JP2621384B2 - 時定数制御型細胞電気刺激装置 - Google Patents
時定数制御型細胞電気刺激装置Info
- Publication number
- JP2621384B2 JP2621384B2 JP63184057A JP18405788A JP2621384B2 JP 2621384 B2 JP2621384 B2 JP 2621384B2 JP 63184057 A JP63184057 A JP 63184057A JP 18405788 A JP18405788 A JP 18405788A JP 2621384 B2 JP2621384 B2 JP 2621384B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- chamber
- cell suspension
- resistance
- time constant
- capacitor
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Electromagnetism (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は遺伝子又は蛋白などの物質を細胞とともに混
合した細胞懸濁液に電気パルスを印加することによって
遺伝子や蛋白などを細胞内に取り込ませる遺伝子導入装
置や、細胞に電気刺激を与えて細胞どおしを電気的に融
合させる細胞融合装置などの細胞電気刺激装置に関する
ものである。
合した細胞懸濁液に電気パルスを印加することによって
遺伝子や蛋白などを細胞内に取り込ませる遺伝子導入装
置や、細胞に電気刺激を与えて細胞どおしを電気的に融
合させる細胞融合装置などの細胞電気刺激装置に関する
ものである。
遺伝子導入装置は細胞に与える電気刺激として直流電
圧パルスのみを与えるのに対して、細胞融合装置では交
流電圧を与えて誘電電気泳動により細胞どおしを接触さ
せた後、直流電圧パルスを与えて融合させる。細胞融合
装置では交流電源がさらに必要であるが、両者はその他
の構成においては共通であるので、以下の説明では主と
して遺伝子導入装置について説明するが、本発明は細胞
融合装置にも適用されるものである。
圧パルスのみを与えるのに対して、細胞融合装置では交
流電圧を与えて誘電電気泳動により細胞どおしを接触さ
せた後、直流電圧パルスを与えて融合させる。細胞融合
装置では交流電源がさらに必要であるが、両者はその他
の構成においては共通であるので、以下の説明では主と
して遺伝子導入装置について説明するが、本発明は細胞
融合装置にも適用されるものである。
（従来の技術） 遺伝子導入装置の一例として、第４図に示されるよう
に直流電圧をコンデンサ（容量Ｃ（Ｆ））に充電した
後、細胞懸濁液（抵抗Ｒ（Ｑ））を負荷として時定数τ
＝CR（秒）で放電させる装置が提案されている（「Plan
t Cell Physiol.」27（４）:619−626（1986）参照）。
に直流電圧をコンデンサ（容量Ｃ（Ｆ））に充電した
後、細胞懸濁液（抵抗Ｒ（Ｑ））を負荷として時定数τ
＝CR（秒）で放電させる装置が提案されている（「Plan
t Cell Physiol.」27（４）:619−626（1986）参照）。
２はチャンバであり、対向電極4,6を備え、対向電極
4,6間に細胞懸濁液を収容して細胞に電界を印加する。
８は直流電源、９は抵抗である。チャンバ２と電源８に
対して容量の異なるコンデンサ10−１〜10−ｎが並列に
設けられている。コンデンサ10−１〜10−ｎの容量はそ
れぞれC1〜Cn（Ｆ）である。12−１〜12−ｎはコンデン
サ10−１〜10−ｎのいずれかを選択するスイッチ、14は
選択されたコンデンサを電源８に接続するためのスイッ
チである。15は充電されたコンデンサをチャンバ２に接
続するためのスイッチである。
4,6間に細胞懸濁液を収容して細胞に電界を印加する。
８は直流電源、９は抵抗である。チャンバ２と電源８に
対して容量の異なるコンデンサ10−１〜10−ｎが並列に
設けられている。コンデンサ10−１〜10−ｎの容量はそ
れぞれC1〜Cn（Ｆ）である。12−１〜12−ｎはコンデン
サ10−１〜10−ｎのいずれかを選択するスイッチ、14は
選択されたコンデンサを電源８に接続するためのスイッ
チである。15は充電されたコンデンサをチャンバ２に接
続するためのスイッチである。
遺伝子導入効率は細胞に印加されるコンデンサ放電波
形の初期電界強度Ｅ（V/cm）及び時定数τ＝CR（秒）に
よって変化する。第４図の装置では時定数τを可変にす
るために、容量の異なるコンデンサ10−１〜10−ｎをス
イッチ12−１〜12−ｎで切り替えている。すなわち、ス
イッチ12−１〜12−ｎによってコンデンサ10−１〜10−
ｎを選択し、まずスイッチ14をオン、スイッチ15をオフ
にしてその選択されたコンデンサを充電し、その後スイ
ッチ14をオフ、スイッチ15をオンにして充電電荷をチャ
ンバ２に放電させる。
形の初期電界強度Ｅ（V/cm）及び時定数τ＝CR（秒）に
よって変化する。第４図の装置では時定数τを可変にす
るために、容量の異なるコンデンサ10−１〜10−ｎをス
イッチ12−１〜12−ｎで切り替えている。すなわち、ス
イッチ12−１〜12−ｎによってコンデンサ10−１〜10−
ｎを選択し、まずスイッチ14をオン、スイッチ15をオフ
にしてその選択されたコンデンサを充電し、その後スイ
ッチ14をオフ、スイッチ15をオンにして充電電荷をチャ
ンバ２に放電させる。
（発明が解決しようとする課題） 第４図の装置ではコンデンサ10−１〜10−ｎの容量の
値C1〜Cnは離散値であるために、時定数τも離散値とな
り、時定数に関する細かな最適化ができない。もし、時
定数の最適化を十分に行なおうとすれば、コンデンサ10
−１〜10−ｎの数を無限に増加させる必要があり、装置
の規模から考えて実現しがたい。
値C1〜Cnは離散値であるために、時定数τも離散値とな
り、時定数に関する細かな最適化ができない。もし、時
定数の最適化を十分に行なおうとすれば、コンデンサ10
−１〜10−ｎの数を無限に増加させる必要があり、装置
の規模から考えて実現しがたい。
また、細胞懸濁液の抵抗値は塩濃度、遺伝子濃度、細
胞密度などによって変化するので、時定数の制御は容易
ではない。
胞密度などによって変化するので、時定数の制御は容易
ではない。
本発明はコンデンサを介して直流電圧パルスを印加す
る場合の時定数を連続的に可変にすることのできる電気
刺激装置を提供することを目的とするものである。
る場合の時定数を連続的に可変にすることのできる電気
刺激装置を提供することを目的とするものである。
（課題を解決するための手段） 第１図に本発明を示す。
２はチャンバ、８は直流電圧電源、10−１〜10−ｎは
電源８により充電され、チャンバ２に放電する並列接続
され互いに容量の異なるコンデンサである。20はチャン
バ２に交流電流を流してチャンバ２の抵抗値を測定する
抵抗測定回路、22は抵抗測定回路の測定値ｒとチャンバ
定数ｋとから細胞懸濁液の比抵抗ρを算出する比抵抗算
出手段、24はチャンバ２の電極間間隔ｄ、時定数τ、コ
ンデンサ10−１〜10−ｎの容量値C1〜Cn及び算出された
比抵抗ρから最適コンデンサ10−ｉを選定し、細胞懸濁
液量voを算出する条件設定手段、26は抵抗測定回路20の
測定値Ｒ、チャンバ２の電極間間隔ｄ及び算出された比
抵抗ρから細胞懸濁液量ｖを検出する細胞懸濁液量検出
手段、28は条件設定手段24で算出された細胞懸濁液量vo
を表示する表示手段である。
電源８により充電され、チャンバ２に放電する並列接続
され互いに容量の異なるコンデンサである。20はチャン
バ２に交流電流を流してチャンバ２の抵抗値を測定する
抵抗測定回路、22は抵抗測定回路の測定値ｒとチャンバ
定数ｋとから細胞懸濁液の比抵抗ρを算出する比抵抗算
出手段、24はチャンバ２の電極間間隔ｄ、時定数τ、コ
ンデンサ10−１〜10−ｎの容量値C1〜Cn及び算出された
比抵抗ρから最適コンデンサ10−ｉを選定し、細胞懸濁
液量voを算出する条件設定手段、26は抵抗測定回路20の
測定値Ｒ、チャンバ２の電極間間隔ｄ及び算出された比
抵抗ρから細胞懸濁液量ｖを検出する細胞懸濁液量検出
手段、28は条件設定手段24で算出された細胞懸濁液量vo
を表示する表示手段である。
（作用） 遺伝子導入を行なう場合を例にして説明する。
チャンバ２を電極間隔ｄと電極面積Ａで決まるチャン
バ定数ｋ（cm-1）＝d/Aは予めわかっており、比抵抗算
出手段22に設定しておく、条件設定手段24にはチャンバ
２の電極間隔ｄ、所望のパルス時定数τ（ms）、コンデ
ンサ10−１〜10−ｎの容量C1〜Cnを設定しておく。
バ定数ｋ（cm-1）＝d/Aは予めわかっており、比抵抗算
出手段22に設定しておく、条件設定手段24にはチャンバ
２の電極間隔ｄ、所望のパルス時定数τ（ms）、コンデ
ンサ10−１〜10−ｎの容量C1〜Cnを設定しておく。
まず、細胞と遺伝子を懸濁させた細胞懸濁液の所定量
のチャンバ２に入れて、チャンバ２の電極を全て細胞懸
濁液で満たす。抵抗測定回路20からチャンバ２へ交流電
流が流され、その電流値と交流電流の電圧とからチャン
バ２の抵抗ｒ（ＫΩ）が測定される。比抵抗算出手段22
は測定された抵抗ｒとチャンバ定数ｋとから比抵抗ρ
（ＫΩ・cm）をρ＝r/kによって算出する。
のチャンバ２に入れて、チャンバ２の電極を全て細胞懸
濁液で満たす。抵抗測定回路20からチャンバ２へ交流電
流が流され、その電流値と交流電流の電圧とからチャン
バ２の抵抗ｒ（ＫΩ）が測定される。比抵抗算出手段22
は測定された抵抗ｒとチャンバ定数ｋとから比抵抗ρ
（ＫΩ・cm）をρ＝r/kによって算出する。
条件設定手段24はコンデンサ10−１〜10−ｎの各容量
C1〜Cnに対して、時定数を設定された時定数τとするの
に必要な細胞懸濁液の量ｖを算出する。それらの算出さ
れたｖのうちチャンバ２の容量よりも小さく、かつ、チ
ャンバ２の容量に最も近い値をvoとして選定し、そのvo
を算出するのに使用された容量Ciのコンデンサ10−ｉを
最適値として選定する。選定されたvoは表示手段28に表
示される。
C1〜Cnに対して、時定数を設定された時定数τとするの
に必要な細胞懸濁液の量ｖを算出する。それらの算出さ
れたｖのうちチャンバ２の容量よりも小さく、かつ、チ
ャンバ２の容量に最も近い値をvoとして選定し、そのvo
を算出するのに使用された容量Ciのコンデンサ10−ｉを
最適値として選定する。選定されたvoは表示手段28に表
示される。
コンデンサ10−ｉが接続され、また、チャンバ２には
自動又は手動により細胞懸濁液が量voだけ注入される。
自動又は手動により細胞懸濁液が量voだけ注入される。
チャンバ２に細胞懸濁液が注入されると、抵抗測定回
路20によって交流電流が流されてその時のチャンバ２の
抵抗Ｒが測定される。懸濁液量検出手段26にもチャンバ
２の電極間間隔ｄを設定しておく。懸濁液量検出手段26
は電極間間隔ｄ、比抵抗ρ及び測定された抵抗値Ｒとか
らチャンバ２に注入された細胞懸濁液量ｖを ｖ＝ρ・d2/R によって検出する。この検出されたｖと算出値voとの比
較によりチャンバ２に所定量の細胞懸濁液が注入された
か否かを判断することができる。
路20によって交流電流が流されてその時のチャンバ２の
抵抗Ｒが測定される。懸濁液量検出手段26にもチャンバ
２の電極間間隔ｄを設定しておく。懸濁液量検出手段26
は電極間間隔ｄ、比抵抗ρ及び測定された抵抗値Ｒとか
らチャンバ２に注入された細胞懸濁液量ｖを ｖ＝ρ・d2/R によって検出する。この検出されたｖと算出値voとの比
較によりチャンバ２に所定量の細胞懸濁液が注入された
か否かを判断することができる。
所定量voの細胞懸濁液が注入されると、選定されたコ
ンデンサ10−ｉに電源８から充電され、その充電電荷が
チャンバ２に放電されることにより所望の時定数τをも
つパルス電界を細胞に印加することができる。
ンデンサ10−ｉに電源８から充電され、その充電電荷が
チャンバ２に放電されることにより所望の時定数τをも
つパルス電界を細胞に印加することができる。
時定数τを条件設定手段に設定すればその時定数τに
応じてコンデンサ10−ｉが選定され、チャンバ２に注入
される細胞懸濁液量voが算出されるので、時定数τを連
続的に変化させて設定することができる。
応じてコンデンサ10−ｉが選定され、チャンバ２に注入
される細胞懸濁液量voが算出されるので、時定数τを連
続的に変化させて設定することができる。
（実施例） 第２図は一実施例を表わす。
チャンバ２は平行平板の対向電極4,6を備えており、
電極4,6は垂直方向に立っている。電極4,6間に細胞懸濁
液を注入することができ、注入量は任意の量とすること
ができる。電極６は接地され、電極４は切替えスイッチ
15aに接続されている。切替えスイッチ15aの一方の接点
にはコンデンサを選択するスイッチ12−１〜12−ｎが接
続されている。スイッチ12−１〜12−ｎにはそれぞれコ
ンデンサ10−１〜10−ｎの一方の電極が接続され、コン
デンサ10−１〜10−ｎの他方の電極は接地されている。
コンデンサの容量はC1〜Cnである。
電極4,6は垂直方向に立っている。電極4,6間に細胞懸濁
液を注入することができ、注入量は任意の量とすること
ができる。電極６は接地され、電極４は切替えスイッチ
15aに接続されている。切替えスイッチ15aの一方の接点
にはコンデンサを選択するスイッチ12−１〜12−ｎが接
続されている。スイッチ12−１〜12−ｎにはそれぞれコ
ンデンサ10−１〜10−ｎの一方の電極が接続され、コン
デンサ10−１〜10−ｎの他方の電極は接地されている。
コンデンサの容量はC1〜Cnである。
コンデンサ10−１〜10−ｎを充電するために、スイッ
チ12−１〜12−ｎとコンデンサ10−１〜10−ｎの回路に
はスイッチ14と抵抗９を介して直流電圧電源８の＋電極
が接続され、電源８の−電極は接地されている。
チ12−１〜12−ｎとコンデンサ10−１〜10−ｎの回路に
はスイッチ14と抵抗９を介して直流電圧電源８の＋電極
が接続され、電源８の−電極は接地されている。
切替えスイッチ15aの他方の接点には抵抗測定回路20
が接続されている。抵抗測定回路20では切替えスイッチ
15aの接点に抵抗32を介して交流電源34が接続されてい
る。抵抗32の両端には電位差を測定するために差動増幅
器36が接続され、差動増幅器36の出力は整流回路38で整
流され、A/D変換器40でデジタル信号に変換されてマイ
クロコンピュータ30に取り込まれる。
が接続されている。抵抗測定回路20では切替えスイッチ
15aの接点に抵抗32を介して交流電源34が接続されてい
る。抵抗32の両端には電位差を測定するために差動増幅
器36が接続され、差動増幅器36の出力は整流回路38で整
流され、A/D変換器40でデジタル信号に変換されてマイ
クロコンピュータ30に取り込まれる。
コンデンサ10−１〜10−ｎを選択するスイッチ12−１
〜12−ｎ、スイッチ14及び切替えスイッチ15aはマイク
ロコンピュータ30によりオン・オフ又は切替えが制御さ
れる。
〜12−ｎ、スイッチ14及び切替えスイッチ15aはマイク
ロコンピュータ30によりオン・オフ又は切替えが制御さ
れる。
42は本装置の動作を操作するとともに、チャンバ定数
ｋ、電極間間隔ｄ、時定数τ、コンデンサの容量C1〜Cn
を設定するために使用されるキーボードであり、28は表
示手段としてのCRTである。
ｋ、電極間間隔ｄ、時定数τ、コンデンサの容量C1〜Cn
を設定するために使用されるキーボードであり、28は表
示手段としてのCRTである。
第１図における比抵抗算出手段22、条件設定手段24及
び細胞懸濁液量検出手段26はマイクロコンピュータ30に
よって実現される。
び細胞懸濁液量検出手段26はマイクロコンピュータ30に
よって実現される。
次に、本実施例の動作を第３図のフローチャートを参
照して説明する。
照して説明する。
まず、操作者はチャンバ２に細胞権濁液の所定量を注
入する。細胞懸濁液を注入したことが入力されると（ス
テップS1）、スイッチ14,15が第２図の状態から、切替
えスイッチ15aが抵抗測定回路20側に切り替えられる。
これにより、交流電源34から抵抗32を経てチャンバ２に
交流電流が流れ、このとき抵抗32で発生する電圧が差動
増幅器36により検出され、整流回路38で整流され、A/D
変換器40でデジタル信号に変換されてマイクロコンピュ
ータ30に取り込まれ、チャンバ２の抵抗ｒ（ＫΩ）が算
出される（ステップS2）。そして、チャンバ定数ｋが取
り込まれ、比抵抗ρが ρ＝r/k として算出される（ステップS3,S4）。
入する。細胞懸濁液を注入したことが入力されると（ス
テップS1）、スイッチ14,15が第２図の状態から、切替
えスイッチ15aが抵抗測定回路20側に切り替えられる。
これにより、交流電源34から抵抗32を経てチャンバ２に
交流電流が流れ、このとき抵抗32で発生する電圧が差動
増幅器36により検出され、整流回路38で整流され、A/D
変換器40でデジタル信号に変換されてマイクロコンピュ
ータ30に取り込まれ、チャンバ２の抵抗ｒ（ＫΩ）が算
出される（ステップS2）。そして、チャンバ定数ｋが取
り込まれ、比抵抗ρが ρ＝r/k として算出される（ステップS3,S4）。
次に、設定された電極間間隔ｄ（cm）、時定数τ（m
s）及びコンデンサ10−１〜10−ｎの容量C1〜Cnが取り
込まれ（ステップS5）、その時定数τになるように、コ
ンデンサ10−１〜10−ｎの容量C1〜Cnに対する細胞懸濁
液量ｖ（ml）が算出される。この計算は次の式によって
行なわれる。
s）及びコンデンサ10−１〜10−ｎの容量C1〜Cnが取り
込まれ（ステップS5）、その時定数τになるように、コ
ンデンサ10−１〜10−ｎの容量C1〜Cnに対する細胞懸濁
液量ｖ（ml）が算出される。この計算は次の式によって
行なわれる。
ｖ＝ρd2Ci/τ 算出された細胞懸濁液量ｖのうちチャンバ２の容量よ
りも小さく、かつチャンバ２の容量に最も近いものが最
適な細胞懸濁液量voとなり、そのときの容量Ciとともに
選定され、コンデンサ選択用スイッチ12−１〜12−ｎの
うちその容量Ciをもつコンデンサ10−ｉのスイッチ12−
ｉがオンとされ（ステップS6）、細胞懸濁液量voはCRT2
8に表示される（ステップS7）。
りも小さく、かつチャンバ２の容量に最も近いものが最
適な細胞懸濁液量voとなり、そのときの容量Ciとともに
選定され、コンデンサ選択用スイッチ12−１〜12−ｎの
うちその容量Ciをもつコンデンサ10−ｉのスイッチ12−
ｉがオンとされ（ステップS6）、細胞懸濁液量voはCRT2
8に表示される（ステップS7）。
比抵抗ρを測定するために注入した細胞懸濁液を取り
出した後、操作者は表示された細胞懸濁液量voになるよ
うにチャンバ２に細胞懸濁液を注入する。このとき細胞
懸濁液はチャンバ２内で均一な高さとなるように注入す
る。
出した後、操作者は表示された細胞懸濁液量voになるよ
うにチャンバ２に細胞懸濁液を注入する。このとき細胞
懸濁液はチャンバ２内で均一な高さとなるように注入す
る。
細胞懸濁液が注入されたことが入力されると、マイク
ロコンピュータ30はその時の抵抗測定回路20の出力から
チャンバ２の抵抗値Ｒが算出し、次式 ｖ＝ρd2/R によって実際に注入された細胞懸濁液量ｖとその時の時
定数τを算出し、CRT28に表示する（ステップS8）。マ
イクロコンピュータ30は注入された細胞懸濁液量ｖと時
定数τから算出された細胞懸濁液量voとを比較し、ｖが
voと一致すると判断される範囲内に入ったことを確認す
ると（ステップS9）、スイッチ14をオンにして選定され
たコンデンサ10−ｉを電源８により所定の初期電圧まで
充電させる（ステップS10）。所定の初期電圧はマイク
ロコンピュータ30に予め入力されているものとする。
ロコンピュータ30はその時の抵抗測定回路20の出力から
チャンバ２の抵抗値Ｒが算出し、次式 ｖ＝ρd2/R によって実際に注入された細胞懸濁液量ｖとその時の時
定数τを算出し、CRT28に表示する（ステップS8）。マ
イクロコンピュータ30は注入された細胞懸濁液量ｖと時
定数τから算出された細胞懸濁液量voとを比較し、ｖが
voと一致すると判断される範囲内に入ったことを確認す
ると（ステップS9）、スイッチ14をオンにして選定され
たコンデンサ10−ｉを電源８により所定の初期電圧まで
充電させる（ステップS10）。所定の初期電圧はマイク
ロコンピュータ30に予め入力されているものとする。
その後、マイクロコンピュータ30はスイッチ14をオフ
にし、スイッチ15aをコンデンサ側に切り替えてチャン
バ２にコンデンサ10−ｉの電荷を放電させる（ステップ
S11）。これにより、チャンバ２の細胞懸濁液に所定の
初期電圧で、設定された時定数τのパルス電界を与え
る。
にし、スイッチ15aをコンデンサ側に切り替えてチャン
バ２にコンデンサ10−ｉの電荷を放電させる（ステップ
S11）。これにより、チャンバ２の細胞懸濁液に所定の
初期電圧で、設定された時定数τのパルス電界を与え
る。
実施例は本発明を遺伝子導入装置に適用した例を示し
ているが、例えば第２図の装置にさらに交流電源装置を
設け、チャンバ２に交流電界と直流電界を切り替えて印
加するようにすれば、細胞融合装置として使用すること
ができるようになる。
ているが、例えば第２図の装置にさらに交流電源装置を
設け、チャンバ２に交流電界と直流電界を切り替えて印
加するようにすれば、細胞融合装置として使用すること
ができるようになる。
（発明の効果） 本発明では複数のコンデンサのうちの最適なものに対
し、チャンバに注入する細胞懸濁液量を算出し、実際に
注入される細胞懸濁液量が算出された量になるように、
抵抗測定回路による抵抗値測定から監視し、その後にコ
ンデンサを経てチャンバの細胞懸濁液に直流電圧パルス
を印加するようにしたので、所望の時定数の直流電圧パ
ルスを印加することができ、実験の再現性がよくなる。
し、チャンバに注入する細胞懸濁液量を算出し、実際に
注入される細胞懸濁液量が算出された量になるように、
抵抗測定回路による抵抗値測定から監視し、その後にコ
ンデンサを経てチャンバの細胞懸濁液に直流電圧パルス
を印加するようにしたので、所望の時定数の直流電圧パ
ルスを印加することができ、実験の再現性がよくなる。
チャンバに注入する細胞懸濁液量は連続的に変えるこ
とができ、チャンバの容量以内であれば自由に変化させ
ることができるので、時定数を連続的に変化させること
ができ、きめの細かい実験を行なうことができる。
とができ、チャンバの容量以内であれば自由に変化させ
ることができるので、時定数を連続的に変化させること
ができ、きめの細かい実験を行なうことができる。
第１図は本発明を示すブロック図、第２図は一実施例を
示す回路図、第３図は一実施例の動作を示すフローチャ
ート図、第４図は従来の遺伝子導入装置を示す回路図で
ある。 ２……チャンバ、4,6……電極、８……直流電圧電源、1
0−１〜10−ｎ……コンデンサ、20……抵抗測定回路、2
2……比抵抗算出手段、24……条件設定手段、26……細
胞懸濁液量検出手段、28……表示手段。
示す回路図、第３図は一実施例の動作を示すフローチャ
ート図、第４図は従来の遺伝子導入装置を示す回路図で
ある。 ２……チャンバ、4,6……電極、８……直流電圧電源、1
0−１〜10−ｎ……コンデンサ、20……抵抗測定回路、2
2……比抵抗算出手段、24……条件設定手段、26……細
胞懸濁液量検出手段、28……表示手段。
Claims (1)
- 【請求項１】対向電極間に細胞懸濁液を収容して電界を
印加するチャンバと、直流電圧電源と、前記電源により
充電され、前記チャンバに放電する並列接続された互い
に容量の異なる複数個のコンデンサと、前記チャンバに
交流電流を流して前記チャンバの抵抗値を測定する抵抗
測定回路と、この抵抗測定回路の測定値とチャンバ定数
とから細胞懸濁液の比抵抗を算出する比抵抗算出手段
と、前記チャンバの電極間間隔、時定数、前記コンデン
サの容量値及び算出された比抵抗から最適コンデンサを
選定し、細胞懸濁液量を算出する条件設定手段と、前記
抵抗測定回路の測定値、前記チャンバの電極間間隔及び
算出された比抵抗から細胞懸濁液量を検出する細胞懸濁
液量検出手段と、前記条件設定手段で算出された細胞懸
濁液量を表示する表示手段とを備えた時定数制御型細胞
電気刺激装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63184057A JP2621384B2 (ja) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | 時定数制御型細胞電気刺激装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63184057A JP2621384B2 (ja) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | 時定数制御型細胞電気刺激装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0235071A JPH0235071A (ja) | 1990-02-05 |
| JP2621384B2 true JP2621384B2 (ja) | 1997-06-18 |
Family
ID=16146619
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63184057A Expired - Fee Related JP2621384B2 (ja) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | 時定数制御型細胞電気刺激装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2621384B2 (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10119901A1 (de) | 2001-04-23 | 2002-10-24 | Amaxa Gmbh | Schaltungsanordnung zur Einbringung von Nukleinsäuren und anderen biologisch aktiven Molekülen in den Kern höherer eukaryontischer Zellen mit Hilfe elektrischen Stroms |
| KR100458662B1 (ko) * | 2002-03-13 | 2004-12-03 | 문영훈 | 정전압회로, 작업환경 저장회로를 내장한 전기세포융합장치 |
| EP1607484B1 (de) | 2004-06-14 | 2014-04-02 | Lonza Cologne GmbH | Verfahren und Schaltungsanordnung zur Behandlung von biologischem Material |
| US7923238B2 (en) * | 2006-02-10 | 2011-04-12 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Multi-channel electroporation system |
| JP2008260008A (ja) * | 2007-03-19 | 2008-10-30 | Tosoh Corp | 微粒子操作装置及びそれを用いた微粒子操作方法 |
| CN110437999A (zh) * | 2019-07-15 | 2019-11-12 | 广州蛟龙细胞医药科技有限公司 | 一种电转仪 |
-
1988
- 1988-07-22 JP JP63184057A patent/JP2621384B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0235071A (ja) | 1990-02-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7134331B2 (en) | Liquid detecting apparatus, liquid-amount detecting apparatus, liquid detecting method, and liquid-amount detecting method | |
| US5047722A (en) | Apparatus for measuring internal resistance of wet cell storage batteries having non-removable cell caps | |
| DE69326921D1 (de) | Verfahren und Schaltungen zum Messen der Leitfähigkeit von Lösungen | |
| US7233823B2 (en) | Apparatus for measuring body composition | |
| JP2621384B2 (ja) | 時定数制御型細胞電気刺激装置 | |
| KR950021947A (ko) | 배터리 충전기와 방전기 및 특성 평가 시스템 | |
| Bezanilla et al. | Sodium and potassium conductance changes during a membrane action potential | |
| US6232786B1 (en) | Apparatus and method for measuring conductivity | |
| US4613850A (en) | Circuit arrangement for checking the position of electrodes | |
| US4139896A (en) | Method and apparatus for producing nonlinear integral functions | |
| JP2621395B2 (ja) | 抵抗値可変型細胞電気刺激装置 | |
| US3887868A (en) | Measuring device for determining the concentration and the mean particle size of particles suspended in an electrolytically conductive liquid | |
| US7378857B2 (en) | Methods and apparatuses for detecting the level of a liquid in a container | |
| JP3583540B2 (ja) | 容量性素子の等価直列抵抗測定方法および等価直列抵抗測定装置 | |
| ES8301843A1 (es) | "perfeccionamientos en los aparatos para el tratamiento electrico de liquidos". | |
| CN103580105B (zh) | 充电装置 | |
| JPH09218241A (ja) | 半導体要素の試験方法及び装置 | |
| JPH0418782B2 (ja) | ||
| JPH0213846A (ja) | 細管式電気泳動装置 | |
| JPH04303780A (ja) | 蓄電池残存容量計 | |
| US2290574A (en) | Moisture measuring device | |
| SU928254A1 (ru) | Устройство дл контрол сопротивлени заземлител | |
| KR100211114B1 (ko) | 액체 레벨 검출기 | |
| JPS5579474A (en) | Concentration detecting method of developer | |
| SU1064485A1 (ru) | Устройство дл определени электростатических свойств диэлектрических материалов |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |