JP2024529156A - 脂質化ポリミキシン類似体 - Google Patents

Abstract

【要約】本発明は、ペプチドバックボーンを介して新規な２－チオエチルエステル結合によって固定された独特の脂質を含むポリミキシン類似体に関する。

Description

本発明は、一般に、ペプチドバックボーンを介して新規な２－チオエチルエステル結合によって固定された独特の脂質を含むポリミキシン類似体に関する。

世界は新しい抗生物質を必要としている。抗生物質発見の「黄金時代」（１９４０－１９６０年）以降、抗生物質研究は大幅に減速しており、過去２０年間で臨床使用に進んだ新しい化合物は３０種類のみである。この差し迫った抗生物質の危機は、大腸菌や緑膿菌のような一部のグラム陰性菌の現在の最前線の抗生物質に対する耐性の増大によってさらに複雑化している。グラム陰性菌感染症は、透過性の低い二重膜の細胞エンベロープを持つ病原体の細胞構造のため、治療がより複雑である。残念ながら、新たに承認された抗生物質のほとんどはグラム陽性菌を対象としたものであり、臨床パイプラインに残っている抗生物質の中でグラム陰性菌を標的としたものはほとんどない。

したがって、病原性細菌、特にグラム陰性病原性細菌の追加の種および株を効果的に標的とすることができる、新しく改良された抗生物質が必要とされている。

本発明の目的は、病原性細菌、特にグラム陰性病原性細菌を効果的に標的とすることができる少なくとも１つの新規かつ改良された抗生物質を提供することによって、この必要性を満たすために少なくとも何らかの方法で取り組むこと、および／または少なくとも公衆に有用な選択肢を提供することである。本発明の他の目的は、単なる例として与えられる以下の説明から明らかになることである。

本明細書では、特許明細書および他の文書を含む外部情報源への参照が行われているが、これは一般に、本発明の特徴を議論するための文脈を提供することを目的としている。いかなる国・地域においても、別段の記載がない限り、そのような情報源への引用は、そのような情報源が先行技術であること、またはその分野の共通の常識の一部を構成することを認めるものと解釈してはならない。

本発明は、ペプチドバックボーンを介して新規な２－チオエチルエステル結合によって固定された１つまたは複数の独特な脂質を含む新規なポリミキシン類似体に関する。

一態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物に関する。

（ただし、
Ａは、
および
から選択され、
ここで、Ｒ^１は、Ｈまたは－Ｃ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルであり、ｎは１または２であり、Ｒ^５はＨまたはＣＨ_３であり、
Ｘ_１は、存在しないか、Ｄａｂであり、
Ｘ_２はＴｈｒであり、
Ｘ_３は、Ｄａｂ、Ｄａｐ、またはＤ－Ｓｅｒからなる群から選択され、
Ｘ_４Ｇは、Ｄａｂ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、またはＤａｐからなる群から選択され、
Ｘ_６は、Ｄ－Ｐｈｅ、または
であり、
Ｘ_７は、Ｌｅｕまたは
であり、
ここで、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４は、独立に、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリール、アリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルアリール、ピリジニル（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、および－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルピリジニルからなる群から選択され、
ここで、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリール、およびピリジニルは、それぞれ独立に、ハロ、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキル、－Ｓ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、_－Ｓ（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、またはＮＨ－（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキルで任意に置換されており、
Ｒ^６およびＲ^７は、独立に、ＨまたはＣＨ_３から選択される。）

別の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物および薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物を提供する。

別の態様本発明は、被験体の細菌感染を処置または予防するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を提供する。

別の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の治療有効量を被験体に投与することを含む、被験体の細菌感染を治療または予防する方法を提供する。

別の態様では、本発明は、被験体における細菌感染の治療または予防のための医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。

上記の態様では、一実施形態では、細菌感染はグラム陰性菌感染である。

別の態様では、本発明は、殺菌量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物と細菌を接触させることを含む、細菌を殺菌する方法を提供する。

別の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を静菌量で細菌と接触させることを含む、細菌の増殖を阻害する方法を提供する。

上記の態様では、一実施形態ではでは、細菌はグラム陰性菌である。

本明細書で開示されている数値範囲（例えば、１～１０）の参照は、この範囲内のすべての有理数（例えば、１、１．１、２、３、３．９、４、５、６、６．５、７、８、９および１０）およびこの範囲内の任意の有理数範囲（例えば、２～８、１．５～５．５および３．１～４．７）をも含むので、本明細書で明示的に開示されているすべての範囲のすべてのサブ範囲は、本明細書で明示的に開示されている。これらは特定の意図の一例にすぎず、列挙された最低値と最高値との間の可能なすべての数値の組み合わせは、同様の方法で本明細書に明示的に記載されているものとみなされるべきである。

本発明は、概して上記で定義されているが、これに限定されるものではなく、本発明は、以下の実施形態に記載される実施形態をさらに含むことが当業者には理解される。

以下、添付の図面を参照して本発明を説明する。
ポリミキシンＢのＳ－脂質化類似体を調製するためのＳ－脂質化ビルディングブロックを用いた固相合成戦略を示すスキームである。試薬と条件：ｉｉ）反復ＦｍｏｃＳＰＰＳ、ＤＭＦ中２０％ピペリジン（ｖ／ｖ）、２×５分、室温、次いでＦｍｏｃ－Ｘａａ－ＯＨ、ＨＡＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、２０分、室温；ｉｉ）ＤＭＦ中の２０％ピペリジン（ｖ／ｖ）、２×５分、室温；ｉｉｉ）ビルディングブロック、３ａ～３ｆ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、１時間、室温。ｉｉｉ）ＤＭＦ中の２０％ピペリジン、ｉｖ）Ｂｏｃ２Ｏ、ＤＭＦ、２時間；ｖ）ＤＭＦ中の２％Ｎ_２Ｈ_４．Ｈ_２Ｏ、３ｘ５分、室温。ｖｉ）Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、ＨＡＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、２０分、ｖｉｉ）Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４、ＰｈＳｉＨ_３、ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＤＭＦ（１：１、ｖ／ｖ）、３時間、室温。ｖｉｉｉ）ＤＭＦ中２０％ピペリジン（ｖ／ｖ）、２×５分、室温。ｉｘ）ＰｙＢＯＰ、ＨＯＡｔ、ＮＭＭ、ＤＭＦ、１２時間、室温。ｘ）９０％ＴＦＡ、５％ＴＩＰＳ、５％Ｈ_２Ｏ（ｖ／ｖ／ｖ）、２時間、室温。 オフレジン脂質化戦略を用いたビスＳ－脂質化ポリミキシンを調製するための固相合成戦略を示すスキームである。試薬と条件：ｉ）反復ＦｍｏｃＳＰＰＳ、ＤＭＦ（ｖ／ｖ）中の２０％ピペリジン、２ｘ５分、室温、その後Ｆｍｏｃ－Ｘａａ－ＯＨ、ＨＣＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、２０分、室温。ｉｉ）ＤＭＦ中２０％ピペリジン（ｖ／ｖ）、２×５分、室温；ｉｉｉ）Ｂｏｃ_２Ｏ、ＤＭＦ、２０分、室温。ｉｖ）ＮＨ_２ＯＨ・ＨＣｌ、イミダゾール、ＮＭＰ、５時間、室温；ｖ）Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、ＨＣＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、２０分、室温；ｖｉ）Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４、ＰｈＳｉＨ３、ＣＨ２Ｃｌ２、３時間、室温。ｖｉｉ）ＤＭＦ中２０％ピペリジン（ｖ／ｖ）、２×５分、室温。ｖｉｉｉ）ＰｙＢＯＰ、ＨＯＡｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、１２時間、室温；ｉｘ）９４％ＴＦＡ、２％ＴＩＰＳ、２％Ｈ_２Ｏ、２％ＥＤＴ（ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）、２時間、室温。ｘ）ビニルエステル、ＤＭＰＡ、ＴＩＰＳ、ｔｅｒｔ－ノナンチオール、ＮＭＰ中５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）、１時間、３６５ｎｍ、室温；ｘｉ）ＡｇＯＡｃ、Ｈ_２Ｏ中５０％ＣＨ_３ＣＮ（ｖ／ｖ）、１２時間、室温、次いでＤＴＴ、Ｈ_２Ｏ中５０％ＣＨ_３ＣＮ（ｖ／ｖ）、１時間、室温；ｘｉｉ）ビニルエステル、ＤＭＰＡ、ＴＩＰＳ、ｔｅｒｔ－ノナンチオール、ＮＭＰ中５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）、１時間、３６５ｎｍ、室温。 環外部分とシステイニルハンドルが異なるモノＳ－脂質化ポリミキシンの別の固相合成を示すスキームである。試薬と条件：ｉ）反復ＦｍｏｃＳＰＰＳ、ＤＭＦ中２０％ピペリジン（ｖ／ｖ）、２×５分、室温、次いでＦｍｏｃ－Ｘａａ－ＯＨ、ＨＡＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、２０分、室温；ｉｉ）ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ、イミダゾール、ＮＭＰ、５時間、室温；ｉｉｉ）Ａｌｌｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、ＤＩＣ、ＨＯＡｔ、ＤＭＦ、１６時間；ｉｖ）Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４、ＰｈＳｉＨ_３、ＣＨ_２Ｃｌ_２、３時間；ｖ）ＰｙＡＯＰ、ＨＯＡｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、１２時間、室温；ｖｉ）反復ＦｍｏｃＳＰＰＳ、ＤＭＦ（ｖ／ｖ）中の２０％ピペリジン、２ｘ５分、室温、その後Ｆｍｏｃ－Ｘａａ－ＯＨ、ＨＡＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、２０分間、室温、Ａについては、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨまたはＦｍｏｃ－Ｄ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨまたはＴｒｔＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ_２Ｈ、またはホモ－Ｌ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨのいずれかＨＡＴＵ、ＨＯＡｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ：ＤＣＭ（１：１）、１時間。ｖｉｉｉ）２０％ピペリジンＤＭＦ（ｖ／ｖ）溶液、２ｘ５分。ｉｘ）９５％ＴＦＡ、２％ＴＩＰＳ、１％Ｈ_２Ｏ、２％ＥＤＴ（ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）、２時間、室温。ｘ）プロピオン酸ビニル、ＤＭＰＡ、ＴＩＰＳ、ｔｅｒｔ－ノナンチオール、ＮＭＰ中５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）、１時間、３６５ｎｍ、室温。 モノＳ－脂質化ポリミキシンを調製するための化学酵素的液相合成を示すスキームである。ｉ）酵素加水分解、パパイン（１．５～１０単位／ｍｇ）、ＤＴＴ、リン酸緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ６．８）、２８時間、３７°Ｃ。ｉｉ）Ｂｏｃ－ＯＮ、ＮＥｔ_３、ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ（２：１ｖ／ｖ）、３０分、室温。ｉｉｉ）Ｂｏｃ－Ｌ－Ｔｈｚ－ＯＨまたはＢｏｃ－Ｄ－Ｔｈｚ－ＯＨ、ＨＡＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_２、２時間、室温。ｉｖ）ＴＦＡ：ＣＨ_２Ｃｌ_２（１：１ｖ／ｖ）、１時間、室温。ｖ）ＭｅＯＮＨ_２・Ｈ_２Ｏ溶液（０．２Ｍ、ｐＨ４）、２４時間、室温または３７℃。ｖｉ）ビニルエステル、ＴＩＰＳ、ｔｅｒｔ－ノナンチオール、ＤＭＰＡ、ＮＭＰ中の５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）、３６５ｎｍ、１時間、室温。 アポトーシスの定量化を示すグラフである。ポリミキシン処理オルガノイド（１００ｍ～１ｍＭポリミキシンＢおよび化合物２９および３５）のパラフィン切片上でアポトーシス（ＴＵＮＥＬ＋）細胞を定量する。条件ごとにｎは１０個以上のオルガノイドである。＊＊＊＊ｐ値≦０．０００１以下、一元配置分散分析。 示された化合物濃度の関数として細胞生存を示すグラフである。データは３回の実験を表している。

５．１ 定義
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、ここで用いられるように、「少なくとも部分的に構成される」という意味である。本明細書および各請求項における各「包括」という用語を解釈するときに、その項またはその項目の前面にあるもの以外の特徴も存在することがある。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」と「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」などの関連用語は、同じ解釈で解釈される。

本明細書で使用されるように、「および／または」という用語は、「および」または「または」、あるいはその両方を意味する。

本文で用いるように、名詞の後に続く「（複数可）」は、名詞の複素数形および／または単数形を意味する。

不斉中心は、本明細書に記載された化合物中に存在し得る。不斉中心は、キラル炭素原子での３次元空間における置換基の配置に依存して、（Ｒ）または（Ｓ）と指定することができる。特定の立体化学または異性体形が示されていない限り、構造のすべてのキラル、ジアステレオマーおよびラセミ体が意図されている。ジアステレオマー、エナンチオマーおよびエピマー形、ならびにｄ体およびｌ体を含む化合物のすべての立体化学異性体形、ならびにエナンチオマーが富化された立体化学異性体混合物およびジアステレオマーが富化された立体化学異性体混合物を含むそれらの混合物は、本発明の範囲内にある。したがって、本発明は、アミノ酸残基の不斉中心に関して、例えば、約９０％を超える、約９５％から約９７％を超える、または９９％を超える、実質的に純粋な立体異性体の形態の化合物に関する。このようなジアステレオマーは、例えばキラル中間体を用いた不斉合成によって調製することができ、または混合物はクロマトグラフィーまたは他の従来の方法を使用して分割することができる。。

個々のエナンチオマーは、市販のエナンチオマー純粋な出発物質から合成的に、またはエナンチオマー混合物を調製し、その混合物を個々のエナンチオマーに分割することによって調製することができる。分割方法は、（ａ）カイラル固定相上でのクロマトグラフィーによるエナンチオマー混合物の分離、および（ｂ）エナンチオマー混合物のジアステレオマー混合物への変換、ならびに、例えば再結晶またはクロマトグラフィーおよび当技術分野で知られている他の任意の適切な方法によるジアステレオマーの分離を含む。決定された立体化学の出発物質は、商業的に入手または製造することができ、必要に応じて、当該技術分野で公知の技術により分割することができる。キラル炭素（ＣＨ_２－ＬＧ部分をｓｅｃｏの形で有する炭素）に「天然」の配置を有するエナンチオマーが好ましい。

本明細書に記載の化合物は、シス、トランス、シン、アンチ、エントゲーゲン（Ｅ）およびズサンメン（Ｚ）異性体を含む配座異性体または幾何異性体として存在することもできる。これらのすべての異性体およびその任意の混合物は、本発明の範囲内にある。

また、記載された化合物の任意の互変異性体またはその混合物も本発明の範囲内である。当業者が理解するように、様々な官能基および他の構造は互変異性を示し得る。例としては、ケトン／エノール、イミン／エナミン、チオン／エンチオール互変異性体が含まれるが、これらに限定されない。

本明細書に記載の化合物は、ここで化合物中の１つまたは複数の原子が異なる同位体で置換されているアイソトポローグおよびアイソトポマーとしても存在し得る。好適な同位体は、例えば、^１Ｈ、^２Ｈ（Ｄ）、^３Ｈ（Ｔ）、^１２Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１６Ｏ、および^１８Ｏを含む。このような同位体を本明細書に記載された化合物に組み込む方法は、当業者にとって明らかであり、本明細書に記載された化合物のアイソトポローグおよびアイソトポマーも本発明の範囲内にある。

本発明の範囲には、薬学的に許容される塩、本明細書に記載の化合物の塩も含まれる。これらの塩としては、酸付加塩、塩基付加塩、塩基性窒素基含有第４級塩が含まれる。酸付加塩は、遊離塩基の形態の化合物と無機酸または有機酸とを反応させることにより製造することができる。無機酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸などが含まれるが、これらに限定されない。有機酸の例としては、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、イセチオン酸、スルホン酸、アジピン酸、酪酸、ピバル酸などが含まれるが、これらに限定されない。塩基付加塩は、遊離酸の形態の化合物と無機または有機塩基とを反応させることにより製造することができる。無機塩基付加塩の例としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、およびアルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウムまたは亜鉛塩などの生理学的に許容される他の金属塩が含まれる。有機塩基付加塩の例としては、例えば、トリメチルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、エチレンジアミンの塩などのアミン塩が含まれる。化合物中の塩基性窒素含有基の第４級塩は、例えば、化合物を、メチル、エチル、プロピル、ブチルの塩化物、臭化物、ヨウ化物等のハロゲン化アルキル、ジメチル、ジエチル、ジブチル、ジアミル硫酸塩等のジアルキル硫酸塩と反応させることにより製造することができる。

本明細書で説明されている化合物は、様々な溶媒で溶媒和物として形成または存在し得る。本明細書で使用される「溶媒和物」という用語は、別段の指示がない限り、１つまたは複数の溶媒分子と本明細書に記載の化合物との会合を指す。溶媒が水である場合、溶媒和物は水和物、例えば一水和物、二水和物、三水和物と呼ぶことができる。この項で記述されている化合物の溶解された形態および未溶解された形態はすべて、発明の範囲内にある．
本明細書で使用される一般的な化学用語は、それらの通常の意味を持っている。

化学基の標準的な略称は、その分野でよく知られており、その一般的な意味を持っている。例えば、Ｍｅ＝メチル、Ｅｔ＝エチル、Ｂｕ＝ブチル、ｔ－Ｂｕ＝ｔ－ブチル、Ｃｙｓ＝システイン、Ｐｈ＝フェニル、Ｌｅｕ＝ロイシン、Ｐｈｅ＝フェニルアラニン、Ｔｈｒ＝スレオニン、Ｄａｂ＝２，４，－ジアミノブタン酸、Ｄａｐ＝２，３－ジアミノプロピオン酸、ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド、Ｏｒｎ＝２，５－ジアミノ吉草酸、ＤＩＰＥＡ＝Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、Ｆｍｏｃ＝９－フルオレニルメトキシカルボニル、Ｂｏｃ＝ｔ－ブチル－ブトキシカルボニル、ＨＡＴＵ＝１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロリン酸、ＰｙＢＯＰ＝ベンゾトリアゾール－１－イル－オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、ＨＯＡｔ＝１－ヒドロキシ－７－アザベンゾトリアゾール、ＮＭＭ＝Ｎ－メチルモルホリン、およびＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸。

特に明記されていない限り、これらの省略名は次のすべての例に適用される。

別段の記載がない限り、本明細書で単独または他の用語と組み合わせて使用される「アルキル」という用語は、直鎖または分岐鎖の飽和または不飽和の非環式炭化水素基を意味する。いくつかの実施形態では、アルキルは、１～１５、１～１３、１～１１、１～１０、１～８、１～６、１～５、１～４、１～３、１～２、２～１２、２～９、２～８、２～６、２～４、３～９、３～８、４～９、４～１５、６～１５、８～１５、１０～１５、または１、２または３個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態では、アルキルは飽和している。このようなアルキルの例としては、－メチル、－エチル、－ｎ－プロピル、－ｎ－ブチル、－ｎ－ペンチル、－ｎ－ヘキシル、－ｎ－ヘプチル、－ｎ－オクチル、－ｎ－ノニル、－ｎ－デシル、ｎ－ウンデシル、ｎ－ドデシル、ｎ－トリデシル、ｎ－テトラデシル、ｎ－ペンタデシル、－イソプロピル、－ｓｅｃ－ブチル、－イソブチル、－ｔｅｒｔ－ブチル、－イソペンチル、－ネオペンチル、２－メチルブチル、－イソヘキシル、２－メチルペンチル、３－メチルペンチル、２，２－ジメチルブチル、２，３－ジメチルブチル、２，２－ジメチルペンチル、２，３－ジメチルペンチル、３，３－ジメチルペンチル、２，３，４－トリメチルペンチル、３－メチルヘキシル、２，２－ジメチルヘキシル、２，４－ジメチルヘキシル、２，５－ジメチルヘキシル、３，５－ジメチルヘキシル、２，４－ジメチルペンチル、２－メチルヘプチル、３－メチルヘプチル、ｎ－ヘプチル、イソヘプチル、イソオクチル、イソノニル、イソデシル、イソデシル、イソドデシル、イソトリデシル、イソテトラデシル、およびイソペンタデシルなどが含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、アルキルは不飽和である。このようなアルキルの例としては、－ビニル、－アリル、－１－ブテニル、－２－ブテニル、－イソブチレニル、－１－ペンテニル、－２－ペンテニル、－３－メチル－１－ブテニル、－２－メチル－２－ブテニル、－２，３－ジメチル－２－ブテニル、１－ヘキシル、２－ヘキシル、３－ヘキシル、－アセチレニル、－プロピニル、－１－ブチニル、－２－ブチニル、－１－ペンチニル、－２－ペンチニル、－３－メチル－１－ブチニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。接頭辞「Ｃ_ｘ－Ｃｙ」は（ｘおよびｙはともに整数である）は、「アリール」という用語と組み合わせて使用される場合、アリール中の環式炭素原子数を意味する。

別段の記載がない限り、本明細書で単独でまたは他の用語と組み合わせて使用される「シクロアルキル」という用語は、単環または多環（例えば、縮合、架橋またはスピロ）の非芳香族炭化水素基を意味する。いくつかの実施形態では、シクロアルキルは飽和している。接頭辞「Ｃ_ｘ－Ｃｙ」（ｘおよびｙは整数である）は、「シクロアルキル」という用語と組み合わせて使用される場合、シクロアルキル中の環炭素原子数を意味する。

本明細書で使用される「アリール」という用語は、環状ヘテロ原子を含まない環状芳香族炭化水素基を意味する。アリールは、単環系および二環系を含む。アリールの例としては、フェニル、アズレニル、ヘプタレニル、ビフェニル、フルオレニル、フェナントレニル、アントラセニル、インデニル、インダニル、ペンタレニル、およびナフチルが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、アリールは、環内に６～２０個、６～１４個、６～１２個、または６～１０個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態では、アリールはフェニルまたはナフチルである。アリールは、芳香族炭素環縮合環系を含む。例として、インダニルおよびテトラヒドロナフチルが挙げられるが、これらに限定されない。接頭辞「Ｃ_ｘ－Ｃｙ」は（ｘおよびｙはともに整数である）は、「アリール」という用語と組み合わせて使用される場合、アリール中の環式炭素原子数を意味する。一実施形態では、アリールはフェニルである。

本明細書で単独でまたは他の用語と組み合わせて使用される用語「ピリジニル」は、別段の指示がない限り、１つの窒素原子を含む芳香族６員環を指す。

「ヘテロ原子」という用語は、酸素、窒素、硫黄、セレン、またはリンを含むことを意図する。いくつかの実施形態では、ヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄からなる群から選択される。

本明細書で単独または他の用語と組み合わせて使用される「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素、好ましくはフッ素、塩素および臭素、より好ましくはフッ素および塩素を意味する。

本明細書で使用される「アミノ酸」という用語は、α炭素と呼ばれる炭素原子に結合したアミノ基とカルボキシル基の両方を含む分子を指す。アミノ酸は天然に存在していてもよいし、非天然に存在していてもよい。天然に存在するアミノ酸には、Ａ、Ｒ、Ｎ、Ｃ、Ｄ、Ｑ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、ＹおよびＷの一文字略語として知られているタンパク質アミノ酸、並びにＰｈｅ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ｃｙｓ等の３文字略語が含まれるが、これらに限定されない。また、天然に存在しないアミノ酸も、アミノやカルボキシル基を介した結合によってペプチド鎖を形成したり、ペプチド鎖に含まれたりすることがある。非天然アミノ酸としては、Ｄａｂ、Ｄａｐ、およびＯｒｎが挙げられる。本発明は、同じアミノ酸のＬ型およびＤ型を組み込んだ化合物を含む、Ｌ型およびＤ型の両方のアミノ酸の使用を企図する。別段の記載がない限り、本発明で使用するために記載されるアミノ酸はＬ－アミノ酸である。

本明細書で使用される「薬学的に許容される塩」という用語は、別段の記載がない限り、本明細書に記載の化合物の薬学的に許容される有機塩または無機塩を指す。例えば、本明細書に記載の化合物はアミノ基を含むことがあり、したがってこのアミノ基を用いて酸付加塩を形成することができる。塩の例としては、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩（すなわち、１，１’－メチレンビス－（２－ヒドロキシ－３－ナフトエ酸））塩が挙げられる宇賀、これらに限定されない。薬学的に許容される塩は、酢酸イオン、コハク酸イオンまたは他の対イオンのような他の分子を含んでもよい。対イオンは、親化合物の電荷を安定化する任意の有機または無機部分であってもよい。さらに、薬学的に許容される塩は、その構造内に複数の荷電原子を有してもよい。複数の荷電原子が薬学的に許容される塩の一部である場合は、複数の対イオンを有してもよい。したがって、薬学的に許容される塩は、１つまたは複数の荷電原子および／または１つまたは複数の対イオンを有してもよい。

本明細書に記載の抗微生物化合物または組成物において使用される用語「治療有効量」は、治療中または治療予定の細菌感染に関連する症状の少なくとも緩和を達成するのに十分な量、または細菌の成長の減少を達成するのに十分な量、または他の治療薬または自然免疫学的除去に対する細菌の感受性を増加させるのに十分な量である。

本明細書に記載の抗菌性化合物または組成物において使用される用語「殺菌量」は、細菌を死滅させるのに十分な量である。

抗菌性化合物または組成物に関する本明細書中の用語「静菌量」は、細菌の増殖を遅らせるのに十分な量である。

本明細書で使用される用語「治療」および「治療する」は、動物の被験体（好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒト）の障害または疾患に対するあらゆる治療を含み、以下を含む。（ｉ）細菌の感染を阻害すること、例えば、細菌の増殖を阻止すること、（ｉｉ）細菌感染を軽減すること（例えば、感染症の重症度を軽減させること）、または（ｉｉｉ）細菌感染に起因する障害、例えば感染症の症状を緩和すること。本明細書で使用される用語「予防」および「予防する」は、動物の被験体（好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒト）における障害または疾患の予防または予防を含み、感染しやすいかもしれないが感染と診断されていない被験体における細菌感染の発生を防止することを含む。

５．２本発明のＤＮＡ－ＰＫ阻害剤化合物
ポリミキシンは、環状リポペプチドの一種で、大腸菌、緑膿菌、肺炎桿菌およびアシネトバクター・バウマンニーなどの主要なグラム陰性病原体に対して選択的に対抗する有効な抗菌剤である。副作用とより安全な代替品の導入により、それらは２０世紀７０年代に臨床使用から徐々に退出した。しかし、その後、既知の抗生物質に対するグラム陰性菌の耐性が急増したため、ポリミキシンが最前線の抗生物質として再び登場した。

ポリミキシンＢ（１）およびポリミキシンノナペプチド（１ａ）

構造上、ポリミキシンは、中心環状ヘプタペプチドコアと、Ｎ－アシル化脂質で終端する直鎖状のトリペプチドまたはジペプチドスペーサーとからなる（上記ポリミキシンＢ、１およびポリミキシンＢノナペプチド、１ａ参照）。これらは、脂質の長さと分岐、６位と７位の疎水性アミノ酸、および環状コアと環状テールに存在する非標準アミノ酸２，４－ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）のポリカチオン性によって定義される。２種類のポリミキシン、ポリミキシンＢおよびポリミキシンＥ（コリスチンとも呼ばれる）は、関連する神経および腎臓毒性があるものの、多剤耐性グラム陰性細菌感染症に臨床的に使用されており、慎重な投与と腎臓のモニタリングが必要である。

本発明者らは、ペプチドバックボーンを介して、Ｎ末端、６位、７位、またはいくつかの部位の組み合わせにおいて、新規な２－チオエチルエステル結合によってアンカーされた、特殊の脂質を含む、ポリミキシンＢおよびポリミキシンノナペプチド類似体のシリーズを調製した。これらの化合物はポリミキシンＢと同様の活性を有し、腎臓毒性が低いことを見出した。

したがって、一態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。

（ただし、
Ａは、
および
から選択され、
ここで、Ｒ^１は、Ｈまたは－Ｃ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルであり、ｎは１または２であり、Ｒ^５はＨまたはＣＨ_３であり、
Ｘ_１は、存在しないか、Ｄａｂであり、
Ｘ_２は、Ｔｈｒであり、
Ｘ_３は、Ｄａｂ、Ｄａｐ、またはＤ－Ｓｅｒからなる群から選択され、
Ｘ_４Ｇは、Ｄａｂ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、またはＤａｐからなる群から選択され、
Ｘ_６は、Ｄ－Ｐｈｅまたは
であり、
Ｘ_７は、Ｌｅｕまたは
であり、
ここで、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は、独立に、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリール、アリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルアリール、ピリジニル（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、および－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルピリジニルからなる群から選択され、
ここで、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリールおよびピリジルは、それぞれ独立に、ハロ、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキル、－Ｓ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、_－Ｓ（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、またはＮＨ－（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキルで任意に置換されており、
Ｒ^６およびＲ^７は、独立に、ＨまたはＣＨ_３から選択される。）

一実施形態では、ＸはＡ１である。一実施形態では、Ｘは、
である。

一実施形態では、Ａ１は
であり、ｎは１であり、Ｘ_１はＤａｂである。

一実施形態では、Ａ１は
であり、ｎは１であり、Ｘ_１は存在しない。

一実施形態では、ＡはＡ２である。一実施形態では、ＡはＡ２であり、ｎは１である。

一実施形態では、ＡはＡ３である。一実施形態では、Ａ３は、
である。

一実施形態では、Ｒ^２は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリール、アリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、および－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルアリールからなる群から選択される。

一実施形態では、Ｒ^１はＨである。

一実施形態では、Ｘ_１はＤａｂである。

一実施形態では、Ｘ_３はＤａｂである。

一実施形態では、Ｘ_４はＬｙｓまたはＤａｂである。

一実施形態では、Ｘ_６はＤ－Ｐｈｅである。

一実施形態では、Ｘ_７はＬｅｕである。

一実施形態では、ＡはＡ１であり、ｎは１であり、Ｒ^２は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルからなる群から選択され、Ｒ^１は、Ｈまたは－Ｃ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルであり、Ｘ_１はＤａｂであり、Ｘ_２はＴｈｒであり、Ｘ_３はＤａｂであり、Ｘ_４はＤａｂまたはＬｙｓであり、Ｘ_６はＤ－Ｐｈｅまたは
であり、ここで、Ｒ^３は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリール、アリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、および－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルアリールからなる群から選択され、好ましくは－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルであり、Ｘ_７は、Ｌｅｕまたは
であり、ここで、Ｒ^４は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリール、アリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、および－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルアリールからなる群から選択され、好ましくは、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルである。好ましくは、Ｒ^２は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキルである。

一実施形態では、ＡはＡ１であり、ｎは１であり、Ｒ^２は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルからなる群から選択され、Ｒ^１はＨであり、Ｘ_１は存在せず、Ｘ_３は、Ｄａｂ、ＤａｐまたはＤ－Ｓｅｒであり、Ｘ_４はＤａｂであり、Ｘ_６はＤ－Ｐｈｅであり、Ｘ_７はＬｅｕである。好ましくは、Ｒ^２は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキルである。

一実施形態では、ＡはＡ２であり、ｎは１であり、Ｒ^２は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルからなる群から選択され、Ｒ^１はＨであり、Ｘ_１はＤａｂであり、Ｘ_３はＤａｂであり、Ｘ_４はＤａｂまたはＬｙｓであり、Ｘ_６はＤ－Ｐｈｅであり、Ｘ_７はＬｅｕである。好ましくは、Ｒ^２は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキルである。

一実施形態では、ＡはＡ１であり、ｎは２であり、Ｒ^２は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルからなる群から選択され、Ｒ^１はＨであり、Ｘ_１はＤａｂであり、Ｘ_３はＤａｂであり、Ｘ_４はＤａｂまたはＬｙｓであり、Ｘ_６はＤ－Ｐｈｅであり、Ｘ_７はＬｅｕである。好ましくは、Ｒ^２は－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキルである。

別の態様では、本発明は、表１および表３のいずれかに定義されるポリミキシン類似体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物からなる群から選択される化合物を提供する。

一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、２９、４４、５９、６０、７６、および７９からなる群から選択され、

またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である。

本明細書に記載された本発明の任意の実施形態は、本明細書に記載された本発明の任意の態様に関する。本明細書に記載される実施形態および優先事項は、単独で、または本明細書に記載される本発明の任意の態様の任意の２つ以上と組み合わせて関連し得る。

本発明のポリミキシンＢおよびポリミキシンノナペプチド類似体は、固体ペプチド合成（ＳＳＰＳ）を使用して調製することができる。ペプチドバックボーンへの新規な２－チオエチルエステル結合を介して、１つまたは複数の脂質化システイン残基を構造に組み込む。

２－チオエチルエステル結合は、システイン残基の遊離メルカプタンと脂肪酸ビニルエステル上の末端ｓｐ^２炭素原子との間のラジカルによるメルカプタン－エン反応を利用して、発明者独自のＣｌｉｐＰＡ（ペプチドまたはアミノ酸上の（システイン脂質化）技術を用いて導入することができる（Ｙａｎｇ，Ｈａｒｒｉｓ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｂｒｉｍｂｌｅ，２０１６）（Ｗｒｉｇｈｔら，２０１３）。

ビニルエステル成分は、Ｍａｇｒｏｎｅら（Ｍａｇｒｏｎｅ，Ｃａｖａｌｌｏ，Ｐａｎｚｅｒｉ， Ｐａｓｓａｒｅｌｌａ， ＆ Ｒｉｖａ， ２０１０）が説明したように、酢酸水銀（Ｈｇ（ＯＡｃ）_２）および硫酸の存在下、対応するカルボン酸酢酸ビニルを還流することにより製造することができる。

調製されると、脂質化されたシステイン残基は、ポリミキシンＢまたはポリミキシンノナペプチド類似体を構成するペプチド鎖に組み込まれる。

化合物のＮ末端の脂質化Ｌ－システイン残基は、Ｄ－Ｃｙｓ、Ｄｅｓアミノ－Ｃｙｓ（スルフヒドリルプロパン酸）またはホモＣｙｓ（４－アミノ－４－スルファニルブタン酸）などのシステイン変異体で置き換えてもよい。

ポリミキシンペプチドフレームワークは、当技術分野で知られている任意のペプチド合成技術を使用して調製することができる。一実施形態では、ＦｍｏｃベースのＳＰＰＳは、線状ペプチドを組み立てるのに好ましく、その後、溶液中または固相上で環化される。

ＣｌｉｐＰＡ技術は、一連の新規ポリミキシンリポペプチド類似体を合成するために使用されている。合成の詳細については、実施例１～３で説明される。

実施例４に記載されているように、大腸菌に対する本発明のポリミキシン類似体をスクリーニングし、合成ポリミキシンＢ３の既知の活性スペクトルと比較した。実施例５では、選択されたポリミキシンＢ類似体の腎臓毒性を測定した。これらの細胞毒性を実施例６において評価した。実施例７では、本発明の化合物を、臨床的に関連する多剤耐性グラム陰性病原体のパネルに対して試験した。実施例８では、臨床的に関連する多剤耐性グラム陰性病原体のパネルを使用して、選択された化合物に対して表現型の抗菌薬感受性試験を行った。

要約すると、調製され試験された本発明の化合物の半分以上は、大腸菌に対して１～２μｇ／ｍＬのＭＩＣの抗菌活性を示した。注目すべきことに、この活性は、臨床的に使用されているＰＭＢ製剤とコリスチン製剤の両方で報告されている範囲内にある。また、カルバペネム耐性腸内細菌やカルバペネム耐性アシネトバクター・バウマニなど、臨床的に重要な病原体の種類に対する有望な活性も観察された。腎臓毒性によるポリミキシンの用量制限は、感染症の治療において重要な要素である。本発明者らは、驚くべきことに、本発明の化合物が一般に、腎臓小器官モデルにおいて高用量でほとんどまたは全く毒性を示さないことを見出した。

したがって、本発明の化合物は、微生物感染症の治療に利用できる、非常に望ましい特性を有する新規抗生物質を構成する。

５．３医薬組成物および本発明の化合物の使用
別の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物に関する。一実施形態では、組成物は医薬組成物である。

用語「薬学的に許容される担体」とは、一般的に安全で無毒であり、生物学的にも他の点においても好ましくない、式（Ｉ）の化合物とともに被験体に投与され得る担体、希釈剤または賦形剤を意味し、獣医およびヒトの医薬用途に適した担体を含む。

組成物に使用することができる薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤は、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ｄ－α－トコフェロールポリエチレングリコール１０００コハク酸などの自己乳化型薬物送達系（ＳＥＤＤＳ）、Ｔｗｅｅｎｓなどの薬物剤形の界面活性剤、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物などの緩衝物質、水、塩または電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイダルシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸エステル、ワックス、ポリエチレンポリオキシプロピレン－ブロックポリマー、ポリエチレングリコール、羊毛脂肪を含んでもよいが、これらに限定されない。α－、β－およびγ－シクロデキストリンのようなシクロデキストリン、または２－および３－ヒドロキシプロピル－３－シクロデキストリンを含むヒドロキシアルキルシクロデキストリンのような化学的に修飾された誘導体、または他の溶解された誘導体も、送達を増強するために有利に使用され得る。油溶液または油懸濁液は、長鎖アルコールの希釈剤または分散剤、またはカルボキシメチルセルロースまたは同様の分散剤を含むこともあり、これらは乳濁液および／または懸濁液などの薬学的に許容される剤形の製剤化に一般的に使用され得る。

一態様では、本発明は、被験体の細菌感染を治療または予防するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を提供する。

一態様では、本発明は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を対象に投与することを含む、被験体における細菌感染症を治療または予防する方法に関する。

一態様では、本発明は、被験体における細菌感染の治療または予防のための医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用に関する。

一実施形態では、細菌感染はグラム陰性菌感染である。

いくつかの実施形態では、グラム陰性菌感染は、１つまたは複数の属から選択される１つまたは複数の種によって引き起こされ得る：アシネトバクター、アクチノバチルス、バルトネッラ、ボルデテラ、ブルセラ、バークホルデリア、カンピロバクター、シアノバクテリア、エンテロバクター、エンビニア、エシェリヒア；フランシセラ、ヘリコバクター、ヘモフィルス、クレブシエラ、レジオネラ；モラクセラ、モルガネラ、ナイセリア、パスツレラ、プロテウス、プロビデンシア、シュードモナス、サルモネラ、セラティア、赤ブドウ球菌、ステノトロフォモナス、トレポネーマ、ビブリオ；、およびエルシニア。

特定の実施形態では、細菌感染は、緑膿菌、アシネトバクター・バウマンニー、肺炎桿菌、クレブシエラ・オキシトカ、ステノトロフォモナス・マルトフィリア、エンテロバクター・クロアカエ、シトロバクター・フロインディ、大腸菌、およびサルモネラ・エンテリカ．からなる群から選択される細菌によって引き起こされ得る。

特定の実施形態では、細菌感染は、カルバペネム耐性腸内細菌（ＣＲＥ）、拡張スペクトルβ－ラクタマーゼ（ＥＳＢＬ）産生腸内細菌、コリスチン耐性大腸菌、カルバペネム耐性アシネトバクター・バウマンニー（ＣＲＡＢ）またはカルバペネム耐性緑膿菌（ＣＲＰＡ）として表現型的に特徴付けられる分離株からなる群から選択される細菌によって引き起こされ得る。

ポリミキシンＢおよびコリスチン（ポリミキシンＥ）の使用がテストされ、一部の多剤耐性（ＭＤＲ）細菌感染症に対して有効であることが示されている。しかし、現在、これらは重篤な場合の最終防衛として使用されているが、腎毒性の副作用が観察されているため、その有用性は限られている。

腎臓毒性も現在ポリコリスチンの主な用量制限要素である。従って、改善された腎臓毒性特性を有する化合物は、感染症をより効果的に治療し、ポリコフィシン耐性の発現を阻害するために、より高用量の投与を可能にする。

したがって、一実施形態ではでは、本方法は、細菌感染の治療または予防のために、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を被験体に投与することを含み、ここで、この化合物は、ポリミキシンＢおよび／またはコリスチンよりも低い腎臓毒性を有する。本明細書では、腎臓毒性を評価するための例示的な方法が記載されており、当業者に知られている他の方法を含むことができる。

さらなる実施形態では、本発明は、血清中に存在する抗菌剤または宿主防御機構補体に対してグラム陰性菌を感作するための方法および化合物を提供する。本明細書で使用される「感作する」という用語は、感受性を高める、抗菌剤に対して感受性を高める、または細菌を感受性にするあらゆる能力を含むことを意図する。

本発明の治療方法では、本発明の医薬組成物は、単用量または多用量の処方として、あるいは単独の治療薬として、あるいは同時に、逐次的に、あるいは個別に、１つまたは複数の追加の治療薬と組み合わせて投与することができる。１つまたは複数の追加の治療薬は、治療すべき疾患または障害、または他の望ましい治療上の利点に依存する。当業者に知られているように、１つまたは複数の追加の治療薬は、特定の薬剤に対して指示されたまたは承認された治療量で使用することができる。
本発明の医薬組成物は、経口投与または胃腸外（局所、皮下、筋肉内および静脈内を含む）投与を含むがこれらに限定されない任意の選択的経路で被験体への投与を可能にするように配合されている。いくつかの実施形態では、この組成物は、経口投与、静脈内投与、皮下投与、筋内投与、経皮投与、腹膜内投与、または他の薬学的に許容可能な経路で投与するために配合される。例えば、この組成物は、期待される投与経路および標準的な薬学的慣行に応じて選択された適切な薬学的に受容可能な担体（賦形剤、希釈剤、助剤およびそれらの組み合わせを含む）を用いて調製することができる。例えば、粉末、液体、錠剤、カプセル剤として経口投与したり、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤として局所投与したりすることができる。適切な製剤は、必要に応じて、乳化剤、抗酸化剤、矯味剤または着色剤を含む追加の薬剤を含んでもよく、即時放出、遅延放出、修飾放出、持続放出、パルス放出または制御放出に適合させてもよい。

この組成物は、胃腸外経路を介して投与されてもよい。胃腸外剤形の例としては、活性剤の水溶液、等張食塩水または５％ブドウ糖、または他のよく知られた薬学的に許容される賦形剤が挙げられる。例えば、シクロデキストリンまたは当業者に公知の他の可溶化剤は、治療薬を送達するための薬物賦形剤として使用することができる。

経口投与に適した剤形の例としては、錠剤、カプセル剤、錠剤または類似の形態、またはシロップ、水溶液、エマルジョンなどの治療有効量の組成物を提供することができる任意の液体形態が挙げられるが、これらに限定されない。カプセルは、ゼラチンまたはセルロースのような任意の標準的な薬学的に許容される材料を含んでもよい。錠剤は、活性成分と固体担体および滑沢剤との混合物を圧縮することにより、従来の手順に従って製剤化することができる。固体担体の例としては、デンプンおよびシュガーベントナイが挙げられる。活性成分はまた、ラクトースまたはマンニトールのような結合剤、従来の充填剤および打錠剤を含むハードシェル錠剤またはカプセルの形態で投与されてもよい。

経皮投与に適した剤形の例としては、経皮パッチ、経皮包帯などが挙げられるが、これらに限定されない。

組成物の局所投与に適した剤形の例には、皮膚に直接適用されるか、またはパッド、パッチなどの中間体を介して適用されるかにかかわらず、任意のローション、スティック、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ゲルなどが含まれる。

組成物の座薬投与に適した剤形の例としては、身体の開口部に挿入される任意の固体剤形、特に直腸、膣および尿道に挿入される剤形が挙げられる。

組成物の注射に適した剤形の例としては、静脈内注射、皮下、真皮下および筋肉内投与または経口投与による単回または複数回投与などのボーラスによる送達が挙げられる。

組成物の蓄積投与に適した剤形の例としては、活性物質（複数可）が生分解性ポリマー、マイクロエマルション、リポソームのマトリックスに捕捉されているか、またはマイクロカプセル化されているペレットまたは固体形態が挙げられる。

組成物用の注入装置の例としては、所望の用量数または定常状態の投与を提供するための注入ポンプが挙げられ、埋め込み型薬物ポンプが挙げられる。組成物用の移植可能な注入装置の例には、活性物質（複数可）が生分解性ポリマーまたは合成ポリマー、例えばシリコーン、シリコーンゴム、シラスティックもしくは同様のポリマー内にカプセル化されるか、またはその全体に分散される任意の固体形態が含まれる。

組成物の経粘膜送達に適した剤形の例としては、活性成分に加えて当分野で知られている適切な担体を含む、浣腸剤、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡、噴霧溶液、粉末、および類似の製剤のためのデポジトリ溶液が挙げられる。このような剤形には、薬学的に許容される水性もしくは有機溶媒中の溶液および／または懸濁液、あるいはそれらの混合物および／または粉末を含む組成物を含む、組成物の吸入または吹送に適した形態が含まれる。組成物の経粘膜投与は、任意の粘膜を利用し得るが、一般に、鼻、頬、膣および直腸の組織を利用する。組成物の経鼻投与に適した製剤は、液体形態、例えば点鼻スプレー、点鼻薬で、またはポリマー粒子の水性もしくは油性溶液を含むネブライザーによるエアロゾル投与によって投与することができる。製剤は、水溶液、例えば生理食塩水、ベンジルアルコールまたは他の適切な保存剤、生物学的利用能を高めるための吸収促進剤、フルオロカーボン、および／または当技術分野で公知の他の可溶化剤または分散剤を使用する溶液として調製され得る。

組成物の口腔内または舌下投与に適した剤形の例としては、錠剤、錠剤などが挙げられる。組成物の眼科投与に適した剤形の例としては、薬学的に受容可能な水性または有機溶媒中の溶液および／または懸濁液を含むインサートおよび／または組成物が挙げられる。

組成物の配合例は、Ｓｗｅｅｔｍａｎ， Ｓ． Ｃ． （Ｅｄ．）． Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ． 完全な医薬品リファレンス，第３３版，製薬プレス，シカゴ， ２００２， ２４８３ ｐｐ．； Ａｕｌｔｏｎ， Ｍ． Ｅ． （Ｅｄ．） Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ． 剤形設計の科学． Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ， Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ， ２０００， ７３４ ｐｐ．； およびＡｎｓｅｌ， Ｈ． Ｃ， Ａｌｌｅｎ， Ｌ． Ｖ． およびＰｏｐｏｖｉｃｈ， Ｎ． Ｇ． 医薬品の剤形および薬物送達系，第７版．， Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ １９９９， ６７６ ｐｐに記載されている。薬物送達系の製造のための賦形剤は、当業者に知られている種々の出版物、例えばＫｉｂｂｅ、Ｅ．Ｈ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ、第３版、アメリカ薬物協会、ワシントン、２０００年、６６５ページなどに記載されている。ＵＳＰはまた、錠剤またはカプセルに配合されたものを含む、改良された放出経口剤形の例を提供する。例えば、米国薬局方２３／国家処方集１８、米国薬事局条約機構、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ ＭＤ，１９９５（以下「ＵＳＰ」という）を参照すると、徐放性および遅延放出性の錠剤およびカプセルの薬物放出能を決定するための特定の試験についても記述されている。米国薬局方の徐放性および遅延放出性物品の薬物放出試験は、投与単位の薬物溶出度と経過試験時間に基づいている。様々なテスト機器やプログラムの説明はＵＳＰにある。ＦＤＡは、徐放性剤形の分析に関するさらなるガイドラインを提供している（業界向けのガイダンスを参照してください。徐放性経口剤形：ｉｎ ｖｉｔｒｏ／ｉｎ ｖｉｖｏ相関関係の開発、評価、および応用。メリーランド州ロックビル：食品医薬品局医薬品評価研究センター、１９９７年参照）。

本明細書に記載される剤形は、治療される対象に対する単位投与量として使用するのに適した物理的に別個の単位の形態であってもよく、各単位は、所望の治療効果を生み出すように計算された所定量の活性物質を含む。剤形単位は、約０．１から約２０００ｍｇの各活性成分を含み得る。

医薬組成物中の活性成分の用量レベルは、患者に対して毒性（有効量）がなく、特定の患者に必要な治療効果を効果的に達成するための活性成分量、組成物、および投与方法を提供するために変化させてもよい。細胞培養試験および動物研究から得られたデータを用いて、ヒト被験体に対する適切な投与範囲を決定することができる。

選択される用量レベルは、使用される特定の組成物の活性、投与経路、投与時間、使用される本発明の特定の化合物の排泄率、使用される特定の組成物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物および／または材料、治療される患者の年齢、性別、体重、状態、一般的な健康状態および既往歴、ならびに医学分野で公知の類似因子を含む種々の薬物動態因子に依存する。一般的に、１日当たりの量またはプログラムは、本発明の化合物の体重１ｋｇあたり約０．０１ｍｇ～約２０００ｍｇの範囲内であるべきである。

別の態様では、本発明は、細菌を殺菌量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物と接触させることを含む、細菌を死滅させる方法を提供する。

本開示の文脈において、細菌を「殺滅させる」とは、本明細書に記載された本発明の化合物に曝露された細菌細胞の集団中の残存する細菌の数が、処理されていない集団中の生存細菌の数と比較して減少することを意味する。

いくつかの実施形態では、細菌の「殺滅」は、抗菌性組み合わせの存在下での培養中の設定時点での生存細菌細胞数の減少を測定することによって決定される（「死滅時間曲線」）。

別の態様では、少なくとも１つの細菌種の増殖を阻害する方法であって、該細菌種を、制菌量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物と接触させることを含む方法が提供される。

本開示の文脈において、少なくとも１つの細菌種の「増殖を「阻害する」とは、細菌の増殖を刺激する条件下（抗菌性の組み合わせがない場合）において、細菌の存在数および／または細菌の存在または感染の持続時間が検出可能な増加を示さないことを意味する。

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの細菌種の「阻害された増殖」は、６００_ｎｍにおける、本明細書に記載された抗菌性組成物または組成物で処理された細菌培養物との経時的光学濃度を比較することによって決定される。いくつかの実施形態では、処理された培養物の光学密度が対照培養物と比較して光学密度の１０％未満である場合に阻害が観察される。

上記の態様では、一実施形態ではでは、細菌はグラム陰性菌である。

６．実施例
一般的な方法と材料
すべての試薬は試薬グレードとして購入し、さらに精製せずに使用する。反応に使用する溶媒は、使用前に標準手順に従って蒸留される。

代替の一般的な方法および方法が示されていない限り、上記の一般的な方法および方法は、以下のすべての例に適用される。

実施例１：ポリミキシンＢ類似体を調製するためのビルディングブロックの合成
システインとビニルエステル（ＣｌｉｐＰＡ）とのメルカプタン－エン反応により脂質化アミノ酸ビルディングブロックを調製し、Ｓ－脂質化Ｎα－Ｆｍｏｃアミノ酸を得た。Ｆｍｏｃ ＳＰＰＳに組み込むための脂質化システイン残基を調製するためのこの反応の使用は、Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ．， ２０１６ および Ｗｒｉｇｈｔ， ｅｔ ａｌ．， ２０１３に以前に記載されている。

この方法を使用して、短鎖または中鎖脂質（３ａ－３ｃ）、分岐脂質（３ｄ）、および芳香族脂質（３ｅおよび３ｆ）を組み込んだ６つの多様な脂質化システインを調製した（スキーム１）。

スキーム１

すべての化合物は、中程度（４１％）から優れた（９５％）収率で得られ、ＳＰＰＳへの組み込みの準備のためにＦｍｏｃ保護されたＳ－脂質化システインを大量に提供するために、標準シリカゲルラピッドクロマトグラフィーによって効率的に精製される。

（Ｒ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ－３－（（２－（プロピオニルオキシ）エチル）チオ）プロパン酸（３ａ）：
［α］
＋ １４．８ （ｃ ０．０１４， ＣＨＣｌ_３）； ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｈ ＝ １．１２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２， ３Ｈ， ＣＨ_３， Ｈ－１）， ２．３２ （ｑ， Ｊ ＝ ７．６， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－２）， ２．７８ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－６）， ３．０４－３．１７ （ｍ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－８）， ４．２３ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－５）， ４．４２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－１３）， ４．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－１４）， ５．７４ （ｄ， Ｊ ＝ １．８ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－９）， ７．３１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１７ ＋ Ｈ－２４）， ７．３９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１８ ＋ Ｈ－２３）， ７．６０ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１６ ＋ Ｈ－２５）， ７．７５ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１９ ＋ Ｈ－２２）。^１３Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｃ ＝ ９．０ （ＣＨ_３， Ｃ－１）， ２７．４ （ＣＨ_２， Ｃ－２）， ３１．２ （ＣＨ_２， Ｃ－６）， ３４．４ （ＣＨ_２， Ｃ－８）， ４７．１ （ＣＨ， Ｃ－１４）， ５３．６ （ＣＨ， Ｃ－９）， ６３．２ （ＣＨ_２， Ｃ－５）， ６７．４ （ＣＨ_２， Ｃ－１３）， １２０．０ （２ × ＣＨ， Ｃ－１７ ＋ Ｃ－２４）， １２７．１ （２ × ＣＨ， Ｃ－１８ ＋ Ｃ－２３）， １２７．８ （２ × ＣＨ， Ｃ－１９ ＋ Ｃ－２２）， １４１．３ （２ × Ｃ_， Ｃ－２０ ＋ Ｃ－２１）， １４３．６ （Ｃ， Ｃ－１５）， １４３．７ （Ｃ， Ｃ－２６）， １５６．０ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－１１）， １７４．６ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－３）， ｎｏｔ ｏｂｓｅｒｖｅｄ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－２７）。ＨＲＭＳ－ＥＳＩ： ｍ／ｚ ［Ｍ ＋ Ｎａ］^＋ ｃａｌｃｄ ｆまたは［Ｃ_２３Ｈ_２５ＮＯ_６Ｓ ＋ Ｎａ］^＋ ４６６．１２９５ ； ｆｏｕｎｄ ４６６．１２９７．

（Ｒ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ－３－（（２－（ブチリルオキシ）エチル）チオ）プロパン酸（３ｂ）：
［α］
＋ ８．１ （ｃ ０．０１９， ＣＨＣｌ_３）； ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｈ ＝ ０．９３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ３Ｈ， ＣＨ_３， Ｈ－１）， １．６３ （ｄｑ， Ｊ ＝ ７．２， １４．８ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－２）， ２．２９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－３）， ２．７８ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－７）， ３．０４－３．２２ （ｍ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－９）， ４．２３ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－６）， ４．４２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－１４）， ４．６６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－１５）， ５．７２ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－１０）， ６．０７ （ＢｒＳ， １Ｈ， ＮＨ）， ７．３１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１８ ＋ Ｈ－２５）， ７．４０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１９， Ｈ－２４）， ７．６０（ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１７ ＋ Ｈ－２６）， ７．７５ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２０ ＋ Ｈ－２３）。^１３Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｃ ＝ １３．６ （ＣＨ_３， Ｃ－１）， １８．３ （ＣＨ_２， Ｃ－２）， ３１．３ （ＣＨ_２， Ｃ－７）， ３４．４ （ＣＨ_２， Ｃ－９）， ３６．０ （ＣＨ_２， Ｃ－３）， ４７．１ （ＣＨ， Ｃ－１５）， ５３．５ （ＣＨ， Ｃ－１０）， ６３．１ （ＣＨ_２， Ｃ－６）， ６７．４ （ＣＨ_２， Ｃ－１４）， １２０．０ （２ × ＣＨ， Ｃ－１７ ＋ Ｃ－２６）， １２５．１ （２ × ＣＨ， Ｃ－１８ ＋ Ｃ－２５）， １２７．１ （２ × ＣＨ， Ｃ－１９ ＋ Ｃ２４）， １２７．８ （２ × ＣＨ， Ｃ－２０ ＋ Ｃ－２３）， １４１．３ （２ × Ｃ， Ｃ－２１ ＋ Ｃ－２２）， １４３．６ （２ × Ｃ， Ｃ－１６ ＋ Ｃ－２７）， １５６．０ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－１２）， １７３．８ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－４）， １７４．１ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－２８）。ＨＲＭＳ－ＥＳＩ： ｍ／ｚ ［Ｍ ＋ Ｎａ］^＋ ｃａｌｃｄ ｆまたは［Ｃ_２３Ｈ_２５ＮＯ_６Ｓ ＋ Ｎａ］^＋ ４８０．１４５１ ； ｆｏｕｎｄ ４８０．１４３４．

（Ｒ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ－３－（（２－（ウンデカノイルオキシ）エチル）チオ）プロパン酸 （３ｃ）：
^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｈ ＝ ０．８７ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ４Ｈ， ＣＨ_３ ＋ ＣＨ ｏｆ ＣＨ_２， Ｈ－１ ＋ Ｈ－２）， ０．９３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ ｏｆ ＣＨ_２， Ｈ－２）， １．２４ （ｓ， １０Ｈ， ５ × ＣＨ_２， Ｈ－４ ＋ Ｈ－５ ＋ Ｈ－６ ＋ Ｈ－７ ＋ Ｈ－８）， １．５８－１．６４ （ｍ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－３）， ２．２９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－９）， ２．７８ （ｔ， Ｊ ＝ ６．０， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－１３）， ３．０４－３．１６ （ｍ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－１５）， ４．２２ （ｑ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－１２）， ４．４２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－２０）， ４．６６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－２１）， ５．５４ （ＢｒＳ， １Ｈ， ＮＨ）， ５．７１ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－１６）， ７．３１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２４ ＋ Ｈ－３１）， ７．４０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２５ ＋ Ｈ－３０）， ７．６０ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２３ ＋ Ｈ－３２）， ７．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２６ ＋ Ｈ－２９）。^１３Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｃ ＝ １４．１ （ＣＨ_３， Ｃ－１）， １８．３ （ＣＨ_２， Ｃ－２）， ２２．６ （ＣＨ_２， Ｃ－１３）， ２４．９ （ＣＨ_２， Ｃ－１５）， ２９．１ （ＣＨ_２， Ｃ－３）， ２９．２ （ＣＨ_２， Ｃ－４）， ２９．４ （ＣＨ_２， Ｃ－５）， ３１．２ （ＣＨ_２， Ｃ－６）， ３１．８ （ＣＨ_２， Ｃ－７）， ３４．２ （ＣＨ_２， Ｃ－８）， ３４．４ （ＣＨ_２， Ｃ－９）， ４７．１ （ＣＨ， Ｃ－２１）， ５３．５ （ＣＨ， Ｃ－１６）， ６３．１ （ＣＨ_２， Ｃ－１２）， ６７．４ （ＣＨ_２， Ｃ－２０）， １２０．０ （２ × ＣＨ， Ｃ－２３ ＋ Ｃ－３２）， １２５．１ （２ × ＣＨ， Ｃ－２４ ＋ Ｃ－３１）， １２７．１ （２ × ＣＨ， Ｃ－２５ ＋ Ｃ－３０）， １２７．８ （２ × Ｃｈ， Ｃ－２６ ＋ Ｃ－２９）， １４１．３ （２ × Ｃ， Ｃ－２７ ＋ Ｃ－２８）， １４３．６ （２ × Ｃ， Ｃ－２２ ＋ Ｃ－３３）， １５５．９ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－１８）， １６１．６ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－３４）， １７４．１ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－１０）。ＨＲＭＳ－ＥＳＩ： ｍ／ｚ ［Ｍ ＋ Ｎａ］^＋ ｃａｌｃｄ ｆまたは［Ｃ_３０Ｈ_３９ＮＯ_６Ｓ ＋ Ｎａ］^＋ ５６４．２３９０ ； ｆｏｕｎｄ ５６４．２３８１

（Ｒ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ－３－（（２－（ピバロイルオキシ）エチル）チオ）プロパン酸 （３ｄ）：
［α］
＋ ６．４ （ｃ ０．０２， ＣＨＣｌ_３）； ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｈ ＝ １．１９ （ｓ， ９Ｈ， ３ × ＣＨ_３， ｔ－Ｂｕ）， ２．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．８ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－６）， ３．０４－３．１６ （ｍ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－８）， ４．１２ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ ｏｆ ＣＨ_２， Ｈ－５）， ４．２２ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ ｏｆ ＣＨ_２， Ｈ－５）， ４．４１ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－１３）， ４．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－１４）， ５．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－９）， ７．３１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１７ ＋ Ｈ－２４）， ７．３９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１８ ＋ Ｈ－２３）， ７．６０ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１６ ＋ Ｈ－２５）， ７．７５ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１９ ＋ Ｈ－２２）。^１３Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｃ ＝ ２７．１ （３ × ＣＨ_３， ｔ－Ｂｕ）， ３１．３ （ＣＨ_２， Ｃ－６）， ３４．４ （ＣＨ_２， Ｃ－８）， ３８．８ （Ｃ， Ｃ－２）， ４７．０ （ＣＨ， Ｃ－１４）， ５３．６ （ＣＨ， Ｃ－９）， ６３．１ （ＣＨ_２， Ｃ－５）， ６７．４ （ＣＨ_２， Ｃ－１３）， １２０．０ （２ × ＣＨ， Ｃ－１６ ＋ Ｃ－２２）， １２５．０ （ＣＨ， Ｃ－１７）， １２５．１ （ＣＨ， Ｃ－２４）， １２７．１ （２ × ＣＨ， Ｃ－１９ ＋ Ｃ－２２）， １２７．７ （２ × ＣＨ， Ｃ－１８ ＋ Ｃ－２３）， １４１．３ （２ × Ｃ， Ｃ－３０ ＋ Ｃ－３１）， １４３．６ （Ｃ， Ｃ－１５）， １４３．７ （Ｃ， Ｃ－２６）， １５５．９ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－１１）， １７４．２ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－３）， １７８．６ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－２７）。ＨＲＭＳ－ＥＳＩ： ｍ／ｚ ［Ｍ ＋ Ｎａ］^＋ ｃａｌｃｄ． ｆまたは［Ｃ_３１Ｈ_３３ＮＯ_６Ｓ ＋ Ｎａ］^＋ ４９４．１６０８ ； ｆｏｕｎｄ ４９４．１５９６．

（Ｒ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ－３－（（２－（ベンゾイルオキシ）エチル）チオ）プロパン酸 （３ｅ）：
［α］
＋ ９．７ （ｃ ０．０１， ＣＨＣｌ_３）； ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｈ ＝ ２．９２ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－１０）， ３．０９－３．２１ （ｍ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－１２）， ４．２２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ ｏｆ ＣＨ_２， Ｈ－９）， ４．４０－４．６９ （ｍ， ３Ｈ， ＣＨ ｏｆ ＣＨ_２ ＋ ＣＨ_２， Ｈ－９ ＋ Ｈ－１７）， ４．６８ （ｔ， Ｊ ＝ ４．８， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－１８）， ５．２３ （ＢｒＳ， １Ｈ， ＮＨ）， ５．７４ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－１３）， ７．２９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２２ ＋ Ｈ－２７）， ７．３８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２１ ＋ Ｈ－２８）， ７．４１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－４ ＋ Ｈ－２）， ７．５４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ， Ｈ－３）， ７．５９ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２０ ＋ Ｈ－２９）， ７．７４ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × Ｈ， Ｈ－２３ ＋ Ｈ－２６）， ８．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × Ｈ， Ｈ－１ ＋ Ｈ－５）。^１３Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｃ ＝ ３１．３ （ＣＨ_２， Ｃ－１０）， ３４．５ （ＣＨ_２， Ｃ－１２）， ４７．１ （ＣＨ， Ｃ－１８）， ５３．６ （ＣＨ， Ｃ－１３）， ６３．７ （ＣＨ_２， Ｃ－９）， ６７．３ （ＣＨ_２， Ｃ－１７）， １１１．０ （２ × ＣＨ， Ｃ－２０ ＋ Ｃ－２９）， １２５．１ （Ｃ， Ｃ－６）， １２７．１ （２ × ＣＨ， Ｃ－２３ ＋ Ｃ－２６）， １２７．７ （２ × ＣＨ， Ｃ－２２ ＋ Ｃ－２７）， １２８．４ （２ × ＣＨ， Ｃ－４ ＋ Ｃ－２）， １２９．７ （２ × ＣＨ， Ｃ－１ ＋ Ｃ－５）， １３３．２ （ＣＨ， Ｃ－３）， １４１．３ （２ × Ｃ， Ｃ－２４ ＋ Ｃ－２５）， １４３．６ （２ × Ｃ， Ｃ－１９ ＋ Ｃ－３０）， １５５．９ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－１５）， １７１．３ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－７）， １７３．７ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－３１）。ＨＲＭＳ－ＥＳＩ： ｍ／ｚ ［Ｍ ＋ Ｎａ］^＋ ｃａｌｃｄ ｆまたは［Ｃ_２７Ｈ_２５ＮＯ_６Ｓ ＋ Ｎａ］^＋ ５１４．１２９５ ； ｆｏｕｎｄ ５１４．１２８３．

（Ｒ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ－３－（（２－（（４－（ｔｅｒｔ－－ブチル）ベンゾイル）オキシ）エチル）チオ）プロパン酸（３ｆ）：
［α］
＋ １２．４ （ｃ ０．０１７， ＣＨＣｌ_３）； ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｈ ＝ １．３１ （ｓ， ９Ｈ， ３ × ＣＨ_３， ｔ－Ｂｕ）， ２．９１ （ｄ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－１０）， ３．１６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．６， １５．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ＣＨ_２， Ｈ－１２）， ４．２２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ ｏｆ ＣＨ_２， Ｈ－９）， ４．４１－４．４７ （ｍ， ３Ｈ， ＣＨ ｏｆ ＣＨ_２ ＋ＣＨ_２， Ｈ－９ ＋ Ｈ－１７）， ４．６８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－１８）， ５．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ， ＣＨ， Ｈ－１３）， ７．３４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２１ ＋ Ｈ－２８）， ７．３８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２２ ＋ Ｈ－２７）， ７．４２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－４ ＋ Ｈ－２）， ７．５９ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２０ ＋ Ｈ－２９）， ７．７４ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－２３ ＋ Ｈ－２６）， ７．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ， ２ × ＣＨ， Ｈ－１ ＋ Ｈ－５）。^１３Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３）： δ_Ｃ ＝ ３１．０ （３ × ＣＨ_３， ｔ－Ｂｕ）， ３１．３ （ＣＨ_２， Ｃ－１０）， ３４．５ （Ｃ， Ｃ－３２）， ３５．０ （ＣＨ_２， Ｃ－１２）， ４７．１ （ＣＨ， Ｃ－１８）， ５３．６ （ＣＨ， Ｃ－１３）， ６３．６ （ＣＨ_２， Ｃ－９）， ６７．３ （ＣＨ_２， Ｃ－１７）， １１９．９ （２ × ＣＨ， Ｃ－２０ ＋ Ｃ－２９）， １２５．１ （２ × ＣＨ， Ｃ－２１ ＋ Ｃ－２８）， １２５．１ （Ｃ， Ｃ－６）， １２５．４ （２ × ＣＨ， Ｃ－２３ ＋ Ｃ－２６）， １２７．０ （２ × ＣＨ， Ｃ－２２ ＋ Ｃ－２７）， １２７．１ （２ × ＣＨ， Ｃ－２ ＋ Ｃ－４）， １２９．５ （２ × ＣＨ， Ｃ－１ ＋ Ｃ－５）， １４１．２ （２ × Ｃ， Ｃ－２４ ＋ Ｃ－２５）， １４３．７ （２ × Ｃ， Ｃ－１９ ＋ Ｃ－３０）， １５６．８ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－１５）， １６６．５ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－７）， １７１．３ （Ｃ＝Ｏ， Ｃ－３１）。ＨＲＭＳ－ＥＳＩ： ｍ／ｚ ［Ｍ ＋ Ｎａ］^＋ ｃａｌｃｄ ｆまたは［Ｃ_３１Ｈ_３３ＮＯ_６Ｓ ＋ Ｎａ］^＋ ５７０．１９２１ ； ｆｏｕｎｄ ５７０．１９１７．
実施例２：モノ－Ｓ－脂質化ポリミキシンおよびビス－Ｓ－脂質化ポリミキシンの合成（２３～６０）

化合物の合成（２３～６０）は、ポリミキシンとＥ２の合成（Ｘｕら，２０１５）に基づいており、この合成の変形例は図１に示される。合成は、アミノ基の側鎖固定を介したＦｍｏｃ－Ｄａｂ－Ｏ－アリルによる塩化２－クロロトリイルＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ樹脂の官能化から始まり、０．３ｍｍｏｌ／ｇの負荷で４を得た。次いで、Ｆｍｏｃ除去のためにＤＭＦ中の２０％ピペリジンを使用する標準的なＦｍｏｃ ＳＰＰＳサイクルによって、Ｆｍｏｃアミノ酸を導入した（２×５分）。脂質化ビルディングブロックを含む、入ってくるＦｍｏｃアミノ酸のカップリングをＨＡＴＵ／ＤＩＰＥＡで２０分間行った（図１）。樹脂結合ペプチド５ａ／５ｂを提供し、これをＳ－脂質化されたビルディングモジュール（３ａ～３ｆ）と結合させて６を得た。その後、Ｎ－末端Ｆｍｏｃ保護基をＢｏｃ基に置換することにより、ヒドラジンを用いてＬｙｓ－４／Ｄａｂ－４からＤｄｅ基を除去する際の潜在的な副反応を回避することができ、Ｆｍｏｃ基はこれらの条件に対して不安定である。線状樹脂結合ペプチド上のＬｙｓ－４／Ｄａｂ－４をＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨでアシル化して７とし、ＰｈＳｉＨ_３の存在下、Ｄａｂ－９上のアリルエステルをＰｄ（ＰＰｈ_３）_４で除去して８とした。

Ｔｈｒ－１０上のＦｍｏｃ基は標準的なＦｍｏｃ脱ブロック条件によって除去され、環状ペプチドはＰｙＢＯＰおよびＨＯＡｔを使用した樹脂上の大環状化によって得られ、遊離アミンの不在についてはカイザーテストによって簡単にモニターされた。最後に、遊離環状ペプチドを樹脂から放出し、同時に全体的な側鎖保護基を除去した。環状リポペプチドを回収し、ＨＰＬＣにより精製し、ＬＣ－ＭＳにより構造を確認した。最終生成物の収率は、初期樹脂負荷量に対して１．１％～２６％であり、多くの場合数ｍｇが得られた。

ビス脂質化化合物（３５～４２および４９～５７）については、Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－ＯＨまたはＦｍｏｃ－Ｄ－Ｐｈｅ－ＯＨを、適切な脂質化Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓビルディングブロック３ａから３ｆまたはそれらのＦｍｏｃ－Ｄ－Ｃｙｓ脂質化対応体で置換されていることを除いて、図１に示す方法と同様の方法が用いられた。実施例１によれば、Ｆｍｏｃ－Ｄ－Ｃｙｓ－ＯＨを使用して、Ｆｍｏｃ－－Ｄ－Ｃｙｓ脂質化のビルディングブロックを調製し、通常のスペクトル法によって特徴付けた。ビス脂質化合物（４３－４８）については、直交保護戦略を採用した手順を採用した（図２）。Ｎ末端のＳ－脂質化ビルディングブロックに代えてＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ（Ｔｒｔ＝トリフェニルメチル）を用い、Ｌｅｕ－７に代えてＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ａｃｍ）－ＯＨ（Ａｃｍ＝アセトアミドメチル）を用い、樹脂結合９を得た。Ｎ末端Ｆｍｏｃ基をＢｏｃに置換し、Ｄａｂ４上のＤｄｅ保護基を除去し、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）でアシル化すると、１０を得た。Ｔｈｒ－１０からはＦｍｏｃを除去し、Ｄａｂ－９からはアリルを除去し、樹脂環化および樹脂開裂により１２をえた。標準的なＣｌｉｐＰＡ反応条件を用いてＮ－末端システインをＳ－脂質化し、モノ脂質化ポリコフィシン１２を得た。Ｃｙｓ－７上のＡｃｍ基をＡｇ（ＯＡｃ）で除去して遊離メルカプタンを発現させ、これをＳ－脂質化してビス脂質化ポリミキシン（４３～４８）を製造した。Ｃｙｓの代わりに組み込まれ得る他のチオールシャンクには、ＬおよびＤ－Ｃｙｓ由来のチオールシャンク、例えば３－メルカプト－Ｄ－バリン（ペニシラミン）が含まれる。

Ｎ末端に異なるチオールハンドルを含む、および／または環外領域（^１－Ｔｈｒ^２－Ｄａｂ^３）に異なるアミノ酸が存在するモノ脂質化ポリミキシン（５８～６０）の場合、図３に示すような通常の中間体１６を調製し、所望の環外アミノ酸を組み込み、Ｎ末端チオール含有アミノ酸またはメルカプト酸を組み込んだ後、溶液でＳ脂質化する（図３）ことがより便利である。Ｃｙｓの代わりに組み込むことができる他のチオールハンドルには、３－メルカプト－Ｄ－バリン（ペニシラミン）などの ＬおよびＤ－Ｃｙｓに由来するものが含まれる。

表１．ポリミキシンＢ Ｓ－リポペプチドの構造

表１において、ＭＰＡ＝２－メルカプトアセチル、ｈ－Ｃｙｓ＝ｈｉｇｈ－Ｌ－Ｃｙｓである。表１において、基「Ｚ」とは、Ｄａｂ_１に結合したカルボキシルと側鎖（式（ＩＩ）で示される）が結合したα－炭素原子を意味する。ここで、Ｚは式（ＩＩ）中の「Ｃｙｓ」であり、Ａは式（Ｉ）中のＡ１とｎ＝１である。式（ＩＩ）において、Ｃｙｓのアミン基はＪである。ここで、Ｚは式（ＩＩ）中のＭＰＡ、Ａは式（Ｉ）中のＡ２である。ここで、式（ＩＩ）においてＺはｈ－Ｃｙｓ、式（Ｉ）においてＡはＡ２、ｎ＝１である。言い換えれば、式（Ｉ）におけるＡは、
式（２）における
に相当する。

表２．Ｓ－脂質化ポリコフィシンの質量分析データ
実施例３：モノ脂質化ポリミキシンノナペプチドの合成（６１～１０４）

ポリミキシンノナペプチドは、Ｄａｂ－１アミノ酸を欠くポリミキシンＢの短縮型である。Ｎ末端に異なるチオールハンドルを含む、および／または環外領域（Ｄａｂ^１－Ｔｈｒ^２－Ｄａｂ^３）に異なるアミノ酸が存在する化合物（６１～６４および８１～８８）については、上記ポリムコフィシンの合成のために、図３に示すような共通の中間体１６を調製することがより便利である。

ポリミキシンＢのＳ－脂質化類似体の合成には、Ｄａｎｎｅｒらによって報告されているような改変された化学酵素法が用いられている（図４）。簡単に説明すると、市販の硫酸ポリミキシンＢをパパインによって酵素的に脱脂して、中間体２０を得た。これは、Ｎ末端トレオニンには影響を与えずに、残りのＤａｂ残基がＢｏｃ保護されている（化合物２１）。システイニルチオールハンドルは、Ｌ－ＣｙｓまたはＤ－Ｃｙｓのチアゾリジン誘導体を使用してペプチドのＮ末端に導入された。これにより、導入中の潜在的なラセミ化が減少した。Ｂｏｃは、ＣｌｉｐＰＡ反応により、ＬまたはＤ－Ｃｙｓハンドルを含むＳ－脂質化ポリミキシンＢノナペプチド（６５～８０、８９～１０４）を直接産生するシステイン化の原因となるポリミキシンＢノナペプチド２２ａ／ｂを脱保護した。

表３．ポリミキシンＢ Ｓ脂質化ノナペプチドの構造

表３において、ＭＰＡ＝２－メルカプトアセチル、ｈ－Ｃｙｓ＝ｈｉｇｈ－Ｌ－Ｃｙｓである。表３において、基「Ｚ」とは、Ｄａｂ_１に結合したカルボキシルと側鎖（式（ＩＩＩ）で示される）が結合したα－炭素原子を意味する。ここで、Ｚは式（ＩＩＩ）中の「Ｃｙｓ」であり、Ａは式（Ｉ）中のＡ１およびｎ＝１である。Ｃｙｓのアミン基は、式（ＩＩＩ）中、Ｊで表される。ここで、Ｚは式（ＩＩＩ）中のＭＰＡ、Ａは式（Ｉ）中のＡ２である。ここで、式（ＩＩＩ）においてＺはｈ－Ｃｙｓであり、式（Ｉ）においてＡはＡ２であり、ｎ＝１である。言い換えれば、式（Ｉ）におけるＡは、
式（３）における
に相当する。

表４．Ｓ－脂質化ポリミキシンノナペプチドの質量分析データ
実施例４：本発明の化合物の抗菌試験

一組のグラム陰性菌に対して、実施例２および３で調製された８１の化合物すべてをスクリーニングし、細菌の増殖を阻害する能力を評価した。このデータは表５を参照する。中央値が示されている。

一般的に、Ｓ－脂質化ポリミキシン類似体の多くは、大腸菌に対して優れた活性を維持し、ポリミキシンＢ３（０．２５μｇ／ｍｌ）または１つの２倍希釈以内と同等の効力を示すことが判明した。Ｌｙｓ（２３～２８）をＤａｂ（２９～３４））に置換することによるポリミキシン大環状分子の拡張は、抗菌活性においてほとんど利点をもたらさなかったが、一般に忍容性は良好であったが、アシネトバクター・バウマニおよび緑膿菌にとっては有害であった。短いアルキル鎖または芳香族基によるＳ－脂質化は、ほとんどの種（２６－２９、３２～３４、３８～４０および４３～４８）に対して最も強力な類似体を提供し、すべて芳香族脂質を含む３３、３４、および４７はより強力であり、コリスチン耐性大腸菌ＡＴＣＣ ＭＳ８３４５に対しては、ポリミキシンよりも優れていた。

Ｎ末端のみ、またはＮ末端および位置６または７にＳ脂質化システインのビルディングブロックが設計された類似体は、いずれも効率的な類似体を提供するが、位置６は特定の修飾に対する耐性が低いように思われる（５３～５７）。有効なビスＳ－脂質化類似体３９（０．５μｇ／ｍｌ、大腸菌）を採取し、Ｎ末端（４９～５２）にアシル化を導入し、システインハンドル（５８～６０）のプロピオニル脂質に対する有利な変化が、５９および６０を提供することを証明する。

ポリミキシンノナペプチド類似体（６１～１０４）では、Ｌ－Ｃｙｓを含む化合物（６５～７３）がほとんど不活性であるため、Ｎ末端のＤ－Ｃｙｓに対する明らかな優先性が認められた（７４～８０）。異なるチオールハンドルとプロピオン酸脂質を備えた３位にＤａｐ（８１～８４）またはＤ－Ｓｅｒ（８５～８８）を含む代替ノナペプチド足場を使用すると、Ｄ－Ｃｙｓ同族体（８２および８６）が大腸菌に対して最も活性を示した。

Ｎ末端にＤ－Ｃｙｓを持つＰＭＢノナペプチドを使用して、さまざまなＳ－アルキル脂質を調べた（８９～１０３）。ほとんどは、大腸菌、緑膿菌、肺炎桿菌に対して優れた活性を保持していが、アシネトバクター・バウマニおよび大腸菌ＡＴＣＣ ＭＳ８３４５に対しては効力が弱かった。

表５．Ｓ－脂質化ポリミキシンおよびＳ－脂質化ポリミキシンノナペプチドのＭＩＣ（μｇ／ｍＬ）
実施例５：選択されたＣｌｉｐＰＡポリミキシンの腎臓毒性

ポリミキシンによる腎障害は、依然として最大６０％の患者に発生することがある主要な用量制限因子である。メカニズムとしては、ポリミキシンは尿細管に蓄積し、ミトコンドリア損傷、小胞体ストレス、酸化ストレス、細胞周期の停滞を介してアポトーシスを引き起こす（Ａｚａｄら，２０１９）。

ヒト誘導多能性幹細胞由来の腎器官様物質を用いて、生理学的に関連するヒト腎組織（Ｓｏｏ等２０１８）．）における選択されたポリミキシン類似体の細胞毒性を評価した。プロピル、デシルまたはフェニル脂質を含むモノ脂質化類似体２９、３１、３３、プロピル、ｔｅｒｔ－ブチルまたはフェニル脂質をそれぞれ含むビス脂質化化合物３５、３８、３９、およびＮキャップされたビス脂質化（フェニル）４９が選出された。

対照化合物ポリミキシンＢと７種類のＣｌｉｐＰＡ類似体を、プロトコールの１２日目にオルガノイドに一定範囲の濃度（Ｇａｌｌａｄｏ－Ｇｏｄｏｙら．２０１６に基づく）を添加することによってテストし、前記のように、オルガノイド組織の最適な成熟度に対応する。陽性対照として、オルガノイドを、患者および腎臓オルガノイドに重度の腎臓毒性副作用を伴う化学療法薬である１００μＭシスプラチンで処理した。（表６）。

表６．腎臓オルガノイドに対するポリミキシンＢおよび新規類似体の腎臓毒性の概要
ｎ．ｄ＝未決定スコア：１＝影響なし、２＝軽度の悪化、３＝重度の悪化、４＝完全な悪化。－ｖｅ対照：水＝１、＋ｖｅ対照１００μＭシスプラチン＝３
４８時間後に、明視野画像で見える腎尿細管劣化の兆候について毒性をスコア化した（図示せず）。本発明のアッセイは、ポリミキシンＢおよび化合物３１、３３、３８～４９、９１～１０４で処理した後の用量依存性分解を明らかにしたが、化合物２９、３５、５８～６０、８２～８３および８６で処理したオルガノイドは、１ｍｍまでの組織損傷を実質的に示さなかった。

アポトーシスを定量的に読み取るために、化合物で処理したオルガノイドパラフィン切片上のＴＵＮＥＬ＋細胞を測定した。明視野イメージングで見られたのと同様の傾向が観察された。すなわち、ポリミキシンＢと比較して、化合物２９および３５で処理したオルガノイドにおけるアポトーシス細胞のパーセンテージが有意に低かった（図５）。

実施例７：ＣｌｉｐＰＡポリムコフィシンを用いた細胞毒性の研究
ＣｌｉｐＰＡ修飾が新たな毒性を導入したかどうかを評価するために、ＶｅｒｏおよびＨａＣａＴ細胞株に対する阻害濃度を測定した。プロピオニル脂質を含む化合物２９は、Ｖｅｒｏ細胞株に対する毒性がコムシンまたはポリコムシンＢより約２．５倍低く（図６および表７）、ＨａＣａＴ細胞株に対する阻害効果は同等である。各測定値の標準誤差が表示される。

表７．ＶｅｒｏまたはＨａＣａＴ細胞株の化合物のＩＣ_５０の計算値

Ｎ末端およびＬｅｕ－７にフェニル脂質を有する化合物３９は、化合物２９と比較して、両細胞株に対する毒性が約５倍高い。これは、２９の毒性が有意に低い腎臓毒性の結果と同様である。両方の細胞株で試験されたポリミキシンの毒性が低いことを示す阻害作用（＞５００μｇ／ｍＬ）を引き起こすためには、依然として大量の化合物２９が必要である。
実施例８：多剤耐性病原体に対する表現型抗菌薬感受性検査

化合物２９、３５、および３８に関連する有望な抗菌活性および低毒性を考慮して、これらの化合物は、臨床的に関連する多剤耐性グラム陰性病原体のセットを使用して、表現型抗菌感受性試験の次のラウンドを実施した。このパネルには、カルバペネム耐性腸内細菌（ＣＲＥ）、拡張スペクトルβ－ラクタマーゼ（ＥＳＢＬ）産生腸内細菌、コリスチン耐性大腸菌、カルバペネム耐性アシネトバクター・バウマニ（ＣＲＡＢ）またはカルバペネム耐性緑膿菌（ＣＲＰＡ）として表現型を特徴付けられる分離株が含まれていた。これらの分離株が選択されたのは、それぞれが臨床で使用されている複数の異なる抗生物質ファミリーに耐性があり、その結果、治療の選択肢が限られているが、重要になり、これらの病原体タイプはそれぞれ、世界保健機関（ＷＨＯ）の新しい抗生物質の研究開発における優先病原体リストで「優先１：緊急」として認識されている。したがって、これらの病原体のいずれに対する抗菌活性も臨床的に重要であると考えられる。心強いことに、各化合物はこの試験パネルのメンバーに対して有望な抗菌活性を示したが、例外としてＣＲＰＡとコリスチン耐性大腸菌は３つの試験化合物すべてとポリミキシンＢ対照に耐性があった（表８）。しかし、実施例４で試験した化合物の多くがコリスチン耐性大腸菌に対して良好な活性を示したことが認められた。

表８．臨床的に関連する多剤耐性病原体タイプに対する化合物２９、３５、および３８のＭＩＣ
ＥＳＢＬ＝拡張スペクトルβ－ラクタマーゼ産生、ＣＲＥ＝カルバペネム耐性腸内細菌、ＣＲ＝コリスチン耐性、ＣＲＰＡ＝カルバペネム耐性緑膿菌、ＣＲＡＢ＝カルバペネム耐性アシネトバクター・バウマニ。

３回の生物学的試験により、各病原体に対する各化合物の最小発育阻止濃度が２～８ｍｇ／Ｌの範囲内であることが明らかになった。ほとんどすべての場合において、観察されたＭＩＣは、ポリミキシンＢ対照で観察されたＭＩＣの２倍希釈の範囲内であり、３つの試験化合物のそれぞれについて、ポリミキシンＢの抗菌活性プロファイルと同様の抗菌活性プロファイルを明らかに示している。
８．参考資料

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Claims (27)

1. 式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
   （ただし、
   Ａは、
   および
   から選択され、
   ここで、Ｒ^１は、Ｈまたは－Ｃ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルであり、ｎは１または２であり、Ｒ^５はＨまたはＣＨ_３であり、
   Ｘ_１は、存在しないか、Ｄａｂであり、
   Ｘ_２は、Ｔｈｒであり、
   Ｘ_３は、Ｄａｂ、Ｄａｐ、またはＤ－Ｓｅｒからなる群から選択され、
   Ｘ_４は、Ｄａｂ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、またはＤａｐからなる群から選択され、
   Ｘ_６は、Ｄ－Ｐｈｅまたは
   であり、
   Ｘ_７は、Ｌｅｕ、または
   であり、
   ここで、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４は、独立に、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリール、アリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルアリール、ピリジル（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、および－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルピリジルから選択され、
   ここで、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリール、およびピリジルは、それぞれ独立に、ハロ、－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキル、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキル、－Ｓ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、－Ｓ（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキル、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、またはＮＨ（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキルで任意に置換されており、
   Ｒ^６およびＲ^７は、独立に、ＨまたはＣＨ_３から選択される。）
2. 前記Ａは、
   （ここで、ｎは１であり、Ｘ_１はＤａｂであり、Ｒ^２は請求項１に定義される通りである。）である、請求項１に記載の化合物。
3. 前記Ａは、下記のものである、請求項１に記載の化合物。
   
4. 前記ｎは１であり、前記Ｘ_１は存在せず、前記Ｒ^２は請求項１に定義される通りである、請求項３に記載の化合物。
5. 前記ＡはＡ２であり、前記ｎは１であり、前記Ｒ^２は請求項１に定義される通りである、請求項１に記載の化合物。
6. 前記Ａは、下記のものである、請求項１に記載の化合物。
   
7. Ｒ^１はＨである、請求項１～６のいずれか１項に記載の化合物。
8. 前記Ｒ^２は－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリール、アリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、および－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルアリールからなる群から選択され、好ましくは－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリールＹＬ（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルである、請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物。
9. 前記Ｘ_３はＤａｂである、請求項１～８のいずれか１項に記載の化合物。
10. 前記Ｘ_４はＬｙｓまたはＤａｂである、請求項１～９のいずれか１項に記載の化合物。
11. 前記Ｘ_６はＤ－Ｐｈｅである、請求項１～１０のいずれか１項に記載の化合物。
12. 前記Ｘ_７はＬｅｕである、請求項１～１１のいずれか１項に記載の化合物。
13. 前記ＡはＡ１であり、前記ｎは１であり、Ｒ^２は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルからなる群から選択され、前記Ｒ^１は、Ｈまたは－Ｃ（Ｏ）－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルであり、前記Ｘ_１はＤａｂであり、前記Ｘ_２はＴｈｒであり、前記Ｘ_３はＤａｂであり、Ｘ_４はＤａｂまたはＬｙｓであり、前記Ｘ_６はＤ－Ｐｈｅまたは
    であり、ここで、Ｒ^３は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリール、アリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、および－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルアリールからなる群から選択され、好ましくは、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルであり、前記Ｘ_７は、Ｌｅｕまたは
    であり、ここで、Ｒ^４は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、－（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル、アリール、アリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキル、および－（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルアリールからなる群から選択され、好ましくは、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルである、請求項１に記載の化合物。
14. 前記ＡはＡ１であり、前記ｎは１であり、前記Ｒ^２は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルからなる群から選択され、前記Ｒ^１はＨであり、前記Ｘ_１は存在せず、前記Ｘ_３はＤａｂ、ＤａｐまたはＤ－Ｓｅｒであり、前記Ｘ_４はＤａｂであり、前記Ｘ_６はＤ－Ｐｈｅであり、前記Ｘ_７は、Ｌｅｕである、請求項１に記載の化合物。
15. 前記ＡはＡ２であり、前記ｎは１であり、前記Ｒ^２は、－Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルからなる群から選択され、前記Ｒ^１はＨであり、前記Ｘ_１はＤａｂであり、前記Ｘ_３はＤａｂであり、前記Ｘ_４はＤａｂまたはＬｙｓであり、前記Ｘ_６はＤ－Ｐｈｅであり、前記Ｘ_７はＬｅｕである、請求項１に記載の化合物。
16. 前記ＡはＡ１であり、前記ｎは２であり、前記Ｒ^２は、－（Ｃ_２～Ｃ_１０）アルキル、アリール、およびアリール（Ｃ_１～Ｃ_１０）アルキルからなる選択され、前記Ｒ^１はＨであり、前記Ｘ_１はＤａｂであり、前記Ｘ_３はＤａｂであり、前記Ｘ_４はＤａｂまたはＬｙｓであり、前記Ｘ_６はＤ－Ｐｈｅであり、前記Ｘ_７はＬｅｕである、請求項１に記載の化合物。
17. 前記化合物は、表１または表３に定義されるポリミキシン類似体からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
18. ２９、４４、５９、６０、７６および７９化合物からなる群から選択される、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
    
19. 請求項１～１８のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物と、その薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
20. 請求項１～１８のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の治療有効量を被験体に投与することを含む、被験体の細菌感染を治療または予防する方法。
21. 細菌を、殺菌量の請求項１～１８のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物と接触させることを含む、細菌を死滅させる方法。
22. 少なくとも１つの細菌種の増殖を阻害する方法であって、前記細菌種を、請求項１～１８のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物と静菌量で接触させることを含む、方法。
23. 前記細菌はグラム陰性菌である、請求項２０～２２のいずれか１項に記載の方法。
24. 前記グラム陰性菌は、アシネトバクター、アクチノバチルス、バルトネッラ、ボルデテラ、ブルセラ、バークホルデリア、カンピロバクター、シアノバクテリア、エンテロバクター、エンビニア、エシェリヒア、フランシセラ、ヘリコバクター、ヘモフィルス、クレブシエラ、レジオネラ、モラクセラ、モルガネラ、ナイセリア、パスツレラ、プロテウス、プロビデンシア、シュードモナス、サルモネラ、セラティア、赤ブドウ球菌、ステノトロフォモナス、トレポネーマ、ビブリオ、およびエルシニアの属から選択される１つまたは複数の種を含む、請求項２３に記載の方法。
25. 前記細菌は、緑膿菌、アシネトバクター・バウマンニー、肺炎桿菌、クレブシエラ・オキシトカ、ステノトロフォモナス・マルトフィリア、エンテロバクター・クロアカエ、シトロバクター・フロインディ、大腸菌、およびサルモネラ・エンテリカからなる群から選択される、請求項２０～２２のいずれか１項に記載の方法。
26. 前記細菌は、カルバペネム耐性腸内細菌（ＣＲＥ）、拡張スペクトルβ－ラクタマーゼ（ＥＳＢＬ）産生腸内細菌、コリスチン耐性大腸菌、カルバペネム耐性アシネトバクター・バウマンニー（ＣＲＡＢ）、またはカルバペネム耐性緑膿菌（ＣＲＰＡ）として表現型を特徴付けられる分離株からなる群から選択される、請求項２０～２２のいずれか１項に記載の方法。
27. 前記化合物は、ポリミキシンＢおよび／またはコリスチンよりも腎臓毒性が低い、請求項２０～２６のいずれか１項に記載の方法。