JP2024518571A - 植物材料からタンパク質濃縮製品を調製するための改良された方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、油糧種子などの植物材料から、植物タンパク質単離物又はタンパク質－繊維配合物などのタンパク質濃縮製品を調製するためのプロセス、並びに前記プロセスによって得ることができるヒトの食品及び／又は動物の飼料における製品の使用に関する。特に、本明細書に提示されるプロセスは、最大５個の炭素原子を有する無極性で親油性の有機エステルと、最大５個の炭素原子を有するアルコールとからなる低沸点共沸混合物をベースとする溶媒を有利に利用し、この溶媒によって、有害なヘキサン系溶媒を使用する必要性が不要になるだけでなく、この溶媒は、本明細書に提示されるプロセスで使用される使用済みの溶媒及び／又は母液から容易に入手可能及び回収可能であるため、再利用サイクルを受けることができ、その結果、開示されたプロセスは極めてエネルギー効率が高く、大規模な工業生産に好適であり、環境に優しいものとなる。【選択図】 図１

Description

［発明の分野］
本発明は、油糧種子などの植物材料から、植物タンパク質単離物又はタンパク質－繊維配合物などのタンパク質濃縮製品を調製するためのプロセス、並びに前記プロセスによって得ることができるヒトの食品及び／又は動物の飼料における製品の使用に関する。特に、本明細書に提示されるプロセスは、最大５個の炭素原子を有する無極性で親油性の有機エステルと、最大５個の炭素原子を有するアルコールとからなる低沸点共沸混合物をベースとする溶媒を有利に利用し、この溶媒によって、有害なヘキサン系溶媒を使用する必要性が不要になるだけでなく、この溶媒は、本明細書に提示されるプロセスで使用される使用済みの溶媒及び／又は母液から容易に入手可能及び回収可能であるため、再利用サイクルを受けることができ、その結果、開示されたプロセスは極めてエネルギー効率が高く、大規模な工業生産に好適であり、環境に優しいものとなる。

［発明の背景］
環境に有害でなく、かつ経済的及び技術的観点から実現可能な方法によって製造された、十分な栄養品質の食品を、増加するヒトの人口に供給する喫緊の必要性がある。

栄養学の専門家の間には、タンパク質摂取に対するヒトのニーズは、動物起源からよりも植物材料からのタンパク質を消費することによってよりよく満たされる可能性があるという共通認識がある。しかし、植物材料起源のタンパク質に伴う固有の問題は、種子、豆果、果実及び穀物のような天然の発生の形態において、これらが通常、繊維、多糖、脂肪、脂質、微量栄養素、及びフェノール化合物、フィテート（ｐｈｙｔａｔｅｓ）などのような抗栄養因子を含む複雑なマトリックスに包埋されていることである。

食品又は動物飼料配合物中の成分として適用するためには、これらのタンパク質を原料から抽出し、精製された形態で単離するか、又は少なくとも食物植物繊維との消化可能な混合物として提供する必要がある。更に、多くの食品用途では、これらのタンパク質が溶解性、油脂との安定なエマルジョンを形成する能力、安定なゲル、発泡体などを形成する能力などの本来の機能特性を保持していることが重要である。

タンパク質に本来結合している不要な成分を除去するために、さまざまな精製及び分離技術が公知であり、現在使用されている。

典型的には、油糧種子及び大豆の場合、植物原料中に存在する脂肪、油及び脂質の一部は、押出成形又はコールドプレスなどの機械的手段によって原料から抽出され、油糧種子ケーキが生成され得る。或いは、前記脂肪、油及び脂質は、ヘキサンなどの無極性で親油性の溶媒中での抽出などの化学的手段によって抽出することができる。ヘキサン抽出が使用されるプロセスでは、典型的には、蒸気及び高温を使用して、意図的に設計された脱溶剤／トーストステップでミールから残留ヘキサンを除去する。

ヘキサン処理は原料から油を抽出する効率的な方法であり得るが、このような処理は非常にエネルギーを消費するだけでなく、天然タンパク質の部分的かつ不可逆的な変性並びに溶解性及び／又は脂質と安定なエマルジョンを形成する能力などの関連する機能的特性の損失が原因で、ミール中のタンパク質の品質に悪影響を与える場合がある。これに加えて、ヘキサンは有毒であり、環境に有害である。

タンパク質の変性を回避するために、近年、ヘキサンの使用を完全に放棄し、タンパク質の抽出プロセスを、油の一部を機械的に排出させた後の全脂肪種子又はコールドプレスケーキから開始する抽出プロトコールが設計されている。例えば、植物材料を、水性溶媒と有機溶媒の逐次的使用を包含する一連のステップに供してタンパク質単離物を得るプロセスが公知である。そのようなプロセスの１つは、例えば、国際公開第０２／０６０２７３号に開示されており、国際公開第０２／０６０２７３では、水を用いて撹拌装置を使用してヒマワリミールからタンパク質を抽出し、その後エタノールを使用して可溶性タンパク質を沈殿させることを教示する。別の例には、国際公開第２０１１／０５７４０７号が含まれ、国際公開第２０１１／０５７４０７号では、菜種／キャノーラからタンパク質濃縮物及び単離物を得る方法を開示し、水とのタンパク質混合物にエタノールを加え、水溶性タンパク質を溶液から沈殿させるプロセスを教示する。更なる例は、国際公開第２０１３／０１３９４９号によって提供されており、国際公開第２０１３／０１３９４９号では、オイルケーキからのタンパク質単離プロセスであって、（ａ）水溶液によりタンパク質を抽出するステップ、（ｂ）濃縮するステップ、及び（ｃ）メタノール、エタノール、及びアセトンなどの水混和性有機溶媒を加えてタンパク質沈殿物を得るステップを含む、プロセスが開示されている。この文献では、タンパク質の抽出は、水中の粗植物タンパク質源の懸濁液を提供し、その懸濁液を撹拌槽型反応器（ＳＴＲ）タイプの装置内で撹拌することによって実行する。次に、水と水混和性溶媒の混合物から沈殿物を乾燥させることにより、タンパク質の単離を達成する。

注目すべき非常に有利なプロセスは、ＮａｐｉＦｅｒｙｎ ＢｉｏＴｅｃｈ Ｓｐ． ｚ ｏ．ｏ．、Ｐｏｌａｎｄにより出願された出願国際公開第２０１９０１１９０４号及び国際公開第２０２００１６２２２号に開示されており、これらは、油糧種子、豆果、又はレンズ豆などの植物材料から、ヘキサンを含まない方法で、天然及び機能性タンパク質又は植物タンパク質－繊維製品をそれぞれうまく得るプロセスを教示している。開示された方法は、植物材料の有利な前処理、続いて水性溶媒を使用した穏やかで非破壊的な条件下での水溶性タンパク質の部分抽出方法、その後のいわゆる「一般に安全と認められている」（“Ｇｅｎｅｒａｌｌｙ ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ ａｓ ｓａｆｅ”）（ＧＲＡＳ）有機溶媒の新規な組み合わせを使用する固体残留物の精製によって目的を達成し、このプロセスで使用される最後の溶媒は、第３の溶媒の総重量に基づき、少なくとも９０ｗｔ％の最大５個の炭素原子を有する無極性（非極性）で親油性の有機エステルを含み、前記有機エステルは、室温で第１の水性溶媒と少なくとも部分的に混和性であり、第２のアルコール系溶媒と完全に混和性であり、第３の溶媒の量は、液相全体が別個の液相に分離しないように選択される。

国際公開第２０１９０１１９０４号及び国際公開第２０２００１６２２２号の有利なプロセスは、ヘキサンなどの有毒溶媒を使用せずに望ましくない成分を除去する必要性にうまく対処し、エタノールと酢酸エチルの組み合わせの使用により高品質の植物タンパク質材料の精製が可能になるが、工業的実践におけるそれらの実施に対する大きな障壁の１つは、精製された形態、すなわち９０％超の純度の酢酸エチルの回収コストが高いことである。

この高コストの主な理由は、酢酸エチル及び類似のエステルがアルコール、特にエタノールと共沸混合物を形成する傾向にあり、その共沸混合物を純粋な成分画分に分離するのは非常に困難なためである。系内に相当量の水が存在する場合、問題は更に複雑になり、植物などの生物材料が関与する回収及び単離プロセスの場合、これは実際に回避できない。水－エタノール－酢酸エチルという特定の３成分系は、エタノール－酢酸エチル又はエタノール水などの均一共沸物の形だけでなく、酢酸エチル－水などの異相共沸物の形で複数の共沸物を形成する能力を示す。

［発明の概要］
本開示は、国際公開第２０１９０１１９０４号及び国際公開第２０２００１６２２２号に記載されているプロセスの実行の一部として得られる使用済みの溶媒（母液としても公知である）の処理中になされた予想外の偶然の経験的観察に基づく。すなわち、これらの使用済みの溶媒の典型的な組成は、菜種、大豆、ヒマワリ、亜麻などの油糧種子加工から得られる在来（ｉｎｄｉｇｅｎｏｕｓ）植物油などの植物由来材料に加えて、半分を超える酢酸エチル（ｗ／ｗの質量分率で表される）と、実質的かつ同等量のエタノール及び水で構成されている。可能な３成分共沸物及び２成分共沸物に関する知識を備えた当業者は、この混合物が蒸留又は蒸発に供されるとき、得られる第１の低沸点共沸混合物は、かなりの量の水を含有するものであるはずであると予想するであろう。しかし、驚いたことに、１０～５０ｋＰａの間の減圧下で使用済みの溶媒を蒸発させた後、実質的に水を含まない留出物を得たことが観察された。予想される挙動からのこの逸脱は、加工された植物材料からの植物由来成分の存在、及び／又はおそらくＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＣａＣｌ_２などの塩の存在に起因する可能性があると推測される。

根底にある原因に関係なく、同様に驚くべきことは、前記回収された実質的に水を欠いた（すなわち、水が１０％未満である）共沸混合物が、少なくとも９０％純粋な、国際公開第２０１９０１１９０４号又は国際公開第２０２００１６２２２号の無極性で親油性の有機エステル系溶媒を効率的に置き換えるのに十分に低極性で親油性であるという観察された効果であった。

これらの観察の結果、豆果、穀物、及び油糧種子由来のタンパク質単離物又はタンパク質－繊維混合物などのタンパク質含有製品の精製のための、驚くほどエネルギー効率が高く、拡張が容易な新しいプロセスが発見され、２つの主要なクラスの不純物、すなわちフェノール化合物及び脂質は、極性が低下する溶媒及び溶媒混合物のカスケードによってうまく除去することができ、第１の溶媒は実質的に水（少なくとも９０％ｗ／ｗ）であり、第２の溶媒はアルコールを含有するが、最終の最も非極性である溶媒は、８：１～１：１の範囲の比率で混合された無極性で親油性の有機エステルとアルコールとの共沸混合物であり、最終混合物中の含水量は、液相全体が別個の液相に分離しないように選択される。

発見されたプロセスの利点の１つは、例えば酢酸エチル対エタノールの比率が８：１～１：１の範囲である酢酸エチルとエタノールを有し、含水量が１０％ｗ／ｗ未満である混合物を、プロセス中に生成される使用済みの溶媒から比較的容易に回収することもできることである。これにより、有機溶媒を再循環又は回収できるという事実のため、プロセスの費用が更に削減され、プロセスから生じる潜在的に環境に有害な廃棄物も削減される。酢酸エチルとエタノールとの低水分共沸混合物の回収は、このような混合物の沸点が純粋な溶媒単独よりも低いため、例えば、流下膜式蒸発、ワイプ式膜蒸発、真空蒸発、蒸留、及び／又はそれらの組み合わせなどのような技術のいずれかによって、比較的低いエネルギー投入で有利に実行することができる。

更なる利点は、開示されたプロセスによって得られる最終タンパク質濃縮製品中に回収される植物タンパク質が、低レベルのフェノール／ポリフェノール化合物及び脂質不純物、並びに低レベルの残留溶媒を示すことである；すなわち、乾燥重量あたり１０００ｐｐｍ未満のエタノールと、乾燥重量あたり１００ｐｐｍ未満の酢酸エチルを含有することが測定された。更に、開示された加工から得られるタンパク質単離物及びタンパク質－繊維製品は、栄養価、溶解性、乳化能力、ゲル化特性などのタンパク質の本来の機能をほとんど保持しており、したがってこれらのタンパク質含有製品は、食品の機能性成分として使用するのに好適なものとなる。これら及び他の利点については、本明細書で更に説明する。

本開示の目的は、工業的に好適であるだけでなく、経済的にも実現可能な、栄養価の高い植物タンパク質濃縮製品の製造のための合理化されたプロセスを提供することである。本明細書で提示される方法は、これまでの既知の方法と比較して溶媒回収プロセスを根本的に簡素化し、一方で同時に、油糧種子、豆果、及びレンズ豆からなど、油、脂肪、及び／又は脂質を大量に含有する難易度の高い植物材料からでも、同様の高品質の植物タンパク質濃縮製品を提供することによってこれらの目的を達成する。

一般的な態様では、植物材料（１）から植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）を調製するためのプロセスが提供され、前記植物材料（１）は、乾燥重量ベースで１０～５０ｗｔ％の間のタンパク質を含み、前記プロセスは：
ａ）植物材料（１）を粉砕又は細分して、固体ケーキ（２）を生成するステップ；
ｂ）固体ケーキ（２）を、第１の溶媒の総重量に基づき少なくとも９０ｗｔ％の水を含む水性の第１の溶媒で抽出して、第１の固体画分と第１の液体画分の混合物を得るステップ；
ｃ）第１の液体画分（１１）を第１の固体画分（１２）から分離するステップ；
ｄ）第２の溶媒の総重量に基づき少なくとも５０ｗｔ％の室温で水と混和性である１～５個の炭素原子を有するアルコールを含む、アルコール性の第２の溶媒を加えるステップであって、
加えるステップは、第２の溶媒を第１の固体画分（１２）に加えることを含むか、又は
第２の溶媒を加える前に、第１の液体画分（１１）を濃縮して第１の液体画分タンパク質濃縮物（１１ｂ）を得て、加えるステップは、第２の溶媒を前記濃縮物（１１ｂ）に加えることを含む、ステップ；
ｅ）ステップｄ）で第２の溶媒を加えることによって得られた混合物のいずれか１つを、第２の液体画分（２１、２３）と第２の固体画分（２２、２４）に分離するステップ；
ｆ）ステップｅ）で得られた第２の固体画分（２２、２４）に第３の溶媒を加えるステップであって、前記第３の溶媒は、第３の溶媒の総重量に基づき、６４～９０ｗｔ％の間の、最大５個の炭素原子を有する無極性で親油性の有機エステルと、１０～３５ｗｔ％の間の、１～５個の炭素原子を有するアルコールとの共沸混合物を含み、有機エステルは、室温で第１の溶媒と少なくとも部分的に混和性であり、第２の溶媒と完全に混和性であり、第３の溶媒の量は、液相全体が別個の液相に分離しないように選択される、ステップ；
ｇ）ステップｆ）で得られた混合物を、共沸使用済みの溶媒（３１、３３）とも更に呼ばれる第３の液体画分（３１、３３）と、第３の固体画分（３２、３４）とに分離するステップ；
ｈ）ステップｇ）で得られた第３の固体画分（３２、３４）を乾燥させて、植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）を得るステップ
を含む。

特定の態様では、工業規模の量の植物材料を処理し、実験室規模を超えた量の最終の植物タンパク質濃縮製品を得ることができる方法が提供される。

なお更なる態様では、植物タンパク質濃縮製品は、本明細書に記載のプロセスによって得られるか、又は得ることができるように提供される。

最後に重要なことであるが、ヒトの食品及び／又は動物飼料の製造における本明細書に記載のプロセス及び製品の使用も提供される。

本開示の性質をよりよく理解するために、添付の図面と併せて以下の詳細な説明が参照される。

開示された方法の可能な実施形態を概略的に示しており、植物材料（１）を最初に機械的に処理して（ステップａ）、固体ケーキ（２）を生成する；次に、ケーキ（２）を、水性溶媒（「第１の溶媒」）を使用して穏やかで非破壊的な条件下で抽出し（ステップｂ）、その後、第１の液相（１１）と第１の固相（１２）に分別する（ステップｃ）。これらの相（１１、１２）は両方とも貴重な植物タンパク質の供給源であるため、これら両方は、少なくとも５０％の炭素数１～５のアルコールを含む、アルコール溶媒（ステップｄ；「第２の溶媒」）を含む、極性が減少している溶媒及び分離サイクルによる逐次的処理を更に受けることができ、その後、分離（ステップｅ）し、画分（２２、２４）を含む得られた固相を、このようなアルコールと炭素数１～５の無極性親油性エステルとの共沸混合物を含む共沸溶媒（ステップｆ；「第３の溶媒」）で処理する。別のラウンドの分離（ステップｇ）の後、次に、得られた固相を含む画分（３２、３４）を乾燥することができ（ステップｈ）、植物タンパク質単離物（４２）、又は植物タンパク質と繊維の混合物又は粉末（４４）のような高品質の植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）の製造につながる。 図１の概略図であり、共沸溶媒の再循環及び回収の有利な実施形態を追加的かつ概念的に示しており、植物タンパク質単離物（４２）の製造経路における分別ステップｇ）からの使用済みの共沸溶媒（使用済みの第３の溶媒３１）は、植物タンパク質及び繊維製品（４４）の製造経路における分別ステップｇ）で再使用され、その後（使用済みの第３の溶媒３３として）、これは蒸発器又は蒸留器などの溶媒回収プラント（ＳＲＰ）ユニットで溶媒回収プロセス（破線）を経て、後で戻され、開示された方法の実施形態による後続の製造ラウンドで再利用される。或いは、植物タンパク質単離物（４２）及び植物タンパク質及び繊維製品（４４）の両方の製造経路からの使用済みの共沸溶媒（３１、３３）は、両方とも、溶媒回収プロセスのためにＳＲＰユニットに直接送ることができる（示されていない実施形態）。 図２に示されるプロセスの実施形態を更に示しており、有利には、植物タンパク質単離物（４２）の製造経路における分別ステップｅ）からの使用済みのアルコール溶媒（使用済みの第２の溶媒２１）も、植物タンパク質及び繊維製品（４４）の製造経路におけるアルコール分別ステップｅ）で、その後再利用することができる。当然のことながら、この後、植物タンパク質及び繊維製品（４４）の製造経路内の使用済みのアルコール溶媒（使用済みの第２の溶媒２３）は、更なるＳＲＰユニット（示されていない実施形態）において溶媒回収プロセスを受けることもできる。 図１に示される方法の実施形態による一般的な実施形態を概略的に示し、乾燥ステップｈ）によっても使用済みの共沸溶媒の実質的な更なる部分（使用済みの第３の溶媒４１及び４３）が生成される可能性があることを更に概念的に示している。 使用済みの共沸溶媒のこれらの更なる部分（４１、４３）は、分別ステップｇ）からの使用済みの共沸溶媒（３１、３３）と一緒に、又はそれらから独立して、蒸発器又は蒸留器などのＳＲＰ内における溶媒回収プロセスを受け、次に、その後の植物タンパク質濃縮製品製造ラウンドのために本明細書に開示されるプロセスに戻されることによって再使用することができる実施形態を概略的に示す。当然のことながら、使用済みの共沸溶媒の再利用及び／又は回収スキームのこの又は他の実施形態は、図３に示すもののような、分別ステップｅ）における使用済みのアルコール溶媒の任意の再利用及び／又は回収スキームと独立して組み合わせることができる。 非常に有利な共沸溶媒の再利用及び回収スキームを含む、開示された方法の実施形態を概念的に示し、分別ステップｇ）からの使用済みの共沸溶媒（３１）、及び植物タンパク質単離物（４２）の製造経路で得られ、任意選択で植物タンパク質及び繊維製品（４４）の製造経路からも得られる、乾燥ステップｈ）からの使用済みの共沸溶媒の更なる部分（４１、４３）は、植物タンパク質及び繊維製品（４４）の製造経路における分別ステップｇ）で再利用することができる。このようにして得られた使用済みの共沸溶媒（３３）は次に溶媒回収プロセスのためにＳＲＰに送られ、後で戻され、開示された方法に従って、その後の植物タンパク質濃縮製品の製造サイクルに再使用することができる。 大豆から得られるタンパク質単離物のプロセススキームを示す。 大豆から得られるタンパク質－繊維濃縮物のプロセススキームを示す。 ＤＲＣから得られるタンパク質単離物のプロセススキームを示す。 ＤＲＣから得られるタンパク質－繊維濃縮物のプロセススキームを示す。 大豆タンパク質単離物について測定された総タンパク質含有量を示す。 大豆タンパク質単離物について測定された水分含有量を示す。 大豆タンパク質単離物について測定された灰分を示す。 大豆タンパク質単離物について測定された脂肪含有量を示す。 大豆タンパク質単離物について測定された総フィテート含有量を示す。 ＤＲＣタンパク質単離物について測定された総タンパク質含有量を示す。 ＤＲＣタンパク質単離物について測定された水分含有量を示す。 ＤＲＣタンパク質単離物について測定された脂肪含有量を示す。 ＤＲＣタンパク質単離物について測定された灰分を示す。 ＤＲＣタンパク質単離物について測定された総フィテート含有量を示す。 ＤＲＣタンパク質単離物について測定された総フェノール含有量を示す。 大豆タンパク質単離物について測定された分散度を示す。 大豆タンパク質単離物について測定された窒素溶解度を示す。 大豆タンパク質単離物について測定された乳化能力を示す。 大豆タンパク質単離物について測定された発泡能力及び安定性を示す。 大豆タンパク質単離物について測定された最小ゲル化濃度を示す。 ＤＲＣタンパク質単離物について測定された分散度を示す。 ＤＲＣタンパク質単離物について測定された窒素溶解度を示す。 ＤＲＣタンパク質単離物について測定された乳化能力を示す。 ＤＲＣタンパク質単離物について測定された発泡能力及び安定性を示す。 ＤＲＣタンパク質単離物について測定された最小ゲル化濃度を示す。 大豆タンパク質－繊維濃縮物について測定された総タンパク質含有量を示す。 大豆タンパク質－繊維濃縮物について測定された水分含有量を示す。 大豆タンパク質－繊維濃縮物について測定された食物繊維含有量を示す。 大豆タンパク質－繊維濃縮物について測定された脂肪含有量を示す。 大豆タンパク質－繊維濃縮物について測定された灰分を示す。 大豆タンパク質－繊維濃縮物について測定された総フィテート含有量を示す。 大豆タンパク質－繊維濃縮物について測定された総フェノール含有量を示す。 ＤＲＣタンパク質－繊維濃縮物について測定された総タンパク質含有量を示す。 ＤＲＣタンパク質－繊維濃縮物について測定された水分含有量を示す。 ＤＲＣタンパク質－繊維濃縮物について測定された食物繊維含有量を示す。 ＤＲＣタンパク質－繊維濃縮物について測定された脂肪含有量を示す。 ＤＲＣタンパク質－繊維濃縮物について測定された灰分を示す。 ＤＲＣタンパク質－繊維濃縮物について測定された総フィテート含有量を示す。 ＤＲＣタンパク質－繊維濃縮物について測定された総フェノール含有量を示す。 大豆タンパク質－繊維濃縮物について測定された水及び油の吸収能力を示す。 ＤＲＣタンパク質－繊維濃縮物について測定された水及び油の吸収能力を示す。

定義及び略語
「共沸混合物」又は単純に「共沸物」という用語は、本明細書で使用される場合、単一の成分として一緒に動作する２つ以上の成分の混合物を意味し、したがって混合物は、単一の温度で完全に気化するか、又は完全に凝縮し、混合物が凝縮又は気化を受ける場合、後者は例えば蒸発を含み、又は、液相の成分の濃度は、気化相の成分の濃度と同じであり、同じままである。

「ミール」という用語は、本明細書で使用される場合、粉末形態の植物材料、例えば、小麦粉などを意味し、前記植物材料は、有機溶媒又は無機溶媒、例えば、ヘキサンなど、によるこれらの油及び脂質の抽出と、その後行われる蒸気でトースト処理することによる前記溶媒の除去により、実質的に油及び脂質を含まない。「無機溶媒」という用語は、本明細書で使用される場合、クラッキング、製油、及び／又は精留のプロセスによって石油又は瀝青炭のような化石堆積物由来の溶媒を指す。「植物材料」という用語は、本明細書で使用される場合、その従来の意味を有し、並びに、植物由来の材料を指し、野菜、果実、種子、豆果、及び穀物を包含する。「植物原材料」という用語は、本明細書で使用される場合、その従来の意味を有し、並びに、本開示の方法に従って処理することによって新しい有用な産物、例として、粗植物材料中に元来存在するタンパク質を含有するタンパク質単離物など、に変換することができる粗植物材料を指す。

「在来タンパク質」（ｉｎｄｉｇｅｎｏｕｓ ｐｒｏｔｅｉｎ）及び在来繊維」（ｉｎｄｉｇｅｎｏｕｓ ｆｉｂｒｅ）という用語は、本明細書で使用される場合、天然タンパク質及び天然繊維を指す。その結果、最終的なタンパク質－繊維製品が、在来タンパク質及び在来繊維を含有する場合、このタンパク質及び繊維は、未処理の植物材料中に存在する天然タンパク質及び天然繊維と区別することができない。

「室温」という用語は、本明細書で使用される場合、１８℃～２５℃の間の温度である。

略語「ＧＲＡＳ溶媒」は、「一般に安全と認められる（Ｇｅｎｅｒａｌｌｙ Ｒｅｇａｒｄｅｄ Ａｓ Ｓａｆｅ）」溶媒を意味し、産業界向けガイダンス（Ｇｕｉｄａｎｃｅ ｆｏｒ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ）、Ｑ３Ｃ－表及びリスト、米国保健社会福祉省（Ｕ．Ｓ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ）、米国食品医薬品局医薬品評価研究センター（Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ， Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（ＣＤＥＲ））、生物学的製剤評価研究センター（Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）（ＣＢＥＲ）、２０１２年２月、ＩＣＨ、改訂２によりクラス３に属する。これに関して、例えば、ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｄｏｗｎｌｏａｄｓ／ｄｒｕｇｓ／ｇｕｉｄａｎｃｅｓ／ｕｃｍ０７３３９５．ｐｄｆを参照されたい。

略語「ＳＴＲ」は、「撹拌槽型反応器」を意味する。略語「ＡＬＳＥＯＳ」は、出願国際公開第２０１９０１１９０４号に開示されているように、「油糧種子の水性低剪断抽出（Ａｑｕｅｏｕｓ Ｌｏｗ Ｓｈｅａｒ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｏｉｌ Ｓｅｅｄｓ）」を意味する。略語、「ＣＶ」、「Ｇ」、「ｒｐｍ」、「ＤＷ」、及び「ＮＳ」は、それぞれ、「カラム体積」、「重力」、「毎分回転数」、「乾燥重量」、及び「窒素溶解度」を意味する。

［発明の詳細な説明］
本明細書の開示の新規なプロセスの根底にある一般的な概念は、出願国際公開第２０１９０１１９０４号及び国際公開第２０２００１６２２２号でそれぞれ開示されているように、植物タンパク質単離物（更に「タンパク質単離物」と呼ばれる）又は植物タンパク質及び植物繊維の混合物（更に「タンパク質－繊維製品」と呼ばれる）を製造するためのプロセスに対する工業的に有利な代替品の提供と考えることができる。

ここで開示された方法は、６４～９０ｗｔ％の間の最大５個の炭素原子を有する無極性で親油性の有機エステルと、１０～３５ｗｔ％の間の１～５個の炭素原子を有するアルコールを含む共沸混合物を含むか又はそのような共沸混合物である溶媒を、最大５個の炭素原子を有するそのような無極性で親油性の有機エステルの実質的に純粋（分析純度グレード）かつアルコール非含有溶液の代わりに第３の分離ステップに加える点で、前記２つの出願のいずれか１つに開示された方法とは異なっている。

したがって、第１の一般的な態様では、植物材料（１）から植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）を調製するためのプロセスが提供され、前記植物材料（１）は、乾燥重量ベースで１０～５０ｗｔ％の間のタンパク質を含み、前記プロセスは：
ａ）植物材料（１）を粉砕又は細分して、固体ケーキ（２）を生成するステップ；
ｂ）固体ケーキ（２）を、第１の溶媒の総重量に基づき少なくとも９０ｗｔ％の水を含む水性の第１の溶媒で抽出して、第１の固体画分と第１の液体画分の混合物を得るステップ；
ｃ）第１の液体画分（１１）を第１の固体画分（１２）から分離するステップ；
ｄ）第２の溶媒の総重量に基づき少なくとも５０ｗｔ％の室温で水と混和性である１～５個の炭素原子を有するアルコールを含む、アルコール性の第２の溶媒を加えるステップであって、
加えるステップは、第２の溶媒を第１の固体画分（１２）に加えることを含むか、又は
第２の溶媒を加える前に、第１の液体画分（１１）を濃縮して第１の液体画分タンパク質濃縮物（１１ｂ）を得て、加えるステップは、第２の溶媒を前記濃縮物（１１ｂ）に加えることを含む、ステップ；
ｅ）ステップｄ）で第２の溶媒を加えることによって得られた混合物のいずれか１つを、第２の液体画分（２１、２３）と第２の固体画分（２２、２４）に分離するステップ；
ｆ）ステップｅ）で得られた第２の固体画分（２２、２４）に第３の溶媒を加えるステップであって、前記第３の溶媒は、更に「有機エステル」とも呼ばれる、最大５個の炭素原子を有する無極性で親油性の有機エステルを含み、有機エステルは、室温で第１の溶媒と少なくとも部分的に混和性であり、第２の溶媒と完全に混和性であり、第３の溶媒の量は、液相全体が別個の液相に分離しないように選択される、ステップ；
ｇ）ステップｆ）で得られた混合物を、使用済みの第３の溶媒（３１、３３）とも呼ばれる第３の液体画分（３１、３３）と、第３の固体画分（３２、３４）とに分離するステップ；
ｈ）ステップｇ）で得られた第３の固体画分（３２、３４）を乾燥させて、植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）を得るステップを含み、
第３の溶媒は、第３の溶媒の総重量に基づき、
６４～９０ｗｔ％の間の有機エステル、及び
１０～３５ｗｔ％の間の１～５個の炭素原子を有するアルコール、及び
１０ｗｔ％未満、好ましくは５ｗｔ％未満の水
を含む共沸混合物を含むか又はそのような共沸混合物である。

このような一般的な方法の実施形態を、図１に概略的に示す。本明細書で使用される場合、６４～９０ｗｔ％の間の有機エステルと、１０～３５ｗｔ％の間の、１～５個の炭素原子を有するアルコールとを含む共沸混合物を含むか又はそのような共沸混合物である溶媒は、更に「有機エステルとアルコールとの共沸混合物」、又は単に「共沸溶媒」又は「第３の溶媒」とも呼ばれる。

国際公開第２０１９０１１９０４号又は国際公開第２０２００１６２２２号の高純度有機エステル溶液の代わりに、有機エステルとアルコールの共沸混合物を使用する本開示の方法は、驚くべきことに、同一又は同等の品質の植物タンパク質濃縮製品を提供すると同時に、経済的に実行可能で環境に優しい方法で工業レベルの製造能力にスケールアップするのに多大な利点がある。

これは主に、（混合物の総重量に基づき）６４～９０ｗｔ％の間の、最大５個の炭素原子を有する無極性で親油性の有機エステルと、１０～３５ｗｔ％の間の、１～５個の炭素原子を有するアルコールと、１０ｗｔ％未満の水を含む共沸混合物が、例えば、後続の（バッチ式製造における）又は連続プロセスラウンド間の蒸発などの気化による、単純な再循環、回収、及び／又はリサイクルが可能である程度に化学的に十分に安定であるという事実による。加えて、例えば、エタノール又はメタノールと酢酸エチル又は酢酸メチルのいずれかとの共沸混合物は、それぞれの成分単独よりも沸点が低くなり、例えば気化による共沸回収に必要なエネルギー量が更に削減される。当然のことながら、工業規模レベルでは、このようなエネルギー節約により、必要な溶媒回収ハードウェアのタイプ及び量に関連する費用だけでなく、稼働費用も大幅に削減することができる。

本明細書に開示されるプロセスは、国際公開第２０１９０１１９０４号又は国際公開第２０２００１６２２２号に記載のプロセスによって得られるような製品の品質に少なくとも匹敵する、高品質の植物タンパク質濃縮製品を提供する。しかし、高純度有機エステル溶媒の大規模回収選択肢は複雑で費用がかかるため、後者のプロセスは主に研究開発目的に設けられるバッチ式製造などの小規模稼働に好適である。

逆に、安定で、再利用可能で、容易に回収可能な、有機エステルとアルコールとの共沸混合物を使用する、本明細書に提示される新しいプロセスは、大規模なバッチ式で有利に使用することができ、或いは更に有利には植物材料の連続処理で植物タンパク質濃縮製品の高製造量をもたらすことができる。共沸溶媒の選択が有利であるため、提示されたプロセスは、工業規模で展開される連続プロセスの一部として実行して、年間数千トンの植物タンパク質濃縮製品を供給することができ、おそらく１日２４時間、週７日間稼働する可能性があり、典型的には、年間６，０００時間を超える製造時間がかかる。

したがって、本開示の有利な態様では、プロセスで得られる植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）の量が、バッチ式製造プロセスでの供給量として、固体ケーキ（２）又は植物材料（１）の処理バッチあたり、又は連続製造プロセスでの時間あたりの製造量として、少なくとも１ｋｇ、好ましくは少なくとも５ｋｇ、より好ましくは少なくとも１０ｋｇ、より好ましくは少なくとも２０ｋｇ、最も好ましくは１００ｋｇ超に達するプロセスが提供される。

上述の態様と適合する別の実施形態では、プロセスにおいて抽出される固体ケーキ（２）の量が、バッチ式製造プロセスでの供給量として、固体ケーキ（２）バッチあたり、又は連続製造プロセスでの時間あたりの抽出量として、少なくとも１０ｋｇ、好ましくは少なくとも２０ｋｇ、より好ましくは少なくとも３０ｋｇ、より好ましくは少なくとも４０ｋｇ、より好ましくは少なくとも５０ｋｇ、より好ましくは少なくとも１００ｋｇ、より好ましくは少なくとも２００ｋｇ、更により好ましくは少なくとも５００ｋｇ、最も好ましくは少なくとも１０００ｋｇ以上に達するプロセスが提供される。

上述の態様と適合する更なる実施形態では、プロセスにおいて粉砕又は細分される植物材料（１）の量が、バッチ式製造プロセスでの供給量として、植物材料（１）バッチあたり、又は連続製造プロセスでの時間あたりの粉砕又は細分量として、少なくとも１０ｋｇ、好ましくは少なくとも２０ｋｇ、より好ましくは少なくとも３０ｋｇ、より好ましくは少なくとも４０ｋｇ、より好ましくは少なくとも５０ｋｇ、より好ましくは少なくとも１００ｋｇ、より好ましくは少なくとも２００ｋｇ、更により好ましくは少なくとも５００ｋｇ、最も好ましくは少なくとも１０００ｋｇ以上に達するプロセスが提供される。

共沸溶媒を再循環させる及び／又は回収する能力は、開示された方法によって達成可能な製造量の拡大に大きな影響を与えるため、図１に概略的に示される方法の有利な実施形態が図２に示され、このような共沸溶媒の再循環及び回収に関して考えられるスキームの一例が更に示される。この例では、タンパク質単離物（４２）の製造経路における分別ステップｇ）からの、「使用済みの第３の溶媒３１」として示される使用済みの共沸溶媒（３１）は、タンパク質－繊維製品の製造経路（４４）における分別ステップｇ）において直接再利用（又は再循環）される。タンパク質－繊維製品（４４）の製造経路における分離ステップｇ）への使用済みの共沸溶媒（３１）の直接添加は、実線で描かれた矢印を使用して概略的に示されている。

使用済みの共沸溶媒を、分離ステップｇ）で、或いは任意の固体画分洗浄ステップで直接再利用することは、前述の利用後、使用済みの共沸溶媒の内容物が６４～９０ｗｔ％の間の有機エステルと、１０～３５ｗｔ％の間の、１～５個の炭素原子を有するアルコールを依然として含むという特定の条件下で、使用済みの共沸溶媒が水であまりにも希釈されていない、及び／又は主に脂質又は脂肪タイプの植物材料由来の化合物で汚染されていない場合に可能である。これらの条件のいずれかが満たされない場合、そのような使用済みの共沸溶媒を、溶媒回収プラント（図２の「ＳＲＰ」）又はＳＲＰユニットに送り、例えば、気化を使用して、水及び／又は任意の植物材料由来の汚染物質の除去を含む共沸溶媒回収を行う。

このような使用済みの共沸溶媒の回収は、図２に破線で描かれた矢印で示されているように概略的に示されており、ここで、タンパク質－繊維製品（４４）の製造経路における分離ステップｇ）から得られる、「使用済みの第３の溶媒３３」として示される使用済みの共沸溶媒（３３）は、ＳＲＰユニットに送られ、その後、開示されたプロセスのステップｆ）の一部として、未使用共沸溶媒を加えるための「即時使用」共沸溶媒プールに戻される。

当然のことながら、「即時使用」共沸溶媒プールは、回収された使用済みの溶媒に加えて、例えば、未使用の共沸溶媒又はその形成成分の溶液、例として、実質的に純粋な、高パーセント及び／又は実験室グレードの、１～５個の炭素原子を有するアルコールの有機エステル溶液と共に提供されてもよいし、例えば、それらで満たされていてもよいし、それらと共に濃縮されていてもよいし、又は更に定期的若しくは散発的にそれらが再充填又は補充されてもよい。当業者であれば、これが、溶媒を更に再使用するために回収する産業において、「パージ」と呼ばれる一般的な慣行を構成することを容易に理解するであろう。この慣行は、タンパク質処理プラントでは、最も効率的な溶媒回収プロセスであっても、例えば、流出、放出、分解などにより、溶媒の一部の損失が必然的に起こるという事実に由来している。これらの損失を補うために、未使用精製溶媒を回収溶媒のプールに加えることができる。回収された溶媒を未使用の若しくは精製された溶媒又はその成分と部分的に置換する別の考えられる理由は、回収された溶媒中に望ましくない不純物が蓄積することであり得る。本明細書に記載される一般的なパージの実践は、当然のことながら、本明細書に開示される方法の特定の実施形態に含めることができる。

植物材料由来の汚染物質の程度に加えて、使用済みの共沸溶媒中に持ち込まれた水の含有量は、使用済みの共沸溶媒を、開示されたプロセスの実施形態において直接再利用できるか、若しくは再循環できるかどうか、又は使用済みの共沸溶媒が共沸溶媒回収のためにＳＲＰに送られるかどうかの重要な決定要因である。例えば、本方法によって最終的に得ることができるタンパク質－繊維製品（４４）となる植物タンパク質は、一般に、同様に本方法によって得ることができるタンパク質単離物（４２）中に存在するある特定の天然タンパク質よりも変性に対する感受性が低い。本方法のある特定の実施形態において、タンパク質－繊維製品（４４）で得ることができる前者のタンパク質は、共沸溶媒、おそらく、（第３の溶媒の総重量に基づき）１０ｗｔ％以下の水、好ましくは７ｗｔ％以下の水、より好ましくは５ｗｔ％以下の水、更により好ましくは２ｗｔ％以下、また更には１ｗｔ％以下の水を含む使用済みの共沸溶媒を使用して分離することができると推定される。

しかしながら、本発明の方法に従ってタンパク質単離物中で得ることができるある特定のタンパク質（４２）は、無極性親油性溶媒を使用して抽出した場合に最も良好に保存され（Ｄ． Ｆｕｋｕｓｈｉｍａ、１９６９、Ｄｅｎａｔｕｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｙ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｂｙ ｏｒｇａｎｉｃ ｓｏｌｖｅｎｔｓを参照のこと）、したがって、６４～９０ｗｔ％の間の有機エステル、１０～３５ｗｔ％の間の、１～５個の炭素原子を有するアルコールを含み、水をできるだけ含まない共沸混合物である第３の溶媒を加えることにより利点が得られる。

したがって、更なる態様では、第３の溶媒が、第３の溶媒中の水の質量分率として表して、７ｗｔ％未満の水、好ましくは５ｗｔ％未満の水、より好ましくは２ｗｔ％未満の水、更により好ましくは１ｗｔ％未満の水、最も好ましくは０．５ｗｔ％未満の水を更に含むプロセスが提供される。

開示されたプロセスの更に有利な実施形態では、共沸混合物は、共沸混合物中の有機エステルの質量分率として表して、６５～８５ｗｔ％の間の有機エステル、好ましくは７０～８４ｗｔ％の間の有機エステル、より好ましくは７５～８３ｗｔ％の間の有機エステル、更により好ましくは７６～８２．５ｗｔ％の間の有機エステル、最も好ましくは７６．５～８２．２ｗｔ％の間の有機エステルを含む。

有利な態様では、有機エステルは０．４未満の相対極性を有する。さまざまな溶媒の相対極性の値は、Ｓｏｌｖｅｎｔｓ ａｎｄ Ｓｏｌｖｅｎｔ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、第３版、２００３年に開示されている。比較のために、水の相対極性は１である。

開示されたプロセスは最終的に、ヒトの食品、及び潜在的には動物の飼料に使用するための植物タンパク質濃縮製品を提供することを目的としているため、有機エステルの選択は、その機能性だけでなく、健康及び安全性の懸念によっても決まる。これらの制約のため、開示された方法の有利な実施形態では、１～５個の炭素原子を有するアルコールとの共沸混合物を形成する有機エステルは酢酸エチルであり、これは食品業界で一般的に使用される有機エステルであり、ＧＲＡＳ溶媒として認められている。

開示されたプロセスの更なる例では、共沸混合物は、共沸混合物中の１～５個の炭素原子を有するアルコールの質量分率として表して、１２～３２ｗｔ％の間の、１～５個の炭素原子を有するアルコール、好ましくは１５～３０ｗｔ％の間、より好ましくは１７～２７ｗｔ％の間、更により好ましくは１８～２５ｗｔ％の間、最も好ましくは１９～２２ｗｔ％の間である、及び有利には約２０ｗｔ％である、１～５個の炭素原子を有するアルコールを含む。

可能な実施形態では、１～５個の炭素原子を有するアルコールは、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、イソブタノール、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。有利には、１～５個の炭素原子を有するアルコールは、０．８～０．４の間の相対極性を有する。上記の好適な有機エステルの選択に関連して説明したのと同じ考察を考慮すると、主に健康及び安全上の懸念によって推進され、有利な実施形態では、１～５個の炭素原子を有するアルコールはエタノールであり、これは食品業界でも一般的に使用されており、ＧＲＡＳ溶媒として認められている。

上記と同様に、開示されたプロセスの更に有利な実施形態では、共沸混合物は酢酸エチル及びエタノールを含み、好ましくは、第３の溶媒の総重量に基づき、６４～９０ｗｔ％の間の酢酸エチル及び１０～３５ｗｔ％の間のエタノールを含む。更に特定の実施形態では、共沸混合物は、有利には、共沸混合物中の酢酸エチルの質量分率として表して、６５～８５ｗｔ％の間、好ましくは７０～８４ｗｔ％の間、より好ましくは７５～８３ｗｔ％の間、更により好ましくは７６～８２．５ｗｔ％の間、最も好ましくは７６．５～８２．２ｗｔ％の間の酢酸エチル、並びに共沸混合物中のエタノールの質量分率として表して、１２～３２ｗｔ％の間、好ましくは１５～３０ｗｔ％の間、より好ましくは１７～２７ｗｔ％の間、更により好ましくは１８～２５ｗｔ％の間、最も好ましくは１９～２２ｗｔ％の間、及び有利には約２０ｗｔ％のエタノールを含み得る。

ＧＲＡＳ溶媒として認められている酢酸エチルとエタノールで構成される共沸溶媒を使用して、特に脂質が豊富な油糧種子を含むタンパク質含有植物材料から脂肪及び脂質の残留物を除去すると、開示されたプロセスでは、特にヘキサンを含む鉱油由来の有害な溶媒を使用する必要がなくなるという更なる利点がもたらされる。これはまた、ミールからヘキサンの残留物を除去するために業界で現在採用されている従来のステップを排除することを示唆しており、前記ステップには、典型的には、蒸気及び高温の使用が関与し、このステップはミール中に存在するタンパク質の抽出性及び機能性を著しく制限する。したがって、別の態様では、ヘキサンなどの６個以上の炭素原子を有する有機溶媒又は無機溶媒を使用せずに実行するプロセスが提供される。

使用される植物材料及びその内容物に応じて、共沸溶媒回収の図２に示されるものに代わる実施形態では、タンパク質単離物（４２）及びタンパク質－繊維製品（４４）の両方の製造経路からの使用済みの共沸溶媒（３１、３３）は、両方とも、溶媒回収プロセスのためにＳＲＰユニットに直接送ることができる（示されていない実施形態）。

本明細書に開示される方法の異なる実施形態による使用済みの共沸溶媒の再循環及び／又は回収の選択された戦略とは独立して、前記方法はまた、使用済みの第２の（又はアルコール性）溶媒の再循環及び／又は回収を含んでもよい。その一例が図３に象徴的に示されており、ここでは、植物タンパク質単離物（４２）の製造経路における分別ステップｅ）からの使用済みのアルコール溶媒（使用済みの第２の溶媒２１）を、植物タンパク質及び繊維製品（４４）の製造経路におけるアルコール分別ステップｅ）に直接加え、したがってそこで再利用することができる。当然のことながら、この後、植物タンパク質及び繊維製品（４４）の製造経路内の使用済みのアルコール溶媒（使用済みの第２の溶媒２３）は、更なるＳＲＰユニット（示されていない）において溶媒回収プロセスを受けることもできる。

開示されたプロセスの更なる可能な実施形態では、本明細書では「使用済みの共沸溶媒の更なる部分」と更に呼ばれる、直接再利用可能、リサイクル可能、及び／又は回収可能な相当量の使用済みの共沸溶媒も、乾燥ステップｈ）の結果として製造することができ、これを図４に概略的に示す（使用済みの第３の溶媒４１及び４３）。

したがって、次の態様では、ステップｈ）における第３の固体画分（３２、３４）の乾燥は、使用済みの共沸溶媒の更なる部分（４１、４３）と更に呼ばれる、使用済みの第３の溶媒の更なる部分（４１、４３）を生成する、プロセスが開示される。

説明したように、図５に概略的に示すような有利な実施形態では、使用済みの共沸溶媒の更なる部分（４１、４３）を、分別ステップｇ）からの使用済みの共沸溶媒（３１、３３）と一緒に、又はそれらから独立して、蒸発器又は蒸留器などのＳＲＰ内における溶媒回収プロセスを受けることによって、再使用することができる。この後、こうして回収された共沸溶媒は、開示されたプロセスによる後続の植物タンパク質濃縮製品の製造ラウンドにおけるステップｆ）の一部として未使用共沸溶媒を加えるための「即時使用」共沸溶媒プールに戻すことができる。

図５の実施形態よりもＳＲＰの負荷が低い、代替の特に有利な共沸溶媒の再利用及び回収スキームを、図６に概略的に示す。この概略的な実施形態では、分別ステップｇ）からの使用済みの共沸溶媒（３１）、及び植物タンパク質単離物（４２）の製造経路で得られ、任意選択で植物タンパク質及び繊維製品（４４）の製造経路からも得られる、乾燥ステップｈ）からの使用済みの共沸溶媒の更なる部分（４１、４３）を、植物タンパク質及び繊維製品（４４）の製造経路における分別ステップｇ）で再利用する。このようにして得られた使用済みの共沸溶媒（３３）は次に溶媒回収プロセスのためにＳＲＰに送られ、後で戻され、開示された方法に従って、その後の植物タンパク質濃縮製品の製造サイクルに再使用することができる。

したがって、更なる態様では、ステップｆ）で加えられる第３の溶媒の少なくとも一部が、使用済みの第３の溶媒（３１、３３）、使用済みの第３の溶媒の更なる部分（４１、４３）、又はそれらの組み合わせのうちのいずれか１つから回収されるプロセスが提供される。

上記の態様の好ましい実施形態では、ステップｆ）で加えられる第３の溶媒の一部が回収される、使用済みの第３の溶媒（３１、３３）、使用済みの第３の溶媒の更なる部分（４１、４３）、又はそれらの組み合わせのうちのいずれか１つは、使用済みの第３の溶媒又はそれらの組み合わせ（３１、３３、４１、４３）中の水の質量分率として表して、少なくとも５ｗｔ％の水、好ましくは少なくとも１０ｗｔ％の水、場合により少なくとも１５ｗｔ％、少なくとも２０ｗｔ％、少なくとも２５ｗｔ％、又は少なくとも３０ｗｔ％以上の水を含む、プロセスが提供される。

直前の２つの実施形態のうちの特定の実施形態では、ステップｆ）で加えられる第３の溶媒が、使用済みの第３の溶媒（３１、３３）、使用済みの第３の溶媒の更なる部分（４１、４３）、又はそれらの組み合わせのうちのいずれか１つから主に又は完全に回収されるプロセスが提供される。同様に、後者の考えられる特定の実施形態では、ステップｆ）で加えられる第３の溶媒が主に又は完全に回収される、使用済みの第３の溶媒（３１、３３）、使用済みの第３の溶媒の更なる部分（４１、４３）、又はそれらの組み合わせのうちのいずれか１つが、使用済みの第３の溶媒又はそれらの組み合わせ（３１、３３、４１、４３）中の水の質量分率として表して、少なくとも５ｗｔ％の水、好ましくは少なくとも１０ｗｔ％の水、場合により少なくとも１５ｗｔ％、少なくとも２０ｗｔ％、少なくとも２５ｗｔ％、又は少なくとも３０ｗｔ％以上の水を含む、プロセスが提供される。

共沸溶媒の回収に関して、更に有利な態様では、第３の溶媒の回収が、２００ｋＰａ以下、より好ましくは大気圧（１ａｔｍは１０１．３２５ｋＰａに相当）以下の動作圧力を適用することを含み、好ましくは、動作圧力は２０～５０ｋＰａの間（０．２～０．５ｂａｒ）で構成される、プロセスが提供される。

更に有利な態様では、第３の溶媒の回収が、好ましくは回転式蒸発器、ワイプ式膜蒸発器（ｗｉｐｅｄ－ｆｉｌｍ ｅｖａｐｏｒａｔｏｒｓ）、かきとり式膜蒸発器（ｓｃｒａｐｅｄ－ｆｉｌｍ ｅｖａｐｏｒａｔｏｒｓ）、流下膜式蒸発器（ｆａｌｌｉｎｇ－ｆｉｌｍ ｅｖａｐｏｒａｔｏｒｓ）、上昇膜式蒸発器（ｒｉｓｉｎｇ－ｆｉｌｍ ｅｖａｐｏｒａｔｏｒｓ）、ショートパス蒸発器を含む群から選択され、好ましくは流下膜式蒸発器である、蒸発器の使用を含む、又は蒸発器を用いて実行される蒸発ステップを含むプロセスが提供される。別の有利な態様では、第３の溶媒の回収が機械的蒸気再圧縮（ｖａｐｏｕｒ ｒｅｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ）を含むプロセスが提供され得る。

当然のことながら、使用済みの共沸溶媒の再利用及び／又は回収スキームの上記又は他の実施形態のいずれかは、図３に示すもののような、分別ステップｅ）における使用済みのアルコール溶媒の任意の再利用及び／又は回収スキームと独立して組み合わせることができる。

上記の概略的な例で説明及び示したように、有利な実施形態では、使用済みの溶媒、特に使用済みの共沸溶媒、例えばタンパク質単離物（４２）の製造のための本明細書に開示されるプロセスで生成されるようなものは、本明細書に開示される植物タンパク質－繊維製品（４４）の製造のためのプロセスにおいて、溶媒として、或いは、洗浄溶液として、有利に再循環又は再利用することができる。

これは、穏やかな水性抽出ステップｂ）及び分離ステップｃ）の後に得られる第１の固体画分（１２）中に在来植物繊維と共に保持される植物タンパク質が、前記ステップの後、第１の液体画分（１１）中に保持される天然水溶性植物タンパク質の実質的な部分としてそのような純粋な溶媒を必ずしも必要としないためである。特に、天然水溶性植物タンパク質の実質的な部分は、おそらく相分離から生じる剪断応力によって損傷又は変性を受けやすく、これは、所与の系において許容される水分制限を超えた場合に、本明細書に開示される方法の多溶媒系で起こる場合がある。

このため、有利な実施形態では、開示された方法のステップｄ）で加えられるアルコール性（又は第２の）溶媒の組成及び／又はステップｆ）で加えられる共沸（又は第３の）溶媒の組成は、好ましくは、タンパク質－繊維製品（４４）製造経路中の対応する溶媒と比較して、タンパク質単離物（４２）製造経路中に含まれる水の量が少ない。

したがって、有利な実施形態では、タンパク質単離物（４２）製造経路中のステップｄ）で加えられるアルコール性（又は第２の）溶媒が、第２の溶媒中の水の質量分率として表して、７ｗｔ％未満の水、好ましくは５ｗｔ％未満の水、より好ましくは３若しくは２ｗｔ％未満の水を含み、及び／又はタンパク質単離物（４２）製造経路中のステップｆ）で加えられる共沸（又は第３の）溶媒が、第３の溶媒中の水の質量分率として表して、２ｗｔ％未満の水、好ましくは１ｗｔ％未満の水、最も好ましくは０．５ｗｔ％未満の水を含む、プロセスが提供される。

可能な実施形態では、開示されたプロセスによって得られるタンパク質濃縮製品が、タンパク質－繊維製品（４４）であるプロセスが提供される。

代替的実施形態では、開示されたプロセスによって得られるタンパク質濃縮製品が、タンパク質単離物（４２）であるプロセスが提供される。

上記２つの実施形態による有利な実施形態では、タンパク質－繊維製品（４４）とタンパク質単離物（４２）の両方がタンパク質濃縮製品として得られるプロセスが提供される。

提供される方法の特定の実施形態では、ステップｄ）における加えることは、第２の溶媒を第１の固体画分（１２）に加えることを含み、ステップｈ）で得られた植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）は、植物タンパク質及び在来繊維を含むタンパク質－繊維製品（４４）であり、好ましくは、植物タンパク質及び在来繊維の総含有量は、タンパク質－繊維製品（４４）の総乾燥重量に基づき、少なくとも３０ｗｔ％である。

上記の実施形態に適用可能な更に有利な実施形態は、国際公開第２０２００１６２２２号に記載されており、参照により本明細書に組み込まれる。例えば、有利な実施形態では、第２の溶媒は、第２の溶媒の総重量に基づき、少なくとも６０ｗｔ％、好ましくは少なくとも７０ｗｔ％、より好ましくは少なくとも８０ｗｔ％、最も好ましくは少なくとも９０ｗｔ％の、室温で水と混和性である１～５個の炭素原子を有するアルコールを含む。
別の特定の実施形態では、ステップｈ）で得られる植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）が、タンパク質単離物の総乾燥重量に基づき、タンパク質含有量が、少なくとも９０ｗｔ％、好ましくは少なくとも９５ｗｔ％であるタンパク質単離物（４２）であり、
ステップｄ）における加えることの前に、第１の液体画分（１１）を濃縮して第１の液体画分タンパク質濃縮物（１１ｂ）を得て、前記濃縮物（１１ｂ）は、好ましくは、前記濃縮物（１１ｂ）の総重量に基づき５０～９０ｗｔ％の間の水と、前記濃縮物（１１ｂ）の総乾燥重量に基づき少なくとも４０ｗｔ％のタンパク質含有量とを含み、加えることは、少なくとも９０ｗｔ％のアルコールを含む第２の溶媒を前記濃縮物（１１ｂ）に加えることを含み；
ステップｆ）で加えられる第３の溶媒は、好ましくは２ｗｔ％未満の水、より好ましくは１ｗｔ％未満の水、最も好ましくは０．５ｗｔ％未満の水を含み、好ましくはまた、
ステップｅ）で得られた第２の固体画分（２２）のタンパク質含有量は、第２の固体画分（２２）の総乾燥重量に基づき少なくとも６０ｗｔ％であり；及び／又は
ステップｇ）で得られた第３の固体画分（３２）のタンパク質含有量は、第３の固体画分（３２）の総乾燥重量に基づき少なくとも９０ｗｔ％である、プロセスが提供される。

本発明の方法の有利な実施形態では、ステップｈ）で得られる植物タンパク質濃縮製品がタンパク質単離物（４２）であり、使用される植物材料（１）に応じて、ステップｄ）において、第１の液体画分（１１）を、非タンパク質成分の少なくとも一部を除去するために１つ又は複数のダイアフィルトレーションステップに更に供し、及び／又は第１の液体画分（１１）を、蒸発ステップに供することができる、プロセスを提供することができる。

参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９０１１９０４号に説明されているように、第１の固体画分（１２）から分離した後、タンパク質単離物（４２）の製造のために得られた第１の液体画分（１１）を、任意選択で、例えば、自動洗浄フィルター若しくはデプスフィルター（ｄｅｐｔｈ ｆｉｌｔｅｒｓ）などの濾過装置を使用して、別の固液分離ステップに供してもよく、又は第１の液体画分を、第１の液相中に存在することがある固体微粉及び／又は脂質を除去する目的で、ディスクスタック遠心分離機又は同様の装置で遠心分離に供してもよい。

可能な実施形態では、第１の液体画分（１１）を濃縮して第１の液体画分タンパク質濃縮物（１１ｂ）を得て、第１の水性溶媒（１１ａ）を廃棄することは、好ましくは、限外濾過、蒸発、又はそれらの組み合わせを含む。一実施形態では、第１の液体画分（１１）は、中空繊維タイプの濾過膜、セラミック膜、又はスパイラル型膜を備えたＴＦＦ装置において限外濾過に供することができ、前記濾過膜は、第１の液相に存在する、典型的には６～２０ｋＤのタンパク質性物質を保持するのに十分小さい開口サイズ（カットオフサイズ）を有し、一方、第１の液体画分中に存在するペプチド、多糖、オリゴ糖、糖、フェノール化合物、フィテート及び塩のような他の溶質対して透過性である。場合により、この限外濾過濃縮ステップの後、好ましくは、溶解しているか又は沈殿しているかのいずれかである少なくとも１０ｗｔ％の固体を含む、第１の液体画分濃縮物（１１ｂ）を製造するために、真水による、又は塩を含み、任意選択により更なる添加剤を含む水溶液による、限外濾過保持液のダイアフィルトレーションステップを使用し、このような第１の液体画分濃縮物（１１ｂ）中のタンパク質含有量は、濃縮物の総乾燥重量に基づき、少なくとも４０ｗｔ％、好ましくは少なくとも５０ｗｔ％であり、タンパク質濃縮物は、タンパク質濃縮物の総重量に基づき５０～９０ｗｔ％の水を含む。任意選択で、過剰な水（１１ａ）を除去するために、第１の液体画分濃縮物（１１ｂ）を真空下で蒸発させてもよい。国際公開第２０１９０１１９０４号で説明されているように、当業者であれば、濾過、沈降、遠心分離などを含むいくつかの異なる好適な濃縮技術を、第１の液体画分（１１）の異なる画分又は部分に適用することができること、更に、得られた濃縮製品を、その後プールして、最終的なタンパク質濃縮第１の液体画分濃縮物（１１ｂ）を形成することができ、これを、本明細書に提示される方法に従って更に処理して、タンパク質単離物（４２）を製造することができることを理解しているであろう。

上記実施形態の有利な実施形態では、タンパク質単離物（４２）は、乾燥物に基づき少なくとも７０ｗｔ％の天然の植物系タンパク質を含み、好ましくは、１ｗｔ％未満の炭水化物、及び／又は０．２ｗｔ％未満のフェノール化合物を含み、及び／又は６個以上の炭素原子を有する有機溶媒若しくは無機溶媒を含まない。

有利な実施形態では、タンパク質－繊維製品（４４）又はタンパク質単離物（４２）のいずれかである、ステップｈ）の開示されたプロセスによって得られるタンパク質濃縮製品（４２、４４）中の共沸溶媒の残留量は、食品当局によって要求される許容レベルを下回っており、典型的には１０００ｐｐｍ未満、好ましくは１００ｐｐｍ未満、更により好ましくは３０ｐｐｍ未満である。

開示された方法の可能な実施形態の種々の態様は、使用される植物材料（１）の選択、特にその脂肪及び脂質、及び／又は繊維の含有量に依存し得る。植物材料（１）は、好ましくは、野菜、果物、種子、豆果、穀物、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。可能な実施形態では、植物材料（１）は植物原材料であり、これは粗製の未処理の植物材料であることを意味する。植物材料（１）の例としては、菜種、キャノーラ、ヒマワリ、ベニバナ、又は綿実を含む油糧種子が挙げられる。代替例としては、大豆及び他の豆のような豆類（ｐｕｌｓｅｓ）、豆果（ｌｅｇｕｍｅｓ）、並びにヒヨコ豆、赤レンズ豆、緑レンズ豆、黄レンズ豆、及び茶レンズ豆などを含む豆（ｐｅａｓ）が挙げられる。有利な実施形態では、植物材料（１）は、菜種、キャノーラ、ヒマワリの種、亜麻仁、ベニバナの種、綿実、及びそれらの組み合わせを含む油糧種子からなる群から選択され、植物材料は好ましくは菜種、大豆、又はヒマワリである。

植物原材料、例として、菜種、キャノーラ、ヒマワリ、ベニバナ、綿実などの油糧種子、大豆及び他の豆のような豆類、豆果並びにヒヨコ豆、赤レンズ豆、緑レンズ豆、黄レンズ豆、及び茶レンズ豆などの豆、は、それらの天然タンパク質含有量のかなりの割合が、アルブミン及び／又はグロブリンと呼ばれるタンパク質のクラスに属するという共通の特徴を共有し、すなわち、それらは、水並びに／或いはＮＨ^４＋、Ｌｉ^＋、Ｎａ^＋、Ｋ^＋、Ｍｇ^２＋、Ｃａ^２＋のようなカチオン及び／又はＣｌ^－、ＳＯ４^２－、ＳＯ３^２－、ＨＳＯ^３－のようなアニオンを含有する無機塩の水溶液に可溶性である。タンパク質以外に、これらの植物原材料には、典型的には、植物材料のタイプに応じてさまざまな割合で存在する他のタイプの化合物も含まれる。前記他の化合物は、典型的には、糖類（多糖、オリゴ糖、単糖）、デンプン、フィテート、フェノール化合物、繊維成分、非タンパク質窒素化合物などである。植物原材料中に存在し得る成分のうちの注目に値する異なるクラスの１つは、４～２８個の範囲内の数の炭素原子を有する脂肪酸で構成された分子構造中に非極性部分を有するという共通の特徴によって特徴付けられる、脂質、例として、脂肪、油、リン脂質、糖脂質などを包含する。

当業者は、本発明の教示による処理の前に、種子全体、豆、又は穀物の形態の植物原材料を、前選択及び／又は乾燥分別、例えば、脱ぷ処理（すなわち、さや及び種子の外皮の除去）に供してもよいことを理解するであろう。そのような操作は、乾式分別によって除去することができる部分のタンパク質含有量が、タンパク質製品を得る目的で更なる処理に供される部分のタンパク質含有量よりも著しく低い場合に、特に有利であり得る。

したがって、一実施形態では、例えば、植物原材料が、種子全体、豆、又は穀物を含む場合に、ステップａ）前の植物材料から、好ましくは脱ぷ処理、剥皮処理、乾式分別、又はそれらの組み合わせの好適な方法を使用して、被膜、樹皮、殻、外皮などの形態を有するタンパク質が乏しくリグニンが豊富な外層を、少なくとも部分的に枯渇させる、プロセスを提供することができる。

典型的には、油糧種子及び大豆の場合、植物原材料中に存在する脂肪、油及び脂質の一部は、押出成形又はコールドプレスなどの機械的手段によって植物原材料から抽出されて、油糧種子ケーキを生成し得るか、或いは前記脂肪、油、及び脂質を、化学的手段、例としてヘキサンなどの無極性で親油性の溶媒での抽出、によって抽出することができる。ヘキサン抽出が使用される従来のプロセスでは、典型的には、蒸気及び高温を使用して、意図的に設計された脱溶剤／トーストステップでミールから残留ヘキサンを除去する。そのような処理は、ミール中に存在するタンパク質の部分的かつ不可逆的な変性並びに溶解性及び／又は脂質と安定なエマルジョンを形成する能力などの関連する機能的特性の損失が原因で、ミール中のタンパク質の品質に悪影響を与える場合がある。

上記を考慮して、考えられる実施形態では、植物材料は、ステップａ）の前に、機械的手段、好ましくはコールドプレスを使用して少なくとも部分的に脱脂処理される。好ましくは、機械的手段を使用する脱脂処理ステップにおいて、有機溶媒も無機溶媒も使用されない。また、好ましくは、植物原料は７５℃を超える温度に加熱されない。

開示されたプロセスの利点は、植物原材料がかなりの量の脂肪、油及び／又は脂質を含有する場合に、特に顕著である。したがって、一実施形態では、植物原材料は、乾燥重量ベースで少なくとも５ｗｔ％、より好ましくは少なくとも１０ｗｔ％、更により好ましくは少なくとも１５ｗｔ％の脂肪、油及び脂質を含む。

示されているように、植物原材料の粉砕又は細分は、開示された方法のステップａ）で実行する。このステップにより、抽出に使用される第１の水性溶媒中での植物材料の分散及び懸濁が容易になる。そうすることにより、粉砕又は細分された植物原材料（別名、固体ケーキ２）と、抽出のために使用された第１の溶媒との間の効果的な物質移動のための条件が容易となる。

一実施形態では、ステップｂ）の第１の溶媒は、水、又はＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＣａＣｌ_２などの塩を含み、任意選択で更なる添加剤を含む水溶液である。

粉砕又は細分された植物原材料から第１の溶媒への水溶性成分の抽出は、懸濁又は分散された固相と、第１の溶媒の連続液相との間の物質移動を促進するために好適な任意の技術、例えば、
ｉ）ＳＴＲにおいて混合すること；
ｉｉ）充填床として固定化された、粉砕又は細分された植物原材料を、充填床を通って浸出する第１の溶媒と接触させること；
ｉｉｉ）粉砕又は細分された植物原材料を、上向きに流れる第１の溶媒に懸濁させることによって、植物原材料を接触させること；又は
ｉｖ）粉砕又は細分された植物原材料を、重力及び／又は遠心力の作用によって第１の溶媒中において沈降させることにより、材料を、第１の溶媒と接触させること、
によって達成することができる。

当業者は、粉砕又は細分された植物原材料を第１の溶媒と接触させる全てのこれらの手段及びメカニズムが、接触装置において発生する剪断の量によって特徴付けられる２つの異なるクラスに分割することができることを理解する。充填床、膨張床若しくは流動床におけるような、低剪断モードの操作において、又は重力沈降の際、接触装置における剪断力及び速度勾配は、粉砕又は細分された植物原材料の完全性が実質的に保持され、並びに粉砕又は細分された植物原材料と第１の溶媒との間の物質移動が、主に、粉砕又は細分された植物原材料から、停滞しているか又は穏やかに流れる第１の溶媒中への可溶性成分の拡散によって支配され、その一方で、繊維及び脂質のような非可溶性成分は、主にそのまま残され、固体マトリックス中に捕捉される。対照的に、ＳＴＲのような高剪断モードの操作を使用する場合、特に撹拌機の付近では撹拌による剪断速度が１００ １／秒を十分超える場合があり、撹拌装置によって発生する速度勾配及び／又は乱流の破壊的な効果のため、粉砕又は細分された植物原材料の完全性は通常保存されないであろう。実際、粉砕又は細分された植物原材料の粒子は、断片化を受け、その後、微粉及び脂質などの構成成分が液相に放出される場合がある。これらの微粉及び脂質の放出は、抽出ステップの更なる下流のプロセスに対する悪影響を及ぼす場合がある。高剪断装置におけるタンパク質及び脂質の共抽出は、タンパク質、脂質、固体微粉、及び抗栄養因子が、グリース様非晶質体に捕捉されるマイクロエマルジョンの形成を引き起こす場合があり、それは、処理装置に対して重大な問題を引き起こし、タンパク質の分別、精製、及び単離のプロセスを実行不可能にする場合がある。したがって、更なる実施形態では、ステップｂ）における水溶性成分の抽出は、低剪断条件下で実行される。

可能な実施形態では、ステップｂ）とステップｃ）との間で、ステップｂ）で得られた第１の固体画分と第１の液体画分との混合物中に存在する脂肪、油及び脂質の少なくとも一部を、好ましくは、遠心分離、濾過、又はそれらの組み合わせを使用して除去する方法が提供される。更に有利な実施形態では、ステップｃ）における第１の液体画分（１１）の第１の固体画分（１２）からの分離は、遠心分離、沈降、濾過及び／又はそれらの組み合わせから選択される技術を使用して実行する。

ステップｄ）における第２の溶媒を第１の液体画分濃縮物（１１ｂ）又は第１の固体画分（１１）に加えると、液相の極性に影響を与え、タンパク質の溶解度が変化し、それによってタンパク質の沈殿が誘発される場合があり、及び／又はそれぞれ、タンパク質若しくはタンパク質－繊維マトリックスと、糖類、フェノール化合物及び／又はイソフラボンなどの他の成分及び不純物との間の相互作用の性質を、これらの不純物が、タンパク質又はタンパク質－繊維マトリックスそれぞれから解離することができ、後続の固液分離ステップで、それぞれタンパク質単離物又はタンパク質－繊維マトリックスから除去することができるような方法で変える場合もある。したがって、ステップｄ）における第２の溶媒の添加及び第１の溶媒の置換によって、それを行わなければタンパク質又はタンパク質－繊維マトリックスと会合する不純物からの効率的な単離及び／又は精製を容易にすることができ、これらの不純物は、タンパク質又はタンパク質－繊維マトリックスがそれぞれ、第１の（水性）溶媒中にある間は除去しにくい。

プロセスのステップｄ）で使用される第２の溶媒の量は、第１の溶媒中のタンパク質の濃度の程度、第１の溶媒と第２の溶媒の混合物中のタンパク質の溶解度、及び第２の溶媒に関する変性効果によって決まる。一実施形態では、アルコール性の第２の溶媒の量は、ステップｂ）で使用される第１の溶媒対ステップｄ）で使用される第２の溶媒の重量比が１：１０～１：１の間、好ましくは１：３～２：３の間に達するような量である。

ステップｄ）でアルコール性の第２の溶媒を添加した後、主にタンパク質又はタンパク質－繊維が、沈殿した第２の固体画分（それぞれ２２、２４）として存在する混合物が生成され、糖類、フェノール化合物、イソフラボン及び他の不純物などの可溶性化合物は、使用済みのアルコール性の第２の溶媒（２１、２３）である液相中に見出される。脂肪及び脂質が存在する場合、主に固体画分（２２、２４）に会合する。

次に、固体画分（２２、２４）を、濾過、沈降、遠心分離及びそれらの組み合わせからなる群から選択される技術を使用して、ステップｅ）で混合物から単離して、第２の固体画分及び第２の液体画分を得ることができる。当業者によって理解されるように、第２の固体画分（２２、２４）は、プロセスにおいて使用された溶媒、例として、水及び水混和性アルコールなどの微量を含む。第２の固体画分は、プロセスの他のステップで除去されなかった脂肪及び脂質の残留物も含有する場合がある。

当業者は更に、第２の固体画分（２２、２４）の単離後、タンパク質生成物の純度を更に向上させるために、追加の洗浄ステップを使用することができ、これにより、アルコール性の第２の溶媒の未使用部分を第２の固体画分（２２、２４）に加え、その後、濾過、沈降、遠心分離及びそれらの組み合わせからなる群から選択される好適な固液分離ステップを行うことができることを理解するであろう。したがって、可能な実施形態では、ステップｅ）の後かつステップｆ）の前に、第２の固体画分（２２、２４）を、アルコール性の第２の溶媒を使用する追加の洗浄ステップに供し、続いて固液分離ステップに供されるプロセスが提供される。

次に、ステップｆ）で得られた固液混合物は、好ましくは、ステップｇ）において、濾過、沈降又は遠心分離を使用して、使用済みの共沸溶媒を含む第３の液体画分（３１、３３）と第３の固体画分（３２、３４）とに分離される。したがって、定型的な実施形態では、ステップｅ）又はｇ）のいずれかにおける分離が、濾過、沈降、遠心分離及びそれらの組み合わせからなる群から選択される技術を含む方法を提供することができる。

本明細書に開示される共沸性の第３の溶媒の作用による脂質及び他の無極性不純物の除去により、タンパク質又はタンパク質－繊維マトリックスの純度は更に改善される。当業者はまた、第３の固体画分（３２、３４）の単離後、純度を更に向上させるため、及び／又は第１及び第２の溶媒の残留物を更に除去するために、追加の洗浄ステップを使用でき、これにより、共沸性の第３の溶媒の未使用部分を第３の固体画分（３２、３４）に加え、その後、濾過、沈降、遠心分離及びそれらの組み合わせからなる群から選択される好適な固液分離ステップを行うことができることを理解するであろう。したがって、可能な実施形態では、ステップｇ）の後かつステップｈ）の前に、第３の固体画分（３２、３４）を、共沸性の第３の溶媒を使用する追加の洗浄ステップに供し、続いて固液分離ステップに供されるプロセスが提供される。当然のことながら、上述したような本開示の一般的な有利な原理に従って、有利である可能な実施形態では、洗浄ステップのいずれか１つで使用された共沸溶媒を直接再利用又はリサイクルすることもでき、或いは共沸溶媒回収用のＳＲＰに送ることもできる。

最後に、それぞれ未乾燥タンパク質単離物又は未乾燥タンパク質－繊維製品のいずれかであり、まだ湿っている、及び／又は共沸性の第３溶媒に浸漬されている第３の固体画分（３２、３４）を、好ましくは、真空乾燥、接触乾燥、対流乾燥、噴霧乾燥、過熱蒸気乾燥、及び／又はそれらの組み合わせから選択される技術による、乾燥ステップｈ）に供する。乾燥ステップｈ）の後、最終の植物タンパク質濃縮製品が得られ、有利には、タンパク質含有量は、第４の固体画分の総乾燥重量に基づき、タンパク質単離物（４２）について９０ｗｔ％を超え、タンパク質－在来繊維含有量はタンパク質－繊維製品（４４）について３０ｗｔ％を超える。

特に、本明細書に開示されるプロセスは、高温又はｐＨの大きな変化などの極端な条件の使用を必要としない。むしろ逆に、開示されたプロセス全体を通じてタンパク質がさらされる温度は、好ましくは０～７０℃の間、より好ましくは０～５５℃の間、より好ましくは４～５０℃の間、より好ましくは４～２０℃の間、最も好ましくは１０～２０℃の間の範囲に維持され、一方、異なるｐＨ値での洗浄ステップが場合により含まれることもあるが、ｐＨは好ましくは４～８の範囲に維持され、これは、高い塩基性ｐＨでの追加の洗浄ステップを含めることは、一部の用途、例えば、マトリックスの繊維状成分を無傷のまま残しながら、タンパク質及び脂質などの塩基性溶液に可溶な成分を洗い流す場合に役立つ可能性があるためである。

上述のように、植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）を得るために開示されたプロセスは、特に溶媒の選択により食品での使用に最適化されている。したがって、重要な追加の態様では、ヒトの食品又は動物の飼料として注目される、消費用の植物タンパク質を得るための、本明細書に開示される方法及びその結果得られる植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）の使用が本明細書に提示される。

本開示の基礎となる概念は、上で考察した異なる実施形態を参照して説明された。これらの実施形態は、当業者には周知の種々の修正及び代替形態が可能であることが認識されるであろう。

更に、本明細書及びその特許請求の範囲を適切に理解するために、「含む（ｔｏ ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という動詞及びその活用は、その単語に続く項目が含まれるが、特に言及されていない項目が除外されるものではないことを意味する非限定的な意味で使用されることを理解されたい。加えて、不定冠詞「ａ」又は「ａｎ」による要素への言及は、文脈上、要素が１つだけであることを明確に要求しない限り、要素が２つ以上存在する可能性を除外するものではない。したがって、不定冠詞「ａ」又は「ａｎ」は通常、「少なくとも１つ」を意味する。

［実施例］
実施例１－菜種タンパク質単離物Ｒａｐｔｅｉｎ（商標）９０の調製のためのプロセス
Ｓ－１５７及びＳ－１５９としてタグ付けされた２つの実験を実行し、得られたＲＰＩ（菜種タンパク質単離物）の試料の化学純度及び機能性を比較した。試料Ｓ－１５７ ＲＰＩを生成する実験では、回収された共沸物を、約７６％ｗ／ｗの酢酸エチル、＜０．１％の水、任意の（ａｄ ｌｉｍｉｔｕｍ）エタノールの組成を有する第３の溶媒として使用した。

試料Ｓ－１５９ＲＰＩを生成する実験では、技術的純度（＞９６％）ｗ／ｗの酢酸エチルを第３の溶媒として使用した。

共沸物の回収は、タンパク質単離物及びタンパク質－繊維製品の製造に使用された使用済みの溶媒から実行した。回収は、温度４０℃、絶対圧１４０ｍｂａｒの２０Ｌ回転蒸発器（Ｈｅｉｄｏｌｐｈ）中で達成した。共沸物の回収に使用した使用済みの溶媒混合物の主成分は、酢酸エチル、エタノール、水、菜種由来の脂質、例として油及びリン脂質など、並びにプロセスで使用する塩：ＮａＣｌ、ＣａＣｌ_２であった。

出発材料は、菜種加工会社から供給された。Ｓ－１５９の場合、ケーキは通常品質のコールドプレスされた菜種ケーキ（種皮／外皮が存在する）であり、Ｓ－１５７の場合、ケーキはコールドプレスされた菜種穀粒であり、種皮／外皮がなかった。
これら２つの実験の出発材料の組成を、以下に示す（％ｗ／ｗＤＷ、水分含有量を除く）：

菜種タンパク質単離物を取得するプロセスのプロトコールは、試料Ｓ－１５９とＳ－１５７の両方で同様であり、以下で説明する。

抽出ステップ
６ｋｇの菜種ケーキを、抽出媒体：０．９％ＮａＣｌ、０．１％Ｎａ_２ＳＯ_３、０．１％Ｅ２１１、０．１％ＥｔＯＨ、任意の水中で懸濁させた。抽出ユニットは、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９０１１９０４号に記載されている３０Ｌ ＡＬＳＥＯＳ装置である。温度を１５℃に、及び天然ｐＨ＝５．８に維持した。２ＣＶ＝約６０Ｌの粗抽出物を、ＡＬＳＥＯＳユニットへの出入りの流量約１５Ｌ／時間で４時間の処理時間後に収集した。

清澄化ステップ
収集した粗抽出物を０．１Ｎ ＮａＯＨでｐＨ＝６．８にｐＨ調整し、ＳＴＲ中で２０分間インキュベートした後、抽出物を４０００Ｇのバケット遠心分離機で固液分離して、上清相として清澄化抽出物を回収した。
［留意点：ＡＬＳＥＯＳ装置での抽出ステップは、６ｋｇの菜種ケーキを８０Ｌの抽出媒体に加え、穏やかに撹拌しながらスラリーを１５℃、天然ｐＨ＝５．８で４時間インキュベートすることにより、撹拌槽型反応器で再現することができ（アンカータイプ又はハイドロフォイルインペラ使用する懸濁直後の状態）、続いて、ｐＨ＝６．８にｐＨ調整し、続いて４０００×Ｇでのバケット遠心分離機などの好適な技術を使用した固液分離ステップを行って、上清相として清澄化抽出物を回収する。］

ＵＦ／ＤＦステップ
次に、清澄化抽出物を、透析媒体として脱塩水を使用し、１０ｋＤａ（中空繊維、ＧＥ、ＵＦＰ－１０－Ｅ－８Ａ）を使用するクロスフロー膜濾過ユニットでＵＦ／ＤＦステップに供した。ダイアフィルトレーション容積の量は、清澄化抽出物の元の容積の約２倍であった。導電率が７ｍＳ／ｃｍ未満に達した後、保持液を、最終保持液中の乾燥固体含有率が約５％になるまで濃縮した。

エタノールステップ
ＵＦ／ＤＦステップからの濃縮ＵＦ保持液を、実験Ｓ－１５９ではエタノール（純度＞９２％ｗ／ｗ）で、実験Ｓ－１５７ではエタノール（純度＞９６％）で処理に供した。エタノール対ＵＦ保持液の比は、両方の実験において１．９：１（ｗ／ｗ）であった。エタノールの添加は、ＳＴＲ容器内で激しく撹拌しながら１５分で完了した。温度を５℃に保持した。更なる１５分間のインキュベーション時間の後、混合物を、４０００×Ｇで２０分間（分）バケット遠心分離機を使用する固液分離ステップに供した。湿潤したペレットを更なる処理のために採取し、上清を廃棄した。

酢酸エチル洗浄ステップ
エタノールステップからの湿潤したペレットを、酢酸エチル溶媒（溶媒３）と、比率（ｗ／ｗ）５：１、溶媒３：湿潤したペレット５：１で混合した。
試料（Ｓ－１５９）には、技術的品質（＞９６％ｗ／ｗ）の酢酸エチルを使用した。
試料（Ｓ－１５７）には、回収した共沸物（７６％（ｖ／ｖ）酢酸エチル、＜０．１％水、任意のエタノール）を使用した。

第３の溶媒の添加は、ＳＴＲ装置内で激しく撹拌しながら完了した。更なる１５分間のインキュベーション時間の後、得られた混合物を、４０００×Ｇで２０分間バケット遠心分離機で固液分離ステップに供した。湿潤したペレットを更なる処理のために採取し、上清を廃棄した。

乾燥ステップ
酢酸エチル洗浄ステップから得られた湿潤したペレットを、以下を含む乾燥手順に供した：絶対圧４００ｍｂａｒ、及び４０℃の真空トレーチャンバ乾燥機内で、ケーキを水分含有量約１％まで乾燥させ、その後ケーキをグライディング／較正して４０～１５０ミクロンの間のＰＳＤ（粒度分布）を取得し、その後、較正された粉末を、５０ｍｂａｒの真空チャンバ内で４０℃にて４８時間更に乾燥させた。
同じ手順を、試料Ｓ－１５７及びＳ－１５９に適用した。
得られた試料の化学組成及び機能性を分析した。

結果を以下の表１に示す。

結論
菜種タンパク質単離物の両方の試料は、化学純度などの重要な品質特性の必要なプロファイルを満たしており、機能特性の点で同等である。

実施例２－菜種タンパク質－繊維製品Ｒａｐｔｅｉｎ（商標）３０の調製のためのプロセス
出発材料：
実験Ｓ－１５７及びＳ－１５９からの清澄化ステップ後のバケット遠心分離機での固液分離ステップ後のペレット相（湿潤したケーキ）を使用して、それぞれＳ－１５７ ＰＦＰ及びＳ－１５９ ＰＦＰとしてタグ付けされた菜種タンパク質－繊維製品の試料を製造した。

塩洗浄ステップ
乾燥重量約１５～２０％を含有するペレットを、ＳＴＲ容器内で以下の条件で塩洗浄に供した：ｐＨ＝４（０．１ＨＣｌで調整）、温度約１５℃、媒体 水中２％ＮａＣｌ、比率５：１（ｗ／ｗ媒体：ペレット）、インキュベーション時間 穏やかな撹拌下で３０分（懸濁直後の状態）。その後、混合物を、４０００×Ｇで２０分間、バケット遠心分離機で固液分離ステップに供した。ペレットを更なる処理のために採取し、上清を廃棄した。

アルコール洗浄ステップ
塩洗浄ステップから得られたペレット（湿潤したケーキ）を、純度（７０％ｖ／ｖ、６４％ｗ／ｗ）のエタノール、任意の水と混合した。エタノール：ペレットの比率５：１（ｗ／ｗ）。
穏やかに撹拌しながらＳＴＲ中で混合（懸濁直後の状態）、インキュベーション時間１５分、温度約１５℃。その後、混合物を、４０００×Ｇで２０分間、バケット遠心分離機で固液分離ステップに供した。ペレットを更なる処理のために採取し、上清を廃棄した。

第１の酢酸エチル洗浄ステップ
アルコール洗浄ステップからのペレットを第３の溶媒と混合した。Ｓ－１５９の場合、第３の溶媒は酢酸エチル（＞９６％ｗ／ｗ）であった。Ｓ－１５７の場合、酢酸エチル（７６％ｖ／ｖ）とエタノールの回収された共沸物であった。この溶媒混合物中の水含有量は＜０．１％であった。比率：５：１（第３の溶媒：ペレット）。
激しく撹拌しながらＳＴＲ中で混合、インキュベーション時間１５分、温度約１５℃。その後、混合物を、４０００×Ｇで２０分間、バケット遠心分離機で固液分離ステップに供した。ペレットを更なる処理のために採取し、上清を廃棄した。

第２の酢酸エチル洗浄ステップ
第１の酢酸エチル洗浄ステップからのペレットを第３の溶媒と混合した。Ｓ－１５９の場合、第３の溶媒は酢酸エチル（９６％ｗ／ｗ）であった。Ｓ－１５７の場合、酢酸エチル（７６％ｖ／ｖ）とエタノールの回収された共沸物であった。この溶媒混合物中の水含有量は＜０．１％であった。比率：５：１（第３の溶媒：ペレット）。
激しく撹拌しながらＳＴＲ中で混合、インキュベーション時間１５分、温度約１５℃。その後、混合物を、４０００×Ｇで２０分間、バケット遠心分離機で固液分離ステップに供した。ペレットを更なる処理のために採取し、上清を廃棄した。

乾燥ステップ
第２の酢酸エチル洗浄ステップからの湿潤したペレットを、水分含有量が＜１％（ｗ／ｗ）に達するまで、４０℃、絶対圧４００ｍｂａｒの真空チャンバ乾燥機に入れた。その後、材料を粉砕機でグライディング／較正して、ＰＳＤ（粒度分布）４０～１５０ミクロンを達成した。その後、材料を４０℃、絶対圧５０ｍｂａｒの真空チャンバ乾燥機に２４時間入れた。
タンパク質－繊維製品の試料を分析し、化学組成及び機能性を比較した。

結果を表２に示す。

結論
菜種タンパク質－繊維製品の両方の試料は、化学純度などの重要な品質特性の必要な標的プロファイルを満たしており、機能特性の点で同等である。

実施例３－菜種／大豆タンパク質濃縮製品の製造のために回収された共沸混合物を使用したさまざまな溶媒組成でのパイロット実験及び化学純度などの前記製品の重要な品質特性の評価

目的及び実験セットアップ：
パイロット実験の主な目的は、溶媒の組成及び回収を大幅に簡素化したにもかかわらず、油糧種子、豆果、又はレンズ豆などからの油、脂肪、及び／又は脂質を大量に含有する難易度の高い植物材料からでも、高品質の植物タンパク質濃縮製品を得ることができることを更に実証することであった。

この目的を達成するために、酢酸エチル（ＥＡ）洗浄ステップに必要な５つの異なる溶媒組成を使用して実験を実施し、これらは全てタンパク質－繊維製品を得るために使用し、そのうちの４つはタンパク質単離製品を得るために使用した。実験は、２つの異なる原材料、すなわち、脱皮菜種ケーキ（ＤＲＣ）及び大豆（必要に応じて、それぞれ菜種又は大豆タンパク質濃縮製品と更に呼ぶ）に対して同じ方法で実行した。次に、化学組成及び／又は機能特性に関する分析データは、本明細書に記載のプロセスに従って得られた菜種／大豆タンパク質濃縮製品を使用して、すなわち純粋な溶媒の代わりに回収された共沸混合物を使用して生成した。

酢酸エチルの回収
酢酸エチルの回収は、ＮａｐｉＦｅｒｙｎ ＢｉｏＴｅｃｈ Ｓｐ． ｚ ｏ．ｏ．， Ｐｏｌａｎｄの出願国際公開第２０１９０１１９０４号及び国際公開第２０２００１６２２２号に開示されているように、タンパク質単離物及びタンパク質－繊維濃縮物の製造プロセスで最初に使用された使用済みの溶媒から実行した。回収は、温度４０℃、絶対圧１４０ｍｂａｒの２０Ｌ回転蒸発器（Ｈｅｉｄｏｌｐｈ）中で実行した。共沸物の回収に使用した使用済みの溶媒混合物の主成分は、酢酸エチル、エタノール、水、菜種由来の脂質、例として油及びリン脂質など、並びにプロセスで使用する塩：（例えば、ＮａＣｌ）であった。回収された溶媒（すなわち、２０Ｌ Ｈｅｉｄｏｌｐｈ蒸発器からの軽質留出物）の平均組成を以下の表３に示す。

プロセスの詳細な説明
２つの主要なタンパク質製品：タンパク質単離物及びタンパク質－繊維濃縮物を、プロセスバッチ番号Ｒ－２０、Ｒ－２１で得た。

実施された実験は、ＥＡ（酢酸エチル）洗浄ステップで純粋な溶媒を共沸物に置き換えることを目的としていた。異なる溶媒組成を以下の表４に示した。

プロセスは、以下のプロセスの説明に従って実行した。

各プロセスの開始時に、原材料を調製した：Ｒ－２０の場合は全脂大豆、Ｒ－２１の場合は脱皮菜種ケーキ（ＤＲＣ）をミリングして篩にかけ、ＲＯ水に塩を溶解して媒体を調製した。この溶液には、塩化ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム及びエタノールが含まれていた。

１）大豆：Ｒ－２０
プロセスは抽出ステップから始まり、原材料Ｒ－２０を加え、希塩溶液（媒体）と穏やかに混合した。この段階で、原材料懸濁液を得た。スラリーの温度を６℃のレベルに制御し維持した。大豆スラリーからのタンパク質の抽出は２４時間続いた。得られたＲＡＥ（抽出後の残留物）を遠心分離して３つの画分：脂肪（廃棄）、ＣＥ１（粗抽出物－単離物に加工）、及び穀粒（濃縮物の出発材料）、に分けた。

ＣＥは、ＵＦ／ＤＦ（限外濾過及びダイアフィルトレーション）のために、クロスフロー濾過システムに向かう途中で１μｍフィルターを通過した。濾過の第１のステップ中に前濃縮が行われ、その後、３つの異なるダイアフィルトレーション係数（酢酸緩衝液、０．９％ＮａＣｌ、脱塩水）を使用して、ダイアフィルトレーションステップを実行した。その後、最終濃縮を行った。その結果、ＣＥはほぼ４倍に濃縮され、そのダイアフィルトレーション係数は１０に等しく、約１０％（ｗ／ｗ）の固体含有量及び約５ｍＳ／ｃｍの導電率が生じるＵＦ保持液が得られた。

次に、ＵＦ保持液を、エタノール誘導沈殿（Ｅｔｈａｎｏｌ Ｉｎｄｕｃｅｄ Ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ）（ＥＩＰ）に供した。このプロセスステップでは、より低い温度の保持液（＜３０℃）を使用し、その温度に達した後、タンパク質を沈殿させるために、混合しながら冷却したエタノール溶液（９０％ＥｔＯＨ＋１０％Ｈ２Ｏ）を材料に徐々に加えた。

アルコールの体積は、ＵＦ／ＤＦ濃縮物の量及び最終濃度７０％ｖｏｌ／ｖｏｌ＝６４％（ｗ／ｗ）の設定値によって決定した。タンパク質の変性を回避するために、エタノールの添加は、ゆっくりと行った。

およそ２５分間混合した後（投与時間を含む）、得られたエタノール懸濁液を遠心分離機に供給した。ＳＬＳステップの後、２つの画分：タンパク質が豊富な残留物（更に処理された）と、約６４％のエチルアルコールを含有する上清の母液１（ＭＬ１）（後で濃縮物のラインでのＥｔＯＨ洗浄に使用）があった。

ＥＩＰステップからの固体残留物を４つの部分に分割し、続いてそれらのそれぞれを異なる溶媒と混合した：表４に列挙されている組成に従って、純粋な酢酸エチル又は異なる共沸物からの範囲である。

溶媒の体積は、タンパク質残留物の量によって決定した。次に、得られた懸濁液を遠心分離機に移し、そこで固体画分と液体画分に分離した。ＳＬＳステップの後、高脂肪含有量に関する材料の特性により、ＥＡＷ（酢酸エチル洗浄）を繰り返した。得られたタンパク質が豊富なケーキを、乾燥段階（後述）に移し、液体画分を、溶媒回収手順（ＳＲＰ）のために保存するか、濃縮物のラインで使用した。

タンパク質繊維濃縮物の製造は、抽出後残留物（ＲＡＥ）から穀粒が得られたときに開始した。その後、穀粒は、エタノール（ＭＬ１）及び純粋な酢酸エチル又は共沸物を溶媒として使用して、４つの洗浄ステップを経た。第１の洗浄ステップはＭＬ１を利用し、これを穀粒と混合した。次に、得られた懸濁液を遠心分離機に移し、そこで固体画分と液体画分に分離した。その後、ＥｔＯＨ穀粒を５つの画分に分割し、それぞれを異なる溶媒：表４に列挙されている組成に従って、純粋な酢酸エチル又は共沸物、と混合した。次のステップは、単離物のＥＡＷと同じ方式で実行した。ＳＬＳステップの後、材料の特性によりＥＡＷを２回繰り返した（合計３回のＥＡ洗浄）。過剰な脂質を除去するために、第２及び第３の酢酸エチル洗浄を実行した。得られたタンパク質－繊維が豊富なケーキを、乾燥段階に移し、液体画分を、ＳＲＰのために保存した。

２）脱皮菜種ケーキ（ＤＲＣ）：Ｒ－２１
Ｒ－２０に関しては、プロセスは抽出ステップから始まり、そこでは、原材料Ｒ－２１を加え、希塩溶液（媒体）と穏やかに混合した。この段階で、原材料懸濁液を得た。スラリーの温度を６℃のレベルに制御し維持した。

ＤＲＣスラリーをＡＬＳＥＯＳユニット（国際公開第２０１６０９３６９８号に記載）にポンプで送り込み、スラリーから粗抽出物を抽出するプロセスを開始した。処理中、塩溶液を絶えずＡＬＳＥＯＳユニットに加え、粗抽出物を、撹拌槽型反応器に収集した。タンパク質の抽出は６時間続いた。

抽出ステップ（１ＣＶ＝２００Ｌを超える粗抽出物が収集された後）では、ＡＬＳＥＯＳユニットからのＲＡＥを、遠心分離機に供給し、ここで、混合物を、２つの画分－水系の上清（ＣＥ１と一緒にプールされたＣＥ２）と穀粒（濃縮物に更に処理される）に分離した。

プールされた粗抽出物（ＣＥ１及びＣＥ２）を、０．５Ｍ水酸化ナトリウムを加えてｐＨを６．８の値に調整した。抽出物を４５℃に加熱し、その後、６．８の値へのｐＨ調整を繰り返した。次のプロセスステップでは、ループ内の５μｍフィルターを通過させ、その後クロスフロー濾過システムに向かう途中で１μｍフィルターを通過させることによってＣＥを清澄化し、そこでＣＥは、ＵＦ／ＤＦ（限外濾過及びダイアフィルトレーション）に向けられた。濾過の第１のステップ中に前濃縮が行われ、その後、４つの異なるダイアフィルトレーション係数（酢酸緩衝液、２％ＮａＣｌ、０．４５％ＮａＣｌ、脱塩水）を使用してダイアフィルトレーションを行い、その後最終濃縮を行った。その結果、ＣＥはほぼ４倍に濃縮され、そのダイアフィルトレーション係数は４２に等しく、約６％（ｗ／ｗ）の固体含有量及び約４ｍＳ／ｃｍの導電率が生じるＵＦ保持液が得られた。このＵＦ保持液は、６．８の値に調整されたｐＨを有し、その後、残っているフィテートを除去するために遠心分離した。次に、タンパク質を含有する保持液上清を、エタノール誘導沈殿（ＥＩＰ）に供した。このプロセスステップでは、より低い温度の保持液上清（＜３０℃）を必要とし、その温度に達した後、タンパク質を沈殿させるために、冷却したエタノール溶液（９０％ＥｔＯＨ＋１０％Ｈ２Ｏ）を、絶えず混合した材料に加えた。アルコールの体積は、ＵＦ／ＤＦ濃縮物の量及び最終濃度７０％ｖｏｌ／ｖｏｌ＝６４％（ｗ／ｗ）の設定値によって決定した。タンパク質の変性を回避するために、エタノールの添加は、ゆっくりと行った。

およそ２５分間混合した後（投与時間を含む）、得られたエタノール懸濁液を遠心分離機に供給した。ＳＬＳステップの後、２つの画分：タンパク質が豊富な残留物（更に処理された）と、約６４％のエチルアルコールを含有する上清の母液１（ＭＬ１）（後で濃縮物のラインでのＥｔＯＨ洗浄に使用）があった。

ＥＩＰステップからの固体残留物を４つの部分に分割し、それぞれを異なる溶媒：表４に示す純粋な酢酸エチル又は共沸物と混合した。溶媒の体積は、タンパク質残留物の量によって決定した。次に、産出された懸濁液を遠心分離機に移し、そこで固体画分と液体画分に分離した。得られたタンパク質が豊富なケーキを、乾燥段階（後述）に移し、液体画分を、溶媒回収手順（ＳＲＰ）のために保存するか、濃縮物のラインで使用した。

タンパク質繊維濃縮物の製造は、ＲＡＥから穀粒が得られたときに開始した。その後、穀粒は、塩溶液、エタノール（ＭＬ１）及び純粋な酢酸エチル又は共沸物を溶媒として使用して、５つの洗浄ステップを経た。最初に、穀粒を２回の塩洗浄ステップに供した。第１の洗浄ステップでは、穀粒を２％ＮａＣｌと混合し、ｐＨ値を４．０に調整し、得られた懸濁液を遠心分離機で分離し、穀粒を含む画分と上清の２つの画分を得た。上清を廃棄し、穀粒を０．９％ＮａＣｌ、ｐＨ＝４．０で第２の塩洗浄に供した。次の洗浄ステップはＭＬ１を利用し、これを穀粒と混合した。次に、得られた懸濁液を遠心分離機に移し、そこで固体画分と液体画分に分離した。その後、ＥｔＯＨ穀粒を５つの画分に分割し、それぞれを異なる溶媒：純粋な酢酸エチル又は共沸物（表４による）と混合した。次のステップは、単離物のＥＡＷと同じ方式で実行した。ＳＬＳステップの後、ＥＡＷを繰り返した（合計２回のＥＡ洗浄）。過剰な脂質を除去するために、第２の酢酸エチル洗浄を実行した。得られたタンパク質－繊維が豊富なケーキを、乾燥段階に移し、液体画分を、ＳＲＰのために保存した。

３）固体の取り扱い：乾燥、ミリング、較正、包装（Ｒ－２０、Ｒ－２１）
ＲＰＩ（タンパク質単離物）とＲＰＣ（タンパク質－繊維濃縮物）を、３つの乾燥段階に送った。

第１の乾燥ステップでは、溶媒の大部分を除去した。その後、残留溶媒を、加湿空気を使用して除去した。最終段階では、設定値の９３％ＤＷに達するまで製品を乾燥させた。

第１の乾燥ステップは、トレイ真空乾燥機内で真空下にて実行した。乾燥温度は６０℃に相当し、圧力を１４０ｍｂａｒに設定し、このプロセスの継続時間は材料の量に応じておよそ１６～４８時間であった。次のステップでは、材料をミリングし、篩にかけ、粒径が確実に１５０μｍ未満になるようにした。

第２の乾燥ステップは、乾燥媒体として前加湿した空気を使用し、残留溶媒を水蒸気で置換するように設計された。これを容易にするために、材料を水バブラーを備えた真空トレイ乾燥機に入れた。６４０～１４０ｍｂａｒの圧力の変動により、半連続的な空気の流れが可能になった。温度を４０℃に保持し、持続時間は、典型的には７２時間であった。

最終の（第３の）乾燥ステップでは、圧力を８００ｍｂａｒに設定し、５時間かけて温度を６０℃まで上昇させ、その後、更に５時間かけて圧力を４０ｍｂａｒに下げた。最後の２つのステップは、材料の湿度が設定値の５～７％ｗ／ｗに確実に達するように指定された。最終製品を、更なる分析のためにサンプリングし、ラベル付きスタンドアップパウチ（Ｄｏｙｐａｃｋｓ）に詰めた。

原材料の特性を以下の表５に示す。

結果
パイロット実験の結果を表６～１２及び図７～４６に示す。

結論
本明細書に提示される、異なる溶媒組成を用いたパイロット実験は、純粋な溶媒の代わりに回収された共沸物を使用して、有利な品質特性内で菜種／大豆タンパク質濃縮製品の効率的な製造を実証する。タンパク質製品を生成し、その組成及び機能の観点から分析した。結果に基づき、以下の結論が得られる：

１．各原材料（大豆、ＤＲＣ）について、共沸物により得られた製品が７つ、純粋な溶媒により得られた製品が２つあり、次にそれらを１つの製品タイプ（タンパク質単離物又はタンパク質－繊維濃縮物）内で比較した。

２．タンパク質単離物（大豆、ＤＲＣ）の全ての試料は、化学純度などの重要な品質特性に関する所望の要件を満たしており、機能特性の点で同等であった。

３．純度の低い溶媒（酢酸エチル含有量が７０％を超える共沸物）の使用は、測定された製品の化学組成にもその機能にも大きな影響を与えなかった。したがって、続いて追加の研究を行って、工業規模の製造では純度の低い溶媒の使用が推奨され、コストの削減につながると結論付けることができる。これらの目的を達成することにより、これまでの既知の方法と比較して溶媒回収プロセスを根本的に簡素化し、同時に、同様の高品質の植物タンパク質濃縮製品を提供することができる。

４．更に、含水量の高い溶媒で洗浄したタンパク質－繊維製品（組成物５）は灰分レベルが低く、これはプラスの側面として認識されており、塩の溶解と相関している場合がある。

分析方法の説明
乾燥物含有量
試料（植物原材料の場合は２．０±０．５ｇ、タンパク質単離物／濃縮物の場合は１．０±０．５ｇ）を、１０５℃の温度で水分分析装置に置いた。水分含有量は、乾燥前後の試料重量の差から決定した。

タンパク質含有量
１）実施例３におけるタンパク質含有量は、ＡＯＡＣ公式法（ＡＯＡＣ Ｏｆｆｉｃｉａｌ Ｍｅｔｈｏｄ）９９２．２３（１９９２）に従って決定した。有機マトリックス中の総窒素含有量を決定するためのデュマ燃焼法。試料を、酸素雰囲気中で高温で燃焼し、換算係数（６．２５）を使用して窒素をＮ２に定量的に変換し、タンパク質に変換する。

２）実施例１及び２におけるタンパク質含有量は、ＡＯＡＣ公式法２００１．１１（２００５）に従ってケルダール法により決定した。換算係数６．２５を使用して、タンパク質の量（重量％）を決定した。

灰分含有量
灰分分析（原材料、タンパク質単離物及び濃縮物における）は、ＷＥ１５２／２００９に従って行った。試料１ｇを、５５０℃まで徐々に発煙させた。その後、試料を６００℃のオーブンで焼却した。

脂肪含有量
脂肪含有量はワイブル・シュトルト法に従って決定した。試料（植物原材料及びタンパク質単離物／濃縮物）を、１０％（ｖ／ｖ）ＨＣｌ溶液で加水分解し、赤外線加熱システムを使用して３００℃に加熱した。加水分解された試料を、抽出システムで石油エーテルを使用して抽出した。

脂肪含有量（Ｘ）を、以下の式に従ってｗｔ％として計算した：

（式中、
ａは、乾燥後の試料脂肪を含むガラス試料管の質量（ｇ）である；
ｂは、乾燥後のガラス試料管の質量（ｇ）である；及び
ｃは、試料の質量（ｇ）である）。

フェノール含有量
分析は、Ｓｉｇｅｒら（２００４）；Ｓｚｙｄｌｏｗｓｋａ－Ｃｚｅｒｎｉａｋら（２０１０）に修正を加えたもの、に従って実行した。ある一定の量（菜種タンパク質単離物の場合は０．５０±０．００５ｇ、菜種タンパク質－繊維製品の場合は０．２５±０．００５ｇ）の脱脂（＜１％ｗ／ｗ脂肪）試料を、オービタルシェーカー内の０．１％（ｖ／ｖ）酢酸を含有する７０％（ｖ／ｖ）メタノール水溶液により、２段階抽出で抽出した。抽出の第１のステップは、室温にて４５０ｒｐｍで１時間実行した。次に、抽出物を、１０％（ｖ／ｖ）トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）によりタンパク質から精製した。その後、抽出の第２のステップは、室温にて４５０ｒｐｍで０．５時間実行した。１０，０００ｘｇで１０分間遠心分離した後、上清１（抽出の第１の段階から）及び上清２（抽出の第２の段階から）を得た。上清をプールし、０．１％（ｖ／ｖ）酢酸を含有する７０％（ｖ／ｖ）メタノール水溶液で最終容量１０ｍＬまで希釈し、孔径０．４５μｌのＰＴＦＥシリンジフィルターに通して濾過した。

ポリフェノール抽出物は、後述のように勾配条件を使用して、ＨＰＬＣ／ＵＶ－ＶＩＳによって分析した。

フィテート含有量
フィテート含有量分析（原材料、タンパク質単離物及び濃縮物における）は、フィチン酸（総リン）アッセイキットＭｅｇａｚｙｍｅによるフィチン酸（フィテート）／総リンアッセイ手順Ｋ－ＰＨＹＴＹ０８／１４に従って行った。

総繊維
総繊維量（原材料及びタンパク質濃縮物における）は、ＡＯＡＣ公式法３０９９１．４３、食品中の総繊維、可溶性及び不溶性食物繊維、酵素－重量法、ＭＥＳ－ＴＲＩＳ緩衝液（Ｔｏｔａｌ， ｓｏｌｕｂｌｅ， ａｎｄ ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ ｄｉｅｔａｒｙ ｆｉｂｒｅ ｉｎ ｆｏｏｄｓ， Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ － ｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄ， ＭＥＳ－ＴＲＩＳ ｂｕｆｆｅｒ）、ＵＳＡ、１９９４に従って決定した。

タンパク質単離物の機能性試験のための方法
分散度
評価は以下のステップに従って実行した：タンパク質単離物（最終タンパク質濃度５％ｗ／ｖ）を１５０ｍｌのビーカーに秤量する。１０ｍｌの脱イオン水を加える。電磁撹拌器を使用して、およそ５００ｒｐｍで１時間撹拌する。デュマ法を使用して、分散タンパク質含有量を決定する（２００μｌを３回繰り返す）。
分散度を以下の式により計算する：

式中、溶液中のタンパク質濃度は、以下を意味する。

窒素溶解度（ＮＳ）：
評価は以下のステップに従って実行した：タンパク質単離物（最終タンパク質濃度５％ｗ／ｗ）を１５０ｍｌのビーカーに２連で秤量する。試験する溶媒１０ｍｌを各ビーカーに加える。粉末が完全に分散するまで試料を撹拌する。ｐＨを所望の値に調整する（０．１Ｍ ＮａＯＨ及び０．１Ｍ ＨＣｌ）。室温で１時間撹拌する。その時間の最後に、２００μＬのアリコートを（ビーカーから直接）ピペットで取り、デュマ法を使用してタンパク質濃度を決定する。次に、ビーカーから１ｍＬを微量遠心管に６回繰り返して移し、そのうちの３つを１３，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離する。遠心分離機から慎重に取り出し、上清の２００μＬアリコートをピペットで取り、タンパク質含有量を決定する（デュマ法）。残りの３回の繰り返しを水浴（８５℃）に３０分間入れる。試料を水浴から取り出し、５分間放置する。試料を１３，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離する。遠心分離機から慎重に取り出し、上清の２００μＬアリコートをピペットで取り、タンパク質含有量を決定する（デュマ法）。

窒素溶解度を、以下の式に従って計算する：

乳化能力（ＥＣ）：
評価は以下のステップに従って実行した：タンパク質単離物（最終タンパク質濃度：１％ｗ／ｗ）を５０ｍｌ遠心管に秤量する。水を加えて２５ｇの試験溶液を得る。１０秒間ボルテックスで混合する。室温で１時間４５０ｒｐｍで撹拌する。得られた溶液をビーカーに移し、その導電率を測定する。菜種油を用いて７２００ｒｐｍで５分間均質化し、得られたエマルジョンの導電率を測定する。エマルジョンの導電率が急激に低下し、エマルジョンの反転が観察されるまで、均質化しながら油を徐々に加える。エマルジョン能力は、タンパク質１グラムあたりの均質化された油のグラム数として表す。

乳化能力（ＥＣ）は、Ｋａｒａｃａ Ａ． Ｃ．ら、Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ；Ｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｃｈｉｃｋｐｅａ， ｆａｂａ ｂｅａｎ， ｌｅｎｔｉｌ ａｎｄ ｐｅａ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓａｌｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ， ２０１１， ４４， ２７４２～２７５０に修正を加えたものに従って分析した：ビーカー内：２５ｇ １％溶液を使用した。

発泡能力（ＦＣ）及び発泡体安定性（ＦＳ）
評価は以下のステップに従って実行した：タンパク質単離物（最終タンパク質濃度：１％）をビーカーに秤量し、９９ｍｌの脱イオン水を加える。電磁撹拌器で５分間撹拌する。１００００ｒｐｍで１分間均質化する。得られた発泡体をメスシリンダーに移し、発泡体の体積を読み取る。５分、１５分、３０分、６０分、及び１２０分後の体積を読み取る。

Ｖ_１＝泡立て後の体積
Ｖ_０＝泡立て前の体積
Ｖ_２＝放置後の体積（５、１５、３０、６０、及び１２０分

発泡能力（ＦＣ）及び発泡体安定性（ＦＳ）は、修正を加えたｔｈｅ Ｋｈａｔｔａｂ Ｒ．Ｙ．， Ａｒｎｔｆｉｅｌｄ Ｓ．Ｄ．；Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｒａｗ ａｎｄ ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ ｃａｎｏｌａ ｍｅａｌ；ＬＷＴ － Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ４２ （２００９） １１１９～１１２４に従って分析した：１％溶液を作製した。

最小ゲル化濃度（ＬＧＣ）
評価は以下のステップに従って実行した：適切な量の試料を秤量して、遠心管に所望の濃度を得る。３０ｍｌの脱イオン水を加える。数秒間ボルテックスする。試料を置いて１０分間超音波洗浄する。４５０ｒｐｍで２０分間撹拌する。得られた溶液の２０ｍｌを、遠心管に移す。試料を水浴にて８０℃で１時間加熱する。冷水浴で１０分間冷却する。その後、４℃で２時間冷却する。遠心管を逆さまにして１分間置き、試料がゲル化しているかどうかを確認する。上記の指示に従って、さまざまな濃度（１パーセンテージポイント間隔）を試験して、最小ゲル化濃度を見出す。

ゲル化は、修正を加えたＫｈａｔｔａｂ Ｒ．Ｙ．， Ａｒｎｔｆｉｅｌｄ Ｓ．Ｄ．；Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｒａｗ ａｎｄ ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ ｃａｎｏｌａ ｍｅａｌ；ＬＷＴ － Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ４２ （２００９） １１１９～１１２４に従って調査した：２０ｍｌを新しい管に移した。

タンパク質濃縮物の機能性試験のための方法
吸水及び吸油能力（ＷＡＣ及びＯＡＣ）
評価は以下のステップに従って実行した：１ｇのタンパク質濃縮物を、５０ｍｌの遠心管に３連で秤量する。１０ｇの脱イオン水又は菜種油を加え、試料を分散させるために数回振とうさせる。４５０ｒｐｍで１分間撹拌する。２２℃、４０００ｇで３０分間遠心分離する。得られた上清を静かにデカントする。遠心管を逆さまにして１０分間置き、残りの上清を流下させる。湿潤した沈降物を含む遠心管を秤量する。

Ａ－空の遠心管の重量
Ｂ－検査試料の重量
Ｅ－湿潤した沈降物を含む遠心管の重量

引用文献：
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Claims (20)

1. 植物材料（１）から植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）を調製するためのプロセスであって、前記植物材料（１）は、乾燥重量ベースで１０～５０ｗｔ％の間のタンパク質を含み、
   ａ）植物材料（１）を粉砕又は細分して、固体ケーキ（２）を生成するステップ；
   ｂ）前記固体ケーキ（２）を、第１の溶媒の総重量に基づき少なくとも９０ｗｔ％の水を含む水性の前記第１の溶媒で抽出して、第１の固体画分と第１の液体画分の混合物を得るステップ；
   ｃ）前記第１の液体画分（１１）を前記第１の固体画分（１２）から分離するステップ；
   ｄ）第２の溶媒の総重量に基づき少なくとも５０ｗｔ％の室温で水と混和性である１～５個の炭素原子を有するアルコールを含む、アルコール性の第２の溶媒を加えるステップであって、
   前記加えるステップは、前記第２の溶媒を前記第１の固体画分（１２）に加えることを含むか、又は
   前記第２の溶媒を加えるステップの前に、前記第１の液体画分（１１）を濃縮して第１の液体画分タンパク質濃縮物（１１ｂ）を得て、前記加えるステップは、前記第２の溶媒を前記濃縮物（１１ｂ）に加えることを含む、ステップ；
   ｅ）ステップｄ）で前記第２の溶媒を加えることによって得られた混合物のいずれか１つを、第２の液体画分（２１、２３）と第２の固体画分（２２、２４）とに分離するステップ；
   ｆ）ステップｅ）で得られた前記第２の固体画分（２２、２４）に第３の溶媒を加えるステップであって、前記第３の溶媒は、最大５個の炭素原子を有する無極性で親油性の有機エステルを含み、前記無極性で親油性の有機エステルは、室温で前記第１の溶媒と少なくとも部分的に混和性で、かつ前記第２の溶媒と完全に混和性であり、前記第３の溶媒の量は、液相全体が別個の液相に分離しないように選択される、ステップ；
   ｇ）ステップｆ）で得られた混合物を、使用済みの第３の溶媒（３１、３３）とも更に呼ばれる第３の液体画分（３１、３３）と、第３の固体画分（３２、３４）とに分離するステップ；
   ｈ）ステップｇ）で得られた前記第３の固体画分（３２、３４）を乾燥させて、前記植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）を得るステップ、を含み、
   前記第３の溶媒は、前記第３の溶媒の総重量に基づき、
   ６４～９０ｗｔ％の間の前記有機エステル、
   １０～３５ｗｔ％の間の前記１～５個の炭素原子を有するアルコール、及び
   １０ｗｔ％未満の水
   を含む共沸混合物を含むことを特徴とする、プロセス。
2. 前記プロセスで得られる前記植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）の量が、バッチ式製造プロセスでのバッチあたり、又は連続製造プロセスでの時間あたりの生産量として、少なくとも１ｋｇ、好ましくは少なくとも５ｋｇ、より好ましくは少なくとも１０ｋｇ、より好ましくは少なくとも２０ｋｇ、最も好ましくは１００ｋｇ超に達する、請求項１に記載のプロセス。
3. 前記プロセスにおいて抽出される前記固体ケーキ（２）の量が、バッチ式製造プロセスでのバッチあたり、又は連続製造プロセスでの時間あたりの抽出量として、少なくとも１０ｋｇ、好ましくは少なくとも２０ｋｇ、より好ましくは少なくとも３０ｋｇ、より好ましくは少なくとも４０ｋｇ、より好ましくは少なくとも５０ｋｇ、より好ましくは少なくとも１００ｋｇ、より好ましくは少なくとも２００ｋｇ、更により好ましくは少なくとも５００ｋｇ、最も好ましくは少なくとも１０００ｋｇに達する、請求項１又は２に記載のプロセス。
4. 前記共沸混合物が、前記共沸混合物中の前記有機エステルの質量分率として表して、６５～８５ｗｔ％の間の前記有機エステル、好ましくは７０～８４ｗｔ％の間の前記有機エステル、より好ましくは７５～８３ｗｔ％の間の前記有機エステル、更により好ましくは７６～８２．５ｗｔ％の間の前記有機エステル、最も好ましくは７６．５～８２．２ｗｔ％の間の前記有機エステルを含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のプロセス。
5. 前記有機エステルが酢酸エチルである、請求項１～４のいずれか一項に記載のプロセス。
6. 前記共沸混合物が、前記共沸混合物中の前記１～５個の炭素原子を有するアルコールの質量分率として表して、１２～３２ｗｔ％の間、好ましくは１５～３０ｗｔ％の間、より好ましくは１７～２７ｗｔ％の間、より好ましくは１８～２５ｗｔ％の間、更により好ましくは１９～２２ｗｔ％の間、最も好ましくは約２０ｗｔ％の、前記１～５個の炭素原子を有するアルコールを含む、請求項１～５のいずれか一項に記載のプロセス。
7. 前記１～５個の炭素原子を有するアルコールが、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、イソブタノール、又はそれらの組み合わせからなる群から選択され、前記１～５個の炭素原子を有するアルコールが、好ましくはエタノールである、請求項１～６のいずれか一項に記載のプロセス。
8. 前記共沸混合物が、酢酸エチル及びエタノールを含み、好ましくは、前記第３の溶媒の総重量に基づき、６４～９０ｗｔ％の間の酢酸エチル及び１０～３５ｗｔ％の間のエタノールを含む、請求項１～７のいずれか一項に記載のプロセス。
9. 前記第３の溶媒が、７ｗｔ％未満の水、好ましくは５ｗｔ％未満の水、より好ましくは２ｗｔ％未満の水、更により好ましくは１ｗｔ％未満の水、最も好ましくは０．５ｗｔ％未満の水を含む、請求項１～８のいずれか一項に記載のプロセス。
10. ステップｈ）における前記第３の固体画分（３２、３４）の前記乾燥が、使用済みの第３の溶媒の更なる部分（４１、４３）を生成する、請求項１～９のいずれか一項に記載のプロセス。
11. ステップｆ）で加えられる前記第３の溶媒の少なくとも一部が、前記使用済みの第３の溶媒（３１、３３）、前記使用済みの第３の溶媒の更なる部分（４１、４３）、又はそれらの組み合わせのうちのいずれか１つから回収される、請求項１～１０のいずれか一項に記載のプロセス。
12. ステップｆ）で加えられる前記第３の溶媒の一部が回収される、前記使用済みの第３の溶媒（３１、３３）、前記使用済みの第３の溶媒の更なる部分（４１、４３）、又はそれらの組み合わせのうちの前記いずれか１つが、少なくとも１０ｗｔ％の水、好ましくは少なくとも１５ｗｔ％の水、より好ましくは少なくとも２０ｗｔ％の水、更により好ましくは少なくとも２５ｗｔ％の水、場合により少なくとも３０ｗｔ％の水を含む、請求項１１に記載のプロセス。
13. 前記第３の溶媒の前記回収が、２００ｋＰａ以下、より好ましくは大気圧以下の動作圧力を適用することを含み、好ましくは、前記動作圧力は２０～５０ｋＰａの間で構成される、請求項１１又は１２に記載のプロセス。
14. 前記第３の溶媒の前記回収が、好ましくは回転式蒸発器、ワイプ式膜蒸発器、かきとり式膜蒸発器、流下膜式蒸発器、上昇膜式蒸発器、ショートパス蒸発器を含む群から選択され、好ましくは流下膜式蒸発器である、蒸発器を含む、蒸発ステップを含む、請求項１１～１３のいずれか一項に記載のプロセス。
15. ヘキサンなどの６個以上の炭素原子を有する有機溶媒又は無機溶媒を使用せずに実行する、請求項１～１４のいずれか一項に記載のプロセス。
16. 前記植物材料が、菜種、キャノーラ、ヒマワリ、ベニバナ、及び綿実を含む油糧種子、大豆及び他の豆を含む豆類、豆果、並びに、ヒヨコ豆、赤レンズ豆、緑レンズ豆、黄レンズ豆、及び茶レンズ豆を含む豆、並びにそれらの組み合わせ、からなる群から選択される、請求項１～１５のいずれか一項に記載のプロセス。
17. ステップｄ）における前記加えることが、前記第２の溶媒を前記第１の固体画分（１２）に加えることを含み、ステップｈ）で得られた前記植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）が、植物タンパク質及び在来繊維を含むタンパク質－繊維製品（４４）であり、好ましくは、前記植物タンパク質及び在来繊維の総含有量が、前記タンパク質－繊維製品（４４）の総乾燥重量に基づき、少なくとも３０ｗｔ％である、請求項１～１６のいずれか一項に記載のプロセス。
18. ステップｈ）で得られる前記植物タンパク質濃縮製品（４２、４４）が、タンパク質単離物（４２）であり、前記タンパク質単離物の総乾燥重量に基づき、前記タンパク質含有量が、少なくとも９０ｗｔ％、好ましくは少なくとも９５ｗｔ％であり；
    ステップｄ）における前記加えることの前に、前記第１の液体画分（１１）を濃縮して第１の液体画分タンパク質濃縮物（１１ｂ）を得て、前記濃縮物（１１ｂ）は、好ましくは、前記濃縮物（１１ｂ）の総重量に基づき５０～９０ｗｔ％の間の水と、前記濃縮物（１１ｂ）の総乾燥重量に基づき少なくとも４０ｗｔ％のタンパク質含有量とを含み、前記加えることが、少なくとも９０ｗｔ％の前記アルコールを含む前記第２の溶媒を前記濃縮物（１１ｂ）に加えることを含み；
    好ましくはまた、ステップｆ）で加えられる前記第３の溶媒が、好ましくは２ｗｔ％未満の水、より好ましくは１ｗｔ％未満の水、最も好ましくは０．５ｗｔ％未満の水を含み、好ましくはまた、
    ステップｅ）で得られた前記第２の固体画分（２２）の前記タンパク質含有量が、前記第２の固体画分（２２）の総乾燥重量に基づき少なくとも６０ｗｔ％であり；及び／又は
    ステップｇ）で得られた前記第３の固体画分（３２）の前記タンパク質含有量が、前記第３の固体画分（３２）の総乾燥重量に基づき少なくとも９０ｗｔ％である、
    請求項１～１６のいずれか一項に記載のプロセス。
19. 前記タンパク質単離物（４２）が、乾燥物に基づき少なくとも７０ｗｔ％の天然の植物系タンパク質を含み、好ましくは、１ｗｔ％未満の炭水化物、及び／又は０．２ｗｔ％未満のフェノール化合物を含み、及び／又は６個以上の炭素原子を有する有機溶媒若しくは無機溶媒を含まない、請求項１８に記載のプロセス。
20. 食品又は動物飼料用の植物タンパク質を得るための、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法の使用。
    

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