JP2612533B2 - Pseudomonas new strain - Google Patents

Pseudomonas new strain

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JP2612533B2
JP2612533B2 JP5105165A JP10516593A JP2612533B2 JP 2612533 B2 JP2612533 B2 JP 2612533B2 JP 5105165 A JP5105165 A JP 5105165A JP 10516593 A JP10516593 A JP 10516593A JP 2612533 B2 JP2612533 B2 JP 2612533B2
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pseudomonas
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acid
soil
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正 相澤
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Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は、土壌病害防除に有用な
シュードモナス属新菌株に関する。
The present invention relates to a new strain of Pseudomonas which is useful for controlling soil diseases.

【0002】[0002]

【従来の技術】本願発明者らは、特開昭64−5080
5号に開示されているシュードモナスC−3(Pseudomo
nas sp. C-3)(微工研菌寄第9396号)を発明した
(なお、シュードモナスC−3はその後、シュードモナ
ス・グラジオリと同定された。以下、シュードモナス・
グラジオリC−3は単に「C−3」と言う)。C−3
は、米ぬか、ふすま又はこれらの混合物と共に土壌中に
混入した後、湛水処理を施すことによりタバコ立枯病や
ナス科植物青枯病等の病害を防除する性質を有する。
2. Description of the Related Art The present inventors have disclosed in Japanese Patent Application Laid-Open No. 64-5080.
Pseudomonas C-3 (Pseudomo
nas sp. C-3) (Microcosms No. 9396) (Pseudomonas C-3 was later identified as Pseudomonas gladioli.
Gladioli C-3 is simply referred to as "C-3"). C-3
Is mixed with rice bran, bran, or a mixture thereof into soil, and then subjected to flooding treatment to control diseases such as tobacco wilt and solanaceous plant wilt.

【0003】C−3は土壌病害防除に有用なものである
が、いくつかの有用植物に対して病原性を発揮するの
で、C−3で処理した土壌に栽培できる作物の種類が限
定されるという問題がある。
Although C-3 is useful for controlling soil diseases, it exhibits pathogenicity to some useful plants, so that the types of crops that can be grown on soil treated with C-3 are limited. There is a problem.

【0004】[0004]

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、土壌病害防除能を有し、かつ、C−3に比べて病原
性が低減された、すなわち、C−3に比べて病原性を発
揮する有用植物の種類が少ない新規な菌株を提供するこ
とである。
SUMMARY OF THE INVENTION Accordingly, an object of the present invention is to have a soil disease controlling ability and to reduce the pathogenicity as compared with C-3, that is, to reduce the pathogenicity as compared with C-3. The purpose of the present invention is to provide a novel strain having a small number of useful plants exhibiting the above.

【0005】[0005]

【課題を解決するための手段】本願発明者らは、C−3
に紫外線照射を行い、得られた菌株について抗菌活性と
病原性を指標にスクリーニングを行うことにより、C−
3と同様な抗菌活性を有し、かつ、病原性が低減された
新菌株を得ることに成功し、本発明を完成した。
Means for Solving the Problems The present inventors have developed a C-3.
By irradiating the strain with ultraviolet light and screening the obtained strains using the antibacterial activity and pathogenicity as indices.
The present inventors have succeeded in obtaining a new strain having the same antibacterial activity as that of Example 3 and reduced pathogenicity, and completed the present invention.

【0006】すなわち、本発明は、シュードモナス・グ
ラジオリC3−NPI(微工研菌寄第12898号)
(以下、「本菌株」という)を提供する。本菌株は、下
記実施例で実験的に示されるように、ナス青枯病菌に対
する防除効果を有し、デンドロビウム、ビルステケラ、
ミルトニア、シンビジウム、グラジオラス、フリージア
及びクロッカスに対する病原性がシュードモナス・グラ
ジオリC−3株(微工研菌寄第9396号)及びシュー
ドモナス・グラジオリ標準菌よりも低減されている。
[0006] That is, the present invention relates to Pseudomonas gladioli C3-NPI (No. 12898, a microbe lab.).
(Hereinafter referred to as "the strain"). This strain is
As shown experimentally in the above examples, it was confirmed that
Dendrobium, Bilstekela,
Miltonia, Cymbidium, Gladiolus, Freesia
And Pseudomonas gra
Geoi C-3 strain (Microtechnical Laboratories No. 9396) and shoe
It is reduced compared to the standard bacteria of Domonas gladioli.

【0007】本菌株の創製方法及び菌学的性質は、下記
実施例において詳述する。本菌株は、米ぬか及びふすま
等と共に土壌に混入し、湛水処理を施すことにより、ト
マト及びナス青枯病、トマト萎凋病、タバコ立枯病等の
土壌病害を防除することができる。
[0007] The creation method and mycological properties of this strain will be described in detail in the following Examples. This strain can be mixed with rice bran, bran, and the like into the soil and subjected to flooding treatment to control soil diseases such as tomato and eggplant wilt, tomato wilt, and tobacco wilt.

【0008】[0008]

【実施例】実施例1 本菌株の創製 ジャガイモ半合成培地に塗末接種したC−3に対し、殺
菌灯により紫外線照射を行った。紫外線照射の条件は1
5ワットの殺菌灯を15cmの距離から30秒間照射し
た。生き残った細菌のコロニーについて、下記実施例3
と同様にしてナス青枯病に対する抗菌活性を指標にスク
リーニングを行い、また、下記実施例4と同様にしてシ
ンビジウムに接種して病原性を指標にスクリーニングを
行った。対照として、C−3についても同様に試験し
た。
EXAMPLES Example 1 Creation of the present strain The potato semi-synthetic medium was inoculated with C-3 and irradiated with ultraviolet light using a germicidal lamp. UV irradiation condition is 1
A 5 watt germicidal lamp was irradiated for 30 seconds from a distance of 15 cm. Example 3 below for surviving bacterial colonies
Screening was carried out using the antibacterial activity against eggplant wilt as an index in the same manner as in Example 1. In addition, screening was carried out in the same manner as in Example 4 described below by inoculating cymbidium with the pathogenicity as an index. As a control, C-3 was similarly tested.

【0009】その結果、ナス青枯病に対する抗菌活性を
有するが、シンビジウムに対して病原性を有さない本菌
株が得られた。対照のC−3は、抗菌活性及び病原性を
共に有していた。本菌株は工業技術院微生物工業技術研
究所に寄託されており、その受託番号は微工研菌寄第1
2898号である。
As a result, the present strain was obtained, which has an antibacterial activity against eggplant wilt but does not have pathogenicity against cymbidium. Control C-3 had both antimicrobial activity and pathogenicity. This strain has been deposited with the Research Institute of Microbial Industry, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, and its accession number is
No. 2898.

【0010】実施例2 本菌株の菌学的性質 本菌株について調べた菌学的性質を下記表1に示す。 Example 2 Mycological properties of this strain The mycological properties of this strain are shown in Table 1 below.

【表1】 表1 ─────────────────────────────────── 形態 桿状 エタノール + グラム反応 − マニトール + 集落の特徴 微細なしわ イノシトール + レバン産生 − エリトリトール − オキシダーゼ反応 + ドルシトール + カタラーゼ反応 + ソルビトール + アルギニン加水分解 −1) アドニトール + デンプンの加水分解 − グリセリン + ゼラチン液化試験 + デンプン − 色素 キングB − イヌリン − リトマスミルク 消化・凝固・脱色 リンゴ酸 + サッカロース還元 − コハク酸 + グルコン酸の酸化 − クエン酸 + カゼインの消化試験 + フマール酸 + ツイーン80の分解 + 乳酸 + レシチナーゼ + 酢酸 + ペクチンの溶解 − 酒石酸(D) + エスクリン加水分解 − プロピオン酸 + メチルレッド試験 − 蟻酸 + アセトイン試験 − シュウ酸 − インドールの生成 − グリコール酸 + 硫化水素の産生 − マレイン酸 + 硝酸塩の還元性 − マロン酸 + 尿素試験(ウレアーゼ) − 安息香酸 + 耐食塩性 3% グルコン酸 + ジャガイモ腐敗能力 − α- ケト- グルタール酸 + タバコ過敏感反応 + ガラクツロン酸 + 炭水化物分解能: トリアセチン + L- アラビノース + ゲラニオール − キシロース + DL- アラニン + リボース + L-ロイシン + グルコース + L-ヒスチジン + フラクトース + L-チロシン +2) ガラクトース + L-トリプトファン + マンノース + プロリン + L-ラムノース + グルタミン + サッカロース − シトルリン − マルトース − アルギニン・一塩酸 + セロビオース + トレハロース + メリビオース + ラクトース − メレジトース − ラフィノース − α- メチル- グルコシド − アルブチン + サリシン + エスクリン − ─────────────────────────────────── 1)開放試験管ははじめ黄変のち赤変 2)増殖するが褐変はみられない なお、これらの菌学的性質のうち、グラム陰性、好気
性、オキシダーゼ活性陽性、かん状、1〜4本の極毛を
有し、運動性、ポリ−β−ヒドロキシ酪酸顆粒が観察さ
れ、アルギニンジヒドロラーゼ活性、硝酸塩還元性及び
脱窒反応は陰性であることから、本菌株はシュードモナ
ス・グラジオリと同定された。
Table 1 Table 1 形態 Form Rod ethanol + Gram reaction-Manitol + Characteristics of colonies Fine wrinkles Inositol + Levan production-Erythritol-Oxidase reaction + Dorsitol + Catalase reaction + Sorbitol + Arginine hydrolysis- 1) Adonitol + Starch hydrolysis-Glycerin + Gelatin liquefaction test + Starch-Pigment King B-Inulin- Litmus milk digestion / coagulation / decolorization malic acid + saccharose reduction-oxidation of succinic acid + gluconic acid-digestion test of citric acid + casein + fumaric acid + decomposition of Tween 80 + lactate + lecithinase + acetic acid + pectin dissolution-tartaric acid (D ) + Esculin hydrolysis-Propionic acid + Methyl Test-formic acid + acetoin test-oxalic acid-indole formation-glycolic acid + hydrogen sulfide production-maleic acid + nitrate reducing properties-malonic acid + urea test (urease)-benzoic acid + salt tolerance 3% gluconic acid + Potato rotting ability-α-keto-glutaric acid + tobacco hypersensitive reaction + galacturonic acid + carbohydrate Resolution: triacetin + L-arabinose + geraniol-xylose + DL-alanine + ribose + L-leucine + glucose + L-histidine + L-tyrosine + 2) galactose + L-tryptophan + mannose + proline + L-rhamnose + glutamine + saccharose-citrulline-maltose-arginine / monohydrochloride + cellobiose + trehalose + melibiose + lactose- Melezitose-raffinose-α-methyl-glucoside-arbutin + salicin + esculin-────────────────────────────────── 1 1) Open test tubes initially turn yellow and then red 2) Proliferate but do not show browning Among these mycological properties, Gram-negative, aerobic, oxidase-positive, rod-shaped, 1-4 The strain was identified as Pseudomonas gladioli because it had polar hairs, motility, poly-β-hydroxybutyrate granules were observed, and arginine dihydrolase activity, nitrate reducing activity, and denitrification were negative. Was.

【0011】実施例3 抗菌活性 日本たばこ植物開発研究所内の原野土壌にナス青枯病菌
を混入した土壌を1 /2000アールワグネルポットに入
れ、防除剤を混入した後、同ポットの地表面から5cmに
達するよう湛水し、30゜Cの常温器内に放置し、青枯病菌
数の減少を調査した。防除剤の混入は、米ぬかとふすま
の等量混合物(以下、「穀粒」)を10アール当り10
0kg又は200kg相当量を土壌に混入し、同時に、
本菌株又は対照としてのC−3を106 個/ml以上含
む溶液を10アール当り200ml相当量混入すること
により行った。さらに、湛水25日後の土壌へ、ナス(品
種:千両2号)の本葉6〜7枚苗を定植し、60日後の発
病率、被害程度および防除率を調査した。また、対照と
して、防除剤を混入することなく湛水処理のみを行った
土壌についても同様に試験した。結果を表2及び表3に
示す。
Example 3 Antibacterial activity A soil obtained by mixing eggplant wilt fungus with wild soil in the Japan Tobacco Plant Development Institute was placed in a 1/2000 are Wagner pot, and after adding a controlling agent, 5 cm from the ground surface of the pot. , And left in a room temperature room at 30 ° C to investigate the decrease in bacterial wilt count. The mixture of the rice bran and the bran (hereinafter referred to as “grain”) is mixed at a rate of 10 per 10 ares.
0kg or 200kg equivalent amount is mixed into the soil,
This was carried out by mixing a solution containing at least 10 6 cells / ml of this strain or C-3 as a control in an amount equivalent to 200 ml per 10 ares. Further, 6 to 7 true leaves of eggplant (variety: Senryo No. 2) were planted on the soil 25 days after flooding, and the disease incidence, damage degree and control rate 60 days later were investigated. In addition, as a control, the same test was performed on soil subjected to only flooding treatment without mixing a controlling agent. The results are shown in Tables 2 and 3.

【表2】 [Table 2]

【表3】 [Table 3]

【0012】なお、青枯病菌数の調査は、原、小野の培
地を用い、単位は土壌1g中の菌数とした。被害程度
は、下記表3に示すように、発病指数を0から10まで
の5段階に区別し、以下の式により算出した。
The bacterial count of bacterial wilt was investigated using the culture media of Hara and Ono, and the unit was the bacterial count in 1 g of soil. As shown in Table 3 below, the degree of damage was calculated by the following formula, with the disease index being classified into five stages from 0 to 10.

【数1】 (Equation 1)

【表4】 また、防除率は、下記式により算出した。[Table 4] The control rate was calculated by the following equation.

【数2】 (Equation 2)

【0013】実施例4 本菌株の病原性(1) ジャガイモ半合成培地に生育した本菌株を1白金耳取
り、蒸留水に懸濁し、ラン類及びアヤメ科植物に針接種
し、病原性を調査した。対照としては、蒸留水、C−3
菌液、Pseudomonas gladioli標準菌を用いた。結果を表
4に示す。
Example 4 Pathogenicity of this strain (1) One platinum loop of this strain grown on a potato semi-synthetic medium was suspended in distilled water, and the pathogenicity was investigated by inoculating needles into orchids and irises. did. As a control, distilled water, C-3
A bacterial solution, Pseudomonas gladioli standard bacteria, was used. Table 4 shows the results.

【表5】 表5 ─────────────────────────────────── C-3 本菌株 P.gladioli 蒸留水 ─────────────────────────────────── デンドロビウム + − + − バンダ + + + + カトレア + + + + ビルステケラ + − + − ミルトニア + − + − シンビジウム + − + − グラジオラス + − + − フリージア + − + − クロッカス + − + − ─────────────────────────────────── 表4から明らかなように、本菌株は、その病原性がC−
3よりも低減されており、この性質によりC−3とは明
瞭に区別できる(なお、バンダとカトレアについては、
蒸留水でも発病しているので、本菌株による発病とは認
められない)。実施例5 本菌株の病原性(2) 実施例4と同様にして、各種植物に対する病原性を調査
した。結果を表6に示す。
[Table 5] Distillation of C-3 strain P.gladioli Water デ ン Dendrobium +-+-Vanda + + + + Cattleya + + + + Virstekela +-+-Miltonia +-+-Cymbidium +-+-Gladiolus +-+-Freesia +-+-Crocus +-+-───────────────────よ う As is clear from Table 4, this strain has a pathogenicity of C-
3 which is clearly distinguishable from C-3 (note that Banda and Cattleya are
The disease is not recognized as being caused by this strain, since the disease is also caused by distilled water.) Example 5 Pathogenicity of this strain (2) The pathogenicity to various plants was investigated in the same manner as in Example 4. Table 6 shows the results.

【表6】 注)サトイモは対照(殺菌水)も針接種部では+反応を
示したが、周辺への拡大は、いづれも認められない。表
6から明らかなように、本菌株は広範囲の有用植物に対
して病原性を示さない。
[Table 6] Note) For the taro, the control (sterilized water) also showed a positive response at the needle inoculation site, but no expansion to the periphery was observed. As is clear from Table 6, this strain does not show pathogenicity to a wide range of useful plants.

【0014】[0014]

【発明の効果】本発明により、土壌病害の防除に有用
で、かつ、有用植物に対する病原性が従来の菌株よりも
低減されたシュードモナス新菌株が提供された。
Industrial Applicability According to the present invention, there is provided a new Pseudomonas strain which is useful for controlling soil diseases and has a lower pathogenicity to useful plants than conventional strains.

フロントページの続き (56)参考文献 特開 平3−220108(JP,A) 特開 平2−59504(JP,A) 特開 昭62−123104(JP,A) 特開 昭64−16579(JP,A) 特開 昭60−186230(JP,A) 特開 平1−50805(JP,A)Continuation of front page (56) References JP-A-3-220108 (JP, A) JP-A-2-59504 (JP, A) JP-A-62-123104 (JP, A) JP-A-64-16579 (JP) JP-A-60-186230 (JP, A) JP-A-1-50805 (JP, A)

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】(57) [Claims] 【請求項1】 ナス青枯病菌に対する防除効果を有し、
デンドロビウム、ビルステケラ、ミルトニア、シンビジ
ウム、グラジオラス、フリージア及びクロッカスに対す
る病原性がシュードモナス・グラジオリC−3株(微工
研菌寄第9396号)及びシュードモナス・グラジオリ
標準菌よりも低減されている、シュードモナス・グラジ
オリC3−NPI(微工研菌寄第12898号)。
According to claim 1, further comprising a controlling effect on the Na scan wilt bacterium,
Dendrobium, Bilstekela, Miltonia, Symbizi
Against um, gladiolus, freesia and crocus
Pathogenicity is Pseudomonas gladioli C-3
No. 9396) and Pseudomonas gradioli
Pseudomonas gladioli C3-NPI , which is reduced compared to a standard bacterium (Microtechnical Laboratory No. 12898).
JP5105165A 1992-04-15 1993-04-07 Pseudomonas new strain Expired - Lifetime JP2612533B2 (en)

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JP4-121179 1992-04-15
JP4121179A JPH0686668A (en) 1992-04-15 1992-04-15 New strain belonging to pseudomonas
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JPH06197754A JPH06197754A (en) 1994-07-19
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