JP2024506682A - 抗ＴＣＲδ鎖可変部１抗体 - Google Patents

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Abstract

本発明は、高親和性の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体及びその抗体断片を提供する。本発明は、かかる抗体を含む組成物及び医薬組成物、ならびにかかる抗体を製造する方法も提供する。本発明は、抗体を含む治療使用及び医学的使用の方法も提供する。【選択図】なし

Description

本発明は、γδＴ細胞のＴ細胞受容体に特異的に結合する抗体ならびにその断片及びバリアントに関する。
がんに対するＴ細胞免疫療法への関心の高まりは、がん細胞を認識し、特にＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、及び他の受容体により発揮される抑制経路の臨床上もたらされる拮抗作用によって抑制解除された場合に宿主保護機能性を媒介するＣＤ８＋及びＣＤ４＋のαβＴ細胞のサブセットの明らかな能力に集中している。しかし、αβＴ細胞は、移植片対宿主病を引き起こし得るＭＨＣ拘束性である。
ガンマデルタＴ細胞（γδＴ細胞）は、異なる特徴的なγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を表面に発現するＴ細胞のサブセットである。このＴＣＲは１つのガンマ（γ）鎖と１つのデルタ（δ）鎖とで構成されており、鎖の各々は鎖の再構成を受けるが、αβＴ細胞と比較してＶ遺伝子の数が限られている。Ｖγをコードする主なＴＲＧＶ遺伝子セグメントは、ＴＲＧＶ２、ＴＲＧＶ３、ＴＲＧＶ４、ＴＲＧＶ５、ＴＲＧＶ８、ＴＲＧＶ９、及びＴＲＧＶ１１、ならびに非機能遺伝子ＴＲＧＶ１０、ＴＲＧＶ１１、ＴＲＧＶＡ、及びＴＲＧＶＢである。最も頻度の高いＴＲＤＶ遺伝子セグメントはＶδ１、Ｖδ２、及びＶδ３をコードし、更にＶδ及びＶαの両方の名称を有する幾つかのＶセグメントをコードする（Ａｄａｍｓ ｅｔ ａｌ．，２９６：３０－４０（２０１５）Ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．）。ヒトγδＴ細胞は、特定のγ型及びδ型が１つ以上の組織型の細胞において、排他的ではないが、広く見出されるため、ヒトγδＴ細胞のＴＣＲ鎖に基づいて大きく分けて分類することができる。例えば、ほとんどの血液常在性γδＴ細胞は、Ｖδ２ ＴＣＲ、一般的にはＶγ９Ｖδ２を発現する一方で、これは、組織常在性γδＴ細胞、例えば、皮膚におけるものにおいてはあまり一般的ではなく、組織常在性γδＴ細胞は、γ鎖と対合したＶδ１ ＴＣＲ、例えば、腸では多くの場合、Ｖγ４と対合したＶδ１ ＴＣＲをより頻繁に使用する。
γδＴ細胞は、免疫監視において重要な役割を果たし、ストレスマーカーのパターンにより悪性細胞または形質転換した細胞（がん細胞など）を認識し、次いで、強力かつ選択的な細胞傷害性を発揮する。従って、γδＴ細胞は、免疫応答のオーケストレーターとして作用し得る。これらの細胞の生体内原位置での調節により、他の免疫療法では困難であることが判明している低変異負荷の腫瘍であっても免疫原性の増加の可能性がもたらされる。腫瘍のγδＴ細胞による認識は、いずれかの単一の腫瘍抗原に依存するものではなく、従って、γδＴ細胞のモジュレーターは、血液系悪性腫瘍及び固形悪性腫瘍の両方が含まれる、広範囲の疾患適応症において可能性を有する。γδＴ細胞の認識メカニズムは、ＭＨＣ拘束性ではない。
ＷＯ２０１９１４７７３５の著者らは、一部のγδ細胞が腫瘍促進活性を有するか、またはαβＴ細胞により媒介される抗がん免疫応答を阻害すると仮説を立てている。同著者らは、γδＴ細胞が免疫抑制物質であると仮定し、従って、がんにおいては抗体を用いてこれらを除去、阻害、または遮断すべきであると提唱している。
しかしながら、抗γδ抗体がγδ細胞を遮断するか、または死滅させることにより、かかる細胞の機能を負に調節するという支配的な見解にもかかわらず、γδＴ細胞の浸潤と患者の予後及び／または生存との間に正相関が存在することが発見されている。
αβ ＴＣＲ受容体／リガンド相互作用と比較して、ｖδ１ ＴＣＲ受容体／リガンド相互作用に関する理解は限定的である。かかる理解がないために、これまでのｖδ１ ＴＣＲを認識する抗体は、主にこの相互作用を調べるための探索的ツールである。通常、かかるツールは、ＴＣＲ受容体／リガンド相互作用がｖδ１＋細胞の遮断、抑制、または除去をもたらすことを示唆する粗製の遮断抗体である。例えば、ツール抗体のＴＳ８．２及びＴＳ－１は、研究において抗γδ遮断抗体として用いられており、当該研究は、当該抗体がｖδ１細胞の細胞傷害性を低減させることを示唆している。これらの研究を他のものと合わせると、生体内原位置での疾患において、ｖδ１細胞の細胞傷害性を有利に調節するためにかかる抗ｖδ１抗体を使用することはあり得ず、従って、ｖδ１細胞傷害性を低減するのではなく増加させる抗体の必要性が示唆される。
γδＴ細胞を免疫療法に利用するために、細胞を生体内原位置で増殖させる手段またはそれらを採取し、それらを再注入する前にエクスビボで増殖させる手段のいずれかが必要とされる。後者のアプローチは、外来性サイトカインの添加を使用するものが以前に記載されている。例えば、ＷＯ２０１７／０７２３６７及びＷＯ２０１８／２１２８０８を参照のこと。薬理学的に修飾された形態のヒドロキシメチルブタ－２－エニルピロリン酸（ＨＭＢＰＰ）または臨床的に承認されたアミノビスホスホネートを使用する、患者自身のγδＴ細胞を増殖させる方法が記載されている。これらのアプローチにより、２５０人を超えるがん患者が、一見したところ安全に処置されたが、完全寛解の発生は極めて稀である。しかしながら、多数のγδＴ細胞を増殖させる能力が証明されている活性化剤が依然として必要とされている。
更に、生体内原位置でＶδ１＋細胞を優先的に標的とするか、またはそれと結合するか、またはそれを認識するか、またはそれを特異的に調節するか、またはその数を増加させることができる結合剤または活性化剤が、薬剤として非常に望ましい可能性がある。
しかしながら、Ｚｏｍｅｔａ（登録商標）（ゾレドロン酸）などのアミノビスホスホネートを含め、Ｖδ２＋細胞を調節する可能性のある薬物は存在するが、当該医薬品は、主に骨再吸収を遅延するように設計されている。また、上記Ｖδ２＋の調節にかかわらず、Ｖδ１＋細胞と結合するか、それを標的とするか、調節するか、活性化するか、またはその数を増加させるよう専用に設計された医薬品を開発する必要性が存在する。その理由は、例えば、Ｖδ２＋の調節を繰り返すことが、持続性かつ進行性の疲弊表現型をもたらし得るためである。
更に、Ｖδ１＋細胞が主に組織常在性であることを考慮すると、Ｖδ１＋を調節することができる理想的な薬剤は、より小さい望ましくない「オフターゲット」効果及び急速な腎臓クリアランスも示すであろう。典型的に、上記の望ましくない効果は、低分子化学物質を用いる場合に顕在化し得る。例えば、（骨に対する一次的な調節効果に対する二次的効果として）別個のクラスのＶδ２＋細胞を調節できることが示されている上述のアミノビスホスホネートは、腎機能の悪化及び腎不全の可能性として顕在化する腎毒性と関連する（例えば、Ｍａｒｋｏｗｉｔｚ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ．６４（１）：２８１－２８９）。欧州医薬品庁により列挙されたＺｏｍｅｔａの追加の望ましくない効果としては、貧血、過敏反応、高血圧、心房細動、筋痛、全身痛、倦怠感、血中尿素増加、嘔吐、関節腫脹、胸痛などが挙げられる。
ｖδ１＋細胞が見出される生体内原位置の環境も更に考慮しなければならない。例えば、非造血組織常在性γδＴ細胞は、組織から最初に分離されたときに強い増殖反応を示したが、これは自己由来の線維芽細胞と直接的に細胞接触していない場合のみであることが以前に示されている。非造血組織常在性Ｔ細胞（γδＴ細胞）が機能するためには非造血細胞（例えば、間質細胞、特に線維芽細胞）から分離されなければならないことが発見されている。その理由は、リンパ球と間質細胞または上皮細胞との直接接触が組織常在性γδＴ細胞の増殖を阻害すると思われるためである。生体内原位置の活性化前の細胞が更に抑制された状態で存在するという観察は、ｖδ１細胞がこれまで有望な治療標的とみなされなかった別の理由である。実際、本明細書に記載される発見があるまで、血液及び組織のｖδ１＋細胞が典型的に「休止」、「活性化前」、または「非活性化」状態とみなされる場合に、これらの細胞を生体内原位置で好適にかつ選択的に調節することができる方法は考案されていない。
様々なフォーマットの二重特異性抗体及び多重特異性抗体が、種々の治療用途のために開発されてきた。二重特異性抗体及び多重特異性抗体は、生物学的標的の種類及び作用様式に基づいて、重複するが別個のクラス分類され得る。例えば、かかる多重特異性抗体は、細胞傷害性エフェクター細胞リダイレクター（二重特異性Ｔ細胞動員抗体、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー、ＴＣＥ、またはＢｉＴＥとしても公知）及びデュアル免疫調節剤（ＤＩ）などのクラスに分類され得る。
ＴＣＥ（Ｔ細胞エンゲージャー）は、Ｔ細胞を腫瘍細胞に標的化することまたはその逆により、腫瘍に対する患者の免疫応答を増強することを意図しており、Ｔ細胞のＴ細胞受容体複合体の第１のエピトープ（通常はＣＤ３）、及びがん抗原または腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）などのがん関連抗原である第２のエピトープを標的とすることにより機能する。かかる抗体は、腫瘍細胞及びＴ細胞に共局在して、腫瘍細胞殺傷を促進する。ＢｉＴＥの例としては、ＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体であるブリナツモマブ、ＣＤ３×ＥｐＣＡＭ二重特異性抗体であるカツマクソマブ、及びＣＤ３×ＨＥＲ２二重特異性抗体であるエルツマキソマブが挙げられる。ＢｉＴＥなどのＴＣＥは、通常、ｓｃＦｖフォーマットで提供されるが、他のフォーマットも提供されている。例えば、ＢｉＫＥは、ＢｉＴＥと類似しているが、ＣＤ３ではなくＮＫ細胞上のＣＤ１６を標的とする。
Ｔ細胞受容体は、哺乳動物免疫系で最も複雑な受容体構造と説明されている。これは、幾つかのＣＤ３鎖に近接したＴ細胞受容体を含む膜貫通多タンパク質受容体複合体を構成する。例えば、哺乳動物において、典型的なかかる複合体は、Ｔ細胞受容体、ＣＤ３γ鎖、ＣＤ３δ鎖、及び２つのＣＤ３ε鎖を含む。これらの鎖は、結合したζ鎖（ゼータ鎖）のそばでＴ細胞受容体（ＴＣＲ）と会合し、次いで、Ｔリンパ球において典型的な活性化シグナルを生成する。しかしながら、代替的な複合体も報告されている。例えば、Ｔ細胞受容体及びζ鎖ホモ二量体を含むＴ細胞受容体複合体が記載されている。ＣＤ４及びＣＤ８などの追加の共受容体もＴＣＲ機能を補助し得る。
受容体複合体の組成にかかわらず、上記複合体が細胞表面の結合事象を細胞内でのリン酸化シグナル伝達カスケードに変換することが確立されている。これらのリン酸化事象は、結果的に、サイトカインならびにグランザイム及びパーフォリンなどのエフェクタータンパク質の発現増加を引き起こすＮＦＡＴ及びＮＦｋＢなどの転写因子の活性化をもたらす。
しかしながら、がんを処置するためのかかるＴＣＥの使用は、依然として説得力のある概念であるが、これまで、また早期臨床開発においてＴＣＥを進展させようと３０年間の協調努力がなされた後でさえ、かかる二重特異性抗体の多くは、低調な安全性、有効性、及び製造容易性プロファイルを示している。実際、２０２０年１月の時点で、承認後撤回されていないＴＣＥは依然としてブリナツモマブのみである。このＴＣＥ多重特異性抗体断片は、第１の結合アームでＴ細胞受容体複合体と結合し、第２の結合アームでＣＤ１９標的と結合する。
二重特異性Ｔ細胞動員抗体は、Ｌｅｊｅｕｎｅ ｅｔ ａｌ．，２０２０，Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１：７６２に記載されている。しかしながら、このカテゴリーにおける既存の二重特異性抗体、特にＣＤ３結合によりＴ細胞を動員するものは、シグナル伝達物質としてのＣＤ３抗原の効力及び患者のＴ細胞集団におけるその遍在性を考慮すると、重度の有害作用をもたらす顕著なオフターゲット効果を有する。よって、カツマクソマブ（現在は撤回されている）などのＣＤ３を標的とする二重特異性の例では、全身送達（例えば、静脈内）は現実的に不可能である。代わりに、手術中、腹膜内、腹腔内送達などのより制限された送達が、より頻繁に意図される。これにより、薬剤としての上記二重特異性薬の選択可能性及び使用が制限される。実際、エフェクター機能が減弱された抗ＣＤ３抗体（すなわち、ＣＤ３を標的とするが、二重特異性ではないＴ細胞複合体エンゲージャー）でさえ、関連する毒性により静脈内送達が困難となる。例えば、抗ＣＤ３抗体であるフォラルマブは、曝露を限定し、毒性を低減するために、現在は殆どの場合、（例えば、消化器疾患の処置における）経口送達が意図される。
早期臨床試験においてかかるＴＣＥで観察される現在の問題の多くは、用いられる高親和性Ｔ細胞複合体結合ドメインに起因すると言われることが多い。更に、その理由は、これらのＴＣＥの設計者が自然界でのＴＣＲ複合体の結合事象の親和性が低いことを十分に考慮せず、重度の用量制限毒性が妨げとなり、治療域が極めて狭くなったためであると提唱されている。これに関して、多数の初期ＴＣＥ薬開発者が、ＯＫＴ３、ＳＰ３４、及びＵＣＨＴ１に由来する３つの抗ＣＤ３ Ｔ細胞複合体結合ドメインに依存していたことが強調されている。そして、これらの元の結合ドメインは全て、自然界での結合事象と比べておよそ１，０００倍高い親和性に等しい、１桁から２桁台前半までのｎＭ範囲の比較的高い親和性で結合する。その結果、Ｔ細胞の活性化が、自然界でのＴ細胞受容体複合体の結合と比較して著しく異なる（かつ多くの場合、好ましくない）影響を受けると提唱されている。例えば、より高親和性のＯＫＴ３に基づくプラットフォームを使用するＴＣＥ開発者は、ＯＫＴ３がＩＬ－２の存在下でＴ細胞のアポトーシスを誘導するという事実に振り回され得る。
これらの理由により、より低親和性のＴ細胞複合体の結合が、Ｔ細胞と会合する二重特異性抗体治療薬の設計パラメータを決定するために考慮すべき重要事項であることが明らかになっている。
上記ＴＣＥを設計する際の別の問題は、Ｆｃ機能を減弱させる必要性である。実際、Ｆｃγ受容体（ＦｃγＲ）へのＦｃの結合は免疫エフェクター細胞の活性化を引き起こすため、ＴＣＥは、治療有効性を最大化し、オフターゲット毒性を最小限にするために、Ｆｃにより媒介されるエフェクター機能の完全な抑制を通常必要とする。実際のところ、現在の医療現場で用いられているＣＤ３を標的とする二重特異性抗体の大多数は、ＦｃγＲに対する結合活性が低減されたＦｃドメインを有するか、または意図的にＦｃ領域を含まない二重特異性断片である。一般的に、減弱されていないＦｃ機能を有するＴＣＥは、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）作用を誘発し、これにより、抗体により認識されるγδＴ細胞集団を枯渇させると予想される。しかし、繰り返しになるが、毒性／安全性の複雑さを回避するためにかかる機能を減弱することにより、例えば、ＣＤ１６＋もしくはＣＤ３２＋もしくはＣＤ６４＋免疫細胞を関与させることにより、または二重特異性の半減期を低減することによって（例えば、ＢＩＴＥなどのより小さな二重特異性抗体断片を用いる場合）、潜在的に重要な有効性の観点も減弱される可能性がある。ＦｃγＲ及びＴＣＥの相互作用を低減する（例えば、当該相互作用を低減するように設計されたＩｇＧフォーマットを使用する）方法は、Ｆｃにより媒介されるＴＣＥの固定化を低減し、固定化されたＴＣＥとの架橋によるＴＣＲクラスター化を低減すると予想される。
これらの問題の全てではないが一部に対処するために、Ｘｅｎｃｏｒ（Ｐａｓａｄｅｎａ、ＣＡ）、Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）、及びＧｅｎｅｎｔｅｃｈ（Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、ＣＡ）などの多数の企業が、ごく最近、それぞれのＴＣＥプラットフォームにおけるＴ細胞受容体複合体結合アームの結合親和性を低減することを報告している。しかしながら、上記結合の親和性の低減により、ＴＣＥの設計及び機能性に関して有効性の低下及び選択可能性の低下がもたらされ得る。例えば、かかるＴＣＥにおける結合ドメインの親和性は、インビボでの分布プロファイルの決定要因となることが現在実証されている。具体的には、ＴＣＥの分布は、その親和性が最も高い標的に偏ることが通常観察される。従って、Ｔ細胞複合体に対するＴＣＥ結合ドメインの親和性を低減することにより、かかるＴＣＥの有効性を引き起こすためにまさに必要とされる細胞であるＴ細胞から離れた分布に偏ることが一般的である。ＴＣＥの治療域が「極めて狭い」と言われているのは、部分的にはかかる理由のためである。
更に、特に固形腫瘍では、免疫調節治療薬に対する更なる大きなハードルが依然として存在する。例えば、現在の最先端のアプローチとしては、第１のドメインがＣＤ３に結合し、第２のドメインがＴＡＡを標的とする、ＣＤ３を標的とする二重特異性薬が挙げられる。しかしながら、多くの場合、これらに問題があることが証明されている。例えば、Ｍｉｄｄｅｌｂｕｒｇ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｏｖｅｒｃｏｍｉｎｇ Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ ｆｏｒ ＣＤ３－Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ Ｓｏｌｉｄ Ｔｕｍｏｒｓ．Ｃａｎｃｅｒｓ．２０２１；１３（２）：２８７は、以下を含む、固形腫瘍空間におけるＴ細胞と会合する多重特異性の免疫調節部分に対するこれらのハードルの一部を要約している。
ｉ．オンターゲット・オフ腫瘍毒性問題：例えば、著者は、固形腫瘍のＴＡＡは、多くの場合、健常な臓器の組織にも発現しており、このことが、ＣＤ３二重特異性薬を使用したマウス前臨床試験において示されたように、結果として免疫病理及び死亡を招く可能性のある臓器不全をもたらし得ることを強調している。
ｉｉ．腫瘍微小環境（ＴＭＥ）におけるエフェクター細胞の利用能：例えば、通常のＣＤ３＋「ナイーブ」Ｔ細胞は、樹状細胞により更に活性化されることなく主に血液系及びリンパ系に存在する。
ｉｉｉ．腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）がＣＤ３＋Ｔｒｅｇ細胞及び／または疲弊したＣＤ３＋細胞を含み得ることを考慮した腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の質：例えば、ＣＤ３を標的とする二重特異性薬は、活性化により誘発される細胞死によってＴＩＬアポトーシスを誘発し得、このことが強力な抗腫瘍応答を妨げる。
従って、少なくとも１つの結合ドメインがＴ細胞に結合し、少なくとも１つの第２の結合ドメインがＴＡＡを標的とする、改良された多重特異性免疫調節薬が必要とされている。
またＶδ１＋細胞を標的とし、感染症、自己免疫状態、及びがんを処置するために特別に設計された改良された薬剤も必要とされている。具体的には、Ｖδ１＋細胞に特異的に結合すること、Ｖδ１＋細胞を標的とすること、Ｖδ１＋細胞を特異的に活性化すること、Ｖδ１＋細胞の増殖及び／または細胞傷害活性を特異的に増強すること、またはＶδ１＋細胞の活性化を特異的に阻害することにより疾患の徴候及び症状を改善するために投与することができる薬剤が必要とされている。
本発明は、高親和性の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体及びその抗体断片を提供する。本発明の抗体は、良好な機能プロファイルを有する。特に、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇に焦点を置く従来技術の抗Ｖδ１抗体と異なり、本発明の抗体は、Ｖδ１Ｔ細胞の活性化に有用である。本発明の抗体は、それらが結合するＴ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし得るが、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇を引き起こさず、むしろＴ細胞を刺激するため、Ｔ細胞のこのコンパートメントの活性化による恩恵を受ける治療状況において有用であり得る。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、ＴＣＲの下方調節、活性化マーカー、例えば、ＣＤ２５、Ｋｉ６７、脱顆粒マーカーＣＤ１０７ａ、ＮＣＲ（自然細胞傷害性受容体）、及び／または４－１ＢＢの変化から明らかである。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、次に、ＩＮＦγ及びＴＮＦαなどの炎症性サイトカインの放出を引き起こして、免疫ライセンシングを促進する。驚くべきことに、ＴＲＤＶ１に対する適切に高い親和性を有する抗体は、Ｖδ１Ｔ細胞殺傷の増加を誘発し、（例えば）ＣＤ３を標的とする抗体と異なり、ＣＤ３による大規模な活性化に伴う副作用を伴うことなく高親和性抗体の供給が可能である。結果として、高親和性抗体は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）による強力な免疫賦活効果を誘発することができる。これは、Ｖδ１細胞の最小限の疲弊または殺傷で達成され得る。従って、本発明の抗体は、アゴニスト抗体とみなされ得る。
本発明の第１の態様によれば、
配列番号５５～７８のいずれかに対する少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３；及び／または
配列番号８２～１０５のいずれかに対する少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
または
配列番号１３３～１４３のいずれかに対する少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３；及び／または
配列番号１４７～１５７のいずれかに対する少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される。
本発明の第２の態様によれば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片であって、
ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１５８）の配列を含むＨＣＤＲ１配列；
配列番号５３の配列を含むＨＣＤＲ２配列；
Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６２）の配列を含むＨＣＤＲ３配列であって、配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
配列番号７９の配列を含むＬＣＤＲ１配列；
配列番号８０の配列を含むＬＣＤＲ２配列；及び
ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６６）の配列を含むＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含み、
Ｘ１～Ｘ１３の各々が天然に存在するアミノ酸である、当該抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片、
または
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片であって、
配列番号１３０の配列を含むＨＣＤＲ１配列；
配列番号１３１の配列を含むＨＣＤＲ２配列；
Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩ（配列番号１８３）の配列を含むＨＣＤＲ３配列であって、配列番号１３２ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
配列番号１４４の配列を含むＬＣＤＲ１配列；
配列番号１４５の配列を含むＬＣＤＲ２配列；及び
ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔ（配列番号１８６）の配列を含むＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含み、
Ｘ１～Ｘ９の各々が天然に存在するアミノ酸である、当該抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片が提供される。
本発明の第３の態様では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、当該抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の親和性成熟したバリアントであり、当該親抗Ｖδ１抗体もしくはその抗原結合断片は、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含むか、または当該親抗Ｖδ１抗体もしくはその抗原結合断片は、配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含む。任意により、任意の親和性成熟したバリアントにおけるＶＨ配列の最初の残基は、ＱまたはＥであり得る。任意により、任意の親和性成熟したバリアントにおけるＶＬ配列の最初の２残基は、元の配列と比較して任意の親和性成熟したバリアントにおいて存在しなくてもよい。
本発明の第４の態様では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、当該抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の親和性成熟したバリアントであり、当該親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、
ａ）配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｂ）配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｃ）配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｄ）配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｅ）配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｆ）配列番号２７８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｇ）配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｈ）配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｉ）配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
ｊ）配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
本発明の第５の態様では、κ軽鎖可変配列であって、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って当該κ軽鎖可変配列の７４位の残基がセリンではない、当該κ軽鎖可変配列を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される。幾つかの実施形態では、セリンは、非ヒト生殖細胞系列での７４位アミノ酸で置換されていてもよい。幾つかの実施形態では、置換は、例えば、セリンを非極性アミノ酸に置換するような、非保存的変異であり得る。幾つかの実施形態では、セリンは、ロイシンで置換されていてもよい。
本発明の第６の態様では、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖に特異的に結合し、本発明の第１～５の態様のいずれかの抗体またはその抗原結合断片とγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖への結合について競合する抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される。
本発明の第７の態様では、本発明の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片をコードするポリヌクレオチド配列が提供される。例えば、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１との少なくとも７０％の配列同一性を有する配列を含む抗Ｖδ１抗体またはその抗体結合断片をコードするポリヌクレオチド配列が提供される。
本発明の第８の態様では、本発明のポリヌクレオチド配列を含む発現ベクターが提供される。本発明のポリヌクレオチド配列または本発明の発現ベクターを含む宿主細胞も提供される。本発明の任意の抗体またはその抗原結合断片を産生させるための方法であって、本発明の宿主細胞を細胞培養培地で培養することを含む、当該方法も提供される。
本発明の更なる態様では、本発明の抗体またはその抗体結合断片を含む組成物が提供される。本発明の抗体またはその抗体結合断片、及び薬学的に許容される希釈剤または担体を含む医薬組成物も提供される。組成物及び医薬組成物は、１種以上の追加の治療効果のある薬剤を任意に更に含み得る。
本発明の更なる態様では、本発明の抗Ｖδ１抗体もしくは抗体結合断片、または本発明の医薬組成物を含み、使用説明書及び／または追加の治療効果のある薬剤を任意に含むキットが提供される。
本発明の更なる態様では、対象の疾患または障害を処置する方法であって、本発明の抗Ｖδ１抗体もしくは抗体結合断片、または本発明の医薬組成物を当該対象に投与することを含む、当該方法が提供される。対象における免疫応答を調節する方法であって、本発明の抗Ｖδ１抗体もしくは抗体結合断片、または本発明の医薬組成物を当該対象に投与することを含む、当該方法も提供される。対象への抗体の投与は、治療上有効量での投与であり得る。
本発明の更に他の態様では、抗体またはその抗原結合断片を変異させる方法であって、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位にセリンを有するκ軽鎖を含む抗体を提供すること、及び当該セリンを異なるアミノ酸に置換すること（例えば、変異させること）を含む、当該方法が提供される。幾つかの実施形態では、セリンは、非ヒト生殖細胞系列での７４位アミノ酸で置換されていてもよい。幾つかの実施形態では、置換は、例えば、セリンを非極性アミノ酸に置換するような、非保存的変異であり得る。幾つかの実施形態では、セリンは、ロイシンで置換されていてもよい。
本発明の更なる態様では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体バリアントまたはその抗原結合断片を調製する方法であって、
ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｂ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｃ）配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｄ）配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｅ）配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｆ）配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｇ）配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｈ）配列番号２７８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｉ）配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｊ）配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｋ）配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
ｌ）配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む親抗体を提供すること、
及び抗体を親和性成熟に供することであって、作製された抗体が、当該親抗体と比べてγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖に対するより強い高い親和性を有する、当該親和性成熟に供することを含む、当該方法が提供される。
本発明の更なる態様では、医薬組成物を調製する方法であって、本発明の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体バリアントまたは抗原結合断片を調製する方法に従って調製された抗体を提供すること、及び当該抗体を少なくとも１種以上の薬学的に許容される希釈剤または担体と共製剤化することを含む、当該方法が提供される。
本発明の更に他の態様では、医療に使用される本発明の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片、または本発明の医薬組成物、または本発明のキットが提供される。薬剤の製造における本発明の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片の使用も提供される。
直接コーティングされた抗原の抗Ｖδ１Ａｂ（ＲＥＡ１７３、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）によるＥＬＩＳＡ検出。Ｖδ１ドメインを含有する抗原でのみ検出が見られた。ロイシンジッパー（ＬＺ）フォーマットはＦｃフォーマットよりも強力であるように見受けられ、これはセルベースのフロー競合アッセイと一致している（データは示していない）。 ＤＶ１選択のためのポリクローナルファージＤＥＬＦＩＡデータ。（Ａ）ヘテロ二量体選択：ラウンド１及び２でヘテロ二量体ＬＺ ＴＣＲフォーマット、両ラウンドでヘテロ二量体ＬＺ ＴＣＲの選択解除。（Ｂ）ホモ二量体選択：ラウンド１はホモ二量体Ｆｃ融合ＴＣＲを使用して行い、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃを選択解除し、続いてラウンド２はヘテロ二量体ＬＺ ＴＣＲに対して行い、ヘテロ二量体ＬＺ ＴＣＲを選択解除した。各グラフには、異なるライブラリからの選択を表すために、各標的に対して２つのバーが含まれている。 ＩｇＧ捕捉：左）抗Ｌ１ ＩｇＧとＬ１との相互作用のセンサグラム、右）利用可能な場合の定常状態のフィット。実験はすべて室温にてＭＡＳＳ－２機器で行った。定常状態のフィッティングはＬａｎｇｍｕｉｒ １：１結合に従う。 クローン１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７、１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８、１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４、１２４５＿Ｐ０１＿Ｂ０７及び１２５１＿Ｐ０２＿Ｃ０５（Ａ）、またはクローン１１３９＿Ｐ０１＿Ｅ０４、１２４５＿Ｐ０２＿Ｆ０７、１２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０６ １２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０９、１１３８＿Ｐ０１＿Ｂ０９、１２５１＿Ｐ０２＿Ｇ１０及び１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８（Ｂ）についての（ＴＨＰ－１事前充填抗体を用いた）ＴＣＲ下方制御アッセイの結果。 クローン１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７、１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８、１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４、１２４５＿Ｐ０１＿Ｂ０７及び１２５１＿Ｐ０２＿Ｃ０５（Ａ）、またはクローン１１３９＿Ｐ０１＿Ｅ０４、１２４５＿Ｐ０２＿Ｆ０７、１２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０６、１２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０９、１１３８＿Ｐ０１＿Ｂ０９、及び１２５１＿Ｐ０２＿Ｇ１０（Ｂ）についてのＴ細胞脱顆粒アッセイの結果。 クローン１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７、１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８、１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４、１２４５＿Ｐ０１＿Ｂ０７及び１２５１＿Ｐ０２＿Ｃ０５（Ａ）、またはクローン１１３９＿Ｐ０１＿Ｅ０４、１２４５＿Ｐ０２＿Ｆ０７、１２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０６、１２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０９、１１３８＿Ｐ０１＿Ｂ０９、及び１２５１＿Ｐ０２＿Ｇ１０（Ｂ）についての傷害アッセイ（ＴＨＰ－１フローベースのアッセイ）の結果。 実施例１０の実験１中の総細胞数。様々な濃度の本明細書に記載される抗Ｖδ１抗体と共に試料を培養し、コンパレータ抗体または対照と共に培養した試料と比較した。グラフは、（Ａ）７日目、（Ｂ）１４日目、及び（Ｃ）１８日目の総細胞数を示す。 実施例１０の実験１中のＶδ１ Ｔ細胞の分析。グラフは、１８日目の試料中の（Ａ）Ｖδ１ Ｔ細胞のパーセンテージ、（Ｂ）Ｖδ１ Ｔ細胞数、及び（Ｃ）Ｖδ１変化倍率を示す。 実施例１０の実験２中の総細胞数。様々な濃度の本明細書に記載される抗Ｖδ１抗体と共に試料を培養し、コンパレータ抗体または対照と共に培養した試料と比較した。グラフは、（Ａ）７日目、（Ｂ）１１日目、（Ｃ）１４日目、及び（Ｄ）１７日目の総細胞数を示す。 実施例１０の実験２中の総細胞数。様々な濃度の本明細書に記載される抗Ｖδ１抗体と共に試料を培養し、コンパレータ抗体または対照と共に培養した試料と比較した。グラフは、（Ａ）７日目、（Ｂ）１１日目、（Ｃ）１４日目、及び（Ｄ）１７日目の総細胞数を示す。 実施例１０の実験２中の総細胞数。様々な濃度の本明細書に記載される抗Ｖδ１抗体と共に試料を培養し、コンパレータ抗体または対照と共に培養した試料と比較した。グラフは、（Ａ）７日目、（Ｂ）１１日目、（Ｃ）１４日目、及び（Ｄ）１７日目の総細胞数を示す。 実施例１０の実験２中の総細胞数。様々な濃度の本明細書に記載される抗Ｖδ１抗体と共に試料を培養し、コンパレータ抗体または対照と共に培養した試料と比較した。グラフは、（Ａ）７日目、（Ｂ）１１日目、（Ｃ）１４日目、及び（Ｄ）１７日目の総細胞数を示す。 実施例１０の実験２中のＶδ１ Ｔ細胞の分析。グラフは、１７日目の試料中の（Ａ）Ｖδ１ Ｔ細胞のパーセンテージ、（Ｂ）Ｖδ１ Ｔ細胞数、及び（Ｃ）Ｖδ１変化倍率を示す。 細胞組成分析。実験２の１７日目に試料（非Ｖδ１細胞を含む）に存在する細胞型を測定した。細胞を採取し、Ｖδ１、Ｖδ２及びαβＴＣＲの表面発現についてフローサイトメトリーで分析した。パーセンテージ値は表１２にも提示する。 ＳＹＴＯＸフロー傷害アッセイ結果。ＳＹＴＯＸフロー傷害アッセイを使用して細胞の機能性を試験し、（Ａ）１０：１のエフェクター対標的（Ｅ：Ｔ）比の細胞を使用した実験１の１４日目、ならびに（Ｂ）１：１及び１０：１のＥ：Ｔ比の細胞を使用した実験２の１７日目（凍結解凍後）について結果を提示している。 凍結解凍後の総細胞数。グラフは、凍結前にＢ０７、Ｃ０８、Ｅ０７、Ｇ０４またはＯＫＴ－３抗体と接触させた培養物についての凍結解凍後に細胞を７日間培養した後の総細胞数を示す。 細胞増大のモニタリング。凍結解凍後に培養した細胞について、総細胞数を４２日目までモニタリングした。 改変された抗Ｖδ１抗体の結合同等性研究 ヒト生殖系Ｖδ１抗原及びその多型変異体に対する抗Ｖδ１抗体結合同等性研究。 抗Ｖδ１抗体は、Ｖδ１＋細胞のサイトカイン分泌レベルの上昇を付与した。組織由来γδＴ細胞を示されている抗体と共にインキュベートした。（Ａ）観察されたＴＮＦ－アルファのレベル。（Ｂ）観察されたＩＦＮ－ガンマのレベル。 抗Ｖδ１抗体は、Ｖδ１＋細胞グランザイムＢレベル／活性の上昇を付与した。がん細胞を、１時間にわたり、組織由来γδＴ細胞と一定の１：２０のＴ：Ｅ比で、且つ示されている抗体と共培養した。結果は、共培養終了時のがん細胞で検出されたグランザイムＢの量を明らかにしている。 抗Ｖδ１抗体は、ヒト組織における免疫細胞の調節及び増殖を付与した。ヒト皮膚パンチ生検（５名の異なるドナー由来）を、示されている抗体と共に培養下で２１日間インキュベートした。（Ａ）生存可能な汎γδ＋細胞の数。（Ｂ）生存可能なＶδ１＋細胞の数。（Ｃ）生存可能な二重陽性Ｖδ１＋ＣＤ２５＋細胞のパーセンテージ。 抗Ｖδ１抗体は、ヒト腫瘍における腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の調節及び増殖を付与した。腎細胞癌腫（ＲＣＣ）＋／－体に関する研究（Ａ）ＴＩＬ Ｖδ１＋細胞の増加倍数。（Ｂ）ＴＩＬ Ｖδ１＋細胞の総数。（Ｃ）ゲーティング戦略の例（Ｄ）ＴＩＬ Ｖδ１＋細胞の細胞表面表現型プロファイルの比較。（Ｅ）ＴＩＬ Ｖδ１陰性ゲート画分の分析。 抗Ｖδ１抗体は、Ｖδ１＋媒介性細胞傷害性及び疾患細胞特異的細胞傷害性の増強を付与した。Ｖδ１＋エフェクター細胞、ＴＨＰ－１単球性がん細胞、及び非疾患の健康な初代単球の三種培養を含むモデル系における細胞傷害性／効力アッセイ。（Ａ）抗Ｖδ１ ｍＡｂまたは対照の存在下のγδＴ細胞を用いる三重共培養下のＴＨＰ－１及び単球細胞の数の数量化。（Ｂ）疾患細胞の特異的傷害と非疾患健康との間のウィンドウを強調する棒グラフ表現：左側の棒グラフ；非疾患細胞（初代ヒト単球）の傷害と対比した疾患細胞（ＴＨＰ－１）の傷害の増加倍率；右側の棒グラフ；同じデータだが、対照に対する傷害増強率として表されている。（Ｃ）ＴＨＰ－１標的細胞±ｍＡｂのＶδ１＋エフェクター細胞傷害効力の向上率をまとめた表形式の結果。（Ｄ）５０％のＴＨＰ－１細胞傷害を付与するのに必要なγδＴ細胞数として表されている、図（Ａ）から計算されたＥＣ５０値の表形式の結果。 抗Ｖδ１抗体は、Ｖδ１＋媒介性細胞傷害性及び疾患細胞特異的細胞傷害性の増強を付与した。Ｖδ１＋エフェクター細胞、ＴＨＰ－１単球性がん細胞、及び非疾患の健康な初代単球の三種培養を含むモデル系における細胞傷害性／効力アッセイ。（Ａ）抗Ｖδ１ ｍＡｂまたは対照の存在下のγδＴ細胞を用いる三重共培養下のＴＨＰ－１及び単球細胞の数の数量化。（Ｂ）疾患細胞の特異的傷害と非疾患健康との間のウィンドウを強調する棒グラフ表現：左側の棒グラフ；非疾患細胞（初代ヒト単球）の傷害と対比した疾患細胞（ＴＨＰ－１）の傷害の増加倍率；右側の棒グラフ；同じデータだが、対照に対する傷害増強率として表されている。（Ｃ）ＴＨＰ－１標的細胞±ｍＡｂのＶδ１＋エフェクター細胞傷害効力の向上率をまとめた表形式の結果。（Ｄ）５０％のＴＨＰ－１細胞傷害を付与するのに必要なγδＴ細胞数として表されている、図（Ａ）から計算されたＥＣ５０値の表形式の結果。 抗Ｖδ１抗体は、Ｖδ１＋媒介性細胞傷害性及び疾患細胞特異的細胞傷害性の増強を付与した。Ｖδ１＋エフェクター細胞、ＴＨＰ－１単球性がん細胞、及び非疾患の健康な初代単球の三種培養を含むモデル系における細胞傷害性／効力アッセイ。（Ａ）抗Ｖδ１ ｍＡｂまたは対照の存在下のγδＴ細胞を用いる三重共培養下のＴＨＰ－１及び単球細胞の数の数量化。（Ｂ）疾患細胞の特異的傷害と非疾患健康との間のウィンドウを強調する棒グラフ表現：左側の棒グラフ；非疾患細胞（初代ヒト単球）の傷害と対比した疾患細胞（ＴＨＰ－１）の傷害の増加倍率；右側の棒グラフ；同じデータだが、対照に対する傷害増強率として表されている。（Ｃ）ＴＨＰ－１標的細胞±ｍＡｂのＶδ１＋エフェクター細胞傷害効力の向上率をまとめた表形式の結果。（Ｄ）５０％のＴＨＰ－１細胞傷害を付与するのに必要なγδＴ細胞数として表されている、図（Ａ）から計算されたＥＣ５０値の表形式の結果。 抗Ｖδ１抗体は、Ｖδ１＋媒介性細胞傷害性及び疾患細胞特異的細胞傷害性の増強を付与した。Ｖδ１＋エフェクター細胞、ＴＨＰ－１単球性がん細胞、及び非疾患の健康な初代単球の三種培養を含むモデル系における細胞傷害性／効力アッセイ。（Ａ）抗Ｖδ１ ｍＡｂまたは対照の存在下のγδＴ細胞を用いる三重共培養下のＴＨＰ－１及び単球細胞の数の数量化。（Ｂ）疾患細胞の特異的傷害と非疾患健康との間のウィンドウを強調する棒グラフ表現：左側の棒グラフ；非疾患細胞（初代ヒト単球）の傷害と対比した疾患細胞（ＴＨＰ－１）の傷害の増加倍率；右側の棒グラフ；同じデータだが、対照に対する傷害増強率として表されている。（Ｃ）ＴＨＰ－１標的細胞±ｍＡｂのＶδ１＋エフェクター細胞傷害効力の向上率をまとめた表形式の結果。（Ｄ）５０％のＴＨＰ－１細胞傷害を付与するのに必要なγδＴ細胞数として表されている、図（Ａ）から計算されたＥＣ５０値の表形式の結果。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した。組織中心疾患関連抗原のターゲティング：（Ａ～Ｄ）抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなし（＋／－）での、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｅ～Ｈ）抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲセツキシマブ由来ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしでの、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｉ～Ｊ）データを表現する代替的なアプローチ：構成部分に対して相対的なＥＧＦＲ＋細胞に対するＶδ１＋エフェクター細胞傷害性に多特異性抗体が付与する向上のパーセンテージ。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した。組織中心疾患関連抗原のターゲティング：（Ａ～Ｄ）抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなし（＋／－）での、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｅ～Ｈ）抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲセツキシマブ由来ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしでの、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｉ～Ｊ）データを表現する代替的なアプローチ：構成部分に対して相対的なＥＧＦＲ＋細胞に対するＶδ１＋エフェクター細胞傷害性に多特異性抗体が付与する向上のパーセンテージ。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した。組織中心疾患関連抗原のターゲティング：（Ａ～Ｄ）抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなし（＋／－）での、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｅ～Ｈ）抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲセツキシマブ由来ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしでの、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｉ～Ｊ）データを表現する代替的なアプローチ：構成部分に対して相対的なＥＧＦＲ＋細胞に対するＶδ１＋エフェクター細胞傷害性に多特異性抗体が付与する向上のパーセンテージ。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した。組織中心疾患関連抗原のターゲティング：（Ａ～Ｄ）抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなし（＋／－）での、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｅ～Ｈ）抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲセツキシマブ由来ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしでの、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｉ～Ｊ）データを表現する代替的なアプローチ：構成部分に対して相対的なＥＧＦＲ＋細胞に対するＶδ１＋エフェクター細胞傷害性に多特異性抗体が付与する向上のパーセンテージ。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した。組織中心疾患関連抗原のターゲティング：（Ａ～Ｄ）抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなし（＋／－）での、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｅ～Ｈ）抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲセツキシマブ由来ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしでの、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｉ～Ｊ）データを表現する代替的なアプローチ：構成部分に対して相対的なＥＧＦＲ＋細胞に対するＶδ１＋エフェクター細胞傷害性に多特異性抗体が付与する向上のパーセンテージ。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した。組織中心疾患関連抗原のターゲティング：（Ａ～Ｄ）抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなし（＋／－）での、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｅ～Ｈ）抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲセツキシマブ由来ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしでの、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｉ～Ｊ）データを表現する代替的なアプローチ：構成部分に対して相対的なＥＧＦＲ＋細胞に対するＶδ１＋エフェクター細胞傷害性に多特異性抗体が付与する向上のパーセンテージ。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した。組織中心疾患関連抗原のターゲティング：（Ａ～Ｄ）抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなし（＋／－）での、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｅ～Ｈ）抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲセツキシマブ由来ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしでの、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｉ～Ｊ）データを表現する代替的なアプローチ：構成部分に対して相対的なＥＧＦＲ＋細胞に対するＶδ１＋エフェクター細胞傷害性に多特異性抗体が付与する向上のパーセンテージ。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した。組織中心疾患関連抗原のターゲティング：（Ａ～Ｄ）抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなし（＋／－）での、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｅ～Ｈ）抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲセツキシマブ由来ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしでの、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｉ～Ｊ）データを表現する代替的なアプローチ：構成部分に対して相対的なＥＧＦＲ＋細胞に対するＶδ１＋エフェクター細胞傷害性に多特異性抗体が付与する向上のパーセンテージ。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した。組織中心疾患関連抗原のターゲティング：（Ａ～Ｄ）抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなし（＋／－）での、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｅ～Ｈ）抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲセツキシマブ由来ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしでの、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｉ～Ｊ）データを表現する代替的なアプローチ：構成部分に対して相対的なＥＧＦＲ＋細胞に対するＶδ１＋エフェクター細胞傷害性に多特異性抗体が付与する向上のパーセンテージ。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した。組織中心疾患関連抗原のターゲティング：（Ａ～Ｄ）抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなし（＋／－）での、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｅ～Ｈ）抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲセツキシマブ由来ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしでの、Ｖδ１＋エフェクター細胞とＡ－４３１がん細胞との共培養の例。（Ｉ～Ｊ）データを表現する代替的なアプローチ：構成部分に対して相対的なＥＧＦＲ＋細胞に対するＶδ１＋エフェクター細胞傷害性に多特異性抗体が付与する向上のパーセンテージ。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋媒介性細胞傷害性及び疾患細胞特異的細胞傷害性の増強を付与した。造血疾患関連抗原のターゲティング。（Ａ）５０％のＲａｊｉ細胞傷害を誘導するのに必要なＥ：Ｔ比。（Ｂ）Ｖδ１－ＣＤ１９多特異性抗体の付加による向上のパーセンテージ。 多特異性抗体は、Ｖδ１＋媒介性細胞傷害性及び疾患細胞特異的細胞傷害性の増強を付与した。造血疾患関連抗原のターゲティング。（Ａ）５０％のＲａｊｉ細胞傷害を誘導するのに必要なＥ：Ｔ比。（Ｂ）Ｖδ１－ＣＤ１９多特異性抗体の付加による向上のパーセンテージ。 ファージ選択ラウンド。（Ａ）ＡＤＴ１－７ライブラリに対するファージ選択ラウンド１～３。（Ｂ）ＡＤＴ１－４ライブラリに対するファージ選択ラウンド１～３。（Ｃ）カニクイザル交差反応性バインダーを単離するための選択戦略によるＡＤＴ１－４ライブラリのファージ選択ラウンド１～３。 ファージ選択ラウンド。（Ａ）ＡＤＴ１－７ライブラリに対するファージ選択ラウンド１～３。（Ｂ）ＡＤＴ１－４ライブラリに対するファージ選択ラウンド１～３。（Ｃ）カニクイザル交差反応性バインダーを単離するための選択戦略によるＡＤＴ１－４ライブラリのファージ選択ラウンド１～３。 ファージ選択ラウンド。（Ａ）ＡＤＴ１－７ライブラリに対するファージ選択ラウンド１～３。（Ｂ）ＡＤＴ１－４ライブラリに対するファージ選択ラウンド１～３。（Ｃ）カニクイザル交差反応性バインダーを単離するための選択戦略によるＡＤＴ１－４ライブラリのファージ選択ラウンド１～３。 哺乳動物ディスプレイによる成熟抗体の選択の概略図である。（Ａ）ＡＤＴ１－７ライブラリのフローソーティングの概略図。（Ｂ）ＡＤＴ１－４ライブラリ１（ヒト）のフローソーティングの概略図。（Ｃ）ＡＤＴ１－４ライブラリ２（カニクイザル）のフローソーティングの概略図。 哺乳動物ディスプレイによる成熟抗体の選択の概略図である。（Ａ）ＡＤＴ１－７ライブラリのフローソーティングの概略図。（Ｂ）ＡＤＴ１－４ライブラリ１（ヒト）のフローソーティングの概略図。（Ｃ）ＡＤＴ１－４ライブラリ２（カニクイザル）のフローソーティングの概略図。 哺乳動物ディスプレイによる成熟抗体の選択の概略図である。（Ａ）ＡＤＴ１－７ライブラリのフローソーティングの概略図。（Ｂ）ＡＤＴ１－４ライブラリ１（ヒト）のフローソーティングの概略図。（Ｃ）ＡＤＴ１－４ライブラリ２（カニクイザル）のフローソーティングの概略図。 親和性に対するカッパ鎖Ｓ７４Ｌ変化の影響。（Ａ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）使用が示されたヒト解離オフレート（ＳＰＲ）対ヒト抗原結合（Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡ、０．４ｎＭヒト抗原）。結果は、ＳＰＲによる親和性の改善と、Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡによる抗原結合による親和性の改善との間の良好な適合を強調している。これらの結果はまた、可変ドメインＳ７４Ｌ改変によって付与される結合の改善を強調している。（Ｂ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）の使用が示された、カニクイザル解離オフレート（ＳＰＲ）対カニクイザル抗原結合（Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡ、１０ｎＭ Ｃｙｎｏ抗原）。（Ｃ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ヒト抗原解離オフレート（ＳＰＲ）改善対カニクイザル抗原解離オフレート（ＳＰＲ）＋ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）使用の間の相関（Ｄ）ＡＤＴ１－４系統親和性に対するＳ７４対Ｌ７４の効果のさらなる確認。低親和性親ＡＤＴ１－４のカッパ鎖第７４位の出発セリンをロイシンに変異させて、配列番号５０４のカッパ鎖を作成した。この改変軽鎖を出発ＡＤＴ１－４ ＶＨ（配列番号１）と対形成させ、示されるように新しい分子「ＡＤＴ１－４（Ｓ７４Ｌ）」を作製した。高親和性ＡＤＴ１－４－２のカッパ鎖第７４位の出発ロイシンをセリンに戻して、配列番号５０５のカッパ鎖を作製した。これをＡＤＴ１－４－２ ＶＨ（配列番号１５）と対形成させ、新しい分子「ＡＤＴ１－４－２（Ｌ７４Ｓ）」を作製した。これらの分子の親和性（それぞれ出発分子ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－４－２に対する）を、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって決定した。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトまたはカニクイザルＶδ１ヘテロ二量体を、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１２．５ｎＭ、６．２５ｎＭの濃度で、会合１８０秒、解離４８０秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。すべての実験は室温で行った：（Ｄｉ）ヒト及びカニクイザルＶδ１抗原に対して示される抗体の親和性を示す得られたＳＰＲトレースの結果（Ｄｉｉ）表にまとめた結果の概要。 親和性に対するカッパ鎖Ｓ７４Ｌ変化の影響。（Ａ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）使用が示されたヒト解離オフレート（ＳＰＲ）対ヒト抗原結合（Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡ、０．４ｎＭヒト抗原）。結果は、ＳＰＲによる親和性の改善と、Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡによる抗原結合による親和性の改善との間の良好な適合を強調している。これらの結果はまた、可変ドメインＳ７４Ｌ改変によって付与される結合の改善を強調している。（Ｂ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）の使用が示された、カニクイザル解離オフレート（ＳＰＲ）対カニクイザル抗原結合（Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡ、１０ｎＭ Ｃｙｎｏ抗原）。（Ｃ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ヒト抗原解離オフレート（ＳＰＲ）改善対カニクイザル抗原解離オフレート（ＳＰＲ）＋ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）使用の間の相関（Ｄ）ＡＤＴ１－４系統親和性に対するＳ７４対Ｌ７４の効果のさらなる確認。低親和性親ＡＤＴ１－４のカッパ鎖第７４位の出発セリンをロイシンに変異させて、配列番号５０４のカッパ鎖を作成した。この改変軽鎖を出発ＡＤＴ１－４ ＶＨ（配列番号１）と対形成させ、示されるように新しい分子「ＡＤＴ１－４（Ｓ７４Ｌ）」を作製した。高親和性ＡＤＴ１－４－２のカッパ鎖第７４位の出発ロイシンをセリンに戻して、配列番号５０５のカッパ鎖を作製した。これをＡＤＴ１－４－２ ＶＨ（配列番号１５）と対形成させ、新しい分子「ＡＤＴ１－４－２（Ｌ７４Ｓ）」を作製した。これらの分子の親和性（それぞれ出発分子ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－４－２に対する）を、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって決定した。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトまたはカニクイザルＶδ１ヘテロ二量体を、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１２．５ｎＭ、６．２５ｎＭの濃度で、会合１８０秒、解離４８０秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。すべての実験は室温で行った：（Ｄｉ）ヒト及びカニクイザルＶδ１抗原に対して示される抗体の親和性を示す得られたＳＰＲトレースの結果（Ｄｉｉ）表にまとめた結果の概要。 親和性に対するカッパ鎖Ｓ７４Ｌ変化の影響。（Ａ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）使用が示されたヒト解離オフレート（ＳＰＲ）対ヒト抗原結合（Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡ、０．４ｎＭヒト抗原）。結果は、ＳＰＲによる親和性の改善と、Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡによる抗原結合による親和性の改善との間の良好な適合を強調している。これらの結果はまた、可変ドメインＳ７４Ｌ改変によって付与される結合の改善を強調している。（Ｂ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）の使用が示された、カニクイザル解離オフレート（ＳＰＲ）対カニクイザル抗原結合（Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡ、１０ｎＭ Ｃｙｎｏ抗原）。（Ｃ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ヒト抗原解離オフレート（ＳＰＲ）改善対カニクイザル抗原解離オフレート（ＳＰＲ）＋ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）使用の間の相関（Ｄ）ＡＤＴ１－４系統親和性に対するＳ７４対Ｌ７４の効果のさらなる確認。低親和性親ＡＤＴ１－４のカッパ鎖第７４位の出発セリンをロイシンに変異させて、配列番号５０４のカッパ鎖を作成した。この改変軽鎖を出発ＡＤＴ１－４ ＶＨ（配列番号１）と対形成させ、示されるように新しい分子「ＡＤＴ１－４（Ｓ７４Ｌ）」を作製した。高親和性ＡＤＴ１－４－２のカッパ鎖第７４位の出発ロイシンをセリンに戻して、配列番号５０５のカッパ鎖を作製した。これをＡＤＴ１－４－２ ＶＨ（配列番号１５）と対形成させ、新しい分子「ＡＤＴ１－４－２（Ｌ７４Ｓ）」を作製した。これらの分子の親和性（それぞれ出発分子ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－４－２に対する）を、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって決定した。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトまたはカニクイザルＶδ１ヘテロ二量体を、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１２．５ｎＭ、６．２５ｎＭの濃度で、会合１８０秒、解離４８０秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。すべての実験は室温で行った：（Ｄｉ）ヒト及びカニクイザルＶδ１抗原に対して示される抗体の親和性を示す得られたＳＰＲトレースの結果（Ｄｉｉ）表にまとめた結果の概要。 親和性に対するカッパ鎖Ｓ７４Ｌ変化の影響。（Ａ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）使用が示されたヒト解離オフレート（ＳＰＲ）対ヒト抗原結合（Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡ、０．４ｎＭヒト抗原）。結果は、ＳＰＲによる親和性の改善と、Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡによる抗原結合による親和性の改善との間の良好な適合を強調している。これらの結果はまた、可変ドメインＳ７４Ｌ改変によって付与される結合の改善を強調している。（Ｂ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）の使用が示された、カニクイザル解離オフレート（ＳＰＲ）対カニクイザル抗原結合（Ｄｅｌｆｉａ ＥＬＩＳＡ、１０ｎＭ Ｃｙｎｏ抗原）。（Ｃ）ＡＤＴ１－４系統哺乳動物ディスプレイアウトプット：ヒト抗原解離オフレート（ＳＰＲ）改善対カニクイザル抗原解離オフレート（ＳＰＲ）＋ＬＣ ７４Ｓ（白丸）または７４Ｌ（黒丸）使用の間の相関（Ｄ）ＡＤＴ１－４系統親和性に対するＳ７４対Ｌ７４の効果のさらなる確認。低親和性親ＡＤＴ１－４のカッパ鎖第７４位の出発セリンをロイシンに変異させて、配列番号５０４のカッパ鎖を作成した。この改変軽鎖を出発ＡＤＴ１－４ ＶＨ（配列番号１）と対形成させ、示されるように新しい分子「ＡＤＴ１－４（Ｓ７４Ｌ）」を作製した。高親和性ＡＤＴ１－４－２のカッパ鎖第７４位の出発ロイシンをセリンに戻して、配列番号５０５のカッパ鎖を作製した。これをＡＤＴ１－４－２ ＶＨ（配列番号１５）と対形成させ、新しい分子「ＡＤＴ１－４－２（Ｌ７４Ｓ）」を作製した。これらの分子の親和性（それぞれ出発分子ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－４－２に対する）を、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって決定した。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトまたはカニクイザルＶδ１ヘテロ二量体を、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１２．５ｎＭ、６．２５ｎＭの濃度で、会合１８０秒、解離４８０秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。すべての実験は室温で行った：（Ｄｉ）ヒト及びカニクイザルＶδ１抗原に対して示される抗体の親和性を示す得られたＳＰＲトレースの結果（Ｄｉｉ）表にまとめた結果の概要。 ＣＤＲ３の使用及び交差共有。（Ａ）ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）系統における親和性成熟抗体間での例示的な重鎖及び軽鎖の交差共有（０．４ｎＭヒトＴＲＤＶ１ ＥＬＩＳＡはヒートマップで等級付けされた結果をもたらす）。この「ヒートマップ」は、ＡＤＴ１－４系統における異なる親和性成熟抗体間のＣＤＲ３配列の交差共有を実証し、特異的な重鎖対及び軽鎖対として提供される必要がない抗体配列を提供する親和性成熟プロセスを示す。結果は、親和性成熟抗体が軽鎖及び重鎖を交差共有することができ、異なるＬＣ／ＨＣの組合せが高ストリンジェンシー抗原結合研究において同等または改善された結果をもたらすことを強調している。ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）親クローンも図に含まれる（左下）。（Ｂ）ＡＤＴ１－４系統の最終選択：ＣＤＲ３の使用及び交差共有＋カニクイザル抗原結合「ヒートマップ」対出発親ＡＤＴ１－４親Ｇ０４ ｍＡｂ（左下）。（Ｃ）ＡＤＴ１－７系統最終選択：ＣＤＲ３使用及び交差共有＋ヒト抗原結合「ヒートマップ」対開始ＡＤＴ１－７親Ｅ０７ ｍＡｂ（左下）。 ＣＤＲ３の使用及び交差共有。（Ａ）ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）系統における親和性成熟抗体間での例示的な重鎖及び軽鎖の交差共有（０．４ｎＭヒトＴＲＤＶ１ ＥＬＩＳＡはヒートマップで等級付けされた結果をもたらす）。この「ヒートマップ」は、ＡＤＴ１－４系統における異なる親和性成熟抗体間のＣＤＲ３配列の交差共有を実証し、特異的な重鎖対及び軽鎖対として提供される必要がない抗体配列を提供する親和性成熟プロセスを示す。結果は、親和性成熟抗体が軽鎖及び重鎖を交差共有することができ、異なるＬＣ／ＨＣの組合せが高ストリンジェンシー抗原結合研究において同等または改善された結果をもたらすことを強調している。ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）親クローンも図に含まれる（左下）。（Ｂ）ＡＤＴ１－４系統の最終選択：ＣＤＲ３の使用及び交差共有＋カニクイザル抗原結合「ヒートマップ」対出発親ＡＤＴ１－４親Ｇ０４ ｍＡｂ（左下）。（Ｃ）ＡＤＴ１－７系統最終選択：ＣＤＲ３使用及び交差共有＋ヒト抗原結合「ヒートマップ」対開始ＡＤＴ１－７親Ｅ０７ ｍＡｂ（左下）。 ＣＤＲ３の使用及び交差共有。（Ａ）ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）系統における親和性成熟抗体間での例示的な重鎖及び軽鎖の交差共有（０．４ｎＭヒトＴＲＤＶ１ ＥＬＩＳＡはヒートマップで等級付けされた結果をもたらす）。この「ヒートマップ」は、ＡＤＴ１－４系統における異なる親和性成熟抗体間のＣＤＲ３配列の交差共有を実証し、特異的な重鎖対及び軽鎖対として提供される必要がない抗体配列を提供する親和性成熟プロセスを示す。結果は、親和性成熟抗体が軽鎖及び重鎖を交差共有することができ、異なるＬＣ／ＨＣの組合せが高ストリンジェンシー抗原結合研究において同等または改善された結果をもたらすことを強調している。ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）親クローンも図に含まれる（左下）。（Ｂ）ＡＤＴ１－４系統の最終選択：ＣＤＲ３の使用及び交差共有＋カニクイザル抗原結合「ヒートマップ」対出発親ＡＤＴ１－４親Ｇ０４ ｍＡｂ（左下）。（Ｃ）ＡＤＴ１－７系統最終選択：ＣＤＲ３使用及び交差共有＋ヒト抗原結合「ヒートマップ」対開始ＡＤＴ１－７親Ｅ０７ ｍＡｂ（左下）。 ＡＤＴ１－４親Ｇ０４と比較したＡＤＴ１－４系統に対する結合の増強倍数。（Ａ）組換えヒトＶδ１抗原結合の増強倍率。（Ｂ）組換えカニクイザルＶδ１抗原結合の増強倍数。（Ｃ）一次Ｖδ１ ＭＦＩの倍率増強。（Ｄ）ＰＥＥＲ Ｖδ１細胞株ＭＦＩの倍率増強。 ＡＤＴ１－７親Ｅ０７と比較したＡＤＴ１－７系統に対する結合の増強倍数。（Ａ）．組換えヒトＶδ１抗原結合の増強倍率。（Ｂ）．一次Ｖδ１ ＭＦＩの増強倍数。（Ｃ）．ＰＥＥＲ Ｖδ１細胞株ＭＦＩの倍数増加。 親クローンに対するヒト（及びカニクイザル）抗原結合の倍数改善。（Ａ）ヒト抗原への結合の倍数改善。親和性成熟クローン対親ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）、０．４ｎＭの組換えヒトＬ１抗原（ヒトＶδ１ ＴＣＲ抗原を含有する）のＤＥＬＦＩＡ ＥＬＩＳＡシグナル。（Ｂ）カニクイザル抗原（カニクイザル配列番号３０８（成熟、マイナスリーダー）を含むＤＶ１／ＧＶ７７）への結合の倍数改善。親和性成熟クローン対親ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）、０．４ｎＭの組換えヒトＬ１抗原のＤＥＬＦＩＡ ＥＬＩＳＡシグナル。（Ｃ）ヒト抗原への結合の倍数改善。親和性成熟クローン対親ＡＤＴ１－７（Ｅ０７）、０．４ｎＭの組換えヒトＬ１抗原のＤＥＬＦＩＡ ＥＬＩＳＡシグナル。 親クローンに対するヒト（及びカニクイザル）抗原結合の倍数改善。（Ａ）ヒト抗原への結合の倍数改善。親和性成熟クローン対親ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）、０．４ｎＭの組換えヒトＬ１抗原（ヒトＶδ１ ＴＣＲ抗原を含有する）のＤＥＬＦＩＡ ＥＬＩＳＡシグナル。（Ｂ）カニクイザル抗原（カニクイザル配列番号３０８（成熟、マイナスリーダー）を含むＤＶ１／ＧＶ７７）への結合の倍数改善。親和性成熟クローン対親ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）、０．４ｎＭの組換えヒトＬ１抗原のＤＥＬＦＩＡ ＥＬＩＳＡシグナル。（Ｃ）ヒト抗原への結合の倍数改善。親和性成熟クローン対親ＡＤＴ１－７（Ｅ０７）、０．４ｎＭの組換えヒトＬ１抗原のＤＥＬＦＩＡ ＥＬＩＳＡシグナル。 親クローンに対するヒト（及びカニクイザル）抗原結合の倍数改善。（Ａ）ヒト抗原への結合の倍数改善。親和性成熟クローン対親ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）、０．４ｎＭの組換えヒトＬ１抗原（ヒトＶδ１ ＴＣＲ抗原を含有する）のＤＥＬＦＩＡ ＥＬＩＳＡシグナル。（Ｂ）カニクイザル抗原（カニクイザル配列番号３０８（成熟、マイナスリーダー）を含むＤＶ１／ＧＶ７７）への結合の倍数改善。親和性成熟クローン対親ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）、０．４ｎＭの組換えヒトＬ１抗原のＤＥＬＦＩＡ ＥＬＩＳＡシグナル。（Ｃ）ヒト抗原への結合の倍数改善。親和性成熟クローン対親ＡＤＴ１－７（Ｅ０７）、０．４ｎＭの組換えヒトＬ１抗原のＤＥＬＦＩＡ ＥＬＩＳＡシグナル。 親クローンに対するヒト（及びカニクイザル）抗原のＫＤの倍数改善。（Ａ）ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）系統のヒト抗原ＫＤの倍数改善。（Ｂ）ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）系統のカニクイザル抗原ＫＤの倍数改善。（Ｃ）ＡＤＴ１－７（Ｅ０７）系統のヒト抗原ＫＤの倍数改善。 親クローンに対するヒト（及びカニクイザル）抗原のＫＤの倍数改善。（Ａ）ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）系統のヒト抗原ＫＤの倍数改善。（Ｂ）ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）系統のカニクイザル抗原ＫＤの倍数改善。（Ｃ）ＡＤＴ１－７（Ｅ０７）系統のヒト抗原ＫＤの倍数改善。 親クローンに対するヒト（及びカニクイザル）抗原のＫＤの倍数改善。（Ａ）ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）系統のヒト抗原ＫＤの倍数改善。（Ｂ）ＡＤＴ１－４（Ｇ０４）系統のカニクイザル抗原ＫＤの倍数改善。（Ｃ）ＡＤＴ１－７（Ｅ０７）系統のヒト抗原ＫＤの倍数改善。 ヒトＶδ１抗原に対する結合親和性分析（ＳＰＲによるＫＤ）。（Ａ）ＡＤＴ１－４系統の表面プラズモン共鳴。（Ｂ）ＡＤＴ１－７系統の表面プラズモン共鳴。（Ｃ）ＡＤＴ１－４系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｄ）ＡＤＴ１－７系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｅ）ＡＤＴ１－４系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。（Ｆ）ＡＤＴ１－７系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。 ヒトＶδ１抗原に対する結合親和性分析（ＳＰＲによるＫＤ）。（Ａ）ＡＤＴ１－４系統の表面プラズモン共鳴。（Ｂ）ＡＤＴ１－７系統の表面プラズモン共鳴。（Ｃ）ＡＤＴ１－４系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｄ）ＡＤＴ１－７系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｅ）ＡＤＴ１－４系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。（Ｆ）ＡＤＴ１－７系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。 ヒトＶδ１抗原に対する結合親和性分析（ＳＰＲによるＫＤ）。（Ａ）ＡＤＴ１－４系統の表面プラズモン共鳴。（Ｂ）ＡＤＴ１－７系統の表面プラズモン共鳴。（Ｃ）ＡＤＴ１－４系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｄ）ＡＤＴ１－７系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｅ）ＡＤＴ１－４系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。（Ｆ）ＡＤＴ１－７系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。 ヒトＶδ１抗原に対する結合親和性分析（ＳＰＲによるＫＤ）。（Ａ）ＡＤＴ１－４系統の表面プラズモン共鳴。（Ｂ）ＡＤＴ１－７系統の表面プラズモン共鳴。（Ｃ）ＡＤＴ１－４系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｄ）ＡＤＴ１－７系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｅ）ＡＤＴ１－４系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。（Ｆ）ＡＤＴ１－７系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。 ヒトＶδ１抗原に対する結合親和性分析（ＳＰＲによるＫＤ）。（Ａ）ＡＤＴ１－４系統の表面プラズモン共鳴。（Ｂ）ＡＤＴ１－７系統の表面プラズモン共鳴。（Ｃ）ＡＤＴ１－４系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｄ）ＡＤＴ１－７系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｅ）ＡＤＴ１－４系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。（Ｆ）ＡＤＴ１－７系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。 ヒトＶδ１抗原に対する結合親和性分析（ＳＰＲによるＫＤ）。（Ａ）ＡＤＴ１－４系統の表面プラズモン共鳴。（Ｂ）ＡＤＴ１－７系統の表面プラズモン共鳴。（Ｃ）ＡＤＴ１－４系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｄ）ＡＤＴ１－７系統についてのＫＤ値及び親クローンに対する倍数変化。（Ｅ）ＡＤＴ１－４系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。（Ｆ）ＡＤＴ１－７系統についての親クローンに対するＫＤの倍数変化。 カニクイザル抗原に対する結合親和性分析（ＳＰＲによるＫＤ）。（Ａ）カニクイザル抗原に対するＡＤＴ１－４系統の表面プラズモン共鳴。（Ｂ）カニクイザル抗原に対するＡＤＴ１－４系統のＫＤ値。 細胞表面Ｖδ１ ＴＣＲへの結合親和性（細胞表面Ｖδ１への結合についてのＥＣ５０）。（Ａ、Ｂ）Ｖδ１ ｍＡｂによる２つのγδ Ｔ細胞ドナー、ＡＴＳ００６（Ａ）及びＴＳ１６４（Ｂ）への結合レベル。（Ｃ）平均２人のドナーとして表される、Ｖδ１陽性γδＴ細胞に結合するＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンからの平均５０％結合値を表す棒グラフであり、これらの値は％改善と共に表に示される。（Ｄ）（Ａ）及び（Ｂ）にプロットされたＩＣ５０、ならびにＨＥＫ２９３Ａ、Ｒａｊｉ細胞及び初代血液単核細胞を含む様々な白血球サブセットを含むＶδ１陰性細胞種を要約する表。Ｖδ１陽性γδＴ細胞の場合、データは２人のドナーの平均として表される。 細胞表面Ｖδ１ ＴＣＲへの結合親和性（細胞表面Ｖδ１への結合についてのＥＣ５０）。（Ａ、Ｂ）Ｖδ１ ｍＡｂによる２つのγδ Ｔ細胞ドナー、ＡＴＳ００６（Ａ）及びＴＳ１６４（Ｂ）への結合レベル。（Ｃ）平均２人のドナーとして表される、Ｖδ１陽性γδＴ細胞に結合するＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンからの平均５０％結合値を表す棒グラフであり、これらの値は％改善と共に表に示される。（Ｄ）（Ａ）及び（Ｂ）にプロットされたＩＣ５０、ならびにＨＥＫ２９３Ａ、Ｒａｊｉ細胞及び初代血液単核細胞を含む様々な白血球サブセットを含むＶδ１陰性細胞種を要約する表。Ｖδ１陽性γδＴ細胞の場合、データは２人のドナーの平均として表される。 細胞表面Ｖδ１ ＴＣＲへの結合親和性（細胞表面Ｖδ１への結合についてのＥＣ５０）。（Ａ、Ｂ）Ｖδ１ ｍＡｂによる２つのγδ Ｔ細胞ドナー、ＡＴＳ００６（Ａ）及びＴＳ１６４（Ｂ）への結合レベル。（Ｃ）平均２人のドナーとして表される、Ｖδ１陽性γδＴ細胞に結合するＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンからの平均５０％結合値を表す棒グラフであり、これらの値は％改善と共に表に示される。（Ｄ）（Ａ）及び（Ｂ）にプロットされたＩＣ５０、ならびにＨＥＫ２９３Ａ、Ｒａｊｉ細胞及び初代血液単核細胞を含む様々な白血球サブセットを含むＶδ１陰性細胞種を要約する表。Ｖδ１陽性γδＴ細胞の場合、データは２人のドナーの平均として表される。 細胞表面Ｖδ１ ＴＣＲへの結合親和性（細胞表面Ｖδ１への結合についてのＥＣ５０）。（Ａ、Ｂ）Ｖδ１ ｍＡｂによる２つのγδ Ｔ細胞ドナー、ＡＴＳ００６（Ａ）及びＴＳ１６４（Ｂ）への結合レベル。（Ｃ）平均２人のドナーとして表される、Ｖδ１陽性γδＴ細胞に結合するＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンからの平均５０％結合値を表す棒グラフであり、これらの値は％改善と共に表に示される。（Ｄ）（Ａ）及び（Ｂ）にプロットされたＩＣ５０、ならびにＨＥＫ２９３Ａ、Ｒａｊｉ細胞及び初代血液単核細胞を含む様々な白血球サブセットを含むＶδ１陰性細胞種を要約する表。Ｖδ１陽性γδＴ細胞の場合、データは２人のドナーの平均として表される。 ＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ、Ｂ）ＡＤＴ１－４系統（Ａ）及びＡＤＴ１－７系統（Ｂ）。（Ｃ）平均ＴＣＲ下方制御－ＩＣ５０は、２人のＧＤ細胞ドナーから得られる。（Ｄ、Ｅ）親ＡＤＴ１－４クローン（Ｄ）及びＡＤＴ１－７クローン（Ｅ）から改善された倍数ＴＣＲ下方制御。（Ｆ）改善率をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。（Ｇ）倍数改善をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。 ＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ、Ｂ）ＡＤＴ１－４系統（Ａ）及びＡＤＴ１－７系統（Ｂ）。（Ｃ）平均ＴＣＲ下方制御－ＩＣ５０は、２人のＧＤ細胞ドナーから得られる。（Ｄ、Ｅ）親ＡＤＴ１－４クローン（Ｄ）及びＡＤＴ１－７クローン（Ｅ）から改善された倍数ＴＣＲ下方制御。（Ｆ）改善率をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。（Ｇ）倍数改善をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。 ＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ、Ｂ）ＡＤＴ１－４系統（Ａ）及びＡＤＴ１－７系統（Ｂ）。（Ｃ）平均ＴＣＲ下方制御－ＩＣ５０は、２人のＧＤ細胞ドナーから得られる。（Ｄ、Ｅ）親ＡＤＴ１－４クローン（Ｄ）及びＡＤＴ１－７クローン（Ｅ）から改善された倍数ＴＣＲ下方制御。（Ｆ）改善率をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。（Ｇ）倍数改善をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。 ＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ、Ｂ）ＡＤＴ１－４系統（Ａ）及びＡＤＴ１－７系統（Ｂ）。（Ｃ）平均ＴＣＲ下方制御－ＩＣ５０は、２人のＧＤ細胞ドナーから得られる。（Ｄ、Ｅ）親ＡＤＴ１－４クローン（Ｄ）及びＡＤＴ１－７クローン（Ｅ）から改善された倍数ＴＣＲ下方制御。（Ｆ）改善率をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。（Ｇ）倍数改善をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。 ＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ、Ｂ）ＡＤＴ１－４系統（Ａ）及びＡＤＴ１－７系統（Ｂ）。（Ｃ）平均ＴＣＲ下方制御－ＩＣ５０は、２人のＧＤ細胞ドナーから得られる。（Ｄ、Ｅ）親ＡＤＴ１－４クローン（Ｄ）及びＡＤＴ１－７クローン（Ｅ）から改善された倍数ＴＣＲ下方制御。（Ｆ）改善率をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。（Ｇ）倍数改善をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。 ＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ、Ｂ）ＡＤＴ１－４系統（Ａ）及びＡＤＴ１－７系統（Ｂ）。（Ｃ）平均ＴＣＲ下方制御－ＩＣ５０は、２人のＧＤ細胞ドナーから得られる。（Ｄ、Ｅ）親ＡＤＴ１－４クローン（Ｄ）及びＡＤＴ１－７クローン（Ｅ）から改善された倍数ＴＣＲ下方制御。（Ｆ）改善率をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。（Ｇ）倍数改善をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。 ＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ、Ｂ）ＡＤＴ１－４系統（Ａ）及びＡＤＴ１－７系統（Ｂ）。（Ｃ）平均ＴＣＲ下方制御－ＩＣ５０は、２人のＧＤ細胞ドナーから得られる。（Ｄ、Ｅ）親ＡＤＴ１－４クローン（Ｄ）及びＡＤＴ１－７クローン（Ｅ）から改善された倍数ＴＣＲ下方制御。（Ｆ）改善率をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。（Ｇ）倍数改善をＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算した（Ｃ）からの５０％効果値。 ＣＤ１０７ａ発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。 ＣＤ１０７ａ発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。 ＣＤ１０７ａ発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。 ＣＤ１０７ａ発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。 ＣＤ１０７ａ発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。 ＣＤ１０７ａ発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。 ＣＤ２５発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。 ＣＤ２５発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。 ＣＤ２５発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。 ＣＤ２５発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。 ＣＤ２５発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。 ＣＤ２５発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。（Ａ、Ｂ）細胞ＧＤ細胞単独（Ａ）またはＴＨＰ－１細胞とのＡＤＴ１－４－２クローン（Ｂ）。（Ｃ、Ｄ）細胞ＧＤ細胞単独（Ｃ）またはＴＨＰ－１細胞との（Ｄ）におけるＡＤＴ１－７－３クローン。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理、共培養及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。 カニクイザルＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ）カニクイザルγδ－Ｔ細胞上のＶＤ１に会合し、発現を低下させるＡＤＴ１－４－２及びＡＤＴ１－４の能力の比較。（Ｂ）ＡＤＴ１－４－２で処理した際のＶＤ１の細胞表面発現の割合。（Ｃ）平均及び標準偏差と組み合わせた異なるドナーの個々のＥＣ５０値。（Ｄ～Ｇ）カニクイザル（ｎ＝５）の全血試料を用いて実施した追加の試験。 カニクイザルＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ）カニクイザルγδ－Ｔ細胞上のＶＤ１に会合し、発現を低下させるＡＤＴ１－４－２及びＡＤＴ１－４の能力の比較。（Ｂ）ＡＤＴ１－４－２で処理した際のＶＤ１の細胞表面発現の割合。（Ｃ）平均及び標準偏差と組み合わせた異なるドナーの個々のＥＣ５０値。（Ｄ～Ｇ）カニクイザル（ｎ＝５）の全血試料を用いて実施した追加の試験。 カニクイザルＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ）カニクイザルγδ－Ｔ細胞上のＶＤ１に会合し、発現を低下させるＡＤＴ１－４－２及びＡＤＴ１－４の能力の比較。（Ｂ）ＡＤＴ１－４－２で処理した際のＶＤ１の細胞表面発現の割合。（Ｃ）平均及び標準偏差と組み合わせた異なるドナーの個々のＥＣ５０値。（Ｄ～Ｇ）カニクイザル（ｎ＝５）の全血試料を用いて実施した追加の試験。 カニクイザルＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ）カニクイザルγδ－Ｔ細胞上のＶＤ１に会合し、発現を低下させるＡＤＴ１－４－２及びＡＤＴ１－４の能力の比較。（Ｂ）ＡＤＴ１－４－２で処理した際のＶＤ１の細胞表面発現の割合。（Ｃ）平均及び標準偏差と組み合わせた異なるドナーの個々のＥＣ５０値。（Ｄ～Ｇ）カニクイザル（ｎ＝５）の全血試料を用いて実施した追加の試験。 カニクイザルＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ）カニクイザルγδ－Ｔ細胞上のＶＤ１に会合し、発現を低下させるＡＤＴ１－４－２及びＡＤＴ１－４の能力の比較。（Ｂ）ＡＤＴ１－４－２で処理した際のＶＤ１の細胞表面発現の割合。（Ｃ）平均及び標準偏差と組み合わせた異なるドナーの個々のＥＣ５０値。（Ｄ～Ｇ）カニクイザル（ｎ＝５）の全血試料を用いて実施した追加の試験。 カニクイザルＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ）カニクイザルγδ－Ｔ細胞上のＶＤ１に会合し、発現を低下させるＡＤＴ１－４－２及びＡＤＴ１－４の能力の比較。（Ｂ）ＡＤＴ１－４－２で処理した際のＶＤ１の細胞表面発現の割合。（Ｃ）平均及び標準偏差と組み合わせた異なるドナーの個々のＥＣ５０値。（Ｄ～Ｇ）カニクイザル（ｎ＝５）の全血試料を用いて実施した追加の試験。 カニクイザルＴＣＲ下方制御（可溶性抗体による）。（Ａ）カニクイザルγδ－Ｔ細胞上のＶＤ１に会合し、発現を低下させるＡＤＴ１－４－２及びＡＤＴ１－４の能力の比較。（Ｂ）ＡＤＴ１－４－２で処理した際のＶＤ１の細胞表面発現の割合。（Ｃ）平均及び標準偏差と組み合わせた異なるドナーの個々のＥＣ５０値。（Ｄ～Ｇ）カニクイザル（ｎ＝５）の全血試料を用いて実施した追加の試験。 Ｖδ１ ｍＡｂまたは対照の存在下でγδＴ細胞と２４時間共培養した後の生ＴＨＰ－１細胞数の定量化。（Ａ）ＡＤＴ１－４クローンについてのＴＨＰ－１細胞傷害アッセイ。（Ｂ）ＡＤＴ１－７クローンについてのＴＨＰ－１細胞傷害アッセイ。（Ｃ）ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンについてのＴＨＰ－１傷害アッセイにおける平均ＥＣ５０。（Ｄ）（Ｃ）においてプロットされたＥＣ５０をまとめた表。 Ｖδ１ ｍＡｂまたは対照の存在下でγδＴ細胞と２４時間共培養した後の生ＴＨＰ－１細胞数の定量化。（Ａ）ＡＤＴ１－４クローンについてのＴＨＰ－１細胞傷害アッセイ。（Ｂ）ＡＤＴ１－７クローンについてのＴＨＰ－１細胞傷害アッセイ。（Ｃ）ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンについてのＴＨＰ－１傷害アッセイにおける平均ＥＣ５０。（Ｄ）（Ｃ）においてプロットされたＥＣ５０をまとめた表。 Ｖδ１ ｍＡｂまたは対照の存在下でγδＴ細胞と２４時間共培養した後の生ＴＨＰ－１細胞数の定量化。（Ａ）ＡＤＴ１－４クローンについてのＴＨＰ－１細胞傷害アッセイ。（Ｂ）ＡＤＴ１－７クローンについてのＴＨＰ－１細胞傷害アッセイ。（Ｃ）ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンについてのＴＨＰ－１傷害アッセイにおける平均ＥＣ５０。（Ｄ）（Ｃ）においてプロットされたＥＣ５０をまとめた表。 Ｖδ１ ｍＡｂまたは対照の存在下でγδＴ細胞と２４時間共培養した後の生ＴＨＰ－１細胞数の定量化。（Ａ）ＡＤＴ１－４クローンについてのＴＨＰ－１細胞傷害アッセイ。（Ｂ）ＡＤＴ１－７クローンについてのＴＨＰ－１細胞傷害アッセイ。（Ｃ）ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンについてのＴＨＰ－１傷害アッセイにおける平均ＥＣ５０。（Ｄ）（Ｃ）においてプロットされたＥＣ５０をまとめた表。 抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）に対するＶδ１モノクローナル抗体。 補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）に対するＶδ１モノクローナル抗体。 クローンＡＤＴ１－４－２の健康な細胞温存。 原発腫瘍生検由来のＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の影響。（Ａ、Ｂ）２人の別々のドナーにおける４８（Ａ）または７２（Ｂ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各場合における標的会合が確認される。（Ｃ）ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞上のＣＤ２５及びＫｉ６７の両方の発現が増強されている。（Ｄ）５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下で７２時間、ＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３により刺激されたＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的な倍数増加を示す。（Ｅ）ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激は、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。（Ｆ、Ｇ）２人の個々のドナーにおける２４（Ｆ）または７２（Ｇ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合が確認される。（Ｈ）ＡＤＴ１－４－２で７２時間刺激した後のγδＴ細胞上のＫｉ６７の用量依存的な発現増強を示す。（Ｉ、Ｊ）酵素消化によって２人の個々のドナーから単離し、２４（Ｉ）または７２（Ｊ）時間２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下、６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激したＴＩＬによって産生されるＩＦＮ－γの倍数増加を示す。すべての場合において、対照抗ＲＳＶ及び親ＡＤＴ１－４の濃度は、研究で使用された最高濃度（すなわち、濃度である。Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊについて６．６６ｎＭの濃度、ならびにＢ及びＥについて６６．６ｎＭの濃度）と一致する。 原発腫瘍生検由来のＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の影響。（Ａ、Ｂ）２人の別々のドナーにおける４８（Ａ）または７２（Ｂ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各場合における標的会合が確認される。（Ｃ）ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞上のＣＤ２５及びＫｉ６７の両方の発現が増強されている。（Ｄ）５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下で７２時間、ＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３により刺激されたＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的な倍数増加を示す。（Ｅ）ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激は、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。（Ｆ、Ｇ）２人の個々のドナーにおける２４（Ｆ）または７２（Ｇ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合が確認される。（Ｈ）ＡＤＴ１－４－２で７２時間刺激した後のγδＴ細胞上のＫｉ６７の用量依存的な発現増強を示す。（Ｉ、Ｊ）酵素消化によって２人の個々のドナーから単離し、２４（Ｉ）または７２（Ｊ）時間２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下、６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激したＴＩＬによって産生されるＩＦＮ－γの倍数増加を示す。すべての場合において、対照抗ＲＳＶ及び親ＡＤＴ１－４の濃度は、研究で使用された最高濃度（すなわち、濃度である。Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊについて６．６６ｎＭの濃度、ならびにＢ及びＥについて６６．６ｎＭの濃度）と一致する。 原発腫瘍生検由来のＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の影響。（Ａ、Ｂ）２人の別々のドナーにおける４８（Ａ）または７２（Ｂ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各場合における標的会合が確認される。（Ｃ）ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞上のＣＤ２５及びＫｉ６７の両方の発現が増強されている。（Ｄ）５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下で７２時間、ＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３により刺激されたＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的な倍数増加を示す。（Ｅ）ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激は、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。（Ｆ、Ｇ）２人の個々のドナーにおける２４（Ｆ）または７２（Ｇ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合が確認される。（Ｈ）ＡＤＴ１－４－２で７２時間刺激した後のγδＴ細胞上のＫｉ６７の用量依存的な発現増強を示す。（Ｉ、Ｊ）酵素消化によって２人の個々のドナーから単離し、２４（Ｉ）または７２（Ｊ）時間２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下、６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激したＴＩＬによって産生されるＩＦＮ－γの倍数増加を示す。すべての場合において、対照抗ＲＳＶ及び親ＡＤＴ１－４の濃度は、研究で使用された最高濃度（すなわち、濃度である。Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊについて６．６６ｎＭの濃度、ならびにＢ及びＥについて６６．６ｎＭの濃度）と一致する。 原発腫瘍生検由来のＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の影響。（Ａ、Ｂ）２人の別々のドナーにおける４８（Ａ）または７２（Ｂ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各場合における標的会合が確認される。（Ｃ）ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞上のＣＤ２５及びＫｉ６７の両方の発現が増強されている。（Ｄ）５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下で７２時間、ＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３により刺激されたＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的な倍数増加を示す。（Ｅ）ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激は、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。（Ｆ、Ｇ）２人の個々のドナーにおける２４（Ｆ）または７２（Ｇ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合が確認される。（Ｈ）ＡＤＴ１－４－２で７２時間刺激した後のγδＴ細胞上のＫｉ６７の用量依存的な発現増強を示す。（Ｉ、Ｊ）酵素消化によって２人の個々のドナーから単離し、２４（Ｉ）または７２（Ｊ）時間２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下、６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激したＴＩＬによって産生されるＩＦＮ－γの倍数増加を示す。すべての場合において、対照抗ＲＳＶ及び親ＡＤＴ１－４の濃度は、研究で使用された最高濃度（すなわち、濃度である。Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊについて６．６６ｎＭの濃度、ならびにＢ及びＥについて６６．６ｎＭの濃度）と一致する。 原発腫瘍生検由来のＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の影響。（Ａ、Ｂ）２人の別々のドナーにおける４８（Ａ）または７２（Ｂ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各場合における標的会合が確認される。（Ｃ）ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞上のＣＤ２５及びＫｉ６７の両方の発現が増強されている。（Ｄ）５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下で７２時間、ＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３により刺激されたＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的な倍数増加を示す。（Ｅ）ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激は、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。（Ｆ、Ｇ）２人の個々のドナーにおける２４（Ｆ）または７２（Ｇ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合が確認される。（Ｈ）ＡＤＴ１－４－２で７２時間刺激した後のγδＴ細胞上のＫｉ６７の用量依存的な発現増強を示す。（Ｉ、Ｊ）酵素消化によって２人の個々のドナーから単離し、２４（Ｉ）または７２（Ｊ）時間２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下、６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激したＴＩＬによって産生されるＩＦＮ－γの倍数増加を示す。すべての場合において、対照抗ＲＳＶ及び親ＡＤＴ１－４の濃度は、研究で使用された最高濃度（すなわち、濃度である。Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊについて６．６６ｎＭの濃度、ならびにＢ及びＥについて６６．６ｎＭの濃度）と一致する。 原発腫瘍生検由来のＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の影響。（Ａ、Ｂ）２人の別々のドナーにおける４８（Ａ）または７２（Ｂ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各場合における標的会合が確認される。（Ｃ）ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞上のＣＤ２５及びＫｉ６７の両方の発現が増強されている。（Ｄ）５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下で７２時間、ＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３により刺激されたＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的な倍数増加を示す。（Ｅ）ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激は、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。（Ｆ、Ｇ）２人の個々のドナーにおける２４（Ｆ）または７２（Ｇ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合が確認される。（Ｈ）ＡＤＴ１－４－２で７２時間刺激した後のγδＴ細胞上のＫｉ６７の用量依存的な発現増強を示す。（Ｉ、Ｊ）酵素消化によって２人の個々のドナーから単離し、２４（Ｉ）または７２（Ｊ）時間２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下、６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激したＴＩＬによって産生されるＩＦＮ－γの倍数増加を示す。すべての場合において、対照抗ＲＳＶ及び親ＡＤＴ１－４の濃度は、研究で使用された最高濃度（すなわち、濃度である。Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊについて６．６６ｎＭの濃度、ならびにＢ及びＥについて６６．６ｎＭの濃度）と一致する。 原発腫瘍生検由来のＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の影響。（Ａ、Ｂ）２人の別々のドナーにおける４８（Ａ）または７２（Ｂ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各場合における標的会合が確認される。（Ｃ）ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞上のＣＤ２５及びＫｉ６７の両方の発現が増強されている。（Ｄ）５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下で７２時間、ＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３により刺激されたＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的な倍数増加を示す。（Ｅ）ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激は、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。（Ｆ、Ｇ）２人の個々のドナーにおける２４（Ｆ）または７２（Ｇ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合が確認される。（Ｈ）ＡＤＴ１－４－２で７２時間刺激した後のγδＴ細胞上のＫｉ６７の用量依存的な発現増強を示す。（Ｉ、Ｊ）酵素消化によって２人の個々のドナーから単離し、２４（Ｉ）または７２（Ｊ）時間２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下、６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激したＴＩＬによって産生されるＩＦＮ－γの倍数増加を示す。すべての場合において、対照抗ＲＳＶ及び親ＡＤＴ１－４の濃度は、研究で使用された最高濃度（すなわち、濃度である。Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊについて６．６６ｎＭの濃度、ならびにＢ及びＥについて６６．６ｎＭの濃度）と一致する。 原発腫瘍生検由来のＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の影響。（Ａ、Ｂ）２人の別々のドナーにおける４８（Ａ）または７２（Ｂ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各場合における標的会合が確認される。（Ｃ）ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞上のＣＤ２５及びＫｉ６７の両方の発現が増強されている。（Ｄ）５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下で７２時間、ＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３により刺激されたＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的な倍数増加を示す。（Ｅ）ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激は、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。（Ｆ、Ｇ）２人の個々のドナーにおける２４（Ｆ）または７２（Ｇ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合が確認される。（Ｈ）ＡＤＴ１－４－２で７２時間刺激した後のγδＴ細胞上のＫｉ６７の用量依存的な発現増強を示す。（Ｉ、Ｊ）酵素消化によって２人の個々のドナーから単離し、２４（Ｉ）または７２（Ｊ）時間２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下、６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激したＴＩＬによって産生されるＩＦＮ－γの倍数増加を示す。すべての場合において、対照抗ＲＳＶ及び親ＡＤＴ１－４の濃度は、研究で使用された最高濃度（すなわち、濃度である。Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊについて６．６６ｎＭの濃度、ならびにＢ及びＥについて６６．６ｎＭの濃度）と一致する。 原発腫瘍生検由来のＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の影響。（Ａ、Ｂ）２人の別々のドナーにおける４８（Ａ）または７２（Ｂ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各場合における標的会合が確認される。（Ｃ）ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞上のＣＤ２５及びＫｉ６７の両方の発現が増強されている。（Ｄ）５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下で７２時間、ＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３により刺激されたＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的な倍数増加を示す。（Ｅ）ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激は、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。（Ｆ、Ｇ）２人の個々のドナーにおける２４（Ｆ）または７２（Ｇ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合が確認される。（Ｈ）ＡＤＴ１－４－２で７２時間刺激した後のγδＴ細胞上のＫｉ６７の用量依存的な発現増強を示す。（Ｉ、Ｊ）酵素消化によって２人の個々のドナーから単離し、２４（Ｉ）または７２（Ｊ）時間２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下、６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激したＴＩＬによって産生されるＩＦＮ－γの倍数増加を示す。すべての場合において、対照抗ＲＳＶ及び親ＡＤＴ１－４の濃度は、研究で使用された最高濃度（すなわち、濃度である。Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊについて６．６６ｎＭの濃度、ならびにＢ及びＥについて６６．６ｎＭの濃度）と一致する。 原発腫瘍生検由来のＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の影響。（Ａ、Ｂ）２人の別々のドナーにおける４８（Ａ）または７２（Ｂ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各場合における標的会合が確認される。（Ｃ）ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞上のＣＤ２５及びＫｉ６７の両方の発現が増強されている。（Ｄ）５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下で７２時間、ＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３により刺激されたＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的な倍数増加を示す。（Ｅ）ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激は、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。（Ｆ、Ｇ）２人の個々のドナーにおける２４（Ｆ）または７２（Ｇ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合が確認される。（Ｈ）ＡＤＴ１－４－２で７２時間刺激した後のγδＴ細胞上のＫｉ６７の用量依存的な発現増強を示す。（Ｉ、Ｊ）酵素消化によって２人の個々のドナーから単離し、２４（Ｉ）または７２（Ｊ）時間２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下、６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激したＴＩＬによって産生されるＩＦＮ－γの倍数増加を示す。すべての場合において、対照抗ＲＳＶ及び親ＡＤＴ１－４の濃度は、研究で使用された最高濃度（すなわち、濃度である。Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊについて６．６６ｎＭの濃度、ならびにＢ及びＥについて６６．６ｎＭの濃度）と一致する。 原発腫瘍生検からのＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の影響。（Ａ）ＡＤＴ１－４－２で１０日間刺激したγδＴ細胞におけるＣＤ２５及びＫｉ６７の発現増強を示す。（Ｂ）ＡＤＴ１－４－２で１０日間刺激した後のパーフォリン＋グランザイムＢ＋γδＴ細胞の実質的な増加を示す。（Ｃ）腫瘍浸潤Ｖδ１＋Ｔ細胞をＡＤＴ１－４－２で１０日間刺激した後のＣＤ８＋及びＣＤ８－αβＴ細胞の両方によるグランザイムＢ及びパーフォリンの発現のかなりの増強を示す。（Ｄ）ＡＤＴ１－４－２で刺激した後の肺腫瘍由来ＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の顕著な増加、ＩＬ－１７及びＩＬ－６産生の中程度の増加を示す。Ｉは、ＡＤＴ１－４－２で１０日間刺激した後のＴＩＬによるケモカインＣＣＬ２、ＣＣＬ４及びＣＸＣＬ１０の産生増強を実証する。すべての場合において、対照抗ＲＳＶ及び親ＡＤＴ１－４は、親和性成熟ＡＤＴ１－４－２と同じ濃度に一致した。 ＡＤＴ１－４系統クローン（軽鎖）の配列 ＡＤＴ１－４系統クローン（重鎖）の配列。 ＡＤＴ１－７系統クローン（軽鎖）の配列。 ＡＤＴ１－７系統クローン（重鎖）の配列。 抗Ｖδ１／ＣＤ１９二重特異性抗体は、親モノクローナルＶδ１ ｍＡｂに匹敵する、ヒトＶδ１及びカニクイザルＶδ１に対する高親和性結合を示す。ＡＤＴ１－４－２／ＣＤ１９二重特異性薬を用いて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析を行い、ヒトＶδ１及びＣＤ１９抗原への結合を評価した。二重特異性抗体はヒト及びカニクイザルの両方のＶδ１と結合し、両抗原に対する親和性の低減はごくわずかである。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。（Ａ）フローサイトメトリーによって決定された、癌性ＮＡＬＭ－６及びＲａｊｉならびに初代Ｂ細胞及びＶδ１γδＴ細胞上のＣＤ１９の発現。（Ｂ～Ｄ）ＮＡＬＭ－６細胞（Ｂ）、Ｒａｊｉ細胞（Ｃ）及びＢ細胞細胞傷害性（Ｄ）に対する親（ＡＤＴ１－４）及び親和性成熟（ＡＤＴ１－４－２）Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性の効果。１：１のＥ：Ｔ比のＶδ１γδＴ細胞の存在下で１２時間にわたって抗体を滴定した。生細胞のパーセントを高含有共焦点顕微鏡法によって計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。（Ｅ）（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）に示されるように、Ｖδ１二重特異性及び対照の存在下でのＮＡＬＭ－６、ＲａｊｉまたはＢ細胞のいずれかとのＶδ１γδＴ細胞の１２時間の共培養後の生細胞のパーセント数を表す棒グラフ。（Ｆ～Ｇ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｆ）及び健康なＢ細胞（Ｇ）の存在下のＶδ１ ＴＣＲ表面発現に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。（Ｈ）最高濃度（３μｇ／ｍｌ）での（Ｆ）及び（Ｇ）に示されるようなＴＣＲ下方制御の最大パーセントを表す棒グラフ。（Ｉ～Ｋ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｉ）及び健康なＢ細胞（Ｊ）の存在下のＶδ１細胞表面上のＣＤ１０７ａ上方制御に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。すべてのデータは平均±標準偏差を示し、ｎ＝３の代表である。すべてのアッセイでブリナツモマブ（ＣＤ３－ＣＤ１９二重特異性（ＢｉＴＥ））を対照として含めた。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。（Ａ）フローサイトメトリーによって決定された、癌性ＮＡＬＭ－６及びＲａｊｉならびに初代Ｂ細胞及びＶδ１γδＴ細胞上のＣＤ１９の発現。（Ｂ～Ｄ）ＮＡＬＭ－６細胞（Ｂ）、Ｒａｊｉ細胞（Ｃ）及びＢ細胞細胞傷害性（Ｄ）に対する親（ＡＤＴ１－４）及び親和性成熟（ＡＤＴ１－４－２）Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性の効果。１：１のＥ：Ｔ比のＶδ１γδＴ細胞の存在下で１２時間にわたって抗体を滴定した。生細胞のパーセントを高含有共焦点顕微鏡法によって計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。（Ｅ）（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）に示されるように、Ｖδ１二重特異性及び対照の存在下でのＮＡＬＭ－６、ＲａｊｉまたはＢ細胞のいずれかとのＶδ１γδＴ細胞の１２時間の共培養後の生細胞のパーセント数を表す棒グラフ。（Ｆ～Ｇ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｆ）及び健康なＢ細胞（Ｇ）の存在下のＶδ１ ＴＣＲ表面発現に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。（Ｈ）最高濃度（３μｇ／ｍｌ）での（Ｆ）及び（Ｇ）に示されるようなＴＣＲ下方制御の最大パーセントを表す棒グラフ。（Ｉ～Ｋ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｉ）及び健康なＢ細胞（Ｊ）の存在下のＶδ１細胞表面上のＣＤ１０７ａ上方制御に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。すべてのデータは平均±標準偏差を示し、ｎ＝３の代表である。すべてのアッセイでブリナツモマブ（ＣＤ３－ＣＤ１９二重特異性（ＢｉＴＥ））を対照として含めた。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。（Ａ）フローサイトメトリーによって決定された、癌性ＮＡＬＭ－６及びＲａｊｉならびに初代Ｂ細胞及びＶδ１γδＴ細胞上のＣＤ１９の発現。（Ｂ～Ｄ）ＮＡＬＭ－６細胞（Ｂ）、Ｒａｊｉ細胞（Ｃ）及びＢ細胞細胞傷害性（Ｄ）に対する親（ＡＤＴ１－４）及び親和性成熟（ＡＤＴ１－４－２）Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性の効果。１：１のＥ：Ｔ比のＶδ１γδＴ細胞の存在下で１２時間にわたって抗体を滴定した。生細胞のパーセントを高含有共焦点顕微鏡法によって計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。（Ｅ）（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）に示されるように、Ｖδ１二重特異性及び対照の存在下でのＮＡＬＭ－６、ＲａｊｉまたはＢ細胞のいずれかとのＶδ１γδＴ細胞の１２時間の共培養後の生細胞のパーセント数を表す棒グラフ。（Ｆ～Ｇ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｆ）及び健康なＢ細胞（Ｇ）の存在下のＶδ１ ＴＣＲ表面発現に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。（Ｈ）最高濃度（３μｇ／ｍｌ）での（Ｆ）及び（Ｇ）に示されるようなＴＣＲ下方制御の最大パーセントを表す棒グラフ。（Ｉ～Ｋ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｉ）及び健康なＢ細胞（Ｊ）の存在下のＶδ１細胞表面上のＣＤ１０７ａ上方制御に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。すべてのデータは平均±標準偏差を示し、ｎ＝３の代表である。すべてのアッセイでブリナツモマブ（ＣＤ３－ＣＤ１９二重特異性（ＢｉＴＥ））を対照として含めた。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。（Ａ）フローサイトメトリーによって決定された、癌性ＮＡＬＭ－６及びＲａｊｉならびに初代Ｂ細胞及びＶδ１γδＴ細胞上のＣＤ１９の発現。（Ｂ～Ｄ）ＮＡＬＭ－６細胞（Ｂ）、Ｒａｊｉ細胞（Ｃ）及びＢ細胞細胞傷害性（Ｄ）に対する親（ＡＤＴ１－４）及び親和性成熟（ＡＤＴ１－４－２）Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性の効果。１：１のＥ：Ｔ比のＶδ１γδＴ細胞の存在下で１２時間にわたって抗体を滴定した。生細胞のパーセントを高含有共焦点顕微鏡法によって計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。（Ｅ）（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）に示されるように、Ｖδ１二重特異性及び対照の存在下でのＮＡＬＭ－６、ＲａｊｉまたはＢ細胞のいずれかとのＶδ１γδＴ細胞の１２時間の共培養後の生細胞のパーセント数を表す棒グラフ。（Ｆ～Ｇ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｆ）及び健康なＢ細胞（Ｇ）の存在下のＶδ１ ＴＣＲ表面発現に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。（Ｈ）最高濃度（３μｇ／ｍｌ）での（Ｆ）及び（Ｇ）に示されるようなＴＣＲ下方制御の最大パーセントを表す棒グラフ。（Ｉ～Ｋ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｉ）及び健康なＢ細胞（Ｊ）の存在下のＶδ１細胞表面上のＣＤ１０７ａ上方制御に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。すべてのデータは平均±標準偏差を示し、ｎ＝３の代表である。すべてのアッセイでブリナツモマブ（ＣＤ３－ＣＤ１９二重特異性（ＢｉＴＥ））を対照として含めた。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。（Ａ）フローサイトメトリーによって決定された、癌性ＮＡＬＭ－６及びＲａｊｉならびに初代Ｂ細胞及びＶδ１γδＴ細胞上のＣＤ１９の発現。（Ｂ～Ｄ）ＮＡＬＭ－６細胞（Ｂ）、Ｒａｊｉ細胞（Ｃ）及びＢ細胞細胞傷害性（Ｄ）に対する親（ＡＤＴ１－４）及び親和性成熟（ＡＤＴ１－４－２）Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性の効果。１：１のＥ：Ｔ比のＶδ１γδＴ細胞の存在下で１２時間にわたって抗体を滴定した。生細胞のパーセントを高含有共焦点顕微鏡法によって計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。（Ｅ）（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）に示されるように、Ｖδ１二重特異性及び対照の存在下でのＮＡＬＭ－６、ＲａｊｉまたはＢ細胞のいずれかとのＶδ１γδＴ細胞の１２時間の共培養後の生細胞のパーセント数を表す棒グラフ。（Ｆ～Ｇ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｆ）及び健康なＢ細胞（Ｇ）の存在下のＶδ１ ＴＣＲ表面発現に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。（Ｈ）最高濃度（３μｇ／ｍｌ）での（Ｆ）及び（Ｇ）に示されるようなＴＣＲ下方制御の最大パーセントを表す棒グラフ。（Ｉ～Ｋ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｉ）及び健康なＢ細胞（Ｊ）の存在下のＶδ１細胞表面上のＣＤ１０７ａ上方制御に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。すべてのデータは平均±標準偏差を示し、ｎ＝３の代表である。すべてのアッセイでブリナツモマブ（ＣＤ３－ＣＤ１９二重特異性（ＢｉＴＥ））を対照として含めた。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。（Ａ）フローサイトメトリーによって決定された、癌性ＮＡＬＭ－６及びＲａｊｉならびに初代Ｂ細胞及びＶδ１γδＴ細胞上のＣＤ１９の発現。（Ｂ～Ｄ）ＮＡＬＭ－６細胞（Ｂ）、Ｒａｊｉ細胞（Ｃ）及びＢ細胞細胞傷害性（Ｄ）に対する親（ＡＤＴ１－４）及び親和性成熟（ＡＤＴ１－４－２）Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性の効果。１：１のＥ：Ｔ比のＶδ１γδＴ細胞の存在下で１２時間にわたって抗体を滴定した。生細胞のパーセントを高含有共焦点顕微鏡法によって計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。（Ｅ）（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）に示されるように、Ｖδ１二重特異性及び対照の存在下でのＮＡＬＭ－６、ＲａｊｉまたはＢ細胞のいずれかとのＶδ１γδＴ細胞の１２時間の共培養後の生細胞のパーセント数を表す棒グラフ。（Ｆ～Ｇ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｆ）及び健康なＢ細胞（Ｇ）の存在下のＶδ１ ＴＣＲ表面発現に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。（Ｈ）最高濃度（３μｇ／ｍｌ）での（Ｆ）及び（Ｇ）に示されるようなＴＣＲ下方制御の最大パーセントを表す棒グラフ。（Ｉ～Ｋ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｉ）及び健康なＢ細胞（Ｊ）の存在下のＶδ１細胞表面上のＣＤ１０７ａ上方制御に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。すべてのデータは平均±標準偏差を示し、ｎ＝３の代表である。すべてのアッセイでブリナツモマブ（ＣＤ３－ＣＤ１９二重特異性（ＢｉＴＥ））を対照として含めた。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。（Ａ）フローサイトメトリーによって決定された、癌性ＮＡＬＭ－６及びＲａｊｉならびに初代Ｂ細胞及びＶδ１γδＴ細胞上のＣＤ１９の発現。（Ｂ～Ｄ）ＮＡＬＭ－６細胞（Ｂ）、Ｒａｊｉ細胞（Ｃ）及びＢ細胞細胞傷害性（Ｄ）に対する親（ＡＤＴ１－４）及び親和性成熟（ＡＤＴ１－４－２）Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性の効果。１：１のＥ：Ｔ比のＶδ１γδＴ細胞の存在下で１２時間にわたって抗体を滴定した。生細胞のパーセントを高含有共焦点顕微鏡法によって計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。（Ｅ）（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）に示されるように、Ｖδ１二重特異性及び対照の存在下でのＮＡＬＭ－６、ＲａｊｉまたはＢ細胞のいずれかとのＶδ１γδＴ細胞の１２時間の共培養後の生細胞のパーセント数を表す棒グラフ。（Ｆ～Ｇ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｆ）及び健康なＢ細胞（Ｇ）の存在下のＶδ１ ＴＣＲ表面発現に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。（Ｈ）最高濃度（３μｇ／ｍｌ）での（Ｆ）及び（Ｇ）に示されるようなＴＣＲ下方制御の最大パーセントを表す棒グラフ。（Ｉ～Ｋ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｉ）及び健康なＢ細胞（Ｊ）の存在下のＶδ１細胞表面上のＣＤ１０７ａ上方制御に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。すべてのデータは平均±標準偏差を示し、ｎ＝３の代表である。すべてのアッセイでブリナツモマブ（ＣＤ３－ＣＤ１９二重特異性（ＢｉＴＥ））を対照として含めた。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。（Ａ）フローサイトメトリーによって決定された、癌性ＮＡＬＭ－６及びＲａｊｉならびに初代Ｂ細胞及びＶδ１γδＴ細胞上のＣＤ１９の発現。（Ｂ～Ｄ）ＮＡＬＭ－６細胞（Ｂ）、Ｒａｊｉ細胞（Ｃ）及びＢ細胞細胞傷害性（Ｄ）に対する親（ＡＤＴ１－４）及び親和性成熟（ＡＤＴ１－４－２）Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性の効果。１：１のＥ：Ｔ比のＶδ１γδＴ細胞の存在下で１２時間にわたって抗体を滴定した。生細胞のパーセントを高含有共焦点顕微鏡法によって計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。（Ｅ）（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）に示されるように、Ｖδ１二重特異性及び対照の存在下でのＮＡＬＭ－６、ＲａｊｉまたはＢ細胞のいずれかとのＶδ１γδＴ細胞の１２時間の共培養後の生細胞のパーセント数を表す棒グラフ。（Ｆ～Ｇ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｆ）及び健康なＢ細胞（Ｇ）の存在下のＶδ１ ＴＣＲ表面発現に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。（Ｈ）最高濃度（３μｇ／ｍｌ）での（Ｆ）及び（Ｇ）に示されるようなＴＣＲ下方制御の最大パーセントを表す棒グラフ。（Ｉ～Ｋ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｉ）及び健康なＢ細胞（Ｊ）の存在下のＶδ１細胞表面上のＣＤ１０７ａ上方制御に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。すべてのデータは平均±標準偏差を示し、ｎ＝３の代表である。すべてのアッセイでブリナツモマブ（ＣＤ３－ＣＤ１９二重特異性（ＢｉＴＥ））を対照として含めた。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。（Ａ）フローサイトメトリーによって決定された、癌性ＮＡＬＭ－６及びＲａｊｉならびに初代Ｂ細胞及びＶδ１γδＴ細胞上のＣＤ１９の発現。（Ｂ～Ｄ）ＮＡＬＭ－６細胞（Ｂ）、Ｒａｊｉ細胞（Ｃ）及びＢ細胞細胞傷害性（Ｄ）に対する親（ＡＤＴ１－４）及び親和性成熟（ＡＤＴ１－４－２）Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性の効果。１：１のＥ：Ｔ比のＶδ１γδＴ細胞の存在下で１２時間にわたって抗体を滴定した。生細胞のパーセントを高含有共焦点顕微鏡法によって計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。（Ｅ）（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）に示されるように、Ｖδ１二重特異性及び対照の存在下でのＮＡＬＭ－６、ＲａｊｉまたはＢ細胞のいずれかとのＶδ１γδＴ細胞の１２時間の共培養後の生細胞のパーセント数を表す棒グラフ。（Ｆ～Ｇ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｆ）及び健康なＢ細胞（Ｇ）の存在下のＶδ１ ＴＣＲ表面発現に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。（Ｈ）最高濃度（３μｇ／ｍｌ）での（Ｆ）及び（Ｇ）に示されるようなＴＣＲ下方制御の最大パーセントを表す棒グラフ。（Ｉ～Ｋ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｉ）及び健康なＢ細胞（Ｊ）の存在下のＶδ１細胞表面上のＣＤ１０７ａ上方制御に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。すべてのデータは平均±標準偏差を示し、ｎ＝３の代表である。すべてのアッセイでブリナツモマブ（ＣＤ３－ＣＤ１９二重特異性（ＢｉＴＥ））を対照として含めた。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。（Ａ）フローサイトメトリーによって決定された、癌性ＮＡＬＭ－６及びＲａｊｉならびに初代Ｂ細胞及びＶδ１γδＴ細胞上のＣＤ１９の発現。（Ｂ～Ｄ）ＮＡＬＭ－６細胞（Ｂ）、Ｒａｊｉ細胞（Ｃ）及びＢ細胞細胞傷害性（Ｄ）に対する親（ＡＤＴ１－４）及び親和性成熟（ＡＤＴ１－４－２）Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性の効果。１：１のＥ：Ｔ比のＶδ１γδＴ細胞の存在下で１２時間にわたって抗体を滴定した。生細胞のパーセントを高含有共焦点顕微鏡法によって計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。（Ｅ）（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）に示されるように、Ｖδ１二重特異性及び対照の存在下でのＮＡＬＭ－６、ＲａｊｉまたはＢ細胞のいずれかとのＶδ１γδＴ細胞の１２時間の共培養後の生細胞のパーセント数を表す棒グラフ。（Ｆ～Ｇ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｆ）及び健康なＢ細胞（Ｇ）の存在下のＶδ１ ＴＣＲ表面発現に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。（Ｈ）最高濃度（３μｇ／ｍｌ）での（Ｆ）及び（Ｇ）に示されるようなＴＣＲ下方制御の最大パーセントを表す棒グラフ。（Ｉ～Ｋ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｉ）及び健康なＢ細胞（Ｊ）の存在下のＶδ１細胞表面上のＣＤ１０７ａ上方制御に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。すべてのデータは平均±標準偏差を示し、ｎ＝３の代表である。すべてのアッセイでブリナツモマブ（ＣＤ３－ＣＤ１９二重特異性（ＢｉＴＥ））を対照として含めた。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。（Ａ）フローサイトメトリーによって決定された、癌性ＮＡＬＭ－６及びＲａｊｉならびに初代Ｂ細胞及びＶδ１γδＴ細胞上のＣＤ１９の発現。（Ｂ～Ｄ）ＮＡＬＭ－６細胞（Ｂ）、Ｒａｊｉ細胞（Ｃ）及びＢ細胞細胞傷害性（Ｄ）に対する親（ＡＤＴ１－４）及び親和性成熟（ＡＤＴ１－４－２）Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性の効果。１：１のＥ：Ｔ比のＶδ１γδＴ細胞の存在下で１２時間にわたって抗体を滴定した。生細胞のパーセントを高含有共焦点顕微鏡法によって計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。（Ｅ）（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）に示されるように、Ｖδ１二重特異性及び対照の存在下でのＮＡＬＭ－６、ＲａｊｉまたはＢ細胞のいずれかとのＶδ１γδＴ細胞の１２時間の共培養後の生細胞のパーセント数を表す棒グラフ。（Ｆ～Ｇ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｆ）及び健康なＢ細胞（Ｇ）の存在下のＶδ１ ＴＣＲ表面発現に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。（Ｈ）最高濃度（３μｇ／ｍｌ）での（Ｆ）及び（Ｇ）に示されるようなＴＣＲ下方制御の最大パーセントを表す棒グラフ。（Ｉ～Ｋ）４時間の共培養後にフローサイトメトリーによって決定される、ＮＡＬＭ－６標的細胞（Ｉ）及び健康なＢ細胞（Ｊ）の存在下のＶδ１細胞表面上のＣＤ１０７ａ上方制御に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性の影響。すべてのデータは平均±標準偏差を示し、ｎ＝３の代表である。すべてのアッセイでブリナツモマブ（ＣＤ３－ＣＤ１９二重特異性（ＢｉＴＥ））を対照として含めた。 二重特異性フォーマットの親和性成熟Ｖδ１クローンは、Ｈｅｒ２＋標的細胞に結合し、Ｖδ１γδＴ細胞への結合の増強、及びＨｅｒ２＋標的細胞の細胞傷害性の増強を示す。（Ａ）乳癌細胞株及びＶδ１γδＴ細胞上のＨｅｒ２及びＶδ１の細胞表面発現（Ｂ）。（Ｃ～Ｆ）Ｈｅｒ２＋（ＳＫ－ＢＲ－３（Ｃ）、ＢＴ－４７４（Ｄ））、Ｈｅｒ２－（ＭＤＡ－ＭＤ－２３１（Ｅ））及びＶδ１＋細胞（Ｆに対するＶδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体及びＨｅｒ２ ｍＡｂ対照（トラスツズマブ）の結合。（Ｇ～Ｉ）Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の存在下で、Ｖδ１γδＴ細胞及びＳＫ－ＢＲ－３細胞（Ｇ）、ＢＴ－４７４（Ｈ）及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（Ｉ）と１：１のＥ：Ｔ比で２４時間共培養した後に残存する生細胞パーセント。（Ｊ）２４時間後のＶδ１γδＴ細胞Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の細胞傷害性の増加パーセントを表す棒グラフ。 二重特異性フォーマットの親和性成熟Ｖδ１クローンは、Ｈｅｒ２＋標的細胞に結合し、Ｖδ１γδＴ細胞への結合の増強、及びＨｅｒ２＋標的細胞の細胞傷害性の増強を示す。（Ａ）乳癌細胞株及びＶδ１γδＴ細胞上のＨｅｒ２及びＶδ１の細胞表面発現（Ｂ）。（Ｃ～Ｆ）Ｈｅｒ２＋（ＳＫ－ＢＲ－３（Ｃ）、ＢＴ－４７４（Ｄ））、Ｈｅｒ２－（ＭＤＡ－ＭＤ－２３１（Ｅ））及びＶδ１＋細胞（Ｆに対するＶδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体及びＨｅｒ２ ｍＡｂ対照（トラスツズマブ）の結合。（Ｇ～Ｉ）Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の存在下で、Ｖδ１γδＴ細胞及びＳＫ－ＢＲ－３細胞（Ｇ）、ＢＴ－４７４（Ｈ）及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（Ｉ）と１：１のＥ：Ｔ比で２４時間共培養した後に残存する生細胞パーセント。（Ｊ）２４時間後のＶδ１γδＴ細胞Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の細胞傷害性の増加パーセントを表す棒グラフ。 二重特異性フォーマットの親和性成熟Ｖδ１クローンは、Ｈｅｒ２＋標的細胞に結合し、Ｖδ１γδＴ細胞への結合の増強、及びＨｅｒ２＋標的細胞の細胞傷害性の増強を示す。（Ａ）乳癌細胞株及びＶδ１γδＴ細胞上のＨｅｒ２及びＶδ１の細胞表面発現（Ｂ）。（Ｃ～Ｆ）Ｈｅｒ２＋（ＳＫ－ＢＲ－３（Ｃ）、ＢＴ－４７４（Ｄ））、Ｈｅｒ２－（ＭＤＡ－ＭＤ－２３１（Ｅ））及びＶδ１＋細胞（Ｆに対するＶδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体及びＨｅｒ２ ｍＡｂ対照（トラスツズマブ）の結合。（Ｇ～Ｉ）Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の存在下で、Ｖδ１γδＴ細胞及びＳＫ－ＢＲ－３細胞（Ｇ）、ＢＴ－４７４（Ｈ）及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（Ｉ）と１：１のＥ：Ｔ比で２４時間共培養した後に残存する生細胞パーセント。（Ｊ）２４時間後のＶδ１γδＴ細胞Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の細胞傷害性の増加パーセントを表す棒グラフ。 二重特異性フォーマットの親和性成熟Ｖδ１クローンは、Ｈｅｒ２＋標的細胞に結合し、Ｖδ１γδＴ細胞への結合の増強、及びＨｅｒ２＋標的細胞の細胞傷害性の増強を示す。（Ａ）乳癌細胞株及びＶδ１γδＴ細胞上のＨｅｒ２及びＶδ１の細胞表面発現（Ｂ）。（Ｃ～Ｆ）Ｈｅｒ２＋（ＳＫ－ＢＲ－３（Ｃ）、ＢＴ－４７４（Ｄ））、Ｈｅｒ２－（ＭＤＡ－ＭＤ－２３１（Ｅ））及びＶδ１＋細胞（Ｆに対するＶδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体及びＨｅｒ２ ｍＡｂ対照（トラスツズマブ）の結合。（Ｇ～Ｉ）Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の存在下で、Ｖδ１γδＴ細胞及びＳＫ－ＢＲ－３細胞（Ｇ）、ＢＴ－４７４（Ｈ）及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（Ｉ）と１：１のＥ：Ｔ比で２４時間共培養した後に残存する生細胞パーセント。（Ｊ）２４時間後のＶδ１γδＴ細胞Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の細胞傷害性の増加パーセントを表す棒グラフ。 二重特異性フォーマットの親和性成熟Ｖδ１クローンは、Ｈｅｒ２＋標的細胞に結合し、Ｖδ１γδＴ細胞への結合の増強、及びＨｅｒ２＋標的細胞の細胞傷害性の増強を示す。（Ａ）乳癌細胞株及びＶδ１γδＴ細胞上のＨｅｒ２及びＶδ１の細胞表面発現（Ｂ）。（Ｃ～Ｆ）Ｈｅｒ２＋（ＳＫ－ＢＲ－３（Ｃ）、ＢＴ－４７４（Ｄ））、Ｈｅｒ２－（ＭＤＡ－ＭＤ－２３１（Ｅ））及びＶδ１＋細胞（Ｆに対するＶδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体及びＨｅｒ２ ｍＡｂ対照（トラスツズマブ）の結合。（Ｇ～Ｉ）Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の存在下で、Ｖδ１γδＴ細胞及びＳＫ－ＢＲ－３細胞（Ｇ）、ＢＴ－４７４（Ｈ）及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（Ｉ）と１：１のＥ：Ｔ比で２４時間共培養した後に残存する生細胞パーセント。（Ｊ）２４時間後のＶδ１γδＴ細胞Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の細胞傷害性の増加パーセントを表す棒グラフ。 二重特異性フォーマットの親和性成熟Ｖδ１クローンは、Ｈｅｒ２＋標的細胞に結合し、Ｖδ１γδＴ細胞への結合の増強、及びＨｅｒ２＋標的細胞の細胞傷害性の増強を示す。（Ａ）乳癌細胞株及びＶδ１γδＴ細胞上のＨｅｒ２及びＶδ１の細胞表面発現（Ｂ）。（Ｃ～Ｆ）Ｈｅｒ２＋（ＳＫ－ＢＲ－３（Ｃ）、ＢＴ－４７４（Ｄ））、Ｈｅｒ２－（ＭＤＡ－ＭＤ－２３１（Ｅ））及びＶδ１＋細胞（Ｆに対するＶδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体及びＨｅｒ２ ｍＡｂ対照（トラスツズマブ）の結合。（Ｇ～Ｉ）Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の存在下で、Ｖδ１γδＴ細胞及びＳＫ－ＢＲ－３細胞（Ｇ）、ＢＴ－４７４（Ｈ）及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（Ｉ）と１：１のＥ：Ｔ比で２４時間共培養した後に残存する生細胞パーセント。（Ｊ）２４時間後のＶδ１γδＴ細胞Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の細胞傷害性の増加パーセントを表す棒グラフ。 二重特異性フォーマットの親和性成熟Ｖδ１クローンは、Ｈｅｒ２＋標的細胞に結合し、Ｖδ１γδＴ細胞への結合の増強、及びＨｅｒ２＋標的細胞の細胞傷害性の増強を示す。（Ａ）乳癌細胞株及びＶδ１γδＴ細胞上のＨｅｒ２及びＶδ１の細胞表面発現（Ｂ）。（Ｃ～Ｆ）Ｈｅｒ２＋（ＳＫ－ＢＲ－３（Ｃ）、ＢＴ－４７４（Ｄ））、Ｈｅｒ２－（ＭＤＡ－ＭＤ－２３１（Ｅ））及びＶδ１＋細胞（Ｆに対するＶδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体及びＨｅｒ２ ｍＡｂ対照（トラスツズマブ）の結合。（Ｇ～Ｉ）Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の存在下で、Ｖδ１γδＴ細胞及びＳＫ－ＢＲ－３細胞（Ｇ）、ＢＴ－４７４（Ｈ）及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（Ｉ）と１：１のＥ：Ｔ比で２４時間共培養した後に残存する生細胞パーセント。（Ｊ）２４時間後のＶδ１γδＴ細胞Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の細胞傷害性の増加パーセントを表す棒グラフ。 二重特異性フォーマットの親和性成熟Ｖδ１クローンは、Ｈｅｒ２＋標的細胞に結合し、Ｖδ１γδＴ細胞への結合の増強、及びＨｅｒ２＋標的細胞の細胞傷害性の増強を示す。（Ａ）乳癌細胞株及びＶδ１γδＴ細胞上のＨｅｒ２及びＶδ１の細胞表面発現（Ｂ）。（Ｃ～Ｆ）Ｈｅｒ２＋（ＳＫ－ＢＲ－３（Ｃ）、ＢＴ－４７４（Ｄ））、Ｈｅｒ２－（ＭＤＡ－ＭＤ－２３１（Ｅ））及びＶδ１＋細胞（Ｆに対するＶδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体及びＨｅｒ２ ｍＡｂ対照（トラスツズマブ）の結合。（Ｇ～Ｉ）Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の存在下で、Ｖδ１γδＴ細胞及びＳＫ－ＢＲ－３細胞（Ｇ）、ＢＴ－４７４（Ｈ）及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（Ｉ）と１：１のＥ：Ｔ比で２４時間共培養した後に残存する生細胞パーセント。（Ｊ）２４時間後のＶδ１γδＴ細胞Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の細胞傷害性の増加パーセントを表す棒グラフ。 二重特異性フォーマットの親和性成熟Ｖδ１クローンは、Ｈｅｒ２＋標的細胞に結合し、Ｖδ１γδＴ細胞への結合の増強、及びＨｅｒ２＋標的細胞の細胞傷害性の増強を示す。（Ａ）乳癌細胞株及びＶδ１γδＴ細胞上のＨｅｒ２及びＶδ１の細胞表面発現（Ｂ）。（Ｃ～Ｆ）Ｈｅｒ２＋（ＳＫ－ＢＲ－３（Ｃ）、ＢＴ－４７４（Ｄ））、Ｈｅｒ２－（ＭＤＡ－ＭＤ－２３１（Ｅ））及びＶδ１＋細胞（Ｆに対するＶδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体及びＨｅｒ２ ｍＡｂ対照（トラスツズマブ）の結合。（Ｇ～Ｉ）Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の存在下で、Ｖδ１γδＴ細胞及びＳＫ－ＢＲ－３細胞（Ｇ）、ＢＴ－４７４（Ｈ）及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（Ｉ）と１：１のＥ：Ｔ比で２４時間共培養した後に残存する生細胞パーセント。（Ｊ）２４時間後のＶδ１γδＴ細胞Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の細胞傷害性の増加パーセントを表す棒グラフ。 二重特異性フォーマットの親和性成熟Ｖδ１クローンは、Ｈｅｒ２＋標的細胞に結合し、Ｖδ１γδＴ細胞への結合の増強、及びＨｅｒ２＋標的細胞の細胞傷害性の増強を示す。（Ａ）乳癌細胞株及びＶδ１γδＴ細胞上のＨｅｒ２及びＶδ１の細胞表面発現（Ｂ）。（Ｃ～Ｆ）Ｈｅｒ２＋（ＳＫ－ＢＲ－３（Ｃ）、ＢＴ－４７４（Ｄ））、Ｈｅｒ２－（ＭＤＡ－ＭＤ－２３１（Ｅ））及びＶδ１＋細胞（Ｆに対するＶδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体及びＨｅｒ２ ｍＡｂ対照（トラスツズマブ）の結合。（Ｇ～Ｉ）Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の存在下で、Ｖδ１γδＴ細胞及びＳＫ－ＢＲ－３細胞（Ｇ）、ＢＴ－４７４（Ｈ）及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（Ｉ）と１：１のＥ：Ｔ比で２４時間共培養した後に残存する生細胞パーセント。（Ｊ）２４時間後のＶδ１γδＴ細胞Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体の細胞傷害性の増加パーセントを表す棒グラフ。 Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体は、ヒトＥＧＦＲに対する高親和性結合及びその親ｍＡｂに匹敵するヒトＶδ１結合親和性を示す。（Ａ、Ｂ）Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性変異体を用いて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析を行い、ヒトＶδ１（Ａ）及びヒトＥＧＦＲ抗原（Ｂ）への結合を評価した。比較目的のために、親ｍＡｂ、セツキシマブ及び陰性対照ｍＡｂを含めた。 Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体は、ヒトＥＧＦＲに対する高親和性結合及びその親ｍＡｂに匹敵するヒトＶδ１結合親和性を示す。（Ａ、Ｂ）Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性変異体を用いて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析を行い、ヒトＶδ１（Ａ）及びヒトＥＧＦＲ抗原（Ｂ）への結合を評価した。比較目的のために、親ｍＡｂ、セツキシマブ及び陰性対照ｍＡｂを含めた。 Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体は、ＥＧＦＲ＋Ａ４３１標的細胞及びＶδ１γδＴ細胞に結合する（Ａ）Ａ４３１細胞株及び初代Ｖδ１γδＴ細胞上のＥＧＦＲ及びＶδ１の細胞表面発現。（Ｂ）Ａ４３１細胞株または初代Ｖδ１γδＴ細胞に対するＶδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体による結合レベル。標的細胞を様々な濃度の抗体で染色した後、蛍光抗ヒトＩｇＧ検出抗体で染色した。すべてのインキュベーションステップは４℃で行い、フローサイトメトリーを使用して蛍光レベル中央値を測定することでｍＡｂ結合を判定した。対数４パラメータ用量応答曲線のフィッティングはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ９を使用して行った。 Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体は、ＥＧＦＲ＋Ａ４３１標的細胞及びＶδ１γδＴ細胞に結合する（Ａ）Ａ４３１細胞株及び初代Ｖδ１γδＴ細胞上のＥＧＦＲ及びＶδ１の細胞表面発現。（Ｂ）Ａ４３１細胞株または初代Ｖδ１γδＴ細胞に対するＶδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体による結合レベル。標的細胞を様々な濃度の抗体で染色した後、蛍光抗ヒトＩｇＧ検出抗体で染色した。すべてのインキュベーションステップは４℃で行い、フローサイトメトリーを使用して蛍光レベル中央値を測定することでｍＡｂ結合を判定した。対数４パラメータ用量応答曲線のフィッティングはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ９を使用して行った。 Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体は、ＥＧＦＲ特異的Ｔ細胞の活性化及び脱顆粒を誘導し、Ａ４３１標的細胞のγδＴ細胞媒介性細胞傷害性の増加をもたらす。（Ａ）Ａ４３１細胞の存在下または非存在下で二重特異性抗体と共に２４時間培養した後の初代Ｖδ１γδＴ細胞におけるγδＴＣＲの細胞表面発現。（Ｂ、Ｃ）様々な濃度の抗体と併せて１：１の比で２４時間共培養した後の生存可能なＡ４３１細胞の数（Ｂ）及び初代Ｖδ１γδＴ細胞の活性化状態。生存率は生死判別色素により測定し、活性化状態はＣＤ２５抗体を使用して測定した。（Ｄ）様々な濃度の抗体と併せて１：１の比でＡ４３１細胞と４時間共培養した後の初代Ｖδ１γδＴ細胞の脱顆粒。脱顆粒は、フルオロフォアにコンジュゲートした抗ＣＤ１０７α抗体を共培養開始時に細胞－抗体ミックスに直接加えることによって決定した。（Ｅ）１０ｐＭの抗体及び様々な量の初代Ｖδ１γδＴ細胞と２４時間共培養した後の生存可能なＡ４３１細胞の数。（Ａ～Ｅ）すべての場合において、蛍光レベル中央値を測定するためにフローサイトメトリーを使用して蛍光を決定した。対数４パラメータ用量応答曲線のフィッティングはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ９を使用して行った。データは、２つの生物学的複製物の平均±ＳＤとして表されている。 Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体は、ＥＧＦＲ特異的Ｔ細胞の活性化及び脱顆粒を誘導し、Ａ４３１標的細胞のγδＴ細胞媒介性細胞傷害性の増加をもたらす。（Ａ）Ａ４３１細胞の存在下または非存在下で二重特異性抗体と共に２４時間培養した後の初代Ｖδ１γδＴ細胞におけるγδＴＣＲの細胞表面発現。（Ｂ、Ｃ）様々な濃度の抗体と併せて１：１の比で２４時間共培養した後の生存可能なＡ４３１細胞の数（Ｂ）及び初代Ｖδ１γδＴ細胞の活性化状態。生存率は生死判別色素により測定し、活性化状態はＣＤ２５抗体を使用して測定した。（Ｄ）様々な濃度の抗体と併せて１：１の比でＡ４３１細胞と４時間共培養した後の初代Ｖδ１γδＴ細胞の脱顆粒。脱顆粒は、フルオロフォアにコンジュゲートした抗ＣＤ１０７α抗体を共培養開始時に細胞－抗体ミックスに直接加えることによって決定した。（Ｅ）１０ｐＭの抗体及び様々な量の初代Ｖδ１γδＴ細胞と２４時間共培養した後の生存可能なＡ４３１細胞の数。（Ａ～Ｅ）すべての場合において、蛍光レベル中央値を測定するためにフローサイトメトリーを使用して蛍光を決定した。対数４パラメータ用量応答曲線のフィッティングはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ９を使用して行った。データは、２つの生物学的複製物の平均±ＳＤとして表されている。 Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体は、ＥＧＦＲ特異的Ｔ細胞の活性化及び脱顆粒を誘導し、Ａ４３１標的細胞のγδＴ細胞媒介性細胞傷害性の増加をもたらす。（Ａ）Ａ４３１細胞の存在下または非存在下で二重特異性抗体と共に２４時間培養した後の初代Ｖδ１γδＴ細胞におけるγδＴＣＲの細胞表面発現。（Ｂ、Ｃ）様々な濃度の抗体と併せて１：１の比で２４時間共培養した後の生存可能なＡ４３１細胞の数（Ｂ）及び初代Ｖδ１γδＴ細胞の活性化状態。生存率は生死判別色素により測定し、活性化状態はＣＤ２５抗体を使用して測定した。（Ｄ）様々な濃度の抗体と併せて１：１の比でＡ４３１細胞と４時間共培養した後の初代Ｖδ１γδＴ細胞の脱顆粒。脱顆粒は、フルオロフォアにコンジュゲートした抗ＣＤ１０７α抗体を共培養開始時に細胞－抗体ミックスに直接加えることによって決定した。（Ｅ）１０ｐＭの抗体及び様々な量の初代Ｖδ１γδＴ細胞と２４時間共培養した後の生存可能なＡ４３１細胞の数。（Ａ～Ｅ）すべての場合において、蛍光レベル中央値を測定するためにフローサイトメトリーを使用して蛍光を決定した。対数４パラメータ用量応答曲線のフィッティングはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ９を使用して行った。データは、２つの生物学的複製物の平均±ＳＤとして表されている。 Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体は、ＥＧＦＲ特異的Ｔ細胞の活性化及び脱顆粒を誘導し、Ａ４３１標的細胞のγδＴ細胞媒介性細胞傷害性の増加をもたらす。（Ａ）Ａ４３１細胞の存在下または非存在下で二重特異性抗体と共に２４時間培養した後の初代Ｖδ１γδＴ細胞におけるγδＴＣＲの細胞表面発現。（Ｂ、Ｃ）様々な濃度の抗体と併せて１：１の比で２４時間共培養した後の生存可能なＡ４３１細胞の数（Ｂ）及び初代Ｖδ１γδＴ細胞の活性化状態。生存率は生死判別色素により測定し、活性化状態はＣＤ２５抗体を使用して測定した。（Ｄ）様々な濃度の抗体と併せて１：１の比でＡ４３１細胞と４時間共培養した後の初代Ｖδ１γδＴ細胞の脱顆粒。脱顆粒は、フルオロフォアにコンジュゲートした抗ＣＤ１０７α抗体を共培養開始時に細胞－抗体ミックスに直接加えることによって決定した。（Ｅ）１０ｐＭの抗体及び様々な量の初代Ｖδ１γδＴ細胞と２４時間共培養した後の生存可能なＡ４３１細胞の数。（Ａ～Ｅ）すべての場合において、蛍光レベル中央値を測定するためにフローサイトメトリーを使用して蛍光を決定した。対数４パラメータ用量応答曲線のフィッティングはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ９を使用して行った。データは、２つの生物学的複製物の平均±ＳＤとして表されている。 Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体は、ＥＧＦＲ特異的Ｔ細胞の活性化及び脱顆粒を誘導し、Ａ４３１標的細胞のγδＴ細胞媒介性細胞傷害性の増加をもたらす。（Ａ）Ａ４３１細胞の存在下または非存在下で二重特異性抗体と共に２４時間培養した後の初代Ｖδ１γδＴ細胞におけるγδＴＣＲの細胞表面発現。（Ｂ、Ｃ）様々な濃度の抗体と併せて１：１の比で２４時間共培養した後の生存可能なＡ４３１細胞の数（Ｂ）及び初代Ｖδ１γδＴ細胞の活性化状態。生存率は生死判別色素により測定し、活性化状態はＣＤ２５抗体を使用して測定した。（Ｄ）様々な濃度の抗体と併せて１：１の比でＡ４３１細胞と４時間共培養した後の初代Ｖδ１γδＴ細胞の脱顆粒。脱顆粒は、フルオロフォアにコンジュゲートした抗ＣＤ１０７α抗体を共培養開始時に細胞－抗体ミックスに直接加えることによって決定した。（Ｅ）１０ｐＭの抗体及び様々な量の初代Ｖδ１γδＴ細胞と２４時間共培養した後の生存可能なＡ４３１細胞の数。（Ａ～Ｅ）すべての場合において、蛍光レベル中央値を測定するためにフローサイトメトリーを使用して蛍光を決定した。対数４パラメータ用量応答曲線のフィッティングはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ９を使用して行った。データは、２つの生物学的複製物の平均±ＳＤとして表されている。 血液由来及び腫瘍関連Ｖδ１ Ｔ細胞の両方における非枯渇及びＣＤ３下方制御のさらなる証拠を示す。（Ａ）抗体刺激時のｖδ１ ＴＣＲ ＭＦＩを、血液由来Ｖδ１ Ｔ細胞に対するｍＡｂ標的会合の指標として示す。（Ｂ）正にゲーティングされた血液由来ｖδ１細胞上のＣＤ３発現のＭＦＩを示す。ｖδ１抗体による刺激はｖδ１細胞に会合し、ｖδ１細胞上のｖδ１及びＣＤ３の両方の下方制御をもたらした。（Ｃ、Ｄ及びＥ）本発明の例示的な抗Ｖδ１抗体による腫瘍関連Ｖδ１ Ｔ細胞に対する付与された活性化及び非枯渇効果を示す。 血液由来及び腫瘍関連Ｖδ１ Ｔ細胞の両方における非枯渇及びＣＤ３下方制御のさらなる証拠を示す。（Ａ）抗体刺激時のｖδ１ ＴＣＲ ＭＦＩを、血液由来Ｖδ１ Ｔ細胞に対するｍＡｂ標的会合の指標として示す。（Ｂ）正にゲーティングされた血液由来ｖδ１細胞上のＣＤ３発現のＭＦＩを示す。ｖδ１抗体による刺激はｖδ１細胞に会合し、ｖδ１細胞上のｖδ１及びＣＤ３の両方の下方制御をもたらした。（Ｃ、Ｄ及びＥ）本発明の例示的な抗Ｖδ１抗体による腫瘍関連Ｖδ１ Ｔ細胞に対する付与された活性化及び非枯渇効果を示す。 血液由来及び腫瘍関連Ｖδ１ Ｔ細胞の両方における非枯渇及びＣＤ３下方制御のさらなる証拠を示す。（Ａ）抗体刺激時のｖδ１ ＴＣＲ ＭＦＩを、血液由来Ｖδ１ Ｔ細胞に対するｍＡｂ標的会合の指標として示す。（Ｂ）正にゲーティングされた血液由来ｖδ１細胞上のＣＤ３発現のＭＦＩを示す。ｖδ１抗体による刺激はｖδ１細胞に会合し、ｖδ１細胞上のｖδ１及びＣＤ３の両方の下方制御をもたらした。（Ｃ、Ｄ及びＥ）本発明の例示的な抗Ｖδ１抗体による腫瘍関連Ｖδ１ Ｔ細胞に対する付与された活性化及び非枯渇効果を示す。 血液由来及び腫瘍関連Ｖδ１ Ｔ細胞の両方における非枯渇及びＣＤ３下方制御のさらなる証拠を示す。（Ａ）抗体刺激時のｖδ１ ＴＣＲ ＭＦＩを、血液由来Ｖδ１ Ｔ細胞に対するｍＡｂ標的会合の指標として示す。（Ｂ）正にゲーティングされた血液由来ｖδ１細胞上のＣＤ３発現のＭＦＩを示す。ｖδ１抗体による刺激はｖδ１細胞に会合し、ｖδ１細胞上のｖδ１及びＣＤ３の両方の下方制御をもたらした。（Ｃ、Ｄ及びＥ）本発明の例示的な抗Ｖδ１抗体による腫瘍関連Ｖδ１ Ｔ細胞に対する付与された活性化及び非枯渇効果を示す。 血液由来及び腫瘍関連Ｖδ１ Ｔ細胞の両方における非枯渇及びＣＤ３下方制御のさらなる証拠を示す。（Ａ）抗体刺激時のｖδ１ ＴＣＲ ＭＦＩを、血液由来Ｖδ１ Ｔ細胞に対するｍＡｂ標的会合の指標として示す。（Ｂ）正にゲーティングされた血液由来ｖδ１細胞上のＣＤ３発現のＭＦＩを示す。ｖδ１抗体による刺激はｖδ１細胞に会合し、ｖδ１細胞上のｖδ１及びＣＤ３の両方の下方制御をもたらした。（Ｃ、Ｄ及びＥ）本発明の例示的な抗Ｖδ１抗体による腫瘍関連Ｖδ１ Ｔ細胞に対する付与された活性化及び非枯渇効果を示す。 Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＦＡＰα＋線維芽細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定した場合の、組換えヒトＶδ１及びＦＡＰαについての抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＦＡＰαモノクローナル（シブロツズマブに基づく）及び抗Ｖδ１ｘＦＡＰα（ＡＤＴ－１－４－２ｘシブロツズマブ）二重特異性抗体の結合動態を示す。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＦＡＰα抗体の、ＦＡＰα＋線維芽細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｆ～Ｇ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞による線維芽細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＦＡＰα＋線維芽細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定した場合の、組換えヒトＶδ１及びＦＡＰαについての抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＦＡＰαモノクローナル（シブロツズマブに基づく）及び抗Ｖδ１ｘＦＡＰα（ＡＤＴ－１－４－２ｘシブロツズマブ）二重特異性抗体の結合動態を示す。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＦＡＰα抗体の、ＦＡＰα＋線維芽細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｆ～Ｇ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞による線維芽細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＦＡＰα＋線維芽細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定した場合の、組換えヒトＶδ１及びＦＡＰαについての抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＦＡＰαモノクローナル（シブロツズマブに基づく）及び抗Ｖδ１ｘＦＡＰα（ＡＤＴ－１－４－２ｘシブロツズマブ）二重特異性抗体の結合動態を示す。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＦＡＰα抗体の、ＦＡＰα＋線維芽細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｆ～Ｇ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞による線維芽細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＦＡＰα＋線維芽細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定した場合の、組換えヒトＶδ１及びＦＡＰαについての抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＦＡＰαモノクローナル（シブロツズマブに基づく）及び抗Ｖδ１ｘＦＡＰα（ＡＤＴ－１－４－２ｘシブロツズマブ）二重特異性抗体の結合動態を示す。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＦＡＰα抗体の、ＦＡＰα＋線維芽細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｆ～Ｇ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞による線維芽細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＦＡＰα＋線維芽細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定した場合の、組換えヒトＶδ１及びＦＡＰαについての抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＦＡＰαモノクローナル（シブロツズマブに基づく）及び抗Ｖδ１ｘＦＡＰα（ＡＤＴ－１－４－２ｘシブロツズマブ）二重特異性抗体の結合動態を示す。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＦＡＰα抗体の、ＦＡＰα＋線維芽細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｆ～Ｇ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞による線維芽細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＦＡＰα＋線維芽細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定した場合の、組換えヒトＶδ１及びＦＡＰαについての抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＦＡＰαモノクローナル（シブロツズマブに基づく）及び抗Ｖδ１ｘＦＡＰα（ＡＤＴ－１－４－２ｘシブロツズマブ）二重特異性抗体の結合動態を示す。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＦＡＰα抗体の、ＦＡＰα＋線維芽細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｆ～Ｇ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞による線維芽細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＦＡＰα＋線維芽細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定した場合の、組換えヒトＶδ１及びＦＡＰαについての抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＦＡＰαモノクローナル（シブロツズマブに基づく）及び抗Ｖδ１ｘＦＡＰα（ＡＤＴ－１－４－２ｘシブロツズマブ）二重特異性抗体の結合動態を示す。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＦＡＰα抗体の、ＦＡＰα＋線維芽細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｆ～Ｇ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞による線維芽細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＦＡＰα＋線維芽細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定した場合の、組換えヒトＶδ１及びＦＡＰαについての抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＦＡＰαモノクローナル（シブロツズマブに基づく）及び抗Ｖδ１ｘＦＡＰα（ＡＤＴ－１－４－２ｘシブロツズマブ）二重特異性抗体の結合動態を示す。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＦＡＰα抗体の、ＦＡＰα＋線維芽細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｆ～Ｇ）ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞による線維芽細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＭＳＬＮ＋標的細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって決定された、組換えヒトＶδ１及びＭＳＬＮに対する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＭＳＬＮモノクローナル（米国特許出願公開第２０１４／０００４１２１号明細書に開示されている抗体に基づく）、及び抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ（ＡＤＴ１－４－２ｘＭＳＬＮ）二重特異性抗体の結合動態。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＭＳＬＮ抗体の、ＭＳＬＮ＋ＨｅＬａ細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル抗体の効果。（Ｆ、Ｇ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞によるＨｅＬａ細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＭＳＬＮ＋標的細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって決定された、組換えヒトＶδ１及びＭＳＬＮに対する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＭＳＬＮモノクローナル（米国特許出願公開第２０１４／０００４１２１号明細書に開示されている抗体に基づく）、及び抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ（ＡＤＴ１－４－２ｘＭＳＬＮ）二重特異性抗体の結合動態。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＭＳＬＮ抗体の、ＭＳＬＮ＋ＨｅＬａ細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル抗体の効果。（Ｆ、Ｇ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞によるＨｅＬａ細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＭＳＬＮ＋標的細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって決定された、組換えヒトＶδ１及びＭＳＬＮに対する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＭＳＬＮモノクローナル（米国特許出願公開第２０１４／０００４１２１号明細書に開示されている抗体に基づく）、及び抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ（ＡＤＴ１－４－２ｘＭＳＬＮ）二重特異性抗体の結合動態。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＭＳＬＮ抗体の、ＭＳＬＮ＋ＨｅＬａ細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル抗体の効果。（Ｆ、Ｇ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞によるＨｅＬａ細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＭＳＬＮ＋標的細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって決定された、組換えヒトＶδ１及びＭＳＬＮに対する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＭＳＬＮモノクローナル（米国特許出願公開第２０１４／０００４１２１号明細書に開示されている抗体に基づく）、及び抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ（ＡＤＴ１－４－２ｘＭＳＬＮ）二重特異性抗体の結合動態。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＭＳＬＮ抗体の、ＭＳＬＮ＋ＨｅＬａ細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル抗体の効果。（Ｆ、Ｇ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞によるＨｅＬａ細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＭＳＬＮ＋標的細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって決定された、組換えヒトＶδ１及びＭＳＬＮに対する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＭＳＬＮモノクローナル（米国特許出願公開第２０１４／０００４１２１号明細書に開示されている抗体に基づく）、及び抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ（ＡＤＴ１－４－２ｘＭＳＬＮ）二重特異性抗体の結合動態。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＭＳＬＮ抗体の、ＭＳＬＮ＋ＨｅＬａ細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル抗体の効果。（Ｆ、Ｇ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞によるＨｅＬａ細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＭＳＬＮ＋標的細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって決定された、組換えヒトＶδ１及びＭＳＬＮに対する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＭＳＬＮモノクローナル（米国特許出願公開第２０１４／０００４１２１号明細書に開示されている抗体に基づく）、及び抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ（ＡＤＴ１－４－２ｘＭＳＬＮ）二重特異性抗体の結合動態。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＭＳＬＮ抗体の、ＭＳＬＮ＋ＨｅＬａ細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル抗体の効果。（Ｆ、Ｇ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞によるＨｅＬａ細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＭＳＬＮ＋標的細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって決定された、組換えヒトＶδ１及びＭＳＬＮに対する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＭＳＬＮモノクローナル（米国特許出願公開第２０１４／０００４１２１号明細書に開示されている抗体に基づく）、及び抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ（ＡＤＴ１－４－２ｘＭＳＬＮ）二重特異性抗体の結合動態。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＭＳＬＮ抗体の、ＭＳＬＮ＋ＨｅＬａ細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル抗体の効果。（Ｆ、Ｇ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞によるＨｅＬａ細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＭＳＬＮ＋標的細胞の溶解を増強する。（Ａ）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって決定された、組換えヒトＶδ１及びＭＳＬＮに対する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ－１－４－２）、抗ＭＳＬＮモノクローナル（米国特許出願公開第２０１４／０００４１２１号明細書に開示されている抗体に基づく）、及び抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ（ＡＤＴ１－４－２ｘＭＳＬＮ）二重特異性抗体の結合動態。（Ｂ、Ｃ）抗Ｖδ１抗体及び抗ＭＳＬＮ抗体の、ＭＳＬＮ＋ＨｅＬａ細胞（Ｂ）及びＶδ１γδＴ細胞（Ｃ）への結合。（Ｄ、Ｅ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｄ）または存在下（Ｅ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル抗体の効果。（Ｆ、Ｇ）ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の非存在下（Ｆ）または存在下（Ｇ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。（Ｈ）２４時間の共培養後のＶδ１γδＴ細胞によるＨｅＬａ細胞の溶解に対する、抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。生細胞率はハイコンテント共焦点顕微鏡法により計算し、Ｖδ１γδＴ細胞の非存在下での生細胞数に対して正規化した。 Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＰＤ－１＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＰＤ－１に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＰＤ－１（ペンブロリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＰＤ－１、及び抗Ｖδ１×抗ＰＤ－１（ＡＤＴ１－４－２ｘペンブロリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＰＤ－１及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＰＤ－１の発現。Ｄ）ＰＤ－１＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１抗体の結合。Ｅ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＰＤ－１＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＰＤ－１＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＰＤ－１に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＰＤ－１（ペンブロリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＰＤ－１、及び抗Ｖδ１×抗ＰＤ－１（ＡＤＴ１－４－２ｘペンブロリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＰＤ－１及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＰＤ－１の発現。Ｄ）ＰＤ－１＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１抗体の結合。Ｅ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＰＤ－１＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＰＤ－１＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＰＤ－１に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＰＤ－１（ペンブロリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＰＤ－１、及び抗Ｖδ１×抗ＰＤ－１（ＡＤＴ１－４－２ｘペンブロリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＰＤ－１及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＰＤ－１の発現。Ｄ）ＰＤ－１＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１抗体の結合。Ｅ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＰＤ－１＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＰＤ－１＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＰＤ－１に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＰＤ－１（ペンブロリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＰＤ－１、及び抗Ｖδ１×抗ＰＤ－１（ＡＤＴ１－４－２ｘペンブロリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＰＤ－１及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＰＤ－１の発現。Ｄ）ＰＤ－１＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１抗体の結合。Ｅ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＰＤ－１＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＰＤ－１＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＰＤ－１に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＰＤ－１（ペンブロリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＰＤ－１、及び抗Ｖδ１×抗ＰＤ－１（ＡＤＴ１－４－２ｘペンブロリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＰＤ－１及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＰＤ－１の発現。Ｄ）ＰＤ－１＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１抗体の結合。Ｅ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＰＤ－１＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＰＤ－１＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＰＤ－１に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＰＤ－１（ペンブロリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＰＤ－１、及び抗Ｖδ１×抗ＰＤ－１（ＡＤＴ１－４－２ｘペンブロリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＰＤ－１及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＰＤ－１の発現。Ｄ）ＰＤ－１＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１抗体の結合。Ｅ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＰＤ－１＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＰＤ－１＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＰＤ－１に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＰＤ－１（ペンブロリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＰＤ－１、及び抗Ｖδ１×抗ＰＤ－１（ＡＤＴ１－４－２ｘペンブロリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＰＤ－１及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＰＤ－１の発現。Ｄ）ＰＤ－１＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＰＤ－１抗体の結合。Ｅ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＰＤ－１＋ＣＤ４ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＰＤ－１＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及び４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１、及び４－１ＢＢに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗４－１ＢＢ（ウトミルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗４－１ＢＢ（ＡＤＴ１－４－２ ｘウトミルマブ）、及び抗Ｖδ１×抗４－１ＢＢ二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒト４－１ＢＢ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗４－１ＢＢ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞における４－１ＢＢの発現。Ｄ）４－１ＢＢ＋活性化ＣＤ８ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１抗体及び抗４－１ＢＢ抗体の結合。Ｅ～Ｆ）４－１ＢＢ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及び４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１、及び４－１ＢＢに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗４－１ＢＢ（ウトミルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗４－１ＢＢ（ＡＤＴ１－４－２ ｘウトミルマブ）、及び抗Ｖδ１×抗４－１ＢＢ二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒト４－１ＢＢ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗４－１ＢＢ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞における４－１ＢＢの発現。Ｄ）４－１ＢＢ＋活性化ＣＤ８ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１抗体及び抗４－１ＢＢ抗体の結合。Ｅ～Ｆ）４－１ＢＢ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及び４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１、及び４－１ＢＢに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗４－１ＢＢ（ウトミルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗４－１ＢＢ（ＡＤＴ１－４－２ ｘウトミルマブ）、及び抗Ｖδ１×抗４－１ＢＢ二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒト４－１ＢＢ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗４－１ＢＢ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞における４－１ＢＢの発現。Ｄ）４－１ＢＢ＋活性化ＣＤ８ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１抗体及び抗４－１ＢＢ抗体の結合。Ｅ～Ｆ）４－１ＢＢ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及び４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１、及び４－１ＢＢに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗４－１ＢＢ（ウトミルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗４－１ＢＢ（ＡＤＴ１－４－２ ｘウトミルマブ）、及び抗Ｖδ１×抗４－１ＢＢ二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒト４－１ＢＢ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗４－１ＢＢ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞における４－１ＢＢの発現。Ｄ）４－１ＢＢ＋活性化ＣＤ８ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１抗体及び抗４－１ＢＢ抗体の結合。Ｅ～Ｆ）４－１ＢＢ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及び４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１、及び４－１ＢＢに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗４－１ＢＢ（ウトミルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗４－１ＢＢ（ＡＤＴ１－４－２ ｘウトミルマブ）、及び抗Ｖδ１×抗４－１ＢＢ二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒト４－１ＢＢ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗４－１ＢＢ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞における４－１ＢＢの発現。Ｄ）４－１ＢＢ＋活性化ＣＤ８ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１抗体及び抗４－１ＢＢ抗体の結合。Ｅ～Ｆ）４－１ＢＢ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及び４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１、及び４－１ＢＢに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗４－１ＢＢ（ウトミルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗４－１ＢＢ（ＡＤＴ１－４－２ ｘウトミルマブ）、及び抗Ｖδ１×抗４－１ＢＢ二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒト４－１ＢＢ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗４－１ＢＢ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞における４－１ＢＢの発現。Ｄ）４－１ＢＢ＋活性化ＣＤ８ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１抗体及び抗４－１ＢＢ抗体の結合。Ｅ～Ｆ）４－１ＢＢ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及び４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１、及び４－１ＢＢに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗４－１ＢＢ（ウトミルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗４－１ＢＢ（ＡＤＴ１－４－２ ｘウトミルマブ）、及び抗Ｖδ１×抗４－１ＢＢ二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒト４－１ＢＢ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗４－１ＢＢ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞における４－１ＢＢの発現。Ｄ）４－１ＢＢ＋活性化ＣＤ８ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１抗体及び抗４－１ＢＢ抗体の結合。Ｅ～Ｆ）４－１ＢＢ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及びＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＯＸ４０に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＯＸ４０（ポガリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＯＸ４０、及び抗Ｖδ１×抗ＯＸ４０（ＡＤＴ１－４－２ｘポガリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＯＸ４０及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＯＸ４０の発現。Ｄ）ＯＸ４０＋活性化ＣＤ４ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０抗体の結合。Ｅ～Ｆ）ＯＸ４０＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）ＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及びＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＯＸ４０に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＯＸ４０（ポガリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＯＸ４０、及び抗Ｖδ１×抗ＯＸ４０（ＡＤＴ１－４－２ｘポガリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＯＸ４０及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＯＸ４０の発現。Ｄ）ＯＸ４０＋活性化ＣＤ４ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０抗体の結合。Ｅ～Ｆ）ＯＸ４０＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）ＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及びＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＯＸ４０に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＯＸ４０（ポガリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＯＸ４０、及び抗Ｖδ１×抗ＯＸ４０（ＡＤＴ１－４－２ｘポガリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＯＸ４０及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＯＸ４０の発現。Ｄ）ＯＸ４０＋活性化ＣＤ４ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０抗体の結合。Ｅ～Ｆ）ＯＸ４０＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）ＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及びＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＯＸ４０に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＯＸ４０（ポガリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＯＸ４０、及び抗Ｖδ１×抗ＯＸ４０（ＡＤＴ１－４－２ｘポガリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＯＸ４０及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＯＸ４０の発現。Ｄ）ＯＸ４０＋活性化ＣＤ４ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０抗体の結合。Ｅ～Ｆ）ＯＸ４０＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）ＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及びＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＯＸ４０に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＯＸ４０（ポガリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＯＸ４０、及び抗Ｖδ１×抗ＯＸ４０（ＡＤＴ１－４－２ｘポガリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＯＸ４０及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＯＸ４０の発現。Ｄ）ＯＸ４０＋活性化ＣＤ４ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０抗体の結合。Ｅ～Ｆ）ＯＸ４０＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）ＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及びＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＯＸ４０に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＯＸ４０（ポガリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＯＸ４０、及び抗Ｖδ１×抗ＯＸ４０（ＡＤＴ１－４－２ｘポガリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＯＸ４０及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＯＸ４０の発現。Ｄ）ＯＸ４０＋活性化ＣＤ４ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０抗体の結合。Ｅ～Ｆ）ＯＸ４０＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）ＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及びＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化を増強する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＯＸ４０に結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＯＸ４０（ポガリズマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＯＸ４０、及び抗Ｖδ１×抗ＯＸ４０（ＡＤＴ１－４－２ｘポガリズマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＯＸ４０及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＯＸ４０の発現。Ｄ）ＯＸ４０＋活性化ＣＤ４ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＯＸ４０抗体の結合。Ｅ～Ｆ）ＯＸ４０＋ＣＤ４ Ｔ細胞の非存在下（Ｅ）または存在下（Ｆ）でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｇ）ＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＴＩＧＩＴに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＴＩＧＩＴ（チラゴルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＴＩＧＩＴ、及び抗Ｖδ１×抗ＴＩＧＩＴ（ＡＤＴ－１－４－２ ｘチラゴルマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＴＩＧＩＴ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＴＩＧＩＴの発現。Ｄ）ＴＩＧＩＴ＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ抗体の結合。Ｅ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＴＩＧＩＴに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＴＩＧＩＴ（チラゴルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＴＩＧＩＴ、及び抗Ｖδ１×抗ＴＩＧＩＴ（ＡＤＴ－１－４－２ ｘチラゴルマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＴＩＧＩＴ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＴＩＧＩＴの発現。Ｄ）ＴＩＧＩＴ＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ抗体の結合。Ｅ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＴＩＧＩＴに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＴＩＧＩＴ（チラゴルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＴＩＧＩＴ、及び抗Ｖδ１×抗ＴＩＧＩＴ（ＡＤＴ－１－４－２ ｘチラゴルマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＴＩＧＩＴ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＴＩＧＩＴの発現。Ｄ）ＴＩＧＩＴ＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ抗体の結合。Ｅ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＴＩＧＩＴに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＴＩＧＩＴ（チラゴルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＴＩＧＩＴ、及び抗Ｖδ１×抗ＴＩＧＩＴ（ＡＤＴ－１－４－２ ｘチラゴルマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＴＩＧＩＴ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＴＩＧＩＴの発現。Ｄ）ＴＩＧＩＴ＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ抗体の結合。Ｅ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＴＩＧＩＴに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＴＩＧＩＴ（チラゴルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＴＩＧＩＴ、及び抗Ｖδ１×抗ＴＩＧＩＴ（ＡＤＴ－１－４－２ ｘチラゴルマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＴＩＧＩＴ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＴＩＧＩＴの発現。Ｄ）ＴＩＧＩＴ＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ抗体の結合。Ｅ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＴＩＧＩＴに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＴＩＧＩＴ（チラゴルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＴＩＧＩＴ、及び抗Ｖδ１×抗ＴＩＧＩＴ（ＡＤＴ－１－４－２ ｘチラゴルマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＴＩＧＩＴ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＴＩＧＩＴの発現。Ｄ）ＴＩＧＩＴ＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ抗体の結合。Ｅ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の効果。 Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強し、ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞のチェックポイント遮断を阻害する。Ａ）組換えヒトＶδ１及びＴＩＧＩＴに結合する、抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＴＩＧＩＴ（チラゴルマブに基づく）、抗ＲＳＶＩｇＧ対照×抗ＴＩＧＩＴ、及び抗Ｖδ１×抗ＴＩＧＩＴ（ＡＤＴ－１－４－２ ｘチラゴルマブ）二重特異性抗体のＳＰＲ分析。Ｂ）ＳＰＲによって決定された、組換えヒトＴＩＧＩＴ及びＶδ１に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の二重結合。Ｃ）抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで活性化されたＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＴＩＧＩＴの発現。Ｄ）ＴＩＧＩＴ＋活性化ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞ならびにＶδ１γδＴ細胞に対する抗Ｖδ１及び抗ＴＩＧＩＴ抗体の結合。Ｅ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の非存在下または存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体及びモノクローナル対照の効果。Ｆ）ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞の存在下または非存在下でのＶδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する、抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体のＥＣ５０。Ｇ）ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞の活性化に対する、Ｖδ１架橋型抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の効果。 ＡＤＣＣレポーターバイオアッセイは、抗ｖδ１抗体の結果としてＡＤＣＣを示さない。標的細胞、すなわちγδ細胞を、抗ｖδ１抗体、抗ｖδ１ ＬＡＧＡ抗体（Ｆｃ無効型）、及びＲＳＶアイソタイプ対照の存在下で、ＡＤＣＣバイオアッセイエフェクター細胞と共にインキュベートした。発光シグナルは相対光単位（ＲＬＵ）として記録し、誘導倍率は方法に記載するように計算した。「抗ｖδ１抗体」、「抗ｖδ１ ＬＡＧＡ抗体」、「ＲＳＶ」、「ＯＫＴ３」についてはＮ＝２のγδドナー（技術的二連（ｔｅｃｈｎｉｃａｌ ｄｕｐｌｉｃａｔｅ）で行った）。「リツキシマブ＋Ｒａｊｉ」条件（技術的二連）についてはＮ＝１のＲａｊｉ細胞株、「抗ｖδ１抗体＋エフェクター」及び「抗ｖδ１ ＬＡＧＡ抗体＋エフェクター」条件（それぞれ技術的二連及び単回（ｓｉｎｇｌｉｃａｔｅ）で行った）についてはｎ＝１のγδドナー。エフェクター：標的比は３：１。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。Ａ～Ｆ）Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞のγδＴ細胞またはαβＴ細胞媒介性溶解に対する、抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体の効果。Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞の陽性率は、Ｖδ１γδＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ａ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｂ）の三種培養物；αβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｃ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｄ）の三種培養物；またはＶδ１γδＴ細胞及びαβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｅ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｆ）の四種培養物において、共焦点顕微鏡法によって２４時間時点で決定した。Ｇ～Ｉ）抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体による刺激の２４時間後のγδＴ細胞またはαβＴ細胞からのＩＬ－１７Ａ分泌の数量化。Ｒａｊｉ細胞、初代Ｂ細胞、及びγδＴ細胞（Ｇ）；またはαβＴ細胞（Ｈ）；またはγδＴ細胞及びαβＴ細胞（Ｉ）の共培養物からの細胞培養上清を収集し、ＩＬ－１７Ａ分泌をＭＳＤによって決定した。点線は数量化の最低レベルを表す。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。Ａ～Ｆ）Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞のγδＴ細胞またはαβＴ細胞媒介性溶解に対する、抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体の効果。Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞の陽性率は、Ｖδ１γδＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ａ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｂ）の三種培養物；αβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｃ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｄ）の三種培養物；またはＶδ１γδＴ細胞及びαβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｅ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｆ）の四種培養物において、共焦点顕微鏡法によって２４時間時点で決定した。Ｇ～Ｉ）抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体による刺激の２４時間後のγδＴ細胞またはαβＴ細胞からのＩＬ－１７Ａ分泌の数量化。Ｒａｊｉ細胞、初代Ｂ細胞、及びγδＴ細胞（Ｇ）；またはαβＴ細胞（Ｈ）；またはγδＴ細胞及びαβＴ細胞（Ｉ）の共培養物からの細胞培養上清を収集し、ＩＬ－１７Ａ分泌をＭＳＤによって決定した。点線は数量化の最低レベルを表す。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。Ａ～Ｆ）Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞のγδＴ細胞またはαβＴ細胞媒介性溶解に対する、抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体の効果。Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞の陽性率は、Ｖδ１γδＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ａ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｂ）の三種培養物；αβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｃ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｄ）の三種培養物；またはＶδ１γδＴ細胞及びαβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｅ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｆ）の四種培養物において、共焦点顕微鏡法によって２４時間時点で決定した。Ｇ～Ｉ）抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体による刺激の２４時間後のγδＴ細胞またはαβＴ細胞からのＩＬ－１７Ａ分泌の数量化。Ｒａｊｉ細胞、初代Ｂ細胞、及びγδＴ細胞（Ｇ）；またはαβＴ細胞（Ｈ）；またはγδＴ細胞及びαβＴ細胞（Ｉ）の共培養物からの細胞培養上清を収集し、ＩＬ－１７Ａ分泌をＭＳＤによって決定した。点線は数量化の最低レベルを表す。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。Ａ～Ｆ）Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞のγδＴ細胞またはαβＴ細胞媒介性溶解に対する、抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体の効果。Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞の陽性率は、Ｖδ１γδＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ａ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｂ）の三種培養物；αβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｃ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｄ）の三種培養物；またはＶδ１γδＴ細胞及びαβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｅ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｆ）の四種培養物において、共焦点顕微鏡法によって２４時間時点で決定した。Ｇ～Ｉ）抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体による刺激の２４時間後のγδＴ細胞またはαβＴ細胞からのＩＬ－１７Ａ分泌の数量化。Ｒａｊｉ細胞、初代Ｂ細胞、及びγδＴ細胞（Ｇ）；またはαβＴ細胞（Ｈ）；またはγδＴ細胞及びαβＴ細胞（Ｉ）の共培養物からの細胞培養上清を収集し、ＩＬ－１７Ａ分泌をＭＳＤによって決定した。点線は数量化の最低レベルを表す。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。Ａ～Ｆ）Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞のγδＴ細胞またはαβＴ細胞媒介性溶解に対する、抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体の効果。Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞の陽性率は、Ｖδ１γδＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ａ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｂ）の三種培養物；αβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｃ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｄ）の三種培養物；またはＶδ１γδＴ細胞及びαβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｅ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｆ）の四種培養物において、共焦点顕微鏡法によって２４時間時点で決定した。Ｇ～Ｉ）抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体による刺激の２４時間後のγδＴ細胞またはαβＴ細胞からのＩＬ－１７Ａ分泌の数量化。Ｒａｊｉ細胞、初代Ｂ細胞、及びγδＴ細胞（Ｇ）；またはαβＴ細胞（Ｈ）；またはγδＴ細胞及びαβＴ細胞（Ｉ）の共培養物からの細胞培養上清を収集し、ＩＬ－１７Ａ分泌をＭＳＤによって決定した。点線は数量化の最低レベルを表す。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。Ａ～Ｆ）Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞のγδＴ細胞またはαβＴ細胞媒介性溶解に対する、抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体の効果。Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞の陽性率は、Ｖδ１γδＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ａ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｂ）の三種培養物；αβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｃ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｄ）の三種培養物；またはＶδ１γδＴ細胞及びαβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｅ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｆ）の四種培養物において、共焦点顕微鏡法によって２４時間時点で決定した。Ｇ～Ｉ）抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体による刺激の２４時間後のγδＴ細胞またはαβＴ細胞からのＩＬ－１７Ａ分泌の数量化。Ｒａｊｉ細胞、初代Ｂ細胞、及びγδＴ細胞（Ｇ）；またはαβＴ細胞（Ｈ）；またはγδＴ細胞及びαβＴ細胞（Ｉ）の共培養物からの細胞培養上清を収集し、ＩＬ－１７Ａ分泌をＭＳＤによって決定した。点線は数量化の最低レベルを表す。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。Ａ～Ｆ）Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞のγδＴ細胞またはαβＴ細胞媒介性溶解に対する、抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体の効果。Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞の陽性率は、Ｖδ１γδＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ａ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｂ）の三種培養物；αβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｃ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｄ）の三種培養物；またはＶδ１γδＴ細胞及びαβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｅ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｆ）の四種培養物において、共焦点顕微鏡法によって２４時間時点で決定した。Ｇ～Ｉ）抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体による刺激の２４時間後のγδＴ細胞またはαβＴ細胞からのＩＬ－１７Ａ分泌の数量化。Ｒａｊｉ細胞、初代Ｂ細胞、及びγδＴ細胞（Ｇ）；またはαβＴ細胞（Ｈ）；またはγδＴ細胞及びαβＴ細胞（Ｉ）の共培養物からの細胞培養上清を収集し、ＩＬ－１７Ａ分泌をＭＳＤによって決定した。点線は数量化の最低レベルを表す。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。Ａ～Ｆ）Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞のγδＴ細胞またはαβＴ細胞媒介性溶解に対する、抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体の効果。Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞の陽性率は、Ｖδ１γδＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ａ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｂ）の三種培養物；αβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｃ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｄ）の三種培養物；またはＶδ１γδＴ細胞及びαβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｅ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｆ）の四種培養物において、共焦点顕微鏡法によって２４時間時点で決定した。Ｇ～Ｉ）抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体による刺激の２４時間後のγδＴ細胞またはαβＴ細胞からのＩＬ－１７Ａ分泌の数量化。Ｒａｊｉ細胞、初代Ｂ細胞、及びγδＴ細胞（Ｇ）；またはαβＴ細胞（Ｈ）；またはγδＴ細胞及びαβＴ細胞（Ｉ）の共培養物からの細胞培養上清を収集し、ＩＬ－１７Ａ分泌をＭＳＤによって決定した。点線は数量化の最低レベルを表す。 Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーは、健康なＣＤ１９＋Ｂ細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びγδＴ細胞の活性化を増強する。Ａ～Ｆ）Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞のγδＴ細胞またはαβＴ細胞媒介性溶解に対する、抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体の効果。Ｒａｊｉ細胞または健康な初代Ｂ細胞の陽性率は、Ｖδ１γδＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ａ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｂ）の三種培養物；αβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｃ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｄ）の三種培養物；またはＶδ１γδＴ細胞及びαβＴ細胞とＲａｊｉ細胞（Ｅ）及び健康な初代Ｂ細胞（Ｆ）の四種培養物において、共焦点顕微鏡法によって２４時間時点で決定した。Ｇ～Ｉ）抗Ｖδ１×ＣＤ１９及びＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体による刺激の２４時間後のγδＴ細胞またはαβＴ細胞からのＩＬ－１７Ａ分泌の数量化。Ｒａｊｉ細胞、初代Ｂ細胞、及びγδＴ細胞（Ｇ）；またはαβＴ細胞（Ｈ）；またはγδＴ細胞及びαβＴ細胞（Ｉ）の共培養物からの細胞培養上清を収集し、ＩＬ－１７Ａ分泌をＭＳＤによって決定した。点線は数量化の最低レベルを表す。 高親和性抗Ｖδ１＋抗体による刺激は、Ｖδ１γδＴ細胞上の４－１ＢＢの発現を増強する。（Ａ）例示的な高親和性抗Ｖδ１抗体の添加による４－１ＢＢの発現増強：４人の異なるヒトドナー由来の組織由来Ｖδ１＋Ｔ細胞を、ＴＨＰ－１細胞の存在下で、示された抗体（１μｇ／ｍｌ）と共にインキュベートした（２：１ Ｅ：Ｔ）。４時間後、Ｖδ１＋Ｔ細胞の表面上の４－１ＢＢの発現をフローサイトメトリーによって分析した。ＡＤＴ１－４－２で刺激した細胞は、この時点で４－１ＢＢの発現が有意に増加し、これはＯＫＴ３での刺激に匹敵した（Ｓｉｄａｋの事後検定による通常の一元配置ＡＮＯＶＡにより＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１）。（Ｂ、Ｃ）４－１ＢＢの発現増強；さらなる試験：組織由来Ｖδ１＋Ｔ細胞を、（Ｂ）ＴＨＰ－１癌細胞の存在または（Ｃ）健康な血液由来単球のいずれかにおいて１：１の比で示されるように、漸増量のＡＤＴ１－４－２または抗ＩｇＧ１アイソタイプ対照と共にインキュベートした。４時間後、Ｖδ１＋Ｔ細胞の表面上の４－１ＢＢの発現をフローサイトメトリーによって分析した。ＡＤＴ１－４－２による刺激は、Ｖδ１ Ｔ細胞の表面上の４－１ＢＢの発現を増加させた。さらに、たとえ活性化されたＶδ１＋細胞が健康な細胞を温存したとしても（さらなる考察については本明細書の他の箇所を参照されたい）、腫瘍または健康なＦｃγＲ＋細胞によって架橋が提供された場合、同様の抗体誘導活性化が観察された。 初代ＰＢＭＣにおけるＶδ１＋Ｔ細胞上の天然細胞傷害性受容体（ＮＣＲの上方制御（Ａ）確認的ＴＣＲ下方制御分析を含む実験的培養セットアップ：３人の異なるドナー由来のヒトＰＢＭＣ培養物を、示されるように３．３３ｎＭの例示的な親和性成熟ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７抗Ｖδ１抗体クローン（Ｂ、Ｃ及びＤも参照されたい）または抗ＲＳＶ対照と共に１０日間インキュベートした。培養物には、４ｎｇ／ｍｌ ＩＬ－２及び１０ｎｇ／ｍｌ ＩＬ－１５（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ、１３０－０９７－７４６及びＰｅｐｒｏｔｅｃｈ、それぞれ２００～１５～５００ ｕｇ）も補充した。１０日間の培養後、％ Ｖδ１＋Ｔ細胞をフローサイトメトリーによって分析した。抗Ｖδ１抗体とインキュベートしたすべての培養物は、抗ＲＳＶ対照培養物と比較して、検出可能なＶδ１＋細胞の顕著な減少（％汎γとして）を示した。１つのそのような抗体についての代表的且つ典型的な結果をここに示す。このような分析により、本試験に含まれるすべての親和性成熟抗Ｖδ１抗体が顕著な標的会合を示し、ＴＣＲの下方制御をもたらしたことを確認することが可能である。（Ｂ～Ｄ）抗Ｖδ１抗体は、検出可能なＶδ１＋細胞上のＮＣＲ（ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６）の発現増強をもたらした：本試験で用いたすべての抗Ｖδ１抗体についての標的会合の確認に加えて、ゲーティングしたＶδ１＋細胞上のＮＣＲの倍数変化も試験した。具体的には、（Ｂ）は、ＲＳＶ対照（右端に正規化され、１倍として表されるＲＳＶ対照）に対する二重陽性Ｖδ１＋、ＮＫｐ３０＋％の倍数変化を示す。（Ｃ）ＲＳＶ対照（右端に正規化され、１倍として表されるＲＳＶ対照）に対する二重陽性Ｖδ１＋、ＮＫｐ４４＋％の倍数変化を示す。（Ｄ）ＲＳＶ対照（右端に正規化され、１倍として表されるＲＳＶ対照）に対する二重陽性Ｖδ１＋、ＮＫｐ４６＋％の倍数変化を示す。これらの組み合わせた結果は、この延長された１０日間の初代ＰＢＭＣ培養系で使用されるすべての親和性成熟抗Ｖδ１＋抗体によって付与される検出可能なＶδ１＋におけるＮＣＲの一貫した（ドナー依存的な）上方制御を強調している。
本発明は、高親和性の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体、多重特異性抗体、及びそれらの抗体断片を提供する。より具体的には、本発明は、最適化抗体、例えば、本明細書においてＧ０４、Ｅ０７、Ｃ０８、Ｂ０７、Ｃ０５、Ｅ０４、Ｆ０７、Ｇ０６、Ｇ０９、Ｂ０９、Ｇ１０、及びＥ０１と称される親抗体などの親抗Ｖδ１抗体から開始される最適化された選別手順により調製された抗体の提供及び特徴付けに関する。特に本発明は、Ｇ０４及びＥ０７に由来する最適化抗体に関する。
定義
特に定義しない限り、本明細書において使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般的に理解される意味を有する。本明細書で使用する場合、以下の用語は、それらに与えられる下記の意味を有する。
ガンマデルタ（γδ）Ｔ細胞は、表面に別個の特徴的なＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を発現するＴ細胞の小さなサブセットを表す。このＴＣＲは、１つのガンマ（γ）鎖及び１つのデルタ（δ）鎖から構成される。各鎖は、可変（Ｖ）領域、定常（Ｃ）領域、膜貫通領域、及び細胞質尾部を含む。Ｖ領域は抗原結合部位を含む。以下の２つの主要なサブタイプのヒトγδＴ細胞が存在する：末梢血で優勢なもの、及び非造血組織で優勢なもの。２つのサブタイプは、細胞に存在するδ及び／またはγの種類により定義され得る。例えば、末梢血で優勢であるγδＴ細胞は、δ可変部２鎖（Ｖδ２）を主に発現する。非造血組織で優勢である（すなわち、組織常在性である）γδＴ細胞は、δ可変部１鎖を主に発現する。「Ｖδ１ Ｔ細胞」または「Ｖδ１＋Ｔ細胞」への言及は、Ｖδ１鎖を有するγδＴ細胞、すなわち、Ｖδ１＋細胞を指す。
「δ可変部１」への言及は、Ｖδ１またはＶｄ１とも称され得る一方で、この領域を含むＴＣＲ鎖をコードするヌクレオチド、またはこの領域を含むＴＣＲタンパク質複合体は、「ＴＲＤＶ１」と称され得る。γδＴＣＲのＶδ１鎖と相互作用する抗体またはその抗原結合断片は全て、事実上、Ｖδ１に結合する抗体またはその抗原結合断片であり、「抗ＴＣＲδ可変部１抗体またはその抗原結合断片」または「抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片」または「抗ＴＲＤＶ１抗体またはその抗原結合断片」と称され得る。
本明細書では、「δ可変部２」鎖などの他のδ鎖に更に言及する。これらは同様な様式で称され得る。例えば、δ可変部２鎖は、Ｖδ２と称され得る一方で、この領域を含むＴＣＲ鎖をコードするヌクレオチド、またはこの領域を含むＴＣＲタンパク質複合体は、「ＴＲＤＶ２」と称され得る。好ましい実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖と相互作用する抗体またはその抗原結合断片は、Ｖδ２などの他のδ鎖と相互作用しない。本発明において、抗体は、ＴＲＤＶ１に特異的であり、ＴＲＤＶ２（配列番号３１０）またはγδＴ細胞受容体に存在する他の抗原、例えば、ＴＲＤＶ３（配列番号３１１）に結合しない。
本明細書では、「γ可変鎖」にも言及する。これらがγ鎖またはＶγと称され得る一方で、この領域を含むＴＣＲ鎖をコードするヌクレオチド、またはこの領域を含むＴＣＲタンパク質複合体は、ＴＲＧＶと称され得る。例えば、ＴＲＧＶ４はＶγ４鎖を指す。好ましい実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖と相互作用する抗体またはその抗原結合断片は、Ｖγ４（例えば、配列番号３０９）などのγ鎖と相互作用しない。好ましい実施形態では、抗体は、ＴＲＤＪ、ＴＲＤＣ、ＴＲＧＪ、またはＴＲＧＣなどのγδＴＣＲ内に見出される他のドメインとも結合または相互作用しない。
用語「Ｔ細胞受容体複合体」は、種々の抗原の認識を担うＴ細胞の表面に見出される「Ｔ細胞受容体」（または「ＴＣＲ」）を含むタンパク質の複合体である。Ｔ細胞受容体複合体は、Ｔ細胞受容体のα鎖及びβ鎖を含むか、またはγδＴ細胞の場合には、Ｔ細胞受容体のγ鎖及びδ鎖、ならびに最大６本またはそれ以上の追加の鎖、例えば、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３ε、及びＣＤ３ζを含むかのいずれかであるが、Ｔ細胞受容体複合体の正確な構成は様々であり得る。Ｔ細胞受容体複合体は、Ｔ細胞活性化を引き起こし得る、Ｔ細胞における細胞内シグナル伝達を媒介する。
用語「抗体」は、少なくとも１つの抗原結合部位（ＡＢＳ）を含む少なくとも１つの抗体可変ドメインを含む任意の抗体タンパク質構築物を包含する。抗体としては、限定されるものではないが、ＩｇＡ型、ＩｇＧ型、ＩｇＥ型、ＩｇＤ型、ＩｇＭ型（及びそれらのサブタイプ）の免疫グロブリンが挙げられる。２本の同一の重（Ｈ）鎖及び２本の同一の軽（Ｌ）鎖ポリペプチドからアセンブルされた免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）抗体の全体構造は十分に確立されており、哺乳類において高度に保存されている（Ｐａｄｌａｎ（１９９４） Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：１６９－２１７）。
通常の抗体または免疫グロブリン（Ｉｇ）は、２本の重（Ｈ）鎖及び２本の軽（Ｌ）鎖の４本のポリペプチド鎖を含むタンパク質である。各鎖は、定常領域と可変ドメインに分けられる。重（Ｈ）鎖可変ドメインは本明細書ではＶＨと略され、軽（Ｌ）鎖可変ドメインは本明細書ではＶＬと略される。これらのドメイン、それらに関連するドメイン及びそれらに由来するドメインは、本明細書において免疫グロブリン鎖可変ドメインと称され得る。ＶＨドメイン及びＶＬドメイン（ＶＨ領域及びＶＬ領域とも称される）は、「フレームワーク領域」（「ＦＲ」）と称されるより保存されている領域と共に散在する、「相補性決定領域」（「ＣＤＲ」）と称される領域に更に分割され得る。フレームワーク領域及び相補性決定領域は正確に定義されている（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，（１９９１） ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｕｍｂｅｒ ９１－３２４２）。ＣＤＲ配列の別の番号付け規則、例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．（１９８９） Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７－８８３に記載されているか、またはＩＭＧＴ．ｏｒｇによりまとめられているものも存在する。通常の抗体では、各ＶＨ及びＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序で配置される３つのＣＤＲと４つのＦＲから構成される。２本の免疫グロブリン重鎖及び２本の免疫グロブリン軽鎖の通常の抗体四量体は、例えば、ジスルフィド結合により相互に連結された免疫グロブリン重鎖及び軽鎖、ならびに同様に連結された重鎖で形成される。重鎖定常領域は、３つのドメインであるＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む。軽鎖定常領域は、１つのドメインであるＣＬから構成される。重鎖の可変ドメイン及び軽鎖の可変ドメインは、抗原と相互作用する結合ドメインである。抗体の定常領域は、通常、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第１成分（Ｃ１ｑ）が含まれる、宿主組織または因子への抗体の結合を媒介する。
本明細書で使用する場合、抗体の「断片」（「抗体断片」、「免疫グロブリン断片」、「抗原結合断片」、または「抗原結合ポリペプチド」とも称され得る）は、標的であるγδＴ細胞受容体のδ可変部１（Ｖδ１）鎖に特異的に結合する抗体（または当該部分を含む構築物）の一部（例えば、１つ以上の免疫グロブリン鎖が完全長ではないが、標的に特異的に結合する分子）を指す。抗体断片という用語に包含される結合断片の例としては、以下が挙げられる：
（ｉ）Ｆａｂフラグメント（ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる一価の断片）；
（ｉｉ）Ｆ（ａｂ′）２断片（ヒンジ領域でのジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片からなる二価の断片）；
（ｉｉｉ）Ｆｄ断片（ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなる）；
（ｉｖ）Ｆｖ断片（抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなる）；
（ｖ）一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）（組換え方法を使用して、ＶＬ及びＶＨ領域が対合して、一価の分子を形成している単一のタンパク質鎖として作製されることを可能にする合成リンカーにより連結されたＶＬ及びＶＨドメインからなる）；
（ｖｉ）ＶＨ（ＶＨドメインからなる免疫グロブリン鎖可変ドメイン）；
（ｖｉｉ）ＶＬ（ＶＬドメインからなる免疫グロブリン鎖可変ドメイン）；
（ｖｉｉｉ）ドメイン抗体（ｄＡｂ）（ＶＨまたはＶＬドメインのいずれかからなる）；
（ｉｘ）ミニボディ（ＣＨ３ドメインにより連結された一対のｓｃＦｖ断片からなる）；及び
（ｘ）ダイアボディ（小さなペプチドリンカーにより１つの抗体由来のＶＬドメインに連結された別の抗体由来のＶＨドメインからなるｓｃＦｖ断片の非共有結合性二量体からなる）。
「ヒト抗体」は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域及び定常領域を有する抗体を指す。上記ヒト抗体を投与されたヒト対象は、上記抗体内に含まれる一次アミノ酸に対する異種間抗体応答（例えば、ＨＡＭＡ反応（ヒト抗マウス抗体反応）と称される）を生じない。上記ヒト抗体は、例えば、ＣＤＲ、特にＣＤＲ３において、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列によりコードされないアミノ酸残基（例えば、ランダムもしくは部位特異的変異誘発、または体細胞突然変異により導入された変異）を含み得る。しかしながら、この用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系列に由来するＣＤＲ配列が、ヒトフレームワーク配列に移植された抗体を包含することを意図しない。組換え手段により調製、発現、作製、もしくは単離されるヒト抗体、例えば、宿主細胞に形質移入された組換え発現ベクターを使用して発現された抗体、組換えヒト抗体ライブラリーの組み合わせから単離された抗体、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックな動物（例えば、マウス）から単離された抗体、またはヒト免疫グロブリン遺伝子配列を他のＤＮＡ配列にスプライシングすることを含む任意の他の手段により調製、発現、作製、もしくは単離された抗体は、「組換えヒト抗体」とも称され得る。
非ヒト免疫グロブリン可変ドメインのフレームワーク領域における少なくとも１つのアミノ酸残基をヒト可変ドメイン由来の対応する残基で置換することは、「ヒト化」と称される。可変ドメインのヒト化により、ヒトにおける免疫原性が低減され得る。
「特異性」とは、特定の抗体またはその抗原結合断片が結合することができる、異なる種類の抗原または抗原決定基の数を指す。抗体の特異性は、特定の抗原を固有の分子実体として認識し、それを別の抗原と区別する抗体の能力である。抗原またはエピトープに「特異的に結合する」抗体は、当該技術分野において十分に理解されている用語である。分子が「特異的結合」を示すと言われるのは、その分子が、他の標的と反応するよりも、特定の標的抗原またはエピトープと、より頻繁に、より急速に、より長い持続時間で、及び／またはより高い親和性で反応する場合である。抗体が標的抗原またはエピトープに「特異的に結合する」のは、それが他の物質に結合するよりも、より高い親和性で、より高い結合活性で、より容易に、及び／またはより長い持続時間で結合する場合である。
本発明の抗体は、単一特異性抗体（すなわち、１つの抗原のみに結合する抗体）及び多重特異性抗体を包含する。「多重特異性抗体」は、複数の異なるエピトープに同時または連続的に結合することができる抗体である。一般に、これらのエピトープは同じ抗原に存在しない。従って、多重特異性抗体は、複数の異なる結合ドメインにより異なる抗原に存在するエピトープに選択的に結合する能力を有する。このことは、この能力を有さない従来の単一特異性抗体とは対照的である。正確には、「単一特異性抗体」は、１つのみの抗原に特異的に結合するが、この１つの抗原に対して複数の結合部位を有してもよい（例えば、完全ヒトＩｇＧ抗体の結合価は２であり、他の抗体の結合価はより高い場合があるが、抗体が１つの抗原のみを認識する場合、これは依然として単一特異性抗体と分類される）。従って、本発明の多重特異性抗体は、複数の異なる抗原に同時に及び／または連続的に結合する。
本発明の幾つかの実施形態では、抗体は二重特異性抗体である。「二重特異性抗体」は、２つの異なるエピトープに同時に及び／または連続的に結合することができる抗体である。一般に、これらのエピトープは同じ抗原に存在しない。従って、二重特異性抗体は、２つの異なる結合ドメインにより２つの異なる抗原に存在する２つの異なるエピトープに選択的に結合する能力を有する。このことは、この能力を有さない従来の単一特異性抗体とは対照的である。従って、本発明の二重特異性抗体は、２つの異なる抗原に同時に及び／または連続的に結合する。
抗原と抗原結合ポリペプチドとの解離に関する平衡定数（ＫＤ）により表される「親和性」とは、抗原決定基と抗体（またはその抗原結合断片）上の抗原結合部位との間の結合強度の尺度である。ＫＤの値が小さいほど、抗原決定基と抗原結合ポリペプチドとの間の結合強度は強くなる。あるいは、親和性は、１／ＫＤである親和定数 （ＫＡ） としても表され得る。親和性は、関心対象の特異的抗原に応じて、既知の方法で決定され得る。例えば、ＫＤは、表面プラズモン共鳴により決定され得る。
１０－６未満のＫＤ値は、いずれも結合を示すとみなされる。抗体またはその抗原結合断片の抗原または抗原決定基への特異的結合は、例えば、スキャッチャード分析及び／または競合結合アッセイ、例えば、放射免疫測定法（ＲＩＡ）、酵素免疫測定法（ＥＩＡ）、及びサンドイッチ競合アッセイ、平衡透析、平衡結合、ゲル濾過、ＥＬＩＳＡ、表面プラズモン共鳴、または分光法（例えば、蛍光アッセイを使用する）、ならびに当該技術分野において公知のそれらの様々な変形形態が含まれる、任意の好適な公知の方法で測定され得る。
「結合活性」は、抗体またはその抗原結合断片と、関連する抗原との間の結合の強さの尺度である。結合活性は、抗原決定基と抗体上のその抗原結合部位との間の親和性、及び抗体に存在する関連する結合部位の数の両方に関連する。
「生体内原位置」は、別の場所に移されるのではなく、天然または元の場所にあることを意味する。例えば、患者の生体内原位置のＶδ１＋細胞は、インビトロまたはエクスビボの細胞ではなく、インビボのｖδ１細胞を指す。
「ヒト組織Ｖδ１＋細胞」、ならびに「造血及び血液Ｖδ１＋細胞」及び「腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）Ｖδ１＋細胞」は、それぞれヒト組織もしくは造血血液系もしくはヒト腫瘍のいずれかに含まれる、またはそれらに由来するＶδ１＋細胞と定義される。全ての上記細胞種は、それらの（ｉ）位置またはそれらが由来する場所、及び（ｉｉ）それらのＶδ１＋ＴＣＲ発現により同定され得る。
「調節性抗体」は、抗体が結合する標的を発現する細胞に接触または結合した際に、限定されるものではないが、細胞周期、及び／または細胞数、及び／または細胞生存率、及び／または１種以上の細胞表面マーカー、及び／または１種以上の分泌性分子（例えば、サイトカイン、ケモカイン、ロイコトリエンなど）の分泌、及び／または機能（例えば、標的細胞または病変細胞に対する細胞傷害性）における測定可能な変化が含まれる、測定可能な変化をもたらす抗体である。細胞またはその集団を「調節する」方法とは、１つ以上の「調節された細胞」を生じさせるために、当該細胞もしくは複数の細胞またはそれらからの分泌における少なくとも１つの測定可能な変化が誘発される方法を指す。
「免疫応答」は、調節性抗体が添加された際の、免疫系（限定されるものではないが、細胞性応答、体液性応答、サイトカイン応答、ケモカイン応答が含まれる）の少なくとも１つの細胞、または１つの細胞種、または１つの内分泌経路、または１つの外分泌経路における測定可能な変化である。
「免疫細胞」は、限定されるものではないが、ＣＤ３４＋細胞、Ｂ細胞、ＣＤ４５＋（リンパ球共通抗原）細胞、αβＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、形質細胞、好中球、単球、マクロファージ、赤血球、血小板、樹状細胞、食細胞、顆粒球、自然リンパ球系細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、及びγδＴ細胞が含まれる、免疫系の細胞と定義される。典型的には、コンビナトリアル細胞表面分子分析を用いて（例えば、フローサイトメトリーにより）免疫細胞を分類して、免疫細胞を同定する、または亜集団にグループ分けもしくはクラスター化して区別する。これらは次いで、追加の分析によってなおも更に細分され得る。例えば、ＣＤ４５＋リンパ球は、ｖδ陽性集団とｖδ陰性集団とに更に細分され得る。
「モデル系」は、抗体またはその抗原結合断片などの医薬品が疾患の徴候または症状の改善において薬剤としてどの程度機能し得るかについての理解を助けるように設計された生体モデルまたは生物学的表現である。かかるモデルは通常、インビトロ、エクスビボ、及びインビボの病変細胞、非病変細胞、健常細胞、エフェクター細胞、及び組織などの使用を含み、これらにおいて上記薬剤の性能が研究及び比較される。
「病変細胞」は、がんなどの疾患、ウイルス感染などの感染、または炎症性状態もしくは炎症性疾患の進行に関連する表現型を示す。例えば、病変細胞は、腫瘍細胞、自己免疫組織、またはウイルスに感染した細胞であり得る。従って、上記病変細胞は、腫瘍状のもの、またはウイルスに感染したもの、または炎症性のものと定義され得る。
「健常細胞」は、疾患にかかっていない正常細胞を指す。これらは「正常」細胞または「非病変」細胞とも称され得る。非病変細胞としては、非がん性細胞、または非感染細胞、または非炎症性細胞が挙げられる。上記細胞は、薬剤によりもたらされる病変細胞特異性を測定するため、及び／または薬剤の治療指数をよりよく理解するために、関連性する病変細胞と共に用いられることが多い。
「病変細胞特異性」は、エフェクター細胞またはその集団（例えば、Ｖδ１＋細胞集団など）が、非病変細胞または健常細胞を温存しながら、がん細胞などの病変細胞を区別し、殺傷するのに、どの程度効果的であるかの尺度である。この能力はモデル系で測定することができ、エフェクター細胞またはエフェクター細胞集団が病変細胞を選択的に殺傷または溶解する傾向を、当該エフェクター細胞が非病変細胞または健常細胞を殺傷または溶解する能力に対して比較することを含み得る。上記病変細胞特異性は、薬剤の潜在的な治療指数についての情報を提供し得る。
「増強された病変細胞特異性」は、病変細胞を特異的に殺傷する能力を更に増強するように調節された、例えば、Ｖδ１＋細胞などのエフェクター細胞またはその集団の表現型を表す。この増強は、病変細胞の殺傷の特異性または選択性における倍率変化またはパーセント増加が含まれる、種々のかたちで測定され得る。
「ＡＤＣＣ」または「抗体依存性細胞性細胞傷害」は、細胞の表面抗原に結合した抗体でコーティングされた細胞に対する免疫応答を表す。これは、免疫エフェクター細胞（例えば、ＮＫ細胞など）が、細胞に結合した抗体を認識し、標的細胞の脱顆粒及び溶解を引き起こす、細胞媒介性プロセスである。通常、これはＦｃ－Ｆｃγ相互作用により媒介される。細胞に結合した抗体のＦｃ領域は、Ｆｃγ受容体を発現するエフェクター細胞（例えば、ＮＫ細胞）を動員し、エフェクター細胞の脱顆粒及び標的細胞の死滅をもたらす。
「Ｆｃ有効型」とは、機能的Ｆｃ領域（結晶化可能領域）、すなわち突然変異または別の方法で無効化されていないＦｃ領域を含む抗体を指す。Ｆｃ有効型抗体は、減弱されていないＦｃ機能を示す。Ｆｃ有効型抗体は、１つ以上のＦｃγ受容体への結合を低減するように改変または操作または構築されていない、ＩＭＧＴに収載されているヒトＩＧＨＣ重鎖配列を含み得る。例えば、ＩＧＨＣヒンジの突然変異によるか、またはＩｇＧ１／ＩｇＧ２ＡもしくはＩｇＧ１／ＩｇＧ４ ＩＧＨＣ配列のキメラもしくはハイブリッドである重鎖定常ドメインを含む抗体の構築による。
好適には、本発明の抗体またはその抗原結合断片（すなわちポリペプチド）は単離されている。「単離された」ポリペプチドは、元の環境から取り出されたものである。「単離された」という用語は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指すように使用され得る（例えば、Ｖδ１と特異的に結合する単離された抗体またはその断片は、Ｖδ１以外の抗原と特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。「単離された」という用語は、単離された抗体が、医薬組成物の活性成分として製剤化された場合、治療的に投与されるのに十分な純度であるか、または少なくとも７０～８０％（ｗ／ｗ）の純度、より好ましくは、少なくとも８０～９０％（ｗ／ｗ）の純度、更により好ましくは、９０～９５％の純度、最も好ましくは、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％（ｗ／ｗ）の純度である調製物を指すように使用されてもよい。
好適には、本発明において使用されるポリヌクレオチドは単離されている。「単離された」ポリヌクレオチドは、元の環境から取り出されたものである。例えば、天然に存在するポリヌクレオチドは、それが自然系で共存する材料の一部または全てから分離されている場合、単離されている。ポリヌクレオチドは、例えば、その自然環境の一部ではないベクターにクローニングされている場合、またはそれがｃＤＮＡ内に含まれる場合、単離されたとみなされる。
抗体またはその抗原結合断片は、「機能的に活性なバリアント」であり得、機能的に活性なバリアントとしては、天然に存在するアレルバリアント、及び変異体または他の任意の非天然バリアントも挙げられる。当該技術分野において公知のように、アレルバリアントは、ポリペプチドの生物学的機能を本質的に変化させない１つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または付加を有することを特徴とする（ポリ）ペプチドの代替形態である。非限定的な例として、ＣＤＲを含有するフレームワークが改変されても、ＣＤＲ自体が改変されても、上記ＣＤＲが代替のフレームワークにグラフトされても、またはＮ末端もしくはＣ末端の伸長が組み込まれても、上記機能的に活性なバリアントは依然として機能し得る。更に、ＣＤＲ含有結合ドメインは、別の抗体と共有されるものなどの異なるパートナー鎖と対になっていてもよい。いわゆる「共通」軽鎖または「共通」重鎖と共有されても、上記結合ドメインは依然として機能し得る。更に、上記結合ドメインは、多量体化された場合に機能し得る。更に、「抗体またはその抗原結合断片」には、ＶＨもしくはＶＬもしくは定常ドメインが異なるカノニカル配列（例えば、ＩＭＧＴ．ｏｒｇに収載されているもの）から離れるように、またはそれに近づくように改変されており、かつ依然として機能する機能的バリアントも含まれ得る。
２つの密接に関連するポリペプチド配列を比較するために、第１のポリペプチド配列と第２のポリペプチド配列との間の「％配列同一性」が、ＮＣＢＩ ＢＬＡＳＴ ｖ２．０を使用し、ポリペプチド配列での標準設定（ＢＬＡＳＴＰ）を使用して算出され得る。２つの密接に関連するポリヌクレオチド配列を比較するために、第１のポリヌクレオチド配列と第２のポリヌクレオチド配列との間の「配列同一性％」が、ＮＣＢＩ ＢＬＡＳＴ ｖ２．０を使用し、ヌクレオチド配列での標準設定（ＢＬＡＳＴＮ）を使用して算出され得る。
ポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列は、それらの全長にわたって１００％の配列同一性を共有する場合、もう一方のポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列と同じまたは「同一」であると言われる。配列内の残基は、左から右に、すなわち、ポリペプチドではＮ末端からＣ末端まで；ポリヌクレオチドでは５’末端から３’末端まで番号付けられる。
幾つかの実施形態では、配列の任意の特定の％配列同一性は、抗体の６つ全てのＣＤＲ配列なしで算出される。例えば、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、特定の重鎖可変領域配列に対して少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する重鎖可変領域配列、及び／または特定の軽鎖可変領域配列に対して少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する軽鎖可変領域配列を含み得、ここで、あらゆるアミノ酸多様性は、重鎖可変領域配列及び軽鎖可変領域配列のフレームワーク領域でのみ生じる。かかる実施形態では、ある特定の配列同一性を有する抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、対応する抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の重鎖及び軽鎖の完全なＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列を保持する。より具体的な例では、決して限定するものではなく、本発明のこれらの実施形態を更に説明するためだけのものであるが、配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、あらゆるアミノ酸多様性は、重鎖可変領域配列及び軽鎖可変領域配列のフレームワーク領域でのみ生じる。従って、この具体例の抗体は、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を更に含む。
更に、本明細書において提供される抗体及びその抗原結合断片は、κ軽鎖可変配列を含み、セリンではない、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位のアミノ酸残基、例えば、非極性及び／または非生殖細胞系列型の残基を保持していてもよく、例えば、それらはこの位置でロイシン残基を含む。例えば、決して限定するものではなく、本発明のこれらの実施形態を更に説明するためだけのものであるが、配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、あらゆるアミノ酸多様性は、重鎖可変領域配列及び軽鎖可変領域配列のフレームワーク領域でのみ生じ、当該抗体は、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位に非生殖細胞系列型及び／または非極性であるアミノ酸残基（例えば、この位置でのロイシン残基）を含むκ軽鎖可変配列を含む。この具体例の抗体は、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を更に含む。
配列間の「差異」とは、第１の配列と比較した、第２の配列のある位置における単一アミノ酸残基の挿入、欠失、または置換を指す。２つのポリペプチド配列は、１つ、２つ、またはそれ以上のかかるアミノ酸の差異を含み得る。それ以外の点では第１の配列と同一（１００％の配列同一性）である第２の配列における挿入、欠失、または置換は、配列同一性％の減少をもたらす。たとえば、同一の配列が ９ アミノ酸残基の長さである場合、第２の配列における１つの置換は、８８．９％の配列同一性をもたらす。第１のポリペプチド配列及び第２のポリペプチド配列が９のアミノ酸残基長であり、６つの同じ残基を共有する場合、第１のポリペプチド配列及び第２のポリペプチド配列は、６６％超の同一性を共有する（第１のポリペプチド配列及び第２のポリペプチド配列は、６６．７％の同一性を共有する）。
あるいは、第１の参照ポリペプチド配列を第２の比較ポリペプチド配列と比較するために、第２の配列を生成するために第１の配列に加えられた付加、置換、及び／または欠失の数が確認され得る。「付加」とは、第１のポリペプチドの配列への１つのアミノ酸残基の付加である（第１のポリペプチドのいずれかの末端での付加が含まれる）。「置換」とは、第１のポリペプチドの配列における１つのアミノ酸残基の１つの異なるアミノ酸残基での置換である。上記置換は、保存的または非保存的であり得る。「欠失」とは、第１のポリペプチドの配列からの１つのアミノ酸残基の欠失である（第１のポリペプチドのいずれかの末端での欠失が含まれる）。
三文字コード及び一文字コードを使用すると、天然に存在するアミノ酸は、以下のように称され得る：グリシン（ＧまたはＧｌｙ）、アラニン（ＡまたはＡｌａ）、バリン（ＶまたはＶａｌ）、ロイシン（ＬまたはＬｅｕ）、イソロイシン（ＩまたはＩｌｅ）、プロリン（ＰまたはＰｒｏ）、フェニルアラニン（ＦまたはＰｈｅ）、チロシン（ＹまたはＴｙｒ）、トリプトファン（ＷまたはＴｒｐ）、リジン（ＫまたはＬｙｓ）、アルギニン（ＲまたはＡｒｇ）、ヒスチジン（ＨまたはＨｉｓ）、アスパラギン酸（ＤまたはＡｓｐ）、グルタミン酸（ＥまたはＧｌｕ）、アスパラギン（ＮまたはＡｓｎ）、グルタミン（ＱまたはＧｌｎ）、システイン（ＣまたはＣｙｓ）、メチオニン（ＭまたはＭｅｔ）、セリン（ＳまたはＳｅｒ）及びスレオニン（ＴまたはＴｈｒ）。残基がアスパラギン酸またはアスパラギンであり得る場合、記号ＡｓｘまたはＢが使用され得る。残基が任意のアミノ酸であり得る場合、記号ＸａａまたはＸが使用され得る。残基がグルタミン酸またはグルタミンであり得る場合、記号ＧｌｘまたはＺが使用され得る。文脈上別段の定めがない限り、アスパラギン酸への言及は、アスパラギン酸塩を包含し、グルタミン酸への言及は、グルタミン酸塩を包含する。
本明細書で使用する場合、ポリペプチド配列の番号付けならびにＣＤＲ及びＦＲの定義は、文脈で示されるように、ＥＵ及び／またはＩＭＧＴの番号付けシステムに従って定義される通りである。第１のポリペプチド配列と第２のポリペプチド配列との間の「対応する」アミノ酸残基は、文脈で示されるように、ＥＵ及び／またはＩＭＧＴ番号付けシステムに従って、第２の配列におけるアミノ酸残基と同じ位置を共有する、第１の配列におけるアミノ酸残基であるが、当該第２の配列における当該アミノ酸残基は、当該第１の配列とは同一性が異なる場合がある。好適には、対応する残基は、フレームワーク及びＣＤＲがＥＵまたはＩＭＧＴの定義に従って同じ長さである場合、同じ番号（及び文字）を共有する。アラインメントは、手作業で、または例えば、標準設定を使用するＮＣＢＩ ＢＬＡＳＴ ｖ２．０（ＢＬＡＳＴＰまたはＢＬＡＳＴＮ）などの配列アラインメントのための公知のコンピューターアルゴリズムを使用することによって達成され得る。
本明細書における「エピトープ」への言及は、抗体またはその抗原結合断片により特異的に結合される標的の一部を指す。エピトープは「抗原決定基」とも称され得る。抗体が別の抗体と「本質的に同じエピトープ」に結合するのは、それらの両方が同一のまたは立体的に重複するエピトープを認識する場合である。２つの抗体が同一のまたは重複するエピトープに結合するかどうかを決定するために一般的に使用される方法は、競合アッセイであり、これは、標識抗原または標識抗体のいずれかを使用する多数の様々なフォーマット（例えば、放射性標識もしくは酵素標識を使用したウェルプレート、または抗原を発現する細胞でのフローサイトメトリー）で構成され得る。抗体が別の抗体と「同じエピトープ」に結合するのは、それらの両方が同一のエピトープを認識する（すなわち、抗原と抗体との間の全ての接触点が同じである）場合である。
タンパク質標的に見出されるエピトープは、「直鎖状エピトープ」または「立体構造エピトープ」として定義され得る。直鎖状エピトープは、タンパク質抗原におけるアミノ酸の連続配列によって形成されている。立体構造エピトープは、タンパク質配列内で非連続的であるが、タンパク質が三次元構造に折り畳まれると集合されるアミノ酸から形成されている。
本明細書で使用する場合、用語「ベクター」は、核酸分子であって、それが連結されている別の核酸を輸送することができる当該核酸分子を指すことを意図する。ベクターの一種は「プラスミド」であり、これは、追加のＤＮＡ断片がライゲーションされ得る環状二本鎖ＤＮＡループを指す。別の種類のベクターは、追加のＤＮＡ断片がウイルスゲノムにライゲーションされ得るウイルスベクターである。ある特定のベクターは、それらが導入された宿主細胞内で自己複製が可能である（例えば、細菌の複製開始点を有する細菌ベクター及びエピソーム哺乳動物ベクター及び酵母ベクター）。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳動物ベクター）は、宿主細胞への導入の際に宿主細胞のゲノムに組み込まれ得、これにより、宿主ゲノムと共に複製される。更に、ある種のベクターは、それらが作動可能に連結された遺伝子の発現を誘導することができる。かかるベクターは、本明細書において「組換え発現ベクター」、または単に「発現ベクター」と称される。一般に、組換えＤＮＡ技術において有用な発現ベクターは、多くの場合プラスミドの形態である。プラスミドが最も一般的に用いられるベクターの形態であるため、本明細書では、「プラスミド」及び「ベクター」は互換的に使用され得る。しかしながら、本発明は、同等の機能を果たすウイルスベクター（例えば、複製欠損レトロウイルス、アデノウイルス、及びアデノ随伴ウイルス）、ならびに更にはバクテリオファージ及びファージミド系などの他の形態の発現ベクターを包含することを意図する。本明細書で使用する場合、用語「組換え宿主細胞」（または単に「宿主細胞」）は、組換え発現ベクターが導入された細胞を指すことを意図する。かかる用語は、特定の対象細胞を指すだけでなく、例えば、かかる細胞の子孫が、細胞株または細胞バンクを作製するために用いられ、次いで、これらが、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を製造するために任意に保存、提供、販売、譲渡、または利用される場合、当該子孫も指すことを意図する。
「対象」、「患者」、または「個体」への言及は、処置される対象、特に哺乳動物対象を指す。哺乳動物対象としては、ヒト、非ヒト霊長類、家畜（例えば、ウシ）、競技用動物、または愛玩動物、例えば、イヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、またはマウスが挙げられる。幾つかの実施形態では、対象はヒトである。代替的実施形態では、対象はマウスなどの非ヒト哺乳動物である。
用語「十分量」は、所望の効果を引き起こすのに十分な量を意味する。用語「治療上有効量」は、疾患または障害の症状を改善するのに有効な量である。治療上有効量は、予防が治療とみなされ得る場合、「予防上有効量」であり得る。
疾患もしくは障害の徴候もしくは症状の重症度、このような徴候もしくは症状を対象が経験する頻度、またはその両方が（初期の時点、例えば、任意の抗体の投与前と比較して）低減される場合、当該疾患または障害は「軽減」される。
本明細書で使用する場合、「疾患または障害を処置する」とは、対象が経験する疾患または障害の少なくとも１つの徴候または症状の頻度及び／または重症度を（初期の時点、例えば、任意の抗体の投与前と比較して）低減することを意味する。
本明細書で使用する場合、「がん」は、細胞の異常な増殖または分裂を指す。一般に、がん細胞の増殖及び／または寿命は、その周囲の正常な細胞及び組織の増殖及び／または寿命を上回り、それらと協調しない。がんは、良性、前悪性、または悪性であり得る。がんは、口腔（例えば、口、舌、咽頭など）、消化器系（例えば、食道、胃、小腸、結腸、直腸、肝臓、胆管、胆嚢、膵臓など）、呼吸器系（例えば、喉頭、肺、気管支など）、骨、関節、皮膚（例えば、基底細胞、扁平細胞、髄膜腫など）、乳房、生殖器系、（例えば、子宮、卵巣、前立腺、精巣など）、泌尿器系（例えば、膀胱、腎臓、尿管など）、眼、神経系（例えば、脳など）、内分泌系（例えば、甲状腺など）、及び造血系（例えば、リンパ腫、骨髄腫、白血病、急性リンパ球性白血病、慢性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病など）が含まれる、種々の細胞及び組織において発生する。
本明細書で使用する場合、用語「約」は、本明細書で使用される場合、指定される値より１０％高い値（この値を含む）まで及び１０％低い値（この値を含む）までを包含し、好適には、指定される値より５％高い値（この値を含む）まで及び５％低い値（この値を含む）までを包含し、特に指定される値を包含する。用語「間」は、指定される境界の値を包含する。
抗体及びその抗原結合断片
本明細書において、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のδ可変部１鎖（Ｖδ１）に特異的に結合することができる抗体またはその抗原結合断片が提供される。本発明は、処置される対象に投与するための薬剤としての上記抗体の使用に関する。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、可変ドメイン（例えば、ＶＨまたはＶＬ）、ダイアボディ、ミニボディ、またはモノクローナル抗体である。更なる実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、ｓｃＦｖである。
本発明の抗体は、任意のクラス、例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはそれらのアイソタイプの抗体であり得、κ軽鎖またはλ軽鎖を含み得る。一実施形態では、抗体は、ＩｇＧ抗体、例えば、アイソタイプであるＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のうちの少なくとも１つである。更なる実施形態では、抗体は、所望の特性を付与するために改変された、例えば、エフェクター機能を低減するように、半減期を延長するように、ＡＤＣＣを変化させるように、またはヒンジ安定性を改善するように変異したＦｃを有する、ＩｇＧフォーマットなどのフォーマットであり得る。かかる改変は、当該技術分野において周知である。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片はヒトである。従って、抗体またはその抗原結合断片は、ヒト免疫グロブリン（Ｉｇ）配列に由来し得る。抗体（またはその抗原結合断片）のＣＤＲ、フレームワーク、及び／または定常領域は、ヒトＩｇ配列、特にヒトＩｇＧ配列に由来し得る。ＣＤＲ、フレームワーク及び／または定常領域は、ヒトＩｇ配列、特にヒトＩｇＧ配列について実質的に同一であり得る。ヒト抗体を使用する利点は、それらがヒトにおいて低免疫原性または非免疫原性であることである。
抗体またはその抗原結合断片は、キメラ、例えば、マウス／ヒトキメラ抗体であってもよい。
あるいは、抗体またはその抗原結合断片は、マウスなどの非ヒト種に由来する。かかる非ヒト抗体は、ヒトにおいて天然に産生される抗体バリアントに対する類似性を増加させるために改変され得、これにより、抗体またはその抗原結合断片は、部分的または完全にヒト化され得る。従って、一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片はヒト化されている。
本明細書において提供される特異的抗体の概要
本発明により提供される特異的な抗原結合分子（すなわち抗体）の一部の概要を以下に示すと共に、添付の配列表における割り当てられた配列番号を明示する。抗原結合性のバリアント、誘導体、及びそれらの断片も本発明の一部として提供される。配列は、付属の配列表及び添付の図に示される。配列表における配列と図４５～４８における配列との間に相違がある場合、図の配列が優先されるべきである。




































































































ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７に由来する抗体
本発明は、親抗体ＡＤＴ１－４（配列番号１に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号２６に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来する抗体、及び親抗体ＡＤＴ１－７（配列番号１０６に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号１１８に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来する抗体を提供する。ＡＤＴ１－４は本明細書においてＧ０４とも称され、ＡＤＴ１－４及びＧ０４は互換的に使用される。ＡＤＴ１－７は本明細書においてＥ０７とも称され、ＡＤＴ１－７及びＥ０７は互換的に使用される。
幾つかの実施形態では、本発明は、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片を提供する：
配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
幾つかの実施形態では、本発明は、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片を提供する：
配列番号５１、５２、及び１３０からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３及び１３１からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；ならびに
配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９及び１４４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０及び１４５からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；ならびに
配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
幾つかの実施形態では、本発明は、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片を提供する：
配列番号２～２５及び１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０及び１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４に由来する抗体
本発明は、例えば、以下に記載されるような、親抗体ＡＤＴ１－４（配列番号１に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号２６に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来する抗体を提供する。ＡＤＴ１－４は本明細書においてＧ０４とも称され、ＡＤＴ１－４及びＧ０４は互換的に使用される。
ＡＤＴ１－４に由来する特定のＣＤＲ配列を含む抗体
本明細書において提供される抗体は、ＡＤＴ１－４に由来する特定の配列を有する以下の抗体を含む。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号５５～７８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または配列番号８２～１０５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
幾つかの実施形態では、配列番号５５～７７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または配列番号８２～１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
幾つかの実施形態では、配列番号５８、６０、６１、６２、６５、６６、６８、７４、７６、及び７７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または配列番号８５、８７、８８、８９、９２、９３、９５、１０１、１０３、及び１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号５１及び５２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；ならびに
配列番号５５～７８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８２～１０５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号５１及び５２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；ならびに
配列番号５５～７７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８２～１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号５１及び５２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；ならびに
配列番号５８、６０、６１、６２、６５、６６、６８、７４、７６、及び７７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８５、８７、８８、８９、９２、９３、９５、１０１、１０３、及び１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
ａ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｂ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｃ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｄ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｅ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｆ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｇ）それぞれ配列番号５２、５３、及び６１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｈ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｉ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｊ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｋ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｌ）それぞれ配列番号５２、５３、及び６６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｍ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｎ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｏ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｐ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｑ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｒ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｓ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１００のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｔ）それぞれ配列番号５２、５３、及び７４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｕ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｖ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｗ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；または
ｘ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３。
抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、κ軽鎖可変配列を含み得（またはκ軽鎖可変配列に由来する可変軽鎖を含む）、ここで、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って当該κ軽鎖可変配列の７４位の残基は、セリンではなく、例えば、７４位の非ヒト生殖細胞系列残基及び／または非極性残基、例えば、７４位の残基は、ロイシン残基である。
更なる実施形態は以下で提供される。
ＡＤＴ１－４－１０５ならびにその断片及びバリアント
ある特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１０５ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号５５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号５５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－１０５に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１０５に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１０７ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１０７ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号５６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号５６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－１０７に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１０７に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１１０ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１１０ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号５７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号５７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－１１０に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１１０に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１１２ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１１２ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号５８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号５８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－１１２に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１１２に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１１７ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１１７ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号５９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号５９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－１１７に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１１７に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１９ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１９ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号６０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－１９に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１９に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－２１ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－２１ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号６１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－２１に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－２１に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－３１ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－３１ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号６２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－３１に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－３１に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１３９ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１３９ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号６３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－１３９に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１３９に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－４ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－４ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号６４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－４に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－４に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１４３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１４３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号６５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－１４３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１４３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－５３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－５３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号６６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－５３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－５３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１７３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１７３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号６７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－１７３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１７３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－２ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－２ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号６８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－２に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－２に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－８ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号６９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－８に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－８に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－８２ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８２ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号７０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－８２に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－８２に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－８３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号７１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－８３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－８３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号７２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－８４ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８４ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号７３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－８４に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１００のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１００のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－８４に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－８６ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８６ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号７４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－８６に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－８６に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－９５ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－９５ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号７５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－９５に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－９５に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号７６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－１に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。

ＡＤＴ１－４－１に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－６ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－６ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号７７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－６に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－６に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１３８ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１３８ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号７８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－４－１３８に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１３８に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４に由来する重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域を含む抗体
本明細書において、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される：
配列番号２～２５からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
本明細書において、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号２～２５からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域であって、当該重鎖可変領域配列が配列番号１ではない、当該重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域であって、当該軽鎖可変領域配列が配列番号２６ではない、当該軽鎖可変領域配列。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号２～２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号５、７、８、９、１２、１３、１５、２１、２３、及び２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号３０、３２、３３、３４、３７、３８、４０、４６、４８、及び４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
本明細書において、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される：
配列番号２～２５からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号２～２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号５、７、８、９、１２、１３、１５、２１、２３、及び２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号３０、３２、３３、３４、３７、３８、４０、４６、４８、及び４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
本明細書において、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される：
配列番号２～２５からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号２～２４からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～４９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号５、７、８、９、１２、１３、１５、２１、２３、及び２４からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号３０、３２、３３、３４、３７、３８、４０、４６、４８、及び４９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される：
ａ）配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）配列番号１２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）配列番号１３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）配列番号１９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される：
ａ）配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）配列番号１２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）配列番号１３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）配列番号１９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
幾つかの実施形態では、
ａ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列を含む、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供され、
ここで、任意により、当該ＶＨ配列は、配列番号１ではなく、及び／または当該ＶＬ配列は、配列番号２６ではない。
「両方の可変領域全体で」とは、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の両方を考慮に入れる場合に、全体として、抗体が指定される合計数までの置換を含み得ることを意味する。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。幾つかの実施形態では、置換（存在する場合）は、可変領域配列のどの箇所でも生じ得る。好ましい実施形態では、置換（存在する場合）は、フレームワーク領域に限定され得る。従って、幾つかの実施形態では、アミノ酸置換は、ＣＤＲ配列では生じない。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される：
ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
定義されたＶＨ及び／またはＶＬ配列（例えば、ある特定の同一性パーセント及び／または置換を有すると定義される任意のＶＨ及び／またはＶＬ配列）に関する任意の実施形態では、好ましくは、ＶＨ配列は配列番号１ではなく、ＶＬ配列は配列番号２６ではない。
ＡＤＴ１－４に由来する他の抗体
一実施形態では、
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１５８）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６２）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６６）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供され、
ここで、Ｘ１～Ｘ１３の各々は、天然に存在するアミノ酸である。
一実施形態では、
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１５９）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６３）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６７）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供され、
ここで、Ｘ１はＡ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＳ及びＴからなる群から選択され、Ｘ３はＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、Ｘ４はＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ５はＹ及びＮからなる群から選択され、Ｘ６はＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、Ｘ７はＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、Ｘ８はＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＳ及びＫからなる群から選択され、Ｘ１０はＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ１１はＰ、Ｈ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ１２はＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、Ｘ１３はＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される。抗体は、配列番号１７０または１７１の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１７２の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１７７または１７８の配列を含むＬＦＲ３配列；及び配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
一実施形態では、
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１６０）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６４）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６８）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供され、
ここで、Ｘ１はＡ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＳ及びＴからなる群から選択され、Ｘ３はＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、Ｘ４はＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ５はＹ及びＮからなる群から選択され、Ｘ６はＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、Ｘ７はＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、Ｘ８はＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＳ及びＫからなる群から選択され、Ｘ１０はＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ１１はＰ及びＨからなる群から選択され、Ｘ１２はＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、Ｘ１３はＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される。抗体は、配列番号１７０または１７１の配列を含むＨＦＲ１配列、配列番号１７２の配列を含むＨＦＲ２配列、配列番号１７３の配列を含むＨＦＲ３配列、配列番号１７４の配列を含むＨＦＲ４配列、配列番号１７５の配列を含むＬＦＲ１配列、配列番号１７６の配列を含むＬＦＲ２配列、配列番号１７７の配列を含むＬＦＲ３配列、及び配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
一実施形態では、
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１６１）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６５）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６９）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供され、
ここで、Ｘ１はＡ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＳ及びＴからなる群から選択され、Ｘ３はＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、Ｘ４はＧ及びＤからなる群から選択され、Ｘ５はＹ及びＮからなる群から選択され、Ｘ６はＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、Ｘ７はＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、Ｘ８はＫ及びＲからなる群から選択され、Ｘ９はＳ及びＫからなる群から選択され、Ｘ１０はＴ、Ｑ、Ａ、及びＥからなる群から選択され、Ｘ１１はＰ及びＨからなる群から選択され、Ｘ１２はＱ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、及びＩからなる群から選択され、Ｘ１３はＶ及びＬからなる群から選択される。抗体は、配列番号１７０または１７１の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１７２の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１７７の配列を含むＬＦＲ３配列；及び配列番号１７９または１８１の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
ＡＤＴ１－７由来の抗体
本発明は、例えば、以下に記載されるような、親抗体ＡＤＴ１－７（配列番号１０６に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号１１８に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来する抗体を提供する。ＡＤＴ１－７は本明細書においてＥ０７とも称され、ＡＤＴ１－７及びＥ０７は互換的に使用される。
ＡＤＴ１－７に由来する特定のＣＤＲ配列を含む抗体
本明細書において提供される抗体は、ＡＤＴ１－７に由来する特定の配列を有する以下の抗体を含む。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１３３～１４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または配列番号１４７～１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
幾つかの実施形態では、配列番号１３８、１４２、及び１４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５２、１５６、及び１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号１３１のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；ならびに
配列番号１３３～１４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号１４５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号１４７～１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号１３１のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；ならびに
配列番号１３８、１４２、及び１４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号１４５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号１５２、１５６、及び１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
更なる実施形態は以下で提供される。
ＡＤＴ１－７－１０ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１０ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１３３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－７－１０に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－１０に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－１５ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１５ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１３４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－７－１５に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－１５に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－１７ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１７ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１３５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－７－１７に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－１７に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－１８ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１８ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１３６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－７－１８に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－１８に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－１９ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１９ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１３７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－７－１９に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－１９に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－２０ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－２０ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１３８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－７－２０に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－２０に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－２２ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－２２ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１３９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－７－２２に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－２２に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－２３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－２３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１４０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１４０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－７－２３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－２３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－４２ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－４２ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１４１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１４１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－７－４２に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－４２に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１４２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１４２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－７－３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－３に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－６１ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－６１ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、配列番号１４３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１４３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。
ＡＤＴ１－７－６１に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－６１に由来するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、以下を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７に由来する重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域を含む抗体
本明細書において、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される：
配列番号１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
本明細書において、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域であって、当該重鎖可変領域配列が配列番号１０６ではない、当該重鎖可変領域；及び／または
配列番号１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域であって、当該軽鎖可変領域配列が配列番号１１８ではない、当該軽鎖可変領域配列。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号１１２、１１６、及び１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１２４、１２８、及び１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
本明細書において、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される：
配列番号１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号１１２、１１６、及び１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１２４、１２８、及び１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
本明細書において、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される：
配列番号１０７～１１７からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１１９～１２９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号１１２、１１６、及び１１７からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１２４、１２８、及び１２９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
幾つかの実施形態では、
ａ）配列番号１０７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号１０８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号１０９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号１１０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号１１１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号１１２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号１１３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号１１４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１１５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供され、
ここで、任意により、ＶＨ配列は配列番号１０６ではなく、及び／またはＶＬ配列は配列番号１１８でない。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される：
ａ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
「両方の可変領域全体で」とは、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の両方を考慮に入れる場合に、全体として、抗体が指定される合計数までの置換を含み得ることを意味する。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。幾つかの実施形態では、置換（存在する場合）は、可変領域配列のどの箇所でも生じ得る。好ましい実施形態では、置換（存在する場合）は、フレームワーク領域に限定され得る。従って、幾つかの実施形態では、アミノ酸置換は、ＣＤＲ配列では生じない。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
幾つかの実施形態では、以下を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供される：
ａ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号１０８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号１０９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号１１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号１１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
定義されたＶＨ及び／またはＶＬ配列（例えば、ある特定の同一性パーセント及び／または置換を有すると定義される任意のＶＨ及び／またはＶＬ配列）に関する任意の実施形態では、好ましくは、ＶＨ配列は配列番号１０６ではなく、ＶＬ配列は配列番号１１８ではない。
ＡＤＴ１－７に由来する他の抗体
一実施形態では、
ａ）配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩ（配列番号１８３）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔ（配列番号１８６）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供され、
ここで、Ｘ１～Ｘ９の各々は、天然に存在するアミノ酸である。
一実施形態では、
ａ）配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩ（配列番号１８４）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔ（配列番号１８７）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供され、
ここで、Ｘ１はＤ、Ｉ、及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＤ及びＳからなる群から選択され、Ｘ３はＮ、Ｅ、Ｄ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、Ｘ４はＤ及びＥからなる群から選択され、Ｘ５はＴ及びＳからなる群から選択され、Ｘ６はＡ、Ｇ、Ｙ、及びＳからなる群から選択され、Ｘ７はＳ及びＤからなる群から選択され、Ｘ８はＴ、Ｅ、及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＬ及びＤからなる群から選択される。抗体は、配列番号１８９の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１９０の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１９１の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１９２の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１９３及び１９４の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１９５の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１９６の配列を含むＬＦＲ３配列；ならびに配列番号１９７の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
一実施形態では、
ａ）配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩ（配列番号１８５）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔ（配列番号１８８）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片が提供され、
ここで、Ｘ１はＤ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＤ及びＳからなる群から選択され、Ｘ３はＤ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、Ｘ４はＤ及びＥからなる群から選択され、Ｘ５はＳであり、Ｘ６はＡ及びＹからなる群から選択され、Ｘ７はＳであり、Ｘ８はＥ及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＬ及びＤからなる群から選択される。抗体は、配列番号１８９の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１９０の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１９１の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１９２の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１９３の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１９５の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１９６の配列を含むＬＦＲ３配列；及び配列番号１９７の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
配列置換を有する抗体
当業者は、様々なアミノ酸が類似の特性を有することを知っている。物質の１つ以上のかかるアミノ酸は、多くの場合、その物質の所望の活性を除去することなく、１つ以上の他のかかるアミノ酸により置換され得る。
従って、アミノ酸のグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、及びイソロイシンは、多くの場合、互いに置換され得る（脂肪族側鎖を有するアミノ酸）。これらの可能な置換のうち、グリシン及びアラニンが（それらが比較的短い側鎖を有するため）互いに置換するために使用されることが好ましく、バリン、ロイシン、及びイソロイシンが（それらが疎水性のより大きな脂肪族側鎖を有するため）互いに置換するために使用されることが好ましい。多くの場合、互いに置換され得る他のアミノ酸としては、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファン（芳香族側鎖を有するアミノ酸）；リジン、アルギニン、及びヒスチジン（塩基性側鎖を有するアミノ酸）；アスパラギン酸及びグルタミン酸（酸性側鎖を有するアミノ酸）；アスパラギン及びグルタミン（アミド側鎖を有するアミノ酸）；ならびにシステイン及びメチオニン（硫黄を含む側鎖を有するアミノ酸）が挙げられる。
「保存的」アミノ酸置換は、アミノ酸残基が類似の化学構造の別のアミノ酸残基と置き換えられ、ポリペプチドの機能、活性、または他の生物学的性質に対してほとんど影響を及ぼさないと予想されるアミノ酸置換である。かかる保存的置換は、好適には、以下の群内の１つのアミノ酸が同じ群内の別のアミノ酸残基により置換される置換である。
Figure 2024506682000008
好適には、疎水性アミノ酸残基は、非極性アミノ酸である。より好適には、疎水性アミノ酸残基は、Ｖ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｆ、Ｗ、またはＣから選択される。幾つかの実施形態では、疎水性アミノ酸残基は、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファンから選択される。
従って、「保存的」アミノ酸置換への言及は、抗体（例えば、ＣＤＲまたはＶＨもしくはＶＬ配列における）の配列内のアミノ酸のうちの１つ以上が上記のような同じ分類の別のアミノ酸で置換されるアミノ酸置換を指す。抗体の機能への悪影響を最小限にするために、ＣＤＲ領域における保存的アミノ酸置換が好ましくてもよい。しかしながら、保存的アミノ酸置換は、フレームワーク領域で生じてもよい。従って、幾つかの実施形態では、ＣＤＲにおけるあらゆる置換が保存的置換であり得るが、フレームワーク領域における置換は、天然に存在するアミノ酸ともう一方の他の天然に存在するアミノ酸との置換によるものであり得る。
本明細書に記載される抗体について示されるアミノ酸配列と比較したアミノ酸欠失または挿入がなされてもよい。従って、例えば、ポリペプチドの活性に対して実質的に影響を及ぼさないか、または少なくともかかる活性を除去しないアミノ酸が除去され得る。かかる欠失は、活性を依然として保持しながらポリペプチドの全長及び分子量が低減され得るため、有利であり得る。このことは、特定の目的に必要とされるポリペプチドの量が低減されることを可能にし得、例えば、投与量レベルが低減され得る。
本明細書において提供される配列と比較したアミノ酸変化は、任意の好適な技術を使用して、例えば、部位特異的変異誘発または固相合成を使用してなされ得る。
本発明の範囲内のアミノ酸置換または挿入は、天然に存在するアミノ酸または非天然アミノ酸を使用してなされ得るが、天然に存在するアミノ酸が好ましくてもよいことが理解されよう。天然または合成アミノ酸が使用されるか否かにかかわらず、Ｌ－アミノ酸のみが存在することが好ましくてもよい。
提供される配列において任意のアミノ酸置換を含む種々の実施形態が本明細書において提供される。加えて、本発明の一実施形態では、抗体の結合ドメインまたは抗原結合ドメインにおける最大１０、好適には、最大５つ、または好適には、最大２つのアミノ酸置換を含む本発明の抗体またはその抗原結合断片が提供される。例えば、本発明の一実施形態では、Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、当該抗体またはその抗原結合断片は、ＡＤＴ１－４－１０５、ＡＤＴ１－４－１０７、ＡＤＴ１－４－１１０、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１１７、ＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－１３９、ＡＤＴ１－４－４、ＡＤＴ１－４－１４３、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－１７３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８、ＡＤＴ１－４－８２、ＡＤＴ１－４－８３、ＡＤＴ１－４－３、ＡＤＴ１－４－８４、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－９５、ＡＤＴ１－４－１、ＡＤＴ１－４－６、ＡＤＴ１－４－１３８、ＡＤＴ１－７－１０、ＡＤＴ１－７－１５、ＡＤＴ１－７－１７、ＡＤＴ１－７－１８、ＡＤＴ１－７－１９、ＡＤＴ１－７－２０、ＡＤＴ１－７－２２、ＡＤＴ１－７－２３、ＡＤＴ１－７－４２、ＡＤＴ１－７－３、及びＡＤＴ１－７－６１からなる群から選択される抗体の６つのＣＤＲ領域を含み、当該抗体またはその抗原結合断片は、その全てのＣＤＲ領域全体で最大１０のアミノ酸置換、好適には、最大５つのアミノ酸置換または最大２つのアミノ酸置換を有する。本発明の別の実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、当該抗体またはその抗原結合断片は、ＡＤＴ１－４－１０５、ＡＤＴ１－４－１０７、ＡＤＴ１－４－１１０、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１１７、ＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－１３９、ＡＤＴ１－４－４、ＡＤＴ１－４－１４３、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－１７３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８、ＡＤＴ１－４－８２、ＡＤＴ１－４－８３、ＡＤＴ１－４－３、ＡＤＴ１－４－８４、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－９５、ＡＤＴ１－４－１、ＡＤＴ１－４－６、ＡＤＴ１－４－１３８、ＡＤＴ１－７－１０、ＡＤＴ１－７－１５、ＡＤＴ１－７－１７、ＡＤＴ１－７－１８、ＡＤＴ１－７－１９、ＡＤＴ１－７－２０、ＡＤＴ１－７－２２、ＡＤＴ１－７－２３、ＡＤＴ１－７－４２、ＡＤＴ１－７－３、及びＡＤＴ１－７－６１からなる群から選択される抗体のＶＨ及びＶＬ配列を含み、当該抗体は、そのＶＨ及びＶＬ配列全体で最大１０のアミノ酸置換、好適には、最大５つのアミノ酸置換または最大２つのアミノ酸置換を有する。本発明の更に他の実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、当該抗体またはその抗原結合断片は、ＡＤＴ１－４－１０５、ＡＤＴ１－４－１０７、ＡＤＴ１－４－１１０、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１１７、ＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－１３９、ＡＤＴ１－４－４、ＡＤＴ１－４－１４３、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－１７３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８、ＡＤＴ１－４－８２、ＡＤＴ１－４－８３、ＡＤＴ１－４－３、ＡＤＴ１－４－８４、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－９５、ＡＤＴ１－４－１、ＡＤＴ１－４－６、ＡＤＴ１－４－１３８、ＡＤＴ１－７－１０、ＡＤＴ１－７－１５、ＡＤＴ１－７－１７、ＡＤＴ１－７－１８、ＡＤＴ１－７－１９、ＡＤＴ１－７－２０、ＡＤＴ１－７－２２、ＡＤＴ１－７－２３、ＡＤＴ１－７－４２、ＡＤＴ１－７－３、及びＡＤＴ１－７－６１からなる群から選択される抗体であり、当該抗体は、最大１０のアミノ酸置換、好適には、最大５つのアミノ酸置換または最大２つのアミノ酸置換を有する。当然のことながら、置換は、元のＣＤＲまたは出発抗体の可変鎖配列を基準にした置換である。
幾つかの実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は、ＣＤＲ領域または複数のＣＤＲ領域に存在する。他の実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は、フレームワーク領域に存在し、すなわち、重鎖及び軽鎖可変部に存在するが、ＣＤＲ領域または複数のＣＤＲ領域には存在しない。他の実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は、重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域における任意の位置に存在し得る。幾つかの実施形態では、アミノ酸置換は、ＣＤＲ配列では生じない。
幾つかの実施形態では、アミノ酸置換は、抗体の結合特異性及び／または親和性に悪影響を及ぼさない。従って、バリアント抗体は、それが由来する抗体と同じ（または実質的に同じ）か、または優れた機能プロファイルを有し得る。
幾つかの実施形態では、アミノ酸置換は、特定の抗原に対する抗体の結合親和性を増加させるために実行され得る。例えば、軽鎖の（可変領域の）７４位のセリンの変異誘発に関する本発明の実施形態では、置換は、抗体が調製されたヒト抗原のカニクイザルホモログに対する抗体の交差反応性を増加させるためになされ得る。上記の他の置換と異なり、この置換は、好ましくは非保存的であり得る。幾つかの実施形態では、置換は、７４位セリンの非極性アミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸）への置換であり得る。あるいは、７４位セリンは、非ヒト生殖細胞系列型アミノ酸（例えば、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸）で置換され得る。幾つかの実施形態では、セリンは、非生殖細胞系列型であり、かつ非極性であるアミノ酸、すなわち、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸で置換され得る。幾つかの実施形態では、セリンは、ロイシンで置換されていてもよい。
エピトープ
本明細書において、γδＴＣＲのＶδ１鎖のエピトープに結合する抗体（またはその抗原結合断片）が提供される。かかる結合は、活性化などのγδＴＣＲ活性に対する効果を任意に有し得る。本発明の抗体は、γδＴＣＲのＶδ１鎖に特異的であり、他の抗原、例えば、γδＴＣＲのＶδ２鎖またはγδＴＣＲのＶδ３鎖のエピトープに結合しない。本発明の抗体は、少なくとも結合時にＶδ１細胞に与えられるアゴニスト効果に関して、アゴニスト抗体とみなされ得る。
一実施形態では、エピトープは、γδＴ細胞の活性化エピトープであり得る。「活性化」エピトープは、例えば、ＴＣＲ機能の活性化、例えば、細胞脱顆粒、ＴＣＲ下方調節、細胞傷害性、増殖、動員、生存期間延長もしくは疲弊に対する耐性の増加、細胞内シグナル伝達、サイトカインもしくは増殖因子の分泌、表現型変化、または遺伝子発現の変化を含み得る。例えば、活性化エピトープの結合は、γδＴ細胞集団、好ましくは、Ｖδ１＋Ｔ細胞集団の増大（すなわち増殖）を刺激し得る。従って、これらの抗体は、γδＴ細胞活性化を調節し、これにより、免疫応答を調節するために使用され得る。従って、一実施形態では、活性化エピトープの結合は、γδＴＣＲを下方調節する。追加のまたは代替的実施形態では、活性化エピトープの結合は、γδＴ細胞の脱顆粒を活性化する。更なる追加のまたは代替的実施形態では、活性化エピトープの結合は、γδＴ細胞による殺傷を促進する。
幾つかの実施形態では、ＴＲＤＶ１の活性化エピトープは、抗体により結合されると、受容体の下方調節をもたらし、任意により、Ｖδ１細胞を活性化するものである。幾つかの実施形態では、活性化エピトープは、Ｖδ１細胞上の活性化マーカー、例えば、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ２５、ＣＤ６９、及び／またはＫｉ６７の発現を上方調節するものである。幾つかの実施形態では、活性化エピトープは、Ｖδ１細胞上の活性化マーカー、例えば、ＣＤ１０７及びＣＤ２５、ならびに任意により、ＣＤ６９及び／またはＫｉ６７の発現を上方調節するものである。幾つかの実施形態では、１種以上の活性化マーカー（例えば、ＣＤ１０７ａ）の上方調節は、がん細胞の存在下での上方調節であり得る。本発明の好ましい実施形態では、抗体は、特にＴＲＤＶ１結合ドメインを介して、ＴＲＤＶ１の活性化エピトープに結合する。
多くの場合、Ｔ細胞受容体は他のタンパク質と複合体を形成しているため、Ｖδ１抗体結合によるＴ細胞受容体の下方調節は、Ｔ細胞受容体と会合した他のタンパク質の下方調節を引き起こし得る（すなわち、Ｖδ１抗体の結合がＴ細胞受容体複合体の下方調節を引き起こす）。例えば、幾つかの実施形態では、ＴＲＤＶ１の活性化エピトープは、結合時にＴＣＲ／ＣＤ３受容体複合体を下方調節するものである。このようにして、本発明の抗体は、抗体により結合されないが、Ｔ細胞受容体と複合体を形成している細胞表面タンパク質の間接的な下方調節を引き起こし得る。γδ１鎖を発現するＴ細胞（すなわちＶδ１細胞）が全Ｔ細胞集団のほんの少数であることを考慮すると、本発明の抗体は、Ｖδ１細胞におけるＴＣＲ複合体のみを下方調節することにより、ＴＣＲ複合体のタンパク質、例えば、ＣＤ３を選択的に（かつ間接的に）下方調節するために使用され得る。
幾つかの実施形態では、Ｔ細胞受容体複合体活性化エピトープは、活性化時に、当該ＴＲＤＶ１ ＴＣＲ複合体と会合していないＣＤ３分子を下方調節することなく、Ｔ細胞受容体複合体を下方調節するものである。
エピトープは、好ましくは、γδＴＣＲのＶδ１鎖の少なくとも１つの細胞外部分、可溶性部分、親水性部分、または外部部分から構成される。
特に、エピトープは、γδＴＣＲのＶδ１鎖の超可変領域、特にＶδ１鎖のＣＤＲ３に見出されるエピトープを含まない。好ましい実施形態では、エピトープは、γδＴＣＲのＶδ１鎖の非可変領域内に存在する。かかる結合は、高度に可変的なＴＣＲの配列（特にＣＤＲ３）に限定されることなく、Ｖδ１鎖固有の認識を可能にすることが理解されよう。抗原を認識する様々なγδＴＣＲ複合体は、Ｖδ１鎖の存在によってのみ、このようにして認識され得る。従って、任意のＶδ１鎖を含むγδＴＣＲが、γδＴＣＲの特異性にかかわらず、本明細書で定義される抗体またはその抗原結合断片を使用して認識され得ることが理解されよう。一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸１～２４及び／または３５～９０の領域内の１つ以上のアミノ酸残基、例えば、ＣＤＲ１及び／またはＣＤＲ３配列の一部ではないＶδ１鎖の部分を含む。一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸９１～１０５（ＣＤＲ３）の領域内のアミノ酸残基を含まない。
幾つかの実施形態では、エピトープは、ＴＲＤＶ－１ ＣＤＲ２配列におけるアミノ酸を含む。
γδＴ細胞は、十分に特徴付けられたαβＴ細胞と同様の様式で、体細胞再構成された可変遺伝子（Ｖ）、多様性遺伝子（Ｄ）、結合遺伝子（Ｊ）、及び定常遺伝子（Ｃ）の異なるセットを利用するが、γδＴ細胞は、αβＴ細胞より少数のＶ、Ｄ、及びＪセグメントを有する。一実施形態では、抗体（またはその抗原結合断片）により結合されるエピトープは、Ｖδ１鎖のＪ領域（例えば、ヒトδ１鎖生殖細胞系列にコードされる以下の４つのＪ領域のうちの１つ：配列番号３０１（Ｊ１＊０）または３０２（Ｊ２＊０）または３０３（Ｊ３＊０）または３０４（Ｊ４＊０））またはＶδ１鎖のＣ領域（例えば、Ｃ末端膜近傍領域／膜貫通領域を含む配列番号３０５（Ｃ１＊０））に見出されるエピトープを含まない。一実施形態では、抗体（またはその抗原結合断片）により結合されるエピトープは、Ｖδ１鎖のＮ末端リーダー配列（例えば、配列番号２９９）に見出されるエピトープを含まない。従って、抗体または断片は、Ｖδ１鎖のＶ領域（例えば、配列番号３００）のみに結合し得る。従って、一実施形態では、エピトープは、γδＴＣＲのＶ領域内のエピトープ（例えば、配列番号２７２のアミノ酸残基１～９０）からなる。
Ｌｕｏｍａ ｅｔ ａｌ．（２０１３） Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ３９：１０３２－１０４２及びＲＣＳＢタンパク質データバンク登録番号：３ＯＭＺに記載されており、以下の配列番号２７２として示される配列に由来するＶδ１配列を参照して、エピトープへの言及がなされる：
ＡＱＫＶＴＱＡＱＳＳＶＳＭＰＶＲＫＡＶＴＬＮＣＬＹＥＴＳＷＷＳＹＹＩＦＷＹＫＱＬＰＳＫＥＭＩＦＬＩＲＱＧＳＤＥＱＮＡＫＳＧＲＹＳＶＮＦＫＫＡＡＫＳＶＡＬＴＩＳＡＬＱＬＥＤＳＡＫＹＦＣＡＬＧＥＳＬＴＲＡＤＫＬＩＦＧＫＧＴＲＶＴＶＥＰＮＩＱＮＰＤＰＡＶＹＱＬＲＤＳＫＳＳＤＫＳＶＣＬＦＴＤＦＤＳＱＴＮＶＳＱＳＫＤＳＤＶＹＩＴＤＫＴＶＬＤＭＲＳＭＤＦＫＳＮＳＡＶＡＷＳＮＫＳＤＦＡＣＡＮＡＦＮＮＳＩＩＰＥＤＴＦＦＰＳＰＥＳＳ（配列番号２７２）。
配列番号２７２は、Ｖ領域（可変ドメインとも称される）、Ｄ領域、Ｊ領域、及びＴＣＲ定常領域を含む可溶性ＴＣＲを示す。Ｖ領域はアミノ酸残基１～９０を含み、Ｄ領域はアミノ酸残基９１～１０４を含み、Ｊ領域はアミノ酸残基１０５～１１５を含み、定常領域（Ｔ細胞受容体αに由来する）はアミノ酸残基１１６～２０９を含む。Ｖ領域内では、ＣＤＲ１は、配列番号２７２のアミノ酸残基２５～３４と定義され、ＣＤＲ２は、配列番号２７２のアミノ酸残基５０～５４と定義され、ＣＤＲ３は、配列番号２７２のアミノ酸残基９３～１０４と定義される（Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ＵＳＡ １０８（６）：２４１４－２４１９（２０１１））。
従って、本発明の態様によれば、以下のアミノ酸領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに結合する単離抗体またはその抗原結合断片が提供される：
（Ｉ）配列番号２７２の３～２０；及び／または
（ｉｉ）配列番号２７２の３７～７７。
本発明の任意の態様では、以下のアミノ酸領域内の１つ以上のアミノ酸残基からなる、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに結合する単離抗体またはその抗原結合断片が提供される：
（Ｉ）配列番号２７２の３～２０；及び／または
（ｉｉ）配列番号２７２の３７～７７。
更なる実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号３０６のアミノ酸残基１～９０のエピトープを含むか、またはそれからなる多型Ｖ領域を追加的に認識する。従って、配列番号２７２のアミノ酸１～９０及び多型の生殖細胞系列バリアント配列（配列番号３０６のアミノ酸１～９０）は、本明細書に記載されるエピトープを定義する場合に互換的とみなされ得る。本明細書において示される研究は、本発明の抗体がこの生殖細胞系列配列の両方のバリアントを認識できることを実証した。一例として、本明細書で定義される抗体またはその抗原結合断片が、配列番号２７２のアミノ酸１～２４及び／または３５～９０の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープを認識すると記述されている場合、それらは、配列番号３０６における同等のエピトープ（すなわち同じ位置）を追加的に認識する。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２７２のアミノ酸１～９０の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を認識する。より具体的には、一実施形態では、本明細書で定義される抗体またはその抗原結合断片は、ヒト生殖細胞系列型エピトープを認識し、ここで、当該生殖細胞系列は、配列番号２７２の７１位でアラニン（Ａ）またはバリン（Ｖ）のいずれかをコードする。
一実施形態では、エピトープは、記載される領域内の１つ以上、例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。
更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３～２０の領域内の１つ以上（例えば、５つ以上、例えば、１０以上）のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。代替の実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３７～７７の領域（例えば、アミノ酸５０～５４の領域）内の１つ以上（例えば、５つ以上、例えば、１０以上）のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。更に他の実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３～２０（例えば、５～２０または３～１７）の領域内の１つ以上（例えば、５つ以上、例えば、１０以上）のアミノ酸残基、及びアミノ酸３７～７７（例えば、６２～７７または６２～６９）の領域内の１つ以上（例えば、５つ以上、例えば、１０以上）のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。
上記抗体（またはその抗原結合断片）は、定義される範囲内の全てのアミノ酸に結合する必要はないことが更に理解されよう。かかるエピトープは、直鎖状エピトープと称され得る。例えば、配列番号２７２のアミノ酸５～２０の領域内のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する抗体は、当該範囲のアミノ酸残基のうちの１つ以上、例えば、範囲内のアミノ酸（すなわち、アミノ酸５、９、１６、及び２０）を任意に含む、範囲の各端のアミノ酸残基（すなわち、アミノ酸５及び２０）とのみ結合し得る。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基３、５、９、１０、１２、１６、１７、２０、３７、４２、５０、５３、５９、６２、６４、６８、６９、７２、または７７のうちの少なくとも１つを含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基３、５、９、１０、１２、１６、１７、２０、３７、４２、５０、５３、５９、６２、６４、６８、６９、７２、または７７から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２アミノ酸を含むか、またはそれからなる。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２の以下のアミノ酸領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる：
（ｉ）３～１７；
（ｉｉ）５～２０；
（ｉｉｉ）３７～５３；
（ｉｖ）５０～６４；
（ｖ）５９～７２；
（ｖｉ）５９～７７；
（ｖｉｉ）６２～６９；及び／または
（ｖｉｉｉ）６２～７７。
更なる実施形態では、エピトープは、以下のアミノ酸領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる：配列番号２７２の５～２０及び６２～７７（例えば、限定されるものではないが、親クローンＥ０７に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）；５０～６４（例えば、限定されるものではないが、親クローンＣ０８に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）；３７～５３及び５９～７２（例えば、限定されるものではないが、親クローンＧ０４に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）；５９～７７（例えば、限定されるものではないが、親クローンＣ０５に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）；または３～１７及び６２～６９（例えば、限定されるものではないが、親クローンＥ０１に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。更なる実施形態では、エピトープは、以下のアミノ酸領域内の１つ以上のアミノ酸残基からなる：配列番号２７２の５～２０及び６２～７７；５０～６４；３７～５３及び５９～７２；５９～７７；または３～１７及び６２～６９。
更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基３、５、９、１０、１２、１６、１７、６２、６４、６８、及び６９を含むか、もしくはそれからなるか、または好適には、配列番号２７２のアミノ酸残基３、５、９、１０、１２、１６、１７、６２、６４、６８、及び６９からなる（例えば、限定されるものではないが、親クローンＥ０１に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７を含むか、もしくはそれからなるか、または好適には、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７からなる（例えば、限定されるものではないが、親クローンＥ０７に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。更に他の実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含むか、もしくはそれからなるか、または好適には、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる（例えば、限定されるものではないが、親クローンＧ０４に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基５０、５３、５９、６２、及び６４を含むか、もしくはそれからなるか、または好適には、配列番号２７２のアミノ酸残基５０、５３、５９、６２、及び６４からなる（例えば、限定されるものではないが、親クローンＣ０８に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基５９、６０、６８、及び７２を含むか、もしくはそれからなるか、または好適には、配列番号２７２のアミノ酸残基５９、６０、６８、及び７２からなる（例えば、限定されるものではないが、親クローンＣ０５に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３及び５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基からなる。他の更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。かかるエピトープを有する抗体またはその抗原結合断片は、Ｇ０４の配列の一部または全てを有し得るか、またはかかる抗体またはその抗原結合断片は、Ｇ０４に由来し得る。例えば、Ｇ０４の１つ以上のＣＤＲ配列、またはＧ０４のＶＨ及びＶＬ配列のうちの一方もしくは両方を有する抗体またはその抗原結合断片は、かかるエピトープに結合し得る。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５～２０及び／または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５～２０及び６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基からなる。他の更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５～２０または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。かかるエピトープを有する抗体またはその抗原結合断片は、Ｅ０７の配列の一部または全てを有し得るか、またはかかる抗体またはその抗原結合断片は、Ｅ０７に由来し得る。例えば、Ｅ０７の１つ以上のＣＤＲ配列、またはＥ０７のＶＨ及びＶＬ配列のうちの一方もしくは両方を有する抗体またはその抗原結合断片は、かかるエピトープに結合し得る。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５０～６４の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５０～６４の領域内の１つ以上のアミノ酸残基からなる。かかるエピトープを有する抗体またはその抗原結合断片は、Ｃ０８の配列の一部または全てを有し得るか、またはかかる抗体またはその抗原結合断片は、Ｃ０８に由来し得る。例えば、Ｃ０８の１つ以上のＣＤＲ配列、またはＣ０８のＶＨ及びＶＬ配列のうちの一方もしくは両方を有する抗体またはその抗原結合断片は、かかるエピトープに結合し得る。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５９～７２の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５９～７２の領域内の１つ以上のアミノ酸残基からなる。かかるエピトープを有する抗体またはその抗原結合断片は、Ｃ０５の配列の一部または全てを有し得るか、またはかかる抗体またはその抗原結合断片は、Ｃ０５に由来し得る。例えば、Ｃ０５の１つ以上のＣＤＲ配列、またはＣ０５のＶＨ及びＶＬ配列のうちの一方もしくは両方を有する抗体またはその抗原結合断片は、かかるエピトープに結合し得る。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸１１～２１の領域内のアミノ酸残基を含まないか、またはそれからならない。一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸２１～２８の領域内のアミノ酸残基を含まないか、またはそれからならない。一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５９及び６０の領域内のアミノ酸残基を含まないか、またはそれからならない。一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸６７～８２の領域内のアミノ酸残基を含まないか、またはそれからならない。
親和性成熟した抗体のエピトープは、通常、親クローンについて本明細書において同定されるエピトープと同じである。カニクイザルＴＲＤＶ１上のエピトープについては、親和性成熟した抗体のエピトープの位置は、通常、対応する親クローンについて同定されるエピトープと同じ位置である。「位置」への言及は、当業者が、エピトープにおけるアミノ酸の一部の同一性がヒトＴＲＤＶ１と異なることを理解しているため、必要である。ヒトＴＲＤＶ１とカニクイザルＴＲＤＶ１との間のこれらの多様性にもかかわらず、かかる抗体は、依然として両方の抗原に特異的に結合することが可能である。
一実施形態では、エピトープは、市販の抗Ｖδ１抗体、例えば、ＴＳ－１またはＴＳ８．２により結合されるエピトープと同じではない。ＷＯ２０１７１９７３４７に記載されるように、ＴＳ－１及びＴＳ８．２の可溶性ＴＣＲへの結合は、δ１鎖がＶδ１ Ｊ１及びＶδ１ Ｊ２配列を含む場合に検出されたが、Ｖδ１ Ｊ３鎖への結合は検出されなかった。このことは、ＴＳ－１及びＴＳ８．２の結合がδＪ１及びδＪ２領域の重要な残基を必要としていたことを示す。
本明細書における「内（ｗｉｔｈｉｎ）」への言及は、定義された範囲の両端を包含する。例えば、「アミノ酸５～２０の領域内」は、残基５を含み残基５から残基２０を含み残基２０までの全てのアミノ酸残基を指す。
どのエピトープが抗体により結合されるかを確定するための様々な技術が当該技術分野において公知である。例示的な技術としては、例えば、定型的なクロスブロッキングアッセイ、アラニンスキャニング変異分析、ペプチドブロット分析、ペプチド切断分析、結晶学的研究、及びＮＭＲ分析が挙げられる。加えて、抗原のエピトープ切除、エピトープ抽出、及び化学修飾などの方法が用いられ得る。抗体が相互作用するポリペプチド内のアミノ酸を同定するために使用され得る別の方法は、（実施例９に記載されるような）質量分析により検出される水素／重水素交換である。一般に、水素／重水素交換法は、関心対象のタンパク質を重水素で標識し、続いて、重水素で標識したタンパク質に抗体を結合させることを含む。次に、タンパク質／抗体複合体は水に移され、抗体複合体により保護されているアミノ酸内の交換可能なプロトンは、界面の一部ではないアミノ酸内の交換可能なプロトンよりも遅い速度で重水素から水素への逆交換を受ける。その結果、タンパク質／抗体の界面部分を形成するアミノ酸は、重水素を保持し得、従って、界面に含まれないアミノ酸と比較して相対的により高い質量を示す。抗体の解離後、標的タンパク質は、プロテアーゼ切断及び質量分析解析に供され、これにより、抗体が相互作用する特定のアミノ酸に対応する重水素標識残基が明らかになる。
抗体及びその抗原結合断片は、好適には、ヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２及び配列番号３０６の多型バリアント）及びカニクイザルにおけるオーソログであるカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ：Ｇ７Ｐ９Ｓ６（Ｇ７Ｐ９Ｓ６＿ＭＡＣＦＡ）も参照のこと）の両方に特異的に結合する。幾つかの実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、ヒト及びカニクイザルＴＲＤＶ１に特異的に結合するＧ０４由来の抗体である。本発明の抗体により結合されるエピトープ（例えば、限定されるものではないが、配列番号２７２、３０６、または３０８のいずれかのアミノ酸残基３７～７７内の領域において結合するもの）は、それがＶδ１に特異的な（すなわち、Ｖδ２またはＶδ３などの類似の抗原に結合しない）抗Ｖδ１抗体の提供を可能にするだけではなく、Ｖδ１の多型バリアントへの交差反応性（すなわち、配列番号２７２のＴＲＤＶ１及び配列番号３０６のＴＲＤＶ１（残基位置２０での多型、及び一部の抗体について残基位置２０が接触残基候補として同定されているか、または同定された接触残基の近くであるにもかかわらず））を提供し、ヒトＶδ１とカニクイザルＶδ１との間の交差反応性（配列番号２７２及び３０８のアミノ酸残基３７～７７の領域内に存在する残基４２、５０、５４、５９、６０、６８、７３、７５、及び７６の全てがヒトＴＲＤＶ１配列とカニクイザルＴＲＤＶ１配列との間で異なるにもかかわらず）を提供するため、特に有利であり得ると仮定される。
ＡＤＴ１－４由来の抗体のエピトープ
ＡＤＴ１－４由来の抗体は、ＡＤＴ１－４親抗体と同じか、または実質的に同じエピトープに結合する。従って、幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－４親抗体に由来するか、またはＡＤＴ１－４親抗体に関連する抗体に関する実施形態では、抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸３７～７７の領域内、例えば、アミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含むか、またはそれからなる。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる。
ＡＤＴ１－４由来の抗体は、カニクイザルＴＲＤＶ１としても公知のγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のカニクイザル可変δ１（Ｖδ１）鎖（配列番号３０８）のエピトープにも結合する。従って、幾つかの実施形態、特にＧ０４親抗体に由来するか、またはＧ０４親抗体に関連する抗体に関する実施形態では、抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、配列番号３０８のアミノ酸３７～７７の領域内、例えば、アミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号３０８のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含むか、またはそれからなる。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号３０８のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる。
ＡＤＴ１－４由来の抗体の交差反応性、特に、本明細書において開示される抗体のＴＲＤＶ１の多型バリアントに結合する能力を考慮すると、幾つかの実施形態、特にＧ０４親抗体に由来するか、またはＧ０４親抗体に関連する抗体に関する実施形態では、抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、配列番号２７２、３０６、及び３０８のアミノ酸３７～７７の領域内、例えば、アミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２、３０６、及び３０８のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含むか、またはそれからなる。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２、３０６、及び３０８のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる。
上記のもののようなかかるエピトープを含むか、またはそれからなり、更にヒトＴＲＤＶ１配列とカニクイザルＴＲＤＶ１配列との間の交差反応性を提供する抗体の提供は、この２つの種由来のこれらの配列間のアミノ酸バリアントの位置を考慮すると驚くべきことである。
ＡＤＴ１－７由来の抗体のエピトープ
ＡＤＴ１－７由来の抗体は、ＡＤＴ１－７親抗体と同じか、または実質的に同じエピトープに結合する。従って、幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－７親抗体に由来するか、またはＡＤＴ１－７親抗体に関連する抗体に関する実施形態では、抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸５～２０及び／または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７を含むか、またはそれからなる。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７からなる。
フレームワーク及び他の配列
好適には、本発明の抗体または抗原結合断片のＶＨ及びＶＬ領域は、それぞれ４つのフレームワーク領域（ＦＲ１～ＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおけるフレームワーク領域との少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含むフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおけるフレームワーク領域との少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、９７％、または９９％の配列同一性を有する配列を含むフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおける配列を含むフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおける配列からなるフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。
幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１７０もしくは１７１の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ１（すなわち、重鎖フレームワーク１領域）配列；配列番号１７２の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ２配列；配列番号１７７もしくは１７８の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ３配列；及び／または配列番号１７９、１８０、１８１、もしくは１８２の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ４配列を含み得る。
幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１７０もしくは１７１の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ１（すなわち、重鎖フレームワーク１領域）配列；配列番号１７２の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ２配列；配列番号１７７の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ３配列；及び／または配列番号１７９、１８０、１８１、もしくは１８２の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ４配列を含み得る。
幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１７０もしくは１７１の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ１（すなわち、重鎖フレームワーク１領域）配列；配列番号１７２の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ２配列；配列番号１７７の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ３配列；及び／または配列番号１７９もしくは１８１の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ４配列を含み得る。
幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１８９の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ１配列；配列番号１９０の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ２配列；配列番号１９１の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ３配列；配列番号１９２の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ４配列；配列番号１９３及び１９４の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ１配列；配列番号１９５の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ２配列；配列番号１９６の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ３配列；ならびに配列番号１９７の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ４配列を含み得る。
幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１８９の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ１配列；配列番号１９０の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ２配列；配列番号１９１の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ３配列；配列番号１９２の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ４配列；配列番号１９３の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ１配列；配列番号１９５の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ２配列；配列番号１９６の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ３配列；及び配列番号１９７の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ４配列を含み得る。
ＶＨ及びＶＬ領域の両方を含む断片では、これらは（例えば、ジスルフィド結合またはリンカーを介した）共有結合または非共有結合のいずれかにより結合していてもよい。本明細書に記載される抗体断片は、ｓｃＦｖ、すなわち、リンカーにより連結されたＶＨ領域及びＶＬ領域を含む断片を含み得る。一実施形態では、ＶＨ及びＶＬ領域は、（例えば、合成）ポリペプチドリンカーにより連結されている。ポリペプチドリンカーは、（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎリンカーを含み得、ここで、ｎ＝１～８、例えば、２、３、４、５、または７である。ポリペプチドリンカーは、［（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎ（Ｇｌｙ３ＡｌａＳｅｒ）ｍ］ｐリンカーを含み得、ここで、ｎ＝１～８、例えば、２、３、４、５、または７であり、ｍ＝１～８、例えば、０、１、２、または３であり、ｐ＝１～８、例えば、１、２、または３である。更なる実施形態では、リンカーは、配列番号２９１を含む。更なる実施形態では、リンカーは、配列番号２９１からなる。
翻訳、精製、及び検出を補助するためにＮ末端及びＣ末端の改変を含むｓｃＦｖ構築物が設計及び作製され得ることが当業者によって理解されるであろう。例えば、ｓｃＦｖ配列のＮ末端では、カノニカルＶＨ配列（例えば、最初のＱＶＱまたはＥＶＱ）の前に追加のメチオニン及び／またはアラニンアミノ酸残基が含まれ得る。Ｃ末端（すなわち、ＩＭＧＴの定義に従って終了するカノニカル成熟ＶＬドメイン配列のＣ末端）では、追加の配列、例えば、（ｉ）定常ドメインの部分配列、及び／または（ｉｉ）精製及び検出を補助するためのＨｉｓタグ及びＦｌａｇタグなどのタグ（例えば、配列番号２９２～２９５のいずれかのタグ）を含む追加の合成配列が含まれ得る。
本明細書に記載されるように、抗体は、任意のフォーマットのものであり得る。好ましい実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１）フォーマットのものである（すなわち、抗体はヒトＩｇＧ１抗体である）。
幾つかの実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２９６もしくは配列番号３０７の配列を含む軽鎖定常領域（または配列番号２９６もしくは配列番号３０７との少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有する配列）、及び／または配列番号２９７もしくは配列番号２９８の配列を含む重鎖定常領域（または配列番号２９７もしくは配列番号２９８との少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有する配列）を含む。幾つかの実施形態では、重鎖定常領域のエフェクター機能は、低減され得るか、または無効化され得る（エフェクター機能を無効にする変異）。エフェクター機能を減弱する好適な変異は、当業者に公知である。例えば、ＥＵ番号付けに従って、Ｌ２３５Ａ及び／またはＧ２３７Ａ変異（「ＬＡＧＡ」）、またはＬ２３４Ａ及び／またはＬ２３５Ａ変異（「ＬＡＬＡ」）。例えば、一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２９６の配列を含む軽鎖定常領域、及び／または配列番号２９７もしくは配列番号２９８の配列を含む重鎖定常領域を含む。
競合抗体
一実施形態では、抗体は、本明細書で定義される抗体もしくはその抗原結合断片と同じか、もしくは本質的に同じエピトープに結合するか、または本明細書で定義される抗体もしくはその抗原結合断片と競合する。当該技術分野において公知の定型的な方法を使用することにより、抗体が抗Ｖδ１参照抗体と同じエピトープに結合するかどうか、または結合について抗Ｖδ１参照抗体と競合するかどうかを容易に決定することができる。例えば、試験抗体が本発明の抗Ｖδ１参照抗体と同じエピトープに結合するかどうかを決定するために、当該参照抗体を飽和条件下でＶδ１タンパク質またはペプチドに結合させる。次に、Ｖδ１鎖に結合する試験抗体の能力が評価される。抗Ｖδ１参照抗体との飽和結合後に試験抗体がＶδ１に結合することができる場合、試験抗体は、抗Ｖδ１参照抗体とは異なるエピトープに結合すると結論付けられる。一方で、抗Ｖδ１参照抗体との飽和結合後に試験抗体がＶδ１鎖に結合できない場合、試験抗体は、本発明の抗Ｖδ１参照抗体により結合されるエピトープと同じエピトープに結合し得る。
本発明は、本明細書で定義される抗体もしくはその抗原結合断片、または本明細書に記載される例示的な抗体のいずれかのＣＤＲ配列を有する抗体とＶδ１への結合について競合する抗Ｖδ１抗体も含む。例えば、どのタンパク質、抗体、及び他のアンタゴニストがＶδ１鎖への結合について本発明の抗体と競合し、及び／またはエピトープを共有するかを決定するために、本発明の抗体を用いて競合アッセイが実行され得る。これらのアッセイは、当業者に良く知られてい。これらは、タンパク質、例えば、Ｖδ１における限られた数の結合部位についてのアンタゴニスト間またはリガンド間の競合を評価する。抗体（またはその抗原結合断片）は競合の前または後に固定化または不溶化され、Ｖδ１鎖に結合した試料が、例えば、デカント（抗体が事前に不溶化された場合）または遠心分離（抗体が競合反応後に沈殿した場合）することによって非結合試料から分離される。また、競合的結合は、タンパク質への抗体の結合または結合の欠如によって機能が変化するかどうか、例えば、抗体分子が、例えば、標識の酵素活性を阻害するか、または増強するかどうかによって決定され得る。当該技術分野において公知であり、本明細書に記載されるような、ＥＬＩＳＡ及び他の機能アッセイが使用され得る。
２つの抗体は、各々が他方の標的抗原への結合を競合阻害（遮断）する場合、同じまたは重複するエピトープに結合する。すなわち、１倍、５倍、１０倍、２０倍、または１００倍過剰の一方の抗体は、競合結合アッセイで測定した場合、他方の結合を少なくとも５０％、ただし好ましくは７５％、９０％、または更には９９％阻害する。あるいは、一方の抗体の結合を低減するか、または消失させる標的抗原におけるほぼ全てのアミノ酸変異が、他方の結合を低減するか、または消失させる場合、２つの抗体は同じエピトープを有する。
次いで、観察された試験抗体の結合の欠如が実際に参照抗体と同じエピトープへの結合によるものかどうか、または立体障害（または別の現象）が観察された結合の欠如の原因であるかどうかを確認するために、追加の定型的実験（例えば、ペプチド変異分析及び結合分析）が実行され得る。この類の実験は、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、表面プラズモン共鳴、フローサイトメトリー、または当該技術分野において利用可能な任意の他の定量的もしくは定性的な抗体結合アッセイを使用して実行され得る。
抗体の抗体結合特性及び薬理学的特性
本発明の抗体は、例えば、下記で述べる様に、好ましい結合特性及び／または薬理学的特性を有し得る。
結合親和性（ＫＤ）
一般的にいえば、親和性成熟したクローンは、それらの抗原（複数可）に対する親クローンより高い親和性を有する。例えば、ヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に対する親和性は、親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも１００％、または少なくとも５００％高い親和性である。
本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し得る。
抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、好ましくは、約５ｎＭ未満の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合するものと更に定義され得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはそれに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列（ただし、ＡＤＴ１－４－１３８を除く）に関連するか、またはそれに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、好ましくは、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列メンバーであるＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１４３、及び／またはＡＤＴ１－４－１に関連するか、またはそれらに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、好ましくは、約１ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得る。
本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはＡＤＴ１－４系列に由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列メンバーであるＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１４３、及び／またはＡＤＴ１－４－１に関連するか、またはそれらに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはＡＤＴ１－４系列に由来するものでは、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列（ただし、ＡＤＴ１－４－１３８を除く）に関連するか、またはそれに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約１００ｎＭ未満の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。好ましくは、この実施形態では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列メンバーであるＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１４３、及び／またはＡＤＴ１－４－１に関連するか、またはそれらに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、５０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得る。好ましくは、この実施形態では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－７系列に関連するか、またはそれに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、好ましくは、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態では、抗体またはその抗原結合断片の結合親和性は、抗体またはその抗原結合断片を直接または間接的に（例えば、抗ヒトＩｇＧ Ｆｃによる捕捉によって）センサーの表面上（例えば、高容量アミンチップまたは同等物）にコーティングすることによって確定され、ここで、抗体またはその抗原結合断片により結合される標的（すなわち、γδＴＣＲのＶδ１鎖）が、結合を検出するためにチップ上に流される。好適には、ＭＡＳＳ－２機器（Ｓｉｅｒｒａ ＳＰＲ－３２とも称され得る）が、３０μｌ／分のＰＢＳ＋０．０２％Ｔｗｅｅｎ ２０のランニング緩衝液で２５℃にて使用される。
本明細書には、抗体機能を定義するために使用され得る他のアッセイが記載される。例えば、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、γδＴＣＲの会合により、例えば、抗体結合時のγδＴＣＲの下方調節を測定するにより評価され得る。抗体またはその抗原結合断片（任意により、細胞の表面に提示される）の適用後のγδＴＣＲの表面発現は、例えば、フローサイトメトリーにより測定され得る。本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、γδＴ細胞の脱顆粒を測定することによっても評価され得る。例えば、抗体またはその抗原結合断片（任意により、細胞の表面に提示される）のγδＴ細胞への適用後に、細胞の脱顆粒のマーカーであるＣＤ１０７ａの発現が、例えば、フローサイトメトリーにより測定され得る。本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、（抗体がγδＴ細胞の殺傷活性に影響を及ぼすかどうかを試験するために）γδＴ細胞による殺傷活性を測定することによっても評価され得る。例えば、標的細胞が、抗体またはその抗原結合断片（任意により、細胞の表面に提示される）の存在下でγδＴ細胞とインキュベートされ得る。インキュベーション後、培養物は、生きている標的細胞と死んでいる標的細胞を区別するために、細胞生死判定用色素で染色され得る。次いで、死細胞の割合が、例えば、フローサイトメトリーにより測定され得る。
阻害濃度（ＩＣ５０及びＩＣ９０）
ＴＣＲ下方調節
ＴＣＲ下方調節は、本明細書に記載されるアッセイにより測定され得る。例えば、試験される抗体は、γδＴ細胞の培養物と共に異なる濃度でインキュベートされ得、下方調節が測定される。細胞殺傷（例えば、ＴＨＰ－１細胞殺傷）を測定する場合、γδＴ細胞は、好適な細胞株、例えば、ＴＨＰ－１細胞と共培養される。ＴＣＲ下方調節は、フローサイトメトリーにより測定され得る。細胞殺傷は、任意の適切な手段、例えば、フローサイトメトリーにより達成され得る。親抗体（例えば、ＡＤＴ１－７及びＡＤＴ１－４）によるＴＣＲ下方調節の最初の研究では、ＴＣＲ下方調節アッセイは、Ｆｃγ受容体＋ｖｅ ＴＨＰ－１細胞に抗体を「負荷すること」を含んだ（実施例１、実施例６、及び表５を参照のこと）。従って、この場合、抗体は、γδＴ細胞との共インキュベーション前に細胞表面に提示される。これにより、かかる負荷は、ＴＣＲ会合時の架橋効果を利用する最大の機会をもたらす。抗体をＦｃ受容体＋ｖｅ細胞に負荷することとは別に、固体表面上に抗体を提示する同様の代替手法としては、プレート上で抗体をプレインキュベートすること（いわゆるプレート結合）、または抗体を提示する担体ビーズの使用が挙げられ得る。全てのかかるアッセイでは、固体表面に提示されたら、次いで、標的受容体（この場合、γδＴ細胞受容体）の会合時に抗体により与えられる技術的効果を調査及び測定することが一般的である。このようにして抗体を提示することは、特に免疫細胞受容体標的及び免疫細胞受容体複合体の抗体との会合、例えば、標的、例えば、ＣＤ３、ＣＤ２８などの抗体との会合の効果を調査する場合、一般的である。
対照的に、本明細書に記載される本発明の親和性成熟した抗体では、本発明者らは、親和性成熟の影響を最大限分析及び比較することを望んでいたため、本発明者らは、より「可溶化」したＴＣＲ下方調節アッセイフォーマットでこれらの抗体の能力を調査した。溶液中での効果の評価も生理学的により関連し得る。これらの理由のため、特に明記しない限り、親和性成熟した抗体、多重特異性抗体、またはそれらの断片の効果が、測定されるか、または特徴付けられ、親抗体と比較される（例えば、図３５を参照のこと）全ての細胞ベースのＴＣＲ下方調節実験において、可溶化アッセイフォーマットが調査される。このより厳密な可溶化アッセイを用いることによるＩＣ５０の差を以下に要約し、ここで、両方の手法による例示的な親分子（ＡＤＴ１－４）のＥＣ５０値のＴＣＲ下方調節を要約する。
「提示」対「可溶化」アッセイフォーマット：
ＡＤＴ１－４ ＩＣ５０（ＴＨＰ－１細胞に負荷される）：０．０１～０．０５ｕｇ／ｍｌ＝０．０６５ｎＭ～０．３２５ｎＭ（実施例１、実施例６、及び表５を参照のこと）
対
ＡＤＴ１－４ ＩＣ５０（可溶化アッセイ、溶液中に添加される）＝３８．２８ｎＭ（図３５Ｆを参照のこと）
本発明の抗体またはその抗原結合断片は、ＴＣＲ下方調節について約５０ｎＭ未満のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１０ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはＡＤＴ１－４系列に由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約５０ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０、及び／または約１００ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１０ｎＭ未満であり、ＩＣ９０は約５０ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列（ただし、ＡＤＴ１－４－１３８を除く）に関連するか、またはそれに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０、及び／または約１０ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約０．５ｎＭ未満であり、ＩＣ９０は約５ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列メンバーであるＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１４３、及び／またはＡＤＴ１－４－１に関連するか、またはそれらに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０、及び／または約１０ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約０．５ｎＭ未満であり、ＩＣ９０は約５ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－７系列に関連するか、またはそれに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約５０ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１０ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－７系列メンバーであるＡＤＴ１－７－２０もしくはＡＤＴ１－７－３に関連するか、またはそれらに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約５ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０、及び／または約１０ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１０ｎＭ未満であり、ＩＣ９０は約５ｎＭ未満である。
ＴＨＰ－１細胞殺傷
細胞殺傷は、本明細書に記載されるアッセイにより測定され得る。例えば、試験される抗体は、γδＴ細胞及び腫瘍細胞（例えば、ＴＨＰ－１細胞）の共培養物と共に異なる濃度でインキュベートされ得る。細胞殺傷は、任意の適切な手段、例えば、フローサイトメトリーにより測定され得る。
本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０、及び／または約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約５ｎＭ未満であり、ＩＣ９０は約５０ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはＡＤＴ１－４系列に由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０、及び／または約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約５ｎＭ未満であり、ＩＣ９０は約５０ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－７系列に関連するか、またはそれに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約５ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０、及び／または約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１ｎＭ未満であり、ＩＣ９０は約５０ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－７系列メンバーであるＡＤＴ１－７－２０もしくはＡＤＴ１－７－３に関連するか、またはそれらに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、約５ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０、及び／または約１０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１ｎＭ未満であり、ＩＣ９０は約５ｎＭ未満である。
当然のことながら、抗体の有利な薬理学的プロファイルは、当該抗体が、種々の試験される特性について有利なＫＤならびに有利なＩＣ５０及び／またはＩＣ９０値を示すように組み合わされ得る。
例えば、幾つかの実施形態では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し得、
●任意により、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し得、
●約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
●約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－４系列に関連する実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１００ｎＭ未満（約５０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
●約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列（ただし、ＡＤＴ１－４－１３８を除く）に関連するか、またはそれに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１０ｎＭ未満（約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
●約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列メンバーであるＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１４３、及び／またはＡＤＴ１－４－１に関連するか、またはそれらに由来する抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１０ｎＭ未満（約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
●約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－７系列に関連する実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
●約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－７系列であるＡＤＴ１－７－２０またはＡＤＴ１－７－３に関する実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得、
●約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－４系列の抗体の薬理学的特性
ＡＤＴ１－４－１０５の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１０７の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１１０の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１１２の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－１１７の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１９の抗体またはＡＤＴ１－４－１１９に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－２１の抗体またはＡＤＴ１－４－２１に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－３１の抗体またはＡＤＴ１－４－２１に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－１３９の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－４の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１４３の抗体またはＡＤＴ１－４－２１に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－５３の抗体またはＡＤＴ１－４－２１に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－１７３の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－２の抗体またはＡＤＴ１－４－２に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－８の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－８２の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－８３の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－３の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－８４の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－８６の抗体またはＡＤＴ１－４－２１に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－９５の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１の抗体またはＡＤＴ１－４－１に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－６の抗体またはＡＤＴ１－４－６に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－１３８の抗体またはＡＤＴ１－４－１３８に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－７系列の抗体の薬理学的特性
ＡＤＴ１－７－１０の抗体またはＡＤＴ１－７－１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－１５の抗体またはＡＤＴ１－７－１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－１７の抗体またはＡＤＴ１－７－１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－１８の抗体またはＡＤＴ１－７－１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－１９の抗体またはＡＤＴ１－７－１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－２０の抗体またはＡＤＴ１－７－１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－７－２２の抗体またはＡＤＴ１－７－１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－２３の抗体またはＡＤＴ１－７－１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－４２の抗体またはＡＤＴ１－７－１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－３の抗体またはＡＤＴ１－７－３に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
ＡＤＴ１－７－６１の抗体またはＡＤＴ１－７－３に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０及び／または約５０未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有し得る。
抗体のその他の機能特性
本発明の抗体は、良好な機能プロファイルを有する。特に、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇に焦点を置く従来技術の抗Ｖδ１抗体と異なり、本発明の抗体は、Ｖδ１Ｔ細胞の活性化に有用である。本発明の抗体は、それらが結合するＴ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし得るが、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇を引き起こさず、むしろＴ細胞を刺激するため、Ｔ細胞のこのコンパートメントの活性化による恩恵を受ける治療状況において有用であり得る。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、ＴＣＲの下方調節、活性化マーカー、例えば、ＣＤ２５及びＫｉ６７、ならびに脱顆粒マーカーＣＤ１０７ａの変化から明らかである。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、次に、ＩＮＦγ及びＴＮＦαなどの炎症性サイトカインの放出を引き起こして、免疫ライセンシングを促進する。驚くべきことに、ＴＲＤＶ１に対する適切に高い親和性を有する抗体は、Ｖδ１Ｔ細胞殺傷の増加を誘発し、（例えば）ＣＤ３を標的とする抗体と異なり、ＣＤ３による大規模な活性化に伴う副作用を伴うことなく高親和性抗体の供給が可能である。結果として、高親和性抗体は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）による強力な免疫賦活効果を誘発することができる。これは、Ｖδ１細胞の最小限の疲弊または殺傷で達成され得る。従って、本発明の抗体は、アゴニスト抗体とみなされ得る。
本発明の一実施形態では、
ａ）Ｖδ１Ｔ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし、
ｂ）ＣＤＣまたはＡＤＣＣを示さず、
ｃ）Ｖδ１Ｔ細胞を枯渇させないこと特徴とする、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供される。
幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、Ｖδ１Ｔ細胞増殖も刺激する。
抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、好ましくは、約５ｎＭ未満の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合するものと更に定義され得る。
抗体またはその抗原結合断片は、上記のように良好なＫＤ、ＩＣ５０、及び／またはＩＣ９０値を有するものと更に定義され得る。
Ｔ細胞枯渇は、Ｔ細胞死、Ｔ細胞除去、またはＴ細胞減少のプロセスである。Ｖδ１Ｔ細胞を枯渇させない抗体または抗原結合断片への言及は、対照研究において本明細書に記載される本発明の抗体のうちの１種以上とインキュベートされる場合（例えば、抗体がＩｇＧ１抗体として提供される場合）に、任意の適切な手段により測定される（例えば、比較対照のあるフローサイトメトリー法、または例えば、図４１及び図５５に記載される他の確立された対照アッセイによる）、生存Ｖδ１Ｔ＋細胞集団の約３０％未満または約２０％未満（好ましくは、約１０％未満）の枯渇を指す。
ＡＤＣＣ及びＣＤＣは、Ｔ細胞枯渇が発生し得るメカニズムである。ＡＤＣＣまたはＣＤＣを引き起こさない本明細書における抗体または抗原結合断片への言及は、本明細書に記載される本発明の抗体のうちの１種以上とインキュベートされる場合（例えば、抗体がＩｇＧ１抗体として提供される場合）に、任意の適切な手段により測定される（例えば、比較対照のあるフローサイトメトリー法、または例えば、図４１に記載される他の確立された対照アッセイによる）、ＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣによる生存Ｖδ１＋Ｔ細胞集団の約３０％未満または約２０％未満（好ましくは、約１０％未満）の枯渇を指す。
一実施形態では、ＩＬ－１７Ａの分泌を誘発しないことを特徴とする抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供される。ＩＬ－１７Ａ（インターロイキン－１７Ａ）は、活性化Ｔ細胞により産生される腫瘍形成促進性サイトカインである。ＩＬ－１７Ａは、腫瘍成長を増強し得、抗がん免疫応答を弱め得る。図６３Ｇ～Ｉに示すように、抗ｖδ１抗体は、Ｖδ１＋ｖｅ細胞を含むヒトリンパ球を含む細胞集団に添加される場合、ＩＬ－１７Ａの分泌を誘発しないが、ＯＫＴ３などの抗ＣＤ３比較抗体は、かかる状況でＩＬ１７Ａを誘発する。従って、ＩＬ－１７Ａの分泌を誘発しない本明細書における抗体または抗原結合断片への言及は、かかる状況において抗ＣＤ３比較抗体（図６３Ｇ～Ｉにおいて用いられる抗ＣＤ３比較抗体であるＯＫＴ３に代表される）により誘発されるＩＬ－１７Ａ分泌の約３０％未満または約２０％未満または約１０％未満のＩＬ－１７Ａ分泌を誘発することを指す。
抗体の改変
抗体及びその断片は、公知の方法を使用して他の点で改変され得る。本明細書に記載される抗体分子の配列改変は、当業者により容易に組み込まれ得る。以下の例は非限定的な例である。
ファージライブラリからの抗体の発見及び配列の回収の間に、所望の抗体可変ドメインがサブクローニングにより完全長ＩｇＧに再フォーマットされ得る。プロセスを加速させるために、可変ドメインは、多くの場合、制限酵素を使用して移される。これらの固有の制限部位は追加／代替のアミノ酸を導入し得、カノニカル配列から離れ得る（かかるカノニカル配列は、例えば、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ［ＩＭＧＴ］ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇを参照のこと）において見出され得る）。これらは、κ軽鎖またはλ軽鎖の配列改変として導入され得る。
軽鎖の改変
可変軽鎖の可変配列は、完全長ＩｇＧに再フォーマットする際に制限部位（例えば、Ｎｈｅ１－Ｎｏｔ１）を使用してクローニングされ得る。より具体的には、クローニングを補助するために、親（非親和性成熟）抗体の軽鎖Ｎ末端に追加のＡｌａ－Ｓｅｒ配列が導入された。好ましくは、この追加のＡＳ配列はその後、カノニカルＮ末端配列を生成させるように、更なる開発の間に除去される。従って、幾つかの実施形態では、本明細書に記載される軽鎖を含む抗体は、それらのＮ末端にＡＳ配列を含まない。すなわち、配列番号２６、１１８、２８２～２９０、または３１３は、最初のＡＳ配列を含まない。親和性成熟した抗体の軽鎖配列のＮ末端は、すでにこのＡＳモチーフを含んでいない。
クローニングを補助するために、追加のアミノ酸改変がなされ得る。例えば、κ軽鎖を有する本明細書に記載される親抗体（すなわち、Ｂ０７、Ｃ０５、Ｅ０４、Ｆ０７、Ｇ０６、Ｇ０９、Ｂ０９、Ｇ１０、Ｇ０４、及びＥ０７）では、全長配列を調製する際のクローニングを補助するために、κ軽鎖可変ドメイン／定常ドメイン境界でバリンからアラニンへの変化が導入された。これにより、κ定常ドメインが改変された。具体的には、これにより、（ＮｏｔＩ制限部位から） ＲＴＡＡＡＰＳで始まる定常ドメインがもたらされる。好ましくは、かかる配列は、ＲＴＶＡＡＰＳで始まるカノニカルκ軽鎖定常領域を生成させるように、更なる開発の間に改変され得る。かかる改変は、抗体の機能特性を変化させない。従って、幾つかの実施形態では、本明細書に記載されるκ軽鎖を含む抗体は、（例えば、配列番号２９６のように）配列ＲＴＶで始まる定常ドメインを含む。
別の例として、本明細書に記載される抗体で（具体的には、Ｅ０１及びＣ０８）は、クローニングを補助するために、λ軽鎖可変ドメイン／定常ドメインの境界で、リジンからアラニンへの配列変化が導入された。これにより、λ定常ドメインが改変された。具体的には、これにより、（ＮｏｔＩ制限部位から）ＧＱＰＡＡＡＰＳで始まる定常ドメインがもたらされる。好ましくは、この配列は、ＧＱＰＫＡＡＰＳで始まるカノニカルλ軽鎖定常領域を生成させるように、更なる開発の間に改変され得る。従って、幾つかの実施形態では、本明細書に記載されるλ軽鎖を含む抗体は、配列ＧＱＰＫで始まる定常ドメインを含む。
重鎖の改変
通常、ヒト可変重鎖配列は、塩基性のグルタミン（Ｑ）または酸性のグルタミン酸（Ｅ）のいずれかで始まる。しかしながら、かかる配列は両方とも、その後、酸性アミノ酸残基であるピログルタミン酸（ｐＥ）に変換されることが知られている。ＱからｐＥへの変換は抗体の電荷変化をもたらすが、ＥからｐＥへの変換は抗体の電荷を変化させない。従って、経時的な電荷変化の変動を回避するための１つの選択肢は、最初に重鎖の開始配列をＱからＥに改変することである。従って、一実施形態では、重鎖のＮ末端にＱ残基を有する本明細書に記載される抗体の重鎖は、Ｎ末端でのＱからＥへの改変を有し得る。特に、配列番号１、１０６、２７６～２７９、または３１２のいずれかの最初の残基は、ＱからＥに改変され得る。この実施形態は、これらの配列を、例えば、全長抗体またはその抗原結合断片に組み込む任意の実施形態にも適用されることが理解されよう。幾つかの実施形態では、重鎖のＮ末端のＥ残基をＥ残基に置換することが有利であり得る。従って、幾つかの実施形態では、配列番号２～２５、１０７～１１７、２７３～２７５、２８０、または２８１のいずれかのＮ末端のＥ残基は、Ｑ残基で置換され得る。
更に、ＩｇＧ１定常ドメインのＣ末端はＰＧＫで終わる。しかしながら、末端の塩基性リジン（Ｋ、ＥＵ４４７位）は、その後、（例えば、ＣＨＯ細胞において）発現の間に切断されることが多い。その結果、Ｃ末端リジン残基の様々な喪失により抗体の電荷が変化する。従って、１つの選択肢は、最初にこのリジンを除去し、これにより、ＰＧで終わる均一かつ一貫した重鎖Ｃ末端配列をもたらすことである。代替的選択肢は、末端Ｇ（ＥＵ４４６位）も除去することである。従って、一実施形態では、本明細書に記載される抗体の重鎖は、Ｃ末端から末端Ｋまたは末端ＧＫが除去されている。
幾つかの実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、Ａｓｎ２９７（ＥＵ番号付けスキーム）に連結された糖の変化により改変されたエフェクター機能を有する。更なる上記改変において、Ａｓｎ２９７は、フコシル化されていないか、またはフコシル化の低減を示す（すなわち、脱フコシル化抗体または非フコシル化抗体）。フコシル化としては、分子への糖フコースの付加、例えば、Ｎ－グリカン、Ｏ－グリカン、及び糖脂質へのフコースの結合が挙げられる。従って、脱フコシル化抗体では、フコースが定常領域の糖鎖に結合していない。抗体は、抗体のフコシル化を防止または阻害するように改変され得る。典型的には、グリコシル化の改変は、標的化遺伝子操作、あるいは標的宿主もしくは標的クローンの選択または偶然による宿主もしくはクローンの選択のいずれかにより、代替的なグリコシル化処理能力を有する宿主細胞において、上記抗体またはその抗原結合断片を発現させることを含む（例えば、実施例１３を参照のこと）。これらの及び他のエフェクター改変は、本明細書に組み込まれるＸｉｎｈｕａ Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１８） Ｐｒｏｔｅｉｎ ＆ Ｃｅｌｌ ９：６３－７３及びＰｅｒｅｉｒａ ｅｔ ａｌ．（２０１８）ｍＡｂｓ １０（５）：６９３－７１１などの最近の概説に更に説明されている。
任意のアロタイプの改変
抗体の探索中に、特定のヒトアロタイプが用いられる場合がある。任意により、抗体は、開発の間に異なるヒトアロタイプに切り替えられ得る。非限定的な例として、カッパ鎖には、３つのＫｍ対立遺伝子を定義するＫｍ１、Ｋｍ１，２、及びＫｍ３と称される３つのヒトアロタイプがある（アロタイプ番号付けを使用）。Ｋｍ１はバリン１５３（ＩＭＧＴ Ｖ４５．１）及びロイシン１９１（ＩＭＧＴ Ｌ１０１）と対応し、Ｋｍ１，２はアラニン１５３（ＩＭＧＴ Ａ４５．１）及びロイシン１９１（ＩＭＧＴ Ｌ１０１）と対応し、Ｋｍ３はアラニン１５３（ＩＭＧＴ Ａ４５．１）及びバリン１９１（ＩＭＧＴ Ｖ１０１）と対応する。従って、任意により、標準的なクローニング手法によって配列を１つのアロタイプから別のものに改変することができる。例えば、Ｌ１９１Ｖ（ＩＭＧＴ Ｌ１０１Ｖ）の変化により、Ｋｍ１，２アロタイプがＫｍ３アロタイプに変換される。かかるアロタイプの更なる詳細については、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ（２００９）ＭＡｂｓ １（４）：３３２－８（これは参照により本明細書に組み込まれる）を参照のこと。
従って、一実施形態では、本明細書に記載される抗体は、同じ遺伝子の別のヒトアロタイプに由来するアミノ酸置換を有する。更なる実施形態では、抗体は、ｃ－ドメインをｋｍ１，２からｋｍ３アロタイプに変換するためのカッパ鎖のＬ１９１Ｖ（ＩＭＧＴ Ｌ１０１Ｖ）置換を有する。
多重特異性抗体
本発明の抗体は、単一特異性であり得る。幾つかの実施形態では、本抗体は、多重特異性抗体ではない。幾つかの実施形態では、本抗体は、二重特異性抗体ではない。しかしながら、本発明は、多重特異性抗体も提供する。従って、本抗体は、追加の標的に結合し得、従って、二重特異性もしくは多重特異性であり得る。多重特異性抗体は、１つの標的ポリペプチドの異なるエピトープに特異的であり得るか、または２種以上の標的ポリペプチドに特異的であり得る。従って、一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、Ｖδ１に対する第１の結合特異性及び第２の標的エピトープまたは抗原に対する第２の結合特異性を含む。
特に、本発明は、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖、及び第２の抗原を標的とする新たなクラスの多重特異性抗体を提供する。第２の抗原は、例えば、がん抗原またはがん関連抗原（例えば、ＴＡＡ）であり得、従って、本抗体は、Ｔ細胞エンゲージャー（ＴＣＥ）と称され得る。あるいは、第２の抗原は、例えば、免疫調節性抗原であり得、従って、本抗体は、デュアル免疫調節性抗体であり得る。本発明の多重特異性抗体は、２つのクラスに分類され得る。１つ目は、Ｔ細胞エンゲージャーである多重特異性抗体である。２つ目は、デュアル免疫調節剤である多重特異性抗体である。
本発明のＴＣＥは、従来技術のＴＣＥに勝る幾つかの利点を提供する。特に、本ＴＣＥは、全く新規かつ独特のメカニズムによりＴ細胞受容体複合体を標的とすることにより、従来技術のＴＣＥに関連する多数の課題を克服し得る。実際、ＴＲＤＶ１ドメイン上のエピトープに結合することによってのみＴ細胞受容体複合体を特異的に標的とする（及び活性化する）ことにより、以下が含まれる多数の利点が実現される。
●全てのＴ細胞ではなくＴ細胞のサブセットのみと会合する（例えば、がんにおけるＴ－ｒｅｇとの会合は望ましくない場合がある）。
●主に「組織常在性」であり、その存在が、多くの場合、がん／腫瘍において予後良好と正に相関する、Ｔ細胞のサブセット（ＴＲＤＶ１＋Ｔ細胞）のみと会合する。
●ＴＲＤＶ１との会合によりＴ細胞受容体複合体を活性化し、これにより、より高い選択可能性をもたらす（例えば、本発明の抗体におけるようなこの結合ドメインの親和性を増加させる）。例えば、ＣＤ３ではなく、ＴＲＤＶ１ドメインのみを介してＴ細胞受容体複合体と会合する組換えＴＣＥを開発することにより、親和性の増加がより好ましい機能性をもたらし得る。例えば、高親和性ＴＲＤＶ１結合性ＴＣＥは、Ｔ細胞を活性化し得るが、疲弊させず、及び／または
●上記新規手段により、かつ組換えＴＲＤＶ１結合ドメインを介してＴＣＥ複合体と会合することにより、有害効果の低減がもたらされ得るため、当該ＴＣＥ部分におけるＦｃ機能性を減弱させる必要性が低減され得る。一般的に、減弱されていないＦｃ機能を有するＴＣＥは、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）作用を誘発し、これにより、抗体により認識されるγδＴ細胞集団を枯渇させると予想される。しかし、繰り返しになるが、毒性／安全性の複雑さを回避するためにかかる機能を減弱することにより、例えば、ＣＤ１６＋もしくはＣＤ３２＋もしくはＣＤ６４＋免疫細胞を関与させることにより、または二重特異性の半減期を低減することによって（例えば、ＢＩＴＥなどのより小さな二重特異性抗体断片を用いる場合）、潜在的に重要な有効性の観点も減弱される可能性がある。ＦｃγＲ及びＴＣＥの相互作用を低減する（例えば、当該相互作用を低減するように設計されたＩｇＧフォーマットを使用する）方法は、Ｆｃにより媒介されるＴＣＥの固定化を低減し、固定化されたＴＣＥとの架橋によるＴＣＲクラスター化を低減すると予想される。上記ＴＣＥ部分におけるＦｃ機能性を減弱する必要性が低減される場合、例えば、ＴＲＤＶ１ ＴＣＥが一方の結合ドメインを介してＴＲＤＶ１＋細胞と会合するのを可能にすること、もう一方の結合アームにより第２の細胞種（例えば、がん細胞）と会合すること、及び機能的Ｆｃドメインを介してＣＤ１６＋免疫細胞またはＣＤ３２＋免疫細胞またはＣＤ６４＋免疫細胞などの他のエフェクター細胞と会合することにより、更なる選択可能性がもたらされ得る。
●ｖδ１＋Ｔ細胞を枯渇させることなくｖδ１ ＴＣＲを活性化する。従って、本明細書に記載される抗体は、ｖδ１Ｔ細胞の望ましくない枯渇を伴わずに、ＣＤ３／γδＴＣＲ複合体と会合し得、それを活性化し得、その下方調節及び表面発現の喪失をもたらし得る（図５５を参照のこと）。これにより、血液、組織、及び腫瘍常在性Ｖδ１＋Ｔ細胞の活性化を伴うメカニズムにより疾患または障害を処置するため、例えば、疾患または障害の少なくとも１つの兆候または症状を改善するための薬剤として本明細書に記載される抗体を用いることが可能になる。
そこから、本発明者らは、本明細書に記載される発見により、新規クラスの組換えＴＣＥを作製した。具体的には、本発明の発明者らは、上記Ｔ細胞受容体シグナル伝達複合体における他のドメインではなくＴＲＤＶ１ドメインを介してＴ細胞受容体と会合する新規クラスのＴＣＥを発見した。より具体的には、本発明の発明者らは、ＴＲＤＶ１上の活性化エピトープを介してこの複合体と会合し、以前に報告されたＴ細胞受容体複合体との高親和性の会合に関連した有害効果の一部を潜在的にもたらすことなく、より高い親和性で結合し得る新規クラスのＴＣＥを発見した。更に、この新規クラスのＴＣＥは、野生型Ｆｃの機能性も許容し得る様式で会合し得、これにより、更なる有効性の可能性ももたらされる。
本発明のＤＩは、全くユニークな免疫調節性二重標的結合の完全に新規の方法を提供し、これにより、がんなどの免疫調節を必要とする広範な新規治療法の候補を提供する。本発明のＤＩプラットフォームは、既存のＤＩアプローチの重要な代替手段または改良を提供し得る新規クラスの治療薬を提供する。以前には、本明細書に記載されるＴＲＤＶ１特異的結合機能がＤＩフォーマットに組み込まれ得ることは意図されていなかった。
本発明の多重特異性抗体は、対応する単一特異性抗体と比較して改善した特性も示し得る。例えば、本発明の多重特異性抗体は、多重特異性抗体の構成部分と同じ抗原結合ドメインを有する単一特異性抗体と比較して改善した特性も示し得る。幾つかの実施形態では、例えば、組換え多重特異性抗体は、第２のエピトープを発現する病変細胞に対する、対応量の上記第１の単一特異性抗体により付与される細胞傷害性と比較して増加したγδＴ細胞媒介性細胞傷害性を付与する。本発明の多重特異性抗体は、依然として健常な細胞を温存しながら、病変細胞に対する改善した細胞傷害性も示し得る。
第２の抗原の正体により、抗体が本明細書において述べる２つの分類であるＴ細胞エンゲージャー（ＴＣＥ）抗体またはデュアル免疫調節剤（ＤＩ）抗体のうちの１つであるかどうかが決まる。
ＴＣＥに関する実施形態では、第２の抗原は、がん抗原またはがん関連抗原である。かかる実施形態では、抗体は、第１の標的エピトープであって、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープである、当該第１の標的エピトープ、及び第２の標的エピトープであって、がん抗原またはがん関連抗原のエピトープである、当該第２の標的エピトープに特異的に結合する。このカテゴリーで考えられる具体的な第２の抗原の正体は、本明細書において述べられる。しかしながら、第２の抗原は、がん細胞により発現され、当該がん細胞のＶδ１Ｔ細胞による殺傷（例えば、直接的な殺傷、または腫瘍細胞に結合した際の他の免疫細胞へのシグナル伝達の免疫ライセンシング効果による殺傷）を促進する任意の抗原であり得る。かかるＶδ１細胞によるがん細胞の殺傷は、Ｖδ１Ｔ細胞及びがん細胞の共局在化、ならびに多重特異性抗体の、特にＶδ１Ｔ細胞の活性化エピトープへの結合によるＶδ１Ｔ細胞の活性化により促進される。本発明は、ＴＣＥ型抗体のための完全に新規のプラットフォームを例示する。
幾つかの実施形態では、第２の抗原は、卵巣癌の抗原ではない。幾つかの実施形態では、第２の抗原は、Ｍｏｖ１９＋卵巣癌の抗原ではない。幾つかの実施形態では、多重特異性（好適には二重特異性）抗体は、Ｍｏｖ１９＋卵巣癌細胞に特異的に結合しない。幾つかの実施形態では、多重特異性（好適には二重特異性）抗体は、α葉酸受容体（α－ＦＲ）に特異的に結合しない。α－ＦＲは、葉酸受容体１、ＦＯＬＲ１、葉酸受容体α、またはＦＲαとしても公知である。これはＦＯＬＲ１遺伝子（ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号：Ｐ１５３２８）によりコードされ、配列番号３９０の配列を有する。幾つかの実施形態では、多重特異性（好適には二重特異性）抗体は、ｓｃＦｖ ＭＯＶ１９により結合されるエピトープに特異的に結合しない。
幾つかの実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性抗体であり、ここで、第２の抗原はα葉酸受容体ではない。
幾つかの実施形態では、多重特異性抗体は、組換え宿主細胞から発現される組換え核酸のオープンリーディングフレームまたは複数のオープンリーディングフレームによりコードされるヒト組換え抗体である。幾つかの実施形態では、多重特異性抗体は、Ｂ細胞融合ハイブリドーマ技術により得られたげっ歯類抗体または他の非ヒト抗体ではない。幾つかの実施形態では、多重特異性抗体は、げっ歯類由来のハイブリドーマに見出される配列などの、非ヒト動物種でのみ見出される非ヒトＩｇＧ定常ドメイン配列を含まない。
ＤＩに関する実施形態では、第２の抗原は免疫調節性抗原である。かかる実施形態では、抗体は、第１の標的エピトープであって、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープである、当該第１の標的エピトープ、及び第２の標的エピトープであって、免疫調節性抗原である、当該第２の標的エピトープと特異的に結合する。「免疫調節性」抗原は、抗体媒介性免疫及び／または細胞媒介性免疫を調節する（例えば、促進する）抗原である。免疫調節性抗原は、Ｔ細胞の細胞表面に存在するものである。第２の抗原が免疫調節性抗原である本発明の実施形態では、第２の抗原は、Ｔ細胞受容体またはＴ細胞受容体複合体の構成要素ではない。例えば、第２のエピトープが免疫調節性抗原のエピトープである本発明の実施形態では、第２のエピトープは、ＴＲＤＶ１のエピトープではない。第２のエピトープが免疫調節性抗原のエピトープである本発明の好ましい実施形態では、第２のエピトープは、Ｔ細胞受容体複合体のエピトープではない。例えば、幾つかの実施形態では、第２のエピトープは、ＣＤ３のエピトープではない。従って、これらの実施形態の抗体は、ＴＲＤＶ１を介してＴ細胞に特異的に結合し、更に、第２の異なるエピトープであって、Ｔ細胞受容体複合体のエピトープではない、当該第２の異なるエピトープを介してＴ細胞に結合し得るため、「デュアル免疫調節剤」である。第２の抗原の例としては、例えば、免疫チェックポイント阻害因子であるＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－１、ＯＸ４０、ＣＴＬＡ－４、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３、ＴＩＧＩＴ、及びＶＩＳＴＡが挙げられる。例えば、固形腫瘍は、骨髄由来抑制性細胞（ＭＤＳＣ）、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）、及び制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）などの免疫抑制性細胞を動員し、これらは全て、細胞傷害性Ｔ細胞の活性を阻害する。従って、固形腫瘍においてＤＩを最も効果的に使用するには、多重特異性部分を使用して、Ｔ細胞調節経路を標的とすることと組み合わせて、免疫抑制性ＴＭＥを克服し、Ｔ細胞が腫瘍の間質にとどまっている（ｉｍｍｕｎｅ ｅｘｃｌｕｄｅｄ）か、または腫瘍局所にＴ細胞が存在しない（ｉｍｍｕｎｅ ｄｅｓｅｒｔ）「冷たい」腫瘍を炎症性の「熱い」腫瘍にするのを促進することがおそらく必要である。しかしながら、本発明は、ＤＩ型抗体の完全に新規なプラットフォームを提供するため、特定の第２の免疫調節性抗原に限定されない。
好ましい実施形態では、本発明の多重特異性抗体（好適には二重特異性抗体）は、ＣＤ３と特異的に結合しない（または直接相互作用しない）。好ましい実施形態では、第２の抗原はＣＤ３ではない。
幾つかの実施形態では、第２の抗原は、ＣＤ３またはα葉酸受容体ではない。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、Ｖδ１＋Ｔ細胞により発現される抗原（特に、Ｖδ１＋Ｔ細胞の表面上に発現される抗原）上に存在する。他の実施形態では、第２の標的エピトープは、別の細胞、すなわちＶδ１＋Ｔ細胞ではない細胞により発現される抗原（特に、Ｖδ１＋Ｔ細胞ではない細胞の表面に発現される抗原）上に存在する。例えば、第２の抗原は、がん細胞により発現され得る。
本明細書における、細胞「上」に存在する抗原への言及は、細胞膜上で発現されるか、またはかかる細胞の細胞膜（の細胞外側）と会合する抗原を指す。
種々の実施形態では、第２の標的エピトープは、がん抗原またはがん関連抗原のエピトープである。種々の実施形態では、がん抗原またはがん関連抗原は、ＡＦＰ、ＡＫＡＰ－４、ＡＬＫ、αフェトプロテイン、アンドロゲン受容体、Ｂ７Ｈ３、ＢＡＧＥ、ＢＣＡ２２５、ＢＣＡＡ、Ｂｃｒ－ａｂｌ、β－カテニン、β－ＨＣＧ、β－ヒト絨毛性ゴナドトロピン、ＢＯＲＩＳ、ＢＴＡＡ、ＣＡ １２５、ＣＡ １５－３、ＣＡ １９５、ＣＡ １９－９、ＣＡ ２４２、ＣＡ ２７．２９、ＣＡ ７２－４、ＣＡ－５０、ＣＡＭ １７．１、ＣＡＭ４３、カルボニックアンヒドラーゼＩＸ、癌胎児性抗原、ＣＤ２２、ＣＤ３３／ＩＬ３Ｒａ、ＣＤ６８＼Ｐ１、ＣＤＫ４、ＣＥＡ、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン４（ＣＳＰＧ４）、ｃ－Ｍｅｔ、ＣＯ－０２９、ＣＳＰＧ４、サイクリンＢ１、シクロフィリンＣ関連タンパク質、ＣＹＰ１Ｂ１、Ｅ２Ａ－ＰＲＬ、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥＬＦ２Ｍ、ＥｐＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、エフリンＢ２、エプスタイン・バーウイルス抗原ＥＢＶＡ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ＥＴＳ融合遺伝子）、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＦＡＰ、ＦＧＦ－５、Ｆｏｓ関連抗原１、フコシルＧＭ１、Ｇ２５０、Ｇａ７３３＼ＥｐＣＡＭ、ＧＡＧＥ－１、ＧＡＧＥ－２、ＧＤ２、ＧＤ３、神経膠腫関連抗原、ＧｌｏｂｏＨ、糖脂質Ｆ７７、ＧＭ３、ＧＰ １００、ＧＰ １００（Ｐｍｅｌ １７）、Ｈ４－ＲＥＴ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＨＥＲ－２／Ｎｅｕ／ＥｒｂＢ－２、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ－ＭＡＡ）、ＨＰＶ Ｅ６、ＨＰＶ Ｅ７、ｈＴＥＲＴ、ＨＴｇｐ－１７５、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、イディオタイプ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＧＦ－ＩＩ、ＩＧＨ－ＩＧＫ、インスリン成長因子（ＩＧＦ）－Ｉ、腸カルボキシルエステラーゼ、Ｋ－ｒａｓ、ＬＡＧＥ－１ａ、ＬＣＫ、レクチン反応性ＡＦＰ、レグマイン、ＬＭＰ２、Ｍ３４４、ＭＡ－５０、Ｍａｃ－２結合タンパク質、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＭＡＤ－ＣＴ－２、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ Ａ１、ＭＡＧＥ Ａ３、ＭＡＧＥ－１、ＭＡＧＥ－３、ＭＡＧＥ－４、ＭＡＧＥ－５、ＭＡＧＥ－６、ＭＡＲＴ－１、ＭＡＲＴ－１／ＭｅｌａｎＡ、Ｍ－ＣＳＦ、黒色腫関連コンドロイチン硫酸プロテオグリカン（ＭＣＳＰ）、メソテリン、ＭＧ７－Ａｇ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＭＮ－ＣＡ ＩＸ、ＭＯＶ１８、ＭＵＣ１、Ｍｕｍ－１、ｈｓｐ７０－２、ＭＹＣＮ、ＭＹＬ－ＲＡＲ、ＮＡ１７、ＮＢ／７０Ｋ、神経／グリア抗原２（ＮＧ２）、好中球エラスターゼ、ｎｍ－２３Ｈ１、ＮｕＭａ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＮＹ－ＣＯ－１、ＮＹ－ＥＳＯ、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＯＹ－ＴＥＳ１、ｐ１５、ｐ１６、ｐ１８０ｅｒｂＢ３、ｐ１８５ｅｒｂＢ２、ｐ５３、ｐ５３変異体、Ｐａｇｅ４、ＰＡＸ３、ＰＡＸ５、ＰＤＧＦＲ－β、ＰＬＡＣ１、ポリシアル酸、前立腺癌腫瘍抗原－１（ＰＣＴＡ－１）、前立腺特異抗原、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ－１、Ｒａｓ、Ｒａｓ変異体、ＲＣＡＳ１、ＲＧＳ５、ＲｈｏＣ、ＲＯＲ１、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、ＳＡＲＴ３、ＳＤＣＣＡＧ１６、ｓＬｅ（ａ）、精子タンパク質１７、ＳＳＸ２、ＳＴｎ、サバイビン、ＴＡ－９０、ＴＡＡＬ６、ＴＡＧ－７２、テロメラーゼ、チログロブリン、Ｔｉｅ ２、ＴＬＰ、Ｔｎ、ＴＰＳ、ＴＲＰ－１、ＴＲＰ－２、ＴＲＰ－２、ＴＳＰ－１８０、チロシナーゼ、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ２、ＶＩＳＴＡ、ＷＴ１、ＸＡＧＥ １、４３－９Ｆ、５Ｔ４、及び７９１Ｔｇｐ７２から選択されるものである。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＥｒｂＢサブファミリーに存在する。Ｅｒｂ－Ｂ１（ＥＧＦＲ）、Ｅｒｂ－Ｂ２（ＨＥＲ２）は、受容体型チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）のスーパーファミリーのサブクラスＩのメンバーである。幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープはＲＴＫである。ＲＴＫは、細胞外リガンド結合ドメイン及び単一膜貫通ヘリックスから構成される同様のタンパク質構造を共有する。これらは主に、それらの細胞内チロシンキナーゼドメイン（ＴＫＤ）及びカルボキシル（Ｃ）末端尾部の性質により、別個のサブクラスに更に細分される。ＲＴＫの細胞外ドメイン領域は、免疫グロブリン（Ｉｇ）様ドメインまたは上皮成長因子（ＥＧＦ）様ドメインが含まれる、種々の保存された要素を示す。幾つかの実施形態では、第２のエピトープは、受容体チロシンキナーゼのエピトープである。ＲＴＫファミリーの例としては、ＶＥＧＦＲ２、ＥＧＦＲ、ｃ－ＭＥＴ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＰＤＧＦＲ－β、ＣＤ１１５、ＣＤ１１７、ＣＤ１４０Ａ、ＣＤ１４０Ｂ、ＣＤ１６７ａ、ＣＤ１６７ｂ、ＣＤ１７２ｇ、ＣＤ２２０、ＣＤ２４６、ＣＤ３０３、ＣＤ３３１、ＣＤ３３２、ＣＤ３３３、及びＣＤ３４０が挙げられる。
例えば、幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＨＥＲ２（ヒト上皮成長因子受容体２）である。ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ－２またはＣＤ３４０としても公知）は、がん関連抗原であり、ＥｒｂＢサブファミリーの受容体型チロシンキナーゼの一例である。ＨＥＲ２の発現は健常な組織では低く、Ｈｅｒ２＋がんでは正常組織と比較して最大４０～１００倍に発現が増加している。Ｈｅｒ２の過剰発現は、多数の乳癌、胃癌、食道癌、卵巣癌、子宮内膜癌、ＮＳＣＬＣ、及び大腸癌と関連している。多数のがんにおいて、ＨＥＲ２は他のＥｒｂＢ受容体と二量体化し、様々な下流シグナル伝達経路の活性化をもたらし、その結果、コントロール不能な増殖及びアポトーシス抵抗性を引き起こす。ＨＥＲ２の過剰発現はより低い生存率と相関するため、予後を改善するための標的であり、腫瘍マーカーでもある。ＨＥＲ２のエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体は、当該技術分野において周知である。例えば、トラスツズマブは、ＨＥＲ２のエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープはＥＧＦＲである。ＥＧＦＲ（上皮成長因子受容体）は、がん関連抗原であり、ＥｒｂＢサブファミリーの受容体チロシンキナーゼの一例である。ＥＧＦＲは複数の臓器で発現し、上皮細胞及び上皮由来の腫瘍の挙動を司るシグナル伝達の開始において重要な役割を果たす。ＥＧＦＲにより媒介されるシグナル伝達は、多様な細胞経路を調節することにより、細胞の増殖、移動、生存、及び転移の制御にも関与している。他の受容体型チロシンキナーゼと同様に、ＥＧＦＲ活性に影響を及ぼすか、またはＥＧＦＲ上方調節を引き起こす変異は、多数のがんに関連している。実際、ＥＧＦＲの遺伝子変化は、固形腫瘍の最大３０％で観察され、概して予後不良と関連している。細胞外ドメインへのＥＧＦの結合を阻害すること、または細胞内チロシンキナーゼ活性を阻害することによるＥＧＦＲシグナル伝達の破壊により、ＥＧＦＲ発現腫瘍の増殖が制限され得る。従って、ＥＧＦＲ阻害薬は、抗がん剤になり得る。実際、ある特定の腫瘍細胞は、ＥＧＦＲシグナル伝達に依存しており、従って、「がん遺伝子中毒」になっており、このため、この受容体は治療のための魅力的な標的となる。ＥＧＦＲのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体は、当該技術分野において周知である。例えば、セツキシマブは、ＥＧＦＲのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、Ｂリンパ球抗原のエピトープである。Ｂ細胞で特に発現する抗原の例としては、ＣＤ１ｄ、ＣＤ５、ＣＤ１０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ３２Ａ、ＣＤ３２Ｂ ＣＤ３７、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ５２、ＣＤ７２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ１３８、ＣＤ１６６、ＣＤ１７９Ａ、ＣＤ１７９Ｂ、ＣＤ１８０、ＣＤ１８５、ＣＤ１５０、ＣＤ２１３ａ１、ＣＤ２１３ａ２、ＣＤ２１７、ＣＤ２４４、ＣＤ２５５、ＣＤ２２９、ＣＤ２３２、ＣＤ２６７、ＣＤ２６８、ＣＤ２６９、ＣＤ２７４、ＣＤ２７７、ＣＤ２７９、ＣＤ２９０、ＣＤ３００Ａ、ＣＤ３００Ｃ、ＣＤ３０５、ＣＤ３０７ａ、ＣＤ３０７ｂ、ＣＤ３０７ｃ、ＣＤ３０７ｄ、ＣＤ３０７ｅ、ＣＤ３１６、ＣＤ３１９、ＣＤ３２７、ＣＤ３５２、及びＣＤ３６１が挙げられる。例えば、幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープはＣＤ１９である。ＣＤ１９（分化抗原群１９）は、がん関連抗原である。ＣＤ１９は、免疫グロブリンスーパーファミリーのＩ型膜貫通糖タンパク質の一例でもある。幾つかの実施形態では、第２の標的は、免疫グロブリンスーパーファミリー（ＩｇＳＦ）のメンバーに存在するエピトープである。このファミリーの例としては、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ１９、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ２８、ＣＤ４８、ＣＤ５８、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ９０、ＣＤ９６、ＣＤ１４７、ＣＤ１５０、ＣＤ１５５、ＣＤ２２９、ＣＤ２４４、ＣＤ２７３、ＣＤ２７４、ＣＤ２７６が挙げられる。ＣＤ１９はＢ細胞においてその発生を通して広く発現し、Ｂ細胞が成熟するにつれてＣＤ１９の表面密度が増加する。ＣＤ１９は、細胞質からのシグナル伝達タンパク質の動員に関与する。ＣＤ１９は、Ｂ細胞受容体シグナル伝達経路にも関与し、Ｂ細胞受容体の機能に不可欠である。Ｂ細胞で発現するため、ＣＤ１９は、白血病及び腫瘍化したリンパ球に対抗するための有用な標的となるだけでなく、Ｂ細胞から発生するがんの診断バイオマーカーにもなる。ＣＤ１９変異は、抗体産生の減少及び免疫不全を引き起こし得、従って、ＣＤ１９は、自己免疫疾患の処置のための標的にもされ得る。ＣＤ１９のエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体は、当該技術分野において周知である。例えば、ブリナツモマブは、ＣＤ１９のエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、腫瘍間質抗原に存在する。腫瘍間質抗原の例としては、ＦＡＰα、ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ７３、ＣＤ１０５、及びＣＤ１６６が挙げられる。例えば、幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＦＡＰα（線維芽細胞活性化タンパク質α）である。ＦＡＰαは、セプラーゼまたはプロリルエンドペプチダーゼＦＡＰとしても公知のがん関連抗原である。ＦＡＰαは、様々な上皮性癌の間質で選択的に発現される。ＦＡＰαは、ジペプチジルペプチダーゼファミリーの細胞表面セリンプロテアーゼの一例である。ＦＡＰαは、腫瘍微小環境において重要な役割を果たす、がん関連線維芽細胞（ＣＡＦ）により発現される。ＣＡＦで選択的に発現される他の分子としては、ＣＤ１０、ＣＤ９０、ＣＤ１４０Ａ、及びＣＤ１４０Ｂが挙げられる。幾つかの実施形態では、第２のエピトープは、ＣＡＦで選択的に発現される分子に存在するエピトープである。上皮癌（乳癌、ＣＲＣ皮膚癌、及び膵臓癌）の９０％超が、周囲間質のＣＡＦの表面にＦＡＰαを発現することが分かっている。ＣＡＦは、Ｔ細胞上のＣＸＣＲ４に結合し、免疫抑制性であるケモカインＣＸＣＬ１２を分泌する。ＦＡＰαは、侵襲性黒色腫細胞株で発現することが分かっており、転帰不良及び低い生存率の乳癌患者で顕著に増加している。ＦＡＰαは、コラゲナーゼ及びジペプチダーゼ活性の両方を有し、腫瘍の成長、移動、浸潤、転移、及びＥＣＭの分解を促進する。正常で健康な成体組織では、組織リモデリングまたは創傷治癒の領域外でＦＡＰα発現は検出されず、従って、ＦＡＰαの発現がほぼ腫瘍間質のみに限られ、がん進行の様々な側面でＦＡＰαが直接的役割を果たすため、ＦＡＰαは有望な抗がん標的である。ＦＡＰαのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体は、当該技術分野において周知である。例えば、シブロツズマブは、ＦＡＰαのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号４６１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４６２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４６３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＦＡＰα結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４５６のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５７のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＦＡＰα結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＦＡＰαに特異的に結合し、配列番号４０２を含む。
かかる配列は、任意の好適な抗ＴＲＤＶ１結合配列と組み合わされ得る。例えば、幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＦＡＰαに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号４６１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４６２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４６３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＦＡＰα結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＦＡＰαに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４５６のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５７のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＦＡＰα結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＦＡＰαに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４０２を含むＦＡＰα結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＦＡＰαに特異的に結合し、配列番号４１４及び配列番号４１５を含む。幾つかの実施形態では、抗体は、ＴＲＤＶ１及びＦＡＰαに特異的に結合し、配列番号５０４及び配列番号４１５を含む。幾つかの実施形態では、抗体は、ＴＲＤＶ１及びＦＡＰαに特異的に結合し、配列番号５０５及び配列番号４１５を含む。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、細胞表面糖タンパク質に存在する。タンパク質グリコシル化は、重要かつ一般的な翻訳後修飾である。ヒトタンパク質の５０％超が、タンパク質の機能性を調節するためにグリコシル化されると考えられている。異常なグリコシル化は、炎症性皮膚疾患、真性糖尿病、循環器障害、関節リウマチ、アルツハイマー病及びプリオン病、ならびにがんなどの幾つかの疾患に関連付けられている。細胞表面糖タンパク質の例としては、ＣＤ１ａ、ＣＤ１ｂ、ＣＤ１ｃ、ＣＤ１ｄ、ＣＤ１ｅ、ＣＤ３ｄ、ＣＤ３ｅ、ＣＤ３ｇ、ＣＤ８ａ、ＣＤ８ｂ、ＣＤ１１ａ、ＣＤ２１、ＣＤ３６、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ４２ｃ、ＣＤ４２ｄ、ＣＤ４３、ＣＤ６６ａ、ＣＤ６６ｆ、ＣＤ１７７、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ２３５ｂ、ＣＤ２３６、ＣＤ２３８、ＣＤ２４３、ＣＤ２２７及びＣＤ３０１が挙げられる。例えば、幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、メソテリン（ＭＳＬＮ）である。ＭＳＬＮは、がん関連抗原であり、細胞表面糖タンパク質の一例である。ＭＳＬＮは、健常細胞での発現は限定されているが（胸膜、腹膜、及び心膜を覆う中皮細胞）、幾つかのがん（悪性中皮腫及び膵臓、胆管細胞癌、卵巣腺癌及び肺腺癌、悪性中皮腫、膵臓、卵巣癌、子宮内膜癌、胆道癌、胃癌、ならびに小児急性骨髄性白血病）でも発現する。ＭＳＬＮは腫瘍分化抗原の一例である。ＭＳＬＮの生理学的機能は不明だが、ＭＳＬＮはＭＳＬＮ＋腫瘍に対する治療を局在化させるための有用な標的であり、または腫瘍マーカーとしても利用され得る。ＭＳＬＮのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体は、当該技術分野において周知である。例えば、アネツマブは、ＭＳＬＮのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号４６９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４７０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４７１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＭＳＬＮ結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４６４のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＭＳＬＮ結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＭＳＬＮに特異的に結合し、配列番号４０４を含む。
かかる配列は、任意の好適な抗ＴＲＤＶ１結合配列と組み合わされ得る。例えば、幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＭＳＬＮに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号４６９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４７０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４７１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＭＳＬＮ結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＭＳＬＮに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４６４のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＭＳＬＮ結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＭＳＬＮに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４０４を含むＭＳＬＮ結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＭＳＬＮに特異的に結合し、配列番号４１４及び配列番号４１６を含む。幾つかの実施形態では、抗体は、ＴＲＤＶ１及びＭＳＬＮに特異的に結合し、配列番号５０４及び配列番号４１６を含む。幾つかの実施形態では、抗体は、ＴＲＤＶ１及びＭＳＬＮに特異的に結合し、配列番号５０５及び配列番号４１６を含む。
種々の実施形態では、第２の標的エピトープは、免疫調節性抗原のエピトープである。免疫調節性抗原は、免疫系を調節する（活性化または抑制する）抗原である。幾つかの実施形態では、免疫調節性抗原は、細胞表面タンパク質（すなわち、細胞の表面に発現される抗原、特にリンパ球、好中球、単球、またはマクロファージなどの免疫細胞の表面に発現される抗原）である。免疫調節性抗原は、Ｖδ１＋Ｔ細胞で発現され得るか、または異なる細胞、例えば、ＣＤ４＋細胞、ＣＤ８＋細胞、または異なる免疫細胞により発現され得る。免疫調節性抗原は、Ｂ７－１（ＣＤ８０）、Ｂ７－２（ＣＤ８６）、Ｂ７－ＤＣ（ＣＤ２７３）、Ｂ７－Ｈ１（ＣＤ２７４）、Ｂ７－Ｈ２（ＣＤ２７５）、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７－Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、Ｂ７－Ｈ５（ＶＩＳＴＡ）、ＢＴＬＡ（ＣＤ２７２）、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＣＤ１３７Ｌ、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ（ＣＤ１５４）、ＣＤ５４、ＣＤ５９、ＣＤ７０、ＣＴＬＡ４（ＣＤ１５２）、ＣＸＣＬ９、ＧＩＴＲ（ＣＤ３５７）、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）、ＩＣＡＭ－１（ＣＤ５４）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、ＬＡＧ－３（ＣＤ２２３）、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、ＯＸ４０Ｌ（ＣＤ２５２）、ＰＤ－１（ＣＤ２７９）、ＰＤ－Ｌ１（ＣＤ２７４）、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ３１４、ＣＤ３３４、ＣＤ３３５、ＣＤ３３７、及びＴＩＭ－３（ＣＤ３６６）からなる群から選択され得る。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、刺激性免疫チェックポイント分子のエピトープである。例えば、幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）である。ＯＸ４０は、免疫調節性抗原であり、ＴＮＦＲスーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）のメンバーの一例である。幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＴＮＦＲＳＦ分子に存在するエピトープである。これらのタンパク質は、細胞外システインリッチドメインを介して腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）に結合する能力を特徴とするサイトカイン受容体のスーパーファミリーである。例としては、ＣＤ１８、ＣＤ２７、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ９５、ＣＤ１２０ａ、ＣＤ１２０ｂ、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２６５、ＣＤ２６８、ＣＤ２６９、ＣＤ２７０、ＣＤ２７１、ＣＤ３５７及びＣＤ３５８が挙げられる。１つのかかる例であるＯＸ４０（ＣＤ１３４）は、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞で発現される後期共刺激性免疫チェックポイント受容体である。ＯＸ４０は、ＣＤ４＋Ｔ細胞でより高度に発現され、ＯＸ４０の発現はＴ細胞の完全な活性化に依存するため、ナイーブＴ細胞では恒常的に発現されない。活性化されると（例えば、ＯＸ４０Ｌにより）、ＯＸ４０は、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞の活性化、エフェクター及びメモリーＴ細胞の生存及び増大を促進し、またＴｒｅｇ活性を抑制する。これにより、腫瘍による免疫回避が抑制される。ＯＸ４０は刺激性標的であるため、ＯＸ４０を標的とする療法は、ＯＸ４０発現免疫細胞を活性化して、腫瘍に対する免疫応答（例えば、ＣＤ４８＋Ｔ細胞応答）を刺激する。ＯＸ４０のエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体は、当該技術分野において周知である。例えば、ポガリズマブは、ＯＸ４０のエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４９０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４９１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４９２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号４９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＯＸ４０結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４８８のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＯＸ４０結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＯＸ４０に特異的に結合し、配列番号４１０を含む。
かかる配列は、任意の好適な抗ＴＲＤＶ１結合配列と組み合わされ得る。例えば、幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＯＸ４０に特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４９０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４９１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４９２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号４９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＯＸ４０結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＯＸ４０に特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４８８のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＯＸ４０結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＯＸ４０に特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４１０を含むＯＸ４０結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＯＸ４０に特異的に結合し、配列番号４１４及び配列番号４１９を含む。幾つかの実施形態では、抗体は、ＴＲＤＶ１及びＯＸ４０に特異的に結合し、配列番号５０４及び配列番号４１９を含む。幾つかの実施形態では、抗体は、ＴＲＤＶ１及びＯＸ４０に特異的に結合し、配列番号５０５及び配列番号４１９を含む。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＴＮＦスーパーファミリーメンバーに存在するエピトープである。例えば、幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）のエピトープである。４－１ＢＢは、免疫調節性抗原であり、ＴＮＦスーパーファミリーのメンバーの一例でもある。ＴＮＦスーパーファミリーは、ＴＮＦ相同性ドメインを含有するＩＩ型膜貫通タンパク質のタンパク質スーパーファミリーであり、ＣＤ７０、ＣＤ１３７、ＣＤ１５３、ＣＤ１５４、ＣＤ２５２、ＣＤ２５３、ＣＤ２５４、ＣＤ２５６、ＣＤ２５７、及びＣＤ２５８を含む。４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）は、Ｔ細胞、ならびにＮＫ細胞、樹状細胞（ＤＣ）、単球、好中球、及びＢ細胞で発現される誘導性の共刺激性免疫チェックポイント受容体である。４－１ＢＢは、刺激性抗原であり、活性化ＣＤ８＋Ｔ細胞で特に発現される。４－１ＢＢは、インビトロでＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、マクロファージ、及びＤＣの増殖、ならびにサイトカイン産生を刺激する。４－１ＢＢの架橋がＴ細胞の増殖、ＩＬ－２の分泌、生存、及び細胞溶解活性を増強することが示されているように、４－１ＢＢは、インビボでＣＤ８＋Ｔ細胞を活性化する傾向があり、強力な抗腫瘍活性を示す。４－１ＢＢは刺激性標的であるため、４－１ＢＢを標的とする治療法は、４－１ＢＢ発現免疫細胞を活性化して、腫瘍に対する免疫応答（例えば、細胞溶解性ＣＤ８＋Ｔ細胞応答）を刺激する。４－１ＢＢのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体は、当該技術分野において周知である。例えば、ウトミルマブは、４－１ＢＢのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４８２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４８３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４８４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号４８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む４－１ＢＢ結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８１のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む４－１ＢＢ結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、４－１ＢＢに特異的に結合し、配列番号４０８を含む。
かかる配列は、任意の好適な抗ＴＲＤＶ１結合配列と組み合わされ得る。例えば、幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及び４－１ＢＢに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４８２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４８３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４８４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号４８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む４－１ＢＢ結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及び４－１ＢＢに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８１のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む４－１ＢＢ結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及び４－１ＢＢに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４０８を含む４－１ＢＢ結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及び４－１ＢＢに特異的に結合し、配列番号４１４及び配列番号４１８を含む。幾つかの実施形態では、抗体は、ＴＲＤＶ１及び４－１ＢＢに特異的に結合し、配列番号５０４及び配列番号４１８を含む。幾つかの実施形態では、抗体は、ＴＲＤＶ１及び４－１ＢＢに特異的に結合し、配列番号５０５及び配列番号４１８を含む。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、免疫チェックポイント阻害分子である。例えば、幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＴＩＧＩＴ（Ｉｇ及びＩＴＩＭドメインを有するＴ細胞免疫受容体）である。ＴＩＧＩＴは、免疫調節性抗原であり、γδＴ細胞が含まれるＴ細胞、及びＮＫ細胞で発現される免疫チェックポイント阻害因子の一例である。ＴＩＧＩＴは、免疫恒常性に関与し、そのリガンド（ＰＶＲ／ＣＤ１５５）に結合し、Ｔ細胞の抑制をもたらすことにより自己免疫を防止する。ＴＩＧＩＴは、腫瘍浸潤リンパ球で過剰発現される。ＴＩＧＩＴの治療的遮断は、Ｔ細胞増殖、サイトカイン産生、及び脱顆粒を増強するため望ましい。ＴＩＧＩＴのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体は、当該技術分野において周知である。例えば、チラゴルマブは、ＴＩＧＩＴのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４９８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４９９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５００のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号５０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号５０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号５０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＴＩＧＩＴ結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４９６のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９７のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＩＧＩＴ結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＩＧＩＴに特異的に結合し、配列番号４１２を含む。
かかる配列は、任意の好適な抗ＴＲＤＶ１結合配列と組み合わされ得る。例えば、幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＴＩＧＩＴに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４９８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４９９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５００のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号５０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号５０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号５０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＴＩＧＩＴ結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＴＩＧＩＴに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４９６のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９７のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＩＧＩＴ結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＴＩＧＩＴに特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４１２を含むＴＩＧＩＴ結合部分
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＴＩＧＩＴに特異的に結合し、配列番号４３９及び配列番号４２０を含む。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、免疫チェックポイント阻害分子である。例えば、幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＰＤ－１（プログラム細胞死タンパク質１）である。ＰＤ－１は、免疫調節性抗原であり、免疫グロブリンスーパーファミリーの細胞表面受容体メンバーの一例である。ＰＤ－１は、活性化ＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞、ならびにγδＴ細胞、Ｂ細胞、及びマクロファージなどの他のタイプの免疫細胞で発現される免疫チェックポイント阻害因子の一例である。ＰＤ－１のそのリガンドへの結合は、Ｔ細胞活性化の阻害をもたらす。正常の状況下では、ＰＤ－１は免疫恒常性に関与し、Ｔｒｅｇのアポトーシスを減少させ抗原特異的Ｔ細胞のアポトーシスを増加させることにより、自己免疫から保護する。がんの状況では、ＰＤ－１は、細胞溶解性ＣＤ８＋Ｔ細胞を不活性化することにより、腫瘍細胞の免疫回避をもたらす。従って、ＰＤ－１の遮断は有望な治療標的である。ＰＤ－１のエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体は、当該技術分野において周知である。例えば、ペムブロリズマブは、ＰＤ－１のエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号４７７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４７８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＰＤ－１結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、配列番号４７２のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＰＤ－１結合部分を含む。幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＰＤ－１に特異的に結合し、配列番号４０６を含む。
かかる配列は、任意の好適な抗ＴＲＤＶ１結合配列と組み合わされ得る。例えば、幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＰＤ－１に特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号４７７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４７８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含むＰＤ－１結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＰＤ－１に特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４７２のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＰＤ－１結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＰＤ－１に特異的に結合し、以下を含む：
●配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含むＴＲＤＶ１結合部分；ならびに
●配列番号４０６を含むＰＤ－１結合部分。
幾つかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、ＴＲＤＶ１及びＰＤ－１に特異的に結合し、配列番号４３８及び配列番号４１７を含む。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、刺激性免疫チェックポイント分子である。刺激性免疫チェックポイント分子としては、例えば、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＣＤ１３７Ｌ、ＣＤ２７、ＣＤ７０、ＣＤ２８、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ、ＣＤ４０、及びＣＤ４０Ｌが挙げられる。幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＣＤ１３７Ｌ、ＣＤ２７、ＣＤ７０、ＣＤ２８、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ、ＣＤ４０、及びＣＤ４０Ｌから選択される１つ以上である。幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＯＸ４０及び４－１ＢＢから選択される１つ以上である。
幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、免疫チェックポイント阻害分子である。免疫チェックポイント阻害分子としては、例えば、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１５５、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ－４、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＬＡＧ－３、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＭ－３が挙げられる。幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１５５、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ－４、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＬＡＧ－３、ＶＩＳＴＡ、及びＴＩＭ－３から選択される１つ以上である。幾つかの実施形態では、第２の標的エピトープは、ＴＩＧＩＴ及びＰＤ－１から選択される１つ以上である。
本明細書における、細胞「上」に存在する抗原への言及は、細胞膜上で発現されるか、またはかかる細胞の細胞膜（の細胞外側）と会合する抗原を指す。
種々の実施形態では、第２の標的エピトープは、分化抗原群（ＣＤ）のエピトープである。分化抗原群（ＣＤ）の命名法は、細胞表面分子を同定し、命名するための統一体系である。典型的には、細胞表面タンパク質には、当該細胞表面タンパク質に対する少なくとも２種のモノクローナル抗体が産生されるまでＣＤ番号が割り当てられない。従って、この体系は、ＣＤ番号が割り当てられた全ての細胞表面タンパク質が特定のモノクローナル抗体またはその断片により認識及び結合されることが可能であることを保証する。種々の実施形態では、ＣＤ抗原は、ＣＤ１ａ、ＣＤ１ｂ、ＣＤ１ｃ、ＣＤ１ｄ、ＣＤ１ｅ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ３ｄ、ＣＤ３ｅ、ＣＤ３ｇ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ８ａ、ＣＤ８ｂ、ＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｄ、ＣＤ１３、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１６ａ、ＣＤ１６ｂ、ＣＤ１７、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ２６、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ３１、ＣＤ３２Ａ、ＣＤ３２Ｂ、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ４１、ＣＤ４２、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ４２ｃ、ＣＤ４２ｄ、ＣＤ４３、ＣＤ４４、ＣＤ４５、ＣＤ４６、ＣＤ４７、ＣＤ４８、ＣＤ４９ａ、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ４９ｄ、ＣＤ４９ｅ、ＣＤ４９ｆ、ＣＤ５０、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ５３、ＣＤ５４、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ５７、ＣＤ５８、ＣＤ５９、ＣＤ６０ａ、ＣＤ６０ｂ、ＣＤ６０ｃ、ＣＤ６１、ＣＤ６２Ｅ、ＣＤ６２Ｌ、ＣＤ６２Ｐ、ＣＤ６３、ＣＤ６４ａ、ＣＤ６５、ＣＤ６５ｓ、ＣＤ６６ａ、ＣＤ６６ｂ、ＣＤ６６ｃ、ＣＤ６６ｄ、ＣＤ６６ｅ、ＣＤ６６ｆ、ＣＤ６８、ＣＤ６９、ＣＤ７０、ＣＤ７１、ＣＤ７２、ＣＤ７３、ＣＤ７４、ＣＤ７５、ＣＤ７５ｓ、ＣＤ７７、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ８３、ＣＤ８４、ＣＤ８５Ａ、ＣＤ８５Ｂ、ＣＤ８５Ｃ、ＣＤ８５Ｄ、ＣＤ８５Ｆ、ＣＤ８５Ｇ、ＣＤ８５Ｈ、ＣＤ８５Ｉ、ＣＤ８５Ｊ、ＣＤ８５Ｋ、ＣＤ８５Ｍ、ＣＤ８６、ＣＤ８７、ＣＤ８８、ＣＤ８９、ＣＤ９０、ＣＤ９１、ＣＤ９２、ＣＤ９３、ＣＤ９４、ＣＤ９５、ＣＤ９６、ＣＤ９７、ＣＤ９８、ＣＤ９９、ＣＤ１００、ＣＤ１０１、ＣＤ１０２、ＣＤ１０３、ＣＤ１０４、ＣＤ１０５、ＣＤ１０６、ＣＤ１０７、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ１０７ｂ、ＣＤ１０８、ＣＤ１０９、ＣＤ１１０、ＣＤ１１１、ＣＤ１１２、ＣＤ１１３、ＣＤ１１４、ＣＤ１１５、ＣＤ１１６、ＣＤ１１７、ＣＤ１１８、ＣＤ１１９、ＣＤ１２０、ＣＤ１２０ａ、ＣＤ１２０ｂ、ＣＤ１２１ａ、ＣＤ１２１ｂ、ＣＤ１２２、ＣＤ１２３、ＣＤ１２４、ＣＤ１２５、ＣＤ１２６、ＣＤ１２７、ＣＤ１２９、ＣＤ１３０、ＣＤ１３１、ＣＤ１３２、ＣＤ１３３、ＣＤ１３４、ＣＤ１３５、ＣＤ１３６、ＣＤ１３７、ＣＤ１３８、ＣＤ１３９、ＣＤ１４０Ａ、ＣＤ１４０Ｂ、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１４３、ＣＤ１４４、ＣＤｗ１４５、ＣＤ１４６、ＣＤ１４７、ＣＤ１４８、ＣＤ１５０、ＣＤ１５１、ＣＤ１５２、ＣＤ１５３、ＣＤ１５４、ＣＤ１５５、ＣＤ１５６、ＣＤ１５６ａ、ＣＤ１５６ｂ、ＣＤ１５６ｃ、ＣＤ１５７、ＣＤ１５８、ＣＤ１５８Ａ、ＣＤ１５８Ｂ１、ＣＤ１５８Ｂ２、ＣＤ１５８Ｃ、ＣＤ１５８Ｄ、ＣＤ１５８Ｅ１、ＣＤ１５８Ｅ２、ＣＤ１５８Ｆ１、ＣＤ１５８Ｆ２、ＣＤ１５８Ｇ、ＣＤ１５８Ｈ、ＣＤ１５８Ｉ、ＣＤ１５８Ｊ、ＣＤ１５８Ｋ、ＣＤ１５９ａ、ＣＤ１５９ｃ、ＣＤ１６０、ＣＤ１６１、ＣＤ１６２、ＣＤ１６３、ＣＤ１６４、ＣＤ１６５、ＣＤ１６６、ＣＤ１６７ａ、ＣＤ１６７ｂ、ＣＤ１６８、ＣＤ１６９、ＣＤ１７０、ＣＤ１７１、ＣＤ１７２ａ、ＣＤ１７２ｂ、ＣＤ１７２ｇ、ＣＤ１７３、ＣＤ１７４、ＣＤ１７５、ＣＤ１７５ｓ、ＣＤ１７６、ＣＤ１７７、ＣＤ１７８、ＣＤ１７９ａ、ＣＤ１７９ｂ、ＣＤ１８０、ＣＤ１８１、ＣＤ１８２、ＣＤ１８３、ＣＤ１８４、ＣＤ１８５、ＣＤ１８６、ＣＤ１８７、ＣＤ１８８、ＣＤ１８９、ＣＤ１９０、ＣＤ１９１、ＣＤ１９２、ＣＤ１９３、ＣＤ１９４、ＣＤ１９５、ＣＤ１９６、ＣＤ１９７、ＣＤｗ１９８、ＣＤｗ１９９、ＣＤ２００、ＣＤ２０１、ＣＤ２０２ｂ、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ２０４、ＣＤ２０５、ＣＤ２０６、ＣＤ２０７、ＣＤ２０８、ＣＤ２０９、ＣＤ２１０、ＣＤｗ２１０ａ、ＣＤｗ２１０ｂ、ＣＤ２１１、ＣＤ２１２、ＣＤ２１３ａ１、ＣＤ２１３ａ２、ＣＤ２１４、ＣＤ２１５、ＣＤ２１６、ＣＤ２１７、ＣＤ２１８ａ、ＣＤ２１８ｂ、ＣＤ２１９、ＣＤ２２０、ＣＤ２２１、ＣＤ２２２、ＣＤ２２３、ＣＤ２２４、ＣＤ２２５、ＣＤ２２６、ＣＤ２２７、ＣＤ２２８、ＣＤ２２９、ＣＤ２３０、ＣＤ２３１、ＣＤ２３２、ＣＤ２３３、ＣＤ２３４、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ２３５ｂ、ＣＤ２３６、ＣＤ２３７、ＣＤ２３８、ＣＤ２３９、ＣＤ２４０ＣＥ、ＣＤ２４０Ｄ、ＣＤ２４１、ＣＤ２４２、ＣＤ２４３、ＣＤ２４４、ＣＤ２４５、ＣＤ２４６、ＣＤ２４７、ＣＤ２４８、ＣＤ２４９、ＣＤ２５０、ＣＤ２５１、ＣＤ２５２、ＣＤ２５３、ＣＤ２５４、ＣＤ２５５、ＣＤ２５６、ＣＤ２５７、ＣＤ２５８、ＣＤ２５９、ＣＤ２６０、ＣＤ２６１、ＣＤ２６２、ＣＤ２６３、ＣＤ２６４、ＣＤ２６５、ＣＤ２６６、ＣＤ２６７、ＣＤ２６８、ＣＤ２６９、ＣＤ２７０、ＣＤ２７１、ＣＤ２７２、ＣＤ２７３、ＣＤ２７４、ＣＤ２７５、ＣＤ２７６、ＣＤ２７７、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、ＣＤ２８０、ＣＤ２８１、ＣＤ２８２、ＣＤ２８３、ＣＤ２８４、ＣＤ２８５、ＣＤ２８６、ＣＤ２８７、ＣＤ２８８、ＣＤ２８９、ＣＤ２９０、ＣＤ２９１、ＣＤ２９２、ＣＤｗ２９３、ＣＤ２９４、ＣＤ２９５、ＣＤ２９６、ＣＤ２９７、ＣＤ２９８、ＣＤ２９９、ＣＤ３００Ａ、ＣＤ３００Ｃ、ＣＤ３０１、ＣＤ３０２、ＣＤ３０３、ＣＤ３０４、ＣＤ３０５、ＣＤ３０６、ＣＤ３０７、ＣＤ３０７ａ、ＣＤ３０７ｂ、ＣＤ３０７ｃ、ＣＤ３０７ｄ、ＣＤ３０７ｅ、ＣＤ３０８、ＣＤ３０９、ＣＤ３１０、ＣＤ３１１、ＣＤ３１２、ＣＤ３１３、ＣＤ３１４、ＣＤ３１５、ＣＤ３１６、ＣＤ３１７、ＣＤ３１８、ＣＤ３１９、ＣＤ３２０、ＣＤ３２１、ＣＤ３２２、ＣＤ３２３、ＣＤ３２４、ＣＤ３２５、ＣＤ３２６、ＣＤ３２７、ＣＤ３２８、ＣＤ３２９、ＣＤ３３０、ＣＤ３３１、ＣＤ３３２、ＣＤ３３３、ＣＤ３３４、ＣＤ３３５、ＣＤ３３６、ＣＤ３３７、ＣＤ３３８、ＣＤ３３９、ＣＤ３４０、ＣＤ３４４、ＣＤ３４９、ＣＤ３５１、ＣＤ３５２、ＣＤ３５３、ＣＤ３５４、ＣＤ３５５、ＣＤ３５７、ＣＤ３５８、ＣＤ３６０、ＣＤ３６１、ＣＤ３６２、ＣＤ３６３、ＣＤ３６４、ＣＤ３６５、ＣＤ３６６、ＣＤ３６７、ＣＤ３６８、ＣＤ３６９、ＣＤ３７０、及びＣＤ３７１から選択されるものである。
健常細胞の温存
γδＴ細胞が抗原を認識し、健常細胞と病変細胞とを区別するメカニズムは完全には理解されていないが（Ｍｉｎｇ Ｈｅｎｇ ａｎｄ Ｍａｄａｌｅｎｅ Ｈｅｎｇ，Ａｎｔｉｇｅｎ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｂｙ γδ Ｔ－Ｃｅｌｌｓ．Ｍａｄａｍｅ Ｃｕｒｉｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｄａｔａｂａｓｅ［Ｉｎｔｅｒｎｅｔ］，Ａｕｓｔｉｎ（ＴＸ）：Ｌａｎｄｅｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ；２０００－２０１３）、γδＴ細胞が健常細胞と病変細胞とを区別し、顕著な病変細胞への多種細胞傷害性（表６の細胞種の非限定的な例を参照のこと）を示すことができるという事実は、これらを活用して、改善された治療域を有する改善された薬剤を提供できることを意味する。更に、かかるγδＴ細胞の能力を活用することにより、特定のがん抗原、炎症性抗原、もしくは病原体抗原が未知であるか、または特定の患者の健常細胞上にも存在する場合であっても、γδＴ細胞を病変細胞と共局在化させることにより、健常細胞を温存しながら疾患を処置する機会が提供される。




























１つの非限定的な例として、ＣＤ３×ＨＥＲ２多重特異性薬に関する最近の研究は、現在または従来のアプローチの課題を強調している。具体的には、かかる従来のアプローチの使用は、あまり好ましくない毒性プロファイルをもたらし得る。その理由は、他の多数の腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）と同様に、ＨＥＲ２抗原が乳癌などのがんで発現されるだけでなく、心臓細胞などの健常な組織でも発現されるからである。よって、全てのＴ細胞と会合してＨＥＲ２陽性細胞と共局在化させるＣＤ３×ＨＥＲ２薬剤の使用により、あまり好ましくない治療域または治療指数がもたらされ得る。その理由は、かかる薬剤が全てのＴ細胞と会合し、循環血液中のそれらのうちの大部分がαβＴ細胞（ＣＤ４＋陽性、ＣＤ８＋陽性など）であるからである。そして、αβＴ細胞がＨＥＲ２陽性細胞と共局在化すると、かかる従来のαβＴ細胞は、ＨＥＲ２＋健常細胞を温存する能力の制限、及び罹患したＨＥＲ２＋病変細胞のみを殺傷する能力の制限を示す。その結果として、この例によれば、かかるＣＤ３×ＨＥＲ２二重特異性薬を投与したカニクイザルの研究において、状況によっては（投与当日であっても）早期安楽死が必要とされた。更に、この研究例では（Ｓｔａｆｌｉｎ ｅｔ ａｌ．（２０２０）ＪＣＩ Ｉｎｓｉｇｈｔ ５（７）：ｅ１３３７５７を参照のこと）、ＨＥＲ２発現細胞を殺傷するようにＴ細胞を再標的化することが、ＨＥＲ２発現組織に対する有害作用を誘発し得ると結論付けられた。肝臓を除いて、作用を受けたか、または損傷した全ての組織がＨＥＲ２を発現していたことが認められた。
更なる非限定的な例では、第２の結合特異性は、免疫細胞機能の制御または調節にも関与する腫瘍関連部分に対するものであり得る。例えば、第２の特異性は、ＰＤ－Ｌ１（ＣＤ２７４）またはＣＤ１５５などのいわゆる「チェックポイント阻害因子」を標的とするように設計され得る。繰り返しになるが、ＰＤＬ－１もＣＤ１５５も１００％疾患特異的ではない。両方のタンパク質が健常細胞でも発現され得る。しかしながら、Ｖδ１＋細胞をＰＤ－Ｌ１陽性細胞またはＣＤ１５５陽性細胞のいずれかと特異的に共局在化させるように設計された多重特異性抗体は、ＰＤ－Ｌ１またはＣＤ１５５陽性の病変細胞またはがん細胞の選択的殺傷をもたらし得る。がん細胞などの病変細胞上に存在する疾患関連チェックポイント阻害因子を更に標的とすると、かかる腫瘍にＶδ１＋細胞を共局在化させるだけでなく、例えば、普通なら疾患に対するＴ細胞性免疫応答を負に調節し得るはずのＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１またはＴＩＧＩＴ／ＣＤ１５５シグナル伝達を調節または抑制することにより、追加の好ましい効果ももたらし得る。
よって、かかる従来のアプローチを用いる代わりに、本明細書で提供されるのは、少なくとも１つの第１の結合ドメインがＶδ１＋細胞に特異的に結合することができ、少なくとも１つの第２の結合ドメインが病変組織及び細胞上に存在する標的に特異的に結合することができる多重特異性抗体である。かかる多重特異性抗体をこのように使用することにより、第２の標的を発現する病変細胞へのＶδ１＋細胞の共局在化がもたらされ得る。更に、かかる疾患関連標的が、多くの場合、１００％疾患特異的ではないことを考慮すると、Ｖδ１＋エフェクター細胞を特異的に標的とし、共局在化させるこのアプローチは、従来のアプローチよりも好ましい可能性がある。その理由は、Ｖδ１＋エフェクター細胞が病変細胞または感染細胞におけるストレスのパターンを認識することができるため、同様に同じ標的を発現する健常細胞を温存しながら病変細胞を選択的に殺傷することができる可能性があるためである。
従って、本明細書において提供される多重特異性抗体は、ｖδ１細胞のＴＣＲに会合することができるが、腫瘍細胞も存在しない限り完全な活性化は起こらない。本明細書において提供される抗体がＴＣＲに完全に会合すると部分的な下方調節が引き起こされ、本明細書において提供される抗体が結合したｖδ１細胞は、腫瘍細胞などのストレスを受けた細胞の存在下でのみ完全に活性化され、細胞傷害性になると考えられる。これは例えば、図５０Ｉ、Ｊ、Ｋ、及び図６３Ａ～Ｆに示されている。これは、本明細書に示されるアプローチの別の重要な安全上の利点となる。なぜなら、オフターゲット細胞傷害性が低減され、ｖδ１細胞を活性化する多重特異性抗体の効力の全てが腫瘍細胞（更には多重特異性抗体の第２の標的抗原を発現する健常細胞）の存在下でのみ誘発され、つまり健常細胞が温存されるからである。
γδＴ細胞が腫瘍細胞のストレスシグナルを検出することができるメカニズムの１つは、それらが発現するＮＣＲ（自然細胞傷害性受容体）に起因すると考えられている。ＮＣＲは、腫瘍細胞上のＮＣＲリガンドに会合することができる。従って、腫瘍細胞を検出して、完全な活性化及び細胞傷害性を有効にすることができるＮＣＲによるものが含まれる、ＴＣＲ刺激を介してγδＴ細胞が活性化される活性化の二重メカニズムが用いられ得る。
これは、例えば、ＣＤ３を介したαβＴ細胞の刺激とは対照的であり、αβＴ細胞の刺激は、全ての刺激がＴＣＲを介する。従って、かかる細胞は、例えば、ＮＣＲによる、抗原提示に依存しない腫瘍細胞の検出などのメカニズムを有さないため、健常細胞または形質転換細胞の区別がほぼ不可能である。従って、ＣＤ３抗体がＦｃ有効型である場合、それらは他の免疫細胞を誘引し、このことがサイトカインストーム、免疫細胞の疲弊及び更には過剰活性化などの予測不可能かつの望ましくない事象のカスケードを引き起こし得、これにより、例えば、Ｔ細胞を殺傷するＮＫ細胞などがもたらされる。本発明のアプローチでは、本明細書において提供される多重特異性抗体によるγδＴ細胞の刺激は、γδＴ細胞が、例えば、ＮＣＲによる検出メカニズムにより、健常細胞と腫瘍細胞とを区別することができ、従って、この病変細胞特異性のためにがん細胞またはウイルス感染細胞などのストレスを受けた細胞を選択的に殺傷することができるため、かかる問題を引き起こさない。
更なる非限定的な例では、患者は、肝臓癌を有し得、当該患者において肝臓癌特異的抗原は未知である。この例では、多重特異性抗体の第２の特異性は、多数または全ての肝細胞上に存在するエピトープ、例えば、アシアロ糖タンパク質受容体１などに対するものであり得る。多重特異性抗体は、その結果、γδＴ細胞を肝臓に共局在化させ、ここで、γδＴ細胞は健常な肝臓細胞を温存しながら肝臓癌細胞を殺傷し得る。これは例えば、図５０Ｉ、Ｊ、Ｋ、及び図６３Ａ～ｆに示されている。第３の非限定的な例として、肺癌を有する患者であって、当該患者における肺癌抗原が未知である、当該患者においては、多重特異性抗体の第２の特異性は、正常な肺細胞上のエピトープ、例えば、ＳＰ－１などに対するものであり得る。多重特異性抗体は、γδＴ細胞を肺に共局在化させ、ここで、γδＴ細胞は健常な肺細胞を温存しながら肺癌細胞を殺傷し得る。第４の非限定的な例として、Ｂ細胞リンパ腫を有する患者がであって、当該患者におけるＢ細胞リンパ腫抗原が未知である、当該患者においては、多重特異性抗体の第２の特異性は、正常なＢ細胞上のエピトープ、例えば、ＣＤ１９などに対するものであり得る。多重特異性抗体は、γδＴ細胞をＢ細胞に共局在化させ、ここで、γδＴ細胞は健常なＢ細胞を温存しながらリンパ腫細胞を殺傷し得る。細胞特異的抗原、細胞関連抗原、組織特異的抗原、及び組織関連抗原は、当該技術分野において周知であり、かかる抗原はいずれも、本発明の多重特異性抗体の第２の特異性により標的とされ得る。
第２の結合特異性は、Ｖδ１と同じ細胞上の、または同じ組織型もしくは異なる組織型の異なる細胞上の抗原を標的とし得る。ある特定の実施形態では、標的エピトープは、異なるＴ細胞、Ｂ細胞、腫瘍細胞、自己免疫組織細胞、またはウイルス感染細胞を含まれる、異なる細胞上に存在し得る。あるいは、標的エピトープは同じ細胞上に存在し得る。
多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、抗体またはその抗原結合断片が複数の特異性を有する限り、任意のフォーマットで作製され得る。多重特異性抗体フォーマットの例としては、限定されるものではないが、ＣｒｏｓｓＭａｂ、ＤＡＦ（ツー・イン・ワン）、ＤＡＦ（フォー・イン・ワン）、ＤｕｔａＭａｂ、ＤＴ－ＩｇＧ、ノブ・イン・ホール（ＫＩＨ）、ノブ・イン・ホール（共通軽鎖）、電荷ペア、Ｆａｂアーム交換、ＳＥＥＤボディ、Ｔｒｉｏｍａｂ、ＬＵＺ－Ｙ、Ｆｃａｂ、κλボディ、直交性Ｆａｂ、ＤＶＤ－ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｈ）－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－（Ｈ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－（Ｌ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ，Ｈ）－Ｆｖ、ＩｇＧ（Ｈ）－Ｖ、Ｖ（Ｈ）－ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）－Ｖ、Ｖ（Ｌ）－ＩｇＧ、ＫＩＨ ＩｇＧ－ｓｃＦａｂ、２ｓｃＦｖ－ＩｇＧ、ＩｇＧ－２ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ４－Ｉｇ、Ｚｙｂｏｄｙ、ＤＶＩ－ＩｇＧ（フォー・イン・ワン）、ナノボディ、Ｎａｎｏｂｙ－ＨＡＳ、ＢｉＴＥ、ダイアボディ、ＤＡＲＴ、ＴａｎｄＡｂ、ｓｃダイアボディ、ｓｃダイアボディ－ＣＨ３、ダイアボディ－ＣＨ３、トリプルボディ、Ｍｏｒｒｉｓｏｎフォーマット、ミニ抗体、ミニボディ、ＴｒｉＢｉミニボディ、ｓｃＦｖ－ＣＨ３ ＫＩＨ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－ＣＨ－ＣＬ－ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆ（ａｂ）２－ｓｃＦｖ２、ｓｃＦｖ－ＫＩＨ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ－Ｆｃ、四価ＨＣＡｂ、ｓｃダイアボディ－Ｆｃ、ダイアボディ－Ｆｃ、タンデムｓｃＦｖ－Ｆｃ、イントラボディ、ドック・アンド・ロック、ＩｍｍＴＡＣ、ＨＳＡボディ、ｓｃダイアボディ－ＨＡＳ、タンデムｓｃＦｖ－毒素、ＩｇＧ－ＩｇＧ、ｏｖ－Ｘ－Ｂｏｄｙ、デュオボディ、ｍａｂ２、及びｓｃＦｖ１－ＰＥＧ－ｓｃＦｖ２（Ｓｐｉｅｓｓ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ６７：９５－１０６を参照のこと）が挙げられる。
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性または三重特異性フォーマットなどの多重特異性フォーマットで増強された機能の能力を測定することによっても評価され得る。驚くべきことに、かかる研究を通じて、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片の性能における更に他の機能的改善を同定することが可能である。
様々な抗体由来の多重特異性フォーマットが依然に記載されており、典型的には成分結合部分から経験的に構築される。典型的には、本明細書に記載されるような多重特異性または複数標的結合フォーマットが構築されたら、その性能（細胞殺傷、細胞増殖、健常細胞温存／病変細胞特異的モデルなど）が上述のモデル系のうちの１つ以上で測定され得る。これらはまた、任意により、上記成分部分及び他の比較分子と比較される。
このアプローチに限定されるものではないが、抗体を多重特異性抗体として構築する場合、概して、各標的（第１、第２、第３など）に対する結合ドメインモジュールは、任意により、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、可変ドメイン（例えば、ＶＨまたはＶＬ）、ダイアボディ、ミニボディ、または全長抗体から構築される。例えば、上記結合ドメインまたはモジュールの各々は、可変ドメインを含む結合ドメイン、及び／または全長抗体、及び／または抗体断片が多重特異性抗体を作製するために連続して作動可能に連結されている、以下の非限定的なフォーマットのうちの１つ以上で作製される。
注目すべきことに、本明細書に記載されるようなγδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つ（第１）の結合ドメインを含む多重特異性抗体は、当該第１の結合ドメインが、組織（「固体」）及び造血器（「液体」）の疾患または細胞種に関連する標的のいずれかに対する少なくとも１つの第２の結合ドメインを含む多重特異性抗体フォーマットでフォーマットされる場合に更に増強される。
多重特異性抗体の非限定的な例：
アプローチの適用可能性を概説するために、多重特異性抗体の一連の非限定的な例を構築した。これらの多重特異性抗体は、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つ（第１）の結合ドメイン、及び疾患に関連する標的を標的とする少なくとも１つ（第２）の結合ドメインを含んでいた。
第１の例；Ｖδ１－ＥＧＦＲ多重特異性抗体：
この例では、（第１の標的に対する）一方の結合ドメインが、インタクトな抗体部分、具体的には、ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３及び同族のＶＬ－ＣＬパートナーを含むと同時に、（第２の標的に対する）もう一方のドメインが、抗体断片、具体的にはｓｃＦｖフォーマットを含んでいた。次いで、リンカーを用いて２つの結合モジュールが融合された。得られる二重特異性フォーマットは、場合により、「Ｍｏｒｒｉｓｏｎフォーマット」と称される。この例では、第１の結合ドメインはγδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とし、第２の結合ドメインはＥＧＦＲを標的とする（実施例２０を参照のこと）。
第２の例；Ｖδ１－ＥＧＦＲ多重特異性抗体：
この例では、（第１の標的に対する）一方の結合ドメインが、抗体可変ドメイン（具体的には、ＶＨ及び同族のＶＬドメインを含む）を含むと同時に、（第２の標的に対する）もう一方の結合ドメインが、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）内の結合ドメインを含んでいた（ＥＰ２５４６２６８ Ａ１の表１／ＥＰ３４８７８８５ Ａ１も参照のこと）。得られる二重特異性抗体は、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする第１の結合ドメイン、及びＥＧＦ受容体を標的とする第２の結合ドメインを含む（実施例２０を参照のこと）。
第３の例；Ｖδ１－ＣＤ１９多重特異性抗体：
この例では、（第１の標的に対する）一方の結合ドメインが、インタクトな抗体部分、具体的には、ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３及び同族のＶＬ－ＣＬパートナーを含むと同時に、（第２の標的に対する）もう一方のドメインが、抗体断片、具体的にはｓｃＦｖフォーマットを含んでいた。次いで、リンカーを用いて２つの結合モジュールが融合された。この例では、得られた二重特異性抗体は、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする第１の結合ドメイン、及びＣＤ１９を標的とする第２の結合ドメインを含んでいた（実施例２１を参照のこと）。
第４の例；更なるＶδ１－ＣＤ１９多重特異性抗体
この例では、ＴＲＤＶ１及びＣＤ１９の両方に特異的に結合する追加の多重特異性抗体が調製され、抗原結合（ヒト及びカニクイザルＴＲＤＶ１の両方を含む）、Ｖδ１細胞の活性化、及びＶδ１細胞の細胞傷害性について試験された。この例はＡＤＴ１－４－２をベースに調製された。実施例２６及び２７を参照のこと。
第５の例；Ｖδ１－Ｈｅｒ２多重特異性抗体
この例では、ＴＲＤＶ１及びＨｅｒ２の両方に特異的に結合する多重特異性抗体が調製され、抗原結合、Ｖδ１細胞の活性化、及びＶδ１細胞の細胞傷害性について試験された。この例はＡＤＴ１－４－２をベースに調製された。実施例２８を参照のこと。
第６の例；更なるＶδ１－ＥＧＦＲ多重特異性抗体
この例では、ＴＲＤＶ１及びＥＧＦＲの両方に特異的に結合する追加の多重特異性抗体が調製され、抗原結合、Ｖδ１細胞の活性化、及びＶδ１細胞の細胞傷害性について試験された。この例はＡＤＴ１－４－２をベースに調製された。実施例２９及び３０を参照のこと。
第７の例；Ｖδ１－ＦＡＰα多重特異性抗体
この例では、（第１の標的に対する）一方の結合ドメインが、インタクトな抗体部分、具体的には、ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３及び同族のＶＬ－ＣＬパートナーを含むと同時に、（第２の標的に対する）もう一方のドメインが、抗体断片、具体的にはｓｃＦｖフォーマットを含んでいた。次いで、リンカーを用いて２つの結合モジュールが融合された。この例では、得られた二重特異性抗体は、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする第１の結合ドメイン、及びＦＡＰαを標的とする第２の結合ドメインを含んでいた（実施例３３を参照のこと）。
第８の例；Ｖδ１－メソテリン多重特異性抗体
この例では、（第１の標的に対する）一方の結合ドメインが、インタクトな抗体部分、具体的には、ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３及び同族のＶＬ－ＣＬパートナーを含むと同時に、（第２の標的に対する）もう一方のドメインが、抗体断片、具体的にはｓｃＦｖフォーマットを含んでいた。次いで、リンカーを用いて２つの結合モジュールが融合された。この例では、得られた二重特異性は、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする第１の結合ドメイン、及びメソテリンを標的とする第２の結合ドメインを含んでいた（実施例３４を参照のこと）。
第９の例；Ｖδ１－ＰＤ－１多重特異性抗体
この例では、（第２の標的に対する）一方の結合ドメインが、インタクトな抗体部分、具体的には、ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３及び同族のＶＬ－ＣＬパートナーを含むと同時に、（第１の標的に対する）もう一方のドメインが、抗体断片、具体的にはｓｃＦｖフォーマットを含んでいた。次いで、リンカーを用いて２つの結合モジュールが融合された。この例では、得られた二重特異性抗体は、ＰＤ－１を標的とする第１の結合ドメイン、及びγδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする第２の結合ドメインを含んでいた（実施例３５を参照のこと）。
第１０の例；Ｖδ１－４－１ＢＢ多重特異性抗体
この例では、（第１の標的に対する）一方の結合ドメインが、インタクトな抗体部分、具体的には、ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３及び同族のＶＬ－ＣＬパートナーを含むと同時に、（第２の標的に対する）もう一方のドメインが、抗体断片、具体的にはｓｃＦｖフォーマットを含んでいた。次いで、リンカーを用いて２つの結合モジュールが融合された。この例では、得られた二重特異性抗体は、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする第１の結合ドメイン、及び４－１ＢＢを標的とする第２の結合ドメインを含んでいた（実施例３６を参照のこと）。
第１１の例；Ｖδ１－ＯＸ４０多重特異性抗体
この例では、（第１の標的に対する）一方の結合ドメインが、インタクトな抗体部分、具体的には、ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３及び同族のＶＬ－ＣＬパートナーを含むと同時に、（第２の標的に対する）もう一方のドメインが、抗体断片、具体的にはｓｃＦｖフォーマットを含んでいた。次いで、リンカーを用いて２つの結合モジュールが融合された。この例では、得られた二重特異性抗体は、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする第１の結合ドメイン、及びＯＸ４０を標的とする第２の結合ドメインを含んでいた（実施例３４を参照のこと）。
第１２の例；Ｖδ１－ＴＩＧＩＴ多重特異性抗体
この例では、（第２の標的に対する）一方の結合ドメインが、インタクトな抗体部分、具体的には、ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３及び同族のＶＬ－ＣＬパートナーを含むと同時に、（第１の標的に対する）もう一方のドメインが、抗体断片、具体的にはｓｃＦｖフォーマットを含んでいた。次いで、リンカーを用いて２つの結合モジュールが融合された。この例では、得られた二重特異性は、ＴＩＧＩＴを標的とする第１の結合ドメイン、及びγδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする第２の結合ドメインを含んでいた（実施例３８を参照のこと）。
注目すべきことに、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つ（第１）の結合ドメイン、及び第２のエピトープを標的とする少なくとも１つの第２のドメインを含む上記例の全てにおいて、対照及び構成部分と比べて機能の増強が観察された（本明細書における実施例２０、２１、及び２６～３８を参照のこと）。
まとめると、これらの非限定的な例は、本明細書に記載される多重特異性抗体またはその抗原結合断片の柔軟性を強調している。これらの非限定的な例は、生殖細胞系列Ｖδ１鎖（例えば、配列番号２７２のアミノ酸１～９０）を標的とする抗体またはその断片が、多重特異性抗体を形成させるための第２の結合ドメインと組み合わされることにより更に改良され得る、多重特異性抗体アプローチの概略を示す。非限定的な例として、増強された機能を有し、インタクトな抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３及びＶＬ－ＣＬ）、及び／または可変ドメイン（ＶＨ及び同族のＶＬまたはＶＨ－ＣＨ１及び同族のＶＬ－ＣＬ）、及び／または抗体断片（ｓｃＦｖ）を含む結合ドメインを有する多重特異性抗体が本明細書において提供される。
一実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖（第１の標的）を標的とする多重特異性抗体結合ドメインは、（ｉ）各々が重鎖（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）及び同族の軽鎖パートナー（ＶＬ－ＣＬ）を含む１つもしくは２つ以上の抗体結合ドメイン、及び／または（ｉｉ）各々が重鎖可変ドメイン（ＶＨ、またはＶＨ－ＣＨ１）及び同族の軽鎖可変ドメインパートナー（ＶＬ、またはＶＬ－ＶＣ）を含む１つもしくは２つ以上の抗体結合ドメイン、及び／または（ｉｉｉ）各々がＣＤＲを含む抗体断片を含む１つもしくは２つ以上の抗体結合ドメインを含み得る。
一実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つの第１の抗体由来の結合ドメインを含み、これが第２のエピトープを標的とする少なくとも１つの第２の抗体結合ドメインに作動可能に連結されている多重特異性抗体が提供される。任意により、上記結合ドメインは、少なくとも１つ以上のＶＨ及び同族のＶＬ結合ドメイン、または１つ以上のＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３及び同族のＶＬ－ＣＬ結合ドメイン、または１つ以上の抗体断片の結合ドメインを含む。任意により、上記第２の結合ドメインは、細胞の細胞表面と会合したか、または細胞表面上に発現された第２のエピトープを標的とする。任意により、上記第２のエピトープは、病変細胞または腫瘍細胞またはウイルス感染細胞または自己免疫性組織細胞に関連する細胞表面ポリペプチド上に存在する。任意により、上記第２のエピトープまたは複数のエピトープは、疾患及び細胞種に関連するＣＤ１９、ＥＧＦＲ、Ｈｅｒ２、ＦＡＰα、メソテリン、ＰＤ－１、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、またはＴＩＧＩＴ抗原上に存在する。任意により、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つの第１の抗体由来結合ドメインを含む上記多重特異性抗体は、ＥＧＦ受容体に結合し、ＥＵ番号付けに従って以下の重鎖改変のうちの１つ以上を含む第２の結合ドメインに作動可能に連結されている：Ｌ３５８Ｔ及び／またはＴ３５９Ｄ及び／またはＫ３６０Ｄ及び／またはＮ３６１Ｇ及び／またはＱ３６２Ｐ及び／またはＮ３８４Ｔ及び／またはＧ３８５Ｙ及び／またはＱ３８６Ｇ及び／またはＤ４１３Ｓ及び／またはＫ４１４Ｙ及び／またはＳ４１５Ｗ及び／またはＱ４１８Ｙ及び／またはＱ４１９Ｋ。
任意により、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つの第１の抗体由来結合ドメインを含む上記多重特異性抗体は、配列番号３８５もしくは配列番号３８６もしくは配列番号３８７もしくは配列番号３１４もしくは配列番号もしくは配列番号３９４もしくは配列番号３９５もしくは配列番号３９７もしくは配列番号４０２もしくは配列番号４０４もしくは配列番号４０６もしくは配列番号４０８もしくは配列番号４１０もしくは配列番号４１２またはそれらの機能的に同等な結合性バリアントを含み、ＥＧＦＲ、ＣＤ１９ Ｈｅｒ２、ＦＡＰα、メソテリン、ＰＤ－１、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、またはＴＩＧＩＴを標的とする第２の結合ドメインに作動可能に連結されている。任意により、多重特異性抗体は、配列番号３８８；または配列番号；または配列番号３１５；または配列番号３１６；または配列番号３７８；または配列番号３７９；または配列番号３８０；または配列番号３８２；または配列番号３８３；または配列番号３８４；または配列番号３９３；または配列番号３９６；または配列番号３９８；または配列番号３９９；；または配列番号４０１；または配列番号４０３；または配列番号４０５；または配列番号４０７；または配列番号４０９；または配列番号４１１；または配列番号４１４及び配列番号４１５；または配列番号４１４及び配列番号４１６；または配列番号４１４及び配列番号４１９；または配列番号４１４及び配列番号４１８；または配列番号５０４及び配列番号４１５；または配列番号５０４及び配列番号４１６；または配列番号５０４及び配列番号４１９；または配列番号５０４及び配列番号４１８；または配列番号５０５及び配列番号４１５；または配列番号５０５及び配列番号４１６；または配列番号５０５及び配列番号４１９；または配列番号５０５及び配列番号４１８；または配列番号４２１及び配列番号４２２；または配列番号５０４及び配列番号４２２；または配列番号４２３及び配列番号４２４；または配列番号４２５及び配列番号４２６；または配列番号４２１及び配列番号４３７；または配列番号５０４及び配列番号４３７；または配列番号４２３及び配列番号４２７；または配列番号４２５及び配列番号４２８；または配列番号４２１及び配列番号４２９；または配列番号５０４及び配列番号４２９；または配列番号４２３及び配列番号４３０；または配列番号４１４及び配列番号４３１；または配列番号４１４及び配列番号４３３；または配列番号４１４及び配列番号４３４；または配列番号４１４及び配列番号４３５；または配列番号５０４及び配列番号４３１；または配列番号５０４及び配列番号４３３；または配列番号５０４及び配列番号４３４；または配列番号５０４及び配列番号４３５；または配列番号５０５及び配列番号４３１；または配列番号５０５及び配列番号４３３；または配列番号５０５及び配列番号４３４；または配列番号５０５及び配列番号４３５；または配列番号４３８及び配列番号４１７；または配列番号４３９及び配列番号４２０を含む。
Figure 2024506682000011

Figure 2024506682000012

Figure 2024506682000013
本発明の一態様では、本発明の多重特異性抗体は、疾患または障害を処置するために、例えば、疾患または障害の少なくとも１つの徴候または症状を改善するために、治療上有効量で使用され得る。
一実施形態では、本明細書に記載されるようなγδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する多重特異性抗体フォーマットの抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法が提供され、ここで、当該多重特異性抗体は、当該多重特異性物質によりＶδ１＋細胞にもたらされる（例えば、当該Ｖδ１＋表現型及び／または細胞傷害性及び／または病変細胞特異性及び／またはそれらの増強に対する）効果を測定するために、Ｖδ１＋細胞に適用される。
併用療法
本発明の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、ある特定の併用療法に使用され得る。幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、がん抗原またはがん関連抗原のモジュレーター、例えば、本発明の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が組み込まれた多重特異性抗体について可能な候補として上記に列挙されたがん抗原またはがん関連抗原のモジュレーターと組み合わされ得る。幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、分化抗原群（ＣＤ）のモジュレーター、例えば、本発明の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が組み込まれた多重特異性抗体について可能な候補として上記に列挙されたＣＤ抗原のモジュレーターと組み合わされ得る。幾つかの実施形態では、モジュレーターは拮抗性または作動性であり得る。好適なモジュレーターとしては、抗体、融合タンパク質、または低分子が挙げられる。
イムノコンジュゲート
本発明の抗体またはその抗原結合断片は、細胞毒素または化学療法薬などの治療用部分にコンジュゲートされ得る。かかるコンジュゲートは、イムノコンジュゲートと称され得る。本明細書で使用する場合、用語「イムノコンジュゲート」は、細胞毒素、放射性薬剤、サイトカイン、インターフェロン、標的部分もしくはレポーター部分、酵素、毒素、ペプチドもしくはタンパク質、または治療薬などの別の部分に化学的または生物学的に連結されている抗体を指す。抗体は、その標的と結合することができる限り、分子に沿った任意の位置で、細胞毒素、放射性薬剤、サイトカイン、インターフェロン、標的部分もしくはレポーター部分、酵素、毒素、ペプチド、または治療薬に連結されていてよい。イムノコンジュゲートの例としては、抗体－薬物コンジュゲート及び抗体－毒素融合タンパク質が挙げられる。一実施形態では、薬剤は、Ｖδ１に対する第２の異なる抗体であり得る。ある特定の実施形態では、抗体は、腫瘍細胞またはウイルス感染細胞に特異的な薬剤にコンジュゲートされ得る。抗Ｖδ１抗体にコンジュゲートされ得る治療用部分の種類は、処置されるべき状態及び達成されるべき所望の治療効果を考慮したものになる。一実施形態では、薬剤は、Ｖδ１以外の分子に結合する第２の抗体またはその抗原結合断片であり得る。
親和性成熟の方法と関連抗体
本発明は、親和性成熟した抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片も提供する。
例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であって、当該抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の親和性成熟したバリアントであり、当該親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含む、当該抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供される。別の実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であって、当該抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の親和性成熟したバリアントであり、当該親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含む、当該抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供される。抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であって、当該抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の親和性成熟したバリアントであり、当該親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、以下を含む、当該抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片も提供される：
配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＶＬ。
本発明の抗体の親和性を増加させて、Ｖδ１抗体に対する増加した親和性を有する親和性成熟した抗体または親和性成熟したヒト化抗体を作製するために、任意の既知の方法が使用され得る。
好適には、親和性成熟したバリアントは、例えば、Ｋｄで測定される場合、親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、より好ましくは、少なくとも５０％高い親和性でγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖に結合する。
幾つかの実施形態では、本発明は、本発明の抗体（またはその抗原結合断片）を調製する方法であって、本明細書に開示される親抗体を提供すること、及び当該抗体を親和性成熟に供することであって、生成された抗体が、当該親抗体より高い親和性でγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖に結合する、当該親和性成熟に供することを含む、当該方法を提供する。好適には、生成された抗体は、例えば、Ｋｄで測定される場合、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）に結合する親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも１００％、少なくとも５００％、またはより好ましくは、少なくとも約１０００％高い親和性でγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）に結合する。親和性を測定する方法は、当該技術分野において公知であり、以下の実施例に記載されている。かかる方法によって作製される親和性成熟した抗体は、本発明の他の抗Ｖδ１抗体及び抗原結合断片について本明細書に記載されるように製剤化及び使用され得る。
親和性成熟は、当業者に公知の任意の好適な方法により実施され得る。例えば、インビトロ抗体ディスプレイシステムは、高親和性の特異的抗体の作製に広く使用されている。これらのシステムでは、表現型（すなわち、抗体断片）が遺伝子型（すなわち、抗体遺伝子）に対応付けられており、これにより、抗体の配列の直接的決定が可能である。抗体レパートリーのディスプレイを達成し、その後の結合剤の選択を可能にする幾つかのシステムが開発されており、選択の厳密性を増加させることにより、更に高い親和性バリアントの選択が可能となる。抗体断片は、酵母、リボソーム、ファージディスプレイ粒子においてまたはＤＮＡへの直接結合により発現され得る。
現在の抗体親和性成熟方法は、確率的突然変異誘発及び非確率的突然変異誘発の２つの突然変異誘発のカテゴリーに属する。エラープローンポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、突然変異誘発細菌株、及び飽和突然変異誘発が確率的突然変異誘発法の典型例である。非確率的技術では、多くの場合、特定のバリアントの限られたコレクションを作製するためにアラニンスキャニングまたは部位特異的突然変異誘発を用いる。加えて、親抗体のシャッフルされたバリアントを得るためのシャッフリングアプローチも抗体の親和性を更に改善するために使用され得る。
従って、本発明の一実施の形態では、親和性成熟の方法は、確率的突然変異誘発（例えば、エラープローンポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、突然変異誘発細菌株、または飽和突然変異誘発）、非確率的突然変異誘発（例えば、アラニンスキャニングまたは部位特異的突然変異誘発）、シャッフリング（例えば、ＤＮＡシャッフリング、鎖シャッフリング、またはＣＤＲシャッフリング）、及び改変を導入するためのＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９システムの使用からなる群から選択される。
親和性成熟方法は、例えば、Ｒａｊｐａｌ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，２００５，１０２（２４）：８４６６－７１、Ｓｔｅｉｎｗａｎｄ ｅｔ ａｌ．，ＭＡｂｓ，２０１４，６（１）：２０４－１８、及びＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｗｉｌｅｙ，２０１４，Ｃｈａｐｔｅｒ ６，Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ａｆｆｉｎｉｔｙ（ページ１１５～１４０）に記載されている。
幾つかの実施形態では、医薬組成物を調製する方法であって、上記の方法（すなわち、親和性成熟により抗体を作製するための上記の方法）に従って調製された抗体を提供すること、及び当該抗体を少なくとも１種以上の薬学的に許容される賦形剤と共製剤化することを含む、当該方法が提供される。医薬組成物の調製に使用される抗体は、あらゆるＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７系列抗体ならびにその抗原結合断片及びバリアントが含まれる、Ｇ０４、Ｅ０７、Ｃ０８、Ｂ０７、Ｃ０５、Ｅ０４、Ｆ０７、Ｇ０６、Ｇ０９、Ｂ０９、Ｇ１０、またはＥ０１の親和性成熟したバリアントであり得る。かかる方法によって製造された医薬組成物は、他の抗Ｖδ１抗体について本明細書に記載されるように本発明の処置方法に使用され得る。
従って、本明細書において開示される抗体の親和性成熟した変異体またはバリアントである抗Ｖδ１抗体及びその抗原結合断片が提供される。例えば、一実施形態では、Ｇ０４、Ｅ０７、Ｃ０８、Ｂ０７、Ｃ０５、Ｅ０４、Ｆ０７、Ｇ０６、Ｇ０９、Ｂ０９、Ｇ１０、及びＥ０１からなる群から選択される抗体の親和性成熟したバリアントが提供される。概して、親和性成熟した変異体は、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖に対する親抗体（変異体が由来する抗体）より高い親和性を有する。本発明の抗体またはその抗原結合断片の親和性成熟により取得可能であるか、または取得される抗体及びその抗原結合断片も本発明により提供される。
親和性成熟方法は、親配列の特定部分に優先的に有利な変異を導入し得る。例えば、幾つかの実施形態では、親和性成熟したバリアントは、親抗体のある特定の領域を保持する（または本発明の方法は、親抗体のある特定の領域に変異を導入しない）。例えば、幾つかの実施形態では、親和性成熟したバリアントは、以下を保持する：
ａ）ＨＣＤＲ２、ＬＣＤＲ１、及びＬＣＤＲ２配列（例えば、限定されるものではないが、Ｇ０４に由来する抗体）；
ｂ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＬＣＤＲ１、及びＬＣＤＲ２配列（例えば、限定されるものではないが、Ｅ０７に由来する抗体）；
ｃ）ＨＦＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＦＲ１、及びＬＦＲ２配列（例えば、限定されるものではないが、Ｇ０４に由来する抗体）；
ｄ）ＨＦＲ１、ＨＦＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＦＲ２、ＬＦＲ３、及びＬＦＲ４配列（例えば、限定されるものではないが、Ｅ０７に由来する抗体）；
ｅ）ＨＦＲ２、ＨＣＤＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＦＲ１、ＬＣＤＲ１、ＬＦＲ２、及びＬＣＤＲ２配列（例えば、限定されるものではないが、Ｇ０４に由来する抗体）；または
ｆ）ＨＦＲ１、ＨＣＤＲ１、ＨＦＲ２、ＨＣＤＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＣＤＲ１、ＬＦＲ２、ＬＣＤＲ２、ＬＦＲ３、及びＬＦＲ４配列（例えば、限定されるものではないが、Ｅ０７に由来する抗体）。
幾つかの実施形態では、親和性成熟した抗体は、κ軽鎖可変配列を含むが、軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位にセリンではない残基を含む。一般に、この残基のアミノ酸は、天然に存在するアミノ酸である。幾つかの実施形態では、この位置の残基は、非極性残基（例えば、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択される任意のアミノ酸）であり、及び／またはその位置での非ヒト生殖細胞系列残基（例えば、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択される任意のアミノ酸）である。幾つかの実施形態では、７４位のアミノ酸残基は、ロイシンである。
幾つかの実施形態では、親和性成熟した抗体は、セリン以外のアミノ酸に変異しているＬＦＲ３領域における７４位（例えば、その位置での非極性及び／または非ヒト生殖細胞系列残基、例えば、ロイシン残基）を除いて、親抗体のＨＦＲ２、ＨＣＤＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＦＲ１、ＬＣＤＲ１、ＬＦＲ２、ＬＣＤＲ２、及びＨＦＲ３配列（例えば、限定されるものではないが、Ｇ０４に由来する抗体）を保持する。
幾つかの実施形態では、親和性成熟した抗体は、セリンではない残基に変異しているＬＦＲ３領域における７４位（例えば、７４位での非ヒト生殖細胞系列及び／または非極性残基、例えば、ロイシン残基）を除いて、親抗体のＨＦＲ１、ＨＣＤＲ１、ＨＦＲ２、ＨＣＤＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＣＤＲ１、ＬＦＲ２、ＬＣＤＲ２、ＬＦＲ３、及びＬＦＲ４配列（例えば、限定されるものではないが、Ｅ０７に由来する抗体）を保持する。
幾つかの実施形態では、親和性成熟した抗体は、元の配列と比較してある特定の同一性パーセントを保持する。例えば、幾つかの実施形態では、親和性成熟した抗体は、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含む。
幾つかの実施形態では、親和性成熟したバリアントは、
ａ）ＨＣＤＲ２、ＬＣＤＲ１、及びＬＣＤＲ２配列（例えば、限定されるものではないが、Ｇ０４に由来する抗体）を保持し、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、もしくは少なくとも９５％、もしくは少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含むか、
ｂ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＬＣＤＲ１、及びＬＣＤＲ２配列（例えば、限定されるものではないが、Ｅ０７に由来する抗体）を保持し、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、もしくは少なくとも９５％、もしくは少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含むか、
ｃ）ＨＦＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＦＲ１、及びＬＦＲ２配列（例えば、限定されるものではないが、Ｇ０４に由来する抗体）を保持し、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、もしくは少なくとも９５％、もしくは少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含むか、
ｄ）ＨＦＲ１、ＨＦＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＦＲ２、ＬＦＲ３、及びＬＦＲ４配列（例えば、限定されるものではないが、Ｅ０７に由来する抗体）を保持し、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、もしくは少なくとも９５％、もしくは少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含むか、
ｅ）ＨＦＲ２、ＨＣＤＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＦＲ１、ＬＣＤＲ１、ＬＦＲ２、及びＬＣＤＲ２配列（例えば、限定されるものではないが、Ｇ０４に由来する抗体）を保持し、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、もしくは少なくとも９５％、もしくは少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含むか、または
ｆ）ＨＦＲ１、ＨＣＤＲ１、ＨＦＲ２、ＨＣＤＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＣＤＲ１、ＬＦＲ２、ＬＣＤＲ２、ＬＦＲ３、及びＬＦＲ４配列（例えば、限定されるものではないが、Ｅ０７に由来する抗体）を保持し、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、もしくは少なくとも９５％、もしくは少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含む。
幾つかの実施形態では、親和性成熟した抗体は、セリンではない残基に変異しているＬＦＲ３領域における７４位（例えば、７４位での非ヒト生殖細胞系列及び／または非極性残基、例えば、ロイシン残基）を除いて、親抗体のＨＦＲ２、ＨＣＤＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＦＲ１、ＬＣＤＲ１、ＬＦＲ２、ＬＣＤＲ２、及びＨＦＲ３配列を保持し（例えば、限定されるものではないが、Ｇ０４に由来する抗体）、当該抗体は、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％、または少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含む。
幾つかの実施形態では、親和性成熟した抗体は、セリンではない残基に変異しているＬＦＲ３領域における７４位（例えば、７４位での非ヒト生殖細胞系列及び／または非極性残基、例えば、ロイシン残基）を除いて、親抗体のＨＦＲ１、ＨＣＤＲ１、ＨＦＲ２、ＨＣＤＲ２、ＨＦＲ３、ＨＦＲ４、ＬＣＤＲ１、ＬＦＲ２、ＬＣＤＲ２、ＬＦＲ３、及びＬＦＲ４配列を保持し（例えば、限定されるものではないが、Ｅ０７に由来する抗体）、当該抗体は、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％、または少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含む。
幾つかの実施形態では、親和性成熟した抗体は、親抗体配列と比較して最大２０、例えば、最大１５、例えば、最大１０のアミノ酸置換を含む。
親和性成熟した抗体を調製するために特定の方法が使用され得る。例えば、本発明の親和性成熟した抗体は、特定の好ましい特徴を有する親和性成熟した抗体を提供するのを容易にするための特定の選別プロトコールにより調製される。具体的には、全ての抗Ｖｄ１ ｍＡｂが、天然の標的である一次γδＴ細胞により発現されたγδＴＣＲへの結合について分析された。γδＴ細胞への抗体の結合は、固定濃度の精製抗体を３ｘ１０＾５個の皮膚由来γδＴ細胞とインキュベートすることにより試験された。このインキュベーションは、Ｆｃ受容体を介した抗体の非特異的結合を防止するためにブロッキング条件下で実行された。検出は、ヒトＩｇＧ１に対する蛍光色素コンジュゲート二次抗体の添加により実行された。陰性対照では、細胞は、ａ）アイソタイプ抗体のみ（組換えヒトＩｇＧ）、ｂ）蛍光色素コンジュゲート抗ヒトＩｇＧ抗体のみで処理された。陽性対照として、親クローン及び市販の抗Ｖｄ１ ｍＡＢクローンＴＳ８．２が含まれた。ほとんどの親和性成熟した抗体は、シグナル振幅（ＭＦＩ）及び皮膚由来γδＴ細胞の不均一集団中に検出されたＶδ１細胞の％の、市販の抗Ｖδ１ツールＡｂと比較した増加により示されたように、天然の標的に対する結合の改善を示した。
抗Ｖδ１ ｍＡｂを更に選別するために、親クローンと比較して最も良好な改善されたオフ速度パラメータを有する各ライブラリーからの１２種の抗体が、ＡＤＴ１－４系列についてヒト及びカニクイザル抗原、ならびにＡＤＴ１－７系列についてヒト抗原のみを用いた、ＳＰＲによる完全なＫＤ測定に進められた。その結果、ＡＤＴ１－４系列の８つのクローン（ＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－１１２、及びＡＤＴ１－４－１４３）及びＡＤＴ１－７クローンの３つのクローン（ＡＤＴ１－７－２０、ＡＤＴ１－７－３、ＡＤＴ１－７－６１）が機能的特徴付けに進められた。これらのクローン（更にＡＤＴ１－４－１、ＡＤＴ１－４－６、及びＡＤＴ１－４－１３８）は、親クローンと比較した標的結合の改善を確認するために、ＴＣＲ下方調節アッセイで特徴付けられた。親和性成熟した抗体のＶδ１細胞の活性化における改善は、皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞のがん細胞に対する細胞傷害性を増加させる能力のイメージングベース殺傷アッセイにおけるＣＤ１０７ａ上方調節アッセイで試験された。
従って、幾つかの実施形態では、親和性成熟した抗Ｖδ１抗体を調製する方法は、以下のステップを含み得る：
ａ）ＶＨ領域配列及びＶＬ領域配列を有す親抗Ｖδ１抗体を提供するステップ；
ｂ）当該親抗体に由来する１種以上の抗Ｖδ１抗体バリアントのパネルを提供するステップであって、当該１種以上の抗体バリアントの各々のＶＨ領域が当該親抗体の当該ＶＨ領域と少なくとも約９６％同一な配列を含み、当該１種以上の抗体バリアントの各々のＶＬ領域が当該親抗体の当該ＶＬ領域と少なくとも約９６％同一な配列を含む、当該ステップ；
ｃ）当該親抗Ｖδ１抗体の親和性より高いヒト及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する親和性を有する抗体バリアントを同定するために、抗体バリアントの当該パネルをスクリーニングして、ヒト及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する当該親抗体より高い親和性を有する抗体バリアントのサブパネルを提供するステップ。このようなスクリーニングステップは、一次γδＴ細胞により発現された抗体バリアントのパネルのγδＴＣＲへの結合を試験することにより実行され得る。このようなスクリーニングステップは、追加的または代替的に、パネル内の１種以上の抗体バリアントのＫＤ値を、例えば、表面プラズモン共鳴により決定することを含み得る。幾つかの実施形態では、抗体バリアントは、それらがヒト及び／またはカニクイザルＴＲＶＤ１に対する親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％高い、少なくとも１００％、少なくとも５００％、または少なくとも約１０００％高い親和性を有する場合、サブパネルに選択され得る。
親抗体と第１パネルの１種以上の抗体バリアントとの間の配列の多様性は、可変領域配列のどの箇所でも生じ得る。幾つかの実施形態では、親抗体と第１パネルの１種以上の抗体バリアントとの間の配列の多様性は、ＣＤＲ領域で生じ得る。
本方法は、以下を更に含み得る：
ｄ）抗体バリアントのサブパネルを機能的にスクリーニングすること。
抗体バリアントのサブパネルの機能的スクリーニングは、以下の誘発について抗体バリアントをスクリーニングすることを含み得る：
ｉ．Ｖδ１細胞におけるＴＣＲ下方調節；
ｉｉ．Ｖδ１細胞におけるＮＣＲ発現の増加；
ｉｉｉ．Ｖδ１細胞における４－１ＢＢ発現の増加；
ｉｖ．Ｖδ１細胞におけるＣＤ１０７ａ上方調節；及び／または
ｖ．Ｖδ１細胞によるがん細胞殺傷；ならびに任意により、
ｖｉ．Ｖδ１細胞枯渇。
本方法は、以下を更に含み得る：
ｅ）抗体バリアントのサブパネルから１種以上の抗体バリアントを選択して、１種以上の親和性成熟した抗ｖｄ２抗体を提供すること。
選択基準は以下であり得る：
ｉ．Ｖδ１細胞におけるＴＣＲ下方調節を引き起こすこと；
ｉｉ．Ｖδ１細胞におけるＮＣＲ発現の増加を引き起こすこと；
ｉｉｉ．Ｖδ１細胞における４－１ＢＢ発現の増加を引き起こすこと；
ｉｖ．Ｖδ１細胞におけるＣＤ１０７ａ上方調節を引き起こすこと；及び／または
ｖ．Ｖδ１細胞によるがん細胞殺傷を引き起こすこと；ならびに任意により、
ｖｉ．Ｖδ１細胞枯渇を引き起こさないこと。
幾つかの実施形態では、本方法は、以下を含む、１種以上の親和性成熟した抗Ｖδ１抗体を提供する方法であり得る：
ａ）ＶＨ領域配列及びＶＬ領域配列を有す親抗Ｖδ１抗体を提供すること；
ｂ）当該親抗体に由来する１種以上の抗Ｖδ１抗体バリアントのパネルを提供することであって、当該１種以上の抗体バリアントの各々のＶＨ領域が当該親抗体の当該ＶＨ領域と少なくとも約９６％同一な配列を含み、当該１種以上の抗体バリアントの各々のＶＬ領域が当該親抗体の当該ＶＬ領域と少なくとも約９６％同一な配列を含む、当該提供すること；
ｃ）当該親抗Ｖδ１抗体の親和性より少なくとも５００％高いヒトＴＲＤＶ１に対する親和性を有する抗体バリアントを同定するために、抗体バリアントの当該パネルをスクリーニングして、抗体バリアントのサブパネルを提供すること；
ｄ）抗体バリアントの当該サブパネルを機能的にスクリーニングして、
ｉ．Ｖδ１細胞におけるＴＣＲ下方調節を引き起こし、
ｉｉ．Ｖδ１細胞におけるＮＣＲ発現の増加を引き起こし、
ｉｉｉ．Ｖδ１細胞における４－１ＢＢ発現の増加を引き起こし、
ｉｖ．Ｖδ１細胞におけるＣＤ１０７ａ上方調節を引き起こし、及び／または
ｖ．Ｖδ１細胞によるがん細胞殺傷を引き起こす、当該サブパネルにおける抗体バリアントを同定すること；
ｅ）抗体バリアントの当該サブパネルから１種以上の抗体バリアントを選択して、１種以上の親和性成熟した抗Ｖδ１抗体を提供することであって、当該１種以上の親和性成熟した抗Ｖδ１抗体が、
ｉ．Ｖδ１細胞におけるＴＣＲ下方調節を引き起こし、
ｉｉ．Ｖδ１細胞におけるＮＣＲ発現の増加を引き起こし、
ｉｉｉ．Ｖδ１細胞における４－１ＢＢ発現の増加を引き起こし、
ｉｖ．Ｖδ１細胞におけるＣＤ１０７ａ上方調節を引き起こし、及び／または
ｖ．Ｖδ１細胞によるがん細胞殺傷を引き起こす、当該提供すること。
幾つかの実施形態では、本方法は、以下を含む、１種以上の親和性成熟した抗Ｖδ１抗体を提供する方法であり得る：
ａ）ＶＨ領域配列及びＶＬ領域配列を有す親抗Ｖδ１抗体を提供すること；
ｂ）当該親抗体に由来する１種以上の抗Ｖδ１抗体バリアントのパネルを提供することであって、当該１種以上の抗体バリアントの各々のＶＨ領域が当該親抗体の当該ＶＨ領域と少なくとも約９６％同一な配列を含み、当該１種以上の抗体バリアントの各々のＶＬ領域が当該親抗体の当該ＶＬ領域と少なくとも約９６％同一な配列を含む、当該提供すること；
ｃ）当該親抗Ｖδ１抗体の親和性より少なくとも５００％高いヒトＴＲＤＶ１に対する親和性を有する抗体バリアントを同定するために、抗体バリアントの当該パネルをスクリーニングすること；
ｄ）当該親抗Ｖδ１抗体の親和性より少なくとも５００％高いカニクイザルＴＲＤＶ１に対する親和性を有する抗体バリアントを同定するために、抗体バリアントの当該パネルをスクリーニングすること；
ｅ）抗Ｖδ１抗体バリアントのサブパネルを提供することであって、抗Ｖδ１抗体バリアントの当該サブパネルが、当該親抗Ｖδ１抗体のヒト及びカニクイザルＴＲＤＶ１に対する親和性より少なくとも５００％高い親和性でヒト及びカニクイザルＴＲＤＶ１の両方に結合する抗Ｖδ１抗体バリアントを含む、当該提供すること；
ｆ）抗体バリアントの当該サブパネルを機能的にスクリーニングして、
ｉ．Ｖδ１細胞におけるＴＣＲ下方調節を引き起こし、
ｉｉ．Ｖδ１細胞におけるＮＣＲ発現の増加を引き起こし、
ｉｉｉ．Ｖδ１細胞における４－１ＢＢ発現の増加を引き起こし、
ｉｖ．Ｖδ１細胞におけるＣＤ１０７ａ上方調節を引き起こし、及び／または
ｖ．Ｖδ１細胞によるがん細胞殺傷を引き起こす、当該サブパネルにおける抗体バリアントを同定すること；
ｇ）抗体バリアントの当該サブパネルから１種以上の抗体バリアントを選択して、１種以上の親和性成熟した抗Ｖδ１抗体を提供することであって、当該１種以上の親和性成熟した抗Ｖδ１抗体が、
ｉ．Ｖδ１細胞におけるＴＣＲ下方調節を引き起こし、
ｉｉ．Ｖδ１細胞におけるＮＣＲ発現の増加を引き起こし、
ｉｉｉ．Ｖδ１細胞における４－１ＢＢ発現の増加を引き起こし、
ｉｖ．Ｖδ１細胞におけるＣＤ１０７ａ上方調節を引き起こし、及び／または
ｖ．Ｖδ１細胞によるがん細胞殺傷を引き起こす、当該提供すること。
カニクイザル交差反応性
好適には、抗Ｖδ１抗体及びその抗原結合断片は、ヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２）（多型バリアント、すなわち配列番号３０６が含まれる）及びカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）の両方に対する交差反応性を示す。交差反応性は、前臨床評価におけるインビボ動物試験に使用され得る抗体を提供するの明らかに有用である。
驚くべきことに、本発明の発明者らは、抗体、例えば、抗Ｖδ１抗体及びその抗原結合断片のカニクイザル抗原への結合の増強を付与し得るフレームワーク変異を同定した。フレームワーク変異は、抗体またはその抗原結合断片の対応するヒト型抗原に対する親和性に悪影響を及ぼさない。変異は、κ軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位のセリン残基のセリンではない残基（例えば、７４位での非ヒト生殖細胞系列型及び／または非極性残基）への変異である。非極性アミノ酸は、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択され得る。非生殖細胞系列型アミノ酸は、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択され得る。非極性かつ非生殖細胞系列型アミノ酸（すなわち、非極性であり、非生殖細胞系列型であるアミノ酸）は、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択され得る。幾つかの実施形態では、変異は、κ軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位のセリン残基のロイシン残基への変異である。変異は、鎖の全長が変化しないような直接的置換である。従って、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位のセリンが除去され、別のアミノ酸と直接置き換えられる（例えば、７４位での非ヒト生殖細胞系列型及び／または非極性アミノ酸、例えば、ロイシン）。置換は、当業者に公知の任意の好適な方法により達成され得る。
例えば、これは図２６により実証される。図２６は、カッパ鎖のセリン７４をロイシンに変異させることにより付与される顕著な効果を実証する。κ生殖細胞系列全体で、７４位は部分的にのみ保存されており、興味深いことに、異なるκ鎖生殖細胞系列サブクラスにおいて多数の異なる極性／非極性／荷電アミノ酸が存在する（ＩＭＧＴ．ｏｒｇを参照のこと）。しかしながら、発明者らの知る限りでは、これが７４位にロイシンを有する任意のκ鎖の最初の例である。それにもかかわらず、この研究は、この単一のアミノ酸位を変異させることにより、ヒト及びカニクイザルＶδ１ＴＣＲに対するＡＤＴ１－４親分子の親和性をそれぞれ約１３倍及び５倍に増強することができることを確証的に実証する。この発見を更に検証するために、高親和性の例示的な子分子（ＡＤＴ１－４－２）について、ロイシン７４の最初の生殖細胞系列型セリンへの復帰突然変異がなされた。これにより、生殖細胞系列型セリンへの復帰突然変異により、ヒト及びカニクイザルＶδ１に対する親和性をそれぞれ約１１分の１及び２３分の１に低減することができることが相互に実証された（図２６Ｄ（ｉ）及び（ｉｉ）を参照のこと）。これらの結果により、ヒト及びカニクイザルＶδ１ＴＣＲの両方に対するＡＤＴ１－４の親和性を最も望ましくは最大１００倍以上に増強する場合の、κ軽鎖の７４位改変と組み合わされたＣＤＲ３改変の付加的な一方向の寄与の重要性が分析される。これらの発見は、（ｉ）親ＡＤＴ１－４分子の親和性を増強する方法、または（ｉｉ）高親和性子分子の親和性を抑える方法（この例では、ＡＤＴ１－４－２により例示される）の非網羅的な例である。従って、これらの発見は、κ鎖７４位での特定アミノ酸の選択と協調した、重鎖及び軽鎖ＣＤＲ３の標的を定めた変化の組み合わせにより、所望される場合、このクラスの分子の親和性を増強及び抑制することができることを強調する。
本明細書における、ＩＭＧＴ番号付けに従って７４位にセリンではない残基を含むκ軽鎖可変配列を含む抗体への言及は、ＬＦＲ１領域、ＬＣＤＲ１領域、ＬＦＲ２領域、ＬＣＤＲ２領域、ＬＦＲ３領域、ＬＣＤＲ３領域、及びＬＦＲ４領域を含む軽鎖可変配列を含む抗体であって、当該ＬＦＲ３領域がＩＭＧＴ番号付けに従って７４位にセリンではない残基（例えば、７４位での非極性及び／または非ヒト生殖細胞系列型残基、例えば、ロイシン残基）を含む、当該抗体と代替的に定義され得る。このような代替的定義は、ＩＭＧＴ番号付けに従って７４位にセリンではない残基（例えば、非ヒト生殖細胞系列型及び／または非極性残基、例えば、ロイシン残基）を含むκ軽鎖可変配列を含む、本明細書において開示される全ての抗体に適用される。
従って、本発明は、軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基が非セリン（例えば、７４位での非極性及び／または非ヒト生殖細胞系列型残基、例えば、ロイシン残基）であるκ軽鎖可変配列を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片を提供する。幾つかの実施形態では、軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基は、ロイシンである。好適には、抗体はＩｇＧ抗体であり得る。例えば、抗体はＩｇＧ１抗体であり得る。
本明細書において提供される抗Ｖδ１抗体及びその抗原結合断片は、軽鎖可変配列の（ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って）７４位での置換により提供され得る。例えば、本明細書に記載される抗Ｖδ１抗体ならびにその抗原結合断片及びバリアントは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位にセリン以外の残基（例えば、７４位での非極性及び／または非ヒト生殖細胞系列型残基、例えば、ロイシン残基）を含むκ軽鎖可変配列を含み得る。幾つかの実施形態では、本明細書に記載される抗Ｖδ１抗体ならびにその抗原結合断片及びバリアントは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位にロイシン残基を含むκ軽鎖可変配列を含み得る。κ軽鎖のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位での変異を含む実施形態は、ＡＤＴ１－４に由来する抗体に特に関連し得るが、変異は他の抗体に同様に適用可能であり得る。例えば、異なるκ／λ軽鎖生殖細胞系列全体で軽鎖７４位が高度に保存されていないことが観察される。更に、異なる軽鎖生殖細胞系列が、非極性（例えば、アラニン）から極性中性（例えば、セリン）、負または正荷電（例えば、それぞれアスパラギン酸またはアスパラギン）までの範囲の極性及び／または電荷が異なるアミノ酸をこの位置で含有することに留意されたい。任意の所与の位置でのアミノ酸の極性／電荷がタンパク質構造に影響を及ぼし得ることは十分に理解されている。例えば、極性及び電荷の変化が、疎水性及びアミノ酸がより表面に露出されるか、またはより埋め込まれる傾向に影響を及ぼし得ることは十分に理解されている。それにもかかわらず、この注目すべき発見は、軽鎖７４位での非保存的アミノ酸変化が、選択された標的に対する親和性を１０倍超に改変し得ることを強調する。従って、本明細書において概説される親和性の改善とは別に、この知識を利用することにより、親和性をより広範囲に増強または抑制する新規なアプローチが提供され得る。例えば、７４位の残基をより極性の残基から非極性残基に、または例えば、非極性残基からより荷電した残基に変化させることを含む方法は、任意の所与の抗体について親和性を増強または抑制することを所望する場合、複雑な／扱いにくい突然変異誘発法、例えば、飽和突然変異誘発などより好ましい場合がある。
本発明の別の実施形態では、抗体またはその抗原結合断片を変異させる方法であって、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って軽鎖可変配列の７４位にセリンを有するκ軽鎖を含む抗体を提供すること、ならびに当該セリンを異なる残基、例えば、非ヒト生殖細胞系列型及び／または非極性アミノ酸、例えば、ロイシンに変異させることを含む、当該方法も提供される。幾つかの実施形態では、抗体は、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片である。幾つかの実施形態では、抗体は、軽鎖可変配列の７４位に変異が導入される前後の両方で、配列番号１と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２６と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬを有する抗体である。
幾つかの実施形態では、抗体は、軽鎖可変配列の７４位に変異が導入される前後の両方で、配列番号１０６と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１１８と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬを有する抗体である。
幾つかの実施形態では、抗体は、以下を含む抗体である：
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７４のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７５のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８４のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７６のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８５のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７７のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８６のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７８のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８７のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８８のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２８０のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２８１のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２９０のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；または
変異が導入される前後の両方で、配列番号３１２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３１３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ。
幾つかの実施形態では、抗体は、以下を含む抗体である：
配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＶＬ。
かかる方法により作製される抗体は、７４位での変異を除いて、指定されるＶＨ及びＶＬ配列に対する１００％の同一性を有する。
幾つかの実施形態では、７４位での変異は、抗体またはその抗原結合断片の相同なカニクイザル（ｃｙｎｏ ｍｏｎｋｅｙ）抗原に対する親和性を増加させる。抗体またはその抗原結合断片の親和性の増加は、（同じまたは実質的に同じ条件下で測定される場合の）変異が導入される前の抗体またはその抗原結合断片の親和性と比較した増加である。幾つかの実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、変異が導入される前後で、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のヒト可変δ１（Ｖδ１）鎖（例えば、配列番号２７２及び／または３０６）に結合する抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であり、当該抗体は、変異が導入された後で、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のカニクイザル可変δ１（Ｖδ１）鎖（例えば、配列番号３０８）に対する増加した親和性を有する。
任意の実施形態では、軽鎖可変配列の（ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って）７４位のアミノ酸は、好ましくは、ロイシンであり得る。
ポリヌクレオチド配列及び発現ベクター
本発明の一態様では、本発明の抗Ｖδ１抗体または多重特異性抗体または断片をコードするポリヌクレオチドが提供される。一実施形態では、ポリヌクレオチドは、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、ポリヌクレオチドは、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１のいずれかを含むか、またはそれからなる。更なる態様では、上記ポリヌクレオチドを含むｃＤＮＡが提供される。
本発明の一態様では、コードされる免疫グロブリン鎖可変ドメインのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／またはＣＤＲ３をコードする、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１の一部のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む、またはそれからなるポリヌクレオチドが提供される。
本発明の一態様では、コードされる免疫グロブリン鎖可変ドメインのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４をコードする、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１の一部のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む、またはそれからなるポリヌクレオチドが提供される。
本発明は、本発明のポリヌクレオチド配列を含む発現ベクター及びプラスミドも提供する。幾つかの実施形態では、発現ベクターは、配列番号１９９～２２２または２４９～２５９（重鎖可変領域をコードする）のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性、または１００％の同一性を有する配列を含む。幾つかの実施形態では、発現ベクターは、配列番号２２４～２４７または２６１～２７１（軽鎖可変領域をコードする）のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性、または１００％の同一性を有する配列を含む。かかる発現ベクターは、本明細書に開示される本発明の抗体を提供する様々なアミノ酸配列の組合せに従って、重鎖可変配列及び軽鎖可変配列を適切に組み合わせた対で使用され得る。幾つかの実施形態では、発現ベクターは、配列番号１９９～２２２または２４９～２５９（重鎖可変領域をコードする）のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性、または１００％の同一性を有する配列を含み、配列番号２２４～２４７または２６１～２７１（軽鎖可変領域をコードする）のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性、または１００％の同一性を有する配列を更に含む。繰り返しになるが、配列は、本発明の抗体をコードするように本明細書に記載される特定の対で提供され得る。
本発明は、任意により１つ以上のアミノ酸置換を含む本明細書に開示される任意のバリアント抗体配列が含まれる、本明細書に開示される全ての抗体配列をコードするポリヌクレオチド配列及び発現ベクター及びプラスミドも提供する。
本発明のポリヌクレオチド及び発現ベクターは、コードされるアミノ酸配列を参照して記載されてもよい。従って、一実施形態では、ポリヌクレオチドは、配列番号１～５０５のいずれかのアミノ酸配列をコードする配列を含むか、またはそれからなる。
抗体またはその抗原結合断片を発現させるために、本明細書に記載される軽鎖及び重鎖の一部または全長をコードするポリヌクレオチドは、遺伝子が転写制御配列及び翻訳制御配列に作動可能に連結されるように発現ベクターに挿入される。従って、本発明の一態様では、本明細書で定義されるポリヌクレオチド配列を含む発現ベクターが提供される。一実施形態では、発現ベクターは、配列番号１９９～２２２または２４９～２５９のいずれかのＶＨ領域を含む。別の実施形態では、発現ベクターは、配列番号２２４～２４７または２６１～２７１のいずれかのＶＬ領域を含む。
本明細書に記載されるヌクレオチド配列は、翻訳、精製、及び検出を補助するためのアミノ酸残基をコードする追加の配列を含み得るが、使用される発現系に応じて代替的な配列が使用され得ることが理解されよう。これらの任意の配列は、代替的な設計、翻訳、精製、または検出戦略が採用される場合、除去、改変、または置換され得る。
ポリペプチドのアミノ酸配列に関して無変化であるが、特定の宿主における翻訳に好ましいコドンを提供するポリペプチドをコードするＤＮＡまたはｃＤＮＡとなるように、変異がなされ得る。例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ及びＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅならびに哺乳動物、特にヒトにおける核酸の翻訳に好ましいコドンが公知である。
ポリペプチドの変異は、例えば、ポリペプチドをコードする核酸に対する置換、付加、または欠失により達成され得る。ポリペプチドをコードする核酸に対する置換、付加、または欠失は、例えば、エラープローンＰＣＲ、シャッフリング、オリゴヌクレオチド指定突然変異誘発、アセンブリＰＣＲ、ＰＣＲ突然変異誘発、インビボ突然変異誘発、カセット突然変異誘発、再帰アンサンブル突然変異誘発、指数アンサンブル突然変異誘発、部位特異的突然変異誘発、遺伝子再構築、人工遺伝子合成、遺伝子部位飽和突然変異誘発（ＧＳＳＭ）、合成ライゲーション再構築（ＳＬＲ）、またはそれらの方法の組み合わせが含まれる、多数の方法により導入され得る。核酸に対する改変、付加、または欠失は、組換え、再帰的配列組換え、ホスホロチオエート修飾ＤＮＡ突然変異誘発、ウラシル含有テンプレート突然変異誘発、ギャップ二重鎖突然変異誘発、ポイントミスマッチ修復突然変異誘発、修復欠損宿主株突然変異誘発、化学的突然変異誘発、放射性突然変異誘発、欠失突然変異誘発、制限選択突然変異誘発、制限精製突然変異誘発、アンサンブル突然変異誘発、キメラ核酸多量体作製、またはそれらの組み合わせを含む方法によっても導入され得る。
特に、人工遺伝子合成が使用され得る。本発明のポリペプチドをコードする遺伝子は、例えば、固相ＤＮＡ合成により人工的に生成され得る。前駆体テンプレートＤＮＡを必要とせずに、遺伝子全体が新たに合成され得る。所望のオリゴヌクレオチドを得るために、構成単位が、生成物の配列により必要とされる順序で、伸長しているオリゴヌクレオチド鎖に逐次的に結合される。鎖の構築が完了すると、生成物が固相から溶液中に放出され、脱保護され、収集される。目的のオリゴヌクレオチドを高純度で得るために、生成物は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により単離され得る。
発現ベクターとしては、例えば、プラスミド、レトロウイルス、コスミド、酵母人工染色体（ＹＡＣ）、及びエプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）由来のエピソームが挙げられる。ポリヌクレオチドは、ベクター内の転写制御配列及び翻訳制御配列がポリヌクレオチドの転写及び翻訳を制御する意図された機能を果たすように、ベクターにライゲーションされる。発現及び／または制御配列としては、プロモーター、エンハンサー、転写ターミネーター、コード配列の５’側の開始コドン（すなわちＡＴＧ）、イントロンのスプライシングシグナル、及び終止コドンが挙げられ得る。発現ベクター及び発現制御配列は、使用される発現宿主細胞と適合するように選択される。例えば、配列は、合成リンカー（例えば、配列番号２９１をコードする）により連結されたＶＨ領域及びＶＬ領域を含む、本発明の抗体の一本鎖可変断片バージョンをコードするヌクレオチド配列を含み得る。本発明のポリヌクレオチドまたは発現ベクターは、ＶＨ領域、ＶＬ領域、またはその両方（任意によりリンカーを含む）を含み得ることが理解されよう。従って、ＶＨ領域及びＶＬ領域をコードするポリヌクレオチドが別々のベクターに挿入され得、あるいは両方の領域をコードする配列が同じ発現ベクターに挿入される。ポリヌクレオチド（複数可）は、標準的方法（例えば、ポリヌクレオチド及びベクターの相補的制限部位のライゲーション、または制限部位が存在しない場合は平滑末端ライゲーション）により発現ベクターに挿入される。
便利なベクターは、機能的に完全なヒトＣＨまたはＣＬ免疫グロブリン配列をコードするものであり、本明細書に記載されるように、任意のＶＨ配列またはＶＬ配列が容易に挿入され得、発現され得るように操作された適切な制限部位を有する。発現ベクターは、宿主細胞からの抗体（またはその抗原結合断片）の分泌を促進するシグナルペプチドもコードし得る。ポリヌクレオチドは、シグナルペプチドが抗体のアミノ末端にインフレームで連結されるようにベクターにクローンニングされ得る。シグナルペプチドは、免疫グロブリンシグナルペプチドまたは異種シグナルペプチド（すなわち、非免疫グロブリンタンパク質由来のシグナルペプチド）であり得る。
本発明の一態様では、本明細書で定義されるポリヌクレオチドまたは発現ベクターを含む細胞（例えば、組換え宿主細胞などの宿主細胞）が提供される。細胞は、抗体またはその抗原結合断片の軽鎖をコードする第１のベクター、及び抗体またはその抗原結合断片の重鎖をコードする第２のベクターを含み得ることが理解されよう。あるいは、重鎖及び軽鎖の両方が、細胞に導入される同じ発現ベクターにコードされる。
一実施形態では、ポリヌクレオチドまたは発現ベクターは、抗体またはその抗原結合断片に融合された膜アンカーまたは膜貫通ドメインをコードし、ここで、当該抗体またはその抗原結合断片は細胞の細胞外表面に提示される。
形質転換は、ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための任意の公知の方法によるものであり得る。異種ポリヌクレオチドを哺乳動物細胞に導入する方法は当該技術分野において周知であり、デキストラン媒介性形質移入、リン酸カルシウム沈殿、ポリブレン媒介性形質移入、プロトプラスト融合、エレクトロポレーション、リポソームへのポリヌクレオチド（複数可）のカプセル化、遺伝子銃による注入、及び核へのＤＮＡの直接的マイクロインジェクションが挙げられる。更に、核酸分子は、ウイルスベクターによって哺乳動物細胞に導入され得る。
発現のための宿主として利用可能な哺乳動物細胞株は、当該技術分野において周知であり、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手可能な多数の不死化細胞株が挙げられる。これらとしては、とりわけ、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＮＳＯ、ＳＰ２細胞、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、サル腎臓細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞癌細胞（例えば、Ｈｅｐ Ｇ２）、Ａ５４９細胞、３Ｔ３細胞、及び多数の他の細胞株が挙げられる。哺乳動物宿主細胞としては、ヒト、マウス、ラット、イヌ、サル、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマ、及びハムスターの細胞が挙げられる。どの細胞株が高い発現レベルを有するかを決定することによって、特に好ましい細胞株が選択される。使用され得る他の細胞株は、Ｓｆ９細胞などの昆虫細胞株、両生類細胞、細菌細胞、植物細胞、及び真菌細胞である。ｓｃＦｖ及びＦｖ断片などの抗体の抗原結合断片は、当該技術分野において公知の方法を使用してＥ．ｃｏｌｉで単離及び発現され得る。
抗体は、宿主細胞における抗体の発現、より好ましくは、宿主細胞が増殖する培養培地への抗体の分泌を可能にするのに十分な期間、宿主細胞を培養することにより産生される。抗体は、標準的なタンパク質精製法を使用して培養培地から回収され得る。
本発明の抗体（または断片）は、例えば、Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（２０１２） ４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｕｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓに開示されている技術を使用して取得及び操作され得る。
モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術を使用して、特定の抗体産生Ｂ細胞を、組織培養で増殖する能力及び抗体鎖合成の欠如のために選択される骨髄腫（Ｂ細胞癌）細胞と融合させることによって産生され得る。
決定された抗原対して指向されたモノクローナル抗体は、例えば、
ａ）ハイブリドーマを形成させるために、決定された抗原で、不死化細胞で、及び好ましくは、骨髄腫細胞で事前に免疫された動物の末梢血から得られたリンパ球を不死化すること、
ｂ）形成された不死化細胞（ハイブリドーマ）を培養し、所望の特異性を有する抗体を産生する細胞を回収することにより取得され得る。
あるいは、ハイブリドーマ細胞を使用する必要はない。本明細書に記載される標的抗原に結合することができる抗体は、例えば、当該技術分野において公知のファージディスプレイ、酵母ディスプレイ、リボソームディスプレイ、または哺乳動物ディスプレイ技術を使用する定型的な実務によって、好適な抗体ライブラリーから単離され得る。従って、モノクローナル抗体は、例えば、以下のステップを含むプロセスにより取得され得る：
ａ）ベクターに、特にファージ及びより具体的には糸状バクテリオファージに、リンパ球、特に動物（好適には決定された抗原で以前に免疫されている）の末梢血リンパ球から取得されたＤＮＡまたはｃＤＮＡ配列をクローン化するステップ、
ｂ）抗体の産生を可能にする条件で、上記のベクターで原核細胞を形質転換するステップ、
ｃ）抗体を抗原親和性選択に供することより抗体を選択するステップ、
ｄ）所望の特異性を有する抗体を回収するステップ。
任意により、本明細書に記載され、かつγδＴ細胞のＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片をコードする単離されたポリヌクレオチドも、疾患の徴候または症状を改善するための薬剤として用いられるのに十分な量を作製するように容易に製造され得る。このように薬剤として用いられる場合、通常、目的のポリヌクレオチドはまず、対象または患者において上記抗体またはその抗原結合断片を発現するように設計された発現ベクターまたは発現カセットに作動可能に連結される。かかる発現カセット及びポリヌクレオチドの送達方法または「核酸ベース」薬剤と称される場合があるものは、当該技術分野において周知である。最近の概説については、Ｈｏｌｌｅｖｏｅｔ ａｎｄ Ｄｅｃｌｅｒｃｋ（２０１７） Ｊ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ． １５（１）：１３１を参照のこと。
抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントの産生のための方法であって、細胞内でプラスミドまたはベクターのコード核酸配列を発現させるための条件下で細胞培養培地中の本発明の宿主細胞を培養することを含む、当該方法も提供される。本方法は、細胞培養上清から抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントを取得することを更に含み得る。次いで、取得された抗体は、医薬組成物に製剤化され得る。更に、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントを発現する細胞を作製する方法であって、本発明のプラスミドまたはベクターを上記細胞に形質移入することを含む、当該方法が提供される。次いで、上記細胞は、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントの産生のために培養され得る。
医薬組成物
本発明の更に別の態様では、本明細書で定義される抗体またはその抗原結合断片を含む組成物が提供される。かかる実施形態では、組成物は、他の賦形剤と任意に組み合わされた抗体を含み得る。１種以上の追加の活性薬剤（例えば、本明細書において言及される疾患を処置するのに好適な活性薬剤）を含む組成物も含まれる。
本発明の更に別の態様では、本明細書で定義される抗体またはその抗原結合断片を、薬学的に許容される希釈剤または担体と共に含む医薬組成物が提供される。本発明の抗体は、対象への投与に適した医薬組成物に組み込まれ得る。典型的には、医薬組成物は、本発明の抗体及び薬学的に許容される担体を含む。本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される担体」としては、生理的に適合可能なあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌薬剤、等張剤、ならびに吸収遅延剤などが挙げられる。薬学的に許容される担体の例としては、水、生理食塩水、塩、リン酸緩衝食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなどのうちの１つ以上、及びそれらの組み合わせが挙げられる。多くの場合、等張剤、例えば、糖類、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、または塩化ナトリウムを組成物に含めることが好ましい。抗体またはその抗原結合断片の貯蔵寿命または有効性を増強する、薬学的に許容される物質、例えば、湿潤剤または少量の補助剤、例えば、湿潤剤もしくは乳化剤、防腐剤、または緩衝剤。
本発明の組成物は種々の形態であり得る。これらとしては、例えば、液体、半固体、及び固体の剤形、例えば、溶液（例えば、注射剤及び注入剤）、分散体または懸濁液、錠剤、丸剤、粉末、リポソーム、及び坐剤が挙げられる。好ましい形態は、意図される投与様式及び治療用途に依存する。典型的な好ましい組成物は、注射剤または注入剤の形態である。
好ましい投与様式は、非経口（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、クモ膜下腔内）である。好ましい実施形態では、抗体は、静脈内注入または注射により投与される。別の好ましい実施形態では、抗体は、筋肉内注射または皮下注射により投与される。
治療用組成物は、通常、製造及び貯蔵条件下で無菌かつ安定でなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルション、分散体、リポソーム、または高薬物濃度に適した他の規則構造として製剤化され得る。
本明細書に記載される疾患の処置のための治療法において、かかる疾患の処置に通常使用される他の確立された治療法の補助として、またはそれと併用して、本発明の医薬組成物を使用することは本発明の範囲内である。
本発明の更なる態様では、抗体、組成物、または医薬組成物は、少なくとも１種の活性薬剤と共に、逐次的に、同時に、または別々に投与される。
処置方法
本発明の更なる態様によれば、薬剤として使用される、本明細書で定義される単離された抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供される。本明細書における、薬剤としてまたは治療において「使用される」抗体またはその抗原結合断片への言及は、対象への抗体またはその抗原結合断片の投与に限定される。
一実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、がん、感染性疾患、または炎症性疾患の処置に使用される。一実施形態では、本発明は、疾患または障害を処置する必要がある対象の疾患または障害を処置する方法であって、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。種々の実施形態では、疾患または障害は、がん、感染性疾患、または炎症性疾患である。一実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、がん、感染性疾患、または炎症性疾患の処置に使用され、健常細胞を温存しながら病変細胞の死をもたらす。更なる実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、がんの治療に使用される。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、がん、感染性疾患、または炎症性疾患の処置に使用される。更なる実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、がんの処置に使用される。
本発明の更なる態様によれば、薬剤として使用される本明細書で定義される医薬組成物が提供される。一実施形態では、医薬組成物は、がん、感染性疾患、または炎症性疾患の処置に使用される。更なる実施形態では、医薬組成物は、がんの処置に使用される。
本発明の更なる態様によれば、免疫応答を調節する必要がある対象における免疫応答を調節する方法であって、治療上有効量の本明細書で定義される単離された抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を投与することを含む、当該方法が提供される。種々の実施形態では、対象における免疫応答を調節することは、γδＴ細胞に結合するか、もしくはγδＴ細胞を標的とすること、γδＴ細胞を活性化すること、γδＴ細胞の増殖を引き起こすか、もしくは増強すること、γδＴ細胞の増大を引き起こすか、もしくは増強すること、γδＴ細胞の脱顆粒を引き起こすか、もしくは増強すること、γδＴ細胞による殺傷活性を引き起こすか、もしくは増強すること、健常細胞を温存しながらγδＴ細胞による殺傷活性を引き起こすか、もしくは増強すること、γδＴ細胞の細胞傷害性を引き起こすか、もしくは増強すること、健常細胞を温存しながらγδＴ細胞の細胞傷害性を引き起こすか、もしくは増強すること、γδＴ細胞の動員を引き起こすか、もしくは増強すること、γδＴ細胞の生存期間を延長させること、またはγδＴ細胞の疲弊に対する抵抗性を増強することを含む。対象における免疫応答を調節することは、第２の抗原に結合するか、またはそれを標的とすることを更に含み得る。例えば、幾つかの実施形態では、第２の抗原の結合は、特にそれが免疫調節性抗原である場合、ＴＲＤＶ１への多重特異性抗体の結合による免疫調節に加えて、第２の抗原による免疫調節を刺激し得る。従って、免疫応答の調節は、ＴＲＤＶ１抗原の会合を介して調節される第１のシグナル伝達経路、及び第２の免疫調節性抗原の会合を介して調節される第２のシグナル伝達経路の２つの異なるシグナル伝達経路を介する調節を含み得る。
本発明の更なる態様によれば、がん、感染症、または炎症性疾患を処置する必要がある対象のがん、感染症、または炎症性疾患を処置する方法であって、治療上有効量の本明細書で定義される単離された抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を投与することを含む、当該方法が提供される。あるいは、治療上有効量の医薬組成物が投与される。
本発明の更なる態様によれば、例えば、がん、感染性疾患、または炎症性疾患の処置における薬剤の製造のための本明細書で定義される抗体またはその抗原結合断片の使用が提供される。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片が対象に投与され、ここで、当該対象は、がん、感染性疾患、または炎症性疾患を有する。
本発明の更なる態様によれば、薬剤として使用される本明細書で定義される医薬組成物が提供される。一実施形態では、医薬組成物が対象に投与され、ここで、当該対象は、がん、感染性疾患または炎症性疾患を有する。
本発明の更なる態様によれば、治療上有効量の本明細書で定義される単離された抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を対象に投与する方法であって、当該対象が、がん、感染性疾患、または炎症性疾患を有する、当該方法が提供される。あるいは、治療上有効量の医薬組成物が投与される。
本発明の更なる態様によれば、例えば、対象に投与される薬剤の製造のための本明細書で定義される抗体またはその抗原結合断片の使用が提供され、ここで、当該対象は、がん、感染性疾患、または炎症性疾患を有する。
種々の実施形態では、開示される方法及び組成物により処置され得るがんとしては、限定されるものではないが、急性リンパ芽球性、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、虫垂癌、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、骨肉腫及び悪性線維性組織球腫、脳幹神経膠腫、脳腫瘍、脳腫瘍、脳幹神経膠腫、中枢神経系非定型奇形腫様／ラブドイド腫瘍、中枢神経系胚芽腫、小脳星状細胞腫、大脳星状細胞腫／悪性神経膠腫、頭蓋咽頭腫、上衣芽細胞腫、上衣腫、髄芽細胞腫、髄上皮腫、中間型松果体実質腫瘍、テント上原始神経外胚葉性腫瘍及び松果体芽腫、視覚路及び視床下部神経膠腫、脳脊髄腫瘍、乳癌、気管支腫瘍、バーキットリンパ腫、カルチノイド腫瘍、消化管カルチノイド腫瘍、中枢神経系非定型奇形腫様／ラブドイド腫瘍、中枢神経系胚芽腫、中枢神経系リンパ腫、小脳星状細胞腫大脳星状細胞腫／悪性神経膠腫、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄増殖性障害、結腸癌、大腸癌、頭蓋咽頭腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、食道癌、ユーイングファミリー腫瘍、性腺外生殖細胞腫瘍、肝外胆管癌、眼内黒色腫、網膜芽細胞腫、胆嚢癌、胃癌（胃がん）、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍（ｇｉｓｔ）、生殖細胞腫瘍、妊娠性絨毛性腫瘍、神経膠腫、神経膠腫脳幹、神経膠腫大脳星状細胞腫、視覚路及び視床下部の神経膠腫、ヘアリーセル白血病、頭頸部癌、肝細胞（肝臓）癌、ランゲルハンス細胞組織球症、ホジキンリンパ腫、下咽頭癌、視床下部及び視覚路の神経膠腫、眼内黒色腫、膵島細胞腫瘍、腎臓（腎細胞）癌、ランゲルハンス細胞組織球症、喉頭癌、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、ヘアリーセル白血病、口唇癌及び口腔癌、肝臓癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、エイズ関連リンパ腫、バーキットリンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、骨の悪性線維性組織球腫及び骨肉腫、髄芽細胞腫、黒色腫、メルケル細胞癌、中皮腫、原発不明の転移性頸部扁平上皮癌、口腔癌（ｍｏｕｔｈ ｃａｎｃｅｒ）、多発性内分泌腫瘍症候群、多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍、真菌症、菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性疾患、骨髄性白血病、骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、骨髄増殖性障害、鼻腔癌及び副鼻腔癌、鼻咽腔癌、神経芽細胞腫、非小細胞肺癌、口腔癌（ｏｒａｌ ｃａｎｃｅｒ）、口腔癌（ｏｒａｌ ｃａｖｉｔｙ ｃａｎｃｅｒ）、中咽頭癌、骨肉腫及び骨の悪性線維性組織球腫、卵巣癌、卵巣上皮癌、卵巣生殖細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍、膵癌、膵癌、乳頭腫症、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌（ｐｈａｒｙｎｇｅａｌ ｃａｎｃｅｒ）、褐色細胞腫、中間型松果体実質腫瘍、松果体芽腫及びテント上原始神経外胚葉性腫瘍、下垂体腫瘍、形質細胞腫瘍／多発性骨髄腫、胸膜肺芽腫、原発性中枢神経系リンパ腫、前立腺癌、直腸癌、腎細胞（腎臓）癌、腎盂及び尿管、第１５染色体のｎｕｔ遺伝子が関与する呼吸器癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、肉腫、ユーイングファミリー腫瘍、カポジ肉腫、軟部組織肉腫、子宮肉腫、セザリー症候群、皮膚癌（非黒色腫）、皮膚癌（黒色腫）、メルケル細胞皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織肉腫、扁平上皮癌、頸部扁平上皮癌、胃がん（胃癌）、テント上原始神経外胚葉性腫瘍、Ｔ細胞リンパ腫、精巣癌、咽頭癌（ｔｈｒｏａｔ ｃａｎｃｅｒ）、胸腺腫及び胸腺癌、甲状腺癌、腎盂及び尿管の移行細胞癌、妊娠性絨毛性腫瘍、尿道癌、子宮癌、子宮肉腫、膣癌、外陰癌、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、ならびにウィルムス腫瘍が挙げられる。種々の実施形態では、開示される方法及び組成物により処置され得るがんが処置される一方で、健常細胞は温存される。
種々の実施形態では、開示される方法及び組成物によって処置され得る炎症性疾患としては、限定されるものではないが、アカラシア、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、急性運動性軸索型ニューロパチー、急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）、アジソン病、有痛脂肪症、成人スチル病、成人発症スチル病、無ガンマグロブリン血症、円形脱毛症、アミロイドーシス、筋萎縮性側索硬化症、強直性脊椎炎、抗ＧＢＭ／抗ＴＢＭ腎炎、抗Ｎ－メチル－Ｄ－アスパラギン酸（抗ＮＭＤＡ）受容体脳炎、抗リン脂質症候群、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ、ＡＰＬＳ）、抗シンテターゼ症候群、抗尿細管基底膜腎炎、再生不良性貧血、アトピー性アレルギー、アトピー性皮膚炎、自己免疫性血管浮腫、自己免疫性共存症、自己免疫性自律神経異常、自己免疫性脳脊髄炎、自己免疫性腸症、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、自己免疫性リンパ増殖症候群、自己免疫性心筋炎、自己免疫性好中球減少症、自己免疫性卵巣炎、自己免疫性精巣炎、自己免疫性膵炎（ＡＩＰ）、自己免疫性末梢性ニューロパチー、自己免疫性多内分泌症候群（ＡＰＳ）１型、自己免疫性多内分泌症候群（ＡＰＳ）２型、自己免疫性多内分泌症候群（ＡＰＳ）３型、自己免疫性網膜症、自己免疫性血小板減少性紫斑病、自己免疫性甲状腺炎、自己免疫性蕁麻疹、自己免疫性ブドウ膜炎、自己免疫性血管炎、軸索型及び神経型ニューロパチー（ＡＭＡＮ）、バロー同心円性硬化症、バロー病、ベーチェット病、良性粘膜類天疱瘡、ビッカースタッフ脳炎、ブラウ症候群、水疱性類天疱瘡、キャッスルマン病（ＣＤ）、セリアック病、シャーガス病、慢性疲労症候群、慢性炎症性脱髄性多発神経炎（ＣＩＤＰ）、慢性閉塞性肺疾患、慢性再発性多発性骨髄炎（ＣＲＭＯ）、チャーグ・ストラウス症候群（ＣＳＳ）または好酸球性肉芽腫症（ＥＧＰＡ）、瘢痕性類天疱瘡、コーガン症候群、寒冷凝集素症、補体成分２欠乏症、複合性局所疼痛症候群、先天性心ブロック、結合組織、全身性、及び多臓器、接触性皮膚炎、コクサッキー心筋炎、ＣＲＥＳＴ症候群、クローン病、クッシング症候群、皮膚白血球破砕性血管炎、デゴス病、疱疹状皮膚炎、皮膚筋炎、デビック病（視神経脊髄炎）、真性糖尿病１型、消化器系、円板状ループス、ドレスラー症候群、薬剤誘発性ループス、湿疹、子宮内膜症、付着部炎関連関節炎、好酸球性食道炎（ＥｏＥ）、好酸球性筋膜炎、好酸球性胃腸炎、好酸球性多発血管炎性肉芽腫症（ＥＧＰＡ）、好酸球性肺炎、後天性表皮水疱症、結節性紅斑、胎児赤芽球症、食道アカラシア、本態性混合型クリオグロブリン血症、エバンス症候群、外分泌、フェルティ症候群、進行性骨化性線維異形成症、線維筋痛症、線維性肺胞炎、胃炎、胃腸類天疱瘡、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎）、巨細胞性心筋炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、多発血管炎性肉芽腫症、グレーブス眼症、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本甲状腺炎、橋本脳症、溶血性貧血、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病（ＨＳＰ）、妊娠性ヘルペスまたは妊娠性類天疱瘡（ＰＧ）、化膿性汗腺炎（ＨＳ）（反転型ざ瘡）、低ガンマグロブリン血症、特発性巨細胞性心筋炎、特発性炎症性脱髄疾患、特発性肺線維症、ＩｇＡ腎症、ＩｇＡ血管炎（ＩｇＡＶ）、ＩｇＧ４関連疾患、ＩｇＧ４関連硬化性疾患、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、封入体筋炎（ＩＢＭ）、炎症性腸疾患、中間部ブドウ膜炎、間質性膀胱炎（ＩＣ）、間質性肺疾患、ＩＰＥＸ症候群、若年性関節炎、若年性糖尿病（１型糖尿病）、若年性筋炎（ＪＭ）、川崎病、ランバート・イートン症候群、白血球破砕性血管炎、扁平苔癬、硬化性苔癬、木質性結膜炎、線状ＩｇＡ病（ＬＡＤ）、ループス、ループス腎炎、ループス血管炎、慢性ライム病、マジード症候群、メニエール病、顕微鏡的多発血管炎（ＭＰＡ）、混合性結合組織病（ＭＣＴＤ）、モーレン潰瘍、限局性強皮症、ムッハ・ハーベルマン病、多巣性運動ニューロパチー（ＭＭＮ）またはＭＭＮＣＢ、多発性硬化症、重症筋無力症、心筋炎、筋炎、ナルコレプシー、新生児ループス、神経系、視神経脊髄炎、神経性筋強直症、好中球減少症、眼瘢痕性類天疱瘡、オプソクローヌス・ミオクローヌス症候群、視神経炎、オード甲状腺炎、オシュトラン症候群、回帰性リウマチ（ＰＲ）、傍腫瘍性小脳変性症（ＰＣＤ）、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）、パリー・ロンベルグ症候群、パーソネージ・ターナー症候群、毛様体扁平部炎（末梢性ブドウ膜炎）、連鎖球菌に関連する小児自己免疫性神経精神障害（ＰＡＮＤＡＳ）、骨盤内炎症性疾患（ＰＩＤ）、天疱瘡、尋常性天疱瘡、末梢性ニューロパチー、静脈周囲脳脊髄炎、悪性貧血（ＰＡ）、急性痘瘡状苔癬状粃糠疹、ＰＯＥＭＳ症候群、結節性多発動脈炎、多腺性症候群Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、リウマチ性多発筋痛症、多発性筋炎、心筋梗塞後症候群、心膜切開後症候群、原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）、原発性胆汁性肝硬変、原発性免疫不全症、原発性硬化性胆管炎、プロゲステロン皮膚炎、進行性炎症性ニューロパチー、乾癬、乾癬性関節炎、真性赤血球系無形成症（ＰＲＣＡ）、壊疽性膿皮症、ラスムッセン脳炎、レイノー現象、反応性関節炎、反射性交感神経性ジストロフィー、再発性多発軟骨炎、レストレスレッグ症候群（ＲＬＳ）、後腹膜線維症、リウマチ熱、関節リウマチ、リウマチ性血管炎、サルコイドーシス、統合失調症、シュミット症候群、シュニッツラー症候群、強膜炎、強皮症、血清病、シェーグレン症候群、精液精巣自己免疫、脊椎関節症、全身硬直症候群（ＳＰＳ）、亜急性細菌性心内膜炎（ＳＢＥ）、スザック症候群、スイート症候群、シデナム舞踏病、交感性眼炎（ＳＯ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨細胞性動脈炎、血小板減少、血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、甲状腺、トロサ・ハント症候群（ＴＨＳ）、横断性脊髄炎、１型糖尿病、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）、未分化結合組織病（ＵＣＴＤ）、未分化脊椎関節症、蕁麻疹様血管炎、蕁麻疹（Ｕｔｉｃａｒｉａ）、ブドウ膜炎、血管炎、白斑、ならびにフォークト・小柳・原田病が挙げられる。種々の実施形態では、開示される方法及び組成物により処置され得る炎症性疾患が処置される一方で、健常細胞は温存される。
種々の実施形態では、開示される方法及び組成物によって処置され得る感染性疾患としては、限定されるものではないが、アシネトバクター感染症、放線菌症、急性弛緩性脊髄炎（ＡＦＭ）、アフリカ睡眠病（アフリカトリパノソーマ症）、ＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）、アメーバ感染症、アメーバ症、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｐｈｉｌｕｍ感染症、アナプラズマ症、住血線虫症、アニサキス症、炭疽、アルボウイルス病、神経浸潤性及び非神経浸潤性、Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、トリインフルエンザ、バベシア症、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ感染症、細菌感染症、細菌性髄膜炎、細菌性肺炎、細菌性膣症、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、バルトネラ症、Ｂａｙｌｉｓａｓｃａｒｉｓ感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスチス症、ボリビア出血熱、ボツリヌス症、ボツリヌス症（食品由来）、ボツリヌス症（乳児）、ボツリヌス症（その他）、ボツリヌス症（創傷）、ブラジル出血熱、ブルセラ症、腺ペスト、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、カリシウイルス感染症（ノロウイルス及びサポウイルス）、カリフォルニア血清型ウイルス病、カンピロバクター、カンピロバクター症、Ｃａｎｄｉｄａ ａｕｒｉｓ、臨床、カンジダ症（モニリア症；鵞口瘡）、毛細虫症、カルバペネマーゼ産生カルバペネム耐性腸内細菌（ＣＰ－ＣＲＥ）、カルバペネム耐性感染症（ＣＲＥ／ＣＲＰＡ）、カリオン病、猫ひっかき病、蜂巣炎、シャーガス病（トリパノソーマ症）、軟性下疳、水痘、チクングニアウイルス感染症（チクングニア）、クラミジア、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ感染症、コレラ、黒色分芽菌症、ツボカビ症、シガテラ、肝吸虫症、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ大腸炎、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ Ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ感染症、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、コクシジオイデス症真菌感染症（渓谷熱）、コロラドダニ熱（ＣＴＦ）、普通感冒（急性ウイルス性鼻咽喉炎；急性コリーザ）、先天性梅毒、結膜炎、ＣＯＶＩＤ－１９（新型コロナウイルス感染症）、ＣＰ－ＣＲＥ、エンテロバクター菌種、ＣＰ－ＣＲＥ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、ＣＰ－ＣＲＥ、クレブシエラ菌種、クロイツフェルト・ヤコブ病、伝達性海綿状脳症（ＣＪＤ）、クロイツフェルト・ヤコブ病（ＣＪＤ）、クリミア・コンゴ出血熱（ＣＣＨＦ）、カキ殻状疥癬、クリプトコッカス症、クリプトスポリジウム症（クリプト）、皮膚幼虫移行症（ＣＬＭ）、サイクロスポラ、サイクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デングウイルス感染症、デング、１，２，３，４（デング熱）、デング様疾患、Ｄｅｓｍｏｄｅｓｍｕｓ感染症、下痢性疾患、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｅ．ｃｏｌｉ感染症、志賀毒素産生（ＳＴＥＣ）、東部ウマ脳炎ウイルス疾患、エボラ出血熱（エボラ）、エキノコックス症、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｃｈａｆｆｅｅｎｓｉｓ感染症、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｅｗｉｎｇｉｉ感染症、エーリキア症、アナプラズマ症、脳炎、アルボウイルス脳炎または傍感染性脳炎、腸蟯虫症（蟯虫感染）、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、Ｄ６８（ＥＶ－Ｄ６８）、エンテロウイルス感染症、非ポリオ（非ポリオエンテロウイルス）、発疹チフス、エプスタイン・バーウイルス伝染性単核球症（モノ）、伝染性紅斑（第五病）、突発性発疹（第六病）、肝蛭症、肥大吸虫症、致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）、第五病、フィラリア症、感冒（季節性）、食中毒、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓによる食中毒、自由生息アメーバ感染症、真菌感染症、フソバクテリウム感染症、ガス壊疽（クロストリジウム性筋壊死）、性器ヘルペス、性器疣贅、ゲオトリクム症、風疹、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー症候群（ＧＳＳ）、ジアルジア症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径肉芽腫、鼠径肉芽腫（ドノバン症）、Ａ群連鎖球菌感染症、Ａ群連鎖球菌、Ｂ群連鎖球菌感染症、ガナリトウイルス、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ疾患、Ｂ型（ＨｉｂまたはＨ－ｆｌｕ）、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ感染症、手足口病（ＨＦＭＤ）、ハンセン病、ハンタウイルス感染症、ハンタウイルス肺症候群（ＨＰＳ）、ハートランドウイルス疾患、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ感染症、溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）、腎症候性出血熱（ＨＦＲＳ）、ヘンドラウイルス感染症、Ａ型肝炎（Ｈｅｐ Ａ）、Ｂ型肝炎（Ｈｅｐ Ｂ）、Ｃ型肝炎（Ｈｅｐ Ｃ）、Ｄ型肝炎（Ｈｅｐ Ｄ）、Ｅ型肝炎（Ｈｅｐ Ｅ）、ヘルペス、ヘルペスＢウイルス、単純ヘルペス、帯状ヘルペス、帯状疱疹ＶＺＶ（シングルス）、Ｈｉｂ病、ヒストプラスマ症感染症（ヒストプラスマ症）、鉤虫感染症、ＨＰＶ（ヒトパピローマウイルス）、ヒトボカウイルス感染症、ヒトＥｈｒｌｉｃｈｉａ ｅｗｉｎｇｉｉ症（Ｈｕｍａｎ ｅｗｉｎｇｉｉ ｅｈｒｌｉｃｈｉｏｓｉｓ）、ヒト顆粒球性アナプラズマ症（ＨＧＡ）、ヒト免疫不全ウイルス／ＡＩＤＳ（ＨＩＶ／ＡＩＤＳ）、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球性エーリキア症、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、膿痂疹、インフルエンザ（感冒）、インフルエンザ（季節性）、侵襲性肺炎球菌症、イソスポーラ症、フニンウイルス、川崎症候群、角膜炎、Ｋｉｎｇｅｌｌａ ｋｉｎｇａｅ感染症、クールー、ラッサ熱、ラッサウイルス、レジオネラ症（レジオネラ病）、リーシュマニア症、ライ病（ハンセン病）、レプトスピラ症、リステリア症（リステリア）、ルジョウイルス、ライム病、リンパ性フィラリア症（象皮症）、リンパ球性脈絡髄膜炎（ＬＣＭＶ）、性病性リンパ肉芽腫感染症（ＬＧＶ）、マチュポウイルス、マラリア、マールブルグウイルス感染症、麻疹、類鼻疽（ウィットモア病）、髄膜炎、細菌性髄膜炎、ウイルス性髄膜炎、髄膜炎菌性疾患、横川吸虫症、微胞子虫症、中東呼吸器症候群（ＭＥＲＳ）、伝染性軟属腫（ＭＣ）、サル痘、単核球症、蚊媒介性疾患、ＭＲＳＡ、ムンプス、発疹熱（地方病性発疹熱）、菌腫、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ感染症、マイコプラズマ肺炎、ハエ幼虫症、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、新生児結膜炎（新生児眼炎）、ニパウイルス感染症、ノカルジア症、ノロウイルス、オンコセルカ症（河川盲目症）、オピストルキス症、オーフウイルス（ただれ口）、パラコクシジオイデス症（南アメリカブラストミセス症）、肺吸虫症、麻痺性貝中毒（麻痺性貝中毒、シガテラ）、パスツレラ症、ＰＥＰ、寄生虫感染症、百日咳（疫咳）、ピンクアイ、肺炎球菌疾患、肺炎球菌感染症、ニューモシスチス肺炎（ＰＣＰ）、肺炎、肺ペスト、灰白髄炎（ポリオ）、麻痺性灰白髄炎、ポリオウイルス感染症、ポンティアック熱、ポワッサンウイルス疾患、プレボテラ感染症、原発性アメーバ性髄膜脳炎（ＰＡＭ）、進行性多巣性白質脳症、原虫感染症、オウム病（オウム熱）、膿疱性発疹症（天然痘、サル痘、牛痘）、狂犬病、アライグマ回虫、鼠咬熱、レクリエーション用水疾患、再帰熱、呼吸器合胞体ウイルス感染症、ライエ症候群、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア症（ロッキー山紅斑熱）、リフトバレー熱（ＲＶＦ）、白癬、ロタウイルス感染症、三日はしか、サビアウイルス、サルモネラ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ Ｐａｒａｔｙｐｈｉ感染症、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉ感染症、サルモネラ症、ＳＡＲＳ（重症急性呼吸器症候群）、疥癬、猩紅熱、住血吸虫症、サバ亜目、敗血症、敗血症性ショック、敗血症性ペスト、重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）、志賀毒素産生Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、赤痢菌、細菌性赤痢、シングルス、シングルス（帯状疱疹）、天然痘、ただれ口（オーフウイルス）、スポロトリクム症、紅斑熱リケッチア症、セントルイス脳炎ウイルス疾患、ブドウ球菌感染症、ブドウ球菌感染症（メチシリン耐性（ＭＲＳＡ））、ブドウ球菌性食中毒、ブドウ球菌感染症（バンコマイシン中等度耐性（ＶＩＳＡ））、連鎖球菌性咽頭炎、Ａ群連鎖球菌症（侵襲性）（Ｓｔｒｅｐ Ａ（侵襲性））、Ｂ群連鎖球菌症（Ｓｔｒｅｐ－Ｂ）、連鎖球菌毒素ショック症候群、糞線虫症、亜急性硬化性全脳炎、梅毒、テニア症、破傷風感染症、マダニ媒介疾患、白癬性毛瘡、頭部白癬、体部白癬、股部白癬、手白癬、黒癬、足白癬、爪白癬、癜風、毒素ショック症候群、トキソカラ症（眼幼虫移行症（ＯＬＭ））、トキソカラ症（内臓幼虫移行症（ＶＬＭ））、トキソプラズマ症、トラコーマ、旋毛虫症、トリコモナス症、旋毛虫感染症（旋毛虫症）、鞭虫症（鞭虫感染症）、結核（ＴＢ）、野兎病（ウサギ熱）、チフス熱、Ｄ群チフス熱、チフス、発疹チフス、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ感染症、膣症、渓谷熱、変異体クロイツフェルト・ヤコブ病（ｖＣＪＤ、ｎｖＣＪＤ）、水疱瘡（水痘）、ベネズエラウマ脳炎、ベネズエラ出血熱、Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ（コレラ）、Ｖｉｂｒｉｏ ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ腸炎、Ｖｉｂｒｉｏ ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓ感染症、ビブリオ症、ウイルス感染症、ウイルス性出血熱、ウイルス性出血熱（エボラ、ラッサ、マールブルグ）、ウイルス性出血熱（ＶＨＦ）、ウイルス性肺炎、西ナイルウイルス病、西部ウマ脳炎ウイルス疾患、白色砂毛（ｔｉｎｅａ ｂｌａｎｃａ）、疫咳、黄熱病、エルセニア（エルシニア）、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ感染症、エルシニア症、ジアスポラ（Ｚｅａｓｐｏｒａ）、ジカ熱、ジカウイルス、先天性ジカウイルス病、非先天性ジカウイルス病、ジカウイルス感染症（ジカ）、先天性ジカウイルス感染症、非先天性ジカウイルス感染症、ならびに接合真菌症が挙げられる。種々の実施形態では、開示される方法及び組成物により処置され得る感染性疾患が処置される一方で、健常細胞は温存される。
一実施形態では、本発明は、対象における少なくとも１つのγδＴ細胞を活性化する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を投与するステップを含む、当該方法である。
一実施形態では、本発明は、対象におけるγδＴ細胞の増殖を引き起こすか、または増強する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。
一実施形態では、本発明は、対象におけるγδＴ細胞の脱顆粒を引き起こすか、または増強する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。
一実施形態では、本発明は、対象におけるγδＴ細胞殺傷活性（例えば、Ｔ細胞による殺傷活性）を引き起こすか、または増強する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。一実施形態では、本発明は、健常細胞を温存しながら対象におけるγδＴ細胞殺傷活性（例えば、Ｔ細胞による殺傷活性）を引き起こすか、または増強する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。
一実施形態では、本発明は、対象におけるγδＴ細胞の細胞傷害性を引き起こすか、または増強する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。一実施形態では、本発明は、健常細胞を温存しながら対象におけるγδＴ細胞の細胞傷害性を引き起こすか、または増強する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。
一実施形態では、本発明は、対象におけるγδＴ細胞の動員を引き起こすか、または増強する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。
一実施形態では、本発明は、対象におけるγδＴ細胞の生存期間を延長させる方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。
一実施形態では、本発明は、対象におけるγδＴ細胞の疲弊に対する抵抗性を増加させる方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。
本発明の更なる態様によれば、対象における免疫応答を刺激する方法であって、免疫応答を刺激するのに有効な量で抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与することを含む、当該方法が提供される。
抗体またはその抗原結合断片の使用
本発明の更なる態様によれば、γδＴ細胞（特にＶδ１Ｔ細胞）の抗原認識、活性化、シグナル伝達、または機能を研究するための、本明細書に記載される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の使用が提供される。本明細書に記載されるように、抗体は、γδＴ細胞機能を調査するために使用され得るアッセイにおいて活性があることが示された。かかる抗体は、γδＴ細胞の増殖を誘発するのにも有用であり得、従って、γδＴ細胞（例えば、Ｖδ１Ｔ細胞）を増殖させる方法において使用され得る。
Ｖδ１鎖に結合する抗体は、γδＴ細胞を検出するために使用され得る。例えば、抗体は、検出可能な標識もしくはレポーター分子で標識されてもよく、または試料中のＶδ１Ｔ細胞を選択的に検出及び／または単離するための捕捉リガンドとして使用されてもよい。標識抗体は、当該技術分野において公知の多くの方法、例えば、免疫組織染色及びＥＬＩＳＡにおいて有用である。
検出可能な標識またはレポーター分子は、放射性同位体、例えば、３Ｈ、１４Ｃ、３２Ｐ、３５Ｓ、もしくは１２５ｌ；蛍光部分もしくは化学発光部分、例えば、フルオレセインイソチオシアネートもしくはローダミン；または酵素、例えば、アルカリホスファターゼ、β－ガラクトシダーゼ、ワサビペルオキシダーゼ、もしくはルシフェラーゼであり得る。本発明の抗体に適用された蛍光標識は、次いで、蛍光活性化セルソーティング （ＦＡＣＳ）法において使用され得る。
従って、種々の実施形態では、本発明は、インビボでγδＴ細胞を調節する方法、インビボでγδＴ細胞に結合する方法、インビボでγδＴ細胞を標的とする方法、インビボでγδＴ細胞を活性化する方法、インビボでγδＴ細胞を増殖させる方法、インビボでγδＴ細胞を増大させる方法、インビボでγδＴ細胞を検出する方法、インビボでγδＴ細胞の脱顆粒を引き起こす方法、インビボでγδＴ細胞による殺傷活性を引き起こす方法、インビボで抗体またはその抗原結合断片を選択する方法を含み、当該方法は、本明細書に記載されるように対象に抗γδ抗体またはその抗原結合断片を投与するステップを含む。
γδＴ細胞を調節するための薬物
本明細書に記載される抗ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、患者の生体内原位置で（すなわち、インビボで）δ可変１鎖（Ｖδ１）Ｔ細胞を調節するために使用され得るか、または調節するのに有用であり得る。抗体またはその抗原結合断片は、かかる目的のための薬物に含まれ得る。
Ｖδ１Ｔ細胞の調節は以下を含み得る：
－ 例えば、Ｖδ１Ｔ細胞の数を選択的に増加させることによるＶδ１Ｔ細胞の増殖、またはＶδ１Ｔ細胞の生存の促進；
－ 例えば、Ｖδ１Ｔ細胞の効力を増強すること、すなわち標的細胞の殺傷を増加させることによる、Ｖδ１Ｔ細胞の刺激；
－ 例えば、Ｖδ１Ｔ細胞の持続性を増加させることによる、Ｖδ１Ｔ細胞の疲弊の防止；
－ Ｖδ１Ｔ細胞の脱顆粒；
－ ＮＣＲ発現の増加；
－ ４－１ＢＢ発現の増加；
－ 例えば、Ｖδ１ＴＣＲ細胞表面発現の下方調節、すなわち、Ｖδ１ＴＣＲ内部移行もしくはＶδ１ＴＣＲタンパク質の発現の減少を引き起こすか、もしくはＶδ１ＴＣＲの結合を遮断することによる、Ｖδ１Ｔ細胞の免疫調節；及び／または
－ ＴＣＲ／ＣＤ３複合体の下方調節。
Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇に焦点を当てる先行技術の抗Ｖδ１抗体とは異なり、本発明の抗体は、ＴＲＤＶ１結合ドメインを介したＶδ１Ｔ細胞の活性化に有用である。本発明の抗体は、それらが結合するＴ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし得るが、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇を引き起こさず、むしろＴ細胞を刺激するため、Ｔ細胞のこのコンパートメントの活性化による恩恵を受ける治療状況において有用であり得る。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、ＴＣＲの下方調節、ＣＤ３の下方調節、活性化マーカー、例えば、ＣＤ２５及びＫｉ６７ならびに脱顆粒マーカーＣＤ１０７ａの変化から明らかである。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、次に、ＩＮＦγ及びＴＮＦαなどの炎症性サイトカインの放出を引き起こして、免疫ライセンシングを促進する。
Ｖδ１＋細胞上の免疫細胞マーカーを調節する薬物
抗体またはその抗原結合断片は、患者に投与されると、Ｖδ１＋細胞の免疫細胞マーカーを調節し得る。
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、γδＴ細胞の調節を測定することによって、その治療的使用に対する適合性が評価され得る。例えば、Ｖδ１＋Ｔ細胞またはモデル系の細胞に存在するＣＤ２５またはＣＤ６９またはＣＤ１０７ａのレベルの変化を測定することによる。かかるマーカーは、多くの場合、リンパ球調節（例えば、増殖または脱顆粒）のマーカーとして使用されており、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片の適用後に、例えば、フローサイトメトリーにより測定され得る。驚くべきことに、かかる評価において（例えば、実施例７、１７、１８を参照のこと）、本明細書に記載される抗体が、標的Ｖδ１＋Ｔ細胞における測定可能により高レベルのＣＤ２５またはＣＤ６９またはＣＤ１０７ａレベルをもたらしたことが観察された。場合により、モデル系で試験されたＶδ１＋細胞またはその集団の表現型の変化は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３、ＴＳ８．２など）が上記の同等なγδＴ細胞に適用された場合の表現型の変化と比較され得る。
従って、本発明の一態様では、治療的使用についてγδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、ならびにＶδ１＋細胞の表面上のＣＤ２５及び／またはＣＤ６９及び／またはＣＤ１０７ａのレベルに対する効果を決定することを含む、当該方法が提供される。ＣＤ２５、ＣＤ６９、及び／またはＣＤ１０７ａのレベルに対する効果は、一定期間にわたって決定／測定され得る。この効果は、同じ期間にわたって上記抗体が上記細胞に適用されない場合のＶδ１＋細胞の表面上のＣＤ２５及び／またはＣＤ６９及び／またはＣＤ１０７ａのレベルと比較して測定され得ることが理解されよう。本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に当該抗体を添加し、次いで、上記Ｖδ１＋細胞の表面上のＣＤ２５またはＣＤ６９またはＣＤ１０７ａのレベル（または発現）を測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋細胞の増殖特性または数を調節する薬物
抗体またはその抗原結合断片は、患者に投与されると、Ｖδ１＋細胞の増殖特性を調節し得る。例えば、抗体またはその抗原結合断片は、Ｖδ１＋細胞を増殖させ得る。
γδＴ増殖を測定する代替的アプローチは、Ｖδ１＋細胞を含有するモデル系に、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を適用した場合の当該細胞の相対数における経時的な変化を測定することを含み得る。驚くべきことに、かかる評価において、本明細書に記載される抗体が、上記Ｖδ１＋Ｔ細胞の数を測定可能に増加させることができたことが観察された（例えば、実施例１０、１７、及び１８を参照のこと）。場合により、この数の変化は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、抗ＯＫＴ３）が上記モデル系に適用される場合に観察される数の変化と比較され得る。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、及び集団内のＶδ１＋細胞の数に対する効果を決定することを含む、当該方法が提供される。細胞数に対する効果は、一定期間にわたって決定／測定され得る。この効果は、同じ期間にわたって上記抗体が細胞集団に適用されない場合に観察される細胞数に対する効果と比較して測定され得ることが理解されよう。本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に上記抗体を適用し、次いで、上記細胞の数を経時的に測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋細胞の増殖能力及び数を調節する薬剤
γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される理想的な治療抗体またはその抗原結合断片は、インビボでＶδ１＋細胞の増殖を増強できるものであり得る。そのため、かかる抗体は、対象または患者におけるＶδ１＋細胞数を特異的に増加させるように設計された薬物として用いられ得る。例を以下に示す。
がん：
Ｖδ１＋細胞数の相対的増加は、多数のがんについて転帰の改善に関連する正の予後指標として報告されている（例えば、Ｇｅｎｔｌｅｓ ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｎａｔｕｒｅ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２１：９３８－９４５、Ｗｕ ｅｔ ａｌ．（２０１９）Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓ．Ｍｅｄ．１１（５１３）：ｅａａｘ９３６４、Ｃａｔｅｌｌａｎｉ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｂｌｏｏｄ １０９（５）：２０７８－２０８５を参照のこと）。一実施形態では、がん患者内の生体内原位置でＶδ１＋細胞の相対数または絶対数を増加させることができる薬物が本明細書において提供される。
病原性感染／寄生虫感染／ウイルス感染：
Ｖδ１＋細胞の濃縮は、多数の後天性病原性感染／寄生虫感染／ウイルス感染に対する宿主防御において観察される。最近の総説については、Ｚｈａｏ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．２０１８：５０８１６３４を参照のこと。更に、Ｖδ１＋の数の増加は、種々のＤＮＡウイルス及びＲＮＡウイルスの感染を防ぐとも考えられている。例えば、数の増加は、同種異系移植片に関連するＣＭＶ感染においても防御的であると考えられている（ｖａｎ Ｄｏｒｐ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｂｌｏｏｄ ａｎｄ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ １７（２）：Ｓ２１７を参照のこと）。更に、Ｖδ＋細胞数は、コロナウイルス感染患者において増加する（Ｐｏｃｃｉａ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１９３（９）：１２４４－１２４９）。
別の実施形態では、病原性感染症を有する対象または患者におけるＶδ１＋細胞の相対数または絶対数を増加させることができる薬剤が本明細書において提供される。
幹細胞移植：
Ｖδ１＋細胞数の増加は、疾患再発の減少、ウイルス感染の減少、全生存率及び無症候生存率の上昇、ならびに造血幹細胞移植中の全般的に良好な臨床転帰にも関連している（例えば、Ａｒｕｄａ ｅｔ ａｌ．（２０１９）Ｂｌｏｏｄ ３（２１）：３４３６－３４４８及びＧｏｄｄｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ３９：７５１－７５７を参照のこと）。従って、別の実施形態では、幹細胞移植を補助する処置レジメンの一部として、対象におけるＶδ１＋細胞の相対数または絶対数を増加させることができる薬物が本明細書において提供される。
従って、生体内原位置でＶδ１＋細胞の数を優先的または特異的に増加させることができる薬物が非常に望ましい。
Ｖδ１＋細胞のサイトカイン分泌を維持するか、または誘発するか、または増加させる薬剤
サイトカインは、免疫系の特定の細胞によって分泌されるタンパク質、ペプチド、または糖タンパク質の大きなグループである。それらは、免疫、炎症、及び造血を媒介し、制御するシグナル伝達分子のカテゴリーである。幾つかのサイトカインは、腫瘍及び細胞の微小環境、自己免疫組織及び関連する微小環境、またはウイルスに感染した組織もしくは細胞の環境の直接的または間接的な調節を通じて、疾患の徴候及び症状を改善させることに関係付けられてきた。例示的な炎症誘発性サイトカインとしては、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）及びインターフェロンγ（ＩＦＮγ）が挙げられる。
しかしながら、かかるサイトカインの多くは、全身投与すると好ましくない毒性を示す。例えば、ＴＮＦαは、移植された腫瘍の出血性壊死を誘発することができ、他の化学療法薬と組み合わせると相乗的な抗腫瘍効果を発揮することが報告されているが、全身性組換えヒトＴＮＦα（ｒｈＴＮＦα）を用いる様々な臨床試験は、低血圧、悪寒、静脈炎、血小板減少、白血球減少及び肝毒性、発熱、疲労、悪心／嘔吐、倦怠感及び脱力感、頭痛、胸部絞扼感、腰背痛、下痢、ならびに息切れを含む重大な用量制限副作用を明らかにしている。
組換えＩＦＮγの使用にも同様の全身毒性の課題がある。例えば、がんの状況において、ＩＦＮγは、ＭＨＣクラスＩ及びＩＩの上方制御を含む好ましい多面的効果を発揮して、抗腫瘍免疫を刺激し、Ｔ細胞浸潤を増加させ、抗血管新生効果を付与し、ケモカイン／サイトカインの分泌を誘発し、直接的ながん細胞増殖抑制効果を発揮し得るが、有害な副作用も観察されている。有害な副作用としては、発熱、頭痛、寒気、疲労、下痢、悪心、嘔吐、食欲不振、肝トランスアミナーゼの一時的増加、ならびに顆粒球数及び白血球数の一時的減少が挙げられる。
全身性組換えＴＮＦα及びＩＦＮγの可能性及び制限の両方に関する最近の概説については、Ｓｈｅｎ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆ．５１（４）：ｅ１２４４１を参照のこと。
よって、かかるサイトカインの、より生体内原位置で制御された、より局所化された、より組織特異的または細胞特異的な産生が必要である。例えば、炎症誘発性サイトカインのより制御された発現または誘導が、「冷たい」腫瘍を「熱い」腫瘍に変えることができる１つのアプローチとして提唱されている。熱い腫瘍は、ＣＤ４５＋Ｔ細胞の数または密度の増加も観察されるため、場合により、「Ｔ細胞炎症性」とも称される。最近の概説については、Ｂｏｎａｖｅｎｔｕｒａ ｅｔ ａｌ．（２０１９） Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：１６８を参照のこと。
このような理由で、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される理想的な治療抗体またはその抗原結合断片は、インビボでＶδ１＋細胞におけるサイトカインの分泌を維持するか、または増強するか、または誘発することができるものであり得る。そのため、かかる抗体は、対象または患者において、より局所的で全身性ではない様式でサイトカインを特異的に増加させるか、または誘発するように設計された薬物として、かつ上記対象または患者におけるＶδ１＋細胞の分布とよりよく相関するものとして用いられ得る。
注目すべきことに、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体がＶδ１＋細胞に適用される場合、顕著に高いレベルのサイトカイン分泌が観察される。より具体的には、また非限定的な例として、顕著に高いレベルのＴＮＦα及びＩＦＮγが観察される。例えば、実施例１５を参照のこと。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、及び当該細胞集団により産生された少なくとも１種のサイトカインの量を決定することを含む、当該方法が提供される。産生されたサイトカインの量は、一定期間にわたって決定／測定されてもよく、任意により、同じ期間にわたって上記抗体が細胞集団に適用されない場合に観察される量と比較されてもよい。一実施形態では、抗体を細胞集団に投与した場合に産生されるサイトカインの観察されるレベルは、抗体を適用しない場合に産生されるサイトカインのレベルと比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約５０％超、約１００％超、約１５０％超、約２００％超、約２５０％超、約３００％超、約３５０％超、約４００％超、約４５０％超、約５００％超、約１０００％超である。本発明の更なる態様では、サイトカインは、炎症誘発性サイトカインである。本発明の更なる態様では、サイトカインは、ＴＮＦ－αサイトカインである。本発明の更なる態様では、ＩＦＮ－γサイトカインである。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に上記抗体を適用し、次いで、生成された少なくとも１種のサイトカインのレベルを測定することによる、当該方法が提供される。本発明の更なる態様では、測定されるサイトカインは、ＴＮＦ－αサイトカイン及び／またはＩＦＮ－γサイトカインである。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に上記抗体またはその抗原結合断片を適用し、産生された炎症誘発性サイトカインの量及び／または腫瘍もしくは腫瘍微小環境に存在するＣＤ４５＋Ｔ細胞の数もしくは密度を決定することによって、当該抗体がより冷たいか、または冷たい腫瘍を調節して、より熱いか、または熱い腫瘍にする効果を測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋細胞のグランザイムＢ活性を維持するか、または誘発するか、または増加させる薬剤
グランザイムＢは、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）及び細胞傷害性Ｔ細胞の顆粒に一般的に見出されるセリンプロテアーゼである。グランザイムＢは、これらの細胞によってポア形成タンパク質パーフォリンと共に分泌され、病変細胞などの標的細胞のアポトーシスを媒介する。
モデル系において標的病変細胞（例えば、がん細胞）との共培養でＶδ１＋細胞をインキュベートすると、溶解前の標的病変細胞においてグランザイムＢレベル及び活性のレベルを測定することができる。注目すべきことに、かかるモデル系で、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を、Ｖδ１＋細胞及びがん細胞のかかる共培養物に適用すると、細胞死前の疾患がん細胞においてより高いグランザイムＢレベル及び活性が観察される（例えば、実施例１６を参照のこと）。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価するための方法であって、Ｖδ１＋細胞及び病変細胞（例えば、がん細胞）を含む共培養物に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、ならびに共培養物中の病変細胞により産生されたグランザイムＢの量に対する効果を測定することを含む、当該方法が提供される。産生されたサイトカインの量は、一定期間にわたって決定／測定されてもよく、任意により、同じ期間にわたって上記抗体が上記共培養物に適用されない場合に観察される量と比較されもよい。一実施形態では、上記抗体が上記共培養物に適用される場合に測定されるグランザイムＢのレベルは、上記抗体が適用されない場合に観察されるグランザイムＢレベルと比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、約５０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、約１００％超、約２００％超である。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞及び病変細胞を含む共培養物に上記抗体を適用し、次いで、病変細胞におけるグランザイムＢの量または活性を測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋Ｔ細胞上の４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）の発現を特異的に上方調節する薬剤
ＴＮＦＲスーパーファミリーのメンバーである４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）は、誘導性Ｔ細胞共刺激分子である。わずかな例外を除き、４－１ＢＢの発現は活性化に依存する。通常、４－１ＢＢは、通常型の（αβ）休止Ｔ細胞または関連するＴ細胞株上には検出されにくい。しかしながら、４－１ＢＢは、通常型のＴ細胞が種々のアゴニスト、例えば、単独またはＡＰＣとの組み合わせのいずれかでの、プレートに結合した抗ＣＤ３、コンカナバリンＡ、フィトヘマグルチニン、インターロイキン（ＩＬ）－２、ＩＬ－４、及びＣＤ２８、ならびに酢酸ミリスチン酸ホルボール及びイオノマイシンにより活性化される場合、安定して上方調節される。しかしながら、かかる薬剤がＴ細胞を普遍的に上方調節し得ることは知られているが、抗ＣＤ３薬剤などによりしばしばもたらされる過剰刺激を回避するためのより強力でなく、より標的化されたアプローチが、尚も必要とされている。更に、「通常型」αβＴ細胞における４－１ＢＢの役割及び機能は十分に研究されているが、γδＴ細胞におけるその役割はあまり調査されていない。それにもかかわらず、少なくとも１つの報告において、Ｌｅｅら（２０１３、ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／ｅｊｉ．２０１２４２８４２）は、４－１ＢＢが通常型のヒト末梢血ヒト休止γδＴ細胞（サブタイプは完全に定義されておらず、おそらく主にＶγ９Ｖδ２である）では発現されないが、４－１ＢＢの上方調節が７日間のＩＰＰ／ＩＬ－２サイトカインの存在下で達成され得ることを実証した。更にこの著者らは、次に、得られたγδＴ細胞が養子移入マウスモデルにおいてリステリア感染症を予防するのにより効果的であることを実証した。最近では、Ｐａｒｋ及びＬｅｅ（２０２１、ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０３８／ｓ１２２７６－０２１－００５７６－０）が、少なくとも末梢血の主要細胞種についてこれらの発見に同意しており、彼らは、４－１ＢＢはＶγ９Ｖδ２Ｔ細胞を増強することが知られていると述べている（一方で、役割及びメカニズムが不明なままであることも認めている）。従って、疾患または障害を処置するために、例えば、疾患または障害の少なくとも１つの徴候または症状を改善するために、γδＴ細胞上の４－１ＢＢの発現を特異的に増強する薬剤が必要とされている。これは特に、本明細書の他箇所で論じられるように、かかる細胞が「休止している」と多くの場合みなされる組織常在性Ｖδ１＋Ｔ細胞を含む、生体内原位置でのシナリオの場合に当てはまる。従って、更なる実施形態では、Ｖδ１＋Ｔ細胞における４－１ＢＢのレベルを有意に増加させることができる高親和性ヒト抗Ｖδ１抗体のクラスが本明細書において提供される（図６４を参照のこと）。また更に他の実施形態では、組織由来Ｖδ１＋Ｔ細胞における４－１ＢＢのレベルを有意に増加させることができる高親和性ヒト抗Ｖδ１抗体のクラスが本明細書において提供される。有意な増加は、例えば、通常の一元配置分散分析及びＳｉｄａｋの事後検定によるｐ＜０．０５であり得る。
Ｖδ１＋Ｔ細胞上での自然細胞傷害性受容体（ＮＣＲ）の発現を上方調節する薬剤
本明細書の他箇所で論じられるように、望ましい薬剤は、最も所望されるＴ細胞のサブセットを特異的に標的とし、活性化するもの、具体的には、Ｖδ１＋Ｔ細胞を標的とし、活性化するものであり得る。かかるＶδ１＋Ｔ細胞が、自然細胞傷害性受容体 （ＮＣＲ）を介した会合を含む検出メカニズムを用いて、ストレスを受けたか、または調節不全にされた「自己」シグネチャ（例えば、感染細胞または癌細胞において見出されるシグネチャ）を認識し、区別する能力を考慮すると、理想的な薬剤は、Ｖδ１＋Ｔ細胞上のＮＣＲを上方調節することができるものであり得る。本明細書に示される研究（図６５を参照のこと）において、研究された全ての親和性成熟した抗Ｖδ１＋抗体は、拡張ＰＢＭＣ培養モデルにおいてＶδ１＋Ｔ細胞にＮＣＲ上方調節を付与した。
ポリクローナルＶδ１＋細胞集団を増大させる薬剤
理想的な抗体薬剤は、Ｖδ１＋細胞の増大が超可変ＣＤＲ３配列レベルでクローン的に集中しすぎないことを保証するように設計されたものでもあり得る。従って、理想的な抗体薬物は、特定のまたは「プライベートな」δ１＋ＣＤＲ３配列パラトープに結合することによってＶδ１＋細胞の増殖を誘発することを回避するように設計され得る。むしろ、抗体は、Ｖδ１＋細胞のサブセットのみで提示される配列に結合するのではなく、全てのＶδ１＋Ｔ細胞受容体に存在する保存された生殖細胞系列型配列を介して、かつガンマ鎖に依存しない様式で結合し得る。
従って、理想的な抗体薬剤は、Ｖδ１＋細胞の増大を刺激して、ＣＤＲ３配列の混合物を含む複数のＶδ１＋細胞を発生させ得る。この結果、δ可変１鎖上に異なるＣＤＲ３配列を提示するＶδ１＋細胞のインビボで増大した異種ポリクローナル集団がもたらされる。注目すべきことに、Ｖδ１＋細胞を含有する免疫細胞の出発集団に本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を添加する方法によって作製された、増大したＶδ１＋細胞集団の分析において、抽出されたＲＮＡのＣＤＲ３超可変領域を通して配列決定するように設計されたＲＮＡｓｅｑベースの方法によって、高度のポリクローナル性が観察されている（例えば、実施例１０を参照のこと）。
従って、一態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、及び増大したＶδ１＋細胞のポリクローナル性を決定することを含む、当該方法が提供される。抗体薬剤は、複数のＶδ１＋ＣＤＲ３配列を含有する増大したポリクローナル集団を発生させることが望ましい。ポリクローナル性は、当該技術分野において公知の方法を使用して、例えば、上記Ｖδ１＋細胞のＶδ１鎖超可変ＣＤＲ３の内容を分析することができる核酸シーケンシング手法により決定され得る。
ポリクローナルＶδ１＋細胞を長時間増大させる薬剤
理想的な抗体薬剤は、一次Ｖδ１＋細胞をインビボで疲弊させることなく、かかる細胞の増殖を増強するか、または促進するか、または刺激することができてもよい。例えば、比較として、ＯＫＴ３などの抗ＣＤ３薬剤（例えば、ムロノマブ）は、ＣＤ３陽性Ｔ細胞を増大させることができる一方で、疲弊させ得るか、またはアネルギーを誘発し得る。本明細書に記載される、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体が生存Ｖδ１＋細胞の持続的な細胞分裂を引き起こす能力を評価するために、より長期の増殖研究を行った。注目すべきことに、これらの研究により、本明細書に記載される、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体が、生存しており、かつ依然として機能的に細胞傷害性であるＶδ１＋細胞の細胞分裂／増殖を４０日以上引き起こすことができることが明らかになった（例えば、実施例１０を参照のこと）。
一実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、当該抗体またはその抗原結合断片を細胞集団に適用すること、及びＶδ１＋細胞の分裂が起こる時間の長さをモニタリングすることを含む、当該方法が提供される。理想的には、抗体は、５～６０日間、例えば、少なくとも７～４５日間、７～２１日間、または７～１８日間にわたってＶδ１＋細胞の分裂を刺激することができる。
更なる実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合し、患者に投与される場合にＶδ１＋細胞の分裂を刺激して、その数を少なくとも２倍の数、少なくとも５倍の数、少なくとも１０倍の数、少なくとも２５倍の数、少なくとも５０倍の数、少なくとも６０倍の数、少なくとも７０倍の数、少なくとも８０倍の数、少なくとも９０倍の数、少なくとも１００倍の数、少なくとも２００倍の数、少なくとも３００倍の数、少なくとも４００倍の数、少なくとも５００倍の数、６００倍の数、または少なくとも１，０００倍の数に増加させることができる、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片が提供される。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞、またはＶδ１＋細胞を含有する混合細胞集団に上記抗体を適用し、次いで、Ｖδ１＋細胞数を経時的に測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋免疫細胞の標的とすることによって非Ｖδ１＋免疫細胞を調節する薬剤
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、他の免疫細胞のＶδ１＋細胞による調節を測定することによっても評価され得る。例えば、ヒト組織αβ細胞及びγδＴ細胞を含むものなどの免疫細胞の混合集団を含むモデル系に、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を適用した後に、非γδＴ細胞「画分」で観察される変化が測定され得る。更に、上記モデルにおける非γδ細胞型に対する効果は、フローサイトメトリーによって測定され得る。例えば、γδＴ細胞及び非γδＴ細胞を含む混合培養物に、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を添加した際の、ＣＤ８＋αβＴ細胞の数の相対変化を測定することによる。任意により、非γδＴ細胞ＣＤ８＋リンパ球集団の数または表現型において観察される変化は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記混合集団に適用される場合の数の変化と比較され得る。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞及びＶδ１陰性免疫細胞を含む免疫細胞または組織の混合集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、及び当該Ｖδ１陰性免疫細胞に対する効果を測定することを含む、当該方法が提供される。この効果は、一定期間にわたって決定／測定されてもよく、任意により、同じ期間にわたって上記抗体が適用されない場合にＶδ１陰性細胞において観察される効果と比較されてもよい。この効果は、Ｖδ１陰性免疫細胞の数の変化として測定され得る。例えば、抗体は、Ｖδ１陰性免疫細胞の数を、上記抗体が適用されない場合に観察されるレベルと比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、約５０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、約１００％超、約５００％超増加させ得る。
本発明の更なる態様では、調節されるＶδ１陰性細胞は、ＣＤ４５＋細胞である。本発明の更なる態様では、調節される細胞は、αβＴ細胞である。本発明の更なる態様では、調節されるαβ＋細胞は、ＣＤ８＋リンパ球である。本発明の更なる態様では、調節されるαβＴ細胞またはその集団は、細胞分裂の増強の証拠を示す。本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞及びＶδ１陰性免疫細胞を含む免疫細胞の混合集団に上記抗体を投与し、次いで、上記抗体またはその抗原結合断片により調節されたＶδ１＋細胞によりＶδ１陰性細胞集団に付与された効果を測定することによる、当該方法が提供される。
任意により、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片によりもたらされる「Ｖδ１＋細胞による免疫系調節」において、Ｖδ１＋細胞数の付随する増加も観察される。そして、この理論に拘束されるものではないが、Ｖδ１＋細胞数の上記増加は、αβＴ細胞などの共存するＶδ１陰性免疫細胞の付随する増殖を引き起こす原因となり得る可能性がある。代替の仮説は、Ｖδ１＋Ｔ細胞からの抗体誘導性サイトカイン分泌がＶδ１陰性免疫細胞の増殖を刺激するというものであり得る。
本発明の更なる態様では、αβ＋ＣＤ８＋リンパ球集団の観察される増加は、ＯＫＴ３抗体または代替的な抗Ｖδ１抗体などの比較抗体と比較される。本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋Ｔ細胞及びαβＴ細胞を含む免疫細胞の混合集団に上記抗体を適用し、次いで、ＣＤ８＋αβ＋Ｔ細胞リンパ球の数を経時的に測定することによる、当該方法が提供される。
腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を調節する薬剤
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、モデル系において腫瘍浸潤集団（ＴＩＬ）に付与される効果を測定することによっても評価され得る。驚くべきことに（例えば、実施例１８を参照のこと）、かかる評価において、本明細書に記載される抗体は、ヒト腫瘍におけるＴＩＬ集団を測定可能に調節した。例えば、γδ＋リンパ球ＴＩＬ集団または非γδリンパ球ＴＩＬ集団の数または表現型のいずれかにおける変化が、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片をヒト腎細胞癌などのヒト腫瘍に適用した後に測定される。任意により、γδ＋リンパ球ＴＩＬ集団または非γδリンパ球ＴＩＬ集団のいずれかの数または表現型において観察される変化は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記モデル系に適用される場合に観察される変化と比較され得る。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、ヒト腫瘍に存在するか、またはヒト腫瘍に由来するＴＩＬに当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、及びＴＩＬの数に対する効果を決定することを含む、当該方法が提供される。この効果は、一定期間にわたって決定／測定されてもよく、任意により、同じ期間にわたって上記抗体が適用されない場合に観察されるＴＩＬ数と比較されてもよい。この効果は、ＴＩＬの数の増加であり得る。例えば、抗体は、ＴＩＬの数を、上記抗体が適用されない場合に観察されるＴＩＬの数と比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、約５０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、約１００％超増加させ得る。更なる態様では、数が観察されるＴＩＬは、γδ＋リンパ球ＴＩＬ細胞及び／または非γδリンパ球ＴＩＬ細胞である。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲ細胞抗体のＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、ヒト腫瘍に存在するか、またはヒト腫瘍に由来するＴＩＬまたは複数のＴＩＬに上記抗体を適用し、次いで、ＴＩＬまたは複数のＴＩＬ細胞の数の変化を一定期間にわたって測定することによる、当該方法が提供される。
ヒトＶδ１＋細胞の細胞傷害性を調節する薬剤
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、Ｖδ１＋細胞による細胞傷害性に対してもたらされる効果を測定することによっても評価され得る。驚くべきことに、本明細書に記載される抗体のかかる評価において（例えば、実施例１９及び２７を参照のこと）、測定可能に増強されたＶδ１＋細胞による細胞傷害性が観察された。例えば、Ｖδ１＋細胞及び上記がん細胞を含む混合培養物を含むモデル系に抗体またはその抗原結合断片を適用した後に、がん細胞の数の低減、または殺傷されたがん細胞の数の増加が観察される。任意により、がん細胞の数の低減または殺傷されたがん細胞の数の増加は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記モデル系に適用される場合の転帰と比較され得る。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞及びがん細胞を含む混合細胞集団に抗体またはその抗原結合断片を適用すること、及びがん細胞に対するＶδ１＋細胞の細胞傷害性を測定することを含む、当該方法が提供される。細胞傷害性は、一定期間にわたる死んだがん細胞の数の増加によって測定されてもよく、任意により、同じ期間にわたって上記抗体が混合細胞集団に適用されない場合に観察される死んだがん細胞の数と比較されてもよい。例えば、上記抗体が適用される場合に観察される死細胞の増加は、上記抗体が適用されない場合に観察される死細胞の数と比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、約５０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、約１００％超、約２００％超、約５００％超であり得る。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲ細胞のＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、ヒトＶδ１＋細胞及びがん細胞を含む免疫細胞の上記混合集団に上記抗体を添加し、次いで、死んだがん細胞の増加を経時的に測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋細胞標的対エフェクター細胞比（Ｔ：Ｅ比）を調節する薬剤
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、薬剤候補として当該抗体を評価するためのモデル系で標的細胞の５０％（ＥＣ５０）が殺傷される標的細胞対エフェクター細胞比を決定することにより、当該抗体がどのくらいＶδ１＋細胞によるがん細胞傷害性を増強するかを測定することによっても評価され得る。例えば、標的がん細胞をヒトＶδ１＋エフェクター細胞と共に含む混合培養物。驚くべきことに、かかる評価において（例えば、実施例１９を参照のこと）、本明細書に記載される抗体は、モデル系におけるＥＣ５０ Ｔ：Ｅ比を有利に改変する。かかる改変は、設定した期間でがん細胞の５０％の殺傷を観察するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数として測定され得る。これはまた、上記がん細胞に対する細胞傷害性の変化または改善倍率または向上パーセントとしても報告され得る。任意により、本発明の抗体によりもたらされるＴ：Ｅ比は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記モデル系に適用される場合のＴ：Ｅ比と比較され得る。幾つかの場合では、本発明の多重特異性抗体は、単一特異性抗体と比較してより低いＥ：Ｔ比であってもがん細胞傷害性を改善する機会を提供する。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、ヒトＶδ１＋細胞及びがん細胞を含む混合細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を適用すること、ならびにがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数を測定することを含む、当該方法が提供される。これは、任意により同じ期間にわたって、上記抗体が適用されることなくがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数と比較して測定され得る。例えば、上記抗体が適用される場合にがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数の低減は、上記抗体が適用されない場合にがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数と比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、約５０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、約１００％超、約２００％超、約５００％超であり得る。
本発明の更なる態様では、Ｖδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞に加えてがん細胞を含む上記細胞集団に上記抗体を添加し、次いで、がん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数を測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋細胞のＥＣ５０細胞傷害性を増強する薬剤
ヒトＶδ１＋細胞またはその集団において観察される細胞傷害性の増強を測定する代替的方法は、条件Ａ（例えば、出発対照）において設定した期間にわたってがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされる細胞の数を測定し、これを条件Ｂ（例えば、本明細書に記載される本発明の抗体の適用時）において設定した期間にわたってがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされる細胞の数と比較することである。
かかるパラメータを測定するための種々の方法が存在することは理解されているが、理解を助けるために、以下の非限定的な仮定例について概説する。
仮定上、エフェクター細胞傷害性の増強は以下の通りに測定され得る。条件Ａ（対照処置）では、設定した時間（例えば、５時間）にわたってがん細胞の５０％を殺傷するのに１０００個のＶδ１＋細胞が必要とされることが観察される。条件Ｂ（例えば、本明細書に記載される本発明の抗体の適用）では、同じ時間にわたってがん細胞の５０％を殺傷するのに５００個のＶδ１＋細胞が必要とされたことが観察される。従って、この例では、抗体の適用によってＶδ１＋細胞集団の細胞傷害性が２００％増強された。
（１０００／５００）×１００＝２００％
例えば（例えば、実施例１９～２１を参照のこと）、驚くべきことに、本明細書に記載される本発明の抗体について、かかるパーセンテージの増強が観察された。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞及びがん細胞を含む免疫細胞の上記混合集団に上記抗体を添加し、上記細胞混合物に上記抗体を適用しない同等の実験または対照実験に対する細胞傷害性の相対的変化またはパーセント変化を決定することによる、当該方法が提供される。
健常細胞を温存しながらＶδ１＋細胞の病変細胞特異性を増強する薬剤
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を評価するための別のアプローチは、当該抗体がどのくらい病変細胞特異的な細胞傷害性を調節するかを測定することである。驚くべきことに、かかる研究において、かかる抗体が、健常細胞または非病変細胞を温存しながら、がん細胞などの病変細胞のＶδ１＋細胞特異的殺傷を特異的に増強し得ることが発見された（例えば、実施例１９及び２７を参照のこと）。がんの症状を改善するために患者に投与される理想的な抗体薬剤は、健常細胞を温存しながら、病変細胞に対して特異的に増強された細胞傷害性を付与する。そして、がん細胞などの病変細胞に対して特異的にエフェクター細胞傷害性を増強する薬剤は、上記病変細胞に対して特異的にエフェクター細胞傷害性を選択的に増強しない薬剤よりも高い治療指数（ＴＩ）を示すと言われ得る。治療指数は、治療可能比とも称され、薬物の相対的安全性の定量的測定値である。これは、治療効果を引き起こす治療薬の量と、例えば、関連するか、または関連性のある健常細胞集団の望ましくない死滅をもたらすことによって毒性を引き起こす量との比較である。本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、モデル系において健常細胞以上に病変細胞を選択的に殺傷するＶδ１＋細胞の能力を変化させるか、または増強するか、または倍増させる能力を測定することによって評価され得る。例えば、上記モデル系は、Ｖδ１＋エフェクター細胞、がん細胞、及び対照細胞（例えば、健常細胞）を含み得る。任意により、本発明の抗体によりもたらされる選択的な病変細胞の殺傷における向上倍率は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記モデル系に適用される場合に観察される向上倍率と比較され得る。
Ｖδ１＋細胞の病変細胞特異性及び病変細胞特異性の増強は、Ｖδ１＋細胞、病変細胞、及び健常細胞を含む培養物において測定され得る。例えば、病変細胞に対するＶδ１＋特異性は、Ｖδ１＋細胞により殺傷されるがん細胞の数を観察し、次いで、Ｖδ１＋細胞により殺傷される健常細胞の数を比較することによって測定され得る。かかる比較は、Ｖδ１＋細胞も含むモデル系に同数の病変細胞及び健常細胞を含めること、例えば、「三種培養」によって管理され得る。例えば、分析または機器の制限により、３つ以上の細胞種（Ｖδ１＋細胞、病変細胞、及び非病変細胞を含む）の全てを単一のアッセイで並行して区別し、追跡する能力が低減される場合には、代替的な比較方法も検討され得る。上記の例では、１つの実験において病変細胞に対するＶδ１＋細胞傷害性を比較し、次いで、別個の同等な実験において健常細胞に対するＶδ１＋細胞の細胞傷害性を比較することにより、かかる研究の代替アプローチが提供される。
本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞及び標的細胞を含む細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、ならびに当該標的細胞に対する細胞の細胞傷害性の特異性を測定することを含む、当該方法が提供される。一実施形態では、第１の標的細胞種に対する細胞傷害性の特異性は、第２の標的細胞種に対して観察される細胞傷害性と比較されてもよく、従って、この方法は、異なる標的細胞種を使用して繰り返されてもよい。本発明の更なる態様では、第１の標的細胞種は病変細胞であり、第２の標的細胞種は、健常細胞または第１の標的細胞種とは異なる疾患を有する細胞などの対照細胞である。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較するための方法であって、（ｉ）第１の細胞種及び（ｉｉ）第２の細胞種に対するＶδ１＋細胞の細胞傷害性に対して上記抗体により付与される効果が測定及び比較される、当該方法が提供される。本発明の更なる態様では、これにより、第２の細胞種に対するものよりも第１の細胞種に対する特異的な細胞傷害性を増強する抗体が選択される。本発明の更なる態様では、第１の細胞種は病変細胞であり、第２の細胞種は健常細胞である。
本明細書に記載されるように、アッセイに使用される抗体またはその抗原結合断片は、表面に、例えば、Ｆｃ受容体を含む細胞などの細胞の表面に提示され得る。例えば、抗体またはその抗原結合断片は、ＴＩＢ－２０２（商標）細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手可能）などのＴＨＰ－１細胞の表面に提示され得る。あるいは、抗体またはその抗原結合断片は、アッセイにおいて直接使用され得る。
このような機能アッセイでは、「ＥＣ５０」または「５０パーセント有効濃度」とも称される５０％濃度を算出することによって結果が評価され得る。用語「ＩＣ５０」は阻害濃度を指す。ＥＣ５０及びＩＣ５０の両方が、フローサイトメトリー法などの当該技術分野において公知の方法を使用して測定され得る。場合によっては、ＥＣ５０及びＩＣ５０は、同じ値であるか、または同等とみなされ得る。例えば、ある特定の細胞種の５０％を阻害する（例えば、殺傷する）のに必要とされるエフェクター細胞の有効濃度（ＥＣ）は、５０％阻害濃度（ＩＣ）ともみなされ得る。誤解を避けるために言及すると、抗体に言及する場合、本出願におけるＥＣ５０値は、ＩｇＧ１フォーマットの抗体を使用して掲示される。かかる値は、抗体フォーマットの分子量に基づいて、以下の通りに相当値に容易に変換され得る。
（μｇ／ｍｌ）／（ｋＤａ単位のＭＷ）＝μＭ
本明細書に記載される親クローンの抗体（または断片）結合時のγδＴＣＲ下方調節のＥＣ５０は、０．５０μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．４０μｇ／ｍｌ未満、０．３０μｇ／ｍｌ未満、０．２０μｇ／ｍｌ未満、０．１５μｇ／ｍｌ未満、０．１０μｇ／ｍｌ未満、０．０６μｇ／ｍｌ未満、または０．０５μｇ／ｍｌ未満であり得る。好ましい実施形態では、抗体（または断片）結合時のγδＴＣＲ下方調節のＥＣ５０は、０．１０μｇ／ｍｌ未満である。特に、抗体（または断片）結合時のγδＴＣＲ下方調節のＥＣ５０は、０．０６μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．０５μｇ／ｍｌ未満、０．０４μｇ／ｍｌ未満、または０．０３μｇ／ｍｌ未満であり得る。特に、上記ＥＣ５０値は、抗体がＩｇＧ１フォーマットで測定される場合のものである。例えば、γδＴＣＲ下方調節のＥＣ５０値は、（例えば、実施例６及び２７のアッセイに記載されるように）フローサイトメトリーを使用して測定され得る。
抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞脱顆粒のＥＣ５０は、０．０５０μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．０４０μｇ／ｍｌ未満、０．０３０μｇ／ｍｌ未満、０．０２０μｇ／ｍｌ未満、０．０１５μｇ／ｍｌ未満、０．０１０μｇ／ｍｌ未満、または０．００８μｇ／ｍｌ未満であり得る。特に、抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞脱顆粒のＥＣ５０は、０．００５μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．００２μｇ／ｍｌ未満であり得る。好ましい実施形態では、抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞脱顆粒のＥＣ５０は、０．００７μｇ／ｍｌ未満である。特に、上記ＥＣ５０値は、抗体がＩｇＧ１フォーマットで測定される場合のものである。例えば、γδＴ細胞脱顆粒のＥＣ５０値は、（例えば、実施例７のアッセイに記載されるように）フローサイトメトリーを使用してＣＤ１０７ａ発現（すなわち細胞脱顆粒のマーカー）を検出することにより測定され得る。一実施形態では、ＣＤ１０７ａ発現は、抗ヒトＣＤ１０７ａ ＢＶ４２１（クローンＨ４Ａ３）（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）などの抗ＣＤ１０７ａ抗体を使用して測定される。
抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞による殺傷のＥＣ５０は、０．５０μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．４０μｇ／ｍｌ未満、０．３０μｇ／ｍｌ未満、０．２０μｇ／ｍｌ未満、０．１５μｇ／ｍｌ未満、０．１０μｇ／ｍｌ未満、または０．０７μｇ／ｍｌ未満であり得る。好ましい実施形態では、抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞による殺傷のＥＣ５０は、０．１０μｇ／ｍｌ未満である。特に、抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞による殺傷のＥＣ５０は、０．０６０μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．０５５μｇ／ｍｌ未満、特に０．０２０μｇ／ｍｌ未満であり得る。特に、上記ＥＣ５０値は、抗体がＩｇＧ１フォーマットで測定される場合のものである。例えば、γδＴ細胞による殺傷のＥＣ５０値は、（例えば、実施例８のアッセイに記載されるように）抗体、γδＴ細胞、及び標的細胞のインキュベーション後にフローサイトメトリーを使用して、死細胞の割合を（すなわち細胞生死判定用色素を使用して）検出することにより測定され得る。一実施形態では、標的細胞の死滅は、細胞生死判定用色素であるＶｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ（商標） ５２０（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を使用して測定される。
これらの態様で説明されるアッセイにおいて、抗体またはその抗原結合断片は、ＴＨＰ－１細胞、例えば、ＴＩＢ－２０２（商標）（ＡＴＣＣ）などの細胞の表面に提示され得る。任意により、ＴＨＰ－１細胞は、ＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ（商標） Ｏｒａｎｇｅ ＣＭＴＭＲ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）などの色素で標識される。
Ｖδ１ＴＣＲに関連するＣＤ３分子を下方調節する薬剤
Ｔ細胞／ＣＤ３複合体に異なる様式で会合する抗体が本明細書において提供される。具体的には、これらの抗体は、Ｖδ１＋細胞上でのみ発現されるＶδ１ＴＣＲのＴＲＤＶ１ドメインを介して会合することができる。そうすることで、かかる薬剤は異なる様式で機能する。その結果、この会合事象により、ＴＣＲに会合したＣＤ３分子複合体が下方調節され得る。かかるＣＤ３の下方調節は、Ｔ細胞の活性化と同義であり得る。しかしながら、このようにＴＲＤＶ１ドメインを介してＴ細胞／ＣＤ３複合体と会合することにより、Ｖδ１ＴＣＲと会合したＣＤＲ３分子のみが下方調節される。このメカニズムは図５５に明示されている。
よって、一実施形態では、抗体により細胞表面上のＴＲＤＶ１を有するＶδ１ＴＣＲ及び会合したＣＤ３分子複合体を下方調節する方法、ならびにこの目的のためのかかる抗体の使用が提供される。
幾つかの実施形態では、ＴＲＤＶ１ドメインを介してＴ細胞／ＣＤ３複合体と会合することができる多重特異性ＴＣＥも本明細書において提供される。現在の多重特異性ＴＣＥフォーマットの薬剤は、通常、ＣＤ３結合事象を介してＴ細胞に会合し、それを活性化する。これは、Ｔ細胞の表面からのＣＤ３分子複合体の下方調節をもたらし得る。しかしながら、ＴＣＥがこのような会合及び下方調節を介してＴ細胞を過剰に刺激する可能性もあることも十分に理解されている。ＣＤ３分子複合体は、１つのクラスのＴ細胞に特異的ではないため、正確に狙える標的ではない。ＣＤ３を介して全てのＴ細胞（主にαβサブタイプ）を刺激すると、結果としてサイトカインの過剰産生をもたらし、急性のサイトカインフレア（いわゆるサイトカインストーム）を引き起こし得る。更に、ＣＤ３を介して全てのＴ細胞に会合し、それを活性化する非標的化アプローチでは、逆説的にＴ細胞が過剰に活性化される可能性があり、これは慢性的なＴ細胞の疲弊及び／またはＴ細胞死につながる。実際、本明細書において提供されるアプローチがエフェクター集団と特異的に相互作用するのに対し、この非特異的な汎Ｔ細胞活性化は、エフェクターＴ細胞及び制御性Ｔ細胞の両方の活性化を引き起こす。従って、この「強力な」アプローチは、選択的なＴ細胞のみを上方調節することが望まれ得る場合には決して理想的とは言えない。
対照的に、本明細書において、Ｔ細胞／ＣＤ３複合体と異なる様式で会合する多重特異性抗体、特にＴ細胞エンゲージャーが提供される。具体的には、これらのＴＣＥは、Ｖδ１＋細胞上でのみ発現されるＶδ１ＴＣＲのＴＲＤＶ１ドメインを介して会合することができる。そうすることで、かかるＴＣＥベースの薬剤は異なる様式で機能する。まず、これらのＴＣＥは、ＴＲＤＶ－１エピトープとの会合を介してＴＣＲを下方調節することができる。その結果、この会合事象により、ＴＣＲに会合したＣＤ３分子複合体が下方調節される。かかるＣＤ３の下方調節は、Ｔ細胞の活性化と同義であり得る。しかしながら、このようにＴＲＤＶ１ドメインを介してＴ細胞／ＣＤ３複合体と会合することにより、Ｖδ１ＴＣＲと会合したＣＤＲ３分子のみが下方調節される。Ｖδ１細胞を特異的に標的とし、活性化するこのアプローチにより、上記の問題（例えば、サイトカインストーム、Ｔ細胞の疲弊／枯渇、及びＡＤＣＣ）の多くを回避することが可能となる。繰り返しになるが、このメカニズムは図５５に明示されている。
「強力な」ＣＤ３アプローチによるＴ細胞の刺激は、ＡＤＣＣなどのＦｃγ受容体により引き起こされるメカニズムを介したＴ細胞の枯渇にも寄与し得る。従って、現在の医療現場で用いられているＣＤ３を標的とする二重特異性抗体の大多数は、ＦｃγＲに対する結合活性が低減されたＦｃドメインを有するか、または意図的にＦｃ領域を含まない二重特異性断片である。ＣＤ３標的化療法では、Ｔ細胞受容体複合体結合アームの結合親和性が低減されている場合もある。
この親和性の低減により、ＴＣＥの設計及び機能性に関して有効性の低下及び選択可能性の低下がもたらされ得る。例えば、かかるＴＣＥにおける結合ドメインの親和性は、インビボでの分布プロファイルの決定要因となることが知られている。具体的には、ＴＣＥの分布は、その親和性が最も高い標的に偏ることが通常観察される。従って、Ｔ細胞複合体に対するＴＣＥ結合ドメインの親和性を低減することにより、かかるＴＣＥの有効性を引き起こすためにまさに必要とされる細胞であるＴ細胞から離れた分布に偏ることが一般的である。ＴＣＥの治療域が「極めて狭い」と言われているのは、部分的にはかかる理由のためである。
本明細書において提供されるアプローチは、ｖδ１細胞を特異的に標的とし、それを活性化し、これにより、Ｆｃ機能を除去するか、または親和性を低減する必要性が回避される。
更に、本明細書において提供されるアプローチでは、抗体はｖδ１細胞のＴＣＲに会合するが、腫瘍細胞も存在しない限り完全な活性化は起こらない。本明細書において提供される抗体がＴＣＲに完全に会合すると部分的な下方調節が引き起こされ、本明細書において提供される抗体が結合したｖδ１細胞は、腫瘍微小環境でのみ完全に活性化され、細胞傷害性になる。これは、本発明のアプローチの別の重要な安全上の利点となる。なぜなら、オフターゲット細胞傷害性が低減され、ｖδ１細胞を活性化させる本発明の抗体の効力の全てが腫瘍細胞の存在下でのみ誘発されるからである。
γδＴ細胞が腫瘍細胞のストレスシグナルを検出することができるメカニズムの１つは、それらが発現するＮＣＲ（自然細胞傷害性受容体）に起因すると考えられている。ＮＣＲは、腫瘍細胞上のＮＣＲリガンドに会合することができる。従って、ＴＣＲ刺激を介してγδＴ細胞が活性化され、ＮＣＲが腫瘍細胞を検出して、完全な活性化及び細胞傷害性を有効にする活性化の二重メカニズムが用いられる。
これは、ＣＤ３を介したαβＴ細胞の刺激とは対照的であり、αβＴ細胞の刺激は、全ての刺激がＴＣＲを介する。従って、かかる細胞は、ＮＣＲを介して抗原提示に依存せずに腫瘍細胞を検出することができないため、健常細胞または形質転換細胞の区別がほぼ不可能である。従って、ＣＤ３抗体がＦｃ有効型である場合、それらは他の免疫細胞を誘引し、このことがサイトカインストーム、免疫細胞の疲弊及び更には過剰活性化などの予測不可能かつの望ましくない事象のカスケードを引き起こし得、これにより、例えば、Ｔ細胞を殺傷するＮＫ細胞などがもたらされる。本発明のアプローチでは、本明細書において提供される抗体によるγδＴ細胞の刺激は、γδＴ細胞（及びＮＫ細胞などの他の免疫細胞の両方）が、例えば、ＮＣＲによる検出メカニズムにより、健常細胞と腫瘍細胞とを区別することができ、従って、この病変細胞特異性のためにがん細胞またはウイルス感染細胞などのストレスを受けた細胞を選択的に殺傷することができるため、かかる問題を引き起こさない。
例えば、ヒト及びカニクイザルｖδ１抗原の両方（例えば、それぞれ配列番号２７２及び配列番号３０８）に対する特異性を有する、本明細書において提供される抗ｖδ１ Ｆｃ有効型多重特異性抗体を用いた最初のカニクイザル研究では、用量漸増反復投与インビボ研究において、測定された全てのパラメータにより、安全かつ忍容性良好であることが発見された。サイトカインの放出または体重減少などのＴ細胞活性化に通常関連する副作用は観察されなかった。
これらの所見は、本明細書に記載されるアプローチの別の利点も強調している。具体的には、ＣＤ３エンゲージャーなどに代表されるＴＣＥとは異なり、本発明のＴＣＥ二重特異性薬は、任意により、例えば、ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３フォーマットの重鎖をＶＬ－ＣＬフォーマットの同族軽鎖と共に含む、全長抗体として設計され得る。より小さい二重特異性フォーマット（例えば、７０ＫＤａ未満）とは異なり、かかる全長二重特異性フォーマットは、インビボでより長い半減期を示すことができ、これにより、より低頻度な投与レジメンが必要とされる。かかるフォーマットにより観察される半減期がより長いのは、サイズの増加（７０ＫＤａ超）を含む種々の理由によるものであり、サイズの増加は、かかるフォーマットが腎臓により濾過されないことを意味する（糸球体の孔径のカットオフ値は６０～７０ＫＤａ）。一実施形態では、多重特異性抗体は、約７０ＫＤａより大きくてもよく、ＩＭＧＴに収載されているヒトＩＧＨＣ配列（例えば、ＩＧＨＡ、ＩＧＨＤ、ＩＧＨＤ、ＩＧＨＭ、ＩＧＨＧ配列）を含み得る。かかるＩｇＧ１フォーマットは、ＦｃＲｎメカニズムにより再利用もされ得る。特にＴＣＥ二重特異性薬でのこのような全長抗体フォーマットの明らかな欠点は、かかるフォーマットが、クリアランス率の低下、曝露の増加、及びより慢性的な曝露に起因する好ましくない安全性プロファイルを示すことである。
従って、本発明のアプローチは、ＮＫ細胞によるγδＴ細胞の殺傷またはその逆などのオフターゲット効果の懸念のないＦｃ機能の実現性を可能にする。従って、本発明のアプローチは、腫瘍環境外での副次的損傷を抑えるためにＣＤ３親和性の低減、Ｆｃ機能の除去などの対策が必要であるという制約をもつＣＤ３指向性アプローチよりも優れている。本明細書で提供される多重特異性抗体、特にＴ細胞エンゲージャーは、損傷の可能性なしにｖδ１細胞に結合することができ、完全な活性化及び細胞傷害性の増強は、ｖδ１細胞が腫瘍細胞と密接に接触している場合にのみ起こる。
従って、一実施形態では、ＴＣＥ多重特異性抗体により細胞表面上のＴＲＤＶ１を有するＶδ１ＴＣＲ及び会合したＣＤ３分子複合体を下方調節する方法、ならびにこの目的のためのかかる多重特異性抗体の使用が提供される。
本発明の他の特徴及び利点は、本明細書において提供される説明から明らかとなるであろう。しかしながら、この説明及び特定の例は、本発明の好ましい実施形態を示してはいるが、当業者には様々な変更及び修正が明らかになるので、例示のためにのみ与えられていることが理解されよう。次に、本発明を、以下の非限定的な実施例を用いて説明する。
実施例１．材料及び方法
ヒト抗体の発見
ヒトファージディスプレイを用いて、本明細書に記載されるヒト抗ヒト可変Ｖδ１＋ドメイン抗体を生成した。ライブラリは、Ｓｃｈｏｆｉｅｌｄ ｅｔ ａｌ（Ｇｅｎｏｍｅ ｂｉｏｌｏｇｙ ２００７，８（１１）：Ｒ２５４）に記載されているように構築され、約４００億個のヒトクローンの一本鎖断片可変（ｓｃＦｖ）提示ライブラリを含んでいた。このライブラリを、本明細書に記載される抗原、方法、選択、選択解除、スクリーニング、及び特性評価のストラテジーを使用してスクリーニングした。
抗原の調製
以下の実施例で使用されるＴＣＲα及びＴＣＲβ定常領域を含む可溶性γδＴＣＲヘテロ二量体の設計は、Ｘｕ ｅｔ ａｌ．（２０１１）ＰＮＡＳ １０８：２４１４－２４１９に従って生成された。ＶγドメインまたはＶδドメインは、膜貫通ドメインを欠くＴＣＲαまたはＴＣＲβ定常領域にインフレームで融合され、ロイシンジッパー配列またはＦｃ配列、及びヒスチジンタグ／リンカーが続いた。
発現構築物を哺乳動物ＥＸＰＩ ＨＥＫ２９３浮遊細胞に一過性にトランスフェクトした（ヘテロ二量体の単一トランスフェクションまたは同時トランスフェクションとして）。分泌された組換えタンパク質は、親和性クロマトグラフィーによって培養上清から回収及び精製された。モノマー抗原の良好な回収を確実にするために、試料は分取サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を使用して更に精製された。精製された抗原の純度をＳＤＳ－ＰＡＧＥによって分析し、凝集状態を分析ＳＥＣによって分析した。
抗原の機能検証
デルタ可変１（Ｖδ１）鎖を含有する抗体の特異性を、ＤＥＬＦＩＡイムノアッセイ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）、及びＲＥＡ１７３－Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ抗Ｖδ１抗体を使用したγδＴ細胞と競合するフローベースのアッセイで確認した。
解離増強ランタニド蛍光イムノアッセイ（ＤＥＬＦＩＡ）
抗原の特異性を確認するために、プレートに直接コーティングした抗原（５０μＬのＰＢＳ中３μｇ／ｍＬの抗原、４℃で一晩（Ｎｕｎｃ＃４３７１１１）及び３００ｎＭから始まる一次抗体の系列希釈を用いてＤＥＬＦＩＡイムノアッセイを行った。検出のために、ＤＥＬＦＩＡ Ｅｕ－Ｎ１抗ヒトＩｇＧ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＃１２４４－３３０）を、５０μＬの３％ＭＰＢＳ（ＰＢＳ＋３％（ｗ／Ｖ）脱脂粉乳）中１／５００の希釈度で二次抗体として使用した。展開には５０μＬのＤＥＬＦＩＡ増強溶液（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＃４００１－００１０）を用いた。
ＤＥＬＦＩＡイムノアッセイを使用して目的の抗体の親和性のランク付けを行った。ＤＥＬＦＩＡイムノアッセイでは、プレート上にコーティングしたＧタンパク質により抗体を捕捉し、可溶性ビオチン化Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）抗原を５０μＬ（３ＭＰＢＳ）中５ｎＭで加えた。検出には５０μＬのストレプトアビジン－Ｅｕ（アッセイバッファー中１：５００、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を使用し、ＤＥＬＦＩＡ増強溶液でシグナルを発生させた。Ｄ１．３ ｈＩｇＧ１（Ｅｎｇｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６２：２１２９－２１３６に記載されている）を陰性対照として使用した。
ファージディスプレイ選択アウトプットをｓｃＦｖ発現ベクターｐＳＡＮＧ１０（Ｍａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．（２００６）ＢＭＣ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６：４６）にサブクローン化した。可溶性ｓｃＦｖを発現させ、直接固定化した標的に対するＤＥＬＦＩＡでの結合についてスクリーニングした。ヒットは、３０００蛍光単位を超えるＤＥＬＦＩＡシグナルとして定義した。
抗体の調製
選択したｓｃＦｖを、市販のプラスミドを使用してＩｇＧ１フレームワークにサブクローン化した。ｅｘｐｉ２９３Ｆ浮遊細胞に前記プラスミドをトランスフェクトして抗体を発現させた。便宜上、別段の記載がない限り、これらの実施例で特性評価した抗体は、ｓｃＦｖとしてファージディスプレイから選択されたＩｇＧ１フォーマットの抗体を指す。しかしながら、本発明の抗体は、前述のように任意の抗体フォーマットであり得る。
抗体精製
ＩｇＧ抗体は、プロテインＡクロマトグラフィーを使用して上清からバッチ精製した。次いで、濃縮されたプロテインＡ溶出液を、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を使用して精製した。精製されたＩｇＧの質を、ＥＬＩＳＡ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及びＳＥＣ－ＨＰＬＣを使用して分析した。
γδＴ細胞の調製
濃縮されたγδＴ細胞の集団を、ＷＯ２０１６／１９８４８０（すなわち血液由来γδＴ細胞）またはＷＯ２０２０／０９５０５９（すなわち皮膚由来γδＴ細胞）に記載の方法に従って調製した。簡潔に述べると、血液由来γδＴ細胞については、ＰＢＭＣを血液から取得し、αβＴ細胞の磁気枯渇に供した。次いで、αβが枯渇したＰＢＭＣを、ＣＴＳ ＯｐＴｍｉｓｅｒ培地（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）中、ＯＫＴ－３（またはそれぞれの抗Ｖδ１抗体）、ＩＬ－４、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２１及びＩＬ－１βの存在下で、７日間培養した。培養７日目に、培地にＯＫＴ－３（またはそれぞれの抗Ｖδ１抗体）、ＩＬ－２１及びＩＬ－１５を補い、更に４日間おいた。培養１１日目に、培地にＯＫＴ－３（またはそれぞれの抗Ｖδ１抗体）及びＩＬ－１５を補い、更に３日間おいた。培養１４日目に、培地の半分を新鮮なＣｏｍｐｌｅｔｅ ＯｐＴｍｉｚｅｒと交換し、ＯＫＴ－３（またはそれぞれの抗Ｖδ１抗体）、ＩＬ－１５及びＩＦＮ－γを補った。培養１７日目以降、培養物にＯＫＴ－３（またはそれぞれの抗Ｖδ１抗体）及びＩＬ－１５を３～４日毎に補い、培地の半分を７日毎に新鮮な培地と交換した。
皮膚由来γδＴ細胞については、皮下脂肪を除去して皮膚試料を調製し、３ｍｍ生検パンチを使用して複数のパンチを作製する。パンチをカーボンマトリックスグリッド上に置き、Ｇ－ＲＥＸ６（Ｗｉｌｓｏｎ Ｗｏｌｆ）のウェルに入れる。各ウェルは、ＡＩＭ－Ｖ培地（Ｇｉｂｃｏ、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ＣＴＳ Ｉｍｍｕｎｅ Ｓｅｒｕｍ Ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ＩＬ－２及びＩＬ－１５を含有する完全単離培地で満たす。培養の最初の７日間は、アンホテリシンＢ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を含有する完全単離培地を使用した（「＋ＡＭＰ」）。プレートまたはバイオリアクターの底部にある細胞を乱さないようにしながら、上方の培地を穏やかに吸引し、２Ｘ完全単離培地（ＡＭＰなし）と交換することにより、培地を７日毎に交換した。培養下で３週間を超えてから、得られた放出細胞を、新しい組織培養容器ならびに組換えＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－１５及びＩＬ－２１を加えた新鮮な培地（例えばＡＩＭ－Ｖ培地またはＴｅｘＭＡＸ培地（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ））で継代培養した後に採取する。場合により、培養物中に同じく存在するαβＴ細胞を、Ｍｉｌｔｅｎｙｉによって提供されているものなどのαβＴ細胞枯渇キット及び関連するプロトコルを用いて除去する。さらなる参照については、国際公開第２０２０／０９５０５９号パンフレットを参照されたい。
γδＴ細胞結合アッセイ
一定濃度の精製抗体を２５００００個のγδＴ細胞と共にインキュベートすることにより、γδＴ細胞への抗体の結合を試験した。このインキュベーションは、Ｆｃ受容体を介した抗体の非特異的結合を防止する遮断条件下で行った。検出は、ヒトＩｇＧ１に対する二次蛍光色素コンジュゲート抗体の添加によって行った。陰性対照については、ａ）アイソタイプ抗体のみ（組換えヒトＩｇＧ）、ｂ）蛍光色素コンジュゲート抗ヒトＩｇＧ抗体のみ、ならびにｃ）ａ）及びｂ）の組み合わせを用いて細胞を調製した。完全に染色されていない細胞の対照ウェルも調製し、分析した。陽性対照として、精製されたマウスモノクローナルＩｇＧ２抗ヒトＣＤ３抗体と、精製されたマウスモノクローナルＩｇＧ１抗ヒトＴＣＲ Ｖδ１抗体とを２つの異なる濃度で使用し、蛍光色素コンジュゲートヤギ抗マウス二次抗体で染色した。より低い濃度の陽性対照のＦＩＴＣチャネルにおける平均蛍光強度が、最も高い陰性対照の少なくとも１０倍高ければ、アッセイを合格とした。
ＳＰＲ分析
アミン大容量チップを備えたＭＡＳＳ－２機器（両方ともＳｉｅｒｒａ Ｓｅｎｓｏｒｓ、Ｇｅｒｍａｎｙ製）を使用してＳＰＲ分析を行った。Ｇタンパク質により、１５ｎＭのＩｇＧをアミン大容量チップ（ＴＳ８．２で１００ｎＭ）に捕捉した。Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）抗原を、２０００ｎＭ～１５．６２５ｎＭの１：２希釈系列で、会合１８０秒、解離６００秒、流速３０μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０２％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。実験はすべて室温にてＭＡＳＳ－２機器で行った。定常状態のフィッティングは、ソフトウェアＳｉｅｒｒａ Ａｎａｌｙｚｅｒ ３．２を使用したＬａｎｇｍｕｉｒ １：１結合に従って決定した。
コンパレータ抗体
本発明の抗体を、記載される試験アッセイにおいて市販の抗体と比較した。
Figure 2024506682000014
γδＴＣＲ下方制御及び脱顆粒アッセイ
試験抗体の負荷ありまたはなしのＴＨＰ－１（ＴＩＢ－２０２（商標）、ＡＴＣＣ）標的細胞を、ＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ（商標）Ｏｒａｎｇｅ ＣＭＴＭＲ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、Ｃ２９２７）で標識し、ＣＤ１０７ａ抗体（抗ヒトＣＤ１０７ａ ＢＶ４２１（クローンＨ４Ａ３）ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ ５６２６２３）の存在下でγδＴ細胞と２：１の比でインキュベートした。２時間のインキュベーション後、フローサイトメトリーを使用して、γδＴ細胞におけるγδＴＣＲの表面発現（ＴＣＲ下方制御を測定するため）及びＣＤ１０７ａの発現（脱顆粒を測定するため）を評価した。
傷害アッセイ（例えば図６）
γδＴ細胞の細胞障害活性及びγδＴ細胞の傷害活性に対する試験抗体の効果を、フローサイトメトリーによって評価した。γδＴ細胞とＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ（商標）Ｏｒａｎｇｅ ＣＭＴＭＲ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、Ｃ２９２７）で標識したＴＨＰ－１細胞（抗体の負荷ありまたはなし）とを２０：１の比で４時間ｉｎ ｖｉｔｒｏ共培養した後、Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ（商標）５２０（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、５２０ ６５－０８６７－１４）で染色して標的ＴＨＰ－１細胞の生死を区別した。試料の取得中に、ＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ（商標）Ｏｒａｎｇｅ ＣＭＴＭＲ陽性で標的細胞をゲーティングし、Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅの取り込みに基づいて細胞死を検査した。ＣＭＴＭＲ及びｅＦｌｕｏｒ（商標）５２０二重陽性細胞は、死んだ標的細胞として認識された。γδＴ細胞の傷害活性を、死んだ標的細胞の割合として提示した。
エピトープマッピング
エピトープマッピングに使用したすべてのタンパク質試料（抗原Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）ならびに抗体１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７、１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４、１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８、１２５１＿Ｐ０２＿Ｃ０５及び１１４１＿Ｐ０１＿Ｅ０１）を、タンパク質の完全性及び凝集レベルについて、高質量ＭＡＬＤＩを使用して分析した。
Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）／１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７、Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）／１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４、Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）／１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８、Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）／１２５１＿Ｐ０２＿Ｃ０５、及びＬ１（ＤＶ１－ＧＶ４）／１１４１＿Ｐ０１＿Ｅ０１複合体のエピトープを高分解能で決定するために、タンパク質複合体を重水素化架橋剤とインキュベートし、トリプシン、キモトリプシン、Ａｓｐ－Ｎ、エラスターゼ及びサーモリシンを使用した多酵素タンパク分解に供した。架橋ペプチドを濃縮した後、試料を高分解能質量分析（ｎＬＣ－ＬＴＱ－Ｏｒｂｉｔｒａｐ ＭＳ）で分析し、生成されたデータをＸＱｕｅｓｔ及びＳｔａｖｒｏｘソフトウェアを使用して分析した。
ＳＹＴＯＸフロー傷害アッセイ
ＳＹＴＯＸアッセイは、フローサイトメトリーを使用して標的細胞のＴ細胞媒介性細胞溶解の数量化を可能にする。原形質膜が損なわれた細胞にのみ浸透し、健康細胞のインタクトな細胞膜は通過できない死細胞染色剤（ＳＹＴＯＸ（登録商標）ＡＡＤｖａｎｃｅｄ（商標）、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｓ１０２７４）により、死んだ／瀕死の細胞が検出される。ＮＡＬＭ－６標的細胞は、ＣＴＶ色素（Ｃｅｌｌ Ｔｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ（商標）、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃ３４５５７）で標識したため、未標識のエフェクターＴ細胞から区別可能であった。死んだ／瀕死の標的細胞は、死細胞色素及び細胞トレース色素の二重染色によって識別される。
示されているエフェクター対標的比（Ｅ：Ｔ、１：１または１０：１）でエフェクター及びＣＴＶ標識標的細胞を１６時間ｉｎ ｖｉｔｒｏ共培養した後、細胞をＳＹＴＯＸ（登録商標）ＡＡＤｖａｎｃｅｄ（商標）で染色し、ＦＡＣＳＬｙｒｉｃ（商標）（ＢＤ）で取得した。傷害結果は、エフェクター細胞を加えていない対照ウェル中の生きている標的細胞（最大数）に対する、試験試料中の生きている標的細胞の数（試料数）を考慮することにより計算される標的細胞低減率（％）として提示される：
標的低減％＝１００－（（試料数／最大数）×１００）
実施例２．抗原の設計
ガンマデルタ（γδ）Ｔ細胞は、ＣＤＲ３ポリクローナル性を備えたポリクローナルである。生成された抗体がＣＤＲ３配列に対して選択される状況を回避するために（ＣＤＲ３配列はＴＣＲクローンごとに異なるため）、抗原設計には異なるフォーマットで一貫したＣＤＲ３を維持することが含まれていた。この設計は、生殖細胞系にコードされ、したがってすべてのクローンで同じである可変ドメイン内の配列を認識する抗体を生成し、γδＴ細胞のより広いサブセットを認識する抗体を提供することを目的とした。
抗原調製プロセスの別の重要な態様は、タンパク質としての発現に適した抗原を設計することであった。γδＴＣＲは、鎖間及び鎖内にジスルフィド結合を備えたヘテロ二量体を含有する複雑なタンパク質である。ロイシンジッパー（ＬＺ）形式及びＦｃ形式を使用して、ファージディスプレイの選択で使用する可溶性ＴＣＲ抗原を作製した。ＬＺ型及びＦｃ型はどちらも良好に発現し、ＴＣＲ（特にヘテロ二量体ＴＣＲ、例えばＶδ１Ｖγ４）を正常に表示した。
γδＴＣＲの公開データベースエントリからのＣＤＲ３配列は、タンパク質として良好に発現することが見出された（ＲＣＳＢタンパク質データバンクエントリ：３ＯＭＺ）。したがって、これを抗原調製のために選択した。
デルタ可変１鎖を含有する抗原を、ＬＺフォーマットでヘテロ二量体として（すなわち、異なるガンマ可変鎖との組み合わせ－「Ｌ１」、「Ｌ２」、「Ｌ３」）、また、Ｆｃフォーマットでヘテロ二量体として（「Ｆ１」、「Ｆ２」、「Ｆ３」）、またはホモ二量体として（すなわち、別のデルタ可変１鎖との組み合わせ－「Ｆｃ１／１」）のいずれかで発現させた。抗原のデルタ可変１鎖はすべて、３ＯＭＺ ＣＤＲ３を含有していた。同様のフォーマットを使用して、異なるデルタ可変鎖（デルタ可変２及びデルタ可変３など）を含有する別の一連のγδＴＣＲ抗原を設計し、非特異的またはオフターゲットの結合を示す抗体（「Ｌ４」、「Ｆ９」、「Ｆｃ４／４」、「Ｆｃ８／８」）を選択解除するために使用した。また、これらの抗原は、ＣＤＲ３領域内で結合する抗体も選択解除されることを確実にするために３ＯＭＺ ＣＤＲ３を含むように設計した。
設計された抗原が抗ＴＲＤＶ１（ＴＣＲデルタ可変１）抗体を生成するのに好適であることを確認するために、抗原の機能検証を行った。δ１ドメインを含有する抗原でのみ検出が見られた（図１）。
実施例３．ファージディスプレイ
ヒトｓｃＦｖのライブラリに対し、ラウンド１及び２でいずれかのヘテロ二量体ＬＺ ＴＣＲフォーマットを使用してファージディスプレイ選択を行い、両ラウンドでヘテロ二量体ＬＺ ＴＣＲを選択解除した。または、過程１は、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃを選択解除したホモ二量体Ｆｃ融合ＴＣＲを使用して実行され、続いてヘテロ二量体ＬＺ ＴＣＲを選択解除したヘテロ二量体ＬＺ ＴＣＲで過程２が実行された（表７を参照）。
選択は、１００ｎＭのビオチン化タンパク質を使用して溶液相で行った。選択解除は、１μＭの非ビオチン化タンパク質を使用して行った。
ファージディスプレイ選択の成功をポリクローナルファージＥＬＩＳＡ（ＤＥＬＦＩＡ）によって分析した。すべてのＤＶ１選択アウトプットが、標的Ｆｃ１／１、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｆ１及びＦ３に対する所望の結合を示した。非標的Ｌ４、Ｆ９、Ｆｃ４／４、Ｆｃ８／８及びＦｃに対しては様々な程度の結合が検出された（図２Ａ及びＢを参照のこと）。
実施例４．抗体の選択
実施例３で得られたヒットをシーケンシングした（当技術分野において公知の標準的方法を使用した）。ＶＨ及びＶＬ ＣＤＲ３のユニークな組み合わせを示した、１３０のユニークなクローンが同定された。これら１３０のユニークなクローンのうち、１２５はユニークなＶＨ ＣＤＲ３を示し、１０９はユニークなＶＬ ＣＤＲ３を示した。
ユニークなクローンを再整列させ、特異性をＥＬＩＳＡ（ＤＥＬＦＩＡ）によって分析した。ＴＲＤＶ１（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３）とは結合するがＴＲＤＶ２（Ｌ４）とは結合しない９４のユニークなヒトｓｃＦｖバインダーのパネルが、選択から同定された。
先に進めるクローンの選択を助けるために、選択されたバインダーの親和性のランク付けを含めた。多数のバインダーがナノモル範囲の親和性を示し、２５～１００ｎＭのビオチン化抗原と反応した。少数のバインダーは５ｎＭの抗原との強い反応を示し、１桁のナノモル親和性の可能性を示した。いくつかのバインダーは１００ｎＭの抗原との反応を示さず、マイクロモル範囲の親和性を示した。
ＩｇＧ変換に進むクローンを選択するために、できるだけ多くの生殖細胞系列及びできるだけ多くの異なるＣＤＲ３を含めることが目的であった。さらに、グリコシル化、インテグリン結合部位、ＣＤ１１ｃ／ＣＤ１８結合部位、不対システイン等の配列責任が回避された。更に、種々の親和性を含めた。
選択されたクローンを、天然の細胞表面発現γδＴＣＲへの結合について、異なるドナーから取得された皮膚由来γδＴ細胞を使用してスクリーニングした。ＩｇＧに変換するために選択されたクローンを表８に示す。
実施例５：抗体ＳＰＲ分析
調製したＩｇＧ抗体をγδ細胞結合アッセイにかけ、更なる機能的及び生物物理学的な特性評価のために５つを選択した。ＳＰＲ分析を行って、平衡解離定数（ＫＤ）を決定した。試験した抗体と分析物との相互作用のセンサグラムを、定常状態のフィット（利用可能な場合）と共に図３に提示する。８０ＲＵのＩｇＧがチップ上に捕捉されたＴＳ８．２については結合が検出されなかった。結果を表９にまとめる。
実施例６：ＴＣＲ会合アッセイ
本発明者らは、選択された抗体の機能的特性評価のために使用される幾つかのアッセイを設計した。第１のアッセイでは、抗体結合時のγδＴＣＲの下方制御を測定することにより、γδＴＣＲの会合を評価した。選択された抗体を、陽性対照として使用した市販の抗ＣＤ３抗体及び抗Ｖδ１抗体に対して、または陽性対照としての（１１３９＿Ｐ０１＿Ｅ０４、１２４５＿Ｐ０２＿Ｆ０７、１２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０６及び１２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０９のための）１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８に対して試験した。市販の抗汎γδは、可変鎖に関係なくすべてのγδＴ細胞を認識する汎γδ抗体であり、したがって異なる作用機序を有する可能性が高いため、これを陰性対照として使用した。
このアッセイは、３つの異なるドナー試料（純度９４％、８０％及び５７％の試料）から取得された皮膚由来γδＴ細胞を使用して行った。結果を図４に示す。ＥＣ５０値は以下の表１０にまとめる。
実施例７：Ｔ細胞脱顆粒アッセイ
第２のアッセイではγδＴ細胞の脱顆粒を評価した。γδＴ細胞は、アポトーシスのパーフォリン－グランザイム媒介性活性化によって標的細胞の傷害を媒介し得ると考えられている。γδＴ細胞の細胞質内の溶解性顆粒は、Ｔ細胞が活性化すると標的細胞に向かって放出され得る。したがって、ＣＤ１０７ａに対する抗体による標的細胞の標識、及びフローサイトメトリーによる発現の測定を使用することで、脱顆粒しているγδＴ細胞を同定することができる。
実施例６に関しては、選択された抗体を、陽性対照としての市販の抗ＣＤ３抗体及び抗Ｖδ１抗体に対して、または陽性対照としての（１１３９＿Ｐ０１＿Ｅ０４、１２４５＿Ｐ０２＿Ｆ０７、１２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０６及び１２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０９のための）１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８に対して試験した。ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ１、及びＤ１．３抗体を陰性対照として使用した。このアッセイは、３つの異なるドナー試料（純度９４％、８０％及び５７％の試料）から取得された皮膚由来γδＴ細胞を使用して行った。結果を図５に示す。ＥＣ５０値は以下の表１０にまとめる。
実施例８：傷害アッセイ
第３のアッセイでは、選択された抗体で活性化されたγδＴ細胞が標的細胞を傷害する能力を評価した。
実施例６に関しては、選択された抗体を、陽性対照としての市販の抗ＣＤ３抗体及び抗Ｖδ１抗体に対して、または陽性対照としての（１１３９＿Ｐ０１＿Ｅ０４、１２４５＿Ｐ０２＿Ｆ０７、１２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０６及び１２４５＿Ｐ０１＿Ｇ０９のための）１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８及び陰性対照としての抗汎γδに対して試験した。ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ１、及びＤ１．３抗体もアイソタイプ対照として使用した。このアッセイは、２名のドナーから取得した皮膚由来γδＴ細胞（純度９４％及び８０％）を使用して行った。結果を図６に示す。
実施例６～８で試験した３つの機能アッセイの結果を表５にまとめる。
実施例９：エピトープマッピング
抗原／抗体複合体のエピトープを高分解能で決定するために、タンパク質複合体を重水素化架橋剤とインキュベートし、多酵素切断に供した。架橋ペプチドを濃縮した後、試料を高分解能質量分析（ｎＬＣ－ＬＴＱ－Ｏｒｂｉｔｒａｐ ＭＳ）で分析し、生成されたデータをＸＱｕｅｓｔ（バージョン２．０）及びＳｔａｖｒｏｘ（バージョン３．６）ソフトウェアを使用して分析した。
重水素化されたｄ０ｄ１２と共にタンパク質複合体Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）／１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７をトリプシン、キモトリプシン、Ａｓｐ－Ｎ、エラスターゼ及びサーモリシンでタンパク分解した後、ｎＬＣ－ｏｒｂｉｔｒａｐ ＭＳ／ＭＳ分析により、Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）と抗体１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７との間に１３個の架橋ペプチドが検出された。
重水素化されたｄ０ｄ１２と共にタンパク質複合体Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）／１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８をトリプシン、キモトリプシン、Ａｓｐ－Ｎ、エラスターゼ及びサーモリシンでタンパク分解した後、ｎＬＣ－ｏｒｂｉｔｒａｐ ＭＳ／ＭＳ分析により、Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）と抗体１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８との間に５個の架橋ペプチドが検出された。
重水素化されたｄ０ｄ１２と共にタンパク質複合体Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）／１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４をトリプシン、キモトリプシン、Ａｓｐ－Ｎ、エラスターゼ及びサーモリシンでタンパク分解した後、ｎＬＣ－ｏｒｂｉｔｒａｐ ＭＳ／ＭＳ分析により、Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）と抗体１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４との間に２０個の架橋ペプチドが検出された。
重水素化されたｄ０ｄ１２と共にタンパク質複合体Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）／１２５１＿Ｐ０２＿Ｃ０５をトリプシン、キモトリプシン、Ａｓｐ－Ｎ、エラスターゼ及びサーモリシンでタンパク分解した後、ｎＬＣ－ｏｒｂｉｔｒａｐ ＭＳ／ＭＳ分析により、Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）と抗体１２５１＿Ｐ０２＿Ｃ０５との間に５個の架橋ペプチドが検出された。
別の抗体、クローンＩＤ １１４１＿Ｐ０１＿Ｅ０１でもエピトープ結合を試験した。重水素化されたｄ０ｄ１２と共にタンパク質複合体Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）／１１４１＿Ｐ０１＿Ｅ０１をトリプシン、キモトリプシン、Ａｓｐ－Ｎ、エラスターゼ及びサーモリシンでタンパク分解した後、ｎＬＣ－ｏｒｂｉｔｒａｐ ＭＳ／ＭＳ分析により、Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）と抗体１１４１＿Ｐ０１＿Ｅ０１との間に２０個の架橋ペプチドが検出された。
エピトープマッピング結果の概要を表１１に提示する。
実施例１０：Ｖδ１ Ｔ細胞の増殖
単離されたγδＴ細胞の増殖について、選択された抗体及びコンパレータ抗体の存在下で調査した。コンパレータ抗体は、陽性対照としてのＯＫＴ３抗ＣＤ３抗体、陰性対照としての無抗体、またはアイソタイプ対照としてのＩｇＧ１抗体から選択した。市販の抗Ｖδ１抗体であるＴＳ－１及びＴＳ８．２も比較のために試験した。
実験１：
最初の調査は、実施例１の血液由来γδＴ細胞に関する「γδＴ細胞の調製」に記載されているようにＣｏｍｐｌｅｔｅ Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒ及びサイトカインと共に７０，０００細胞／ウェルを播種することによって実施した。選択された抗体及びコンパレータ抗体を４．２ｎｇ／ｍｌ～４２０ｎｇ／ｍｌの範囲の様々な濃度で試験した。この実験は、プラスチックへの抗体の結合／固定化を可能にする組織培養プレートを使用して実施した。
７日目、１４日目、及び１８日目に細胞を採取し、細胞計数器（ＮＣ２５０、ＣｈｅｍｏＭｅｔｅｃ）を使用して総細胞数を決定した。結果を図７に示す。各採取時にＶδ１ Ｔ細胞の細胞生存率も測定したところ、すべての抗体が実験全体を通して細胞生存率を維持したことが示された（データは示していない）。１８日目には、Ｖδ１ Ｔ細胞のパーセンテージ、細胞数、及び変化倍率も分析した。結果を図８に示す。
図７から分かるように、抗体を含む培養物中で産生された細胞の総数は培養中絶えず増加し、市販の抗Ｖδ１抗体に匹敵するかそれよりも良好であった。１８日目に、１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４（「Ｇ０４」）、１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７（「Ｅ０７」）、１２４５＿Ｐ０１＿Ｂ０７（「Ｂ０７」）及び１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８（「Ｃ０８」）の各抗体の存在下でのＶδ１陽性細胞の割合は、試験したほとんどの濃度において、ＯＫＴ３、ＴＳ－１またはＴＳ８．２の対照抗体が存在した培養物中よりも大きかった（図８Ａ参照）。
実験２：
実施例１の「γδＴ細胞の調製」に記載したようなサイトカインを含む培養容器中の単離細胞に対して、後続の実験を行った。実験１と比較して、表面が抗体の結合／固定化を促進しない異なる培養容器を使用した。選択された抗体及びコンパレータ抗体を、４２ｐｇ／ｍｌ～４２ｎｇ／ｍｌの範囲の様々な濃度で試験した。実験２では、三連で実行した実験から結果を得た。
７日目、１１日目、１４日目及び１７日目に細胞を採取し、前出の細胞計数器を使用して総細胞数を決定した。結果を図９に示す。１７日目には、Ｖδ１ Ｔ細胞のパーセンテージ、細胞数、及び変化倍率も分析した。結果を図１０に示す。
実験２では、非Ｖδ１細胞を含む細胞組成も測定した。１７日目の細胞を採取し、Ｖδ１、Ｖδ２及びαβＴＣＲの表面発現についてフローサイトメトリーで分析した。各培養における各細胞型の割合を図１１にグラフで示し、パーセンテージ値を表１２に提示する。
これらの結果から分かるように、Ｖδ１陽性細胞の割合は、ＯＫＴ３、ＴＳ－１またはＴＳ８．２の対照と比較すると、Ｂ０７、Ｃ０８、Ｅ０７及びＧ０４が存在する培養物中でより大きい。したがって、試験された抗体は、培養物中に低濃度で存在する場合でも、市販の抗体よりも効率的にＶδ１陽性細胞を産生し増大させる。
実験２の１７日目の細胞を、ＣＤ３－ＣＤ５６＋を含む追加の細胞マーカーについても分析して、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞及びＣＤ２７を発現する（すなわちＣＤ２７＋）Ｖδ１ Ｔ細胞の存在を同定した。結果を表１３にまとめる。
実施例１１：Ｖδ１ Ｔ細胞の機能性
選択された抗体の存在下で増大したＶδ１ Ｔ細胞は、ＣＤＲ３領域のポリクローナルレパートリーを保持し、ＳＹＴＯＸフロー傷害アッセイを使用して機能性についても試験した。結果は、１０：１のエフェクター対標的（Ｅ：Ｔ）比の細胞を使用した実験１の１４日目に得られた細胞（図１２Ａ）、ならびに１：１及び１０：１のＥ：Ｔ比の細胞を使用した実験２の１７日目（凍結解凍後）に得られた細胞（図１２Ｂ）について提示している。
図１２から分かるように、すべての抗体の存在下で増大したＶδ１陽性細胞が標的細胞を効果的に溶解し、細胞を凍結し解凍した後でもそれらが機能的であることが示された。
実施例１２：貯蔵後の細胞の機能性
凍結した後に解凍する貯蔵ステップ後の細胞の機能性についても調査した。実験２の１７日目に細胞の一部を培養物から取り出し、凍結した。次いで、細胞を解凍し、ＩＬ－１５を含む培養物中で更に増大させた。図１３は、凍結前にＢ０７、Ｃ０８、Ｅ０７、Ｇ０４またはＯＫＴ－３抗体と接触させた培養物についての凍結解凍後に細胞を７日間培養した後の総細胞数を示す。すべての培養物が貯蔵後に増殖する能力を示した。培養は４２日目まで継続し、この期間中、総細胞数をモニタリングした（結果を図１４に示す）。総細胞数は、選択された抗体に以前に曝露された培養物中では維持されたか、または増加した。
実施例１３：改変された抗Ｖδ１抗体の結合同等性試験
ＥＬＩＳＡベースの抗原滴定結合研究を行って、ＨＥＫで製造された１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４抗体を、ＣＨＯで製造されたその配列変異体及びグリコシル化変異体と比較した。具体的には、フレームワーク、アロタイプ、ヒンジ媒介性エフェクター機能性、Ａｓｎ ２９７グリコシル化、及び／または製造方法に改変を行い、次いでこの研究に含めた。アッセイＥＬＩＳＡのセットアップは次のとおりであった：抗原は抗原Ｌ１（ＴＲＤＶ１／ＴＲＧＶ４）を含んでいた；ブロッキングバッファーは２％Ｍａｒｖｅｌ／ＰＢＳ；ｍＡｂは５μｇ／ｍｌから始まる１／２希釈系列で希釈；ＥＬＩＳＡプレートでの抗原－抗体のインキュベーションは１時間；非特異的結合を除去するための洗浄は３×ＰＢＳ－Ｔｗｅｅｎ、次いで３×ＰＢＳ；用いた二次抗体は１／５００希釈のＤＥＬＦＩＡ Ｅｕ標識抗ヒトＩｇＧ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ；カタログ番号：１２４４－３３０；５０μｇ／ｍｌ）；その後１時間インキュベーションしてからＤＥＬＦＩＡ増強溶液を添加（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、説明どおりに使用）；時間分解蛍光測定法（ＴＲＦ）により測定。ＣＨＯで作られた抗体については、重鎖及び軽鎖カセットを含有する標準的な発現ベクターをアニオン交換クロマトグラフィーに基づく内毒素の低い条件下で調製した。ＤＮＡ濃度は、２６０ｎｍの波長で吸収を測定することによって決定した。配列はサンガーシーケンシングで検証した（ｃＤＮＡのサイズに応じてプラスミド毎に最大２つのシーケンシング反応を用いた）。懸濁に適合させたＣＨＯ Ｋ１細胞（元々ＡＴＣＣからのものを懸濁培養での無血清増殖に適合させた）を製造に用いた。シード細胞は、既知組成で動物成分を含まない無血清培地で増殖させた。次いで細胞にベクター及びトランスフェクション試薬をトランスフェクトし、細胞を更に増殖させた。上清を遠心分離及びその後の濾過（０．２μｍフィルタ）によって採取し、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ（商標）ＳｕＲｅ（商標）を使用して抗体を精製した後に製剤した。例示的な脱フコシル化抗体を生成するために、ｖｏｎ Ｈｏｒｓｔｅｎ ＨＨ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ ２０（１２）：１６０７－１８に最初に記載されたプロトコルを、発現及び精製の前に上述のＣＨＯ発現プラットフォームに導入した。製造及び精製の後、ｍＡｂの脱フコシル化をＭＳベースの分析によって確認した。
この試験の結果を図１５にまとめる。図中、ｙ軸はＥＬＩＳＡシグナルを示し、ｘ軸は用いられたＶδ１抗原濃度（ｕｇ／ｍｌ）を示す。この滴定研究に含まれた抗体は概説されており、更に詳述すると、ＲＳＶは抗ＲＳＶ対照ｍＡｂ対照である（ＣＨＯで作製）。Ｇ０４は１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４である（ＨＥＫで作製）。ＡＤ３＝バリアントＧ０４（ＣＨＯで作製）。ＡＤ４＝ヒンジ改変ＡＤ３（ＣＨＯで作製）。ＡＤ３ｇｌｙは、工学操作されたＣＨＯで作製された脱フコシル化ＡＤ３である。すべての滴定において、すべてのバリアントで同等の抗原結合が観察された。
実施例１４：ヒト生殖系Ｖδ１抗原及びその多型変異体に対する抗Ｖδ１抗体結合同等性研究。
ＥＬＩＳＡベースの結合研究比較を行って、ＩＭＧＴデータベースによるヒト生殖系Ｖδ１抗原（配列番号２７２を参照）への抗Ｖδ１抗体の結合を、多型ヒト生殖系Ｖδ１抗原（配列番号３０６）への結合と対比して調べた。具体的には、抗原Ｌ１（カノニカルなＴＲＤＶ１／ＴＲＧＶ４生殖系配列を含有する）及びＬ１ＡＶ（前記ＴＲＤＶ１生殖系多型を含む変異体ＴＲＤＶ１／ＴＲＧＶ４）との抗体結合及び交差反応性の比較を行った。結果を図１６に提示する。示されている抗体は次のとおりである：Ｇ０４＝１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４；Ｇ０４ ＬＡＧＡ＝ヒンジＦｃ改変を有するＧ０４（Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ ＥＵ番号付け）。Ｅ０７ ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを有する１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７。Ｃ０８ ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを有する１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８、Ｄ１．３＝対照。前記抗原に対する各抗体の系列希釈を行ったところ、すべての希釈度で、各抗体変異体について、両抗原に対する同等の結合が観察された。示されているのは、前記系列の１つの希釈例（１ｎＭ抗体）で観察された同等の結合である。
実施例１５：抗Ｖδ１抗体の結合は、Ｖδ１＋細胞のサイトカイン分泌の増加を付与した
手短に述べると、すべての抗体を１０μｇ／ｍｌに希釈し、一晩インキュベートして抗体をプレートに結合させた後、洗浄した。２つの異なる皮膚のドネーションから、本明細書の他の箇所に概説されるように（実施例１；特に、皮膚由来γδＴ細胞の調製に関するセクションを参照のこと）、皮膚由来γδＴ細胞を調製した。次いで、これらの皮膚細胞を、示されている結合抗体を含む組織培養プレートに加えた（ウェル当たり細胞１００，０００個）。次いで、細胞を１日放置してから上清を採取し、－８０℃で貯蔵した。上清のサイトカイン分析には、ＭＳＤ Ｕ－ＰＬＥＸ Ｈｕｍａｎ Ａｓｓａｙ：Ｋ１５１ＴＴＫ－１、Ｋ１５１ＵＣＫ－１を用いた（Ｍｅｓｏｓｃａｌｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｍａｒｙｌａｎｄ）。この試験で用いた抗体には、ＩｇＧ１（非Ｖδ１結合対照）、Ｂ０７（１２４５＿Ｐ０１＿Ｂ０７）、Ｅ０７（１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７）、Ｇ０４（１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４；１２４５）、及びＣ０８（１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８）が含まれていた。この試験の結果は図１７に提示する。具体的には、図１７（Ａ）及び（Ｂ）はそれぞれ、皮膚由来γδＴ細胞の上清で検出されたＴＮＦ－アルファ及びＩＦＮ－ガンマの量、ならびに示されている抗Ｖδ１抗体を適用したときに観察されたより高いレベルを概説している。
実施例１６：抗Ｖδ１抗体は、Ｖδ１＋細胞のグランザイムＢレベル／活性の増加を付与した
本明細書の他の箇所に概説されるように（実施例１；皮膚由来γδＴ細胞の調製に関するセクションを参照のこと）、皮膚由来γδＴ細胞を調製した。まずＴＨＰ－１細胞に、ＧｒａｎＴｏｘｉＬｕｘプローブ（細胞透過性の蛍光発生基質は、標的細胞におけるグランザイムＢ活性を検出するように設計されている）を製造元の説明書（ＯｎｃｏＩｍｍｕｎｉｎ，Ｉｎｃ．Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＵＳ）に従ってロードした。次いで、ＴＨＰ－１細胞を図１８に示される抗体１０μｇ／ｍｌでパルスしてから、１：２０の標的／エフェクター比で皮膚由来γδＴと混合した。次いで、共培養物を手短に遠心分離して、迅速なコンジュゲート形成を確実にし、その後、１時間の共培養を行い、ＧｒａｎＴｏｘｉＬｕｘプロトコルに従って後続のフロー分析を行った。この試験で用いた抗体には、ＩｇＧ１（非Ｖδ１結合対照）、Ｂ０７（１２４５＿Ｐ０１＿Ｂ０７）、Ｅ０７（１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７）、Ｇ０４（１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４；１２４５）、及びＣ０８（１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８）が含まれていた。結果は図１８に提示されており、示されている抗Ｖδ１抗体をこのＶδ１＋／ＴＨＰ－１共培養モデル系に適用したときに観察された標的がん細胞中のグランザイムＢのより高いレベルを明らかにしている。
実施例１７：抗Ｖδ１抗体は、ヒト組織における免疫細胞の調節及び増殖を付与した。
ヒト皮膚パンチ生検（５名の異なるドナー由来）を、示されている抗体と共に培養下で２１日間インキュベートした。皮膚試料は、本明細書の他の箇所に記載されるように（実施例１；皮膚由来γδＴ細胞の調製に関するセクションを参照のこと）、皮下脂肪などを除去することによって調製した。次いで、各ドネーションからのパンチ複製物をカーボンマトリックスグリッド上に置き、次いでこれらをＧ－ＲＥＸ６（Ｗｉｌｓｏｎ Ｗｏｌｆ）のウェルに入れた。本明細書の他の箇所にも記載されているように、各ウェルを完全培地で満たした。異なる抗体の効果を調査し比較するために、これらを０日目、７日目、１４日目に加えて１００ｎｇ／ｍｌの使用濃度とした。２１日間の培養後、細胞を採取し、フローサイトメトリーによって分析した。前記研究の結果は図１９に提示されており、異なる抗体の調節効果における顕著な差異を特に明らかにしている：左から右への順序：Ｖｄ１ ＴＳ８．２＝ＴＳ８．２（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）；ＯＫＴ－３（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）；Ｃ０８ ＩｇＧ１＝１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８；Ｅ０７＝１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７；Ｇ０４＝１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４。図１９（Ａ）は、培養終了時に観察された生存可能な汎γδＴＣＲ陽性細胞の平均量を明らかにしている；結果は、フローサイトメトリーによって分析された総生細胞集団のうちのゲーティングした画分（パーセント平均＋標準偏差）として提示されている。汎γδ含有量分析のフローゲーティングストラテジーは次のとおりである：一重項＞生細胞＞汎γδ抗体（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ、１３０－１１３－５０８）。図１９（Ｂ）は、培養終了時に観察された生存可能なＶδ１＋ＴＣＲ陽性細胞の平均量を明らかにしている；結果は、フローサイトメトリーによって分析された総生細胞集団のうちのゲーティングした画分率（パーセント平均＋標準偏差）として提示されている。Ｖδ１＋細胞含有量分析に関して、フローゲーティングストラテジーは次のとおりである：一重項＞生細胞＞汎γδ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ、１３０－１１３－５０８）＞Ｖδ１（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ、１３０－１００－５５３）。図１９（Ｃ）は、培養終了時に観察された生存可能な二重陽性Ｖδ１＋ＣＤ２５＋細胞の数を明らかにしている；結果は、総生細胞集団のうちのゲーティングした画分（パーセント平均＋標準偏差）として提示されている。ＣＤ２５＋Ｖδ１＋細胞含有量分析に関して、フローゲーティングストラテジーは次のとおりである：一重項＞生細胞＞汎γδ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ、１３０－１１３－５０８）＞Ｖδ１（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ、１３０－１００－５５３）＞ＣＤ２５（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ、１３０－１１３－２８６。この研究の複合結果は、コンパレータ抗体ＴＳ８．２及びＯＫＴ３に比して異なる、本明細書に記載される本発明の抗体の効果を要約している。また、この理論に束縛されるものではないが、ＴＳ８．２またはＯＫＴ３がＶδ１＋細胞にあまり好ましくない効果を付与する可能性の１つは、このモデル系でこれらのコンパレータ分子が免疫細胞機能に経時的に付与する有害効果に起因するものであり得る。
実施例１８：抗Ｖδ１抗体は、ＴＩＬにおける免疫細胞の調節及び増殖を付与した。
抗Ｖδ１抗体によって付与されるヒト腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の調節及び増殖を調査するために、複数の研究を行った。これらの研究では、ヒト腎細胞癌（ＲＣＣ）腫瘍生検が新鮮な状態で輸送され、受領時に処理された。具体的には、組織を約２ｍｍ２に細断した。最大１ｇの組織を、４．７ｍＬのＲＰＭＩ及びＭｉｌｔｅｎｙｉのＴｕｍｏｕｒ Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｋｉｔの酵素（関連細胞表面分子の切断を防止するために０．２倍濃度で使用した酵素Ｒを除いては製造元が推奨する濃度）と共に、各Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｃチューブに入れた。Ｃチューブをヒーター付きｇｅｎｔｌｅＭＡＣＳ（商標）Ｏｃｔｏ Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｏｒに配置した。軟性腫瘍の解離のためにプログラム３７Ｃ＿ｈ＿ＴＤＫ＿１を選択した。次いで、消化物を７０ｍＭフィルタで濾過して単一細胞懸濁液を生成した。１０％ＦＢＳを含有するＲＰＭＩを消化物に加えて、酵素活性をクエンチした。細胞をＲＰＭＩ／１０％ＦＢＳで２回洗浄し、計数のために再懸濁した。次いで、得られた細胞をＴＣウェル（２４ウェルＧ－ＲＥＸ、Ｗｉｌｓｏｎ Ｗｏｌｆ）にウェル当たり２．５×１０ｅ６で播種した。次いで、サイトカインなしまたはなしで、そして抗体ありまたはなしで、細胞を１８日間インキュベートした。この研究に含まれた抗体を図２０に概説する。これらには、ＯＫＴ３（５０ｎｇ／ｍｌまで）、及び本明細書では「Ｃ０８」ともいう１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８（５００ｎｇ／ｍｌまで）が含まれる。含まれた場合、これらの抗体のボーラス添加は、０日目、７日目、１１日目、及び１４日目に加えた。前記インキュベーション中、１１日目及び１４日目に培地を新鮮な培地と交換した。フローサイトメトリー分析を０日目及び１８日目に行って、リンパ球表現型及び細胞数の変化倍率を決定した。細胞はまず、生きているＣＤ４５＋細胞でゲーティングし、次いで示されているようにゲーティングした。組換えサイトカインが含まれたアームでは、これらは次のように添加した。０日目：ＩＬ－４、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２１、ＩＬ－１β。追加のＩＬ－１５は７日目、１１日目、１４日目に含めた。追加のＩＬ－２１及びＩＦＮ－γは、それぞれ７日目及び１４日目に含めた。図２０（Ａ）は、示されているようなサイトカイン補助（ＣＫ）あり及びなしで、Ｃ０８またはＯＫＴ３の存在下で１８日間培養した後のＴＩＬ Ｖδ１＋細胞の増加倍率を示す。これらの結果は、抗体またはサイトカイン単独と比較した、サイトカインの存在下でＣ０８またはコンパレータＯＫＴ３抗体のいずれかを適用したＴＩＬ Ｖδ１＋細胞における実質的な増加倍率を示す。図２０（Ｂ）は、次の採取時の総Ｖδ１細胞数の増加を示す。これらの結果は、抗体またはサイトカイン単独と比較した、サイトカインの存在下でＣ０８またはコンパレータＯＫＴ３抗体と共に培養した後のＴＩＬ Ｖδ１＋細胞数における実質的な増加を示す。図２０（Ｃ）は、細胞のフローサイトメトリー分析で使用されるゲーティングストラテジーの一例を提示する。生きているＣＤ４５＋細胞集団から、細胞をそれらの前方散乱及び側方散乱の特性（図示せず）に基づいてリンパ球でゲーティングし、次いでγδＴ細胞をＴ細胞受容体の染色によりαβＴ細胞から分離した。最後に、総γδＴ細胞集団内のＶδ１細胞の割合を決定した。１８日目の実施例データが、図示の２つの条件（±１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８）について示されている：６４．３％の細胞はＣＤ４５＋であり、これらのＣＤ４５％細胞のうち、５３．１％はγδ＋であり、γδ細胞のうち、８９．７％はＶδ１＋であった。図２０（Ｄ）は、採取時のＴＩＬ Ｖδ１＋細胞の細胞表面表現型プロファイルを提示する。Ｃ０８抗体を用いた培養後、より高いレベルのＣＤ６９が観察された。図２０（Ｅ）は、採取時の生きているＣＤ４５陽性ゲート内のＴＩＬ γδ陰性、ＣＤ８陽性リンパ球画分の分析を提示する。まとめると、複合結果は、本明細書に記載される本発明の抗Ｖδ１抗体によってＴＩＬ集団に付与される調節効果を明らかにしている。
実施例１９：抗Ｖδ１抗体は、Ｖδ１＋細胞媒介性細胞傷害性及び疾患細胞特異的細胞傷害性の増強を付与した。
図２１に示されるように、Ｖδ１＋エフェクター細胞、ＴＨＰ－１単球性がん細胞、及び健康な初代単球±本明細書に記載される抗Ｖδ１抗体（１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４；１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７；１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８）の三種培養物を含み、対照（ｍＡｂなしまたはＤ１．３）を含むモデル系において、細胞傷害性／効力アッセイ及び研究を行った。手短に述べると、すべての抗体をＰＢＳで１０μｇ／ｍｌに希釈し、３８４ウェルウルトライメージングアッセイプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で一晩４℃でインキュベートして抗体をプレートに結合させた後、ＰＢＳで洗浄した。磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ；Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用した負の選択により、健康な対照単球を末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ；Ｌｏｎｚａ）から単離した。単球及び培養したＴＨＰ－１細胞（ＡＴＣＣ）をそれぞれ［０．５μＭ］ＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ及びＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で２０分間染色した後、１：１の比で混合した。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、ある範囲のエフェクター対標的比（Ｅ：Ｔ）となるように系列希釈した後、ＴＨＰ１：単球細胞懸濁液に加えた。細胞懸濁液を３８４ウェルアッセイプレートに播種して、最終的な細胞播種密度をウェル当たりＴＨＰ－１細胞１，０００個、ウェル当たり単球１，０００個、及びある範囲のγδＴ細胞（最高Ｅ：Ｔ比６０：１）とした。２４時間後の生きているＴＨＰ－１及び健康な対照単球の数を決定するために、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感、及び強度に基づいて数量化した。結果を図２１に提示する。図２１（Ａ）は、示されているようにプレートに結合したｍＡｂまたは対照の存在下のγδＴ細胞を用いる三重共培養下の２４時間後のＴＨＰ－１及び単球細胞の数を提示する。細胞数は、生細胞イメージングを使用したハイコンテント共焦点顕微鏡法を使用して計算した。図２１（Ｂ）は、最高Ｅ：Ｔ比（６０：１）における２４時間の共培養後の疾患細胞の特異的傷害と非疾患健康細胞の温存との間のウィンドウを強調するように設計された棒グラフ表現を提示する。左側の棒グラフ；非疾患細胞（初代ヒト単球）の傷害と対比した疾患細胞（ＴＨＰ－１）の傷害の増加倍率。右側の棒グラフ；同じデータだが、対照に対する傷害増強率として表されている。図２１（Ｃ）は、図（Ａ）から計算されたｍＡｂなしの対照と比較した、Ｖδ１ ｍＡｂの存在下でＴＨＰ－１標的細胞を傷害するＶδ１γδＴ細胞の効力の向上率をまとめた表形式の結果を提示する。図２１（Ｄ）は、５０％のＴＨＰ－１細胞傷害を付与するのに必要なγδＴ細胞数として表されている、図（Ａ）から計算されたＥＣ５０値の表形式の結果を提示する。図２１に概説される複合結果及び発見は、本明細書に記載される抗体がＶδ１＋細胞の細胞傷害性及び疾患細胞特異性を増強する能力を明らかにしている。
実施例２０：多特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した；組織中心疾患関連抗原のターゲティング。
細胞傷害性／効力アッセイ研究を行って、Ｖδ１＋エフェクター細胞及びＡ－４３１がん細胞の共培養物に対する多特異性抗体の効果を調査した。Ａ－４３１（ＥＧＦＲ＋＋；ＡＴＣＣ）標的細胞を３８４ウェルイメージングプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に１，０００細胞／ウェルで播種し、ＤＭＥＭ（１０％ＦＣＳ）において３７℃で一晩インキュベートした。示されている抗体及び多特異性抗体を１０μｇ／ｍｌに希釈してアッセイプレートに加えた（最終アッセイ濃度２μｇ／ｍｌ）。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、ある範囲のＥ：Ｔ比（最高Ｅ：Ｔ比６０：１）となるように系列希釈した後、アッセイプレートに加えた。Ａ－４３１細胞をＶδ１γδＴ細胞と共に、抗体または対照の存在下、３０℃、５％ＣＯ２でインキュベートした。２４時間のインキュベーション後、Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を加えて細胞を染色した（最終２μＭ）。生きているＡ－４３１細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感、及び強度に基づいて数量化した。示されている対照、コンパレータ、抗体及び多特異性抗体ありまたはなしのモデル系において標的細胞の５０％が傷害されるＥＴ比を決定するためのエフェクター／標的（Ｅ：Ｔ）時間経過研究。結果を図２２に提示する。
第１に、図２２（Ａ～Ｄ）は、抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしで、Ｖδ１＋／Ａ－４３１共培養物を研究した共培養結果の例を提示する。用いた対照及びコンパレータは示されているとおりである；左から右：ｍＡｂなし＝抗体の添加なし；Ｄ１．３＝Ｄ１．３対照；Ｄ１．３ ＩｇＧ ＬＡＧＡ＝Ｄ１．３＋Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ；Ｄ１．３ ＦＳ１－６７＝ＥＧＦＲ結合定常ドメインとＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含むＤ１．３可変ドメイン；セツキシマブ（インハウスで生成した）。より具体的には、図２２（Ａ）は、前述の対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｃ０８－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８；Ｃ０８ ＦＳ１－６７＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含有するＥＧＦＲ結合ドメインと組み合わせた１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８を用いた５時間の共培養の結果を提示する。図２２（Ｂ）は、前述の対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｇ０４－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４；Ｇ０４ ＦＳ１－６７＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含有するＥＧＦＲ結合ドメインと組み合わせた１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４を用いた５時間の共培養の同等のデータを提示する。図２２（Ｃ）は、対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｅ０７－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７；Ｅ０７ ＦＳ１－６７＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含有するＥＧＦＲ結合ドメインと組み合わせた１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７を用いた５時間の共培養の同等のデータを提示する。図２２（Ｄ）は、５時間、１２時間、及び２４時間にわたる、対照、コンパレータ、及び試験品の存在下のＶδ１γδＴ細胞の細胞傷害性の向上率をまとめた表を提示する。本明細書に記載される抗体またはその抗原結合性断片を多特異性フォーマットで提示した場合、４５０％を超える増強が観察され得る。
第２に、図２２（Ｅ～Ｈ）は、抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲ ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多特異性抗体ありまたはなしで、Ｖδ１＋／Ａ－４３１共培養物を研究した結果の例を提示する。用いた対照及びコンパレータは示されているとおりである；左から右：ｍＡｂなし＝抗体の添加なし；Ｄ１．３＝対照；Ｄ１．３ ＩｇＧ ＬＡＧＡ＝Ｄ１．３＋Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ；Ｄ１．３ ＬＡＧＡセツキシマブ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７ＡとＣ末端セツキシマブ由来ｓｃＦｖを含むＤ１．３；セツキシマブ（インハウスで生成した）。より具体的には、図２２（Ｅ）は、前述の対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｃ０８－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８；Ｃ０８ ＬＡＧＡセツキシマブ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＣ末端セツキシマブ由来ｓｃＦｖを含む１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８を用いた５時間の共培養を提示する。図２２（Ｆ）は、前述の対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｇ０４－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４；Ｇ０４ ＬＡＧＡセツキシマブ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＣ末端セツキシマブ由来ｓｃＦｖを含む１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４を用いた５時間の培養を提示する。図２２（Ｇ）は、対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｅ０７－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７；Ｅ０７ ＬＡＧＡセツキシマブ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＣ末端セツキシマブ由来ｓｃＦｖを含む１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７を用いた５時間の培養を提示する。図２２（Ｈ）は、５時間、１２時間、及び２４時間にわたる、対照、コンパレータ、及び試験品の存在下のＶδ１γδＴ細胞の効力の向上率をまとめた表を提示する。本明細書に記載される抗体またはその抗原結合性断片を多特異性フォーマットで提示した場合、３００％を超える増強が観察され得る。
第３に、図２２（Ｉ及びＪ）は、データを表現する代替的なアプローチの一例を概説する。具体的には、示されているすべての構成部分及びコンパレータに対して相対的な２４時間の時点でのＥＧＦＲ＋細胞に対するＶδ１＋エフェクター細胞傷害性に多特異性抗体Ｅ０７ ＦＳ１－６７（Ｉ）またはＣ０８ ＦＳ１－６７（Ｊ）が付与する向上のパーセンテージが示されている。
実施例２１：多特異性抗体は、Ｖδ１＋媒介性細胞傷害性及び疾患細胞特異的細胞傷害性の増強を付与した；造血系中心疾患関連抗原のターゲティング。
二重特異性フォーマットの腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）に連結したＶδ１モノクローナル抗体が特定の標的細胞のＶδ１γδＴ細胞傷害を増強し得るかどうかを判定するために、三種培養のＶδ１＋エフェクター細胞、及びＲａｊｉがん細胞、及び健康な初代単球±抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＣＤ１９）多特異性抗体を含む多特異性抗体を含むモデル系において細胞傷害性／効力アッセイ及び研究を行った。具体的には、Ｒａｊｉ細胞（ＣＤ１９＋＋；ＡＴＣＣ）をＶδ１×ＣＤ１９多特異性抗体の存在下でＶδ１γδＴ細胞と共にインキュベートした。すべての抗体を４μｇ／ｍｌに希釈し（最終アッセイ濃度１μｇ／ｍｌ）、３８４ウェルイメージングプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に加えた。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、ある範囲のエフェクター対標的比（Ｅ：Ｔ）となるように系列希釈した。Ｒａｊｉ細胞を［０．５μＭ］ＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｆａｒ Ｒｅｄで染色した後、滴定したＶδ１γδＴ細胞と１：１の比で混合した。細胞懸濁液を３８４ウェルアッセイプレートに播種して、最終的な細胞播種密度をウェル当たりＲａｊｉ細胞１，０００個、及びある範囲のγδＴ細胞（最高Ｅ：Ｔ比３０：１）とした。２４時間後の生きているＲａｊｉの数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感及び強度に基づいて数量化した。結果は図２３に記録してある。ここで用いた抗体及びコンパレータは示されているとおりである。具体的には、ＲＳＶ ＩｇＧ＝モタビズマブ非結合対照であり、Ｇ０４＝１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４であり；Ｅ０７＝１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７であり；Ｄ１．３ ＶＨＶＬ＝重鎖Ｃ末端抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを含むＤ１．３ ＨＥＬであり（用いたｓｃＦｖ結合モジュールについては配列番号３１４を参照のこと）；Ｇ０４ ＶＨＶＬ＝重鎖Ｃ末端抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを含む１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４ ＬＡＧＡ（配列番号３１５、または配列番号４２１及び配列番号４２２）であり；Ｅ０７ ＶＨＶＬ＝重鎖Ｃ末端抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを含む１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７ ＬＡＧＡ（配列番号３１６、配列番号４２３及び配列番号４２４）である。図２３（Ａ）は、（ｉ）５０％のＲａｊｉ細胞傷害を誘導するのに必要なγδＴ細胞数またはＥ：Ｔ比として表されているＥＣ５０計算値、及び（ｉｉ）ｍＡｂなしの対照と比較したＥＣ５０における向上のパーセンテージをまとめた表である。図２３（Ｂ）は、Ｖδ１－ＣＤ１９多特異性抗体の存在下でＲａｊｉ標的細胞の５０％を溶解するγδＴ細胞の能力における向上のパーセンテージを表す棒グラフである。
実施例２２哺乳動物ディスプレイ
親和性成熟のために２つのクローンを選択した。ここで、クローンＡＤＴ１－４（Ｇ０４）及びクローンＡＤＴ１－７（Ｅ０７）に由来する親和性成熟クローンの調製及び特性決定を示す。
ヒト抗Ｖδ１モノクローナル抗体の親和性成熟
親抗Ｖδ１モノクローナル抗体を生成するために使用されるファージディスプレイにより、上記のように１２ｎＭ～１μＭの範囲の親和性を有する抗体が得られた。次いで、親抗体クローンＡＤＴ１－４（Ｇ０４）及びクローンＡＤＴ１－７（Ｅ０７）をｉｎ ｖｉｔｒｏで親和性成熟させて、驚くべきことに、優れた標的会合について１００倍改善された親和性を達成した。親抗体のｉｎ ｖｉｔｒｏ親和性成熟は、２段階プロセス：標的化ＣＤＲ３突然変異誘発を使用した親抗体配列の多様化、次いでファージ及び哺乳動物ディスプレイプラットフォームを使用した親和性改善抗体の選択的濃縮によって達成された。クローンＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７のＶＨ及びＶＬ ＣＤＲ３ ２量体ライブラリを、Ｋｕｎｋｅｌ突然変異誘発（Ｋｕｎｋｅｌ ｅｔ ａｌ．，１９８７；Ｓｉｄｈｕ ａｎｄ Ｗｅｉｓｓ，２００４）及びＲＣＡ増幅を使用して作成した。ＶＨ及びＶＬ ＣＤＲ３の特定の位置におけるすべての単一及び二重アミノ酸置換の組合せを、Ａｇｉｌｅｎｔプライマー合成技術を用いて組み込んだ。特定の位置に組み込まれる異なるアミノ酸の数を特定した。システイン及びメチオニンは省略した。クローンのＣＤＲにおいて行われた変更を以下の表１４に要約する。
各ライブラリのサイズを表１５に示す。
変異誘発ＶＨ及びＶＬ ＣＤＲ３ライブラリの作製
変異誘発ライブラリは、適切な過剰のライブラリメンバーをカバーする適切な培養体積から調製された。親和性成熟は、溶液相選択を使用してＳｃｈｏｆｉｅｌｄ ｅｔ ａｌ．（２００７）に記載されているファージディスプレイ技術を使用して行った。ヒト及びカニクイザル抗原（ヒトＴＲＤＶ１配列を含むヒト抗原、カニクイザル抗原は配列番号３０８マイナスリーダーを含む）を使用して溶液中で選択を行った。より高い親和性を有する変異体ライブラリから結合剤を単離するために、抗原濃度を制御して、一連のよりストリンジェントな選択を得た。図２４に示されるように、ヒト及びカニクイザル抗原を用いた数回のファージディスプレイ選択を各クローンについて行った。ＡＤＴ１－４系統では、選択に使用した抗原濃度は、ヒトでは１００ｎｍ～１０ｐＭ、カニクイザル抗原では１００ｎＭ～１０ｎＭの範囲であった。ＡＤＴ１－７系統では、ヒト抗原を１０ｎＭ～１ｐＭの濃度で使用し、カニクイザルでは１００ｎＭ～１００ｐＭの濃度で使用した。図２４は、カニクイザル交差反応性バインダー（ｉＣ）を単離するための選択戦略を有するＡＤＴ１－７ライブラリ（ｉＡ）、ＡＤＴ１－４ライブラリ（ｉＢ）及びＡＤＴ１－７ライブラリのファージ選択ラウンドを示す。
ポリクローナルファージＥＬＩＳＡを使用して、選択の進行を評価した。ヒト抗原（ＤＶ１／ＧＶ４）及びカニクイザル抗原（ＤＶ１／ＧＶ７６）を１５０ｎｇ／ウェル、５０μＬ／ウェルで一晩コーティングした。カニクイザル抗原ＤＶ２／ＧＶ７６（配列番号３０８を含まない）及びＨＳＡを対照として使用した。ＡＤＴ４－１ライブラリからのアウトプットのみが、ヒト及びカニクイザルＤＶ１抗原の両方に対して交差反応性であった。ＡＤＴ１－７からのアウトプットは、ヒト抗原に対してのみ反応性であった。選択したアウトプットを、モノクローナルファージＥＬＩＳＡによってさらに特徴づけ、その概要を表１６に示す。明るいボックスと濃い灰色のボックスは、それぞれヒト抗原またはカニクイザル抗原のいずれかを使用して選択が実行されたことを示す。矢印は、ヒトまたはカニクイザルＶＤ１に対する結合剤として分類されるクローンの割合に関する表示を示す（上向きは高く、下向きは低い）。
配列多様性を表１７に要約する。明るいボックスと濃い灰色のボックスは、それぞれヒト抗原またはカニクイザル抗原のいずれかを使用して選択が実行されたことを示す。矢印は、多様性のレベルに関する表示を示す（上向きは高く、下向きは低い）。
ＩｇＧ哺乳動物ディスプレイライブラリーの作製
哺乳類ディスプレイ用の最終ライブラリを形成するために、以下のＡＤＴ１－４選択がプールされた：
－ ＡＤＴ１－４ライブラリ１（ヒト）を作成するためのＳＥＬ２４０９、２４１２及び２４１３
－ ＡＤＴ１－４ライブラリ２（ｃｙｎｏ）を作成するためのＳＥＬ ２４１８、２４２０、及び２４１５
－ ＡＤＴ１－７ライブラリを作成するためのＳＥＬ２３７０及び２４０４。
次いで、プールを哺乳動物ディスプレイに進めた。一本鎖可変フラグメント抗体（ｓｃＦｖ）集団を一括してＩｇＧフォーマットに変換し、元の可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）の対形成を維持した。次いで、ＩｇＧフォーマットの抗体を哺乳動物ディスプレイドナーベクターにクローニングし、これをＴＡＬＥヌクレアーゼ対をコードするプラスミドで同時トランスフェクトし、単一の染色体遺伝子座におけるヌクレアーゼ指向性抗体遺伝子組込みを可能にした。ファージアウトプット多様性（１０６クローン超）をカバーする哺乳動物ディスプレイ抗体ライブラリをＨＥＫ２９３細胞において作成した。細胞表面に抗体を発現する細胞の安定な集団を、トランスフェクションの２日後（ｄｐｔ）のブラストサイジン添加によって選択した。細胞表面に抗体を発現する細胞を、磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ）選別（７ｄｐｔ）によって濃縮し；細胞を抗Ｆｃ－ＰＥ、続いて抗ＰＥマイクロビーズで標識し、Ｍｉｄｉ ＭＡＣＳ磁石（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）及びＬＳカラムを用いて選別した。これらの細胞集団を選択に進めた。
哺乳動物ディスプレイによる成熟抗体の選択
抗体発現細胞を濃縮するためのＭＡＣＳに続いて、ＴＲＤＶ１結合剤を同定するために２つの戦略を採用した。主な戦略には、Ｆｃ発現及び抗原結合に基づく二色蛍光選別が含まれた。もう１つは、高親和性交差反応性結合剤を単離する可能性を最大化するための、カニクイザルとヒトの両方の抗原の結合に基づく二色蛍光選別を含んだ。プロセスの概略を図２５に示す。
配列、特異性、親和性ランク付け及び特徴付け
ゲノムＤＮＡを８つの異なる選別された集団から抽出した。選択されたＩｇＧをコードするＤＮＡを増幅し、可溶性ＩｇＧ１発現ベクターにクローニングした。８つの異なる選択から計１４７２個のクローンを選択した。ｐＤＮＡをＥｘｐｉ２９３細胞にトランスフェクションした。トランスフェクションの５日後に上清を回収し、発現した抗体親和性を捕捉ＥＬＩＳＡにおいてヒト及びカニクイザルＴＲＤＶ１結合についてランク付けした。各選択鎖からの計９３の抗ＤＶ１抗体を配列及びＳＰＲオフレート分析のために選択した。さらに、これらのクローンを、ヒトＴＲＤＶ１、多型ヒトＴＲＤＶ１（Ａ→Ｖ）、ヒトＴＲＤＶ２、カニクイザルＴＲＤＶ１及びＢＳＡへの結合について直接ＥＬＩＳＡによって確認した。
実施例２３ ヒト及びＣＹＮＯ抗原への結合親和性
細胞上に発現される組換え抗原及びｖδ１ ＴＣＲへの結合：ＡＤＴ１－４系統
抗ｖδ１抗体のその標的抗原への結合を調べるための試験を行った。Ｖδ１ ＴＣＲ抗原への抗Ｖδ１ ｍＡｂの結合をＥＬＩＳＡによって試験した。ヒト抗原１μｇまたはカニクイザル抗原１μｇを９６ウェルのイムノアッセイプレート（ＳＬＳ＃４７５９０４）にウェルあたり固定し、次いで、非特異的結合を防ぐためにＢＳＡでブロッキングした。１．３ｐｍｏｌ（２０ｎｇ）の各ｍＡｂを添加し、室温で１時間インキュベートした。抗原へのｍＡｂ結合を、ＴＭＢ基質（Ｆｉｓｈｅｒ＃１２７５００００）及び停止溶液（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ＃４２３００１）と共にＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＨＲＰ（Ａｂｃａｍ＃Ａｂ７４５６）を使用して、４５０ｎＭでの吸光度を測定することによって検出した。親対照は、アッセイ及びプレート間変動の両方の陽性対照として含まれた。ヒットは、親ｍＡｂよりも高い吸光度測定値を示すｍＡｂとして特定された。図２８Ａは、１．３ｐｍｏｌの抗体がヒトＶδ１抗原に結合した場合の親ＡＤＴ１－４結合吸光度と比較した成熟ＡＤＴ１－４クローンの吸光度の倍数増加を示す。図２８Ｂは、１．３ｐｍｏｌの抗体がカニクイザルＶδ１抗原に結合した場合の親ＡＤＴ１－４結合吸光度と比較した成熟ＡＤＴ１－４クローンの吸光度の倍数増加を示す。
内在性Ｖδ１ ＴＣＲへのｍＡｂの結合を、フローサイトメトリーを使用して試験した。皮膚Ｖδ１細胞（ドナーＡＴＳ００６；ＡＤＴ拡張Ｅ００００１１３）またはＰＥＥＲ Ｖδ１細胞株を３ｘ１０＾５細胞／ウェルで９６ウェル丸底プレートに播種し、３ｕｇ／ｍｌの試験ｍＡｂを含むＦＡＣＳバッファー（ＰＢＳ中、ｖ／ｖ：２％ ＦＣＳ、０．１％ ＮａＡｚｉｄｅ及び１ｍＭ ＥＤＴＡ）５０ｕｌに４℃で１５分間再懸濁した。細胞をペレット化し、二次抗ｈｍＩｇＧ－ＡＰＣ抗体（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃ １３０－１１９－７７２）をＦＡＣＳ緩衝液中に１／１００で添加し、４℃でさらに２０分間インキュベートした。細胞を洗浄し、ＣｅｌｌＦｉｘ（ＢＤ ＃３４０１８１）で固定し、フローサイトメトリーで分析した。％ Ｖδ１表現型及び平均蛍光強度を算出した（Ｉｎｉｖａｉ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｆｌｏｗｌｏｇｉｃｖ７．２）。陽性対照として、親抗体が含まれていた。図２８Ｃは、親ＡＤＴ１－４結合初代皮膚由来ヒトＶδ１細胞と比較した、成熟ＡＤＴ１－４クローンの平均蛍光強度の増加倍数を示す。図２８Ｄは、形質転換ＰＥＥＲ Ｖδ１細胞株に結合する親ＡＤＴ１－４と比較した、成熟ＡＤＴ１－４クローンの平均蛍光強度の増加倍数を示す。
細胞上に発現される組換え抗原及びｖδ１ ＴＣＲへの結合：ＡＤＴ１－７系統：
ＡＤＴ１－７成熟抗ｖδ１抗体のその標的抗原への結合を調べるための試験を行った。Ｖδ１ ＴＣＲ抗原への抗Ｖδ１ ｍＡｂの結合をＥＬＩＳＡによって試験した。抗原１μｇを９６ウェルのイムノアッセイプレート（ＳＬＳ＃４７５９０４）にウェルあたり固定した後、非特異的結合を防ぐためにＢＳＡでブロッキングした。６．７ｐｍｏｌ（１００ｎｇ）、１．３ｐｍｏｌ（２０ｎｇ）及び０．２７ｐｍｏｌ（４ｎｇ）のｍＡｂの滴定を添加し、室温で１時間インキュベートした。抗原へのｍＡｂ結合を、ＴＭＢ基質（Ｆｉｓｈｅｒ＃１２７５００００）及び停止溶液（Ｂｉｏｌｏｇｅｎｄ＃４２３００１）と共にＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＨＲＰ（Ａｂｃａｍ＃Ａｂ７４５６）を使用して、４５０ｎＭでの吸光度を測定することによって検出した。親対照は、アッセイ及びプレート間変動の両方の陽性対照として含まれた。ヒットは、親ｍＡｂよりも高い吸光度測定値を示すｍＡｂとして特定された。図２９Ａは、１．３ｐｍｏｌの抗体がヒトＶδ１抗原に結合した場合の親ＡＤＴ１－４結合吸光度と比較した成熟ＡＤＴ１－４クローンの吸光度の倍数増加を示す。
内在性Ｖδ１ ＴＣＲへのｍＡｂの結合を、フローサイトメトリーを使用して試験した。皮膚Ｖδ１細胞（ドナーＡＴＳ００６；ＡＤＴ拡張Ｅ００００１１３）またはＰＥＥＲ Ｖδ１細胞株を３ｘ１０＾５細胞／ウェルで９６ウェル丸底プレートに播種し、３ｕｇ／ｍｌの試験ｍＡｂを含むＦＡＣＳバッファー（ＰＢＳ中、ｖ／ｖ：２％ ＦＣＳ、０．１％ ＮａＡｚｉｄｅ及び１ｍＭ ＥＤＴＡ）５０ｕｌに４℃で１５分間再懸濁した。細胞をペレット化し、二次抗ｈｍＩｇＧ－ＡＰＣ抗体（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃ １３０－１１９－７７２）をＦＡＣＳ緩衝液中に１／１００で添加し、４℃でさらに２０分間インキュベートした。細胞を洗浄し、ＣｅｌｌＦｉｘ（ＢＤ ＃３４０１８１）で固定し、フローサイトメトリーで分析した。％ Ｖδ１表現型及び平均蛍光強度を算出した（Ｉｎｉｖａｉ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｆｌｏｗｌｏｇｉｃｖ７．２）。陽性対照として、親抗体が含まれていた。図２９Ｂは、親ＡＤＴ１－４結合初代皮膚由来ヒトＶδ１細胞と比較した、成熟ＡＤＴ１－４クローンの平均蛍光強度の増加倍数を示す。図２９Ｃは、形質転換ＰＥＥＲ Ｖδ１細胞株に結合する親ＡＤＴ１－７と比較した、成熟ＡＤＴ１－７クローンの平均蛍光強度の増加倍数を示す。
親クローンに対する倍数改善
解離増強ランタニド蛍光イムノアッセイ（ＤＥＬＦＩＡ）
ヒト抗原及びカニクイザル抗原への親和性成熟ｍＡｂの結合の改善を確認するために、プレートに直接コーティングした抗原（５０μＬのＰＢＳ中３μｇ／ｍＬの抗原、４℃で一晩（Ｎｕｎｃ＃４３７１１１）を用いてＤＥＬＦＩＡイムノアッセイを行った。検出のために、ＤＥＬＦＩＡ Ｅｕ－Ｎ１抗ヒトＩｇＧ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＃１２４４－３３０）を、５０μＬの３％ＭＰＢＳ（ＰＢＳ＋３％（ｗ／Ｖ）脱脂粉乳）中１／５００の希釈度で二次抗体として使用した。展開には５０μＬのＤＥＬＦＩＡ増強溶液（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＃４００１－００１０）を用いた。
プレート上にコーティングしたＧタンパク質を介して抗体を捕捉し、ヒト可溶性ビオチン化Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）抗原を０．４ｎＭで添加し、カニクイザル抗原ＤＶ１／ＧＶ７７を１０ｎＭ（３ＭＰＢＳ）で添加するＤＥＬＦＩＡイムノアッセイを使用して、目的の抗体の親和性ランク付けを行った。検出には５０μＬのストレプトアビジン－Ｅｕ（アッセイバッファー中１：５００、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を使用し、ＤＥＬＦＩＡ増強溶液でシグナルを発生させた。Ｄ１．３ ｈＩｇＧ１（Ｅｎｇｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６２：２１２９－２１３６に記載されている）を陰性対照として使用した。結果を図３０Ａ～Ｃに示す。
ＳＰＲ分析－ＩｇＧ捕捉
ＳＰＲ分析を使用して、親クローンと比較した親和性成熟クローンのＫＤ値を比較した。使用機器：ＭＡＳＳ－２（Ｓｉｅｒｒａ Ｓｅｎｓｏｒｓ）；チップ：アミン高容量（Ｓｉｅｒｒａ Ｓｅｎｓｏｒｓ）；ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ ２０。実験は室温または３７℃で行い、Ｇタンパク質をチップにカップリングさせた。ヒトＤＶ１－ＧＶ４では５０ｎＭ～０．２ｎＭ、カニクイザルＤＶ１－７７では１００ｎＭ～１ｎＭの範囲の希釈系列で抗原を細胞上に流した。１２０秒間の会合、６００秒間の解離、５０μＬ／分の流速、ソフトウェアＳｉｅｒｒａ Ａｎａｌｙｚｅｒを使用したＬａｎｇｍｕｉｒ １：１結合による１０ｍＭグリシンｐＨ １．５の動力学的適合による再生。結果を図３１Ａ～Ｃに示す。
結合親和性分析（ＳＰＲによるＫＤ）
Ｖδ１モノクローナル抗体のＶδ１抗原への結合親和性
標的（すなわち、γδＴＣＲのＶδ１鎖）に対する抗体の結合親和性は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって確立される。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。抗原（例えば、Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）を、３００ｎＭ～３．７ｎＭの１：３希釈系列で、会合１８０秒、解離６００秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。実験はすべて室温で行った。定常状態のフィッティングは、ソフトウェアＴｒａｃｅＤｒａｗｅｒ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＬａｎｇｍｕｉｒ１：１結合に従って決定した。
ヒト抗原
親和性成熟Ｖδ１ ｍＡｂは、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析によって決定されるように、いずれかが親となるヒトＶδ１抗原に対して非常に増強された親和性を示す（図３２）。（Ａ、Ｂ）ＡＤＴ１－４（Ａ）またはＡＤＴ１－７（Ｂ）親ｍＡｂ及びその親和性成熟誘導体を用いて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析を実施して、ヒトＶδ１抗原に対する結合親和性を決定した。Ｖδ１と親和性成熟ｍＡｂの結合相互作用は、Ｌａｎｇｍｕｉｒ１：１結合に従ってモデル化した。（Ｃ、Ｄ）（Ａ）及び（Ｂ）に示されるセンソグラムから誘導されるＶδ１標的化抗体の平衡解離定数（ＫＤ）を要約する表。データは、２つの異なるＳＰＲ装置で実施された２回の反復の平均として表される。（Ｅ、Ｆ）親ＡＤＴ１－４またはＡＤＴ１－７と比較した、Ｖδ１抗原に対する親和性成熟誘導体の平衡解離定数（ＫＤ）の倍数増加を表す棒グラフ。
結論：このデータは、ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７の親和性成熟誘導体が、親抗体よりもヒトＶδ１抗原に対して有意に高い親和性を示すことを実証している。
カニクイザル抗原
表面プラズモン共鳴分析は、ＡＤＴ１－４系統の親和性成熟Ｖδ１ ｍＡｂが親抗体よりもカニクイザルＶδ１抗原に対して非常に増強された親和性を示すことを実証する（図３３）。（Ａ）ＡＤＴ１－４親抗体及び親和性成熟誘導体を用いて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析を実施して、カニクイザルＶδ１抗原に対する結合親和性を決定した。Ｖδ１と親和性成熟ｍＡｂの結合相互作用は、Ｌａｎｇｍｕｉｒ１：１結合に従ってモデル化した。（Ｂ）（Ａ）に示されるセンソグラムから誘導されるＶδ１標的化抗体の平衡解離定数（ＫＤ）を要約する表。データは、２つの異なるＳＰＲ装置で実施された２回の反復の平均として表される。結果を図３３Ａ及び図３３Ｂに示す。
結論：このデータは、ＡＤＴ１－４の親和性成熟誘導体が親抗体よりもカニクイザルＶδ１抗原に対して有意に高い親和性を示すことを実証する。
細胞表面Ｖδ１ ＴＣＲへの結合親和性（細胞表面Ｖδ１への結合についてのＥＣ５０）
親和性成熟Ｖδ１ ｍＡｂは、Ｖδ１陽性γδＴ細胞に対して非常に増強された親和性を示し、図３４Ａ～Ｄに示すように、Ｖδ１を欠く細胞への明らかな結合はない。（Ａ、Ｂ）Ｖδ１ ｍＡｂによる２つのγδＴ細胞ドナー、ＡＴＳ００６（Ａ）及びＴＳ１６４（Ｂ）への結合レベル。γδＴ細胞を様々な濃度のＶδ１ ｍＡｂで染色し、続いて蛍光抗ヒトＩｇＧ検出抗体（ｘｘｘ）で染色した。すべてのインキュベーションステップは４℃で行い、フローサイトメトリーを使用して蛍光レベル中央値を測定することでｍＡｂ結合を判定した。対数４パラメータ用量－応答曲線を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ９を使用して当てはめた。（Ｃ）平均２人のドナーとして表される、Ｖδ１陽性γδＴ細胞に結合するＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンからの平均ＥＣ５０を表す棒グラフ。（Ｄ）（Ａ）及び（Ｂ）でプロットされたＥＣ５０、ならびにＨＥＫ２９３Ａ、Ｒａｊｉ細胞及び初代血液単核細胞を有する様々な白血球サブセットを含むＶδ１陰性細胞型を要約する表。Ｖδ１陽性γδＴ細胞の場合、データは２人のドナーの平均として表される。
結論：このデータは、ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７の親和性成熟誘導体が、それらの親ｍＡｂよりもＶδ１陽性γδＴ細胞に対すて有意に高い親和性を示す一方で、Ｖδ１陰性細胞ＨＥＫ２９３Ｔ、ＲａｊｉまたはＰＢＭＣ内のＣＤ８、ＣＤ４、ＮＫ、ＣＤ１９または単球細胞への結合を示さないことを実証する。
Ｖδ１モノクローナル抗体の標的細胞結合
特定の範囲の標的細胞をアッセイして、Ｖδ１ ｍＡｂ結合の特異性及び親和性を決定した。これには、増殖皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞、Ｒａｊｉ細胞、及びヒト初代血液単核細胞内の複数の白血球サブセットが含まれた。接着細胞または半接着細胞（皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ）を組織培養フラスコから剥離し、ＰＢＳに再懸濁した。同様に、非接着細胞型（Ｒａｊｉ、ＰＢＭＣ）を回収し、ＰＢＳに再懸濁した。細胞を、ｖ底９６ウェルプレートに１００，０００細胞／ウェルの最終密度で播種した。細胞を遠心分離にかけ、製造元の説明書に従って細胞ペレットをＦｃＲブロッキング試薬に再懸濁し、４℃で２０分間インキュベートしてから更に洗浄した。Ｖδ１ ｍＡｂ、抗ＲＳＶ ＩｇＧ対照及び抗ＣＤ３ ＯＫＴ３をＰＢＳ中で５００ｎＭに希釈し、ＰＢＳ中で６．４ｐＭまで１：５に連続希釈し、細胞に添加し、続いて４℃で２０分間インキュベートした。細胞表面に結合したｍＡｂの量を決定するために、ＡＰＣにコンジュゲートされたマウス抗ヒトＩｇＧ二次抗体（希釈度１：１００）で細胞を染色した。Ｖδ１γδＴ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ及びＲａｊｉについては、細胞を生存色素のみで染色した。ＰＢＭＣについては、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ５６、ＣＤ１１ｂ及びＣＤ１９（すべて１：１００）に対するコンジュゲート抗体も含まれ、これによりαβサブセット、ＮＫ細胞、Ｂ細胞及び単球細胞の識別が可能になった。４℃で２０分間のインキュベーション後、細胞を２回洗浄し、ＭＡＣＳＱｕａｎｔを使用して蛍光を測定した。ＩＣ５０を図３４Ｄに示す。
ＡＤＴ１－４系列のＫＤ値のまとめ（ヒト及びカニクイザル）
以下の表は、ＡＤＴ１－４系統の２４クローン及びＡＤＴ１－４親クローン（Ｇ０４）のＫＤ値を提供する（ヒトＴＲＤＶ１及びカニクイザルＴＲＤＶ１への結合について）：
Figure 2024506682000026
ＡＤＴ１－７系統のＫＤ値のまとめ（ヒトのみ）
以下の表は、ＡＤＴ１－７系統の１１クローン及びＡＤＴ１－７親クローン（Ｅ０７）のＫＤ値を提供する（ヒトＴＲＤＶ１のみへの結合について）：
Figure 2024506682000027
ＡＤＴ１－４系統の好ましいメンバーの薬理学的データの概要
Figure 2024506682000028
ＡＤＴ１－７系統の好ましいメンバーの薬理学的データの概要
Figure 2024506682000029
実施例２４．機能特性
ＴＣＲ下方制御に対するＶδ１モノクローナル抗体
ＡＤＴｍＡｂがγδＴ細胞受容体と会合し、その結果γδＴ細胞受容体を下方制御する能力を、ＴＣＲ発現を測定することによって評価する。皮膚γδＴ細胞（ドナーＡＴＳ ００６及びＴＳ１６４由来）を、試験ｍＡｂの濃度を増加させるか（０．０００６７～６７ｎＭの範囲）、またはＰＢＳで希釈した対応するアイソタイプ対照（ｈＩｇＧ１、ＲＳＶ）を最高濃度（６７ｎＭ）で含むγδ培地中に３×１０＾５細胞／ｍｌで９６ウェル丸底プレートに播種した。細胞を３７℃の加湿ＣＯ２チャンバー内で２時間インキュベートした。細胞を洗浄し、死細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ＃１５５８０６０７）及びそのＶＤ１ ＴＣＲ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ＃１３０－１１７－６９７）について４℃で３０分間染色した。細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ＃３４０１８１）に再懸濁した後、暗所で４℃で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により決定されるＶＤ１ ＴＣＲの発現レベルを測定した。
結果を図３５に示すが、これは、親和性成熟Ｖδ１ ｍＡｂが、その親クローン及び可溶性アッセイフォーマット（Ａ及びＢ）でのＯＫＴ３よりも効果的にＶδ１ ＴＣＲに結合し、Ｖδ１ ＴＣＲを下方制御することを示す。この注目すべき発見は、Ｖδ１受容体を含有するＴＣＲ／ＣＤ３複合体を下方制御／活性化するための高親和性Ｖδ１ ｍＡｂの使用を含む本明細書で採用されるアプローチが、従来のＣＤ３標的化アプローチと比較して、はるかに選択的であるだけでなく、はるかに効果的であることを強調している。Ｖδ１ ＴＣＲをａ－Ｖδ１ ＴＣＲ－ＰＥ－Ｖｉｏ７７０で染色する前の、Ｖδ１ ｍＡｂ及びＯＫＴ３と共にγδ細胞を２時間インキュベートした後のγδ ＴＣＲ発現の定量化。ａ－Ｖδ１染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、ＴＣＲ陽性ゲートから計算した後、ＴＣＲ陽性未処理γδ細胞のＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。上のグラフはＡＤＴ１－４系統からのデータを表し、下のグラフはＡＤＴ１－７系統からのデータを表す。（Ｃ）（Ａ）から計算されたＩＣ５０値を表す棒グラフ。（Ｄ及びＥ）（Ｂ）のＩＣ５０値を表す棒グラフは、親ＡＤＴ１－４（左）及びＡＤＴ１－７（右）からの倍数改善として提示される。（Ｆ）ＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算された改善率と共に、（Ｂ）からのＩＣ５０値（ｎＭ）を表す表。（Ｇ）ＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算された倍数改善と共に、（Ｂ）からのＩＣ５０値を表す表。
ＣＤ１０７ａ発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。
ＣＤ１０７ａ発現を測定することによって、ＶＤ１ γδ細胞と会合して活性化するＡＤＴｍＡｂの能力を評価する。皮膚γδＴ細胞（ドナーＡＴＳ ００６由来）を、ＴＨＰ－１細胞（ＡＴＣＣ－ＴＩＢ－２０２）を１．２×１０＾６細胞／ｍｌ及び、試験ｍＡｂの濃度を増加させるか（０．０００６７～６７ｎＭの範囲）、またはＰＢＳで希釈した対応するアイソタイプ対照（ｈＩｇＧ１、ＲＳＶ）を最高濃度（６７ｎＭ）で含むγδ培地中６×１０＾５細胞／ｍｌで９６ウェル丸底プレートに播種し。細胞を３７℃の加湿ＣＯ２チャンバー内で２時間インキュベートした。細胞を洗浄し、死細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ＃１５５８０６０７）、ＶＤ１ ＴＣＲ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ＃１３０－１１７－６９７）及びａＣＤ１０７ａ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ＃１３０－１１２－６１０）について４℃で３０分間染色した。細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄した後、暗所で４℃で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により決定されるＶＤ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａの発現レベルを測定した。
結果を図３６に示し、これは、親和性成熟Ｖδ１ ｍＡｂが標的細胞の存在下でのみ活性化を誘導することを示す。（Ａ及びＢ）それぞれａ－Ｖδ１ ＴＣＲ－ＰＥ－Ｖｉｏ７７０及びａ－ＣＤ１０７ ａ－ＶｉｏＢｌｕｅでＶδ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａを染色する前に、１：２の標的対エフェクター比でγδ細胞をＡＤＴ１－４－２単独（上）及びＴＨＰ－１細胞（下）と２時間インキュベートした後のγδＴＣＲ発現（黒色）及びＣＤ１０７ａ発現（灰色）の定量化。Ｖδ１染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、ＴＣＲ陽性ゲートから計算した後、ＴＣＲ陽性未処理且つ非共培養γδ細胞のＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。ＣＤ１０７ａ染色のＭＦＩはフローサイトメトリーを使用して取得し、未処理の非共培養γδ細胞のＣＤ１０７ａ ＭＦＩから％ＭＦＩを計算する前に「ＮＯＴ ＴＨＰ－１」ゲートから計算した。（Ｃ及びＤ）それぞれａ－Ｖδ１ ＴＣＲ－ＰＥ－Ｖｉｏ７７０及びａ－ＣＤ１０７ ａ－ＶｉｏＢｌｕｅでＶδ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａを染色する前に、１：２の標的対エフェクター比でγδ細胞をＡＤＴ１－７－３単独（上）及びＴＨＰ－１細胞（下）と２時間インキュベートした後のγδＴＣＲ発現（黒色）及びＣＤ１０７ａ発現（灰色）の定量化。Ｖδ１染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、ＴＣＲ陽性ゲートから計算した後、ＴＣＲ陽性未処理且つ非共培養γδ細胞のＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。ＣＤ１０７ａ染色のＭＦＩはフローサイトメトリーを使用して取得し、未処理の非共培養γδ細胞のＣＤ１０７ａ ＭＦＩから％ＭＦＩを計算する前に「ＮＯＴ ＴＨＰ－１」ゲートから計算した。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較して、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理の共培養及び非共培養γδ細胞と比較して、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。
ＣＤ２５発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体。
ＣＤ２５発現を測定することによって、ＶＤ１ γδ細胞と会合して活性化するＡＤＴｍＡｂの能力を評価する。皮膚γδＴ細胞（ドナーＡＴＳ ００６由来）を、ＴＨＰ－１細胞（ＡＴＣＣ－ＴＩＢ－２０２）を１．２×１０＾６細胞／ｍｌ及び、試験ｍＡｂの濃度を増加させるか（０．０００６７～６７ｎＭの範囲）、またはＰＢＳで希釈した対応するアイソタイプ対照（ｈＩｇＧ１、ＲＳＶ）を最高濃度（６７ｎＭ）で含むγδ培地中６×１０＾５細胞／ｍｌで９６ウェル丸底プレートに播種し。細胞を３７℃の加湿ＣＯ２チャンバー内で２４時間インキュベートした。細胞を洗浄し、死細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ＃１５５８０６０７）、ＶＤ１ ＴＣＲ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ＃１３０－１１７－６９７）及びＣＤ２５（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ＃１３０－１１３－２８０）について４℃で３０分間染色した。細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄した後、暗所で４℃で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により決定されるＶＤ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａの発現レベルを測定した。
結果を図３７に示し、これは、親和性成熟Ｖδ１ ｍＡｂが標的細胞の存在下でのみ活性化を誘導することを示す。（Ａ及びＢ）それぞれａ－Ｖδ１ ＴＣＲ－ＰＥ－Ｖｉｏ７７０及びａ－ＣＤ２５－ＶｉｏＢｌｕｅでＶδ１ ＴＣＲ及びＣＤ２５を染色する前に、１：２の標的対エフェクター比でγδ細胞をＲＳＶ（６７ｎＭで添加）及びＡＤＴ１－４－２単独（上）及びＴＨＰ－１細胞（下）と２４時間インキュベートした後のγδＴＣＲ発現（黒色）及びＣＤ２５発現（灰色）の定量化。Ｖδ１染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、ＴＣＲ陽性ゲートから計算した後、ＴＣＲ陽性未処理且つ非共培養γδ細胞のＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。ＣＤ２５染色のＭＦＩはフローサイトメトリーを使用して取得し、未処理の非共培養γδ細胞のＣＤ２５ ＭＦＩから％ＭＦＩを計算する前に「ＮＯＴ ＴＨＰ－１」ゲートから計算した。（Ｃ及びＤ）それぞれａ－Ｖδ１ ＴＣＲ－ＰＥ－Ｖｉｏ７７０及びａ－ＣＤ２５－ＶｉｏＢｌｕｅでＶδ１ ＴＣＲ及びＣＤ２５を染色する前に、１：２の標的対エフェクター比でγδ細胞をＲＳＶ（６７ｎＭで添加）及びＡＤＴ１－７－３単独（上）及びＴＨＰ－１細胞（下）と２時間インキュベートした後のγδＴＣＲ発現（黒色）及びＣＤ２５発現（灰色）の定量化。Ｖδ１染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、ＴＣＲ陽性ゲートから計算した後、ＴＣＲ陽性未処理且つ非共培養γδ細胞のＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。ＣＤ２５染色のＭＦＩはフローサイトメトリーを使用して取得し、未処理の非共培養γδ細胞のＣＤ２５ ＭＦＩから％ＭＦＩを計算する前に「ＮＯＴ ＴＨＰ－１」ゲートから計算した。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較して、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理の共培養及び非共培養γδ細胞と比較して、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδＣＤ２５発現の増加率を表す表。
カニクイザルＴＣＲ下方制御
ＡＤＴ１－４－２がカニクイザルｖδ１ガンマデルタＴ細胞に結合し、そのＴＣＲ下方制御を誘導する能力を探索する試験が行われた。これらの試験のために、カニクイザルＰＢＭＣを新鮮血液から採取し、γδ－Ｔ細胞を増殖させるために１４日間培養した。あるいは、αβ－Ｔ細胞を、ｉｎ ｖｉｔｒｏで増殖させる前に、抗αβ抗体（クローンＲ７３）でコーティングした磁気ビーズを使用して全ＰＢＭＣ集団から枯渇させた。拡大培養の後、Ｕ底９６ウェルプレートのウェルあたり２５０，０００個の細胞を、１０％のＦＣＳ、抗生物質（Ｐ／Ｓ）及びサイトカインのカクテル（ＩＦＮγ、ＩＬ２１、ＩＬ４、ＩＬ１β及びＩＬ１５）を含有するＲＰＭＩ－１６４０培地に添加した。７日後、細胞に、１０％のＦＣＳ、抗生物質（Ｐ／Ｓ）ならびにサイトカインＩＬ２１及びＩＬ１５を含有する１０μｌの新鮮な培地を添加した。その後、１１日目に、１０％のＦＣＳ、抗生物質（Ｐ／Ｓ）及びＩＬ１５を含有する新鮮な培地で１００μｌの培地を交換した。１４日目に、細胞を回収し、ＴＣＲ下方制御アッセイに供した。このアッセイは、細胞を様々な濃度の抗体と２時間混合することからなる。インキュベート時間後、細胞を以下のマーカー：ＣＤ３、ＴＣＲ－αβ、ＴＣＲ－γδ及びＶＤ１についてフローサイトメトリー分析のために染色した。生／死細胞色素も、細胞の生集団を識別するために含めた。フローサイトメトリー分析を、ＣＤ３＋、ＴＣＲ－γδ＋及びＶＤ１＋細胞集団をゲーティングすることによって行い、ＶＤ１平均蛍光強度をＶＤ１＋ゲートの内側で測定した。アイソタイプ対照（抗ＲＳＶ）または抗体なしを、最高濃度のみで陰性対照として使用した。データを、抗体なしの対照に対して正規化した。図３８（Ａ）は、カニクイザルγδ－Ｔ細胞上のＶＤ１に会合し、その発現を低下させるＡＤＴ１－４－２及びＡＤＴ１－４の能力の比較を示す。結果は、ＡＤＴ１－４抗体ではなくＡＤＴ１－４－２（３３．３ｎＭで最大７６％）で処理した場合のＶＤ１発現の用量応答減少を示す。その特定のアッセイでは、γδ－Ｔ細胞をαβ－Ｔ細胞枯渇集団から増殖させた。５００倍の範囲の濃度を使用した。図３８（Ｂ）は、ＡＤＴ１－４－２で処理した際のＶＤ１の細胞表面発現のパーセンテージを示す。このアッセイでは、γδ－Ｔ細胞の増殖は、すべてＰＢＭＣ集団からのものであった。１０，０００倍の範囲の濃度を使用した。データは、一例として、２人の異なるドナー（ＡＤ８１７０及びＡＭ９４５ＢＡ）におけるＶＤ１細胞発現の用量応答減少を示す。合計４人のドナーを試験し、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ非線形適合曲線関数を用いてＥＣ５０を個別に抽出した。図３８（Ｃ）は、平均及び標準偏差と組み合わせた異なるドナーの個々のＥＣ５０値を示す。平均は３．８３±２．２３ｎＭである。
抗体：
ＣＤ３－ＡＦ７００（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、クローンＳＰ３４－２、参照：５５７９１７）
ＴＣＲ－αβ－ＡＦ６４７（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、クローンＲ７３、参照：２０１１１６）
ＴＣＲ－γδ－ＢＶ４２１（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、クローンＢ１、参照：３３１２１８
ＶＤ１－ＰＥ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、クローンＴＳ８．２、参照：１２－５６７９－４２）
カニクイザル（ｎ＝５）由来の全血試料を用いて追加の試験を行った（図３８（Ｄ～Ｇ）参照）。これらをＡＤＴ１－４－２（０．０５２ｍｇ／ｍｌ－カニクイザルドナー１～２、または１ｍｇ／ｍｌ－カニクイザルドナー３～５）で２０時間刺激した。各動物由来の未処理の全血試料を対照として使用した。刺激後にフローサイトメトリーによって、生単一ＣＤ４５＋単核細胞を分析した。図３８Ｄ～Ｇのフロー分析のために、使用した標識分析抗体には、抗ＣＤ３、ＢＶ４２１、ＳＰ３４－２ ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（カタログ番号５６２８７７）、抗ＣＤ４５、Ｖ５００、Ｄ０５８－１２８３ ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（５６１４８９）、抗汎ＧＤ ＰＥ－Ｃｙ７ Ｂ１ ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ（カタログ番号３３１２２２）が含まれた。結果は、最初に（Ｄ）において、全生γδ＋細胞の絶対数が、未処理対照と比較して、ＡＤＴ１－４－２で刺激した後も変化しないままであることを示す。一定のままであるγδＴ細胞の絶対数にもかかわらず、（Ｅ）は、非刺激対照と比較して、ＣＤ３（Ｅｉ）及び汎γδＴＣＲ（Ｅｉｉ）の両方の表面発現が、中央蛍光強度（ＭＦＩ）の減少を介して測定される、ＡＤＴ１－４－２で刺激した後のγδＴ細胞で下方制御されることを示す。次に、カニクイザルドナー１を表すフロープロットを（Ｆ）に示し、ここで、γδＴ細胞は、ＣＤ３及び汎γδの表面発現がＡＤＴ１－４－２による刺激後に下方制御されるにつれてプロットの左下に向かって斜めにシフトするが、全体の％汎ｎγδ＋は両方の条件で同等のままである。最後に、対照的に、（Ｇ）は、ＴＣＲシグナル伝達に関与しない分子であるＣＤ４５の表面発現が、ＡＤＴ１－４－２による刺激後にγδＴ細胞上で変化しないことを示す。これらは、カニクイザル由来のγδＴ細胞に対する本明細書に記載のカニクイザル交差反応性親和性成熟抗Ｖδ１抗体の薬理活性を例示する重要なデータである。
親和性成熟クローンの増強された細胞傷害性
ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７両方のＶδ１クローンの親和性成熟は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＴＨＰ－１傷害アッセイにおいてＶδ１ γδＴ細胞の細胞傷害効果を有意に増強する
ＴＨＰ－１細胞傷害アッセイ
Ｖδ１ ｍＡｂ及び抗ＲＳＶ ＩｇＧ対照をＰＢＳで１μｇ／ｍｌに希釈し、ＰＢＳで１：１０に段階希釈した後、３８４ウェル超イメージングアッセイプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に添加した。ＲＰＭＩ、１０％ ＦＣＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中で培養したＴＨＰ－１細胞（ＡＴＣＣ）を、［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で２０分間染色した。増殖した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁した後、懸濁状態でＴＨＰ－１細胞と１：１で混合した。細胞懸濁液を３８４ウェルアッセイプレートに播種して、ウェルあたり１，０００個のＴＨＰ－１細胞及びウェルあたり２，０００個のＶδ１γδＴ細胞の最終細胞播種密度を得た。ｍＡｂを最終アッセイ体積で２００ｎｇ／ｍｌ～０．２ｐｇ／ｍｌの範囲の濃度に希釈した。ＴＨＰ－１及びＶδ１γδＴ細胞を、Ｖδ１ ｍＡｂの存在下、３７℃、５％ ＣＯ２で２４時間培養した。２４時間後の生きているＴＨＰ－１細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感及び強度に基づいて数量化した。
図３９は、親和性成熟Ｖδ１ ｍＡｂが、親クローンと比較して、ＴＨＰ－１高含量細胞傷害性アッセイにおいて増強された効力を示すことを示す。（Ａ及びＢ）Ｖδ１ ｍＡｂまたは対照の存在下でγδＴ細胞と２４時間共培養した後の生ＴＨＰ－１細胞数の定量化［エフェクター：目標比２：１］。細胞数を、γδなしのＴ細胞対照（１００％）のパーセンテージとして正規化した。ＯＫＴ３（抗ＣＤ３抗体）及び抗ＲＳＶアイソタイプ対照を、アッセイ対照として含めた。生細胞に対する高含量共焦点顕微鏡法を使用して細胞数を計算した。グラフは、親ＡＤＴ１－４（Ａ）及びＡＤＴ１－７（Ｂ）クローンを表す。（Ｃ）ＯＫＴ３対照、ならびにＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンからの平均ＥＣ５０を表す棒グラフ。データは、ｎ＝３の生物学的反復の平均±標準偏差として表される（Ｄ）（Ｃ）にプロットされたＥＣ５０をまとめた表。データは、ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７親クローンと比較した平均値、標準偏差、変化倍数及び改善率として表される。
抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）に対するＶδ１モノクローナル抗体
３人のドナー由来の増殖した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁し、白色９６ウェルプレートにウェルあたり２０，０００細胞の最終密度で播種した。Ｒａｊｉ細胞を２０，０００／ウェルで同様に播種し、ＣＤ２０標的化抗体リツキシマブによって誘導されるＡＤＣＣの陽性対照として使用した。ｍＡｂを希釈し、１～１００ｎＭの範囲の最終濃度で各ウェルに添加した。ＦｃγＲＩＩＩａ＋ＡＤＤ Ｂｉｏａｓｓａｙエフェクター細胞を解凍し、６２，５００個の細胞を各ウェルに添加した後、３７℃、５％ ＣＯ２で４．５時間インキュベートした。ルシフェリン含有Ｂｉｏ－Ｇｌｏ試薬を各ウェルに添加した後、さらに１０分間インキュベートし、プレートリーダーを使用して発光を測定した。
図４０は、Ｖδ１標的化ｍＡｂが無視できる抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導することを示す。下流ＮＦＡＴシグナル伝達をＦｃγＲＩＩＩａ＋エフェクター細胞内のルシフェラーゼ活性の誘導によって測定する代理レポーターアッセイを使用して測定した場合のＡＤＣＣ。エフェクター細胞を、３人のγδＴ細胞ドナー（エフェクター：標的比３）及び様々な濃度のモノクローナル抗体と共培養した。ＣＤ２０＋Ｒａｊｉ細胞及びリツキシマブを陽性対照として含めた。共培養の４．５時間後に生物発光を測定した。データは、３つの生物学的複製物（３人のγδＴ細胞ドナー）の平均±ＳＤとして表される。
結論：このデータは、ＮＦＡＴシグナル伝達がルシフェラーゼ活性を誘導するＦｃγＲＩＩＩａ＋エフェクターレポーター細胞株を介して実証された、ＡＤＴ１－４親及び親和性成熟誘導体ＡＤＴ１－４－２がＡＤＣＣを誘導しないことを実証している。しかしながら、ＯＫＴ３は、高レベルのＡＤＣＣ特異的シグナル伝達を誘導するようである。
補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）に対するＶδ１モノクローナル抗体
増殖した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁し、白色９６ウェルプレートにウェルあたり７５，０００細胞の最終密度で播種した。Ｒａｊｉ細胞を７５，０００／ウェルで同様に播種し、ＣＤ２０標的化抗体リツキシマブによって誘導されるＣＤＣの陽性対照として使用した。ｍＡｂを希釈し、１～１００ｎＭの範囲の最終濃度で各ウェルに添加した。新鮮または熱不活性化したヒト血清を最終濃度４０％まで添加した。熱不活化は、血清を水浴中で５６℃で３０分間温め、続いて氷上で冷却することによって行った。次いで培養物を３７℃、５％ＣＯ２で２４インキュベートした。２４時間後に生細胞の数を決定するために、細胞を採取し、１：１０００の希釈度のｘｘ生死判別色素で２０分間染色した。ＭＡＣＳＱｕａｎｔを用いて蛍光を測定し、生細胞数を生存色素についての陰性染色に基づいて定量化した。
結果を図４１に示し、これは、Ｖδ１標的化ｍＡｂが補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導しないことを実証している。４０％ヒト血清及び５０ｎＭ抗ＣＤ３ ＯＫＴ３または抗Ｖδ１ ＡＤＴ１－４－２及び様々な濃度のモノクローナル抗体との培養後の生存可能なγδＴ細胞の数。血清を新鮮な状態で使用したか、または事前に熱不活性化した。ＣＤ２０＋Ｒａｊｉ細胞及びリツキシマブを陽性対照として含めた。生存率は、２４時間の共培養後に生存率色素を介して測定した。データは、３つの生物学的複製物の平均±ＳＤとして表される。
結論：このデータは、ＡＤＴ１－４－２が補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導せず、補体含有血清の存在下でＶδ１陽性細胞の細胞傷害性が増加しないことを実証している。しかしながら、リツキシマブは、ＣＤ２０陽性Ｒａｊｉ細胞に対して強いＣＤＣ刺激を示す。
健康細胞の温存
健康な細胞に対する細胞傷害性に関して、抗ｖδ１抗体でｖδ１細胞を刺激／活性化する効果を調べるために研究を行った。これは、抗ｖδ１クローンＡＤＴ１－４－２をＰＢＭＣとインキュベートし、次いで単球の細胞傷害性及びアポトーシスを評価することによって試験した。
凍結保存ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）は、３人の健康なドナーから商業的に供給された。ＰＢＭＣを丸底９６ウェル組織培養プレートに、１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ１５を含む２５０ｕｌの完全培地（１０％ＦＣＳ、ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ、非必須アミノ酸、ピルビン酸ナトリウム、及びＨＥＰＥＳを補ったＲＰＭＩ）中、２５０，０００細胞／ウェルで播種した。滴定ｖδ１抗体ＡＤＴ１－４－２を６．６ｎＭの最終濃度まで添加した。ＲＳＶ ＩｇＧ、ＩｇＧ２α及びＯＫＴ ３抗体を対照として含めた。刺激は２０時間行った。フローサイトメトリー分析をエンドポイントで実施して、ｖδ１細胞に対して各条件の単球表現型及びアポトーシス単球を決定した。細胞を最初に生シングレットでゲーティングし、続いてＣＤ１４（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ １３０－１１０－５２３）でゲーティングして単球を同定した。次いで、陽性ＡｐｏＴｒａｃｋｅｒ Ｇｒｅｅｎ染色（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ ４２７４０２）によってアポトーシス単球を同定した。
図４２Ａ（左上パネル）は、標的会合の指標としての抗体刺激時のｖδ１ ＴＣＲ染色ＭＦＩを示す。図４２Ｂ（右上パネル）及びｘｉｘＣ（下パネル）は、抗体刺激後のエンドポイント単球表現型及びアポトーシス単球を（それぞれ）示す。ｖδ１抗体クローンＡＤＴ１－４－２による刺激はＶδ１細胞に会合したが、健康な単球細胞傷害性を引き起こさなかった。
実施例２５．一次腫瘍生検からの全集団に対する抗ＶΔ１抗体の効果
抗Ｖδ１抗体は、腫瘍浸潤リンパ球において活性化、増殖及び細胞傷害性を促進した。
抗Ｖδ１抗体によって付与されるヒト腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の調節を調査するために、複数の試験を行った。これらの研究では、ヒト腎細胞癌（ＲＣＣ）腫瘍生検が新鮮な状態で輸送され、受領時に処理された。生検を約２ｍｍ２の大きさの断片に切断し、Ｋｕｐｐｅｒ及びＣｌａｒｋｅ（Ｃｌａｒｋｅ ｅｔ ａｌ，２００６）によって最初に記載された方法の適合を使用してＴＩＬを得た。具体的には、最大４つの２ｍｍ２の生検を９ｍｍｘ９ｍｍｘ１．５ｍｍのＣｅｌｌｆｏａｍマトリクスに配置し、２４ウェルプレートのウェルごとに１つのマトリクスを配置した。次に、４％ヒト血漿、β－メルカプトエタノール（５０μＭ）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、アンホテリシンＢ（２．５μｇ／ｍｌ）、ＨＥＰＥＳ（１０ｍＭ）、ピルビン酸Ｎａ（１ｍＭ）、ＭＥＭ非必須アミノ酸溶液（１Ｘ）及びＩＬ－１５（２ｎｇ／ｍｌ、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ）を添加した２ｍｌのイスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）で生検を行った。１ｍｌの培地を３～４日ごとに吸引し、２×濃縮ＩＬ－１５を含有する１ｍｌの完全培地と交換した。ＴＩＬを１０または１１日後に収集し、７０μＭナイロン細胞ストレーナーに通し、３００ｘｇで５分間遠心分離し、計数のために完全培地に再懸濁した。次いで、抗Ｖδ１抗体で刺激する前に、９６ウェルプレートにウェルあたり４００，０００個の細胞を播種した。ＴＩＬを、２または５０ｎｇ／ｍｌの濃度のＩＬ－１５の存在下で、ＡＤＴ１－４、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－７－３またはＲＳＶ ＩｇＧ１アイソタイプ対照抗体で刺激した。
図４３（Ａ及びＢ）は、２人の別々のドナーにおける４８（Ａ）または７２（Ｂ）時間のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各場合における標的会合が確認される。腫瘍浸潤Ｖδ１＋細胞を、ＣＤ２５及びＫｉ６７の発現について分析した。図４３（Ｃ）は、ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞上のＣＤ２５及びＫｉ６７の両方の発現の増強を示す。ｍＡｂで刺激されたＴＩＬの培養物からの上清を、ＭＳＤによってサイトカイン産生について分析した。図４３（Ｄ）は、５０ｎｇ／ｍｌ ＩＬ－１５の存在下、ＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３で７２時間刺激したＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的な倍数増加を示す。図４３（Ｅ）は、ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激が、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。
あるいは、異なるドナーからの生検物を受領時に酵素消化して、単一細胞懸濁液を得た。具体的には、関連細胞表面分子の切断を防ぐために０．２Ｘ濃度で使用された酵素Ｒとは別に製造元が推奨する濃度のＭｉｌｔｅｎｙｉ腫瘍解離キットの酵素を含む４．７ｍｌのＲＰＭＩと共に最大１ｇの組織をＭｉｌｔｅｎｙｉ Ｃ管に入れた。Ｃ管は、加熱ブロックが取り付けられたｇｅｎｔｌｅＭＡＣＳ（商標）Ｏｃｔｏ Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｏｒに配置された。小腫瘍の解離のためにプログラム３７Ｃ＿ｈ＿ＴＤＫ＿１を選択した。１時間後、消化物を７０μＭフィルタを通して濾過し、４％のヒト血漿を含有する完全ＩＭＤＭを加えて酵素活性をクエンチした。次に、細胞を２回洗浄し、計数のために完全ＩＭＤＭに再懸濁させた。細胞数に応じて、２×１０６個または４×１０６個の細胞を４８ウェルプレートにウェルあたり播種し、２ｎｇ／ｍｌの濃度のＩＬ－１５の存在下でＡＤＴ１－４、ＡＤＴ１－４－２またはＲＳＶ ＩｇＧ１アイソタイプ対照抗体で刺激した。酵素消化によって単離されたＴＩＬは、ｍＡｂ刺激の２４～７２時間後にフローサイトメトリーによって分析した。図４３（Ｆ及びＧ）は、２人の個々のドナーにおける２４（Ｆ）または７２（Ｇ）時間でのｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞上のＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合が確認される。図４３（Ｈ）は、ＡＤＴ１－４－２で７２時間刺激した後のγδＴ細胞上のＫｉ６７の用量依存的な発現増強を示す。ｍＡｂで刺激されたＴＩＬの培養物からの上清を、ＭＳＤによってサイトカイン産生について分析した。図４３（Ｉ及びＪ）は、酵素消化によって２人の個々のドナーから単離され、２ｎｇ／ｍｌ ＩＬ－１５の存在下、６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激されたＴＩＬによって産生されるＩＦＮ－γの倍数増加を２つの時点、２４時間（Ｉ）及び７２時間（Ｊ）において示す。要約すると、これらの組み合わせた結果は、親和性成熟抗Ｖδ１抗体が刺激の７２時間以内に腫瘍浸潤γδＴ細胞による活性化、増殖及び抗腫瘍原性サイトカイン産生を駆動する能力を強調している。
別の実験では、肺腫瘍由来ＴＩＬをグリッドマトリクス上で単離し、２ｎｇ／ｍｌ ＩＬ－１５の存在下で１０日間、ＡＤＴ１－４、ＡＤＴ１－４－２またはＩｇＧ１アイソタイプ対照で刺激した。図４４（Ａ）はＡＤＴ１－４－２で１０日間刺激したγδＴ細胞におけるＣＤ２５及びＫｉ６７の発現増強を示す。図４４（Ｂ）はＡＤＴ１－４－２で１０日間刺激した後のパーフォリン＋グランザイムＢ＋γδＴ細胞の実質的な増加を示す。より長い期間にわたるｍＡｂによる刺激により、抗Ｖδ１抗体刺激Ｖδ１＋Ｔ細胞を介するαβＴ細胞の免疫ライセンス付与の分析が可能になった。図４４（Ｃ）は腫瘍浸潤Ｖδ１＋Ｔ細胞をＡＤＴ１－４－２で１０日間刺激した後のＣＤ８＋及びＣＤ８－αβＴ細胞の両方によるグランザイムＢ及びパーフォリンの発現のかなりの増強を示す。ｍＡｂと共に１０日間培養したＴＩＬ由来の上清をＭＳＤによって分析した。図４４（Ｄ）はＡＤＴ１－４－２で刺激した後の肺腫瘍由来ＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の顕著な増加、ＩＬ－１７及びＩＬ－６産生の中程度の増加を示す。図４４（Ｅ）はＡＤＴ１－４－２で１０日間刺激した後のＴＩＬによるケモカインＣＣＬ２、ＣＣＬ４及びＣＸＣＬ１０の産生増強を実証する。要約すると、これらの結果は、抗Ｖδ１抗体が腫瘍浸潤γδＴ細胞の活性化及び細胞傷害性を駆動する能力を有し、その後、腫瘍浸潤αβＴ細胞の細胞傷害性を促進することができることを強調している。
実施例２６．ヒト及びカニクイザルＶδ１に対するＶδ１－ＣＤ１９二重特異性抗体の結合親和性
標的（すなわち、γδＴＣＲのＶδ１鎖、ヒト及びカニクイザルの両方の抗原）に対する抗体の結合親和性は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって確立される。抗体をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体またはカニクイザルＶδ１ヘテロ二量体を細胞上に流した。実験はすべて室温で行った。結果を図４９に示す。
これらのデータは、二重特異性抗体がヒト及びカニクイザルの両方のＶδ１と結合することを実証する。
実施例２７Ａ Ｖδ１γδＴ細胞活性化及び細胞傷害性アッセイにおけるＶδ１－ＣＤ１９二重特異性抗体。
負の磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ；ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）を使用して、健康なＢ細胞をＰＢＭＣ（Ｌｏｎｚａ）から単離した。がん性ＮＡＬＭ－６細胞（ＡＴＣＣ）、Ｒａｊｉ細胞（ＡＴＣＣ）、及び健康な単離Ｂ細胞におけるＣＤ１９の発現を決定した。簡潔に述べると、５×１０＾４個の細胞をＣＤ１９抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）と共に１５分間４℃でインキュベートした後、洗浄し固定した。ＣＤ１９の発現をフローサイトメトリー（ＭＡＣＳＱｕａｎｔ１０、ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）によって決定した。結果を図５０Ａに示す。
ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びＣＤ１９＋健康細胞の温存に対するＣＤ１９－Ｖδ１二重特異性抗体の効果を、Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）のハイコンテント共焦点イメージングを使用して決定した。ＮＡＬＭ－６、Ｒａｊｉ、及びＢ細胞を［０．５μＭ］ＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で２０分間染色した。二重特異性抗体及び対照をＰＢＳに系列希釈した後、３８４ウェルイメージングアッセイプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に加えた。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁した後、懸濁状態でＮＡＬＭ－６、Ｒａｊｉ、またはＢ細胞のいずれかと１：１で混合した。細胞懸濁液を３８４ウェルアッセイプレートに播種して、最終的な細胞播種密度をウェル当たりＮＡＬＭ－６細胞、Ｒａｊｉ細胞またはＢ細胞２，０００個、及びウェル当たりＶδ１γδＴ細胞２，０００個とした。最終アッセイ抗体濃度は６．６ｎＭ～６６ｐＭの範囲であった。細胞を２４時間共培養した後にＤＲＡＱ７（１：３００最終、Ａｂｃａｍ）で染色した。
生きている標的細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、ＣＦＳＥ染色のサイズ、形態、質感及び強度、ならびにＤＲＡＱ７染色の非存在に基づいて数量化した。結果を図５０、Ｂ～Ｄに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及び脱顆粒に対するＣＤ１９－Ｖδ１二重特異性抗体の効果を決定するため、Ｖδ１ ＴＣＲの下方制御及びＣＤ１０７ａの上方制御をＣＤ１９＋標的細胞及びＣＤ１９＋健康細胞の存在下で数量化した。簡潔に述べると、抗体をＰＢＳで系列希釈した後、Ｕ底９６ウェルプレートに加えた。ＮＡＬＭ－６及び単離Ｂ細胞を［０．５μＭ］ＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で２０分間染色した。皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を培養フラスコから剥離し、細胞懸濁液をＮＡＬＭ－６またはＢ細胞と０．５：１で混合した。細胞懸濁液をウェル当たりＮＡＬＭ－６またはＢ細胞５×１０＾４個に対してウェル当たりＶδ１γδＴ細胞２．５×１０＾４個でアッセイプレートに播種した。最終アッセイ抗体濃度は６０ｎＭ～３ｐＭの範囲である。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で４時間インキュベートした。細胞を洗浄し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ５２０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、Ｖδ１ ＴＣＲ（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）、及びａＣＤ１０７ａ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）の表面発現について３０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、４℃の暗所で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、ＶＤ１ ＴＣＲ発現レベルを測定した。結果を図５０、Ｆ～Ｋに示す。
結論：Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性抗体は、健康なＣＤ１９＋細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞のγδＴ細胞媒介性細胞傷害性を増強する。Ｖδ１抗体の親和性成熟により、一価フォーマットの親クローンと比較して細胞傷害性が増強される。
実施例２７Ｂ：Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性抗体は、健康細胞を温存しながら、がん細胞に対するＶδ１γδＴ細胞の細胞傷害性効果を選択的に増強する
ＣＤ１９＋標的細胞傷害性及びＣＤ１９＋健康細胞の温存に対するＣＤ１９－Ｖδ１二重特異性抗体の効果を、Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）のハイコンテント共焦点イメージングを使用して決定した。負の磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ；ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）を使用して、健康なＢ細胞をＰＢＭＣ（Ｌｏｎｚａ）から単離した。Ｒａｊｉ細胞及び健康な初代Ｂ細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ色素で染色した。増殖した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞及びドナー適合αβＴ細胞を培養物から取り出し、洗浄し、培養培地に再懸濁した後、Ｒａｊｉ細胞及びＢ細胞と１：１で混合した。二重特異性抗体及び対照をＰＢＳで系列希釈した後、３８４ウェルイメージングアッセイプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に加えた。γδＴ細胞、Ｒａｊｉ細胞、及びＢ細胞、またはαβＴ細胞、Ｒａｊｉ細胞、及びＢ細胞、またはＶδ１γδＴ細胞、αβＴ細胞、Ｒａｊｉ細胞、及びＢ細胞のいずれかの細胞懸濁液を３８４ウェルイメージングアッセイプレートに加えて、ウェル当たり各細胞型２，０００個、及び６．６ｎＭ～６６ｐＭの範囲の最終的な抗体アッセイ濃度を達成した。生きている標的細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、２４時間時点のＣＦＳＥ染色のサイズ、形態、質感及び強度に基づいて数量化した。結果を図６３、Ａ～Ｆに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞またはαβＴ細胞の活性化が腫瘍形成促進性サイトカインＩＬ－１７の産生上昇をもたらすかどうかを判定するために、２４時間時点で画像を取得した後、上清をイメージングプレートから収集した。上清をＵ－Ｐｌｅｘ １０－ｐｌｅｘ Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭＳＤ）に流し、ＩＬ－１７Ａレベルを数量化した。結果を図６３、Ｇ～Ｉに示す。
ＩＬ－１７Ａ（インターロイキン－１７Ａ）は、活性化されたＴ細胞によって産生される腫瘍形成促進性サイトカインである。ＩＬ－１７Ａは、腫瘍の増殖を増強し、抗がん免疫応答を抑制し得る。図６３、Ｇ～Ｉに示すように、抗ｖδ１抗体はＩＬ－１７Ａの分泌を誘導しないが、抗ＣＤ３抗体は誘導する。
結論：Ｖδ１－ＣＤ１９二重特異性抗体は、健康なＣＤ１９＋細胞を温存しながら、ＣＤ１９＋標的細胞のγδＴ細胞媒介性細胞傷害性を増強する。対照的に、抗ＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性薬は、γδＴ細胞及びαβＴ細胞の両方によるＣＤ１９＋標的細胞の溶解を増強させたが、αβＴ細胞の活性化は、健康な初代ＣＤ１９＋Ｂ細胞の溶解、及び腫瘍形成促進性サイトカインＩＬ－１７Ａの分泌も増強させた。
実施例２８ 結合アッセイ及びハイコンテント細胞傷害性アッセイにおけるＶδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体
Ｈｅｒ２及びＶδ１の発現を、ＳＫ－ＢＲ－３細胞（Ｃａｌｔａｇ－Ｍｅｄｓｙｓｔｅｍｓ Ｌｔｄ）、ＢＴ－４７４細胞（ＡＴＣＣ）、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１－Ｌｕｃ細胞（Ｃｒｅａｔｉｖｅ Ｂｉｏｇｅｎｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、及びＶδ１γδＴ細胞で測定した。簡潔に述べると、５×１０＾４個の細胞をＨｅｒ２及びＶδ１抗体（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）と共に１５分間４℃でインキュベートした後、洗浄し固定した。Ｈｅｒ２及びＶδ１の発現をフローサイトメトリー（ＭＡＣＳＱｕａｎｔ１０、ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）によって決定した。結果を図５１Ａ及び５１Ｂに示す。ある範囲の濃度のＡＤＴ１－４若しくはＡＤＴ１－４－２ ｍＡｂまたはＶδ１二重特異性抗体、または対照（ＩｇＧ対照またはトラスツズマブ）と共に標的細胞を１５分間インキュベートすることにより、Ｈｅｒ２－Ｖδ１二重特異性抗体の結合を決定した。洗浄後、細胞を抗ヒトＩｇＧ二次抗体と共に更に１５分間インキュベートしてから、洗浄し固定した。各細胞型に結合した抗体の量をフローサイトメトリーによって決定した。結果を図５１、Ｃ～Ｆに示す。
Ｈｅｒ２＋／Ｈｅｒ２－標的細胞傷害性に対するＨｅｒ２－Ｖδ１二重特異性抗体の効果を、Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）のハイコンテント共焦点イメージングを使用して決定した。簡潔に述べると、ＳＫ－ＢＲ－３、ＢＴ－４７４及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を３８４ウェルイメージングプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に播種して最終的な播種密度をウェル当たり標的細胞２，０００個とした後、３７℃、５％ＣＯ２で一晩インキュベートした。抗体をＰＢＳに希釈し、１：１０に系列希釈した後、アッセイプレートに加えて最終アッセイ濃度を３３３ｎＭ～０．３３ｐＭとした。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁した後、アッセイプレートに１：１のエフェクター：標的比でウェル当たり細胞２，０００個を加えた。細胞を２４時間共培養した後にＨｏｅｃｈｓｔ（１：１０００最終、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＤＲＡＱ７（１：３００最終、Ａｂｃａｍ）で染色した。生きている標的細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感及び強度、ならびにＤＲＡＱ７染色の非存在に基づいて数量化した。結果を図５１、Ｇ～Ｊに示す。
結論：Ｖδ１－Ｈｅｒ２二重特異性抗体は、Ｈｅｒ２－細胞を温存しながら、Ｈｅｒ２＋標的細胞のγδＴ細胞媒介性細胞傷害性を増強する。Ｖδ１抗体（ＡＤＴ１－４－２）の親和性成熟により、親クローン（ＡＤＴ４－１）と比較して細胞傷害性が増強される。
実施例２９ ヒトＶδ１及びヒトＥＧＦＲ抗原に対するＶδ１－ＥＧＦＲ二重特異性抗体の結合親和性
標的（すなわち、γδＴＣＲのＶδ１鎖及びＥＧＦＲ）に対する抗体の結合親和性は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって確立される。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体またはヒトＥＧＦＲを、１００ｎＭの濃度で、会合１８０秒、解離４８０秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。実験はすべて室温で行った。結果を図５２Ａ及び図５２Ｂに示す。
結論：このデータは、Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体が、ヒトＥＧＦＲ結合能の導入にもかかわらず、それらの調製において使用される単一特異性抗Ｖδ１抗体の結合に匹敵するヒトＶδ１への結合を示すことを実証している。
実施例３０．Ｖδ１－ＥＧＦＲ二重特異性抗体の標的細胞結合
ＥＧＦＲ／Ｖδ１二重特異性抗体の結合の特異性及び親和性を決定するために、ＥＧＦＲ陽性Ａ４３１及びＶδ１陽性初代γδＴ細胞をアッセイした。標的細胞を組織培養フラスコから剥離し、ＰＢＳに再懸濁し、ｖ底９６ウェルプレートにウェル当たり細胞１００，０００個の最終密度で播種した。細胞を遠心分離にかけ、製造元の説明書に従って細胞ペレットをＦｃＲブロッキング試薬に再懸濁し、４℃で２０分間インキュベートしてから更に洗浄した。抗体をＰＢＳで５００ｎＭに希釈し、ＰＢＳで１：１０に系列希釈して５０ｐＭとし、細胞に加えた後、４℃で２０分間のインキュベーションを行った。細胞表面に結合したｍＡｂの量を決定するために、生死判別色素に加えて、ＡＰＣにコンジュゲートされたマウス抗ヒトＩｇＧ二次抗体（希釈度１：１００）で細胞を染色した。４℃で２０分間のインキュベーション後、細胞を２回洗浄し、ＭＡＣＳＱｕａｎｔを使用して蛍光を測定した。
結果を図５３に示す。
結論：このデータは、Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体が、ＥＧＦＲ陽性Ａ４３１細胞株への結合の導入にもかかわらず、その調製において使用される単一特異性抗Ｖδ１抗体の結合に匹敵するＶδ１陽性γδＴ細胞への結合を示すことを実証している。
実施例３１ ｉｎ ｖｉｔｒｏでのγδＴ細胞の活性化及び標的細胞傷害性の評価
増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞及びＡ４３１細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁し、所望のエフェクター：標的比に応じた適切な細胞希釈度で９６ウェルプレートに播種した。ｍＡｂを希釈し、規定濃度で各ウェルに加えた。次いで培養物を３７℃、５％ＣＯ２で４時間（Ｄ）または２４時間（Ａ～Ｃ、Ｅ）インキュベートした。生細胞の数を決定するために、細胞を採取し、１：１０００の希釈度の生死判別色素で２０分間染色した。ＣＤ２５の状態を決定するために、細胞を採取した後、細胞表面を抗ＣＤ２５抗体で染色した。脱顆粒を測定するために、フルオロフォアにコンジュゲートした抗ＣＤ１０７α抗体を共培養開始時に細胞－抗体ミックスに直接加えた。２回の洗浄及び細胞固定の後、ＭＡＣＳＱｕａｎｔを使用して蛍光を測定し、生細胞数及び蛍光強度中央値を決定した。結果を図５４に示す。
結論：このデータは、Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体が初代Ｖδ１陽性γδＴ細胞の活性化及び脱顆粒を誘導し、ＥＧＦＲ陽性Ａ４３１細胞株の細胞媒介性溶解を増加させることを実証する。
実施例３２ 本発明の抗体によって付与されるγδＴ細胞活性化及び非枯渇効果のさらなる評価
血液由来のｖδ１＋細胞（図５５Ａ、Ｂ）を用いた試験：
複数の研究を行って、ｖδ１細胞におけるＣＤ３の下方制御に関する、抗ｖδ１抗体によるｖδ１細胞の刺激／活性化の効果を調査した。これは、抗ｖδ１クローンＡＤＴ１－４－２をＰＢＭＣと共にインキュベートし、次いで表現型解析によりＴＣＲを分析することによって試験した。
凍結保存されたヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を商業的に調達し、丸底９６ウェル組織培養プレートに、１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ１５を含む２５０ｕｌの完全培地（１０％ＦＣＳ、ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ、非必須アミノ酸、ピルビン酸ナトリウム、及びＨＥＰＥＳを補ったＲＰＭＩ）中、２５０，０００細胞／ウェルで播種した。滴定ｖδ１抗体ＡＤＴ１－４－２を、１ｕｇ／ｍｌ（６．６７ｎＭ）、０．０１ｕｇ／ｍｌ（０．０６７ｎＭ）、または０．０００１ｕｇ／ｍｌ（０．０００６７ｎＭ）の最終濃度まで加えた。一致する濃度の対照としてＲＳＶ ＩｇＧ抗体を含めた。３日毎に培地及び抗体を補充しながら、培養物を１４日間インキュベートした。各条件でｖδ１細胞及びＴＣＲ発現の表現型解析を行うために、エンドポイントでフローサイトメトリー分析を行った。細胞はまず、生きている一重項でゲーティングし、続いて汎γδ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＲＥＡ５９２；１３０－１１３－５０８）でゲーティングし、これはｖδ１（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＲＥＡ１７３；１３０－１００－５５３）のための親ゲートであり、これ自体がＣＤ３（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＲＥＡ６１３；１３０－１１３－１４２）のための親ゲートであった。細胞集団を陽性染色によって同定し、次いでＭＦＩによって試料間の各マーカーの相対的な発現レベルを同定した。
腫瘍常在性ｖδ１＋細胞（図５５Ｃ、Ｄ、Ｅ）に関する試験：
図５５Ｃ、Ｄ及びＥについては、固形腫瘍生検（腎細胞癌（ＲＣＣ）患者から切除）を新鮮な状態で輸送し、受領時に処理して単一細胞懸濁液を得た。具体的には、組織を約２ｍｍ２の大きさに細かく刻み、関連細胞表面分子の切断を防ぐために０．２Ｘ濃度で使用された酵素Ｒ以外の製造元が推奨する濃度のＭｉｌｔｅｎｙｉ腫瘍解離キットの酵素を含む４．７ｍｌのＲＰＭＩと共に最大１ｇの組織をＭｉｌｔｅｎｙｉ Ｃ管に入れた。Ｃ管は、加熱ブロックが取り付けられたｇｅｎｔｌｅＭＡＣＳ（商標）Ｏｃｔｏ Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｏｒに配置された。軟性腫瘍の解離のためにプログラム３７Ｃ＿ｈ＿ＴＤＫ＿１を選択した。１時間後、消化物を７０μＭフィルタを通して濾過し、４％のヒト血漿を含有する完全ＩＭＤＭを加えて酵素活性をクエンチした。次に、細胞を２回洗浄し、計数のために完全ＩＭＤＭに再懸濁させた。この時点で、細胞を刺激のために播種した。２．５×１０６細胞／ウェルを２４ウェルプレートに播種し、２ｎｇ／ｍｌの濃度のＩＬ－１５の存在下でＡＤＴ－１－４－２または抗ＩｇＧ１アイソタイプ対照抗体で刺激した。生単一ＣＤ４５＋腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を、ｍＡｂ刺激の２４時間後にフローサイトメトリーによって分析した。
図５５Ａは、ｍＡｂ標的会合の指標としての抗体刺激時のｖδ１ ＴＣＲのＭＦＩを示す。図５５Ｂは、陽性ゲーティングされたｖδ１細胞におけるＣＤ３発現のＭＦＩを示す。ｖδ１抗体クローンＡＤＴ１－４－２による刺激はｖδ１細胞に会合し、ｖδ１細胞上のｖδ１及びＣＤ３の両方の下方制御をもたらした。合わせて、図５５Ｃ、図５５Ｄ及び図５５Ｅは、本明細書に記載の例示的抗Ｖδ１抗体による腫瘍関連Ｖδ１ Ｔ細胞の活性化がＶδ１＋Ｔ細胞を枯渇させないが、ＣＤ３／γδＴＣＲ複合体と会合して活性化し、その下方制御及び表面発現の喪失を付与することを示す。具体的には、図５５Ｃは、ウェルあたりの総γδ＋及びγδ＋Ｖδ１＋細胞の絶対数が、ＡＤＴ－１－４－２または抗ＩｇＧ１アイソタイプ対照による刺激後に一定のままであることを示す。Ｖδ１ Ｔ細胞の絶対数が一貫したままであるにもかかわらず、図５５Ｄは、Ｖδ１ ＴＣＲ、汎γδＴＣＲ及びＣＤ３の表面発現が、ＡＤＴ－１－４－２による刺激後にＶδ１ Ｔ細胞上で下方制御されるが、抗ＩｇＧ１アイソタイプ対照による刺激では下方制御されないことを示す。対照的に、ＴＣＲシグナル伝達に関与しない分子であるＣＤ４５の表面発現は、ＡＤＴ－１－４－２による刺激後も変化しない。図５５Ｅは、図５５Ｄのデータを表すＦＡＣＳプロット（ｍＡｂ濃度３３．３ｎＭ）を示し、Ｖδ１ Ｔ細胞は灰色で標識されている。ここで、Ｖδ１＋Ｔ細胞は、ＣＤ３及び汎γδの表面発現が、アイソタイプ対照ではなくＡＤＴ－１－４－２での刺激後に下方制御されるため、プロットの左下に向かって斜めにシフトする（示される上パネル）が、ＣＤ４５＋の全体的な％汎γδ＋は、両方の条件で同等のままである。Ｖδ１発現のさらなるゲーティング（下パネル）は、刺激後及び確立されたＶδ１ ＴＣＲ陽性ゲーティングからＶδ１「陰性」ゲートにわずかな割合（約５％）が移動する点までのＶδ１ ＭＦＩの減少を特に示す（同時に「陰性」ゲートの約５％の増加が観察される）。合わせると、これらは、本明細書に記載の抗体によるＶδ１ ＴＣＲの活性化がＶδ１＋Ｔ細胞を枯渇させないことを例示する重要なデータである。そのような発見などから、本発明の抗体は、血液、組織及び腫瘍常在Ｖδ１＋Ｔ細胞の活性化を伴う機構を介して疾患または障害の少なくとも１つの徴候または症状を改善するように、疾患または障害を治療するための医薬として使用し得ると考えることができる。
実施例３３：Ｖδ１－ＦＡＰα二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＦＡＰα＋線維芽細胞の溶解を増強する。
抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＦＡＰα（シブロツズマブに基づく）及び抗Ｖδ１ｘＦＡＰα（ＡＤＴ１－４ｘシブロツズマブ）（配列番号４０１または配列番号４１４及び配列番号４１５）抗体のその標的（すなわち、γδＴＣＲ及びＦＡＰαのＶδ１鎖）への結合の結合速度論を、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ装置（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用するＳＰＲ分析によって確立する。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体またはヒトＦＡＰαを、１００ｎＭの濃度で、会合１８０秒、解離４８０秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。実験はすべて室温で行った。結果を図５６Ａに示す。ＫＤ値は以下の通りである：
Figure 2024506682000030
ある範囲の濃度の抗Ｖδ１抗体若しくはＶδ１二重特異性抗体または対照（ＩｇＧ対照または抗ＦＡＰα）と共にＦＡＰα＋標的細胞またはＶδ１＋エフェクター細胞を１５分間インキュベートすることにより、Ｖδ１－ＦＡＰα二重特異性抗体の結合を決定した。洗浄後、細胞を抗ヒトＦｃ二次抗体と共に更に１５分間インキュベートしてから、洗浄し固定した。各細胞型に結合した抗体の量をフローサイトメトリーによって決定した。結果を図５６、Ｂ～Ｃに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及び脱顆粒に対するＶδ１－ＦＡＰα二重特異性抗体の効果を決定するため、Ｖδ１ ＴＣＲの下方制御及びＣＤ１０７ａの上方制御をＦＡＰα＋標的細胞の存在下で数量化した。簡潔に述べると、抗Ｖδ１、抗ＦＡＰα、及び抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体をＰＢＳで系列希釈した後、Ｕ底９６ウェルプレートに加えた。ＦＡＰα＋標的細胞（ＢＪ線維芽細胞またはヒト皮膚線維芽細胞）を［０．５μＭ］ＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で２０分間染色した。皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を培養フラスコから剥離し、細胞懸濁液をＦＡＰα＋標的細胞と１：１で混合したか、または培地で１：１に希釈した。細胞懸濁液を、ウェル当たりＦＡＰα＋標的細胞２．５×１０＾４個の存在下または非存在下にて、ウェル当たりＶδ１γδＴ細胞２．５×１０＾４個でアッセイプレートに播種した。最終アッセイ抗体濃度は２００ｎＭ～２ｐＭの範囲である。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で４時間インキュベートしてから洗浄し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ５２０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、Ｖδ１ ＴＣＲ（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）、及びａＣＤ１０７ａ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）の表面発現について３０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、４℃の暗所で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により決定されるＶＤ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａの発現レベルを測定した。結果を図５６Ｄ～Ｇに示す。
ＦＡＰα＋線維芽細胞の非存在下では中程度のＶδ１ ＴＣＲ下方制御が観察される（図５６、Ｄ）。しかしながら、ＦＡＰα＋線維芽細胞の存在下では、抗ＦＡＰα－Ｖδ１二重特異性抗体はＴＣＲ下方制御を大幅に増強する（図５６、Ｅ）。これは、Ｖδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する抗ＦＡＰα－Ｖδ１二重特異性抗体の効果が、隣接細胞上のＦＡＰαなどの腫瘍特異的抗原への結合を介して増強されることを示す。
抗Ｖδ１×ＦＡＰα二重特異性抗体及びＦＡＰα＋線維芽細胞の存在下では、ＣＤ１０７ａ（脱顆粒のマーカー）がＶδ１γδＴ細胞においてモノクローナル対照と比較して上方制御される（図５６、Ｇ）。ＦＡＰα＋線維芽細胞が存在しない場合、ＣＤ１０７ａはＶδ１γδＴ細胞においてモノクローナル対照と比較して上方制御されない（図５６、Ｆ）。これは、Ｖδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する抗ＦＡＰα－Ｖδ１二重特異性抗体の効果が特異的であり、抗ＦＡＰα－Ｖδ１二重特異性抗体がＦＡＰα＋細胞の存在下でＶδ１γδＴ細胞の脱顆粒及び活性化を増強することを示す。
ＦＡＰα＋標的細胞傷害性に対するＦＡＰα－Ｖδ１二重特異性抗体の効果を、Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）のハイコンテント共焦点イメージングを使用して決定した。ＦＡＰα＋標的細胞（ＢＪ線維芽細胞、ヒト皮膚線維芽細胞）を３８４ウェルイメージングプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に播種し、２４時間インキュベートした。二重特異性抗体及び対照をＰＢＳに系列希釈した後、アッセイプレートに加えた。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁した後、アッセイプレートに１：１のエフェクター：標的比で加えた。最終アッセイ抗体濃度は６．６ｎＭ～６６ｆＭの範囲であった。細胞を２４時間共培養した後にＤＲＡＱ７（１：３００最終、Ａｂｃａｍ）及びＨｏｅｃｈｓｔ（１：１，０００、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で染色した。
生きている標的細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、Ｈｏｅｃｈｓｔ染色のサイズ、形態、質感及び強度、ならびにＤＲＡＱ７染色の非存在に基づいて数量化した。結果を図５６、Ｈに示す。抗ＦＡＰα－Ｖδ１二重特異性抗体の存在下では、抗Ｖδ１及び抗ＦＡＰα対照と比較して、線維芽細胞傷害性の顕著な増加が観察された（図５６、Ｈ）。これは、Ｖδ１γδＴ細胞を標的細胞と直接架橋すると、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及び細胞傷害性効果を特異的に増強できることを示している。
結論：抗Ｖδ１－ＦＡＰα二重特異性抗体は、Ｖδ１＋γδＴ細胞及びＦＡＰα＋標的細胞に特異的に結合し、上昇したＶδ１ ＴＣＲ下方制御、ＣＤ１０７ａ上方制御、及びＦＡＰα＋線維芽細胞の溶解によって示されるように、ＦＡＰα＋細胞の存在下のＶδ１γδＴ細胞の活性化を増強させる。
実施例３４：Ｖδ１－ＭＳＬＮ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及びＭＳＬＮ＋標的細胞の溶解を増強する。
抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＭＳＬＮ（メソテリン）（米国特許出願公開第２０１４／０００４１２１号明細書に開示されている抗体に基づく）及び抗Ｖδ１ ｘＭＳＬＮ（ＡＤＴ１－４－２ ｘＭＳＬＮ）（配列番号４０３または配列番号４１４及び配列番号４１６）抗体のその標的（すなわち、γδＴＣＲ及びＭＳＬＮのＶδ１鎖）への結合の結合速度論は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ装置（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用するＳＰＲ分析によって確立される。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体またはヒトＭＳＬＮを、１００ｎＭの最高濃度で、会合１８０秒、解離４８０秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。実験はすべて室温で行った。結果を図５７Ａに示す。ＫＤ値は以下の通りである：
Figure 2024506682000031
特定の範囲の濃度の抗Ｖδ１抗体若しくはＶδ１二重特異性抗体または対照（ＩｇＧ対照または抗ＭＳＬＮ）と共にＭＳＬＮ＋標的細胞またはＶδ１＋エフェクター細胞を１５分間インキュベートすることにより、ＭＳＬＮ－Ｖδ１二重特異性抗体の結合を決定した。洗浄後、細胞を抗ヒトＩｇＧ二次抗体と共に更に１５分間インキュベートしてから、洗浄し固定した。各細胞型に結合した抗体の量をフローサイトメトリーによって決定した。結果を図５７、Ｂ～Ｃに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及び脱顆粒に対するＭＳＬＮ－Ｖδ１二重特異性抗体の効果を決定するため、Ｖδ１ ＴＣＲの下方制御及びＣＤ１０７ａの上方制御をＭＳＬＮ＋標的細胞の存在下で数量化した。簡潔に述べると、抗Ｖδ１、抗ＭＳＬＮ、及び抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体をＰＢＳで系列希釈した後、Ｕ底９６ウェルプレートに加えた。ＭＳＬＮ＋標的細胞（ＯＶＣＡＲ－３またはＨｅＬａ）を［０．５μＭ］ＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で２０分間染色した。皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を培養フラスコから剥離し、細胞懸濁液をＭＳＬＮ＋標的細胞と１：１で混合したか、または培地で１：１に希釈した。細胞懸濁液を、ウェル当たりＭＳＬＮ＋標的細胞２．５×１０＾４個の存在下または非存在下にて、ウェル当たりＶδ１γδＴ細胞２．５×１０＾４個でアッセイプレートに播種した。最終アッセイ抗体濃度は２００ｎＭ～２ｐＭの範囲である。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で４時間インキュベートしてから洗浄し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ５２０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、Ｖδ１ ＴＣＲ（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）、及びａＣＤ１０７ａ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）の表面発現について３０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、４℃の暗所で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により決定されるＶＤ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａの発現レベルを測定した。結果を図５７Ｄ～Ｇに示す。
ＭＳＬＮ＋標的細胞の非存在下では中程度のＶδ１ ＴＣＲ下方制御が観察される（図５７、Ｄ）。しかしながら、ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の存在下では、抗ＭＳＬＮ－Ｖδ１二重特異性抗体はＴＣＲ下方制御を大幅に増強する（図５７、Ｅ）。これは、Ｖδ１γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲの下方制御に対する抗ＭＳＬＮ－Ｖδ１二重特異性抗体の効果が、隣接細胞上のＭＳＬＮなどの腫瘍特異的抗原への結合を介して増強されることを示す。
抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体及びＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞の存在下では、ＣＤ１０７ａ（脱顆粒のマーカー）がＶδ１γδＴ細胞においてモノクローナル対照と比較して上方制御される（図５７、Ｇ）。ＭＳＬＮ＋ＯＶＣＡＲ－３細胞が存在しない場合、ＣＤ１０７ａはＶδ１γδＴ細胞においてモノクローナル対照と比較して上方制御されない（図５７、Ｆ）。これは、Ｖδ１γδＴ細胞におけるＣＤ１０７ａの上方制御に対する抗ＭＳＬＮ－Ｖδ１二重特異性抗体の効果が特異的であり、抗ＭＳＬＮ－Ｖδ１二重特異性抗体がＭＳＬＮ＋細胞の存在下でＶδ１γδＴ細胞の脱顆粒及び活性化を増強することを示す。
ＭＳＬＮ＋標的細胞傷害性に対するＭＳＬＮ－Ｖδ１二重特異性抗体の効果を、Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）のハイコンテント共焦点イメージングを使用して決定した。ＭＳＬＮ＋標的細胞（ＨｅＬａまたはＯＶＣＡＲ－２）を３８４ウェルイメージングプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に播種し、２４時間インキュベートした。二重特異性抗体及び対照をＰＢＳに系列希釈した後、アッセイプレートに加えた。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁した後、アッセイプレートに１：１のエフェクター：標的比で加えた。最終アッセイ抗体濃度は６．６ｎＭ～６６ｆＭの範囲であった。細胞を２４時間共培養した後にＤＲＡＱ７（１：３００最終、Ａｂｃａｍ）及びＨｏｅｃｈｓｔ（１：１，０００、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で染色した。
生きている標的細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、Ｈｏｅｃｈｓｔ染色のサイズ、形態、質感及び強度、ならびにＤＲＡＱ７染色の非存在に基づいて数量化した。結果を図５７、Ｈに示す。抗ＭＳＬＮ－Ｖδ１二重特異性抗体の存在下では、抗Ｖδ１及び抗ＭＳＬＮ対照と比較して、標的細胞傷害性の顕著な増加が観察された（図５７、Ｈ）。これは、Ｖδ１γδＴ細胞を標的細胞と直接架橋すると、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化及び細胞傷害性効果を特異的に増強できることを示している。
結論：抗Ｖδ１×ＭＳＬＮ二重特異性抗体は、Ｖδ１＋γδＴ細胞及びＭＳＬＮ＋標的細胞に特異的に結合し、上昇したＶδ１ ＴＣＲ下方制御、ＣＤ１０７ａ上方制御、及びＭＳＬＮ＋標的細胞の溶解によって示されるように、ＭＳＬＮ＋細胞の存在下のＶδ１γδＴ細胞の活性化を増強させる。
実施例３５：Ｖδ１－ＰＤ－１二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞活性化を増強し、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１チェックポイント阻害を遮断する
抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＰＤ－１（ペンブロリズマブに基づく）及び抗Ｖδ１ ｘＰＤ－１（ＡＤＴ１－４－２ｘペンブロリズマブ）（配列番号４０５または配列番号４３８及び配列番号４１７）抗体の結合（すなわち、γδＴＣＲ及びＰＤ－１のＶδ１鎖）の結合速度は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ装置（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって確立される。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体またはヒトＰＤ－１を１００ｎＭの最高濃度で細胞上に流した。結果を図５８Ａに示す。ＫＤ値は次のとおりである：
Figure 2024506682000032
両方の標的リガンドに対する二重特異性抗体の二重結合を評価するため、組換えＰＤ－１をまずＣａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ Ｄｅｘｔｒａｎ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に１０ｕｇ／ｍｌで固定化してから、二重特異性抗体を１００ｎＭで流した。次いで、組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体を１００ｎＭで流すことにより、その後にＶδ１γδＴＣＲに結合する能力を評価した。実験はすべて室温で行った。結果を図５８Ｂに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞及びＰＤ－１＋免疫細胞に対する抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体の結合をフローサイトメトリーによって評価した。最初に、全血から抽出されたＰＢＭＣバフィーコートからの磁気選別により、ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞の負の選択を行った。Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にコンジュゲートされた抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８抗体による活性化の後、ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＰＤ－１の細胞表面発現を検出した。活性化されたＴ細胞及びＶδ１γδＴ細胞を、ある範囲の濃度の抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体または対照（ＩｇＧ対照または抗ＰＤ－１）と共に１５分間インキュベートした。洗浄後、細胞を抗ヒトＩｇＧ二次抗体と共に更に１５分間インキュベートしてから、洗浄し固定した。各細胞型に結合した抗体の量をフローサイトメトリーによって決定した。結果を図５８Ｃ、Ｄに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞の活性化に対する抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体の効果を決定するため、Ｖδ１ ＴＣＲの下方制御をＰＤ－１＋Ｔ細胞の存在下で数量化した。簡潔に述べると、抗Ｖδ１、抗ＰＤ－１、及び抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体をＰＢＳで系列希釈した後、アッセイプレートに加えた。ＰＤ－１＋Ｔ細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で染色し、皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞と１：１で混合したか、または培地で１：１に希釈した。細胞懸濁液を、ウェル当たりＰＤ－１＋Ｔ細胞２．５×１０＾４個の存在下または非存在下にて、ウェル当たりＶδ１γδＴ細胞２．５×１０＾４個でアッセイプレートに播種した。最終アッセイ抗体濃度は２００ｎＭ～２ｐＭの範囲である。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で４時間インキュベートしてから洗浄し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ５２０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＶδ１ ＴＣＲ（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）について染色した。細胞を洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した。ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーで測定した蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により、ＶＤ１ ＴＣＲ発現レベルを決定した。結果を図５８Ｅ、Ｆに示す。
ＰＤ－１＋Ｔ細胞の活性化に対する抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体の効果を評価するため、ＰＤ－１＋ＮＦＡＴ Ｊｕｒｋａｔ細胞（Ｐｒｏｍｅｇａ、ＪＡ２１９１）を抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体または対照（ＰＤ－１モノクローナル抗体または抗ＲＳＶＩｇＧ×抗ＰＤ－１）と共に、３７℃、５％ＣＯ２で５時間インキュベートした。このアッセイは、不透明な白色９６ウェルプレートに１μｇ／ウェルで予めコーティングした組換えＶδ１タンパク質の存在下または非存在下で行った。５時間後、Ｂｉｏ－Ｇｌｏ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を細胞に１：１の比で加えた。室温で５分間インキュベートした後、発光シグナルをＢｉｏＴｅｋ Ｓｙｎｅｒｇｙプレートリーダーで検出した。生の発光シグナルを相対発光単位（ＲＬＵ）の倍率に変換した。結果を図５８ ５８ Ｇに示す。
結論：抗Ｖδ１×ＰＤ－１二重特異性抗体は、例えば、ＰＤ－１＋ＣＤ４またはＣＤ８ Ｔ細胞を介して架橋すること、及びＣＤ４またはＣＤ８ Ｔ細胞におけるＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１免疫チェックポイント阻害を遮断することにより、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強する。
実施例３６：Ｖδ１－４－１ＢＢ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及びＣＤ８ Ｔ細胞の活性化を増強する
抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗４－１ＢＢ（ウトミルマブに基づく）及び抗Ｖδ１ ｘ４－１ＢＢ（ＡＤＴ１－４－２ ｘウトミルマブ）（配列番号４０７または配列番号４１４及び配列番号４１８）抗体のその標的（すなわち、γδＴＣＲ及び４－１ＢＢのＶδ１鎖）への結合の結合動態は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ装置（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用するＳＰＲ分析によって確立される。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体またはヒト４－１ＢＢを１００ｎＭの最高濃度で細胞上に流した。結果を図５９Ａに示す。ＫＤ値は次のとおりである：
Figure 2024506682000033
両方の標的リガンドに対する二重特異性抗体の二重結合を評価するため、組換え４－１ＢＢをまずＣａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ Ｄｅｘｔｒａｎ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に１０ｕｇ／ｍｌで固定化してから、二重特異性抗体を１００ｎＭで流した。次いで、組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体を１００ｎＭで流すことにより、その後にＶδ１γδＴＣＲに結合する能力を評価した。実験はすべて室温で行った。結果を図５９Ｂに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞及び４－１ＢＢ＋免疫細胞に対する抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体の結合をフローサイトメトリーによって評価した。最初に、全血から抽出されたＰＢＭＣバフィーコートからの磁気選別により、ＣＤ８＋Ｔ細胞の負の選択を行った。Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にコンジュゲートされた抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８抗体による活性化の後、ＣＤ８ Ｔ細胞における４－１ＢＢの細胞表面発現は上昇していた。活性化された４－１ＢＢ＋ＣＤ８ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞を、ある範囲の濃度の抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体または対照（ＩｇＧ対照または抗４－１ＢＢ）と共に１５分間インキュベートした。洗浄後、細胞を抗ヒトＩｇＧ二次抗体と共に更に１５分間インキュベートしてから、洗浄し固定した。各細胞型に結合した抗体の量をフローサイトメトリーによって決定した。結果を図５９Ｃ、Ｄに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞の活性化に対する抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体の効果を決定するため、Ｖδ１ ＴＣＲの下方制御を４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の存在下で数量化した。簡潔に述べると、抗Ｖδ１、抗４－１ＢＢ、及び抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体をＰＢＳで系列希釈した後、アッセイプレートに加えた。４－１ＢＢ＋ＣＤ８ Ｔ細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で染色し、皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞と１：１で混合したか、または培地で１：１に希釈した。細胞懸濁液を、ウェル当たり４－１ＢＢ＋ＣＤ８ Ｔ細胞２．５×１０＾４個の存在下または非存在下にて、ウェル当たりＶδ１γδＴ細胞２．５×１０＾４個でアッセイプレートに播種した。最終アッセイ抗体濃度は２００ｎＭ～２ｐＭの範囲である。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で４時間インキュベートしてから洗浄し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ５２０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＶδ１ ＴＣＲ（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）について染色した。細胞を洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した。ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーで測定した蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により、ＶＤ１ ＴＣＲ発現レベルを決定した。結果を図５９Ｅ、Ｆに示す。
４－１ＢＢ＋Ｔ細胞の活性化に対する抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体の効果を評価するため、４－１ＢＢ＋ＮＦＡＴ Ｊｕｒｋａｔ細胞（Ｐｒｏｍｅｇａ、ＪＡ２１９１）を抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体または対照（抗４－１ＢＢモノクローナル抗体または抗ＲＳＶＩｇＧ×抗４－１ＢＢ）と共に、３７℃、５％ＣＯ２で５時間インキュベートした。アッセイは、不透明な白色９６ウェルプレートに１μｇ／ウェルで予めコーティングした組換えＶδ１タンパク質の存在下または非存在下で行った。５時間後、Ｂｉｏ－Ｇｌｏ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を細胞に１：１の比で加えた。室温で５分間インキュベートした後、発光シグナルをＢｉｏＴｅｋ Ｓｙｎｅｒｇｙプレートリーダーで検出した。生の発光シグナルを相対発光単位（ＲＬＵ）の倍率に変換した。結果を図５９Ｇに示す。
結論：抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体は、例えば、４－１ＢＢ＋ＣＤ８ Ｔ細胞に架橋すること、及び４－１ＢＢ＋Ｔ細胞を活性化することにより、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強する。
実施例３７：Ｖδ１－ＯＸ４０二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞及びＣＤ４ Ｔ細胞の活性化を増強する
抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＯＸ４０（ポガリズマブに基づく）及び抗Ｖδ１ｘＯＸ４０（ＡＤＴ１－４－２ｘポガリズマブ）（配列番号４０９または配列番号４１４及び配列番号４１９）抗体のその標的（すなわち、γδＴＣＲ及びＯＸ４０のＶδ１鎖）への結合の結合速度論は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ装置（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用するＳＰＲ分析によって確立される。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体またはヒトＯＸ４０を１００ｎＭの最高濃度で細胞上に流した。結果を図６０Ａに示す。ＫＤ値は次のとおりである：
Figure 2024506682000034
両方の標的リガンドに対する二重特異性抗体の二重結合を評価するため、組換えＯＸ４０をまずＣａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ Ｄｅｘｔｒａｎ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に１０ｕｇ／ｍｌで固定化してから、二重特異性抗体を１００ｎＭで流した。次いで、組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体を１００ｎＭで流すことにより、その後にＶδ１γδＴＣＲに結合する能力を評価した。実験はすべて室温で行った。結果を図６０Ｂに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞及びＯＸ４０＋免疫細胞に対する抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体の結合をフローサイトメトリーによって評価した。最初に、全血から抽出されたＰＢＭＣバフィーコートからの磁気選別により、ＣＤ４＋Ｔ細胞の負の選択を行った。Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にコンジュゲートされた抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８抗体による活性化の後、ＣＤ４ Ｔ細胞におけるＯＸ４０の細胞表面発現は上昇していた。活性化されたＯＸ４０＋ＣＤ４ Ｔ細胞及びＶδ１γδＴ細胞を、ある範囲の濃度の抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体または対照（ＩｇＧ対照または抗ＯＸ４０）と共に１５分間インキュベートした。洗浄後、細胞を抗ヒトＩｇＧ二次抗体と共に更に１５分間インキュベートしてから、洗浄し固定した。各細胞型に結合した抗体の量をフローサイトメトリーによって決定した。結果を図６０Ｃ、Ｄに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞の活性化に対する抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体の効果を決定するため、Ｖδ１ ＴＣＲの下方制御をＯＸ４０＋Ｔ細胞の存在下で数量化した。簡潔に述べると、抗Ｖδ１、抗ＯＸ４０、及び抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体をＰＢＳで系列希釈した後、アッセイプレートに加えた。ＯＸ４０＋ＣＤ４ Ｔ細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で染色し、皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞と１：１で混合したか、または培地で１：１に希釈した。細胞懸濁液を、ウェル当たりＯＸ４０＋ＣＤ４ Ｔ細胞２．５×１０＾４個の存在下または非存在下にて、ウェル当たりＶδ１γδＴ細胞２．５×１０＾４個でアッセイプレートに播種した。最終アッセイ抗体濃度は２００ｎＭ～２ｐＭの範囲である。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で４時間インキュベートしてから洗浄し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ５２０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＶδ１ ＴＣＲ（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）について染色した。細胞を洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した。ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーで測定した蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により、ＶＤ１ ＴＣＲ発現レベルを決定した。結果を図６０、Ｅ、Ｆに示す。
ＯＸ４０＋Ｔ細胞の活性化に対する抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体の効果を評価するため、ＯＸ４０＋ＮＦＡＴ Ｊｕｒｋａｔ細胞（Ｐｒｏｍｅｇａ、ＪＡ２１９１）を抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体または対照（ＯＸ４０Ｌ（ＯＸ４０リガンド）、抗ＯＸ４０または抗ＲＳＶＩｇＧ×抗ＯＸ４０）と共に、３７℃、５％ＣＯ２で５時間インキュベートした。アッセイは、不透明な白色９６ウェルプレートに１μｇ／ウェルで予めコーティングした組換えＶδ１タンパク質の存在下または非存在下で行った。５時間後、Ｂｉｏ－Ｇｌｏ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を細胞に１：１の比で加えた。室温で５分間インキュベートした後、発光シグナルをＢｉｏＴｅｋ Ｓｙｎｅｒｇｙプレートリーダーで検出した。生の発光シグナルを相対発光単位（ＲＬＵ）の倍率に変換した。結果を図６０、Ｇに示す。
結論：抗Ｖδ１×ＯＸ４０二重特異性抗体は、例えば、ＯＸ４０＋ＣＤ４ Ｔ細胞に架橋すること、及びＯＸ４０＋Ｔ細胞を活性化することにより、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強する。
実施例３８：Ｖδ１－ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体は、Ｖδ１γδＴ細胞活性化を増強し、ＴＩＧＩＴ／ＰＶＲ（ＣＤ１５５）チェックポイント阻害を遮断する
抗Ｖδ１（ＡＤＴ１－４－２）、抗ＴＩＧＩＴ（チラゴロマブに基づく）及び抗Ｖδ１ｘＴＩＧＩＴ（ＡＤＴ１－４－２ ｘチラゴロマブ）（配列番号４１１または配列番号４３９及び配列番号４２０）抗体のその標的（すなわち、γδＴＣＲ及びＴＩＧＩＴのＶδ１鎖）に対する結合の結合速度論は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ装置（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用するＳＰＲ分析によって確立される。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体またはヒトＴＩＧＩＴを１００ｎＭの最高濃度で細胞上に流した。結果を図６１Ａに示す。ＫＤ値は次のとおりである：
Figure 2024506682000035
両方の標的リガンドに対する二重特異性抗体の二重結合を評価するため、組換えＴＩＧＩＴをまずＣａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ Ｄｅｘｔｒａｎ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に１０ｕｇ／ｍｌで固定化してから、二重特異性抗体を１００ｎＭで流した。次いで、組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体を１００ｎＭで流すことにより、その後にＶδ１γδＴＣＲに結合する能力を評価した。実験はすべて室温で行った。結果を図６１、Ｂに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞及びＴＩＧＩＴ＋免疫細胞に対する抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の結合をフローサイトメトリーによって評価した。最初に、全血から抽出されたＰＢＭＣバフィーコートからの磁気選別により、ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞の負の選択を行った。Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にコンジュゲートされた抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８抗体による活性化の後、ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞における４－１ＢＢの細胞表面発現を検出した。活性化されたＴ細胞及びＶδ１γδＴ細胞を、ある範囲の濃度の抗Ｖδ１×４－１ＢＢ二重特異性抗体または対照（ＩｇＧ対照または抗４－１ＢＢ）と共に１５分間インキュベートした。洗浄後、細胞を抗ヒトＩｇＧ二次抗体と共に更に１５分間インキュベートしてから、洗浄し固定した。各細胞型に結合した抗体の量をフローサイトメトリーによって決定した。結果を図６１、Ｃ、Ｄに示す。
Ｖδ１γδＴ細胞の活性化に対する抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の効果を決定するため、Ｖδ１ ＴＣＲの下方制御をＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞の存在下で数量化した。簡潔に述べると、抗Ｖδ１、抗ＴＩＧＩＴ、及び抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体をＰＢＳで系列希釈した後、アッセイプレートに加えた。ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で染色し、皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞と１：１で混合したか、または培地で１：１に希釈した。細胞懸濁液を、ウェル当たりＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞２．５×１０＾４個の存在下または非存在下にて、ウェル当たりＶδ１γδＴ細胞２．５×１０＾４個でアッセイプレートに播種した。最終アッセイ抗体濃度は２００ｎＭ～２ｐＭの範囲である。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で４時間インキュベートしてから洗浄し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ５２０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＶδ１ ＴＣＲ（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）について染色した。細胞を洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した。ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーで測定した蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により、ＶＤ１ ＴＣＲ発現レベルを決定した。結果を図６１、Ｅ、Ｆに示す。
ＴＩＧＩＴ＋Ｔ細胞の活性化に対する抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体の効果を評価するため、ＴＩＧＩＴ＋ＮＦＡＴ Ｊｕｒｋａｔ細胞（Ｐｒｏｍｅｇａ、ＪＡ２１９１）を抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体または対照（抗ＴＩＧＩＴモノクローナル抗体または抗ＲＳＶＩｇＧ×抗ＴＩＧＩＴ）と共に、３７℃、５％ＣＯ２で５時間インキュベートした。アッセイは、不透明な白色９６ウェルプレートに１μｇ／ウェルで予めコーティングした組換えＶδ１タンパク質の存在下または非存在下で行った。５時間後、Ｂｉｏ－Ｇｌｏ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を細胞に１：１の比で加えた。室温で５分間インキュベートした後、発光シグナルをＢｉｏＴｅｋ Ｓｙｎｅｒｇｙプレートリーダーで検出した。生の発光シグナルを相対発光単位（ＲＬＵ）の倍率に変換した。結果を図６１、Ｇに示す。
結論：抗Ｖδ１×ＴＩＧＩＴ二重特異性抗体は、ＴＩＧＩＴ＋ＣＤ８ Ｔ細胞を介して架橋すること、及びＣＤ８ Ｔ細胞におけるＴＩＧＩＴ／ＣＤ１５５免疫チェックポイント阻害を遮断することにより、Ｖδ１γδＴ細胞の活性化を増強する。
実施例３９：抗ｖδ１抗体はＡＤＣＣを誘導しない。
ＡＤＣＣ Ｒｅｐｏｒｔｅｒ Ｂｉｏａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、抗ｖδ１抗体によって誘導されるＡＤＣＣ（抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性）のレベルを対照抗体と比較して評価した。
ＡＤＣＣとは、抗体によってタグ付けされた標的細胞をエフェクター細胞が傷害する生物学的現象を指す。エフェクター細胞は、Ｆｃγ受容体を介して抗体に結合し、続いて標的細胞を傷害する。ここで提示するＡＤＣＣレポーターバイオアッセイは、ＮＦＡＴ（活性化Ｔ細胞核内因子）経路による遺伝子転写の活性化を介してＡＤＣＣの早期開始を検出することにより、アッセイ内で試験される抗体の潜在的なＡＤＣＣ作用メカニズムを明らかにする。このレポーターアッセイは、ＮＦＡＴ経路に連結した高親和性ＦｃγＲＩＩＩａ受容体を発現するエフェクター細胞（Ｊｕｒｋａｔｓ）を利用する工学操作系であり、活性化されるとホタルルシフェラーゼ酵素のさらなる活性化を誘導するように、さらに工学操作されている。ルシフェラーゼ活性は、発生するＡＤＣＣのレベルに相関し得る発光の読み取り値によって数量化される。
このアッセイは、抗ｖδ１抗体、または好適には多特異性抗体の抗ｖδ１アームが、ＡＤＣＣ反応を駆動するかどうかを理解するために利用した。利用した標的細胞は、ｖδ１γδＴＣＲを介して抗ｖδ１抗体に結合するγδ細胞であった。ＡＤＣＣ作用メカニズムが存在する場合、抗ｖδ１抗体は、アッセイエフェクター細胞上のＦｃγ受容体と結合し、発光シグナルを生成する。シグナルが生成されなければ、これはＡＤＣＣが発生していないことを示唆する。
このアッセイには、ＡＤＣＣ Ｒｅｐｏｒｔｅｒ Ｂｉｏａｓｓａｙ Ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いた。Ｂｉｏ－Ｇｌｏ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅアッセイバッファーのボトル１本を解凍し、基質ボトルに移した。この混合物を４～６時間室温に保った。次の抗体：抗ｖδ１抗体（ＡＤＴ１－４－２）、同じ抗ｖδ１抗体だがＦｃ無効型（Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ）（ＡＤＴ１－４－２ ＬＡＧＡ）、リツキシマブ、ＲＳＶ及びＯＫＴ３について、１０ｎＭ～０．０１ｎＭ（最終濃度）の範囲の抗体濃度（３Ｘ濃度）で希釈プレートを調製した。標的細胞（γδ細胞）をウェル当たり２５μｌで２つのアッセイプレートに播種した。次いで、抗体希釈プレートから適切な抗体溶液２５μｌを適切なウェルに移した。エフェクター細胞（工学操作されたＪｕｒｋａｔ細胞）を温かいアッセイバッファーに解凍し、４ｍｌのアッセイバッファーに再懸濁し、２５μｌのエフェクター細胞溶液を各ウェルにピペットで入れた。次いで、プレートを３７℃で４．５時間インキュベートした。インキュベーション期間の後、プレートを室温まで平衡化させ、その後、７５μｌのＢｉｏ－Ｇｌｏ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ試薬を各ウェルに加え、プレートを室温で１０分間インキュベートした。次いで、Ｂｉｏｔｅｋ Ｈ４プレートリーダーを使用してプレートを読み取り、プレートから発光シグナル（相対光単位ＲＬＵとして）を収集した。誘導倍率は、次の等式を使用して計算した：誘導倍率＝ＲＬＵ（誘導－バックグラウンド）／ＲＬＵ（無抗体対照－バックグラウンド）。
陽性対照として、ＯＫＴ３（抗ＣＤ３抗体）を使用した。追加の陽性対照として、対照ウェルにはγδ細胞の代わりにＲａｊｉ細胞を播種した。Ｒａｊｉ細胞は、抗ＣＤ２０抗体であるリツキシマブと併用すると強力なＡＤＣＣ反応を示すように使用される一般的に許容されている細胞株である。内部対照として、且つ抗ｖδ１抗体がγδ細胞におけるｖδ１結合の非存在下でＡＤＣＣを駆動するかどうかを理解するために、本発明の抗ｖδ１抗体と、同じ抗ｖδ１抗体だがＦｃ無効型（Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ）とを、エフェクター細胞単独と共に加えた。
結果を図６２に示す。
結論：Ｒａｊｉ細胞と共にリツキシマブを使用した陽性対照では強力なＡＤＣＣ反応が示され、γδ細胞に対するＯＫＴ３ではさらに強力なＡＤＣＣ反応が示された。対照的に、本発明の抗ｖδ１抗体、同じ抗ｖδ１抗体だがＦｃ無効型でもあるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、またはＲＳＶ陰性対照を使用したいずれの条件でもＡＤＣＣ反応は検出されなかった。これは、この系において、ｖδ１に結合する本発明の抗体（抗ｖδ１ ｍＡｂまたは抗ｖδ１多特異性抗体など）が、ＡＤＣＣ作用メカニズムの証拠を示さないことを実証する。注目すべきことに、Ｆｃ有効型抗Ｖδ１抗体でさえγδＴ細胞を枯渇させず、そのため、例えば高Ｆｃγ腫瘍環境において、本明細書で提示される抗Ｖδ１抗体のＦｃ機能を維持し、機能性を付加するオプションが提供される。これは、かかる抗Ｖδ１抗体が本明細書に記載されるような二重特異性抗体フォーマットに含まれる適性をさらに明らかにしている。
好適には、単特異性フォーマットで提供される場合の抗体の機能特性は、さらに第２の抗原に特異的に結合する本発明の多特異性抗体によって共有される。
実施形態
本発明は、少なくとも以下の番号付けられた実施形態を含む。
１．配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または
配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
２．配列番号５１、５２、及び１３０からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３及び１３１からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；ならびに
配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または
配列番号７９及び１４４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０及び１４５からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２；ならびに
配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、実施形態１に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
３．配列番号２～２５及び１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０及び１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域を含む、実施形態１または実施形態２に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
４．ａ．配列番号５５～７８のいずれかに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｂ．配列番号８２～１０５のいずれかに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
５．ａ．配列番号５５～７８のいずれかのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｂ．配列番号８２～１０５のいずれかのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
６．ａ．配列番号５１もしくは配列番号５２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号５３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号７９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号８０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を更に含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
７．ａ．配列番号５１もしくは配列番号５２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を更に含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
８．ａ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｂ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｃ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｄ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｅ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｆ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｇ．それぞれ配列番号５２、５３、及び６１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｈ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｉ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｊ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｋ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｌ．それぞれ配列番号５２、５３、及び６６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｍ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｎ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｏ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｐ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｑ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｒ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｓ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１００のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｔ．それぞれ配列番号５２、５３、及び７４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｕ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｖ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｗ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；または
ｘ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
９．ａ．配列番号２～２５のいずれかに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号２７～５０のいずれかに対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１０．ａ．配列番号２～２５のいずれかのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号２７～５０のいずれかのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１１．ａ．配列番号２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ．配列番号１２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ．配列番号１３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ．配列番号１４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ．配列番号１５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ．配列番号１６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ．配列番号１７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ．配列番号１８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ．配列番号１９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ．配列番号２０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ．配列番号２１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ．配列番号２２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ．配列番号２３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ．配列番号２４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ．配列番号２５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０に対する少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１２．ａ．配列番号２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ．配列番号１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ．配列番号１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ．配列番号１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ．配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ．配列番号１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ．配列番号１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ．配列番号１８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ．配列番号１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ．配列番号２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ．配列番号２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ．配列番号２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ．配列番号２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ．配列番号２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ．配列番号２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１３．前記抗体またはその抗原結合断片が、κ軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位でセリン以外のアミノ酸残基を含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１４．ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基が、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態１３に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１５．ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基が、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態１３に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１６．κ軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基が、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態１３に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１７．ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基がロイシン残基である、実施形態１３に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１８．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、ＡＤＴ１－４－１０５、ＡＤＴ１－４－１０７、ＡＤＴ１－４－１１０、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１１７、ＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－１３９、ＡＤＴ１－４－４、ＡＤＴ１－４－１４３、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－１７３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８、ＡＤＴ１－４－８２、ＡＤＴ１－４－８３、ＡＤＴ１－４－３、ＡＤＴ１－４－８４、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－９５、ＡＤＴ１－４－１、ＡＤＴ１－４－６、及びＡＤＴ１－４－１３８からなる群から選択される抗体である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１９．前記抗体が６つ全てのＣＤＲ領域全体で１～１０のアミノ酸置換、１～５つのアミノ酸置換、または１～２つのアミノ酸置換を有する、実施形態１８に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２０．前記抗体が６つ全てのＣＤＲ領域全体で最大２つまたは最大１つのアミノ酸置換を含む、実施形態１８または実施形態１９に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２１．前記抗体が６つ全てのＣＤＲ領域全体で１つまたは２つのアミノ酸置換を含む、実施形態１８～２０のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２２．前記抗体が１つ以上のフレームワーク領域に１～１０、１～５つ、または１～２つのアミノ酸置換を含む、実施形態１８～２１のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２３．前記抗体が１つ以上のフレームワーク領域に最大２つまたは最大１つのアミノ酸置換を含む、実施形態１８～２２のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２４．前記抗体が１つ以上のフレームワーク領域に１つまたは２つのアミノ酸置換を含む、実施形態１８～２３のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２５．前記アミノ酸置換が保存的アミノ酸置換である、実施形態１８～２４のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２６．ａ．ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａの配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ．配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ．Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、前記ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、前記ＨＣＤＲ３配列；
ｄ．配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ．配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ．ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔの配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、前記ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、前記ＬＣＤＲ３配列を含み、
Ｘ１～Ｘ１３の各々が天然に存在するアミノ酸である、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片。
２７．ａ．Ｘ１がＡ及びＶからなる群から選択され、
ｂ．Ｘ２がＳ及びＴからなる群から選択され、
ｃ．Ｘ３がＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、
ｄ．Ｘ４がＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｅ．Ｘ５がＹ及びＮからなる群から選択され、
ｆ．Ｘ６がＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、
ｇ．Ｘ７がＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、
ｈ．Ｘ８がＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、
ｉ．Ｘ９がＳ及びＫからなる群から選択され、
ｊ．Ｘ１０がＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｋ．Ｘ１１がＰ、Ｈ、及びＤからなる群から選択され、
ｌ．Ｘ１２がＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、
ｍ．Ｘ１３がＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される、実施形態２６に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２８．前記抗体が、
ａ．配列番号１７０または１７１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１７２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１７３の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１７４の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１７５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１７６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１７７または１７８の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態２６または実施形態２７に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２９．前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し、
ｂ．任意により、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し、
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し、
ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し、及び／または
ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
３０．前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１００ｎＭ未満（約５０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し、
ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
３１．ａ．Ｘ１がＡ及びＶからなる群から選択され、
ｂ．Ｘ２がＳ及びＴからなる群から選択され、
ｃ．Ｘ３がＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、
ｄ．Ｘ４がＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｅ．Ｘ５がＹ及びＮからなる群から選択され、
ｆ．Ｘ６がＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、
ｇ．Ｘ７がＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、
ｈ．Ｘ８がＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、
ｉ．Ｘ９がＳ及びＫからなる群から選択され、
ｊ．Ｘ１０がＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｋ．Ｘ１１がＰ及びＨからなる群から選択され、
ｌ．Ｘ１２がＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、
ｍ．Ｘ１３がＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される、実施形態２６に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
３２．前記抗体が、
ａ．配列番号１７０または１７１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１７２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１７３の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１７４の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１７５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１７６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１７７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態３１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
３３．前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１０ｎＭ未満（約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し、及び／または
ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
３４．ａ．Ｘ１がＡ及びＶからなる群から選択され、
ｂ．Ｘ２がＳ及びＴからなる群から選択され、
ｃ．Ｘ３がＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、
ｄ．Ｘ４がＧ及びＤからなる群から選択され、
ｅ．Ｘ５がＹ及びＮからなる群から選択され、
ｆ．Ｘ６がＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、
ｇ．Ｘ７がＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、
ｈ．Ｘ８がＫ及びＲからなる群から選択され、
ｉ．Ｘ９がＳ及びＫからなる群から選択され、
ｊ．Ｘ１０がＴ、Ｑ、Ａ、及びＥからなる群から選択され、
ｋ．Ｘ１１がＰ及びＨからなる群から選択され、
ｌ．Ｘ１２がＱ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、及びＩからなる群から選択され、
ｍ．Ｘ１３がＶ及びＬからなる群から選択される、実施形態２６に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
３５．前記抗体が、
ａ．配列番号１７０または１７１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１７２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１７３の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１７４の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１７５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１７６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１７７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１７９または１８１の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態３４に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
３６．前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１０ｎＭ未満（約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し、及び／または
ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
３７．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
３８．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
３９．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
４０．ａ．配列番号１３３～１４３のいずれかに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｂ．配列番号１４７～１５７のいずれかに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片。
４１．ａ．配列番号１３３～１４３のいずれかのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｂ．配列番号１４７～１５７のいずれかのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む、実施形態４０に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
４２．ａ．配列番号１３０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号１３１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号１４４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号１４５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を更に含む、実施形態４０～４１のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
４３．ａ．配列番号１３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号１３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号１４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号１４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を更に含む、実施形態４０～４２のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
４４．ａ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｂ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｃ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｄ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｅ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｆ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｇ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｈ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｉ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｊ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；または
ｋ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む、実施形態４０～４３のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
４５．ａ．配列番号１０７～１１７のいずれかに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号１１９～１２９のいずれかに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態４０～４４のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
４６．ａ．配列番号１０７～１１７のいずれかのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号１１９～１２９のいずれかのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態４０～４５のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
４７．ａ．配列番号１０７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号１０８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号１０９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号１１０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号１１１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号１１２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号１１３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号１１４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１１５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ．配列番号１１７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態４０～４６のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
４８．ａ．配列番号１０７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号１０８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号１０９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号１１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号１１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号１１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号１１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号１１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ．配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態４０～４７のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
４９．前記抗体またはその抗原結合断片が、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位にセリン以外のアミノ酸残基を有するκ軽鎖可変配列を含む、実施形態４０～４８のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
５０．軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基が、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態４９に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
５１．軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基が、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態４９に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
５２．軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基が、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態４９に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
５３．軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基が、ロイシン残基である、実施形態４９に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
５４．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、ＡＤＴ１－７－１０、ＡＤＴ１－７－１５、ＡＤＴ１－７－１７、ＡＤＴ１－７－１８、ＡＤＴ１－７－１９、ＡＤＴ１－７－２０、ＡＤＴ１－７－２２、ＡＤＴ１－７－２３、ＡＤＴ１－７－４２、ＡＤＴ１－７－３、及びＡＤＴ１－７－６１からなる群から選択される抗体である、実施形態４０～５３のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
５５．前記抗体が６つ全てのＣＤＲ領域全体で１～１０のアミノ酸置換、１～５つのアミノ酸置換、または１～２つのアミノ酸置換を有する、実施形態５４に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
５６．前記抗体が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で最大２つまたは最大１つのアミノ酸置換を含む、実施形態５４または５５に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
５７．前記抗体が６つ全てのＣＤＲ領域全体で１つまたは２つのアミノ酸置換を含む、実施形態５４～５６のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
５８．前記抗体が１つ以上のフレームワーク領域に１～１０、１～５つ、または１～２つのアミノ酸置換を含む、実施形態５４～５７のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
５９．前記抗体が１つ以上のフレームワーク領域に最大２つまたは最大１つのアミノ酸置換を含む、実施形態５４～５５のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
６０．前記抗体が１つ以上のフレームワーク領域に１つまたは２つのアミノ酸置換を含む、実施形態５４～５９のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
６１．前記アミノ酸置換が保存的アミノ酸置換である、実施形態５５～６０のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
６２．ａ．配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ．配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ．Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩの配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、前記ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、前記ＨＣＤＲ３配列；
ｄ．配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ．配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ．ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔの配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、前記ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、前記ＬＣＤＲ３配列を含み、
Ｘ１～Ｘ９の各々が天然に存在するアミノ酸である、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片。
６３．ａ．Ｘ１がＤ、Ｉ、及びＶからなる群から選択され、
ｂ．Ｘ２がＤ及びＳからなる群から選択され、
ｃ．Ｘ３がＮ、Ｅ、Ｄ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、
ｄ．Ｘ４がＤ及びＥからなる群から選択され、
ｅ．Ｘ５がＴ及びＳからなる群から選択され、
ｆ．Ｘ６がＡ、Ｇ、Ｙ、及びＳからなる群から選択され、
ｇ．Ｘ７がＳ及びＤからなる群から選択され、
ｈ．Ｘ８がＴ、Ｅ、及びＧからなる群から選択され、
ｉ．Ｘ９がＬ及びＤからなる群から選択される、実施形態６２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
６４．前記抗体が、
ａ．配列番号１８９の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１９０の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１９１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１９２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１９３及び１９４の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１９５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１９６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１９７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態６２または実施形態６３に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
６５．前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し、
ｃ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し、
ｄ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、実施形態４０～６４のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
６６．ａ．Ｘ１がＤ及びＶからなる群から選択され、
ｂ．Ｘ２がＤ及びＳからなる群から選択され、
ｃ．Ｘ３がＤ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、
ｄ．Ｘ４がＤ及びＥからなる群から選択され、
ｅ．Ｘ５がＳであり、
ｆ．Ｘ６がＡ及びＹからなる群から選択され、
ｇ．Ｘ７がＳであり、
ｈ．Ｘ８がＥ及びＧからなる群から選択され、
ｉ．Ｘ９がＬ及びＤからなる群から選択される、実施形態６２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
６７．前記抗体が、
ａ．配列番号１８９の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１９０の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１９１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１９２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１９３の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１９５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１９６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１９７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態６６に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
６８．前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し、
ｃ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し、
ｅ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有するである、実施形態４０～６７のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
６９．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７１のアミノ酸５～２０及び／または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、実施形態４０～６８のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
７０．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７を含む、実施形態４０～６９のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
７１．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７からなる、実施形態４０～７０のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
７２．抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の親和性成熟したバリアントであり、前記親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含む、前記抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
７３．前記抗体が、実施形態４～４０のいずれか１項に記載の抗体である、実施形態７２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
７４．前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１００ｎＭ未満（約５０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し、及び／または
ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、実施形態４～４０、７２または７３のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
７５．前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１０ｎＭ未満（約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し、及び／または
ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、実施形態４～４０、７２または７３のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
７６．前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１０ｎＭ未満（約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し、及び／または
ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、実施形態４～４０、７２または７３のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
７７．抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の親和性成熟したバリアントであり、前記親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含む、前記抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
７８．前記抗体が、実施形態４１～７１のいずれか１項に記載の抗体である、実施形態７７に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
７９．前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し、
ｃ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し、及び／または
ｄ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、実施形態４１～７１、７７または７８のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
８０．前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し、
ｃ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し、及び／または
ｅ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、実施形態４１～７１、７７または７８のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
８１．抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の親和性成熟したバリアントであり、前記親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．配列番号２７３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号２７４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号２７５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号２７６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号２７７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号２７８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号２７９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号２８０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号２８１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｊ．配列番号３１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、前記抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
８２．前記親和性成熟した抗体が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖への結合ついて、例えば、Ｋｄで測定される場合、前記親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも１００％、少なくとも５００％、またはより好ましくは、少なくとも約１０００％高い親和性を有する、実施形態７２～８１のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
８３．前記親和性成熟した抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含む、実施形態７２～８２のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
８４．前記親和性成熟した抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、親抗体配列と比較して最大２０、例えば、最大１５、例えば、最大１０のアミノ酸置換を含む、実施形態７２～８２のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
８５．前記抗体が、配列番号５４を有するＶＨＣＤＲ３及び配列番号８１を有するＶＬＣＤＲ３を含まず、及び／または前記抗体が、配列番号１３２を有するＶＨＣＤＲ３及び配列番号１４６を有するＶＬＣＤＲ３を含まない、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
８６．前記抗体が、配列番号１を有するＶＨ領域及び配列番号２６を有するＶＬ領域を含まず、及び／または前記抗体が、配列番号１０６を有するＶＨ領域及び配列番号１１８を有するＶＬ領域を含まない、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
８７．ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基がセリン残基ではないκ軽鎖可変配列を含む、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
８８．ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基が、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態８５に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
８９．ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基が、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態８８に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
９０．ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基が、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態８８に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
９１．ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基がロイシン残基である、実施形態８８に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
９２．前記抗体がＩｇＧ抗体である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
９３．前記抗体がＩｇＧ１抗体である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
９４．前記抗体が、実施形態４～４０または７２～７６のいずれか１項に記載の抗体である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
９５．抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片であって、前記抗体が、
ａ．第１の標的エピトープであって、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープである、前記第１の標的エピトープ、及び
ｂ．第２の標的エピトープに特異的に結合する多重特異性抗体である、前記抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片。
９６．抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片であって、前記抗体が、
ａ．第１の標的エピトープであって、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープである、前記第１の標的エピトープ、及び
ｂ．第２の標的エピトープに特異的に結合する多重特異性抗体であり、
前記多重特異性抗体が、配列番号３８５；配列番号：３８６；配列番号：３８７；配列番号３１４；配列番号３９３；配列番号３９４；配列番号３９５；配列番号３９７；配列番号３８８；配列番号３１５；配列番号３１６；配列番号３７８；配列番号３７９；配列番号３８０；配列番号３８２；配列番号３８３；配列番号３８４；配列番号３９３；配列番号３９６；配列番号３９８；配列番号３９９；配列番号４０１；配列番号４０２；配列番号４０３；配列番号４０４；配列番号４０５；配列番号４０６；配列番号４０７；配列番号４０８；配列番号４０９；配列番号４１０；配列番号４１１；配列番号４１２；配列番号４１３；配列番号４１４及び配列番号４１５；配列番号４１４及び配列番号４１６；配列番号４１４及び配列番号４１９；配列番号４１４及び配列番号４１８；配列番号５０４及び配列番号４１５；配列番号５０４及び配列番号４１６；配列番号５０４及び配列番号４１９；配列番号５０４及び配列番号４１８；配列番号５０５及び配列番号４１５；配列番号５０５及び配列番号４１６；配列番号５０５及び配列番号４１９；配列番号５０５及び配列番号４１８；配列番号４２１及び配列番号４２２；配列番号５０４及び配列番号４２２；配列番号４２３及び配列番号４２４；配列番号４２５及び配列番号４２６；配列番号４２１及び配列番号４３７；配列番号５０４及び配列番号４３７；配列番号４２３及び配列番号４２７；配列番号４２５及び配列番号４２８；配列番号４２１及び配列番号４２９；配列番号５０４及び配列番号４２９；配列番号４２３及び配列番号４３０；配列番号４１４及び配列番号４３１；配列番号４１４及び配列番号４３３；配列番号４１４及び配列番号４３４；配列番号４１４及び配列番号４３５；配列番号５０４及び配列番号４３１；配列番号５０４及び配列番号４３３；配列番号５０４及び配列番号４３４；配列番号５０４及び配列番号４３５；配列番号５０５及び配列番号４３１；配列番号５０５及び配列番号４３３；配列番号５０５及び配列番号４３４；配列番号５０５及び配列番号４３５；配列番号４３８及び配列番号４１７；または配列番号４３９及び配列番号４２０を含む、前記抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片。
９７．前記抗体が、
ａ．第１の標的エピトープであって、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープである、前記第１の標的エピトープ、及び
ｂ．第２の標的エピトープに特異的に結合する多重特異性抗体であり、
前記多重特異性抗体が、配列番号３８５；配列番号：３８６；配列番号：３８７；配列番号３１４；配列番号３９３；配列番号３９４；配列番号３９５；配列番号３９７；配列番号３８８；配列番号３１５；配列番号３１６；配列番号３７８；配列番号３７９；配列番号３８０；配列番号３８２；配列番号３８３；配列番号３８４；配列番号３９３；配列番号３９６；配列番号３９８；配列番号３９９；配列番号４０１；配列番号４０２；配列番号４０３；配列番号４０４；配列番号４０５；配列番号４０６；配列番号４０７；配列番号４０８；配列番号４０９；配列番号４１０；配列番号４１１；配列番号４１２；配列番号４１４及び配列番号４１５；配列番号４１４及び配列番号４１６；配列番号４１４及び配列番号４１９；配列番号４１４及び配列番号４１８；配列番号５０４及び配列番号４１５；配列番号５０４及び配列番号４１６；配列番号５０４及び配列番号４１９；配列番号５０４及び配列番号４１８；配列番号５０５及び配列番号４１５；配列番号５０５及び配列番号４１６；配列番号５０５及び配列番号４１９；配列番号５０５及び配列番号４１８；配列番号４２１及び配列番号４２２；配列番号５０４及び配列番号４２２；配列番号４２３及び配列番号４２４；配列番号４２５及び配列番号４２６；配列番号４２１及び配列番号４３７；配列番号５０４及び配列番号４３７；配列番号４２３及び配列番号４２７；配列番号４２５及び配列番号４２８；配列番号４２１及び配列番号４２９；配列番号５０４及び配列番号４２９；配列番号４２３及び配列番号４３０；配列番号４１４及び配列番号４３１；；配列番号４１４及び配列番号４３３；配列番号４１４及び配列番号４３４；配列番号４１４及び配列番号４３５；配列番号５０４及び配列番号４３１；配列番号５０４及び配列番号４３３；配列番号５０４及び配列番号４３４；配列番号５０４及び配列番号４３５；配列番号５０５及び配列番号４３１；配列番号５０５及び配列番号４３３；配列番号５０５及び配列番号４３４；配列番号５０５及び配列番号４３５；配列番号４３８及び配列番号４１７；または配列番号４３９及び配列番号４２０を含む、実施形態１～９５のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片。
９８．前記多重特異性抗体が、配列番号３８８；配列番号３９３；配列番号３９４；配列番号３９５；配列番号３９６；配列番号３９７；配列番号３９８；配列番号３９９；；配列番号４０１；配列番号４０２；配列番号４０３；配列番号４０４；配列番号４０５；配列番号４０６；配列番号４０７；配列番号４０８；配列番号４０９；配列番号４１０；配列番号４１１；配列番号４１２；配列番号４１４及び配列番号４１５；配列番号４１４及び配列番号４１６；配列番号４１４及び配列番号４１９；配列番号４１４及び配列番号４１８；配列番号５０４及び配列番号４１５；配列番号５０４及び配列番号４１６；配列番号５０４及び配列番号４１９；配列番号５０４及び配列番号４１８；配列番号５０５及び配列番号４１５；配列番号５０５及び配列番号４１６；配列番号５０５及び配列番号４１９；配列番号５０５及び配列番号４１８；配列番号４１４及び配列番号４３１；配列番号４１４及び配列番号４３３；配列番号４１４及び配列番号４３４；配列番号４１４及び配列番号４３４；配列番号５０４及び配列番号４３１；配列番号５０４及び配列番号４３３；配列番号５０４及び配列番号４３４；配列番号５０４及び配列番号４３５；配列番号５０５及び配列番号４３１；配列番号５０５及び配列番号４３３；配列番号５０５及び配列番号４３４；配列番号４３８及び配列番号４１７；または配列番号４３９及び配列番号４２０を含む、実施形態９４または実施形態９５に記載の抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片。
９９．前記第１の標的エピトープが、実施形態３７～３９または６９～７１のいずれか１項に記載のエピトープである、実施形態９６～９８のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片。
１００．γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖に特異的に結合し、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合断片とγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の前記可変δ１（Ｖδ１）鎖への結合について競合する抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
１０１．前記抗体がＦｃ有効型である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片。
１０２．抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であって、
ａ．それが結合するＶδ１Ｔ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし、
ｂ．ＣＤＣまたはＡＤＣＣを示さず、
ｃ．Ｖδ１Ｔ細胞を枯渇させないことを特徴とする、前記抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
１０３．前記抗体が、ＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣによる生存Ｖδ１＋Ｔ細胞集団の約３０％未満または約２０％未満または約１０％未満の枯渇を引き起こす、実施形態１０２に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
１０４．前記抗体がＩＬ－１７Ａの分泌を誘発しない、実施形態１０２に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
１０５．前記抗体が、相当量のＣＤ３抗体により誘発されるＩＬ－１７Ａ分泌の約３０％未満または約２０％未満または約１０％未満のＩＬ－１７Ａ分泌を誘発する、実施形態１０２に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
１０６．前記抗体またはその抗原結合断片が、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＶＤ１に結合する、実施形態１０２～１０５のいずれか１項に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
１０７．前記抗体またはその抗原結合断片が、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＶＤ１に結合する、実施形態１０２～１０６のいずれか１項に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
１０８．前記抗体またはその抗原結合断片が、約１００ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＶＤ１に結合する、実施形態１０２～１０７のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１０９．前記抗体またはその抗原結合断片が、約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＶＤ１に結合する、実施形態１０８のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１１０．約１０ｎＭ未満のＫＤでγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のヒト可変δ１（Ｖδ１）鎖に特異的に結合する、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
１１１．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、実施形態１～１０９のいずれか１項に記載の抗体またはその抗原結合断片である、実施形態１１０に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１１２．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約１００ｎＭ未満または約５０ｎＭ未満のＫＤでγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のカニクイザル可変δ１（Ｖδ１）鎖に結合する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１１３．前記抗体またはその抗原結合断片が、約５０ｎＭ未満、好ましくは、約１０ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１１４．前記抗体またはその抗原結合断片が、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１１５．前記抗体またはその抗原結合断片が、約１０ｎＭ未満、好ましくは、約５ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１１６．前記抗体またはその抗原結合断片が、約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１１７．前記抗体またはその抗原結合断片がＶδ１Ｔ細胞増殖を刺激する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１１８．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約１００ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＶＲＤ１に結合する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１１９．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約５０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＶＲＤ１に結合する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１２０．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１２１．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１２２．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約１ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１２３．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約１００ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１２４．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１２５．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約５０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、または約０．５ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１２６．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約１０ｎＭ未満または約５ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１２７．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、または約１ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１２８．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約５０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、または約１ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１２９．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し、
ｂ．任意により、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し、
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し、
ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有するである、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１３０．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１００ｎＭ未満（約５０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１３１．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１０ｎＭ未満（約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１３２．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１０ｎＭ未満（約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１３３．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
ｃ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
ｄ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１３４．前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し、
ｃ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有し、
ｄ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
ｅ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１３５．前記抗体またはその抗原結合断片が、ヒト抗体またはその抗原結合断片である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１３６．前記抗体が、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、可変ドメイン（例えば、ＶＨまたはＶＬ）、ダイアボディ、ミニボディ、または全長抗体である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１３７．前記抗体がｓｃＦｖまたは全長抗体、例えば、ＩｇＧ１である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１３８．前記抗体またはその抗原結合断片が、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、またはＩｇＹ抗体である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１３９．前記抗体またはその抗原結合断片がＩｇＧ抗体である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１４０．前記抗体またはその抗原結合断片がＩｇＧ１抗体である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１４１．前記抗体がモノクローナル抗体である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１４２．前記抗体またはその抗原結合断片がＶＨ及びＶＬを含み、前記ＶＨ及びＶＬ領域がポリペプチドリンカーなどのリンカーにより連結されている、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１４３．前記リンカーが（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎフォーマットを含み、ｎ＝１～８である、実施形態１４２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１４４．前記リンカーが、［（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎ（Ｇｌｙ３ＡｌａＳｅｒ）ｍ］ｐリンカーを含み、ｎ、ｍ、及びｐ＝１～８である、実施形態１４２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１４５．前記リンカーが配列番号２９１を含む、実施形態１４２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１４６．前記リンカーが配列番号２９１からなる、実施形態１４２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１４７．前記抗体またはその抗原結合断片が、γδＴＣＲのＶδ１鎖のＶ領域におけるエピトープにのみ結合する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１４８．前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号２７２、配列番号３０６、または配列番号３０８のアミノ酸残基１～９０内のエピトープにのみ結合する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１４９．前記抗体またはその抗原結合断片が、γδＴＣＲのＶδ１鎖のＣＤＲ３に見出されるエピトープに結合しない、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１５０．前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号２７２のアミノ酸９１～１０５の領域（ＣＤＲ３）内のエピトープに結合しない、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１５１．前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ｉ）配列番号２７２のアミノ酸３～２０；及び／または
（ｉｉ）配列番号２７２のアミノ酸３７－７７の領域内のエピトープに結合する、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１５２．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、実施形態１５１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１５３．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含む、実施形態１５１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１５４．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる、実施形態１５１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１５５．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７２のアミノ酸５～２０及び／または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、実施形態１５１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１５６．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７を含む、実施形態１５１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１５７．前記抗体またはその抗原結合断片により結合されるエピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７からなる、実施形態１５１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１５８．前記エピトープがγδＴ細胞の活性化エピトープである、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１５９．前記活性化エピトープの結合が、（ｉ）γδＴＣＲを下方調節し、（ｉｉ）γδＴ細胞の脱顆粒を活性化し、及び／または（ｉｉｉ）γδＴ細胞による殺傷を促進する、実施形態１５８に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１６０．前記活性化エピトープの結合が、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ２５、ＣＤ６９、及び／またはＫｉ６７の発現を上方調節する、実施形態１５８または１５９に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１６１．前記抗体が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖及び第２の抗原に特異的に結合するか、またはγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖上の２つの異なるエピトープに結合する多重特異性抗体である、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１６２．前記第２の抗原が細胞表面タンパク質である、実施形態１６１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１６３．前記第２の抗原がＶδ１＋Ｔ細胞上に存在する、実施形態１６１または１６２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１６４．前記第２の抗原がＶδ１細胞上に存在しない、実施形態１６１または１６２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１６５．前記第２の抗原が免疫細胞上に存在する、実施形態１６１または１６２または１６３に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１６６．前記第２の抗原が、がん抗原またはがん関連抗原である、実施形態１６１～１６５のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１６７．前記がん抗原またはがん関連抗原が腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）である、実施形態１６６に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１６８．前記がん抗原またはがん関連抗原が、ＡＦＰ、ＡＫＡＰ－４、ＡＬＫ、αフェトプロテイン、アンドロゲン受容体、Ｂ７Ｈ３、ＢＡＧＥ、ＢＣＡ２２５、ＢＣＡＡ、Ｂｃｒ－ａｂｌ、β－カテニン、β－ＨＣＧ、β－ヒト絨毛性ゴナドトロピン、ＢＯＲＩＳ、ＢＴＡＡ、ＣＡ １２５、ＣＡ １５－３、ＣＡ １９５、ＣＡ １９－９、ＣＡ ２４２、ＣＡ ２７．２９、ＣＡ ７２－４、ＣＡ－５０、ＣＡＭ １７．１、ＣＡＭ４３、カルボニックアンヒドラーゼＩＸ、癌胎児性抗原、ＣＤ２２、ＣＤ３３／ＩＬ３Ｒａ、ＣＤ６８＼Ｐ１、ＣＤＫ４、ＣＥＡ、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン４（ＣＳＰＧ４）、ｃ－Ｍｅｔ、ＣＯ－０２９、ＣＳＰＧ４、サイクリンＢ１、シクロフィリンＣ関連タンパク質、ＣＹＰ１Ｂ１、Ｅ２Ａ－ＰＲＬ、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥＬＦ２Ｍ、ＥｐＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、エフリンＢ２、エプスタイン・バーウイルス抗原ＥＢＶＡ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ＥＴＳ融合遺伝子）、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＦＡＰ、ＦＧＦ－５、Ｆｏｓ関連抗原１、フコシルＧＭ１、Ｇ２５０、Ｇａ７３３＼ＥｐＣＡＭ、ＧＡＧＥ－１、ＧＡＧＥ－２、ＧＤ２、ＧＤ３、神経膠腫関連抗原、ＧｌｏｂｏＨ、糖脂質Ｆ７７、ＧＭ３、ＧＰ １００、ＧＰ １００（Ｐｍｅｌ １７）、Ｈ４－ＲＥＴ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＨＥＲ－２／Ｎｅｕ／ＥｒｂＢ－２、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ－ＭＡＡ）、ＨＰＶ Ｅ６、ＨＰＶ Ｅ７、ｈＴＥＲＴ、ＨＴｇｐ－１７５、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、イディオタイプ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＧＦ－ＩＩ、ＩＧＨ－ＩＧＫ、インスリン成長因子（ＩＧＦ）－Ｉ、腸カルボキシルエステラーゼ、Ｋ－ｒａｓ、ＬＡＧＥ－１ａ、ＬＣＫ、レクチン反応性ＡＦＰ、レグマイン、ＬＭＰ２、Ｍ３４４、ＭＡ－５０、Ｍａｃ－２結合タンパク質、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＭＡＤ－ＣＴ－２、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ Ａ１、ＭＡＧＥ Ａ３、ＭＡＧＥ－１、ＭＡＧＥ－３、ＭＡＧＥ－４、ＭＡＧＥ－５、ＭＡＧＥ－６、ＭＡＲＴ－１、ＭＡＲＴ－１／ＭｅｌａｎＡ、Ｍ－ＣＳＦ、黒色腫関連コンドロイチン硫酸プロテオグリカン（ＭＣＳＰ）、メソテリン、ＭＧ７－Ａｇ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＭＮ－ＣＡ ＩＸ、ＭＯＶ１８、ＭＵＣ１、Ｍｕｍ－１、ｈｓｐ７０－２、ＭＹＣＮ、ＭＹＬ－ＲＡＲ、ＮＡ１７、ＮＢ／７０Ｋ、神経／グリア抗原２（ＮＧ２）、好中球エラスターゼ、ｎｍ－２３Ｈ１、ＮｕＭａ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＮＹ－ＣＯ－１、ＮＹ－ＥＳＯ、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＯＹ－ＴＥＳ１、ｐ１５、ｐ１６、ｐ１８０ｅｒｂＢ３、ｐ１８５ｅｒｂＢ２、ｐ５３、ｐ５３変異体、Ｐａｇｅ４、ＰＡＸ３、ＰＡＸ５、ＰＤＧＦＲ－β、ＰＬＡＣ１、ポリシアル酸、前立腺癌腫瘍抗原－１（ＰＣＴＡ－１）、前立腺特異抗原、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ－１、Ｒａｓ、Ｒａｓ変異体、ＲＣＡＳ１、ＲＧＳ５、ＲｈｏＣ、ＲＯＲ１、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、ＳＡＲＴ３、ＳＤＣＣＡＧ１６、ｓＬｅ（ａ）、精子タンパク質１７、ＳＳＸ２、ＳＴｎ、サバイビン、ＴＡ－９０、ＴＡＡＬ６、ＴＡＧ－７２、テロメラーゼ、チログロブリン、Ｔｉｅ ２、ＴＬＰ、Ｔｎ、ＴＰＳ、ＴＲＰ－１、ＴＲＰ－２、ＴＲＰ－２、ＴＳＰ－１８０、チロシナーゼ、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ２、ＶＩＳＴＡ、ＷＴ１、ＸＡＧＥ １、４３－９Ｆ、５Ｔ４、及び７９１Ｔｇｐ７２からなる群から選択される、実施形態１６６に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１６９．前記多重特異性抗体がＴ細胞エンゲージャー二重特異性抗体である、実施形態１６１～１６８のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１７０．前記抗体が二重特異性抗体であり、前記第２の抗原が、ＣＤ１９、Ｈｅｒ２、ＥＧＦＲ、ＦＡＰα、またはＭＳＬＮである、実施形態１６１～１６９のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１７１．前記抗体が二重特異性抗体であり、前記第２の抗原がＣＤ１９である、実施形態１６１～１７０のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１７２．前記抗体が、配列番号３１４、配列番号３１５、配列番号３１６、配列番号３９６及び配列番号３９７、配列番号４２１及び配列番号４２２、配列番号５０４及び配列番号４２２、配列番号４２３及び配列番号４２４からなる群から選択される配列を含む、実施形態１７１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１７３．前記抗体が二重特異性抗体であり、前記第２の抗原がＨｅｒ２（ＣＤ３４０）である、実施形態１６１～１７０のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１７４．前記抗体が、配列番号３９３、配列番号３９４、配列番号３９５、配列番号３９８、配列番号４１４、及び配列番号４３３；ならびに配列番号４１４及び配列番号４３４；配列番号５０４及び配列番号４３３；ならびに配列番号５０５及び配列番号４３４からなる群から選択される配列を含む、実施形態１７３に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１７５．前記抗体が二重特異性抗体であり、前記第２の抗原がＥＧＦＲである、実施形態１６１～１７０のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１７６．前記抗体が、配列番号３７８；配列番号３７９；配列番号３８０；配列番号３８２；配列番号３８３；配列番号３８４；配列番号３８５；配列番号３８６；配列番号３８７；配列番号３８８；配列番号３９９；配列番号４２５及び配列番号４２６；配列番号４２１及び配列番号４３７；配列番号５０４及び配列番号４３７；配列番号４２３及び配列番号４２７；配列番号４２５及び配列番号４２８；配列番号４２１及び配列番号４２９；配列番号５０４及び配列番号４３７；配列番号４２３及び配列番号４３０；配列番号４１４及び配列番号４３１；配列番号５０４及び配列番号４３１；配列番号５０５及び配列番号４３１；配列番号５０４及び配列番号４３５；配列番号４１４及び配列番号４３５；または配列番号４１４及び配列番号４３５を含む、実施形態１７５に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１７７．前記抗体が二重特異性抗体であり、前記第２の抗原がＦＡＰαである、実施形態１６１～１７０のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１７８．
ａ．配列番号４５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号４６１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４６２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４６３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、実施形態１７７に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１７９．
ａ．配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を更に含む、実施形態１７８に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１８０．配列番号４５６のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５７のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態１７７に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１８１．配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態１８０に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１８２．配列番号４０２を含む、実施形態１７７～１８１のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１８３．前記抗体が、配列番号４０１；または配列番号４１４及び配列番号４１５を含む、実施形態１７７～１８２のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１８４．前記抗体が二重特異性抗体であり、前記第２の抗原がＭＳＬＮである、実施形態１６１～１７０のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１８５．ａ．配列番号４６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号４６９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４７０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４７１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、実施形態１８４に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１８６．ａ．配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を更に含む、実施形態１８５に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１８７．配列番号４６４のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態１８４に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１８８．配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態１８７に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１８９．配列番号４０４を含む、実施形態１８４～１８８のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１９０．前記抗体が、配列番号４０３；または配列番号４１４及び配列番号４１６を含む、実施形態１８４～１８９のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１９１．前記第２の抗原が免疫調節性抗原である、実施形態１６１～１６５のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１９２．前記免疫調節性抗原が、Ｂ７－１（ＣＤ８０）、Ｂ７－２（ＣＤ８６）、Ｂ７－ＤＣ（ＣＤ２７３）、Ｂ７－Ｈ１（ＣＤ２７４）、Ｂ７－Ｈ２（ＣＤ２７５）、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７－Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、Ｂ７－Ｈ５（ＶＩＳＴＡ）、ＢＴＬＡ（ＣＤ２７２）、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＣＤ１３７Ｌ、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ（ＣＤ１５４）、ＣＤ５４、ＣＤ５９、ＣＤ７０、ＣＴＬＡ４（ＣＤ１５２）、ＣＸＣＬ９、ＧＩＴＲ（ＣＤ３５７）、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）、ＩＣＡＭ－１（ＣＤ５４）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、ＬＡＧ－３（ＣＤ２２３）、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、ＯＸ４０Ｌ（ＣＤ２５２）、ＰＤ－１（ＣＤ２７９）、ＰＤ－Ｌ１（ＣＤ２７４）、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ３１４、ＣＤ３３４、ＣＤ３３５、ＣＤ３３７、及びＴＩＭ－３（ＣＤ３６６）からなる群から選択され得る、実施形態１９１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１９３．前記第２の抗原が刺激性免疫チェックポイント分子である、実施形態１９１または１９２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１９４．前記第２の抗原が抑制性免疫チェックポイント分子である、実施形態１９１または１９２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１９５．前記抗体が二重特異性抗体であり、前記第２のエピトープが、ＰＤ－１、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、またはＴＩＧＩＴのエピトープである、実施形態１９１または１９２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１９６．前記抗体が二重特異性抗体であり、前記第２のエピトープがＰＤ－１のエピトープである、実施形態１９１または１９２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１９７．ａ．配列番号４７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号４７７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４７８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、実施形態１９６に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１９８．ａ．配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を更に含む、実施形態１９７に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
１９９．配列番号４７２のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態１９５に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２００．配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態１９９に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２０１．配列番号４０６を含む、実施形態１９５～２００のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２０２．前記抗体が、配列番号４０５；または配列番号４３８及び配列番号４１７を含む、実施形態１９５～２０１のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２０３．前記抗体が二重特異性抗体であり、前記第２のエピトープが４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）のエピトープである、実施形態１９１または１９２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２０４．ａ．配列番号４８２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４８３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４８４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号４８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、実施形態２０３に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２０５．ａ．配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を更に含む、実施形態２０４に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２０６．配列番号４８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８１のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態２０３に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２０７．配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態２０６に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２０８．配列番号４０８を含む、実施形態２０３～２０７のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２０９．前記抗体が、配列番号４０７；または配列番号４１４及び配列番号４１８を含む、実施形態２０３～２０８のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２１０．前記抗体が二重特異性抗体であり、前記第２のエピトープがＯＸ４０のエピトープである、実施形態１９１または１９２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２１１．ａ．配列番号４９０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４９１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号４９２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号４９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号４９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号４９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、実施形態２１０に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２１２．ａ．配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を更に含む、実施形態２１１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２１３．配列番号４８８のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態２１０に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２１４．配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態２１３に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２１５．配列番号４１０を含む、実施形態２１０～２１４のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２１６．前記抗体が、配列番号４０９；または配列番号４１４及び配列番号４１９を含む、実施形態２１０～２１５のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２１７．前記抗体が二重特異性抗体であり、前記第２のエピトープがＴＩＧＩＴのエピトープである、実施形態１９１または１９２に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２１８．
ａ．配列番号４９８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号４９９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５００のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号５０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号５０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号５０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、実施形態２１７に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２１９．ａ．配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
ｂ．配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を更に含む、実施形態２１８に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２２０．配列番号４９６のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９７のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態２１７に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２２１．配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む、実施形態２２０に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２２２．配列番号４１２を含む、実施形態２１７～２２１のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２２３．前記抗体が、配列番号４１１；または配列番号４３９及び配列番号４２０を含む、実施形態２１７～２２２のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２２４．前記第２の抗原が分化抗原群（ＣＤ）である、実施形態１６１～２２３のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２２５．前記ＣＤ抗原が、ＣＤ１ａ、ＣＤ１ｂ、ＣＤ１ｃ、ＣＤ１ｄ、ＣＤ１ｅ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ３ｄ、ＣＤ３ｅ、ＣＤ３ｇ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ８ａ、ＣＤ８ｂ、ＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｄ、ＣＤ１３、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１６ａ、ＣＤ１６ｂ、ＣＤ１７、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ２６、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ３１、ＣＤ３２Ａ、ＣＤ３２Ｂ、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ４１、ＣＤ４２、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ４２ｃ、ＣＤ４２ｄ、ＣＤ４３、ＣＤ４４、ＣＤ４５、ＣＤ４６、ＣＤ４７、ＣＤ４８、ＣＤ４９ａ、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ４９ｄ、ＣＤ４９ｅ、ＣＤ４９ｆ、ＣＤ５０、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ５３、ＣＤ５４、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ５７、ＣＤ５８、ＣＤ５９、ＣＤ６０ａ、ＣＤ６０ｂ、ＣＤ６０ｃ、ＣＤ６１、ＣＤ６２Ｅ、ＣＤ６２Ｌ、ＣＤ６２Ｐ、ＣＤ６３、ＣＤ６４ａ、ＣＤ６５、ＣＤ６５ｓ、ＣＤ６６ａ、ＣＤ６６ｂ、ＣＤ６６ｃ、ＣＤ６６ｄ、ＣＤ６６ｅ、ＣＤ６６ｆ、ＣＤ６８、ＣＤ６９、ＣＤ７０、ＣＤ７１、ＣＤ７２、ＣＤ７３、ＣＤ７４、ＣＤ７５、ＣＤ７５ｓ、ＣＤ７７、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ８３、ＣＤ８４、ＣＤ８５Ａ、ＣＤ８５Ｂ、ＣＤ８５Ｃ、ＣＤ８５Ｄ、ＣＤ８５Ｆ、ＣＤ８５Ｇ、ＣＤ８５Ｈ、ＣＤ８５Ｉ、ＣＤ８５Ｊ、ＣＤ８５Ｋ、ＣＤ８５Ｍ、ＣＤ８６、ＣＤ８７、ＣＤ８８、ＣＤ８９、ＣＤ９０、ＣＤ９１、ＣＤ９２、ＣＤ９３、ＣＤ９４、ＣＤ９５、ＣＤ９６、ＣＤ９７、ＣＤ９８、ＣＤ９９、ＣＤ１００、ＣＤ１０１、ＣＤ１０２、ＣＤ１０３、ＣＤ１０４、ＣＤ１０５、ＣＤ１０６、ＣＤ１０７、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ１０７ｂ、ＣＤ１０８、ＣＤ１０９、ＣＤ１１０、ＣＤ１１１、ＣＤ１１２、ＣＤ１１３、ＣＤ１１４、ＣＤ１１５、ＣＤ１１６、ＣＤ１１７、ＣＤ１１８、ＣＤ１１９、ＣＤ１２０、ＣＤ１２０ａ、ＣＤ１２０ｂ、ＣＤ１２１ａ、ＣＤ１２１ｂ、ＣＤ１２２、ＣＤ１２３、ＣＤ１２４、ＣＤ１２５、ＣＤ１２６、ＣＤ１２７、ＣＤ１２９、ＣＤ１３０、ＣＤ１３１、ＣＤ１３２、ＣＤ１３３、ＣＤ１３４、ＣＤ１３５、ＣＤ１３６、ＣＤ１３７、ＣＤ１３８、ＣＤ１３９、ＣＤ１４０Ａ、ＣＤ１４０Ｂ、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１４３、ＣＤ１４４、ＣＤｗ１４５、ＣＤ１４６、ＣＤ１４７、ＣＤ１４８、ＣＤ１５０、ＣＤ１５１、ＣＤ１５２、ＣＤ１５３、ＣＤ１５４、ＣＤ１５５、ＣＤ１５６、ＣＤ１５６ａ、ＣＤ１５６ｂ、ＣＤ１５６ｃ、ＣＤ１５７、ＣＤ１５８、ＣＤ１５８Ａ、ＣＤ１５８Ｂ１、ＣＤ１５８Ｂ２、ＣＤ１５８Ｃ、ＣＤ１５８Ｄ、ＣＤ１５８Ｅ１、ＣＤ１５８Ｅ２、ＣＤ１５８Ｆ１、ＣＤ１５８Ｆ２、ＣＤ１５８Ｇ、ＣＤ１５８Ｈ、ＣＤ１５８Ｉ、ＣＤ１５８Ｊ、ＣＤ１５８Ｋ、ＣＤ１５９ａ、ＣＤ１５９ｃ、ＣＤ１６０、ＣＤ１６１、ＣＤ１６２、ＣＤ１６３、ＣＤ１６４、ＣＤ１６５、ＣＤ１６６、ＣＤ１６７ａ、ＣＤ１６７ｂ、ＣＤ１６８、ＣＤ１６９、ＣＤ１７０、ＣＤ１７１、ＣＤ１７２ａ、ＣＤ１７２ｂ、ＣＤ１７２ｇ、ＣＤ１７３、ＣＤ１７４、ＣＤ１７５、ＣＤ１７５ｓ、ＣＤ１７６、ＣＤ１７７、ＣＤ１７８、ＣＤ１７９ａ、ＣＤ１７９ｂ、ＣＤ１８０、ＣＤ１８１、ＣＤ１８２、ＣＤ１８３、ＣＤ１８４、ＣＤ１８５、ＣＤ１８６、ＣＤ１８７、ＣＤ１８８、ＣＤ１８９、ＣＤ１９０、ＣＤ１９１、ＣＤ１９２、ＣＤ１９３、ＣＤ１９４、ＣＤ１９５、ＣＤ１９６、ＣＤ１９７、ＣＤｗ１９８、ＣＤｗ１９９、ＣＤ２００、ＣＤ２０１、ＣＤ２０２ｂ、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ２０４、ＣＤ２０５、ＣＤ２０６、ＣＤ２０７、ＣＤ２０８、ＣＤ２０９、ＣＤ２１０、ＣＤｗ２１０ａ、ＣＤｗ２１０ｂ、ＣＤ２１１、ＣＤ２１２、ＣＤ２１３ａ１、ＣＤ２１３ａ２、ＣＤ２１４、ＣＤ２１５、ＣＤ２１６、ＣＤ２１７、ＣＤ２１８ａ、ＣＤ２１８ｂ、ＣＤ２１９、ＣＤ２２０、ＣＤ２２１、ＣＤ２２２、ＣＤ２２３、ＣＤ２２４、ＣＤ２２５、ＣＤ２２６、ＣＤ２２７、ＣＤ２２８、ＣＤ２２９、ＣＤ２３０、ＣＤ２３１、ＣＤ２３２、ＣＤ２３３、ＣＤ２３４、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ２３５ｂ、ＣＤ２３６、ＣＤ２３７、ＣＤ２３８、ＣＤ２３９、ＣＤ２４０ＣＥ、ＣＤ２４０Ｄ、ＣＤ２４１、ＣＤ２４２、ＣＤ２４３、ＣＤ２４４、ＣＤ２４５、ＣＤ２４６、ＣＤ２４７、ＣＤ２４８、ＣＤ２４９、ＣＤ２５０、ＣＤ２５１、ＣＤ２５２、ＣＤ２５３、ＣＤ２５４、ＣＤ２５５、ＣＤ２５６、ＣＤ２５７、ＣＤ２５８、ＣＤ２５９、ＣＤ２６０、ＣＤ２６１、ＣＤ２６２、ＣＤ２６３、ＣＤ２６４、ＣＤ２６５、ＣＤ２６６、ＣＤ２６７、ＣＤ２６８、ＣＤ２６９、ＣＤ２７０、ＣＤ２７１、ＣＤ２７２、ＣＤ２７３、ＣＤ２７４、ＣＤ２７５、ＣＤ２７６、ＣＤ２７７、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、ＣＤ２８０、ＣＤ２８１、ＣＤ２８２、ＣＤ２８３、ＣＤ２８４、ＣＤ２８５、ＣＤ２８６、ＣＤ２８７、ＣＤ２８８、ＣＤ２８９、ＣＤ２９０、ＣＤ２９１、ＣＤ２９２、ＣＤｗ２９３、ＣＤ２９４、ＣＤ２９５、ＣＤ２９６、ＣＤ２９７、ＣＤ２９８、ＣＤ２９９、ＣＤ３００Ａ、ＣＤ３００Ｃ、ＣＤ３０１、ＣＤ３０２、ＣＤ３０３、ＣＤ３０４、ＣＤ３０５、ＣＤ３０６、ＣＤ３０７、ＣＤ３０７ａ、ＣＤ３０７ｂ、ＣＤ３０７ｃ、ＣＤ３０７ｄ、ＣＤ３０７ｅ、ＣＤ３０８、ＣＤ３０９、ＣＤ３１０、ＣＤ３１１、ＣＤ３１２、ＣＤ３１３、ＣＤ３１４、ＣＤ３１５、ＣＤ３１６、ＣＤ３１７、ＣＤ３１８、ＣＤ３１９、ＣＤ３２０、ＣＤ３２１、ＣＤ３２２、ＣＤ３２３、ＣＤ３２４、ＣＤ３２５、ＣＤ３２６、ＣＤ３２７、ＣＤ３２８、ＣＤ３２９、ＣＤ３３０、ＣＤ３３１、ＣＤ３３２、ＣＤ３３３、ＣＤ３３４、ＣＤ３３５、ＣＤ３３６、ＣＤ３３７、ＣＤ３３８、ＣＤ３３９、ＣＤ３４０、ＣＤ３４４、ＣＤ３４９、ＣＤ３５１、ＣＤ３５２、ＣＤ３５３、ＣＤ３５４、ＣＤ３５５、ＣＤ３５７、ＣＤ３５８、ＣＤ３６０、ＣＤ３６１、ＣＤ３６２、ＣＤ３６３、ＣＤ３６４、ＣＤ３６５、ＣＤ３６６、ＣＤ３６７、ＣＤ３６８、ＣＤ３６９、ＣＤ３７０、及びＣＤ３７１からなる群から選択される、実施形態２２４に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２２６．前記抗体が二重特異性抗体である、実施形態１６１～２２５のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２２７．前記抗体が二重特異性抗体であり、ＣｒｏｓｓＭａｂ、ＤＡＦ（ツー・イン・ワン）、ＤＡＦ（フォー・イン・ワン）、ＤｕｔａＭａｂ、ＤＴ－ＩｇＧ、ノブ・イン・ホール（ＫＩＨ）、ノブ・イン・ホール（共通軽鎖）、電荷ペア、Ｆａｂアーム交換、ＳＥＥＤボディ、Ｔｒｉｏｍａｂ、ＬＵＺ－Ｙ、Ｆｃａｂ、κλボディ、直交性Ｆａｂ、ＤＶＤ－ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｈ）－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－（Ｈ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－（Ｌ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ，Ｈ）－Ｆｖ、ＩｇＧ（Ｈ）－Ｖ、Ｖ（Ｈ）－ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）－Ｖ、Ｖ（Ｌ）－ＩｇＧ、ＫＩＨ ＩｇＧ－ｓｃＦａｂ、２ｓｃＦｖ－ＩｇＧ、ＩｇＧ－２ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ４－Ｉｇ、Ｚｙｂｏｄｙ、ＤＶＩ－ＩｇＧ（フォー・イン・ワン）、ナノボディ、Ｎａｎｏｂｙ－ＨＡＳ、ＢｉＴＥ、ダイアボディ、ＤＡＲＴ、ＴａｎｄＡｂ、ｓｃダイアボディ、ｓｃダイアボディ－ＣＨ３、ダイアボディ－ＣＨ３、トリプルボディ、Ｍｏｒｒｉｓｏｎフォーマット、ミニ抗体、ミニボディ、ＴｒｉＢｉミニボディ、ｓｃＦｖ－ＣＨ３ ＫＩＨ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－ＣＨ－ＣＬ－ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆ（ａｂ）２－ｓｃＦｖ２、ｓｃＦｖ－ＫＩＨ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ－Ｆｃ、四価ＨＣＡｂ、ｓｃダイアボディ－Ｆｃ、ダイアボディ－Ｆｃ、タンデムｓｃＦｖ－Ｆｃ、イントラボディ、ドック・アンド・ロック、ＩｍｍＴＡＣ、ＨＳＡボディ、ｓｃダイアボディ－ＨＡＳ、タンデムｓｃＦｖ－毒素、ＩｇＧ－ＩｇＧ、ｏｖ－Ｘ－Ｂｏｄｙ、デュオボディ、ｍａｂ２及びｓｃＦｖ１－ＰＥＧ－ｓｃＦｖ２からなる群から選択される、実施形態１６１～２２６のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２２８．前記抗体が、二重特異性抗体コンジュゲート、例えば、ＩｇＧ２、ｓｃＦｖ、タンデムｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２、ＫｉＨ二重特異性抗体、Ｍｏｒｒｉｓｏｎフォーマット二重特異性抗体（ＩｇＧ－ＨＣ－ｓｃＦｖ）、ダイアボディ、トリアボディ、ミニボディ、または全長二重特異性抗体である、実施形態１６１～２２７のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２２９．前記抗体が二重特異性抗体ではない、実施形態１６１～２２５のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２３０．前記多重特異性抗体が約７０ＫＤａより大きい、先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２３１．前記多重特異性抗体が、配列番号３８５、配列番号３８６、配列番号３８７、配列番号３１４、配列番号、配列番号３９４、配列番号３９５、配列番号３９７、配列番号４０２、配列番号４０４、配列番号４０６、配列番号４０８、配列番号４１０、配列番号４１２、及び配列番号４１３からなる群から選択される配列を含む、実施形態１６１～２３０のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２３２．前記多重特異性抗体が、配列番号３８８；配列番号３１５；配列番号３１６；配列番号３７８；配列番号３７９；配列番号３８０；配列番号３８２；配列番号３８３；配列番号３８４；配列番号３９３；配列番号３９６；配列番号３９８；配列番号３９９；配列番号４０１；配列番号４０３；配列番号４０５；配列番号４０７；配列番号４０９；配列番号４１１；配列番号４１４及び配列番号４１５；配列番号４１４及び配列番号４１６；配列番号４１４及び配列番号４１９；配列番号４１４及び配列番号４１８；配列番号５０４及び配列番号４１５；配列番号５０４及び配列番号４１６；配列番号５０４及び配列番号４１９；配列番号５０４及び配列番号４１８；配列番号５０５及び配列番号４１５；配列番号５０５及び配列番号４１６；配列番号５０５及び配列番号４１９；配列番号５０５及び配列番号４１８；配列番号４２１及び配列番号４２２；配列番号５０４及び配列番号４２２；配列番号４２３及び配列番号４２４；配列番号４２５及び配列番号４２６；配列番号４２１及び配列番号４３７；配列番号５０４及び配列番号４３７；配列番号４２３及び配列番号４２７；配列番号４２５及び配列番号４２８；配列番号４２１及び配列番号４２９；配列番号５０４及び配列番号４２９；配列番号４２３及び配列番号４３０；配列番号４１４及び配列番号４３１；配列番号４１４及び配列番号４３３；配列番号４１４及び配列番号４３４；配列番号４１４及び配列番号４３５；配列番号５０４及び配列番号４３１；配列番号５０４及び配列番号４３３；配列番号５０４及び配列番号４３４；配列番号５０４及び配列番号４３５；配列番号５０５及び配列番号４３１；配列番号５０５及び配列番号４３３；配列番号５０５及び配列番号４３４；配列番号５０５及び配列番号４３５；配列番号４３８及び配列番号４１７；または配列番号４３９及び配列番号４２０を含む、実施形態１６１～２３０のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２３３．先行実施形態のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片をコードするポリヌクレオチド配列。
２３４．配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１との少なくとも７０％の配列同一性を有する配列を含む、前記抗Ｖδ１抗体またはその抗体結合断片をコードするポリヌクレオチド配列。
２３５．実施形態２３３または実施形態２３４に記載のポリヌクレオチド配列を含む発現ベクター。
２３６．実施形態２３３もしくは実施形態２３４に記載のポリヌクレオチド配列、または実施形態２３５に記載の発現ベクターを含む宿主細胞であって、任意により、前記宿主細胞が組換え宿主細胞である、前記宿主細胞。
２３７．ＶＨ配列をコードする第１のポリヌクレオチド配列、及びＶＬ配列をコードする第２のポリヌクレオチド配列を含む、実施形態２３６に記載の宿主細胞。
２３８．ＶＨ配列をコードする第１のポリヌクレオチド配列を含む第１の発現ベクター、及びＶＬ配列をコードする第２のポリヌクレオチド配列を含む第２の発現ベクターを含む、実施形態２３６に記載の宿主細胞。
２３９．ＶＨ配列をコードする第１のポリヌクレオチド配列、及びＶＬ配列をコードする第２のポリヌクレオチド配列を含む発現ベクターを含む、実施形態２３６に記載の宿主細胞。
２４０．前記ポリヌクレオチドまたは発現ベクターが、前記抗体またはその抗原結合断片に融合された膜アンカーまたは膜貫通ドメインをコードし、前記抗体またはその抗原結合断片が、前記細胞の細胞外表面上に提示される、実施形態２３６～２３９のいずれか１項に記載の宿主細胞。
２４１．実施形態１～２３２のいずれか１項に記載の１項に記載の抗体またはその抗原結合断片を産生させるための方法であって、実施形態２３６～２４０のいずれか１項に記載の宿主細胞を細胞培養培地で培養することを含む、前記方法。
２４２．前記培養培地から前記抗体またはその抗原結合断片を単離することを更に含む、実施形態２４１に記載の方法。
２４３．抗体またはその抗原結合断片を変異させる方法であって、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位にセリンを有するκ軽鎖を含む抗体を提供すること、及び前記セリンを異なるアミノ酸に変異させることを含む、前記方法。
２４４．前記抗体が、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片である、実施形態２４３に記載の方法。
２４５．変異が導入される前後の両方で前記抗体が、配列番号１と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２６と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むＶＬを有する抗体である、実施形態２４３または実施形態２４４に記載の方法。
２４６．前記抗体またはその抗原結合断片がヒト抗原を結合し、変異が相同なカニクイザル抗原に対する前記抗体またはその抗原結合断片の親和性を増加させる、実施形態２４３～２４４のいずれか１項に記載の方法。
２４７．変異が導入される前後で前記抗体またはその抗原結合断片が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のヒト可変δ１（Ｖδ１）鎖に結合する抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であり、変異が導入された後で前記抗体が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のカニクイザル可変δ１（Ｖδ１）鎖に対する増加した親和性を有する、実施形態２４３～２４６のいずれか１項に記載の方法。
２４８．バリアント抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片を調製する方法であって、
ａ．配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｂ．配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｃ．配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｄ．配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｅ．配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｆ．配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｇ．配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｈ．配列番号２７８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｉ．配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｊ．配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｋ．配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
ｌ．配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む親抗体を提供すること、
ならびに前記抗体を親和性成熟に供することであって、生成された抗体が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖に対する前記親抗体より高い親和性を有する、前記親和性成熟に供することを含む、前記方法。
２４９．生成された抗体が、例えば、Ｋｄで測定される場合、前記親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、より好ましくは、少なくとも５０％、少なくとも１００％、またはより好ましくは、少なくとも約１０００％高い親和性でγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖に結合する、実施形態２４８に記載の方法。
２５０．生成された抗体を少なくとも１種以上の薬学的に許容される希釈剤または担体と共製剤化することを更に含む、実施形態２４８または実施形態２４９に記載の方法。
２５１．医薬組成物を調製する方法であって、実施形態２４１～２５０のいずれか１項に記載の方法により調製された抗体を提供すること、及び前記抗体を少なくとも１種以上の薬学的に許容される希釈剤または担体と共製剤化することを含む、前記方法。
２５２．実施形態２４１～２５０のいずれか１項に記載の方法により調製されたか、または調製可能な抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
２５３．実施形態２５１に記載の方法により調製されたか、または調製可能な医薬組成物。
２５４．実施形態１～２３１または２５１のいずれか１項に記載の抗体またはその抗体結合断片を含む組成物。
２５５．実施形態１～２３１または２５１のいずれか１項に記載の抗体またはその抗体結合断片、及び薬学的に許容される希釈剤または担体を含む医薬組成物。
２５６．実施形態１～２２９もしくは２４９のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体もしくは抗体結合断片、または実施形態２５３もしくは２５５に記載の医薬組成物を含むキット。
２５７．治療効果のある追加の薬剤を更に含む、実施形態２５６に記載のキット。
２５８．使用説明書を更に含む、実施形態２５６または実施形態２５７に記載のキット。
２５９．対象の疾患または障害を処置する方法であって、実施形態１～２３１もしくは２５１のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体もしくは抗体結合断片、または実施形態２５３もしくは２５５に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
２６０．前記疾患または障害が、がん、感染性疾患、または炎症性疾患である、実施形態２５９に記載の方法。
２６１．同時にまたは任意の順序で逐次的に第２の薬剤を対象に投与することを更に含む、実施形態２５９～２６０のいずれか１項に記載の方法。
２６２．対象における免疫応答を調節する方法であって、実施形態１～２３１もしくは２５１のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体もしくは抗体結合断片、または実施形態２５３もしくは２５５に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
２６３．前記対象が、がん、感染性疾患、または炎症性疾患を有する、実施形態２６２に記載の方法。
２６４．対象における免疫応答を調節することが、γδＴ細胞を活性化すること、γδＴ細胞の増殖を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞の増大を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞の脱顆粒を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞による殺傷活性を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞の細胞傷害性を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞の動員を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞の生存期間を延長させること、及びγδＴ細胞の疲弊に対する抵抗性を増強することからなる群から選択される少なくとも１つを含む、実施形態２６２または２６３に記載の方法。
２６５．病変細胞は殺傷されると共に健常な細胞が温存される、実施形態２５９～２６４のいずれか１項に記載の方法。
２６６．医療に使用するための実施形態１～２３１もしくは２５１のいずれか１項に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片、または実施形態２５３もしくは２５に記載の医薬組成物、または実施形態２５６～２５８のいずれか１項に記載のキット。
２６７．がん、感染性疾患、または炎症性疾患の処置に使用するための実施形態１～２３１もしくは２５１のいずれか１項に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片、または実施形態２５３もしくは２５５に記載の医薬組成物、または実施形態２５６～２５８のいずれか１項に記載のキット。
２６８．薬剤の製造における実施形態１～２３１もしくは２５１のいずれか１項に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片の使用。
２６９．がん、感染性疾患、または炎症性疾患の処置のための薬剤の製造における実施形態１～２３１もしくは２５１のいずれか１項に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片の使用。
２７０．前記抗体が実施形態１～１０１のいずれか１項に記載の抗体である、実施形態１０３～１１０のいずれか１項に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。

Claims (29)

  1. 配列番号５１、５２、及び１３０からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
    配列番号５３及び１３１からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；ならびに
    配列番号６８、５５～６７、６９～７８、及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または
    配列番号７９及び１４４からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
    配列番号８０及び１４５からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２；ならびに
    配列番号９５、８２～９４、９６～１０５、及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
  2. ａ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｂ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｃ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｄ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｅ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｆ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｇ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｈ．それぞれ配列番号５２、５３、及び６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｉ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｊ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｋ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｌ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｍ．それぞれ配列番号５２、５３、及び６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｎ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｏ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｐ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｑ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｒ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｓ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｔ．それぞれ配列番号５２、５３、及び７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｕ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｖ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｗ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｘ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｙ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｚ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ａａ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｂｂ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｃｃ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｄｄ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｅｅ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｆｆ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｇｇ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
    ｈｈ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；または
    ｉｉ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む、請求項１に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  3. 配列番号１５、２～１４、１６～２５、及び１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
    配列番号４０、２７～３９、４１～５０、及び１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域を含む、請求項１または請求項２に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
  4. ａ．配列番号１５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｂ．配列番号２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｃ．配列番号３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｄ．配列番号４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｅ．配列番号５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｆ．配列番号６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｇ．配列番号７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｈ．配列番号８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｉ．配列番号９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｊ．配列番号１０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｋ．配列番号１１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｌ．配列番号１２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｍ．配列番号１３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｎ．配列番号１４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｏ．配列番号１６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｐ．配列番号１７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｑ．配列番号１８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｒ．配列番号１９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｓ．配列番号２０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｔ．配列番号２１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｕ．配列番号２２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｖ．配列番号２３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｗ．配列番号２４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｘ．配列番号２５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号５０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｙ．配列番号１０７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１１９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｚ．配列番号１０８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ａａ．配列番号１０９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｂｂ．配列番号１１０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｃｃ．配列番号１１１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｄｄ．配列番号１１２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｅｅ．配列番号１１３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｆｆ．配列番号１１４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｇｇ．配列番号１１５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｈｈ．配列番号１１６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；または
    ｉｉ．配列番号１１７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬを含む、先行請求項のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  5. 前記抗体またはその抗原結合断片が、κ軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位でセリン以外のアミノ酸残基を含み、任意により、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基がロイシン残基である、先行請求項のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  6. 抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗体もしくはその抗原結合断片が、
    ａ．ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１５８）の配列を含むＨＣＤＲ１配列；
    ｂ．配列番号５３の配列を含むＨＣＤＲ２配列；
    ｃ．Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６２）の配列を含むＨＣＤＲ３配列であって、前記ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、前記ＨＣＤＲ３配列；
    ｄ．配列番号７９の配列を含むＬＣＤＲ１配列；
    ｅ．配列番号８０の配列を含むＬＣＤＲ２配列；及び
    ｆ．ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６６）の配列を含むＬＣＤＲ３配列であって、前記ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、前記ＬＣＤＲ３配列を含み、
    Ｘ１～Ｘ１３の各々が天然に存在するアミノ酸であるか、
    または前記抗体もしくはその抗原結合断片が、
    ａ．配列番号１３０の配列を含むＨＣＤＲ１配列；
    ｂ．配列番号１３１の配列を含むＨＣＤＲ２配列；
    ｃ．Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩの配列を含むＨＣＤＲ３配列であって、前記ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、前記ＨＣＤＲ３配列；
    ｄ．配列番号１４４の配列を含むＬＣＤＲ１配列；
    ｅ．配列番号１４５の配列を含むＬＣＤＲ２配列；及び
    ｆ．ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔの配列を含むＬＣＤＲ３配列であって、前記ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、前記ＬＣＤＲ３配列を含み、
    Ｘ１～Ｘ９の各々が天然に存在するアミノ酸である、前記抗体またはその抗原結合断片。
  7. 抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の親和性成熟したバリアントであり、前記親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、
    ａ．配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ配列；
    ｂ．配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＶＬ配列；
    ｃ．配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｄ．配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｅ．配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｆ．配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｇ．配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｈ．配列番号２７８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｉ．配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｊ．配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＶＬ；
    ｋ．配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
    ｌ．配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＶＬを含み、
    任意により、
    前記親和性成熟した抗体が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖への結合ついて、例えば、Ｋｄで測定される場合、前記親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも１００％、少なくとも５００％、もしくはより好ましくは、少なくとも約１０００％高い親和性を有し、
    前記親和性成熟した抗Ｖδ１抗体もしくはその抗原結合断片が、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくは少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含み、及び／または
    前記親和性成熟した抗Ｖδ１抗体もしくはその抗原結合断片が、親抗体配列と比較して最大２０、例えば、最大１５、例えば、最大１０のアミノ酸置換を含む、前記抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
  8. 抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片であって、前記抗体が、
    ａ．第１の標的エピトープであって、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープである、前記第１の標的エピトープ、及び
    ｂ．第２の標的エピトープに特異的に結合する多重特異性抗体であり、
    前記多重特異性抗体が、配列番号３８５；配列番号：３８６；配列番号：３８７；配列番号３１４；配列番号３９３；配列番号３９４；配列番号３９５；配列番号３９７；配列番号３８８；配列番号３１５；配列番号３１６；配列番号３７８；配列番号３７９；配列番号３８０；配列番号３８２；配列番号３８３；配列番号３８４；配列番号３９３；配列番号３９６；配列番号３９８；配列番号３９９；配列番号４０１；配列番号４０２；配列番号４０３；配列番号４０４；配列番号４０５；配列番号４０６；配列番号４０７；配列番号４０８；配列番号４０９；配列番号４１０；配列番号４１１；配列番号４１２；配列番号４１３；配列番号４１４及び配列番号４１５；配列番号４１４及び配列番号４１６；配列番号４１４及び配列番号４１９；配列番号４１４及び配列番号４１８；配列番号５０４及び配列番号４１５；配列番号５０４及び配列番号４１６；配列番号５０４及び配列番号４１９；配列番号５０４及び配列番号４１８；配列番号５０５及び配列番号４１５；配列番号５０５及び配列番号４１６；配列番号５０５及び配列番号４１９；配列番号５０５及び配列番号４１８；配列番号４２１及び配列番号４２２；配列番号５０４及び配列番号４２２；配列番号４２３及び配列番号４２４；配列番号４２５及び配列番号４２６；配列番号４２１及び配列番号４３７；配列番号５０４及び配列番号４３７；配列番号４２３及び配列番号４２７；配列番号４２５及び配列番号４２８；配列番号４２１及び配列番号４２９；配列番号５０４及び配列番号４２９；配列番号４２３及び配列番号４３０；配列番号４１４及び配列番号４３１；配列番号４１４及び配列番号４３３；配列番号４１４及び配列番号４３４；配列番号４１４及び配列番号４３５；配列番号５０４及び配列番号４３１；配列番号５０４及び配列番号４３３；配列番号５０４及び配列番号４３４；配列番号５０４及び配列番号４３５；配列番号５０５及び配列番号４３１；配列番号５０５及び配列番号４３３；配列番号５０５及び配列番号４３４；配列番号５０５及び配列番号４３５；配列番号４３８及び配列番号４１７；または配列番号４３９及び配列番号４２０を含む、前記抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片。
  9. 抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であって、
    ａ．それが結合するＶδ１Ｔ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし、
    ｂ．ＣＤＣまたはＡＤＣＣを示さず、
    ｃ．Ｖδ１Ｔ細胞を枯渇させないことを特徴とする、前記抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
  10. 前記多重特異性抗体が、ＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣによる生存Ｖδ１＋Ｔ細胞集団の約３０％未満または約２０％未満または約１０％未満の枯渇を引き起こす、先行請求項のいずれか１項に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
  11. 前記抗体またはその抗原結合断片が、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＶＤ１に結合する、任意により、前記抗体またはその抗原結合断片が、約１００ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＶＤ１に結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片。
  12. 約１０ｎＭ未満のＫＤでγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のヒト可変δ１（Ｖδ１）鎖に特異的に結合する、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であって、任意により、前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約１００ｎＭ未満のＫＤでγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のカニクイザル可変δ１（Ｖδ１）鎖に結合する、前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  13. 前記抗体またはその抗原結合断片が、
    ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し、
    ｂ．任意により、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば、表面プラズモン共鳴により測定される場合、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し、
    ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し、
    ｄ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ５０を有し得、
    ｅ．約５０ｎＭ未満のＴＨＰ－１細胞殺傷のＩＣ９０を有する、先行請求項のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  14. 前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号２７２、配列番号３０６、及び／または配列番号３０８のアミノ酸残基１～９０内のエピトープにのみ結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  15. 前記抗体またはその抗原結合断片が、
    （ｉ）配列番号２７２、配列番号３０６、及び／または配列番号３０８のアミノ酸３～２０；及び／または
    （ｉｉ）配列番号２７２、配列番号３０６、及び／または配列番号３０８のアミノ酸３７～７７の領域内のエピトープに結合する、先行請求項のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  16. 前記エピトープがγδＴ細胞の活性化エピトープであり、任意により、前記活性化エピトープの結合が、（ｉ）前記γδＴＣＲを下方調節し、（ｉｉ）前記γδＴ細胞の脱顆粒を活性化し、及び／または（ｉｉｉ）γδＴ細胞による殺傷を促進する、先行請求項のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  17. 前記活性化エピトープの結合が、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ２５、ＣＤ６９、及び／またはＫｉ６７の発現を上方調節する、請求項１６に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  18. 前記抗体がＩｇＧ抗体であり、任意により、前記抗体がＩｇＧ１抗体である、先行請求項のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  19. 前記抗体が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖及び第２の抗原に特異的に結合する多重特異性抗体であり、前記第２の抗原が、がん抗原もしくはがん関連抗原、免疫調節性抗原、または分化抗原群（ＣＤ）である、先行請求項のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  20. 前記がん抗原またはがん関連抗原が、ＡＦＰ、ＡＫＡＰ－４、ＡＬＫ、αフェトプロテイン、アンドロゲン受容体、Ｂ７Ｈ３、ＢＡＧＥ、ＢＣＡ２２５、ＢＣＡＡ、Ｂｃｒ－ａｂｌ、β－カテニン、β－ＨＣＧ、β－ヒト絨毛性ゴナドトロピン、ＢＯＲＩＳ、ＢＴＡＡ、ＣＡ １２５、ＣＡ １５－３、ＣＡ １９５、ＣＡ １９－９、ＣＡ ２４２、ＣＡ ２７．２９、ＣＡ ７２－４、ＣＡ－５０、ＣＡＭ １７．１、ＣＡＭ４３、カルボニックアンヒドラーゼＩＸ、癌胎児性抗原、ＣＤ２２、ＣＤ３３／ＩＬ３Ｒａ、ＣＤ６８＼Ｐ１、ＣＤＫ４、ＣＥＡ、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン４（ＣＳＰＧ４）、ｃ－Ｍｅｔ、ＣＯ－０２９、ＣＳＰＧ４、サイクリンＢ１、シクロフィリンＣ関連タンパク質、ＣＹＰ１Ｂ１、Ｅ２Ａ－ＰＲＬ、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥＬＦ２Ｍ、ＥｐＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、エフリンＢ２、エプスタイン・バーウイルス抗原ＥＢＶＡ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ＥＴＳ融合遺伝子）、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＦＡＰ、ＦＧＦ－５、Ｆｏｓ関連抗原１、フコシルＧＭ１、Ｇ２５０、Ｇａ７３３＼ＥｐＣＡＭ、ＧＡＧＥ－１、ＧＡＧＥ－２、ＧＤ２、ＧＤ３、神経膠腫関連抗原、ＧｌｏｂｏＨ、糖脂質Ｆ７７、ＧＭ３、ＧＰ １００、ＧＰ １００（Ｐｍｅｌ １７）、Ｈ４－ＲＥＴ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＨＥＲ－２／Ｎｅｕ／ＥｒｂＢ－２、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ－ＭＡＡ）、ＨＰＶ Ｅ６、ＨＰＶ Ｅ７、ｈＴＥＲＴ、ＨＴｇｐ－１７５、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、イディオタイプ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＧＦ－ＩＩ、ＩＧＨ－ＩＧＫ、インスリン成長因子（ＩＧＦ）－Ｉ、腸カルボキシルエステラーゼ、Ｋ－ｒａｓ、ＬＡＧＥ－１ａ、ＬＣＫ、レクチン反応性ＡＦＰ、レグマイン、ＬＭＰ２、Ｍ３４４、ＭＡ－５０、Ｍａｃ－２結合タンパク質、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＭＡＤ－ＣＴ－２、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ Ａ１、ＭＡＧＥ Ａ３、ＭＡＧＥ－１、ＭＡＧＥ－３、ＭＡＧＥ－４、ＭＡＧＥ－５、ＭＡＧＥ－６、ＭＡＲＴ－１、ＭＡＲＴ－１／ＭｅｌａｎＡ、Ｍ－ＣＳＦ、黒色腫関連コンドロイチン硫酸プロテオグリカン（ＭＣＳＰ）、メソテリン、ＭＧ７－Ａｇ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＭＮ－ＣＡ ＩＸ、ＭＯＶ１８、ＭＵＣ１、Ｍｕｍ－１、ｈｓｐ７０－２、ＭＹＣＮ、ＭＹＬ－ＲＡＲ、ＮＡ１７、ＮＢ／７０Ｋ、神経／グリア抗原２（ＮＧ２）、好中球エラスターゼ、ｎｍ－２３Ｈ１、ＮｕＭａ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＮＹ－ＣＯ－１、ＮＹ－ＥＳＯ、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＯＹ－ＴＥＳ１、ｐ１５、ｐ１６、ｐ１８０ｅｒｂＢ３、ｐ１８５ｅｒｂＢ２、ｐ５３、ｐ５３変異体、Ｐａｇｅ４、ＰＡＸ３、ＰＡＸ５、ＰＤＧＦＲ－β、ＰＬＡＣ１、ポリシアル酸、前立腺癌腫瘍抗原－１（ＰＣＴＡ－１）、前立腺特異抗原、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ－１、Ｒａｓ、Ｒａｓ変異体、ＲＣＡＳ１、ＲＧＳ５、ＲｈｏＣ、ＲＯＲ１、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、ＳＡＲＴ３、ＳＤＣＣＡＧ１６、ｓＬｅ（ａ）、精子タンパク質１７、ＳＳＸ２、ＳＴｎ、サバイビン、ＴＡ－９０、ＴＡＡＬ６、ＴＡＧ－７２、テロメラーゼ、チログロブリン、Ｔｉｅ ２、ＴＬＰ、Ｔｎ、ＴＰＳ、ＴＲＰ－１、ＴＲＰ－２、ＴＲＰ－２、ＴＳＰ－１８０、チロシナーゼ、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ２、ＶＩＳＴＡ、ＷＴ１、ＸＡＧＥ １、４３－９Ｆ、５Ｔ４、及び７９１Ｔｇｐ７２からなる群から選択されるか、
    前記免疫調節性抗原が、Ｂ７－１（ＣＤ８０）、Ｂ７－２（ＣＤ８６）、Ｂ７－ＤＣ（ＣＤ２７３）、Ｂ７－Ｈ１（ＣＤ２７４）、Ｂ７－Ｈ２（ＣＤ２７５）、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７－Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、Ｂ７－Ｈ５（ＶＩＳＴＡ）、ＢＴＬＡ（ＣＤ２７２）、ＣＤ１３７、ＣＤ１３７Ｌ、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ（ＣＤ１５４）、ＣＤ５４、ＣＤ５９、ＣＤ７０、ＣＴＬＡ４（ＣＤ１５２）、ＣＸＣＬ９、ＧＩＴＲ（ＣＤ３５７）、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）、ＩＣＡＭ－１（ＣＤ５４）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、ＬＡＧ－３（ＣＤ２２３）、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、ＯＸ４０Ｌ（ＣＤ２５２）、ＰＤ－１（ＣＤ２７９）、ＰＤ－Ｌ１（ＣＤ２７４）、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ３１４、ＣＤ３３４、ＣＤ３３５、ＣＤ３３７、及びＴＩＭ－３（ＣＤ３６６）からなる群から選択されるか、または
    前記ＣＤ抗原が、ＣＤ１ａ、ＣＤ１ｂ、ＣＤ１ｃ、ＣＤ１ｄ、ＣＤ１ｅ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ３ｄ、ＣＤ３ｅ、ＣＤ３ｇ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ８ａ、ＣＤ８ｂ、ＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｄ、ＣＤ１３、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１６ａ、ＣＤ１６ｂ、ＣＤ１７、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ２６、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ３１、ＣＤ３２Ａ、ＣＤ３２Ｂ、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ４１、ＣＤ４２、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ４２ｃ、ＣＤ４２ｄ、ＣＤ４３、ＣＤ４４、ＣＤ４５、ＣＤ４６、ＣＤ４７、ＣＤ４８、ＣＤ４９ａ、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ４９ｄ、ＣＤ４９ｅ、ＣＤ４９ｆ、ＣＤ５０、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ５３、ＣＤ５４、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ５７、ＣＤ５８、ＣＤ５９、ＣＤ６０ａ、ＣＤ６０ｂ、ＣＤ６０ｃ、ＣＤ６１、ＣＤ６２Ｅ、ＣＤ６２Ｌ、ＣＤ６２Ｐ、ＣＤ６３、ＣＤ６４ａ、ＣＤ６５、ＣＤ６５ｓ、ＣＤ６６ａ、ＣＤ６６ｂ、ＣＤ６６ｃ、ＣＤ６６ｄ、ＣＤ６６ｅ、ＣＤ６６ｆ、ＣＤ６８、ＣＤ６９、ＣＤ７０、ＣＤ７１、ＣＤ７２、ＣＤ７３、ＣＤ７４、ＣＤ７５、ＣＤ７５ｓ、ＣＤ７７、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ８３、ＣＤ８４、ＣＤ８５Ａ、ＣＤ８５Ｂ、ＣＤ８５Ｃ、ＣＤ８５Ｄ、ＣＤ８５Ｆ、ＣＤ８５Ｇ、ＣＤ８５Ｈ、ＣＤ８５Ｉ、ＣＤ８５Ｊ、ＣＤ８５Ｋ、ＣＤ８５Ｍ、ＣＤ８６、ＣＤ８７、ＣＤ８８、ＣＤ８９、ＣＤ９０、ＣＤ９１、ＣＤ９２、ＣＤ９３、ＣＤ９４、ＣＤ９５、ＣＤ９６、ＣＤ９７、ＣＤ９８、ＣＤ９９、ＣＤ１００、ＣＤ１０１、ＣＤ１０２、ＣＤ１０３、ＣＤ１０４、ＣＤ１０５、ＣＤ１０６、ＣＤ１０７、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ１０７ｂ、ＣＤ１０８、ＣＤ１０９、ＣＤ１１０、ＣＤ１１１、ＣＤ１１２、ＣＤ１１３、ＣＤ１１４、ＣＤ１１５、ＣＤ１１６、ＣＤ１１７、ＣＤ１１８、ＣＤ１１９、ＣＤ１２０、ＣＤ１２０ａ、ＣＤ１２０ｂ、ＣＤ１２１ａ、ＣＤ１２１ｂ、ＣＤ１２２、ＣＤ１２３、ＣＤ１２４、ＣＤ１２５、ＣＤ１２６、ＣＤ１２７、ＣＤ１２９、ＣＤ１３０、ＣＤ１３１、ＣＤ１３２、ＣＤ１３３、ＣＤ１３４、ＣＤ１３５、ＣＤ１３６、ＣＤ１３７、ＣＤ１３８、ＣＤ１３９、ＣＤ１４０Ａ、ＣＤ１４０Ｂ、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１４３、ＣＤ１４４、ＣＤｗ１４５、ＣＤ１４６、ＣＤ１４７、ＣＤ１４８、ＣＤ１５０、ＣＤ１５１、ＣＤ１５２、ＣＤ１５３、ＣＤ１５４、ＣＤ１５５、ＣＤ１５６、ＣＤ１５６ａ、ＣＤ１５６ｂ、ＣＤ１５６ｃ、ＣＤ１５７、ＣＤ１５８、ＣＤ１５８Ａ、ＣＤ１５８Ｂ１、ＣＤ１５８Ｂ２、ＣＤ１５８Ｃ、ＣＤ１５８Ｄ、ＣＤ１５８Ｅ１、ＣＤ１５８Ｅ２、ＣＤ１５８Ｆ１、ＣＤ１５８Ｆ２、ＣＤ１５８Ｇ、ＣＤ１５８Ｈ、ＣＤ１５８Ｉ、ＣＤ１５８Ｊ、ＣＤ１５８Ｋ、ＣＤ１５９ａ、ＣＤ１５９ｃ、ＣＤ１６０、ＣＤ１６１、ＣＤ１６２、ＣＤ１６３、ＣＤ１６４、ＣＤ１６５、ＣＤ１６６、ＣＤ１６７ａ、ＣＤ１６７ｂ、ＣＤ１６８、ＣＤ１６９、ＣＤ１７０、ＣＤ１７１、ＣＤ１７２ａ、ＣＤ１７２ｂ、ＣＤ１７２ｇ、ＣＤ１７３、ＣＤ１７４、ＣＤ１７５、ＣＤ１７５ｓ、ＣＤ１７６、ＣＤ１７７、ＣＤ１７８、ＣＤ１７９ａ、ＣＤ１７９ｂ、ＣＤ１８０、ＣＤ１８１、ＣＤ１８２、ＣＤ１８３、ＣＤ１８４、ＣＤ１８５、ＣＤ１８６、ＣＤ１８７、ＣＤ１８８、ＣＤ１８９、ＣＤ１９０、ＣＤ１９１、ＣＤ１９２、ＣＤ１９３、ＣＤ１９４、ＣＤ１９５、ＣＤ１９６、ＣＤ１９７、ＣＤｗ１９８、ＣＤｗ１９９、ＣＤ２００、ＣＤ２０１、ＣＤ２０２ｂ、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ２０４、ＣＤ２０５、ＣＤ２０６、ＣＤ２０７、ＣＤ２０８、ＣＤ２０９、ＣＤ２１０、ＣＤｗ２１０ａ、ＣＤｗ２１０ｂ、ＣＤ２１１、ＣＤ２１２、ＣＤ２１３ａ１、ＣＤ２１３ａ２、ＣＤ２１４、ＣＤ２１５、ＣＤ２１６、ＣＤ２１７、ＣＤ２１８ａ、ＣＤ２１８ｂ、ＣＤ２１９、ＣＤ２２０、ＣＤ２２１、ＣＤ２２２、ＣＤ２２３、ＣＤ２２４、ＣＤ２２５、ＣＤ２２６、ＣＤ２２７、ＣＤ２２８、ＣＤ２２９、ＣＤ２３０、ＣＤ２３１、ＣＤ２３２、ＣＤ２３３、ＣＤ２３４、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ２３５ｂ、ＣＤ２３６、ＣＤ２３７、ＣＤ２３８、ＣＤ２３９、ＣＤ２４０ＣＥ、ＣＤ２４０Ｄ、ＣＤ２４１、ＣＤ２４２、ＣＤ２４３、ＣＤ２４４、ＣＤ２４５、ＣＤ２４６、ＣＤ２４７、ＣＤ２４８、ＣＤ２４９、ＣＤ２５０、ＣＤ２５１、ＣＤ２５２、ＣＤ２５３、ＣＤ２５４、ＣＤ２５５、ＣＤ２５６、ＣＤ２５７、ＣＤ２５８、ＣＤ２５９、ＣＤ２６０、ＣＤ２６１、ＣＤ２６２、ＣＤ２６３、ＣＤ２６４、ＣＤ２６５、ＣＤ２６６、ＣＤ２６７、ＣＤ２６８、ＣＤ２６９、ＣＤ２７０、ＣＤ２７１、ＣＤ２７２、ＣＤ２７３、ＣＤ２７４、ＣＤ２７５、ＣＤ２７６、ＣＤ２７７、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、ＣＤ２８０、ＣＤ２８１、ＣＤ２８２、ＣＤ２８３、ＣＤ２８４、ＣＤ２８５、ＣＤ２８６、ＣＤ２８７、ＣＤ２８８、ＣＤ２８９、ＣＤ２９０、ＣＤ２９１、ＣＤ２９２、ＣＤｗ２９３、ＣＤ２９４、ＣＤ２９５、ＣＤ２９６、ＣＤ２９７、ＣＤ２９８、ＣＤ２９９、ＣＤ３００Ａ、ＣＤ３００Ｃ、ＣＤ３０１、ＣＤ３０２、ＣＤ３０３、ＣＤ３０４、ＣＤ３０５、ＣＤ３０６、ＣＤ３０７、ＣＤ３０７ａ、ＣＤ３０７ｂ、ＣＤ３０７ｃ、ＣＤ３０７ｄ、ＣＤ３０７ｅ、ＣＤ３０８、ＣＤ３０９、ＣＤ３１０、ＣＤ３１１、ＣＤ３１２、ＣＤ３１３、ＣＤ３１４、ＣＤ３１５、ＣＤ３１６、ＣＤ３１７、ＣＤ３１８、ＣＤ３１９、ＣＤ３２０、ＣＤ３２１、ＣＤ３２２、ＣＤ３２３、ＣＤ３２４、ＣＤ３２５、ＣＤ３２６、ＣＤ３２７、ＣＤ３２８、ＣＤ３２９、ＣＤ３３０、ＣＤ３３１、ＣＤ３３２、ＣＤ３３３、ＣＤ３３４、ＣＤ３３５、ＣＤ３３６、ＣＤ３３７、ＣＤ３３８、ＣＤ３３９、ＣＤ３４０、ＣＤ３４４、ＣＤ３４９、ＣＤ３５１、ＣＤ３５２、ＣＤ３５３、ＣＤ３５４、ＣＤ３５５、ＣＤ３５７、ＣＤ３５８、ＣＤ３６０、ＣＤ３６１、ＣＤ３６２、ＣＤ３６３、ＣＤ３６４、ＣＤ３６５、ＣＤ３６６、ＣＤ３６７、ＣＤ３６８、ＣＤ３６９、ＣＤ３７０、及びＣＤ３７１からなる群から選択される、請求項１９に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  21. 前記抗体が二重特異性抗体または多重特異性抗体ではない、請求項１～１８のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  22. 前記抗体が二重特異性抗体であり、
    ａ．前記第２の抗原がＣＤ１９であり、任意により、前記抗体が、配列番号３１４；配列番号３１５；配列番号３１６；配列番号３９６；配列番号３９７；配列番号４２１及び配列番号４２２；配列番号５０４及び配列番号４２２；もしくは配列番号４２３及び配列番号４２４を含むか、
    ｂ．前記第２の抗原がＨｅｒ２（ＣＤ３４０）であり、任意により、前記抗体が、配列番号３９３；配列番号３９４；配列番号３９５；配列番号３９８；配列番号４１４及び配列番号４３３；配列番号５０４及び配列番号４３３；配列番号５０５及び配列番号４３３；配列番号４１４及び配列番号４３４；配列番号５０４及び配列番号４３４；もしくは配列番号５０５及び配列番号４３４を含むか、
    ｃ．前記第２の抗原がＥＧＦＲであり、任意により、前記抗体が、配列番号３７８；配列番号３７９；配列番号３８０；配列番号３８２；配列番号３８３；配列番号３８４；配列番号３８５；配列番号：３８６；配列番号３８７；配列番号３８８；配列番号３９９；配列番号４２５及び配列番号４２６；配列番号４２１及び配列番号４３７；配列番号５０４及び配列番号４３７；配列番号４２３及び配列番号４２７；配列番号４２５及び配列番号４２８；配列番号４２１及び配列番号４２９；配列番号５０４及び配列番号４２９；配列番号４２３及び配列番号４３０；配列番号４１４及び配列番号４３１；配列番号４１４及び配列番号４３５；配列番号５０４及び配列番号４３１；配列番号５０４及び配列番号４３５；配列番号５０５及び配列番号４３１；もしくは配列番号５０５及び配列番号４３５を含むか、
    ｄ．前記第２の抗原がＦＡＰαであり、任意により、前記抗体が、配列番号４０１；配列番号４０２；配列番号４１４及び配列番号４１５；配列番号５０４及び配列番号４１５；もしくは配列番号５０５及び配列番号４１５を含むか、
    ｅ．前記第２の抗原がＭＳＬＮであり、任意により、前記抗体が、配列番号４０３；配列番号４０４；配列番号４１４及び配列番号４１６；配列番号５０４及び配列番号４１６；もしくは配列番号５０５及び配列番号４１６を含むか、
    ｆ．前記第２の抗原がＰＤ－１であり、任意により、前記抗体が、配列番号４０５；配列番号４０６；もしくは配列番号４３８及び配列番号４１７を含むか、
    ｇ．前記第２の抗原が４－１ＢＢであり、任意により、前記抗体が、配列番号４０７；配列番号４０８；もしくは配列番号４１４及び配列番号４１８；配列番号５０４及び配列番号４１８；もしくは配列番号５０５及び配列番号４１８を含むか、
    ｈ．前記第２の抗原がＯＸ４０であり、任意により、前記抗体が、配列番号４０９；配列番号４１０；配列番号４１４及び配列番号４１９；配列番号５０４及び配列番号４１９；もしくは配列番号５０４及び配列番号４１９を含むか、または
    ｉ．前記第２の抗原がＴＩＧＩＴであり、任意により、前記抗体が、配列番号４１１；配列番号４１２；もしくは配列番号４３９及び配列番号４２０を含む、請求項１～２０のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  23. 前記抗体がＦｃ有効型である、先行請求項のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片。
  24. 請求項１～２２のいずれか１項に記載の抗体またはその抗体結合断片、及び薬学的に許容される希釈剤または担体を含む医薬組成物。
  25. 対象の疾患もしくは障害を処置する方法、または対象における免疫応答を調節する方法であって、請求項１～２２のいずれか１項に記載の抗Ｖδ１抗体もしくは抗体結合断片、または請求項２４に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
  26. 前記疾患または障害が、がん、感染性疾患、もしくは炎症性疾患であるか、または免疫応答が調節される前記対象が、がん、感染性疾患、もしくは炎症性疾患を有する、請求項２５に記載の方法。
  27. 対象における免疫応答を調節することが、γδＴ細胞を活性化すること、γδＴ細胞の増殖を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞の増大を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞の脱顆粒を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞による殺傷活性を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞の細胞傷害性を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞の動員を引き起こすか、または増強すること、γδＴ細胞の生存期間を延長させること、及びγδＴ細胞の疲弊に対する抵抗性を増強することからなる群から選択される少なくとも１つを含む、請求項２４に記載の方法。
  28. 病変細胞は殺傷されると共に健常な細胞が温存される、請求項２５～２７のいずれか１項に記載の方法。
  29. がん、感染性疾患、または炎症性疾患の処置に使用するための請求項１～２２のいずれか１項に記載の抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体もしくはその抗原結合断片、または請求項２４に記載の医薬組成物。
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