JP2024509332A - 多重特異性抗ＴＣＲδ可変部１抗体 - Google Patents
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Abstract
本発明は、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体を提供する。本発明は、かかる多重特異性抗体を含む組成物及び医薬組成物、ならびにかかる多重特異性抗体を作製する方法も提供する。本発明は、多重特異性抗体を用いる処置方法及び医学的使用も提供する。【選択図】なし
Description
本発明は、γδＴ細胞のＴ細胞受容体と特異的に結合し、ＥＧＦＲに特異的に結合する多重特異性抗体ならびにその断片及びバリアントに関する。
がんに対するＴ細胞免疫療法への関心の高まりは、がん細胞を認識し、特にＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、及び他の受容体により発揮される抑制経路の臨床上もたらされる拮抗作用によって抑制解除された場合に宿主保護機能性を媒介するＣＤ８＋及びＣＤ４＋のαβＴ細胞のサブセットの明らかな能力に集中している。しかし、αβＴ細胞は、移植片対宿主病を引き起こし得るＭＨＣ拘束性である。
ガンマデルタＴ細胞（γδＴ細胞）は、異なる特徴的なγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を表面に発現するＴ細胞のサブセットである。このＴＣＲは１つのガンマ（γ）鎖と１つのデルタ（δ）鎖とで構成されており、鎖の各々は鎖の再構成を受けるが、αβＴ細胞と比較してＶ遺伝子の数が限られている。Ｖγをコードする主なＴＲＧＶ遺伝子セグメントは、ＴＲＧＶ２、ＴＲＧＶ３、ＴＲＧＶ４、ＴＲＧＶ５、ＴＲＧＶ８、ＴＲＧＶ９、及びＴＲＧＶ１１、ならびに非機能遺伝子ＴＲＧＶ１０、ＴＲＧＶ１１、ＴＲＧＶＡ、及びＴＲＧＶＢである。最も頻度の高いＴＲＤＶ遺伝子セグメントはＶδ１、Ｖδ２、及びＶδ３をコードし、更にＶδ及びＶαの両方の名称を有する幾つかのＶセグメントをコードする（Ａｄａｍｓ ｅｔ ａｌ．，２９６：３０－４０（２０１５）Ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．）。ヒトγδＴ細胞は、特定のγ型及びδ型が１つ以上の組織型の細胞において、排他的ではないが、広く見出されるため、ヒトγδＴ細胞のＴＣＲ鎖に基づいて大きく分けて分類することができる。例えば、ほとんどの血液常在性γδＴ細胞は、Ｖδ２ ＴＣＲ、一般的にはＶγ９Ｖδ２を発現する一方で、これは、組織常在性γδＴ細胞、例えば、皮膚におけるものにおいてはあまり一般的ではなく、組織常在性γδＴ細胞は、γ鎖と対合したＶδ１ ＴＣＲ、例えば、腸では多くの場合、Ｖγ４と対合したＶδ１ ＴＣＲをより頻繁に使用する。
γδＴ細胞は、免疫監視において重要な役割を果たし、ストレスマーカーのパターンにより悪性細胞または形質転換した細胞（がん細胞など）を認識し、次いで、強力かつ選択的な細胞傷害性を発揮する。従って、γδＴ細胞は、免疫応答のオーケストレーターとして作用し得る。これらの細胞の生体内原位置での調節により、他の免疫療法では困難であることが判明している低変異負荷の腫瘍であっても免疫原性の増加の可能性がもたらされる。腫瘍のγδＴ細胞による認識は、いずれかの単一の腫瘍抗原に依存するものではなく、従って、γδＴ細胞のモジュレーターは、血液系悪性腫瘍及び固形悪性腫瘍の両方が含まれる、広範囲の疾患適応症において可能性を有する。γδＴ細胞の認識メカニズムは、ＭＨＣ拘束性ではない。
ＷＯ２０１９１４７７３５の著者らは、一部のγδ細胞が腫瘍促進活性を有するか、またはαβＴ細胞により媒介される抗がん免疫応答を阻害すると仮説を立てている。同著者らは、γδＴ細胞が免疫抑制物質であると仮定し、従って、がんにおいては抗体を用いてこれらを除去、阻害、または遮断すべきであると提唱している。
しかしながら、抗γδ抗体がγδ細胞を遮断するか、または死滅させることにより、かかる細胞の機能を負に調節するという支配的な見解にもかかわらず、γδＴ細胞の浸潤と患者の予後及び／または生存との間に正相関が存在することが発見されている。
αβ ＴＣＲ受容体／リガンド相互作用と比較して、ｖδ１ ＴＣＲ受容体／リガンド相互作用に関する理解は限定的である。かかる理解がないために、これまでのｖδ１ ＴＣＲを認識する抗体は、主にこの相互作用を調べるための探索的ツールである。通常、かかるツールは、ＴＣＲ受容体／リガンド相互作用がｖδ１＋細胞の遮断、抑制、または除去をもたらすことを示唆する粗製の遮断抗体である。例えば、ツール抗体のＴＳ８．２及びＴＳ－１は、研究において抗γδ遮断抗体として用いられており、当該研究は、当該抗体がｖδ１細胞の細胞傷害性を低減させることを示唆している。これらの研究を他のものと合わせると、生体内原位置での疾患において、ｖδ１細胞の細胞傷害性を有利に調節するためにかかる抗ｖδ１抗体を使用することはあり得ず、従って、ｖδ１細胞傷害性を低減するのではなく増加させる抗体の必要性が示唆される。
γδＴ細胞を免疫療法に利用するために、細胞を生体内原位置で増殖させる手段またはそれらを採取し、それらを再注入する前にエクスビボで増殖させる手段のいずれかが必要とされる。後者のアプローチは、外来性サイトカインの添加を使用するものが以前に記載されている。例えば、ＷＯ２０１７／０７２３６７及びＷＯ２０１８／２１２８０８を参照のこと。薬理学的に修飾された形態のヒドロキシメチルブタ－２－エニルピロリン酸（ＨＭＢＰＰ）または臨床的に承認されたアミノビスホスホネートを使用する、患者自身のγδＴ細胞を増殖させる方法が記載されている。これらのアプローチにより、２５０人を超えるがん患者が、一見したところ安全に処置されたが、完全寛解の発生は極めて稀である。しかしながら、多数のγδＴ細胞を増殖させる能力が証明されている活性化剤が依然として必要とされている。
更に、生体内原位置でＶδ１＋細胞を優先的に標的とするか、またはそれと結合するか、またはそれを認識するか、またはそれを特異的に調節するか、またはその数を増加させることができる結合剤または活性化剤が、薬剤として非常に望ましい可能性がある。
しかしながら、Ｚｏｍｅｔａ（登録商標）（ゾレドロン酸）などのアミノビスホスホネートを含め、Ｖδ２＋細胞を調節する可能性のある薬物は存在するが、当該医薬品は、主に骨再吸収を遅延するように設計されている。また、上記Ｖδ２＋の調節にかかわらず、Ｖδ１＋細胞と結合するか、それを標的とするか、調節するか、活性化するか、またはその数を増加させるよう専用に設計された医薬品を開発する必要性が存在する。その理由は、例えば、Ｖδ２＋の調節を繰り返すことが、持続性かつ進行性の疲弊表現型をもたらし得るためである。
更に、Ｖδ１＋細胞が主に組織常在性であることを考慮すると、Ｖδ１＋を調節することができる理想的な薬剤は、より小さい望ましくない「オフターゲット」効果及び急速な腎臓クリアランスも示すであろう。典型的に、上記の望ましくない効果は、低分子化学物質を用いる場合に顕在化し得る。例えば、（骨に対する一次的な調節効果に対する二次的効果として）別個のクラスのＶδ２＋細胞を調節できることが示されている上述のアミノビスホスホネートは、腎機能の悪化及び腎不全の可能性として顕在化する腎毒性と関連する（例えば、Ｍａｒｋｏｗｉｔｚ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ．６４（１）：２８１－２８９）。欧州医薬品庁により列挙されたＺｏｍｅｔａの追加の望ましくない効果としては、貧血、過敏反応、高血圧、心房細動、筋痛、全身痛、倦怠感、血中尿素増加、嘔吐、関節腫脹、胸痛などが挙げられる。
ｖδ１＋細胞が見出される生体内原位置の環境も更に考慮しなければならない。例えば、非造血組織常在性γδＴ細胞は、組織から最初に分離されたときに強い増殖反応を示したが、これは自己由来の線維芽細胞と直接的に細胞接触していない場合のみであることが以前に示されている。非造血組織常在性Ｔ細胞（γδＴ細胞）が機能するためには非造血細胞（例えば、間質細胞、特に線維芽細胞）から分離されなければならないことが発見されている。その理由は、リンパ球と間質細胞または上皮細胞との直接接触が組織常在性γδＴ細胞の増殖を阻害すると思われるためである。生体内原位置の活性化前の細胞が更に抑制された状態で存在するという観察は、ｖδ１細胞がこれまで有望な治療標的とみなされなかった別の理由である。実際、本明細書に記載される発見があるまで、血液及び組織のｖδ１＋細胞が典型的に「休止」、「活性化前」、または「非活性化」状態とみなされる場合に、これらの細胞を生体内原位置で好適にかつ選択的に調節することができる方法は考案されていない。
よって、Ｖδ１＋細胞を標的とし、感染症、自己免疫状態、及びがんを処置するために特別に設計された改良された薬剤が必要とされている。具体的には、Ｖδ１＋細胞に特異的に結合すること、Ｖδ１＋細胞を標的とすること、Ｖδ１＋細胞を特異的に活性化すること、Ｖδ１＋細胞の増殖及び／または細胞傷害活性を特異的に増強すること、またはＶδ１＋細胞の活性化を特異的に遮断することにより疾患の徴候及び症状を改善するために投与することができる薬剤が必要とされている。
様々なフォーマットの二重特異性抗体及び多重特異性抗体が、種々の治療用途のために開発されてきた。二重特異性抗体及び多重特異性抗体は、生物学的標的の種類及び作用様式に基づいて、重複するが別個のクラス分類され得る。例えば、かかる多重特異性抗体は、細胞傷害性エフェクター細胞リダイレクター（二重特異性Ｔ細胞動員抗体、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー、ＴＣＥ、またはＢｉＴＥとしても公知）及びデュアル免疫調節剤（ＤＩ）などのクラスに分類され得る。
ＴＣＥ（Ｔ細胞エンゲージャー）は、Ｔ細胞を腫瘍細胞に標的化することまたはその逆により、腫瘍に対する患者の免疫応答を増強することを意図しており、Ｔ細胞のＴ細胞受容体複合体の第１のエピトープ（通常はＣＤ３）、及びがん抗原または腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）などのがん関連抗原である第２のエピトープを標的とすることにより機能する。かかる抗体は、腫瘍細胞及びＴ細胞に共局在して、腫瘍細胞殺傷を促進する。ＢｉＴＥの例としては、ＣＤ３×ＣＤ１９二重特異性抗体であるブリナツモマブ、ＣＤ３×ＥｐＣＡＭ二重特異性抗体であるカツマクソマブ、及びＣＤ３×ＨＥＲ２二重特異性抗体であるエルツマキソマブが挙げられる。ＢｉＴＥなどのＴＣＥは、通常、ｓｃＦｖフォーマットで提供されるが、他のフォーマットも提供されている。例えば、ＢｉＫＥは、ＢｉＴＥと類似しているが、ＣＤ３ではなくＮＫ細胞上のＣＤ１６を標的とする。
Ｔ細胞受容体は、哺乳動物免疫系で最も複雑な受容体構造と説明されている。これは、幾つかのＣＤ３鎖に近接したＴ細胞受容体を含む膜貫通多タンパク質受容体複合体を構成する。例えば、哺乳動物において、このような複合体の典型的なものは、Ｔ細胞受容体、ＣＤ３γ鎖、ＣＤ３δ鎖、及び２つのＣＤ３ε鎖を含む。これらの鎖は、結合したζ鎖（ゼータ鎖）のそばでＴ細胞受容体（ＴＣＲ）と会合し、次いで、Ｔリンパ球において典型的な活性化シグナルを生成する。しかしながら、代替的な複合体も報告されている。例えば、Ｔ細胞受容体及びζ鎖ホモ二量体を含むＴ細胞受容体複合体が記載されている。ＣＤ４及びＣＤ８など、追加の共受容体もＴＣＲ機能を補助することができる。
受容体複合体の組成にかかわらず、前記複合体が細胞表面結合事象を細胞内リン酸化シグナル伝達カスケードに翻訳することは十分に確立されている。これらのリン酸化事象は、最終的に、サイトカインならびにグランザイム及びパーフォリンなどのエフェクタータンパク質の発現増加につながるＮＦＡＴ及びＮＦｋＢなどの転写因子の活性化をもたらす。
しかしながら、このようなＴＣＥを使用してがんを処置するのは依然として説得力のある概念であるが、これまで、初期臨床開発においてＴＣＥを進展させようと３０年間の協調努力がなされた後でさえ、このような二重特異性抗体の多くは、さえない安全性、有効性、及び製造性プロファイルを示している。実際、２０２０年１月の時点で、承認後撤回されていないＴＣＥは依然としてブリナツモマブのみである。このＴＣＥ多重特異性抗体断片は、第１の結合アームでＴ細胞受容体複合体と結合し、第２の結合アームでＣＤ１９標的と結合する。
二重特異性Ｔ細胞動員抗体は、Ｌｅｊｅｕｎｅ ｅｔ ａｌ．，２０２０，Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１：７６２に記載されている。しかしながら、このカテゴリーにおける既存の二重特異性抗体、特にＣＤ３結合によりＴ細胞を動員するものは、シグナル伝達物質としてのＣＤ３抗原の効力及び患者のＴ細胞集団におけるその遍在性を考慮すると、重度の有害作用をもたらす顕著なオフターゲット効果を有する。よって、カツマクソマブ（現在は撤回されている）などのＣＤ３を標的とする二重特異性の例では、全身送達（例えば、静脈内）は現実的に不可能である。代わりに、手術中、腹膜内、腹腔内送達などのより制限された送達が、より頻繁に意図される。これにより、薬剤としての上記二重特異性薬の選択可能性及び使用が制限される。実際、エフェクター機能が減弱された抗ＣＤ３抗体（すなわち、ＣＤ３を標的とするが、二重特異性ではないＴ細胞複合体エンゲージャー）でさえ、関連する毒性により静脈内送達が困難となる。例えば、抗ＣＤ３抗体であるフォラルマブは、曝露を限定し、毒性を低減するために、現在は殆どの場合、（例えば、消化器疾患の処置における）経口送達が意図される。
早期臨床試験においてかかるＴＣＥで観察される現在の問題の多くは、用いられる高親和性Ｔ細胞複合体結合ドメインに起因すると言われることが多い。更に、その理由は、これらのＴＣＥの設計者が自然界でのＴＣＲ複合体の結合事象の親和性が低いことを十分に考慮せず、重度の用量制限毒性が妨げとなり、治療域が極めて狭くなったためであると提唱されている。これに関して、多数の初期ＴＣＥ薬開発者が、ＯＫＴ３、ＳＰ３４、及びＵＣＨＴ１に由来する３つの抗ＣＤ３ Ｔ細胞複合体結合ドメインに依存していたことが強調されている。そして、これらの元の結合ドメインは全て、自然界での結合事象と比べておよそ１，０００倍高い親和性に等しい、１桁から２桁台前半までのｎＭ範囲の比較的高い親和性で結合する。その結果、Ｔ細胞の活性化が、自然界でのＴ細胞受容体複合体の結合と比較して著しく異なる（かつ多くの場合、好ましくない）影響を受けると提唱されている。例えば、より高親和性のＯＫＴ３に基づくプラットフォームを使用するＴＣＥ開発者は、ＯＫＴ３がＩＬ－２の存在下でＴ細胞のアポトーシスを誘導するという事実に振り回され得る。
これらの理由により、より低親和性のＴ細胞複合体の結合が、Ｔ細胞と会合する二重特異性抗体治療薬の設計パラメータを決定するために考慮すべき重要事項であることが明らかになっている。
上記ＴＣＥを設計する際の別の問題は、Ｆｃ機能を減弱させる必要性である。実際、Ｆｃγ受容体（ＦｃγＲ）へのＦｃの結合は免疫エフェクター細胞の活性化を引き起こすため、ＴＣＥは、治療有効性を最大化し、オフターゲット毒性を最小限にするために、Ｆｃにより媒介されるエフェクター機能の完全な抑制を通常必要とする。実際のところ、現在の医療現場で用いられているＣＤ３を標的とする二重特異性抗体の大多数は、ＦｃγＲに対する結合活性が低減されたＦｃドメインを有するか、または意図的にＦｃ領域を含まない二重特異性断片である。一般的に、減弱されていないＦｃ機能を有するＴＣＥは、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）作用を誘発し、これにより、抗体により認識されるγδＴ細胞集団を枯渇させると予想される。しかし、繰り返しになるが、毒性／安全性の複雑さを回避するためにかかる機能を減弱することにより、例えば、ＣＤ１６＋もしくはＣＤ３２＋もしくはＣＤ６４＋免疫細胞を関与させることにより、または二重特異性の半減期を低減することによって（例えば、ＢＩＴＥなどのより小さな二重特異性抗体断片を用いる場合）、潜在的に重要な有効性の観点も減弱される可能性がある。ＦｃγＲ及びＴＣＥの相互作用を低減する（例えば、当該相互作用を低減するように設計されたＩｇＧフォーマットを使用する）方法は、Ｆｃにより媒介されるＴＣＥの固定化を低減し、固定化されたＴＣＥとの架橋によるＴＣＲクラスター化を低減すると予想される。
これらの問題の全てではないが一部に対処するために、Ｘｅｎｃｏｒ（Ｐａｓａｄｅｎａ、ＣＡ）、Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）、及びＧｅｎｅｎｔｅｃｈ（Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、ＣＡ）などの多数の企業が、ごく最近、それぞれのＴＣＥプラットフォームにおけるＴ細胞受容体複合体結合アームの結合親和性を低減することを報告している。しかしながら、上記結合の親和性の低減により、ＴＣＥの設計及び機能性に関して有効性の低下及び選択可能性の低下がもたらされ得る。例えば、かかるＴＣＥにおける結合ドメインの親和性は、インビボでの分布プロファイルの決定要因となることが現在実証されている。具体的には、ＴＣＥの分布は、その親和性が最も高い標的に偏ることが通常観察される。従って、Ｔ細胞複合体に対するＴＣＥ結合ドメインの親和性を低減することにより、かかるＴＣＥの有効性を引き起こすためにまさに必要とされる細胞であるＴ細胞から離れた分布に偏ることが一般的である。ＴＣＥの治療域が「極めて狭い」と言われているのは、部分的にはかかる理由のためである。
更に、特に固形腫瘍では、免疫調節治療薬に対する更なる大きなハードルが依然として存在する。例えば、現在の最先端のアプローチとしては、第１のドメインがＣＤ３に結合し、第２のドメインがＴＡＡを標的とする、ＣＤ３を標的とする二重特異性薬が挙げられる。しかしながら、多くの場合、これらに問題があることが証明されている。例えば、Ｍｉｄｄｅｌｂｕｒｇ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｏｖｅｒｃｏｍｉｎｇ Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ ｆｏｒ ＣＤ３－Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ Ｓｏｌｉｄ Ｔｕｍｏｒｓ．Ｃａｎｃｅｒｓ．２０２１；１３（２）：２８７は、以下を含む、固形腫瘍空間におけるＴ細胞と会合する多重特異性の免疫調節部分に対するこれらのハードルの一部を要約している。
ｉ．オンターゲット・オフ腫瘍毒性問題：例えば、著者は、固形腫瘍のＴＡＡは、多くの場合、健常な臓器の組織にも発現しており、このことが、ＣＤ３二重特異性薬を使用したマウス前臨床試験において示されたように、結果として免疫病理及び死亡を招く可能性のある臓器不全をもたらし得ることを強調している。
ｉｉ．腫瘍微小環境（ＴＭＥ）におけるエフェクター細胞の利用能：例えば、通常のＣＤ３＋「ナイーブ」Ｔ細胞は、樹状細胞により更に活性化されることなく主に血液系及びリンパ系に存在する。
ｉｉｉ．腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）がＣＤ３＋Ｔｒｅｇ細胞及び／または疲弊したＣＤ３＋細胞を含み得ることを考慮した腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の質：例えば、ＣＤ３を標的とする二重特異性薬は、活性化により誘発される細胞死によってＴＩＬアポトーシスを誘発し得、このことが強力な抗腫瘍応答を妨げる。
ｉ．オンターゲット・オフ腫瘍毒性問題：例えば、著者は、固形腫瘍のＴＡＡは、多くの場合、健常な臓器の組織にも発現しており、このことが、ＣＤ３二重特異性薬を使用したマウス前臨床試験において示されたように、結果として免疫病理及び死亡を招く可能性のある臓器不全をもたらし得ることを強調している。
ｉｉ．腫瘍微小環境（ＴＭＥ）におけるエフェクター細胞の利用能：例えば、通常のＣＤ３＋「ナイーブ」Ｔ細胞は、樹状細胞により更に活性化されることなく主に血液系及びリンパ系に存在する。
ｉｉｉ．腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）がＣＤ３＋Ｔｒｅｇ細胞及び／または疲弊したＣＤ３＋細胞を含み得ることを考慮した腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の質：例えば、ＣＤ３を標的とする二重特異性薬は、活性化により誘発される細胞死によってＴＩＬアポトーシスを誘発し得、このことが強力な抗腫瘍応答を妨げる。
従って、少なくとも１つの結合ドメインがＴ細胞に結合し、少なくとも１つの第２の結合ドメインがＴＡＡを標的とする、改良された多重特異性免疫調節薬が必要とされている。
また、Ｖδ１＋細胞を標的とし、感染症、自己免疫状態、及びがんを処置するために特別に設計された改良された薬剤も必要とされている。具体的には、Ｖδ１＋細胞に特異的に結合すること、Ｖδ１＋細胞を標的とすること、Ｖδ１＋細胞を特異的に活性化すること、Ｖδ１＋細胞の増殖及び／または細胞傷害活性を特異的に増強すること、またはＶδ１＋細胞の活性化を特異的に遮断することにより疾患の徴候及び症状を改善するために投与することができる薬剤が必要とされている。
本発明は、ＴＣＲδ可変部１（Ｖδ１）に対する抗原結合部位及びＥＧＦＲに対する抗原結合部位を含む、複数の抗原結合部位を含む高親和性抗体（「多重特異性抗体」）に関する。より具体的には、本発明は、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲに特異的な結合部位を含む、当該多重特異性抗体に関する。
本発明の多重特異性抗体は、「ｍＡｂ２抗体」または「ｍＡｂ二乗抗体」として知られるフォーマットであり、ＣＨ３ドメインに抗原結合ループを含むように工学操作されたＦｃ領域を含む抗体である。この改変されたＦｃ領域は「Ｆｃａｂ」（抗原結合性Ｆｃ）と呼ばれる。得られたＦｃａｂを天然ＩｇＧ抗体フォーマットに迅速に挿入すると、２つの異なる抗原に結合する四価ｍＡｂ２二重特異性抗体を作ることができる。従って、ｍＡｂ２抗体は、抗原結合部位をもたらすＶＨ－ＶＬドメイン対を含むＦａｂ領域を更に含む。本発明のｍＡｂ２分子は、ＥＧＦＲ結合Ｆｃａｂ及びｖδ１結合Ｆａｂを含む。
本発明の抗体は、良好な機能プロファイルを有する。特に、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇に焦点を置く従来技術の抗Ｖδ１抗体と異なり、本発明の抗体は、Ｖδ１Ｔ細胞の活性化に有用である。本発明の抗体は、それらが結合するＴ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし得るが、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇を引き起こさず、むしろＴ細胞を刺激するため、Ｔ細胞のこのコンパートメントの活性化による恩恵を受ける治療状況において有用であり得る。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、ＴＣＲの下方調節、活性化マーカー、例えば、ＣＤ２５、Ｋｉ６７、脱顆粒マーカーＣＤ１０７ａ、ＮＣＲ（自然細胞傷害性受容体）、及び／または４－１ＢＢの変化から明らかである。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、次に、ＩＮＦγ及びＴＮＦαなどの炎症性サイトカインの放出を引き起こして、免疫ライセンシングを促進する。驚くべきことに、ＴＲＤＶ１に対する適切に高い親和性を有する抗体は、Ｖδ１Ｔ細胞殺傷の増加を誘発し、（例えば）ＣＤ３を標的とする抗体と異なり、ＣＤ３による大規模な活性化に伴う副作用を伴うことなく高親和性抗体の供給が可能である。結果として、高親和性抗体は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）による強力な免疫賦活効果を誘発することができる。これは、Ｖδ１細胞の最小限の疲弊または殺傷で達成され得る。従って、本発明の多重特異性抗体は、アゴニスト抗体とみなされ得る。
本発明の多重特異性抗体に含まれるＦｃａｂ領域は、典型的なモノクローナル抗体結合部位よりも小さな結合界面を有する。典型的なｍＡｂのＦａｂアームが柔軟なヒンジ領域によって分離されている場合、Ｆｃａｂの結合部位は、近くに位置する２つの結合部位を持つコンパクトな抗体断片を形成する。Ｆｃａｂの２つの抗原結合部位は、典型的なｍＡｂの抗原結合部位と比較して、空間的にも互いに近接している。このより小さい結合界面及び２つの結合部位の柔軟性の低下に基づけば、本発明の多重特異性抗体（Ｆｃａｂ領域を含む）がモノクローナル抗体ベンチマークと同様の親和性及び効力でＥＧＦＲに結合でき、ＥＧＦＲを阻害できることは驚くべきことである。
本発明の第１の態様によれば、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。
本発明の第２の態様では、本発明の多重特異性抗体をコードするポリヌクレオチド配列が提供される。例えば、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１との少なくとも７０％の配列同一性を有する配列を含む、抗Ｖδ１の第１の結合ドメインをコードするポリヌクレオチド配列が提供される。
本発明の第３の態様では、本発明のポリヌクレオチド配列を含む発現ベクターが提供される。本発明のポリヌクレオチド配列または本発明の発現ベクターを含む宿主細胞も提供される。本発明の任意の多重特異性抗体またはその抗原結合断片を産生させるための方法であって、本発明の宿主細胞を細胞培養培地で培養することを含む、当該方法も提供される。
本発明の更なる態様では、本発明の多重特異性抗体を含む組成物が提供される。本発明の多重特異性抗体と、薬学的に許容される希釈剤または担体とを含む医薬組成物も提供される。組成物及び医薬組成物は、任意により、１つ以上の治療効果のある追加の薬剤を更に含み得る。
本発明の更なる態様では、本発明の多重特異性抗体または本発明の医薬組成物を含み、任意により使用説明書及び／または追加の治療活性剤を含むキットが提供される。
本発明の更なる態様では、対象の疾患または障害を処置する方法であって、対象に、本発明の多重特異性抗体、または本発明の医薬組成物を投与することを含む方法が提供される。対象における免疫応答を調節する方法であって、対象に、本発明の多重特異性抗体、または本発明の医薬組成物を投与することを含む方法も提供される。対象への抗体の投与は、治療上有効量での投与であり得る。
本発明のなおも更なる態様では、医療に使用するための、本発明の多重特異性抗体、または本発明の医薬組成物、または本発明のキットが提供される。薬物の製造における本発明の多重特異性抗体の使用も提供される。
本発明は、γδＴ細胞のＴ細胞受容体と特異的に結合し、ＥＧＦＲに特異的に結合する多重特異性抗体ならびにその断片及びバリアントを提供する。
より具体的には、本発明は、ＴＣＲδ可変部１（Ｖδ１）に対する抗原結合部位及びＥＧＦＲに対する抗原結合部位を含む、複数の抗原結合部位を含む高親和性抗体（「多重特異性抗体」）に関する。
本発明の多重特異性抗体は、ｍＡｂ２フォーマットであり、ＣＨ３ドメインに抗原結合ループを含むように工学操作されたＦｃ領域を含む。この改変されたＦｃ領域は「Ｆｃａｂ」と呼ばれる。ｍＡｂ２抗体は、抗原結合部位をもたらすＶＨ－ＶＬドメイン対を含むＦａｂ領域を更に含む。本発明のｍＡｂ２分子は、ＥＧＦＲ結合Ｆｃａｂ及びｖδ１結合Ｆａｂを含む。
より具体的には、本発明は、最適化された多重特異性抗体、例えば、本明細書においてＧ０４、Ｅ０７、Ｃ０８、Ｂ０７、Ｃ０５、Ｅ０４、Ｆ０７、Ｇ０６、Ｇ０９、Ｂ０９、Ｇ１０、及びＥ０１と称される親抗体などの親抗Ｖδ１抗体から開始される最適化された選択手順により調製された抗体の提供及び特徴付けに関する。特に本発明は、Ｇ０４及びＥ０７に由来する最適化された多重特異性抗体に関する。
定義
特に定義しない限り、本明細書において使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般的に理解される意味を有する。本明細書で使用する場合、以下の用語は、それらに与えられる下記の意味を有する。
特に定義しない限り、本明細書において使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般的に理解される意味を有する。本明細書で使用する場合、以下の用語は、それらに与えられる下記の意味を有する。
ガンマデルタ（γδ）Ｔ細胞は、表面に別個の特徴的なＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を発現するＴ細胞の小さなサブセットを表す。このＴＣＲは、１つのガンマ（γ）鎖及び１つのデルタ（δ）鎖から構成される。各鎖は、可変（Ｖ）領域、定常（Ｃ）領域、膜貫通領域、及び細胞質尾部を含む。Ｖ領域は抗原結合部位を含む。以下の２つの主要なサブタイプのヒトγδＴ細胞が存在する：末梢血で優勢なもの、及び非造血組織で優勢なもの。２つのサブタイプは、細胞に存在するδ及び／またはγの種類により定義され得る。例えば、末梢血で優勢であるγδＴ細胞は、δ可変部２鎖（Ｖδ２）を主に発現する。非造血組織で優勢である（すなわち、組織常在性である）γδＴ細胞は、δ可変部１鎖を主に発現する。「Ｖδ１ Ｔ細胞」または「Ｖδ１＋Ｔ細胞」への言及は、Ｖδ１鎖を有するγδＴ細胞、すなわち、Ｖδ１＋細胞を指す。
「δ可変部１」への言及は、Ｖδ１またはＶｄ１とも称され得る一方で、この領域を含むＴＣＲ鎖をコードするヌクレオチド、またはこの領域を含むＴＣＲタンパク質複合体は、「ＴＲＤＶ１」と称され得る。γδＴＣＲのＶδ１鎖と相互作用し、かつＥＧＦＲとも相互作用する抗体またはその抗原結合断片は全て、事実上、Ｖδ１に結合する抗体またはその抗原結合断片であり、「抗ＴＣＲδ可変部１抗体またはその抗原結合断片」または「抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片」または「抗ＴＲＤＶ１抗体またはその抗原結合断片」または「抗Ｖδ１ｘＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合断片」と称され得る。
本明細書では、「δ可変部２」鎖などの他のδ鎖に更に言及する。これらは同様な様式で称され得る。例えば、δ可変部２鎖は、Ｖδ２と称され得る一方で、この領域を含むＴＣＲ鎖をコードするヌクレオチド、またはこの領域を含むＴＣＲタンパク質複合体は、「ＴＲＤＶ２」と称され得る。好ましい実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖と相互作用する多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、Ｖδ２などの他のδ鎖と相互作用しない。本発明において、抗体は、ＴＲＤＶ１に特異的であり、ＴＲＤＶ２（配列番号３１０）またはγδＴ細胞受容体に存在する他の抗原、例えば、ＴＲＤＶ３（配列番号３１１）に結合しない。
本明細書では、「γ可変鎖」にも言及する。これらがγ鎖またはＶγと称され得る一方で、この領域を含むＴＣＲ鎖をコードするヌクレオチド、またはこの領域を含むＴＣＲタンパク質複合体は、ＴＲＧＶと称され得る。例えば、ＴＲＧＶ４はＶγ４鎖を指す。好ましい実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖と相互作用する多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、Ｖγ４（例えば、配列番号３０９）などのγ鎖と相互作用しない。好ましい実施形態では、抗体は、ＴＲＤＪ、ＴＲＤＣ、ＴＲＧＪ、またはＴＲＧＣなどのγδＴＣＲ内に見出される他のドメインとも結合または相互作用しない。
用語「Ｔ細胞受容体複合体」は、種々の抗原の認識を担うＴ細胞の表面に見出される「Ｔ細胞受容体」（または「ＴＣＲ」）を含むタンパク質の複合体である。Ｔ細胞受容体複合体は、Ｔ細胞受容体のα鎖及びβ鎖を含むか、またはγδＴ細胞の場合には、Ｔ細胞受容体のγ鎖及びδ鎖、ならびに最大６本またはそれ以上の追加の鎖、例えば、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３ε、及びＣＤ３ζを含むかのいずれかであるが、Ｔ細胞受容体複合体の正確な構成は様々であり得る。Ｔ細胞受容体複合体は、Ｔ細胞活性化を引き起こし得る、Ｔ細胞における細胞内シグナル伝達を媒介する。
用語「抗体」は、少なくとも１つの抗原結合部位（ＡＢＳ）を含む少なくとも１つの抗体可変ドメインを含む任意の抗体タンパク質構築物を包含する。抗体としては、限定されるものではないが、ＩｇＡ型、ＩｇＧ型、ＩｇＥ型、ＩｇＤ型、ＩｇＭ型（及びそれらのサブタイプ）の免疫グロブリンが挙げられる。２本の同一の重（Ｈ）鎖及び２本の同一の軽（Ｌ）鎖ポリペプチドからアセンブルされた免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）抗体の全体構造は十分に確立されており、哺乳類において高度に保存されている（Ｐａｄｌａｎ（１９９４） Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：１６９－２１７）。
通常の抗体または免疫グロブリン（Ｉｇ）は、２本の重（Ｈ）鎖及び２本の軽（Ｌ）鎖の４本のポリペプチド鎖を含むタンパク質である。各鎖は、定常領域と可変ドメインに分けられる。重（Ｈ）鎖可変ドメインは本明細書ではＶＨと略され、軽（Ｌ）鎖可変ドメインは本明細書ではＶＬと略される。これらのドメイン、それに関連するドメイン及びそれに由来するドメインは、本明細書では免疫グロブリン鎖可変ドメインと称され得る。ＶＨドメイン及びＶＬドメイン（ＶＨ領域及びＶＬ領域とも称される）は、「フレームワーク領域」（「ＦＲ」）と称されるより保存されている領域と共に散在する、「相補性決定領域」（「ＣＤＲ」）と称される領域に更に分割され得る。フレームワーク領域及び相補性決定領域は正確に定義されている（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，（１９９１） ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｕｍｂｅｒ ９１－３２４２）。ＣＤＲ配列の別の番号付け規則、例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．（１９８９） Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７－８８３に記載されているか、またはＩＭＧＴ．ｏｒｇによりまとめられているものも存在する。通常の抗体では、各ＶＨ及びＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序で配置される３つのＣＤＲと４つのＦＲから構成される。２本の免疫グロブリン重鎖及び２本の免疫グロブリン軽鎖の通常の抗体四量体は、例えば、ジスルフィド結合により相互に連結された免疫グロブリン重鎖及び軽鎖、ならびに同様に連結された重鎖で形成される。したがって、全抗体は２つのＦａｂを含み、各ＦａｂはＶＨ－ＶＬドメイン対を含む。重鎖定常領域は、３つのドメインであるＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む。軽鎖定常領域は、１つのドメインであるＣＬから構成される。重鎖の可変ドメイン及び軽鎖の可変ドメインは、抗原と相互作用する結合ドメインである。抗体の定常領域は、通常、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第１成分（Ｃ１ｑ）が含まれる、宿主組織または因子への抗体の結合を媒介する。
「ＥＵ番号付け」とは、抗体におけるアミノ酸残基の番号付けに使用される番号付け規則を指す。抗体の各残基には、抗体の比較を可能にするために番号が割り当てられる。バリアント抗体が、野生型抗体には存在しなかった残基（例えば、挿入変異）を含む場合、挿入を示すために小数が使用される。例えば、番号３６１及び３６２で指定された残基の間に残基が挿入された場合、新しい残基にはＥＵ番号３６１．１が与えられる。ＥＵ番号付けは、Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ． Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ， Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ Ｕ．Ｓ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ， （１９９１） ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｕｍｂｅｒ ９１－３２４２）、Ｃｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ． （１９８９） Ｎａｔｕｒｅ ３４２： ８７７－８８３）、またはＩＭＧＴ．ｏｒｇ．［ＥＵ番号付けをＥｄｅｌｍａｎ， Ｇ．Ｍ． ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． ＵＳＡ， ６３， ７８－８５ （１９６９）．（１０．１０７３／ｐｎａｓ．６３．１．７８）へのさらなる相互参照と共に提示している］によってまとめられているような他の番号付けスキームに代わる代替的な番号付けスキームである。図３３は、ＣＨ３ドメイン残基のＥＵ番号付け、ＩＭＧＴ番号付け、及びＫａｂａｔ番号付けの間の対応関係を示す。図３２は、本発明の多重特異性抗体の残基がＥＵ番号付けスキームに従ってどのように番号付けされるかを示す。
本明細書で使用される「Ｆａｂ領域」は、抗原結合部位（ＣＤＲベースの抗原結合部位としても知られる）を提供するＶＨ－ＶＬドメイン対を含む抗体の一部（または当該部分を含む構築物）を指す。Ｆａｂ領域は、ＣＬドメイン及びＣＨ１ドメインを更に含み得る。したがって、２つの重鎖及び２つの軽鎖を有する従来の抗体は２つのＦａｂを含み、各ＦａｂはＶＨ－ＶＬドメイン対を含む。
本明細書で使用される「Ｆｃ領域」（断片結晶化可能領域）とは、ＣＨ２及びＣＨ３ドメインを含む抗体の一部（または当該部分を含む構築物）を指す。Ｆｃ領域は、野生型配列Ｆｃ領域及び改変されたＦｃ領域を含む、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域である。Ｆｃ領域は二量体であるため、各々がＣＨ２及びＣＨ３ドメインを含む対になった重鎖定常領域を含む。
本明細書で使用する場合、抗体の「断片」（「抗体断片」、「免疫グロブリン断片」、「抗原結合断片」、または「抗原結合ポリペプチド」とも称され得る）は、第１の標的であるγδＴ細胞受容体のδ可変部１（Ｖδ１）鎖または第２の標的であるＥＧＦＲに特異的に結合する抗体（または当該部分を含む構築物）の一部（例えば、１つ以上の免疫グロブリン鎖が完全長ではないが、標的に特異的に結合する分子）を指す。抗体断片という用語に包含される結合断片の例としては、以下が挙げられる：
（ｉ）Ｆａｂ断片（ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる一価の断片）；
（ｉｉ）Ｆ（ａｂ′）２断片（ヒンジ領域でのジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片からなる二価の断片）；
（ｉｉｉ）Ｆｄ断片（ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなる）；
（ｉｖ）Ｆｖ断片（抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなる）；
（ｖ）一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）（組換え方法を使用して、ＶＬ及びＶＨ領域が対合して、一価の分子を形成している単一のタンパク質鎖として作製されることを可能にする合成リンカーにより連結されたＶＬ及びＶＨドメインからなる）；
（ｖｉ）ＶＨ（ＶＨドメインからなる免疫グロブリン鎖可変ドメイン）；
（ｖｉｉ）ＶＬ（ＶＬドメインからなる免疫グロブリン鎖可変ドメイン）；
（ｖｉｉｉ）ドメイン抗体（ｄＡｂ）（ＶＨまたはＶＬドメインのいずれかからなる）；
（ｉｘ）ミニボディ（ＣＨ３ドメインにより連結された一対のｓｃＦｖ断片からなる）；及び
（ｘ）ダイアボディ（小さなペプチドリンカーにより１つの抗体由来のＶＬドメインに連結された別の抗体由来のＶＨドメインからなるｓｃＦｖ断片の非共有結合性二量体からなる）、
（ｘｉ）Ｆｃ断片（ＣＨ２及びＣＨ３ドメインからなる）、
（ｘｉｉ）Ｆｃａｂ断片（ＣＨ３ドメインに抗原結合ループを含むように工学操作されたＦｃ断片からなる）、
（ｘｉｉｉ）Ｆｃａｂの抗原結合ＣＨ３ドメイン。
（ｉ）Ｆａｂ断片（ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる一価の断片）；
（ｉｉ）Ｆ（ａｂ′）２断片（ヒンジ領域でのジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片からなる二価の断片）；
（ｉｉｉ）Ｆｄ断片（ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなる）；
（ｉｖ）Ｆｖ断片（抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなる）；
（ｖ）一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）（組換え方法を使用して、ＶＬ及びＶＨ領域が対合して、一価の分子を形成している単一のタンパク質鎖として作製されることを可能にする合成リンカーにより連結されたＶＬ及びＶＨドメインからなる）；
（ｖｉ）ＶＨ（ＶＨドメインからなる免疫グロブリン鎖可変ドメイン）；
（ｖｉｉ）ＶＬ（ＶＬドメインからなる免疫グロブリン鎖可変ドメイン）；
（ｖｉｉｉ）ドメイン抗体（ｄＡｂ）（ＶＨまたはＶＬドメインのいずれかからなる）；
（ｉｘ）ミニボディ（ＣＨ３ドメインにより連結された一対のｓｃＦｖ断片からなる）；及び
（ｘ）ダイアボディ（小さなペプチドリンカーにより１つの抗体由来のＶＬドメインに連結された別の抗体由来のＶＨドメインからなるｓｃＦｖ断片の非共有結合性二量体からなる）、
（ｘｉ）Ｆｃ断片（ＣＨ２及びＣＨ３ドメインからなる）、
（ｘｉｉ）Ｆｃａｂ断片（ＣＨ３ドメインに抗原結合ループを含むように工学操作されたＦｃ断片からなる）、
（ｘｉｉｉ）Ｆｃａｂの抗原結合ＣＨ３ドメイン。
「ヒト抗体」は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域及び定常領域を有する抗体を指す。上記ヒト抗体を投与されたヒト対象は、上記抗体内に含まれる一次アミノ酸に対する異種間抗体応答（例えば、ＨＡＭＡ反応（ヒト抗マウス抗体反応）と称される）を生じない。上記ヒト抗体は、例えば、ＣＤＲ、特にＣＤＲ３において、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列によりコードされないアミノ酸残基（例えば、ランダムもしくは部位特異的変異誘発、または体細胞突然変異により導入された変異）を含み得る。しかしながら、この用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系列に由来するＣＤＲ配列が、ヒトフレームワーク配列に移植された抗体を包含することを意図しない。組換え手段により調製、発現、作製、もしくは単離されるヒト抗体、例えば、宿主細胞に形質移入された組換え発現ベクターを使用して発現された抗体、組換えヒト抗体ライブラリの組み合わせから単離された抗体、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックな動物（例えば、マウス）から単離された抗体、またはヒト免疫グロブリン遺伝子配列を他のＤＮＡ配列にスプライシングすることを含む任意の他の手段により調製、発現、作製、もしくは単離された抗体は、「組換えヒト抗体」とも称され得る。
非ヒト免疫グロブリン可変ドメインのフレームワーク領域における少なくとも１つのアミノ酸残基をヒト可変ドメイン由来の対応する残基で置換することは、「ヒト化」と称される。可変ドメインのヒト化により、ヒトにおける免疫原性が低減され得る。
「特異性」とは、特定の抗体またはその抗原結合断片が結合することができる、異なる種類の抗原または抗原決定基の数を指す。抗体の特異性は、特定の抗原を固有の分子実体として認識し、それを別の抗原と区別する抗体の能力である。抗原またはエピトープに「特異的に結合する」（または抗原もしくはエピトープに「特異的」である）抗体は、当該技術分野において十分に理解されている用語である。分子が「特異的結合」を示すと言われるのは、その分子が、他の標的と反応するよりも、特定の標的抗原またはエピトープと、より頻繁に、より急速に、より長い持続時間で、及び／またはより高い親和性で反応する場合である。抗体が標的抗原またはエピトープに「特異的に結合する」のは、それが他の物質に結合するよりも、より高い親和性で、より高い結合活性で、より容易に、及び／またはより長い持続時間で結合する場合である。
本発明の抗体は多重特異性抗体である。「多重特異性抗体」は、複数の異なるエピトープに同時または連続的に結合することができる抗体である。一般に、これらのエピトープは同じ抗原に存在しない。よって、多重特異性抗体は、複数の異なる結合ドメインを介して異なる抗原に存在するエピトープに選択的に結合する能力を有する。これは、この能力を有しない従来の単一特異性抗体とは対照的である。正確には、「単一特異性抗体」は、１つの抗原に対する結合特異性しか有しないが、この１つの抗原に対して複数の結合部位を有してもよい（例えば、完全ヒトＩｇＧ抗体の結合価は２であり、他の抗体の結合価はより高い場合があるが、抗体が１つの抗原のみを認識する場合、これは依然として単一特異性抗体と分類される）。従って、本発明の多重特異性抗体は、複数の異なる抗原に同時に及び／または連続的に結合する。
本発明の幾つかの実施形態では、抗体は二重特異性抗体である。「二重特異性抗体」は、２つの異なるエピトープに同時に及び／または連続的に結合することができる抗体である。一般に、これらのエピトープは同じ抗原に存在しない。従って、二重特異性抗体は、２つの異なる結合ドメインにより２つの異なる抗原に存在する２つの異なるエピトープに選択的に結合する能力を有する。このことは、この能力を有さない従来の単一特異性抗体とは対照的である。従って、本発明の二重特異性抗体は、２つの異なる抗原に同時に及び／または連続的に結合する。
本明細書で使用される「ｍＡｂ２抗体」または「ｍＡｂ二乗抗体」は、ある二重特異性抗体フォーマットを指し、これによれば、二重特異性抗体は、そのＣＨ３ドメインに抗原結合ループを含むように工学操作されたＦｃ領域を含む。この改変されたＦｃ領域は「Ｆｃａｂ」と呼ばれる。ｍＡｂ２抗体は、抗原結合部位をもたらすＶＨ－ＶＬドメイン対を含むＦａｂ領域を更に含む。
ヒトＩｇＧ１のＣＨ３ドメインは残基３４１番で始まり、残基４４７番で終わる（ＥＵ番号付け）。残基４４７番（ＥＵ番号付け）は、製造中に切断されることがあるため、必ずしも最終分子に現れるとは限らない。ヒトＩｇＧ１のＣＨ３ドメイン（配列番号５６３）は、それぞれ３つ及び４つのβストランドによって形成された２つのβシートで構成されている。３つの構造ループが、ＣＨ３ドメインのＣ末端でこれらのβストランドを接続する。本発明の抗体において、これらのループは、ＥＧＦＲ結合部位を形成するように改変されている。残基３５５～３６２は、ＣＨ３ドメインのストランドＡ及びＢを接続するループである「ＡＢループ」と定義され、残基３８３～３９１は、ＣＨ３ドメインのストランドＣ及びＤを接続するループである「ＣＤループ」と定義され、残基４１３～４２２は、ＣＨ３ドメインのストランドＥ及びＦを接続するループである「ＥＦループ」と定義された。ＥＵ番号付けが使用されている（図３２を参照）。
抗原と抗原結合ポリペプチドとの解離に関する平衡定数（ＫＤ）により表される「親和性」とは、抗原決定基と抗体（またはその抗原結合断片）上の抗原結合部位との間の結合強度の尺度である。ＫＤの値が小さいほど、抗原決定基と抗原結合ポリペプチドとの間の結合強度は強くなる。あるいは、親和性は、１／ＫＤである親和定数（ＫＡ）としても表され得る。親和性は、関心対象の特異的抗原に応じて、既知の方法で決定され得る。例えば、ＫＤは、表面プラズモン共鳴により決定され得る。
１０－６未満のＫＤ値は、いずれも結合を示すとみなされる。抗体またはその抗原結合断片の抗原または抗原決定基への特異的結合は、例えば、スキャッチャード分析及び／または競合結合アッセイ、例えば、放射免疫測定法（ＲＩＡ）、酵素免疫測定法（ＥＩＡ）、及びサンドイッチ競合アッセイ、平衡透析、平衡結合、ゲル濾過、ＥＬＩＳＡ、表面プラズモン共鳴、または分光法（例えば、蛍光アッセイを使用する）、ならびに当該技術分野において公知のそれらの様々な変形形態が含まれる、任意の好適な公知の方法で測定され得る。
「結合活性」は、抗体またはその抗原結合断片と、関連する抗原との間の結合の強さの尺度である。結合活性は、抗原決定基と抗体上のその抗原結合部位との間の親和性、及び抗体に存在する関連する結合部位の数の両方に関連する。
「生体内原位置」は、別の場所に移されるのではなく、天然または元の場所にあることを意味する。例えば、患者の生体内原位置のＶδ１＋細胞は、インビトロまたはエクスビボの細胞ではなく、インビボのｖδ１細胞を指す。
「ヒト組織Ｖδ１＋細胞」、ならびに「造血及び血液Ｖδ１＋細胞」及び「腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）Ｖδ１＋細胞」は、それぞれヒト組織もしくは造血血液系もしくはヒト腫瘍のいずれかに含まれる、またはそれらに由来するＶδ１＋細胞と定義される。全ての上記細胞種は、それらの（ｉ）位置またはそれらが由来する場所、及び（ｉｉ）それらのＶδ１＋ＴＣＲ発現により同定され得る。
「調節性抗体」は、抗体が結合する標的を発現する細胞に接触または結合した際に、限定されるものではないが、細胞周期、及び／または細胞数、及び／または細胞生存率、及び／または１種以上の細胞表面マーカー、及び／または１種以上の分泌性分子（例えば、サイトカイン、ケモカイン、ロイコトリエンなど）の分泌、及び／または機能（例えば、標的細胞または病変細胞に対する細胞傷害性）における測定可能な変化が含まれる、測定可能な変化をもたらす抗体である。細胞またはその集団を「調節する」方法とは、１つ以上の「調節された細胞」を生じさせるために、当該細胞もしくは複数の細胞またはそれらからの分泌における少なくとも１つの測定可能な変化が誘発される方法を指す。
「免疫応答」は、調節性抗体が添加された際の、免疫系（限定されるものではないが、細胞性応答、体液性応答、サイトカイン応答、ケモカイン応答が含まれる）の少なくとも１つの細胞、または１つの細胞種、または１つの内分泌経路、または１つの外分泌経路における測定可能な変化である。
「免疫細胞」は、限定されるものではないが、ＣＤ３４＋細胞、Ｂ細胞、ＣＤ４５＋（リンパ球共通抗原）細胞、αβＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、形質細胞、好中球、単球、マクロファージ、赤血球、血小板、樹状細胞、食細胞、顆粒球、自然リンパ球系細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、及びγδＴ細胞が含まれる、免疫系の細胞と定義される。典型的には、コンビナトリアル細胞表面分子分析を用いて（例えば、フローサイトメトリーにより）免疫細胞を分類して、免疫細胞を同定する、または亜集団にグループ分けもしくはクラスター化して区別する。これらは次いで、追加の分析によってなおも更に細分され得る。例えば、ＣＤ４５＋リンパ球は、ｖδ陽性集団とｖδ陰性集団とに更に細分され得る。
「モデル系」は、抗体またはその抗原結合断片などの医薬品が疾患の徴候または症状の改善において薬剤としてどの程度機能し得るかについての理解を助けるように設計された生体モデルまたは生物学的表現である。かかるモデルは通常、インビトロ、エクスビボ、及びインビボの病変細胞、非病変細胞、健常細胞、エフェクター細胞、及び組織などの使用を含み、これらにおいて上記薬剤の性能が研究及び比較される。
「病変細胞」は、がんなどの疾患、ウイルス感染などの感染、または炎症性状態もしくは炎症性疾患の進行に関連する表現型を示す。例えば、病変細胞は、腫瘍細胞、自己免疫組織、またはウイルスに感染した細胞であり得る。従って、上記病変細胞は、腫瘍状のもの、またはウイルスに感染したもの、または炎症性のものと定義され得る。
「健常細胞」は、疾患にかかっていない正常細胞を指す。これらは「正常」細胞または「非病変」細胞とも称され得る。非病変細胞としては、非がん性細胞、または非感染細胞、または非炎症性細胞が挙げられる。上記細胞は、薬剤によりもたらされる病変細胞特異性を測定するため、及び／または薬剤の治療指数をよりよく理解するために、関連性する病変細胞と共に用いられることが多い。
「病変細胞特異性」は、エフェクター細胞またはその集団（例えば、Ｖδ１＋細胞集団など）が、非病変細胞または健常細胞を温存しながら、がん細胞などの病変細胞を区別し、殺傷するのに、どの程度効果的であるかの尺度である。この能力はモデル系で測定することができ、エフェクター細胞またはエフェクター細胞集団が病変細胞を選択的に殺傷または溶解する傾向を、当該エフェクター細胞が非病変細胞または健常細胞を殺傷または溶解する能力に対して比較することを含み得る。上記病変細胞特異性は、薬剤の潜在的な治療指数についての情報を提供し得る。
「増強された病変細胞特異性」は、病変細胞を特異的に殺傷する能力を更に増強するように調節された、例えば、Ｖδ１＋細胞などのエフェクター細胞またはその集団の表現型を表す。この増強は、病変細胞の殺傷の特異性または選択性における倍率変化またはパーセント増加が含まれる、種々のかたちで測定され得る。
「ＡＤＣＣ」または「抗体依存性細胞性細胞傷害」は、細胞の表面抗原に結合した抗体でコーティングされた細胞に対する免疫応答を表す。これは、免疫エフェクター細胞（例えば、ＮＫ細胞など）が、細胞に結合した抗体を認識し、標的細胞の脱顆粒及び溶解を引き起こす、細胞媒介性プロセスである。通常、これはＦｃ－Ｆｃγ相互作用によって媒介される。細胞に結合した抗体のＦｃ領域は、Ｆｃγ受容体を発現するエフェクター細胞（例えば、ＮＫ細胞）を動員し、エフェクター細胞の脱顆粒及び標的細胞の死を引き起こす。
「Ｆｃ有効型」とは、機能的Ｆｃ領域（断片結晶化可能領域）、すなわち突然変異または別の方法で無効化されていないＦｃ領域を含む抗体を指す。Ｆｃ有効型抗体は、減弱されていないＦｃ機能を示す。Ｆｃ有効型抗体は、１つ以上のＦｃγ受容体への結合を低減するように改変または工学操作または構築されていない、ＩＭＧＴに収載されているヒトＩＧＨＣ重鎖配列を含み得る。例えば、ＩＧＨＣヒンジ突然変異を介するか、またはＩｇＧ１／ＩｇＧ２ＡもしくはＩｇＧ１／ＩｇＧ４ ＩＧＨＣ配列のキメラもしくはハイブリッドである重鎖定常ドメインを含む抗体の構築による。
好適には、本発明の抗体またはその抗原結合断片（すなわちポリペプチド）は単離されている。「単離された」ポリペプチドは、元の環境から取り出されたものである。「単離された」という用語は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指すように使用され得る（例えば、Ｖδ１と特異的に結合する単離された抗体またはその断片は、Ｖδ１以外の抗原と特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。「単離された」という用語は、単離された抗体が、医薬組成物の活性成分として製剤化された場合、治療的に投与されるのに十分な純度であるか、または少なくとも７０～８０％（ｗ／ｗ）の純度、より好ましくは、少なくとも８０～９０％（ｗ／ｗ）の純度、更により好ましくは、９０～９５％の純度、最も好ましくは、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％（ｗ／ｗ）の純度である調製物を指すように使用されてもよい。
好適には、本発明において使用されるポリヌクレオチドは単離されている。「単離された」ポリヌクレオチドは、元の環境から取り出されたものである。例えば、天然に存在するポリヌクレオチドは、それが自然系で共存する材料の一部または全てから分離されている場合、単離されている。ポリヌクレオチドは、例えば、その自然環境の一部ではないベクターにクローニングされている場合、またはそれがｃＤＮＡ内に含まれる場合、単離されたとみなされる。
抗体またはその抗原結合断片は、「機能的に活性なバリアント」であり得、機能的に活性なバリアントとしては、天然に存在するアレルバリアント、及び変異体または他の任意の非天然バリアントも挙げられる。当該技術分野において公知のように、アレルバリアントは、ポリペプチドの生物学的機能を本質的に変化させない１つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または付加を有することを特徴とする（ポリ）ペプチドの代替形態である。非限定的な例として、ＣＤＲを含有するフレームワークが改変されても、ＣＤＲ自体が改変されても、上記ＣＤＲが代替のフレームワークにグラフトされても、またはＮ末端もしくはＣ末端の伸長が組み込まれても、上記機能的に活性なバリアントは依然として機能し得る。更に、ＣＤＲ含有結合ドメインは、別の抗体と共有されるものなどの異なるパートナー鎖と対になっていてもよい。いわゆる「共通」軽鎖または「共通」重鎖と共有されても、上記結合ドメインは依然として機能し得る。更に、上記結合ドメインは、多量体化された場合に機能し得る。更に、「抗体またはその抗原結合断片」には、ＶＨもしくはＶＬもしくは定常ドメインが異なるカノニカル配列（例えば、ＩＭＧＴ．ｏｒｇに収載されているもの）から離れるように、またはそれに近づくように改変されており、かつ依然として機能する機能的バリアントも含まれ得る。
２つの密接に関連するポリペプチド配列を比較するために、第１のポリペプチド配列と第２のポリペプチド配列との間の「％配列同一性」が、ＮＣＢＩ ＢＬＡＳＴ ｖ２．０を使用し、ポリペプチド配列での標準設定（ＢＬＡＳＴＰ）を使用して算出され得る。２つの密接に関連するポリヌクレオチド配列を比較するために、第１のポリヌクレオチド配列と第２のポリヌクレオチド配列との間の「配列同一性％」が、ＮＣＢＩ ＢＬＡＳＴ ｖ２．０を使用し、ヌクレオチド配列での標準設定（ＢＬＡＳＴＮ）を使用して算出され得る。
ポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列は、それらの全長にわたって１００％の配列同一性を共有する場合、もう一方のポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列と同じまたは「同一」であると言われる。配列内の残基は、左から右に、すなわち、ポリペプチドではＮ末端からＣ末端まで；ポリヌクレオチドでは５’末端から３’末端まで番号付けられる。
幾つかの実施形態では、配列の任意の特定の％配列同一性は、抗体の６つ全てのＣＤＲ配列なしで算出される。例えば、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、特定の重鎖可変領域配列に対して少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する重鎖可変領域配列、及び／または特定の軽鎖可変領域配列に対して少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する軽鎖可変領域配列を含み得、ここで、あらゆるアミノ酸多様性は、重鎖可変領域配列及び軽鎖可変領域配列のフレームワーク領域でのみ生じる。かかる実施形態では、ある特定の配列同一性を有する抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、対応する抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片の重鎖及び軽鎖の完全なＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列を保持する。より具体的な例では、決して限定するものではなく、本発明のこれらの実施形態を更に説明するためだけのものであるが、配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、あらゆるアミノ酸多様性は、重鎖可変領域配列及び軽鎖可変領域配列のフレームワーク領域でのみ生じる。従って、この具体例の抗体は、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を更に含む。
更に、本明細書において提供される多重特異性抗体は、κ軽鎖可変配列を含み、ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位にセリンではないアミノ酸残基、例えば、非極性及び／または非ヒト生殖細胞系列型の残基を保持していてもよく、例えば、それらはこの位置でロイシン残基を含み得る。例えば、決して限定するものではなく、本発明のこれらの実施形態を更に説明するためだけのものであるが、配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬを含む抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、あらゆるアミノ酸多様性は、重鎖可変領域配列及び軽鎖可変領域配列のフレームワーク領域でのみ生じ、当該抗体は、ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位に非ヒト生殖細胞系列型及び／または非極性であるアミノ酸残基（例えば、この位置でのロイシン残基）を含むκ軽鎖可変配列を含む。この具体例の抗体は、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を更に含む。
配列間の「差異」とは、第１の配列と比較した、第２の配列のある位置における単一アミノ酸残基の挿入、欠失、または置換を指す。２つのポリペプチド配列は、１つ、２つ、またはそれ以上のかかるアミノ酸の差異を含み得る。それ以外の点では第１の配列と同一（１００％の配列同一性）である第２の配列における挿入、欠失、または置換は、配列同一性％の減少をもたらす。たとえば、同一の配列が９アミノ酸残基の長さである場合、第２の配列における１つの置換は、８８．９％の配列同一性をもたらす。第１のポリペプチド配列及び第２のポリペプチド配列が９のアミノ酸残基長であり、６つの同じ残基を共有する場合、第１のポリペプチド配列及び第２のポリペプチド配列は、６６％超の同一性を共有する（第１のポリペプチド配列及び第２のポリペプチド配列は、６６．７％の同一性を共有する）。
あるいは、第１の参照ポリペプチド配列を第２の比較ポリペプチド配列と比較するために、第２の配列を生成するために第１の配列に加えられた付加、置換、及び／または欠失の数が確認され得る。「付加」とは、第１のポリペプチドの配列への１つのアミノ酸残基の付加である（第１のポリペプチドのいずれかの末端での付加が含まれる）。「置換」とは、第１のポリペプチドの配列における１つのアミノ酸残基の１つの異なるアミノ酸残基での置換である。上記置換は、保存的または非保存的であり得る。「欠失」とは、第１のポリペプチドの配列からの１つのアミノ酸残基の欠失である（第１のポリペプチドのいずれかの末端での欠失が含まれる）。
三文字コード及び一文字コードを使用すると、天然に存在するアミノ酸は、以下のように称され得る：グリシン（ＧまたはＧｌｙ）、アラニン（ＡまたはＡｌａ）、バリン（ＶまたはＶａｌ）、ロイシン（ＬまたはＬｅｕ）、イソロイシン（ＩまたはＩｌｅ）、プロリン（ＰまたはＰｒｏ）、フェニルアラニン（ＦまたはＰｈｅ）、チロシン（ＹまたはＴｙｒ）、トリプトファン（ＷまたはＴｒｐ）、リジン（ＫまたはＬｙｓ）、アルギニン（ＲまたはＡｒｇ）、ヒスチジン（ＨまたはＨｉｓ）、アスパラギン酸（ＤまたはＡｓｐ）、グルタミン酸（ＥまたはＧｌｕ）、アスパラギン（ＮまたはＡｓｎ）、グルタミン（ＱまたはＧｌｎ）、システイン（ＣまたはＣｙｓ）、メチオニン（ＭまたはＭｅｔ）、セリン（ＳまたはＳｅｒ）及びトレオニン（ＴまたはＴｈｒ）。残基がアスパラギン酸またはアスパラギンであり得る場合、記号ＡｓｘまたはＢが使用され得る。残基が任意のアミノ酸であり得る場合、記号ＸａａまたはＸが使用され得る。残基がグルタミン酸またはグルタミンであり得る場合、記号ＧｌｘまたはＺが使用され得る。文脈上別段の定めがない限り、アスパラギン酸への言及は、アスパラギン酸塩を包含し、グルタミン酸への言及は、グルタミン酸塩を包含する。
本明細書で使用する場合、ポリペプチド配列の番号付けならびにＣＤＲ及びＦＲの定義は、文脈で示されるように、ＥＵ及び／またはＩＭＧＴの番号付けシステムに従って定義される通りである。第１のポリペプチド配列と第２のポリペプチド配列との間の「対応する」アミノ酸残基は、文脈で示されるように、ＥＵ及び／またはＩＭＧＴ番号付けシステムに従って、第２の配列におけるアミノ酸残基と同じ位置を共有する、第１の配列におけるアミノ酸残基であるが、当該第２の配列における当該アミノ酸残基は、当該第１の配列とは同一性が異なる場合がある。好適には、対応する残基は、フレームワーク及びＣＤＲがＥＵまたはＩＭＧＴの定義に従って同じ長さである場合、同じ番号（及び文字）を共有する。アラインメントは、手作業で、または例えば、標準設定を使用するＮＣＢＩ ＢＬＡＳＴ ｖ２．０（ＢＬＡＳＴＰまたはＢＬＡＳＴＮ）などの配列アラインメントのための公知のコンピューターアルゴリズムを使用することによって達成され得る。
本明細書における「エピトープ」への言及は、抗体またはその抗原結合断片により特異的に結合される標的の一部を指す。エピトープは「抗原決定基」とも称され得る。抗体が別の抗体と「本質的に同じエピトープ」に結合するのは、それらの両方が同一のまたは立体的に重複するエピトープを認識する場合である。２つの抗体が同一のまたは重複するエピトープに結合するかどうかを決定するために一般的に使用される方法は、競合アッセイであり、これは、標識抗原または標識抗体のいずれかを使用する多数の様々なフォーマット（例えば、放射性標識もしくは酵素標識を使用したウェルプレート、または抗原を発現する細胞でのフローサイトメトリー）で構成され得る。抗体が別の抗体と「同じエピトープ」に結合するのは、それらの両方が同一のエピトープを認識する（すなわち、抗原と抗体との間の全ての接触点が同じである）場合である。
タンパク質標的に見出されるエピトープは、「直鎖状エピトープ」または「立体構造エピトープ」として定義され得る。直鎖状エピトープは、タンパク質抗原におけるアミノ酸の連続配列によって形成されている。立体構造エピトープは、タンパク質配列内で非連続的であるが、タンパク質が三次元構造に折り畳まれると集合されるアミノ酸から形成されている。
本明細書で使用する場合、用語「ベクター」は、核酸分子であって、それが連結されている別の核酸を輸送することができる当該核酸分子を指すことを意図する。ベクターの一種は「プラスミド」であり、これは、追加のＤＮＡ断片がライゲーションされ得る環状二本鎖ＤＮＡループを指す。別の種類のベクターは、追加のＤＮＡ断片がウイルスゲノムにライゲーションされ得るウイルスベクターである。ある特定のベクターは、それらが導入された宿主細胞内で自己複製が可能である（例えば、細菌の複製開始点を有する細菌ベクター及びエピソーム哺乳動物ベクター及び酵母ベクター）。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳動物ベクター）は、宿主細胞への導入の際に宿主細胞のゲノムに組み込まれ得、これにより、宿主ゲノムと共に複製される。更に、ある種のベクターは、それらが作動可能に連結された遺伝子の発現を誘導することができる。かかるベクターは、本明細書において「組換え発現ベクター」、または単に「発現ベクター」と称される。一般に、組換えＤＮＡ技術において有用な発現ベクターは、多くの場合プラスミドの形態である。プラスミドが最も一般的に用いられるベクターの形態であるため、本明細書では、「プラスミド」及び「ベクター」は互換的に使用され得る。しかしながら、本発明は、同等の機能を果たすウイルスベクター（例えば、複製欠損レトロウイルス、アデノウイルス、及びアデノ随伴ウイルス）、ならびに更にはバクテリオファージ及びファージミド系などの他の形態の発現ベクターを包含することを意図する。本明細書で使用する場合、用語「組換え宿主細胞」（または単に「宿主細胞」）は、組換え発現ベクターが導入された細胞を指すことを意図する。かかる用語は、特定の対象細胞を指すだけでなく、例えば、かかる細胞の子孫が、細胞株または細胞バンクを作製するために用いられ、次いで、これらが、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を製造するために任意に保存、提供、販売、譲渡、または利用される場合、当該子孫も指すことを意図する。
「対象」、「患者」、または「個体」への言及は、処置される対象、特に哺乳動物対象を指す。哺乳動物対象としては、ヒト、非ヒト霊長類、家畜（例えば、ウシ）、競技用動物、または愛玩動物、例えば、イヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、またはマウスが挙げられる。幾つかの実施形態では、対象はヒトである。代替的実施形態では、対象はマウスなどの非ヒト哺乳動物である。
用語「十分量」は、所望の効果を引き起こすのに十分な量を意味する。用語「治療上有効量」は、疾患または障害の症状を改善するのに有効な量である。治療上有効量は、予防が治療とみなされ得る場合、「予防上有効量」であり得る。
疾患もしくは障害の徴候もしくは症状の重症度、このような徴候もしくは症状を対象が経験する頻度、またはその両方が（初期の時点、例えば、任意の抗体の投与前と比較して）低減される場合、当該疾患または障害は「軽減」される。
本明細書で使用する場合、「疾患または障害を処置する」とは、対象が経験する疾患または障害の少なくとも１つの徴候または症状の頻度及び／または重症度を（初期の時点、例えば、任意の抗体の投与前と比較して）低減することを意味する。
本明細書で使用する場合、「がん」は、細胞の異常な増殖または分裂を指す。一般に、がん細胞の増殖及び／または寿命は、その周囲の正常な細胞及び組織の増殖及び／または寿命を上回り、それらと協調しない。がんは、良性、前悪性、または悪性であり得る。がんは、口腔（例えば、口、舌、咽頭など）、消化器系（例えば、食道、胃、小腸、結腸、直腸、肝臓、胆管、胆嚢、膵臓など）、呼吸器系（例えば、喉頭、肺、気管支など）、骨、関節、皮膚（例えば、基底細胞、扁平細胞、髄膜腫など）、乳房、生殖器系、（例えば、子宮、卵巣、前立腺、精巣など）、泌尿器系（例えば、膀胱、腎臓、尿管など）、眼、神経系（例えば、脳など）、内分泌系（例えば、甲状腺など）、及び造血系（例えば、リンパ腫、骨髄腫、白血病、急性リンパ球性白血病、慢性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病など）が含まれる、種々の細胞及び組織において発生する。
本明細書で使用する場合、用語「約」は、本明細書で使用される場合、指定される値より１０％高い値（この値を含む）まで及び１０％低い値（この値を含む）までを包含し、好適には、指定される値より５％高い値（この値を含む）まで及び５％低い値（この値を含む）までを包含し、特に指定される値を包含する。「間」という用語には、指定された境界の値が含まれる。
多重特異性抗体及びその抗原結合断片
本明細書では、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のδ可変部１鎖（Ｖδ１）に特異的に結合することができ、ＥＧＦＲに特異的に結合することもできる、多重特異性抗体が提供される。本発明は、処置される対象に投与するための薬剤としての上記抗体の使用に関する。
本明細書では、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のδ可変部１鎖（Ｖδ１）に特異的に結合することができ、ＥＧＦＲに特異的に結合することもできる、多重特異性抗体が提供される。本発明は、処置される対象に投与するための薬剤としての上記抗体の使用に関する。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、可変ドメイン（例えば、ＶＨまたはＶＬ）、ダイアボディ、ミニボディ、またはモノクローナル抗体である。更なる実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、ｓｃＦｖである。
本発明の多重特異性抗体は、任意のクラス、例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはそれらのアイソタイプの抗体であり得、κ軽鎖またはλ軽鎖を含み得る。一実施形態では、抗体は、ＩｇＧ抗体、例えば、アイソタイプであるＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のうちの少なくとも１つである。更なる実施形態では、抗体は、所望の特性を付与するために改変された、例えば、エフェクター機能を低減するように、半減期を延長するように、ＡＤＣＣを変化させるように、またはヒンジ安定性を改善するように変異したＦｃを有する、ＩｇＧフォーマットなどのフォーマットであり得る。かかる改変は、当該技術分野において周知である。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片はヒトである。従って、抗体またはその抗原結合断片は、ヒト免疫グロブリン（Ｉｇ）配列に由来し得る。抗体（またはその抗原結合断片）のＣＤＲ、フレームワーク、及び／または定常領域は、ヒトＩｇ配列、特にヒトＩｇＧ配列に由来し得る。ＣＤＲ、フレームワーク及び／または定常領域は、ヒトＩｇ配列、特にヒトＩｇＧ配列について実質的に同一であり得る。ヒト抗体を使用する利点は、それらがヒトにおいて低免疫原性または非免疫原性であることである。
抗体またはその抗原結合断片は、キメラ、例えば、マウス／ヒトキメラ抗体であってもよい。
あるいは、抗体またはその抗原結合断片は、マウスなどの非ヒト種に由来する。かかる非ヒト抗体は、ヒトにおいて天然に産生される抗体バリアントに対する類似性を増加させるために改変され得、これにより、抗体またはその抗原結合断片は、部分的または完全にヒト化され得る。従って、一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片はヒト化されている。
本明細書において提供される特異的Ｆａｂ領域の概要
本発明で使用される特異的な抗原結合分子（すなわち抗体）の一部の概要を以下に示すと共に、添付の配列表における割り当てられた配列番号を明示する。抗原結合性のバリアント、誘導体、及びそれらの断片も本発明の一部として提供される。配列は、付属の配列表及び添付の図に示される。配列表における配列と図２２～２５における配列との間に相違がある場合、図の配列が優先するものとする。
本発明で使用される特異的な抗原結合分子（すなわち抗体）の一部の概要を以下に示すと共に、添付の配列表における割り当てられた配列番号を明示する。抗原結合性のバリアント、誘導体、及びそれらの断片も本発明の一部として提供される。配列は、付属の配列表及び添付の図に示される。配列表における配列と図２２～２５における配列との間に相違がある場合、図の配列が優先するものとする。
ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７由来のＦａｂ領域
本発明は、Ｆａｂ領域が親抗体ＡＤＴ１－４（配列番号１に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号２６に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来する多重特異性抗体、及び親抗体ＡＤＴ１－７（配列番号１０６に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号１１８に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来する抗体を提供する。ＡＤＴ１－４は本明細書においてＧ０４とも称され、ＡＤＴ１－４及びＧ０４は互換的に使用される。ＡＤＴ１－７は本明細書においてＥ０７とも称され、ＡＤＴ１－７及びＥ０７は互換的に使用される。
本発明は、Ｆａｂ領域が親抗体ＡＤＴ１－４（配列番号１に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号２６に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来する多重特異性抗体、及び親抗体ＡＤＴ１－７（配列番号１０６に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号１１８に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来する抗体を提供する。ＡＤＴ１－４は本明細書においてＧ０４とも称され、ＡＤＴ１－４及びＧ０４は互換的に使用される。ＡＤＴ１－７は本明細書においてＥ０７とも称され、ＡＤＴ１－７及びＥ０７は互換的に使用される。
幾つかの実施形態では、本発明は、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体を提供する：
配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
幾つかの実施形態では、本発明は、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体を提供する：
配列番号５１、５２、及び１３０からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３及び１３１からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９及び１４４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０及び１４５からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１、５２、及び１３０からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３及び１３１からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９及び１４４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０及び１４５からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアントＦａｂ領域を提供するためになされ得る。
幾つかの実施形態では、本発明は、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体を提供する：
配列番号２～２５及び１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０及び１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号２～２５及び１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０及び１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４由来のＦａｂ領域
本発明は、例えば、以下に記載されるような、親抗体ＡＤＴ１－４（配列番号１に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号２６に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来するＦａｂ領域を含む多重特異性抗体を提供する。ＡＤＴ１－４は本明細書においてＧ０４とも称され、ＡＤＴ１－４及びＧ０４は互換的に使用される。
本発明は、例えば、以下に記載されるような、親抗体ＡＤＴ１－４（配列番号１に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号２６に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来するＦａｂ領域を含む多重特異性抗体を提供する。ＡＤＴ１－４は本明細書においてＧ０４とも称され、ＡＤＴ１－４及びＧ０４は互換的に使用される。
ＡＤＴ１－４に由来する特定のＣＤＲ配列を含む抗体
本明細書において提供される多重特異性抗体は、ＡＤＴ１－４に由来する特定の配列を有する以下のＦａｂ領域を含む。
本明細書において提供される多重特異性抗体は、ＡＤＴ１－４に由来する特定の配列を有する以下のＦａｂ領域を含む。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５５～７８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または配列番号８２～１０５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５５～７７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または配列番号８２～１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５８、６０、６１、６２、６５、６６、６８、７４、７６、及び７７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または配列番号８５、８７、８８、８９、９２、９３、９５、１０１、１０３、及び１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号５１及び５２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号５５～７８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８２～１０５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
配列番号５１及び５２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号５５～７８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８２～１０５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号５１及び５２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号５５～７７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８２～１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
配列番号５１及び５２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号５５～７７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８２～１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号５１及び５２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号５８、６０、６１、６２、６５、６６、６８、７４、７６、及び７７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８５、８７、８８、８９、９２、９３、９５、１０１、１０３、及び１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１及び５２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号５８、６０、６１、６２、６５、６６、６８、７４、７６、及び７７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８５、８７、８８、８９、９２、９３、９５、１０１、１０３、及び１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
ａ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｂ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｃ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｄ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｅ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｆ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｇ）それぞれ配列番号５２、５３、及び６１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｈ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｉ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｊ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｋ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｌ）それぞれ配列番号５２、５３、及び６６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｍ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｎ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｏ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｐ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｑ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｒ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｓ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１００のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｔ）それぞれ配列番号５２、５３、及び７４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｕ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｖ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｗ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；または
ｘ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３。
ａ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｂ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｃ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｄ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｅ）それぞれ配列番号５１、５３、及び５９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｆ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｇ）それぞれ配列番号５２、５３、及び６１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｈ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｉ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｊ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｋ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｌ）それぞれ配列番号５２、５３、及び６６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｍ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｎ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｏ）それぞれ配列番号５１、５３、及び６９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｐ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｑ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｒ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｓ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１００のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｔ）それぞれ配列番号５２、５３、及び７４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｕ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｖ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｗ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；または
ｘ）それぞれ配列番号５１、５３、及び７８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３。
多重特異性抗体は、κ軽鎖可変配列を含み得（またはκ軽鎖可変配列に由来する可変軽鎖を含む）、ここで、ＩＭＧＴ番号付けシステムによる当該κ軽鎖可変配列の７４位の残基は、セリンではなく、例えば、７４位の非ヒト生殖細胞系列残基及び／または非極性残基、例えば、７４位の残基は、ロイシン残基である。
更なる実施形態は以下で提供される。
ＡＤＴ１－４－１０５ならびにその断片及びバリアント
ある特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１０５ならびにその断片及びバリアントに関する。
ある特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１０５ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号５５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－１０５に由来するＦａｂ領域を持つバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１０５に由来するＦａｂ領域を持つバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１０７ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１０７ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１０７ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号５６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－１０７に由来するＦａｂ領域を含むバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１０７に由来するＦａｂ領域を含むバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１１０ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１１０ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１１０ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号５７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－１１０に由来するＦａｂ領域を含むバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１１０に由来するＦａｂ領域を含むバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１１２ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１１２ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１１２ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号５８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－１１２に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１１２に由来するＦａｂ領域を持つバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１１７ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１１７ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１１７ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号５９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－１１７に由来するＦａｂ領域を持つバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１１７に由来するＦａｂ領域を持つバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１９ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１９ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１９ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号６０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－１９に由来するＦａｂ領域を含むバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１９に由来するＦａｂ領域を持つバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－２１ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－２１ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－２１ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号６１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－２１に由来するＦａｂ領域を持つバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－２１に由来するＦａｂ領域を含むバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－３１ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－３１ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－３１ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号６２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－３１に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－３１に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１３９ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１３９ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１３９ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号６３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－１３９に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１３９に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－４ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－４ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－４ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号６４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－４に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－４に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１４３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１４３ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１４３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号６５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－１４３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１４３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－５３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－５３ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－５３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号６６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－５３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－５３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１７３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１７３ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１７３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号６７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－１７３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１７３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－２ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－２ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－２ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号６８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－２に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－２に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－８ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号６９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－８に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－８に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－８２ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８２ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８２ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号７０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－８２に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－８２に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－８３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８３ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号７１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－８３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－８３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－３ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号７２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－８４ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８４ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８４ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号７３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－８４に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１００のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１００のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１００のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１００のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－８４に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－８６ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８６ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－８６ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号７４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－８６に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－８６に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－９５ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－９５ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－９５ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号７５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－９５に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－９５に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号７６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－１に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－６ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－６ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－６ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号７７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－６に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－６に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４－１３８ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１３８ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－４－１３８ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号７８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－４－１３８に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－４－１３８に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－４に由来する重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域を含む抗体
本明細書では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号２～２５からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
本明細書では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号２～２５からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号２～２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号２～２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号５、７、８、９、１２、１３、１５、２１、２３、及び２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号３０、３２、３３、３４、３７、３８、４０、４６、４８、及び４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号５、７、８、９、１２、１３、１５、２１、２３、及び２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号３０、３２、３３、３４、３７、３８、４０、４６、４８、及び４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号２～２５からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号２～２５からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号２～２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号２～２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号５、７、８、９、１２、１３、１５、２１、２３、及び２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号３０、３２、３３、３４、３７、３８、４０、４６、４８、及び４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号５、７、８、９、１２、１３、１５、２１、２３、及び２４からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号３０、３２、３３、３４、３７、３８、４０、４６、４８、及び４９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号２～２５からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号２～２５からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号２～２４からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～４９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号２～２４からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～４９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号５、７、８、９、１２、１３、１５、２１、２３、及び２４からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号３０、３２、３３、３４、３７、３８、４０、４６、４８、及び４９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号５、７、８、９、１２、１３、１５、２１、２３、及び２４からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号３０、３２、３３、３４、３７、３８、４０、４６、４８、及び４９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
ａ）配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）配列番号１２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）配列番号１３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）配列番号１９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
ａ）配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）配列番号１２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）配列番号１３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）配列番号１９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
ａ）配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）配列番号１２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）配列番号１３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）配列番号１９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
ａ）配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）配列番号１２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）配列番号１３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）配列番号１９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
ａ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列を含む、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
ａ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列を含む、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
「両方の可変領域全体で」とは、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の両方を考慮に入れる場合に、全体として、抗体が指定される合計数までの置換を含み得ることを意味する。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。幾つかの実施形態では、置換（存在する場合）は、可変領域配列のどの箇所でも生じ得る。好ましい実施形態では、置換（存在する場合）は、フレームワーク領域に限定され得る。従って、幾つかの実施形態では、アミノ酸置換は、ＣＤＲ配列では生じない。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
定義されたＶＨ及び／またはＶＬ配列（例えば、ある特定の同一性パーセント及び／または置換を有すると定義される任意のＶＨ及び／またはＶＬ配列）を有するＦａｂ領域に関する任意の実施形態では、好ましくは、ＶＨ配列は配列番号１ではなく、ＶＬ配列は配列番号２６ではない。
ＡＤＴ１－４に由来するＦａｂ領域を含む他の抗体
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１５８）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６２）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６６）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１～Ｘ１３の各々は、天然に存在するアミノ酸である。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１５８）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６２）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６６）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１～Ｘ１３の各々は、天然に存在するアミノ酸である。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１５９）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６３）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６７）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１はＡ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＳ及びＴからなる群から選択され、Ｘ３はＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、Ｘ４はＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ５はＹ及びＮからなる群から選択され、Ｘ６はＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、Ｘ７はＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、Ｘ８はＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＳ及びＫからなる群から選択され、Ｘ１０はＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ１１はＰ、Ｈ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ１２はＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、Ｘ１３はＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される。抗体は、配列番号１７０または１７１の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１７２の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１７７または１７８の配列を含むＬＦＲ３配列；及び配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１５９）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６３）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６７）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１はＡ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＳ及びＴからなる群から選択され、Ｘ３はＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、Ｘ４はＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ５はＹ及びＮからなる群から選択され、Ｘ６はＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、Ｘ７はＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、Ｘ８はＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＳ及びＫからなる群から選択され、Ｘ１０はＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ１１はＰ、Ｈ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ１２はＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、Ｘ１３はＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される。抗体は、配列番号１７０または１７１の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１７２の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１７７または１７８の配列を含むＬＦＲ３配列；及び配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１６０）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６４）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６８）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１はＡ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＳ及びＴからなる群から選択され、Ｘ３はＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、Ｘ４はＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ５はＹ及びＮからなる群から選択され、Ｘ６はＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、Ｘ７はＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、Ｘ８はＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＳ及びＫからなる群から選択され、Ｘ１０はＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ１１はＰ及びＨからなる群から選択され、Ｘ１２はＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、Ｘ１３はＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される。抗体は、配列番号１７０または１７１の配列を含むＨＦＲ１配列、配列番号１７２の配列を含むＨＦＲ２配列、配列番号１７３の配列を含むＨＦＲ３配列、配列番号１７４の配列を含むＨＦＲ４配列、配列番号１７５の配列を含むＬＦＲ１配列、配列番号１７６の配列を含むＬＦＲ２配列、配列番号１７７の配列を含むＬＦＲ３配列、及び配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１６０）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６４）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６８）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１はＡ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＳ及びＴからなる群から選択され、Ｘ３はＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、Ｘ４はＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ５はＹ及びＮからなる群から選択され、Ｘ６はＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、Ｘ７はＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、Ｘ８はＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＳ及びＫからなる群から選択され、Ｘ１０はＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、Ｘ１１はＰ及びＨからなる群から選択され、Ｘ１２はＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、Ｘ１３はＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される。抗体は、配列番号１７０または１７１の配列を含むＨＦＲ１配列、配列番号１７２の配列を含むＨＦＲ２配列、配列番号１７３の配列を含むＨＦＲ３配列、配列番号１７４の配列を含むＨＦＲ４配列、配列番号１７５の配列を含むＬＦＲ１配列、配列番号１７６の配列を含むＬＦＲ２配列、配列番号１７７の配列を含むＬＦＲ３配列、及び配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１６１）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６５）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６９）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１はＡ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＳ及びＴからなる群から選択され、Ｘ３はＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、Ｘ４はＧ及びＤからなる群から選択され、Ｘ５はＹ及びＮからなる群から選択され、Ｘ６はＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、Ｘ７はＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、Ｘ８はＫ及びＲからなる群から選択され、Ｘ９はＳ及びＫからなる群から選択され、Ｘ１０はＴ、Ｑ、Ａ、及びＥからなる群から選択され、Ｘ１１はＰ及びＨからなる群から選択され、Ｘ１２はＱ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、及びＩからなる群から選択され、Ｘ１３はＶ及びＬからなる群から選択される。抗体は、配列番号１７０または１７１の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１７２の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１７７の配列を含むＬＦＲ３配列；及び配列番号１７９または１８１の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
ａ）ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１６１）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６５）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６９）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１はＡ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＳ及びＴからなる群から選択され、Ｘ３はＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、Ｘ４はＧ及びＤからなる群から選択され、Ｘ５はＹ及びＮからなる群から選択され、Ｘ６はＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、Ｘ７はＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、Ｘ８はＫ及びＲからなる群から選択され、Ｘ９はＳ及びＫからなる群から選択され、Ｘ１０はＴ、Ｑ、Ａ、及びＥからなる群から選択され、Ｘ１１はＰ及びＨからなる群から選択され、Ｘ１２はＱ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、及びＩからなる群から選択され、Ｘ１３はＶ及びＬからなる群から選択される。抗体は、配列番号１７０または１７１の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１７２の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１７７の配列を含むＬＦＲ３配列；及び配列番号１７９または１８１の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
ＡＤＴ１－７由来のＦａｂ領域
本発明は、例えば、以下に記載されるような、親抗体ＡＤＴ１－７（配列番号１０６に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号１１８に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来するＦａｂ領域を含む多重特異性抗体を提供する。ＡＤＴ１－７は本明細書においてＥ０７とも称され、ＡＤＴ１－７及びＥ０７は互換的に使用される。
本発明は、例えば、以下に記載されるような、親抗体ＡＤＴ１－７（配列番号１０６に記載の重鎖可変領域配列及び配列番号１１８に記載の軽鎖可変領域配列を有する）に由来するＦａｂ領域を含む多重特異性抗体を提供する。ＡＤＴ１－７は本明細書においてＥ０７とも称され、ＡＤＴ１－７及びＥ０７は互換的に使用される。
ＡＤＴ１－７に由来する特定のＣＤＲ配列を含む抗体
本明細書において提供される多重特異性抗体は、ＡＤＴ１－７に由来する特定の配列を有する以下のＦａｂ領域を含む。
本明細書において提供される多重特異性抗体は、ＡＤＴ１－７に由来する特定の配列を有する以下のＦａｂ領域を含む。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３３～１４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または配列番号１４７～１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３８、１４２、及び１４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５２、１５６、及び１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号１３１のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号１３３～１４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号１４５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号１４７～１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号１３１のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号１３３～１４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号１４５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号１４７～１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号１３１のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号１３８、１４２、及び１４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号１４５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号１５２、１５６、及び１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号１３１のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号１３８、１４２、及び１４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号１４５のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号１５２、１５６、及び１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
更なる実施形態は以下で提供される。
ＡＤＴ１－７－１０ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１０ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１０ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号１３３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－７－１０に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－１０に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－１５ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１５ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１５ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号１３４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－７－１５に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－１５に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－１７ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１７ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１７ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号１３５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－７－１７に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－１７に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－１８ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１８ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１８ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号１３６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－７－１８に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－１８に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－１９ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１９ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－１９ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号１３７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－７－１９に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－１９に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－２０ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－２０ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－２０ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号１３８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－７－２０に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３８のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３８のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－２０に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－２２ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－２２ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－２２ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号１３９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－７－２２に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３９のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３９のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－２２に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－２３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－２３ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－２３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１４０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号１４０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－７－２３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－２３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－４２ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－４２ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－４２ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１４１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号１４１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－７－４２に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－４２に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－３ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－３ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－３ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１４２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号１４２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－７－３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４２のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５６のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４２のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５６のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－３に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７－６１ならびにその断片及びバリアント
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－６１ならびにその断片及びバリアントに関する。
特定の実施形態は、抗体ＡＤＴ１－７－６１ならびにその断片及びバリアントに関する。
例えば、幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１４３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。一実施形態では、配列番号１４３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントが提供される。一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。
ＡＤＴ１－７－６１に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、多重特異性抗体が提供される。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４３のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５７のアミノ酸配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４３のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号１４４のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５７のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに
配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。
ＡＤＴ１－７－６１に由来するＦａｂ領域を有するバリアント抗体を提供するためにアミノ酸置換がなされ得、例えば、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、及び１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び、１つもしくは２つのアミノ酸置換を任意に含む配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
あるいは、抗体は、（アミノ酸置換を含むか、または含まない）指定される配列からなってもよい。
ＡＤＴ１－７に由来する重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域を含む抗体
本明細書では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
本明細書では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号１１２、１１６、及び１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１２４、１２８、及び１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号１１２、１１６、及び１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１２４、１２８、及び１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号１１２、１１６、及び１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１２４、１２８、及び１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号１１２、１１６、及び１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１２４、１２８、及び１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
本明細書では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
配列番号１０７～１１７からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１１９～１２９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号１０７～１１７からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１１９～１２９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
本明細書では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体も提供される：
配列番号１１２、１１６、及び１１７からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１２４、１２８、及び１２９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
配列番号１１２、１１６、及び１１７からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号１２４、１２８、及び１２９からなる群から選択される配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
ａ）配列番号１０７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号１０８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号１０９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号１１０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号１１１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号１１２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号１１３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号１１４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１１５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
ａ）配列番号１０７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号１０８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号１０９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号１１０のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号１１１のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号１１２のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号１１３のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号１１４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１１５のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
ａ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
ａ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１０９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ）両方の可変領域全体で最大５つ、最大４つ、最大３つ、最大２つ、もしくは１つのアミノ酸置換を任意に含む、配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
「両方の可変領域全体で」とは、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の両方を考慮に入れる場合に、全体として、抗体が指定される合計数までの置換を含み得ることを意味する。アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。幾つかの実施形態では、置換（存在する場合）は、可変領域配列のどの箇所でも生じ得る。好ましい実施形態では、置換（存在する場合）は、フレームワーク領域に限定され得る。従って、幾つかの実施形態では、アミノ酸置換は、ＣＤＲ配列では生じない。
任意により、上記の抗体は、ＶＨ及びＶＬ配列におけるあらゆる多様性がフレームワーク領域で生じるように、対応するＣＤＲ配列を保持する。
幾つかの実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が以下を含む多重特異性抗体が提供される：
ａ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号１０８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号１０９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号１１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号１１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
ａ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ）配列番号１０８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ）配列番号１０９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ）配列番号１１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ）配列番号１１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ。
ある特定のアミノ酸置換が本明細書に記載される１種以上のバリアント抗体を提供するためになされ得る。
定義されたＶＨ及び／またはＶＬ配列（例えば、ある特定の同一性パーセント及び／または置換を有すると定義される任意のＶＨ及び／またはＶＬ配列）を有するＦａｂ領域に関する任意の実施形態では、好ましくは、ＶＨ配列は配列番号１０６ではなく、ＶＬ配列は配列番号１１８ではない。
ＡＤＴ１－７に由来するＦａｂ領域を含む他の抗体
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、
ａ）配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩ（配列番号１８３）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔ（配列番号１８６）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
Ｘ１～Ｘ９の各々は天然に存在するアミノ酸である。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、
ａ）配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩ（配列番号１８３）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔ（配列番号１８６）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
Ｘ１～Ｘ９の各々は天然に存在するアミノ酸である。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、
ａ）配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩ（配列番号１８４）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔ（配列番号１８７）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１はＤ、Ｉ、及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＤ及びＳからなる群から選択され、Ｘ３はＮ、Ｅ、Ｄ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、Ｘ４はＤ及びＥからなる群から選択され、Ｘ５はＴ及びＳからなる群から選択され、Ｘ６はＡ、Ｇ、Ｙ、及びＳからなる群から選択され、Ｘ７はＳ及びＤからなる群から選択され、Ｘ８はＴ、Ｅ、及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＬ及びＤからなる群から選択される。抗体は、配列番号１８９の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１９０の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１９１の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１９２の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１９３及び１９４の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１９５の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１９６の配列を含むＬＦＲ３配列；ならびに配列番号１９７の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
ａ）配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩ（配列番号１８４）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔ（配列番号１８７）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１はＤ、Ｉ、及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＤ及びＳからなる群から選択され、Ｘ３はＮ、Ｅ、Ｄ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、Ｘ４はＤ及びＥからなる群から選択され、Ｘ５はＴ及びＳからなる群から選択され、Ｘ６はＡ、Ｇ、Ｙ、及びＳからなる群から選択され、Ｘ７はＳ及びＤからなる群から選択され、Ｘ８はＴ、Ｅ、及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＬ及びＤからなる群から選択される。抗体は、配列番号１８９の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１９０の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１９１の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１９２の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１９３及び１９４の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１９５の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１９６の配列を含むＬＦＲ３配列；ならびに配列番号１９７の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
一実施形態では、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）結合Ｆａｂ領域が、
ａ）配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩ（配列番号１８５）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔ（配列番号１８８）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１はＤ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＤ及びＳからなる群から選択され、Ｘ３はＤ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、Ｘ４はＤ及びＥからなる群から選択され、Ｘ５はＳであり、Ｘ６はＡ及びＹからなる群から選択され、Ｘ７はＳであり、Ｘ８はＥ及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＬ及びＤからなる群から選択される。抗体は、配列番号１８９の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１９０の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１９１の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１９２の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１９３の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１９５の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１９６の配列を含むＬＦＲ３配列；及び配列番号１９７の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
ａ）配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ）配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ）Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩ（配列番号１８５）の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、当該ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、当該ＨＣＤＲ３配列；
ｄ）配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ）配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ）ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔ（配列番号１８８）の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、当該ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、当該ＬＣＤＲ３配列を含む、多重特異性抗体が提供され、
ここで、Ｘ１はＤ及びＶからなる群から選択され、Ｘ２はＤ及びＳからなる群から選択され、Ｘ３はＤ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、Ｘ４はＤ及びＥからなる群から選択され、Ｘ５はＳであり、Ｘ６はＡ及びＹからなる群から選択され、Ｘ７はＳであり、Ｘ８はＥ及びＧからなる群から選択され、Ｘ９はＬ及びＤからなる群から選択される。抗体は、配列番号１８９の配列を含むＨＦＲ１配列；配列番号１９０の配列を含むＨＦＲ２配列；配列番号１９１の配列を含むＨＦＲ３配列；配列番号１９２の配列を含むＨＦＲ４配列；配列番号１９３の配列を含むＬＦＲ１配列；配列番号１９５の配列を含むＬＦＲ２配列；配列番号１９６の配列を含むＬＦＲ３配列；及び配列番号１９７の配列を含むＬＦＲ４配列を更に含み得る。
配列置換を有する抗体
当業者は、様々なアミノ酸が類似の特性を有することを知っている。物質の１つ以上のかかるアミノ酸は、多くの場合、その物質の所望の活性を除去することなく、１つ以上の他のかかるアミノ酸により置換され得る。
当業者は、様々なアミノ酸が類似の特性を有することを知っている。物質の１つ以上のかかるアミノ酸は、多くの場合、その物質の所望の活性を除去することなく、１つ以上の他のかかるアミノ酸により置換され得る。
従って、アミノ酸のグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、及びイソロイシンは、多くの場合、互いに置換され得る（脂肪族側鎖を有するアミノ酸）。これらの可能な置換のうち、グリシン及びアラニンが（それらが比較的短い側鎖を有するため）互いに置換するために使用されることが好ましく、バリン、ロイシン、及びイソロイシンが（それらが疎水性のより大きな脂肪族側鎖を有するため）互いに置換するために使用されることが好ましい。多くの場合、互いに置換され得る他のアミノ酸としては、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファン（芳香族側鎖を有するアミノ酸）；リジン、アルギニン、及びヒスチジン（塩基性側鎖を有するアミノ酸）；アスパラギン酸及びグルタミン酸（酸性側鎖を有するアミノ酸）；アスパラギン及びグルタミン（アミド側鎖を有するアミノ酸）；ならびにシステイン及びメチオニン（硫黄を含む側鎖を有するアミノ酸）が挙げられる。
「保存的」アミノ酸置換は、アミノ酸残基が類似の化学構造の別のアミノ酸残基と置き換えられ、ポリペプチドの機能、活性、または他の生物学的性質に対してほとんど影響を及ぼさないと予想されるアミノ酸置換である。かかる保存的置換は、好適には、以下の群内の１つのアミノ酸が同じ群内の別のアミノ酸残基により置換される置換である。
好適には、疎水性アミノ酸残基は、非極性アミノ酸である。より好適には、疎水性アミノ酸残基は、Ｖ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｆ、Ｗ、またはＣから選択される。幾つかの実施形態では、疎水性アミノ酸残基は、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファンから選択される。
従って、「保存的」アミノ酸置換への言及は、抗体（例えば、ＣＤＲまたはＶＨもしくはＶＬ配列における）の配列内のアミノ酸のうちの１つ以上が上記のような同じ分類の別のアミノ酸で置換されるアミノ酸置換を指す。抗体の機能への悪影響を最小限にするために、ＣＤＲ領域における保存的アミノ酸置換が好ましくてもよい。しかしながら、保存的アミノ酸置換は、フレームワーク領域で生じてもよい。従って、幾つかの実施形態では、ＣＤＲにおけるあらゆる置換が保存的置換であり得るが、フレームワーク領域における置換は、天然に存在するアミノ酸ともう一方の他の天然に存在するアミノ酸との置換によるものであり得る。
本明細書に記載される抗体について示されるアミノ酸配列と比較したアミノ酸欠失または挿入がなされてもよい。従って、例えば、ポリペプチドの活性に対して実質的に影響を及ぼさないか、または少なくともかかる活性を除去しないアミノ酸が除去され得る。かかる欠失は、活性を依然として保持しながらポリペプチドの全長及び分子量が低減され得るため、有利であり得る。このことは、特定の目的に必要とされるポリペプチドの量が低減されることを可能にし得、例えば、投与量レベルが低減され得る。
本明細書において提供される配列と比較したアミノ酸変化は、任意の好適な技術を使用して、例えば、部位特異的変異誘発または固相合成を使用してなされ得る。
本発明の範囲内のアミノ酸置換または挿入は、天然に存在するアミノ酸または非天然アミノ酸を使用してなされ得るが、天然に存在するアミノ酸が好ましくてもよいことが理解されよう。天然または合成アミノ酸が使用されるか否かにかかわらず、Ｌ－アミノ酸のみが存在することが好ましくてもよい。
提供される配列において任意のアミノ酸置換を含む種々の実施形態が本明細書において提供される。加えて、本発明の一実施形態では、抗体の結合ドメインまたは抗原結合ドメインにおける最大１０、好適には、最大５つ、または好適には、最大２つのアミノ酸置換を含む、本発明の抗体またはその抗原結合断片が提供される。例えば、本発明の一実施形態では、Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、当該抗体またはその抗原結合断片は、ＡＤＴ１－４－１０５、ＡＤＴ１－４－１０７、ＡＤＴ１－４－１１０、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１１７、ＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－１３９、ＡＤＴ１－４－４、ＡＤＴ１－４－１４３、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－１７３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８、ＡＤＴ１－４－８２、ＡＤＴ１－４－８３、ＡＤＴ１－４－３、ＡＤＴ１－４－８４、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－９５、ＡＤＴ１－４－１、ＡＤＴ１－４－６、ＡＤＴ１－４－１３８、ＡＤＴ１－７－１０、ＡＤＴ１－７－１５、ＡＤＴ１－７－１７、ＡＤＴ１－７－１８、ＡＤＴ１－７－１９、ＡＤＴ１－７－２０、ＡＤＴ１－７－２２、ＡＤＴ１－７－２３、ＡＤＴ１－７－４２、ＡＤＴ１－７－３、及びＡＤＴ１－７－６１からなる群から選択される抗体の６つのＣＤＲ領域を含み、当該抗体またはその抗原結合断片は、その全てのＣＤＲ領域全体で最大１０のアミノ酸置換、好適には、最大５つのアミノ酸置換または最大２つのアミノ酸置換を有する。本発明の別の実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、当該抗体またはその抗原結合断片は、ＡＤＴ１－４－１０５、ＡＤＴ１－４－１０７、ＡＤＴ１－４－１１０、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１１７、ＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－１３９、ＡＤＴ１－４－４、ＡＤＴ１－４－１４３、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－１７３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８、ＡＤＴ１－４－８２、ＡＤＴ１－４－８３、ＡＤＴ１－４－３、ＡＤＴ１－４－８４、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－９５、ＡＤＴ１－４－１、ＡＤＴ１－４－６、ＡＤＴ１－４－１３８、ＡＤＴ１－７－１０、ＡＤＴ１－７－１５、ＡＤＴ１－７－１７、ＡＤＴ１－７－１８、ＡＤＴ１－７－１９、ＡＤＴ１－７－２０、ＡＤＴ１－７－２２、ＡＤＴ１－７－２３、ＡＤＴ１－７－４２、ＡＤＴ１－７－３、及びＡＤＴ１－７－６１からなる群から選択される抗体のＶＨ及びＶＬ配列を含み、当該抗体は、そのＶＨ及びＶＬ配列全体で最大１０のアミノ酸置換、好適には、最大５つのアミノ酸置換または最大２つのアミノ酸置換を有する。本発明の更に他の実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供され、ここで、当該抗体またはその抗原結合断片は、ＡＤＴ１－４－１０５、ＡＤＴ１－４－１０７、ＡＤＴ１－４－１１０、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１１７、ＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－１３９、ＡＤＴ１－４－４、ＡＤＴ１－４－１４３、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－１７３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８、ＡＤＴ１－４－８２、ＡＤＴ１－４－８３、ＡＤＴ１－４－３、ＡＤＴ１－４－８４、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－９５、ＡＤＴ１－４－１、ＡＤＴ１－４－６、ＡＤＴ１－４－１３８、ＡＤＴ１－７－１０、ＡＤＴ１－７－１５、ＡＤＴ１－７－１７、ＡＤＴ１－７－１８、ＡＤＴ１－７－１９、ＡＤＴ１－７－２０、ＡＤＴ１－７－２２、ＡＤＴ１－７－２３、ＡＤＴ１－７－４２、ＡＤＴ１－７－３、及びＡＤＴ１－７－６１からなる群から選択される抗体であり、当該抗体は、最大１０のアミノ酸置換、好適には、最大５つのアミノ酸置換または最大２つのアミノ酸置換を有する。当然のことながら、置換は、元のＣＤＲまたは出発抗体の可変鎖配列を基準にした置換である。
幾つかの実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は、ＣＤＲ領域または複数のＣＤＲ領域に存在する。他の実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は、フレームワーク領域に存在し、すなわち、重鎖及び軽鎖可変部に存在するが、ＣＤＲ領域または複数のＣＤＲ領域には存在しない。他の実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は、重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域における任意の位置に存在し得る。幾つかの実施形態では、アミノ酸置換は、ＣＤＲ配列では生じない。
幾つかの実施形態では、アミノ酸置換は、抗体の結合特異性及び／または親和性に悪影響を及ぼさない。従って、バリアント抗体は、それが由来する抗体と同じ（または実質的に同じ）か、または優れた機能プロファイルを有し得る。
幾つかの実施形態では、アミノ酸置換は、特定の抗原に対する抗体の結合親和性を増加させるために実行され得る。例えば、軽鎖の（可変領域の）７４位のセリンの変異誘発に関する本発明の実施形態では、置換は、抗体が調製されたヒト抗原のカニクイザルホモログに対する抗体の交差反応性を増加させるためになされ得る。上記の他の置換と異なり、この置換は、好ましくは非保存的であり得る。幾つかの実施形態では、置換は、７４位のセリンの非極性アミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸）への置換であり得る。あるいは、セリンは、非ヒト生殖細胞系列型アミノ酸（例えば、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸）で置換され得る。幾つかの実施形態では、セリンは、非ヒト生殖細胞系列型であり、かつ非極性であるアミノ酸、すなわち、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸で置換され得る。幾つかの実施形態では、セリンは、ロイシンで置換されていてもよい。
エピトープ
本明細書において、γδＴＣＲのＶδ１鎖のエピトープに結合する多重特異性抗体（またはその抗原結合断片）が提供される。このような結合は、場合により、活性化などのγδＴＣＲ活性に影響を及ぼし得る。本発明の多重特異性抗体は、γδＴＣＲのＶδ１鎖に特異的であり、他の抗原、例えば、γδＴＣＲのＶδ２鎖またはγδＴＣＲのＶδ３鎖のエピトープに結合しない。本発明の抗体は、少なくとも結合時にＶδ１細胞に与えられるアゴニスト効果に関して、アゴニスト抗体とみなされ得る。
本明細書において、γδＴＣＲのＶδ１鎖のエピトープに結合する多重特異性抗体（またはその抗原結合断片）が提供される。このような結合は、場合により、活性化などのγδＴＣＲ活性に影響を及ぼし得る。本発明の多重特異性抗体は、γδＴＣＲのＶδ１鎖に特異的であり、他の抗原、例えば、γδＴＣＲのＶδ２鎖またはγδＴＣＲのＶδ３鎖のエピトープに結合しない。本発明の抗体は、少なくとも結合時にＶδ１細胞に与えられるアゴニスト効果に関して、アゴニスト抗体とみなされ得る。
一実施形態では、エピトープは、γδＴ細胞の活性化エピトープであり得る。「活性化」エピトープは、例えば、ＴＣＲ機能の活性化、例えば、細胞脱顆粒、ＴＣＲ下方調節、細胞傷害性、増殖、動員、生存期間延長もしくは疲弊に対する耐性の増加、細胞内シグナル伝達、サイトカインもしくは増殖因子の分泌、表現型変化、または遺伝子発現の変化を含み得る。例えば、活性化エピトープの結合は、γδＴ細胞集団、好ましくは、Ｖδ１＋Ｔ細胞集団の増大（すなわち増殖）を刺激し得る。従って、これらの抗体は、γδＴ細胞活性化を調節し、これにより、免疫応答を調節するために使用され得る。従って、一実施形態では、活性化エピトープの結合は、γδＴＣＲを下方調節する。追加のまたは代替的実施形態では、活性化エピトープの結合は、γδＴ細胞の脱顆粒を活性化する。更なる追加のまたは代替的実施形態では、活性化エピトープの結合は、γδＴ細胞による殺傷を促進する。
幾つかの実施形態では、ＴＲＤＶ１の活性化エピトープは、抗体により結合されると、受容体の下方調節をもたらし、任意により、Ｖδ１細胞を活性化するものである。幾つかの実施形態では、活性化エピトープは、Ｖδ１細胞上の活性化マーカー、例えば、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ２５、ＣＤ６９、及び／またはＫｉ６７の発現を上方調節するものである。幾つかの実施形態では、活性化エピトープは、Ｖδ１細胞上の活性化マーカー、例えば、ＣＤ１０７及びＣＤ２５、ならびに任意により、ＣＤ６９及び／またはＫｉ６７の発現を上方調節するものである。幾つかの実施形態では、１種以上の活性化マーカー（例えば、ＣＤ１０７ａ）の上方調節は、がん細胞の存在下での上方調節であり得る。本発明の好ましい実施形態では、抗体は、特にＴＲＤＶ１結合ドメインを介して、ＴＲＤＶ１の活性化エピトープに結合する。
多くの場合、Ｔ細胞受容体は他のタンパク質と複合体を形成しているため、Ｖδ１抗体結合によるＴ細胞受容体の下方調節は、Ｔ細胞受容体と会合した他のタンパク質の下方調節を引き起こし得る（すなわち、Ｖδ１抗体の結合がＴ細胞受容体複合体の下方調節を引き起こす）。例えば、幾つかの実施形態では、ＴＲＤＶ１の活性化エピトープは、結合時にＴＣＲ／ＣＤ３受容体複合体を下方調節するものである。このようにして、本発明の抗体は、抗体により結合されないが、Ｔ細胞受容体と複合体を形成している細胞表面タンパク質の間接的な下方調節を引き起こし得る。γδ１鎖を発現するＴ細胞（すなわちＶδ１細胞）が全Ｔ細胞集団のほんの少数であることを考慮すると、本発明の多重特異性抗体は、Ｖδ１細胞におけるＴＣＲ複合体のみを下方調節することにより、ＴＣＲ複合体のタンパク質、例えば、ＣＤ３を選択的に（かつ間接的に）下方調節するために使用され得る。
幾つかの実施形態では、Ｔ細胞受容体複合体活性化エピトープは、活性化時に、当該ＴＲＤＶ１ ＴＣＲ複合体と会合していないＣＤ３分子を下方調節することなく、Ｔ細胞受容体複合体を下方調節するものである。
エピトープは、好ましくは、γδＴＣＲのＶδ１鎖の少なくとも１つの細胞外部分、可溶性部分、親水性部分、または外部部分から構成されるか、またはそれからなる。
特に、エピトープは、γδＴＣＲのＶδ１鎖の超可変領域、特にＶδ１鎖のＣＤＲ３に見出されるエピトープを含まないか、またはそれからならない。好ましい実施形態では、エピトープは、γδＴＣＲのＶδ１鎖の非可変領域内に存在する。かかる結合は、高度に可変的なＴＣＲの配列（特にＣＤＲ３）に限定されることなく、Ｖδ１鎖固有の認識を可能にすることが理解されよう。抗原を認識する様々なγδＴＣＲ複合体は、Ｖδ１鎖の存在によってのみ、このようにして認識され得る。したがって、Ｖδ１鎖を含むγδＴＣＲはいずれも、γδＴＣＲの特異性に関係なく、本明細書で定義される多重特異性抗体を使用して認識され得ることが理解されよう。一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸１～２４及び／または３５～９０の領域内の１つ以上のアミノ酸残基、例えば、ＣＤＲ１及び／またはＣＤＲ３配列の一部ではないＶδ１鎖の部分を含むか、またはそれからなる。一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸９１～１０５（ＣＤＲ３）の領域内のアミノ酸残基を含まないか、またはそれからならない。
幾つかの実施形態では、エピトープは、ＴＲＤＶ－１ ＣＤＲ２配列におけるアミノ酸を含むか、またはそれからなる。
γδＴ細胞は、十分に特徴付けられたαβＴ細胞と同様の様式で、体細胞再構成された可変遺伝子（Ｖ）、多様性遺伝子（Ｄ）、結合遺伝子（Ｊ）、及び定常遺伝子（Ｃ）の異なるセットを利用するが、γδＴ細胞は、αβＴ細胞より少数のＶ、Ｄ、及びＪセグメントを有する。一実施形態では、多重特異性抗体（またはその抗原結合断片）により結合されるＶδ１のエピトープは、Ｖδ１鎖のＪ領域（例えば、ヒトδ１鎖生殖細胞系列にコードされる以下の４つのＪ領域のうちの１つ：配列番号３０１（Ｊ１＊０）または３０２（Ｊ２＊０）または３０３（Ｊ３＊０）または３０４（Ｊ４＊０））またはＶδ１鎖のＣ領域（例えば、Ｃ末端膜近傍領域／膜貫通領域を含む配列番号３０５（Ｃ１＊０））に見出されるエピトープを含まないか、またはそれからならない。一実施形態では、多重特異性抗体（またはその抗原結合断片）により結合されるＶδ１のエピトープは、Ｖδ１鎖のＮ末端リーダー配列（例えば、配列番号２９９）に見出されるエピトープを含まないか、またはそれからならない。従って、抗体または断片は、Ｖδ１鎖のＶ領域（例えば、配列番号３００）のみに結合し得る。従って、一実施形態では、エピトープは、γδＴＣＲのＶ領域内のエピトープ（例えば、配列番号２７２のアミノ酸残基１～９０）からなる。
Ｌｕｏｍａ ｅｔ ａｌ．（２０１３） Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ３９：１０３２－１０４２及びＲＣＳＢタンパク質データバンク登録番号：３ＯＭＺに記載されており、以下の配列番号２７２として示される配列に由来するＶδ１配列を参照して、エピトープへの言及がなされる：
ＡＱＫＶＴＱＡＱＳＳＶＳＭＰＶＲＫＡＶＴＬＮＣＬＹＥＴＳＷＷＳＹＹＩＦＷＹＫＱＬＰＳＫＥＭＩＦＬＩＲＱＧＳＤＥＱＮＡＫＳＧＲＹＳＶＮＦＫＫＡＡＫＳＶＡＬＴＩＳＡＬＱＬＥＤＳＡＫＹＦＣＡＬＧＥＳＬＴＲＡＤＫＬＩＦＧＫＧＴＲＶＴＶＥＰＮＩＱＮＰＤＰＡＶＹＱＬＲＤＳＫＳＳＤＫＳＶＣＬＦＴＤＦＤＳＱＴＮＶＳＱＳＫＤＳＤＶＹＩＴＤＫＴＶＬＤＭＲＳＭＤＦＫＳＮＳＡＶＡＷＳＮＫＳＤＦＡＣＡＮＡＦＮＮＳＩＩＰＥＤＴＦＦＰＳＰＥＳＳ（配列番号２７２）。
ＡＱＫＶＴＱＡＱＳＳＶＳＭＰＶＲＫＡＶＴＬＮＣＬＹＥＴＳＷＷＳＹＹＩＦＷＹＫＱＬＰＳＫＥＭＩＦＬＩＲＱＧＳＤＥＱＮＡＫＳＧＲＹＳＶＮＦＫＫＡＡＫＳＶＡＬＴＩＳＡＬＱＬＥＤＳＡＫＹＦＣＡＬＧＥＳＬＴＲＡＤＫＬＩＦＧＫＧＴＲＶＴＶＥＰＮＩＱＮＰＤＰＡＶＹＱＬＲＤＳＫＳＳＤＫＳＶＣＬＦＴＤＦＤＳＱＴＮＶＳＱＳＫＤＳＤＶＹＩＴＤＫＴＶＬＤＭＲＳＭＤＦＫＳＮＳＡＶＡＷＳＮＫＳＤＦＡＣＡＮＡＦＮＮＳＩＩＰＥＤＴＦＦＰＳＰＥＳＳ（配列番号２７２）。
配列番号２７２は、Ｖ領域（可変ドメインとも称される）、Ｄ領域、Ｊ領域、及びＴＣＲ定常領域を含むか、またはそれからなる、可溶性ＴＣＲを表す。Ｖ領域はアミノ酸残基１～９０を含むか、またはそれからなり、Ｄ領域はアミノ酸残基９１～１０４を含むか、またはそれからなり、Ｊ領域はアミノ酸残基１０５～１１５を含むか、またはそれからなり、定常領域（Ｔ細胞受容体αに由来する）はアミノ酸残基１１６～２０９を含むか、またはそれからなる。Ｖ領域内では、ＣＤＲ１は、配列番号２７２のアミノ酸残基２５～３４と定義され、ＣＤＲ２は、配列番号２７２のアミノ酸残基５０～５４と定義され、ＣＤＲ３は、配列番号２７２のアミノ酸残基９３～１０４と定義される（Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ＵＳＡ １０８（６）：２４１４－２４１９（２０１１））。
従って、本発明の一態様によれば、以下の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに結合する単離抗体またはその抗原結合断片が提供される：
（ｉ）配列番号２７２のアミノ酸３～２０；及び／または
（ｉｉ）配列番号２７２のアミノ酸３７～７７。
（ｉ）配列番号２７２のアミノ酸３～２０；及び／または
（ｉｉ）配列番号２７２のアミノ酸３７～７７。
更なる実施形態では、多重特異性抗体は、配列番号３０６のアミノ酸残基１～９０のエピトープを含むか、またはそれからなる多型Ｖ領域を追加的に認識する。従って、配列番号２７２のアミノ酸１～９０及び多型の生殖細胞系列バリアント配列（配列番号３０６のアミノ酸１～９０）は、本明細書に記載されるエピトープを定義する場合に互換的とみなされ得る。本明細書において示される研究は、本発明の多重特異性抗体がこの生殖細胞系列配列の両方のバリアントを認識できることを実証した。一例として、本明細書で定義される多重特異性抗体またはその抗原結合断片が、配列番号２７２のアミノ酸１～２４及び／または３５～９０の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープを認識すると記述されている場合、それらは、配列番号３０６における同等のエピトープ（すなわち同じ位置）を追加的に認識する。
一実施形態では、多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２７２のアミノ酸１～９０の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を認識する。より具体的には、一実施形態では、本明細書で定義される多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、ヒト生殖細胞系列型エピトープを認識し、ここで、当該生殖細胞系列は、配列番号２７２の７１位でアラニン（Ａ）またはバリン（Ｖ）のいずれかをコードする。
一実施形態では、エピトープは、記載される領域内の１つ以上、例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。
更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３～２０の領域内の１つ以上（例えば、５つ以上、例えば、１０以上）のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。代替の実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３７～７７の領域（例えば、アミノ酸５０～５４の領域）内の１つ以上（例えば、５つ以上、例えば、１０以上）のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。更に他の実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３～２０（例えば、５～２０または３～１７）の領域内の１つ以上（例えば、５つ以上、例えば、１０以上）のアミノ酸残基、及びアミノ酸３７～７７（例えば、６２～７７または６２～６９）の領域内の１つ以上（例えば、５つ以上、例えば、１０以上）のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。
上記抗体（またはその抗原結合断片）は、定義される範囲内の全てのアミノ酸に結合する必要はないことが更に理解されよう。かかるエピトープは、直鎖状エピトープと称され得る。例えば、配列番号２７２のアミノ酸５～２０の領域内のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する抗体は、当該範囲のアミノ酸残基のうちの１つ以上、例えば、範囲内のアミノ酸（すなわち、アミノ酸５、９、１６、及び２０）を任意に含む、範囲の各端のアミノ酸残基（すなわち、アミノ酸５及び２０）とのみ結合し得る。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基３、５、９、１０、１２、１６、１７、２０、３７、４２、５０、５３、５９、６２、６４、６８、６９、７２、または７７のうちの少なくとも１つを含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基３、５、９、１０、１２、１６、１７、２０、３７、４２、５０、５３、５９、６２、６４、６８、６９、７２、または７７から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２アミノ酸を含むか、またはそれからなる。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２の以下のアミノ酸領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる：
（ｉ）３～１７；
（ｉｉ）５～２０；
（ｉｉｉ）３７～５３；
（ｉｖ）５０～６４；
（ｖ）５９～７２；
（ｖｉ）５９～７７；
（ｖｉｉ）６２～６９；及び／または
（ｖｉｉｉ）６２～７７。
（ｉ）３～１７；
（ｉｉ）５～２０；
（ｉｉｉ）３７～５３；
（ｉｖ）５０～６４；
（ｖ）５９～７２；
（ｖｉ）５９～７７；
（ｖｉｉ）６２～６９；及び／または
（ｖｉｉｉ）６２～７７。
更なる実施形態では、エピトープは、以下のアミノ酸領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる：配列番号２７２の５～２０及び６２～７７（例えば、限定されるものではないが、親クローンＥ０７に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）；５０～６４（例えば、限定されるものではないが、親クローンＣ０８に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）；３７～５３及び５９～７２（例えば、限定されるものではないが、親クローンＧ０４に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）；５９～７７（例えば、限定されるものではないが、親クローンＣ０５に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）；または３～１７及び６２～６９（例えば、限定されるものではないが、親クローンＥ０１に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。更なる実施形態では、エピトープは、以下のアミノ酸領域内の１つ以上のアミノ酸残基からなる：配列番号２７２の５～２０及び６２～７７；５０～６４；３７～５３及び５９～７２；５９～７７；または３～１７及び６２～６９。
更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基３、５、９、１０、１２、１６、１７、６２、６４、６８、及び６９を含むか、もしくはそれからなるか、または好適には、配列番号２７２のアミノ酸残基３、５、９、１０、１２、１６、１７、６２、６４、６８、及び６９からなる（例えば、限定されるものではないが、親クローンＥ０１に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７を含むか、もしくはそれからなるか、または好適には、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７からなる（例えば、限定されるものではないが、親クローンＥ０７に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。更に他の実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含むか、もしくはそれからなるか、または好適には、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる（例えば、限定されるものではないが、親クローンＧ０４に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基５０、５３、５９、６２、及び６４を含むか、もしくはそれからなるか、または好適には、配列番号２７２のアミノ酸残基５０、５３、５９、６２、及び６４からなる（例えば、限定されるものではないが、親クローンＣ０８に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸残基５９、６０、６８、及び７２を含むか、もしくはそれからなるか、または好適には、配列番号２７２のアミノ酸残基５９、６０、６８、及び７２からなる（例えば、限定されるものではないが、親クローンＣ０５に由来する抗体、例えば、その親和性成熟したバリアントに関する実施形態）。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３及び５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基からなる。他の更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。かかるエピトープを有する多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、Ｇ０４の配列の一部または全てを有し得るか、またはかかる抗体またはその抗原結合断片は、Ｇ０４に由来し得る。例えば、Ｇ０４の１つ以上のＣＤＲ配列、またはＧ０４のＶＨ及びＶＬ配列のうちの一方もしくは両方を有する多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、かかるエピトープに結合し得る。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５～２０及び／または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５～２０及び６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基からなる。他の更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５～２０または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。かかるエピトープを有する多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、Ｅ０７の配列の一部または全てを有し得るか、またはかかる抗体またはその抗原結合断片は、Ｅ０７に由来し得る。例えば、Ｅ０７の１つ以上のＣＤＲ配列、またはＥ０７のＶＨ及びＶＬ配列のうちの一方もしくは両方を有する多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、かかるエピトープに結合し得る。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５０～６４の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５０～６４の領域内の１つ以上のアミノ酸残基からなる。かかるエピトープを有する多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、Ｃ０８の配列の一部または全てを有し得るか、またはかかる抗体またはその抗原結合断片は、Ｃ０８に由来し得る。例えば、Ｃ０８の１つ以上のＣＤＲ配列、またはＣ０８のＶＨ及びＶＬ配列のうちの一方もしくは両方を有する多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、かかるエピトープに結合し得る。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５９～７２の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５９～７２の領域内の１つ以上のアミノ酸残基からなる。かかるエピトープを有する多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、Ｃ０５の配列の一部または全てを有し得るか、またはかかる抗体またはその抗原結合断片は、Ｃ０５に由来し得る。例えば、Ｃ０５の１つ以上のＣＤＲ配列、またはＣ０５のＶＨ及びＶＬ配列のうちの一方もしくは両方を有する多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、かかるエピトープに結合し得る。
一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸１１～２１の領域内のアミノ酸残基を含まないか、またはそれからならない。一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸２１～２８の領域内のアミノ酸残基を含まないか、またはそれからならない。一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸５９及び６０の領域内のアミノ酸残基を含まないか、またはそれからならない。一実施形態では、エピトープは、配列番号２７２のアミノ酸６７～８２の領域内のアミノ酸残基を含まないか、またはそれからならない。
親和性成熟した抗体のエピトープは、通常、親クローンについて本明細書において同定されるエピトープと同じである。カニクイザルＴＲＤＶ１上のエピトープについては、親和性成熟した抗体のエピトープの位置は、通常、対応する親クローンについて同定されるエピトープと同じ位置である。「位置」への言及は、当業者が、エピトープにおけるアミノ酸の一部の同一性がヒトＴＲＤＶ１と異なることを理解しているため、必要である。ヒトＴＲＤＶ１とカニクイザルＴＲＤＶ１との間のこれらの多様性にもかかわらず、かかる抗体は、依然として両方の抗原に特異的に結合することが可能である。
一実施形態では、エピトープは、市販の抗Ｖδ１抗体、例えば、ＴＳ－１またはＴＳ８．２により結合されるエピトープと同じではない。ＷＯ２０１７１９７３４７に記載されるように、ＴＳ－１及びＴＳ８．２の可溶性ＴＣＲへの結合は、δ１鎖がＶδ１ Ｊ１及びＶδ１ Ｊ２配列を含む場合に検出されたが、Ｖδ１ Ｊ３鎖への結合は検出されなかった。このことは、ＴＳ－１及びＴＳ８．２の結合がδＪ１及びδＪ２領域の重要な残基を必要としていたことを示す。
本明細書における「内（ｗｉｔｈｉｎ）」への言及は、定義された範囲の両端を包含する。例えば、「アミノ酸５～２０の領域内」は、残基５を含み残基５から残基２０を含み残基２０までの全てのアミノ酸残基を指す。
どのエピトープが抗体により結合されるかを確定するための様々な技術が当該技術分野において公知である。例示的な技術としては、例えば、定型的なクロスブロッキングアッセイ、アラニンスキャニング変異分析、ペプチドブロット分析、ペプチド切断分析、結晶学的研究、及びＮＭＲ分析が挙げられる。加えて、抗原のエピトープ切除、エピトープ抽出、及び化学修飾などの方法が用いられ得る。抗体が相互作用するポリペプチド内のアミノ酸を同定するために使用され得る別の方法は、（実施例９に記載されるような）質量分析により検出される水素／重水素交換である。一般に、水素／重水素交換法は、関心対象のタンパク質を重水素で標識し、続いて、重水素で標識したタンパク質に抗体を結合させることを含む。次に、タンパク質／抗体複合体は水に移され、抗体複合体により保護されているアミノ酸内の交換可能なプロトンは、界面の一部ではないアミノ酸内の交換可能なプロトンよりも遅い速度で重水素から水素への逆交換を受ける。その結果、タンパク質／抗体の界面部分を形成するアミノ酸は、重水素を保持し得、従って、界面に含まれないアミノ酸と比較して相対的により高い質量を示す。抗体の解離後、標的タンパク質は、プロテアーゼ切断及び質量分析解析に供され、これにより、抗体が相互作用する特定のアミノ酸に対応する重水素標識残基が明らかになる。
多重特異性抗体及びその抗原結合断片は、好適には、ヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２及び配列番号３０６の多型バリアント）及びカニクイザルにおけるオーソログであるカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ：Ｇ７Ｐ９Ｓ６（Ｇ７Ｐ９Ｓ６＿ＭＡＣＦＡ）も参照のこと）の両方に特異的に結合する。幾つかの実施形態では、多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、ヒト及びカニクイザルＴＲＤＶ１に特異的に結合するＧ０４由来の抗体である。本発明の多重特異性抗体により結合されるエピトープ（例えば、限定されるものではないが、配列番号２７２、３０６、または３０８のいずれかのアミノ酸残基３７～７７内の領域において結合するもの）は、それがＶδ１に特異的な（すなわち、Ｖδ２またはＶδ３などの類似の抗原に結合しない）抗Ｖδ１抗体の提供を可能にするだけではなく、Ｖδ１の多型バリアントへの交差反応性（すなわち、配列番号２７２のＴＲＤＶ１及び配列番号３０６のＴＲＤＶ１（残基位置２０での多型、及び一部の抗体について残基位置２０が接触残基候補として同定されているか、または同定された接触残基の近くであるにもかかわらず））を提供し、ヒトＶδ１とカニクイザルＶδ１との間の交差反応性（配列番号２７２及び３０８のアミノ酸残基３７～７７の領域内に存在する残基４２、５０、５４、５９、６０、６８、７３、７５、及び７６の全てがヒトＴＲＤＶ１配列とカニクイザルＴＲＤＶ１配列との間で異なるにもかかわらず）を提供するため、特に有利であり得ると仮定される。
ＡＤＴ１－４由来の抗体のエピトープ
ＡＤＴ１－４由来の抗体は、ＡＤＴ１－４親抗体と同じか、または実質的に同じエピトープに結合する。従って、幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－４親抗体に由来するか、またはＡＤＴ１－４親抗体に関連する抗体に関する実施形態では、抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸３７～７７の領域内、例えば、アミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含むか、またはそれからなる。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる。
ＡＤＴ１－４由来の抗体は、ＡＤＴ１－４親抗体と同じか、または実質的に同じエピトープに結合する。従って、幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－４親抗体に由来するか、またはＡＤＴ１－４親抗体に関連する抗体に関する実施形態では、抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸３７～７７の領域内、例えば、アミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含むか、またはそれからなる。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる。
ＡＤＴ１－４由来の抗体は、カニクイザルＴＲＤＶ１としても公知のγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のカニクイザル可変δ１（Ｖδ１）鎖（配列番号３０８）のエピトープにも結合する。従って、幾つかの実施形態、特にＧ０４親抗体に由来するか、またはＧ０４親抗体に関連する抗体に関する実施形態では、抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、配列番号３０８のアミノ酸３７～７７の領域内、例えば、アミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号３０８のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含むか、またはそれからなる。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号３０８のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる。
ＡＤＴ１－４由来の抗体の交差反応性、特に、本明細書において開示される抗体のＴＲＤＶ１の多型バリアントに結合する能力を考慮すると、幾つかの実施形態、特にＧ０４親抗体に由来するか、またはＧ０４親抗体に関連する抗体に関する実施形態では、抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、配列番号２７２、３０６、及び３０８のアミノ酸３７～７７の領域内、例えば、アミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２、３０６、及び３０８のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含むか、またはそれからなる。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２、３０６、及び３０８のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる。
上記のもののようなかかるエピトープを含むか、またはそれからなり、更にヒトＴＲＤＶ１配列とカニクイザルＴＲＤＶ１配列との間の交差反応性を提供する抗体の提供は、この２つの種由来のこれらの配列間のアミノ酸バリアントの位置を考慮すると驚くべきことである。
ＡＤＴ１－７由来の抗体のエピトープ
ＡＤＴ１－７由来の抗体は、ＡＤＴ１－７親抗体と同じか、または実質的に同じエピトープに結合する。従って、幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－７親抗体に由来するか、またはＡＤＴ１－７親抗体に関連する抗体に関する実施形態では、抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸５～２０及び／または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７を含むか、またはそれからなる。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７からなる。
ＡＤＴ１－７由来の抗体は、ＡＤＴ１－７親抗体と同じか、または実質的に同じエピトープに結合する。従って、幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－７親抗体に由来するか、またはＡＤＴ１－７親抗体に関連する抗体に関する実施形態では、抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸５～２０及び／または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含むか、またはそれからなるエピトープに結合する。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７を含むか、またはそれからなる。幾つかの実施形態では、エピトープは、配列番号２７２（または配列番号３０６）のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７からなる。
フレームワーク及び他の配列
好適には、本発明の多重特異性抗体または抗原結合断片のＶＨ及びＶＬ領域は、それぞれ４つのフレームワーク領域（ＦＲ１～ＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおけるフレームワーク領域との少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含むフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおけるフレームワーク領域との少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、９７％、または９９％の配列同一性を有する配列を含むフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおける配列を含むフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおける配列からなるフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。
好適には、本発明の多重特異性抗体または抗原結合断片のＶＨ及びＶＬ領域は、それぞれ４つのフレームワーク領域（ＦＲ１～ＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおけるフレームワーク領域との少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含むフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおけるフレームワーク領域との少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、９７％、または９９％の配列同一性を有する配列を含むフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおける配列を含むフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２～２５（例えば、Ｇ０４に由来する軽鎖可変配列の場合）、配列番号２７～５０（例えば、Ｇ０４に由来する重鎖可変配列の場合）、配列番号１０７～１１７（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）、または配列番号１１９～１２９（例えば、Ｅ０７に由来する軽鎖可変配列の場合）のいずれかにおける配列からなるフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４）を含む。
幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１７０もしくは１７１の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ１（すなわち、重鎖フレームワーク１領域）配列；配列番号１７２の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ２配列；配列番号１７７もしくは１７８の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ３配列；及び／または配列番号１７９、１８０、１８１、もしくは１８２の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ４配列を含み得る。
幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１７０もしくは１７１の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ１（すなわち、重鎖フレームワーク１領域）配列；配列番号１７２の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ２配列；配列番号１７７の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ３配列；及び／または配列番号１７９、１８０、１８１、もしくは１８２の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ４配列を含み得る。
幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１７０もしくは１７１の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ１（すなわち、重鎖フレームワーク１領域）配列；配列番号１７２の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ２配列；配列番号１７３の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ３配列；配列番号１７４の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ４配列；配列番号１７５の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ１配列；配列番号１７６の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ２配列；配列番号１７７の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ３配列；及び／または配列番号１７９もしくは１８１の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ４配列を含み得る。
幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１８９の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ１配列；配列番号１９０の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ２配列；配列番号１９１の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ３配列；配列番号１９２の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ４配列；配列番号１９３及び１９４の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ１配列；配列番号１９５の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ２配列；配列番号１９６の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ３配列；ならびに配列番号１９７の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ４配列を含み得る。
幾つかの実施形態では、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１８９の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ１配列；配列番号１９０の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ２配列；配列番号１９１の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ３配列；配列番号１９２の配列を含むか、もしくはそれからなるＨＦＲ４配列；配列番号１９３の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ１配列；配列番号１９５の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ２配列；配列番号１９６の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ３配列；及び配列番号１９７の配列を含むか、もしくはそれからなるＬＦＲ４配列を含み得る。
ＶＨ及びＶＬ領域の両方を含む断片では、これらは（例えば、ジスルフィド結合またはリンカーを介した）共有結合または非共有結合のいずれかにより結合していてもよい。本明細書に記載される抗体断片は、ｓｃＦｖ、すなわち、リンカーにより連結されたＶＨ領域及びＶＬ領域を含む断片を含み得る。一実施形態では、ＶＨ及びＶＬ領域は、（例えば、合成）ポリペプチドリンカーにより連結されている。ポリペプチドリンカーは、（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎリンカーを含み得、ここで、ｎ＝１～８、例えば、２、３、４、５、または７である。ポリペプチドリンカーは、［（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎ（Ｇｌｙ３ＡｌａＳｅｒ）ｍ］ｐリンカーを含み得、ここで、ｎ＝１～８、例えば、２、３、４、５、または７であり、ｍ＝１～８、例えば、０、１、２、または３であり、ｐ＝１～８、例えば、１、２、または３である。更なる実施形態では、リンカーは、配列番号２９１を含む。更なる実施形態では、リンカーは、配列番号２９１からなる。
翻訳、精製、及び検出を補助するためにＮ末端及びＣ末端の改変を含むｓｃＦｖ構築物が設計及び作製され得ることが当業者によって理解されるであろう。例えば、ｓｃＦｖ配列のＮ末端では、カノニカルＶＨ配列（例えば、最初のＱＶＱまたはＥＶＱ）の前に追加のメチオニン及び／またはアラニンアミノ酸残基が含まれ得る。Ｃ末端（すなわち、ＩＭＧＴの定義に従って終了するカノニカル成熟ＶＬドメイン配列のＣ末端）では、追加の配列、例えば、（ｉ）定常ドメインの部分配列、及び／または（ｉｉ）精製及び検出を補助するためのＨｉｓタグ及びＦｌａｇタグなどのタグ（例えば、配列番号２９２～２９５のいずれかのタグ）を含む追加の合成配列が含まれ得る。
本明細書に記載されるように、抗体は、任意のフォーマットのものであり得る。好ましい実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１）フォーマットのものである（すなわち、抗体はヒトＩｇＧ１抗体である）。
幾つかの実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２９６もしくは配列番号３０７の配列を含む軽鎖定常領域（または配列番号２９６もしくは配列番号３０７との少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有する配列）、及び／または配列番号２９７もしくは配列番号２９８の配列を含む重鎖定常領域（または配列番号２９７もしくは配列番号２９８との少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有する配列）を含む。幾つかの実施形態では、重鎖定常領域のエフェクター機能は、低減され得るか、または無効化され得る（エフェクター機能を無効にする変異）。エフェクター機能を減弱する好適な変異は、当業者に公知である。例えば、ＥＵ番号付けに従って、Ｌ２３５Ａ及び／またはＧ２３７Ａ変異（「ＬＡＧＡ」）、またはＬ２３４Ａ及び／またはＬ２３５Ａ変異（「ＬＡＬＡ」）。例えば、一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２９６の配列を含む軽鎖定常領域、及び／または配列番号２９７もしくは配列番号２９８の配列を含む重鎖定常領域を含む。
競合抗体
一実施形態では、抗体は、本明細書で定義される抗体もしくはその抗原結合断片と同じか、もしくは本質的に同じエピトープに結合するか、または本明細書で定義される抗体もしくはその抗原結合断片と競合する。当該技術分野において公知の定型的な方法を使用することにより、抗体が抗Ｖδ１参照抗体と同じエピトープに結合するかどうか、または結合について抗Ｖδ１参照抗体と競合するかどうかを容易に決定することができる。例えば、試験抗体が本発明の抗Ｖδ１参照抗体と同じエピトープに結合するかどうかを決定するために、当該参照抗体を飽和条件下でＶδ１タンパク質またはペプチドに結合させる。次に、Ｖδ１鎖に結合する試験抗体の能力が評価される。抗Ｖδ１参照抗体との飽和結合後に試験抗体がＶδ１に結合することができる場合、試験抗体は、抗Ｖδ１参照抗体とは異なるエピトープに結合すると結論付けられる。一方で、抗Ｖδ１参照抗体との飽和結合後に試験抗体がＶδ１鎖に結合できない場合、試験抗体は、本発明の抗Ｖδ１参照抗体により結合されるエピトープと同じエピトープに結合し得る。
一実施形態では、抗体は、本明細書で定義される抗体もしくはその抗原結合断片と同じか、もしくは本質的に同じエピトープに結合するか、または本明細書で定義される抗体もしくはその抗原結合断片と競合する。当該技術分野において公知の定型的な方法を使用することにより、抗体が抗Ｖδ１参照抗体と同じエピトープに結合するかどうか、または結合について抗Ｖδ１参照抗体と競合するかどうかを容易に決定することができる。例えば、試験抗体が本発明の抗Ｖδ１参照抗体と同じエピトープに結合するかどうかを決定するために、当該参照抗体を飽和条件下でＶδ１タンパク質またはペプチドに結合させる。次に、Ｖδ１鎖に結合する試験抗体の能力が評価される。抗Ｖδ１参照抗体との飽和結合後に試験抗体がＶδ１に結合することができる場合、試験抗体は、抗Ｖδ１参照抗体とは異なるエピトープに結合すると結論付けられる。一方で、抗Ｖδ１参照抗体との飽和結合後に試験抗体がＶδ１鎖に結合できない場合、試験抗体は、本発明の抗Ｖδ１参照抗体により結合されるエピトープと同じエピトープに結合し得る。
本発明は、本明細書で定義される抗体もしくはその抗原結合断片、または本明細書に記載される例示的な抗体のいずれかのＣＤＲ配列を有する抗体とＶδ１への結合について競合する抗Ｖδ１抗体も含む。例えば、どのタンパク質、抗体、及び他のアンタゴニストがＶδ１鎖への結合について本発明の抗体と競合し、及び／またはエピトープを共有するかを決定するために、本発明の抗体を用いて競合アッセイが実行され得る。これらのアッセイは、当業者に良く知られている。これらは、タンパク質、例えば、Ｖδ１における限られた数の結合部位についてのアンタゴニスト間またはリガンド間の競合を評価する。抗体（またはその抗原結合断片）は競合の前または後に固定化または不溶化され、Ｖδ１鎖に結合した試料が、例えば、デカント（抗体が事前に不溶化された場合）または遠心分離（抗体が競合反応後に沈殿した場合）することによって非結合試料から分離される。また、競合的結合は、タンパク質への抗体の結合または結合の欠如によって機能が変化するかどうか、例えば、抗体分子が、例えば、標識の酵素活性を阻害するか、または増強するかどうかによって決定され得る。当該技術分野において公知であり、本明細書に記載されるような、ＥＬＩＳＡ及び他の機能アッセイが使用され得る。
２つの抗体は、各々が他方の標的抗原への結合を競合阻害（遮断）する場合、同じまたは重複するエピトープに結合する。すなわち、１倍、５倍、１０倍、２０倍、または１００倍過剰の一方の抗体は、競合結合アッセイで測定した場合、他方の結合を少なくとも５０％、ただし好ましくは７５％、９０％、または更には９９％阻害する。あるいは、一方の抗体の結合を低減するか、または消失させる標的抗原におけるほぼ全てのアミノ酸変異が、他方の結合を低減するか、または消失させる場合、２つの抗体は同じエピトープを有する。
次いで、観察された試験抗体の結合の欠如が実際に参照抗体と同じエピトープへの結合によるものかどうか、または立体障害（または別の現象）が観察された結合の欠如の原因であるかどうかを確認するために、追加の定型的実験（例えば、ペプチド変異分析及び結合分析）が実行され得る。この類の実験は、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、表面プラズモン共鳴、フローサイトメトリー、または当該技術分野において利用可能な任意の他の定量的もしくは定性的な抗体結合アッセイを使用して実行され得る。
抗体の抗体結合特性及び薬理学的特性
本発明の多重特異性抗体は、例えば、下記で述べる様に、好ましい結合特性及び／または薬理学的特性を有し得る。
本発明の多重特異性抗体は、例えば、下記で述べる様に、好ましい結合特性及び／または薬理学的特性を有し得る。
幾つかの実施形態では、抗体またはその抗原結合断片の結合親和性は、抗体またはその抗原結合断片を直接または間接的に（例えば、抗ヒトＩｇＧ Ｆｃによる捕捉によって）センサーの表面上（例えば、高容量アミンチップまたは同等物）にコーティングすることによって確定され、ここで、抗体またはその抗原結合断片により結合される標的（すなわち、γδＴＣＲのＶδ１鎖またはＥＧＦＲ）が、結合を検出するためにチップ上に流される。好適には、ＭＡＳＳ－２機器（Ｓｉｅｒｒａ ＳＰＲ－３２とも称され得る）を３０μｌ／分でＰＢＳ＋０．０２％Ｔｗｅｅｎ ２０のランニングバッファー中２５℃で使用する。
本明細書には、抗体機能を定義するために使用され得る他のアッセイが記載される。例えば、本明細書に記載される多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、γδＴＣＲの会合により、例えば抗体結合時のγδＴＣＲの下方調節を測定することで評価され得る。抗体またはその抗原結合断片（任意により、細胞の表面に提示される）の適用後のγδＴＣＲの表面発現は、例えば、フローサイトメトリーにより測定され得る。本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、γδＴ細胞の脱顆粒を測定することによっても評価され得る。例えば、抗体またはその抗原結合断片（任意により、細胞の表面に提示される）のγδＴ細胞への適用後に、細胞の脱顆粒のマーカーであるＣＤ１０７ａの発現が、例えば、フローサイトメトリーにより測定され得る。本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、（抗体がγδＴ細胞の殺傷活性に影響を及ぼすかどうかを試験するために）γδＴ細胞による殺傷活性を測定することによっても評価され得る。例えば、標的細胞が、抗体またはその抗原結合断片（任意により、細胞の表面に提示される）の存在下でγδＴ細胞とインキュベートされ得る。インキュベーション後、培養物は、生きている標的細胞と死んでいる標的細胞を区別するために、細胞生死判定用色素で染色され得る。次いで、死細胞の割合が、例えば、フローサイトメトリーにより測定され得る。
さらに、本明細書では、別個のγδＴＣＲ＋ｖｅ細胞及びＥＧＦＲ＋ｖｅ細胞を含む少なくとも２つの異なる細胞種の混合物を含むアッセイで評価される多重特異性抗体の機能を定義するために使用され得るアッセイが記載される。これらのアッセイは、本明細書に記載される多重特異性抗体の驚くべき技術的効果の一部を更に強調するのに役立ち、それによって、そのような細胞混合物を含むアッセイで多重特異性抗体の機能を評価及び定義した場合、更に増強された効果が観察される（例えば、ＴＣＲ下方調節の増加）。
ヒトＴＲＤＶ１に対する結合親和性（ＫＤ）
一般的にいえば、親和性成熟したクローン（及びそのようなクローンに由来するか、またはそれに関連する多重特異性抗体）は、それらの抗原（複数可）に対して、親クローンより高い親和性を有する。例えば、ヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に対する親和性は、親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも１００％、または少なくとも５００％高い親和性である。
一般的にいえば、親和性成熟したクローン（及びそのようなクローンに由来するか、またはそれに関連する多重特異性抗体）は、それらの抗原（複数可）に対して、親クローンより高い親和性を有する。例えば、ヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に対する親和性は、親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも１００％、または少なくとも５００％高い親和性である。
本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し得る。
多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、好ましくは、約５ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合するものと更に定義され得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片（例えば、親和性成熟または別法の結果として、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはそれに由来するＦａｂ領域を持つ本発明の多重特異性抗体など）では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１００ｎＭ未満、好ましくは約５０ｎＭ未満のＫＤで、ヒトＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列（ただし、ＡＤＴ１－４－１３８を除く）に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、好ましくは、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列メンバーであるＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１４３、及び／またはＡＤＴ１－４－１に関連するか、またはそれらに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、好ましくは、約１ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得る。
本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列メンバーであるＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１４３、及び／またはＡＤＴ１－４－１に関連するか、またはそれらに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはそれに由来するものでは、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約１００ｎＭ未満、好ましくは、約５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列（ただし、ＡＤＴ１－４－１３８を除く）に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約１００ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。好ましくは、この実施形態では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列メンバーであるＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１４３、及び／またはＡＤＴ１－４－１に関連するか、またはそれらに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、５０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得る。好ましくは、この実施形態では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－７系列に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片（例えば、親和性成熟または別法の結果として、ＡＤＴ１－７系列に関連するか、またはそれに由来するＦａｂ領域を持つ本発明の多重特異性抗体など）では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、好ましくは約５ｎＭ未満のＫＤで、ヒトＴＲＤＶ１に結合し得る。
ヒトＴＲＤＶ１に対する結合親和性を約１０ｎＭ未満に増加させると、増加した結合（ＭＦＩ）、改善されたｖδ１ ＴＣＲ下方調節、改善されたＣＤ１０７Ａ上方調節、増加した細胞傷害性、及び増加した増殖など、有利な技術的効果がもたらされることが示されている（図３５Ｌ参照）。
ＥＧＦＲに対する結合親和性（ＫＤ）
幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体、例えば、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６５、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、ＡＤＴ１－４－２ｘ７４７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ２、及びＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１は、約１５０ｎＭ未満のＫＤでＥＧＦＲに結合し得る。
幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体、例えば、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６５、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、ＡＤＴ１－４－２ｘ７４７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ２、及びＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１は、約１５０ｎＭ未満のＫＤでＥＧＦＲに結合し得る。
幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体、例えば、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６５、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、ＡＤＴ１－４－２ｘ７４７、及びＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３は、約２０ｎＭ未満のＫＤでＥＧＦＲに結合し得る。
幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体、例えば、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６５、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、及びＡＤＴ１－４－２ｘ７４７は、約１０ｎＭ未満のＫＤでＥＧＦＲに結合し得る。
幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体、例えば、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６５、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、及びＡＤＴ１－４－２ｘ７４７は、約５ｎＭ未満のＫＤでＥＧＦＲに結合し得る。
いずれの実施形態においても、ＥＧＦＲはヒトＥＧＦＲであり得る。
表７は、ＳＰＲによって決定された、本発明の例示的な多重特異性抗体のＥＧＦＲ親和性の概要を提供する。
幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体、例えば、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６５、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、ＡＤＴ１－４－２ｘ７４７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ２、及びＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１は、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約１５０ｎＭ未満のＫＤでＥＧＦＲに結合し得る。
幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体、例えば、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６５、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、ＡＤＴ１－４－２ｘ７４７、及びＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３は、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約２０ｎＭ未満のＫＤでＥＧＦＲに結合し得る。
幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体、例えば、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６５、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、及びＡＤＴ１－４－２ｘ７４７は、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約１０ｎＭ未満のＫＤでＥＧＦＲに結合し得る。
幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体、例えば、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６５、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、及びＡＤＴ１－４－２ｘ７４７は、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、約５ｎＭ未満のＫＤでＥＧＦＲに結合し得る。
ＥＧＦＲに対する結合親和性を増加させると、増加した結合（ＭＦＩ）、改善されたｖδ１ ＴＣＲ下方調節、改善された脱顆粒、増加した細胞傷害性、増加した４－１ＢＢ上方調節、及び増加した増殖など、有利な技術的効果がもたらされることが示されている（図３６参照）。約１ｎＭ～約２０ｎＭの親和性の範囲内のＥＧＦＲに対する中から高の親和性を持つ本発明の多重特異性抗体（ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３、ＡＤＴ１－４－２ＬＥＥ２）が機能的にクラスター化するクラスタリング効果が観察される一方で、親和性が約１４２ｎＭの低親和性分子（ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１）は著しく損なわれ、このアッセイにおける非結合性（ＴＣＲに対して非結合性）の対照と同等である。興味深いことに、最も高い親和性のＥＧＦＲ結合（約２ｎＭ未満）は、ｖδ１ ＴＣＲ下方調節の改善、脱顆粒の改善、細胞傷害性の増加、４１ＢＢ上方調節の増加、及び増殖の増加について最も高い飽和効果を付与しない。むしろ、約９ｎＭ～１９ｎＭの中域親和性分子（それぞれＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３及びＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ２）が、抗体の飽和濃度で最も高い効果を付与する。本発明の中域親和性多重特異性抗体によって付与される、このより最適な効果については、本明細書で後述する。結果を図３６に示す。
結合ドメインの親和性のダイヤルアップ及びダイヤルダウン
本明細書で提示される多重特異性抗体は、Ｖδ１ ＴＣＲのＴＲＤＶ１ドメインに結合する少なくとも１つの第１の結合ドメインと、ＥＧＦＲに結合する少なくとも１つの第２の結合ドメインとを含む。各結合ドメインは、異なる結合親和性（Ｋｄ）でその標的に結合する。これらの結合親和性は、互いとは無関係に変化させることができる。第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインの両方に合わせて親和性を上下に微調整すると、機能性及び付与される技術的効果に影響が及ぶ。
本明細書で提示される多重特異性抗体は、Ｖδ１ ＴＣＲのＴＲＤＶ１ドメインに結合する少なくとも１つの第１の結合ドメインと、ＥＧＦＲに結合する少なくとも１つの第２の結合ドメインとを含む。各結合ドメインは、異なる結合親和性（Ｋｄ）でその標的に結合する。これらの結合親和性は、互いとは無関係に変化させることができる。第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインの両方に合わせて親和性を上下に微調整すると、機能性及び付与される技術的効果に影響が及ぶ。
第１の結合ドメインの（Ｖδ１ ＴＣＲのＴＲＤＶ１ドメインに対する）親和性：
１）第１の結合ドメインに対する親和性を高めると（約１０ｎＭ超まで）、ある特定の状況においてこれらの多重特異性抗体の効果を更に増強することができる。これまでに報告されているヒトＶδ１ ＴＣＲに対する天然に存在するリガンドの全てが２．９ｕＭ（ＭＡＲＴ１）から９００ｕＭ（ＭＩＣＡ）の範囲のはるかに低い親和性を示すことを考えると、これは驚くべきことである。
２）ＴＲＤＶ１に対する親和性が低い（約１０ｎＭ未満の）多重特異性抗体の濃度を増加させると、これらの分子によって付与される、観察される低い活性（例えば、増殖効果）の一部が克服され得るが、興味深いことに、全ての効果が低親和性バリアントの濃度増加によって再現できるわけではない。
３）より高いＴＡＡコピー数を有するがん細胞は、これらの多重特異性抗体、特に、親和性が（ＴＲＤＶ１に対して）低いバリアントによって付与される、観察される効果を更に増強させることができる。
１）第１の結合ドメインに対する親和性を高めると（約１０ｎＭ超まで）、ある特定の状況においてこれらの多重特異性抗体の効果を更に増強することができる。これまでに報告されているヒトＶδ１ ＴＣＲに対する天然に存在するリガンドの全てが２．９ｕＭ（ＭＡＲＴ１）から９００ｕＭ（ＭＩＣＡ）の範囲のはるかに低い親和性を示すことを考えると、これは驚くべきことである。
２）ＴＲＤＶ１に対する親和性が低い（約１０ｎＭ未満の）多重特異性抗体の濃度を増加させると、これらの分子によって付与される、観察される低い活性（例えば、増殖効果）の一部が克服され得るが、興味深いことに、全ての効果が低親和性バリアントの濃度増加によって再現できるわけではない。
３）より高いＴＡＡコピー数を有するがん細胞は、これらの多重特異性抗体、特に、親和性が（ＴＲＤＶ１に対して）低いバリアントによって付与される、観察される効果を更に増強させることができる。
第２の結合ドメインの（ＥＧＦＲに対する）親和性
１）ＥＧＦＲに対してより高い親和性を有する本発明の多重特異性抗体は、行われた複数の探索的研究においてより最適に機能した（実施例１３～１７を参照のこと）。
２）多くの機能的効果に大きな影響を与えることなく、ＥＧＦＲに対する親和性が１ｎＭ～２０ｎＭの範囲となり得る、閾値効果が観察された（実施例１３～１７を参照のこと）。高から中程度の親和性の多重特異性抗体について観察されたこのクラスター効果または閾値効果は予想外であった。
３）がん細胞株におけるＴＡＡコピー数がより高ければ、親和性が（ＥＧＦＲに対して）より低い多重特異性抗体によって観察される低減した効果の一部が克服され得るが、これもまたある状況においてのみである（実施例１３～１７を参照のこと）。
４）ＥＧＦＲに対して中域の親和性（９ｎＭ～２０ｎＭ）を有する本発明の幾つかの多重特異性抗体は、場合によっては、飽和濃度において最高親和性バリアント（２ｎＭ未満）よりも良好に機能した。例えば、ｎＭの抗体濃度で作業した場合、ＥＧＦＲに対して中域の親和性（約８ｎＭ～２０ｎＭ）を持つ多重特異性抗体は、記述されているアッセイにおける最高親和性バリアント（２ｎＭ未満、好ましくは１．５ｎＭ未満）及び最低親和性バリアント（約１４２ｎＭ）の両方と比較して、増強された増殖効果及び４１ＢＢ活性化ステータスを付与したことが観察された。
１）ＥＧＦＲに対してより高い親和性を有する本発明の多重特異性抗体は、行われた複数の探索的研究においてより最適に機能した（実施例１３～１７を参照のこと）。
２）多くの機能的効果に大きな影響を与えることなく、ＥＧＦＲに対する親和性が１ｎＭ～２０ｎＭの範囲となり得る、閾値効果が観察された（実施例１３～１７を参照のこと）。高から中程度の親和性の多重特異性抗体について観察されたこのクラスター効果または閾値効果は予想外であった。
３）がん細胞株におけるＴＡＡコピー数がより高ければ、親和性が（ＥＧＦＲに対して）より低い多重特異性抗体によって観察される低減した効果の一部が克服され得るが、これもまたある状況においてのみである（実施例１３～１７を参照のこと）。
４）ＥＧＦＲに対して中域の親和性（９ｎＭ～２０ｎＭ）を有する本発明の幾つかの多重特異性抗体は、場合によっては、飽和濃度において最高親和性バリアント（２ｎＭ未満）よりも良好に機能した。例えば、ｎＭの抗体濃度で作業した場合、ＥＧＦＲに対して中域の親和性（約８ｎＭ～２０ｎＭ）を持つ多重特異性抗体は、記述されているアッセイにおける最高親和性バリアント（２ｎＭ未満、好ましくは１．５ｎＭ未満）及び最低親和性バリアント（約１４２ｎＭ）の両方と比較して、増強された増殖効果及び４１ＢＢ活性化ステータスを付与したことが観察された。
親和性のダイヤルアップ及びダイヤルダウンは、多重特異性抗体の「ツールボックス」となり、多重特異性抗体には、低コピー数ＴＡＡシナリオに最適なものもあれば、ある特定の状況においてｎＭ濃度／用量範囲でより最適なものもあり、高コピー数ＴＡＡ癌に対してのみ選択性が高いものもある。
阻害濃度（ＩＣ５０）
ＴＣＲ下方調節
ＴＣＲ下方調節は、本明細書に記載されるアッセイにより測定され得る。例えば、試験される抗体は、γδＴ細胞の培養物と共に異なる濃度でインキュベートされ得、下方調節が測定される。細胞殺傷（例えば、ＴＨＰ－１細胞殺傷、またはＡ３７５細胞殺傷）を測定する場合、γδＴ細胞は、好適な細胞株、例えば、ＴＨＰ－１細胞またはＡ３７５細胞と共培養される。ＴＣＲ下方調節は、フローサイトメトリーで測定され得る。細胞殺傷は、任意の適切な手段、例えば、フローサイトメトリーにより達成され得る。
ＴＣＲ下方調節
ＴＣＲ下方調節は、本明細書に記載されるアッセイにより測定され得る。例えば、試験される抗体は、γδＴ細胞の培養物と共に異なる濃度でインキュベートされ得、下方調節が測定される。細胞殺傷（例えば、ＴＨＰ－１細胞殺傷、またはＡ３７５細胞殺傷）を測定する場合、γδＴ細胞は、好適な細胞株、例えば、ＴＨＰ－１細胞またはＡ３７５細胞と共培養される。ＴＣＲ下方調節は、フローサイトメトリーで測定され得る。細胞殺傷は、任意の適切な手段、例えば、フローサイトメトリーにより達成され得る。
親抗体（例えば、ＡＤＴ１－７及びＡＤＴ１－４）によるＴＣＲ下方調節の最初の研究では、ＴＣＲ下方調節アッセイは、Ｆｃγ受容体＋ｖｅ ＴＨＰ－１細胞に抗体を「負荷すること」を含んだ（ＷＯ２０２１／０３２９６３の実施例１、実施例６、及び表５を参照のこと）。従って、この場合、抗体は、γδＴ細胞との共インキュベーション前に細胞表面に提示される。これにより、かかる負荷は、ＴＣＲ会合時の架橋効果を利用する最大の機会をもたらす。抗体をＦｃ受容体＋ｖｅ細胞に負荷することとは別に、固体表面上に抗体を提示する同様の代替手法としては、プレート上で抗体をプレインキュベートすること（いわゆるプレート結合）、または抗体を提示する担体ビーズの使用が挙げられ得る。全てのかかるアッセイでは、固体表面に提示されたら、次いで、標的受容体（この場合、γδＴ細胞受容体）の会合時に抗体により与えられる技術的効果を調査及び測定することが一般的である。このようにして抗体を提示することは、特に免疫細胞受容体標的及び免疫細胞受容体複合体の抗体との会合、例えば、標的、例えば、ＣＤ３、ＣＤ２８などの抗体との会合の効果を調査する場合、一般的である。
対照的に、本明細書に記載される本発明の親和性成熟した抗体では、我々は、親和性成熟の影響を最大限分析及び比較することを望んでいたため、我々は、より「可溶化」したＴＣＲ下方調節アッセイフォーマットでこれらの抗体の能力を調査した。溶液中での効果の評価も生理学的により関連し得る。これらの理由のため、特に明記しない限り、親和性成熟した抗体、多重特異性抗体、またはそれらの断片の効果が、測定されるか、または特徴付けられ、親抗体と比較される（例えば、図３５を参照のこと）全ての細胞ベースのＴＣＲ下方調節実験において、可溶化アッセイフォーマットが調査される。このより厳密な可溶化アッセイを用いることによるＩＣ５０の差を以下に要約し、ここで、両方の手法による例示的な親分子（ＡＤＴ１－４）のＥＣ５０値のＴＣＲ下方調節を要約する。
「提示」対「可溶化」アッセイフォーマット：
ＡＤＴ１－４ ＩＣ５０（ＴＨＰ－１細胞に負荷される）：０．０１～０．０５ｕｇ／ｍｌ＝０．０６５ｎＭ～０．３２５ｎＭ
（ＷＯ２０２１／０３２９６３の実施例１、実施例６、及び表５を参照のこと）
対
ＡＤＴ１－４ ＩＣ５０（可溶化アッセイ、溶液中に添加される）＝３８．２８ｎＭ
（図１２参照）
「提示」対「可溶化」アッセイフォーマット：
ＡＤＴ１－４ ＩＣ５０（ＴＨＰ－１細胞に負荷される）：０．０１～０．０５ｕｇ／ｍｌ＝０．０６５ｎＭ～０．３２５ｎＭ
（ＷＯ２０２１／０３２９６３の実施例１、実施例６、及び表５を参照のこと）
対
ＡＤＴ１－４ ＩＣ５０（可溶化アッセイ、溶液中に添加される）＝３８．２８ｎＭ
（図１２参照）
本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約５０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、または約１ｍＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片（例えば、親和性成熟または別法の結果として、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはそれに由来するＦａｂ領域を持つ本発明の多重特異性抗体など）では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約５０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、または約１ｍＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列（ただし、ＡＤＴ１－４－１３８を除く）に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約０．５ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列メンバーであるＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１４３、及び／またはＡＤＴ１－４－１に関連するか、またはそれらに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の抗体またはその多重特異性抗原結合断片は、約１ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約０．５ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－７系列に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片（例えば、親和性成熟または別法の結果として、ＡＤＴ１－７系列に関連するか、またはそれに由来するＦａｂ領域を持つ本発明の多重特異性抗体など）では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約５０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、または約１ｍＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－７系列メンバーであるＡＤＴ１－７－２０もしくはＡＤＴ１－７－３に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約５ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１０ｎＭ未満である。
細胞殺傷
細胞殺傷は、本明細書に記載されるアッセイにより測定され得る。例えば、試験される抗体は、γδＴ細胞及び腫瘍細胞（例えば、ＴＨＰ－１細胞またはＡ３７５細胞）の共培養物と共に異なる濃度でインキュベートされ得る。細胞殺傷は、任意の適切な手段、例えば、フローサイトメトリーにより測定され得る。
細胞殺傷は、本明細書に記載されるアッセイにより測定され得る。例えば、試験される抗体は、γδＴ細胞及び腫瘍細胞（例えば、ＴＨＰ－１細胞またはＡ３７５細胞）の共培養物と共に異なる濃度でインキュベートされ得る。細胞殺傷は、任意の適切な手段、例えば、フローサイトメトリーにより測定され得る。
本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、約０．１ｎＭ未満、または約０．０１ｎＭ未満のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片（例えば、親和性成熟または別法の結果として、ＡＤＴ１－４系列に関連するか、またはそれに由来するＦａｂ領域を持つ本発明の多重特異性抗体など）では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、約０．１ｎＭ未満、または約０．０１ｎＭ未満のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－７系列に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片（例えば、親和性成熟または別法の結果として、ＡＤＴ１－７系列に関連するか、またはそれに由来するＦａｂ領域を持つ本発明の多重特異性抗体など）では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約５ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、または約０．１ｎＭ未満のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１ｎＭ未満である。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－７系列メンバーであるＡＤＴ１－７－２０もしくはＡＤＴ１－７－３に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、または約０．１ｎＭ未満のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。好ましくは、ＩＣ５０は約１ｎＭ未満である。
当然のことながら、多重特異性抗体の有利な薬理学的プロファイルは、当該抗体が、種々の試験される特性について有利なＫＤ及び有利なＩＣ５０値を示すように組み合わされ得る。
例えば、幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し得、
●任意により、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し得、
●約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し得、
●任意により、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し得、
●約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－４系列に関連する実施形態では、多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列（ただし、ＡＤＴ１－４－１３８を除く）に関連するか、またはそれに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
幾つかの実施形態、例えば、ＡＤＴ１－４系列メンバーであるＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１４３、及び／またはＡＤＴ１－４－１に関連するか、またはそれらに由来する多重特異性抗体またはその抗原結合断片では、本発明の多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し得、
●約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－７系列に関連する実施形態では、多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
幾つかの実施形態、特にＡＤＴ１－７系列であるＡＤＴ１－７－２０またはＡＤＴ１－７－３に関する実施形態では、多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し得、
●約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得、
●約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－４系列のＦａｂ領域またはＡＤＴ１－４系列に由来するＦａｂ領域を含む抗体の薬理学的特性
ＴＲＤＶ１への（Ｆａｂ領域を介した）結合に関する抗体の薬理学的特性は、ある特定のパラメータの範囲内に収まる可能性がある。例えば、ＡＤＴ１－４－１０５の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＴＲＤＶ１への（Ｆａｂ領域を介した）結合に関する抗体の薬理学的特性は、ある特定のパラメータの範囲内に収まる可能性がある。例えば、ＡＤＴ１－４－１０５の抗体またはＡＤＴ１－４－１０５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１０７の抗体またはＡＤＴ１－４－１０７に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１１０の抗体またはＡＤＴ１－４－１１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１１２の抗体またはＡＤＴ１－４－１１２に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－１１７の抗体またはＡＤＴ１－４－１１７に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１９の抗体またはＡＤＴ１－４－１９に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－２１の抗体またはＡＤＴ１－４－２１に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－３１の抗体またはＡＤＴ１－４－３１に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－１３９の抗体またはＡＤＴ１－４－１３９に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－４の抗体またはＡＤＴ１－４－４に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１４３の抗体またはＡＤＴ１－４－１４３に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－５３の抗体またはＡＤＴ１－４－５３に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－１７３の抗体またはＡＤＴ１－４－１７３に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－２の抗体またはＡＤＴ１－４－２に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－８の抗体またはＡＤＴ１－４－８に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－８２の抗体またはＡＤＴ１－４－８２に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－８３の抗体またはＡＤＴ１－４－８３に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－３の抗体またはＡＤＴ１－４－３に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－８４の抗体またはＡＤＴ１－４－８４に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－８６の抗体またはＡＤＴ１－４－８６に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－９５の抗体またはＡＤＴ１－４－９５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約５０ｎＭ未満のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－４－１の抗体またはＡＤＴ１－４－１に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－６の抗体またはＡＤＴ１－４－６に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－４－１３８の抗体またはＡＤＴ１－４－１３８に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤ及び／またはカニクイザルＴＲＤＶ１に対する約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－７系列のＦａｂ領域を含む抗体の薬理学的特性
ＴＲＤＶ１への（Ｆａｂ領域を介した）結合に関する抗体の薬理学的特性は、ある特定のパラメータの範囲内に収まる可能性がある。例えば、ＡＤＴ１－７－１０の抗体またはＡＤＴ１－７－１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＴＲＤＶ１への（Ｆａｂ領域を介した）結合に関する抗体の薬理学的特性は、ある特定のパラメータの範囲内に収まる可能性がある。例えば、ＡＤＴ１－７－１０の抗体またはＡＤＴ１－７－１０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－１５の抗体またはＡＤＴ１－７－１５に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－１７の抗体またはＡＤＴ１－７－１７に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－１８の抗体またはＡＤＴ１－７－１８に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－１９の抗体またはＡＤＴ１－７－１９に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－２０の抗体またはＡＤＴ１－７－２０に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－７－２２の抗体またはＡＤＴ１－７－２２に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－２３の抗体またはＡＤＴ１－７－２３に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－４２の抗体またはＡＤＴ１－７－４２に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。
ＡＤＴ１－７－３の抗体またはＡＤＴ１－７－３に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
ＡＤＴ１－７－６１の抗体またはＡＤＴ１－７－６１に由来する抗体（例えば、その断片、１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアント、またはある特定の同一性パーセントを有するバリアント）は、ヒトＴＲＤＶ１に対する約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤを有し得る。かかる抗体は、代替的にまたは追加的に、約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有し得る。
抗体のその他の機能特性
本発明の抗体は、良好な機能プロファイルを有する。特に、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇に焦点を置く従来技術の抗Ｖδ１抗体と異なり、本発明の抗体は、Ｖδ１Ｔ細胞の活性化に有用である。本発明の抗体は、それらが結合するＴ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし得るが、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇を引き起こさず、むしろＴ細胞を刺激するため、Ｔ細胞のこのコンパートメントの活性化による恩恵を受ける治療状況において有用であり得る。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、ＴＣＲの下方調節、活性化マーカー、例えば、ＣＤ２５及びＫｉ６７、ならびに脱顆粒マーカーＣＤ１０７ａの変化から明らかである。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、次に、ＩＮＦγ及びＴＮＦαなどの炎症性サイトカインの放出を引き起こして、免疫ライセンシングを促進する。驚くべきことに、ＴＲＤＶ１に対する適切に高い親和性を有する抗体は、Ｖδ１Ｔ細胞殺傷の増加を誘発し、（例えば）ＣＤ３を標的とする抗体と異なり、ＣＤ３による大規模な活性化に伴う副作用を伴うことなく高親和性抗体の供給が可能である。結果として、高親和性抗体は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）による強力な免疫賦活効果を誘発することができる。これは、Ｖδ１細胞の最小限の疲弊または殺傷で達成され得る。従って、本発明の抗体は、アゴニスト抗体とみなされ得る。
本発明の抗体は、良好な機能プロファイルを有する。特に、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇に焦点を置く従来技術の抗Ｖδ１抗体と異なり、本発明の抗体は、Ｖδ１Ｔ細胞の活性化に有用である。本発明の抗体は、それらが結合するＴ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし得るが、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇を引き起こさず、むしろＴ細胞を刺激するため、Ｔ細胞のこのコンパートメントの活性化による恩恵を受ける治療状況において有用であり得る。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、ＴＣＲの下方調節、活性化マーカー、例えば、ＣＤ２５及びＫｉ６７、ならびに脱顆粒マーカーＣＤ１０７ａの変化から明らかである。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、次に、ＩＮＦγ及びＴＮＦαなどの炎症性サイトカインの放出を引き起こして、免疫ライセンシングを促進する。驚くべきことに、ＴＲＤＶ１に対する適切に高い親和性を有する抗体は、Ｖδ１Ｔ細胞殺傷の増加を誘発し、（例えば）ＣＤ３を標的とする抗体と異なり、ＣＤ３による大規模な活性化に伴う副作用を伴うことなく高親和性抗体の供給が可能である。結果として、高親和性抗体は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）による強力な免疫賦活効果を誘発することができる。これは、Ｖδ１細胞の最小限の疲弊または殺傷で達成され得る。従って、本発明の抗体は、アゴニスト抗体とみなされ得る。
本発明の一実施形態では、
ａ）Ｖδ１Ｔ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし、
ｂ）ＣＤＣまたはＡＤＣＣを示さず、
ｃ）Ｖδ１Ｔ細胞を枯渇させないこと特徴とする、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供される。
ａ）Ｖδ１Ｔ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし、
ｂ）ＣＤＣまたはＡＤＣＣを示さず、
ｃ）Ｖδ１Ｔ細胞を枯渇させないこと特徴とする、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供される。
幾つかの実施形態では、多重特異性抗Ｖδ１抗体または抗原結合断片は、Ｖδ１Ｔ細胞増殖も刺激する。
幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体は、Ｖδ１Ｔ細胞がＥＧＦＲ＋がん細胞などのＥＧＦＲ＋ｖｅ細胞の存在下にある（それと混合される、その近くにある、またはそれに隣接している）とき、Ｖδ１Ｔ細胞に、
（ａ）増強されたＴＣＲ下方調節効果；
（ｂ）増強されたＶδ１Ｔ細胞増殖効果；及び／または
（ｃ）増強されたＶδ１Ｔ細胞活性化効果
のうちの１つ以上を付与する。
（ａ）増強されたＴＣＲ下方調節効果；
（ｂ）増強されたＶδ１Ｔ細胞増殖効果；及び／または
（ｃ）増強されたＶδ１Ｔ細胞活性化効果
のうちの１つ以上を付与する。
多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、約１０ｎＭ未満、好ましくは、約５ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合するものと更に定義され得る。
多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、上記のように良好なＫＤ及び／またはＩＣ５０値を有するものと更に定義され得る。
Ｔ細胞枯渇は、Ｔ細胞死、Ｔ細胞除去、またはＴ細胞低減のプロセスである。Ｖδ１Ｔ細胞を枯渇させない抗体または抗原結合断片への言及は、対照研究において本明細書に記載される本発明の多重特異性抗体のうちの１種以上とインキュベートされる場合（例えば、抗体がＩｇＧ１抗体として提供される場合）に、任意の適切な手段により測定される（例えば、比較対照のあるフローサイトメトリー法、または例えば、図１８及び図２９に記載される他の確立された対照アッセイによる）、生存Ｖδ１＋Ｔ細胞集団の約３０％未満または約２０％未満（好ましくは、約１０％未満）の枯渇を指す。
ＡＤＣＣ及びＣＤＣは、Ｔ細胞枯渇が発生し得るメカニズムである。ＡＤＣＣまたはＣＤＣを引き起こさない本明細書における抗体または抗原結合断片への言及は、本明細書に記載される本発明の多重特異性抗体のうちの１種以上とインキュベートされる場合（例えば、抗体がＩｇＧ１抗体として提供される場合）に、任意の適切な手段により測定される（例えば、比較対照のあるフローサイトメトリー法、または例えば、図１８に記載される他の確立された対照アッセイによる）、ＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣによる生存Ｖδ１＋Ｔ細胞集団の約３０％未満または約２０％未満（好ましくは、約１０％未満）の枯渇を指す。
一実施形態では、ＩＬ－１７Ａの分泌を誘発しないことを特徴とする抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が提供される。ＩＬ－１７Ａ（インターロイキン－１７Ａ）は、活性化Ｔ細胞により産生される腫瘍形成促進性サイトカインである。ＩＬ－１７Ａは、腫瘍成長を増強し得、抗がん免疫応答を弱め得る。図４０に示すように、抗ｖδ１抗体は、Ｖδ１＋ｖｅ細胞を含むヒトリンパ球を含む細胞集団に添加される場合、ＩＬ－１７Ａの分泌を誘発しないが、抗ＣＤ３比較抗体（ＯＫＴ３など）は、かかる状況でＩＬ１７Ａを誘発する。従って、ＩＬ－１７Ａの分泌を誘発しない本明細書における抗体または抗原結合断片への言及は、かかる状況において抗ＣＤ３比較抗体（図６３Ｇ～Ｉにおいて用いられる抗ＣＤ３比較抗体であるＯＫＴ３に代表される）により誘発されるＩＬ－１７Ａ分泌の約３０％未満または約２０％未満または約１０％未満のＩＬ－１７Ａ分泌を誘発することを指す。
抗体の改変
抗体及びその断片は、公知の方法を使用して他の点で改変され得る。本明細書に記載される抗体分子の配列改変は、当業者により容易に組み込まれ得る。以下の例は非限定的な例である。
抗体及びその断片は、公知の方法を使用して他の点で改変され得る。本明細書に記載される抗体分子の配列改変は、当業者により容易に組み込まれ得る。以下の例は非限定的な例である。
ファージライブラリからの抗体の発見及び配列の回収の間に、所望の抗体可変ドメインがサブクローニングにより完全長ＩｇＧに再フォーマットされ得る。プロセスを加速させるために、可変ドメインは、多くの場合、制限酵素を使用して移される。これらの固有の制限部位は追加／代替のアミノ酸を導入し得、カノニカル配列から離れ得る（かかるカノニカル配列は、例えば、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ［ＩＭＧＴ］ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇを参照のこと）において見出され得る）。これらは、κ軽鎖またはλ軽鎖の配列改変として導入され得る。
軽鎖の改変
可変軽鎖の可変配列は、完全長ＩｇＧに再フォーマットする際に制限部位（例えば、Ｎｈｅ１－Ｎｏｔ１）を使用してクローニングされ得る。より具体的には、クローニングを補助するために、親（非親和性成熟）抗体の軽鎖Ｎ末端に追加のＡｌａ－Ｓｅｒ配列が導入された。好ましくは、この追加のＡＳ配列はその後、カノニカルＮ末端配列を生成させるように、更なる開発の間に除去される。従って、幾つかの実施形態では、本明細書に記載される軽鎖を含む抗体は、それらのＮ末端にＡＳ配列を含まない。すなわち、配列番号２６、１１８、２８２～２９０、または３１３は、最初のＡＳ配列を含まない。親和性成熟した抗体の軽鎖配列のＮ末端は、すでにこのＡＳモチーフを含んでいない。
可変軽鎖の可変配列は、完全長ＩｇＧに再フォーマットする際に制限部位（例えば、Ｎｈｅ１－Ｎｏｔ１）を使用してクローニングされ得る。より具体的には、クローニングを補助するために、親（非親和性成熟）抗体の軽鎖Ｎ末端に追加のＡｌａ－Ｓｅｒ配列が導入された。好ましくは、この追加のＡＳ配列はその後、カノニカルＮ末端配列を生成させるように、更なる開発の間に除去される。従って、幾つかの実施形態では、本明細書に記載される軽鎖を含む抗体は、それらのＮ末端にＡＳ配列を含まない。すなわち、配列番号２６、１１８、２８２～２９０、または３１３は、最初のＡＳ配列を含まない。親和性成熟した抗体の軽鎖配列のＮ末端は、すでにこのＡＳモチーフを含んでいない。
クローニングを補助するために、追加のアミノ酸改変がなされ得る。例えば、κ軽鎖を有する本明細書に記載される親抗体（すなわち、Ｂ０７、Ｃ０５、Ｅ０４、Ｆ０７、Ｇ０６、Ｇ０９、Ｂ０９、Ｇ１０、Ｇ０４、及びＥ０７）では、全長配列を調製する際のクローニングを補助するために、κ軽鎖可変ドメイン／定常ドメイン境界でバリンからアラニンへの変化が導入された。これにより、κ定常ドメインが改変された。具体的には、これにより、（ＮｏｔＩ制限部位から）ＲＴＡＡＡＰＳで始まる定常ドメインがもたらされる。好ましくは、かかる配列は、ＲＴＶＡＡＰＳで始まるカノニカルκ軽鎖定常領域を生成させるように、更なる開発の間に改変され得る。かかる改変は、抗体の機能特性を変化させない。従って、幾つかの実施形態では、本明細書に記載されるκ軽鎖を含む抗体は、（例えば、配列番号２９６のように）配列ＲＴＶで始まる定常ドメインを含む。
別の例として、本明細書に記載される抗体で（具体的には、Ｅ０１及びＣ０８）は、クローニングを補助するために、λ軽鎖可変ドメイン／定常ドメインの境界で、リジンからアラニンへの配列変化が導入された。これにより、λ定常ドメインが改変された。具体的には、これにより、（ＮｏｔＩ制限部位から）ＧＱＰＡＡＡＰＳで始まる定常ドメインがもたらされる。好ましくは、この配列は、ＧＱＰＫＡＡＰＳで始まるカノニカルλ軽鎖定常領域を生成させるように、更なる開発の間に改変され得る。従って、幾つかの実施形態では、本明細書に記載されるλ軽鎖を含む抗体は、配列ＧＱＰＫで始まる定常ドメインを含む。
重鎖の改変
通常、ヒト可変重鎖配列は、塩基性のグルタミン（Ｑ）または酸性のグルタミン酸（Ｅ）のいずれかで始まる。しかしながら、かかる配列は両方とも、その後、酸性アミノ酸残基であるピログルタミン酸（ｐＥ）に変換されることが知られている。ＱからｐＥへの変換は抗体の電荷変化をもたらすが、ＥからｐＥへの変換は抗体の電荷を変化させない。従って、経時的な電荷変化の変動を回避するための１つの選択肢は、最初に重鎖の開始配列をＱからＥに改変することである。従って、一実施形態では、重鎖のＮ末端にＱ残基を有する本明細書に記載される抗体の重鎖は、Ｎ末端でのＱからＥへの改変を有し得る。特に、配列番号１、１０６、２７６～２７９、または３１２のいずれかの最初の残基は、ＱからＥに改変され得る。この実施形態は、これらの配列を、例えば、完全長の多重特異性抗体またはその抗原結合断片に組み込む任意の実施形態にも適用されることが理解されよう。幾つかの実施形態では、重鎖のＮ末端のＥ残基をＥ残基に置換することが有利であり得る。従って、幾つかの実施形態では、配列番号２～２５、１０７～１１７、２７３～２７５、２８０、または２８１のいずれかのＮ末端のＥ残基は、Ｑ残基で置換され得る。
通常、ヒト可変重鎖配列は、塩基性のグルタミン（Ｑ）または酸性のグルタミン酸（Ｅ）のいずれかで始まる。しかしながら、かかる配列は両方とも、その後、酸性アミノ酸残基であるピログルタミン酸（ｐＥ）に変換されることが知られている。ＱからｐＥへの変換は抗体の電荷変化をもたらすが、ＥからｐＥへの変換は抗体の電荷を変化させない。従って、経時的な電荷変化の変動を回避するための１つの選択肢は、最初に重鎖の開始配列をＱからＥに改変することである。従って、一実施形態では、重鎖のＮ末端にＱ残基を有する本明細書に記載される抗体の重鎖は、Ｎ末端でのＱからＥへの改変を有し得る。特に、配列番号１、１０６、２７６～２７９、または３１２のいずれかの最初の残基は、ＱからＥに改変され得る。この実施形態は、これらの配列を、例えば、完全長の多重特異性抗体またはその抗原結合断片に組み込む任意の実施形態にも適用されることが理解されよう。幾つかの実施形態では、重鎖のＮ末端のＥ残基をＥ残基に置換することが有利であり得る。従って、幾つかの実施形態では、配列番号２～２５、１０７～１１７、２７３～２７５、２８０、または２８１のいずれかのＮ末端のＥ残基は、Ｑ残基で置換され得る。
更に、ＩｇＧ１定常ドメインのＣ末端はＰＧＫで終わる。しかしながら、末端の塩基性リジン（Ｋ、ＥＵ４４７位）は、その後、（例えば、ＣＨＯ細胞において）発現の間に切断されることが多い。その結果、Ｃ末端リジン残基の様々な喪失により抗体の電荷が変化する。従って、１つの選択肢は、最初にこのリジンを除去し、これにより、ＰＧで終わる均一かつ一貫した重鎖Ｃ末端配列をもたらすことである。代替的選択肢は、末端Ｇ（ＥＵ４４６位）も除去することである。従って、一実施形態では、本明細書に記載される抗体の重鎖は、Ｃ末端から末端Ｋまたは末端ＧＫが除去されている。
幾つかの実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、Ａｓｎ２９７（ＥＵ番号付けスキーム）に連結された糖の変化により改変されたエフェクター機能を有する。更なる上記改変において、Ａｓｎ２９７は、フコシル化されていないか、またはフコシル化の低減を示す（すなわち、脱フコシル化抗体または非フコシル化抗体）。フコシル化としては、分子への糖フコースの付加、例えば、Ｎ－グリカン、Ｏ－グリカン、及び糖脂質へのフコースの結合が挙げられる。従って、脱フコシル化抗体では、フコースが定常領域の糖鎖に結合していない。抗体は、抗体のフコシル化を防止または阻害するように改変され得る。典型的には、グリコシル化の改変は、標的を定めた工学操作、または標的を定めたもしくは偶然による宿主もしくはクローンの選択のいずれかにより、代替的なグリコシル化処理能力を有する宿主細胞において、上記抗体またはその抗原結合断片を発現させることを含む（例えば、実施例１３を参照のこと）。これらの及び他のエフェクター改変は、本明細書に組み込まれるＸｉｎｈｕａ Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１８） Ｐｒｏｔｅｉｎ ＆ Ｃｅｌｌ ９：６３－７３及びＰｅｒｅｉｒａ ｅｔ ａｌ．（２０１８）ｍＡｂｓ １０（５）：６９３－７１１などの最近の概説に更に説明されている。
任意のアロタイプの改変
抗体の探索中に、特定のヒトアロタイプが用いられる場合がある。任意により、抗体は、開発の間に異なるヒトアロタイプに切り替えられ得る。非限定的な例として、カッパ鎖には、３つのＫｍ対立遺伝子を定義するＫｍ１、Ｋｍ１，２、及びＫｍ３と称される３つのヒトアロタイプがある（アロタイプ番号付けを使用）。Ｋｍ１はバリン１５３（ＩＭＧＴ Ｖ４５．１）及びロイシン１９１（ＩＭＧＴ Ｌ１０１）と対応し、Ｋｍ１，２はアラニン１５３（ＩＭＧＴ Ａ４５．１）及びロイシン１９１（ＩＭＧＴ Ｌ１０１）と対応し、Ｋｍ３はアラニン１５３（ＩＭＧＴ Ａ４５．１）及びバリン１９１（ＩＭＧＴ Ｖ１０１）と対応する。従って、任意により、標準的なクローニング手法によって配列を１つのアロタイプから別のものに改変することができる。例えば、Ｌ１９１Ｖ（ＩＭＧＴ Ｌ１０１Ｖ）の変化により、Ｋｍ１，２アロタイプがＫｍ３アロタイプに変換される。かかるアロタイプの更なる詳細については、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ（２００９）ＭＡｂｓ １（４）：３３２－８（これは参照により本明細書に組み込まれる）を参照のこと。
抗体の探索中に、特定のヒトアロタイプが用いられる場合がある。任意により、抗体は、開発の間に異なるヒトアロタイプに切り替えられ得る。非限定的な例として、カッパ鎖には、３つのＫｍ対立遺伝子を定義するＫｍ１、Ｋｍ１，２、及びＫｍ３と称される３つのヒトアロタイプがある（アロタイプ番号付けを使用）。Ｋｍ１はバリン１５３（ＩＭＧＴ Ｖ４５．１）及びロイシン１９１（ＩＭＧＴ Ｌ１０１）と対応し、Ｋｍ１，２はアラニン１５３（ＩＭＧＴ Ａ４５．１）及びロイシン１９１（ＩＭＧＴ Ｌ１０１）と対応し、Ｋｍ３はアラニン１５３（ＩＭＧＴ Ａ４５．１）及びバリン１９１（ＩＭＧＴ Ｖ１０１）と対応する。従って、任意により、標準的なクローニング手法によって配列を１つのアロタイプから別のものに改変することができる。例えば、Ｌ１９１Ｖ（ＩＭＧＴ Ｌ１０１Ｖ）の変化により、Ｋｍ１，２アロタイプがＫｍ３アロタイプに変換される。かかるアロタイプの更なる詳細については、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ（２００９）ＭＡｂｓ １（４）：３３２－８（これは参照により本明細書に組み込まれる）を参照のこと。
従って、一実施形態では、本明細書に記載される抗体は、同じ遺伝子の別のヒトアロタイプに由来するアミノ酸置換を有する。更なる実施形態では、抗体は、ｃ－ドメインをｋｍ１，２からｋｍ３アロタイプに変換するためのカッパ鎖のＬ１９１Ｖ（ＩＭＧＴ Ｌ１０１Ｖ）置換を有する。
多重特異性抗体
本発明の抗体は多重特異性である。それらは二重特異性多重特異性であり得る。多重特異性抗体は、１つの標的ポリペプチドの異なるエピトープに特異的であり得るか、または２種以上の標的ポリペプチドに特異的であり得る。従って、一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、Ｖδ１に対する第１の結合特異性及びＥＧＦＲに対する第２の結合特異性を含む。
本発明の抗体は多重特異性である。それらは二重特異性多重特異性であり得る。多重特異性抗体は、１つの標的ポリペプチドの異なるエピトープに特異的であり得るか、または２種以上の標的ポリペプチドに特異的であり得る。従って、一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、Ｖδ１に対する第１の結合特異性及びＥＧＦＲに対する第２の結合特異性を含む。
特に、本発明は、ＴＣＲδ可変部１（Ｖδ１）に対する抗原結合部位及びＥＧＦＲに対する抗原結合部位を含む、複数の抗原結合部位を含む新しいクラスの高親和性抗体（「多重特異性抗体」）を提供する。
本発明の多重特異性抗体は、「ｍＡｂ２抗体」または「ｍＡｂ二乗抗体」として知られるフォーマットであり、ＣＨ３ドメインに抗原結合ループを含むように工学操作されたＦｃ領域を含む抗体である。この改変されたＦｃ領域は「Ｆｃａｂ」と呼ばれる。ｍＡｂ２抗体は、抗原結合部位をもたらすＶＨ－ＶＬドメイン対を含むＦａｂ領域を更に含む。本発明のｍＡｂ２分子は、ＥＧＦＲ結合Ｆｃａｂ及びｖδ１結合Ｆａｂを含む。
本発明のＴＣＥは、従来技術のＴＣＥに勝る幾つかの利点を提供する。特に、本ＴＣＥは、全く新規かつ独特のメカニズムによりＴ細胞受容体複合体を標的とすることにより、従来技術のＴＣＥに関連する多数の課題を克服し得る。実際、ＴＲＤＶ１ドメイン上のエピトープに結合することによってのみＴ細胞受容体複合体を特異的に標的とする（及び活性化する）ことにより、以下が含まれる多数の利点が実現される。
●全てのＴ細胞ではなくＴ細胞のサブセットのみと会合する（例えば、がんにおけるＴ－ｒｅｇとの会合は望ましくない場合がある）。
●主に「組織常在性」であり、その存在が、多くの場合、がん／腫瘍において予後良好と正に相関する、Ｔ細胞のサブセット（ＴＲＤＶ１＋Ｔ細胞）のみと会合する。
●ＴＲＤＶ１との会合によりＴ細胞受容体複合体を活性化し、これにより、より高い選択可能性をもたらす（例えば、本発明の抗体におけるようなこの結合ドメインの親和性を増加させる）。例えば、ＣＤ３ではなく、ＴＲＤＶ１ドメインのみを介してＴ細胞受容体複合体と会合する組換えＴＣＥを開発することにより、親和性の増加がより好ましい機能性をもたらし得る。例えば、高親和性ＴＲＤＶ１結合性ＴＣＥは、Ｔ細胞を活性化し得るが、疲弊させず、及び／または
●上記新規手段により、かつ組換えＴＲＤＶ１結合ドメインを介してＴＣＥ複合体と会合することにより、有害効果の低減がもたらされ得るため、当該ＴＣＥ部分におけるＦｃ機能性を減弱させる必要性が低減され得る。一般的に、減弱されていないＦｃ機能を有するＴＣＥは、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）作用を誘発し、これにより、抗体により認識されるγδＴ細胞集団を枯渇させると予想される。しかし、繰り返しになるが、毒性／安全性の複雑さを回避するためにかかる機能を減弱することにより、例えば、ＣＤ１６＋もしくはＣＤ３２＋もしくはＣＤ６４＋免疫細胞を関与させることにより、または二重特異性の半減期を低減することによって（例えば、ＢＩＴＥなどのより小さな二重特異性抗体断片を用いる場合）、潜在的に重要な有効性の観点も減弱される可能性がある。ＦｃγＲ及びＴＣＥの相互作用を低減する（例えば、当該相互作用を低減するように設計されたＩｇＧフォーマットを使用する）方法は、Ｆｃにより媒介されるＴＣＥの固定化を低減し、固定化されたＴＣＥとの架橋によるＴＣＲクラスター化を低減すると予想される。上記ＴＣＥ部分におけるＦｃ機能性を減弱する必要性が低減される場合、例えば、ＴＲＤＶ１ ＴＣＥが一方の結合ドメインを介してＴＲＤＶ１＋細胞と会合するのを可能にすること、もう一方の結合アームにより第２の細胞種（例えば、がん細胞）と会合すること、及び機能的Ｆｃドメインを介してＣＤ１６＋免疫細胞またはＣＤ３２＋免疫細胞またはＣＤ６４＋免疫細胞などの他のエフェクター細胞と会合することにより、更なる選択可能性がもたらされ得る。
●ｖδ１＋Ｔ細胞を枯渇させることなくｖδ１ ＴＣＲを活性化する。従って、本明細書に記載される多重特異性抗体は、ｖδ１Ｔ細胞の望ましくない枯渇を伴わずに、ＣＤ３／γδＴＣＲ複合体と会合し得、それを活性化し得、その下方調節及び表面発現の喪失をもたらし得る（図２９を参照のこと）。これにより、血液、組織、及び腫瘍常在性Ｖδ１＋Ｔ細胞の活性化を伴うメカニズムにより疾患または障害を処置するため、例えば、疾患または障害の少なくとも１つの兆候または症状を改善するための薬剤として本明細書に記載される多重特異性抗体を用いることが可能になる。
●全てのＴ細胞ではなくＴ細胞のサブセットのみと会合する（例えば、がんにおけるＴ－ｒｅｇとの会合は望ましくない場合がある）。
●主に「組織常在性」であり、その存在が、多くの場合、がん／腫瘍において予後良好と正に相関する、Ｔ細胞のサブセット（ＴＲＤＶ１＋Ｔ細胞）のみと会合する。
●ＴＲＤＶ１との会合によりＴ細胞受容体複合体を活性化し、これにより、より高い選択可能性をもたらす（例えば、本発明の抗体におけるようなこの結合ドメインの親和性を増加させる）。例えば、ＣＤ３ではなく、ＴＲＤＶ１ドメインのみを介してＴ細胞受容体複合体と会合する組換えＴＣＥを開発することにより、親和性の増加がより好ましい機能性をもたらし得る。例えば、高親和性ＴＲＤＶ１結合性ＴＣＥは、Ｔ細胞を活性化し得るが、疲弊させず、及び／または
●上記新規手段により、かつ組換えＴＲＤＶ１結合ドメインを介してＴＣＥ複合体と会合することにより、有害効果の低減がもたらされ得るため、当該ＴＣＥ部分におけるＦｃ機能性を減弱させる必要性が低減され得る。一般的に、減弱されていないＦｃ機能を有するＴＣＥは、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）作用を誘発し、これにより、抗体により認識されるγδＴ細胞集団を枯渇させると予想される。しかし、繰り返しになるが、毒性／安全性の複雑さを回避するためにかかる機能を減弱することにより、例えば、ＣＤ１６＋もしくはＣＤ３２＋もしくはＣＤ６４＋免疫細胞を関与させることにより、または二重特異性の半減期を低減することによって（例えば、ＢＩＴＥなどのより小さな二重特異性抗体断片を用いる場合）、潜在的に重要な有効性の観点も減弱される可能性がある。ＦｃγＲ及びＴＣＥの相互作用を低減する（例えば、当該相互作用を低減するように設計されたＩｇＧフォーマットを使用する）方法は、Ｆｃにより媒介されるＴＣＥの固定化を低減し、固定化されたＴＣＥとの架橋によるＴＣＲクラスター化を低減すると予想される。上記ＴＣＥ部分におけるＦｃ機能性を減弱する必要性が低減される場合、例えば、ＴＲＤＶ１ ＴＣＥが一方の結合ドメインを介してＴＲＤＶ１＋細胞と会合するのを可能にすること、もう一方の結合アームにより第２の細胞種（例えば、がん細胞）と会合すること、及び機能的Ｆｃドメインを介してＣＤ１６＋免疫細胞またはＣＤ３２＋免疫細胞またはＣＤ６４＋免疫細胞などの他のエフェクター細胞と会合することにより、更なる選択可能性がもたらされ得る。
●ｖδ１＋Ｔ細胞を枯渇させることなくｖδ１ ＴＣＲを活性化する。従って、本明細書に記載される多重特異性抗体は、ｖδ１Ｔ細胞の望ましくない枯渇を伴わずに、ＣＤ３／γδＴＣＲ複合体と会合し得、それを活性化し得、その下方調節及び表面発現の喪失をもたらし得る（図２９を参照のこと）。これにより、血液、組織、及び腫瘍常在性Ｖδ１＋Ｔ細胞の活性化を伴うメカニズムにより疾患または障害を処置するため、例えば、疾患または障害の少なくとも１つの兆候または症状を改善するための薬剤として本明細書に記載される多重特異性抗体を用いることが可能になる。
そこから、本発明者らは、本明細書に記載される発見により、新規クラスの組換えＴＣＥを作製した。具体的には、本発明の発明者らは、上記Ｔ細胞受容体シグナル伝達複合体における他のドメインではなくＴＲＤＶ１ドメインを介してＴ細胞受容体と会合する新規クラスのＴＣＥを発見した。より具体的には、本発明の発明者らは、ＴＲＤＶ１上の活性化エピトープを介してこの複合体と会合し、以前に報告されたＴ細胞受容体複合体との高親和性の会合に関連した有害効果の一部を潜在的にもたらすことなく、より高い親和性で結合し得る新規クラスのＴＣＥを発見した。更に、この新規クラスのＴＣＥは、野生型Ｆｃの機能性も許容し得る様式で会合し得、これにより、更なる有効性の可能性ももたらされる。
本発明の多重特異性抗体は、対応する単一特異性抗体と比較して改善した特性も示し得る。例えば、本発明の多重特異性抗体は、多重特異性抗体の構成部分と同じ抗原結合ドメインを有する単一特異性抗体と比較して改善した特性も示し得る。幾つかの実施形態では、例えば、組換え多重特異性抗体は、第２のエピトープを発現する病変細胞に対する、対応量の上記第１の単一特異性抗体により付与される細胞傷害性と比較して増加したγδＴ細胞媒介性細胞傷害性を付与する。本発明の多重特異性抗体は、依然として健常細胞を温存しながら、病変細胞に対する改善した細胞傷害性も示し得る。
幾つかの実施形態では、多重特異性抗体は、組換え宿主細胞から発現される組換え核酸のオープンリーディングフレームまたは複数のオープンリーディングフレームによりコードされるヒト組換え抗体である。幾つかの実施形態では、多重特異性抗体は、Ｂ細胞融合ハイブリドーマ技術により得られたげっ歯類抗体または他の非ヒト抗体ではない。幾つかの実施形態では、多重特異性抗体は、げっ歯類由来のハイブリドーマに見出される配列などの、非ヒト動物種でのみ見出される非ヒトＩｇＧ定常ドメイン配列を含まない。
好ましい実施形態では、本発明の多重特異性抗体（好適には二重特異性抗体）は、ＣＤ３と特異的に結合しない（または直接相互作用しない）。
本明細書における、細胞「上」に存在する抗原への言及は、細胞膜上で発現されるか、またはかかる細胞の細胞膜（の細胞外側）と会合する抗原を指す。
第２の標的エピトープはＥＧＦＲである。ＥＧＦＲ（上皮成長因子受容体）は、がん関連抗原であり、ＥｒｂＢサブファミリーの受容体チロシンキナーゼの一例である。ＥＧＦＲは複数の臓器で発現し、上皮細胞及び上皮由来の腫瘍の挙動を司るシグナル伝達の開始において重要な役割を果たす。ＥＧＦＲにより媒介されるシグナル伝達は、多様な細胞経路を調節することにより、細胞の増殖、移動、生存、及び転移の制御にも関与している。他の受容体型チロシンキナーゼと同様に、ＥＧＦＲ活性に影響を及ぼすか、またはＥＧＦＲ上方調節を引き起こす変異は、多数のがんに関連している。実際、ＥＧＦＲの遺伝子変化は、固形腫瘍の最大３０％で観察され、概して予後不良と関連している。細胞外ドメインへのＥＧＦの結合を阻害すること、または細胞内チロシンキナーゼ活性を阻害することによるＥＧＦＲシグナル伝達の破壊により、ＥＧＦＲ発現腫瘍の増殖が制限され得る。従って、ＥＧＦＲ阻害薬は、抗がん剤になり得る。実際、ある特定の腫瘍細胞は、ＥＧＦＲシグナル伝達に依存しており、従って、「がん遺伝子中毒」になっており、このため、この受容体は治療のための魅力的な標的となる。ＥＧＦＲのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体は、当該技術分野において周知である。例えば、セツキシマブは、ＥＧＦＲのエピトープに特異的に結合するモノクローナル抗体である。
健常細胞の温存
γδＴ細胞が抗原を認識し、健常細胞と病変細胞とを区別するメカニズムは完全には理解されていないが（Ｍｉｎｇ Ｈｅｎｇ ａｎｄ Ｍａｄａｌｅｎｅ Ｈｅｎｇ，Ａｎｔｉｇｅｎ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｂｙ γδ Ｔ－Ｃｅｌｌｓ．Ｍａｄａｍｅ Ｃｕｒｉｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｄａｔａｂａｓｅ［Ｉｎｔｅｒｎｅｔ］，Ａｕｓｔｉｎ（ＴＸ）：Ｌａｎｄｅｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ；２０００－２０１３）、γδＴ細胞が健常細胞と病変細胞とを区別し、顕著な病変細胞への多種細胞傷害性（表８の細胞種の非限定的な例を参照のこと）を示すことができるという事実は、これらを活用して、改善された治療域を有する改善された薬剤を提供できることを意味する。更に、かかるγδＴ細胞の能力を活用することにより、特定のがん抗原、炎症性抗原、もしくは病原体抗原が未知であるか、または特定の患者の健常細胞上にも存在する場合であっても、γδＴ細胞を病変細胞と共局在化させることにより、健常細胞を温存しながら疾患を処置する機会が提供される。
γδＴ細胞が抗原を認識し、健常細胞と病変細胞とを区別するメカニズムは完全には理解されていないが（Ｍｉｎｇ Ｈｅｎｇ ａｎｄ Ｍａｄａｌｅｎｅ Ｈｅｎｇ，Ａｎｔｉｇｅｎ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｂｙ γδ Ｔ－Ｃｅｌｌｓ．Ｍａｄａｍｅ Ｃｕｒｉｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｄａｔａｂａｓｅ［Ｉｎｔｅｒｎｅｔ］，Ａｕｓｔｉｎ（ＴＸ）：Ｌａｎｄｅｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ；２０００－２０１３）、γδＴ細胞が健常細胞と病変細胞とを区別し、顕著な病変細胞への多種細胞傷害性（表８の細胞種の非限定的な例を参照のこと）を示すことができるという事実は、これらを活用して、改善された治療域を有する改善された薬剤を提供できることを意味する。更に、かかるγδＴ細胞の能力を活用することにより、特定のがん抗原、炎症性抗原、もしくは病原体抗原が未知であるか、または特定の患者の健常細胞上にも存在する場合であっても、γδＴ細胞を病変細胞と共局在化させることにより、健常細胞を温存しながら疾患を処置する機会が提供される。
１つの非限定的な例として、ＣＤ３ｘＥＧＦＲ多重特異性薬に関する最近の研究は、現在または従来のアプローチの課題を強調している。具体的には、かかる従来のアプローチの使用は、あまり好ましくない毒性プロファイルをもたらし得る。その理由は、他の多数の腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）と同様に、ＥＧＦＲ抗原が乳癌、大腸癌、及び頭頸部癌などのがんで発現されるだけでなく、上皮細胞などの健常な組織でも発現されるからである。よって、全てのＴ細胞と会合してＥＧＦＲ陽性細胞と共局在化させるＣＤ３ｘＥＧＦＲ薬剤の使用により、あまり好ましくない治療域または治療指数がもたらされ得る。その理由は、かかる薬剤が全てのＴ細胞と会合し、循環血液中のそれらのうちの大部分がαβＴ細胞（ＣＤ４＋陽性、ＣＤ８＋陽性など）であるからである。そして、αβＴ細胞がＥＧＦＲ陽性細胞と共局在化すると、かかる従来のαβＴ細胞は、ＥＧＦＲ＋健常細胞を温存する能力の制限、及び罹患したＥＧＦＲ＋病変細胞のみを殺傷する能力の制限を示す。これらのハードルは、カニクイザル（雄のみ）における毒性研究の例でさらに強調されている。Ｌｕｔｔｅｒｂｕｅｓｅ ｅｔ ａｌ ２０１０（ｄｏｉ：１０．１０７３／ｐｎａｓ．１０００９７６１０７）による研究では、小さなＢＩＴＥ（登録商標）フォーマットのＣＤ３ｘＥＧＦＲ二重特異性薬が用いられた。そして、これらの分子は、より大きな抗体ベースの分子（＞７０Ｋｄａ）と比較して低減した半減期／全身曝露プロファイルを示すため、そのような部分は比較的忍容性良好であると予想され得る。しかし、３１μｇ／ｋｇ／日及び１５４μｇ／ｋｇ／日の連続静脈内注入による適度な「比較的高い」用量でも、注入開始後５６時間以内に重篤な毒性の兆候が観察された。そのため、福祉上の理由から動物の殺処分が行われた。投与を受けた動物の組織病理学的分析では、肝臓及び腎臓の毒性の兆候が示されたが、これは、これらの臓器で低レベルのＥＧＦＲを発現する細胞のリダイレクトされた溶解の結果であり得る。さらに、両方の高用量群の動物が、ＥＧＦＲ陽性細胞に遭遇したＴ細胞によって放出されると考えられる、血清中の炎症性サイトカイン（すなわち、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－６、ＩＬ－５、及びＩＬ－２）レベルの上昇を示した。リンパ球浸潤及び細胞死を含む組織病理学的変化は、ＥＧＦＲを発現することが知られている全ての組織、すなわち、唾液腺、肝臓、胃、小腸、結腸、直腸、腎臓、副腎、尿管、膀胱、前立腺、及び精巣上体で認められた。
よって、かかる従来のアプローチを用いる代わりに、本明細書で提供されるのは、少なくとも１つの第１の結合ドメインが、Ｖδ１＋細胞に特異的に結合することができ、少なくとも１つの第２の結合ドメインが、病変組織及び細胞上に存在する標的であるＥＧＦＲに特異的に結合することができる多重特異性抗体である。かかる多重特異性抗体をこのように使用することにより、第２の標的を発現する病変細胞へのＶδ１＋細胞の共局在化がもたらされ得る。更に、かかる疾患関連標的が、多くの場合、１００％疾患特異的ではないことを考慮すると、Ｖδ１＋エフェクター細胞を特異的に標的とし、共局在化させるこのアプローチは、従来のアプローチよりも好ましい可能性がある。その理由は、Ｖδ１＋エフェクター細胞が病変細胞または感染細胞におけるストレスのパターンを認識することができるため、同様に同じ標的を発現する健常細胞を温存しながら病変細胞を選択的に殺傷することができる可能性があるためである。
従って、本明細書において提供される多重特異性抗体は、ｖδ１細胞のＴＣＲに会合することができるが、腫瘍細胞も存在しない限り完全な活性化は起こらない。本明細書において提供される抗体がＴＣＲに完全に会合すると部分的な下方調節が引き起こされ、本明細書において提供される抗体が結合したｖδ１細胞は、腫瘍細胞などのストレスを受けた細胞の存在下でのみ完全に活性化され、細胞傷害性になると考えられる。これは、例えば実施例１８及び図４０に示されている。これは、本明細書に示されるアプローチの別の重要な安全上の利点となる。なぜなら、オフターゲット細胞傷害性が低減され、ｖδ１細胞を活性化する多重特異性抗体の効力の全てが腫瘍細胞（更にはＥＧＦＲを発現する健常細胞）の存在下でのみ誘発され、つまり健常細胞が温存されるからである。
γδＴ細胞が腫瘍細胞のストレスシグナルを検出することができるメカニズムの１つは、それらが発現するＮＣＲ（自然細胞傷害性受容体）に起因すると考えられている。ＮＣＲは、腫瘍細胞上のＮＣＲリガンドに会合することができる。従って、腫瘍細胞を検出して、完全な活性化及び細胞傷害性を有効にすることができるＮＣＲによるものが含まれる、ＴＣＲ刺激を介してγδＴ細胞が活性化される活性化の二重メカニズムが用いられ得る。
これは、例えば、ＣＤ３を介したαβＴ細胞の刺激とは対照的であり、αβＴ細胞の刺激は、全ての刺激がＴＣＲを介する。従って、そのような細胞は、例えばＮＣＲを介した、抗原提示に依存しない腫瘍細胞の感知などのメカニズムを有しないため、健常細胞または形質転換細胞の区別がほぼ不可能である。従って、ＣＤ３抗体がＦｃ有効型であれば、それらは他の免疫細胞を誘引し、これがサイトカインストーム、免疫細胞の消耗及び更には過剰活性化といった予想外の望ましい事象のカスケードを誘起し、例えば、ＮＫ細胞によるＴ細胞の殺傷などをもたらすことができる。本件のアプローチでは、γδＴ細胞がそれらのＮＣＲ感知メカニズムを介するものを含めて健常細胞と腫瘍細胞とを区別することができ、従ってこの病変細胞特異性のためにがん細胞またはウイルス感染細胞などのストレスを受けた細胞を選択的に殺傷することができるため、本明細書で提示される多重特異性抗体によるγδＴ細胞の刺激は、このような懸念を生じない。
第２の標的エピトープは、異なるＴ細胞、Ｂ細胞、腫瘍細胞、自己免疫組織細胞、またはウイルス感染細胞を含む、異なる細胞上に存在し得る。
様々な抗体由来の多重特異性フォーマットが既報であり、典型的には成分結合部分から経験的に構築される。典型的には、本明細書に記載されるような多重特異性または複数標的結合フォーマットが構築されたら、その性能が上述のモデル系（細胞殺傷、細胞増殖、健常細胞温存／病変細胞特異的モデルなど）のうちの１つ以上で測定され得る。これらはまた、任意により、上記成分部分及び他の比較分子と比較される。
このアプローチによって限定されるものではないが、概して、本発明の多重特異性抗体として抗体を構築する際、各標的（第１及び第２）に対する結合ドメインモジュールは、完全長抗体へと組み合わされるＦａｂ及びＦｃａｂ結合モジュールから構築される。多重特異性抗体ならびに所望のＦａｂ及びＦｃａｂ結合ドメインの修飾及び生成は、当技術分野で周知の定型的な分子生物学の方法論によって行うことができる。非限定的な例として、ＰＣＲ増幅の補助の有無を問わず、オリゴヌクレオチドに基づくアプローチを用いて、所望の二重特異性抗体の所望のＣＨ３ドメイン及び／または他の要素をコードする合成ＤＮＡ配列を構築することができる。任意により、これらを次に、出発抗体重鎖（本明細書に記載のものなど）をコードするオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）に、出発ＣＨ３配列を所望の修飾ＣＨ３配列で置換するなどの制限酵素ベースのサブクローニング方法論を介して正確にクローニングすることができる。逆に、ＰＣＲ増幅の補助の有無を問わず、オリゴヌクレオチドベースのアプローチを用いて、所望のＶＨ領域（本明細書に記載のものなど）をコードするように設計されたＤＮＡ ＯＲＦ要素を生成し、次にこれを、所望のＣＨ３ドメインコード領域を既に発現している既存の重鎖ＯＲＦカセットにサブクローニングするか、または入れ替えることができる。あるいは、ＯＲＦをコードするより大きな要素、または実に抗体重鎖全体を、オリゴヌクレオチド及び／またはＰＣＲ法を用いて出発インシリコ配列からデノボ構築して、本明細書に記載されるような多重特異性抗体のＶＨ結合アーム及び修飾されたＣＨ３ドメインを含む好ましい完全長重鎖をコードする最終ＯＲＦ全体を生成することもできる。次いで、これを、本明細書に記載のものなどの好ましい同族κ軽鎖と組み合わせて発現、回収、及び精製することで、ヒトＶδ１ ＴＣＲのＴＲＤＶ１ドメインに結合し、かつヒトＥＧＦＲに結合する修飾されたＣＨ３結合ドメインに作動可能に連結された、最終的な精製された多重特異性抗体を生成することができる。
注目すべきことに、本明細書に記載されるようなγδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つ（第１）の結合ドメインを含む多重特異性抗体は、当該第１の結合ドメインが、ＥＧＦＲに対する少なくとも１つの第２の結合ドメインを含む多重特異性抗体フォーマットでフォーマットされる場合に更に増強される。
多重特異性抗体の非限定的な例：
アプローチの適用可能性を概説するために、多重特異性抗体の一連の非限定的な例を構築した。これらの多重特異性抗体は、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つ（第１）の結合ドメイン、及びＥＧＦＲを標的とする少なくとも１つ（第２）の結合ドメインを含んでいた。
アプローチの適用可能性を概説するために、多重特異性抗体の一連の非限定的な例を構築した。これらの多重特異性抗体は、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つ（第１）の結合ドメイン、及びＥＧＦＲを標的とする少なくとも１つ（第２）の結合ドメインを含んでいた。
Ｖδ１－ＥＧＦＲ多重特異性抗体（ＬＥＥ）
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
この態様では、ＥＧＦＲ結合部位は、残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインによって提供され得る。
この態様では、残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成する。
この態様では、ＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインは、以下の突然変異（ＥＵ番号付け）を含み得る。ＡＢループには、Ｔ３５９Ｅ．Ｋ３６０Ｅ．Ｎ３６１Ｇ．Ｑ３６２Ｐの突然変異が存在し得る。ＣＤループには、Ｎ３８４Ｔ．Ｇ３８５Ｙ．Ｑ３８６Ｇの突然変異が存在し得る。ＥＦループには、Ｄ４１３Ｓ．Ｋ４１４Ｙ．Ｓ４１５Ｗ．Ｑ４１８Ｙ．Ｑ４１９Ｋの突然変異が存在し得る。
この態様では、ＣＨ３ドメインのアミノ酸配列は、配列番号５６２と少なくとも９０％同一、または少なくとも９５％同一、または１００％同一であり得る。
この態様では、重鎖定常ドメインは、配列番号３９１または配列番号３９２を含み得る。
この態様では、多重特異性抗体は、配列番号３８９、または配列番号４１４及び配列番号４３２を含み得る。この態様では、多重特異性抗体は、配列番号４００、または配列番号４１４及び配列番号４３６を含み得る。
この態様では、Ｆａｂ領域は、本明細書に記載のＦａｂ領域のいずれであってもよい（例えば、表９を参照のこと）。具体的には、この態様のＦａｂ領域は、それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含み得る。この態様のＦａｂ領域は、配列番号１５を含むＶＨ及び配列番号４０を含むＶＬを含み得る。
この態様の一実施形態では、多重特異性抗体は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含むＦａｂ領域と、配列番号５６２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含むＦｃ領域とを含む。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体は、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の追加のリジン（Ｋ）残基（Ｋ４４７、ＥＵ番号付け）を含み得る。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体において、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の末端グリシン（Ｇ）残基（Ｇ４４６、ＥＵ番号付け）が除去されていてもよい。
本開示は、上記の表の各横列の配列を有する抗体を明示的に含む。例えば、本開示には、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、Ｆａｂ領域が、配列番号５１の配列を含むＶＨＣＤＲ１、配列番号５３の配列を含むＶＨＣＤＲ２、配列番号６８の配列を含むＶＨＣＤＲ３、配列番号７９の配列を含むＶＬＣＤＲ１、配列番号８０の配列を含むＶＬＣＤＲ２、及び配列番号９５の配列を含むＶＬＣＤＲ３を含み、Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含み、ＥＧＦＲ結合部位が、残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）が配列番号５２３を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）が配列番号５１１を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）が配列番号５１２を構成するＣＨ３ドメインによって提供される、多重特異性抗体が含まれる。上記の表の各横列が同様に開示される。このような抗体は、ヒトＩｇＧ１抗体である。従って、ヒトＩｇＧ１抗体は、配列番号５６２の配列を含むＣＨ３ドメインを含み得る。
本開示は、上記の表の各横列の配列を有する抗体を明示的に含む。例えば、本開示には、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、Ｆａｂ領域が、配列番号１５の配列を含むＶＨ領域と、配列番号４０の配列を含むＶＬ領域とを含み、Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含み、ＥＧＦＲ結合部位が、残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）が配列番号５２３を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）が配列番号５１１を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）が配列番号５１２を構成するＣＨ３ドメインによって提供される、多重特異性抗体が含まれる。上記の表の各横列が同様に開示される。このような抗体は、ヒトＩｇＧ１抗体である。従って、ヒトＩｇＧ１抗体は、配列番号５６２の配列を含むＣＨ３ドメインを含み得る。
Ｖδ１－ＥＧＦＲ多重特異性抗体（ＬＥＥ１）
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
この態様では、ＥＧＦＲ結合部位は、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインによって提供され得る。
この態様では、残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＴＫＮＱ（配列番号５１３）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成する。
この態様では、ＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインは、以下の突然変異（ＥＵ番号付け）を含み得る。ＡＢループは野生型（突然変異が存在しない）でもよい。ＣＤループには、Ｎ３８４Ｔ．Ｇ３８５Ｙ．Ｑ３８６Ｇの突然変異が存在し得る。ＥＦループには、Ｄ４１３Ｓ．Ｋ４１４Ｙ．Ｓ４１５Ｗ．Ｑ４１８Ｙ．Ｑ４１９Ｋの突然変異が存在し得る。
この態様では、ＣＨ３ドメインのアミノ酸配列は、配列番号５１０と少なくとも９０％同一、または少なくとも９５％同一、または１００％同一であり得る。
この態様では、重鎖定常ドメインは、配列番号５０８または配列番号５０９を含み得る。
この態様では、多重特異性抗体は、配列番号５０４、または配列番号４１４及び配列番号５０６を含み得る。この態様では、多重特異性抗体は、配列番号５０５、または配列番号４１４及び配列番号５０７を含み得る。
この態様では、Ｆａｂ領域は、本明細書に記載のＦａｂ領域のいずれであってもよい（例えば、表１１を参照のこと）。具体的には、この態様のＦａｂ領域は、それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含み得る。この態様のＦａｂ領域は、配列番号１５を含むＶＨ及び配列番号４０を含むＶＬを含み得る。
この態様の一実施形態では、多重特異性抗体は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含むＦａｂ領域と、配列番号５１０のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含むＦｃ領域とを含む。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体は、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の追加のリジン（Ｋ）残基（Ｋ４４７、ＥＵ番号付け）を含み得る。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体において、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の末端グリシン（Ｇ）残基（Ｇ４４６、ＥＵ番号付け）が除去されていてもよい。
Ｖδ１－ＥＧＦＲ多重特異性抗体（ＬＥＥ２）
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
この態様では、ＥＧＦＲ結合部位は、残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインによって提供され得る。
この態様では、残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＮＧＱＰＥＮＮＹ（配列番号５２５）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成する。
この態様では、ＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインは、以下の突然変異（ＥＵ番号付け）を含み得る。ＡＢループには、Ｔ３５９Ｅ．Ｋ３６０Ｅ．Ｎ３６１Ｇ．Ｑ３６２Ｐの突然変異が存在し得る。ＣＤループは野生型（突然変異が存在しない）でもよい。ＥＦループには、Ｄ４１３Ｓ．Ｋ４１４Ｙ．Ｓ４１５Ｗ．Ｑ４１８Ｙ．Ｑ４１９Ｋの突然変異が存在し得る。
この態様では、ＣＨ３ドメインのアミノ酸配列は、配列番号５２２と少なくとも９０％同一、または少なくとも９５％同一、または１００％同一であり得る。
この態様では、重鎖定常ドメインは、配列番号５２０または配列番号５２１を含み得る。この態様では、多重特異性抗体は、配列番号５１６、または配列番号４１４及び配列番号５１８を含み得る。この態様では、多重特異性抗体は、配列番号５１７、または配列番号４１４及び配列番号５１９を含み得る。
この態様では、Ｆａｂ領域は、本明細書に記載のＦａｂ領域のいずれであってもよい（例えば、表１３を参照のこと）。具体的には、この態様のＦａｂ領域は、それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含み得る。この態様のＦａｂ領域は、配列番号１５を含むＶＨ及び配列番号４０を含むＶＬを含み得る。
この態様の一実施形態では、多重特異性抗体は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含むＦａｂ領域と、配列番号５２２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含むＦｃ領域とを含む。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体は、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の追加のリジン（Ｋ）残基（Ｋ４４７、ＥＵ番号付け）を含み得る。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体において、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の末端グリシン（Ｇ）残基（Ｇ４４６、ＥＵ番号付け）が除去されていてもよい。
Ｖδ１－ＥＧＦＲ多重特異性抗体（ＬＥＥ３）
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
この態様では、ＥＧＦＲ結合部位は、残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１５（ＥＵ番号付け）がＳＹＷ（配列番号５３３）を構成するＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインによって提供され得る。
この態様では、残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＱＱＧＮＶ（配列番号５３４）を構成するＥＦループを形成する。
この態様では、ＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインは、以下の突然変異（ＥＵ番号付け）を含み得る。ＡＢループには、Ｔ３５９Ｅ．Ｋ３６０Ｅ．Ｎ３６１Ｇ．Ｑ３６２Ｐの突然変異が存在し得る。ＣＤループには、Ｎ３８４Ｔ．Ｇ３８５Ｙ．Ｑ３８６Ｇの突然変異が存在し得る。ＥＦループには、Ｄ４１３Ｓ．Ｋ４１４Ｙ．Ｓ４１５Ｗの突然変異が存在し得る。
この態様では、ＣＨ３ドメインのアミノ酸配列は、配列番号５３２と少なくとも９０％同一、または少なくとも９５％同一、または１００％同一であり得る。
この態様では、重鎖定常ドメインは、配列番号５３０または配列番号５３１を含み得る。
この態様では、多重特異性抗体は、配列番号５２６、または配列番号４１４及び配列番号５２８を含み得る。この態様では、多重特異性抗体は、配列番号５２７、または配列番号４１４及び配列番号５２９を含み得る。
この態様では、Ｆａｂ領域は、本明細書に記載のＦａｂ領域のいずれであってもよい（例えば、表１５を参照のこと）。具体的には、この態様のＦａｂ領域は、それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含み得る。この態様のＦａｂ領域は、配列番号１５を含むＶＨ及び配列番号４０を含むＶＬを含み得る。
この態様の一実施形態では、多重特異性抗体は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含むＦａｂ領域と、配列番号５３２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含むＦｃ領域とを含む。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体は、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の追加のリジン（Ｋ）残基（Ｋ４４７、ＥＵ番号付け）を含み得る。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体において、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の末端グリシン（Ｇ）残基（Ｇ４４６、ＥＵ番号付け）が除去されていてもよい。
Ｖδ１－ＥＧＦＲ多重特異性抗体（ＦＳ１－６７）
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
この態様では、ＥＧＦＲ結合部位は、残基３５８～３６２（ＥＵ番号付け）がＴＤＤＧＰ（配列番号５６０）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインによって提供され得る。
この態様では、残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＴＤＤＧＰ（配列番号５６１）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成する。
この態様では、ＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインは、以下の突然変異（ＥＵ番号付け）を含み得る。ＡＢループには、Ｌ３５８Ｔ．Ｔ３５９Ｄ．Ｋ３６０Ｄ．Ｎ３６１Ｇ．Ｑ３６２Ｐの突然変異が存在し得る。ＣＤループには、Ｎ３８４Ｔ．Ｇ３８５Ｙ．Ｑ３８６Ｇの突然変異が存在し得る。ＥＦループには、Ｄ４１３Ｓ．Ｋ４１４Ｙ．Ｓ４１５Ｗ．Ｑ４１８Ｙ．Ｑ４１９Ｋの突然変異が存在し得る。
この態様では、ＣＨ３ドメインのアミノ酸配列は、配列番号５５９と少なくとも９０％同一、または少なくとも９５％同一、または１００％同一であり得る。
この態様では、重鎖定常ドメインは、配列番号３８５または配列番号３８６を含み得る。
この態様では、多重特異性抗体は、配列番号３８８、または配列番号４１４及び配列番号４３１を含み得る。この態様では、多重特異性抗体は、配列番号３９９、または配列番号４１４及び配列番号４３５を含み得る。
この態様では、Ｆａｂ領域は、本明細書に記載のＦａｂ領域のいずれであってもよい（例えば、表１７を参照のこと）。具体的には、この態様のＦａｂ領域は、それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含み得る。この態様のＦａｂ領域は、配列番号１５を含むＶＨ及び配列番号４０を含むＶＬを含み得る。
この態様の一実施形態では、多重特異性抗体は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含むＦａｂ領域と、配列番号５５９のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含むＦｃ領域とを含む。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体は、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の追加のリジン（Ｋ）残基（Ｋ４４７、ＥＵ番号付け）を含み得る。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体において、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の末端グリシン（Ｇ）残基（Ｇ４４６、ＥＵ番号付け）が除去されていてもよい。
一実施形態では、本発明の多重特異性抗体はＡＤＴ１－４ｘＦＳ１－６７ではない。
Ｖδ１－ＥＧＦＲ多重特異性抗体（ＦＳ１－６５）
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
この態様では、ＥＧＦＲ結合部位は、残基３５８～３６１、３６１．１、及び３６２（ＥＵ番号付け）がＬＤＥＧＧＰ（配列番号５４２）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＶＫ（配列番号５４３）を構成するＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインによって提供され得る。ここで、残基３６１．１は、残基３６１と３６２との間の追加の残基を示す（ＥＵ番号付け）。
この態様では、残基３６１．１を含む残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＤＥＧＧＰ（配列番号５４４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＶＫＧＮＶ（配列番号５４５）を構成するＥＦループを形成する。ここで、残基３６１．１は、残基３６１と３６２との間の追加の残基を示す（ＥＵ番号付け）。
この態様では、ＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインは、以下の突然変異（ＥＵ番号付け）を含み得る。ＡＢループには、Ｔ３５９Ｄ．Ｋ３６０Ｅ．Ｎ３６１Ｇ．３６１－１Ｇ．Ｑ３６２Ｐの突然変異が存在し得る。ＣＤループには、Ｎ３８４Ｋ．Ｇ３８５Ｆ．Ｑ３８６Ｇの突然変異が存在し得る。ＥＦループには、Ｄ４１３Ｓ．Ｋ４１４Ｙ．Ｓ４１５Ｗ．Ｑ４１８Ｖ．Ｑ４１９Ｋの突然変異が存在し得る。ここで、残基３６１－１は、残基３６１と３６２との間の追加の残基を示す（ＥＵ番号付け）。
この態様では、ＣＨ３ドメインのアミノ酸配列は、配列番号５４１と少なくとも９０％同一、または少なくとも９５％同一、または１００％同一であり得る。
この態様では、重鎖定常ドメインは、配列番号５３９または配列番号５４０を含み得る。
この態様では、多重特異性抗体は、配列番号５３５、または配列番号４１４及び配列番号５３７を含み得る。この態様では、多重特異性抗体は、配列番号５３６、または配列番号４１４及び配列番号５３８を含み得る。
この態様では、Ｆａｂ領域は、本明細書に記載のＦａｂ領域のいずれであってもよい（例えば、表１９を参照のこと）。具体的には、この態様のＦａｂ領域は、それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含み得る。この態様のＦａｂ領域は、配列番号１５を含むＶＨ及び配列番号４０を含むＶＬを含み得る。
この態様の一実施形態では、多重特異性抗体は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含むＦａｂ領域と、配列番号５４１のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含むＦｃ領域とを含む。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体は、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の追加のリジン（Ｋ）残基（Ｋ４４７、ＥＵ番号付け）を含み得る。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体において、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の末端グリシン（Ｇ）残基（Ｇ４４６、ＥＵ番号付け）が除去されていてもよい。
Ｖδ１－ＥＧＦＲ多重特異性抗体（７４７）
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
本発明のこの態様では、Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、当該Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、当該Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、当該多重特異性抗体が提供される。Ｆａｂ領域は、ＶＨ及び同族ＶＬドメインを具体的に含む。Ｆｃ領域は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）、具体的にはＣＨ３ドメイン内の結合ドメインを含む。
この態様では、ＥＧＦＲ結合部位は、残基３５８～３６２（ＥＵ番号付け）がＴＥＳＧＰ（配列番号５５３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＫＦＧ（配列番号５５４）を構成し、残基４１３～４２１（ＥＵ番号付け）がＳＮＬＲＷＴＫＧＨ（配列番号５５５）を構成し、残基３７８がバリンであるＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインによって提供され得る。
この態様では、残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＴＥＳＧＰ（配列番号５５６）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＫＦＧＰＥＮＮＹ（配列番号５５７）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＮＬＲＷＴＫＧＨＶ（配列番号５５８）を構成するＥＦループを形成し、残基３７８がバリンである。
この態様では、ＩｇＧ１ ＣＨ３ドメインは、以下の突然変異（ＥＵ番号付け）を含み得る。ＡＢループには、Ｌ３５８Ｔ．Ｔ３５９Ｅ．Ｋ３６０Ｓ．Ｎ３６１Ｇ．Ｑ３６２Ｐの突然変異が存在し得る。ＣＤループには、Ｎ３８４Ｋ．Ｇ３８５Ｆ．Ｑ３８６Ｇの突然変異が存在し得る。ＥＦループには、Ｄ４１３Ｓ．Ｋ４１４Ｎ．Ｓ４１５Ｌ．Ｑ４１８Ｔ．Ｑ４１９Ｋ．Ｎ４２１Ｈの突然変異が存在し得る。Ａ３７８Ｖの突然変異も存在する。
この態様では、ＣＨ３ドメインのアミノ酸配列は、配列番号５５２と少なくとも９０％同一、または少なくとも９５％同一、または１００％同一であり得る。
この態様では、重鎖定常ドメインは、配列番号５５０または配列番号５５１を含み得る。
この態様では、多重特異性抗体は、配列番号５４６、または配列番号４１４及び配列番号５４８を含み得る。この態様では、多重特異性抗体は、配列番号５４７、または配列番号４１４及び配列番号５４９を含み得る。
この態様では、Ｆａｂ領域は、本明細書に記載のＦａｂ領域のいずれであってもよい（例えば、表２１を参照のこと）。具体的には、この態様のＦａｂ領域は、それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含み得る。この態様のＦａｂ領域は、配列番号１５を含むＶＨ及び配列番号４０を含むＶＬを含み得る。
この態様の一実施形態では、多重特異性抗体は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含むＦａｂ領域と、配列番号５５２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含むＦｃ領域とを含む。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体は、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の追加のリジン（Ｋ）残基（Ｋ４４７、ＥＵ番号付け）を含み得る。幾つかの実施形態では、本発明の多重特異性抗体において、ＣＨ３ドメイン配列のすぐＣ末端側の末端グリシン（Ｇ）残基（Ｇ４４６、ＥＵ番号付け）が除去されていてもよい。
注目すべきことに、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つの（第１の）結合ドメイン、及びＥＧＦＲを標的とする少なくとも１つの（第２の）結合ドメインを含む上記例の全てにおいて、対照及び構成部分と比べて機能の増強が観察された（本明細書における実施例２、及び６～１０を参照のこと）。
まとめると、これらの非限定的な例は、本明細書に記載される多重特異性抗体またはその抗原結合断片の柔軟性を強調している。これらの非限定的な例は、生殖細胞系列Ｖδ１鎖（例えば、配列番号２７２のアミノ酸１～９０）を標的とする抗体またはその断片が、多重特異性抗体を形成させるためのＥＧＦＲ結合ドメインと組み合わされることにより更に改良され得る、多重特異性抗体アプローチの概略を示す。
一実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖（第１の標的）を標的とする多重特異性抗体結合ドメインは、（ｉ）各々が重鎖（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３）及び同族の軽鎖パートナー（ＶＬ－ＣＬ）を含む１つもしくは２つ以上の抗体結合ドメイン、及び／または（ｉｉ）各々が重鎖可変ドメイン（ＶＨ、またはＶＨ－ＣＨ１）及び同族の軽鎖可変ドメインパートナー（ＶＬ、またはＶＬ－ＶＣ）を含む１つもしくは２つ以上の抗体結合ドメイン、及び／または（ｉｉｉ）各々がＣＤＲを含む抗体断片を含む１つもしくは２つ以上の抗体結合ドメインを含み得る。
一実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つの第１の抗体由来の結合ドメインを含み、これがＥＧＦＲを標的とする少なくとも１つの第２の抗体結合ドメインに作動可能に連結されている多重特異性抗体が提供される。任意により、上記結合ドメインは、少なくとも１つ以上のＶＨ及び同族のＶＬ結合ドメイン、または１つ以上のＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３及び同族のＶＬ－ＣＬ結合ドメイン、または１つ以上の抗体断片の結合ドメインを含む。γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つの第１の抗体由来結合ドメインを含む上記多重特異性抗体は、ＥＧＦ受容体に結合し、ＥＵ番号付けに従って以下の重鎖修飾のうちの１つ以上を含む、第２の結合ドメインに作動可能に連結されている：Ｌ３５８Ｔ及び／または（Ｔ３５９ＤもしくはＴ３５９Ｅ）及び／または（Ｋ３６０ＤもしくはＫ３６０Ｅ［「ＬＥＥ」］もしくはＫ３６０Ｓ）及び／またはＮ３６１Ｇ及び／またはＱ３６２Ｐ及び／または３６１．１Ｇ（ここで、３６１．１は、３６１と３６２との間の追加の残基である）及び／またはＡ３７８Ｖ及び／または（Ｎ３８４ＴもしくはＮ３８４Ｋ）及び／または（Ｇ３８５ＹもしくはＧ３８５Ｆ）及び／またはＱ３８６Ｇ及び／またはＤ４１３Ｓ及び／または（Ｋ４１４ＹもしくはＫ４１４Ｎ）及び／または（Ｓ４１５ＷもしくはＳ４１５Ｌ）及び／または（Ｑ４１８ＹもしくはＱ４１８ＴもしくはＱ４１８Ｖ）及び／またはＱ４１９Ｋ及び／またはＮ４２１Ｈ。
このような重鎖修飾は有利であることが分かっている。例えば、ＥＧＦＲに結合する第２の結合ドメインに作動可能に連結されたγδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つの第１の抗体由来結合ドメインを含み、野生型Ｌ３５８ならびにＴ３５９Ｅ及びＫ３６０Ｅ重鎖修飾を含む多重特異性抗体は、多数の利点を有する。第一に、このような重鎖修飾は、未修飾の重鎖配列に存在する二重異性化のリスクをなくす。異性化モチーフは、抗体の親和性、効力、安定性、及び均一性を低減させる可能性のある欠点であり、製品開発または製造における問題を引き起こす可能性がある。さらに、Ｔ３５８Ｌの変化は、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７などの分子のＡＢループ内のトレオニンをロイシンに戻す。ロイシンはその位置で標準的な野生型ヒト配列に対応し、より保存されたＡＢ修飾ループ配列をもたらす。追加の驚くべき所見は、ＥＧＦ受容体に結合する第２の結合ドメインに作動可能に連結されたγδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つの第１の抗体由来結合ドメインを含み、かつＬ３５８ならびにＴ３５９Ｅ及びＫ３６０Ｅ重鎖修飾を含む多重特異性抗体が、Ｔ３５８ならびにＤ３５９及びＤ３６０を含むことを除いては同一である関連性の高い抗体と比べて一過性のＣＨＯ細胞における発現の改善をもたらすということである。この改善された発現プロファイルは、Ｌ３５８ならびにＥ３５９及びＥ３６０（配列番号３８９に組み込まれたものなど）を有する重鎖ＣＨ３ドメインを含む本発明のＣＨ３修飾多重特異性抗体のＣＨＯ細胞からの採集時力価が、配列番号３８８に組み込まれたものなどのＴ３５８、Ｄ３５９及びＤ３６０重鎖修飾を含むことを除いては同一の抗体と比較して大幅に増加し得ることを意味する。異性化リスクをなくすことで発現が改善するとは予想されないため、これは驚くべきことである。図３４Ａを参照されたい。いずれの実施形態においても、本発明の多重特異性抗体は、３５９位、３６０位、及び３６１位（ＥＵ番号付け）にわたる追加のＤＤ及びＤＧの高リスク異性化デュアルアミノ酸モチーフを含まなくてもよい。むしろ、より具体的には、任意の実施形態において、本発明の多重特異性抗体は、Ｔ３５９Ｅ、Ｋ３６０Ｅ、Ｎ３６１Ｇの修飾を含む修飾されたＡＢループを含み得る。より具体的には、任意の実施形態において、本発明の多重特異性抗体は、３５９位及び３６０位に二重負電荷を含むＣＨ３修飾ＡＢループを含むことができ、この二重負電荷はアスパラギン酸（Ｄ、Ａｓｐ）の代わりにグルタミン酸（Ｅ、Ｇｌｕ）によって提供される。
γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つの第１の抗体由来結合ドメインを含む多重特異性抗体は、配列番号３８５もしくは配列番号３８６もしくは配列番号３９１もしくは配列番号３９２もしくは配列番号５２０もしくは配列番号５２１もしくは配列番号５３０もしくは配列番号５３１、もしくは配列番号５３９もしくは配列番号５４０、もしくは配列番号５０８もしくは配列番号５０９、もしくは配列番号５５０もしくは配列番号５５１、またはそれらの機能的に同等な結合性バリアントを含み、かつＥＧＦＲを標的とする、第２の結合ドメインに作動可能に連結されている。任意により、多重特異性抗体は、配列番号３８９；または配列番号４１４及び配列番号４３２；または配列番号４００；または配列番号４１４及び配列番号４３６；または配列番号５１６；または配列番号４１４及び配列番号５１８；または配列番号５１７；または配列番号４１４及び配列番号５１９；配列番号５２６；または配列番号４１４及び配列番号５２８；または配列番号５２７；または配列番号４１４及び配列番号５２９；または配列番号５３５；または配列番号４１４及び配列番号５３７；または配列番号５３６；または配列番号４１４及び配列番号５３８；または配列番号５０４；または配列番号４１４及び配列番号５０６；または配列番号５０５；または配列番号４１４及び配列番号５０７；または配列番号３８８；または配列番号４１４及び配列番号４３１；または配列番号３９９；または配列番号４１４及び配列番号４３５；または配列番号５４６；または配列番号４１４及び配列番号５４８；または配列番号５４７；または配列番号４１４及び配列番号５４９；または配列番号３７８；または配列番号４２５及び配列番号４２６；または配列番号３７９；または配列番号４２１及び配列番号４３７；または配列番号３８０；または配列番号４２３及び配列番号４２７を含む。
本発明の一態様では、本発明の多重特異性抗体は、疾患または障害を処置するために、例えば、疾患または障害の少なくとも１つの徴候または症状を改善するために、治療上有効量で使用され得る。
一実施形態では、本明細書に記載されるようなγδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する多重特異性抗体フォーマットの抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法が提供され、ここで、当該多重特異性抗体は、当該多重特異性実体によりＶδ１＋細胞にもたらされる（例えば、当該Ｖδ１＋表現型及び／または細胞傷害性及び／または病変細胞特異性及び／またはそれらの増強に対する）効果を測定するために、Ｖδ１＋細胞に適用される。
併用療法
本発明の多重特異性抗体は、ある特定の併用療法に使用され得る。幾つかの実施形態では、多重特異性抗体は、例えば、ＡＦＰ、ＡＫＡＰ－４、ＡＬＫ、αフェトプロテイン、アンドロゲン受容体、Ｂ７Ｈ３、ＢＡＧＥ、ＢＣＡ２２５、ＢＣＡＡ、Ｂｃｒ－ａｂｌ、β－カテニン、β－ＨＣＧ、β－ヒト絨毛性ゴナドトロピン、ＢＯＲＩＳ、ＢＴＡＡ、ＣＡ １２５、ＣＡ １５－３、ＣＡ １９５、ＣＡ １９－９、ＣＡ ２４２、ＣＡ ２７．２９、ＣＡ ７２－４、ＣＡ－５０、ＣＡＭ １７．１、ＣＡＭ４３、カルボニックアンヒドラーゼＩＸ、癌胎児性抗原、ＣＤ２２、ＣＤ３３／ＩＬ３Ｒａ、ＣＤ６８＼Ｐ１、ＣＤＫ４、ＣＥＡ、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン４（ＣＳＰＧ４）、ｃ－Ｍｅｔ、ＣＯ－０２９、ＣＳＰＧ４、サイクリンＢ１、シクロフィリンＣ関連タンパク質、ＣＹＰ１Ｂ１、Ｅ２Ａ－ＰＲＬ、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥＬＦ２Ｍ、ＥｐＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、エフリンＢ２、エプスタイン・バーウイルス抗原ＥＢＶＡ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ＥＴＳ融合遺伝子）、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＦＡＰ、ＦＧＦ－５、Ｆｏｓ関連抗原１、フコシルＧＭ１、Ｇ２５０、Ｇａ７３３＼ＥｐＣＡＭ、ＧＡＧＥ－１、ＧＡＧＥ－２、ＧＤ２、ＧＤ３、神経膠腫関連抗原、ＧｌｏｂｏＨ、糖脂質Ｆ７７、ＧＭ３、ＧＰ １００、ＧＰ １００（Ｐｍｅｌ １７）、Ｈ４－ＲＥＴ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＨＥＲ－２／Ｎｅｕ／ＥｒｂＢ－２、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ－ＭＡＡ）、ＨＰＶ Ｅ６、ＨＰＶ Ｅ７、ｈＴＥＲＴ、ＨＴｇｐ－１７５、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、イディオタイプ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＧＦ－ＩＩ、ＩＧＨ－ＩＧＫ、インスリン成長因子（ＩＧＦ）－Ｉ、腸カルボキシルエステラーゼ、Ｋ－ｒａｓ、ＬＡＧＥ－１ａ、ＬＣＫ、レクチン反応性ＡＦＰ、レグマイン、ＬＭＰ２、Ｍ３４４、ＭＡ－５０、Ｍａｃ－２結合タンパク質、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＭＡＤ－ＣＴ－２、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ Ａ１、ＭＡＧＥ Ａ３、ＭＡＧＥ－１、ＭＡＧＥ－３、ＭＡＧＥ－４、ＭＡＧＥ－５、ＭＡＧＥ－６、ＭＡＲＴ－１、ＭＡＲＴ－１／ＭｅｌａｎＡ、Ｍ－ＣＳＦ、黒色腫関連コンドロイチン硫酸プロテオグリカン（ＭＣＳＰ）、メソテリン、ＭＧ７－Ａｇ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＭＮ－ＣＡ ＩＸ、ＭＯＶ１８、ＭＵＣ１、Ｍｕｍ－１、ｈｓｐ７０－２、ＭＹＣＮ、ＭＹＬ－ＲＡＲ、ＮＡ１７、ＮＢ／７０Ｋ、神経／グリア抗原２（ＮＧ２）、好中球エラスターゼ、ｎｍ－２３Ｈ１、ＮｕＭａ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＮＹ－ＣＯ－１、ＮＹ－ＥＳＯ、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＯＹ－ＴＥＳ１、ｐ１５、ｐ１６、ｐ１８０ｅｒｂＢ３、ｐ１８５ｅｒｂＢ２、ｐ５３、ｐ５３変異体、Ｐａｇｅ４、ＰＡＸ３、ＰＡＸ５、ＰＤＧＦＲ－β、ＰＬＡＣ１、ポリシアル酸、前立腺癌腫瘍抗原－１（ＰＣＴＡ－１）、前立腺特異抗原、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ－１、Ｒａｓ、Ｒａｓ変異体、ＲＣＡＳ１、ＲＧＳ５、ＲｈｏＣ、ＲＯＲ１、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、ＳＡＲＴ３、ＳＤＣＣＡＧ１６、ｓＬｅ（ａ）、精子タンパク質１７、ＳＳＸ２、ＳＴｎ、サバイビン、ＴＡ－９０、ＴＡＡＬ６、ＴＡＧ－７２、テロメラーゼ、チログロブリン、Ｔｉｅ ２、ＴＬＰ、Ｔｎ、ＴＰＳ、ＴＲＰ－１、ＴＲＰ－２、ＴＲＰ－２、ＴＳＰ－１８０、チロシナーゼ、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ２、ＶＩＳＴＡ、ＷＴ１、ＸＡＧＥ １、４３－９Ｆ、５Ｔ４、及び７９１Ｔｇｐ７２からなる群から選択される、がん抗原またはがん関連抗原のモジュレーターと組み合わされ得る。
本発明の多重特異性抗体は、ある特定の併用療法に使用され得る。幾つかの実施形態では、多重特異性抗体は、例えば、ＡＦＰ、ＡＫＡＰ－４、ＡＬＫ、αフェトプロテイン、アンドロゲン受容体、Ｂ７Ｈ３、ＢＡＧＥ、ＢＣＡ２２５、ＢＣＡＡ、Ｂｃｒ－ａｂｌ、β－カテニン、β－ＨＣＧ、β－ヒト絨毛性ゴナドトロピン、ＢＯＲＩＳ、ＢＴＡＡ、ＣＡ １２５、ＣＡ １５－３、ＣＡ １９５、ＣＡ １９－９、ＣＡ ２４２、ＣＡ ２７．２９、ＣＡ ７２－４、ＣＡ－５０、ＣＡＭ １７．１、ＣＡＭ４３、カルボニックアンヒドラーゼＩＸ、癌胎児性抗原、ＣＤ２２、ＣＤ３３／ＩＬ３Ｒａ、ＣＤ６８＼Ｐ１、ＣＤＫ４、ＣＥＡ、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン４（ＣＳＰＧ４）、ｃ－Ｍｅｔ、ＣＯ－０２９、ＣＳＰＧ４、サイクリンＢ１、シクロフィリンＣ関連タンパク質、ＣＹＰ１Ｂ１、Ｅ２Ａ－ＰＲＬ、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥＬＦ２Ｍ、ＥｐＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、エフリンＢ２、エプスタイン・バーウイルス抗原ＥＢＶＡ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ＥＴＳ融合遺伝子）、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＦＡＰ、ＦＧＦ－５、Ｆｏｓ関連抗原１、フコシルＧＭ１、Ｇ２５０、Ｇａ７３３＼ＥｐＣＡＭ、ＧＡＧＥ－１、ＧＡＧＥ－２、ＧＤ２、ＧＤ３、神経膠腫関連抗原、ＧｌｏｂｏＨ、糖脂質Ｆ７７、ＧＭ３、ＧＰ １００、ＧＰ １００（Ｐｍｅｌ １７）、Ｈ４－ＲＥＴ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＨＥＲ－２／Ｎｅｕ／ＥｒｂＢ－２、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ－ＭＡＡ）、ＨＰＶ Ｅ６、ＨＰＶ Ｅ７、ｈＴＥＲＴ、ＨＴｇｐ－１７５、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、イディオタイプ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＧＦ－ＩＩ、ＩＧＨ－ＩＧＫ、インスリン成長因子（ＩＧＦ）－Ｉ、腸カルボキシルエステラーゼ、Ｋ－ｒａｓ、ＬＡＧＥ－１ａ、ＬＣＫ、レクチン反応性ＡＦＰ、レグマイン、ＬＭＰ２、Ｍ３４４、ＭＡ－５０、Ｍａｃ－２結合タンパク質、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＭＡＤ－ＣＴ－２、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ Ａ１、ＭＡＧＥ Ａ３、ＭＡＧＥ－１、ＭＡＧＥ－３、ＭＡＧＥ－４、ＭＡＧＥ－５、ＭＡＧＥ－６、ＭＡＲＴ－１、ＭＡＲＴ－１／ＭｅｌａｎＡ、Ｍ－ＣＳＦ、黒色腫関連コンドロイチン硫酸プロテオグリカン（ＭＣＳＰ）、メソテリン、ＭＧ７－Ａｇ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＭＮ－ＣＡ ＩＸ、ＭＯＶ１８、ＭＵＣ１、Ｍｕｍ－１、ｈｓｐ７０－２、ＭＹＣＮ、ＭＹＬ－ＲＡＲ、ＮＡ１７、ＮＢ／７０Ｋ、神経／グリア抗原２（ＮＧ２）、好中球エラスターゼ、ｎｍ－２３Ｈ１、ＮｕＭａ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＮＹ－ＣＯ－１、ＮＹ－ＥＳＯ、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＯＹ－ＴＥＳ１、ｐ１５、ｐ１６、ｐ１８０ｅｒｂＢ３、ｐ１８５ｅｒｂＢ２、ｐ５３、ｐ５３変異体、Ｐａｇｅ４、ＰＡＸ３、ＰＡＸ５、ＰＤＧＦＲ－β、ＰＬＡＣ１、ポリシアル酸、前立腺癌腫瘍抗原－１（ＰＣＴＡ－１）、前立腺特異抗原、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ－１、Ｒａｓ、Ｒａｓ変異体、ＲＣＡＳ１、ＲＧＳ５、ＲｈｏＣ、ＲＯＲ１、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、ＳＡＲＴ３、ＳＤＣＣＡＧ１６、ｓＬｅ（ａ）、精子タンパク質１７、ＳＳＸ２、ＳＴｎ、サバイビン、ＴＡ－９０、ＴＡＡＬ６、ＴＡＧ－７２、テロメラーゼ、チログロブリン、Ｔｉｅ ２、ＴＬＰ、Ｔｎ、ＴＰＳ、ＴＲＰ－１、ＴＲＰ－２、ＴＲＰ－２、ＴＳＰ－１８０、チロシナーゼ、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ２、ＶＩＳＴＡ、ＷＴ１、ＸＡＧＥ １、４３－９Ｆ、５Ｔ４、及び７９１Ｔｇｐ７２からなる群から選択される、がん抗原またはがん関連抗原のモジュレーターと組み合わされ得る。
幾つかの実施形態では、多重特異性抗体は、例えば、Ｂ７－１（ＣＤ８０）、Ｂ７－２（ＣＤ８６）、Ｂ７－ＤＣ（ＣＤ２７３）、Ｂ７－Ｈ１（ＣＤ２７４）、Ｂ７－Ｈ２（ＣＤ２７５）、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７－Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、Ｂ７－Ｈ５（ＶＩＳＴＡ）、ＢＴＬＡ（ＣＤ２７２）、ＣＤ１３７、ＣＤ１３７Ｌ、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３８、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ（ＣＤ１５４）、ＣＤ５４、ＣＤ５９、ＣＤ７０、ＣＴＬＡ４（ＣＤ１５２）、ＣＸＣＬ９、ＧＩＴＲ（ＣＤ３５７）、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）、ＩＣＡＭ－１（ＣＤ５４）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、ＬＡＧ－３（ＣＤ２２３）、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、ＯＸ４０Ｌ（ＣＤ２５２）、ＰＤ－１（ＣＤ２７９）、ＰＤ－Ｌ１（ＣＤ２７４）、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ３１４、ＣＤ３３４、ＣＤ３３５、ＣＤ３３７、及びＴＩＭ－３（ＣＤ３６６）からなる群から選択される免疫調節性抗原のモジュレーターと組み合わされ得る。
幾つかの実施形態では、多重特異性抗体は、例えば、ＣＤ１ａ、ＣＤ１ｂ、ＣＤ１ｃ、ＣＤ１ｄ、ＣＤ１ｅ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ３ｄ、ＣＤ３ｅ、ＣＤ３ｇ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ８ａ、ＣＤ８ｂ、ＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｄ、ＣＤ１３、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１６ａ、ＣＤ１６ｂ、ＣＤ１７、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ２６、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ３１、ＣＤ３２Ａ、ＣＤ３２Ｂ、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ４１、ＣＤ４２、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ４２ｃ、ＣＤ４２ｄ、ＣＤ４３、ＣＤ４４、ＣＤ４５、ＣＤ４６、ＣＤ４７、ＣＤ４８、ＣＤ４９ａ、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ４９ｄ、ＣＤ４９ｅ、ＣＤ４９ｆ、ＣＤ５０、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ５３、ＣＤ５４、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ５７、ＣＤ５８、ＣＤ５９、ＣＤ６０ａ、ＣＤ６０ｂ、ＣＤ６０ｃ、ＣＤ６１、ＣＤ６２Ｅ、ＣＤ６２Ｌ、ＣＤ６２Ｐ、ＣＤ６３、ＣＤ６４ａ、ＣＤ６５、ＣＤ６５ｓ、ＣＤ６６ａ、ＣＤ６６ｂ、ＣＤ６６ｃ、ＣＤ６６ｄ、ＣＤ６６ｅ、ＣＤ６６ｆ、ＣＤ６８、ＣＤ６９、ＣＤ７０、ＣＤ７１、ＣＤ７２、ＣＤ７３、ＣＤ７４、ＣＤ７５、ＣＤ７５ｓ、ＣＤ７７、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ８３、ＣＤ８４、ＣＤ８５Ａ、ＣＤ８５Ｂ、ＣＤ８５Ｃ、ＣＤ８５Ｄ、ＣＤ８５Ｆ、ＣＤ８５Ｇ、ＣＤ８５Ｈ、ＣＤ８５Ｉ、ＣＤ８５Ｊ、ＣＤ８５Ｋ、ＣＤ８５Ｍ、ＣＤ８６、ＣＤ８７、ＣＤ８８、ＣＤ８９、ＣＤ９０、ＣＤ９１、ＣＤ９２、ＣＤ９３、ＣＤ９４、ＣＤ９５、ＣＤ９６、ＣＤ９７、ＣＤ９８、ＣＤ９９、ＣＤ１００、ＣＤ１０１、ＣＤ１０２、ＣＤ１０３、ＣＤ１０４、ＣＤ１０５、ＣＤ１０６、ＣＤ１０７、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ１０７ｂ、ＣＤ１０８、ＣＤ１０９、ＣＤ１１０、ＣＤ１１１、ＣＤ１１２、ＣＤ１１３、ＣＤ１１４、ＣＤ１１５、ＣＤ１１６、ＣＤ１１７、ＣＤ１１８、ＣＤ１１９、ＣＤ１２０、ＣＤ１２０ａ、ＣＤ１２０ｂ、ＣＤ１２１ａ、ＣＤ１２１ｂ、ＣＤ１２２、ＣＤ１２３、ＣＤ１２４、ＣＤ１２５、ＣＤ１２６、ＣＤ１２７、ＣＤ１２９、ＣＤ１３０、ＣＤ１３１、ＣＤ１３２、ＣＤ１３３、ＣＤ１３４、ＣＤ１３５、ＣＤ１３６、ＣＤ１３７、ＣＤ１３８、ＣＤ１３９、ＣＤ１４０Ａ、ＣＤ１４０Ｂ、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１４３、ＣＤ１４４、ＣＤｗ１４５、ＣＤ１４６、ＣＤ１４７、ＣＤ１４８、ＣＤ１５０、ＣＤ１５１、ＣＤ１５２、ＣＤ１５３、ＣＤ１５４、ＣＤ１５５、ＣＤ１５６、ＣＤ１５６ａ、ＣＤ１５６ｂ、ＣＤ１５６ｃ、ＣＤ１５７、ＣＤ１５８、ＣＤ１５８Ａ、ＣＤ１５８Ｂ１、ＣＤ１５８Ｂ２、ＣＤ１５８Ｃ、ＣＤ１５８Ｄ、ＣＤ１５８Ｅ１、ＣＤ１５８Ｅ２、ＣＤ１５８Ｆ１、ＣＤ１５８Ｆ２、ＣＤ１５８Ｇ、ＣＤ１５８Ｈ、ＣＤ１５８Ｉ、ＣＤ１５８Ｊ、ＣＤ１５８Ｋ、ＣＤ１５９ａ、ＣＤ１５９ｃ、ＣＤ１６０、ＣＤ１６１、ＣＤ１６２、ＣＤ１６３、ＣＤ１６４、ＣＤ１６５、ＣＤ１６６、ＣＤ１６７ａ、ＣＤ１６７ｂ、ＣＤ１６８、ＣＤ１６９、ＣＤ１７０、ＣＤ１７１、ＣＤ１７２ａ、ＣＤ１７２ｂ、ＣＤ１７２ｇ、ＣＤ１７３、ＣＤ１７４、ＣＤ１７５、ＣＤ１７５ｓ、ＣＤ１７６、ＣＤ１７７、ＣＤ１７８、ＣＤ１７９ａ、ＣＤ１７９ｂ、ＣＤ１８０、ＣＤ１８１、ＣＤ１８２、ＣＤ１８３、ＣＤ１８４、ＣＤ１８５、ＣＤ１８６、ＣＤ１８７、ＣＤ１８８、ＣＤ１８９、ＣＤ１９０、ＣＤ１９１、ＣＤ１９２、ＣＤ１９３、ＣＤ１９４、ＣＤ１９５、ＣＤ１９６、ＣＤ１９７、ＣＤｗ１９８、ＣＤｗ１９９、ＣＤ２００、ＣＤ２０１、ＣＤ２０２ｂ、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ２０４、ＣＤ２０５、ＣＤ２０６、ＣＤ２０７、ＣＤ２０８、ＣＤ２０９、ＣＤ２１０、ＣＤｗ２１０ａ、ＣＤｗ２１０ｂ、ＣＤ２１１、ＣＤ２１２、ＣＤ２１３ａ１、ＣＤ２１３ａ２、ＣＤ２１４、ＣＤ２１５、ＣＤ２１６、ＣＤ２１７、ＣＤ２１８ａ、ＣＤ２１８ｂ、ＣＤ２１９、ＣＤ２２０、ＣＤ２２１、ＣＤ２２２、ＣＤ２２３、ＣＤ２２４、ＣＤ２２５、ＣＤ２２６、ＣＤ２２７、ＣＤ２２８、ＣＤ２２９、ＣＤ２３０、ＣＤ２３１、ＣＤ２３２、ＣＤ２３３、ＣＤ２３４、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ２３５ｂ、ＣＤ２３６、ＣＤ２３７、ＣＤ２３８、ＣＤ２３９、ＣＤ２４０ＣＥ、ＣＤ２４０Ｄ、ＣＤ２４１、ＣＤ２４２、ＣＤ２４３、ＣＤ２４４、ＣＤ２４５、ＣＤ２４６、ＣＤ２４７、ＣＤ２４８、ＣＤ２４９、ＣＤ２５０、ＣＤ２５１、ＣＤ２５２、ＣＤ２５３、ＣＤ２５４、ＣＤ２５５、ＣＤ２５６、ＣＤ２５７、ＣＤ２５８、ＣＤ２５９、ＣＤ２６０、ＣＤ２６１、ＣＤ２６２、ＣＤ２６３、ＣＤ２６４、ＣＤ２６５、ＣＤ２６６、ＣＤ２６７、ＣＤ２６８、ＣＤ２６９、ＣＤ２７０、ＣＤ２７１、ＣＤ２７２、ＣＤ２７３、ＣＤ２７４、ＣＤ２７５、ＣＤ２７６、ＣＤ２７７、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、ＣＤ２８０、ＣＤ２８１、ＣＤ２８２、ＣＤ２８３、ＣＤ２８４、ＣＤ２８５、ＣＤ２８６、ＣＤ２８７、ＣＤ２８８、ＣＤ２８９、ＣＤ２９０、ＣＤ２９１、ＣＤ２９２、ＣＤｗ２９３、ＣＤ２９４、ＣＤ２９５、ＣＤ２９６、ＣＤ２９７、ＣＤ２９８、ＣＤ２９９、ＣＤ３００Ａ、ＣＤ３００Ｃ、ＣＤ３０１、ＣＤ３０２、ＣＤ３０３、ＣＤ３０４、ＣＤ３０５、ＣＤ３０６、ＣＤ３０７、ＣＤ３０７ａ、ＣＤ３０７ｂ、ＣＤ３０７ｃ、ＣＤ３０７ｄ、ＣＤ３０７ｅ、ＣＤ３０８、ＣＤ３０９、ＣＤ３１０、ＣＤ３１１、ＣＤ３１２、ＣＤ３１３、ＣＤ３１４、ＣＤ３１５、ＣＤ３１６、ＣＤ３１７、ＣＤ３１８、ＣＤ３１９、ＣＤ３２０、ＣＤ３２１、ＣＤ３２２、ＣＤ３２３、ＣＤ３２４、ＣＤ３２５、ＣＤ３２６、ＣＤ３２７、ＣＤ３２８、ＣＤ３２９、ＣＤ３３０、ＣＤ３３１、ＣＤ３３２、ＣＤ３３３、ＣＤ３３４、ＣＤ３３５、ＣＤ３３６、ＣＤ３３７、ＣＤ３３８、ＣＤ３３９、ＣＤ３４０、ＣＤ３４４、ＣＤ３４９、ＣＤ３５１、ＣＤ３５２、ＣＤ３５３、ＣＤ３５４、ＣＤ３５５、ＣＤ３５７、ＣＤ３５８、ＣＤ３６０、ＣＤ３６１、ＣＤ３６２、ＣＤ３６３、ＣＤ３６４、ＣＤ３６５、ＣＤ３６６、ＣＤ３６７、ＣＤ３６８、ＣＤ３６９、ＣＤ３７０、及びＣＤ３７１からなる群から選択されるＣＤ抗原のモジュレーターと組み合わされ得る。
幾つかの実施形態では、モジュレーターは拮抗性または作動性であり得る。好適なモジュレーターとしては、抗体、融合タンパク質、または低分子が挙げられる。
イムノコンジュゲート
本発明の多重特異性抗体は、細胞毒素または化学療法剤などの治療用部分にコンジュゲートされ得る。かかるコンジュゲートは、イムノコンジュゲートと称され得る。本明細書で使用する場合、用語「イムノコンジュゲート」は、細胞毒素、放射性薬剤、サイトカイン、インターフェロン、標的部分もしくはレポーター部分、酵素、毒素、ペプチドもしくはタンパク質、または治療薬などの別の部分に化学的または生物学的に連結されている抗体を指す。抗体は、その標的と結合することができる限り、分子に沿った任意の位置で、細胞毒素、放射性薬剤、サイトカイン、インターフェロン、標的部分もしくはレポーター部分、酵素、毒素、ペプチド、または治療薬に連結されていてよい。イムノコンジュゲートの例としては、抗体－薬物コンジュゲート及び抗体－毒素融合タンパク質が挙げられる。一実施形態では、薬剤は、Ｖδ１に対する第２の異なる抗体であり得る。ある特定の実施形態では、抗体は、腫瘍細胞またはウイルス感染細胞に特異的な薬剤にコンジュゲートされ得る。抗Ｖδ１抗体にコンジュゲートされ得る治療用部分の種類は、処置されるべき状態及び達成されるべき所望の治療効果を考慮したものになる。一実施形態では、薬剤は、Ｖδ１以外の分子に結合する第２の抗体またはその抗原結合断片であり得る。
本発明の多重特異性抗体は、細胞毒素または化学療法剤などの治療用部分にコンジュゲートされ得る。かかるコンジュゲートは、イムノコンジュゲートと称され得る。本明細書で使用する場合、用語「イムノコンジュゲート」は、細胞毒素、放射性薬剤、サイトカイン、インターフェロン、標的部分もしくはレポーター部分、酵素、毒素、ペプチドもしくはタンパク質、または治療薬などの別の部分に化学的または生物学的に連結されている抗体を指す。抗体は、その標的と結合することができる限り、分子に沿った任意の位置で、細胞毒素、放射性薬剤、サイトカイン、インターフェロン、標的部分もしくはレポーター部分、酵素、毒素、ペプチド、または治療薬に連結されていてよい。イムノコンジュゲートの例としては、抗体－薬物コンジュゲート及び抗体－毒素融合タンパク質が挙げられる。一実施形態では、薬剤は、Ｖδ１に対する第２の異なる抗体であり得る。ある特定の実施形態では、抗体は、腫瘍細胞またはウイルス感染細胞に特異的な薬剤にコンジュゲートされ得る。抗Ｖδ１抗体にコンジュゲートされ得る治療用部分の種類は、処置されるべき状態及び達成されるべき所望の治療効果を考慮したものになる。一実施形態では、薬剤は、Ｖδ１以外の分子に結合する第２の抗体またはその抗原結合断片であり得る。
カニクイザル交差反応性
好適には、多重特異性抗体は、ヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２）（多型バリアント、すなわち配列番号３０６が含まれる）及びカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）の両方に対する交差反応性を示す。交差反応性は、前臨床評価におけるインビボ動物試験に使用され得る抗体を提供するのに明らかに有用である。
好適には、多重特異性抗体は、ヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２）（多型バリアント、すなわち配列番号３０６が含まれる）及びカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）の両方に対する交差反応性を示す。交差反応性は、前臨床評価におけるインビボ動物試験に使用され得る抗体を提供するのに明らかに有用である。
驚くべきことに、本発明の発明者らは、抗体、例えば、抗Ｖδ１ｘＥＧＦＲ抗体及びその抗原結合断片のカニクイザル抗原への結合の増加を付与し得るフレームワーク変異を同定した。このフレームワーク変異は、抗体またはその抗原結合断片の対応するヒト型抗原に対する親和性に悪影響を及ぼさない。この変異は、κ軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位のセリン残基のセリンではない残基（例えば、非ヒト生殖細胞系列型及び／または非極性残基）への変異である。非極性アミノ酸は、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択され得る。非生殖細胞系列型アミノ酸は、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択され得る。非極性かつ非生殖細胞系列型アミノ酸（すなわち、非極性であり、非生殖細胞系列型であるアミノ酸）は、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択され得る。幾つかの実施形態では、変異は、κ軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位のセリン残基のロイシン残基への変異である。変異は、鎖の全長が変化しないような直接的置換である。従って、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位のセリンが除去され、別のアミノ酸と直接置き換えられる（例えば、非ヒト生殖細胞系列型及び／または非極性アミノ酸、例えば、ロイシン）。置換は、当業者に公知の任意の好適な方法により達成され得る。
本明細書における、ＩＭＧＴ番号付けに従って７４位にセリンではない残基を含むκ軽鎖可変配列を含む抗体への言及は、ＬＦＲ１領域、ＬＣＤＲ１領域、ＬＦＲ２領域、ＬＣＤＲ２領域、ＬＦＲ３領域、ＬＣＤＲ３領域、及びＬＦＲ４領域を含む軽鎖可変配列を含む抗体であって、当該ＬＦＲ３領域がＩＭＧＴ番号付けに従って７４位にセリンではない残基（例えば、非極性及び／または非ヒト生殖細胞系列型残基、例えば、ロイシン残基）を含む、当該抗体と代替的に定義され得る。このような代替的定義は、ＩＭＧＴ番号付けに従って７４位にセリンではない残基（例えば、非ヒト生殖細胞系列型及び／または非極性残基、例えば、ロイシン残基）を含むκ軽鎖可変配列を含む、本明細書において開示される全ての抗体に適用される。
従って、本発明は、軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基がセリン以外（例えば、非極性及び／または非ヒト生殖細胞系列型残基、例えば、ロイシン残基）であるκ軽鎖可変配列を含む抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体またはその抗原結合断片を提供する。幾つかの実施形態では、軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位の残基は、ロイシンである。好適には、抗体はＩｇＧ抗体であり得る。例えば、抗体はＩｇＧ１抗体であり得る。
本明細書において提供される抗Ｖδ１ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体及びその抗原結合断片は、軽鎖可変配列の（ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って）７４位での置換により提供され得る。例えば、本明細書に記載される抗Ｖδ１ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体ならびにその抗原結合断片及びバリアントは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位にセリン以外の残基（例えば、非極性及び／または非ヒト生殖細胞系列型残基、例えば、ロイシン残基）を含むκ軽鎖可変配列を含み得る。幾つかの実施形態では、本明細書に記載される抗Ｖδ１ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体ならびにその抗原結合断片及びバリアントは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位にロイシン残基を含むκ軽鎖可変配列を含み得る。κ軽鎖のＩＭＧＴ番号付けシステムに従って７４位での変異を含む実施形態は、ＡＤＴ１－４に由来する抗体に特に関連し得るが、変異は他の抗体に同様に適用可能である。例えば、異なるκ／λ軽鎖生殖細胞系列全体で軽鎖７４位が高度に保存されていないことが観察される。更に、異なる軽鎖生殖細胞系列が、非極性（例えば、アラニン）から極性中性（例えば、セリン）、負または正荷電（例えば、それぞれアスパラギン酸またはアスパラギン）までの範囲の極性及び／または電荷が異なるアミノ酸をこの位置で含有することに留意されたい。任意の所与の位置でのアミノ酸の極性／電荷がタンパク質構造に影響を及ぼし得ることは十分に理解されている。例えば、極性及び電荷の変化が、疎水性及びアミノ酸がより表面に露出されるか、またはより埋め込まれる傾向に影響を及ぼし得ることは十分に理解されている。それにもかかわらず、この注目すべき発見は、軽鎖７４位での非保存的アミノ酸変化が、選択された標的に対する親和性を１０倍超に改変し得ることを強調する。従って、本明細書において概説される親和性の改善とは別に、この知識を利用することにより、親和性をより広範囲に増強または抑制する新規なアプローチが提供され得る。例えば、７４位の残基をより極性の残基から非極性残基に、または例えば、非極性残基からより荷電した残基に変化させることを含む方法は、任意の所与の抗体について親和性を増強または抑制することを所望する場合、複雑な／扱いにくい突然変異誘発法、例えば、飽和突然変異誘発などより好ましい場合がある。
本発明の別の実施形態では、抗体またはその抗原結合断片を変異させる方法であって、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って軽鎖可変配列の７４位にセリンを有するκ軽鎖を含む抗体を提供すること、ならびに当該セリンを異なる残基、例えば、非ヒト生殖細胞系列型及び／または非極性アミノ酸、例えば、ロイシンに変異させることを含む、当該方法も提供される。幾つかの実施形態では、抗体は、抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片である。幾つかの実施形態では、抗体は、軽鎖可変配列の７４位に変異が導入される前後の両方で、配列番号１と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２６と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬを有する抗体である。幾つかの実施形態では、抗体は、７４位の変異を除いては配列１と１００％同一であるアミノ酸配列を含むＶＨと、７４位の変異を除いては配列番号２６と１００％同一であるアミノ酸配列を含むＶＬとを有する抗体である。
幾つかの実施形態では、抗体は、軽鎖可変配列の７４位に変異が導入される前後の両方で、配列番号１０６と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１１８と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬを有する抗体である。幾つかの実施形態では、抗体は、７４位の変異を除いては配列１０６と１００％同一であるアミノ酸配列を含むＶＨと、７４位の変異を除いては配列番号１１８と１００％同一であるアミノ酸配列を含むＶＬとを有する抗体である。
幾つかの実施形態では、抗体は、以下を含む抗体である：
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７４のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７５のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８４のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７６のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８５のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７７のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８６のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７８のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８７のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８８のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２８０のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２８１のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２９０のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；または
変異が導入される前後の両方で、配列番号３１２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３１３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ。
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７４のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７５のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８４のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７６のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８５のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７７のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８６のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７８のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８７のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２７９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８８のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２８０のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；
変異が導入される前後の両方で、配列番号２８１のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２９０のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ；または
変異が導入される前後の両方で、配列番号３１２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３１３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含むＶＬ。
幾つかの実施形態では、抗体は、以下を含む抗体である：
配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＶＬ。
配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＶＬ；
配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＶＬ。
かかる方法により作製される抗体は、７４位での変異を除いて、指定されるＶＨ及びＶＬ配列に対する１００％の同一性を有する。
幾つかの実施形態では、７４位での変異は、抗体またはその抗原結合断片の相同なカニクイザル（ｃｙｎｏ ｍｏｎｋｅｙ）抗原に対する親和性を増加させる。抗体またはその抗原結合断片の親和性の増加は、（同じまたは実質的に同じ条件下で測定される場合の）変異が導入される前の抗体またはその抗原結合断片の親和性と比較した増加である。幾つかの実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、変異が導入される前後で、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のヒト可変δ１（Ｖδ１）鎖（例えば、配列番号２７２及び３０６）に結合する抗ＴＣＲδ可変部１（抗Ｖδ１）抗体またはその抗原結合断片であり、当該抗体は、変異が導入された後で、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）のカニクイザル可変δ１（Ｖδ１）鎖（例えば、配列番号３０８）に対する増加した親和性を有する。
ポリヌクレオチド配列及び発現ベクター
本発明の一態様では、本発明の多重特異性抗体をコードするポリヌクレオチドが提供される。一実施形態では、ポリヌクレオチドは、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、ポリヌクレオチドは、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１のいずれかを含むか、またはそれからなる。更なる態様では、上記ポリヌクレオチドを含むｃＤＮＡが提供される。
本発明の一態様では、本発明の多重特異性抗体をコードするポリヌクレオチドが提供される。一実施形態では、ポリヌクレオチドは、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含むか、またはそれからなる。更なる実施形態では、ポリヌクレオチドは、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１のいずれかを含むか、またはそれからなる。更なる態様では、上記ポリヌクレオチドを含むｃＤＮＡが提供される。
本発明の一態様では、コードされる免疫グロブリン鎖可変ドメインのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／またはＣＤＲ３をコードする、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１の一部のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む、またはそれからなるポリヌクレオチドが提供される。
本発明の一態様では、コードされる免疫グロブリン鎖可変ドメインのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／またはＦＲ４をコードする、配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１の一部のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む、またはそれからなるポリヌクレオチドが提供される。
本発明は、本発明のポリヌクレオチド配列を含む発現ベクター及びプラスミドも提供する。幾つかの実施形態では、発現ベクターは、配列番号１９９～２２２または２４９～２５９（重鎖可変領域をコードする）のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性、または１００％の同一性を有する配列を含む。幾つかの実施形態では、発現ベクターは、配列番号２２４～２４７または２６１～２７１（軽鎖可変領域をコードする）のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性、または１００％の同一性を有する配列を含む。かかる発現ベクターは、本明細書に開示される本発明の多重特異性抗体を提供する様々なアミノ酸配列の組合せに従って、重鎖可変配列及び軽鎖可変配列を適切に組み合わせた対で使用され得る。幾つかの実施形態では、発現ベクターは、配列番号１９９～２２２または２４９～２５９（重鎖可変領域をコードする）のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性、または１００％の同一性を有する配列を含み、配列番号２２４～２４７または２６１～２７１（軽鎖可変領域をコードする）のいずれかと少なくとも７０％、例えば、少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９９％の配列同一性、または１００％の同一性を有する配列を更に含む。ここでも、配列は、本発明の多重特異性抗体をコードするために本明細書に記載されるように特定の対で提供され得る。
本発明は、任意により１つ以上のアミノ酸置換を含む本明細書に開示される任意のバリアント抗体配列が含まれる、本明細書に開示される全ての抗体配列をコードするポリヌクレオチド配列及び発現ベクター及びプラスミドも提供する。
本発明のポリヌクレオチド及び発現ベクターは、コードされるアミノ酸配列を参照して記載されてもよい。従って、一実施形態では、ポリヌクレオチドは、配列番号１～１９７のいずれか１つのアミノ酸配列をコードする配列を含むか、またはそれからなる。
多重特異性抗体またはその抗原結合断片を発現させるために、本明細書に記載される軽鎖及び重鎖の一部または全長をコードするポリヌクレオチドは、遺伝子が転写制御配列及び翻訳制御配列に作動可能に連結されるように発現ベクターに挿入される。従って、本発明の一態様では、本明細書で定義されるポリヌクレオチド配列を含む発現ベクターが提供される。一実施形態では、発現ベクターは、配列番号１９９～２２２または２４９～２５９のいずれかのＶＨ領域を含む。別の実施形態では、発現ベクターは、配列番号２２４～２４７または２６１～２７１のいずれかのＶＬ領域を含む。
本明細書に記載されるヌクレオチド配列は、翻訳、精製、及び検出を補助するためのアミノ酸残基をコードする追加の配列を含み得るが、使用される発現系に応じて代替的な配列が使用され得ることが理解されよう。これらの任意の配列は、代替的な設計、翻訳、精製、または検出戦略が採用される場合、除去、改変、または置換され得る。
ポリペプチドのアミノ酸配列に関して無変化であるが、特定の宿主における翻訳に好ましいコドンを提供するポリペプチドをコードするＤＮＡまたはｃＤＮＡとなるように、変異がなされ得る。例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ及びＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅならびに哺乳動物、特にヒトにおける核酸の翻訳に好ましいコドンが公知である。
ポリペプチドの変異は、例えば、ポリペプチドをコードする核酸に対する置換、付加、または欠失により達成され得る。ポリペプチドをコードする核酸に対する置換、付加、または欠失は、例えば、エラープローンＰＣＲ、シャッフリング、オリゴヌクレオチド指定突然変異誘発、アセンブリＰＣＲ、ＰＣＲ突然変異誘発、インビボ突然変異誘発、カセット突然変異誘発、再帰アンサンブル突然変異誘発、指数アンサンブル突然変異誘発、部位特異的突然変異誘発、遺伝子再構築、人工遺伝子合成、遺伝子部位飽和突然変異誘発（ＧＳＳＭ）、合成ライゲーション再構築（ＳＬＲ）、またはそれらの方法の組み合わせが含まれる、多数の方法により導入され得る。核酸に対する改変、付加、または欠失は、組換え、再帰的配列組換え、ホスホロチオエート修飾ＤＮＡ突然変異誘発、ウラシル含有テンプレート突然変異誘発、ギャップ二重鎖突然変異誘発、ポイントミスマッチ修復突然変異誘発、修復欠損宿主株突然変異誘発、化学的突然変異誘発、放射性突然変異誘発、欠失突然変異誘発、制限選択突然変異誘発、制限精製突然変異誘発、アンサンブル突然変異誘発、キメラ核酸多量体作製、またはそれらの組み合わせを含む方法によっても導入され得る。
特に、人工遺伝子合成が使用され得る。本発明のポリペプチドをコードする遺伝子は、例えば、固相ＤＮＡ合成により人工的に生成され得る。前駆体テンプレートＤＮＡを必要とせずに、遺伝子全体が新たに合成され得る。所望のオリゴヌクレオチドを得るために、構成単位が、生成物の配列により必要とされる順序で、伸長しているオリゴヌクレオチド鎖に逐次的に結合される。鎖の構築が完了すると、生成物が固相から溶液中に放出され、脱保護され、収集される。目的のオリゴヌクレオチドを高純度で得るために、生成物は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により単離され得る。
発現ベクターとしては、例えば、プラスミド、レトロウイルス、コスミド、酵母人工染色体（ＹＡＣ）、及びエプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）由来のエピソームが挙げられる。ポリヌクレオチドは、ベクター内の転写制御配列及び翻訳制御配列がポリヌクレオチドの転写及び翻訳を制御する意図された機能を果たすように、ベクターにライゲーションされる。発現及び／または制御配列としては、プロモーター、エンハンサー、転写ターミネーター、コード配列の５’側の開始コドン（すなわちＡＴＧ）、イントロンのスプライシングシグナル、及び終止コドンが挙げられ得る。発現ベクター及び発現制御配列は、使用される発現宿主細胞と適合するように選択される。例えば、配列は、合成リンカー（例えば、配列番号２９１をコードする）により連結されたＶＨ領域及びＶＬ領域を含む、本発明の抗体の一本鎖可変断片バージョンをコードするヌクレオチド配列を含み得る。本発明のポリヌクレオチドまたは発現ベクターは、ＶＨ領域、ＶＬ領域、またはその両方（任意によりリンカーを含む）を含み得ることが理解されよう。従って、ＶＨ領域及びＶＬ領域をコードするポリヌクレオチドが別々のベクターに挿入され得、あるいは両方の領域をコードする配列が同じ発現ベクターに挿入される。ポリヌクレオチド（複数可）は、標準的方法（例えば、ポリヌクレオチド及びベクターの相補的制限部位のライゲーション、または制限部位が存在しない場合は平滑末端ライゲーション）により発現ベクターに挿入される。
便利なベクターは、機能的に完全なヒトＣＨまたはＣＬ免疫グロブリン配列をコードするものであり、本明細書に記載されるように、任意のＶＨ配列またはＶＬ配列が容易に挿入され得、発現され得るように工学操作された適切な制限部位を有する。発現ベクターは、宿主細胞からの抗体（またはその抗原結合断片）の分泌を促進するシグナルペプチドもコードし得る。ポリヌクレオチドは、シグナルペプチドが抗体のアミノ末端にインフレームで連結されるようにベクターにクローンニングされ得る。シグナルペプチドは、免疫グロブリンシグナルペプチドまたは異種シグナルペプチド（すなわち、非免疫グロブリンタンパク質由来のシグナルペプチド）であり得る。
本発明の一態様では、本明細書で定義されるポリヌクレオチドまたは発現ベクターを含む細胞（例えば、組換え宿主細胞などの宿主細胞）が提供される。細胞は、抗体またはその抗原結合断片の軽鎖をコードする第１のベクター、及び抗体またはその抗原結合断片の重鎖をコードする第２のベクターを含み得ることが理解されよう。あるいは、重鎖及び軽鎖の両方が、細胞に導入される同じ発現ベクターにコードされる。
一実施形態では、ポリヌクレオチドまたは発現ベクターは、抗体またはその抗原結合断片に融合された膜アンカーまたは膜貫通ドメインをコードし、ここで、当該抗体またはその抗原結合断片は細胞の細胞外表面に提示される。
形質転換は、ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための任意の公知の方法によるものであり得る。異種ポリヌクレオチドを哺乳動物細胞に導入する方法は当該技術分野において周知であり、デキストラン媒介性形質移入、リン酸カルシウム沈殿、ポリブレン媒介性形質移入、プロトプラスト融合、エレクトロポレーション、リポソームへのポリヌクレオチド（複数可）のカプセル化、遺伝子銃による注入、及び核へのＤＮＡの直接的マイクロインジェクションが挙げられる。更に、核酸分子は、ウイルスベクターによって哺乳動物細胞に導入され得る。
発現のための宿主として利用可能な哺乳動物細胞株は、当該技術分野において周知であり、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手可能な多数の不死化細胞株が挙げられる。これらとしては、とりわけ、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＮＳＯ、ＳＰ２細胞、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、サル腎臓細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞癌細胞（例えば、Ｈｅｐ Ｇ２）、Ａ５４９細胞、３Ｔ３細胞、及び多数の他の細胞株が挙げられる。哺乳動物宿主細胞としては、ヒト、マウス、ラット、イヌ、サル、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマ、及びハムスターの細胞が挙げられる。どの細胞株が高い発現レベルを有するかを決定することによって、特に好ましい細胞株が選択される。使用され得る他の細胞株は、Ｓｆ９細胞などの昆虫細胞株、両生類細胞、細菌細胞、植物細胞、及び真菌細胞である。ｓｃＦｖ及びＦｖ断片などの抗体の抗原結合断片は、当該技術分野において公知の方法を使用してＥ．ｃｏｌｉで単離及び発現され得る。
抗体は、宿主細胞における抗体の発現、より好ましくは、宿主細胞が増殖する培養培地への抗体の分泌を可能にするのに十分な期間、宿主細胞を培養することにより産生される。抗体は、標準的なタンパク質精製法を使用して培養培地から回収され得る。
本発明の抗体（または断片）は、例えば、Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（２０１２） ４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｕｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓに開示されている技術を使用して取得及び操作され得る。
モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術を使用して、特定の抗体産生Ｂ細胞を、組織培養で増殖する能力及び抗体鎖合成の欠如のために選択される骨髄腫（Ｂ細胞癌）細胞と融合させることによって産生され得る。
決定された抗原対して指向されたモノクローナル抗体は、例えば、
ａ）ハイブリドーマを形成させるために、決定された抗原で、不死化細胞で、及び好ましくは、骨髄腫細胞で事前に免疫された動物の末梢血から得られたリンパ球を不死化すること、
ｂ）形成された不死化細胞（ハイブリドーマ）を培養し、所望の特異性を有する抗体を産生する細胞を回収することにより取得され得る。
ａ）ハイブリドーマを形成させるために、決定された抗原で、不死化細胞で、及び好ましくは、骨髄腫細胞で事前に免疫された動物の末梢血から得られたリンパ球を不死化すること、
ｂ）形成された不死化細胞（ハイブリドーマ）を培養し、所望の特異性を有する抗体を産生する細胞を回収することにより取得され得る。
あるいは、ハイブリドーマ細胞を使用する必要はない。本明細書に記載される標的抗原に結合することができる抗体は、例えば、当該技術分野において公知のファージディスプレイ、酵母ディスプレイ、リボソームディスプレイ、または哺乳動物ディスプレイ技術を使用する定型的な実務によって、好適な抗体ライブラリから単離され得る。従って、モノクローナル抗体は、例えば、以下のステップを含むプロセスにより取得され得る：
ａ）ベクターに、特にファージ及びより具体的には糸状バクテリオファージに、リンパ球、特に動物（好適には決定された抗原で以前に免疫されている）の末梢血リンパ球から取得されたＤＮＡまたはｃＤＮＡ配列をクローン化するステップ、
ｂ）抗体の産生を可能にする条件で、上記のベクターで原核細胞を形質転換するステップ、
ｃ）抗体を抗原親和性選択に供することより抗体を選択するステップ、
ｄ）所望の特異性を有する抗体を回収するステップ。
ａ）ベクターに、特にファージ及びより具体的には糸状バクテリオファージに、リンパ球、特に動物（好適には決定された抗原で以前に免疫されている）の末梢血リンパ球から取得されたＤＮＡまたはｃＤＮＡ配列をクローン化するステップ、
ｂ）抗体の産生を可能にする条件で、上記のベクターで原核細胞を形質転換するステップ、
ｃ）抗体を抗原親和性選択に供することより抗体を選択するステップ、
ｄ）所望の特異性を有する抗体を回収するステップ。
任意により、本明細書に記載され、かつγδのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片をコードする単離されたポリヌクレオチドも、疾患の徴候または症状を改善するための薬剤として用いられるのに十分な量を作製するように容易に製造され得る。このように薬剤として用いられる場合、通常、目的のポリヌクレオチドはまず、対象または患者において上記抗体またはその抗原結合断片を発現するように設計された発現ベクターまたは発現カセットに作動可能に連結される。かかる発現カセット及びポリヌクレオチドの送達方法または「核酸ベース」薬剤と称される場合があるものは、当該技術分野において周知である。最近の概説については、Ｈｏｌｌｅｖｏｅｔ ａｎｄ Ｄｅｃｌｅｒｃｋ（２０１７） Ｊ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ． １５（１）：１３１を参照のこと。
抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントの産生のための方法であって、細胞内でプラスミドまたはベクターのコード核酸配列を発現させるための条件下で細胞培養培地中の本発明の宿主細胞を培養することを含む、当該方法も提供される。本方法は、細胞培養上清から抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントを取得することを更に含み得る。次いで、取得された抗体は、医薬組成物へと製剤化され得る。更に、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントを発現する細胞を作製する方法であって、本発明のプラスミドまたはベクターを上記細胞に形質移入することを含む、当該方法が提供される。次いで、上記細胞は、抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片もしくはバリアントの産生のために培養され得る。
医薬組成物
本発明の更なる態様によれば、本明細書で定義される多重特異性抗体を含む組成物が提供される。かかる実施形態では、組成物は、他の賦形剤と任意に組み合わされた抗体を含み得る。１種以上の追加の活性薬剤（例えば、本明細書において言及される疾患を処置するのに好適な活性薬剤）を含む組成物も含まれる。
本発明の更なる態様によれば、本明細書で定義される多重特異性抗体を含む組成物が提供される。かかる実施形態では、組成物は、他の賦形剤と任意に組み合わされた抗体を含み得る。１種以上の追加の活性薬剤（例えば、本明細書において言及される疾患を処置するのに好適な活性薬剤）を含む組成物も含まれる。
本発明の更に別の態様では、本明細書で定義される抗体またはその抗原結合断片を、薬学的に許容される希釈剤または担体と共に含む医薬組成物が提供される。本発明の多重特異性抗体は、対象に投与するのに好適な医薬組成物に組み込むことができる。典型的に、医薬組成物は、本発明の抗体と、薬学的に許容される担体とを含む。本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される担体」としては、生理的に適合可能なあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌薬剤、等張剤、ならびに吸収遅延剤などが挙げられる。薬学的に許容される担体の例としては、水、生理食塩水、塩、リン酸緩衝食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなどのうちの１つ以上、及びそれらの組み合わせが挙げられる。多くの場合、等張剤、例えば、糖類、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、または塩化ナトリウムを組成物に含めることが好ましい。抗体またはその抗原結合断片の貯蔵寿命または有効性を増強する、薬学的に許容される物質、例えば、湿潤剤または少量の補助剤、例えば、湿潤剤もしくは乳化剤、防腐剤、または緩衝剤。
本発明の組成物は種々の形態であり得る。これらとしては、例えば、液体、半固体、及び固体の剤形、例えば、溶液（例えば、注射剤及び注入剤）、分散体または懸濁液、錠剤、丸剤、粉末、リポソーム、及び坐剤が挙げられる。好ましい形態は、意図される投与様式及び治療用途に依存する。典型的な好ましい組成物は、注射剤または注入剤の形態である。
好ましい投与様式は、非経口（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、クモ膜下腔内）である。好ましい実施形態では、抗体は、静脈内注入または注射により投与される。別の好ましい実施形態では、抗体は、筋肉内注射または皮下注射により投与される。
治療用組成物は、通常、製造及び貯蔵条件下で無菌かつ安定でなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルション、分散体、リポソーム、または高薬物濃度に適した他の規則構造として製剤化され得る。
本明細書に記載される疾患の処置のための治療法において、かかる疾患の処置に通常使用される他の確立された治療法の補助として、またはそれと併用して、本発明の医薬組成物を使用することは本発明の範囲内である。
本発明の更なる態様では、抗体、組成物、または医薬組成物は、少なくとも１種の活性薬剤と共に、逐次的に、同時に、または別々に投与される。
処置方法
本発明の更なる態様によれば、薬物として使用するための、本明細書で定義される単離された多重特異性抗体が提供される。本明細書における、薬物としてまたは療法において「使用するための」抗体への言及は、対象への抗体の投与に限定される。
本発明の更なる態様によれば、薬物として使用するための、本明細書で定義される単離された多重特異性抗体が提供される。本明細書における、薬物としてまたは療法において「使用するための」抗体への言及は、対象への抗体の投与に限定される。
一実施形態では、多重特異性抗体は、がんの処置に使用するためのものである。一実施形態では、本発明は、多重特異性抗体を対象に投与するステップを含む、それを必要とする対象の疾患または障害を処置する方法である。種々の実施形態において、疾患または障害は、がんである。一実施形態では、多重特異性抗体は、がんの処置に使用するためのものであり、健常細胞を温存しながら病変細胞の死をもたらす。更なる実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、がんの処置に使用するためのものである。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、がんの処置に使用するためのものである。更なる実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、がんの処置に使用するためのものである。
本発明の更なる態様によれば、薬剤として使用するための本明細書で定義される医薬組成物が提供される。一実施形態では、医薬組成物は、がんの処置に使用するためのものである。更なる実施形態では、医薬組成物は、がんの処置に使用するためのものである。
本発明の更なる態様によれば、本明細書で定義される治療上有効量の単離された多重特異性抗体を投与することを含む、それを必要とする対象における免疫応答を調節する方法が提供される。種々の実施形態では、対象における免疫応答を調節することは、γδＴ細胞に結合するか、もしくはγδＴ細胞を標的とすること、γδＴ細胞を活性化すること、γδＴ細胞の増殖を引き起こすか、もしくは増加させること、γδＴ細胞の増大を引き起こすか、もしくは増加させること、γδＴ細胞の脱顆粒を引き起こすか、もしくは増加させること、γδＴ細胞による殺傷活性を引き起こすか、もしくは増加させること、健常細胞を温存しながらγδＴ細胞による殺傷活性を引き起こすか、もしくは増加させること、γδＴ細胞の細胞傷害性を引き起こすか、もしくは増加させること、健常細胞を温存しながらγδＴ細胞の細胞傷害性を引き起こすか、もしくは増加させること、γδＴ細胞の動員を引き起こすか、もしくは増加させること、γδＴ細胞の生存率を増加させること、またはγδＴ細胞の疲弊に対する抵抗性を増加させることを含む。対象における免疫応答を調節することは、第２の抗原に結合するか、またはそれを標的とすることを更に含み得る。例えば、幾つかの実施形態では、第２の抗原の結合は、特にそれが免疫調節性抗原である場合、ＴＲＤＶ１への多重特異性抗体の結合による免疫調節に加えて、第２の抗原による免疫調節を刺激し得る。よって、免疫応答の調節は、ＴＲＤＶ１抗原の会合を介して調節される第１のシグナル伝達経路と、第２の免疫調節性抗原の会合を介して調節される第２のシグナル伝達経路との、２つの異なるシグナル伝達経路を介する調節を含み得る。
本発明の更なる態様によれば、本明細書で定義される治療上有効量の多重特異性抗体を投与することを含む、それを必要とする対象のがんを処置する方法が提供される。あるいは、治療上有効量の医薬組成物が投与される。
本発明の更なる態様によれば、例えば、がんの処置における薬剤の製造のための本明細書で定義される抗体またはその抗原結合断片の使用が提供される。
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片が対象に投与され、対象は、がんを有する。
本発明の更なる態様によれば、薬剤として使用するための本明細書で定義される医薬組成物が提供される。一実施形態では、医薬組成物が対象に投与され、対象は、がんを有する。
本発明の更なる態様によれば、本明細書で定義される治療上有効量の単離された多重特異性抗体を対象に投与する方法が提供され、対象は、がんを有する。あるいは、治療上有効量の医薬組成物が投与される。
本発明の更なる態様によれば、例えば、対象に投与される薬剤の製造のための本明細書で定義される抗体またはその抗原結合断片の使用が提供され、対象は、がんを有する。
種々の実施形態では、開示される方法及び組成物により処置され得るがんとしては、限定されるものではないが、急性リンパ芽球性、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、虫垂癌、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、骨肉腫及び悪性線維性組織球腫、脳幹神経膠腫、脳腫瘍、脳腫瘍、脳幹神経膠腫、中枢神経系非定型奇形腫様／ラブドイド腫瘍、中枢神経系胚芽腫、小脳星状細胞腫、大脳星状細胞腫／悪性神経膠腫、頭蓋咽頭腫、上衣芽細胞腫、上衣腫、髄芽細胞腫、髄上皮腫、中間型松果体実質腫瘍、テント上原始神経外胚葉性腫瘍及び松果体芽腫、視覚路及び視床下部神経膠腫、脳脊髄腫瘍、乳癌、気管支腫瘍、バーキットリンパ腫、カルチノイド腫瘍、消化管カルチノイド腫瘍、中枢神経系非定型奇形腫様／ラブドイド腫瘍、中枢神経系胚芽腫、中枢神経系リンパ腫、小脳星状細胞腫大脳星状細胞腫／悪性神経膠腫、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄増殖性障害、結腸癌、大腸癌、頭蓋咽頭腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、食道癌、ユーイングファミリー腫瘍、性腺外生殖細胞腫瘍、肝外胆管癌、眼内黒色腫、網膜芽細胞腫、胆嚢癌、胃癌（胃がん）、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍（ｇｉｓｔ）、生殖細胞腫瘍、妊娠性絨毛性腫瘍、神経膠腫、神経膠腫脳幹、神経膠腫大脳星状細胞腫、視覚路及び視床下部の神経膠腫、ヘアリーセル白血病、頭頸部癌、肝細胞（肝臓）癌、ランゲルハンス細胞組織球症、ホジキンリンパ腫、下咽頭癌、視床下部及び視覚路の神経膠腫、眼内黒色腫、膵島細胞腫瘍、腎臓（腎細胞）癌、ランゲルハンス細胞組織球症、喉頭癌、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、ヘアリーセル白血病、口唇癌及び口腔癌、肝臓癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、エイズ関連リンパ腫、バーキットリンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、骨の悪性線維性組織球腫及び骨肉腫、髄芽細胞腫、黒色腫、メルケル細胞癌、中皮腫、原発不明の転移性頸部扁平上皮癌、口腔癌（ｍｏｕｔｈ ｃａｎｃｅｒ）、多発性内分泌腫瘍症候群、多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍、真菌症、菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性疾患、骨髄性白血病、骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、骨髄増殖性障害、鼻腔癌及び副鼻腔癌、鼻咽腔癌、神経芽細胞腫、非小細胞肺癌、口腔癌（ｏｒａｌ ｃａｎｃｅｒ）、口腔癌（ｏｒａｌ ｃａｖｉｔｙ ｃａｎｃｅｒ）、中咽頭癌、骨肉腫及び骨の悪性線維性組織球腫、卵巣癌、卵巣上皮癌、卵巣生殖細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍、膵癌、膵癌、乳頭腫症、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌（ｐｈａｒｙｎｇｅａｌ ｃａｎｃｅｒ）、褐色細胞腫、中間型松果体実質腫瘍、松果体芽腫及びテント上原始神経外胚葉性腫瘍、下垂体腫瘍、形質細胞腫瘍／多発性骨髄腫、胸膜肺芽腫、原発性中枢神経系リンパ腫、前立腺癌、直腸癌、腎細胞（腎臓）癌、腎盂及び尿管、第１５染色体のｎｕｔ遺伝子が関与する呼吸器癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、肉腫、ユーイングファミリー腫瘍、カポジ肉腫、軟部組織肉腫、子宮肉腫、セザリー症候群、皮膚癌（非黒色腫）、皮膚癌（黒色腫）、メルケル細胞皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織肉腫、扁平上皮癌、頸部扁平上皮癌、胃がん（胃癌）、テント上原始神経外胚葉性腫瘍、Ｔ細胞リンパ腫、精巣癌、咽頭癌（ｔｈｒｏａｔ ｃａｎｃｅｒ）、胸腺腫及び胸腺癌、甲状腺癌、腎盂及び尿管の移行細胞癌、妊娠性絨毛性腫瘍、尿道癌、子宮癌、子宮肉腫、膣癌、外陰癌、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、ならびにウィルムス腫瘍が挙げられる。種々の実施形態では、開示される方法及び組成物により処置され得るがんが処置される一方で、健常細胞は温存される。
種々の実施形態では、開示される方法及び組成物により処置され得るがんは、ＥＧＦＲ陽性（ＥＧＦＲ＋）癌を含む。
一実施形態において、本発明は、本明細書で定義される多重特異性抗体を投与するステップを含む、対象における少なくとも１つのγδＴ細胞を活性化する方法である。
一実施形態において、本発明は、本明細書で定義される多重特異性抗体を対象に投与するステップを含む、対象におけるγδＴ細胞の増殖を引き起こすまたは増加させる方法である。
一実施形態において、本発明は、本明細書で定義される多重特異性抗体を対象に投与するステップを含む、対象におけるγδＴ細胞の脱顆粒を引き起こすまたは増加させる方法である。
一実施形態では、本発明は、対象におけるγδＴ細胞殺傷活性（例えば、Ｔ細胞による殺傷活性）を引き起こすか、または増強する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。一実施形態では、本発明は、健常細胞を温存しながら対象におけるγδＴ細胞殺傷活性（例えば、Ｔ細胞による殺傷活性）を引き起こすか、または増強する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。
一実施形態では、本発明は、対象におけるγδＴ細胞の細胞傷害性を引き起こすか、または増強する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。一実施形態では、本発明は、健常細胞を温存しながら対象におけるγδＴ細胞の細胞傷害性を引き起こすか、または増強する方法であって、本明細書で定義される抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片を当該対象に投与するステップを含む、当該方法である。
一実施形態において、本発明は、本明細書で定義される多重特異性抗体を対象に投与するステップを含む、対象におけるγδＴ細胞の動員を引き起こすまたは増加させる方法である。
一実施形態において、本発明は、本明細書で定義される多重特異性抗体を対象に投与するステップを含む、対象におけるγδＴ細胞の生存率を増加させる方法である。
一実施形態において、本発明は、本明細書で定義される多重特異性抗体を対象に投与するステップを含む、対象におけるγδＴ細胞の消耗に対する抵抗性を増加させる方法である。
本発明の更なる態様によれば、対象における免疫応答を刺激する方法が提供され、この方法は、免疫応答を刺激するのに有効な量で多重特異性抗体を対象に投与することを含む。
多重特異性抗体またはその抗原結合断片の使用
本発明の更なる態様によれば、γδＴ細胞（特にＶδ１Ｔ細胞）の抗原認識、活性化、シグナル伝達、または機能を研究するための、本明細書に記載される多重特異性抗体の使用が提供される。本明細書に記載されるように、抗体は、γδＴ細胞機能を調査するために使用され得るアッセイにおいて活性があることが示された。かかる抗体は、γδＴ細胞の増殖を誘発するのにも有用であり得、従って、γδＴ細胞（例えば、Ｖδ１Ｔ細胞）を増殖させる方法において使用され得る。
本発明の更なる態様によれば、γδＴ細胞（特にＶδ１Ｔ細胞）の抗原認識、活性化、シグナル伝達、または機能を研究するための、本明細書に記載される多重特異性抗体の使用が提供される。本明細書に記載されるように、抗体は、γδＴ細胞機能を調査するために使用され得るアッセイにおいて活性があることが示された。かかる抗体は、γδＴ細胞の増殖を誘発するのにも有用であり得、従って、γδＴ細胞（例えば、Ｖδ１Ｔ細胞）を増殖させる方法において使用され得る。
Ｖδ１鎖に結合する抗体は、γδＴ細胞を検出するために使用され得る。例えば、抗体は、検出可能な標識もしくはレポーター分子で標識されてもよく、または試料中のＶδ１Ｔ細胞を選択的に検出及び／または単離するための捕捉リガンドとして使用されてもよい。標識抗体は、当該技術分野において公知の多くの方法、例えば、免疫組織染色及びＥＬＩＳＡにおいて有用である。
検出可能な標識またはレポーター分子は、放射性同位体、例えば、３Ｈ、１４Ｃ、３２Ｐ、３５Ｓ、もしくは１２５ｌ；蛍光部分もしくは化学発光部分、例えば、フルオレセインイソチオシアネートもしくはローダミン；または酵素、例えば、アルカリホスファターゼ、β－ガラクトシダーゼ、ワサビペルオキシダーゼ、もしくはルシフェラーゼであり得る。本発明の多重特異性抗体に適用された蛍光標識は、次いで、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）法において使用され得る。
従って、種々の実施形態では、本発明は、インビボでγδＴ細胞を調節する方法、インビボでγδＴ細胞に結合する方法、インビボでγδＴ細胞を標的とする方法、インビボでγδＴ細胞を活性化する方法、インビボでγδＴ細胞を増殖させる方法、インビボでγδＴ細胞を増大させる方法、インビボでγδＴ細胞を検出する方法、インビボでγδＴ細胞の脱顆粒を引き起こす方法、インビボでγδＴ細胞による殺傷活性を引き起こす方法、インビボで抗体またはその抗原結合断片を選択する方法を含み、当該方法は、本明細書に記載されるように対象に多重特異性抗体またはその抗原結合断片を投与するステップを含む。
γδＴ細胞を調節するための薬物
本明細書に記載される多重特異性抗体は、患者の生体内原位置で（すなわち、インビボで）δ可変部１鎖（Ｖδ１）Ｔ細胞を調節するために使用され得るか、または調節するのに有用であり得る。多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、かかる目的のための薬物に含まれ得る。
本明細書に記載される多重特異性抗体は、患者の生体内原位置で（すなわち、インビボで）δ可変部１鎖（Ｖδ１）Ｔ細胞を調節するために使用され得るか、または調節するのに有用であり得る。多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、かかる目的のための薬物に含まれ得る。
Ｖδ１Ｔ細胞の調節は以下を含み得る：
－ 例えば、Ｖδ１Ｔ細胞の数を選択的に増加させることによるＶδ１Ｔ細胞の増殖、またはＶδ１Ｔ細胞の生存の促進；
－ 例えば、Ｖδ１Ｔ細胞の効力を増強すること、すなわち標的細胞の殺傷を増加させることによる、Ｖδ１Ｔ細胞の刺激；
－ 例えば、Ｖδ１Ｔ細胞の持続性を増加させることによる、Ｖδ１Ｔ細胞の疲弊の防止；
－ Ｖδ１Ｔ細胞の脱顆粒；
－ ＮＣＲ発現の増加；
－ 例えば、Ｖδ１ＴＣＲ細胞表面発現の下方調節、すなわち、Ｖδ１ＴＣＲ内部移行もしくはＶδ１ＴＣＲタンパク質の発現の減少を引き起こすか、もしくはＶδ１ＴＣＲの結合を遮断することによる、Ｖδ１Ｔ細胞の免疫調節；及び／または
－ ＴＣＲ／ＣＤ３複合体の下方調節。
－ 例えば、Ｖδ１Ｔ細胞の数を選択的に増加させることによるＶδ１Ｔ細胞の増殖、またはＶδ１Ｔ細胞の生存の促進；
－ 例えば、Ｖδ１Ｔ細胞の効力を増強すること、すなわち標的細胞の殺傷を増加させることによる、Ｖδ１Ｔ細胞の刺激；
－ 例えば、Ｖδ１Ｔ細胞の持続性を増加させることによる、Ｖδ１Ｔ細胞の疲弊の防止；
－ Ｖδ１Ｔ細胞の脱顆粒；
－ ＮＣＲ発現の増加；
－ 例えば、Ｖδ１ＴＣＲ細胞表面発現の下方調節、すなわち、Ｖδ１ＴＣＲ内部移行もしくはＶδ１ＴＣＲタンパク質の発現の減少を引き起こすか、もしくはＶδ１ＴＣＲの結合を遮断することによる、Ｖδ１Ｔ細胞の免疫調節；及び／または
－ ＴＣＲ／ＣＤ３複合体の下方調節。
Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇に焦点を当てる先行技術の抗Ｖδ１抗体とは異なり、本発明の抗体は、ＴＲＤＶ１結合ドメインを介したＶδ１Ｔ細胞の活性化に有用である。本発明の抗体は、それらが結合するＴ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし得るが、Ｖδ１Ｔ細胞の枯渇を引き起こさず、むしろＴ細胞を刺激するため、Ｔ細胞のこのコンパートメントの活性化による恩恵を受ける治療状況において有用であり得る。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、ＴＣＲの下方調節、ＣＤ３の下方調節、活性化マーカー、例えば、ＣＤ２５及びＫｉ６７ならびに脱顆粒マーカーＣＤ１０７ａの変化から明らかである。Ｖδ１Ｔ細胞の活性化は、次に、ＩＮＦγ及びＴＮＦαなどの炎症性サイトカインの放出を引き起こして、免疫ライセンシングを促進する。
Ｖδ１＋細胞上の免疫細胞マーカーを調節する薬物
抗体またはその抗原結合断片は、患者に投与されると、Ｖδ１＋細胞の免疫細胞マーカーを調節し得る。
抗体またはその抗原結合断片は、患者に投与されると、Ｖδ１＋細胞の免疫細胞マーカーを調節し得る。
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、γδＴ細胞の調節を測定することによって、その治療的使用に対する適合性が評価され得る。例えば、Ｖδ１＋Ｔ細胞またはモデル系の細胞に存在するＣＤ２５またはＣＤ６９またはＣＤ１０７ａのレベルの変化を測定することによる。かかるマーカーは、多くの場合、リンパ球調節（例えば、増殖または脱顆粒）のマーカーとして使用されており、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片の適用後に、例えば、フローサイトメトリーにより測定され得る。驚くべきことに、かかる評価において（例えば、実施例７、１７、１８を参照のこと）、本明細書に記載される抗体が、標的Ｖδ１＋Ｔ細胞における測定可能により高レベルのＣＤ２５またはＣＤ６９またはＣＤ１０７ａレベルをもたらしたことが観察された。場合により、モデル系で試験されたＶδ１＋細胞またはその集団の表現型の変化は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３、ＴＳ８．２など）が上記の同等なγδＴ細胞に適用された場合の表現型の変化と比較され得る。
従って、本発明の一態様では、治療的使用についてγδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、ならびにＶδ１＋細胞の表面上のＣＤ２５及び／またはＣＤ６９及び／またはＣＤ１０７ａのレベルに対する効果を決定することを含む、当該方法が提供される。ＣＤ２５、ＣＤ６９、及び／またはＣＤ１０７ａのレベルに対する効果は、一定期間にわたって決定／測定され得る。この効果は、同じ期間にわたって上記抗体が上記細胞に適用されない場合のＶδ１＋細胞の表面上のＣＤ２５及び／またはＣＤ６９及び／またはＣＤ１０７ａのレベルと比較して測定され得ることが理解されよう。本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される多重特異性抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に当該抗体を添加し、次いで、上記Ｖδ１＋細胞の表面上のＣＤ２５またはＣＤ６９またはＣＤ１０７ａのレベル（または発現）を測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋細胞の増殖特性または数を調節する薬物
抗体またはその抗原結合断片は、患者に投与されると、Ｖδ１＋細胞の増殖特性を調節し得る。例えば、抗体またはその抗原結合断片は、Ｖδ１＋細胞を増殖させ得る。
抗体またはその抗原結合断片は、患者に投与されると、Ｖδ１＋細胞の増殖特性を調節し得る。例えば、抗体またはその抗原結合断片は、Ｖδ１＋細胞を増殖させ得る。
γδＴ増殖を測定する代替的アプローチは、Ｖδ１＋細胞を含有するモデル系に、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を適用した場合の当該細胞の相対数における経時的な変化を測定することを含み得る。驚くべきことに、かかる評価において、本明細書に記載される抗体が、上記Ｖδ１＋Ｔ細胞の数を測定可能に増加させることができたことが観察された（例えば、実施例１０、１７、及び１８を参照のこと）。場合により、この数の変化は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、抗ＯＫＴ３）が上記モデル系に適用される場合に観察される数の変化と比較され得る。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、及び集団内のＶδ１＋細胞の数に対する効果を決定することを含む、当該方法が提供される。細胞数に対する効果は、一定期間にわたって決定／測定され得る。この効果は、同じ期間にわたって上記抗体が細胞集団に適用されない場合に観察される細胞数に対する効果と比較して測定され得ることが理解されよう。本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に上記抗体を適用し、次いで、上記細胞の数を経時的に測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋細胞の増殖能力及び数を調節する薬剤
γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される理想的な治療抗体またはその抗原結合断片は、インビボでＶδ１＋細胞の増殖を増強できるものであり得る。そのため、かかる抗体は、対象または患者におけるＶδ１＋細胞数を特異的に増加させるように設計された薬物として用いられ得る。例を以下に示す。
γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される理想的な治療抗体またはその抗原結合断片は、インビボでＶδ１＋細胞の増殖を増強できるものであり得る。そのため、かかる抗体は、対象または患者におけるＶδ１＋細胞数を特異的に増加させるように設計された薬物として用いられ得る。例を以下に示す。
がん：
Ｖδ１＋細胞数の相対的増加は、多数のがんについて転帰の改善に関連する正の予後指標として報告されている（例えば、Ｇｅｎｔｌｅｓ ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｎａｔｕｒｅ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２１：９３８－９４５、Ｗｕ ｅｔ ａｌ．（２０１９）Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓ．Ｍｅｄ．１１（５１３）：ｅａａｘ９３６４、Ｃａｔｅｌｌａｎｉ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｂｌｏｏｄ １０９（５）：２０７８－２０８５を参照のこと）。一実施形態では、がん患者内の生体内原位置でＶδ１＋細胞の相対数または絶対数を増加させることができる薬物が本明細書において提供される。
Ｖδ１＋細胞数の相対的増加は、多数のがんについて転帰の改善に関連する正の予後指標として報告されている（例えば、Ｇｅｎｔｌｅｓ ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｎａｔｕｒｅ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２１：９３８－９４５、Ｗｕ ｅｔ ａｌ．（２０１９）Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓ．Ｍｅｄ．１１（５１３）：ｅａａｘ９３６４、Ｃａｔｅｌｌａｎｉ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｂｌｏｏｄ １０９（５）：２０７８－２０８５を参照のこと）。一実施形態では、がん患者内の生体内原位置でＶδ１＋細胞の相対数または絶対数を増加させることができる薬物が本明細書において提供される。
病原性感染／寄生虫感染／ウイルス感染：
Ｖδ１＋細胞の濃縮は、多数の後天性病原性感染／寄生虫感染／ウイルス感染に対する宿主防御において観察される。最近の総説については、Ｚｈａｏ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．２０１８：５０８１６３４を参照のこと。更に、Ｖδ１＋の数の増加は、種々のＤＮＡウイルス及びＲＮＡウイルスの感染を防ぐとも考えられている。例えば、数の増加は、同種異系移植片に関連するＣＭＶ感染においても防御的であると考えられている（ｖａｎ Ｄｏｒｐ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｂｌｏｏｄ ａｎｄ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ １７（２）：Ｓ２１７を参照のこと）。更に、Ｖδ＋細胞数は、コロナウイルス感染患者において増加する（Ｐｏｃｃｉａ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１９３（９）：１２４４－１２４９）。
Ｖδ１＋細胞の濃縮は、多数の後天性病原性感染／寄生虫感染／ウイルス感染に対する宿主防御において観察される。最近の総説については、Ｚｈａｏ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．２０１８：５０８１６３４を参照のこと。更に、Ｖδ１＋の数の増加は、種々のＤＮＡウイルス及びＲＮＡウイルスの感染を防ぐとも考えられている。例えば、数の増加は、同種異系移植片に関連するＣＭＶ感染においても防御的であると考えられている（ｖａｎ Ｄｏｒｐ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｂｌｏｏｄ ａｎｄ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ １７（２）：Ｓ２１７を参照のこと）。更に、Ｖδ＋細胞数は、コロナウイルス感染患者において増加する（Ｐｏｃｃｉａ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１９３（９）：１２４４－１２４９）。
別の実施形態では、病原性感染症を有する対象または患者におけるＶδ１＋細胞の相対数または絶対数を増加させることができる薬剤が本明細書において提供される。
幹細胞移植：
Ｖδ１＋細胞数の増加は、疾患再発の減少、ウイルス感染の減少、全生存率及び無症候生存率の上昇、ならびに造血幹細胞移植中の全般的に良好な臨床転帰にも関連している（例えば、Ａｒｕｄａ ｅｔ ａｌ．（２０１９）Ｂｌｏｏｄ ３（２１）：３４３６－３４４８及びＧｏｄｄｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ３９：７５１－７５７を参照のこと）。従って、別の実施形態では、幹細胞移植を補助する処置レジメンの一部として、対象におけるＶδ１＋細胞の相対数または絶対数を増加させることができる薬物が本明細書において提供される。
Ｖδ１＋細胞数の増加は、疾患再発の減少、ウイルス感染の減少、全生存率及び無症候生存率の上昇、ならびに造血幹細胞移植中の全般的に良好な臨床転帰にも関連している（例えば、Ａｒｕｄａ ｅｔ ａｌ．（２０１９）Ｂｌｏｏｄ ３（２１）：３４３６－３４４８及びＧｏｄｄｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ３９：７５１－７５７を参照のこと）。従って、別の実施形態では、幹細胞移植を補助する処置レジメンの一部として、対象におけるＶδ１＋細胞の相対数または絶対数を増加させることができる薬物が本明細書において提供される。
従って、生体内原位置でＶδ１＋細胞の数を優先的または特異的に増加させることができる薬物が非常に望ましい。
Ｖδ１＋細胞のサイトカイン分泌を維持するか、または誘発するか、または増加させる薬剤
サイトカインは、免疫系の特定の細胞によって分泌されるタンパク質、ペプチド、または糖タンパク質の大きなグループである。それらは、免疫、炎症、及び造血を媒介し、制御するシグナル伝達分子のカテゴリーである。幾つかのサイトカインは、腫瘍及び細胞の微小環境、自己免疫組織及び関連する微小環境、またはウイルスに感染した組織もしくは細胞の環境の直接的または間接的な調節を通じて、疾患の徴候及び症状を改善させることに関係付けられてきた。例示的な炎症誘発性サイトカインとしては、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）及びインターフェロンγ（ＩＦＮγ）が挙げられる。
サイトカインは、免疫系の特定の細胞によって分泌されるタンパク質、ペプチド、または糖タンパク質の大きなグループである。それらは、免疫、炎症、及び造血を媒介し、制御するシグナル伝達分子のカテゴリーである。幾つかのサイトカインは、腫瘍及び細胞の微小環境、自己免疫組織及び関連する微小環境、またはウイルスに感染した組織もしくは細胞の環境の直接的または間接的な調節を通じて、疾患の徴候及び症状を改善させることに関係付けられてきた。例示的な炎症誘発性サイトカインとしては、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）及びインターフェロンγ（ＩＦＮγ）が挙げられる。
しかしながら、かかるサイトカインの多くは、全身投与すると好ましくない毒性を示す。例えば、ＴＮＦαは、移植された腫瘍の出血性壊死を誘発することができ、他の化学療法薬と組み合わせると相乗的な抗腫瘍効果を発揮することが報告されているが、全身性組換えヒトＴＮＦα（ｒｈＴＮＦα）を用いる様々な臨床試験は、低血圧、悪寒、静脈炎、血小板減少、白血球減少及び肝毒性、発熱、疲労、悪心／嘔吐、倦怠感及び脱力感、頭痛、胸部絞扼感、腰背痛、下痢、ならびに息切れを含む重大な用量制限副作用を明らかにしている。
組換えＩＦＮγの使用にも同様の全身毒性の課題がある。例えば、がんの状況において、ＩＦＮγは、ＭＨＣクラスＩ及びＩＩの上方調節を含む好ましい多面的効果を発揮して、抗腫瘍免疫を刺激し、Ｔ細胞浸潤を増加させ、抗血管新生効果を付与し、ケモカイン／サイトカインの分泌を誘発し、直接的ながん細胞増殖抑制効果を発揮し得るが、有害な副作用も観察されている。有害な副作用としては、発熱、頭痛、寒気、疲労、下痢、悪心、嘔吐、食欲不振、肝トランスアミナーゼの一時的増加、ならびに顆粒球数及び白血球数の一時的減少が挙げられる。
全身性組換えＴＮＦα及びＩＦＮγの可能性及び制限の両方に関する最近の概説については、Ｓｈｅｎ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆ．５１（４）：ｅ１２４４１を参照のこと。
よって、かかるサイトカインの、より生体内原位置で制御された、より局所化された、より組織特異的または細胞特異的な産生が必要である。例えば、炎症誘発性サイトカインのより制御された発現または誘導が、「冷たい」腫瘍を「熱い」腫瘍に変えることができる１つのアプローチとして提唱されている。熱い腫瘍は、ＣＤ４５＋Ｔ細胞の数または密度の増加も観察されるため、場合により、「Ｔ細胞炎症性」とも称される。最近の概説については、Ｂｏｎａｖｅｎｔｕｒａ ｅｔ ａｌ．（２０１９） Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：１６８を参照のこと。
このような理由で、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される理想的な治療抗体またはその抗原結合断片は、インビボでＶδ１＋細胞におけるサイトカインの分泌を維持するか、または増強するか、または誘発することができるものであり得る。そのため、かかる抗体は、対象または患者において、より局所的で全身性ではない様式でサイトカインを特異的に増加させるか、または誘発するように設計された薬物として、かつ上記対象または患者におけるＶδ１＋細胞の分布とよりよく相関するものとして用いられ得る。
注目すべきことに、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体がＶδ１＋細胞に適用される場合、顕著に高いレベルのサイトカイン分泌が観察される。より具体的には、また非限定的な例として、顕著に高いレベルのＴＮＦα及びＩＦＮγが観察される。例えば、実施例１５を参照のこと。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、及び当該細胞集団により産生された少なくとも１種のサイトカインの量を決定することを含む、当該方法が提供される。産生されたサイトカインの量は、一定期間にわたって決定／測定されてもよく、任意により、同じ期間にわたって上記抗体が細胞集団に適用されない場合に観察される量と比較されてもよい。一実施形態では、抗体を細胞集団に投与した場合に産生されるサイトカインの観察されるレベルは、抗体を適用しない場合に産生されるサイトカインのレベルと比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約５０％超、約１００％超、約１５０％超、約２００％超、約２５０％超、約３００％超、約３５０％超、約４００％超、約４５０％超、約５００％超、約１０００％超である。本発明の更なる態様では、サイトカインは、炎症誘発性サイトカインである。本発明の更なる態様では、サイトカインは、ＴＮＦ－αサイトカインである。本発明の更なる態様では、ＩＦＮ－γサイトカインである。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に上記抗体を適用し、次いで、生成された少なくとも１種のサイトカインのレベルを測定することによる、当該方法が提供される。本発明の更なる態様では、測定されるサイトカインは、ＴＮＦ－αサイトカイン及び／またはＩＦＮ－γサイトカインである。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に上記抗体またはその抗原結合断片を適用し、産生された炎症誘発性サイトカインの量及び／または腫瘍もしくは腫瘍微小環境に存在するＣＤ４５＋Ｔ細胞の数もしくは密度を決定することによって、当該抗体がより冷たいか、または冷たい腫瘍を調節して、より熱いか、または熱い腫瘍にする効果を測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋細胞のグランザイムＢ活性を維持するか、または誘発するか、または増加させる薬剤
グランザイムＢは、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）及び細胞傷害性Ｔ細胞の顆粒に一般的に見出されるセリンプロテアーゼである。グランザイムＢは、これらの細胞によってポア形成タンパク質パーフォリンと共に分泌され、病変細胞などの標的細胞のアポトーシスを媒介する。
グランザイムＢは、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）及び細胞傷害性Ｔ細胞の顆粒に一般的に見出されるセリンプロテアーゼである。グランザイムＢは、これらの細胞によってポア形成タンパク質パーフォリンと共に分泌され、病変細胞などの標的細胞のアポトーシスを媒介する。
モデル系において標的病変細胞（例えば、がん細胞）との共培養でＶδ１＋細胞をインキュベートすると、溶解前の標的病変細胞においてグランザイムＢレベル及び活性のレベルを測定することができる。注目すべきことに、かかるモデル系で、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を、Ｖδ１＋細胞及びがん細胞のかかる共培養物に適用すると、細胞死前の疾患がん細胞においてより高いグランザイムＢレベル及び活性が観察される（例えば、実施例１６を参照のこと）。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価するための方法であって、Ｖδ１＋細胞及び病変細胞（例えば、がん細胞）を含む共培養物に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、ならびに共培養物中の病変細胞により産生されたグランザイムＢの量に対する効果を測定することを含む、当該方法が提供される。産生されたサイトカインの量は、一定期間にわたって決定／測定されてもよく、任意により、同じ期間にわたって上記抗体が上記共培養物に適用されない場合に観察される量と比較されもよい。一実施形態では、上記抗体が上記共培養物に適用される場合に測定されるグランザイムＢのレベルは、上記抗体が適用されない場合に観察されるグランザイムＢレベルと比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、約５０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、約１００％超、約２００％超である。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞及び病変細胞を含む共培養物に上記抗体を適用し、次いで、病変細胞におけるグランザイムＢの量または活性を測定することによる、当該方法が提供される。
ポリクローナルＶδ１＋細胞集団を増大させる薬剤
理想的な抗体薬剤は、Ｖδ１＋細胞の増大が超可変ＣＤＲ３配列レベルでクローン的に集中しすぎないことを保証するように設計されたものでもあり得る。従って、理想的な抗体薬物は、特定のまたは「プライベートな」δ１＋ＣＤＲ３配列パラトープに結合することによってＶδ１＋細胞の増殖を誘発することを回避するように設計され得る。むしろ、抗体は、Ｖδ１＋細胞のサブセットのみで提示される配列に結合するのではなく、全てのＶδ１＋Ｔ細胞受容体に存在する保存された生殖細胞系列型配列を介して、かつガンマ鎖に依存しない様式で結合し得る。
理想的な抗体薬剤は、Ｖδ１＋細胞の増大が超可変ＣＤＲ３配列レベルでクローン的に集中しすぎないことを保証するように設計されたものでもあり得る。従って、理想的な抗体薬物は、特定のまたは「プライベートな」δ１＋ＣＤＲ３配列パラトープに結合することによってＶδ１＋細胞の増殖を誘発することを回避するように設計され得る。むしろ、抗体は、Ｖδ１＋細胞のサブセットのみで提示される配列に結合するのではなく、全てのＶδ１＋Ｔ細胞受容体に存在する保存された生殖細胞系列型配列を介して、かつガンマ鎖に依存しない様式で結合し得る。
従って、理想的な抗体薬剤は、Ｖδ１＋細胞の増大を刺激して、ＣＤＲ３配列の混合物を含む複数のＶδ１＋細胞を発生させ得る。この結果、δ可変１鎖上に異なるＣＤＲ３配列を提示するＶδ１＋細胞のインビボで増大した異種ポリクローナル集団がもたらされる。注目すべきことに、Ｖδ１＋細胞を含有する免疫細胞の出発集団に本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を添加する方法によって作製された、増大したＶδ１＋細胞集団の分析において、抽出されたＲＮＡのＣＤＲ３超可変領域を通して配列決定するように設計されたＲＮＡｓｅｑベースの方法によって、高度のポリクローナル性が観察されている（例えば、実施例１０を参照のこと）。
従って、一態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞を含む細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、及び増大したＶδ１＋細胞のポリクローナル性を決定することを含む、当該方法が提供される。抗体薬剤は、複数のＶδ１＋ＣＤＲ３配列を含有する増大したポリクローナル集団を発生させることが望ましい。ポリクローナル性は、当該技術分野において公知の方法を使用して、例えば、上記Ｖδ１＋細胞のＶδ１鎖超可変ＣＤＲ３の内容を分析することができる核酸シーケンシング手法により決定され得る。
ポリクローナルＶδ１＋細胞を長時間増大させる薬剤
理想的な抗体薬剤は、一次Ｖδ１＋細胞をインビボで疲弊させることなく、かかる細胞の増殖を増強するか、または促進するか、または刺激することができてもよい。例えば、比較として、ＯＫＴ３などの抗ＣＤ３薬剤（例えば、ムロノマブ）は、ＣＤ３陽性Ｔ細胞を増大させることができる一方で、疲弊させ得るか、またはアネルギーを誘発し得る。本明細書に記載される、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体が生存Ｖδ１＋細胞の持続的な細胞分裂を引き起こす能力を評価するために、より長期の増殖研究を行った。注目すべきことに、これらの研究により、本明細書に記載される、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体が、生存しており、かつ依然として機能的に細胞傷害性であるＶδ１＋細胞の細胞分裂／増殖を４０日以上引き起こすことができることが明らかになった（例えば、実施例１０を参照のこと）。
理想的な抗体薬剤は、一次Ｖδ１＋細胞をインビボで疲弊させることなく、かかる細胞の増殖を増強するか、または促進するか、または刺激することができてもよい。例えば、比較として、ＯＫＴ３などの抗ＣＤ３薬剤（例えば、ムロノマブ）は、ＣＤ３陽性Ｔ細胞を増大させることができる一方で、疲弊させ得るか、またはアネルギーを誘発し得る。本明細書に記載される、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体が生存Ｖδ１＋細胞の持続的な細胞分裂を引き起こす能力を評価するために、より長期の増殖研究を行った。注目すべきことに、これらの研究により、本明細書に記載される、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体が、生存しており、かつ依然として機能的に細胞傷害性であるＶδ１＋細胞の細胞分裂／増殖を４０日以上引き起こすことができることが明らかになった（例えば、実施例１０を参照のこと）。
一実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、当該抗体またはその抗原結合断片を細胞集団に適用すること、及びＶδ１＋細胞の分裂が起こる時間の長さをモニタリングすることを含む、当該方法が提供される。理想的には、抗体は、５～６０日間、例えば、少なくとも７～４５日間、７～２１日間、または７～１８日間にわたってＶδ１＋細胞の分裂を刺激することができる。
更なる実施形態では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合し、患者に投与される場合にＶδ１＋細胞の分裂を刺激して、その数を少なくとも２倍の数、少なくとも５倍の数、少なくとも１０倍の数、少なくとも２５倍の数、少なくとも５０倍の数、少なくとも６０倍の数、少なくとも７０倍の数、少なくとも８０倍の数、少なくとも９０倍の数、少なくとも１００倍の数、少なくとも２００倍の数、少なくとも３００倍の数、少なくとも４００倍の数、少なくとも５００倍の数、６００倍の数、または少なくとも１，０００倍の数に増加させることができる、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片が提供される。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞、またはＶδ１＋細胞を含有する混合細胞集団に上記抗体を適用し、次いで、Ｖδ１＋細胞数を経時的に測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋免疫細胞を標的とすることによって非Ｖδ１＋免疫細胞を調節する薬剤
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、他の免疫細胞のＶδ１＋細胞による調節を測定することによっても評価され得る。例えば、ヒト組織αβ細胞及びγδＴ細胞を含むものなどの免疫細胞の混合集団を含むモデル系に、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を適用した後に、非γδＴ細胞「画分」で観察される変化が測定され得る。更に、上記モデルにおける非γδ細胞型に対する効果は、フローサイトメトリーによって測定され得る。例えば、γδＴ細胞及び非γδＴ細胞を含む混合培養物に、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を添加した際の、ＣＤ８＋αβＴ細胞の数の相対変化を測定することによる。任意により、非γδＴ細胞ＣＤ８＋リンパ球集団の数または表現型において観察される変化は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記混合集団に適用される場合の数の変化と比較され得る。
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、他の免疫細胞のＶδ１＋細胞による調節を測定することによっても評価され得る。例えば、ヒト組織αβ細胞及びγδＴ細胞を含むものなどの免疫細胞の混合集団を含むモデル系に、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を適用した後に、非γδＴ細胞「画分」で観察される変化が測定され得る。更に、上記モデルにおける非γδ細胞型に対する効果は、フローサイトメトリーによって測定され得る。例えば、γδＴ細胞及び非γδＴ細胞を含む混合培養物に、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を添加した際の、ＣＤ８＋αβＴ細胞の数の相対変化を測定することによる。任意により、非γδＴ細胞ＣＤ８＋リンパ球集団の数または表現型において観察される変化は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記混合集団に適用される場合の数の変化と比較され得る。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞及びＶδ１陰性免疫細胞を含む免疫細胞または組織の混合集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、及び当該Ｖδ１陰性免疫細胞に対する効果を測定することを含む、当該方法が提供される。この効果は、一定期間にわたって決定／測定されてもよく、任意により、同じ期間にわたって上記抗体が適用されない場合にＶδ１陰性細胞において観察される効果と比較されてもよい。この効果は、Ｖδ１陰性免疫細胞の数の変化として測定され得る。例えば、抗体は、Ｖδ１陰性免疫細胞の数を、上記抗体が適用されない場合に観察されるレベルと比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、約５０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、約１００％超、約５００％超増加させ得る。
本発明の更なる態様では、調節されるＶδ１陰性細胞は、ＣＤ４５＋細胞である。本発明の更なる態様では、調節される細胞は、αβＴ細胞である。本発明の更なる態様では、調節されるαβ＋細胞は、ＣＤ８＋リンパ球である。本発明の更なる態様では、調節されるαβＴ細胞またはその集団は、細胞分裂の増強の証拠を示す。本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞及びＶδ１陰性免疫細胞を含む免疫細胞の混合集団に上記抗体を投与し、次いで、上記多重特異性抗体またはその抗原結合断片により調節されたＶδ１＋細胞によりＶδ１陰性細胞集団に付与された効果を測定することによる、当該方法が提供される。
任意により、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片によりもたらされる「Ｖδ１＋細胞による免疫系調節」において、Ｖδ１＋細胞数の付随する増加も観察される。そして、この理論に拘束されるものではないが、Ｖδ１＋細胞数の上記増加は、αβＴ細胞などの共存するＶδ１陰性免疫細胞の付随する増殖を引き起こす原因となり得る可能性がある。代替の仮説は、Ｖδ１＋Ｔ細胞からの抗体誘導性サイトカイン分泌がＶδ１陰性免疫細胞の増殖を刺激するというものであり得る。
本発明の更なる態様では、αβ＋ＣＤ８＋リンパ球集団の観察される増加は、ＯＫＴ３抗体または代替的な抗Ｖδ１抗体などの比較抗体と比較される。本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋Ｔ細胞及びαβＴ細胞を含む免疫細胞の混合集団に上記抗体を適用し、次いで、ＣＤ８＋αβ＋Ｔ細胞リンパ球の数を経時的に測定することによる、当該方法が提供される。
腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を調節する薬剤
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、モデル系において腫瘍浸潤集団（ＴＩＬ）に付与される効果を測定することによっても評価され得る。驚くべきことに（例えば、実施例１８を参照のこと）、かかる評価において、本明細書に記載される抗体は、ヒト腫瘍におけるＴＩＬ集団を測定可能に調節した。例えば、γδ＋リンパ球ＴＩＬ集団または非γδリンパ球ＴＩＬ集団の数または表現型のいずれかにおける変化が、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片をヒト腎細胞癌などのヒト腫瘍に適用した後に測定される。任意により、γδ＋リンパ球ＴＩＬ集団または非γδリンパ球ＴＩＬ集団のいずれかの数または表現型において観察される変化は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記モデル系に適用される場合に観察される変化と比較され得る。
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、モデル系において腫瘍浸潤集団（ＴＩＬ）に付与される効果を測定することによっても評価され得る。驚くべきことに（例えば、実施例１８を参照のこと）、かかる評価において、本明細書に記載される抗体は、ヒト腫瘍におけるＴＩＬ集団を測定可能に調節した。例えば、γδ＋リンパ球ＴＩＬ集団または非γδリンパ球ＴＩＬ集団の数または表現型のいずれかにおける変化が、本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片をヒト腎細胞癌などのヒト腫瘍に適用した後に測定される。任意により、γδ＋リンパ球ＴＩＬ集団または非γδリンパ球ＴＩＬ集団のいずれかの数または表現型において観察される変化は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記モデル系に適用される場合に観察される変化と比較され得る。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、ヒト腫瘍に存在するか、またはヒト腫瘍に由来するＴＩＬに当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、及びＴＩＬの数に対する効果を決定することを含む、当該方法が提供される。この効果は、一定期間にわたって決定／測定されてもよく、任意により、同じ期間にわたって上記抗体が適用されない場合に観察されるＴＩＬ数と比較されてもよい。この効果は、ＴＩＬの数の増加であり得る。例えば、抗体は、ＴＩＬの数を、上記抗体が適用されない場合に観察されるＴＩＬの数と比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、約５０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、約１００％超増加させ得る。更なる態様では、数が観察されるＴＩＬは、γδ＋リンパ球ＴＩＬ細胞及び／または非γδリンパ球ＴＩＬ細胞である。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲ細胞抗体のＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、ヒト腫瘍に存在するか、またはヒト腫瘍に由来するＴＩＬまたは複数のＴＩＬに上記抗体を適用し、次いで、ＴＩＬまたは複数のＴＩＬ細胞の数の変化を一定期間にわたって測定することによる、当該方法が提供される。
ヒトＶδ１＋細胞の細胞傷害性を調節する薬剤
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、Ｖδ１＋細胞による細胞傷害性に対してもたらされる効果を測定することによっても評価され得る。驚くべきことに、本明細書に記載される抗体のかかる評価において（例えば、実施例１９及び２７を参照のこと）、測定可能に増強されたＶδ１＋細胞による細胞傷害性が観察された。例えば、Ｖδ１＋細胞及び上記がん細胞を含む混合培養物を含むモデル系に抗体またはその抗原結合断片を適用した後に、がん細胞の数の低減、または殺傷されたがん細胞の数の増加が観察される。任意により、がん細胞の数の低減または殺傷されたがん細胞の数の増加は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記モデル系に適用される場合の転帰と比較され得る。
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、Ｖδ１＋細胞による細胞傷害性に対してもたらされる効果を測定することによっても評価され得る。驚くべきことに、本明細書に記載される抗体のかかる評価において（例えば、実施例１９及び２７を参照のこと）、測定可能に増強されたＶδ１＋細胞による細胞傷害性が観察された。例えば、Ｖδ１＋細胞及び上記がん細胞を含む混合培養物を含むモデル系に抗体またはその抗原結合断片を適用した後に、がん細胞の数の低減、または殺傷されたがん細胞の数の増加が観察される。任意により、がん細胞の数の低減または殺傷されたがん細胞の数の増加は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記モデル系に適用される場合の転帰と比較され得る。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞及びがん細胞を含む混合細胞集団に抗体またはその抗原結合断片を適用すること、及びがん細胞に対するＶδ１＋細胞の細胞傷害性を測定することを含む、当該方法が提供される。細胞傷害性は、一定期間にわたる死んだがん細胞の数の増加によって測定されてもよく、任意により、同じ期間にわたって上記抗体が混合細胞集団に適用されない場合に観察される死んだがん細胞の数と比較されてもよい。例えば、上記抗体が適用される場合に観察される死細胞の増加は、上記抗体が適用されない場合に観察される死細胞の数と比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、約５０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、約１００％超、約２００％超、約５００％超であり得る。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲ細胞のＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、ヒトＶδ１＋細胞及びがん細胞を含む免疫細胞の上記混合集団に上記抗体を添加し、次いで、死んだがん細胞の増加を経時的に測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋細胞標的対エフェクター細胞比（Ｔ：Ｅ比）を調節する薬剤
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、薬剤候補として当該抗体を評価するためのモデル系で標的細胞の５０％（ＥＣ５０）が殺傷される標的細胞対エフェクター細胞比を決定することにより、当該抗体がどのくらいＶδ１＋細胞によるがん細胞傷害性を増強するかを測定することによっても評価され得る。例えば、標的がん細胞をヒトＶδ１＋エフェクター細胞と共に含む混合培養物。驚くべきことに、かかる評価において（例えば、実施例１９を参照のこと）、本明細書に記載される抗体は、モデル系におけるＥＣ５０ Ｔ：Ｅ比を有利に改変する。かかる改変は、設定した期間でがん細胞の５０％の殺傷を観察するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数として測定され得る。これはまた、上記がん細胞に対する細胞傷害性の変化または改善倍率または向上パーセントとしても報告され得る。任意により、本発明の抗体によりもたらされるＴ：Ｅ比は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記モデル系に適用される場合のＴ：Ｅ比と比較され得る。幾つかの場合では、本発明の多重特異性抗体は、単一特異性抗体と比較してより低いＥ：Ｔ比であってもがん細胞傷害性を改善する機会を提供する。
本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、薬剤候補として当該抗体を評価するためのモデル系で標的細胞の５０％（ＥＣ５０）が殺傷される標的細胞対エフェクター細胞比を決定することにより、当該抗体がどのくらいＶδ１＋細胞によるがん細胞傷害性を増強するかを測定することによっても評価され得る。例えば、標的がん細胞をヒトＶδ１＋エフェクター細胞と共に含む混合培養物。驚くべきことに、かかる評価において（例えば、実施例１９を参照のこと）、本明細書に記載される抗体は、モデル系におけるＥＣ５０ Ｔ：Ｅ比を有利に改変する。かかる改変は、設定した期間でがん細胞の５０％の殺傷を観察するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数として測定され得る。これはまた、上記がん細胞に対する細胞傷害性の変化または改善倍率または向上パーセントとしても報告され得る。任意により、本発明の抗体によりもたらされるＴ：Ｅ比は、次いで、代替的な比較抗体（例えば、ＯＫＴ－３）が上記モデル系に適用される場合のＴ：Ｅ比と比較され得る。幾つかの場合では、本発明の多重特異性抗体は、単一特異性抗体と比較してより低いＥ：Ｔ比であってもがん細胞傷害性を改善する機会を提供する。
従って、本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、ヒトＶδ１＋細胞及びがん細胞を含む混合細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を適用すること、ならびにがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数を測定することを含む、当該方法が提供される。これは、任意により同じ期間にわたって、上記抗体が適用されることなくがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数と比較して測定され得る。例えば、上記抗体が適用される場合にがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数の低減は、上記抗体が適用されない場合にがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数と比較して、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、約５０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、約１００％超、約２００％超、約５００％超であり得る。
本発明の更なる態様では、Ｖδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞に加えてがん細胞を含む上記細胞集団に上記抗体を添加し、次いで、がん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされるＶδ１＋細胞の数を測定することによる、当該方法が提供される。
Ｖδ１＋細胞のＥＣ５０細胞傷害性を増強する薬剤
ヒトＶδ１＋細胞またはその集団において観察される細胞傷害性の増強を測定する代替的方法は、条件Ａ（例えば、出発対照）において設定した期間にわたってがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされる細胞の数を測定し、これを条件Ｂ（例えば、本明細書に記載される本発明の抗体の適用時）において設定した期間にわたってがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされる細胞の数と比較することである。
ヒトＶδ１＋細胞またはその集団において観察される細胞傷害性の増強を測定する代替的方法は、条件Ａ（例えば、出発対照）において設定した期間にわたってがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされる細胞の数を測定し、これを条件Ｂ（例えば、本明細書に記載される本発明の抗体の適用時）において設定した期間にわたってがん細胞の５０％を殺傷するのに必要とされる細胞の数と比較することである。
かかるパラメータを測定するための種々の方法が存在することは理解されているが、理解を助けるために、以下の非限定的な仮定例について概説する。
仮定上、エフェクター細胞傷害性の増強は以下の通りに測定され得る。条件Ａ（対照処置）では、設定した時間（例えば、５時間）にわたってがん細胞の５０％を殺傷するのに１０００個のＶδ１＋細胞が必要とされることが観察される。条件Ｂ（例えば、本明細書に記載される本発明の抗体の適用）では、同じ時間にわたってがん細胞の５０％を殺傷するのに５００個のＶδ１＋細胞が必要とされたことが観察される。従って、この例では、抗体の適用によってＶδ１＋細胞集団の細胞傷害性が２００％増強された。
（１０００／５００）×１００＝２００％
（１０００／５００）×１００＝２００％
例えば（例えば、実施例１９～２１を参照のこと）、驚くべきことに、本明細書に記載される本発明の多重特異性抗体について、かかるパーセンテージの増強が観察された。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較する方法であって、Ｖδ１＋細胞及びがん細胞を含む免疫細胞の上記混合集団に上記抗体を添加し、上記細胞混合物に上記抗体を適用しない同等の実験または対照実験に対する細胞傷害性の相対的変化またはパーセント変化を決定することによる、当該方法が提供される。
健常細胞を温存しながらＶδ１＋細胞の病変細胞特異性を増強する薬剤
本明細書に記載される多重特異性抗体またはその抗原結合断片を評価するための別のアプローチは、当該抗体がどのくらい病変細胞特異的な細胞傷害性を調節するかを測定することである。驚くべきことに、かかる研究において、かかる抗体が、健常細胞または非病変細胞を温存しながら、がん細胞などの病変細胞のＶδ１＋細胞特異的殺傷を特異的に増強し得ることが発見された（例えば、実施例１９及び２７などを参照のこと）。がんの症状を改善するために患者に投与される理想的な抗体薬剤は、健常細胞を温存しながら、病変細胞に対して特異的に増強された細胞傷害性を付与する。そして、がん細胞などの病変細胞に対して特異的にエフェクター細胞傷害性を増強する薬剤は、上記病変細胞に対して特異的にエフェクター細胞傷害性を選択的に増強しない薬剤よりも高い治療指数（ＴＩ）を示すと言われ得る。治療指数は、治療可能比とも称され、薬物の相対的安全性の定量的測定値である。これは、治療効果を引き起こす治療薬の量と、例えば、関連するか、または関連性のある健常細胞集団の望ましくない死滅をもたらすことによって毒性を引き起こす量との比較である。本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、モデル系において健常細胞以上に病変細胞を選択的に殺傷するＶδ１＋細胞の能力を変化させるか、または増強するか、または倍増させる能力を測定することによって評価され得る。例えば、上記モデル系は、Ｖδ１＋エフェクター細胞、がん細胞、及び対照細胞（例えば、健常細胞）を含み得る。場合により、本発明の多重特異性抗体によって付与される選択的な病変細胞の殺傷における向上倍率を、代替的なコンパレータ抗体（例えばＯＫＴ－３）を前記モデル系に適用した場合に観察される向上倍率と比較してもよい。
本明細書に記載される多重特異性抗体またはその抗原結合断片を評価するための別のアプローチは、当該抗体がどのくらい病変細胞特異的な細胞傷害性を調節するかを測定することである。驚くべきことに、かかる研究において、かかる抗体が、健常細胞または非病変細胞を温存しながら、がん細胞などの病変細胞のＶδ１＋細胞特異的殺傷を特異的に増強し得ることが発見された（例えば、実施例１９及び２７などを参照のこと）。がんの症状を改善するために患者に投与される理想的な抗体薬剤は、健常細胞を温存しながら、病変細胞に対して特異的に増強された細胞傷害性を付与する。そして、がん細胞などの病変細胞に対して特異的にエフェクター細胞傷害性を増強する薬剤は、上記病変細胞に対して特異的にエフェクター細胞傷害性を選択的に増強しない薬剤よりも高い治療指数（ＴＩ）を示すと言われ得る。治療指数は、治療可能比とも称され、薬物の相対的安全性の定量的測定値である。これは、治療効果を引き起こす治療薬の量と、例えば、関連するか、または関連性のある健常細胞集団の望ましくない死滅をもたらすことによって毒性を引き起こす量との比較である。本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片は、モデル系において健常細胞以上に病変細胞を選択的に殺傷するＶδ１＋細胞の能力を変化させるか、または増強するか、または倍増させる能力を測定することによって評価され得る。例えば、上記モデル系は、Ｖδ１＋エフェクター細胞、がん細胞、及び対照細胞（例えば、健常細胞）を含み得る。場合により、本発明の多重特異性抗体によって付与される選択的な病変細胞の殺傷における向上倍率を、代替的なコンパレータ抗体（例えばＯＫＴ－３）を前記モデル系に適用した場合に観察される向上倍率と比較してもよい。
Ｖδ１＋細胞の病変細胞特異性及び病変細胞特異性の増強は、Ｖδ１＋細胞、病変細胞、及び健常細胞を含む培養物において測定され得る。例えば、病変細胞に対するＶδ１＋特異性は、Ｖδ１＋細胞により殺傷されるがん細胞の数を観察し、次いで、Ｖδ１＋細胞により殺傷される健常細胞の数を比較することによって測定され得る。かかる比較は、Ｖδ１＋細胞も含むモデル系に同数の病変細胞及び健常細胞を含めること、例えば、「三種培養」によって管理され得る。例えば、分析または機器の制限により、３つ以上の細胞種（Ｖδ１＋細胞、病変細胞、及び非病変細胞を含む）の全てを単一のアッセイで並行して区別し、追跡する能力が低減される場合には、代替的な比較方法も検討され得る。上記の例では、１つの実験において病変細胞に対するＶδ１＋細胞傷害性を比較し、次いで、別個の同等な実験において健常細胞に対するＶδ１＋細胞の細胞傷害性を比較することにより、かかる研究の代替アプローチが提供される。
本発明の別の態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する抗体またはその抗原結合断片を評価する方法であって、Ｖδ１＋細胞及び標的細胞を含む細胞集団に当該抗体またはその抗原結合断片を投与すること、ならびに当該標的細胞に対する細胞の細胞傷害性の特異性を測定することを含む、当該方法が提供される。一実施形態では、第１の標的細胞種に対する細胞傷害性の特異性は、第２の標的細胞種に対して観察される細胞傷害性と比較されてもよく、従って、この方法は、異なる標的細胞種を使用して繰り返されてもよい。本発明の更なる態様では、第１の標的細胞種は病変細胞であり、第２の標的細胞種は、健常細胞または第１の標的細胞種とは異なる疾患を有する細胞などの対照細胞である。
本発明の更なる態様では、γδＴＣＲのＶδ１鎖に結合する本明細書に記載される抗体またはその抗原結合断片を選択するか、または特徴付けるか、または比較するための方法であって、（ｉ）第１の細胞種及び（ｉｉ）第２の細胞種に対するＶδ１＋細胞の細胞傷害性に対して上記抗体により付与される効果が測定及び比較される、当該方法が提供される。本発明の更なる態様では、これにより、第２の細胞種に対するものよりも第１の細胞種に対する特異的な細胞傷害性を増強する抗体が選択される。本発明の更なる態様では、第１の細胞種は病変細胞であり、第２の細胞種は健常細胞である。
本明細書に記載されるように、アッセイに使用される多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、表面に、例えば、Ｆｃ受容体を含む細胞などの細胞の表面に提示され得る。例えば、多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、ＴＩＢ－２０２（商標）細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手可能）などのＴＨＰ－１細胞の表面に提示され得る。あるいは、多重特異性抗体またはその抗原結合断片は、アッセイにおいて直接使用され得る。
このような機能アッセイでは、「ＥＣ５０」または「５０パーセント有効濃度」とも称される５０％濃度を算出することによって結果が評価され得る。用語「ＩＣ５０」は阻害濃度を指す。ＥＣ５０及びＩＣ５０の両方が、フローサイトメトリー法などの当該技術分野において公知の方法を使用して測定され得る。場合によっては、ＥＣ５０及びＩＣ５０は、同じ値であるか、または同等とみなされ得る。例えば、ある特定の細胞種の５０％を阻害する（例えば、殺傷する）のに必要とされるエフェクター細胞の有効濃度（ＥＣ）は、５０％阻害濃度（ＩＣ）ともみなされ得る。誤解を避けるために言及すると、抗体に言及する場合、本出願におけるＥＣ５０値は、ＩｇＧ１フォーマットの抗体を使用して掲示される。かかる値は、抗体フォーマットの分子量に基づいて、以下の通りに相当値に容易に変換され得る。
（μｇ／ｍｌ）／（ｋＤａ単位のＭＷ）＝μＭ
（μｇ／ｍｌ）／（ｋＤａ単位のＭＷ）＝μＭ
本明細書に記載される親クローンの抗体（または断片）結合時のγδＴＣＲ下方調節のＥＣ５０は、０．５０μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．４０μｇ／ｍｌ未満、０．３０μｇ／ｍｌ未満、０．２０μｇ／ｍｌ未満、０．１５μｇ／ｍｌ未満、０．１０μｇ／ｍｌ未満、０．０６μｇ／ｍｌ未満、または０．０５μｇ／ｍｌ未満であり得る。好ましい実施形態では、抗体（または断片）結合時のγδＴＣＲ下方調節のＥＣ５０は、０．１０μｇ／ｍｌ未満である。特に、抗体（または断片）結合時のγδＴＣＲ下方調節のＥＣ５０は、０．０６μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．０５μｇ／ｍｌ未満、０．０４μｇ／ｍｌ未満、または０．０３μｇ／ｍｌ未満であり得る。特に、上記ＥＣ５０値は、抗体がＩｇＧ１フォーマットで測定される場合のものである。例えば、γδＴＣＲ下方調節のＥＣ５０値は、（例えば、実施例６及び２７のアッセイに記載されるように）フローサイトメトリーを使用して測定され得る。
抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞脱顆粒のＥＣ５０は、０．０５０μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．０４０μｇ／ｍｌ未満、０．０３０μｇ／ｍｌ未満、０．０２０μｇ／ｍｌ未満、０．０１５μｇ／ｍｌ未満、０．０１０μｇ／ｍｌ未満、または０．００８μｇ／ｍｌ未満であり得る。特に、抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞脱顆粒のＥＣ５０は、０．００５μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．００２μｇ／ｍｌ未満であり得る。好ましい実施形態では、抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞脱顆粒のＥＣ５０は、０．００７μｇ／ｍｌ未満である。特に、上記ＥＣ５０値は、抗体がＩｇＧ１フォーマットで測定される場合のものである。例えば、γδＴ細胞脱顆粒のＥＣ５０値は、（例えば、実施例７のアッセイに記載されるように）フローサイトメトリーを使用してＣＤ１０７ａ発現（すなわち細胞脱顆粒のマーカー）を検出することにより測定され得る。一実施形態において、ＣＤ１０７ａ発現は、抗ヒトＣＤ１０７ａ ＢＶ４２１（クローンＨ４Ａ３）（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）などの抗ＣＤ１０７ａ抗体を使用して測定される。
抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞による殺傷のＥＣ５０は、０．５０μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．４０μｇ／ｍｌ未満、０．３０μｇ／ｍｌ未満、０．２０μｇ／ｍｌ未満、０．１５μｇ／ｍｌ未満、０．１０μｇ／ｍｌ未満、または０．０７μｇ／ｍｌ未満であり得る。好ましい実施形態では、抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞による殺傷のＥＣ５０は、０．１０μｇ／ｍｌ未満である。特に、抗体（または断片）結合時のγδＴ細胞による殺傷のＥＣ５０は、０．０６０μｇ／ｍｌ未満、例えば、０．０５５μｇ／ｍｌ未満、特に０．０２０μｇ／ｍｌ未満であり得る。特に、上記ＥＣ５０値は、抗体がＩｇＧ１フォーマットで測定される場合のものである。例えば、γδＴ細胞による殺傷のＥＣ５０値は、（例えば、実施例８のアッセイに記載されるように）抗体、γδＴ細胞、及び標的細胞のインキュベーション後にフローサイトメトリーを使用して、死細胞の割合を（すなわち細胞生死判定用色素を使用して）検出することにより測定され得る。一実施形態では、標的細胞の死滅は、細胞生死判定用色素であるＶｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ（商標）５２０（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を使用して測定される。
これらの態様で説明されるアッセイにおいて、抗体またはその抗原結合断片は、ＴＨＰ－１細胞、例えば、ＴＩＢ－２０２（商標）（ＡＴＣＣ）などの細胞の表面に提示され得る。任意により、ＴＨＰ－１細胞は、ＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ（商標）Ｏｒａｎｇｅ ＣＭＴＭＲ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）などの色素で標識される。
Ｖδ１ＴＣＲに関連するＣＤ３分子を下方調節する薬剤
Ｔ細胞／ＣＤ３複合体に異なる様式で会合する抗体が本明細書において提供される。具体的には、これらの抗体は、Ｖδ１＋細胞上でのみ発現されるＶδ１ＴＣＲのＴＲＤＶ１ドメインを介して会合することができる。そうすることで、かかる薬剤は異なる様式で機能する。その結果、この会合事象により、ＴＣＲに会合したＣＤ３分子複合体が下方調節され得る。かかるＣＤ３の下方調節は、Ｔ細胞の活性化と同義であり得る。しかしながら、このようにＴＲＤＶ１ドメインを介してＴ細胞／ＣＤ３複合体と会合することにより、Ｖδ１ＴＣＲと会合したＣＤＲ３分子のみが下方調節される。このメカニズムは図２９に明示されている。
Ｔ細胞／ＣＤ３複合体に異なる様式で会合する抗体が本明細書において提供される。具体的には、これらの抗体は、Ｖδ１＋細胞上でのみ発現されるＶδ１ＴＣＲのＴＲＤＶ１ドメインを介して会合することができる。そうすることで、かかる薬剤は異なる様式で機能する。その結果、この会合事象により、ＴＣＲに会合したＣＤ３分子複合体が下方調節され得る。かかるＣＤ３の下方調節は、Ｔ細胞の活性化と同義であり得る。しかしながら、このようにＴＲＤＶ１ドメインを介してＴ細胞／ＣＤ３複合体と会合することにより、Ｖδ１ＴＣＲと会合したＣＤＲ３分子のみが下方調節される。このメカニズムは図２９に明示されている。
よって、一実施形態では、抗体により細胞表面上のＴＲＤＶ１を有するＶδ１ＴＣＲ及び会合したＣＤ３分子複合体を下方調節する方法、ならびにこの目的のためのかかる抗体の使用が提供される。
幾つかの実施形態では、ＴＲＤＶ１ドメインを介してＴ細胞／ＣＤ３複合体と会合することができる多重特異性ＴＣＥも本明細書において提供される。現在の多重特異性ＴＣＥフォーマットの薬剤は、通常、ＣＤ３結合事象を介してＴ細胞に会合し、それを活性化する。これは、Ｔ細胞の表面からのＣＤ３分子複合体の下方調節をもたらし得る。しかしながら、ＴＣＥがこのような会合及び下方調節を介してＴ細胞を過剰に刺激する可能性もあることも十分に理解されている。ＣＤ３分子複合体は、１つのクラスのＴ細胞に特異的ではないため、正確に狙える標的ではない。ＣＤ３を介して全てのＴ細胞（主にαβサブタイプ）を刺激すると、結果としてサイトカインの過剰産生をもたらし、急性のサイトカインフレア（いわゆるサイトカインストーム）を引き起こし得る。更に、ＣＤ３を介して全てのＴ細胞に会合し、それを活性化する非標的化アプローチでは、逆説的にＴ細胞が過剰に活性化される可能性があり、これは慢性的なＴ細胞の疲弊及び／またはＴ細胞死につながる。実際、本明細書において提供されるアプローチがエフェクター集団と特異的に相互作用するのに対し、この非特異的な汎Ｔ細胞活性化は、エフェクターＴ細胞及び制御性Ｔ細胞の両方の活性化を引き起こす。従って、この「強力な」アプローチは、選択的なＴ細胞のみを上方調節することが望まれ得る場合には決して理想的とは言えない。
対照的に、本明細書において、Ｔ細胞／ＣＤ３複合体と異なる様式で会合する多重特異性抗体、特にＴ細胞エンゲージャーが提供される。具体的には、これらのＴＣＥは、Ｖδ１＋細胞上でのみ発現されるＶδ１ＴＣＲのＴＲＤＶ１ドメインを介して会合することができる。そうすることで、かかるＴＣＥベースの薬剤は異なる様式で機能する。まず、これらのＴＣＥは、ＴＲＤＶ－１エピトープとの会合を介してＴＣＲを下方調節することができる。その結果、この会合事象により、ＴＣＲに会合したＣＤ３分子複合体が下方調節される。かかるＣＤ３の下方調節は、Ｔ細胞の活性化と同義であり得る。しかしながら、このようにＴＲＤＶ１ドメインを介してＴ細胞／ＣＤ３複合体と会合することにより、Ｖδ１ＴＣＲと会合したＣＤＲ３分子のみが下方調節される。Ｖδ１細胞を特異的に標的とし、活性化するこのアプローチにより、上記の問題（例えば、サイトカインストーム、Ｔ細胞の疲弊／枯渇、及びＡＤＣＣ）の多くを回避することが可能となる。繰り返しになるが、このメカニズムは図２９に明示されている。
「強力な」ＣＤ３アプローチによるＴ細胞の刺激は、ＡＤＣＣなどのＦｃγ受容体により引き起こされるメカニズムを介したＴ細胞の枯渇にも寄与し得る。従って、現在の医療現場で用いられているＣＤ３を標的とする二重特異性抗体の大多数は、ＦｃγＲに対する結合活性が低減されたＦｃドメインを有するか、または意図的にＦｃ領域を含まない二重特異性断片である。ＣＤ３標的化療法では、Ｔ細胞受容体複合体結合アームの結合親和性が低減されている場合もある。
この親和性の低減により、ＴＣＥの設計及び機能性に関して有効性の低下及び選択可能性の低下がもたらされ得る。例えば、かかるＴＣＥにおける結合ドメインの親和性は、インビボでの分布プロファイルの決定要因となることが知られている。具体的には、ＴＣＥの分布は、その親和性が最も高い標的に偏ることが通常観察される。従って、Ｔ細胞複合体に対するＴＣＥ結合ドメインの親和性を低減することにより、かかるＴＣＥの有効性を引き起こすためにまさに必要とされる細胞であるＴ細胞から離れた分布に偏ることが一般的である。ＴＣＥの治療域が「極めて狭い」と言われているのは、部分的にはかかる理由のためである。本明細書において提供されるアプローチは、ｖδ１細胞を特異的に標的とし、それを活性化し、これにより、Ｆｃ機能を除去するか、または親和性を低減する必要性が回避される。これは例えば、図３７及び実施例１５に示されており、これは例えば、本発明の高親和性ＥＧＦＲバリアントと比較して、用量制限皮膚毒性を更に低減する可能性を示している。
更に、本明細書において提供されるアプローチでは、抗体はｖδ１細胞のＴＣＲに会合するが、腫瘍細胞も存在しない限り完全な活性化は起こらない。本明細書において提供される抗体がＴＣＲに完全に会合すると部分的な下方調節が引き起こされ、本明細書において提供される抗体が結合したｖδ１細胞は、腫瘍微小環境でのみ完全に活性化され、細胞傷害性になる。これは、本発明のアプローチの別の重要な安全上の利点となる。なぜなら、オフターゲット細胞傷害性が低減され、ｖδ１細胞を活性化させる本発明の抗体の効力の全てが腫瘍細胞の存在下でのみ誘発されるからである。
γδＴ細胞が腫瘍細胞のストレスシグナルを検出することができるメカニズムの１つは、それらが発現するＮＣＲ（自然細胞傷害性受容体）に起因すると考えられている。ＮＣＲは、腫瘍細胞上のＮＣＲリガンドに会合することができる。従って、ＴＣＲ刺激を介してγδＴ細胞が活性化され、ＮＣＲが腫瘍細胞を検出して、完全な活性化及び細胞傷害性を有効にする活性化の二重メカニズムが用いられる。
これは、ＣＤ３を介したαβＴ細胞の刺激とは対照的であり、αβＴ細胞の刺激は、すべての刺激がＴＣＲを介する。従って、そのような細胞は、ＮＣＲを介した抗原提示に依存しない腫瘍細胞の感知をしないため、健常細胞または形質転換細胞の区別がほぼ不可能である。従って、ＣＤ３抗体がＦｃ有効型である場合、それらは他の免疫細胞を誘引し、このことがサイトカインストーム、免疫細胞の疲弊及び更には過剰活性化などの予測不可能かつの望ましくない事象のカスケードを引き起こし得、これにより、例えば、Ｔ細胞を殺傷するＮＫ細胞などがもたらされる。本発明のアプローチでは、本明細書において提供される抗体によるγδＴ細胞の刺激は、γδＴ細胞（及びＮＫ細胞などの他の免疫細胞の両方）が、例えば、ＮＣＲによる検出メカニズムにより、健常細胞と腫瘍細胞とを区別することができ、従って、この病変細胞特異性のためにがん細胞またはウイルス感染細胞などのストレスを受けた細胞を選択的に殺傷することができるため、かかる問題を引き起こさない。
例えば、ヒト及びカニクイザルの両方のｖδ１抗原（配列番号１及び配列番号１７２）に対する特異性を有する、本明細書で提示される抗ｖδ１ Ｆｃ有効型多重特異性抗体を用いた初期のカニクイザル研究では、用量漸増反復投与インビボ研究において、測定された全てのパラメータにより、安全かつ忍容性良好であることが見出された。サイトカインの放出または体重減少など、Ｔ細胞活性化に通常関連する副作用は観察されなかった。
これらの所見は、本明細書に記載されるアプローチの別の利点も強調している。具体的には、ＣＤ３エンゲージャーなどに代表されるＴＣＥとは異なり、本発明のＴＣＥ二重特異性薬は、任意により、例えば、ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３フォーマットの重鎖をＶＬ－ＣＬフォーマットの同族軽鎖と共に含む、全長抗体として設計され得る。より小さい二重特異性フォーマット（例えば、７０ＫＤａ未満）とは異なり、かかる全長二重特異性フォーマットは、インビボでより長い半減期を示すことができ、これにより、より低頻度な投与レジメンが必要とされる。かかるフォーマットにより観察される半減期がより長いのは、サイズの増加（７０ＫＤａ超）を含む種々の理由によるものであり、サイズの増加は、かかるフォーマットが腎臓により濾過されないことを意味する（糸球体の孔径のカットオフ値は６０～７０ＫＤａ）。一実施形態では、多重特異性抗体は、約７０ＫＤａより大きくてもよく、ＩＭＧＴに収載されているヒトＩＧＨＣ配列（例えば、ＩＧＨＡ、ＩＧＨＤ、ＩＧＨＤ、ＩＧＨＭ、ＩＧＨＧ配列）を含み得る。かかるＩｇＧ１フォーマットは、ＦｃＲｎメカニズムにより再利用もされ得る。特にＴＣＥ二重特異性薬でのこのような全長抗体フォーマットの明らかな欠点は、かかるフォーマットが、クリアランス率の低下、曝露の増加、及びより慢性的な曝露に起因する好ましくない安全性プロファイルを示すことである。
従って、本発明のアプローチは、ＮＫ細胞によるγδＴ細胞の殺傷またはその逆などのオフターゲット効果の懸念のないＦｃ機能の実現性を可能にする。従って、本発明のアプローチは、腫瘍環境外での副次的損傷を抑えるためにＣＤ３親和性の低減、Ｆｃ機能の除去などの対策が必要であるという制約をもつＣＤ３指向性アプローチよりも優れている。本明細書で提供される多重特異性抗体、特にＴ細胞エンゲージャーは、損傷の可能性なしにｖδ１細胞に結合することができ、完全な活性化及び細胞傷害性の増強は、ｖδ１細胞が腫瘍細胞と密接に接触している場合にのみ起こる。
従って、一実施形態では、ＴＣＥ多重特異性抗体により細胞表面上のＴＲＤＶ１を有するＶδ１ＴＣＲ及び会合したＣＤ３分子複合体を下方調節する方法、ならびにこの目的のためのかかる多重特異性抗体の使用が提供される。
本発明の他の特徴及び利点は、本明細書において提供される説明から明らかとなるであろう。しかしながら、この説明及び特定の例は、本発明の好ましい実施形態を示してはいるが、当業者には様々な変更及び修正が明らかになるので、例示のためにのみ与えられていることが理解されよう。次に、本発明を、以下の非限定的な実施例を用いて説明する。
実施例１：表
ＷＯ２０２１／０３２９６３の実施例１～１９に記載されているように親抗体クローンを調製した。
ＷＯ２０２１／０３２９６３の実施例１～１９に記載されているように親抗体クローンを調製した。
親クローンのＣＤＲの配列を以下の表２３に示す。
ＳＰＲ分析によって決定された親クローンのＫＤ値は次のとおりであった。
親クローンのうち５つについて、水素－重水素交換を使用してエピトープマッピングを実施した。エピトープマッピング結果の概要を表２５に提示する。
実施例２：多重特異性抗体は、Ｖδ１＋エフェクター細胞媒介性細胞傷害性の増強を付与した；組織中心疾患関連抗原の標的化。
細胞傷害性／効力アッセイ研究を行って、Ｖδ１＋エフェクター細胞及びＡ－４３１がん細胞の共培養物に対する多重特異性抗体の効果を調査した。Ａ－４３１（ＥＧＦＲ＋＋；ＡＴＣＣ）標的細胞を３８４ウェルイメージングプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に１，０００細胞／ウェルで播種し、ＤＭＥＭ（１０％ＦＣＳ）において３７℃で一晩インキュベートした。示されている抗体及び多重特異性抗体を１０μｇ／ｍｌに希釈してアッセイプレートに加えた（最終アッセイ濃度２μｇ／ｍｌ）。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、ある範囲のＥ：Ｔ比（最高Ｅ：Ｔ比６０：１）となるように系列希釈した後、アッセイプレートに加えた。Ａ－４３１細胞を、抗体または対照の存在下、３０℃、５％ＣＯ２でＶδ１γδＴ細胞と共にインキュベートした。２４時間のインキュベーション後、Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を加えて細胞を染色した（最終２μＭ）。生きているＡ－４３１細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感、及び強度に基づいて数量化した。エフェクター／標的（Ｅ：Ｔ）時間経過研究により、示されている対照、コンパレータ、抗体及び多重特異性抗体ありまたはなしのモデル系において標的細胞の５０％が殺傷されるＥＴ比を決定した。結果を図３１に提示する。
細胞傷害性／効力アッセイ研究を行って、Ｖδ１＋エフェクター細胞及びＡ－４３１がん細胞の共培養物に対する多重特異性抗体の効果を調査した。Ａ－４３１（ＥＧＦＲ＋＋；ＡＴＣＣ）標的細胞を３８４ウェルイメージングプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に１，０００細胞／ウェルで播種し、ＤＭＥＭ（１０％ＦＣＳ）において３７℃で一晩インキュベートした。示されている抗体及び多重特異性抗体を１０μｇ／ｍｌに希釈してアッセイプレートに加えた（最終アッセイ濃度２μｇ／ｍｌ）。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、ある範囲のＥ：Ｔ比（最高Ｅ：Ｔ比６０：１）となるように系列希釈した後、アッセイプレートに加えた。Ａ－４３１細胞を、抗体または対照の存在下、３０℃、５％ＣＯ２でＶδ１γδＴ細胞と共にインキュベートした。２４時間のインキュベーション後、Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を加えて細胞を染色した（最終２μＭ）。生きているＡ－４３１細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感、及び強度に基づいて数量化した。エフェクター／標的（Ｅ：Ｔ）時間経過研究により、示されている対照、コンパレータ、抗体及び多重特異性抗体ありまたはなしのモデル系において標的細胞の５０％が殺傷されるＥＴ比を決定した。結果を図３１に提示する。
第１に、図３１（Ａ～Ｄ）は、抗Ｖδ１ ＶＬ＋ＶＨ結合ドメイン（第１の標的に対する）を抗ＥＧＦＲ結合部位（第２の標的に対する）のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインと組み合わせた抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多重特異性抗体ありまたはなしで、Ｖδ１＋／Ａ－４３１共培養物を研究した共培養結果の例を提示する。用いた対照及びコンパレータは示されているとおりである；左から右：ｍＡｂなし＝抗体の添加なし；Ｄ１．３＝Ｄ１．３対照；Ｄ１．３ ＩｇＧ ＬＡＧＡ＝Ｄ１．３＋Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ；Ｄ１．３ ＦＳ１－６７＝ＥＧＦＲ結合定常ドメインとＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含むＤ１．３可変ドメイン；セツキシマブ（インハウスで生成した）。より具体的には、図３１（Ａ）は、前述の対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｃ０８－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８；Ｃ０８ ＦＳ１－６７＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含有するＥＧＦＲ結合ドメインと組み合わせた１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８を用いた５時間の共培養の結果を提示する。図３１（Ｂ）は、前述の対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｇ０４－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４；Ｇ０４ ＦＳ１－６７＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含有するＥＧＦＲ結合ドメインと組み合わせた１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４を用いた５時間の共培養の同等のデータを提示する。図３１（Ｃ）は、対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｅ０７－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７；Ｅ０７ ＦＳ１－６７＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含有するＥＧＦＲ結合ドメインと組み合わせた１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７を用いた５時間の共培養の同等のデータを提示する。図３１（Ｄ）は、５時間、１２時間、及び２４時間にわたる、対照、コンパレータ、及び試験品の存在下のＶδ１γδＴ細胞の細胞傷害性の向上率をまとめた表を提示する。本明細書に記載される抗体またはその断片を多重特異性フォーマットで提示した場合、４５０％を超える増強が観察され得る。
第２に、図３１（Ｅ～Ｈ）は、抗Ｖδ１結合ドメイン（第１の標的に対する）が完全長抗体（ＶＨ－ＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３／ＶＬ－ＣＬ）を含み、次いで抗ＥＧＦＲ ｓｃＦｖ結合部位（第２の標的に対する）と組み合わさった、抗Ｖδ１×抗ＴＡＡ（ＥＧＦＲ）二重特異性結合部位を含む多重特異性抗体ありまたはなしで、Ｖδ１＋／Ａ－４３１共培養物を研究した結果の例を提示する。用いた対照及びコンパレータは示されているとおりである；左から右：ｍＡｂなし＝抗体の添加なし；Ｄ１．３＝対照；Ｄ１．３ ＩｇＧ ＬＡＧＡ＝Ｄ１．３＋Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ；Ｄ１．３ ＬＡＧＡセツキシマブ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７ＡとＣ末端セツキシマブ由来ｓｃＦｖを含むＤ１．３；セツキシマブ（インハウスで生成した）。より具体的には、図３１（Ｅ）は、前述の対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｃ０８－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８；Ｃ０８ ＬＡＧＡセツキシマブ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＣ末端セツキシマブ由来ｓｃＦｖを含む１２５２＿Ｐ０１＿Ｃ０８を用いた５時間の共培養を提示する。図３１（Ｆ）は、前述の対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｇ０４－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４；Ｇ０４ ＬＡＧＡセツキシマブ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＣ末端セツキシマブ由来ｓｃＦｖを含む１２４５＿Ｐ０２＿Ｇ０４を用いた５時間の培養を提示する。図３１（Ｇ）は、対照、コンパレータ、及び次の試験品：Ｅ０７－ＬＡＧＡ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａを含む１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７；Ｅ０７ ＬＡＧＡセツキシマブ＝Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＣ末端セツキシマブ由来ｓｃＦｖを含む１２４５＿Ｐ０１＿Ｅ０７を用いた５時間の培養を提示する。図３１（Ｈ）は、５時間、１２時間、及び２４時間にわたる、対照、コンパレータ、及び試験品の存在下のＶδ１γδＴ細胞の効力の向上率をまとめた表を提示する。本明細書に記載される抗体またはその断片を多重特異性フォーマットで提示した場合、３００％を超える増強が観察され得る。
実施例３：哺乳動物ディスプレイ
親和性成熟のために２つのクローンを選択した。上記実施例は、クローンＡＤＴ１－４（Ｇ０４）及びクローンＡＤＴ１－７（Ｅ０７）に由来する親和性成熟したクローンの調製及び特徴付けについて記述している。
親和性成熟のために２つのクローンを選択した。上記実施例は、クローンＡＤＴ１－４（Ｇ０４）及びクローンＡＤＴ１－７（Ｅ０７）に由来する親和性成熟したクローンの調製及び特徴付けについて記述している。
ヒト抗Ｖδ１モノクローナル抗体の親和性成熟
親抗Ｖｄ１モノクローナル抗体を生成するために用いたファージディスプレイにより、上述のように、１０ｎＭ～１μＭの範囲の親和性を有する抗体がもたらされた。次いで、親抗体のクローンＡＤＴ１－４（Ｇ０４）及びクローンＡＤＴ１－７（Ｅ０７）をインビトロで親和性成熟させると、驚くべきことに、優れた標的会合のための１００倍改善された親和性が達成された。親抗体のインビトロ親和性成熟は、標的化されたＣＤＲ３変異誘発を使用した親抗体配列の多様化の次に、ファージ及び哺乳動物ディスプレイプラットフォームを使用して親和性が改善された抗体の選択的濃縮を行う、２ステッププロセスを介して達成された。Ｋｕｎｋｅｌ変異誘発（Ｋｕｎｋｅｌ ｅｔ ａｌ．，１９８７、Ｓｉｄｈｕ ａｎｄ Ｗｅｉｓｓ，２００４）及びＲＣＡ増幅を使用して、クローンＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７のＶＨ及びＶＬ ＣＤＲ３の２量体ライブラリを作成した。Ａｇｉｌｅｎｔプライマー合成技術を使用して、ＶＨ及びＶＬ ＣＤＲ３における指定された位置におけるアミノ酸の単置換及び二重置換の全ての組み合わせを組み込んだ。特定の位置に組み込むべき異なるアミノ酸の数を指定した。システイン及びメチオニンは省略した。クローンのＣＤＲに加えた変更を以下の表２６にまとめる。
親抗Ｖｄ１モノクローナル抗体を生成するために用いたファージディスプレイにより、上述のように、１０ｎＭ～１μＭの範囲の親和性を有する抗体がもたらされた。次いで、親抗体のクローンＡＤＴ１－４（Ｇ０４）及びクローンＡＤＴ１－７（Ｅ０７）をインビトロで親和性成熟させると、驚くべきことに、優れた標的会合のための１００倍改善された親和性が達成された。親抗体のインビトロ親和性成熟は、標的化されたＣＤＲ３変異誘発を使用した親抗体配列の多様化の次に、ファージ及び哺乳動物ディスプレイプラットフォームを使用して親和性が改善された抗体の選択的濃縮を行う、２ステッププロセスを介して達成された。Ｋｕｎｋｅｌ変異誘発（Ｋｕｎｋｅｌ ｅｔ ａｌ．，１９８７、Ｓｉｄｈｕ ａｎｄ Ｗｅｉｓｓ，２００４）及びＲＣＡ増幅を使用して、クローンＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７のＶＨ及びＶＬ ＣＤＲ３の２量体ライブラリを作成した。Ａｇｉｌｅｎｔプライマー合成技術を使用して、ＶＨ及びＶＬ ＣＤＲ３における指定された位置におけるアミノ酸の単置換及び二重置換の全ての組み合わせを組み込んだ。特定の位置に組み込むべき異なるアミノ酸の数を指定した。システイン及びメチオニンは省略した。クローンのＣＤＲに加えた変更を以下の表２６にまとめる。
各ライブラリのサイズを表２７に示す。
変異誘発されたＶＨ及びＶＬ ＣＤＲ３ライブラリの生成
好適な培養液量から、適切な過剰のライブラリメンバーをカバーする変異誘発ライブラリを調製した。溶液相選択を使用する、Ｓｃｈｏｆｉｅｌｄ ｅｔ ａｌ．（２００７）に記載されているファージディスプレイ技術を使用して、親和性成熟を行った。選択は、ヒト及びカニクイザル抗原を使用して、溶液中で行った。より高い親和性を有する変異体ライブラリからバインダーを単離するために、抗原濃度を制御して、漸増するストリンジェンシーで一連の選択を行った。図１に示すように、ヒト及びカニクイザル抗原を用いた複数ラウンドのファージディスプレイ選択を各クローンに対して行った。ＡＤＴ１－４系列の場合、選択に使用した抗原濃度は、ヒトでは１００ｎｍ～１０ｐＭ、カニクイザル抗原では１００ｎＭ及び１０ｎＭの範囲であった。ＡＤＴ１－７系列については、ヒト抗原を１０ｎＭ～１ｐＭの濃度で使用し、カニクイザル抗原を１００ｎＭ～１００ｐＭの濃度で使用した。図１は、ＡＤＴ１－７ライブラリ（ｉＡ）、ＡＤＴ１－４ライブラリ（ｉＢ）、及びカニクイザル交差反応性バインダーを単離するための選択ストラテジーによるＡＤＴ１－７ライブラリ（ｉＣ）のファージ選択ラウンドを示す。
好適な培養液量から、適切な過剰のライブラリメンバーをカバーする変異誘発ライブラリを調製した。溶液相選択を使用する、Ｓｃｈｏｆｉｅｌｄ ｅｔ ａｌ．（２００７）に記載されているファージディスプレイ技術を使用して、親和性成熟を行った。選択は、ヒト及びカニクイザル抗原を使用して、溶液中で行った。より高い親和性を有する変異体ライブラリからバインダーを単離するために、抗原濃度を制御して、漸増するストリンジェンシーで一連の選択を行った。図１に示すように、ヒト及びカニクイザル抗原を用いた複数ラウンドのファージディスプレイ選択を各クローンに対して行った。ＡＤＴ１－４系列の場合、選択に使用した抗原濃度は、ヒトでは１００ｎｍ～１０ｐＭ、カニクイザル抗原では１００ｎＭ及び１０ｎＭの範囲であった。ＡＤＴ１－７系列については、ヒト抗原を１０ｎＭ～１ｐＭの濃度で使用し、カニクイザル抗原を１００ｎＭ～１００ｐＭの濃度で使用した。図１は、ＡＤＴ１－７ライブラリ（ｉＡ）、ＡＤＴ１－４ライブラリ（ｉＢ）、及びカニクイザル交差反応性バインダーを単離するための選択ストラテジーによるＡＤＴ１－７ライブラリ（ｉＣ）のファージ選択ラウンドを示す。
ポリクローナルファージＥＬＩＳＡを使用して、選択の進行を評価した。ヒトＤＶ１／ＧＶ４及びカニクイザルＤＶ１／ＧＶ７６を、１５０ｎｇ／ウェル、５０μＬ／ウェルで一晩コーティングした。カニクイザルＤＶ２／ＧＶ７６及びＨＳＡを対照として使用した。ＡＤＴ４－１ライブラリからのアウトプットのみが、ヒト及びカニクイザルＤＶ１抗原の両方に対して交差反応性であった。ＡＤＴ１－７からのアウトプットはヒト抗原に対してのみ反応性であった。選択されたアウトプットをモノクローナルファージＥＬＩＳＡによって更に特徴付けた。その概要を表２８に示す。薄灰色及び濃灰色のボックスは、それぞれヒト抗原またはカニクイザル抗原のいずれかを用いて選択が実行されたことを示す。矢印は、ヒトまたはカニクイザルのＶＤ１に対するバインダーとして分類されるクローンのパーセンテージに関する指標を提供する（上向きは高く、下向きは低い）。
配列多様性を表２９にまとめる。薄灰色及び濃灰色のボックスは、それぞれヒト抗原またはカニクイザル抗原のいずれかを用いて選択が実行されたことを示す。矢印は多様性のレベルに関する指標を提供する（上向きは高く、下向きは低い）。
ＩｇＧ哺乳動物ディスプレイライブラリの生成
哺乳動物ディスプレイ用の最終ライブラリを形成するために、次のＡＤＴ１－４選択をポーリングした：
－ ＡＤＴ１－４ライブラリ１（ヒト）を作成するためのＳＥＬ２４０９、２４１２、及び２４１３
－ ＡＤＴ１－４ライブラリ２（カニクイザル）を作成するためのＳＥＬ ２４１８、２４２０、及び２４１５
－ ＡＤＴ１－７ライブラリを作成するためのＳＥＬ２３７０及び２４０４。
哺乳動物ディスプレイ用の最終ライブラリを形成するために、次のＡＤＴ１－４選択をポーリングした：
－ ＡＤＴ１－４ライブラリ１（ヒト）を作成するためのＳＥＬ２４０９、２４１２、及び２４１３
－ ＡＤＴ１－４ライブラリ２（カニクイザル）を作成するためのＳＥＬ ２４１８、２４２０、及び２４１５
－ ＡＤＴ１－７ライブラリを作成するためのＳＥＬ２３７０及び２４０４。
その後、プールを哺乳動物ディスプレイに進めた。一本鎖可変断片抗体（ｓｃＦｖ）集団を、元の可変重鎖（ＶＨ）と可変軽鎖（ＶＬ）との対合を維持しながら、まとめてＩｇＧフォーマットに変換した。次に、ＩｇＧフォーマットの抗体を哺乳動物ディスプレイドナーベクターにクローニングし、これを、ＴＡＬＥヌクレアーゼ対をコードするプラスミドとコトランスフェクトして、単一の染色体座位でのヌクレアーゼ指向性抗体遺伝子組み込みを可能にした。ファージアウトプットの多様性（１０６超のクローン）をカバーする哺乳動物ディスプレイ抗体ライブラリをＨＥＫ２９３細胞で作成した。細胞表面に抗体を発現している安定な細胞集団を、トランスフェクション２日後（２ｄｐｔ）にブラストサイジンの添加によって選択した。細胞表面に抗体を発現している細胞を、磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ）による選別によって濃縮した（７ｄｐｔ）。抗Ｆｃ－ＰＥに続いて抗ＰＥマイクロビーズで細胞を標識し、Ｍｉｄｉ ＭＡＣＳ磁石（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）及びＬＳカラムを使用して選別した。これらの細胞集団を選択に進めた。
哺乳動物ディスプレイによる成熟抗体の選択
抗体発現細胞を濃縮するためのＭＡＣＳに続いて、ＴＲＤＶ１バインダーを同定するために２つのストラテジーを採用した。主なストラテジーには、Ｆｃ発現及び抗原結合に基づく二色蛍光選別が含まれた。もう１つには、高親和性の交差反応性バインダーを単離する可能性を最大化するための、カニクイザル抗原及びヒト抗原の両方の結合に基づく二色蛍光選別が含まれた。プロセスの概要を図２に示す。
抗体発現細胞を濃縮するためのＭＡＣＳに続いて、ＴＲＤＶ１バインダーを同定するために２つのストラテジーを採用した。主なストラテジーには、Ｆｃ発現及び抗原結合に基づく二色蛍光選別が含まれた。もう１つには、高親和性の交差反応性バインダーを単離する可能性を最大化するための、カニクイザル抗原及びヒト抗原の両方の結合に基づく二色蛍光選別が含まれた。プロセスの概要を図２に示す。
配列、特異性、親和性のランキング及び特徴付け
８つの異なる選別された集団からゲノムＤＮＡを抽出した。選択されたＩｇＧをコードするＤＮＡを増幅し、可溶性ＩｇＧ１発現ベクターにクローニングした。８回の異なる選択から合計１４７２個のクローンが選択された。ｐＤＮＡをＥｘｐｉ２９３細胞にトランスフェクトした。トランスフェクションの５日後に上清を採取し、発現した抗体の親和性を捕捉ＥＬＩＳＡでヒト及びカニクイザルのＴＲＤＶ１結合に関してランク付けした。各選択のストランドから合計９３個の抗ＤＶ１抗体を、配列及びＳＰＲオフレート分析のために選択した。さらに、これらのクローンを、ヒトＴＲＤＶ１、ヒトＴＲＤＶ１（Ａ→Ｖ）、ヒトＴＲＤＶ２、カニクイザルＴＲＤＶ１及びＢＳＡへの結合について、直接ＥＬＩＳＡによって調べた。
８つの異なる選別された集団からゲノムＤＮＡを抽出した。選択されたＩｇＧをコードするＤＮＡを増幅し、可溶性ＩｇＧ１発現ベクターにクローニングした。８回の異なる選択から合計１４７２個のクローンが選択された。ｐＤＮＡをＥｘｐｉ２９３細胞にトランスフェクトした。トランスフェクションの５日後に上清を採取し、発現した抗体の親和性を捕捉ＥＬＩＳＡでヒト及びカニクイザルのＴＲＤＶ１結合に関してランク付けした。各選択のストランドから合計９３個の抗ＤＶ１抗体を、配列及びＳＰＲオフレート分析のために選択した。さらに、これらのクローンを、ヒトＴＲＤＶ１、ヒトＴＲＤＶ１（Ａ→Ｖ）、ヒトＴＲＤＶ２、カニクイザルＴＲＤＶ１及びＢＳＡへの結合について、直接ＥＬＩＳＡによって調べた。
実施例４：ヒト抗原及びカニクイザル抗原に対する結合親和性
細胞で発現された組換え抗原及びｖδ１ＴＣＲへの結合：ＡＤＴ１－４系列
複数の研究を行って、標的抗原に対する抗ｖδ１抗体の結合を調査した。ｖｄ１ ＴＣＲ抗原に対するｖｄ１ ｍＡｂの結合をＥＬＩＳＡによって試験した。１ウェル当たり１ｕｇのヒト抗原または１ｕｇのカニクイザル抗原を９６ウェルイムノアッセイプレート（ＳＬＳ ＃４７５９０４）に固定化し、次いで、非特異的結合を防止するためにＢＳＡでブロックした。１．３ｐｍｏｌ（２０ｎｇ）の各ｍＡｂを加え、室温で１時間インキュベートした。ＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＨＲＰ（Ａｂｃａｍ ＃Ａｂ７４５６）をＴＭＢ基質（Ｆｉｓｈｅｒ ＃１２７５００００）及び停止液（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ ＃４２３００１）と共に使用して、４５０ｎＭでの吸光度を測定することにより、抗原に対するｍＡｂの結合を検出した。アッセイ及びプレート間のばらつきの両方の陽性対照として、親対照を含めた。ヒットは、親ｍＡｂよりも高い吸光度測定値を示すｍＡｂとして同定された。図５Ａは、１．３ｐｍｏｌの抗体がヒトｖδ１抗原に結合したときの、親ＡＤＴ１－４結合吸光度と比較した成熟ＡＤＴ１－４クローンの吸光度の増加倍率を示す。図５Ｂは、１．３ｐｍｏｌの抗体がカニクイザルｖδ１抗原に結合したときの、親ＡＤＴ１－４結合吸光度と比較した成熟ＡＤＴ１－４クローンの吸光度の増加倍率を示す。
細胞で発現された組換え抗原及びｖδ１ＴＣＲへの結合：ＡＤＴ１－４系列
複数の研究を行って、標的抗原に対する抗ｖδ１抗体の結合を調査した。ｖｄ１ ＴＣＲ抗原に対するｖｄ１ ｍＡｂの結合をＥＬＩＳＡによって試験した。１ウェル当たり１ｕｇのヒト抗原または１ｕｇのカニクイザル抗原を９６ウェルイムノアッセイプレート（ＳＬＳ ＃４７５９０４）に固定化し、次いで、非特異的結合を防止するためにＢＳＡでブロックした。１．３ｐｍｏｌ（２０ｎｇ）の各ｍＡｂを加え、室温で１時間インキュベートした。ＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＨＲＰ（Ａｂｃａｍ ＃Ａｂ７４５６）をＴＭＢ基質（Ｆｉｓｈｅｒ ＃１２７５００００）及び停止液（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ ＃４２３００１）と共に使用して、４５０ｎＭでの吸光度を測定することにより、抗原に対するｍＡｂの結合を検出した。アッセイ及びプレート間のばらつきの両方の陽性対照として、親対照を含めた。ヒットは、親ｍＡｂよりも高い吸光度測定値を示すｍＡｂとして同定された。図５Ａは、１．３ｐｍｏｌの抗体がヒトｖδ１抗原に結合したときの、親ＡＤＴ１－４結合吸光度と比較した成熟ＡＤＴ１－４クローンの吸光度の増加倍率を示す。図５Ｂは、１．３ｐｍｏｌの抗体がカニクイザルｖδ１抗原に結合したときの、親ＡＤＴ１－４結合吸光度と比較した成熟ＡＤＴ１－４クローンの吸光度の増加倍率を示す。
内因性ｖｄ１－ＴＣＲへのｍＡｂの結合について、フローサイトメトリーを使用して試験した。皮膚ｖｄ１細胞（ドナーＡＴＳ００６；ＡＤＴ増大Ｅ００００１１３）またはＰＥＥＲ ｖδ１細胞株を３×１０＾５細胞／ウェルで９６ウェル丸底プレートに播種し、３ｕｇ／ｍｌの試験ｍＡｂを含む５０ｕｌのＦＡＣＳバッファー（ｖ／ｖ：ＰＢＳ中で２％のＦＣＳ、０．１％のＮａＡｚｉｄｅ、及び１ｍＭのＥＤＴＡ）に４℃で１５分間再懸濁した。細胞をペレット化し、二次抗ｈｍＩｇＧ－ＡＰＣ抗体（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１９－７７２）をＦＡＣＳバッファー中に１／１００で加え、４℃で更に２０分間インキュベートした。細胞を洗浄し、ＣｅｌｌＦｉｘ（ＢＤ ＃３４０１８１）で固定し、フローサイトメトリーによって分析した。ｖｄ１表現型の割合（％）及び平均蛍光強度を計算した（Ｉｎｉｖａｉ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｆｌｏｗｌｏｇｉｃｖ７．２）。陽性対照として、親抗体を含めた。図５Ｃは、初代皮膚由来ヒトｖδ１細胞に結合する親ＡＤＴ１－４と比較した成熟型ＡＤＴ１－４クローンの平均蛍光強度の増加倍率を示す。図５Ｄは、形質転換されたＰＥＥＲ ｖδ１細胞株に結合する親ＡＤＴ１－４と比較した成熟型ＡＤＴ１－４クローンの平均蛍光強度の増加倍率を示す。
細胞で発現された組換え抗原及びｖδ１ＴＣＲへの結合：ＡＤＴ１－７系列：
複数の研究を行って、標的抗原に対するＡＤＴ１－７成熟型抗ｖδ１抗体の結合を調査した。ｖδ１ ＴＣＲ抗原に対するｖｄ１ ｍＡｂの結合をＥＬＩＳＡによって試験した。１ウェル当たり１ｕｇの抗原を９６ウェルイムノアッセイプレート（ＳＬＳ ＃４７５９０４）に固定化し、次いで、非特異的結合を防止するためにＢＳＡでブロックした。滴定した６．７ｐｍｏｌ（１００ｎｇ）、１．３ｐｍｏｌ（２０ｎｇ）、及び０．２７ｐｍｏｌ（４ｎｇ）のｍＡｂを加え、室温で１時間インキュベートした。ＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＨＲＰ（Ａｂｃａｍ ＃Ａｂ７４５６）をＴＭＢ基質（Ｆｉｓｈｅｒ ＃１２７５００００）及び停止液（Ｂｉｏｌｏｇｅｎｄ ＃４２３００１）と共に使用して、４５０ｎＭでの吸光度を測定することにより、抗原に対するｍＡｂの結合を検出した。アッセイ及びプレート間のばらつきの両方の陽性対照として、親対照を含めた。ヒットは、親ｍＡｂよりも高い吸光度測定値を示すｍＡｂとして同定された。図６Ａは、１．３ｐｍｏｌの抗体がヒトｖδ１抗原に結合したときの、親ＡＤＴ１－４結合吸光度と比較した成熟ＡＤＴ１－４クローンの吸光度の増加倍率を示す。
複数の研究を行って、標的抗原に対するＡＤＴ１－７成熟型抗ｖδ１抗体の結合を調査した。ｖδ１ ＴＣＲ抗原に対するｖｄ１ ｍＡｂの結合をＥＬＩＳＡによって試験した。１ウェル当たり１ｕｇの抗原を９６ウェルイムノアッセイプレート（ＳＬＳ ＃４７５９０４）に固定化し、次いで、非特異的結合を防止するためにＢＳＡでブロックした。滴定した６．７ｐｍｏｌ（１００ｎｇ）、１．３ｐｍｏｌ（２０ｎｇ）、及び０．２７ｐｍｏｌ（４ｎｇ）のｍＡｂを加え、室温で１時間インキュベートした。ＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＨＲＰ（Ａｂｃａｍ ＃Ａｂ７４５６）をＴＭＢ基質（Ｆｉｓｈｅｒ ＃１２７５００００）及び停止液（Ｂｉｏｌｏｇｅｎｄ ＃４２３００１）と共に使用して、４５０ｎＭでの吸光度を測定することにより、抗原に対するｍＡｂの結合を検出した。アッセイ及びプレート間のばらつきの両方の陽性対照として、親対照を含めた。ヒットは、親ｍＡｂよりも高い吸光度測定値を示すｍＡｂとして同定された。図６Ａは、１．３ｐｍｏｌの抗体がヒトｖδ１抗原に結合したときの、親ＡＤＴ１－４結合吸光度と比較した成熟ＡＤＴ１－４クローンの吸光度の増加倍率を示す。
内因性ｖｄ１－ＴＣＲへのｍＡｂの結合について、フローサイトメトリーを使用して試験した。皮膚ｖδ１細胞（ドナーＡＴＳ００６；ＡＤＴ増大Ｅ００００１１３）またはＰＥＥＲ ｖδ１細胞株を３×１０＾５細胞／ウェルで９６ウェル丸底プレートに播種し、３ｕｇ／ｍｌの試験ｍＡｂを含む５０ｕｌのＦＡＣＳバッファー（ｖ／ｖ：ＰＢＳ中で２％のＦＣＳ、０．１％のＮａＡｚｉｄｅ、及び１ｍＭのＥＤＴＡ）に４℃で１５分間再懸濁した。細胞をペレット化し、二次抗ｈｍＩｇＧ－ＡＰＣ抗体（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１９－７７２）をＦＡＣＳバッファー中に１／１００で加え、４℃で更に２０分間インキュベートした。細胞を洗浄し、ＣｅｌｌＦｉｘ（ＢＤ ＃３４０１８１）で固定し、フローサイトメトリーによって分析した。ｖｄ１表現型の割合（％）及び平均蛍光強度を計算した（Ｉｎｉｖａｉ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｆｌｏｗｌｏｇｉｃｖ７．２）。陽性対照として、親抗体を含めた。図６Ｂは、初代皮膚由来ヒトｖδ１細胞に結合する親ＡＤＴ１－４と比較した成熟型ＡＤＴ１－４クローンの平均蛍光強度の増加倍率を示す。図６Ｃは、形質転換されたＰＥＥＲ ｖδ１細胞株に結合する親ＡＤＴ１－７と比較した成熟型ＡＤＴ１－７クローンの平均蛍光強度の増加倍率を示す。
親クローンと比べた改善倍率
解離増強ランタニド蛍光イムノアッセイ（ＤＥＬＦＩＡ）
ヒト抗原及びカニクイザル抗原に対する親和性成熟ｍＡｂの結合における改善を確認するために、プレートに直接コーティングした抗原（５０μＬのＰＢＳ中３μｇ／ｍＬの抗原、４℃で一晩（Ｎｕｎｃ ＃４３７１１１）を用いてＤＥＬＦＩＡイムノアッセイを行った。検出のために、ＤＥＬＦＩＡ Ｅｕ－Ｎ１抗ヒトＩｇＧ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＃１２４４－３３０）を、５０μＬの３％ＭＰＢＳ（ＰＢＳ＋３％（ｗ／Ｖ）脱脂粉乳）中１／５００の希釈度で二次抗体として使用した。展開には５０μＬのＤＥＬＦＩＡ増強溶液（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＃４００１－００１０）を用いた。
解離増強ランタニド蛍光イムノアッセイ（ＤＥＬＦＩＡ）
ヒト抗原及びカニクイザル抗原に対する親和性成熟ｍＡｂの結合における改善を確認するために、プレートに直接コーティングした抗原（５０μＬのＰＢＳ中３μｇ／ｍＬの抗原、４℃で一晩（Ｎｕｎｃ ＃４３７１１１）を用いてＤＥＬＦＩＡイムノアッセイを行った。検出のために、ＤＥＬＦＩＡ Ｅｕ－Ｎ１抗ヒトＩｇＧ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＃１２４４－３３０）を、５０μＬの３％ＭＰＢＳ（ＰＢＳ＋３％（ｗ／Ｖ）脱脂粉乳）中１／５００の希釈度で二次抗体として使用した。展開には５０μＬのＤＥＬＦＩＡ増強溶液（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＃４００１－００１０）を用いた。
ＤＥＬＦＩＡイムノアッセイを使用して目的の抗体の親和性のランク付けを行った。ＤＥＬＦＩＡイムノアッセイでは、プレート上にコーティングしたＧタンパク質により抗体を捕捉し、ヒト可溶性ビオチン化Ｌ１（ＤＶ１－ＧＶ４）抗原を０．４ｎＭで加え、カニクイザル抗原ＤＶ１／ＧＶ７７を１０ｎＭで加えた（３ＭＰＢＳ）。検出には５０μＬのストレプトアビジン－Ｅｕ（アッセイバッファー中１：５００、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を使用し、ＤＥＬＦＩＡ増強溶液でシグナルを発生させた。Ｄ１．３ ｈＩｇＧ１（Ｅｎｇｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６２：２１２９－２１３６に記載されている）を陰性対照として使用した。結果を図７Ａ～Ｃに示す。
ＳＰＲ分析 － ＩｇＧ捕捉
ＳＰＲ分析を使用して、親クローンと比較した親和性成熟クローンのＫＤ値を比較した。使用機器：ＭＡＳＳ－２（Ｓｉｅｒｒａ Ｓｅｎｓｏｒｓ）；チップ：アミン高容量（Ｓｉｅｒｒａ Ｓｅｎｓｏｒｓ）；ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ ２０。実験は室温または３７℃で行い、Ｇタンパク質をチップにカップリングした。ヒトＤＶ１－ＧＶ４については５０ｎＭ～０．２ｎＭ、カニクイザルＤＶ１－７７については１００ｎＭ～１ｎＭの範囲の希釈系列で、抗原を細胞上に流した。１２０秒の会合、６００秒の解離、５０μＬ／分の流速、１０ｍＭグリシンｐＨ１．５での再生、ソフトウェアＳｉｅｒｒａ Ａｎａｌｙｚｅｒを使用したＬａｎｇｍｕｉｒ １：１結合による動力学的フィッティング。結果を図８Ａ～Ｃに示す。
ＳＰＲ分析を使用して、親クローンと比較した親和性成熟クローンのＫＤ値を比較した。使用機器：ＭＡＳＳ－２（Ｓｉｅｒｒａ Ｓｅｎｓｏｒｓ）；チップ：アミン高容量（Ｓｉｅｒｒａ Ｓｅｎｓｏｒｓ）；ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ ２０。実験は室温または３７℃で行い、Ｇタンパク質をチップにカップリングした。ヒトＤＶ１－ＧＶ４については５０ｎＭ～０．２ｎＭ、カニクイザルＤＶ１－７７については１００ｎＭ～１ｎＭの範囲の希釈系列で、抗原を細胞上に流した。１２０秒の会合、６００秒の解離、５０μＬ／分の流速、１０ｍＭグリシンｐＨ１．５での再生、ソフトウェアＳｉｅｒｒａ Ａｎａｌｙｚｅｒを使用したＬａｎｇｍｕｉｒ １：１結合による動力学的フィッティング。結果を図８Ａ～Ｃに示す。
結合親和性分析（ＳＰＲによるＫＤ）
Ｖδ１抗原に対するＶδ１モノクローナル抗体の結合親和性
標的（すなわち、γδＴＣＲのＶδ１鎖）に対する抗体の結合親和性は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって確立される。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。抗原（例えばＬ１（ＤＶ１－ＧＶ４）を、３００ｎＭ～３．７ｎＭの１：３希釈系列で、会合１８０秒、解離６００秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。実験はすべて室温で行った。定常状態のフィッティングは、ソフトウェアＴｒａｃｅＤｒａｗｅｒ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＬａｎｇｍｕｉｒ １：１結合に従って決定した。
Ｖδ１抗原に対するＶδ１モノクローナル抗体の結合親和性
標的（すなわち、γδＴＣＲのＶδ１鎖）に対する抗体の結合親和性は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって確立される。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。抗原（例えばＬ１（ＤＶ１－ＧＶ４）を、３００ｎＭ～３．７ｎＭの１：３希釈系列で、会合１８０秒、解離６００秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。実験はすべて室温で行った。定常状態のフィッティングは、ソフトウェアＴｒａｃｅＤｒａｗｅｒ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＬａｎｇｍｕｉｒ １：１結合に従って決定した。
ヒト抗原
親和性成熟したＶδ１ ｍＡｂは、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析によって決定した場合、いずれの親よりも、ヒトＶδ１抗原に対して大幅に増強された親和性を示す（図９）。（Ａ、Ｂ）ＡＤＴ１－４（Ａ）またはＡＤＴ１－７（Ｂ）親ｍＡｂ及びそれらの親和性成熟誘導体を用いて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析を行って、ヒトＶδ１抗原に対する結合親和性を決定した。Ｖδ１と親和性成熟したｍＡｂとの結合相互作用は、Ｌａｎｇｍｕｉｒ １：１結合に従ってモデル化した。（Ｃ、Ｄ）は、（Ａ）及び（Ｂ）に示されているセンサグラムから導出された、Ｖδ１標的化抗体の平衡解離定数（ＫＤ）をまとめた表である。データは、２つの異なるＳＰＲ機器で行った２つの反復試験の平均として表されている。（Ｅ、Ｆ）親であるＡＤＴ１－４またはＡＤＴ１－７と比較した、Ｖδ１抗原に対する親和性成熟誘導体の平衡解離定数（ＫＤ）における増加倍率を表す棒グラフ。
親和性成熟したＶδ１ ｍＡｂは、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析によって決定した場合、いずれの親よりも、ヒトＶδ１抗原に対して大幅に増強された親和性を示す（図９）。（Ａ、Ｂ）ＡＤＴ１－４（Ａ）またはＡＤＴ１－７（Ｂ）親ｍＡｂ及びそれらの親和性成熟誘導体を用いて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析を行って、ヒトＶδ１抗原に対する結合親和性を決定した。Ｖδ１と親和性成熟したｍＡｂとの結合相互作用は、Ｌａｎｇｍｕｉｒ １：１結合に従ってモデル化した。（Ｃ、Ｄ）は、（Ａ）及び（Ｂ）に示されているセンサグラムから導出された、Ｖδ１標的化抗体の平衡解離定数（ＫＤ）をまとめた表である。データは、２つの異なるＳＰＲ機器で行った２つの反復試験の平均として表されている。（Ｅ、Ｆ）親であるＡＤＴ１－４またはＡＤＴ１－７と比較した、Ｖδ１抗原に対する親和性成熟誘導体の平衡解離定数（ＫＤ）における増加倍率を表す棒グラフ。
結論：このデータは、ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７の親和性成熟誘導体が、親抗体よりもヒトＶδ１抗原に対して有意に高い親和性を示すことを実証する。
カニクイザル抗原
表面プラズモン共鳴分析は、ＡＤＴ１－４系列の親和性成熟したＶδ１ ｍＡｂが、親抗体よりもカニクイザルＶδ１抗原に対して大幅に増強された親和性を示すことを実証する（図１０）。（Ａ）ＡＤＴ１－４親抗体及び親和性成熟誘導体を用いて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析を行って、カニクイザルＶδ１抗原に対する結合親和性を決定した。Ｖδ１と親和性成熟したｍＡｂとの結合相互作用は、Ｌａｎｇｍｕｉｒ １：１結合に従ってモデル化した。（Ｂ）は、（Ａ）に示されたセンサグラムから導出された、Ｖδ１標的化抗体の平衡解離定数（ＫＤ）をまとめた表である。データは、２つの異なるＳＰＲ機器で行った２つの反復試験の平均として表されている。結果を図１０Ａ及び１０Ｂに示す。
表面プラズモン共鳴分析は、ＡＤＴ１－４系列の親和性成熟したＶδ１ ｍＡｂが、親抗体よりもカニクイザルＶδ１抗原に対して大幅に増強された親和性を示すことを実証する（図１０）。（Ａ）ＡＤＴ１－４親抗体及び親和性成熟誘導体を用いて表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析を行って、カニクイザルＶδ１抗原に対する結合親和性を決定した。Ｖδ１と親和性成熟したｍＡｂとの結合相互作用は、Ｌａｎｇｍｕｉｒ １：１結合に従ってモデル化した。（Ｂ）は、（Ａ）に示されたセンサグラムから導出された、Ｖδ１標的化抗体の平衡解離定数（ＫＤ）をまとめた表である。データは、２つの異なるＳＰＲ機器で行った２つの反復試験の平均として表されている。結果を図１０Ａ及び１０Ｂに示す。
結論：このデータは、ＡＤＴ１－４の親和性成熟誘導体が、親抗体よりもカニクイザルＶδ１抗原に対して有意に高い親和性を示すことを実証する。
細胞表面Ｖδ１ ＴＣＲに対する結合親和性（細胞表面Ｖδ１に対する結合のＥＣ５０）
図１１Ａ～Ｄに示すように、親和性成熟したＶδ１ ｍＡｂは、Ｖδ１陽性γδＴ細胞に対して大幅に増強された親和性を示し、Ｖδ１を欠く細胞に対しては明らかな結合を示さない。（Ａ、Ｂ）２つのγδＴ細胞ドナー、ＡＴＳ００６（Ａ）及びＴＳ１６４（Ｂ）に対するＶδ１ ｍＡｂによる結合のレベル。γδＴ細胞を様々な濃度のＶδ１ ｍＡｂで染色し、続いて蛍光抗ヒトＩｇＧ検出抗体（ｘｘｘ）で染色した。すべてのインキュベーションステップは４℃で行い、フローサイトメトリーを使用して蛍光レベル中央値を測定することでｍＡｂ結合を判定した。対数４パラメータ用量応答曲線のフィッティングはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ９を使用して行った。（Ｃ）２人のドナーの平均として表された、Ｖδ１陽性γδＴ細胞に結合するＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンからの平均ＥＣ５０を表す棒グラフ。（Ｄ）は、（Ａ）及び（Ｂ）でプロットされたＥＣ５０、ならびにＨＥＫ２９３Ａ、Ｒａｊｉ細胞、及び初代血中単核細胞を含む種々の白血球サブセットを含むＶδ１陰性細胞種をまとめた表である。Ｖδ１陽性γδＴ細胞については、データは２人のドナーの平均として表されている。
図１１Ａ～Ｄに示すように、親和性成熟したＶδ１ ｍＡｂは、Ｖδ１陽性γδＴ細胞に対して大幅に増強された親和性を示し、Ｖδ１を欠く細胞に対しては明らかな結合を示さない。（Ａ、Ｂ）２つのγδＴ細胞ドナー、ＡＴＳ００６（Ａ）及びＴＳ１６４（Ｂ）に対するＶδ１ ｍＡｂによる結合のレベル。γδＴ細胞を様々な濃度のＶδ１ ｍＡｂで染色し、続いて蛍光抗ヒトＩｇＧ検出抗体（ｘｘｘ）で染色した。すべてのインキュベーションステップは４℃で行い、フローサイトメトリーを使用して蛍光レベル中央値を測定することでｍＡｂ結合を判定した。対数４パラメータ用量応答曲線のフィッティングはＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ９を使用して行った。（Ｃ）２人のドナーの平均として表された、Ｖδ１陽性γδＴ細胞に結合するＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンからの平均ＥＣ５０を表す棒グラフ。（Ｄ）は、（Ａ）及び（Ｂ）でプロットされたＥＣ５０、ならびにＨＥＫ２９３Ａ、Ｒａｊｉ細胞、及び初代血中単核細胞を含む種々の白血球サブセットを含むＶδ１陰性細胞種をまとめた表である。Ｖδ１陽性γδＴ細胞については、データは２人のドナーの平均として表されている。
結論：このデータは、ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７の親和性成熟誘導体が、Ｖδ１陽性γδＴ細胞に対しては親ｍＡｂよりも有意に高い親和性を示す一方で、Ｖδ１陰性細胞のＨＥＫ２９３Ｔ、Ｒａｊｉ、またはＰＢＭＣ中のＣＤ８、ＣＤ４、ＮＫ、ＣＤ１９、もしくは単球細胞に対する結合は示さないことを実証する。
Ｖδ１モノクローナル抗体の標的細胞結合
様々な標的細胞をアッセイして、Ｖδ１ ｍＡｂ結合の特異性及び親和性を決定した。これには、増大した皮膚由来のＶδ１γδＴ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞、Ｒａｊｉ細胞、及びヒト初代血中単核細胞内の複数の白血球サブセットが含まれた。接着細胞または半接着細胞（皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ）を組織培養フラスコから剥離し、ＰＢＳに再懸濁した。同様に、非接着細胞種（Ｒａｊｉ、ＰＢＭＣ）を採取し、ＰＢＳに再懸濁した。ｖ底９６ウェルプレートにウェル当たり細胞１００，０００個の最終密度で細胞を播種した。細胞を遠心分離にかけ、製造元の説明書に従って細胞ペレットをＦｃＲブロッキング試薬に再懸濁し、４℃で２０分間インキュベートしてから更に洗浄した。Ｖδ１ ｍＡｂ、抗ＲＳＶ ＩｇＧ対照、及び抗ＣＤ３ ＯＫＴ３をＰＢＳで５００ｎＭに希釈し、ＰＢＳで１：５に系列希釈して６．４ｐＭとし、細胞に加えた後、４℃で２０分間のインキュベーションを行った。細胞表面に結合したｍＡｂの量を決定するために、ＡＰＣにコンジュゲートされたマウス抗ヒトＩｇＧ二次抗体（製品コード．．、希釈度１：１００）で細胞を染色した。Ｖδ１γδＴ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ、及びＲａｊｉについても、生死判別色素のみで細胞を染色した。ＰＢＭＣについては、αβサブセット、ＮＫ細胞、Ｂ細胞、及び単球細胞の区別が可能になるように、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ５６、ＣＤ１１ｂ、及びＣＤ１９に対するコンジュゲート抗体（全て１：１００）も含めた。４℃で２０分間のインキュベーション後、細胞を２回洗浄し、ＭＡＣＳＱｕａｎｔを使用して蛍光を測定した。ＩＣ５０を図１１Ｄに示す。
様々な標的細胞をアッセイして、Ｖδ１ ｍＡｂ結合の特異性及び親和性を決定した。これには、増大した皮膚由来のＶδ１γδＴ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞、Ｒａｊｉ細胞、及びヒト初代血中単核細胞内の複数の白血球サブセットが含まれた。接着細胞または半接着細胞（皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ）を組織培養フラスコから剥離し、ＰＢＳに再懸濁した。同様に、非接着細胞種（Ｒａｊｉ、ＰＢＭＣ）を採取し、ＰＢＳに再懸濁した。ｖ底９６ウェルプレートにウェル当たり細胞１００，０００個の最終密度で細胞を播種した。細胞を遠心分離にかけ、製造元の説明書に従って細胞ペレットをＦｃＲブロッキング試薬に再懸濁し、４℃で２０分間インキュベートしてから更に洗浄した。Ｖδ１ ｍＡｂ、抗ＲＳＶ ＩｇＧ対照、及び抗ＣＤ３ ＯＫＴ３をＰＢＳで５００ｎＭに希釈し、ＰＢＳで１：５に系列希釈して６．４ｐＭとし、細胞に加えた後、４℃で２０分間のインキュベーションを行った。細胞表面に結合したｍＡｂの量を決定するために、ＡＰＣにコンジュゲートされたマウス抗ヒトＩｇＧ二次抗体（製品コード．．、希釈度１：１００）で細胞を染色した。Ｖδ１γδＴ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ、及びＲａｊｉについても、生死判別色素のみで細胞を染色した。ＰＢＭＣについては、αβサブセット、ＮＫ細胞、Ｂ細胞、及び単球細胞の区別が可能になるように、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ５６、ＣＤ１１ｂ、及びＣＤ１９に対するコンジュゲート抗体（全て１：１００）も含めた。４℃で２０分間のインキュベーション後、細胞を２回洗浄し、ＭＡＣＳＱｕａｎｔを使用して蛍光を測定した。ＩＣ５０を図１１Ｄに示す。
ＡＤＴ１－４系列のＫＤ値のまとめ（ヒト及びカニクイザル）
以下の表は、ＡＤＴ１－４系列の２４クローン及びＡＤＴ１－４親クローン（Ｇ０４）のＫＤ値を提供する（ヒトＴＲＤＶ１及びカニクイザルＴＲＤＶ１への結合について）。
以下の表は、ＡＤＴ１－４系列の２４クローン及びＡＤＴ１－４親クローン（Ｇ０４）のＫＤ値を提供する（ヒトＴＲＤＶ１及びカニクイザルＴＲＤＶ１への結合について）。
ＡＤＴ１－７系列のＫＤ値のまとめ（ヒトのみ）
以下の表は、ＡＤＴ１－７系列の１１クローン及びＡＤＴ１－７親クローン（Ｅ０７）のＫＤ値を提供する（ヒトＴＲＤＶ１への結合のみ）。
以下の表は、ＡＤＴ１－７系列の１１クローン及びＡＤＴ１－７親クローン（Ｅ０７）のＫＤ値を提供する（ヒトＴＲＤＶ１への結合のみ）。
実施例５．機能の特徴付け
ＴＣＲ下方調節に対するＶδ１モノクローナル抗体
ＴＣＲ発現を測定することによって、γδＴ細胞受容体と会合した結果それを下方調節するＡＤＴ ｍＡｂの能力を評価する。皮膚γδＴ細胞（ドナーＡＴＳ００６及びＴＳ１６４由来）を、９６ウェル丸底プレートに、γδ培地中３×１０＾５細胞／ｍｌで、ＰＢＳで希釈した漸増濃度の試験ｍＡｂ（０．０００６７～６７ｎＭの範囲）または最高濃度（６７ｎＭ）の対応するアイソタイプ対照（ｈＩｇＧ１、ＲＳＶ）と共に播種した。細胞を３７℃の加湿ＣＯ２チャンバ内で２時間インキュベートした。細胞を洗浄し、死細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＃１５５８０６０７）及びそれらのＶＤ１ ＴＣＲ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１７－６９７）について４℃で３０分間染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ ＃３４０１８１）に再懸濁した後、４℃の暗所で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により決定されるＶＤ１ ＴＣＲの発現レベルを測定した。
ＴＣＲ下方調節に対するＶδ１モノクローナル抗体
ＴＣＲ発現を測定することによって、γδＴ細胞受容体と会合した結果それを下方調節するＡＤＴ ｍＡｂの能力を評価する。皮膚γδＴ細胞（ドナーＡＴＳ００６及びＴＳ１６４由来）を、９６ウェル丸底プレートに、γδ培地中３×１０＾５細胞／ｍｌで、ＰＢＳで希釈した漸増濃度の試験ｍＡｂ（０．０００６７～６７ｎＭの範囲）または最高濃度（６７ｎＭ）の対応するアイソタイプ対照（ｈＩｇＧ１、ＲＳＶ）と共に播種した。細胞を３７℃の加湿ＣＯ２チャンバ内で２時間インキュベートした。細胞を洗浄し、死細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＃１５５８０６０７）及びそれらのＶＤ１ ＴＣＲ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１７－６９７）について４℃で３０分間染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ ＃３４０１８１）に再懸濁した後、４℃の暗所で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により決定されるＶＤ１ ＴＣＲの発現レベルを測定した。
結果を図１２に示す。これは、親和性成熟したＶδ１ ｍＡｂが、それらの親クローン及びＯＫＴ３よりも効果的にＶδ１ ＴＣＲに結合し、それを下方調節することを示している。（Ａ及びＢ）。γδ細胞をＶδ１ ｍＡｂ及びＯＫＴ３と２時間インキュベートした後、Ｖδ１ ＴＣＲをａ－Ｖδ１ ＴＣＲ－ＰＥ－Ｖｉｏ７７０で染色する前のγδＴＣＲ発現の数量化。α－Ｖδ１染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、ＴＣＲ陽性ゲートから計算した後、ＴＣＲ陽性の未処理γδ細胞のＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。上のグラフはＡＤＴ１－４系列からのデータを表し、下のグラフはＡＤＴ１－７系列からのデータを表す。（Ｃ）は、（Ａ）から計算されたＩＣ５０値を表す棒グラフである。（Ｄ及びＥ）。親ＡＤＴ１－４（左）及びＡＤＴ１－７（右）からの改善倍率として提示された、（Ｂ）のＩＣ５０値を表す棒グラフ。（Ｆ）ＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算された改善率と共に（Ｂ）からのＩＣ５０値を表す表。（Ｇ）ＡＤＴ１－４（上）及びＡＤＴ１－７（下）のそれぞれの親から計算された改善倍率と共に（Ｂ）からのＩＣ５０値を表す表。
ＣＤ１０７ａ発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体
ＣＤ１０７ａ発現を測定することによって、ＶＤ１ γδ細胞と会合してそれを活性化するＡＤＴ ｍＡｂの能力を評価する。皮膚γδＴ細胞（ドナーＡＴＳ００６由来）を、９６ウェル丸底プレートに、γδ培地中６×１０＾５細胞／ｍｌで、１．２×１０＾６細胞／ｍｌのＴＨＰ－１細胞（ＡＴＣＣ－ＴＩＢ－２０２）、及びＰＢＳで希釈した漸増濃度の試験ｍＡｂ（０．０００６７～６７ｎＭの範囲）または最高濃度（６７ｎＭ）の対応するアイソタイプ対照（ｈＩｇＧ１、ＲＳＶ）と共に播種した。細胞を３７℃の加湿ＣＯ２チャンバ内で２時間インキュベートした。細胞を洗浄し、死細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＃１５５８０６０７）、ＶＤ１ ＴＣＲ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１７－６９７）、及びａＣＤ１０７ａ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１２－６１０）について４℃で３０分間染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄した後、４℃の暗所で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により決定されるＶＤ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａの発現レベルを測定した。
ＣＤ１０７ａ発現を測定することによって、ＶＤ１ γδ細胞と会合してそれを活性化するＡＤＴ ｍＡｂの能力を評価する。皮膚γδＴ細胞（ドナーＡＴＳ００６由来）を、９６ウェル丸底プレートに、γδ培地中６×１０＾５細胞／ｍｌで、１．２×１０＾６細胞／ｍｌのＴＨＰ－１細胞（ＡＴＣＣ－ＴＩＢ－２０２）、及びＰＢＳで希釈した漸増濃度の試験ｍＡｂ（０．０００６７～６７ｎＭの範囲）または最高濃度（６７ｎＭ）の対応するアイソタイプ対照（ｈＩｇＧ１、ＲＳＶ）と共に播種した。細胞を３７℃の加湿ＣＯ２チャンバ内で２時間インキュベートした。細胞を洗浄し、死細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＃１５５８０６０７）、ＶＤ１ ＴＣＲ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１７－６９７）、及びａＣＤ１０７ａ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１２－６１０）について４℃で３０分間染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄した後、４℃の暗所で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により決定されるＶＤ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａの発現レベルを測定した。
結果を図１３に示す。これは、親和性成熟したＶδ１ ｍＡｂが標的細胞の存在下でのみ活性化を誘導することを示している。（Ａ及びＢ）γδ細胞をＡＤＴ１－４－２単独（上）及びＴＨＰ－１細胞（下）と共に１：２の標的対エフェクター比で２時間インキュベートした後、Ｖδ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａをそれぞれａ－Ｖδ１ ＴＣＲ－ＰＥ－Ｖｉｏ７７０及びａ－ＣＤ１０７ａ－ＶｉｏＢｌｕｅで染色する前の、γδ ＴＣＲ発現（黒）及びＣＤ１０７ａ発現（灰色）の数量化。Ｖδ１染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、ＴＣＲ陽性ゲートから計算した後、ＴＣＲ陽性で未処理の非共培養γδ細胞のＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。ＣＤ１０７ａ染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、「ＮＯＴ ＴＨＰ－１」ゲートから計算した後、未処理の非共培養γδ細胞のＣＤ１０７ａ ＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。（Ｃ及びＤ）γδ細胞をＡＤＴ１－７－３単独（上）及びＴＨＰ－１細胞（下）と共に１：２の標的対エフェクター比で２時間インキュベートした後、Ｖδ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａをそれぞれａ－Ｖδ１ ＴＣＲ－ＰＥ－Ｖｉｏ７７０及びａ－ＣＤ１０７ａ－ＶｉｏＢｌｕｅで染色する前の、γδ ＴＣＲ発現（黒）及びＣＤ１０７ａ発現（灰色）の数量化。Ｖδ１染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、ＴＣＲ陽性ゲートから計算した後、ＴＣＲ陽性で未処理の非共培養γδ細胞のＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。ＣＤ１０７ａ染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、「ＮＯＴ ＴＨＰ－１」ゲートから計算した後、未処理の非共培養γδ細胞のＣＤ１０７ａ ＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδ ＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理の、共培養γδ細胞及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδ ＣＤ１０７ａ発現の増加率を表す表。
ＣＤ２５発現によって測定されるγδ活性化に対するＶδ１モノクローナル抗体
ＣＤ２５発現を測定することによって、ＶＤ１ γδ細胞と会合してそれを活性化するＡＤＴ ｍＡｂの能力を評価する。皮膚γδＴ細胞（ドナーＡＴＳ００６由来）を、９６ウェル丸底プレートに、γδ培地中６×１０＾５細胞／ｍｌで、１．２×１０＾６細胞／ｍｌのＴＨＰ－１細胞（ＡＴＣＣ－ＴＩＢ－２０２）、及びＰＢＳで希釈した漸増濃度の試験ｍＡｂ（０．０００６７～６７ｎＭの範囲）または最高濃度（６７ｎＭ）の対応するアイソタイプ対照（ｈＩｇＧ１、ＲＳＶ）と共に播種した。細胞を３７℃の加湿ＣＯ２チャンバ内で２４時間インキュベートした。細胞を洗浄し、死細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＃１５５８０６０７）、ＶＤ１ ＴＣＲ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１７－６９７）、及びＣＤ２５（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１３－２８０）について４℃で３０分間染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄した後、４℃の暗所で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により決定されるＶＤ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａの発現レベルを測定した。
ＣＤ２５発現を測定することによって、ＶＤ１ γδ細胞と会合してそれを活性化するＡＤＴ ｍＡｂの能力を評価する。皮膚γδＴ細胞（ドナーＡＴＳ００６由来）を、９６ウェル丸底プレートに、γδ培地中６×１０＾５細胞／ｍｌで、１．２×１０＾６細胞／ｍｌのＴＨＰ－１細胞（ＡＴＣＣ－ＴＩＢ－２０２）、及びＰＢＳで希釈した漸増濃度の試験ｍＡｂ（０．０００６７～６７ｎＭの範囲）または最高濃度（６７ｎＭ）の対応するアイソタイプ対照（ｈＩｇＧ１、ＲＳＶ）と共に播種した。細胞を３７℃の加湿ＣＯ２チャンバ内で２４時間インキュベートした。細胞を洗浄し、死細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＃１５５８０６０７）、ＶＤ１ ＴＣＲ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１７－６９７）、及びＣＤ２５（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＃１３０－１１３－２８０）について４℃で３０分間染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄した後、４℃の暗所で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １６を使用したフローサイトメトリーにより、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）により決定されるＶＤ１ ＴＣＲ及びＣＤ１０７ａの発現レベルを測定した。
結果を図１４に示す。これは、親和性成熟したＶδ１ ｍＡｂが標的細胞の存在下でのみ活性化を誘導することを示している。（Ａ及びＢ）γδ細胞をＲＳＶ（６７ｎＭで添加）及びＡＤＴ１－４－２単独（上）ならびにＴＨＰ－１細胞（下）と共に１：２の標的対エフェクター比で２４時間インキュベートした後、Ｖδ１ ＴＣＲ及びＣＤ２５をそれぞれａ－Ｖδ１ ＴＣＲ－ＰＥ－Ｖｉｏ７７０及びａ－ＣＤ２５－ＶｉｏＢｌｕｅで染色する前の、γδ ＴＣＲ発現（黒）及びＣＤ２５発現（灰色）の数量化。Ｖδ１染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、ＴＣＲ陽性ゲートから計算した後、ＴＣＲ陽性で未処理の非共培養γδ細胞のＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。ＣＤ２５染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、「ＮＯＴ ＴＨＰ－１」ゲートから計算した後、未処理の非共培養γδ細胞のＣＤ２５ ＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。（Ｃ及びＤ）γδ細胞をＲＳＶ（６７ｎＭで添加）及びＡＤＴ１－７－３単独（上）ならびにＴＨＰ－１細胞（下）と共に１：２の標的対エフェクター比で２時間インキュベートした後、Ｖδ１ ＴＣＲ及びＣＤ２５をそれぞれａ－Ｖδ１ ＴＣＲ－ＰＥ－Ｖｉｏ７７０及びａ－ＣＤ２５－ＶｉｏＢｌｕｅで染色する前の、γδ ＴＣＲ発現（黒）及びＣＤ２５発現（灰色）の数量化。Ｖδ１染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、ＴＣＲ陽性ゲートから計算した後、ＴＣＲ陽性で未処理の非共培養γδ細胞のＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。ＣＤ２５染色のＭＦＩをフローサイトメトリーを使用して取得し、「ＮＯＴ ＴＨＰ－１」ゲートから計算した後、未処理の非共培養γδ細胞のＣＤ２５ ＭＦＩから％ＭＦＩを計算した。（Ｅ）未処理の非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδ ＣＤ２５発現の増加率を表す表。（Ｆ）未処理の、共培養γδ細胞及び非共培養γδ細胞と比較した、最高濃度のＶδ１ ｍＡｂで処理した共培養細胞からのγδ ＣＤ２５発現の増加率を表す表。
カニクイザルＴＣＲ下方調節
カニクイザルｖδ１γδＴ細胞に結合してそのＴＣＲ下方調節を誘導するＡＤＴ１－４－２の能力を調査するために、複数の研究を行った。これらの研究では、カニクイザルのＰＢＭＣを新鮮な血液から収集し、１４日間培養してγδ－Ｔ細胞を増殖させた。代替的に、抗αβ抗体（クローンＲ７３）でコーティングされた磁気ビーズを使用してαβ－Ｔ細胞を全ＰＢＭＣ集団から枯渇させ、その後インビトロで増大させた。増大は次の通りであった。Ｕ底９６ウェルプレートの各ウェルで、１０％のＦＣＳ、抗生物質（Ｐ／Ｓ）、及びサイトカインのカクテル（ＩＦＮγ、ＩＬ２１、ＩＬ４、ＩＬ１β及びＩＬ１５）を含むＲＰＭＩ－１６４０培地中に、２５０，０００個の細胞を加えた。７日後、１０％のＦＣＳ、抗生物質（Ｐ／Ｓ）、ならびにサイトカインＩＬ２１及びＩＬ１５を含む１０μｌの新鮮培地を細胞に添加した。続いて１１日目に、１０％のＦＣＳ、抗生物質（Ｐ／Ｓ）及びＩＬ１５を含む新鮮培地と１００μｌの培地を交換した。１４日目に細胞を収集し、ＴＣＲ下方調節アッセイに供した。このアッセイは、細胞を様々な濃度の抗体と２時間混合することからなる。インキュベーション時間後、ＣＤ３、ＴＣＲ－αβ、ＴＣＲ－γδ、及びＶＤ１のマーカーについてフローサイトメトリー分析のために細胞を染色した。生細胞集団を区別するために、生／死細胞色素も含めた。ＣＤ３＋、ＴＣＲ－γδ＋、及びＶＤ１＋細胞集団をゲーティングすることによってフローサイトメトリー分析を行い、ＶＤ１平均蛍光強度をＶＤ１＋ゲート内で測定した。アイソタイプ対照（抗ＲＳＶ）または抗体なしを、最高濃度のみで陰性対照として使用した。データは、抗体を含まない対照に対して正規化した。図１５（Ａ）は、カニクイザルγδ－Ｔ細胞上のＶＤ１に会合し、その発現を低減させるＡＤＴ１－４－２及びＡＤＴ１－４の能力の比較を示す。結果は、ＡＤＴ１－４－２で処理した際にはＶＤ１発現の用量応答低減があったが（３３．３ｎＭで最大７６％）、ＡＤＴ１－４抗体ではそれがなかったことを示す。この特定のアッセイでは、αβ－Ｔ細胞が枯渇した集団からγδ－Ｔ細胞を増大させた。５００倍の濃度範囲を使用した。図１５（Ｂ）は、ＡＤＴ１－４－２で処理した際のＶＤ１の細胞表面発現のパーセンテージを示す。このアッセイでは、γδ－Ｔ細胞の増大は全ＰＢＭＣ集団からのものであった。１０，０００倍の濃度範囲を使用した。データは、一例として２人の異なるドナー（ＡＤ８１７０及びＡＭ９４５ＢＡ）におけるＶＤ１細胞発現の用量応答低減を示している。合計４人のドナーを試験し、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍの非線形フィット曲線関数を使用してＥＣ５０を個別に抽出した。図１５（Ｃ）は、平均及び標準偏差と組み合わせた、異なるドナーの個々のＥＣ５０値を示す。平均は３．８３±２．２３ｎＭである。
抗体：
ＣＤ３－ＡＦ７００（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、クローンＳＰ３４－２、参照：５５７９１７）
ＴＣＲ－αβ－ＡＦ６４７（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、クローンＲ７３、参照：２０１１１６）
ＴＣＲ－γδ－ＢＶ４２１（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、クローンＢ１、参照：３３１２１８）
ＶＤ１－ＰＥ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、クローンＴＳ８．２、参照：１２－５６７９－４２）
カニクイザルｖδ１γδＴ細胞に結合してそのＴＣＲ下方調節を誘導するＡＤＴ１－４－２の能力を調査するために、複数の研究を行った。これらの研究では、カニクイザルのＰＢＭＣを新鮮な血液から収集し、１４日間培養してγδ－Ｔ細胞を増殖させた。代替的に、抗αβ抗体（クローンＲ７３）でコーティングされた磁気ビーズを使用してαβ－Ｔ細胞を全ＰＢＭＣ集団から枯渇させ、その後インビトロで増大させた。増大は次の通りであった。Ｕ底９６ウェルプレートの各ウェルで、１０％のＦＣＳ、抗生物質（Ｐ／Ｓ）、及びサイトカインのカクテル（ＩＦＮγ、ＩＬ２１、ＩＬ４、ＩＬ１β及びＩＬ１５）を含むＲＰＭＩ－１６４０培地中に、２５０，０００個の細胞を加えた。７日後、１０％のＦＣＳ、抗生物質（Ｐ／Ｓ）、ならびにサイトカインＩＬ２１及びＩＬ１５を含む１０μｌの新鮮培地を細胞に添加した。続いて１１日目に、１０％のＦＣＳ、抗生物質（Ｐ／Ｓ）及びＩＬ１５を含む新鮮培地と１００μｌの培地を交換した。１４日目に細胞を収集し、ＴＣＲ下方調節アッセイに供した。このアッセイは、細胞を様々な濃度の抗体と２時間混合することからなる。インキュベーション時間後、ＣＤ３、ＴＣＲ－αβ、ＴＣＲ－γδ、及びＶＤ１のマーカーについてフローサイトメトリー分析のために細胞を染色した。生細胞集団を区別するために、生／死細胞色素も含めた。ＣＤ３＋、ＴＣＲ－γδ＋、及びＶＤ１＋細胞集団をゲーティングすることによってフローサイトメトリー分析を行い、ＶＤ１平均蛍光強度をＶＤ１＋ゲート内で測定した。アイソタイプ対照（抗ＲＳＶ）または抗体なしを、最高濃度のみで陰性対照として使用した。データは、抗体を含まない対照に対して正規化した。図１５（Ａ）は、カニクイザルγδ－Ｔ細胞上のＶＤ１に会合し、その発現を低減させるＡＤＴ１－４－２及びＡＤＴ１－４の能力の比較を示す。結果は、ＡＤＴ１－４－２で処理した際にはＶＤ１発現の用量応答低減があったが（３３．３ｎＭで最大７６％）、ＡＤＴ１－４抗体ではそれがなかったことを示す。この特定のアッセイでは、αβ－Ｔ細胞が枯渇した集団からγδ－Ｔ細胞を増大させた。５００倍の濃度範囲を使用した。図１５（Ｂ）は、ＡＤＴ１－４－２で処理した際のＶＤ１の細胞表面発現のパーセンテージを示す。このアッセイでは、γδ－Ｔ細胞の増大は全ＰＢＭＣ集団からのものであった。１０，０００倍の濃度範囲を使用した。データは、一例として２人の異なるドナー（ＡＤ８１７０及びＡＭ９４５ＢＡ）におけるＶＤ１細胞発現の用量応答低減を示している。合計４人のドナーを試験し、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍの非線形フィット曲線関数を使用してＥＣ５０を個別に抽出した。図１５（Ｃ）は、平均及び標準偏差と組み合わせた、異なるドナーの個々のＥＣ５０値を示す。平均は３．８３±２．２３ｎＭである。
抗体：
ＣＤ３－ＡＦ７００（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、クローンＳＰ３４－２、参照：５５７９１７）
ＴＣＲ－αβ－ＡＦ６４７（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、クローンＲ７３、参照：２０１１１６）
ＴＣＲ－γδ－ＢＶ４２１（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、クローンＢ１、参照：３３１２１８）
ＶＤ１－ＰＥ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、クローンＴＳ８．２、参照：１２－５６７９－４２）
親和性成熟クローンの増強された細胞傷害性
ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７両方のＶδ１クローンの親和性成熟は、インビトロＴＨＰ－１殺傷アッセイにおいてＶδ１γδＴ細胞の細胞傷害効果を有意に増強する
ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７両方のＶδ１クローンの親和性成熟は、インビトロＴＨＰ－１殺傷アッセイにおいてＶδ１γδＴ細胞の細胞傷害効果を有意に増強する
ＴＨＰ－１細胞殺傷アッセイ
Ｖδ１ ｍＡｂ及び抗ＲＳＶ ＩｇＧ対照をＰＢＳで１μｇ／ｍｌに希釈し、ＰＢＳで１：１０に系列希釈した後、３８４ウェルのウルトライメージングアッセイプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に加えた。ＲＰＭＩ、１０％ＦＣＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で培養したＴＨＰ－１細胞（ＡＴＣＣ）を、［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で２０分間染色した。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁した後、懸濁状態でＴＨＰ－１細胞と１：１で混合した。細胞懸濁液を３８４ウェルアッセイプレートに播種して、最終的な細胞播種密度をウェル当たりＴＨＰ－１細胞１，０００個、及びウェル当たりＶδ１γδＴ細胞２，０００個とした。最終アッセイ容量で２００ｎｇ／ｍｌ～０．２ｐｇ／ｍｌの範囲の濃度までｍＡｂを希釈した。ＴＨＰ－１及びＶδ１γδＴ細胞を、Ｖδ１ ｍＡｂの存在下、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間培養した。２４時間後の生きているＴＨＰ－１細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感及び強度に基づいて数量化した。
Ｖδ１ ｍＡｂ及び抗ＲＳＶ ＩｇＧ対照をＰＢＳで１μｇ／ｍｌに希釈し、ＰＢＳで１：１０に系列希釈した後、３８４ウェルのウルトライメージングアッセイプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に加えた。ＲＰＭＩ、１０％ＦＣＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で培養したＴＨＰ－１細胞（ＡＴＣＣ）を、［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ生細胞色素で２０分間染色した。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁した後、懸濁状態でＴＨＰ－１細胞と１：１で混合した。細胞懸濁液を３８４ウェルアッセイプレートに播種して、最終的な細胞播種密度をウェル当たりＴＨＰ－１細胞１，０００個、及びウェル当たりＶδ１γδＴ細胞２，０００個とした。最終アッセイ容量で２００ｎｇ／ｍｌ～０．２ｐｇ／ｍｌの範囲の濃度までｍＡｂを希釈した。ＴＨＰ－１及びＶδ１γδＴ細胞を、Ｖδ１ ｍＡｂの存在下、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間培養した。２４時間後の生きているＴＨＰ－１細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感及び強度に基づいて数量化した。
図１６は、親和性成熟したＶδ１ ｍＡｂが、親クローンと比較して、ＴＨＰ－１高含量細胞傷害性アッセイにおいて増強された効力を示すことを示す。（Ａ及びＢ）Ｖδ１ ｍＡｂまたは対照の存在下でのγδ Ｔ細胞との２４時間の共培養後の生ＴＨＰ－１細胞数の数量化［エフェクター：標的比２：１］。細胞数は、γδＴ細胞なしの対照（１００％）に対するパーセンテージとして正規化した。ＯＫＴ３（抗ＣＤ３抗体）及び抗ＲＳＶアイソタイプ対照をアッセイ対照として含めた。細胞数は、生細胞に対するハイコンテント共焦点顕微鏡法を使用して計算した。グラフは、親ＡＤＴ１－４（Ａ）及びＡＤＴ１－７（Ｂ）クローンを表すものである。（Ｃ）ＯＫＴ３対照、ならびにＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７クローンからの平均ＥＣ５０を表す棒グラフ。データは、ｎ＝３の生物学的複製物の平均±標準偏差として表されている。（Ｄ）は、（Ｃ）にプロットされたＥＣ５０をまとめた表である。データは、ＡＤＴ１－４及びＡＤＴ１－７親クローンと比較した平均値、標準偏差、変化倍率、及び改善率として表されている。
抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）に対するＶδ１モノクローナル抗体
３人のドナー由来の増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁し、白色９６ウェルプレートにウェル当たり２０，０００細胞の最終密度で播種した。Ｒａｊｉ細胞を同様にウェル当たり２０，０００個で播種し、ＣＤ２０標的化抗体リツキシマブによって誘導されるＡＤＣＣの陽性対照として使用した。ｍＡｂを希釈し、１～１００ｎＭの範囲の最終濃度で各ウェルに加えた。ＦｃγＲＩＩＩａ＋ ＡＤＤ Ｂｉｏａｓｓａｙエフェクター細胞を解凍し、６２，５００個の細胞を各ウェルに加えた後、３７℃、５％ＣＯ２で４．５時間インキュベートした。ルシフェリンを含むＢｉｏ－Ｇｌｏ試薬を各ウェルに加えた後、更に１０分間インキュベートし、プレートリーダーを使用して発光を測定した。
３人のドナー由来の増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁し、白色９６ウェルプレートにウェル当たり２０，０００細胞の最終密度で播種した。Ｒａｊｉ細胞を同様にウェル当たり２０，０００個で播種し、ＣＤ２０標的化抗体リツキシマブによって誘導されるＡＤＣＣの陽性対照として使用した。ｍＡｂを希釈し、１～１００ｎＭの範囲の最終濃度で各ウェルに加えた。ＦｃγＲＩＩＩａ＋ ＡＤＤ Ｂｉｏａｓｓａｙエフェクター細胞を解凍し、６２，５００個の細胞を各ウェルに加えた後、３７℃、５％ＣＯ２で４．５時間インキュベートした。ルシフェリンを含むＢｉｏ－Ｇｌｏ試薬を各ウェルに加えた後、更に１０分間インキュベートし、プレートリーダーを使用して発光を測定した。
図１７は、Ｖδ１標的化ｍＡｂが、無視できる抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導することを示す。ＡＤＣＣは、ＦｃγＲＩＩＩａ＋エフェクター細胞内のルシフェラーゼ活性の誘導によって下流のＮＦＡＴシグナル伝達を測定するサロゲートレポーターアッセイを使用して測定される。エフェクター細胞を、３人のγδＴ細胞ドナー（エフェクター：標的比３）及び様々な濃度のモノクローナル抗体と共培養した。ＣＤ２０＋Ｒａｊｉ細胞及びリツキシマブを陽性対照として含めた。４．５時間の共培養後に生物発光を測定した。データは、３つの生物学的複製物（３人のγδＴ細胞ドナー）の平均±ＳＤとして表されている。
結論：このデータは、ＡＤＴ１－４親及び親和性成熟誘導体ＡＤＴ１－４－２がＡＤＣＣを誘導しないことを示しており、これは、ＮＦＡＴシグナル伝達がルシフェラーゼ活性を誘導するＦｃγＲＩＩＩａ＋エフェクターレポーター細胞株を介して実証された。ただし、ＯＫＴ３は高レベルのＡＤＣＣ特異的シグナル伝達を誘導するようである。
補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）に対するＶδ１モノクローナル抗体
増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁し、白色９６ウェルプレートにウェル当たり７５，０００細胞の最終密度で播種した。Ｒａｊｉ細胞を同様にウェル当たり７５，０００個で播種し、ＣＤ２０標的化抗体リツキシマブによって誘導されるＣＤＣの陽性対照として使用した。ｍＡｂを希釈し、１～１００ｎＭの範囲の最終濃度で各ウェルに加えた。ヒト血清を、新鮮なまま、または熱不活化して、最終濃度４０％まで加えた。熱不活化は、血清を５６℃の水浴中で３０分間温め、続いて氷上で冷却することによって行った。次いで培養物を３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。２４時間後、生細胞の数を決定するために、細胞を採取し、１：１０００の希釈度のｘｘ生死判別色素で２０分間染色した。ＭＡＣＳＱｕａｎｔを使用して蛍光を測定し、生死判別色素の陰性染色に基づいて生細胞数を数量化した。
増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁し、白色９６ウェルプレートにウェル当たり７５，０００細胞の最終密度で播種した。Ｒａｊｉ細胞を同様にウェル当たり７５，０００個で播種し、ＣＤ２０標的化抗体リツキシマブによって誘導されるＣＤＣの陽性対照として使用した。ｍＡｂを希釈し、１～１００ｎＭの範囲の最終濃度で各ウェルに加えた。ヒト血清を、新鮮なまま、または熱不活化して、最終濃度４０％まで加えた。熱不活化は、血清を５６℃の水浴中で３０分間温め、続いて氷上で冷却することによって行った。次いで培養物を３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。２４時間後、生細胞の数を決定するために、細胞を採取し、１：１０００の希釈度のｘｘ生死判別色素で２０分間染色した。ＭＡＣＳＱｕａｎｔを使用して蛍光を測定し、生死判別色素の陰性染色に基づいて生細胞数を数量化した。
結果を図１８に示す。これは、Ｖδ１標的化ｍＡｂが補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導しないことを示している。４０％ヒト血清及び５０ｎＭ抗ＣＤ３ ＯＫＴ３または抗Ｖδ１ ＡＤＴ１－４－２、ならびに様々な濃度のモノクローナル抗体と培養した後の生存γδＴ細胞の数。血清は新鮮な状態で使用するか、または事前に熱不活化した。ＣＤ２０＋Ｒａｊｉ細胞及びリツキシマブを陽性対照として含めた。２４時間の共培養後に生死判別色素によって生存率を測定した。データは、３つの生物学的複製物の平均±ＳＤとして表されている。
結論：このデータは、ＡＤＴ１－４－２が補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導せず、補体含有血清の存在下でＶδ１陽性細胞の細胞傷害性が増加しないことを実証する。ただし、リツキシマブは、ＣＤ２０陽性Ｒａｊｉ細胞に対する強いＣＤＣ刺激を示す。
健常細胞の温存
複数の研究を行って、健常細胞に対する細胞傷害性に関する、抗ｖδ１抗体によるｖδ１細胞の刺激／活性化の効果を調査した。これは、抗ｖδ１クローンＡＤＴ１－４－２をＰＢＭＣとインキュベートしてから単球の細胞傷害性及びアポトーシスを評価することによって試験した。
複数の研究を行って、健常細胞に対する細胞傷害性に関する、抗ｖδ１抗体によるｖδ１細胞の刺激／活性化の効果を調査した。これは、抗ｖδ１クローンＡＤＴ１－４－２をＰＢＭＣとインキュベートしてから単球の細胞傷害性及びアポトーシスを評価することによって試験した。
凍結保存されたヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を３人の健康なドナーから商業的に調達した。ＰＢＭＣを、丸底９６ウェル組織培養プレートに、１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ１５を含む２５０ｕｌの完全培地（１０％ＦＣＳ、ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ、非必須アミノ酸、ピルビン酸ナトリウム、及びＨＥＰＥＳを補ったＲＰＭＩ）中、２５０，０００細胞／ウェルで播種した。滴定ｖδ１抗体ＡＤＴ１－４－２を６．６ｎＭの最終濃度まで加えた。ＲＳＶ ＩｇＧ、ＩｇＧ２α、及びＯＫＴ３抗体を対照として含めた。刺激は２０時間にわたって行った。フローサイトメトリー分析をエンドポイントで実施して、ｖδ１細胞に対する各条件での単球表現型及びアポトーシス性単球を決定した。細胞はまず、生きている一重項でゲーティングし、続いてＣＤ１４（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ １３０－１１０－５２３）でゲーティングして、単球を同定した。次に、陽性のＡｐｏＴｒａｃｋｅｒ Ｇｒｅｅｎ染色（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ ４２７４０２）によってアポトーシス性単球を同定した。
図１９Ａ（左上パネル）は、標的会合の指標としての抗体刺激時のｖδ１ ＴＣＲ染色のＭＦＩを示す。図１９Ｂ（右上パネル）及び１９Ｃ（下パネル）は、抗体刺激後のエンドポイントの単球表現型及びアポトーシス性単球（それぞれ）を示す。ｖδ１抗体クローンＡＤＴ１－４－２での刺激によってＶδ１細胞が会合したが、健常な単球の細胞傷害性は引き起こされなかった。
実施例６．原発腫瘍生検からのＴＩＬ集団に対する抗Ｖδ１抗体の効果
抗Ｖδ１抗体は、腫瘍浸潤リンパ球の活性化、増殖、及び細胞傷害性を促進した。
抗Ｖδ１抗体は、腫瘍浸潤リンパ球の活性化、増殖、及び細胞傷害性を促進した。
抗Ｖδ１抗体によって付与されるヒト腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の調節を調査するために、複数の研究を行った。これらの研究では、ヒト腎細胞癌（ＲＣＣ）腫瘍生検が新鮮な状態で輸送され、受領時に処理された。生検は、約２ｍｍ２の大きさの小片に切断され、ＴＩＬは、Ｋｕｐｐｅｒ及びＣｌａｒｋｅ（Ｃｌａｒｋｅ ｅｔ ａｌ，２００６）によって最初に記述された方法を応用した方法を使用して取得された。具体的には、最大４つの２ｍｍ２の生検を９ｍｍ×９ｍｍ×１．５ｍｍのＣｅｌｌｆｏａｍマトリクスに配置し、２４ウェルプレートのウェルごとに１つのマトリクスを配置した。次に、４％ヒト血漿、β－メルカプトエタノール（５０μＭ）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、アンホテリシンＢ（２．５μｇ／ｍｌ）、ＨＥＰＥＳ（１０ｍＭ）、ピルビン酸Ｎａ（１ｍＭ）、ＭＥＭ非必須アミノ酸溶液（１Ｘ）及びＩＬ－１５（２ｎｇ／ｍｌ、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ）を添加した２ｍｌのイスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）で生検を行った。１ｍｌの培地を３～４日ごとに吸引し、２×濃縮ＩＬ－１５を含有する１ｍｌの完全培地と交換した。１０日後または１１日後にＴＩＬを採取し、７０μＭナイロンセルストレーナーに通し、３００×ｇで５分間遠心分離し、計数のために完全培地に再懸濁した。次いで、９６ウェルプレートにウェル当たり４００，０００個の細胞をプレーティングした後、抗Ｖδ１抗体で刺激した。２ｎｇ／ｍｌまたは５０ｎｇ／ｍｌの濃度のＩＬ－１５の存在下で、ＡＤＴ１－４、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－７－３、またはＲＳＶ ＩｇＧ１アイソタイプ対照抗体によってＴＩＬを刺激した。
図２０（Ａ及びＢ）は、２人の別々のドナーにおける４８時間（Ａ）または７２時間（Ｂ）のｍＡｂ刺激後の総腫瘍浸潤γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、各事例における標的会合を裏付けている。腫瘍浸潤Ｖδ１＋細胞をＣＤ２５及びＫｉ６７の発現について分析した。図２０（Ｃ）は、ＩｇＧ１アイソタイプ対照またはＡＤＴ１－４による刺激と比較して、ＡＤＴ１－４－２による４８時間の刺激後のＶδ１＋Ｔ細胞におけるＣＤ２５及びＫｉ６７両方の発現が増強されたことを示す。ｍＡｂで刺激されたＴＩＬの培養物からの上清を、ＭＳＤによってサイトカイン産生について分析した。図２０（Ｄ）は、５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下でＡＤＴ１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によって７２時間刺激されたＴＩＬによるＩＦＮ－γ産生の実質的増加倍率を示す。図２０（Ｅ）は、ＡＤＴ－１－４－２またはＡＤＴ１－７－３によるＴＩＬの刺激が、この時点で１７型関連サイトカインＩＬ－６またはＩＬ－１７の分泌を増強しなかったことを示す。
代替的に、異なるドナーからの生検材料を受領時に酵素消化して単一細胞懸濁液を得た。具体的には、最大１ｇの組織を、ＭｉｌｔｅｎｙｉのＴｕｍｏｕｒ Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｋｉｔの酵素（関連細胞表面分子の切断を防止するために０．２倍濃度で使用した酵素Ｒを除いては製造元が推奨する濃度）を補った４．７ｍｌのＲＰＭＩと共に、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｃチューブに入れた。Ｃ管は、加熱ブロックが取り付けられたｇｅｎｔｌｅＭＡＣＳ（商標）Ｏｃｔｏ Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｏｒに配置された。小腫瘍の解離のためにプログラム３７Ｃ＿ｈ＿ＴＤＫ＿１を選択した。１時間後、消化物を７０μＭフィルターで濾過し、４％ヒト血漿を含む完全ＩＭＤＭを加えて酵素活性をクエンチした。次に、細胞を２回洗浄し、計数のために完全ＩＭＤＭに再懸濁させた。細胞数に応じて、ウェル当たり２×１０６または４×１０６個の細胞を４８ウェルプレートにプレーティングし、２ｎｇ／ｍｌの濃度のＩＬ－１５の存在下で、ＡＤＴ１－４、ＡＤＴ１－４－２、またはＲＳＶ ＩｇＧ１アイソタイプ対照抗体によって刺激した。酵素消化によって単離されたＴＩＬを、ｍＡｂ刺激の２４～７２時間後にフローサイトメトリーによって分析した。図２０（Ｆ及びＧ）は、２人の別々のドナーにおけるｍＡｂ刺激後２４時間（Ｆ）または７２時間（Ｇ）の総腫瘍浸潤γδＴ細胞におけるＶδ１ ＴＣＲ発現の減少％を示し、酵素消化によって単離されたＴＩＬにおける標的会合を裏付けている。図２０（Ｈ）は、ＡＤＴ１－４－２による７２時間の刺激後のγδＴ細胞上のＫｉ６７発現の用量依存的な増強を示す。ｍＡｂで刺激されたＴＩＬの培養物からの上清を、ＭＳＤによってサイトカイン産生について分析した。図２０（Ｉ及びＪ）は、酵素消化によって２人の各ドナーから単離され、２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下で６．６６ｎＭの濃度のＡＤＴ１－４－２で刺激されたＴＩＬによって、２４時間（Ｉ）及び７２時間（Ｊ）の２つの時点で産生されたＩＦＮ－γの増加倍率を示す。まとめると、これらの総合結果は、親和性成熟した抗Ｖδ１抗体が、刺激後７２時間以内に腫瘍浸潤γδＴ細胞による活性化、増殖、及び抗腫瘍原性サイトカイン産生を推進できることを強調している。
別の実験では、肺腫瘍由来のＴＩＬをグリッドマトリクス上で単離し、２ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５の存在下でＡＤＴ１－４、ＡＤＴ１－４－２、またはＩｇＧ１アイソタイプ対照によって１０日間刺激した。図２１（Ａ）は、ＡＤＴ１－４－２で１０日間刺激されたγδＴ細胞におけるＣＤ２５及びＫｉ６７の発現の増強を示す。図２１（Ｂ）は、ＡＤＴ１－４－２による１０日間の刺激後のパーフォリン＋グランザイムＢ＋γδＴ細胞の実質的な増加を示す。より長期間にわたるｍＡｂでの刺激により、抗Ｖδ１抗体で刺激されたＶδ１＋Ｔ細胞を介したαβ Ｔ細胞の免疫ライセンシングの分析が可能になった。図２１（Ｃ）は、ＡＤＴ１－４－２で腫瘍浸潤Ｖδ１＋Ｔ細胞を１０日間刺激した後、ＣＤ８＋及びＣＤ８－の両方のαβ Ｔ細胞によるグランザイムＢ及びパーフォリンの発現が大幅に増強されたことを示す。ｍＡｂと共に１０日間培養したＴＩＬからの上清をＭＳＤによって分析した。図２１（Ｄ）は、ＡＤＴ１－４－２による刺激後の肺腫瘍由来ＴＩＬによる、ＩＦＮ－γの産生の顕著な増加、ならびにＩＬ－１７及びＩＬ－６の産生の中程度の増加を示す。図２１（Ｅ）は、ＡＤＴ１－４－２による１０日間の刺激後のＴＩＬによるケモカインＣＣＬ２、ＣＣＬ４及びＣＸＣＬ１０の産生の増強を示す。まとめると、これらの結果は、抗Ｖδ１抗体が腫瘍浸潤γδＴ細胞の活性化及び細胞傷害性を推進でき、それによって腫瘍浸潤αβＴ細胞の細胞傷害性が推進され得ることを強調している。
実施例７．ヒトＶδ１及びヒトＥＧＦＲ抗原に対するＶδ１－ＥＧＦＲ二重特異性抗体の結合親和性
標的（すなわち、γδＴＣＲのＶδ１鎖及びＥＧＦＲ）に対する抗体の結合親和性は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって確立される。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体またはヒトＥＧＦＲを、１００ｎＭの濃度で、会合１８０秒、解離４８０秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。実験はすべて室温で行った。結果を図２６Ａ及び２６Ｂに示す。
標的（すなわち、γδＴＣＲのＶδ１鎖及びＥＧＦＲ）に対する抗体の結合親和性は、Ｒｅｉｃｈｅｒｔ ４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって確立される。抗体（１．５ｕｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらす。組換えヒトＶδ１ヘテロ二量体またはヒトＥＧＦＲを、１００ｎＭの濃度で、会合１８０秒、解離４８０秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０のパラメータを用いて細胞上に流した。実験はすべて室温で行った。結果を図２６Ａ及び２６Ｂに示す。
結論：このデータは、Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体が、ヒトＥＧＦＲ結合能の導入にもかかわらず、その調製に使用された単特異性抗Ｖδ１抗体のものに匹敵するヒトＶδ１への結合を示すことを実証する。
実施例８． Ｖδ１－ＥＧＦＲ二重特異性抗体の標的細胞結合
ＥＧＦＲ／Ｖδ１二重特異性抗体の結合の特異性及び親和性を決定するために、ＥＧＦＲ陽性Ａ４３１及びＶδ１陽性初代γδＴ細胞をアッセイした。標的細胞を組織培養フラスコから剥離し、ＰＢＳに再懸濁し、ｖ底９６ウェルプレートにウェル当たり細胞１００，０００個の最終密度で播種した。細胞を遠心分離にかけ、製造元の説明書に従って細胞ペレットをＦｃＲブロッキング試薬に再懸濁し、４℃で２０分間インキュベートしてから更に洗浄した。抗体をＰＢＳで５００ｎＭに希釈し、ＰＢＳで１：１０に系列希釈して５０ｐＭとし、細胞に加えた後、４℃で２０分間のインキュベーションを行った。細胞表面に結合したｍＡｂの量を決定するために、生死判別色素に加えて、ＡＰＣにコンジュゲートされたマウス抗ヒトＩｇＧ二次抗体（希釈度１：１００）で細胞を染色した。４℃で２０分間のインキュベーション後、細胞を２回洗浄し、ＭＡＣＳＱｕａｎｔを使用して蛍光を測定した。結果を図２７に示す。
ＥＧＦＲ／Ｖδ１二重特異性抗体の結合の特異性及び親和性を決定するために、ＥＧＦＲ陽性Ａ４３１及びＶδ１陽性初代γδＴ細胞をアッセイした。標的細胞を組織培養フラスコから剥離し、ＰＢＳに再懸濁し、ｖ底９６ウェルプレートにウェル当たり細胞１００，０００個の最終密度で播種した。細胞を遠心分離にかけ、製造元の説明書に従って細胞ペレットをＦｃＲブロッキング試薬に再懸濁し、４℃で２０分間インキュベートしてから更に洗浄した。抗体をＰＢＳで５００ｎＭに希釈し、ＰＢＳで１：１０に系列希釈して５０ｐＭとし、細胞に加えた後、４℃で２０分間のインキュベーションを行った。細胞表面に結合したｍＡｂの量を決定するために、生死判別色素に加えて、ＡＰＣにコンジュゲートされたマウス抗ヒトＩｇＧ二次抗体（希釈度１：１００）で細胞を染色した。４℃で２０分間のインキュベーション後、細胞を２回洗浄し、ＭＡＣＳＱｕａｎｔを使用して蛍光を測定した。結果を図２７に示す。
結論：このデータは、Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体が、ＥＧＦＲ陽性Ａ４３１細胞株への結合の導入にもかかわらず、その調製に使用された単特異性抗Ｖδ１抗体のものに匹敵するＶδ１陽性γδＴ細胞への結合を示すことを実証する。
実施例９．インビトロでのγδＴ細胞の活性化及び標的細胞傷害性の評価
増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞及びＡ４３１細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁し、所望のエフェクター：標的比に応じた適切な細胞希釈度で９６ウェルプレートに播種した。ｍＡｂを希釈し、規定濃度で各ウェルに加えた。次いで培養物を３７℃、５％ＣＯ２で４時間（Ｄ）または２４時間（Ａ～Ｃ、Ｅ）インキュベートした。生細胞の数を決定するために、細胞を採取し、１：１０００の希釈度の生死判別色素で２０分間染色した。ＣＤ２５の状態を決定するために、細胞を採取した後、細胞表面を抗ＣＤ２５抗体で染色した。脱顆粒を測定するために、フルオロフォアにコンジュゲートした抗ＣＤ１０７α抗体を共培養開始時に細胞－抗体ミックスに直接加えた。２回の洗浄及び細胞固定の後、ＭＡＣＳＱｕａｎｔを使用して蛍光を測定し、生細胞数及び蛍光強度中央値を決定した。結果を図２８に示す。
増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞及びＡ４３１細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁し、所望のエフェクター：標的比に応じた適切な細胞希釈度で９６ウェルプレートに播種した。ｍＡｂを希釈し、規定濃度で各ウェルに加えた。次いで培養物を３７℃、５％ＣＯ２で４時間（Ｄ）または２４時間（Ａ～Ｃ、Ｅ）インキュベートした。生細胞の数を決定するために、細胞を採取し、１：１０００の希釈度の生死判別色素で２０分間染色した。ＣＤ２５の状態を決定するために、細胞を採取した後、細胞表面を抗ＣＤ２５抗体で染色した。脱顆粒を測定するために、フルオロフォアにコンジュゲートした抗ＣＤ１０７α抗体を共培養開始時に細胞－抗体ミックスに直接加えた。２回の洗浄及び細胞固定の後、ＭＡＣＳＱｕａｎｔを使用して蛍光を測定し、生細胞数及び蛍光強度中央値を決定した。結果を図２８に示す。
結論：このデータは、Ｖδ１／ＥＧＦＲ二重特異性抗体が初代Ｖδ１陽性γδＴ細胞の活性化及び脱顆粒を誘導し、ＥＧＦＲ陽性Ａ４３１細胞株の細胞媒介性溶解を増加させることを実証する。
実施例１０．本発明の抗体により付与されるγδＴ細胞活性化及び非枯渇効果の更なる評価
複数の研究を行って、ｖδ１細胞におけるＣＤ３の下方調節に関する、抗ｖδ１抗体によるｖδ１細胞の刺激／活性化の効果を調査した。これは、抗ｖδ１クローンＡＤＴ１－４－２をＰＢＭＣと共にインキュベートし、次いで表現型解析によりＴＣＲを分析することによって試験した。
複数の研究を行って、ｖδ１細胞におけるＣＤ３の下方調節に関する、抗ｖδ１抗体によるｖδ１細胞の刺激／活性化の効果を調査した。これは、抗ｖδ１クローンＡＤＴ１－４－２をＰＢＭＣと共にインキュベートし、次いで表現型解析によりＴＣＲを分析することによって試験した。
凍結保存されたヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を商業的に調達し、丸底９６ウェル組織培養プレートに、１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ１５を含む２５０ｕｌの完全培地（１０％ＦＣＳ、ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ、非必須アミノ酸、ピルビン酸ナトリウム、及びＨＥＰＥＳを補ったＲＰＭＩ）中、２５０，０００細胞／ウェルで播種した。滴定ｖδ１抗体ＡＤＴ１－４－２を、１ｕｇ／ｍｌ（６．６７ｎＭ）、０．０１ｕｇ／ｍｌ（０．０６７ｎＭ）、または０．０００１ｕｇ／ｍｌ（０．０００６７ｎＭ）の最終濃度まで加えた。一致する濃度の対照としてＲＳＶ ＩｇＧ抗体を含めた。３日毎に培地及び抗体を補充しながら、培養物を１４日間インキュベートした。各条件でｖδ１細胞及びＴＣＲ発現の表現型解析を行うために、エンドポイントでフローサイトメトリー分析を行った。細胞はまず、生きている一重項でゲーティングし、続いて汎γδ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＲＥＡ５９２；１３０－１１３－５０８）でゲーティングし、これはｖδ１（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＲＥＡ１７３；１３０－１００－５５３）のための親ゲートであり、これ自体がＣＤ３（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ ＲＥＡ６１３；１３０－１１３－１４２）のための親ゲートであった。細胞集団を陽性染色によって同定し、次いでＭＦＩによって試料間の各マーカーの相対的な発現レベルを同定した。
図２９Ａは、ｍＡｂ標的会合の指標としての抗体刺激時のｖδ１ ＴＣＲのＭＦＩを示す。図２９Ｂは、陽性ゲーティングされたｖδ１細胞におけるＣＤ３発現のＭＦＩを示す。ｖδ１抗体クローンＡＤＴ１－４－２による刺激はｖδ１細胞を会合させ、ｖδ１細胞上のｖδ１及びＣＤ３の両方の下方調節をもたらした。
実施例１１：抗ｖδ１抗体はＡＤＣＣを誘導しない。
ＡＤＣＣ Ｒｅｐｏｒｔｅｒ Ｂｉｏａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、抗ｖδ１抗体によって誘導されるＡＤＣＣ（抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性）のレベルを対照抗体と比較して評価した。
ＡＤＣＣ Ｒｅｐｏｒｔｅｒ Ｂｉｏａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、抗ｖδ１抗体によって誘導されるＡＤＣＣ（抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性）のレベルを対照抗体と比較して評価した。
ＡＤＣＣは、抗体でタグ付けされた標的細胞をエフェクター細胞が殺傷する生物学的現象を指す。エフェクター細胞は、そのＦｃγ受容体を介して抗体に結合し、続いて標的細胞を殺傷する。ここで提示するＡＤＣＣレポーターバイオアッセイは、ＮＦＡＴ（活性化Ｔ細胞核内因子）経路による遺伝子転写の活性化を介してＡＤＣＣの早期開始を検出することにより、アッセイ内で試験される抗体の潜在的なＡＤＣＣ作用メカニズムを明らかにする。このレポーターアッセイは、ＮＦＡＴ経路に連結した高親和性ＦｃγＲＩＩＩａ受容体を発現するエフェクター細胞（Ｊｕｒｋａｔｓ）を利用する工学操作系であり、活性化されるとホタルルシフェラーゼ酵素のさらなる活性化を誘導するように、さらに工学操作されている。ルシフェラーゼ活性は、発生するＡＤＣＣのレベルに相関し得る発光の読み取り値によって数量化される。
このアッセイは、抗ｖδ１抗体、または好適には多重特異性抗体の抗ｖδ１アームが、ＡＤＣＣ反応を推進するかどうかを理解するために利用した。利用した標的細胞は、ｖδ１γδＴＣＲを介して抗ｖδ１抗体に結合するγδ細胞であった。ＡＤＣＣ作用メカニズムが存在する場合、抗ｖδ１抗体は、アッセイエフェクター細胞上のＦｃγ受容体と結合し、発光シグナルを生成する。シグナルが生成されなければ、これはＡＤＣＣが発生していないことを示唆する。
このアッセイには、ＡＤＣＣ Ｒｅｐｏｒｔｅｒ Ｂｉｏａｓｓａｙ Ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いた。Ｂｉｏ－Ｇｌｏ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅアッセイバッファーのボトル１本を解凍し、基質ボトルに移した。この混合物を４～６時間室温に保った。次の抗体：抗ｖδ１抗体（ＡＤＴ１－４－２）、同じ抗ｖδ１抗体だがＦｃ無効型（Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ）（ＡＤＴ１－４－２ ＬＡＧＡ）、リツキシマブ、ＲＳＶ及びＯＫＴ３について、１０ｎＭ～０．０１ｎＭ（最終濃度）の範囲の抗体濃度（３Ｘ濃度）で希釈プレートを調製した。標的細胞（γδ細胞）をウェル当たり２５μｌで２つのアッセイプレートに播種した。次いで、抗体希釈プレートから適切な抗体溶液２５μｌを適切なウェルに移した。エフェクター細胞（工学操作されたＪｕｒｋａｔ細胞）を温かいアッセイバッファーに解凍し、４ｍｌのアッセイバッファーに再懸濁し、２５μｌのエフェクター細胞溶液を各ウェルにピペットで入れた。次いで、プレートを３７℃で４．５時間インキュベートした。インキュベーション期間の後、プレートを室温まで平衡化させ、その後、７５μｌのＢｉｏ－Ｇｌｏ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ試薬を各ウェルに加え、プレートを室温で１０分間インキュベートした。次いで、Ｂｉｏｔｅｋ Ｈ４プレートリーダーを使用してプレートを読み取り、プレートから発光シグナル（相対光単位ＲＬＵとして）を収集した。誘導倍率は、次の等式を使用して計算した：誘導倍率＝ＲＬＵ（誘導－バックグラウンド）／ＲＬＵ（無抗体対照－バックグラウンド）。
陽性対照としてＯＫＴ３（抗ＣＤ３抗体）を使用した。追加の陽性対照として、対照ウェルにはγδ細胞の代わりにＲａｊｉ細胞を播種した。Ｒａｊｉ細胞は、抗ＣＤ２０抗体であるリツキシマブと併用すると強力なＡＤＣＣ反応を示すように使用される一般的に許容されている細胞株である。内部対照として、かつ抗ｖδ１抗体がγδ細胞におけるｖδ１結合の非存在下でＡＤＣＣを駆動するかどうかを理解するために、本発明の抗ｖδ１抗体と、同じ抗ｖδ１抗体だがＦｃ無効型（Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ）とを、エフェクター細胞単独と共に加えた。
結果を図３０に示す。
結論：Ｒａｊｉ細胞と共にリツキシマブを使用した陽性対照では強力なＡＤＣＣ反応が示され、γδ細胞に対するＯＫＴ３ではさらに強力なＡＤＣＣ反応が示された。対照的に、本発明の抗ｖδ１抗体、同じ抗ｖδ１抗体だがＦｃ無効型でもあるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、またはＲＳＶ陰性対照を使用したいずれの条件でもＡＤＣＣ反応は検出されなかった。これは、この系において、ｖδ１に結合する本発明の抗体（抗ｖδ１ ｍＡｂまたは抗ｖδ１多重特異性抗体など）がＡＤＣＣ作用機序の証拠を示さないことを実証する。注目すべきことに、Ｆｃ有効型抗Ｖδ１抗体でさえγδＴ細胞を枯渇させず、そのため、例えば高Ｆｃγ腫瘍環境において、本明細書で提示される抗Ｖδ１抗体のＦｃ機能を維持し、機能性を付加するオプションが提供される。これは、かかる抗Ｖδ１抗体が本明細書に記載されるような二重特異性抗体フォーマットに含まれる適性をさらに明らかにしている。
実施例１２：Ｖδ１ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体の製造可能性／安定性の評価
本明細書に記載される新規Ｖδ１×ＥＧＦＲ多重特異性分子の製造可能性／安定性についての理解を深めるために、本発明者らは、様々な方法によってこれらの分子のパネルを評価した。複数の研究により、驚くべき違いが明らかになった。それについてこれから概説する。
本明細書に記載される新規Ｖδ１×ＥＧＦＲ多重特異性分子の製造可能性／安定性についての理解を深めるために、本発明者らは、様々な方法によってこれらの分子のパネルを評価した。複数の研究により、驚くべき違いが明らかになった。それについてこれから概説する。
（Ａ）ＣＨＯでの収量
方法：まず、標準的なＣＨＯ発現プラットフォーム（「ＣＨＯプラットフォーム１」）で多重特異性抗体を産生した。このプラットフォームは、重鎖カセット及び軽鎖カセットを含む標準的な発現ベクターを備える。懸濁に適合させたＣＨＯ Ｋ１細胞（元々ＡＴＣＣからのものを懸濁培養での無血清増殖に適合させた）を製造に用いた。シード細胞は、既知組成で動物成分を含まない無血清培地で増殖させた。次いで細胞にベクター及びトランスフェクション試薬をトランスフェクトし、細胞を更に増殖させた。上清を遠心分離によって採取し、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ（商標）ＳｕＲｅ（商標）を使用して抗体を精製した後に製剤した。
方法：まず、標準的なＣＨＯ発現プラットフォーム（「ＣＨＯプラットフォーム１」）で多重特異性抗体を産生した。このプラットフォームは、重鎖カセット及び軽鎖カセットを含む標準的な発現ベクターを備える。懸濁に適合させたＣＨＯ Ｋ１細胞（元々ＡＴＣＣからのものを懸濁培養での無血清増殖に適合させた）を製造に用いた。シード細胞は、既知組成で動物成分を含まない無血清培地で増殖させた。次いで細胞にベクター及びトランスフェクション試薬をトランスフェクトし、細胞を更に増殖させた。上清を遠心分離によって採取し、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ（商標）ＳｕＲｅ（商標）を使用して抗体を精製した後に製剤した。
結論：このプラットフォームで発現させた２つの分子の収量比較を図３４Ａに示す。これは、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥについて観察された、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７（矢印で示す）と比較して優れた発現及び回収率を強調している。次いで、代替ＣＨＯプラットフォーム（「ＣＨＯプラットフォーム２」）で更なる比較を行った。この代替プラットフォームでは、各分子の収量がより同等であった。
（Ｂ）加速貯蔵条件下の安定性
方法：上記の「ＣＨＯプラットフォーム２」で産生した抗体を、典型的な抗体製剤バッファー中２ｍｇ／ｍｌで製剤し、加速ストレス条件（３７℃）下で研究した。次いで、Ｕｎｃｌｅプラットフォーム及び標準プロトコル（Ｕｎｃｈａｉｎｅｄ Ｌａｂｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用した標準ｉｃＩＥＦ法によって分子を分析した。
方法：上記の「ＣＨＯプラットフォーム２」で産生した抗体を、典型的な抗体製剤バッファー中２ｍｇ／ｍｌで製剤し、加速ストレス条件（３７℃）下で研究した。次いで、Ｕｎｃｌｅプラットフォーム及び標準プロトコル（Ｕｎｃｈａｉｎｅｄ Ｌａｂｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用した標準ｉｃＩＥＦ法によって分子を分析した。
結論：図３４Ｂは、ほとんどの分子が比較的安定しているように見えるのに対し、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７分子（矢印で示す）ではわずか４８時間後に塩基性種の顕著な増加が認められたことを示している。この図３４ＢのＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ分子によって例示されるように、他の分子ではそのような増加は観察されなかった。この所見は、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ分子がより安定した（例えば、より熱的に安定な）Ｖδ１ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体であることを示している。ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７とＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥとの唯一の配列の違いが位置Ｌ３５８．Ｔ３５９．Ｋ３６０にあることを考慮すると、これは、γδＴＣＲのＶδ１鎖を標的とする少なくとも１つの第１の抗体由来結合ドメインと、ＥＧＦ受容体に結合する第２の結合ドメインとを含み、かつＬ３５８．Ｅ３５９Ｅ．Ｅ３６０を含むＶδ１ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体が、場合によっては、代わりにＴ３５８．Ｄ３５９．Ｄ３６０をこれらの位置に含むＶδ１ｘＥＧＦＲ二重特異性薬と比べてより好ましいバリアントであることを示唆している（全ての番号付けはＥＵに従う）。
（Ｃ）凝集傾向
方法：Ｕｎｃｌｅ及び標準プロトコル（Ｕｎｃｈａｉｎｅｄ Ｌａｂｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用して、多重特異性抗体の融解プロファイルを評価した。
方法：Ｕｎｃｌｅ及び標準プロトコル（Ｕｎｃｈａｉｎｅｄ Ｌａｂｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用して、多重特異性抗体の融解プロファイルを評価した。
結論：図３４Ｃは、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６５分子については、凝集の開始が融解より前に起こり、その結果、有意なデルタ（矢印で示す）が生じたことを強調している。これは、凝集の開始が融解の開始とより同時であった他の分子とは対照的であった。同時の融解／凝集は通常、より安定な分子を示す。
（Ｄ）加速条件下のより高い濃度における減衰プロファイル（非還元分析）
方法：２ｍｇ／ｍｌでの凝集傾向を調査した研究では有意差が明らかにならなかったが、５ｍｇ／ｍｌ（加速条件下、３７℃で１８日間）の研究では、Ｍａｕｒｉｃｅ及び標準プロトコル（Ｕｎｃｈａｉｎｅｄ Ｌａｂｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて非還元ＣＥ－ＳＤＳによって分析すると、異なる分子における顕著な変化が明らかになった。
方法：２ｍｇ／ｍｌでの凝集傾向を調査した研究では有意差が明らかにならなかったが、５ｍｇ／ｍｌ（加速条件下、３７℃で１８日間）の研究では、Ｍａｕｒｉｃｅ及び標準プロトコル（Ｕｎｃｈａｉｎｅｄ Ｌａｂｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて非還元ＣＥ－ＳＤＳによって分析すると、異なる分子における顕著な変化が明らかになった。
結論：このような分析により、分析された二重特異性分子のうちの複数において（ただし全てではない）、非モノマー不純物の出現における顕著な増加が認められた。この研究の例示的な結果及び表形式でまとめられた結果を図３４Ｄに示す（顕著な変化は矢印で示されている）。
（Ｅ）加速条件下の高濃度における減衰プロファイル（還元分析）
上記（Ｄ）の研究は、非還元条件下で分析した場合にＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７が加速条件下でより安定なプロファイルを示したことを強調しているが、還元ＣＥ－ＳＤＳ条件下で分析すると（ここでもＵｎｃｌｅ及び標準プロトコル、Ｕｎｃｈａｉｎｅｄ Ｌａｂｓ，ＣＡ，ＵＳＡを使用）、この同じＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７分子は、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥによって図３４Ｅに例示されている他の多重特異性分子と比べて独特の非定型プロファイルを示した。ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥは、３７℃で１８日間の後に観察された「ショルダリング」の増加を示さず（これはＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７にのみ特有）、これはＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥのより好ましい特性を示唆している可能性がある。
上記（Ｄ）の研究は、非還元条件下で分析した場合にＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７が加速条件下でより安定なプロファイルを示したことを強調しているが、還元ＣＥ－ＳＤＳ条件下で分析すると（ここでもＵｎｃｌｅ及び標準プロトコル、Ｕｎｃｈａｉｎｅｄ Ｌａｂｓ，ＣＡ，ＵＳＡを使用）、この同じＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７分子は、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥによって図３４Ｅに例示されている他の多重特異性分子と比べて独特の非定型プロファイルを示した。ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥは、３７℃で１８日間の後に観察された「ショルダリング」の増加を示さず（これはＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７にのみ特有）、これはＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥのより好ましい特性を示唆している可能性がある。
実施例１３：ＶＤ１ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体のＶＤ１結合アームにおける親和性のダイヤルアップ／ダウン。
これらの研究では、一連の多重特異性抗体を作出し、ここで、
（ｉ）Ｖδ１＋に対する親和性を約０．２ｎＭ～２０ｎＭの間でダイヤルアップ／ダウンし、
（ｉｉ）ＥＧＦＲに対する親和性は約１ｎＭで一定に保った。
これらの研究では、一連の多重特異性抗体を作出し、ここで、
（ｉ）Ｖδ１＋に対する親和性を約０．２ｎＭ～２０ｎＭの間でダイヤルアップ／ダウンし、
（ｉｉ）ＥＧＦＲに対する親和性は約１ｎＭで一定に保った。
次に、これらの分子の効果について、一連の実験で研究した。対照のＤ１．３ｘＥＧＦＲ多重特異性分子もこの一連の研究に含めた。この対照は、（Ｖδ１ ＴＣＲの代わりに）ニワトリリゾチームに結合するｍＡｂ Ｄ１．３の第１の結合ドメインと、約１ｎＭの親和性でＥＧＦＲに結合する第２の結合ドメインとを含んでいた。
（Ａ）親和性の概要。
このパネルの多重特異性分子の命名法及び親和性を提示する。
このパネルの多重特異性分子の命名法及び親和性を提示する。
実施例１３のＳＰＲ方法：標的（ヒトＶδ１）に対する抗体の結合親和性を、４ＳＰＲ機器（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＳＰＲ分析によって確立した。抗体（１．５μｇ／ｍＬ）をＰｌａｎａｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｓｅｎｓｏｒ Ｃｈｉｐ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にコーティングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらした。ヒトＶδ１抗原を、最高濃度５０ｎＭの１：３の希釈系列で、会合１８０秒、解離９００秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ＋０．０５％ Ｔｗｅｅｎ－２０のパラメータを用いて細胞上に流した。各注入後に、２０ｍＭリン酸を使用してチップ表面を再生した。実験はすべて室温で行った。定常状態のフィッティングは、ＴｒａｃｅＤｒａｗｅｒソフトウェア（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＬａｎｇｍｕｉｒ １：１結合に従って決定した。
（Ｂ）（Ｃ）組織常在性Ｖδ１＋細胞への多重特異性結合に対するｖδ１ ＴＣＲ親和性の影響。
この分子パネルを用いたこの最初の実験では、Ｖδ１ ＴＣＲに対する親和性の役割を調査した。
この分子パネルを用いたこの最初の実験では、Ｖδ１ ＴＣＲに対する親和性の役割を調査した。
方法：皮膚組織由来のＶδ１＋エフェクター細胞を、１０ｎＭ～０．１３ｐＭの濃度範囲までＰＢＳで系列希釈した抗体と共インキュベートした。細胞を２０分間４℃でインキュベートした。細胞を洗浄し、抗ヒトＦｃ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）及び死細胞用生死判別色素（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）によって４℃で２０分間染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、ＭＡＣＳＱｕａｎｔ Ａｎａｌｙｓｅｒ １０フローサイトメーター（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）で分析した。
結論：提示された結合データは、Ｖδ１親和性の増加と、組織常在性Ｖδ１＋細胞への多重特異性抗体の結合レベルの上昇との間に、強い相関関係があることを示唆している。図３５Ｂ、及び図３５Ｂの結果を表形式で示す図３５Ｃを参照されたい。このデータは、高親和性の分子が、飽和濃度で増強された効果を付与することを強調している。注目すべきことに、高親和性のバリアントによって付与される効果は、抗体の低親和性のバリアントをより高い濃度で用いても、模倣も再現もできない。これは、Ｖδ１ ＴＣＲに対して（不自然に）高い親和性を持つ分子が、親和性の低い分子では著しく高い濃度（例えば１００倍）でも模倣できない異なる効果を付与することを示唆している。この発見についても、本明細書で更に説明する。
次に、これらの分子の更なる効果について、以下の一連の実験で研究した。皮膚組織由来のＶδ１＋エフェクター細胞を、次のようにＥＧＦＲ＋Ａ３７５黒色腫癌細胞株と共インキュベートした。
●まず、アッセイセットアップの約１６時間前に、ＥＧＦＲ＋標的細胞をマルチウェル組織培養プレートに播種した。
●翌日、ＥＧＦＲ＋標的細胞に加える前に、抗体を基礎増殖の濃度範囲まで系列希釈した。
●皮膚由来のＶδ１γδＴ細胞を培養フラスコから剥離し、細胞懸濁液をアッセイプレートに播種し、共培養物を３７℃、５％ＣＯ２で規定期間にわたってインキュベートした。
●各事例で説明したように、選択した読み取り値に応じて細胞を処理及び分析した。
●まず、アッセイセットアップの約１６時間前に、ＥＧＦＲ＋標的細胞をマルチウェル組織培養プレートに播種した。
●翌日、ＥＧＦＲ＋標的細胞に加える前に、抗体を基礎増殖の濃度範囲まで系列希釈した。
●皮膚由来のＶδ１γδＴ細胞を培養フラスコから剥離し、細胞懸濁液をアッセイプレートに播種し、共培養物を３７℃、５％ＣＯ２で規定期間にわたってインキュベートした。
●各事例で説明したように、選択した読み取り値に応じて細胞を処理及び分析した。
これらの研究の結果は次のように示される：
（Ｄ）（Ｅ）組織常在性Ｖδ１＋細胞のＶδ１ ＴＣＲ内部移行に対するｖδ１ ＴＣＲ親和性の影響。
Ｖδ１＋エフェクター細胞をＥＧＦＲ＋がん細胞と共インキュベートするこの最初の分析では、多重特異性抗体会合後のＶδ１ ＴＣＲ内部移行の誘導に焦点を当てる。
Ｖδ１＋エフェクター細胞をＥＧＦＲ＋がん細胞と共インキュベートするこの最初の分析では、多重特異性抗体会合後のＶδ１ ＴＣＲ内部移行の誘導に焦点を当てる。
方法：Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり２．５×１０＾４個のＥＧＦＲ＋標的細胞に２．５×１０＾４個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。添加前に、Ｖδ１γδＴ細胞を［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ生細胞色素で２０分間染色した。最終アッセイ抗体濃度は１０ｎＭ～０．１３ｐＭの範囲であった。３７℃、５％ＣＯ２で４時間のインキュベーション後、細胞を採取し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＶδ１ ＴＣＲ（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）の表面発現について２０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、ＭＡＣＳＱｕａｎｔ Ａｎａｌｙｓｅｒ １０フローサイトメーター（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）で分析した。
結論：ＭＦＩの低減を図３５Ｄに示す。これらの結果は、抗体会合時のＴＣＲ下方調節の増加を示している。また、親和性が高いほど、ＭＦＩシグナルの低減（従ってＴＣＲの下方調節）が大きくなることも発見された。注目すべきことに、１００倍以上の低親和性分子（ＡＤＴ１－４－１３８ｘＡＤＴ３－２）を加えても、同等のシグナル低減は誘導できなかった。これは、ＴＲＤＶ１標的に対する不自然に高い親和性がＴＣＲ下方調節を更に増強し得ることを示唆している。これはまた、非常に高い親和性の結合がＴＣＲ機能に異なる影響を与えることも示唆している。より最適な飽和下方調節効果を達成するためにこのような高い親和性が必要である理由については、推測することしかできない。これは、より親和性の高い分子の滞留時間の延長（オフレートの低下による）が、おそらく高レベルのＴＣＲ架橋を介してより高い飽和効果を付与するという、均質なＶδ１＋集団に対する確率的影響である可能性がある。別の可能性は、Ｖδ１＋細胞のサブセットが、より親和性の低い分子によって付与されるＴＣＲ下方調節効果を受けにくいというものである。図３５Ｄの所見の要約を表形式で示す（図３５Ｅを参照のこと）。これは、高い親和性が飽和濃度で異なる効果をもたらすこと、そして、より親和性の低い分子によって付与される低減した効果が、より高い濃度での投与では補償できないということを更に強調している。
（Ｆ）（Ｇ）組織常在性Ｖδ１＋細胞の脱顆粒に対するｖδ１ ＴＣＲ親和性の影響。
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与される脱顆粒効果に焦点を当てる。
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与される脱顆粒効果に焦点を当てる。
方法：Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり２．５×１０＾４個のＥＧＦＲ＋標的細胞に２．５×１０＾４個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。添加前に、Ｖδ１γδＴ細胞を［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ生細胞色素で２０分間染色した。最終アッセイ多重特異性抗体濃度は１０ｎＭ～０．１３ｐＭの範囲であった。さらに、ＣＤ１０７ａに特異的なフルオロフォア結合抗体（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）を共インキュベーションの開始時に加えた。３７℃、５％ＣＯ２で４時間のインキュベーション後、細胞を採取し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）について２０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、ＭＡＣＳＱｕａｎｔ Ａｎａｌｙｓｅｒ １０フローサイトメーター（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）で分析した。図３５Ｆを参照されたい。
結論：これらの研究は、親和性の増加が最適な効果を付与することを重ねて実証する。ＣＤ１０７ａ上方調節の増加と親和性の増加との間には、直接的相関関係が観察される。繰り返しになるが、このデータは、Ｖδ１ ＴＣＲに対する不自然に高い親和性によって、著しく異なる、より好ましい効果が推進され、この効果は、Ｖδ１に対する親和性が低い分子では、はるかに高い濃度で投与しても再現できないことを示唆している。図３５Ｆの結果の要約を表形式で示す（図３５Ｇを参照のこと）。繰り返しになるが、この要約は、飽和濃度での高親和性の分子が、低親和性の分子と比べて（はるかに高い濃度で用いた場合でも）、異なる、より増強された飽和効果を付与するという発見を強調している。
（Ｈ）（Ｉ）ＥＧＦＲ＋がん細胞に対する多重特異性細胞溶解機能に対するｖδ１ ＴＣＲ親和性の影響
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与される細胞溶解効果に焦点を当てる。
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与される細胞溶解効果に焦点を当てる。
方法：３８４ウェルＣｅｌｌＣａｒｒｉｅｒ Ｕｌｔｒａプレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）のウェル当たり４×１０＾３個のＥＧＦＲ＋標的細胞に４×１０＾３個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。最終アッセイ抗体濃度は５ｎＭ～０．０３ｐＭの範囲であった。３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした後、細胞をＨｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で、また死細胞について（ＤＲＡＱ７、Ａｂｃａｍ）、３７℃で１時間染色した。Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘシステム（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で細胞をイメージングし、線形回帰モデル（Ｈａｒｍｏｎｙ ４．９）を使用して、生細胞染色のサイズ、形態、質感及び強度、ならびにＤＲＡＱ７染色の非存在に基づいて、生存標的細胞の量を決定した。
結論：ここで提示されたデータは、Ｖδ１親和性が最も高い分子が、ＥＧＦＲ＋がん細胞に対して最も強力で細胞溶解性があることを実証する。図３５Ｈを参照されたい。更に、Ｖδ１親和性が最も低い多重特異性抗体（２０ｎＭ）と、中／高Ｖδ１親和性の多重特異性抗体（それぞれ１．２ｎＭ及び０．２ｎＭ）との間で質的な差異が観察され、顕著に異なる飽和効果が観察された。これは、不自然に高い親和性が、著しく異なる増強された効果を付与することを示唆している。これらの効果は、Ｖδ１ ＴＣＲに対する親和性が低い分子を使用した場合、はるかに高い（例えば１００倍の）濃度で投与しても模倣することができない。図３５Ｈからの結果の要約を表形式で示す（図３５Ｉを参照のこと）。これは、飽和濃度での高親和性の分子が、低親和性の分子と比べて（はるかに高い濃度で送達された場合でも）、異なる、より増強された効果を付与するという発見を強調している。
（Ｊ）（Ｋ）組織常在性Ｖδ１＋細胞の増殖に対するｖδ１ ＴＣＲ親和性の影響。
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与されるＶδ１＋細胞の増殖の誘導に焦点を当てる。
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与されるＶδ１＋細胞の増殖の誘導に焦点を当てる。
方法：Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり１．５×１０＾４個のＥＧＦＲ＋標的細胞に３×１０＾４個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。添加前に、標的細胞を［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ生細胞色素で２０分間染色した。最終アッセイ多重特異性抗体濃度は２ｎＭ～０．２５ｐＭの範囲であった。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で、５日間または７日間インキュベートした。サイトカイン（ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－４、及びＩＬ－２１；単位が必要）を添加した完全培地を３日目及び５日目に加えた。細胞を洗浄し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）について２０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １０を使用したフローサイトメトリーにより、事象の数を測定した。
結論：これらの研究は、増加した親和性がより増強された効果をもたらし、Ｖδ１ Ｔ細胞の増殖誘導の増加と親和性の増加との間に直接的相関関係が観察されるという所見を更に強固にする。図３５Ｊ（及び図３５Ｋの表形式の概要）を参照されたい。これは、最も低いＥＣ５０及びＥＣ９５、ならびに最も高い最大細胞数を示す、最高の親和性の反復において最も明らかである。より親和性の高い分子は、Ｖδ１ Ｔ細胞増殖の増殖の推進においてより強力である。興味深いことに、より親和性の高い分子によって付与される他の技術的効果とは多少異なるが、この事例では、より親和性の低い分子のバリアントは、１００倍高い濃度で送達された場合に同様の効果を付与することができる。
（Ｌ）この研究の全体的概要
図３５Ｌを参照されたい。
図３５Ｌを参照されたい。
この概要は、以下の点を強調する。
（ｉ）Ｖδ１＋ＴＣＲに対する比較的高い親和性（１０ｎＭ未満）を有する本発明の抗体によって付与される有利な技術的効果；及び
（ｉｉ）より親和性の低い分子（１０ｎＭ超）によって付与される低減した効果のうち、濃度を１００倍以上に増加させることによって補償できるものはどれか。
（ｉ）Ｖδ１＋ＴＣＲに対する比較的高い親和性（１０ｎＭ未満）を有する本発明の抗体によって付与される有利な技術的効果；及び
（ｉｉ）より親和性の低い分子（１０ｎＭ超）によって付与される低減した効果のうち、濃度を１００倍以上に増加させることによって補償できるものはどれか。
（Ｍ）ＴＡＡコピー数の影響。
図３５Ｌにまとめた上記の所見は、幾つかの興味深い結果を強調している。具体的には以下の点である。
（ｉ）高親和性分子（Ｖδ１ ＴＣＲに対する）は、低親和性分子バリアントと比べて増強された効果をもたらし、
（ｉｉ）低親和性バリアントによって付与される低減した効果は、これらの分子の濃度を増加させることによって常に補償できるとは限らない。
図３５Ｌにまとめた上記の所見は、幾つかの興味深い結果を強調している。具体的には以下の点である。
（ｉ）高親和性分子（Ｖδ１ ＴＣＲに対する）は、低親和性分子バリアントと比べて増強された効果をもたらし、
（ｉｉ）低親和性バリアントによって付与される低減した効果は、これらの分子の濃度を増加させることによって常に補償できるとは限らない。
しかしながら、本発明者らは次に、そのようなアッセイにおける第２の標的（この事例ではＥＧＦＲ）に対するコピー数の影響を調査した。（図３５Ｍを参照のこと）。これらの研究では、上記で概説したものと同じ方法論を用いたが、コピー数の低いＴＡＡがん細胞株（Ａ３７５）を、極めて高いコピー数を示すがん細胞株（Ａ４３１）に置き換えた。従って初代Ｖδ１＋細胞と独特の高コピー数ＥＧＦＲ＋がん細胞株との共インキュベーションを伴うこの同等の研究では、興味深いことに、異なる所見が明らかになった。具体的に述べると、場合によっては、より親和性の低いバリアントによって観察される低調な効果は、より高いＴＡＡコピー数のがん細胞株と組み合わされば、アッセイにおけるこれらのバリアントの濃度を増加させることによって克服され得る。高親和性分子は、アッセイに用いられるがん細胞株のＥＧＦＲコピー数に関係なく、同様の濃度で同様の効果を示すが、より親和性の低い分子の場合、より高いコピー数のがん細胞株の使用と組み合わせた分子の濃度の増加の組み合わせにより、補償効果がもたらされた。このような状況でより高濃度の低親和性バリアントを使用することで初めて、より親和性の低い分子によって付与される飽和ＣＤ１０７ａ上方調節及び飽和ＴＣＲ下方調節が、より親和性の高い分子の飽和効果を模倣することができる。
これは、以下の場合に、より親和性の低い分子の低減した効果が「回復」され得ることを示唆している。
（ａ）非常に高いＴＡＡ標的細胞株がアッセイに使用され、
（ｂ）１００倍（またはそれ以上）増加した濃度の分子が用いられる場合。
（ａ）非常に高いＴＡＡ標的細胞株がアッセイに使用され、
（ｂ）１００倍（またはそれ以上）増加した濃度の分子が用いられる場合。
これらの所見の背後にあるメカニズムは推測することしかできないが、Ｖδ１ ＴＣＲに対してより高い親和性を有する本発明の分子の利点が重ねて強調される。例えば、標的がん細胞株が正常なＥＧＦＲ ＴＡＡレベルを有する場合、より親和性の低いバリアントの有効性は大幅に低減する。これは、より高い用量では克服できない可能性がある。さらに、ＥＧＦＲ ＴＡＡの場合、コピー数が極めて高いＥＧＦＲがんは、ほとんどのがんにおいて少数であることがよく理解されている。例えば、ある特定の乳癌（例えば、Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ ２０１３１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００７９０１４）または頭頸部癌（例えば、Ｌｉｃｉｔｒａ ｅｔ ａｌ ２０１１ ＤＯＩ： １０．１０９３／ａｎｎｏｎｃ／ｍｄｑ５８８）または胃癌（例えば、Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ ２０１５ ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．３８９２／ｏｌ．２０１５．３８７５）に関する最近の研究を参照されたい。したがって、より親和性の低いバリアントと比べて勝っている、本発明の非天然高親和性抗体の増加した有用性及び驚くべき利点は非常に明らかである。
実施例１４：ＶＤ１ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体のＥＧＦＲ結合アームにおける親和性のダイヤルアップ／ダウン。
一連の多重特異性抗体を作出し、ここで、
（ｉ）ＥＧＦＲへの親和性をダイヤルアップ／ダウンし、
（ｉｉ）Ｖδ１に対する親和性は約０．２ｎＭで一定に保った。
一連の多重特異性抗体を作出し、ここで、
（ｉ）ＥＧＦＲへの親和性をダイヤルアップ／ダウンし、
（ｉｉ）Ｖδ１に対する親和性は約０．２ｎＭで一定に保った。
この調査のための出発ＥＧＦＲ結合ドメイン（ＦＳ１－６７）は既報である（ＷＯ２０１８０１５４４８）。この結合ドメインを更に修飾する動機の１つは、本発明の多重特異性抗体に用いる場合のこのドメインの親和性を更に微調整する試みであった。そうすることで、本発明者らは、ＥＧＦＲ結合ドメイン内の特定のアミノ酸を野生型ヒト免疫グロブリン配列に戻すと、他のものよりもＥＧＦＲ標的に対する親和性に影響が及ぶことを発見した。この調査の結果、ＥＧＦＲに対する約１ｎＭの結合から約１４０ｎＭまでの範囲の様々な親和性オプションを備えた、より微調整された結合ドメインのパネルが発見された。異なるＥＧＦＲ結合ドメインは、本発明の多重特異性抗体に組み込まれた場合に、様々な特徴的な特性を付与した。従って、この多重特異性抗体のパネルは、親和性の役割を調査及び決定する際に非常に貴重であることも証明された。
この研究には、示されている場合には、多重特異性Ｄ１．３ｘＦＳ１－６７対照（ＥＧＦＲ親和性が１ｎＭの第２の結合ドメインと、第１の結合ドメインに含まれるニワトリリゾチームに対する結合ドメインとを含む）も含まれる。
（Ａ）親和性の概要
このパネルの多重特異性分子の命名法及び親和性を提示する。
このパネルの多重特異性分子の命名法及び親和性を提示する。
実施例１４のＳＰＲ方法：ヒトＥＧＦＲについては、組換えタンパク質（Ｓｔｒａｔｅｃｈ；１０００１－Ｈ０８Ｈ－ＳＩＢ－１００ｕｇ）をカルボキシルメチルデキストランセンサーチップ（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にカップリングして、およそ５００ｕＲＩＵのベースラインの増加をもたらした。会合１８０秒、解離６６０秒、流速２５μＬ／分、ランニングバッファーＰＢＳ－Ｔのパラメータを用いて、濃度範囲の抗体（７．５～２００ｎＭ）をＰＢＳ－Ｔバッファーに注入した。各注入後に、２０ｍＭリン酸を使用してチップ表面を再生した。実験はすべて室温で行った。定常状態のフィッティングは、ＴｒａｃｅＤｒａｗｅｒソフトウェア（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用したＬａｎｇｍｕｉｒ １：１結合に従って決定した。
結論：結果の要約を図３６Ａに示す。この研究では、出発時のＣＨ３ベースのＦＳ１－６７結合モジュールは、ＡＢループに５つ、ＣＤループに３つ、及びＥＦループに５つの修飾を含む。この分子の親和性を様々な程度で変更しようと試みると、幾つかの興味深い発見があった。例えば、ＡＢループ内の５つのアミノ酸全てを野生型配列に戻すと、ＥＧＦＲ結合親和性に最も大きな影響があることが発見された（破線の黒い四角形で示されるＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１）。確かに、野生型免疫グロブリン配列へのＣＤループの完全な復帰またはＥＦループの（部分的な）復帰（それぞれ、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ２及びＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３）と比較すると、ＡＢループの変更が最も影響の強いものであった。実際、幾つかの尺度（後述）により、ＡＢループを野生型配列に戻すと、結合親和性及び特異性が失われる結果となった。したがって、ＦＳ１－６７のＡＢループに見られる非保存的アミノ酸がトレオニン（極性）からロイシン（非極性）に戻るように修飾された場合に、親和性が影響を受けなかったのは予想外であった。これは、ＡＤＴ１－４－２ ＬＥＥ分子（黒い実線の長方形で強調表示、１つの変化－親和性／機能への影響は無視できる）を、ＡＤＴ１－４－２ ＬＥＥ１分子（黒い点線の長方形で強調表示、５つの変化－親和性／機能への影響が最も大きい）と比較することによって強調される。とはいえ、結果として得られる、ＡＢループへの変更を４つだけ含むＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥには、追加の修飾も組み込まれていた。したがって、結合ループにおけるこれらの他の（保存的）変化（Ｄ３６５９Ｅ、Ｄ３６０Ｅ）も高い親和性の保持に寄与したということは、驚くべきことではあるが、あり得ないとはいえない。いずれにせよ、そのような修飾を野生型に戻すと、結果として得られる本発明の多重特異性抗体における免疫原性のリスクが低減する可能性があることを考慮すると、３５８位の（そしてＡＢループへの４アミノ酸変化の一部としての）野生型ロイシンは、それぞれＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７、ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６５、及びＡＤＴ１－４－２ｘ７４７に組み込まれた、出発時のＦＳ１－６７、ＦＳ１－６５または７４７のＥＧＦＲ結合ドメインに見られる５つ（またはそれ以上）のアミノ酸変化よりも好ましいと考えられる。
（Ｂ）（Ｃ）ＥＧＦＲ＋結腸癌細胞株ＨＴ－２９への多重特異性結合に対するＥＧＦＲ親和性の影響。
方法：ＰＢＳで５００ｎＭ～０．１３ｐＭの範囲の濃度に系列希釈した抗体とＥＧＦＲ＋ＨＴ－２９標的細胞を４度で２０分間インキュベートすることにより、ＥＧＦＲｘＶδ１多重特異性抗体の例示的結合を決定した。洗浄後、細胞を抗ヒトＩｇＧ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）及び生／死色素（ｅＦｌｕｏｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）と共に更に２０分間インキュベートしてから、洗浄し、ＣｅｌｌＦｉｘを使用して固定した。フローサイトメトリー（ＭＡＣＳＱｕａｎｔ Ａｎａｌｙｓｅｒ １０、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ）を使用して、各細胞種に結合した抗体の量を決定した。
方法：ＰＢＳで５００ｎＭ～０．１３ｐＭの範囲の濃度に系列希釈した抗体とＥＧＦＲ＋ＨＴ－２９標的細胞を４度で２０分間インキュベートすることにより、ＥＧＦＲｘＶδ１多重特異性抗体の例示的結合を決定した。洗浄後、細胞を抗ヒトＩｇＧ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）及び生／死色素（ｅＦｌｕｏｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）と共に更に２０分間インキュベートしてから、洗浄し、ＣｅｌｌＦｉｘを使用して固定した。フローサイトメトリー（ＭＡＣＳＱｕａｎｔ Ａｎａｌｙｓｅｒ １０、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ）を使用して、各細胞種に結合した抗体の量を決定した。
結論：提示されたデータは、ＥＧＦＲ親和性の増加と、ＥＧＦＲ＋ＨＴ－２９がん細胞への多重特異性抗体の結合レベルの上昇との間に、強く直接的かつ段階的な相関関係が観察されたことを示唆している。図３６Ｂを参照されたい。図３６Ｃは、図３６Ｂの結果を表形式で示す。
次に、これらの分子の更なる効果について、以下の一連の実験で研究した。簡潔に述べると、皮膚組織由来のＶδ１＋エフェクター細胞を、次のようにＥＧＦＲ＋Ａ３７５黒色腫癌細胞株と共インキュベートした；アッセイセットアップの約１６時間前に、ＥＧＦＲ＋標的細胞をマルチウェル組織培養プレートに播種した。翌日、ＥＧＦＲ＋標的細胞に加える前に、抗体を基礎増殖の濃度範囲まで系列希釈した。皮膚由来のＶδ１γδＴ細胞を培養フラスコから剥離し、細胞懸濁液をアッセイプレートに播種し、共培養物を３７℃、５％ＣＯ２で規定期間にわたってインキュベートした。各事例で説明したように、選択した読み取り値に応じて細胞を処理及び分析した。これらの研究の結果は次のように示される：
（Ｄ）（Ｅ）組織常在性Ｖδ１＋細胞のＶδ１ ＴＣＲ下方調節に対するＥＧＦＲ親和性の影響。
この次の分析は、多重特異性抗体会合後のＶδ１ ＴＣＲ内部移行の誘導に焦点を当てる。
この次の分析は、多重特異性抗体会合後のＶδ１ ＴＣＲ内部移行の誘導に焦点を当てる。
方法：Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり２．５×１０＾４個のＡ３７５ ＥＧＦＲ＋標的細胞に２．５×１０＾４個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。添加前に、Ｖδ１γδＴ細胞を［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ生細胞色素で２０分間染色した。最終アッセイ抗体濃度は１０ｎＭ～０．１３ｐＭの範囲であった。３７℃、５％ＣＯ２で４時間のインキュベーション後、細胞を採取し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＶδ１ ＴＣＲ（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）の表面発現について２０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、ＭＡＣＳＱｕａｎｔ Ａｎａｌｙｓｅｒ １０フローサイトメーター（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）で分析した。
結論：Ｖδ１ ＴＣＲ ＭＦＩの低減は、ＴＣＲ下方調節の増加を示しており、具体的には、ＥＧＦＲに対する親和性が高いほど、このシグナルの低減が大きいことが発見された。しかし、注目すべきことに、ＥＧＦＲ親和性とＴＣＲ下方調節の誘導との間の関係は、段階的な相関関係ではなく、親和性の閾値に依存するものと見受けられた。具体的には、ＥＧＦＲに対してそれぞれ約１ｎＭ、約９ｎＭ、及び約１９ｎＭの親和性を示した３つの分子（ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ２、及びＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３）は、密接にクラスター化し、同様のＴＣＲ下方調節効果及び関連するＥＣ５０値を付与した。これら３つの分子は、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１とは大きく異なっていた。前述したように、この分子は野生型免疫グロブリンＡＢループを含み、約１４０ｎＭという最低の親和性を示す。この分子は、他の３つの分子と比較すると、本事例のように高親和性抗Ｖδ１ ＴＣＲ ＡＤＴ１－４－２結合ドメインと組み合わせた場合でも、望ましいＴＣＲ下方調節効果を付与しない。これは、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ２、及びＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３などの多重特異性抗体がクラスター化し、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１などのＥＧＦＲ親和性の低い分子から分離されている、閾値効果または急勾配の勾配効果が存在することを示唆する。これは、これらの多重特異性抗体によって付与された結合効果が、２つの対照的な群に更にクラスター化されるのではなく、第２の結合標的であるＥＧＦＲに対するそれぞれの親和性によって段階分けされた、以前に見られた、より浅く、より段階的な親和性／結合事象（上記の図３６Ｂを参照のこと）とは対照的である。図３６Ｄを参照されたい。図３６Ｅは、図３６Ｄの結果を表形式で示す。
（Ｆ）（Ｇ）組織常在性Ｖδ１＋細胞の脱顆粒に対するＥＧＦＲ親和性の影響
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与される脱顆粒効果に焦点を当てる。
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与される脱顆粒効果に焦点を当てる。
方法：Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり２．５×１０＾４個のＥＧＦＲ＋標的細胞に２．５×１０＾４個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。添加前に、Ｖδ１γδＴ細胞を［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ生細胞色素で２０分間染色した。最終アッセイ多重特異性抗体濃度は１０ｎＭ～０．１３ｐＭの範囲であった。さらに、ＣＤ１０７ａに特異的なフルオロフォア結合抗体（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）を共インキュベーションの開始時に加えた。３７℃、５％ＣＯ２で４時間のインキュベーション後、細胞を採取し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）について２０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、ＭＡＣＳＱｕａｎｔ １６フローサイトメーター（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）で分析した。
結論：これらの研究は、ＥＧＦＲに対する親和性の増加が最適な効果をもたらし、ＣＤ１０７ａ上方調節の増加と親和性の増加との間に相関関係が観察されることを重ねて実証する。この関係は、親和性の閾値に依存する。ＴＣＲの下方調節と同様に、約１ｎＭから約１９ｎＭのＥＧＦＲ親和性範囲を有する多重特異性抗体が機能的にクラスター化し、より親和性の低い分子（ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１）と比較して有意に高いレベルのＣＤ１０７ａを誘導した。このデータは、ＥＧＦＲに対して高から中程度の親和性を有する本発明の多重特異性抗体が、ある特定のシナリオにおいて著しく異なる、より有利な効果を推進し、この効果は、ＥＧＦＲに対してより低い親和性を有する分子では、はるかに高い濃度（例えば１，０００倍）で投与しても再現できないことを示唆している。結果を図３６Ｆに示し、図３６Ｇに表形式でまとめる。
（Ｈ）（Ｉ）組織常在性Ｖδ１＋細胞の４１ＢＢ活性化ステータスに対するＥＧＦＲ親和性の影響。
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与されるＶδ１＋細胞の活性化誘導マーカー４１ＢＢの増加に焦点を当てる。
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与されるＶδ１＋細胞の活性化誘導マーカー４１ＢＢの増加に焦点を当てる。
方法：Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり２×１０＾４個のＥＧＦＲ＋標的細胞に２×１０＾４個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。添加前に、Ｖδ１＋γδＴ細胞を［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ生細胞色素で２０分間染色した。最終アッセイ多重特異性抗体濃度は１００ｐＭ～０．１３ｐＭの範囲であった。３７℃、５％ＣＯ２で２４時間のインキュベーション後、細胞を採取し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及び４１ＢＢ（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）の表面発現について２０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、ＭＡＣＳＱｕａｎｔ Ａｎａｌｙｓｅｒ １０フローサイトメーター（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）で分析した。
結論：ここで提示したデータ（図３６Ｈ及び図３６Ｉの表形式の概要を参照のこと）は、ＥＧＦＲに対してより高い親和性を有する本発明の多重特異性抗体が、Ｖδ１＋細胞の４１ＢＢ活性化の増加を刺激するのに最も有効であることを実証する。前述した幾つかの他の研究と同様に、ＥＧＦＲ親和性が最も低い多重特異性抗体（約１４０ｎＭ）と、ＥＧＦＲ親和性が中から高の多重特異性抗体（約２０ｎＭの閾値未満のもの）との間には、親和性が低いと顕著なＶδ１＋細胞活性化を誘導できないという有意な質的差異が再び観察された。このことは、この場合は４１ＢＢ上方調節によって測定される、中から高の親和性が機能的にクラスター化される閾値を示唆している。繰り返しになるが、これらの効果は、ＥＧＦＲに対する親和性が低い分子を使用した場合、はるかに高い（例えば１，０００倍の）濃度で投与しても再現することができない。しかしながら、興味深いことに、最も高い親和性の分子（ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、約１ｎＭ）の飽和における４１ＢＢレベルの上昇は、約９ｎＭ～１９ｎＭの間の本発明の中域多重特異性分子（ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ２及びＡＤＴ１－４－２ ＬＥＥ３）について観察されたものよりも低かったことも観察された。この観察、つまり最高の親和性が常に最も好ましいとは限らないということについては、本明細書で更に後述する。
（Ｊ）（Ｋ）ＥＧＦＲ＋がん細胞に対する多重特異性細胞溶解機能に対するＥＧＦＲ親和性の影響
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与される細胞溶解効果に焦点を当てる。
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与される細胞溶解効果に焦点を当てる。
方法：３８４ウェルＣｅｌｌＣａｒｒｉｅｒ Ｕｌｔｒａプレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）のウェル当たり４×１０＾３個のＥＧＦＲ＋標的細胞に４×１０＾３個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。最終アッセイ抗体濃度は５ｎＭ～０．０３ｐＭの範囲であった。３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした後、細胞をＨｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で、また死細胞について（ＤＲＡＱ７、Ａｂｃａｍ）、３７℃で１時間染色した。Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘシステム（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で細胞をイメージングし、線形回帰モデル（Ｈａｒｍｏｎｙ ４．９）を使用して、生細胞染色のサイズ、形態、質感及び強度、ならびにＤＲＡＱ７染色の非存在に基づいて、生存標的細胞の量を決定した。
結論：このデータは、ＥＧＦＲ親和性がより高い分子が、ＥＧＦＲ＋がん細胞に対して最も強力で細胞溶解性があることを実証する。繰り返しになるが、ＥＧＦＲ親和性が最も低い多重特異性抗体（約１４０ｎＭ）とＥＧＦＲ親和性が中から高の多重特異性抗体（約１ｎＭ～１９ｎＭ）との間で有意な質的差異が観察された。実際、測定可能な標的殺傷が低ＥＧＦＲ親和性分子（ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１）によって誘導されることはなかった。したがって、これは、約１ｎＭ～約１９ｎＭの分子（ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ２）がクラスター化されたより最適な機能的効果を付与する閾値効果が観察される別の例である。これらの効果は、ＥＧＦＲに対する親和性が低い分子を使用した場合、はるかに高い（例えば１０，０００倍の）濃度で投与しても再現することができない。結果を図３６Ｊに示し、図３６Ｋに表形式でまとめる。
（Ｌ）（Ｍ）組織常在性Ｖδ１＋細胞の増殖に対するＥＧＦＲ親和性の影響；
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与されるＶδ１＋細胞の増殖の誘導に焦点を当てる。
この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与されるＶδ１＋細胞の増殖の誘導に焦点を当てる。
方法：Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり１．５×１０＾４個のＥＧＦＲ＋標的細胞に３×１０＾４個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。添加前に、標的細胞を［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ生細胞色素で２０分間染色した。最終アッセイ多重特異性抗体濃度は２ｎＭ～０．２５ｐＭの範囲であった。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で、５日間または７日間インキュベートした。サイトカイン（ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－４、及びＩＬ－２１；単位が必要）を添加した完全培地を３日目及び５日目に加えた。細胞を洗浄し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）について２０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １０を使用したフローサイトメトリーにより、事象の数を測定した。
結論：これらの研究は、増加した親和性がより最適な効果をもたらし、Ｖδ１ Ｔ細胞の増殖誘導の増加と親和性の増加との間に直接的相関関係が観察されることを重ねて実証する。繰り返しになるが、約１ｎＭ～約１９ｎＭの親和性の範囲内のＥＧＦＲに対する中から高の親和性を持つ本発明の多重特異性抗体（ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３、ＡＤＴ１－４－２ＬＥＥ２）が機能的にクラスター化するクラスタリング効果が観察される一方で、親和性が約１４０ｎＭの低親和性分子（ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１）は著しく損なわれ、このアッセイにおける非結合性（ＴＣＲに対して非結合性）の対照と同等である。興味深いことに、また４１ＢＢ効果と同様に（図３６Ｈ参照）、ＥＧＦＲに対する親和性が約１ｎＭの最も高い親和性は、最も高い飽和効果を付与しない。むしろ、約９ｎＭ～１９ｎＭの中域親和性分子（それぞれＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３及びＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ２）が、抗体の飽和濃度で最も高い増殖効果を付与する。本発明の中域親和性多重特異性抗体によって付与される、このより最適な効果については、本明細書で後述する。結果を図３６Ｌに示し、図３６Ｍに表形式でまとめる。
（Ｎ）ＥＧＦＲに対する親和性及びがん細胞ＴＡＡコピー数の影響
これらの研究は、本発明の多重特異性抗体のＥＧＦＲに対する親和性の影響を強調する。
これらの研究は、本発明の多重特異性抗体のＥＧＦＲに対する親和性の影響を強調する。
次に、これらの効果を、Ｖδ１＋細胞／ＥＧＦＲ＋がん細胞の共インキュベーション研究において低コピー数のＡ３７５細胞株ではなく極めて高コピー数のＡ４３１細胞株を代わりに用いた場合に観察された効果と比較した。
この比較の概要を図３６Ｎに示す。Ａ４３１によって代表されるＥＧＦＲコピー数が極めて高いがんでは、約１４０ｎＭの低親和性の多重特異性抗体（ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１）によって観察される低減した効果の一部が「回復」される可能性があることが発見された。しかし、この回復は依然として段階的であり、より低い親和性の分子は依然として、中～高親和性バリアントであるＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ、ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ２、及びＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ３と「クラスター化」しない。とはいえ、この観察は興味深いものであり、低親和性バリアントが、より高いコピー数のＥＧＦＲを有するがん細胞に対してより機能的である（従ってより選択的である）ことを示唆している。
好適には、単特異性フォーマットで提供される場合の抗体の機能特性は、さらに第２の抗原に特異的に結合する本発明の多重特異性抗体によって共有される。
実施例１５：ＥＧＦＲ細胞と比したＶδ１細胞への優先的結合に対する親和性の影響
この次の実験では、それぞれの結合ドメインの親和性をダイヤルアップ及びダイヤルダウンすることが、分子の分布及び優先的結合にどのように影響するかを調査する。具体的には、この研究では、それぞれのＶδ１及びＥＧＦＲ標的に対する結合親和性の変化が、本発明の多重特異性抗体の結合優先傾向にどのように影響するかを調査した。
この次の実験では、それぞれの結合ドメインの親和性をダイヤルアップ及びダイヤルダウンすることが、分子の分布及び優先的結合にどのように影響するかを調査する。具体的には、この研究では、それぞれのＶδ１及びＥＧＦＲ標的に対する結合親和性の変化が、本発明の多重特異性抗体の結合優先傾向にどのように影響するかを調査した。
方法：Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり２×１０＾４個のＥＧＦＲ＋標的細胞に２×１０＾４個のＶδ１ Ｔ細胞を加えて、共培養を確立した。次いで、示されている「制限」量（１６ｐＭ）の各多重特異性抗体を加え、細胞を２０分間４℃でインキュベートした。細胞を抗ヒトＩｇＧ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）及び生／死色素（ｅＦｌｕｏｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）と共に更に２０分間インキュベートしてから、洗浄し、固定した（ＢＤ Ｃｅｌｌ ｆｉｘ）。フローサイトメトリー（ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １０、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ）を使用して、各細胞種に結合した抗体の量を決定した。
結論：図３７（Ａ）は、ＥＧＦＲ細胞と比したＶδ１への優先的結合に対する親和性の影響を棒グラフ形式で示す：２つの細胞種間の相対分布が図示の各抗体について示されている。このデータは、Ｖδ１親和性の変更が結合の比率及び分布プロファイルにわずかな影響しか及ぼさないことを実証する。対照的に、ＥＧＦＲ結合ドメインに対する親和性が変更されると、より顕著な効果があるように見受けられる。具体的には、より低いＥＧＦＲ親和性を持つ多重特異性抗体はＶδ１結合に対して強い優先傾向を示し、最も低いＥＧＦＲバインダーのＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ１（Ｋｄ、１４０ｎＭ）はＶδ１細胞に対する最大の優先傾向を示している。まとめると、これらの結果は、それぞれの結合ドメインの親和性をダイヤルアップ及びダイヤルダウンすることによって、異なる細胞標的／組織分布プロファイルを選択及び指向できる可能性があることを示している。さらに、これらの所見を本明細書における他の所見と組み合わせると、本発明のＥＧＦＲ中親和性抗体（約９ｎＭ～約１９ｎＭ）が、より親和性の高いバリアント（ＥＧＦＲに対して約１ｎＭの親和性）と様々な面で同様の効果を示す一方で、そのような本発明の中親和性多重特異性抗体は他の面で異なり、ある特定の状況ではより有利な腫瘍媒介抗体クリアランス、分布及びＥＧＦ遮断プロファイルを提供し得ることが示唆される。このことにより、本発明の高親和性ＥＧＦＲバリアントと比較して、用量制限皮膚毒性を更に低減する可能性が高まる可能性がある。図３７Ｂは、表形式で示された図（Ａ）の結果を示し、図３７Ｃは、パート（Ａ／Ｂ）の結果を比として示す。
実施例１６：ＥＧＦＲに対する親和性；Ａ４３１腫瘍細胞による多重特異性抗体の内部移行に対する影響
（Ａ）（Ｂ）この分析は、ある特定の多重特異性抗体（及びコンパレータ）の内部移行に焦点を当てる。前述のように、一連の多重特異性抗体を作出し、ここで、
（ｉ）ＥＧＦＲに対する親和性を、ＥＧＦＲに対する約１ｎＭの結合から約１４０ｎＭの範囲の様々な親和性オプションでダイヤルアップ／ダウンし、
（ｉｉ）（ｉｉ）Ｖδ１に対する親和性は約０．２ｎＭで一定に保った。
この研究には、示されている場合には、単特異性ＲＳＶ ＩｇＧコンパレータ（ＲＳＶタンパク質への結合ドメインを含む）、多重特異性Ｄ１．３ｘＦＳ１－６７対照（ＥＧＦＲ親和性が１ｎＭの第２の結合ドメインと、第１の結合ドメインに含まれるニワトリリゾチームに対する結合ドメインとを含む）も含まれる。
（Ａ）（Ｂ）この分析は、ある特定の多重特異性抗体（及びコンパレータ）の内部移行に焦点を当てる。前述のように、一連の多重特異性抗体を作出し、ここで、
（ｉ）ＥＧＦＲに対する親和性を、ＥＧＦＲに対する約１ｎＭの結合から約１４０ｎＭの範囲の様々な親和性オプションでダイヤルアップ／ダウンし、
（ｉｉ）（ｉｉ）Ｖδ１に対する親和性は約０．２ｎＭで一定に保った。
この研究には、示されている場合には、単特異性ＲＳＶ ＩｇＧコンパレータ（ＲＳＶタンパク質への結合ドメインを含む）、多重特異性Ｄ１．３ｘＦＳ１－６７対照（ＥＧＦＲ親和性が１ｎＭの第２の結合ドメインと、第１の結合ドメインに含まれるニワトリリゾチームに対する結合ドメインとを含む）も含まれる。
方法：３８４ウェルＣｅｌｌＣａｒｒｉｅｒ Ｕｌｔｒａプレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）のウェル当たり４×１０＾３個のＥＧＦＲ＋Ａ４３１腫瘍細胞を用いて培養を確立した。製造元の説明に従ってＬｉｇｈｔｎｉｎｇ Ｌｉｎｋ抗体コンジュゲーションキット（Ａｂｃａｍ）を使用して、抗体をＣｙ５フルオロフォアで共有結合的に標識した。抗体を加える前に、Ｃｙ５フィルターセットを使用して、Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘシステム（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で細胞をイメージングした。次いで、最終濃度１ｎＭの標識抗体を加え、１５分間隔で更に８．５時間、Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘにより細胞をイメージングした。Ｈａｒｍｏｎｙ ４．９分析を使用して、細胞内領域内のＣｙ５の強度を決定した。
結論：このデータは、より低いＥＧＦＲ親和性の多重特異性分子が、標的Ａ４３１腫瘍細胞において最も少ないＥＧＦＲ媒介性内部移行を示すことを実証する。ＥＧＦＲ親和性が最も低い多重特異性抗体（約１４０ｎＭ；抗体なしの対照と同等）と高ＥＧＦＲ親和性の多重特異性抗体（約１ｎＭ）との間で有意な質的差異が観察された。具体的には、ＥＧＦＲ標的親和性と観察された抗体内部移行レベルとの間の正の相関関係が発見された。これは、ＥＧＦＲに対して約１ｎＭ～約１４０ｎＭの範囲にわたる本発明の分子のＥＧＦＲ親和性に関連する段階的効果の一例を表す。結果を図３８Ａに示し、図３８Ｂに表形式で示す。
（Ｃ）（Ｄ）この分析は、本発明に記載の多重特異性抗体のクリアランスに焦点を当てる。この場合のクリアランスとは、ＥＧＦＲ媒介性抗体内部移行によるＡ４３１細胞培養物の培地からの抗体の除去を指す。
方法：９６ウェル平底ＴＣ処理プレートのウェル当たり２×１０＾４個のＥＧＦＲ＋Ａ４３１腫瘍細胞を用いて培養を確立した。最終アッセイ抗体濃度は５ｎＭ～１．６ｐＭの範囲であった。３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした後、上清を採取し、更なる分析のために貯蔵した。多重特異性抗体濃度はインハウスＥＬＩＳＡによって決定した。簡潔に述べると、プレートに直接コーティングした後にブロッキングバッファーでブロッキングした１ｕｇのＶδ１抗原を用いてＥＬＩＳＡを行った。採取した上清をプレートに加え、洗浄し、抗ヒトＦｃ－ＨＲＰを１／２０００希釈度で二次抗体として使用した。５０μＬのＴＭＢ溶液を用いて展開し、マイクロプレートリーダー（Ｔｅｃａｎ）を使用して４５０ｎＭで吸光度を測定した。
結論：このデータは、より低いＥＧＦＲ親和性の多重特異性分子が、最も少ないＥＧＦＲ媒介性抗体クリアランスを示すことを実証する。ＥＧＦＲ親和性が最も低い多重特異性抗体（約１４０ｎＭ；抗体なしの対照と同等）と高ＥＧＦＲ親和性の多重特異性抗体（約１ｎＭ）との間で有意差が観察された。更に、これは、ＥＧＦＲ標的親和性と観察された抗体クリアランスレベルとの間の正の相関関係を示している。繰り返しになるが、これらの所見は、ＥＧＦＲに対する多重特異性抗体の親和性と、ＥＧＦＲ標的に対する約１ｎＭ～約１４０ｎＭの範囲にわたる分子のＥＧＦＲ媒介性内部移行との間の直接的で段階的な相関関係を強調している。結果を図３８Ｃに示し、図３８Ｄに表形式で示す。
実施例１７：ＥＧＦリガンド結合及び腫瘍細胞増殖の多重特異性抗体による阻害に対するＥＧＦＲ親和性の影響
（Ａ）（Ｂ）この分析は、本発明に記載の多重特異性抗体（及びコンパレータ）によるＥＧＦＲ陽性腫瘍細胞へのＥＧＦの結合の阻害（または遮断）に焦点を当てる。この研究には、示されている場合には、単特異性ＲＳＶ ＩｇＧコンパレータ（ＲＳＶタンパク質への結合ドメインを含む）も含まれる。
（Ａ）（Ｂ）この分析は、本発明に記載の多重特異性抗体（及びコンパレータ）によるＥＧＦＲ陽性腫瘍細胞へのＥＧＦの結合の阻害（または遮断）に焦点を当てる。この研究には、示されている場合には、単特異性ＲＳＶ ＩｇＧコンパレータ（ＲＳＶタンパク質への結合ドメインを含む）も含まれる。
方法：ＰＢＳで２５０ｎＭ～３．２ｐＭの範囲の濃度に系列希釈した抗体と３×１０＾４個のＥＧＦＲ＋Ａ４３１標的細胞を４度で３０分間インキュベートすることにより、ＥＧＦＲｘＶδ１多重特異性抗体によって媒介されるＥＧＦ遮断を決定した。細胞を洗浄し、最終濃度４０ｕｇ／ｍＬのＥＧＦ（ＥＧＦ－ＡＦ６４７、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈ）をウェルごとに加えた。次いで、細胞を４℃で１時間インキュベートし、洗浄し、生／死色素（ｅＦｌｕｏｒ ５２０、Ｆｉｓｈｅｒ）で染色し、４度で更に２０分間インキュベートした。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、４℃の暗所で一晩インキュベートした。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １０を使用したフローサイトメトリーにより、ＥＧＦの遮断を測定した。
結論：図３９Ａ及び３９Ｂに示されるＭＦＩの低減は、ＥＧＦＲ陽性Ａ４３１細胞へのＥＧＦ結合の遮断の増加を示す。記載されている多重特異性抗体については、ＥＧＦＲ標的親和性と観察されたＥＧＦ遮断レベルとの間に直接的相関関係がある。これは、約１ｎＭ～約１４０ｎＭの範囲のＥＧＦＲに対する親和性を有する分子によって付与される段階的効果の更なる例を表す。
（Ｃ）（Ｄ）この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与される腫瘍細胞増殖の阻害に焦点を当てる。
方法：簡潔に述べると、ＥＧＦＲ＋Ａ４３１細胞を３８４ウェルイメージングプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に播種して最終的な播種密度をウェル当たり標的細胞２×１０＾３個とした後、３７℃、５％ＣＯ２で一晩インキュベートした。抗体を基礎増殖培地に希釈し、１：５に系列希釈した後、アッセイプレートに加えて最終アッセイ濃度を５００ｎＭ～０．０５ｐＭとした。細胞を２４時間培養した後にＨｏｅｃｈｓｔ（１：１０００最終、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＤＲＡＱ７（１：３００最終、Ａｂｃａｍ）で染色した。生きている標的細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感及び強度、ならびにＤＲＡＱ７染色の非存在に基づいて数量化した。
結論：図３９Ｃ及び３９Ｄに提示したデータは、ＥＧＦＲに対してより高い親和性を有する本発明の多重特異性抗体が、ＥＧＦＲ陽性腫瘍細胞の増殖を阻害するのに最も有効であることを実証する。繰り返しになるが、これは、ＥＧＦＲ標的親和性と観察された腫瘍増殖阻害レベルとの間の明らかな正の相関関係を示している。したがって、これは、ＥＧＦＲ標的に対する親和性（約１ｎＭ～約１４０ｎＭの範囲）と相関する段階的効果を強調する別の例である。
実施例１８：健常なＥＧＦＲ＋細胞の温存 － ＶＤ１ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体
方法：ＥＧＦＲ＋標的細胞傷害性に対するＥＧＦＲ－Ｖδ１二重特異性抗体の効果を、Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）のハイコンテント共焦点イメージングを使用して決定した。簡潔に述べると、ＥＧＦＲ＋Ａ３７５細胞（黒色腫）及びＨＵＶＥＣ（ヒト臍帯静脈内皮細胞）を３８４ウェルイメージングプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に播種して最終的な播種密度をウェル当たり標的細胞５０００個とした後、３７℃、５％ＣＯ２で一晩インキュベートした。抗体を基礎増殖培地に希釈し、１：５に系列希釈した後、アッセイプレートに加えて最終アッセイ濃度を１ｎＭ～０．０００５ｐＭとした。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁した後、アッセイプレートに１：１のエフェクター：標的比でウェル当たり細胞５０００個を加えた。細胞を２４時間共培養した後にＨｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（１：１０００最終、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＤＲＡＱ７（１：３００最終、Ａｂｃａｍ）で染色した。生きている標的細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感及び強度、ならびにＤＲＡＱ７染色の非存在に基づいて数量化した。結果を図４０Ａ～Ｃに示す。
方法：ＥＧＦＲ＋標的細胞傷害性に対するＥＧＦＲ－Ｖδ１二重特異性抗体の効果を、Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）のハイコンテント共焦点イメージングを使用して決定した。簡潔に述べると、ＥＧＦＲ＋Ａ３７５細胞（黒色腫）及びＨＵＶＥＣ（ヒト臍帯静脈内皮細胞）を３８４ウェルイメージングプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に播種して最終的な播種密度をウェル当たり標的細胞５０００個とした後、３７℃、５％ＣＯ２で一晩インキュベートした。抗体を基礎増殖培地に希釈し、１：５に系列希釈した後、アッセイプレートに加えて最終アッセイ濃度を１ｎＭ～０．０００５ｐＭとした。増大した皮膚由来Ｖδ１γδＴ細胞を組織培養フラスコから剥離し、基礎増殖培地に再懸濁した後、アッセイプレートに１：１のエフェクター：標的比でウェル当たり細胞５０００個を加えた。細胞を２４時間共培養した後にＨｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（１：１０００最終、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＤＲＡＱ７（１：３００最終、Ａｂｃａｍ）で染色した。生きている標的細胞の数を決定するため、９つの視野を１０倍拡大率でキャプチャするＯｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘハイコンテントプラットフォームを使用して共焦点像を取得した。生細胞数は、生細胞染色のサイズ、形態、質感及び強度、ならびにＤＲＡＱ７染色の非存在に基づいて数量化した。結果を図４０Ａ～Ｃに示す。
用量漸増効果を図４０Ａに示す。このデータは、健常細胞と悪性細胞とを区別するＶδ１ Ｔ細胞の生来の能力を強調するのに役立つ。本発明の多重特異性抗体は、同等のＥＧＦＲコピー数を発現する健常細胞を「温存」しながら、Ｖδ１ Ｔ細胞をリダイレクトしてＥＧＦＲ＋腫瘍細胞を殺傷させる。（Ａ）の表形式の結果を図４０Ｃに示す。
健常なＨＵＶＥＣ細胞の「温存」と併せて、Ａ３７５腫瘍細胞のＴ細胞誘導性細胞傷害を示す（Ａ）に記載の実験からの代表的な顕微鏡画像を図４０Ｂに示す。画像はグレースケールで示されており、細胞核はＨｏｅｃｈｓｔ ３３３４２で染色されている。
実施例１９：ＶＤ１ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体：ＡＤＴ１－４－２ｘＦＳ１－６７と、より親和性の低い「親」ＡＤＴ１－４ｘＦＳ１－６７（別名Ｇ０４ ＦＳ１－６７）との用量応答比較。
本発明者らは、「親」（非親和性成熟型）Ｇ０４ ＦＳ１－６７多重特異性抗体が、Ｖδ１＋細胞及び標的Ａ４３１細胞を含む共培養物において様々な望ましい技術的効果を付与することを以前に実証した（ＷＯ２０２１０３２９６３）。
本発明者らは、「親」（非親和性成熟型）Ｇ０４ ＦＳ１－６７多重特異性抗体が、Ｖδ１＋細胞及び標的Ａ４３１細胞を含む共培養物において様々な望ましい技術的効果を付与することを以前に実証した（ＷＯ２０２１０３２９６３）。
具体的には、本発明者らは、この多重特異性抗体がＡ４３１細胞に対する細胞傷害性を、２００％を超えて増強できることを観察した。この一連の実験では、より親和性の低い「親」の第１のＶδ１結合ドメイン（約１２６ｎＭ）及び高親和性（約１ｎＭ）のＥＧＦＲ結合を含むＧ０４ ＦＳ１－６７（配列番号３７９）を、同等の多重特異性抗体だが親和性成熟バリアントの第１のＶδ１結合ドメインＡＤＴ１－４－２（親和性約０．２ｎＭ）（配列番号４１４）を含むものと比較した。
方法：この分析では、示されているようにＶδ１＋エフェクター細胞をＥＧＦＲ＋がん細胞と共インキュベートし、多重特異性抗体会合後のＶδ１ ＴＣＲ内部移行の誘導を測定した。Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり２．５×１０＾４個のＥＧＦＲ＋標的細胞に２．５×１０＾４個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、共培養を確立した。添加前に、Ｖδ１γδＴ細胞を［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ生細胞色素で２０分間染色した。最終アッセイ抗体濃度は１０ｎＭ～０．１３ｐＭの範囲であった。３７℃、５％ＣＯ２で４時間のインキュベーション後、細胞を採取し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及びＶδ１ ＴＣＲ（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）の表面発現について２０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、ＭＡＣＳＱｕａｎｔ Ａｎａｌｙｓｅｒ １０フローサイトメーター（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）で分析した。
結論：この比較の結果は図４１Ａ（及び図４１Ｂの表形式）に示されており、本明細書の他の箇所に記載されている発見と一致する。ＭＦＩの低減（したがってＴＣＲの下方調節）が示されており、この比較研究は、（ｉ）Ｖδ１親和性が不自然に高い本発明の多重特異性抗体が、より親和性の低いバリアント（この場合はＧ０４ ＦＳ１－６７）と比較した場合に増強された効果を付与すること、及び（ｉｉ）これらの増強された効果が、Ａ３７５などの低コピー数ＴＡＡ標的がん細胞を用いた研究で特に顕著であることを更に裏付ける。このデータはまた、より低いｖｄ１親和性を持つ分子（この場合はＧ０４ ＦＳ１－６７コンパレータ）については、この分子を１００倍多く加えても、Ｖδ１／Ａ３７５共培養物中で同等のＴＣＲ下方調節効果が達成できないことを重ねて強調している。
実施例２０：ＶＤ１ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体：ＣＤ３ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体との比較
コンパレータ多重特異性抗体を作出し、ここで、
（ｉ）ＥＧＦＲに対する親和性は約０．２ｎＭで一定に保ち、
（ｉｉ）Ｖδ１を標的とする可変ドメインは、ＣＤ３εに特異的な可変ドメイン（ＯＫＴ３由来）で置換した。
次いで、この分子（ＣＤ３／ＡＤＴ３－２と称する）を、本明細書の他の箇所で前述したＶδ１ｘＥＧＦＲ多重特異性ＡＤＴ１－４－２／ＡＤＴ３－２（別名ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ）と比較した。この比較の動機の１つは、Ｖδ１ ＴＣＲを標的とする多重特異性ＴＣＥ（Ｔ細胞エンゲージャー）によって付与されるＴ細胞活性化と、ＣＤ３ε共受容体を介して会合するものによって付与されるＴ細胞活性化との違いを比較することであった。そうすることで、本発明者らは、Ｖδ１ ＴＣＲを介してＴ細胞に会合する多重特異性ＴＣＥが、ＣＤ３εを介してＴ細胞に会合する多重特異性ＴＣＥと比較して特徴的な効果を付与することを発見した。これらの効果は、次の一連の実験で示される。これらの研究には、多重特異性Ｄ１．３ｘＦＳ１－６７対照（ＥＧＦＲ親和性が１ｎＭの第２の結合ドメインと、第１の結合ドメインに含まれるニワトリリゾチームに対する結合ドメインとを含む）も含まれる。
コンパレータ多重特異性抗体を作出し、ここで、
（ｉ）ＥＧＦＲに対する親和性は約０．２ｎＭで一定に保ち、
（ｉｉ）Ｖδ１を標的とする可変ドメインは、ＣＤ３εに特異的な可変ドメイン（ＯＫＴ３由来）で置換した。
次いで、この分子（ＣＤ３／ＡＤＴ３－２と称する）を、本明細書の他の箇所で前述したＶδ１ｘＥＧＦＲ多重特異性ＡＤＴ１－４－２／ＡＤＴ３－２（別名ＡＤＴ１－４－２ｘＬＥＥ）と比較した。この比較の動機の１つは、Ｖδ１ ＴＣＲを標的とする多重特異性ＴＣＥ（Ｔ細胞エンゲージャー）によって付与されるＴ細胞活性化と、ＣＤ３ε共受容体を介して会合するものによって付与されるＴ細胞活性化との違いを比較することであった。そうすることで、本発明者らは、Ｖδ１ ＴＣＲを介してＴ細胞に会合する多重特異性ＴＣＥが、ＣＤ３εを介してＴ細胞に会合する多重特異性ＴＣＥと比較して特徴的な効果を付与することを発見した。これらの効果は、次の一連の実験で示される。これらの研究には、多重特異性Ｄ１．３ｘＦＳ１－６７対照（ＥＧＦＲ親和性が１ｎＭの第２の結合ドメインと、第１の結合ドメインに含まれるニワトリリゾチームに対する結合ドメインとを含む）も含まれる。
（Ａ）（Ｂ）ＣＤ３ｘＥＧＦＲ多重特異性抗体への分化；Ｖδ１ ＴＣＲ及びＣＤ３εの下方調節に対するＴ細胞標的受容体の影響。次の実験は、異なるＴ細胞受容体（Ｖδ１またはＣＤ３ε）を標的とすることが、多重特異性抗体会合後のＶδ１ ＴＣＲ内部移行の誘導にどのように影響するかを決定する。
方法：図４２Ａに示す凡例に示すように、様々なＴ細胞集団をアッセイした。これらには、ＰＢＭＣ、及び皮膚組織または末梢血から直接単離された精製Ｖδ１γδ Ｔ細胞が含まれた。Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり２×１０＾４個のＡ３７５ ＥＧＦＲ＋Ａ３７５腫瘍細胞に２×１０＾４個のＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。次いで、最終濃度１ｎＭの抗体を加え、培養物を３７℃、５％ＣＯ２で４時間インキュベートした。細胞を採取し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、Ｖδ１ ＴＣＲ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）、ＣＤ３ε（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）の表面発現について２０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した後、ＭＡＣＳＱｕａｎｔ Ａｎａｌｙｓｅｒ １０フローサイトメーター（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）で分析した。
結論：ＭＦＩの低減を図４２Ａに示す。驚くべきことに、皮膚及び末梢血の両方から精製されたＶδ１ Ｔ細胞集団で示されたように、ＣＤ３εを介するよりもＶδ１を介したＴＣＲ複合体の抗体会合を介して、より強力なＴＣＲ下方調節が観察された。逆に、ＣＤ３εを介したＴ細胞の会合は、少数のＶδ１細胞集団（このドネーションでは０．０８％）のみを含むＰＢＭＣにおいて、より強力なＣＤ３の下方調節を誘導した。ＰＢＭＣにおけるＣＤ３ベースのＴＣＥの顕著な効果は、この従来のストラテジーの強引なアプローチを強調している。具体的には、ＣＤ３ベースのＴＣＥは、Ｔｒｅｇ、ＣＤ４＋、及びＣＤ８＋Ｔ細胞を含む、ＰＢＭＣに存在する全てのＣＤ３＋細胞に影響する。対照的に、第１のＶδ１結合ドメインを介してＴ細胞に会合する本発明の多重特異性抗体は、典型的には血液よりも組織に多く存在する非常に望ましい細胞のＶδ１＋ＣＤ３サブセットに対してのみ選択的である。
（Ｂ）Ｖδ１ ＴＣＲ下方調節に対するＴ細胞標的受容体の影響。（Ａ）の表形式の結果を図４２Ｂに示す。これは、Ｖδ１ ＴＣＲを多重特異性薬で直接標的とすることによるＴＣＲ下方調節の誘導が、この複合体をＣＤ３ε共受容体によって標的とすることよりも優れていることを強調している。
（Ｃ）ＣＤ３ε下方調節に対するＴ細胞標的受容体の影響。（Ａ）の表形式の結果を図４２Ｃに示す。これは、特に未分画のＰＢＭＣにおいて、ＣＤ３ベースのＴＣＥがＣＤ３レベルに与える影響がより顕著であることを強調している。
（Ｄ）（Ｅ）ＥＧＦＲ＋がん細胞に対する多重特異性細胞溶解機能に対する影響。この次の実験は、異なるＴ細胞受容体（Ｖδ１またはＣＤ３ε）に会合することが、腫瘍標的細胞を溶解するＴ細胞集団の刺激にどのように影響するかを決定する。
方法：上記のように、ＰＢＭＣ、または皮膚組織もしくは末梢血から直接単離した精製γδ Ｔ細胞を含む、様々なＴ細胞集団を評価した。３８４ウェルＣｅｌｌＣａｒｒｉｅｒ Ｕｌｔｒａプレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）にウェル当たり４×１０＾３個のＡ３７５ ＥＧＦＲ＋Ａ３７５腫瘍細胞を播種することにより、培養を確立した。様々な量のＴ細胞を加えて、エフェクターと標的の比率を１０～０．０８の間で変化させた。次いで、最終濃度１ｎＭの抗体を加え、培養物を３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。細胞をＨｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で、また死細胞（ＤＲＡＱ７、Ａｂｃａｍ）について、３７℃で１時間染色し、Ｏｐｅｒａ Ｐｈｅｎｉｘシステム（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）でイメージングした。線形回帰モデル（Ｈａｒｍｏｎｙ ４．９）を使用して、生細胞染色のサイズ、形態、質感及び強度、ならびにＤＲＡＱ７染色の非存在に基づいて、生存腫瘍細胞の量を決定した。
結論：図４２Ｄに示されるデータは、Ｖδ１ Ｔ細胞集団のみを特異的にリダイレクトしてＥＧＦＲ＋腫瘍細胞を殺傷させる、Ｖδ１を標的とする多重特異性抗体の独特の能力を実証する。これは、ＣＤ３ベースのＴＣＥが未分画ＰＢＭＣもＥＧＦＲ＋細胞にリダイレクトするというここでの観察によって実証されるように、より無差別に機能するＣＤ３ベースのＴＣＥとは対照的である。（Ｄ）の表形式の結果を図４２Ｅに示す。これは、ＣＤ３ベースのＴＣＥと比したＶδ１ベースのＴＣＥの優れた特異性を更に強調している。
（Ｆ）活性化Ｔ細胞によるサイトカイン分泌の誘導に対する影響。この次の実験は、異なるＴ細胞受容体（Ｖδ１またはＣＤ３ε）または標的集団を標的とすることが、活性化Ｔ細胞のサイトカイン分泌プロファイルにどのように影響するかを決定する。
方法：ＰＢＭＣ、または２人の健康なドナーの末梢血から直接精製されたγδ Ｔ細胞を含む、様々なＴ細胞集団をアッセイした。Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり２×１０＾４個のＡ３７５ ＥＧＦＲ＋Ａ３７５腫瘍細胞に２×１０＾４個のＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。次いで、最終濃度１ｎＭの抗体を加え、培養物を３７℃、５％ＣＯ２で４８時間インキュベートした。上清を採取し、細胞を除去し、ＬＥＧＥＮＤｐｌｅｘサイトカインビーズアレイキット（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用してサイトカイン濃度を決定した。
結論：図４２Ｆ及び４２Ｇに示されるデータは、Ｖδ１＋Ｔ細胞の特異的活性化と、未分画ＰＢＭＣ内の全てのＣＤ３＋Ｔ細胞のより広範な活性化との間の、有意な量的及び質的な差異を示している。特筆すべき差異の１つは、ＰＢＭＣ内のＣＤ３ベースのＴＣＥによってのみ誘導されるＩＬ－１７Ａレベルの２４８倍の上昇である。対照的に、ＣＤ３ベースまたはＶδ１ベースのＴＣＥで刺激されたγδＴ細胞は、ＩＬ－１７Ａを産生しない。ＩＬ１７Ａは、腫瘍成長を増強し得、抗がん免疫応答を弱め得るサイトカインである。これは、Ｖδ１＋Ｔ細胞サブセットの独特のサイトカイン分泌プロファイルを強調している。さらに、全てのＴ細胞集団において、ＣＤ３ベースのＴＣＥは、多くのサイトカイン（最も顕著なのはＴＮＦａ）のレベルの著しい上昇を誘導した。繰り返しになるが、これは、ＣＤ３＋細胞に対する、より包括的な誘導効果を含む、ＣＤ３ベースのＴＣＥによって付与される、あまり調整されていない、より強引な効果を強調している。
（Ｈ）組織常在性Ｖδ１＋細胞の増殖に対する影響。この次の分析は、本発明の多重特異性抗体によって付与されるＶδ１＋細胞の増殖の誘導に焦点を当てる。
方法：Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり１．５×１０＾４個のＥＧＦＲ＋標的細胞に３×１０＾４個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。添加前に、標的細胞を［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ生細胞色素で２０分間染色した。最終アッセイ多重特異性抗体濃度は２ｎＭ～０．２５ｐＭの範囲であった。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で、５日間または７日間インキュベートした。サイトカイン（ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－４、及びＩＬ－２１；単位が必要）を添加した完全培地を３日目及び５日目に加えた。細胞を洗浄し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）について２０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １０を使用したフローサイトメトリーにより、事象の数を測定した。
方法：Ｕ底９６ウェルプレートのウェル当たり１．５×１０＾４個のＥＧＦＲ＋標的細胞に３×１０＾４個のＶδ１γδＴ細胞を加えて、上記のように共培養を確立した。添加前に、標的細胞を［０．５μＭ］のＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ生細胞色素で２０分間染色した。最終アッセイ多重特異性抗体濃度は２ｎＭ～０．２５ｐＭの範囲であった。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で、５日間または７日間インキュベートした。サイトカイン（ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－４、及びＩＬ－２１；単位が必要）を添加した完全培地を３日目及び５日目に加えた。細胞を洗浄し、死細胞（ｅＦｌｏｕｒ ７８０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）について２０分間４℃で染色した。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄し、Ｃｅｌｌ Ｆｉｘ（ＢＤ ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した。翌日、ＭＡＣＳ Ｑｕａｎｔ Ａｎａｌｙｚｅｒ １０を使用したフローサイトメトリーにより、事象の数を測定した。
結論：この研究は、Ｖδ１ベースのＴＣＥが、Ｖδ１ Ｔ細胞の増殖の誘導において、同等のＣＤ３ベースのＴＣＥと比べて明らかに優れていることを実証し、Ｖδ１二重特異性薬は、１０分の１以下の用量で増殖を誘導すると共に、飽和濃度でより顕著な効果を示した。図４２Ｈ及びＩを参照されたい。これらの図は、ＣＤ３εを介した刺激と比較すると、Ｖδ１ Ｔ細胞の抗体媒介刺激によって付与される増殖効果が増加することを強調している。
実施形態
本発明は、少なくとも以下の番号付けられた実施形態を含む。
本発明は、少なくとも以下の番号付けられた実施形態を含む。
１．
Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、前記Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、前記Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、前記多重特異性抗体。
Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、前記Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、前記Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、前記多重特異性抗体。
２．
前記ＥＧＦＲ結合部位が、
ａ．残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、
ｂ．残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、
ｃ．残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１５（ＥＵ番号付け）がＳＹＷ（配列番号５３３）を構成するか、
ｄ．残基３５８～３６１、３６１．１及び３６２（ＥＵ番号付け）がＬＤＥＧＧＰ（配列番号５４２）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＶＫ（配列番号５４３）を構成するか、
ｅ．残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、
ｆ．残基３５８～３６２（ＥＵ番号付け）がＴＤＤＧＰ（配列番号５６０）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、または
ｇ．残基３５８～３６２（ＥＵ番号付け）がＴＥＳＧＰ（配列番号５５３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＫＦＧ（配列番号５５４）を構成し、残基４１３～４２１（ＥＵ番号付け）がＳＮＬＲＷＴＫＧＨ（配列番号５５５）を構成し、残基３７８がバリンであるＣＨ３ドメインによって提供される、実施形態１に記載の多重特異性抗体。
前記ＥＧＦＲ結合部位が、
ａ．残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、
ｂ．残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、
ｃ．残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１５（ＥＵ番号付け）がＳＹＷ（配列番号５３３）を構成するか、
ｄ．残基３５８～３６１、３６１．１及び３６２（ＥＵ番号付け）がＬＤＥＧＧＰ（配列番号５４２）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＶＫ（配列番号５４３）を構成するか、
ｅ．残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、
ｆ．残基３５８～３６２（ＥＵ番号付け）がＴＤＤＧＰ（配列番号５６０）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、または
ｇ．残基３５８～３６２（ＥＵ番号付け）がＴＥＳＧＰ（配列番号５５３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＫＦＧ（配列番号５５４）を構成し、残基４１３～４２１（ＥＵ番号付け）がＳＮＬＲＷＴＫＧＨ（配列番号５５５）を構成し、残基３７８がバリンであるＣＨ３ドメインによって提供される、実施形態１に記載の多重特異性抗体。
３．
ａ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｂ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＮＧＱＰＥＮＮＹ（配列番号５２５）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｃ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＱＱＧＮＶ（配列番号５３４）を構成するＥＦループを形成するか、
ｄ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＤＥＧＧＰ（配列番号５４４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＶＫＧＮＶ（配列番号５４５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｅ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＴＫＮＱ（配列番号５１３）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｆ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＴＤＤＧＰ（配列番号５６１）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、または
ｇ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＴＥＳＧＰ（配列番号５５６）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＫＦＧＰＥＮＮＹ（配列番号５５７）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＮＬＲＷＴＫＧＨＶ（配列番号５５８）を構成するＥＦループを形成する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
ａ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｂ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＮＧＱＰＥＮＮＹ（配列番号５２５）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｃ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＱＱＧＮＶ（配列番号５３４）を構成するＥＦループを形成するか、
ｄ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＤＥＧＧＰ（配列番号５４４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＶＫＧＮＶ（配列番号５４５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｅ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＴＫＮＱ（配列番号５１３）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｆ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＴＤＤＧＰ（配列番号５６１）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、または
ｇ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＴＥＳＧＰ（配列番号５５６）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＫＦＧＰＥＮＮＹ（配列番号５５７）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＮＬＲＷＴＫＧＨＶ（配列番号５５８）を構成するＥＦループを形成する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
４．
前記ＣＨ３ドメインが、前記ＥＧＦＲ結合部位を含むように工学操作されたヒトＩｇＧ ＣＨ３ドメインである、実施形態１に記載の多重特異性抗体。
前記ＣＨ３ドメインが、前記ＥＧＦＲ結合部位を含むように工学操作されたヒトＩｇＧ ＣＨ３ドメインである、実施形態１に記載の多重特異性抗体。
５．
前記Ｆｃ領域が、前記ＥＧＦＲ結合部位を含むように工学操作された前記ＣＨ３ドメインを含むヒトＩｇＧ Ｆｃ領域である、実施形態２に記載の抗体。
前記Ｆｃ領域が、前記ＥＧＦＲ結合部位を含むように工学操作された前記ＣＨ３ドメインを含むヒトＩｇＧ Ｆｃ領域である、実施形態２に記載の抗体。
６．
前記ＣＨ３ドメインのアミノ酸配列が、
ａ．配列番号５６２；
ｂ．配列番号５２２；
ｃ．配列番号５３２；
ｄ．配列番号５４１；
ｅ．配列番号５１０；
ｆ．配列番号５５９；または
ｇ．配列番号５５２
と少なくとも９０％同一であるか、または少なくとも９５％同一であるか、または１００％同一である、先行実施形態のいずれかに記載の抗体。
前記ＣＨ３ドメインのアミノ酸配列が、
ａ．配列番号５６２；
ｂ．配列番号５２２；
ｃ．配列番号５３２；
ｄ．配列番号５４１；
ｅ．配列番号５１０；
ｆ．配列番号５５９；または
ｇ．配列番号５５２
と少なくとも９０％同一であるか、または少なくとも９５％同一であるか、または１００％同一である、先行実施形態のいずれかに記載の抗体。
７．
前記抗体が、Ｆｃ有効型である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記抗体が、Ｆｃ有効型である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
８．
重鎖定常ドメインが、
ａ．配列番号３９１もしくは配列番号３９２；
ｂ．配列番号５２０もしくは配列番号５２１；
ｃ．配列番号５３０もしくは配列番号５３１；
ｄ．配列番号５３９もしくは配列番号５４０；
ｅ．配列番号５０８もしくは配列番号５０９；
ｆ．配列番号３８５もしくは配列番号３８６；または
ｇ．配列番号５５０もしくは配列番号５５１
を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
重鎖定常ドメインが、
ａ．配列番号３９１もしくは配列番号３９２；
ｂ．配列番号５２０もしくは配列番号５２１；
ｃ．配列番号５３０もしくは配列番号５３１；
ｄ．配列番号５３９もしくは配列番号５４０；
ｅ．配列番号５０８もしくは配列番号５０９；
ｆ．配列番号３８５もしくは配列番号３８６；または
ｇ．配列番号５５０もしくは配列番号５５１
を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
９．
ａ．配列番号３８９；または配列番号４１４及び配列番号４３２；
ｂ．配列番号４００；または配列番号４１４及び配列番号４３６；
ｃ．配列番号５１６；または配列番号４１４及び配列番号５１８；
ｄ．配列番号５１７；または配列番号４１４及び配列番号５１９；
ｅ．配列番号５２６；または配列番号４１４及び配列番号５２８；
ｆ．配列番号５２７；または配列番号４１４及び配列番号５２９；
ｇ．配列番号５３５；または配列番号４１４及び配列番号５３７；
ｈ．配列番号５３６；または配列番号４１４及び配列番号５３８；
ｉ．配列番号５０４；または配列番号４１４及び配列番号５０６；
ｊ．配列番号５０５；または配列番号４１４及び配列番号５０７；
ｋ．配列番号３８８；または配列番号４１４及び配列番号４３１；
ｌ．配列番号３９９；または配列番号４１４及び配列番号４３５；
ｍ．配列番号５４６；または配列番号４１４及び配列番号５４８；
ｎ．配列番号５４７；または配列番号４１４及び配列番号５４９；
ｏ．配列番号３７８；または配列番号４２５及び配列番号４２６；
ｐ．配列番号３７９；または配列番号４２１及び配列番号４３７；
ｑ．配列番号３８０；または配列番号４２３及び配列番号４２７を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
ａ．配列番号３８９；または配列番号４１４及び配列番号４３２；
ｂ．配列番号４００；または配列番号４１４及び配列番号４３６；
ｃ．配列番号５１６；または配列番号４１４及び配列番号５１８；
ｄ．配列番号５１７；または配列番号４１４及び配列番号５１９；
ｅ．配列番号５２６；または配列番号４１４及び配列番号５２８；
ｆ．配列番号５２７；または配列番号４１４及び配列番号５２９；
ｇ．配列番号５３５；または配列番号４１４及び配列番号５３７；
ｈ．配列番号５３６；または配列番号４１４及び配列番号５３８；
ｉ．配列番号５０４；または配列番号４１４及び配列番号５０６；
ｊ．配列番号５０５；または配列番号４１４及び配列番号５０７；
ｋ．配列番号３８８；または配列番号４１４及び配列番号４３１；
ｌ．配列番号３９９；または配列番号４１４及び配列番号４３５；
ｍ．配列番号５４６；または配列番号４１４及び配列番号５４８；
ｎ．配列番号５４７；または配列番号４１４及び配列番号５４９；
ｏ．配列番号３７８；または配列番号４２５及び配列番号４２６；
ｐ．配列番号３７９；または配列番号４２１及び配列番号４３７；
ｑ．配列番号３８０；または配列番号４２３及び配列番号４２７を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１０．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆｃ領域が、約１５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆｃ領域が、約１５０ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
１１．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆｃ領域が、約２０ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆｃ領域が、約２０ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
１２．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆｃ領域が、約１０ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆｃ領域が、約１０ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
１３．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆｃ領域が、約５ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆｃ領域が、約５ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
１４．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆｃ領域が、約３ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆｃ領域が、約３ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
１５．
前記Ｆａｂ領域が、
配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または
配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または
配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１６．
前記Ｆａｂ領域が、
配列番号５１、５２、及び１３０からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３及び１３１からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または
配列番号７９及び１４４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０及び１４５からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、実施形態１５に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
配列番号５１、５２、及び１３０からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３及び１３１からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号５５～７８及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または
配列番号７９及び１４４からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０及び１４５からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号８２～１０５及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、実施形態１５に記載の多重特異性抗体。
１７．
前記Ｆａｂ領域が、
配列番号２～２５及び１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０及び１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域を含む、実施形態１５または１６に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
配列番号２～２５及び１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号２７～５０及び１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域を含む、実施形態１５または１６に記載の多重特異性抗体。
１８．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号５５～７８のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｂ．配列番号８２～１０５のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む、実施形態１～１０のうちの１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号５５～７８のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｂ．配列番号８２～１０５のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む、実施形態１～１０のうちの１つに記載の多重特異性抗体。
１９．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号５５～７８のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｂ．配列番号８２～１０５のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号５５～７８のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｂ．配列番号８２～１０５のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
２０．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号５１もしくは配列番号５２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号５３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号７９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号８０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号５１もしくは配列番号５２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号５３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号７９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号８０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
２１．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号５１もしくは配列番号５２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号５１もしくは配列番号５２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号５３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
２２．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｂ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｃ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｄ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｅ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｆ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｇ．それぞれ配列番号５２、５３、及び６１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｈ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｉ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｊ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｋ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｌ．それぞれ配列番号５２、５３、及び６６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｍ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｎ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｏ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｐ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｑ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｒ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｓ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１００のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｔ．それぞれ配列番号５２、５３、及び７４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｕ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｖ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｗ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；または
ｘ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｂ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｃ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｄ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｅ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｆ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｇ．それぞれ配列番号５２、５３、及び６１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｈ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｉ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｊ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｋ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｌ．それぞれ配列番号５２、５３、及び６６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｍ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｎ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｏ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｐ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｑ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｒ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｓ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１００のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｔ．それぞれ配列番号５２、５３、及び７４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｕ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｖ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｗ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；または
ｘ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
２３．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号２～２５のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号２７～５０のいずれか１つに対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号２～２５のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号２７～５０のいずれか１つに対する少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
２４．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号２～２５のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号２７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号２～２５のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号２７～５０のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
２５．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ．配列番号１２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ．配列番号１３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ．配列番号１４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ．配列番号１５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ．配列番号１６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ．配列番号１７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ．配列番号１８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ．配列番号１９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ．配列番号２０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ．配列番号２１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ．配列番号２２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ．配列番号２３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ．配列番号２４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ．配列番号２５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０に対する少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ．配列番号１２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ．配列番号１３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ．配列番号１４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ．配列番号１５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ．配列番号１６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ．配列番号１７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ．配列番号１８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ．配列番号１９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ．配列番号２０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ．配列番号２１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ．配列番号２２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ．配列番号２３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ．配列番号２４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ．配列番号２５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０に対する少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
２６．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ．配列番号１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ．配列番号１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ．配列番号１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ．配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ．配列番号１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ．配列番号１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ．配列番号１８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ．配列番号１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ．配列番号２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ．配列番号２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ．配列番号２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ．配列番号２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ．配列番号２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ．配列番号２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｋ．配列番号１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｌ．配列番号１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｍ．配列番号１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｎ．配列番号１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｏ．配列番号１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｐ．配列番号１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｑ．配列番号１８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｒ．配列番号１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｓ．配列番号２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｔ．配列番号２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｕ．配列番号２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｖ．配列番号２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｗ．配列番号２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｘ．配列番号２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
２７．
前記Ｆａｂ領域が、ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位にセリン以外のアミノ酸残基を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位にセリン以外のアミノ酸残基を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
２８．
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態２７に記載の多重特異性抗体。
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態２７に記載の多重特異性抗体。
２９．
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態２７に記載の多重特異性抗体。
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態２７に記載の多重特異性抗体。
３０．
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態２７に記載の多重特異性抗体。
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態２７に記載の多重特異性抗体。
３１．
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基がロイシン残基である、実施形態２７に記載の多重特異性抗体。
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基がロイシン残基である、実施形態２７に記載の多重特異性抗体。
３２．
前記Ｆａｂ領域が、ＡＤＴ１－４－１０５、ＡＤＴ１－４－１０７、ＡＤＴ１－４－１１０、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１１７、ＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－１３９、ＡＤＴ１－４－４、ＡＤＴ１－４－１４３、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－１７３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８、ＡＤＴ１－４－８２、ＡＤＴ１－４－８３、ＡＤＴ１－４－３、ＡＤＴ１－４－８４、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－９５、ＡＤＴ１－４－１、ＡＤＴ１－４－６、及びＡＤＴ１－４－１３８からなる群から選択される、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、ＡＤＴ１－４－１０５、ＡＤＴ１－４－１０７、ＡＤＴ１－４－１１０、ＡＤＴ１－４－１１２、ＡＤＴ１－４－１１７、ＡＤＴ１－４－１９、ＡＤＴ１－４－２１、ＡＤＴ１－４－３１、ＡＤＴ１－４－１３９、ＡＤＴ１－４－４、ＡＤＴ１－４－１４３、ＡＤＴ１－４－５３、ＡＤＴ１－４－１７３、ＡＤＴ１－４－２、ＡＤＴ１－４－８、ＡＤＴ１－４－８２、ＡＤＴ１－４－８３、ＡＤＴ１－４－３、ＡＤＴ１－４－８４、ＡＤＴ１－４－８６、ＡＤＴ１－４－９５、ＡＤＴ１－４－１、ＡＤＴ１－４－６、及びＡＤＴ１－４－１３８からなる群から選択される、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
３３．
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で１～１０個、１～５個、または１～２個のアミノ酸置換を含む、実施形態３２に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で１～１０個、１～５個、または１～２個のアミノ酸置換を含む、実施形態３２に記載の多重特異性抗体。
３４．
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で最大２個または最大１個のアミノ酸置換を含む、実施形態３２または３３に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で最大２個または最大１個のアミノ酸置換を含む、実施形態３２または３３に記載の多重特異性抗体。
３５．
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で１個または２個のアミノ酸置換を含む、実施形態３２～３４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で１個または２個のアミノ酸置換を含む、実施形態３２～３４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
３６．
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に１～１０個、１～５個、または１～２個のアミノ酸置換を含む、実施形態３２～３５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に１～１０個、１～５個、または１～２個のアミノ酸置換を含む、実施形態３２～３５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
３７．
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に最大２個または最大１個のアミノ酸置換を含む、実施形態３２～３６のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に最大２個または最大１個のアミノ酸置換を含む、実施形態３２～３６のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
３８．
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に１個または２個のアミノ酸置換を含む、実施形態３６～３７のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に１個または２個のアミノ酸置換を含む、実施形態３６～３７のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
３９．
前記アミノ酸置換が保存的アミノ酸置換である、実施形態３２～３９のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記アミノ酸置換が保存的アミノ酸置換である、実施形態３２～３９のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
４０．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ． ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａの配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ． 配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ． Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、前記ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、前記ＨＣＤＲ３配列；
ｄ． 配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ． 配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ． ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔの配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、前記ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、前記ＬＣＤＲ３配列を含み、
Ｘ１～Ｘ１３の各々が天然に存在するアミノ酸である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ． ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａの配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ． 配列番号５３の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ． Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、前記ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、前記ＨＣＤＲ３配列；
ｄ． 配列番号７９の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ． 配列番号８０の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ． ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔの配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、前記ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、前記ＬＣＤＲ３配列を含み、
Ｘ１～Ｘ１３の各々が天然に存在するアミノ酸である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
４１．
ａ． Ｘ１がＡ及びＶからなる群から選択され、
ｂ． Ｘ２がＳ及びＴからなる群から選択され、
ｃ． Ｘ３がＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、
ｄ． Ｘ４がＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｅ． Ｘ５がＹ及びＮからなる群から選択され、
ｆ． Ｘ６がＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、
ｇ． Ｘ７がＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、
ｈ． Ｘ８がＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、
ｉ． Ｘ９がＳ及びＫからなる群から選択され、
ｊ． Ｘ１０がＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｋ． Ｘ１１がＰ、Ｈ、及びＤからなる群から選択され、
ｌ． Ｘ１２がＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、
ｍ． Ｘ１３がＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される、実施形態４０に記載の多重特異性抗体。
ａ． Ｘ１がＡ及びＶからなる群から選択され、
ｂ． Ｘ２がＳ及びＴからなる群から選択され、
ｃ． Ｘ３がＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、
ｄ． Ｘ４がＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｅ． Ｘ５がＹ及びＮからなる群から選択され、
ｆ． Ｘ６がＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、
ｇ． Ｘ７がＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、
ｈ． Ｘ８がＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、
ｉ． Ｘ９がＳ及びＫからなる群から選択され、
ｊ． Ｘ１０がＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｋ． Ｘ１１がＰ、Ｈ、及びＤからなる群から選択され、
ｌ． Ｘ１２がＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、
ｍ． Ｘ１３がＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される、実施形態４０に記載の多重特異性抗体。
４２．
前記Ｆａｂ領域が、
ｎ．配列番号１７０または１７１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｏ．配列番号１７２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｐ．配列番号１７３の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｑ．配列番号１７４の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｒ．配列番号１７５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｓ．配列番号１７６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｔ．配列番号１７７または１７８の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｕ．配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態４０または実施形態４１に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ｎ．配列番号１７０または１７１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｏ．配列番号１７２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｐ．配列番号１７３の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｑ．配列番号１７４の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｒ．配列番号１７５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｓ．配列番号１７６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｔ．配列番号１７７または１７８の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｕ．配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態４０または実施形態４１に記載の多重特異性抗体。
４３．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し、
ｂ．任意により、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し、及び／または
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し、
ｂ．任意により、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し、及び／または
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、前記多重特異性抗体。
４４．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合する、及び／または
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１００ｎＭ未満（約５０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有する、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合する、及び／または
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１００ｎＭ未満（約５０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有する、前記多重特異性抗体。
４５．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、
ａ．その前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し、
ｂ．任意により、その前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し、
及び／または、
ｃ．その前記Ｆｃ領域が、約１５０ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、
ａ．その前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し、
ｂ．任意により、その前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し、
及び／または、
ｃ．その前記Ｆｃ領域が、約１５０ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＥＧＦＲに結合する、前記多重特異性抗体。
４６．
前記多重特異性抗体が、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に特異的に結合し、約１５０ｎＭ未満、約２０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、または約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＥＧＦＲに特異的に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記多重特異性抗体が、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に特異的に結合し、約１５０ｎＭ未満、約２０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、または約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＥＧＦＲに特異的に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
４７．
前記多重特異性抗体が、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に特異的に結合し、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＥＧＦＲに特異的に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記多重特異性抗体が、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に特異的に結合し、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＥＧＦＲに特異的に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
４８．
ａ． Ｘ１がＡ及びＶからなる群から選択され、
ｂ． Ｘ２がＳ及びＴからなる群から選択され、
ｃ． Ｘ３がＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、
ｄ． Ｘ４がＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｅ． Ｘ５がＹ及びＮからなる群から選択され、
ｆ． Ｘ６がＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、
ｇ． Ｘ７がＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、
ｈ． Ｘ８がＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、
ｉ． Ｘ９がＳ及びＫからなる群から選択され、
ｊ． Ｘ１０がＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｋ． Ｘ１１がＰ及びＨからなる群から選択され、
ｌ． Ｘ１２がＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、
ｍ． Ｘ１３がＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される、実施形態４０に記載の多重特異性抗体。
ａ． Ｘ１がＡ及びＶからなる群から選択され、
ｂ． Ｘ２がＳ及びＴからなる群から選択され、
ｃ． Ｘ３がＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、
ｄ． Ｘ４がＧ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｅ． Ｘ５がＹ及びＮからなる群から選択され、
ｆ． Ｘ６がＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、
ｇ． Ｘ７がＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、
ｈ． Ｘ８がＫ、Ｒ、及びＧからなる群から選択され、
ｉ． Ｘ９がＳ及びＫからなる群から選択され、
ｊ． Ｘ１０がＴ、Ｑ、Ａ、Ｅ、及びＤからなる群から選択され、
ｋ． Ｘ１１がＰ及びＨからなる群から選択され、
ｌ． Ｘ１２がＱ、Ｒ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、Ｅ、及びＩからなる群から選択され、
ｍ． Ｘ１３がＩ、Ｖ、及びＬからなる群から選択される、実施形態４０に記載の多重特異性抗体。
４９．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１７０または１７１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１７２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１７３の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１７４の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１７５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１７６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１７７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態４８に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１７０または１７１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１７２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１７３の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１７４の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１７５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１７６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１７７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１７９、１８０、１８１、または１８２の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態４８に記載の多重特異性抗体。
５０．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、前記多重特異性抗体。
５１．
ａ． Ｘ１がＡ及びＶからなる群から選択され、
ｂ． Ｘ２がＳ及びＴからなる群から選択され、
ｃ． Ｘ３がＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、
ｄ． Ｘ４がＧ及びＤからなる群から選択され、
ｅ． Ｘ５がＹ及びＮからなる群から選択され、
ｆ． Ｘ６がＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、
ｇ． Ｘ７がＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、
ｈ． Ｘ８がＫ及びＲからなる群から選択され、
ｉ． Ｘ９がＳ及びＫからなる群から選択され、
ｊ． Ｘ１０がＴ、Ｑ、Ａ、及びＥからなる群から選択され、
ｋ． Ｘ１１がＰ及びＨからなる群から選択され、
ｌ． Ｘ１２がＱ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、及びＩからなる群から選択され、
ｍ． Ｘ１３がＶ及びＬからなる群から選択される、実施形態４０に記載の多重特異性抗体。
ａ． Ｘ１がＡ及びＶからなる群から選択され、
ｂ． Ｘ２がＳ及びＴからなる群から選択され、
ｃ． Ｘ３がＶ、Ａ、及びＬからなる群から選択され、
ｄ． Ｘ４がＧ及びＤからなる群から選択され、
ｅ． Ｘ５がＹ及びＮからなる群から選択され、
ｆ． Ｘ６がＶ、Ａ、及びＰからなる群から選択され、
ｇ． Ｘ７がＶ、Ｙ、及びＲからなる群から選択され、
ｈ． Ｘ８がＫ及びＲからなる群から選択され、
ｉ． Ｘ９がＳ及びＫからなる群から選択され、
ｊ． Ｘ１０がＴ、Ｑ、Ａ、及びＥからなる群から選択され、
ｋ． Ｘ１１がＰ及びＨからなる群から選択され、
ｌ． Ｘ１２がＱ、Ｋ、Ｗ、Ｐ、及びＩからなる群から選択され、
ｍ． Ｘ１３がＶ及びＬからなる群から選択される、実施形態４０に記載の多重特異性抗体。
５２．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１７０または１７１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１７２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１７３の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１７４の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１７５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１７６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１７７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１７９または１８１の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態５１に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１７０または１７１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１７２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１７３の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１７４の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１７５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１７６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１７７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１７９または１８１の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態５１に記載の多重特異性抗体。
５３．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、前記多重特異性抗体。
５４．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
５５．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含む、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含む、前記多重特異性抗体。
５６．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
５７．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１３３～１４３のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｂ．配列番号１４７～１５７のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む、実施形態１～１０のうちの１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１３３～１４３のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｂ．配列番号１４７～１５７のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む、実施形態１～１０のうちの１つに記載の多重特異性抗体。
５８．
前記Ｆａｂ領域が、
ｃ．配列番号１３３～１４３のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｄ．配列番号１４７～１５７のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む、実施形態５７に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ｃ．配列番号１３３～１４３のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３；及び／または
ｄ．配列番号１４７～１５７のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む、実施形態５７に記載の多重特異性抗体。
５９．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１３０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号１３１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号１４４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号１４５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を更に含む、実施形態５７～５８のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１３０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号１３１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号１４４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号１４５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を更に含む、実施形態５７～５８のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
６０．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号１３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号１４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号１４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を更に含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１３０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
ｂ．配列番号１３１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；
ｃ．配列番号１４４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；及び／または
ｄ．配列番号１４５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２を更に含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
６１．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｂ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｃ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｄ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｅ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｆ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｇ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｈ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｉ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｊ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；または
ｋ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む、実施形態５７～６０のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｂ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｃ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｄ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｅ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｆ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｇ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｈ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｉ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｊ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；または
ｋ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む、実施形態５７～６０のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
６２．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１０７～１１７のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号１１９～１２９のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態５７～６１のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１０７～１１７のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号１１９～１２９のいずれか１つに対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態５７～６１のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
６３．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１０７～１１７のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号１１９～１２９のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態５７～６２のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１０７～１１７のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ；及び／または
ｂ．配列番号１１９～１２９のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態５７～６２のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
６４．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１０７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号１０８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号１０９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号１１０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号１１１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号１１２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号１１３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号１１４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１１５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ．配列番号１１７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態５７～６３のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１０７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号１０８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号１０９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号１１０に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号１１１に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号１１２に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号１１３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号１１４に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１１５に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１６に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ．配列番号１１７に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態５７～６３のいずれかに記載の多重特異性抗体。
６５．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１０７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号１０８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号１０９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号１１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号１１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号１１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号１１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号１１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ．配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態５７～６４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１０７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１１９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号１０８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号１０９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号１１０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号１１１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号１１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号１１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号１１４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号１１５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｊ．配列番号１１６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｋ．配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号１２９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態５７～６４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
６６．
前記Ｆａｂ領域が、ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位にセリン以外のアミノ酸残基を有するκ軽鎖可変配列を含む、実施形態５７～６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位にセリン以外のアミノ酸残基を有するκ軽鎖可変配列を含む、実施形態５７～６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
６７．
前記軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態６６に記載の多重特異性抗体。
前記軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態６６に記載の多重特異性抗体。
６８．
前記軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態６６に記載の多重特異性抗体。
前記軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態６６に記載の多重特異性抗体。
６９．
前記軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態６６に記載の多重特異性抗体。
前記軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態６６に記載の多重特異性抗体。
７０．
前記軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基がロイシン残基である、実施形態６６に記載の多重特異性抗体。
前記軽鎖可変配列のＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基がロイシン残基である、実施形態６６に記載の多重特異性抗体。
７１．
前記Ｆａｂ領域が、ＡＤＴ１－７－１０、ＡＤＴ１－７－１５、ＡＤＴ１－７－１７、ＡＤＴ１－７－１８、ＡＤＴ１－７－１９、ＡＤＴ１－７－２０、ＡＤＴ１－７－２２、ＡＤＴ１－７－２３、ＡＤＴ１－７－４２、ＡＤＴ１－７－３、及びＡＤＴ１－７－６１からなる群から選択される、実施形態５７～７０のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、ＡＤＴ１－７－１０、ＡＤＴ１－７－１５、ＡＤＴ１－７－１７、ＡＤＴ１－７－１８、ＡＤＴ１－７－１９、ＡＤＴ１－７－２０、ＡＤＴ１－７－２２、ＡＤＴ１－７－２３、ＡＤＴ１－７－４２、ＡＤＴ１－７－３、及びＡＤＴ１－７－６１からなる群から選択される、実施形態５７～７０のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
７２．
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で１～１０個、１～５個、または１～２個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で１～１０個、１～５個、または１～２個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１に記載の多重特異性抗体。
７３．
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で最大２個または最大１個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１または７２に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で最大２個または最大１個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１または７２に記載の多重特異性抗体。
７４．
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で１個または２個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１～７３のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、６つ全てのＣＤＲ領域全体で１個または２個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１～７３のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
７５．
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に１～１０個、１～５個、または１～２個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１～７４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に１～１０個、１～５個、または１～２個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１～７４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
７６．
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に最大２個または最大１個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１～７５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に最大２個または最大１個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１～７５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
７７．
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に１個または２個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１～７６のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、１つ以上のフレームワーク領域に１個または２個のアミノ酸置換を含む、実施形態７１～７６のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
７８．
前記アミノ酸置換が保存的アミノ酸置換である、実施形態７１～６０７７のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記アミノ酸置換が保存的アミノ酸置換である、実施形態７１～６０７７のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
７９．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ． 配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ． 配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ． Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩの配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、前記ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、前記ＨＣＤＲ３配列；
ｄ． 配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ． 配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ． ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔの配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、前記ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、前記ＬＣＤＲ３配列を含み、
Ｘ１～Ｘ９の各々が天然に存在するアミノ酸である、実施形態１～１４のうちの１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ． 配列番号１３０の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ１配列；
ｂ． 配列番号１３１の配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ２配列；
ｃ． Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩの配列を含むか、またはそれからなるＨＣＤＲ３配列であって、前記ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、前記ＨＣＤＲ３配列；
ｄ． 配列番号１４４の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ１配列；
ｅ． 配列番号１４５の配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ． ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔの配列を含むか、またはそれからなるＬＣＤＲ３配列であって、前記ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、前記ＬＣＤＲ３配列を含み、
Ｘ１～Ｘ９の各々が天然に存在するアミノ酸である、実施形態１～１４のうちの１つに記載の多重特異性抗体。
８０．
ａ． Ｘ１がＤ、Ｉ、及びＶからなる群から選択され、
ｂ． Ｘ２がＤ及びＳからなる群から選択され、
ｃ． Ｘ３がＮ、Ｅ、Ｄ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、
ｄ． Ｘ４がＤ及びＥからなる群から選択され、
ｅ． Ｘ５がＴ及びＳからなる群から選択され、
ｆ． Ｘ６がＡ、Ｇ、Ｙ、及びＳからなる群から選択され、
ｇ． Ｘ７がＳ及びＤからなる群から選択され、
ｈ． Ｘ８がＴ、Ｅ、及びＧからなる群から選択され、
ｉ． Ｘ９がＬ及びＤからなる群から選択される、実施形態７９に記載の多重特異性抗体。
ａ． Ｘ１がＤ、Ｉ、及びＶからなる群から選択され、
ｂ． Ｘ２がＤ及びＳからなる群から選択され、
ｃ． Ｘ３がＮ、Ｅ、Ｄ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、
ｄ． Ｘ４がＤ及びＥからなる群から選択され、
ｅ． Ｘ５がＴ及びＳからなる群から選択され、
ｆ． Ｘ６がＡ、Ｇ、Ｙ、及びＳからなる群から選択され、
ｇ． Ｘ７がＳ及びＤからなる群から選択され、
ｈ． Ｘ８がＴ、Ｅ、及びＧからなる群から選択され、
ｉ． Ｘ９がＬ及びＤからなる群から選択される、実施形態７９に記載の多重特異性抗体。
８１．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１８９の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１９０の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１９１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１９２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１９３及び１９４の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１９５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１９６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１９７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態７９または実施形態８０に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１８９の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１９０の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１９１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１９２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１９３及び１９４の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１９５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１９６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１９７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態７９または実施形態８０に記載の多重特異性抗体。
８２．
前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、実施形態５７～８１のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、実施形態５７～８１のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
８３．
ａ． Ｘ１がＤ及びＶからなる群から選択され、
ｂ． Ｘ２がＤ及びＳからなる群から選択され、
ｃ． Ｘ３がＤ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、
ｄ． Ｘ４がＤ及びＥからなる群から選択され、
ｅ． Ｘ５がＳであり、
ｆ． Ｘ６がＡ及びＹからなる群から選択され、
ｇ． Ｘ７がＳであり、
ｈ． Ｘ８がＥ及びＧからなる群から選択され、
ｉ． Ｘ９がＬ及びＤからなる群から選択される、実施形態７９に記載の多重特異性抗体。
ａ． Ｘ１がＤ及びＶからなる群から選択され、
ｂ． Ｘ２がＤ及びＳからなる群から選択され、
ｃ． Ｘ３がＤ、Ｑ、及びＡからなる群から選択され、
ｄ． Ｘ４がＤ及びＥからなる群から選択され、
ｅ． Ｘ５がＳであり、
ｆ． Ｘ６がＡ及びＹからなる群から選択され、
ｇ． Ｘ７がＳであり、
ｈ． Ｘ８がＥ及びＧからなる群から選択され、
ｉ． Ｘ９がＬ及びＤからなる群から選択される、実施形態７９に記載の多重特異性抗体。
８４．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１８９の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１９０の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１９１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１９２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１９３の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１９５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１９６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１９７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態８３に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１８９の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ１配列；
ｂ．配列番号１９０の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ２配列；
ｃ．配列番号１９１の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ３配列；
ｄ．配列番号１９２の配列を含むか、またはそれからなるＨＦＲ４配列；
ｅ．配列番号１９３の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ１配列；
ｆ．配列番号１９５の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ２配列；
ｇ．配列番号１９６の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ３配列；及び
ｈ．配列番号１９７の配列を含むか、またはそれからなるＬＦＲ４配列を更に含む、実施形態８３に記載の多重特異性抗体。
８５．
実施形態５７～８４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｂ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、前記多重特異性抗体。
実施形態５７～８４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｂ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、前記多重特異性抗体。
８６．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７１のアミノ酸５～２０及び／または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、実施形態５７～８５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７１のアミノ酸５～２０及び／または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、実施形態５７～８５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
８７．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７を含む、実施形態５７～８６のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７を含む、実施形態５７～８６のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
８８．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７からなる、実施形態５７～８７のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７からなる、実施形態５７～８７のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
８９．
前記Ｆａｂ領域が、親抗Ｖδ１抗体の親和性成熟したバリアントに由来し、前記親抗Ｖδ１抗体が、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含む、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、親抗Ｖδ１抗体の親和性成熟したバリアントに由来し、前記親抗Ｖδ１抗体が、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含む、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
９０．
前記Ｆａｂ領域が、先行実施形態のいずれかで定義されたとおりである、実施形態８９に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、先行実施形態のいずれかで定義されたとおりである、実施形態８９に記載の多重特異性抗体。
９１．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、前記多重特異性抗体。
９２．
Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
９３．
Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
９４．
前記Ｆａｂ領域が、親抗Ｖδ１抗体の親和性成熟したバリアントに由来し、前記親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含む、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、親抗Ｖδ１抗体の親和性成熟したバリアントに由来し、前記親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含む、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
９５．
前記Ｆａｂ領域が、先行実施形態のいずれか１つで定義されたとおりである、実施形態９４に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、先行実施形態のいずれか１つで定義されたとおりである、実施形態９４に記載の多重特異性抗体。
９６．
前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｂ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｂ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
９７．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｂ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｂ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
９８．
前記Ｆａｂ領域が、親抗Ｖδ１抗体の親和性成熟したバリアントであり、前記親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．配列番号２７３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号２７４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号２７５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号２７６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号２７７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号２７８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号２７９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号２８０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号２８１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｊ．配列番号３１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、親抗Ｖδ１抗体の親和性成熟したバリアントであり、前記親抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、
ａ．配列番号２７３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｂ．配列番号２７４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｃ．配列番号２７５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｄ．配列番号２７６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｅ．配列番号２７７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｆ．配列番号２７８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｇ．配列番号２７９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｈ．配列番号２８０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；
ｉ．配列番号２８１のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬ；または
ｊ．配列番号３１２のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨ、及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬを含む、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
９９．
前記親和性成熟したバリアントが、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖への結合について、例えば、Ｋｄで測定される場合、前記親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも１００％、少なくとも５００％、またはより好ましくは、少なくとも約１０００％高い親和性を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記親和性成熟したバリアントが、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖への結合について、例えば、Ｋｄで測定される場合、前記親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも１００％、少なくとも５００％、またはより好ましくは、少なくとも約１０００％高い親和性を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１００．
前記親和性成熟したバリアントが、対応する前記親のＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記親和性成熟したバリアントが、対応する前記親のＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１０１．
前記親和性バリアントが、前記親抗体配列と比較して最大２０個、例えば最大１５個、例えば最大１０個のアミノ酸置換を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記親和性バリアントが、前記親抗体配列と比較して最大２０個、例えば最大１５個、例えば最大１０個のアミノ酸置換を含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１０２．
前記Ｆａｂ領域が、ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の残基がセリン残基ではないκ軽鎖可変配列を含む、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の残基がセリン残基ではないκ軽鎖可変配列を含む、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の多重特異性抗体。
１０３．
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態１０２に記載の多重特異性抗体。
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態１０２に記載の多重特異性抗体。
１０４．
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態１０２に記載の多重特異性抗体。
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、アルギニン、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態１０２に記載の多重特異性抗体。
１０５．
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態１０２に記載の多重特異性抗体。
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基が、グリシン、バリン、メチオニン、ロイシン、及びイソロイシンからなる群から選択されるアミノ酸である、実施形態１０２に記載の多重特異性抗体。
１０６．
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基がロイシン残基である、実施形態１０２に記載の多重特異性抗体。
ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基がロイシン残基である、実施形態１０２に記載の多重特異性抗体。
１０７．
前記抗体がＩｇＧ抗体である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記抗体がＩｇＧ抗体である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１０８．
前記抗体がＩｇＧ１抗体である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記抗体がＩｇＧ１抗体である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１０９．
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５６２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５６２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１１０．
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５２２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５２２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１１１．
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５３２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５３２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１１２．
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５４１のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５４１のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１１３．
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５１０のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５１０のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１１４．
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５５９のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５５９のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１１５．
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５５２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５５２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１１６．
前記Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖に特異的に結合し、先行実施形態のいずれかに記載の抗体またはその抗原結合断片とγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の前記可変δ１（Ｖδ１）鎖への結合を競合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖に特異的に結合し、先行実施形態のいずれかに記載の抗体またはその抗原結合断片とγδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の前記可変δ１（Ｖδ１）鎖への結合を競合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１１７．
前記抗体が、Ｆｃ有効型である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記抗体が、Ｆｃ有効型である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１１８．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、
ａ． それが結合するＶδ１Ｔ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし、
ｂ． ＣＤＣまたはＡＤＣＣを示さず、
ｃ． Ｖδ１Ｔ細胞を枯渇させないことを特徴とする、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、
ａ． それが結合するＶδ１Ｔ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし、
ｂ． ＣＤＣまたはＡＤＣＣを示さず、
ｃ． Ｖδ１Ｔ細胞を枯渇させないことを特徴とする、前記多重特異性抗体。
１１９．
前記抗体が、ＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣを介して、生存可能なＶδ１ Ｔ＋細胞集団の約３０％未満、または約２０％未満、または約１０％未満の枯渇を引き起こす、実施形態１１８に記載の多重特異性抗体。
前記抗体が、ＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣを介して、生存可能なＶδ１ Ｔ＋細胞集団の約３０％未満、または約２０％未満、または約１０％未満の枯渇を引き起こす、実施形態１１８に記載の多重特異性抗体。
１２０．
前記抗体が、ＩＬ－１７Ａの分泌を誘導しない、実施形態１１８に記載の多重特異性抗体。
前記抗体が、ＩＬ－１７Ａの分泌を誘導しない、実施形態１１８に記載の多重特異性抗体。
１２１．
前記抗体が、同等のＣＤ３抗体によって誘導されるＩＬ－１７Ａ分泌の約３０％未満、または約２０％未満、または約１０％未満を誘導する、実施形態１１８に記載の多重特異性抗体。
前記抗体が、同等のＣＤ３抗体によって誘導されるＩＬ－１７Ａ分泌の約３０％未満、または約２０％未満、または約１０％未満を誘導する、実施形態１１８に記載の多重特異性抗体。
１２２．
前記Ｆａｂ領域が、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＶＤ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＶＤ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１２３．
前記Ｆａｂ領域が、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＶＤ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＶＤ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１２４．
前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＶＤ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＶＤ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１２５．
前記Ｆａｂ領域が、約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＶＤ１に結合する、実施形態１１５に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＶＤ１に結合する、実施形態１１５に記載の多重特異性抗体。
１２６．
前記Ｆａｂ領域が、約１０ｎＭ未満のＫＤでγδ Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のヒト可変δ１（Ｖδ１）鎖に特異的に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約１０ｎＭ未満のＫＤでγδ Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のヒト可変δ１（Ｖδ１）鎖に特異的に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１２７．
前記Ｆａｂ領域が、実施形態１～１２６のいずれか１つで定義されたとおりである、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、実施形態１～１２６のいずれか１つで定義されたとおりである、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１２８．
前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満または約５０ｎＭ未満のＫＤでγδ Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のカニクイザル可変δ１（Ｖδ１）鎖に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満または約５０ｎＭ未満のＫＤでγδ Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のカニクイザル可変δ１（Ｖδ１）鎖に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１２９．
前記Ｆａｂ領域が、約５０ｎＭ未満、好ましくは約１０ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約５０ｎＭ未満、好ましくは約１０ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１３０．
前記多重特異性抗体が、約１０ｎＭ未満、好ましくは約５ｎＭ未満のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記多重特異性抗体が、約１０ｎＭ未満、好ましくは約５ｎＭ未満のＡ３７５細胞殺傷のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１３１．
前記Ｆａｂ領域が、Ｖδ１ Ｔ細胞増殖を刺激する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、Ｖδ１ Ｔ細胞増殖を刺激する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１３２．
前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＶＲＤ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＶＲＤ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１３３．
前記Ｆａｂ領域が、約５０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＶＲＤ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約５０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＶＲＤ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１３４．
前記Ｆａｂ領域が、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１３５．
前記Ｆａｂ領域が、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約５ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１３６．
前記Ｆａｂ領域が、約１ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約１ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１３７．
前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約１００ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１３８．
前記Ｆａｂ領域が、約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１３９．
前記Ｆａｂ領域が、約５０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、または約０．５ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、約５０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、または約０．５ｎＭ未満のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１４０．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し、
ｂ．任意により、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し、
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し、
ｂ．任意により、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し、
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１４１．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１００ｎＭ未満（約５０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０及び約１００ｎＭ未満（約５０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ９０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１４２．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、及び／または
ｂ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１４３．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＤＶ１に結合し、
ｃ．約１ｎＭ未満（好ましくは、約０．５ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１４４．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１４５．
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
ａ．約１０ｎＭ未満（好ましくは、約５ｎＭ未満）のＫＤでヒトＴＲＤＶ１に結合し、
ｂ．約５ｎＭ未満（好ましくは、約１ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１４６．
前記Ｆａｂ領域がヒトＦａｂ領域である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域がヒトＦａｂ領域である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１４７．
前記抗体が、ｍＡｂ２である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記抗体が、ｍＡｂ２である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１４８．
前記抗体がモノクローナル抗体である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記抗体がモノクローナル抗体である、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１４９．
前記Ｆａｂ領域が、γδＴＣＲのＶδ１鎖のＶ領域内のエピトープにのみ結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、γδＴＣＲのＶδ１鎖のＶ領域内のエピトープにのみ結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１５０．
前記Ｆａｂ領域が、配列番号２７２、配列番号３０６または配列番号３０８のアミノ酸残基１～９０内のエピトープにのみ結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、配列番号２７２、配列番号３０６または配列番号３０８のアミノ酸残基１～９０内のエピトープにのみ結合する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１５１．
前記Ｆａｂ領域が、γδＴＣＲのＶδ１鎖のＣＤＲ３に見出されるエピトープに結合しない、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、γδＴＣＲのＶδ１鎖のＣＤＲ３に見出されるエピトープに結合しない、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１５２．
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、配列番号２７２のアミノ酸９１～１０５の領域（ＣＤＲ３）内のエピトープに結合しない、前記多重特異性抗体。
先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、その前記Ｆａｂ領域が、配列番号２７２のアミノ酸９１～１０５の領域（ＣＤＲ３）内のエピトープに結合しない、前記多重特異性抗体。
１５３．
前記Ｆａｂ領域が、
（ｉ）配列番号２７２のアミノ酸３～２０；及び／または
（ｉｉ）配列番号２７２のアミノ酸３７～７７の領域内のエピトープに結合する、先行実施形態のいずれか記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が、
（ｉ）配列番号２７２のアミノ酸３～２０；及び／または
（ｉｉ）配列番号２７２のアミノ酸３７～７７の領域内のエピトープに結合する、先行実施形態のいずれか記載の多重特異性抗体。
１５４．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸３７～５３及び／または５９～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
１５５．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含む、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７を含む、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
１５６．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基３７、４２、５０、５３、５９、６４、６８、６９、７２、７３、及び７７からなる、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
１５７．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸５～２０及び／または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸５～２０及び／または６２～７７の領域内の１つ以上のアミノ酸残基を含む、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
１５８．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７を含む、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７を含む、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
１５９．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７からなる、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、配列番号２７２のアミノ酸残基５、９、１６、２０、６２、６４、７２、及び７７からなる、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
１６０．
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、γδＴ細胞の活性化エピトープである、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
前記Ｆａｂ領域が結合する前記エピトープが、γδＴ細胞の活性化エピトープである、実施形態１５３に記載の多重特異性抗体。
１６１．
前記活性化エピトープの結合が、（ｉ）前記γδＴＣＲを下方調節し、（ｉｉ）前記γδＴ細胞の脱顆粒を活性化し、及び／または（ｉｉｉ）γδＴ細胞による殺傷を促進する、実施形態１６０に記載の多重特異性抗体。
前記活性化エピトープの結合が、（ｉ）前記γδＴＣＲを下方調節し、（ｉｉ）前記γδＴ細胞の脱顆粒を活性化し、及び／または（ｉｉｉ）γδＴ細胞による殺傷を促進する、実施形態１６０に記載の多重特異性抗体。
１６２．
前記活性化エピトープの結合が、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ２５、ＣＤ６９、及び／またはＫｉ６７の発現を上方調節する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記活性化エピトープの結合が、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ２５、ＣＤ６９、及び／またはＫｉ６７の発現を上方調節する、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１６３．
前記多重特異性抗体が、約７０ＫＤａよりも大きい、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記多重特異性抗体が、約７０ＫＤａよりも大きい、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１６４．
前記抗体が、配列番号５４を有するＶＨＣＤＲ３及び配列番号８１を有するＶＬＣＤＲ３を含まず、及び／または前記抗体が、配列番号１３２を有するＶＨＣＤＲ３及び配列番号１４６を有するＶＬＣＤＲ３を含まない、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記抗体が、配列番号５４を有するＶＨＣＤＲ３及び配列番号８１を有するＶＬＣＤＲ３を含まず、及び／または前記抗体が、配列番号１３２を有するＶＨＣＤＲ３及び配列番号１４６を有するＶＬＣＤＲ３を含まない、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１６５．
前記抗体が、配列番号１を有するＶＨ領域及び配列番号２６を有するＶＬ領域を含まず、及び／または前記抗体が、配列番号１０６を有するＶＨ領域及び配列番号１１８を有するＶＬ領域を含まない、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
前記抗体が、配列番号１を有するＶＨ領域及び配列番号２６を有するＶＬ領域を含まず、及び／または前記抗体が、配列番号１０６を有するＶＨ領域及び配列番号１１８を有するＶＬ領域を含まない、先行実施形態のいずれかに記載の多重特異性抗体。
１６６．
先行実施形態のいずれかにおいて定義されたような前記多重特異性抗体をコードするポリヌクレオチド配列。
先行実施形態のいずれかにおいて定義されたような前記多重特異性抗体をコードするポリヌクレオチド配列。
１６７．
配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１との少なくとも７０％の配列同一性を有する配列を含む、抗Ｖδ１の第１の結合ドメインをコードするポリヌクレオチド配列。
配列番号１９９～２２２、２２４～２４７、２４９～２５９、または２６１～２７１との少なくとも７０％の配列同一性を有する配列を含む、抗Ｖδ１の第１の結合ドメインをコードするポリヌクレオチド配列。
１６８．
実施形態１６６または実施形態１６７において定義されたような前記ポリヌクレオチド配列を含む発現ベクター。
実施形態１６６または実施形態１６７において定義されたような前記ポリヌクレオチド配列を含む発現ベクター。
１６９．
実施形態１６６もしくは実施形態１６７において定義されたような前記ポリヌクレオチド配列、または実施形態１６８において定義されたような前記発現ベクターを含む宿主細胞であって、任意により、前記宿主細胞が組換え宿主細胞である、前記宿主細胞。
実施形態１６６もしくは実施形態１６７において定義されたような前記ポリヌクレオチド配列、または実施形態１６８において定義されたような前記発現ベクターを含む宿主細胞であって、任意により、前記宿主細胞が組換え宿主細胞である、前記宿主細胞。
１７０．
ＶＨ配列をコードする第１のポリヌクレオチド配列と、ＶＬ配列をコードする第２のポリヌクレオチド配列とを含む、実施形態１６９に記載の宿主細胞。
ＶＨ配列をコードする第１のポリヌクレオチド配列と、ＶＬ配列をコードする第２のポリヌクレオチド配列とを含む、実施形態１６９に記載の宿主細胞。
１７１．
ＶＨ配列をコードする第１のポリヌクレオチド配列を含む第１の発現ベクター、及びＶＬ配列をコードする第２のポリヌクレオチド配列を含む第２の発現ベクターを含む、実施形態１６９に記載の宿主細胞。
ＶＨ配列をコードする第１のポリヌクレオチド配列を含む第１の発現ベクター、及びＶＬ配列をコードする第２のポリヌクレオチド配列を含む第２の発現ベクターを含む、実施形態１６９に記載の宿主細胞。
１７２．
ＶＨ配列をコードする第１のポリヌクレオチド配列と、ＶＬ配列をコードする第２のポリヌクレオチド配列とを含む発現ベクターを含む、実施形態１６９に記載の宿主細胞。
ＶＨ配列をコードする第１のポリヌクレオチド配列と、ＶＬ配列をコードする第２のポリヌクレオチド配列とを含む発現ベクターを含む、実施形態１６９に記載の宿主細胞。
１７３．
前記ポリヌクレオチドまたは発現ベクターが、前記抗体またはその抗原結合断片に融合された膜アンカーまたは膜貫通ドメインをコードし、前記抗体またはその抗原結合断片が、前記細胞の細胞外表面上に提示される、実施形態１６９～１７２のいずれか１つに記載の宿主細胞。
前記ポリヌクレオチドまたは発現ベクターが、前記抗体またはその抗原結合断片に融合された膜アンカーまたは膜貫通ドメインをコードし、前記抗体またはその抗原結合断片が、前記細胞の細胞外表面上に提示される、実施形態１６９～１７２のいずれか１つに記載の宿主細胞。
１７４．
実施形態１～１６５のいずれか１つに記載のいずれかの多重特異性抗体を産生させるための方法であって、実施形態１６９～１７３のいずれか１つに記載の宿主細胞を細胞培養培地で培養することを含む前記方法。
実施形態１～１６５のいずれか１つに記載のいずれかの多重特異性抗体を産生させるための方法であって、実施形態１６９～１７３のいずれか１つに記載の宿主細胞を細胞培養培地で培養することを含む前記方法。
１７５．
前記多重特異性抗体を前記培養培地から単離することを更に含む、実施形態１７４に記載の方法。
前記多重特異性抗体を前記培養培地から単離することを更に含む、実施形態１７４に記載の方法。
１７６．
実施形態１～１６５のいずれか１つにおいて定義されたような前記多重特異性抗体またはその抗体結合断片を含む組成物。
実施形態１～１６５のいずれか１つにおいて定義されたような前記多重特異性抗体またはその抗体結合断片を含む組成物。
１７７．
実施形態１～１６５のいずれか１つにおいて定義されたような前記多重特異性抗体と、薬学的に許容される希釈剤または担体とを含む、医薬組成物。
実施形態１～１６５のいずれか１つにおいて定義されたような前記多重特異性抗体と、薬学的に許容される希釈剤または担体とを含む、医薬組成物。
１７８．
実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体または実施形態１７７に記載の医薬組成物を含むキット。
実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体または実施形態１７７に記載の医薬組成物を含むキット。
１７９．
治療効果のある追加の薬剤を更に含む、実施形態１７８に記載のキット。
治療効果のある追加の薬剤を更に含む、実施形態１７８に記載のキット。
１８０．
使用説明書を更に含む、実施形態１７８または実施形態１７９に記載のキット。
使用説明書を更に含む、実施形態１７８または実施形態１７９に記載のキット。
１８１．
対象の疾患または障害を処置する方法であって、前記対象に、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体、または実施形態１７７に記載の医薬組成物を投与することを含む前記方法。
対象の疾患または障害を処置する方法であって、前記対象に、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体、または実施形態１７７に記載の医薬組成物を投与することを含む前記方法。
１８２．
前記疾患または障害が、がんである、実施形態１８１に記載の方法。
前記疾患または障害が、がんである、実施形態１８１に記載の方法。
１８３．
前記がんが、ＥＧＦＲ陽性癌である、実施形態１８２に記載の方法。
前記がんが、ＥＧＦＲ陽性癌である、実施形態１８２に記載の方法。
１８４．
同時にまたは任意の順序で逐次的に、第２の薬剤を前記対象に投与することを更に含む、実施形態１８１～１８３のいずれか１つに記載の方法。
同時にまたは任意の順序で逐次的に、第２の薬剤を前記対象に投与することを更に含む、実施形態１８１～１８３のいずれか１つに記載の方法。
１８５．
対象における免疫応答を調節する方法であって、前記対象に、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体、または実施形態１７７に記載の医薬組成物を投与することを含む前記方法。
対象における免疫応答を調節する方法であって、前記対象に、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体、または実施形態１７７に記載の医薬組成物を投与することを含む前記方法。
１８６．
前記対象が、がんを有する、実施形態１８５に記載の方法。
前記対象が、がんを有する、実施形態１８５に記載の方法。
１８７．
対象における免疫応答を調節することが、γδＴ細胞を活性化すること、γδＴ細胞の増殖を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の増大を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の脱顆粒を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞による殺傷活性を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞傷害性を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の動員を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の生存率を増加させること、及びγδＴ細胞の疲弊に対する抵抗性を増加させることからなる群から選択される少なくとも１つを含む、実施形態１８５または１８６に記載の方法。
対象における免疫応答を調節することが、γδＴ細胞を活性化すること、γδＴ細胞の増殖を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の増大を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の脱顆粒を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞による殺傷活性を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞傷害性を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の動員を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の生存率を増加させること、及びγδＴ細胞の疲弊に対する抵抗性を増加させることからなる群から選択される少なくとも１つを含む、実施形態１８５または１８６に記載の方法。
１８８．
病変細胞は殺傷されると共に健常細胞が温存される、実施形態１８１～１８７のいずれか１つに記載の方法。
病変細胞は殺傷されると共に健常細胞が温存される、実施形態１８１～１８７のいずれか１つに記載の方法。
１８９．
医療に使用するための、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体、または実施形態１７７に記載の医薬組成物、または実施形態１７８～１７９のいずれか１つに記載のキット。
医療に使用するための、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体、または実施形態１７７に記載の医薬組成物、または実施形態１７８～１７９のいずれか１つに記載のキット。
１９０．
がんの処置に使用するための、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体、または実施形態１７７に記載の医薬組成物、または実施形態１７８～１７９のいずれか１つに記載のキット。
がんの処置に使用するための、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体、または実施形態１７７に記載の医薬組成物、または実施形態１７８～１７９のいずれか１つに記載のキット。
１９１．
薬物の製造における、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体の使用。
薬物の製造における、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体の使用。
１９２．
がんの処置のための薬物の製造における、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体の使用。
がんの処置のための薬物の製造における、実施形態１～１６５のいずれか１つに記載の多重特異性抗体の使用。
Claims (45)
- Ｆａｂ領域及びＦｃ領域を含む多重特異性抗体であって、前記Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖のエピトープに特異的な結合部位を含み、前記Ｆｃ領域が、ＥＧＦＲ結合部位を含む、前記多重特異性抗体。
- 前記ＥＧＦＲ結合部位が、
ａ．残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、
ｂ．残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、
ｃ．残基３５９～３６２（ＥＵ番号付け）がＥＥＧＰ（配列番号５２３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１５（ＥＵ番号付け）がＳＹＷ（配列番号５３３）を構成するか、
ｄ．残基３５８～３６１、３６１．１及び３６２（ＥＵ番号付け）がＬＤＥＧＧＰ（配列番号５４２）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＶＫ（配列番号５４３）を構成するか、
ｅ．残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、
ｆ．残基３５８～３６２（ＥＵ番号付け）がＴＤＤＧＰ（配列番号５６０）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、または
ｇ．残基３５８～３６２（ＥＵ番号付け）がＴＥＳＧＰ（配列番号５５３）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＫＦＧ（配列番号５５４）を構成し、残基４１３～４２１（ＥＵ番号付け）がＳＮＬＲＷＴＫＧＨ（配列番号５５５）を構成し、残基３７８がバリンであるＣＨ３ドメインによって提供される、請求項１に記載の多重特異性抗体。 - 前記ＥＧＦＲ結合部位が、
ａ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｂ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＮＧＱＰＥＮＮＹ（配列番号５２５）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｃ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＥＥＧＰ（配列番号５２４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＱＱＧＮＶ（配列番号５３４）を構成するＥＦループを形成するか、
ｄ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＤＥＧＧＰ（配列番号５４４）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＶＫＧＮＶ（配列番号５４５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｅ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＬＴＫＮＱ（配列番号５１３）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、
ｆ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＴＤＤＧＰ（配列番号５６１）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成するか、または
ｇ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＴＥＳＧＰ（配列番号５５６）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＫＦＧＰＥＮＮＹ（配列番号５５７）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＮＬＲＷＴＫＧＨＶ（配列番号５５８）を構成するＥＦループを形成し、残基３７８がバリンであるＣＨ３ドメインによって提供される、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記ＥＧＦＲ結合部位が、
ａ．残基３５８～３６２（ＥＵ番号付け）がＴＤＤＧＰ（配列番号５６０）を構成し、残基３８４～３８６（ＥＵ番号付け）がＴＹＧ（配列番号５１１）を構成し、残基４１３～４１９（ＥＵ番号付け）がＳＹＷＲＷＹＫ（配列番号５１２）を構成するか、または
ｂ．残基３５５～３６２（ＥＵ番号付け）が、ＲＤＥＴＤＤＧＰ（配列番号５６１）を構成するＡＢループを形成し、残基３８３～３９１（ＥＵ番号付け）が、ＳＴＹＧＰＥＮＮＹ（配列番号５１４）を構成するＣＤループを形成し、残基４１３～４２２（ＥＵ番号付け）が、ＳＹＷＲＷＹＫＧＮＶ（配列番号５１５）を構成するＥＦループを形成する、ＣＨ３ドメインによって提供されない、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記ＣＨ３ドメインが、前記ＥＧＦＲ結合部位を含むように工学操作されたヒトＩｇＧ ＣＨ３ドメインである、請求項１に記載の多重特異性抗体。
- 前記Ｆｃ領域が、前記ＥＧＦＲ結合部位を含むように工学操作された前記ＣＨ３ドメインを含むヒトＩｇＧ Ｆｃ領域である、請求項２に記載の多重特異性抗体。
- 前記ＣＨ３ドメインのアミノ酸配列が、
ａ．配列番号５６２；
ｂ．配列番号５２２；
ｃ．配列番号５３２；
ｄ．配列番号５４１；
ｅ．配列番号５１０；
ｆ．配列番号５５９；または
ｇ．配列番号５５２
と少なくとも９０％同一であるか、または少なくとも９５％同一であるか、または１００％同一である、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記抗体が、Ｆｃ有効型である、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記Ｆｃ領域が、
ａ．配列番号３９１もしくは配列番号３９２；
ｂ．配列番号５２０もしくは配列番号５２１；
ｃ．配列番号５３０もしくは配列番号５３１；
ｄ．配列番号５３９もしくは配列番号５４０；
ｅ．配列番号５０８もしくは配列番号５０９；
ｆ．配列番号３８５もしくは配列番号３８６；または
ｇ．配列番号５５０もしくは配列番号５５１
を含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - ａ．配列番号３８９；または配列番号４１４及び配列番号４３２；
ｂ．配列番号４００；または配列番号４１４及び配列番号４３６；
ｃ．配列番号５１６；または配列番号４１４及び配列番号５１８；
ｄ．配列番号５１７；または配列番号４１４及び配列番号５１９；
ｅ．配列番号５２６；または配列番号４１４及び配列番号５２８；
ｆ．配列番号５２７；または配列番号４１４及び配列番号５２９；
ｇ．配列番号５３５；または配列番号４１４及び配列番号５３７；
ｈ．配列番号５３６；または配列番号４１４及び配列番号５３８；
ｉ．配列番号５０４；または配列番号４１４及び配列番号５０６；
ｊ．配列番号５０５；または配列番号４１４及び配列番号５０７；
ｋ．配列番号３８８；または配列番号４１４及び配列番号４３１；
ｌ．配列番号３９９；または配列番号４１４及び配列番号４３５；
ｍ．配列番号５４６；または配列番号４１４及び配列番号５４８；
ｎ．配列番号５４７；または配列番号４１４及び配列番号５４９；
ｏ．配列番号３７８；または配列番号４２５及び配列番号４２６；
ｐ．配列番号３７９；または配列番号４２１及び配列番号４３７；
ｑ．配列番号３８０；または配列番号４２３及び配列番号４２７
を含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - ａ．配列番号３８５もしくは配列番号３８６；
ｂ．配列番号３７８；もしくは配列番号４２５及び配列番号４２６；
ｃ．配列番号３７９；もしくは配列番号４２１及び配列番号４３７；または
ｄ．配列番号３８０；もしくは配列番号４２３及び配列番号４２７
を含まない、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記多重特異性抗体が、約１５０ｎＭ未満、約２０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、または約５ｎＭ未満の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＥＧＦＲに結合する、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記Ｆａｂ領域が、
配列番号５１、５２、及び１３０からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ１；
配列番号５３及び１３１からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ２；及び
配列番号６８、５５～６７、６９～７８、及び１３３～１４３からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；及び／または
配列番号７９及び１４４からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ１；
配列番号８０及び１４５からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ２；及び
配列番号９５、８２～９４、９６～１０５、及び１４７～１５７からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記Ｆａｂ領域が、
ａ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｂ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｃ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｄ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｅ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｆ．それぞれ配列番号５１、５３、及び５９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｇ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｈ．それぞれ配列番号５２、５３、及び６１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｉ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び８９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｊ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｋ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｌ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｍ．それぞれ配列番号５２、５３、及び６６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｎ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｏ．それぞれ配列番号５１、５３、及び６９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｐ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｑ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｒ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び９９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｓ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１００のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｔ．それぞれ配列番号５２、５３、及び７４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｕ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｖ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｗ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｘ．それぞれ配列番号５１、５３、及び７８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号７９、８０、及び１０５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｙ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｚ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３４のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４８のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ａａ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３５のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１４９のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｂｂ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３６のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５０のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｃｃ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３７のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５１のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｄｄ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３８のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５２のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｅｅ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１３９のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５３のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｆｆ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４０のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５４のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｇｇ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４１のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５５のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；
ｈｈ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４２のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５６のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３；または
ｉｉ．それぞれ配列番号１３０、１３１、及び１４３のアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３、ならびにそれぞれ配列番号１４４、１４５、及び１５７のアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記Ｆａｂ領域が、
配列番号１５、２～１４、１６～２５、及び１０７～１１７からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる重鎖可変領域；及び／または
配列番号４０、２７～３９、４１～５０、及び１１９～１２９からなる群から選択される配列に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の同一性を有する配列を含むか、もしくはそれからなる軽鎖可変領域を含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｂ．配列番号２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｃ．配列番号３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｄ．配列番号４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｅ．配列番号５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｆ．配列番号６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｇ．配列番号７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｈ．配列番号８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｉ．配列番号９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｊ．配列番号１０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｋ．配列番号１１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｌ．配列番号１２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｍ．配列番号１３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｎ．配列番号１４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｏ．配列番号１６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｐ．配列番号１７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｑ．配列番号１８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｒ．配列番号１９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｓ．配列番号２０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｔ．配列番号２１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｕ．配列番号２２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｖ．配列番号２３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｗ．配列番号２４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号４９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｘ．配列番号２５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号５０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｙ．配列番号１０７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１１９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｚ．配列番号１０８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ａａ．配列番号１０９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｂｂ．配列番号１１０に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｃｃ．配列番号１１１に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｄｄ．配列番号１１２に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｅｅ．配列番号１１３に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｆｆ．配列番号１１４に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｇｇ．配列番号１１５に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｈｈ．配列番号１１６に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２８に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ；または
ｉｉ．配列番号１１７に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号１２９に対する少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬを含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記Ｆａｂ領域が、ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位にセリン以外のアミノ酸残基を含み、任意により、ＩＭＧＴ番号付けシステムによる７４位の前記残基がロイシン残基である、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記Ｆａｂ領域が、
ａ． ＧＤＳＶＳＳＫＳＸ１Ａ（配列番号１５８）の配列を含むＨＣＤＲ１配列；
ｂ． 配列番号５３の配列を含むＨＣＤＲ２配列；
ｃ． Ｘ２ＷＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＤＸ７（配列番号１６２）の配列を含むＨＣＤＲ３配列であって、前記ＨＣＤＲ３配列が配列番号５４ではない、前記ＨＣＤＲ３配列；
ｄ． 配列番号７９の配列を含むＬＣＤＲ１配列；
ｅ． 配列番号８０の配列を含むＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ． ＱＱＸ８ＹＸ９Ｘ１０Ｘ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｔ（配列番号１６６）の配列を含むＬＣＤＲ３配列であって、前記ＬＣＤＲ３配列が配列番号８１ではない、前記ＬＣＤＲ３配列を含み、
Ｘ１～Ｘ１３の各々が天然に存在するアミノ酸であるか、
または前記抗体もしくはその抗原結合断片が、
ａ． 配列番号１３０の配列を含むＨＣＤＲ１配列；
ｂ． 配列番号１３１の配列を含むＨＣＤＲ２配列；
ｃ． Ｘ１Ｘ２ＹＸ３Ｘ４ＡＦＤＩの配列を含むＨＣＤＲ３配列であって、前記ＨＣＤＲ３配列が配列番号１３２ではない、前記ＨＣＤＲ３配列；
ｄ． 配列番号１４４の配列を含むＬＣＤＲ１配列；
ｅ． 配列番号１４５の配列を含むＬＣＤＲ２配列；及び
ｆ． ＱＱＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８ＬＸ９Ｔの配列を含むＬＣＤＲ３配列であって、前記ＬＣＤＲ３配列が配列番号１４６ではない、前記ＬＣＤＲ３配列を含み、
Ｘ１～Ｘ９の各々が天然に存在するアミノ酸である、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記Ｆａｂ領域が、親抗Ｖδ１ Ｆａｂ領域の親和性成熟したバリアントであり、前記親抗Ｖδ１ Ｆａｂ領域が、
ａ．配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ配列；
ｂ．配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＶＬ配列；
ｃ．配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｄ．配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｅ．配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｆ．配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｇ．配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｈ．配列番号２７８のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｉ．配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｊ．配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＶＬ；
ｋ．配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
ｌ．配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＶＬを含み、
任意により、
前記親和性成熟した抗体が、γδＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の可変δ１（Ｖδ１）鎖への結合について、例えば、Ｋｄで測定される場合、前記親抗体より少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも１００％、少なくとも５００％、もしくはより好ましくは、少なくとも約１０００％高い親和性を有し、
前記親和性成熟した抗Ｖδ１抗体もしくはその抗原結合断片が、対応する親ＶＨ及びＶＬ配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくは少なくとも９６％同一なＶＨ及びＶＬ配列を含み、及び／または
前記親和性成熟した抗Ｖδ１抗体もしくはその抗原結合断片が、親抗体配列と比較して最大２０、例えば、最大１５、例えば、最大１０のアミノ酸置換を含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５６２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５２２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５３２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５４１のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５１０のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５５９のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記Ｆａｂ領域が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶＬ配列を含み、前記Ｆｃ領域が、配列番号５５２のアミノ酸配列を含むＣＨ３ドメインを含む、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、
ａ． それが結合するＶδ１Ｔ細胞上のＴＣＲの下方調節を引き起こし、
ｂ． ＣＤＣまたはＡＤＣＣを示さず、
ｃ． Ｖδ１Ｔ細胞を枯渇させないことを特徴とする、前記多重特異性抗体。 - 前記多重特異性抗体が、ＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣを介して、生存可能なＶδ１ Ｔ＋細胞集団の約３０％未満、または約２０％未満、または約１０％未満の枯渇を引き起こす、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記抗体またはその抗原結合断片が、約１０ｎＭ未満のＫＤでヒトＴＲＶＤ１に結合し、任意により、前記抗体またはその抗原結合断片が、約１００ｎＭ未満のＫＤでカニクイザルＴＲＶＤ１に結合する、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 約１０ｎＭ未満のＫＤでγδ Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のヒト可変δ１（Ｖδ１）鎖に特異的に結合する、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、任意により、前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約１００ｎＭ未満のＫＤでγδ Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のカニクイザル可変δ１（Ｖδ１）鎖に結合する、及び／または約１５０ｎＭ未満のＫＤでヒトＥＧＦＲに特異的に結合する、前記多重特異性抗体。
- 約１０ｎＭ未満のＫＤでγδ Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のヒト可変δ１（Ｖδ１）鎖に特異的に結合する、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体であって、任意により、前記抗Ｖδ１抗体またはその抗原結合断片が、約１００ｎＭ未満のＫＤでγδ Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）のカニクイザル可変δ１（Ｖδ１）鎖に結合する、及び／または約２０ｎＭ未満のＫＤでヒトＥＧＦＲに特異的に結合する、前記多重特異性抗体。
- ａ．約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でヒトＴＲＤＶ１（配列番号２７２または３０６）に結合し、
ｂ．任意により、約１００ｎＭ未満（好ましくは、約５０ｎＭ未満）の結合親和性（例えば表面プラズモン共鳴により測定される、ＫＤ）でカニクイザルＴＲＤＶ１（配列番号３０８）に結合し、
ｃ．約５０ｎＭ未満（好ましくは、約１０ｎＭ未満）のＴＣＲ下方調節のＩＣ５０を有する、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記Ｆａｂ領域が、配列番号２７２、配列番号３０６及び／または配列番号３０８のアミノ酸残基１～９０内のエピトープにのみ結合する、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記Ｆａｂ領域が、
（ｉ）配列番号２７２、配列番号３０６、及び／または配列番号３０８のアミノ酸３～２０；及び／または
（ｉｉ）配列番号２７２、配列番号３０６、及び／または配列番号３０８のアミノ酸３７～７７の領域内のエピトープに結合する、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。 - 前記Ｆａｂ領域が、γδＴ細胞の活性化エピトープに結合し、任意により、前記活性化エピトープの結合が、（ｉ）前記γδＴＣＲを下方調節し、（ｉｉ）前記γδＴ細胞の脱顆粒を活性化し、及び／または（ｉｉｉ）γδＴ細胞による殺傷を促進する、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記活性化エピトープの結合が、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ２５、ＣＤ６９、及び／またはＫｉ６７の発現を上方調節する、請求項１６に記載の多重特異性抗体。
- 前記多重特異性抗体が、二重特異性抗体である、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 前記多重特異性抗体が、二重特異性抗体ではない、先行請求項のいずれかに記載の多重特異性抗体。
- 請求項１～３８のいずれか１項において定義されたような前記多重特異性抗体と、薬学的に許容される希釈剤または担体とを含む、医薬組成物。
- 対象の疾患もしくは障害を処置する方法、または対象における免疫応答を調節する方法であって、前記対象に、請求項１～３８のいずれか１項に記載の多重特異性抗体、または請求項３９に記載の医薬組成物を投与することを含む前記方法。
- 前記疾患もしくは障害ががんであるか、または免疫応答が調節される前記対象ががんを有する、請求項４０に記載の方法。
- 前記がんが、ＥＧＦＲ陽性癌である、請求項４１に記載の方法。
- 対象における免疫応答を調節することが、γδＴ細胞を活性化すること、γδＴ細胞の増殖を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の増大を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の脱顆粒を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞による殺傷活性を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞傷害性を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の動員を引き起こすか、または増加させること、γδＴ細胞の生存率を増加させること、及びγδＴ細胞の疲弊に対する抵抗性を増加させることからなる群から選択される少なくとも１つを含む、請求項４０に記載の方法。
- 病変細胞は殺傷されると共に健常細胞が温存される、請求項４０～４３のいずれか１項に記載の方法。
- がんの処置に使用するための、請求項１～３８のいずれか１項に記載の多重特異性抗体、または請求項２３に記載の医薬組成物。
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