g）
の溶液で処理した。15分後、1.8gの臭化テトラエチルア
ンモニウムを混合物に添加し、混合物を室温で２−３時
間撹拌した（続いてシリカゲルのt.l.c.を行った）。過
剰の臭素を消滅させるため少量のシクロヘキサンを添加
し、反応混合物を冷飽和重炭酸ナトリウム溶液の中に入
れて冷却し、水で洗浄し、乾燥し、溶液の体積を30mLに
低下させた。化合物32aのこのジクロロメタン溶液は、
それ以上の単離および／または精製なしに化合物42の合
成に直接使用した。

実施例３ ８−メトキシカルボニルオクチル−２−アセ
トアミド−4,6−ジ−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ
−β−Ｄ−グルコピラノシド（化合物５）の合成 20Lのガラス反応器に8Lのジクロロエタン、1Lの無水
酢酸および1kgの無水酢酸ナトリウムを充填した。この
撹拌混合物に1kgの塩酸グルコサミンを添加し、この混
合物を還流した。さらに3.5Lの無水酢酸をこの還流溶液
に３−４時間にわたり滴下して添加し、溶液を還流を36
時間続けた。還流の最後の１時間に200mLの水を滴下し
て溶液へ添加した。次に反応物を冷却し、50Lの撹拌反
応器中の35Lの氷水に添加した。有機層を除去し、次に
追加の20Lの水で２回水洗した。有機層は無水硫酸ナト
リウム上で乾燥し、濾過し、２時間無水気体HClで飽和
した。反応物は１日おきに１時間６日間かけてHCl飽和
させた。塩化２−アセトアミド−２−デオキシ−3,4,6
−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシルを、
氷冷重炭酸ナトリウム溶液の中へ入れて冷却して単離し
た。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し褐色固体になる
まで蒸発させた。

400グラムの塩化２−アセトアミド−２−デオキシ−
3,4,6−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシ
ルを、200gの活性モレキュラーシーブを含有する2Lの無
水ジクロロメタンに溶解した。266gの８−メトキシカル
ボニルオクタノールを、317gのシアン化水銀と一緒に反
応混合物に充填した。溶液は室温で24時間急激に撹拌し
た。t.l.c.による反応終了の確認後反応混合物をシリカ
のブフナーロートで濾過し、有機層を水で２回、５％の
ヨー化カリウム溶液で２回、および重炭酸ナトリウムの
飽和溶液で２回洗浄した。溶液を、硫酸ナトリウム上で
乾燥し、乾燥するまで蒸発させた。ざ咲を無水メタノー
ルに分取し、1gの新鮮ナトリウム断片で処理し、次に室
温で一晩撹拌した。８−メトキシカルボニルオクチル２
−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノ
シド溶液を、酸性イオン交換樹脂で中和し、濾過し、蒸
発乾固させて、イソプロパノール／ジイソプロルエーテ
ルから結晶化して218gの生成物を得た。

200グラムの８−メトキシカルボニルオクチル２−ア
セトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド
を、1.2Lの無水ジメチルホルムアミドに溶解し、169mL
のジメトキシトルエン（ベンジルアルデヒドジメチルア
セタール）および１−2gのｐ−トルエンスルホン酸で処
理した。反応物を５時間撹拌し40℃まで加熱し、次にt.
l.c.によって終了を確認した。反応の終了が明らかにな
ったら、混合物はトリエチルアミンで中和し、数倍の体
積の氷水の中へ入れて冷却し、ジクロロメタン中に抽出
し、水で数回逆流洗浄（backwash）した。有機層を硫酸
ナトリウム上で乾燥し、乾燥するまで蒸発乾固し、熱イ
ソプロパノールに分取した。冷却後、８−メトキシカル
ボニルオクチル−２−アセトアミド−4,6−Ｏ−ベンジ
リデン−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシドが沈
殿する。これを濾過し、乾燥して106gの生成物を得る。
¹H−n.m.r.（CDCl₃）：δ＝7.41（m,5H,芳香族）、6.11
（d,1H,NH）、5.5（s,1H,CH）、4.63（d,1H,H−1,J
_1,27.4Hz）、2.29（t,2H）、1.99（s,3H,Ac）、1.58
（m,4H）、1.29（bs,8H）。

実施例４ ８−メトキシカルボニルオクチル−２−アセ
トアミド−３−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル−4,6−Ｏ−
ベンジリデン−β−Ｄ−グルコラノシド（化合物６）の
合成 無水ジクロロメタン（100mL）中の化合物５（17.5g、
〜3mmol）および触媒量のｐ−トルエンスルホン酸（化
合物５に基づいて0.25から３重量パーセント）の撹拌溶
液に、ｐ−メトキシベンジルトリクロロアセトイミド
（25mL CH₂Cl₂中に10g）の溶液を滴下して添加する。
反応混合物を室温で一晩撹拌する。トリエチルアミンを
加えて反応を停止し、有機層を重炭酸ナトリウム溶液で
洗浄し、有機層を乾燥し蒸発乾固させた。熱エタノール
中で結晶化して20gの目的の生成物を得た。¹H−n.m.r.
（CDCl₃）：δ＝7.56−6.90（m,9H,芳香族）、5.60（d,
1H,NH）、5.30（s,1H,PhCH）、4.94（d,1H,J_1,28.0Hz,H
−１）、3.80（s,3H,CH₃）、3.60（s,3H,CH₃Ph）、2.30
（t,2H,CH₂CO）、1.90（s,3H,AcNH）、1.80−1.10（m,1
2H,（CH₂）_６）。

実施例５ ８−メトキシカルボニルオクチル２−アセト
アミド−２−デオキシ−３−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル
−６−Ｏ−ベンジル−２−β−Ｄ−グルコピラノシド
（化合物７）の合成 200mLの無水THF中の化合物６（15.0g、〜3mmol）の撹
拌溶液に、11.0gのシアノホウ化水素ナトリウム、10gの
モレキュラーシーブ４Åおよび5mgのメチルオレンジを
添加した。溶液を−10℃まで冷却し、次にエーテル含有
の塩化水素酸を溶液が酸性になるまで滴下して添加し
た。反応終了時これをジクロロメタン（200mL）で希釈
し、セライトで濾過し、重炭酸ナトリウム水溶液（２×
100mL）および水（２×100mL）て逐次洗浄し、次に溶媒
を乾燥しシロップ状になるまで蒸発させた。シリカゲル
を吸着剤として用いるクロマトグラフィーでヘキサン：
酢酸エチル：エタノール（20:10:1）で溶離して、混合
物を精製して、７が収率70％で得られた。¹H−n.m.r.
（CDCl₃）：δ＝7.40−6.90（m,9H,芳香族）、5.70（d,
1H,NH）、4.64（d,1H,J_1,28.0Hz,H−１）、3.86（s,3H,
CH₃O）、3.68（s,3H,CH₃OPh）、2.30（t,2H,CH₂CO）、
1.90（s,3H,NHAc）、1.80−1.10（m,12H,（CH₂）_６）。

実施例６ ８−メトキシカルボニルオクチル２−アセト
アミド−２−デオキシ−３−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル
−４−Ｏ−（4,6−Ｏ−ベンジリデン−2,3−Ｏ−ジベン
ゾイル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−６−Ｏ−ベン
ジル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（化合
物42）の合成 250Lのジクロロメタン中の化合物７（10.61g、19.7mm
ol）および化合物32A（化合物７に基づき1.6−1.7当
量）および2,6−ジ−ｔ−ブチル−４−メチルピリジン
（3.11g、15.2mmol）の溶液および40gのモレキュラーシ
ーブ（４Å）を室温で30分間撹拌し、次に窒素下で−50
℃まで冷却した。トルエン（40mL）中のトリフル酸銀
（4.47g、17.3mmol）の無水溶液を撹拌混合物に添加し
た。混合物は２時間の間に−15℃まで加温し、さらに５
時間−15℃に保存した。最後に混合物を室温まで加温
し、一晩撹拌した。3mLのピリジンおよび250mLのジクロ
ロメタンを混合物に添加し、セライト上で濾過し、瀘液
は飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（0.5N、200mL）で、
次に水（200mL）で洗浄し、真空で濃縮した。6.0gの化
合物８は白色結晶として、酢酸エチル−ジエチルエーテ
ル−ヘキサンから結晶化した。母液は濃縮し、クロマト
グラフィー（300gシリカゲル、トルエン：酢酸エチル
（1:1））で精製し、4.5gの純粋な化合物42を得た。全
収量は、10.5g（68％）であった。Rf0.48（メタノー
ル；ジクロロメタン、4:96）。¹H−n.m.r.（CDCl₃）：
δ5.80（t,1H,J_２′,3′11.0Hz,H−２′）、5.52（s,1
H,CHPh）、5.25（dd,1H,J_3,44.0Hz,H−３′）、4.88
（d,1H,J_１′,2′11.0Hz,H−１′）、4.70（d,1H,J
_1,29.0Hz,H−１）、3.78（s,2H,CH₃O）、3.64（s,3H,CH
₃OPh）。

実施例７ 臭化２−Ｏ−ベンゾイル−4,6−Ｏ−ベンジ
リデン−３−Ｏ−クロロアセチル−α−Ｄ−ガラクトピ
ラノシル（化合物33）の合成 化合物32（ベンジル4,6−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ
−ベンゾイル−３−クロロアセチル−β−Ｄ−チオガラ
クトピラノシド）（8.87g）を100mLのジクロロメタンに
溶解し、０℃に冷却し、10mLのジクロロメタン中の臭素
（2.7g）溶液で処理した。15分後、1.7gの臭化テトラエ
チルアンモニウムを混合物に添加し、混合物を２から３
時間室温で撹拌した（続いてシリカゲルのt.l.c.を行っ
た）。少量のヘキサンを過剰の臭素を消滅するため添加
し、反応混合物を冷飽和重炭酸ナトリウム溶液の中へ入
れて冷却し、水で洗浄し、乾燥し、溶液の体積を30mLに
低下させて化合物33のジクロロメタン溶液を得た。この
溶液を化合物37の合成に直接使用した。

実施例８ ８−メトキシカルボニルオクチル２−アセト
アミド−４−Ｏ−（２′−Ｏ−ベンゾイル−４′,6′−
Ｏ−ベンジリデン−３′−Ｏ−クロロアセチル−β−Ｄ
−ガラクトピラノシル）−６−Ｏ−ベンジル−２−デオ
キシ−３−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル−β−Ｄ−グルコ
−ピラノシド（化合物37）の合成 50mLのジクロロメタン中の化合物７（5.0g、0.9mmo
l）および化合物33（1.4から1.5当量−実施例７より）
および2,6−ジ−ｔ−ブチル−４−メチルピリジン（1.7
8g、1.0mmol）の溶液およびモレキュラーシーブ（４
Å）を、室温で30分間撹拌し、次に窒素下で−50℃まで
冷却した。トルエン中の無水トリフル酸銀（3.3g、1.5m
L）溶液を撹拌混合物に添加した。混合物を２時間にわ
たって−15℃まで加温し、さらに５時間−15℃に保持
し、次に室温まで加温し、一晩撹拌した。1mLのピリジ
ンおよび100mLのジクロロメタンを混合物に添加し、セ
ライト上で濾過し、瀘液を重炭酸ナトリウム水溶液（10
0mL）で、次に水（100mL）で、さらに塩酸（0.5N、100m
L）および水（100mL）で洗浄し、真空で濃縮した。シリ
カゲルを吸着剤としてヘキサン：酢酸エチル（1:1）で
溶離するカラムクロマトグラフィーで粗混合物を精製
し、5.2gの純粋な化合物37を得た。¹H−n.m.r.（CDC
l₃）：δ 5.85（d,1h,NH）、5.62（t,1H,J_２′,3′10.
8Hz,H−２′）、5.52（s,1H−CH−ベンジリデン）、5.0
8（dd,1H,J_３′,4′4Hz,H−３′）、4.85（d,1H,J
_１′,2′11.0Hz,H−１′）、4.68（d,1H,J_1,29.0Hz,H−
１）、3.72および3.64（2s,6H,OCＨ _３およびCOOＣH₃）;
¹³C−n.m.r.:159.0（芳香族 ｃ−ｐ−メトキシル）、1
65.15（ｃ＝0,クロロアセチル）、167.12（ｃ−0,アセ
チル）、174.2（ｃ＝0,ＣOOCH3）、99.64（ｃ−１）、1
00.26（ｃ−１′）、101.0（PhCＨ）。

実施例９ ２−デオキシ−２−フタルイミド−1,3,4,6
−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
（化合物１）の合成 塩素（Ｄ＋）グルコサミン（100g、0.46mmol）を、メ
タノール（0.5L）中の等モル量の金属ナトリウムから調
製した、メタノール中のナトリウムメトキシドの溶液に
添加した。得られる混合物を、等モル当量の無水フタル
酸およびトリエチルアミン（80mL）で処理した。次に混
合物を２時間撹拌し、濾過し、固形分を真空で12時間乾
燥した。乾燥固形分をピリジン（300mL）に溶解し、無
水酢酸（200mL、2.1mol）で処理した。混合物を室温で4
8時間撹拌し、次に氷水混合物の中に入れて冷却し、得
られる沈殿物を濾過し、濃縮し、ジエチルエーテルから
結晶化して、98.3g（45％）の標題の化合物を得た。¹H
−n.m.r.（CDCl₃）：δ 7.75（m,4h,芳香族）、6.45
（d,1H,H−1,J_1,29.0Hz）、5.85（t,1H）、5.15（t,1
H）、4.4（t,1H）、4.3（q,1H）、4.1（q,1H）、4.00
（m,1H）、2.05、2.00、1.95、1.80（4s,12H,4Ac）。¹³
C−n.m.r.（CDCl₃）δ 89.7（Ｃ−１）、72.6、70.5、
68.3（3C,C−3,C−4,C−５）、61.45（Ｃ−６）、53.42
（Ｃ−２） 実施例10 臭化２−デオキシ−２−フタルアミド−3,4,
6−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル
（化合物12）の合成 ２−デオキシ−２−フタルアミド−1,3,4,6−テトラ
−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド １（20
g、41.9mmol）を、酢酸（30％、200mL）中の臭化水素溶
液で処理し、室温で２時間撹拌した。次に混合物を氷水
混合物中に注ぎ、ジクロロメタンで抽出した。抽出物を
NaHCO₃溶液および水で洗浄し、続いてMgSO₄で乾燥し
た。混合物を濾過し、乾燥し、真空で濃縮して化合物12
をドライシロップ（化合物12）として得た。

実施例11 エチル２−デオキシ−２−フタルイミド−3,
4,6−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
（化合物13）の合成 実施例16からの臭化２−デオキシ−２−フタルイミド
−3,4,6−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ
シル（化合物12）を無水エタノール中に分取し、無水エ
タノール（200mL）、シアン化水銀（13.7g、55mmol）で
直接処理し、室温で48時間撹拌した。次に混合物を濾過
し濃縮した。残渣を200mLのジクロロメタン中に分取し
て10％ヨウ化カリウムの溶液、５％重炭酸ナトリウム、
水で洗浄し、MgSO₄で乾燥し、濃縮しシロップにした。

実施例12 エチル２−デオキシ−２−フタルイミド−β
−Ｄ−グルコピラノシド（化合物14）の合成 実施例17からのエチル２−デオキシ−２−フタルアミ
ド−3,4,6−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド（化合物13）を、100mLの無水メタノール中に分
取し、100mgのナトリウム金属で処理した。溶液を室温
で24時間撹拌し、次にアンダーライト［Ｒ−120（Ｈ
＋）］樹脂で中和し、濾過し、蒸発乾固した。この化合
物を化合物15および化合物66の調製に使用した。

実施例13 エチル２−デオキシ−２−フタルイミド−６
−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシド（化合物1
5）の合成 化合物14（2.1g、6.23mmol）を100mLのトルエン中に
分取した。ここに酸化ビス（トリブチルスズ）（2.22m
L、4.35mmol）および臭化テトラブチルアンモニウム
（0.983g、3.05mmol）を加えた。混合物を150℃で４時
間加熱し、次にトルエン（50mL）を混合物から蒸留して
除去した。反応混合物を室温まで冷却し、臭化ベンジル
（2.17mL、18.27mmol）を添加し、反応物を36時間110℃
に加熱した。トルエンを蒸発し、残渣を酢酸エチル（22
mL）に分取し、重炭酸ナトリウム水溶液、飽和塩化ナト
リウム溶液および水で逐次洗浄した。有機層を乾燥し、
蒸発乾固して、粗固形分を得た。シリカゲルのカラムク
ロマトグラフィーにより精製し、結晶性固体15（1.4g、
70％）を得た。¹H−n.m.r.（CDCl₃）：δ 7.3−8.1（9
H,芳香族）、4.5（dd,2H,CＨ ₂Ph）、5.18（d,1H,J_1,21
0.0Hz,H−１）、4.36（dd,1H,H−３）、4.25（dd,H,J
_2,110.0Hz,J_2,38.0Hz,H−２）および1.0（t,3H,CH₃）。

実施例14 エチル２−アセトアミド−６−Ｏ−アセチル
−３−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピ
ラノシドの合成 酢酸水溶液（80％、150mL）中の化合物90（以下に記
載する−2g、4.68mmol）の溶液を80℃で２時間加熱し
た。次に混合物を蒸発し、得られる固形分をP₂O₅上、高
真空で乾燥した。乾燥固体を塩化アセチル（0.33mL、4.
7mmol）およびジクロロメタン（100mL）中のピリジン
（10mL）で10℃から５℃で選択的にアセチル化した。次
に混合物をジクロロメタン（50mL）で希釈し、NaHCO₃水
溶液で洗浄し、MgSO₄上で乾燥し、蒸発させた。残渣をE
ToAc:ヘキサン、3:1（v:v）を溶出液として用いてシリ
カゲルカラムでクロマトグラフィーし、0.82g（46％）
の標題の化合物を得た:¹H−n.m.r.（300MHz、CDCl₃）：
δ7.3（m,5H,芳香族）、5.67（bs,1H,NH）、4.86（d,1
H,H−１）、4.75（m,2H）、4.48（q,1H）、4.27（d,1
H）、4.1（t,1H）、3.85（m,1H）、3.5（m,3H）、3.16
（m,1H）、2.70（bs,1H,OH）、2.1（s,3H,Ac）、1.9
（s,3H,Ac）、1.18（t,3H,CH₃）、¹³C−n.m.r.（CDC
l₃）：δ99.45（Ｃ−１）、79.85、74.5（CH₂ph）、73.
7、71.09、65.25（Ｃ−６）、63.36（CH₂−）、57.7
（Ｃ−２）、23.6（Ac）、20.86（Ac）、15.06（C
H₃）。

実施例15 エチル６−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−ベンジル
−２−デオキシ−２−フタルイミド−β−Ｄ−グルコピ
ラノシド（化合物69）の合成 実施例12からのエチル２−デオキシ−２−フタルイミ
ド−β−Ｄ−グルコピラノシド（化合物14）を、無水ア
セトニトリル（100mL）に分取し、ベンズアルデヒドジ
メチルアセタール（9.6g）および触媒量のｐ−トルエン
スルホン酸（100mg）で処理した。混合物を室温で17時
間撹拌し、次にトリエチルアミンでpH7に中和した。混
合物を蒸発し、熱ヘキサンから結晶化して12.7gのエチ
ル4,6−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ−２−フタル
イミド−β−Ｄ−グルコピラノシド化合物66を得た。

化合物66（10g）を無水ジメチルホルムアミド（DMF）
に−５℃で溶解し、1.1g（46.6mmol）の水素化ナトリウ
ムおよび臭化ベンジル（5.46mL、22mmol）で処理した。
混合物を０℃で２時間撹拌し、次に20mLのメタノールで
ゆっくり処理し、次にゆっくり室温にしHCl（1N）で処
理してpH7にし、ジクロロメタンで３回抽出した。有機
層を無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、次に濾過し、乾
燥して濃縮し、熱エタノールに分取して7.2gの化合物67
を得た。酢酸水溶液（80％、200mL）中の化合物67（5.4
3g、10.50mmol）を80℃で２時間加熱した。混合物を蒸
発し、得られる固体をP₂O₅上で高真空で乾燥した。乾燥
固体を塩化アセチル（0.8mL、11.0mmol）およびジクロ
ロメタン（200mL）中のピリジン（10mL）で−10℃から
０℃で選択的にアセチル化した。次に混合物をジクロロ
メタン（10mL）で希釈し、NaHCO₃水溶液で洗浄し、MgSO
₄上で乾燥し、蒸発させた。残渣をEtOAc:ヘキサン、1:2
（v:v）を溶出液として用いて、シリカゲルカラムでク
ロマトグラフィーして、3.5g（71％）の化合物69を得
た:¹H−n.m.r.（300MHz、CDCl₃）：δ 7.7（m,4H,芳香
族）、7.0（m,5H,芳香族）、5.16（d,1H,H−１）、4.7
（d,1H）、4.5（m,2H）、4.2（m,3H）、3.8（m,1H）、
3.6（m,2H）、3.45（m,1H）、2.9（bs,1H,OH）、2.1
（s,3H,Ac）、1.95（t,3H,CH₃）。¹³C−n.m.r.（CDC
l₃）：δ98.09（Ｃ−１）、78.45、74.5、73.9、71.7、
65.1、63.1、55.5、20.87（Ac）、14.92（CH₃）。

実施例16 エチル６−Ｏ−アセチル−３−ベンジル−２
−デオキシ−２−フタルイミド−４−Ｏ−（2,3,4,6−
テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトシル）−β−
Ｄ−グルコピラノシド（化合物70）の合成 モノキュラーシーブ（３Å、1g）、2,6−ジ−tert−
ブチル−４−メチル−リジン（45mg、0.22mmol）および
トリフル酸銀（57mg、0.22mmol）を含有するジクロロメ
タン（10mL）中の化合物９（80mg、0.17mmol）の撹拌溶
液に、30℃で窒素下で、ジクロロメタン（5mL）中の臭
化2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクト
シルを添加した。混合物をこの温度で１時間撹拌し、次
に２時間にわたり５℃まで加温した。次に混合物をジク
ロロメタン（10mL）で希釈し、濾過し、不溶性物質をジ
クロロメタン（5mL）で洗浄した。一緒に瀘液を飽和炭
酸水素ナトリウム水溶液および水で洗浄し、MgSO₄上で
乾燥し、そして濃縮した。残渣をシリカゲルカラムで酢
酸エチレン：ヘキサン、1:2（v:v）を溶出液として用い
てクロマトグラフィーして、120mg（80％）の標題の化
合物を得た:¹H−n.m.r.（300MHz、CDCl₃）：δ 7.68、
6.96（2m,9H,芳香族）、5.3（m,2H）、5.13（d,1H,H−
１′,J_１′,2′8.0Hz）、4.99（q,1H）、4.82（d,1
H）、4.62（d,1H,H−1,J_1,2,7.7Hz）、4.54（d,1H）、
4.42（d,1H）、4.3（q,1H）、4.15（m,2H）、3.99（m,2
H）、3.87（m,2H）、3.72（m,2H）、3.46（m,1h）、2.1
5、2.12、2.09、2.00、1.98（5s,15H,5XA c）、1.00
（t,3H,CH₃）。¹³C−n.m.r.（CDCl₃）：δ 101.2、97.
8（Ｃ−1,C−１′）、14.85（CH₃）。

以下の実施例において、他に記載のない限り、Ｒは−
CH₂）₈CO₂CH₃である。

実施例17 ８−メトキシカルボニルオクチル３−Ｏ−
（4,6−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−
ガラクトピラノシル）−２−アセトアミド−4,6−Ｏ−
ベンジリデン−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシ
ド（化合物105）の合成 標題の化合物を、８−メトキシカルボニルオクチル２
−アセトアミド−4,6−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキ
シ−β−Ｄ−グルコピラノシドと化合物32を結合するこ
とによって生成（この合成法は上記実施例２に記載され
ている）した、８−メトキシカルボニルオクチル３−Ｏ
−（2,3−ジ−Ｏ−ベンゾイル−4,6−Ｏ−ベンジリデン
−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−アセトアミド−
4,6−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ−β−Ｄ−グル
コピラノシドをまず調製することにより調製した。この
８−メトキシカルボニルオクチル２−アセトアミド−4,
6−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコ
ピラノシドは、Ｎ−アセチルグルコサミン−OR（例え
ば、図１の化合物４）を、酸性（ｐ−トルエンスルホン
酸）アセトニトリルまたはジメチルホルムアミド（DM
F）媒体中の約1.5当量のC₆H₅CH（OCH₃）_２と約０℃から
約50℃で６−48時間反応させ、4,6−Ｏ−保護化ベンジ
リジン化合物を得ることにより調製することができる。

まずモレキュラーシーブ（存在する水を除去する）を
含有する塩化メチレン中で、約１当量のＮ−ヨードサク
シニミドを、約１当量のトリフルオロメタンスルホン酸
と化合させることにより、化合物32と８−メトキシカル
ボニルオクチル２−アセトアミド−4,6−Ｏ−ベンジリ
ジン−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（「化
合物Ａ」）との結合が達成される。反応混合物を−50℃
に冷却し、次に化合物Ａを添加し続けて約１から1.1当
量（化合物Ａに基づく）の化合物32が添加する。大量の
トリフルオロメタンスルホン酸を使用する時、好ましく
はトリフルオロメタンスルホン酸の添加より前に反応物
を−50℃に冷却する。

反応を約１−３時間で約−20℃から０℃に平衡化す
る。次に反応溶液を−50℃に冷却することで冷却し、続
いて中性pHに達するまでトリエチルアミンを添加する。
溶液をセライトで濾過し、次に飽和重炭酸ナトリウム溶
液および水で洗浄する。有機層を乾燥し、真空で除去し
て、８−メトキシカルボニルオクチル３−Ｏ−（2,3−
ジ−Ｏ−ベンゾイル−4,6−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ
−ガラクトピラノシル）−２−アセトアミド−4,6−Ｏ
−ベンジリデン−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノ
シド（「化合物Ｂ」）を得た。

化合物Ｂのベンゾイル基をゼンプレン（Zemplen）条
件（NaOMe/MeOH）下で除去して、８−メトキシカルボニ
ルオクチル３−Ｏ−（4,6−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ
−ガラクトピラノシル）−２−アセトアミド−4,6−Ｏ
−ベンジリデン−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノ
シド（「化合物Ｃ」）が得られる。

化合物Ｃ（１グラム、1.37mmol）を無水ジメチルホル
ムアミド（5.0mL）に溶解し、−30℃で三酸化イオウ−
ピリジン複合体（267.1mg、1.64mmol）を添加した。得
られる溶液を−30℃で５時間、次に０℃で15時間撹拌し
た。メタノール（2ml）を添加して過剰の試薬を破壊し
た。反応混合物をメタノール中のDowex 50−X8（Na＋）
樹脂に通してナトリウム塩に変換した。蒸発およびトル
エンとの共蒸発により白色固体が残り、これをジクロロ
メタン−メタノール−ピリジン（9:1:0.1）を溶出液と
して用いるシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製
し、標題の化合物を白色固体として得た。この物質をメ
タノール中のDowex 50−X8（Na＋）樹脂に通してナトリ
ウム塩に変換して、標題の化合物（850mg、74.6％）を
得た。

実施例18 ８−メトキシカルボニルオクチル３−Ｏ−
（３−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２
−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノ
シドの合成 実施例17の生成物（800mg、0.96mmol）を５％パラジ
ウム混合炭素（800mg）を含有するメタノール（10mL）
に溶解し、水素（１気圧）下で室温で５時間撹拌した。
触媒を濾過により除去し、メタノール（500mL）で洗浄
し、溶媒を蒸発乾固させた。次に残渣を、ジクロロメタ
ン−メタノール−水−ピリジン（80:20:2:0.2）を溶出
液として用いてシリカゲルのクロマトグラフィーにより
精製した。バイオゲル（BioGel）Ｐ−２（200−400メッ
シュ）による濾過およびナトリウム塩への変換後、標題
の化合物（488mg、77.5％）を白色固体として得た。¹H
−n.m.r.（D₂O）δ:4.520−4.570［m,2h,H−１（dd,4.5
50,J_1,28.0Hz）およびH1′（d,4.542,J_１′,2′7.7Hz）
を含む］、4.277−4.343［m,2H,H−３′（dd,4.310,J
_2,310.0Hz,J_3,43.5Hz）およびＨ−４′（4.296）を含
む］、3.687（s,3H,OCH₃）、2.388（t,2H,J7.5Hz,CH₂CO
O）、2.025（s,3H,NHAc）、1.570（m,4H）および1.30
（m,8H）。

硫酸化を６当量の三酸化イオウ／ピリジン複合体を用
いて行い、反応を室温で24時間行った以外は同様な方法
で、実施例18の2,3−ジ硫酸塩を調製した。得られる生
成物は２−、３−硫酸塩および主に2,3−ジ硫酸塩の混
合物であった。混合物を記載したクロマトグラフィーに
より精製し、得られる生成物をイオン交換することによ
り、ルイス^Ｃ−ORの2,3−ジ硫酸塩を二ナトリウム塩と
して得た。

上述条件下でベンゾイル化することにより、化合物Ｃ
からルイス^Ｃ−ORの２−硫酸塩を調製した。得られる生
成物は、主にガラクトース単位上に３−ベンゾイル基
と、少量の２−ベンゾイルおよび2,3−ジベンゾイル誘
導体を含有していた。生成物をシリカゲルのクロマトグ
ラフィーにより分離して、２−ベンゾイルおよび３−ベ
ンゾイル誘導体の両方を純生成物として得た。

３−ベンゾイル誘導体を上述の方法で硫酸化し、次に
脱保護して、２′−スルホ−ルイス^Ｃ−ORを得て、これ
を上述のようにイオン交換することによりこの生成物の
ナトリウム塩を得た。

３′−スルホ−LacNAc誘導体を化合物42（実施例６で
調製）から調製し、ゼンプレン（Zemplen）条件（ナト
リウムメトキシド／メタノール）でジベンゾイル基を除
去し、上述の条件下で硫酸化して３′−スルホ−ルイス
^Ｃ−ORを得た。

以下の実施例19−20は、本発明の化合物の免疫調節特
性を説明する。

実施例19 DTH炎症応答の阻害 DTH炎症応答を、スミスとジオラ（Smith and Ziola）
¹⁴の記載する、マウスのフットパッド膨張評価（foot p
ad swelling assay）を用いて測定した。簡単に述べる
と、Balb/cマウスの群を、強い炎症性DTH応答を誘発す
ることが知られている20μｇのDDAアジュバント（臭化
ジメチルジオクタデシルアンモニウム）を含有する100
μｇのOVA抗原［アルブミン、鶏卵、シグマ社（Sigm
a）、セントルイス、ミズーリ州］で免疫した。７日
後、各群のマウスを20μｇのOVA抗原でフットパッド−
抗原投与した。得られる炎症性フットパッド膨張を、抗
原投与から24時間後にミツトヨエンジニアリング（Mitu
toyo Engineering）のマイクロメーターで測定した。

ルイス^Ｃ−ORおよびLacNAc−OR類似体の炎症性DTH応
答に及ぼす効果を評価するため、マウスの群にOVA抗原
によるフットパッド抗原投与の５時間後100μｇの下記
のオリゴ糖配糖体を投与した。

化合物Ａ＝３′−スルホ−ルイス^Ｃ−OR ［３′−スルホ−βGal（１−３）βGlc
NAc−OR］ 化合物Ｂ＝２′−スルホ−ルイス^Ｃ−OR ［２′−スルホ−βGal（１−３）βGlc
NAc−OR］ 化合物Ｃ＝シアリル ルイス^Ｘ−OR ［αNeu5Ac（２→３）βGal（１−４）
−［α−Ｌ−Fuc（１−３）］−βGlcNAc−OR］ 化合物Ｄ＝シアリル ルイス^Ａ−OR ［αNeu5Ac（２→３）βGal（１−３）
−［α−Ｌ−Fuc（１−４）］−βGlcNAc−OR］ 化合物Ｅ＝シアリル ルイス^Ｃ−OR ［αNeu5Ac（２→３）βGal（１−３）
−βGlcNAc−OR］ この実施例の炎症の低下パーセンテージを、以下の式
により計算した： 「処理したマウス」とは、抗原以外に上記化合物の１
つが投与されるマウスである。「未処理のマウス」と
は、上記化合物のいずれも投与されないマウスである。
バックグラウンド（bkg）膨張とは、抗原または化合物
なしのPBS単独で免疫し、抗原で抗原投与したマウスで
観察される膨張のレベルである。

この実験の結果を以下に示す： 別の研究では、３′−スルホ−LacNAcを上記方法でOV
A抗原投与の５時間後にOVA感作マウスに投与した時、約
24％炎症を低下させることが証明された。

上記結果は、本発明の化合物が抗原投与に起因する哺
乳動物の細胞性２次免疫応答の治療に有効であることを
示している。

実施例21 オリゴ糖配糖体のLPS誘発肺傷害に及ぼす効
果 マウスにLPSを鼻腔内投与し24時間後に殺したマウス
の肺の重量を測定して、LPS（リポポリサッカライド）
誘発肺傷害を測定する。簡単に述べると、８−10週齢の
Balb/cマウスの群を、軽く麻酔をかけた状態で、50μｌ
のPBS中の５μg/マウスのLPSを鼻腔内に投与して感作し
た。

鼻腔内に化合物を投与する方法はスミス（Smith）ら
が記載しており、これは参考のため引用されている。簡
単に述べると、マウスをメトフェイン（Metofane）（ピ
ットマン−ムーア社（Pitman−Moore Ltd.）、ミシソー
ガ（Mississauga）、オンタリオ、カナダ）で麻酔し、5
0μｇ滴の化合物をマウスの鼻孔上に置き吸入させる。

５時間後、200μｌのPBS中の100μg/マウスの３′−
スルホ−ルイス^Ｃ−ORをマウスの鼻腔内に投与する。24
時間、48時間または72時間後に、異なる群のマウスを殺
し、肺を取り出し重さを計る。３−スルホ−ルイス^Ｃ−
ORで処理したマウスの肺を重量を、コントロール（すな
わち、LPSで処理したが、３−スルホ−ルイス^Ｃ−ORを
投与しなかったマウス）と比較した。低下パーセント
を、以下の値を100から引いて計算する： この分数を、正常肺（LPS、３−スルホ−ルイス^Ｃ−O
Rに暴露しないマウスの肺）重量から処理した肺重量を
引いて求めた値を分子、正常肺重量からコントロールの
肺（LPSのみ投与したマウス）重量を引いて求めた値を
分母として得られ、得られる分数に100をかける。

低下パーセントが大きいほど、化合物は肺損傷をよく
軽減している。

この試験の結果を以下に示す： 時間 ％炎症低下 24時間 〜53％ 48時間 〜27％ 72時間 〜52％ 上記データは本発明の化合物が傷害による細胞性炎症
応答を低下させるのに有効であることを示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ｃ０７Ｈ 15/12 Ｃ０７Ｈ 15/12 15/14 15/14 (31)優先権主張番号 ９８８，２５４ (32)優先日 1992年12月９日 (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (72)発明者 ジアング，コング アメリカ合衆国92128 カリフォルニア 州サン ディエゴ，ストニー ピーク ドライブ 11729，ナンバー 81 (72)発明者 ハンナ，エッチ．リズク カナダ国ティー６エル ３ゼット９ ア ルバータ，エドモントン，シックスティ ーファースト ストリート 1104 (72)発明者 ベノット，アンドレ ピー. アメリカ合衆国91362 カリフォルニア 州サウザンド オークス，アッシュモア サークル 2518，アパートメント 25 (72)発明者 ニクラド，パンデュラング ブイ. カナダ国ティー６ジェイ ２ケイ４ ア ルバータ，エドモントン，ワンハンドレ ッドアンド フィフス ストリート 3619 (72)発明者 カシェム，モハメッド エイ. アメリカ合衆国91362 カリフォルニア 州サウザンド オークス，アッシュモア サークル 2518，アパートメント 14 (72)発明者 スミス，リチャード エッチ. カナダ国ティー６アール ２エイ６ ア ルバータ，エドモントン，ブキャナン プレイス 1010 (72)発明者 スリバスタバ，オム ピー. カナダ国ティー６エル ６エル９ アル バータ，エドモントン，ジャクソン ハ イツ，フォーティースリー アベニュー 4708 (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) C07H 3/06 C07H 5/06 C07H 5/08 C07H 15/04 C07H 15/12 C07H 15/14 A61K 31/70 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ) ＷＰＩＤＳ（ＳＴＮ)

Claims (16)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】式ＩまたはII: （式中、Ｒは水素および式−（Ａ）Ｚにより表されるア
   グリコンからなる群から選択され、 但しこの式中、Ａは結合、炭素原子数２〜10のアルキレ
   ン基、式−（CH₂−CR₂₀G）_ｎ−の基（この式においてｎ
   は１〜５の整数、R₂₀は水素、メチルまたはエチルから
   なる群から選択され、Ｇは水素、ハロゲン、フェニルお
   よび１〜３個の置換基で置換されたフェニル（但し、こ
   の置換基はアミン、ヒドロキシル、ハロ、炭素原子数１
   〜４のアルキルおよび炭素原子数１〜４のアルコキシか
   らなる群から選択される）からなる群から選択され
   る）、または式−（CH₂−CR₂₀R₂₀−Ｇ）_ｎ−の基（この
   式においてｎ及びR₂₀は前記定義と同じであり、Ｇは酸
   素、イオウまたは窒素である）を表わし、Ｚは水素、メ
   チル、フェニル、ニトロフェニル、アミノフェニルから
   なる群から選択され、ここでＧが酸素、イオウまたは窒
   素でなくＡが結合でない場合、Ｚはまた−OH、−SH、−
   NH₂、−NHR₂₁、−Ｎ（R₂₁）_２、−Ｃ（Ｏ）OH、−Ｃ
   （Ｏ）OR₂₁、−Ｃ（Ｏ）NH−NH₂、−Ｃ（Ｏ）NH₂、−Ｃ
   （Ｏ）NHR₂₁、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（R₂₁）_２および−OR₂₂から
   なる群からも選択される（但し、R₂₁はそれぞれ独立に
   炭素原子数１〜４のアルキルであり、R₂₂は炭素原子数
   ３〜10のアルケニル基である）： Ｙは酸素、イオウ、および−NH−よりなる群から選択さ
   れ； R₁は水素、−NH₂、−N₃、−NHSO₃H、−NR₅C（Ｏ）R₄、
   −Ｎ＝Ｃ（R₅）_２、−NHCH（R₅）_２、−NHR₆、−Ｎ
   （R₆）_２、−OH、−OR₆、−Ｓ（Ｏ）R₆、−Ｓ（Ｏ）₂R₆
   および硫酸塩（式中、R₄は、水素、炭素原子数１〜４の
   アルキル、OR₇（R₇は炭素原子数１から４のアルキル、
   または水酸基で置換した炭素原子数２から４のアルキル
   である）、および−NR₈R₉（R₈およびR₉は、独立に水素
   および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選
   択される）よりなる群から選択され、 各R₅は水素および炭素原子数１から４のアルキルよりな
   る群から選択され、 各R₆は炭素原子数１から４のアルキルである）よりなる
   群から選択され； R₂は水素、−N₃、−NH₂、−NHSO₃H、−NR₁₁C（Ｏ）
   R₁₀、−Ｎ＝Ｃ（R₁₁）_２、−NHCH（R₁₁）_２、−NHR₁₂、
   −Ｎ（R₁₂）_２、−OHおよび−OR₁₂（式中、R₁₀は、水
   素、炭素原子数１から４のアルキル、−OR₁₃（R₁₃は炭
   素原子数１から４のアルキル、または水酸基で置換した
   炭素原子数２から４のアルキルである）、および−NR₁₄
   R₁₅（R₁₄およびR₁₅は、独立に水素および炭素原子数１
   から４のアルキルよりなる群から選択される）よりなる
   群から選択され、 各R₁₁は水素および炭素原子数１から４のアルキルより
   なる群から選択され、 各R₁₂は炭素原子数１から４のアルキルである）よりな
   る群から選択され； R₃は水素、フルオロ、硫酸塩およびヒドロキシよりなる
   群から選択され； X₁は水素、シアリル、硫酸塩、リン酸塩、および−CHR
   ₁₈COOH（R₁₈は水素、炭素原子数１から７のアルキルお
   よび−COOHよりなる群から選択される）よりなる群から
   選択され； X₂は水素、硫酸塩、リン酸塩、および−CHR₁₈COOH（R₁₈
   は水素、炭素原子数１から７のアルキルおよび−COOHよ
   りなる群から選択される）よりなる群から選択される）
   の化合物；および 薬剤として許容されるその塩（但し、X₁またはX₂の少な
   くとも一方は、硫酸塩、リン酸塩、または−CHR₁₈COOH
   であるか、またはR₃は硫酸塩である）。
2. 【請求項２】該化合物は式Ｉで表される請求項１記載の
   化合物。
3. 【請求項３】該化合物は式IIで表される請求項１記載の
   化合物。
4. 【請求項４】R₁は水酸基、水素または炭素原子数１から
   ４のアルコキシよりなる群から選択される請求項１記載
   の化合物。
5. 【請求項５】R₂は水酸基、炭素原子数１から４のアルコ
   キシ、−NH₂、−N³および−NHC（Ｏ）R₁₀よりなる群か
   ら選択される請求項１記載の化合物。
6. 【請求項６】R₃は−OHである請求項１記載の化合物。
7. 【請求項７】ＸおよびX₁は水素であり、X₂は硫酸塩、リ
   ン酸塩、および−CHR₁₈COOHよりなる群から選択される
   請求項１記載の化合物。
8. 【請求項８】ＸおよびX₂は水素であり、X₁は硫酸塩、リ
   ン酸塩、および−CHR₁₈COOHよりなる群から選択される
   請求項１記載の化合物。
9. 【請求項９】X₁は水素であり、X₂は硫酸塩であり、R₁は
   水酸基であり、R₂は−NH₂および−NHC（Ｏ）CH₃よりな
   る群から選択され、R₃は水酸基である請求項２記載の化
   合物。
10. 【請求項１０】X₁は水素であり、X₂は硫酸塩であり、R₁
    は水酸基であり、R₂は−NH₂および−NHC（Ｏ）CH₃より
    なる群から選択され、R₃は水酸基である請求項３記載の
    化合物。
11. 【請求項１１】薬剤として不活性な担体および有効量の
    請求項１記載の化合物からなる哺乳動物用細胞性免疫応
    答調節剤。
12. 【請求項１２】免疫応答を調節するのに有効な量の請求
    項１記載の化合物をヒト以外の哺乳動物に投与すること
    を含む、ヒト以外の哺乳動物の細胞性免疫応答を調節す
    る方法。
13. 【請求項１３】有効な量の請求項１記載の化合物をヒト
    以外の哺乳動物に投与することを含む、抗原に対するヒ
    ト以外の哺乳動物の感作を低下させる方法。
14. 【請求項１４】有効な量の請求項２記載の化合物をヒト
    以外の哺乳動物に投与することを含む、抗原に対するヒ
    ト以外の哺乳動物の感作を低下させる方法。
15. 【請求項１５】有効な量の請求項３記載の化合物をヒト
    以外の哺乳動物に投与することを含む、抗原に対するヒ
    ト以外の哺乳動物の感作を低下させる方法。
16. 【請求項１６】免疫応答の抑制はDTH応答の抑制と抗原
    に対する寛容の誘導を含む請求項12記載の方法。