JP2816342B2 - 高比重リポ蛋白質分画測定用カラム充填剤 - Google Patents
高比重リポ蛋白質分画測定用カラム充填剤Info
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- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
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- B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
- B01J20/282—Porous sorbents
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- B01J20/02—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising inorganic material
- B01J20/04—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising inorganic material comprising compounds of alkali metals, alkaline earth metals or magnesium
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Description
【発明の詳細な説明】 本発明は高比重リポ蛋白質及び/又はHDLコレステロ
ール分画測定カラム充填剤に関する。
ール分画測定カラム充填剤に関する。
近年日本は食生活の洋風化などにより、多量、多品種
の食品が並んだ量販店舗、深夜営業店舗が多数出現し
た。またグルメブームから、よりおいしい高カロリー食
品を摂取する機会が増えた。そのため糖尿病や高脂血症
あるいは脂肪肝などの栄養過多が原因と考えられる疾患
の発症が増えた。いわゆる飽食の時代に入ったといえ
る。一方世界的な視点から見ると多くの発展途上国、戦
乱にさらされた国などでは衛生環境の乏しさあるいは飢
えなどにより、不可逆的な栄養失調状態となった多くの
人々がいる。こうした栄養の過剰あるいは不足など、栄
養障害を原因とする疾患の治療は、単に栄養の制限ある
いは補給など、消極的な方法だけでは必ずしも良好な結
果が得られない。そのため実際の臨床の場では高脂血症
治療薬などの薬物療法、血漿交換−血漿分離法、中心静
脈栄養法など多くの治療方法が検討されている。
の食品が並んだ量販店舗、深夜営業店舗が多数出現し
た。またグルメブームから、よりおいしい高カロリー食
品を摂取する機会が増えた。そのため糖尿病や高脂血症
あるいは脂肪肝などの栄養過多が原因と考えられる疾患
の発症が増えた。いわゆる飽食の時代に入ったといえ
る。一方世界的な視点から見ると多くの発展途上国、戦
乱にさらされた国などでは衛生環境の乏しさあるいは飢
えなどにより、不可逆的な栄養失調状態となった多くの
人々がいる。こうした栄養の過剰あるいは不足など、栄
養障害を原因とする疾患の治療は、単に栄養の制限ある
いは補給など、消極的な方法だけでは必ずしも良好な結
果が得られない。そのため実際の臨床の場では高脂血症
治療薬などの薬物療法、血漿交換−血漿分離法、中心静
脈栄養法など多くの治療方法が検討されている。
また治療法の確立と共に診断領域でも酵素法の登場、
生化学自動分析装置の開発はど臨床検査の進歩により、
血中脂質測定の検査数は増加し、またアポ蛋白質測定な
ど精密な診断が可能となったことから、その臨床検査上
の意義も次第に増大している。高比重リポ蛋白質及び/
又はHDLコレステロール分画の測定は、一連の脂質検査
の項目の中でほぼルーチン化されている。それはHDL−
C濃度と動脈硬化性疾患、特に虚血性疾患の発生率との
間に負の相関関係があることが広く知られており、重要
な臨床検査項目と考えられているからである。
生化学自動分析装置の開発はど臨床検査の進歩により、
血中脂質測定の検査数は増加し、またアポ蛋白質測定な
ど精密な診断が可能となったことから、その臨床検査上
の意義も次第に増大している。高比重リポ蛋白質及び/
又はHDLコレステロール分画の測定は、一連の脂質検査
の項目の中でほぼルーチン化されている。それはHDL−
C濃度と動脈硬化性疾患、特に虚血性疾患の発生率との
間に負の相関関係があることが広く知られており、重要
な臨床検査項目と考えられているからである。
しかし最近の医療費の高騰などの問題が生じている先
進諸国、あるいは医療予算の乏しい国々では、臨床検査
費用がかさむことが問題となった。そのためにHDL−C
測定は遠沈などの煩雑な操作が必要で、かつ割高である
ことから、臨床上必要ではあっても、次第に敬遠される
傾向にある。そのためより簡便、安価、かつ確実はHDL
−Cの測定法の開発は急務と考えられている。
進諸国、あるいは医療予算の乏しい国々では、臨床検査
費用がかさむことが問題となった。そのためにHDL−C
測定は遠沈などの煩雑な操作が必要で、かつ割高である
ことから、臨床上必要ではあっても、次第に敬遠される
傾向にある。そのためより簡便、安価、かつ確実はHDL
−Cの測定法の開発は急務と考えられている。
本発明者らは鋭意研究の結果、燐酸カルシウム化合
物、特に合成ハイドロキシアパタイトが燐酸イオン雰囲
気で使用することにより高比重リポ蛋白質及び/又はHD
L−Cを吸着せず低比重リポ蛋白質及び又はLDL−C、超
低比重リポ蛋白質及び/又はVLDL−C、中性脂肪あるい
は燐脂質を選択的に吸着することを発見し、この吸着剤
を用いた高比重リポ蛋白質及び/又はHDL−C分画測定
カラム充填剤を確立にするに至った。
物、特に合成ハイドロキシアパタイトが燐酸イオン雰囲
気で使用することにより高比重リポ蛋白質及び/又はHD
L−Cを吸着せず低比重リポ蛋白質及び又はLDL−C、超
低比重リポ蛋白質及び/又はVLDL−C、中性脂肪あるい
は燐脂質を選択的に吸着することを発見し、この吸着剤
を用いた高比重リポ蛋白質及び/又はHDL−C分画測定
カラム充填剤を確立にするに至った。
以下に本脂質吸着剤及びカラムデザインの詳細な説明
をする。
をする。
本高比重リポ蛋白質分画測定カラム充填剤を構成する
成分は燐酸カルシウム化合物と燐含有化合物からなる。
また脂質吸着選択性改善のため二価イオンキレート剤、
ヘパリンあるいはデキストラン硫酸などのポリアニオ
ン、燐タングステン酸、マンガンイオン、マグネシウム
イオン、ニッケルイオンなどの多価金属イオンも添加す
る。(中井継彦著:HDL−代謝・測定・臨床,中外医学
社,102-140,1986)。カラムに充填された吸着剤は微粉
の流出防止のために粉体の表面にpolyHEMAコーティング
処理(文献:末永松彦,他.石油ピッチ活性炭によるDi
rect Hemoperfusion 12臨床例の検討人工臓器,Vol.6,N
o.6,442-445,1977)など、あるいはミリポア社製ポアサ
イズ0.45μm MILLIPOREフィルターなどを用いたカラム
が例示される。また0.01μm〜500μmのサイズ粒度を
調製された粉体が好適に使用しうる。また好適には80μ
m〜300μm、更に好適には150μm〜180μmのサイズ
粒度を調製された粉体が使用しうる。またスプレードラ
イ法で球状に成形し、粒度を上記のごとく調製された粉
体も例示される。
成分は燐酸カルシウム化合物と燐含有化合物からなる。
また脂質吸着選択性改善のため二価イオンキレート剤、
ヘパリンあるいはデキストラン硫酸などのポリアニオ
ン、燐タングステン酸、マンガンイオン、マグネシウム
イオン、ニッケルイオンなどの多価金属イオンも添加す
る。(中井継彦著:HDL−代謝・測定・臨床,中外医学
社,102-140,1986)。カラムに充填された吸着剤は微粉
の流出防止のために粉体の表面にpolyHEMAコーティング
処理(文献:末永松彦,他.石油ピッチ活性炭によるDi
rect Hemoperfusion 12臨床例の検討人工臓器,Vol.6,N
o.6,442-445,1977)など、あるいはミリポア社製ポアサ
イズ0.45μm MILLIPOREフィルターなどを用いたカラム
が例示される。また0.01μm〜500μmのサイズ粒度を
調製された粉体が好適に使用しうる。また好適には80μ
m〜300μm、更に好適には150μm〜180μmのサイズ
粒度を調製された粉体が使用しうる。またスプレードラ
イ法で球状に成形し、粒度を上記のごとく調製された粉
体も例示される。
高比重リポ蛋白質分画測定カラム吸着体の基本的構成
は、燐酸カルシウム化合物からなる吸着体と燐酸イオン
雰囲気、及び金属イオンあるいはポリアニオンなどの脂
質選択性増強物質からなる。
は、燐酸カルシウム化合物からなる吸着体と燐酸イオン
雰囲気、及び金属イオンあるいはポリアニオンなどの脂
質選択性増強物質からなる。
燐酸カルシウム化合物としては例えば合成ハイドロキ
シアパタイト、燐酸三カルシウム、燐酸四カルシウム、
ピロ燐酸カルシウム、塩素アパタイト、フッ素アパタイ
ト、燐酸カルシウム系ガラス、あるいはこれらと他のセ
ラミックス及び/又はガラスとの複合材、金属あるいは
高分子樹脂表面にコーティングしたもの、及び燐酸カル
シウムを含有する骨粉なども使用しうる。燐含有化合物
は、例えば燐酸ナトリウムや燐酸カリウム等の燐酸塩、
燐酸、燐酸イオンや燐含有有機物、ピロ燐酸等が具体的
に例示される。その他ひ素含有化合物、ヘパリンあるい
は硫酸デキストランなどのポリアニオンも例示される。
シアパタイト、燐酸三カルシウム、燐酸四カルシウム、
ピロ燐酸カルシウム、塩素アパタイト、フッ素アパタイ
ト、燐酸カルシウム系ガラス、あるいはこれらと他のセ
ラミックス及び/又はガラスとの複合材、金属あるいは
高分子樹脂表面にコーティングしたもの、及び燐酸カル
シウムを含有する骨粉なども使用しうる。燐含有化合物
は、例えば燐酸ナトリウムや燐酸カリウム等の燐酸塩、
燐酸、燐酸イオンや燐含有有機物、ピロ燐酸等が具体的
に例示される。その他ひ素含有化合物、ヘパリンあるい
は硫酸デキストランなどのポリアニオンも例示される。
また二価イオンキレート剤としては、EDTAやEGTAなど
が例示しうるが、カルシウムのキレート剤であるクエン
酸なども例示しうる。
が例示しうるが、カルシウムのキレート剤であるクエン
酸なども例示しうる。
燐酸カルシウム化合物にHDL−Cが非吸着性となる選
択的脂質吸着機能を持たせるには、燐酸カルシウム化合
物が燐酸イオン雰囲気であることが必要である。そのた
め燐酸カルシウム化合物から燐酸イオンを遊離しうる塩
酸、硫酸などの無機酸、クエン酸、コハク酸、乳酸、酢
酸などの有機酸も構成成分となりうる。更に燐酸カルシ
ウム化合物及び/又は燐酸カルシウム化合物を含有する
素材を上述した無機酸及び有機酸で処理した物質も使用
しうる。
択的脂質吸着機能を持たせるには、燐酸カルシウム化合
物が燐酸イオン雰囲気であることが必要である。そのた
め燐酸カルシウム化合物から燐酸イオンを遊離しうる塩
酸、硫酸などの無機酸、クエン酸、コハク酸、乳酸、酢
酸などの有機酸も構成成分となりうる。更に燐酸カルシ
ウム化合物及び/又は燐酸カルシウム化合物を含有する
素材を上述した無機酸及び有機酸で処理した物質も使用
しうる。
燐酸カルシウム化合物としては合成ハイドロキシアパ
タイト、天然ハイドロキシアパタイト、燐酸三カルシウ
ム、燐酸四カルシウム、ピロ燐酸カルシウム、塩素アパ
タイト、フッ素アパタイトなどを例示できるが、合成ハ
イドロキシアパタイトが優れた脂質選択性及び吸着能を
有していた。カルシウムと燐のモル比(Ca/P)が1〜2
である燐酸カルシウムが好適に使用しうる。更に好適に
は、カルシウムと燐のモル比(Ca/P)が1.5〜1.7の燐酸
カルシウムが使用しうる。脂質吸着体の吸着特性を改善
のための加工はサンプルミルあるいはジェットミルによ
る粉砕、乾燥粉あるいは60℃〜1300℃の温度で焼成し調
製された粉体が好適に使用しうる。また好適には300℃
〜1200℃、更に好適には400℃〜800℃の温度で焼成し調
製された粉体が使用しうる。
タイト、天然ハイドロキシアパタイト、燐酸三カルシウ
ム、燐酸四カルシウム、ピロ燐酸カルシウム、塩素アパ
タイト、フッ素アパタイトなどを例示できるが、合成ハ
イドロキシアパタイトが優れた脂質選択性及び吸着能を
有していた。カルシウムと燐のモル比(Ca/P)が1〜2
である燐酸カルシウムが好適に使用しうる。更に好適に
は、カルシウムと燐のモル比(Ca/P)が1.5〜1.7の燐酸
カルシウムが使用しうる。脂質吸着体の吸着特性を改善
のための加工はサンプルミルあるいはジェットミルによ
る粉砕、乾燥粉あるいは60℃〜1300℃の温度で焼成し調
製された粉体が好適に使用しうる。また好適には300℃
〜1200℃、更に好適には400℃〜800℃の温度で焼成し調
製された粉体が使用しうる。
本吸着システムのブロック構成は試料注入部、血清−
選択性増強物質混合部分、粉体−血清接触部分、脂質選
択吸着体本体部分、粉体−血清分離部分、試料分画液放
出部分からなる。
選択性増強物質混合部分、粉体−血清接触部分、脂質選
択吸着体本体部分、粉体−血清分離部分、試料分画液放
出部分からなる。
カラム材質はポリプロピレン、TPX、アクリル、ポリ
カーボネート、シリコーンゴム、テフロンなどの高分子
樹脂、また医用抗血栓材料のポリウレタン、セグメント
ポリウレタンなどが例示される。またガラス、セラミッ
クス、金属なども例示される。試料注入部、分画液放出
部が差込み式、パッキン式ワンタッチロック式などが例
示される。
カーボネート、シリコーンゴム、テフロンなどの高分子
樹脂、また医用抗血栓材料のポリウレタン、セグメント
ポリウレタンなどが例示される。またガラス、セラミッ
クス、金属なども例示される。試料注入部、分画液放出
部が差込み式、パッキン式ワンタッチロック式などが例
示される。
脂質吸着剤は前述した吸着担体と燐酸イオン及び/又
は脂質沈澱物質から使用される。
は脂質沈澱物質から使用される。
簡易式カラムは次の様な構成となる。注射筒接続部
脂質吸着剤本体カラム部分画液放出部からなる。
脂質吸着剤本体カラム部分画液放出部からなる。
以下脂質吸着剤の特性とHDL−C測定の実施例を示
す。
す。
実験例1 湿式法で合成したCa/Pが1.66のハイドロキシアパタイ
ト(HA)を、attrition millで粉砕した後、800℃で焼
成した粉末を用いた。
ト(HA)を、attrition millで粉砕した後、800℃で焼
成した粉末を用いた。
ヒト血清1mlまたは0.5M燐酸緩衝液(pH7.4)0.1mlを
加え、全量を1.1mlとした試料1mlに、HAを200mgに添加
した。室温で10分間ゆっくりかくはん後、遠心上清をコ
ーニングユニバーサルシルム試薬=ヘレナ社デンシトメ
ータで、リポ蛋白質の分析を行なった。
加え、全量を1.1mlとした試料1mlに、HAを200mgに添加
した。室温で10分間ゆっくりかくはん後、遠心上清をコ
ーニングユニバーサルシルム試薬=ヘレナ社デンシトメ
ータで、リポ蛋白質の分析を行なった。
結果を第1図に示す。第1a図は原血清のリポ蛋白質の
分布、第1b図は原血清に200mgのHAを加えた上清のリポ
蛋白質の分布を示す。第1c図は原血清に1/10量の燐酸バ
ッファーを添加した試料のリポ蛋白質の分布、第1d図は
原血清に1/10量の燐酸バッファーを添加した試料に200m
gのHAを加えた上清のリポ蛋白質の分布を示す。
分布、第1b図は原血清に200mgのHAを加えた上清のリポ
蛋白質の分布を示す。第1c図は原血清に1/10量の燐酸バ
ッファーを添加した試料のリポ蛋白質の分布、第1d図は
原血清に1/10量の燐酸バッファーを添加した試料に200m
gのHAを加えた上清のリポ蛋白質の分布を示す。
第1d図のβ−リポ蛋白質が吸着されている様子がわか
る。一方α−リポ蛋白質は非吸着性である。この第1d図
に示される特性が本吸着剤のリポ蛋白質に対する選択性
である。
る。一方α−リポ蛋白質は非吸着性である。この第1d図
に示される特性が本吸着剤のリポ蛋白質に対する選択性
である。
なおα−リポ蛋白質とHDL−Cとの相同性及びβ−リ
ポ蛋白質としLDL−Cとの相同性はすでに広く知られて
いる。
ポ蛋白質としLDL−Cとの相同性はすでに広く知られて
いる。
実験例2 総コレステロール値(TCHO)とHDLコレステロール値
(HDL−C)の関係とHA量の関係を調べるために燐酸バ
ッファーを添加した試料1000μlに実験例1で用いたHA
を100mg、200mg、300mg、400mgをそれぞれ加えた。そし
て室温で120分間ゆっくりかくはん後、遠心上清中のTCH
O値とHDL−C値を酵素法で測定した。TCHOの測定は和光
純薬社製コレステロール測定キットC IIを使用、スタン
ダードは協和メディクス社製200mg/dlを用いた(試料量
10μl)。HDL−Cの測定は協和メディクス社製デタミ
ナHDLキットで前処理、測定は和光純薬社製コレステロ
ール測定キットC IIを使用した。スタンダードは協和メ
ディクス社製50mg/dlを用いた(試料量50μl)。測定
はファルマシア−LKB社製分光光度計Ultraspec IIで行
った。
(HDL−C)の関係とHA量の関係を調べるために燐酸バ
ッファーを添加した試料1000μlに実験例1で用いたHA
を100mg、200mg、300mg、400mgをそれぞれ加えた。そし
て室温で120分間ゆっくりかくはん後、遠心上清中のTCH
O値とHDL−C値を酵素法で測定した。TCHOの測定は和光
純薬社製コレステロール測定キットC IIを使用、スタン
ダードは協和メディクス社製200mg/dlを用いた(試料量
10μl)。HDL−Cの測定は協和メディクス社製デタミ
ナHDLキットで前処理、測定は和光純薬社製コレステロ
ール測定キットC IIを使用した。スタンダードは協和メ
ディクス社製50mg/dlを用いた(試料量50μl)。測定
はファルマシア−LKB社製分光光度計Ultraspec IIで行
った。
結果を第1表に示す。HAを300mg加えることにより各
症例ともにTCHO値はHDL−C値とほぼ同一になる。
症例ともにTCHO値はHDL−C値とほぼ同一になる。
実験例3 総コレステロール値(TCHO)、HDLコレステロール値
(HDL−C)、及びHAによる脂質吸着の関係を調べるた
めに酵素法による同時測定を行った。HAの吸着は血清試
料500μlに燐酸バッファー500μlを添加、実験例1で
用いたHAを150mgを加えた。室温で10分間ゆっくりかく
はん後、遠心上清中のTCHO値を酵素法で測定した。HDL
−Cの測定は血清試料200μlに、協和メディクス社製
デタミナHDL沈澱試薬100μlを加え、かくはん後10分間
静置した後、遠心上清中のTCHO値を酵素法で測定した。
TCHOの測定は和光純薬社製コレステロール測定キットC
IIを使用した。スタンダードは協和メディクス社製50mg
/dlを用いた(試料量50μl)。測定はファルマシア−L
KB社製分光光度計Ultraspec IIで行った。
(HDL−C)、及びHAによる脂質吸着の関係を調べるた
めに酵素法による同時測定を行った。HAの吸着は血清試
料500μlに燐酸バッファー500μlを添加、実験例1で
用いたHAを150mgを加えた。室温で10分間ゆっくりかく
はん後、遠心上清中のTCHO値を酵素法で測定した。HDL
−Cの測定は血清試料200μlに、協和メディクス社製
デタミナHDL沈澱試薬100μlを加え、かくはん後10分間
静置した後、遠心上清中のTCHO値を酵素法で測定した。
TCHOの測定は和光純薬社製コレステロール測定キットC
IIを使用した。スタンダードは協和メディクス社製50mg
/dlを用いた(試料量50μl)。測定はファルマシア−L
KB社製分光光度計Ultraspec IIで行った。
結果を第2表に示す。HA150mgにより吸着された試料
のTCHO濃度はHDL−C濃度とほぼ同一である。
のTCHO濃度はHDL−C濃度とほぼ同一である。
以上、実施例からも明らかなように、本発明高比重リ
ポ蛋白質分画測定カラム充填剤を用いたカラムは、血清
中のHDL−Cを沈澱及び遠心分離操作を行うことなく分
画できることが判る。また本カラムは単に用手法あるい
は自動分析機器で測定する分画試料を調製するプレカラ
ムとして使用できるだけでなく、自動分析装置内に組み
込んで自動化HDL−C測定システムを構築することも例
示できる。
ポ蛋白質分画測定カラム充填剤を用いたカラムは、血清
中のHDL−Cを沈澱及び遠心分離操作を行うことなく分
画できることが判る。また本カラムは単に用手法あるい
は自動分析機器で測定する分画試料を調製するプレカラ
ムとして使用できるだけでなく、自動分析装置内に組み
込んで自動化HDL−C測定システムを構築することも例
示できる。
添付第1図は血清リポ蛋白質のHAへの吸着の選択性をみ
たものである。第1a図は原血清のリポ蛋白質の分布、第
1b図は原血清に200mgのHAを加えた上清のリポ蛋白質の
分布を示す。第1c図は原血清に1/10量の燐酸バッファー
を添加した試料のリポ蛋白質の分布、第1d図は原血清に
1/10量の燐酸バッファーを添加した試料に200mgのHAを
加えた上清のリポ蛋白質の分布を示す。横軸は原点より
の泳動距離を、また縦軸は吸光度を示す。図に示すα−
Lipoはα−リポ蛋白質を、β−Lipoはβ−リポ蛋白質を
それぞれ示す。 添付第2図は本吸着カラムのシステム構成を示したも
のである。前処理ブロックとカラム本体ブロックに大別
される。それぞれ試料注入部、血清−燐酸イオン混合部
分、粉体−血清接触部分、脂質選択吸着体本体部分、粉
体−血清分離部分、試料分画液放出部分からなる。放出
された分画液は化学的方法、酵素法、酵素及び/または
抗体電極法(Dietschy JM,et al.Enzymatic measuremen
t of free and esterified cholesterol levels in pla
sma and other biological preparations using the ox
ygen electrode in a modified glucose analyzer.Clin
Chim Acta.73(3) 407-417,1976)(ディーシィジェ
ーエム,エトアル,エンザイマティック メージャメン
ト オブ フリー アンド エステリファイド コレス
テロール レベルズ イン プラズマ アンド アザー
バイオロジカル プリパレーションズ ユージング
ザ オキシゲン エレクトロード イン ア モディフ
ァイド グルコース アナライザー)、EIA法、RIA法あ
るいは電気泳動法などによる高比重リポ蛋白質中のコレ
ステロール測定に際し前処理に使用され、用手法あるい
は自動分析法で測定される。
たものである。第1a図は原血清のリポ蛋白質の分布、第
1b図は原血清に200mgのHAを加えた上清のリポ蛋白質の
分布を示す。第1c図は原血清に1/10量の燐酸バッファー
を添加した試料のリポ蛋白質の分布、第1d図は原血清に
1/10量の燐酸バッファーを添加した試料に200mgのHAを
加えた上清のリポ蛋白質の分布を示す。横軸は原点より
の泳動距離を、また縦軸は吸光度を示す。図に示すα−
Lipoはα−リポ蛋白質を、β−Lipoはβ−リポ蛋白質を
それぞれ示す。 添付第2図は本吸着カラムのシステム構成を示したも
のである。前処理ブロックとカラム本体ブロックに大別
される。それぞれ試料注入部、血清−燐酸イオン混合部
分、粉体−血清接触部分、脂質選択吸着体本体部分、粉
体−血清分離部分、試料分画液放出部分からなる。放出
された分画液は化学的方法、酵素法、酵素及び/または
抗体電極法(Dietschy JM,et al.Enzymatic measuremen
t of free and esterified cholesterol levels in pla
sma and other biological preparations using the ox
ygen electrode in a modified glucose analyzer.Clin
Chim Acta.73(3) 407-417,1976)(ディーシィジェ
ーエム,エトアル,エンザイマティック メージャメン
ト オブ フリー アンド エステリファイド コレス
テロール レベルズ イン プラズマ アンド アザー
バイオロジカル プリパレーションズ ユージング
ザ オキシゲン エレクトロード イン ア モディフ
ァイド グルコース アナライザー)、EIA法、RIA法あ
るいは電気泳動法などによる高比重リポ蛋白質中のコレ
ステロール測定に際し前処理に使用され、用手法あるい
は自動分析法で測定される。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 秦 美治 東京都東村山市富士見町1―2―54 富 士見台4―207 (72)発明者 津崎 尚子 神奈川県川崎市多摩区菅野戸呂17―13 第二越路コーポ (72)発明者 山口 俊平 東京都目黒区中目黒5―7―33―101 ハイツ伊東 審査官 亀田 宏之 (56)参考文献 特開 昭63−16045(JP,A) 特開 昭62−67451(JP,A) 中井継彦著 「HDL−代謝・測定・ 臨床」 (1986) P.135 (58)調査した分野(Int.Cl.6,DB名) G01N 30/88 G01N 30/48
Claims (4)
- 【請求項1】燐酸イオン雰囲気下における80μm〜300
μmのサイズ粒度の粉体状多孔質燐酸カルシウム化合物
を、高比重リポ蛋白質及び/又はHDLコレステロールを
吸着しない為に用いることを特徴とする高比重リポ蛋白
質分画測定用カラム充填剤の使用方法。 - 【請求項2】高比重リポ蛋白質及び/又はHDLコレステ
ロール分画特性を増強するために下記の分画特性増強剤
を添加することを特徴とする特許請求の範囲第(1)項
に記載の高比重リポ蛋白質分画測定用カラム充填剤の使
用方法。 a) 燐含有化合物 b) 界面活性剤 c) 脂肪酸 d) ポリアニオン e) アミノ酸 f) 蛋白質及び/又は糖蛋白質 g) 糖類及び/又は糖類含有化合物 h) 重金属塩及び/又は重金属含有化合物 i) 多価カチオン - 【請求項3】前記リン酸緩衝下の80μm〜300μmのサ
イズ粒度の粉体状多孔質燐酸カルシウム化合物が、試料
注入部、脂質選択吸着剤本体カラム部、試料分画液放出
部、前記試料分画放出部より放出された分画液より高比
重リポ蛋白質乃至HDLコレステロールを測定するための
カラムに於ける脂質吸着剤本体カラム部に使用されるこ
とを特徴とする特許請求の範囲第(1)項に記載の高比
重リポ蛋白質分画測定用カラム充填剤の使用方法。 - 【請求項4】前記分画液は、化学的方法、酵素法、酵素
及び/又は抗体電極法、EIA法、RIA法あるいは電気泳動
法による高比重リポ蛋白質中のコレステロール(HDL−
C)測定に際し前処理に使用される特許請求の範囲第
(3)項に記載の高比重リポ蛋白質分画測定用カラム充
填剤の使用方法。
Priority Applications (4)
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JP63251908A JP2816342B2 (ja) | 1988-10-07 | 1988-10-07 | 高比重リポ蛋白質分画測定用カラム充填剤 |
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EP19900905668 EP0481074A4 (en) | 1988-10-07 | 1990-04-06 | Packing of column for fractionating and assaying high specific gravity lipoprotein and/or hdl cholesterol |
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- 1990-04-06 WO PCT/JP1990/000468 patent/WO1991015760A1/ja not_active Application Discontinuation
- 1990-04-06 AU AU53583/90A patent/AU633314B2/en not_active Ceased
Non-Patent Citations (1)
Title |
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中井継彦著 「HDL−代謝・測定・臨床」 (1986) P.135 |
Also Published As
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AU5358390A (en) | 1991-10-30 |
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EP0481074A4 (en) | 1992-11-19 |
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WO1991015760A1 (fr) | 1991-10-17 |
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