JP2024500408A - 癌の治療のためのｓｍａｃ模倣物、その調製プロセスおよび医薬組成物 - Google Patents
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Abstract
本発明は、哺乳動物における癌を含む増殖性疾患の治療に有用な新規ＳＭＡＣ模倣ペプチド模倣物に関する。新規ＳＭＡＣ模倣物は、（２Ｓ，５Ｒ）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボン酸、標的タンパク質結合に有利なトランスアミド結合ジオメトリを排他的に付与する新規非天然アミノ酸を組み込むことによって調製される。ここで、新規ＳＭＡＣ模倣分子は、様々な癌タイプにおいてその有効性を示すだけでなく、単剤として治療抵抗性癌に対するインビトロおよびインビボ有効性をも示す。本発明に開示される新規ＳＭＡＣ模倣物は、ＸＩＡＰのＢＩＲ－２ドメインおよびＢＩＲ－３ドメインに結合し、化学療法およびＴＲＡＩＬ耐性細胞株を含むがこれらに限定されない多様な哺乳動物癌細胞株に対して高い抗増殖活性を示す。【選択図】なし
Description
本発明は、癌を含む増殖性障害の治療に有用なＳＭＡＣ（第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子）模倣化合物に関する。
アポトーシスまたは「プログラム細胞死」の回避は、ヒト癌の顕著な特徴のうちの１つである。したがって、癌細胞におけるアポトーシスの回復または誘導は、魅力的な治療戦略である。細胞死と生存との間の複雑なバランスを調節する複数の内因性細胞対抗作用タンパク質が存在する。細胞内のそのような相互的な調節の古典的な例のうちの１つは、ＳＭＡＣとＩＡＰとの間の相互作用である。ＳＭＡＣは、アポトーシス促進性タンパク質であり、ＩＡＰの活性に対抗することによって癌性細胞のアポトーシスに対して細胞を感作する。したがって、ＳＭＡＣ模倣物は、癌を治療するための新規かつ標的化された治療アプローチとして見出されている（Ａｂｒａｈａ ｅｔ．ａｌ，Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ Ｏｎｃｏｌ．２０１６年８月１５日；８（８）：５８３－５９１）。現在、様々な癌タイプに対する異なるＳＭＡＣ模倣物について複数の臨床試験が進行中であり、これは、癌治療におけるその多大な重要性を実証している（Ｆｕｌｄａ ｅｔ．ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．Ｖｏｌｕｍｅ２１，Ｉｓｓｕｅ２２，２０１５．５０３０－５０３６）。
アポトーシス阻害タンパク質（ＩＡＰ）は、カスパーゼ依存性アポトーシスを抑制する天然に存在する細胞内タンパク質である。ＩＡＰは、アポトーシス経路の開始および実行に重要な別個のカスパーゼを阻害する重要な負の調節因子である。哺乳動物ＩＡＰファミリーには８つのメンバーが存在する。これらの中でも、Ｘ染色体連鎖ＩＡＰ（ＸＩＡＰ）は、おそらく、アポトーシスの調節において直接的な役割を果たすことが知られているＩＡＰファミリーの最もよく特徴づけられたメンバーである。ＸＩＡＰは、そのＢＩＲ２ドメインおよび前のリンカー領域を介してカスパーゼ－３およびカスパーゼ－７にそれぞれ結合する。加えて、ＸＩＡＰはまた、そのＢＩＲ３ドメインを介してカスパーゼ－９に結合し、それにより、カスパーゼ－９の二量体化およびその後の活性化を阻止する。カスパーゼ－３およびカスパーゼ－７が外因性経路および内因性経路の両方においてアポトーシスの実行において主要な役割を果たし、カスパーゼ－９が内因性経路における重要な誘導型カスパーゼであるという事実を考慮すると、ＸＩＡＰは、アポトーシスを復活させるための最も好ましい標的である。ＳＭＡＣは、ＩＡＰタンパク質の天然に利用可能なアンタゴニストである。ＳＭＡＣは、アポトーシスシグナル伝達に際してミトコンドリアからサイトゾルに放出され、および、成熟処理されたＳＭＡＣタンパク質のアミノ末端で露出され、ＸＩＡＰのカスパーゼとの相互作用を妨げる４つのアミノ酸残基（ＡＶＰＩ）を含有する保たれたＩＡＰ結合モチーフ（ＩＢＭ）を介してＸＩＡＰのＢＩＲ３ドメインに結合する（Ｃｏｎｇ ｅｔ．ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１９，６２，５７５０－５７７２）。
加えて、Ｓｍａｃはまた、ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２のＢＩＲ３ドメインに結合し、その結果、ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２のａｕｔｏ－ｕｂｉｑｕｉｔｉｎａｔｉｏｎおよびプロテアソーム分解を促進するそれらのＥ３リガーゼ活性を増強する。ＩＡＰ阻害剤と呼ばれるＡＶＰＩのいくつかの小分子模倣物が、癌の治療のための臨床試験において進められている。ＬＣＬ－１６１およびＡＴ－４０６は、構造的に一価であるが、Ｂｉｒｉｎａｐａｎｔ／ＴＬ３２７１１は二価であり、開発中の顕著なものの１つである。
ＳＭＡＣを設計するために使用される主要なアプローチは、Ｘｘｘ－Ｐｒｏ結合が好ましくはトランス配置である配座的に拘束された化合物の合成に焦点を当てている。さらに別の検討を行ったのは、Ｃ末端の親油性または二価分子のリンカーのバランスである。ＡＶＰＩ（１）ペプチドの各アミノ酸の役割および置換への耐性を体系的に調べることによって、バイオアベイラブルなＳｍａｃ模倣物を開発するために、Ｓｍａｃ ＡＶＰＩテトラペプチドを進化させるためのいくつかの努力が過去になされている。
ＳｍａｃのＮ末端を使用するテトラペプチドのライブラリーを、プロリン残基の周りのトランスジオメトリを出発点として制御する新規な戦略を用いて調製する。それらは、４つのアミノ酸のそれぞれの位置を全ての天然アミノ酸で置き換えた。テトラペプチドの１位のアラニン残基は、活性にとって非常に重要であり、アラニンが任意の天然アミノ酸で置き換えられると結合が大幅に減少することが分かっている。
したがって、当該技術分野では、癌の治療のために癌細胞においてアポトーシスを回復または誘導することができる新規化合物が必要とされている。
Ａｂｒａｈａ ｅｔ．ａｌ，Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ Ｏｎｃｏｌ．２０１６年８月１５日；８（８）：５８３－５９１
Ｆｕｌｄａ ｅｔ．ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．Ｖｏｌｕｍｅ２１，Ｉｓｓｕｅ２２，２０１５．５０３０－５０３６
Ｃｏｎｇ ｅｔ．ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１９，６２，５７５０－５７７２
本発明の主な目的は、様々なタイプの癌に対する安全かつ有効な療法として、単独療法として、および利用可能な抗癌剤との併用において有用なペプチドＳＭＡＣ模倣物を開発することである。
本発明の別の目的は、ＳＭＡＣ模倣物を合成するためのプロセスを開発することである。
本発明のさらに別の目的は、ヒトへの適用に適したＳＭＡＣ模倣物の製剤を開発することである。
本発明のさらに別の目的は、ＳＭＡＣ模倣物を使用する癌の治療である。
本発明の別の目的は、ＳＭＡＣ模倣物を使用することによって、治療抵抗性癌に対する標的療法を提供することである。
本発明のさらに別の目的は、ＸＩＡＰ／ＩＡＰのＢＩＲ－２ドメインおよびＢＩＲ－３ドメインの両方に強力に結合する能力を有し、治療抵抗性難治性癌に対してロバストなインビトロおよびインビボ有効性を有する有意なバイオアベイラビリティを有するＳＭＡＣ模倣物またはＩＡＰアンタゴニストまたはＩＡＰ阻害剤を提供することである。
本発明の態様は、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩を提供する。
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩を提供する。
本発明の別の態様は、以下からなる群から選択されるＳＭＡＣ模倣化合物を提供する。
本発明のさらに別の態様は、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を調製するためのプロセスであって、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシまたはＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
ａ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、２－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（２Ｓ，５Ｓ）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１，２－ジカルボキシラートのＢｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンをＢｏｃＮＨＣＨ（Ｒ２′）ＣＯＯＨとカップリングさせて、式Ｐ１の化合物を得るステップと；
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシまたはＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
ａ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、２－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（２Ｓ，５Ｓ）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１，２－ジカルボキシラートのＢｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンをＢｏｃＮＨＣＨ（Ｒ２′）ＣＯＯＨとカップリングさせて、式Ｐ１の化合物を得るステップと；
ｂ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、式Ｐ１の化合物からＢｏｃ基を除去し、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンを式ＢｏｃＮ（Ｒ４′）ＣＨ（Ｒ３′）ＣＯＯＨの化合物とカップリングさせて、式Ｐ２の化合物を得るステップと；
ｃ）溶媒の存在下で、Ｐｄ触媒を使用して式Ｐ２の化合物を接触水素化して、式Ｐ３の遊離カルボン酸を得るステップと；
ｄ）式Ｐ３の遊離カルボン酸を、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、ＮＨ２ＣＨ（Ａ）（Ｂ）とカップリングさせて、式Ｉの化合物を得るステップと、を含む、プロセスを提供する。
本発明の別の態様は、Ｂｏｃ基２－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（２Ｓ，５Ｓ）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１，２－ジカルボキシラートを除去し、続いて得られたアミンをＢｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨとカップリングさせて、Ｂｏｃ基が脱保護された化合物ＩＩを得、続いてＢｏｃ－Ａｌａ－ＯＨとのそれのカップリングを行って、エステルがカルボン酸にけん化された化合物ＩＩＩを提供し、続いてＨ－Ｉｌｅ－ＯＢｎまたはベンズヒドリルアミンのいずれかとそれのカップリングを行って、続いてそれの酸分解を行って、化合物２および３をそれぞれ与えることを含むプロセスを提供する。
本発明の別の態様は、化合物ＩＩからＢｏｃ基を除去し、続いてＢｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨとそれのカップリングを行って、エステルがカルボン酸にけん化された化合物Ｖを提供し、続いてＨ－Ｉｌｅ－ＯＢｎまたはベンズヒドリルアミンまたはＨ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミドのいずれかとのそれのカップリングを行って、続いてそれの酸分解を行って、化合物４、５および６をそれぞれ生じることを含むプロセスを提供する。
本発明の態様は、中間体ＩからＢｏｃ基を除去し、続いて得られたアミンをＢｏｃ－Ｃｈｇ－ＯＨとカップリングさせて、Ｂｏｃ基が脱保護された化合物ＶＩＩを得、続いてＢｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨとカップリングさせて、エステルがカルボン酸に変換された化合物ＶＩＩＩを得、続いてＨ－Ｉｌｅ－ＯＢｎまたはベンズヒドリルアミンのいずれかとのそれのカップリングを行って、続いてそれの酸分解を行って、化合物７、８および９をそれぞれ得ることを含むプロセスを提供する。
本発明の別の態様は、ＳＭＡＣ模倣化合物（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－フェニルピロリジン－２－カルボキサミド（１０）（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－１－ｏｘｏｐｅｎｔａｎ－２－ｙｌ）－１－（（Ｓ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－ｐｈｅｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ （１０））を調製するためのプロセスであって、
ａ）溶媒中、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、化合物ＸをＨ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミドとけん化およびカップリングし、化合物ＸＩを得るステップと；
ａ）溶媒中、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、化合物ＸをＨ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミドとけん化およびカップリングし、化合物ＸＩを得るステップと；
ｂ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、化合物ＸＩからＢｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンをＢｏｃ－Ｖａｌ－ＣＯＯＨとカップリングさせて、式ＸＩＩの化合物を得るステップと；
ｃ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、化合物ＸＩＩからＢｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンをＢｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨとカップリングさせて、式ＸＩＩＩの化合物を得るステップと；
ｄ）酸分解によって式ＸＩＩＩの化合物からＢｏｃ基を除去して、化合物１０を得るステップと、を含むプロセスを提供する。
本発明の別の態様は、ＳＭＡＣタンパク質のアポトーシス阻害タンパク質（ＩＡＰ）への結合を阻害し、癌を含む増殖性疾患の治療に有用な式－Ｉの化合物を提供する。
本発明のさらに別の態様は、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
本発明のさらに別の態様は、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩、少なくとも１つの抗癌剤および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩、少なくとも１つの抗癌剤および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
本発明の態様では、式ＩのＳＭＡＣ模倣化合物は、結腸、乳房、腎臓、前立腺、脳、卵巣、膵臓、黒色腫、肝臓、白血病およびリンパ腫からなる群から選択される様々な哺乳動物癌細胞株に対して強力な抗増殖活性を有する。
本発明の別の態様では、ＳＭＡＣ模倣化合物は、哺乳動物における治療抵抗性、難治性および転移性の癌の治療に有用である。
本発明のさらに別の態様では、ＳＭＡＣ模倣化合物は、ＴＲＡＩＬアゴニスト／ＭＡｂ、アロマターゼ阻害剤、エピジェネティックモジュレーター、キナーゼ阻害剤、アルキル化剤、微小管破壊剤（ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ ｄｉｓｒｕｐｔｅｒ）、トポイソメラーゼ阻害剤、抗血管新生化合物、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、エストロゲンおよびアンドロゲンアンタゴニスト、ＭＭＰ阻害剤および生物学的応答修飾物質からなる群から選択される他の抗増殖剤との併用療法において有用である。
本発明の別の態様は、式ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を使用して癌を治療するための方法を提供する。
本発明のさらに別の態様は、ＸＩＡＰ／ＩＡＰのＢＩＲ－２およびＢＩＲ－３ドメインの両方に結合する能力を有し、治療抵抗性難治性癌に対してロバストなインビトロおよびインビボ有効性を有する有意なバイオアベイラビリティを有する式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を使用して癌を治療するための方法を提供する。
略称
ＳＭＡＣ：第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ｓｅｃｏｎｄ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ－ｄｅｒｉｖｅｄ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｏｆ ｃａｓｐａｓｅ）
ＴＲＡＩＬ：腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ－ｒｅｌａｔｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｌｉｇａｎｄ）
ＳＭＡＣ：第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ｓｅｃｏｎｄ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ－ｄｅｒｉｖｅｄ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｏｆ ｃａｓｐａｓｅ）
ＴＲＡＩＬ：腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ－ｒｅｌａｔｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｌｉｇａｎｄ）
ここで、本発明を、その様々な態様がより完全に理解および認識され得るように、特定の好ましいおよび任意選択の実施形態に関連して詳細に説明する。
便宜上、本開示のさらなる説明の前に、本明細書で用いられる特定の用語、および例をここで説明する。これらの定義は、本開示の残りの部分に照らして読まれ、当業者によって理解される。本明細書で使用される用語は、当業者に認識され公知の意味を有するが、便宜上および完全性のために、特定の用語およびそれらの意味を以下に記載する。
冠詞「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、冠詞の文法的対象の１つまたは１を超えること（すなわち、少なくとも１まで）を指すために使用される。
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、包括的、オープンな意味で使用され、追加の要素が含まれ得ることを意味する。「のみからなる」と解釈されることを意図しない。
本明細書を通して、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という語、ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変形は、任意の他の要素もしくはステップまたは要素もしくはステップの群を除外することではなく、記載された要素もしくはステップまたは要素もしくはステップの群を含むことを意味すると理解されるであろう。
本発明は、アポトーシス経路を介してインビトロおよびインビボで強力な抗癌潜在性を示す式－ＩのＳＭＡＣ模倣物に関する。
本発明は、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩を対象とする。
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩を対象とする。
本発明の実施形態では、
Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル－Ｌ－プロリル－Ｌ－イソロイシン（化合物１）、
ベンジル（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボニル）－Ｌ－イソロイシナート（化合物２）、
（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－Ｎ－ベンズヒドリル－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物３）、
（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル３－メチル－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）ペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）ｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（化合物４）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物５）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物６）、
（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（化合物７）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌ－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）（化合物８）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－１－ｏｘｏｐｅｎｔａｎ－２－ｙｌ）－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）（化合物９）；および
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル）－５－フェニルピロリジン－２－カルボキサミド（化合物１０）
からなる群から選択される式ＩのＳＭＡＣ模倣化合物が提供される。
Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル－Ｌ－プロリル－Ｌ－イソロイシン（化合物１）、
ベンジル（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボニル）－Ｌ－イソロイシナート（化合物２）、
（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－Ｎ－ベンズヒドリル－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物３）、
（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル３－メチル－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）ペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）ｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（化合物４）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物５）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物６）、
（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（化合物７）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌ－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）（化合物８）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－１－ｏｘｏｐｅｎｔａｎ－２－ｙｌ）－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）（化合物９）；および
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル）－５－フェニルピロリジン－２－カルボキサミド（化合物１０）
からなる群から選択される式ＩのＳＭＡＣ模倣化合物が提供される。
本発明の別の実施形態は、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を調製するためのプロセスであって、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
ｉ．ＴＦＡを使用する酸分解によって、２－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（２Ｓ，５Ｓ）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１，２－ジカルボキシラートのＢｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンをＢｏｃＮＨＣＨ（Ｒ２′）ＣＯＯＨとカップリングさせて、式Ｐ１の化合物を得るステップと；
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
ｉ．ＴＦＡを使用する酸分解によって、２－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（２Ｓ，５Ｓ）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１，２－ジカルボキシラートのＢｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンをＢｏｃＮＨＣＨ（Ｒ２′）ＣＯＯＨとカップリングさせて、式Ｐ１の化合物を得るステップと；
ｉｉ．ＴＦＡを使用する酸分解によって、式Ｐ１の化合物からＢｏｃ基を除去し、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンを式ＢｏｃＮ（Ｒ４′）ＣＨ（Ｒ３′）ＣＯＯＨの化合物とカップリングさせて、式Ｐ２の化合物を得るステップと；
ｉｉｉ．溶媒の存在下で、Ｐｄ触媒を使用して式Ｐ２の化合物を接触水素化して、式Ｐ３の遊離カルボン酸を得るステップと；
ｉｖ．式Ｐ３の遊離カルボン酸を、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、ＮＨ２ＣＨ（Ａ）（Ｂ）とカップリングさせて、式Ｉの化合物を得るステップと、を含む、プロセスを提供する。
本発明の実施形態では、ペプチドカップリング試薬がＨＯＢｔ、ＥＤＣＩおよびＨＢＴＵからなる群から選択される、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を調製するためのプロセスが提供される。
本発明の別の実施形態では、弱塩基がジエチルイソプロピルアミンである、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を調製するためのプロセスが提供される。
本発明のさらに別の実施形態では、Ｐｄ触媒がＰｄ／ＣまたはＰｄ（ＯＨ）２／Ｃから選択される、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を調製するためのプロセスが提供される。
本発明のさらに別の実施形態では、溶媒がペプチドカップリングのためにＤＣＭまたはＤＭＦから選択される、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を調製するためのプロセスが提供される。
本発明の実施形態では、溶媒が接触水素化のためにＭｅＯＨまたはＥｔＯＡｃから選択される、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を調製するためのプロセスが提供される。
本発明の別の実施形態では、ＳＭＡＣ模倣化合物１０を調製するプロセスであって、
（ａ）溶媒中、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、化合物ＸをＨ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミドとけん化及びカップリングさせて、化合物ＸＩを得るステップと；
（ａ）溶媒中、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、化合物ＸをＨ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミドとけん化及びカップリングさせて、化合物ＸＩを得るステップと；
（ｂ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、化合物ＸＩからＢｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンをＢｏｃ－Ｖａｌ－ＣＯＯＨとカップリングさせて、式ＸＩＩの化合物を得るステップと；
（ｃ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、化合物ＸＩＩからＢｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンをＢｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨとカップリングさせて、式ＸＩＩＩの化合物を得るステップと；
（ｄ）酸分解によって式ＸＩＩＩの化合物からＢｏｃ基を除去して、化合物１０を得るステップと、を含む、プロセスを提供する。
本発明のさらに別の実施形態では、ペプチドカップリング試薬がＨＯＢｔ、ＥＤＣＩおよびＨＢＴＵからなる群から選択される、ＳＭＡＣ模倣化合物１０を調製するプロセスが提供される。
本発明のさらに別の実施形態では、溶媒がＤＣＭまたはＤＭＦから選択される、ＳＭＡＣ模倣化合物１０を調製するプロセスが提供される。
本発明の別の実施形態では、弱塩基がジエチルイソプロピルアミンである、ＳＭＡＣ模倣化合物１０を調製するプロセスが提供される。
本発明のさらに別の実施形態では、酸分解のための試薬がＴＦＡである、ＳＭＡＣ模倣化合物１０を調製するプロセスが提供される。
本発明の別の実施形態では、式ＩのＳＭＡＣ模倣化合物であって、化合物がＳｍａｃタンパク質のアポトーシス阻害タンパク質（ＩＡＰ）への結合を阻害し、癌を含む増殖性疾患の治療に有用である、式ＩのＳＭＡＣ模倣化合物が提供される。
本発明のさらに別の実施形態は、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
本発明のさらに別の実施形態は、式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を含む医薬組成物を提供し、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択される。
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択される。
本発明の別の実施形態では、結腸、乳房、腎臓、前立腺、脳、卵巣、膵臓、黒色腫、肝臓、白血病およびリンパ腫からなる群から選択される哺乳動物癌細胞株に対して強力な抗増殖活性を有する式ＩのＳＭＡＣ模倣化合物が提供される。
本発明のさらに別の実施形態では、哺乳動物における治療抵抗性、難治性および転移性の癌の治療に有用な式ＩのＳＭＡＣ模倣化合物が提供される。
本発明のさらに別の実施形態では、ＴＲＡＩＬアゴニスト／ＭＡｂ、アロマターゼ阻害剤、エピジェネティックモジュレーター、キナーゼ阻害剤、アルキル化剤、微小管破壊剤（ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ ｄｉｓｒｕｐｔｅｒ）、トポイソメラーゼ阻害剤、抗血管新生化合物、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、エストロゲンおよびアンドロゲンアンタゴニスト、ＭＭＰ阻害剤および生物学的応答修飾物質からなる群から選択される他の抗増殖剤との併用療法において有用である、式ＩのＳＭＡＣ模倣化合物が提供される。
本発明のさらに別の実施形態は、ＳＭＡＣ模倣化合物を使用して癌を治療するための方法を提供する。
したがって、本発明は、化学療法がその効果をもたらすことができない単独療法および併用療法として癌の治療に有用な式－ＩのＳＭＡＣ模倣ペプチド模倣化合物に関する。それぞれ、ＳＭＡＣ模倣ペプチド模倣化合物２～９は、（２Ｓ，５Ｒ）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボン酸を組み込むことによって調製され、化合物１０は、（２Ｓ，５Ｒ）－５－フェニルピロリジン－２－カルボン酸残基を組み込むことによって調製される。
本発明は、スキームＡおよびスキームＢに記載の式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を調製するためのプロセスを提供する。
（試薬および条件：（ａ）２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ；（ｂ）ＢｏｃＮＨＣＨ（Ｒ２′）－ＯＨ、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ、ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１）；（ｃ）ＢｏｃＮ（Ｒ４′）ＣＨ（Ｒ３′）－ＯＨ、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ、ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１）；（ｄ）１０ｍｏｌ％のＰｄ－Ｃ、バルーンによるＨ２、ＭｅＯＨ；（ｅ）ＮＨ２－Ｉｌｅ－ＯＢｎ、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ、ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１）；（ｆ）ベンズヒドリルアミン、ＩＢＣＦ、ＮＭＭ、ＴＨＦ、－１５℃）；（ｇ）ＮＨ２－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミド、ＨＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ）
（試薬および条件：（ａ）２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ；（ｂ）Ｂｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ、ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１）；（ｃ）Ｂｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨ ＥＤＣＩ．ＨＣｌ、ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１）；（ｇ）Ｈ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミド、ＨＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ ｈ）ＬｉＯＨ、ＴＨＦ、ＭｅＯＨ、水；）
スキームＡに記載のプロセスに基づいて、化合物２～９を；およびスキームＢに記載のプロセスに基づいて、化合物１０を以下の方法で調製する；
（ｉ）主要な中間体ＩからＢｏｃ基を除去し、続いて得られたアミンをＢｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨとカップリングさせて化合物ＩＩを得る（スキーム１）；化合物－ＩＩのＢｏｃ基を除去し、得られたアミンをＢｏｃ－Ａｌａ－ＯＨとカップリングさせて化合物ＩＩＩを得（スキーム１）、化合物－ＩＩＩの接触水素化により遊離カルボン酸ＩＶを得て、これをＨ－Ｉｌｅ－ＯＢｎまたはベンズヒドリルアミンのいずれかとカップリングさせ、続いて酸分解して、それぞれ化合物２または３を生じる（スキーム１）。
（試薬および条件：（ａ）２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ；（ｂ）Ｂｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ、ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１）；（ｃ）Ｂｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ、ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１）；（ｄ）１０ｍｏｌ％のＰｄ－Ｃ、バルーンによるＨ２；（ｅ）Ｈ－Ｉｌｅ－ＯＢｎ、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ、ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１）；（ｆ）ベンズヒドリルアミン、ＩＢＣＦ、ＮＭＭ、ＴＨＦ、－１５℃）
（ｉｉ）化合物－ＩＩのＢｏｃ基を除去し、得られたアミンをＢｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨとカップリングさせて化合物Ｖを得る；化合物Ｖの接触水素化により遊離カルボン酸を有する化合物ＶＩを得て、これをＨ－Ｉｌｅ－ＯＢｎ、ベンズヒドリルアミンまたはＨ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミドのいずれかとカップリングさせ、続いて酸分解して、化合物４、５または６をそれぞれ生じる（スキーム２）。
（試薬および条件：（ａ）２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ；（ｂ）Ｂｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ、ＨＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ；（ｃ）Ｂｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨ、ＨＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ；（ｄ）１０ｍｏｌ％のＰｄ－Ｃ、バルーンによるＨ２、ＭｅＯＨ；（ｅ）Ｈ－Ｉｌｅ－ＯＢｎ、ＨＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ；（ｆ）ベンズヒドリルアミン、ＩＢＣＦ、ＮＭＭ、ＴＨＦ、－１５℃；（ｇ）ＮＨ２－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミド、ＨＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ）
（ｉｉｉ）化合物－ＩのＢｏｃ基を除去し、得られたアミンをＢｏｃ－Ｃｈｇ－ＯＨとカップリングさせて、化合物ＶＩＩを得る；化合物ＶＩＩのＢｏｃ－基の酸分解的切断、続いてＢｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨとカップリングさせ、化合物ＶＩＩＩを形成し、および化合物ＶＩＩＩの接触水素化により化合物ＩＸを得て、これをＨ－Ｉｌｅ－ＯＢｎ、ベンズヒドリルアミンまたはＩｌｅ－ベンズヒドリルアミドのいずれかとカップリングさせ、続いて酸分解して、化合物７、８または９をそれぞれ生じる（スキーム３）。
（試薬および条件：（ａ）２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ；（ｂ）Ｂｏｃ－Ｃｈｇ－ＯＨ、ＨＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ；（ｃ）Ｂｏｃ－Ｎ（Ｍｅ）－Ａｌａ－ＯＨ、ＨＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ；（ｄ）１０ｍｏｌ％のＰｄ－Ｃ、バルーンによるＨ２、ＭｅＯＨ；（ｅ）ＮＨ２－Ｉｌｅ－ＯＢｎ、ＨＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ；（ｆ）ベンズヒドリルアミン、ＩＢＣＦ、ＮＭＭ、ＴＨＦ、－１５℃；（ｇ）ＮＨ２－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミド、ＨＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ）
（ｉｖ）化合物Ｘをけん化し、続いてＨ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミドとカップリングさせて、化合物ＸＩを得る；化合物ＸＩのＢｏｃ脱保護、続いてＢｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨとカップリングさせて、化合物ＸＩＩを得る；化合物ＸＩＩのＢｏｃ脱保護、続いてＢｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨとカップリングさせて、化合物ＸＩＩＩを得る；化合物ＸＩＩＩをＢｏｃ脱保護して、化合物１０を得る（スキーム４）。
（試薬および条件：（ｈ）ＬｉＯＨ、ＴＨＦ、ＭｅＯＨ、水；（ｇ）Ｈ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミド、ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ；（ａ）３０％のＴＦＡ／ＤＣＭ；（ｂ）Ｂｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ、ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ；（ｃ）Ｂｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨ、ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ；
本発明の式－ＩのＳＭＡＣ模倣ペプチド模倣物は、ＸＩＡＰのＢＩＲ－２ドメインおよびＢＩＲ－３ドメインに対して強い結合親和性を示す。結合親和性は、インシリコ実験（図１）によって、および表１に示す蛍光偏光アッセイを使用するタンパク質結合アッセイによって測定される。結合確認後、ＳＭＡＣ模倣化合物の細胞傷害能を、非ヒトサル腎臓（ＶＥＲＯ）細胞株に対する癌細胞株に対して評価した。全ての化合物は、全ての癌細胞に対して細胞傷害活性を示した。最も重要なことには、一連のＳｍａｃ模倣化合物のうち、化合物６は、全ての癌細胞に対して強力な細胞傷害活性を示すが、その腫瘍細胞選択性を証明する非ヒトＶＥＲＯ細胞に対しては限定的または最小の毒性を有する（表１）。その腫瘍細胞選択的な細胞傷害の性質および潜在的な結合特性のために、化合物６（Ｃ６）をさらなる実験分析のための強力な分子として選択した。
さらに、多様な癌細胞株に対するＣ６のＩＣ５０濃度を決定し、式－ＩのＳＭＡＣ模倣ペプチド模倣物は、結腸、乳房、腎臓、前立腺、脳、卵巣、膵臓、肝臓、黒色腫、白血病およびリンパ腫を含むがこれらに限定されない様々な癌細胞株に対して強力な活性を示すことが観察された（表２）。
ＳＭＡＣ模倣物Ｃ６は、図２および図３に示すように、カスパーゼの切断およびｃＩＡＰ１の分解のような顕著なＳＭＡＣ駆動アポトーシス特徴をオンにすることによって、癌細胞における細胞死を促進する。さらに、そのアポトーシス機能は、ターゲットエンゲージメントに高度に依存し、それは、図４および図５に示されるように、ＴＲＡＩＬ耐性細胞においてアポトーシスを促進する。Ｃ６の安定性および薬物動態分析は、それがＳＩＦ、ＳＧＦ、ミクロソームで非常に安定であり（図６）、表３に示すように皮下および経口投与経路を介して有意なバイオアベイラビリティを有することを示し、本発明に開示されるＳＭＡＣ模倣物のドラッガブルな可能性を示唆している。
Ｃ６は、図７および図８に示すように、腹腔内、皮下および経口投与経路によるロバストなインビボ抗腫瘍活性を示している。それはまた、シスプラチン耐性結腸癌に対してインビボ活性である。Ｃ６は、図７および図８に示すように、治療の経過中に動物において重量減少が観察されなかった用量で、忍容性が良好で非毒性であることが分かっている。さらに、Ｃ６は、経口投与経路を通して腫瘍部位に到達し、ＸＩＡＰ／ＩＡＰ分解およびカスパーゼの切断のようなそのターゲットに関与している（図９）。
（例）
以下の実施例は、本発明をサポートするために与えられるが、これに限定されない。
以下の実施例は、本発明をサポートするために与えられるが、これに限定されない。
例１
スキーム１で言及されるベンジル（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボニル）－Ｌ－イソロイシナート（化合物２）の合成
スキーム１で言及されるベンジル（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボニル）－Ｌ－イソロイシナート（化合物２）の合成
（２Ｓ，５Ｓ）－２－ベンジル１－ｔｅｒｔ－ブチル５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１，２－ジカルボキシラート（８５０ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で１時間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。次いで、このアミンを無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、Ｂｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ（９５６ｍｇ、４．４ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１．７ｇｍ、４．４ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）中で予備撹拌した溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（１．２ｍＬ、６．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応の完了後、水（３０～４０ｍＬ）を添加した。水溶液を酢酸エチル（３×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を１０％のクエン酸（水溶液）、１０％のＮａＨＣＯ３（水溶液）、最後にブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して粗生成物を得、これを溶離液として１８％の酢酸エチル／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィーにより精製して、中間体化合物（２Ｓ，５Ｒ）－ベンジル１－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－３－メチルブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキシラート（ＩＩ）を茶色がかったゴム状の油として収率５６．８％で与えた（６０５．６ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ Ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ２７Ｈ３７Ｎ２Ｏ６
＋＝４８５．２６４６、ｆｏｕｎｄ ４８５．２６４５。
中間体化合物ＩＩ（４８４．６ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で１時間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。次いで、このアミンを無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、Ｂｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ（３７８．４ｍｇ、２ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（７５８．５ｍｇ、２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）中で予備撹拌した溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（０．５６ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、中間体化合物（２Ｓ，５Ｒ）－ベンジル１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）プロパンアミド）－３－メチルブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキシラート（ＩＩＩ）（（２Ｓ，５Ｒ）－ｂｅｎｚｙｌ １－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ （ＩＩＩ））を黄色がかったゴム状の油として収率６５％で得た（３６１ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３０Ｈ４２Ｎ３Ｏ７
＋＝５５６．３０１７、ｆｏｕｎｄ ５５６．３０２２。
化合物ＩＩＩ（１ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）中で撹拌した溶液に１０ｍｏｌ％のＰｄ－Ｃ（０．１ｍｍｏｌ）を添加し、水素ガスをバルーンによって３０分間パージすることによって水素化に供した。その後、Ｐｄをセライトパッドを使用して濾過し、濾液を真空中で濃縮し、遊離酸（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）プロパンアミド）－３－メチルブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボン酸（ＩＶ）（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ （ＩＶ））を与え、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。その後、イソロイシンベンジルエステル（１３．３ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解し、化合物ＩＶ（２８ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（２２．７ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１ｍＬ）中で予備撹拌した溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（０．０３４ｍＬ、．１８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、保護されたテトラペプチド（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）プロパンアミド）－３－メチルブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）を黄色がかったゴム状の油として収率８６％で得た（３４．８ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３６Ｈ５３Ｎ４Ｏ８
＋＝６６９．３８５８、ｆｏｕｎｄ ６６９．３８６５。
保護されたペプチド（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）プロパンアミド）－３－メチルブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（６７ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で３０分間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。粗ペプチドをＣ－１８カラムを使用する逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ－ＨＰＬＣ）によって精製し、次いで、試料を凍結乾燥させて、所望のペプチド化合物（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノプロパンアミド）－３－メチルブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（２）（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ（２））を白色粉末として収率６５％で与えた（３７ｍｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）。化合物２は、分析ＲＰ－ＨＰＬＣで２２０ｎｍで９７％純粋であることが分かった。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ／ｐｐｍ＝８．６７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），８．０８（ｂｒ，２Ｈ），７．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．３８－７．３１（ｍ，５Ｈ），６．５３（ｂｒ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），６．０４（ｂｒｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．０，３．１Ｈｚ），５．４１（ｍ，１Ｈ），５．１３（ｍ，２Ｈ），４．４１－４．２２（ｍ，３Ｈ），３．８８（ｂｒ，１Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），２．１２－１．７６（ｍ，６Ｈ），１．４２－１．３４（ｍ，１Ｈ），１．３１（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．２３－１．１２（ｍ，１Ｈ），０．８６－０．７７（ｍ，９Ｈ），０．６１（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ Ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ４５Ｎ４Ｏ６
＋＝５６９．３３３４、ｆｏｕｎｄ ５６９．３３３５。
例２
スキーム１で言及された（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－Ｎ－ベンズヒドリル－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物３）の合成
スキーム１で言及された（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－Ｎ－ベンズヒドリル－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物３）の合成
－１５℃の化合物ＩＶ（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１ｍＬ）の溶液に、Ｎ－メチルモルホリン（１７．５μＬ、０．１６ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。５分後、イソブチルクロロホルマート（１７．５μＬ、０．１４４ｍｍｏｌ、１．２当量）を反応混合物に添加した。次いで、５分後、ベンズヒドリルアミン（１９μＬ、０．１４４ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加し、反応混合物を－１５℃でさらに１時間撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、化合物保護されたペプチドｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（Ｓ）－１－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（ベンズヒドリルカルバモイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１－イル）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イルアミノ）－１－オキソプロパン－２－イルカルバマート（Ｂｏｃ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｆｒｏ－ベンズヒドリルアミド）を収率７１％で得た（５３ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３６Ｈ４７Ｎ４Ｏ６
＋＝６３１．３４９０、ｆｏｕｎｄ ６３１．３４８５。
化合物ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（Ｓ）－１－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（ベンズヒドリルカルバモイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１－イル）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イルアミノ）－１－オキソプロパン－２－イルカルバマート（Ｂｏｃ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｆｒｏ－ベンズヒドリルアミド）（５３ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で３０分間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。粗ペプチドをＣ－１８カラムを使用する逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ－ＨＰＬＣ）によって精製し、次いで、試料を凍結乾燥させて、所望のペプチド（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノプロパンアミド）－３－メチルブタノイル）－Ｎ－ベンズヒドリル－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（３）（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｙｌ）－Ｎ－ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌ－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ （３））を白色粉末として収率７０％で与えた（３２ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）。化合物３は、分析ＲＰ－ＨＰＬＣで２２０ｎｍで９６％純粋であることが分かった。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ／ｐｐｍ＝８．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），８．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），８．０８（ｂｒ ｄ，２Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ），７．３５－７．２１（ｍ，１０Ｈ），６．５２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．９Ｈｚ），６．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），６．０（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．９Ｈｚ），５．４４（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），４．４５（ｍ，１Ｈ），４．２２（ｍ，１Ｈ），３．８７（ｍ，１Ｈ），２．２０－２．１４（ｍ，１Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．１０－１．９８（ｍ，２Ｈ），１．９６－１．８９（ｍ，１Ｈ），１．８８－１．８０（ｍ，１Ｈ），１．３０（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），０．７７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），０．５５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ３９Ｎ４Ｏ４
＋＝５３１．２９６６、ｆｏｕｎｄ ５３１．２９５８。
例３
スキーム２で言及された（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル３－メチル－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）ペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）ｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（化合物４）の合成
スキーム２で言及された（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル３－メチル－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）ペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）ｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（化合物４）の合成
（スキーム１で得られた）中間体化合物ＩＩ（４８４．６ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で１時間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。次いで、このアミンを無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、Ｂｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨ（４０６ｍｇ、２ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（７５８．５ｍｇ、２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）中で予備撹拌された溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（０．５６ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、化合物（２Ｓ，５Ｒ）－ベンジル１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）－３－メチルブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキシラート（Ｖ）（（２Ｓ，５Ｒ）－ｂｅｎｚｙｌ １－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（ｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ （Ｖ））を茶色がかったゴム状の油として収率６２％で得た（３５３ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ４４Ｎ３Ｏ７
＋＝５７０．３１７４、ｆｏｕｎｄ ５７０．３４０７。
化合物Ｖ（５７０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）のメタノール／テトラヒドロフラン（５ｍＬ、１：１）中で撹拌された溶液に１０ｍｏｌ％のＰｄ－Ｃ（０．１ｍｍｏｌ）を添加し、水素ガスをバルーンによって３０分間パージすることによって水素化に供した。その後、Ｐｄをセライトパッドを使用して濾過し、濾液を真空中で濃縮し、遊離酸（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）－３－メチルブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボン酸（ＶＩ）（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（ｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ （ＶＩ））を与え、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。
イソロイシンベンジルエステル（５５．５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解し、化合物ＶＩ（１２０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（９５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中で予備撹拌された溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（０．１３ｍＬ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加した。反応および粗生成物の通常の後処理の完了後、これを、溶離液として５％のメタノール／ジクロロメタンを使用するカラムクロマトグラフィーによって精製すると、化合物Ｂｏｃ保護されたテトラペプチド（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）－３－メチルブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（ｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（Ｂｏｃ－Ｎ（Ｍｅ）－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｆｒｏ－Ｉｌｅ－ＯＢｎ）を茶色がかったゴム状の油として収率８０％で与えた（１３６ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３７Ｈ５５Ｎ４Ｏ８
＋＝６８３．４０１４、ｆｏｕｎｄ ６８３．４０１１。
化合物（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）－３－メチルブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（ｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（５３．５ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で３０分間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。粗ペプチドを、Ｃ－１８カラムを使用する逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ－ＨＰＬＣ）によって精製し、次いで、試料を凍結乾燥させて、所望の化合物（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル３－メチル－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）ペンタノアート（４）（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）ｐｅｎｔａｎｏａｔｅ （４））を白色粉末として与えた。収率（２８ｍｇ、６２％）。化合物４は、分析ＲＰ－ＨＰＬＣで２２０ｎｍで９９％純粋であることが分かった。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ／ｐｐｍ＝８．９６（ｂｒ，１Ｈ），８．８５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），７．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．３８－７．３０（ｍ，５Ｈ），６．５４（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），６．０３（ｂｒｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．０，３．２Ｈｚ），５．３６（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），５．１６－５．０８（ｍ，２Ｈ），４．４２－４．２４（ｍ，３Ｈ），３．８２（ｂｒ，１Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），２．２３（ｓ，３Ｈ），２．１１－１．９４（ｍ，３Ｈ），１．９２－１．７５（ｍ，３Ｈ），１．４３－１．３４（ｍ，１Ｈ），１．３３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．２２－１．１３（ｍ，１Ｈ），０．８６－０．７６（ｍ，９Ｈ），０．６２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３２Ｈ４７Ｎ４Ｏ６
＋＝５８３．３４９０、ｆｏｕｎｄ ５８３．３４８２。
例４
スキーム２で言及された（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物５）の合成
スキーム２で言及された（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物５）の合成
－１５℃の中間体化合物ＶＩ（５８ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１ｍＬ）中の溶液に、Ｎ－メチルモルホリン（１７．５μＬ、０．１６ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。５分後、イソブチルクロロホルマート（１７．５μＬ、０．１４４ｍｍｏｌ、１．２当量）を反応混合物に添加した。次いで、５分後、ベンズヒドリルアミン（１９μＬ、０．１４４ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加し、反応混合物を－１５℃でさらに１時間撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、粗生成物を得て、これを４％のメタノール／ジクロロメタンによって精製して、化合物Ｂｏｃ保護されたペプチドｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（Ｓ）－１－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（ベンズヒドリルカルバモイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１－イル）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イルアミノ）－１－オキソプロパン－２－イル（メチル）カルバマート（Ｂｏｃ－Ｎ（Ｍｅ）－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｆｒｏ－ベンズヒドリルアミド）を収率７５％で与えた（５７ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３７Ｈ４９Ｎ４Ｏ６
＋＝６４５．３６４７、ｆｏｕｎｄ ６４５．３６４６。
化合物ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（Ｓ）－１－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（ベンズヒドリルカルバモイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１－イル）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イルアミノ）－１－オキソプロパン－２－イル（メチル）カルバマート（Ｂｏｃ－Ｎ（Ｍｅ）－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｆｒｏ－ベンズヒドリルアミド）（５７ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で３０分間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。粗ペプチドを、Ｃ－１８カラムを使用する逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ－ＨＰＬＣ）によって精製し、次いで、試料を凍結乾燥させて、所望の化合物（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（５）（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌ－１－（（Ｓ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ（５））を白色粉末として収率６８％で与えた（３０ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）。
化合物５は、分析ＲＰ－ＨＰＬＣで２２０ｎｍで９９％を超えて純粋であることが分かった。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ／ｐｐｍ＝８．８７（ｂｒ，１Ｈ），８．８５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），８．４１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．３５－７．２１（ｍ，１０Ｈ），６．５４（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），６．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），５．９９（ｂｒｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．０，３．０Ｈｚ），５．４０（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），４．４７－４．４３（ｍ，１Ｈ），４．２７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），３．８３（ｍ，１Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），２．２１－２．１３（ｍ，１Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．１２－１．８１（ｍ，４Ｈ），１．３４（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），０．７７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），０．５７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３２Ｈ４１Ｎ４Ｏ４
＋＝５４５．３１２２、ｆｏｕｎｄ ５４５．３１１６。
例５
スキーム２で言及された（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物６）の合成
スキーム２で言及された（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物６）の合成
イソロイシンベンズヒドリルアミド（ｉｓｏｌｅｕｃｉｎｅ ｂｅｎｚｈｄｒｙｌａｍｉｄｅ）（１７８ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解し、化合物ＶＩ（２８８ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（２２７．５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）中で予備撹拌された溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（０．３４ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、このようにして得られた粗生成物を、溶離液として５％のメタノール／ジクロロメタンを使用するカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｂｏｃ保護されたｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（Ｓ）－１－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イルカルバモイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１－イル）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イルアミノ）－１－オキソプロパン－２－イル（メチル）カルバマートを茶色がかったゴム状の油として収率８３％で与え（３７９ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ４３Ｈ６０Ｎ５Ｏ７
＋＝７５８．４４８７、ｆｏｕｎｄ ７５８．４４８３。
化合物ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（Ｓ）－１－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イルカルバモイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１－イル）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イルアミノ）－１－オキソプロパン－２－イル（メチル）カルバマート（２５０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で３０分間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。粗ペプチドを、Ｃ－１８カラムを使用する逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ－ＨＰＬＣ）によって精製し、次いで、試料を凍結乾燥させて、所望の化合物（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（６）（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－１－ｏｘｏｐｅｎｔａｎ－２－ｙｌ）－１－（（Ｓ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ （６））を白色粉末として収率５６％で与えた（１１９ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）。化合物６は、分析ＲＰ－ＨＰＬＣで２２０ｎｍで９９％純粋であることが分かった。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ／ｐｐｍ＝８．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．８６（ｂｒ，１Ｈ），８．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），７．３３－７．２１（ｍ，１０Ｈ），６．５２（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），６．１１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），６．０３（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５Ｈｚ），５．３５（ｍ，１Ｈ），４．４０－４．３０（ｍ，３Ｈ），３．８（ｂｒ，１Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ），２．２５（ｓ，３Ｈ），２．１３－１．６８（ｍ，６Ｈ），１．４５－１．３７（ｍ，１Ｈ），１．３３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．０９－０．９８（ｍ，１Ｈ），０．８０－０．７４（ｍ，９Ｈ），０．５９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３８Ｈ５２Ｎ５Ｏ５
＋＝６５８．３９６３、ｆｏｕｎｄ ６５８．３９５３。
例６
スキーム３で言及される（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（化合物７）の合成
スキーム３で言及される（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（化合物７）の合成
２－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（２Ｓ，５Ｓ）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１，２－ジカルボキシラート（８５０ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で１時間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。次いで、このアミンを無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、Ｂｏｃ－Ｃｈｇ－ＯＨ（１．１３ｇｍ、４．４ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１．７ｇｍ、４．４ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）中で予備撹拌された溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（１．２ｍＬ、６．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応ならびに通常の後処理および精製の完了後、収率５４．５％で黄色がかったゴム状の油としての中間体化合物（２Ｓ，５Ｒ）－ベンジル１－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－２－シクロヘキシルアセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキシラート（ＶＩＩ）（６２９ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３０Ｈ４１Ｎ２Ｏ６
＋＝５２５．２９５９、ｆｏｕｎｄ ５２５．２９５２。
化合物ＶＩＩ（５２４．６ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で１時間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。次いで、このアミンを無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、Ｎ－Ｂｏｃ－Ｎ－メチルアラニン（４０６ｍｇ、２ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（７５８．５ｍｇ、２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）中で予備撹拌された溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（０．５６ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応の完了後、水（１０～２０ｍＬ）を添加した。水溶液を酢酸エチル（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を１０％のクエン酸（水溶液）、１０％のＮａＨＣＯ３（水溶液）、最後にブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して粗生成物を得、これを溶離液として３２％の酢酸エチル／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィーにより精製して、中間体化合物（２Ｓ，５Ｒ）－ベンジル１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）－２－シクロヘキシルアセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキシラート（ＶＩＩＩ）（（２Ｓ，５Ｒ）－ｂｅｎｚｙｌ １－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（ｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ （ＶＩＩＩ））を茶色がかったゴム状の油として収率６２％で与えた（３７８ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３４Ｈ４８Ｎ３Ｏ７
＋＝６１０．３４８７、ｆｏｕｎｄ ６１０．３３７８。
化合物ＶＩＩＩ（３７８ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）のメタノール／テトラヒドロフラン（５ｍＬ、１：１）中で撹拌された溶液に１０ｍｏｌ％のＰｄ－Ｃ（０．０６ｍｍｏｌ）を添加し、水素ガスをバルーンによって３０分間パージすることによって水素化に供した。その後、Ｐｄをセライトパッドを使用して濾過し、濾液を真空中で濃縮し、遊離酸（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）－２－シクロヘキシルアセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボン酸（ＩＸ）（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（ｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ （ＩＸ））を与え、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。イソロイシンベンジルエステル（５５．５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解し、Ｂｏｃ－Ｎ（Ｍｅ）－Ａｌａ－Ｃｈｇ－Ｆｒｏ－ＯＨ（１３０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（９５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中で予備撹拌された溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（０．１３ｍＬ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、化合物Ｂｏｃ保護されたテトラペプチド（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）－２－シクロヘキシルアセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（ｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（Ｂｏｃ－Ｎ（Ｍｅ）－Ａｌａ－Ｃｈｇ－Ｆｒｏ－Ｉｌｅ－ＯＢｎ）を黄色がかったゴム状の油として収率８０％で得た（１４４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ４０Ｈ５９Ｎ４Ｏ８
＋＝７２３．４３２７、ｆｏｕｎｄ ７２３．４３２５。
化合物（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）－２－シクロヘキシルアセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（ｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ）（Ｂｏｃ－Ｎ（Ｍｅ）－Ａｌａ－Ｃｈｇ－Ｆｒｏ－Ｉｌｅ－ＯＢｎ）（５８ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で３０分間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。粗ペプチドを、Ｃ－１８カラムを使用する逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ－ＨＰＬＣ）によって精製し、次いで、試料を凍結乾燥させて、所望の化合物（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート７（（２Ｓ，３Ｓ）－ｂｅｎｚｙｌ ２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｎｏａｔｅ ７）を白色粉末として収率６２％で与えた（２８ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）。化合物７は、分析ＲＰ－ＨＰＬＣで２２０ｎｍで９８％純粋であることが分かった。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ／ｐｐｍ＝８．８８（ｂｒ，１Ｈ），８．７９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．８６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３７－７．３２（ｍ，５Ｈ），６．５１（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），６．０５（ｂｒｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．０，３．０Ｈｚ），５．３４（ｍ，１Ｈ），５．１７－５．０８（ｍ，２Ｈ），４．４２－４．３２（ｍ，３Ｈ），３．８３－３．７９（ｍ，１Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），２．０９－１．８６（ｍ，４Ｈ），１．８３－１．７６（ｍ，１Ｈ），１．７０－１．４１（ｍ，７Ｈ），１．３３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．２０－１．１２（ｍ，１Ｈ），１．０６－０．９２（ｍ，３Ｈ），０．８６－０．７７（ｍ，７Ｈ），０．５５－０．４６（ｍ，１Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３５Ｈ５１Ｎ４Ｏ６
＋＝６２３．３８０３、ｆｏｕｎｄ ６２３．３８００。
例７
スキーム３で言及された（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌ－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）（化合物８）の合成
スキーム３で言及された（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌ－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）（化合物８）の合成
－１５℃の中間体化合物ＩＸ（６２．４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１ｍＬ）中溶液に、Ｎ－メチルモルホリン（１７．５μＬ、０．１６ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。５分後、イソブチルクロロホルマート（１７．５μＬ、０．１４４ｍｍｏｌ、１．２当量）を反応混合物に添加した。次いで、５分後、ベンズヒドリルアミン（１９μＬ、０．１４４ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加し、反応混合物を－１５℃でさらに１時間撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、化合物Ｂｏｃ保護されたテトラペプチドｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（ベンズヒドリルカルバモイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１－イル）－１－シクロヘキシル－２－オキソエチルアミノ）－１－オキソプロパン－２－イル（メチル）カルバマートを収率６７％で得た（５５ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ４０Ｈ５３Ｎ４Ｏ６
＋＝６８５．３９６０、ｆｏｕｎｄ ６８５．３９３９。
化合物ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（ベンズヒドリルカルバモイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１－イル）－１－シクロヘキシル－２－オキソエチルアミノ）－１－オキソプロパン－２－イル（メチル）カルバマート（５５ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で３０分間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。粗ペプチドを、Ｃ－１８カラムを使用する逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ－ＨＰＬＣ）によって精製し、次いで、試料を凍結乾燥させて、所望の化合物（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（８）（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌ－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ （８））を白色粉末として収率６２．５％で与えた（２９ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）。化合物８は、分析ＲＰ－ＨＰＬＣで２２０ｎｍで９９％純粋であることが分かった。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ／ｐｐｍ＝８．８８（ｂｒ，１Ｈ），８．８１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），８．３０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．３６－７．２１（ｍ，１０Ｈ），６．５１（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），６．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），６．０１（ｂｒｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．０，３．１Ｈｚ），５．３８（ｍ，１Ｈ），４．４６（ｍ，１Ｈ），４．３６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），３．８２（ｍ，１Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ），２．２１－１．８９（ｍ，４Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ），１．７０－１．３９（ｍ，５Ｈ），１．３３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．１３－０．８９（ｍ，４Ｈ），０．７９－０．６９（ｍ，１Ｈ），０．５１－０．４２（ｍ，１Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３５Ｈ４５Ｎ４Ｏ４
＋＝５８５．３４３５、ｆｏｕｎｄ ５８５．３４２７。
例８
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－１－ｏｘｏｐｅｎｔａｎ－２－ｙｌ）－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）（化合物９）の合成
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－１－ｏｘｏｐｅｎｔａｎ－２－ｙｌ）－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）（化合物９）の合成
（２Ｓ，３Ｓ）－２－アミノ－Ｎ－ベンズヒドリル－３－メチルペンタンアミド（６０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解し、（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）－２－シクロヘキシルアセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボン酸（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（ｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）（１０４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（７５．８ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１ｍＬ）中で予備撹拌された溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（０．１１ｍＬ、０．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、化合物Ｂｏｃ保護されたペプチドｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イルカルバモイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１－イル）－１－シクロヘキシル－２－オキソエチルアミノ）－１－オキソプロパン－２－イル（メチル）カルバマートを茶色がかったゴム状の油として収率８５％で得た（１３５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ４６Ｈ６４Ｎ５Ｏ７
＋＝７９８．４８００、ｆｏｕｎｄ ７９８．４８１７。
化合物ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イルカルバモイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１－イル）－１－シクロヘキシル－２－オキソエチルアミノ）－１－オキソプロパン－２－イル（メチル）カルバマート（８０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を２０％のＴＦＡ／ＤＣＭ中で３０分間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥した。粗ペプチドを、Ｃ－１８カラムを使用する逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ－ＨＰＬＣ）によって精製し、次いで、試料を凍結乾燥させて、所望の化合物（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（９）（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－１－ｏｘｏｐｅｎｔａｎ－２－ｙｌ）－１－（（Ｓ）－２－ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ａｃｅｔｙｌ）－５－（５－ｍｅｔｈｙｌｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ （９））を白色粉末として収率６０％で与えた（４１ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）。化合物９は、分析ＲＰ－ＨＰＬＣで２２０ｎｍで９８％純粋であることが分かった。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ／ｐｐｍ＝８．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），８．８０（ｂｒ，１Ｈ），８．７５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．５２（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），７．３３－７．２２（ｍ，１０Ｈ），６．４８（ｂｒ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），６．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６．０４（ｂｒｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．０，３．０Ｈｚ），５．３３（ｍ，１Ｈ），４．４３－４．３８（ｍ，３Ｈ），３．８２（ｂｒ ｍ，１Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．１４－１．９６（ｍ，４Ｈ），１．７６－１．３７（ｍ，８Ｈ），１．３３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．０９－０．９８（ｍ，２Ｈ），０．９７－０．８６（ｍ，２Ｈ），０．７９－０．７２（ｍ，７Ｈ），０．５４－０．４４（ｍ，１Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ４１Ｈ５６Ｎ５Ｏ５
＋＝６９８．４２７６、ｆｏｕｎｄ ６９８．４２４５。
例９
スキーム４で言及された（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル）－５－フェニルピロリジン－２－カルボキサミド（化合物１０）の合成
スキーム４で言及された（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル）－５－フェニルピロリジン－２－カルボキサミド（化合物１０）の合成
丸底フラッシュ中で、化合物１－（ｔｅｒｔ－ブチル）２－メチル（２Ｓ，５Ｒ）－５－フェニルピロリジン－１，２－ジカルボキシラート（３．０８９ｇｍ、１０．１２７ｍｍｏｌ）をメタノール／水（１０：１）の５０ｍｌの混合物に入れた。その後、反応混合物中にＬｉＯＨ（８９０ｍｇ、２０．２５５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物をＴＬＣで監視した。反応の完了後、５０ｍｌの水を反応物に添加し、反応混合物から有機溶媒を蒸発させた。その後、酢酸エチルおよび水を添加し、不純物を含有する有機層を分離した。水層をクエン酸で酸性化し、酢酸エチルをその層に添加した。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。有機層を減圧下で蒸発させて、遊離酸を白色固体として得た。粗酸をさらに精製することなく次のステップに直接使用した。ＮＨ２－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミド（４．４２ｇｍ、１４．９４８ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解し、粗酸（２．９ｇｍ、９．９６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（５．７１ｇ、２９．８９６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（４．０３５ｇ、２９．８９６ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ（３５ｍＬ）中で予備撹拌された溶液に、０℃および窒素雰囲気下で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（５．１７ｍＬ、２９．８９６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、粗生成物をシリカゲル（４０％の酢酸エチル／ヘキサン）を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製し、標記化合物（２Ｓ，５Ｒ）－ｔｅｒｔ－ブチル２－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イルカルバモイル）－５－フェニルピロリジン－１－カルボキシラート（ＸＩ）を白色固体として与えた（４．６５７ｇｍ、８．１８４ｍｍｏｌ、収率８２％）。
化合物ＸＩ（４．４５ｇｍ、７．８２ｍｍｏｌ）に、３０％のＴＦＡ／ＤＣＭ（２５ｍＬ）［３ｍｌ／ｍＭ、すなわち１ｍｌのＴＦＡおよび２ｍｌのＤＣＭ／ｍＭ］を０℃で添加し、反応物を室温でさらに１時間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥し、これにＤＣＭ（１５０ｍＬ）を添加し、これを１０％のＮａ２ＣＯ３（水溶液）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で除去し、粗アミンを白色固体として与えた（３．３６ｇｍ、７．０３６ｍｍｏｌ、収率９０％）。この粗アミン（６００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、Ｂｏｃ－ＮＨ－バリン（６９２ｍｇ、３．１９５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（１．３４２ｇ、７．０３４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（９５０ｍｇ、７．０３４ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ（２５ｍＬ）中で予備撹拌された溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（１．２２ｍＬ、７．０３４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、粗生成物をシリカゲル（４０％ＥＡ／ヘキサン）を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製し、標記化合物ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イルカルバモイル）－５－フェニルピロリジン－１－イル）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イルカルバマート（ＸＩＩ）を白色固体（７２３ｇｍ、１．０８２ｍｍｏｌ、収率８５％）として与えた。
化合物ＸＩＩ（７００ｍｇ、１．０４７ｍｍｏｌ）に、３０％のＴＦＡ／ＤＣＭ（６ｍＬ）［３ｍｌ／ｍＭ、すなわち１ｍｌのＴＦＡおよび２ｍｌのＤＣＭ／ｍＭ］を０℃で添加し、反応物を室温でさらに１時間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥し、これにＤＣＭ（３０ｍＬ）を添加し、これを１０％のＮａ２ＣＯ３（水溶液）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で除去し、粗アミンを白色固体として与えた（７４０ｍｇ、０．８２７ｍｍｏｌ、収率８０％）。この粗アミン（４３０ｍｇ、０．７５７ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解し、Ｂｏｃ－ｖａｌ－ＯＨ（３８５ｍｇ、１．８９２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（１．０５ｇ、４．１６３ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（５６３ｍｇ、４．１６３ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ（８ｍＬ）中で予備撹拌された溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加し、続いてＤＩＰＥＡ（０．９７ｍＬ、４．１６３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて追加で４～６時間さらに撹拌した。反応および通常の後処理の完了後、粗生成物をシリカゲル（４０％ＥＡ／ヘキサン）を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製し、標記化合物ｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－１－（（Ｓ）－１－（（２Ｓ，５Ｒ）－２－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イルカルバモイル）－５－フェニルピロリジン－１－イル）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イルアミノ）－１－オキソプロパン－２－イル（メチル）カルバマート（ＸＩＩＩ）を白色固体として与えた（４７７ｇｍ、０．６３３ｍｍｏｌ、収率８４％）。
化合物ＸＩＩＩ（４３０ｍｇ、０．５７１ｍｍｏｌ）に、３０％のＴＦＡ／ＤＣＭ（６ｍＬ）［３ｍｌ／ｍＭ、すなわち１ｍｌのＴＦＡおよび２ｍｌのＤＣＭ／ｍＭ］を０℃で添加し、反応物を室温でさらに１時間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下で濃縮して乾燥し、これにＤＣＭ（３０ｍＬ）を添加し、これを１０％のＮａ２ＣＯ３（水溶液）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で除去し、粗生成物をシリカゲル（８％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製し、標記化合物（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－フェニルピロリジン－２－カルボキサミド（１０）（（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｏ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－１－ｏｘｏｐｅｎｔａｎ－２－ｙｌ）－１－（（Ｓ）－３－ｍｅｔｈｙｌ－２－（（Ｓ）－２－（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎａｍｉｄｏ）ｂｕｔａｎｏｙｌ）－５－ｐｈｅｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ （１０））を白色固体として与えた（３２６ｍｇ、０．４９９ｍｍｏｌ、収率８７％）。ＥＳＩＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３９Ｈ５２Ｎ５Ｏ４＝６５４．４、ｆｏｕｎｄ ６５４．６
生物学的活性
例１０：結合アッセイ
ＳＭＡＣ模倣物１～９を、蛍光標識ペプチドＡＶＰＩＡＱＫ（ＦＡＭ）－ＯＨをＸＩＡＰ ＢＩＲ２またはＸＩＡＰ ＢＩＲ３タンパク質から置き換えるそれらの能力について試験した。次いで、一定濃度の蛍光標識ペプチドおよびＸＩＡＰ ＢＩＲ２またはＸＩＡＰ ＢＩＲ３タンパク質でＳＭＡＣ模倣化合物の濃度を順次増加させることによって、用量依存的結合実験を行った。ＩＣ５０値を、非線形最小二乗分析を使用してｐｒｉｓｍソフトウェアによるプロット描画から決定した。ｈｔｔｐ：／／ｓｗ１６．ｉｍ．ｍｅｄ．ｕｍｉｃｈ．ｅｄｕ／ｓｏｆｔｗａｒｅ／ｃａｌｃ＿ｋｉ／．Ｉｎ－ｓｉｌｉｃｏ．で自由にアクセスできるウェブベースのプログラムを使用して、測定されたＩＣ５０値、トレーサーＡＶＰＩＡＱＫ（ＦＡＭ）－ＯＨとＸＩＡＰ ＢＩＲ２またはＸＩＡＰ ＢＩＲ３複合体との間のＫｄ値、ならびに競合アッセイにおけるタンパク質およびトレーサーの濃度に基づくＳＭＡＣ模倣物のＫｉ値を計算した。
例１０：結合アッセイ
ＳＭＡＣ模倣物１～９を、蛍光標識ペプチドＡＶＰＩＡＱＫ（ＦＡＭ）－ＯＨをＸＩＡＰ ＢＩＲ２またはＸＩＡＰ ＢＩＲ３タンパク質から置き換えるそれらの能力について試験した。次いで、一定濃度の蛍光標識ペプチドおよびＸＩＡＰ ＢＩＲ２またはＸＩＡＰ ＢＩＲ３タンパク質でＳＭＡＣ模倣化合物の濃度を順次増加させることによって、用量依存的結合実験を行った。ＩＣ５０値を、非線形最小二乗分析を使用してｐｒｉｓｍソフトウェアによるプロット描画から決定した。ｈｔｔｐ：／／ｓｗ１６．ｉｍ．ｍｅｄ．ｕｍｉｃｈ．ｅｄｕ／ｓｏｆｔｗａｒｅ／ｃａｌｃ＿ｋｉ／．Ｉｎ－ｓｉｌｉｃｏ．で自由にアクセスできるウェブベースのプログラムを使用して、測定されたＩＣ５０値、トレーサーＡＶＰＩＡＱＫ（ＦＡＭ）－ＯＨとＸＩＡＰ ＢＩＲ２またはＸＩＡＰ ＢＩＲ３複合体との間のＫｄ値、ならびに競合アッセイにおけるタンパク質およびトレーサーの濃度に基づくＳＭＡＣ模倣物のＫｉ値を計算した。
ＳＭＡＣ模倣物は、ＦＰＡによって決定されるようにＸＩＡＰのＢＩＲ２およびＢＩＲ３ドメインに結合する。結合等温線を、ＦＰ読み取り値とｎＭでのタンパク質濃度のｌｏｇ値との間でプロットした。ＧｒａｐｈＰａｄ ｐｒｉｓｍを使用してデータを分析し、ボルツマン－シグモイド非線形回帰曲線フィッティングを使用してＫｄ値を決定した。最初に、蛍光標識ペプチドのＸＩＡＰ ＢＩＲ２およびＸＩＡＰ ＢＩＲ３との結合についてのＫｄ値を決定して、ＢＩＲ２／３ドメインに対する各分子結合についての正確なＫｉ値を評価し、表１に示す。
例１１：細胞傷害性アッセイ（ＳＲＢアッセイ）
異なる化合物のインビトロ細胞傷害活性を、異なる細胞における標準的なＳＲＢアッセイを使用することによって評価した。処理細胞および未処理細胞の吸光度を、マルチウェルスキャン分光光度計（Ｅｐｏｃｈ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ、Ｂｉｏｔｅｋ、米国）で５１０ｎｍの波長で測定した。成長阻害率は、式［１００－（化合物処理細胞の吸光度／未処理細胞の吸光度）］×１００を使用することによって計算した。
異なる化合物のインビトロ細胞傷害活性を、異なる細胞における標準的なＳＲＢアッセイを使用することによって評価した。処理細胞および未処理細胞の吸光度を、マルチウェルスキャン分光光度計（Ｅｐｏｃｈ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ、Ｂｉｏｔｅｋ、米国）で５１０ｎｍの波長で測定した。成長阻害率は、式［１００－（化合物処理細胞の吸光度／未処理細胞の吸光度）］×１００を使用することによって計算した。
ＳＭＡＣ模倣物は、腫瘍細胞選択的細胞傷害効果を促進する。ＳＷ６２０、ＨＴ２９、ＨＣＴ１１６およびＶＥＲＯ細胞を１０μＭ用量の一連のＳｍａｃ模倣物で４８時間処理し、細胞傷害性をＳＲＢアッセイによって測定した。成長阻害率を上記の表１にまとめた。Ｃ６は、腫瘍細胞に対してロバストなインビトロ細胞傷害効果を示したが、ＶＥＲＯ細胞に対しては示さなかったので、本発明者らは、異なるタイプの癌細胞株に対するＣ６のＩＣ５０値を決定した。ＩＣ５０値を表２に示す。本発明者らはまた、Ｃ６のインシリコ分子ドッキング分析（図１）を評価し、ＢＩＲ２上のＣ－６の安定化に関与する寄与残基が水素結合を介してＳ１６２、Ｅ１６３およびＲ１６６の能動的役割を示し、Ｙ１６１およびＦ２２９が塩基スタッキング相互作用を形成することを観察した。さらに、ＢＩＲ３の結合ポケットの分析は、Ｙ３２４、Ｒ２９９およびＧ３０６が水素結合を形成しており、Ｗ３２３残基がＣ６化合物の安定化における塩基スタッキング相互作用を示すことを示す。
例１２：アポトーシス抗体アレイ分析
Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ製のＰｒｏｔｅｏｍｅ Ｐｒｏｆｉｌｅｒ Ｈｕｍａｎ Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ Ａｒｒａｙ Ｋｉｔ（ＡＲＹ００９）を製造者の指示書に従って使用することによって、アポトーシスアレイを実行した。詳細なアッセイ手順に従った。画像をｇｅｌ ｄｏｃｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ ｃｈｅｍｉｄｏｃ ＸＲＳ ｐｌｕｓ）によってキャプチャーし、ＩｍａｇｅＪソフトウェア（ＮＩＨ）を分析および定量化に使用した。Ｐｌｏｔｌｙソフトウェアをヒートマップ生成に使用した（モントリオール、カナダ）。
Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ製のＰｒｏｔｅｏｍｅ Ｐｒｏｆｉｌｅｒ Ｈｕｍａｎ Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ Ａｒｒａｙ Ｋｉｔ（ＡＲＹ００９）を製造者の指示書に従って使用することによって、アポトーシスアレイを実行した。詳細なアッセイ手順に従った。画像をｇｅｌ ｄｏｃｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ ｃｈｅｍｉｄｏｃ ＸＲＳ ｐｌｕｓ）によってキャプチャーし、ＩｍａｇｅＪソフトウェア（ＮＩＨ）を分析および定量化に使用した。Ｐｌｏｔｌｙソフトウェアをヒートマップ生成に使用した（モントリオール、カナダ）。
アネキシン－Ｖ陽性細胞を示すヒストグラムオーバーレイの右シフトによって観察されるように、化合物Ｃ６がｓｍａｃ駆動アポトーシス特徴を促進することが観察された。（図２、左）。さらに、Ｃ６処理は、対照と比較して、処理細胞におけるＰＡＲＰおよびカスパーゼ－３の切断ならびにｃＩＡＰ－１の分解によって観察されるように、ＳＭＡＣ媒介ホールマークアポトーシス特徴を駆動する（図２、右および図３）。さらに、Ｃ６は、インビトロでＴＲＡＩＬ媒介腫瘍細胞細胞傷害応答を堅固に感作する（図４）。アポトーシスもしくはカスパーゼの阻害、またはＸＩＡＰのようなその標的の過剰発現、またはＤＲ５のノックダウンは、Ｃ６媒介細胞死をレスキューする。
例１３：コロニー形成アッセイ
クローン原性コロニー形成アッセイを単一細胞懸濁液で行った。簡単に説明すると、細胞を完全ＭｃＣｏｙ培地に１２ウェルプレートに播種し、２４時間後、単独または組み合わせてのいずれかで、異なる用量の異なる薬剤で処理した。細胞を、３日ごとにメディア（ｍｅｄｉａ）を取り換えながら２週間培養した。プレートをＰＢＳで洗浄し、氷冷メタノールで固定し、続いてメタノール中の０．５％のクリスタルバイオレットで３０分間染色した。水で十分に洗浄することによって過剰な染色を除去し、プレートを乾燥させた。代表的な画像をｇｅｌ ｄｏｃｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ ｃｈｅｍｉｄｏｃ ＸＲＳ ｐｌｕｓ）でキャプチャーし、ＩｍａｇｅＪソフトウェア（ＮＩＨ）を分析および定量化に使用して、異なる処理の組み合わせ下での単一細胞コロニー形成効率を監視した。
クローン原性コロニー形成アッセイを単一細胞懸濁液で行った。簡単に説明すると、細胞を完全ＭｃＣｏｙ培地に１２ウェルプレートに播種し、２４時間後、単独または組み合わせてのいずれかで、異なる用量の異なる薬剤で処理した。細胞を、３日ごとにメディア（ｍｅｄｉａ）を取り換えながら２週間培養した。プレートをＰＢＳで洗浄し、氷冷メタノールで固定し、続いてメタノール中の０．５％のクリスタルバイオレットで３０分間染色した。水で十分に洗浄することによって過剰な染色を除去し、プレートを乾燥させた。代表的な画像をｇｅｌ ｄｏｃｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ ｃｈｅｍｉｄｏｃ ＸＲＳ ｐｌｕｓ）でキャプチャーし、ＩｍａｇｅＪソフトウェア（ＮＩＨ）を分析および定量化に使用して、異なる処理の組み合わせ下での単一細胞コロニー形成効率を監視した。
Ｐａｎカスパーゼ阻害剤Ｚ－ＶＡＤ－ＦＭＫによるアポトーシスの阻害は、コロニー形成アッセイによって観察されるＣ６の細胞傷害表現型を著しくレスキューし、Ｃ６が癌細胞においてアポトーシス細胞死を誘導することを確認した（図５、中央上パネル）。同様に、ＸＩＡＰ過剰発現細胞およびＤＲ５ノックダウン細胞におけるコロニー形成アッセイは、Ｃ６媒介アポトーシス細胞死の有意な耐性を示し、これは全アポトーシスプロセスにおけるＸＩＡＰおよびＤＲ５の重大な関与を示唆していた（図５の下の左パネルおよび右パネル）。
例１４：異種移植腫瘍モデルにおけるインビボ試験
全ての動物を病原体のない設備で昼－夜周期下で維持した。本発明者らの十分に確立された結腸癌異種移植モデルに従って、１００μｌのＰＢＳ中の２×１０６細胞（ＳＷ６２０およびＨＣＴ１１６）または０．５×１０６細胞（ＨＣＴ１１６）を、各４～６週齢のヌードＣｒｌ：ＣＤ１－Ｆｏｘｎ１ｎｕマウスの左／および右後肢の側面に皮下接種した。盲検の独立した調査者によって、マウスを群に無作為に割り当てた。試験を通して、一定の間隔で腫瘍を電子デジタルキャリパで測定し、標準式Ｖ＝Π／６×ａ２×ｂを使用して腫瘍体積を計算し、式中、「ａ」は短い腫瘍軸であり、「ｂ」は長い腫瘍軸である。実験の最後に、マウスを屠殺し、皮下腫瘍をさらなる試験のために解剖した。採取した腫瘍の一部を滅菌鉗子およびハサミで小片に刻み、ライセート調製のためにホモジナイズした。
全ての動物を病原体のない設備で昼－夜周期下で維持した。本発明者らの十分に確立された結腸癌異種移植モデルに従って、１００μｌのＰＢＳ中の２×１０６細胞（ＳＷ６２０およびＨＣＴ１１６）または０．５×１０６細胞（ＨＣＴ１１６）を、各４～６週齢のヌードＣｒｌ：ＣＤ１－Ｆｏｘｎ１ｎｕマウスの左／および右後肢の側面に皮下接種した。盲検の独立した調査者によって、マウスを群に無作為に割り当てた。試験を通して、一定の間隔で腫瘍を電子デジタルキャリパで測定し、標準式Ｖ＝Π／６×ａ２×ｂを使用して腫瘍体積を計算し、式中、「ａ」は短い腫瘍軸であり、「ｂ」は長い腫瘍軸である。実験の最後に、マウスを屠殺し、皮下腫瘍をさらなる試験のために解剖した。採取した腫瘍の一部を滅菌鉗子およびハサミで小片に刻み、ライセート調製のためにホモジナイズした。
シスプラチン耐性ＳＷ－６２０異種移植モデルを利用して、本発明者らは、Ｃ６のインビボ有効性を決定し、それが同じモデルに対して強力な抗腫瘍有効性を有することを観察した（図７）。同様に、Ｃ６の皮下および経口投与は、それぞれの対照と比較して、ＨＣＴ－１１６異種移植腫瘍体積および重量を著しく減少させたことが観察された。（図８）。腫瘍組織からのイムノブロットは、Ｃ６処理腫瘍がインビボでのビヒクル処理腫瘍と比較して、低下したＸＩＡＰおよびｃＩＡＰ１タンパク質発現を示すことを明らかにし、これは、Ｃ６がこれらのタンパク質を標的とし、腫瘍体積を減少させることを確認する（図９、左パネル）。さらに、本発明者らの臓器分布分析では、腫瘍組織中のＣ６の存在が有意な量で観察され、腫瘍部位への分子の送達が確認された（図９、右パネル）。
例１５：Ｃ６の安定性および薬物動態試験
ＳＩＦ、ＳＧＦおよび他の安定性試験を以下の標準プロトコルによって実行した。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法をＣ６：静脈内群（Ｃ６、４ｍｇ／ｋｇ）、皮下群（Ｃ６、３０ｍｇ／ｋｇ）、経口群（Ｃ６、３０ｍｇ／ｋｇ）について開発した。マウスに、体重に応じたそれぞれの用量を静脈内（ｌａｔｅｒａｌ ｖｅｉｎ）、皮下経路および経口によってそれぞれ投与した。血液試料を０．０８３、０．２５、０．５、０．７５、１、２、４、８、１２、２４および４８時間で収集した。血漿を分離し、分析のために処理した。薬物動態分析のために、血漿濃度対時間データをプロットし、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ、マウンテンビュー、CA）ソフトウェアを使用するノンコンパートメント分析法によって分析した。
ＳＩＦ、ＳＧＦおよび他の安定性試験を以下の標準プロトコルによって実行した。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法をＣ６：静脈内群（Ｃ６、４ｍｇ／ｋｇ）、皮下群（Ｃ６、３０ｍｇ／ｋｇ）、経口群（Ｃ６、３０ｍｇ／ｋｇ）について開発した。マウスに、体重に応じたそれぞれの用量を静脈内（ｌａｔｅｒａｌ ｖｅｉｎ）、皮下経路および経口によってそれぞれ投与した。血液試料を０．０８３、０．２５、０．５、０．７５、１、２、４、８、１２、２４および４８時間で収集した。血漿を分離し、分析のために処理した。薬物動態分析のために、血漿濃度対時間データをプロットし、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ、マウンテンビュー、CA）ソフトウェアを使用するノンコンパートメント分析法によって分析した。
図６に示すように、Ｃ６は、ＳＩＦ、ＳＧＦ、血漿、ＭＬＭ、ＨＬＭにおいて非常に安定である。Ｃ６のＩＶ、ＳＣおよび経口経路による薬物動態プロファイルを図で与え、薬物動態パラメータを表３に示す。皮下経路および経口経路によるＣ６の絶対バイオアベイラビリティは、表３に示すように、それぞれ５６．６１±７．２１％および５５．９３±１１．１５％であることがわかった。
図６に示すように、Ｃ６は、ＳＩＦ、ＳＧＦ、血漿、ＭＬＭ、ＨＬＭにおいて非常に安定である。Ｃ６のＩＶ、ＳＣおよび経口経路による薬物動態プロファイルを図で与え、薬物動態パラメータを表３に示す。皮下経路および経口経路によるＣ６の絶対バイオアベイラビリティは、表３に示すように、それぞれ５６．６１±７．２１％および５５．９３±１１．１５％であることがわかった。
以下に、本願出願の当初の特許請求の範囲に記載された発明を付記する。
［１］
式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物、
ここで、
Ｒ １ は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールからなる群から選択され；
Ｒ ２ 、Ｒ ３ およびＲ ４ は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルおよびＣ ４ －Ｃ ８ シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ ５ およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ ６ ）（Ｒ ７ ）からなる群から選択され；
Ｒ ５ は、ＯＨ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルコキシおよびＣ ６ アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ ６ およびＲ ７ は、それぞれ独立して、水素、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリールおよびＣ ６ －Ｃ １０ アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩。
［２］
Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル－Ｌ－プロリル－Ｌ－イソロイシン（化合物１）、
ベンジル（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボニル）－Ｌ－イソロイシナート（化合物２）、
（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－Ｎ－ベンズヒドリル－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物３）、
（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル３－メチル－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）ペンタノアート（化合物４）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物５）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物６）、
（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（化合物７）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物８）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物９）；および
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル）－５－フェニルピロリジン－２－カルボキサミド（化合物１０）
からなる群から選択される、［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
［３］
式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を調製するためのプロセスであって、
ここで、
Ｒ １ は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールからなる群から選択され；
Ｒ ２ 、Ｒ ３ およびＲ ４ は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルおよびＣ ４ －Ｃ ８ シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ ５ およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ ６ ）（Ｒ ７ ）からなる群から選択され；
Ｒ ５ は、ＯＨ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルコキシおよびＣ ６ アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ ６ およびＲ ７ は、それぞれ独立して、水素、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリールおよびＣ ６ －Ｃ １０ アリールアルキルからなる群から選択され；
ｉ．ＴＦＡを使用する酸分解によって、２－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（２Ｓ，５Ｓ）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１，２－ジカルボキシラートの前記Ｂｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンをＢｏｃＮＨＣＨ（Ｒ ２ ′）ＣＯＯＨとカップリングさせて、式Ｐ１の化合物を得るステップと；
ｉｉ．ＴＦＡを使用する酸分解によって、前記式Ｐ１の化合物からＢｏｃ基を除去し、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、前記得られたアミンを式ＢｏｃＮ（Ｒ ４ ′）ＣＨ（Ｒ ３ ′）ＣＯＯＨの化合物とカップリングさせて、式Ｐ２の化合物を得るステップと；
ｉｉｉ．溶媒の存在下で、Ｐｄ触媒を使用して前記式Ｐ２の化合物を接触水素化して、式Ｐ３の遊離カルボン酸を得るステップと；
ｉｖ．前記式Ｐ３の遊離カルボン酸を、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、ＮＨ ２ ＣＨ（Ａ）（Ｂ）とカップリングさせて、前記式Ｉの化合物を得るステップと、
を含む、プロセス。
［４］
前記ペプチドカップリング試薬がＨＯＢｔ、ＥＤＣＩおよびＨＢＴＵからなる群から選択され、前記弱塩基がジエチルイソプロピルアミンであり、前記Ｐｄ触媒がＰｄ／Ｃ、またはＰｄ（ＯＨ） ２ ／Ｃから選択される、［３］に記載のプロセス。
［５］
前記溶媒が、ペプチドカップリングのためにＤＣＭ、またはＤＭＦおよび接触水素化のためにＭｅＯＨ、またはＥｔＯＡｃから選択される、［３］に記載のプロセス。
［６］
請求項２に記載のＳＭＡＣ模倣化合物１０を調製するプロセスであって、
（ａ）溶媒中、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、化合物ＸをＨ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミドとけん化およびカップリングさせて、化合物ＸＩを得るステップと；
（ｂ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、前記化合物ＸＩから前記Ｂｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、前記得られたアミンをＢｏｃ－Ｖａｌ－ＣＯＯＨとカップリングさせて、式ＸＩＩの化合物を得るステップと；
（ｃ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、前記化合物ＸＩＩから前記Ｂｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、前記得られたアミンをＢｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨとカップリングさせて、式ＸＩＩＩの化合物を得るステップと；
（ｄ）酸分解によって前記式ＸＩＩＩの化合物から前記Ｂｏｃ基を除去して、前記化合物１０を得るステップと、
を含む、プロセス。
［７］
前記ペプチドカップリング試薬がＨＯＢｔ、ＥＤＣＩおよびＨＢＴＵからなる群から選択され、前記溶媒がＤＣＭ、またはＤＭＦから選択され、前記弱塩基がジエチルイソプロピルアミンであり、酸分解のために前記試薬がＴＦＡである、［６］に記載のプロセス。
［８］
Ｓｍａｃタンパク質のアポトーシス阻害タンパク質（ＩＡＰ）への結合を阻害し、癌を含む増殖性疾患の治療に有用である、［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
［９］
式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物、
ここで、
Ｒ １ は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールからなる群から選択され；
Ｒ ２ 、Ｒ ３ およびＲ ４ は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルおよびＣ ４ －Ｃ ８ シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ ５ およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ ６ ）（Ｒ ７ ）からなる群から選択され；
Ｒ ５ は、ＯＨ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルコキシおよびＣ ６ アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ ６ およびＲ ７ は、それぞれ独立して、水素、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリールおよびＣ ６ －Ｃ １０ アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される賦形剤
を含む、医薬組成物。
［１０］
式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を含む医薬組成物であって、
ここで、
Ｒ １ は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールからなる群から選択され；
Ｒ ２ 、Ｒ ３ およびＲ ４ は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルおよびＣ ４ －Ｃ ８ シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ ５ およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ ６ ）（Ｒ ７ ）からなる群から選択され；
Ｒ ５ は、ＯＨ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルコキシおよびＣ ６ アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ ６ およびＲ ７ は、それぞれ独立して、水素、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリールおよびＣ ６ －Ｃ １０ アリールアルキルからなる群から選択される、医薬組成物。
［１１］
結腸、乳房、腎臓、前立腺、脳、卵巣、膵臓、黒色腫、肝臓、白血病およびリンパ腫からなる群から選択される哺乳動物癌細胞株に対して強力な抗増殖活性を有する、［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
［１２］
哺乳動物における治療抵抗性、難治性、および転移性の癌の治療に有用である、［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
［１３］
ＴＲＡＩＬアゴニスト／ＭＡｂ、アロマターゼ阻害剤、エピジェネティックモジュレーター、キナーゼ阻害剤、アルキル化剤、微小管破壊剤、トポイソメラーゼ阻害剤、抗血管新生化合物、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、エストロゲンおよびアンドロゲンアンタゴニスト、ＭＭＰ阻害剤および生物学的応答修飾物質からなる群から選択される他の抗増殖剤との併用療法において有用である、［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
［１４］
［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物を使用して癌を治療するための方法。
以下に、本願出願の当初の特許請求の範囲に記載された発明を付記する。
［１］
式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物、
ここで、
Ｒ １ は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールからなる群から選択され；
Ｒ ２ 、Ｒ ３ およびＲ ４ は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルおよびＣ ４ －Ｃ ８ シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ ５ およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ ６ ）（Ｒ ７ ）からなる群から選択され；
Ｒ ５ は、ＯＨ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルコキシおよびＣ ６ アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ ６ およびＲ ７ は、それぞれ独立して、水素、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリールおよびＣ ６ －Ｃ １０ アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩。
［２］
Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル－Ｌ－プロリル－Ｌ－イソロイシン（化合物１）、
ベンジル（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボニル）－Ｌ－イソロイシナート（化合物２）、
（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－Ｎ－ベンズヒドリル－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物３）、
（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル３－メチル－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）ペンタノアート（化合物４）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物５）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物６）、
（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（化合物７）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物８）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物９）；および
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル）－５－フェニルピロリジン－２－カルボキサミド（化合物１０）
からなる群から選択される、［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
［３］
式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を調製するためのプロセスであって、
ここで、
Ｒ １ は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールからなる群から選択され；
Ｒ ２ 、Ｒ ３ およびＲ ４ は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルおよびＣ ４ －Ｃ ８ シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ ５ およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ ６ ）（Ｒ ７ ）からなる群から選択され；
Ｒ ５ は、ＯＨ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルコキシおよびＣ ６ アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ ６ およびＲ ７ は、それぞれ独立して、水素、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリールおよびＣ ６ －Ｃ １０ アリールアルキルからなる群から選択され；
ｉ．ＴＦＡを使用する酸分解によって、２－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（２Ｓ，５Ｓ）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１，２－ジカルボキシラートの前記Ｂｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンをＢｏｃＮＨＣＨ（Ｒ ２ ′）ＣＯＯＨとカップリングさせて、式Ｐ１の化合物を得るステップと；
ｉｉ．ＴＦＡを使用する酸分解によって、前記式Ｐ１の化合物からＢｏｃ基を除去し、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、前記得られたアミンを式ＢｏｃＮ（Ｒ ４ ′）ＣＨ（Ｒ ３ ′）ＣＯＯＨの化合物とカップリングさせて、式Ｐ２の化合物を得るステップと；
ｉｉｉ．溶媒の存在下で、Ｐｄ触媒を使用して前記式Ｐ２の化合物を接触水素化して、式Ｐ３の遊離カルボン酸を得るステップと；
ｉｖ．前記式Ｐ３の遊離カルボン酸を、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、ＮＨ ２ ＣＨ（Ａ）（Ｂ）とカップリングさせて、前記式Ｉの化合物を得るステップと、
を含む、プロセス。
［４］
前記ペプチドカップリング試薬がＨＯＢｔ、ＥＤＣＩおよびＨＢＴＵからなる群から選択され、前記弱塩基がジエチルイソプロピルアミンであり、前記Ｐｄ触媒がＰｄ／Ｃ、またはＰｄ（ＯＨ） ２ ／Ｃから選択される、［３］に記載のプロセス。
［５］
前記溶媒が、ペプチドカップリングのためにＤＣＭ、またはＤＭＦおよび接触水素化のためにＭｅＯＨ、またはＥｔＯＡｃから選択される、［３］に記載のプロセス。
［６］
請求項２に記載のＳＭＡＣ模倣化合物１０を調製するプロセスであって、
（ａ）溶媒中、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、化合物ＸをＨ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミドとけん化およびカップリングさせて、化合物ＸＩを得るステップと；
（ｂ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、前記化合物ＸＩから前記Ｂｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、前記得られたアミンをＢｏｃ－Ｖａｌ－ＣＯＯＨとカップリングさせて、式ＸＩＩの化合物を得るステップと；
（ｃ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、前記化合物ＸＩＩから前記Ｂｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、前記得られたアミンをＢｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨとカップリングさせて、式ＸＩＩＩの化合物を得るステップと；
（ｄ）酸分解によって前記式ＸＩＩＩの化合物から前記Ｂｏｃ基を除去して、前記化合物１０を得るステップと、
を含む、プロセス。
［７］
前記ペプチドカップリング試薬がＨＯＢｔ、ＥＤＣＩおよびＨＢＴＵからなる群から選択され、前記溶媒がＤＣＭ、またはＤＭＦから選択され、前記弱塩基がジエチルイソプロピルアミンであり、酸分解のために前記試薬がＴＦＡである、［６］に記載のプロセス。
［８］
Ｓｍａｃタンパク質のアポトーシス阻害タンパク質（ＩＡＰ）への結合を阻害し、癌を含む増殖性疾患の治療に有用である、［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
［９］
式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物、
ここで、
Ｒ １ は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールからなる群から選択され；
Ｒ ２ 、Ｒ ３ およびＲ ４ は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルおよびＣ ４ －Ｃ ８ シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ ５ およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ ６ ）（Ｒ ７ ）からなる群から選択され；
Ｒ ５ は、ＯＨ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルコキシおよびＣ ６ アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ ６ およびＲ ７ は、それぞれ独立して、水素、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリールおよびＣ ６ －Ｃ １０ アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される賦形剤
を含む、医薬組成物。
［１０］
式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を含む医薬組成物であって、
ここで、
Ｒ １ は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールからなる群から選択され；
Ｒ ２ 、Ｒ ３ およびＲ ４ は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルおよびＣ ４ －Ｃ ８ シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ １ －Ｃ ６ アルキルまたはＣ ６ －Ｃ １０ アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ ５ およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ ６ ）（Ｒ ７ ）からなる群から選択され；
Ｒ ５ は、ＯＨ、Ｃ １ －Ｃ ６ アルコキシおよびＣ ６ アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ ６ およびＲ ７ は、それぞれ独立して、水素、Ｃ ６ －Ｃ １０ アリールおよびＣ ６ －Ｃ １０ アリールアルキルからなる群から選択される、医薬組成物。
［１１］
結腸、乳房、腎臓、前立腺、脳、卵巣、膵臓、黒色腫、肝臓、白血病およびリンパ腫からなる群から選択される哺乳動物癌細胞株に対して強力な抗増殖活性を有する、［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
［１２］
哺乳動物における治療抵抗性、難治性、および転移性の癌の治療に有用である、［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
［１３］
ＴＲＡＩＬアゴニスト／ＭＡｂ、アロマターゼ阻害剤、エピジェネティックモジュレーター、キナーゼ阻害剤、アルキル化剤、微小管破壊剤、トポイソメラーゼ阻害剤、抗血管新生化合物、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、エストロゲンおよびアンドロゲンアンタゴニスト、ＭＭＰ阻害剤および生物学的応答修飾物質からなる群から選択される他の抗増殖剤との併用療法において有用である、［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
［１４］
［１］に記載のＳＭＡＣ模倣化合物を使用して癌を治療するための方法。
Claims (14)
- 式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩。 - Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル－Ｌ－プロリル－Ｌ－イソロイシン（化合物１）、
ベンジル（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボニル）－Ｌ－イソロイシナート（化合物２）、
（２Ｓ，５Ｒ）－１－（Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－Ｎ－ベンズヒドリル－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物３）、
（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル３－メチル－２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－３－メチル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）ブタノイル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）ペンタノアート（化合物４）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物５）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－バリル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物６）、
（２Ｓ，３Ｓ）－ベンジル２－（（２Ｓ，５Ｒ）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－３－メチルペンタノアート（化合物７）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－ベンズヒドリル－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物８）、
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（（Ｓ）－２－シクロヘキシル－２－（（Ｓ）－２－（メチルアミノ）プロパンアミド）アセチル）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物９）；および
（２Ｓ，５Ｒ）－Ｎ－（（２Ｓ，３Ｓ）－１－（ベンズヒドリルアミノ）－３－メチル－１－オキソペンタン－２－イル）－１－（メチル－Ｌ－アラニル－Ｌ－アラニル）－５－フェニルピロリジン－２－カルボキサミド（化合物１０）
からなる群から選択される、請求項１に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。 - 式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を調製するためのプロセスであって、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
ｉ．ＴＦＡを使用する酸分解によって、２－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（２Ｓ，５Ｓ）－５－（５－メチルフラン－２－イル）ピロリジン－１，２－ジカルボキシラートの前記Ｂｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、得られたアミンをＢｏｃＮＨＣＨ（Ｒ２′）ＣＯＯＨとカップリングさせて、式Ｐ１の化合物を得るステップと；
ｉｉ．ＴＦＡを使用する酸分解によって、前記式Ｐ１の化合物からＢｏｃ基を除去し、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、前記得られたアミンを式ＢｏｃＮ（Ｒ４′）ＣＨ（Ｒ３′）ＣＯＯＨの化合物とカップリングさせて、式Ｐ２の化合物を得るステップと；
ｉｉｉ．溶媒の存在下で、Ｐｄ触媒を使用して前記式Ｐ２の化合物を接触水素化して、式Ｐ３の遊離カルボン酸を得るステップと；
ｉｖ．前記式Ｐ３の遊離カルボン酸を、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、ＮＨ２ＣＨ（Ａ）（Ｂ）とカップリングさせて、前記式Ｉの化合物を得るステップと、
を含む、プロセス。 - 前記ペプチドカップリング試薬がＨＯＢｔ、ＥＤＣＩおよびＨＢＴＵからなる群から選択され、前記弱塩基がジエチルイソプロピルアミンであり、前記Ｐｄ触媒がＰｄ／Ｃ、またはＰｄ（ＯＨ）２／Ｃから選択される、請求項３に記載のプロセス。
- 前記溶媒が、ペプチドカップリングのためにＤＣＭ、またはＤＭＦおよび接触水素化のためにＭｅＯＨ、またはＥｔＯＡｃから選択される、請求項３に記載のプロセス。
- 請求項２に記載のＳＭＡＣ模倣化合物１０を調製するプロセスであって、
（ａ）溶媒中、ペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、化合物ＸをＨ－Ｉｌｅ－ベンズヒドリルアミドとけん化およびカップリングさせて、化合物ＸＩを得るステップと；
（ｂ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、前記化合物ＸＩから前記Ｂｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、前記得られたアミンをＢｏｃ－Ｖａｌ－ＣＯＯＨとカップリングさせて、式ＸＩＩの化合物を得るステップと；
（ｃ）ＴＦＡを使用する酸分解によって、前記化合物ＸＩＩから前記Ｂｏｃ基を除去し、続いてペプチドカップリング試薬および弱塩基の存在下で、前記得られたアミンをＢｏｃ－Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ－ＯＨとカップリングさせて、式ＸＩＩＩの化合物を得るステップと；
（ｄ）酸分解によって前記式ＸＩＩＩの化合物から前記Ｂｏｃ基を除去して、前記化合物１０を得るステップと、
を含む、プロセス。 - 前記ペプチドカップリング試薬がＨＯＢｔ、ＥＤＣＩおよびＨＢＴＵからなる群から選択され、前記溶媒がＤＣＭ、またはＤＭＦから選択され、前記弱塩基がジエチルイソプロピルアミンであり、酸分解のために前記試薬がＴＦＡである、請求項６に記載のプロセス。
- Ｓｍａｃタンパク質のアポトーシス阻害タンパク質（ＩＡＰ）への結合を阻害し、癌を含む増殖性疾患の治療に有用である、請求項１に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
- 式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択され；
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される賦形剤
を含む、医薬組成物。 - 式－ＩのＳＭＡＣ模倣化合物を含む医薬組成物であって、
ここで、
Ｒ１は、水素、および非置換または置換ヘテロアリールまたはＣ６－Ｃ１０アリールからなる群から選択され；
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキルおよびＣ４－Ｃ８シクロアルキルからなる群から選択され；
Ａは、非置換または置換Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ６－Ｃ１０アリールから選択され；
Ｂは、Ｃ６－Ｃ１０アリール、Ｃ（Ｏ）Ｒ５およびＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）（Ｒ７）からなる群から選択され；
Ｒ５は、ＯＨ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシおよびＣ６アルコキシアリールからなる群から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ６－Ｃ１０アリールおよびＣ６－Ｃ１０アリールアルキルからなる群から選択される、医薬組成物。 - 結腸、乳房、腎臓、前立腺、脳、卵巣、膵臓、黒色腫、肝臓、白血病およびリンパ腫からなる群から選択される哺乳動物癌細胞株に対して強力な抗増殖活性を有する、請求項１に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
- 哺乳動物における治療抵抗性、難治性、および転移性の癌の治療に有用である、請求項１に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
- ＴＲＡＩＬアゴニスト／ＭＡｂ、アロマターゼ阻害剤、エピジェネティックモジュレーター、キナーゼ阻害剤、アルキル化剤、微小管破壊剤、トポイソメラーゼ阻害剤、抗血管新生化合物、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、エストロゲンおよびアンドロゲンアンタゴニスト、ＭＭＰ阻害剤および生物学的応答修飾物質からなる群から選択される他の抗増殖剤との併用療法において有用である、請求項１に記載のＳＭＡＣ模倣化合物。
- 請求項１に記載のＳＭＡＣ模倣化合物を使用して癌を治療するための方法。
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