JP2024504490A - 一価／二価抗原粒子媒介性免疫応答及び多価抗原粒子媒介性免疫応答による感染症の治療及び／又は予防 - Google Patents

Abstract

本発明は、一価／二価抗原粒子及び／又は多価抗原粒子とＢ細胞とを接触させることによる、免疫応答の標的調節のための手段及び方法に関する。Ｂ細胞免疫の標的調節は、感染症の療法において使用することができる。本発明は、多価抗原構造と一価／二価抗原構造との組み合わせが、抗原に対する免疫応答を増強する能力を有するという観察に基づいている。【選択図】なし

Description

本発明は、一価／二価抗原粒子及び／又は多価抗原粒子とＢ細胞とを接触させることによる、免疫応答の標的調節のための手段及び方法に関する。Ｂ細胞免疫の標的調節は、感染症の療法において使用することができる。本発明は、多価抗原構造と一価／二価抗原構造との組み合わせが、抗原に対する免疫応答を増強する能力を有するという観察に基づいている。

ワクチンは、現代医学の最も偉大な発明の１つであり、人間にとってウイルス及びウイルスによって引き起こされる疾患などの病原体に抵抗するための最も経済的かつ効果的な武器である。ワクチンの使用により、人類は、天然痘の根絶、ポリオの実質的な根絶、結核、麻疹、ジフテリア、破傷風など、かつて人類を苦しめたほとんどの疾患の制圧に成功した。

現在のところ、ワクチンの開発は、中枢耐性機構が自己反応性Ｂ細胞の特異性を除去し、その結果、自己反応性の可能性がない末梢Ｂ細胞レパートリーをもたらすことを提案する従来のＢ細胞選択及び開発の従来のモデルに依存している。

今回の世界的なＣＯＶＩＤ－１９パンデミックの発生以来、各国の研究所は、免疫応答を誘導し、ワクチンを改善する新しい方法の研究を強化している。

したがって、病原体に対する予防及び／又は治療を改善するために、免疫応答の制御可能な調節のための新規かつ柔軟なアプローチが依然として必要とされている。

上記の技術的問題は、本明細書に開示され、特許請求の範囲で定義される実施形態によって解決される。

したがって、本発明は、とりわけ以下の実施形態に関する。
１．感染症の治療及び／又は予防での使用のための組成物であって、
（ｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む抗原部分を含む一価／二価抗原粒子であって、標的抗原が病原体関連抗原である、一価／二価抗原粒子と、
（ｉｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含む多価抗原粒子であって、３つ以上の抗原構造が架橋され、標的抗原が病原体関連抗原である、多価抗原粒子と、を含む、組成物。
２．３つ以上の抗原構造が、複数の同一の抗原構造を含む、実施形態１に記載の使用のための組成物。
３．多価抗原粒子が、抗原部分に結合された担体部分を更に含み、及び／又は一価／二価抗原粒子は、抗原部分に結合された担体部分を更に含む、実施形態１又は２に記載の使用のための組成物。
４．担体部分が、ポリペプチド、免疫ＣｐＧ島、リンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、破傷風トキソイド（ＴＴ）、コレラトキシンサブユニットＢ（ＣＴＢ）、細菌又は細菌ゴースト、リポソーム、キトソーム、ビロソーム、マイクロスフェア、樹状細胞、粒子、マイクロ粒子、ナノ粒子、又はビーズの群から選択される構造を含む、実施形態３に記載の使用のための組成物。
５．多価抗原粒子中の架橋が、ビス－マレイミド媒介架橋などの化学架橋であるか、又はビオチン－ストレプトアビジン媒介架橋などのタンパク質架橋である、実施形態１～４に記載の使用のための組成物。
６．多価抗原粒子が、以下の式Ａ－Ｌ－Ａの複合体を含み、式中、Ａが、標的抗原を含む部分であり、Ｌが、架橋結合のリンカーであり、好ましくはＬが、ビスマレイミドであり、最も好ましくは、複合体が、以下の構造（Ｉ）のものであり、Ｒが、標的抗原を含む部分である、実施形態１～５に記載の使用のための組成物。

７．多価抗原粒子が、タンパク質コンジュゲーションのための架橋反応基を有するリンカー、好ましくは、安定したタンパク質コンジュゲーションのための架橋反応基を有するリンカーを含む、実施形態１～５に記載の使用のための組成物。
８．架橋反応基が、カルボキシル－アミン反応基、アミン反応基、スルフヒドリル反応基、アルデヒド反応基、及び光反応基から選択される基である、実施形態７に記載の使用のための組成物。
９．架橋反応基が、カルボジイミド、ＮＨＳエステル、イミドエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ヒドロキシメチルホスフィン、マレイミド、ハロアセチル、ヒドラジド、アルコキシアミン、ジアジリン、及びアリールアジドから選択される基である、実施形態７に記載の使用のための組成物。
１０．多価抗原粒子が、好ましくは、３ｎｍ～２０ｎｍの範囲内で互いに空間的に近接した抗原構造の少なくとも２つのコピーを含む、実施形態１～９に記載の使用のための組成物。
１１．病原体関連抗原が、核酸、炭水化物、及びペプチドの群から選択される少なくとも１つの物質を含む、実施形態１～１０に記載の使用のための組成物。
１２．多価抗原粒子がアジュバントに連結され、好ましくは、多価粒子がアジュバントに共有結合的に連結される、実施形態１～１１に記載の使用のための組成物。
１３．アジュバントが、ＩｇＧである、実施形態１２に記載の使用のための組成物。
１４．治療及び／又は予防が、少なくとも２つの投与時点を含む、実施形態１～１３に記載の使用のための組成物。
１５．予防が、多価抗原粒子の前に一価／二価抗原粒子を投与することを含む、実施形態１４に記載の使用のための組成物。
１６．治療及び／又は予防が、一価／二価抗原粒子のための少なくとも２つの投与時点と、多価抗原粒子のための少なくとも２つの投与時点と、を含む、実施形態１４～１５に記載の使用のための組成物。
１７．抗体媒介性免疫応答が、ＩｇＧ媒介性免疫応答及び／又はＩｇＭ媒介性免疫応答である、前述の実施形態のいずれか１つに記載の使用のための組成物。
１８．病原体が、寄生虫、細菌、及びウイルスの群から選択される少なくとも１つの病原体である、実施形態１～１７に記載の使用のための組成物。
１９．感染症が、ウイルス感染症である、実施形態１～１８に記載の使用のための組成物。
２０．ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症である、実施形態１９に記載の使用のための組成物。
２１．コロナウイルス感染症が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症である、実施形態２０に記載の使用のための組成物。
２２．病原体関連抗原が、コロナウイルススパイクタンパク質に由来するアミノ酸配列、例えば、受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）配列、好ましくは完全なＲＢＤ配列、又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤアミノ酸配列（配列番号１）のアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列を含む、実施形態２１に記載の使用のための組成物。
２３．病原体関連抗原に結合する抗体を産生するための方法であって、
（１）抗体を産生することができる対象及び／又は細胞への、
（ｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む抗原部分を含む一価／二価粒子であって、標的抗原が病原体関連抗原を含む、一価／二価粒子、及び
（ｉｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含む多価抗原粒子であって、３つ以上の抗原構造が架橋され、標的抗原が病原体関連抗原を含む、多価抗原粒子、
の投与のステップと、
（２）対象及び／又は細胞から抗体を単離するステップであって、抗体が標的抗原に結合する、単離するステップと、を含む、方法。
２４．感染症の治療及び／又は予防での使用のためのポリヌクレオチドであって、
（ｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む抗原部分を含む一価／二価抗原粒子であって、標的抗原が病原体関連抗原を含む、一価／二価抗原粒子、及び
（ｉｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含む多価抗原粒子であって、３つ以上の抗原構造が架橋され、標的抗原が病原体関連抗原を含む、多価抗原粒子、
をコードする、ポリヌクレオチド。
２５．実施形態２４に記載の使用のためのポリヌクレオチドを含む、ベクター。

したがって、本発明は、感染症の治療及び／又は予防での使用のための組成物であって、（ｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む抗原部分を含む一価／二価抗原粒子であって、標的抗原が病原体関連抗原を含む、一価／二価抗原粒子と、（ｉｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含む多価抗原粒子であって、３つ以上の抗原構造が架橋され、標的抗原が病原体関連抗原を含む、多価抗原粒子と、を含む、組成物に関する。

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２由来ＲＢＤによる免疫化後の抗体応答。免疫化の２週間前に示されるように、マウスを前処置した。続いて、マウスを１日目及び２１日目に免疫化した。免疫濃度後２８日目に血清を採取し、ＥＬＩＳＡで使用してＩｇ濃度を決定した。 複合体ＲＢＤが弱い応答を誘導する一方で、天然ＲＢＤを用いた免疫後に抗体応答はない。Ａ．ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の概略図：ヒトアンジオテンシン変換酵素２（ＡＣＥ２）と相互作用し、それによって宿主細胞へのウイルス粒子の侵入を媒介する受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）は、抗体を中和するための標的として記載された。Ｂ．天然ＲＢＤ（約２７ｋＤａ）を、ＨＥＫ２９３－６Ｅ細胞で産生し、ビオチン化し、ストレプトアビジン（ＳＡＶ）の添加によって複合化し、試料を１０％クマシーゲル上で分離した（ここでは、非還元条件下で）。ＲＢＤは、ｂ－メルカプトエタノールとのジスルフィド結合を還元することによって溶解することができる自己凝集体を形成する。Ｃ．免疫手順の概略図：ＷＴマウスを、対照免疫化（ＣＩ）し、ＣｐＧ－ＯＤＮ ＃１８２６の存在下で、５０μｇの天然ＲＢＤ（ｎＲＢＤ）、ストレプトアビジンと複合体化したＲＢＤ（ｃＲＢＤ）を腹腔内で免疫化したか、又は天然ＲＢＤの反復注射を施した（１４日以内に、アジュバントの非存在下で、各々、５０μｇの６回の腹腔内投与）。一次免疫に使用したのと同じワクチン接種組成物を用いて、ＣＩ、ｎＲＢＤ－及びｃＲＢＤ－免疫マウスで２１日目に免疫をブーストした。Ｄ．示される時点で免疫化マウス（Ｃに記載）から血液を採取し、ＲＢＤ特異的ＩｇＭ及びＩｇＧを、ＥＬＩＳＡによって測定した。免疫複合体化ＲＢＤは、弱い抗体応答のみを誘導し、ブースト後にのみ検出可能である。天然ＲＢＤへの反復曝露はまた、ｃＲＢＤによって誘導されるものに匹敵する抗体応答も誘導する。 反復ｎＲＢＤ処置をｃＲＢＤ免疫化と組み合わせることは、堅牢な抗体応答をもたらす。Ａ．免疫手順の概略図。Ｂ．示される時点で免疫化マウス（Ａに記載）から血液を採取した。 反復ｎＲＢＤ処置の効果は、延長された時間を持続させ得る。Ａ．免疫手順の概略図。Ｂ．示される時点で免疫化マウス（Ａに記載）から血液を採取した。ＲＢＤ特異的ＩｇＭ及びＩｇＧを、ＥＬＩＳＡによって決定した。一次免疫応答が５週間遅延した場合でも、効率的な抗体応答のために天然のＲＢＤプライムで前処置する。 高い抗体価は、インビトロでのウイルス中和には必要である。Ａ．中和アッセイに使用された試料中のＥＬＩＳＡによって決定されたＲＢＤ特異的ＩｇＭ（左）、ＩｇＧ（中央）、及び総Ｉｇ（右）の濃度。血清は、ブーストの１週間後の２８日目で採取した。Ｂ．～Ｃ．ＰＢＳ－（－ＰＴ）及びｎＲＢＤ－前処置（＋ＰＴ）マウスの群において、ｃＲＢＤ免疫化後に採取された血清間で中和電位を比較した。中和能力は、総ＲＢＤ特異的Ｉｇの濃度と相関する。 ＩｇＤ欠損マウスによる強力な早期抗体応答。 ＲＢＤのランダム架橋による免疫複合体の模倣は、堅牢な抗体応答をもたらす。Ａ．天然ＲＢＤ（約２７ｋＤａ）を、ＨＥＫ２９３－６Ｅ細胞で産生し、マレイミド（ｃＲＢＤ＊ＭＭ）の添加によって化学的に架橋した。試料を１０％クマシーゲル上で分離した（ここでは、還元条件下で）。Ｂ．免疫手順の概略図。Ｃ．示される時点で免疫化マウス（Ｂに記載）から血液を採取した。ＲＢＤ特異的ＩｇＭ及びＩｇＧを、両方の群でＥＬＩＳＡによって測定し、ＣＩマウスで測定した力価と比較した。 ＲＢＤの化学架橋による免疫複合体の模倣は、堅牢な抗体応答をもたらす。Ａ．中和アッセイに使用された試料中のＥＬＩＳＡによって決定されたＲＢＤ特異的ＩｇＭ（左）、ＩｇＧ（中央）、及び総Ｉｇ（右）の濃度。Ｂ～Ｃ．ｃＲＢＤ＊ＭＭで免疫化されたマウス由来の血清中で測定された中和電位。結果を、ＲＢＤ前処置後にｃＲＢＤ－ＳＡＶで免疫化されたマウスにおいて決定された中和能力と比較した。ＩｇＭは、ウイルス中和を達成するために排他的に必要とされるものではなく、主にＩｇＧを含む試料によっても達成することができる。ＲＢＤ特異的総Ｉｇのより高い濃度は、強力な中和能力と相関する。ｃＲＢＤ ＭＭ：マレイミド（ＭＭ）との複合ＲＢＤ。 活性化抗原は、免疫応答をブーストするＩｇＧ複合体を形成する。Ａ．受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）の局在を伴うＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の概略図。Ｂ．化学架橋の反応スキーム。ｐＨ６．５～７．５で、１，２－フェニレン－ビス－マレイミドの反応基（赤色で印付けした）は、タンパク質のシステイン残基上でスルフヒドリル基と酸化し、安定したチオエーテル連結を形成する。Ｃ．１，２－フェニレン－ビス－マレイミド（ビスマレ）によって錯化されたＲＢＤに対するクマシー染色。ＲＢＤは、架橋なしの天然ＲＢＤを示す。Ｄ及びＥ．ＲＢＤによる免疫化。 活性化抗原は、免疫応答をブーストするＩｇＧ複合体を形成する。Ａ．受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）の局在を伴うＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の概略図。Ｂ．化学架橋の反応スキーム。ｐＨ６．５～７．５で、１，２－フェニレン－ビス－マレイミドの反応基（赤色で印付けした）は、タンパク質のシステイン残基上でスルフヒドリル基と酸化し、安定したチオエーテル連結を形成する。Ｃ．クマシー染色による、１０％のＳＤＳ ｐａｇｅ上の還元条件下での１，２－フェニレン－ビス－マレイミド複合体ＲＢＤの分析。ＲＢＤは、１，２－フェニレン－ビス－マレイミドの非存在下での天然ＲＢＤを示す。ＲＢＤ＊は、１００μｇのＲＢＤ当たり２０μｇの１，２－フェニレン－ビス－マレイミドと複合体化したが、ＲＢＤ＊＊は、１００μｇのＲＢＤ当たり１００μｇの１，２－フェニレン－ビス－マレイミドとの複合体化を示す。Ｄ．ＷＴマウスを、「Ｃ」中の異なる量の架橋剤（マレイミド）を使用して記載されるように生成されたＲＢＤ＊又はＲＢＤ＊＊のいずれかで免疫化した。 ビオチン化及びその後のストレプトアビジン（ＳＡＶ）とのインキュベーションによる抗原（Ａｇ）複合体の生成。Ａ．ビオチン－ＳＡＶ複合体の形成には、ビオチン化及びＳＡＶを含む追加のステップが必要である。Ｂ．ＩｇＧの存在下での抗原の生化学的活性化は、より単純である。ＭＭ、マレイミド架橋。反応性マレイミド基を有する抗原複合体は、自己抗原と複合体を形成し、これが、免疫応答をブーストする。本発明について、特許請求の範囲に記載された本発明の範囲を限定しない以下の実施例に更に記載する。 活性化抗原は、免疫応答をブーストするＩｇＧ複合体を形成する。Ａ．受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）の局在を伴うＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の概略図。Ｂ．化学架橋の反応スキーム。ｐＨ６．５～７．５で、１，２－フェニレン－ビス－マレイミドの反応基は、タンパク質のシステイン残基上でスルフヒドリル基と酸化し、安定したチオエーテル連結を形成する。Ｃ．１，２－フェニレン－ビス－マレイミド（ビスマレ）によって錯化されたＲＢＤに対するクマシー染色。ＲＢＤは、架橋なしの天然ＲＢＤを示す。Ｄ及びＥ．ＲＢＤによる免疫化。

「価」という用語は、本出願内で使用される場合、それぞれ、抗体又は抗原分子内に特定の数の結合部位が存在することを示す。したがって、抗体の結合部位はパラトープであるが、抗原内の結合部位は一般にエピトープと称される。例えば、天然抗体又は本発明に従う完全長抗体は、２つの結合部位を有し、二価である。抗原タンパク質は、一価／二価（単量体として存在する場合）であるが、そのような抗原タンパク質が多量体として提供される場合、それらは、２つ以上の同一のエピトープを含み得、したがって、二価、三価、四価などであり得る多価である。したがって、「三価」という用語は、抗体分子内の３つの結合部位の存在を示す。したがって、「四価」という用語は、抗体分子内の４つの結合部位の存在を示す。

「一価／二価抗原粒子」という用語は、本明細書に記載される場合、抗原性であり、したがって脊椎動物における免疫応答を刺激することができる、タンパク質又はタンパク質複合体などの分子又は分子複合体を指す。典型的には、一価／二価抗原粒子は、（ｉ）かかる抗原構造に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる抗原構造のうちの２つ以下を含む１つの抗原部分、又は（ｉｉ）かかる抗原構造に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる抗原構造のうちの１つ以下を含む２つの抗原部分で構成される。本明細書で使用される場合、「一価／二価抗原粒子」という用語は、一価抗原粒子、二価粒子、又は一価抗原粒子と二価抗原粒子との組み合わせを指す。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される「一価／二価抗原粒子」という用語は、実質的な免疫応答（例えば、体内の酵素との接触時に活性化されるプロドラッグ）を誘発する前に、対象の体内において一価／二価抗原粒子に分解する多価前駆体を更に含む。

本明細書で使用される場合、「抗原構造」という用語は、抗体媒介性免疫応答を刺激する能力を保持する抗原物質（例えば、タンパク質）の断片を指す。そのような抗原構造は、抗体と特異的に反応する分子の領域、より具体的には、抗体のパラトープと反応する分子の領域を指す抗原決定基又は「エピトープ」を提供すると理解される。本発明の好ましい実施形態では、本発明の一価／二価抗原粒子は、抗原構造の１つの特異的エピトープの２つ以下のコピーを含む。したがって、好ましくは、特定のパラトープを有するある特定の抗体種の１つ／２つの抗体分子のみが、本発明による一価／二価抗原粒子に結合し得る。

「多価抗原粒子」という用語は、本明細書に開示される本発明の文脈において、抗原性であり、したがって脊椎動物における免疫応答を刺激することができる、タンパク質又はタンパク質複合体などの分子又は分子複合体を指すものである。本発明において、一価／二価抗原粒子とは異なり、多価抗原粒子は、抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分で構成される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の「多価抗原粒子」という用語は、実質的な免疫応答（例えば、体内の酵素との接触時に複合及び／又は重合される物質）を誘発する前に、対象の体内において多価抗原粒子を形成する低価（例えば、一価／二価）前駆体を更に含む。

「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」（及び「治療する（ｔｒｅａｔ）」又は「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」などのその文法的変形）という用語は、本明細書で使用される場合、治療される個体の自然経過を変更しようとする試みにおける臨床的介入を指し、予防のために又は臨床病理学の経過中に実施することができる。治療の所望の効果には、疾患の発生又は再発を予防すること、症状の緩和、疾患の任意の直接的又は間接的な病理学的結果の減少、疾患進行の速度の低下、疾患状態の改善又は緩和、並びに寛解又は予後の改善が含まれるが、これらに限定されない。

「予防」という用語は、本明細書で使用される場合、それが発症する前に、障害、疾患、又は状態の発症又は発症を予防する、最小限に抑える、又は妨げる能力に関する。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の疾患又は障害は、疾患又は障害の１つ以上の症状及び／又は合併症を指す。

本発明の好ましい実施形態では、本発明の多価抗原粒子は、抗原構造の１つの特異的エピトープの３つ以上のコピーを含む。いくつかの実施形態では、本発明の多価抗原粒子は、抗原構造の１つの特異的エピトープの３つ以上のコピーを含む。

したがって、好ましくは、特異的パラトープを有するある特定の抗体種の２つ以上の抗体分子が、本発明による一価／二価抗原粒子に結合し得る。そのような多価抗原粒子は、２つ以上の抗原構造が互いに共有結合的又は非共有結合的に架橋された構造を有し得る。好ましくは、多価抗原粒子の抗原部分に含まれる２つ以上の抗原構造は、複数の同一の抗原構造を含む。

本発明の文脈において、本発明の一価／二価抗原粒子は、しばしば「可溶性」粒子又は抗原と称されるが、多価抗原粒子は、「複合」粒子又は抗原と称される。

「標的抗原」という用語は、本明細書で使用される場合、抗原構造を含む任意の分子又は構造を指す。本発明の標的抗原は、完全、断片的又は部分的免疫原性物質などの天然及び／又は合成の免疫原性物質であり得、免疫原性物質は、核酸、炭水化物、ペプチド、又はそれらの任意の組み合わせから選択され得る。

「架橋」という用語は、本明細書で使用される場合、少なくとも２つの抗原構造を互いに連結させる結合を指し、架橋された複合体は、分離された抗原構造とは異なる物理的特性を有する。いくつかの実施形態では、架橋複合体は、分離した抗原構造よりも可溶性が低い。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の架橋は、少なくとも１つの共有結合を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の架橋は、少なくとも１つのイオン結合を含む。

「病原体」という用語は、本明細書で使用される場合、対象において感染症などの疾患を引き起こし得る物質を指す。病原体としては、例えば、細菌、ウイルス、プリオン、真菌、原虫、蠕虫、線虫、及び対象を病気にし得る、又は疾患に罹患しない可能性のある対象から伝染する場合、病原体が伝染する更なる対象において疾患を引き起こし得る任意の他の病原体が挙げられる。

「病原体関連抗原」という用語は、本明細書で使用される場合、病原体中に見出すことができる任意の抗原性分子、構造、又は物質、好ましくは、病原体に特異的である分子、構造、又は物質（例えば、病原体特異的核酸、炭水化物、ペプチド、及び／又はタンパク質）を指す。したがって、病原体関連抗原は、好ましくは、病原体内に見出されるが、対象の体内には実質的に見出されないか、又は対象の体内よりも病原体内により高い生物学的関連性を有する構造である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の病原体関連抗原は、病原体の表面上に見出される炭水化物及び／又はペプチドである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の病原体関連抗原は、病原体の細胞への侵入に必要な炭水化物及び／又はペプチドである。

「感染」という用語は、本明細書で使用される場合、対象の体内での病原体の侵入及び繁殖を指す。

本発明の文脈において、多価抗原粒子とは対照的に一価／二価抗原粒子が区別される。各粒子は、単一の分子実体とみなされ、これは、共有結合的又は非共有結合的に接続された部分を含み得る。しかしながら、本発明によれば、各粒子は、特定の抗原に対して免疫原性活性を有する。したがって、一価／二価抗原粒子は、抗原への免疫応答を誘発することができる１つ又は２つの抗原構造のみを含むと理解され、一方、多価抗原粒子は、そのような抗原構造の３つ以上、４つ以上のコピーを含む。本発明の文脈において、時には「可溶性」抗原という用語は、多価抗原粒子の「複合体」抗原とは対照的な一価／二価抗原粒子についても使用される。ほとんどの場合、抗原構造は、抗体免疫応答を誘発するエピトープを含むか又はそれからなり、一方で、細胞媒介性免疫応答に基づいて産生される抗体の結合部位であることを理解されたい。換言すれば、本発明は、可溶性単一エピトープとしての免疫誘発エピトープの提示又は複合アレイにおける同一のエピトープの提示を区別する。

本発明は、抗原が、可溶性抗原として免疫細胞に提示されるか、又は多価抗原粒子として提示されるかに応じて、異なる免疫応答を誘導し得るという驚くべき発見に少なくとも部分的に基づいている。可溶性抗原及び複合多価抗原粒子の組み合わせは、免疫を増加させ、アジュバントの必要性を低減し、及び／又はアジュバントの効果を改善し、及び／又は必要な用量を低減することができる（例えば、図１を参照されたい）。更に、本明細書に記載の組み合わせは、保護ＩｇＭ抗体の産生を抑制することができる（図２～図８）。

これらの所見は、免疫応答が相対量の抗原形態Ｂ細胞によって調節され、それによって適応免疫応答の無制限の可能性を可能にするＢ細胞活性化の動的モデルを確立する。

したがって、本明細書に記載の手段及び方法は、免疫応答を誘導及び変更するための新規かつ多用途な方法を提供する。抗原粒子上に提示される抗原は、新たに出現する病原体、病原体変異及び／又は耐性機構に効率的に適合させることができる。抗原粒子の産生は、標準化することができ、減衰又は不活性化ウイルスワクチンなどの他の免疫応答誘導物質の生物学的変異を有しない。更に、本明細書に記載の抗原粒子の分布は、ｍＲＮＡワクチンなどの他の免疫応答誘導物質とは異なり、制御及び予測することができる。

したがって、本発明は、一価／二価抗原粒子及び多価抗原粒子の組み合わせを使用して、抗体産生を増強及び／又は維持することができるという驚くべき発見に少なくとも部分的に基づいている。

ある特定の実施形態では、本発明は、３つ以上の抗原構造が複数の同一の抗原構造を含む、本発明の使用のための組成物に関する。

したがって、好ましくは、特異的パラトープを有するある特定の抗体種の２つ以上の抗体分子が、本発明による多価抗原粒子に結合し得る。そのような多価抗原粒子は、抗原構造のうちの２つ以上が互いに共有結合的又は非共有結合的に架橋された構造を有し得る。したがって、好ましい実施形態では、多価抗原粒子は、同時に２つの抗体の多価抗原粒子への結合を可能にする、少なくとも２つの同一のエピトープを含む複合体を含む。好ましくは、多価抗原粒子の抗原部分に含まれる抗原構造のうちの２つ以上は、複数の同一の抗原構造を含む。したがって、好ましい実施形態では、多価抗原粒子は、同時に２つの抗体の多価抗原粒子への結合を可能にする、少なくとも２つ、少なくとも３つ又は少なくとも４つの同一のエピトープを含む複合体を含む。

本発明によるそのような粒子を含む組成物は、免疫応答を調節することができる（例えば、図１～図８を参照されたい）。

したがって、本発明は、本明細書に記載されるように、複数の連結した同一構造が標的抗原に対する免疫応答を調節することができるという驚くべき発見に少なくとも部分的に基づいている。

ある特定の実施形態では、本発明は、多価抗原粒子は、抗原部分に結合された担体部分を更に含み、及び／又は一価／二価抗原粒子は、抗原部分に結合された担体部分を更に含む、本発明の使用のための組成物に関する。

本明細書に開示される本発明の文脈における「担体部分」という用語は、好ましくは、本発明の粒子の抗原構造を提示するか、又はそれを含む物質又は構造に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、担体部分が、ポリペプチド、免疫ＣｐＧ島、リンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、破傷風トキソイド（ＴＴ）、コレラトキシンサブユニットＢ（ＣＴＢ）、細菌又は細菌ゴースト、リポソーム、キトソーム、ビロソーム、マイクロスフェア、樹状細胞、粒子、マイクロ粒子、ナノ粒子、又はビーズの群から選択される構造を含む、本発明の使用のための組成物に関する。

本発明のいくつかの実施形態では、多価抗原粒子は、任意選択的にリンカーを介して抗原部分に結合された担体部分を更に含み、担体、及び任意選択的にリンカーは、抗原構造の別のコピーを含まず、担体部分、及び任意選択的にリンカーは、標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘発することができない。本発明の別の代替又は追加の実施形態では、多価抗原粒子は、任意選択的にリンカーを介して抗原部分に結合された担体部分を更に含む。

「リンカー」という用語は、本明細書に記載される場合、本発明の化合物の２つの部分を互いに共有結合又は非共有結合で接続するために使用し得る任意の分子、ペプチド、又は構造を指す。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のリンカーは、本発明の文脈における所与の用途に好適な任意のサイズ及び長さを有し得るペプチドリンカーである。リンカーは、長さ又は１～１００アミノ酸、好ましくは２～５０アミノ酸を有し得る。リンカーは、２、３、４、５、６、又はそれよりも多くの反復における典型的な４ＧＳリンカーであり得る。

ある特定の実施形態では、本発明は、多価抗原粒子中の架橋は、ビス－マレイミド媒介架橋などの化学架橋であるか、又はビオチン－ストレプトアビジン媒介架橋などのタンパク質架橋である、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体関連抗原が、核酸、炭水化物、及びペプチドの群から選択される少なくとも１つの物質を含む、本発明の使用のための多価粒子又は本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、多価抗原粒子が以下の式Ａ－Ｌ－Ａの複合体を含み、式中、Ａが、標的抗原を含む部分であり、Ｌが、架橋結合のリンカーであり、好ましくはＬが、ビスマレイミドであり、最も好ましくは複合体が、以下の構造（Ｉ）のものであり、Ｒが、標的抗原を含む部分である、本発明の使用のための組成物に関する。

好ましくは、担体部分、及び任意選択的にリンカーのいずれも、標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘発することができない。

担体部分は、免疫系への抗原の提示を容易にし、粒子の安定性を改善することができる。

したがって、本発明は、抗原部分に連結された担体が多価抗原粒子の抗原性、薬理学的特性及び／又は薬物動態特性を改善することができ、したがって本明細書に記載の標的抗原に対する免疫応答の調節に影響を与えることができるという驚くべき発見に少なくとも部分的に基づいている。

ある特定の実施形態では、本発明は、多価抗原粒子が、タンパク質コンジュゲーションのための架橋反応基を有するリンカーを含む、本発明の使用のための組成物に関する。

「タンパク質コンジュゲーションのための架橋反応基」という用語は、本明細書で使用される場合、本明細書に記載の抗原粒子とタンパク質との間の結合を形成することを可能にする任意の化学基又は構造を指す。そのような架橋反応基及びその調製は、当業者に周知である（例えば、Ｂｒｉｎｋｌｅｙ，Ｍ．，１９９２，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３（１），２－１３、Ｋｌｕｇｅｒ，Ｒ．，＆Ａｌａｇｉｃ，Ａ，２００４，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３２．６（２００４）：４５１－４７２．、Ｓｔｅｐｈａｎｏｐｏｕｌｏｓ，Ｎ．；Ｆｒａｎｃｉｓ，Ｍ．Ｂ．，２０１１，Ｎａｔｕｒｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ．７（１２）：８７６－８８４を参照されたい）。

本発明者らは、本明細書に記載の抗原粒子（例えば多価抗原粒子）に連結し、対象において内因性タンパク質に結合するための架橋反応基を含むリンカーが、免疫応答を増強することができることを見出した（例えば、図８～図１２、実施例７、９、１０を参照されたい）。

ある特定の実施形態では、本発明は、多価抗原粒子が、安定なタンパク質コンジュゲーションのための架橋反応基を有するリンカーを含む、本発明の使用のための組成物に関する。

「安定なタンパク質コンジュゲーション」という用語は、本明細書で使用される場合、Ｓ－Ｓ結合ではない共有結合タンパク質コンジュゲーションを指す。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の安定なタンパク質コンジュゲーションは、加水分解安定性である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の安定なタンパク質コンジュゲーションは、不可逆的結合である。

本発明者らは、内因性タンパク質への安定した結合が、本明細書に記載の抗原粒子に対する免疫反応を増強することができることを見出した（実施例９）。

ある特定の実施形態では、本発明は、架橋反応基が、リジンアミノ酸残基、システイン残基、チロシン残基、トリプトファン残基、Ｎ末端及びＣ末端の群から選択される少なくとも１つとタンパク質に結合する、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、架橋反応基が、カルボキシル－アミン反応基、アミン反応基、スルフヒドリル反応基、アルデヒド反応基、及び光反応基から選択される基である、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、架橋反応基が、カルボジイミド、ＮＨＳエステル、イミドエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ヒドロキシメチルホスフィン、マレイミド、ハロアセチル、ヒドラジド、アルコキシアミン、ジアジリン、及びアリールアジドから選択される基である、本発明の使用のための組成物に関する。

したがって、本発明は、内因性タンパク質に結合することによる免疫応答の増強に少なくとも部分的に基づいている。

ある特定の実施形態では、本発明は、多価抗原粒子が、好ましくは、３ｎｍ～２０ｎｍの範囲内で互いに空間的に近接した抗原構造の少なくとも２つのコピーを含む、本発明の使用のための組成物に関する。

本発明の多価抗原粒子は、好ましくは、約１ｎｍ～約１０００ｎｍ、約１ｎｍ～約５００ｎｍ、約１ｎｍ～約１００ｎｍ、約１ｎｍ～約５０ｎｍ、約１ｎｍ～約２０ｎｍ、又は約３ｎｍ～約２０ｎｍの範囲から選択されるナノメートル範囲内で互いに空間的に近接した抗原構造の少なくとも２つのコピーを含む。

空間的近接性を測定するための方法は、当業者に既知である（例えば、Ｆ．Ｓｃｈｕｅｄｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０２１，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０２１，６０，７１６、Ｅｒｉｃｋｓｏｎ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．，２００８，Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ ａｎｄ ｎａｎｏｆｌｕｉｄｉｃｓ，４（１－２），３３－５２、Ｔｕｒｋｏｗｙｄ，Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，２０１６，Ａｎａｌ Ｂｉｏａｎａｌ Ｃｈｅｍ ４０８，６８８５－６９１１を参照されたい）。

本発明者らは、ある特定のサイズ範囲の多価粒子がある特定の免疫応答を誘発するのに特に効果的であることを見出した。

したがって、本発明は、本明細書に記載されるように、抗原粒子のサイズ及び／又は空間的近接性が標的抗原に対する免疫応答の調節に影響を与えることができるという驚くべき発見に少なくとも部分的に基づいている。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体関連抗原が、核酸、炭水化物、及びペプチドの群から選択される少なくとも１つの物質を含む、本発明の使用のための組成物に関する。

核酸、炭水化物、及び／又はペプチドは、病原体の抗原パターンをコピー又は模倣するために有用な構造である。更に、それらは、実質的な副作用なしに特定の免疫応答を誘発するように設計することができる。

したがって、本発明は、ある特定の抗原タイプが、本明細書に記載の標的抗原に対する免疫応答の調節に影響を与えることができるという驚くべき発見に少なくとも部分的に基づいている。

ある特定の実施形態では、本発明は、多価抗原粒子がアジュバントに連結され、好ましくは多価粒子がアジュバントに共有結合的に連結されている、本発明の使用のための組成物に関する。

「アジュバント」という用語は、本明細書で使用される場合、標的抗原を含まず、本明細書に記載の抗原粒子に対する免疫応答を増強することができる薬剤を指す。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のアジュバントは、油（例えば、パラフィン油、ピーナッツ油）、細菌産物、サポニン、サイトカイン（例えば、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－１２）、スクワレン、及びＩｇＧの群から選択される少なくとも１つのアジュバントを含み、好ましくは、アジュバントは遊離ＳＨ基を含む。

本発明者らは、本明細書に記載の抗原粒子をアジュバントに連結することにより、免疫応答、特に多価抗体によって誘導される免疫応答を増強することができることを見出した（図９Ｄ及び図９Ｅ、図１１、図１２）。このアジュバントへの連結は、実質的により多くの非連結アジュバントを用いて本明細書に記載の抗原粒子を製剤化する必要性を低減する。更に、アジュバントは、本明細書に記載の抗原粒子の安定性を増加させることができる。

したがって、本発明は、本明細書に記載の抗原粒子をアジュバントに連結することにより、誘発された免疫応答を増強することができるという発見に少なくとも部分的に基づいている。

ある特定の実施形態では、本発明は、アジュバントがＩｇＧである、本発明の使用のための組成物に関する。

「ＩｇＧ」という用語は、本明細書で使用される場合、免疫グロブリンＧクラスのポリペプチドからなるか、又はそれを含む分子を指す。

従来のアジュバントは、副作用と関連している（例えば、Ｐｅｔｒｏｖｓｋｙ，Ｎｉｋｏｌａｉ．Ｄｒｕｇ ｓａｆｅｔｙ ３８．１１（２０１５）：１０５９－１０７４を参照されたい）。本発明者らは、本明細書に記載の抗原粒子をＩｇＧと連結することにより、免疫応答を増強し、その後、従来のアジュバントを用いて本明細書に記載の抗原粒子を製剤化する必要性を低減するのに有用であることを見出した（図９Ｄ及び図９Ｅ、図１１、図１２）。

したがって、本発明は、本明細書に記載の抗原粒子をＩｇＧに連結することにより、誘発された免疫応答を増強することができるという発見に少なくとも部分的に基づいている。

ある特定の実施形態では、本発明は、治療及び／又は予防が、少なくとも２つの投与時点を含む、本発明の使用のための組成物に関する。

したがって、本発明の組成物の成分は、ある特定の免疫調節を達成するために異なる時点で投与することができ、又は強化された効果をブーストして達成するために繰り返し投与することができる（図１を参照されたい）。

したがって、本発明は、プライミング及び／又はブーストが、本発明の手段及び方法によって誘発される免疫応答の変化を調節するという驚くべき発見に少なくとも部分的に基づいている。

ある特定の実施形態では、本発明は、予防が、多価抗原粒子の前に一価／二価抗原粒子を投与することを含む、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、感染症の予防及び／又は治療する方法に関し、本方法は、１）一価／二価抗原粒子の投与によるプライミングするステップと、２）多価抗原粒子でブーストするステップと、を含み、一価／二価抗原粒子及び多価抗原粒子が同じ抗原を標的とする。

ある特定の実施形態における本発明の様々な実施形態の手段及び方法は、ある特定の所望の抗体応答の生成のための免疫化方法として見ることができる。この文脈において、本発明の方法の好ましい実施形態は、対象のプライミング／ブースト免疫スキームを含む。

抗原への免疫応答を「プライミングする」という用語は、単一の免疫原性組成物の投与によって得られる免疫応答よりも、同じ又は第２の組成物での後続の投与時に抗原へのより高いレベルの免疫応答を誘導する免疫原性組成物の対象への投与を指す。

抗原に対する免疫応答を「ブーストする」という用語は、プライミング免疫原性組成物の投与後に、第２のブースト免疫原性組成物を対象に投与することを指す。一実施形態では、免疫原性組成物のブースト投与は、プライミング用量の投与の約２～２７週間後、好ましくは１～１０週間後、より好ましくは１～５週間後、最も好ましくは約３週間後に行われる。

本発明のいくつかの実施形態では、プライミングのステップは、標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる抗原構造のうちの１つ以下を含む抗原部分で構成される一価／二価抗原粒子で実行されるが、ブーストするステップは、標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる抗原構造のうちの２つ以上を含む抗原部分で構成される多価抗原粒子の投与を含み、抗原構造のうちの２つ以上は、共有結合的又は非共有結合的に架橋している。本発明のそのようなプライミング／ブーストの実施形態では、プライミング及びブーストステップにおいて免疫応答を誘導するために使用される抗原構造は、同じ抗原構造である。

本発明のいくつかの実施形態では、ブーストするステップは、一価／二価抗原粒子及び多価抗原粒子の組成物を用いて行われてもよい。

したがって、本発明は、一価／二価抗原粒子でプライミングすると、多価抗原粒子に対する免疫応答が増加するという驚くべき発見に少なくとも部分的に基づいている。

ある特定の実施形態では、本発明は、治療及び／又は予防が、一価／二価抗原粒子のための少なくとも２つの投与時点と、多価抗原粒子のための少なくとも２つの投与時点と、を含む、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、抗体媒介性免疫応答がＩｇＭ媒介性免疫応答である、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、抗体媒介性免疫応答がＩｇＧ媒介性免疫応答である、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、抗体媒介性免疫応答がＩｇＧ媒介性免疫応答及びＩｇＭ媒介性免疫応答である、本発明の使用のための組成物に関する。

本発明者らは、本発明の組成物がＩｇＧ媒介性免疫応答及び／又はＩｇＭ媒介性免疫応答を選択的に誘発することができることを見出した（図２～図４、図７）。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体が、寄生虫、細菌、及びウイルスの群から選択される少なくとも１つの病原体である、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体が、Ａｂｉｏｔｒｏｐｈｉａ、Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ、Ａｃｉｄａｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｕｌｕｍ、Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ、Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ａｅｒｏｍｏｎａｓ、Ａｆｉｐｉａ、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ、Ａｌｌｏｉｏｃｏｃｃｕｓ ＡｌｔｅｒｏｍｏｎａｓＡｍｙｃｏｌａｔａ、Ａｍｙｃｏｌａｔｏｐｓｉｓ、Ａｎａｅｒｏｂｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ、Ａｎａｅｒｏｒｈａｂｄｕｓ、「Ａｎｇｕｉｌｌｉｎａ」、Ａｒａｃｈｎｉａ、Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ａｒｃｏｂａｃｔｅｒ、Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ、Ａｔｏｐｏｂｉｕｍ、Ａｕｒｅｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｂａｌｎｅａｔｒｉｘ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ、Ｂｅｒｇｅｙｅｌｌａ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｂｉｌｏｐｈｉｌａ、Ｂｒａｎｈａｍｅｌｌａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ、Ｂｒａｃｈｙｓｐｉｒａ、Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ、Ｂｕｔｔｉａｕｘｅｌｌａ、Ｂｕｔｙｒｉｖｉｂｒｉｏ、Ｃａｌｙｍｍａｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ、Ｃａｐｎｏｃｙｔｏｐｈａｇａ、Ｃａｒｄｉｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｃａｔｏｎｅｌｌａ、Ｃｅｄｅｃｅａ、Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ、Ｃｅｎｔｉｐｅｄａ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ、Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｃｈｙｓｅｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｃｈｒｙｓｅｏｍｏｎａｓ、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ、Ｃｏｌｌｉｎｓｅｌｌａ、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｃｏｘｉｅｌｌａ、Ｃｒｙｐｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｄｅｌｆｔｉａ、Ｄｅｒｍａｂａｃｔｅｒ、Ｄｅｒｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ、Ｄｅｓｕｌｆｏｍｏｎａｓ、Ｄｅｓｕｌｆｏｖｉｂｒｉｏ、Ｄｉａｌｉｓｔｅｒ、Ｄｉｃｈｅｌｏｂａｃｔｅｒ、Ｄｏｌｏｓｉｃｏｃｃｕｓ、Ｄｏｌｏｓｉｇｒａｎｕｌｕｍ、Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ、Ｅｇｇｅｒｔｈｅｌｌａ、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ、Ｅｉｋｅｎｅｌｌａ、Ｅｍｐｅｄｏｂａｃｔｅｒ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｅｒｗｉｎｉａ、Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｅｗｉｎｇｅｌｌａ、Ｅｘｉｇｕｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｆａｃｋｌａｍｉａ、Ｆｉｌｉｆａｃｔｏｒ、Ｆｌａｖｉｍｏｎａｓ、Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｆｌｅｘｉｓｐｉｒａ、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｇａｒｄｎｅｒｅｌｌａ、Ｇｅｍｅｌｌａ Ｇｌｏｂｉｃａｔｅｌｌａ、Ｇｏｒｄｏｎａ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｈａｆｎｉａ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ、Ｈｅｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｈｏｌｄｅｍａｎｉａ、Ｉｇｎａｖｉｇｒａｎｕｍ、Ｊｏｈｎｓｏｎｅｌｌａ、Ｋｉｎｇｅｌｌａ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｋｏｃｕｒｉａ、Ｋｏｓｅｒｅｌｌａ、Ｋｕｒｔｈｉａ、Ｋｙｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｌａｕｔｒｏｐｉａ、Ｌｅｃｌｅｒｃｉａ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ、Ｌｅｍｉｎｏｒｅｌｌａ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ、Ｌｅｐｔｏｔｒｉｃｈｉａ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ、Ｌｉｓｔｏｎｅｌｌａ、Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｍｉｔｓｕｏｋｅｌｌａ、Ｍｏｂｉｌｕｎｃｕｓ、Ｍｏｅｌｌｅｒｅｌｌａ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ、Ｍｏｒｇａｎｅｌｌａ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ、Ｍｙｒｏｉｄｅｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ、Ｎｏｃａｒｄｉａ、Ｎｏｃａｒｄｉｏｐｓｉｓ、Ｏｃｈｒｏｂａｃｔｒｕｍ、ＯｅｓｋｏｖｉａＯｌｉｇｅｌｌａ、Ｏｒｉｅｎｔｉａ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｐａｎｔｏｅａ、Ｐａｒａｃｈｌａｍｙｄｉａ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ、Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｐｈｏｔｏｒｈａｂｄｕｓ、Ｐｌｅｓｉｏｍｏｎａｓ Ｐｏｒｐｈｙｒｉｍｏｎａｓ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｐｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄｉａ、Ｐｓｅｕｄｏｒａｍｉｂａｃｔｅｒ、Ｐｓｙｃｈｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｒａｈｎｅｌｌａ、Ｒａｌｓｔｏｎｉａ、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ、Ｒｏｃｈａｌｉｍａｅａ、Ｒｏｓｅｏｍｏｎａｓ、Ｒｏｔｈｉａ、Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｓｅｌｅｎｏｍｏｎａｓ、Ｓｅｒｐｕｌｉｎａ、Ｓｅｒｒａｔｉａ、Ｓｈｅｗｅｎｅｌｌａ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｓｉｍｋａｎｉａ、Ｓｌａｃｋｉａ、Ｓｐｈｉｎｇｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ、Ｓｐｉｒｉｌｌｕｍ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ、Ｓｔｏｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ、Ｓｕｃｃｉｎｉｖｉｂｒｉｏ、Ｓｕｔｔｅｒｅｌｌａ、Ｓｕｔｔｏｎｅｌｌａ、Ｔａｔｕｍｅｌｌａ、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ、Ｔｒａｂｕｌｓｉｅｌｌａ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ、Ｔｒｏｐｈｅｒｙｍａ、Ｔｓａｋａｍｕｒｅｌｌａ、Ｔｕｒｉｃｅｌｌａ、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ、Ｖａｇｏｃｏｃｃｕｓ、Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ、Ｖｉｂｒｉｏ、Ｗｅｅｋｓｅｌｌａ、Ｗｏｌｉｎｅｌｌａ、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ、Ｘｅｎｏｒｈａｂｄｕｓ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ及びＹｏｋｅｎｅｌｌａからなる群から選択される属からの少なくとも１つの細菌である、本発明の使用のための組成物に関する。

特定の実施形態では、本発明は、病原体が、Ｂａｃｔｅｒｉａ Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｅｕｒｏｐｅｕｓ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｇｅｏｒｇｉａｅ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｇｅｒｅｎｃｓｅｒｉａｅ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｇｒａｅｖｅｎｉｔｚｉｉ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｉｓｒａｅｌｉｉ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｍｅｙｅｒｉ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｎａｅｓｌｕｎｄｉｉ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｎｅｕｉｉ ｎｅｕｉｉ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｎｅｕｉｉ ａｎｉｔｒａｔｕｓ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｏｄｏｎｔｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｒａｄｉｎｇａｅ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｔｕｒｉｃｅｎｓｉｓ、Ａｃｔｉｍｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓ、Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｒｅａｔｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｕｍｍｉｎｓｉｉ、Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｗｏｌｕｗｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｙｒｏｉｄｅｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ａｆｚｅｌｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ａｎｄｅｒｓｏｎｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｉｓｓｅｔｔｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｇａｒｉｎｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｊａｐｏｎｉｃａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｌｕｓｉｔａｎｉａｅ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｔａｎｕｋｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｔｕｒｄｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｖａｌａｉｓｉａｎａ Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｃａｕｃａｓｉｃａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｃｒｏｃｉｄｕｒａｅ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｒｅｃｕｒｒｅｎｔｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｄｕｔｔｏｎｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｇｒａｉｎｇｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｈｅｒｍｓｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｈｉｓｐａｎｉｃａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｌａｔｙｓｃｈｅｗｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｍａｚｚｏｔｔｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｐａｒｋｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｐｅｒｓｉｃａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｒｅｃｕｒｒｅｎｔｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｔｕｒｉｃａｔａｅ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｖｅｎｅｚｕｅｌｅｎｓｉ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｈｉｎｚｉｉ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｈｏｌｍｓｅｉｉ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｔｒｅｍａｔｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ａｂｓｏｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ａｒｇｅｎｔｉｎｅｎｓｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂａｒａｔｉｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋｉｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃａｄａｖｅｒｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃａｒｎｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌａｔｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｏｆｏｒｍｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｏｃｈｌｅａｒｉｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｏｃｌｅａｔｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｆａｌｌａｘ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｇｈｏｎｉｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｇｌｙｃｏｌｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｈａｓｔｉｆｏｒｍｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｉｎｄｏｌｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｉｎｎｏｃｕｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｉｒｒｅｇｕｌａｒｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｌｅｐｔｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｌｉｍｏｓｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｍａｌｅｎｏｍｉｎａｔｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｎｏｖｙｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｏｒｏｔｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐａｒａｐｕｔｒｉｆｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｉｌｉｆｏｒｍｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｕｔｒｅｆａｓｃｉｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｒａｍｏｓｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｅｐｔｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｏｒｄｅｌｉｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｐｈｅｎｏｉｄｅｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｐｏｒｏｇｅｎｅｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｕｂｔｅｒｍｉｎａｌｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｙｍｂｉｏｓｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｒｔｉｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｆｅｒｇｕｓｏｎｉｉ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｈｅｒｍａｎｉｉ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｖｕｌｎｅｒｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ａｖｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｃａｓｓｅｌｉｆｌａｖｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｃｅｃｏｒｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｄｉｓｐａｒ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｄｕｒａｎｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｈｉｒａｅ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｍａｌｏｄｏｒａｔｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｎｄｔｉｉ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｐｓｅｕｄｏａｖｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｒａｆｆｉｎｏｓｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｓｏｌｉｔａｒｉｕｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ａｅｇｙｐｔｉｕｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ａｐｈｒｏｐｈｉｌｕｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｐａｒａｐｈｒｏｐｈｉｌｕｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｐａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｓｅｇｎｉｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｄｕｃｒｅｙｉ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｒｎｉｔｈｏｌｙｔｉｃａ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｌａｎｔｉｃｏｌａ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｚａｅｎａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｔｅｒｒｉｇｅｎａ、Ｌｙｓｔｅｒｉａ ｉｖａｎｏｖｉｉ、Ｌｙｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｂｓｃｅｓｓｕｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｆｒｉｃａｎｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｌｖｅｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｓｉａｔｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｕｒｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｖｉｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｏｈｅｍｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｏｖｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒａｎｄｅｒｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｕｍａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃｅｌａｔｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃｈｅｌｏｎａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃｈｕｂｅｎｓｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃｏｎｆｌｕｅｎｔｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃｏｎｓｐｉｃｕｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃｏｏｋｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｏｒｔｕｉｔｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇａｄｉｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇａｓｔｒｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｅｎａｖｅｎｓｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｏｒｄｏｎａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｏｏｄｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｓｓｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｔｅｒｊｅｃｔｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｅｎｓｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｋａｎｓａｓｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｎｔｉｆｌａｖｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍａｌｍｏｅｎｓｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍａｒｉｎｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍｉｃｒｏｇｅｎｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍｉｃｒｏｔｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍｕｃｏｇｅｎｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｏａｕｒｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｏｎｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｅｒｅｇｒｉｎｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｈｌｅｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｃｒｏｆｕｌａｃｅｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｈｉｍｏｉｄｅｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｉｍｉａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｍｅｇｍａｔｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｚｕｌｇａｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｅｒｒａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｒｅｓｉｓｔａｂｉｌｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｒｉｐｌｅｘ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｒｉｖｉａｌｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｓｃｉａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｖａｃｃａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｗｏｌｉｎｓｋｙｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｘｅｎｏｐｉ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｂｕｃｃａｌｅ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｆａｕｃｉｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｌｉｐｏｐｈｉｌｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｏｒａｌｅ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｉｒｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｒｉｍａｔｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｓａｌｉｖａｒｉｕｍ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｓｐｅｒｍａｔｏｐｈｉｌｕｍ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ、
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｈｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｌｕｔｅｏｌａ．Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｅｎｄｏｃｉｎａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｏｎｔｅｉｌｉｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚｉｈａｂｉｔａｎｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｅｒｔｏｃｉｎｏｇｅｎａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｓｅｕｄａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ａｆｒｉｃａｅ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ａｋａｒｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ａｕｓｔｒａｌｉｓ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｃｏｎｏｒｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｆｅｌｉｓ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｈｏｎｅｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｊａｐｏｎｉｃａ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｍｏｎｇｏｌｏｔｉｍｏｎａｅ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｅ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｓｉｂｉｒｉｃａ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｓｌｏｖａｃａ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｔｙｐｈｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ ａｒｉｚｏｎａｅ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ ｂｏｎｇｏｒｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ ｄｉａｒｉｚｏｎａｅ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ ｈｏｕｔｅｎａｅ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ ｉｎｄｉｃａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ ｓａｌａｍａｅ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｂｏｙｄｉｉ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｄｙｓｅｎｔａｅｒｉａｅ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｆｌｅｘｎｅｒｉ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｓｏｎｎｅｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｉｃｕｌａｒｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｃａｐｉｔｉｓ ｃａｐｉｔｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｃ．ｕｒｅｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｃａｐｒａｅ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｃｏｈｎｉｉ ｃｏｈｎｉｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｃ．ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｑｕｏｒｕｍ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｈｏｍｉｎｉｓ ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｈ．ｎｏｖｏｂｉｏｓｅｐｔｉｃｉｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｈｙｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｇｄｕｎｅｎｓｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｐａｓｔｅｕｒｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓｃｈｌｅｉｆｅｒｉ ｓｃｈｌｅｉｆｅｒｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓ．ｃｏａｇｕｌａｎｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓｃｉｕｒｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓｉｍｕｌａｎｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｗａｒｎｅｒｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｘｙｌｏｓｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃａｎｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ ｅｑｕｉｓｉｍｉｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｅｑｕｉ ｅｑｕｉ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｅｑｕｉ ｚｏｏｅｐｉｄｅｍｉｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｉｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｏｒｃｉｎｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｎｇｉｎｏｓｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｏｎｓｔｅｌｌａｔｕｓ ｃｏｎｓｔｅｌｌａｔｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｏｎｓｔｅｌｌａｔｕｓ ｐｈａｒｙｎｇｉｄｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｉｔｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｏｒａｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｎｇｕｉｎｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｉｓｔａｔｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇｏｒｄｏｎｉｉ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐａｒａｓａｎｇｕｉｎｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｖｅｓｔｉｂｕｌａｒｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｉｃｅｔｉ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｒａｔｔｉ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｏｂｒｉｎｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｏｍｉｎｉｍｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｂｏｖｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｅｑｕｉｎｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｕｉｓ、Ｖｉｂｒｉｏ ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｖ、ｃａｒｃｈａｒｉａｅ、Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｃ． ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉｅｎｓｉｓ、Ｖｉｂｒｉｏ ｄａｍｓｅｌａ、Ｖｉｂｒｉｏ ｆｌｕｖｉａｌｉｓ、Ｖｉｂｒｉｏ ｆｕｒｎｉｓｓｉｉ、Ｖｉｂｒｉｏ ｈｏｌｌｉｓａｅ、Ｖｉｂｒｉｏ ｍｅｔｓｃｈｎｉｋｏｖｉｉ、Ｖｉｂｒｉｏ ｍｉｍｉｃｕｓ、Ｖｉｂｒｉｏ ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｖｉｂｒｉｏ ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｅｓｔｉｓ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ａｌｄｏｖａｅ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｂｅｒｃｏｖｉｅｒｉ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｆｒｅｄｅｒｉｋｓｅｎｉｉ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｋｒｉｓｔｅｎｓｅｎｉｉ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｍｏｌｌａｒｅｔｉｉ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、及び／又はＹｅｒｓｉｎｉａ ｒｏｈｄｅｉからなる群から選択される少なくとも１つの細菌である、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体がマラリア（ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）である、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体がＭ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓである、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体が、多耐性細菌（例えば、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）の群から選択される、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、感染症がウイルス感染症である、本発明の使用のための多価粒子又は本発明の使用のための組成物に関する。好ましくは、本実施形態では、病原体は、ウイルスである。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載のウイルス感染症は、ａｄｅｎｏｖｉｒｉｄａｅ、ａｎｅｌｌｏｖｉｒｉｄａｅ、ａｒｅｎａｖｉｒｉｄａｅ、ａｓｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ、ｂｕｎｙａｖｉｒｉｄａｅ、ｂｕｎｙａｖｉｒｕｓ、ｃａｌｉｃｉｖｉｒｉｄａｅ、ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ、ｆｉｌｏｖｉｒｉｄａｅ、ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ、ｈｅｐａｄｎａｖｉｒｉｄａｅ、ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｉｄａｅ、ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ、ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｉｄａｅ、ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ、ｐａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅ、ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｄａｅ、ｐｏｌｙｏｍａｖｉｒｉｄａｅ、ｐｏｘｖｉｒｉｄａｅ、ｒｅｏｖｉｒｉｄａｅ、ｒｅｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ、ｒｈａｂｄｏｖｉｒｉｄａｅ、ｒｈａｂｄｏｖｉｒｕｓ、及びｔｏｇａｖｉｒｉｄａｅの群から選択されるウイルスの感染症である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のウイルス感染症は、ＲＮＡウイルスの感染症である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のウイルス感染症は、Ａｍａｌｇａｖｉｒｉｄａｅ、Ｂｉｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｃｈｒｙｓｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｃｙｓｔｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｅｎｄｏｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｈｙｐｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｍｅｇａｂｉｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｐａｒｔｉｔｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｉｃｏｂｉｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｒｅｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｔｏｔｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｑｕａｄｒｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｂｏｔｙｂｉｒｎａｖｉｒｕｓ、Ｕｎａｓｓｉｇｎｅｄ ｄｓＲＮＡ ｖｉｒｕｓｅｓ、Ａｒｔｅｒｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ（とりわけ、コロナウイルス、ＳＡＲＳ－ＣｏＶを含む）、Ｍｅｓｏｎｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｒｏｎｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｄｉｃｉｓｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｉｆｌａｖｉｒｉｄａｅ、Ｍａｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｓｅｃｏｖｉｒｉｄａｅ、Ａｌｐｈａｆｌｅｘｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｂｅｔａｆｌｅｘｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｇａｍｍａｆｌｅｘｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｔｙｍｏｖｉｒｉｄａｅ、Ａｌｐｈａｔｅｔｒａｖｉｒｉｄａｅ、Ａｌｖｅｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ａｓｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｂａｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｂｅｎｙｖｉｒｉｄａｅ、Ｂｏｔｏｕｒｍｉａｖｉｒｉｄａｅ、Ｂｒｏｍｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｃａｌｉｃｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｃａｒｍｏｔｅｔｒａｖｉｒｉｄａｅ、Ｃｌｏｓｔｅｒｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｆｕｓａｒｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｈｅｐｅｖｉｒｉｄａｅ、Ｈｙｐｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｌｅｖｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｌｕｔｅｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｏｌｙｃｉｐｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｎａｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｎｏｄａｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｅｒｍｕｔｏｔｅｔｒａｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｏｔｙｖｉｒｉｄａｅ、Ｓａｒｔｈｒｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｓｔａｔｏｖｉｒｕｓ、Ｔｏｇａｖｉｒｉｄａｅ、Ｔｏｍｂｕｓｖｉｒｉｄａｅ、Ｖｉｒｇａｖｉｒｉｄａｅ、未分類属プラス鎖ｓｓＲＮＡウイルス、Ｑｉｎｖｉｒｉｄａｅ、Ａｓｐｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｃｈｕｖｉｒｉｄａｅ、Ｂｏｒｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｆｉｌｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｍｙｍｏｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｎｙａｍｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｎｅｕｍｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｒｈａｂｄｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｓｕｎｖｉｒｉｄａｅ、Ａｎｐｈｅｖｉｒｕｓ、Ａｒｌｉｖｉｒｕｓ、Ｃｈｅｎｇｔｉｖｉｒｕｓ、Ｃｒｕｓｔａｖｉｒｕｓ、Ｗａｓｔｒｉｖｉｒｕｓ、Ｙｕｅｖｉｒｉｄａｅ、Ａｒｅｎａｖｉｒｉｄａｅ、Ｃｒｕｌｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｆｅｒａｖｉｒｉｄａｅ、Ｆｉｍｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｈａｎｔａｖｉｒｉｄａｅ、Ｊｏｎｖｉｒｉｄａｅ、Ｎａｉｒｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｅｒｉｂｕｎｙａｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｈａｓｍａｖｉｒｉｄａｅ、Ｐｈｅｎｕｉｖｉｒｉｄａｅ、Ｔｏｓｐｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｔｉｌａｐｉｎｅｖｉｒｉｄａｅ、Ａｍｎｏｏｎｖｉｒｉｄａｅ、Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｓａｔｅｌｌｉｔｅウイルス（とりわけ、Ｓａｒｔｈｒｏｖｉｒｉｄａｅ、Ａｌｂｅｔｏｖｉｒｕｓ、Ａｕｍａｉｖｉｒｕｓ、Ｐａｐａｎｉｖｉｒｕｓ、Ｖｉｒｔｏｖｉｒｕｓ、慢性麻痺症ウイルスを含む）、Ｒｅｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｍｅｔａｖｉｒｉｄａｅ、及びＰｓｅｕｄｏｖｉｒｉｄａｅの群から選択されるＲＮＡウイルスの感染症である。

いくつかの実施形態では、アデノ随伴関連ウイルス、Ａｉｃｈｉウイルス、Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ ｂａｔリッサウイルス、ＢＫポリオーマウイルス、Ｂａｎｎａウイルス、Ｂａｒｍａｈ ｆｏｒｅｓｔウイルス、Ｂｕｎｙａｍｗｅｒａウイルス、Ｂｕｎｙａｖｉｒｕｓ Ｌａ Ｃｒｏｓｓｅ、Ｂｕｎｙａｖｉｒｕｓ ｓｎｏｗｓｈｏｅ ｈａｒｅ、Ｃｅｒｃｏｐｉｔｈｅｃｉｎｅヘルペスウイルス、Ｃｈａｎｄｉｐｕｒａウイルス、Ｃｈｉｋｕｎｇｕｎｙａウイルス、Ｃｏｓａｖｉｒｕｓ Ａ、牛痘ウイルス、コクサッキーウイルス、Ｃｒｉｍｅａｎ－Ｃｏｎｇｏ出血熱ウイルス、デング熱ウイルス、Ｄｈｏｒｉウイルス、Ｄｕｇｂｅウイルス、Ｄｕｖｅｎｈａｇｅウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、エボラウイルス、エコーウイルス、脳心筋炎ウイルス、エプスタインバーウイルス、Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｂａｔリッサウイルス、ＧＢ Ｃ型肝炎／Ｇ型肝炎ウイルス、Ｈａｎｔａａｎウイルス、Ｈｅｎｄｒａウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、デルタ型肝炎ウイルス、馬痘ウイルス、ヒトアデノウイルス、ヒトアストロウイルス、ヒトコロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ヒトエンテロウイルス６８、ヒトエンテロウイルス７０、ヒトヘルペスウイルス１、ヒトヘルペスウイルス２、ヒトヘルペスウイルス６、ヒトヘルペスウイルス７、ヒトヘルペスウイルス８、ヒト免疫不全ウイルス、ヒトパピローマウイルス１、ヒトパピローマウイルス２、ヒトパピローマウイルス１６、ヒトパピローマウイルス１８、ヒトパラインフルエンザ、ヒトパルボウイルスＢ１９、ヒト呼吸器合胞体ウイルス、ヒトライノウイルス、ヒトＳＡＲＳコロナウイルス、ヒトスプマウイルス、ヒトＴ－リンパ向性ウイルス、ヒトトロウイルス、インフルエンザＡウイルス、インフルエンザＢウイルス、インフルエンザＣウイルス、Ｉｓｆａｈａｎウイルス、ＪＣポリオーマウイルス、日本脳炎ウイルス、Ｊｕｎｉｎアレナウイルス、ＫＩポリオーマウイルス、Ｋｕｎｊｉｎウイルス、Ｌａｇｏｓ ｂａｔウイルス、Ｌａｋｅ Ｖｉｃｔｏｒｉａ ｍａｒｂｕｒｇｖｉｒｕｓ、Ｌａｎｇａｔウイルス、Ｌａｓｓａウイルス、Ｌｏｒｄｓｄａｌｅウイルス、跳躍病ウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、Ｍａｃｈｕｐｏウイルス、Ｍａｙａｒｏウイルス、ＭＥＲＳコロナウイルス、Ｍｅａｓｌｅｓウイルス、Ｍｅｎｇｏ脳心筋炎ウイルス、メルケル細胞ポリオーマウイルス、Ｍｏｋｏｌａウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、サル痘ウイルス、ムンプスウイルス、マーレーバレー脳炎ウイルス、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋウイルス、ニパウイルス、Ｎｏｒｗａｌｋウイルス、Ｏ’ｎｙｏｎｇ－ｎｙｏｎｇウイルス、伝染性膿疱性皮膚炎ウイルス、Ｏｒｏｐｏｕｃｈｅウイルス、Ｐｉｃｈｉｎｄｅウイルス、ポリオウイルス、Ｐｕｎｔａ ｔｏｒｏ ｐｈｌｅｂｏｖｉｒｕｓ、Ｐｕｕｍａｌａウイルス、Ｒａｂｉｅｓウイルス、リフトバレー熱ウイルス、Ｒｏｓａｖｉｒｕｓ Ａ、Ｒｏｓｓ ｒｉｖｅｒウイルス、ロタウイルスＡ、ロタウイルスＢ、ロタウイルスＣ、Ｒｕｂｅｌｌａウイルス、Ｓａｇｉｙａｍａウイルス、Ｓａｌｉｖｉｒｕｓ Ａ、スナバエ熱シシリアウイルス、Ｓａｐｐｏｒｏウイルス、ＳＡＲＳコロナウイルス ２、Ｓｅｍｌｉｋｉ ｆｏｒｅｓｔウイルス、Ｓｅｏｕｌウイルス、Ｓｉｍｉａｎ ｆｏａｍｙウイルス、シミアンウイルス５、Ｓｉｎｄｂｉｓウイルス、Ｓｏｕｔｈａｍｐｔｏｎウイルス、Ｓｔ．ｌｏｕｉｓ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓウイルス、Ｔｉｃｋ－ｂｏｒｎｅ ｐｏｗａｓｓａｎウイルス、Ｔｏｒｑｕｅ ｔｅｎｏウイルス、Ｔｏｓｃａｎａウイルス、Ｕｕｋｕｎｉｅｍｉウイルス、Ｖａｃｃｉｎｉａウイルス、Ｖａｒｉｃｅｌｌａ－ｚｏｓｔｅｒウイルス、Ｖａｒｉｏｌａウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、水胞性口炎ウイルス、西部ウマ脳炎ウイルス、ＷＵポリオーマウイルス、ウエストナイルウイルス、ヤバサル腫瘍ウイルス、ヤバ様疾患ウイルス、黄熱病ウイルス、及び／又はジカウイルスの群から選択されるウイルスが、本明細書に記載されている。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体がＨＨＶ－３である、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体がＨＩＶ－１である、本発明の使用のための組成物に関する。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載のウイルスは、本明細書に記載の少なくとも１つのウイルスのウイルスゲノム配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、９９．９％の配列同一性を有するバリアントである。

ある特定の実施形態では、本発明は、ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症である、本発明の使用のための多価粒子又は本発明の使用のための組成物に関する。好ましくは、本実施形態では、病原体は、コロナウイルスである。

本発明において、コロナウイルスは、特に、α－ＣｏＶ、β－ＣｏＶ、γ－ＣｏＶ、又はδ－ＣｏＶ属のものであり得る。より具体的には、コロナウイルスは、ヒトコロナウイルスＯＣ４３（ＨＣｏＶ－ＯＣ４３）、ヒトコロナウイルスＨＫＵ１（ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１）、ヒトコロナウイルス２２９Ｅ（ＨＣｏＶ－２２９Ｅ）、ヒトコロナウイルスＮＬ６３（ＨＣｏＶ－ＮＬ６３、ニューヘーブンコロナウイルス）、中東呼吸器症候群関連コロナウイルス（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ又は「新型コロナウイルス２０１２」）、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ又は「ＳＡＲＳ－ｃｌａｓｓｉｃ」）、及び重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２又は「新型コロナウイルス２０１９」）からなる群から選択され得る。

ある特定の実施形態では、本発明は、コロナウイルス感染症がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症である、本発明の使用のための多価粒子又は本発明の使用のための組成物に関する。好ましくは、本実施形態では、病原体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２バリアントである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２バリアントは、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．１．２０７、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．１．７、Ｃｌｕｓｔｅｒ ５、５０１．Ｖ２バリアント、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｐ．１、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．４２９／ＣＡＬ．２０Ｃ、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．４２７、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．５２６、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．５２５、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．１．３１７、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．１．３１８、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．３５１、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．６１７、Ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．６１７．２、及びＬｉｎｅａｇｅ Ｐ．３の群から選択されるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２バリアントである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２バリアントは、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｃ、２０Ｇ、２０Ｈ、２０Ｂ、２０Ｄ、２０Ｆ、２０Ｉ、及び２０Ｅ群から選択されるＮｅｘｔｓｔｒａｉｎクレードによって説明されるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２バリアントである。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２バリアントは、アルファ、デルタ、ベータ、ガンマ、エータ、イオタ、カッパ、ラムダの群から選択されるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２バリアントである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスは、Ｎ４４０Ｋ、Ｌ４５２Ｒ、Ｓ４７７Ｇ／Ｎ、Ｅ４８４Ｑ、Ｅ４８４Ｋ、Ｎ５０１Ｙ、Ｄ６１４Ｇ、Ｐ６８１Ｈ、Ｐ６８１Ｒ、及びＡ７０１Ｖの群から選択される少なくとも１つの変異を含むＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２バリアントである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２バリアントは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２バリアント又は本明細書に記載のバリアントに由来するハイブリッドである。

本発明は、例えば、曝露前に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する免疫応答を誘導する手段及び方法を提供する（図１）。したがって、本発明は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するワクチンを生成する新規の方法を提供する。提示された抗原（すなわち、実施例ではＲＢＤ）を別の病原体／ウイルス／バリアントの抗原に置き換えることによって、本明細書に提供される手段及び方法は、任意の他の病原体の予防に使用することができる。

本発明は、感染中に不十分な免疫応答をブーストするためにも使用することができ、したがって、予防よりもむしろ治療にも使用することができる。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体関連抗原が、コロナウイルススパイクタンパク質に由来するアミノ酸配列、例えば、受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）配列、好ましくは完全なＲＢＤ配列、その断片、又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤアミノ酸配列（配列番号１）のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の配列同一性を含む配列配列を含む、本発明の使用のための組成物に関する。

ある特定の実施形態では、本発明は、治療の方法に関し、本方法は、（ｉ）対象に、標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む一価／二価抗原粒子であって、標的抗原が病原体関連抗原である、一価／二価抗原粒子
を投与するステップと、（ｉｉ）対象に、標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含む多価抗原粒子であって、３つ以上の抗原構造が架橋され、標的抗原が病原体関連抗原である、多価抗原粒子を投与するステップと、を含む。

ある特定の実施形態では、本発明は、治療の方法に関し、本方法は、（ｉ）対象に、標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含む多価抗原粒子であって、３つ以上の抗原構造が架橋され、標的抗原が病原体関連抗原である、多価抗原粒子を投与するステップと、（ｉｉ）対象に、標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む抗原部分を含む一価／二価抗原粒子であって、標的抗原が病原体関連抗原である、一価／二価抗原粒子を投与するステップと、を含む。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体関連標的抗原に対する体液性免疫応答及び／又はＢ細胞媒介性免疫応答を誘発する及び／又は調節する方法に関し、本方法は、１つ以上のＢ細胞を、（ｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む抗原部分を含む一価／二価抗原粒子であって、標的抗原が病原体関連抗原である、一価／二価抗原粒子と、（ｉｉ）標的抗原関連抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含む多価抗原粒子であって、３つ以上の抗原構造が架橋され、標的抗原が病原体関連抗原である、多価抗原粒子と、を含む、組み合わせと接触させることを含む。

ある特定の実施形態では、本発明は、病原体関連抗原に結合する抗体を産生するための方法に関し、（１）抗体を産生することができる対象及び／又は細胞への、（ｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む抗原部分を含む一価／二価抗原粒子及び／又は二価抗原粒子であって、標的抗原が病原体関連抗原である、一価／二価抗原粒子及び／又は二価抗原粒子、並びに（ｉｉ）多価抗原粒子及び／又はその前駆体であって、多価抗原粒子が、標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含み、３つ以上の抗原構造が架橋され、標的抗原が病原体関連抗原であり、多価抗原粒子及び／又はその前駆体の投与のステップと、（２）抗体を産生することができる対象及び／又は細胞から抗体を単離するステップであって、抗体が標的抗原に結合する、単離するステップと、を含む。

「対象」という用語は、本明細書で使用される場合、霊長類（ヒト非ヒト霊長類、例えば、サル、及びチンパンジーなど）、非霊長類（ウシ、ブタ、ラクダ、ラマ、ウマ、ヤギ、ウサギ、ヒツジ、ハムスター、モルモット、ネコ、イヌ、ラット、マウス、ウマ、及びクジラなど）を含む哺乳動物、又はトリ（例えば、アヒル又はガチョウ）などの動物を指す。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の対象は、非ヒト動物である。

「抗体を産生することができる細胞」は、好ましくは、ｂ細胞、ハイブリドーマ細胞、骨髄腫細胞、及び／又は抗体を産生するように遺伝子改変された細胞である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体を産生することができる細胞は、細胞株の細胞である。

抗体の単離のための方法は、当業者に既知である（例えば、Ｈｕａｎｇ Ｊ，Ｄｏｒｉａ－Ｒｏｓｅ ＮＡ，ｅｔ ａｌ．，２０１３，Ｎａｔ Ｐｒｏｔｏｃ．Ｏｃｔ；８（１０）：１９０７－１５を参照されたい）。対象及び／又は細胞から抗体を単離するために、当業者に既知の任意の方法が、使用され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体を単離することは、物理化学分画、クラス特異的親和性、及び抗原特異的親和性の群から選択される少なくとも１つの方法を含む。

ある特定の実施形態では、本発明は、感染症の治療及び／又は予防での使用のためのポリヌクレオチドであって、（ｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む抗原部分を含む一価／二価抗原粒子であって、標的抗原が病原体関連抗原である、一価／二価抗原粒子と、（ｉｉ）多価抗原粒子及び／又はその前駆体であって、多価抗原粒子が、標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含み、３つ以上の抗原構造が架橋され、標的抗原が病原体関連抗原である、多価抗原粒子及び／又はその前駆体と、をコードするポリヌクレオチドに関する。

「ポリヌクレオチド」という用語は、本明細書で使用される場合、核酸配列を指す。核酸配列は、ＤＮＡ又はＲＮＡ配列であってもよく、好ましくは、核酸配列はＤＮＡ配列である。本発明のポリヌクレオチドは、好ましくは、単離されたポリヌクレオチド（すなわち、その天然のコンテキストから単離された）又は遺伝子改変形態のいずれかとして提供されるものである。本明細書で言及される単離されたポリヌクレオチドはまた、それらの天然細胞コンテキスト、すなわち異種ポリヌクレオチド以外の細胞コンテキストに存在するポリヌクレオチドを包含する。ポリヌクレオチドという用語は、一本鎖ポリヌクレオチド及び二本鎖ポリヌクレオチドを包含する。更に、グリコシル化若しくはメチル化ポリヌクレオチドなどの天然に存在する修飾ポリヌクレオチド、又はビオチン化ポリヌクレオチドなどの人工修飾ポリヌクレオチドを含む化学修飾ポリヌクレオチドも含まれる。

ある特定の実施形態では、本発明は、本発明の使用のためのポリヌクレオチドを含むベクターに関する。

「ベクター」という用語は、本明細書で使用される場合、別の核酸分子を移送又は輸送することができる核酸分子を指す。移送された核酸は、一般に、ベクター核酸分子に連結され、すなわち、ベクター核酸分子に挿入される。ベクターは、細胞における自律複製を指示する配列を含んでもよく、又は宿主細胞ＤＮＡへの組み込みを可能にするのに十分な配列を含んでもよい。有用なベクターとしては、例えば、プラスミド（例えば、ＤＮＡプラスミド又はＲＮＡプラスミド）、トランスポゾン、コスミド、細菌人工染色体、及びウイルスベクターが挙げられる。

本明細書に記載のポリヌクレオチド及び／又はベクターは、本明細書に記載の抗原粒子及び／又はその部分を産生するために使用され得る。

「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」という冠詞は、冠詞の文法的目的語の１つ又は２つ以上（すなわち、少なくとも１つ又は１つ以上）を指すように本明細書で使用される。

「又は」は、代替物のいずれか一方、両方、又はそれらの任意の組み合わせを意味すると理解されるべきである。「及び／又は」は、代替物のいずれか一方、又は両方を意味すると理解されるべきである。

本明細書全体にわたって、文脈上他に要求されない限り、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、及び「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という語句は、述べられたステップ若しくは要素又はステップ若しくは要素の群を包含するが、任意の他のステップ若しくは要素又はステップ若しくは要素の群を除外しないことを暗に示すことが理解されるであろう。

「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という用語は、同義的に使用される。「好ましくは（ｐｒｅｆｅｒａｂｌｙ）」は、他の選択肢を除外しない一連の選択肢のうちの１つの選択肢を意味する。「例えば（ｅ．ｇ．）」は、言及された例に限定されない１つの例を意味する。「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」とは、「からなる」という語句に続くものを含み、これらに限定されることを意味する。

「約（ａｂｏｕｔ）」又は「およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」という用語は、本明細書で使用される場合、所与の値又は範囲の「２０％以内」、より好ましくは「１０％以内」、及び更により好ましくは「５％以内」を指す。

本明細書全体を通して、「一実施形態」、「実施形態」、「特定の実施形態」、「関連する実施形態」、「ある特定の実施形態」、「追加の実施形態」、「特定の実施形態」、又は「更なる実施形態」、又はそれらの組み合わせへの言及は、実施形態に関連して説明する特定の特徴、構造、又は特性が、本発明の少なくとも１つの実施形態に含まれることを意味する。それ故に、本明細書全体を通して、様々な場所での前述のフレーズ又は出現は、必ずしも全てが同じ実施形態に言及しているわけではない。更に、特定の特徴、構造、又は特性は、１つ以上の実施形態では任意の好適な方法で組み合わされ得る。また、一実施形態における特徴の肯定的な列挙は、特定の実施形態における特徴を除外するための基礎として機能することが理解される。

別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が関連する当業者によって通常理解されているものと同じ意味を有する。矛盾する場合には、本明細書が、定義を含めて優先される。加えて、材料、方法、及び実施例は、単に例示であり、限定することを意図するものではない。

別段に指定されない限り、本明細書に記載の一般的方法及び技術は、当該技術分野で周知の従来の方法に従って行われ、また本明細書全体を通して引用及び議論される様々な一般的及びより具体的な参考文献に記載されるように行われ得る。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，２ｄ ｅｄ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９８９）及びＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ（１９９２）、及びＨａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９９０）を参照されたい。

本発明の態様は、図面及び前述の説明において詳細に説明及び記載されるが、このような説明及び記載は、説明的又は例示的であり、限定的ではないとみなされるものである。当業者には、変更及び修正は、以下の特許請求の範囲の範囲及び趣旨内で行われ得ることを理解されよう。特に、本発明は、上記及び以下で説明した異なる実施形態からの特徴の任意の組み合わせで更なる実施形態を網羅する。

実施例１：免疫化スキーム
ウイルス由来ペプチド（Ｐｅｐｔｉｄｅｓ＆Ｅｌｅｐｈａｎｔｓ，Ｂｅｒｌｉｎ）（配列番号２、配列番号３）を、純水又は１％のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中のそれらの水溶性に従って溶解した。ウイルス由来ペプチド（配列番号２、配列番号３）を、それぞれ、ビオチン又はＫＬＨに結合させた。１ｍｇの量を購入し、１ｍｌの体積に溶解した。１０～５０μｇのＫＬＨ結合ペプチドを、腹腔内注射を介したマウスの免疫化に使用した。

ワクチン設計に関する本発明の免疫概念の影響を、ＣＯＶＩＤ－１９を引き起こすＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２コロナウイルスに由来する病原体特異的抗原を使用して試験した。感染中、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２コロナウイルスは、受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）を介して、宿主細胞表面上のアンジオテンシン変換酵素２（ＡＣＥ２）に結合する。したがって、ＲＢＤ／ＡＣＥ２相互作用を遮断する抗体応答を誘発することが、コロナウイルス感染症を予防するための鍵であると考えられる。したがって、本発明者らは、免疫化中の免疫応答における抗原形態の役割にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２由来のＲＢＤを使用した。

複合体ＲＢＤ（ｃＲＢＤ）による免疫化（ストレプトアビジン及びビオチン化ＲＢＤとの錯化には、４：１の割合を使用した。１，２－ＰＢＭを有する１，２－フェニレン－ビス－マレイミドとの錯化には１００μｇのＲＢＤ当たり最低２０μｇ）は、可溶性ＲＢＤ（ｓＲＢＤ）と比較して、より強いＩｇＧ免疫応答を誘導することが見出された。ＲＢＤの産生のために、ＲＢＤのヘキサヒスチジンタグバージョンをコードする発現ベクターをＨＥＫ２９３－６Ｅ細胞に一過性にトランスフェクトした（Ａｍａｎａｔ，Ｆ．，ｅｔ ａｌ．，２０２０，Ｎａｔｕｒｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２６（７），１０３３－１０３６）。可溶性ＲＢＤを、ニッケル系固定化金属親和性クロマトグラフィー（ＴａＫａＲａ）によってトランスフェクションの５日後に上清から精製した。しかしながら、抗体濃度は、インビトロ感染実験を使用したウイルス中和を可能にするのに十分ではなかった（図１～図８を参照されたい）。したがって、免疫化前にｓＲＢＤでマウスを前処置することが免疫応答をブーストするかどうかを試験した。実際に、免疫化の２週間前に可溶性ＲＢＤでマウスを前処置すると、免疫応答が大幅に増強した（図１）。重要なことに、前処置されたマウスの血清は、インビトロでＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を予防するための非常に高い能力を示した。

更に、免疫化カクテルの組成物中のｓＲＢＤ対ｃＲＢＤの異なる比率は、免疫化後の免疫応答の精密な制御を可能にする免疫グロブリンアイソタイプの異なる比率（すなわちＩｇＧ対ＩｇＭ）をもたらすことが見出された（図２～図８を参照されたい）。

実施例２ 天然ＲＢＤ又は複合体ＲＢＤの複数回注射後の抗体応答
感染中、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２コロナウイルスは、受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）を介して、宿主細胞表面上のアンジオテンシン変換酵素２（ＡＣＥ２）に結合し、この結合はウイルス感染症のための重要なステップであるように思われた。したがって、ＲＢＤ／ＡＣＥ２相互作用を遮断する抗体応答を誘発することが、コロナウイルス感染症を予防するための鍵であると考えられる。したがって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２由来の組換えＲＢＤを生成し、免疫化中の免疫応答における抗原形態の役割を評価した。

天然のＲＢＤ（ｎＲＢＤ）が非還元条件下で二量体を形成し、ビオチン化後にＲＢＤのより高い分子複合体（ｃＲＢＤ）が形成され得ることを見出した（図２Ａ）。０日目（一次免疫化）及び２１日目（二次免疫化又はブースト）でｎＲＢＤを注射することによる典型的な免疫化は、信頼性の高い抗体応答を誘導することができなかったが、ｃＲＢＤは、二次免疫化から１週間後の２８日目で検出可能な抗体応答を誘導することができた（図２Ｂ及びＣ）。興味深いことに、２週間にわたるｎＲＢＤの６回の反復注射もまた、検出可能な免疫応答を誘導することができた（図２Ｄ）。

要約すると、これらのデータは、多価複合体ＲＢＤによる免疫化又はｎＲＢＤの複数回の注射が、検出可能なＲＢＤ特異的抗体応答が誘導することを示唆している。

実施例３ ｃＲＢＤによる反復ｎＲＢＤ処置は、強力な抗体応答をもたらす。
上記の抗体応答は、免疫保護を確実にするために増加されるべきであるため、ｃＲＢＤとｎＲＢＤの６回の反復注射を組み合わせることが免疫応答を高める可能性があるかどうかを試験した。したがって、ｃＲＢＤの免疫化前に、ｎＲＢＤを用いてマウスを６回前処置した（図３Ａ）。

ＷＴマウスは、天然ＲＢＤのいずれかの反復注射が施された（１４日以内に、アジュバントの非存在下で、各々、５０μｇの６回の腹腔内投与；＋ＰＴ）が、対照動物は、ＰＢＳのみで前処置した（－ＰＴ）。その後、全ての動物を、ＣｐＧ－ＯＤＮ ＃１８２６の存在下で、ストレプトアビジンと複合体化した天然ＲＢＤ（ｃＲＢＤ）５０μｇを用いて腹腔内で免疫化し、３週間後にブーストした。

実際に、免疫化の２週間前にｎＲＢＤでマウスを前処置すると、免疫応答が大幅に増強した（図３Ｂ）。

ＲＢＤ特異的ＩｇＭ及びＩｇＧを、両方の群でＥＬＩＳＡによって測定し、ＣＩマウスで測定した力価と比較した。ｃＲＢＤによる免疫化の前に、天然ＲＢＤに繰り返し曝露したマウスは、ｃＲＢＤの最初の適用後に既に検出することができるＲＢＤに対する堅牢な抗体応答をマウントする。

前処置なしのｃＲＢＤ（ｗｏ ＰＴ）と比較して、前処置により、ｃＲＢＤ免疫化後の７日目での抗ＲＢＤ ＩｇＭの濃度が最大４０倍高くなり、このＩｇＭ応答は、二次免疫化から１週間後の２８日目で更に増加した（図３Ｂ）。１４日目及び２８日目における抗ＲＢＤ ＩｇＧの高い力価によって測定されるように、ｎＲＢＤ前処置をｃＲＢＤ免疫化と組み合わせた場合、抗ＲＢＤ ＩｇＧも増加した（図３Ｂ）。

ＷＴマウスは、天然ＲＢＤのいずれかの反復注射が行われた（１４日以内に、アジュバントの非存在下で、各々、５０μｇの６回の腹腔内投与；＋ＰＴ）が、対照動物は、ＰＢＳのみで前処置した（－ＰＴ）。その後、動物を、ＣｐＧ－ＯＤＮ ＃１８２６の存在下で、ストレプトアビジンと複合体化した天然ＲＢＤ（ｃＲＢＤ、０日目）５０μｇを用いて腹腔内で免疫化し、３週間及び５週間後にブーストした。マウスの第３の群は、ＲＢＤで前処置したが、５週間後にｃＲＢＤを用いた一次免疫化を施した（図４Ａ）。

ＲＢＤ特異的ＩｇＭ及びＩｇＧを、ＥＬＩＳＡ：
１０μｇ／ｍｌの濃度の５０μｌ／ウェルのＲＢＤで一晩コーティングした９６ウェルのＭａｘｉｓｏｒｐ ＥＬＩＳＡプレート（Ｎｕｎｃ）によって判定した。

２００μｌのＥＬＩＳＡ洗浄緩衝液（ＰＢＳ ０，１％のＴｗｅｅｎ－２０）での３つの洗浄ステップの後、非特異的結合部位を、１００μｌ／ウェルのＥＬＩＳＡ遮断緩衝液（ＰＢＳ １％のＢＳＡ）を用いて、３７℃で１時間遮断した。２００μｌ／ウェルのＥＬＩＳＡ洗浄緩衝液での３つの追加の洗浄ステップの後、１００μｌのＥＬＩＳＡ遮断緩衝液を、各ウェルに添加した。１５０μｌの予め希釈した血清を、プレートの第１の列に二重に塗布した。５０μｌを第１の列から第２の列に、更に第８の列まで移すことによって、１：３の比率での連続希釈液を、調製した。１０μｇ／ｍｌの濃度で、抗マウスＩｇＭ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ、１０２０－０１）又はＩｇＧ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ、１０３０－０１）のいずれかでコーティングし、マウスＩｇＭ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ、０１０１－０１）又はＩｇＧ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ、０１０７－０１）で捕捉した重複カラムは、標準としての役割を果たした。遮断緩衝液のみを含む２つのウェルは、ブランクとしての役割を果たした。捕捉のために、プレートを、３７℃で更に２時間インキュベートした。非結合抗体を、２００μｌ／ウェルのＥＬＩＳＡ洗浄緩衝液を用いて３回洗浄することによって除去し、５０μｌ／ウェルの二次ヤギａ－マウスＩｇＭ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ １０２０－０４、ＥＬＩＳＡ遮断緩衝液中で１：１，０００希釈）又はアルカリホスファターゼ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ １０３０－０４、ＥＬＩＳＡ遮断緩衝液中で１：２，０００希釈）溶液に結合させたＩｇＧ抗体を、加えて、３７℃で１時間インキュベートした。その後、プレートを、ＥＬＩＳＡ洗浄緩衝液を用いて再度３回洗浄して、過剰な抗体を除去した。ジエタノールアミン緩衝液中の４－ニトロフェニルリン酸塩（ｐＮＰＰ，Ｇｅｎｎａｘｏｎ）を含有する基質溶液を、各ウェルに添加した。ＯＤを、Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ ＦＣ ＥＬＩＳＡプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して４０５ｎｍで測定し、抗体濃度を、機械で提供されたＳｋａｎＩｔソフトウェアを使用して決定した。

一次免疫応答が５週間遅延した場合でも、効率的な抗体応答のために天然のＲＢＤプライムで前処置する。

興味深いことに、ｎＲＢＤによる前処置の効果は、前処置後の３５日目でｃＲＢＤによる免疫化が、免疫化の０日目で誘導されたものと同様の堅牢な抗体応答を誘導したため、長期間持続すると思われる（図４）。

これらのデータは、ｎＲＢＤによる前処置が、ｃＲＢＤによって誘導される免疫応答を強く増強することを示し、反復ｎＲＢＤの処置が、効率的なＲＢＤ特異的免疫応答のために免疫系をプライミングし得ることを示唆している。

実施例４ 高い抗体価は、インビトロウイルス中和には必要である。
併用処置によって誘導された抗体の量がウイルス中和に十分であったかどうかを試験するために、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ ２のスパイクタンパク質を発現する偽ウイルス調製物を使用してインビトロ中和アッセイを行った（方法は、Ｈｏｆｆｍａｎｎ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，２０２１，Ｃｅｌｌ，１８４（９），２３８４－２３９３に記載されている）。

データは、前処置したマウスの血清が、インビトロでＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を予防するための明白な能力を示したことを示す（図５Ｃ）。更に、データはまた、前処置することなくｃＲＢＤ注射によって誘導された弱い免疫応答がウイルス中和に十分ではなかったことも示す（図５）。

更に、免疫化カクテルの組成物中のｓＲＢＤ対ｃＲＢＤの異なる比率は、免疫化後の免疫応答の精密な制御を可能にする免疫グロブリンアイソタイプの異なる比率（すなわちＩｇＧ対ＩｇＭ）をもたらすことを見出した。

したがって、ｎＲＢＤ処置をｃＲＢＤ免疫と組み合わせることは、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ ２感染症を中和するための堅牢な抗体応答を誘導する。

実施例５ ＩｇＭ ＢＣＲ発現は、抗体応答を加速する。
ｎＲＢＤ前処置及びその後のｃＲＢＤ免疫化の組み合わせプロトコルを使用して、野生型マウスと並行してＩｇＤ欠損マウスを免疫化した。ＷＴ及びＩｇＤ－ＫＯマウスを、天然ＲＢＤに繰り返し曝露した（１４日以内に、アジュバントの非存在下で、各々、５０μｇの腹腔内投与；＋ＰＴ）。その後、全ての動物を、ＣｐＧ－ＯＤＮ ＃１８２６の存在下で、ストレプトアビジンと複合体化した天然ＲＢＤ（ｃＲＢＤ）５０μｇを用いて腹腔内で免疫化し、３週間後にブーストした。血液を、示される時点で免疫化されたマウスから収集した。ＲＢＤ特異的ＩｇＭ及びＩｇＧを、ＥＬＩＳＡによって両方の群において測定した。

提案されているＩｇＤの役割と一致して、一次（７日目）及び二次（２８日目）ＩｇＭ免疫応答は、野生型対照と比較して、ＩｇＤ欠損マウスにおいて非常に増加した（図６）。対照的に、二次（２８日目）ＩｇＧ抗体応答は、ＩｇＤ欠損マウスにおいて減少した（図６）。これは、ＩｇＤ発現が低下又は不在であるＢ細胞集団が、ｃＲＢＤによる免疫化後により速い免疫応答を誘発し得ることを示す。これは、ＩｇＤ高値ステージに達していない新しく産生されたＢ細胞の重要な産生を有する個体が、より迅速な一次応答のためにウイルス感染症から十分に保護されていることを示唆している。

Ｂ細胞の応答性は、抗体応答の強度及びアイソタイプを決定する。新しく生成されたＢ細胞は、ＩｇＤよりもはるかに多くのＩｇＭを有し、加齢とともに低下するリンパ球産生の過程で生成される。生存しているＣＯＶＩＤ－１９における高齢患者と若年患者の違いは、高齢患者の弱い一次免疫応答に関連し得る。

実施例６ 化学架橋によって生成されたＲＢＤ複合体による堅牢な抗体応答
上記の実験は、ＲＢＤ複合体が免疫応答を誘発するために重要であり、天然のＲＢＤが免疫応答の効率的なプライミングに必要であることを示唆している。しかしながら、ＲＢＤをビオチン化することによる免疫複合体の生成及びその後の複合体形成は、ワクチンの大規模な生成のために実用的である可能性は低い。したがって、化学架橋が免疫原性ｃＲＢＤを生成することができるかどうかを試験した。この目的を達成するために、典型的にはスルフヒドリル（ＳＨ）基を介した不可逆的架橋のために使用される化合物、１，２－フェニレン－ビス－マレイミド（以下、ビスマレと称する）を使用した。複合体対天然ＲＢＤの異なる比率を生成するために、異なる濃度及びインキュベーション時間を試験した（図７Ａ）。

ＷＴマウスを、ＣｐＧ－ＯＤＮ ＃１８２６の存在下で、５０μｇのｃＲＢＤ＊ＭＭで腹腔内で免疫化した。同じ化合物を用いて３週間及び５週間後に、免疫をブーストした（図７Ｂ）。

透析後、同様の量の化学的に架橋されたＲＢＤを０日目及び２１日目の野生型マウスに注射することによって免疫実験を行った。実験は、二次免疫の１週間後の２８日目で中程度のＩｇＭ量が検出されたが、この時点でＩｇＧが強く増加したことを示している（図７Ｃ）。依然として単量体ＲＢＤ分子を含有するｃＲＢＤ＊ＭＭで免疫化したマウスは、低いＲＢＤ特異的ＩｇＭ濃度で堅牢な抗体応答をマウントする。これらのデータは、化学的架橋が、抗原特異的免疫応答を誘導するための非常に高い能力を有するｎＲＢＤ及びｃＲＢＤの混合物を産生することを示す。

実施例７ 化学的に架橋されたＲＢＤによって誘発された抗体は、高い中和能力を有する
組換えＲＢＤは、典型的なワクチン接種において一次及び二次免疫化のために容易に生成及び使用され得るため、ＲＢＤの化学架橋は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２ワクチンの生成のための実用的な方法を提供し得る。したがって、得られた抗体がウイルス感染症を予防できるかどうかを試験した（方法は、Ｈｏｆｆｍａｎｎ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，２０２１，Ｃｅｌｌ，１８４（９），２３８４－２３９３に記載されている）。結果は、化学的に架橋されたＲＢＤで免疫化されたマウスが、疑似ウイルス調製物を使用する中和アッセイにおいて高い能力を有することを示している（図８）。

これらのデータは、ＲＢＤの化学的架橋により、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２に対する効率的なワクチンを簡単に設計できることが示唆している。

実施例８ 活性化抗原は、免疫応答をブーストするＩｇＧ複合体を形成する
ビスマレとの化学架橋が、ＳＤＳ ｐａｇｅ上のクマシー染色における単量体ＲＢＤの挙動をわずかに変化したことに気づいた（図７Ａ）。ＲＢＤの配列を分析し、分子内ジスルフィド結合に関与していない単一のＳＨ基を特定した。ＲＢＤ又は他のタンパク質のビスマレ処理がビスマレの飽和結合をもたらし得、追加のタンパク質がビスマレ分子によって架橋され得ないようにすることを提案した（図９Ｂ、中央）。しかしながら、ビスマレ処理は、遊離マレイミド基が依然として利用可能である、ビスマレによって結合された単量体ＲＢＤをもたらすことが可能である（図９Ｂ、下）。

ＲＢＤ＊は、１００μｇのＲＢＤ当たり２０μｇのビスマレと複合体化したが、ＲＢＤ＊＊は、１００μｇのＲＢＤ当たり１００μｇのビスマレとの複合体化を示す（図９Ｃ）。

５０μｇの非複合型天然ＲＢＤ（ｎＲＢＤ、ｎ＝３）、１０μｇのビスマレと複合した５０μｇのＲＢＤ（ＲＢＤ＊、ｎ＝３）、又は１０μｇのビスマレと複合した５０μｇのＲＢＤを用いて、２５μｇのポリクローナルマウスＩｇＧ（ＲＢＤ＊ＩｇＧ）の存在下で、ＷＴ Ｃ５７ＢＬ６／Ｊマウスにおいて免疫化を行った。５０μｇのＣｐＧ－ＯＤＮ ＃１８２６を、全ての条件でアジュバントとして使用した。ＩｇＭ又はＩｇＡアイソタイプを、ＲＢＤ＊ＩｇＭ及びＲＢＤ＊ＩｇＡによる免疫化のためにＩｇＧの代わりに使用した。マウスを、一次免疫化の２１日後に同一の免疫化混合物でブーストした。分析のため、２８日目に血清を採取した。（図９Ｄ）。

ＷＴマウスを、５０μｇの非複合型天然ＲＢＤ＋ＣｐＧ－ＯＤＮ（ｎＲＢＤ、ｎ＝３）、１０μｇのビスマレ＋ＣｐＧ－ＯＤＮと複合した５０μｇのＲＢＤ（ＲＢＤ＊、ｎ＝３）、又は１０μｇのビスマレと複合した５０μｇのＲＢＤで、２５μｇのマウスＩｇＧの存在下であるが、ＣｐＧ－ＯＤＮが存在しない状態で免疫化した（ＲＢＤ＊ＩｇＧ、ｎ＝２）。

これにより、インビトロ又はインビボで他のタンパク質と生体接合を行うことができる活性化されたＲＢＤがもたらされる。重要なことに、ビスマレの量の増加は、単量体ＲＢＤの減少をもたらし、より多くのビスマレがより多くのタンパク質複合体をもたらすことを示唆している（図９Ｃ）。ヘテロ複合体を形成する可能性を試験すると同時に、無作為に形成された複合体における免疫グロブリンの役割を調査するために、架橋反応にＩｇＭ、ＩｇＡ及びＩｇＧを含めた。

興味深いことに、結果は、ＩｇＭ及びＩｇＡが免疫応答をブーストすることに失敗したが、ＲＢＤ及びＩｇＧの架橋は、ＲＢＤ特異的免疫応答の劇的な増加をもたらしたことを示した（図９Ｄ）。重要なことに、ビスマレ媒介性架橋を終了した後にＩｇＧを添加しても、ビスマレ媒介性架橋がＩｇＧ媒介性増強のために重要であることを示唆する免疫応答はブーストされなかった。

ＩｇＧによって観察された増強により、我々は、ＩｇＧがミョウバン又はＣｐＧなどの従来のアジュバントを置き換えるアジュバントとして機能し得るかどうかを試験することにした。この目的のために、我々は、アジュバントとしてのＣｐＧ又はＩｇＧの存在下で注射された複合体ＲＢＤによって生成された免疫応答を比較した。結果は、免疫複合体を含有するＩｇＧが、ＴＬＲを活性化するＣｐＧ又はミョウバンなどの従来のアジュバントの不在下で堅牢な抗体応答を誘導することができることを示している。結論として、データは、ＩｇＧと特定の抗原とをインビトロで架橋することによって、又はインビトロで２つの反応基を含有する二官能性架橋剤でインキュベーションした後に抗原を注射することによって、免疫複合体を含有するＩｇＧが生成されることを示唆している。そのような活性化抗原は、有効なワクチンの開発及び生成のための単純かつ効率的な方法を表す。

実施例９
ビスマレイミド架橋免疫複合体をインビトロでシステインで処理すると、依然として利用可能な反応性マレイミド基がクエンチされ、抗原活性化が回復し、それによって抗体産生が低減する（図１０Ｄ）。

１００μｇの活性化ＲＢＤを、少なくとも１μｌの新たに調製した２ＭのＬ－システイン（Ｓｉｇｍａ－Ｌ－システインＢｉｏＵｌｔｒａ、≧９８．５％ ３００８９－２５Ｇ）溶液中でクエンチし、室温で一晩インキュベートした。翌日、結合していないシステイン及びマレイミドを除去するために、磁気撹拌棒を用いて一定の撹拌下、４℃で透析カセットにより試料を再緩衝した（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ（商標）１０Ｋ ＭＷＣＯ ６６３８１）。１×ＰＢＳを、一晩透析後に交換し、試料を、磁気撹拌棒を用いて一定の撹拌下、４℃で更に４～６時間透析した。

データは、マレイミド（ＲＢＤ＊＊）の増加が抗体応答の増加をもたらし、マレイミド処理抗原をシステイン（ＲＢＤ＊＊Ｃ）でクエンチすると、抗体応答が劇的に低下することを示している。これは、マレイミド処理が、インビボで複合体を生成することができる活性化抗原の生成をもたらし、この能力が免疫応答にとって重要であることを示唆している。

したがって、抗原の活性化は、自己抗原上のＳＨ基と反応性にすることによって、免疫応答を増幅する。抗原活性化に総ＩｇＧを含めることは、免疫複合体を模倣するタンパク質複合体の生成をもたらし、それによって効率的な抗体応答を誘導する。

実施例１０
抗原（Ａｇ）複合体は、ビオチン化及びその後のストレプトアビジン（ＳＡＶ）とのインキュベーションによって生成された。複合体抗原は、抗体応答を誘導する。多価性は、分子当たりのビオチンの数に依存する。複数のビオチン基は、複数のＳＡＶ結合及びより高い分子複合体を可能にする。ＳＡＶとの架橋は、より高分子の複合体及び効率的な免疫応答をもたらす（図１１、図１２）。

Claims (25)

1. 感染症の治療及び／又は予防での使用のための組成物であって、
   （ｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む抗原部分を含む一価／二価抗原粒子であって、前記標的抗原が病原体関連抗原である、一価／二価抗原粒子と、
   （ｉｉ）前記標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含む多価抗原粒子であって、前記３つ以上の抗原構造が架橋され、前記標的抗原が病原体関連抗原である、多価抗原粒子と、を含む、組成物。
2. 前記３つ以上の抗原構造が、複数の同一の抗原構造を含む、請求項１に記載の使用のための組成物。
3. 前記多価抗原粒子が、前記抗原部分に結合された担体部分を更に含み、及び／又は前記一価／二価抗原粒子が、前記抗原部分に結合された担体部分を更に含む、請求項１又は２に記載の使用のための組成物。
4. 前記担体部分が、ポリペプチド、免疫ＣｐＧ島、リンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、破傷風トキソイド（ＴＴ）、コレラトキシンサブユニットＢ（ＣＴＢ）、細菌又は細菌ゴースト、リポソーム、キトソーム、ビロソーム、マイクロスフェア、樹状細胞、粒子、マイクロ粒子、ナノ粒子、又はビーズの群から選択される構造を含む、請求項３に記載の使用のための組成物。
5. 前記多価抗原粒子中の前記架橋が、ビス－マレイミド媒介架橋などの化学架橋であるか、又はビオチン－ストレプトアビジン媒介架橋などのタンパク質架橋である、請求項１～４に記載の使用のための組成物。
6. 前記多価抗原粒子が、以下の式Ａ－Ｌ－Ａの複合体を含み、式中、Ａが、標的抗原を含む部分であり、Ｌが、前記架橋結合のリンカーであり、好ましくはＬが、ビスマレイミドであり、最も好ましくは、前記複合体が、以下の構造（Ｉ）のものであり、Ｒが、標的抗原を含む部分である、請求項１～５に記載の使用のための組成物。
   
7. 前記多価抗原粒子が、タンパク質コンジュゲーションのための架橋反応基を有するリンカー、好ましくは安定なタンパク質コンジュゲーションのための架橋反応基を有するリンカーを含む、請求項１～５に記載の使用のための組成物。
8. 前記架橋反応基が、カルボキシル－アミン反応基、アミン反応基、スルフヒドリル反応基、アルデヒド反応基、及び光反応基から選択される基である、請求項７に記載の使用のための組成物。
9. 前記架橋反応基が、カルボジイミド、ＮＨＳエステル、イミドエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ヒドロキシメチルホスフィン、マレイミド、ハロアセチル、ヒドラジド、アルコキシアミン、ジアジリン、及びアリールアジドから選択される基である、請求項７に記載の使用のための組成物。
10. 前記多価抗原粒子が、好ましくは、３ｎｍ～２０ｎｍの範囲内で互いに空間的に近接した前記抗原構造の少なくとも２つのコピーを含む、請求項１～９に記載の使用のための組成物。
11. 前記病原体関連抗原が、核酸、炭水化物、及びペプチドの群から選択される少なくとも１つの物質を含む、請求項１～１０に記載の使用のための組成物。
12. 前記多価抗原粒子がアジュバントに連結され、好ましくは、前記多価粒子がアジュバントに共有結合的に連結される、請求項１～１１に記載の使用のための組成物。
13. 前記アジュバントが、ＩｇＧである、請求項１２に記載の使用のための組成物。
14. 治療及び／又は予防が、少なくとも２つの投与時点を含む、請求項１～１３に記載の使用のための組成物。
15. 予防が、前記多価抗原粒子の前に前記一価／二価抗原粒子を投与することを含む、請求項１４に記載の使用のための組成物。
16. 前記治療及び／又は予防が、前記一価／二価抗原粒子のための少なくとも２つの投与時点と、前記多価抗原粒子のための少なくとも２つの投与時点と、を含む、請求項１４～１５に記載の使用のための組成物。
17. 前記抗体媒介性免疫応答が、ＩｇＧ媒介性免疫応答及び／又はＩｇＭ媒介性免疫応答である、先行請求項のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
18. 前記病原体が、寄生虫、細菌、及びウイルスの群から選択される少なくとも１つの病原体である、請求項１～１７に記載の使用のための組成物。
19. 前記感染症が、ウイルス感染症である、請求項１～１８に記載の使用のための組成物。
20. 前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症である、請求項１９に記載の使用のための組成物。
21. 前記コロナウイルス感染症が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症である、請求項２０に記載の使用のための組成物。
22. 前記病原体関連抗原が、前記コロナウイルススパイクタンパク質に由来するアミノ酸配列、例えば、受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）配列、好ましくは完全なＲＢＤ配列、又は前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤアミノ酸配列（配列番号１）の前記アミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を含む配列を含む、請求項２１に記載の使用のための組成物。
23. 病原体関連抗原に結合する抗体を産生するための方法であって、
    （１）抗体を産生することができる対象及び／又は細胞への、
    （ｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む抗原部分を含む一価／二価粒子であって、前記標的抗原が病原体関連抗原を含む、一価／二価粒子、及び
    （ｉｉ）前記標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含む多価抗原粒子であって、前記３つ以上の抗原構造が架橋され、前記標的抗原が病原体関連抗原を含む、多価抗原粒子、
    の投与のステップと、
    （２）前記対象及び／又は細胞から抗体を単離するステップであって、前記抗体が前記標的抗原に結合する、単離するステップと、を含む、方法。
24. 感染症の治療及び／又は予防での使用のためのポリヌクレオチドであって、
    （ｉ）標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる１つ又は２つの抗原構造を含む抗原部分を含む一価／二価抗原粒子であって、前記標的抗原が病原体関連抗原を含む、一価／二価抗原粒子、及び
    （ｉｉ）前記標的抗原に対する抗体媒介性免疫応答を誘導することができる３つ以上の抗原構造を含む抗原部分を含む多価抗原粒子であって、前記３つ以上の抗原構造が架橋され、前記標的抗原が病原体関連抗原を含む、多価抗原粒子、
    をコードする、ポリヌクレオチド。
25. 請求項２４に記載の使用のためのポリヌクレオチドを含む、ベクター。