JP2024532149A - 動物ウイルス感染を治療するための方法および組成物 - Google Patents

Abstract

動物におけるウイルス感染を治療する方法が提供される。オレアンドリンまたはジゴキシンは、以下のウイルス科：アルテルウイルス科、アストロウイルス科、ボルナウイルス科、サーコウイルス科、コロナウイルス科、コルドポックスウイルス亜科、フラビウイルス科、ヘルペスウイルス科、オルトミクソウイルス科、パピローマウイルス科、パポバウイルス科、パラミクソウイルス科、パルボウイルス科、ピコルナウイルス科、ポックスウイルス科、レオウイルス科、レトロウイルス科、ラブドウイルス科、およびトガウイルス科のいずれかにより引き起こされるウイルス感染を治療するために投与される。抗ウイルス組成物は、ウイルス感染の疾患状態を予防するために投与され得る。家庭用および家畜動物が治療され得る。

Description

本発明は、治療を必要とする動物への強心配糖体、詳細にはオレアンドリンの投与により、動物ウイルス感染を治療する方法に関する。アルテルウイルス科、フラビウイルス科、パラミクソウイルス科、ピコルナウイルス科、コルドポックスウイルス亜科、ポックスウイルス科、コロナウイルス科、パピローマウイルス科、ラブドウイルス科、パルボウイルス科、オルトミクソウイルス科、レオウイルス科、アストロウイルス科、およびサーコウイルス科ウイルス感染が治療され得る。詳細には、ウシコロナウイルス（ＢＣＶ）、ブタコロナウイルス（ＰＣＶ）、ウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）、ウシ呼吸器多核体ウイルス（ＢＲＳＶ）、およびブタ繁殖・呼吸障害症候群ウイルス（ＰＲＲＳＶ）が治療され得る。

オレアンドリンは、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｄｏｒｕｍ）植物からの抽出により得られる強心配糖体である。植物材料の消費は、動物に毒性であり、時には致死的な中毒をもたらし得ることは、畜産において広く認識されている。（Ｒｕｂｉｎｉら、Ｔｏｘｉｎｓ（２０１９），１１，４４２の“Ａ ｐｒｏｂａｂｌｅ ｆａｔａｌ ｃａｓｅ ｏｆ ｏｌｅａｎｄｅｒ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ）ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ ｏｎ ａ ｃａｔｔｌｅ ｆａｒｍ：ａ ｎｅｗ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｏｌｅａｎｄｒｉｎ ｔｏｘｉｎ ｉｎ ｒｕｍｅｎ”；Ｃｅｃｉら、Ｔｏｘｉｎｓ（２０２０），１２，４７１の“Ｏｕｔｂｒｅａｋ ｏｆ ｏｌｅａｎｄｅｒ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ）ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ ｉｎ ｄａｉｒｙ ｃａｔｔｌｅ：ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｆｏｏｄ ｓａｆｅｔｙ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”；Ａｓｌａｎｉら、Ｖｅｔ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．（２００４），２８，６０９－６１６の“Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｏｌｅａｎｄｅｒ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ）ｔｏｘｉｃｏｓｉｓ ｉｎ ｓｈｅｅｐ”；Ｂａｒｂｏｓａら、Ｒｅｓ．Ｖｅｔ．Ｓｃｉ．（２００８），８５，２７９－２８１の“Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ｇｏａｔｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｏｌｅａｎｄｅｒ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ）”；Ｓｏｔｏ－Ｂｌａｎｃｏら、Ｔｒｏｐ．Ａｎｉｍ．Ｈｅａｌｔｈ Ｐｒｏｄ．（２００６），３８，４５１－４５４の“Ａｃｕｔｅ ｃａｔｔｌｅ ｉｎｔｏｘｉｃａｔｉｏｎ ｆｒｏｍ Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ ｐｏｄｓ”）。

キョウチクトウは、南アフリカにおいて家畜中毒の最も重要な原因と考えられている。不慮の中毒症が、ウマ、ロバ、ウシ、ラクダ類（アルパカおよびラマ）、イヌ、ネコおよび愛玩鳥類において報告されている。キョウチクトウ摂取後の動物における散瞳も、交感神経緊張の増加に関連して観察される。この理由のため、植物に由来する治療製品は、商業的動物または家畜などの動物、例えば、ウマ、ウシ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、家禽などに使用するために開発されていない。

動物ウイルスは７つの群に細分される：ＤＮＡウイルス（ＩおよびＩＩ群）、ＲＮＡウイルス（ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶ群）、およびＲＴウイルス（ＶＩおよびＶＩＩ群）。Ｉ群は、二本鎖ＤＮＡゲノムを含有するウイルスによって代表される。Ｉ群ウイルス（アデノウイルス、ヘルペスウイルス、パポバウイルス、ポックスウイルス）は、ＤＮＡゲノム鋳型からの転写によってｍＲＮＡを合成する。Ｉ群ウイルスは、呼吸器疾患、結膜肺炎、急性出血性膀胱炎、または急性胃腸炎を引き起こす。ＩＩ群（パルボウイルス）は、一本鎖ＤＮＡゲノムを含有するウイルスによって代表される。ＩＩ群ウイルスは、初めにそれらの一本鎖ＤＮＡゲノムを二本鎖ＤＮＡに変換し、次いで、二本鎖ＤＮＡはｍＲＮＡ転写のための鋳型として使用される。ＩＩＩ群は、二本鎖ＲＮＡゲノムを含有するウイルスによって代表される。ＩＩＩ群ウイルスは、それらの二本鎖ＲＮＡ鋳型からの転写によってｍＲＮＡを合成する。ＩＶ群は、プラスセンス一本鎖ＲＮＡゲノムを含有するウイルスによって代表される。ＩＶ群ウイルスは、ゲノムＲＮＡを直接ｍＲＮＡとして利用する（図において点線で示される）。Ｖ群は、マイナスセンス一本鎖ＲＮＡゲノムを含有するウイルスによって代表される。Ｖ群ウイルスは、それらのＲＮＡゲノム鋳型からの転写によってｍＲＮＡを合成する。ＶＩおよびＶＩＩ群は、「逆転写（ＲＴ）ウイルス」ウイルスである。これらは、ＲＮＡまたは二本鎖ＤＮＡゲノムのどちらかを有するが、これらのＲＴウイルスは、ＲＮＡウイルスにもＤＮＡウイルスにも分類されない。ＲＴウイルスによって共有される重要な特徴は、ウイルスＤＮＡが逆転写によって合成されることである。ＶＩ群ウイルスは一本鎖ＲＮＡゲノムを含有するが、ゲノムＲＮＡは、ＩＶ群のものと異なり、ｍＲＮＡとして機能しないことに留意されたい。ＶＩＩ群ウイルスは二本鎖ＤＮＡゲノムを含有する。

マイナスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（－）－（ｓｓ）－ｅｎｖＲＮＡＶ）は、アレナウイルス科、ブニヤウイルス科（ブニヤウイルス目）、フィロウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、およびラブドウイルス科のものを含む。プラスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（＋）－（ｓｓ）－ｅｎｖＲＮＡＶは、コロナウイルス科（ヒトおよび動物病原体）、フラビウイルス科（ヒトおよび動物病原体）、トガウイルス科（ヒトおよび動物病原体）、アルテルウイルス科（動物病原体）、レトロウイルス科を含む。

家庭的または商業的に重要な動物に有毒であるウイルスは、ニワトリ、シチメンチョウ、ブタ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、スイギュウ、ハトなどにおいて共通する。例示的なウイルスは、ブタサーコウイルス２型（ＰＣＶ２）、ブタ繁殖・呼吸障害症候群（ＰＲＲＳ）ウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤ）ウイルス、ウシヘルペスウイルス１型ウイルス（ＢＨＶ－１、例えば、ウシ感染性鼻気管炎（ＩＢＲ））、ウシパピローマウイルス、リッサウイルス（狂犬病、ラブドウイルス）、口蹄疫ウイルス（ＦＭＤ；ピコルナウイルス科のアフトウイルス属；例えば、血清型Ａ、Ｏ、Ｃ、ＳＡＴ１、ＳＡＴ２、ＳＡＴ３、Ａｓｉａ１）、ランピースキン病ウイルス（ポックスウイルス科のカプリポックスウイルス属）、アフリカウマ病ウイルス（レオウイルス科）、羊痘ウイルスおよびヤギ痘ウイルス（コルドポックスウイルス亜科、カプリポックスウイルス属）、ウマインフルエンザウイルス、ウマ感染性貧血ウイルス、ウマ動脈炎ウイルス、アフリカブタ熱ウイルス、ブタコレラウイルス、ニパウイルス、ブタ水疱症ウイルス、ブタ伝染性胃腸炎ウイルス、トリ感染性気管支炎ウイルス、感染性喉頭気管炎ウイルス（トリ）、アヒル肝炎ウイルス、トリインフルエンザウイルス、感染性ファブリキウス嚢病ウイルス（ガンボロ）、マレック病ウイルス（内臓白血症；ヘルペスウイルス）、悪性ニューカッスル病ウイルス（ｖＮＤＶ、パラミクソウイルス科、エイブラウイルス属）、トリメタニューモウイルス（シチメンチョウにおける）、トリインフルエンザウイルス、家禽腸炎致死症候群（シチメンチョウにおけるＰＥＭＳ）、ハトアルファヘルペスウイルス－１（ＣｏＨＶ－１）、トリ腎炎、アルボウイルス感染、シチメンチョウウイルス性肝炎、トリ脳脊髄炎、トリＥ型肝炎ウイルス、ニワトリコレラ、鶏痘、家禽コレラ、シチメンチョウにおける出血性腸炎、イヌパルボウイルス１型または２型、イヌ感染性肝炎（ＩＣＨ、アデノウイルス１）、イヌヘルペス、イヌジステンパーウイルス（モルビリウイルス属）、イヌにおけるロタウイルス腸ウイルス、ブタヘルペスウイルス１（仮性狂犬病、オーエスキー病）、イヌインフルエンザ、イヌパラインフルエンザウイルス、ネコヘルペスウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、ネコパルボウイルス、ネコ感染性腹膜炎ウイルス、ネコインフルエンザウイルス、ネコカリシウイルス、ネコ白血病ウイルス、ネコウイルス性鼻気管炎、ネココロナウイルス、ネコロタウイルス、ネコアストロウイルス、トルクテノススウイルス（ＴＴＳｕＶ）、ブタテシオウイルス（ＰＴＶ）、ブタボカウイルス１（ＰＢｏＶ１）、ブタインフルエンザウイルス（例えば、Ａ型）、ブタ風土性下痢ウイルス（ＰＥＤＶ）、ブタデルタコロナウイルスなどを含む。これらのウイルスの多くは、好適な抗ウイルス治療を有しない。

コロナウイルス（ＣｏＶ）は、コロナウイルス科の一般名称である。動物では、ＣｏＶ、例えばウシコロナウイルス（ＢＣＶ）は、呼吸器感染症を引き起こす。ウシコロナウイルス（ＢＣＶ）は、仔ウシ腸炎（通常は下痢を伴う腸の炎症）のウイルス性の原因である。ウイルスは、仔ウシの腸および／または上気道に感染し、肺炎の発症の一因となる。それは、成体の舎飼牛における冬季赤痢の原因でもある。ウシコロナウイルスは、世界中のウシで見出されている。ＢＣＶの発生率は、世界の様々な地域で異なるが、公開年次報告は、ＢＣＶが全ての仔ウシ腸炎症例のうちの１５～３０％を引き起こすことを指示する。世界中の多くの検査室は、ＢＣＶ抗原検出方法を備えていないので、発生率は少なく見積もられ得る。臨床徴候は、血便排泄またはメレナを伴うことがある下痢、第一胃アトニー、食欲不振または食欲減少、体重減少または体重増加の減少、泌乳量の減少および脱水および抑うつを含む。呼吸器の徴候は、二次細菌感染が存在する場合は化膿に進行する漿液性鼻漏、咳、呼吸困難および頻呼吸を含み得る。ＢＣＶに対して有効な抗ウイルス治療には、かなりの必要性が依然ある（組成物および方法）。

ウシウイルス性下痢（ＢＶＤＶ）は、世界中のウシに影響を与えるウイルス性疾患である。それは、ペスチウイルスによって引き起こされ、生産および繁殖へのその影響により、酪農および食肉用のウシの両方において重大な経済的損失を生じさせる。ウシウイルス性下痢ウイルスは、無症状の感染症から流産、不妊、および致死的な粘膜疾患を含むより重度の症状に及ぶ様々な臨床転帰に至り得る。状態は、高度に免疫抑制性であり、二次的な呼吸器および腸合併症が発生することが多い。ＢＶＤＶに対して有効な抗ウイルス治療には、かなりの必要性が依然ある（組成物および方法）。
ウシ呼吸器多核体ウイルス（ＢＲＳＶ）は、ウシにおける呼吸器の状態である。それは、鼻上皮において複製し、次いで、上気道全体に気管支樹まで散らばる。ここで、合胞体が形成し、細気管支へのさらなる広がりが発生する。ＲＳＶ関連疾患の大発生は、通常、冬の収容に関連して発生し、仔ウシの混合および輸送などのストレスの期間中にも発生する。このウイルスは、仔ウシ流行性肺炎の一因となり得る。ワクチンは入手可能であるが、典型的にはあまり有効でない。ＢＲＳＶに対して有効な抗ウイルス治療には、かなりの必要性が依然ある（組成物および方法）。

ブタ繁殖・呼吸障害症候群（ＰＲＲＳまたはＰＲＲＳＶ）は、２つ合わさった臨床症状、繁殖動物における繁殖障害または不全、およびあらゆる年齢のブタにおける呼吸器疾患によって特徴付けられるウイルス性疾患である。ＰＲＲＳは、ブタコレラ（ＣＳＦ）の撲滅以来、米国のブタ生産に影響を与える最も経済的に重大な疾患である。世界中でＰＲＲＳは、ブタの最も経済的に重要な感染性疾患である。ブタ繁殖・呼吸障害症候群ウイルス（ＰＲＲＳＶ）は、全ての年齢群において発生する。雌ブタまたは雌仔ブタではより当然の繁殖障害または不全は、一部の雄ブタにも影響を与える。呼吸器症候群は、若齢の成長中のブタにおいて見られることがより多いが、感作済みのブタおよび種畜においても発生する。ＰＲＲＳは、初めは１９８０年代後半に、ほんのいくつかの国で報告されたが、今ではほとんどの主要なブタ飼育国において世界中で発生している。ＰＲＲＳは、米国において流行しており、流行性および風土性の形態の両方で存在する。主に、ウイルスの変異、大きなブタ集団、および伝播の未解決の問題ゆえに、ＰＲＲＳのコントロールのための単一の成功する戦略はない。ＰＲＲＳＶに対して有効な抗ウイルス治療には、かなりの必要性が依然ある（組成物および方法）。

特定のウイルスに対する特定の化合物の抗ウイルスは予測不可能である。いくつかの場合では、化合物は、第１のウイルスに対して活性であるが、第２のウイルスに対して不活性であることが見出され得る。さらに、ウイルスは、抗ウイルス薬に対する耐性を予測不能に発現する（Ｋｉｒｗｉｎら、Ｖｉｒｕｓ Ｅｖｏｌ（Ｊａｎ ２１０６），２（１），１－１０の“Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｓ ａｎ ａｄａｐｔｉｖｅ ｐｒｏｃｅｓｓ”）。薬物耐性の発現は、アマンタジン、オセルタミビル、および他の薬物について見出されている。ＨＩＶ、インフルエンザ、Ｂ型肝炎、ポリオ、Ｃ型肝炎、ＨＳＶ－２などの薬物耐性株。

Ｎｅｒｉｕｍ種のメンバーであるＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒは、亜熱帯アジア、米国南西部、および地中海に広く分布する観賞植物である。その医学的および毒物学的特性は、長い間認識されてきた。ヒトでは、それは例えば、痔疾、潰瘍、ハンセン病、ヘビ咬傷、癌、腫瘍、神経障害、疣贅および細胞増殖性疾患の治療での使用が提案されている。Ｚｉｂｂｕら（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．（２０１０），２（６），３５１－３５８）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの化学的および薬理学的活性について簡単に触れている。

Ｎｅｒｉｕｍ種の植物からの構成成分の抽出は、伝統的に、沸騰水、冷水、超臨界流体または有機溶媒を使用して実施されている。

ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）（ＯｚｅｌのＵＳ５，１３５，７４５）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物の濃縮形態または粉末形態を含む。Ｍｕｌｌｅｒら（Ｐｈａｒｍａｚｉｅ．（１９９１）Ｓｅｐｔ．４６（９），６５７－６６３）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの水抽出物の分析に関する結果を開示している。それらは、存在する多糖類が主にガラクツロン酸であることを報告している。他の糖類には、ラムノース、アラビノース、およびガラクトースが含まれる。Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物内の多糖類含有量および多糖類の個々の糖組成物もまた、Ｎｅｗｍａｎら（Ｊ．Ｈｅｒｂａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ，（２００１）ｖｏｌ１，ｐｐ．１－１６）によって報告されている。熱水抽出物ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）の組成分析は、Ｎｅｗｍａｎら（Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．（２０００），７２（１５），３５４７－３５５２）によって説明されている。Ｓｅｌｖａｒａｊらの米国特許第５，８６９，０６０号は、Ｎｅｒｉｕｍ種の抽出物および生成の方法に関する。抽出物を調製するために、植物材料を水に入れて沸騰させる。次いで、粗抽出物を植物から分離し、濾過によって滅菌する。次いで、得られた抽出物は、凍結乾燥され、粉末を生成することができる。米国特許第６，５６５，８９７号（米国登録前第２００２０１１４８５２号およびＳｅｌｖａｒａｊらのＰＣＴ国際公開第２０００／０１６７９３号）は、実質的に減菌の水抽出物の調製のための熱水抽出プロセスを開示している。Ｉｓｈｉｋａｗａら（Ｊ．Ｎｕｔｒ．Ｓｃｉ．Ｖｉｔａｍｉｎｏｌ．（２００７），５３，１６６－１７３）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物、ならびにクロロホルム、メタノールおよび水の混合物を使用した液体クロマトグラフィーによるその分画を開示している。これらはまた、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒの葉抽出物が、ＩＩ型糖尿病の治療に使用されていることを報告している。２００６年８月２４日に公開されたＰａｎｙｏｓａｎのＵＳ２００６０１８８５８５は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物を開示している。２０１９年６月１８日に発行されたＳｍｏｔｈｅｒｓのＵＳ１０３２３０５５は、植物材料をアロエおよび水で抽出して、アロエおよび強心配糖体を含む抽出物を得る方法を開示している。２００７年７月５日に公開されたＲａｓｈａｎらのＵＳ２００７０１５４５７３は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの冷水抽出物およびその使用を開示している。

Ｅｒｄｅｍｏｇｌｕら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２００３）Ｎｏｖ．８９（１），１２３－１２９）は、抗侵害受容作用および抗炎症作用に基づいて、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒを含む植物の水性抽出物およびエタノール抽出物の比較結果を開示している。Ｆａｒｔｙａｌら（Ｊ．Ｓｃｉ．Ｉｎｎｏｖ．Ｒｅｓ．（２０１４），３（４），４２６－４３２）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒのメタノール抽出物、水性抽出物および石油エーテル抽出物の、その抗菌活性に基づく比較結果を開示している。

Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの有機溶媒抽出物もまた、Ａｄｏｍｅら（Ａｆｒ．Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉ．（２００３）Ａｕｇ．３（２），７７－８６；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、ｅｌ－Ｓｈａｚｌｙら（Ｊ．Ｅｇｙｐｔ Ｓｏｃ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．（１９９６），Ａｕｇ．２６（２），４６１－４７３；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｂｅｇｕｍら（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９９）Ｆｅｂ．５０（３），４３５－４３８；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｚｉａら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｌｐｈａｒｍａｃｏｌ．（１９９５）Ｎｏｖ．４９（１），３３－３９；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、およびＶｌａｓｅｎｋｏら（Ｆａｒｍａｔｓｉｉａ．（１９７２）Ｓｅｐｔ．－Ｏｃｔ．２１（５），４６－４７；ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）によって開示される。Ｔｕｒｋｍｅｎら（Ｊ．Ｐｌａｎａｒ Ｃｈｒｏｍａ．（２０１３），２６（３），２７９－２８３）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの葉および茎のエタノール水溶液抽出物を開示している。１９７４年９月３日に発行されたＹａｍａｕｃｈｉのＵＳ３８３３４７２は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｄｏｒｕｍ ＳＯＬ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ Ｌｉｎｎ）の葉の、水、有機溶媒または水性有機溶媒での抽出を開示しており、葉を、６０℃～１７０℃に加熱し、次いで抽出し、有機溶媒は、メタノール、エタノール、プロピルエーテルまたはクロロホルムである。

Ｎｅｒｉｕｍ種の超臨界流体抽出物は、知られており（ＵＳ８３９４４３４、ＵＳ８１８７６４４、ＵＳ７４０２３２５）、神経障害（ＵＳ８４８１０８６、ＵＳ９２２０７７８、ＵＳ９３５８２９３、ＵＳ２０１６０２４３１４３Ａ１、ＵＳ９８７７９７９、ＵＳ１０３８３８８６）および細胞増殖性障害（ＵＳ８３６７３６３、ＵＳ９４９４５８９、ＵＳ９８４６１５６）、ならびにいくつかのウイルス感染（ＵＳ１０５９６１８６、ＷＯ２０１８０５３１２３Ａ１、ＷＯ２０１９０５５１１９Ａ１）を治療することにおいて有効性が示されている。

トリテルペンは、幅広い様々な治療活性を有することが知られている。既知のトリテルペンのいくつかには、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、バルドキソロン、マスリン酸などが含まれる。トリテルペンの治療活性は、トリテルペンの組み合わせとしてではなく、主に個別に評価されている。
オレアノール酸は、バルドキソロンなどの化合物に代表されるトリテルペノイドのクラスに属し、それは、転写因子Ｎｒｆ２の活性化が抗酸化転写応答要素（ＡＲＥ）を含む下流の抗酸化遺伝子のプログラムの転写増加につながる自然細胞相２解毒経路の強力な活性化因子であることが示されている。バルドキソロン自体は、炎症状態の臨床試験で広く調査されているが、しかしながら、高められた濃度のバルドキソロンを含むある特定のトリテルペノイドの既知の細胞毒性に関連している可能性がある有害事象のため、慢性腎臓疾患の第３相臨床試験は終了した。

他の治療成分と組み合わせてトリテルペンを含む組成物は、植物抽出物として見出される。Ｆｕｍｉｋｏら（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ（２００２），２５（１１），１４８５－１４８７）は、トリパノソーマ症を治療するためのＲｏｓｍａｒｉｍｕｓ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ Ｌ．のメタノール抽出物の評価を開示している。Ａｄｄｉｎｇｔｏｎら（ＵＳ８４８１０８６、ＵＳ９２２０７７８、ＵＳ９３５８２９３、ＵＳ２０１６／０２４３１４３Ａ１）は、神経学的状態の治療のためのオレアンドリンおよびトリテルペンを含むＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの超臨界流体抽出物（ＳＣＦ；ＰＢＩ－０５２０４）を開示している。Ａｄｄｉｎｇｔｏｎら（ＵＳ９０１１９３７、ＵＳ２０１５／０２８３１９１Ａ１）は、神経学的状態の治療のためのオレアンドリンおよびトリテルペンを含むＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒのＳＣＦ抽出物のトリテルペン含有画分（ＰＢＩ－０４７１１）を開示している。Ｊａｇｅｒら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２００９），１４，２０１６－２０３１）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含む様々な植物抽出物を開示している。Ｍｉｓｈｒａら（ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ２０１６ ２５；１１（７）：ｅ０１５９４３０．Ｅｐｕｂ ２０１６ Ｊｕｌ ２５）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＢｅｔｕｌａ ｕｔｉｌｉｓ樹皮の抽出物を開示している。Ｗａｎｇら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２０１６），２１，１３９）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＡｌｓｔｏｎｉａ ｓｃｈｏｌａｒｉｓの抽出物を開示している。Ｌ．ｅ Ｓｉｌｖａら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２０１２），１７，１２１９７）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＥｒｉｏｐｅ ｂｌａｎｃｈｅｔｔｉの抽出物を開示している。Ｒｕｉら（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．（２０１２），１３，７６４８－７６６２）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＥｕｃａｐｌｙｐｔｕｓ ｇｌｏｂｕｌｕｓの抽出物を開示している。Ａｙａｔｏｌｌａｈｉら（Ｉｒａｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．（２０１１），１０（２），２８７－２９４）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＥｕｐｈｏｒｂｉａ ｍｉｃｒｏｓｃｉａｄｉａの抽出物を開示している。Ｗｕら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２０１１），１６，１－１５）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＬｉｇｕｓｔｒｕｍ種の抽出物を開示している。Ｌｅｅら（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ（２０１０），３３（２），３３０）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＦｏｒｓｙｔｈｉａ ｖｉｒｉｄｉｓｓｉｍａの抽出物を開示している。

オレアノール酸（ＯまたはＯＡ）、ウルソール酸（ＵまたはＵＡ）、およびベツリン酸（ＢまたはＢＡ）は、ＰＢＩ－０５２０４（ＰＢＩ－２３；Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの超臨界流体抽出物）およびＰＢＩ－０４７１１（ＰＢＩ－０５２０４のトリテルペン含有画分０～４）に見出される３つの主要なトリテルペン構成成分である。Ｖａｎ Ｋａｎｅｇａｎらは、同様の濃度で脳スライス酸素グルコース欠乏（ＯＧＤ）モデルアッセイにおいてそれらの神経保護活性を比較することによる有効性に向けたトリテルペンの寄与について以前に報告した（Ｎａｔｕｒｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ（Ｍａｙ ２０１６），６：２５６２６ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｒｅｐ２５６２６）。ＰＢＩ－０５２０４（ＰＢＩ）およびＰＢＩ－０４７１１（画分０～４）は、神経保護活性を提供することが見出された。

Ｎｅｒｉｕｍ種の抽出物は、強心配糖体、グリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖類などの多数の異なるクラスの化合物を含むことが知られている。特定の化合物には、オレアンドリン；ネリタロシド；オドロシド；オレアノール酸；ウルソール酸；ベツリン酸；オレアンドリゲニン（ｏｌｅａｎｄｒｉｇｅｎｉｎ）；オレアシドＡ；ベツリン（ウルス－１２－エン－３－β，２８－ジオール）；２８－ノルウルス－１２－エン－３－β－オール；ウルス－１２－エン－３β－オール；３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸；３β，２０α－ジヒドロキシウルス－２１－エン－２８－酸；３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸；３β，１３β－ジヒドロキシウルス－１１－エン－２８－酸；３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド；３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸；およびその他の構成成分が挙げられる。

オレアンドリンおよびＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物は、ＨＩＶ－１のｇｐ１２０エンベロープ糖タンパク質が、成熟ウイルス粒子へと組み込まれるのを予防し、インビトロでウイルスの感染性を阻害することが示されている（Ｓｉｎｇｈら、Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ（２０１３）８４，３２－３９の“Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ ｄｅｒｉｖｅｄ ｃａｒｄｉａｃ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ ｏｌｅａｎｄｒｉｎ ｉｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｖｉｔｙ”）。

オレアンドリンは、抗ＨＩＶ活性を示したが、多くのウイルスに対して評価されていない。トリテルペンのオレアノール酸、ベツリン酸、およびウルソール酸は、異なるレベルの抗ウイルス活性を示すことが報告されているが、多くのウイルスに対して評価されていない。ベツリン酸は、ＨＳＶ－１株１Ｃ、インフルエンザＡ Ｈ７Ｎ１、ＥＣＨＯ ６、およびＨＩＶ－１に対するいくつかの抗ウイルス活性を示している。オレアノール酸は、ＨＩＶ－１、ＨＥＰ Ｃ、およびＨＣＶ Ｈ株ＮＳ５Ｂに対していくつかの抗ウイルス活性を示している。ウルソール酸は、ＨＩＶ－１、ＨＥＰ Ｃ、ＨＣＶ Ｈ株ＮＳ５Ｂ、ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２、ＡＤＶ－３、ＡＤＶ－８、ＡＤＶ－１１、ＨＥＰ Ｂ、ＥＮＴＶ ＣＶＢ１、およびＥＮＴＶ ＥＶ７１に対していくつかの抗ウイルス活性を示している。オレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸の抗ウイルス活性は、特定のウイルスに対する有効性に関しては予測不可能である。

オレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、および／またはベツリン酸が抗ウイルス活性をほとんどまたはまったく有さないウイルスが存在し、それはオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、および／またはベツリン酸が特定の属のウイルスに対して抗ウイルス活性を示すかどうかを先験的に予測できないことを意味する。

Ｂａｒｒｏｗｓら（Ｃｅｌｌ Ｈｏｓｔ Ｍｉｃｒｏｂｅ（２０１６），２０，２５９－２７０の“Ａ ｓｃｒｅｅｎ ｏｆ ＦＤＡ－ａｐｐｒｏｖｅｄ ｄｒｕｇｓ ｆｏｒ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ Ｚｉｋａｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”）は、ジゴキシンがジカウイルスに対する抗ウイルス活性を示すが、用量が高すぎて毒性がある可能性が高いことを報告している。Ｃｈｅｕｎｇら（Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．（２０１４）１１１，９３－９９の“Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌａｎａｔｏｓｉｄｅ Ｃ ａｇａｉｎｓｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”）は、ラナトシドＣがデングウイルスに対する抗ウイルス活性を示すことを報告している。

強心配糖体は、いくつかのウイルスに対していくらかの抗ウイルス活性を示すことが示されているが、特定の化合物は、異なるウイルスに対して非常に異なるレベルの抗ウイルス活性を示し、それは、同じウイルスに対して評価した場合、いくつかは非常に乏しい抗ウイルス活性を示し、いくつかはより良好な抗ウイルス活性を示すことを意味する：Ｅｍａｍｚａｄｅｈ－Ｙａｚｄｉ（Ｍａｓｔｅｒｓ Ｔｈｅｓｉｓ（Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｔｏｒｉａ），Ａｐｒｉｌ ２０１３の“Ａｎｔｉｖｉｒａｌ，ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ，ａｎｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｓｏｕｔｈ Ａｆｒｉｃａｎ ｐｌａｎｔｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｃａｒｄｉａｃ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ”）、Ｃｏｒｒｅａ Ｓｏｕｚａら（Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ Ｐｈａｒｍａ．（２０２１），１２，６２４７０４の“Ｎａ＋／Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ ａｓ ａ ｔａｒｇｅｔ ｏｆ ｃａｒｄｉａｃ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”）、Ａｍａｒｅｌｌｅら（Ｉｎｔｅｒ．Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．Ｓｃｉ．（２０１８），１９，２１５４の“Ｔｈｅ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｎａ，Ｋ－ＡＴＰａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ：ａ ｍｉｎｉｒｅｖｉｅｗ”）、Ａｍａｒｅｌｌｅら（Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｌｕｎｇ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．（２０１９），３１６，Ｌ１０９４－Ｌ１１０６の“Ｃａｒｄｉａｃ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ ｖｉｒｕｓ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｂｙ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ｃｅｌｌ ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ ｍａｃｈｉｎｅｒｙ”）、Ａｓｈｂｒｏｏｋ（ＭＢｉｏ，（２０１６），７（３），ｅ００６９３－１６の“Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ ｓｏｄｉｕｍ－ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ＡＴＰａｓｅ ｉｍｐａｉｒｓ Ｃｈｉｋｕｎｇｕｎｙａ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”）、Ｃａｉら（Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（２０１４），５，３９５－３９９の“Ｄｉｇｉｔｏｘｉｎ ａｎａｌｏｇｕｅｓ ｗｉｔｈ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ａｎｔｉ－ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ ａｃｔｉｖｉｔｙ”）、Ｃｈｅｕｎｇら（Ａｎｔｉｖｉｒ．Ｒｅｓ．（２０１４），１１１，９３－９９の“Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌａｎａｔｏｓｉｄｅ Ｃ ａｇａｉｎｓｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”）。種ウイルス種に対する特定の強心配糖体の抗ウイルス活性は、先験的に予測不可能なようである。

オレアンドリンは、いくつかのウイルスに対して抗ウイルス活性が示されているが、抗ウイルス活性は、先験的に予測不可能であり、特定のウイルス科またはウイルス属内でさえ、および哺乳動物種の間でさえ予測不可能である：ＵＳ１０７０２５６７、ＵＳ１０７２９７３５、ＵＳ１０５９６１８６、ＵＳ１１００７２３９、ＵＳ１０８７４７０４、ＵＳ２０２００２０６２８７Ａ１、ＵＳ１１０１３７７６、ＵＳ１０９８０８５２、ＷＯ２０１８０５３１２３Ａ１、ＷＯ２０１９０５５１１９Ａ１、ＷＯ２０２００４２００９Ａ１、Ｐｌａｎｔら（Ｂｉｏｍｅｄ．Ｐｈａｒｍａ．（２０２１），１３８，１１１４５７の“Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｏｌｅａｎｄｒｉｎ ａｎｄ ａ ｄｅｆｉｎｅｄ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ ａｇａｉｎｓｔ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２”）、Ｎｅｗｍａｎら（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｐｈａｒｍａ．（２０２０），１２，５０３－５１５の“Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｏｌｅａｎｄｒｉｎ”）、Ａｖｃｉら（Ａｎｉｍａｌ Ｖｅｔ．Ｓｃｉ．（２０１４），２（５），１５０－１５３の“Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ ｄｉｓｔｉｌｌａｔｅ ａｇａｉｎｓｔ ｐａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａ－３ ｖｉｒｕｓ”）（蒸留物はオレアンドリンを含有しない）、Ｄｅｙら（Ｐｈａｒｍａｃｏｇｎ．Ｒｅｖ．（２０１４），８（１６），１５６－１６２の“Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ Ｎｅｒｉｕｍ ｉｎｄｉｃｕｍ Ｍｉｌｌ：ａ ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ ｒｅｖｉｅｗ”）、Ｓｉｎｇｈら（Ｆｉｔｏｔｅｒ．（２０１３），８４，３２－３９のＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ ｄｅｒｉｖｅｄ ｃａｒｄｉａｃ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ ｉｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｖｉｔｙ”）、Ｈｕｔｃｈｉｓｏｎら（Ｊ．Ａｎｔｉｖｉｒ．Ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒ．（２０１９），１１（３），１８４のＴｈｅ ｂｏｔａｎｉｃａｌ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ ｏｌｅａｎｄｒｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｓ Ｈｕｍａｎ Ｔ－ｃｅｌｌ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ－１ ｉｎｆｅｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ Ｅｎｖ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｖｉｒｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｙｎａｐｓｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ”）、Ｐｌａｎｔｅら（ｂｉｏＲｘｉｖ（２０２０），ｄｏｉ：１０．１１０１／２０２０．０７．１５．２０３４８９の“Ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｂｙ ｏｌｅａｎｄｒｉｎ”）。

詳細には、Ｙａｎｇら（Ｔｏｘｉｃ．Ａｐｐｌｉｅｄ Ｐｈａｒｍａ．（２０１７），３３２，１２９－１３７の“Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｃａｒｄｅｎｏｌｉｄｅｓ，Ｎａ／Ｋ－ＡＴＰａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，ａｇａｉｎｓｔ ｐｏｒｃｉｎｅ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｂｌｅ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ”）は、いくつかの強心配糖体が、いくつかの種のいくつかのコロナウイルスに対して活性であるが、他の種のいくつかのコロナウイルスに対して不活性であることを示す。同じ動物種内でさえ、強心配糖体は、実質的に異なるレベルの活性を示し得る。

オレアンドリン（および／またはジゴキシン）を、特定の動物ウイルス感染に対して治療的に活性である、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．から得られる他の化合物、例えば、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、またはそれらの任意の組み合わせと任意で一緒に含有する改善された薬学的組成物の必要性が残っている。

強心配糖体、詳細にはオレアンドリンおよびジゴキシンが動物に毒性であることは広く知られているが、本発明は、動物におけるウイルス感染を治療および／または予防するための薬学的組成物および方法を提供する。本発明はまた、薬学的組成物の投与により動物におけるウイルス感染を治療する方法を提供する。本発明者らは、動物におけるウイルス感染の治療におけるそれらの使用を正当化するのに十分な抗ウイルス活性を示し、同時に動物に致死的でない用量で投与される、抗ウイルス組成物を調製することに成功した。本発明者らは、特定の投与計画を用いる対応する治療方法を開発した。

本発明はまた、ウイルス感染に罹るリスクのある動物を治療する予防方法であって、動物がウイルス感染に罹る前に長期治療期間にわたって繰り返しの頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を動物に慢性的に投与し、それによって動物がウイルス感染に罹ることを予防することを含み、抗ウイルス組成物がオレアンドリンおよび／またはジゴキシンを含む、予防方法を提供する。あるいは、本発明はまた、ウイルス性疾患を有するリスクのある動物を治療する予防方法であって、動物が前記ウイルス性疾患を引き起こすウイルス感染に罹ってから０～５日以内に、長期治療期間にわたって繰り返しの頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を動物に慢性的に投与し、それによって動物が前記ウイルス性疾患に関連する症状を示すことを予防することを含み、抗ウイルス組成物がオレアンドリンおよび／またはジゴキシンを含む、予防方法を提供する。

いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、ウイルス感染細胞を有する動物に投与される。いくつかの実施形態では、ウイルス感染は、以下のウイルス科のいずれかによって引き起こされる：アルテルウイルス科、アストロウイルス科、ボルナウイルス科、サーコウイルス科、コロナウイルス科、コルドポックスウイルス亜科、フラビウイルス科、ヘルペスウイルス科、オルトミクソウイルス科、パピローマウイルス科、パポバウイルス科、パラミクソウイルス科、パルボウイルス科、ピコルナウイルス科、ポックスウイルス科、レオウイルス科、レトロウイルス科、ラブドウイルス科、およびトガウイルス科。

動物は、家庭用または家畜動物、例えば、ブタ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ラマ、アルパカ、スイギュウ、シカ、ヘラジカ、キリン、ラクダ、イヌ、ネコ、ニワトリ、シチメンチョウ、ハト、アヒル、キジ、ギニア、または他の動物であり得る。

治療され得るウイルス感染および疾患は、ベネズエラウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＶＥＥ）ウイルス、西部ウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＷＥＥ）ウイルス、東部ウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＥＥＥ）ウイルス、ウシコロナウイルス（ＢＣＶ）、ブタコロナウイルス（ＰＣＶ）、ウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）、ウシ呼吸器多核体ウイルス（ＢＲＳＶ）、ブタ繁殖・呼吸障害症候群ウイルス（ＰＲＲＳＶ）、ブタサーコウイルス２型（ＰＣＶ２）、ウシヘルペスウイルス１型（ＢＨＶ－１、例えば、ウシ感染性鼻気管炎（ＩＢＲ））、ウシヘルペスウイルス２型（ＢＨＶ－２、ウシヘルペス乳頭炎）、ウシヘルペスウイルス３型（ＢＨＶ－３、カタル熱）、ウシヘルペスウイルス５型（ＢＨＶ－５、脳炎）、ウシパピローマウイルス、リッサウイルス（狂犬病、ラブドウイルス）、口蹄疫ウイルス（ＦＭＤ；ピコルナウイルス科のアフトウイルス属；例えば、血清型Ａ、Ｏ、Ｃ、ＳＡＴ１、ＳＡＴ２、ＳＡＴ３、Ａｓｉａ１）、ランピースキン病ウイルス（ポックスウイルス科のカプリポックスウイルス属）、牛痘ウイルス、偽牛痘ウイルス（パラワクシニア）、ウシ白血病ウイルス、ウシレンチウイルス、レスピロウイルス（ウシパラインフルエンザ－３ウイルス）、モルビリウイルス属（牛疫ウイルス）、ウシ流行熱ウイルス、水疱性口内炎ウイルス、アフリカブタ熱ウイルス、アフリカウマ病ウイルス（レオウイルス科）、羊痘ウイルスおよびヤギ痘ウイルス（コルドポックスウイルス亜科、カプリポックスウイルス属）、ウマインフルエンザウイルス、ウマ感染性貧血ウイルス、ウマ動脈炎ウイルス、ブタコレラウイルス、ニパウイルス、ブタ水疱症ウイルス、ブタ伝染性胃腸炎ウイルス、トリ感染性気管支炎ウイルス、感染性喉頭気管炎ウイルス（トリ）、アヒル肝炎ウイルス、トリインフルエンザウイルス、感染性ファブリキウス嚢病ウイルス（ガンボロ）、マレック病ウイルス（内臓白血症；ヘルペスウイルス）、悪性ニューカッスル病ウイルス（ｖＮＤＶ、パラミクソウイルス科、エイブラウイルス属）、トリメタニューモウイルス（シチメンチョウにおける）、トリインフルエンザウイルス、家禽腸炎致死症候群（シチメンチョウにおけるＰＥＭＳ）、ハトアルファヘルペスウイルス－１（ＣｏＨＶ－１）、トリ腎炎、アルボウイルス感染、シチメンチョウウイルス性肝炎、トリ脳脊髄炎、トリＥ型肝炎ウイルス、ニワトリコレラ、鶏痘、家禽コレラ、シチメンチョウにおける出血性腸炎、イヌパルボウイルス１型または２型、イヌ感染性肝炎（ＩＣＨ、アデノウイルス１）、イヌヘルペス、イヌジステンパーウイルス（モルビリウイルス属）、イヌにおけるロタウイルス腸ウイルス、ブタヘルペスウイルス１（仮性狂犬病、オーエスキー病）、イヌインフルエンザ、イヌパラインフルエンザウイルス、ネコヘルペスウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、ネコパルボウイルス、ネコ感染性腹膜炎ウイルス、ネコインフルエンザウイルス、ネコカリシウイルス、ネコ白血病ウイルス、ネコウイルス性鼻気管炎、ネココロナウイルス、ネコロタウイルス、ネコアストロウイルス、トルクテノススウイルス（ＴＴＳｕＶ）、ブタテシオウイルス（ＰＴＶ）、ブタボカウイルス１（ＰＢｏＶ１）、ブタインフルエンザウイルス（例えば、Ａ型）、ブタ風土性下痢ウイルス（ＰＥＤＶ）、ブタデルタコロナウイルス、ならびにそれらの種および／またはバリアントを含む。

いくつかの実施形態では、本発明は、ａ）特定の強心配糖体、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）特定の強心配糖体および複数のトリテルペンの組み合わせを含む（から本質的になる）抗ウイルス組成物を提供する。特定の強心配糖体は、オレアンドリンおよびジゴキシンからなる群から選択され得る。

本発明の一態様は、抗ウイルス組成物の動物への慢性投与により動物のウイルス感染を治療する方法を提供する。動物は、治療有効量（治療関連用量）の組成物を動物に慢性投与し、それにより、ウイルス感染に関連する症状の緩和またはウイルス感染の改善を提供することによって治療される。動物への組成物の投与は、感染直後、または感染後０～約５日以内のいずれかの時間、またはウイルス感染の確定診断後の最も早い時間に開始することができる。ウイルスは、本明細書に記載される任意のウイルスであり得るが、いくつかのウイルスが好ましい。慢性投与は、急速もしくは即時放出剤形（または組成物）の繰り返し毎日投与によって、または長期（制御）放出剤形の繰り返し投与（毎日、毎週または毎月）によって達成することができる。

したがって、本発明はまた、哺乳動物のウイルス感染を治療する方法を提供し、方法は、哺乳動物に１つ以上の治療有効用量の抗ウイルス組成物を投与することを含む。１回以上の治療用量は、動物にとって致命的でも致死的でもない。１回以上の用量は、毎日、毎週、および／または毎月の頻度で投与される。１日あたり１回以上の用量が投与され得る。ウイルスは、動物に対して病原性である本明細書に記載される任意のウイルスであり得る。

本発明はまた、治療を必要とする動物においてウイルス感染を治療する方法を提供し、方法は、
動物がウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、抗ウイルス組成物の初期用量を動物に投与することと、
抗ウイルス組成物による治療に対する動物の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
動物の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
動物の臨床応答および／または治療応答が初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、動物の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、用量を漸増または漸減させることと、を含む。
抗ウイルス組成物による動物の治療は、必要に応じて継続される。動物が、ウイルス感染に関連する特定の症状の低減または緩和などの所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。臨床応答および／または治療応答の妥当性の判定は、ウイルス感染に精通した臨床医によって行われ得る。

本発明の方法の個々のステップは、別々の施設で、または同じ施設内で行うことができる。
本発明は、本明細書に記載される全ての実施形態に対する別の実施形態を提供し、オレアンドリンは、ジゴキシンで置き換えられる、ジゴキシンと組み合わせて使用される。本発明の方法は、オレアンドリン、ジゴキシン、またはオレアンドリンおよびジゴキシンの組み合わせを用いてよい。したがって、オレアンドリン、ジゴキシン、オレアンドリン含有組成物、ジゴキシン含有組成物、またはオレアンドリンおよびジゴキシン含有組成物は、本発明の方法に使用され得る。強心配糖体は、オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを意味するように解釈できる。強心配糖体含有組成物は、オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを含む。

本発明はまた、コロナウイルス感染、詳細には動物に対して病原性であるコロナウイルスの感染、例えば、ＢＣＶ感染またはＰＣＶ感染を治療する方法であって、前記感染を有する動物に、治療有効用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）を慢性投与することを含む方法を提供する。
本発明の別の態様は、動物がウイルス感染に関連する１つ以上の症状を示すことを予防する方法であって、１回以上の治療有効用量の強心配糖体含有組成物を前記動物に投与することを含み、前記１回以上の用量が、ａ）前記動物がウイルスに感染する前に、またはｂ）前記動物がウイルスに感染してから最大５日、最大４日、最大３日、最大２日、または最大１日の期間内に投与される、方法を提供する。
本発明の別の態様は、動物におけるウイルス感染が、疾患状態に進行することまたはウイルス感染に関連する１つ以上の症状を示すことを予防する方法であって、前記動物がウイルスに感染してから最大７日、最大６日、最大５日、最大４日、最大３日、最大２日、または最大１日の期間内に１回以上の治療有効用量の強心配糖体含有組成物を前記動物に投与することを含む方法を提供する。言い換えれば、組成物は、感染が発生することを止めないかもしれないが、感染が疾患状態に進行することを止める。
いくつかの実施形態では、動物は、ウイルス感染を有する別の動物と濃厚接触している（６フィート以内）。濃厚接触は、ウイルス感染動物と一緒に生活しているか、食物を共有しているか、住みかを共有しているか、空気を共有しているか、または水を共有している前記未感染動物にも起因し得る。

本発明はまた、前記感染を有する動物に、複数回の治療有効用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）を繰り返し投与することにより（本明細書で論じられている投与様式のいずれかを介して）、コロナウイルス感染、例えば、ウシコロナウイルス感染またはブタコロナウイルス感染を治療する方法を提供する。１回以上の用量は、１週間に１日以上にわたって、任意に１カ月あたり１週間以上にわたって、任意に１年あたり１カ月以上にわたって１日に投与され得る。

複数回の１日用量の強心配糖体の等価物は、治療期間全体を通して前記動物に治療有効１日用量の強心配糖体を放出する１つ以上の長期放出剤形を投与することによって達成できる。有効１日用量を投与する追加の手段は、水、乳、液体飼料、代用乳、初乳、代用初乳、または固形飼料における使用に好適な剤形の使用により達成できる。
本発明はまた、動物におけるウイルス感染を治療する方法であって、２日～約２カ月の治療期間にわたって、動物に１日あたり１～１０回の用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）を投与することを含む方法を提供する。治療期間中に、１日に２～８、２～６または４回の用量が投与され得る。用量は、２日～約６０日間、２日～約４５日間、２日～約３０日間、２日～約２１日間、または２日～約１４日間投与され得る。前記投与は、本明細書で論じられている投与様式のいずれかを介してよい。前記動物において治療的に有効な血漿レベルのオレアンドリンおよび／またはジゴキシンを付与する全身投与が好ましい。
いくつかの実施形態では、ウイルス感染が治癒するまで、１回以上の用量の強心配糖体が、複数日にわたり１日に投与される。いくつかの実施形態では、ウイルス感染が治癒するまで、１回以上の用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）が、複数日および複数週間にわたり１日に投与される。１回以上の用量が１日に投与され得る。１、２、３、４、５、６回以上の用量が１日に投与される。

強心配糖体含有組成物は、少なくとも１つの強心配糖体を含む。１つ以上の薬学的賦形剤が前記組成物に含まれてもよい。好ましい強心配糖体は、オレアンドリンまたはジゴキシンである。強心配糖体含有組成物が、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．またはＤｉｇｉｔａｌｉｓ ｌａｎａｔａ植物材料の抽出物を含む場合、抽出物は、前記植物材料から抽出された１つ以上の成分をさらに含み得る。
いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、少なくとも１つの強心配糖体－代謝阻害剤、少なくとも１つの強心配糖体－消化阻害剤、少なくとも１つの酵素阻害剤、またはそれらの組み合わせをさらに含む。
獣医学臨床医は、動物に投与されるオレアンドリンまたはジゴキシンの安全で有効な用量を決定するために公知の用量漸増または漸減プロトコールを使用することができる。

強心配糖体の最大耐容用量（ＭＴＤ）は、動物種によって異なり得る。いくつかの実施形態では、ａ）前記動物はウシであり、抗ウイルス組成物の用量は１ｎｇ／ｍＬ以下のジゴキシンまたはオレアンドリンの最大血漿中濃度をもたらすか；ｂ）前記動物はブタであり、抗ウイルス組成物の用量は５ｎｇ／ｍＬ以下のジゴキシンまたはオレアンドリンの最大血漿中濃度をもたらすか；ｃ）前記動物はウマであり、抗ウイルス組成物の用量は５ｎｇ／ｍＬ以下のジゴキシンまたはオレアンドリンの最大血漿中濃度をもたらすか；ｄ）前記動物はヒツジであり、抗ウイルス組成物の用量は５ｎｇ／ｍＬ以下のジゴキシンまたはオレアンドリンの最大血漿中濃度をもたらすか；またはｅ）前記動物はヤギであり、抗ウイルス組成物の用量は１０ｎｇ／ｍＬ以下のジゴキシンまたはオレアンドリンの最大血漿中濃度をもたらす。

動物におけるジゴキシンの薬物動態は、ジゴキシンの目標血漿中濃度をもたらす好適な用量の決定を可能にする。ジゴキシンの半減期は以下の通りである：ａ）ウシでは約７～９時間；ｂ）ヒツジでは約７～８時間；ｃ）雌ヒツジおよび仔ヒツジでは１３～１５時間；ｄ）ウマでは約１６～１８時間または約１０～２３時間；ｅ）仔イヌでは約２０～３０時間または約２３時間；ｆ）成体のイヌでは約４～６時間；ｇ）シチメンチョウでは約１０～１２時間；ｈ）ネコでは約９～１２時間；ｉ）仔ウシでは約５～７時間；およびｊ）ニワトリでは約２０～３０時間または約２５時間。

動物におけるジゴキシンの好適で非致命的な目標血漿中濃度は以下の通りである：ａ）ウマでは約２ｎｇ／ｍｌ未満または約０．５～２ｎｇ／ｍｌ；ｂ）イヌでは約２．５ｎｇ／ｍｌ未満または約０．５～２．５ｎｇ／ｍｌ；ｃ）ウシでは約２．５ｎｇ／ｍｌ未満または約０．５～２ｎｇ／ｍｌ；ｄ）ニワトリでは約２ｎｇ／ｍｌ未満。
動物におけるジゴキシンの好適な目標用量（１日に１～４回）は以下の通りである：ａ）イヌでは約１００μｇ／ｋｇ体重未満または約５～６０μｇ／ｋｇ体重；ｂ）シチメンチョウでは約１ｍｇ／ｋｇ体重未満または約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ体重；ｃ）ウシでは約１００μ／ｋｇ体重未満または約５～５０μｇ／ｋｇ体重；ｄ）ネコでは約１００μ／ｋｇ体重未満または０．５～５０μ／ｋｇ体重；ｅ）ウマでは約１００μ／ｋｇ体重未満または０．５～５０μ／ｋｇ体重；およびｆ）ニワトリでは１００μ／ｋｇ体重未満、約１～５０μｇ／ｋｇ体重または約４～２０μｇ／ｋｇ体重。

オレアンドリンが動物にＮｅｒｉｕｍ種（Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．）、例えば、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒまたはＮｅｒｉｕｍ ｉｎｄｉｃｕｍの葉の材料の形態で投与される場合、乾燥した葉の材料の量は、好ましくは、ａ）ウシについては１００ｍｇ／Ｋｇ体重未満または５０ｍｇ／Ｋｇ体重未満；ｂ）ヤギについては１１０ｍｇ／Ｋｇ体重未満；ｃ）ヒツジについては１１０ｍｇ／Ｋｇ体重未満または２５０ｍｇ／Ｋｇ体重未満である。
いくつかの実施形態では、治療される動物の血漿中のオレアンドリンおよび／またはジゴキシンの濃度は、約１０ｎｇ／ｍＬ以下、約５ｎｇ／ｍＬ以下、約２．５ｎｇ／ｍＬ以下、約２ｎｇ／ｍＬ以下、約１ｎｇ／ｍＬ、または約０．５ｎｇ／ｍＬ以下である。いくつかの実施形態では、治療される動物の血漿中のオレアンドリンおよび／またはジゴキシンの濃度は、約０．０００１ｎｇ／ｍＬ以上、約０．０００５ｎｇ／ｍＬ以上、約０．００１ｎｇ／ｍＬ以上、約０．００１５ｎｇ／ｍＬ以上、約０．０１ｎｇ／ｍＬ以上、約０．０１５ｎｇ／ｍＬ以上、約０．１ｎｇ／ｍＬ以上、約０．１５ｎｇ／ｍＬ以上、約０．０５ｎｇ／ｍＬ以上、または約０．０７５ｎｇ／ｍＬ以上である。動物に投与される抗ウイルス組成物の１日用量は、本明細書で明記されている範囲の少なくとも１つ内のオレアンドリンまたはジゴキシンの血漿中濃度をもたらすのに十分である。本発明は、本明細書で明記されている血漿中濃度範囲の全ての組み合わせおよび選択肢を含む。

抗ウイルス組成物は、慢性的に、すなわち、毎日、１日おき、２日おき、３日おき、４日おき、５日おき、６日おき、毎週、１週おき、２週おき、３週おき、毎月、隔月、半月毎、１カ月おき、２カ月おき、四半期毎、四半期おき、季節毎、三半期毎、季節毎、半年毎、および／または毎年などの繰り返しの頻度で投与され得る。１週間以上、１カ月以上、１四半期以上、および／または１年以上の治療期間。有効用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）が１日に１回以上投与される。

いくつかの実施形態では、動物に、１日あたり１４０μｇ～３１５μｇの強心配糖体を投与する。いくつかの実施形態では、用量は、２０μｇ～７５０μｇ、１２μｇ～３００μｇ、または１２μｇ～１２０μｇの強心配糖体を含む。強心配糖体の１日用量は、２０μｇ～７５０μｇ、０．０１μｇ～１００ｍｇ、または０．０１μｇ～１００μｇの強心配糖体／日の範囲であり得る。
強心配糖体の用量はまた、約０．５～約５００μｇ／日以下、約０．５～約４００μｇ／日以下、約０．５～約３００μｇ／日以下、約０．５～約２００μｇ／日以下、約０．５～約１００μｇ／日以下、約１～約８０μｇ／日、約１．５～約６０μｇ／日、約１．８～約６０μｇ／日、約１．８～約４０μｇ／日であり得る。
いくつかの実施形態では、強心配糖体は、少なくとも２つの投与相：負荷相および維持相、で投与される。負荷相は、強心配糖体の定常状態血漿レベルがほぼ達成されるまで継続する。維持相は、治療の開始時に、または負荷相がほぼ完了した後で始める。用量漸増法は、負荷相および／または維持相で行われ得る。

本明細書に記載される全ての投与計画、投与スケジュール、および用量は、好適と想定される；しかしながら、いくつかの投与計画、投与スケジュール、および用量は、いくつかの対象で他のものよりも好適になり得る。目標の臨床的エンドポイントは、前記投与を誘導するために使用される。
組成物は、全身投与することができる。全身投与の様式には、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、肺、または口腔が含まれる。組成物はまた、注射を介してまたは静脈内に投与することができる。組成物はまた、２つ以上の経路により同一の対象に投与され得る。いくつかの実施形態では、組成物は、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、肺、および口腔からなる群から選択される２つ以上の投与様式のいずれかの組み合わせにより投与される。

強心配糖体はまた、飼料および／または液体に含まれてもよく、動物に経口投与されてもよい。固体飼料は、強心配糖体および少なくとも１つの飼料原料を含み得る。液体飼料は、強心配糖体、少なくとも１つの液体、および少なくとも１つの栄養素を含み得る。強心配糖体はまた、代用乳製品または水で投与され得る。強心配糖体はまた、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．植物からの葉の材料を動物に与えることによって動物に投与され得る。葉の材料は、乾燥させてもよいか、または乾燥させなくてもよい。いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．またはＤｉｇｉｔａｌｉｓ ｌａｎａｔａの植物材料を除外する。

本発明はまた、オレアンドリン（またはジゴキシン）および液体担体を含む舌下剤形を提供する。本発明はまた、ウイルス感染を治療する方法であって、複数回用量のオレアンドリン含有（ジゴキシン含有）組成物を、前記ウイルス感染を有する動物に舌下投与することを含む方法を提供する。１日あたり１回以上の用量は、１週間あたり２日以上および１カ月あたり１週間以上、任意に１年あたり１カ月以上にわたって投与される。液体担体は、水、油、液体飼料、またはそれらの任意の組み合わせを含み得る。
いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、オレアンドリン（またはジゴキシンまたはオレアンドリンおよびジゴキシンの組み合わせ）および油を含む。油は、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含み得る。抗ウイルス組成物は、１、２またはそれ以上のオレアンドリン含有抽出物、および１つ以上の薬学的賦形剤を含み得る。

いくつかの実施形態では、配糖体含有組成物は、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．の抽出物を含み、前記抽出物は、ａ）少なくともオレアンドリン；ｂ）少なくともオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸；またはｃ）少なくともオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、カネロシン、カネロジオン、オレアンドリゲニン、Ｎｅｒｉｕｍ Ｆ、ネリタロシド、オドロシド、アジネリン、オドロシド－Ｇ－アセテート、およびギトキシゲニンを含む。
強心配糖体含有組成物（または抽出物）は、ポリフェノール、炭水化物、フラボノイド、アミノ酸、可溶性タンパク質、セルロース、デンプン、アルカロイド、サポニン、タンニン、およびそれらの任意の組み合わせをさらに含み得る。
アミノ酸は、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、セリン、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、アルギニン、スレオニン、アラニン、プロリン、チロシン、バリン、メチオニン、システイン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、およびリジンからなる群から選択され得る。いくつかの実施形態では、アミノは、アスパラギン、アルギニン、スレオニン、アラニン、プロリン、チロシン、バリン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、およびリジンからなる群から選択される。
追加の強心配糖体は、抗ウイルス組成物に存在する場合、オドロシドまたはネリタロシドがさらに含まれ得る。アグリコンであるオレアンドリゲニンもさらに含まれ得る。いくつかの実施形態では、組成物は、ａ）１つ以上のトリテルペ、ｂ）１つ以上のステロイド、ｃ）１つ以上のトリテルペン誘導体、ｄ）１つ以上のステロイド誘導体、またはｅ）それらの組み合わせをさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、強心配糖体、およびａ）２つもしくは３つのトリテルペン、ｂ）２つもしくは３つのトリテルペン誘導体、ｃ）２つもしくは３つのトリテルペン塩、またはｄ）それらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、トリテルペンは、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、およびそれらの塩または誘導体からなる群から選択される。

本発明のいくつかの実施形態は、薬学的組成物が少なくとも１つの薬学的賦形剤および抗ウイルス組成物を含むものを含む。いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、ａ）少なくとも１つの強心配糖体および少なくとも１つのトリテルペン、ｂ）少なくとも１つの強心配糖体および少なくとも２つのトリテルペン、ｃ）少なくとも１つの強心配糖体および少なくとも３つのトリテルペン、ｄ）少なくとも２つのトリテルペンおよび強心配糖体を除く、ｅ）少なくとも３つのトリテルペンおよび強心配糖体を除く；またはｆ）少なくとも１つの強心配糖体、例えばオレアンドリン、ジゴキシンを含む。本明細書で使用される場合、特に明記しない限り、トリテルペンおよび強心配糖体の一般用語はまた、その塩および誘導体も包含する。
強心配糖体は、純粋な形態で、または１つ以上の強心配糖体を含む抽出物の一部として薬学的組成物中に存在し得る。トリテルペンは、純粋な形態で、またはトリテルペンを含む抽出物の一部として薬学的組成物中に存在し得る。いくつかの実施形態では、強心配糖体は、薬学的組成物中、主要な治療成分として存在し、抗ウイルス活性に主に関与する構成成分を意味する。

いくつかの実施形態では、オレアンドリン含有抽出物は、植物材料の抽出により得られる。抽出物は、植物材料の熱水抽出物、冷水抽出物、超臨界流体（ＳＣＦ）抽出物、亜臨界液体抽出物、有機溶媒抽出物、またはそれらの組み合わせを含み得る。いくつかの実施形態では、抽出物は、抽出流体として、任意にアルコールを含んでもよい亜臨界液体二酸化炭素を使用したＮｅｒｉｕｍ植物塊（バイオマス）の亜臨界液体抽出により調製される、（バイオマス）であった。いくつかの実施形態では、オレアンドリン含有組成物は、２つ以上の異なる種類のオレアンドリン含有抽出物を含む。
本発明の実施形態は、オレアンドリン含有バイオマス（植物材料）が、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．、例えば、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ Ｌ（Ａｐｏｃｙｎａｃｅａｅ）、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｄｏｕｒｕｍ、Ｎｅｒｉｕｍ ｉｎｄｉｃｕｍ Ｍｉｌｌ、白キョウチクトウ、ピンクキョウチクトウ、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ、前記種のいずれかの細胞培養物（細胞塊）、またはそれらの組み合わせであるものを含む。いくつかの実施形態では、バイオマスは、葉、茎、花、樹皮、果実、種子、樹液、および／または鞘を含む。

いくつかの実施形態では、抽出物は、抽出物が動物に投与されたとき、強心配糖体の治療有効性に寄与する、抽出中に強心配糖体とともに得られる少なくとも１つの他の薬理学的に活性な薬剤を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、１つ以上の他の非強心配糖体の治療上有効な薬剤、すなわち、強心配糖体ではない１つ以上の薬剤をさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、１つ以上の抗ウイルス化合物をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、薬理学的に活性な多糖類を除外する。
本発明の各実施形態について、好ましい強心配糖体は、ａ）オレアンドリン、ｂ）ジゴキシン、またはｃ）オレアンドリンおよびジゴキシンの組み合わせである。

いくつかの実施形態では、抽出物は、１つ以上の強心配糖体および１つ以上の強心配糖体前駆体（カルデノリド、カルダジエノリド、およびカルダトリエノリドなど、それらの全てが強心配糖体のアグリコン構成物質、例えば、ジギトキシン、アセチルジギトキシン、ジギトキシゲニン、ジゴキシン、アセチルジゴキシン、ジゴキシゲニン、メジゴキシン、ストロファンチン、シマリン、ウアベイン、またはストロファンチジンである）を含む。抽出物は、強心配糖体前駆体として、強心配糖体の１つ以上のグリコン構成物質（グルコシド、フルクトシド、および／またはグルクロニドなど）をさらに含み得る。したがって、抗ウイルス組成物は、１つ以上の強心配糖体、ならびに１つ以上のアグリコン構成物質、および１つ以上のグリコン構成物質からなる群から選択される２つ以上の強心配糖体前駆体を含み得る。抽出物はまた、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．の植物材料から得られる、１つ以上の他の非強心配糖体の治療的に有効な薬剤を含み得る。

いくつかの実施形態では、オレアンドリン（ＯＬ）、オレアノール酸（ＯＡ）、ウルソール酸（ＵＡ）、およびベツリン酸（ＢＡ）を含む組成物は、オレアンドリン含有量に基づく同等の用量を比較すると、純粋なオレアンドリンよりも有効である。

いくつかの実施形態では、総トリテルペン含有量（ＯＡ＋ＵＡ＋ＢＡ）対オレアンドリンのモル比は、約１５：１～約５：１、または約１２：１～約８：１、または約１００：１～約１５：１、または約１００：１～約５０：１、または約１００：１～約７５：１、または約１００：１～約８０：１、または約１００：１～約９０：１、または約１０：１の範囲である。
いくつかの実施形態では、個々のトリテルペン対オレアンドリンのモル比は、以下の範囲である：約２～８（ＯＡ）：約２～８（ＵＡ）：約０．１～１（ＢＡ）：約０．５～１．５（ＯＬ）；約または３～６（ＯＡ）：約３～６（ＵＡ）：約０．３～８（ＢＡ）：約０．７～１．２（ＯＬ）；または約４～５（ＯＡ）：約４～５（ＵＡ）：約０．４～０．７（ＢＡ）：約０．９～１．１（ＯＬ）；または約４．６（ＯＡ）：約４．４（ＵＡ）：約０．６（ＢＡ）：約１（ＯＬ）。

いくつかの実施形態では、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．植物材料の抽出により得られるものなどの他の治療薬は、抽出物の調製中に得られる多糖ではなく、それは酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンではないことを意味する。いくつかの実施形態では、抽出物は、別の治療薬を除外および／または抽出物の調製中に得られる酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンを除外する。

いくつかの実施形態では、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．植物材料の抽出により得られるものなどの他の治療薬は、抽出物、例えば酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンの調製中に得られる多糖類である。いくつかの実施形態では、抽出物は、別の治療薬を含み、かつ／または、前記植物材料からの抽出物の調製中に得られる酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンを含む。

いくつかの実施形態では、抽出物は、オレアンドリン、ならびに、強心配糖体、グリコン、アグリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖類、糖類、アルカロイド、脂肪、タンパク質、ネリタロシド、オドロシド、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、オレアンドリゲニン、オレアシドＡ、ベツリン（ウルサ－１２－エン－３β，２８－ジオール）、２８－ノルウルサ－１２－エン－３β－オール、ウルサ－１２－エン－３β－オール、３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、３β，２０α－ジヒドロキシウルサ－２１－エン－２８－酸、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３β，１３β－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸、ホモポリガラクツロナン、アラビノガラツロナン、クロロゲン酸、コーヒー酸、Ｌ－キナ酸、４－クマロイル－ＣｏＡ、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、５－Ｏ－カフェオイルキナ酸、カルデノリドＢ－１、カルデノリドＢ－２、オレアゲニン、ネリジジノシド、ネリゾシド、オドロシド－Ｈ、ガラクツロン酸、ラムノース、アラビノース、キシロース、およびガラクトースで構成される３－ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－５－ベータ，１４ベータ－ジヒドロキシ－カルド－２０（２２）－エノリドペクチン性多糖類、１７０００～１２００００Ｄの範囲のＭＷ、または約３５０００Ｄ、約３０００Ｄ、約５５００Ｄ、もしくは約１２０００ＤのＭＷを有する多糖類、カルデノリドモノグリコシド、カルデノリドＮ－１、カルデノリドＮ－２、カルデノリドＮ－３、カルデノリドＮ－４、プレグナン、４，６－ジエン－３，１２，２０－トリオン、２０Ｒ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン、１６ベータ，１７ベータ－エポキシ－１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，２０－ジオン、１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６，１６－トリエン－３，２０－ジオン（ネリジエノンＡ）、２０Ｓ，２１－ジヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン（ネリジエノンＢ）、ネリウクマル酸、イソネリウクマル酸、オレアンデロン酸（ｏｌｅａｎｄｅｒｏｉｃ ａｃｉｄ）、オレアンデレン（ｏｌｅａｎｄｅｒｅｎ）、８アルファ－メトキシラブダン－１８－酸、１２－ウルセン、カネロシド、ネリウモシド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α－ヒドロキシ－８，１４β－エポキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α，１４β－ジヒドロキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β，２７－ジヒドロキシ－ウルサ－１８－エン－１３，２８－オリド、３β，２２α，２８－トリヒドロキシ－２５－ノル－ルプ－１（１０），２０（２９）－ジエン－２－オン、ｃｉｓ－カレニン（３β－ヒドロキシ－２８－Ｚ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、ｔｒａｎｓ－カレニン（３－β－ヒドロキシ－２８－Ｅ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、３ベータ－ヒドロキシ－５アルファ－カルダ－１４（１５），２０（２２）－ジエノリド（ベータ－アンヒドロエピジギトキシゲニン）、３ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギタロシル）－２１－ヒドロキシ－５ベータ－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド（ネリウモゲニン－Ａ－３ベータ－Ｄ－ジギタロシド）、プロセラゲニン、ネリジエノンＡ、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３ベータ，１３ベータ－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、２８－オルウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ，２８－ジオール、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、（２０Ｓ，２４Ｒ）－エポキシダンマラン－３ベータ，２５－ジオール、２０ベータ，２８－エポキシ－２８アルファ－メトキシタラキサステラン－３ベータ－オール、２０ベータ，２８－エポキシタラキサステル－２１－エン－３ベータ－オール、２８－ノル－ウルサ－１２－エン－３ベータ，１７ベータ－ジオール、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、アルファ－ネリウルセート、ベータ－ネリウルセート、３アルファ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、３ベータ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、オレアンデロール酸（ｏｌｅａｎｄｅｒｏｌｉｃ ａｃｉｄ）、カネロジオン、３β－ｐ－ヒドロキシフェノキシ－１１α－メトキシ－１２α－ヒドロキシ－２０－ウルセン－２８－酸、２８－ヒドロキシ－２０（２９）－ルペン－３，７－ジオン、カネロシン、３アルファ－ヒドロキシ－ウルサ－１８，２０－ジエン－２８－酸、Ｄ－サルメントース、Ｄ－ジギノース、ネリジジノシド、ネリゾシド、イソリシノール酸、ゲンチオビオシルネリゴシド、ゲンチオビオシルボーモントシド、ゲンチオビオシルオレアンドリン、ホリネリン、１２β－ヒドロキシ－５β－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド、８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－ネリアゲニン、ウバオール、ウルソールアルデヒド、２７（ｐ－クマロイルオキシ）ウルソール酸、オレアンデロール（ｏｌｅａｎｄｅｒｏｌ）、１６－アンヒドロ－デアセチル（ｄｅａｃｔｅｙｌ）－ネリゴシド、９－Ｄ－ヒドロキシ－ｃｉｓ－１２－オクタデカン酸、アジゴシド、アジネリン、アルファ－アミリン、ベータ－シトステロール、カンペステロール（ｃａｍｐｅｓｔｒｏｌ）、カウチューク、カプリン酸、カプリル酸、コリン、コルネリン、コルテネリン、デアセチルオレアンドリン、ジアセチル－ネリゴシド、ホリアンドリン、プソイドクラミン（ｐｓｅｕｄｏｃｕｒａｍｉｎｅ）、ケルセチン、ケルセチン－３－ラムノグルコシド、ケルシトリン、ロサギニン（ｒｏｓａｇｉｎｉｎ）、ルチン、ステアリン酸、スチグマステロール、ストロスペシド、ウレヒトキシン（ｕｒｅｈｉｔｏｘｉｎ）およびウザリゲニンからなる群から選択される少なくとも１つの他の化合物を含む。抽出物に存在し得る追加の成分は、Ｇｕｐｔａらにより開示されている（ＩＪＰＳＲ（２０１０（，１（３），２１－２７、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれる）。

オレアンドリンはまた、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓの形質転換カルスに由来する懸濁液培養物の抽出物から得られる。Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍの熱水、有機溶媒、水性有機溶媒、亜臨界液体抽出物、または超臨界流体抽出物が、本発明に従って使用され得る。

オレアンドリンはまた、インビトロのＮｅｒｉｕｍ ｓｐ．マイクロ培養物の抽出物から得られ、それによってシュート培養物は、実生から、および／またはＮｅｒｉｕｍ ｓｐ．品種、例えばＳｐｌｅｎｄｅｎｓ Ｇｉｇａｎｔｅｕｍ、ＲｅｖａｎｃｈｅもしくはＡｌｓａｃｅ、または他の品種の茎端から開始できる。マイクロ培養Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．の熱水、有機溶媒、水性有機溶媒、または超臨界流体抽出物は、本発明に従って使用され得る。
抽出物はまた、前記植物種のいずれかの細胞塊（細胞培養物に存在するものなど）の抽出により得られる。

本発明はまた、動物におけるウイルス感染の治療のための医薬品の製造における強心配糖体の使用を提供する。いくつかの実施形態では、そのような医薬品の製造は、本発明の１つ以上の抗ウイルス化合物を提供することと、薬学的剤形の抗ウイルス化合物の用量を含むことと、薬学的剤形をパッケージすることとを含む。いくつかの実施形態では、製造は、ＰＣＴ国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ０６／２９０６１に記載されるように行うことができる。製造はまた、パッケージされた剤形を売主（小売業者、卸売業者、および／または流通業者）に送ること、ウイルス感染を有する動物にパッケージされた剤形を販売またはそうでなければ提供すること、使用、投与計画、投与、内容物、および剤形の毒性プロファイルに関する指示を提供するラベルおよび添付文書を医薬品とともに含むことなどの１つ以上の追加のステップを含む。いくつかの実施形態では、ウイルス感染の治療は、動物がウイルス感染を有することを判定することと、投与計画に従って動物への薬学的剤形の投与を指示することと、１つ以上の薬学的剤形を動物に投与することとを含み、１つ以上の薬学的剤形は、投与計画に従って投与される。

薬学的組成物は、水溶性（混和性）共溶媒、水不溶性（不混和性）共溶媒、界面活性剤、抗酸化剤、キレート剤、および吸収促進剤からなる群から選択される少なくとも１つの材料の組み合わせをさらに含み得る。
可溶化剤は、少なくとも単一の界面活性剤であるが、それはまた、ａ）界面活性剤および水混和性溶媒；ｂ）界面活性剤および水不混和性溶媒；ｃ）界面活性剤、抗酸化剤；ｄ）界面活性剤、抗酸化剤、および水混和性溶媒；ｅ）界面活性剤、抗酸化剤、および水不混和性溶媒；ｆ）界面活性剤、水混和性溶媒、および水不混和性溶媒；またはｇ）界面活性剤、抗酸化剤、水混和性溶媒、および水不混和性溶媒の組み合わせなどの材料の組み合わせであり得る。
薬学的組成物は、ａ）少なくとも１つの液体担体、ｂ）少なくとも１つの乳化剤、ｃ）少なくとも１つの可溶化剤、ｄ）少なくとも１つの分散剤、ｅ）少なくとも１つの他の賦形剤、またはｆ）それらの組み合わせを任意にさらに含む。

いくつかの実施形態では、水混和性溶媒は、低分子量（６０００未満）のＰＥＧ、グリコール、またはアルコールである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ペグ化界面活性剤であり、ポリ（エチレングリコール）官能基を含む界面活性剤を意味する。
本発明は、本明細書に開示された本発明の態様、実施形態、および下位実施形態の全ての組み合わせを含む。
以下の図は、本明細書の一部を形成し、特許請求される発明の例示的な実施形態を説明する。当業者は、これらの図および本明細書の説明に照らして、過度の実験なしで本発明を実施することができるであろう。

ＨＲＴ細胞において判定される、ウシコロナウイルスに対する、対照（ＤＭＳＯビヒクル）と比較したオレアンドリン（図１Ａ）のインビトロ用量応答治療的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例６） ＨＲＴ細胞において判定される、ウシコロナウイルスに対する、対照（ＤＭＳＯビヒクル）と比較したオレアンドリンを含有する抽出物（図１Ｂ；ＰＢＩ－オレアンドリン）のインビトロ用量応答治療的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例６） ＨＲＴ細胞において判定される、ウシコロナウイルスに対する、オレアンドリン（図２Ａ）のインビトロ用量応答予防的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例２２） ＨＲＴ細胞において判定される、ウシコロナウイルスに対する、オレアンドリンを含有する抽出物（図２Ｂ：ＰＢＩ－オレアンドリン）のインビトロ用量応答予防的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例２２） ＭＤＢＫ細胞において判定される、ＢＶＤＶに対する、対照（ＤＭＳＯビヒクル）と比較したオレアンドリン（図３Ａ）のインビトロ用量応答治療的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例１３） ＭＤＢＫ細胞において判定される、ＢＶＤＶに対する、対照（ＤＭＳＯビヒクル）と比較したオレアンドリンを含有する抽出物（図３Ｂ；ＰＢＩ－オレアンドリン）のインビトロ用量応答治療的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例１３） ＭＤＢＫ細胞において判定される、ＢＶＤＶに対する、オレアンドリン（図４Ａ）のインビトロ用量応答予防的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例２２） ＭＤＢＫ細胞において判定される、ＢＶＤＶに対する、オレアンドリンを含有する抽出物（図４Ｂ：ＰＢＩ－オレアンドリン）のインビトロ用量応答予防的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例２２） ＭＡＲＣ１４５細胞において判定される、ＰＲＲＳＶに対する、対照（ＤＭＳＯビヒクル）と比較したオレアンドリン（図５Ａ）のインビトロ用量応答治療的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例１４） ＭＡＲＣ１４５細胞において判定される、ＰＲＲＳＶに対する、対照（ＤＭＳＯビヒクル）と比較したオレアンドリンを含有する抽出物（図５Ｂ；ＰＢＩ－オレアンドリン）のインビトロ用量応答治療的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例１４） ＭＡＲＣ１４５細胞において判定される、ＰＲＲＳＶに対する、オレアンドリン（図６Ａ）のインビトロ用量応答予防的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例２３） ＭＡＲＣ１４５細胞において判定される、ＰＲＲＳＶに対する、オレアンドリンを含有する抽出物（図６Ｂ：ＰＢＩ－オレアンドリン）のインビトロ用量応答予防的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例２３） ＢＴ細胞において判定される、ＢＲＳＶに対する、対照（ＤＭＳＯビヒクル）と比較したオレアンドリン（図７Ａ）のインビトロ用量応答治療的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例１５） ＢＴ細胞において判定される、ＢＲＳＶに対する、対照（ＤＭＳＯビヒクル）と比較したオレアンドリンを含有する抽出物（図７Ｂ；ＰＢＩ－オレアンドリン）のインビトロ用量応答治療的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例１５） ＢＴ１４５細胞において判定される、ＢＲＳＶに対する、オレアンドリン（図８Ａ）のインビトロ用量応答予防的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例２４） ＢＴ１４５細胞において判定される、ＢＲＳＶに対する、オレアンドリンを含有する抽出物（図８Ｂ：ＰＢＩ－オレアンドリン）のインビトロ用量応答予防的抗ウイルス活性を要約する図表を示す。（実施例２４）

本発明は、１つ以上の有効用量の抗ウイルス組成物（または抗ウイルス組成物および少なくとも１つの薬学的賦形剤を含む薬学的組成物）の動物への慢性または急性投与により、動物のウイルス感染を治療する方法を提供する。組成物は、動物に最適な投与計画に従って投与され、用量および投与計画の好適性は、ウイルス感染の従来の臨床慣行および臨床治療エンドポイントに従って臨床的に決定される。
本明細書で使用される場合、用語「対象」は、鳥類および哺乳動物などの温血動物、例えば、ブタ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ラマ、アルパカ、スイギュウ、シカ、ヘラジカ、キリン、ラクダ、イヌ、ネコ、ニワトリ、シチメンチョウ、ハト、アヒル、キジ、ギニア、または他の動物を意味すると解釈される。家畜動物は、対象として特に好適である。
本発明に従って治療される動物は、治療応答を示すであろう。「治療応答」とは、ウイルス感染に罹患している動物が、強心配糖体による治療の結果として、以下の臨床的利益：動物の血液もしくは血漿中の活性ウイルス力価の低減、動物の血液もしくは血漿からの活性ウイルスの根絶、感染の改善、感染に関連する症状の発生の低減、感染の部分的もしくは完全な寛解、または感染の進行までの時間の増加、ならびに／あるいは前記ウイルス感染症を引き起こすウイルスの感染性の低減の少なくとも１つを享受することを意味する。治療応答は、完全または部分的な治療応答であり得る。

本明細書で使用される場合、「進行までの時間」は、ウイルス感染が診断（または治療）されてから感染が悪化し始めるまでの期間、長さ、または持続時間である。それは、感染のさらなる進行なしで感染のレベルが維持される期間であり、感染が再び進行し始めると、期間は終了する。疾患の進行は、治療の開始前または開始時に感染に罹患している動物を「病期分類」することにより決定される。例えば、動物の健康は、治療の開始前または開始時に決定される。動物は、次いで抗ウイルス組成物で治療し、ウイルス力価を定期的にモニターした。後のいくつかの時点で、感染の症状が悪化し、したがって感染の進行および「進行までの時間」の終了をマークし得る。感染が進行しなかった間の期間、または感染のレベルもしくは重症度が悪化しなかった間の期間が、「進行までの時間」である。

投与計画には、投与スケジュールに従って投与される治療関連用量（または有効用量）の１つ以上の強心配糖体、および／またはトリテルペンが含まれる。したがって、治療関連用量は、抗ウイルス組成物による治療に対するウイルス感染の治療応答が観察され、かつ動物に、過剰量の望ましくないまたは有害な副作用なしで抗ウイルス組成物を投与することができる治療用量である。治療関連用量は、動物にいくつかの副作用を引き起こし得るが、動物にとって致命的ではない。それは、抗ウイルス組成物を投与されている動物に対する臨床的利益のレベルが、抗ウイルス組成物またはその構成成分の投与により動物によって経験される有害な副作用のレベルを超える用量である。

治療関連用量は、様々な確立された薬理学、薬力学、および薬物動態学の原則に従って、動物により異なるであろう。しかしながら、治療関連用量（例えば、オレアンドリンに対する）は、約２５マイクログラム、約１００マイクログラム、約２５０マイクログラム、約５００マイクログラムまたは約７５０マイクログラムの強心配糖体／日であり得るか、あるいはそれは、用量あたり約２５～７５０マイクログラムの強心配糖体の範囲にあり得るか、または約２５マイクログラム、約１００マイクログラム、約２５０マイクログラム、約５００マイクログラムまたは約７５０マイクログラムの強心配糖体／日を超え得ない。治療関連用量（例えば、個々または一緒のトリテルペンに対する）の別の例は、典型的には体重１ｋｇあたり約０．１マイクログラム～１００マイクログラム、約０．１μｇ～約５００μｇ、約１～約１００μｇ、約１５～約２５μｇ／ｋｇ、約２５～約５０μｇ／ｋｇ、約５０～約１００μｇ／ｋｇ、約１００～約２００μｇ／ｋｇ、約２００～約５００μｇ／ｋｇ、約１０～約７５０μｇ／ｋｇ、約１６～約６４０μｇ／ｋｇ、約１５～約７５０μｇ／ｋｇ、約１５～約７００μｇ／ｋｇ、または約１５～約６５０μｇ／ｋｇ体重の範囲であろう。

動物において標的治療結果を提供するために必要な抗ウイルス組成物の実際の量は、薬局の基本原則に従って対象毎に異なり得ることは、当該技術分野で既知である。
オレアンドリンは、ウシ、ヒツジ、ヤギ、スイギュウ、シカ、ヘラジカ、キリン、およびラクダを含む反芻類を含む反芻動物に投与され得る。
反芻動物について、若齢動物は、成体動物と異なる消化管を有する。したがって、オレアンドリンの用量（体重１Ｋｇあたりのオレアンドリンのμｇ）は、同じ種の成体動物と比較して、若齢動物において異なり得る。例えば、仔ウシは、オレアンドリン療法から利益を得るために、ウシと異なる用量を必要とし得る。獣医学臨床医は、投与される安全で有効な用量を決定するために公知の用量漸増または漸減プロトコールを使用することができる。
治療関連用量は、ウイルス感染の治療に通常使用される任意の投与計画に従って投与することができる。治療関連用量は、１日１回、２回、３回、またはそれ以上、または連続的に投与することができる。それは、１日おき、３日おき、４日おき、５日おき、半週毎、毎週、隔週、３週間おき、４週間おき、毎月、隔月、半月毎、３カ月おき、４カ月おき、半年毎、毎年、または上記のいずれかの組み合わせに従って投与され、好適な投与スケジュールに到達する。例えば、治療関連用量は、１週間以上にわたって１日１回以上（最も高い用量では１日に最大１０回）投与することができる。

オレアンドリンは、動物に投与される飼料および／または液体に含まれ得る。オレアンドリンは、固体飼料、液体飼料、またはゲル飼料を含む任意の飼料形式に含まれ得る。固体飼料は、もろい顆粒、ペレット、食料、ブロックまたは動物に与えるために使用される他のそのような飼料であり得る。
固体飼料は、オレアンドリンおよび少なくとも１つの飼料原料を含み得る。好適な飼料原料は、作物飼料原料の例である、全綿実、綿実殻、綿実粕、大豆粕、大豆皮、トウモロコシグルテン飼料、ホミニーフィード、乾燥蒸留穀物残渣、および精米副産物を含む。含まれ得る追加の成分は、サイレージ、栄養補助剤、ビタミン、ミネラル、塩、穀物（コムギ、オオムギ、エンバク、トウモロコシ）、繊維、干し草、ムラサキウマゴヤシ、ライグラス、ビート、糖液、血粉、骨粉、酵母、ブロムグラス、カナリーグラス、トマト、ニンジン、エンドウ豆、エンドウ豆の蔓の干し草、ベニバナ、ヤマヨモギ、モロコシ属、チートグラス、クローバー、脂肪、ブドウ、ホミニー、ホップ、牧草地の干し草、スーダングラス、ヒマワリ、オオアワガエリの干し草、肉粉、ミロ、オレンジ、カモガヤ、ジャガイモ、白インゲンマメ、落花生、草地の干し草、アブラナ粉、ダイズ、タンパク質など、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。

液体飼料は、オレアンドリン、少なくとも１つの液体、および少なくとも１つの栄養素を含む。液体は、水、発酵ブロス、乳、または代用乳、または動物への投与に好適な他のそのような液体であり得る。
オレアンドリンおよびキョウチクトウ抽出物の苦味を考慮すると、動物に投与される経口組成物は、１つ以上の味マスキング剤を含み得る。甘味料、例えば糖液は、飼料に有利に含まれる。
オレアンドリンは、動物に与えられる水または他の液体にも含まれ得る。
組成物は、動物への投与に好適な１つ以上の添加剤も含み得る。例えば、硫酸アンモニウム、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、脱フッ素リン酸塩、リン酸二アンモニウム、リン酸二カルシウム、石灰石、リン酸一アンモニウム、リン酸一カルシウム、トリポリリン酸ナトリウム、尿素、またはそれらの任意の組み合わせが添加剤として使用され得る。

本発明は、哺乳動物または宿主細胞のウイルス感染を治療する方法を提供し、方法は、当該ウイルス感染の罹患前に哺乳動物または宿主細胞に抗ウイルス組成物を投与し、それにより当該哺乳動物または宿主細胞のウイルス感染時に、抗ウイルス組成物が、ウイルス力価を低減し、ウイルス感染を改善、または排除することを含む。
本発明の抗ウイルス組成物は、ａ）ウイルスへの暴露後のウイルス感染を阻害するために、ウイルス感染の前に予防的に投与することができるか、ｂ）ウイルス複製および感染性子孫の生成を阻害もしくは低減するために、ウイルス感染後に投与することができるか、またはｃ）ａ）およびｂ）の組み合わせである。

本発明は、動物または宿主細胞における、アルテルウイルス科、フラビウイルス科、パラミクソウイルス科、ピコルナウイルス科、コルドポックスウイルス亜科、ポックスウイルス科、コロナウイルス科、パピローマウイルス科、ラブドウイルス科、パルボウイルス科、オルトミクソウイルス科、レオウイルス科、アストロウイルス科、またはサーコウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染を治療する方法であって、有効量の抗ウイルス組成物を投与し、それによってウイルスを抗ウイルス組成物に曝露させ、前記ウイルス感染を治療することを含む方法を提供する。

本明細書の組成物の抗ウイルス活性は、ライノウイルス感染に対して評価された。ライノウイルスは、ピコルナウイルス科およびエンテロウイルス属である。それは、エンベロープを有さず、（＋）極性のｓｓ－ＲＮＡウイルスである。オレアンドリンは、ウイルスの複製を阻害しなかったため、本明細書で用いられる濃度およびアッセイで、ライノウイルスに対して不活性であることが見出された。オレアンドリンは、ヒトアデノウイルス（ＨＡｄｖ－Ｃ５；アデノウイルス科、マストアデノウイルス属）、デング熱ウイルス（フラビウイルス科、フラビウイルス属）、オムスク出血熱ウイルス（フラビウイルス科、フラビウイルス属）、キャサヌール森林病ウイルス（フラビウイルス科、フラビウイルス属）、およびアルフマ（Ａｌｋｈｕｍａ）出血熱ウイルス（フラビウイルス科、フラビウイルス属）に対して不活性であることも見出された。さらに、オレアンドリンは、マウスコロナウイルスに対して不活性であることが報告されている。
オレアンドリンおよびオレアンドリンを含有する抽出物の治療的および予防的抗ウイルス活性の両方が、許容される細胞培養アッセイのインビトロアッセイによって確立された。

ウシコロナウイルス（ＢＣＶ）に対するオレアンドリン（オレアンドリン含有組成物）の有効性の証明は、実施例６によるインビトロ評価を経て得られ、ＢＣＶに感染したＨＲＴ細胞をオレアンドリンで処理した。ＨＲＴ細胞をアッセイの４８時間前に蒔いた。アッセイ時に各ウェルにおいて、培地を除去し、０．０１のＭＯＩでＢＣＶを含有するウイルス維持培地で置き換えた。別々のセットのプレートを１２または２４時間インキュベートした。各時点（１２または２４時間）で、プレートを１×ＤＰＢＳで静かに３回洗浄し、次いで、ＤＭＳＯに溶解した所望の濃度のオレアンドリンもしくはＰＢＩ－０５２０４、または適合した濃度のＤＭＳＯのみを含有する２ｍｌのウイルス維持培地を各ウェルに添加した。オレアンドリン、ＰＢＩ、およびＤＭＳＯ希釈液を作製し、光から保護して４℃で保存した。試料を、１２時間のウイルス接種後２４および４８時間で、ならびに２４時間のウイルス接種後４８時間で取り出し、２つのクライオバイアルに等分した。各時点で収集した試料でウイルス単離を直ちに行い、次いで、アリコートを－８０℃で冷凍した。試料をｑＲＴ－ｑＰＣＲ分析のために提出した。

図１Ａ（唯一の活性としてのオレアンドリン）および図１Ｂ（オレアンドリンを含有するキョウチクトウ抽出物）における結果は、ａ）オレアンドリンが、２４時間の時点でウイルス感染性の９８～１００％の低減および４８時間の時点で同様の９９～１００％の低減を引き起こした；ｂ）オレアンドリンが、約０．０１μｇ／ｍｌ以上の全濃度範囲にわたって有効である；ｃ）オレアンドリンは、ウイルスの複製を完全に止めるには単回投与が不十分なので、繰り返し投与されるべきである；また、ｄ）オレアンドリンが、子孫ウイルスの感染性を阻害するのに非常に有効であることを指示する。結果は、最大１．０μｇ／ｍＬの濃度でのオレアンドリンがＨＲＴ細胞に毒性でないことも指示した。
したがって、本発明は、ウシコロナウイルス感染を治療する方法であって、治療有効量のオレアンドリンを、前記感染を有する動物に投与することを含む方法を提供する。

ＢＣＶに対するオレアンドリンおよびオレアンドリン含有抽出物の予防有効性は実施例２２に従って評価された。ＨＲＴ細胞をアッセイの４８時間前に１２ウェルプレートに蒔いた。アッセイ時に培地を各ウェルから除去し、ＤＭＳＯ中の所望の濃度のオレアンドリンもしくはＰＢＩ－抽出物、または適合した濃度のＤＭＳＯのみを含有する２００μｌの培地で置き換えた。オレアンドリン、ＰＢＩ、およびＤＭＳＯ希釈液は、アッセイ前に新しく作製した。プレートを生成物と共に３０分間インキュベートし、次いで、０．０１のＭＯＩのＢＣＶを各ウェルに（ウェルあたり１×１０⁴ＴＣＩＤ５０）、５００μＬのウイルス維持培地中に添加した。ウイルスをプレート上で１時間インキュベートし、次いで取り出した。プレートを１×ＤＰＢＳで静かに３回洗浄し、続いて、オレアンドリン、ＰＢＩ－抽出物、またはＤＭＳＯのみを含有する２ｍｌのウイルス維持培地を各ウェルに添加した。試料を各時点（２４および４８時間）で取り出し、２つのクライオバイアルに等分した。１つのアリコートをウイルス単離に使用し、２つ目をＲＴ－ｑＰＣＲに使用した。各時点で収集した試料でウイルス単離を直ちに行い、次いでアリコートを－８０℃で冷凍した。試料をＲＴ－ｑＰＣＲ分析のために提出した。

図２Ａ（唯一の活性としてのオレアンドリン）および図２Ｂ（オレアンドリンを含有するキョウチクトウ抽出物）における結果は、ＢＣＶ細胞感染前の細胞とオレアンドリンの３０分のプレインキュベーションが、０．０１～１ｕｇ／ｍｌの間のオレアンドリン濃度でウイルス感染性の９９％～１００％の阻害をもたらしたことを指示する。
したがって、本発明は、ウシコロナウイルス感染の疾患状態への進行を予防する方法であって、治療有効量のオレアンドリンを、前記ウシコロナウイルス感染を有する動物に投与することを含む方法を提供する。

ウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）に対するオレアンドリン（オレアンドリン含有組成物）の有効性の証明は、実施例１２によるインビトロ評価を経て得られ、ＢＶＤＶに感染したＭＤＢＫ細胞をオレアンドリンで処理した。ＭＤＢＫ細胞をアッセイの４８時間前に蒔いた。アッセイ時に各ウェルにおいて、培地を除去し、０．０１のＭＯＩでウイルスを含有するウイルス維持培地で置き換えた。別々のセットのプレートを１２または２４時間インキュベートした。各時点（１２または２４時間）で、プレートを１×ＤＰＢＳで静かに３回洗浄し、次いで、ＤＭＳＯに溶解した所望の濃度のオレアンドリンもしくはＰＢＩ－０５２０４、または適合した濃度のＤＭＳＯのみを含有する２ｍｌのウイルス維持培地を各ウェルに添加した。オレアンドリン、ＰＢＩ－抽出物、およびＤＭＳＯ希釈液を作製し、光から保護して４℃で保存した。試料を、１２時間のウイルス接種後２４および４８時間で、ならびに２４時間のウイルス接種後４８時間で取り出し、２つのクライオバイアルに等分した。各時点で収集した試料でウイルス単離を直ちに行い、次いで、アリコートを－８０℃で冷凍した。試料をｑＲＴ－ｑＰＣＲ分析のために提出した。

図３Ａ（唯一の活性としてのオレアンドリン）および図３Ｂ（オレアンドリンを含有するキョウチクトウ抽出物）における結果は、ａ）オレアンドリン前処理が、２４時間の時点で対照と比較してウイルス感染性の９１～９４％の阻害および４８時間の時点で９８～１００％の低減を引き起こした；ｂ）オレアンドリンが、約０．００５～１．０ｕｇ／ｍｌの全濃度範囲にわたって有効である；ｃ）オレアンドリンは、ウイルスの複製を完全に止めるには単回投与が不十分なので、繰り返し投与されるべきである；また、ｄ）オレアンドリンが、子孫ビリオンのウイルス感染性を低減するのに有効であることを指示する。結果は、最大１．０μｇ／ｍＬの濃度でのオレアンドリンがＭＤＢＫ細胞に毒性でないことも指示した。
したがって、本発明は、ウシウイルス性下痢ウイルス感染を治療する方法であって、治療有効量のオレアンドリンを、前記感染を有する動物に投与することを含む方法を提供する。

ＢＶＤＶに対するオレアンドリンおよびオレアンドリン含有抽出物の予防有効性は実施例２３に従って評価された。ＭＤＢＫ細胞をアッセイの４８時間前に蒔いた。アッセイ時に培地を各ウェルから除去し、ＤＭＳＯに溶解した所望の濃度のオレアンドリンもしくはＰＢＩ－０５２０４、または適合した濃度のＤＭＳＯのみを含有する２００ｕｌの培地で置き換えた。オレアンドリン、ＰＢＩ－抽出物、およびＤＭＳＯ希釈液は、アッセイ前に新しく作製した。プレートを生成物と共に３０分間インキュベートし、次いで、０．０１のＭＯＩのＢＶＤＶウイルスを各ウェルに添加した。ウイルスをプレート上で１時間インキュベートし、次いで取り出した。プレートを１×ＤＰＢＳで静かに３回洗浄し、オレアンドリン、ＰＢＩ－抽出物、またはＤＭＳＯのみを含有する２ｍｌのウイルス維持培地を各ウェルに添加した。試料を各時点（２４および４８時間）で取り出し、２つのクライオバイアルに等分した。各時点で収集した試料でウイルス単離を直ちに行い、次いで、アリコートを－８０℃で冷凍した。試料をＲＴ－ｑＰＣＲ分析のために提出した。

図４Ａ（唯一の活性としてのオレアンドリン）および図４Ｂ（オレアンドリンを含有するキョウチクトウ抽出物）における結果は、ａ）０．１～１．０ｕｇ／ｍｌのオレアンドリンの濃度を使用した場合、ＢＶＤＶによる細胞の感染前の細胞とオレアンドリンの３０分のプレインキュベーションが、元の親細胞の感染後４８時間で測定した場合、子孫細胞の感染性の８５～９３％の阻害をもたらす）；また、ｂ）０．００５～０．０５ｕｇ／ｍｌの濃度を使用した場合、ＢＶＤＶによる細胞の感染の３０分前の細胞とＰＢＩ－オレアンドリン抽出物のプレインキュベーションが子孫細胞に対するウイルスの感染性の９５～１００％の阻害をもたらしたことを指示する。
したがって、本発明は、ウシウイルス性下痢ウイルス感染の疾患状態への進行を予防する方法であって、治療有効量のオレアンドリンを、前記感染を有する動物に投与することを含む方法を提供する。

ブタ繁殖・呼吸障害症候群ウイルス（ＰＲＲＳＶ）に対するオレアンドリン（オレアンドリン含有組成物）の有効性の証明は、実施例１４によるインビトロ評価を経て得られ、ＢＶＤＶに感染したＭＡＲＣ１４５細胞を感染前および感染後にオレアンドリンで処理した。ＭＡＲＣ１４５細胞をアッセイの４８時間前に蒔いた。アッセイ時に各ウェルにおいて、培地を除去し、０．０１のＭＯＩでＰＲＲＳＶを含有するウイルス維持培地で置き換えた。別々のセットのプレートを１２または２４時間インキュベートした。各時点（１２または２４時間）で、プレートを１×ＤＰＢＳで静かに３回洗浄し、次いで、ＤＭＳＯに溶解した所望の濃度のオレアンドリンもしくはＰＢＩ－０５２０４、または適合した濃度のＤＭＳＯのみを含有する２ｍｌのウイルス維持培地を各ウェルに添加した。オレアンドリン、ＰＢＩ－抽出物、およびＤＭＳＯ希釈液を作製し、光から保護して４℃で保存した。試料を、１２時間のウイルス接種後２４および４８時間で、ならびに２４時間のウイルス接種後４８時間で取り出し、２つのクライオバイアルに等分した。各時点で収集した試料でウイルス単離を直ちに行い、次いで、アリコートを－８０℃で冷凍した。試料をｑＲＴ－ｑＰＣＲ分析のために提出した。

図５Ａ（唯一の活性としてのオレアンドリン）および図５Ｂ（オレアンドリンを含有するキョウチクトウ抽出物）における結果は、ａ）オレアンドリン処理が、０．０１～１ｕｇ／ｍｌのオレアンドリンの濃度範囲にわたって、２４－４８時間の期間、新しい細胞への子孫ウイルスのウイルス感染性の７８～９８％の阻害を引き起こした；ｂ）オレアンドリンが、約０．０５ｕｇ／ｍｌ以上の全濃度範囲にわたって有効である；ｃ）オレアンドリンは、ウイルスの複製を完全に止めるには単回投与が不十分なので、繰り返し投与されるべきである；また、ｄ）オレアンドリンが子孫ビリオンのウイルス感染性を低減するのに有効であることを指示する。結果は、最大１．０μｇ／ｍＬの濃度でのオレアンドリンがＭＡＲＣ１４５細胞に毒性でないことも指示した。
したがって、本発明は、動物におけるＰＲＲＳＶ感染を治療する方法であって、治療有効量のオレアンドリンを、前記感染を有する前記動物に投与することを含む方法を提供する。

ＰＲＲＳＶに対するオレアンドリンおよびオレアンドリン含有抽出物の予防有効性は、実施例２４に従って評価された。ＭＡＲＣ１４５細胞をアッセイの４８時間前に１２ウェルプレートに蒔いた。アッセイ時に培地を各ウェルから除去し、ＤＭＳＯに溶解した所望の濃度のオレアンドリンもしくはＰＢＩ－０５２０４、または適合した濃度のＤＭＳＯのみを含有する２００μｌの培地で置き換えた。オレアンドリン、ＰＢＩ－抽出物、およびＤＭＳＯ希釈液は、アッセイ前に新しく作製した。プレートを生成物と共に３０分間インキュベートし、次いで、０．０１のＭＯＩのＰＲＲＳＶウイルスを各ウェルに（あたり１×１０４ＴＣＩＤ５０）、５００μＬのウイルス維持培地中に添加した。ウイルスをプレート上で１時間インキュベートし、次いで取り出した。プレートを１×ＤＰＢＳで静かに３回洗浄し、続いて、オレアンドリン、ＰＢＩ－抽出物、またはＤＭＳＯのみを含有する２ｍｌのウイルス維持培地を各ウェルに添加した。試料を各時点（２４および４８時間）で取り出し、２つのクライオバイアルに等分した。１つのアリコートをウイルス単離に使用し、２つ目をＲＴ－ｑＰＣＲに使用した。各時点で収集した試料でウイルス単離を直ちに行い、次いで、アリコートを－８０℃で冷凍した。試料をＲＴ－ｑＰＣＲ分析のために提出した。

図６Ａ（唯一の活性としてのオレアンドリン）および図６Ｂ（オレアンドリンを含有するキョウチクトウ抽出物）における結果は、ａ）ＰＲＲＳＶによる細胞の感染前の細胞とオレアンドリンの３０分の前処理が、感染後４８時間で測定した場合、０．０５～１μｇ／ｍｌのオレアンドリン濃度範囲にわたって９９％～１００％のウイルス阻害をもたらしたことを指示する。図６Ｂにおけるデータは、ＰＲＲＳＶ感染前の細胞とＰＢＩ－オレアンドリンの３０分のプレインキュベーションが、ウイルス感染後４８で測定した場合、０．００５～０．０５ｕｇ／ｍｌの濃度範囲にわたって６８～１００％のウイルス阻害をもたらしたことを示す。
したがって、本発明は、ＰＲＲＳＶ感染の疾患状態への進行を予防する方法であって、治療有効量のオレアンドリンを、前記感染を有する動物に投与することを含む方法を提供する。

ウシ呼吸器多核体ウイルス（ＢＲＳＶ）に対するオレアンドリン（オレアンドリン含有組成物）の有効性の証明は、実施例１５によるインビトロ評価を経て得られ、ＢＶＤＶに感染したＢＴ細胞をオレアンドリンで処理した。ＢＴ細胞をアッセイの４８時間前に蒔いた。アッセイ時に各ウェルにおいて、培地を除去し、０．０１のＭＯＩでウイルスを含有するウイルス維持培地で置き換えた。別々のセットのプレートを１２または２４時間インキュベートした。各時点（１２または２４時間）で、プレートをＤＰＢＳで静かに洗浄し、次いで、ＤＭＳＯに溶解した所望の濃度のオレアンドリンもしくはＰＢＩ－０５２０４、または適合した濃度のＤＭＳＯのみを含有する２ｍｌのウイルス維持培地を各ウェルに添加した。オレアンドリン、ＰＢＩ、およびＤＭＳＯ希釈液を１２時間の処理の５時間前に作製し、光から保護して４℃で保存した（午後４時に調製し、午後９時に使用した）。新鮮なオレアンドリン、ＰＢＩ、およびＤＭＳＯ希釈液を２４時間の処理の前に作製した。試料を１２時間のウイルス接種後２４および４８時間で、ならびに２４時間のウイルス接種後４８時間で取り出し、２つのクライオバイアルに等分した。各時点で収集した試料でウイルス単離を直ちに行い、次いで、アリコートを－８０℃で冷凍した。試料をｑＲＴ－ｑＰＣＲ分析のために提出した。

図７Ａ（唯一の活性としてのオレアンドリン）および図７Ｂ（オレアンドリンを含有するキョウチクトウ抽出物）における結果は、ａ）オレアンドリンが、２４時間の時点および４８時間の時点でウイルス感染性の６２～１００％の低減を引き起こした；ｂ）オレアンドリンが、約０．００５μｇ／ｍＬ以上の全濃度範囲にわたって有効である；ｃ）オレアンドリンは、ウイルスの複製を完全に止めるには単回投与が不十分なので、繰り返し投与されるべきである；また、ｄ）オレアンドリンが子孫ビリオンのウイルス感染性を低減するのに有効であることを指示する。結果は、最大１．０μｇ／ｍＬの濃度でのオレアンドリンがＢＴ細胞に毒性でないことも指示した。
したがって、本発明は、動物におけるＢＲＳＶ感染を治療する方法であって、治療有効量のオレアンドリンを、前記感染を有する前記動物に投与することを含む方法を提供する。

ＢＲＳＶに対するオレアンドリンおよびオレアンドリン含有抽出物の予防有効性は、実施例２５に従って評価された。ＢＴ細胞をアッセイの４８時間前に蒔いた。アッセイ時に培地を各ウェルから除去し、ＤＭＳＯに溶解した所望の濃度のオレアンドリンもしくはＰＢＩ－０５２０４、または適合した濃度のＤＭＳＯのみを含有する培地で置き換えた。オレアンドリン、ＰＢＩ－抽出物、およびＤＭＳＯ希釈液をアッセイ前に新しく作製した。プレートを生成物と共に３０分間インキュベートし、次いで、０．０１のＭＯＩのＢＲＳＶウイルスを各ウェルに添加した。ウイルスをプレート上で１時間インキュベートし、次いで取り出した。プレートをＤＰＢＳで静かに洗浄し、オレアンドリン、ＰＢＩ－抽出物、またはＤＭＳＯのみを含有する２ｍｌのウイルス維持培地を各ウェルに添加した。試料を各時点（２４および４８時間）で取り出し、２つのクライオバイアルに等分した。各時点で収集した試料でウイルス単離を直ちに行い、次いで、アリコートを－８０℃で冷凍した。試料をＲＴ－ｑＰＣＲ分析のために提出した。

図８Ａ（唯一の活性としてのオレアンドリン）および図８Ｂ（オレアンドリンを含有するキョウチクトウ抽出物）における結果は、ａ）ＢＲＳＶ感染前の細胞と０．００５～１μｇ／ｍｌの濃度範囲にわたるオレアンドリンの３０分のプレインキュベーションが、ウイルス感染後４８時間で測定した場合、ウイルス感染性の８２％～１００％の阻害をもたらした；また、ｂ）図８Ｂにおけるデータは、ＢＲＳＶによる細胞の感染前の細胞とＰＢＩ－オレアンドリンの３０分のプレインキュベーションが、ウイルス感染後４８時間で測定した場合、ウイルス感染性の９３％～９９％の阻害をもたらしたことを示すことを指示する。
したがって、本発明は、ＢＲＳＶ感染の疾患状態への進行を予防する方法であって、治療有効量のオレアンドリンを、前記感染を有する動物に投与することを含む方法を提供する。

アッセイで評価されたオレアンドリンの濃度は、用量および血漿中濃度の観点から臨床的に関連性がある。
オレアンドリン含有組成物の安全性の証明は、前記細胞の、異なる濃度のオレアンドリンを含む溶液への曝露後に、乳酸脱水素酵素の放出を判定するためのインビトロ細胞アッセイによりさらに得られる。１μｇ／ｍＬの最大濃度で、対照ビヒクルを超えるさらなる毒性は存在しなかったことを判定した。
したがって、本発明は、動物におけるウイルス感染を治療する方法であって、前記感染を有する動物に、治療有効用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）を慢性的に投与することを含む方法を提供する。慢性投与は、１回以上の（複数の）治療有効用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）を繰り返し投与することにより達成できる。１回以上の用量は、１週間に１日以上にわたって、任意に１カ月あたり１週間以上にわたって、任意に１年あたり１カ月以上にわたって１日に投与され得る。

したがって、本発明は、治療を必要とする動物において、ウイルス感染を治療する方法であって、動物に、ａ）オレアンドリン；またはｂ）オレアンドリン、およびＮｅｒｉｕｍ種から抽出される１つ以上の他の化合物を含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を投与することを含む方法を提供する。オレアンドリンは、Ｎｅｒｉｕｍ種の抽出物の一部として存在し得、この抽出物は、ａ）超臨界流体抽出物；ｂ）熱水抽出物；ｃ）有機溶媒抽出物；ｄ）水性有機溶媒抽出物；ｅ）超臨界流体を使用し、任意に少なくとも１つの有機溶媒（抽出改質剤）を加える抽出物；ｆ）亜臨界液体を使用し、任意に少なくとも１つの有機溶媒（抽出改質剤）を加える抽出物；またはｇ）前記抽出物のいずれか２つ以上の任意の組み合わせであり得る。

ＰＢＩ－０５２０４（本明細書、およびその開示全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１２年５月２９日発行のＡｄｄｉｎｇｔｏｎのＵＳ８１８７６４４Ｂ２、２００８年７月２２日発行のＡｄｄｉｎｇｔｏｎのＵＳ７４０２３２５Ｂ２、２０１３年３月１２日発行のＡｄｄｉｎｇｔｏｎらのＵＳ８３９４４３４Ｂ２に記載される）は、主要な薬理学的に活性な構成成分として強心配糖体（オレアンドリン、ＯＬ）およびトリテルペン（オレアノール酸（ＯＡ）、ウルソール酸（ＵＡ）、およびベツリン酸（ＢＡ））を含む。ＯＬ対総トリテルペンのモル比は、約１：（１０～９６）である。ＯＡ：ＵＡ：ＢＡのモル比は、約７．８：７．４：１である。ＰＢＩ－０５２０４のＯＡ、ＵＡ、およびＢＡの組み合わせは、ＯＬ等モル基準で比較した場合、オレアンドリンの抗ウイルス活性を増加させる。ＰＢＩ－０４７１１は、ＰＢＩ－０５２０４の画分であるが、それは強心配糖体（ＯＬ）を含まない。ＰＢＩ－０４７１１のＯＡ：ＵＡ：ＢＡのモル比は、約３：２．２：１である。ＰＢＩ－０４７１１はまた、抗ウイルス活性も保有する。したがって、ＯＬ、ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを含む抗ウイルス組成物は、ＯＬの等モル含有量に基づいて、唯一の活性成分としてＯＬを含む組成物よりも有効である。いくつかの実施形態では、個々のトリテルペン対オレアンドリンのモル比は、以下の範囲である：約２～８（ＯＡ）：約２～８（ＵＡ）：約０．１～１（ＢＡ）：約０．５～１．５（ＯＬ）；または約３～６（ＯＡ）：約３～６（ＵＡ）：約０．３～８（ＢＡ）：約０．７～１．２（ＯＬ）；または約４～５（ＯＡ）：約４～５（ＵＡ）：約０．４～０．７（ＢＡ）：約０．９～１．１（ＯＬ）；または約４．６（ＯＡ）：約４．４（ＵＡ）：約０．６（ＢＡ）：約１（ＯＬ）。

唯一の抗ウイルス剤としてオレアンドリンを含む抗ウイルス組成物は、本発明の範囲内にある。単体の抗ウイルス剤としてジゴキシンを含む抗ウイルス組成物は、本発明の範囲内にある。
抗ウイルス剤としてオレアンドリンおよび複数のトリテルペンを含む抗ウイルス組成物は、本発明の範囲内にある。いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。化合物のモル比は、本明細書に記載される通りである。

主要な活性成分として複数のトリテルペンを含む（ステロイド、強心配糖体、および薬理学的に活性な成分を除くことを意味する）抗ウイルス組成物はまた、本発明の範囲内にある。上記のように、ＰＢＩ－０４７１１は。ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを主要な活性成分として含み、それは抗ウイルス活性を示す。いくつかの実施形態では、トリテルペンベースの抗ウイルス組成物は、ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを含み、それらの各々は独立して、その遊離酸形態、塩形態、重水素化形態、および誘導体形態から各発生時に選択される。

ＰＢＩ－０１０１１は、ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを含む改善されたトリテルペンベースの抗ウイルス組成物であり、ＯＡ：ＵＡ：ＢＡのモル比は、約９～１２：最大約２：最大約２、または約１０：約１：約１、または約９～１２：約０．１～２：約０．１～２、または約９～１１：約０．５～１．５：約０．５～１．５、または約９．５～１０．５：約０．７５～１．２５：約０．７５～１．２５、または約９．５～１０．５：約０．８～１．２：約０．８～１．２、または約９．７５～１０．５：約０．９～１．１：約０．９～１．１である。

いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、本明細書に記載されるように、ＯＡ対ＵＡのモル比で存在する少なくともオレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）およびウルソール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。ＯＡは、ＵＡを超える大モル過剰で存在する。
いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、本明細書に記載されるように、ＯＡ対ＢＡのモル比で存在する少なくともオレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）およびベツリン酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。ＯＡは、ＢＡを超える大モル過剰で存在する。
いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、本明細書に記載されるように、ＯＡ対ＵＡ対ＢＡのモル比で存在する少なくともオレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。ＯＡは、ＵＡおよびＢＡの両方を超える大モル過剰で存在する。
いくつかの実施形態では、トリテルペンベースの抗ウイルス組成物は、強心配糖体を除外する。

一般に、アルテルウイルス科感染、フラビウイルス科感染、コロナウイルス科感染、またはパラミクソウイルス科感染を有する動物は、以下のように治療される。動物は、当該対象が当該ウイルスに感染しているかどうかを判定するために評価される。抗ウイルス組成物の投与が指示される。抗ウイルス組成物の初期用量は、一定期間（治療期間）、処方された投与計画に従って動物に投与される。動物の臨床応答および治療応答のレベルは、定期的に判定される。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、動物における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による動物の治療は、必要に応じて継続される。動物が感染自体の停止、感染に関連する症状の低減、および／または感染の進行の低減などの所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。

臨床医が、抗ウイルス組成物および１つ以上の他の治療薬の組み合わせによりウイルス感染を有する動物を治療する意図があり、動物が有するウイルス感染が、当該１つ以上の他の治療薬による治療に少なくとも部分的に治療的に応答することが知られている場合、本発明の方法は、治療関連用量の抗ウイルス組成物および治療関連用量の当該１つ以上の他の治療薬を、それを必要とする動物に投与することを含み、抗ウイルス組成物は、第１の投与計画に従って投与され、１つ以上の他の治療薬は、第２の投与計画に従って投与される。いくつかの実施形態では、第１および第２の投与計画は同じである。いくつかの実施形態では、第１および第２の投与計画は異なる。
本発明の抗ウイルス組成物は、一次抗ウイルス療法、補助抗ウイルス療法、または併用抗ウイルス療法として投与することができる。本発明の方法は、抗ウイルス組成物の少なくとも１つの他の既知の抗ウイルス組成物との別々の投与または同時投与を含み、本発明の抗ウイルス組成物は、既知の抗ウイルス組成物（化合物）またはウイルス感染に関連する症状を治療するための組成物の投与の前、その間、またはその後に投与され得ることを意味する。例えば、炎症、嘔吐、悪心、頭痛、発熱、下痢、悪心、蕁麻疹、結膜炎、倦怠感、筋肉痛、関節痛、発作、または麻痺を治療するために使用される薬剤は、本発明の抗ウイルス組成物とともに、またはそれとは別々に投与することができる。

１つ以上の他の治療薬は、治療上有効であると臨床医が認識している用量および投与計画に従って、または治療有効以下であると臨床医が認識している用量で投与することができる。抗ウイルス組成物および１つ以上の他の治療薬の組み合わせの投与により提供される臨床的利益および／または治療効果は、相加的または相乗的であり得、そのようなレベルの利益または効果は、組み合わせの投与と個々の抗ウイルス組成物構成成分および１つ以上の他の治療薬の投与との比較により決定されている。食品医薬品局（動物用医薬品センター）、世界保健機関、欧州医薬品庁（動物用医薬品部門）、オーストラリア農薬・動物用医薬品局（ＡＰＶＭＡ）、全米保健機関（獣医公衆衛生プログラム）、農薬・動物用医薬品局（ニュージーランド）または世界中の様々な保健省によって提案または説明されているような用量で、および投与計画に従って、１つ以上の他の治療薬を投与することができる。

薬学的組成物中に存在する抗ウイルス化合物（トリテルペン、強心配糖体など）は、それらの非修飾形態、塩形態、誘導体形態、またはそれらの組み合わせで存在し得る。本明細書で使用される場合、「誘導体」という用語は、ａ）第１の化学物質に構造的に関連し、それから理論的に誘導可能な化学物質；ｂ）同様の第１の化合物から形成される化合物、もしくは第１の化合物の１つの原子が別の原子または原子の群で置き換えられた場合、別の第１の化合物から生じると考えられ得る化合物；ｃ）親化合物から誘導もしくは取得され、親化合物の必須要素を含む化合物；またはｄ）１つ以上のステップで同様の構造の第１の化合物から生成され得る化学化合物を意味すると解釈される。例えば、誘導体は、その重水素化形態、酸化形態、脱水、不飽和、ポリマー複合体化、またはグリコシル化形態を含み得るか、あるいはエステル、アミド、ラクトン、同族体、エーテル、チオエーテル、シアノ、アミノ、アルキルアミノ、スルフヒドリル、複素環式、複素式環縮合、重合、ペグ化、ベンジリデニル、トリアゾリル、ピペラジニル、またはそれらの重水素化形態を含み得る。

本明細書で使用される場合、「オレアンドリン」という用語は、特に明記しない限り、オレアンドリンの全ての既知の形態を意味すると解釈される。オレアンドリンは、ラセミ体、光学的に純粋な形態、または光学的に濃縮された形態で存在し得る。Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．植物材料は、例えば、テキサス州アタスコサのアルドリッジ・ナーサリーなどの商業的な植物供給業者から入手することができる。
超臨界流体（ＳＣＦ）抽出物は、ＵＳ７，４０２，３２５、ＵＳ８３９４４３４、ＵＳ８１８７６４４、またはＰＣＴ国際公開第ＷＰ２００７／０１６１７６Ａ２に詳述されるように調製することができ、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。抽出は、エタノールなどの改質剤（有機溶媒）の存在下または不在下で、超臨界二酸化炭素を使用して行うことができる。

熱水抽出物は、ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）（Ｎｅｒｉｕｍ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ Ａｎｔｏｎｉｏ、ＴＸ；Ｓａｌｕｄ Ｉｎｔｅｇｒａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｌｉｎｉｃ、Ｔｅｇｕｃｉｇａｌｐａ、Ｈｏｎｄｕｒａｓ；ｗｗｗ．ｓａｌｕｄｉｎｔｅｇｒａｌ．ｃｏｍ；ｗｗｗ．ａｎｖｉｒｚｅｌ．ｃｏｍ）の商品名で液体剤形として利用できる。ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）は、オレアンドリン、オレアンドリゲニン、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒから抽出された多糖類（熱水抽出物）を含む。市販のバイアルは、約２００～約９００μｇのオレアンドリン、約５００～約７００μｇのオレアンドリゲニン、およびＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒから抽出された多糖類を含む、約１５０ｍｇのｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物をフリーズドライ粉末（投与前に水で再構成する前）として含む。前記バイアルはまた、少なくとも１つの浸透物質、例えばマンニトール、塩化ナトリウム、少なくとも１つの緩衝剤、例えばアスコルビン酸ナトリウムとアスコルビン酸、少なくとも１つの防腐剤、例えばプロピルパラベン、メチルパラベンなどの薬学的賦形剤を含み得る。

強心配糖体、特にオレアンドリンを含む他の抽出物は、様々な異なるプロセスによって調製することができる。抽出物は、熱水抽出物の調製のための手順を説明するＤｒ．Ｈｕｓｅｙｉｎ Ｚｉｙａ Ｏｚｅｌ（米国特許第５，１３５，７４５号）によって開発されたプロセスに従って抽出物を調製することができる。水性抽出物には、分子量が２ＫＤ～３０ＫＤで変化するいくつかの多糖類、オレアンドリン、オレアンドリゲニン、オドロシドおよびネリタロシドが含まれると報告されている。多糖類には、酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンが含まれると報告されている。Ｓｅｌｖａｒａｊらの米国特許第５，８６９，０６０号は、Ｎｅｒｉｕｍ種の熱水抽出物およびその生成方法、例えば、実施例２を開示している。次いで、得られた抽出物は、凍結乾燥され、粉末を生成することができる。米国特許第６，５６５，８９７号（米国登録前第２００２０１１４８５２号およびＳｅｌｖａｒａｊらのＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０００／０１６７９３号）は、実質的に減菌の抽出物の調製のための熱水抽出プロセスを開示している。Ｅｒｄｅｍｏｇｌｕら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２００３）Ｎｏｖ．８９（１），１２３－１２９）は、抗侵害受容作用および抗炎症作用に基づいて、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒを含む植物の水性抽出物およびエタノール抽出物の比較結果を開示している。Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの有機溶媒抽出物もまた、Ａｄｏｍｅら（Ａｆｒ．Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉ．（２００３）Ａｕｇ．３（２），７７－８６；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、ｅｌ－Ｓｈａｚｌｙら（Ｊ．Ｅｇｙｐｔ Ｓｏｃ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．（１９９６），Ａｕｇ．２６（２），４６１－４７３；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｂｅｇｕｍ ら（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９９）Ｆｅｂ．５０（３），４３５－４３８；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｚｉａら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｌｐｈａｒｍａｃｏｌ．（１９９５）Ｎｏｖ．４９（１），３３－３９；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、およびＶｌａｓｅｎｋｏら（Ｆａｒｍａｔｓｉｉａ．（１９７２）Ｓｅｐｔ．－Ｏｃｔ．２１（５），４６－４７；ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）によって開示される。Ｓｉｎｇｈらの米国登録前特許出願公開第２００４０２４７６６０号は、癌の治療における使用のためのオレアンドリンのタンパク質安定化リポソーム製剤の調製を開示している。Ｓｉｎｇｈらの米国登録前特許出願公開第２００５００２６８４９号は、シクロデキストリンを含むオレアンドリンの水溶性製剤を開示している。Ｓｉｎｇｈらの米国登録前特許出願公開第２００４００８２５２１号は、熱水抽出物からのオレアンドリンのタンパク質安定化ナノ粒子製剤の調製を開示している。

オレアンドリンはまた、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓの形質転換カルス（Ｉｂｒａｈｉｍら、Ｅｎｚ． Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｔｅｃｈｎｏ．（２００７），４１（３），３３１－３３６の“Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｌｅａｎｄｒｉｎ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ ｃｏｍｂｉｎｅｄ Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｇａｌ ｅｌｉｃｉｔａｔｉｏｎ ｉｎ Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ ｃｅｌｌ ｃｕｌｔｕｒｅｓ”、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれる）に由来する懸濁液培養物の抽出物から得られる。ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍの熱水、有機溶媒、水性有機溶媒、または超臨界流体抽出物が、本発明に従って使用され得る。

オレアンドリンはまた、インビトロで、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒマイクロ培養物の抽出物から得られ、それによってシュート培養を実生から、および／あるいはＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ品種Ｓｐｌｅｎｄｅｎｓ Ｇｉｇａｎｔｅｕｍ、ＲｅｖａｎｃｈｅもしくはＡｌｓａｃｅ、または他の品種の茎端から開始できる（Ｖｉｌａら、ＨｏｒｔＳｃｉｅｎｃｅ（２０１０），４５（１），９８－１０２の“Ｍｉｃｒｏｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｏｌｅａｎｄｅｒ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ Ｌ．）”、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれる）。マイクロ培養Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．の熱水、有機溶媒、水性有機溶媒、または超臨界流体抽出物は、本発明に従って使用され得る。

抽出物はまた、それらの多糖類および炭水化物の含有量が異なる。熱水抽出物は、グルコースで調製された標準曲線に対して４０７．３グルコース当量単位の炭水化物を含むが、一方で、ＳＣＦ ＣＯ₂抽出物の分析は、定量限界を下回る非常に低いレベルで見出された炭水化物レベルを見出した。しかしながら、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物中の炭水化物の量は、ＳＣＦ ＣＯ₂抽出物のそれよりも少なくとも１００倍多かった。ＳＣＦ抽出物の多糖類含有量は、０％、＜０．５％、＜０．１％、＜０．０５％、または＜０．０１％重量であり得る。いくつかの実施形態では、ＳＣＦ抽出物は、植物塊の抽出中に得られた多糖類を除外する。

ＳＣＦ ＣＯ₂抽出物および熱水抽出物の部分的な組成物は、ＪＥＯＬ ＡｃｃｕＴＯＦ－ＤＡＲＴ質量分析計（ＪＥＯＬ ＵＳＡ、Ｐｅａｂｏｄｙ，ＭＡ，ＵＳＡ）で、ＤＡＲＴ ＴＯＦ－ＭＳ（飛行質量分析のリアルタイム時間の直接分析）によって決定した。
Ｎｅｒｉｕｍ種またはＴｈｅｖｅｔｉａ種のＳＣＦ抽出物は、オレアンドリンおよびトリテルペンなどの薬理学的に活性な化合物の混合物である。ＳＣＦプロセスによって得られる抽出物は、周囲温度で実質的に水不溶性の、粘性の半固体である（溶媒を除去した後）。ＳＣＦ抽出物は、様々な異なる範囲の水溶性を有する多くの異なる構成成分を含む。超臨界流体プロセスからの抽出物は、重量で０．９重量％～２．５重量％のオレアンドリンまたは１．７重量％～２．１重量％のオレアンドリンまたは１．７重量％～２．０重量％のオレアンドリンの理論的範囲を含む。異なる量のオレアンドリンを含むＳＣＦ抽出物が得られている。一実施形態では、ＳＣＦ抽出物は、約２重量％のオレアンドリンを含む。ＳＣＦ抽出物は、熱水抽出物よりも３～１０倍高い濃度のオレアンドリンを含む。これは、ＨＰＬＣならびにＬＣ／ＭＳ／ＭＳ（タンデム質量分析）分析の両方によって確認された。
ＳＣＦ抽出物は、オレアンドリンおよびトリテルペンオレアノール酸、ベツリン酸およびウルソール酸、ならびに任意に本明細書に記載される他の構成成分を含む。オレアンドリンおよびトリテルペンの含有量は、バッチにより異なり得るが、しかしながら、変動の程度は過度ではない。例えば、ＳＣＦ抽出物（ＰＢＩ－０５２０４）のバッチは、これら４つの構成成分について分析され、以下の各々のおおよその量を含むことが見出された。

個々の構成成分の含有量は、示された値に対して±２５％、±２０％、±１５％、±１０％、または±５％異なり得る。したがって、ＳＣＦ抽出物中のオレアンドリンの含有量は、ＳＣＦ抽出物の１ｍｇあたり２０ｍｇ±５ｍｇ（２０ｍｇの±２５％である）の範囲になる。
オレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、およびそれらの誘導体はまた、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（ｗｗｗ．ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍ；Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡ）からも購入することができる。ジゴキシンは、ＨＩＫＭＡ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＬＴＤ（ＮＤＡ Ｎ０１２６４８、エリキシル剤、０．０５ｍｇ／ｍＬ；錠剤、０．１２５ｍｇ、０．２５ｍｇ）、ＶｉｓｔａＰｈａｒｍ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ２１３０００、エリキシル剤、０．０５ｍｇ／ｍＬ）、Ｓａｎｄｏｚ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ０４０４８１、注射剤、０．２５ｍｇ／ｍＬ）、Ｗｅｓｔ－Ｗａｒｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＬＴＤ（ＮＤＡ Ａ０８３３９１、注射剤、０．２５ｍｇ／ｍＬ）、Ｃｏｖｉｓ Ｐｈａｒｍａ ＢＶ（ＮＤＡ Ｎ００９３３０、０．１ｍｇ／ｍＬ、０．２５ｍｇ／ｍＬ）、Ｉｍｐａｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（ＮＤＡ Ａ０７８５５６、錠剤、０．１２５ｍｇ、０．２５ｍｇ）、Ｊｅｒｏｍｅ Ｓｔｅｖｅｎｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ０７６２６８、錠剤、０．１２５ｍｇ、０．２５ｍｇ）、Ｍｙｌａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ０４０２８２、錠剤、０．１２５ｍｇ、０．２５ｍｇ）、Ｓｕｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ０７６３６３、錠剤、０．１２５ｍｇ、０．２５ｍｇ）、Ｃｏｎｃｏｒｄｉａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ０２０４０５、錠剤、０．０６２５、０．１２５ｍｇ、０．１８７５ｍｇ、０．２５ｍｇ、０．３７５ｍｇ、０．５ｍｇ、ＬＡＮＯＸＩＮ）、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＬＬＣ（ＮＤＡ ０１８１１８、カプセル剤、０．０５ｍｇ、０．１ｍｇ、０．１５ｍｇ、０．２ｍｇ、ＬＡＮＯＸＩＣＡＰＳ）から市販されている。

本明細書で使用される場合、個々に命名されたトリテルペンは、それらの天然（非修飾、遊離酸）形態、それらの塩形態、誘導体形態、プロドラッグ形態、またはそれらの組み合わせで、各発生時に選択される。トリテルペンの重水素化形態を含む組成物およびそれを用いる使用方法もまた、本発明の範囲内にある。

オレアノール酸の誘導体、プロドラッグ、および塩は、２０１５年１月８日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１５／００１１６２７Ａ１、２０１４年１１月２０日に公開されたＲｏｎｇらのＵＳ２０１４／０３４３１０８Ａ１、２０１４年１１月２０日に公開されたＸｕらのＵＳ２０１４／０３４３０６４Ａ１、２０１４年６月２６日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１４／０１７９９２８Ａ１、２０１４年４月１０日に公開されたＢｅｎｄｅｒらのＵＳ２０１４／０１００２２７Ａ１、２０１４年３月２７日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１４／００８８１８８Ａ１、２０１４年３月２７日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１４／００８８１６３Ａ１、２０１４年３月６日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１４／００６６４０８Ａ１、２０１３年１１月２８日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１３／０３１７００７Ａ１、２０１３年１１月１４日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１３／０３０３６０７Ａ１、２０１２年９月２７日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１２／０２４５３７４、２０１２年９月２０日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１２／０２３８７６７Ａ１、２０１２年９月２０日に公開されたＳｈｏｄｅらのＵＳ２０１２／０２３７６２９Ａ１、２０１２年８月２３日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１２／０２１４８１４Ａ１、２０１２年６月２８日に公開されたＬｅｅらのＵＳ２０１２／０１６５２７９Ａ１、２０１１年１２月１日に公開されたＡｒｎｔｚｅｎらのＵＳ２０１１／０２９４７５２Ａ１、２０１１年４月２１日に公開されたＭａｊｅｅｄらのＵＳ２０１１／００９１３９８Ａ１、２０１０年７月２９日に公開されたＡｒｎｔｚｅｎらのＵＳ２０１０／０１８９８２４Ａ１、２０１０年２月２５日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１０／００４８９１１Ａ１、および２００６年４月６日に公開されたＡｒｎｔｚｅｎらのＵＳ２００６／００７３２２２Ａ１に開示されており、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。

ウルソール酸の誘導体、プロドラッグ、および塩は、２０１５年１月８日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１５／００１１６２７Ａ１、２０１３年１１月１４日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１３／０３０３６０７Ａ１、２０１５年８月６日に公開されたＹｏｏｎらのＵＳ２０１５／０２１８２０６Ａ１、２００４年１１月３０日に発行されたＦｒｉｔｓｃｈｅらのＵＳ６８２４８１１、２０１０年５月８日に発行されたＯｃｈｉａｉらのＵＳ７７１８６３５、２０１４年５月２０日に発行されたＬｉｎらのＵＳ８７２９０５５、および２０１５年９月１日に発行されたＹｏｏｎらのＵＳ９１２０８３９に開示されており、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。

ベツリン酸の誘導体、プロドラッグ、および塩は、２０１５年１月８日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１５／００１１６２７Ａ１、２０１３年１１月１４日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１３／０３０３６０７Ａ１、２０１２年９月２０日に公開されたＳｈｏｄｅらのＵＳ２０１２／０２３７６２９Ａ１、２０１７年７月２０日に公開されたＲｅｇｕｅｉｒｏ－ＲｅｎらのＵＳ２０１７／０２０４１３３Ａ１、２０１７年４月６日に公開されたＮｉｔｚらのＵＳ２０１７／００９６４４６Ａ１、２０１５年１１月２６日に公開されたＰａｒｔｈａｓａｒａｄｈｉ ＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１５／０３３７００４Ａ１、２０１５年４月３０日に公開されたＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１５／０１１９３７３Ａ１、２０１４年１０月２日に公開されたＹａｎらのＵＳ２０１４／０２９６５４６Ａ１、２０１４年８月２８日に公開されたＳｗｉｄｏｒｓｋｉらのＵＳ２０１４／０２４３２９８Ａ１、２０１４年８月７日に公開されたＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１４／０２２１３２８Ａ１、２０１４年３月６日に公開されたＬｅｕｎｉｓらのＵＳ２０１４／００６６４１６Ａ１、２０１３年３月１４日に公開されたＤｕｒｓｔらのＵＳ２０１３／００６５８６８Ａ１、２０１３年１月３１日に公開されたＲｅｇｕｅｉｒｏ－ＲｅｎらのＵＳ２０１３／００２９９５４Ａ１、２０１２年１１月２９日に公開されたＺｈａｎｇらのＵＳ２０１２／０３０２５３０Ａ１、２０１２年８月２３日に公開されたＰｏｗｅｒらのＵＳ２０１２／０２１４７７５Ａ１、２０１２年４月２６日に公開されたＨｏｎｄａらのＵＳ２０１２／０１０１１４９Ａ１、２０１１年９月１５日に公開されたＢｕｌｌｏｃｋらのＵＳ２０１１／０２２４１８２、２０１１年１２月２２日に公開されたＨｅｍｐらのＵＳ２０１１／０３１３１９１Ａ１、２０１１年９月１５日に公開されたＰｉｃｈｅｔｔｅらのＵＳ２０１１／０２２４１５９Ａ１、２０１１年９月８日に公開されたＰａｒｔｈａｓａｒａｄｈｉ ＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１１／０２１８２０４、２００９年８月１３日に公開されたＳａｆｅらのＵＳ２００９／０２０３６６１Ａ１、２００９年５月２１日に公開されたＫｒａｓｕｔｓｋｙらのＵＳ２００９／０１３１７１４Ａ１、２００９年３月１９日に公開されたＫｒａｓｕｔｓｋｙらのＵＳ２００９／００７６２９０、２００９年３月１２日に公開されたＬｅｕｎｉｓらのＵＳ２００９／００６８２５７Ａ１、２００８年１１月２７日に公開されたＭｕｋｈｅｒｊｅｅらのＵＳ２００８／０２９３６８２、２００７年３月２９日に公開されたＰｅｚｚｕｔｏらのＵＳ２００７／００７２８３５Ａ１、２００６年１１月９日に公開されたＪａｎｓｅｎらのＵＳ２００６／０２５２７３３Ａ１、および２００６年１１月９日に公開されたＯ’ＮｅｉｌｌらのＵＳ２００６／０２５２７４Ａ１に開示されており、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。

ウイルス感染は、複数の器官に同時に影響を与え、多臓器不全を引き起こし得るので、１つ超の経路により組成物を投与することが有利になり得る。
抗ウイルス組成物は、任意の好適な薬学的に許容される剤形に製剤化することができる。非経口、耳、眼、鼻、吸入、頬側、舌下、経腸、局所、口腔、経口、および注射可能な剤形が特に有用である。特定の剤形には、固体または液体の剤形が含まれる。例示的な好適な剤形には、錠剤、カプセル、丸剤、カプレット、トローチ、サシェ、溶液、懸濁液、分散液、バイアル、バッグ、ボトル、注射液、ｉ．ｖ．（静脈内）、ｉ．ｍ．（筋肉内）またはｉ．ｐ．（腹腔内）投与可能な液体および薬科学の当業者に既知である他のそのような剤形が含まれる。

オレアンドリン（またはジゴキシン）を動物に投与するための好適な剤形は、公知の手順に従って作製することができ、オレアンドリン（またはジゴキシン）は、別の薬物の代わりに使用される：Ｋｌｉｎｋら（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ，２^ndｅｄ．，Ｅｄｓ．Ｇ．Ｅ．Ｈａｒｄｅｅ ａｎｄ Ｊ．Ｄ．Ｂａｇｇｏｔ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，１９９８の“Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ”）、Ｆｏｓｔｅｒら（Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，４^thｅｄ．，Ｅｄｓ．Ｊ．Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，２０１５の“Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ”）。

有効量のまたは治療関連量の抗ウイルス化合物（強心配糖体、トリテルペン、またはそれらの組み合わせ）が特に企図される。「有効量」という用語により、薬学的有効量が企図されることが理解される。薬学的有効量は、必要なまたは所望の治療応答に十分な活性成分の量または分量、言い換えれば、動物に投与されたときにかなりの生物学的応答を誘発するのに十分な量である。かなりの生物学的応答は、活性物質の単回または複数回用量の結果として発生し得る。用量は、１つ以上の剤形を含んでもよい。任意の動物の特定の用量レベルは、治療される適応症、適応症の重症度、動物の健康、年齢、性別、体重、食事、薬理学的応答、用いられる特定の剤形、および他のそのような要因を含む様々な要因に依存することが理解されよう。

経口投与に所望の用量は最大５剤形であるが、単回用量としてわずか１および最大１０剤形を投与してもよい。用量は、動物において特定の治療応答または臨床的利益を達成するために、事前に決定および／または調整され得る投与計画に従って投与される。
強心配糖体は、約２０～約１００μｇ、約１２μｇ～約３００μｇ、または約１２μｇ～約１２０μｇのオレアンドリンの初期用量を動物に提供するのに十分な量で剤形に存在し得る。例えば、剤形は、オレアンドリン約２０～約１００μｇ、約０．０１μｇ～約１００μｇまたは約０．０１μｇ～約１００μｇのオレアンドリン、オレアンドリン抽出物またはオレアンドリンを含むＮｅｒｉｕｍ ｓｐ．の抽出物を含み得る。
抗ウイルス剤は、経口剤形に含まれ売る。剤形のいくつかの実施形態は、腸溶コーティングされておらず、０．５～１時間以下の期間内に抗ウイルス組成物のそれらの電荷を放出する。剤形のいくつかの実施形態は、腸溶コーティングされており、空腸、回腸、小腸、および／または大腸（結腸）からなどの胃の下流に抗ウイルス組成物のそれらの電荷を放出する。腸溶コーティングされた剤形は、経口投与後１～１０時間以内に抗ウイルス組成物を全身循環に放出する。
抗ウイルス組成物は、急速放出、即時放出、制御放出、持続放出、持効性放出、長期放出、バースト放出、連続放出、遅延放出、もしくはパルス放出剤形、またはそれらの種類の放出のうちの２つ以上を示す剤形に含まれ得る。剤形からの抗ウイルス組成物の放出プロファイルは、ゼロ次、疑似ゼロ、一次、疑似一次、またはＳ字状放出プロファイルであり得る。抗ウイルス組成物が投与される動物におけるトリテルペンの血漿濃度プロファイルは、１つ以上の最大値を示し得る。

予想されるオレアンドリン血漿中濃度（２４時間の期間中に測定されるＣｍａｘまたはＣａｖｇ）は、約０．００５～約５ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約４ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約３ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約２ｎｇ／ｍＬ、または約０．００５～約２ｎｇ／ｍＬの範囲にある。獣医学臨床医は、１日あたりの安全に投与されるオレアンドリンまたはジゴキシンの適当な用量を決定するために公知の用量漸増および漸減プロトコールを使用する。

本明細書の化合物は、本発明の組成物または製剤において１つ以上の機能を有し得ることに留意すべきである。例えば、化合物は、界面活性剤および水混和性溶媒の両方として、または界面活性剤および水不混和性溶媒の両方として役立ち得る。
液体組成物は、１つ以上の薬学的に許容される液体担体を含み得る。液体担体は、水性、非水性、極性、非極性、および／または有機担体であり得る。液体担体には、例として、限定されることなく、水混和性溶媒、水不混和性溶媒、水、緩衝液、およびそれらの混合物が含まれる。

本明細書で使用される場合、交換可能に使用される「水溶性溶媒」または「水混和性溶媒」という用語は、水との二相混合物を形成しないか、または水中で十分に可溶性であり、液相を分離せずに少なくとも５パーセントの溶媒を含む水性溶媒混合物を提供する有機液体を指す。溶媒は、動物への投与に好適である。例示的な水溶性溶媒には、例としておよび限定することなく、ＰＥＧ（ポリ（エチレングリコール））、ＰＥＧ４００（約４００の近似分子量を有するポリ（エチレングリコール）、エタノール、アセトン、アルカノール、アルコール、エーテル、プロピレングリコール、グリセリン、トリアセチン、ポリ（プロピレングリコール）、ＰＶＰ（ポリ（ビニルピロリドン））、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、ピリジン、プロパノール、Ｎ－メチルアセトアミド、ブタノール、ソルフォール（ｓｏｌｕｐｈｏｒ）（２－ピロリドン）、ファルマソルブ（ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ）（Ｎ－メチル－２－ピロリドン）が含まれる。

本明細書で使用される場合、その用語が交換可能に使用される「水不溶性溶媒」または「水不混和性溶媒」という用語は、水との二相混合物を形成するか、または水中の溶媒の濃度が５パーセントを超える場合に相分離を提供する有機液体を指す。溶媒は、動物への投与に好適である。例示的な水不溶性溶媒には、例としておよび限定することなく、中／長鎖トリグリセリド、油、ヒマシ油、トウモロコシ油、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、オレイン酸、脂肪酸、オリーブ油、ソフチザン６４５（ジグリセリルカプリレート／カプレート／ステアレート／ヒドロキシイステアレートアジペート）、ミグリオール、キャプテックス（ｃａｐｔｅｘ）（Ｃａｐｔｅｘ３５０：グリセリルトリカプリレート／カプレート／ラウレートトリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ３５５：グリセリルトリカプリレート／カプレートトリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ３５５ ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド）が含まれる。

好適な溶媒は、“Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ｈａｒｍｏｎｉｓａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｆｏｒ Ｈｕｍａｎ Ｕｓｅ（ＩＣＨ）ｇｕｉｄａｎｃｅ ｆｏｒ ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｑ３Ｃ Ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ：Ｒｅｓｉｄｕａｌ Ｓｏｌｖｅｎｔｓ”（１９９７）に列挙されており、それはどの量の残留溶媒が、医薬品において安全であるとみなされるかを推奨している。例示的な溶媒は、クラス２またはクラス３の溶媒として列挙されている。クラス３の溶媒には、例えば、酢酸、アセトン、アニソール、１－ブタノール、２－ブタノール、酢酸ブチル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、クメン、エタノール、エチルエーテル、酢酸エチル、ギ酸エチル、ギ酸、ヘプタン、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、メチル－１－ブタノール、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、２－メチル－１－プロパノール、ペンタン、１－ペンタノール、１－プロパノール、２－プロパノール、または酢酸プロピルが含まれる。

本発明において水不混和性溶媒として使用され得る他の材料には、Ｃａｐｔｅｘ１００：プロピレングリコールジカプレート；Ｃａｐｔｅｘ２００：プロピレングリコールジカプリレート／ジカプレート；Ｃａｐｔｅｘ２００Ｐ：プロピレングリコールジカプリレート／ジカプレート；プロピレングリコールジカプリロカプレート；Ｃａｐｔｅｘ３００：グリセリルトリカプリレート／カプレート；Ｃａｐｔｅｘ３００ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ３５０：グリセリルトリカプリレート／カプレート／ラウレート；Ｃａｐｔｅｘ３５５：グリセリルトリカプリレート／カプレート；Ｃａｐｔｅｘ３５５ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ５００：トリアセチン；Ｃａｐｔｅｘ５００Ｐ：トリアセチン（医薬品グレード）；Ｃａｐｔｅｘ８００：プロピレングリコールジ（２－エチテキサノエート）；Ｃａｐｔｅｘ８１０Ｄ：グリセリルトリカプリレート／カプレート／リノレエート；Ｃａｐｔｅｘ１０００：グリセリルトリカプレート；ＣａｐｔｅｘＣＡ：中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ ＭＣＴ－１７０：中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｍｕｌ ＧＭＯ：グリセリルモノオレエート；Ｃａｐｍｕｌ ＧＭＯ－５０ ＥＰ／ＮＦ：グリセリルモノオレエート；Ｃａｐｍｕｌ ＭＣＭ：中鎖モノおよびジグリセリド；Ｃａｐｍｕｌ ＭＣＭ Ｃ８：グリセリルモノオレエート；Ｃａｐｍｕｌ ＭＣＭ Ｃ１０：グリセリルモノカプレート；Ｃａｐｍｕｌ ＰＧ－８：プロピレングリコールモノカプリレート；Ｃａｐｍｕｌ ＰＧ－１２：プロピレングリコールモノラウレート；Ｃａｐｒｏｌ １０Ｇ１０Ｏ：デカグリセロールデカオレエート；Ｃａｐｒｏｌ ３ＧＯ：トリグリセロールモノオレエート；Ｃａｐｒｏｌ ＥＴ：混合脂肪酸のポリグリセロールエステル；Ｃａｐｒｏｌ ＭＰＧＯ：ヘキサグリセロールジオレエート；Ｃａｐｒｏｌ ＰＧＥ ８６０：デカグリセロールモノ－、ジオレートが挙げられる。

本明細書で使用される場合、「界面活性剤」とは、極性または荷電親水性部分ならびに非極性疎水性（親油性）部分を含む化合物を指し、すなわち、界面活性剤は、両親媒性である。界面活性剤という用語は、化合物のうちの１つまたは混合物を指し得る。界面活性剤は、可溶化剤、乳化剤、または分散剤であり得る。界面活性剤は、親水性であるか、または疎水性であり得る。

親水性界面活性剤は、薬学的組成物での使用に好適な任意の親水性界面活性剤であり得る。そのような界面活性剤は、アニオン性、カチオン性、双性イオン性または非イオン性であり得るが、非イオン性親水性界面活性剤が、現在好ましい。上に議論されるように、これらの非イオン性親水性界面活性剤は、一般に約１０を超えるＨＬＢ値を有する。親水性界面活性剤の混合物もまた、本発明の範囲内にある。

同様に、疎水性界面活性剤は、薬学的組成物での使用に好適な任意の疎水性界面活性剤であり得る。一般に、好適な疎水性界面活性剤は、約１０未満のＨＬＢ値を有する。疎水性界面活性剤の混合物もまた、本発明の範囲内にある。

追加の好適な可溶化剤の例には、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、ベンジルアルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブタンジオールおよびその異性体、グリセロール、ペンタエリスリトール、ソルビトール、マンニトール、トランスクトール、ジメチルイソソルビド、ポリエチレングリコール、ポリプロピレン、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび他のセルロース誘導体、シクロデキストリンおよびシクロデキストリン誘導体などのアルコールおよびポリオール；テトラヒドロフルフリルアルコールＰＥＧエーテル（ＢＡＳＦから商品名Ｔｅｔｒａｇｌｙｃｏｌで市販されている、グリコフロール）またはメトキシＰＥＧ（Ｕｎｉｏｎ Ｃａｒｂｉｄｅ）などの約２００～約６０００の平均分子量を有するポリエチレングリコールのエーテル；２－ピロリドン、２－ピペリドン、カプロラクタム、Ｎ－アルキルピロリドン、Ｎ－ヒドロキシアルキルピロリドン、Ｎ－アルキルピペリドン、Ｎ－アルキルカプロラクタム、ジメチルアセトアミド、およびポリビニピロリドンなどのアミド；プロピオン酸エチル、クエン酸トリブチル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸アセチルトリブチル、クエン酸トリエチル、オレイン酸エチル、カプリル酸エチル、酪酸エチル、トリアセチン、プロピレングリコールモノアセテート、プロピレングリコールジアセテート、カプロラクトンおよびその異性体、バレロラクトンおよびその異性体、ブチロラクトンおよび異性体などのエステル；ならびにジメチルアセトアミド、ジメチルイソソルビド（Ａｒｌａｓｏｌｖｅ ＤＭＩ（ＩＣＩ））、Ｎ－メチルピロリドン（Ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ（ＩＳＰ））、モノオクタノイン、ジエチレングリコールノノエチルエーテル（Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅから商品名Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌで入手可能）、および水などの当該技術分野で知られている他の可溶化剤が挙げられる。可溶化剤の混合物もまた、本発明の範囲内にある。

示されている場合を除いて、本明細書で言及される化合物は、標準的な商業的供給源から容易に入手可能である。
必要ではないが、組成物または製剤は、１つ以上のキレート剤、１つ以上の防腐剤、１つ以上の抗酸化剤、１つ以上の吸着剤、１つ以上の酸性化剤、１つ以上のアルカリ化剤、１つ以上の消泡剤、１つ以上の緩衝剤、１つ以上の着色剤、１つ以上の電解質、１つ以上の塩、１つ以上の安定化剤、１つ以上の張性改質剤、１つ以上の希釈剤、またはそれらの組み合わせをさらに含み得る。
本発明の組成物はまた、固定油、落花生油、ゴマ油、綿実油、トウモロコシ油、およびオリーブ油などの油；オレイン酸、ステアリン酸、およびイソステアリン酸などの脂肪酸；ならびにオレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、脂肪酸グリセリド、およびアセチル化脂肪酸グリセリドなどの脂肪酸エステルを含み得る。組成物は、エタノール、イソプロパノール、ヘキサデシルアルコール、グリセロール、およびプロピレングリコールなどのアルコール；２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－メタノールなどのグリセロールケタール；ポリ（エチレングリコール）４５０などのエーテル；鉱油およびワセリンなどの石油系炭化水素；水；薬学的に好適な界面活性剤、懸濁化剤、もしくは乳化剤；またはそれらの混合物を含み得る。

薬学的製剤の技術分野で使用される化合物は、一般に、様々な機能または目的に役立つことを理解されたい。したがって、本明細書で名付けられた化合物が一度だけ言及されるか、または本明細書で２つ以上の用語を定義するために使用される場合、その目的または機能は、その名付けられた目的または機能のみに限定されると解釈されるべきではない。
製剤の１つ以上の構成成分は、その遊離塩基、遊離酸、または薬学的もしくは分析的に許容される塩形態で存在し得る。本明細書で使用される場合、「薬学的または分析的に許容される塩」は、イオン結合対を形成するために必要に応じて酸と化合物を反応させることにより修飾された化合物を指す。許容される塩の例には、例えば、非毒性の無機酸または有機酸から形成される従来の非毒性の塩が含まれる。好適な非毒性の塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルホン酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸、および当業者に知られている他のものなどの無機酸に由来するものが含まれる。アミノ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２－アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、および当業者に知られている他のものなどの有機酸から調製された塩。一方で、薬理学的に活性な成分が酸官能基を有する場合、薬学的に許容される塩基が添加され、薬学的に許容される塩を形成する。他の好適な塩の一覧は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ´ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７^th．ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９８５，ｐ．１４１８に見出され、その関連する開示は、参照により本明細書に組み込まれる。

「薬学的に許容される」という語句は、健全な医学的判断の範囲内で、動物の組織との接触での使用に好適であり、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または任意の他の問題もしくは合併症なく、合理的な利益／リスク比に相応する、化合物、材料、組成物、および／または剤形を指す。
剤形は、製薬業界で知られている任意の従来の手段によって作製することができる。液体剤形は、少なくとも１つの液体担体および抗ウイルス組成物を容器に提供することによって調製することができる。１つ以上の他の賦形剤を、液体剤形に含めることができる。固体剤形は、少なくとも１つの固体担体および抗ウイルス組成物を提供することによって調製することができる。１つ以上の他の賦形剤を、固体剤形に含めることができる。

剤形は、従来のパッケージング機器および材料を使用してパッケージすることができる。それは、パック、ボトル、ビア、バッグ、シリンジ、封筒、パケット、ブリスターパック、箱、アンプル、またはその他のそのような容器に入れることができる。
本発明の組成物は、任意の剤形に含まれ売る。特定の剤形には、固体または液体の剤形が含まれる。例示的な好適な剤形には、錠剤、カプセル、丸剤、カプレット、トローチ、サシェ、および薬科学の当業者に知られている他のそのような剤形が含まれる。

抗ウイルス組成物は、少なくとも１つの強心配糖体－代謝阻害剤、少なくとも１つの強心配糖体－消化阻害剤、少なくとも１つの酵素阻害剤、またはそれらの組み合わせをさらに含み得る。強心配糖体－代謝阻害剤は、強心配糖体の代謝を阻害する化合物である。強心配糖体－消化阻害剤は、強心配糖体の消化を阻害する化合物である。酵素阻害剤は、酵素を阻害する化合物である。代謝または消化は、動物または動物内の１つ以上の微生物によって引き起こされ得る。これらのカテゴリーの阻害剤は、本明細書でまとめてより広く阻害剤と呼ばれる。前記阻害剤の目的は、強心配糖体の代謝または消化の速度を低減し、それによって動物内の強心配糖体の血漿中濃度半減期を増加させることである。
上記の説明および以下の実施例を考慮して、当業者は、過度の実験をすることなく、請求された本発明を実施することができるであろう。上記は、本発明の実施形態の調製のためのある特定の手順を詳述する以下の実施例を参照してより理解されるであろう。これらの例になされる全ての参照は、説明を目的のためである。以下の実施例は、網羅的なものとみなされるべきではないが、本発明によって企図される多くの実施形態のうちのほんのいくつかのみの単なる例示とみなされるべきである。

（実施例１）
粉末化したキョウチクトウの葉の超臨界流体抽出
方法Ａ．二酸化炭素を使用。
キョウチクトウの葉の材料を、収穫、洗浄、および乾燥し、その後、キョウチクトウの葉の材料を、米国特許第５，２３６，１３２号、第５，５９８，９７９号、第６，５１７，０１５号、および第６，７１５，７０５号に記載されているものなどの粉砕および脱水装置に通すことにより、粉末化したキョウチクトウの葉を調製した。使用した出発材料の重量は、３．９４ｋｇであった。
出発材料を、抽出装置で３００ｂａｒ（３０ＭＰａ、４３５１ｐｓｉ）の圧力および５０℃（１２２°Ｆ）の温度で純ＣＯ₂と混合した。合計１９７ｋｇのＣＯ₂を使用して、５０：１の溶媒対原料の比率を得た。次いで、ＣＯ₂および原料の混合物を分離装置に通し、分離装置で混合物の圧力および温度を変化させ、抽出物を二酸化炭素から分離した。
抽出物（６５ｇ）を、良い香りを有する茶色がかった、粘着性の、粘性物質として得た。色は、クロロフィルおよび他の残留発色性化合物によって引き起こされた可能性が高い。正確な収率決定のために、チューブおよび分離器をアセトンですすぎ、アセトンを蒸発させて追加の抽出物９ｇを得た。総抽出量は、７４ｇであった。出発物質の重量に基づいて、抽出物の収率は、１．８８％であった。抽出物中のオレアンドリンの含有量を、高圧液体クロマトグラフィーおよび質量分析法を使用して、５６０．１ｍｇ、または０．７６％の収率であると計算した。

方法Ｂ．二酸化炭素およびエタノールの混合物を使用
キョウチクトウの葉の材料を、収穫、洗浄、および乾燥し、その後、キョウチクトウの葉の材料を、米国特許第５，２３６，１３２号、第５，５９８，９７９号、第６，５１７，０１５号、および第６，７１５，７０５号に記載されているものなどの粉砕および脱水装置に通すことにより、粉末化したキョウチクトウの葉を調製した。使用した出発材料の重量は、３．８５ｋｇであった。
出発物質を、抽出装置で２８０ｂａｒ（２８ＭＰａ、４０６１ｐｓｉ）の圧力および５０℃（１２２°Ｆ）の温度で、改質剤として純ＣＯ₂および５％エタノールと混合した。合計１６０ｋｇのＣＯ₂および８ｋｇのエタノールを使用して、４３．６対１の溶媒対原料の比率を得た。次いで、ＣＯ₂、エタノール、および原料の混合物を分離装置に通し、分離装置で混合物の圧力および温度を変化させ、抽出物を二酸化炭素から分離した。
エタノールの除去後、抽出物（２０７ｇ）を、明らかにいくらかのクロロフィルを含む暗緑色の、粘着性の、粘性のある塊として得た。出発物質の重量に基づいて、抽出物の収率は、５．３８％であった。抽出物中のオレアンドリンの含有量を、高圧液体クロマトグラフィーおよび質量分析法を使用して、１．８９ｇ、または０．９１％の収率であると計算した。

（実施例２）
粉末化したキョウチクトウの葉の熱水抽出
温水抽出は、典型的には、キョウチクトウの葉からオレアンドリンおよび他の活性成分を抽出するために使用される。熱水抽出プロセスの例は、米国特許第５，１３５，７４５号および第５，８６９，０６０号に見出され得る。
５ｇの粉末化したキョウチクトウの葉を使用して、熱水抽出を実施した。１０容量の沸騰水（キョウチクトウ出発原料の重量）を、粉末化したキョウチクトウの葉に添加し、混合物を６時間一定に撹拌した。次いで、混合物を濾過し、葉の残留物を収集し、同じ条件下で再度抽出した。濾液を混合して凍結乾燥した。抽出物の外観は、茶色であった。乾燥した抽出物の重量は、約１．４４ｇであった。３４．２１ｍｇの抽出物材料を、水に溶解し、高圧液体クロマトグラフィーおよび質量分析を使用してオレアンドリン含有量分析を行った。オレアンドリンの量を、３．６８ｍｇであると判定した。抽出物の量に基づいて、オレアンドリンの収率を、０．２６％であると計算した。

（実施例３）
獣医学的組成物の調製。
方法Ａ．クレモフォールベースの薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。

賦形剤を瓶に分注し、Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃ２４ＫＣ冷蔵インキュベーターシェーカーで、６０℃で２４時間振盪して、均一性を確実にした。次に、試料を引き抜き、可溶化について視覚的に検査した。２４時間後、全ての製剤について、賦形剤および抗ウイルス組成物の両方が完全に溶解した。

方法Ｂ．ＧＭＯ／クレモフォールベースの薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。

方法Ａの手順に従った。

方法Ｃ．ラブラゾルベースの薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。

方法Ａの手順に従った。

方法Ｄ．ビタミンＥ－ＴＰＧＳベースのミセル形成システム
以下の成分を、示される量で提供した。

方法Ａの手順に従った。

方法Ｅ．多構成成分薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。

方法Ａの手順に従った。

方法Ｆ．多構成成分薬物送達システム
以下の成分を、カプセルに含まれることが示されている量で提供した。

方法Ａの手順に従った。

（実施例４）
腸溶コーティングされたカプセルの調製
ステップＩ：液体充填カプセルの調製
硬ゼラチンカプセル（５０カウント、００サイズ）に、実施例３の液体組成物を充填した。これらのカプセルに、８００ｍｇの製剤を手で充填し、次いで、５０％エタノール／５０％水溶液で、手で密封した。次いで、カプセルを、以下の成分を示される量で含む２２％ゼラチン溶液で、手でバンディングした。

ゼラチン溶液を完全に混合し、１～２時間膨潤させた。膨潤後、溶液をしっかりと覆い、５５℃のオーブンに入れて液化させた。ゼラチン溶液全体が液体になると、バンディングを行った。
先の尖った丸い３／０アーティストブラシを使用して、ゼラチン溶液をカプセルに塗布した。シオノギ社から提供されているバンディングキットを使用した。バンディング後、カプセルを、周囲条件に１２時間保持し、バンドを硬化させた。

ステップＩＩ：液体充填カプセルのコーティング
以下の表に列挙される成分からコーティング分散液を調製した。

ステップＩのバンディングしたカプセルを使用した場合、分散液を、２０．０ｍｇ／ｃｍ²のコーティングレベルまでカプセルに塗布した。以下の条件を使用して、カプセルをコーティングした。

（実施例５）
動物におけるウシコロナウイルス感染の治療
ウシコロナウイルス感染を呈している動物に抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間動物に投与する。動物の治療応答のレベルを定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の動物のコロナウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、動物における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による動物の治療は、必要に応じて継続され、動物が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。

（実施例６）
ウシコロナウイルス感染に対する治療的抗ウイルス活性のインビトロ評価
方法Ａ．唯一の活性としてのオレアンドリン
感染（ＭＯＩ＝０．０１）の１２時間または２４時間後に、様々な濃度のオレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＨＲＴ細胞に添加した。感染後１２時間で先に処理した試料から上清を感染の２４時間後に収集した（１２－２４時間）。また、感染後１２時間で先に処理した試料（１２－４８時間）および感染後２４時間で先に処理した試料（２４－４８時間）の両方から上清を感染の４８時間後に収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＢＣＶ力価を定量した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を、図に示されるように異なる時点（１２－２４時間）、（１２－４８時間）、および（２４－４８時間）で計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

方法Ｂ．抽出物形態のオレアンドリン
感染（ＭＯＩ＝０．０１）の１２時間または２４時間後に、様々な濃度のＰＢＩ－オレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＨＲＴ細胞に添加した。感染後１２時間で先に処理した試料から上清を感染の２４時間後に収集した（１２－２４時間）。また、感染後１２時間で先に処理した試料（１２－４８時間）および感染後２４時間で先に処理した試料（２４－４８時間）の両方から上清を感染の４８時間後に収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＢＣＶ力価を定量した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、ＰＢＩ－オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を、図に示されるように異なる時点（１２－２４時間）、（１２－４８時間）、および（２４－４８時間）で計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

（実施例７）
抗ウイルス組成物を含む錠剤の調製
３％サイロイド２４４ＦＰおよび９７％微結晶セルロース（ＭＣＣ）の初期錠剤化混合物を混合した。次いで、実施例３に従って調製された組成物の既存のバッチを、湿式造粒を介してサイロイド／ＭＣＣ混合物に組み込んだ。この混合物は、以下の表で「初期錠剤化混合物」と標識される。圧縮性を高めるために、追加のＭＣＣをさらに顆粒状で添加した。初期錠剤化混合物へのこの添加を、「さらなる顆粒状添加」と標識した。さらなる顆粒状添加から得られた混合物は、「最終錠剤化混合物」と同じ組成物であった。

サイロイド２４４ＦＰは、Ｇｒａｃｅ Ｄａｖｉｓｏｎによって製造されたコロイド状二酸化ケイ素である。コロイド状二酸化ケイ素は、吸着剤、流動促進剤、および錠剤崩壊剤などのいくつかの機能を提供するために一般的に使用される。サイロイド２４４ＦＰを、その重量の３倍の油を吸着するその能力およびその５．５ミクロンの粒子サイズのために選択した。

（実施例８）
オレアンドリンを含む溶液のＨＰＬＣ分析
試料（オレアンドリン標準、ＳＣＦ抽出物、および熱水抽出物）を、以下の条件を用いてＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）で分析した：シンメトリーＣ１８カラム（５．０μｍ、１５０´４．６ｍｍ内径；Ｗａｔｅｒｓ）；ＭｅＯＨ：水の移動相＝５４：４６（ｖ／ｖ）および流量１．０ｍｌ／分。検出波長を、２１７ｎｍに設定した。試料を、オレアンドリンのおおよその目標濃度を達成するために、化合物または抽出物を一定量のＨＰＬＣ溶媒に溶解することによって調製した。オレアンドリンの保持時間は、内部標準を使用することによって判定することができる。オレアンドリンの濃度は、内部標準を使用してシグナル応答曲線を作成することによって判定／較正することができる。

（実施例９）
獣医学的薬学的組成物の調製
本発明の薬学的組成物は、以下の方法のうちのいずれかで調製することができる。混合を、湿潤または乾燥条件下で行うことができる。薬学的組成物は、調製中に圧縮、乾燥、またはその両方を行うことができる。薬学的組成物は、剤形に分割することができる。

方法Ａ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの抗ウイルス化合物と混合する。
方法Ｂ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも２つの抗ウイルス化合物と混合する。
方法Ｃ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの強心配糖体と混合する。

方法Ｄ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも２つのトリテルペンと混合する。
方法Ｅ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの強心配糖体および本明細書に開示される少なくとも２つのトリテルペンと混合する。
方法Ｄ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも３つのトリテルペンと混合する。

（実施例１０）
トリテルペン混合物の調製
以下の組成物を、示されたおおよそのモル比で指定されたトリテルペンを混合することによって作製した。

各組成物について、３つの異なるそれぞれの溶液を作製し、よって各溶液中のトリテルペンの総濃度は、約９μＭ、１８μＭ、または３６μＭであった。

（実施例１１）
抗ウイルス組成物の調製
抗ウイルス組成物は、その個々のトリテルペン成分を混合して混合物を形成することによって調製することができる。許容される抗ウイルス活性を提供した上記で調製したトリテルペン混合物を、抗ウイルス組成物に製剤化した。

オレアノール酸およびウルソール酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアノール酸およびウルソール酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。

薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。

オレアノール酸およびベツリン酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアノール酸およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。

オレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。

オレアドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアンドリンオレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。

（実施例１２）
動物におけるフラビウイルス感染の治療
例示的なフラビウイルス感染には、黄熱、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病、チクングニアウイルス、オムスク出血熱、ポワッサンウイルス感染が含まれる。

方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
フラビウイルス感染を呈している動物に抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間動物に投与する。動物の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の動物のフラビウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、動物における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による動物の治療は、必要に応じて継続され、動物が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
方法Ｂ．併用療法：別の薬剤との抗ウイルス組成物
フラビウイルス感染またはその症状の治療のために動物が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。

（実施例１３）
ウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）に対する治療的抗ウイルス活性のインビトロ評価
方法Ａ．唯一の活性としてのオレアンドリン
感染（ＭＯＩ＝０．０１）の１２時間または２４時間後に、様々な濃度のオレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＭＤＢＫ細胞に添加した。感染後１２時間で先に処理した試料から上清を感染の２４時間後に収集した（１２－２４時間）。また、感染後１２時間で先に処理した試料（１２－４８時間）および感染後２４時間で先に処理した試料（２４－４８時間）の両方から上清を感染の４８時間後に収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＢＶＤＶ力価を定量した。検出可能なウイルスを有しなかった試料は、グラフにおいてゼロとスコア化した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を、図に示されるように異なる時点（１２－２４時間）、（１２－４８時間）、および（２４－４８時間）で計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

方法Ｂ．抽出物中のオレアンドリン
感染（ＭＯＩ＝０．０１）の１２時間または２４時間後に、様々な濃度のＰＢＩ－オレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＭＤＢＫ細胞に添加した。感染後１２時間で先に処理した試料から上清を感染の２４時間後に収集した（１２－２４時間）。また、感染後１２時間で先に処理した試料（１２－４８時間）および感染後２４時間で先に処理した試料（２４－４８時間）の両方から上清を感染の４８時間後に収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＢＶＤＶ力価を定量した。検出可能なウイルスを有しなかった試料は、グラフにおいてゼロとスコア化した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、ＰＢＩ－オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を、図に示されるように異なる時点（１２－２４時間）、（１２－４８時間）、および（２４－４８時間）で計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

（実施例１４）
ブタ繁殖・呼吸障害症候群（ＰＲＲＳＶ）に対する治療的抗ウイルス活性のインビトロ評価
方法Ａ．唯一の活性としてのオレアンドリン
感染（ＭＯＩ＝０．０１）の１２時間または２４時間後に、様々な濃度のオレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＭＡＲＣ１４５細胞に添加した。感染後１２時間で先に処理した試料から上清を感染の２４時間後に収集した（１２－２４時間）。また、感染後１２時間で先に処理した試料（１２－４８時間）および感染後２４時間で先に処理した試料（２４－４８時間）の両方から上清を感染の４８時間後に収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＰＲＲＳＶ力価を定量した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を、図に示されるように異なる時点（１２－２４時間）、（１２－４８時間）、および（２４－４８時間）で計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

方法Ｂ．抽出物中のオレアンドリン
感染（ＭＯＩ＝０．０１）の１２時間または２４時間後に、様々な濃度のＰＢＩ－オレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＭＡＲＣ１４５細胞に添加した。感染後１２時間で先に処理した試料から上清を感染の２４時間後に収集した（１２－２４時間）。また、感染後１２時間で先に処理した試料（１２－４８時間）および感染後２４時間で先に処理した試料（２４－４８時間）の両方から上清を感染の４８時間後に収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＰＲＲＳＶ力価を定量した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、ＰＢＩ－オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を、図に示されるように異なる時点（１２－２４時間）、（１２－４８時間）、および（２４－４８時間）で計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

（実施例１５）
ウシ呼吸器多核体ウイルス（ＢＲＳＶ）に対する治療的抗ウイルス活性のインビトロ評価
方法Ａ．唯一の活性としてのオレアンドリン
インキュベーション期間の細胞の十分な被覆を確実にするために、ウェルあたり１×１０４ＴＣＩＤ５０を含有する５００μＬの維持培地を１００μＬの代わりにウェルに添加した以外は、確立されたプロトコールに従って治療アッセイを完了した。ＢＴ細胞をアッセイの４８時間前に蒔いた。アッセイ時に各ウェルにおいて、培地を除去し、０．０１のＭＯＩでウイルスを含有するウイルス維持培地で置き換えた。別々のセットのプレートを１２または２４時間インキュベートした。各時点（１２または２４時間）で、プレートをＤＰＢＳで静かに洗浄し、次いで、ＤＭＳＯに溶解した所望の濃度のオレアンドリンもしくはＰＢＩ－０５２０４、または適合した濃度のＤＭＳＯのみを含有する２ｍｌのウイルス維持培地を各ウェルに添加した。オレアンドリン、ＰＢＩ、およびＤＭＳＯ希釈液を１２時間の処理の５時間前に作製し、光から保護して４℃で保存した（午後４時に調製し、午後９時に使用した）。新鮮なオレアンドリン、ＰＢＩ、およびＤＭＳＯ希釈液を２４時間の処理の前に作製した。試料を１２時間のウイルス接種後２４および４８時間で、ならびに２４時間のウイルス接種後４８時間で取り出し、２つのクライオバイアルに等分した。各時点で収集した試料でウイルス単離を直ちに行い、次いで、アリコートを－８０℃で冷凍した。試料をｑＲＴ－ｑＰＣＲのためにＳｏｕｔｈ Ｄａｋｏｔａ Ｓｔａｔｅ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙのＡＤＲＤＬの分子診断部門に提出した。

方法Ｂ．抽出物中のオレアンドリン
純粋なオレアンドリンの代わりに、オレアンドリンを含有する抽出物を使用した以外は、方法Ａを繰り返した。使用した抽出物の量は、そのオレアンドリン含有量によって正規化され、それを純粋なオレアンドリンに等しい量でアッセイにおいて使用した。感染（ＭＯＩ＝０．０１）の１２時間または２４時間後に、様々な濃度のＰＢＩ－オレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＢＴ細胞に添加した。感染後１２時間で先に処理した試料から上清を感染の２４時間後に収集した（１２－２４時間）。また、感染後１２時間で先に処理した試料（１２－４８時間）および感染後２４時間で先に処理した試料（２４－４８時間）の両方から上清を感染の４８時間後に収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＢＲＳＶ力価を定量した。検出可能なウイルスを有しなかった試料は、グラフにおいてゼロとスコア化した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、ＰＢＩ－オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を、図に示されるように異なる時点（１２－２４時間）、（１２－４８時間）、および（２４－４８時間）で計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

（実施例１６）
統計解析
実験データセットの統計学的有意性は、不対両側Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定（アルファ＝０．０５）を使用して判定しＳｈａｐｉｒｏ－Ｗｉｌｋ正常性試験およびＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ７．０３ソフトウェアを使用してＰ－値を計算した。Ｐ－値を：０．１２３４（ｎｓ）、０．０３３２（^*）、０．００２１（^**）、０．０００２（^***）、＜０．０００１（^****）と定義した。特に注記がなければ、エラーバーは、少なくとも３つの独立した実験からのＳＥＭを表す。

（実施例１７）
ウシにおけるウイルス感染の治療
複数回用量のオレアンドリン含有組成物を投与することによって、ウシにおけるＲＳＶ、ＢＶＤＶまたはＢＣＶ感染を治療する。組成物は、獣医学的薬学的組成物、飼料、または液体であり得る。それは、経口で、注射により、植え込みにより、またはウシへの化合物の投与に好適であることが公知の他の手段により投与され得る。ウシに投与されるオレアンドリンの量は、ウシにおけるオレアンドリンの対応する血漿中濃度が１ｎｇ／ｍＬ以下となるようにすべきである。

（実施例１８）
細胞に対するオレアンドリン毒性のインビトロ評価
このアッセイの目的は、様々な細胞に対するオレアンドリンの相対的な潜在的毒性をインビトロで判定することであった。
オレアンドリン（ＰｈｙｔｏＬａｂ、Ｖｅｓｔｅｎｂｅｒｇｓｇｒｅｕｔｈ、ドイツ）を１ｍｇ／ｍｌの濃度でＤＭＳＯに溶解した。細胞毒性試験において使用される所望の濃度範囲は、それぞれ０．０００５～０．１重量％のＤＭＳＯ中０．００５～１ｕｇ／ｍｌである。乳酸脱水素酵素放出アッセイ（ＬＤＨアッセイ）を使用して、異なる細胞培養物に対する異なる濃度のオレアンドリンの細胞毒性効果を判定した。ＬＤＨは、損傷した細胞からのみ（増加した膜透過性に起因して）外の培地に放出され、ＮＡＤ＋のＮＡＤＨへの還元を含む連動した反応において培地中の乳酸をピルビン酸に変換するサイトゾル酵素であり、ＮＡＤＨは、ＬＤＨキットミックス中のジアホラーゼの存在下で酸化されてＮＡＤ＋に戻り、これは、同様にキットミックス中にある水溶性テトラゾリウム（ＩＮＴ）の赤いホルマザン生成物への還元につながり、赤いホルマザン生成物は、４９０ｎｍの波長でＥＬＩＳＡリーダーにより読み取ることができる。３つの異なる細胞株に対する８つの異なる濃度のオレアンドリン（０．００５～１ｕｇ／ｍｌ）の細胞毒性効果を、ＢＴ（Ｂｏｓ ｔａｕｒｕｓ鼻甲介）、ＭＤＢＫ（Ｂｏｓ ｔａｕｒｕｓ腎臓）およびＭＡＲＣ１４５（サル腎臓）細胞で、３連で、処理後の２つの異なる時点２４および４８時間で試験した。

これは、１０００細胞／１００μｌから開始して２０，０００細胞／１００μｌまでの１００μｌの体積中の異なる濃度の細胞を２倍段階希釈様式で調製することにより達成した。この段階希釈は、２セットの細胞について３連で行い、一方のセットは、自然なＬＤＨ放出を報告する細胞対照として使用し、他方のセットは、最大ＬＤＨ放出を報告するために細胞溶解緩衝液で処理した。製造者の指示に従って試験を行った後、各セットの各希釈の３連の平均ＯＤ値の読み取りをとり、細胞の数に対してプロットした。最善の細胞播種容量／１００μｌの体積は、両方の時点で、キットミックスとの３０分のインキュベーション後（製造者の指示）、１．６～２の最大ＬＤＨ放出および０．５未満の自然なＬＤＨ放出を達成したものであった。１００μＬの増殖培地中の最適な細胞数／ウェル（予備実験で決定した）を９６ウェル組織培養プレートのウェルに３連で蒔いた。細胞を適当なレベルのＣＯ₂と共に３７℃で終夜インキュベートした。翌日、細胞をＰＢＳで２回洗浄することにより、増殖培地を除去した。増殖培地を、ＬＤＨの最大および自然放出２５０の対照として役立つ、１～０．００５ｕｇ／ｍｌのオレアンドリン、薬物なしの０．１～０．０００５％のＤＭＳＯ、または未処理培地を含有する１００μｌの維持培地で置き換えた。全ての処理を３連のウェルに添加し、プレートを３７℃／５％ＣＯ₂のインキュベーターに２４～４８時間戻した。処理後２４または４８時間でプレートをインキュベーターから取り出し、製造者の指図に従って、ＣｙＱＵＡＮＴ ＬＤＨ毒性アッセイ（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ、Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲ）により、上清に放出されたＬＤＨを評価した。Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ ｉ３ｘを使用して、吸光度を４９０ｎｍおよび６８０ｎｍで測定する。最大ＬＤＨ放出対照の補正ＯＤ値はおよそ１．６～２であるはずであり、自然なＬＤＨ放出対照の補正ＯＤ値は０．５未満であるはずである。

オレアンドリンおよびＤＭＳＯの細胞毒性を判定するために、以下の式を各濃度の補正ＯＤ値に適用した：
個々の濃度の細胞毒性％＝補正ＯＤ値の（（処理＊－自然なＬＤＨ放出）／（最大ＬＤＨ放出－自然なＬＤＨ放出））×１００
オレアンドリンの安全な投与量を判定するために、オレアンドリン濃度および対応するＤＭＳＯ濃度について、各時点で細胞毒性％を２％未満に維持した。

（実施例１９）
Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの亜臨界流体抽出物の調製
Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒバイオマスの超臨界流体抽出ではなく、亜臨界液体抽出を用いることにより、オレアンドリン含有抽出物を調製するための改善された方法を開発した。
乾燥させ、粉末化したバイオマスを抽出チャンバに入れ、これを次いで密封した。二酸化炭素（約９５重量％）およびアルコール（約５重量％；メタノールまたはエタノール）をチャンバ中に注入した。チャンバの内部温度および圧力は、抽出培地が、抽出時間の大部分または実質的に全てにわたって、超臨界流体相ではなく亜臨界液相中で：約２℃～約１６℃（約７℃～約８℃）の範囲の温度、約１１５～約１３５ｂａｒ（約１２４ｂａｒ）の範囲の圧力で維持されるようにした。抽出期間は、約４時間～約１２時間（約６～約１０時間）であった。抽出環境を次いで濾過し、上清を収集した。二酸化炭素を上清から放出し、生じた粗抽出物をエタノール（約９部エタノール：約１部抽出物）中で希釈し、約－５０℃にて少なくとも１２時間冷凍した。溶液を解凍し、濾過した（１００ミクロンの細孔サイズフィルター）。濾液を元の体積の約１０％に濃縮し、次いで減菌濾過した（細孔サイズ０．２ミクロンのフィルター）。濃度抽出物を、次いで５０％エタノール水溶液で、１ｍＬの溶液あたり抽出物約１．５ｍｇの濃度に希釈した。
生じた亜臨界液体（ＳｂＣＬ）抽出物には、オレアンドリン、およびＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒから抽出可能な１つ以上の他の化合物が含まれており、前記１つ以上の他の化合物は、本明細書に定義される。

（実施例２０）
Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒのエタノール抽出物の調製
この目的は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒバイオマスをエタノール水溶液で抽出することによりエタノール抽出物を調製することであった。
粉砕した乾燥葉を、エタノール水溶液（９０～９５％ ｖ／ｖエタノール；１０～５％ ｖ／ｖ水）で繰り返し処理した。いくつかの場合では、温度は周囲より上であった。組み合わせたエタノール上清を組み合わせ、濾過し、次いで真空で蒸発させることにより濃縮して、その中のエタノールおよび水の量を減少させ、約２５ｍｇオレアンドリン／ｍＬの抽出物を含む粗エタノール抽出物（約５０％ ｖ／ｖエタノール含有量を有する）を得た。

（実施例２１）
Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物の組み合わせを含む剤形の調製
この目的は、実施例３６のエタノール抽出物の一部（１重量％）を、実施例３３のＳｂＣＬ抽出物の一部（１重量％）、中鎖トリグリセリド（９５重量％）、および香味剤（３重量％）と組み合わせることを除いて、実施例３２に従って剤形を調製することであった。

（実施例２２）
ウシコロナウイルス感染に対する予防的抗ウイルス活性のインビトロ評価
方法Ａ．唯一の活性としてのオレアンドリン
感染（ＴＣＩＤ５０に基づいてＭＯＩ＝０．０１）の３０分前に、様々な濃度のオレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＨＲＴ細胞に添加し、感染後同様に維持した。感染の（Ａ）２４時間後および（Ｂ）４８時間後に上清を収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＢＣＶ力価を定量した（ＡおよびＢ）。検出可能なウイルスを有しなかった試料は、グラフにおいてゼロとスコア化した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を、２４および４８時間で計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

方法Ｂ．抽出物形態のオレアンドリン
感染（ＴＣＩＤ５０に基づいてＭＯＩ＝０．０１）の３０分前に、様々な濃度のＰＢＩ－オレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＨＲＴ細胞に添加し、感染後同様に維持した。感染の２４時間および４８時間後に上清を収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＢＣＶ力価を定量した。検出可能なウイルスを有しなかった試料は、グラフにおいてゼロとスコア化した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、ＰＢＩ－オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を２４および４８時間で計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

（実施例２３）
ＢＶＤＶに対する予防的抗ウイルス活性のインビトロ評価
方法Ａ．唯一の活性としてのオレアンドリン
感染（ＴＣＩＤ５０に基づいてＭＯＩ＝０．０１）の３０分前に、様々な濃度のオレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＭＤＢＫ細胞に添加し、感染後同様に維持した。感染の２４時間および４８時間後に上清を収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＢＶＤＶ力価を定量した。検出可能なウイルスを有しなかった試料は、グラフにおいてゼロとスコア化した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を２４および４８時間で計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

方法Ｂ．抽出物形態のオレアンドリン
感染（ＴＣＩＤ５０に基づいてＭＯＩ＝０．０１）の３０分前に、様々な濃度のＰＢＩ－オレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＭＤＢＫ細胞に添加し、感染後同様に維持した。感染の２４時間および４８時間後に上清を収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＢＶＤＶ力価を定量した。検出可能なウイルスを有しなかった試料は、グラフにおいてゼロとスコア化した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、ＰＢＩ－オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を２４および４８時間で計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

（実施例２４）
ＰＲＲＳＶ感染に対する予防的抗ウイルス活性のインビトロ評価
方法Ａ．唯一の活性としてのオレアンドリン
感染（ＴＣＩＤ５０に基づいてＭＯＩ＝０．０１）の３０分前に、様々な濃度のオレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＭＡＲＣ１４５細胞に添加し、感染後同様に維持した。感染の２４時間および４８時間後に上清を収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＰＲＲＳＶ力価を定量した。検出可能なウイルスを有しなかった試料は、グラフにおいてゼロとスコア化した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を２４および４８時間でそれぞれ計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

方法Ｂ．抽出物形態のオレアンドリン
感染（ＴＣＩＤ５０に基づいてＭＯＩ＝０．０１）の３０分前に、様々な濃度のＰＢＩ－オレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＭＡＲＣ１４５細胞に添加し、感染後同様に維持した。感染の２４時間および４８時間後に上清を収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＰＲＲＳＶ力価を定量した。検出可能なウイルスを有しなかった試料は、グラフにおいてゼロとスコア化した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、ＰＢＩ－オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を２４および４８時間でそれぞれ計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

（実施例２５）
ＢＲＳＶ感染に対する予防的抗ウイルス活性のインビトロ評価
方法Ａ．唯一の活性としてのオレアンドリン
ＢＴ細胞をアッセイの４８時間前に蒔いた。アッセイ時に培地を各ウェルから除去し、ＤＭＳＯに溶解した所望の濃度のオレアンドリン、または適合した濃度のＤＭＳＯのみを含有する培地で置き換えた。オレアンドリンおよびＤＭＳＯ希釈液をアッセイ前に新しく作製した。プレートを生成物と共に３０分間インキュベートし、次いで、０．０１のＭＯＩのＢＲＳＶウイルスを各ウェルに添加した。ウイルスをプレート上で１時間インキュベートし、次いで取り出した。プレートをＤＰＢＳで静かに洗浄し、オレアンドリン、ＰＢＩ、またはＤＭＳＯのみを含有する２ｍｌのウイルス維持培地を各ウェルに添加した。試料を各時点（２４および４８時間）で取り出し、２つのクライオバイアルに等分した。各時点で収集した試料でウイルス単離を直ちに行い、次いで、アリコートを－８０℃で冷凍した。試料をＲＴ－ｑＰＣＲのためにＳｏｕｔｈ Ｄａｋｏｔａ Ｓｔａｔｅ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙのＡＤＲＤＬの分子診断部門に提出した。

方法Ｂ．抽出物形態のオレアンドリン
純粋なオレアンドリンの代わりに、オレアンドリンを含有する抽出物を使用した以外は、方法Ａを繰り返した。使用した抽出物の量は、そのオレアンドリン含有量によって正規化され、それを純粋なオレアンドリンに等しい量でアッセイにおいて使用した。感染（ＴＣＩＤ５０に基づいてＭＯＩ＝０．０１）の３０分前に、様々な濃度のＰＢＩ－オレアンドリンまたはＤＭＳＯ適合対照をＢＴ細胞に添加し、感染後同様に維持した。感染の２４時間および４８時間後に上清を収集した。組織培養感染用量（ＴＣＩＤ５０）アッセイにより、感染性ＢＲＳＶ力価を定量した。検出可能なウイルスを有しなかった試料は、グラフにおいてゼロとスコア化した。示したデータは、３連で行った単一の代表的な実験からの平均である。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。ＤＭＳＯ適合対照の感染細胞と比較した、ＰＢＩ－オレアンドリンによって誘導されたウイルス感染性の阻害率を計算した。棒の高さは平均を表し、エラーバーは標準偏差を表す。

（実施例２６）
ウシヘルペスウイルス１型に対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
インターフェロンの代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｂａｂｉｕｋら（Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ（１９８５），６６，２３８３－２３９４の“Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｂｏｖｉｎｅ ａｌｐｈａ１ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｏｎ ｂｏｖｉｎｅ ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ－１－ｉｎｄｕｃｅｄ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ”）の方法に従う。
（実施例２７）
ブタサーコウイルス１型に対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
シクロスポリンＡの代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｍｅｅｒｔｓら（Ｖｉｒａｌ Ｉｍｍｕｎ．（２００５），１８，３３３－３４１の“Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｙｐｅ ｏｆ ａｄａｐｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｇａｉｎｓｔ ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ ２ ａｎｄ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｖｉｒｕｓ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ”）の方法に従う。

（実施例２８）
口蹄疫ウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
リバビリンの代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ａｉｒａｋｓｉｎｅｎら（Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（２００３），３１１，３３９－３４９の“Ｃｕｒｉｎｇ ｏｆ ｆｏｏｔ ａｎｄ ｍｏｕｔｈ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ ｆｒｏｍ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔｌｙ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｒｉｂａｖｉｒｉｎ ｉｎｖｏｌｖｅｓ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ”）の方法に従う。
（実施例２９）
アフリカブタ熱ウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
他の抗ウイルス剤の代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ａｒａｂｙａｎら（Ｖｉｒｕｓ Ｒｅｓ．（２０１９），２７０，１９７６６９の“Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｇｅｎｔｓ ａｇａｉｎｓｔ Ａｆｒｉｃａｎ ｓｗｉｎｅ ｆｅｖｅｒ ｖｉｒｕｓ”）の方法に従う。

（実施例３０）
アフリカウマ病ウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
他の抗ウイルス剤の代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｇｏｒｉｓら（Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．（２００８），７８（１），１７０－１７８の“Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｔｈｅｒａｐｙ ａｎｄ ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ ｆｏｒ ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ ＲＮＡ ｖｉｒａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ”）の方法に従う。
（実施例３１）
羊痘ウイルスおよびランピースキン病ウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
イベルメクチンの代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｔｏｋｅｒら（Ｖｉｒｕｓ Ｒｅｓ．（２０２２），３１０，１９８６７１の“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｖｉｎｅ ａｎｄ ｏｖｉｎｅ ｃａｐｒｉｐｏｘｖｉｒｕｓｅｓ（Ｌｕｍｐｙ ｓｋｉｎ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｓｈｅｅｐｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）ｂｙ ｉｖｅｒｍｅｃｔｉｎ ｏｃｃｕｒｓ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔａｇｅｓ ｏｆ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ”）の方法に従う。

（実施例３２）
ブタ水疱症ウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
他の抗ウイルス剤の代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、ｄｅ Ｌｅｏｎら（Ｆｒｏｎｔ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．（２０１９），１０，１８５３；ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．３３８９／ｆｍｉｃｂ．２０１９．０１８５３の“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｒｃｉｎｅ ｖｉｒｕｓｅｓ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｅｌｌ－ｔａｒｇｅｔｅｄ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｄｒｕｇｓ”）の方法に従う。
（実施例３３）
トリ感染性気管支炎ウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
抽出物の代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｌｅｌｅｓｉｕｓら（ＢＭＣ Ｖｅｔ．Ｒｅｓ．（２０１９），１５，１７８の“Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｆｉｆｔｅｅｎ ｐｌａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ａｖｉａｎ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ”）の方法に従う。

（実施例３４）
感染性ファブリキウス嚢病ウイルスおよびニューカッスル病に対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
インターフェロンの代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｍｏら（Ａｖｉａｎ Ｄｉｓ．（２００１），４５，３８９－３９９の“Ｔｈｅ ｉｎ ｖｉｖｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｈｉｃｋｅｎ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｌｐｈａ ｏｎ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｕｒｓａｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ ａｎｄ Ｎｅｗｃａｓｔｌｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”）の方法に従う。
（実施例３５）
トリインフルエンザウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
他の抗ウイルス剤の代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｂｅｉｇｅｌら（Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．（２００８），７８（１），９１－１０２の“Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｓｅｖｅｒｅ ｓｅａｓｏｎａｌ ａｎｄ ａｖｉａｎ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ”）の方法に従う。

（実施例３６）
マレック病ウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
他のハーブ抽出物の代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｓｕｎら（Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｌ．（２０１４），５２（７），８４１－８４７の“Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｈｅｒｂｓ ａｎｔｉ－Ｍａｒｅｋ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ”）の方法に従う。
（実施例３７）
シチメンチョウにおける家禽腸炎致死症候群に対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
他の薬剤の代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｓｈｅｈａｔａら（Ａｎｉｍａｌｓ（２０２１），１１，２０６３の“Ｐｏｕｌｔ ｅｎｔｅｒｉｔｉｓ ａｎｄ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｉｎ ｔｕｒｋｅｙ ｐｏｕｌｔｓ：ｃａｕｓｅｓ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ ｍｅａｓｕｒｅｓ”）の方法に従う。

（実施例３８）
イヌジステンパーウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
ＥＩＣＡＲの代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｆａｂｉａｎａら（Ｒｅｓ．Ｖｅｔ．Ｓｃｉ．（２０１０），３３９－３４４の“Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ＥＩＣＡＲ ａｇａｉｎｓｔ ｃａｎｉｎｅ ｄｉｓｔｅｍｐｅｒ ｖｉｒｕｓ（ＣＤＶ）ｉｎ ｖｉｔｒｏ”）の方法に従う。
（実施例３９）
イヌインフルエンザウイルス対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
ニタゾキサニドおよびチゾキサニドの代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ａｓｈｔｏｎら（Ｖｅｔ．Ｍｅｄ．Ｉｎｔｅｒ．（２０１０），８９１０１０の“Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｃａｎｉｎｅ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ（Ｈ３Ｎ８）ｖｉｒｕｓ ｔｏ ｎｉｔａｚｏｘａｎｉｄｅ ａｎｄ ｔｉｚｏｘａｎｉｄｅ”）の方法に従う。

（実施例４０）
ネコヘルペスウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
他の薬剤の代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｔｈｏｍａｓｙら（Ｖｅｔ．Ｏｐｈｔｈａｌ．（２０１６），１９（Ｓｕｐｐｌ．１），１１９－１３０の“Ａ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｄｒｕｇｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗｉｔｈ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔ ｆｅｌｉｎｅ ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ－１”）の方法に従う。
（実施例４１）
Ｉ型ネコ感染性腹膜炎ウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
Ｕ１８６６６Ａの代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｄｏｋｉら（Ｐａｔｈｏｇｅｎｓ（２０２０），９，６７の“Ｉｎ ｖｉｖｏ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｕ１８６６６Ａ ａｇａｉｎｓｔ ｔｙｐｅ Ｉ ｆｅｌｉｎｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｐｅｒｉｔｏｎｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ”）の方法に従う。

（実施例４２）
ネコロタウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
他の抽出物の代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｔｅｌｌｅｚら（ＢＭＣ Ｃｏｍｐｌ．Ａｌｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．（２０１５），１５，４２８の“Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔ ｒｏｔａｖｉｒｕｓ ａｎｄ ａｓｔｒｏｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｅｘｅｒｔｅｄ ｂｙ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ Ａｃｈｙｒｏｌｉｎｅ ｂｏｇｏｔｅｎｓｉｓ（Ｋｕｎｔｈ）ＤＣ．（ｃｏｍｐｏｓｉｔａｅ”）の方法に従う。
（実施例４３）
ブタデルタコロナウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
塩化リチウムおよびグリチルリチン酸二アンモニウムの代わりに、異なる濃度のオレアンドリンまたはジゴキシンを含有する溶液を使用することを除いて、Ｚｈａｉら（Ｐａｔｈｏｇｅｎｓ（２０１９），８，１４４の“Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｌｉｔｈｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ａｎｄ ｄｉａｍｍｏｎｉｕｍ ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎａｔｅ ｏｎ ｐｏｒｃｉｎｅ ｄｅｌｔａｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ”）の方法に従う。

（実施例４４）
ブタインフルエンザウイルスに対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
細胞を１２ウェルプレートにおよそ５×１０₅細胞／ウェルの濃度で蒔く。オレアンドリン／抽出物／ＤＭＳＯ濃度を３連で試験する。細胞を集密になるまで４８時間インキュベートする。

予防試験
感染しやすい細胞を所望の濃度の純粋なオレアンドリンまたは抽出物で前処理し、ウイルスを感染させ、次いで、また前処理と同じ濃度のオレアンドリンを含有するウイルス維持培地中で４８時間インキュベートする。その後のＴＣＩＤ５０およびＲＴ－ＲＴ－ｑＰＣＲ判定のために、試料を２４および４８時間で収集する。
増殖培地を１２ウェルプレートにおけるおよそ５×１０₅細胞の集密単層から除去し、ＰＢＳで２回洗浄し、２００μＬの維持培地およびＤＭＳＯに溶解した所望の濃度のオレアンドリンまたは適合したＤＭＳＯのみの対照ウェルで置き換える。プレートを３７℃／５％ＣＯ₂で３０分間インキュベートする。前処理後、５００μＬの体積中の５×１０₃ウイルス単位を各ウェルに添加する（ＭＯＩ＝０．０１）。これを３７℃／５％ＣＯ₂で１時間インキュベートする。プレートをＤＰＢＳで静かに３回洗浄する。次いで、ＤＭＳＯ中の純粋なオレアンドリン、抽出物、またはＤＭＳＯのみを含有する２ｍＬのウイルス維持培地を同じ前処理濃度で各ウェルに添加する。ＴＣＩＤ₅₀およびＲＴ－ｑＰＣＲ判定のために、試料を各ウェルから２４および４８時間で収集する。収集した試料を試験まで－８０℃で保存する。

治療試験
感染しやすい細胞にウイルスを感染させ、最大４８時間インキュベートする。感染後１２または２４時間で、感染細胞をウイルス維持培地において所望の濃度の純粋なオレアンドリンまたは抽出物で処理する。その後のＴＣＩＤ５０およびＲＴ－ｑＰＣＲ判定のために、感染後１２時間で先に処理した試料から上清を感染の２４時間後に収集し、感染後１２および２４時間で先に処理した試料の両方から上清を感染の４８時間後に収集する。
増殖培地を１２ウェルプレートにおけるおよそ５×１０₅細胞の集密単層から除去し、各ウェルにおいて、５００μＬの維持培地および０．０１のＭＯＩのＳＩＶウイルスで置き換える。プレートを３７℃／５％ＣＯ₂で１２または２４時間インキュベートする。プレートをＤＰＢＳで静かに３回洗浄する。予防処理濃度と同様のＤＭＳＯ中の純粋なオレアンドリン、抽出物またはＤＭＳＯのみの適合濃度を含有する４．２ｍＬのウイルス維持培地を感染後１２または２４時間で添加する。ＴＣＩＤ₅₀およびＲＴ－ｑＰＣＲ判定のために、感染後２４および４８時間で、感染後１２時間でのオレアンドリンまたはＤＭＳＯのみの処理から試料を収集する。ＴＣＩＤ₅₀およびＲＴ－ｑＰＣＲ判定のために、感染後４８時間で、感染後２４時間でのオレアンドリンまたはＤＭＳＯのみの処理から試料を収集する。ＴＣＩＤ₅₀およびＲＴ－ｑＰＣＲ判定のために２４および４８時間で各ウェルから収集した試料を試験まで－８０℃で保存する。

本明細書で使用される場合、「約」または「おおよそ」という用語は、指定された値の±１０％、±５％、±２．５％、または±１％を意味すると解釈される。本明細書で使用される場合、「実質的に」という用語は、「大部分」または「少なくとも大部分」または「５０％超」を意味すると解釈される。
上記は、本発明の特定の実施形態の詳細な説明である。本発明の特定の実施形態を例示の目的で本明細書に説明してきたが、本発明の精神および範囲から逸脱することなく様々な修正を行うことができることを理解されたい。したがって、本発明は、添付の特許請求の範囲による場合を除いて限定されない。本明細書で開示および特許請求される実施形態の全ては、本開示に照らして過度の実験なしで作成および実行することができる。

Claims (34)

1. 治療を必要とする動物においてウイルス感染を治療する方法であって、オレアンドリン、ジゴキシン、またはそれらの組み合わせを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記動物に投与することを含む方法。
2. ウイルス感染に罹るリスクのある動物において前記ウイルス感染を予防する方法であって、前記動物が前記ウイルス感染に罹る前に長期治療期間にわたって繰り返しまたは連続の頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記動物に慢性的に投与し、それによって前記動物が前記ウイルス感染に罹ることを予防することを含み、前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、ジゴキシン、またはそれらの組み合わせを含む、方法。
3. 動物がウイルス感染に関連する１つ以上の症状を示すことを予防する方法であって、１回以上の治療有効用量の強心配糖体含有組成物を前記動物に投与することを含み、前記１回以上の用量が、ａ）前記動物がウイルスに感染する前に；またはｂ）前記動物がウイルスに感染してから最大５日、最大４日、最大３日、最大２日、または最大１日の期間内に投与される、方法。
4. 動物におけるウイルス感染が疾患状態に進行することを予防する方法であって、繰り返しまたは連続の頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を、疾患状態に進行していないウイルス感染を有する動物に投与し、それによって前記ウイルス感染の疾患状態への進行を予防することを含み、前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、ジゴキシン、またはそれらの組み合わせを含む、方法。
5. 動物におけるウイルス感染が疾患状態に進行することまたはウイルス感染に関連する１つ以上の症状を示すことを予防する方法であって、前記動物がウイルスに感染してから最大７日、最大６日、最大５日、最大４日、最大３日、最大２日、または最大１日の期間内に、１回以上の治療有効用量の強心配糖体含有組成物を前記動物に投与することを含む方法。
6. 前記動物が前記ウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
   前記抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
   処方された初期投与計画に従って一定期間、前記抗ウイルス組成物の初期用量を前記動物に投与することと、
   前記抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
   動物の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて前記抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
   前記動物の臨床応答および／または治療応答が前記初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、前記動物の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、用量を漸増または漸減させることを含む、請求項１に記載の方法。
7. 前記抗ウイルス組成物が全身投与される、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
8. 前記動物が、ウイルス感染を有する別の動物と濃厚接触（６フィート以内）しているか、および／または未感染動物が、ウイルス感染動物と一緒に生活しているか、食物を共有しているか、住みかを共有しているか、空気を共有しているか、または水を共有している、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
9. ａ）前記動物がウシであり、抗ウイルス組成物の用量が、１ｎｇ／ｍＬ以下のジゴキシンまたはオレアンドリンの最大血漿中濃度をもたらすか、
   ｂ）前記動物がブタであり、抗ウイルス組成物の用量が、５ｎｇ／ｍＬ以下のジゴキシンまたはオレアンドリンの最大血漿中濃度をもたらすか、
   ｃ）前記動物がウマであり、抗ウイルス組成物の用量が、５ｎｇ／ｍＬ以下のジゴキシンまたはオレアンドリンの最大血漿中濃度をもたらすか、
   ｄ）前記動物がヒツジであり、抗ウイルス組成物の用量が、５ｎｇ／ｍＬ以下のジゴキシンまたはオレアンドリンの最大血漿中濃度をもたらすか、または
   ｅ）前記動物がヤギであり、抗ウイルス組成物の用量が、１０ｎｇ／ｍＬ以下のジゴキシンまたはオレアンドリンの最大血漿中濃度をもたらす、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
10. 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日あたり体重１ｋｇあたりのオレアンドリンおよび／またはジゴキシンの単位量に基づいて約０．０５～０．５μｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５μｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２μｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４μｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３μｇ／ｋｇ／日を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。
11. 前記強心配糖体が、少なくとも２つの投与相：負荷相および維持相で投与される、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。
12. 前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲にある、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
13. ａ）複数回用量が、１週間あたり２日以上にわたり１日に投与される１回以上の用量であるか、ｂ）１日あたり１～１０回の用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）が、２日～約２カ月の治療期間にわたり投与されるか、またはｃ）前記ウイルス感染が治癒するまで、１回以上の用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）が、複数日および複数週間にわたり１日に投与される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。
14. 投与が１カ月あたり１週間以上継続する、請求項１３に記載の方法。
15. 投与が１年あたり１カ月以上継続する、請求項１４に記載の方法。
16. 前記抗ウイルス組成物がａ）オレアンドリン；ｂ）オレアンドリン、オレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）およびウルソール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）の組み合わせ；ｃ）オレアンドリン、オレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）およびベツリン酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）の組み合わせ；ｄ）オレアンドリン、オレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）およびベツリン酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）の組み合わせ；ｅ）オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸または塩）、ウルソール酸（遊離酸または塩）、およびベツリン酸（遊離酸または）の組み合わせ；ｆ）オレアンドリン、およびオレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）、ベツリン酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）からなる群から選択される少なくとも２つのトリテルペンの組み合わせ；またはｇ）少なくともオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、カネロシン、カネロジオン、オレアンドリゲニン、Ｎｅｒｉｕｍ Ｆ、ネリタロシド、オドロシド、アジネリン、オドロシド－Ｇ－アセテート、およびギトキシゲニンの組み合わせを含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。
17. 前記抗ウイルス組成物が、ポリフェノール、炭水化物、フラボノイド、アミノ酸、可溶性タンパク質、セルロース、デンプン、アルカロイド、サポニン、タンニン、またはそれらの任意の組み合わせをさらに含む、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。
18. 前記抗ウイルス組成物が、バイオマスの抽出物を含む、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。
19. 前記抽出物が、熱水抽出、冷水抽出、有機溶媒抽出、超臨界流体抽出、亜臨界液体抽出、またはそれらの組み合わせにより調製される、請求項１８に記載の方法。
20. 前記抽出物が、オレアンドリンと、前記バイオマスから抽出された１つ以上の化合物との組み合わせを含む、請求項１８または１９に記載の方法。
21. 前記バイオマスが、Ｎｅｒｉｕｍ種またはＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ種からの植物材料のバイオマスである、請求項２０に記載の方法。
22. 前記抽出物が、１つ以上の強心配糖体前駆体、強心配糖体の１つ以上のグリコン構成物質、またはそれらの組み合わせをさらに含む、請求項２０に記載の方法。
23. 前記抽出物が、オレアンドリンと、強心配糖体、グリコン、アグリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖類、糖類、アルカロイド、脂肪、タンパク質、ネリタロシド、オドロシド、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、オレアンドリゲニン、オレアシドＡ、ベツリン（ウルサ－１２－エン－３β，２８－ジオール）、２８－ノルウルサ－１２－エン－３β－オール、ウルサ－１２－エン－３β－オール、３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、３β，２０α－ジヒドロキシウルサ－２１－エン－２８－酸、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３β，１３β－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸、ホモポリガラクツロナン、アラビノガラツロナン、クロロゲン酸、コーヒー酸、Ｌ－キナ酸、４－クマロイル－ＣｏＡ、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、５－Ｏ－カフェオイルキナ酸、カルデノリドＢ－１、カルデノリドＢ－２、オレアゲニン、ネリジジノシド、ネリゾシド、オドロシド－Ｈ、ガラクツロン酸、ラムノース、アラビノース、キシロース、およびガラクトースで構成される３－ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－５－ベータ，１４ベータ－ジヒドロキシ－カルド－２０（２２）－エノリドペクチン性多糖類、１７０００～１２００００Ｄの範囲のＭＷ、または約３５０００Ｄ、約３０００Ｄ、約５５００Ｄ、もしくは約１２０００ＤのＭＷを有する多糖類、カルデノリドモノグリコシド、カルデノリドＮ－１、カルデノリドＮ－２、カルデノリドＮ－３、カルデノリドＮ－４、プレグナン、４，６－ジエン－３，１２，２０－トリオン、２０Ｒ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン、１６ベータ，１７ベータ－エポキシ－１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，２０－ジオン、１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６，１６－トリエン－３，２０－ジオン（ネリジエノンＡ）、２０Ｓ，２１－ジヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン（ネリジエノンＢ）、ネリウクマル酸、イソネリウクマル酸、オレアンデロン酸、オレアンデレン、８アルファ－メトキシラブダン－１８－酸、１２－ウルセン、カネロシド、ネリウモシド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α－ヒドロキシ－８，１４β－エポキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α，１４β－ジヒドロキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β，２７－ジヒドロキシ－ウルサ－１８－エン－１３，２８－オリド、３β，２２α，２８－トリヒドロキシ－２５－ノル－ルプ－１（１０），２０（２９）－ジエン－２－オン、ｃｉｓ－カレニン（３β－ヒドロキシ－２８－Ｚ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、ｔｒａｎｓ－カレニン（３－β－ヒドロキシ－２８－Ｅ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、３ベータ－ヒドロキシ－５アルファ－カルダ－１４（１５），２０（２２）－ジエノリド（ベータ－アンヒドロエピジギトキシゲニン）、３ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギタロシル）－２１－ヒドロキシ－５ベータ－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド（ネリウモゲニン－Ａ－３ベータ－Ｄ－ジギタロシド）、プロセラゲニン、ネリジエノンＡ、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３ベータ，１３ベータ－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、２８－オルウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ，２８－ジオール、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、（２０Ｓ，２４Ｒ）－エポキシダンマラン－３ベータ，２５－ジオール、２０ベータ，２８－エポキシ－２８アルファ－メトキシタラキサステラン－３ベータ－オール、２０ベータ，２８－エポキシタラキサステル－２１－エン－３ベータ－オール、２８－ノル－ウルサ－１２－エン－３ベータ，１７ベータ－ジオール、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、アルファ－ネリウルセート、ベータ－ネリウルセート、３アルファ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、３ベータ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、オレアンデロール酸、カネロジオン、３β－ｐ－ヒドロキシフェノキシ－１１α－メトキシ－１２α－ヒドロキシ－２０－ウルセン－２８－酸、２８－ヒドロキシ－２０（２９）－ルペン－３，７－ジオン、カネロシン、３アルファ－ヒドロキシ－ウルサ－１８，２０－ジエン－２８－酸、Ｄ－サルメントース、Ｄ－ジギノース、ネリジジノシド、ネリゾシド、イソリシノール酸、ゲンチオビオシルネリゴシド、ゲンチオビオシルボーモントシド、ゲンチオビオシルオレアンドリン、ホリネリン、１２β－ヒドロキシ－５β－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド、８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－ネリアゲニン、ウバオール、ウルソールアルデヒド、２７（ｐ－クマロイルオキシ）ウルソール酸、オレアンデロール、１６－アンヒドロ－デアセチル－ネリゴシド、９－Ｄ－ヒドロキシ－ｃｉｓ－１２－オクタデカン酸、アジゴシド、アジネリン、アルファ－アミリン、ベータ－シトステロール、カンペステロール、カウチューク、カプリン酸、カプリル酸、コリン、コルネリン、コルテネリン、デアセチルオレアンドリン、ジアセチル－ネリゴシド、ホリアンドリン、プソイドクラミン、ケルセチン、ケルセチン－３－ラムノグルコシド、ケルシトリン、ロサギニン、ルチン、ステアリン酸、スチグマステロール、ストロスペシド、ウレヒトキシン、およびウザリゲニンからなる群から選択される１つ以上の化合物を含む、請求項２２に記載の方法。
24. 前記ウイルス感染が、ウシコロナウイルス（ＢＣＶ）、ブタコロナウイルス（ＰＣＶ）、ウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）、ウシ呼吸器多核体ウイルス（ＢＲＳＶ）、およびブタ繁殖・呼吸障害症候群ウイルス（ＰＲＲＳＶ）からなる群から選択される、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
25. 前記ウイルス感染が、ブタサーコウイルス２型（ＰＣＶ２）、ウシヘルペスウイルス１型（ＢＨＶ－１、例えば、ウシ感染性鼻気管炎（ＩＢＲ））、ウシヘルペスウイルス２型（ＢＨＶ－２、ウシヘルペス乳頭炎）、ウシヘルペスウイルス３型（ＢＨＶ－３、カタル熱）、ウシヘルペスウイルス５型（ＢＨＶ－５、脳炎）、ウシパピローマウイルス、リッサウイルス（狂犬病、ラブドウイルス）、口蹄疫ウイルス（ＦＭＤ；ピコルナウイルス科のアフトウイルス属；例えば、血清型Ａ、Ｏ、Ｃ、ＳＡＴ１、ＳＡＴ２、ＳＡＴ３、Ａｓｉａ１）、ランピースキン病ウイルス（ポックスウイルス科のカプリポックスウイルス属）、牛痘ウイルス、偽牛痘ウイルス（パラワクシニア）、ウシ白血病ウイルス、ウシレンチウイルス、レスピロウイルス（ウシパラインフルエンザ－３ウイルス）、モルビリウイルス属（牛疫ウイルス）、ウシ流行熱ウイルス、水疱性口内炎ウイルス、アフリカブタ熱ウイルス、アフリカウマ病ウイルス（レオウイルス科）、羊痘ウイルスおよびヤギ痘ウイルス（コルドポックスウイルス亜科、カプリポックスウイルス属）、ウマインフルエンザウイルス、ウマ感染性貧血ウイルス、ウマ動脈炎ウイルス、ブタコレラウイルス、ニパウイルス、ブタ水疱症ウイルス、ブタ伝染性胃腸炎ウイルス、トリ感染性気管支炎ウイルス、感染性喉頭気管炎ウイルス（トリ）、アヒル肝炎ウイルス、トリインフルエンザウイルス、感染性ファブリキウス嚢病ウイルス（ガンボロ）、マレック病ウイルス（内臓白血症；ヘルペスウイルス）、悪性ニューカッスル病ウイルス（ｖＮＤＶ、パラミクソウイルス科、エイブラウイルス属）、トリメタニューモウイルス（シチメンチョウにおける）、トリインフルエンザウイルス、家禽腸炎致死症候群（シチメンチョウにおけるＰＥＭＳ）、ハトアルファヘルペスウイルス－１（ＣｏＨＶ－１）、トリ腎炎、アルボウイルス感染、シチメンチョウウイルス性肝炎、トリ脳脊髄炎、トリＥ型肝炎ウイルス、ニワトリコレラ、鶏痘、家禽コレラ、シチメンチョウにおける出血性腸炎、イヌパルボウイルス１型または２型、イヌ感染性肝炎（ＩＣＨ、アデノウイルス１）、イヌヘルペス、イヌジステンパーウイルス（モルビリウイルス属）、イヌにおけるロタウイルス腸ウイルス、ブタヘルペスウイルス１（仮性狂犬病、オーエスキー病）、イヌインフルエンザ、イヌパラインフルエンザウイルス、ネコヘルペスウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、ネコパルボウイルス、ネコ感染性腹膜炎ウイルス、ネコインフルエンザウイルス、ネコカリシウイルス、ネコ白血病ウイルス、ネコウイルス性鼻気管炎、ネココロナウイルス、ネコロタウイルス、ネコアストロウイルス、トルクテノススウイルス（ＴＴＳｕＶ）、ブタテシオウイルス（ＰＴＶ）、ブタボカウイルス１（ＰＢｏＶ１）、ブタインフルエンザウイルス（例えば、Ａ型）、ブタ風土性下痢ウイルス（ＰＥＤＶ）、ブタデルタコロナウイルス、それらの種、およびそれらのバリアントからなる群から選択される、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
26. 前記動物が、ブタ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ラマ、アルパカ、スイギュウ、シカ、ヘラジカ、キリン、ラクダ、イヌ、ネコ、ニワトリ、シチメンチョウ、ハト、アヒル、キジ、およびギニアからなる群から選択される、請求項１～２５のいずれか一項に記載の方法。
27. 前記抗ウイルス組成物が、前記強心配糖体の代謝または消化の速度を低下させ、それによって前記動物における前記強心配糖体の血漿中濃度半減期を増加させる少なくとも１つの阻害剤をさらに含む、請求項１～２６のいずれか一項に記載の方法。
28. 前記阻害剤が、前記強心配糖体の代謝または消化を阻害する、請求項２７に記載の方法。
29. 前記抗ウイルス組成物が、前記動物に経口投与される飼料および／または液体に含まれる、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法。
30. 本明細書に記載される組成物。
31. 動物におけるウイルス感染の治療のための本明細書に記載される組成物の使用。
32. 動物におけるウイルス感染の治療に使用するための本明細書に記載される組成物。
33. 医薬品の調製のための本明細書に記載される組成物の使用。
34. 医薬品の調製に使用するための本明細書に記載される組成物。

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