JP2024516917A - 抗体－薬物結合体 - Google Patents

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Abstract

本発明は、（ｉ）抗体またはその抗原結合断片、（ｉｉ）低分子薬物などの１つまたは複数の生物活性部分に、任意にリンカーを介して共有結合している、アミノ酸誘導体を含む特定の繰り返し単位を含むポリマー、並びに（ｉｉｉ）該ポリマーおよび該抗体またはその抗原結合断片の両方に共有結合しているポリマー－抗体リンカー部分を含む、抗体－薬物結合体に関する。さらに、本発明は、抗体－薬物結合体を含む医薬組成物および医薬における抗体－薬物結合体の使用に関する。【選択図】なし

Description

発明の分野
本発明は、（ｉ）抗体またはその抗原結合断片、（ｉｉ）低分子薬物などの１つまたは複数の生物活性部分に、任意にリンカーを介して共有結合している、アミノ酸誘導体を含む特定の繰り返し単位を含むポリマー、並びに（ｉｉｉ）該ポリマーおよび該抗体またはその抗原結合断片の両方に共有結合しているポリマー－抗体リンカー部分を含む、抗体－薬物結合体に関する。さらに、本発明は、抗体－薬物結合体を含む医薬組成物および医薬における抗体－薬物結合体の使用に関する。
背景情報
抗体薬物結合体（ＡＤＣ）は、非常に強力なバイオ医薬品のクラスであり、さまざまな治療用途を有する。例えば、腫瘍学の分野においては、リンカーを介して細胞毒性薬物が結合した抗体を使用して、癌細胞を標的にするためにＡＤＣを使用することができる。これらの利点にもかかわらず、ＡＤＣの開発は、典型的に達成することができる薬物対抗体比（ＤＡＲ）が３～４と低いため、制限されている。多くの場合、従来のＡＤＣでは、１つのリンカー当たり１つの薬物しか抗体に結合することができない。この限定により、ＡＤＣの治療指数、およびＡＤＣにおいて使用することができる薬物の範囲が制限される。これは、細胞毒性の高い薬物しか使用することができないためである。これはまた、患者における有害反応の有病率を増加させる。さらに、ＤＡＲを増加させようとする現在までの試みは、ＡＤＣの凝集をもたらし、効果がなかった。
従って、高いＤＡＲをサポートすることができるが、高い水溶性および安定性などの望ましい物理化学的特性も併せもつ新しいＡＤＣが必要とされている。
本発明は、水溶液中での良好な安定性および高い溶解性を可能にする、特定のポリマーリンカーを含有するＡＤＣを提供する。本発明において使用される特定のポリマーリンカーはまた、高いＤＡＲをサポートすることができ、多くの異なる生物活性分子（典型的には、４以上、８以上、好ましくは１２以上、なおより好ましくは１６以上、および最も好ましくは２０までのまたはそれより多くの生物活性分子）を単一の抗体に結合させることができる。そのような高いＤＡＲは、治療指数の改善を可能にする。
さらに、本発明のＡＤＣにおいて使用される特定のポリマーはまた、結合体からの生物活性分子の放出速度を制御することを可能にし得る。この放出速度は、ＡＤＣ内のポリマー－薬物またはリンカー－薬物共有結合の分解に依存する。異なるタイプの共有結合は、（例えば）ｐＨ、酵素の異なる条件下で加水分解するであろう。
本発明のＡＤＣにおいて使用される特定のポリマーはまた、複数の異なるタイプの薬物部分がポリマーに結合されることを可能にする。これは、特に、２つ以上の活性剤を使用する標的併用療法を達成するのに有用であり得る。併用療法は、腫瘍学および感染症の治療において特に有用である。併用療法において使用される薬物は、しばしば補完的な作用機序および／または相加的若しくは相乗的な治療効果を有する。しかしながら、複数の薬物を使用する治療プロトコルは、常に複雑で集中的である。薬物の頻回投与および一定の時点で幾つかの異なる薬物を同時に投与することは、一般的である。そのような複雑なプロトコルは、より単純なプロトコルよりも患者のコンプライアンスおよび忍容性が低い傾向がある。従って、高いＤＡＲおよび好ましい物理化学的特性で単一の抗体に複数の薬物を結合させる能力は、併用療法における新しい機会を提供する。
本発明のＡＤＣにおいて使用される特定のポリマーはまた、驚くべきことに、ＤＡＲが高いときでさえ、溶液中のＡＤＣの凝集（ａｇｇｌｏｍｅｒａｔｉｏｎ）／凝集（ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ）を防ぎ、異なるポリマー主鎖／リンカーを有する対照ＡＤＣと比較して改善された血清安定性を有することが見出されている。
本発明は従って、
（ｉ）抗体またはその抗原結合断片；
（ｉｉ）式（Ｉ）：
（式中：
Ｘは、Ｏ、ＮＨ、ＮＲＡおよびＳから選択され；
Ｙは、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝ＮＨ、Ｃ＝ＮＲＡおよびＣ＝Ｓから選択され；
Ｒは、水素またはＣ１－２０ヒドロカルビルであり；
ＲＡは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルであり；
各Ｑは、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－、－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－および－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－から独立して選択され（ここで、Ｔ１は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から選択され、Ｔ２は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から選択される）；
ｏは、０から１００の整数であり；
ｓは、０から１５０の整数であり；
ｘは、１から６の整数であり；
各Ｚは、式（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）または（ｖ）：
（式中、
Ｚが式（ｉ）または（ｉｉ）の基であるとき：
－ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｈがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり、
各Ｌ１は、リンカー基であり；
各Ｂは、生物活性部分であり；
Ｚが式（ｉｉｉ）の基であるとき：
－ＡＡ＝は、－ＡＡ＝Ｏがアミノ酸の側鎖を表すような三価の部分であり；
各Ｌ２は、リンカー基であり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
各Ｂは、生物活性部分であり；
Ｚが式（ｉｖ）の基であるとき：
－ＡＡ－は、－ＡＡ－ＣＨ＝ＣＨ２または－ＡＡ－Ｃ≡ＣＨがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
各Ｌ３は、リンカー基であり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
各Ｂは、生物活性部分であり；および
Ｚが式（ｖ）の基であるとき：
－ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｎ３がアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
各Ｌ３は、リンカー基であり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
各Ｂは、生物活性部分である）の群から独立して選択される）の繰り返し単位を含むポリマー；並びに
（ｉｉｉ）該抗体および該ポリマーの両方に共有結合しているポリマー－抗体リンカー
を含む、抗体－薬物結合体を提供する。
別の態様においては、本発明はまた、本発明による抗体－薬物結合体、および薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物を提供する。
本発明はさらに、それを必要とする患者における疾患または状態の治療における使用のための、本発明のいずれかによる抗体－薬物結合体を提供する。
本発明はさらに、ヒト患者において、本明細書において定義する疾患または状態を治療する方法であって、前記方法が、それを必要とする患者への、本発明による少なくとも１つの抗体－薬物結合体の投与を含む、方法を提供する。
本発明はさらに、患者における本明細書において定義する疾患または状態の治療のための薬剤の製造のための、本発明による抗体－薬物結合体の使用を提供する。
本発明はさらに、
（ｉ）標的化剤；
（ｉｉ）式（Ｉ）の繰り返し単位を含むポリマー；並びに
（ｉｉｉ）該標的化剤および該ポリマーの両方に共有結合しているポリマー－標的化剤リンカー
を含む、標的化剤－薬物結合体を提供する。
ＣＤＣｌ３中、４００ＭＨｚおよび２９８Ｋでの構築ブロック（３）の１Ｈ－ＮＭＲスペクトル。 ポリマー（１）の質量スペクトル。 ポリマー（４）の質量スペクトル。 ＭＭＡＥ試薬（５）のＬＣ－ＭＳスペクトル。 ＭＭＡＥ試薬（５）のＬＣ－ＭＳスペクトル。 ２１４ｎｍでのポリマー－薬物結合体（６）のＲＰ－ＵＰＬＣスペクトル。 ポリマー－薬物結合体（６）のＬＣ－ＭＳスペクトル。 ＮＣＩ－Ｎ８７ヒト胃癌ＣＤＸモデルにおけるＭＭＡＥ ＡＤＣのインビボ抗腫瘍有効性を示す、時間に対する腫瘍体積のグラフ。ＡＤＣ＝実施例３において記載するように製造したＭＭＡＥ ＡＤＣ。 ポリマー（７）のＬＣ－ＭＳ分析。 ポリマー（８）のＬＣ－ＭＳ分析。 ＳＮ－３８ポリマー結合体（１１）のＲＰ－ＨＰＬＣ（λ＝２１４ｎｍ）分析。 ＳＮ－３８ポリマー結合体（１１）のＬＣ－ＭＳ分析。 ＳＮ－３８ポリマー結合体（１３）のＲＰ－ＨＰＬＣ（λ＝２１４ｎｍ）分析。 ＳＮ－３８ポリマー結合体（１３）のＬＣ－ＭＳ分析。
発明の詳細な説明
定義
本明細書において使用する用語「ポリマー」は、繰り返し単位を含む化合物を指す。ポリマーは通常、１より大きい多分散性を有する。ポリマーは一般に、主鎖、側鎖および末端を含む。主鎖は、全ての側鎖がぶらさがっている線形鎖である。側鎖は、主鎖にぶらさがっているかまたは主鎖から分岐する基である。末端は、主鎖の終端である。
本明細書において使用する用語「生物活性部分」は、水素基の引き抜きによって生物活性分子から誘導される任意の部分を指す。「生物活性分子」は、インビボで投与したときに生化学的応答を誘導することができる任意の分子である。典型的には、生物活性分子は、動物（または、好ましくはヒト）に投与したときに、局所または全身の生化学的反応を引き起こすことができ；好ましくは、局所または全身の反応は、治療活性である。生物活性分子の好ましい例は、薬物、ペプチド、タンパク質、ペプチド模倣物、抗体、抗原、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ、低分子ヘアピンＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ＰＮＡ、フォルダマー、炭水化物、炭水化物誘導体、非リピンスキー分子、合成ペプチドおよび合成オリゴヌクレオチドを含み、最も好ましくは、低分子薬物である。
本明細書において使用する用語「低分子薬物」は、ヒトなどの動物に対して既知の生物学的効果を有する化合物を指す。典型的には、薬物は、疾患を治療、予防または診断するために使用する化合物である。好ましい低分子薬物は、それらが、動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトにおいて局所または全身の効果を引き起こすという点で生物学的に活性である。低分子薬物は、「薬物分子」または「薬物」と呼ばれることがある。典型的には、薬物分子は、約５ｋＤａ以下のＭｗを有する。好ましくは、薬物分子は、約１．５ｋＤａ以下のＭｗを有する。網羅的ではないが、本発明における使用に適したクラスおよび特定の薬物のより完全なリストは、“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ：Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ，Ｐａｔｅｎｔｓ，Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”， ｂｙ Ａｘｅｌ Ｋｌｅｅｍａｎｎ ａｎｄ Ｊｕｒｇｅｎ Ｅｎｇｅｌ， Ｔｈｉｅｍｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，１９９９および“Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ：Ａｎ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｄｒｕｇｓ，ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ”， ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｓｕｓａｎ Ｂｕｄａｖａｒｉ ｅｔ ａｌ．，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，１９９６（これらは両方とも、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に見出し得る。
本明細書において使用する用語「ペプチド」は、ペプチド（アミド）結合によって連結された、生物学的に発生するまたは合成の、アミノ酸モノマーの短鎖を指す。あるアミノ酸のカルボキシル基が別のアミノ酸のアミノ基と反応するとき、共有化学結合が形成される。最も短いペプチドは、単一のペプチド結合によって結合した２つのアミノ酸からなるジペプチドであり、トリペプチド、テトラペプチド等が続く。ポリペプチドは、長い、連続した、枝分かれのないペプチド鎖である。従って、ペプチドは、核酸、オリゴ糖および多糖等と並んで、生物学的オリゴマーおよびポリマーの幅広い化学的クラスに分類される。
本明細書において使用する用語「アミノ酸」は、任意の天然または合成アミノ酸、すなわち、炭素、水素、酸素および窒素原子を含み、アミノ（－ＮＨ２）およびカルボン酸（－ＣＯＯＨ）官能基の両方を含む、有機化合物を指す。典型的には、アミノ酸は、α－、β－、γ－またはδ－アミノ酸である。アミノ酸は、２２種類の天然タンパク質構成α－アミノ酸の１つであり得る。あるいは、アミノ酸は、α－アミノ－ｎ－酪酸、ノルバリン、ノルロイシン、アロイソロイシン、ｔ－ロイシン、α－アミノ－ｎ－ヘプタン酸、ピペコリン酸、α，β－ジアミノプロピオン酸、α，γ－ジアミノ酪酸、オルニチン、アロスレオニン、ホモシステイン、ホモセリン、β－アラニン、β－アミノ－ｎ－酪酸、β－アミノイソ酪酸、γ－アミノ酪酸、α－アミノイソ酪酸、イソバリン、サルコシン、Ｎ－エチルグリシン、Ｎ－プロピルグリシン、Ｎ－イソプロピルグリシン、Ｎ－メチルアラニン、Ｎ－エチルアラニン、Ｎ－メチルβ－アラニン、Ｎ－エチルβ－アラニン、イソセリン、α－ヒドロキシ－γ－アミノ酪酸、ホモノルロイシン、Ｏ－メチル－ホモセリン、Ｏ－エチル－ホモセリン、セレノホモシステイン、セレノメチオニン、セレノエチオニン、カルボキシグルタミン酸、ヒドロキシプロリン、ヒプシン、ピログルタミン酸、アミノイソ酪酸、デヒドロアラニン、β－アラニン、γ－アミノ酪酸、δ－アミノレブリン酸、４－アミノ安息香酸、シトルリン、２，３－ジアミノプロパン酸、３－アミノプロパン酸、ヒドロキシトリプトファン、セレノホモシステイン、α－アミノグリシンおよびジアミノ酢酸、２，３－ジアミノプロピオン酸、α，γ－ジアミノ酪酸、アミノ－２－ケト－酪酸、４－アセチルフェニルアラニンおよびホルミルグリシン、アジドリジン、アジドオルニチン、アジドノルロイシン、アジドアラニン、アジドホモアラニン、４－アジドフェニルアラニンおよび４－アジドメチルフェニルアラニン、ホモアリルグリシン、４－エチニルフェニルアラニン、４－プロパルギルオキシフェニルアラニン、プロパルギルグリシン、４－（２－プロピニル）プロリン、２－アミノ－６－（｛［（１Ｒ，８Ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノン－４－イン－９－イルメトキシ］カルボニル｝アミノ）ヘキサン酸およびホモプロパルギルグリシンから選択される合成アミノ酸である。立体中心を有するアミノ酸は、単一のエナンチオマーまたはエナンチオマーの混合物（例えばラセミ混合物）として存在し得る。好ましくは、アミノ酸がα－アミノ酸である場合、アミノ酸は、α－炭素立体中心に関してＬ立体化学を有する。
本明細書において使用する用語「タンパク質」は、サイズに基づいてペプチドと区別されるアミノ酸モノマーのポリマーを含む生体分子を指し、任意の基準（ｂｅｎｃｈｍａｒｋ）として、約５０以上のアミノ酸を含有すると理解することができる。タンパク質は、生物学的に機能的な方法で配置された１つまたは複数のポリペプチドからなり、多くの場合、補酵素および補因子などのリガンド、または別のタンパク質若しくは他の高分子（ＤＮＡ、ＲＮＡ等）、または複合高分子アセンブリに結合している。
本明細書において使用する用語「ペプチド模倣物」は、ペプチドを模倣するように設計された低分子タンパク質様鎖を指す。それらは、典型的には、既存のペプチドの修飾から、またはペプトイドおよびβ－ペプチドなどのペプチドを模倣する同様のシステムを設計することによって発生する。アプローチに関係なく、変更された化学構造は、安定性または生物活性などの分子特性を有利に調整するように設計されている。これは、既存のペプチドからの薬物様化合物の開発において役割を有し得る。これらの修飾は、自然には発生しないであろうペプチドへの変更を含む（主鎖の変更および非天然アミノ酸の取り込みなどの）。
本明細書において使用する用語「ｍＲＮＡ」は、遺伝子発現のタンパク質産物のアミノ酸配列を指定する、ＤＮＡからリボソームに遺伝情報を伝達するＲＮＡ分子のファミリーである、メッセンジャーＲＮＡを指す。ＲＮＡポリメラーゼによる一次転写ｍＲＮＡ（プレｍＲＮＡとして知られる）の転写に続いて、プロセシングされ、成熟したｍＲＮＡは、アミノ酸のポリマー：すなわちタンパク質に翻訳される。ＤＮＡにおけるのと同様に、ｍＲＮＡの遺伝情報は、ヌクレオチドの配列中にあり、それぞれ３つの塩基からなるコドン中に配置されている。各コドンは、タンパク質合成を終了させる終止コドンを除いて、特定のアミノ酸をコードする。コドンのアミノ酸へのこの翻訳プロセスは、コドンの認識を仲介し、対応するアミノ酸を提供する転移ＲＮＡ（ｔＲＮＡ）、およびリボソームのタンパク質製造機構の中心的な構成要素であるリボソームＲＮＡ（ｒＲＮＡ）の他の２種類のＲＮＡを必要とする。
本明細書において使用する用語「低分子干渉ＲＮＡ」（ｓｉＲＮＡ）は、２０～２５塩基対の長さの二本鎖ＲＮＡ分子のクラスを指す。ｓｉＲＮＡは、多くの役割を果たすが、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）経路において最も顕著であり、相補的なヌクレオチド配列を有する特定の遺伝子の発現を妨げる。ｓｉＲＮＡは、転写後にｍＲＮＡを分解し、翻訳されないことで機能する。ｓｉＲＮＡはまた、ＲＮＡｉ関連経路、例えば抗ウイルス機構としてまたはゲノムのクロマチン構造を形成する際に作用する。
本明細書において使用する用語「低分子ヘアピンＲＮＡ」（ｓｈＲＮＡ）は、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）を介して標的遺伝子発現をサイレンシングすために使用することができるタイトなヘアピンターンを有する人工ＲＮＡ分子を指す。細胞におけるｓｈＲＮＡの発現は、典型的には、プラスミドの送達によってまたはウイルス若しくは細菌のベクターを通して達成される。ｓｈＲＮＡは、分解およびターンオーバーが比較的遅いという点で、ＲＮＡｉの有利なメディエーターである。
本明細書において使用する用語「マイクロＲＮＡ」（ｍｉＲＮＡ）は、植物、動物、および一部のウイルスにおいて見られる低分子の非コードＲＮＡ分子（約２２ヌクレオチドを含有する）を指し、ＲＮＡサイレンシングおよび遺伝子発現の転写後調節において機能する。
本明細書において使用する用語「ＰＮＡ」は、１９９１年にＰｅｔｅｒ Ｅ． Ｎｉｅｌｓｅｎ（コペンハーゲン大学）、Ｍｉｃｈａｅｌ Ｅｇｈｏｌｍ（コペンハーゲン大学）、Ｒｏｌｆ Ｈ． Ｂｅｒｇ（Ｒｉｓｏ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｌａｂ）、およびＯｌｅ Ｂｕｃｈａｒｄｔ（コペンハーゲン大学）により発明された、ＤＮＡまたはＲＮＡに類似する人工的に合成されたポリマーであるペプチド核酸を指す。ＰＮＡの主鎖は、ペプチド結合によって連結されたＮ－（２－アミノエチル）－グリシン単位の繰り返しで構成されている。さまざまなプリンおよびピリミジン塩基が、メチレン架橋（－ＣＨ２－）およびカルボニル基（－（Ｃ＝Ｏ）－）によって主鎖に連結している。
本明細書において使用する用語「ＤＮＡ」は、デオキシリボ核酸およびその誘導体を指し、全ての既知の生物および多くのウイルスの発生、機能および再生において使用される遺伝的指示のほとんどを運ぶ分子である。ほとんどのＤＮＡ分子は、二重らせんを形成するために互いに巻き付いた２つの生体高分子鎖からなる。２本のＤＮＡ鎖は、ヌクレオチドと呼ばれるより単純な単位で構成されているため、ポリヌクレオチドとして知られている。各ヌクレオチドは、窒素を含有する核酸塩基（シトシン（Ｃ）、グアニン（Ｇ）、アデニン（Ａ）、またはチミン（Ｔ））並びにデオキシリボースと呼ばれる単糖およびリン酸基で構成されている。ヌクレオチドは、１つのヌクレオチドの糖と次のヌクレオチドのリン酸との間の共有結合によって鎖の中で互いに結合し、結果として交互の糖－リン酸主鎖が形成される。塩基対のルール（ＡとＴ、およびＣとＧ）により、水素結合は、２つの別々のポリヌクレオチド鎖の窒素含有塩基に結合して、二本鎖ＤＮＡを作る。
本明細書において使用する用語「フォルダマー」は、溶液中で立体構造的に秩序立った状態で折りたたまれている不連続な鎖状分子またはオリゴマーを指す。それらは、タンパク質、核酸、および多糖類がヘリックスおよびβシートなどの明確に定義されたコンフォメーションに折りたたまれる能力を模倣した人工分子である。フォルダマーの構造は、隣接していないモノマー間の非共有相互作用によって安定化される。
本明細書において使用する用語「炭水化物」は、炭素（Ｃ）、水素（Ｈ）および酸素（Ｏ）原子からなる生体分子を指し、通常、水素：酸素原子の比は２：１（水におけるように）；言い換えれば、実験式（ｅｍｐｉｒｉｃａｌ ｆｏｒｍｕｌａ）Ｃｍ（Ｈ２Ｏ）ｎ（ここで、ｍは、ｎと異なり得る）を有する。いくつかの例外があり；例えば、ＤＮＡの糖成分であるデオキシリボースは、実験式Ｃ５Ｈ１０Ｏ４を有する。炭水化物は、技術的には炭素の水和物であり；構造的には、それらをポリヒドロキシアルデヒドおよびケトンと見るのがより正確である。この用語は、生化学において最も一般的であり、糖、デンプン、およびセルロースを含むグループであるサッカライドの同義語である。サッカライドは、単糖、二糖、オリゴ糖、および多糖の４つの化学グループに分けられる。
本明細書において使用する用語「非リピンスキー分子」は、リピンスキーのルールオブファイブ（ファイザーのルールオブファイブまたは単にルールオブファイブ（Ｒ０５）としても知られる）に適合しない分子を指す。リピンスキーのルールオブファイブは、ドラッグライクネス（ｄｒｕｇ－ｌｉｋｅｎｅｓｓ）を評価したり、または特定の薬理学的若しくは生物学的活性を有する化合物が、ヒトにおける経口薬として活性である可能性が高い特性を有しているかを判断したりするための経験則である。このルールは、経口投与されるほとんどの薬物が比較的小さく、適度に親油性の分子であるという観察に基づいて、１９９７年にＣｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ Ａ． Ｌｉｐｉｎｓｋｉによって提唱された。このルールは、吸収、分布、代謝、および排泄（「ＡＤＭＥ」）を含む、人体における薬物動態に重要な分子特性を説明する。しかしながら、このルールでは、化合物が薬理学的に活性であるかは予測されない。
本明細書において使用する用語「酸に不安定」は、酸性条件、例えば７未満のｐＨにおいて切断される結合を指す。
本明細書において使用する用語「直接結合」は、介在する原子がないことを意味する。すなわち、例えば、繰り返し単位と薬物との間の直接結合は、薬物の官能基が繰り返し単位の原子に結合していること、すなわち、間に連結基の使用がないことを意味する。
本明細書において使用する用語「Ｃ１－２０ヒドロカルビル」は、水素および１個と２０個との間の炭素原子を含む任意の一価炭化水素基を指す。すなわち、ヒドロカルビル基は、炭素および水素からなる。ヒドロカルビル基の例は、アルキル、シクロアルキル、アリール、アラルキル、アルケニル、およびアルキニル基を含む。
本明細書において使用する用語「アルキル」は、接頭辞において示す数の炭素原子を有する直鎖または分岐の飽和一価炭化水素基を指す。すなわち、用語「Ｃ１－４アルキル」は、１から４個の炭素原子の直鎖の飽和一価炭化水素基または３個若しくは４個の炭素原子の分岐の飽和一価炭化水素基、例えばメチル、エチル、ｎ－プロピル、ｉｓｏ－プロピル、ｎ－ブチル、ｉｓｏ－ブチルおよびｔｅｒｔ－ブチルを指す。好ましくは、アルキル基は、Ｃ１－２０アルキル基、より好ましくはＣ１－１２アルキル基、なおより好ましくはＣ１－８アルキル基、および最も好ましくはＣ１－４アルキル基である。
本明細書において使用する用語「アルキレン」は、接頭辞において示す数の炭素原子を有する、直鎖の飽和二価炭化水素基または分岐の飽和二価炭化水素基、例えばメチレン、エチレン、プロピレン、１－メチルプロピレン、２－メチルプロピレン、ブチレン、ペンチレン等を指す。好ましくは、アルキレン基は、Ｃ１－２０アルキレン基、より好ましくはＣ１－１２アルキレン基、なおより好ましくはＣ１－８アルキレン基、および最も好ましくはＣ１－４アルキレン基である。
本明細書において使用する用語「アルケニル」は、接頭辞において示す数の炭素原子を有し、少なくとも１個の二重結合を含有する、直鎖または分岐の飽和一価炭化水素基を指す。すなわち、用語「Ｃ２－６アルケニル」は、少なくとも１個の二重結合を有する２から６個の炭素原子の直鎖の飽和一価炭化水素基、または少なくとも１個の二重結合を有する３から６個の炭素原子の分岐の飽和一価炭化水素基、例えばエテニル、プロペニル、１，３－ブタジエニル、（ＣＨ２）２ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２、ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ（ＣＨ３）２等を指す。好ましくは、アルケニル基は、Ｃ２－２０アルケニル基、より好ましくはＣ２－１２アルケニル基、なおより好ましくはＣ２－８アルケニル基、および最も好ましくはＣ２－４アルケニル基である。
本明細書において使用する用語「アルケニレン」は、接頭辞において示す数の炭素原子を有し、少なくとも１個の二重結合を含有する、直鎖の飽和二価炭化水素基または分岐の飽和二価炭化水素基、例えばエテニレン、プロペニレン、１－メチルプロペニレン、２－メチルプロペニレン、ブテニレン、ペンテニレン等を指す。好ましくは、アルケニレン基は、Ｃ２－２０アルケニレン基、より好ましくはＣ２－１２アルケニレン基、なおより好ましくはＣ２－８アルケニレン基、および最も好ましくはＣ２－４アルケニレン基である。
本明細書において使用する用語「アルキニル」は、接頭辞において示す数の炭素原子を有し、少なくとも１個の三重結合を含有する、直鎖または分岐の飽和一価炭化水素基を指す。すなわち、用語「Ｃ２－６アルキニル」は、少なくとも１個の三重結合を有する２から６個の炭素原子の直鎖の飽和一価炭化水素基、または少なくとも１個の二重結合を有する４から６個の炭素原子の分岐の飽和一価炭化水素基、例えばエチニル、プロピニル等を指す。好ましくは、アルキニル基は、Ｃ２－２０アルキニル基、より好ましくはＣ２－１２アルキニル基、なおより好ましくはＣ２－８アルキニル基、および最も好ましくはＣ２－４アルキニル基である。
本明細書において使用する用語「アルキニレン」は、接頭辞において示す数の炭素原子を有し、少なくとも１個の三重結合を含有する、直鎖の飽和二価炭化水素基または分岐の飽和二価炭化水素基、例えばエチニレン、プロピニレン、１－メチルプロピニレン、２－メチルプロピニレン、ブチニレン、ペンチニレン等を指す。好ましくは、アルキニレン基は、Ｃ２－２０アルキニレン基、より好ましくはＣ２－１２アルキニレン基、なおより好ましくはＣ２－８アルキニレン基、および最も好ましくはＣ２－４アルキニレン基である。
本明細書において使用する用語「シクロアルキル」は、３から１０個の炭素原子の環状の飽和一価炭化水素基、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシル等を指す。
本明細書において使用する用語「シクロアルキレン」は、３から１０個の炭素原子の環状の飽和二価炭化水素基、例えばシクロプロピレン、シクロブチレン、シクロペンチレン、またはシクロヘキシレン等を指す。好ましくは、シクロアルキレン基は、Ｃ３－１０シクロアルキレン基、より好ましくはＣ３－８シクロアルキレン基、および最も好ましくはＣ３－６シクロアルキレン基である。
本明細書において使用する用語「ヘテロシクリル」は、４から８個の環原子（そのうち１個または２個の環原子は、Ｎ、Ｏ、またはＳ（Ｏ）ｎから選択されるヘテロ原子であり、ｎは、０から２の整数であり、残りの環原子は、Ｃである）の飽和または不飽和の一価単環式基を指す。ヘテロシクリル環は、本明細書において定義する（１個の）アリールまたはヘテロアリール環に任意に縮合している。ただし、当該アリールおよびヘテロアリール環は、単環式である。さらに、ヘテロシクリル環における１個または２個の環炭素原子は、－ＣＯ－基によって任意に置き換え得る。より具体的には、用語ヘテロシクリルは、ピロリジノ、ピペリジノ、ホモピペリジノ、２－オキソピロリジニル、２－オキソピペリジニル、モルホリノ、ピペラジノ、テトラヒドロピラニル、チオモルホリノ等を含むが、これらに限定されない。ヘテロシクリル環が不飽和であるとき、１個または２個の環二重結合を含有し得る。ただし、当該環は、芳香族ではない。
本明細書において使用する用語「ヘテロシクリレン」は、４から８個の環原子（そのうち１個または２個の環原子は、Ｎ、Ｏ、またはＳ（Ｏ）ｎから選択されるヘテロ原子であり、ｎは、０から２の整数であり、残りの環原子は、Ｃである）の飽和または不飽和の二価単環式基を指す。ヘテロシクリレン環は、本明細書において定義する（１個の）アリールまたはヘテロアリール環に任意に縮合している。ただし、当該アリールおよびヘテロアリール環は、単環式である。さらに、ヘテロシクリレン環における１個または２個の環炭素原子は、－ＣＯ－基によって任意に置き換え得る。より具体的には、用語ヘテロシクリレンは、ピロリジニレン、ピペリジニレン、ホモピペリジニレン、２－オキソピロリジニレン、２－オキソピペリジニレン、モルホリニレン、ピペラジニレン、テトラヒドロピラニレン、チオモルホリニレン等を含むが、これらに限定されない。ヘテロシクリレン環が不飽和であるとき、１個または２個の環二重結合を含有し得る。ただし、当該環は、芳香族ではない。
本明細書において使用する用語「アリール」は、６から１０個の環原子の一価の単環式または二環式芳香族炭化水素基、例えばフェニルまたはナフチル等を指す。
本明細書において使用する用語「アリーレン」は、６から１０個の環原子の二価の単環式または二環式芳香族炭化水素基、例えばフェニルまたはナフチル等を指す。好ましくは、アリーレン基は、フェニレンまたはナフチレンである。
本明細書において使用する用語「アラルキル」は、－（アルキレン）－Ｒ基を指し、ここで、Ｒは、上記で定義したアリールである。好ましくは、アルキレン基は、Ｃ１－２０アルキレン基、より好ましくはＣ１－１２アルキレン基、なおより好ましくはＣ１－８アルキレン基、および最も好ましくはＣ１－４アルキレン基である。
本明細書において使用する用語「アラルキレン」は、－（アルキレン）－Ｒ二価基を指し、ここで、Ｒは、上記で定義したアリーレンである。好ましくは、アラルキレン基は、Ｃ７－２０アラルキレン基、より好ましくはＣ７－１４アラルキレン基、および最も好ましくはＣ７－１０アラルキレン基である。
本明細書において使用する用語「ヘテロアリール」は、５から１０個の環原子（そのうち１個または複数の、好ましくは１個、２個、または３個の環原子は、Ｎ、Ｏ、またはＳから選択されるヘテロ原子であり、残りの環原子は、炭素である）の一価の単環式または二環式芳香族基を指す。代表的な例は、ピロリル、チエニル、チアゾリル、イミダゾリル、フラニル、インドリル、イソインドリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、キノリニル、イソキノリニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、テトラゾリル等を含むが、これらに限定されない。
本明細書において使用する用語「ヘテロアリーレン」は、５から１０個の環原子（そのうち１個または複数の、好ましくは１個、２個、または３個の環原子は、Ｎ、Ｏ、またはＳから選択されるヘテロ原子であり、残りの環原子は、炭素である）の二価の単環式または二環式芳香族基を指す。代表的な例は、ピロリレン、チエニレン、チアゾリレン、イミダゾリレン、フラニレン、インドリレン、イソインドリレン、オキサゾリレン、イソオキサゾリレン、ベンゾチアゾリレン、ベンゾオキサゾリレン、キノリニレン、イソキノリニレン、ピリジニレン、ピリミジニレン、ピラジニレン、ピリダジニレン、トリアゾリレン、テトラゾリレン等を含むが、これらに限定されない。
本明細書において使用する用語「ヘテロアラルキル」は、－（アルキレン）－Ｒ基を指し、ここで、Ｒは、上記で定義したヘテロアリールである。好ましいアルキレン基は、上記のアラルキル基について定義したとおりである。
本明細書において使用する用語「ヘテロアラルキレン」は、－（アルキレン）－Ｒ二価基を指し、ここで、Ｒは、上記で定義したヘテロアリーレンである。好ましくは、ヘテロアラルキレン基は、Ｃ６－２０ヘテロアラルキレン基、より好ましくはＣ６－１４ヘテロアラルキレン基、および最も好ましくはＣ６－１０ヘテロアラルキレン基である。
アルキル、アルキレン、アルケニル、アルケニレン、アルキニル、アルキニレン、シクロアルキル、シクロアルキレン、ヘテロシクリル、ヘテロシクリレン、アリール、アリーレン、アラルキル、アラルキレン、ヘテロアリール、ヘテロアリーレン、ヘテロアラルキルおよびヘテロアラルキレン基上に存在し得る任意の置換基は、Ｃ１－１６アルキルまたはＣ１－１６シクロアルキル（ここで、１個または複数の隣接しないＣ原子をＯ、Ｓ、Ｎ、Ｃ＝Ｏおよび－ＣＯＯ－で置き換え得る）、置換または非置換Ｃ５－１４アリール、置換または非置換Ｃ５－１４ヘテロアリール、Ｃ１－１６アルコキシ、Ｃ１－１６アルキルチオ、ハロ、シアノおよびアラルキルを含む。
本明細書において使用する用語「アルコキシ」は、－ＯＲ基（ここで、Ｒは、上記で定義したアルキルである）、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、ｉｓｏ－プロポキシ、ｎ－ブトキシ、ｉｓｏ－ブトキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシ等を指す。好ましくは、アルコキシ基は、Ｃ１－２０アルコキシ基、より好ましくはＣ１－１２アルコキシ基、なおより好ましくはＣ１－８アルコキシ基、および最も好ましくはＣ１－４アルコキシ基である。
本明細書において使用する用語「アルキルチオ」は、－ＳＲ基を指し、ここで、Ｒは、上記で定義したアルキルである。好ましくは、アルキルチオ基は、Ｃ１－２０アルキルチオ基、より好ましくはＣ１－１２アルキルチオ基、なおより好ましくはＣ１－８アルキルチオ基、および最も好ましくはＣ１－４アルキルチオ基である。
本明細書において使用する用語「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨード、好ましくはフルオロまたはクロロを指す。
本明細書において使用する用語「ケト基」は、カルボニル基を指し、ここで、カルボニルの炭素原子はまた、２個の炭素原子に結合している。
本明細書において使用する用語「ヒドラジン」は、式－ＮＨ－ＮＨ２の基を指す。
本明細書において使用する用語「ヒドラジド」は、式Ｒ’（ＣＯ）－ＮＨ－ＮＨ２の基を指し、ここで、Ｒ’は、水素またはＣ１－２０ヒドロカルビルであり得る。
本明細書において使用する用語「ヒドラゾン」は、式＝Ｎ－ＮＨ－の基を指す。
本明細書において使用する用語「アミン」は、式－ＮＨ２、ＮＨＲまたはＮＲ２の基を指し、ここで、Ｒは、Ｃ１－２０ヒドロカルビル基である。
本明細書において使用する用語「イミン」は、式＝Ｎ－の基を指す。
本明細書において使用する用語「ヒドロキシル」は、式－ＯＨの基を指す。
本明細書において使用する用語「ケタール」は、式－Ｃ（ＯＲ）２－の基を指し、ここで、各Ｒは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルであるか、または２つのＲ基が、一緒になってヒドロカルビル環を形成する。
本明細書において使用する用語「チオール」は、式－ＳＨの基を指す。
本明細書において使用する用語「チオケタール」は、式－Ｃ（ＳＲ）２－の基を指し、ここで、各Ｒは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルであるか、または２つのＲ基が、一緒になってヒドロカルビル環を形成する。
本明細書において使用する用語「オキシム」は、式＝Ｎ－Ｏ－の基を指す。
本明細書において使用する用語「アミノキシ」または「ヒドロキシルアミン」は、式－Ｏ－ＮＨ２の基を指す。ＲＯ－ＮＨ２は、アルコキシルアミンを指す。
本明細書において使用し、ポリマーに適用する用語「Ｍｎ」は、該ポリマーの数平均分子量を指す。
本明細書において使用し、ポリマーに適用する用語「Ｍｗ」は、該ポリマーの重量平均分子量を指す。
本明細書において使用する用語「多分散性」（ＰＤまたはＤＭとも呼ばれる）は、ポリマーの重量平均分子量および数平均分子量の比、すなわちＤＭ＝Ｍｗ／Ｍｎを指す。これは、ポリマーサンプルの均一性の尺度である。低い多分散性は、ポリマーサンプル内の分子質量の分布が狭いことを示し、高い多分散性は、ポリマーサンプル内の分子質量の分布が広いことを示す。
抗体－薬物結合体
本発明は、（ｉ）抗体またはその抗原結合断片、（ｉｉ）低分子薬物などの１つまたは複数のの生物活性部分に、任意にリンカーを介して共有結合している、特定の繰り返し単位を含むポリマー、並びに（ｉｉｉ）該ポリマーおよび該抗体またはその抗原結合断片の両方に共有結合しているポリマー－抗体リンカー部分を含む、抗体－薬物結合体に関する。生物活性部分をポリマー繰り返し単位に結合するためのリンカー基は、当技術分野においてよく知られている。有利には、生物活性部分は、ポリマーと生物活性部分との間またはリンカー基と生物活性部分との間の共有結合が切断されるまで、例えば加水分解されるまで、該ポリマーから放出されない。従って、生物活性部分の放出位置および生物活性部分の放出速度は、ＡＤＣを作用部位に向ける抗体を選択し、ポリマーと生物活性部分との間、またはリンカー基と生物活性部分との間の結合の性質を調整することによって、制御することができる。
本発明の抗体－薬物結合体は：
（ｉ）抗体またはその抗原結合断片；
（ｉｉ）式（Ｉ）：
（式中：
Ｘは、Ｏ、ＮＨ、ＮＲＡおよびＳから選択され；
Ｙは、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝ＮＨ、Ｃ＝ＮＲＡおよびＣ＝Ｓから選択され；
Ｒは、水素またはＣ１－２０ヒドロカルビルであり；
ＲＡは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルであり；
各Ｑは、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－、－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－および－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－から独立して選択され（ここで、Ｔ１は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から選択され、Ｔ２は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から選択される）；
ｏは、０から１００の整数であり；
ｓは、０から１５０の整数であり；
ｘは、１から６の整数であり；
各Ｚは、式（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）または（ｖ）：
（式中、
Ｚが式（ｉ）または（ｉｉ）の基であるとき：
－ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｈがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり、
各Ｌ１は、リンカー基であり；
各Ｂは、生物活性部分であり；
Ｚが式（ｉｉｉ）の基であるとき：
－ＡＡ＝は、－ＡＡ＝Ｏがアミノ酸の側鎖を表すような三価の部分であり；
各Ｌ２は、リンカー基であり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
各Ｂは、生物活性部分であり；
Ｚが式（ｉｖ）の基であるとき：
－ＡＡ－は、－ＡＡ－ＣＨ＝ＣＨ２または－ＡＡ－Ｃ≡ＣＨがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
各Ｌ３は、リンカー基であり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
各Ｂは、生物活性部分であり；および
Ｚが式（ｖ）の基であるとき：
－ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｎ３がアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
各Ｌ３は、リンカー基であり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
各Ｂは、生物活性部分である）の群から独立して選択される）の繰り返し単位を含むポリマー；並びに
（ｉｉｉ）該抗体および該ポリマーの両方に共有結合しているポリマー－抗体リンカー
を含む。
抗体の構造的特徴
このセクションは、本発明の抗体－薬物結合体中に存在する抗体の可能な構造的特徴を説明する。
本明細書において言及する用語「抗体」は、抗体全体および任意の抗原結合断片（すなわち、「抗原結合部分」）またはそれらの単鎖、並びにそれらの二重特異性抗体、および変異体を含む。抗体はまた、免疫グロブリン（Ｉｇ）と呼ばれることもある。抗体は、ジスルフィド結合によって相互接続された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質、またはその抗原結合部分を指す。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書においてはＶＨと略記する）および重鎖定常領域から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書においてはＶＬと略記する）および軽鎖定常領域から構成される。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗原は、動物の体の免疫系に免疫応答を引き起こす任意の物質、例えば化学物質、細菌、ウイルスまたは花粉である。ＶＨおよびＶＬ領域は、さらに相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、より保存された領域が点在する領域に細分することができる。抗体の定常領域は、免疫系のさまざまな細胞（例えば、エフェクター細胞）および古典的補体系の第一成分（Ｃ１ｑ）を含む、宿主組織または因子への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。
抗体は、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体であり得る。典型的には、抗体は、モノクローナル抗体である。あるいは、抗体は、ポリクローナル抗体である。ポリクローナル抗体は、異なるＢ細胞株に由来する抗体である。ポリクローナル抗体は、特定の抗原に対して向けられる異なる免疫グロブリン分子の混合物を含み得る。ポリクローナル抗体は、抗原分子内の１つまたは複数の異なるエピトープに結合する異なる免疫グロブリン分子の混合物を含み得る。ポリクローナル抗体は、目的の抗原での免疫化などの通常の方法によって製造し得る。例えば、抗体を発現することができるマウスまたはヒツジを、免疫原性結合体で免疫化し得る。これらの動物は、任意にヒト抗体配列を発現することができ得る。引き続き、血液を取り出し、Ｉｇ画分を精製して、ポリクローナル抗体を抽出し得る。
モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、互いに同一の免疫グロブリン分子であり、特定のエピトープに対して単一の結合特異性および親和性を有する。モノクローナル二重特異性抗体（ＢｓｍＡｂ）は、２つの異なるタイプの抗原に同時に結合することができるｍＡｂである。本発明の抗体－薬物結合体において有用なｍＡｂは、従来のモノクローナル抗体方法論、例えば“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ；Ａ ｍａｎｕａｌ ｏｆ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ”， Ｈ Ｚｏｌａ（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，１９８８）および“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ”， ＳＧＲ Ｈｕｒｒｅｌｌ（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，１９８２）に開示されるものを含む、さまざまな技術によって製造することができる。
抗体の「抗原結合部分」という用語は、タンパク質、ポリペプチドまたはペプチドなどの、抗原に特異的に結合する能力を保持する抗体の断片を指す。抗体の抗原結合機能は、全長抗体の断片によって実施され得ることが示されている。抗体の「抗原結合部分」という用語内に包含される結合断片の例は、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ｄＡｂ断片および単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。ｓｃＦｖなどの単鎖抗体並びにＶＨＨおよびラクダ科動物の抗体などの重鎖抗体もまた、抗体の「抗原結合部分」という用語内に包含されるものとする。これらの抗体断片は、当業者に知られている従来の技術を使用して取得し得、断片は、インタクト抗体と同じ方法で有用性についてスクリーニングし得る。
本明細書において定義する抗体「断片」は、切断によって、例えばそのＮおよび／またはＣ末端からの１つまたは複数のアミノ酸の除去によって作製し得る。このようにして、１０までの、２０までの、３０までの、４０までのまたはそれより多いアミノ酸を、Ｎおよび／またはＣ末端から除去し得る。断片はまた、１つまたは複数の内部欠失によっても生成し得る。断片は、抗体または抗体変異体配列からの少なくとも１０、少なくとも１５、少なくとも２０、少なくとも２５、少なくとも３０、少なくとも３５、少なくとも４０、少なくとも４５、少なくとも５５、少なくとも６０、少なくとも６５、少なくとも７０、少なくとも７５、少なくとも８０、少なくとも８５、少なくとも９０、少なくとも９５、少なくとも１００、少なくとも１０５、少なくとも１２０、少なくとも１５０、少なくとも２００、少なくとも２５０、少なくとも３００または少なくとも４００の連続したアミノ酸を含み得る。
好ましくは、本発明の抗体－薬物結合体中の抗体は、ゲムツズマブｈＰ６７．６ヒト化ＩｇＧ４、ブレンツキシマブキメラＩｇＧ１、トラスツズマブヒト化ＩｇＧ１、イノツズマブＧ５／４４ヒト化ＩｇＧ４、グレムバツムマブ完全ヒトＩｇＧ１、アネツマブ抗メソテリン完全ヒトＩｇＧ１、ミルベツキシマブＭ９３４６Ａヒト化ＩｇＧ１、デパツキシズマブ（ＡＢＴ－８０６）ヒト化ＩｇＧ１、ロバルピツズマブ（ＳＣ１６）ヒト化ＩｇＧ１、およびバダスツキシマブヒト化ＩｇＧ１から選択される。
ポリマーの構造的特徴
このセクションは、本発明の抗体－薬物結合体中に存在するポリマーの可能な構造的特徴を説明する。
本発明の抗体－薬物結合体のポリマーは：
（ｉ）１つまたは複数の式（ＩＩａ）：
（式中、ＬＧは、付加－脱離反応条件下での脱離基であり、ＲおよびＺは、式（Ｉ）の繰り返し単位について上記で定義したとおりである）の化合物；および
（ｉｉ）式（ＩＩｂ）：。
（式中、ＬＧは、付加－脱離反応条件下での脱離基であり、Ｑ、ＸおよびＹは、式（Ｉ）の繰り返し単位について上記で定義したとおりである）の化合物から誘導し得る。
付加－脱離条件は、当業者によく知られている。典型的には、付加－脱離条件は、求核性（すなわち電子が豊富な）部分が不飽和炭素原子に付加して、その炭素原子へのσ共有結合を形成し、その結果、該炭素原子へのπ結合の破壊、並びに引き続く前記π結合の再形成、および前記炭素原子と、典型的には正味の電子求引部分である他の置換基の１つとの間のσ結合の同時切断により、その置換基が除去され得る、任意の反応条件である。
本発明の抗体－薬物結合体のポリマーにおいては、ｘは、１、２、３、４、５または６であり得る。好ましくは、しかしながら、ｘは、１、２、３、４または５、さらにより好ましくは１、２、３または４、なおより好ましくは１、２または３、さらにより好ましくは１または２、特に好ましくは１である。好ましくは、ｘは、１である。好ましくは従って、本発明の抗体－薬物結合体のポリマーは、式（Ｉａ）：
（式中、Ｑ、Ｒ、Ｘ、ＹおよびＺは、式（Ｉ）に関して上記で定義したとおりである）の繰り返し単位を含む。
ポリマーは、好ましくは、Ｒが水素である１つまたは複数の式（ＩＩａ）の化合物から誘導される。より好ましくは、Ｒは、ポリマーが誘導される全ての式（ＩＩａ）の化合物において水素である。
ポリマーは、好ましくは、１つまたは複数の式（ＩＩａ）および／若しくは式（ＩＩｂ）の化合物から誘導される（ここで、ＬＧは、Ｃｌ、ＯＨ、ＯＲ’、ＳＨ、ＳＲ’、ＮＨ２、ＮＨＲ’、ＮＲ’２、Ｏ－２－Ｃｌ－Ｔｒｔ、ＯＤｍｂ、Ｏ－２－ＰｈｉＰｒ、Ｏ－ＥＤＯＴｎ－Ｐｈ、０－ＮＨＳ、ＯＦｍ、ＯＤｍａｂおよびＯＣａｍから選択される）。さらにより好ましくは、ＬＧは、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯｔＢｕ、Ｏ－２－Ｃｌ－Ｔｒｔ、ＯＤｍｂ、Ｏ－２－ＰｈｉＰｒ、Ｏ－ＥＤＯＴｎ－Ｐｈ、０－ＮＨＳ、ＯＦｍ、ＯＤｍａｂおよびＯＣａｍから選択される。１つまたは複数の式（ＩＩａ）の化合物におけるＬＧおよび／または式（ＩＩｂ）におけるＬＧは、同一でも異なっていてもよい。
本明細書において定義する２－Ｃｌ－Ｔｒｔは、２－クロロトリチルを指す。本明細書において定義するＤｍｂは、２，４－ジメトキシベンジルを指す。本明細書において定義する２－ＰｈｉＰｒは、２－フェニルイソプロピルを指す。本明細書において定義するＦｍは、９－フルオレニルメチルを指す。本明細書において定義するＤｍａｂは、４－（Ｎ－［１－（４，４－ジメチル－２，６－ジオキソシクロヘキシリデン）－３－メチルブチル］－アミノ）ベンジルを指す。本明細書において定義するＮＨＳは、Ｎ－ヒドロキシスクシンアミドを指す。本明細書において定義するＣａｍは、カルバモイルメチルを指す。本明細書において定義するアリール－ＥＤＯＴｎは、以下の式：
（式中、Ｒ３は、ＨまたはＯＭｅであり、Ｒ４は、ＨまたはＯＭｅであり、Ｒ５は、ＨまたはＯＭｅである）を有する部分を指す。好ましくは、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、（ａ）Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の全てがＨである、（ｂ）Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の全てがＯＭｅである、（ｃ）Ｒ３およびＲ４がＯＭｅであり、Ｒ５がＨである、または（ｄ）Ｒ３およびＲ４がＨであり、Ｒ５がＯＭｅであるように選択される。
ＬＧがＲ’基を含むとき、Ｒ’は、好ましくはＣ１－２０アルキル、より好ましくはＣ１－１２アルキル、なおより好ましくはＣ１－８アルキル、特に好ましくはＣ１－４アルキルである。適切なアルキル基の代表例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルおよびｔｅｒｔ－ブチルを含む。メチル、エチルおよびｔｅｒｔ－ブチルが、特に好ましいアルキル基である。
典型的には、本発明の抗体－薬物結合体のポリマーにおいて、Ｑは、－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－または－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－である。この実施態様においては、Ｔ１は、好ましくは－ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－であり、より好ましくは－ＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－である。この実施態様においては、Ｔ２は、好ましくは－ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－であり、より好ましくは－ＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－である。Ｔ１およびＴ２は、同一でも異なっていてもよい。好ましくは、Ｔ１およびＴ２は、同一である。典型的には、Ｔ１およびＴ２の両方が、－ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－および－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－から選択され、好ましくは、Ｔ１およびＴ２の両方が、－ＣＨ２ＣＨ２－および－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－から選択され、より好ましくは、Ｔ１およびＴ２の両方が、－ＣＨ２ＣＨ２－である。
あるいは、本発明の抗体－薬物結合体のポリマーにおいては、Ｑは、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－であり得る。
式（Ｉ）中の各Ｑは、同一でも異なっていてもよい。好ましくは、式（Ｉ）中の各Ｑは、同一である。あるいは、式（Ｉ）中の各Ｑは、異なる。
誤解を避けるために、描かれているＱ部分の左側は、式（Ｉ）中のＹ部分に共有結合しており、描かれているＱ部分の右側は、式（Ｉ）中のＸ部分に共有結合している。
本抗体－薬物結合体のポリマーにおいては、Ｘは、好ましくはＯ、ＮＨ、またはＮＲ’である。さらにより好ましくは、Ｘは、ＯまたはＮＨである。なおより好ましくは、Ｘは、ＮＨである。さらに好ましいポリマーにおいては、Ｙは、（Ｃ＝Ｏ）である。特に好ましい実施態様においては、Ｘは、ＮＨであり、Ｙは、（Ｃ＝Ｏ）である。
さらに好ましい実施態様においては、式（ＩＩｂ）の化合物は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはポリプロピレングリコールから誘導される。この場合において好ましくは、式（ＩＩｂ）の化合物は、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ５００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ１０００、ＰＥＧ１５００、ＰＥＧ２０００、ＰＥＧ３０００、ＰＥＧ４０００およびＰＥＧ５０００から誘導される。なおより好ましくは、Ｘは、ＮＨであり、Ｙは、Ｃ＝Ｏであり、Ｑは、－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－または－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－であり、Ｔ１およびＴ２の両方が、－ＣＨ２ＣＨ２－である。最も好ましくは、Ｘは、ＮＨであり、Ｙは、（Ｃ＝Ｏ）であり、Ｑは－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２－である。好ましくは式（ＩＩｂ）の化合物は、２００から２２００の分子量を有し、より好ましくは４００から１２００の分子量を有する。
ｓは、好ましくは、０から１５０、より好ましくは１から１００、さらにより好ましくは１から５０、なおより好ましくは３から３５、さらにより好ましくは７から２３の整数である。すなわち、特に好ましい実施態様においては、Ｑは、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２－であり、ｓは、０から１５０、より好ましくはより好ましくは１から１００、さらにより好ましくは１から５０、なおより好ましくは３から３５、さらにより好ましくは７から２３の整数である。さらにより好ましい実施態様においては、Ｘは、ＮＨであり、Ｙは、（Ｃ＝Ｏ）であり、Ｑは、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２－であり、ｓは、０から１５０、より好ましくはより好ましくは１から１００、さらにより好ましくは１から５０、なおより好ましくは３から３５、さらにより好ましくは７から２３の整数である。
別の好ましい実施態様においては、式（ＩＩｂ）の化合物は、ポリ（サルコシン）またはそのエステルから誘導される。この実施態様においては、Ｑは、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－である。なおより好ましくは、この実施態様においては、Ｘは、ＮＨまたはＮＲ’、より好ましくはＮＲ’、さらにより好ましくはＮＭｅである。さらにより好ましくは、Ｑは、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－であり、Ｘは、ＮＭｅであり、Ｙは、（Ｃ＝Ｏ）である。さらにより好ましくは、Ｑは、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－であり、Ｘは、ＮＭｅであり、Ｙは、（Ｃ＝Ｏ）である。好ましくはポリ（サルコシン）またはそのエステルは、３５０から１８００の分子量を有する。ｏは、好ましくは０から１００、より好ましくは１から７５、さらにより好ましくは２から５０、最も好ましくは５から２５の整数である。すなわち、特に好ましい実施態様においては、Ｑは、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－であり、Ｘは、ＮＭｅであり、Ｙは、（Ｃ＝Ｏ）であり、ｏは、０から１００、より好ましくは１から７５、さらにより好ましくは２から５０、最も好ましくは５から２５の整数である。
抗体－薬物結合体のポリマーにおいては、各Ｚは、式（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）または（ｖ）：
の群から独立して選択される。
誤解を避けるために、描かれている式（ｉ）から（ｖ）のそれぞれの左側末端は、ポリマー主鎖の炭素原子に結合している。すなわち、式（Ｉ）の繰り返し単位において、部分－ＡＡ－は、ポリマー主鎖の炭素原子に直接共有結合している。
すなわち、一つの実施態様においては、Ｚは、式（ｉ）の基である。この実施態様においては、ポリマーのアミノ酸側鎖と生物活性部分との間にリンカー基は何もない。この実施態様においては、－ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｈがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分である。典型的には、生物活性部分Ｂは、－ＡＡ－上のヘテロ原子を介して－ＡＡ－部分に共有結合している。好ましくは、従って、この実施態様においては、－ＡＡ－Ｈは、側鎖中にヘテロ原子を含むアミノ酸の側鎖を表す。より好ましくは、－ＡＡ－Ｈは、セリン、システイン、スレオニン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、チロシン、トリプトファン、ヒスチジン、オルニチン、ヒドロキシトリプトファン、ホモセリン、ホモシステイン、アロスレオニン、セレノシステイン、およびセレノホモシステイン、α－アミノグリシン、ジアミノ酢酸、２，３－ジアミノプロピオン酸およびα，γ－ジアミノ酪酸から選択されるアミノ酸の側鎖を表す。この実施態様の別の好ましい態様においては、－ＡＡ－Ｈは－、（ＣＨ２）ｎ－ＮＨ２（式中、ｎは、０から１０、好ましくは１から８、より好ましくは２から６、最も好ましくは３または４の整数である）である。なおより好ましくは、－ＡＡ－Ｈは、セリン、システイン、スレオニン、リジンおよびオルニチンから選択されるアミノ酸の側鎖を表す。最も好ましくは、－ＡＡ－Ｈは、リジンの側鎖を表す。
別の実施態様においては、Ｚは、式（ｉｉ）の基である。この実施態様においては、ポリマーのアミノ酸側鎖と生物活性部分との間にリンカー基Ｌ１がある。換言すると、典型的には本発明の抗体－薬物結合体は、ポリマー主鎖のアミノ酸側鎖と生物活性部分との間にリンカーを含む。
この実施態様においては、－ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｈがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分である。典型的には、リンカー基Ｌ１は、－ＡＡ－上のヘテロ原子を介して－ＡＡ－部分に共有結合している。好ましくは、従って、この実施態様においては、－ＡＡ－Ｈは、側鎖中にヘテロ原子を含むアミノ酸の側鎖を表す。より好ましくは、－ＡＡ－Ｈは、セリン、システイン、スレオニン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、チロシン、トリプトファン、ヒスチジン、オルニチン、ヒドロキシトリプトファン、ホモセリン、ホモシステイン、アロスレオニン、セレノシステイン、およびセレノホモシステイン、α－アミノグリシン、ジアミノ酢酸、２，３－ジアミノプロピオン酸およびα，γ－ジアミノ酪酸から選択されるアミノ酸の側鎖を表す。この実施態様の別の好ましい態様においては、－ＡＡ－Ｈは－、（ＣＨ２）ｎ－ＮＨ２（式中、ｎは、０から１０、好ましくは１から８、より好ましくは２から６、最も好ましくは３または４の整数である）である。なおより好ましくは、－ＡＡ－Ｈは、セリン、システイン、スレオニン、リジンおよびオルニチンから選択されるアミノ酸の側鎖を表す。最も好ましくは、－ＡＡ－Ｈは、リジンの側鎖を表す。
Ｚが式（ｉｉ）の基であるこの実施態様においては、リンカー基Ｌ１は、生物活性部分を共有結合を介してポリマー主鎖に結合するのに適した任意のリンカー基であり得る。そのようなリンカー基は、当技術分野においてよく知られている。好ましくは、Ｌ１は、１４から４０００Ｄａ、より好ましくは２８から２０００Ｄａ、さらにより好ましくは５０から１０００Ｄａ、なおより好ましくは１００から５００Ｄａの分子量を有する。リンカー基Ｌ１は、例えば、ヒドラゾン部分、オキシム部分、イミン部分、ケタール部分、チオケタール部分、カルバメート部分、チオセミカルボゾン部分、チアゾリジン部分、チオエステル部分、ジスルフィド部分、チオエーテル部分、アミド部分またはテトラヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，４－ｂ］インドール部分を含み得る。すなわち、リンカー基Ｌ１は、例えば、縮合反応、酸化反応、ピクテ・スペングラー反応、ネイティブライゲーション反応、トラップされたクネーフェナーゲル反応、またはタンデムクネーフェナーゲル縮合－マイケル付加において形成され得る。
リンカー基Ｌ１は、好ましくは式－Ｖ１－Ｌ’－Ｖ２－（式中、
Ｖ１は、
（式中、
●は、－ＡＡ－への結合点を示し；
●●は、－Ｌ’－への結合点を示し；
Ｙ１は、Ｏ、ＳおよびＮＨから選択され、好ましくはＯであり；
Ｙ２は、Ｏ、ＳおよびＮＨから選択され、好ましくはＯであり；
ＲＡは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルであり；
ｖは、１から１００、好ましくは１から５０、より好ましくは１から２０、なおより好ましくは１から１２、さらにより好ましくは２から８、最も好ましくは２から６の整数であり；
破線は、任意に存在する結合を表す）から選択され；
Ｌ’は、結合、Ｃ１－２０アルキレン、Ｃ１－２０アルケニレン、Ｃ１－２０アルキニレン、Ｃ６－１０アリーレン（例えばフェニレンまたはナフチレン）、Ｃ７－２０アラルキレン、Ｃ３－１０シクロアルキレン、Ｃ４－８ヘテロシクロアルキレン、Ｃ５－１０ヘテロアリーレン、Ｃ６－２０ヘテロアラルキレン、－（Ｏ－Ｋ）ｉ－、－（ＮＨ－Ｋ）ｉ－、－（ＮＲ’－Ｋ）ｉ－、１１６から２０００Ｄａの分子量を有するポリエステル、１１４から２０００Ｄａの分子量を有するポリアミド、および部分－Ｗ－（ここで、Ｈ－Ｗ－ＯＨは、アミノ酸または２から２０個の天然若しくは合成アミノ酸サブユニットを含有するペプチドである）から選択され；
Ｖ２は、－ＯＶ－、－ＮＨＶ－、－ＮＲＡＶ－、－ＳＶ－、－Ｓ－、－ＶＳ－、－ＯＶＳ－、－ＮＨＶＳ－、－ＮＲＡＶＳ－、－ＳＶＳ－、－Ｖ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－ＮＲＡ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－（Ｃ＝ＮＨ）－、Ｖ－Ｏ（Ｃ＝ＮＨ）－、－Ｖ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）－、－Ｖ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＨ）－、－Ｖ－Ｓ（Ｃ＝ＮＨ）－、－Ｖ－（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－Ｖ－Ｏ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－Ｖ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－Ｖ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－Ｖ－Ｓ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＯＶ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＯＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＯＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＯＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＯＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＯＶ－（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＯＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＯＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＯＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＯＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＨＶ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－（Ｃ＝ＮＨ）－、ＮＨＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＨＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＨＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＨＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＨＶ－（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＨＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＨＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＨＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＨＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＲＡＶ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡＶ－（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＲＡＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＲＡＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＲＡＶ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＲＡＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＲＡＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＳＶ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－（Ｃ＝ＮＨ）－、ＳＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＳＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＳＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＳＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＳＶ－（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＳＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＳＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＳＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＳＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｏ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｓ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、７６から２０００Ｄａの分子量を有するポリエーテル例えばポリ（アルキレングリコール）、７５から２０００Ｄａの分子量を有するポリアミン、１１６から２０００Ｄａの分子量を有するポリエステル、１１４から２０００Ｄａの分子量を有するポリアミド、および部分－Ｗ－（ここで、Ｈ－Ｗ－ＯＨは、アミノ酸または２から２０個の天然若しくは合成アミノ酸サブユニットを含有するペプチドである）から選択され；
Ｖは、Ｃ１－２０アルキレン、Ｃ１－２０アルケニレン、Ｃ１－２０アルキニレン、Ｃ６－１０アリーレン（例えばフェニレンまたはナフチレン）、Ｃ７－２０アラルキレン、Ｃ３－１０シクロアルキレン、Ｃ４－８ヘテロシクロアルキレン、Ｃ５－１０ヘテロアリーレン、およびＣ６－２０ヘテロアラルキレンから選択され；
Ｊは、糖置換基、および糖置換基に対してパラまたはオルトに、メチレン基または部分－（ＣＨ＝ＣＨ）ｋ－ＣＨ２－（ここで、ｋは、１から１０の整数であり、さらに該メチレン基または部分－（ＣＨ＝ＣＨ）ｋ－ＣＨ２－は、生物活性部分Ｂに近い－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－基に直接結合しており、フェニル環の炭素は、生物活性部分Ｂから遠位のリンカー基の残りに直接結合している）を有するフェニル基であり；
各Ｋは、同一または異なって、Ｃ１－１０アルキレンを表し；
ｉは、１から１００、好ましくは１から５０、より好ましくは２から２０の整数であり；
ＲＡは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルである）から選択される）の基である。
好ましくは、部分－Ｖ１－Ｌ’－Ｖ２－は、求核性ヘテロ原子（－ＮＨ－、－Ｏ－または－Ｓ－などの）、またはカルボニル誘導体（－（Ｃ＝Ｏ）－、－（Ｃ＝Ｓ）－、－（Ｃ＝ＮＨ）－または－（Ｃ＝ＮＲＡ）－などの、および好ましくは－（Ｃ＝Ｏ）－）における右側で終わる。
より好ましくは、リンカー基Ｌ１は、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－Ｏ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－または－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２（式中、Ｌ’は、上記で定義したとおりであり、Ｖ２は、－Ｖ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’Ｖ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’Ｖ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’Ｖ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’Ｖ－ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’Ｖ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｏ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｓ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、１１６から２０００Ｄａの分子量を有するポリエステル、１１４から２０００Ｄａの分子量を有するポリアミド、および部分－Ｗ－から選択されるか、または、Ｌ’が部分－Ｗ－であるとき、Ｖ２は、さらに結合であり得る）である。好ましくは、リンカー基Ｌ１は、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－Ｏ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－または－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２であり、－ＡＡ－部分から遠位のリンカーの末端は、カルボニル基で終わる。
特に好ましいリンカー基Ｌ１は、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－Ｏ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）－ＮＨ－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）－ＮＨ－Ｏ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－および－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－（式中、－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－は、以下の構造：
（式中、＊は、Ｖ１への結合点を示し、＊＊は、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｂへの結合点を示す）を有する）から選択される。
これは、抗体薬物結合体の分野においてよく知られているリンカー基である。
最も好ましくは、リンカー基Ｌ１は、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－Ｏ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－である。
好ましくは、部分Ｊは、糖置換基に対してパラまたはオルトにメチレン基を有するフェニル基である。より好ましくは、メチレン基は、糖置換基に対してパラである。さらにより好ましくは、部分Ｊにおける糖置換基は、糖のアノマー炭素原子にも直接結合している酸素原子を介してフェニル基に結合している。なおより好ましくは、糖置換基は、六炭糖である。さらにより好ましくは、糖置換基は、グルクロン酸（β－グルクロニダーゼの作用によって切断され得る）などの、酵素の作用によってヒドロキシル置換基に変換され得る糖置換基から選択される。最も好ましくは、部分Ｊは、以下の構造：
を有する。
部分Ｊを含む特に好ましいリンカー基は、以下の構造：
（式中、Ｒ６は、任意のアミノ酸Ｒ基またはその誘導体、例えばＨ、ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２Ｐｈ、ＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＳＨ、ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ３、ＣＨ２ＣＯＮＨ２、ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２、ＣＨ２ＣＯＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ、（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＮ）ＮＨ２、（ＣＨ２）４ＮＨ２、（ＣＨ２）３ＮＨ２、
から選択される）から選択される。好ましくは、Ｒ６は、Ｈ、ＣＨ３およびＣＨ２ＮＨ２から選択され、より好ましくはＣＨ２ＮＨ２である。
－（Ｃ＝Ｏ）－ＣＨ２－ＮＨ－ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－、－（Ｃ＝Ｏ）－ＣＨ２－ＮＨ－Ｏ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－および－（Ｃ＝Ｏ）－ＣＨ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－から選択されるリンカー基Ｌ１を有するポリマー－薬物結合体は、それぞれ、式－（Ｃ＝Ｏ）－ＣＨ＝ＮＨ－ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－、－（Ｃ＝Ｏ）－ＣＨ＝ＮＨ－Ｏ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－および－（Ｃ＝Ｏ）－ＣＨ＝ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－のリンカー基Ｌ１を有するポリマー－薬物結合体の還元によって取得し得る。
別の実施態様においては、Ｚは、式（ｉｉｉ）の基である。この実施態様においては、ポリマーのアミノ酸側鎖と生物活性部分との間にリンカー基Ｌ２がある。
この実施態様においては、－ＡＡ＝は、－ＡＡ＝Ｏがアミノ酸の側鎖を表すような三価の部分である。典型的には、リンカー基Ｌ２は、－ＡＡ－上の炭素原子を介して－ＡＡ－部分に共有結合している。典型的には、リンカー基Ｌ２は、二重結合を介して－ＡＡ－部分に共有結合している。あるいは、リンカー基Ｌ２は、単結合を介して－ＡＡ－部分に共有結合している。あるいは、リンカー基Ｌ２は、２つの別個の単結合を介して－ＡＡ－部分に共有結合し得、例えばリンカー基Ｌ２は、ケタールまたはチオケタール部分を含み得る。典型的には、リンカー基Ｌ２は、－ＡＡ－上の炭素原子への二重結合を介して－ＡＡ－部分に共有結合している。あるいは、リンカー基Ｌ２は、－ＡＡ－上の炭素原子への単結合を介して－ＡＡ－部分に共有結合している。あるいは、リンカー基Ｌ２は、－ＡＡ－上の炭素原子への２つの別個の単結合を介して－ＡＡ－部分に共有結合している。
好ましくは、従って、この実施態様においては、－ＡＡ＝Ｏは、その側鎖中にアルデヒドまたはケトンを含むアミノ酸の側鎖を表す。より好ましくは、－ＡＡ＝Ｏは、アミノ－２－ケト－酪酸、４－アセチルフェニルアラニンおよびホルミルグリシンから選択されるアミノ酸の側鎖を表す。
Ｚが式（ｉｉｉ）の基であるこの実施態様においては、リンカー基Ｌ２は、生物活性部分を共有結合を介してポリマー主鎖に結合するのに適した任意のリンカー基であり得る。そのようなリンカー基は、当技術分野においてよく知られている。好ましくは、Ｌ２は、１４から４０００Ｄａ、より好ましくは２８から２０００Ｄａ、さらにより好ましくは５０から１０００Ｄａ、なおより好ましくは１００から５００Ｄａの分子量を有する。リンカー基Ｌ２は、例えば、ヒドラゾン部分、オキシム部分、イミン部分、ケタール部分若しくはチオケタール部分、またはテトラヒドロ－１Ｈ－ピリド［３，４－ｂ］インドール部分を含み得る。すなわち、リンカー基Ｌ２は、例えば、縮合反応、ピクテ・スペングラー反応、トラップされたクネーフェナーゲル反応、またはタンデムクネーフェナーゲル縮合－マイケル付加において形成され得る。
リンカー基Ｌ２は、好ましくは式
（式中：
Ｖ３は、
（式中、●、●●、Ｙ２、ＲＡおよびｖおよび破線は、上記のＬ１におけるＶ１について定義したとおりである）から選択され；
Ｌ’は、上記のＬ１において定義したとおりであり；
Ｖ２は、上記のＬ１において定義したとおりである）の基である。
好ましくは、部分－Ｖ３－Ｌ’－Ｖ２－は、求核性ヘテロ原子（－ＮＨ－、－Ｏ－または－Ｓ－などの）、またはカルボニル誘導体（－（Ｃ＝Ｏ）－、－（Ｃ＝Ｓ）－、－（Ｃ＝ＮＨ）－または－（Ｃ＝ＮＲＡ）－などの、および好ましくは－（Ｃ＝Ｏ）－）における右側で終わる。
より好ましくは、リンカー基Ｌ２は、Ｎ－Ｏ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－、＝Ｎ－ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－または＝Ｎ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２（式中、Ｌ’は、上記のＬ１において定義したとおりであり、Ｖ２は、－Ｖ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’Ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’Ｖ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’Ｖ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’Ｖ－ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’Ｖ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｏ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｓ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲ’－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、１１６から２０００Ｄａの分子量を有するポリエステル、１１４から２０００Ｄａの分子量を有するポリアミド、および部分－Ｗ－から選択されるか、または、Ｌ’が部分－Ｗ－であるとき、Ｖ２は、さらに結合であり得る）である。好ましくは、リンカー基Ｌ２は、＝Ｎ－Ｏ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－、＝Ｎ－ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－または＝Ｎ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２であり、－ＡＡ－部分から遠位のリンカーの末端は、カルボニル基で終わる。
特に好ましいリンカー基Ｌ２は、＝Ｎ－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、＝Ｎ－Ｏ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、＝Ｎ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨ－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨ－Ｏ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－および－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－から選択される。－ＮＨ－ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－、－ＮＨ－Ｏ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－および－ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－から選択されるリンカー基Ｌ２を有するポリマー－薬物結合体は、それぞれ、式＝ＮＨ－ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－、＝ＮＨ－Ｏ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－および＝ＮＨ－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｌ’－Ｖ２－のリンカー基Ｌ２を有するポリマー－薬物結合体の還元によって取得し得る。
最も好ましくは、リンカー基Ｌ２は、＝Ｎ－Ｏ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－である。
別の実施形態においては、Ｚは、式（ｉｖ）の基である。この実施態様においては、ポリマーのアミノ酸側鎖と生物活性部分との間にリンカー基Ｌ３がある。
この実施態様においては、－ＡＡ－は、－ＡＡ－ＣＨ＝ＣＨ２または－ＡＡ－Ｃ≡ＣＨがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分である。典型的には、部分－ＡＡ－およびリンカー基Ｌ３は、それぞれ、トリアゾール環における隣接原子に共有結合している；すなわち、Ｌ３は、１，２，３－トリアゾールの１位で結合し、－ＡＡ－は、１，２，３－トリアゾールの５位で結合している。あるいは、部分－ＡＡ－およびリンカー基は、それぞれ、トリアゾール環における非隣接原子に共有結合している；すなわち、Ｌ３は、１，２，３－トリアゾールの１位で結合し、－ＡＡ－は、１，２，３－トリアゾールの４位で結合している。典型的には、トリアゾール環における任意の二重結合が、存在する。この場合においては、－ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｃ≡ＣＨがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分である。あるいは、トリアゾール環における任意の二重結合は、存在せず、すなわちトリアゾール環は、４，５－デヒドロ－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール環である。この場合においては、－ＡＡ－は、－ＡＡ－ＣＨ＝ＣＨ２がアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分である。
この実施態様においては、－ＡＡ－ＣＨ＝ＣＨ２は、側鎖中にアルケンを含むアミノ酸の側鎖を表し、－ＡＡ－Ｃ≡ＣＨは、側鎖中にアルキンを含むアミノ酸の側鎖を表す。この実施態様においては、－ＡＡ－ＣＨ＝ＣＨ２が側鎖中にアルケンを含むアミノ酸の側鎖を表すとき、該アミノ酸は、好ましくはホモアリルグリシンである。この実施態様においては、－ＡＡ－Ｃ≡ＣＨが側鎖中にアルキンを含むアミノ酸の側鎖を表すとき、該アミノ酸は、好ましくは、４－エチニルフェニルアラニン、４－プロパルギルオキシフェニルアラニン、プロパルギルグリシン、４－（２－プロピニル）プロリン、２－アミノ－６－（｛［（１Ｒ，８Ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノン－４－イン－９－イルメトキシ］カルボニル｝アミノ）ヘキサン酸およびホモプロパルギルグリシンから選択される。
Ｚが式（ｉｖ）の基であるこの実施態様においては、リンカー基Ｌ３は、生物活性部分を共有結合を介してポリマー主鎖に結合するのに適した任意のリンカー基であり得る。そのようなリンカー基は、当技術分野においてよく知られている。好ましくは、Ｌ３は、１４から４０００Ｄａ、より好ましくは２８から２０００Ｄａ、さらにより好ましくは５０から１０００Ｄａ、なおより好ましくは１００から５００Ｄａの分子量を有する。
リンカー基Ｌ３は、好ましくは式－Ｖ４－Ｌ’－Ｖ２－（式中：
Ｖ４は、－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｙ２）（式中、ｖおよびＹ２は、上記のＬ１におけるＶ１について定義したとおりである）であり；
Ｌ’は、上記のＬ１において定義したとおりであり；
Ｖ２は、上記のＬ１において定義したとおりである）の基である。
好ましくは、部分－Ｖ４－Ｌ’－Ｖ２－は、求核性ヘテロ原子（－ＮＨ－、－Ｏ－または－Ｓ－などの）、またはカルボニル誘導体（－（Ｃ＝Ｏ）－、－（Ｃ＝Ｓ）－、－（Ｃ＝ＮＨ）－または－（Ｃ＝ＮＲＡ）－などの、および好ましくは－（Ｃ＝Ｏ）－）における右側で終わる。
特に好ましいリンカー基Ｌ３は、－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）である。
別の実施態様においては、Ｚは、式（ｖ）の基である。この実施態様においては、ポリマーのアミノ酸側鎖と生物活性部分との間にリンカー基Ｌ３がある。
この実施態様においては、－ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｎ３がアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分である。典型的には、部分－ＡＡ－およびリンカー基Ｌ３は、それぞれ、トリアゾール環における隣接原子に共有結合している；すなわち、Ｌ３は、１，２，３－トリアゾールの５位で結合し、－ＡＡ－は、１，２，３－トリアゾールの１位で結合している。あるいは、部分－ＡＡ－およびリンカー基は、それぞれ、トリアゾール環における非隣接原子に共有結合している；すなわち、Ｌ３は、１，２，３－トリアゾールの４位で結合し、－ＡＡ－は、１，２，３－トリアゾールの１位で結合している。典型的には、トリアゾール環における任意の二重結合が、存在する。あるいは、トリアゾール環における任意の二重結合は、存在せず、すなわちトリアゾール環は、４，５－デヒドロ－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール環である。
この実施態様においては、－ＡＡ－Ｎ３は、その側鎖中にアジドを含むアミノ酸の側鎖を表し、ここで、該アミノ酸は、好ましくは、４－アジドリシン、アジドオルニチン、アジドノルロイシン、アジドアラニン、アジドホモアラニン、４－アジドフェニルアラニンおよび４－アジドメチルフェニルアラニンから選択される。
Ｚが式（ｖ）の基であるこの実施態様においては、リンカー基Ｌ３は、式（ｉｖ）の場合において上記で定義したとおりである。
Ｚが式（ｉｖ）または（ｖ）の基である実施態様においては、－ＡＡ－とＬ３部分との間のトリアゾール環は、典型的には、アジド－アルキンまたはアジド－アルケン環化反応において形成される。
典型的には、Ｚは、式（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）または（ｖ）の基である。好ましくは、Ｚは、式（ｉｉ）または（ｉｉｉ）の基である。最も好ましくは、Ｚは、式（ｉｉ）の基である。
誤解を避けるために、リンカー基Ｌ１からＬ３の上記の定義において、描かれているリンカー基の左側は、－ＡＡ－部分に結合し、描かれているリンカー基の右側は、生物活性部分Ｂに結合する。リンカー－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－の上記描写においては、左側は、バリン（Ｖａｌ）への外部結合を示し、上部は、パラアミノベンジルアルコール（ＰＡＢ）への外部結合を示す。部分Ｊを含む好ましいリンカー基の上記描写においては、左下は、－ＡＡ－への結合を示し、右上は、生物活性部分Ｂへの結合を示す。
部分Ｚにおいては、Ｂは、生物活性部分である。生物活性部分は、いったん生物活性分子がポリマー繰り返し単位の主鎖または、存在する場合、リンカー基のいずれかへの共有結合を形成したときに、その分子（例えば薬物）から誘導されている部分である。－ＡＡ－またはリンカー基とＢとの間の結合が加水分解されるとき、生物活性分子である化合物Ｂ－ＨまたはＢ－ＯＨが放出される。Ｂ－ＯＨは、Ｂ－ＬＧ（式中、ＬＧは、本明細書において定義する付加－脱離反応条件下での任意の脱離基である）と呼ばれる、より広いクラスの求電子生物活性分子の例である。すなわち、本明細書において使用する「生物活性分子」は、ポリマー繰り返し単位またはリンカー基にではなく水素原子に結合している前記生物活性部分である。
各生物活性部分－Ｂは、同一でも異なっていてもよい。すなわち、各生物活性分子Ｂ－ＨまたはＢ－ＬＧは、同一でも異なっていてもよい。すなわち、本発明の抗体－薬物結合体における各生物活性部分Ｂは、同一であり得る。しかしながら、好ましくは、本発明の抗体－薬物結合体は、少なくとも２つの異なる生物活性部分、例えば２、３または４つの異なる生物活性部分を含有する。
生物活性分子Ｂ－ＨまたはＢ－ＬＧは、典型的には、低分子薬物、ペプチド、タンパク質、ペプチド模倣物、抗体、抗原、ＤＮＡ、ｍＲＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ、低分子ヘアピンＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ＰＮＡ、フォルダマー、炭水化物、炭水化物誘導体、非リピンスキー分子、合成ペプチドおよび合成オリゴヌクレオチド、好ましくは低分子薬物から独立して選択される。好ましい生物活性分子は、抗感染症薬、抗生物質、抗細菌薬、抗微生物薬、抗炎症薬、鎮痛薬、抗高血圧薬、抗真菌薬、抗結核薬、抗ウイルス薬、抗癌薬、抗血小板薬、抗マラリア薬、抗痙攣薬、心臓保護薬、駆虫薬（ａｎｔｉｈｅｌｍｉｎｔｉｃ）、抗原虫薬、抗トリパノソーマ薬、抗住血吸虫症薬、抗腫瘍薬、抗緑内障薬、精神安定剤、催眠薬、抗痙攣薬、抗パーキンソン薬、抗うつ薬、抗ヒスタミン薬、抗糖尿病薬、抗アレルギー薬またはタンパク質分解誘導キメラ分子（ＰＲＯＴＡＣ）から選択される薬物である。
生物活性分子の非限定的な例は、イソニアジド、カルビドパ、エンドララジン、ジヒドララジン、ヒドララジン、ヒドラカルバジン、フェニプラジン、ピルドララジン、オクタモキシン、合成ペプチド、合成オリゴヌクレオチド、炭水化物、ペプチド模倣物、抗体、ヒドラジン、アルテプラーゼ、アダリムマブ、ビバリルジン、クロロプロカイン、ダプトマイシン、ドキサゾシン、エファビレンツ、ヒドロフルメチアジド、インダパミド、インスリン デテミル、リシノプリル、ペプチド模倣物、プラゾシン、サキサグリプチン、低分子干渉ＲＮＡ、スルファメチルチアゾール、スルファメトロール、スルフィソミジン、トリパミド、２－ｐ－スルファニリルアニリノエタノール、３－アミノ－４－ヒドロキシ酪酸、３－アミノピリジン－２－カルボキシアルデヒドチオセミカルバゾン（３－ＡＰ）／３－アミノピリジン－４－メチル－２－カルボキシアルデヒドチオセミカルバゾン（３－ＡＭＰ／Ｔｒｉａｐｉｎｅ／ＯＣＸ－１９１／ＯＣＸ－０１９１）、４，４’－スルフィニルジアニリン、４’－（メチルスルファモイル）スルファニルアニリド、４’－スルファニリルスルファニルアミド、４－アミノ－３－ヒドロキシ酪酸、４－スルファニルアミドサリチル酸、５－ヒドロキシトリプトファン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン（ＤＯＮ）、９－アミノアクリジン、９－アミノカンプトテシン、アバカビル、アバタセプト、アセジアスルホン、アセトスルホンナトリウム、アシクロビル、アデホビル、アルフゾシン、アマンタジン、アムフェナク、アミジノマイシン、アミカシン、アミノレブリン酸、アムロジピン、アモキシシリン、アンフェタミン、アンホマイシン、アムホテリシンＢ、アンピシリン、アンプレナビル、アンシタビン、抗体、抗原、アルベカシン、アスポキシシリン、アザシチジン、アザセリン、バカンピシリン、バシトラシン、ベネキセートＨＣｌ、ベンセラジド、ベンゾカイン、ベンジルスルファミド、ベバシズマブ、ブレオマイシン、ブロジモプリム（Ｂｒｏｉｏｐｒｉｍ）、ブロピリミン、ブナゾシン、ブチロシン、カプレオマイシン、炭水化物、カルボプラチン、カルビシン、カルモナム、カスポファンギン、セファクロル、セファドロキシル、セファトリジン、セフカペン、セフクリジン、セフジニル、セフジトレン、セフェピム、セフェタメト、セフメノキシム（Ｃｅｆｉｎｅｎｏｘｉｍｅ）、セフィキシム、セフミノックス、セフォジジム、セフォラニド、セフォセリス、セフォタキシム、セフォチアム、セフォゾプラン、セフピロム、セフポドキシム、セフプロジル、セフロキサジン、セフタジジム、セフテラム、セフチブテン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフゾナム、セレコキシブ、セファレキシン、セファログリシン、セファロスポリンＣ、セファラジン、セルトリズマブ、セトキシム、セトラキサート、セツキシマブ、クロルプログアニル、シドホビル、シラスタチン、クラドリビン、クリナフロキサシン、クロパミド、コレセベラム、コリスチン、シクラシリン、シクログアニル、シクロペンチアジド、サイクロセリン、シタラビン、ダプソン、ダルベポエチンアルファ、ダルナビル、ダウノルビシン、デシタビン、デノスマブ、デキストロアンフェタミン、デゾシン、ジベカシン、ジデオキシアデノシン、ジソプロキシル、ＤＮＡ、ドルナーゼアルファ、ドキソルビシン、ドキシサイクリン、エブロチジン、エダトレキサート、エフロルニチン、エムトリシタビン、エンテカビル、エンビオマイシン、エピシリン、エピナスチン、エピルビシン、エポエチンアルファ、エタネルセプト、エタンブトール、エキセナチド、
ファムシクロ イミキモドビル（Ｆａｍｃｉｃｌｏ Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄｖｉｒ）、ファモチジン、フィルグラスチム、フィンゴリモド、フルシトシン、フルボキサミン、フォルダマー、葉酸、ホルチミシン（Ｆｏｒｉｍｉｃｉｎｓ）、ガバペンチン、ガンマ－アミノ酪酸、ゲムシタビン、ゲミフロキサシン、ゲンタマイシン、グラチラマーアセテート、ゴリムマブ、ヒスタミン、４価ヒトパピローマ（Ｈｕｍａｎ Ｐａｐｉｌｌｏｍａ Ｑｕａｄｒｉｖａｌｅｎｔ）、ヒドロクロロチアジド、イダルビシン、免疫グロブリン、インフリキシマブ、インスリン アスパルト、インスリン グラルギン、インスリン リスプロ、インターフェロンベータ－１ａ、インターフェロンベータ－１ｂ、イピリムマブ、イルソグラジン、イセパマイシン、カナマイシン、ラミブジン、ラモトリギン、ランレオチド、Ｌ－ＤＯＰＡ、レナリドミド、レナンピシリン、レボドパ、レボチロキシン、リラグルチド、リスデキサンフェタミン、ロラカルベフ、ライムサイクリン、マフェニド、マンタジン、メクロサイクリン、メルファラン、メマンチン、メサラミン、メサラジン、メトホルミン、メタサイクリン、メトトレキサート、アミノレブリン酸メチル、メチルドパ、ミボプラチン、ミクロノマイシン、マイクロＲＮＡ、ミカマイシン、ミルナシプラン、ミノサイクリン、ミトグアゾン、モルファジナミド、ｍＲＮＡ、Ｎ４－ベータ－Ｄ－グルコシルスルファニルアミド、ナタリズマブ、ナタマイシン、ネガマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、ニムスチン、ノラトレキセド、ノミフェンシン、非リピンスキー分子、ノプリスルファミド、Ｎ－スルファニリル－３，４－キシルアミド、ナイスタチン、オクトレオチドアセテート（Ｏｃｒｅｏｔｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、オマリズマブ、オセルタミビル、オキサリプラチン、パリビズマブ、ｐ－アミノサリチル酸、ｐ－アミノサリチル酸ヒドラジド、パロモマイシン、パルサルミド、パズフロキサシン、ペグフィルグラスチム、ペグインターフェロンアルファ－２ａ、ペメトレキセド、ペンシクロビル、ペプロマイシン、ペプチド、タンパク質、ペキシガナン、アミノサリチル酸フェニル、ピクロキシジン、ピラルビシン、ピリトレキシム、ピバンピシリン、ピブセファレキシン、ピボキシル、ＰＮＡ、ポリミキシン、プララトレキサート、プレガバリン、プレガベリン、プリマキン、プロカイン、プロパラカイン、プロポキシカイン、プロキセチル、ｐ－スルファニリルベンジルアミン、プロマイシン、ピリメタミン、キノシド、ラモプラニン、ラニビズマブ、レガデノソン、レマセミド、レシキモド、リボスタマイシン、リマンタジン、リストセチン、リツキシマブ、ロトラキサート、Ｓ－アデノシルメチオニン、サラセタミド、サンパトリラット、セベラマー、シソマイシン、シタフロキサシン、シタグリプチン、低分子ヘアピンＲＮＡ、Ｓ－メチルメチオニン、ソマトロピン、スパルフロキサシン、ストレプトニグリン、スクシスルホン、スクロフェニド、スルファベンズアミド、スルファセタミド、スルファクロルピリダジン、スルファクリソイジン、スルファシチン、スルファジアジン、スルファジクラミド、スルファジメトキシン、スルファドキシン、スルファエチドール、スルファグアニジン、スルファグアノール、スルファレン、スルファメラジン、スルファメーター、スルファメタジン、スルファメチゾール、スルファメトキサゾール、スルファメトキシピリダジン（ｕｌｆａｍｅｔｈｏｘｙｐｙｒｉｄａｚｉｎｅ）、スルファミドクリソイジン、スルファモキソール、スルファニルアミド、スルファニル酸、スルファニリル尿素、スルファペリン、スルファフェナゾール、スルファプロキシリン、
スルファピラジン、スルファソミゾール、スルファシマジン、スルファチアゾール、スルファチオ尿素、スルファトラミド、スルフィソキサゾール、スルホンアミド、スルファメトミジン（Ｓｕｌｆｒａｍｅｔｈｏｍｉｄｉｎｅ）、スルタミシリン、スルチアム、合成オリゴヌクレオチド、合成ペプチド、タフェノキン、タランパネル、タランピシリン、テイコプラニン、テノホビル、テラゾシン、テリパラチド、テトロキソプリム、チアミプリン、チオグアニン、チゲモナム、チノリジン、チラパザミン、トブラマイシン、トピラマート、トスフロキサシン、トラニルシプロミン、トラスツズマブ、トリマゾシン、トリメトプリム、トリメトレキサート、トリトクアリン、トロバフロキサシン、トロキサシタビン、ツベラクチノマイシン、ツベルシジン、チロシジン、ウステキヌマブ、バラシクロビル、バルデコキシブ、バルガンシクロビル、バンコマイシン、ビダラビン、ビガバトリン、ビンデシン、ビオマイシン、ザルシタビン、ゾニサミド、２，４，６－トリブロモ－ｍ－クレゾール、２１－アセトキシプレグネノロン、２－ｐ－スルファニリルアニリノエタノール、３－アミノ－４－ヒドロキシ酪酸、４－アミノ－３－ヒドロキシ酪酸、４－ヘキシルレゾルシノール、４－スルファニルアミドサリチル酸、５－（メチルアミノ）－２－デオキシウリジン（ＭＡＤＵ）、５－ブロモサリチルヒドロキサム酸、５－ヒドロキシトリプトファン、９－アミノカンプトテシン、アバカビル、アバタセプト、アビラテロン、アセブトロール、アセトアミノフェン、アセトアミノサロール、アクラシノマイシン、アシクロビル、アダリムマブ、アジュマリン、アルクロメタゾン、アルファ－ビサボロール、全てのエリスロマイシンエステル誘導体、アルプレノロール、アルテプラーゼ、ビス（アセチルサリチル酸）アルミニウム、アミカシン、アミノクロルテノキサジン、アミノプロピロン、アモジアキン、アモスラロール、アモキシシリン、アンプレナビル、アンシタビン、アニデュラファンギン、アニレリジン、アントラマイシン、抗体、抗原、アパルシリン、アピシクリン、アルベカシン、アロチノロール、アルテミシニンアルコール、アルゾキシフェン、アスポキシシリン、アタザナビル、アテノロール、アトロラクタミド、アザシチジン、アジダムフェニコール、アジスロマイシン、バンベルマイシン、バチマスタット、ベベエリン、ベクロメタゾンジプロピオネート、ベフロキサトン、ベンセラジド、ベンゾイルパス、ベンジルモルヒネ、ベタメタゾン、ベタキソロール、ベバシズマブ、ビアペネム、ビマトプロスト、ビソプロロール、ブレオマイシン、ボセンタン、ブロモサリチルクロルアニリド、ブロクスウリジン、ブセチン、ブシンドロール、ブデソニド、ブフェニオド、ブフェキサマク、ブニトロロール、ブプラノロール、ブプレノルフィン、ブプロピオン、ブラマート、ブセレリン、ブチロシン、ブトフィロロール、ブトルファノール、カドララジン、カルステロン、カペシタビン、カプレオマイシン、カプサイシン、カラゾロール、カルビドパ、炭水化物、カルボマイシン、カルテオロール、カルビシン、カルベジロール、カスポファンギン、ＣＣ－１０６５、セファドロキシル、セファマンドール、セファトリジン、セフブペラゾン、セフォニシド、セフォペラゾン、セフォセリス、セフピラミド、セフプロジル、セリプロロール、セファピリンナトリウム、セルトリズマブ、セツキシマブ、クロラムフェニコール、クロロブタノール、クロロキシレノール、クロロゾトシン、クロルフェネシン、クロルキナドール、
クロルテトラサイクリン ダルホプリスチン、クロモマイシン、シクレタニン、シクロピロクス、シクロスポリン、シドホビル、シンコニジン、シンコニン、シラマドール、クラドリビン、クラリスロマイシン、クラブラン酸、クリンダマイシン、クロベタゾン、クロホクトール、クロモサイクリン、クロキシキン、コデイン、コレセベラム、コリスチン、シクロスポリン、シタラビン、ダルベポエチンアルファ、ダルナビル、ダサチニブ、ダウノルビシン、デシタビン、デフラザコート、デルモスタチン、デメクロサイクリン、デノスマブ、デオキシジヒドロストレプトマイシン、デソモルヒネ、デソニド、デスオキシメタゾン、デスベンラファキシン、デキサメタゾン、デゾシン、ジアチモスルホン、ジベカシン、ジダノシン、ジデオキシアデノシン、ジエチルスチルベストロール、ジフロラゾン、ジフルコルトロン、ジフルニサル、ゲンチジン酸、ジフルプレドナート、ジヒドロアルテミシニン、ジヒドロコデイン、ジヒドロモルヒネ、ジヒドロストレプトマイシン、ジヒドロキシアルミニウムアセチルサリチレート、ジレバロール、ジメフェプタノール、ジリスロマイシン、ジタゾール、ＤＮＡ、ドセタキセル、ドルナーゼアルファ、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、ドキシサイクリン、ドロロキシフェン、ドロモスタノロン、エクテイナスシジン、エドクスジン、エムトリシタビン、エノシタビン、エノキサパリン、エノキソロン、エンプロスチル、エンタカポン、エンテカビル、エンビオマイシン、エパノロール、エピネフリン、エピルビシン、エピチオスタノール、エポエチンアルファ、エプタゾシン、エルタペネム、エリスロマイシン、エストラムスチン、エタネルセプト、エタニダゾール、エチニルエストラジオール、エトキサゼン、エチルモルヒネ、エトフェナマート、エトノゲストレル、エトポシド、オイゲノール、エベロリムス、エキセナチド、エゼチミブ、フェンドサール、フェノルドパム、フェンペンタジオール、フェンレチニド、フェプラジノール、フェキソフェナジン、フィルグラスチム、フィリピン、フラボピリドール、フルピルチン、フロクタフェニン、フロモキセフ、フロクスウリジン、フルアザコート、フルコナゾール、フルドロコルチゾン、フルメタゾン、フルオシノロン、フルオシノニド、フルオコルチンブチル、フルオコルトロン、フルプレドニデンアセテート、フルチカゾンプロピオネート、フォルダマー、ホルチミシン、フォルメスタン、ホルモテロール、ホスカルネットナトリウム、ホスフェストロール、フロペネム、フルベストラント、ファンギクロミン、フロナジド、フシジン酸、ガランタミン、ガンシクロビル、ゲムシタビン、ゲンタマイシン、グラフェニン、グルカメタシン、グルコスルホンナトリウム、グリコニアジド、ゴリムマブ、バルサラジド、ゴセレリン、グラミシジン、グアメシクリン、ハルシノニド、ハロベタゾールプロピオネート、ハロファントリン、ハロメタゾン、ハロプレドンアセテート、４価ヒトパピローマ（Ｈｕｍａｎ Ｐａｐｉｌｌｏｍａ Ｑｕａｄｒｉｖａｌｅｎｔ）、ヒドロコルチゾン、ヒドロモルフォン、ヒドロキシペチジン、ヒペリシン、イブプロキサム、イダルビシン、イドクスウリジン、イミペネム、免疫グロブリン、インデノロール、インジナビル、インフリキシマブ、インスリン アスパルト、インスリン デテミル、インスリン グラルギン、インスリン リスプロ、インターフェロンベータ－１ａ、インターフェロンベータ－１ｂ、イピリムマブ、イプラトロピウム、イリノテカン、イセパマイシン、イソキシカム、カナマイシン、ケトキサール、ケトベミドン、
ラベタロール、ラミブジン、ラタノプロスト、Ｌ－ＤＯＰＡ、ロイプロリド、レブクロマカリム、レボドパ、レボノルゲストレル、レボルファノール、レボチロキシン、リンコマイシン、リラグルチド、ロピナビル、ロルノキシカム、ロサルタン、ロテプレドノールエタボネート、ルメファントリン、ライムサイクリン、マンノムスチン、マリマスタット、マジプレドン、メクロサイクリン、メフロキン、メレンゲストロール、メロキシカム、モメタゾン、メノガリル、メピンドロール、メプタジノール、メルブロミン、メロペネム、メサラミン、メサラジン、メタゾシン、メタサイクリン、メチルドパ、メチルプレドニゾロン、メチプラノロール、メトポン、メトプロロール、メトロニダゾール、ミクロノマイシン、マイクロＲＮＡ、ミカマイシン、ミルテホシン、ミノサイクリン、ミソプロストール、ミトブロニトール、ミトラクトール、ミトキサントロン、モメタゾンフロエート、モンテルカスト、モピダモール、モプロロール、モルヒネ、モキサラクタム、ｍＲＮＡ、Ｎ４－ベータ－Ｄ－グルコシルスルファニルアミド、ナジフロキサシン、ナドロール、ナフトピジル、ナルブフィン、ナタリズマブ、ネビボロール、ネガマイシン、ネルフィナビル、ネオマイシン、ネチルマイシン、Ｎ－ヒドロキシエチルプロメタジンクロリド、ニフルピリノール、ニフルトイノール、ニトラクリン、ニトロキソリン、ノガラマイシン、非リピンスキー分子、ノルジヒドログアイアレチン酸、ノルレボルファノール、ノルモルヒネ、ノボビオシン、オレアンドマイシン、オリボマイシン、オルメサルタン、オルサラジン、オマリズマブ、オピプラモール、オルノプロスチル、オリザノールＡ、ガナキソロン、オキサセプロール、オキサメタシン、オキシコドン ペンタゾシン（Ｏｘｙｃｏｄｏｎｅ Ｐｅｎｔａｚｏｃｉｎｅ）， オキシコドン、オキシモルフォン、オキシフェンブタゾン、オキシテトラサイクリン、パクリタキセルおよび他の公知のパクリタキセル類似体、パクリタキセル、パリペリドンパルミテート、パリペリドン、パリビズマブ、ｐ－アミノサリチル酸ヒドラジド、ｐ－アミノサリチル酸、パニペネム、パロモマイシン、ペシロシン、ペグフィルグラスチム、ペグインターフェロンアルファ－２ａ、ペンブトロール、ペンシクロビル、ペントスタチン、ペプロマイシン、ペプチド模倣物、ペプチド、ペリソキサール、フェナクトロピニウムクロリド、フェナゾシン、フェナゾピリジン、フェノコール、フェノペリジン、フェントラミン、アミノサリチル酸フェニル、フェニルラミドール、フェニルサリチレート、ピルドララジン、ピメクロリムス、ピンドロール、ピパサイクリン、ピラルビシン、ピロキシカム、ｐ－ラクトフェネチド、プラウノトール、プリカマイシン、ＰＮＡ、ポドフィロトキシン、ポリミキシン、ポサコナゾール、プレドニゾロン、プレドニゾン、プリマイシン、プリスチナマイシン、プロプラノロール、タンパク質、プロトベラトリン、ピューロマイシン、ピリスクシデアノール、クエチアピン、エゼチミブ、キニーネ、キヌプリスチン、ラロキシフェン、ラルテグラビル、ラモプラニン、ラニビズマブ、ラニムスチン、ラノラジン、ラブコナゾール、レスシメトール、レシキモド、レチノイン酸（全てのｔｒａｎｓ－レチノイン酸を含む）、リバビリン、リボスタマイシン、リファブチン、リファラジル、リファミド、リファンピシン、リファマイシンＳＶ、リファペンチン、リファキシミン、リメキソロン、リオプロスチル、リセドロン酸、リストセチン、リチペネム、リトナビル、リツキシマブ、ロリテトラサイクリン、ロキニメクス、
ロサプロストール、ロキサルソン、ロキシンドール、ロキシスロマイシン、ルビジェルビン、ルビテカン、Ｓ－アデノシルメチオニン、サラゾスルファジミジン、サリシン、トラマドール、サリチルアミド、サリチルアニリド、サリナジド、サルメテロール、サルサレート、サンパトリラット、サンサイクリン、サキナビル、サキサグリプチン、セオカルシトール、セベラマー、シッカニン、シンバスタチン、シロリムス、シソマイシン、低分子ヘアピンＲＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ、ソマトロピン、ソリブジン、スペクチノマイシン、スタブジン、ストレプトリジギン、ストレプトマイシン、ストレプトニコジド、ストレプトゾシン、スルファサラジン、スルフィナロール、合成オリゴヌクレオチド、合成ペプチド、タクロリムス、タクロリムス、タリノロール、テイコプラニン、テリスロマイシン、テモポルフィン、テニポシド、テノキシカム、テヌアゾン酸、テルフェナジン、テリパラチド、テロフェナメート、テルタトロール、テストステロン、チアンフェニコール、チオストレプトン、チアゾフリン、チモロール、チオトロピウム、チプラナビル、トブラマイシン、トルカポン、トロキサトン、トルテロジン、トポテカン、Ｔｒａｎｓ－レスベラトロール ［（Ｅ）－３，４’，５－トリヒドロキシスチルベン）、トラスツズマブ、トラボプロスト、トリアムシノロン、トリフルリジン、トリマゾシン、トリモプロスチル、トロスペクトマイシン、トロキサシタビン、ツベラクチノマイシン、チロシジン、ウステキヌマブ、バルデコキシブ、バルガンシクロビル、バルルビシン、バンコマイシン、ベンラファキシン、ビダラビン、ビミノール、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビオマイシン、ビルギニアマイシン、ボリコナゾール、キサントシリン、キシボモール、キシモプロフェン、イングザオスＡ、ザルシタビン、ザナミビル、ジドブジン、ゾレドロン酸、ゾレンドロン酸、ゾルビシン、ゾスキダル、ペプチド、タンパク質、炭水化物、ペプチド模倣物、抗体、抗原、合成オリゴヌクレオチド、アダリムマブ、エタネルセプト、ペグフィルグラスチム、リツキシマブ、ベバシズマブ、インスリン グラルギン、エポエチンアルファ、トラスツズマブ、インターフェロンベータ－１ａ、ラニビズマブ、インスリン デテミル、インスリン アスパルト、インスリン リスプロ、フィルグラスチム、ダルベポエチンアルファ、インターフェロンベータ－１ｂ、アバタセプト、リラグルチド、パリビズマブ、セツキシマブ、ウステキヌマブ、デノスマブ、４価ヒトパピローマ、ペグインターフェロンアルファ－２ａ、イピリムマブ、免疫グロブリン、ドルナーゼアルファ、セルトリズマブ、ナタリズマブ、ソマトロピン、アルテプラーゼおよびゴリムマブから選択される薬物を含む。
特に好ましい生物活性分子は、オーリスタチン（例えばモノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）およびＭＭＡＦ）、ドラスタチン、メイタンシノイド（例えばＤＭ１およびＤＭ４）、チューブリシン、カリケアマイシン、デュオカルマイシン、ベンゾジアゼピン、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体および類似体（例えばＳＮ－３８）、アマトキシン、ドキソルビシン、およびα－アマニチンである。
典型的には、－ＡＡ－若しくはリンカー基のいずれかとＢとの間の、またはリンカー基内の結合（複数可）は、酸に不安定である。この場合において好ましくは、結合（複数可）は、マクロファージなどのさまざまな細胞において見られるリソソーム、エンドソーム、ファゴソーム、ファゴリソソームおよびオートファゴソームなどの細胞コンパートメントの酸性および／または加水分解環境において加水分解される。この場合において好ましくは、－ＡＡ－若しくはリンカー基のいずれかとＢとの間の結合（複数可）、またはリンカー基内の少なくとも１つの結合は、＜６のｐＨにおいて、さらにより好ましくは＜５のｐＨにおいて加水分解される。酸性環境において加水分解される結合の例は、ヒドラゾン結合である。
あるいは、－ＡＡ－若しくはリンカー基のいずれかとＢとの間の、またはリンカー基内の結合（複数可）は、中性条件において不安定である。この場合において好ましくは、－ＡＡ－若しくはリンカー基のいずれかとＢとの間の結合（複数可）、またはリンカー基内の少なくとも１つの結合は、中性ｐＨ、好ましくは６．５から７．５のｐＨで加水分解される。
あるいは、－ＡＡ－若しくはリンカー基のいずれかとＢとの間の、またはリンカー基内の結合（複数可）は、塩基に不安定である。好ましくは、－ＡＡ－若しくはリンカー基のいずれかとＢとの間の結合（複数可）、またはリンカー基内の少なくとも１つの結合は、＞８のｐＨで、さらにより好ましくは＞９のｐＨにおいて加水分解される。
結合（複数可）が加水分解される最適なｐＨは、関連する結合（複数可）の正確な化学的性質に依存するであろう。
あるいは、－ＡＡ－若しくはリンカー基のいずれかとＢとの間の、またはリンカー基内の結合（複数可）は、酵素の存在下で加水分解される。この場合において好ましくは、－ＡＡ－若しくはリンカー基のいずれかとＢとの間の結合（複数可）、またはリンカー基内の少なくとも１つの結合は、カテプシンＢによって加水分解される。カテプシンＢによって酵素的に加水分解される結合の例は、ペプチド結合である。
あるいは、－ＡＡ－若しくはリンカー基のいずれかとＢとの間の、またはリンカー基内の結合（複数可）は、加水分解に対して抵抗性である。例えば、－ＡＡ－若しくはリンカー基のいずれかとＢとの間の結合（複数可）、またはリンカー基内の少なくとも１つの結合は、細胞内チオール（例えばグルタチオン）とのジスルフィド交換を通して切断され得る。この方法で切断され得る結合の例は、ジスルフィド結合である。あるいは、－ＡＡ－若しくはリンカー基のいずれかとＢとの間の結合（複数可）、またはリンカー基内の少なくとも１つの結合は、細胞内タンパク質分解を通して切断され得る。この方法で切断され得る結合の例は、チオエーテル結合である。
－ＡＡ－またはリンカー基のいずれかとＢとの間の結合（複数可）の切断は、前記生物活性分子（例えば薬物）を放出する。好ましくは、－ＡＡ－と部分Ｂとの間にリンカー基がある。
典型的には、ポリマー繰り返し単位が誘導される生物活性分子は、アミン、アルコールまたはチオールなどの求核性官能基を含む。典型的には、式（Ｉ）における生物活性部分は、この求核性官能基におけるヘテロ原子を通して－ＡＡ－またはリンカー基に結合している。この場合においては、生物活性分子は、式Ｂ－Ｈを有する。あるいは、ポリマー繰り返し単位が誘導される生物活性分子は、カルボン酸、エステル、チオエステルまたはα，β－不飽和カルボニルなどの求電子性官能基を含み得る。典型的には、式（Ｉ）における生物活性部分は、この求電子性官能基における炭素原子を通して－ＡＡ－またはリンカー基に結合している。この場合においては、生物活性分子は、式Ｂ－ＬＧ（式中、ＬＧは、本明細書において定義する、付加－脱離反応条件下での任意の脱離基である）を有する。
一つの実施態様においては、リンカー基Ｌ１、Ｌ２またはＬ３は、遮蔽基をさらに含む。いかなる特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、そのような遮蔽基は、本発明の抗体－薬物結合体の溶解度を改善し、および／または抗体－薬物結合体の凝集を低下させると考えられる。前記遮蔽基は、典型的には、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）またはポリ（サルコシン）部分から誘導される。
すなわち、特定の実施態様においては、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、ここで、式（ｉｉ）の基は、式（ｖｉ）：
（式中：
－ＡＡ－およびＢは、式（ｉｉ）において定義したとおりであり；
各Ｌ４は、リンカー基であり；
各Ａは、結合、アミノ酸、ペプチド、スルホネート、またはピロリン酸ジエステルから独立して選択され；
各Ｘ’は、Ｏ、ＮＨ、ＮＲＡ’およびＳから独立して選択され；
各Ｒ’は、独立して水素またはＣ１－２０ヒドロカルビルであり；
各ＲＡ’は、独立してＣ１－２０ヒドロカルビルであり；
各Ｑ’は、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ’－、－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ’Ｔ’２－および－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ’Ｔ’２－（ここで、各Ｔ’１は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から独立して選択され、各Ｔ’２は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から独立して選択される）から独立して選択され；
各ｏ’は、独立して０から１００の整数であり；
各ｓ’は、独立して０から１５０の整数であり；
Ｑ’が－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ’Ｔ’２－および－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ’Ｔ’２－であるとき、各Ｙ’は、Ｏ、ＮＨ、ＮＲＡ’およびＳから独立して選択され、Ｑ’が－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ’－であるとき、各Ｙ’は、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｏ－、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｓ－、－（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨおよび－（Ｃ＝Ｏ）－ＮＲＡ’－から独立して選択される）の基である。
描かれているＱ’部分の左側は、式（ｖｉ）におけるＹ’部分に共有結合しており、描かれているＱ’部分の右側は、式（ｖｉ）におけるＸ’部分に共有結合している。
式（ｖｉ）において、Ｑ’は、典型的には－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ’２－または－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ’２－である。典型的には、Ｔ’１は、ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－、より好ましくは、－ＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－である。典型的には、Ｔ’２は、－ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－、より好ましくは、－ＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－である。Ｔ’１およびＴ’２は、同一でも異なっていてもよい。好ましくは、Ｔ’１およびＴ’２は、同一である。典型的には、式（ｖｉ）におけるＴ’１およびＴ’２の両方が、－ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－および－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－から選択され、好ましくはＴ’１およびＴ’２の両方が、－ＣＨ２ＣＨ２－および－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－から選択され、より好ましくは、Ｔ’１およびＴ’２の両方が、－ＣＨ２ＣＨ２－である。Ｑ’が－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ’２－または－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ’２－であるとき、式（ｖｉ）におけるＸ’は、好ましくは、ＯまたはＮＨである。なおより好ましくは、Ｘ’は、ＮＨである。Ｑ’が－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ’２－または－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ’２－であるとき、式（ｖｉ）におけるＹ’は、好ましくは、ＯまたはＮＨである。なおより好ましくは、Ｙ’は、Ｏである。Ｑ’が－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ’２－または－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ’２－であるとき、式（ｖｉ）におけるＲ’は、好ましくは水素、メチルまたはエチルである。なおより好ましくは、Ｒ’は、メチルである。特に好ましい実施態様においては、Ｘ’は、ＮＨであり、Ｙ’は、Ｏであり、Ｒ’は、メチルである。
さらに好ましい実施態様においては、式（ｖｉ）における部分Ｘ’－Ｑ’－Ｙ’は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはポリプロピレングリコールから誘導される。この場合において好ましくは、部分Ｘ’－Ｑ’－Ｙ’は、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ５００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ１０００、ＰＥＧ１５００、ＰＥＧ２０００、ＰＥＧ３０００、ＰＥＧ４０００およびＰＥＧ５０００から誘導される。なおより好ましくは、式（ｖｉ）において、Ｘ’は、ＮＨであり、Ｙ’は、Ｏであり、Ｔ’１およびＴ’２の両方が、－ＣＨ２ＣＨ２－である。最も好ましくは、Ｘ’は、ＮＨであり、Ｙ’は、Ｏであり、Ｑ’は、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２－である。好ましくは、部分Ｘ’－Ｑ’－Ｙ’は、２００から２２００の分子量を有し、より好ましくは、４００から１２００の分子量を有する。
ｓ’は、好ましくは０から１５０、より好ましくは１から１００、さらにより好ましくは１から５０、なおより好ましくは３から３５、さらにより好ましくは７から２３の整数である。すなわち、特に好ましい実施態様においては、Ｑ’は、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２－であり、ｓ’は、０から１５０、より好ましくはより好ましくは１から１００、さらにより好ましくは１から５０、なおより好ましくは３から３５、さらにより好ましくは７から２３の整数である。さらにより好ましい実施態様においては、Ｘ’は、ＮＨであり、Ｙ’は、Ｏであり、Ｑ’は、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２－であり、ｓ’は、０から１５０、より好ましくはより好ましくは１から１００、さらにより好ましくは１から５０、なおより好ましくは３から３５、さらにより好ましくは７から２３の整数である。この実施態様においては、なおより好ましくは、Ｒ’は、メチルである。
式（ｖｉ）の別の好ましい実施態様においては、Ｑ’は、ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－である。なおより好ましくは、この実施態様においては、Ｘ’は、ＮＨまたはＮＲＡ’、より好ましくはＮＲＡ’、さらにより好ましくはＮＭｅである。さらにより好ましくは、Ｑ’は、ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－であり、Ｘ’は、ＮＭｅであり、Ｙ’は、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｏ－である。さらにより好ましくは、Ｑ’は、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－であり、Ｘ’は、ＮＭｅであり、Ｙ’は、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｏ－であり、Ｒ’は、水素またはメチルである。この場合において、部分Ｘ’－Ｑ’－Ｙ’は、ポリ（サルコシン）またはそのエステルから誘導される。好ましくは、ポリ（サルコシン）は、３５０から１８００の分子量を有する。
ｏ’は、好ましくは０から１００、より好ましくは１から７５、さらにより好ましくは２から５０、最も好ましくは５から２５の整数である。すなわち、特に好ましい実施態様においては、Ｑは、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－であり、Ｘは、ＮＭｅであり、Ｙは、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｏ－であり、ｏ’は、０から１００、より好ましくは１から７５、さらにより好ましくは２から５０、最も好ましくは５から２５の整数である。この実施態様においては、なおより好ましくは、Ｒ’は、水素またはメチルである。
式（ｖｉ）において、各Ａは、結合、アミノ酸、ペプチド、スルホネート、またはピロリン酸ジエステルから独立して選択される。好ましくは、Ａは、結合である。あるいは、Ａは、アミノ酸、ペプチド、スルホネート、スルホンアミド、またはピロリン酸ジエステルである。Ａがスルホネートであるとき、Ａは、構造：
（式中、＊は、Ｌ４への結合点であり、＊＊は、Ｘ’－Ｑ’－Ｙ’Ｒ’への結合点である）を有する。
Ａがスルホンアミドであるとき、Ａは、構造：
（式中、＊は、Ｌ４への結合点であり、＊＊は、Ｘ’－Ｑ’－Ｙ’Ｒ’への結合点である）を有する。
Ａがピロリン酸ジエステルであるとき、Ａは、構造：
（式中、＊は、Ｌ４への結合点であり、＊＊は、Ｘ’－Ｑ’－Ｙ’Ｒ’への結合点であり、ｆは、０から１０、好ましくは１から６の整数である）を有する。
式（ｖｉ）において、Ｌ４は、典型的には式（ｘ）または（ｘｉ）：
（式中：
＊は、－ＡＡ－への結合点を示し；
＊＊は、－Ａ－Ｘ’－Ｑ’－Ｙ’Ｒ’への結合点を示し；
＊＊＊は、－Ｂへの結合点を示し；
Ｖ１、Ｌ’およびＶ２は、上記の式（ｉｉ）において定義したとおりであり；
Ｘ１は、Ｏ、ＳおよびＮＨから選択され；
Ｘ２は、Ｏ、ＳおよびＮＨから選択され；
Ｘ３は、Ｏ、ＳおよびＮＨから選択され；
ＲＡは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルであり；
ｍは、０から６までの整数であり；
ｐは、０から６までの整数である）のリンカー部分である。
すなわち、式（ｖｉ）において、Ｌ４は、典型的には式（ｘ）のリンカー部分である。あるいは、Ｌ４は、式（ｘｉ）のリンカー部分であり得る。
式（ｘ）において、Ｘ１は、好ましくはＯまたはＮＨ、より好ましくはＮＨである。式（ｘ）において、Ｘ２は、好ましくはＯである。式（ｘ）において、Ｘ３は、好ましくはＯである。より好ましくは、式（ｘ）において、Ｘ１は、ＮＨであり、Ｘ２は、Ｏであり、Ｘ３は、Ｏである。式（ｘｉ）において、Ｘ１は、好ましくはＯまたはＮＨ、より好ましくはＮＨである。式（ｘｉ）において、Ｘ２は、好ましくはＯである。式（ｘｉ）において、Ｘ３は、好ましくはＯである。より好ましくは、式（ｘｉ）において、Ｘ１は、ＮＨであり、Ｘ２は、Ｏであり、Ｘ３は、Ｏである。
式（ｘ）において、好ましくはｍおよびｐの一方は、２または３のいずれかであり、他方は、０である。この実施態様においては、式（ｘ）は、アスパラギン酸またはグルタミン酸から誘導される。式（ｘｉ）において、好ましくはｍおよびｐの一方は、２または３のいずれかであり、他方は、０である。この実施態様においては、式（ｘｉ）は、アスパラギン酸またはグルタミン酸から誘導される。
別の実施態様においては、Ｚは、式（ｉｉｉ）の基であり、ここで、式（ｉｉｉ）の基は、式（ｖｉｉ）：

（式中：
－ＡＡ－およびＢは、式（ｉｉｉ）において定義したとおりであり；
各Ｌ５は、リンカー基であり；
各Ａ、Ｘ’、Ｙ’、Ｒ’、ＲＡ’およびＱ’は、式（ｖｉ）において（好ましい実施態様を含めて）定義したとおりであり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表す）の基である。
式（ｖｉｉ）において、Ｌ５は、典型的には式（ｘｉｉ）または（ｘｉｉｉ）：
（式中、＊、＊＊、＊＊＊、Ｌ’、Ｖ２、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、ＲＡ、ｍおよびｐは、式（ｘ）または式（ｘｉ）において定義したとおりであり、Ｖ３は、式（ｉｉｉ）において定義したとおりであり、各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合である）のリンカー部分である。
すなわち、式（ｖｉｉ）において、Ｌ５は、典型的には式（ｘｉｉ）のリンカー部分である。あるいは、Ｌ５は、式（ｘｉｉｉ）のリンカー部分であり得る。
別の実施態様においては、Ｚは、式（ｉｖ）の基であり、ここで、式（ｉｖ）の基は式（ｖｉｉｉ）：
（式中：
－ＡＡ－およびＢは、式（ｉｖ）において定義したとおりであり；
各Ｌ６は、リンカー基であり；
各Ａ、Ｘ’、Ｙ’、Ｒ’、ＲＡ’およびＱ’は、式（ｖｉ）において（好ましい実施態様を含めて）定義したとおりであり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表す）の基である。
式（ｖｉｉ）において、Ｌ６は、典型的には式（ｘｉｖ）または（ｘｖ）：
（式中、＊、＊＊、＊＊＊、Ｌ’、Ｖ２、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、ＲＡ、ｍおよびｐは、式（ｘ）または式（ｘｉ）において定義したとおりであり、Ｖ４は、式（ｉｖ）において定義したとおりである）のリンカー部分である。
すなわち、式（ｖｉｉｉ）において、Ｌ６は、典型的には式（ｘｉｖ）のリンカー部分である。あるいは、Ｌ６は、式（ｘｖ）のリンカー部分であり得る。
別の実施態様においては、Ｚは、式（ｖ）の基であり、ここで、式（ｖ）の基は、式（ｉｘ）：
（式中：
－ＡＡ－およびＢは、式（ｖ）において定義したとおりであり；
各Ｌ６は、式（ｖｉｉｉ）において定義したリンカー基であり；
各Ａ、Ｘ’、Ｙ’、Ｒ’、ＲＡ’およびＱ’は、式（ｖｉ）において（好ましい実施態様を含めて）定義したとおりであり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表す）の基である。
ポリマー－抗体リンカー部分の構造
このセクションは、本発明の抗体－薬物結合体中に存在するリンカー部分の可能な構造的特徴を説明する。
本発明の抗体－薬物結合体におけるリンカー部分は、少なくとも２つの別個の反応性官能基（ポリマーと反応して共有結合を形成する１つの官能基、および抗体と反応して共有結合を形成するさらなる官能基）を有する任意の適切な化合物から誘導し得る。抗体－薬物リンカー部分は、ポリマー主鎖を生物活性部分に結合するために使用される任意のリンカー基と同一または異なっていてもよい（そのようなリンカー基が存在するとき）。好ましくは、抗体－薬物リンカー部分は、ポリマー主鎖を生物活性部分に結合するために使用されるリンカー基とは異なる。
典型的には、ポリマー－抗体リンカーは、式（Ｉ）の繰り返し単位中の－Ｙ－部分の炭素原子、または式（Ｉ）の繰り返し単位のアミノ酸由来部分中の－ＮＲ－基を通してポリマーに共有結合している。典型的には、ポリマー－抗体リンカーは、ポリマー末端の１つでポリマーに共有結合している。
典型的には、ポリマー－抗体リンカーは、抗体の反応性アミノ酸側鎖、例えばシステイン残基のチオール基、リジン残基のアミノ基、グルタミン酸残基若しくはアスパラギン酸残基のカルボン酸基、セレノシステイン残基のセレノール基を通して、または抗体中のポリペプチドの１つの主鎖のＮ－末端を通して、または抗体のフラグメント結晶化可能（Ｆｃ）領域中に存在するオリゴ糖のヒドロキシル基を通して、またはグリカン若しくは非天然残基のアルデヒド若しくはヒドロキシルアミン基を通して、またはグリカン若しくは非天然残基のアルキンまたはアジド基を通して、抗体に共有結合している、
ポリマーおよび抗体は、リンカー部分の同じ原子に独立して共有結合し得、またはそれらは、リンカー部分の異なる原子に独立して共有結合し得る。好ましくは、ポリマーおよび抗体は、リンカー部分の異なる原子に独立して共有結合している。
本発明の抗体－薬物結合体における使用のための適切なリンカー部分は、チオール、マレイミド、モノブロモマレイミド、マレイミド類似体、ビニルスルホン、ビス（スルホン）（例えばＴｈｉｏｂｒｉｄｇｅ（登録商標））、アレンアミド、ビニル－ピリジン、ジビニルピリミジン、デヒドロアラニン、アルケン、パーフルオロ芳香族分子、Ｊｕｌｉａ－Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ様であるスルホン試薬、Ｎ－ヒドロキシスクシンアミド－エステル活性化カルボキシレート種、アルデヒド、ケトン、ヒドロキシルアミン、アルキンおよびアジドから誘導されるリンカーを含むが、これらに限定されない。
すなわち、チオール、マレイミド、モノブロモマレイミド、マレイミド類似体、ビニルスルホン、ビス（スルホン）（例えばＴｈｉｏｂｒｉｄｇｅ（登録商標））、アレンアミド、ビニル－ピリジン、ジビニルピリジン、デヒドロアラニン、アルケン、パーフルオロ芳香族種、Ｊｕｌｉａ－Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ様であるスルホン試薬、Ｎ－ヒドロキシスクシンアミド－エステル活性化カルボキシレート種、アルデヒド、ケトン、ヒドロキシルアミン、アルキンおよびアジドの（ａ）ポリマー主鎖および（ｂ）抗体の両方との反応は、適切なリンカー基をもたらす。ビス（スルホン）は、この状況においては、（ビス－アルキル化）試薬として作用する。リンカーは、例えば光開始チオール－エン反応によってアルケンから誘導することができる。すなわち、抗体上のチオール基は、アルケン官能基と反応して共有結合を生成し得る。デヒドロアラニンとの反応は、例えば抗体上のチオール基とのマイケル付加－脱離によって起こり得る。Ｎ－ヒドロキシスクシンアミド－エステル活性化カルボキシレート種は、抗体中のリジン基と反応し得る。ケトン、アルデヒドおよび／またはヒドロキシルアミンは、オキシム結合形成を介してまたはヒドラジノ－ピクテ－スペングラー（ＨＩＰＳ）ライゲーションによって、グリカン修飾抗体または非天然残基に結合し得る。アルキンおよびアジドは、クリックケミストリー（アジド－アルキン環化付加）を介して、グリカン修飾抗体または非天然残基に結合し得る。
抗体－薬物結合体の構造
最も好ましくは、本発明の抗体－薬物結合体は、式（ＩＩＩ）または（ＩＶ）：
（式中：
（Ｉ）は、前述の請求項のいずれかにおいて定義した、式（Ｉ）の繰り返し単位であり；
Ａｂは、抗体またはその抗原結合断片であり；
Ｌは、上記で定義したポリマー－抗体リンカーであり；
Ｒ”は、ＯＨ、ＯＲＡ、ＳＨ、ＳＲＡ、ＮＨ２、ＮＨＲＡおよびＮＲＡ ２から選択され；
Ｅは、ＨおよびＲＡから選択され；
ＲＡは、式（Ｉ）において定義したとおりであり；
ｚは、１から５０の整数である）を有する。
すなわち、典型的には、本発明の抗体－薬物結合体は、式（ＩＩＩａ）または式（ＩＶａ）：
を有する。
好ましくは、ｚは、１から３０、より好ましくは２から２０、さらにより好ましくは２から１５、最も好ましくは２から１２の整数である。
本発明の抗体－薬物結合体におけるポリマーは典型的には、５００から５０００００Ｄａ、より好ましくは１０００から２０００００Ｄａ、さらにより好ましくは１５００から３６０００Ｄａの重量平均分子量を有する。好ましくは、ポリマーは、５００から５０００００Ｄａ、より好ましくは１０００から２０００００Ｄａ、さらにより好ましくは１５００から２５０００Ｄａ、なおより好ましくは２０００から２００００Ｄａの数平均分子量を有する。好ましくは、ポリマーは、１から５、より好ましくは１．０５から４．８、さらにより好ましくは１．１から２．４、なおより好ましくは１．１から１．５の多分散性を有する。あるいは、ポリマーは、０．９から１．１、好ましくは０．９５から１．０５、最も好ましくは約１の多分散性を有する、すなわち、好ましくは、ポリマーは、単分散である。
本発明の抗体－薬物結合体中に存在する生物活性部分は好ましくは、３２から１０００００Ｄａの分子量を有する。生物活性部分は、有機低分子、すなわち非ポリマーであり得る低分子薬物、またはポリマーであり得る。好ましくは、本発明の抗体－薬物結合体は、乾燥抗体－薬物結合体の重量に基づいて、０．５から９０ｗｔ％、より好ましくは０．７５から７０ｗｔ％、さらにより好ましくは１から６０ｗｔ％、なおより好ましくは１．５から５０ｗｔ％、さらにより好ましくは１．７５から２５ｗｔ％、最も好ましくは２から１０ｗｔ％の生物活性部分を含む。本発明の抗体－薬物結合体の重要な利点は、比較的多量の生物活性分子をポリマー中に組み込むことができる点である。さらに、複数のポリマーが、単一の抗体に結合し得る。これらの要因は、次に、高い生物活性分子の搭載量（ｌｏａｄｉｎｇｓ）を達成し得ることを意味する。典型的には、薬物対抗体比（ＤＡＲ）は、４：１以上、好ましくは５：１以上、より好ましくは８：１以上、なおより好ましくは１０：１以上、さらにより好ましくは１２：１以上、さらにより好ましくは１５：１以上、最も好ましくは１６：１以上、例えば２０：１以上である。
典型的には、本発明の抗体－薬物結合体は、少なくとも１０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは少なくとも３０ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは少なくとも５０ｍｇ／ｍＬ、さらにより好ましくは少なくとも７５ｍｇ／ｍＬ、最も好ましくは少なくとも１００ｍｇ／ｍＬの、水中溶解度を有する。
本発明はまた、ポリマーからの生物活性部分の放出が、ｐＨ感受性であり、前記生物活性部分とポリマーの繰り返し単位またはそれが共有結合しているリンカー基との間の結合の性質に依存する、本明細書において記載する抗体－薬物結合体を提供する。
あるいは、抗体は、代替形態の標的化剤によって置き換え得る。すなわち、本発明はまた：
（ｉ）標的化剤；
（ｉｉ）式（Ｉ）：
（式中：
Ｘは、Ｏ、ＮＨ、ＮＲＡおよびＳから選択され、
Ｙは、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝ＮＨ、Ｃ＝ＮＲＡおよびＣ＝Ｓから選択され；
Ｒは、水素またはＣ１－２０ヒドロカルビルであり；
ＲＡは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルであり；
各Ｑは、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－、－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－および－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－から独立して選択され（ここで、Ｔ１は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から選択され、Ｔ２は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から選択される）；
ｏは、０から１００の整数であり；
ｓは、０から１５０の整数であり；
ｘは、１から６の整数であり；
各Ｚは、式（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）または（ｖ）：
（式中、
Ｚが式（ｉ）または（ｉｉ）の基であるとき：
－ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｈがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
各Ｌ１は、リンカー基であり；
各Ｂは、生物活性部分であり；
Ｚが式（ｉｉｉ）の基であるとき：
－ＡＡ＝は、－ＡＡ＝Ｏがアミノ酸の側鎖を表すような三価の部分であり；
各Ｌ２は、リンカー基であり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
各Ｂは、生物活性部分であり；
Ｚが式（ｉｖ）の基であるとき：
－ＡＡ－は、－ＡＡ－ＣＨ＝ＣＨ２または－ＡＡ－Ｃ≡ＣＨがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
各Ｌ３は、リンカー基であり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
各Ｂは、生物活性部分であり；および
Ｚが式（ｖ）の基であるとき：
－ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｎ３がアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
各Ｌ３は、リンカー基であり；
各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
各Ｂは、生物活性部分である）の群から独立して選択される）の繰り返し単位を含むポリマー；並びに
（ｉｉｉ）該標的化剤および該ポリマーの両方に共有結合しているポリマー－標的化剤リンカー
を含む、標的化剤－薬物結合体を提供する。
式（Ｉ）の好ましい実施態様は、上記の抗体－薬物結合体に関してのものである。
標的化剤は、ポリマーに共有結合している。適切な標的化剤は、ペプチド、タンパク質、ペプチド模倣物、抗体、抗原、ＤＮＡ、ｍＲＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ、低分子ヘアピンＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ＰＮＡ、フォルダマー、炭水化物、炭水化物誘導体、非リピンスキー分子、合成ペプチドおよび合成オリゴヌクレオチドなどの生体分子を含む。
ポリマー－標的化剤リンカーは、上記で定義しているポリマー－抗体リンカーと同じ構造のいずれかを取り得る。
最も好ましくは、本発明の標的化剤－薬物結合体は、式（Ｖ）または（ＶＩ）：
（式中：
（Ｉ）は、前述の請求項のいずれかにおいて定義した、式（Ｉ）の繰り返し単位であり；
Ｔａｒは、上記で定義した標的化剤であり；
Ｌは、上記で定義したポリマー－抗体リンカーであり；
Ｒ”は、ＯＨ、ＯＲＡ、ＳＨ、ＳＲＡ、ＮＨ２、ＮＨＲＡおよびＮＲＡ ２から選択され；
Ｅは、ＨおよびＲＡから選択され；
ＲＡは、式（Ｉ）において定義したとおりであり；
ｚは、１から５０の整数である）を有する。
すなわち、典型的には、本発明の抗体－薬物結合体は、式（Ｖａ）または（ＶＩａ）：
を有する。
好ましくは、ｚは、１から３０、より好ましくは２から２０、さらにより好ましくは２から１５、最も好ましくは２から１２の整数である。本発明の標的化剤－薬物結合体におけるポリマーは典型的には、５００から５０００００Ｄａ、より好ましくは１０００から２０００００Ｄａ、さらにより好ましくは１５００から３６０００Ｄａの重量平均分子量を有する。好ましくは、ポリマーは、５００から５０００００Ｄａ、より好ましくは１０００から２０００００Ｄａ、さらにより好ましくは１５００から２５０００Ｄａ、なおより好ましくは２０００から２００００Ｄａの数平均分子量を有する。好ましくは、ポリマーは、１から５、より好ましくは１．０５から４．８、さらにより好ましくは１．１から２．４、なおより好ましくは１．１から１．５の多分散性を有する。
本発明の標的化剤－薬物結合体中に存在する生物活性部分は好ましくは、３２から１０００００Ｄａの分子量を有する。生物活性部分は、有機低分子、すなわち非ポリマーであり得る低分子薬物、またはポリマーであり得る。好ましくは、本発明の標的化剤－薬物結合体は、乾燥抗体－薬物結合体の重量に基づいて、０．５から９０ｗｔ％、より好ましくは０．７５から７０ｗｔ％、さらにより好ましくは１から６０ｗｔ％、なおより好ましくは１．５から５０ｗｔ％、さらにより好ましくは１．７５から２５ｗｔ％、最も好ましくは２から１０ｗｔ％の生物活性部分を含む。本発明の標的化剤－薬物結合体の重要な利点は、比較的多量の生物活性分子をポリマー中に組み込むことができる点である。さらに、複数のポリマーが、単一の標的化剤に結合し得る。これらの要因は、次に、高い生物活性分子の搭載量（ｌｏａｄｉｎｇｓ）を達成し得ることを意味する。典型的には、薬物対標的化剤比は、４：１以上、好ましくは５：１以上、より好ましくは８：１以上、なおより好ましくは１０：１以上、さらにより好ましくは１２：１以上、さらにより好ましくは１５：１以上、最も好ましくは１６：１以上、例えば２０：１以上である。
本発明の標的化剤－薬物結合体における各生物活性部分Ｂは、同じであってもよい。あるいは、本発明の標的化剤－薬物結合体は、少なくとも２つの異なる生物活性部分、例えば２、３または４つの異なる生物活性部分を含有する。本発明の標的化剤－薬物結合体中に存在する好ましい生物活性部分は、抗体－薬物結合体に関して上記したとおりである。
典型的には、本発明の標的化剤－薬物結合体は、少なくとも３０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは少なくとも５０ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは少なくとも７５ｍｇ／ｍＬ、最も好ましくは少なくとも１００ｍｇ／ｍＬの、水中溶解度を有する。
抗体－薬物結合体の製造方法
本発明はまた、本発明による抗体－薬物結合体を製造する方法に関する。
以下の方法において、各脱離基ＬＧは、好ましくはＣｌ、ＯＨ、ＯＲ’、ＳＨ、ＳＲ’、ＮＨ２、ＮＨＲ’、ＮＲ’２、Ｏ－２－Ｃｌ－Ｔｒｔ、ＯＤｍｂ、Ｏ－２－ＰｈｉＰｒ、Ｏ－ＥＤＯＴｎ－Ｐｈ、Ｏ－ＮＨＳ、ＯＦｍ、ＯＤｍａｂおよびＯＣａｍから選択される。さらにより好ましくは、ＬＧは、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯｔＢｕ、Ｏ－２－Ｃｌ－Ｔｒｔ、ＯＤｍｂ、Ｏ－２－ＰｈｉＰｒ、Ｏ－ＥＤＯＴｎ－Ｐｈ、Ｏ－ＮＨＳ、ＯＦｍ、ＯＤｍａｂおよびＯＣａｍから選択される。式（ＩＩａ）および／または式（ＩＩｂ）および／または式（ＩＩｃ）および／または式（ＩＩｄ）および／または式（ＩＩｆ）および／または式（ＩＩｇ）および／または式（ＩＩｈ）および／または式（ＩＩｊ）および／またはＢ－ＬＧの１つまたは複数の化合物におけるＬＧは、同一でも異なっていてもよい。
典型的には、そのような方法は：
（ａ）式（ＩＩａ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＺおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩａ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＺおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉ）の基であり、方法は：

（ａ）式（ＩＩｃ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；、
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物を生物活性分子Ｂ－ＬＧと反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｃ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物を生物活性分子Ｂ－ＬＧと反応させ；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｃ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物および生物活性分子Ｂ－ＬＧと反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｃ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物を生物活性分子Ｂ－ＬＧと反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｃ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物および生物活性分子Ｂ－ＬＧと反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｄ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物をリンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｆ）工程（ｄ）の生成物を生物活性部分Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｇ）工程（ｆ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｂ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｄ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物をリンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｆ）工程（ｄ）の生成物を生物活性部分Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｇ）工程（ｆ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｂ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｃ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物をリンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｆ）工程（ｄ）の生成物を生物活性部分Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｇ）工程（ｆ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは式、（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｄ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｅ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性部分Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｆ）工程（ｄ）の生成物を工程（ｅ）の生成物と反応させ；
（ｇ）工程（ｆ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｂ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｄ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｅ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性部分Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｆ）工程（ｄ）の生成物を工程（ｅ）の生成物と反応させ；
（ｇ）工程（ｆ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｂ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｃ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｅ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性部分Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｆ）工程（ｄ）の生成物を工程（ｅ）の生成物と反応させ；
（ｇ）工程（ｆ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｂ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｃ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｄ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性部分Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｅ）工程（ｃ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させ；
（ｆ）工程（ｅ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｇ）工程（ｆ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｃ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｄ）工程（ａ）の生成物を工程（ｃ）の生成物と反応させ；
（ｅ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｆ）工程（ｅ）の生成物をリンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｇ）工程（ｆ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｃ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｄ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｅ）工程（ａ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させ；
（ｆ）工程（ｅ）の生成物をリンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｇ）工程（ｆ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｃ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｄ）工程（ａ）の生成物を工程（ｃ）の生成物と反応させ；
（ｅ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｆ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｇ）工程（ｅ）の生成物を工程（ｆ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｃ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｄ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｅ）工程（ａ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させ；
（ｆ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｇ）工程（ｅ）の生成物を工程（ｆ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｃ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｄ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物をリンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｆ）工程（ｅ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｇ）工程（ａ）の生成物を工程（ｆ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｃ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｄ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｅ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは。上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｆ）工程（ｄ）の生成物を工程（ｅ）の生成物と反応させ；
（ｇ）工程（ｆ）の生成物を工程（ａ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｆ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物をリンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｆ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をリンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｆ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｄ）工程（ｂ）の生成物を工程（ｃ）の生成物と反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｆ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｆ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物をリンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｆ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物をリンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｅ）工程（ａ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｆ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させ；
（ｄ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｅ）工程（ｃ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｆ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｄ）工程（ｂ）の生成物を工程（ｃ）の生成物と反応させ；
（ｅ）工程（ａ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｖ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｇ）または式（ＩＩｈ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物をリンカー部分Ｎ３－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｖ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｇ）または式（ＩＩｈ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をリンカー部分Ｎ３－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｖ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｇ）または式（ＩＩｈ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）別々に、リンカー部分Ｎ３－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｄ）工程（ｂ）の生成物を工程（ｃ）の生成物と反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｖ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｇ）または式（ＩＩｈ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）別々に、リンカー部分Ｎ３－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｖ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｇ）または式（ＩＩｈ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物をリンカー部分Ｎ３－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｖ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｇ）または式（ＩＩｈ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物をリンカー部分Ｎ３－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｅ）工程（ａ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｖ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｇ）または式（ＩＩｈ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させ；
（ｄ）別々に、リンカー部分Ｎ３－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｅ）工程（ｃ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｉｖ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｇ）または式（ＩＩｈ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）別々に、リンカー部分Ｎ３－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｄ）工程（ｂ）の生成物を工程（ｃ）の生成物と反応させ；
（ｅ）工程（ａ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｖ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｊ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物をリンカー部分ＨＣ≡Ｃ－Ｌ３－ＬＧまたはＨ２Ｃ＝ＣＨ－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｖ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｊ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をリンカー部分ＨＣ≡Ｃ－Ｌ３－ＬＧまたはＨ２Ｃ＝ＣＨ－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｖ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｊ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）別々に、リンカー部分ＨＣ≡Ｃ－Ｌ３－ＬＧまたはＨ２Ｃ＝ＣＨ－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｄ）工程（ｂ）の生成物を工程（ｃ）の生成物と反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｖ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｊ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｂ）別々に、リンカー部分ＨＣ≡Ｃ－Ｌ３－ＬＧまたはＨ２Ｃ＝ＣＨ－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｖ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｊ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物をリンカー部分ＨＣ≡Ｃ－Ｌ３－ＬＧまたはＨ２Ｃ＝ＣＨ－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｅ）工程（ｄ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｖ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｊ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ｂ）の生成物をリンカー部分ＨＣ≡Ｃ－Ｌ３－ＬＧまたはＨ２Ｃ＝ＣＨ－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）と反応させ；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｅ）工程（ａ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｖ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｊ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）工程（ａ）の生成物を工程（ｂ）の生成物と反応させ；
（ｄ）別々に、リンカー部分ＨＣ≡Ｃ－Ｌ３－ＬＧまたはＨ２Ｃ＝ＣＨ－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｅ）工程（ｃ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させる
工程を含む。
あるいは、Ｚは、式（ｖ）の基であり、方法は：
（ａ）抗体またはその抗原結合断片をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｂ）別々に、式（ＩＩｊ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりである）；
（ｃ）別々に、リンカー部分ＨＣ≡Ｃ－Ｌ３－ＬＧまたはＨ２Ｃ＝ＣＨ－Ｌ３－ＬＧ（式中、Ｌ３およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｄ）工程（ｂ）の生成物を工程（ｃ）の生成物と反応させ；
（ｅ）工程（ａ）の生成物を工程（ｄ）の生成物と反応させる
工程を含む。
特に好ましい方法においては、Ｚは、式（ｉｉ）の基であり、方法は：
（ａ）式（ＩＩｄ）：
の化合物を式（ＩＩｂ）：
の化合物と反応させ（ここで、Ｑ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＡＡおよびＬＧは、上記で定義したとおりであり、ＰＧおよびＰＧ’は、それぞれ独立して保護基である）；
（ｂ）工程（ａ）の生成物をポリマー－抗体リンカーと反応させ；
（ｃ）適切な反応条件下で保護基ＰＧおよびＰＧ’を除去し；
（ｄ）酸化的切断を実施して、繰り返し単位式（ＩＩｅ）：
を含む１，２－ジカルボニル種を提供し（ここで、ｘは、上記で定義したとおりである）；
（ｅ）別々に、リンカー部分Ｈ－Ｌ２－ＬＧ（式中、Ｌ２およびＬＧは、上記で定義したとおりである）を生物活性部分Ｂ－Ｈと反応させ；
（ｆ）工程（ｄ）の生成物を工程（ｅ）の生成物と反応させ；
（ｇ）工程（ｆ）の生成物を抗体またはその抗原結合断片と反応させる
工程を含む。
本発明の好ましい方法においては、生物活性分子は、本明細書において定義するとおりであるか、または本明細書において定義する生物活性分子の保護バージョンである。当技術分野においてよく知られている従来の保護基戦略を、重合、官能化および結合反応の間に用い得る。本発明のさらに好ましい方法においては、抗体は、本明細書において定義するとおりである。本発明のなおさらに好ましい方法においては、ポリマー－抗体リンカー部分は、本明細書において定義するとおりである。
Ｚが式（ｉｉ）の基である特に好ましい方法においては、ＰＧは、任意の適切なアミン保護基である。好ましくは、ＰＧは、アセタール、ベンゾイル、トシル、パラ－メトキシベンジル、スルホンアミド、またはカルバメート保護基である。カルバメート保護基の非限定的な例は、ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、カルボキシベンジル（Ｃｂｚ）、またはフルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）を含む。Ｚが式（ｉｉ）の基である特に好ましい方法においては、ＰＧ’は、任意の適切なアルコール保護基である。好ましくは、ＰＧ’は、アセチル、ベンゾイル、ベンジル、β－メトキシエトキシメチルエーテル（ＭＥＭ）、メトキシメチルエーテル（ＭＯＭ）、パラ－メトキシベンジルエーテル（ＰＭＢ）、ピバロイル（Ｐｉｖ）、テトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トリチル（Ｔｒ）、シリルエーテルまたはエステル保護基である。特に好ましい保護基ＰＧ’は、ｔｅｒｔ－ブチルエステルである。いくつかの特に好ましい方法においては、ＰＧおよびＰＧ’は、同じ反応条件下で切断される。あるいは、いくつかの方法においては、ＰＧおよびＰＧ’は、直交反応条件下で切断される。１つの特に好ましい方法においては、ＰＧは、Ｂｏｃであり、ＰＧ’は、ｔｅｒｔ－ブチルエステルである。これらの基は、酸、例えばトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）の添加によって同時に切断し得る。
本発明の方法における重合工程は、好ましくは、酵素的に、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）により、重縮合により、フリーラジカル鎖成長重合によりまたは開環重合により、最も好ましくは、酵素的にまたはＳＰＰＳにより行われる。
分子Ｈ－Ｌ２－ＬＧ、ＨＣ≡Ｃ－Ｌ３－ＬＧ、Ｈ２Ｃ＝ＣＨ－Ｌ３－ＬＧまたはＮ３－Ｌ３－ＬＧを生物活性分子Ｂ－Ｈと反応させることを含む上記の任意の方法における任意の工程は、それぞれの分子Ｈ－Ｌ２－Ｂ、ＨＣ≡Ｃ－Ｌ３－Ｂ、Ｈ２Ｃ＝ＣＨ－Ｌ３－ＢまたはＮ３－Ｌ３－Ｂを作り出すための任意の適切な代替で置き換え得る。これは、最終合成工程として、リンカー部分Ｌ２またはＬ３内で結合を形成するための２つのユニットの縮合を含み得る。例えば、目的生成物中のＺが式（ｉｉ）または（ｉｉｉ）の基であるとき、分子Ｈ－Ｖ３－ＬＧを分子Ｈ－Ｌ’－Ｖ２－Ｂと反応させて、分子Ｈ－Ｌ２－Ｂを作製し得る。例えば、好ましい方法においては、分子Ｈ－Ｖ３－ＯＨを分子Ｈ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－Ｂと反応させて、Ｈ－Ｌ２－Ｂを形成し得る。同様に、目的生成物中のＺが式（ｉｖ）の基であるとき、分子Ｎ３－Ｖ４－ＬＧを分子Ｈ－Ｌ’－Ｖ２－Ｂと反応させて、分子Ｎ３－Ｌ３－ＬＧを作製し得る。同様に、目的生成物中のＺが式（ｖ）の基であるとき、分子ＨＣ≡Ｃ－Ｖ４－ＬＧまたはＨ２Ｃ＝ＣＨ－Ｖ４－ＬＧを分子Ｈ－Ｌ’－Ｖ２－Ｂと反応させて、分子ＨＣ≡Ｃ－Ｌ３－ＬＧを作製し得る。
医薬組成物
本発明の抗体－薬物結合体は、医薬組成物中に組み込み得る。すなわち、本発明は、本明細書において定義する抗体－薬物結合体、および１つまたは複数の薬学的に許容される担体、希釈剤若しくは賦形剤を含む医薬組成物を提供する。医薬組成物は、任意の従来の方法で調製し得る。医薬組成物は、本明細書において記載する１つまたは複数の異なる抗体－薬物結合体を含み得る。適切な担体、希釈剤および賦形剤は、当技術分野においてよく知られている。
本発明の医薬組成物は、以下の経路：経口、全身（例えば経皮、鼻腔内、経粘膜または坐剤により）、または非経口（例えば筋肉内、静脈内または皮下）のいずれか１つまたは複数によって患者に投与し得る。本発明の組成物は、錠剤、ピル、カプセル、半固形剤、散剤、徐放性製剤、溶液、懸濁液、エリキシル、エアロゾル、経皮パッチ、生体接着性フィルム、または任意の他の適切な組成物の形態をとり得る。製剤の選択は、薬物投与の様式（例えば経口投与については、錠剤、ピルまたはカプセルの形態の製剤が好ましい）および原薬の生物学的利用能などのさまざまな要因に依存する。
本発明の医薬組成物は、滑沢剤、増粘剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、保存剤、充填剤、結合剤、防腐剤および吸着促進剤、例えば表面浸透剤などの一般的な医薬賦形剤をさらに含み得る。可溶化剤および／または安定化剤、例えばシクロデキストリン（ＣＤ）も使用し得る。当業者は、自身の目的に基づいて適切な賦形剤を選択することができるであろう。本明細書において記載する医薬品において使用し得る一般的な賦形剤は、さまざまなハンドブック（例えばＤ．Ｅ． Ｂｕｇａｙ ａｎｄ Ｗ．Ｐ． Ｆｉｎｄｌａｙ（Ｅｄｓ） Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，９９９）、Ｅ－Ｍ Ｈｏｅｐｆｎｅｒ，Ａ． Ｒｅｎｇ ａｎｄ Ｐ．Ｃ． Ｓｃｈｍｉｄｔ（Ｅｄｓ） Ｆｉｅｄｌｅｒ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｒｅｌａｔｅｄ Ａｒｅａｓ（Ｅｄｉｔｉｏｎ Ｃａｎｔｏｒ，Ｍｕｎｉｃｈ，２００２）およびＨ．Ｐ． Ｆｉｅｌｄｅｒ（Ｅｄ） Ｌｅｘｉｋｏｎ ｄｅｒ Ｈｉｌｆｓｓｔｏｆｆｅ ｆｕｒ Ｐｈａｒｍａｚｉｅ，Ｋｏｓｍｅｔｉｋ ｕｎｄ ａｎｇｒｅｎｚｅｎｄｅ Ｇｅｂｉｅｔｅ（Ｅｄｉｔｉｏｎ Ｃａｎｔｏｒ Ａｕｌｅｎｄｏｒｆ，１９８９））に列挙されている。
本発明の医薬組成物は、当技術分野においてよく知られた手順を用いることにより、患者への投与後に速放性、持続放出性または遅延放出性の抗体－薬物結合体を提供するように製剤化し得る。医薬組成物中の抗体－薬物結合体の濃度は、ポリマーの性質、ポリマー上への薬物搭載量、抗体の素性、組成、投与の様式、治療または診断される状態、および投与される対象を含む多くの要因に依存し、当業者によく知られた技術による選択によって変更または調整し得る。
抗体－薬物結合体の医療用途
本明細書において記載する抗体－薬物結合体および医薬組成物は、医薬適用において有用である。すなわち、本発明は、それを必要とする患者における疾患または状態の治療における使用のための、本明細書において記載する抗体－薬物結合体を提供する。典型的には、本明細書において記載する抗体－薬物結合体および医薬組成物は、炎症性疾患（例えば炎症性腸疾患、関節リウマチおよびアテローム性動脈硬化症）、代謝障害（例えば糖尿病、インスリン抵抗性、肥満）、癌、細菌感染症（例えば結核、肺炎、心内膜炎、敗血症、サルモネラ症、腸チフス、嚢胞性線維症、慢性閉塞性肺疾患）、ウイルス感染症、心血管疾患、神経変性疾患、神経障害、行動および精神障害、血液疾患、染色体障害、先天性および遺伝性疾患、結合組織疾患、消化器疾患、耳、鼻および喉の疾患、内分泌疾患、環境疾患、眼疾患、女性生殖器疾患、真菌感染症、心疾患、遺伝性癌症候群、免疫系疾患、腎臓泌尿器疾患、肺疾患、男性生殖器疾患、口腔疾患、筋骨格疾患、骨髄異形成症候群、神経系疾患、新生児スクリーニング、栄養疾患、寄生虫疾患、希少癌、および皮膚疾患から選択される疾患の治療における使用のためのものである。
一般に、本発明の抗体－薬物結合体は、その中に含有される生物活性分子の治療有効量をヒト患者に送達するために、該患者に投与される。
本明細書にいて使用する用語「治療有効量」は、治療されている障害の重篤度、期間、進行、または発症を低下させるまたは改善するために、治療されている障害の進展（ａｄｖａｎｃｅｍｅｎｔ）を防ぐために、治療されている障害に関連する症状の退行（ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）を引き起こすために、治療されている障害に関連する症状の再発、進展（ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ）、発症または進行を防ぐために、または別の療法の予防または治療効果を増強するまたは改善するために十分な生物活性分子の量を指す。患者に投与される生物活性分子の正確な量は、疾患または状態の種類および重篤度に、並びに一般的健康状態、年齢、性別、体重および薬物への耐性などの患者の特性に依存するであろう。それはまた、治療されている障害の程度、重篤度および種類にも依存するであろう。当業者は、これらのおよび他の要因に依存する適切な投与量を決定することができるであろう。
本明細書において使用する用語「治療する」、「治療」および「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、本発明によるフィルムの患者への投与の結果生じる、治療されている障害の進行、重篤度および／または期間の低下若しくは改善、または治療されている障害の１つ若しくは複数の症状（好ましくは、１つ若しくは複数の識別可能な症状）の改善を指す。
本発明はまた、ヒト患者において本明細書において記載する疾患または状態を治療する方法を提供し、ここで、当該方法は、本明細書において記載する少なくとも１つの抗体－薬物結合体の、それを必要とする患者への投与を含む。
本発明はまた、ヒト患者における本明細書において記載する疾患または状態の治療のための薬剤の製造のための、本明細書において記載する抗体－薬物結合体の使用を提供する。
本発明の任意の抗体－薬物結合体または抗体－薬物結合体（複数）は、本発明のＡＤＣおよび／または他の薬物若しくは医薬組成物が有用性を有し得る疾患または状態の治療において、１つまたは複数の該他の薬物または医薬組成物と組み合わせて使用し得る。
１つまたは複数の他の薬物または医薬組成物は、以下の経路：経口、全身（例えば経皮、鼻腔内、経粘膜または坐剤により）、または非経口（例えば筋肉内、静脈内または皮下）のいずれか１つまたは複数によって患者に投与し得る。１つまたは複数の他の薬物または医薬組成物の組成物は、錠剤、ピル、カプセル、半固形剤、散剤、徐放性製剤、溶液、懸濁液、エリキシル、エアロゾル、経皮パッチ、生体接着性フィルム、または任意の他の適切な組成物の形態をとり得る。製剤の選択は、薬物投与の様式（例えば経口投与については、錠剤、ピルまたはカプセルの形態の製剤が好ましい）および原薬の生物学的利用能などのさまざまな要因に依存する。
本明細書において引用する刊行物、特許公報および他の特許文書は、参照により全体が本明細書に組み込まれる。本明細書においては、単数形の用語に対する任意の言及はまた、その複数形を包含する。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」を使用する場合、当該用語は、それぞれ「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔ ｏｆ）」若しくは「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ ｏｆ）」によって、またはそれぞれ「から実質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」、「から実質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」若しくは「から実質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」によって置き換え得る。数値範囲または単一の数値への任意の言及はまた、およそその範囲または単一の値である値も含む。式（Ｉ）の繰り返し単位を有するポリマーへの任意の言及はまた、他に示されていない限り、その生理学的に許容される塩も包含する。他に示されていない限り、任意の％値は、問題になっている成分または成分（複数）の相対的な重量に基づいている。
以下は、本発明を例示する実施例である。しかしながら、これらの実施例は、本発明の範囲を限定することを決して意図するものではない。
実施例１：ポリマー（１）の調製
式（１）の標的ポリマー（スキーム１）は、以下の合成工程を介して合成した。ポリマー（１）は、特定の数の単位のポリマーの構築を可能にする固相合成（ＳＰＳ）を使用して、モノマー（２）および（３）（スキーム２）から構築した。ポリマーを、次いで樹脂から切断して、生成物を単分散ポリマーとして得ることができる。
Ｆｍｏｃ保護されたＰＥＧ１２酸（２）は、商業的供給業者から購入し、アミノ酸由来モノマー（３）は、以下に記載するように合成した。ＳＰＳを使用してポリマーを構築した後、末端アミン基を３－マレイミドプロピオン酸とカップリングすることによってキャップし、その後、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、トリイソプロピルシラン（ＴＩＳ）および水のカクテルを使用して１回の切断および脱保護工程を行い、ポリマー（１）を得る。
工程ａ：モノマー（３）の調製
Ｂｏｃ－Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）－ＯＨを、酢酸エチルおよび１，４－ジオキサンの混合物中でＤＣＣおよびＮ－ヒドロキシスクシンイミドを使用して酸基をＮ－ヒドロキシスクシンイミドエステルに変換することによって活性化した。反応は、１０ｇの出発物質から１４．５ｇの白色固体をもたらした（定量的）。該物質を、次の工程中に取り入れ、ジイソプロピルエチルアミンを有するジクロロメタン中でＦｍｏｃ－Ｌｙｓ－ＯＨ．ＨＣｌと反応させた。単離した物質は、９８％の収率の白色固体であり、ＮＭＲは、主生成物（３）を示した（図１）。ＨＰＬＣ分析は、２１４ｎｍで９０％、２５４ｎｍで９５．２％の純度を示した。
工程ｂ：ＳＰＳを介したポリマー（１）の合成
合成における最初の工程は、０．３～０．４ｍｍｏｌ／ｇの搭載を達成するための、樹脂（７５０ｍｇ）のモノマー（２）での最初の搭載であった。Ｆｍｏｃ切断による樹脂搭載測定を、樹脂上の置換の量（０．３６ｍｍｏｌ／ｇ）を概算するために使用した。残っている非置換アミノ部位を無水酢酸でのアシル化によりキャップした後、標準的なＦｍｏｃ脱保護（ＤＭＦ中２０％ピペリジン）を実施し、モノマー（３）とモノマー（２）との間のカップリング／活性化工程（ＤＭＦ中のＨＡＴＵおよびＤＩＰＥＡ）を交互に行うことにより、ポリマーを構築した。該手順を使用して、４単位ポリマーを構築した。反応シーケンスの各段階で、分析を行った。ＵＶ分光法を使用して、反応シーケンスの各段階でＦｍｏｃ基の脱保護をモニターした。カイザーテストによる各カップリング／活性化段階でのアミン官能基の不在は、反応が完了に向かっていることを示唆した。このデータは、質量分析（ＭＡＬＤＩ－ＴｏＦおよびＥＳＩ－ＭＳ）からの分析と相まって、ポリマーの成長を示した。
ポリマーを４単位に構築した後、標準条件、カップリング試薬としてＨＡＴＵおよび塩基としてＤＩＰＥＡを使用して、大過剰の３－マレイミドプロピオン酸を使用して、アミンをキャップした。樹脂上のカイザーテストは、いずれのアミン残基についても陰性であり、ポリマーの完全なキャッピングを示した。ポリマーの脱保護および樹脂からの切断を実施し、得られた粗残渣（１）を、ジエチルエーテルおよびペンタンで洗浄した。ポリマーを、最少量のＤＣＭ中に溶解し、ポリマーが溶液から出るまで、ペンタンを加えた。有機溶媒をピペットにより注意深く除去し、この手順を繰り返した。残渣をＤＣＭ中に溶解し、揮発性物質を真空中３５℃で除去し、得られた粗製の（１）の質量は、８５２ｍｇであった。ポリマー（１）は、ＭＳによって特徴付けした（図２）。
実施例２：ポリマー（１）へのＭＭＡＥ薬物ペイロードの結合
工程ａ：ポリマー（４）の合成
過ヨウ素酸ナトリウムでの酸化を、粗ポリマー（１）上で実施し、ポリマー（４）の合成を達成した（スキーム３）。ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（７１２μＬ）およびアセトニトリル（８０μＬ）の混合物中の粗ポリマー（１）（４１ｍｇ、０．１０１μｍｏｌ）の溶液に、ＮａＩＯ４（４０ｍｇ、１８７μｍｏｌ）を固体として一度に加えた。反応混合物を、周囲温度で１時間にわたって時々振とうした。反応混合物を、０．４５μｍのＰＴＦＥによって濾過し、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の１５～４５％ＭｅＣＮの勾配を３５分にわたって使用する分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８）により直ちに精製した。画分を、ＬＣ－ＭＳおよびＲＰ－ＵＰＬＣによって分析した。所望の生成物（４）を含有する画分を、合わせた。ポリマー（４）は、ＭＳによって特徴付けした（図３）。
工程ｂ：ＭＭＡＥ試薬（５）の合成
Figure 2024516917000140
ＭＭＡＥ試薬（５）の合成は、以下の工程を介して達成した。
１．Ｆｍｏｃ－Ｌ－グルタミド－（ＰＥＧ２４－ＯＭｅ）－γ－ｔｅｒｔ－ブチルエステルの調製
撹拌棒を有する４０ｍＬバイアルに、Ｆｍｏｃ－Ｌ－グルタミン酸γ－ｔｅｒｔ－ブチルエステルα－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステルおよびｍ－ｄＰＥＧ（登録商標）２４－アミンを入れた。ＤＭＦを、次いで注射器を介して加え、物質を、撹拌後に溶解した。ＤＩＰＥＡを、次いで注射器を介して加え、内容物を、室温で２時間撹拌した。反応を、０．５ｍＬのＡｃＯＨでクエンチし、次いで反応混合物を、ロータリーエバポレーター上で半分の体積に濃縮した。粗反応混合物を、１０％アセトニトリル（ＡＣＮ）／Ｈ２Ｏ ｗ／０．０５％ＴＦＡで平衡化した１５０グラムのＩＳＣＯ Ｇｏｌｄ Ｃ１８カラム上にロードした。物質を、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ ｗ／０．０５％ＴＦＡで溶出し、画分を、分析し、収集し、凍結し、次いで凍結乾燥した。２日後、フラスコを凍結乾燥機から取り出し、２．６２グラム（９１．６％収率）の白色ワックス状固体を得た。
２．Ｆｍｏｃ－Ｌ－グルタミド－（ＰＥＧ２４－ＯＭｅ）の調製
撹拌棒を有する６０ｍＬバイアル中に、Ｆｍｏｃ－Ｌ－グルタミド－（ＰＥＧ２４－ＯＭｅ）－γ－ｔｅｒｔ－ブチルエステルおよびＤＣＭを入れた。物質を、撹拌により溶解し、次いでＩＰＡ／氷浴中で０から－３℃に冷却した。ＴＦＡを、次いで、５℃未満の温度を維持しながら、注射器を介して１５分間にわたって加えた。ＴＦＡの完全な添加後、内容物を、室温に温め、１時間撹拌した。バイアルの内容物を、次いでロータリーエバポレーター上で濃縮し、物質を、引き続く変換のために「そのまま」使用した。
３．Ｆｍｏｃ－Ｌ－グルタミド－（ＰＥＧ２４－ＯＭｅ）－ｖｃ－ＰＡＢ－ＭＭＡＥの調製
撹拌棒を有する６０ｍＬバイアルに、ｖｃ－ＰＡＢ－ＭＭＡＥ、ＨＡＴＵ、Ｆｍｏｃ－Ｌ－グルタミド－（ＰＥＧ２４－ＯＭｅ）を入れた。ＤＭＦを、注射器を介して加え、内容物を、撹拌して溶解した。いったん均一な溶液が達成されたら、ＤＩＰＥＡを、注射器を介して加え、内容物を、室温で２４時間撹拌した。反応を、１Ｍ ａｑ．ＡｃＯＨ（１０ｍＬ）でクエンチし、次いで２０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ ｗ／０．０５％ＴＦＡで平衡化した２７５グラムのＩＳＣＯ Ｇｏｌｄ Ｃ１８カラム上にロードした。物質を、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ ｗ／０．０５％ＴＦＡで溶出し、画分を、分析し、収集し、凍結し、次いで凍結乾燥した。５日後、フラスコを凍結乾燥機から取り出し、９３３ｍｇ（６５．４％収率）の白色固体を得た。
４．Ｂｏｃ－アミノオキシアセトアミド－Ｌ－グルタミド－（ＰＥＧ２４－ＯＭｅ）－ｖｃ－ＰＡＢ－ＭＭＡＥの調製
撹拌棒を有する１００ｍｌの丸底フラスコに、Ｆｍｏｃ－Ｌ－グルタミド－（ＰＥＧ２４－ＯＭｅ）－ｖｃ－ＰＡＢ－ＭＭＡＥを入れ、メタノール中で溶解した。ピペリジンを、次いで注射器を介して加え、内容物を、室温で１８時間撹拌した。反応混合物を、次いでロータリーエバポレーター上で濃縮し、固体を生成した。濃縮反応混合物を、次いでＴＨＦ（２０ｍＬ）中に溶解し、次いで氷浴中で２～５℃に冷却し、その後、ＤＩＰＥＡ（３．５ｍＬ）を加えた。Ｎ－Ｂｏｃ－アミノオキシ酢酸ＮＨＳエステルを、次いで固体としてフラスコに加え、内容物を、室温で１８時間撹拌した。反応混合物を、次いでロータリーエバポレーター上で濃縮し、次いでＤＭＦ中に溶解し、１Ｍ ＨＣｌでｐＨ３に酸性化した。クエンチした混合物を、次いで２０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ ｗ／０．０５％ＴＦＡで平衡化した１５０グラムのＩＳＣＯ Ｇｏｌｄ Ｃ１８カラム上にロードした。物質を、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ ｗ／０．０５％ＴＦＡで溶出し、画分を、分析し、収集し、凍結し、次いで凍結乾燥した。５日後、フラスコを凍結乾燥機から取り出し、１．１２ｇ（１２２％収率）の透明なガラス状の固体を得た。
５．アミノオキシアセトアミド－Ｌ－グルタミド－（ＰＥＧ２４－ＯＭｅ）－ｖｃ－ＰＡＢ－ＭＭＡＥ ＴＦＡ（５）の調製
撹拌棒を有する１００ｍＬの丸底フラスコ中に、Ｂｏｃ－アミノオキシアセトアミド－Ｌ－グルタミド－（ＰＥＧ２４－ＯＭｅ）－ｖｃ－ＰＡＢ－ＭＭＡＥを入れ、その後、ＤＣＭ（２３ｍＬ）を加えた。内容物を、撹拌して溶解し、次いで内容物を、ＩＰＡ／氷浴中で９．０℃に冷却した。ＴＦＡを、次いで注射器を介して加え、反応混合物を、－９と－１４℃との間で５時間維持した。制御された添加によって０℃未満の温度を維持しながら、反応を、７ｍＬのＮ－メチルモルホリンでクエンチした。クエンチした混合物を、次いで室温でロータリーエバポレーター上で濃縮し、次いで２ｍＬの水中に溶解した。溶液を、２０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ ｗ／２０ｍｍｏｌ ＮＨ４ＯＡｃで平衡化した２５０×５０ｍｍ Ｌｕｎａ Ｃ１８カラムを備えたＩＳＣＯ ＥＺＰｒｅｐ器具を使用して精製した。物質を、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ ｗ／２０ｍｍｏｌ ＮＨ４ＯＡｃで溶出し、画分を、分析し、収集し、凍結し、次いで凍結乾燥した。３日後、フラスコを凍結乾燥機から取り出し、ＬＣ－ＭＳによって特徴付けられる（図４および図５）、１９２ｍｇ（３４％収率）の生成物（５）の白色固体を得た。
工程ｃ：ＭＭＡＥポリマー結合体（６）を生成するための、ポリマー（４）へのＭＭＡＥ試薬（５）カップリング
オキシムライゲーションを、精製したアルデヒド官能化ポリマー（４）とヒドロキシルアミン－ｖｃ－ＰＡＢ－ＭＭＡＥ（５）との間で実施して、４つのコピーの薬物ペイロードＭＭＡＥ（６）（スキーム５）を有する結合体を生成した。
アミノオキシアセトアミド－Ｌ－グルタミド－（ＰＥＧ２４－ＯＭｅ）－ｖｃ－ＰＡＢ－ＭＭＡＥ ＴＦＡ（５、１３ｍｇ、５０．９μｍｏｌ）を、ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏの０．０５％ＴＦＡとの１：１ ｖ／ｖ混合物（２５０μＬ）中に溶解し、ポリマー（４）の合わせたＨＰＬＣ画分に加えた。得られた混合物を、室温で１時間撹拌した。アルデヒドポリマーの完全な変換を、ＲＰ－ＵＰＬＣ分析によって観察し、所望の生成物の形成を、ＬＣ－ＭＳによって確認した。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を、Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）中の３０～８０％ＭｅＣＮの勾配を２５分にわたって使用する分取ＲＰ－ＨＰＬＣ（Ｃ１８）により直接精製した。（６）の画分を、ＲＰ－ＵＰＬＣおよびＬＣ－ＭＳによって分析した（図６および図７）。所望の生成物を含有する画分を、合わせ、凍結乾燥して、６ｍｇの所望の生成物（６）を白色固体として得た。
実施例３：トラスツズマブへのＭＭＡＥポリマー結合体（６）の結合によるＭＭＡＥ ＡＤＣの調製
反応緩衝液（２０ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ７．５、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、２０ｍＭ ＥＤＴＡ（５１９μＬ；５．５ｍｇ；３７ｎｍｏｌ；１．０ｅｑ．））中の１０．６ｍｇ／ｍＬのトラスツズマブを、反応緩衝液（３８１μＬ）で希釈し、加熱ブロック中で４０℃に１０分間加温した。トリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）の５ｍＭ水溶液を、エンドトキシンを含まない水を使用して、ｐＨ７の水中の０．５Ｍ ＴＣＥＰストック溶液からの２２℃での希釈によって調製した。５ｍＭ ＴＣＥＰ溶液（１７．１μＬ；８５．５ｎｍｏｌ；２．３ｅｑ．）を４０℃でトラスツズマブ溶液に加え、６ｍｇ／ｍＬの最終トラスツズマブ濃度をもたらした。トラスツズマブ溶液を、４０℃で２時間インキュベートし、その後、それを、２２℃に冷却した。
ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中のＭＭＡＥポリマー結合体（６）の２６．０ｍｇ／ｍＬ溶液を、６．０ｍｇの（６）（ＭＷ＝１３４１５ｇ．ｍｏｌ－１）を２３１μＬのＤＭＳＯ中に溶解することによって調製した。ＤＭＳＯ中の（６）試薬溶液（１６３μＬ；３１５ｎｍｏｌ；８．５ｅｑ．）および反応緩衝液（１８μＬ）をトラスツズマブ溶液に加え、５．０ｍｇ／ｍＬの最終抗体濃度を有する１５％（ｖ／ｖ）ＤＭＳＯの最終濃度をもたらした。反応物を、２２℃で１．５時間インキュベートした。
２２℃で１．５時間後、反応混合物を、１０％（ｖ／ｖ）グリセロールを含有するＰＢＳ、ｐＨ７．２で平衡化したＨｉＬｏａｄ１６／６００Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００ｐｇカラム上での分取ＳＥＣにより精製した。流速は、１．５ｍＬ／分で一定に保った。画分を、収集し、分析ＨＩＣおよび分析ＳＥＣによって分析した。遊離（６）試薬のない単量体ＡＤＣを含有し、８～３２の間の平均ＤＡＲを示す画分を、プールし、１０％（ｖ／ｖ）グリセロールを含有するＰＢＳ、ｐＨ７．２で平衡化したＶｉｖａｓｐｉｎ２０遠心濃縮器（ＰＥＳ膜、３０ｋＤａ ＭＷＣＯ）を使用して、３．０ｍｇ／ｍＬに濃縮した。濃縮結合体サンプルは、０．２２μｍの孔径のＰＶＤＦメンブレンフィルターを通して滅菌濾過した。
ＭＭＡＥ ＡＤＣの予備的な特徴付けは、ＨＩＣ、ＳＥＣによって行い、ＵＶによって定量化し、エンドトキシンレベルを決定した（分析結果を、表１ａに示す）。ＡＤＣは、１５の高い平均ＤＡＲを有するにもかかわらず、３．０ｍｇ／ｍＬの濃度で保存緩衝液内での凝集が起こることは観察されなかった。さらに、予備研究は、ＡＤＣが対照ＡＤＣと比較して改善された血清安定性を有することを示唆する。
ＨＩＣ実験を繰り返し、ＭＭＡＥ ＡＤＣの平均ＤＡＲが１７．１であることが明らかになった（表１ｂを参照）。
実施例４：ＭＭＡＥ ＡＤＣを用いた細胞生存率アッセイ
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）発光生存率アッセイを使用して、細胞増殖に対する実施例３において調製したＭＭＡＥ ＡＤＣの阻害効果を測定した。細胞増殖または代謝活性におけるどの低下も、化合物の細胞毒性および／または細胞増殖抑制特性を示す。
Ｈｅｒ２Ｈｉｇｈ ＳＫ－ＢＲ－３（ヒト乳房腺癌、ＡＴＣＣ（登録商標） ＨＴＢ－３０、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ、米国）は、２００Ｕ／ｍＬペニシリン、２００μｇ／ｍＬストレプトマイシンおよび２０％熱不活化ウシ胎児血清を添加したマッコイ５Ａ培地中で培養した。Ｈｅｒ２Ｌｏｗ ＪＩＭＴ－１（ヒト乳癌、ＡＣＣ５８９、ＤＳＭＺ、Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ、ドイツ）は、２００Ｕ／ｍＬペニシリン、２００μｇ／ｍＬストレプトマイシンおよび１０％熱不活化ウシ胎児血清を添加したＤＭＥＭ ＧｌｕｔａＭａｘ（登録商標）培地中で培養した。Ｈｅｒ２Ｎｅｇａｔｉｖｅ ＮＣＩ－Ｈ５２０（ヒト肺扁平上皮癌、ＡＴＣＣ（登録商標）－ＨＴＢ－１８２）は、２００Ｕ／ｍＬペニシリン、２００μｇ／ｍＬストレプトマイシンおよび１０％熱不活化ウシ胎児血清を添加したＲＰＭＩ培地中で培養した。
ＳＫ－ＢＲ－３、ＪＩＭＴ－１およびＮＣＩ－Ｈ５２０細胞を、１００μＬの増殖培地中、それぞれ５ｘ１０３、２ｘ１０３および２．５ｘ１０３細胞の密度で９６ウェルプレート中に播種し、３７℃／５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。２４時間後、増殖培地を、増殖培地中の試験サンプル（ＡＤＣ、Ｋａｄｃｙｌａ（登録商標）および遊離ペイロードＭＭＡＥ）の段階希釈物で置き換えた。
ＡＤＣまたは対照の存在下で９６時間後、生存率を、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）発光アッセイを使用して検出した。アッセイプレートを、ウェルあたり１００μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）試薬の添加前に、室温で２０分間平衡化した。プレートを、次いで３００ｒｐｍで３分間混合して、細胞溶解を補助し、室温でさらなる２０分間インキュベートして、発光シグナルを安定化させた。発光を、０．５秒／ウェルのデフォルト積分時間を有するＳｐｅｃｔｒａＭａｘ ｉ３ｘプレートリーダーを使用して、記録した。
データを、次いで４パラメーターの非線形回帰モデルを使用して分析した。生存率は、未処理細胞のパーセンテージとして表し、１００％生存率は、完全培地のみで処理した細胞を含有するウェルの平均発光に対応した。生存率（Ｙ軸）を、ｎＭ単位の薬物濃度（Ｘ軸）に対してプロットし、ソフトウェアを使用して、全ての試験化合物についてＩＣ５０値を計算した。
強力な抗増殖効果が、ＡＤＣについてのＳＫ－ＢＲ－３（Ｈｅｒ２Ｈｉｇｈ）およびＪＩＭＴ－１（Ｈｅｒ２Ｌｏｗ）細胞株の両方を用いて、観察された（表２）。最小限の抗増殖効果が、ＮＣＩ－Ｈ５２０（Ｈｅｒ２Ｎｅｇａｔｉｖｅ）細胞株を用いて、観察された。
実施例５：ＭＭＡＥ ＡＤＣのインビボ有効性研究
この研究の目的は、雌ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスにおける皮下ＮＣＩ－Ｎ８７ヒト胃癌ＣＤＸモデルにおける実施例３のＭＭＡＥ ＡＤＣのインビボ抗腫瘍有効性を評価することであった。
実験計画
実験方法および手順
動物
種：Ｍｕｓ ｍｕｓｃｕｌｕｓ
系統：ＢＡＬＢ／ｃヌード
年齢：６～８週
性別：雌
体重：１８～２２ｇ
細胞培養
ＮＣＩ－Ｎ８７腫瘍細胞（ＡＴＣＣ、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ、カタログ番号ＣＲＬ－５８２２）は、１０％ウシ胎児血清、１％抗生物質－抗真菌剤を添加したＲＰＭＩ－１６４０培地中、空気中の５％ＣＯ２の雰囲気中、３７℃で単層培養としてインビトロで維持した。腫瘍細胞は、トリプシン－ＥＤＴＡ処理により、定期的に週２回継代培養した。指数増殖期中に増殖している細胞を、採取し、腫瘍接種のために計数した。
腫瘍接種および動物の群化
有効性研究用の各マウスの右側腹部に、腫瘍発生のためにマトリゲルを添加した０．２ｍＬのＰＢＳ（１：１）中のＮＣＩ－Ｎ８７腫瘍細胞（１０ｘ１０６）を皮下接種した。平均腫瘍サイズが約１９８ｍｍ３に達した、腫瘍接種後６日目に、治療を開始した。動物は、その腫瘍体積に基づいて階層化ランダム化を実施するＥｘｃｅｌベースのランダム化ソフトウェアを使用して群に割り当てた。各群は、１０匹の担癌マウスからなった。試験品を、所定のレジメンに従ってマウスに投与した。
観察
研究における動物の取り扱い、ケアおよび治療に関連する全ての手順は、実験動物ケア評価認証協会（ＡＡＡＬＡＣ）のガイダンスに従って、ＣＲＯの施設内動物管理使用委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認されたガイドラインに従って実施した。定期的なモニタリングの時点で、動物は、移動性、食物および水の消費量（見ることのみによる）、体重の増減（体重は週に２回測定した）、目／髪のつや消しおよびプロトコル中に記載されている任意の他の異常な効果などの、正常な行動に対する腫瘍増殖および治療の任意の効果について毎日チェックした。死亡および観察された臨床徴候は、各サブセット内の動物の数に基づいて記録した。
腫瘍測定およびエンドポイント
主要なエンドポイントは、腫瘍増殖を遅らせることができるか、またはマウスを治癒することができるかを見ることであった。腫瘍サイズは、週に２回、キャリパーを使用して２次元で測定し、体積は、式：Ｖ＝０．５ａ×ｂ２（式中、ａおよびｂは、それぞれ腫瘍の長径および短径である）を使用して、ｍｍ３で表した。腫瘍サイズを、次いでＴ／ＣおよびＴＧＩ値の両方の計算のために使用した。
Ｔ／Ｃ（％）値は、式：Ｔ／Ｃ（％）＝ＴＲＴＶ／ＣＲＴＶ×１００％（ＴＲＴＶ：治療群の相対腫瘍体積（ＲＴＶ）；ＣＲＴＶ：ＴＲＴＶと同じ日のビヒクル対照群の相対腫瘍体積（ＲＴＶ））を使用して、各群について計算する。相対腫瘍体積（ＲＴＶ）は、式：ＲＴＶ＝Ｖｔ／Ｖ０（Ｖ０は、治療の初日の平均腫瘍体積であり、Ｖｔは、所与の日の平均腫瘍体積である）を使用して、各群について計算する。
ＴＧＩは、式：ＴＧＩ（％）＝［１－（Ｔｉ－Ｔ０）／（Ｖｉ－Ｖ０）］×１００（Ｔｉは、所与の日の治療群の平均腫瘍体積であり、Ｔ０は、０日目の治療群の平均腫瘍体積であり、Ｖｉは、Ｔｉと同じ日のビヒクル対照群の平均腫瘍体積であり、Ｖ０は、治療の初日のビヒクル群の平均腫瘍体積であるを使用して、各群について計算した。
統計分析
平均値および平均値の標準誤差（ＳＥＭ）を含む要約統計量を、各時点での各群の腫瘍体積について提供する。群間の腫瘍体積における差の統計分析を、治療開始後４２日目に得られたデータについて行った。一元配置分散分析を、群間の腫瘍体積を比較するために実施し、有意なＦ統計量を得、群間の比較は、Ｇａｍｅｓ－Ｈｏｗｅｌｌテストを用いて行った。全てのデータは、ＳＰＳＳ１７．０を使用して分析した。ｐ＜０．０５は、統計的に有意であると見なした。
結果
この研究においては、ＮＣＩ－Ｎ８７ヒト胃癌ＣＤＸモデルの治療におけるＭＭＡＥ ＡＤＣの治療有効性を、評価した。腫瘍体積の結果を、図８に示す。ＡＤＣは、ＮＣＩ－Ｎ８７の腫瘍増殖を有意に阻害した。特に、４ｍｇ／ｋｇのＡＤＣ（Ｔ／Ｃ＝３．４４％、ＴＧＩ＝１０７．４７％；ｐ＜０．００１）は、ＰＧ－Ｄ４２に対して６７ｍｍ３の平均腫瘍体積で腫瘍退縮に至った。さらに、ＡＤＣの抗腫瘍活性は、用量依存的であることが示されている。３ｍｇ／ｋｇの陽性対照物Ｔ－ＤＭ１（Ｔ／Ｃ＝２９．３７％、ＴＧＩ＝７８．５８％；ｐ＝０．００４）もまた、１．３３ｍｇ／ｋｇの新規ＭＭＡＥ ＡＤＣ（Ｔ／Ｃ＝２７．１７％、ＴＧＩ＝８０．３２％；ｐ＝０．００３）によって示される活性と同様に、ＰＧ－Ｄ４２に対して５７４ｍｍ３の平均腫瘍体積で有意な抗腫瘍活性を生じた。ＭＭＡＥ ＡＤＣは、担癌マウスによって十分に忍容された。
要約すると、新規ＡＤＣは、ＮＣＩ－Ｎ８７ヒト胃癌ＣＤＸモデルに対して有意な抗腫瘍活性を生じ、この研究における担癌動物によって十分に忍容された。
実施例６：ポリマー（７）の調製
式（７）の標的ポリマー（スキーム６）は、以下の合成工程を介して合成した。ポリマー（７）は、特定の数の単位のポリマーの構築を可能にする固相合成（ＳＰＳ）を使用して、Ｂｏｃ－Ｓｅｒ（－ｔＢｕ）－ＤＡＰ（－Ｆｍｏｃ）－ＯＨジペプチド（７ａ）およびＦｍｏｃ－Ｎ－アミド－ＰＥＧ－酸構築ブロックから構築した。ポリマーを、次いで樹脂から切断して、生成物を単分散ポリマーとして得ることができる。
Ｆｍｏｃ－Ｎ－アミド－ＰＥＧ－酸構築ブロックは、商業的供給業者から購入し、Ｂｏｃ－Ｓｅｒ（－ｔＢｕ）－ＤＡＰ（－Ｆｍｏｃ）－ＯＨジペプチド（７ａ）は、以下に記載するように合成した。ＳＰＳを使用してポリマーを構築した後、末端アミン基を３－マレイミドプロピオン酸とカップリングすることによってキャップし、その後、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、トリイソプロピルシラン（ＴＩＳ）および水のカクテルを使用して１回の切断および脱保護工程を行い、ポリマー（７）を得た。
工程ａ：Ｂｏｃ－Ｓｅｒ（－ｔＢｕ）－ＤＡＰ（－Ｆｍｏｃ）－ＯＨジペプチド（７ａ）の調製
ＤＣＭ（１５０ｍＬ）中のＢｏｃ－Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ（３．７１ｇ、１４．１７ｍｍｏｌ）およびＮＨＳ（３．２６ｇ、２８．３５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＣＣ（２．９２ｇ、１４．１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温で２時間撹拌した。混合物を、次いでフリットを通して濾過し、固体を少量のＤＣＭですすぎ、濾液を真空下で濃縮して、琥珀色の粘性油を得た。油をＴＨＦ（５０ｍＬ）中に溶解し、溶液を、混合物Ｈ２Ｏ：ＴＨＦ（１：１、１８０ｍＬの総量）中のＦｍｏｃ－ＤＡＰ－ＯＨ（３．７ｇ、１０．３２ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（０．８７ｇ、１０．３２ｍｍｏｌ）の懸濁液に加えた。得られた反応混合物を、室温で１６時間撹拌した。ＴＨＦを真空下で除去し、混合物を、次いで希ＨＣｌでｐＨ約３に酸性化した。水層をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗油状残渣を、ＤＣＭ中０～１０％ＭｅＯＨの勾配法を使用するシリカゲル（１２０ｇ）カラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物を含有する画分を、合わせ、真空下で濃縮して、化合物（７ａ）（２．６ｇ、４０％）を白色固体として得た。粗物質の一部（１．８ｇ）を、さらに精製し、Ｃ１８カラム上にロードし、Ｈ２Ｏ（＋０．０５％ギ酸）中の５～７０％ＭｅＣＮの移動相で溶出した。純粋な生成物を含有する画分を、合わせ、部分的に濃縮し、凍結乾燥して、１．２ｇの化合物、６６％収率を綿毛状の白色粉末として得た。
工程ｂ：ＳＰＳによるポリマー（７）の合成
ポリマー（７）のＳＰＰＳは、４サイクルの脱保護およびカップリングを含み、各サイクルは、ｉ）Ｆｍｏｃ脱保護、ｉｉ）Ｆｍｏｃ－Ｎ－アミド－ＰＥＧ８－酸のカップリング、ｉｉｉ）Ｆｍｏｃ脱保護、ｉｖ）Ｂｏｃ－Ｓｅｒ（－ｔＢｕ）－ＤＡＰ（－Ｆｍｏｃ）－ＯＨジペプチド（７ａ）のカップリングを含んだ（最初の４サイクルについて）。追加の最終サイクルは、ｖ）Ｆｍｏｃ脱保護、ｖｉ）Ｆｍｏｃ－Ｎ－アミド－ＰＥＧ４－酸のカップリング、ｖｉｉ）Ｆｍｏｃ脱保護およびｖｉｉｉ）３－マレイミドプロピオン酸カップリングを含んだ。最後に、ポリマーを、樹脂から切断した。ポリマー（７）の最終サンプルは、冷ジエチルエーテル中での粗物質の沈殿後に調製した。物質を、凍結乾燥により一晩乾燥させた。３６８ｍｇの粗ポリマー（７）を、６６％収率で単離した（図９のＬＣ－ＭＳ特性付け）。
実施例７：ポリマー（８）の調製
式（８）の標的ポリマー（スキーム７）は、以下の合成工程を介して合成した。ポリマー（８）は、特定の数の単位のポリマーの構築を可能にする固相合成（ＳＰＳ）を使用して、実施例６において調製したＢｏｃ－Ｓｅｒ（－ｔＢｕ）－ＤＡＰ（－Ｆｍｏｃ）－ＯＨジペプチド（７ａ）およびＦｍｏｃ－Ｎ－アミド－ＰＥＧ－酸構築ブロックから構築した。ポリマーを、次いで樹脂から切断して、生成物を単分散ポリマーとして得ることができる。
ポリマー（８）の合成は、３－マレイミドプロピオン酸の代わりにＴｈｉｏＢｒｉｄｇｅ（登録商標） ＨＯＢｔエステルとカップリングし、その後、樹脂切断並びにｔ－ＢｕおよびＢｏｃ基の脱保護を行うことを含む最終工程ｖｉｉｉ）を除いて、ポリマー（７）の合成について使用した手順に従い、１．４ｇのＰｒｏＴｉｄｅ Ｒｉｎｋ Ａｍｉｄｅ ＬＬ Ｒｅｓｉｎを用いて実行した。ＴｈｉｏＢｒｉｄｇｅ（登録商標） ＨＯＢｔエステルは、ＷＯ２０１６／０６３００６、２５～２６ページに記載されているように調製した。ＴｈｉｏＢｒｉｄｇｅ（登録商標）部分のトシル基が脱離する可能性があるため、４－メチルモルホリンを、塩基として使用した。ポリマー（８）の樹脂切断／脱保護は、室温で２時間（ｉｎ ２ｈ）、きれいな（ｎｅａｔ）ＴＦＡ（２０ｍＬ）を使用することによって行った。ＴＦＡを分離し、樹脂を、ＴＦＡ（１０ｍＬ）で１０分間洗浄した。合わせたＴＦＡ母液を、２～３ｍＬに濃縮した。最終生成物は、冷ジエチルエーテル（１００ｍＬ）中での粗物質の沈殿後に調製した。物質を、凍結乾燥により一晩乾燥させた。５０５ｍｇのポリマー（８）を、６０．６％収率で単離した（図１０のＬＣ－ＭＳ特徴付け）。
実施例８：ＳＮ－３８薬物ペイロード試薬（１１）の調製
工程ａ：ポリマー（９）の合成
過ヨウ素酸ナトリウムでの酸化を粗ポリマー（７）上で実施し、ポリマー（９）の合成を達成した（スキーム８）。
ＤＰＢＳ（１０００ｍＬ）およびアセトニトリル（１００ｍＬ）の混合物中の粗ポリマー（７）（４２ｍｇ、１５μｍｏｌ）の溶液に、ＮａＩＯ４（８０ｍｇ、３７５μｍｏｌ）を固体として一度に加えた。反応混合物を、周囲温度で１時間にわたって時々振とうした。反応混合物を、０．４５μｍのＰＴＦＥによって濾過し、Ｈ２Ｏ（０．０５％ギ酸）中の５～５５％ＭｅＣＮの勾配を４５分にわたって使用する分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８）により直ちに精製した。
画分を、ＬＣ－ＭＳおよびＲＰ－ＵＰＬＣによって分析した。所望の生成物を含有する画分を、合わせた。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋２Ｈ］２＋ 計算値：１３３９．２、実測値：１３３８．６９；［Ｍ＋３Ｈ］３＋ 計算値：８９３．１、実測値：８９３．０７；［Ｍ＋４Ｈ］４＋ 計算値：６７０．１、実測値：６７０．０５。
工程ｂ：ＳＮ－３８試薬（１０）の合成
ＳＮ－３８試薬（１０）の合成（スキーム９）は、以下の工程を介して達成した。
１．Ｂｏｃ－ＳＮ－３８の調製
無水ＤＣＭ（８０ｍＬ）中のＳＮ－３８（１ｇ、２．５５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、（Ｂｏｃ）２Ｏ（７２３ｍｇ、３．３１ｍｍｏｌ）および無水ピリジン（６．０５ｍＬ、７．６５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、アルゴン雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。反応混合物を、０．５Ｎ ＨＣｌ溶液（３×３５ｍＬ）、その後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１×５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を、Ｍｇ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮乾固し、真空下で濃縮して、純粋なＢｏｃ－ＳＮ－３８（１．２３ｇ、９８％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ 計算値：４９３．１９、実測値：４９３．２５。
２．Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｂｏｃ－ＳＮ－３８）の調製
無水ＤＣＭ（１５ｍＬ）中のＢｏｃ－ＳＮ－３８（０．７５４ｇ、１．５３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＭＡＰ（１８７ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．３４ｍＬ、７．６７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、氷浴中に置いた。トリホスゲン（１９５ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（４ｍＬ）中の溶液として滴下した。反応混合物を、氷浴中で５分間、次いで周囲温度で１０分間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ（８３０ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＳＯ（５ｍＬ）およびＤＣＭ（５ｍＬ）の混合物中に溶解し、溶液を、反応混合物に加えた。得られた混合物を、室温で２時間撹拌した。反応混合物を、濃縮し、ＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）で希釈した。有機物を、５％ａｑ．ＮａＨＣＯ３（２ｘ４０ｍＬ）、ブライン（４０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮した。粗残渣を、ＤＣＭ－ＭｅＯＨ勾配法（０～５％）を使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｂｏｃ－ＳＮ－３８）（１．２ｇ、７７％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ 計算値：１０２０．４６、実測値：１０２０．１。
３．Ｈ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８の調製
無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｂｏｃ－ＳＮ－３８）（１．２ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（１．０６ｍＬ、１０．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温で２．５時間撹拌した。反応混合物を濃縮乾固し、混合物Ｅｔ２Ｏ／ＥｔＯＨ １０／１（ｖ／ｖ／による）（５０ｍＬ）を加えた。形成した固体を、遠心分離によって分離し、Ｅｔ２Ｏ（２×４０ｍＬ）により洗浄して、ｖａｌ－ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８（０．６４１ｍｇ、７５％）を黄色固体として得、これを、精製なしに次の工程において使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ 計算値：７９８．３４、実測値：７９７．８９。
４．Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯＨ）－ＰＥＧ２４ｕの調製
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のｍＰＥＧ２４－ＮＨ２（１．５３ｇ、１．４ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ｔ－ＯＢｕ）ＯＨ（０．５７ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）の混合物に、ＮＭＭ（４４４ｍｌ、４．０５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、氷浴中で冷却した。ＨＡＴＵ（０．６４１ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）を、フラスコに固体として少しずつ加えた。反応混合物を、室温で１６時間撹拌した。混合物を、真空中で濃縮した。残渣を、緩衝液Ａ：１００％Ｈ２Ｏ、０．１％ギ酸および緩衝液Ｂ：１００％アセトニトリル、０．１％ギ酸勾配法（０～６０％）を使用する逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。プールした画分の凍結乾燥後、固体を、ＴＦＡ（５ｍＬ）およびＤＣＭ（１０ｍＬ）の混合物で室温で３時間処理した。混合物を濃縮し、残渣を、緩衝液Ａ：１００％Ｈ２Ｏ、０．０５％ＴＦＡおよび緩衝液Ｂ：１００％アセトニトリル、０．０５％ＴＦＡ勾配法（０～６０％）を使用する逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。プールした画分を凍結乾燥して、純粋なＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯＨ）－ＰＥＧ２４ｕ（１．４４ｇ、７４．６％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ 計算値：１４３９．８、実測値：１４３９．４７。
５．Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕの調製
ＤＭＦ（４ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯＨ）－ｍＰＥＧ２４ｕ（０．３５ｇ、０．２４３ｍｍｏｌ）およびＶａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８（０．２１ｇ、０．２６７ｍｍｏｌ）の混合物に、ＮＭＭ（８０ｍｌ、０．７２９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、氷浴中で冷却した。ＨＡＴＵ（０．１１５ｇ、０．３０４ｍｍｏｌ）を、フラスコに固体として少しずつ加えた。反応混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物を、真空中で濃縮した。残渣を、緩衝液Ａ：１００％Ｈ２Ｏ、０．１％ギ酸および緩衝液Ｂ：１００％アセトニトリル、０．１％ギ酸勾配法（０～６０％）を使用する逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。プールした画分を凍結乾燥して、純粋なＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕ（０．４５ｇ、８３．３％）をオフホワイトの固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋２Ｈ］２＋ 計算値：１１１０．０６、実測値：１１１０．１３。
６．Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕの調製
無水ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕ（０．４２７ｇ、０．１９２ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（２８５ｍｌ、２．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温で１時間撹拌した。反応混合物を濃縮乾固し、Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）を加えた。形成した固体を、遠心分離によって分離し、Ｅｔ２Ｏ（２ｘ４０ｍＬ）により洗浄して、純粋なＧｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕ（３４０ｍｇ、８７．２％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋２Ｈ］２＋ 計算値：９９９．０２、実測値：９９９．１０。
７．（Ｂｏｃ）２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕの調製
ＤＭＦ（４ｍＬ）中のＨ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕ（３３５ｍｇ、０．１６７ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯＯＨ（５４ｍｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）の混合物に、ＮＭＭ（６１ｍｌ、０．５５３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、氷浴中で冷却した。ＨＢＴＵ（８０ｍｇ、０．２１０ｍｍｏｌ）を、固体として少しずつ加えた。反応混合物を、室温で１．５時間撹拌した。混合物を、真空中で濃縮した。残渣を、緩衝液Ａ：１００％Ｈ２Ｏ、０．１％ギ酸および緩衝液Ｂ：１００％アセトニトリル、０．１％ギ酸勾配法（０～７５％）を使用する逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。プールした画分を凍結乾燥して、純粋な（Ｂｏｃ）２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕ（０．３２０ｇ、８３．３％）をオフホワイトの固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋２Ｈ］２＋ 計算値：１１３５．５８、実測値：１１３５．１５。
８．Ｈ２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕ－ＳＮ－３８試薬（１０）の調製
きれいなギ酸（２５ｍＬ）を（Ｂｏｃ）２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕ固体（３１５ｍｇ、０．１３８ｍｍｏｌ）に加え、溶液を、室温で２時間撹拌した。混合物を、真空中で濃縮した。残渣を、緩衝液Ａ：１００％Ｈ２Ｏ、０．１％ギ酸および緩衝液Ｂ：１００％アセトニトリル、０．１％ギ酸勾配法（０～６５％）を使用する逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。プールした画分を凍結乾燥して、純粋なＨ２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕギ酸塩（１０）（０．１６５ｇ、５６．３％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋２Ｈ］２＋ 計算値：１０３５．５３、実測値：１０３５．５７。
工程ｃ：ＳＮ－３８試薬（１１）を生成するための、ポリマー（９）へのＳＮ－３８試薬（１０）カップリング
オキシムライゲーションを、精製したアルデヒド官能化ポリマー（９）とＳＮ－３８試薬（１０）との間で実施して、４つのコピーの薬物ペイロードＳＮ－３８（１１）を有する結合体を生成した（スキーム１０）。
Ｈ２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ２４ｕギ酸塩（１０）（８７ｍｇ、４１μｍｏｌ）を、ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏの０．０５％ギ酸との混合物（１：１ ｖ／ｖ）（２５０μＬ）中に溶解し、アルデヒド官能化ポリマー（９）を含有する、合わせたＨＰＬＣ画分に加えた。得られた混合物を、室温で１．５時間撹拌した。アルデヒドポリマーの完全な変換を、ＲＰ－ＵＰＬＣ分析によって観察し；所望の生成物の形成を、ＬＣ－ＭＳによって確認した。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を、Ｈ２Ｏ（０．０５％ギ酸）中の２０～７０％ＭｅＣＮの勾配を４５分にわたって使用する分取ＲＰ－ＨＰＬＣ（Ｃ１８）により直接精製した。
画分を、ＬＣ－ＭＳおよびＲＰ－ＵＰＬＣによって分析した（図１１および１２）。所望の生成物を含有する画分を、合わせ、凍結乾燥して、所望のＳＮ－３８試薬（１１）（３１ｍｇ、１９％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋１０Ｈ］１０＋ 計算値：１０８９．１、実測値：１０８９．３３。［Ｍ＋９Ｈ］９＋ 計算値：１２０９．９、実測値：１２０９．４４。［Ｍ＋８Ｈ］８＋ 計算値：１３６１．０；実測値：１３６１．１１；［Ｍ＋７Ｈ］７＋ 計算値：１５５５．４；実測値：１５５５．４５。
実施例９：ＳＮ－３８試薬（１１）のトラスツズマブへの結合によるＳＮ－３８試薬（１１）ＡＤＣの調製
ＤＰＢＳ、ｐＨ７．２、５ｍＭ ＥＤＴＡ（２．０９７ｍＬ；２２．０ｍｇ；１５１ｎｍｏｌ；１．０ｅｑ．）中の１０．４９ｍｇ／ｍＬのトラスツズマブを、ダルベッコＰＢＳ、ｐＨ７．２、５ｍＭ ＥＤＴＡ（２．２３３ｍＬ）で希釈した。エンドトキシンを含まない水中のＴＣＥＰの５ｍＭ溶液（６９．３μＬ；３４７ｎｍｏｌ；２．３ｅｑ．）を、希釈トラスツズマブ溶液に加えた。還元は、５．０ｍｇ／ｍＬの最終抗体濃度を用いて４０℃で１．５時間進行させた。
４０℃で１．５時間後、還元混合物を、ダルベッコＰＢＳ、ｐＨ７．２、５ｍＭ ＥＤＴＡ（５５０μＬ）で希釈し、２２℃に冷却した。１：１ ＭｅＣＮ／水中のＳＮ－３８試薬（１１）の１７．９０ｍｇ／ｍＬ（１．６４ｍＭ）溶液を、１０．０ｍｇ（９１９ｎｍｏｌ）のＳＮ－３８試薬（１１）（ＭＷ＝１０８８７ｇ．ｍｏｌ－１）を５５９μＬの、ＭｅＣＮ／水の１：１混合物中に溶解することにより調製した。１：１ ＭｅＣＮ／水中のＳＮ－３８試薬（１１）溶液（５５０μＬ；９．８４ｍｇ；９０６ｎｍｏｌ；６．０ｅｑ．）を、還元トラスツズマブ溶液に加え、５％ＭｅＣＮの最終濃度および４．０ｍｇ／ｍＬの最終抗体濃度をもたらした。結合反応は、２２℃で１時間進行させた。１：１ ＭｅＣＮ／水中のＳＮ－３８試薬（１１）溶液のさらなる部分（６８．７５μＬ；１．２３ｍｇ；１１３ｎｍｏｌ；０．７５ｅｑ．）を、還元トラスツズマブ溶液に加え、結合反応を、２２℃で１時間進行させた。
２２℃で２時間後、反応混合物を、ＨｉＬｏａｄ１６／６００Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００ｐｇカラム上にロードした。溶出は、ＤＰＢＳ、ｐＨ７．２緩衝液および１．０ｍＬ／分の一定流量を用いて行った。単量体純度＞９５％を有する画分を、プールし、０．２２μｍの孔径のＰＶＤＦメンブレンフィルターを通して滅菌濾過した。最終結合体サンプル（４０ｍｇ；１８．０ｍＬ）を、得た。ＳＮ－３８試薬（１１）ＡＤＣ結合体は、ＨＩＣ、ＳＥＣ、ＬＣ－ＭＳ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥによって特徴付けし、ＵＶによって定量化し、エンドトキシンレベルを決定した（分析結果を表４に示す）。
実施例１０：ＳＮ－３８薬物ペイロード試薬（１３）の調製
工程ａ：ポリマー（９）の合成
これは、実施例８の工程（ａ）において記載するように行った。
工程ｂ：ＳＮ－３８試薬（１２）の合成
ＳＮ－３８試薬（１２）の合成（スキーム１１）は、以下のように達成した。まず、工程１、２および３を、実施例８において記載するように行った。次いで、以下の工程を、行った。
４．Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯＨ）－ＰＥＧ１２ｕの調製
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のｍＰＥＧ１２－ＮＨ２（１．３７ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ｔ－ＯＢｕ）ＯＨ（１．０１２ｇ、２．３８ｍｍｏｌ）の混合物に、ＮＭＭ（７８４ｍｌ、７．１４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、氷浴中で冷却した。ＨＡＴＵ（１．０４５ｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を、フラスコに固体として少しずつ加えた。反応混合物を、室温で１６時間撹拌した。混合物を、真空中で濃縮した。残渣を、緩衝液Ａ：１００％Ｈ２Ｏ、０．１％ギ酸および緩衝液Ｂ：１００％アセトニトリル、０．１％ギ酸勾配法（０～６５％）を使用する逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。プールした画分の凍結乾燥後、固体を、ＴＦＡ（８ｍＬ）およびＤＣＭ（１６ｍＬ）の混合物で室温で３時間処理した。混合物を濃縮し、残渣を、緩衝液Ａ：１００％Ｈ２Ｏ、０．０５％ＴＦＡおよび緩衝液Ｂ：１００％アセトニトリル、０．０５％ＴＦＡ勾配法（０～６５％）を使用する逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。プールした画分を凍結乾燥して、純粋なＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯＨ）－ＰＥＧ１２ｕ（１．５６ｇ、７２．１％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ 計算値：９１１．４７、実測値：９１１．５。
５．Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ１２ｕの調製
ＤＭＦ（４ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯＨ）－ｍＰＥＧ１２ｕ（０．３１１ｇ、０．３４２ｍｍｏｌ）およびＨ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８（０．３ｇ、０．３７６ｍｍｏｌ）の混合物に、ＮＭＭ（１２４ｍｌ、１．１３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、氷浴中で冷却した。ＨＢＴＵ（０．１６２ｇ、１．１３０ｍｍｏｌ）を、フラスコに固体として少しずつ加えた。反応混合物を、室温で２時間撹拌した。混合物を、真空中で濃縮した。残渣を、緩衝液Ａ：１００％Ｈ２Ｏ、０．１％ギ酸および緩衝液Ｂ：１００％アセトニトリル、０．１％ギ酸勾配法（０～６０％）を使用する逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。プールした画分を凍結乾燥して、純粋なＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ１２ｕ（０．４１０ｇ、７１．１％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ 計算値：１６９０．８、実測値：１６９０．２１。
６．Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ１２ｕの調製
無水ＤＭＦ（３ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ１２ｕ（０．４ｇ、０．２３６ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（２９１ｍｌ、２．８４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温で１時間撹拌した。反応混合物を濃縮乾固し、Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）を加えた。形成した固体を、遠心分離によって分離し、Ｅｔ２Ｏ（２×４０ｍＬ）により洗浄して、純粋なＨ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ１２ｕ（３２１ｍｇ、９２．７％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ 計算値：１４６８．７３、実測値：１４６８．３９。
７．（Ｂｏｃ）２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ１２ｕの調製
ＤＭＦ（４ｍＬ）中のＨ－Ｇｌｕ［Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８］－ＰＥＧ（１２ｕ）（３２１ｍｇ、０．２１９ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２－Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯＯＨ（７３ｍｇ、０．２５１ｍｍｏｌ）の混合物に、ＮＭＭ（８０ｍＬ、０．７２３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、氷浴中で冷却した。ＨＢＴＵ（１０４ｍｇ、０．２７４ｍｍｏｌ）を、固体として少しずつ加えた。反応混合物を、室温で１．５時間撹拌した。混合物を、真空中で濃縮した。残渣を、緩衝液Ａ：１００％Ｈ２Ｏ、０．１％ギ酸および緩衝液Ｂ：１００％アセトニトリル、０．１％ギ酸勾配法（０～７５％）を使用する逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。プールした画分を凍結乾燥して、純粋な（Ｂｏｃ）２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ１２ｕ（０．３２７ｇ、８５．９％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ 計算値：１７４０．８４、実測値：１７４１．５４。
８．Ｈ２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ１２ｕ－ＳＮ－３８試薬（１２）の調製
きれいなギ酸（２５ｍＬ）を（Ｂｏｃ）２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ１２ｕ固体（３２０ｍｇ）に加え、溶液を、室温で２時間撹拌した。混合物を、真空中で濃縮した。残渣を、緩衝液Ａ：１００％Ｈ２Ｏ、０．１％ギ酸および緩衝液Ｂ：１００％アセトニトリル、０．１％ギ酸勾配法（０～６５％）を使用する逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。プールした画分を凍結乾燥して、純粋なＨ２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ１２ｕギ酸塩（０．１４４ｇ、５０．１％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ 計算値：１５４１．７４、実測値：１５４１．８７。
工程ｃ：ＳＮ－３８試薬（１３）を生成するための、ポリマー（９）へのＳＮ－３８試薬（１２）カップリング
オキシムライゲーションを、精製したアルデヒド官能化ポリマー（９）とＳＮ－３８試薬（１２）との間で実施して、４つのコピーの薬物ペイロードＳＮ－３８（１３）を有する結合体を生成した（スキーム１２）。
Ｈ２Ｎ－ＯＣＨ２ＣＯ－Ｇｌｕ（Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－ＳＮ－３８）－ＰＥＧ１２ｕギ酸塩（１２）（５０ｍｇ、３１μｍｏｌ）を、ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏの０．０５％ギ酸との混合物（１：１ ｖ／ｖ）（２５０μＬ）中に溶解し、アルデヒド官能化ポリマー（９）を含有する、合わせたＨＰＬＣ画分に加えた。得られた混合物を、室温で１．５時間撹拌した。アルデヒドポリマーの完全な変換を、ＨＰＬＣ分析によって観察し；所望の生成物の形成を、ＬＣ－ＭＳによって確認した。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を、Ｈ２Ｏ（０．０５％ギ酸）中の２０～７０％ＭｅＣＮの勾配を４５分にわたって使用する分取ＲＰ－ＨＰＬＣ（Ｃ１８）により直接精製した。
画分を、ＬＣ－ＭＳおよびＨＰＬＣによって分析した（図１３および１４）。所望の生成物を含有する画分を、合わせ、凍結乾燥して、所望のＳＮ－３８試薬（１３）（３０ｍｇ、１９．５％）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ：［Ｍ＋９Ｈ］９＋ 計算値：９７５．１、実測値：９７４．７２。［Ｍ＋８Ｈ］８＋ 計算値：１０９６．９；実測値：１０９７．１３；［Ｍ＋７Ｈ］７＋ 計算値：１２５３．５；実測値：１２５３．０４；［Ｍ＋６Ｈ］６＋ 計算値：１４６２．２、実測値：１４６２．０２；［Ｍ＋５Ｈ］５＋ 計算値：１７５４．４、実測値：１７５４．２１。
実施例１１：ＳＮ－３８試薬（１３）のトラスツズマブへの結合によるＳＮ－３８試薬（１３）ＡＤＣの調製
ＤＰＢＳ、ｐＨ７．２、５ｍＭ ＥＤＴＡ（２．０９７ｍＬ；２２．０ｍｇ；１５１ｎｍｏｌ；１．０ｅｑ．）中の１０．４９ｍｇ／ｍＬのトラスツズマブを、ダルベッコＰＢＳ、ｐＨ７．２、５ｍＭ ＥＤＴＡ（２．２３３ｍＬ）で希釈した。エンドトキシンを含まない水中のＴＣＥＰの５ｍＭ溶液（６９．３μＬ；３４７ｎｍｏｌ；２．３ｅｑ．）を、希釈トラスツズマブ溶液に加えた。還元は、５．０ｍｇ／ｍＬの最終抗体濃度を用いて４０℃で１．５時間進行させた。４０℃で１．５時間後、還元混合物を、ダルベッコＰＢＳ、ｐＨ７．２、５ｍＭ ＥＤＴＡ（５５０μＬ）で希釈し、２２℃に冷却した。１：１ ＭｅＣＮ／水中のＳＮ－３８試薬（１３）の１４．４ｍｇ／ｍＬ（１．６４ｍＭ）溶液を、８．９８ｍｇ（１０２４ｎｍｏｌ）のＳＮ－３８試薬（１３）（ＭＷ＝８７７２ｇ．ｍｏｌ－１）を６２３μＬの、ＭｅＣＮ／水の１：１混合物中に溶解することにより調製した。１：１ ＭｅＣＮ／水中のＳＮ－３８試薬（１３）溶液（５５０μＬ；７．９３ｍｇ；９０６ｎｍｏｌ；６．０ｅｑ．）を、還元トラスツズマブ溶液に加え、５％ＭｅＣＮの最終濃度および４．０ｍｇ／ｍＬの最終抗体濃度をもたらした。結合反応は、２２℃で１時間進行させた。
２２℃で１時間後、反応混合物を、ＨｉＬｏａｄ１６／６００Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００ｐｇカラム上にロードした。溶出は、ＤＰＢＳ、ｐＨ７．２緩衝液および１．０ｍＬ／分の一定流量を用いて行った。プールした画分を分取ＳＥＣにより再度精製して、残りの試薬関連種を除去した。物質を、ＨｉＬｏａｄ１６／６００Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００ｐｇカラム上にロードした。溶出は、ＤＰＢＳ、ｐＨ７．２＋１０％イソプロパノール緩衝液および１．０ｍＬ／分の一定流量を用いて行った。単量体純度＞９５％を有する画分を、プールし、緩衝液交換し、Ｖｉｖａｓｐｉｎ２０遠心濃縮器（ＰＥＳ膜、３０ｋＤａ ＭＷＣＯ）を使用する限外濾過／ダイアフィルトレーションによりＤＰＢＳ緩衝液中に濃縮した。最終結合体サンプル（２５．８ｍｇ；７．０ｍＬ）は、０．２２μｍの孔径のＰＶＤＦメンブレンフィルターを通して滅菌濾過した。
ＳＮ－３８試薬（１３）ＡＤＣ結合体は、ＨＩＣ、ＳＥＣ、ＬＣ－ＭＳ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥによって特徴付けし、ＵＶによって定量化し、エンドトキシンレベルを決定した（分析結果を、表５に示す）。
実施例１２：ＳＮ－３８試薬（１１）の無関係なｈＩｇＧ１アイソタイプ対照への結合によるＳＮ－３８試薬（１１）ｈＩｇＧ１アイソタイプ対照ＡＤＣの調製
ＤＰＢＳ、ｐＨ７．２、５ｍＭ ＥＤＴＡ（１．０２３ｍＬ；８．０ｍｇ；５５ｎｍｏｌ；１．０ｅｑ．）中の７．８２ｍｇ／ｍＬの無関係なｈＩｇＧ１を、ダルベッコＰＢＳ、ｐＨ７．２、５ｍＭ ＥＤＴＡ（５５２μＬ）で希釈した。エンドトキシンを含まない水中のＴＣＥＰの５ｍＭ溶液（２５．１μＬ；１２６ｎｍｏｌ；２．３ｅｑ．）を、希釈した無関係なｈＩｇＧ１溶液に加えた。還元は、５．０ｍｇ／ｍＬの最終抗体濃度を用いて４０℃で１時間進行させた。
４０℃で１時間後、還元混合物を、ダルベッコＰＢＳ、ｐＨ７．２、５ｍＭ ＥＤＴＡ（６８．４μＬ）で希釈し、２２℃に冷却した。１：１ ＭｅＣＮ／水中のＳＮ－３８試薬（１１）の１７．９０ｍｇ／ｍＬ（１．６４ｍＭ）溶液を、１０．０ｍｇ（９１９ｎｍｏｌ）のＳＮ－３８試薬（１１）（ＭＷ＝１０８８７ｇ．ｍｏｌ－１）を５５９μＬの、ＭｅＣＮ／水の１：１混合物中に溶解することにより調製した。１：１ ＭｅＣＮ／水中のＳＮ－３８試薬（１１）溶液（３３２μＬ；５．９４ｍｇ；５４６ｎｍｏｌ；１０．０ｅｑ．）を、還元された無関係なｈＩｇＧ１溶液に加え、５％ＭｅＣＮの最終濃度および４．０ｍｇ／ｍＬの最終抗体濃度をもたらした。結合反応は、２２℃で１時間進行させた。
２２℃で２時間後、反応混合物を、ＨｉＬｏａｄ１６／６００Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００ｐｇカラム上にロードした。溶出は、ＤＰＢＳ、ｐＨ７．５緩衝液、１０％ＩＰＡおよび１．０ｍＬ／分の一定流量を用いて行った。単量体純度＞９５％を有し、結合していない抗体を何ら有さない画分を、プールし、０．２２μｍの孔径のＰＶＤＦメンブレンフィルターを通して滅菌濾過した。最終結合体サンプル（７．１ｍｇ；１．８ｍＬ）を、得た。
ＳＮ－３８試薬（１１）ｈＩｇＧ１アイソタイプ対照ＡＤＣは、ＨＩＣ、ＳＥＣによって特徴付けし、ＵＶによって定量化し、エンドトキシンレベルを決定した（分析結果を、表６に示す）。
実施例１３：ＳＮ－３８ ＡＤＣを用いた細胞生存率アッセイ
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）発光生存率アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｓｏｕｔｈａｍｐｔｏｎ、ＵＫ）を使用して、細胞増殖に対するＳＮ－３８ ＡＤＣの阻害効果を測定した。細胞増殖または代謝活性におけるどの低下も、化合物の細胞毒性および／または細胞増殖抑制特性を示す。ＳＫ－ＢＲ－３細胞（ヒト乳房腺癌、ＡＴＣＣ ＨＴＢ－３０）は、２００Ｕ／ｍＬペニシリン、２００μｇ／ｍＬストレプトマイシンおよび２０％熱不活化ウシ胎児血清（Ｃｙｔｉｖａ Ｈｙｃｌｏｎｅ（商標）、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｌｏｕｇｈｂｏｒｏｕｇｈ、ＵＫ）を添加したＭｃＣｏｙｓ ５Ａ培地（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｌｏｕｇｈｂｏｒｏｕｇｈ、ＵＫ）中で培養した。ＳＫ－ＢＲ－３（ＨＥＲ２ Ｈｉｇｈ）細胞を、２０μＬの増殖培地中１．２５×１０３細胞の密度で３８４ウェルプレート中に播種した。３×３８４ウェルプレートを、インキュベーションの時点を可能にするために、各細胞株について調製した。これらを、次いで３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。２４時間後、増殖培地中の、２０μＬの、試験サンプルの２倍連続希釈液を加えた。
各サンプルを３連で加え、プレートを、次いで３７℃／５％ＣＯ２で９時間（限定暴露）または９６時間（連続暴露）インキュベートした。９時間後、限定暴露処理プレートをインキュベーターから取り出し、化合物を含有する培地を取り出した。細胞を増殖培地で２回洗浄し、４０μＬの増殖培地を、次いで各ウェルに加えた。プレートを、３７℃／５％ＣＯ２でさらなる９６時間インキュベートした。
生存率は、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）発光アッセイを使用して検出した。アッセイプレートを室温で２０分間平衡化した後、１ウェルあたり４０μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）試薬（サプライヤーの推奨に従って調製）を加えた。プレートを、次いで細胞溶解を支援するために３００ｒｐｍで３分間混合し、発光シグナルを安定化させるために室温でさらなる２０分間インキュベートした。発光は、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ ｉ３ｘプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｗｏｋｉｎｇｈａｍ、ＵＫ）を使用して、０．５秒／ウェルの既定の積分時間を用いて記録した。生存率データは、同じ手順を介して時点で収集した。
データを、次いでＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍバージョン８（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｌａ Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）上で４パラメーターの非線形回帰モデルを使用して分析した。生存率は、未処理細胞のパーセンテージとして表し、１００％生存率は、完全培地のみで処理した細胞を含有するウェルの平均発光に対応した。％生存率（Ｙ軸）をＭ単位の全試験化合物（Ｘ軸）に対してプロットし、ソフトウェアを使用して、全てのＡＤＣおよび遊離薬物についてＩＣ５０値を計算した。
細胞アッセイは、ＳＮ－３８試薬（１１）ＡＤＣ、ＳＮ－３８試薬（１３）ＡＤＣ、２つの対照ＡＤＣ－（ａ）ＤＡＲ ８ ＡＤＣでＣＬ２Ａ－ＳＮ－３８に結合したトラスツズマブ（トラスツズマブ－ＣＬ２Ａ－ＳＮ－３８と命名）、および（ｂ）ＳＮ－３８試薬（１１）を有するＩｇＧ１アイソタイプ対照ＡＤＣ（アイソタイプＡＤＣと命名）－並びにＳＮ－３８遊離薬物を含む。
ＡＤＣからのＳＮ－３８の自然放出のため、腫瘍細胞に対するＡＤＣおよび遊離ＳＮ－３８の細胞毒性効果は、限定（９時間）並びに連続曝露（９６時間）アッセイを使用して決定した。限定暴露アッセイ（細胞毒性化合物を、細胞との９時間インキュベーションに続いて取り出した）は全体的に、ＳＮ－３８試薬（１１）ＡＤＣおよびＳＮ－３８試薬（１３）ＡＤＣと比較して、ＡＤＣアイソタイプ対照で処理した培養においてより低いバックグラウンド細胞毒性を示した（表７）。さらに、限定暴露データは、ＳＮ－３８試薬（１１）ＡＤＣおよびＳＮ－３８試薬（１３）ＡＤＣが、トラスツズマブ－ＣＬ２Ａ－ＳＮ－３８と比較して、ＳＫ－ＢＲ－３細胞における細胞死を誘導することにおいてより強力であることを示す（表７）。
実施例１４：ＳＮ－３８ ＡＤＣの血清安定性
この研究の目的は、ＳＮ－３８試薬（１１）ＡＤＣおよびＳＮ－３８試薬（１３）ＡＤＣおよびＤＡＲ８でＣＬ２Ａ－ＳＮ－３８に結合した対照ＡＤＣトラスツズマブ（トラスツズマブ－ＣＬ２Ａ－ＳＮ－３８）の、３７℃での９６時間インキュベーションにわたるマウス血漿中の安定性をモニターすることであった。
ＡＤＣを、マウス血漿中にスパイクし、３７℃で９６時間にわたってインキュベートした。血漿インキュベーションを通したＤＡＲプロファイルにおける変化を評価するために、ＡＤＣを、アフィニティーキャプチャーを使用した血漿からの分離後に、ＨＩＣ－ＵＶ（２１４ｎｍ）によって分析した。
ＳＮ－３８試薬（１１）ＡＤＣおよびＳＮ－３８試薬（１３）ＡＤＣについては、対照ＡＤＣトラスツズマブ－ＣＬ２Ａ－ＳＮ－３８と比較して、より高い安定性が観察された。ＳＮ－３８試薬（１１）ＡＤＣおよびＳＮ－３８試薬（１３）ＡＤＣについては、９６時間後に平均ＤＡＲが約５０～５５％減少し、より高いＤＡＲの種における漸進的な減少およびより低いＤＡＲの種における増加が、後の時点で観察される。トラスツズマブ－ＣＬ２Ａ－ＳＮ－３８については、高いＤＡＲの種における大幅な減少がマウス血漿における４８時間のインキュベーション後に観察され、これは、４８時間後の高いＤＡＲの種の７０％を超える減少という、マウス血漿中のより低い安定性を示す。
実施例１５：ＭＭＡＥ ＡＤＣの血清安定性
この研究の目的は、ＭＭＡＥ ＡＤＣ（実施例３において調製）およびＭＣ－ＶＣ－ＰＡＢ－ＭＭＡＥ（トラスツズマブ－ＭＣ－ＶＣ－ＰＡＢ－ＭＭＡＥと命名）に結合した対照ＡＤＣトラスツズマブの、３７℃での９６時間インキュベーションにわたるマウス血漿中の安定性をモニターすることであった。
ＡＤＣを、マウス血清中にスパイクし、３７℃で９６時間にわたってインキュベートした。血清インキュベーションを通したＤＡＲプロファイルにおける変化を評価するために、ＡＤＣを、アフィニティーキャプチャーを使用した血清からの分離後に、ＨＩＣ－ＵＶ（２８０ｎｍ）によって分析した。
マウス血清中で９６時間インキュベートすると、９６時間で約４４％のＤＡＲ損失である対照ＡＤＣトラスツズマブ－ＭＣ－ＶＣ－ＰＡＢ－ＭＭＡＥと比較して、ＡＤＣについては、より高い安定性、９６時間にわたっての約１６％のＤＡＲ損失が、観察された。

Claims (25)

  1. （ｉ）抗体またはその抗原結合断片；
    （ｉｉ）式（Ｉ）：

    （式中：
    Ｘは、Ｏ、ＮＨ、ＮＲＡおよびＳから選択され；
    Ｙは、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝ＮＨ、Ｃ＝ＮＲＡおよびＣ＝Ｓから選択され；
    Ｒは、水素またはＣ１－２０ヒドロカルビルであり；
    ＲＡは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルであり；
    各Ｑは、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－、－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－および－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－から独立して選択され（ここで、Ｔ１は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から選択され、Ｔ２は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から選択される）；
    ｏは、０から１００の整数であり；
    ｓは、０から１５０の整数であり；
    ｘは、１から６の整数であり；
    各Ｚは、式（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）または（ｖ）：

    （式中、
    Ｚが式（ｉ）または（ｉｉ）の基であるとき：
    －ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｈがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり、
    各Ｌ１は、リンカー基であり；
    各Ｂは、生物活性部分であり；
    Ｚが式（ｉｉｉ）の基であるとき：
    －ＡＡ＝は、－ＡＡ＝Ｏがアミノ酸の側鎖を表すような三価の部分であり；
    各Ｌ２は、リンカー基であり；
    各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
    各Ｂは、生物活性部分であり；
    Ｚが式（ｉｖ）の基であるとき：
    －ＡＡ－は、－ＡＡ－ＣＨ＝ＣＨ２または－ＡＡ－Ｃ≡ＣＨがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
    各Ｌ３は、リンカー基であり；
    各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
    各Ｂは、生物活性部分であり；およびＺが式（ｖ）の基であるとき：
    －ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｎ３がアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
    各Ｌ３は、リンカー基であり；
    各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
    各Ｂは、生物活性部分である）の群から独立して選択される）の繰り返し単位を含むポリマー；並びに
    （ｉｉｉ）該抗体および該ポリマーの両方に共有結合しているポリマー－抗体リンカー
    を含む、抗体－薬物結合体。
  2. 式（ｉｉ）の基が式（ｖｉ）：

    の基であり、および／または式（ｉｉｉ）の基が式（ｖｉｉ）：

    の基であり、および／または式（ｉｖ）の基が式（ｖｉｉｉ）：

    の基であり、および／または式（ｖ）の基が式（ｉｘ）：

    の基である（ここで：
    －ＡＡ－、ＢおよびＲは、請求項１において定義されるとおりであり；
    各Ｌ４は、リンカー基であり；
    各Ｌ５は、リンカー基であり；
    各Ｌ６は、リンカー基であり；
    各Ａは、結合、アミノ酸、ペプチド、スルホネート、スルホンアミド、またはピロリン酸ジエステルから独立して選択され；
    各Ｘ’は、Ｏ、ＮＨ、ＮＲＡ’およびＳから独立して選択され；
    各Ｒ’は、独立して水素またはＣ１－２０ヒドロカルビルであり；
    各ＲＡ’は、独立してＣ１－２０ヒドロカルビルであり；
    各Ｑ’は、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ’－、－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ’Ｔ’２－および－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ’Ｔ’２－から独立して選択され（ここで、各Ｔ’１は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から独立して選択され、各Ｔ’２は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から独立して選択される）、描かれているＱ’部分の左側は、Ｙ’部分に共有結合しており、描かれているＱ’部分の右側は、Ｘ’部分に共有結合しており；
    各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
    各ｏ’は、独立して０から１００の整数であり；
    各ｓ’は、独立して０から１５０の整数であり；
    Ｑ’が－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ’Ｔ’２－および－Ｔ’１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ’Ｔ’２－であるとき、各Ｙ’は、Ｏ、ＮＨ、ＮＲＡ’およびＳから独立して選択され、Ｑ’が－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ’－であるとき、各Ｙ’は、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｏ－、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｓ－、－（Ｃ＝Ｏ）－ＮＨおよび－（Ｃ＝Ｏ）－ＮＲＡ’－から独立して選択される）、請求項１に記載の抗体－薬物結合体。
  3. （ａ）－ＡＡ－Ｈが、セリン、システイン、スレオニン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、チロシン、トリプトファン、ヒスチジン、オルニチン、ヒドロキシトリプトファン、ホモセリン、ホモシステイン、アロスレオニン、セレノシステイン、セレノホモシステイン、α－アミノグリシン、ジアミノ酢酸、２，３－ジアミノプロピオン酸およびα，γ－ジアミノ酪酸から選択されるアミノ酸の側鎖、好ましくはセリン、システイン、スレオニン、リジンおよびオルニチンから選択されるアミノ酸の側鎖、および最も好ましくはリジンの側鎖を表すか；または
    （ｂ）－ＡＡ＝Ｏが、アミノ－２－ケト－酪酸、４－アセチルフェニルアラニンおよびホルミルグリシンから選択されるアミノ酸の側鎖を表すか；
    （ｃ）－ＡＡ－Ｎ３が、アジドリジン、アジドオルニチン、アジドノルロイシン、アジドアラニン、アジドホモアラニン、４－アジドフェニルアラニンおよび４－アジドメチルフェニルアラニンから選択されるアミノ酸の側鎖を表すか；または
    （ｄ）－ＡＡ－ＣＨ＝ＣＨ２が、ホモアリルグリシンの側鎖を表すか；または
    （ｅ）－ＡＡ－Ｃ≡ＣＨが、４－エチニルフェニルアラニン、４－プロパルギルオキシフェニルアラニン、プロパルギルグリシン、４－（２－プロピニル）プロリン、２－アミノ－６－（｛［（１Ｒ，８Ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノン－４－イン－９－イルメトキシ］カルボニル｝アミノ）ヘキサン酸およびホモプロパルギルグリシンから選択されるアミノ酸の側鎖を表す、
    請求項１または請求項２に記載の抗体－薬物結合体。
  4. 式（ｉ）におけるＢ、式（ｉｉ）におけるＬ１および／または式（ｖｉ）におけるＬ４が、アミノ酸側鎖におけるヘテロ原子を通して部分ＡＡに共有結合している、請求項１から３のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  5. ポリマー－抗体リンカーが、式（Ｉ）における－ＮＲ－基または式（Ｉ）におけるＹ基の窒素原子を通してポリマーに共有結合している、請求項１から４のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  6. ポリマー－抗体リンカーが、マレイミド、モノブロモマレイミド、ビニルスルホン、ビス（スルホン）、アレンアミド、デヒドロアラニン、アルケン、パーフルオロ芳香族種、Ｊｕｌｉａ－Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ様であるスルホン試薬、Ｎ－ヒドロキシスクシンアミド－エステル活性化カルボキシレート種、アルデヒド、ケトン、ヒドロキシルアミン、アルキンおよびアジドから誘導される、請求項１から５のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  7. ＸがＯまたはＮＨであり、ＹがＣ＝Ｏである、請求項１から６のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  8. Ｚが式（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）または（ｉｘ）の基であり、Ｘ’がＯまたはＮＨであり、Ｙ’がＯまたはＮＨであり、好ましくはＸ’がＮＨであり、Ｙ’がＯである、請求項２から７のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  9. Ｑが－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－であり、好ましくはｓが１から１００である、請求項１から８のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  10. Ｑが－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２－であり、ｓが３、７、１１、２３または３５である、請求項９に記載の抗体－薬物結合体。
  11. Ｚが式（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）または（ｉｘ）の基であり、Ｑ’が－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－であり、好ましくはｓが１から１００である、請求項２から１０のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  12. Ｚが式（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）または（ｉｘ）の基であり、Ｑが－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＣＨ２ＣＨ２－であり、ｓが３、７、１１、２３または３５である、請求項１１に記載の抗体－薬物結合体。
  13. Ｚが式（ｖｉ）、（ｖｉｉ）、（ｖｉｉｉ）または（ｉｘ）の基であり、Ｒ’が水素およびＣ１－６アルキルから選択され、好ましくはＲ’が水素、メチル、エチルまたはｎ－プロピルである、請求項２から１２のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  14. 各Ｂ－ＨまたはＢ－ＯＨが、低分子薬物、ペプチド、タンパク質、ペプチド模倣物、抗体、抗原、ＤＮＡ、ｍＲＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ、低分子ヘアピンＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ＰＮＡ、フォルダマー、炭水化物、炭水化物誘導体、非リピンスキー分子、合成ペプチドおよび合成オリゴヌクレオチド、好ましくは低分子薬物から独立して選択されるように、各生物活性部分－Ｂが同一であるかまたは異なる、請求項１から１３のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  15. （ａ）Ｚが式（ｉｉ）の基であり、Ｌ１が式－Ｖ１－Ｌ’－Ｖ２－（式中：
    Ｖ１は、

    （式中、
    ●は、－ＡＡ－への結合点を示し；
    ●●は、－Ｌ’－への結合点を示し；
    Ｙ１は、Ｏ、ＳおよびＮＨから選択され、好ましくはＯであり；
    Ｙ２は、Ｏ、ＳおよびＮＨから選択され、好ましくはＯであり；
    ＲＡは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルであり；
    ｖは、１から１００、好ましくは１から１０の整数であり；
    破線は、任意に存在する結合を表す）から選択され；
    Ｌ’は、結合、Ｃ１－２０アルキレン、Ｃ１－２０アルケニレン、Ｃ１－２０アルキニレン、Ｃ６－１０アリーレン（例えばフェニレンまたはナフチレン）、Ｃ７－２０アラルキレン、Ｃ３－１０シクロアルキレン、Ｃ４－８ヘテロシクロアルキレン、Ｃ５－１０ヘテロアリーレン、Ｃ６－２０ヘテロアラルキレン、－（Ｏ－Ｋ）ｉ－、－（ＮＨ－Ｋ）ｉ－、－（ＮＲ’－Ｋ）ｉ－、１１６から２０００Ｄａの分子量を有するポリエステル、１１４から２０００Ｄａの分子量を有するポリアミド、および部分－Ｗ－（ここで、Ｈ－Ｗ－ＯＨは、アミノ酸または２から２０個の天然または合成アミノ酸サブユニットを含有するペプチドである）から選択され；
    Ｖ２は、－ＯＶ－、－ＮＨＶ－、－ＮＲＡＶ－、－ＳＶ－、－Ｓ－、－ＶＳ－、－ＯＶＳ－、－ＮＨＶＳ－、－ＮＲＡＶＳ－、－ＳＶＳ－、－Ｖ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－ＮＲＡ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｖ－（Ｃ＝ＮＨ）－、Ｖ－Ｏ（Ｃ＝ＮＨ）－、－Ｖ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）－、－Ｖ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＨ）－、－Ｖ－Ｓ（Ｃ＝ＮＨ）－、－Ｖ－（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－Ｖ－Ｏ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－Ｖ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－Ｖ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－Ｖ－Ｓ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＯＶ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＯＶ－（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＯＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＯＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＯＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＯＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＯＶ－（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＯＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＯＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＯＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＯＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＨＶ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨＶ－（Ｃ＝ＮＨ）－、ＮＨＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＨＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＨＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＨＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＨＶ－（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＨＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＨＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＨＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＨＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＲＡＶ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡＶ－（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＲＡＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＲＡＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＮＲＡＶ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＲＡＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＲＡＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＮＲＡＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＳＶ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－Ｓ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＳＶ－（Ｃ＝ＮＨ）－、ＳＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＳＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＳＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＳＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＨ）－、－ＳＶ－（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＳＶ－Ｏ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＳＶ－ＮＨ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＳＶ－ＮＲＡ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－ＳＶ－Ｓ（Ｃ＝ＮＲＡ）－、－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｏ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－Ｓ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＲＡ－Ｊ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、ポリエーテル、例えば７６から２０００Ｄａの分子量を有するポリ（アルキレングリコール）、７５から２０００Ｄａの分子量を有するポリアミン、１１６から２０００Ｄａの分子量を有するポリエステル、１１４から２０００Ｄａの分子量を有するポリアミド、および部分－Ｗ－（ここで、Ｈ－Ｗ－ＯＨは、アミノ酸または２から２０個の天然若しくは合成アミノ酸サブユニットを含有するペプチドである）から選択され；
    Ｖは、Ｃ１－２０アルキレン、Ｃ１－２０アルケニレン、Ｃ１－２０アルキニレン、Ｃ６－１０アリーレン（例えばフェニレンまたはナフチレン）、Ｃ７－２０アラルキレン、Ｃ３－１０シクロアルキレン、Ｃ４－８ヘテロシクロアルキレン、Ｃ５－１０ヘテロアリーレン、およびＣ６－２０ヘテロアラルキレンから選択され；
    Ｊは、糖置換基、および糖置換基に対してパラまたはオルトに、メチレン基または部分－（ＣＨ＝ＣＨ）ｋ－ＣＨ２－（ここで、ｋは、１から１０の整数であり、さらに該メチレン基または部分－（ＣＨ＝ＣＨ）ｋ－ＣＨ２－は、生物活性部分Ｂに近い－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－基に直接結合しており、フェニル環の炭素は、生物活性部分Ｂから遠位のリンカー基の残りに直接結合している）を有するフェニル基であり；
    各Ｋは、同一または異なって、Ｃ１－１０アルキレンを表し；
    ｉは、１から１００、好ましくは１から５０、より好ましくは２から２０の整数であり；
    ＲＡは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルである）のリンカー部分であり；
    好ましくは、Ｌ１が、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－Ｏ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－（Ｃ＝Ｏ）－Ｃ（Ｈ）＝Ｎ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－（Ｃ＝Ｏ）－ＣＨ２－ＮＨ－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－（Ｃ＝Ｏ）－ＣＨ２－ＮＨ－Ｏ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－および－（Ｃ＝Ｏ）－ＣＨ２－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－から選択される部分である）のリンカー部分であるか；または
    （ｂ）Ｚが式（ｖｉ）の基であり、Ｌ４が式（ｘ）または（ｘｉ）：

    （式中：
    ＊は、－ＡＡ－への結合点を示し；
    ＊＊は、－Ａ－Ｘ’－Ｑ’－Ｙ’Ｒ’への結合点を示し；
    ＊＊＊は、－Ｂへの結合点を示し；
    Ｖ１、Ｌ’およびＶ２は、上記（ａ）において定義されるとおりであり；
    Ｘ１は、Ｏ、Ｓ、およびＮＨから選択され；
    Ｘ２は、Ｏ、Ｓ、およびＮＨから選択され；
    Ｘ３は、Ｏ、Ｓ、およびＮＨから選択され；
    ＲＡは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルであり；
    ｍは、０から６の整数であり；
    ｐは、０から６の整数である）のリンカー部分である、
    請求項１から１４のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  16. （ａ）Ｚが式（ｉｉｉ）の基であり、Ｌ２が式

    （式中：
    Ｖ３は、
    （式中、●、●●、Ｙ２、ＲＡおよびｖおよび破線は、請求項１５において定義されるとおりである）から選択され；
    Ｌ’は、請求項１５において定義されるとおりであり；
    Ｖ２は、請求項１５において定義されるとおりであり；
    好ましくは、Ｌ２は、＝Ｎ－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、＝Ｎ－Ｏ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、＝Ｎ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨ－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－、－ＮＨ－Ｏ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－および－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ＝Ｏ）－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－ＰＡＢ－（Ｃ＝Ｏ）－から選択される部分である）のリンカー部分であるか；または
    （ｂ）Ｚが式（ｖｉｉ）の基であり、Ｌ５が式（ｘｉｉ）または（ｘｉｉｉ）：

    （式中、＊、＊＊、＊＊＊、Ｌ’、Ｖ２、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３ ＲＡ、ｍおよびｐは、請求項１５において定義されるとおりであり、Ｖ３は、上記（ａ）において定義されるとおりであり、破線は、存在し得るか存在しなくあり得る結合である）のリンカー部分である、
    請求項１から１４のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  17. （ａ）Ｚが式（ｉｖ）または（ｖ）の基であり、Ｌ３が式－Ｖ４－Ｌ’－Ｖ２－（式中：
    Ｖ４は、－（ＣＨ２）ｖ－（Ｃ＝Ｙ２）（式中、ｖおよびＹ２は、請求項１５において定義されるとおりである）であり；
    Ｌ’は、請求項１５において定義されるとおりであり；
    Ｖ２は、請求項１５において定義されるとおりである）のリンカー部分であるか；または
    （ｂ）Ｚが式（ｖｉｉｉ）または（ｉｘ）の基であり、Ｌ６が式（ｘｉｉ）または（ｘｉｉｉ）：

    （式中、＊、＊＊、＊＊＊、Ｌ’、Ｖ２、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、ＲＡ、ｍおよびｐは、請求項１５において定義されるとおりであり、Ｖ４は、上記（ａ）において定義されるとおりである）のリンカー部分である、
    請求項１から１４のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  18. Ｘ１がＮＨであり、Ｘ２がＯであり、Ｘ３がＯであり、好ましくはｍおよびｐの一方が２または３のいずれかであり、他方が０である、請求項１５から１７のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  19. 式（ＩＩＩ）または（ＩＶ）：

    （式中：
    （Ｉ）は、前述の請求項のいずれかにおいて定義される式（Ｉ）の繰り返し単位であり；
    Ａｂは、抗体またはその抗原結合断片であり；
    Ｌは、請求項１、７または８のいずれか一項において定義されるポリマー－抗体リンカーであり；
    Ｒ”は、ＯＨ、ＯＲＡ、ＳＨ、ＳＲＡ、ＮＨ２、ＮＨＲＡおよびＮＲＡ ２から選択され；
    Ｅは、ＨおよびＲＡから選択され；
    ＲＡは、請求項１において定義されるとおりであり；
    ｚは、１から５０の整数である）を有する、請求項１から１８のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体。
  20. 請求項１から１９のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体および薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
  21. それを必要とする患者における疾患または状態の治療における使用のための、請求項１から１９のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体であって、好ましくは該疾患が、炎症性疾患（例えば炎症性腸疾患、関節リウマチおよびアテローム性動脈硬化症）、代謝障害（例えば糖尿病、インスリン抵抗性、肥満）、癌、細菌感染症（例えば結核、肺炎、心内膜炎、敗血症、サルモネラ症、腸チフス、嚢胞性線維症、慢性閉塞性肺疾患）、ウイルス感染症、心血管疾患、神経変性疾患、神経障害、行動および精神障害、血液疾患、染色体障害、先天性および遺伝性疾患、結合組織疾患、消化器疾患、耳、鼻、および喉の疾患、内分泌疾患、環境疾患、眼疾患、女性生殖器疾患、真菌感染症、心臓病、遺伝性癌症候群、免疫系疾患、腎臓泌尿器疾患、肺疾患、男性生殖器疾患、口腔疾患、筋骨格疾患、骨髄異形成症候群、神経系疾患、新生児スクリーニング、栄養疾患、寄生虫疾患、希少癌並びに皮膚疾患から選択される、抗体－薬物結合体。
  22. ヒト患者において請求項２１において定義される疾患または状態を治療する方法であって、前記方法が、それを必要とする患者への、請求項１から１９のいずれか一項に記載の少なくとも１つの抗体－薬物結合体の投与を含む、方法。
  23. 患者における請求項２１において定義される疾患または状態の治療のための薬剤の製造のための、請求項１から１９のいずれか一項に記載の抗体－薬物結合体の使用。
  24. （ｉ）標的化剤；
    （ｉｉ）式（Ｉ）：

    （式中：
    Ｘは、Ｏ、ＮＨ、ＮＲＡおよびＳから選択され、
    Ｙは、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝ＮＨ、Ｃ＝ＮＲＡおよびＣ＝Ｓから選択され；
    Ｒは、水素またはＣ１－２０ヒドロカルビルであり；
    ＲＡは、Ｃ１－２０ヒドロカルビルであり；
    各Ｑは、－ＣＨ２（ＮＭｅ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２）ｏ－、－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－および－Ｔ１Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓＴ２－から独立して選択され（ここで、Ｔ１は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から選択され、Ｔ２は、二価のメチレン、エチレン、プロピレンまたはブチレン基から選択される）；
    ｏは、０から１００の整数であり；
    ｓは、０から１５０の整数であり；
    ｘは、１から６の整数であり；
    各Ｚは、式（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）または（ｖ）：

    （式中、
    Ｚが式（ｉ）または（ｉｉ）の基であるとき：
    －ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｈがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
    各Ｌ１は、リンカー基であり；
    各Ｂは、生物活性部分であり；
    Ｚが式（ｉｉｉ）の基であるとき：
    －ＡＡ＝は、－ＡＡ＝Ｏがアミノ酸の側鎖を表すような三価の部分であり；
    各Ｌ２は、リンカー基であり；
    各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
    各Ｂは、生物活性部分であり；
    Ｚが式（ｉｖ）の基であるとき：
    －ＡＡ－は、－ＡＡ－ＣＨ＝ＣＨ２または－ＡＡ－Ｃ≡ＣＨがアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
    各Ｌ３は、リンカー基であり；
    各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
    各Ｂは、生物活性部分であり；および
    Ｚが式（ｖ）の基であるとき：
    －ＡＡ－は、－ＡＡ－Ｎ３がアミノ酸の側鎖を表すような二価の部分であり；
    各Ｌ３は、リンカー基であり；
    各破線は、存在するか存在しないかのいずれかである結合を表し；
    各Ｂは、生物活性部分である）の群から独立して選択される）の繰り返し単位を含むポリマー；並びに
    （ｉｉｉ）該標的化剤および該ポリマーの両方に共有結合しているポリマー－標的化剤リンカー
    を含む、標的化剤－薬物結合体。
  25. 標的化剤が、ペプチド、タンパク質、ペプチド模倣体、抗体、抗原、ＤＮＡ、ｍＲＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ、低分子ヘアピンＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ＰＮＡ、フォルダマー、炭水化物、炭水化物誘導体、非リピンスキー分子、合成ペプチドおよび合成オリゴヌクレオチドから選択される、請求項２４に記載の標的化剤－薬物結合体。
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